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Mode of Action of Itraconazole: Morphological Aspects
Authors: Borgers M. , Van de Ven Marie‐Anne 
Published: July 2010

Summary: The broad spectrum of antifun‐gal activity of itraconazole is verified by morphologic criteria at the light and electron microscopical level. Yeast and fungal species examined are Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Paracoccidioides brasiliensis, Sporothrix s chenckii, Pityro‐sporum ovale, Trichophyton rubrum and Aspergillus fumigatus. Exposures of cultures of these yeasts and fungi to itraconazole results in dose‐ and time‐dependent alterations which vary in nature and intensity from one species to another. The most striking gross morphological change is seen in the biphasic species and consists of the abolishment of morphogenic development of the blastospore into the hyphal forms (C. albicans and P.ovale) and of the hyphal into the yeast forms (P. brasiliensis). Furthermore, the outgrowth and development of inoculated A. fumigatus hyphae into sporu‐lating vesicles is almost completely abolished. The above mentioned effects on morphogenesis are achieved in the 10‐‐10‐‐10‐‐7M range. Except for P. ovale, the earliest ultra‐structural changes after itraconazole consist of abnormalities at the plasma membrane, the cell wall and cytoplasmic vacuoles. They preceed a marked increase in cell volume, defective cell division, abortive hyphal outgrowth and loss of cell viability. These changes are identical to those previously described after miconazole and ketoconazole treatment. However, when compared to the other available azole‐deri‐vatives sharing the same basic mechanisms of action, itraconazole displays an exceptionally strong activity against A. fumigatus which can be morphologically translated by a potent necrotizing action on hyphae and inhibition of vesicle formation and sporulation.The in vitro effects of itraconazole are supported by data obtained from microscopic examinations of samples derived from patients and experimental animals infected with various fungal organisms.
Pathogenesis of postoperative candidosis: no detectable fungemia during reoperations after abdominal surgery
Authors: Rantala A. , Niinikoski J. , Lehtonen O. P. 
Published: July 2010

Summary. Pathogenesis of systemic candidosis in surgical patients is unsettled. Results from animal models suggest that invasion from colonized intestine is the major portal of entry into circulation. To study the mechanisms of systemic candidosis in surgical patients after intestinal surgery, multiple blood cultures were taken during reoperations with manipulation of the intestinum to detect possible peri‐operative fungemia. The lysis centrifugation method (Isolator®) was used for blood cultures. Of the 30 subjects in the material, 12 were demonstrated to be colonized with yeast before the reoperation. Three patients had positive blood cultures during reoperation, but no yeasts were found in the 146 perioperative blood cultures. Three patients had severe nonsuperficial yeast infection after reoperation, but none had disseminated candidosis. This finding in high risk patients supports the view that immediate perioperative fungemia and persorption from colonized intestinum is rare. However, persorption may occur later via healing wounds of the colonized intestinum. Both persorption and the exogenous route (e.g. vascular catheters) are possible in the pathogenesis of postoperative candidosis.Zusammenfassung. Die Pathogenese der generalisierten Candidose bei chirurgischen Patienten ist unklar. Ergebnisse von Tierexperimenten lassen annehmen, daß die wichtigste Eintrittspforte in den Kreislauf die Invasion vom kolonisierten Darm sein könnte. Um den Mechanismus der generalisierten Candidose bei Patienten nach Darmchirurgie aufzuklären, wurden mehrere Blutproben während der Reoperationen und der Manipulationen am Darm gewonnen und als Blutkulturen auf Pilze untersucht. Für die Blutkultur wurde die Lysis‐Zentri‐fugations‐Methode (Isolator®) verwendet. Von insgesamt 30 Fällen waren 12 vor der Reoperation mit Pilzen kolonisiert. Bei drei Patienten war die Blutkultur während der Reoperation positiv. In insgesamt 146 postoperativen Blutproben wurden keine Pilze nachgewiesen. Drei Patienten hatten nach der Operation eine schwere nicht‐oberflächliche Pilzinfektion, aber keine generalisierte Candidose konnte nachgewiesen werden. Diese Ergebnisse bei Hochrisikopatienten stützen die Annahme, daß die Persorption von Pilzen aus dem kolonisierten Darm bei Operationen selten ist. Diese kann jedoch später stattfinden. Außerdem muß die Schmierinfektion (z. B. über Katheter) als weiterer wichtiger Invasionsweg in der Pathogenese der postoperativen Candidose in Betracht gezogen werden.
Protective effect of human granulocyte colony stimulating factor (hG‐CSF) on Candida, infections in normal and immunosuppressed mice
Authors: Polak‐Wyss Annemarie 
Published: July 2010

