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Diagnostik invasiver Pilzinfektionen/Diagnosis of invasive fungal infections
Authors: Rath Peter-Michael , Steinmann Jörg 
Published: February 2015

Zusammenfassung
Invasive Pilzinfektionen sind insbesondere bei Patienten mit Immunsuppression (Neutropenie, Chemotherapie, Organtransplantation) mit erheblicher Morbidität und Letalität verbunden. Am häufigsten sind Candida und Aspergillus-Arten nachzuweisen, jedoch müssen auch Kryptokokken und Pneumocystis sowie früher sehr selten anzutreffende Pilze (Fusarium, Zygomyzeten) in der Diagnostik berücksichtigt werden. Durch die steigende Anzahl von Patienten mit Risikofaktoren in allen medizinischen Disziplinen muss jedes mikrobiologische Labor in der Lage sein, diese Erreger nachzuweisen. In dieser Übersichtsarbeit wird die Labordiagnostik von Candida-, Aspergillus-, Kryptokokken-, Pneumocystis-Infektionen sowie die Diagnostik seltener Pilze zusammenfassend dargestellt.
Virologische Diagnostik der Influenza: Infektionsnachweis und Prüfung des Immunstatus/Virological diagnostics of influenza: detection of infectious agents and assessment of immunity
Authors: Doerr Hans W. 
Published: February 2015

ZusammenfassungZum virologischen Nachweis einer akuten Influenza und zur Überprüfung des Immunstatus steht eine Vielzahl von Untersuchungsmethoden zur Verfügung. Bei Verdacht auf eine Influenzavirusinfektion liefert der Rachenabstrich das geeignete Untersuchungsmaterial. Das tiefe Nasopharynxaspirat ist etwas sensitiver, Sputum etwas weniger ergiebig. Die RT-PCR ermöglicht in 1–2 h nach Materialeingang ein sensitives und spezifisches Ergebnis. Typen, Subtypen und Driftvarianten lassen sich durch geeignete Primersonden, die kommerziell zur Verfügung stehen, einwandfrei identifizieren. Demgegenüber ist die Zellkultur-gestützte Virusisolierung zeitaufwendiger und stärker abhängig von einer sachgerechten Materialgewinnung und –überbringung (Kühlkette). PCR und Virusanzüchtung ermöglichen die geno- bzw. phänotypische Testung auf Therapieresistenzen. Der Antigentest ist eine einfache (bed-side) Schnellmethode. Seine Spezifität ist gut, die Sensitivität limitiert; daher kann der Antigentest nicht zur individuellen Ausschlussdiagnose eingesetzt werden. Influenzavirusspezifische Antikörper erscheinen im Blut erst in der zweiten Krankheitswoche. Die Serodiagnostik erfolgt typenspezifisch mit Komplementbindungsreaktion (KBR), IFT und ELISA über eine signifikante Titerbewegung oder den Nachweis von IgA-Antikörpern. IgG-spezifische IFT und ELISA Methoden geben Auskunft über die Influenzavirus-typspezifische Durchseuchung. Die klinisch relevantere subtypen- und variantenspezifische Influenzavirusimmunität wird mit dem HHT oder NT gemessen.
Vitamin D und kardiovaskuläre Erkrankungen: Standortbestimmung 2012/Vitamin D and cardiovascular diseases: where do we stand in 2012?
Authors: Pilz Stefan , März Winfried 
Published: February 2015

