Metformin as an Alternative Radiosensitizing Agent to 5-Fluorouracil During Neoadjuvant Treatment for Rectal Cancer
Authors: Fernandes Jennifer Marx , Jandrey Elisa Helena Farias , Koyama Fernanda Christtanini , Leite Katia Ramos Moeira , Camargo Anamaria Aranha , Costa Érico Tosoni , Perez Rodrigo Oliva , Asprino Paula Fontes 
Published: March 2020

BACKGROUND:
Neoadjuvant chemoradiation for locally advanced rectal cancer combining 5-fluorouracil with radiation increases tumor regression compared with radiation alone. However, it occurs at the cost of significant treatment-related toxicity. Patients with rectal cancer using metformin have been associated with improved response to radiotherapy.

OBJECTIVE:
The purpose of this study was to evaluate the radiosensitizing effects of metformin in vitro and in vivo and compare it with a standard combination of radiation/5-fluorouracil.

DESIGN:
Colorectal cancer cell lines SW480, HT29, and HCT116 were used as models. Cell viability was compared under treatments with radiation, radiation/5-fluorouracil, metformin, radiation/metformin, and radiation/5-fluorouracil/metformin. Nude mice were injected subcutaneously with SW480 cells and treated for 1 week with radiation/5-fluorouracil, metformin, radiation/metformin, or radiation/5-fluorouracil/metformin. Tumor volume was evaluated for 4 weeks after treatment completion. The phosphorylation status of key proteins of the PI3K/Akt/mTOR pathway was determined by immunoblots.

SETTINGS:
This was an experimental study conducted in vitro and in vivo.

PATIENTS:
Animal models/cell lines were used.

MAIN OUTCOME MEASURES:
The end point was to investigate how metformin compares with 5-fluorouracil as a radiosensitizer.

RESULTS:
All cell lines significantly decreased cell viability after treatment with radiation/metformin when compared with radiation alone. Radiation/metformin was superior to radiation/5-fluorouracil in SW480 (37% vs 74%; p < 0.001). In HT29 and in HCT116, radiation/metformin was inferior to radiation/5-fluorouracil (40.0% vs 13.8%, p < 0.001 and 40.0% vs 7.0%, p < 0.001), mainly because of increased 5-fluorouracil toxicity (≤20% of cell viability). In vivo assays indicated that radiation/metformin treatment was comparable with radiation/5-fluorouracil (557 vs 398 mm3; p > 0.05) and that the addition of metformin to the standard radiation/5-fluorouracil did not improve tumor response (349 mm3; p > 0.05). Metformin exerted strong PI3K/Akt/mTOR pathway inactivation effects after 24-hour exposure (increasing pAMPK, p < 0.01; decreasing pAkt, p < 0.01; and pS6, p <0.05).

LIMITATIONS:
In vitro and in vivo chemoradiation regimens cannot be directly translated to human delivery methods.

CONCLUSIONS:
Metformin enhances tumor response to radiation in vitro and in vivo. Metformin is an attractive alternative radiosensitizing agent to be considered in future studies/trials. See Video Abstract at http://links.lww.com/DCR/B219.

LA METFORMINA COMO AGENTE RADIOSENSIBILIZADOR ALTERNATIVO A 5FU DURANTE EL TRATAMIENTO NEOADYUVANTE PARA CÁNCER DE RECTO

ANTECEDENTES:

La quimiorradiación neoadyuvante para el cáncer de recto localmente avanzado que combina 5FU con radiación aumenta la regresión tumoral en comparación con la radiación sola. Sin embargo, se produce a costa de una toxicidad significativa relacionada con el tratamiento. Los pacientes con cáncer de recto que usan metformina se han asociado con una mejor respuesta a la radioterapia.

OBJETIVO:

Evaluar los efectos radiosensibilizantes de metformina in vitro e in vivo y compararlo con la combinación estándar de radiación / 5FU.

DISEÑO:

Se usaron como modelos las líneas celulares de cáncer colorrectal SW480, HT29 y HCT116. La viabilidad celular se comparó en tratamientos con radiación, radiación / 5FU, metformina, radiación / metformina y radiación / 5FU / metformina. A los ratones desnudos se les inyectó por vía subcutánea células SW480 y fueron tratados durante una semana con radiación / 5FU, metformina, radiación / metformina o radiación / 5FU / metformina. El volumen tumoral se evaluó durante 4 semanas después de la finalización del tratamiento. El estado de fosforilación de las proteínas clave de la vía PI3K / Akt / mTOR se determinó mediante inmunotransferencias.

AJUSTES:

Estudio experimental in vitro e in vivo.

PACIENTES:

Modelo animal / líneas celulares.

PRINCIPALES MEDIDAS DE RESULTADO:

El punto final fue investigar cómo la metformina se compara con 5FU como un radiosensibilizador.

RESULTADOS:

Todas las líneas celulares disminuyeron significativamente la viabilidad celular después del tratamiento con radiación / metformina en comparación con la radiación sola. La radiación / metformina fue superior a la radiación / 5FU en SW480 (37% frente a 74%; p <0,001). En el HT29 y el HCT116 la radiación / metformina fue inferior a la radiación / 5FU (40% vs 13.8%, p <0.001 y 40% vs 7%, p <0.001; respectivamente), debido principalmente al aumento de la toxicidad de 5FU (≤20% de la célula viabilidad). Los ensayos in vivo indicaron que el tratamiento con radiación / metformina era comparable a la radiación / 5FU (557 vs 398 mm3, p > 0.05), y que la adición de metformina a la radiación estándar / 5FU no mejoró la respuesta tumoral (349 mm3, p > 0.05). La metformina ejerció fuertes efectos de inactivación de la vía PI3K / Akt / mTOR después de 24 horas de exposición (aumentando pAMPK p < 0.01, disminuyendo pAkt, p < 0.01; y pS6, p < 0.05).

LIMITACIONES:

Los regímenes de CRT in vitro e in vivo no se pueden traducir directamente a los métodos de entrega en humanos.

CONCLUSIONES:

La metformina mejora la respuesta tumoral a la radiación in vitro e in vivo. La metformina es un agente alternativo de radiosensibilización atractivo para ser considerado en futuros estudios / ensayos. Consulte Video Resumen en http://links.lww.com/DCR/B219. (Traducción—Dr Gonzalo Hagerman)