Summary. Prophylactic treatment with human granulocyte colony stimulating factor (hG‐CSF) affords significant protection against systemic infections caused by C. albicans in cyclophosphamide‐treated but not in cortisone‐treated mice. Localized candidosis in neutropenic mice does not respond to hG‐CSF. Our data show that granulocytes play an important role in the immune defence against deep mycoses, but not against local infections. From our data it is reasonable to assume that prophylactic treatment with hG‐CSF may augment the resistance of immunosuppressed patients to deep Candida infection, but it would be of little help against oral candidosis of HIV patients.Zusammenfassung. Die prophylaktische Be‐handlung mit dem granulozytenstimulierenden Faktor des Menschen (hG‐CSF) gewährt signifi‐kanten Schutz gegen tieflokalisierte Candida albi‐cans‐Infektionen an Cyclophosphamid‐behandel‐ten, nicht jedoch an Cortison‐behandelten Mäusen. Die lokalisierte Candidose in neutropenischen Mäusen spricht nicht auf hG‐CSF‐Therapie an. Unsere Ergebnisse zeigen, daß Granulozyten eine wichtige Rolle in der Immunabwehr tieflokalisierter, nicht jedoch in der Haut lokalisierter Mykosen spielen. Aus den Untersuchungsergebnissen kann man schließen, daß die prophylaktische Behandlung mit hG‐CSF die Resistenz immunsupprimierter Pati‐enten gegenüber tieflokalisierten Candida‐Infektio‐nen zu steigern vermag. Andererseits ist wenig Wir‐kung bei der oralen Candidose an HIV‐Patienten zu erwarten.
Kinetic study of antifungal activity of amphotericin B, 5‐fluorocytosine and ketoconazole against clinical yeast isolates using liquid‐phase turbidimetry
Authors: Dei‐Cas E. , Dujardin L. , Pinto M. E. Ribeiro , Ajana F. , Fruit J. , Poulain D. , Camus D. , Vernes A. , François N. 
Published: July 2010

Summary. The fungal growth of clinical yeast isolates and of VW32 clone of Candida albicans were measured in vitro using a liquid‐phase turbidimetric system (Bioscreen from Labsystems, France) in defined conditions. Cultures were performed in Sha‐domy's liquid medium and the fungal growth automatically evaluated every 10 minutes for 24 hours using various concentrations of drugs. The system made it possible to test 200 culture samples in one experiment. Yeast sensitivity to drugs was also measured by using our routine semi‐automatic turbidimetric system. We observed that kinetic patterns of activity of each antifungal agent were typical. The in vitro tests showed that of 927 clinical yeast isolates 99.2% were sensitive to amphotericin B, 94.4% to 5‐fluorocytosine and 69.7% to ketoconazole.Zusammenfassung. Das Wachstum klinischer Isolate und des Klons VW32 von Candida albicans wurde unter definierten Bedingungen in vitro in einem Flüssigphase‐Trübungsmeßsystem (Bioscreen von Labsystems, Frankreich) gemessen. Die Kul‐turen wurden in Shadomys Flüssigmedium ange‐setzt, und das Pilzwachstum wurde automatisch unter dem Einfluß verschiedener Antimyzetika‐Kon‐zentrationen 24 h lang alle 10 min bestimmt. Dieses System ermöglichte es, 200 Kulturproben in einem Experiment durchzutesten. Die Antimyzetika‐Sen‐sitivität der Hefen wurde vergleichend in unserem halbautomatischen Trübungsmeßsystem des Rou‐tinebetriebs bestimmt. Die Kinetik der Aktivitäts‐muster erwiesen sich für jedes Antimyzetikum als typisch. Der In‐vitro‐Ansatz zeigte, daß unter 927 klinischen Hefeisolaten 99,2 % für Amphotericin B, 94,4 % für 5‐Fluorcytosin und 69,7 % für Ketoco‐nazol empfindlich waren.
The preservation of fungal cultures by lyophilization
Authors: Bunse T. , Steigleder G. K. 
Published: July 2010

