Die Immunperoxidase‐Methode zum Nachweis von Virus‐ und Chlamydien‐Antigenen
Authors: Teufel P. , Mields W. , Becker W. 
Published: August 2010

ZusammenfassungDurch den Nachweis von Herpesvirus‐equi‐1‐Antigen in der Leber experimentell infizierter Goldhamster konnte die Brauchbarkeit einer direkten und indirekten Immunperoxidase‐Methode zur Lokalisierung von Virusantigen in Organen infizierter Versuchstiere aufgezeigt werden.Die direkte Immunperoxidase‐Technik erbrachte gegenüber der indirekten Methode und der direkten Immunfluoreszenz ein detailreicheres Bild der Verteilung von Herpesvirusantigen im Kern und Zytoplasma infizierter Leberparenchymzellen.Die endogene Peroxidaseaktivität von Entzündungszellen kann den Nachweis der an die Antikörper gebundenen Meerrettichperoxidase stören und muß vor Anwendung der Immunperoxidase‐Technik mit einer H2O2‐haltigen Natriumazid‐Lösung beseitigt werden.Beide Immunperoxidase‐Methoden haben gegenüber der Immunfluoreszenz den Vorteil, daß durch den histochemischen Enzymnachweis ein Farbstoff gebildet wird, der das Anfertigen von Dauerpräparaten und die Verwendung eines gewöhnlichen Lichtmikroskops gestattet.SummaryThe immunoperoxidase method for detection of viral and chlamydial antigens 1. Basic method and detection of herpes virus equi‐1 antigen in livers of infected hamstersThe value of the direct and the indirect immunoperoxidase method for showing local deposits of viral antigen in organs of infected experimental animals was demonstrated with herpes virus equi‐1 antigen in the liver of experimentally infected hamsters.The direct technique gave a more detailed picture of the distribution of the antigen in the nucleus and cytoplasm of the infected liver parenchymal cells than did the indirect method.The endogenous peroxidase activity of inflammatory cells can interfere with the horseradish peroxidase bound to antibody and for this reason the immunoperoxidase technique must be preceded by treatment with sodium azide solution containing H2O2.Both immunoperoxidase methods have the advantage over immunofluorescence that the histochemical demonstration of the enzyme yields a coloured compound that makes it possible to prepare permanent preparations and to use ordinary light microscopy.RésuméLa méthode de l'immunoperoxydase dans la recherche des antigènes viraux et de Chlamydia Communication I: Principes de la méthode et mise en évidence de l'antigène viral Herpes equi‐1 dans des foies d'hamsters dorésOn a pu montrer la validité d'une méthode directe et indirecte de l'immunoperoxydase pour la localisation d'antigènes viraux dans des organes d'animaux d'expérience infectés par la mise en évidence de l'antigène viral Herpes equi‐1 dans le foie d'hamsters dorés infectés expérimentalement. La technique directe de l'immunoperoxydase a donné une image plus détaillée de la répartition des antigènes viraux Herpes dans le noyau et le cytoplasme des cellules parenchymateuses infectées du foie que la méthode indirecte et l'immunofluorescence directe.L'activité endogène de la peroxydase des cellules inflammatoires peut déranger la mise en évidence de la peroxydase de Meerrettich liée aux anticorps et doit de ce fait être écartée par l'emploi d'une solution d'azide de sodium contenant H2O2.Les deux méthodes d'immunoperoxydase ont l'avantage suivant sur l'immunofluorescence: il y a formation d'une coloration lors de recherche enzymatique histochimique qui permet de faire des préparations durables et l'emploi d'un microscope conventionnel.ResumenEl método de la inmunoperoxidasa para identificar los antígenos de virus y de clamidios I° comunicación: Fundamentos metodológicos e identificación del antígeno viral herpes‐equi‐1 en los hígados de hamsters dorados infectadosMediante la identificación del antígeno viral herpes‐equi‐1 en el hígado de hamsters dorados infectados experimentalmente, se pudo demostrar la utilidad de una técnica directa e indirecta de la inmunoperoxidasa para localizar el antígeno viral en los órganos de los animales de ensayo infectados.El procedimiento directo de la inmunoperoxidasa ofreció frente al método indirecto y la inmunofluorescencia directa un cuadro más rico en detalles sobre la distribución de los antígenos virales herpéticos en el núcleo y el citoplasma de las células parenquimatosas hepáticas infectadas.La actividad endógena de la peroxidasa de las células inflamatorias puede interferir la identificación de la peroxidasa del rábano silvestre ligada a los anticuerpos y debe ser eliminada antes de aplicar la técnica de la inmuno‐peroxidasa con una solución de azida sódica que contiene H2O2.Ambos métodos de la inmunoperoxidasa tienen frente a la inmunofluorescencia la ventaja de que mediante la identificación histoquímica de la enzima se forma un colorante, el cual permite la confección de preparaciones duraderas y el empleo de un fotomicroscopio usual.