Vermehrung, Interferenz und Interferoninduktion aviärer Herpesvirusarten: Beitrag zur Schutzimpfung gegen die Mareksche Krankheit
Authors: Kaleta Erhard F. 
Published: August 2010

Die experimentellen Untersuchungsergebnisse beziehen sich auf drei Themenkreise:

a) Vermehrung des Puten‐Herpesvirus in vitro: Durch Versuche in der Durchströmungskammer sowie durch Untersuchungen mit markierten Antikörpern konnte der Nachweis erbracht werden, daß die Virusweitergabe von Zelle zu Zelle durch erregerhaltige Zytoplasmateile erfolgt, die von infizierten Zellen abgeschnürt und kurze Zeit später von nicht infizierten Zellen aufgenommen werden. Unter Berücksichtigung dieses offenbar den zellassoziierten Herpesviren der Gruppe B eigenen Übertragungsweges ist eine größere Virusproduktion bei gleichzeitiger kürzerer Kultivierungszeit möglich.

b) Interferon: Während drei Puten‐Herpesvirusstämme sowie drei apathogene Hühner‐Herpesvirusstämme in vitro kein nachweisbares Interferon induzierten, waren drei geprüfte pathogene MKV‐Stämme in der Lage, sowohl in Hühnerembryofibroblasten‐ als auch in Hühnerkükennierenzellkulturen die Bildung großer Mengen Interferon zu induzieren. Auf Grund der fehlenden Interferoninduktion durch die drei Puten‐ und die drei apathogenen Hühner‐Herpesvirusstämme kann als sicher gelten, daß der Interferonmechanismus nicht für die Schutzwirkung dieser Stämme gegen das Entstehen der MK in Frage kommt.

c) Interferenz: Es konnten experimentelle Beweise für das Vorkommen der homologen Interferenz in vitro erbracht werden. Durch Endpunktpassagen mit einem zeitlichen Abstand von 24 Stunden zwischen Infektion und Passage der Kulturen konnte die Bildung inkompletter interferierender Viruspartikel weitgehend vermieden werden. Inaktiviertes Herpesvirus vermag ebenfalls mit infektiösem Virus zu interferieren.

Die Infektion von Hühnerkükennierenzellkulturen mit Puten‐Herpesvirus und die nachfolgende Infektion mit pathogenem Marekvirus vermochte die Vermehrung des MKV nachhaltig zu hemmen. Dieses in vitro beobachtete, als heterologe Interferenz bezeichnete Ereignis tritt Literaturberichten zufolge auch in vivo auf und wird als eines der Wirkungsprinzipien der Schutzimpfung von Eintagsküken gegen die MK angesehen.

Multiplication, interference and interferon induction of avian herpesviruses. Protection against Marek's Disease

2. Materials and methods, results, discussion and conclusions

The results of experimental studies relate to three different themes.

a) Multiplication of turkey herpesvirus in vitro. Studies using the continuous culture chamber and experiments with labelled antibodies have shown that spread of virus from cell to cell takes place by virus‐containing cytoplasmic particles which become detached from infected cells and are taken up by uninfected cells. Consideration of this method of transmission of herpesviruses of Group B suggests that a very large amount of virus can be produced in a very short period of culture.

b) Interferon. Whereas three turkey herpesvirus strains and three nonpathogenic chicken herpesvirus strains produced no demonstrable interferon in vitro, three pathogenic MD virus strains tested were able to induce large amounts of interferon in chick embryo fibroblast cultures and in chick kidney cultures. In the light of the failure of the six strains mentioned above to produce interferon it seems certain that the interferon mechanism is not involved in protection against Marek's disease.

c) Interference. Experimental proof was obtained of the occurrence of homologous interference in vitro. End‐point passages with 24 hour intervals between infection and passage of cultures made it possible to avoid the formation of incomplete interfering virus particles to a large extent. Inactivated herpesvirus can also interfere with infectious virus.

Infection of chick kidney cell cultures with turkey herpesvirus and subsequent infection with pathogenic MD virus can inhibit subsequent multiplication of MD virus. This in vitro heterologous interference has also been found in vivo and indeed constitutes one of the principles on which protection of day‐old chicks against MD is based.

