Analysis of the association of VW (T2385C) and VEGFA (G634C) gene polymorphism with the development of non-alcoholic liver steatosis in obese women during menopause
Authors: Булатова И.А. , Соболь А.А. , Гуляева И.Л. 
Published: October 2022

Введение. Неалкогольный стеатоз печени (НАСП) является наиболее распространенным клинико-морфологическим вариантом неалкогольной жировой болезни печени. Нарушения внутрипеченочной гемодинамики при патологии печени нередко связывают с повреждением эндотелиальной выстилки синусоидов и развитием эндотелиальной дисфункции (ЭД). В последние годы повышается интерес исследователей к оценке роли генетических факторов развития и прогрессирования заболеваний. Цель работы - исследование комбинации аллельных вариантов генов VWF в регионе -2385Т/C, VEGFA в регионе -634G/C и определение концентрации васкулоэндотелиального фактора роста (vascular endothelial growth factor - VEGF) и антигена фактора Виллебранда (vWFAg) в крови у женщин с неалкогольным стеатом печени и ожирением в периоде менопаузы, проживающих в Перми. Методика. Обследовано 60 пациенток с НАСП и ожирением в менопаузе, средний возраст 50,9 ± 1,1 лет. Контрольная группа состояла из 60 здоровых женщин в менопаузе без ожирения. Методом иммуноферментного анализа на анализаторе «Stat-Fax 2100» (США) в крови исследовали концентрацию VEGF с применением набора «VEGF-ИФА-БЕСТ» (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск) и vWFAg с помощью набора «TECHNOZYM vWF:Ag ELISA» (США). Однонуклеотидные полиморфные варианты генов изучали с использованием аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени на детектирующем амплификаторе «CFХ-96» («Bio-RadLaboratories, Inc.», США) с применением праймеров «SNP-Скрин» (ЗАО «Синтол», Москва). Результаты. Развитие неалкогольного стеатоза печени у женщин с ожирением в менопаузе сопровождается развитием ЭД и активацией процессов неоангиогенеза с повышением концентрации VEGF (р=0,001) и vWFAg (р=0,041). При анализе аллельных вариантов гена VEGFA (G-634C) гомозигота СС и рецессивный аллель С значимо чаще обнаруживались в когорте пациенток с НАСП в 21,67% (р=0,04) и 45% случаев (р=0,04), а у здоровых женщин лишь в 8,33% и 33,33% соответственно. У женщин с ожирением, имеющих рецессивные гомозиготы СС по гену VWF (T-2385C) в 3,04 раза увеличивается вероятность развития НАСП по рецессивной модели наследования. Была выявлена ассоциация полиморфизма гена VWF (T-2385C) с выработкой vWFAg (р=0,041). Заключение. Носительство аллеля С генов VWF в регионе -2385Т/С и VEGFA в регионе -634G/C в виде генотипа СС может являться фактором риска развития НАСП у женщин с ожирением в период менопаузы.

Non-alcoholic hepatic steatosis (NAHS) is the most common clinical and morphological variant of non-alcoholic fatty liver disease. The pathogenesis of NAHS is multifactorial. Alterations of intrahepatic hemodynamics associated with liver pathology often result in damage to the endothelial lining of sinusoids and endothelial dysfunction. In recent years, the interest of researchers in assessing the role of genetic factors in the development and progression of diseases has increased. Аim: To determine the blood concentrations of vascular endothelial growth factor (VEGF) and Willebrand factor antigen (vWFAg) and to investigate combinations of allelic variants of the VWF genes in the region -2385T/C and VEGFA in the region -634G/C in menopausal women with NAHS and obesity. Methods. 60 patients, living in Perm, with NAHS and menopausal obesity aged 50.9 ± 1.1 yrs were examined. The control group consisted of 60 healthy, non-obese, menopausal women. By employing enzyme immunoassay (Stat-Fax 2100, USA), the blood concentrations of VEGF were measured using the VEGF-ELISA-BEST kit (ZAO Vector-Best, Novosibirsk) and of vWFAg using the TECHNOZYM vWF:Ag ELISA kit (USA). Single nucleotide polymorphic variants of genes were studied using allele-specific, real time polymerase chain reaction on a CFX-96 detecting amplifier (Bio-Rad Laboratories, Inc., USA) and using the SNP-Screen primers (ZAO Syntol, Moscow). Results. The development of NAHS in obese menopausal women was accompanied by endothelial dysfunction and activation of neoangiogenesis, as indicated by increases in VEGF (p=0.001) and vWFAg (p=0.041). The CC homozygote and the recessive C allele allelic variants of the VEGFA gene (G-634C) were more often detected in the NAHS patients, 21.7% (p=0.04) and 45% (p=0.04), respectively. These values in healthy women were only 8.3% and 33.3%, respectively. Obese women who had recessive homozygotes of CC in the VWF gene (T-2385C) had a 3.04-fold higher probability of developing NAHS, according to the recessive inheritance model. Polymorphism of the VWF gene (T-2385C) was associated with the production of vWFAg (p=0.041). Conclusion. Carrying the C allele of VWF genes in the region -2385T/S and VEGFA in the region -634G/C in the form of the CC genotype may be a risk factor for the development of NAHS in obese women during menopause.