High dilutions of euphorbia tirucalli L. (aveloz) modify the viability and glycolytic metabolism of cell lines
Authors: Aquino Carolina Lessa , Barbosa Glauce Moreno , Barbosa Gleyce Moreno , Varricchio Marcia Braga Antunes , Veiga Venicio Feo , Kuster Ricardo Machado , Zancan Patricia , Sola-Penna Mauro , Holandino Carla 
Published: December 2021

The latex of Euphorbia tirucalli L. (Aveloz) is popularly used to treat cancers from diverse sources such as: breast, prostate, lung and kidney. Furthermore, high dilutions of this latex (latex-HDs) have been successfully used in the treatment of tumors, although the mechanisms involved in this antitumoral activity are not yet known. The present study aimed to investigate the cytotoxic effects of latex-HDs in 2 human cell lines, including non-tumoral melanocytes (MelanA line) and human breast cancer cells (MCF7 line). Latex-HDs were obtained through the interaction of two procedures: 1:100 dilution in mass and agitation, using 2 solvents, water and 70% ethanol in homeopathic preparations 5, 15 and 30cH, following the Brazilian Homeopathic Pharmacopeia. Cell lines were incubated with 1 % and 10 % of latex-HDs for 24 hours. Controls treated with similar preparations without latex were incubated under the same conditions. Cell viability was analyzed by MTT assay and morphological features were assessed by May-Grunwald-Giemsa method. Cell ultrastructure was analyzed by transmission electron microscopy. Metabolic alterations were detected by spectrophotometric assay for the enzyme 6-phosphofructo-1-kinase (PFK-1) activity. 1% of ethanolic latex-HDs induced no alterations in MelanA cells viability, however Aveloz 15cH induced an increase in MCF7 cells viability. After aqueous treatment, MelanA cells viability decreased in almost all systems, whereas in MCF7 cells, an increase was detected in dynamized water systems and Aveloz 15CH. However, only water 15cH increased cell viability in comparison to control and non-dynamized water. No alterations in MCF7 morphology and ultrastructure were visualized through light microscopy or electronic microscopy, respectively. Interesting results were detected when we studied the glycolytic metabolism of both cells, giving support to evidences showing that HDs interfere in the metabolism of cell lines. Further studies are needed to better understand the mechanisms involved in this in vitro biological response to HDs. Keywords:Ãƒâ€šÃ‚Â Euphorbia tirucalli L.; Aveloz; PFK-1; High Dilutions; Cell metabolism. Ãƒâ€šÃ‚Â Altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes de Euphorbia tirucalli L. (aveloz) modificam a viabilidade e o metabolismo glicolítico de linhas celulares Resumo O látex de Ephorbia tirucalli L. (aveloz) ÃƒÆ’Ã‚Â© usado popularmente no tratamento de diversos tipos de cÃƒÆ’Ã‚Â¢ncer incluindo mama, prÃƒÆ’Ã‚Â³stata, pulmÃƒÆ’Ã‚Â£o e rim. AlÃƒÆ’Ã‚Â©m do mais, altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes desse látex (latex-HDs) tém sido utilizadas com sucesso no tratamento de tumores, embora o mecanismo dessa aÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o ainda seja desconhecido. O presente trabalho objetivou pesquisar os efeitos citotÃƒÆ’Ã‚Â³xicos de látex-HDs em 2 linhas celulares humanas, incluindo melanÃƒÆ’Ã‚Â³citos nÃƒÆ’Ã‚Â£o tumorais (línha MelanA) e cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas de cÃƒÆ’Ã‚Â¢ncer de mama humano (linha MCF7). As látex-HDs foram obtidas atravÃƒÆ’Ã‚Â©s de 2 procedimentos: diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o 1:100 em massa e agitaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o, com 2 solventes, água e etanol 70%, nas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes homeopáticas 5, 15cH e 30cH de acordo com a FarmacopÃƒÆ’Ã‚Â©ia Homeopática Brasileira. As linhas celulares foram incubadas com látex-HDs 1% e 10% por 24 horas. Foram preparados controles similares sem o látex e incubados sob as mesmas condiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes. A viabilidade celular foi analisada atravÃƒÆ’Ã‚Â©s do mÃƒÆ’Ã‚Â©todo May-grunwald-Giemsa. A ultrastrutura celular foi analisada atravÃƒÆ’Ã‚Â©s de microscopia eletrÃƒÆ’Ã‚Â´nica de transmissÃƒÆ’Ã‚Â£o. As alteraÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes metabÃƒÆ’Ã‚Â³licas foram detectadas por ensaio de espectrofotometria para a atividade da anzima 6-fosfofructo-1-quinase (PFK-1). Látex-Hds em etanol 1% nÃƒÆ’Ã‚Â£o induziram qualquer alteraÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o na viabilidade das cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MelanA, mas Aveloz 15cH induziu aumento da viabilidade das cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MCF7. ApÃƒÆ’Ã‚Â³s tratamento, a