DNA‐Reparaturvorgänge in Thymus‐ und Milzzellen der Ratte in vitro unter dem Einfluß des Poly(ADP‐ribose)‐Polymerase‐Hemmstoffs 3‐Aminobenzamid
Authors: Tempel K. 
Published: August 2010

Die mit Hilfe der Nucleoidsedimentation gemessene — aus Primärläsion und Reparatur resultierende — Schädigung der DNA von Thymus‐ und Milzzellen der Ratte nach in vitro‐Einwirkung von Röntgenstrahlen (10,2 Gy), Methylmethansulfonat (MMS, 5 × 10−4 mol/l) und Bleomycin (BM, 1 μg/ml) wurde durch 3‐Aminobenzamid (3‐AB, 1–10mmol/l) hochgradig verstärkt. Gegenüber UV‐Licht (16–64 J/m2) blieb 3‐AB wirkungslos. Hinsichtlich der 3‐AB‐Wirkung bestanden keine signifikanten Unterschiede zwischen den genannten Zellarten.

Sekundärer DNA‐Abbau prägte sich an UV‐Licht‐ bzw. MMS‐behandelten Milzzellen, reparaturbedingte Zunahme der Nucleoidsedimentation an röntgenbestrahlten Thymuszellen stärker aus.

3‐AB beeinflußte die DNA‐Reparatursynthese entweder nicht signifikant oder führte zu einer geringgradigen Erhöhung. Von den zum Vergleich mituntersuchten DNA‐Synthese‐Hemmstoffen Arabinofuranosylcytosin und Dideoxythymidin (ddT) vermochte nur der DNA‐Polymerase‐β‐Inhibitor ddT — bei Kombination mit Röntgenbestrahlung — die unterschiedliche Nucleoidsedimentation von Milz‐ und Thymuszellen zu unterdrücken.

Es wird der Schluß gezogen, daß die erhöhte Reparaturkapazität von Milzzellen nach Einwirkung von UV‐Licht (Langkettenreparatur) auf der Fähigkeit zu verstärktem — kontrolliert ablaufenden — DNA‐Abbau beruht, während Thymuszellen auf Röntgenbestrahlung (Kurzkettenreparatur) mit intensiverer DNA‐Polymerase‐β‐abhängiger DNA‐Synthese reagieren.

DNA ‐ reparative changes in thymus and spleen cells of rats in vitro under the influence of poly (ADP‐ribose)‐polymerase‐inhibitor 3‐amino‐benzamide

DNA damage to thymus and spleen cells, with a primary lesion or at the stage of repair, measured with the help of sedimentation of nucleosides (DNA damage caused by X‐rays 10.2 Gy, methylmethane‐sulphonate (MMS) 5 × 10−4 mol/l and bleomycin 1 mg/ml) was markedly increased by 3‐amidobenzamide (3‐AB 1–10mmol/L). In contrast, UV light (16–64 J/m2) was ineffective. There were no significant differences between the various cell types and effect of 3‐AB.

Secondary DNA ‐ breakdown was more extensive in spleen cells treated with UV or MMS and a repair‐related increase of nucleoide sedimentation in X‐irradiated thymus cells.

3‐AB influenced DNA‐repair synthesis either non‐significantly or resulted in a slight increase. Comparison with the synthetic synthesis‐inhibitors arabinofuranosylcytosin and dideoxythymidine showed that only the latter inhibitor, when combined with X‐irradiation, depressed the differential nucleoide sedimentation of spleen and thymus cells.

It is concluded that the higher reparative capacity of spleen cells after damage with UV light (long‐chein relair) is dependant on increased DNA breakdown, whereas thymus cells damaged by X‐rays (short‐chain repair) respond with more intensive DNA‐polymerase‐β‐dependent DNA synthesis.

