Patent WO-2013039411-A1 (WO)
Title: Support à base de fibrine autologue et allogène, son procédé d'obtention et utilisation d'un support à base de fibrine pour la transplantation de cellules et, notamment, de cellules humaines
Inventor: BURSIG HENRYK
IPC: A61L24/10
Filed: 2012-04-30
Abstract: La présente invention concerne un support à base de fibrine autologue et allogène caractérisé en ce qu'il s'agit d'un mélange de type gel associant du fibrinogène et du plasma riche en plaquettes qui sont combinés selon un rapport en volume de 0,1-2 à 0,1-2, et de préférence de 1/1, ainsi que du chlorure de calcium dans une solution à 0,1 à 99 %, et de préférence dans une solution à 10 %, qui est présent selon un rapport de 0,1-2 à 0,1-2, et de préférence de 1/1, par rapport au mélange de fibrinogène et de plasma riche en plaquettes. L'invention concerne également un procédé d'obtention d'un support à base de fibrine autologue comprenant les étapes consistant à prélever du sang, à séparer le plasma sanguin des cellules sanguines, à congeler, puis à décongeler le plasma sanguin, ledit procédé se caractérisant en ce que le sang recueilli auprès du donneur est séparé du concentré de cellules sanguines, c'est à dire que les érythrocytes et les leucocytes en sont éliminés, ladite séparation prenant la forme d'une centrifugation à +20 à +24 °C pendant 5 à 15 minutes, à 700 à 2 000 x g. Par la suite, le plasma est acheminé jusqu'à un récipient satellite vide, où une centrifugation est réalisée à +20 à +24 °C pendant 5 à 15 minutes, à 2 100 à 5 000 x g afin de séparer le plasma riche en plaquettes, qui est conservé dans des poches, de préférence des poches perméables à l'air et agitées, pendant au maximum 7 jours et, de préférence, 3. Le plasma restant, pauvre en plaquettes, est utilisé pour la préparation de fibrinogène sous la forme d'un cryoprécipité, cela se faisant par congélation du plasma sanguin à deux reprises à une température de -30 à -90 °C, puis par décongélation jusqu'à environ +4 °C, par exemple dans un bain d'eau, puis par centrifugation à environ +4 °C pendant 5 à 20 minutes à 1 000 à 5 000 x g, suite à quoi le surnageant est éliminé et le cryoprécipité résultant est mélangé au plasma riche en plaquettes contenu dans le récipient, selon un rapport de 0,1-2 à 0,1-2, et de préférence de 1/1, et à une solution d'un composé de calcium, de préférence à une solution de chlorure de calcium à 10 % selon un rapport de préférence égal à 1/1 par rapport au mélange de fibrinogène et de plasma riche en plaquettes. L'invention concerne également l'utilisation d'un support à base de fibrine autologue en vue de l'obtention d'un greffon se présentant sous la forme d'un gel, c'est-à-dire un support obtenu en mélangeant du fibrinogène et du plasma riche en plaquettes provenant du sang du receveur, de préférence prélevé en une seule fois, ou du fibrinogène prêt à l'emploi caractérisé par un phénotype adapté et du plasma riche en plaquettes directement obtenu à partir d'un don de sang du patient-receveur grâce à l'appareillage de la salle d'opération. Dans le cadre du procédé d'obtention d'un support et préalablement à l'addition d'une solution à 0,1 à 99 % de chlorure de calcium selon un rapport en volume de 0,1-2 à 0,1-2, et de préférence 1/1, au mélange de fibrinogène et de plasma riche en plaquettes, de 5 000 à 100 millions de cellules du receveur ou de cellules allogènes et hétérologues sont ajoutées, cultivées selon un procédé connu et traitées le jour de la transplantation par trypsinisation, lavage dans un milieu contenant du sérum et évaluation de leur vitalité.