Patent RU-191895-U1 (RU)
Title: Устройство для сбора личинок и мелких нематод из фекалий животных и человека
IPC: A61B10/00
Filed: 2019-07-03
Granted: 2019-08-26
Abstract: Изобретение относится к области ветеринарии, медицины и зоологии.Устройство для сбора личинок и мелких нематод из фекалий животных и человека, отличающееся тем, что содержит емкость в виде плоскодонного цилиндра высотой 14 мм и диаметром 100 мм, в центре которого расположена шестигранная сквозная втулка, высота которой соответствует высоте бортов емкости, причем внутренняя поверхность втулки снабжена вертикальными бороздами, а ее внешние ребра соединены с бортами емкости радиальными перегородками, высота которых соответствует высоте бортов емкости.Устройство можно использовать по-разному, в зависимости от цели исследования.1.1. При необходимости исследовать свежие фекалии, в которых могут содержаться личинки первого возраста дыхательных нематод отряда Strongylida, а также половозрелые мелкие нематоды отряда Rhabditida, поступают следующим образом: 1) устройство помещают в чашку ЧБН («чашка биологическая невысокая», ГОСТ 25336-82, известна как чашка Петри); 2) исследуемую пробу фекалий помещают в сквозную втулку так, чтобы она заполняла все ее внутреннее пространство, плотно прилегая к бороздам; 3) устройство максимально наполняют водой в пространствах между перегородками; 4) устройство в чашке ЧБН накрывают крышкой ЧБН; 5) экспонируют устройство в течение заданного времени, которое определяется исходя из предполагаемой интенсивности инвазии и составляет, в среднем, 6-12 часов; за это время нематоды из фекалий поднимаются по вертикальным желобам и мигрируют в резервуары с водой, где и оседают на дне; 6) снимают крышку ЧБН с устройства; 7) пипеткой (или иным способом) собирают личинок и/или мелких нематод со дна устройства для последующей микроскопии.1.2. ГОСТом Р 54627-2011 «Животные сельскохозяйственные жвачные. Методы лабораторной диагностики гельминтозов» предусмотрена следующая процедура: «для дифференциации личинок диктиокаулюсов <…> добавляют <…> 0,1%-ного водного раствора метиленового синего. <…>. В результате личинки диктиокаулюсов овец окрашиваются в ярко-сиреневый, телят - в светло-сиреневый цвет, личинки других нематод остаются неокрашенными». Окрашивание полученных личинок можно производить непосредственно в секциях устройства, образованных его перегородками, путем добавления туда метиленового синего.2. При необходимости исследовать фекалии после культивирования личинок третьего возраста нематод отряда Strongylida, поступают следующим образом: 1) устройство помещают в чашку ЧБН; 2) исследуемую пробу фекалий помещают в сквозную втулку так, чтобы она заполняла все ее внутреннее пространство, плотно прилегая к бороздам; 3) устройство в чашке ЧБН накрывают крышкой ЧБН; 4) устройство в ЧБН помещают в термостат при температуре +24°С на срок порядка 10 суток (что позволяет личинкам паразитических нематод органов пищеварения вылупиться из яиц и развиться до стадии L3, когда они становятся морфологически отличимы друг от друга); при необходимости материал проветривают, вынимая ЧБН из термостата и приоткрывая крышку); 5) сняв крышку ЧБН, устройство максимально наполняют водой в пространствах между перегородками; 6) устройство в чашке ЧБН накрывают крышкой ЧБН; 7) экспонируют устройство в течение заданного времени, которое определяется исходя из предполагаемой интенсивности инвазии и составляет, в среднем, 6-12 часов; за это время нематоды из фекалий поднимаются по вертикальным желобам и мигрируют в резервуары с водой, где оседают на дне; 8) снимают крышку ЧБН с устройства; 9) пипеткой (или иным способом) собирают личинок и/или мелких нематод со дна устройства для последующей микроскопии.Полезность предлагаемой полезной модели заключается в том, что она позволяет:1) собирать личинок и мелких нематод из фекалий животных и человека, даже если масса пробы составляет порядка 5 граммов (что означает возможность проведения исследования даже при отборе небольшой пробы, экономию затрат на транспортировку материала в случае большого количества проб или возможность использовать только часть полученной пробы для сбора личинок и мелких нематод, в то время, как оставшуюся часть можно использовать для выявления яиц гельминтов, ооцист кокцидий или иных паразитов);2) сохранять полученных нематод продолжительное время, гарантируя при этом высокую чистоту материала (что облегчает дифференциальную диагностику нематод, основанную на их морфологии, так как они успевают испражниться, и визуализация их внутренних структур за счет этого улучшается, однако при этом не наступает их отравления собственными метаболитами и существенного загрязнения воды, в которой они находятся; сбор таких личинок и мелких нематод для исследований молекулярно-генетическими методами не требует дополнительного их отмывания);3) проводить такие манипуляции как окрашивание части собранных нематод при интактности оставшихся нематод в одном устройстве (что позволяет использовать оставшихся нематод для исследований другими методами). 7 ил.