Estratégia voltamétrica baseada em nanopartículas de prata para diagnóstico da leucemia linfoblástica aguda
Authors: Costa Gabrielly Pinto da , Oliveira Sevy Reis Dias Egydio de , Oliveira Leony Soares de , Silva Norma Lucena Cavalcanti Licinio da , Andrade César Augusto Souza de , Oliveira Maria Danielly Lima de 
Published: June 2024

Leucemia é um câncer caracterizado pela rápida multiplicação de células imaturas. A leucemia linfoblástica aguda (LLA), comum em crianças, resulta de mutações como a translocação cromossômica t(1;19), que gera o gene TCF3-PBX11,2 . Os biossensores, incluindo os genossensores, são ferramentas promissoras na detecção precisa, rápida, sensível e específica de DNA-alvo, oferecendo novas possibilidades nos diagnósticos genéticos e oncológicos3 . O estudo visa melhorar a detecção da Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) com um genossensor voltamétrico. Utilizando um nanobioeletrodo específico, foram testadas a especificidade e seletividade do biossensor com amostras clínicas de LLA em várias concentrações. Inicialmente, um 90 eletrodo de ouro foi limpo, com uma suspensão de alumina, seguido por enxágue com água ultrapura e banho de ultrassom para remover resíduos. Em seguida, o Polipirrol (PPy) foi eletropolimerizado sobre o eletrodo, usando uma solução de ácido clorídrico e monômero pirrol4 . Após a formação do filme polimérico, nanopartículas de prata (AgNPs) modificadas com Cisteamina (Cys) foram adsorvidas na superfície, utilizando glutaraldeído. Sondas de DNA específicas para a translocação cromossômica t(1;19), associadas à LLA, foram então imobilizadas na interface PPy/AgNPs-Cys usando glutaraldeído. Por fim, sítios inespecíficos foram bloqueados com Albumina Sérica Bovina (BSA) para aumentar a seletividade da detecção. O biossensor foi testado quanto à sensibilidade e especificidade usando plasmídeos recombinantes e amostras clínicas de pacientes com LLA. As medições foram realizadas em um sistema eletroquímico com eletrodo de ouro modificado como eletrodo de trabalho, eletrodo de referência Ag/AgCl e fio de platina como contra-eletrodo. O desempenho da interface foi avaliado por voltamogramas cíclicos. Essas análises são cruciais para entender a transferência de carga, a reversibilidade de reações eletroquímicas e as interações biomoleculares, essenciais para compreender o comportamento do biossensor em diferentes aplicações. O voltamograma cíclico do eletrodo de ouro mostra uma alta significativa após a eletropolimerização do polipirrol. A adição do nanocompósito híbrido de prata e cisteína resulta em redução nas correntes anódica e catódica, indicando propriedades dielétricas. A imobilização das sondas de DNA causa uma redução adicional nas correntes voltamétricas, assim como o bloqueio de sítios inespecíficos com albumina sérica bovina. O desempenho analítico com DNA plasmídico é avaliado, demonstrando a resposta linear do biossensor à translocação 1;19. Ensaios com amostras clínicas confirmam a viabilidade do biossensor, destacando sua rápida resposta e alta seletividade para detecção do oncogene quimérico TCF3- PBX14 . O biossensor desenvolvido oferece uma resposta analítica rápida em 5 a 10 minutos, eliminando a necessidade de ciclagem térmica5 . Ele utiliza pequenos volumes de amostras biológicas para detecção quantitativa do gene de fusão, apresentando notável desempenho analítico, alta seletividade e especificidade, além de reduzir o consumo de produtos químicos, o tempo de resposta e os custos metodológicos, em comparação com outros métodos eletroquímicos. Um estudo desenvolveu um genossensor voltamétrico para detectar a Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA). O sensor, feito com polipirrol e nanoestruturas metálicas, foi testado com sucesso em amostras clínicas, mostrando especificidade para a LLA. Ele identificou a translocação 1;19 e diferentes concentrações do gene de fusão TCF3-PBX1.