In vitro Studies on Ovulatory Mechanisms in the Hen
Authors: Moudgal R. P. , Razdan M. N. 
Published: August 2010

SummaryThe addition of an extract from the largest ovarian follicles of hens (about half an hour prior to expected ovulation) to the incubation medium induced in vitro follicular ovulation in follicles removed 20–24 hours prior to expected ovulation. In contrast, an extract from immature (next to largest) follicles inhibited the ovulatory effect of LH in quantities normally sufficient to cause ovulation in vitro. Ovulation in such cases could be brought about only on charging the medium with a higher concentration of LH, thereby indicating the presence of some dose‐dependent ovulation inhibitory mechanism in the immature ovarian follicle or some facilitatory mechanism developing in the largest follicle prior to ovulation, an indication that both these mechanisms are working. LH or adrenaline alone or in combination with imidazol (phosphodiesterase stimulator which inactivates cAMP) or tolazoline (alpha‐adrenergic receptor blocker) were tested in different incubation media. Follicles were incubated at 41 °C for about 10 hours to observe the induction of in vitro ovulation. The results showed that the LH ovulatory effect is mediated through cAMP and is facilitated by alpha‐adrenergic receptors, while adrenaline involvement in ovulation acts through alpha‐adrenergic receptors without involving cAMP.ZusammenfassungIn vitro‐Untersuchungen über den Ovulationsmechanismus beim HuhnDas Hinzufügen eines Extraktes aus dem größten Ovarfollikel (etwa 1/2 Stunde vor der erwarteten Ovulation) zum Inkubationsmedium führte in vitro zur Ovulation von Follikeln, die 20 bis 24 h vor der erwarteten Ovulation entnommen wurden. Im Unterschied dazu unterdrückte ein Extrakt aus unreifen (zweitgrößten) Follikeln die ovulatorische Wirkung von LH in Dosierungen, die normalerweise ausreichen, um in vitro die Ovulation auszulösen. In solchen Fällen ließ sich die Ovulation nur erreichen, wenn das Medium höhere Konzentrationen von LH enthielt. Es wird daher angenommen, daß bei unreifen Follikeln ein dosisabhängiger Mechanismus zur Unterdrückung der Ovulation führt bzw. daß im größten Follikel ein Mechanismus abläuft, der die Ovulation begünstigt und daß möglicherweise beide Mechanismen wirksam sind. In verschiedenen Inkubationsmedien wurden folgende Substanzen überprüft: LH und Adrenalin, allein und in Kombination mit Imidazol (Phosphodiesterasestimulator, welcher cAMP inaktiviert) oder Tolazolin (Blocker der α‐adrenergischen Rezeptoren). Die Follikel wurden während 10 h bei 41 °C inkubiert, um eine in vitro‐Ovulation auszulösen. Die Ergebnisse zeigten, daß die ovulatorische Wirkung von LH durch cAMP und durch α‐adrenergische Rezeptoren begünstigt wird, während die Beteiligung von Adrenalin am Ovulationsvorgang durch α‐adrenergische Rezeptoren ohne Beteiligung von cAMP erfolgt.RésuméRecherches in vitro sur le mécanisme de l'ovulation chez la pouleL'addition d'un extrait du plus gros follicule ovarien (environ 1/2 heure avant l'ovulation attendue) au milieu d'incubation a provoqué in vitro une ovulation des follicules qui avaient été prélevés 20 à 24 h avant l'ovulation attendue. Par contre, un extrait de follicules immatures (de deuxiàme grosseur) a supprimé l'effet ovulatoire de LH à des doses que suffisent normalement à déclencher l'ovulation in vitro. L'ovulation peut être obtenue dans de tels cas lorsque le milieu contient de plus fortes concentrations en LH. On en a déduit qu'un mécanisme dépendant de la dose inhibe l'ovulation chez les follicules immatures et qu'un mécanisme existe dans les plus gros follicules qui favorise l'ovulation et que vraisemblablement les deux mécanismes sont effectifs. Les substances suivantes ont été testées dans différents milieux d'incubation: LH et adrénaline, seul ou en combinaison avec imidazol (stimulateur de la phosphodiestérase qui inactive cAMP) ou tolazoline (bloqueur des récepteurs α‐adrénergiques). Les follicules furent incubés 10 h à 41 °C pour déclencher une ovulation in vitro. Les résultats ont montré que l'effet ovulatoire de LH est favorisé par cAMP et par des récepteurs α‐adrénergiques alors que la participation de l'adrénaline au mécanisme de l'ovulation se fait par des récepteurs α‐adrénergiques sans participation de cAMP.ResumenEstudios in vitro sobre los mecanismos ovulatorios en la gallinaLa adición de un extracto del folículo ovárico mayor de gallina (una media hora antes de la ovulación esperada) al medio de incubación indujo in vitro la ovulación folicular en los folículos sacados 20 hasta 24 h antes de la ovulación esperada. En contraste, un extracto de folículos inmaduros (que seguían a los mayores) inhibía el efecto ovulatorio de HL en cantidades que normalmente eran suficientes para causar la ovulación in vitro. En casos semejantes solo se pudo lograr la ovulación cuando el medio contenía concentraciones mayores de HL. Por lo tanto, se supone que en los folículos no maduros conduce un mecanismo, dependiente de la dosis, a la inhibición de la ovulación o bien que en el folículo mayor se desencadena un mecanismo que favorece la ovulación y que posiblemente ambos mecanismos son efectivos. En diversos medios de incubación se ensayaron las substancias siguientes: HL y adrenalina, sola o en combinación con imidazol (estimulador de la fosfodiesterasa, el cual inactiva el cAMP) o tolazolina (bloqueador de los receptores α‐adrenérgicos). Los folículos se incubaron durante 10 h a 41 °C para observar la inducción de la ovulación in vitro. Los resultados mostraron que el efecto ovulatorio de la HL es mediado por el cAMP y favorecido por los receptores α‐adrenérgicos, mientras que la participación de la adrenalina en el evento de la ovulación se verifica a través de los receptores α‐adrenérgicos sin intervención del cAMP.