Patent ES-2915378-T3 (ES)
Title: Procedimientos para detectar y cuantificar una proteína de célula huésped en líneas celulares
Inventor: GUNAWAN FENY
IPC: G01N33/573
Filed: 2014-09-12
Granted: 2022-06-22
Abstract: Un procedimiento de selección de una línea de células huésped óptima de un grupo de dos o más líneas de células huésped, en el que la línea de células huésped óptima expresa una baja cantidad de PLBL2 de hámster, que comprende: (i) obtener una muestra de línea de células huésped de cada una de las dos o más líneas de células huésped; (ii) calcular la cantidad de PLBL2 en cada una de las muestras de línea de células huésped de acuerdo con un procedimiento para detectar la proteína fosfolipasa de tipo B 2 (PLBL2) de hámster en cada una de las muestras de línea de células huésped, comprendiendo el procedimiento: (a) poner en contacto un primer anticuerpo de captura que se une a PLBL2 de hámster con la muestra, generando, de este modo, un material de combinación muestra-anticuerpo de captura; (b) poner en contacto un segundo anticuerpo de detección que se une a PLBL2 de hámster con el material de combinación muestra-anticuerpo de captura; y (c) detectar el segundo anticuerpo unido al material de combinación muestra-anticuerpo de captura; (d) cuantificar el nivel del segundo anticuerpo de detección unido usando una curva de valoración patrón, (e) calcular una cantidad de PLBL2 de hámster presente en la muestra en base al nivel del segundo anticuerpo de detección unido, (iii) comparar la cantidad de PLBL2 en cada una de las muestras de línea de células huésped con la cantidad de PLBL2 en cada una de las muestras de línea de células huésped del grupo; (iv) identificar la muestra de línea de células huésped que tiene la cantidad más baja de PLBL2 en comparación con cada una de las muestras de línea de células huésped del grupo, generando, de este modo, una línea de células huésped identificada del grupo que tiene la cantidad más baja de PLBL2; y (v) seleccionar la línea de células huésped identificada de (iv) como la línea de células huésped óptima, en el que el anticuerpo monoclonal de captura que se une a fosfolipasa de tipo B 2 de hámster comprende una región variable que comprende una región de cadena pesada variable que comprende CDRH1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 15, CDRH2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 16 y CDRH3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 17 y una región de cadena ligera variable que comprende CDRL1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 20, CDRL2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 21 y CDRL3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 22, y/o en el que el anticuerpo monoclonal de detección que se une a fosfolipasa de tipo B 2 de hámster comprende una región variable que comprende una región de cadena pesada variable que comprende CDRH1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 5, CDRH2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 6 y CDRH3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 7 y una región de cadena ligera variable que comprende CDRL1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 10, CDRL2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 11 y CDRL3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO.: 12.