Patent AR-035595-A1 (AR)
Title: Nuevos genes de glisfosato n-acetil transferasa (gat)
Inventor: SIEHL DAN
IPC: C12N15/54
Filed: 2001-10-30
Abstract: Un polinucleótido aislado o recombinante que codifica un polipéptido que tiene actividad glifosato N-acetil transferasa (GAT). Un polipéptido aislado o recombinante que tiene actividad GAT, un constructo de ácido nucleico que comprende el polinucleótido, una célula que comprende el polinucleótido o el constructo, una planta transgénica o semilla producida a partir de la misma, o un explante de una planta transgénica, que comprende la célula, más específicamente una planta transgénica o explante de una planta transgénica que tiene una tolerancia aumentada al glifosato, un polipéptido que está unido específicamente por un antisuero policlonal creado contra un antígeno, un método para producir un polipéptido que tiene actividad GAT, un método para producir una planta transgénica resistente al glifosato, una semilla de la misma o una célula de planta, un método para producir una variante del polinucleótido, una biblioteca de variantes de polinucleótidos así producida y un método para controlar las malezas en un campo que contiene un cultivo. Esencialmente toda planta puede ser transformada con los polinucleótidos GAT. En una forma de realización particular la planta de cultivo es seleccionada entre los géneros: Eleusine, Lollium, Bambusa, Brassica, Dactylis, Sorghum, Pennisetum, Zea, Oryza, Triticum, Secale, Avena, Hordeum, Saccharum, Coix, Glycine y Gossypium. En una forma de realización, se producen polinucleótidos GAT por diversificación, p. ej., recombinando y/o mutando uno o más polinucleótidos naturales, aislados o recombinantes GAT. Es posible generar polinucleótidos GAT diversificados que codifiquen polipéptidos GAT con atributos funcionales superiores, p. ej., mayor función catalítica, mayor estabilidad, mayor nivel de expresión, que un polinucleótido GAT usado como sustrato o progenitor en el procedimiento de diversificación. En una forma de realización particular se describen plantas transgénicas o explantes de plantas transgénicas con mayor tolerancia al glifosato debido a la expresión de un polipéptido con actividad GAT y un polipéptido que imparte tolerancia al glifosato mediante otro mecanismo, tal como una 5-enolpiruvilshikimato-3-fosfato sintasa con tolerancia al glifosato y/o una glifosato óxido-reductasa con tolerancia al glifosato. En otra forma de realización, se describen plantas transgénicas o explantes de plantas transgénicas con mayor tolerancia al glifosato, como así también tolerancia a un herbicida adicional debido a la expresión de un polipéptido con actividad GAT, un polipéptido que imparte tolerancia al glifosato mediante otro mecanismo tal como el definido anteriormente, y un polipéptido que imparta tolerancia a un herbicida adicional, tal como una hidroxifenilpiruvato dioxigenasa mutada, una acetolactato sintasa tolerante a la sulfonamida, una acetolactato sintasa tolerante a la imidazolinona, una acetohidroxiácido sintasa tolerante a la imidazolinona, una fosfinotricina acetil transferasa y una protoporfirinógeno oxidasa mutada. También se describen plantas transgénicas o explantes de plantas transgénicas con mayor tolerancia al glifosato, como así también tolerancia a un herbicida adicional debido a la expresión de un polipéptido con actividad GAT y el polipéptido que imparte tolerancia al herbicida adicional definido anteriormente. Los polinucleótidos tienen una variedad de usos en, por ejemplo: producción recombinante (o sea, expresión) de los polipéptidos GAT; como transgenes (p. je., para conferir resistencia a herbicida en plantas transgénicas); como marcadores seleccionables para transformación y mantenimiento de plásmido; como inmunógenos; como sondas diagnósticas para la presencia de ácidos nucleicos complementarios o parcialmente complementarios; como sustratos para generación ulterior de diversidad.