The Value of Enzyme‐linked Immunosorbent Assay (ELISA) in the Sero‐diagnosis of Canine Dermatophytosis Due to Microsporum Canis
Authors: PINTER LJILJANA , NOBLE WILLIAM C. , ELLIS JULIA , CICLITIRA PAUL J. 
Published: March 2008

Abstract— Fourteen sera from dogs naturally or experimentally infected with Microsporum canis were examined by enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) in order to study the humoral response to infection. A group of 12 animals (7 laboratory dogs and 5 dogs from the natural environment) was used as controls. ELISA optical density (OD) values in twofold serial dilutions from 1:100 to 1:51200 were compared between the groups. Significant antibody response to infection with M. canis was observed in naturally and experimentally infected animals and confirmed by threshold determination. Specificity for the dermatophyte fungi was tested by performing cross‐reactivity assays with three fungal antigens, Malassezia pachydermatis, Candida albicans and Aspergillus fumigatus. There were no statistically significant indications of cross‐reactions, except with anti‐A. fumigatus IgG, where differences were noticed within the groups of naturally infected animals and controls. The use of ELISA technique in sero‐diagnosis of dermatophytosis in dogs is discussed.

Résumé— 14 sérums chiens infectés naturellement ou expérimentalement par Microsporum canis ont été testés par une technique Immunoenzymatique (ELISA) pour étudier la réponse immunitaire humorale à cette infection. Le groupe témoin était composé de 12 animaux (7 chiens de laboratoire et 5 chiens d'un milieu naturel). Les valeurs de densité optique (DO) obtenues avec des dilutions sériées de raison 2 des sérums (1:100 à 1:51,500) ont été comparées entre chaque groupe. Des taux significativement élevés d'anticorps spécifiques de Microsporum canis ont été retrouvés chez les animaux infectés naturellement et expérimentalement et confirmés par l'établissement d'un seull de positivité. La spécificité de la technique vis‐à‐vis des dermatophytes a été appréciée en effectuant des tests d'antigénicité croisée avec des Malassezia pachydermatis, Candida albicans et Aspergillus fumigatus. II n'y avait pas de réactions croisées significatives, exception faite des IgG spécifiques d'A. fumigatus, pour lequel il existait des differences de réponse entre les animaux infectés naturellement et le groups témoin. L'utilisation d'une technique ELISA dans le diagnostic des dermatophyties canines est discutées.

Zusammenfassung— Vierzehn Seren von Hunden, die natürlich oder experimentell mit Microsporum canis infiziert waren, wurde mit dem ELISA‐Verfahren (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) untersucht, um die humorale Antwort auf die lnfektion zu verfolgen. Eine Gruppe von 12 Tieren (7 Laborhunde und 5 Hunde aus normaler Haltung) dienten als Kontrolle. ELISA‐optische Dichtewerte (OD) in zweifacher serieller Verdünnung von 1:100 bis 1:51200 wurden zwischen beiden Gruppen verglichen. Bei den natürlich und experimentell infizierten Tieren konnte eine signifikante Antikörperreaktion auf die lnfektion mit M. canis beobachtet und durch Schwellenwertbestimmung bestätigt werden. Die Spezifität für Dermatophyten wurde überprüft, indem Kreuzreaktionsproben mit drei Pilzantigenen, Malassezia pachydermatis, Canidida albicans und Aspergillus fumigatus, durchgeführt wurden. Statistisch signifikante Anzeichen für Kreuzreaktionen konnten nicht nachgewiesen werden, außer bei Anti‐A. fumigatus‐IgG, bei dem Unterschiede innerhalb der Gruppe der natürlich infizierten und der Kontrolltiere beobachtet wurden. Es wird über die Brauchbarkeit der ELISA‐Technik für die Serodiagnose von Dermatophyten bei Hunden diskutiert.

Resumen  Se examinaron un total de 14 sueros procedentes de perros infectados de forma natural y artificial con Microsporum canis por el método de enzima ligado de inmunoabsorbencia, (ELISA), con el fin de estudiar la respuesta humoral a la infección. Como controles, se usaron un grupo de 12 animales (7 perros de laboratorio y 5 perros que vivían en condiciones naturales). Los valores de densidad óptica ELISA, (OD), fueron comparados entre los grupos en dos diluciones seriadas de 1:100 a 1:51,200. Una respuesta significativa de anticuerpos a la infección con Microsporum canis fue observada en perros infectados de forma natural y artificial, y confirmada por la determinación del punto crítico. La especificidad del dermatofito füngico se estudió por medio de ensayos de reactividad cruzada con otros tres antigenos fúngicos, Malassezia pachydermatis, Candida albicans y Aspergillus fumigatus. No se encontraron indicaciones de reacciones cruzadas estadísticamente significativas, excepto con la IgG de A. fumigatus, donde se advirtieron diferencias en el group de animales infectados naturalmente y en el grupo control. El uso de la téchnica ELISA en el diagnóstico serólogico de las dermatofilosis en el perro, es discutido.