viabilidade das cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MelanA diminuiu em quase todos os sistemas, enquanto que nas cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MCF7 foi detectado aumento nos sistemas aquosos e Aveloz 15cH, mas sÃƒÆ’Ã‚Â³ água 15cH aumentou a viabilidade celular por comparaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o ao controle e agua nÃƒÆ’Ã‚Â£o dinamizada. NÃƒÆ’Ã‚Â£o foram detectadas alteraÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes na morfologia celular por microscopis de luz quando se estudou o metabolismo glicolítico em ambas as cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas, demonstrando que os padrÃƒÆ’Ã‚Âµes de resposta celular dependem do tipo de solvente, metabolismo celular e procedimento de diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o. esa ÃƒÆ’Ã‚Â© a primeira vez que se mostra que as altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes interferem no metabolismo de linhas celulares. Outros estudos sÃƒÆ’Ã‚Â£o necessários para se compreender melhor os mecanismos envolvidos nesta resposta in vitro a altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes de aveloz. Palavras-chave:Ãƒâ€šÃ‚Â Euphorbia tirucalli L.; Aveloz; PFK-1; Altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes; Metabolismo celular. Ãƒâ€šÃ‚Â Altas Diluciones de Euphorbia tirucalli L. (arbusto de goma) modifican la viabilidad y metabolismo glucolítico de líneas celulares Resumen El látex de Euphorbia tirucalli L. (arbusto de goma) es popularmente utilizado en el tratamiento de diversos tipos de cáncer, incluyendo mama, prÃƒÆ’Ã‚Â³stata, pulmÃƒÆ’Ã‚Â³n y riÃƒÆ’Ã‚Â±ÃƒÆ’Ã‚Â³n. Además, altas diluciones de este látex (latex-HDs) han sido utilizadas con ÃƒÆ’Ã‚Â©xito en el tratamiento de tumores, aunque el mecanismo de esta acciÃƒÆ’Ã‚Â³n todavía es desconocido. Este trabajo tuvo por objetivo investigar los efectos citotÃƒÆ’Ã‚Â³xicos de látex-HDs en 2 líneas celulares humanas, incluyendo melanocitos no tumorales (línea MelanA) y cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas de cáncer de mama humano (línea MCF7). Las latex-HDs fueron obtenidas mediante 2 procedimientos; diluciÃƒÆ’Ã‚Â³n 1:100 en masa y agitaciÃƒÆ’Ã‚Â³n, con 2 solventes, agua y etanol 70%, en las diluciones homeopáticas 5, 15 y 30cH, segÃƒÆ’Ã‚Âºn la Farmacopea Homeopática BrasileÃƒÆ’Ã‚Â±a. Las líneas celulares fueron incubadas con latex-HDs 1% y 10% durante 24 horas. Fueron preparados controles similares sin látex e incubados bajo las mismas condiciones. La viabilidad celular fue analizada por el mÃƒÆ’Ã‚Â©todo May-Grunwald-Giemsa. La ultra-estructura celular fue analizada por microscopía electrÃƒÆ’Ã‚Â³nica de transmisiÃƒÆ’Ã‚Â³n. Alteraciones metabÃƒÆ’Ã‚Â³licas fueron detectadas por ensayo de espectrofotometría para la actividad de la enzima 6-fosfofructo-1-kinasa (PFK-1). Látex-HDs en etanol 1% no indujeran ninguna alteraciÃƒÆ’Ã‚Â³n en la viabilidad de las cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MelanA, sin embargo Euphorbia tirucalli 15cH indujo aumento de la viabilidad de las cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MCF7. DespuÃƒÆ’Ã‚Â©s del tratamiento, la viabilidad de las cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MelanA disminuyÃƒÆ’Ã‚Â³ en casi todos los sistemas, mientras que en las cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas MCF7 fue detectado aumento en los sistemas acuosos y Euphorbia tirucalli 15cH, pero solamente agua 15cH aumentÃƒÆ’Ã‚Â³ la viabilidad celular en comparaciÃƒÆ’Ã‚Â³n con el control y agua no dinamizada. No fueron detectadas alteraciones en la morfología celular por microscopía de luz cuando se estudiÃƒÆ’Ã‚Â³ el metabolismo glucolítico de ambas cÃƒÆ’Ã‚Â©lulas demostrando los modelos de respuesta celular dependen del tipo de solvente, metabolismo celular y procedimiento de diluciÃƒÆ’Ã‚Â³n. Esta es la primera vez que se demostrÃƒÆ’Ã‚Â³ que altas diluciones interfieren en el metabolismo de líneas celulares. Otros estudios son necesarios para entender mejor los mecanismos implicados en esta respuesta in vitro a las altas diluciones de Euphorbia tirucalli. Palabras-clave:Ãƒâ€šÃ‚Â Euphorbia tirucalli L.; Aveloz; PFK-1; Altas diluciones; metabolismo celular. Ãƒâ€šÃ‚Â Correspondence author:Ãƒâ€šÃ‚Â	Carla Holandino Quaresma, cholandino@yahoo.com How to cite this article:Ãƒâ€šÃ‚Â Aquino CL, Barbosa GM, Barbosa GM, Varricchio MCBA, Veiga VF, Kuster R, Zancan P, Sola-Penna M, Quaresma CH. High dilutions of Euphorbia tirucalli L. (AVELOZ) modify the viability and glycolytic metabolism of cell lines. Int J High Dilution Res [online]. 2008 [cited YYYY Mmm DD]; 7(24): 132-139. Available from: http://journal.giri-society.org/index.php/ijhdr/article/view/283/361. Ãƒâ€šÃ‚Â