Patent AR-100106-A2 (AR)
Title: Plantas de algodón tolerantes a herbicidas y métodos para producir e identificar las mismas
Inventor: GWYN JEFFERSON
IPC: C12N15/29
Filed: 2014-08-29
Abstract: Plantas de algodón, material vegetal y semillas transgénicas, caracterizadas por contener un evento de transformación específico, en particular por la presencia de un gen que codifica una proteína que confiere tolerancia a herbicidas, en una ubicación específica del genoma de algodón. Las plantas de algodón de la presente combinan el fenotipo tolerante a herbicidas con un rendimiento agronómico óptimo. Reivindicación1: Un método para identificar la presencia del evento de elite EE-GH1 en muestras biológicas, dicho evento de elite comprendiendo la secuencia codificante del gen de resistencia bialafos (bar) de Streptomyces hygroscopicus bajo el control del promotor 35S del virus en mosaico de la coliflor integrado en el ADN cromosómico en una región que comprende la secuencia de ADN de SEQ. ID. Nº 5, donde la región flanqueadora 5 y el transgen contiguo a la misma comprenden la secuencia de SEQ. ID. Nº 1, y donde la secuencia flanqueadora 3 y el transgen contiguo a la misma comprenden la secuencia de SEQ. ID. Nº 4, semilla de referencia que comprende dicho evento de elite depositado en ATCC con el número de acceso PTA-3343, caracterizado porque a) amplificar una secuencia de un ácido nucleico presente en dichas muestras biológicas utilizando una reacción en cadena de la polimerasa con al menos dos cebadores, uno de los cuales comprende una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 1 a 677 de SEQ. ID. Nº 1, el otro comprende una secuencia que es complementaria a una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 678 a 850 de la SEQ. ID. Nº 1; b) amplificar una secuencia de un ácido nucleico presente en dichas muestras biológicas utilizando una reacción en cadena de la polimerasa con al menos dos cebadores, uno de los cuales comprende una secuencia que es complementaria a una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 180 a 426 de la SEQ. ID. Nº 4, y la otra que comprende una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 1 a 179 de SEQ. ID. Nº 4; c) poner en contacto el ácido nucleico de dichas muestras biológicas con una sonda, dicha sonda comprendiendo una secuencia de aproximadamente 15 a aproximadamente 100 nucleótidos contiguos de la SEQ. ID. Nº 1 o el complemento de la misma, que comprende al menos los nucleótidos 669 a 686 de la SEQ. ID. Nº 1 o el complemento de la misma; o d) poner en contacto el ácido nucleico de dichas muestras biológicas con una sonda, dicha sonda comprendiendo una secuencia de; aproximadamente 15 a aproximadamente 100 nucleótidos contiguos de la SEQ. ID. Nº 4 o el complemento de la misma, que comprende al menos los nucleótidos 177 a 188 de la SEQ. ID. Nº 4 o el complemento de la misma. Reivindicación 4: Un kit para identificar el suceso de élite EE-GH1 de la reivindicación 1, dicho evento de élite comprendiendo un ADN extraño que comprende la secuencia codificante del gen de resistencia bialafos (bar) de Streptomyces hygroscopicus, dicho gen bar comprendiendo los nucleótidos 1635 a 2186 de la SEQ. ID. Nº 6, integrado en el ADN cromosómico en una región que comprende la secuencia de ADN de SEQ. ID. Nº 5, donde la región flanqueadora 5 y el transgen contiguo a la misma comprenden la secuencia de SEQ. ID. Nº 1, y donde la secuencia flanqueadora 3 y el transgen contiguo a la misma comprenden la secuencia de SEQ. ID. Nº 4, semilla de referencia que comprende dicho evento de elite depositado en ATCC con el número de acceso PTA-3343, en muestras biológicas, caracterizado porque comprende a) al menos dos cebadores, donde un cebador comprende una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 1 a 677 de SEQ. ID. Nº 1, y el otro cebador comprende una secuencia que es complementaria a una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 678 a 850 de la SEQ. ID. Nº 1; b) al menos dos cebadores, donde un cebador comprende una secuencia que es complementaria a una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 180 a 426 de la SEQ. ID. Nº 4, y el otro cebador comprende una secuencia con entre 80% y 100% de identidad de secuencia con una secuencia de entre 15 y 35 nucleótidos consecutivos entre las posiciones 1 a 179 de SEQ. ID. Nº 4; c) al menos una sonda, donde dicha sonda comprende una secuencia de aproximadamente 15 a aproximadamente 100 nucleótidos contiguos de la SEQ. ID. Nº 1 o el complemento de la misma, comprendiendo al menos los nucleótidos 669 a 686 de la SEQ. ID. Nº 1 o su complemento; o d) al menos una sonda, donde dicha sonda comprende una secuencia de aproximadamente 15 a aproximadamente 100 nucleótidos contiguos de la SEQ. ID. Nº 4 o el complemento de la misma, comprendiendo al menos los nucleótidos 177 a 188 de la SEQ. ID. Nº 4 o el complemento de la misma.