context: Detectable 2019-nCoV viral ARN en sangre es un fuerte indicador de la gravedad clínica adicionalhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7054964/SHA: 77b0c98d1a2ca46b219ad090074814c387c80d8fAutores: Chen, Weilie; Lan, Yun; Yuan, Xiaozhen; Deng, Xilong; Li, Yueping; Cai, Xiaoli; Li, Liya; He, Ruiying; Tan, Yizhou; Deng, Xizi; Gao, Ming; Tang, Guofang; Zhao, Lingzhai; Wang, Jinlin; Fan, Qinghong; Wen, Chunyan; Tong, Yuwei; Tang, Yangbo; Hu Se analizó retrospectivamente la presencia del virus en el hisopo faríngeo, la sangre y el hisopo anal detectados por PCR en tiempo real en el laboratorio clínico. Inesperadamente, el ARN 2109-nCoV se detectó fácilmente en la sangre (6 de 57 pacientes) y los hisopos anal (11 de 28 pacientes). Importantemente, todos los 6 pacientes con ARN viral detectable en la cohorte sanguínea progresaron a la fase de síntomas severos, lo que indica una fuerte correlación del ARN viral sérico con la gravedad de la enfermedad (valor p = 0,0001). Mientras tanto, 8 de los 11 pacientes con virus de hisopo annal positivos se encontraban en fase clínica severa. Sin embargo, la concentración de ARN viral en el hisopo anal (valor Ct = 24 + 39) fue mayor que en la sangre (valor Ct = 34 + 39) del paciente En conjunto, nuestros resultados confirmaron la presencia de ARN del virus en sitios extrapulmonares. Texto: El nuevo coronavirus 2019 (2019-nCoV), originalmente estallado desde Wuhan China, ha transmitido en un período extremadamente corto a 25 países e infectado a más de 31 000 individuos a partir del 06 de febrero de 2020, causando una alarma internacional. La investigación científica básica ha logrado significativamente en la investigación de la originación viral [1, 2], la transmisión y la evolución [3], y las acciones de control de la salud pública sin precedentes en China se han activado y efectivamente evitado la propagación dramática de otra manera. El virus 2019-nCoV parece más infeccioso en su capacidad de transmisión pública en comparación con el conocido virus SARS 2003 a pesar de la falta de pruebas científicas convincentes. El mecanismo de transmisión viral sigue siendo digno de exploración. Varios estudios han descrito de forma aproximada las características clínicas globales de los pacientes con VC-n 2019 [4, 5]. Sin embargo, las características clínicas más específicas y clasificadas de los pacientes infectados aún requieren una investigación más profunda, particularmente para aquellos con síntomas graves, que se estima aproximadamente en aproximadamente 15-20 por ciento de los casos totalmente confirmados basados en los datos locales de nuestro hospital. Clínicamente, para esos pacientes graves, los principales síntomas de la neumonía por VC-n-n 2019 son fiebre, disminución del recuento de glóbulos blancos y linfocitos, aumento de la proteína de reacción C y citocinas anormalmente expresadas [6]. Una pregunta que queda por resolver es si el virus del VC-n 2019 puede replicarse en sitios extrapulmonares, lo que podría explicar la manifestación clínica deteriorada. En este estudio, investigamos si los pacientes con síntomas clínicos graves presentaron perfiles especiales de replicación del virus o/y distribución en comparación con aquellos Los pacientes, que fueron confirmados como infectados por el virus nCoV 2019, fueron reclutados o trasladados en primer lugar al Hospital Popular Octavo de Guangzhou para fines de tratamiento. Este estudio siguió las directrices del Comité de Ética del Hospital Popular Octavo de Guangzhou. Todas las muestras de sangre, hisopo faríngeo y hisopo anal fueron recogidas con fines diagnósticos en el laboratorio y nuestro estudio no añadió ninguna carga adicional a los pacientes. El ARN viral se extrajo con el kit de aislamiento de ácido nucleico (Da'an Gene Corporation, Cat: DA0630) en una estación de trabajo automática Smart 32 (Da'an Gene Corporation) siguiendo las directrices. En resumen, en el mismo tubo de reacción se agregaron dos conjuntos de primores y sondas PCR, que diana of1ab (reportero FAM) y N (reportor VIC) por separado; se incluyeron controles positivos y negativos para cada lote de detección; se consideró que las muestras eran virales positivas cuando uno o ambos conjuntos daban una o varias señales confiables; todos los pacientes tenían enfermedades basadas en neumonía pero con manifestación clínica diversificada; para simplificar el análisis de los datos, los pacientes sólo se clasificaron como grupos de síntomas clínicos leves o graves basados en la directriz recién publicada por el gobierno chino; los pacientes que estaban con al menos uno de los síntomas siguientes deben