Patent ES-2436867-T3 (ES)
Title: Ensayos para el nt-pro-péptido natriurético de tipo b humano, el pro-péptido natriurético de tipo b humano y el péptido natriurético de tipo b humano
Inventor: KONRATH JOHN G
IPC: G01N33/50
Filed: 2010-11-17
Granted: 2014-01-07
Abstract: Un inmunoensayo para cuantificar la cantidad de NT-pro-péptido natriurético de tipo B humano ("NT-proBNPhumano"), de pro-péptido natriurético de tipo B humano ("proBNP humano") y de péptido natriurético cerebral5 humano ("hBNP") en una muestra de prueba que se está ensayando o que se sospecha que contiene el NT-proBNPhumano, el proBNP humano y el hBNP, comprendiendo el procedimiento las etapas de: (a) poner en contacto una muestra de prueba con (i) un primer anticuerpo de captura que se une al NT-proBNPhumano y que ha sido inmovilizado sobre una fase sólida para producir un primer anticuerpo inmovilizado yformar una primera mezcla que comprende un complejo del primer anticuerpo de captura-NT-proBNP humano; (ii) un segundo anticuerpo de captura que se une al proBNP humano y que ha sido inmovilizado sobre una fasesólida para producir un segundo anticuerpo inmovilizado y formar una segunda mezcla que comprende uncomplejo del segundo anticuerpo de captura-proBNP humano; y (iii) el segundo anticuerpo de captura, queademás de unirse al proBNP humano también se une al hBNP y que ha sido inmovilizado sobre una fase sólidapara producir un tercer anticuerpo inmovilizado y formar una tercera mezcla que comprende un complejo delsegundo anticuerpo de captura-hBNP humano, en el que dicho primer anticuerpo de captura comprende elanticuerpo 15F11 y el segundo anticuerpo de captura comprende el anticuerpo 8.1; (b) poner en contacto dicha primera mezcla que comprende el complejo del primer anticuerpo de captura-NTproBNP humano con un primer anticuerpo de detección que se une al NT-proBNP humano y que ha sidoconjugado con un marcador detectable para formar una tercera mezcla que comprende un complejo del primeranticuerpo de captura-NT-proBNP humano-primer anticuerpo de detección, en el que el primer anticuerpo dedetección es el anticuerpo 15C4; (c) poner en contacto dicha según la mezcla que comprende el complejo del segundo anticuerpo de capturaproBNPhumano con el primer anticuerpo de detección que, además de unirse al NT-proBNP humano, tambiénse une al proBNP humano, y que ha sido conjugado con un marcador detectable para formar una quinta mezclaque comprende un complejo del segundo anticuerpo de captura-proBNP humano-primer anticuerpo de detección,en el que el primer anticuerpo de detección es el anticuerpo 15C4; (d) poner en contacto la tercera mezcla que comprende el complejo del segundo anticuerpo de captura- hBNPhumano con un segundo anticuerpo de detección que se une al hBNP y que ha sido conjugado con un marcadordetectable para formar una sexta mezcla que comprende un complejo del segundo anticuerpo de captura-hBNPsegundoanticuerpo de detección, en el que el segundo anticuerpo de detección es el anticuerpo 201.3; y (e) determinar la cantidad de (i) el complejo del primer anticuerpo de captura-NT-proBNP humano-primeranticuerpo de detección formado en la etapa (b) mediante la detección del marcador detectable como unamedida de la cantidad de NT-proBNP humano contenido en la muestra de prueba; (ii) el complejo segundo deanticuerpo de captura-proBNP humano-primer anticuerpo de detección formado en la etapa (c) mediante ladetección del marcador detectable como una medida de la cantidad de proBNP humano contenido en la muestrade prueba; y (iii) el complejo del segundo anticuerpo de captura-hBNP-segundo anticuerpo de detección formadoen la etapa (d) mediante la detección del marcador detectable como una medida de la cantidad de hBNPcontenido en la muestra de prueba.