ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ИЗОЛИРОВАНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ
Authors: Баратов М.О. , Гусейнова П.С. 
Published: December 2024

Лабораторная диагностика имеет решающее значение в выявлении туберкулёза животных. Предложенные питательные среды для изолирования возбудителя богаты разнообразием. Изучены практическая значимость часто используемых питательных сред и их модификации. Исследованы образцы сред Петраньяни, Герольда, Евглевского, Мордовского, Павловского, Левенштейна-Йенсена, Финна-II и некоторые их модификации, для первичного выделения и пересева микобактерий. В сравнительном плане изучены среды также Левенштейна-Йенсена и Финна-II в различных вариантах: Левенштейна - Йенсена, по прописи и замороженная; Левенштейна-Йенсена, сухая и замороженная; Финна-II в авторском варианте и четырех модификациях, АФ - I (гликоколь вместо глутамата натрия), АФ-II- (с картофельным экстрактом), АФ-III - (без гликоколя) и вариант «МФ» (с экстрактом M. flei). Для посева использовали биоматериал от больных животных, также искусственно инфицированный. Исследования позволили установить результативность сред Левенштейна-Йенсена и Финна-II для первичного выделения возбудителя. По ростовым свойствам сухая среда Левенштейна-Йенсена превосходит нативную, но значительно уступает нативной среде Финна по ингибирующим постороннюю микрофлору свойствам. Возможность ускорения роста микобактерии углеводородами определяли добавлением н-алканов с широким диапазоном углеводов – от декана до нонадекана (от С10 до С22). Всего испытано 30 разных вариантов: добавление жидкого парафина; спиртового экстракта M. flei; растворов воска; прополиса на гексане; сыворотки крупного рогатого скота и другие. Использование в качестве стимулятора роста н-алканов, в колическтве 2-3 капель на 10 мл питательной среды (1 капля на 4 мл среды), позволило сократить сроки культивирования на 15-20 дней и увеличить бактериальную массу примерно в 2 раза. Достоверность стимуляции роста М. bovis (Р<0,05) н –алканами на яичных средах по критерию χ2 подтверждена и результатами вариационной статистики. Выявлены слабые ростовые свойства по отношению к М. aviumи незначительная стимуляция роста М.tuberculosis.

Laboratory diagnostics is of decisive importance in the detection of animal tuberculosis. The proposed nutrient media for isolating of the pathogen are rich in variety. The practical significance of frequently used culture media and their modifications have been studied. Samples of Petragnani, Gerold, Evglevsky, Mordovsky, Pavlovsky, Levenshtein-Jensen, Finn-II and some of their modifications for the primary isolation and subculturing of mycobacteria were studied. Also, in a comparative plan, the Levenshtein-Jensen and Finn-II media were studied in various versions: Levenshtein-Jensen, prescribed and frozen; Levenshtein-Jensen, dry and frozen; Finna-II in the author's version and four modifications, AF-I (glycocol instead of monosodium glutamate), AF-II- (with potato extract), AF-III - (without glycocol) and MF variant (with M. flei extract). For sowing, biomaterial from sick animals, also artificially infected, was used. The studies made it possible to establish the effectiveness of the Levenshtein-Jensen and Finn-II media for the primary isolation of the pathogen. In terms of growth properties, the dry Levenshtein-Jensen medium is superior to the nitive one, but is significantly inferior to Finn's native medium in terms of properties that inhibit foreign microflora. The ability to accelerate the growth of mycobacteria with hydrocarbons was determined by the addition of n-alkanes with a wide range of carbohydrates - from decane to nonadecane (from C10 to C22). A total of 30 different options were tested: by adding liquid paraffin; alcohol extract of M. flei; wax solutions; propolis on hexane; bovine serum and others. The use of n-alkanes as a growth stimulator in the amount of 2-3 drops per 10 ml of nutrient medium (1 drop per 4 ml of medium) made it possible to reduce the cultivation time on 15-20 days and increase the bacterial mass in about 2 times. The reliability of growth stimulation of M. bovis (P<0.05) by n-alkanes on egg media according to the χ2 criterion was also confirmed by the results of variation statistics. Weak growth properties in relation to M. avium and a slight stimulation of the growth of M. tuberculosis were revealed.