Диагностика наследственной патологии обмена пуринов и пиримидинов методами ВЭЖХ-МС и молекулярной генетики
Authors: Мамедов И.С. , Перевезенцев О.А. , Золкина И.В. , Крапивкин А.И. 
Published: February 2025

Введение. Наследственные нарушения обмена пуринов и пиримидинов представляют собой гетерогенную группу заболеваний, активно изучаемых в последнее время. Поэтому разработка новых алгоритмов биохимической и молекулярно-генетической диагностики данной патологии представляется чрезвычайно актуальной. Цель. Определить значимость использования технологий хроматографии-масс-спектрометрии и молекулярно-генетического анализа в диагностике наследственных нарушений обмена пуринов и пиримидинов у детей. Материалы и методы. C использованием хромато-масс-спектрометрического и молекулярно-генетического анализа исследован уровень ключевых метаболитов обмена нуклеотидов в моче у 137 детей. Среди них 72 пациента с подозрением на наследственные нарушения обмена пуринов и пиримидинов (по результатам выполнения традиционного клинико-лабораторного исследования), 35 детей с подозрением на нарушение обмена аминокислот и органических кислот, составивших группу сравнения, а также 30 детей контрольной группы. Результаты. Среди 72 детей с подозрением на нарушение обмена пуринов и пиримидинов выявлено 18 пациентов с различными формами наследственно обусловленной патологии. Биологический материал 3 пациентов с установленным синдромом Леша – Нихана был подвергнут таргетному секвенированию гена HPRT1 методом NGS. При этом обнаружены мутации p.G16V (c.47G>T), p.R48H (c.143G>A) и p.L49R (c.146T>G). Заключение. Результаты выполненной работы обосновывают высокую диагностическую значимость сочетанного использования методов аналитической химии (состоящих в использовании технологии хромато-масс-спектрометрического анализа) и молекулярно-генетического исследования для установления наследственно обусловленных нарушений обмена пуринов и пиримидинов. Показано, что определение в моче содержания пуринов и пиримидинов может рассматриваться как перспективный методологический аспект клинико-лабораторной диагностики отдельных наследственно обусловленных нарушений обмена. В качестве подтверждения диагноза рекомендовано использовать молекулярно-генетический анализ генов, включающий технологию таргетного NGS-секвенирования.

Introduction. Hereditary purine and pyrimidine metabolism disorders are a heterogeneous group of diseases that have been actively studied lately. Therefore, elaborating new algorithms for biochemical and molecular genetic diagnostics of this pathology seems extremely relevant. Purpose. To study the role of GC-MS and molecular genetic methods in the diagnosis of hereditary purine and pyrimidine metabolism disorders in children. Materials and methods. Chromatography–Mass Spectrometry and molecular genetic assay were performed to analyze key nucleotide metabolites in 72 children with suspected purine and pyrimidine metabolism disorders, 35 children from the comparison group with suspected amino acid and organic acid metabolism disorders, and 30 healthy children of the control group. Results. A total of 18 patients with various purine and pyrimidine metabolism disorders were identified. Targeted sequencing of the HPRT1 gene by NGS was performed in 3 patients with identified Lesch-Nyhan syndrome. The previously described mutations p.G16V (c.47G>T), p.R48H (c.143G>A) and p.L49R (c.146T>G) were detected. Conclusion. Thus, our work confirms the diagnostic significance of biochemical markers determined by Chromatography–Mass Spectrometry methods in the diagnosis of purine and pyrimidine NBO. As a confirmatory method, molecular genetic analysis of genes associated with this spectrum of pathologies should be used, using the method of targeted NGS sequencing.