Untersuchungen über den Neutralisationstest bei der infektiösen Bronchitis der Hühner
Authors: Vicco Bülow 
Published: August 2010

ZusammenfassungNeutralisationsversuche mit verschiedenen Serotypen des Hühnerbronchitis‐Virus (IBV) wurden nach der Serum‐ und der Virusverdünnungsmethode in embryonierten Hühnereiern und in Hühnerembryonieren (HEN)‐Kulturen durchgeführt. Dabei zeigten sich variable, lineare Beziehungen zwischen Testvirusdosis (log ID50) und Serumtiter (log ND50). Die Neigung der Neutralisationsgeraden war von der Virusvirulenz und der Empfänglichkeit des Wirtszellsystems, nicht aber von Eigenschaften des Immunserums abhängig. Versuche mit relativ stark virulentem IBV ergaben am häufigsten Neutralisationsgeraden mit einer Neigung von etwa — 2,0 bei embryonierten Eiern bzw. — 2,5 bei HEN‐Kulturen. Die für ein Hyperimmunserum ermittelten Dosis‐Wirkungs‐Kurven (Serumverdünnungs‐Methode) entsprachen der Poisson‐Verteilung und hatten je nach Virusvirulenz bzw. Empfänglichkeit des Wirtszellsystems eine Spannweite von 0,9 bis 1,5 (log Serumverdünnung). Demgegenüber ergaben die Dosis‐Wirkungs‐Beziehungen beim Virus (Virus‐verdünnungs‐Methode) Ein‐Treffer‐Kurven mit der konstanten Spannweite von 2,4 (log Virusverdünnung). Die Konsequenzen der dargestellten variablen quantitativen Beziehungen für die Methodik des Neutralisationstestes und für die Beurteilung qualitativer Unterschiede bei der serologischen Differenzierung von IBV‐Stämmen werden eingehend diskutiert und die Methode mit abgestuften Serumverdünnungen empfohlen.Herrn Dr. habil. F. Hecke danke ich für die sehr anregenden Diskussionen. Der technischen Assistentin Frl. Marita Schultes danke ich für ihre gewissenhafte und fleißige Mitarbeit.SummaryStudies on the neutralisation test in infectious bronchitis in poultryNeutralisation tests with different serotypes of IB virus were carried out by the serum‐ and virus‐dilution methods in embryonated eggs and and in chick embryo kidney cultures. Results showed variable, linear relationships between the test virus dose (log ID50) and the serum titre (log ND50). The slope of the neutralisation line depended on the virulence of the virus and the susceptibility of the host cell system, but not on the characters of the immune serum. Studies with relatively virulent strains of IB virus mostly gave neutralisation lines with a spread of about — 2.0 in embryonated eggs and — 2.5 in kidney culture. The dose‐activity curves (serum dilution method) for a hyperimmune serum followed the Poisson distribution and, depending on the virus virulence and the susceptibility of the cell system, had a spread of 0.9 to 1.5 (log serum dilution). In contrast, the dose‐effect relationships with virus (virus dilution method) gave a curve with a constant spread of 2.4 (log virusRésuméExamen sur le test de neutralisation de la bronchite infectieuse des poulesOn procède à des tests de neutralisation au moyen de différents sérotypes du virus de la bronchite infectieuse (IBV) selon la méthode de dilution du sérum et du virus sur des oeufs embryonnés et sur culture de reins d'embryons de poulets. On observe des rapports linéaires variables entre la dose du virus testé (log ID50) et le titre du sérum (log ND50). La pente des droites de la neutralisation dépend de la virulence du virus et de la réceptivité du système cellulaire, mais non des propriétés de l'immunsérum. Des expériences avec un IBV relativement fortement virulent donnèrent, le plus fréquemment, des droites de neutralisation ayant une pente de — 2,0 sur les oeufs embryonnés, respectivement de — 2,5 sur les cultures de reins d'embryons. Les courbes dose‐activité obtenues avec un hyperimmunsérum (selon la méthode de dilution du sérum) correspondent à la courbe de répartition de Poisson et, suivant la virulence du virus et respectivement la réceptivité du système cellulaire, le sommet est compris entre 0,9 et 1,5 (log de dilution du sérum). Par contre les relations dose‐activité pour le virus (selon méthode de dilution du virus) donnent une seule courbe dont le sommet se situe à la constante de 2,4 (log de dilution du virus). On discute largement les conséquences des relations variables quantitatives exposées pour la méthode du test de neutralisation et le jugement des différences qualitatives lors de la différenciation sérologique des souches IBV, en recommandant la méthode de dilution du sérum.ResumenEstudios sobre la prueba de neutralización en la bronquitis infecciosa de las gallinasCon diversos serotipos del virus de la bronquitis de las gallinas (VBG) se efectuaron ensayos de neutralización con arreglo a las técnicas de dilución del suero y del virus en huevos embrionados de gallina y en riñones embrionarios de pollo (cultivos REG). Se comprobaron relaciones lineales variables entre la dosis del virus problema (log DI50) y el título sérico (log DN50). La inclinación de la recta de neutralización dependía de la virulencia virósica y de la receptividad del sistema celular anfitrión, pero no de las propiedades del suero inmune. Ensayos con VBG muy virulento relativamente ofrecieron con mayor frecuencia rectas de neutralización con una inclinación de — 2,0 aproximadamente con huevos embrionados y de cerca de — 2,5 con los cultivos REG. Las curvas dosis‐efecto (técnica de dilución del suero) establecidas para un suero hiperinmune correspondían a la distribución del tósigo y tenían, según la virulencia virósica o bien la receptividad del sistema celular anfitrión, un alcance desde 0,9 hasta 1,5 (log de dilución sérica). Frente a esto, las relaciones dosis‐efecto del virus (técnica de dilución del virus) ofrecieron curvas de un blanco con el alcance constante de 2,4 (log de dilución del virus). En detalle se discuten las consecuencias de las relaciones cuantitativas variables representadas para la metodología de la prueba de neutralización y para enjuiciar las diferencias cualitativas en el diferencia‐miento serológico de las cepas VBG, recomendándose el método con las diluciones graduadas del suero.