Marek'sche Hühnerlähmung: Reaktionen im experimentell infizierten embryonierten Ei
Authors: VON Bülow V. 
Published: August 2010

Zitratblut, Milz‐, Thymus‐ oder Tumorzellen von Küken, die mit Marek‘‐scher Krankheit infiziert waren, wurden in embryonierte Eier inoculiert. Auf der Chorioallantoismembran (CAM) der am 4. Bruttag via Dottersack beimpften Embryonen entwickelten sich pockenartige Herde, die ab 11. Tag p. i. deutlich erkennbar waren (= “Dottersack‐Test”). Serieneipassagen und die Rückübertragung der Marek'schen Krankheit von den infizierten Embryonen auf Eintagsküken ließen sich mit Erfolg durchführen.

Nach Inoculation auf die CAM 11 Tage alter Embryonen bewirkte Blut von marekinfizierten Küken ebenso wie solches nicht infizierter Küken die Symptome der homoplastischen Embryokrankheit (graft‐versus‐host reaction). Aber nur das Blut infizierter Tiere bewirkte als spezifische Reaktion am 8. Tag p. i. eine Generalisierung der CAM‐Herde (= “CAM‐Test”).

Die Reaktionen im Dottersack‐Test waren quantitativ abhängig von der Herkunft der Bruteier und vom Alter der inoculierten Embryonen. Im Dotter enthaltene spezifische Antikörper können vermutlich die Resultate erheblich beeinträchtigen.

Die Untersuchungen über die Spezifität der Befunde ergaben insgesamt, daß die Reaktionen im Dottersack‐ und im CAM‐Test durch ein infektiöses Agens hervorgerufen wurden, bei dem es sich mit größter Wahrscheinlichkeit um den Erreger der Marek'schen Krankheit handelte. Das beschriebene System eröffnet eine neue Möglichkeit für die Diagnostik latenter Infektionen des Geflügels mit dem Marek‐Erreger.

Marek's disease: Reactions in experimentally infected embryonated eggs

Citrated blood, spleen, thymus or tumour cells of chicks infected with Marek's disease were inoculated into embryonated eggs. In eggs embryonated for four days and inoculated with material via the yolk sac, pock‐like foci were seen in the chorioallantoic membrane (CAM) which were clearly visible from the 11th day after inoculation (yolk‐sac test). Serial egg passages and attempts to transmit the infection to one‐day‐old chicks from the infected embryos were successful.

Inoculation of the CAM of 11‐day‐old embryos with blood of chicks infected with Marek's disease, as well as blood of uninfected chicks, produced a homoplastic disease of the embryo (graft‐versus‐host reaction). Only the blood of infected chicks, however, caused a specific reaction from the 8th day after inoculation in the form of generalised CAM foci (CAM test).

The reactions in the yolk‐sac test were quantitatively dependent on the source of the embryonated eggs and the age of the embryos inoculated. Specific antibodies present in the yolk presumably can influence the results significantly. Studies on the specificity of these findings showed that the reactions found in the yolk‐sac and CAM tests were caused by an infective agent, which is most probably the agent of Marek's disease. The technique opens up new possibilities for the diagnosis of latent infections of birds with Marek's disease.

Paralysie de Marek: Réactions dans l'embryon de poulet infecté expérimentalement

On inocule du sang citraté, des cellules de la rate, du thymus ou des cellules tumorales de poussins infectés par l'agent de la maladie de Marek à des embryons de poulets. Des foyers varioliformes, nettement reconnaissables dès le 11 ème jour p. i., se développent sur la membrane allantochorionique (MAC) des embryons inoculés dans le sac vitellin au 4ème jour d'incubation (test du sac vitellin). On pratique avec succès des passages sériés et une retransmission de la maladie de Marek des embryons infectés sur des poussins d'un jour.

Inoculé sur la MAC des embryons de 11 jours, le sang de poussins infectés par la maladie de Marek, de même que celui de poussins non infectés, provoque les symptômes de la maladie homoplastique des embryons (graft‐versus‐host reaction). Mais seul le sang des animaux infectés cause une réaction spécifique au 8ème jour p. i., caractérisée par une généralisation des foyers MAC (test MAC).

Les réactions du test du sac vitellin dépendent quantitativement de la provenance des oeufs à couver et de l'âge des embryons inoculés. Les anticorps spécifiques contenus dans le vitellus peuvent fausser considérablement les résultats.

Les tests sur la spécificité des résultats montrent que les réactions observées dans le test du sac vitellin et de MAC sont provoquées par un agent infectieux, qui est selon toute vraisemblance l'agent de la maladie de Marek. Les expériences décrites apportent une possibilité nouvelle au diagnostic des infections latentes de la volaille par l'agent de Marek.

Parálisis aviar de Marek: reacciones en el huevo embrionado infectado experimentalmente

En huevos embrionados se inocularon sangre citratada, células esplénicas, tímicas o tumorales de pollos, infectados con la enfermedad de Marek. En la membrana corioalantoidea (MCA) de los embriones inyectados el 4° día de incubación por vía vitelina, se desarrollaron focos varioliformes, que se podían reconocer de forma precisa a partir del día 11 p. i. (“prueba vitelina”). Coronados por el éxito, se efectuaron pases seriados y la retrotransmisión de la enfermedad de Marek de los embriones infectados a pollitos de un día de edad.

Tras la inoculación a la MCA de embriones de pollo de 11 días de edad ocasionaba la sangre de pollos marekinfectados, a igual que la de pollitos no infectados, los síntomas de la enfermedad embrionaria homoplástica (reacción injerto contra anfitrión). Pero solo la sangre de los animales infectados inducía como reacción específica en el 8° día p. i. una generalización de los focos de la MCA (“prueba MCA”).

Las reacciones en la prueba vitelina dependían cuantitativamente de la procedencia de los huevos incubados y de la edad de los embriones inoculados. Se sospecha que los anticuerpos específicos contenidos en el ovoplasma podrían afectar bastante los resultados.

Los estudios realizados sobre la especificidad de los hallazgos permiten resumir que las reacciones en las pruebas vitelina y MCA fueron originadas por un agente infeccioso, tratándose con suma probabilidad del agente causal de la enfermedad de Marek. El sistema descrito inició una etapa nueva en el diagnóstico de las enfermedades latentes de las aves de corral con el agente etiológico de Marek.

Herrn Professor Dr. Karl Fritzsche schulde ich vielen Dank für die histologischen Untersuchungen und sein Interesse an dieser Arbeit. Herrn Dr. Peter M. Biggs danke ich sehr für interessante und anregende Diskussionen.