Latent ECSO VIRUS Infections of Sucking Pigs: I. Isolation of latent enteroviruses from tissue cultures, obtained from kidneys of apparently healthy sucking pigs
Authors: Christov St. 
Published: August 2010

SummaryPrimary tissue cultures were prepared from kidneys of 52 clinically healthy sucking pigs. The kidney tissues yielded trypsinized cells with preserved dividing ability and metabolism. As a result of their multiplication, a confluent cell sheet was formed on the glass surface in the course of 72 to 96 hours incubation at 37° C. After this period eleven of them showed spontaneous cytopathogenic changes and viruses were isolated which were resistant to ethyl ether, chloroform, trypsin, sodium desoxycholate and saponin. Ten of the 11 viruses were tested and were neutralized with hyperimmune rabbit sera obtained against standard porcine enteroviruses. In the blood of the pig virus carriers a high level titer of neutralization antibodies against homologous enteroviruses was established. The results of these investigations suggest that a latent enterovirus infection of the pig kidney cells was present in vivo. The role is discussed of an “antibody‐enterovirus” complex as a form of existence of the virus particles in the cell‐virus system, its disintegration in the nutrient tissue culture medium and the subsequent release of unmasked, virulent enterovirus particles, able to infect susceptible cells of the tissue cultures.ZusammenfassungLatente ECSO‐Virus‐Infektionen bei SaugferkelnI. Isolierung latenter Enteroviren aus Nierengewebekulturen von gesunderscheinenden SaugferkelnAus den Nieren von 52 klinisch gesunden Saugferkeln wurden Gewebe‐Primärkulturen hergestellt. Aus dem Nierengewebe wurden trypsinierte Zellen gewonnen, bei denen Teilungsfähigkeit und Stoffwechsel erhalten waren. Nach 72‐ bis 96stündiger Bebrütung bei 37° C bildete sich auf der Glasoberfläche ein konfluierender Zellbelag aus. Danach entwickelten sich in 11 Kulturen spontan zytopathogene Veränderungen, und es wurden Viren isoliert, die gegenüber Äthyläther, Chloroform, Trypsin, Na‐desoxycholat und Sapronin resistent waren. Von ihnen wurden 10 getestet und mit einem Kaninchen‐Hyperimmunserum gegen Standard‐Enteroviren vom Schwein neutralisiert. Im Blut der Virusträger fand sich ein hoher Titer neutralisierender Antikörper gegen die homologen Enteroviren. Diese Befunde machen eine in vivo bestehende Enterovirus‐Infektion der Schweinenierenzellen wahrscheinlich. Die Bedeutung eines “Antikörper‐Enterovirus”‐Komplexes als einer Existenzform von Viruspartikeln im Zell‐Virus‐System wird diskutiert im Hinblick auf den Zerfall im Gewebekultur‐Nährmedium und die folgende Freisetzung unmaskierter virulenter Enteroviruspartikel, die fähig sind, empfängliche Zellen der Gewebekultur zu infizieren.RésuméInfections latentes à ECSO‐virus chez les porceletsI. Isolement d'entérovirus latents sur culture de tissu de reins de porcelets apparentent sainsNous avons préparé des cultures de tissue primaires à partir des reins de 52 porcelets cliniquement sains. De ce tissu rénal, nous avons obtenu des cellules trypsinisées, dont la faculté de division et le métabolisme étaient préservés. Une couche cellulaire confluante se forme sur la surface du verre après 72 à 96 heures d'incubation à 37° C. Un effet cytopathogène se manifeste spontanément sur 11 cultures, d'où l'on parvient à isoler un virus résistant à l'éther éthylique, au chloroforme, à la trypsine, au désoxycholate de Na et à la saponine. 10 de ces souches furent testées et neutralisées avec un hyperimmunsérum de lapin contre les entérovirus standards du porc. On a trouvé dans le sang des porteurs de virus des titres élevés d'anticorps neutralisant les entérovirus homologues. Ces constatations rendent probable la présence in vivo d'une infection à entérovirus dans les reins. En considérant la destruction qui s'opère dans le milieu nutritif de la culture de tissu, suivie d'une libération de particules d'entérovirus virulentes non masquées, qui sont capables d'infecter des cellules réceptives de la culture de tissu, on discute la signification d'un complexe ≪anticorps‐entéro‐virus≫, en tant que mode d'existence de particules virales dans le système cellule‐virus.ResumenInfecciones latentes por virus ECSO en lechonesI. Aislamiento de enterovirus latentes a partir de cultivos hísticos renales de lechones aparentemente sanosDe los riñones de 52 lechones clínicamente sanos se prepararon cultivos hísticos primarios. Del tejido renal se obtuvieron células tripsinadas, en las cuales aun funcionaban la mitosis y el metabolismo. Tras la incubación durante 72–96 horas a 37° C, en la superficie del vidrio se formaba una cubierta celular confluente. Después de este periodo, en 11 cultivos se produjeron modificaciones citopatógenas espontáneas, aislándose virus resistentes frente al éter etílico, cloroformo, tripsina, desoxicolato sódico y saponina. 10 de estos 11 virus se estudiaron y neutralizaron con un suero hiperinmune de conejo, obtenido frente a enterovirus porcinos standard. En la sangre de los portadores de virus se encontró un título elevado de anticuerpos neutralizantes frente a los enterovirus homólogos. Estos hallazgos hacen probable la infección en vida por enterovirus de las células renales porcinas. Se discute la importancia de un complejo ≪anticuerpos‐enterovirus≫ como una forma de existencia de las partículas víricas en el sistema célula‐virus, desintegración en el medio de cultivo hístico nutritivo y la subsiguiente liberación de partículas de enterovirus desenmascaradas, virulentas, que son capaces de infectar células susceptibles de los cultivos hísticos.