Die Auftrennung der Serumproteine verschiedener Haussäugetiere in der Trägerelektrophorese
Authors: Matthaeus W. 
Published: August 2010

Unter bestimmten Bedingungen auftretende Faktoren, wie heterogene Verhältnisse im elektrischen Feld und Agargel oder zu große Konzentrationsunterschiede im Salzgehalt zwischen Serum und Gelpuffer, sind die Ursache dafür, daß durch Deformationserscheinungen der Proteinbanden und durch auftretende Verschmierungseffekte schlecht auswertbare Elektropherogramme erhalten werden. Versuche über die Verfahrenstechnik zur Darstellung geeigneter Platten für eine reproduzierbare, quantitative Analyse zeigen deren Abhängigkeit vom Fixierungs‐, Anfärbe‐ und Spülprozeß. Methanolhaltige Färbeflotten mit Amidoschwarz 10 B sowie methanolische Waschlösungen eignen sich nicht. Bei ihnen macht sich das unterschiedliche Farbstoffbindungsvermögen der Proteine bemerkbar, denn bei nicht streng eingehaltenen Entfärbezeiten wirkt sich der schnelle Farbstoffverlust der Globulinfraktionen auf die Auswertung nachteilig aus. Aus den Untersuchungen wird eine Standardmethode für die Agarelektrophorese tierischer Seren vorgeschlagen.

Separation of serum proteins by gel electrophoresis 1. Contribution to the technique

Under certain conditions, factors such as heterogeneous relationships in the electric field and in the agar gel, or too large concentration differences in the salt content as between serum and gel buffer, cause distortion of the protein bands and the resulting blurring effects which make it difficult to evaluate the electropherogram. Studies on the technique for the preparation of suitable plates for a reproducible quantitative analysis show how dependent one is on the processes of fixation, staining and washing. Staining solutions containing methanol and rinsing solutions containing methanol are unsuitable. Their use makes the different proteins stain with differing intensity because by insufficient staining the globulin fractions lose the stain rapidly and produce an unfavourable result. From the author's experience a standard method for agar gel electrophoresis of animal sera is proposed.

La séparation des protéines sériques chez divers mammifères domestiques par électrophorèse sur gel. 1ere Communication: Contribution à la technique de l'électrophorèse sur gel d'agar‐agar

Certains facteurs accidentels comme un champ électrique non homogène ou de trop grandes différences de concentration saline entre le sérum et le système tampon du gel sont la cause de déformations des bandes de protéines. et par les effets qui en découlent, on obtient des diagrammes électrophorétiques difficiles à interpréter. Des essais concernant la technique d'obtention de plaques adéquates pour une analyse quantitative reproductible montrent leur dépendance des processus de fixation, de coloration et de rinçage. Des solutions de coloration contenant du méthanol avec de «l'amidoschwarz 10 B» ainsi que des solutions de lavage au méthanol ne conviennent pas. Leur emploi souligne trop les différences du pouvoir de fixation du colorant des différentes protéines, car si l'on n'observe pas exactement les temps de différenciation, la décoloration rapide des fractions de globuline ont une action défavorable sur les résultats. Ces recherches aboutissent à la proposition d'une méthode standard pour l'électrophorèse sur gélose de sérums d'origine animale.

Separación de las seroproteínas de diversos mamíferos domésticos en la electroforesis porteadora. 1 a comunicación: Contribución a la ingeniería química de electroforesis sobre agar

Bajo determinadas condiciones surjen factores, tales como condiciones heterogéneas en el campo eléctrico y en el gel de agar o diferencias de concentración demasiado grandes en el contenido salino entre el suero y el tampón gelificado, los cuales son causa de que por manifestaciones deformadoras de las bandas proteicas y por efectos de ensuciamiento que surjen se obtengan electroferogramas mal evaluables. Ensayos acerca de la ingeniería química para la elaboración de placas apropiadas para un análisis cuantitativo reproducible muestran su dependencia del proceso de fijación, coloración y lavado. No resultan apropiadas flotas de tinción que contienen metanol con amidonegro 10 B, así como tampoco soluciones de lavado a base de metanol. En ellas se nota la diferente capacidad de fijación de colorantes por parte de las proteínas, pues al no cumplirse con exactitud los tiempos de decoloración, la rápida pérdida de colorante de las fracciones globulínicas se refleja desfavorablemente sobre la valoración. Como resultado de las investigaciones, se propone una tícnica standard para la electroforesis sobre agar de los sueros sanguíneos animales.

Herrn E. Schlotterer danke ich für aufgeschlossene Mitarbeit.