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Late Development of Hagfish Vertebral Elements
Authors: OTA KINYA G. , FUJIMOTO SATOKO , OISI YASUHIRO , KURATANI SHIGERU 
Published: February 2013

AbstractIt has been demonstrated recently that hagfishes, one of two groups of extant jawless vertebrates, have cartilaginous vertebral elements. Embryological and gene expression analyses have also shown that this group of animals develops a sclerotome, the potential primordium of the axial skeleton. However, it has not been shown unequivocally that the hagfish sclerotome truly differentiates into cartilage, because access to late‐stage embryos and information about the cartilaginous extracellular matrix (ECM) are lacking for these animals. Here we investigated the expression patterns of the biglycan/decorin (BGN/DCN) gene in the inshore hagfish, Eptatretus burgeri. The homologue of this gene encodes the major noncollagenous component of the cartilaginous ECM among gnathostomes. We clearly identified the expression of this gene in adult vertebral tissues and in embryonic mesenchymal cells on the ventral aspect of the notochord. Taking into account that the sclerotome in the gnathostomes expresses BGN/DCN gene during the chondrogenesis, it is highly expected the hagfish BGN/DCN‐positive mesenchymal cells are derived from the sclerotomes. We propose that hagfishes and gnathostomes share conserved developmental mechanisms not only in their somite differentiation, but also in chondrogenesis of their vertebral elements. J. Exp. Zool. (Mol. Dev. Evol.) 320B:129–139, 2013. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.
Spermiogenesis in the imbricate alligator lizard,Barisia imbricata(Reptilia, Squamata, Anguidae)
Authors: Gribbins Kevin M. , Rheubert Justin L. , Touzinsky Katherine , Hanover Jessica , Matchett Caroline L. , Granados‐González Gisela , Hernández‐Gallegos Oswaldo 
Published: February 2013

AbstractAlthough the events of spermiogenesis are commonly studied in amniotes, the amount of research available for Squamata is lacking. Many studies have described the morphological characteristics of mature spermatozoa in squamates, but few detail the ultrastructural changes that occur during spermiogenesis. This study's purpose is to gain a better understanding of the subcellular events of spermatid development within the Imbricate Alligator Lizard,Barisia imbricata. The morphological data presented here represent the first complete ultrastructural study of spermiogenesis within the family Anguidae. Samples of testes from four specimens collected on the northwest side of the Nevado de Toluca, México, were prepared using standard techniques for transmission electron microscopy. Many of the ultrastructural changes occurring during spermiogenesis withinB. imbricataare similar to that of other squamates (i.e., early acrosome formation, chromatin condensation, flagella formation, annulus present, and a prominent manchette). However, there are a few unique characteristics withinB. imbricataspermatids that to date have not been described during spermiogenesis in other squamates. For example, penetration of the acrosomal granule into the subacrosomal space to form the basal plate of the perforatorium during round spermatid development, the clover‐shaped morphology of the developing nuclear fossa of the flagellum, and the bulbous shape to the perforatorium are all unique to the Imbricate Alligator Lizard. These anatomical character differences may be valuable nontraditional data that along with more traditional matrices (such as DNA sequences and gross morphological data) may help elucidate phylogenetic relationships, which are historically considered controversial within Squamata. J. Morphol., 2013. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.
Role of Adhatoda vasica (L.) Nees leaf extract in the prevention of aflatoxin‐induced toxicity in Wistar rats
Authors: Brinda Rajendran , Vijayanandraj Selvaraj , Uma Doraiswamy , Malathi Dorairaj , Paranidharan Vaikuntavasan , Velazhahan Rethinasamy 
Published: February 2013

