bluuebunny/crossref_metadata_2025 huggingface dataset:
Ligand‐induced association of epidermal growth factor receptor to the cytoskeleton of A431 cells
Authors: van Bergen en Henegouwen P. M. P. , Defize L. H. K. , de Kroon J. , van Damme H. , Verkleij A. J. , Boonstra J.
Published: December 2004

Recently, we have obtained evidence in favor of a structural interaction between the epidermal growth factor (EGF) receptor and the Triton X‐100‐insoluble cytoskeleton of epidermoid carcinoma A431 cells. Here we present a further analysis of the properties of EGF receptors attached to the cytoskeleton. Steady‐state EGF binding studies, analyzed according to the Scatchard method, showed that A431 cells contain two classes of EGF‐binding sites: a high‐affinity site with an apparent dissociation constant (KD) of 0.7 nM (7.5 × 104 sites per cell) and a low‐affinity site with a KD of 8.5 nM (1.9 × 106 sites per cell). Non‐equilibrium binding studies revealed the existence of two kinetically distinguishable sites: a fast‐dissociating site, with a dissociation rate constant (k−1) of 1.1. × 10−3s−1 (1.0–1.3 × 106 sites per cell) and a slow‐dissociating site, with a k−1 of 3.5 × 10−5s−1 (0.6–0.7 × 106 sites per cell).

The cytoskeleton of A431 cells was isolated by Triton X‐100 extraction. Scatchard analysis revealed that ∼5% of the original number of receptors were associated with the cytoskeleton predominantly via high‐affinity sites (KD = 1.5 nM). This class of receptors is further characterized by the presence of a fast‐dissociating component (k−1 = 2.0 × 10−3s−1) and a slow‐dissociating component (k−1 = 9.1 × 10−5s−1). The distribution between fast and slow sites of the cytoskeleton was similar to that of intact cells (65% fast and 35% slow sites). Incubation of A431 cells for 2 h at 4°C in the presence of EGF resulted in a dramatic increase in the number of EGF receptors associated to the cytoskeleton. These newly cytoskeleton‐associated receptors appeared to represent low‐affinity binding sites (KD = 7 nM). Dissociation kinetics also revealed an increase of fast‐dissociating sites. These results indicate that at 4°C EGF induces the binding of low‐affinity, fast‐dissociating sites to the cytoskeleton of A431 cells.
Biosynthesis of lysosomal endopeptidases
Authors: Erickson Ann H.
Published: December 2004

Despite the clear differences between the amino acid sequence and enzymatic specificity of aspartic and cysteine endopeptidases, the biosynthetic processing of lysosomal members of these two families is very similar. With in vitro translation and pulse‐chase analysis in tissue culture cells, the biosynthesis of cathepsin D, a aspartic protease, and cathepsins B, H and L, cysteine proteases, are compared. Both aspartic and cysteine endopeptidases undergo cotranslational cleavage of an amino‐terminal signal peptide that mediates transport across the endoplasmic reticulum (ER) membrane. Addition of high‐mannose carbohydrate also occurs cotranslationally in the lumen of the ER. Proteases of both enzyme classes are initially synthesized as inactive proenzymes possessing amino‐terminal activation peptides. Removal of the propeptide generates an active single‐chain enzyme. Whether the single‐chain enzyme undergoes asymmetric cleavage into a light and a heavy chain appears to be cell type specific. Finally, late during their biosynthesis both classes of enzymes undergo amino acid trimming, losing a few amino acid residues at the cleavage site between the light and heavy chains and/or at their carboxyltermini. During biosynthesis these enzymes are also secreted to some extent. In most cells the secreted enzyme is the proenzyme bearing some complex carbohydrate. Under certain physiological conditions the inactive secreted enzymes may become activated as a result of a conformational change that may or may not result in autolysis. Analysis of the biochemical nature of the various processing steps helps define the cellular pathway followed by newly synthesized proteases targeted to the lysosome.
Antibodies to hnRNP core protein A1 in connective tissue diseases
Authors: Ricotti Giulia C. B. Astaldi , Bestagno Marco , Cerino Antonella , Negri Claudia , Caporali Roberto , Cobianchi Fabio , Longhi Matteo , Montecucco Carlo Maurizio
Published: December 2004

We investigated the specificity of circulating autoantibodies to a heterogeneous nuclear ribonuclear protein A1 (hnRNP A1), obtained by recombinant DNA technique, in different rheumatic diseases: systemic lupus erythematosus (SLE), rheumatoid arthritis (RA), scleroderma, primary Sjogren's syndrome (SS), idiopathic Raynaud (IR), mixed connective tissue disease (MCTD), and healthy donors. All sera were tested by ELISA on hnRNP A1 protein. Positive values were obtained in 22% SLE, 19% scleroderma, 10% IR, 40% (2/5) MCTD, 5% SS, and 50% RA patients. The majority of patients reacted with the aminoterminal part (UP1) of hnRNP A1; however, some RA patients reacted also with the carboxy‐terminal part that shows partial homology with keratin. Therefore, hnRNP A1 (UP1) can be considered a target of antinuclear autoimmunity in various rheumatic disorders.
Human macrophage colony‐stimulating factor heterogeneity results from alternative mRNA splicing, differential glycosylation, and proteolytic processing
Authors: Shadle P. J. , Aldwin L. , Nitecki D. E. , Koths K.
Published: December 2004

The single gene for human macrophage colony‐stimulating factor (M‐CSF, or CSF‐1) generates multiple mRNA species that diverge within the coding region. We have characterized translation products of these mRNA species from native and recombinant sources. Immunoblots of reduced native M‐CSF indicate that multiple glycosylated species ranging from 25 kd to 200 kd are secreted by human monocytes and cell lines. In contrast, CV‐1 cells expressing a short M‐CSF clone secrete only 24 kd recombinant M‐CSF. Synthetic peptide antibodies were developed to distinguish between secreted recombinant M‐CSF from long and short mRNA splicing variants. Immunoblot analysis indicates that alternative mRNA splicing generates some M‐CSF protein heterogeneity. Most secreted MIA PaCa‐2 M‐CSF reacts with long‐clone‐specific antibody. Lectin affinity chromatography shows that variable glycosylation contributes significantly to MIA PaCa‐2 M‐CSF size heterogeneity. In addition, cell lysates also contain larger M‐CSF species that apparently undergo proteolytic processing before secretion. The data indicate that M‐CSF protein heterogeneity results from both pre‐ and post‐translational processing.
Effect of oxidative iodination of epidermal growth factor on its binding and secretion by hepatocytes
Authors: Marti Ulrich , Burwen Susan Jo , Barker Mary E. , Huling Sandra , Feren Anna M. , Jones Albert L.
Published: December 2004

