Macroglobulin Rheumatoid Factors Directed Toward Buried Antigenic Sites of Human γ‐Globulins*
Authors: Schoenfeld L. S. , Epstein W. V. 
Published: March 2009

Fifty rheumatoid sera with high FII hemagglutination titers have been examined for the presence of agglutinating factors directed toward an antigenic site revealed by pepsin digestion of human γ2‐globulins; 19 sera (38% of the sera examined) contained such factors.

The agglutinating factor directed toward the buried site was characterized in 13 sera by sulfhydryl reduction, column chromatography and density gradient ultracentrifugation experiments. In 12 sera the agglutinating factor was a 19S protein. 7S agglutinators were present in two sera.

By hemagglutination inhibition studies, it was demonstrated that proteolysis of human γ2‐globulins with pepsin reveals an antigenic site which is not available in the intact molecules. This buried site was present only in the electrophoretic fractions of human sera which contain γ‐globulins. Pepsin treatment of bovine and rabbit γ‐globulins failed to reveal a similar determinant.

The possible significance of the heterogeneity in combining specificities and molecular size of the agglutinating factors is discussed.

Cinquante sérums de malades atteints de polyarthrite chronique évolutive, ayant un titre élevé au test F II selon Heller, ont été examinés quant à la présence de facteurs agglutinants dirigés contre un site antigénique manifeste après digestion peptique des gamma2‐globulins: 19 sérums (38% des sérums examinés) contenaient ces facteurs.

Les caractères du facteur agglutinant dirigé contre ce site antigénique interne ont été déterminés par des expériences de réduction sulfhydrique, de chromatographic sur colonne et d'ultracentrifugation. Dans 12 sérums, le facteur agglutinant était une protéine 19 S. Dans 2 sérums, le facteur agglutinant était une protéine 7 S.

Des tests d'inhibition d'hémagglutination ont démontré que la protéolyse des gamma2‐globulines humaines par la pepsine révèle un site antigénique non détectable sur les molécules intactes. Ce site antigénique interne n'était présent que dans les fractions électrophorétiques d'un sérum humain contenant des gamma‐globulines. Le traitement par la pepsine de gamma‐globulines de bœuf et de lapin ne révélait pas la présence d'un déterminant antigénique similaire.

La signification de la présence de facteurs agglutinants, de spécificité et de grandeur moléculaire différentes, est discutée.

Fünfzig Rheumatikerseren mit hohen F II‐Hämagglutinationstitern wurden auf die Anwesenheit agglutinierender Faktoren gegen Antigenbezirke, die bei Pepsinbehandlung von menschlichen γ2‐Globulinen freigelegt werden, untersucht. In 19 Seren, d. h. in 38% der untersuchten Seren gelang es, solche Faktoren nachzuweisen.

In 13 Seren wurde der gegen den abgedeckten Antigenbezirk gerichtete agglutinierende Faktor durch Sulfhydrylreduktion, Säulenchromatographie sowie Ultrazentrifugenuntersuchung im Dichtegradienten näher charakterisiert. In 12 Seren erwies sich der agglutinierende Faktor als 19 S‐Protein. In zwei Seren waren 7 S‐Agglutinatoren vorhanden.

Mit Hilfe von Hämagglutinationshemmungsversuchen gelang es zu zeigen, daß bei der Pepsin‐Proteolyse von menschlichem γ2‐Globulin ein Antigenbezirk freigelegt wird, der am intakten Molekül für serologische Reaktionen nicht zur Verfügung steht. Diese abgedeckte Antigendeterminante war in den elektrophoretisch aufgetrennten Serumeiweißfraktionen nur in jenen nachweisbar, die γ‐Globuline enthielten. Bei Pepsinbehandlung von Rinder‐ und Kaninchen‐γ‐Globulin wurde keine analoge Determinante freigelegt.

Die Bedeutung der Heterogenität der kombinierten Spezifitäten sowie der unterschiedlichen Molekülgroße solcher agglutinierender Faktoren wird diskutiert.