AbstractBackgroundAflatoxin contamination of various foodstuffs and agricultural commodities is a major problem worldwide. Several strategies have been reported for the detoxification of aflatoxins in contaminated foods and feeds, but all these methods have their own shortcomings. Traditional medicinal plants are potential sources of aflatoxin‐detoxifying compounds. In this study a spray‐dried formulation of Adhatoda vasica (L.) Nees leaf extract was prepared and its chemopreventive effect on aflatoxin B1 (AFB1)‐induced biochemical changes in the liver and serum of Wistar rats was investigated.ResultsAdministration of AFB1 (1.5 mg kg−1 body weight (BW) intraperitoneally) to rats significantly reduced the activities of superoxide dismutase and catalase in liver tissues and increased the activities of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase and the levels of very‐low‐density lipoprotein, low‐density lipoprotein and cholesterol in blood serum. However, pre‐feeding of rats with A. vasica formulation (500 mg kg−1 BW for 7 days) protected the animals from AFB1‐induced biochemical changes during subsequent exposure to AFB1.ConclusionPre‐feeding of rats with A. vasica formulation counteracted the hepatic dysfunction induced by subsequent treatment with AFB1. This formulated A. vasica extract offers a biologically safe alternative to detoxify aflatoxin and has huge potential to be used in the poultry industry to reduce aflatoxicosis. © 2013 Society of Chemical Industry
Optimisation and characterisation of marihuana extracts obtained by supercritical fluid extraction and focused ultrasound extraction and retention time locking GC‐MS
Authors: Omar Jone , Olivares Maitane , Alzaga Mikel , Etxebarria Nestor 
Published: February 2013

The optimisation of focused ultrasound extraction and supercritical fluid extraction of volatile oils and cannabinoids from marihuana has been accomplished by experimental design approach. On the one hand, the focused ultrasound extraction method of volatile compounds and cannabinoids was studied based on the optimisation of cyclohexane and isopropanol solvent mixtures, and the instrumental variables. The optimal working conditions were finally fixed at isopropanol/cyclohexane 1:1 mixture, cycles (3 s−1), amplitude (80%) and sonication time (5 min). On the other hand, the supercritical fluid extraction method was optimised in order to obtain a deterpenation of the plant and a subsequent cannabinoid extraction. For this purpose, pressure, temperature, flow and co‐solvent percentage were optimised and the optimal working conditions were set at 100 bar, 35°C, 1 mL/min, no co‐solvent for the terpenes and 20% of ethanol for the cannabinoids. Based on the retention time locking GC‐MS analysis of the supercritical fluid extracts the classification of the samples according to the type of plant, the growing area and season was attained. Finally, three monoterpenes and three cannabinoids were quantified in the ranges of 0.006–6.2 μg/g and 0.96–324 mg/g, respectively.
Protein tyrosine kinase signaling in the mouse oocyte cortex during sperm–egg interactions and anaphase resumption
Authors: McGinnis Lynda K. , Luo Jinping , Kinsey William H. 
Published: February 2013

AbstractFertilization triggers activation of a series of pre‐programmed signal transduction pathways in the oocyte that establish a block to polyspermy, induce meiotic resumption, and initiate zygotic development. Fusion between sperm and oocyte results in rapid changes in oocyte intracellular free‐calcium levels, which in turn activate multiple protein kinase cascades in the ooplasm. The present study examined the possibility that sperm–oocyte interaction involves localized activation of oocyte protein tyrosine kinases, which could provide an alternative signaling mechanism to that triggered by the fertilizing sperm. Confocal immunofluorescence analysis with antibodies to phosphotyrosine and phosphorylated protein tyrosine kinases allowed detection of minute signaling events localized to the site of sperm–oocyte interaction that were not amenable to biochemical analysis. The results provide evidence for localized accumulation of phosphotyrosine at the site of sperm contact, binding, or fusion, which suggests active protein tyrosine kinase signaling prior to and during sperm incorporation. The PYK2 kinase was found to be concentrated and activated at the site of sperm–oocyte interaction, and likely participates in this response. Widespread activation of PYK2 and FAK kinases was subsequently observed within the oocyte cortex, indicating that sperm incorporation is followed by more global signaling via these kinases during meiotic resumption. The results demonstrate an alternate signaling pathway triggered in mammalian oocytes by sperm contact, binding, or fusion with the oocyte. Mol. Reprod. Dev. 80: 260–272, 2013. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.
Das ist ein Mensch
Authors: Metzger Jürgen O. 
Published: February 2013

AbstractAm 11. April 1987 nahm sich der Schriftsteller und Chemiker Primo Levi das Leben. Sein literarisches Schaffen — besonders die Werke über seine Zeit im KZ — machte ihn zu einem der einflussreichsten Chemiker des 20. Jahrhunderts.
Chemiker im Grid
Authors: Herres‐Pawlis Sonja , Krüger Jens , Packschies Lars 
Published: February 2013

