Patent ES-2566737-T3 (ES)
Title: Métodos de modificación de anticuerpos y anticuerpos modificados con propiedades funcionales mejoradas
Inventor: URECH DAVID
IPC: C12N15/13
Filed: 2008-06-25
Granted: 2016-04-15
Abstract: Método de modificación mediante ingeniería genética de un agente de unión inmunológica, comprendiendo el agente de unión inmunológica (i) una región variable de cadena pesada, o fragmento de la misma, comprendiendo la región variable de cadena pesada residuos de región de marco de VH y/o (ii) una región variable de cadena ligera, o fragmento de la misma, comprendiendo la región variable de cadena ligera residuos de región de marco de VL, comprendiendo el método: A) seleccionar una o más posiciones de aminoácido dentro de los residuos de región de marco de VH, los residuos de región de marco de VL o los residuos de región de marco de VH y VL para la mutación; y B) mutar la una o más posiciones de aminoácido seleccionadas para la mutación, a) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH3 humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en: (i) glutamina (Q) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (ii) glutamina (Q) en la posición de aminoácido 6 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (iii) treonina (T) o alanina (A) en la posición de aminoácido 7 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (iv) alanina (A), valina (V) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 89 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 78 usando el sistema de numeración de Kabat); y (v) arginina (R), glutamina (Q), isoleucina (I), leucina (L), metionina (M) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 103 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 89 usando la numeración de Kabat); b) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH1a humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en: (i) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (ii) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 6 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (iii) leucina (L) en la posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de AHo (posición de 30 aminoácido 11 usando el sistema de numeración de Kabat); (iv) metionina (M) en la posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de Kabat); (v) ácido glutámico (E) o glutamina (Q) en la posición de aminoácido 14 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de Kabat); (vi) leucina (L) en la posición de aminoácido 19 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 18 usando el sistema de numeración de Kabat); (vii) isoleucina (I) en la posición de aminoácido 21 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 20 usando el sistema de numeración de Kabat); (viii) fenilalanina (F), serina (S), histidina (H) o ácido aspártico (D) en la posición de aminoácido 90 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 79 usando el sistema de numeración de Kabat); (ix) ácido aspártico (D) o glutamina (Q) en la posición de aminoácido 92 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 81 usando el sistema de numeración de Kabat); (x) glicina (G), asparagina (N) o treonina (T) en la posición de aminoácido 95 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 82b usando el sistema de numeración de Kabat); y (xi) treonina (T), alanina (A), prolina (P) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 98 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 84 usando la numeración de Kabat); c) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH1b humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en: (i) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat; (ii) treonina (T), prolina (P), valina (V) o ácido aspártico (D) en la posición de aminoácido usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 9 usando el sistema de numeración de Kabat); (iii) leucina (L) en la posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 11 usando el sistema de numeración de Kabat); (iv) valina (V), arginina (R), glutamina (Q) o metionina (M) en la posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de Kabat); (v) ácido glutámico (E), arginina (R) o metionina (M) en la posición de aminoácido 14 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de 15 Kabat); (vi) arginina (R), treonina (T) o asparagina (N) en la posición de aminoácido usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 19 usando el sistema de numeración de Kabat); (vii) isoleucina (I), fenilalanina (F) o leucina (L) en la posición de aminoácido 21 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 20 usando el sistema de numeración de Kabat); (viii) lisina (K) en la posición de aminoácido 45 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 38 usando el sistema de numeración de Kabat); (ix) treonina (T), prolina (P), valina (V) o arginina (R) en la posición de aminoácido 47 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 40 usando el sistema de numeración de Kabat); (x) lisina (K), histidina (H) o ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 50 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 43 usando el sistema de numeración de Kabat); (xi) isoleucina (I) en la posición de aminoácido 55 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 48 usando la numeración de Kabat); (xii) lisina (K) en la posición de aminoácido 77 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 66 usando la numeración de Kabat); (xiii) alanina (A), leucina (L) o isoleucina (I) en la posición de aminoácido 78 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 67 usando el sistema de numeración de Kabat); (xiv) ácido glutámico (E), treonina (T) o alanina (A) en la posición de aminoácido 82 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 71 usando el sistema de numeración de Kabat); (xv) treonina (T), serina (S) o leucina (L) en la posición de aminoácido 86 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 75 usando el sistema de numeración de Kabat); (xvi) ácido aspártico (D), asparagina (N) o glicina (G) en la posición de aminoácido 87 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 76 usando el sistema de numeración de Kabat); y (xvii) asparagina (N) o serina (S) en la posición de aminoácido 107 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 93 usando el sistema de numeración de Kabat);