Summary. A method for the preservation of fungal strains is presented. The cultures are grown on Sabouraud glucose agar in glass ampoules and lyophilized without further processing. By this method the macroscopical morphology of the cultures is preserved, so that these can be used immediately without recultivation as reference cultures. All tested mould and yeast strains remained viable over the six months duration of the experiment, whereas the dermatophyte strains could only partially be recultivated.Zusammenfassung. Es wird ein Verfahren zur Konservierung von Pilzstämmen vorgestellt, bei dem die Kulturen auf Sabouraud‐Glucose‐Agar in Glasampullen wachsen und ohne weitere Aufberei‐tung gefriergetrocknet werden. Die makroskopische Morphologie der Kulturen bleibt bei diesem Verfahren erhalten, so daß diese sofort, ohne erneute Anzüchtung, als Referenzkulturen verwendet werden können. Alle geprüften Schimmel‐ und Hefe‐stämme blieben über die Versuchsdauer von sechs Monaten lebensfähig, während sich die Dermato‐phytenstämme nur teilweise wieder anzüchten lie‐ßen.
Acretnonium kiliense in oesophagus stenosis
Authors: Simon G. , Rákóczy G. , Galgóczy J. , Verebély T. , Bókay J. 
Published: July 2010

Summary. The aetiological significance of Acremonium kiliense is demonstrated for the first time in a human gastrointestinal infection. The mycotic oesophagitis with gastro‐oesophageal reflux is described. The situation was treated effectively with itraconazole and anti‐reflux surgery.Zusammenfassung. Die ätiologische Beteiligung von Acremonium kiliense wird zum ersten Mai bei einer Gastrointestinaltrakt‐Infektion des Menschen nachgewiesen. Die Autoren beschreiben die pilz‐bedingte Ösophagitis mit gastro‐ösophagealem Reflux. Die Situation konnte mit Itraconazol und einem chirurgischen Eingriff wirksam saniert wer‐den.
Tinea pedis in children
Authors: Terragni L. , Buzzetti I. , Lasagni A. , Oriani A. 
Published: July 2010

Summary. Tinea pedis is a superficial mycosis, unusual in children. Epidemiological and clinical data regarding cases of tinea pedis observed in children over a period of 20 years are discussed and some explanation given for the conditions which predisposed children to the infection. Clinical features are variable and similar to adults. Bullous lesions are more frequently seen in children. Most of the cases were seen in children over 10 years of age. Males are more often affected with tinea pedis: this is particularly true for 10 to 13 year‐old children. As in adults, Trichophyton rubrum is the most frequently isolated etiological agent.Zusammenfassung. Tinea pedis ist eine bei Kin‐dern ungewöhnliche oberflächliche Mykose. Es wer‐den epidemiologische und klinische Daten aus einer 20jährigen Beobachtungszeit über Tinea pedis bei Kindern vorgestellt mit Erklärungsversuchen für die Bedingungen, unter welchen Kinder für diese In‐fektion prädisponiert sind. Die klinischen Bilder va‐riieren und ähneln denen bei Erwachsenen. Groß‐blasige Läsionen werden bei Kindern häufiger ge‐sehen. Die meisten Fälle wurden bei über 10jährigen Kindern erfaßt. Jungen sind öfter be‐troffen, vor allem in der Gruppe der 10‐ bis 13jährigen. Wie bei Erwachsenen ist Trichophyton rubrum das am häufigsten isolierte ätiologische Agens.
Treatment of disseminated onychomycosis due to Trichophyton rubrum with itraconazole under control of plasma levels
Authors: Schrenker T. , Koch H. U. 
Published: July 2010

