Porcine Parvovirus Infection in vitro: A Study Model for the Replication of Parvoviruses
Authors: Bachmann P. A. , Danner K. 
Published: August 2010

SummaryPorcine parvovirus replication was studied in a time course experiment, investigating mechanisms of virus‐induced changes and viral antigens in connection with cellular functions at temperatures of 28 °C, 33 °C, 37 °C and 40 °C.At 28 °C, 33 °C and 37 °C similar changes were detected although at different times after infection. Infectivity titers, HA activity, appearance of fluorescing antigen in the nucleus and the cytoplasm and nuclear inclusion body formation reached comparable levels, but were delayed with falling temperatures although cells showed different rates of DNA synthesis. PPV infection induced a decline in DNA synthesis at all temperatures between 16 and 24 hours after infection.At 40 °C different results were obtained. HA production and development of nuclear inclusion bodies and fluorescing cells was comparable to 37 °C, while infectious virus production was not significant. In addition no cytoplasmic fluorescence appeared in these cultures at any time after occurrence of nuclear fluorescence. These results and data from time course experiments with temperature shifts between 37 °C and 40 °C led to the conclusion that a thermosensitive factor is responsible for the maturation of virus particles.ZusammenfassungPorcine Parvovirus‐Infektion in vitro: Ein Modell für die Vermehrung von Parvoviren 11. Kinetik der Virus‐ und AntigenproduktionDie Vermehrung porciner Parvoviren wurde im Hinblick auf Mechanismen für virusinduzierte Veränderungen und virale Antigene im Zusammenhang mit Zellfunktionen bei Temperaturen von 28 °C, 33 °C, 37 °C und 40 °C untersucht.Bei 28 °C, 33 °C und 37 °C ließen sich vergleichbare Veränderungen feststellen, wenn auh zu verschiedenen Zeitpunkten nach Infektion. Infektiositätstiter, Hamagglutinin‐ und Einschlußkörperhenproduktion sowie Auftreten von fluoreszierendem Antigen in Zellkernen und einige Stunden später im Plasma waren ähnlich, abqr verzögert mit fallenden Temperaturen, obwohl die Zellen unterschiedliche DNS‐Syntheseraten aufwiesen. PPV‐Infektion führte zu einer Reduktion der DNS‐Synthese in Zellen bei allen Temperaturen zwischen 16 und 24 Stunden p. inf.Bei 40 °C waren die Ergebnisse unterschiedlich. Hämagglutinin‐ und Einschlußkörperchenproduktion sowie Auftreten fluoresziereiider Zellkerne verliefen wie bei 37 °C, die Produktion von infektiösem Virus war jedoch nicht signifikant. Weiterhin trat in diesen Kulturen zusätzlich zur Kernfluoreszenz zu keiner Zeit zytoplasmatische Fluoreszenz auf. Diese Ergebnisse sowie Daten von Versuchen mit Änderung der Temperatur von 37 °C auf 40 °C und umgekehrt fuhrten zu dem Schluß, daß ein thermolabiler Faktor für die Virusreifung verantwortlich ist.RésuméInfection avec des Parvovirus porcins in vitro: un modèle pour la multiplication des Parvovirus II. Cinétique de la production virale et antigéniqueOn a examiné la multiplication des Parvovirus porcins par rapport à des mécanismes de changements d'induction virale et des antigèines viraux en relation avec des fonctions cellulaires à des températures de 28, 33, 37 et 40 °C. Des changements comparables ont été établis à 28, 33 et 37 °C et cela à différents moments après une infection. Le titre d'infectiosité, la production d'hémagglutinines et d'inclusions ainsi que l'apparition d'antigènes fluorescents dans les noyaux cellulaires et quelques heures plus tard dans le plasma furent scmblables; un ralentissement fut constaté avec des températures plus basses, bien que les cellules aient montré des taux de synthèse du DNA différents. Unc infection PPV conduisit à une réduction de la synthèse du DNA dam des cellules à toutes les températures entre 16 et 24 heures après l'infection.Les résultats furent différents à 40 °C. La production d'hemagglutinines et d'inclusions ainsi que l'apparition de noyaux cellulaires fluorescents se déroulèrent comme à 37 °C, la production d'un virus infectieux n'étant cependant pas significative. I1 n'y a eu à aucun momect de fluorescence cytoplasmique dans les cultures avec fluorescence des noyaux. Ces résultats ainsi que ceux enrégistrés avec un changement de température de 37 °C 21 40 °C et vice‐versa permirent de conclure à la responsabilité d'un facteur thermolabile pour le murrissement viral.ResumenInfección con parvovirus porcino in vitro: un modelo para la multiplicación de 10s parvovirus: II. Cinética de la producción viral y antigéicaSc cxaminó la multiplicación de 10s parvovirus con miras a los mecanismos de modificaciones inducidas a virus y antígenos virales en relación con 13s funciones celulares a temperaturas de 28, 33, 37 y 40 °C.A 28, 33 y 37 °C se cornprobaron modificaciones comparables, aunque en momentos diferentes despuks de la infección. Eran similares 10s titulos de infecciosidad, produccibn de hemoaglutininas y corplisculos de inclusión, y la aparición de antígenos fluorescentes en 10s nhcleos celulares y algunas horas más tarde en el plasma; se constató un retardo con temperaturas más bajas, aunque las células contenían tasas diferentes de síntesis de ADN. Una infección PPV conducía a la reducción de la síntesis de ADN en las célulasz todas las temperaturas entre 16 y 24 horas p. inf.Los resultados eran diferentes a 40 °C. Las producciones de hemoaglutinina y corpúsculos de inclusión, y la aparición de núcleos celulares fluorescentes discurrían como a 37 °C, mientras que la producción de virus infeccioso no era significante. Además no aparecía en estos cultivos, junto a la fluorescencia nuclear, en ningún momento, ninguna fluorescencia citoplasmática. Estos resultados y los datos de ensayos con variación térmica de 37 a 40 °C y viceversa condujeron a la conclusión, que u n factor termolábil es el responsable de la maduración de las partículas virales.