Patent AR-118629-A1 (AR)
Title: Proteínas de unión triespecíficas, métodos y usos
IPC: C12N15/79
Filed: 2020-04-08
Abstract: Reivindicación 1: Una proteína de unión que comprende cuatro cadenas polipeptídicas que forman tres sitios de unión a antígeno, donde una primera cadena polipeptídica comprende una estructura representada por la fórmula: VL₂-L¹-VL₁-L²-CL (1) y una segunda cadena polipeptídica comprende una estructura representada por la fórmula: VH₁-L³-VH₂-L⁴-CH₁-bisagra-CH₂-CH₃ (2) y una tercera cadena polipeptídica comprende una estructura representada por la fórmula: VH₃-CH₁-bisagra-CH₂-CH₃ (3) y una cuarta cadena polipeptídica comprende una estructura representada por la fórmula: VL₃-CL (4) donde: VL₁ es un primer dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina; VL₂ es un segundo dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina; VL₃ es un tercer dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina; VH₁ es un primer dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina; VH₂ es un segundo dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina; VH₃ es un tercero dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina; CL es un dominio constante de cadena ligera de inmunoglobulina; CH₁ es un dominio constante de cadena pesada CH₁ de inmunoglobulina; CH₂ es un dominio constante de cadena pesada CH₂ de inmunoglobulina; CH₃ es un dominio constante de cadena pesada CH₃ de inmunoglobulina; bisagra es una región bisagra de inmunoglobulina que conecta los dominios CH₁ y CH₂; y L¹, L², L³ y L⁴ son enlazadores de aminoácidos; donde el polipéptido de fórmula (1) y el polipéptido de fórmula (2) forman un par cruzado de cadena ligera-cadena pesada; y donde VH₁ y VL₁ forman un primer sitio de unión a antígeno; donde VH₂ y VL₂ forman un segundo sitio de unión a antígeno que se une a un polipéptido CD3, donde el dominio VH₂ comprende una secuencia CDR-H1 que comprende la secuencia de aminoácidos de GFTFTKAW (SEQ ID Nº 55), una secuencia CDR-H2 que comprende la secuencia de aminoácidos de IKDKSNSYAT (SEQ ID Nº 56) y una secuencia CDR-H3 que comprende la secuencia de aminoácidos de RGVYYALSPFDY (SEQ ID Nº 57), y el dominio VL₂ comprende una secuencia CDR-L1 que comprende la secuencia de aminoácidos de QSLVHX¹NX²X³TY, en la que X¹ es E o Q, X² es A o L y X³ es Q, R o F (SEQ ID Nº 180), una secuencia CDR-L2 que comprende la secuencia de aminoácidos de KVS (SEQ ID Nº 64) y una secuencia CDR-L3 que comprende la secuencia de aminoácidos de GQGTQYPFT (SEQ ID Nº 65); y donde VH₃ y VL₃ forman un tercer sitio de unión a antígeno. Reivindicación 28: Una molécula aislada de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína de unión de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27. Reivindicación 29: Un vector de expresión que comprende la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 28. Reivindicación 30: Una célula huésped aislada que comprende la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 28 o el vector de expresión de la reivindicación 29. Reivindicación 32: Una composición farmacéutica que comprende la proteína de unión de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27 y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Reivindicación 33: Un método de prevención y/o tratamiento del cáncer en un paciente que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos una proteína de unión de cualquiera de las reivindicaciones 7 - 27 o la composición farmacéutica de la reivindicación 32. Reivindicación 86: Un sistema vectorial que comprende uno o más vectores que codifican una primera, segunda, tercera y cuarta cadena polipeptídica de una proteína de unión de una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27. Reivindicación 88: Un kit de polinucleótidos, que comprende: (a) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 189, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 190, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 191 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 192; (b) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 193, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 194, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 195 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 196; (c) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 197, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 198, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 199 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 200; (d) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 201, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 202, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 203 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 204; (e) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 205, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 206, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 207 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 208; (f) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 209, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 210, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 211, y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 212; (g) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 213, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 214, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 215 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 216; (h) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 217, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 218, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 219 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 220; (i) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 221, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 222, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 223 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 224; (j) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 225, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 226, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 227 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 228; (k) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 229, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 230, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 231 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 232; (l) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 233, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 234, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 235 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 236; (m) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 237, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 238, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 239 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 240; (n) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 241, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 242, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 243 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 244; (o) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 245, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 246, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 247 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 248; (p) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 249, un segundo polinucleótido que comprende 1a secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 250, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 251 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 252; (q) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 253, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 254, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 255 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 256; (r) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 257, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 258, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 259 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 260; (s) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 261, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 262, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 263 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 264; (t) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 265, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 266, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 267 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 268; (u) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 269, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 270, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 271 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 272; (v) un primer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 273, un segundo polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 274, un tercer polinucleótido que comprende la secuencia de polinucleótidos de SEQ ID Nº 275 y un cuarto polinucleótido que comprende la secuencia polinucleotídica de SEQ ID Nº 276.