Zur Anwendung der direkten Immunofluoreszenz in der Diagnostik der Newcastle‐Krankheit1
Authors: Lüthgen W. , Förster U. , Wachendörfer G. 
Published: August 2010

Aus dem Serum mit ND‐Virus immunisierter Hähne konnte durch Aussalzen mit einer 13,5 %igen Na2SO4‐Lösung eine Gamma‐Globulin‐Fraktion gewonnen werden, die nach Konjugation mit FITC ein hochwertiges Konjugat ergab. Die Spezifität desselben wurde durch Absorption mit CAM von embryonierten, mit dem ND‐Stamm „Italien” infizierten Hühnereiern gesichert.

In vergleichenden Untersuchungen mittels der direkten Immunofluoreszenz und der Virusisolierung im embryonierten Hühnerei wurden Organe von insgesamt 12 Hähnen, 9 Tauben sowie 62 Papageien und Sittichen überprüft. Sofern mehrere Organe in die Untersuchungen einbezogen wurden, erwiesen sich beide Verfahren als ebenbürtig, nicht dagegen bei der Überprüfung einzelner Organe.

In der direkten Immunofluoreszenz ließen sich außerdem speziesbedingte Differenzen erkennen. Während bei den Psittaciden eine weitgehend gleichmäßige Antigenverteilung in den Abklatschpräparaten nachgewiesen werden konnte, beschränkte sich das fluoreszenzserologisch erfaßbare Antigen bei den Hähnen sowie den Tauben vielfach auf einzelne kleinere Partien.

Zum gegenwärtigen Zeitpunkt kann daher aufgrund der vorliegenden Untersuchungen der Einsatz der direkten Immunofluoreszenz in der Routinediagnostik ohne Einschränkung nur für Psittaciden empfohlen werden. Bei Hühnern sollte bei negativem Ausgang der fluoreszenzserologischen Überprüfung auf den Versuch einer Virusanzüchtung im embryonierten Hühnerei vorerst nicht verzichtet werden.

Use of direct immunofluorescence in the diagnosis of Newcastle Disease

From the sera of cockerels immunized with ND virus, salting out with 13.5% Na2SO4 solution yielded a gamma‐globulin fraction which, after conjugation with FITC, produced a highly active conjugate. Its specifity was confirmed by absorption with CAM of embryonated eggs infected with the “Italien” strain of ND virus.

In comparative studies between direct immunofluorescence and virus isolation in embryonated hen eggs the organs of 12 cockerels, 9 pigeons and 62 parrots and parakeets were tested. When several organs were used, the results with the two methods were in agreement but not when only a single organ was used.

By direct immunofluorescence there are also species‐related differences. Whereas in psittacines a generally uniformly distributed pattern of antigen through the preparations was seen, the fluorescent antigen in cockerels and pigeons was often restricted to a few small particles.

These findings suggest that the use of direct immunofluorescence can be recommended without restriction in routine diagnosis for psittacines only. In poultry a negative result with the fluorescent serological test should be supplemented by attempts to isolate the virus in embryonated eggs.

Utilisation de l'immunofluorescence dans le diagnostic de la maladie de Newcastle

On a pu obtenir une solution avec fraction de gamma‐globulines par adjonction d'une solution de Na2SO4 13,5 % dans du sérum de coqa immunisés avec un virus ND; cette solution donnait un conjugué de grande valeurs après une conjugaison avec FITC. La spécificité fut assurée par absorption avec CAM d'oeufs de poules embryonnés, infectés avec la souche ND «Italien».

En comparant l'immunofluorescence directe et l'isolement du virus dans des oeufs de poules embryonnée, on a examiné les organes de 12 coqs, 9 pigeons ainsi que 62 perroquets et perruches. Les deux procédés se sont révelés identiques lors de l'examen de plusieurs organes et non avec un seul organe.

On a rencontré des différences spécifiques dans l'immunofluorescence directe. Les préparations par application donnèrent une répartition antigénique égale chez les psittacidés, alors que l'antigène repérable par la fluorescence fut reparti dans de nombreuses petites zones isolées chez les coqs et chez les pigeons.

L'emploi de l'immunofluorescence peut être utilisé sans limitation seulement chez les psittacidés à la suite de ces recherches. Une culture du virus sur oeufs de poules embryonnés doit compléter l'examen chez les poules lorsque l'analyse sérologique par fluorescence s'est révélée négative.

Empleo de la inmunofluorescencia directa en el diagnóstico rutinario de Newcastle

Del suero sanguíneo de gallos inmunizados con virus ND se pudo obtener mediante precipitación por una solución de SO4 Na2 al 13,5 % una fracción de globulina gamma, la cual dió tras conjugación con FITC un conjugado muy valioso. La especificidad de este último se aseguró mediante absorción con MCA de huevos de gallina embrionados infectados con la estirpe ND „Italia”.

En estudios comparados por medio de la inmunofluorescencia directa y aislamiento de virus en el huevo embrionado de gallina se contrastaron los órganos de un total de 12 gallos, 9 palomas y 62 papagayos y conúridos. En tanto que se incluían varios órganos en los estudios, se mostraron ambos procedimientos como equivalentes, no así en la revisión de los distintos órganos.

Además se pudieron reconocer en la inmunofluorescencia directa diferencias condicionadas por la especie. Mientras que se pudo ubicar en los psitácidos una distribución antigénica uniforme amplia en las preparaciones por inculcación, se limitaba a menudo el antígeno abarcable fluorescenteserológicamente en los gallos y palomas a lotes menores aislados.

Por ello, en el momento actual, en virtud de las investigaciones presentes, solo se puede recomendar para los psitácidos el empleo de la inmunofluorescencia directa en el diagnóstico rutinario sin limitación alguna. Por de pronto no se debería prescindir en las gallinas con resultado negativo de la revisión fluorescenteserológica de un ensayo de cultivo de virus en huevos embrionados de gallina.