БИГОРМОНАЛЬНЫЕ ЭНДОКРИННЫЕ КЛЕТКИ В ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЕ ЛЮДЕЙ
С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 1 ТИПА
Authors: Кривова Ю. С. , Прощина А. Е. , Отлыга Д. А. , Барабанов В. М. , Савельев С. В. 
Published: July 2023

ЦЕЛЬ: изучить распределение бигормональных (инсулин+/глюкагон+) клеток в поджелудочной железе

(ПЖ) людей, страдавших сахарным диабетом 1 типа (СД1).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: работа выполнена на аутопсиях ПЖ ребенка (мальчик, 3 года 9 месяцев)

и подростка (мальчик, 13 лет 11 месяцев) с недавно диагностированным сахарным СД1, и 2 взрослых лю-

дей с СД1 длительностью более 15 лет (мужчины, 27 лет и 41 год). Группой сравнения послужили аутопсии

ПЖ 3 людей, не страдавших нарушениями углеводного обмена (мальчик, 4 года 9 месяцев; девочка, 8 лет;

женщина, 25 лет). Парафиновые срезы ПЖ исследованы методом иммунофлуоресцентного маркирова-

ния. Для оптимального выявления инсулина использовали и сравнивали первичные антитела различ-

ных производителей: мышиные моноклональные атитела к инсулину (Sigma, Cat.#I2018; Thermo Scientific,

Cat.#Ms-1379-P), кроличьи поликлональные антитела к инсулину (Santa Cruz Biotechnology, Cat.#Sc-9168;

Abcam, Cat.#ab63280; Golden Bridge, Cat.#P9009) и поликлональные антитела морской свинки к инсулину

(Dako, Cat.#A0564). Двойное иммунофлуоресцентное маркирование проводили с использованием мы-

шиных моноклональных антител к инсулину (Sigma и Thermo Scientific) и кроличьих поликлональных

антител к глюкагону (ThermoFisherScientitfic, Cat.#PA-13442). В качестве вторичных антител применяли

AlexaFluor®555 goat anti-rabbit IgG(H+L) (Molecular Probes, Cat#A21429), AlexaFluor®488 goat anti-mouse

IgG(H+L) (Molecular Probes, Cat#A11029), AlexaFluor®488 goat anti-guinea pig IgG(H+L) (Molecular Probes,

Cat#A11073).

РЕЗУЛЬТАТЫ: при использовании антител разных производителей выявлены существенные отличия

в распределении иммунореактивности к инсулину. В реакциях с антителами фирм Thermo Scientific, Santa

Cruz Biotechnology, Golden Bridge, Dako, инсулин+ β-клетки выявлены во всех островках ПЖ людей из груп-

пы сравнения, а также в немногочисленных (около 10% от общего количества) островках ПЖ у ребенка

и подростка с недавно диагностированным СД1. В большинстве островков ПЖ у ребенка и подростка

и во всех островках ПЖ в двух случаях продолжительного СД1 реакция на инсулин была иммунонегативной

(инсулин-дефицитные островки). Колокализация инсулина с глюкагоном обнаружена в единичных клетках

островков ПЖ в группе сравнения и в сохранившихся инсулин-содержащих островках ребенка и подростка

с СД1. При использовании антител фирм Sigma и Abcam наряду с иммунопозитивной реакцией на инсулин

в β-клетках инсулин-содержащих островков, реакция на инсулин меньшей интенсивности обнаружена

в большинстве глюкагон-содержащих клеток инсулин-дефицитных островков ПЖ людей с СД1. Сходная

иммунопозитивная реакция наблюдалась в большинстве глюкагон-содержащих клеток в островках ПЖ

людей из группы сравнения и сохранившихся островках ПЖ у ребенка и подростка с СД1.

ВЫВОДЫ: выявленные различия в распределении иммунореактивности к инсулину, вероятно, об-

условлены различной чувствительностью и эпитоп-специфичностью применяемых антител. Полученные

результаты свидетельствуют о том, что большинство глюкагон-позитивных клеток одновременно содержат

инсулин или его предшественники (проинсулин, препроинсулин) и могут служить источником эндогенного

инсулина даже у людей с продолжительным СД1.

ФИНАНСИРОВАНИЕ: работа выполнена в рамках государственного задания НИОКТР – 122030200535-1.