Über das Verhalten des Virus der Maul‐ und Klauenseuche beim Einfrieren und Auftauen in Gegenwart verschiedener Medien
Authors: Storz Hanns 
Published: September 2010

Untersucht wurde das Verhalten des Virus der Maul‐ und Klauenseuche aus Muskulatur von Säuglingsmäusen beim Einfrieren von Temperaturen von —20° C und —65° C und beim Auftauen bei 4° C im Kühlschrank, bei 22° C Zimmertemperatur und bei 37° C im Wasserbad in Gegenwart verschiedener Medien. Verwendet wurden Puffersysteme des schwach sauren, des neutralen und des schwach alkalischen Bereiches.

Dabei ergab sich, daß die Viruszerstörung in den brauchbaren Flüssigkeiten völlig unabhängig war von der Geschwindigkeit bzw. der Temperatur des Einfrierens und Auftauens.

Für Gefrierversuche mit MKS‐Virus erwies sich das Experimentieren bei pH 8,0 als vorteilhaft. Ein wesentlicher Einfluß des pH‐Wertes auf den Grad der Schädigung war im optimalen Bereich von pH 7,0 bis 9,0 nicht zu erkennen. Der Phosphatpuffer nach Sörensen, der Boratpuffer nach Holmes, der Borax‐Kaliumbiphosphat‐Puffer nach Kolthoff und der Borsäure‐Soda‐Puffer nach Atkins und Pantin wurden beim Einfrieren sauer und waren deshalb ungeeignet.

Das Maß der Schädigung des MKS‐Virus war bei den einzelnen Lösungsmitteln sehr unterschiedlich. Der Virusverlust war am größten bei den zuletzt genannten Puffern sowie bei Aqua dest., geringer bei Rinderamnionflüssigkeit. In Gegenwart des Glykokollpuffers, des isotonen Phosphatpuffers (I. P.) und der Ringer‐Locke‐Tris‐Lösung wurde das Virus durch einen einmaligen Gefrierprozeß nicht geschädigt. Nach 10‐ bis 15‐maliger Kälteeinwirkung setzte auch bei diesen Lösungsmitteln eine Schädigung des Virus ein.

Eine Erhöhung der Viskosität sowohl bei gepufferten als auch bei ungepufferten Lösungen wirkte sich schützend gegenüber schädigenden Einflüssen auf das MKS‐Virus aus. Lösungen mit einer Viskosität von 0,95 Centipoise und weniger waren ausnahmslos ungeeignet für Gefrierversuche mit diesem Erreger. Bei einer Viskosität des Mediums über 1,7 Centipoise trat auch ohne Pufferung keine Schädigung ein.

Eine äußerst wirksame Viskositätserhöhung und Schutzwirkung war durch Saccharose‐Zusatz zu erreichen.

The behaviour of the virus of foot‐and‐mouth disease when subjected to freezing and thawing in various media

The behaviour of foot‐and‐mouth disease virus from the musculature of suckling mice was studied when it was subjected to freezing at temperatures of —20° and —60° C., and also by thawing at 4° C. in the refrigerator, at 20° C. room temperature, and at 37° C. in a water bath. Various media, including buffer systems of weakly acid, neutral and weakly alkaline reaction were used.

Damage to the virus did not depend on the speed or temperature of freezing and thawing.

Freezing experiments with virus gave favourable results at pH 8.0 but no significant influence of pH was seen in the range 7.0 to 9.0.

The phosphate buffer of Sörensen, the borate buffer of Holmes, the borax potassium biphosphate buffer of Kolthoff and the boric acid soda buffer of Atkins and Pantin were acid in reaction when frozen, and were on that account unsatisfactory.

The amount of damage to the virus varied widely with the different media. Loss of virus was greatest with the buffers mentioned above and with distilled water, and less with bovine amniotic fluid. In contrast, glycocol buffer, isotonic phosphate buffer (I. P.) and Ringer‐Locke‐Tris solution caused no damage to the virus after a single freezing, but did so when the process was repeated ten to fifteen times.

Increasing the viscosity of buffered and unbuffered solutions had a protective effect on the virus. Solutions with a viscosity of 0.95 centipoise and less were without exception unsuited for freezing experiments with this virus. When the viscosity of the media was above 1.7 centipoise there was no damage to the virus even when buffer was omitted.

The addition of saccharose to media produced a very striking increase in viscosity and protective effect on the virus.

