Beitrag zur Unterscheidung der Monozyten von Lymphozyten im Blutausstrich vom Rind (Morphologie, Naphthol‐AS‐Esterase)
Authors: Stöber M. , Heubner D. 
Published: August 2010

Ausgehend von den bekannten Schwierigkeiten einer sicheren Differenzierung der Monozyten von größeren „monozytoiden” Lymphozyten in panoptisch gefärbten Blutausstrichen vom Rind sind einige morphologische Merkmale sowie die Aktivität der Naphthol‐AS‐Esterase („Monozyten‐Esterase”) von Lymphozyten und Monozyten des Menschen sowie gesunder und an tumoröser lymphatischer Leukose erkrankter Rinder einer vergleichenden Prüfung unterzogen worden. Dabei zeigte sich, daß die Reaktion der Naphthol‐AS‐Esterase (nach Löffler, 1961) in den Monozyten des Rindes im Mittel nur etwa halb so stark ist wie in denjenigen des Menschen (Scores: Rind 2,15; Mensch: 3,93); beim Rind stellt sie damit kein brauchbares Kriterium für die Unterscheidung der Monozyten von den Lymphozyten dar (Scores: Rind 1,17; Mensch: 1,30). Da von den bislang hierauf untersuchten zytochemischen Färbungen lediglich der Peroxydase‐ und der Lipid‐Nachweis, und diese auch nur in einem Teil der eindeutig als Monozyten anzusprechenden Blutzellen des Rindes — im Gegensatz zu den stets negativ reagierenden Lymphozyten — positiv ausfällt (Stöber, 1965), bleiben somit morphologische Kennzeichen (nämlich Form und Struktur des Zellkernes; Breite, Färbung, Azurbestäubung und Vakuolisierung des Zytoplasmas) sowie die kritische vergleichende Musterung der Einzelzelle im sachgemäß angefertigten panoptisch gefärbten Präparat nach wie vor die wichtigsten Merkmale zur Unterscheidung der Monozyten von Lymphozyten beim Rind.

Die im Vergleich zu den Verhältnissen beim Menschen festzustellende relativ enge morphologische und zytochemische „Verwandtschaft” der beiden genannten Zellarten beim Rind ist insofern überraschend, als sich die Blutmonozyten des Menschen nach den Untersuchungen Leders (1966) aufgrund ihrer zytochemischen Eigenschaften über die Stufe eines „Promonozyten” von myeloischen Vorläufern (Promyelozyten) ableiten lassen; die myeloische Abstammung der Monozyten des Rindes wird anhand eigener Beobachtungen an panoptisch gefärbten sowie an zytochemisch behandelten Knochenmarks‐ausstrichen diskutiert.

Quantitative Auswertungen (Scoring) des Naphthol‐AS‐Esterase‐Gehaltes der lymphatischen Zellen sowie der Monozyten in Blutausstrichen gesunder und leukosekranker Rinder ergaben keine differential‐diagnostischen Vorteile für die Erkennung der lymphatischen Leukose bei dieser Tierart.

Differentiation between monocytes and lymphocytes in smears of bovine blood (morphology, naphthol‐AS‐esterase)

Because of the well‐known difficulties in differentiating monocytes from large monocyte‐like lymphocytes in smears of bovine blood, some of their morphological characters are compared in human blood and in the blood of healthy cattle and of cattle with lymphoid leucotic tumours. Studies were also made on the naphtol‐AS‐esterase activity (Löffler, 1961) of monocytes of cattle which showed only half the concentration of enzyme compared with that in man. The difference in concentration of the enzyme in cattle between monocytes and lymphocytes did not allow these cells to be distinguished by this means. Among the hitherto studied cytochemical staining methods, the demonstration of peroxidase and lipids is positive in only a proportion of cells in bovine blood which are clearly monocytes and is always negative in lymphocytes (Stöber, 1965). The morphological features, such as form and structure of the nucleus, diameter, staining, azure granulation and vacuolisation of the cytoplasm, are the main distinguishing criteria, along with critical comparative observation of individual cells in preparations stained by the panoptic method.

In man the blood monocytes, according to the findings of Leder (1966), represent, on the basis of their cytochemical properties, primitive myeloid cells (promyelocytes) passing through a promonocyte stage. The possible myeloid of origin of bovine monocytes is discussed against a background of the authors' studies on panoptic preparations and bone‐marrow films examined cytochemically.

Quantitative evaluation (scoring) of the naphthol‐AS‐esterase content of lymphoid cells and monocytes in the blood cells of healthy cattle and animals with leucosis provides no differential diagnostic advantages for recognising lymphatic leucosis in this species.

