Patent ES-2659786-T3 (ES)
Title: Detección ultrasensible de moléculas o partículas usando perlas u otros objetos de captura
Inventor: DUFFY DAVID C
IPC: G01N33/58
Filed: 2011-03-01
Granted: 2018-03-19
Abstract: Método para determinar una medida de la concentración de una pluralidad de tipos de moléculas o partículas de analito, incluyendo dicha pluralidad al menos un primer tipo de moléculas o partículas de analito y un segundo tipo de moléculas o partículas de analito en una muestra de fluido, que comprende: inmovilizar una pluralidad del primer tipo de moléculas o partículas de analito y una pluralidad de un segundo tipo de moléculas o partículas de analito con respecto a una pluralidad del primer tipo de objetos de captura y una pluralidad de un segundo tipo de objetos de captura, respectivamente, en el que una fracción estadísticamente significativa del primer tipo de objetos de captura se asocia con al menos un primer tipo de molécula o partícula de analito y una fracción estadísticamente significativa no se asocia con ninguna molécula o partícula de analito, y en el que una fracción estadísticamente significativa del segundo tipo de objetos de captura se asocia con al menos un segundo tipo de molécula o partícula de analito y una fracción estadísticamente significativa no se asocia con ninguna molécula o partícula de analito; y en el que el primer tipo de objetos de captura incluye, cada uno, una superficie de unión que tiene afinidad por el primer tipo de moléculas o partículas de analito y el segundo tipo de objetos de captura incluye, cada uno, una superficie de unión que tiene afinidad por el segundo tipo de moléculas o partículas de analito, y en el que el primer tipo de objetos de captura puede distinguirse del segundo tipo de objetos de captura; segregar espacialmente al menos una parte de la pluralidad del primer tipo de objetos de captura y la pluralidad del segundo tipo de objetos de captura en una pluralidad de recipientes de reacción; opcionalmente sellar los recipientes de reacción tras la adición de los objetos de captura y un agente de marcaje precursor opcional; abordar al menos algunos de la pluralidad de recipientes de reacción y determinar el número de recipientes de reacción que contienen un primer tipo de objeto de captura y el número de recipientes de reacción que contienen un segundo tipo de objeto de captura; determinar además el número de dichos recipientes de reacción que contienen un primer tipo de objeto de captura y un primer tipo de molécula o partícula de analito y el número de dichos recipientes de reacción que contienen un segundo tipo de objeto de captura y un segundo tipo de molécula o partícula de analito; en el que, en el caso de detección directa, examinando y/o detectando una molécula o un resto que está comprendido en la molécula o partícula de analito, o, en el caso de detección indirecta, examinando y/o detectando una molécula o un resto que está comprendido en un agente de marcaje que se ha convertido a partir de un agente de marcaje precursor mediante exposición a la molécula o partícula de analito; determinar una medida de la concentración del primer tipo de moléculas o partículas de analito en la muestra de fluido basándose al menos en parte en la razón del número de recipientes de reacción que contienen un primer tipo de objeto de captura y un primer tipo de molécula o partícula de analito, con respecto al número de recipientes de reacción que contienen un primer tipo de objeto de captura o con respecto al número de recipientes de reacción que contienen un primer tipo de objeto de captura pero no contienen ningún primer tipo de moléculas o partículas de analito; y determinar una medida de la concentración del segundo tipo de moléculas o partículas de analito en la muestra de fluido basándose al menos en parte en la razón del número de recipientes de reacción que contienen un segundo tipo de objeto de captura y un segundo tipo de molécula o partícula de analito, con respecto al número de recipientes de reacción que contienen un segundo tipo de objeto de captura o con respecto al número de recipientes de reacción que contienen un segundo tipo de objeto de captura pero no contienen ningún segundo tipo de moléculas o partículas de analito.