Der Einfluß verschiedener Lagerungstemperaturen auf Infektiosität und Antigenität von Maul‐ und Klauenseuche (MKS)‐Virusstämmen vor und nach Inaktivierung
Authors: Wittmann G. 
Published: August 2010

Der Einfluß verschiedener Lagerungstemperaturen auf Infektiosität und Antigenität von Maul‐ und Klauenseuche (MKS)‐Virusstämmen vor und nach Inaktivierung

Bei sechs O‐, fünf A‐ und fünf C‐Stämmen des MKS‐Virus ist untersucht worden, ob Infektiosität und Antigenität während der Lagerung bei 4 °C (4 Wochen), − 20 °C (18 Wochen) und − 65 °C (19 Wochen) geschädigt werden. Außerdem wurde geprüft, ob eine nachfolgende EEI‐Inaktivierung die Stabilität des immunogenen 140 S‐Antigens beeinflußt. Der Antigennachweis erfolgte mit der doppelten Diffusion im Agar.

Eine Lagerungstemperatur von − 20 °C führte bei allen O‐ und C‐Stämmen sowie bei drei der fünf A‐Stämme zu einem erhöhten Zerfall der Viruspartikel bzw. des 140 S‐Antigens in nicht immunogene 12 S‐Proteinuntereinheiten. Unter den anderen Lagerungsbedingungen war die Mehrzahl der Virusstämme stabil. Lediglich bei O1Lombardei und vier C‐Stämmen war eine gewisse Labilität des Capsids nachweisbar.

Die Schädigung der immunogen wirksamen Virusbestandteile konnte unter den gewählten Testbedingungen weit häufiger mit dem Präzipitationstest als mit dem Infektiositätstest nachgewiesen werden. Während mit dem zuletzt genannten Test nur bei sieben von sechzehn geprüften, bei − 20 °C gelagerten Virusstämmen ein signifikanter Infektiositätsverlust festgestellt werden konnte, war mit dem Präzipitationstest bei vierzehn Stämmen eine Schädigung des 140 S‐Antigens nachweisbar.

Ein schädigender Einfluß der EEI‐Inaktivierung auf das 140 S‐Antigen von frischem sowie bei 4 °C und 65 °C gelagertem Virus konnte nicht nachgewiesen werden. Jedoch ist nicht mit Sicherheit auszuschließen, daß nach ungünstigen Lagerungsbedingungen die EEI‐Inaktivierung zu einer zusätzlichen Schädigung des Viruscapsids führen kann. Andererseits zeigte sich bei O3Venezuela, einem Virus, dessen Capsid bei 37 °C bereits zerfällt, daß EEI bei dieser Temperatur eine Capsid‐stabilisierende Wirkung hatte.

Die Befunde werden, insbesondere im Hinblick auf die Impfstoffherstellung, diskutiert.

The influence of varying storage temperatures on the infectivity and antigenicity of F. and M. virus strains before and after inactivation

Using six 0, five A and five C strains of FM virus the demaging effects of storage at 4 °C (4 weeks), − 20 °C (18 weeks) and − 65 °C (19 weeks) were studied. In addition, the question was examined as to whether subsequent EEI inactivation affected the stability of the immunogenic 140 S antigen. Demonstration of antigen was by double diffusion in agar.

Storage at − 20 °C resulted, in all O and C strains and in 3 of the 5 A strains, in increased damage to virus particles, namely conversion of the 140 S antigen into non‐immunogenic 12 S protein sub‐units. Under the other conditions of storage most of the virus strains remained stable, Occasionally the O1 Lombardy and four C strains showed some lability of the capsids.

Damage to the immunogenically active virus components could be detected more often by the precipitin test than by the infectivity test. Whereas the latter test detected significant loss of infectivity in only 7 of the 16 strains stored at − 20 °C, the precipitin test detected damage to the 140 S antigen in 14 of the strains.

A damaging effect of EI inactivation on the 140 S antigen could not be detected in virus stored at − 4 °C and − 65 °C. It cannot be concluded with certainty, however, that unfavourable conditions of storage result in damage to the virus capsids due to EEI inactivation. On the contrary, inactivation with EEI of O3 Venezuelan virus, the capsids of which had already been damaged at 37 °C, had a capsid‐stabilizing effect.

