Bestimmung der osmotischen Resistenz von Eberspermien und deren Beziehungen zur Konservierungsfähigkeit von Samenproben
Authors: Schilling Von E. , Vengust M. 
Published: October 2007

Inhalt

An 34 Besamungsebern rnit insgesamt 482 Ejakulaten wurde das osmotische Verhalten der Samenzellen in Verdünnern mit unterschiedlichen Osmolalitäten (von 150 bis 500 mosm/kg) untersucht. Beurteilungskriterium war die Feststellung des %‐Anteils von Spermien mit normalem akrosomalen Rand (NAR) nach Inkubation von 0,2 ml Nativsperma in 3 ml der osmotischen Testlösungen bei 39 °C für 15 und 120 Minuten. Bereits nach 15 Minuten Inkubationszeit, deutlicher aber nach 120 Minuten, war in den nicht isotonen Testlösungen ein quantifizierbarer Rückgang im NAR erfolgt. Die Unterschiede zwischen Ejakulaten und zwischen Ebern waren groβ, innerhalb von Ebern klein. Es bestanden enge und signifikante Korrelationen zwischen dem Rückgang in den NAR‐Werten bei 150 und 500 mosm/kg und den NAR‐Werten in konservierten Samenproben nach Auftauen oder 3täpger Lagerung. Noch engere Beziehungen ergabensich durch Berechnung eines osmotischen Resistenzwertes (ORT‐Wert), der definiert wurde als

ORT = 1 /2 [NAR in isotonem Medium/nach 15 minuten +% NAR bei 150 od. 500 mosm/kg/nach 15 oder 120 Minuten

Der hypotone ORT‐Wert für 120 Minuten ist der genaueste. Die hypotonen ORT‐Werte (für 120 Minuten) variierten zwischen Ebern von 44–76 mit kleiner Variabilität innerhalb von Ebern. Die Unterschiede in den ORT‐Werten zwischen Ejakulaten aller 34 untersuchten Eber waren gröβer, mit Einzelwerten zwischen 34–83. Eine Gruppierung der Eber nach ihren ORT‐Werten in “gute”, “mittlere” und “schlechte” entsprach weitgehend einer Gruppierung dieser Eber nach der Spermienqualität in ihren konservierten Samenproben. Auch eine Klassifizierung der ORT‐Werte von Ejakulaten in “gute”, “mittlere” und “schlechte” ergab eine weitgehend zuverlässige Einstufung der Ejakulate nach ihrer Konservierungsfähigkeit. Zwischen ORT‐Werten und der Motilität von Spermien in konservierten Samenproben bestanden ebenfalls signifikante Korrelationen. Der osmotische Resistenztest scheint für die Auswahl geeigneter Samenspender zur Tiefgefrierung oder Langzeitlagerung in der Besamungspraxis ein geeignetes Beurteilungsverfahren. Auch die Brauchbarkeit von Konservierungsmethoden kann daran überprüft werden. Seine Anwendbarkeit ist jedoch noch weiter zu prüfen, und auch die möglichen Beziehungen zur Befruchtungsfähigkeit sind zu ermitteln.

Contents: Determination of the osmotic resistance of boar spermatozoa and the relations to sperm freezing and long storage

The osmotic behaviour of fresh boar spermatozoa (482 ejaculates from 34 A.I. boars) was examined in a standard medium but with different osmotic pressures ranging from 150 mosm/kg till 500 mosm/kg. The percentage of spermatozoa with normal acrosomal ridge (NAR) was determined after incubation of 0.2 ml fresh semen in 3 ml of the osmotic test solutions at 39° C for 15 and 120 min. In the non‐isotonic media % NAR decreased and could be quantified depending to incubation time and to the different osmolalities; NAR decreased strongest at 150 or 500 mosm/kg and after 120 min incubation time. Differences in%NAR were large between ejaculates and between boars but low within boars and statistically significant correlations had been found to % NAR and motility in froren/thawed semen samples or stored samples. Still higher correlations were found by calculation of an osmotic resistance test‐value (ORT‐value) which is defined as follows:

ORT = 1/2 % NAR in isotonic medium/(after 15 min) +% NAR in 150 or 500 mosm/kg/(after 15 or 120 min)

ORT‐values can be calculated for hypotonic (150 mosm/kg) as well as for hypertonic (500 mosm/kg) test solutions and for 15 and 120 minutes incubation time. The hypotonic ORT‐value for 120 min. is the most accurate; the values varied from 34 till 83 between ejaculates and from 44 till 76 between boars with a low variability within boars. Grouping of boars by their ORT‐values in “good”, “moderate” and “poor” corresponded to a similar grouping of these boars by their semen quality (% NAR and motility) in preserved semen samples. Also a grouping of single ejaculates by their ORT‐values corresponded to a similar qualitative classification of these ejaculates. ORT seems to become a good and practicable assessment test for the selection of boars suitable dor deep freezing or long storage of their spermatozoa. On the other hand preservation techniques too can be examined by ORT. But more investigations with this test must be done especially its relation to the fertilization capacity of semen samples with different ORT‐values.