Untersuchungen zur Reproduzierbarkeit der Katalase‐und Ureaseprobe*
Authors: Reusse U. 
Published: September 2010

Die Ergebnisse der mit einem Brucellen‐Stamm durchgeführten Katalase‐Aktivitätsbestimmungen (Methode nach Huddleson) weisen erhebliche Abweichungen auf. Als Ursache konnten Ungenauigkeiten in der Einstellung der verwendeten Keimsuspensionen mit dem Trübungsmesser ermittelt werden.

Die Höhe der Katalase‐Aktivität eines Brucellen‐Stammes ist direkt proportional der verwendeten Keimzahl. Daher kann der mit jeder Keimsuspension erhaltene Katalasewert auf eine theoretische Standard‐Suspension interpoliert werden, die für alle Katalase‐Untersuchungen zugrunde gelegt wird. Auf diese Weise lassen sich die Ergebnisse der Katalase‐Untersuchungen reproduzierbar gestalten. Voraussetzung ist jedoch die genaue Keimzahlbestimmung bei den verwendeten Bakteriensuspensionen. Hierfür erwies sich die Bakterienzählkammer am geeignetsten, wobei die besten mikroskopischen Bilder mit Hilfe eines Dunkelfeld‐Effektes bei entsprechend dünner Zählkammer erhalten wurden.

Da sich die Katalase‐Aktivität von Brucellen sehr konstant verhält, ist es möglich, die Katalaseprobe auch zur Identifizierung einzelner Stämme (z.B. Identifizierung des Impfstammes „Buck 19”) zu verwenden.

Zwischen der Dauer der Reaktionszeit und der Höhe der Katalase‐Aktivität besteht ebenfalls eine lineare Proportion. Daher lassen sich die Katalasewerte verschiedener Autoren vergleichen, selbst wenn diese au&#x007a;̀er mit unterschiedlichen Keimzahlen auch mit unterschiedlichen Reaktionszeiten gearbeitet haben.

Um reproduzierbare Ergebnisse bei der Katalaseprobe zu erzielen, ist ein Schütteln der Reaktionssuspension nicht unbedingt erforderlich. Die mit einem Schütteleffekt erhaltenen Katalasewerte liegen allerdings stets etwas höher als die Werte ungeschüttelter Reaktionsgemische.

Bei der Ureaseprobe (Methode nach Bauer) besteht ebenfalls eine direkte Proportion zwischen Keimzahl und Höhe der Urease‐Aktivität. Eine Interpolation der Ergebnisse auf eine theoretische Standard‐Suspension ist bei dieser Methode jedoch nicht möglich. Infolgedessen lassen sich mit dieser halbquantitativen Methode auch keine exakt reproduzierbaren Ergebnisse erzielen.

Studies on the reproducibility of the catalase and urease tests

The catalase activity of a Brucella strain is directly proportional to the number of organisms, which means that for each suspension the catalase value can be interpolated in relation to a theoretical standard suspension. In this way the results of catalase tests are reproducible, provided that bacterial counts are carried out very precisely, for which purpose counting chambers provide the best method.

Because catalase activity in Brucella is very constant it is possible to use the catalase test to identify particular strains such as S 19.

There is also a linear relationship between the duration of the reaction time and the height of catalase activity. Thus the catalase values of different authors can be compared even if they have worked not only with different bacterial numbers but also if they used different reaction times.

The urease test of Bauer shows also a direct proportion between bacterial numbers and urease activity but an interpolation of the results in terms of a theoretical standard suspension is not possible with this method. This semiquantitative method fails, therefore, to give exactly reproducible results.

Recherches sur la reproductibilité de l'épreuve de la catalase et de l'uréase

L'activité de la catalase d'une souche de Brucella est directement proportionnelle au nombre de germes employés. Aussi le taux de la catalase obtenu dans chaque suspension de germes peut ětre transposé pour une suspension standard théorique. De cette fačon on peut rendre reproductibles les résultats de l'épreuve de la catalase. Mais pour cela il importe de déterminer exactement le nombre de germes de la suspension utilisée. A cet effet les chambres de numération pour bactéries se montràrent les plus pratiques.

Comme l'activité de la catalase des Brucella est très constante, il est possible d'utiliser l'épreuve de la catalase pour l'identification de souches particulières (par exemple de la souche „Buck 19”).

Il existe également une proportionalité linéaire entre la durée de la réaction et le taux d'activité de la catalase. C'est pourquoi les taux de la catalase de divers auteurs peuvent ětre comparés, měme si ceux‐ci ont travaillé non seulement avec des concentrations bactériennes différentes, mais aussi avec d'autres temps de réaction.

Dans l'épreuve de l'uréase (méthode de Bauer) il existe également une proportionnalité directe entre le nombre de germes et le taux d'activité de la catalase. La transposition des résultats pour une suspension standard théorique n'est pourtant pas possible dans cette méthode. On ne peut obtenir par conséquent avec cette méthode semi‐quantitative des résultats exactement reproductibles.

Estudios sobre la posibilidad de reproducción de la prueba de la catalasa y la ureasa

El grado de actividad catalásica de una cepa Brucella es directamente proporcional al número de gérmenes empleados. Por ello, el valor catalasico obtenido con cada suspensión de gérmenes se puede interpolar frente a una suspensión patrón teórica. De este modo se pueden configurar los resultados de las investigaciones catalásicas de forma reproducible. Ahora bien, condición previa es el exacto recuento de gérmenes de las suspensiones bacterianas utilizadas. Para este efecto, la cámara de recuentos bacterianos resultó ser la más apropiada.

Puesto que la actividad catalásica de las brucelas se comporta de manera muy constante, resulta posible utilizar también la prueba catalásica para la identificación de algunas cepas (p. ej., identificación de la cepa vacunal „Buck 19”).

Entre la duración del tiempo de reacción y el grado de la actividad catalásica existe igualmente una proporción lineal. Debido a ello, pueden comparase los valores catalásicos de diversos autores, incluso cuando éstos han trabajado por un lado con diferentes cantidades de gérmenes y por otro con diversos tiempos de reacción. En la prueba de la ureasa (técnica de Bauer) existe igualmente una proporción directa entre el número de gérmenes y el grado de la actividad ureásica. Sin embargo, en este método no resulta posible la interpolación de los resultados frente a una suspensión patrón teórica. En consecuencia, con esta técnica semicuantitativa tampoco se pueden lograr resultados exactamente reproducibles.