Experiments were undertaken to determine whether the method of iodination of epidermal growth factor (EGF) affects its binding to rat liver plasma membranes and its uptake, processing, and secretion into bile by intact rat hepatocytes. EGF was iodinated using one of three oxidative reagents: chloramine T (CT), lactoperoxidase (LP), or monochloride (MC). Quantitative receptor binding studies on plasma membranes isolated from male rat livers with either CT‐, LP‐or MC‐125I‐EGF indicated no significant difference in the apparent binding constants of the three preparations. To determine whether these three preparations were capable of forming a covalent‐like complex with the EGF receptor, they were individually incubated with isolated plasma membranes and subjected to polyacrylamide gel electrophoresis under reducing conditions, followed by autoradiography. Each preparation formed a major radioactive protein band of ∼180 kD, identified as the EFG receptor by immunoprecipitation with monoclonal anti‐EGF receptor antibodies. Furthermore, even unlabeled EGF incubated with plasma membranes formed this same 180 kD band, as revealed on Western blots using anti‐EGF antibody. The biliary secretion of CT‐, LP‐, and MC‐125I‐EGF was compared by injecting each one into rat portal veins and measuring the total and immunoprecipitable radioactivity in bile. The amount of immunologically intact CT‐125I‐EGF in bile was significantly greater than the others, whereas MC‐125I‐EGF transport was significantly reduced. We conclude that the method of iodination does not affect the covalent‐like binding properties of EGF. Furthermore, since unlabeled EGF displayed these same binding properties, oxidative iodination procedures per se do not account for the covalent‐like association between EGF and its receptor. However, the method of iodination used did affect the intracellular transport and processing of EGF by hepatocytes. The structural modification responsible for this alteration in transport properties has yet to be determined.
Molecular analysis of pleckstrin: The major protein kinase c substrate of platelets
Authors: Tyers Michael , Haslam Richard J. , Rachubinski Richard A. , Harley Calvin B.
Published: December 2004

Activation of protein kinase C (PKC) in platelets causes the immediate phosphorylation of pleckstrin, an apparent Mr 40–47,000 protein previously called 40K or P47. Pleckstrin presumably plays an important but as yet unknown role in mediating cellular responses evoked by agonist‐induced phosphoinositide turnover. We have cloned the cDNA for pleckstrin from the HL‐60 human promyelocytic leukemia cell line by immunological screening of a λgt11 expression library (Tyers et al.: Nature 333:470–473, 1988) and now report further analysis of the pleckstrin sequence. Pleckstrin has a deduced Mr of 40,087 and is encoded by a 1,050‐bp open reading frame which is preceded by a short open reading frame that terminates before the correct initiator methionine. A single polymorphic site was found in the coding region. An unusual pattern of sequence heterogeneity occurred about a poly(A) tract in the 3′ untranslated region. The 3.0‐kb pleckstrin mRNA induced upon differentiation of HL‐60 cells apparently has heterogeneous 5′ ends which undergo differential regulation during HL‐60 cell maturation. Analysis by multiple sequence alignment with known PKC substrates identified a strong candidate site for phosphorylation by PKC and a potential Ca2+‐binding EF‐hand motif. No other similarities to proteins in current databases were found.
Preliminary studies on phospholipase A2‐induced mouse paw edema as a model to evaluate antiinflammatory agents
Authors: Marshall L. A. , Chang J. Y. , Calhoun W. , Yu J. , Carlson R. P.
Published: December 2004

Phospholipase A2 (PLA2) is a key component of the inflammatory process because of its role in the generation of eicosanoids and platelet‐activating factor (PAF). Manipulation of PLA2 activity offers a novel therapeutic approach for the development of antiinflammatory agents; however, there is a need for a suitable in vivo model. Injection of 1 μg of snake venom PLA2 (A. piscivorus piscivorus, D‐49) into the mouse hind footpad produced a significant three‐ to four‐fold rise in paw edema within 10 min, compared to the saline control. Edema formation depended on enzyme concentration and appeared specific for PLA2 since edema was negated by enzyme pretreatment with p‐bromophenacyl bromide, a nonspecific PLA2 inhibitor. Moreover, injection of a protein such as bovine serum albumin did not result in significant edema. Coinjection of phenidone (lipoxygenase inhibitor, 50 μg), indomethacin (cyclooxygenase inhibitor, 50 μg), cyproheptadine (antihistamine/antiserotonin, 50 μg), aristolochic acid (putative PLA2 inhibitor, 100 μg), or kadsurenone (PAF antagonist, 50μg) with PLA2 (1 μg/paw) resulted in partial reduction (44.5, 34.2, 54.7, 64, and 50% inhibition, respectively) of edema formation. Oral administration of cyproheptadine (10 mg/kg), indomethacin (10 mg/kg), BW 755c (100 mg/kg), or dexamethasone (1 mg/kg) 1–3 h before challenge also decreased PLA2‐induced edema (63.0, 30.1, 47.8, or 62.5% inhibition, respectively). The data suggest that mouse paw edema resulting from PLA2 injection is a multicomponent event, influenced by both autacoids and lipid mediators of inflammation.
Translocation of diacylglycerol kinase from the cytosol to the membrane in phorbol ester–treated Swiss 3T3 fibroblasts
Authors: Maroney Anna Coco , Macara Ian G.
Published: December 2004

The tumor‐promoting phorbol ester, 12‐O‐tetradecanoyl‐phorbol‐13‐acetate, causes a rapid, partial redistribution of 1,2‐diacylglycerol kinase from the cytosol to the particulate fraction of quiescent Swiss 3T3 fibroblasts. The inactive alpha form of the phorbol ester does not cause any change in diacylglycerol kinase localization, and depletion of protein kinase C by chronic administration of phorbol ester blocks the redistribution. Phorbol ester has no direct effect on membrane‐bound diacylglycerol kinase in 3T3 cells. When phorbol ester is added to 3T3 membranes in the presence of ATP, Mg2+, and Ca2+, there is no activation of membrane‐bound kinase, indicating that phorbol ester does not activate membrane‐bound kinase through phosphorylation by protein kinase C. Stimulation of the cells with phorbol ester increases the total mass of diacylglycerol. In protein kinase C–depleted cells, addition of a cell‐permeable synthetic diacylglycerol, dioctanoylglycerol, results in a partial redistribution of cytosolic diacylglycerol kinase to the membrane, also suggesting that the translocation of DAG kinase is regulated primarily by substrate concentration.
Role of growth factors in inflammation and repair
Authors: Wahl S. M. , Wong H. , McCartney‐Francis N.
Published: December 2004

