The Fluorescent Antibody Technique for Diagnosis of Equine Histoplasmosis (Epizootic Lymphangitis)
Authors: Gabal M. A. , Bana A. A. , Gendi M. E. 
Published: August 2010

SummaryThe fluorescent antibody technique (FA) was evaluated as a diagnostic aid for the diagnosis of equine histoplasmosis, using sera from ten clinical cases of epizootic lymphangitis. The globulin fraction was separated, quantitated and then labelled with fluorescein isothiocynate. Of several antigen fixatives, heat‐fixation was the best. Conjugated sera diluted 1:5 yielded the highest fluorescence intensity with heat‐fixed mycelial antigen preparations. Acetone and P‐formaldehyde treated preparations gave a less efficient intensity. Glutaraldehyde was the least effective fixative.The test confirmed that humoral antibody formation occurs during the course of the infection and the results seem promising for the use of FA as a diagnostic aid.ZusammenfassungDie Benutzung der fluoreszierenden Antikörpertechnik für den Nachweis von equiner Histoplasmose (epizootischer Lymphangitis)Die fluoreszierende Antikörpertechnik wurde erstmals zum Nachweis der Histoplasmose der Pferde (epizootische Lymphangitis) herangezogen. Die Seren stammten von 10 klinischen Fällen. Die Globulinfraktion wurde abgetrennt und mit Fluorescein‐Isothiocyanat markiert.Mehrere Methoden der Antigenfixierung wurden ausprobiert. Am besten geeignet war die Hitzefixation. 1: 5 verdünnte konjugierte Seren zeigten die höchste Fluoreszenz‐aktivität mit hitzefixierten Antigenpräparationen aus dem Mycel. Mit Azeton und p‐Formaldehyd behandelte Präparationen ergaben eine schlechtere Intensität, Glutaraldehyd war am wenigsten geeignet.Während der Infektion kommt es zur Bildung humoraler Antikörper, die mit dem Test nachweisbar waren. Die erzielten Ergebnisse lassen den Test als geeignet für die Diagnose erscheinen.RésuméLa technique des anticorps fluorescents pour le diagnostic de l'histoplasmose équine (Lymphangite épizootique)La technique des anticorps fluorescents a été utilisée pour la première fois dans la mise en évidence de l'histoplasmose chez les chevaux (lymphangite épizootique). Les sérums provenaient de 10 cas cliniques. La fraction des globulines a été séparée et marquée avec l'isothiocyanate de fluorescéine.Différentes méthodes de fixation de l'antigène ont été testées. La fixation thermique fut la plus appropriée. Des sérums conjugés dilués 1: 5 ont montré la plus forte activité fluorescente avec des préparations d'antigène fixées à la chaleur à partir du mycèle. Des préparations traitées à l'acétone et au p‐formaldéhyde ont rendu une intensité moins bonne et le glutaraldéhyde fut le moins approprié.II est apparu pendant l'infection une formation d'anticorps humoraux qui ont été mis en évidence par le test. Les résultats obtenus laissent apparaître que le test est valable pour le diagnostic.ResumenEl uso de la técnica de anticuerpos fluorescentes en el diagnóstico de la histoplasmosis equina (linfangitis epizoótica)Por vez primera se recurrió a la técnica de anticuerpos fluorescentes para la puesta en evidencia de la histoplasmosis de los caballos (linfangitis epizoótica). Los sueros sanguíneos procedían de 10 casos clínicos. Se separó la fracción globulínica, marcándose con isotiocianato de fluoresceína.Se probaron varias técnicas para la fijación del antígeno. La más adecuada era la fijación térmica. Sueros conjugados, diluidos a 1: 5, mostraron la actividad de fluorescencia máxima con preparaciones de antígeno miceliar fijadas con el calor. Las preparaciones tratadas con acetona y p‐formaldehido acusaron una intensidad peor, mientras que el glutaraldehido era el menos apropiado para este fin.Durante la infección se forman anticuerpos humorales, identificables con la prueba. Los resultados obtenidos indican que la prueba es adecuada para establecer el diagnóstico.