Genetisches Fingerprinting von Inzuchtlinien, Auszuchten, transgenen Individuen und 3T3‐Zellen von Mus musculus mit der Sonde B. E. S. T. MZ 1.3*
Authors: Hins J. , Gruber F. P. 
Published: May 2010

Genetic monitoring of inbred and outbred strains, transgenic individuals and 3T3‐cells of Mus musculus with the probe B. E. S. T. MZ 1.3

DNA samples from different inbred strains and F1‐hybrids, from two outbred strains and from transgenic animals of the species Mus musculus were tested according to the “DNA fingerprint” technique (Jeffreys et al., 1985) using the B. E. S. T.‐probe MZ 1.3 (Fa. Biotest, Frankfurt) and the restriction endonuclease Hinf 1. In addition, the same method was applied to two cell types i. e. BALB/3T3 clone A 31 and 3T3 B‐SV40.

The DNA fingerprinting technique with probe MZ 1.3 proved to be a reliable method for genetic monitoring of different strains of mice. All inbred strains tested as well as their substrains could be identified and distinguished from each other without any doubt. Congenic and transgenic individuals, however, were identical with their background strains. After several in vitro passages, cells from cultures showed the similar DNA configuration as the donor strains. Within outbred strains, it was possible to quantify heterozygosity by the configuration of the DNA‐patterns. These results suggest that it might be appropriate to replace the mathematically estimated inbreeding coefficient by so‐called identity‐coefficient (IK), which would depend on the probe and the restriction endonuclease used (e. g. IKMZ 1.3/Hinf I).

Using the MZ 1.3 probe, the DNA fingerprint technique allows a unique genetic identification of different strains of mice and offers, furthermore, the possibility to use a colour kit rather than the usual P‐32 marker.

Mit der “DNA‐Fingerprinting Technik” (J. A. Jeffreys u. Mitarb., 1985) und mit Hilfe der B. E. S. T.‐Sonde MZ 1.3 (Fa. Biotest, Frankfurt) und der Restriktionsendonuklease Hinf I werden DNA‐Präparationen von verschiedenen Inzuchtlinien und F1‐Tieren, zwei Auszuchtstämmen und transgenen Tieren der Hausmaus, Mus musculus, untersucht. Ferner werden eine “teiltransfortmierte” 3T3‐Zellinie (BALB/3T3 Clone A31) und eine SV 40 transformierte 3T3‐Zellinie (3T3 B‐SV 40) in die Genomanalyse einbezogen.

Die Ergebnisse zeigen, da&#x007a;̀ das DNA‐Fingerprinting mit dem System MZ 1.3 eine verlä&#x007a;̀liche Technik für das genetische Monitoring von Mäusestämmen darstellt.

Alle untersuchten Inzuchtlinien und auch Sublinien sind eindeutig identifizierbar und voneinander zu unterscheiden.

Congene und transgene Individuen sind dagegen identisch mit ihren Background‐Stämmen.

Zellen haben nach mehreren in vitro‐Generationen noch die ähnliche DNA‐Konfiguration wie der Spenderstamm.

Innerhalb der Auszuchtstämme kann die Heterogenität durch die Konfiguration der gefundenen Bandenmuster gemessen werden. Die Ergebnisse aus diesen Untersuchungen, insbesondere der Auszuchtlinien, bestärken darüber hinaus die aufgestellte Forderung, den bisher üblichen, rein rechnerisch ermittelten Inzuchtkoeffizienten, durch einen tatsächlichen Identitätskoeffizienten (IK) zu ersetzen.

Dieser IK kann dabei nur in Abhängigkeit von der verwendeten Sonde und dem jeweiligen Restriktionsenzym gesehen werden (z. B. IKMZ 1.3/Hinf I).

Der Vorteil bei der Verwendung der Sonde MZ 1.3 liegt neben der differenzierten Kennung der Mäuse darin, da&#x007a;̀ nicht radioaktiv mit P‐32, sondern mit einer Färbereaktion gearbeitet werden kann.

Ein dreiteiliges Computerprogramm zur Erfassung und Auswertung der gewonnenen Daten wird derzeit ausgearbeitet. Es errechnet anhand der elektrophoretischen Laufstrecken die Anzahl der Basenpaare (bp) der markierten DNA‐Bruchstücke, verwendet die gefundenen bp‐Muster zur Eta‐blierung eines individuellen Codes und vergleicht schlie&#x007a;̀lich interindividuell zwei und mehrere DNA‐Muster zur Erstellung eines Identitätskoeffizienten.