Processus de réparation de l'ADN dans des cellules du thymus et de la rate chez des rats in vitro sous l'action de la substance inhibitrice poly (ADP‐ribose)‐polymérase 3‐aminobenzamide

La lésion de l'ADN des cellules du thymus et de la rate résultant d'une lésion primaire et d'une réparation, mesurée à l'aide de la sédimentation des nucléoides, fut fortement renforcée par 3‐aminobenzamide (3‐AB, 1–10mmol/l) après un effet in vitro de rayons x (10,2 Gy), du méthylmétansulfonate (MMS, 5 × 10−4 mol/l) et de bléomycine (BM, 1 μg/ml). 3‐AB est resté sans effet vis‐à‐vis de rayons UV (16–64 J/m2). Il n'y a pas eu de différences significatives entre les espèces de cellules mentionnées du point de vue de l'effet de 3‐AB.

Une dégradation secondaire de l'ADN fut plus fortement étendue aux cellules de la rate traitées aux UV et avec MMS et on a constaté une augmentation de la sédimentation des nucléoides, liée à la réparation, chez les cellules du thymus soumises aux rayons X.

3‐AB n'a pas influencé de manière significative la synthèse réparatrice de l'ADN on a provoqué une très faible augmentation. Des inhibiteurs de la synthèse de l'ADN également examinés, tels que arabinofuranosyl‐cytosine et dideoxythymidine (ddT), seul ADN‐polymérase β‐inhibiteur ddT, en combinaison avec des rayons x, a supprimé la sédimentation différente des nucléoides des cellules de la rate et du thymus. On a déduit que la capacité augmentée de réparation des cellules de la rate après un effet de lumière UV (réparation des longues chaînes) repose sur une capacité à renforcer une dégradation de l'ADN se déroulant sous contrôle, alors que les cellules du thymus soumises à des rayons x (réparation des courtes chaînes) réagissent avec une synthèse de l'ADN dépendant plus intensivement de l'ADN‐polymérase β.

Los procesos de reparación del ADN en células tímicas y esplénicas de la rata in vitro bajo el influjo del inhibidor de la poli(ADF‐ribosa)polimerasa 3‐aminobenzamida

Se reforzó en alto grado la lesión del ADN de células de timo y bazo de rata in vitro, medida con ayuda de la sedimentación de nucleóidos — resultante de lesión primaria y reparación — después de una acción in vitro de rayos X (10,2 Gy), metilmetanosulfonato (MMS, 5 × 10−4 mol/l) y bleomicina (BM, 1 μg/ml) por medio de 3‐aminobenzamida (3‐AB, 1–10mmol/l). Frente a la luz UV (16–64 J/m2) resultó ser 3‐AB ineficaz. En lo concerniente al efecto de 3‐AB no existían diferencias significantes entre los tipos celulares mencionados.

El catabolismo secundario del ADN se revelaba como más intenso en las células esplénicas tratadas con luz UV y MMS, resp., mientras que el aumento de la sedimentación de los nucleóidos, condicionado por la reparación, era mayor en las células tímicas tratadas por irradiación.

La 3‐AB o no ejercía influencia significante sobre la síntesis de reparación del ADN o conducía a un aumento escaso. De las substancias inhibidoras de la síntesis de ADN, las cuales fueron examinadas también en calidad de comparación, arabinofuranosilcitosina y dideoxitimidina (ddT), solo la ddT, inhibidora de la ADN‐polimerasa β, — en combinación con la irradiación X — se hallaba en condiciones de suprimir la sedimentación diferente de nucleóidos de las células esplénicas y tímicas.

Se saca en conclusión que la capacidad aumentada de reparación de las células esplénicas tras el efecto de la luz UV (reparación de las cadenas largas) se basa en la facultad de catabolismo reforzado de ADN, de curso controlado, mientras que las células tímicas reaccionan frente a la irradiación X (reparación de las cadenas cortas) con síntesis más intensiva del ADN, dependiente de la ADN‐polimerasa β.