Features of Condition of Oral Cavity Local Immunity in Patients Who Have Had COVID-19
Authors: Сахарук Н.А. , Пожарицкая А.А. , Колчанова Н.Э. , Гречиха А.С. , Кашкина Т.А. 
Published: June 2024

Введение. В данной статье изучается состояние локального иммунитета полости рта путем определения уровня sIgA, эластазной и БАПНА-амидазной активности у пациентов, перенесших COVID-19. Цель. Изучить состояние локального иммунитета полости рта (уровень sIgA, эластазной, БАПНА-амидазной активности) у пациентов после COVID-19. Материалы и методы. Исследование проводилось на клинической базе кафедры терапевтической стоматологии с курсом ФПК и ПК УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет» и УЗ «Витебский областной стоматологический центр». В исследование включены пациенты с подтвержденным методом ПЦР диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19. Для определения уровня секреторного иммуноглобулина использовали ротовую жидкость, которую забирали натощак. Содержание секреторного иммуноглобулина (sIgA) в ротовой жидкости определяли методом ИФА с набором тест-систем Saliva ELISA kit (Euroimmun, Германия) в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. Для определения БАПНА-амидазной активности использовали бензоил-аргинин-р-нитроанилид (Sigma-Aldrich, USA), активность эластазы определяли модифицированной методикой Бэйли Дж. Статистический анализ результатов исследования был выполнен с использованием аналитического пакета Statistica (Version 10-Index, StatSoft Inc, США) и Excel. Объектом исследования явились пациенты с подтвержденным методом ПЦР диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19. Результаты. У пациентов с COVID-19 отмечались более низкие показатели уровня гигиены ротовой полости (индекс PI Silnes-Loe), высокие показатели, характеризующие состояние тканей периодонта (SBI, PI Pussel, глубина периодонтального кармана) и интенсивности кариеса (КПУ) в сравнении с контрольной группой. Количество секреторного иммуноглобулина (sIgA) в ротовой жидкости у пациентов с COVID-19 (n=48) составило 592,67; 254,23–944,39 мкг/мл (Ме; LQ–UQ), что статистически значимо выше, чем в контрольной группе (n=28) – 326,94; 175,72– 551,76 мкг/мл (р<0,05). При анализе уровня sIgA в динамике было установлено, что статистически значимое снижение показателей происходит в диапазоне от 3 до 6 месяцев (p2–4=0,006; p3– 4=0,028) и более 6 месяцев (p2–5=0,004; p3–5=0,032), значения, полученные от пациентов в этот период, не отличались от показателей контрольной группы (p1–4>0,05; p1–5>0,05). В период до 1 месяца (p1–2=0,016), а также от 1 до 3 месяцев (p1–3=0,013) уровень sIgA сохранялся на статистически значимо высоком уровне в сравнении с контрольной группой. В зависимости от сроков заболевания у пациентов с COVID-19 наблюдалось статистически значимое повышение показателей секреторного IgA через 7 дней (p1–2=0,043; p1–3=0,038; p1–4=0,004) и через 30 дней от начала лечения (p2–3>0,05; p2–4=0,019; p3–4>0,05). Уровень активности нейтрофильной эластазы в ротовой жидкости был статистически значимо ниже у пациентов с COVID-19 (9,1×10–5; 0,7×10–5–42,3×10–5 пкат, Ме, LQ–UQ), чем таковой в контрольной группе – 90×10–5; 20×10–5–13×10–5 пкат (р<0,001). При изучении данного показателя в зависимости от сроков заболевания и периода реабилитации статистически значимых изменений у пациентов не выявлено (p>0,05). При анализе показателя БАПНА-амидазной активности в динамике установлено, что БАПНА-амидазная активность статистически значимо возрастает у пациентов, сроки заболевания которых составили от 30 дней и более (p1–4=0,024; p2–4=0,028). Проявления на СОПР были обнаружены у 26 (из 48) человек, что составило 54,2%. Установлено, что поражения СОПР наблюдались при значениях sIgA>886,8 мкг/мл со специфичностью 94,74% и чувствительностью 47,62%. Анализ данных позволил установить, что частота встречаемости поражений СОПР была больше у пациентов, сроки заболевания которых превышали 30 дней и на ранних сроках реабилитации (до 1 месяца после COVID-19). Выводы. 1. Уровень гигиены полости рта у пациентов, перенесших COVID-19, значительно снижен. 2. Пациенты с подтвержденной методом ПЦР коронавирусной инфекцией COVID-19 имели достоверно более высокие показатели sIgA в ротовой жидкости, чем в контрольной группе (р<0,05). Наибольшие значения sIgA наблюдались у пациентов, сроки заболевания которых превысили 30 дней, а период реабилитации был менее 3 месяцев. 3. Установлено, что статистически значимое снижение уровня sIgA происходит в период реабилитации от 3 до 6 месяцев (p=0,006), то есть к 3-му месяцу после заболевания отмечается нормализация показателей sIgA в ротовой жидкости по отношению к контрольной группе (p>0,05). 4. У пациентов после COVID-19 происходит статистически значимое повышение уровня БАПНА-амидазной активности в ротовой жидкости, в то же время снижается уровень активности нейтрофильной эластазы примерно в 10 раз (p<0,001). 5. Поражения слизистой оболочки полости рта чаще встречались у пациентов на ранних сроках реабилитации (до 1 месяца после COVID-19), а также у пациентов, сроки заболевания которых превышали 30 дней, при этом в обоих случаях наблюдался высокий уровень sIgA в ротовой жидкости. Встречаемость кандидоза ротовой полости у пациентов, перенесших COVID-19, достоверно выше, чем у здоровых лиц.
