Nadweis von Oestradiol‐17 ß‐Rezeptoren im Knochenmark des Hundes
Authors: Elling H. , Ungemach F. R. , Staimer Susanne 
Published: August 2010

Klinische und pathologisch‐anatomische Befunde ergaben Anhaltspunkte für die Myelotoxizität oestrogen wirksamer Substanzen beim Hund. Mit Hilfe zweier vollständig verschiedener Techniken wurde das Vorkommen von Oestrogenrezeptoren im Knochenmark des Hundes untersucht. Mit dem Radio‐Rezeptor‐Test konnten spezifische, absättigbare Bindungsstellen für Oestradiol‐17 ß im Knochenmark nachgewiesen werden. Mittels Scatchard‐Analysen wurde gezeigt, daß die bindenden Moleküle geringe Kapazität und hohe Affinität mit Dissoziationskonstanten von 4,6 bis 15,3 × 10−9mol/l besaßen. Am Rezeptor wurden 29–38 fmol Hormon/mg Cytosol‐Protein gebunden. Durch die Bindung von fluoreszeinkonjugiertem Oestradiol‐17 ß am Knochenmarks‐Gefrierschnitt konnte die Existenz von Oestradiol‐Rezeptoren auch morphologisch verifiziert werden. Mit dieser fluoreszenz‐histochemischen Technik kann jedoch keine Aussage darüber gemacht werden, welche Knochenmarkszellen das Steroid spezifisch binden. Unsere Ergebnisse lassen daran denken, daß Oestrogene beim Hund über entsprechende Rezeptoren einen direkten myelotoxischen Effekt ausüben.

Danksagung

Für die ausgezeichnete technische Assistenz sagen wir Frau E. Kemper ein herzliches Vergelt's Gott.

Demonstration of Oestradiol‐17 ß‐receptors in the bone marrow of the dog

Clinical and pathological findings displayed evidence for myelotoxicity of oestrogens in the dog. Using two different techniques we investigated the occurrence of oestrogen receptors in canine bone marrow. With a radio‐receptor‐assay, specific, saturable binding sites for oestradiol‐17 ß could be demonstrated. The use of Scatchard analyses showed binding sites of small capacity and high affinity for oestradiol‐17 ß, with a dissociation binding constant of 4.6 to 15.3 × 10−9mol./l.; the binding capacity of the receptors amounted to 29–38 fmol./mg. cytosol‐protein. By a fluorescent‐histochemical technique the presence of oestrogen receptors in canine bone marrow could also be shown morphologically. By the use of this method, however, no conclusion can be drawn about the type of bone marrow cells which bind fluorcscein‐conjugated estradiol.

Our findings suggest that oestrogens exhibit direct myelotoxic effects on canine bone marrow via specific oestrogen receptors.

Mise en évidence de récepteurs d'oestradiol‐17 ß dans la moëlle osseuse du chien

Des résultats cliniques et pathologiques ont fait penser à une myélotoxicité de la part de substances oestrogènes actives chez le chien. On a examiné l'apparition de récepteurs d'oestrogène dans la moëlle osseuse à l'aide du test radio‐récepteur. Des analyses de Scatchard ont montré que les molécules de liaison possédaient une faible capacité et une forte affinité avec des constantes de dissociation de 4,6 à 15,3 × 10−9mol/l. La capacité de liaison des récepteurs fut de 29–38 fmol/mg cytosol‐protéine. L'existance de récepteurs d'oestradiol a également pu être morphologiquement vérifiée par la liaison d'oestradiol‐17 β conjugué à la fluorescéine sur des coupes congelées de moëlle osseuse. Cette technique histochimique de fluorescence n'a pas permis de déterminer quelles cellules de la moëlle osseuse liaient spécifiquement le stéroïde. Ces recherches permettent de penser que des oestrogènes exercent un effet myélotoxique direct par des récepteurs correspondants.

La identificatioón de receptores de oestradiol‐17 ß en la medula ósea de perras

Los hallazgos clínicos e histopatológicos pusieron de manifiesto la evidencia de mielotoxicidad de los estrógenos en las perras. Usando dos técnicas diferentes, estudiamos la presencia de receptores de estrógenos en la medula ósea canina. Con una prueba radio‐receptora se pudieron identificar en la medula ósea puntos específicos de unión saturables con oestradiol‐17 ß. Mediante el análisis según Scatchard se pudo mostrar que las moléculas de enlace poseían una capacidad escasa y una afinidad elevada para oestradiol‐17 ß, con una constante de disociación de 4,6 hasta 15,3 × 10−9mol./l. La capacidad de ligazón de los receptores ascendió a 29–38 fmol. hormona/mg. citosol‐proteína. Por medio de la unión de oestradiol‐17 ß, conjugado con fluoresceína, en la criotomía de la medula ósea, también se pudo verificar morfológicamente la existencia de receptores de oestradiol. Sin embargo, con esta técnica fluorescente‐histoquímica no se puede expresar qué clase de células de la medula ósea fijan específicamente el esteroide. Nuestros resultados sugieren que los estrógenos ejercen en la perra un efecto mielotóxico directo a través de receptores específicos.