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Tödliche Meningoenzephalitis durch Cryptococcus neoformans var. neoformans bei einem Mädchen ohne schwerwiegende Immundefekte
Authors: Wendisch J. , Blaschke‐Hellmessen Renate , Kaulen F. , Schwarze R. , Kabus Maria 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Es wird der Verlauf einer Meningoenzephalitis durch Cryptococcus neoformans bei einer 14jährigen Patientin dargelegt. Die mykologischen Untersuchungsbefunde wiesen anfangs einen massiven Befall des Liquors mit Cryptococcus neoformans (ca. 10000 Hefezellen/ml) und wochenlang sehr hohe Cryptococcus‐Antigentiter (maximal 1:2048) aus. Eine HIV‐Infektion oder andere schwerwiegende Immundefekte konnten ausgeschlossen werden. Die Behandlung der Cryptococcose erfolgte mit der Dreifachkombination Amphotericin B, Flucytosin und Fluconazol. Der Liquor konnte saniert werden. Trotzdem kam es zu erheblichen Läsionen am Gehirn. Die Patientin ist an den Folgen der Pilzinfektion am 74. Behandlungstag verstorben. Der geschilderte Krankheitsverlauf ist Anlaß, auf die Differentialdiagnose, Cryptococcus neoformans‐Infektion“bei der chronischen lymphozytären Liquorpleozytose, verbunden mit Hirndruck‐ und Augensymptomen, hinzuweisen.Summary. Case report on a lethal meningo‐encephalitis due to Cryptococcus neoformans in a 14‐year‐old girl without serious immunodeficiency inclusive HIV‐infection. The detection of high quantities of cells of Cryptococcus neoformans (about 10000/ml) and high levels of Cryptococcus antigen (up to 1:2048) in the cerebrospinal fluid are remarkable. The patient was treated with a triple combination of amphotericin B, flucytosine and fluconazole. After 18 days the cerebrospinal fluid was sterile. Nevertheless considerable lesions of the brain arised. The patient died from the Cryptococcus infection on day 74 of the antimycotic therapy. Cryptococcosis should be included into the differential diagnosis of the chronic lymphocytic pleocytosis of the cerebrospinal fluid connected with symptoms of intracranial pressure and ocular symptoms.
Itraconazol‐Suspension in der Behandlung HIV‐infizierter Patienten mit Fluconazol‐resistenter oropharyngealer Candida‐Infektion und Soorösophagitis
Authors: Eichel M. , Just‐Nübling Gudrun , Helm Eilke Brigitte , Stille W. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Im Rahmen einer Pilotstudie sowie einer deutschen multizentrischen Studie wurden 40 AIDS‐Patienten mit Fluconazol‐resistenter oropharyngealer Candida‐Infektion mit Itraconazol‐Suspension (200–800 mg/Tag) oral behandelt. Bei 39/40 Patienten konnte initial eine Heilung oder deutliche Besserung erzielt werden. Im Gegensatz zum guten klinischen Behandlungsergebnis fanden sich jedoch nur bei 6 Patienten eine komplette Keimelimination in den Mundspülwasserproben, bei 29 Patienten kulturell eine Keimzahlreduktion ‐ allerdings nicht unter 102KBE/ml (koloniebildende Einheiten pro ml) ‐ und bei 4 Patienten unverändert hohe Keimzahlen. Als Haupterreger wurde C. albicans isoliert. Auch bei Langzeitanwendung war die Itraconazol‐Suspension gut verträglich; nur bei 2 Patienten mußte die Therapie wegen Transaminasenanstieg vorzeitig abgebrochen werden. Es fanden sich erhebliche individuelle Schwankungen der Itraconazol‐ bzw. Hydroxy‐Itraconazol‐Serumkonzentrationen, die nur in geringem Ausmaß mit den klinischen und mykologischen Behandlungsergebnissen korrelierten. Die orale Applikation von Itraconazol in flüssiger Form führt durch die gleichzeitige lokale und systemische Wirksamkeit (duales Therapiekonzept) zu einer Wirkungssteigerung. Itraconazol‐Suspension ist bei Fluconazol‐Versagen eine wertvolle Alternative zur nebenwirkungsreichen Therapie mit Amphotericin B.Summary. Forty AIDS patients suffering from fluconazole‐resistant oropharyngeal candidosis were treated with oral itraconazole solution (200–800 mg/day). In 39/49 patients the disease could be initially cured or significantly improved. In contrast to the good clinical results, however, only in six patients a yeast count reduction was observed, and in four patients unchanged high yeast counts persisted. The main pathogen was C. albicans. Even in longtime treatment itraconazole solution was well tolerated. In two patients only the therapy had to be stopped due to the increase of transaminases. Considerable individual deviations in serum concentrations of itraconazole or hydroxy‐itraconazole, respectively, were observed which correlated only to a minor degree with clinical and mycological results. Application of itraconazole in a soluble preparation caused an increase in efficacy due to simultaneous local and systemic action. In the case of resistance to fluconazole the itraconazole solution is a valuable alternative to the administration of amphotericin B which is rich in adverse reactions.