Summary. Successful treatment of a disseminated Trichophyton rubrum infection of the nails is reported. Under therapy with 50 mg/100 mg itraconazole daily total remission was achieved after 5 months (fmger nails) and 6 months (toe nails) respectively. Plasma levels of itraconazole were determined twice a month to control the regularity of the treatment using HPLC.Zusammenfassung. Berichtet wird über eine erfolgreiche 6monatige Itraconazol‐Behandlung bei generalisierter Onychomykose durch Trichophyton rubrum. Unter Therapie mit 50 mg/100 mg Itra‐conazol täglich erfolgte eine vollständige Abheilung der Fingernägel nach 5 Monaten, der Zehennägel nach 6 Monaten. Zur Überprüfung der tegelmä‐ßigen Arzneimitteleinnahme wurde der Itracona‐zol‐Serumspiegel in 2wöchigen Abständen mittels HPLC‐Methode bestimmt.
Malassezia pachyderznatis: properties and storage
Authors: Breierová E. , Kocková‐Kratochvílová A. , Šajbidor J. , Ladzianská K. 
Published: July 2010

Summary. Five strains of Malassezia pachydermatis isolated from small animals in Bratislava were subcultured, maintained under sterile paraffin oil and preserved in liquid nitrogen. Morphological and physiological characteristics as well as the analysis of long chain fatty acids of the cell mass were determined. The results showed that the maintenance in liquid nitrogen is the most satisfactory method of preservation of pure cultures of Malassezia pachydermatis.Zusammenfassung. Fünf Stämme der Art Ma‐lassezia pachydermatis wurden von verschiedenen Kleintieren in Bratislava isoliert, subkultiviert und unter Paraffinöl und in flüssigem Stickstoff aufbe‐wahrt. Die morphologischen und physiologischen Eigenschaften sowie auch die langkettigen Fettsäu‐ren in der Zellmasse wurden untersucht. Die Re‐sultate zeigen, daß die Aufbewahrung im flüssigen Stickstoff die beste Methode für die Stammhaltung von Malassezia pachydermatis ist, die bis jetzt nur sehr schwer in Sammlungen zu halten war.
In vitro comparative evaluations of the postantifungal effect: synergistic interaction between flucytosine and fluconazole against Candida albicans
Authors: Scalarone G. M. , Mikami Y. , Kurita N. , Yazawa K. , Uno J. , Miyaji M. 
Published: July 2010

Summary. In vitro comparative evaluations were performed to study the efficacy of combinations of flucytosine and fluconazole in producing a postantifungal effect (PAFE) on Candida albicans. Initial studies were done to determine MIC, FIC (fractional inhibitory concentration) and optimal PAFE parameters. A turbidometric method was used to measure yeast cell growth following exposure to different concentrations of the two drugs for periods of 0.5, 1 or 2 h at temperatures of 30 d̀C and 37 d̀C. The PAFE was determined by the difference in time (h) required for growth of the control and test cultures to reach the 0.5 absorbance level following removal of the drug by dilution. Ten strains of C. albicans were then assayed (30 d̀C; 2 h exposure time) and a synergistic PAFE was evidenced with the two drugs at concentrations well below their individual MICs. PAFEs ranging from 3.8 to 10.5 h, which persisted for 1.2–2.5 h longer than those achieved with either agent separately, were evidenced when flucytosine and fluconazole were combined (flucytosine: fluconazole ratios of 1: 16–1: 32) at concentrations ranging from 0.024 to 0.098 μg ml‐1 and 0.78 to 1.56μg ml“1 respectively. The concentrations of each agent required to produce an optimal PAFE varied according to the C. albicans strain being assayed.Zusammenfassung. Kombinationen von Flu‐cytosin und Fluconazol wurden in einer verglei‐chenden Studie in vitro auf den postantifungalen Effekt (PAFE) an Candida albicans untersucht. In Vorversuchen wurden die minimale Hemmkon‐zentration (MIC) sowie die Synergismus/Antago‐nismus‐Koeffizienten (FIC) und die optimalen PAFE‐Parameter bestimmt. Das Wachstum der Hefezellen nach Exposition gegenüber unter‐schiedlichen Konzentrationen der beiden Wirk‐stoffe wurde bei 30 d̀C und 37 d̀C nach 0.5, 1, oder 2 h turbidimetrisch bestimmt. Der PAFE war definiert durch den Zeitunterschied (h), der für die Kontroll‐ und Testkulturen benötigt wurde, das Absorptionsniveau 0.5 nach Wirkstoffelimi‐nation durch Herausverdünnen zu erreichen. An 10 C. albicans‐Stämmen (30d̀C, 2h Expositions‐zeit) konnte ein synergistischer PAFE der beiden Wirkstoffe mit Konzentrationen nachgewiesen werden, die deutlich unter ihrer individuellen MIC lagen. Die PAFEs mit der Flucytosin‐Fluconazol‐Kombination 1: 16 bis 1:32 lagen im Bereich von 3.8 bis 10.5 h und bestanden 1.2 bis 2.5 h länger als die, die mit jedem Wirkstoff einzeln zu erreichen waren; die Konzentrationen dieser Kombinationen lagen hierbei zwischen 0.024 bis 0.098 μg ml‐1 beziehungsweise bei 0.78 bis 1.56 μg ml‐1. Die Konzentrationen, die für jeden Wirkstoff notwendig waren, um einen optimalen PAFE zu erzeugen, variierten von einem C. albicans‐Stamm zum anderen.
Cultural evidence for a bullous type of tinea pedis
Authors: Korting H. C. , Zienicke Helga 
Published: July 2010

