Patent WO-2022129608-A2 (WO)
Title: Enzymes et procédés de production par fermentation d'esters de monoterpène
Inventor: BEEKWILDER MARTINUS JULIUS
Filed: 2021-12-17
Abstract: La présente invention concerne une alcool acyl transférase qui est susceptible d'estérifier un alcool monoterpène tertiaire de telle sorte qu'au moins 30 % en masse dudit alcool monoterpène tertiaire soit estérifié, de préférence en 36 h, 24 h, 18 h, 12 h, 6 h, 3 h, 2 h, 1 h, 45 min ou 30 min, de préférence dans une cellule microbienne. L'invention concerne en outre un acide nucléique comprenant une séquence d'acide nucléique codant pour l'alcool acyl transférase de l'invention, ou une séquence complémentaire associée, et un vecteur ou une construction génique comprenant l'acide nucléique de l'invention. La présente invention concerne en outre une cellule hôte comprenant le vecteur ou la construction génique de l'invention, et un organisme transgénique non humain comprenant l'acide nucléique de l'invention, le vecteur ou la construction génique de l'invention, ou la cellule hôte de l'invention. L'invention concerne également un procédé de préparation d'un ester de monoterpène, comprenant l'estérification d'un alcool de monoterpène en un ester de monoterpène, en présence d'une alcool acyl transférase de l'invention. Plus particulièrement, l'invention concerne un procédé de préparation d'acétate de linalyle, comprenant l'estérification de linalol en acétate de linalyle, en présence d'une alcool acyl transférase de l'invention. L'invention concerne en outre l'utilisation de l'alcool acyl transférase de l'invention, l'acide nucléique de l'invention, le vecteur ou la construction génique de l'invention, la cellule hôte de l'invention, ou l'organisme transgénique non humain de l'invention (i) pour la reconstitution hétérologue d'une voie de biosynthèse de terpène ; (ii) pour la production d'un produit industriel, de préférence un arôme ou un parfum, un biocarburant, une composition de carburant, un composé de combustible, par exemple, un agent d'expansion pour des compositions de carburant diesel, un pesticide, un insectifuge ou un antimicrobien ; (iii) pour la production d'un ester de monoterpène aliphatique et/ou aromatique à partir d'un alcool de monoterpène, de préférence à partir d'un alcool de monoterpène tertiaire ; (iv) pour la détoxification d'un alcool de monoterpène dans un micro-organisme, ce qui permet d'augmenter la production de monoterpène dans ledit micro-organisme ; (v) en combinaison avec une GPP synthase et/ou une S- ou R-linalol synthase ; (vi) pour l'augmentation des effets bénéfiques d'acétylation pour que les séparations d'acétate hydrophobes entrent plus facilement dans une phase organique, par comparaison avec l'alcool de monoterpène ; (vii) pour l'expression de l'alcool acyl transférase de l'invention de telle sorte que le rapport entre l'acétate de monoterpène et l'alcool de monoterpène soit supérieur à 5 : 1 ou 10 : 1 ; ou (viii) dans un système de production microbienne pour des esters de monoterpène. L'invention concerne également un kit comprenant l'alcool acyle transférase de l'invention, l'acide nucléique de l'invention, le vecteur ou la construction génique de l'invention, la cellule hôte de l'invention, ou l'organisme transgénique non humain de l'invention, et éventuellement au moins un alcool monoterpène, de préférence un alcool de monoterpène tertiaire. Enfin, l'invention concerne un procédé de production d'un composé de carburant et/ou de biolubrifiant, le procédé comprenant les étapes consistant à : a) produire un ou plusieurs esters de monoterpène par l'un quelconque des procédés de l'invention ; b) éventuellement, purifier le ou les esters de monoterpène produits à l'étape a) ; et c) convertir une partie ou la totalité du ou des esters de monoterpène de l'étape a), ou le ou les esters de monoterpène éventuellement purifiés de l'étape b), en un ou plusieurs composés de carburant et/ou de biolubrifiant, choisis de préférence dans le groupe constitué par : le tétrahydrolinalool ; le 2,6-diméthyloctane (DMO) ; des dimères d'hydrocarbures c20 saturés ; des trimères d'hydrocarbures c30 saturés ; des dimères de méthylcyclopentadiène hydrogénés ; des composés hydrocarbonés multicycliques à haute densité saturés appropriés pour la propulsion d'un missile ; et des oligomères c40+ hydrogénés appropriés pour produire des additifs biolubrifiants ; d) éventuellement à combiner le ou les composés de carburant ou de biolubrifiant avec des composés supplémentaires appropriés pour un carburant et/ou un biolubrifiant ; la composition de carburant et/ou de biolubrifiant ayant une somme comprise entre 0,01 % (poids/poids) et 99,99 % (poids/poids) de composé de carburant ou de biolubrifiant produit à partir du ou des esters de monoterpène pouvant être obtenus par l'un des procédés de l'invention.