Kontroversen bei der Standardisierung der Empfindlichkeits‐prüfung von Hefen gegen Azol‐Antimyotika
Authors: Tintelnot Kathrin , Seibold M. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Die unterschiedlichen physikalisch‐chemischen Eigenschaften der therapeutisch ein‐gesetzten Azol‐Antimykotika erfordern ein Testverfahren, welches diesen gerecht wird. Fluconazol kann innerhalb der Gruppe der Azol‐Antimykotika aufgrund seiner Hydrophilie als unproblematische Testsubstanz angesehen werden. Die extreme Hydrophobizität des Itraconazols läßt eine Übertragung der Testbedingungen für Fluconazol auf die Itraconazoltestung nicht zu. Die aktuellen Empfehlungen des NCCLS werden dieser Problematik nicht gerecht. Deshalb ist es notwendig, einen einheitlichen Standard für die In‐vitro‐Testung der Gruppe der Azol‐Antimykotika festzulegen.Summary. Due to the different physical‐chemical conditions of the therapeutical azoles it is necessary to choose an adequate testing procedure. In the group of azoles caused by its hydrophilia fluconazole susceptibility testing can be handled easily. However it is not possible to take the same test conditions for itraconazole as for fluconazole due to the extreme high hydrophobicity of itraconazole. The current recommendations of NCCLS should be considering these problems. Therefore it is necessary to standardize susceptibility testing for all azoles possible.
Der Etest®— eine Alternative zum NCCLS‐Standard für die Empfindlichkeitsprüfung von Hefen?
Authors: Seibold M. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Im Hinblick auf die Reproduzierbarkeit können zwischen dem Etest® und der NCCLS‐Methode keine gravierenden Unterschiede festgestellt werden. Bei der Frage der klinischen Korrelation existieren bisher nur Einzelbeobachtungen. Die Korrelation der Teste untereinander ist als Erreger‐ und Testsubstanz‐abhängig bekannt. Die einfachert Handhabbarkeit prädisponiert den Etest® für die Routine. Bevor der Etest® für die Empfindlichkeitsprüing von Hefen uneingeschränkt empfohlen werden kann, sind weitere Evaluierangen erforderlich. Auch für das NCCLS‐Verfahren steht eine Validierung noch aus. Andere Verfahren werden sich an diesen beiden Testsystemen messen müssen.Summary. The Etest® and the NCCLS method are not much differing in respect to their reproducibility. Only single observations exist on the clinical correlation of both tests. The correlation between both tests are known as being dependent on the yeast species and antifungals used. Due to the easy and simple handling the Etest® is attractive for routine laboratories. The Etest® has to be more evaluated before it can be generally recommended. The NCCLS method also is not validated until now. Different test methods should be compared thoroughly with the above mentioned standard.
Fungal infections of the cardiovascular system—a review*
Authors: Kuttin E. S. 
