Haemagglutination of Bluetongue virus (BTV), a simple preparation of high titre antigen
Authors: Yang Ch. , Ho Ellen , Hübschle O. J. B. 
Published: August 2010

The hitherto complicated procedure of producing staphylococcal enterotoxins has been simplified and reduced to two purification steps. The first one is a cationic exchange on CM‐cellulose. The second one is chromatofocusing for the toxin types A, B and C1 or preparative flat‐bed gel electrofocusing for type D toxin. The resulting products exhibit a purity of 74 % to 92 % according to the polyacrylamide densitogram. They have been used for immunizing rabbits. The resulting antisera are very well suited for ELISA serology and at working dilution do not cross‐react with heterologous antigens. A diagnostic kit is now based on these methods.

Einfache Herstellung von Staphylokokken‐Enterotoxinen (SET) durch Chromatofokussierung und Isoelektrofokussierung in Flachbett‐Gelen

Das bisherige komplizierte Verfahren der Staphylokokken‐Enterotoxinherstellung wurde vereinfacht und auf zwei Reinigungsschritte reduziert. Der erste ist ein Kationenaustausch auf CM‐Zellulose. Der zweite besteht aus einer Chromatofokussierung für die Toxine Typ A, B und C1 oder aus einer präparativen Flachbett‐Gel‐Elektrofokussierung für das Toxin Typ D. Die daraus resultierenden Produkte zeigen eine Reinheit von 74 % bis 92 % gemaß dem Polyacrylamid‐Densitogramm. Sie wurden zur Immunisierung von Kaninchen verwendet. Die daraus gewonnenen Antisera sind für die ELISA‐Serologie gut geeignet und bilden in der Arbeitsverdünnung keine Kreuzreaktionen mit heterologen Antigenen. Ein Diagnostik‐Kit basiert nun auf diesen Methoden.

Préparation simple des entérotoxines de staphylocoques (SET) par chromato focusing et isoelectrofucusing dans des gels sur couche plate

La méthode jusqu'à maintenant compliquée de préparation des entérotoxines de staphylocoques a été simplifiée et réduite à deux pas de purification. La première est un échange cationique sur cellulose CM. La deuxième consiste en une chromatofocusing pour les toxines de type A, B et C1 ou en une isoelectrofocusing préparative sur gel en couche plate pour la toxine du type D. Les produits qui en résultent présentent une pureté de 74 % à 92 % selon le densitogramme de polyacrylamide. Ils ont été utilisés pour l'immunisation de lapins. Les antisérums ainsi obtenus sont tout à fait valables pour la sérologie ELISA et ne donnent avec une dilution de travail aucune réaction croisée avec des antigènes hétérologues. Un kit de diagnostic est actuellement basé sur ces méthodes.

La elaboración simple de enterotoxinas estafilocócicas (SET) mediante enfocamiento cromático y enfocamiento isoeléctrico en geles de cama plana

El procedimiento complicado hasta la fecha para la elaboración de enterotoxinas estafilocócicas se pudo simplificar, reduciéndose a dos pasos de purificación. El primero consiste en un intercambio de cationes sobre celulosa CM. El segundo estriba en un enfocamiento cromático para las toxinas de los tipos A, B y C1 o en un electroenfocamiento preparatorio en gelosa de cama lisa para la toxina del tipo D. Los productos resultantes de esto muestran una pureza de 74 % hasta 92 % conforme al densitograma en poliacrilamida. Las enterotoxinas mencionadas fueron utilizadas para inmunizar conejos. Los antisueros obtenidos así resultan muy apropiados para la serología concerniente a la ELISA, no formando al ser diluidos durante el trabajo reacciones cruzadas con antígenos heterólogos. Un juego de diagnóstico se basa en estas técnicas.