Mononuclear cells generate a variety of hormone‐like proteins termed growth factors that are instrumental in the evolution and resolution of inflammatory reactions. Many of these growth regulatory molecules have multifunctional properties. For example, the mononuclear cell‐derived growth factors, platelet‐derived growth factor (PDGF), and transforming growth factor beta (TGF‐β), are potent leukocyte chemoattractants. In addition, TGF‐β, a product of platelets, T lymphocytes, and monocytes, appears to induce the transcription of other monocyte‐derived growth hormone genes. In this regard, picomolar concentrations of TGF‐β stimulate peripheral blood monocytes to transcribe the genes for PDGF (c‐sis), basic fibroblast growth factor (FGF), interleukin 1 (IL‐1), and tumor necrosis factor (TNF). Furthermore, levels of mRNA for TGF‐β, which is constitutively expressed in resting monocytes, are also increased by exogenous TGF‐β. Each of these monocyte products exhibits a plethora of biological activities on other cell types. T lymphocytes, in response to antigen, contribute to this network by secreting growth factors and lymphokines that regulate monocyte growth factor production.
Microinjection of inositol 1,2‐(cyclic)‐4,5‐trisphosphate, inositol 1,3,4,5‐tetrakisphosphate, and inositol 1,4,5‐trisphosphate into intact Xenopus oocytes can induce membrane currents independent of extracellular calcium
Authors: Stith Bradley J. , Proctor William R.
Published: December 2004

Inositol phosphate action in an intact cell has been investigated by intracellular microinjection of eight inositol phosphate derivatives into Xenopus laevis oocytes. These cells have calcium‐regulated chloride channels but do not have a calcium‐induced calcium release system. Microinjection of inositol 1,3,4,5‐tetrakisphosphate (IP4), inositol 1,2‐(cyclic)‐4,5‐trisphosphate (cIP3), inositol 1,4,5‐trisphosphate (IP3), or inositol 4,5‐bisphosphate [(4,5)IP2], open chloride channels to induce a membrane depolarization. However, inositol 1‐phosphate (IP1), inositol 1,3,4,5,6‐pentakisphosphate (IP5), inositol 1,4‐bisphosphate, or inositol 3,4‐bisphosphate are unable to induce this depolarization. The depolarization is mimicked by calcium microinjection, inhibited by EGTA coinjection, and is insensitive to removal of extracellular calcium. By means of the depolarization response, the efficacy of various inositol phosphate derivatives are compared. IP3 and cIP3 induce similar half‐maximal, biphasic depolarization responses at an intracellular concentration of approximately 90 nM, whereas IP4 induces a mono‐ or biphasic depolarization at approximately 3400 nM. At concentrations similar to that required for IP3 and cIP3, (4,5)IP2 induces a long‐term (greater than 40 min) depolarization. The efficacy (cIP3 = IP3 = (4,5)IP2 ≫ IP4) and action of the various inositol phosphates in an intact cell and their inability to induce meiotic cell division are discussed.
Subcellular localization of phospholipids and enzymes involved in PAF‐acether metabolism
Authors: Record Michel , Ribbes Gérard , Tercé François , Chap Hugues
Published: December 2004

The biosynthesis of platelet‐activating factor (PAF‐acether or 1‐O‐2‐acetyl‐sn‐glycero‐3‐phosphocholine) through the remodeling pathway was investigated at the subcellular level in two different cell lines. In human neutrophils, plasma membrane was isolated not only from granules, but also from internal membranes related to endoplasmic reticulum. Interestingly, the latter exhibited enhanced acetyltransferase upon neutrophil stimulation with ionophore A23187. A similar study was undertaken on the tumor strain Krebs‐II cells. The enzyme acetyltransferase was found to be located only on an endoplasmic reticulum subfraction, whereas most alkylacyl‐GPC, the source of PAF‐precursor alkyl‐lyso‐GPC, was located in the plasma membrane inner leaflet. The topographical separation of enzyme and precursor emphasizes the central role of the intracellular phospholipase A2 in providing lyso‐PAF to the acetyltransferase to form PAF‐acether.
Processing of asparagine‐linked oligosaccharides is an early biochemical marker of the enterocytic differentiation of HT‐29 cells
Authors: Ogier‐Denis Eric , Bauvy Chantal , Aubery Michèle , Codogno Patrice , Sapin Catherine , Rousset Monique , Zweibaum Alain , Trugnan Germain
Published: December 2004

The inability of HT‐29 cells to undergo an enterocytic differentiation when grown in a glucose‐containing (Glc+) medium has been recently correlated to an overall impairment of N‐glycan processing. These results were obtained using confluent HT‐29 cells in which the differentiation characteristics are fully expressed under differentiation permissive conditions (glucose‐deprived medium, Glc−). Whether these changes of N‐glycan processing appear progressively during the cell growth or are already present from the beginning of the culture was investigated in this work by comparing the actual status of N‐glycan processing in both exponentially growing Glc+ and Glc− HT‐29 cells. Under these conditions, HT‐29 cells do not express any characteristics of enterocytic differentiation, even when grown in differentiation permissive conditions. We show here that the conversion of high‐mannose to complex glycoproteins is, however, severely reduced in HT‐29 cells grown studied. In contrast, HT‐29 cells grown in differentiation permissive conditions (HT‐29 Glc−) display a normal pattern of N‐glycan processing in both the exponential and the stationary phase of growth. We also show that both growing and confluent HT‐29 Glc+ cells accumulate Man9–8 GlcNAc2 species, thus suggesting that there is an important regulatory point at this level. We therefore conclude that the N‐glycan processing may be used as an early biochemical probe for the enterocytic differentiation of HT‐29 cells. Whether these early changes result from an early metabolic regulation or are the consequence of a genetic control remains to be studied.
Division competence in Tetrahymena: Determination of minimum cell volume and rate of nutrient uptake
Authors: Andersen Anders Poul , Hellung‐Larsen Per
Published: December 2004

Cell volume and doubling time have been determined for exponentially growing Tetrahymena pyriformis cells in broth medium with and without glucose and in media made from these media by dilution with water. The cells tolerate media with dry weights from 105 down to 0.06 g/L. In the diluted media the cells have small volumes and the doubling time is increased.

