Ανάλυση φυσικών βαφών και οργανικών χρωστικών με Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Πίεσης με ανιχνευτή παράταξης φωτοδιόδων και φασματομετρία μαζών
Authors: Βασιλειάδου Αθηνά 
Published: July 2022

Αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μια μέθοδος HPLC-DAD για την ποσοτική ανάλυση των χρωστικών συστατικών διαφόρων φυσικών βαφών, οι οποίες είναι: αλιζαρίνη, πουρπουρίνη, καρμινικό οξύ, κερμεσικό οξύ, απιγενίνη, κουρκουμίνη, ελλαγικό οξύ, εμοδίνη, φισετίνη, σουλφουρετίνη, καμπφερίδιο, καμπφερόλη, μορίνη και κερκετίνη. Η ένωση 1- Η υδροξυανθρακινόνη ήταν το εσωτερικό πρότυπο. Η μέθοδος επικυρώθηκε ως προς τη γραμμικότητα, το LOD και το LOQ, την ευαισθησία, την ακρίβεια, την ανθεκτικότητα και την ευρωστία. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση μεταξιού βαμμένου με ράμνο, κουρκουμά, ριζάρι, κοκκινίλη και χρυσόξυλο. Τα βαμμένα δείγματα μεταξιού υποβλήθηκαν σε συνθήκες τεχνητά επιταχυνόμενης γήρανσης με υπεριώδη ακτινοβολία (254 mn) και έγιναν ποσοτικές μετρήσεις. Δείγματα μεταξιού βαμμένα με ινδικό, διαλυτό κοκκινόξυλο, ρεζεδά, ριζάρι και ράμνο αναλύθηκαν λαμβάνοντας τα % εμβαδά των ενώσεων για να μελετηθούν περισσότερα συστατικά των βαφών. Μια δεύτερη μέθοδος HPLC-DAD χρησιμοποιήθηκε για την ποσοτική ανάλυση των συστατικών της πορφύρας. Μαλλί και μετάξι βαμμένα με πορφύρα εκτέθηκαν σε τεχνητά επιταχυνόμενη γήρανση. Τα δείγματα συλλέχθηκαν σε διαφορετικά χρονικά διαστήματα γήρανσης και αναλύθηκαν με τη μέθοδο HPLC-DAD. Οι συγκεντρώσεις των κορυφών HPLC των συστατικών μειώθηκαν γρήγορα τις πρώτες πέντε ημέρες της θεραπείας γήρανσης. Σε μεγαλύτερη έκθεση (>10 ημέρες) ο ρυθμός της αποικοδόμησης έγινε πολύ μικρός. Η % σχετική σύσταση των χρωστικών φαίνεται να μην επηρεάζεται από τη διαδικασία αποικοδόμησης.Η επίδραση της υπεριώδους ακτινοβολίας (λ=254 nm) σε μαλλί και μετάξι βαμμένα με πορφύρα και μετάξι βαμμένο με ινδικό, διαλυτό κοκκινόξυλο, κοκκινίλη, ριζάρι, ρεζεδά, χρυσόξυλο, κουρκουμά και ράμνο διερευνώνται επίσης με τη χρήση χρωματομετρίας, SEM και FTIR . Οι χημικές και δομικές αλλαγές του υποστρώματος μαλλιού και μεταξιού διευκρινίστηκαν χρησιμοποιώντας φασματοσκοπία υπέρυθρου μετασχηματισμού Fourier (FTIR) και Ηλεκτρονική Μικροσκοπία Σάρωσης (SEM), αντίστοιχα.Επιπλέον, αναπτύχθηκε μια μέθοδος UHPLC-MS/MS με ηλεκτροψεκασμό (ESI) για την ανίχνευση των προϊόντων αποικοδόμησης του ινδικού και της πορφύρας και τεσσάρων ενώσεων (Ένωση Α, Β, C και D) πορφύρας που ανιχνεύθηκαν πρόσφατα. Η τέσσερεις ενώσεις ανήκουν στην ίδια δομική κατηγορία με την ινδιρουβίνη και τα μονο- και δι-βρωμιωμένα παράγωγά της. Αυτά τα συστατικά έχουν κατά μία μονάδα μικρότερη μάζα από ινδουριβίνη και τα μονο- και δι-βρωμιωμένα παράγωγά της [209] Οκτώ προϊόντα αποικοδόμησης της ινδικοτίνης, όπως η ιστίνη και ο ισατοϊκός ανυδρίτης, εντοπίστηκαν σε πρότυπα διαλύματα (που αφέθηκαν για 30 μέρες σε συνθήκες περιβάλλοντος) ινδικοτίνης και 6-βρωμο-ινδικκοτίνης, σε διάλυμα χρωστικής πορφύρας και σε δείγματα γηρασμένου μεταξιού και μαλλιού. Οι τέσσερεις ενώσεις ταυτοποιήθηκαν σε μικρές ποσότητες σε διάλυμα πορφύρας και σε δείγμα μεταξιού βαμμένο με πορφύρα. Μια νέα προσέγγιση παρασκευής διαλύματος με υδατικά διαλύματα NaOH χρησιμοποιήθηκε για την αραίωση των πρότυπων διαλυμάτων για την ανάλυση με άμεση έγχυση σε MS/MS. Τα υδατικά διαλύματα NaOH επιλέχθηκαν προκειμένου να επιτευχθεί επαρκής ιονισμός στο ESI, επειδή το DMSO, ο διαλύτης στον οποίο αραιώνονται οι ενώσεις της πορφύρας, έχει υψηλό σημείο βρασμού και υψηλό ιξώδες και δεν είναι πλήρως συμβατό με την ανάλυση με άμεση έγχυση σε MS/MS με ESI .