Summary. Maceration, hyperkeratosis and vesicles are well known as typical clinical correlates of dermatophyte infection of the feet. It seems, however, still to be controversial whether bullae also belong to the clinical spectrum. In a 48‐year‐old female Trichophyton rubrum could be cultured from the fluid obtained by aspiration of an interdigital bulla. In another case Trichophyton mentagrophytes could be isolated from the interdigital space but not from a bulla found on the sole, microscopic investigation, however, being positive. This emphasizes the hypothesis that blisters found on the foot can be due to dermatophytes.Zusammenfassung. Während Mazeration, Hyperkeratose und Bläschen als typische klinische Korrelate der Dermatophyten‐Infektion der Füβe gelten, scheint es bis heute umstritten, ob auch Blasen hierher gehören. Bei einer 48 Jahre alten Frau konnte Trichophyton rubrum aus dem durch Aspiration gewonnenen Inhalt einer interdigita‐len Blase angezüchtet werden. In einem weiteren Fall konnte Trichophyton mentagrophytes aus dem Interdigitalraum kultiviert werden, aber nicht aus einer Blase an der Fuβsohle, deren Inhalt sich freilich mikroskopisch als positiv erwies. Dies erhärtet die Auffassung, wonach Blasen an der Fuβsohle unmittelbar auf Dermatophyten zurückgehen können.
Aquatic fungi parasitic on temperate fishes of Kumaun Himalaya, India
Authors: Sati S. C. 
Published: July 2010

Summary. Eighty isolates of different species of aquatic fungi belonging to Achlya, Aphanomyces, Dictyuchus, Protoachlya, Saprolegnia, Thraustotheca and Pythium are observed as parasites of certain temperate fish of Kumaun Himalaya, India. The parasitic ability of each isolate was confirmed by artificial inoculation experiments under laboratory conditions. The genera of Saprolegnia and Achlya were more virulent fish parasites than Aphanomyces, Dictyuchus, Protoachlya, Thraustotheca and Pythium. All the fish species observed are new hosts for these pathogens. Protoachlya paradoxa, Achlya klebsiana, Thraustotheca clavata and Pythium undulatum are reported for the first time as natural pathogens of fish.Zusammenfassung. Achtzig Isolate von aqua‐tischen Pilzen, die zu den Genera Achlya, Aphano‐myces, Dictyuchus, Protoachlya, Saprolegnia, Thraustotheca and Pythium gehören, werden als Parasiten gewisser Kaltwasserfische im Kumaun‐Himalaya, Indien, angesehen. Die Parasitenei‐genschaft eines jeden Isolates wurde durch experi‐mentelle Infektion unter Laborbedingungen bestätigt. Die Genera Saprolegnia and Achlya erwie‐sen sich als höher virulente Fischparasiten als die übrigen. Alle einbezogenen Fische wurden erst jetzt als Wirte für die genannten Erreger erkannt. Protoachlya paradoxa, Achlya klebsiana, Thraustotheca clavata und Pythium undulatum werden zum ersten Mai als natürliche Krankheitserreger für Fische beschrieben.,
Ultrastructure of black piedra
Authors: de Almeida H. L. , Salebian A. , Rivitti E. A. 
Published: July 2010