Zusammenfassung
Es mehren sich die Hinweise, dass Vitamin D eine Rolle bei der Entstehung kardiovaskulärer Krankheiten spielen könnte. Vitamin D-Rezeptor (VDR) und Enzyme des Vitamin D-Stoffwechsels kommen im Gefäßsystem und im Herzen vor. VDR knock out Mäuse leiden an Herz-Kreislauf-Erkrankungen (HKE) und selektive Inaktivierung des VDR in Herzmuskelzellen verursacht Myokardhypertrophie. Viele, jedoch nicht alle Beobachtungsstudien haben gezeigt, dass Vitamin D-Mangel mit HKE und deren Risikofaktoren assoziiert ist. Niedrige Konzentrationen von 25-Hydroxy-Vitamin D (25 [OH] D) sind ein unabhängiger Risikofaktor für kardiovaskuläre Ereignisse, insbesondere für Schlaganfall und plötzlichen Herztod. Es gibt nur wenige randomisierte, kontrollierte Studien (RCT) zu diesem Thema, deren Aussagen durch die zusätzliche Gabe von Kalzium, welches das Risiko für kardiovaskuläre Erkrankungen (KVE) erhöhen kann, eingeschränkt sind. Studien, in denen nur Vitamin D supplementiert wurde, haben teilweise, aber nicht durchweg positive Auswirkungen auf kardiovaskuläre Risikofaktoren wie arterielle Hypertonie gezeitigt. Eine Reihe von großen Studien zu den Auswirkungen der Supplementierung von Vitamin D auf kardiovaskuläre Ereignisse und Mortalität haben bereits begonnen. Deren Design ist aber zum Beispiel wegen des Einschlusses von Personen mit relativ hohen 25 (OH) D-Spiegeln problematisch. Die Evidenz für allgemeine Empfehlungen zur Einnahme von Vitamin D zur Vorbeugung und Behandlung von KVE ist damit noch nicht hinreichend. Prävention und Behandlung eines Vitamin D-Mangels sind aber aufgrund der Wirkungen der Vitamin-D-Supplementation auf den Bewegungsapparat schon heute gerechtfertigt.
Zukünftiger Stellenwert von Liquor-Biomarker in der modernen MS-Therapie/Future relevance of CSF biomarkers in modern MS treatment
Authors: Pilz Georg , Wipfler Peter , Harrer Andrea , Holl Barbara , Oppermann Katrin , Golaszewski Stefan M. , Trinka Eugen , Kraus Jörg 
Published: February 2015

ZusammenfassungIn den letzten Jahren wurde die Therapie der Multiplen Sklerose (MS) durch neue, immunologisch selektivere und wirksamere Medikamente erweitert. Untersuchungen des Liquors cerebrospinalis (CSF) zeigten, dass diese Medikamente auch einschneidende immunologische Veränderungen hinter der Blut-CSF-Schranke induzieren. Dadurch kann einerseits die gute Wirksamkeit erklärt werden, andererseits wird aber auch das Risiko opportunistischer Infektionen im ZNS, wie z.B. das Auftreten einer progressiven multifokalen Leukenzephalopathie (PML), begünstigt. In dieser Übersichtsarbeit wird auf die bis jetzt bekannten immunologischen Veränderungen, die durch die beiden in der Behandlung der hochaktiven MS zugelassenen Medikamente-Natalizumab und Fingolimod-ausgelöst werden, eingegangen. Die Untersuchung des CSF bietet ein sehr interessantes Forschungsfeld, um zukünftig mehr über die immunologischen Veränderungen bei MS hinter der Blut-Hirn-Schranke unter Therapie herauszufinden.
Befundinterpretation der molekularen Diagnostik in der Verlaufskontrolle der chronischen myeloischen Leukämie: Empfehlungen einer deutschen Expertengruppe/Interpretation of molecular diagnostics results in routine monitoring for chronic myeloid leukemia: recommendations from a German expert panel
Authors: Hochhaus Andreas , Müller Martin C. , Lange Thoralf , Thiede Christian , Haferlach Torsten 
Published: February 2015