When the cell volume increase per time per cell in a given medium is expressed as function of the cell volume in this same medium, a direct proportionality is found. From this equation the minimum cell volume of division competence (MVDC) can be found. It is 2,100 μm3 for T. pyriformis at 28°C.

The lag period resulting from an upshift of exponentially growing cells from diluted media to more concentrated media is a function of the initial and resulting cell volumes and MVDC.

The increase in cell volume per unit of time for a given cell‐depends on the dry weight of the medium. This parameter can be transformed to mass increase per cell surface area per time, which represents rate of nutrient uptake. When plotted against the dry weight of the media, a Michaelis‐Menten‐like curve is obtained with two Km values of 3.8 and 0.08 g/L with corresponding Vmax values of 20 and 4 ng/cm2 · s.

The low Km value (0.08 g/L) indicates that Tetrahymena is able to take up nutrients from highly diluted media. The high value of Vmax (20 ng/cm2 · s) increases the ability of growth in more concentrated media. Thus, the adaptability of Tetrahymena to regulate its growth rate on media with considerable differences in nutrient supply is partly explained.
Cis effect of the type 5 adenovirus E1A gene enhancer element on cellular transformation
Authors: Herbst Roy S. , Pelletier Mike , Babiss Lee E.
Published: December 2004

Mutants of type 5 adenovirus that lack all or part of the early region IA(EIA) gene enhancer element transform rodent embryo fibroblast (CREF) cells at higher efficiencies than wild‐type virus. An analysis of viral E1A cytoplasmic mRNA levels in mutant and wild‐type virus‐infected CREF cells revealed no differences in the levels of the E1A mRNAs. This implies that a decrease in the rate of viral E1A gene expression was not responsible for the transforming properties of the enhancer‐less viruses. Unlike wild‐type virus, however, the mutant viruses were able to replicate their genomes in the normally nonpermissive CREF cells. This change in viral DNA template concentration further resulted in an increase in early gene mRNA concen‐trations in mutant‐virus‐infected CREF cells. These studies suggest several possible mechanisms that could be responsible for the increased transforming potentials of these viruses, including (1) a cis effect of removing the viral E1A enhancer element on the efficiency of viral DNA integration, (2) viral DNA replication, or (3) an increase in the levels of the viral E1A and EIB mRNAs owing to viral DNA replication in the virus‐infected CREF cells.
Preliminary characterization of phosphotyrosine phosphatase activities in human peripheral blood lymphocytes: Identification of CD45 as a phosphotyrosine phosphatase
Authors: George R. J. , Parker C. W.
Published: December 2004

A preliminary characterization of the protein phosphotyrosine phosphatase (PT‐Pase) activity in human peripheral blood lymphocytes (PBL) has been made using two tyrosine‐containing peptides and the epidermal growth factor receptor from A‐431 cells as substrates. High PTPase activity with a pH optimum near 7.4 was observed in both the membrane and the cytosolic fractions. At least three distinct fractions with PTPase activity were separated on DEAE cellulose columns, indicating that the enzyme is heterogeneous. Vanadate, molybdate, and salts of zinc, copper, and mercury were all effective enzyme inhibitors, although the inhibition was generally incomplete and showed some variation with the enzyme preparation. The difficulty in completely inhibiting PTPase activity in lymphocytes may help explain the variation between laboratories in studies of tyrosine phosphorylation in these cells. Studies with highly purified T lymphocytes obtained by filtration of PBL through nylon wool columns indicated that the activity is present in T cells. Absorption with agarose containing anti‐HLe‐I, a mouse monoclonal lgGi antibody specific for the leukocyte‐specific surface protein T‐200 (CD45), removed up to 40% of the PTPase activity. Enzyme activity was recovered on the immunoadsorbent after extensive washing, confirming that the enzyme was being bound to the beads. Immunoabsorbents containing other mouse lgGi antibodies failed to bind PTPase activity, indicating that the binding to beads with anti‐HLe‐I antibody is specific. Further characterization of the CD45 and PTPase activities in lymphocytes may provide a better under standing of the role of protein tyrosine phosphorylation in the regulation of proliferation and differentiation in these cells.
Androgenic control of N‐acetyltransferase activity in the harderian glands of the syrian hamster is mediated by 5α‐dihydrotestosterone
Authors: Menendez‐Pelaez Armando , Buzzell Gerald R. , Gonzaiez‐Brito Aldo , Reiter Russel J.
Published: December 2004

N‐acetyltransferase (NAT) activity in the Harderian glands of intact and gonadectomized male and female Syrian hamsters was evaluated. The exogenous administration of 5α‐dihydrotestosterone (DHT) to castrated males and intact females produced an increase in NAT values, which reached the values present in the glands of intact males. The administration of a 5α‐reductase inhibitor to intact males led to a decrease in NAT activity, suggesting that testosterone is converted in DHT within the glands. It is concluded that NAT activity in the Syrian hamster Harderian glands is under androgenic control, the active steroid being DHT.
Regulation by EGF is maintained in an overexpressed chimeric EGFR/neu receptor tyrosine kinase
Authors: Lehväslaiho Heikki , Sistonen Lea , DiRenzo Flavia , Partanen Juha , Comoglio Paolo , Hölttä Erkki , Alitalo Kari
Published: December 2004

The effects of ligand regulated neu tyrosine were examined in NIH 3T3 cells. A chimeric construct encoding the human EGF receptor extracellular domain fused to the tyrosine kinase domain of the rat neu c DNA was expressed under the transcriptional control of the Moloney murine leukemia virus LTR promoter. This resulted in higher levels of expression of the chimeric receptor than were previously obtained from the SV40 virus early promoter in the same cells. The chimeric receptor showed strict ligand‐dependent tyrosine kinase and signal transducing activities for the induction of growth‐regulated biochemical activities and DNA synthesis in resting cells. The ligand‐activated cells became morphologically transformed and grew in agar in the presence of EGF and TGFβas efficiently as did the ligand‐independent neu oncogene‐transformed cells. Our results establish similarities between the signal pathways of the EGF receptor and the neu tyrosine kinase.
Expression of mRNAs for pore‐forming protein and two serine esterases in murine primary and cloned effector lymphocytes
Authors: Jaog Sanjay V. , Liu Chau‐Ching , Kwon Byoung S. , Clark William R. , Young John D.‐E
Published: December 2004

