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Die allergische bronchopulmonale Aspergillose (ABPA) bei Patienten mit Mukoviszidose (CF): Klinische Bedeutung, Diagnostik und Therapie
Authors: Paul K.‐D. , Leupold W. , Blaschke‐Hellmessen Renate , Ulbrich Karin , Peter‐Kern Martina , Neumeister V. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Patienten mit Mukoviszidose sind infolge intermittierender bzw. Dauertherapie mit Antibiotika, progredienter Destruktionen des Lungengewebes sowie ihrer Dystrophie für den Befall der Atemwege mit opportunistischen Pilzen wie Aspergillus fumigalus prädisponiert. Besondere klinische Bedeutung kommt dabei der Verlaufsform einer allergischen bronchopulmonalen Aspergillose (ABPA) zu, deren Häufigkeit bei Patienten mit Mukoviszidose 10% beträgt. Die Diagnosestellung einer ABPA kann schwierig sein, da viele der Diagnosekriterien auch auf CF‐Patienten ohne ABPA zutreffen. Die Therapie erfolgt in der Regel mit Predniselon in einer Initialdosis von 0,5–1,0 mg/kg KG/die Dosisreduktion und Therapiedauer orientieren sich am klinischen Befund sowie an der Höhe des Gesamt‐IgE.Summary. Intermittent or long term treatment with antibiotics, progredient destruction of the lungs as well as dystrophy of individuals are predisposing factors for the colonization of the respiratory tract with Aspergillus fumigatus in CF patients. Allergic bronchopulmonary aspergillosis (ABPA) is a significant problem in CF patients. It has been reported with an incidence of 10%. The diagnosis of ABPA in patients with CF is difficult since it is common for both diseases to have several of the same clinical and laboratory features. Prednisolone with an initial dose of between 0,5–1,0 mg/kg/day remains the treatment of choice for ABPA. The dosis reduction and the duration of the treatment depend on clinical findings and on serum IgE levels.
Disseminierte Aspergillose und Mucormykose. Ein Fallbericht
Authors: Mölle M. , Blaschke‐Hellmessen Renate , Schuler U. , Nowak R. , Ehninger G. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Es wird über das von einer pulmonalen Co‐Infektion ausgehende duplizitäre Auftreten einer disseminierten Aspergillose durch Aspergillus fumigatus und einer disseminierten Mucormykose durch Rhizomucor pusillus bei einer 40jährigen Patientin mit akuter myeloischer Leukämie und Neutropenie berichtet. Mit Kultivierung von Bronchialsekret gelang die Diagnosestellung bereits antemortal. Trotz hochdosierter intravenöser Amphotericin‐B‐Therapie konnte ein fataler Ausgang nicht verhindert werden. Autoptisch wurden Aspergillus‐Hyphen in Lunge und Gehirn und Zygomyzeten‐Hyphen in Leber und Nieren nachgewiesen.Summary. This paper reports a simultaneous pulmonary infection due to Aspergillus fumigatus and Rhizomucor pusillus which evolved to disseminated aspergillosis and mucormycosis in a leukaemic and neutropenic 40‐year‐old woman. Both fungi were cultured ante mortem from bronchial secretion. Although high doses of intravenous amphotericin B were administered, the course of the infection was fatal. At autopsy, aspergilli were demonstrated by histology in lungs and brain, and zygomycetes were found to have invaded liver and kidneys.