Multiplication, interférence et induction d'interféron des espèces d'Herpesvirus aviaires: contribution à la vaccination contre la maladie de Marek Communication II

Les données des recherches expérimentales reposent sur trois thémes:

a) Multiplication du virus Herpes du dondon in vitro: des recherches dans la chambre de courant et avec des anticorps marqués ont montré que le passage du virus de cellule à cellule se fait par l'intermédiaire de parties du cytoplasme de virus qui se détachent des cellules infectées pour être prises ensuite par des cellules non infectées. En considérant ce mode de transmission cellulaire des virus Herpes du group B, il est possible de produire une plus grande quantité du virus dans un temps de culture plus bref.

b) Interféron: alors que trois souches de virus Herpes du dindon et trois souches apathogènes de la poule n'ont pas induit d'interféron in vitro, trois souches pathogènes testées ont été en mesure d'induire une grande quantité d'interférons aussi bien dans les cultures de fibroblastes d'embryons de poules que de cellules rénales de poussins. Sur la base du manque d'induction d'interférons par les trois souches de dindon et les deux souches apathogènes de poule, on peut admettre que le mécanisme des interférons ne peut pas être utilisé avec sec souches pour une protection lors del l'apparition de la maladie de Marek.

c) Interférence: on a apporté la preuve expérimentale de l'apparition de l'interférence homologue in vitro. La formation de particules virales interférentes peut être évitée dans une large mesure par des passages finaux à un intervalle de 24 heures entre une infection et une passage des cultures. Un virus Herpes inactivé peut également interférer avec un virus infectieux. L'infection des cultures de reins de poussins avec un virus Herpes du dindon et l'infection qui a suivi avec un virus pathogène de la maladie de Marek ont été capables d'inhiber de facon durable la multiplication du virus. Cet évènement observé in vitro et désigné comme une interférence hétérologue a été également constaté in vivo selon la littérature et peut être considéré comme un des principes d'action de la vaccination des poussins d'un jour.

Multiplicación, interferencia e inducción de interferona de las especies de virus herpes aviar: contribución a la vacunación contra la enfermedad de Marek parte II

Los resultados experimentales de la pesquisa se refieren a tres círculos de temas:

a) Multiplicación del virus herpes de pavo in vitro: mediante ensayos en la cámara de perfusión y por medio de anticuerpos marcados se aporta la comprobación de que la cesión de virus de célula acontece mediante partes citoplasmáticas que contienen el agente etiológico, las cuales son acordeladas por células infectadas e incorporadas poco tiempo después por células no infectadas. Considerando esta vía de transmisión, al parecer propia de los virus herpes del grupo B asociados a las células, resulta posible una producción mayor de virus con un tiempo de cultivación simultánea más breve.

b) Interferona: mientras que tres estirpes de virus herpes de pavo y tres estirpes apatógenas de virus herpes de gallina no inducían in vitro ninguna interferona demostrable, se hallaban tres estirpes de VEM patógenas examinadas en condiciones de inducir la formación de cantidades elevadas de interferona en cultivos celulares de fibroblastos de embriones de pollo y de riñones de pollitos. En consecuencia de la inducción ausente de interferona por las tres estirpes de virus herpes de pavo y las tres apatógenas de gallina puede darse como seguro que el mecanismo de interferona no entra en consideración para la acción protectora de estas estirpes contra la génesis de la EM.

c) Interferencia: se pudieron aportar pruebas experimentales de la presencia de interferencia homóloga in vitro. Mediante pases terminales con una distancia temporal de 24 horas entre infección y pase de los cultivos se pudo impedir en sumo grado la farmación de partículas víricas interferentes incompletas. El virus herpes inactivado también logra interferir con virus infeccioso.

La infección con cultivos celulares de riñones de pollitos con virus herpes de pavo y la infección subsiguiente con virus patógeno de Marek consiguió de forma perdurable la multiplicación del VEM. Este acontecimiento observado in vitro, calificado como interferencia heteróloga, también se presenta in vivo con arreglo a los informes bibliográficos y se considera como uno de los principios de acción de la vacunación profiláctica de pollitos de un día contra la EM.