Herstellung von monospezifischen Immunglobulinfraktionen (IgG, IgM) und anti‐Immunglobulinseren (anti‐IgG, anti‐IgM) zur quantitativen Serumimmunglobulinermittlung beim Hund
Authors: Thimel Heidi 
Published: August 2010

ZusammenfassungZur Herstellung monospezifischer Antiimmunglobulinseren (anti‐IgG1, anti‐IgG2ab, anti‐IgG2c, anti‐IgM) für die quantitative Auswertung der Immunglobuline beim Hund wird versucht, die Immunglobuline IgG1, IgG2ab, IgG2c und IgM mit Hilfe der Ammoniumsulfatfällung, der Borsäurefällung, der Dialyse gegen 0,005 M Phosphatpuffer, der Gelfiltration und der Ionenaustauschchromatographie aus Seren erwachsener Hunde rein zu isolieren. IgG2ab wird rein gewonnen, IgG1 wird in den meisten Fällen als Doppelfraktion zusammen mit IgG2ab isoliert, IgG2c kann nicht identifiziert werden, und IgM weist nur sehr geringe Verunreinigungen auf.Mit diesen Immunglobulinfraktionen werden Meerschweinchen immunisiert; die gebildeten Antiseren werden in der Immunelektrophorese und Immundiffusion auf Reinheit geprüft und bei Verunreinigungen entsprechend abgesättigt.Die angewandten Methoden sind zuverlässig reproduzierbar.Frau Hermine Seidler danke ich für die Anfertigung des elektrophoretischen Teils der Immunelektrophorese. Herrn Dr. Franz Gruber, Institut für Versuchstierkunde und Versuchstierkrankheiten der Freien Universität Berlin, danke ich für die Immunisierung der von ihm zur Verfügung gestellten Versuchstiere.SummaryPreparation of monospecific immunoglobulin fractions (IgG, IgM) and anti‐immunoglobulin sera (anti‐IgG, anti‐IgM) for quantitative serum immunoglobulin measurement in the dogFor the preparation of monospecific anti‐immunoglobulin sera (anti‐IgG1, anti‐IgG2ab, anti‐IgG 2c, anti‐IgM) for the quantitative evaluation of dog immunoglobulins, the immunoglobulins concerned were prepared by ammonium sulphate precipitation, boric acid precipitation, dialysis against 0.005 M phosphate buffer, gel filtration and ion exchange chromatography of sera of adult dogs. IgG2ab was obtained pure, IgG1 was mostly isolated as a double fraction with IgG2ab, IgG2c could not be identified and IgM showed only very slight impurities.Guinea pigs were immunized with these immunoglobulin fractions. The resulting antisera were tested by immunoelectrophoresis and immunodiffusion for their purity and in the case of impurities they were desaturated.The methods proved to be dependably reproducible.RésuméPréparation de fractions d'immunoglobulines monospécifiques (IgG, IgM) et de sérums anti‐immunoglobulines (anti IgG, anti IgM) pour la recherche quantitative des immunoglobulines sériques chez le chienPour la recherche quantitative des immunoglobulines sériques chez le chien on a cherché à préparer des serums anti‐immunoglobulines (anti‐IgG1, anti‐IgG2ab, anti‐IgG2c, anti‐IgM). On a tenté d'isoler les immunoglobulines IgG1, IgG2ab, IgG2c et IgM de façon pure à partir de sérums de chiens adultes avec la précipitation par le sulfate d'ammonium et l'acide borique, par la dialyse avec une solution de phosphatetampon 0,005 M, par la filtration sur gel et par la chromatographie d'échange ionique. IgG2ab a été obtenue de façon pure; IgG2c fut isolée dans la plupart des cas comme fraction double avec IgG2ab; IgG2c n'a pu être identifiée; IgM a montré une très faible quantité d'impuretés. Des cobayes ont été immunisés au moyen de ces fractions d'immunoglobulines; les antisérums obtenus furent testés avec l'immunoélectrophorèse et l'immunodiffusion pour leur pureté et on a procédé par désaturation correspondante lors d'impuretés.Resumen