The cDNAs encoding several proteins present in the granules of cytolytic effector lymphocytes have now been cloned. These included the cytolytic pore‐forming protein (PFP) or perforin, and at least six serine esterases (SE), also called granzymes. The cDNA probes for PFP, SE‐1, and SE‐2 are used here to study the expression of these proteins in murine primary effector lymphocytes. Among the stimuli effective in inducing the expression of PFP, SE‐1, and SE‐2 were recombinant interleukin‐2, the lectin concanavalin A in the presence of phorbol esters, and allogeneic cells in mixed lymphocyte cultures. Some correlation was seen between the levels of PFP and SE mRNAs and cytotoxicity measured in a standard 51Cr release assay. We also examined a panel of 13 cloned cytotoxic T Lymphocyte (CTL) lines and found that mRNAs for PFP and SE‐2 were expressed in all CTL lines, including some that were previously considered not to produce PFP. Twelve of the 13 CTL lines also proved to possess the mRNA for SE‐1. One thymoma cell line, TIMI.4, did not express mRNA for PFP, although it expressed mRNA for SE‐1 and SE‐2.
Elektrochemische und chemische Sauerstoffkorrosion
Authors: Tödt F.
Published: December 2004

Der zeitliche Abfall der Korrosion und der Oxydreduktion an galvanischen Modellelementen führt zu folgender Schlußfolgerung: Metalloberflächen, die nach einer Belüftung in Berührung mit einem Elektrolyten stehen, verlieren in verhältnismäßig kurzer Zeit die Oxydbedeckung durch kathodische Reduktion. Dieser Prozeß verläuft in derselben Weise, unabhängig davon, ob der Oxydabbau durch Lokalelementwirkung, also durch anodische Wirkung derselben Metalloberfläche oder durch galvanische Verbindung mit einem als Anode Dienenden anderen Metall erfolgt. Nach dieser Vorstellung ist ein korrodierendes Metall, wenn es sich nicht gerade um die Anfangsperiode der Korrosion oder um eine unmittelbare Luftberührung handelt, nur zu einem geringen Teil mit elektrochemisch wirksamem Oxyd bedeckt.
Neue korrosionsbeständige Werkstoffe im Ausland IV. Kupfer‐Nickel‐Legierungen mit geringen Eisengehalten für Kondensatorrohre
Authors: Franke E.
Published: December 2004

Zusammenfassend läßt sich sagen, daß Wissenschaft und Technik zwar der Lösung des Problems, eine in jeder Beziehung genügend salzsäurebeständige Legierung zu finden, sehr nahe gekommen sind, daß jedoch noch manches zu tun ist, um alle berechtigten Wünsche der Praxis zu erfüllen. Dabei darf natürlich nicht übersehen werden, daß die erheblichen Fortschritte auf den Gebieten der nichtmetallischen und synthetischen Werkstoffe manche Fragen in einem ganz anderen Lichte erscheinen lassen, als noch vor 10 oder 20 Jahren.
Konstruktionswerkstoffe für die chemische Industrie. (Übersichtsbericht)
Authors: Franke E.
Published: December 2004

An Hand der wichtigsten im Jahre 1949 erschienenen einschlägigen Veröffentlichungen wird ein Überblick gegeben über Prüfung und Korrosionsverhalten von rostfreien Stählen, austenitischen Manganstäben, hochsiliziumhaltigen Eisenlegierungen, hochfesten niedriglegierten Stählen, Kohlenstoffstäben und Gußeisen sowie über ihre Einsatzmöglichkeit in der chemischen Industrie.
Säurefeste Kitte
Authors: Dietz Karl
Published: December 2004

Durch die Fortenwicklung der chemischen Industrie ergeben sich bei neuen chemischen Produktionsverfahren ständig neue Korrosionsprobleme und dementsprechend neue Aufgaben für korrosionsgeschützte Konstruktionen. Auf diesem Gebiet spielen säurefeste Plattenverkleidungen eine große Rolle. In letzter Zeit ist es gelungen, Berechnungsmethoden für die auf der Verschiedenheit der Konstruktionselemente beruhenden Spannungsbeanspruchungen berücksichtigen. Auf Grund der sich hieraus ergebenden Forderungen wurden neue Kittmaterialien für Plattenverkleidungen ausgearbeitet, welche den konstruktionsmäßig vorliegenden Spannungsverhältnissen gerecht werden und außerdem noch weitere Verbesserungen in der chemischen und physikalischen Widerstandsfähigkeit besitzen.
Der Einfluß von Verunreinigungen auf das Korrosionsverhalten von Aluminium und seinen Legierungen. Übersichtsbericht
Authors: Franke Erich
Published: December 2004

Auf Grund der vorliegenden Versuchsergebnisse kann ganz allgemein gefolgert werden, daß der Korrosionswiderstand von Reinaluminium mit steigendem Reinheitsgrad zunimmt. Der Einfluß der Verunreinigungen wird bestimmt von der Art des Korrosionsmediums und oft wird das Versagen von Aluminium mehr auf die Einflüsse der vorliegenden Betriebsbedingungen bzw. seiner Umgebung als auf den der Verunreinigungen selbst zurückzuführen sein.

Bei der Betrachtung der einzelnen Verunreinigungen und geringen Zusätze an fremden Elementen hinsichtlich ihrer Korrosionsbeeinflussung ergibt sich, daß Eisen und Kupfer einen schädlichen Einfluß ausüben, wobei jedoch die Wirkung des Eisens durch Zugabe von Mangan stark verringert werden kann. Silizium ist in fester Lösung völlig unschädlich, in elementarer Form ausgeschieden verringert es die Beständigkeit des Aluminium. Durch geeignete Wärmebehandlung gelingt es jedoch, bis zu 0,5% Si in fester Lösung zu halten. Das Verhältnis Fe:Si scheint nach den neueren Auffassungen für das Korrosionsverhalten von Aluminium nicht von besonderer Wichtigkeit zu sein. Magnesium, Zink, Blei und Titan sind in Gehalten, wie sie üblicherweise im Aluminium vorkommen, unschädlich, dagegen ist Nickel in jedem Falle schädlich. Auch Calcium und Natrium, die oftmals in aus bestimmten Erzen hergestelltem Aluminium als Verunreinigungen auftreten, beeinträchtigen dessen Korrosionsbeständigkeit.

