Modifikation der Methodik für die genaue Bestimmung des direkten Bilirubins im Blutserum der Pferde
Authors: Zakopal J. , Fišer C. 
Published: August 2010

ZusammenfassungIn der Arbeit wurde die bisher angewandte Methode zur quantitativen Bestimmung des direkten Bilirubins im Pferdeblutserum mit der modifizierten Methode nach Rusnák verglichen. Rusnák verhinderte die unspezifische Reaktion bei der Diazotation durch Senkung des pH‐Wertes des Serums mittels 1 N HCl und beseitigte zudem das überschüssige Diazoreagenz mit Ascorbinsäure. Spektrophotometrisch wurde festgestellt, daß sich die gemessenen Werte bei gesunden und kranken Pferden hoch signifikant unterscheiden und bei gesunden durchschnittlich um 46%, bei kranken um 65,1 % niedriger waren. Bei 30 gesunden Pferden wurden mit der modifizierten Methode folgende Werte (mg%) gemessen: Direktes Bilirubin 0,34 ± 0,10 (0,04–0,56), indirektes Bilirubin 0,72 ± 0,27 (0,32–1,56) Bilirubinindex 0,53 (0,0–0,9), Gesamtbilirubingehalt 1,07 ± 0,31 (0,54–1,76). Der Vorteil der Modifikation wurde durch den Vergleich des Bilirubingehaltes im Verlauf einzelner innerer Erkrankungen bei Pferden mit verschiedenen Typen von Bilirubinämie bewiesen. Der Autor empfiehlt die modifizierte Methode in die veterinärmedizinische Diagnostik einzuführen.Die Methode der Messung des direkten Bilirubins im Pferdeblutserum mit Jodsäure bewährte sich nicht.SummaryA modification of the method for precise determination of direct bilirubin in horse serumThe author compares the method hitherto used with the modified method introduced by Rusnák. The latter hinders non‐specific reactions due to diazotation by reducing the pH of the serum with 1 N HCl and neutralising excess diazo‐reagent with ascorbic acid. Spectrophotometric measurements showed that the values for healthy and sick horses differed highly significantly. Those for healthy horses are 46 % lower and for diseased horses 65 % lower than with the original method. In 30 healthy horses the modified method gave the following values (mg%): direct bilirubin 0.34±0.10 (0.04–0.56), indirect bilirubin 0.72±0.27 (0.32–1.56), bilirubin index 0.53 (0.0–0.9), total bilirubin 1.07±0.31 (0.54–1.76). The advantage of the modified method was shown by comparing the bilirubin content in various internal diseases presenting different types of bilirubinaemia. The author recommends the modified method in the field of veterinary diagnosis.The method of measuring direct bilirubin in horse serum with iodic acid is unsuitable.RésuméUne modification de la méthode de dosage exact de la bilirubine directe dans le sérum du ChevalL'auteur a comparé dans ce travail la méthode utilisée qusqu'ici pour le dosage quantitatif de la bilirubine directe dans le sérum du Cheval avec la méthode modifiée par Rusnák. Rusnák évite la réaction non spécifique au cours de la diazotation en diminuant le pH du sérum par de l'acide chlorhydrique 1 n et neutralise le réactif de diazotation excédentaire par l'acide ascorbique. On constata par spectro‐photométrie que les valeurs trouvées diffèrent d'une manière hautement significative chez les chevaux sains et les chevaux malades. Elles étaient de 46% plus faibles chez les chevaux sains et de 65% chez les chevaux malades. Ches 30 chevaux sains on trouva par la méthode modifiée les valeurs suivantes: bilirubine directe 0,34 ± 0,10 (0,04–0,56); bilirubine indirecte 0,72±0,27 (0,32–1,56); index de bilirubine 0,53 (0,0–0,9); teneur totale en bilirubine 1,07 ± 0,31 (0,54–1,76). Les avantages de cette modification furent mis en évidence en comparant la teneur en bilirubine dans des maladies internes du cheval présentant différents types de bilirubinémie. L'auteur recommande l'utilisation de la méthode modifiée pour le diagnostic en médecine véterinaire. La méthode de dosage de la bilirubine directe dans le sérum de cheval par l'acide iodique ne donna pas satisfaction.ResumenModificación de la técnica para determinar con exactitud la bilirrubina directa en el suero sanguíneo de los caballosEn este trabajo se compara el método empleado hasta ahora para determinar cuantitativamente la bilirrubina directa en el suero sanguíneo de caballos con la técnica modificada segün Rusnák. Rusnák impidió la reacción inespecífica durante la diazotación bajando el pH del suero por medio de una disolución N. de HCl y separó además el diazoreactivo excedente con ácido ascórbico. Espectrofotométricamente se comprobó que los valores medidos en caballos sanos y enfermos se diferencian de forma harto señalada, siendo en los sanos menores en un 46 % como media, y en los enfermos en un 65,1 %. En 30 caballos sanos se midieron con la técnica modificada los valores (mg %) siguientes: bilirrubina directa 0,34 ±0,10 (0,04–0,56); bilirrubina indirecta 0,72 ±0,27 (0,32–1,56); índice bilirrubínico 0,53 (0,0–0,9); contenido bilirrubínico total 1,07 ±0,31 (0,54–1,76). La ventaja de la modificación se demostró mediante la comparación del contenido bilirrubínico en el curso de diferentes enfermedades internas en caballos con diversos tipos de bilirrubinemia. El autor recomienda introducir el método modificado en el diagnóstico médico‐veterinario.No se ha acreditado la técnica de medición de la bilirrubina directa en el suero sanguíneo de los caballos con ácido yódico.