AbstractMosgrid als neues Werkzeug der Computerchemie ermöglicht workflowbasierte Rechnungen in Quantenchemie, Molekulardynamik und Docking auf verteilten Rechnerinfrastrukturen. Zudem bietet das System einen Speicher zur Ablage der Daten und Workflows.
Märkte und Industrie 2030
Authors: Haug Peter 
Published: February 2013

AbstractDrei Studien zur wirtschaftlichen Zukunft zeigen, wie es in den nächsten 17 Jahren mit der chemischen Industrie weiter gehen könnte. Zwei Unternehmensberatungen geben darin strategische Hinweise für Konzerne. Die vom Verband der Chemischen Industrie initiierte Untersuchung empfiehlt der Politik, deutsche Forschung zu unterstützen. Innovation und neue Technologien bleiben für die deutsche und die europäische Chemieindustrie im globalen Wettbewerb entscheidend.
Speziationsanalytik: Haben wir die richtigen Werkzeuge?
Authors: Feldmann Jörg , Krupp Eva M. , Urgast Dagmar S. , Raab Andrea , Uroic M. Kalle 
Published: February 2013

AbstractEinige Elementspezies, darunter Arsen in anorganischen Verbindungen, lassen sich bereits in der Routineanalytik identifizieren und quantifizieren. Allerdings bereiten Speziationsuntersuchungen in komplexen biologischen Umgebungen oder große Biomoleküle noch Probleme, und einige Elemente und Spezies mit toxikologischer Bedeutung sind schwer erfassbar.
Ideen für neue Geschäfte
Authors: Küchenthal Christian 
Published: February 2013

AbstractUm neue Produkte und Dienstleistungen auf den Markt zu bringen, entwickeln Forscher Techniken, und Marketing‐Experten entwerfen dazu Geschäftsmodelle. Doch auch ganz zu Beginn suchen Innovationsmanager außerhalb des Unternehmens in Hochschulen, Forschungsinstituten und Start‐Ups nach neuartigen Entwicklungen und Ideen.
Die Bedeutung der Forschung
Authors: Zenneck J. 
Published: February 2013

AbstractDie Ausführungen des langjährigen Vorstandes des Deutschen Museums, des Altmeisters der drahtlosen Telegraphie, sind dem Manuskript eines Vortrages entnommen, der im Frühjahr des Jahres 1942 im Rahmen der Lilienthal‐Gesellschaft für Luftfahrtforschung gehalten wurde. In der Einleitung zu dem Vortrag wies der Vortragende auf folgendes hin: In jenem Jahr feiere man den 100. Geburtstag Carl von Linde's, des Pioniers der Kälte‐Technik und Begründers der technischen Herstellung der flüssigen Luft und der in der Luft enthaltenen Edelgase. Man feiere die 100jährige Wiederkehr des Tages, an dem Robert Mayer seine Auffassung der Wärme als Energieform ausgesprochen und damit die Grundlagen der mechanischen Wärmetheorie geschaffen hatte. Man feiere schließlich das 75jährige Jubiläum des dynamoelektrischen Prinzips und damit der Dynamomaschine von Werner von Siemens. des Begründers der Elektrotechnik in Deutschland, alles Gedenkfeiern, die in diesen Einzelfällen daran erinnern, was die Welt den Leistungen deutscher Forschung zu verdanken hat. Von den drei Teilen des Vortrages seien hier zunächst die beiden ersten wiedergegeben, während der letzte, der dem Stand der deutschen Forschung gewidmet ist, in einem späteren Heft abgedruckt werden soll.
Einschätzung der Grundlagenforschung
Authors: Speer Reichsminister 
Published: February 2013

AbstractWir schließen unsere Zusammenstellung über die Bedeutung der Forschung mit Ausführungen, die der Reichsminister für Bewaffnung und Kriegsproduktion in einem Schreiben vom 9. Juni 1943 an einen Physiker machte. Es kann hinzugefügt werden, daß in den seither vergangenen Monaten manches im Sinne dieser Ausführungen geschehen ist.
Chemie und Chemiestudium im Kriege
Authors: Helferich B. 
Published: February 2013

