Bestimmung von Progesteron in bovinen Blut‐ und Milchproben mit Hilfe verschiedener Methoden des Radio‐und Enzymimmuntests
Authors: Hoedemaker M. , Arnstadt K.‐I. , Grunert E. 
Published: August 2010

Mit Hilfe von EIA und RIA wurde Progesteron im Milchfett von 232 Milchproben (Viertelendgemelk) bestimmt, die von 39 Kühen mit einem Corpus luteum gesammelt wurden. Der durchschnittliche Progesterongehalt lag bei 207 ± 81 (EIA) und 169 ± 77 (RIA) ng ml−1. Die mit den beiden Methoden gemessenen Progesteronwerte waren mit einem Korrelationskoeffizienten von 0,7 statistisch hoch signifikant korreliert (p ≦ 0,001). Die “intra”‐ bzw. “inter‐assay”‐Variationskoeffizienten betrugen 8,3% (n=15) bzw. 9,7% (n = 8) beim RIA und 7,7% (n = 10) bzw. 11,9% (n = 12) beim EIA. Bei 152 der gleichen Milchproben wurde eine Progesteronbestimmung ohne vorherige Progesteronextraktion mit Hilfe des EIA durchgeführt. Der Mittelwert war 61,7 ± 31,8 nmol l−1 (19,4 ± 10,0ng ml−1). Die “intra”‐bzw. “inter‐assay”‐Variationskoeffizienten lagen bei 11,3% (n = 11) bzw. 14,2% (n = 10). Außerdem wurde im Blutplasma eine mittlere Progesteron‐konzentration von 15,35 ± 6,26 nmol l−1 (4,8 ± 2,0 mg ml−1) (n = 39) mit Hilfe des RIA festgestellt.

Die Korrelation der mit den unterschiedlichen Methoden gemessenen Konzentrationen in Milch und Blut untereinander und in Vergleich zu Befunden anderer Autoren wird diskutiert. Zwischen dem Blut‐ und Milchprogesteronspiegel während der Gelbkörperphase wurde keine Korrelation gefunden. Da die Progesteronkonzentrationen von Blutplasma nur eine Momentaufnahme der Gelbkörperaktivität darstellen, ist wegen der Progesteronspeicherung (“pool”) über den längeren Zeitraum zwischen den Melkzeiten die Messung des Milchprogesteronspiegels vermutlich besser zur Charakterisierung des Corpus‐luteum‐Zustandes geeignet als die Messung von Blutproben.

Determination of progesterone in bovine blood and milk samples by various radio‐ and enzyme‐immune tests

By means of EIA and RIA the concentration of progesterone in milk fat was measured in 232 milk samples (last milk) from single quarters of 39 cows with a corpus luteum. The mean progesterone concentrations were 207 ± 81 and 169 ± 77 ng ml−1 obtained by EIA and RIA, respectively. For the progesterone concentrations measured with both methods, a statistically highly significant coefficient of correlation of 0.7 was found (p ≦ 0.001). The intra‐ and inter‐assay coefficients of variation were 8.3% (n = 15) and 9.7% (n = 8) for RIA and 7.7% (n = 10) and 11.9% (n = 12) for EIA. In 152 of the milk samples progesterone was determined directly without previous extraction by means of EIA. The mean correlation was 61.7 ± 31.8 nmol l−1 (19.4 ± 10.0ng ml−1). The intra‐and inter‐assay coefficients of variation were 11.3% (n = 11) and 14.2% (n = 10), respectively. The mean progesterone content of blood plasma measured by RIA was 15.4 ± 6.3 nmol l−1 (4.8 ± 2.0 ng ml−1) (n = 39).

The correlation of progesterone levels of blood and milk measured by the different methods is discussed also in relation to published results. The progesterone levels of blood plasma had no correlation to the contents of milk fat and milk, respectively.

Since the progesterone concentration in blood plasma represents only a momentary picture of the activity of the corpus luteum, measurement of the concentration in milk is probably preferable as an index of CL activity because of the long time lapse between milkings and the “pooling” of progesterone over this time. Characterization of CL activity is probably thus better shown by milk than by blood progesterone levels.

