Patent ES-2592380-T3 (ES)
Title: Extracción de analitos separados por isotacoforesis
Inventor: SCHOCH RETO
IPC: G01N27/447
Filed: 2010-07-06
Granted: 2016-11-29
Abstract: Un método para preconcentrar y aislar una diversidad n de analitos cargados (Ai, con i >= 1 a n) contenidos en una muestra mediante isotacoforesis, y cada uno de dichos analitos Ai tiene una movilidad electroforética efectiva μAi, y dichas movilidades electroforéticas efectivas μAi obedecen la relación completamente ordenada μA1 > μA2 > etc. > μAn, por medio de un aparato que comprende: - un canal de separación principal (C) con un extremo proximal (P) y un extremo distal (D), - medios para cargar una porción de muestra suplementada en un segmento interno de dicho canal de separación principal localizado entre dicho extremo proximal y dicho extremo distal, - medios para aplicar un campo eléctrico (Ê) entre dicho extremo proximal (P) y dicho extremo distal (D), - una diversidad n de canales de extracción (Ei, con i >= 1 a n) que están orientados de manera transversal con respecto a dicho canal de separación principal (C) y que tienen uniones respectivas con dicho canal de separación principal localizadas en sitios diferentes del mismo, y cada canal de extracción tiene una parte de extracción que conduce fuera del canal de separación principal, - medios para detectar zonas enfocadas dentro de dicho canal de separación (C) y/o medios para medir una velocidad de flujo a lo largo de un eje longitudinal de dicho canal de separación bajo la influencia de un campo eléctrico (Ê) aplicado a lo largo de dicho eje mediante dichos medios para aplicar un campo eléctrico, - medios para aplicar un flujo transversal a lo largo de cada uno de dichos canales de extracción (Ei) para extraer cualquiera de dichos analitos localizados en la unión respectiva del canal de extracción (Ei) y del canal de separación principal (C), y dicho método comprende las etapas de: - cargar un electrolito líder (LE) en una región distal del canal adyacente a dicho extremo distal y un electrolito terminal (TE) en una región proximal del canal adyacente a dicho extremo proximal, y dicho electrolito líder (LE) tiene una movilidad electroforética efectiva μLE > μA1 y dicho electrolito terminal (TE) tiene una movilidad electroforética efectiva μTE < μAn, - añadir una muestra suplementada a dicha región proximal (P) del canal, - dicha muestra suplementada comprende una mezcla de dicha muestra y un número n-1 de compuestos espaciadores (Sk, con k >= 1 a n-1), y cada uno de dichos compuestos espaciadores (Sk) tiene una movilidad electroforética efectiva μSk, y dichas movilidades electroforéticas efectivas μSk obedecen la relación completamente ordenada μAk > μSk > μAk+1, - aplicar un campo eléctrico axial entre dicho extremo proximal (P) y dicho extremo distal (D), y de ese modo se provoca una preconcentración y separación de dichos analitos y espaciadores formando zonas de espaciadores enfocadas y zonas de analitos enfocadas respectivas que fluyen a lo largo de dicho eje longitudinal, - cada uno de dichos compuestos espaciadores (Sk) en dicha muestra suplementada tiene una concentración inicial (c0,Sk) seleccionada de tal manera que corresponda sustancialmente, como su concentración preconcentrada (cSk) en la zona de espaciador enfocada respectiva, a un volumen de dicho canal de separación principal encerrado entre un par asociado de canales de extracción adyacentes (Ek) y (Ek+1), - detectar la posición y/o medir la velocidad de dichas zonas enfocadas, - opcionalmente detener el proceso desconectando dicho campo eléctrico (Ê) cuando la zona enfocada de cada analito (Ai) se localiza en la unión respectiva con el canal de extracción (Ei), - aplicar un flujo transversal de la parte de la muestra suplementada localizada en la unión del canal de separación principal y del canal de extracción respectivo, por lo que se transfiere cada analito preconcentrado (Ai) del canal de separación principal para el aislamiento de dicho analito.