ZusammenfassungDie chronische myeloische Leukämie ist eine neoplastische Erkrankung der Hämatopoese, charakterisiert durch die BCR-ABL1-Fusion. Zur Behandlung neu diagnostizierter Patienten sind drei selektive Tyrosinkinase-Inhibitoren zugelassen. Zur Beurteilung der Residualerkrankung ist eine frühe und engmaschige molekulargenetische Verlaufskontrolle unumgänglich. Sie ermöglicht eine frühe Prognoseeinschätzung sowie ein frühes Erkennen eines Rezidives bzw. einer Therapieresistenz. Eine Harmonisierung der Nachweismethode und des Laborberichts ist wichtig für die Beurteilung des Therapieverlaufs. Eine rasche Befundübermittlung motiviert den Patienten zur Therapietreue. In dieser Stellungnahme diskutiert eine deutsche Expertengruppe Harmonisierungsempfehlungen zur Nachweismethode und zum Laborbericht.
Hämatologische Labordiagnostik im interdisziplinären hämatologischen Kompetenzzentrum (IHK) der hämatologisch onkologischen Klinik V der Universitätsklinik Innsbruck und des Zentrallabors der Universitätsklinik Innsbruck/Laboratory examination of hematologic diseases in the Interdiscipline Hematologic Competence Center (IHK) of Innsbruck of the Clinic for Hemato-Oncology V of the University Hospital Innsbruck and the Central Laboratory of the University Hospital Innsbruck
Authors: Anliker Markus , Hammerer-Lercher Angelika , Falkner Andreas , Heiss Brigitte , Willenbacher Wolfgang , Schrezenmeier Hubert , Huber Andreas , Gastl Günther , Griesmacher Andrea 
Published: February 2015

Zusammenfassung
Die hämatologische Labordiagnostik hat in den letzten 30 Jahren große Fortschritte gemacht. Sie basiert heute im Wesentlichen auf vier Säulen: Zytomorphologie, Immunphänotypisierung, Zytogenetik und Molekulargenetik. Weiterhin unerlässlich steht am Anfang jeder Abklärung die Zytomorphologie meist gefolgt von einer Immunphänotypisierung. Beide Untersuchungen erfordern vom Laborteam hohe Expertise und oft Informationsaustausch mit den klinischen Zuweisern. Trotz hochspezialisierter Mitarbeiter ist es für kleine Speziallaboratorien eine große Herausforderung den Anforderungen an Qualitätssicherung und Wirtschaftlichkeit zu genügen. Eine Lösung kann die Zusammenarbeit zwischen der Labormedizin einerseits (meist in einem Zentrallabor angesiedelt) und den meist in der Hämatologie angesiedelten kleineren Speziallaboren sein, wie sie in Innsbruck seit 2008 modellhaft im interdisziplinären hämatologischen Kompetenzzentrum (IHK) praktiziert wird. Auf diese Weise wurde in Innsbruck eine interdisziplinäre Einrichtung geschaffen, welche die gesamte hämatologische Laborkompetenz der Klinik aus Zytomorphologie und Durchflusszytometrie zentral bündelt. Neben der Abklärung bekannter hämatologischer Erkrankungen bietet das IHK auch optimale Vorraussetzungen zur gezielten, zeitnahen Erstdiagnostik hämatologischer Erkrankungen (z.B. Zufallsbefunde) aber auch zum Screening von Blutproben eines großen Klinikums, die aufgrund von morphologischen oder numerischen Auffälligkeiten einer weiteren diagnostischen Abklärung bedürfen. Für die weitere Entwicklung des IHK ist eine zusätzliche Einbindung der zytogenetischen bzw. molekularbiologischen Diagnostik unerlässlich. Die interdisziplinäre Zusammenarbeit von Labormedizinern, Hämatologen, Zytogenetikern und Molekularbiologen fördert den Wissenstransfer und die Expertise aller beteiligten Mitarbeiter und steigert das Leistungspotential und Qualitätsniveau dieser Laborbereiche. Weitere Vorteile bieten sich im Bereich wichtiger Laborentwicklungsprozesse (z.B. Laborakkreditierung, Einführung neuer teurer Ausrüstungsgegenstände, wie etwa 10-Farben-Flowzytometer, moderner Labor-EDV oder Bildarchivierungssysteme), wobei durch interdiszplinäre Zusammenarbeit und gemeinsame Nutzung hohe Synergieeffekte zu erwarten sind. Die Etablierung interdisziplinärer Kompetenzzentren für hämatologische Diagnostik stellt daher einen Meilenstein in der modernen Labordiagnostik dar.
Tödliche Urosepsis durch verzögerte Diagnose einer urogenitalen Melioidose
Authors: Frickmann Hagen , Neubauer Heinrich , Haase Gerhard , Peltroche-Llacsahuanga Heidrun , Pérez-Bouza Alberto , Racz Paul , Loderstaedt Ulrike , Hagen Ralf M. 
Published: February 2015