AbstractPhysik und Chemie sind die Grundwissenschaft der Technik. Die Wissenschaftler dieser Gebiete sind die Träger grundsätzlicher Fortschritte. Die Lösung ihres Nachwuchsproblems ist die Voraussetzung dauernden technischen Fortschritts, ist die Vorbedingung für den erfolgreichen Kampf einer Nation im technischen Zeitalter. Mathematiker, Physiker, Volkswirte zeigten sich in den vorstehend abgedruckten Beiträgen einer Meinung. Mag nun noch ein Chemiker zu Worte kommen. Die Beispiele, die der Direktor des Chemischen Laboratoriums der Universität Leipzig anführt, sind der Chemie entnommen und ergänzen auf diese Weise die vielen Beispiele aus der Physik, die die bisherigen Aufsätze brachten. Was Prof. Helferich sagt, gilt fast durchgehend ebenso auch für die Physik. Der Herausgeber hat daher oft in Klammern das Wort Physik hinzugesetzt, wobei er hofft, daß der Autor ihm diese Ergänzung nicht verargen wird, sagt dieser doch selbst, daß die Kenntnis der Physik in ganz besonderem Maße lebensnotwendig sei. — Es sei noch erwähnt, daß der folgende Beitrag aus den “Leipziger Neueste Nachrichten” vom 10. Juni 1943 entnommen wurde. Wir würden uns freuen, häufig solche Beiträge in der Presse zu finden.
Wissenschaftlicher Nachwuchs im fünften Kriegsjahr
Authors: Hahn K. 
Published: February 2013

AbstractDie Betrachtungen von Prof. Hahn, die der Herausgeber im letzten Heft zur Wiedergabe brachte, werden anschließend fortgesetzt. Dabei geht der Sonderbeauftragte für den Luftwaffenhelfereinsatz in einem Luftgau noch stärker als im ersten Beitrag auf Kriegsfragen ein: Es bedarf in der Ausbildung der naturwissenschaftlichen Jugend einer wohldurchdachten Planung auf Jahrzehnte hinaus. Es darf dabei kein Stillstand eintreten und keine Pause entstehen. Wie sieht es in diesem Sinne mit der Wirkungsmöglichkeit auf der höheren Schule aus? Was können wir unter den gegebenen Umständen im fünften Kriegsjahr besser machen? Folgen wir Prof. Hahn, der wie wenige die Nöte der zwischen Schule und Wehrmacht stehenden Luftwaffenhelfer und ihrer Ausbildung kennt. Beachten wir dabei seine Warnung, technische Schulungskurse der Kriegsjugend nicht mit dem zu verwechseln was Deutschland not tut: Heranbildung der geistig und charakterlich veranlagten jungen Menschen zu Idealisten auf dem Gebiet der Wissenschaft und damit zu wahren Forschern, von denen allein wirklicher Fortschritt kommen kann.
Physiker oder Ingenieur?
Authors: Westphal W. 
Published: February 2013

AbstractIn Prof. Westphal, dessen Darstellung: “Probleme der Physik” in Heft 2 wiedergegeben wurde, spricht hier ein in besonderem Maße zuständiger Hochschullehrer über Nachwuchsfragen. War in den bisherigen Beiträgen und Hinweisen stets gefordert, die jungen Menschen der Naturwissenschaft, insbesondere der Physik zuzuführen, so wird nun hier eine Warnung vor der Lenkung des ungeeigneten Menschen zur Physik ausgesprochen. Nicht in jedem Schüler, der gern bastelt und dort etwas leistet, steckt ein Physiker. Zwischen Physiker und Ingenieur besteht vielmehr ein großer Unterschied, den mancher nicht kennt. Damit wird in unsere Diskussion eine neue große Frage geworfen, an die bisher in dem Drang, den Nachwuchsmangel zu beseitigen, kaum gerührt wurde. Wenn der Herausgeber sich die Frage nach der Natur von Forscher und Physiker auch für ein besonderes Heft aufsparen möchte, so gehört doch die Warnung vor einer falschen Lenkung der Jugend zur Physik ebensosehr zu unserer augenblicklichen Diskussion, wie die Sorge, daß die geeigneten Kräfte den Weg zur Physik nicht finden könnten. Mit mehreren hundert Studenten im Felde — in der Mehrzahl fernimmatrikulierten Abiturienten — tauscht Prof. Westphal brieflich Meinungen aus. Er hat vielen bereits den rechten Weg weisen können, sei es zur Physik oder von der Physik fort zur Technik.
Warum forschen?
Authors: Berve H. 
Published: February 2013

