Hämagglutination und Hämolyse durch einen eiadaptierten Stamm des Osttyps des amerikanischen Pferdeencephalitis‐Virus II. Mitteilung: Untersuchungen über den Agglutinationsmechanismus und die Hemmung der Hämolyse*
Authors: Mussgay Manfred 
Published: September 2010

Der Mechanismus der Adsorption des EEE‐Hämagglutinins und der HA‐ und Hämolysereaktion wurde experimentell untersucht. Das hämagglutinierende und hämolysierende Prinzip wurde aus EEE‐infizierten Hühnerembryonen mittels Aceton‐ätherextraktion gewonnen. Bei der HA‐ und Hämolysereaktion waren durch änderung der Temperatur, Salz‐ und Wasser‐stoffionenkonzentration zwei Phasen zu unterscheiden. Die erste Phase wird als eine elektrostatische Adsorption gedeutet, während die zweite Phase den Charakter einer Fermentreaktion besitzt und zu Hämolyse und stabilen Agglutinaten führt. Bei diesen Untersuchungen wurde die Feststellung gemacht, daß die Inaktivierung des Hämagglutinins bei der für die HA‐Reaktion notwendigen Wasserstoffionenkonzentration und Temperatur durch eine hohe Salzkonzentration verzögert wird.

Die Hämolyse konnte während ihres Ablaufes durch Lecithin und zu Beginn der Reaktion durch eine Komponente des Mäuseserums gehemmt werden.

In der Ultrazentrifuge sedimentierte die hämagglutinierende und hämolysierende Aktivität mit dem infektiösen Prinzip.

Ein mögliches Reaktionsschema wird diskutiert.

Haemagglutination and haemolysis by an egg‐adapted strain of the Eastern type of the American equine encephalomyelitis virus

II. Studies on the agglutination mechanism and on inhibition of haemolysis

The haemagglutinating and haemolysing factors were obtained by acetoneether extraction of chick embryos infected with the virus. By changing the temperature, salt concentration and Ph, two phases could be distinguished in the haemagglutination and haemolysis reactions. The first phase is interpreted as an electrostatic adsorption and the second is enzymic in character and leads to haemolysis and stable agglutinates. Inactivation of haemagglutinins at the Ph and temperature necessary for the haemagglutinin reaction to occur was found to be hindered by high salt concentrations.

Haemolysis could be hindered during its course by lecithin and at its commencement by a component of mouse serum.

In the ultracentrifuge the haemagglutinating and haemolysing activity came down along with the infective principle.

A possible scheme to explain these reactions is discussed.

Recherches sur le mécanisme de l'agglutination et sur l'inhibition de l'hémolise

Le mécanisme de l'adsorption de l'hémagglutinine EEE (souche est du virus américain de l'encéphalite du cheval) et de la réaction d'hémagglutination et d'hémolyse fut étudié expérimentalement. Le principe hémagglutinant et hémolysant fut extrait à l' acétone‐éther à partir d'embryons de poulets infectés par le virus EEE. Dans la réaction d'hémagglutination et d'hémolyse il nest nécessaire de distinguer deux phases dépendant de la température, de la concentration saline et des ions d'hydrogène. La première phase est interprétée comme une adsorption électrostatique, tandis que la seconde phase possède le caractère d'une réaction fermentative et provoqua une hémolyse et des agglutinats stabiles. Lors de ces recherches on constata que l'inactivation de l'hémagglutinine est retardée par une concentration saline élevée au pH et à la température nécessaires pour la réaction d'hémagglutination.

Le cours de l'hémolyse put être inhibé par la lécithine et au début de la réaction par une fraction du sérum de souris.

Dans l'ultracentrifuge le principe hémagglutinant et hémolysant se trouvait dans le sédiment avec le principe infectieux.

Un schéma de réaction possible est discuté.

Investigaciones sobre el mecanismo de la aglutinación y la inhibición de la hemolisis

Se estudió experimentalmente el mecanismo de adsorción de la hemoaglutinina de la encefalitis equina oriental (EEE) y de la reacción de hemoaglutinación y hemolisis. El principio hemoaglutinante y hemolizante se obtuvo mediante extracciones con acetona‐éter de embriones de pollo infectados por el virus de la EEE. En la reacción de hemoaglutinación y hemolisis se podían distinguir dos fases distintas al alterar la temperatura, concentración salina y la de los hidrogeniones. La fase primera se interpreta como la adsorción electrostática, mientras que la fase segunda tiene el carácter de una reacción fermentativa y conduce a la hemolisis y aglutinados estables. Durante estas investigaciones se llegó a apreciar que la inactivación de la hemoaglutinina por la concentración de iones hidrógeno y temperatura precisas para la reacción de la hemoaglutinación, se retrasa mediante una concentración salina elevada.

La hemolisis se pudo inhibir con la lecitina durante su curso y por un componente del suero de ratón al principio de la reacción.

En la ultracentrífuga sedimentó la actividad hemoaglutinante y hemolizante con el principio infeccioso.

Se discute un posible esquema de reacción.