Enhanced phagocytosis and intracellular killing of Pityrosporum ovale by human neutrophils after exposure to ketoconazole is correlated to changes of the yeast cell surface
Authors: Richardson M. D. , Shankland Gillian S. 
Published: July 2010

Summary. In seborrhoeic dermatitis an inflammatory response occurs secondary to large numbers of Pityrosporum yeasts appearing within and beneath the epidermis. To study the interaction between human neutrophils and P. ovale and any im‐munomodulating effect of antifungal agents, the yeast was exposed to ketoconazole and then incorporated into neutrophil monolayer assays. Phagocytosis was complement dependent and reached a maximum after 40 min. Ketoconazole at 25, 50 and 100 mg 1‐1 had no significant effect on phagocytosis of P. ovale. However, when yeast cells were pre‐treated with ketoconazole for 2 h before exposure to the phagocyte monolayer there was a significant enhancement of phagocytosis with increasing drug concentration. Intracellular killing of P. ovale was assessed by methylene blue dye exclusion. In the absence of ketoconazole, 5% of intracellular yeast cells were killed following internalization for 2 h. Pretreatment of yeast cells with ketoconazole at 10 and 100 mg 1‐1 for 2 h prior to ingestion significantly increased intracellular killing to a maximum of 23%. This study demonstrates that yeast cells of P. ovale are readily ingested by human neutrophils by a complement dependent process. Phagocytosis is enhanced if the organism is exposed to ketoconazole before opsonisation and ingestion. The inability of neutrophils to kill P. ovale is modulated in the presence of therapeutic concentrations of ketoconazole.Zusammenfassung. Bei seborrhoischer Dermatitis tritt eine Entzündungsreaktion sekundär auf, wenn Pityrosporum‐Hefen zahlreich in und unter der Epidermis vorhanden sind. Um die Wechselwirkungen zwischen menschlichen Neutrophilen und Pityrosporum ovale unter dem immunmodu‐latorischen Einfluß von Antimyzetika zu untersuchen, wurde die Hefe Ketoconazol exponiert und dann in vitro Neutrophilen in Zellkultur angeboten. Die Phagozytose erwies sich als Komplement‐abhängig und erreichte nach 40 min ein Maximum. Ketoconazol in der Konzentration von 25, 50 und 100 mg 1‐1 hatte keine signifikante Wirkung auf die Phagozytose von P. ovale. Wurden die Hefezellen jedoch 2 h vor dem Phagozytose‐Ansatz mit Ketoconazol vorbehandelt, so wurde eine signifikante Erhöhung der Phagozytose‐Rate mit ansteigender Antimyzetika‐Konzentration beobachtet. Die intrazelluläre Abtötung von P. ovale wurde mittels Methylenblau‐Färbung beurteilt. Bei Abwesenheit von Ketoconazol wurden 5 % der intrazellulär aufgenommenen Hefezellen innerhalb 2 h nach Phago‐zytose abgetötet. Die zweistündige Vorbehandlung der Hefezellen mit 10 und 100 mg 1‐1 Ketoconazol vor der Ingestion erhöhte die intrazelluläre Abtö‐tungsrate auf maximal 23 %. Die Ergebnisse zeigen, daßP. ovale‐Hefezellen von menschlichen Neutro‐philen in einem Komplement‐abhängigen Prozeß leicht aufgenommen werden. Die Phagozytoserate ist erhöht, wenn die Pilze vor der Opsonisierung und Ingestion Ketoconazol ausgesetzt werden. Die Unfähigkeit der Neutrophilen, P. ovale abzutöten, wird in Gegenwart therapeutischer Konzentrationen von Ketoconazol moduliert.