Studies on the Growth of Bovine Rotavirus in Cell Cultures*
Authors: Butchaiah G. , Bøtner A. G. , Lund E. 
Published: August 2010

Various growth conditions for the UK strain of bovine rotavirus in cell cultures were examined. The importance of trypsin treatment throughout the cultivation for the virus titer obtained was confirmed. The absence of serum in the maintenance medium also improved the titer. The cell types that gave the highest titer (measured by fluorescence foci) were secondary calf kidney cells and BGM cells. When samples from cases of calf diarrhea were examined, the best results were obtained by direct ELISA technique on fecal suspensions. For demonstration of virus in cell cultures immunfluorescence, immunperoxidase technique, acridine orange staining, ELISA and CPE were employed.

Untersuchungen über das Wachstum von bovinem Rotavirus in Zellkulturen

Es wurden verschiedene Wachstumsbedingungen für den UK Stamm von bovinem Rotavirus in Zellkulturen geprüft. Die Wichtigkeit der Trypsinbehandlung während der Anzüchtung für den zu erreichenden Virustiter wurde bestätigt. Ein Erhaltungsmedium ohne Serum verbesserte den Titer ebenfalls. Die Zellart, die den höchsten Titer ermöglichte (gemessen mit der Fluoreszenz‐Zellzähl‐Methode) waren sekundäre Kälbernierenzellen und BGM‐Zellen. Bei Untersuchungen von Proben aus Fällen mit Kälberdurchfall brachte die ELISA‐Technik mit Kotaufschwemmungen die besten Ergebnisse. Für das Nachweisen des Virus in Zellkulturen wurden die Immunfluoreszenz, die Immunperoxidase‐Technik, die Akridin‐Orange‐Färbung, der ELISA und der CPE verwendet.

Recherches sur la croissance du Rotavirus bovin en cultures cellulaires

Différentes conditions de croissances pour la souche UK du Rotavirus bovin ont été testées en cultures cellulaires. L'importance du traitement par la trypsine durant l'ensemencement pour atteindre le titre viral a été confirmée. Un milieu de conservation sans sérum a également amélioré le titre. Les espèces cellulaires qui ont donné les titres les plus élevés (mesurés avec la méthode du comptage cellulaire par la fluorescence) furent des cellules rénales secondaires de veaux et des cellules BGM. La technique ELISA avec des suspensions de matières fécales a donné les meilleurs résultats lors des examens d'échantillons de cas de diarrhée des veaux. On a utilisé l'immunfluorescence, la technique de l'immunperoxydase, la coloration à l'acridine‐orange, l'ELISA et CPE pour la représentation du virus dans les cultures cellulaires.

Estudios sobre el crecimiento de rotavirus bovinos en cultivos celulares

Se analizaron varias condiciones de crecimiento para la estirpe UK de rotavirus bovino en cultivos celulares. Pudo confirmarse la importancia del tratamiento a base de tripsina durante la cultivación para alcanzar título de virus. Un medio de sostenimiento sin suero sanguíneo también mejoró los títulos. La especie celular que hizo posible los títulos máximos (medidos con la técnica de recuento celular en fluorescencia) eran células secundarias de riñones de ternero y células BGM. En los estudios de indagación con muestras de casos de diarreas en terneros, se lograron los mejores resultados empleando la técnica ELISA con suspensiones de estiércol. Para representar el virus en cultivos celulares se utilizaron la inmunofluorescencia, coloración a base de acridina‐naranja, la ELISA y el CPE.