Patent AR-124546-A1 (AR)
Title: Dispositivos y procesos para la producción automática de linfocitos infiltrantes de tumor
Inventor: WELLS ADRIAN WELLS
IPC: C12N5/0783
Filed: 2021-12-30
Abstract: La presente invención proporciona métodos automatizados para expandir TIL y producir poblaciones terapéuticas de TIL, incluidos nuevos dispositivos de cultivo de tejidos y métodos automatizados para expandir poblaciones de TIL en un sistema cerrado que conducen a una eficacia mejorada, un fenotipo mejorado y una mayor salud metabólica de los TIL en una período de tiempo más corto, al tiempo que permite reducir la contaminación microbiana y reducir los costos.  Reivindicación 1: Un dispositivo de cultivo de tejidos, que comprende: un cuerpo del dispositivo que tiene una primera superficie permeable a los gases para cultivar células, una segunda superficie permeable a los gases para cultivar células y una o más paredes laterales que se extienden al menos desde la primera superficie permeable a los gases hasta la segunda superficie permeable a los gases; un tamiz dispuesto dentro del cuerpo del dispositivo entre la primera superficie permeable a los gases y la segunda superficie permeable a los gases separando así el dispositivo en: (i) un primer compartimiento definido por la primera superficie permeable a los gases, una o más paredes laterales y el tamiz, y (ii) un segundo compartimiento definido por la segunda superficie permeable a los gases, una o más paredes laterales y el tamiz; y un puerto de acceso que está en comunicación fluida con el primer compartimiento, en donde el área de la sección transversal de la segunda superficie permeable a los gases es mayor que el área de la sección transversal de la primera superficie permeable a los gases. Reivindicación 25: Un método para expandir linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) en una población terapéutica de TIL usando el dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 24, que comprende: (a) obtener una primera población de TIL de un tumor resecado de un paciente procesando una muestra de tumor obtenida del paciente en múltiples fragmentos de tumor o una digestión de los mismos; (b) añadir los fragmentos tumorales o el digerido, a través del puerto de acceso, en el primer compartimiento del dispositivo de cultivo de tejidos, en donde el dispositivo de cultivo de tejidos está en una primera orientación con respecto a una superficie plana en donde la primera superficie permeable a los gases, el segunda superficie permeable a los gases, y el tamiz están colocados sustancialmente horizontalmente paralelos a la superficie plana; (c) realizar una primera expansión cultivando la primera población de TIL en un medio de cultivo celular suplementado con IL-2 y opcionalmente con OKT-3 y/o células presentadoras de antígeno (APC) para producir una segunda población de TIL, en donde la primera la expansión se realiza en la primera superficie permeable a los gases del dispositivo de cultivo de tejidos, y en donde la transición del paso (b) al paso (c) se produce sin abrir el dispositivo de cultivo de tejidos; (d) realizar cualquiera de: (1) los pasos de: (x) filtrar la segunda población de TIL a través del tamiz y en el segundo compartimiento girando el dispositivo de cultivo de tejidos en una segunda orientación con respecto a la superficie plana en donde la primera superficie permeable a los gases y la segunda superficie permeable a los gases están en una posición invertida en relación con la primera orientación, separando así los fragmentos tumorales o los desechos voluminosos del digerido en el primer compartimiento de la segunda población de TIL en el segundo compartimiento, y (y) realizar una segunda expansión complementando el medio de cultivo celular de la segunda población de TIL para producir una tercera población de TIL, en donde la tercera población de TIL es una población terapéutica de TIL, y en donde la segunda expansión se realiza en la segunda superficie permeable a los gases del dispositivo de cultivo de tejidos, en donde el paso (x) y el paso (y) se realizan en secuencia sin abrir el dispositivo de cultivo de tejidos; o (2) los pasos de: (p) realizar una segunda expansión dividida en un primer período y un segundo período, en donde durante el primer período, la segunda expansión se realiza en la primera superficie permeable a los gases del dispositivo de cultivo de tejidos complementando el medio de cultivo celular de la segunda población de TIL, (q) filtrar la segunda población de TIL a través del tamiz y en el segundo compartimiento girando el dispositivo de cultivo de tejidos en una segunda orientación con respecto a la superficie plana en donde la primera superficie permeable a los gases y la segunda superficie permeable a los gases están en una posición invertida en relación con la primera orientación, separando así los fragmentos tumorales o los desechos voluminosos del digerido en el primer compartimiento de la segunda población de TIL en el segundo compartimiento, y (r) realizar el segundo período de la segunda expansión en el segundo compartimiento complementando el medio de cultivo celular de la segunda población de TIL para producir una tercera población de TIL, en donde la tercera población de TIL es una población terapéutica de TIL, y en donde la segunda expansión se realiza en la segunda superficie permeable a los gases del dispositivo de cultivo de tejidos, en donde el paso (p), el paso (q) y el paso (r) se realizan en secuencia sin abrir el dispositivo de cultivo de tejidos; (e) recolectar la población terapéutica de TIL obtenida del paso (d), en donde la transición del paso (d) al paso (e) ocurre sin abrir el dispositivo de cultivo de tejidos; y (f) transferir la población de TIL recolectada del paso (e) a una bolsa de infusión. Reivindicación 179: Un sistema de biorreactor, que comprende: el dispositivo de cultivo de tejidos de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 24; un recipiente de medio fresco conectado de forma fluida a uno o ambos del primer compartimiento y el segundo compartimiento del dispositivo de cultivo de tejidos; un recipiente de medios de desecho conectado de forma fluida al segundo compartimiento del dispositivo de cultivo de tejidos; y una o más bombas configuradas para: (i) bombear medio fresco desde el recipiente de medio fresco a uno o ambos del primer compartimiento y el segundo compartimiento del dispositivo de cultivo de tejidos, (ii) bombear el medio de desecho desde el segundo compartimiento al recipiente de material de desecho, y/o (iii) bombear células desde el segundo compartimiento a una bolsa de infusión. Reivindicación 185: Un dispositivo de cultivo celular, que comprende: un espacio interior definido entre una primera pared y una segunda pared; y un diafragma dispuesto entre una primera cámara y una segunda cámara del espacio interior, incluyendo el diafragma: una primera sección que se extiende desde un extremo distal del espacio interior hasta un límite, siendo la primera sección impermeable a los líquidos para evitar que el líquido pase de la primera cámara a la segunda cámara a través de la primera sección; y una segunda sección que se extiende desde el límite hacia un extremo proximal del espacio interior, siendo la segunda sección permeable a los líquidos para permitir que el líquido pase de la primera cámara a la segunda cámara a través de la segunda sección, donde la primera sección del diafragma y la primera pared definen un pozo en la primera cámara que está configurado para retener hasta un volumen predeterminado de líquido cuando el dispositivo de cultivo celular está en una orientación vertical, el volumen predeterminado es menor que un llenado máximo volumen de la primera cámara.