Reparative process in superficial burns, treated with wound cover, including collagen bands and platelets (experimental study)
Authors: Пономарев И.Н. , Макаров М.С. , Боровкова Н.В. , Андреев Ю.В. , Сторожева М.В. , Будаев А.А. 
Published: August 2021

Введение. При поверхностных ожогах процесс репарации происходит благодаря активности стволовых клеток и клеток-предшественников, сохранившихся в ране. Стимуляция миграционной, пролиферативной и секреторной активности этих клеток может быть инициирована с помощью компонентов, содержащихся в гранулах тромбоцитов. Значительно повысить сохранность тромбоцитарных гранул можно путем предварительной стабилизации тромбоцитов с помощью наночастиц серебра. Цель исследования - изучение репаративного эффекта коллагеновых повязок, насыщенных тромбоцитами, при лечении мышей с поверхностными ожогами. Методика. В работе использовались 3 типа раневых покрытий: коллагеновая повязка без тромбоцитов (контроль); повязка с нативными тромбоцитами (1-я опытная группа); повязка с тромбоцитами, предварительно стабилизированными 2,5 мкМ наносеребра (2 -я опытная группа). Тромбоциты выделяли из венозной крови доноров-добровольцев, консервированной на ЭДТА. Для стабилизации тромбоцитов в исходную суспензию с тромбоцитами предварительно добавляли раствор наносеребра до достижения концентрации 2,5 мкМ и инкубировали при 22 °С в течение 1 ч. Во всех опытах общее количество тромбоцитов с гранулами (биологически полноценные тромбоциты) в повязках составило 30-31 млн. После нанесения тромбоцитов раневые покрытия экспонировали в течение 30 мин при 37 °С, затем удаляли всю жидкую фракцию с неадгезировавшими тромбоцитами. Готовые повязки хранили при -40 °С и размораживали непосредственно перед экспериментом. Результаты. Через 3 сут у животных контрольной группы наблюдалась выраженная воспалительная реакция и значительная деформация коллагеновых волокон дермы, в опытных группах эти процессы были менее выражены. Использование коллагеновых повязок с тромбоцитами существенно усиливало миграцию эпителиальных клеток из дериватов кожи, а также миграцию фибробластов из глубоких слоев дермы. Через 5 сут эпителизация раны в контроле была частичной, тогда как у опытных животных эпителий был непрерывным по всей площади раны. В опытных группах сохранялась высокая миграционная активность эпителиальных клеток и фибробластов. Структурно деформированные волокна коллагена не выявлялись в опытных группах. Декомпактизация и отечность волокон в контрольной группе наблюдалась по всей глубине дермы, тогда как в опыте отечные волокна присутствовали только в сетчатом слое дермы. Заключение. Использование коллагеновых повязок с тромбоцитами ускоряло процессы эпителизации и восстановления волокон дермы на фоне сохранения локальной инфильтрация раны воспалительными клетками.

Activity of stem cells and primordial cells is the main reparative factor in healing of superficial burns. Components of platelet granules could stimulate cell migration, proliferation, and secretion. Survival of platelet granules can be enhanced by prior platelet stabilization with silver nanoparticles. The aim of this work was to study reparative effect of collagen bands, saturated with platelets, on mice with superficial burns. Methods. Three types of wound coatings were used: 1) collagen bands without platelets (control); 2) collagen bands with native platelets (1st experimental group); 3) collagen bands with platelets, prestabilized with 2.5 µM nanosilver (2nd experimental group). Platelets were harvested from venous blood of volunteer donors preserved in EDTA. Platelet were stabilized by incubation with 2.5 µM nanosilver at 22°С for 1 hr. In all experiments, the collagen bands contained 30-31 million platelets with granules, i.e., biologically normal platelets. Collagen bands were incubated with platelets at 37°С for 30 min, and then all solution with unadhered platelets was eliminated. Experimental bands were stored at -40°С and defrosted immediately before experimental treatment. Results. After three days of treatment, the control group had a pronounced inflammatory reaction and significant deformation of dermal collagen fibers. In the experimental groups, these processes were less pronounced. Collagen bands with platelets significantly increased migration of epithelial cells from the skin derivatives and migration of fibroblasts from the deep dermal layers. After five days, the epithelization of wounds in the control group was partial, while in experimental groups, epithelium covered all areas of the wound. Experimental groups maintained high migration activity of epithelial cells and fibroblasts. Structurally deformed collagen fibers were detected sporadically in the control group and were not detected in the experimental groups. Decompactization and swelling of fibers in the control group were observed throughout the depth of the derma, while in the experiment groups, swollen fibers were present only in the deep dermal layer. Conclusion. The use of collagen bands with platelets accelerated the processes of epithelialization and collagen remodeling associated with preserved local infiltration of the wound with inflammatory cells.