Сryopreservation of Platelets and Integral Assessment of Their Functional Properties
Authors: Дашкевич Э.В. , Романчук И.А. , Коледа И.Н. 
Published: July 2024

Технология криоконсервирования тромбоцитов необходима для создания безопасных банков тромбоцитных компонентов крови (ТКк), типированных по АВ0, HLA и HPA системам, при аллоиммунизации и рефрактерности. Исследование посвящено выбору консервантов, техники заготовки и интегральной оценке тромбоцитного компонента крови. Материалами были 23 образца тромбоцитного концентрата (ТК), полученные на различных сепараторах клеток крови. В качестве криопротектора (КП) применялся диметилсульфоксид (ДМСО) и глицерол. Проведение контроля качества: количество тромбоцитов – на гематологическом анализаторе Sysmex KX 21N, содержание остаточных лейкоцитов – на анализаторе ADAM-rWBCNanoentek, уровень pH – на универсальном ионометре ЭВ-74. Оценка качества тромбоцитов в концентрате проводилась на основании анализа параметров: выраженность феномена «метели» в ТК в проходящем свете, наличие макроагрегатов, общее количество тромбоцитов в дозе ТК, процент восстановления тромбоцитов после размораживания, микроскопия мазка после окраски по Май-Грюнвальду в световом микроскопе, дифференциальная оценка тромбоцитов по модифицированной шкале Куницкого с подсчетом процента в трех морфологических группах и расчетом интегрального показателя (ИП). Выполнялась агрегатометрия в образцах ТК. Результаты. Качество ТКк зависит от качества исходного ТК (от донора, от сепаратора клеток крови, КП и проч.). Так, при подготовке к замораживанию концентратов тромбоцитов, заготовленных на аппарате MCS+, Trima, на стадиях фракционирования (центрифугирования) отмечалось 58% и 65% пригодных для криоконсервирования образцов соответственно. Все образцы, заготовленные на аппарате AmiCORE, были пригодны для замораживания. ТК, замороженный в камере сепарации аппарата AmiCORE, показывает хороший ИП 84–94%. Свойства ТКк сохраняются в течение 2 часов после размораживания. Результаты изучения стабильности ТКк с использованием ИП указывают на сохранность параметров в течение 3, 6, 9 и 12 месяцев хранения.

The technology of platelet cryopreservation is necessary to create safe banks of PCs typed according to AB0, HLA and HPA systems in case of alloimmunization and refractoriness. The study is devoted to the preservatives choice, preparation techniques and integral assessment of the platelet components of blood. The materials were 23 platelet concentrate (PC) samples obtained on various blood cell separators. Dimethylsulfoxide (DMSO) ore glycerol were used as cryopreservatives (CP). Carrying out quality control: the amount of platelets – on the hematological analyzer Sysmex KX 21N, the content of residual leukocytes – on the ADAM-rWBCNanoentek analyzer, pH level – on the universal ion meter EV-74. The quality of PC was carried out based on the parameters analysis: the severity of the "swirling" phenomenon in PC in transmitted light, the presence of macroaggregates, the total number of platelets in a dose of PC, the platelet recovery percent, light microscopy of a smear after May-Grunwald staining, platelet percent in three morphological groups, modified Kunitsky scale with differential assessment and calculation of integral index (II). Agregometry was performed on PC samples. Results. The quality of cryopreserved platelets (CPP) depends on the quality of the original PC (from the donor, from the blood cell separator, CP, etc.). So, when preparing PC to cryopreservation from the MCS+ ore Trima cell separators at the fractionation stage (centrifugation) 58% and 65% of suitable samples were noted for freezing respectively. All of PCs from AmiCORE cell separator were suitable for freezing. Platelets frozen in the separation chamber of the AmiCORE device show good II of 84–94%. The properties of CPP are saved mainly for 2 hours after thawing. The results of studying stability of CPP using II indicate the safety of the parameters after 3, 6, 9 and 12 months of storage.