Antimykotische Prophylaxe in der protrahierten Neutropenie und der allogenen Knochenmarktransplantation
Authors: Blau I. W. , Fauser A. A. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Invasive Pilzinfektionen sind schwerwiegende Komplikationen in der Behandlung von Patienten mit hämatologischen Erkrankungen. Systemische Mykosen werden insbesondere begünstigt durch lang anhaltende Neutropenien und durch die Kolonisation mit Pilzen nach längerer Gabe von Breit‐spektrum‐Antibiotika. Die Risiken einer systemischen Pilzinfektion sind insbesondere bei der allogenen familiären und unverwandten Knochenmarktransplantation hoch einzuschätzen und mit einep hohen Morbidität und Mortalität verbunden. Aus diesen Gründen werden neue Strategien in der Prävention systemischer Pilzinfektionen diskutiert, so zeigt die Einfuhrung von Triazolen und die liposomale Darreichungsform von Amphotericin B neue Möglichkeiten auf, Pilzinfektionen zu verhindern oder diese in ihrem Verlauf positiv zu beeinflussen. In dieser Übersicht werden die Klinik invasiver Pilzinfektionen bei Patienten mit hämatologischen Grunderkrankungen diskutiert und Wege zur antimykotischen Prophylaxe aufgezeichnet.Summary. Severe and prolonged neutropenia and fungal colonization during the long term administration of broad‐spectrum antibiotics are well known factors increasing the risk of invasive fungal infections. This is in particular true in patients undergoning allgeneic bone marrow transplantation due to the intensity of the conditioning regimen, the immuno‐suppressive effect of allografting and the administration of immunosuppressive agents to prevent graft‐versus‐host‐disease. Therefore, strategies in the prevention of fungal infections decreasing the morbidity and mortality in patients with hematological malignancies need to be developed. In this review, we discussed fungal infections an important cause of morbidity and mortality in patients with hematological disorders and attempted to provide some insights in the current status of antifungal prophylaxis.
Untersuchungen zum ökologischen Verhalten von Cryptococcus neoformans
Authors: Kielstein P. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Tenazitätsprüfungen von Cryptococcus neoformans im Vogelkot verschiedener Ziervögelarten und von Hühnern ergaben den Hinweis, daßCr. neoformans in unsterilen sowie in bakterienfreien Kotproben von Großsittichen und Hühnern im Vergleich zu Kleinsittichen geringere Überlebenschancen haben. Aufgrund der Überlebensrate von Cr. neoformans in Pufferlösungen mit pH‐Werten von 8,5–9,5 wird geschlußfolgert, daßCr. neoformans keine Alkaliempfindlichkeit aufweist. Deshalb ist für das Absterben von Cr. neoformans im Vogelkot nicht ein durch Faulnis bedingter pH‐Wert‐Anstieg verantwortlich. Möglicherweise sind fungistatisch wirkende Substanzen des Vogelkots daran betelligtSummary. Tenacity studies of Cryptococcus neoformans in bird droppings originated from different ornamental birds and chickens showed that there is less chance for this fungus species to survive in non‐sterile or bacteria‐free droppings of large parakeets and chickens in comparison with droppings of small parakeets. Survival rates of Cr. neoformans in buffer solutions with pH‐values ranging from 8.5–9.5 allow to conclude that this species is not alkali‐sensitive. Therefore, the increase of pH is not regarded responsible for the survival of Cr. neoformans in bird droppings. Possibly fungistatic substances present in droppings are involved.
Empfindlichkeitsprüfung von Fluconazol: Auswertung einer Multizenter‐Studie der Arbeitsgemeinschaft „Klinische Mykologie” der Deutschsprachigen Mykologischen Gesellschaft
Authors: Schmalreck A.‐F. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. An einem Ringversuch zur Invitro‐Testung von Fluconazol gegenüber klinischen Hefe‐lsolaten nahmen 21 Labors der Arbeitsgemeinschaft, Klinische Mykologie“der Deutschsprachigen Mykologischen Gesellschaft teil. 1181 klinische Isolate von 1033 Patienten wurden in den Zentren anhand eines standardisierten Testprotokolls mittels Mikrodilutionstest, Agardiffusionstest und teilweise im Agardilutionstest auf ihre Empfindlichkeit gegenüber Fluconazol überprüft. Ca. 600 Stämme (59.1 %) der an ein Referenzzentrum eingesandten 1106 Isolate wurden von einem Labor (Zentrum 13) nachgetestet. Diese Stämme zeigten nahezu die gleiche prozentuale Speziesverteilung wie das Gesamtkollektiv. Für 90% aller Isolate wurde eine MHK von ≤ 4 μg/ml und für 90% der Candida albicans‐Stämme eine MHK von ≤ 2 μg/ml ermittelt. Nur ca. 9% aller Isolate (Candida albicans 4%) zeigten eine MHK von ≤ 25 μg/ml. Durch das Mittesten von 10 Kontrollstämmen, verteilt an