Patent ES-2527446-T3 (ES)
Title: Análisis de fusión de ácidos nucleicos con colorantes de saturación
Inventor: WITTWER CARL T
IPC: C12Q1/68
Filed: 2005-04-20
Granted: 2015-01-23
Abstract: Mezcla de reacción de PCR que comprende un ácido nucleico diana reactivos de PCR, un par de cebadores de oligonucleótidos configurados para amplificar una parte del ácido nucleico diana para producir un amplicón, y un colorante de unión a ADNdc que tiene la fórmula:**Fórmula** en la que el residuo representa un anillo aromático, monocíclico o policíclico, fusionado, opcionalmente sustituido o un anillo heteroaromático que contiene nitrógeno, monocíclico o policíclico, fusionado, opcionalmente sustituido; X es oxígeno, azufre, selenio, telurio o un residuo seleccionado entre C(CH3)2 y NR1, en el que R1 es hidrógeno o alquilo C1-6; R2 se selecciona del grupo que comprende alquilo C1-6, cicloalquilo C3-8, arilo, arilo(alquilo C1-3), hidroxialquilo, alcoxialquilo, aminoalquilo, mono y dialquilaminoalquilo, trialquilamonioalquilo, alquilencarboxilato, alquilencarboxamida, alquilensulfonato, residuos que contienen un heteroátomo cíclico opcionalmente sustituido, o residuos que contienen un heteroátomo acíclico opcionalmente sustituido; t >= 0 ó 1; Z es una carga seleccionada entre 0 y 1; R3, R9 y R10 se seleccionan independientemente del grupo que comprende hidrógeno, alquilo C1-6 y arilcarbonilo; n >= 0, 1 ó 2; y Q es un heterociclo seleccionado del grupo de estructuras que comprende:**Fórmula** en el que R5, R6, R7 y R8 se seleccionan independientemente del grupo que comprende hidrógeno, halógeno, alquilo, cicloalquilo, heteroalquilo, heterocicloalquilo, alquenilo, polialquenilo, alquinilo, polialquinilo, alquenilalquinilo, arilo, heteroarilo, alcoxi, alquiltio, ariltio, arilcarboniltio, dialquilamino, cicloheteroalquilcarboniltio, dialquilaminoalquilcarboniltio, trialquilamonioalquilcarboniltio, cicloalquiltio, cicloheteroalquiltio, trialquilamonioalquiltio y nucleosidiltio, cada uno de los cuales puede estar sustituido opcionalmente; un residuo que contiene un heteroátomo acíclico, o un residuo que contiene un heteroátomo cíclico, una unión PUENTE-COLORANTE con la fórmula:**Fórmula** en el que el PUENTE es un enlace covalente simple, o un enlace covalente lineal o ramificado, cíclico o heterocíclico, saturado o insaturado, que tiene 1-16 átomos diferentes al hidrógeno, tales como carbono, nitrógeno, fosfato, oxígeno y azufre, de tal forma que la unión contiene cualquier combinación de enlaces alquilo, éter, tioéter, amina, éster o amida; enlaces carbono-carbono simples, dobles, triples o aromáticos; enlaces fósforo-oxígeno, fósforoazufre, nitrógeno-nitrógeno o nitrógeno-oxígeno; o enlaces aromáticos o heteroaromáticos; y un grupo reactivo seleccionado entre halógenos, hidroxi, alcóxidos, aminas, ácidos carboxílicos, haluros, alcoholes, aldehídos, tioles, alquilo y ariltioles, alquilo y arilsulfonilos, ésteres de succinimidilo, cetonas e isotiocianatos; cada uno de los cuales comprende opcionalmente un residuo de amonio cuaternario, y R4 se selecciona del grupo que comprende arilcarboniltio, cicloheteroalquilcarboniltio, dialquilaminoalquilcarboniltio; trialquilamonioalquilcarboniltio, cicloalquiltio, cicloheteroalquiltio, trialquilamonioalquiltio, alquilnitriltio, y nucleosidiltio, cada uno de los cuales puede estar sustituido opcionalmente.