Patent AR-126413-A1 (AR)
Title: Estructuras para reducir la unión anticuerpo-lipasa
Inventor: HECHT ELIZABETH SARA
IPC: C07K16/00
Filed: 2022-07-08
Abstract: La presente solicitud se refiere a anticuerpos recombinantes que se modifican por ingeniería genética para alterar interacciones entre los anticuerpos y una o más lipasas endógenas de una célula huésped usada para producir los anticuerpos. En algunos casos, los anticuerpos se mutan en la región constante de la cadena pesada, tal como en CH1, CH2 y/o CH3. En otros casos, los anticuerpos se mutan para alterar su perfil de glicosilación.  Reivindicación 1: Un anticuerpo recombinante producido por una célula huésped modificada por ingeniería genética para expresar dicho anticuerpo, en donde dicho anticuerpo tiene una modificación (sustitución, eliminación o adición) de al menos un residuo de aminoácido en la región CH1, región CH2 o región CH3 de la cadena pesada del anticuerpo, en donde la modificación tiene como resultado una interacción alterada del anticuerpo con una o más lipasas endógenas expresadas por dicha célula huésped. Reivindicación 31: Un método para reducir las interacciones entre un anticuerpo recombinante y una o más lipasas endógenas expresadas en una célula huésped usada para expresar el anticuerpo, que comprende modificar por ingeniería genética una modificación (sustitución, eliminación o adición) de al menos un residuo de aminoácido en la región CH1, región CH2 o región CH3 de la cadena pesada del anticuerpo. Reivindicación 62: Un método para producir una proteína recombinante o anticuerpo, que comprende: a. expresar la proteína o anticuerpo en una célula huésped modificada para: mutar, regular de manera descendente o inactivar uno o ambos de a-Man-1 o a-Man-2; inhibir el procesamiento de precursores de glicano Man₉GlcNac₂ unidos a Asn y/o para aumentar especies de manosa de alto peso molecular, tales como Man6 o mayor, Man7 o mayor, o Man7-9, en relación con Man3-5; y/o aumentar la expresión de una o más enzimas que aumentan la longitud de la cadena de glicanos, tales como GNT-1, GNT-2, GNT-3, GNT-4abc, GNT-5 o GalT; y b. determinar si la proteína o anticuerpo tiene interacción reducida con una o más lipasas endógenas expresadas por dicha célula huésped en comparación con una proteína o anticuerpo expresado de una célula huésped no modificada. Reivindicación 63: Un método para producir una proteína recombinante o anticuerpo, que comprende: a. expresar la proteína o anticuerpo en una célula huésped en condiciones que aumentan significativamente la concentración de especies de manosa de alto peso molecular, tales como Man6 o mayor, Man7 o mayor, o Man7-9 en relación con especies manosiladas generales, y b. determinar si la proteína o anticuerpo tiene interacción reducida con una o más lipasas endógenas expresadas por dicha célula huésped en comparación con una proteína o anticuerpo expresado de una célula huésped no modificada. Reivindicación 65: Un método para producir una proteína recombinante o anticuerpo, que comprende: a. expresar la proteína o anticuerpo en una célula huésped modificada para eliminar al menos un sitio de glicosilación en al menos una lipasa endógena; y b. determinar si la proteína o anticuerpo tiene interacción reducida con una o más lipasas endógenas expresadas por dicha célula huésped en comparación con una proteína o anticuerpo expresado de una célula huésped no modificada.