DEHIDRASI DAN PEMBEKUAN JARINGAN APEKS TEBU UNTUK PENYIMPANAN JANGKA PANJANG
Authors: ROOSTIKA IKA , DEWI LIMA WATI RARA PUSPITA , EFENDI DARDA 
Published: October 2016

<p>ABSTRAK<br />Tebu (Saccharum officinarum L.) merupakan tanaman yang<br />diperbanyak secara vegetatif. Kriopreservasi merupakan metode yang<br />paling sesuai untuk penyimpanan jangka panjang bagi tanaman yang<br />diperbanyak secara vegetatif. Dehidrasi dan pembekuan jaringan merupa-<br />kan tahapan paling kritis yang menentukan keberhasilan kriopreservasi.<br />Tujuan penelitian adalah untuk memperoleh durasi dehidrasi yang optimal<br />dan metode pembekuan jaringan apeks tebu. Penelitian dilakukan di<br />Laboratorium Kultur Jaringan, Kelompok Peneliti Biologi Sel dan<br />Jaringan, Balai Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber-<br />daya Genetik Pertanian, Bogor pada Mei 2013 sampai Februari 2014.<br />Untuk optimasi metode dehidrasi, apeks direndam dalam larutan PVS2<br />(MS + gliserol 30% + etilen glikol 15% + dimetil sulfoksida 15% +<br />sukrosa 0,4 M) selama 10, 20, 30, dan 40 menit. Untuk optimasi metode<br />pembekuan, diujikan kombinasi perlakuan prakultur (dengan sukrosa 0;<br />0,1; dan 0,3 M selama 5 hari) dan pemuatan dalam larutan LS (MS +<br />gliserol 2 M + sukrosa 0,4 M) selama 0, 10, 20, dan 30 menit sebelum<br />tahapan dehidrasi dan pembekuan jaringan di dalam nitrogen cair (-<br />196 o C). Hasil penelitian menunjukkan durasi dehidrasi jaringan yang<br />terbaik adalah 30 menit dalam larutan PVS2. Kombinasi perlakuan<br />prakultur dengan sukrosa 0,3 M dan pemuatan dengan larutan LS selama<br />10 menit merupakan metode terbaik untuk pembekuan jaringan. Persentase<br />tumbuh sebelum dan setelah pembekuan dalam nitrogen cair berturut-turut<br />adalah 100 dan 40%. Setelah kriopreservasi, biakan mampu tumbuh<br />dengan tingkat multiplikasi tunas sekitar 10 tunas/eksplan. Metode yang<br />diperoleh pada penelitian ini berpeluang diterapkan untuk penyimpanan<br />plasma nutfah tebu dalam jangka panjang secara kriopreservasi dan<br />eliminasi patogen obligat secara krioterapi.<br />Kata kunci: Saccharum officinarum L., apeks, dehidrasi, pembekuan,<br />nitrogen cair</p><p>ABSTRACT<br />Sugarcane (Saccharum officinarum L.) is vegetatively propagated<br />plant. Cryopreservation is the most suitable method for long-term<br />preservation of vegetatively propagated plant. Dehydration and freezing<br />are critical steps of successful cryopreservation so that it should be<br />optimized. The research aimed to obtain the optimal duration of<br />dehydration and freezing method of sugarcane apex tissues. The<br />experiments were conducted at Tissue Culture Laboratory, Plant Cell<br />Tissue Biology Group, Indonesian Center for Agricultural Biotechnology<br />and Genetic Resources Research and Development on May<br />2013−February 2014. To optimize dehydration method, the tissues were<br />exposured in PVS2 solution (MS + 30% glycerol + 15% ethylene glycol +<br />15% dimethyl sulphoxide + 0.4 M sucrose) for 10, 20, 30, and 40 minutes.<br />To optimize freezing method, the combined treatment of preculture with<br />sucrose (0, 0.1, dan 0.3 M) for 5 days and loading in LS solution (MS + 2<br />M glycerol + 0.4 M sucrose) for 0, 10, 20, dan 30 minutes) were tested<br />before dehydration for 30 minutes and freezing in liquid nitrogen (-196 o C).<br />The best duration of dehydration was 30 minutes. The combined treatment<br />of preculture on 0.3 M sucrose and loading for 10 minutes was the best<br />method for tissues freezing. Percentage of regrowth before and after<br />freezing in liquid nitrogen was 100 and 40% respectively. After<br />cryopreservation, the cultures could grow with high shoot multiplication<br />rate about 10 shoots/explant. The method resulted in this study can be<br />applied for long-term storage of sugarcane germplasms by cryopreser-<br />vation and (elimination of obligate pathogens by cryotherapy.<br />Keywords: Saccharum officinarum L., apex, dehydration, freezing, liquid<br />nitrogen.</p>