ser diagnosticados como casos graves, 1) dificultad respiratoria con tasa respiratoria > = 30/min; 2) saturación de oxígeno < = 93% en el estado de reposo, y 3) tensión arterial de oxígeno (PaO2) sobre fracción de oxígeno En la cohorte de detección de sangre (Figura 1 (A)) se incluyó a los pacientes que tenían menos de una muestra sérica con el método PCR; en los 57 se detectaron 6 casos positivos en sangre, todos ellos (100%) fueron graves en síntomas que requerían atención especial, y en los 51 casos restantes no se detectaron virus en sangre, sólo 12 de ellos (23,5%) fueron graves; la proporción de síntomas graves entre estos dos grupos fue significativamente diferente (valor p = 0,0001); en la cohorte de hisopo anal (Figura 1 (B)), 11 de 28 casos fueron detectados como positivos en hisopo anal, 8 de ellos (72,7%) fueron con síntomas graves, lo que fue significativamente superior a los 4 (23,5%) de los 17 casos restantes sin virus detectable en anal fueron graves; afortunadamente, se registraron dos casos con virus detectable tanto en sangre como en cohor El paciente 1 (Figura 2 (A)) fue ingresado en la UTI después de la evaluación de la inscripción y fue altamente sospechoso de infección con 2019-nCoV debido a su reciente viaje desde Wuhan y de neumonía confirmada por diagnóstico radiográfico con fiebre de 5 días y tos seca continua de 1 día. Luego fue confirmado de estar infectado por el virus 2019-nCoV en el día 6 de la enfermedad por CDC. Se detectaron altas concentraciones de ARN viral en los hisopos faríngeos en los días 5 (Ct = 17 + 25), 7, 8 (Ct = 25 + 26) y 11 (Ct = 15 + 25). En la sangre, no se detectó ARN viral en el día 5, pero la muestra en el día 6 dio una señal positiva débil (Ct = Neg+ 39), y luego la señal se volvió a retirar en el día 8. El día 9, se detectó nuevamente en la sangre un nivel bajo de ARN viral (Ct = 36 + 41). El día 12, la sangre volvió a perder la señal. Se detectó una alta concentración de ARN viral (Ct = 23 + 27) en la muestra anal el día 13, el día en que no se detectó el virus COV 2019-n en la muestra faríngea. Desafortunadamente, fue trasladado a otro hospital después de una consulta de expertos de emergencia. El paciente 2 (Figura 2 (B)), que tenía un historial claro de infección y comenzó la fiebre hace 5 días y tos seca hace 2 días, fue admitido con sospecha clínica de infección por COV 2019-n, considerando el diagnóstico radiográfico que indicaba neumonía clara en los lóbulos pulmonares bilaterales. El virus fue detectado en la sangre en los días 7 (Ct = 34 + 36) y 8 (Ct = Su infección también fue informada por el CDC en el día 8. Debido a que su enfermedad avanzó muy rápido, fue trasladado a la sala de la UTI para necesidades especiales de atención médica en el día 9, en el cual se detectaron títulos altos de virus (Ct = 25 + 36) en la muestra faríngea. Importantemente, se detectó ARN del virus en todas las muestras faríngeas (Ct = 23 + 24), sangre (Ct = 34 + 39) y anal (Ct = 24 + 29) en el día 10. Fue trasladado a otro hospital después de una consulta de expertos de emergencia. Finalmente, describimos aquí a los cuatro pacientes con ARN viral sérico detectable. El paciente 3 (Figura 3(A) ) fue trasladado a la UTI directamente el día 11 de la enfermedad debido a su condición grave, el virus 2019-nCoV fue detectado de laboratorio tanto en faringe (Ct = 30 + 30) como en muestras de sangre (Ct = 37 + 39) el día 12, y su infección fue confirmada por los CDC el día 13; las muestras de faringe fueron PCR positivas en los días 14 y 17 y negativas en el día 22. El paciente 4 (Figura 3(B) ) fue trasladado a la sala de la UTI el día 6 con una confirmación de los CDC; su enfermedad avanzó bastante rápido y se hizo grave el día 7 y fue trasladado a la UTI después de que se detectó que su muestra de sangre era viral positiva (Ct = 32 + 37). El día 9 fue trasladado. La paciente 5 (Figura 3(C) ) fue ingresada en el día 4 de la enfermedad y su muestra de sangre fue seropositiva (Ct = 38 + Neg) en el día 6 de la misma. Su enfermedad progresó rápidamente a una etapa severa en los siguientes 3 días. El paciente 6 (Figura 3 (D)) con un historial claro de infección vírica fue confirmado como infectado en el día 7 de la infección. El ARN viral fue detectado en su muestra de sangre en el día 9, un día antes de su traslado a la UCI. A medida que su condición empeoraba, fue trasladado el día 13. En este estudio retrospectivo, analizamos los datos de PCR de detección de virus en diferentes tejidos en nuestro laboratorio. En primer lugar, nuestra observación indicó que la presencia de ARN viral fuera del tracto respiratorio podría anunciar la