Patent ES-2343411-T3 (ES)
Title: Procedimientos para identificar agentes biologicamente activos y combinaciones sinergicas.
Inventor: SCOTT IAN R
IPC: G01N33/53
Filed: 2004-03-24
Granted: 2010-07-30
Abstract: Un procedimiento in vitro para identificar combinaciones muy sinérgicas de agentes biológicamente activos, que comprende: i. seleccionar una biblioteca de activos potenciales en los que se busca sinergia; ii. identificar un subconjunto de compuestos S(1) que presenten actividad significativa ensayando cada componente de la biblioteca para su actividad en un Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías, siendo dicho ensayo un ensayo de alto rendimiento que incorpora lo suficiente de un sistema biológico completo de modo que las múltiples vías para las que se busca la sinergia sean activas e interaccionen en el ensayo, y teniendo un rango útil conocido de detectabilidad; iii. identificar un subconjunto de mezclas binarias denominado S(2) que presenten sinergia, por ensayo en el Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías de todo o una parte de S(1) en mezclas binarias con sustancialmente cada componente de la biblioteca, incluyendo componentes que mostraban actividad marginal o ninguna actividad en la etapa ii), donde la concentración del componente S(1) en la mezcla binaria se ajusta usando un Protocolo de Escala de Componente Único en el que uno o más componentes S(1) identificados en la etapa (ii) se diluyen repetidamente y se vuelven a ensayar en el Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías y se determina una concentración en la que la actividad en dicho ensayo es λ CMáx,1, donde λ es un factor de escala en el intervalo de aproximadamente 0,01 a 0,5, y CMáx,1 es la actividad máxima realmente detectable en el extremo superior del rango útil del Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías; iv. identificar un subconjunto de mezclas sinérgicas ternarias, S(3), por ensayo en el Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías de todo o una parte de las mezclas sinérgicas binarias S(2) en combinación con sustancialmente cada componente de la biblioteca, incluyendo componentes que mostraban actividad marginal o ninguna actividad en la etapa ii), donde las concentraciones de los componentes S(2) usadas en la mezcla ternaria se ajustan usando un Protocolo de Escala de Múltiples Componentes de modo que se vuelva a graduar S(2) a un valor λ CMáx,1, donde λ y CMáx,1 son como se han definido en (iii) anteriormente y por lo cual se elimina cualquier componente de la mezcla S(3) que esté contribuyendo solamente de forma marginal a la eficacia de la mezcla S(3) de esa mezcla; y v. opcionalmente realizar una o más etapas adicionales para identificar un subconjunto de combinaciones sinérgicas de N componentes, denominado S(N), donde N es un número entero mayor de 3, por ensayo en el Ensayo de Alto Rendimiento de Múltiples Vías de todo o una parte de las mezclas sinérgicas que contienen (N-1) componentes, denominadas S(N-1) e identificadas de una manera análoga a la etapa iv), en combinación con sustancialmente cada componente de la biblioteca, incluyendo los componentes que mostraron actividad marginal o ninguna actividad en la etapa ii), donde las concentraciones de los componentes S(N-1) usadas en las mezcla de N componentes se ajustan usando el Protocolo de Escala de Múltiples Componentes de modo que se vuelva a graduar la mezcla S(N-1) a un valor λ CMáx,1, donde λ y CMáx,1 son como se han definido en (iii) anteriormente, y por lo cual se elimina cualquier componente de la mezcla S(N-1) que esté contribuyendo solamente de forma marginal a la eficacia de la mezcla S(N-1) de esa mezcla.