Patent ES-2753624-T3 (ES)
Title: Determinación de una cantidad de un analito en una muestra de sangre
Inventor: BOEHM CHRISTOPH
IPC: G01N35/00
Filed: 2016-11-25
Granted: 2020-04-13
Abstract: Un procedimiento de determinación de una cantidad de un analito (602, 602') en una muestra de sangre (600) usando un cartucho (100), en el que el cartucho puede funcionar para girar alrededor de un eje de rotación (102), en el que el cartucho comprende: - una entrada (108) para recibir la muestra de sangre; - una cámara de separación de sangre (118) para separar el plasma sanguíneo de la muestra de sangre, en la que la cámara de separación de sangre está conectada hidráulicamente a la entrada; - una cámara de procesamiento (124) que contiene al menos un reactivo que comprende al menos un ligando específico (608, 610) que puede funcionar para unirse al analito para formar al menos un complejo analito-ligando específico (611); - una primera estructura valvular (122) que conecta la cámara de separación de sangre a la cámara de procesamiento; - una estructura de medición (130) para permitir la medición de la cantidad del analito, en la que la estructura de medición comprende una membrana cromatográfica (134), en la que la membrana cromatográfica comprende un ligando inmovilizado (620) para la unión directa o indirecta del analito o del al menos un complejo analito-ligando específico, en la que la estructura de medición comprende además una estructura absorbente (132), en la que la estructura absorbente está más cerca del eje de rotación que la membrana; - una segunda estructura valvular (128) que conecta la cámara de procesamiento a la estructura de medición; - una cámara de líquido (136, 136') llena de un amortiguador de lavado (1202), en la que la cámara de líquido está conectada hidráulicamente a la estructura de medición, en la que un cierre mantiene el amortiguador de lavado dentro de la cámara de líquido; - una cámara de alícuotas (144); - un conducto hidráulico (138) que conecta la cámara de líquido con la cámara de alícuotas; - una cámara de dosificación (146); - un conducto de conexión (148) que conecta hidráulicamente la cámara de dosificación con la cámara de alícuotas, en el que la estructura de medición está conectada a la cámara de dosificación por medio de una tercera estructura valvular; y - un respiradero (114, 1028) conectado a la cámara de dosificación, en el que el respiradero está más cerca del eje de rotación que la cámara de dosificación; en el que el procedimiento comprende las etapas de: - colocar (902) la muestra de sangre en la entrada; - hacer girar (800, 904) el cartucho alrededor del eje de rotación para transportar la muestra de sangre a la cámara de separación de sangre; - controlar (802, 906) el giro del cartucho alrededor del eje de rotación para separar el plasma sanguíneo de los componentes globulares de la muestra de sangre por centrifugación; - abrir (804, 908) la primera estructura valvular y hacer girar el cartucho alrededor del eje de rotación para transportar una parte definida del plasma sanguíneo desde la cámara de separación de sangre hasta la cámara de procesamiento; - retener (806, 910) la parte del plasma sanguíneo en la cámara de procesamiento, en la que el plasma sanguíneo se mezcla con el reactivo y se combina con el al menos un ligando específico para formar el al menos un complejo analito-ligando específico; - liberar (808, 912) el cierre para permitir que una primera parte (1602) del amortiguador de lavado entre en la estructura de medición, en la que la etapa de liberar el cierre permite que el amortiguador de lavado entre en la cámara de alícuotas; - controlar la velocidad de giro del cartucho para permitir que el amortiguador de lavado de la cámara de alícuotas se transfiera al conducto de conexión y llene la cámara de dosificación por primera vez; - abrir (810, 914) la segunda estructura valvular para transferir el al menos un complejo analito-ligando específico a la estructura de medición y controlar la velocidad de giro del cartucho para permitir que el al menos un complejo analito-ligando específico fluya a la estructura de medición a través de la segunda estructura valvular; - controlar (812, 916) la velocidad de giro del cartucho para permitir que el al menos un complejo analito-ligando específico fluya a lo largo de la membrana hacia la estructura absorbente a una velocidad definida y permitir 10 que el al menos un complejo analito-ligando específico se una al ligando inmovilizado; - controlar la velocidad de giro del cartucho para transferir la primera parte del amortiguador de lavado desde la cámara de dosificación a través de la tercera válvula a la estructura de medición y transferir una primera parte restante de vuelta a la cámara de alícuotas; - controlar (814, 918, 920) la velocidad de giro del cartucho para permitir que la primera parte del amortiguador de lavado fluya a lo largo de la membrana hacia la estructura absorbente a una velocidad definida; - controlar la velocidad de giro del cartucho para permitir que el amortiguador de lavado de la cámara de alícuotas se transfiera al conducto de conexión y llene la cámara de dosificación por segunda vez; - controlar la velocidad de giro del cartucho para transferir una segunda parte del amortiguador de lavado desde la cámara de dosificación a través de la tercera válvula a la estructura de medición y transferir una segunda parte restante de vuelta a la cámara de alícuotas; - controlar la velocidad de giro del cartucho para permitir que la segunda parte del amortiguador de lavado fluya a lo largo de la membrana hacia la estructura absorbente; y - medir (816, 924) la cantidad del analito usando la membrana y usando un sistema de medición óptica (712).