Patent AR-084704-A1 (AR)
Title: METODO PARA IDENTIFICAR a AMILASAS RESISTENTES A LA PEPSINA PARA SU USO EN SUPLEMENTOS DE PIENSO Y FORRAJE
Inventor: ISAKSEN MAI FAURSCHOU
IPC: A23K1/165
Filed: 2011-07-08
Abstract: Un método para identificar una enzima a amilasa resistente a la pepsina para usar en un suplemento para pienso que comprende: i) proveer una enzima a amilasa; ii) mezclar dicha a amilasa con pienso basado en maíz y solución amortiguadora que comprende una concentración de pepsina de 9000 U/ml a pH 3, 40ºC, 500 rpm durante al menos 120 minutos y analizar la actividad de a amilasa de dicha a amilasa en comparación con una muestra control; en donde dicha muestra control difiere en que no hay pepsina presente durante la incubación; y iii) seleccionar una enzima a amilasa que sustancialmente mantiene la actividad de a amilasa bajo las condiciones de ensayo.Reivindicación 13: Un suplemento para pienso para animales monogástricos caracterizado porque comprende una a amilasa resistente a la pepsina y al menos un vehículo fisiológicamente aceptable que se selecciona del grupo que consiste en maltodextrina, caliza (carbonato de calcio), ciclodextrina, trigo o un componente de trigo, sacarosa, almidón, Na2SO4, Talco, PVA, sorbitol, benzoato, sorbato, glicerol, sacarosa, propilenglicol, 1,3-propanodiol, glucosa, parabenos, cloruro de sodio, citrato, acetato, fosfato, calcio, metabisulfito, formiato y mezclas de los mismos. Reivindicación15: El suplemento para pienso de acuerdo a la reivindicación 13 o reivindicación 14 caracterizado porque la amilasa resistente a la pepsina tiene una secuencia de aminoácidos: i) como se describe en SEQ ID Nº 1 o SEQ ID Nº 3; ii) como se describe en SEQ ID Nº 1 o SEQ ID Nº 3 excepto por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones; iii) que tiene al menos 85% de identidad con SEQ ID Nº 1; o al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 3; iv) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 2 o SEQ ID Nº 4; v) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 2 o SEQ ID Nº 4 debido a la degeneración del código genético; vi) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 2 o SEQ ID Nº 4 por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones de nucleótidos; o vii) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que tiene al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 2 o SEQ ID Nº 4. Reivindicación 33: Un método para preparar un forraje para un animal monogástrico caracterizado porque comprende mezclar suplemento para pienso de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 13 a 24 con uno o más materiales para pienso. Reivindicación 43: El forraje de acuerdo a la reivindicación 41 o reivindicación 42 caracterizado porque la a amilasa tiene una secuencia de aminoácidos: i) como se describe en SEQ ID Nº 3; ii) como se describe en SEQ ID Nº 3 excepto por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones; iii) que tiene al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 3; o iv) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 4; v) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 4 debido a la degeneración del código genético; vi) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 4 por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones de nucleótidos; o vii) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que tiene al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 4. Reivindicación 57: Una a amilasa para usar en un suplemento para pienso y/o forraje caracterizada porque dicha a amilasa sustancialmente mantiene la actividad de a amilasa en presencia de 100.000 U/mI de pepsina. Reivindicación 58: La amilasa de la reivindicación 57 caracterizada porque la amilasa tiene la secuencia de aminoácidos: i) como se describe en SEQ ID Nº 3, o ii) como se describe en SEQ ID Nº 3 excepto por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones; iii) que tiene al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 3; o iv) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 4; v) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 4 debido a la degeneración del código genético; o vi) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que difiere de SEQ ID Nº 4 por una o varias adiciones/inserciones, eliminaciones o sustituciones de nucleátidos; o vii) que se produce por expresión de una secuencia de nucleótidos que tiene al menos 70% de identidad con SEQ ID Nº 4. Reivindicación 63: Uso de un suplemento para pienso que comprende una a amilasa resistente a la pepsina caracterizado porque es para mejorar el rendimiento animal y/o aumentar la absorción de energía y/o eficacia del pienso y/o para mejorar la digestibilidad de una materia prima en un pienso (por ejemplo digestibilidad de nutrientes, tal como digestibilidad de almidón) y/o para mejorar la relación de conversión de pienso (FCR) y/o para mejorar la ganancia de peso en un animal.