The Preparation of an Inactivated Antigen for Bluetongue Serology
Authors: Yang Ch. , Hübschle O. J. B. 
Published: August 2010

SummaryNon‐infectious Bluetongue virus (BTV) was prepared for both a group‐ and type‐specific serological test to detect BTV specific antibodies. Group‐specific antibodies directed against all 21 serotypes were detected with the ELISA whereas serotype‐specific antibodies were shown with the haemagglutination inhibition test. Purified BTV was treated with each of the following substances: hydroxylamine, β‐propiolactone and ethyleneimine. The three substances produced differential inactivation of BTV as judged by innocuity tests and the serological activity retained varied. Hydroxylamine alone produced complete inactivation with full retention of the serological activity, whereas the other compounds caused significant losses of the serological activity. Serological results obtained with inactivated antigen as compared to an uninactivated antigen are presented and the effect of the inactivating compound on the integrity of the virus is discussed.ZusammenfassungDie Herstellung von inaktiviertem Antigen für die Bluetongue SerologieNicht infektiöses Bluetongue (BTV) Virus wurde sowohl für einen gruppen‐ als auch für einen typenspezifischen serologischen Test hergestellt, um spezifische Antikörper gegen BTV nachzuweisen. Gruppenspezifische Antikörper, gerichtet gegen alle 21 Seroty‐pen, wurden mit dem ELISA nachgewiesen, während serotyp‐spezifische Antikörper mit dem Hämagglutinations‐Hemmungstest festgestellt wurden. Gereinigtes BTV wurde mit jedem der folgenden Substanzen behandelt: Hydroxylamin, β‐Propiolakton und Äthylenimin. Die drei Substanzen erzeugten eine unterschiedliche Inaktivierung des BTV, beurteilt durch Unschädlichkeitsprüfungen, und die serologische Aktivität blieb verschieden. Hydroxylamin allein erzeugte eine vollständige Inaktivierung mit voller Beibehaltung der serologischen Aktivität, während die anderen Komponenten einen bedeutenden Verlust der serologischen Aktivität verursachten. Es werden serologische Ergebnisse dargelegt, die mit inaktiviertem Antigen im Vergleich mit nicht inaktiviertem Antigen erhalten wurden, und die Wirkung der inaktivierenden Komponenten auf die Vollständigkeit des Virus wird diskutiert.RésuméPréparation d'un antigène inactivé pour la sérologie de BluetongueUn virus Bluetongue (BTV) non infectieux a été préparé aussi bien pour un test sérologique spécifique de groupes et de types et des anticorps spécifiques contre BTV ont été mis en évidence. Les anticorps spécifiques de groupes contre tous les 21 sérotypes ont été mis en évidence avec ELISA et les anticorps spécifiques des sérotypes avec le test d'inhibition de l'hémagglutination. BTV purifié a été traité avec chacune des substances suivantes: hydroxylamine. β‐propiolacton et éthyléneimine. Les trois substances ont provoqué une inactivation différentielle de BTV examinée par des examens d'inocuité et l'activité sérologique est restée différente. Seule l'hydroxylamine a induit une inactivation complète avec une conservation totale de l'activité sérologique alors que les deux autres composants provoquèrent une perte sensible de l'activité sérologique. On a représenté les résultats sérologiques comparés obtenus avec un antigène activé et non activé et l'action des composants d'inactivation sur l'intégrité du virus a été discutée.ResumenLa preparación de un antígeno inactivado para la serología de la lengua azulSe elaboró virus lengua azul (BTV) no infeccioso tanto para una prueba serológica específica de grupo como para una similar específica de tipo para poner en evidencia anticuerpos específicos frente a BTV. Anticuerpos específicos de grupo, dirigidos contra todos los 21 serotipos, se pusieron en evidencia con el ELISA, mientras que los anticuerpos específicos de serotipo se detectaron por medio de la prueba de inhibición de la hemoaglutinación. BTV purificado fue tratado con cada una de las substancias siguientes: hidroxilamina, β‐propiolactona y etilenimina. Las tres substancias produjeron una inactivación diferente del BTV, apreciadas por medio de exámenes para probar la innocuidad, y la actividad serológica permaneció diferenciada. La hidroxilamina sola producía una inactivación completa conservando del todo la actividad serológica, mientras que los otros componentes ocasionaban una pérdida importante de la actividad serologica. Se exponen resultados serológicos, logrados con antígeno inactivado, en comparación con los obtenidos con antígeno que no fue inactivado, y se discute el efecto de los componentes inactivadores sobre la integridad del virus.