Patent ES-2884155-T3 (ES)
Title: Variantes de serina proteasa y polinucleótidos que codifican las mismas
Inventor: KLITGAARD DORTE
IPC: C12N9/58
Filed: 2017-07-14
Granted: 2021-12-10
Abstract: Una variante de proteasa que comprenden una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones 1, 5, 9, 25, 29,30, 32, 38, 39, 40, 41, 42, 45, 46, 49, 50, 53, 54, 55, 57, 59, 60, 61, 62, 64, 67, 68, 69, 74, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 87, 93, 94, 96, 99, 102, 103, 105, 109, 111, 112, 114, 115, 117, 122, 123, 124, 128, 130, 136, 141, 142, 145, 146, 147, 150, 153, 154, 157, 159, 161, 167, 169, 175, 182, 185, 199, 200, 205, 207, 209, 210, 213, 216, 217, 225, 228, 231, 234, 237, 242, 244, 245, 246, 248, 258, 262, 266, 267, 269, 271, 272, 276, 278, 280, 284, 289, 293, 296, 299, 305, 308, 313, 314, 317, 318, 319, 321, 322, 324, 325, 326, 329, 330, 331, 333, 336, 338, 341, 343, 345, 347, 348, 355, 358, 359, 361, 362, 363, y 364 del polipéptido de SEQ ID NO: 3, y la variante tiene actividad proteasa, y en donde la variante tiene al menos 90%, al menos 95%, al menos 96%, al menos 97%, al menos 98% o al menos 99%, pero menos de 100% identidad de la secuencia con el polipéptido maduro de SEQ ID NO: 3, y en donde la variante tiene una termoestabilidad incrementada medida como factor de mejora, HIF, en comparación con la proteasa de SEQ ID NO: 3, en donde la variante comprende al menos una sustitución seleccionada del grupo que consiste en : A1T, S5I, S5K, S5L, S5Y, T9H, K25P, S29I, S29P, S29R, S30E, K32W, F38L, 139G, I39L, I39V, I39Y, D40F, D40G, D40H, D40N, D40P, Q41I, Q41V, F42C, F42K, F42S, F42Y, K45L, K45M, K45Y, A46C, A46E, K49P, S50C, S50I, S50L, S50M, S50Q, A53C, A53E, A53V, Q54I, Q54L, Q54M, Q54V, F55H, F55L, K57P, K57S, I59G, I59M, I59P, S60P, S61L, S61P, S62C, S62N, S62P, T64G, T64I, L67V, Q68V, Q68Y, T69C, E74H, E74R, D76L, D76R, Q77L, S78D, P79Y, S80L, E81A, E81H, E81K, E81L, E81P, E81Y, A82F, A82L, A82M, A82P, N87S, T93L, T93S, V94S, L96W, G99C, T102L, T102V, T103I, T103K, T103V, I105Q, D109H, D109K, D109M, D109Y, F111H, F111K, F111S, F111Y, Q112R, G114L, N115A, N115C, N115K, N115P, N115R, N115T, N115Y, E117D, E117G, E117H, E117N, E117Q, E117S, I122K, I122R, I123A, N124L, N124V, G128A, G128E, G128F, G128L, G128S, S130D, S130G, S130L, S130N, S130P, L136K, G141T, Q142A, Q142F, Q142L, Q142N, N145V, T146A, T146I, T146L, T146N, I147S, K150F, K150L, K150R, N153A, N153L, N153M, N153P, N153R, N153Y, Q154A, Q154I, Q154L, Q154M, Q154N, Q154T, Q154V, N1571, N157L, Y159H, Q161E, T167F, I169F, I169S, D175I, D175N, Q182C, Q182T, Q182V, H185P, F199L, F199M, M200S, A205S, Q207H, Q207L, V209F, S210T, T213L, T213R, A216R, F217I, F217Y, V225Y, I228L, I228T, I228W, Y231I, S234Q, S237F, S237Q, A242I, A242L, A242V, G244S, S245P, T246S, S248Y, F258P, S262P, V266K, V266R, D267A, D267H, D267L, D267N, Q269L, V271R, S272I, S272K, S272L, S272R, S272T, S272V, S272Y, T276L, T276Y, G278P, D280N, D280S, D280T, D280Y, C284A, C284G, F289Y, I293T, V296A, V296I, R299N, K305S, L308V, P313L, F314I, F314L, S317E, S317N, S317W, S318P, A319F, A319Q, K321L, K321Q, K321S, A322D, L324Q, L324S, N325L, D326P, S329C, S329H, S329I, S329L, S329N, S329T, S329V, S329W, G330Q, S331W, S331Y, P333R, S336K, S336N, N338M, N338Q, N338R, P341S, K343A, K343H, K343S, K343T, K343V, G345S, D347I, P348Y, P355I, P355R, A358L, A358P, A358R, A358Y, K359L, K359S, L361M, T362L, T362N, A363G, A363L, y V364I, y en donde la sustitución en la una o más posiciones proporciona una variante de proteasa que tiene un aumento en la termoestabilidad medida como factor de mejora, HIF, de al menos 1,4.