Published: April 2009

Summary. Various yeasts and filamentous fungal infections of human and animal heart and blood vessels, as well as the experimental investigations, are reviewed. Clinical, diagnostic, therapeutic and pathological aspects are discussed. The prevalence of mycotic infection of the heart, once considered to be an uncommon disease, has been reported frequently during recent years. The rate will certainly be higher if cases are more thoroughly investigated.Zusammenfassung. Es wird eine Übersicht über Infektionen des Herzens und der Blutgefäße mit verschiedenen Hefen und Fadenpilzen bei Mensch und Tier vorgestellt. Experimentelle Untersuchungen zu diesem Thema werden berücksichtigt. Behandelt werden klinische, diagnostische, therapeutische und pathologische Aspekte. Obwohl früher als seltene Erkrankung angesehen, häufen sich in letzter Zeit die Berichte über solche Infektionen. Daß die Rate sicher höher liegt, wird sich zeigen, wenn eingehender in dieser Richtung untersucht wird.
Plasma and tissue concentrations of fluconazole and their correlation to breakpoints
Authors: Pittrow L. , Penk A. 
Published: April 2009

Summary. The prediction of clinical outcome during antifungal therapy is an issue of paramount importance in clinical research, because no consistently reliable parameters are available. Minimum inhibitory concentration (MIC) values and breakpoint interpretation may serve as surrogate criteria until standardized in vitro antifungal susceptibility testing is developed, especially for fluconazole. With reproducible susceptibility testing methods for Candida species now available, tentative fluconazole interpretive breakpoints derived from MIC values determined by the National Committee on Clinical Laboratory Standards (NCCLS) M27‐T broth macrodilution method are open for public comment. Besides the in vitro susceptibility of the fungus, clinical response to antifungal therapy with fluconazole depends to a great extent on the daily dose and corresponding plasma and tissue concentrations. Promising results from a few dose‐finding studies in non‐neutropenic patients show that fluconazole doses of up to 1000 mg day‐1 result in higher clinical response rates than lower dosages.* Therapeutic success depends substantially on achieving fluconazole plasma and tissue levels that are sufficiently higher than MIC values indicated by in vitro testing. However, this simplified concept must be related to the clinical situation and it is essential to consider the immunological status and underlying disease of the patient. Misinterpretation of MIC values may result in selection of an antifungal agent for life‐threatening infections that does not provide optimal efficacy or toleration.Zusammenfassung. Die möglichst sichere Vorhersage des klinischen Ansprechens unter einer antimykotischen Therapie besitzt höchste Priorität, zumal gegenwärtig hierfür keine verläßlichen Parameter verfügbar sind. Daher werden MHK‐Werte und künftig auch Breakpoints als Surrogatkriterien herangezogen. Allerdings ist die generelle Akzeptanz validierter in vitro‐Testverfahren sowie eine verbesserte Reproduzierbarkeit der Ergebnisse insbesondere für Fluconazol eine wichtige Voraussetzung. Derzeit stehen vorläufige Breakpoints für Fluconazol zur Diskussion, die von dem zuständigen NCCLS‐Ausschuß kürzlich vorgeschlagen wurden. Diese wurden im Rahmen einer Untersuchung an 519 Candida‐Isolaten von MHK‐Werten abgeleitet, die mit einer Makrodilutionsmethode nach NCCLS M27‐T Standard bestimmt wurden. Insgesamt hängt das klinische Ansprechen auf eine Therapie mit Fluconazol nicht nur von einer ausreichenden Empfindlichkeit des Erregers, der gewählten Fluconazoldosierung sowie den korrespondierenden Plasma‐ und Gewebespiegeln ab, sondern auch in entscheidendem Umfang von der Immunkompetenz und Grunderkrankung des Patienten. Die Ergebnisse einer sehr begrenzten Anzahl von Dosisfindungsstudien mit immunkom‐
Random amplification of polymorphic DNA is useful for the differentiation of several anthropophilic dermatophytes
Authors: Mochizuki T. , Sugie N. , Uehara M. 