Summary. Black piedra or nodular tricho‐mycosis is a superficial mycosis of the hair shaft, prevalent in the tropical areas of South America and Asia and caused by the fungus Piedraia hortai. By scanning electron microscopy the invasion of the hair keratin and the elimination of spores through canals was seen. Transmission electron microscopy showed a complex, well‐organized microsystem, in which cement‐producing hyphae constitute the pseudoparenchyma. Both sexual and asexual reproduction were found. Sexual reproduction gives rise to ascospores and asexual reproduction to arthrospores. The ascospores were found in thick‐walled bags, the asci; the arthrospores, that undergo gemmation, are eliminated through canals, disseminating the disease.Zusammenfassung. Die schwarze Piedra, Piedra nigra oder noduläre Trichomykose ist eine oberflächliche Mykose des Haarschaftes, die in den tropischen Gebieten Südamerikas und Asiens vorkommt. Der Erreger ist Piedraia hortai. Die rasterelektronenmikroskopische Untersuchung belegt die Invasion des Haarkeratins und die Freisetzung von Sporen an der Knötchenober‐fläche. Transmissionselektronenmikroskopisch ließ sich ein komplexes, gut organisiertes Mikro‐system darstellen: Eine vom Pilz sezernierte Kittsubstanz zementiert die Hyphen zu einem Pseudoparenchym zusammen. Sexuelle und asexuelle Reproduktion tritt nebeneinander auf. Die sexuelle Vermehrung führt zur Askosporenbildung, die asexuelle zur Arthrosporenbildung. Die Askosporen finden sich in dickwandigen, sackförmigen Asci. Arthrosporen sind zur Gemmenbildung befähigt und verbreiten die Infektion durch ihre Streuung.
In vitro susceptibility of Trichophyton mentagrophytes arthroconidia to clotrimazole and griseofulvin in human corneocyte suspensions
Authors: Aljabre S. H. M. , Scotty E. M. , Shankland G. S. , Richardson M. D. 
Published: July 2010

Summary. The use of corneocytes in suspension as a medium for the study of the effect of antifun‐gal drugs on Trichophyton mentagrophytes arthroconidia was investigated. In the presence of clotrimazole or griseofulvin, arthroconidia germination in a suspension of corneocytes and in Sabouraud glucose liquid medium was significantly reduced compared with germination in drug‐free media. Where antifungals were added to arthroconidia after an activation period during which germination occurred, any further germination was inhibited. The data showed that the growth of T. mentagrophytes in the presence of corneocytes offered a simple, rapid, inexpensive and relevant model for the assessment of antifun‐gal activity of compounds for the treatment of dermatophytosis.Zusammenfassung. Es wurde die Wirkung von Antimyzetika auf Arthrokonidien von Trichophyton mentagrophytes in einer Korneozyten‐Suspension untersucht. In Gegenwart von Clotrimazol oder Griseofulvin war die Auskeimung der Arthrokonidien in der Korneozyten‐Suspension und in Sabouraud‐Glucose‐Bouillon signifikant vermindert, verglichen mit der Auskeimung in wirkstoffreiem Medium. Wurden die Antimyzetika den Arthrokonidien erst nach einer Aktivierungsperiode zugesetzt, während der sie auskeimten, war jedes weitere Wachstum gehemmt. Die Ergebnisse belegen, daß das Wachstum von T. mentagrophytes in Gegenwart von Korneozyten ein einfaches, schnelles, preiswertes und aussagefähiges Modell für die Wirksamkeitsprüfung von Antimyzetika in der Dermatophytosen‐Behandlung darstellt.