Möglichkeiten und Grenzen der Mikromanipulation embryonaler Furchungsstadien landwirtschaftlicher Nutztiere dargestellt am Modell artifiziell monozygoter Zwillinge beim Schaf
Authors: Meinecke‐Tillmann S. , Meinecke B. 
Published: August 2010

ZusammenfassungIn der Untersuchung wurden 2 1/2 bis 6 1/2 Tage alte Schafembryonen zur Erstellung artifiziell monozygoter Zwillinge herangezogen. Nach Entfernen der Zona pellucida und Teilung der Zellmasse in 2 Hälften erfolgte der Transfer bei frühen Blastozysten, sofern sich beide Hälften wieder reexpandiert hatten, direkt in die Empfängertiere; bei jüngeren Entwicklungsstadien wurden die Hälften zunächst in einen Zwischenwirt übertragen, um eine Vorselektion potentieller Zwillingspaare im Blastozystenstadium vorzunehmen. Hierbei kam eine Doppelzonatechnik oder die Agarzylindertechnik nach Willadsen (1980) zum Schutz der Blastomeren zum Einsatz. Neben vollständigen Hälften wurden auch “Hälften” mit einer reduzierten Blastomerenzahl (1/3‐ beziehungsweise 1/4‐Embryonen) übertragen. In der Regel wurde jeweils nur 1 Embryo in die endgültigen Empfänger transferiert.Die in der Untersuchung erzielte Trächtigkeitsrate liegt bei den halben Blastozysten bei 51,1% und den jüngeren Entwicklungsstadien bei 63,3%. Die entsprechenden Embryoüberlebensraten, die an Hand der geborenen Lämmer ermittelt wurden, betragen 37,5% beziehungsweise 62,5%. 2 der Lämmer entwickelten sich aus einzeln übertragenen 1/4‐Embryonen.SummaryPossibilities and limits of micromanipulation of embryonic division stages of farm animals demonstrated using as model artificial monozygotic twins in sheepFor this study 2 1/2 to 6 1/2 days old sheep embryos were used to produce artificial monozygotic twins. After removing the Zona pellucida and dividing the cell mass into 2 halves the early blastocysts, when the two halves had re‐expanded, were transferred directly to the receptor animals. With younger developmental stages the two halves were first transferred to an intermediate host in order to make a selection from potential twin pairs at the blastocyst stage. For this purpose a double zone technique or the agar cylinder technique of Willadsden (1980) was used to protect the blastomeres for insertion. In addition to complete halves, “halves” comprising a reduced number of blastomeres (one‐third or one‐quarter embryos) were transferred. As a rule only a single embryo was transferred to the final host.The pregnancy rate for half‐blastocytes was 51.1% and for the younger stages of development 63.3%. The corresponding embryo survival rates, measured as lambs born, were 37.5% and 62.5%, respectively. Two lambs from individually transferred one‐quarter‐embryos developed.RésuméPossibilités et limites de la micromanipulation des stades de segmentation embryonnaire des animaux domestiques représenté avec un modèle de jumeaux monozygotes artificiels chez le moutonDes embryons de mouton âgés de 2 1/2 à 6 1/2 jours ont été utilisés pour obtenir artificiellement des jumeaux monozygotes. Après l'éloignement de Zona pellucida et la séparation de la masse cellulaire en deux parties, on a procédé au transfert par des blastocytes précoces directement sur des animaux récepteurs pour autant que les deux moitiés furent tout d'abord transplantées chez un hôte intermédiaire pour les stades de développements précoces afin d'examiner une présélection de jumeaux potentiels au stade de blastocytes. On a utilisé une technique de double zone ou la technique de cylindre d'agar selon à Willadsen (1980) pour protéger les blastomères. A côté des moitiés complètes, on a également transféré des <moitiés> avec un nombre réduit de blastomères (1/3 et 1/4 d'embryons). On a transféré dans la règle seulement 1 embryon chez l'animal récepteur final.Le taux de gestation obtenu dans l'expérience s'est situé à 51,1% pour les demiblastocytes et à 63,3% pour les stades de développement plus jeunes. Les taux de survie embryonnaire obtenus à la naissance des agneaux furent de 37,5% et respectivement 62,5%. Deux des agneaux se sont développés à partir d'un quart d'embryon unique transplanté.ResumenPosibilidades y confines de la micromanipulación de estadios de segmentación embrionaria de los animales agronómicos útiles representadas en el modelo de gemelos monocigotes artificiales en la ovejaEn este estudio se recurrió a embriones de oveja desde 2 1/2 hasta 6 1/2 días de edad para la compostura de gemelos monocigotes artificiales. Tras separar la zona pelúcida y dividir la masa celular en dos mitades, se realizó la transferencia en blastocitos précoces, en tanto que ambas mitades habían vuelto a reexpander, directamente a los animales receptores; en los estadios de desarrollo más recientes se pasaron las mitades en primer lugar a un anfitrión intermedio, con el fin de poder realizar una preselección de parejas potenciales de gemelos en el estadio de blastoquistes. Se aplicó aquí una técnica de zona doble o la técnica de cilindro de agar según Willadsen (1980) para proteger los blastómeros. Al lado de partes medias íntegras se traspasaron también <mitades> con un número reducido de blastómeros (1/3 resp. 1/4 de embriones). Por regla general, no se transfirió más que 1 embrión a las receptoras definitivas.La tasa de gestación conseguida en esta experiencia es del orden de un 51,1% en los blastocitos medios, siendo de un 63,3% en los estadios de desarrollo más recientes. Las tasas de supervivencia embrionaria correspondientes, las cuales se hallaron a la vista de los corderos nacidos, importaron 37,5% resp. 62,5%. 2 de los corderos se desarrollaron a partir de 1/4 de embrión, transmitidos individualmente.