Patent AR-101744-A1 (AR)
Title: Conjugados que comprenden agentes de unión celular y agentes citotóxicos
Inventor: RAVI V J CHARI
IPC: C07K16/28
Filed: 2015-09-02
Abstract: Reivindicación 1: Un conjugado de agente de unión celular-agente citotóxico representado por la fórmula estructural (1); o una sal farmacéuticamente aceptable de estos, caracterizado porque: CBA es un agente de unión celular unido por enlace covalente al grupo JCB; JCB es un resto formado por la reacción de un grupo aldehído en el CBA y un grupo reactivo aldehído conectado al grupo L, en donde el grupo aldehído se deriva de la oxidación de un resto 2-hidroxietilamina representado por la fórmula estructural (2), en donde el resto 2-hidroxietilamina forma parte de un residuo de serina, treonina, hidroxilisina, 4-hidroxiornitina o ácido 2,4-diamino-5-hidroxi valérico; L es un espaciador o un enlace; JD es un resto de unión que conecta el agente citotóxico D con el grupo L o que está ausente cuando L es un enlace; D es un agente citotóxico unido por enlace covalente a L a través del resto de unión JD o a CBA a través de JCD cuando L es un enlace; y w es 1, 2, 3 ó 4. Reivindicación 81: Una composición caracterizado porque comprende un conjugado de anticuerpo-agente citotóxico de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 79 caracterizado por que w es 2 ó 4 en al menos aproximadamente el 70%, el 80%, el 90%, el 95% o más de los conjugados. Reivindicación 90: Un anticuerpo recombinante caracterizado porque comprende una secuencia procesada madura de la cadena pesada, cadena ligera o parte de unión al antígeno de estas derivada de la cadena pesada (HC), la cadena ligera (LC) de anticuerpo recombinante o la parte de unión al antígeno de estas de cualquiera de las reivindicaciones 86 - 89. Reivindicación 103: Un método para preparar un conjugado de agente de unión celular-agente citotóxico, caracterizado porque comprende las etapas de: (a) oxidar un resto de 2-hidroxietilamina de un agente de unión celular con un agente oxidante para formar un agente de unión celular oxidado que tiene un grupo aldehído; en donde el resto de 2-hidroxietilamina forma parte de un residuo de serina, treonina, hidroxilisina, 4-hidroxiornitina o ácido 2,4-diamino-5-hidroxi valérico y está representado por la fórmula estructural (2); (b) poner en contacto el agente de unión celular oxidado con: (i) un compuesto de agente citotóxico-enlazador que tiene un grupo reactivo aldehído o un agente citotóxico que tiene un grupo reactivo aldehído para formar el conjugado de agente de unión celular-agente citotóxico; o (ii) un compuesto enlazador que tiene un grupo reactivo aldehído para formar un anticuerpo modificado o una parte de unión al antígeno modificada de este que tiene un enlazador unido, seguido de la reacción del anticuerpo modificado o la parte de unión al antígeno modificada de este con un agente citotóxico para formar el conjugado de agente de unión celular-agente citotóxico; o (iii) un agente citotóxico seguido del añadido de un compuesto enlazador que tiene un grupo reactivo aldehído y un grupo reactivo que puede formar un enlace covalente con el agente citotóxico para formar el conjugado de agente de unión celular-agente citotóxico. Reivindicación 130: Un compuesto citotóxico representado por la fórmula estructural (3) a (8), o una sal farmacéuticamente aceptable de estos, en donde: uno de LD, LD y LD se representa con la fórmula: -NR⁵-P-C(=O)-(CRᵃRᵇ)ʳ-Zᵈ₁-(CRᵃRᵇ)ʳ-JCB (A) y los otros dos son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de -H, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, una unidad de polietilenglicol -(OCH₂CH₂)ₙ-Rᶜ, halógeno, guanidinio [-NH(C=NH)NH₂], -OR, -NRR, -NO₂, -NRCOR, -SR, -SOR, -SO₂R, -SO₃H, -OSO₃H, -SO₂NRR, ciano, un azido, -COR, -OCOR y -OCONRR; Zᵈ₁ está ausente, -C(=O)-NR⁹- o -NR⁹-C(=O)-; P es un residuo de aminoácido o un péptido que contiene entre 2 y 20 residuos de aminoácidos; Rᵃ y Rᵇ, para cada aparición, son independientemente -H, C₁₋₃ alquilo o un sustituyente cargado o un grupo ionizable Q; r y r son independientemente un entero de 1 a 6; la línea doble ⁻ ⁻ ⁻ ⁻ ⁻ entre N y C representa un enlace simple o un enlace doble, con la condición de que cuando es un enlace doble, X está ausente e Y es -H o un alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, y cuando es un enlace simple, X es -H o un resto