Züchtung und Titrierung von Borna‐Virus in Zellkulturen aus Organen fötaler Lämmer
Authors: Mayr A. , Danner K. 
Published: August 2010

Borna‐Virus konnte in Zellkulturen aus Haut, Hoden, Nieren und Gehirn von Lammföten vermehrt werden. Der Virusnachweis wurde durch Übertragung von Zellkulturmaterial auf das Kaninchen und mit der Immunofluoreszenz‐Technik geführt. Kerneinschlußkörperchen traten selten und erst im späteren Verlauf der Virusvermehrung auf.

Zellkulturen aus Nieren und Gehirn von Lammföten eignen sich am besten für die direkte Anzüchtung und Titrierung von Borna‐Virus aus Zellkultur‐ und Kaninchenmaterial. Die Infektiositätstiter lagen bei Kulturvirus zwischen 101,45 und 103,2 KID50/ml. Kaninchengehirn‐Virus erreichte Titer zwischen 102 und 104 Infektiösen Einheiten/ml. Die Zellkulturen aus dem Gehirn von Lammföten waren bei den Titrierungen etwas sensibler.

Mit der Immunofluoreszenz‐Technik konnte Borna‐Virusantigen bereits 4 Tage p. inf. in den Zellkulturen beobachtet werden, während infektiöses Virus erst später erschien. Die Infizierung von Zellkulturen und der fluoreszenzserologische Nachweis von Borna‐Virusantigen sind dem Kaninchenversuch überlegen.

Cultivation and titration of Borna virus in cell cultures from organs of foetal lambs

Borna virus can be grown in cell cultures of skin, testis, kidney and brain of lamb foetuses. Proof of the virus is obtained by transfer of the culture material to the rabbit and by immunofluorescence. Intranuclear inclusions are rare and are first seen in the later stages of virus multiplication.

Cell cultures of kidney and brain of lamb foetuses are best suited for direct cultivation and titration of Borna virus from culture and rabbit material. The infectivity titre of culture virus lies between 101,45 and 103,2 TCID50/ml. Rabbit brain virus reaches titres between 102 and 104 infective units/ml. Cell cultures from the brain of lamb foetuses gave the highest titre.

By immunofluorescence Borna antigen was detectable in cell cultures within a few days of infection, whereas infective virus appeared later. Infection of cell cultures and immunofluorescence are to be preferred to rabbit inoculation.

Reproduction et titration du virus de la maladie de Borna dans des cultures de cellules d'organes d'embryons de mouton

On a pu multiplier le virus de la maladie de Borna dans des cultures de cellules de la peau, des testicules, des reins et du cerveau de foetus d'agneau. La mise en évidence du virus a été faite par passage du matériel de culture cellulaire sur lapin et par la technique de l'immunofluorescence. Les inclusions dans les noyaux furent rares et seulement dans un stade tardif de la multiplication du virus.

Les cultures de cellules des reins et du cerveau de foetus d'agneau se prétent le mieux pour la culture et la titration directe du virus de la maladie de Borna à partir d'un matériel de culture cellulaire et du lapin. Le titre d'infectiosité se situait entre 101,45 et 103,2 TCID50/ml pour le virus de culture. Le virus du cerveau de lapin a atteint un titre entre 102 et 104 unités infectieuses/ml. Les cultures de cellules du cerveau de foetus d'agneau furent un peu plus sensibles lors de la titration.

On a pu observer l'antigène viral de la maladie de Borna déjà 4 jours après l'inoculation des cultures cellulaires avec la technique de l'immunofluorescence, le virus infectieux n'apparaissant que plus tard. L'infection de cultures cellulaires et la mise en évidence sérologique par immunofluorescence sont supérieures à la recherche sur lapin.

Cultivación y titulación del virus de Borna en cultivos celulares de órganos de corderos fetales

Se pudo multiplicar el virus de Borna en cultivos celulares de piel, testículos, riñones y cerebro de fetos de cordero. La identificación de virus se efectuó mediante la transmisión de material de cultivo celular al conejo y con la técnica de inmunofluorescencia. Los corpúsculos de inclusión nucleares aparecieron muy rara vez y solamente en el curso final de la multiplicación viral.

Los cultivos celulares de riñones y cerebro de fetos de cordero resultan muy apropiados para la cultivación directa y titulación del virus de Borna a partir de material de cultivo celular y de conejo. Los títulos de infecciosidad se hallaban en el virus cultural entre 101,45 y 103,2 DIC50/ml. El virus de cerebro de conejo alcanzaba títulos comprendidos entre 102 y 104 unidades infecciosas/ml. Los cultivos celulares de cerebro de fetos de cordero eran algo más sensibles en las titulaciones.

Con la técnica de inmunofluorescencia ya se pudo observar el antígeno virósico de Borna a los 4 días p. inf. en los cultivos celulares, mientras que el virus infeccioso surgió más adelante. La infección de cultivos celulares y la identificación fluorescente‐serológica de antígeno virósico de Borna son superiores al ensayo en conejos.