Züchtung des NDV‐Stammes Hitchner B1 in Zellkulturen aus Schweinenieren*
Authors: Mayr Anton 
Published: September 2010

Der Stamm Hitchner B1 vermehrte sich sehr gut in Schweinenierenkulturen (ENS). Der Vermehrung lief ein zytopathogener Effekt (ZPE) parallel, der zur vollständigen Kulturzerstörung führte. Der Verlauf der Virusvermehrung und des ZPE werden beschrieben.

Das Virus reichert sich mit Titern zwischen 10−7,0 bis 10−‐8,0 im Kulturmedium an. Es erreichte seine höchsten Titer bereits in der ersten Hälfte der Kulturzerstörung. Die Zeitspanne für eine optimale Virusernte war sehr kurz, da das freigesetzte Virus im Kulturmedium rasch thermoinaktiviert wird.

Es sind bisher 50 direkte Passagen in den ENS durchgeführt worden. Mit steigender Zahl der Passagen stieg die Virulenz des Virus für die Kulturen leicht an. Eine Virulenzzunahme für Küken, Huhn und Schwein konnte nicht beobachtet werden.

Die Virusernten aus den ENS glichen quantitativ denen aus Hühnerembryo‐fibroblasten‐Kulturen. In letzteren lief die Virusvermehrung und der ZPE wesentlich langsamer ab. Im Vergleich zum Hühnerembryo (Allantoishöhlenbeimpfung) waren die ENS für den H i t c h n e r ‐Stamm weniger empfänglich. Der mittlere Unterschied lag zwischen 1,25 und 1,38 Zehnerpotenzen, gleichgültig, woher das Virus stammte. Entsprechend fielen die Virusernten aus den ENS im Vergleich zu denen aus dem Hühnerembryo niedriger aus. Bis zur 50. ENS‐Passage änderte sich dieses Verhältnis nicht.

Cultivation of Newcastle disease virus Hitchner B1 in pig kidney cell cultures

This strain grows well in pig kidney cultures, producing a cytopathogenic effect which leads to complete destruction of the culture cells. The course of the virus multiplication and virus cytopathogenic effect is described.

The virus reaches titres between 10−7.0 and 10−8.0 in culture. It reaches its highest titre during the first half of culture damage. The time needed for optimal virus harvest was very short because the free virus in the culture medium is rapidly inactivated by heat.

Fifty direct passages have been carried out, during which time the virulence of the virus for the culture increased slightly. There was no increase in virulence for chicks, adult birds or pigs.

Virus harvest from the culture corresponded quantitatively with that in egg fibroblast cultures. Virus proliferation and cytopathogenic effect were slower in the latter medium. In comparison with the chick embryo (inoculation in the allantoic cavity) kidney cultures were less susceptible to the Hitchner strain. The main difference lay between 1.25 and 1.38 units, irrespective of the source of virus. The virus harvest from kidney culture was less than from chick embryos. Up to the fiftieth kidney culture passage this relationship had not changed.

Culture de la souche de virus Hitchner B1 (maladie de Newcastle) dans des cellules rénales de porc

La souche Hitchner B1 se multiplie très bien dans des cultures de reins de porc (ENS). La multiplication est accompagnée d'un effet cytopathogène parallèle (ZPE) qui entrai&#x030c;ne une destruction totale de la culture. L'auteur décrit le processus de multiplication cellulaire et l'effet cytopathogène.

Le virus se concentre dans le milieu de culture et atteint des titres variant de 10−7,0 à 10−8,0. Les titres les plus élevés apparaissent déjà dans la première moitié de la destruction cellulaire. Le laps de temps pendant lequel une récolte optimale est possible s'avéra très court car le virus libéré dans le milieu de culture est rapidement inactivé par la chaleur.

On effectua jusqu'à maintenant 50 passages directs dans le ENS. Avec l'augmentation du nombre des passages, la virulence du virus pour la culture augmentait légèrement. On n'observa pas d'augmentation de virulence pour le poulet, la poule et le porc.

La récolte de virus à partir du ENS se rapproche quantitativement de celle qu'on obtient en culture de fibroblastes d'embryon de poulet. Dans cette dernière la multiplication du virus et le ZPE se produisent à un rythme nettement plus lent. Par comparaison avec l'embryon de poulet (inoculation dans l'allantoïde) les ENS sont moins réceptifs à la souche Hitchner. La différence moyenne varie entre 1,25 et 1,38 puissance de 10, quelle que soit

l'origine du virus. Les récoltes de virus à partir du ENS furent comparativement plus faibles que celles de l'embryon de poulet. Jusqu'au 50e passage ce rapport ne se modifia pas.

Cultivo de la cepa Hitchner B1 de la enfermedad de Newcastle en cultivos celulares de riñones de cerdo

La cepa Hitchner B1 se multiplicaba muy bien en cultivos renales de cerdo. A la multiplicación le corrí paralelo un efecto citopatógeno, que conducí a la destrucción total del cultivo. Se describen el curso de la multiplicación vírica y el del efecto citopatógeno.

El virus se enriquece en el medio de cultivo con títulos comprendidos entre 10−7,0 y 10−8,0. Su título más elevado ya le alcanzaba en la primer mitad de la destrucción del cultivo. El espacio de tiempo para una cosecha óptima de virus era bastante breve, ya que el virus liberado en el medio de cultivo se termoinactiva muy rápidamente.

Hasta la fecha se han realizado cincuenta pases directos al cultivo renal de cerdo. Aumentando el número de pases aumentaba ligeramente la virulencia del virus para el cultivo.

No se pudo observar el aumento de virulencia para pollitos, gallina y cerdo.

Las cosechas de virus de los cultivos renales de cerdo se asemejaban cuantitativamente a las de cultivos en fibroblastos de embriones de pollo. En estos últimos se realizaban bastante más lentamente la multiplicación del virus y el efecto citopatógeno. En comparación con el embrión de pollo (inoculación en la cavidad alantoidea), los cultivos renales de cerdo eran menos receptivos para la cepa de Hitchner. La diferencia media se encontraba entre 1,25 y 1,38 potencias decimales, resultando indiferente la procedencia del virus. De modo correspondiente, las cosechas de virus de cultivos renales de cerdo resultaron menores en comparación con las procedentes de embriones de pollo. Hasta el pase número 50 en cultivos renales de cerdo no varió esta relación.