Bei den Angaben über den Einfluß von geringen Zusätzen weniger üblicher Elemente werden die daraus gezogenen Schlußfolgerungen in den meisten Fällen nicht wiedergeben, da die Beobachtungen überwiegend bei Einzelversuchen gemacht worden sind und demzufolge zu wenig Beweismaterial bieten für endgültige Rückschlüsse, die für die Praxis von Bedeutung sein könnten.
Über den Aufbau der Doppelschicht an der Eisen‐ und Blei‐Elektrode im Erdreich
Authors: Markovic Tihomil , Kirkov P.
Published: December 2004

Der Aufbau der Doppelschicht an der Fe‐ und Pb‐Elektrode wurde mit Hilfe der Hicklingschen Methode verfolgt. Im Einklang mit den Ergebnissen, die bei früheren Korrosionsversuchen mit Eisen und Blei im Erdreich erhalten wurden, ergab sich bei den Untersuchungen, die völlige übereinstimmung bezüglich der Entstehung der Korrosionstype, wenn sich der Boden hinsichtlich seines Wassergehaltes unter seiner Sättigungsgrenze befindet. Auf einer Fe‐Elektrode bildet sich in sandhaltigem Boden bei niedrigen Wassergehalten nur der erste Teil der Helmholtz‐Doppelschicht aus, nach Überschreiten der Sättigungsgrenze weist diese die gleiche Ausbildung auf wie in destilliertem Wasser. Eine Pb‐Elektrode weist dagegen in tonhaltigem Boden eine Doppelschicht auf, die der ähnelt, die sich in einem Elektrolyt ausbildet. In diesem Fall ist die Kapazität des diffusen Teils der Doppelschicht größer als die der Helmholtz‐Doppelschicht.
Der Einfluß der Bodenfeuchtigkeit auf die Korrosionsgeschwindigkeit von Eisen und Blei im Erdreich
Authors: Markovic Tihomil
Published: December 2004

Die Korrosionsgeschwindigkeit von Eisen und Blei wurde an dem Element Pt/feuchter Boden/unedleres Metall untersucht. Dabei ergab sich, daß in sand‐ und tonhaltigem Boden zwei Korrosionsarten zu unterscheiden sind, nämlich ein aktives Verhalten des Eisens und ein passives Verhalten des Blei.
Gesichtspunkte zur Werkstoffauswahl bei Kontaktkatalysatoren
Authors: Block Jochen
Published: December 2004

Anhand der neueren Literatur wird der gegenwärtige Entwicklungsstand auf dem Gebiet der heterogenen Katalyse beschrieben, wobei die Zusammenhänge zwischen der katalytischen Aktivität und der Struktur des katalysators besonders berücksichtigt werden. Als Untersuchungsmethoden für die Vorgänge in der Katalysatoroberfläche haben sich Kontaktpotential‐, elektrische Leitfähigkeits‐ und Chemisorptionsmessungen und die Bestimmung des Akkommodationskoeffizienten besonders bewährt. Die TAYLOR‐ sche Theorie der „aktiven Zentren”︁, die Balandinsche „Multiplett‐Theorie”︁ und die Schwabsche „Adlineations‐Theorie”︁ werden der heutigen Auffassung eines vielfach maßgebenden Einflusses der Elektronenkonfiguration eines katalysators gegenübergestellt. Dabei ergeben sich auch für die Auswahl von Kontaktkatalysatoren technisch wichtiger Reaktionen neue Gesichtspunkte.
Solid‐State Olefin Metathesis: ADMET of Rigid‐Rod Polymers and Ring‐Closing Metathesis
Authors: Oakley Garrett W. , Wagener Kenneth B.
Published: December 2004

Summary: Solid‐state olefin metathesis of rigid‐rod acyclic diene metathesis (ADMET) polymers and ring‐closing metathesis (RCM) have been investigated. 1,4‐Dipropoxy‐2,5‐divinylbenzene (4) was synthesized and used in a bulk ADMET polymerization to produce oligomers of dialkoxy poly(phenylene vinylene). The reaction was continued in the solid state, effectively doubling the molecular weight. Solid‐state RCM was investigated with a variety of solid dienes and metathesis catalysts, and demonstrated in low conversions using amide diene 5 with catalysts 9, 13, and 14.

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Cover Picture: Macromol. Chem. Phys. 18/2004
Authors: Frankowski David J. , Fournier‐Bidoz Sébastien , Manners Ian , Ozin Geoffrey A. , Khan Saad A. , Spontak Richard J.
Published: December 2004

Cover: Surface‐constrained foaming of poly(ferrocenylsilane) ceramic precursor films with supercritical CO2 yields tunable microcellular foams that exhibit conventional isotropic pore cells (inset), as well as anisotropic pore cells that elongate and orient along preferred diffusion pathways.

Further details can be found in the Full Paper by D. J. Frankowski, S. Fournier‐Bidoz, I. Manners,* G. A. Ozin, S. A. Khan, and R. J. Spontak* on page 2398.
Determination of J‐integral R‐curves for Hastelloy X and inconel 617 up to 1223 K using the potential drop technique
Authors: Krompholz K. , Grosser E. D. , Ewert K.
Published: December 2004

For Hastelloy X (T = 308 K and T = 1223 K) and for Inconel 617 (T = 308 K, 473 K, 673 K, 873 K, 973 K, 998 K, 1023 K, 1048 K, 1073 K, 1173 K, and 1223 K) the J‐integral R‐curves have been determined. For Hastelloy X at 308 K the multispecimen technique has been compared with the single specimen method using the potential drop technique. At 1223 K Hastelloy X delivered a low J0‐integral value. Inconel 617 showed a smooth increase in J0with increasing temperature, up to 998 K; above this temperature even for large loadline displacements only blunting behaviour has been observed. The same tendency has been found for the evaluation of the tearing modulus. With increasing temperature the tearing modulus increases. In the temperature range from 998 K to 1223 K the tearing modulus increases by about one order of magnitude. For both alloys the onset of stable crack growth in most cases is earlier than the load maximum is reached in the load versus load‐line displacement curves.
Deckschichtbildung und Korrosionsverhalten des hochsiliciumlegierten austenitischen Sonderstahls X 2 CrNiSi 18 15 in Salpetersäuren
Authors: Horn E.‐M. , Kilian R. , Schoeller K.
Published: December 2004

Mit Hilfe von ESCA‐ und AAS‐Messungen wurde die Ausbildung der Deckschicht auf dem austenitischen Stahl X 2 CrNiSi 18 15 in Salpetersäuren untersucht. Es entsteht eine chromoxidreiche Deckschicht, über der sich eine SiO2‐Schicht befindet. Nickel und Mangan sind am Aufbau der Oxidschichten nicht beteiligt. Unter der Oxidschicht wurde eine Chromanreicherung bzw. Eisenverarmung im Stahl nachgewiesen.

