Ein Beitrag zur Reindarstellung des Psittakose‐Virus durch Behandlung mit Trypsin
Authors: Roots E. , Rott R. 
Published: September 2010

ZusammenfassungEs wird ein Verfahren zur Reinigung des Psittakose ‐ Virus beschrieben, das einwandfreie elektronenmikroskopische Bilder ermöglicht. Die im Unter‐suchungsmaterial (infektiöse Eiflüssigkeiten) vorhandenen groben Beimengungen wurden durch niedertourige Zentrifugation (3 Minuten lang bei 2000 U/min) entfernt, die Überstände mehrmals bei 4200 g gewaschen und die so gewonnenen Sedimente mit Trypsin 3 Stunden lang bei 40° C behandelt. Nach erneutem mehrmaligem Waschen war der für optische Untersuchungen erforderliche Reinigungsgrad erreicht.An den Viren konnten morphologische Veränderungen, die durch die Art der Behandlung bedingt sein könnten, nicht festgestellt werden.Für die wertvolle Hilfe beim Arbeiten am Elektronenmikroskop und für die photographische Arbeit danken wir der technischen Assistentin Frl. Inge‐Marie Schultze verbindlichst.SummaryStudies on the purification of the psittacosis virus with trypsinA method was described of purifying Psittacosis virus for use in the electronmicroscope. The material to be examined (fluid from infected eggs) was centrifuged at low speed (3 minutes at 2000 rpm). The supernatant was washed several times at 4200 g. The resulting precipitate was treated with trypsin for 3 hours at 40° C. After several additional washings the preparation was ready for use. Specimens prepared by this method were found to be free from undesirable background contaminations. No alterations due to this treatment could be detected in the virus.RésuméRecherches sur la purification par la trypsine du virus de la psittacoseLes auteurs décrivent un procédé de purification du virus de la psittacose, permettant une microscopie électronique impeccable. Les impuretés grossières contenues dans le matériel d'examen (liquides infectieux de l'oeuf) sont enlevés par une centrifugation de 3 minutes à 2000 tours/mn. Les suspensions restantes sont lavées plusieurs fois à 4200 g et le sédiment est traité à la trypsine pendant trois heures à 40°C. Après plusieurs lavages successifs on obtient le degré de purification nécessaire pour les examens optiques.On ne put constater aucune modification morphologique du virus qui puisse être imputée au procédé de purification.ResumenContribución al aislamiento al estado puro de virus de la psittacosis mediante el tratamiento con tripsinaSe describe una técnica para purificar el virus de la psitacosis, permitiendo la obtención de imágenes perfectas a través del microscopio electrónico. Las impurezas más groseras presentes en el material analizado (líquidos infecciosos del huevo) se separaron mediante la centrifugación a poco velocidad (durante tres minutos a 2.000 r.p.m.), el líquido sobrenadante se lavó varias veces con 4.200 g, y los sedimentos así obtenidos se trataron entonces con tripsina durante 3 horas a 40°C. Después de lavar nuevamente repetidas veces, se había logrado el grado de pureza precisado para las investigaciones ópticas.En los virus no se pudieron comprobar alteraciones morfológicas que pudieran estar condicionades por este tipo de tratamiento.