Patent ES-2907054-T3 (ES)
Title: TriFab-Contorsbody
Inventor: BRINKMANN ULRICH
IPC: A61P35/00
Filed: 2018-10-30
Granted: 2022-04-21
Abstract: Un anticuerpo multiespecífico que comprende tres sitios de unión a antígeno y que consiste en dos polipéptidos de fusión circulares, en el que a) el primer polipéptido de fusión circular comprende una primera parte de un primer dominio de unión, una segunda parte de un primer dominio de unión y una primera parte de un tercer dominio de unión, en el que - la primera parte del primer dominio de unión se fusiona directamente o bien por medio de un primer conector peptídico al extremo N de la primera parte del tercer dominio de unión, - la segunda parte del primer dominio de unión se fusiona directamente o bien por medio de un segundo conector peptídico al extremo C de la primera parte del tercer dominio de unión, - la primera parte del primer dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena pesada (VH1-CH1) o un fragmento Fab de la cadena ligera (VL1-CL1), con lo que la segunda parte del primer dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena ligera si la primera parte del primer dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena pesada o viceversa, y - la primera parte del primer dominio de unión y la segunda parte del primer dominio de unión se asocian entre sí y son conjuntamente el primer sitio de unión a antígeno, b) el segundo polipéptido de fusión circular comprende una primera parte de un segundo dominio de unión, una segunda parte de un segundo dominio de unión y la segunda parte del tercer dominio de unión, en el que - la primera parte del segundo dominio de unión se fusiona directamente o bien por medio de un tercer conector peptídico al extremo N de la segunda parte del tercer dominio de unión, - la segunda parte del segundo dominio de unión se fusiona directamente o bien por medio de un cuarto conector peptídico al extremo C de la segunda parte del tercer dominio de unión, - la primera parte del segundo dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena pesada (VH2-CH1) o un fragmento Fab de la cadena ligera (VL2-CL1), con lo que la segunda parte del segundo dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena ligera si la primera parte del segundo dominio de unión es un fragmento Fab de la cadena pesada o viceversa, - la primera parte del segundo dominio de unión y la segunda parte del segundo dominio de unión se asocian entre sí y son conjuntamente el segundo sitio de unión a antígeno, c) la primera parte del tercer dominio de unión y la segunda parte del tercer dominio de unión son conjuntamente el tercer sitio de unión a antígeno, en el que - la primera parte del tercer dominio de unión es un polipéptido de fusión de dominio variable de la cadena pesada-CH3 (VH3-CH3) o bien un polipéptido de fusión de dominio variable de la cadena ligera-CH3 (VL3-CH3), - la segunda parte del tercer dominio de unión es un polipéptido de fusión de dominio variable de la cadena pesada-CH3 si la primera parte del segundo dominio de unión es un polipéptido de fusión de dominio variable de la cadena ligera-CH3, o viceversa, - la primera parte del tercer dominio de unión y la segunda parte del tercer dominio de unión se asocian entre sí y forman el tercer sitio de unión a antígeno, en el que los dos dominios constantes de la cadena pesada 3 (CH3) se alteran para promover la heterodimerización por i) generación de una protuberancia en uno de los dominios CH3 sustituyendo al menos un residuo aminoacídico original con un residuo aminoacídico que tiene un volumen de cadena lateral más grande que el residuo aminoacídico original, y generación de una cavidad en el otro de los dominios CH3 sustituyendo al menos un residuo aminoacídico original con un residuo aminoacídico que tiene un volumen de cadena lateral más pequeño que el residuo aminoacídico original, de modo que la protuberancia generada en uno de los dominios CH3 es posicionable en la cavidad generada en el otro de los dominios CH3, o sustituyendo al menos un residuo aminoacídico original en uno de los dominios CH3 con un aminoácido cargado positivamente, y sustituyendo al menos un residuo aminoacídico original en el otro de los dominios CH3 con un aminoácido cargado negativamente, o ii) introducción de al menos un residuo de cisteína en cada dominio CH3 de modo que se forma un enlace disulfuro entre los dominios CH3, o iv) ambas modificaciones de i) y ii), en el que el anticuerpo multiespecífico está desprovisto de dominios constantes de la cadena pesada 2 (CH2) y de una región bisagra.