The findings are discussed in relation to vaccine preparation.

Influence de différentes températures d'entreposage sur l'infectiosité et l'antigénicité de souches du virus de la fièvre aphteuse avant et après inactivation

On a cherché à savoir si l'entreposage à 4 °C (4 semaines), − 20 °C (18 semaines) et − 65 °C (19 semaines) de 6 souches 0,5 souches A et 5 souches C du virus de la fièvre aphteuse avait une influence sur l'infectiosité et l'antigénicité. On a en outre examiné si une inactivation EEI par la suite influencerait la stabilité de l'antigène 140 S immunogène. La mise en évidence de l'antigène s'est faite par double diffusion sur agar.

Une température d'entreposage de − 20 °C provoqua une destruction élevée de la particule virale et le changement de l'antigène 140 S en sousunités non immunogènes 12 S chez toutes les souches O et C ainsi que chez trois des cinq souches A. La plupart des souches virales furent stables dans les autres conditions de conservation. On a remarqué uniquement une certaine labilité de la capside chez la souche O1Lombardei et quatre souches C.

L'atteinte des parties actives et immunogènes du virus a pu être beaucoup plus fréquemment démontrée dans les conditions de tests choisies avec le test de précipitation qu'avec le test d'infectiosité. Alors que le test d'infectiosité n'a pu établir une perte d'infeciosité significative que chez 7 sur 16 souches virales entreposées à − 20 °C, le test de précipitation a montré une atteinte de l'antigène 140 S chez 14 souches. Une influence dommageable de l'inactivation EEI sur l'antigène 140 S du virus frais et entreposé à 4 °C et à − 65 °C n'a pas été démontrée. On ne peut cependant conclure avec sûreté qu'après de mauvaises conditions d'entreposage, l'inactivation EEI puisse amener à un dommage supplémentaire de la capside du virus. Par contre l'inactivation EEI avait une action de stabilisation de la capside à 37 °C chez un virus O3Vénézuela dont la capside se détériorait à cette température.

On discute les résultats en fonction particulièrement de la préparation du vaccin.

El influjo de varias temperaturas de almacenamiento sobre la infecciosidad y antigeneidad de estirpes virósicas aftosas antes y después de la inactivación

En seis estirpes O, cinco A y cinco C del virus aftoso, se examinó si son deterioradas la infecciosidad y antigeneidad durante el almacenamiento a 4 °C (4 semanas), − 20 °C (18 semanas) y − 65 °C (19 semanas). Además se contrastó si la inactivación ulterior con EEI influye sobre la estabilidad del antígeno inmunógeno 140 S. La identificación del antígeno se verificaba con la difusión doble en agar.

La temperatura de almacenamiento de − 20 °C conducía en todas las estirpes O y C, así como en tres de cinco estirpes A, a una desintegración aumentada de las partículas víricas resp. del antígeno 140 S en subunidades proteicas 12 S no inmunógenas. Bajo las condiciones restantes de almacenamiento era estable la mayoría de las estirpes virales. Solo en O1‐Lombardía y cuatro estirpes C era demostrable cierta labilidad del cápside.

El detrimento de los componentes virósicos inmunógenamente activos se pudo poner de manifiesto bajo las condiciones elegidas de prueba muchas veces más con la técnica de precipitación que con el test de infecciosidad. Mientras que con este último test solo en siete estirpes de virus de dieciseis examinadas, almacenadas a − 20 °C, se pudo comprobar una pérdida significante en la infecciosidad, con la prueba de precipitación se logró reconocer en catorce estirpes una extorsión en el antígeno 140 S.

No se pudo probar ningún influjo nocivo de la inactivación con EEI sobre el antígeno 140 S tanto del virus fresco como del almacenado a 4 °C y − 65 °C. Sin embargo, no se puede excluir con seguridad el que tras condiciones desfavorables de almacenamiento pueda conducir la inactivación por EEI a un perjuicio aditivo del cápside viral. Por otra parte, se vió en O3‐Venezuela, un virus cuyo cápside ya se desintegra a 37 °C, que la EEI ejercía a esta temperatura una acción estabilizadora sobre el cápside.

Los hallazgos se discuten, sobre todo, con respecto a la elaboración de la vacuna antiaftosa.