Über Immunantikörper gegen Brucella abortus im Blutserum von Rindern, Möglichkeiten zu ihrem Nachweis und ihre klinische Bewertung: Gleichzeitig ein Beitrag zur Differenzierung von Impftitern und Infektionstitern
Authors: Bürki Franz 
Published: September 2010

Blutseren Bang‐freier, Bang‐infizierter resp. Buck 19‐geimpfter Rinder wurden mit vier sero‐diagnostischen Methoden auf ihren Gehalt an Immunantikörpern gegen Brucella abortus untersucht. Zur Anwendung kamen die Blutserum‐Langsamagglutination nach den Richtlinien des Office International des Epizooties, die Komplementbindungsreaktion nach einer eigenen Technik, die Praecipitation nach Bürki und Mosimann (1956 a) und der indirekte Coombstest nach der Technik von Bürki und Fey. Die Praecipitation erwies sich als die stumpfste Methode; ihr folgen mit zunehmender Empfindlichkeit die Komplementbindungsreaktion, die Blutserum‐Langsamagglutination und der Coombstest.

Je nach dem gewählten Bekämpfungsplan lassen sich die erwähnten serodiagnostischen Methoden mit verschiedener Zweckmäßigkeit einsetzen. Sofern keine Schutzimpfungen mit agglutinogenen Vakzinen und keine Allergieteste mit antigen aktiven Brucella‐Allergenen zur Anwendung gelangen, halten wir die Blutserum‐Langsamagglutination auf Grund ihrer Einfachheit und Leistungsfähigkeit als generelle Untersuchungsmethode des Blutserums für angezeigt. Sie läßt sich in bestimmten Fällen durch die Vornahme eines Coombstest zweckmäßig ergänzen. Dieser ist, in Anbetracht seines technischen Aufwandes, auf Spezialfälle zu beschränken. Er gestattet nach unseren Erfahrungen die Diagnose einer Brucella‐Infektion bei bestimmten Bang‐infizierten Tieren mit negativer Blutserum‐Langsamagglutination (Aborttiere!) einerseits, andererseits scheinbar die Abklärung von Fällen, wo ein Tier auf Grund von Normalagglutininen fälschlicherweise verdächtigt wird.

Umfaßt ein Bekämpfungsprogramm Schutzimpfungen mit der Lebendvakzine Buck 19, gestattet die Vornahme einer Komplementbindungsreaktion und/oder einer Praecipitation in vielen Fällen eine Differenzierung von Impftitern und von Infektionstitern, welche die Blutserum‐Langsamagglutination beide anzeigt. Sowohl die Komplementbindungsreaktion als auch die Praecipitation stellen elektivere Methoden als die Blutserum‐Langsamagglutination dar und fallen vorwiegend (Komplementbindungsreaktion) bzw. ausschließlich (Praecipitation) an Bang‐infizierten Tieren positiv aus. Nach Jungtierimpfungen mit 30–50 times 109 lebenden Keimen des Impfstammes Buck 19 in lyophiler Form konnten bei keinem Tier zu keinem Zeitpunkt Praecipitine im Blutserum ermittelt werden; die Titer der Komplementbindungsreaktion waren anfänglich niedrig, bereits 20 Wochen post vaccinationem wieder durchwegs negativ.

Die Komplementbindungsreaktion nach der beschriebenen Technik stellt, wie erwähnt, eine weniger empfindliche sero‐diagnostische Methode dar als die Blutserum‐Langsamagglutination, welche am internationalen Standardserum eingestellt ist. Da sie jedoch die schwer infizierten, und insbesondere die vom hygienischen Standpunkt aus betrachtet wichtigen Geburtsweg‐ und Milchausscheiderinnen mit gleicher Schärfe erfaßt wie diese, kann sie allein oder als Parallelmethode zur Blutserum‐Langsamagglutination angewandt werden. Im ersten Fall werden ein hoher Prozentsatz von Buck 19‐Reagenten sowie eine kleine Anzahl hygienisch unbedenklicher infizierter Tiere nicht erfaßt; im zweiten Fall gestattet sie gewisse differential‐diagnostische Rückschlüsse.

Die Praecipitation ist eine so unempfindliche Methode, daß ihre alleinige Anwendung zur Bekämpfung des Rinderabortus Bang nicht in Frage kommt, fällt sie doch selbst an einem beträchtlichen Prozentsatz von Seren von Geburtsweg‐ und Milchausscheiderinnen negativ aus. Da jedoch ein positives Ergebnis das Vorliegen einer schweren Bang‐Infektion belegt und eine allfällige Buck 19‐Impfung als Grundlage ausschaltet, sehen wir die Indikation der Praecipitation in der überprüfung bestimmter in der Blutserum‐Langsamagglutination positiver Rinderseren in Bekämpfungsplänen mit Buck 19‐Impfungen, im Hinblick auf eine allfällige Differenzierung von Impftitern und Infektionstitern.

Eine Anzahl praktizierender Tierärzte sind unserem Wunsch nach Einsendung bestimmter Blutseren bereitwilligst nachgekommen. Die Herren Dr. R. Schweizer, St. Gallen, und Dr. X. Bühlmann, Zürich, haben uns in freundlicher Weise ein umfangreiches Material aus ihren Laboratorien überwiesen. Frl. E. Stucki, Frl. M. Pfenninger und Herr E. Erne haben durch ihre technische Mitarbeit wesentlich zum Gelingen dieser Arbeit beigetragen; Frl. M. Pfenninger widmete sich außerdem mit Aufmerksamkeit der Bibliographie. Herr H. Stocker erstellte die photographische Abbildung. Ihnen allen schulden wir unseren warmen und aufrichtigen Dank.

