Aus Saccharomyces cerevisiae isolierte LILAs (Lipid‐like leukocyte activators) induzieren Kalziumeinstrom in humane neutrophile Granulozyten
Authors: Bülow M. , Kahlke Barbara , Brasch J. , Christophers E. , Schröder J.‐M. 
Published: April 2009

Zusammenfassung. Kürzlich wurden von unserer Arbeitsgruppe aus Candida albicans, der nichtpathogenen Hefe Saccharomyces cerevisiae sowie verschiedenen Dermatophyten neue funktionell gleichwertige panchemotaktische Faktoren (Lipid‐like leukocyte activators = LILAs) isoliert, die für humane neutrophile und eosinophile Granulozyten sowie Monozyten chemotaktisch sind. In dieser Studie wurden die Mobiljsierung des intrazellulären second messengers Kalzium in neutrophilen Granulozyten durch LILA gemessen sowie Deaktivierungsexperimente mit bekannten Chemotaxinen durchgerührt, um die Frage zu klären, ob es Hinweise für einen LILA‐spezifischen Rezeptor auf neutrophilen Granulozyten gibt. Als Methodik wurde die Messung der intrazellulären Kalziumkonzentration mit Hilfe eines Fluoreszenzindikators angewendet. Deaktivierungsexperimente wurden mit den bekannten Neutrophilenaktivatoren 5‐Oxo‐eicosatetraensäure, Leukotrien B4, Plättchen aktivierender Faktor, C5a, Interleukin‐8 und N‐Formyl‐Methionyl‐Leucyl‐Phenylalanin (FMLP) durchgeführt. Die intrazelluläre Kalziumkonzentration wurde mittels Fluoreszenz‐Indikator FURA‐2/AM gemessen. Als Ergebnis konnte ein signifikanter dosisabhängiger Anstieg der intrazellulären Kalziumkonzentration in neutrophilen Granulozyten nach einer Stimulation mit LILA nachgewiesen werden. Eine Kreuzdeaktivierung der LILA‐vermittelten Stimulation durch die bekannten Chemotaxine war nicht möglich. Unsere Ergebnisse zeigen, daß LILA zusätzlich zur panchemotaktischen Aktivität ein intrazelluläres Kalziumsignal induziert. Dies weist auf einen Signaltransduktionsweg hin, der Kalzium als second messenger verwendet. Die Ergebnisse der Deaktivierungsexperimente sprechen für einen LILA‐spezifischen Rezeptor auf neutrophilen Granulozyten.

Summary. Recently, we isolated some new and functionally identical panchemotactic factors (Lipid‐like leucocyte activators = LILAs) from Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae and various dermatophytes, which are chemotactic for human neutrophilic and eosinophilic granulocytes as well as for monocytes. In order to answer the question, whether human neutrophilic granulocytes express a specific receptor for LILA, we now investigated the mobilisation of the intracellular second messenger calcium within human neutrophils which were stimulated with LILA. Furthermore, LILA‐mediated activation of neutrophils was subjected to desensitisation experiments with the well known neutrophil activators 5‐oxo‐eicosatetraenoic acid, leukotriene B4, platelet activating factor, C5a, Interleukin‐8, and N‐formyl‐methionyl‐leucyl‐phenylalanin (FMLP). The intracellular calcium concentration was measured by use of the fluorescence indicator FURA‐2/AM. As a result we were able to show a significant dose‐dependent increase in the intracellular calcium concentration after stimulation of human neutrophils with LILA. The desensitisation experiments revealed no cross‐desensitisation between LILA and the well known stimuli. Our results show that LILA induces an intracellular calcium signal in addition to its panchemotactic activities. Therefore calcium may act as second messenger in LILA‐stimulated activation of neutrophils. Since LILA‐mediated activation was maintained in the clesensitisation experiments, LILA‐specific receptors may be present on human neutrophils.