alle Labors von dem Referenzzentrum, wurde die Inter‐ und Intralabor‐Vergleichbarkeit der Empfindlichkeitsprüfung von Fluconazol überprüft. Die Ergebnisse zeigten, daß die in der Bakteriologie routinemäßig eingesetzten Methoden Mikrodilution, Agardilution und Agardiffusion bei entsprechenden technischen Voraussetzungen und standardisierten Testbedingungen auch für eine reproduzierbare Empfindlichkeitsprüfung von Sproß‐pilzen im mykologischen Routinelabor einsetzbar sind.Summary. In a collaborative study for in vitro testing of fluconazole against clinical yeast isolates participated 21 laboratories of the working group „Clinical Mycology” of the German Speaking Mycological Society. In these centers, according to a standard test protocol 1181 clinical isolates from 1033 patients were tested to their susceptibility against fluconazole by microdilution, agar diffusion and partly by agar dilution. Approximately 600 strains (59.1%) of the collective of 1106 isolates sent to a reference center underwent retesting in one laboratory (center 13). These strains demonstrated almost the same species distribution as the total collective. For 80% of all isolates a MIC of ≤ 4μg/ml and for 90% of the Candida albicans strains a MIC of ≤ 2μg/ml has been determined. Only approx. 9% of all isolates (4% with Candida albicans) showed a MIC of ≤ 25μg/ml. By parallel testing of 10 control strains issued by the reference center to the laboratories, the inter‐ and intra‐laboratory comparability of the susceptibility testing of fluconazole was checked. The results demonstrated that under appropriate tech‐ nical prerequisites and standardised test conditions, the methods used routinely in bacteriology microdiluti‐ on, agar dilution and agar diffusion may also be applied in a reproducible way in the routine mycological laboratory for the susceptibility testing of yeasts.
Kriterien zur Empfindlichkeitsprüfung von Fluconazol im Mikrodilutionstest: Vorschlag für eine standardisierte Methode zur Testung von Sproßpilzen
Authors: Schmalreck A.‐F. , Fegeler W. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Für den Vorschlag zu einer standardisierten Empfindlichkeitsprüfung von Hefen gegenüber Fluconazol wurden die Laborerfahrungen der letzten Jahre sowie die Ergebnisse eines Ringversuches mit 21 Laboratorien aus Deutschland und Österreich zusammengefafßt. Die vorliegende Arbeit erläutert den Arbeitsablauf und gibt Hinweise zur Durchführung und Bewertung der Mikrodilutions‐Methode.Summary. For the proposal of a standardised susceptibility testing method of yeasts against fluconazole the laboratory experiences of the last years and the results of a collaborative study of 21 laboratories from Germany and Austria were compiled. The present paper reflects the work flow and gives advice for performing the microdilution method.
Die In‐vitro‐Empfindlichkeitsprüfung von Candida‐Species gegenüber Fluconazol im Mikrodilutionstest unter Einsatz von Alamar Blue
Authors: Schröder Gudrun , Bernhardt Hannelore , Schulz Katrin 
Published: April 2009

ZUSAMMENFASSUNG. Die Fluconazoltestung von Candida‐Spezies erfolgte im Mikrodilutionstest mit supplementiertem HR‐Medium. Zur Verbesserung der visuellen MHK‐Bestim‐mung wurde der Redox‐Indikator Alamar Blue 10%ig dem Testmedium zugesetzt. Die gute Reproduzierbarkeit des Testverfahrens konnte mit Kontrollstümmen und Patientenstämmen nachgewiesen werden. Die Eignung dieser Methode in der Routinediagnostik zeigte sich bei der In‐vitro‐Empfindlichkeitsprüfung von 279 Candida‐Isolaten von Patienten mit einer massiven Candida‐Kolonisierung bzw. einer Endomykose.Die Candida‐Spezies variierten in ihrer Empfindlichkeit gegenüber Fluconazol. Während 96% der. C.‐albi‐cans‐Isolate sensibel waren, fanden wir bei 55% der C.‐glabrata‐Stämme eine verminderte Empfindlichkeit, und 26% dieser Spezies waren resistent (MHK > 25 μg/ml). Neun der elf isolierten C.‐krusei‐Stämme waren Fluconazol‐resistent.Summary. The investigation of susceptibility of Candida species to fluconazole was performed in microdilution to a supplemented HR‐medium. The sufficient reproducibility of the test was verified using special control isolates and isolates of patients. The excellent applicability of the method in routine diagnostics was evaluated by in vitro testing of susceptibility of 279 Candida isolates from patients being colonised or suffering from endomycoses. The Candida species showed different suceptibility against fluconazole: 96% of the C. albicans isolates were sensitive, 55% of the C. glabrata isolates had a reduced sensitivity, and 26% were resistant against fluconazole (MIC > 25 μg/ml). C. krusei isolates were highly resistant (9 of 11 strains).
