Counterstaining of Milk Cells in the Test Tube
Authors: Wahby A. M. 
Published: August 2010

Summary1. Different stain mixtures were tried on 200 fore‐milk samples of known origin to counterstain milk cells in the test tube.2. The stain mixture which gave the best results was composed of equal parts of 2% methylene blue solution and carbol fuchsin solution (after Ziehl‐Neelsen) diluted to 1: 9 with distilled water and used in the proportion of 0.5 cc. to 4.5 cc. of fore‐milk. The staining procedure is given in detail.3. The morphological characters of cell types in milk were easily recognised by this method and there was no difficulty in differentiating between pseudopolymorphs and true polymorphs, or in identifying each type of the true polymorphs.4. Neutrophils were found in very small numbers in two normal milk samples and their presence might be attributed to mechanical irritation of the udder.5. In no sample of normal milk were there eosinophils, basophils, monocytes or neutrophils in large numbers. Their presence in large numbers in milk samples should be regarded as indicative of deviation of the udder from normality, and bacteriological and confirmatory tests should be carried out to ascertain the cause.ZusammenfassungFärbung von Milchzellen in Reagenzgläsern1. Bei 200 Anfangsgemelkproben bekannter Herkunft wurde versucht, mittels verschiedener Farbstoffmischungen die Milchzellen in Reagenzröhrchen zu färben.2. Der Farbstoff, der die besten Resultate ergab, bestand zu gleichen Teilen aus 2%iger Methylenblau‐ und Karbolfuchsinlösung (nach Ziehl‐Neelsen), die 1: 9 mit Aqua dest. verdünnt wurde. Seine Anwendung erfolgte im Verhältnis von 0,5 ccm zu 4,5 ccm Milch des Anfangsgemelkes. Die Färbemethode ist im einzelnen im Text beschrieben.3. Bei Anwendung dieser Methode ließ sich die Morphologie der Zellen leicht erkennen. Insbesondere bestanden keine Schwierigkeiten bei der Differenzierung von polymorphen und pseudopolymorphen Zellen sowie bei der Unterscheidung der einzelnen Typen von Polymorphen.4. In 2 Normalmilchproben wurden vereinzelt Neutrophile gefunden. Ihre Anwesenheit dürfte auf mechanische Beschädigung des Euters zurückzuführen sein.5. In keiner Normalmilchprobe fanden sich Eosinophile, Basophile, Monozyten oder Neutrophile in größerer Anzahl. Das Vorliegen in größerer Zahl muß als eine krankhafte Veränderung des Euters angesehen werden. Um die Ursache zu klären, müssen dann bakteriologische und sonstige ergänzende Untersuchungen durchgeführt werden.RésuméLa coloration des cellules du lait en éprouvette1. On essaya de colorer les cellules du lait en éprouvette en utilisant divers mélanges de colorants à partir de 200 spécimens de lait de début de traite dont la provenance était connue.2. Le colorant qui donna les meilleurs résultats était composé à parties égales de bleu de méthylène à 2% et d'une solution de fuchsine phéniquée (selon Ziehl‐Neelsen) diluée 1:9 à l'eau distillée. On utilisa ce colorant à raison de 0,5 cm3 pour 4,5 cm3 de lait du début de traite. La méthode de coloration est décrite en détail dans le texte.3. Cette méthode permet une bonne observation morphologique des cellules. On put en particulier différencier facilement les cellules polymorphes et pseudo‐polymorphes ainsi que les divers types de polymorphes.4. On trouva quelques neutrophiles dans deux spécimens de lait normal. Leur présence a sans doute une origine traumatique.5. Dans aucun spécimen de lait normal on ne trouva des éosinophils, des basophiles, des monocytes et des neutrophiles en nombre appréciable. Leur présence en grand nombre doit être considérée comme le signe d'une lésion pathologique de la mammelle. Pour en découvrir la cause, il faut effectuer des analyses bactériologiques ou tout autre examen complémentaire utile.ResumenColoración de células lácteas en tubos de ensayo1)— En 200 muestras de principio de ordeño de origen conocido se intentó teñir las células lácteas en tubos de ensayo mediante diversas mezclas de colorantes.2)— El colorante que ofreció los resultados mejores estaba formado por partes iguales de una solución de azul de metileno al 2% y otra de fucsina fenicada (de Ziehl‐Neelsen), que estaba diluída con agua destilada en la proporción de 1:9. Su utilización se efectuaba en la relación de 0,5 c.c. con 4,5 c.c. de leche de ordeño inicial. En el texto se describe con detalle la técnica de coloración.3)— Empleando esta técnica se podrá reconocer con facilidad la morfología celular. En especial, no existían dificultades en la diferenciación de células polimorfas y pseudopolimorfas, así como en la distinción de los diversos tipos de células polimorfas.4)— En dos muestras de leche normal se hallaron a veces neutrófilos. Su presencia ha de atribuirse a la lesión mecánica de la glándula mamaria.5)— En ninguna muestra de leche normal se encontraron eosinófilos, basófilos, monocitos o neutrófilos en gran cantidad. Su presencia en cantidad debe admitirse como una alteración patológica de la mama. Para aclarar su origen deben realizarse entonces análisis bacteriológicos y las restantes pruebas complementarias.