Patent ES-2731343-T3 (ES)
Title: Composiciones, kits y métodos para presentación de antígenos in vitro, evaluación de eficacia de vacunas y evaluación de la inmunotoxicidad de productos biológicos y fármacos
Inventor: DAFTARIAN PIROUZ
IPC: G01N33/50
Filed: 2010-05-19
Granted: 2019-11-15
Abstract: Método de evaluación de una respuesta de células T frente a una vacuna o un producto biológico, comprendiendo el método las etapas de: a) preparar o proporcionar una composición que comprende una pluralidad de dendrímeros poliméricos cargados altamente ramificados que tienen cada uno conjugados a los mismos al menos un péptido de unión a DR universal y al menos un antígeno peptídico o polipeptídico o un ácido nucleico que codifica para el al menos un antígeno, en el que el al menos un péptido de unión a DR universal y el ácido nucleico o al menos un antígeno peptídico o polipeptídico están conjugados a la superficie exterior de la pluralidad de dendrímeros poliméricos cargados altamente ramificados de tal manera que el al menos un péptido de unión a DR universal se une específicamente a células presentadoras de antígeno profesionales (PAPC), en el que la vacuna o el producto biológico comprende el antígeno; b) proporcionar una primera muestra que comprende PAPC, obtenida a partir del sujeto antes de la vacunación del sujeto o la administración del producto biológico al sujeto; c) dividir la primera muestra en una primera porción de la primera muestra y una segunda porción de la primera muestra; d) poner en contacto la primera porción de la primera muestra con la composición en condiciones de incubación de tal manera que la pluralidad de dendrímeros poliméricos cargados altamente ramificados se captan por las PAPC y de tal manera que el antígeno se procesa por las PAPC y se presenta por las PAPC en combinación con MHC de clase II; e) lavar la primera porción de la primera muestra y la segunda porción de la primera muestra; f) combinar la primera porción de la primera muestra y la segunda porción de la primera muestra a dos o más razones, dando como resultado una primera pluralidad de mezclas; g) incubar la primera pluralidad de mezclas durante una o más horas; h) examinar la pluralidad de mezclas para determinar la presencia de al menos una molécula o un marcador que es indicativo de una respuesta de células T frente a la vacuna o el producto biológico y determinar el nivel de la al menos una molécula o un marcador; i) proporcionar una segunda muestra que comprende PAPC, obtenida a partir del sujeto después de que el sujeto se haya vacunado o haya recibido el producto biológico; j) dividir la segunda muestra en una primera porción de la segunda muestra y una segunda porción de la segunda muestra; k) poner en contacto la primera porción de la segunda muestra con la composición en condiciones de incubación de tal manera que la pluralidad de dendrímeros poliméricos cargados altamente ramificados se captan por las PAPC en la primera porción de la segunda muestra y de tal manera que el antígeno se procesa por las PAPC en la primera porción de la segunda muestra y se presenta por las PAPC en la primera porción de la segunda muestra en combinación con MHC de clase II; l) lavar la primera porción de la segunda muestra y la segunda porción de la segunda muestra; m) combinar la primera porción de la segunda muestra y la segunda porción de la segunda muestra a dos o más razones, dando como resultado una segunda pluralidad de mezclas; n) incubar la segunda pluralidad de mezclas durante una o más horas; o) examinar la segunda pluralidad de mezclas para determinar la presencia de la al menos una molécula o un marcador y determinar el nivel de la al menos una molécula o un marcador; p) comparar el nivel de la al menos una molécula o un marcador en la primera pluralidad de mezclas con el nivel de la al menos una molécula o un marcador en la segunda pluralidad de mezclas; y q) correlacionar un nivel superior de la al menos una molécula o marcador en la segunda pluralidad de mezclas en comparación con la primera pluralidad de mezclas con una respuesta de células T frente a la vacuna o el producto biológico.