Patent ES-2713873-T3 (ES)
Title: Complejos bifuncionales y métodos para hacer y utilizar tales complejos
Inventor: GOULIAEV ALEX
IPC: C12N15/10
Filed: 2011-04-16
Granted: 2019-05-24
Abstract: Un método para la síntesis de un complejo bifuncional que comprende una parte de molécula y una parte de oligonucleótido identificador que identifica la parte de la molécula, comprendiendo dicho método los pasos de i) proporcionar un soporte sólido, ii) proporcionar un primer identificador de oligonucleótido opcionalmente protegido que comprende un sitio de reacción química capaz de reaccionar con un primer bloque de construcción de compuesto reactivo y capaz de reaccionar con otro bloque de construcción de compuesto reactivo iii) proporcionar un primer bloque de construcción de compuesto reactivo, en donde la primera etiqueta oligonucleotídica identificadora identifica el primer bloque de construcción de compuesto reactivo, iv) unir covalentemente la etiqueta del primer oligonucleótido identificador al soporte sólido, v) reaccionar en un solvente orgánico el primer bloque de construcción del compuesto reactivo con el sitio de reacción química de la primera etiqueta oligonucleotídica identificadora que identifica el primer bloque de construcción del compuesto reactivo, en donde la primera etiqueta oligonucleotídica identificadora está unida covalentemente al soporte sólido cuando el primer bloque de construcción del compuesto reactivo reacciona con el sitio de reacción química de la primera etiqueta oligonucleotídica identificadora, donde la reacción de la primera unidad constructiva del compuesto reactivo y la primera etiqueta oligonucleotídica identificadora genera un primer complejo bifuncional intermedio que comprende una primera parte de molécula y una etiqueta de oligonucleótido del primer identificador opcionalmente protegida unida covalentemente al soporte sólido, vi) haciendo reaccionar en un disolvente orgánico el primer complejo bifuncional intermedio obtenido en el paso v) con un segundo bloque de construcción de compuesto reactivo en ausencia de una segunda etiqueta oligonucleotídica identificadora que identifica el segundo bloque de construcción de compuesto reactivo en donde el primer complejo bifuncional intermedio está unido covalentemente al soporte sólido cuando el segundo bloque de construcción del compuesto reactivo reacciona con el sitio de reacción química y/o reacciona con la primera parte de la molécula del primer complejo bifuncional intermedio, en donde la reacción del segundo bloque de construcción de compuesto reactivo y el primer complejo bifuncional intermedio genera un segundo complejo bifuncional intermedio unido al enlace sólido, de manera covalente vii) escindir el segundo complejo bifuncional intermedio obtenido en el paso vi) del soporte sólido, y viii) ligar enzimáticamente en solución el primer identificador de la etiqueta oligonucleotídica de dicho segundo complejo bifuncional intermedio escindido de dicho soporte sólido a una segunda etiqueta identificativa del oligonucleótido que identifica el segundo bloque de construcción del compuesto reactivo, en donde la ligadura enzimática de las etiquetas de oligonucleótidos identificadores primera y segunda genera un tercer complejo bifuncional intermedio que comprende una parte de molécula y una parte de oligonucleótido identificador que identifica dicha parte de molécula.