Patent AR-102163-A1 (AR)
Title: Factores de transcripción artificiales procesados en el endosoma
IPC: C07K1/06
Filed: 2015-10-02
Abstract: Reivindicación 1: Un factor de transcripción artificial que comprende una proteína con dedos de zinc polidactilar dirigida específicamente a un promotor génico, fusionada a un dominio de proteína inhibidor o activador, una secuencia de localización nuclear, una proteína de transporte que comprende una o varias copias de un dominio de transducción de proteína, y uno solo o dos más sitios de escisión de proteasas especificas del endosoma, en donde el sitio único de escisión de proteasa especifica del endosoma es diferente de la secuencia de aminoácidos SEQ ID Nº 26. Reivindicación 38: Un factor de transcripción artificial que comprende una proteína con dedos de zinc polidactilar dirigida específicamente a un promotor génico, fusionada a un dominio de proteína inhibidor o activador, una secuencia de localización nuclear, una proteína de transporte que comprende una o varias copias de un dominio de transducción de proteína, y un sitio de escisión de proteasa específica del endosoma, en donde el factor de transcripción artificial comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo integrado por DRHLIIS (SEQ ID Nº 203), DLVTLLT (SEQ ID Nº 204), DEHLLVY (SEQ ID Nº 205), DFYTHLA (SEQ ID Nº 206), PLTLPTI (SEQ ID Nº 207), PRLMFLC (SEQ ID Nº 208), TAYLPHI (SEQ ID Nº 209), TETLPHI (SEQ ID Nº 210), TDYLDPH (SEQ ID Nº 211), QRYLEIT (SEQ ID Nº 212), NLHTIHI (SEQ ID Nº 213), NLCSVTQ (SEQ ID Nº 214), LAKFDMI (SEQ ID Nº 215), LYLTQFR (SEQ ID Nº 216), DLTHISI (SEQ ID Nº 217), DFKSVQF (SEQ ID Nº 218), REYLIIS (SEQ ID Nº 219), RIDQLTL (SEQ ID Nº 220), RQVTLAL (SEQ ID Nº 221), YEKITVT (SEQ ID Nº 222), YVTIRLF (SEQ ID Nº 223), YFSIHGL (SEQ ID Nº 224), ELNIDIL (SEQ ID Nº 225), PSLSFIV (SEQ ID Nº 226), SLLITNL (SEQ ID Nº 227), EISTTLF (SEQ ID Nº 228), NMSTTNL (SEQ ID Nº 229), IKTDYSL (SEQ ID Nº 230), TKVRVFL (SEQ ID Nº 231), EYILNYY (SEQ ID Nº 232), TTVNLTI (SEQ ID Nº 233), IVLNLSI (SEQ ID Nº 234), TSLLYTC (SEQ ID Nº 235), PTISFAL (SEQ ID Nº 236), KESFTLI (SEQ ID Nº 237), KLDVNFF (SEQ ID Nº 238), TELSYTL (SEQ ID N0: 239), IERFQFA (SEQ ID Nº 240), INQMLSH (SEQ ID Nº 241), ELFILHA (SEQ ID Nº 242), VYPILPI (SEQ ID N0: 243) y RRELFLL (SEQ ID Nº 244). Reivindicación 39: Una línea celular de mamífero que segrega un factor de transcripción artificial de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 38. Reivindicación 42: Un método para producir una proteína con dedos de zinc polidactilar que comprende una proteína con dedos de zinc octamérica o de orden superior, que comprende i) seleccionar una proteína con dedos de zinc hexamérica de una primera biblioteca de Proteínas con dedos de zinc; ii) construir una segunda biblioteca de Proteínas con dedos de zinc sobre la base de la proteína con dedos de zinc hexamérica seleccionada en i) mediante la fusión de esta Proteína con dedos de zinc hexamérica a una biblioteca aleatoria de dos o mas dedos de zinc; iii) seleccionar una proteína con dedos de zinc polidactilar que comprende una proteína con dedos de zinc octamérica o de orden superior. Reivindicación 46: Un sistema de cribado para seleccionar una proteína que comprende: i) un organismo huésped que es capaz de expresar la proteína; ii) un vector de expresión que está presente en el organismo huésped de i) con 1 - 2 copias, en donde el vector de expresión comprende un promotor enlazado operativamente a la proteína en donde la proteína es expresada en el organismo huésped con una tasa de expresión igual o inferior a la lograda para la proteína expresada en el mismo organismo huésped por un promotor de SEQ ID Nº 197 enlazado operativamente a la misma proteína.