Patent AR-039897-A1 (AR)
Title: Liberacion incrementada in vivo de una construccion de acido nucleico mediante el sistema poli-l-glutamato ("plg")
Inventor: DRAGHIA-AKLI RUXANDRA
IPC: A61K48/00
Filed: 2003-05-28
Abstract: Reivindicación 1: Una composición que comprende a) una construcción de expresión de ácido nucleico; y b) un polipéptido cargado que facilita la transfección asociado con la misma; en donde una relación en moles del polipéptido cargado que facilita la transfección con la construcción de expresión de ácido nucleico comprende desde 1 mol a 5.000 moles del polipéptido cargado que facilita la transfección por mol de construcción de expresión de ácido nucleico. Reivindicación 2: La composición de la reivindicación 1, en donde el polipéptido cargado que facilita la transfección comprende poli-L-glutamato. Reivindicación 8: La composición de la reivindicación 1, en donde la construcción de expresión de ácido nucleico comprende la Seq ID 11, Seq ID 12, Seq ID 13, Seq ID 14, Seq ID 17, Seq ID 18, Seq ID 19, Seq ID 20, Seq ID 21. Reivindicación 9:La composición de la reivindicación 1, en donde la construcción de expresión de ácido nucleico comprende un gen que codifica una hormona de liberación de la hormona de crecimiento (GHRH) o un equivalente biológico funcional de la misma. Reivindicación 10: La composición de la reivindicación 9, en donde el GHRH codificado es un polipéptido biológicamente activo, y el equivalente biológico funcional de GHRH codificado es un polipéptido que ha sido modificado por ingeniería genética para contener una secuencia de aminoácidos distinta mientras mantiene simultáneamente una actividad biológica similar o mejorada en comparación con el polipéptido GHRH. Reivindicación 11: La composición de la reivindicación 9, en donde GHRH codificado o el equivalente biológico funcional del mismo es de la fórmula (SEQ ID 6): -X-1-X2-DAIFTNSYRKVL-X3-QLSARKLLQDI-X4-X5-RQQGERNQEQGA-OH donde la formula tiene las siguientes características: X1 es un isómero D-o-L- del aminoácido tirosina (''Y''), o histidina (''H''); X2 es un isómero a D-o-L- del aminoácido alanina (''A''), valina (''V''), o isoleucina (''I''); X3 es un isómero D-o-L- del aminoácido alanina (''A'') o glicina (''G''); X4 es un isómero D-o-L- del aminoácido metionina (''M''), o leucina (''L''); X5 es un isómero D-o-L- del aminoácido serina (''S'') o asparagina (''N''); o una combinación de los mismos. Reivindicación 12: La composición de la reivindicación 1, en donde la construcción de expresión de ácido nucleico codifica un polipéptido de una secuencia que comprende Seq ID 1, Seq ID 2, Seq ID 3, Seq ID 4, o Seq ID 5. Reivindicación 13: Una composición que comprende: a) una construcción de expresión de ácido nucleico; y b) un polipéptido poli-L-glutamato asociado a la misma; en donde una relación en moles del polipéptido cargado que facilita la transfección a la construcción de expresión de ácido nucleico comprende desde 1 mol a 5.000 moles del polipéptido cargado que facilita la transfección por mol de construcción de expresión de ácido nucleico. Reivindicación 24: Una composición que comprende: a) una construcción de expresión de ácido nucleico que codifica una hormona liberadora de la hormona de crecimiento (''GHRH''), o un equivalente biológico funcional de la misma, y b) un polipéptido poli-L-glutamato asociado a la misma, en donde una relación en moles del polipéptido cargado que facilita la transfección a la construcción de expresión de ácido nucleico comprende desde 1 mol a 5.000 moles del polipéptido cargado que facilita la transfección por mol de la construcción de expresión de ácido nucleico. Reivindicación 45: Un método para introducir una construcción de expresión de ácido nucleico dentro de una célula de un tejido seleccionado de un receptor que comprende: a) colocar una pluralidad de electrodos en el tejido seleccionado, en donde la pluralidad de electrodos están dispuestos en un espacio interrelacionado; b) introducir la construcción de expresión de ácido nucleico que tiene un polipéptido cargado que facilita la transfección asociado a la misma; y c) aplicar un pulso eléctrico de corriente constante a la pluralidad de electrodos; en donde una relación en moles del polipéptido cargado que facilita la transfección a la construcción de expresión de ácido nucleico comprende desde 1 mol a 5.000 moles del polipéptido cargado que facilita la transfección por mol de la construcción de expresión de ácido nucleico. Reivindicación 47: El método de la reivindicación 45, en donde la célula del tejido seleccionado comprende una célula somática, una célula troncal o una célula germinal. Reivindicación 48: El método de la reivindicación 45, en donde el tejido seleccionado del receptor comprende músculo. Reivindicación 53: El método de la reivindicación 45, en donde la construcción de expresión de ácido nucleico comprende un gen que codifica una hormona de liberación de la hormona de crecimiento (''GHRH'') o un equivalente biológico funcional de la misma. Reivindicación 71: Un método para incrementar la estabilidad de una construcción de expresión de ácido nucleico que comprende: mezclar la construcción de expresión de ácido nucleico con un polipéptido cargado que facilita la transfección para dar una construcción de expresión de ácido nucleico estabilizada en donde; a) la degradación in vitro de la construcción de expresión de ácido nucleico estabilizada es mas lenta en comparación con aquélla de la construcción de expresión de ácido nucleico no asociada a un polipéptido que facilita la transfección; y b) una relación en moles del polipéptido cargado que facilita la transfección a la construcción de expresión de ácido nucleico que comprende desde 1 mol a 5.000 moles del polipéptido cargado que facilita la transfección por mol de la construcción de expresión de ácido nucleico.