Contribution à la différenciation des monocytes et des lymphocytes dans les frottis sanguins du Boeuf (morphologie, naphtol‐AS‐estérase)

On sait qu'il est difficile de différencier avec certitude les monocytes des grands lymphocytes «monocytoïdes» dans des frottis de sang bovin colorés par les méthodes panoptiques. Aussi les auteurs ont‐ils soumis à une étude comparée quelques caractères morphologiques ainsi que l'activité de la naphtol‐AS‐estérase («Estérase des monocytes») des lymphocytes et monocytes humains ainsi que ceux des bêtes bovines saines ou atteintes de leucose lymphatique tumoreuse. On constata au cours de ces essais que la réaction de la naphtol‐AS‐estérase (selon Loeffler, 1961) est, dans les monocytes bovins, deux fois plus faible que dans les monocytes humains (scores: Boeuf 2,15; Homme 3,93). Chez le Boeuf, ce critère n'est donc pas utilisable pour distinguer les monocytes des lymphocytes (scores: Boeuf 1,17; Homme 1,30). Parmi les colorations cytochimiques étudiées jusqu'ici, uniquement la mise en évidence de la peroxydase et des lipides donna des résultats positifs — et cela seulement chez

une partie des cellules bovines que l'on pouvait considérer avec certitude comme étant des monocytes, tandis que chez les lymphocytes, ces réactions étaient toujours négatives (Stöber, 1965). Par conséquent les caractères morphologiques (en particulier la forme et la structure du noyau, la largeur et la coloration du cytoplasme, la poussière azurophile et les vacuoles), ainsi que l'observation critique et comparée des cellules prises individuellement dans des préparations faites selon les régles et colorées par les méthodes panoptiques restent, comme par le passé, les critères principaux pour distinguer les monocytes des lymphocytes chez le Boeuf. Par rapport à ce qui se passe chez l'Homme, la parenté morphologique et cytochimique relativement étroite qui existe chez le Boeuf entre ces deux types de cellules est surprenante. En effet, chez l'Homme les monocytes sanguins, selon les recherches de Leder (1966) sur la base de leurs propriétés cytochimiques remontent à des stades primitifs myéloïdes (promyélocytes) en passant par le stade d'un promonocyte; l'origine myéloïde des monocytes bovins est discutée sur la base d'observations personnelles effectuées sur des frottis de moelle osseuse colorés par les méthodes panoptiques ou ayant subi des traitement histochimiques. Des études quantitatives (scoring) de la teneur en naphtol‐AS‐estérase des cellules lymphatiques et des monocytes dans les frottis de sang bovin provenant d'animaux sains ou atteints de leucose ne sont d'aucun avantage pour le diagnostic et le diagnostic différenciel de la leucose lymphatique chez cette espèce animale.

Contribución a la diferenciación de los monocitos de los linfocitos en el frote sanguíneo de la vaca (morfología, naftol‐AS‐esterasa)

Partiendo de las dificultades conocidas de una diferenciación segura de los monocitos de los linfocitos «monocitoides» mayores en frotes sanguineos de vaca teñidos panópticamente, se sometieron a un examen comparado algunas características morfológicas, así como la actividad de la naftol‐AS‐esterasa («esterasa de los monocitos») de los linfocitos y monocitos del hombre, de bovinos sanos y enfermos de leucosis linfática tumoral. De esta forma se pudo ver que la reacción de la naftol‐AS‐esterasa (según Loeffler, 1961) en los monocitos vacunos es, como media, la mitad aproximadamente de fuerte que en los del hombre (scores: vaca 2,15; hombre 3,93); con ello, en la vaca no resulta ser un criterio ütil para diferenciar los monocitos de los linfocitos (scores: vaca 1,17; hombre 1,30). Puesto que de las coloraciones citoquímicas examinadas a este respecto hasta la fecha, solo la identificacíon de la peroxidasa y de los lípidos, y éstas también nada más en una parte de las células hemáticas de la vaca calificables inequívocamente como monocitos — en contraposición a los linfocitos, que siempre reaccionan negativamente — resultan positivas (Stóber, 1965), quedan, por tanto, las características morfológicas (forma y estructura del núcleo celular; anchura, coloración, pulverización azur y vacuolización del citoplasma) así como el examen comparado crítico de la célula individual en la preparación teñida panópticamente, elaborada de forma conveniente, como los indicios más importantes para diferenciar los monocitos de los linfocitos en la vaca.

El «parentesco» morfológico y citoquímico relativamente estrecho de ambas especies celulares citadas comprobable en la vaca, en comparación con las circumstancias en el hombre, sorprende en cuanto que los monocitos sanguíneos del hombre se pueden derivar, según los estudios de Leder (1966), en vista a sus propiedades citoquímicas, a través de la fase de un «promonocito», de precursores mieloides (promielocitos); se discute el origen mieloide de los monocitos de la vaca con arreglo a observaciones propias en frotes de medula ósea coloreados panópticamente o tratados con procedimientos citoquímicos. Las evaluaciones cuantitativas del contenido en naftol‐AS‐esterasa de las células linfáticas, así como de los monocitos en extensiones sanguíneas de vacas sanas y leucósicas no evidenciaron ventajas diagnósticodiferenciales para el diagnóstico de la leucosis linfática en esta especie animal.