Immune antibodies to Brucella abortus in the serum of cattle, their demonstration and clinical significance, with a contribution to the differentiation between vaccination and infection titres

Sera of infected, uninfected and vaccinated (Strain 19) cattle were examined by four serological methods for their content of antibodies to Brucella abortus. The four methods were the slow serum agglutination test on the lines indicated by O.I.E., complement fixation by the author's method, precipitation by the method of Bürki and Mosimann (1956a) and the indirect Coombs test by the method of Burki and Fey. The precipitation test was the least sensitive; it was followed by complement fixation, slow agglutination and the Coombs test, the last being the most sensitive.

The different methods vary in their suitability according to the plan adopted to control the disease. Where no vaccination with agglutinogenic vaccines and no allergic tests with active antigens are to be used, the slow serum agglutination is considered to be the most suitable method because of its simplicity and reliability. In certain cases it may be an advantage to supplement it by the Coombs test, but because of the technical difficulties the latter test could be confined to special cases. We have found it is able to detect infection in certain animals with negative agglutination tests (aborting animals) on the one hand, and it can also clarify cases where an animal might be wrongly condemned because of normal agglutinins.

When the method of control involves vaccination with living Strain 19, the use of complement fixation and/or precipitation has the advantage of differentiating in many cases between vaccination and infection titres, which the serum agglutination test cannot do. Both the complement fixation and precipitation tests are more selective techniques than agglutination and are positive with infected animals mainly (complement fixation) or exclusively (precipitation). For example, when young animals were inoculated with 30 to 50 times 103 living Strain 19 organisms no animals at any time showed precipitins in the serum; complement fixation titres were low from the beginning, and the test was negative 20 weeks after vaccination.

Complement fixation by the method described is a less sensitive diagnostic method than serum agglutination carried out with the international standard serum. Because it picks out heavily infected animals and particularly those excreting the organism in the reproductive tract or milk as readily as the serum agglutination test, it could be used either alone or as a parallel method with agglutination. In the former case a higher proportion of Strain 19 reactors and a small number of possibly infected animels will be missed; in the second case there will be a possibility of differential diagnosis when the two tests are used in parallel.

Precipitation is so insensitive that there is no question of using it on its own for the control of brucellosis, because it would fail to detect an appreciable portion of animals excreting the organism. But because a positive result indicates the presence of a severe infection and excludes the possibility of a mere reaction to Strain 19, the precipitation test may be useful in the further study of certain sera found positive by the agglutination test in herds where Strain 19 is used, because it may help to differentiate vaccine titres from infection titres.

Les anticorps d'immunité contre Brucella abortus dans le sérum sanguin des bovins, les possibilités de leur mise en évidence et leur interprétation clinique, avec une contribution à la différenciation des titres de vaccination et des titres d'infection

Le sérum sanguin de bovins indemnes de brucellose, infectés par le bacille de Bang ou vaccinés au Buck 19 fut examiné au moyen de 4 méthodes sérologiques différentes pour déterminer le titre des anticorps contre Brucella abortus. On utilisa l'agglutination (abrégé en allemand BSLA = Blutserum‐Langsamagglutination) d'après les indications de l'Office International des Epizooties, la réaction de déviation du complément, la précipitation d'après Bürki et Mosimann et le test indirect de Coombs d'après la technique de Bürki et Fey.

La précipitation était la moins sensible des 4 méthodes. La sensibilité augmentait dans l'ordre pour la réaction de déviation du complément, la “BSLA” et le test de Coombs. Après vaccination au Buck 19 chez les jeunes animaux, on ne constata jamais de précipitation positive; les titres obtenus par déviation du complément étaient tous peu élevés et devenaient négatif 20 semaines déjà après la vaccination. Les bovins atteints de brucellose dans les conditions naturelles ont pu être déterminés avec certitude par la déviation du complément et donnaient souvent une précipitation positive. A l'aide du test de Coombs on put d'une part poser un diagnostic précoce chez un certain nombre d'animaux ayant avorté et négatifs au “BSLA“, et distinguer d'autre part les agglutinines normales des agglutinines d'immunité. L'emploi de ces quatre tests pour le diagnostic différentiel est l'objet d'une discussion.

Sobre los anticuerpos inmunes frente a la Brucella abortus en el suero sanguíneo de los bóvidos, las posibilidades de su identificación y su interpretación clinica. Contribución simultánea a la diferenciación de los títulos de vacunación e infección

Los sueros sanguíneos del ganado vacuno libre de brucelosis, infectado con brucelosis e inoculado con la cepa “Buck 19” se estudiaron con ayuda de cuatro métodos serodiagnósticos en cuanto a su contenido en anticuerpos inmunes frente a la Brucella abortus. Se aplicaron la aglutinación lenta según las normas dictadas por la Oficina Internacional de Epizootías, la fijación des complemento, la precipitación de Bürkt y Mosimann y la prueba indirecta de Coombs según la técnica de Bürki y Fey.

La precipitación resultó ser el método más burdo; le siguen, en aumento de sensibilidad, la fijación del complemento, la aglutinación lenta del suero sanguíneo y la prueba de Coombs. Después de las vacunaciones con “Buck 19” en terneras jamás se comprobó la precipitación positiva; los títulos de fijación del complemento eran siempre bajos y a las 20 semanas de haber sido vacunadas daban reacción negativa. Sin embargo, los bóvidos enfermos de brucelosis por infección natural podían abarcarse efectivamente y con frecuencia reflejaron una precipitación positiva. Con ayuda de la prueba de Coombs por un lado pudo realizarse el diagnóstico serológico precoz en una serie de animales con aglutinación lenta del suero sanguíneo negativa, y por otro permitió distinguir aparentemente las inmunoaglutininas de las normoaglutininas. Se discuten las posibilidades de aplicación en el diagnóstico diferencial de las cuatro pruebas.