Patent AR-127014-A1 (AR)
Title: Anticuerpo quimérico biespecífico bivalente que comprende un heterodímero basado en proteínas mhc o proteínas similares a mhc
Inventor: LEGOTSKII SERGEI ALEKSANDROVICH
IPC: C07K16/28
Filed: 2022-09-08
Abstract: La presente invención se refiere al campo de la biotecnología, específicamente a los anticuerpos quiméricos bivalentes y biespecíficos que incluyen un heterodímero basado en los dominios proximales de membrana del MHC (complejo mayor de histocompatibilidad) o proteínas tipo MHC (CD1 (agrupamiento de diferenciación 1) o HFE (proteína de hemocromatosis)), así como a una técnica para producir dichos anticuerpos biespecíficos. La invención se refiere además a un ácido nucleico que codifica dicho anticuerpo biespecífico, un vector de expresión, una célula huésped para producir dicho anticuerpo quimérico, biespecífico y bivalente, y a un método para producir dicha célula.  Reivindicación 1: Un anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico, en donde dicho anticuerpo comprende: a) una primera cadena liviana y una primera cadena pesada del anticuerpo que se une específicamente a un primer antígeno; en donde la primera cadena liviana comprende un dominio variable de cadena liviana y un dominio constante de cadena liviana; en donde la primera cadena pesada comprende un dominio variable de cadena pesada y los dominios constantes de cadena pesada del anticuerpo que incluye un primer (CH1) dominio constante de cadena pesada y un monómero del fragmento Fc que comprende el segundo (CH2) y tercer (CH3) dominios constantes de cadena pesada; b) una segunda cadena liviana y una segunda cadena pesada del anticuerpo de unión específica a un segundo antígeno, en donde la segunda cadena liviana comprende un dominio variable de cadena liviana y un dominio constante que se selecciona del grupo: un primer dominio proximal de membrana del MHC (complejo de histocompatibilidad principal) o un primer dominio proximal de membrana de la proteína tipo MHC; en donde la segunda cadena pesada comprende un dominio variable de cadena pesada, un dominio constante que se selecciona del grupo: un segundo dominio proximal de membrana del MHC (complejo de histocompatibilidad principal) o un segundo dominio proximal de membrana de la proteína tipo MHC; y un monómero del fragmento Fc que comprende el segundo (CH2) y tercer (CH3) dominios constantes de cadena pesada; en donde el primer dominio proximal de membrana del MHC o proteína tipo MHC y el segundo dominio proximal de membrana del MHC o proteína tipo MHC forman un heterodímero entre ellos, que se estabiliza mediante un enlace disulfuro; en donde el dominio CH3 de una cadena pesada y el dominio CH3 de otra cadena pesada se ponen en contacto entre sí con sus superficies, que se modifican para formar un anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico, dichas modificaciones en los dominios CH· de cadena pesada son sustituciones para facilitar la heterodimerización. Reivindicación 67: Un ácido nucleico aislado, que codifica el anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 66. Reivindicación 69: Un vector de expresión que comprende el ácido nucleico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 67 a 68. Reivindicación 70: Un método para producir una célula huésped para producir un anticuerpo quimérico bivalente, biespecífico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 66, que comprende transformar la célula con el vector de acuerdo con la reivindicación 69. Reivindicación 71: Una célula huésped para producir el anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 66, que comprende el ácido nucleico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 67 a 68. Reivindicación 72: Un método para producir el anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 66, en donde el método comprende las etapas de: a) transformar la célula huésped con vectores de expresión que comprenden moléculas de ácido nucleico que codifican la primera cadena liviana y la primera cadena pesada del anticuerpo quimérico biespecífico, con vectores de expresión que comprenden moléculas de ácido nucleico que codifican la segunda cadena liviana y la segunda cadena pesada del anticuerpo quimérico biespecífico, b) cultivar la célula huésped en condiciones adecuadas para la síntesis de dicho anticuerpo quimérico, bivalente, biespecífico; y c) aislar dicho anticuerpo biespecífico bivalente del cultivo celular.