gravedad de la enfermedad y alarmar la necesidad de atención especial. En la cohorte de análisis de sangre, todos los 6 pacientes infectados se encontraban en (o posteriormente progresaron a) estadio de enfermedad grave cuando el ARN viral sérico se hizo detectable, lo que mostró una diferencia significativa en comparación con el grupo sanguíneo negativo (p = 0,0001). Paciente 2 (Figura 2(B) ), 5 (Figura 3(C)) y 6 (Figura 3(D) ) todos tenían ARN viral detectable en el suero antes de que progresaran a la fase clínica grave. Lamentablemente, no se obtuvieron los primeros puntos de tiempo del paciente 1 (Figura 2(A)) y 3 (Figura 3(A) ) que fueron ingresados directamente en la UCI al ser trasladados a nuestro hospital debido a una condición grave, del paciente 4 (Figura 3(B) ) que recibió muestra sérica un día después del diagnóstico de enfermedad En la cohorte de hisopo anal, se encontró que la presencia de ARN viral en el tracto digestivo anal también estaba correlacionada positivamente con la gravedad de la enfermedad (p = 0,0102). Los 3 pacientes detectados con ARN viral anal pero en estadio leve deben ser monitoreados si avanzarán a la etapa severa. Hemos resumido la información de aproximadamente el 70 por ciento de los pacientes en la ciudad de Guangzhou, y el estudio representó casi toda la imagen de esta región. Sin embargo, el virus salió de esta emergencia, lo que no permite esperar a que más pacientes confirmen los hallazgos. En segundo lugar, una alta concentración de ARN viral en hisopos anal sugirió que el tracto digestivo podría ser un sitio extrapulmonar para la replicación del virus. Para el paciente 1, se detectó una alta concentración de ARN viral (Ct = 23 + 27 en el día 13) en el hisopo anal pero Para el paciente 2, se detectaron concentraciones más altas de ARN viral en hisopo anal (Ct = 24 + 39) y hisopo faríngeo (Ct = 23 + 24) que en la sangre (Ct = 34 + 39) el mismo día. La enzima angiotensina convertidora 2 (ACE2) sigue siendo uno de los receptores para la unión y entrada 2019-nCoV [2]. El análisis estructural intensivo de la proteína S de 2019-nCoV con el SARS-Coronavirus sugirió que varios residuos críticos en la proteína de pico viral podrían conferir una interacción favorable con la ACE2 humana [7]. Cabe señalar que la ACE2 también está abundantemente presente en los seres humanos en la epitelia del intestino delgado además del tracto respiratorio y está ubicuamente presente en las células endoteliales [8], lo que podría proporcionar posibles vías de transmisión Proponemos que la replicación rampante del coronavirus en el alveolo pulmonar resulta en la descomposición del vaso alveolar y la posterior fuga de virus en el flujo sanguíneo, a través del cual el virus se disemina a través de todo el cuerpo. Entonces el virus logra establecer la reinfección en el tracto digestivo mediante el uso del receptor ACE2 altamente expresado, que exacerbó la enfermedad viceversa. Se encontró que el coronavirus originado por murciélago se replica en el tracto digestivo porcino recientemente, sugiriendo también la posibilidad de replicación potencial en el tracto digestivo humano [9]. Sin embargo, la confirmación de la transmisión del virus a través del tracto digestivo justifica un mayor aislamiento del virus del hisopo anal en el laboratorio de alto nivel de seguridad. Desafortunadamente, en nuestro estudio, no recogimos muestras de heces de pacientes y no perseguimos el ARN viral en las heces. Pero creemos que la existencia de ARN viral en las muestras de heces de estos pacientes porque se detectó una gran cantidad de ARN viral en hisopos anales y que el ARN viral también se había detectado en un caso reportado desde los Estados Unidos [10]. Además, no recogimos líquido de lavado broncoalveolar y esputo para la detección de virus porque la tos seca característica de los pacientes infectados con 2019-nCoV impide producir suficiente cantidad de esputo y que la recolección de líquido de lavado broncoalveolar requiere una operación sofisticada que aumenta la posibilidad de exposición al virus de los proveedores de cuidados a altas concentraciones de aerosoles que contienen virus. En resumen, encontramos que la presencia de ARN viral en la sangre y el hisopo anal está correlacionada positivamente con la etapa de enfermedad severa y que la monitorización temprana del ARN viral en la sangre y el tracto digestivo encima del tracto respiratorio podría beneficiar la predicción de la enfermedad.
question: ¿Cuál podría ser la implicación del virus 2019-nCOV en los hisopos anales?
answers.text: tracto digestivo podría ser un sitio extrapulmonar para la replicación del virus