Patent ES-2910699-T3 (ES)
Title: Inmunoglobulinas conjugadas con lisina C-terminal
Inventor: SPIDEL JARED
IPC: C07K16/00
Filed: 2016-12-16
Granted: 2022-05-13
Abstract: Un método para generar una inmunoglobulina conjugada, comprendiendo el método: (1) incubar una inmunoglobulina con una transglutaminasa microbiana y un agente funcional que comprende un sustrato donante de acilo, a) en donde la inmunoglobulina comprende al menos un residuo de aminoácido pero menos de 13 residuos de aminoácidos después de una lisina 447 (K447) en una cadena pesada de la inmunoglobulina, en donde los residuos de aminoácidos están numerados de acuerdo con el sistema de numeración de la UE, i) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende un residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el residuo de un aminoácido después de la lisina C-terminal es glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, metionina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, asparagina, glutamina o histidina, ii) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende dos residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal es cualquier residuo de aminoácido excepto ácido aspártico, ácido glutámico o prolina; y el segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, iii) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende tres residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, iv) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende cuatro residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, v) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende cinco residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un quinto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el quinto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, o vi) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende menos de 13 residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, el último residuo de aminoácido después de la lisina C- terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, b) en donde el sustrato donante de acilo comprende un residuo de glutamina, y c) en donde el agente funcional es un agente terapéutico o un agente de diagnóstico, en donde la transglutaminasa microbiana conjuga K447 con el residuo de glutamina del sustrato donante de acilo en el agente funcional, o (2) (i) incubar una inmunoglobulina con una transglutaminasa microbiana y un sustrato donante de acilo, a) en donde la inmunoglobulina comprende al menos un aminoácido pero menos de 13 residuos de aminoácidos después de la lisina 447 (K447) en una cadena pesada de la inmunoglobulina, I) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende un residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el residuo de un aminoácido después de la lisina C-terminal es glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, metionina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, asparagina, glutamina o histidina, II) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende dos residuos de aminoácido después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el primer residuo de aminoácido después de la lisina C- terminal es cualquier residuo de aminoácido excepto ácido aspártico, ácido glutámico o prolina; y el segundo residuo de aminoácido después de la lisina C- terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, III) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende tres residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, IV) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende cuatro residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, V) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende cinco residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, que comprende un primer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un segundo residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un tercer residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, un cuarto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal y un quinto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal, el quinto residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina o VI) en donde, cuando la inmunoglobulina comprende menos de 13 residuos de aminoácidos después de la lisina C-terminal, el último residuo de aminoácido después de la lisina C-terminal se selecciona del grupo que consiste en fenilalanina, leucina, isoleucina, metionina, valina, serina, prolina, treonina, alanina, tirosina, histidina, glutamina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, cisteína, triptófano y glicina, y b) en donde el sustrato donante de acilo comprende un residuo de glutamina y un grupo reactivo, en donde la transglutaminasa microbiana conjuga K447 con el residuo de glutamina del sustrato donante de acilo, y ii) conjugar un agente funcional con el grupo reactivo del sustrato donante de acilo, en donde el agente funcional es un agente terapéutico o un agente de diagnóstico; opcionalmente, en donde el grupo reactivo del sustrato donante de acilo se conjuga con el agente funcional mediante química de clic, generando con ello la inmunoglobulina conjugada.