Preparation and Testing of a Goat Pox Vaccine from a Pathogenic Field Isolate Attenuated in Cell Culture
Authors: El‐Zein A. , Nehme S. , Singh K. V. 
Published: August 2010

SummaryA field goat pox virus (GPV) isolate was attenuated through 120 passages in sheep testicular cell (STC) cultures and used as a vaccine. Direct adaptation of the virus on STC needed either one passage in susceptible goats or treatment of the virus or of the virus‐infected cell with proteolytic enzymes.Cell strains developed from frozen primary cultures retained a normal diploid state over 11 cell passages. Rabbit testicular cell (RTC) cultures were not susceptible to GPV and virus passages on co‐cultivated strains of STC and RTC cultures as well as treatment with proteolytic enzymes did not promote RTC susceptibility to GPV. The virus isolate was not pathogenic for sheep and was not or only weakly related to a vaccinal sheep pox virus. Both viruses grew to a limited extent in heterologous hosts. Periodic challenges of vaccinated goats showed that the attenuated GPV to be highly immunogenic; the immunity lasted at least one year.ZusammenfassungHerstellung und Prüfung eines Ziegenpockenimpfstoffes aus einem pathogenen in Zellkulturen attenuierten FeldisolatEin Ziegenpocken (GPV)‐Feldvirus wurde über 120 Passagen in Schafherden‐Zellkulturen (STC) attenuiert und als Vakzine eingesetzt. Für die direkte Adaptierung des Virus an STC erwies sich entweder eine Passage in empfänglichen Ziegen oder die Behandlung des Virus bzw. der virusinfizierten Zellen mit proteolytischen Enzymen als notwendig.Aus primären tiefgefrorenen ST‐Zellen abgeleitete Zellinien behielten über 11 Zell‐passagen ihren normalen diploiden Charakter. Kulturen aus Kaninchenhoden (RTC) waren für GPV nicht empfänglich. Dies ließ sich auch durch Cokultivierung von RTC mit STC und durch eine Behandlung der Zellen mit proteolytischen Enzymen nicht verbessern. Das Virusisolat war für Schafe nicht pathogener und zeigte keine oder kaum eine Beziehung zu einem Schafpocken‐Impfvirus. Beide Viren vermehrten sich nur sehr begrenzt in heterologen Wirten.Testinfektionen bei geimpften Ziegen in regelmäßigen Abständen bestätigten dem attenuierten GPV eine hohe Immunogenität. Der Impfschutz hielt mindestens 1 Jahr an.RésuméPréparation et testage d'un vaccin variolique caprin à partir d'un isolement pathogène du terrain atténué en cultures cellulairesUn virus sauvage (GPV) de la variole de la chèvre a été atténué par 120 passages sur cultures cellulaires ovine (STC) et utilisé comme vaccin. L'adaptation directe du virus à STC a nécessité soit un passage sur des chèvres réceptives, soit le traitement du virus ou des cellules infectées par le virus avec des enzymes protéolytiques. Les lignées cellulaires issues des celllules ST primaires congelées ont conservé leur caractère diploïde normal sur 11 passages cellulaires. Des cultures à partir de testicules de lapins (RTC) n'ont pas été réceptives pour GPV. Une cocultivation de RTC avec STC et un traitement des cellules avec des enzymes protéolytiques n'ont rien amélioré. Le virus isolé n'a pas été pathogène pour des moutons et n'a montré aucune ou peu de parenté avec un virus vaccinal de la variole ovine. La multiplication des deux virus a été très limitée chez des hôtes hétérologues.Des infections expérimentales chez des chèvres vaccinées à intervalles réguliers ont confirmé une forte immunogénicité pour GPV atténué. La protection vaccinale a duré au moins une année.ResumenPreparación y contrastación de una vacuna antivariólica para cabras, elaborada en cultivo celular a partir de un aislamiento campal patógeno atenuadoUn virus campal de viruela caprina (GPV) se atenuó a través de más de 120 pases por cultivos celulares de testículos de moruecos (STC), empleándose como vacuna. Para la adaptación directa del virus a los STC resultó necesario bien un pase por cabras receptivas o bien el tratamiento del virus resp. de las células infectadas con virus con enzimas proteoliticas.Las líneas celulares derivadas de células ST criocongeladas primarias conservaron a lo largo de 11 pases celulares su carácter diploide normal. Los cultivos de testículos de conejo (RTC) no eran receptivos para GPV. Esto tampoco se pudo mejorar mediante cocultivo de RTC con STC ni por medio de un tratamiento de las células con enzimas proteolíticas. El virus aislado no era patógeno para ovejas y no mostraba ninguna o apenas una relación con una virus‐vacuna contra la viruela ovina. Ambos virus se multiplicaban solo dentro de límites muy estrechos en dos anfitriones heterólogos.Infecciones de prueba llevadas a cabo en cabras vacunadas en plazos de tiempo regulares confirman al GPV atenuado una inmunogeneidad muy elevada. La protección vacunal duró l año cuanto menos.