THE STUDY OF MMSC HOMING AFTER LIVER RESECTION
Authors: Маклакова И.Ю. , Гребнев Д.Ю. , Юсупова В.Ч. , Примакова Е.А. 
Published: December 2020

Цель работы - изучение направленного движения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК), выделенных из плаценты, в различные органы и ткани лабораторных животных в физиологических условиях и после субтотальной резекции печени. Методика. Клеточную культуру ММСК получали из хориона плаценты лабораторных крыс. Культивирование ММСК проводилось в условиях СО2- инкубатора при температуре 37 ºC с содержанием углекислого газа 5% и влажностью 90%. Замену среды проводили каждые 3-4 сут до достижения клетками 70-80 % конфлюэнтности. При формировании соответствующего монослоя осуществлялся пересев клеток. При трансплантации лабораторным животным была использована культура ММСК 3-го пассажа. Введение клеток производили сразу после выполнения субтотальной резекции печени. Резекция 70% печени у крыс выполнена по методике G.M. Higgins, R.M. Anderson. Введение ММСК, меченых акридиновым оранжевым, осуществляли внутривенно, интраперитонеально, в печеночную артерию, в портальную вену в дозе 4 млн кл/кг. массы тела. Анализ распределения ММСК проводили через 3 и 24 ч. Результаты. Показано, что через 1 сут после введения клеток ложно-оперированным животным не отмечено существенных изменений распределения ММСК по сравнению с их распределением через 3 ч. Однако если введение клеток сопряжено с оперативным вмешательством (лапаротомия для обеспечения введения клеток в v. portae и a. hepatica) происходит снижение их количества в периферической крови. Через 1 сут после резекции печени в изучаемых органах и тканях (периферическая кровь, легкое, селезенка, костный мозг, тонкий кишечник, почка) содержание трансплантированных ММСК ниже по сравнению с их количеством в тот же период времени в данных органах и тканях без резекции печени. Обращает внимание значительное увеличение количества введенных клеток в печени после ее резекции как через 3 ч, так и через 24 ч по сравнению с физиологическими условиями. Заключение. Отмечено значительное увеличение количества клеток в печени после ее резекции вне зависимости от способа введения. Внутрибрюшинный способ введения клеток показал низкую эффективность доставки клеток в органы и ткани организма.

The aim was to study migration of multipotent mesenchymal stromal cells (MSCS) isolated from the placenta to various organs and tissues of laboratory animals under the physiological conditions and after subtotal liver resection. Method. The MMSC cells for culturing were obtained from the rat placental chorion. MMSCs were cultured in a CO2 incubator at 37 oC, 5% CO2, and 90% humidity. The medium was replaced every 3-4 days until the cells reached 70-80 % confluence. Upon formation of an appropriate monolayer the cells were passed. The third passage culture of MMSC was used for transplantation to laboratory animals. Cells were injected immediately after subtotal liver resection. The 70% rat liver resection was performed according to the method of G.M. Higgins and R.M. Anderson. The acridine orange labeled MMSC were injected intravenously, intraperitoneally, into the hepatic artery, and into the portal vein at a dose of 4x106 cells/kg body weight. The MMSC distribution was analyzed at 3 and 24 hours. Results. In 24 h after the cell injection in the absence of liver resection, no significant changes were observed in the MMSCs distribution compared to their distribution in 3 hours. However, when the cell injection was associated with a surgery (laparotomy to ensure the cell injection into the portal vein and hepatic artery) the cell number was decreased in the peripheral blood. At one day after liver resection, the content of transplanted MMSCs was lower in the studied organs and tissues (peripheral blood, lung, spleen, bone marrow, small intestine, and kidney) compared to the respective values without liver resection in the same period. Noticeably, the number of injected cells was significantly increased in the liver at both 3 and 24 hours after resection compared to the physiological conditions. Conclusion. The number of cells was significantly increased in the liver after resection regardless of the cell administration route. Intraperitoneal cell injection showed a low effectiveness of cell delivery to organs and tissues.