Dermal Fibroblast Hücrelerinde Oleuropeinin Antioksidan Özelliğinin Ve Yaşlanma Üzerine Etkilerinin Araştırılması
Authors: DEMİRCAN Günnur , GÜZELSOY Ümmügülsüm 
Published: May 2019

ÖZET

AMAÇ:

Yapılan çalışmada hidrojen peroksit
ile oksidatif stres oluşturulmuş dermal fibroblast hücrelerine farklı dozlarda oleuropein
uygulanmış ve oleuropeinin oksidatif strese ve yaşlanma mekanizmasına karşı etkileri
incelenmiştir.

 

GEREÇ VE
YÖNTEM:

Oleuropeinin dermal fibroblast
hücreleri üzerindeki toksik etkisi MTT analiziyle belirlenmiştir. Oksidatif
stres oluşturulmuş dermal fibroblast hücrelerinde oleuropeinin total
antioksidan kapasite üzerine etkisi total antioksidan durumu inceleme kiti ve
total oksidan kapasite üzerine etkisi, total oksidan durumu inceleme kiti ile
belirlenmiştir. Senesensin (yaşlanmanın) test edilmesinde standart
protokollerde yer alan SA-ß-gal (senescence associated ß-galaktosidase)
aktivitesi hücrelere verilen X-gal substratının parçalanması yöntemi ile
ölçülmüştür.

 

BULGULAR:

Oleuropeinin toksik doz düzeyi 750 μM olarak
saptanmıştır. BJ Fibroblast hücrelerinde  24 saat süre ile H2O2 ile
inkübasyonundan kaynaklanan total oksidan durumunda istatistiksel olarak
anlamlı olmayan bir azalma gözlemlenmiştir (p&gt;0,05).  Oleuropein ile muamele edilen BJ Fibroblast
hücre gruplarında 24 saat süre ile H2O2 ile muamele
edilen BJ Fibroblast hücre gruplarına göre total antioksidan durumunda
istatistiksel olarak anlamlı bir artış gözlemlenmiştir (p&lt;0,05). H2O2 ile oksidatif stres oluşturulduktan sonra
oleuropein ile muamele edilen hücre gruplarında yaşlanma etkilerinin daha az
ortaya çıktığı SA-ß-gal boyama ile tespit edilmiştir.

SONUÇ:

Oleuropeinin fibroblast hücrelerinde antioksidan enzim
aktivitesini arttırdığı ve buna bağlı olarak oksidatif stres koşullarında
hücrelerde meydana gelen yaşlanma mekanizmalarını azalttığı gözlemlenmiştir.

 

Anahtar Kelimeler: Oleuropein;
yaşlanma; oksidatif stres; fibroblast

 

ABSTRACT

AİM:

               In the study, oleuropein was administered to dermal fibroblast cells oxidatively stressed with hydrogen peroxide at different doses and the effects of oleuropein on oxidative stress and aging mechanism were investigated.

 

MATERIAL
METHOD

               The toxic effect of oleuropein on dermal fibroblast cells was determined by MTT analysis. The effect of oleuropein on total antioxidant capacity in oxidative stressed dermal fibroblast cells was evaluated with total antioxidant status determination kit and the effect of oleuropein on total oxidant capacity in oxidative stressed dermal fibroblast cells was evaluated with total oxidant status determination kit. SA-ß-gal (senescence associated ß-galactosidase) activity, which is included in standard protocols when senescence is tested, was measured by the method of disruption of the X-gal substrate given to the cells.                RESULTS               The toxic dose level of oleuropein was determined as 750 μM. A statistically insignificant reduction in the total oxidant status from incubation with H2O2 for 24 hours was observed in BJ Fibroblast cell line (p&gt;0,05).  A statistically significant increase in the total antioxidant status was observed in oleuropein treated BJ fibroblast cell groups compared to BJ Fibroblast cell groups treated with H2O2 for 24 hours (p&lt;0,05). After oxidative stress formation with H2O2, the aging effects in the oleuropein-treated cell groups were less marked by SA-ß-gal staining.                 CONCLUSION               It has been observed that oleuropein increases the activity of antioxidant enzymes in fibroblast cells and consequently reduces aging mechanisms in cells under oxidative stress conditions.