Colletotrichum nymphaeae - возбудитель антракноза сельскохозяйственных культур
Authors:   Всероссийский центр карантина растений, Цветкова Ю.В. , Черноброва А.В. , Камченков А.В. ,   Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова
Published: November 2023

Colletotrichum nymphaeae (Pass.) Aa (Ascomycota, Sordariomycetes, Glomerellaceae) широко распространенный гриб, который встречается как паразит растений, так и эндофит и энтомопаразит. В Бразилии C. nymphaeae на цитрусовых широко известен как гриб salmão (лосось) из-за характерного лососево-розового цвета конидиальных масс, проявляющихся на зараженных цитрусовых червецах (Praelongorthezia praelonga (Hemiptera: Ortheziidae)) [9]. После дифференциации видов комплекса Colletotrichum acutatum, было показано, что C. nymphaeae является наиболее вредоносным для растений земляники по сравнению с другими представителями комплекса (С. fioriniae, C. godetiae, C. acutatum) [1, 5]. В последующие годы данный гриб был выявлен как возбудитель антракноза на оливах (Olea europaea), где вызывал ожог цветков, преждевременное опадение оливок, снижение качества масла; на миндале (Prunus dulcis) (потеря товарных качеств плодов, некроз побегов и плодоножек); на персиках (Prunus persica), яблоне (Malus domestica) и др. плодовых и ягодных культурах.[1,3,5,7,8] Было показано, что данный патоген может также вызывать загнивание плодов томатов в послеуборочный период. [2]. Типовые изоляты выделены из растений кувшинки белой (Nymphaea alba) [10]. В мире также обнаружен на перце (Capsicum annum), ветренице (Anemone spp.), протее (Protea repens) и др. [1]. В ходе исследования было показано, что в России C. nymphaeae широко распространен на растениях земляники садовой. Единично выделен из семян сои Амурской области, а также из семян подсолнечника, предназначенных для импорта в РФ. Для выделения грибов из растительных образцов использовали метод влажной камеры и агаризованной питательной среды. Для идентификации полученных изолятов проводили микроскопию и морфометрию ключевых признаков (ацервул, конидий); классическую ПЦР с универсальными праймерами с последующим определением нуклеотидных последовательностей. Для работы использовали следующие прймеры: ITS 4 (TCCTCCGCTTATTGATATGC)/ITS 5 (GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG) (участок внутреннего транскрибируемого спейсера, ITS); GDF (GCCGTCAACGACCCCTTCATTGA)/GDR (GGGTGGAGTCGTACTTGAGCATGT) (участок гена глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы, GAPDH); TUB2Fd (GTBCACCTYCARACCGGYCARTG)/TUB4Rd (CCRGAYTGRCCRAARACRAAGTTGTC) (участок гена бета тубулина, TUB2). Изоляты, выделенные из растений земляники, характеризовались двумя основными морфотипами, а также отличалась по участку гена GAPDH. Группа изолятов с регионами происхождения Нидерланды, Сербия, Россия, отличалась от группы изолятов итальянского происхождения двумя точечными заменами. По маркерному, для данного вида участку гена бета тубулина, изоляты, выделенные из землянки, сои, подсолнечника, не отличались. При обнаружении семян подсолнечника, пораженных антракнозом, наблюдалось ингибирование прорастания семян и загнивание проростков. На семенах было развито типичное оранжевое спороношение, характерное для грибов р. Colletotrichum. После выделения изолята в чистую культуру была подготовлена суспензия спор концентрацией 5,5 *106 спор гриба/мл для проведения искусственного заражения растений и семян подсолнечника и растений земляники. При проведении искусственного заражения растений подсолнечника на стадии 6–8 настоящих листьев методами укола и опрыскивания, развития болезни отмечено не было. При параллельной обработке растений земляники были получены симптомы антракноза (некрозы на листьях, язвы на черешках листьев), выделен целевой патоген, что было подтверждено микроскопией и морфометрией, и определением нуклеотидных последовательностей. При заражении семян подсолнечника были получены различные результаты при различной экспозиции. При замачивании семян в суспензии спор на сутки прорастание семян отсутствовало. При экспозиции 1 час в варианте с обработкой проросло на 14% меньше семян, чем в контроле. При этом дальнейшее развитие проростков ингибировалось: на семядолях образовывались бурые пятна, иногда полностью покрывавшие проросток, корни загнивали, корневые волоски отсутствовали; при микроскопии было обнаружено прорастание спор, развитие гиф гриба. Через две недели проявлялось типичное спороношение на проростках. По литературным данным, это третье обнаружение патогенных грибов Colletotrichum acutatum species complex, на проростках подсолнечника [4, 6]. При проведении теста на патогенность на семенах сои изолятом, выделенным из семян сои, проявлялись типичные для данного вида признаки: быстрорастущий серый воздушный мицелий и оранжевая масса спор, наблюдалось образование аппрессориев, свидетельствующих о патогенном процессе. Несмотря на сообщения об обнаружении C. nymphaeae на растениях сем Fabaceae, это первое обнаружение данного вида на семенах сои. Таким образом, C. nymphaeae получил сравнительно широкое распространение во всем мире на различных группах растений-хозяев. Вредоносность патогена может определяться стадией заражения, в то время как для определенного круга растений хозяев данный гриб может быть использован как потенциальный биоагент против насекомых-вредителей.