Détermination de la progestérone dans des échantillons de sang et de lait de bovins avec différentes méthodes de tests radioimmunologiques et immunoenzymatiques

La progestérone a été déterminée au moyen de EIA et RIA dans la graisse du lait de 232 échantillons de lait (lait de quartier à la fin de la traite) qui provenaient de 39 vaches avec un corps jaune. Le taux moyen de progestérone se situait à 207 ± 81 (EIA) et à 169 ± 77 (RIA) ng/ml−1. Les valeurs de la progestérone mesurées avec les deux méthodes étaient statistiquement en corrélation hautement significative (p ≦ 0,001) avec un coefficient de corrélation de 0,7. Les coefficients de variation «intra» et respectivement «inter‐assay» furent de 8,3% (n = 15) et 9,7% (n = 8) pour RIA et 7,7% (n = 10) et 11,9% (n = 12) pour EIA. Une détermination de la progestérone sans extraction préalable de la progestérone a été faite avec EIA pour 152 échantillons de lait identiques. La valeur moyenne fut 61,7 ± 31,8 nmol l−1 (19,4 ± 10,0 ng ml−1). Les coefficients de la variation «intra» et «inter‐assay» se situaient à 11,3% (n = 11) et à 14,2% (n = 10). On a établi en plus avec RIA une concentration moyenne de progestérone dans le plasma sanguin de 15,35 ± 6,26 nmol l−1 (4,8 ± 2,0 ng ml−1) (n = 39).

On discute la corrélation entre les concentrations mesurées dans le lait et le sang avec les différentes méthodes et en comparaison avec les données d'autres auteurs. Aucune corrélation n'a été trouvée entre le taux de la progestérone du sang et du lait durant la phase du corps jaune. Etant donné que les concentrations de la progestérone dans le plasma sanguin ne représentent qu'un relevé momentané de l'activité du corps jaune, la mesure du taux de la progestérone dans le lait à cause de l'accumulation de la progestérone («pool») sur une période plus longue entre les traites est plus indiquée que la mesure dans le sang pour la caractérisation de l'état du corps jaune.

La valoración de progesterona en muestras de leche y sangre vacunas con ayuda de varias técnicas de las pruebas radio y encimainmunitarias

Con ayuda de los EIA y RIA se valoró progesterona en la grasa de leche de 232 muestras de leche (parte final del ordeño en cada cuarterón), las cuales se coleccionaron de 39 vacas con cuerpo amarillo. El contenido medio de progesterona era del orden de 207 ± 81 (EIA) y 169 ± 77 ng ml−1 (RIA). Los valores de progesterona medidos con ambos métodos se hallaban correlacionados de forma estadística muy significativa (p ≤ 0,001) con un coeficiente de correlación de 0,7. Los coeficientes de variación «intra‐assay» resp. «inter‐assay» se elevaron a 8,3% (n = 15) resp. 9,7% en el RIA y 7,7% (n = 10) resp. 11,9% (n = 12) en el EIA. En 152 de las mismas muestras de leche se llevó a cabo una valoración de progesterona, sin extracción previa, con ayuda del EIA. El valor medio era 61,7 ± 31,8 nmol l−1 (19,4 ± 10,0 ng ml−1). Los coeficientes de variación «intra‐assay» resp. «inter‐assay» eran del orden de 11,3% (n = 11) resp. 14,2% (n = 10). Además se determinó en el plasma sanguíneo una concentración media de progesterona de 15,35 ± 6,26 nmol−1 (4,8 ± 2,0 ng ml−1) (n = 39) con ayuda del RIA.

Se discute la correlación de las concentraciones medidas en leche y sangre, con técnicas diferentes, entre sí y en comparación con los hallazgos obtenidos por otros autores. Entre los niveles de progesterona en sangre y leche durante la fase de cuerpo amarillo no se halló ninguna correlación. Puesto que las concentrationes de progesterona en el plasma sanguíneo solo son una instantánea de la actividad de cuerpo amarillo, debido al almacenamiento de progesterona («pool») a lo largo del espacio de tiempo que se registra entre los tiempos de ordeño, tal vez sea mejor la medición del nivel de progesterona en leche para caracterizar el estado de cuerpo lúteo que los análisis de las muestras de sangre.