AbstractDer Rektor an der Universität Leipzig veröffentlichte in der “Berliner Börsenztg.” vom 3. März 1943 eine Darstellung, die wir an die Spitze dieses Heftes stellen wollen. Daß im Bereiche der Naturwissenschaft heute kriegswichtige Forschungsarbeiten durchgeführt werden, liegt auf der Hand. Wird aber, kann man fragen, nicht gleichzeitig noch sehr viel Arbeit auf Forschung verwandt, die keinen praktischen Nutzen, zumindest keinen unmittelbaren Nutzen für die Kriegführung zu ergeben scheint? Diese Frage, die der Rektor einer großen Universität hier behandelt, ist weiter gespannt als das, womit sich diese Blätter bisher beschäftigten. Die Forderungen, die Prof. Berve stellt, gehen weiter, indem er nicht nur auf die Wichtigkeit der Naturwissenschaften, sondern auch der Geisteswissenschaften hinweist. Man braucht nur an die Frage des Nachwuchses der Naturwissenschaften zu denken, um zugeben zu müssen, daß die Behandlung und Lösung unserer Aufgaben aufs engste mit den großen Aufgaben der deutschen Universität, der Alma mater, zusammenhängt. Die Deckung des Bedarfs an Lehrern ist eine Angelegenheit der Geisteswissenschaften, die zu den dringendsten Fragen gehört. Möge, so sagt Prof. Berve, die kulturelle Größe Deutschlands nach dem Siege keine geringere sein, als die militärische und politische!
Der Einfluß der Physik auf das Wehrwesen im Wandel der Zeiten
Authors: Schimank H. 
Published: February 2013

AbstractDer Hamburger Physik‐Historiker Prof. Hans Schimank ist der Bitte des Herausgebers nachgekommen und hat den anschließenden Bericht über die Kriegswichtigkeit der Physik für die “Physikalischen Blätter” zusammengestellt. Der Bericht belegt die Auswirkung der physikalischen Forschungen auf die Kriegsführung und die Bedeutung der physikalischen Forschung als eine der Grundlagen zur Aufrechterhaltung und Sicherung unseres völkischen Lebens mit historischem Material. Der Herausgeber ist der Meinung, daß solche historischen Ausblicke für die Erkennung von Zusammenhängen nützlich sind, und ist daher Herrn Prof. Schimank dankbar, daß er sich nicht nur zur fortlaufenden Mitarbeit an den biographischen Notizen, sondern auch für gelegentliche Beiträge zu den Themen unserer Hefte zur Verfügung gestellt hat.
Englische Wissenschaft im Kriegsdienst
Authors: Bragg William 
Published: February 2013

AbstractSir William Bragg, einer der führenden Männer der englischen Physik, hielt auf der Jahresversammlung der Royal Society am 30. November 1940 eine Ansprache, die nach einer Kürzung am Anfang um ein Drittel, jedoch ohne erhebliche Änderungen im abgedruckten Text wiedergegeben sei. Wir erkennen aus ihr, welche enge Fühlung in England zwischen den führenden Wissenschaftlern und den führenden Politikern besteht, eine Fühlung, die auch im Kriege 1914—18 England die Kriegsführung erleichtert hatte. Bragg erwähnt die Bildung eines wissenschaftlichen Beratungsausschusses, der dem Kabinett durch seinen Vorsitzenden berichtet. „Nach einer langen Zeit des Wartens eröffnet sich jetzt eine große Gelegenheit zur Betätigung. Die Royal Society ist in hohem Maße dafür verantwortlich, daß keine Hindernisse von außen sie in ihrer Aufgabe stören werden, und wir sind entschlossen, daß es von innen heraus nicht an Energie fehlen soll.”︁
Ein russisches Galvanometer
Authors: Zapp W. 
Published: February 2013

