Patent ES-2552627-T3 (ES)
Title: Métodos y reactivos para la detección mejorada de péptidos beta amiloides
Inventor: SARASA BARRIO JOSÉ MANUEL
IPC: G01N33/68
Filed: 2010-12-13
Granted: 2015-12-01
Abstract: Método para el diagnóstico en un sujeto de una enfermedad neurodegenerativa, para la detección de una etapa anterior de una enfermedad neurodegenerativa o para la distinción una enfermedad neurodegenerativa de una etapa anterior a dicha enfermedad neurodegenerativa, que comprende las etapas de (i) determinar uno o más parámetros seleccionados del grupo de (a) el nivel de uno o más péptidos beta amiloides libres en una muestra biológica de dicho sujeto, (b) los niveles agregados de uno o más péptidos amiloides libres en una muestra biológica de dicho sujeto y de dichos uno o más péptidos beta amiloides asociados a los componentes macromoleculares presentes en dicha muestra biológica, en el que dichos niveles agregados se determinan mediante la cuantificación de la cantidad de dichos uno o más péptidos beta amiloides en la fracción libre de células de dicha muestra después de poner en contacto dicha muestra con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación del péptido o péptidos beta amiloides de los componentes presentes en la muestra biológica, (c) el nivel de uno o más péptidos beta amiloides asociados a las células en una muestra biológica de dicho sujeto, en el que dicho nivel se determina mediante el aislamiento de la fracción de células de dicha muestra biológica, el contacto de dicha fracción celular de dicha muestra con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación del péptido o péptidos beta amiloides de las células presentes en la muestra y (ii) comparar el valor de, como mínimo, uno de los parámetros (b) o (c) o el valor de un parámetro calculado resultante de combinar aritméticamente, como mínimo, dos de los parámetros (a) a (c) con un valor de referencia correspondiente al valor de dichos parámetros (b) o (c), o dicho parámetro calculado en una muestra de referencia y (iii) diagnosticar la enfermedad neurodegenerativa, detectar una etapa anterior a una enfermedad neurodegenerativa o distinguir una enfermedad neurodegenerativa de una etapa anterior a dicha enfermedad neurodegenerativa cuando hay una alteración en el valor del parámetro o en el valor del parámetro calculado con respecto al valor de referencia, en el que la muestra biológica es plasma o sangre y en el que los parámetros determinados en la etapa (i) son uno o más de los parámetros seleccionados del grupo (a) 1ab40, correspondiente al nivel de péptido ABETA40 libre en una muestra biológica de dicho sujeto, (b) 1ab42, correspondiente al nivel de péptido ABETA42 libre en una muestra biológica de dicho sujeto, (c) 2ab40, correspondientes a los niveles agregados de péptido ABETA40 libre en una muestra biológica de dicho sujeto y de péptido ABETA40 asociado a los componentes de dicha muestra biológica, en el que 2ab40 se determina mediante la cuantificación de la cantidad de péptido ABETA40 en dicha muestra después de poner en contacto dicha muestra con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación del péptido ABETA40 de los componentes presentes en la muestra biológica, (d) 2ab42, correspondiente al nivel agregado de péptido ABETA42 libre en una muestra biológica de dicho sujeto y de péptido ABETA42 asociado a los componentes de dicha muestra biológica, en el que 2ab42 se determina mediante la cuantificación de la cantidad de péptido ABETA42 en dicha muestra después de poner en contacto dicha muestra con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación del péptido ABETA42 de los componentes presentes en la muestra biológica, (e) 3ab40, correspondiente al nivel del péptido ABETA40 asociado a las células en una muestra biológica de dicho sujeto, en el que 3ab40 se determina mediante la cuantificación de la cantidad de péptido ABETA40 después de poner en contacto la fracción celular de dicha muestra biológica con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación de los péptidos beta amiloides de las células presentes en la muestra y (f) 3ab42, correspondiente al nivel del péptido ABETA42 asociado a las células en una muestra biológica de dicho sujeto, en el que 3ab42 se determina mediante la cuantificación de la cantidad de péptido ABETA42 después de poner en contacto la fracción celular de dicha muestra biológica con un agente solubilizante de proteínas en condiciones adecuadas para promover la disociación de los péptidos beta amiloides de las células presentes en la muestra.