Incorporation of 35S‐Cystine in Tissue Fragments from the Matrix of the Bovine Claw and Effect on Incorporation Rate of Adding Blood Serum and Some Serum Fractions1
Authors: Ekfalck A. , Funkquist B. , Jones B. , Obel N. 
Published: August 2010

SummaryTissue fragments from the matrix of the bovine claw, incubated in a substrate containing L35S‐cystine, increased their tracer content 7–25 times during an incubation period of 3 hours. The incorporation of the tracer was inhibited by adding L‐cysteine to the substrate and the inhibition was much stronger than in previous experiments using 75Se‐cystine as a tracer. It is concluded that the incorporation of 35S‐cystine in the matrix of the claw is a better indicator of the access of specific cystine receptors than the incorporation of 75Se‐cystine.As the authors intend to use the present experimental model to investigate whether blood from animals suffering from laminitis contains substances capable of disturbing the keratinization process in the matrix of the hoof and claw, respectively, the effects of blood serum and various serum fractions on the incorporation of labelled cystine into the matrix fragments were studied. Serum and serum fractions containing solutes with molecular weights < 1,000 or > 50,000 strongly inhibited the incorporation of 35S‐cystine, whereas a serum fraction containing solutes with molecular weights of 1,000–50,000 had little inhibitory effect. The possible causes of the effects observed are discussed.ZusammenfassungInkorporation von 35S‐Cystin in Gewebefragmente aus der Matrix von Rinderklauen und Einfluß von Blut und Serumfraktionen auf die InkorporationsrateDie Inkubation von Gewebefragmenten aus der Matrix von Rinderklauen in einem Medium mit L35S‐Cystin führte im Verlauf von 3 Stunden zu einer 7‐ bis 25fachen Zunahme des Tracergehalts. Die Inkorporation des Tracers wurde gehemmt durch L‐Cystin; diese Inhibition war viel stärker als in früheren Untersuchungen mit Verwendung von 75Se‐Cystin als Tracer. Es wird daraus geschlossen, daß die Inkorporation von 35S‐Cystin in die Klauenmatrix im Vergleich zu 75Se‐Cystin ein besserer Indikator zur Ermittlung spezifischer Cystinrezeptoren ist.Mit Hilfe des vorliegenden experimentellen Modells sollte abgeklärt werden, ob Blut von Tieren mit Klauenrehe Substanzen enthält, welche die Keratinisierungsvorgänge in der Matrix von Huf oder Klaue beeinträchtigen. Daher wurden die Wirkungen von Blutserum und verschiedenen Serumfraktionen auf die Inkorporation von markiertem Cystin in Matrixfragmente untersucht. Serum und Serumfraktionen enthalten Substanzen mit einem Molekulargewicht von < 1000 oder > 50 000, welche die Inkorporation von 35S‐Cystin stark hemmen, während Substanzen mit Molekulargewichten zwischen 1000 und 50000 nur eine geringe Inhibitionswirkung zeigen. Die möglichen Ursachen der beobachteten Effekte werden diskutiert.RésuméIncorporation de 35S‐cystine dans des fragments tissulaires de la matrice d'onglons de bovin et influence du sang et des fractions de sérum sur les taux d'incorporationL'incubation de fragments tissulaires de la matrice d'onglons de bovin dans un milieu contenant L35S‐cystine a provoqué durant 3 heures une augmentation de 7 à 25 fois du taux du traceur. L'incorporation du traceur fut inhibée par L‐cystéine. Cette inhibition fut beaucoup plus forte que dans des recherches précédentes avec l'emploi de 75Se‐cystine comme traceur. On en a conclu que l'incorporation de 35S‐cystine dans la matrice de l'onglon est un meilleur indicateur pour l'obtention des récepteurs spécifiques de la cystine que l'incorporation de 75Se‐cystine.On a essayé d'expliquer à l'aide de ce modèle expérimental si du sang d'animaux atteints de fourbure contenant de substances capables d'influencer le processus de kératinisation dans la matrice du sabot ou de l'onglon. Les effets du sérum sanguin et des différentes fractions du sérum sur l'incorporation de cystine marquée dans des fragments de matrices ont été examinés. Sérum et fractions de sérum contiennent des substances avec un poids moléculaire < 1000 ou > 50 000 qui inhibent fortement l'incorporation de 35S‐cystine, alors que des substances de poids moléculaires entre 1000 et 50000 ne présentent qu'une faible effet d'inhibition. Les causes possibles des effets observés sont discutées.ResumenLa incorporación de 35S‐cistina en fragmentos hísticos de la matriz del tejido querafiloso de pezuñas de ganado vacuno y el influjo de sangre y fracciones séricas sobre la tasa de incorporaciónLa incubación de fragmentos hísticos de la matriz del tejido querafiloso de pezuñas de reses vacunas en un medio con L35S‐cistina conducía en el plazo de 3 horas al aumento del contenido trazador en unas 7 hasta 25 veces. La incorporación del trazador fue inhibida por L‐cisteína; esta inhibición era mucho más intensa que en ensayos anteriores utilizando 75Se‐cistina como trazador. De aquí se infiere que la incorporación de 35S‐cistina en la matriz de la pezuña es un indicador mejor en la indagación de receptores específicos de la cistina que la incorporación de 75Se‐cistina.Con ayuda del modelo experimental presente se quería dilucidar si la sangre de animales con pododermitis contiene substancias que menoscaban los procesos de queratinización en la matriz del casco o pezuña. Por ello, se analizaron las acciones de suero sanguíneo y diversas fracciones séricas sobre la incorporación de cistina marcada en fragmentos de matrices. El suero y fracciones séricas contienen substancias con un peso molecular de < 1.000 o > 50.000, las cuales inhiben fuertemente la incorporación de 35S‐cistina, mientras que substancias con pesos moleculares comprendidos entre 1.000 y 50.000 muestran solo una acción inhibitoria escasa. Se discuten las causas posibles de los efectos observados.