Kinetic changes in activity of HR-peroxidase, induced by very low doses of phenol
Authors: Malarczyk Elzbieta 
Published: December 2021

The allosteric protein of horseradish peroxidase (HRP) shows two main types of activity, peroxidase and oxidase, depending on the kind of low molecular effectors. The effects of very low doses of phenol, prepared by successive dilutions in water or in 75% ethanol, on initial HRP activity in oxidation of o-dianisidine or luminol were tested in a systematic manner by colorimetric and luminometric methods. Results showed that phenol dilutions, including those below AvogadroÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s number, could activate or inhibit HRP in peroxidase and oxidase type reactions with a sinusoidal pattern. Km values for the studied substrates changed parallel to HRP peroxidase/oxidase activity and the maximum activity in the peroxidase reaction corresponded to the minimum activity in the oxidase reaction and vice versa. The effect also depended on the type of dilutor. The observations of the peroxidase/oxidase oscillations in the sinusoidal pattern of HRP activity, dependent on the rate of phenol dissolution and the time of preincubation, point out to the conclusion that HRP might be a good model for high dilutions research. The experiments provide strong evidence that horseradish peroxidase (HRP) is a very sensitive detector of subtle changes in the concentration of phenol used as a cofactor in the peroxidase/oxidase reaction. Keywords: HR-peroxidase, peroxidase-oxidase, phenol, hormesis, homeopathy, high dilutions. Ãƒâ€šÃ‚Â  MudanÃƒÆ’Ã‚Â§as cinÃƒÆ’Ã‚Â©ticas na atividade da HR-peroxidade induzidas por doses muito baixas de fenol Resumo A proteína alostÃƒÆ’Ã‚Â©rica da peroxidase do rabano (HRP) mostra dois tipos principais de atividade, peroxidase e oxidase, de acordo com o tipo de efetores de baixa molecularidade. Os efeitos de doses muito baixas de fenol, preparadas atravÃƒÆ’Ã‚Â©s de diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes sucessivas em água ou etanol 75% na atividade inicial da HRP sobre a oxidaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o da o-dianisidina ou luminol for testados de modo sistemático atravÃƒÆ’Ã‚Â©s de mÃƒÆ’Ã‚Â©todos colorimÃƒÆ’Ã‚Â©tricos e luminomÃƒÆ’Ã‚Â©tricos. Os resultados mostram que as diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes de fenol, incluindo aquelas por baixo do nÃƒÆ’Ã‚Âºmero de Avogadro, foram capazes de ativar ou inibir a HRP em reaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes de tipo peroxidade e oxidase com um padrÃƒÆ’Ã‚Â£o sinusoidal. os valores Km dos substratos estudados variaram paralelamente ÃƒÆ’Ã‚Â  atividade peroxidase/oxidase da HRP; a atividade máxima da reaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o peroxidase correspondeu ÃƒÆ’Ã‚Â  atividade mínima na reaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o oxidase e vice-versa. O efeito tambÃƒÆ’Ã‚Â©m se mostrou dependente do tipo do solvente. A observaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o das oscilaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes sinusoidais na atividade da HRP, dependentes da taxa de dissoluÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o do fenol e do tempo de prÃƒÆ’Ã‚Â©-incubaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o, permitem concluir que a HRP pode ser um bom modelo na pesquisa das altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes. Os experimentos oferecem fortes evidéncias a favor da HRP como detector muito sensível de mudanÃƒÆ’Ã‚Â§as mínimas na concentraÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o do fenol, utilizado como cofator na reaÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Â£o peroxidase/oxigenase. Palavras-chave: HR-peroxidase, peroxidase-oxidase, fenol, hormese, homeopatia, altas diluiÃƒÆ’Ã‚Â§ÃƒÆ’Ã‚Âµes. Ãƒâ€šÃ‚Â  Cambios cinÃƒÆ’Ã‚Â©ticos en la actividad de la HR-peroxidasa inducidos por dosis muy bajas de fenol Resumen La proteína alostÃƒÆ’Ã‚Â©rica de la peroxidasa del rábano (HRP) muestra dos tipos principales de actividad, peroxidasa y oxidasa, dependiendo del tipo de efectores de baja molecularidade. Los efectos de doses muy bajas de fenol, preparadas mediante diluciones sucesivas en agua o etanol al 75% sobre la actividad inicial de la HRP sobre la oxidaciÃƒÆ’Ã‚Â³n de o-dianisidina o luminol fueron testados de modo sistemático mediante mÃƒÆ’Ã‚Â©todos colorimÃƒÆ’Ã‚Â©tricos y luminomÃƒÆ’Ã‚Â©tricos. Los resultados muestran que las diluciones de fenol, incluyendo aquellas abajo del nÃƒÆ’Ã‚Âºmero de Avogadro, pudieron activar o inhibir la HRP en reacciones de tipo peroxidasa y oxidasa con un patrÃƒÆ’Ã‚Â³n sinusoidal. Los valores Km de los sustratos estudiados variaron paralelamente a la actividad peroxidasa/oxidasa de la HRP; la actividad máxima de la reacciÃƒÆ’Ã‚Â³n peroxidasa correspondiÃƒÆ’Ã‚Â³ a la actividad mínima en la reacciÃƒÆ’Ã‚Â³n oxidasa y viceversa. El efecto tambiÃƒÆ’Ã‚Â©n se mostrÃƒÆ’Ã‚Â³ dependiente del tipo de solvente. La observaciÃƒÆ’Ã‚Â³n de las oscilaciones sinusoidales en la actividad de la HRP, dependientes de la tasa de disoluciÃƒÆ’Ã‚Â³n del fenol y del tiempo de preincubaciÃƒÆ’Ã‚Â³n, llevan a concluir que la HRP puede ser un buen modelo para la investigaciÃƒÆ’Ã‚Â³n de las altas diluciones. Los experimentos ofrecen fuertes evidencias a favor de la HRP como detector muy sensible de cambios mínimos en la concentraciÃƒÆ’Ã‚Â³n de fenol, utilizado como cofactor en la reacciÃƒÆ’Ã‚Â³n peroxidasa/oxigenasa. Palabras-clave: HR-peroxidasa, oxidasa-peroxidasa, fenol, hormesis, homeopatía, altas diluciones. Ãƒâ€šÃ‚Â  Correspondence author: Elzbieta Malarczyk, malar@poczta.umcs.lublin.pl How to cite this article: Malarczyk E. Kinetic changes in the activity of HR-peroxidase induced by very low doses of phenol. Int J High Dilution Res [online]. 2008 [cited YYYY Mmm DD]; 7(23): 48-55. Available from: http://journal.giri-society.org/index.php/ijhdr/article/view/37/349. Ãƒâ€šÃ‚Â