Um die teilweise sehr geringen (bis 5 · 10−5 mm · a−1) Abtragungsraten reproduzierbar erfassen zu können, wurde in Lösung gegangenes Eisen, Chrom und Nickel in Abhängigkeit von der Beanspruchungsdauer mittels AAS bestimmt.

Für ruhende Werkstoffproben ergaben sich scheinbare Aktivierungsenergien von 65,2 kJ/Mol (azeotrope Salpetersäure) bzw. 37,5 kJ/Mol (hochkonzentrierte Salpetersäure); diese Werte bestätigen die Annahme einer geschwindigkeitsbestimmenden Phasengrenzreaktion. Ein nennenswerter Einfluß der Fließgeschwindigkeit auf die Korrosion war nicht nachweisbar.
Glatt‐ und Festwalzen an PKW Fahrgestell‐ und Antriebsbauteilen
Authors: Gruber S. , Holzheimer G. , Naundorf H.
Published: December 2004

Kraftfahrzeug‐Bauteile, insbesondere Fahrwerkskomponenten und Antriebsbauelemente sind festigkeitsmäßig dynamisch hoch beansprucht.

Bei der Neukonstruktion wird dem durch Dimension, Werkstoffauswahl und Konstruktionsprinzip Rechnung getragen. An bestehenden Konstruktionen, wenn diese beispielsweise durch spätere Leistungssteigerung höher belastet werden, scheiden in der Regel die genannten Maßnahmen aus. Hier bleiben dann neben anderer Werkstoffwahl nur festigkeitssteigernde Maßnahmen und Verfahren.

Als ein bedeutendes Verfahren steht hier das Festwalzen. Die Beispiele ausgeführter Konstruktionen zeigen die möglichen Festigkeitssteigerungen, den Einfluß der Walzkräfte auf die Bauteilfestigkeit sowie erwünschte und unerwünschte Begleiterscheinungen.

Es wird verglichen zwischen Festwalzen und anderen Maßnahmen zur Festigkeitssteigerung wie Induktivhärten.

Das Ergebnis zeigt das Festwalzverfahren als kostengünstig, sehr wirksam und sicher in der Handhabung. Grenzen liegen verfahrensbedingt in der Geometrie (offene rotationssymmetrische Querschnitte notwendig), Dimension (Bauteil zu groß, Querschnitt zu filigran) und im Einsatzbereich (Temperatur) der Bauteile.
Über die Abschätzung des Größeneinflusses bei unregelmäßig beanspruchten Bauteilen
Authors: Schweiger G. , Lowak H. , Heckel K.
Published: December 2004

Geometrisch ähnliche Lochstäbe unterschiedlicher Größe wurden einer Gaußschen Zufallsbelastung bzw. einer Einzelflugbelastung unterworfen. Die Versuche wurden mit dem Stahl StE 47 und der Al‐Legierung AlCuMg 2 auf jeweils zwei Mittelspannungshorizonten durchgeführt. Es wurde die Anrißlastspielzahl ermittelt, wobei je Versuchspunkt vier Probestäbe zur Verfügung standen.

Die Umrechnung der an verschieden großen Proben ermittelten Anrißlastspielzahl wurde mit Hilfe der zweiparametrigen Weibull‐Verteilung vorgenommen. Zur Bestimmung des Weibullexponenten standen jeweils nur vier Einzelergebnisse zur Verfügung, so daß dessen Wert nur sehr unsicher bestimmt werden konnte. Trotzdem konnten die Versuchsergebnisse tendenziell richtig umgerechnet werden.
Relaxationsverhalten des Werkstoffs X6 CrNi 18 11 (DIN 1.4948) für den Temperaturbereich 450–650 °C
Authors: Gomm W. , Stärk E. , Grosser E. D. , Dietz W.
Published: December 2004

Anhand eines umfangreichen Meßdatenfeldes von Relaxationsversuchen nach einsinniger Belastung, das den Temperaturbereich 450–650 °C und Versuchszeiten bis 1000 h abdeckt, wird für den Werkstoff X6 CrNi 1811 eine mittlere Spannungs‐Zeit‐Beziehung für das Relaxationsverhalten abgeleitet. Für die ausgewählte Temperatur von 550 °C werden die Meßdaten einer repräsentativen Halbzeuglieferung und die abgeleiteten mittleren Beziehungen vergleichend gegenübergestellt.

Aus der schon veröffentlichten Charakterisierung des mittleren Kriechverhaltens des Werkstoffs X6 CrNi 18 11 wird unter Verwendung gängiger Verfestigungstheorien numerisch das Relaxationsverhalten berechnet und mit der aus den Daten abgeleiteten mittleren Beziehung verglichen.
Druckversuch an Scheiben zur Prüfung der Wasserstoffversprödung von Metallen
Authors: Speitling A. , Vibrans G.
Published: December 2004

Eine Anlage für Beulversuche wird vorgestellt. Es werden an scheibenförmigen Proben die Berstdrücke unter Helium und unter Wasserstoff ermittelt. Der jeweilige Berstdruck wird als Funktion der Druckanstiegsgeschwindigkeit dargestellt. Dabei erhält man für die meisten Metalle ein deutliches Berstdruckminimum unter Wasserstoff. Seine Entstehung wird diskutiert. Als Maß für die Wasserstoffempfindlichkeit wird das Berstdruckverhältnisx= (PHe/PH2)maxangegeben.

