AVALIAÇÃO DA PREVALÊNCIA DE Rickettsia rickettsii EM CARRAPATOS DO GÊNERO Amblyomma cajennense ENCONTRADOS EM SUÍDEOS ASSELVAJADOS ABATIDOS POR CONTROLADORES NO ESTADO DE SANTA CATARINA
Authors: Rafael André Werlang  , Diego Rodrigo Torres Severo  , Soraya Regina Sacco Surian  , Teane Milagres Augusto Gomes  
Published: February 2021

Riquetsioses são zoonoses causadas por bactérias da Família Rickettsiaceae, especialmente aspertencentes aos gêneros Rickettsia que causam a doença denominada febre maculosa. NoBrasil, Rickettsia rickettsii é o principal agente da febre maculosa brasileira, sendo o carrapatotrioxeno Amblyomma cajennense o principal vetor. A capivara (Hydrochoerus capybara) éincriminada como reservatório de Rickettsia spp. na natureza, pois tem capacidade de mantero agente circulante em seu organismo, sem apresentar sinais clínicos da doença. Porém, abaixa especificidade parasitária permite que ocorra a troca de hospedeiros dos carrapatos dogênero Amblyomma durante seu ciclo biológico. Além disso, a capacidade de transmissão deRickettsia spp. transestadial e transovariana, associada a coabitação de javalis e capivaras nanatureza, sugerem a possibilidade de javalis estarem participando do ciclo epidemiológico dafebre maculosa. O objetivo deste trabalho foi classificar os carrapatos colhidos de suídeosasselvajados, abatidos legalmente para controle populacional no estado de Santa Catarina eavaliar, através da técnica de PCR convencional, a prevalência de R. rickettsii nestes vetores.Foram acompanhados abates legalmente autorizados de 61 javalis durante o período deoutubro de 2017 a novembro de 2018 em várias cidades de Santa Catarina, para coleta eclassificação taxonômica de carrapatos no IFC - Campus Concórdia. Ao total, 27 carrapatosem diferentes estágios de desenvolvimento foram colhidos aderidos à pele de nove animais(14,75%) abatidos, sendo que o maior grau de parasitemia foi observado no mês de novembrode 2018. Destes, três foram classificados como Dermacentor sp. e 24 como A. cajennense,que foram destinados à pesquisa de Rickettsia. A extração do DNA foi realizada em doiscarrapatos, sendo estes triturados e extraídos pela técnica de isotiocianato de guanidina,clorofórmio e isopropanol. A qualidade do DNA extraído foi testado por eletroforese em gelde agarose a 1,5%, para a observação das bandas do material genético, sendo que as bandasesperadas foram observadas. Para a PCR, foi preparado, em um tubo, uma mistura contendoSupermix®, dois iniciadores, Taq polimerase e o DNA extraído. Os iniciadores utilizados naprimeira reação amplificam gene conservado em todas as espécies do gênero Rickettsia. APCR foi realizada com termociclador e o produto submetido à eletroforese em gel de agarosecom brometo de etídio, em cuba horizontal de corrida. A visualização das bandas foi realizadacom um transiluminador ultravioleta. Ambas as amostras testadas foram negativas, o quedemonstra que os dois carrapatos não apresentavam infecção por Rickettsia spp. Em seguida,dois iniciadores específicos para R. rickettsii foram desenhados neste trabalho com softwarePrimer-BLAST, utilizando a sequência genômica do agente disponível no NCBI. Assequências senso e anti-senso dos iniciadores criados foram 5’-ACCGCTACTCGGTTGCATAA-3’ e 5’-ACAGATGTCACACCGTAGTCA-3’,respectivamente. Para a conclusão do projeto, os demais 25 carrapatos armazenados serão futuramente testados, bem como será de extrema importância a utilização de um controlepositivo para validar a PCR para Rickettsia isoladas na região de Santa Catarina.