Patent AR-126240-A1 (AR)
Title: Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
Inventor: MARRI PRADEEP REDDY
IPC: C12N9/22
Filed: 2022-06-24
Abstract: Una planta o parte de ella que comprende al menos una mutación no natural en un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT) que codifica un polipéptido HECT E3 UPL. Una célula vegetal que comprende un sistema de edición, donde el sistema de edición comprende: (a) una proteína efectora CRISPR-Cas; y (b) un ácido nucleico guía que comprende una secuencia espaciadora con complementariedad con un gen objetivo endógeno que codifica un polipéptido HECT E3 UPL. Una célula vegetal que comprende al menos una mutación no natural en un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT), en donde la mutación es una sustitución, inserción, deleción o inversión que se introduce mediante un sistema de edición que comprende un dominio de unión de ácido nucleico que se une a un sitio objetivo en el gen endógeno HECT E3 UPL. Un método para generar variación en una región de un polipéptido de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT), que comprende: introducir un sistema de edición en una célula vegetal, en donde el sistema de edición está dirigido a una región de un gen HECT E3 UPL que codifica la región del polipéptido HECT E3 UPL. Un método para editar un sitio específico en el genoma de una célula vegetal, donde el método comprende: escindir, de manera específica del sitio, un sitio objetivo dentro de un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT) en la célula vegetal. Un ácido nucleico guía que se une a un sitio objetivo en un gen de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT). Un sistema de edición de genes que comprende una proteína efectora CRISPR-Cas en asociación con un ácido nucleico guía, en donde el ácido nucleico guía comprende una secuencia espaciadora que se une a un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT). Un complejo que comprende un ácido nucleico guía y una proteína efectora CRISPR-Cas que comprende un dominio de escisión, en donde el ácido nucleico guía se une a un sitio objetivo en un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT). Un casete de expresión que comprende (a) un polinucleótido que codifica una proteína efectora CRISPR-Cas que comprende un dominio de escisión y (b) un ácido nucleico guía que se une a un sitio objetivo en un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT). Un ácido nucleico que codifica una mutación negativa dominante o una mutación nula de un polipéptido de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT), opcionalmente en donde el ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que tiene al menos un 90% de identidad de secuencia con cualquiera de SEQ ID Nº 119 - 125. Un polipéptido modificado de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT) que comprende una mutación en un residuo de aminoácido ubicado en la posición 1839 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 78, en la posición 1844 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 79, en la posición 1862 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 80, en la posición 1858 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 81, en la posición 1807 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 82, y/o en la posición 1800 con referencia a la numeración de posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº 83. Un método para crear una mutación en un gen endógeno de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT) en una planta. Un ácido nucleico guía que se une a un ácido nucleico objetivo en un gen de Proteína Ubiquitina Ligasa (UPL) E3 Homólogo a E6AP C-Terminal (HECT) que tiene el número de identificación de gen (ID del gen) de Zm00001d014920, Zm00001d004139, Glyma.11G107500, Glyma.12G032500, Glyma.06G003600 y/o Glyma.04G004000.