AbstractGanz ohne Zweifel: Murks! Mit Verachtung wird jeder gute deutsche Mechaniker dieses russische Instrument, das aus Pappe, gewendelten Drähten, gedrückten Teilen, einem Hufeisenmagneten und noch einigem zusammengeschustert ist, mustern. Tun wir aber wirklich recht daran, uns im sechsten Kriegsjahr auf die Sauberkeit im Bau etwas einzubilden, wenn das gleiche sachliche Ergebnis auch mit halbem Aufwand erzielbar ist? Haben nicht die großen Physiker immer mit kleinsten Mitteln ihre Leistungen vollbracht? Nahm Faraday nicht einen Eiseimer? Sagt man nicht von Lenard, daß seine Untersuchungsapparatur genau nach der letzten Messung zusammenkrachte? Wenn heute noch Vieles in unserer Technik äußerlich mit großer Sorgfalt hergerichtet ist, so — das wollen wir getrost zugeben — ist das vom höheren Standpunkt ein Mangel, den zu überwinden, uns gegen die Natur geht und damit sehr schwerfällt. Wenn wir weiter bedenken, welche überraschend primitiven Konstruktionseigentümlichkeiten das russische Galvanometer einhält und daß es keinen einzigen gedrehten Teil besitzt, dann kann der Herausgeber nur seine Achtung vor solcher Konstruktion bekennen. — Der Herausgeber hat einen bekannten Konstrukteur, dem die Welt den kleinsten Fotoapparat, ein Meisterwerk der Präzisionsmechanik, verdankt, gebeten, das russische Galvanometer dem Leser nahezubringen und vom Standpunkt des Konstrukteurs zu beleuchten. Zapp, der außerdem die russischen Verhältnisse genau kennt, widmet sich im folgenden dieser Aufgabe.
Staatliche Forschungsunterstützung in Schweden
Authors: Sundström E. 
Published: February 2013

AbstractDer Sekretär des schwedischen Forschungsausschusses veröffentlichte in Statens Informationsstyrelsen „Fran Departement och Nämnder”︁ Ausführungen über die Errichtung staatlich geförderter Institute für technische Forschung. Ein Teil seines Beitrages wurde 1943 in den Mitteilungen der Deutschen Handelskammer in Schweden zum Abdruck gebracht. Wir geben diesen Ausschnitt hier nach abermaliger Kürzung durch Beschränkung auf die uns naheliegenden Fragen wieder. Der Bericht zeigt, daß auch in Schweden die Wichtigkeit der Forschung nicht nur erkannt ist, sondern wie mit aller Energie die Konsequenzen dieser Erkenntnisse gezogen werden. Mancher Leser wird mit Überraschung gewahr werden, daß das kleine Land Schweden, das in seiner Bevölkerungszahl etwa der der Stadt Berlin entspricht, eine starke und mannigfaltige Forschung hat, die nicht nur den unmittelbaren Bedürfnissen des Landes dient, sondern auch zu beachtenswerten Spitzenleistungen internationaler Höhe aufsteigt.
Ueber das Studium der Naturwissenschaften
Authors: von Liebig Justus 
Published: February 2013

AbstractDiese Schrift, die 1840 bei Fr. Vieweg u. Sohn in Braunschweig verlegt wurde, trägt noch den Untertitel: „Über den Zustand der Chemie in Preußen.”︁ Sie ist eine Streit‐ und Anklageschrift, deren Hauptfrage uns in der heutigen Zeit in ihren Einzelheiten insofern nicht mehr stark berührt, als die von Liebig geforderten chemischen Laboratorien an den Universitäten Selbstverständlichkeiten geworden sind. Was aber noch heute frisch und jung aus dieser Schrift spricht und auch für die Gegenwart gilt, sind die Anschauungen Liebigs über die Naturwissenschaft und ihre Bedeutung. Der Vorwurf, daß „die Regierung selbst es ist, welche nicht die entfernteste Ahnung von der Bedeutung der Chemie besitzt”︁ und daß „alle Bemühungen der Lehrer an dem Mangel an Erkenntnis derer scheitern, deren Aufgabe es ist, die Fortschritte der Wissenschaft vorzubereiten und zu erleichtern”︁, wurde ihm von dem zuständigen Ministerium sehr übelgenommen und mit jahrelangen Verzögerungen in Berufungsfragen beantwortet. Es ist der kämpferische Geist des Fortschritts, der aus den vergilbten Blättern der Schrift von einem halben Hundert Seiten aufsteigt, aus der hier zwei Drittel wiedergegeben seien.