Published: April 2009

Summary. The efficacy of random amplification of polymorphic DNA (RAPD) analysis, a polymerase chain reaction (PCR)‐based technology, as a tool for differentiation of several anthropophilic dermatophytes, that is, Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale, T. rubrum and Epidermophyton floccosum, was examined. Total cellular DNA extracted by a mini‐preparation method were used as template DNAs and PCRs were performed using five primers, all of which were synthesized 10‐mers. All of the primers generated PCR products and their electrophoresed profiles were characteristic for each of the species. Since these anthropophilic dermatophyte species could be differentiated clearly by the RAPD analysis, this method may be useful for identification of these species. Minimal intraspecies polymorphisms were observed between the isolates of T. mentagrophytes var. interdigitale. The banding patterns were reproducible using template DNAs prepared at different times from each of stock cultures.Zusammenfassung. Es wurde die Leistungsfähigkeit der RAPD‐Analyse, einer auf der PCR basierenden Methode, als Hilfsmittel zur Differenzierung mehrerer anthropophiler Dermatophyten geprüft, namlich Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale, T. rubrum und Epidermophyton floccosum. Die gesamte Zell‐DNA, extrahiert mittels einer Minipräparationsmethode, wurde als Template‐DNA benutzt, und die PCR wurde unter Einsatz von 5 Primern durchgeführt, von denen alle synthetisierte Dekamere waren. Alle Primer führten zu PCR‐Produkten, und ihre Elektrophorese‐Profile waren charakteristisch für jede Art. Da diese anthropophilen Dermatophytenarten eindeutig durch RAPD‐Analyse differenziert werden konnten, dürfte diese Methode für die Artidentifizierung nützlich sein. Geringe Intraspecies‐Polymorphismen wurden zwischen den Isolaten von T. mentagrophytes var. interdigitale beobachtet. Die Bandenmuster waren reproduzierbar auch dann, wenn Template‐DNA zu unterschiedlichen Zeiten vom Kulturenbestand präpariert wurde.
Phylogenetic analysis of 8 dermatophyte species using chitin synthase 1 gene sequences
Authors: Kano R. , Nakamura Y. , Watari T. , Watanabe S. , Takahashi H. , Tsujimoto H. , Hasegawa A. 
Published: April 2009

Summary. Nucleotide sequences of chitin synthase 1 (CHS1) gene of eight species of dermatophytes, Arthroderma benhamiae, A. fulvum, A. grubyi, A. gypseum, A, incurvatum, A. otae, A. simii and A. vanbreuseghemii were obtained and analysed for their phylogenetic relationship. A 600‐bp genomic DNA fragment of the CHS1 gene was amplified from these dermatophytes by polymerase chain reaction (PCR) and sequenced. The CHS1 nucleotide sequences of these eight dermatophyte species showed more than 85% similarity between the species. The phylogenetic analysis of their sequences revealed three clusters, the first cluster consisting of A. benhamiae, A. simii and A. vanbreuseghemii, the second cluster consisting of A. fulvum, A. gypseum and A. incurvatum, and the third cluster consisting of A. grubyi and A. otae. The phylogenetic analysis of CHS1 gene in this study will provide useful information for classification and understanding the evolution of these dermatophyte species.Zusammenfassung. Es wurden die Nukleotidsequenzen des Chitinsynthase‐1‐Gens (CHS1) von 8 Dermatophytenarten gewonnen und auf ihre phylogenetische Verwandschaft analysiert, nämlich von Arthroderma benhamiae, A. fulvum, A. grubyi, A. gypseum, A. incurvatum, A. otae, A. simii und A. vanbreuseghemii. Ein 600‐bp‐Genom‐DNA‐Fragment des CHS1‐Gens dieser Dermatophyten wurde mittels PCR amplifiziert und sequenziert. Die CHS1‐Nukleotidsequenzen dieser 8 Dermatophyten‐Arten zeigten mehr als 85% Homologie zwischen den Arten. Die phylogenetische Analyse dieser Sequenzen ergab 3 Cluster, der erste Cluster bestehend aus A. benhamiae, A. simii und A. vanbreuseghemii, ein zweiter bestehend aus A. fulvum, A. gypseum und A. incurvatum, und ein dritter bestehend aus A. grubyi und A. otce. Die phylogenetische Analyse des CHS1‐Gens erbringt weiterführende Informationen für die Klassifikation und das Evolutionsverstandnis dieser Dermatophytenarten.
