Patent AR-035965-A1 (AR)
Title: Un adn aislado que codifica para una antranilato sintasa monomerica, el vector ,la semilla y la planta transgenica que lo comprende; el metodo para alterar el contenido de triptofano en dicha planta; el metodo para hacer alimento animal o alimento humano y alimento animal o humano obtenido.
Inventor: WEAVER LISA M
IPC: C12N9/88
Filed: 2002-05-03
Abstract: Un método para alterar el contenido de triptófano de una planta mediante la introducción y la expresión de un segmento aislado de ADN que codifica para una antranilato sintasa monomérica en las células de la planta. La antranilato sintasa monomérica puede ser naturalmente monomérica, incluyendo y sin limitarse a organismos tales como Agrobacterium tumefaciens, Rhizobium meliloti, Mesorhizobium loti, Brucella melitensis, Nostoc sp. PCC7120, Azospirillum brasilense y Anabaena M22983. Alternativamente, la antranilato sintasa monomérica puede ser una fusión de cualquier dominio disponible alfa y beta de antranilato sintasa. Tales dominios alfa y beta pueden derivarse de Zea mays, soja, arroz, algodón, trigo, tabaco o cualquier gen que codifique para una sub-unidad o dominio de antranilato sintasa. El ADN aislado también puede codificar para una antranilato sintasa mutante o un dominio de antranilato sintasa mutante. Las plantas transgénicas transformadas con un segmento de ADN aislado que codifican para una antranilato sintasa, así como el alimento para personas o animales, las semillas y progenie derivada de estas plantas. Reivindicación 1: Un ADN aislado que codifica para una antranilato sintasa monomérica, caracterizado porque la antranilato sintasa monomérica comprende un único polipéptido con un dominio alfa de antranilato sintasa y un dominio beta de antranilato sintasa, y en donde la antranilato sintasa monomérica se expresa en una planta. Reivindicación 9: El ADN aislado de la reivindicación 1, caracterizado porque la antranilato sintasa comprende una mutación que incrementa la actividad de la antranilato sintasa o reduce la sensibilidad de la antranilato sintasa a la inhibición pro triptófano o un análogo del mismo. Reivindicación 11: El ADN aislado de la reivindicación 9, caracterizado porque la mutación está dentro de las posiciones de aminoácidos 25-60 o 200-225 o 290-300 o 370-375 cuando la secuencia de aminoácidos de la antranilato sintasa está alineada con un antranilato sintasa monomérica de Agrobacterium tumefaciens con SEQ ID NO: 4. Reivindicación 17: El ADN aislado de la reivindicación 1, caracterizado porque el ADN aislado codifica además para gen marcador seleccionable o un gen reporter. Reivindicación 19: El ADN aislado de la reivindicación 18, caracterizado porque la resistencia a los herbicidas comprende la resistencia al glifosato, glufosinato o dalapon. Reivindicación 20: El ADN aislado de la reivindicación 1, caracterizado porque el ADN aislado codifica además para una proteína de Bacillus thuringiensis que, cuando se expresa en una planta, imparte a la planta resistencia a los insectos. Reivindicación 93: Un método para alterar el contenido de triptófano en una planta y que involucra: (b) introducir en células regenerables de una planta un transgén que comprende un ADN aislado que codifica para una antranilato sintasa monomérica que comprende un dominio alfa de antranilato sintasa y un dominio beta de antranilato sintasa, en donde el ADN aislado está operativamente ligado a un promotor que es funcional en una célula vegetal, para dar lugar a células vegetales transformadas; y (c) regenerar una planta a partir de dichas células vegetales transformadas, en donde las células de la planta expresan la antranilato sintasa monomérica codificada por el ADN aislado en cantidad efectiva como para incrementar el contenido de triptófano en la planta en relación al contenido de triptófano en una planta no transformada con los mismos antecedentes genéticos. Reivindicación 149: Un alimento animal o un alimento humano caracterizado porque comprende al menos una porción de una planta que comprende un ADN aislado que codifica para una antranilato sintasa monomérica que comprende un dominio alfa de antranilato sintasa y un dominio beta de antranilato sintasa, en donde las células de la planta pueden expresar la antranilato sintasa monomérica codificada por el ADN aislado.