Untersucht wurde der Werkstoff 34 CrMo 4 im vergüteten sowie normalisierten und kaltverformten Zustand, ferner austenitischer Stahl, NE‐Metalle (V, Nb, Ta, Mo) und amorphe Metalle. Die Messungen bestätigen, daß der Beultest besonders einfach und zweckmäßig zum Nachweis der Wasserstoffversprödung ist. Selbst an Werkstoffen, die i. a. als wasserstoffbeständig gelten, läßt sich die Wirkung des H2nachweisen. So ergab sich an austenitischem CrNi‐Stahl ein Wert vonx= 1,5. Die stärkste Versprödung zeigte das amorphe Metall Vitrovac 0040 mitx= 9,8.
On‐Line Measurement of Onset and Growth of Edge‐Delaminations in CFRP‐laminates by an optical grating reflection method
Authors: Schütze R. , Goetting H. C.
Published: December 2004

The onset and growth of edge‐delaminations in multidirectional CFRP‐specimens under quasi‐static and fatigue loading was determined by the application of a new optical grating reflection method. This procedure allows the on‐line observation of surface deformations corresponding to the actual size of propagating edge‐delaminations. The evaluation of the grid patterns described the growth of the delamination versus increasing load or number of cycles, respectively, and permitted the measurement of out‐of‐plane deformations with relatively high resolution.
Prüfmethoden für langjährig gebrauchte GFK‐Behälter
Authors: Hessel J. , Gaube E.
Published: December 2004

Kunststoffbehälter aus glasfaserverstärkten ungesättigten Polyesterharzen mit und ohne thermoplastischer Auskleidung werden seit langem zur Lagerung von Säuren, Laugen, Salzlösungen etc. eingesetzt. Diejenigen Behälter, die vor Inkrafttreten der Gesetze zum Schutz des Grundwassers installiert worden sind, wurden noch nicht in der Form auf ihre Eignung untersucht, wie es heute üblich ist. Deshalb ergibt sich hier die Notwendigkeit einer nachträglichen Eignungsfeststellung. In der vorliegenden Arbeit wird ein Konzept für eine solche Prüfung vorgestellt.
Schwingungsverschleißfestigkeit von plasmanitriertem, 34 CrAlMo 5
Authors: Rie K.‐T. , Lampe Th. , Broszeit E. , Schweighöfer B. O.
Published: December 2004

Unter Schwingungsverschließbeanspruchung wird hier eine oszillierende Gleitbewegung von sehr kleiner Amplitude (1–3 μm) bei gleichzeitiger schwingender Werkstoffbelastung verstanden. Kennzeichnend ist das Auftreten von Scheuer‐ und Reibschweißstellen. Diese Oberflächenschäden bewirken die Bildung von Mikrorissen, welche sich ausbreiten und zum vorzeitigen Ermüdungsbruch des Bauteils führen. Zur Simulation solcher Schadensvorgänge, wie sie bei Paarverbindungen wie Wälzlagersitzen, Turbinenschaufeln und Wellen Naben‐Verbindungen bekannt sind, wird eine Reibkufenapparatur benutzt.

Das Plasmanitrieren und das Plasmanitrocarburiern metallischer Werkstoffe sind thermochemische Wärmebehandlungsverfahren, die den mikrostrukturellen Aufbau der oberflächennahen Bereiche Verändern. Dadurch werden die mechanisch‐technologischen Eigenschaften von Werkstücken, wie z. B. der Verschleiß‐ und Korrosionswiderstand sowie die Dauerfestigkeit verbessert. Aufgrund seiner verfahrenstechnischen Vorteile wird das Plasmanitrieren inzwischen in vielen Fertigungsbereichen angewendet.

Die Ermittlung der Schwingungsverschleißfestigkeit an vergütetem und plasmanitriertem bzw. ‐nitrocarburiertem 34 CrAlMo 5 zeigt, daß durch diese Behandlungsverfahren die Zugschwellfestigkeit um bis zu 14%, die Schwingungsverschleißfestigkeit um bis zu 50% angehoben werden kann.
An optical Strain Measurement Facility for damage mechanics investigations on composites
Authors: Goetting H. C. , Schütze R.
Published: December 2004

In order to support experimental studies for a damage mechanics research program on CFRP composites a fast contactless strain measurement facility based on light‐diffraction has been developed. It can be utilized in static and fatigue investigations of materials for stiffness measurements and evaluations of local strain distributions in one plane. The principle of measurement and grating preparation techniques as well as mechanical, optical and electronical set‐up are described here in detail. Some results of strain field investigations on notched and un‐notched CFRP‐laminates under static and fatigue load are presented and discussed.
Mehrlagige galvanische Chromschichten unter mechanischen und tribologischen Beanspruchungen
Authors: Ginsberg J. , Gahr K.‐H. Zum
Published: December 2004

Das Verhalten ein‐ und mehrlagiger Chromschichten wurde unter statischer und schwingender Biegebeanspruchung sowie unter Bedingungen des Abrasivverschleißes untersucht Ergänzend wurden die Eigenspannungen der verschiedenen Schichtsysteme ermittelt und licht‐und rasterelektronenmikroskopische Analysen der Bildung und Ausbreitung von Rissen vorgenommen. Die Ergebnisse zeigen, daß durch einen optimierten mehrlagigen Schichtaufbau das Eigenschaftsprofil der Verbundkörper unter kombinierter mechanischer und tribologischer Beanspruchung verbessert wird.
CO2‐ Laserschneiden von Siliziumnitrid – Möglichkeiten und Grenzen
Authors: Wielage B. , Drozak J.
Published: December 2004

Siliziumnitrid (Si3N4 · Y2O3) wurde in verschiedenen Stärken mit einem 1500 W CO2− Laser getrennt. Die beim Schneiden mit unterschiedlichen Bearbeitungsgasen (Sauerstoff, Luft, Stickstoff und Argon) auf der Schnittfläche entstandenen festen Reaktionsprodukte wurden rasterelektronen‐, lichtmikroskopisch und röntgenographisch untersucht. Weiterhin wurde das Festigkeitsverhalten getrennter Keramik im 4‐Punkt‐Biegeversuch geprüft, um den Materialschädigungsgrad zu bestimmen. Die durchgeführten Parameterstudien belegen, daß die besten Trennergebnisse bezüglich der Biegefestigkeit und der Schnittflächenbeschaffenheit nur mit äußerst kurzen Laserpulslängen sowie mit Sauerstoff als Bearbeitungsgas zu erzielen sind.