Zusammenfassung

Kasuistik: Ein 54-jähriger Diabetespatient mit bekanntem Alkoholabusus wurde mit therapierefraktärem, fieberhaftem Harnwegsinfekt nach Thailandaufenthalt stationär aufgenommen. Nach Fehldiagnose von Burkholderia pseudomallei als Burkholderia cepacia im Urin kam es unter insuffizienter antibiotischer Therapie zur systemischen Ausbreitung der abszedierenden Harnwegsinfektion, woran der Patient im septischen Schock mit respiratorischem Versagen verstarb.

Ergebnisse: Die korrekte Spezies-Identifizierung erfolgte durch 16S rRNA-Gen-Sequenzierung. Zudem gelang post mortem der Nachweis von Burkholderia pseudomallei aus Prostatagewebe mittels PCR und Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung.

Schlussfolgerung: Die biochemische Differenzierung von Bakterien des Genus Burkholderia ist auf Speziesebene unzuverlässig. Wenn die klinische Anamnese eine B. pseudomallei Infektion wahrscheinlich erscheinen lässt, sollten molekulare Identifikationsverfahren ergänzt werden. Bei Verdacht auf abszedierende Prozesse sollte die Antibiotika-Dosierempfehlung am oberen Rand des Dosisspektrums gewählt werden.
Das neonatale Immunsystem: Modulation durch regulatorische T-Zellen und CTLA-4 (CD152)
Authors: Hebel Katrin , Pierau Mandy , Lingel Holger , Steiner Michael , Krause Hardy , Jorch Gerhard , Brunner-Weinzierl Monika C. 
Published: February 2015

Zusammenfassung
Fehlregulationen von CTLA-4 (CD152), einem auf der Oberfläche von Lymphozyten exprimiertem Glykoprotein, können zu chronischen Entzündungsreaktionen führen. Aufgrund neuer Erkenntnisse wird deutlich, dass CTLA-4 die Effektorfunktionen von T-Lymphozyten abschaltet und damit die Effektorphase von T-Lymphozyten beendet. Interessanterweise sind die CTLA-4 exprimierenden T-Lymphozyten resistent gegen Apoptose (programmierter Zelltod) und migrieren verstärkt in Lymphknoten und Gewebe. Weitere Studien zeigen, dass regulatorische T-Zellen, die unerwünschte Immunantworten abschalten, in vivo nur inhibieren können, wenn Sie über ein intaktes CTLA-4-Gen verfügen. Darüber hinaus hat sich bestätigt, dass CTLA-4 nicht nur-wie angenommen-auf T-Lymphozyten exprimiert wird, sondern auch auf B-Lymphozyten. So zeigen Mäuse mit genetischer Inaktivierung von CTLA-4 in B-Lymphozyten eine verstärkte Produktion von IgM nach Immunisierung. Interessanterweise exprimieren insbesondere B-Lymphozyten und T-Lymphozyten von Neugeborenen und Kleinkindern stark CTLA-4, was auf eine zentrale immunregulatorische Rolle bei frühkindlichen Immunantworten hindeutet. Moleküle, die wie CTLA-4 die Differenzierung von Lymphozyten regulieren, könnten einen neuen Ansatzpunkt bieten, um bereits im Kindesalter die Weichen für ein vor Autoimmunität und Allergie geschütztes Immunsystem zu stellen.
Key figures and benchmarking in the hospital laboratory1)
Authors: Orth Matthias , Aufenanger Johannes , Klosson Rupert J. 
Published: February 2015

