Patent RU-2653191-C1 (RU)
Title: Способ хроматографического разделения гидрокортизона ацетата, кортизона ацетата, метилпарагидроксибензоата, пропилпарагидроксибензоата методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии
Inventor: ALEKSENKO PAVEL VLADIMIROVICH
IPC: G01N30/10
Filed: 2017-02-15
Granted: 2018-05-07
Abstract: Изобретение относится к области хроматографии и может быть использовано в фармацевтической промышленности для контроля качества лекарственных препаратов (мазь, крем). В заявленном способе хроматографического разделения гидрокортизона ацетата, кортизона ацетата, метилпарагидроксибензоата, пропилпарагидроксибензоата методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии готовят подвижную фазу, в которую дополнительно вводят второй органический модификатор метанол для жидкостной хроматографии в количестве, сопоставимом с количеством ацетонитрила для хроматографии в соотношениях соответственно метанол для жидкостной хроматографии, ацетонитрил для хроматографии, вода - 200:240:560 об/об/об. Готовят растворитель, состоящий из ацетонитрила для хроматографии, тетрагидрофурана и воды в объемном соотношении 20:20:60, а также готовят испытуемый раствор, включающий около 500 мг мази или крема и 10,0 мл растворителя. Готовят раствор «плацебо», включающий 495 мг смеси вспомогательных веществ, входящих в состав мази или крема в соответствующих пропорциях и 10,0 мл растворителя, и готовят раствор сравнения гидрокортизона ацетата, включающий около 10,0 мг  стандартного образца гидрокортизона ацетата и 100 мл растворителя. Затем разводят растворителем 1,0 мл в колбу на 10 мл и готовят раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. Готовят исходный раствор кортизона ацетата, включающий 10,0 мг стандартного образца кортизона ацетата  и 100 мл растворителя. Готовят исходный раствор метилпарагидроксибензоата, включающий 8,0 мг стандартного образца метилпарагидроксибензоата или стандартного образца метилпарабена и 20 мл растворителя, готовят исходный раствор пропилпарагидроксибензоата, включающий 10,0 мг стандартного образца пропилпарагидроксибензоата или стандартного образца пропилпарабена и 100 мл растворителя. После этого готовят раствор для проверки пригодности хроматографической системы, включающий 5,0 мг стандартного образца гидрокортизона ацетата, 1,0 мл исходного раствора кортизона ацетата, 1,0 мл исходного раствора метилпарагидроксибензоатата и 1,0 мл исходного раствора пропилпарагидроксибензоатата. Затем, по 10 мкл раствора для проверки чувствительности хроматографической системы, раствора для проверки пригодности хроматографической системы, раствора сравнения гидрокортизона ацетата, получая не менее трех хроматограмм, растворителя, раствора «плацебо» и испытуемого раствора хроматографируют на жидкостном хроматографе с УФ-спектрофотометрическим детектором, применяют хроматографические условия, при которых колонка 250×4,6 мм, размер частиц 5 мкм, заполненная сорбентом силикагель октадецилсилильный, например Zorbax Eclipse XDB С18, скорость потока 1,2 мл/мин, температура колонки 30°C, детектор УФ, 254 нм, после чего вычисляют содержание любой единичной примеси в препарате и сумму примесей. Технический результат - разработка хроматографического способа разделения четырех составляющих: гидрокортизон ацетат, кортизон ацетат, метилпарагидроксибензоат и пропилпарагидроксибензоат. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.