The condition of oral cavity local immunity by determining the level of sIgA, elastase and BAPNA-hydrolyzing activity in patients who have had COVID-19 is studied in this article. Purpose. Studying of the condition of oral cavity local immunity (sIgA level, elastase, BAPNA- hydrolyzing activity) in patients after COVID-19. Materials and methods. The research was conducted at the Chair of Therapeutic Dentistry with the course of Advanced Training and Staff Retraining of Educational Establishment "Vitebsk State Order of Peoples’Friendship Medical University", at the therapeutic department of the Health Institution "Vitebsk Regional Clinical Dental Center". The study included patients with a PCR-confirmed diagnosis of coronavirus infection COVID-19. To determine the level of secretory immunoglobulin, oral fluid was used, which was taken on an empty stomach. The content of secretory immunoglobulin (sIgA) in oral fluid was determined by ELISA with a set of test systems Saliva ELISA kit (Euroimmun, Germany) in accordance with the manufacturer’s instructions. To determine BAPNA-hydrolyzing activity, benzoyl- arginine-p-nitroanilide (Sigma-Aldrich, USA) was used; elastase activity was determined by the modified Bailey J method. Statistical analysis of the study results was performed using the Statistica analytical package (Version 10-Index, StatSoft Inc, USA) and Excel. The subjects of the study were patients with a confirmed diagnosis of coronavirus infection COVID-19 using the PCR method. Results. Patients with COVID-19 have lower levels of oral hygiene (Silnes-Loe PI index), high indicators characterizing the condition of periodontal tissues (SBI, PI Pussel, periodontal pocket depth) and caries intensity (DMFT) than in the control group. The amount of secretory immunoglobulin (sIgA) in the oral fluid of patients with COVID-19 (n=48) was 592.67; 254.23–944.39 μg/ml (Me; LQ–UQ), which is statistically significantly higher than in the control group (n=28) 326.94; 175.72–551.76 μg/ml (p<0.05). When analyzing the level of sIgA over time, it was found that a statistically significant decrease in indicators occurs in the range from 3 to 6 months (p2–4=0.006; p3–4=0.028) and more than 6 months (p2–5=0.004; p3–5=0.032), the values obtained from patients during this period did not differ from those in the control group (p1–4>0.05; p1–5>0.05). In the period up to 1 month (p1–2=0.016), as well as from 1 to 3 months (p1–3=0.013), the level of sIgA remained at a statistically significantly high level in comparison with the control group. Depending on the duration of the disease, patients with COVID-19 had a statistically significant increase in secretory IgA levels after seven days (p1–2=0.043; p1–3=0.038; p1– 4=0.004) and increased until 30 days from the start of treatment (p2–3>0.05; p2–4=0.019; p3–4>0.05). The level of neutrophil elastase activity in oral fluid was statistically significantly lower in patients with COVID-19 (9.1×10–5; 0.7×10–5–42.3×10–5 pcat, Me, LQ–UQ), than that in the control group – 90×10–5; 20×10–5–13×10–5 pcat (p<0.001). When studying this indicator depending on the duration of the disease and the rehabilitation period, no statistically significant changes were revealed in patients (p>0.05). When analyzing the BAPNA-hydrolyzing activity indicator over time, it was found that BAPNA-hydrolyzing activity increases statistically significantly in patients whose illness duration was 30 days or more (p1–4=0.024; p2–4=0.028). Manifestations on the oral mucosa were detected in 26 (out of 48) people, which amounted to 54.2%. It was found that lesions of the oral mucosa were observed at sIgA values >886.8 μg/ml with a specificity of 94.74% and sensitivity of 47.62%. Analysis of the data made it possible to establish that the incidence of lesions of the oral mucosa was higher in patients whose illness duration exceeded 30 days and in the early stages of rehabilitation (up to 1 month after COVID-19). Conclusions. 1. The level of oral hygiene in patients who have had COVID-19 is significantly reduced. 2. Patients with PCR-confirmed coronavirus infection COVID-19 had significantly higher levels of sIgA in oral fluid than in the control group (p<0.05). The highest sIgA values were observed in patients whose illness duration exceeded 30 days, and the rehabilitation period was less than 3 months. 3. It was found that a statistically significant decrease in the level of sIgA occurs during the rehabilitation period from 3 to 6 months (p=0.006), that is, by the 3rd month after the disease, normalization of sIgA levels in the oral fluid is observed in relation to the control group (p>0.05). 4. In patients after COVID-19, there is a statistically significant increase in the level of BAPNA-hydrolyzing activity in the oral fluid, while at the same time the level of neutrophil elastase activity decreases by approximately 10 times (p<0.001). 5. Lesions of the oral mucosa were more common in patients in the early stages of rehabilitation (up to 1 month after COVID-19), as well as in patients whose illness duration exceeded 30 days, while in both cases a high level of sIgA was observed in the oral fluid. The incidence of oral candidiasis in patients who have had COVID-19 is significantly higher than in healthy individuals.