Patent AR-099876-A1 (AR)
Title: Proteínas de toxinas pesticidas activas contra insectos coleópteros
IPC: A01N63/50
Filed: 2015-03-27
Abstract: Reivindicación 1: Una molécula de ácido nucleico que recombinante que comprende opcionalmente: a) un promotor heterólogo unido operativamente a un segmento de polinucleótido que tiene la secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID: SEQ ID Nº 1 de la posición 100 - 945, SEQ ID Nº 3 de la posición 100 - 939, SEQ ID Nº 5 de la posición 85 - 1011, SEQ ID Nº 7 de la posición 94 - 948, SEQ ID Nº 9 de la posición 79 - 978, SEQ ID Nº 11 de la posición 100 - 942, SEQ ID Nº 13 de la posición 100 - 939, SEQ ID Nº 15 de la posición 100 - 939, SEQ ID Nº 17 de la posición 85 - 1011, SEQ ID Nº 19 de la posición 85 - 1011, SEQ ID Nº 21 de la posición 79 - 978, SEQ ID Nº 23 de la posición 79 - 978, SEQ ID Nº 25 de la posición 100 - 963, SEQ ID Nº 27 de la posición 100 - 963, SEQ ID Nº 29 de la posición 100 - 963, SEQ ID Nº 31 de la posición 1 - 846, SEQ ID Nº 33 de la posición 1 - 843, SEQ ID Nº 35 de la posición 226 - 1065, SEQ ID Nº 37 de la posición 187 - 1023, SEQ ID Nº 39 de la posición 1 - 846, SEQ ID Nº 41 de la posición 100 - 939 y que tienen cualquier codón diferente de TAA, TAG o TGA que ocupa la posición 781 - 783, SEQ ID Nº 43 de la posición 100 - 945, SEQ ID Nº 44 de la posición 100 - 939, SEQ ID Nº 45 de la posición 85 - 1011, SEQ ID Nº 46 de la posición 94 - 948, SEQ ID Nº 47 de la posición 79 - 978, SEQ ID Nº 48 de la posición 1 - 852, SEQ ID Nº 50 de la posición 1 - 852, SEQ ID Nº 52 de la posición 1 - 852, SEQ ID Nº 54 de la posición 1 - 933, SEQ ID Nº 56 de la posición 100 - 939, SEQ ID Nº 58 de la posición 100 - 939 y SEQ ID Nº 60 de la posición 100 - 939; b) un promotor heterólogo unido operativamente a un segmento de polinucleótido que codifica un polipéptido pesticida que comprende la secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID Nº 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 49, 51, 53, 55, 57, 59 y 61; c) un promotor heterólogo unido operativamente a un segmento de polinucleótido que codifica un polipéptido pesticida que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene al menos el 44%, el 50%, el 55%, el 60%, el 65%, el 70%, el 75%, el 80%, el 85%, el 90%, el 95% o aproximadamente el 100 % de identidad de secuencia de aminoácidos con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de SEQ ID Nº 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 49, 51, 53, 55, 57, 59 y 61; y d) un promotor heterólogo unido operativamente a un segmento de polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene actividad pesticida; en donde dicho segmento de polinucleótido se hibrida en condiciones de hibridación severas con un ADN que tiene la secuencia de nucleótidos según se presenta en cualquier secuencia en a); y en donde dichas condiciones de hibridación comprenden la hibridación de 4 a 12 horas en el 50% de formamida, 1 M de NaCl y el 1% SDS a 37ºC, y un lavado en 0,1 x SSC entre 60ºC y aproximadamente 65ºC. Reivindicación 10: Un método para controlar una población de plagas de coleópteros que comprende poner en contacto dicha población con una cantidad eficaz como pesticida del polipéptido recombinante de la reivindicación 6. Reivindicación 14: Una planta que tiene incorporada de forma estable en su genoma una construcción de ADN que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína que tiene actividad pesticida caracterizada por que dicha proteína opcionalmente: a) tiene la secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID Nº 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 49, 51, 53, 55, 57, 59, ó 61; o b) presenta una secuencia de aminoácidos que tiene al menos el 44% - 100% (incluso el 44%, el 50%, el 55%, el 60%, el 65%, el 70%, el 75%, el 80%, el 85%, el 90%, el 95% o aproximadamente el 100%) de identidad de secuencia de aminoácidos con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de SEQ ID Nº 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 49, 51, 53, 55, 57, 59 ó 61. Reivindicación 16: Un método para proteger una planta de la infestación por plagas de insectos coleópteros, dicho método comprende expresar en una planta o célula de una planta una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido pesticida, en donde dicho polipéptido pesticida comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos el 44% - 100% idéntica a la secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: a) la secuencia de aminoácidos según se presenta en SEQ ID Nº 2 de la posición de aminoácido 34 - 315, SEQ ID Nº 4 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 6 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 8 de la posición de aminoácido 34 - 316, SEQ ID Nº 10 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 12 de la posición de aminoácido 34 - 314, SEQ ID Nº 14 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 16 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 18 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 20 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 22 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 24 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 26 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 28 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 30 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 32 de la posición de aminoácido 1 - 282, SEQ ID Nº 34 de la posición de aminoácido 1 - 281, SEQ ID Nº 36 de la posición de aminoácido 76 - 355, SEQ ID Nº 38 de la posición de aminoácido 62 - 341, SEQ ID Nº 49 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 51 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 53 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 55 de la posición de aminoácido 1 - 310, SEQ ID Nº 57 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 59 de la posición de aminoácido 34 - 313 y SEQ ID Nº 61 de la posición de aminoácido 34 - 313; o b) cualquier secuencia según se presenta en a) unida operativamente a un péptido de direccionamiento de orgánulo subcelular seleccionado del grupo que consiste en un péptido de direccionamiento de cloroplasto o plástido y un péptido de direccionamiento de amiloplasto; en donde dicha secuencia de aminoácidos tiene actividad pesticida. Reivindicación 18: Un método para aumentar el rendimiento de un cultivo de semilla, fruta, bayas, nueces, vegetales, aceite o hilas producidas a partir de una planta, dicho método comprende cultivar dicha planta en un campo; en donde una construcción de ADN se incorpora de forma estable en el genoma de las células de dicha planta y codifica una proteína pesticida; en donde dicha proteína pesticida comprende una secuencia de aminoácidos del grupo que consiste en: a) la secuencia de aminoácidos según se presenta en SEQ ID Nº 2 de la posición de aminoácido 34 - 315, SEQ ID Nº 4 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 6 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 8 de la posición de aminoácido 34 - 316, SEQ ID Nº 10 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 12 de la posición de aminoácido 34 - 314, SEQ ID Nº 14 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 16 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 18 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 20 de la posición de aminoácido 29 - 337, SEQ ID Nº 22 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 24 de la posición de aminoácido 27 - 326, SEQ ID Nº 26 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 28 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 30 de la posición de aminoácido 34 - 321, SEQ ID Nº 32 de la posición de aminoácido 1 - 282, SEQ ID Nº 34 de la posición de aminoácido 1 - 281, SEQ ID Nº 36 de la posición de aminoácido 76 - 355, SEQ ID Nº 38 de la posición de aminoácido 62 - 341, SEQ ID Nº 49 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 51 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 53 de la posición de aminoácido 1 - 283, SEQ ID Nº 55 de la posición de aminoácido 1 - 310, SEQ ID Nº 57 de la posición de aminoácido 34 - 313, SEQ ID Nº 59 de la posición de aminoácido 34 - 313 y SEQ ID Nº 61 de la posición de aminoácido 34 - 313; b) una secuencia de aminoácidos que presenta al menos el 44% - 100% de identidad de secuencia de aminoácidos con cualquiera de a) y presentaba actividad pesticida; y c) cualquier secuencia según se presenta en a) o b) unida operativamente a un péptido de direccionamiento de secreción seleccionado del grupo que consiste en un péptido de direccionamiento de cloroplasto o plástido y un péptido de direccionamiento de amiloplasto; en donde dicho campo está infestado con una plaga contra la cual dicho polipéptido tiene actividad pesticida.