Patent ES-2713479-T3 (ES)
Title: Células y procedimiento para la producción de ramnolípidos
Inventor: SCHAFFER STEFFEN
IPC: C12R1/385
Filed: 2011-07-20
Granted: 2019-05-22
Abstract: Célula, seleccionadas a partir de microorganismos, que puede formar al menos un ramnolípido de la Fórmula general (I),**Fórmula** siendo m = 2, 1 o 0, en especial 1 o 0, n = 1 o 0, en especial 1, R1 y R2 = independientemente entre sí, restos orgánicos iguales o diferentes independientemente entre sí, con 2 a 24 átomos de carbono, en especial resto alquilo, en caso dado ramificado, en caso dado sustituido, en especial hidroxisustituido, en caso dado insaturado, en especial, en caso dado, mono-, di- o triinsaturado, caracterizada por que se modificó mediante técnica génica de modo que, en comparación con su tipo salvaje, presenta una actividad acrecentada de al menos una de las enzimas E1, E2 y E3, pudiendo catalizar la enzima E1 la reacción de 3-hidroxialcanoil-ACP a través de ácido-3-hidroxialcanoil-3-hidroxialcanoico-ACP para dar ácido hidroxialcanoil-3-hidroxialcanoico, la enzima E2 es una ramnosiltransferasa I, y puede catalizar la reacción de dTDPramnosa y 3-hidroxialcanoato de 3-hidroxialcanoilo para dar 3-hidroxialcanoato de α-L-ramnosilpiranosil-3- hidroxialcanoilo, y la enzima E3 es una ramnosiltransferasa II, y puede catalizar la reacción de dTPD-ramnosa y 3- hidroxialcanoato de α-L-ramnopiranosil-3-hidroxialcanoilo para dar 3-hidroxialcanoato de α-L-ramnopiranosil-(1-2)-α- L-ramnopiranosil-3-hidroxialcanoilo, y presenta, en comparación con su tipo salvaje, una actividad acrecentada, como se especifica a continuación respectivamente, de al menos una de las enzimas seleccionadas a partir del grupo constituido por una enzima E4, una dTTP: α-D-glucosa-1-fosfato timidililtransferasa, EC 2.7.7.24, en especial una con la secuencia de polipéptidos Seq ID Nr. 10 o con la secuencia de polipéptidos en la que hasta un 25 % de los restos aminoácido se han modificado frente a la secuencia de referencia Seq ID Nr. 10 mediante deleción, inserción, sustitución, o una combinación de los mismos, y que posee al menos un 10 % de la actividad enzimática de la enzima con la secuencia de referencia Seq ID Nr. 10, una enzima E5, una dTTP-glucosa-4,6-hidroliasa, EC 4.2.1.46, en especial una con secuencia de polipéptidos Seq ID Nr. 12 o con una secuencia de polipéptidos en la que hasta un 25 % de los restos aminoácido se han modificado respecto a la secuencia de referencia Seq ID Nr. 12 mediante deleción, inserción, sustitución, o una combinación de las mismas, y que aún posee al menos un 10 % de la actividad enzimática de la enzima con la secuencia de referencia Seq ID Nr. 12, una enzima E6, una dTDP-4-dehidrorramnosa-3,5-epimerasa, EC 5.1.3.13, en especial una con secuencia de polipéptidos Seq ID Nr. 14 o con una secuencia de polipéptidos en la que hasta un 25 % de los restos aminoácido se han modificado respecto a la secuencia de referencia Seq ID Nr. 14 mediante deleción, inserción, sustitución, o una combinación de las mismas, y que aún posee al menos un 10 % de la actividad enzimática de la enzima con la secuencia de referencia Seq ID Nr. 14, y una enzima E7, una dTDP-4-dehidrorramnosa-reductasa, EC 1.1.1.133, en especial una con secuencia de polipéptidos Seq ID Nr. 16 o con una secuencia de polipéptidos en la que hasta un 25 % de los restos aminoácido se han modificado respecto a la secuencia de referencia Seq ID Nr. 16 mediante deleción, inserción, sustitución o una combinación de las mismas, y que aún presenta al menos un 10 % de la actividad enzimática de la enzima con la secuencia de referencia Seq ID Nr. 16.