Differenzierte Serodiagnose der Salmonellose der Tauben durch Nachweis von IgG‐ und IgM‐Antikörpern mittels Enzymimmuntest
Authors: Schmeer N. , Weiss R. , Krauss H. , Raddei J. 
Published: August 2010

Ein zur Serodiagnose der Ornithose entwickelter indirekter Enzymimmuntest (ELISA) wurde durch Verwendung von kommerziell erhältlichem Lipopolysaccharid‐Antigen von Salmonella typhimurium zum Nachweis von Antikörpern in Taubenseren adaptiert. Das in einer Gebrauchsverdünnung von 2 ng/ml zur Beschichtung von Mikrotiterplatten verwendete Antigen eignete sich sowohl zum IgG‐ wie zum IgM‐Nachweis und ergab eine hohe Spezifität der Testergebnisse. In einer vergleichenden Untersuchung konnten von 192 Seren 14,6 % im (H + L)‐Ketten‐spezifischen IgG‐ELISA, 12,0 % in der Serumlangsamagglutination und 6,3 % in der Objektträgeragglutination als positiv erfaßt werden. Sämtliche in der Agglutination reagierenden Seren waren auch im ELISA positiv.

Bei Tauben mit dem Vorbericht „Salmonellose” war der Anteil ELISA‐positiver Seren mit 65 %, im Vergleich zu 8,6 % bei Tauben ohne Vorbericht, signifikant höher. Der vergleichsweise hohe Anteil IgM‐positiver Seren sowie das erheblich kleinere IgG/IgM‐Verhältnis bei den erkrankten Tauben deutete darauf hin, daß der Nachweis von spezifischem IgM — wie bei anderen Erkrankungen — einen frischen oder noch nicht abgeschlossenen Infektionsprozeß anzeigt, wohingegen reine IgG‐Werte eher einen schützenden Residualtiter darstellen. Dies wurde durch die Auswertung eines mit Salmonella‐Voll‐Antigen an 4 Tauben durchgeführten Immunisierungsversuches bestätigt.

Danksagung

Frl. Sonja Giebisch sowie Frau Hannelore Christoph danken wir für hervorragende technische Mitarbeit.

Differentiation of IgG‐ and IgM‐Antibodies for Serodiagnosis of Salmonellosis in Pigeons by ELISA

A sensitive ELISA for detection of IgG‐ and IgM‐antibodies in pigeons is described. When commercial Lipopolysaccharide (LPS)‐antigen of Salmonella typhimurium (2 ng/ml coating buffer) was used for coating the microtitre plates, the test proved to be highly specific. In a comparative investigation with 192 pigeon sera, 14.5 % were positive in the (H + L)‐chain specific IgG‐ELISA, 12 % in the tube agglutination test and 6.3 % in the slide agglutination test. All sera reacting in the agglutination tests were also positive in the ELISA.

In pigeons with an anamnesis of “salmonellosis”, the percentage of positive sera (65 %) was significantly higher than in pigeons without any anamnesis (8.6 %). As known from other infectious diseases, the comparatively higher percentage of IgM‐positive sera, and the significantly smaller IgG/IgM ratio in pigeons with salmonellosis demonstrated, that detection of specific IgM indicates a current or continuing infection, while IgG alone indicates a protecting residual titre. These observations were substantiated further by the results of an immunization trial with four pigeons.

Sérodiagnostic différentiel de la salmonellose des pigeons par la mise en évidence d'anticorps IgG et IgM avec un immuntest enzymatique

Un immuntest enzymatique indirect (ELISA) développé pour le sérodiagnostic de l'ornithose a été adapté par l'emploi d'un antigène lipopolysaccharidique commercial de Salmonella typhimurium pour mettre en évidence des anticorps dans des sérums de pigeons. L'antigène a été utilisé à une dilution de 2 ng/ml pour couvrir les microplaques et a révélé une forte spécificité dans les résultats du test aussi bien pur la mise en évidence d'IgG que d'IgM. Une recherche comparée sur 192 sérums a donné un résultatpositif de 14,6 % avec (H + L)‐chaînes‐spécifiques‐IgG‐ELISA, 12,0 % avec l'agglutination lente et 6,3 % avec l'agglutintion sur lamelle. Tous les sérums réagissant dans l'agglutination ont été positifs à l'ELISA.

Les sérums de pigeons avec une anamnèse «salmonellose» ont donné une proportion de 65 % de positifs à l'ELISA significativement plus élevée en comparaison du 8,6 % chez les pigeons sans anamnèse. La proportion comparée élevée des sérums IgM positifs ainsi que le rapport IgG/IgM nettement plus petit chez les pigeons malades a montré que la mise en évidence d'IgM spécifiques (comme dans d'autres maladies) signifie un processus infectieux récent ou pas encore terminé, alors que des valeurs pures d'IgG représentent plutôt un titre résiduel protecteur. Cela a été confirmé par le déroulement d'un essai d'immunisation fait chez 4 pigeons avec un antigène complet de Salmonelle.

Serodiagnóstico diferenciado de la salmonelosis columbina mediante la puesta en evidencia de anticuerpos IgG e IgM en la prueba de enzimas inmunitarias

Se adaptó una prueba indirecta de enzima inmunitaria (ELISA), desarrollada para el serodiagnóstico de la ornitosis, usando antígeno lipopolisacárido, adquirible en el comercio, de Salmonella typhimurium para la puesta en evidencia de anticuerpos en sueros sanguíneos de palomas. El antígeno utilizado en una dilución de uso de 2 ng/ml para cubrir las placas microtítulo valía tanto para la puesta en evidencia de IgG como IgM y ofrecía una especificidad elevada de los resultados en las pruebas. En un examen comparativo se pudieron abarcar de 192 sueros el 14,6 % en el ELISA IgG específicos de cadenas (H ÷ L), 12,0 % en la aglutinación sérica lenta y 6,3 en la aglutinación sobre portaobjetos como positivos. La totalidad de los sueros que reaccionaban en la aglutinación también era positiva en la ELISA.

En palomas con la anamnesis «salmonelosis» era significantemente mayor el contingente de sueros ELISA‐positivos con 8,6 % en palomas sin antecedentes. La cuota comparativamente elevada de sueros IgM‐positivos así como la relación bastante menor IgG/IgM en los palomas enfermas señala que la puesta en evidencia de IgM específicos — igual que en otras enfermedades — indica un proceso de infección fresco o no terminado todavía, mientras que los valores IgG puros representan más bien un título residual protector. Esto fué confirmado mediante la evaluación de un ensayo de inmunización llevado a cado en 4 palomas con antígeno Salmonella completo.