Empfindlichkeitsprüfung von Hefen gegenüber Fluconazol: Vorschlag für eine standardisierte Agardiffusions‐Methode mit 25‐μg‐Fluconazol‐Testblättchen
Authors: Schmalreck A.‐ F. , Kottmann I. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Der Beitrag enthält einen Vorschlag für die standardisierte Empfindlichkeitsprüfung von Hefen im Agardiffusionstest mit 25‐μg‐Fluconazol‐Testblättchen. Die Methodik ist das Ergebnis mehr‐jähriger Bemühungen, eine zuverlässige und reproduzierbare Routinemethode für das mikrobiologische Labor zu entwickeln. In den Vorschlag sind zudem die Erfahrungen und Anregungen aus einem Ringversuch zur Empfindlichkeitsprüfung von Fluconazol mit 21 Laboratorien aus Deutschland und Österreich mit eingeflossen.Summary. This paper gives a proposal for a standardised agar diffusion susceptibility testing method with 25 μg fluconazole discs. The methodology compiles the results of several years of work to develop a reliable and reproducible routine‐method for the microbiology laboratory. In this proposal, in addition, the critics and experiences of a collaborative study for susceptibility testing of fluconazole with 21 laboratories from Germany and Austria are included.
Fluconazol‐ und Itraconazol‐Sensibilitätsprüfung an klinischen Hefe‐Isolaten und Algen der Gattung Prototheca mittels Etest
Authors: Blaschke‐Hellmessen Renate 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Nach den bisherigen eigenen Erfahrungen ist der Etest® (Hersteller: AB BIODISK, Solna, Schweden) zur routinemäßigen antifungalen Sensibilitätsbestimmung für Fluconazol und Itraconazol als eine einfach zu handhabende Methode mit reproduzierbaren Ergebnissen für mikrobiologische Laboratorien geeignet. Die Testung von klinischen Hefepilz‐Isolaten (n = 46), von Exophiala dermatitidis (n = 5) und Algen der Gattung Prototheca (n = 4) erbrachte art‐, gattungs‐ und stammspezifische Unterschiede in der Empfindlichkeit für Fluconazol und Itraconazol. Candida glabrata enwies sich für beide Präparate als weniger sensibel als die übrigen Candida‐Arten mit Ausnahme von Candida krusei. Exophiala war hochempfind‐lich für Itraconazol und gering empfindlich oder resistent für Fluconazol. Prototheca wickerhamii und P. zopfii waren gegen beide Triazole resistent. Casitone‐Agar brachte als Testmedium den deutlichsten Hemmeffekt im Vergleich zu Sabouraud‐Glucose‐ und Yeast Morphology Agar hervor. Die Ergebnisse des Etests für Fluconazol stimmten mit denen eines Breakpoint‐Tests (Mikrodilutionsmethode) überein. So wurden bei Wachstum der Pilze bei Konzentrationen bis ≥ 4 μg Fluconazol/ml im Breakpoint‐Test vergleichsweise im Etest MHK‐Werte von ≥ 4 μ/ml erreicht.Summary. Preliminary own results suggest, that the Etest® (produced by AB BIODISK, Solna, Sweden) performed on casitone medium meets the requirements of a routine test of yeast susceptibility to fluconazole and itraconazole. Testing of 46 clinical yeast isolates, of 5 strains of Exophiala dermatitidis and 4 strains of algae of the genus Prototheca revealed species‐, genus‐and strain‐specific variations of the susceptibility to fluconazole and itraconazole. Candida glabrata was less susceptible to both triazoles than the other Candida species with exception of Candida krusei. Exophiala dermatitidis was highly susceptible to itraconazole. Protothecc wickerhamii and P. zopfii were resistant to both triazoles. — Casitone medium is most appropriate for the determination of susceptibility to fluconazole and itraconazole by the Etest.— The results of the Etest were comparable with those of a breakpoint test (microdilution method).