AbstractBenchmarking is a systematic and continuous process used to compare products, services, and processes – as regards quantitative and qualitative aspects. Benchmarking in laboratory medicine departments of hospitals is a frequently used but only poorly standardized system. Sophisticated procedures for data collection are necessary due to the large heterogeneity and complexity of activities performed in laboratory medicine with regard to the type of testing, response times, availability and amount of different resources needed for single analysis and reporting. These prerequisites are difficult to fulfill. In internal benchmarking projects – i.e., monitoring of productivity, costs, and revenues within one laboratory over an extended period of time – the current tools for data collection are generally fit for purpose. In external benchmarking, however, several pitfalls may obscure the results. In broad terms, external benchmarking projects compare only partial processes with sufficient validity. Differences in benchmarking have to be controlled for improvements of data collection and for changes in surrounding conditions outside the laboratory. This review lists different approaches for benchmarking projects in laboratory medicine departments and describes their strengths and weaknesses.
Laboratory examination of hematologic diseases at the interdisciplinary hematologic competence center (IHK) of Innsbruck of the clinic for hemato-oncology V of the university hospital Innsbruck and the central laboratory of the university hospital Innsbruck (ZIMCL)1)
Authors: Anliker Markus , Hammerer-Lercher Angelika , Falkner Andreas , Heiss Brigitte , Willenbacher Wolfgang , Schrezenmeier Hubert , Huber Andreas , Gastl Günther , Griesmacher Andrea 
Published: February 2015

Abstract
The laboratory examination of hematologic diseases has made great progress in the last 30 years and is now based on a fourfold strategy: cytomorphology, flow cytometry, cytogenetics, and molecular genetics. Cytomorphology is still the crucial first step, and then it usually followed by flow cytometric immunophenotyping of relevant cell population. Both investigations require a highly expert laboratory team and, often, an exchange of information among the clinicians. It is a challenge for small specialized laboratories to reach quality standards and economic efficiency nowadays, even with highly specialized personnel. One solution is the collaboration among institutes of clinical pathology (usually a central laboratory), smaller laboratories specialized in hematology, and usually residents in departments of hematologic diseases, as is the practice in the Interdiscipline Hematologic Competence Center (IHK) of Innsbruck since 2008. Thus, in Innsbruck, this competence center concentrates the whole expertise in the hematology laboratory of the hospital based on cytomorphology and flow cytometry. Besides the clarification of already identified hematologic diseases, the IHK has optimal conditions not only for the specific and prompt first-time diagnosis of hematologic diseases (e.g., additional diagnostic findings) but also for the screening of blood samples, from tertiary care hospitals, that require further diagnostic workup for specific disease clarification based on numeric and morphologic abnormalities. For the further progression of the IHK, the integration of cytogenetic and molecular genetic diagnostics is essential. The interdisciplinary collaboration of clinical pathologists, hematology clinicians, and cytogenetic and molecular genetics experts improves the knowledge transfer and expertise of all members and enhances the efficiency and quality level of such a collaborating laboratory division. Further advantages can be achieved in important laboratory development processes (e.g., laboratory accreditation, implementation of expensive laboratory equipment, such as ten-color flow cytometers, introduction of modern laboratory information systems, or image-archiving systems), with a high potential of synergetic effects stemming from the collaboration. The establishment of interdisciplinary competence centers for hematologic diagnostics is therefore a milestone in modern laboratory diagnostics.
Developments and insights into the analysis of the human microbiome
Authors: Rücker Ovidiu , Dangel Alexandra , Klein Hanns-Georg 
Published: February 2015

Abstract
The intense research focused on the human microbiome during the last years has shed some light on this mostly uncharacterized part of the human body. The constantly improving sequencing technologies have additionally eased the process of collecting a large amount of genome data from metagenomics samples. Using these methods, large studies with sufficient number of subjects have started to reveal the implications of our microbiome in health and disease. Here, we present a review on the last developments of sequencing technology together with an overview on the findings in this fast-evolving field of science.
Weiterbildung in der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin in Europa
Authors: Parthaune Tanja , Hendig Doris , Schaaf Christian 
Published: February 2015

