A lyophilized form of xenogeneic total RNA stimulates hematopoiesis in post-radiation myelosuppression
Authors: Тишевская Н.В. , Геворкян Н.М. , Позина А.А. 
Published: January 2022

Введение. Аллогенная суммарная РНК, выделенная из клеток лимфоидных органов, стимулирует регенерацию кроветворной ткани после острого и хронического нарушения кроветворной функции. Цель исследования: 1) доказательство отсутствия ксеногенных ограничений механизмов лимфоцитарного контроля регенеративных процессов на примере гемостимулирующего действия суммарной РНК лимфоцитов бычьей селезенки в отношении кроветворения крыс, подвергшихся гамма-облучению в сублетальной дозе; 2) сравнительный анализ эффективности нативной и лиофилизированной форм указанной РНК. Методика. Работа выполнена на белых нелинейных крысах-самцах массой 200-220 г. Cуммарную РНК выделяли методом фенол - хлороформной экстракции из лимфоидных клеток бычьей селезенки. Для создания исходной миелосупрессии 30 крыс подвергли однократному общему воздействию гамма-излучения с источником 60Co в дозе 6 Гр при мощности дозы 0,1 Гр/с, после чего разделили их на 3 равные группы. Через 2 ч после облучения крысам контрольной группы внутрибрюшинно ввели по 0,5 мл 0,9% NaCl; крысам 2-й группы - нативную суммарную РНК в дозе 30 мкг/100г массы, крысам 3-й группы - лиофилизированную суммарную РНК в аналогичной дозе. На 3-и, 7-е и 12-е сут в периферической крови определяли количество ретикулоцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, после чего крысы были выведены из эксперимента с целью исследования костномозгового кроветворения. Через 12 сут в костном мозге определяли количество эритроидных, лимфоидных, мегакариоцитарных и миелоидных клеток. Из костного мозга выделяли эритробластические островки (ЭО) и дифференцировали их на пролиферирующие (ЭО 1,2 классов и реконструирующиеся ЭО) и зрелые (ЭО 3 класса и инволюциирующие ЭО) морфо-функциональные клеточные ассоциации. Результаты. Под влиянием ксеногенной суммарной РНК в периферической крови крыс в 2-3 раза увеличилось количество лейкоцитов и в 1,6-1,75 раза возросло число ретикулоцитов. В костном мозге увеличилось количество пролиферирующих миелоидных и лимфоидных элементов, а также общее число клеток эритроидного ряда. Ксеногенная суммарная РНК стимулировала образование ЭО как на основе контакта свободных костномозговых макрофагов с молодыми эритроидными клетками (ЭО 1 и 2 классов), так и на базе реконструкции (ЭО реконструирующиеся). Сравнительный анализ эффектов нативной и лиофилизированной суммарной РНК не выявил различий между гемопоэтическими показателями у крыс, получивших эти препаратов. Заключение. Суммарная РНК, выделенная из лимфоидных клеток бычьей селезенки, активирует гемопоэз у крыс с постлучевой миелосупрессией, что свидетельствует об отсутствии ксеногенных ограничений у млекопитающих в механизмах лимфоцитарного контроля восстановительных процессов. Лиофилизированная суммарная РНК активирует костномозговое кроветворение в те же сроки и в том же объеме, что и нативная форма.

Introduction. Allogeneic total RNA isolated from cells of lymphoid organs stimulates regeneration of hematopoietic tissue after acute and chronic disturbance of hematopoietic function. Aim. 1) To prove the absence of xenogeneic limitation for the lymphocytic regulation of regenerative processes using an example of the hemo-stimulating effect of total RNA from bovine spleen lymphocytes on hematopoiesis in rats exposed to sublethal gamma-irradiation; 2) To perform a comparative analysis of the effectiveness of the native and lyophilized forms of the total RNA. Methods. Experiments were performed on white outbred male rats weighing 200-220 g. Total RNA was isolated from bovine spleen lymphoid cells by phenol-chloroform extraction. To create the initial myelosuppression, 30 rats were exposed to a single general 60Co gamma radiation (6 Gy at 0.1 Gy/s). The rats were then divided into 3 equal groups. Two hrs after irradiation, the rats of the control group were injected intraperitoneally with 0.5 ml of 0.9% NaCl; rats of the second group received native total RNA, 30 μg/100 g body weight, and rats of the third group received lyophilized total RNA at a similar dose. On days 3, 7, and 12, the number of peripheral blood reticulocytes, leukocytes, and platelets was measured. The rats were then sacrificed, and bone marrow hematopoiesis was studied. After 12 days, the number of bone marrow erythroid, lymphoid, megakaryocytic, and myeloid cells was measured. Erythroblastic islets (EIs) were isolated from the bone marrow and differentiated into proliferating (class 1 and 2 EIs and reconstructing EIs) and mature (class 3 EIs and involving EIs) morpho-functional cell associations. Results. Under the influence of xenogeneic total RNA, the number of peripheral blood leukocytes increased by 2-3 times, and the number of reticulocytes increased by 1.6-1.75 times. In the bone marrow, the number of proliferating myeloid and lymphoid cells increased, as did the total number of erythroid cells. Xenogeneic total RNA stimulated formation of EIs, based both on the contact of free bone marrow macrophages with young erythroid cells (class 1 and 2 EIs) and on reconstruction (reconstructing EIs). Comparative analysis of the effects of native and lyophilized total RNA did not reveal differences between hematopoietic parameters in rats that received these agents. Conclusion. Total RNA isolated from bovine spleen lymphoid cells activates hematopoiesis in rats with post-radiation myelosuppression. This indicates the absence of mammalian xenogenic limitation of lymphocytic control of recovery processes. Lyophilized total RNA activates bone marrow hematopoiesis at the same rate and to the same extent as the native form.