Vergleich von drei Antimykotika‐Empfindlichkeitsprüfungs‐Methoden für die In‐vitro‐Testung von Candida‐Isolaten von Patienten mit HIV‐Infektion
Authors: Ruhnke M. , Schmidt‐Westhausen A. , Trautmann M. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Es wurden die MHK‐Werte für Fluconazol von 90 Candida‐Isolaten (56 C. albicans, 15 C. glabrata, 9 C. krusei und 10 C. tropicalis) untersucht. Zur Antimykotika‐Resistenztestung wurden die Mikrodilutionsmethoden nach dem Protokoll M27‐P des NCCLS (M27‐Pmicro) mit RPMI 1640‐Medium sowie der Methode nach Troke & Pye mit HR‐Medium (HRmicro) als auch die Agardiffusionsmethode mit dem Etest (YNB‐Agar) verwendet. Die Ergebnisse mit diesen Methoden wurden mit den klinischen Befunden verglichen. Sämtliche C. albicans‐Isolate von AIDS‐Patienten mit Fluconazol‐refraktärer Candidose hatten MHK‐Werte entweder ≥ 6,25 μg/ml (M27‐Pmicro) oder ≥ 25 μg/ml (HRmicro und Etest). Andererseits lagen die MHK‐Werte von C. albicans‐Isolaten bei AIDS‐Patienten mit Fluconazol‐empfindlicher Candidose teil‐weise ebenfalls über diesen Endpunkten. Ein mögliches Ansprechen auf eine Fluconazol‐Therapie kann somit nicht zwangsläufig von dem MHK‐Wert abgeleitet werden.Summary. The MIC values of fluconazole were determined for 96 Candida isolates (56 C. albicans, 15 C. glabrata, 9 C. krusei and 10 C. tropicalis). The methods employed for antifungal susceptibility testing were: microdilution according to the protocol M27‐P of the NCCLS (M 27‐Pmicro) using RPMI 1640 medium or HR medium following Troke & Pye (HRmicro) as well as the agar diffusion method by means of the Etest (YNB agar). The in vitro results were compared with the clinical outcome of patients. All C. albicans isolates received from AIDS patients with fluconazole‐refractory candidosis showed MICs of ≥ 6,25 mg/ml (M27‐Pmicro) or ≥ 25 mg/ml (MRmicro) and Etest). On the other hand some MICs of C. albicans isolates from AIDS patients with fluconazole‐sensitive candidosis were also beyond these breakpoints. Therefore a possible success of a fluconazole therapy cannot unequivocally be predicted from the MIC value determined in vitro.