Le comportement du virus de la fièvre aphteuse après congélation et dégel dans différents milieux

On étudia le comportement du virus de la fièvre aphteuse provenant de la musculature de souriceaux après congélation à des températures de —20° et —65° C. et dégel à 4° C au frigidaire, à 22° à la température de la chambre et à 37° au bain‐marie. On utilisa des solutions‐tampon légèrement acides, neutres et légèrement alcalines.

On constata au cours de ces essais que la destruction du virus dans les liquides utilisables était entièrement indépendante de la rapidité ou de la température de la congélation et du dégel.

Dans les essais de congélation avec le virus de la fièvre aphteuse, il est avantageux d'expérimenter au pH 8,0. Une influence appréciable de la valeur du pH sur l'intensité du dommage causé ne put être observée dans les limites optimales du pH comprises entre 7,0 et 9,0. La solution‐tampon phosphatée de Sörensen, le tampon au borate selon Holmes, le tampon au borax, et biphosphate de potassium selon Kolthoff et le tampon à l'acide borique et soude selon Atkins et Pantin devenaient acides lors de la congélation et étaient par conséquent inutilisables.

L'importance des dommages subis par le virus de la fièvre aptheuse était très différente selon les solutions employées. La perte la plus grande fut constatée avec les tampons nommés ci‐dessus, ainsi qu'avec de l'eau distillée. Elle était plus faible avec du liquide amniotique bovin. En présence du tampon au glycol, du tampon au phosphate isotonique (I. P.) et de la solution de Ringer‐Locke‐Tris le virus ne fut pas endommagé par une congélation unique. Si l'on répétait cette congélation 10 à 15 fois on observait cependant, même avec ces solutions, une détérioration du virus.

Une augmentation de la viscosité tant dans les solutions tamponnées que dans les solutions non tamponnées avait une action protectrice sur le virus de la fièvre apthteuse. Les solutions qui avaient une viscosité inférieure ou égale à 0,95 Centipoise étaient sans exception inutilisables pour des essais de congélation avec ce virus. Si la viscosité atteignait 1,7 Centipoise ou plus, on ne constatait aucun dommage, même sans tampon.

Par l'adjonction de saccharose on put obtenir une augmentation de viscosité qui assurait une protection très efficace.

Sobre el comportamiento del virus aftoso al congelar y deshelar en presencia de varios medios

Se ha estudiado el comportamiento del virus de la glosopeda procedente de musculatura de ratones lactantes al congelar a temperaturas de —20° y —65° C. y al deshelar a 4° C. en el frigorífico, a la temperatura ambiente a 22° C., y a 37° C. en bao maría en presencia de varios medios. Se utilizaron sistemas tampón de las zonas ligeramente ácida, neutra y ligeramente alcalina.

Se obtuvo por resultado que la destrucción del virus en los líquidos útiles era independiente por completo de la velocidad y de la temperatura de congelación y deshielo.

En los ensayos de congelación con virus aftoso resultó ventajosa la experimentación a pH 8.0. No se pudo reconocer ninguna influencia esencial del valor del pH sobre el grado de lesión en la zona óptima de pH 7.0 a 9.0. El tampón al fosfato según Sörensen, el tampón al borato según Holmes, el tampón al bórax‐fosfato bipotásico según Kolthoff y el tampón ácido bórico‐carbonato sódico según Atkins y Pantin se acidificaban al enfriarse y por ello eran poco apropiados.

El grado de detrimento del virus aftoso variaba mucho con los distintos disolventes. La pérdida de virus era mayor en los tampones citados en los últimos lugares, así como en agua destilada, y menor en el líquido amniótico de vaca. En presencia de tampón a la glicocola, del tampón isotónico al fosfato y de la solución Ringer‐Locke‐Tris el virus no fué menoscabado mediante un único proceso de congelación. Tras actuar el frío de 10 a 15 veces también en estos disolventes se produjo cierto detrimento del virus.

El aumento de la viscosidad tanto en soluciones tamponadas como en las no tamponadas repercutió de manera protectora frente a los influjos perjudiciales sobre el virus aftoso. Las soluciones con una viscosidad de 0.95 centipoises y menos no eran apropiadas sin excepción alguna para los ensayos de congelación con este agente etiológico. En la viscosidad del medio superior a 1.7 centipoises no se produjo ningún detrimento incluso sin amortiguación.

Por medio de la adición de sacarosa se pudo obtener un aumento de la viscosidad y acción protectora extraordinariamente eficaces.