Identificación de mutaciones y diagnóstico molecular de portadoras en familias mexicanas con distrofia muscular Duchenne/Becker
Authors: Canizales S. , Salamanca F. , García N. , Arenas D. 
Published: July 2016

Introducción: La Distrofia muscular de Duchenne/Becker (DMD/BMD) es la miopatía hereditaria más frecuente en las poblaciones humanas. Se caracteriza por una debilidad muscular progresiva que ocasiona, para el tipo Duchenne, la muerte por falla cardiaca y/o respiratoria durante la segunda década de la vida. Para el tipo Becker las alteraciones musculares son menos severas y los pacientes generalmente sobreviven hasta la edad adulta. El gen DMD, responsable de la enfermedad, se localiza en el brazo corto del cromosoma X y se hereda en forma recesiva ligada al cromosoma X. La mutación más frecuentemente asociada a esta enfermedad es la eliminación genética de diversas partes del gen DMD.La identificación del estado portador sólo se pude realizar mediante estudios moleculares, debido a la ausencia de manifestaciones clínicas en las posibles portadoras.En el presente trabajo se estudió la distribución de eliminaciones genéticas en el gen DMD de pacientes mexicanos con DMD/BMD y se identificaron portadoras para esta enfermedad en familias mexicanas con antecedentes de la miopatía y que no se habían estudiado previamente.Método: Se obtuvo DNA y RNA de linfocitos de sangre periférica de pacientes con DMD/BMD y mujeres en riesgo, pertenecientes a familias mexicanas con antecedentes de esta enfermedad. La concentración e integridad de los ácidos nucleicos se determinó por espectrometría y electroforesis en geles de agarosa. Las eliminaciones genéticas se identificaron por ensayos de amplificación múltiple, analizándose los 2 puntos calientes de mutación y la región promotora del gen.El diagnóstico molecular de portadoras se realizó mediante estudios de ligamiento genético empleando 5 marcadores microsatélites localizados en el gen DMD. En las familias en donde se identificó la eliminación genética el diagnóstico de portadoras se hizo mediante amplificación en cadena de la polimerasa acoplada a la síntesis de cDNA (RT-PCR).Resultados: Se identificaron eliminaciones genéticas en 8/23 pacientes. En cuatro afectados se pudo definir la extensión de la eliminación, en uno de ellos, ésta también afectó a los genes cercanos GK y DAX-1. Se identificó un empalme alternativo en un paciente, lo que explicaría el fenotipo leve que presenta. Con estudios de ligamiento genético y RT-PCR, 6/10 mujeres fueron portadoras. Discusión o Conclusión: El porcentaje de eliminaciones genéticas en los pacientes estudiados fue menor al reportado en otras poblaciones. Un estudio con un mayor número de individuos permitirá saber sí esta baja frecuencia es característica de nuestra población. El uso de estudios de ligamiento genético y de RT-PCR aumenta la posibilidad de definir el estado portador en mujeres pertenecientes a familias con DMD/BMD y así poder ofrecerles un adecuado consejo genético. Este es el primer trabajo realizado en México, donde se usó el RT-PCR como herramienta diagnóstica en esta distrofia, se identificó por primera vez, a nivel molecular, un paciente con Síndrome de genes continuos y se demostró un empalme alternativo en un paciente con esta miopatía para explicar su fenotipo.