Patent WO-2023279121-A2 (WO)
Title: EXPRESSION D'IMMUNOGLOBULINE A DIMÈRE ET D'IMMUNOGLOBULINE A POLYMÈRE PAR VECTEUR À ARNm LENTIVIRAL ET GAMMARÉTROVIRAL À INTÉGRATION ÉPISOMIQUE ET GÉNOMIQUE POUR PERMETTRE UNE IMMUNITÉ/PROTECTION MUQUEUSE ET HÉMATOLOGIQUE PAR THÉRAPIE GÉNIQUE CONTRE DES ALLERGÈNES, DES VIRUS, LE VIH, DES BACTÉRIES, LA PNEUMONIE, DES INFECTIONS, DES PROTÉINES ASSOCIÉES À UNE PATHOLOGIE, DES PATHOLOGIES SYSTÉMIQUES, LE CANCER, LES TOXINES ET DES VIRUS NON NATURELS. EXPRESSION D'IMMUNOGLOBULINE DIMÈRE A ET D'IMMUNOGLOBULINE POLYMÈRE A PAR DES CELLULES IMMUNITAIRES MODIFIÉES PAR CAR ET NON MODIFIÉES PAR CAR
Inventor: SWARTZ ROGER
IPC: C12N15/86
Filed: 2022-07-07
Abstract: La présente invention concerne l'immunisation ou la protection immunitaire par vaccin à ARNm basée sur la thérapie génique génomique épisomique ou rétrovirale à court terme, moyen ou long terme, qui peut aussi être administré en tant que thérapie génique génomique rétrovirale à la fois in vivo et ex vivo, un procédé destiné à procurer une protection épithéliale et hématologique à des sujets humains afin d'assurer une protection contre le cancer, en particulier les carcinomes, des virus pandémiques et non pandémiques, des infections bactériennes, des allergènes ou la cause de réactions allergiques, d'états pathologiques systémiques, du cancer et contre des agents anti-guerre biologique (par exemple, des virus et des toxines naturels et non naturels) où l'immunité muqueuse, et pour certaines maladies hématologiques, est obtenue par l'expression de l'immunoglobuline dimère Al (dlgAl) et de l'immunoglobuline dimère A2 (dIgA2), et de variants modifiés, par vecteur à ARNm lentiviral et gammarétroviral à intégration épisomique ou génomique. De plus, certains modes de réalisation prévoient un procédé regroupant des cancers y compris des carcinomes et des cancers hématologiques pour prévenir la métastase avec une immunoglobuline A polymère et une immunoglobuline A dimère dlgA et des variants modifiés par ingénierie de la région charnière de l'immunoglobuline, mais de façon non limitative. La présente invention concerne des constructions de vecteurs pour exprimer dlgA et des immunoglobulines A polymères à activité thérapeutique pertinente (par exemple basées sur des régions déterminantes de complémentarité (CDR) ou des régions V) contre sa cible chez un sujet humain. Des régions V ou des régions CDR d'anticorps peuvent être découvertes chez un sujet humain. En variante, des banques combinatoires utilisant des fragments variables monocaténaire (scFv) dérivés de lymphocytes B humains ou d'autres lymphocytes B animaux, où la technologie de présentation sur phage et la mutagénèse peuvent être utilisées, permettent l'identification de fragments VH et VL puissants pouvant être incorporés dans des chaînes lourdes et légères d'immunoglobulines de longueur totale ou réduite. De plus, des souris ou d'autres animaux ayant des systèmes immunitaire humanisés ou des souris transgéniques ou autre vertébré non-humain tels que des lapins ou des hamsters capables de produire des anticorps entièrement humains à partir d'une exposition à l'antigène peuvent être utilisés pour identifier des immunoglobulines puissantes ou des régions de liaison d'immunoglobulines puissantes ou des régions de détermination de complémentarité d'immunoglobulines puissantes (CDR) pour une fusion avec des anticorps humains donnant naissance à des anticorps chimériques. Les immunoglobulines identifiées à partir de ces procédés seront éventuellement optimisées par des techniques de mutagenèse et seront exprimées dans le receveur par l'ARNm, via un épisome ou par insertion rétrovirale dans leur ADN génomique des cellules d'intérêt à exprimer par administration intramusculaire, administration intraveineuse, administration par endoscopie à la lamina propria de l'estomac et/ou de l'intestin grêle ou même du poumon, par ingestion ou administration proximale à des ganglions lymphatiques ou sous forme d'une administration ex vivo dans l'un quelconque des lymphocytes B, des lymphocytes T, des cellules tueuses naturelles (NK) cellules et d'autres types de cellules immunitaires. Les cellules préférées à cibler pour recevoir le vecteur comprennent des cellules musculaires, des cellules hépatiques, en particulier des hépatocytes et des lymphocytes B notamment des lymphocytes B de mémoire, des lymphocytes B de centre germinatif, des lymphocytes B de plasma de mémoire (également appelés cellules de plasma à longue durée de vie), des lymphocytes B naïfs, des cellules NK, des lymphocytes T, notamment des Lymphocytes T à récepteurs antigéniques chimériques (CAR lymphocytes T) ainsi qu'une quelconque cellule immunitaire modifiée CAR. De plus, le vecteur peut coder à la fois CAR et l'immunoglobuline polymère et dimère dans une seule construction de vecteur. Lors de la conception d'un vecteur viral à ARNm, AAV, d'un vecteur à adénovirus, d'un vecteur rétroviral de lentivirus déficient en intégration ou d'un vecteur gammarétroviral codant dlgAl, dIgA2 ou une immunoglobuline A polymère, un seul vecteur à base d'ADN ou un ou plusieurs vecteurs à ARNm coderont la totalité de l'immunoglobuline et l'expression de la chaîne J (chaîne de jonction), l'expression de dlgAl ou dIgA2, l'expression pouvant se produire avec un seul codon de départ et codon d'arrêt pour chaque transgène et, dans certains modes de réalisation, un second codon de départ pour l'expression de la chaîne J. L'utilisation d'un seul codon de départ et d'arrêt est possible par le placement dans la direction 5' à 3' d'un site de clivage de furine suivi de manière concomitante par un peptide à auto-traitement 2A ou un site de clivage de furine suivi concomitamment d'un peptide d'auto-traitement 2A ou d'un site de clivage de furine entre chaque gène de n'importe quel nombre de transgènes consécutifs sous la forme d'un seul cadre de lecture ouvert.