Extracellular enzyme activities of dermatophytes and yeast isolates on solid media
Authors: Muhsin T. M. , Aubaid A. H. , Al‐Duboon A. H. 
Published: April 2009

Summary. A total of 123 isolates of 14 species of dermatophytes and yeasts were screened for the activity of five extracellular enzymes including elastase, keratinase, protease (gelatinase), lipase and phospholipase, by using solid media. The optimal production and activity of each enzyme was determined with regard to different pH and temperatures. Keratinase activity was high with all the tested fungi with exception of Malassezia furfur. Protease (gelatinase) was produced only by dermatophytes. Elastase was secreted by three dermatophytes viz. Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes var. mentagrophytes and T. verrucosum, wheieas lipase and phospholipase were detected in all the species except T. violaceum.Zusammenfassung. Die Aktivität von fünf extrazellulären Enzymen (Elastase, Kératinase, Protease, Lipase und Phospholipase) wurde auf festen Medien an 123 Isolaten von 14 Dermatophyten‐ und Hefe‐Arten untersucht. Es wurden die Aktivitätsoptima in Abhängigkeit von pH‐Wert und Temperatur bestimmt. Die Keratinase‐Aktivität war bei allen geprüften Pilzen mit Ausnahme von Malassezia furfur hoch. Protease‐Aktivität zeigten nur die Dermatophyten. Elastase‐Aktivität war bei drei Dermatophyten, Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes var. mentagrophytes und T. verrucosum zu beobachten. Lipase‐ und Phospholipase‐Aktivität zeigte sich bei allen geprüften Pilzarten außer T. violaceum.
Primary unusual cutaneous cryptococcosis in an HIV former drug‐abuser patient
Authors: Gatti M. , Silverio A. Di , Cespa M. , Mosca M. 
Published: April 2009

Summary. We describe an HIV‐positive patient suffering from cutaneous cryptococcosis who was a former intravenous drug abuser and who presented a nodulo‐ulcerated lesion on the back of his left hand. This was caused 4 months previously when the patient was injured by a pigeon nesting in an abandoned house. After fluconazole treatment for 4 months, no other visceral infections were recorded 18 months after complete healing of the lesion.Zusammenfassung. Es wird der Fall einer Haut‐Cryptococcose bei einem HIV‐positiven Patienten dargestellt. Der Mann hatte früher intravenös Drogen konsumiert. Auf der Rückseite seiner linken Hand zeigte sich eine nodulär ulzerierte Läsion, verursacht vier Monate zuvor bei einer Verletzung durch eine Taube, die in einem verlassenen Hause nistete. Andere Infeklokalisationen waren nicht nachweisbar. Es erfolgte komplette Abheilung der Läsion unter einer vier Monate langen Fluconazol‐Behandlung. Über 18 Monate Beobachtungsdauer blieb der Patient Cryptococcose‐frei.
Prevalence of Candida tropicalis in clinical specimens from patients with variable clinical syndromes over a 5‐year period
Authors: Al‐Hedaithy S. S. A. , Fotedar R. 
