PENINGKATAN KERAGAMAN GENETIK PURWOCENG MELALUI IRADIASI SINAR GAMMA DAN SELEKSI IN VITRO
Authors: ROOSTIKA IKA , DARWATI IRENG , YUDIWANTI YUDIWANTI 
Published: June 2020

<p>ABSTRAK<br />Peningkatkan keragaman genetik purwoceng memerlukan aplikasi<br />teknologi alternatif yang mampu membentuk keragaman baru. Tujuan<br />penelitian adalah untuk meningkatkan keragaman genetik dan toleransi<br />purwoceng terhadap cekaman suhu tinggi melalui iradiasi dan seleksi in<br />vitro. Tahapan penelitian meliputi induksi mutasi kalus embriogenik<br />dengan sinar gamma, seleksi in vitro dengan cekaman suhu tinggi, induksi<br />perakaran  somaklon  putatif,  analisis  keragaman  genetik  secara<br />flowcytometry, dan aklimatisasi somaklon putatif. Iradiasi dilakukan pada<br />dosis 0, 1, 2, 3, 4, dan 5 Krad sedangkan seleksi in vitro dilakukan pada<br />tiga level suhu (20, 25, dan 30 0 C). Induksi perakaran dilakukan dalam dua<br />tahap, dengan menggunakan media DKW atau MS yang mengandung<br />sukrosa 3-6% dengan penambahan IBA atau NAA taraf 0,5-1,5 ppm. Hasil<br />penelitian menunjukkan bahwa kalus purwoceng mampu bertahan hidup<br />pada dosis iradiasi tertinggi (5 Krad). Meningkatnya dosis iradiasi<br />cenderung meningkatkan pendewasaan embrio somatik. Pada tahap seleksi<br />in vitro, kalus purwoceng mampu tumbuh pada kondisi suhu tertinggi<br />(30 0 C). Tingkat proliferasi kalus yang tinggi dan jumlah embrio somatik<br />terbanyak diperoleh dari perlakuan suhu 25 0 C. Embrio somatik yang<br />terbentuk dari perlakuan suhu tinggi tersebut merupakan kandidat<br />somaklon yang toleran suhu tinggi pada lingkungan dataran rendah.<br />Diantara embrio somatik yang terbentuk, hanya embrio yang berasal dari<br />perlakuan suhu 20 0 C saja yang berhasil membentuk planlet. Media yang<br />terbaik untuk induksi perakaran adalah media MS yang mengandung<br />sukrosa 4% dengan penambahan NAA 1,5 ppm. Analisis ploidi pada daun<br />embrio somatik menunjukkan terbentuknya varian yang bersifat tetraploid<br />(4x).<br />Kata kunci: Pimpinella pruatjan, iradiasi sinar gamma, seleksi in vitro,<br />keragaman genetik, suhu tinggi</p><p>ABSTRACT<br />To improve new pruatjan genetic variations, the alternative<br />technology should be applied. The objective of the research was to increase<br />pruatjan genetic variation and tolerance to the high temperature through<br />induced mutation and in vitro selection. The steps of this study were induced<br />mutation of embryogenic callus by gamma irradiation, in vitro selection, root<br />induction of putative somaclones, genetic variation analysis by flowcytometer,<br />and putative somaclones acclimatization. The dosages of gamma irradiation<br />were 0, 1, 2, 3, 4, and 5 Krad. In vitro selection was conducted at three<br />temperatures (20, 25, and 30 0 C). The root induction was conducted in two<br />steps by using DKW or MS media containing of 3-6% sucrose with<br />addition of 0.5-1.5 ppm IBA or NAA. The result showed that embryogenic<br />calli could survive after treatment of the highest gamma irradiation dose. It<br />tends to increase the maturation of somatic embryos. During in vitro<br />selection, embryogenic calli could grow at the highest temperature but the<br />highest callus proliferation and the number of somatic embryos were<br />obtained from 25 0 C. The somatic embryos survived and grew at the high<br />temperature are assumed as somaclones which considered as the<br />candidates of tolerant plants to high temperature that can be developed in<br />the of low altitude area. Among the regenerated somatic embryos, only the<br />20 0 C-derived embryos were successfully form plantlets. The best medium<br />for root induction was MS basal medium containing of 4% sucrose<br />supplemented with 1.5 ppm NAA. The ploidy analysis of somatic embryos<br />leaf showed a tetraploid (4x) variant.<br />Key words: Pimpinella pruatjan, gamma irradiation, in vitro selection,<br />genetic variation, high temperature</p>