РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ В ЖИДКОМ И СУХОМ ЭКСТРАКТАХ РАСТИТЕЛЬНОЙ КОМПОЗИЦИИ
Authors: М.А. Джавахян , М.Г. Токарева , Н.Б. Фадеев , В.Н. Дул , Ю.Э. Прожогина , Е.И. Каленикова 
Published: November 2024

Целью исследования была разработка методики количественного определения суммы флавоноидов как основных терапевтически активных соединений в экспериментальных жидком и сухом экстрактах уникальной растительной композиции, включающей траву пустырника, зверобоя, мелиссы и чабреца, а также валидация созданных методик. Определение суммы флавоноидов проводилось методом дифференциальной спектрофотометрии при длине волны 410 нм. Метод основан на реакции комплексообразования флавоноидов с хлоридом трехвалентного алюминия, в результате чего происходит батохромный сдвиг полосы поглощения с 330-350 нм до 390-410 нм, что позволяет провести количественное обнаружение искомых соединений в растворе по разнице аналитического сигнала тех же растворов без добавления солей алюминия. В качестве стандарта использован раствор стандартного образца (СО) рутина в 70% этиловом спирте. Валидация созданных методик проводилась согласно требованиям Государственной фармакопеи РФ XIV издания, ОФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик». В результате разработаны методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин в жидком и сухом экстрактах уникальной растительной композиции. Созданные методики подверглись валидации, в ходе которой были установлены критерии их приемлемости, а именно: специфичность, линейность, правильность, сходимость и воспроизводимость, которые признаны положительными. Полученные в ходе валидации данные дают возможность считать разработанные методики пригодными для достоверного количественного определения суммы флавоноидов в изучаемых сухом и жидком экстрактах для их дальнейшей стандартизации и контроля качества.

The aim of the study was to develop methods for quantifying the amount of flavonoids as the main therapeutically active compounds in experimental liquid and dry extracts of a unique plant composition, including motherwort, St. John's wort, Melissa and thyme, as well as their validation. Determination of the flavonoid sum was carried out by differential spectrophotometry at a wavelength of 410 nm. The method is based on the complexation reaction of flavonoids with trivalent aluminum chloride, resulting in a bathochromic shift of the absorption band from 330-350 nm to 390-410 nm, which allows quantitative detection of the desired compounds in the solution by the difference in the analytical signal of the same solutions without the addition of aluminum salts. As a standard, a solution of the standard sample rutin in 70% ethyl alcohol was used. Validation of the created methods was carried out according to the requirements of XIV edition of the State Pharmacopoeia of Russian Federation, General Pharmacopoeia article 1.1.0012.15 "Validation of analytical techniques". Methods of quantitative determination of the amount of flavonoids in terms of rutin in liquid and dry extracts of a unique plant composition have been developed. The developed methods underwent validation, during which the criteria of their acceptability were established, namely: specificity, linearity, correctness, convergence and reproducibility, which were recognized as positive. The data obtained during validation make it possible to consider the developed methods suitable for reliable quantitative determination of the amount of flavonoids in the studied dry and liquid extracts for their further standardization and quality control.