protector amina; Y es un grupo saliente seleccionado de -OR, -OCOR, -OCOOR, -OCONRR, -NRR, -NRCOR, -NRNRR, un heterociclo que contiene nitrógeno de 5 ó 6 miembros opcionalmente sustituido (p. ej., piperidina, tetrahidropirrol, pirazol, morfolina, etc., unido a través del átomo de nitrógeno), un guanidinio representado por -NR(C=NH)NRR, un aminoácido o un péptido representado por -NRCOP, -SR, -SOR, halógeno, ciano, azido, -OSO₃H, sulfito (-SO₃H o -SO₂H), metabisulfito (H₂S₂O₅), mono, di, tri y tetratiofosfato (PO₃SH₃, PO₂S₂H₂, POS₃H₂, PS₄H₂), éster de tiofosfato (RⁱO)₂PS(ORⁱ), RⁱS-, RⁱSO, RⁱSO₂, RⁱSO₃, tiosulfato (HS₂O₃), ditionita (HS₂O₄), fosforoditioato (P(=S)(ORᵏ)(S)(OH)), ácido hidroxámico (RᵏC(=O)NOH) y sulfoxilato de formaldehído (HOCH₂SO₂⁻) o una mezcla de estos, en donde Rⁱ es un alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 10 átomos de carbono y está sustituido con al menos un sustituyente seleccionado de -N(Rʲ)₂, -CO₂H, -SO₃H y -PO₃H; Rⁱ además puede estar opcionalmente sustituido con un sustituyente para un alquilo descrito en la presente; Rʲ es un alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; Rᵏ es un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, arilo, heterociclilo o heteroarilo; P es un residuo de aminoácido o un polipéptido que contiene entre 2 y 20 residuos de aminoácidos; R, para cada aparición, se selecciona independientemente del grupo que consiste en -H, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, una unidad de polietilenglicol -(CH₂CH₂O)ₙ-Rᶜ, un arilo opcionalmente sustituido que tiene de 6 a 18 átomos de carbono, un anillo heteroarilo de 5 a 18 miembros opcionalmente sustituido que contiene uno o más heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre o un anillo heterocíclico de 3 a 18 miembros opcionalmente sustituido que contiene de 1 a 6 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, N y P; R y R se seleccionan cada uno independientemente de -H, - OH, -OR, -NHR, -NR₂, -COR, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado-cn cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, una unidad de polietilenglicol -(CH₂CH₂O)ₙ-Rᶜ y un anillo heterocíclico de 3 a 18 miembros opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 6 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, N y P; Rᶜ es -H o un alquilo lineal o ramificado opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 4 átomos de carbono; n es un entero de 1 a 24; X se selecciona de -H, un grupo protector amina, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, una unidad. de polietilenglicol -(CH₂CH₂O)ₙ-Rᶜ, un arilo opcionalmente sustituido que tiene de 6 a 18 átomos de carbono, un anillo heteroarilo de 5 a 18 miembros opcionalmente sustituido que contiene uno o más heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre y un anillo heterocíclico de 3 a 18 miembros opcionalmente sustituido que contiene de 1 a 6 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, N y P; Y se selecciona de -H, un grupo oxo, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, un arilo de 6 a 18 miembros opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo de 5 a 18 miembros opcionalmente sustituido que contiene uno o más heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre, un anillo heterocíclico de 3 a 18 miembros opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 6 heteroátomos; R¹, R², R³, R⁴, R¹, R², R³ y R⁴ se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en -H, un alquilo, alquenilo o alquinilo lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido, que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, una unidad de polietilenglicol -(OCH₂CH₂)ₙ-Rᶜ, halógeno, guanidinio [-NH(C=NH)NH₂], -OR, -NRR, -NO₂, -NCO, -NRCOR, -SR, -SOR, -SO₂R, -SO₃⁻H, -OSO₃H, -SO₂NRR, ciano, un azido, -COR, -OCOR y -OCONRR; R⁶ es -H, -R, -OR, -SR, -NRR,-NO₂ o halógeno; A y A son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de -O-, oxo (-C(=O)-), -CRRO-, -CRR-, -S-, -CRRS-, -NR⁵ y -CRRN(R⁵)-; R⁵ y R⁹ son cada uno independientemente -H o un alquilo lineal o ramificado opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 10 átomos de carbono; JCB es un grupo reactivo aldehído. Reivindicación 169: El conjugado de la reivindicación 167 ó 168 caracterizado porque el anticuerpo del receptor anti-folato que se une específicamente a FOLR1 es el anticuerpo huMOV19.