Further studies on the antigenic structure of Brucella brucei and Pasteurella tularensis*
Authors: Parnas Jozef , Burdzy Krystyna , Cegielka Marian 
Published: August 2010

SummaryBy the aid of diffusion precipitation in gel it was confirmed that standard Brucella brucei strains (melitensis M16, bovis 544, and suis 1330) showed regularly the appearance of 6 precipitate lines in both cases in the cross test with heterologous and homologous antigens and precipitating sera.In the electrophoresis test the precipitating sera for each of these strains show the presence of strongly marked fractions of β1, β2 and γ globulins.Instead, two atypical Brucella strains (melitensis and suis) show in the Ouchterlony test the reduction of precipitate lines to 4 and 3. This phenomenon appears independently from cross examination of antigens and homologous and heterologous sera.The precipitating sera of atypical Brucella strains in electrophoresis tests show lower peaks of β1, β2 and γ fractions.For this reason there is found the certain relationship between antigenic degradation of the atypical strains and reduction of peaks of the globulin fraction.Pasteurella tularensis examined in the Ouchterlony test with the homologous serum shows regularly the presence of 4 precipitate lines. In no case was there observed precipitate lines between P. tularensis antigen and Brucella brucei sera and vice versa. This shows the antigenic difference between Brucella brucei and Pasteurella tularensis.ZusammenfassungWeitere Untersuchungen über die Antigenstruktur von Brucella brucei und Pasteurella tularensisMittels der Diffusionspräzipitation in Gel wurde bestätigt, daß die Standard‐Brucella‐Stämme (melitensis M16, bovis 544 und suis 1330) im Kreuztest mit heterologen und homologen Antigenen und Präzipitationsseren regelmäßig durch das Auftreten von 6 Präzipitationslinien charakterisiert sind.Die elektrophoretische Untersuchung der zu jedem dieser Stämme gehörenden Präzipitationsseren ergab kräftig markierte β1‐, β2‐ und γ‐Globuline.2 atypische Stämme (melitensis und suis) ließen im Ouchterlony‐Test allerdings nur 4 bzw. 3 Präzipitationslinien erkennen. Dies Phänomen trat auch dann auf, wenn die Antigene mit heterologen Seren untersucht wurden.Die Präzipitationsseren für atypische Brucella‐Stämme zeigten bei der Elektrophorese weniger deutlich ausgeprägte β1‐, β2‐ und γ‐Fraktionen. Es besteht also eine sichere Beziehung zwischen dem Antigen‐Abbau der atypischen Stämme und der Erniedrigung der Peaks bei der Globulin‐Fraktion.Pasteurella tularensis ergab bei der Überprüfung im Ouchterlony‐Test mit dem homologen Serum regelmäßig 4 Präzipitationslinien. In keinem einzigen Falle wurden Präzipitationslinien zwischen Pasteurella tularensis‐Antigen und Brucellaseren (oder umgekehrt) beobachtet. Dies spricht für die besondere Antigenspezifität von Brucella brucei und Pasteurella tularensis.RésuméNouvelles recherches sur la structure antigénique de Brucella brucei et Pasteurella tularensisA l'aide du test de précipitation par diffusion en gel, on put confirmer que les souches standard de Brucella (melitensis M16 et suis 1330) sont caractérisées dans les tests croisés avec des antigènes et des sérum hétérologues et homologues par la formation régulière de 6 lignes de précipitation.L'analyse électrophorétique des sérums précipitants correspondant à ces souches montra la présence de globulines α, β et γ fortement marquées. Deux souches atypiques (melitensis et suis) ne présentèrent cependant dans le test d'Ouchterlony que 4 et resp. 3 lignes de précipitation. Ce phénomène se produisit également lorsque les antigènes furent étudiés par des sérums hétérologues.Les sérums de précipitation pour les souches de Brucella atypiques ne présentèrent aucune fraction α, β et γ importante à l'électrophorèse. Il existe donc un rapport constant entre la destruction des antigènes des souches atypiques et l'abaissement des peaks dans les fractions de globulines.Pasteurella tularensis présenta régulièrement lors du contrôle par le test d'Ouchterlony avec le sérum homologue 4 lignes de précipitation. En aucun cas on n'observa de ligne de précipitation entre l'antigène de P. tularensis et les sérums de Brucella (ou le contraire). Ceci parle pour une spécificité anti‐génique spéciale de Brucella brucei et Pasteurella tularensis.ResumenNuevas investigaciones sobre la estructura antigénica de Brucella brucei y Pasteurella tularensisMediante la precipitación de difusión en gel se confirmó que las cepas standard Brucella (melitensis M16, bovis 544 y suis 1330) están caracterizadas regularmente por la aparición de 6 líneas de precipitación en la prueba cruzada con antígenos y sueros precipitantes heterólogos y homólogos.El estudio electroforético de los sueros precipitantes pertenecientes a cada una de estas cepas evidenció globulinas β1, β2 y γ fuertemente marcadas. Sin embargo, 2 cepas atípicas (melitensis y suis) sólo permitieron reconocer en la prueba de Ouchterlony 4 y 3 líneas de precipitación, respectivamente. Este fenómeno también aparecía cuando los antígenos se estudiaban con sueros heterólogos.Los sueros precipitantes para cepas Brucella típicas no presentaban en la electroforesis ninguna fracción β1, β2 o γ marcada. Por tanto, existe una relación segura entre la degradación antigénica de las cepas atípicas y el rebajamiento de los vértices en la fracción globulínica.Pasteurella tularensis dió regularmente en el control, recurriendo a la prueba de Ouchterlony con el suero homólogo, 4 líneas de precipitación. Ni en un solo caso se observaron líneas de precipitación entre el antígeno de Pasteurella tularensis y los sueros brucelares (o viceversa). Esto aboga por la especificidad antigénica especial de Brucella brucei y Pasteurella tularensis.