Method of Preparing Blood Samples on Solid Sorbents for Quantitative Determination of Valproic Acid with Gas Chromatography and Mass Spectrometric Detection
Authors: Вергун О.М. , Камышников В.С. , Богомолов А.Н. 
Published: March 2022

Цель. Разработка методики подготовки проб биологического материала для обнаружения и количественного определения вальпроевой кислоты в крови методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ГХ/МС).Материалы и методы. Биологическим материалом исследования явились сыворотка крови пациентов в возрасте 25–30 лет, вальпроевая кислота (Valproic acid, «Sanofi», в виде таблеток 500 мг). Для реализации технологии исследования использовались хлороформ, этилацетат (градации «х.ч.а.»), готовые системы для экстракции: EXtrelut® (Merck, Germany), EVIDEX-BOX 50% 3 ml tubes, 300 mg (Agilent, USA); газовый хроматограф Agilent 6890N Network GC System, масс-селективный детектор Agilent 5975C VL VSD (Agilent, США).Результаты. Разработан метод подготовки проб крови с применением традиционной жидкостно-жидкостной, твердо-жидкостной (на основе природного сорбента – диатомового известняка: эксклюзионная хроматография) и твердофазной (на основе универсального сорбента селикогель С18) экстракции, предназначающийся для определения вальпроевой кислоты с использованием технологии газовой хроматографии с масс-селективным детектированием в режиме SIM-мониторинга, что создает возможность применения наиболее приемлемого способа экстракции в ходе выполнения исследования вальпроевой кислоты в конкретных условиях лаборатории.Выводы. В ходе выполнения исследовательской работы установлена эффективность применения разных сорбентов, используемых при проведении жидкостно-жидкостной, твердофазной и твердо-жидкостной экстракции, для изолирования из биологического материала (крови) вальпроевой кислоты с целью дальнейшего ее количественного определения методом газожидкостной хроматографии – масс-спектрометрии. Разработана методика количественногоопределения VPA в режиме селективного мониторинга с использованием газовой хроматографии с масс-селективным детектированием, установлены оптимальные условия подготовки проб крови и элюентов для выделения вальпроевой кислоты из биологических объектов.

Purpose. Development of technique of preparation of biological objects for detection and quantitative determination of valproic acid in blood with gas chromatography and mass spectrometric detection (GC/MS).Materials and methods. Blood serum of patients aged 25–30 years; valproic acid (Valproic acid, "Sanofi") in the form of tablets 500 mg, chloroform, ethyl acetate, the systems for extraction: EXtrelut® (Merck, Germany), EVIDEX-BOX 50% 3 ml tubes, 300 mg (Agilent, USA); Agilent 6890N Network GC System gas chromatograph, Agilent 5975C VL VSD mass-selective detector (Agilent, USA).Results. The method is proposed for preparing blood samples using traditional liquid-liquid extraction, solid-liquid extraction based on natural diatomaceous limestone sorbent (exclusive chromatography), and solid-phase extraction based on the universal sorbent selikogel C18, for determination of valproic acid based on gas chromatography with mass-selective detection in the SIM monitoring mode.Conclusion. During the research, the effectiveness of application of various sorbents used in liquid-liquid, solid-phase and solid-liquid extraction for isolation of valproic acid from biological material (blood) for further quantitative determination with gas-liquid chromatography – mass spectrometry was established. The method for quantitative determination of VPA in the mode of selective monitoring, using gas chromatography with mass-selective detection, was developed, and the optimal conditions for preparation of blood samples and eluents for isolation of valproic acid from biological objects were established.