Mastite caprina por Staphylococcus warneri: uma abordagem multifatorial no estudo da infecção
Authors:   , Caldeira Jéssica Lobo Albuquerque 
Published: June 2024

A mastite, inflamação da glândula mamária, emerge como um desafio na pecuária leiteira, impactando negativamente a produção e a qualidade do leite. Este trabalho aborda essa questão complexa em três capítulos em formato de artigo, cada um com foco específico e contribuições distintas para o entendimento da dinâmica da infecção na mastite caprina. Para isso, trabalhamos com 112 amostras de leite oriundas de sete cabras primíparas da raça Parda Alpina, das quais seis foram submetidas à infecção experimental intramamária com uma dose de 1,2 × 108 UFC/ml do isolado de S. warneri e uma serviu como controle negativo. O primeiro capítulo investigou o impacto da infecção experimental por Staphylococcus warneri nas alterações dos elementos químicos do leite bem como na presença de patógenos nos caprinos infectados. Utilizou-se PCR em tempo real para detecção de patógenos e utilizamos a Contagem de Células Somáticas (CCS) e Contagem Bacteriana Total (CBT) como parâmetros de infecção. Elementos químicos foram analisados via Espectroscopia de Energia Dispersiva (EDS) acoplada ao MEV. Os resultados revelaram diferenças entre o lado do úbere infectado e o não infectado durante os dias de desenvolvimento da infecção tanto para os elementos quanto para a presença de patógenos. O cloro apresentou maior concentração no lado infectado do úbere no segundo dia, enquanto cálcio e ferro exibiram variações ao longo dos dias de infecção. Correlações específicas foram estabelecidas entre diferentes patógenos e elementos químicos. A infecção experimental por S. warneri impactou a microbiota, com uma maior variedade de patógenos nos animais infectados bem como no úbere infectado, além de variações entre os elementos químicos entre o lado do úbere infectado e não infectado, sendo um trabalho pioneiro nessa abordagem. No segundo capítulo, abordamos a atividade da enzima N-acetil-β-glucosaminidase (NAGase) como uma ferramenta diagnóstica para mastite caprina. Amostras oriundas da infecção experimental e 49 amostras de animais naturalmente infectados foram utilizados neste estudo. Aplicamos o método fluorométrico para quantificar a enzima NAGase além de citometria de fluxo para a CCS e CBT que foram utilizados como parâmetro da evolução da infecção. A análise revelou aumento da NAGase em cabras infectadas com S. warneri, destacando-se como uma ferramenta útil para o monitoramento da doença. Além disso, ao combinarmos o NAGase com a CCS, obtivemos um melhor resultado na classificação da mastite em amostras de campo. Essa abordagem multidimensional contribui para aprimorar estratégias de diagnóstico e tratamento da mastite. O terceiro capítulo investigou a liberação de Neutrophil Extracellular Traps (NETs) por neutrófilos caprinos estimulados in vitro por Staphylococcus aureus e S. warneri. Neste capítulo, sangue de cabras adultas saudáveis foram coletados e utilizado no isolamento de neutrófilos polimorfonucleares caprino (PMNs). Avaliamos a formação NETs caprinos induzindo as células sob estímulos de forbol 12-miristato 13-acetato (PMA), citocalasina para inibição da fagocitose, S. warneri e S. aureus. Esses dois patógenos comuns da mastite caprina desencadearam a formação de NETs, sugerindo um mecanismo de defesa celular contra a mastite, sendo um achado inédito na literatura. Essa resposta dos neutrófilos destaca nuances distintas na defesa imunológica, oferecendo uma perspectiva valiosa para futuras estratégias terapêuticas. Em conclusão, esses achados contribuem significativamente para avanços na compreensão e no manejo sanitário caprino, destacando a necessidade contínua de abordagens multidisciplinares para enfrentar esse desafio complexo na pecuária leiteira. Palavras-chave: Ruminantes. Mastite. Leite. Diagnóstico. Resposta imune.