Zusammenfassung
Die Weiterbildung in der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin ist in Europa heterogen. Mediziner, Naturwissenschaftler und Pharmazeuten können sich in Europa in der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin weiterbilden. Die Weiterbildungszeiten und -inhalte sowie Abschlussmodalitäten unterscheiden sich jedoch voneinander. Mit dem Ziel der Harmonisierung und Qualitätssicherung der Weiterbildung in Europa veröffentlichten sowohl die Sektion „Laboratory Medicine/Medical Biopathology“ der „European Union of Medical Specialists“ (UEMS) als auch die „European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine“ (EFLM) 2012 ein überarbeitetes Curriculum für die postgraduale Weiterbildung in der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin. Die EFLM führte die Berufsbezeichnung „Specialist in Laboratory Medicine“ (ehemals „European Specialist in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine“) ein. Die UEMS vergibt den polyvalenten Titel „Specialist in General Laboratory Medicine – Polyvalent Medical Biopathology“ sowie 4 monovalente Titel. Die vorliegende Arbeit gibt eine Übersicht zum aktuellen Stand der Weiterbildung in der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin in den EU-Staaten im Vergleich zu Deutschland. Die Ziele der UEMS und EFLM als Dachorganisationen der Klinischen Chemie und Laboratoriumsmedizin in der EU werden diskutiert.
Feasibility studies of cellulose microfiber (CMF) reinforced poly(ethylene-co-vinyl acetate) (EVA) composites for food packaging applications
Authors: Sonia Ashok Kumar , Dasan Keereyadath Priya 
Published: February 2015

Abstract
Recently, there has been increased interest in the extraction of cellulose microfiber (CMF)/nanofibers from plant sources and their utilization as fillers in polymers. These natural fibers are characterized by good mechanical, thermal, and biodegradability properties. The present work was aimed at studying the feasibility of these fiber-reinforced polymer in food packaging. Poly(ethylene-co-vinyl acetate) (EVA) is a common food packaging material used in refrigerated items. The CMF/EVA composite films were exposed to milk, curd, and orange juice at fixed time intervals at three different temperatures and the microbial growth profile in the food material was evaluated. The incorporation of CMF in EVA was found to have no impact on the microbial contamination or proliferation of microbial growth in the food materials.
Prolonged life-threatening hypoglycaemia following dose escalation of octreotide LAR in a patient with malignant polysecreting pancreatic neuroendocrine tumour
Authors: Abell Sally K , Teng Jessie , Dowling Anthony , Hofman Michael S , MacIsaac Richard J , Sachithanandan Nirupa 
Published: February 2015

Summary
This paper details the case of a 77-year-old male with refractory hypoglycaemia due to inoperable metastatic pancreatic neuroendocrine tumour (pNET) co-secreting insulin and gastrin. Multiple medical therapies were trialled with limited success, and we describe the complications experienced by our patient. Somatostatin analogues can ameliorate hypoglycaemia and may have tumour-stabilising effects; however, in our case resulted in paradoxical worsening of hypoglycaemia. This rendered our patient hospital dependent for glycaemic support including continuous dextrose infusion. Although this is a reported adverse effect with initiation of therapy, we describe successful initiation of short-acting octreotide as an inpatient followed by commencement of long-acting octreotide. Hypoglycaemic collapse occurred only after dose titration of long-acting octreotide. We outline the pitfalls of somatostatin analogue therapy and the mechanisms that may contribute to worsening hypoglycaemia. This rare side effect cannot be reliably predicted, necessitating close supervision and glucose monitoring during therapy. Our patient achieved disease stabilisation and gradual resolution of hypoglycaemia with peptide receptor radionuclide therapy (PRRT), an emerging therapeutic option for metastatic neuroendocrine tumours with high efficacy and low toxicity. We present a brief but comprehensive discussion of currently available and novel therapies for insulin secreting pNETs.

Learning points

Hypoglycaemia due to malignant insulin secreting pNET is frequently severe and may be life-threatening despite supportive therapies.

Octreotide can ameliorate hypoglycaemia, and may have anti-proliferative and tumour-stabilising effects in malignant pNETs that are surgically unresectable.

Paradoxical worsening of hypoglycaemia may occur with octreotide initiation and dose titration, necessitating close supervision and glucose monitoring.

PRRT is emerging as a therapeutic option with high efficacy and low toxicity.