Patent AR-109451-A1 (AR)
Title: Composiciones y métodos para preparar anticuerpos basados en el uso de loci mejoradores de expresión
IPC: C12N15/90
Filed: 2017-04-20
Abstract: Reivindicación 1: Una célula que comprende, un primer ácido nucleico exógeno integrado dentro de un primer locus de expresión mejorada; y un segundo ácido nucleico exógeno integrado dentro de un segundo locus de expresión mejorada; en donde el primer y el segundo ácido nucleico exógeno codifican juntos una proteína de unión a antígeno. Reivindicación 32: Un conjunto de vectores para expresar una proteína de unión a antígeno biespecífica en una célula, que comprende: un primer vector que comprende, de 5 a 3, un primer RRS, un primer ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un primer HCF, y un segundo RRS; un segundo vector que comprende, de 5 a 3, un tercer RRS, un segundo ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una segunda HC, un cuarto RRS; y una secuencia de nucleótidos que codifica una primera LC que está dentro del primer ácido nucleico en el primer vector, o está en un tercer vector diferente del primer y el segundo vector; en donde el primer, el segundo, el tercer y el cuarto RRS son diferentes; y en donde la proteína de unión a antígeno biespecífica comprende el primer HCF, el segundo HCF y el primer LCF, y en donde el primer y el segundo HCF son diferentes. Reivindicación 51: Un sistema que comprende una célula y un conjunto de vectores, en donde la célula comprende, integrado dentro de un primer locus de expresión mejorada: de 5 a 3, un primer RRS, un primer ácido nucleico exógeno y un segundo RRS; integrado dentro de un segundo locus de expresión mejorada: de 5 a 3, un tercer RRS, un segundo ácido nucleico exógeno y un cuarto RRS; en donde el primer y el segundo RRS son diferentes, y el tercer y el cuarto RRS son diferentes; y en donde el primer y el segundo loci de expresión mejorada son diferentes; en donde el conjunto de vectores comprende, un primer vector que comprende, de 5 a 3, un primer vector RRS 5, un primer ácido nucleico y un primer vector RRS 3, en donde el primer vector RRS 5 y 3 son diferentes; un segundo vector que comprende, de 5 a 3, un segundo vector RRS 5, un segundo ácido nucleico y un segundo vector RRS 3, en donde el segundo vector RRS 5 y 3 son diferentes; una secuencia de nucleótidos que codifica un primer HCF y una secuencia de nucleótidos que codifica un primer LCF, en donde una de las secuencias de nucleótidos está en el primer ácido nucleico y las otras secuencias de nucleótidos están en el segundo ácido nucleico; en donde el primer HCF y el primer LCF son regiones de una proteína de unión a antígeno; y en donde, tras la introducción de los vectores en la célula, el primer y el segundo ácido nucleico en los vectores se integran en el primer locus de expresión mejorada y el segundo locus de expresión mejorada, respectivamente, a través de la recombinación mediada por los RRS. Reivindicación 78: Un método que comprende: (i) proporcionar un sistema de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 - 77; (ii) introducir los vectores en la célula por transfección; y (iii) seleccionar una célula transfectada donde los ácidos nucleicos en los vectores se han integrado en el primer y el segundo loci de expresión mejorada a través de la recombinación mediada por los RRS.