Estudo Histopatológico e Viabilidade de Análises do DNA em Ossadas Humanas Expostas a Condições Tafonômicas: aplicações na identificação forense
Authors: Soler Mirella Perruccio 
Published: February 2016

<span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><font size="1" color="#221e1f"><p>Brasil apresenta a 6ª maior taxa de homicídios do mundo e são muitos os casos em que ossos humanos</p></font></span></span><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;">post-mortem </span></em></span></em></span></em><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;">que estiveram expostos a condições tafonômicas variadas são os únicos materiais disponíveis para a identificação. Fatores ambientais e o tempo podem exercer influência direta sobre o tecido ósseo e suas células, dificultando a viabilidade da análise do DNA para identificação humana. Os objetivos do trabalho são: avaliar alterações microscópicas no tecido ósseo, verificar a presença de células típicas e correlacionar os achados entre si e com a quantidade de DNA e amplificação de marcadores genéticos. Foram utilizados fragmentos córtico-medulares de diáfise femoral de 20 cadáveres esqueletizados encontrados no período de 1998 a 2009 na Microrregião de Ribeirão Preto. Para a análise </span></span><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;">histopatológica, cortes histológicos foram corados por H&amp;E, Prata Metenamina e Ácido Periódico de Schiff, e imunomarcados por CD31 e CD34. Na análise do DNA, os fragmentos foram desgastados e pulverizados, empregando-se 3 </span></span></span><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;">métodologias de extração: colunas de sílica, solvente orgânico e desmineralização completa. Os marcadores genéticos foram amplificados por kit de STR e de mini-STR. Observaram-se osteócitos em todos os casos variando de 1 a 40, não houve expressão dos marcadores de célula endotelial e foi constatada a presença acentuada de fungos em 35% dos casos. As variáveis correlacionadas com maior quantidade de DNA e de alelos amplificados foram: maior área óssea, maior número de núcleos e menor presença de fungos. O sucesso na obtenção do perfil genético completo de 50% das amostras foi alcançado através da extração de DNA pelo método de desmineralização e da amplificação por kit de </span></span><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;">mini-STR. Melhores </span></span></span><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;">resultados moleculares a partir de ossos esqueletizados em clima tropical podem ser obtidos pela qualificação macro e microscópica da amostra, extração de DNA através de desmineralização e utilização de </span></span><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;"><em><span style="font-family: Helvetica,Helvetica; color: #221e1f; font-size: xx-small;">primers </span></em></span></em></span></em><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;"><span style="color: #221e1f; font-size: xx-small;">que amplificam regiões do DNA mais curtas.</span></span></span></span></span>