Fluconazol: Vergleich von Pharmakokinetik, Therapie und Empfindlichkeit der Sproßpilze in vitro
Authors: Wildfeuer A. , Laufen H. , Schmalreck A.‐F. , Yeates R. A. , Zimmermann T. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Fluconazol penetriert gut in die untersuchten Gewebe bzw. Körperflüssigkeiten und erzielt eine schnelle Äquilibrierung der Konzentrationen zwischen unterschiedlichen Kompartimenten. Die nach intravenöser oder oraler Applikation dosisproportionale Pharmakokinetik und die nur langsame Elimination (t1/2 30 h) des Triazols aus dem Körper erleichtern eine Voraussage für die therapeutisch wirksame Dosierung. Die im Blut gemessenen Fluconazol‐Konzentrationen konnen auch bei Patienten auf verschiedene Gewebe (Lunge, Gehirn, gynäkologische Proben) bzw. andere Körperflüssigkeiten (Sputum, Speichel, Vaginalsekret) oder Exsudate projiziert werden. Im Liquor cerebrospinalis und Kammerwasser des Auges betragen die Konzentrationen des Antimy‐kotikums etwa 80% der Blutspiegel. Die überwiegend renale Ausscheidung von unverandertem Fluconazol bewirkt hingegen im Urin 10–20fach höhere Konzentrationen als im Blut. Dieses pharmakokinetische Profil, das Fluconazol in der Behandlung mykotischer Harnwegsinfekte per se begünstigt, erfordert allerdings bei Patienten mit eingeschränkter Nierenfunktion die Anpassung der systemischen Therapie an eine niedere Dosierung. Die Empfindlichkeit der Sproßpilze korreliert in vitro und in vivo mit den in verschiedenen Kompartimenten des Körpers gemessenen Fluconazol‐Konzentrationen.Summary. Fluconazole penetrates well into the tissues and body fluids which were examined and achieves rapid equilibration between the different compartments. The pharmacokinetics of fluconazole are independent of the dose after oral or intravenous administration. This finding, together with the drug's slow elimination (t1/2 30 h) facilitate the estimation of the therapeutically effective dosage. The concentrations of fluconazole measured in blood can be extrapolated to the concentrations in tissue (lung, brain, gynecological tissues), body fluids (sputum, saliva, vaginal secretions) and exudates. The concentration of fluconazole in cerebrospinal fluid and in the vitreous humour of the eye is ca. 80% of that in blood. Fluconazole is predominantly excreted in the urine in the unchanged form, which explains the 10 to 20 fold higher concentration of the drug in urine relative to blood. Although this pharmacokinetic profile favours the use of fluconazole in mycotic infections of the urinary tract it also means that the dose of the drug may have to be adapted to lower regimens in the systemic treatment of patients with restricted kidney function. The in vitro and in vivo susceptibility of the yeasts correlates with the concentrations of fluconazole measured in the different compartments of the body.
Adhesion of Candida albicans to epithelial cells ‐ effect of nikkomycin
Authors: Segal Esther , Gottlieb S. , Altboum Z. , Gov Y. , Berdicevsky Israela 
Published: April 2009

Summary. This study investigated the effect of the chitin synthetase inhibitors, the nikkomycins (NZ and NZ + NX), on Candida albicans adhesion to buccal epithelial cells (BECs) in vitro. The effect was expressed in reduced chitin synthetase activity and chitin content of fungal cells. In vitro adhesion assays to BECs of Candida exposed to NZ and NZ + NX revealed reduced adhesion values. Light, scanning and transmission electron microscopy (SEM, TEM) of NZ‐treated and untreated microorganisms showed changed fungal morphology and reduced adherence of the treated yeasts. Scanning electron microscopy of NZ‐treated C. albicans labelled with gold‐conjugated wheatgerm agglutinin (WGA) revealed less labelling than in the untreated organisms. A close contact between the fungus and the epithelial cell at a site with intense WGA‐gold labelling was noted in TEM experiments. The data point to the involvement of chitin in the adhesion of C. albicans to epithelial cells.Zusammenfassung. Es wurde die Wirkung des Chitinsynthetase‐Hemmers Nikkomycin auf die Adhärenz von Candida albicans an Epithelzellen der Mundschleimhaut in vitro untersucht. Der Einfluß wurde über die Reduktion der Chitinsynthetase‐Aktivität und des Chitingehalts der Pilzzellen erfaßt. Lichtmikroskopisch, raster‐ und transmissions‐elektronenmikroskopisch Zeigten die Nikkomycin‐behandelten Hefezellen morphologische Veränderungen und reduzierte Adhärenz. Nikkomycin‐behandelte C. albicans‐Zellen, die mit Gold‐konjugiertem Weizenkeimagglutinin (WGA) inkubiert waren, erwiesen sich weniger markiert als nicht mit Nikkomycin‐behandelte Hefezellen. Transmissionselektronenmikroskopisch wurde eine intensive WGA‐Gold‐Markierung am Ort intensiven Kontaktes zwischen Epithelzelle und adhärenter Pilzzelle beobachtet. Die Ergebnisse sprechen für die Beteiligung von Chitin bei der Adhärenz von C. albicans an Epithelzellen.