Published: April 2009

Summary. In this study, we have examined our records for the isolation of Candida tropicalis from clinical specimens of patients with heterogeneous clinical presentations during the past 5 years. We have found that this species ranks third among all yeasts in frequency of isolation from clinical specimens and that the trend of recovery from the specimens is rising over the years. The isolation rate of C. tropicalis was highest from urine specimens (36%) followed by respiratory specimens (22%). The frequency of isolation of C. tropicalis from vaginal specimens was relatively high (14%), however the trend was declining over the years. In general, the high recovery of Candida tropicalis from clinical specimens of patients with variable disease supports the views of this organism being a major pathogen.Zusammenfassung. Die Studie basiert auf einer Durchsicht der Patientenarchive der letzten fünf Jahre auf die Isolationshäufigkeit von Candida tropicalis aus klinischen Untersuchungsmaterialien von Patienten mit unterschiedlichen klinischen Krankheitsbildern. Diese Hefeart war die dritthäufigste mit steigender Tendenz über die Jahre. Die Isolierungsrate von C. tropicalis war am höchsten aus Urin (36%), gefolgt von Respirationstrakt‐Materialien (22%). Die Isolationshäufigkeit aus dem hinteren Scheidengewölbe war relativ hoch (14%), nahm jedoch mit den jahren ab. Allgemein unterstreicht die hohe Isolationsrate von C. tropicalis aus klinischen Untersuchungsmaterialien die ätiologische Bedeutung dieses Erregers.
Western blot analysis of the immune response to Candida albicans antigens in 391 long‐term intensive care patients
Authors: Weis Christine , Kappe R. , Sonntag H. G. 
Published: April 2009

Summary. The aim of this study was to determine, using Western blot, the prevalence of anti‐Candida albicans antibodies in long‐term intensive care patients and to characterize specific immune responses that may only occur in patients with invasive candidosis. A total of 1751 serum samples from 391 patients of a German multicentre study, which was designed to determine the incidence of systemic candidosis, was examined. Significantly enhanced antibody production against specific antigens was observed in several subgroups of patients, i.e. those with underlying disease of the pancreas (29 kDa, P=0.006), cholecystolithiasis (47 kDa, P=0.029), gastrointestinal tract disease (47 kDa, P=0.03), steroid therapy (58 kDa, P=0.02), thrush (58 kDa, P=0.032), urogenital infection (58 kDa, P=0.034), Candida antigen titre 1:4 (58 kDa, P=0.002) and positive fungal culture (36 kDa, P=0.033) and those who had died (36 kDa, P=0.011). In contrast to earlier publications, an immune response against the 29 and 47 kDa antigens was relatively common among long‐term intensive care patients (37% and 70% antibody positive respectively). A single antigen that provided satisfactory sensitivity and specificity for the discrimination between fungal infection and no fungal infection or between superficial and invasive fungal infection was not identified in this study.Zusammenfassung. Das Ziel dieser Arbeit war, mittels Western Blot die Prävalenz der Anti‐Candida albicans‐Antikörper bei Langzeit‐Intensivpatienten zu ermitteln und spezifische Immunantworten, die möglicherweise nur bei Patienten mit gesicherter invasiver Candidose auftreten, zu charakterisieren. Untersucht wurden 1751 Serumproben von 391 Patienten einer deutschen Multizenterstudie zur Erfassung der Häufigkeit systemischer Candidosen. Signifikant häufiger auftretende Antikörperproduktion gegen definierte Antigene wurde in einigen Patienten‐Subgruppen gefunden: Pankreaserkrankungen als Grundieiden (29 kDa, P=0.006), Cholecystolithiasis (47 kDa, P=0.029), gastrointestinale Affektionen (47 kDa, P=0.03), Steroidtherapie (58 kDa, P=0.02), Soor (58 kDa, P=0.032), urogenitale Infektionen (58 kDa, P=0.034), Candida‐Antigentiter 1:4 (58 kDa, P=0.002), kultureller Pilznachweis (36 kDa, P=0.033), Tod (36 kDa, P=0.011). Im Gegensatz zu früheren Untersuchungen waren Immunantworten auf das 29 kDa und das 47 kDa Antigen relativ häufig bei Langzeit‐Intensivpatienten (37% und 70% Antikörper positiv). Ein einzelnes Antigen, das eine befriedigende Sensitivität und Spezifität zur Unterscheidung zwischen Pilzinfektion und keiner Pilzinfektion oder zwischen oberflächlicher und invasiver Pilzinfektion ermöglichte, wurde in dieser Studie nicht identifiziert.