The role of blood plasma microparticles in the development of procoagulant changes in post-COVID-19 patients
Authors: Матвиенко О.Ю. , Смирнова О.А. , Головина О.Г. 
Published: June 2024

Введение. Известно, что новая коронавирусная инфекция COVID-19 ассоциирована с прокоагулянтными изменениями системы гемостаза, которые могут сохраняться и после выздоровления. Изучение роли микрочастиц (МЧ) плазмы крови в сохранении протромботических изменений после перенесенного заболевания даёт возможность выявить новый маркер риска тромбоэмболических осложнений. Цель исследования: оценить значение МЧ для развития гиперкоагуляционных изменений системы гемостаза у пациентов, перенесших COVID-19 в легкой форме. Материалы и методы. В проспективное наблюдательное исследование были включены 39 пациентов (средний возраст 45 лет), перенесших COVID-19 в легкой форме. Пациенты не получали антитромботическую профилактику. Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту. Оценку количества и происхождения МЧ прово­дили методом проточной цитометрии с использованием флуоресцентно меченых антител к поверхностным маркерам клеток. Генерацию тромбина определяли методом калиброванной автоматизированной тромбинографии в свободной от тромбоцитов плазме; измеряли эндогенный тромбиновый потенциал (endogenous thrombin potential, ETP) и пиковую концентрацию тромбина (Peak). В качестве триггеров использовали «PRP-reagent», содержащий рекомбинантный тканевой фактор, и «MP-reagent», содержащий отрицательно заряженные фосфолипиды. Результаты. Значимые различия по параметрам ETP и Peak у пациентов, перенесших COVID-19, с группой контроля были получены при использовании обоих реагентов. Так, если у здоровых лиц показатели ETP и Peak в случае применения «PRP-reagent» или «MP-reagent» составляли 471,8 [384,2–564,0] нмоль×мин и 18,4 [12,3–20,2] нмоль или 566,5 [453,2–708,0] нмоль×мин и 46,3 [32,9–67,2] нмоль соответственно, то у пациентов – 562,5 [428,3–918,6] нмоль×мин и 24,4 [15,5–36,1] нмоль и 1263,4 [721,8–1800,4] нмоль×мин и 151,6 [87,1–214,8] нмоль соответственно. Также в группе пациентов было отмечено повышение количества МЧ тромбоцитарного происхождения: 0,28 [0,17–0,415] у пациентов против 0,13 [0,09–0,26] у здоровых лиц. Заключение. У пациентов, перенесших COVID-19 в легкой форме, МЧ, в первую очередь тромбоцитарного происхождения, значимо увеличивают протромботический потенциал плазмы крови за счет тканевого фактора и отрицательно заряженных прокоагулянтных фосфолипидов, экспонированных на поверхности данных МЧ, что может способствовать повышению риска развития тромботических осложнений. Увеличение количества циркулирующих МЧ тромбоцитарного происхождения можно использовать как маркер активации системы гемостаза после перенесенной новой коронави­русной инфекции COVID-19.

Introduction. COVID-19 is widely recognized to be associated with prothrombotic states of hemostasis, potentially resulting in hypercoagulability and thrombosis complications in recovering patients. Examining the role of microparticles (MPs) in sustaining prothrombogenic changes after COVID-19 provides an opportunity to identify new thromboembolic risk markers. Aim: to assess the importance of MPs for the development of hypercoagulable changes in patients after mild COVID-19. Materials and Мethods. The prospective observational study included 39 patients (median age = 45) following mild COVID-19. Patients did not receive any antithrombotic prophylaxis with anticoagulant and/or antiplatelet agents. Reference blood samples were collected from 30 healthy individuals (balanced by age and gender) to measure the amount and origin of MPs flow cytometry using fluorescently labeled antibodies to cell surface markers. Thrombin generation was measured in platelet-free plasma by Calibrated Automated Thrombinography. Endogenous thrombin potential (ETP) and peak thrombin level (Peak) were measured using “PRP-reagent” and “MP-reagent“, respectively. “PRP-reagent” contained recombinant tissue factor, while “MP-reagent” contained negatively charged phospholipids. Results. Significant differences in ETP and Peak level were observed between post-COVID-19 patients and controls for both reagents. If in healthy individuals the ETP and Peak level using “PRP-reagent” or “MP-reagent” were 471.8 [384.2–564.0] nmol×min and 18.4 [12.3–20.2] nmol and 566.5 [453.2–708.0] nmol×min and 46.3 [32.9–67.2] nmol, respectively, then in patients, they were 562.5 [428.3–918.6] nmol×min and 24.4 [15.5–36.1] nmol and 1263.4 [721.8–1800.4] nmol×min and 151.6 [87.1–214.8] nmol, correspondingly. Also, an increase in platelet-derived MPs was observed: 0.28 [0.17–0.415] in patients vs. 0.13 [0.09–0.26] in healthy individuals. Conclusion. After mild COVID-19, MPs (particularly those derived from platelets) significantly increase the prothrombotic potential of blood plasma due to tissue factor and negatively charged procoagulant phospholipids exposed on the microparticles surface, which may increase the risk of thrombotic complications. An increased number of circulating platelet-derived MPs can serve as a marker for hemostasis activation after COVID‑19.