ગ્રામ-નેગેટિવ બેક્ટેરિયાની તેમની સેલ દિવાલોમાં ઓછી પેપ્ટીડાઓગ્લીકિન હોય છે, તેથી આ પગલું તેમને રંગહીન બનાવે છે, જ્યારે માત્ર કેટલાક ગ્રામ-પોઝીટીવ કોશિકાઓમાંથી દૂર કરવામાં આવે છે, જે વધુ પેપ્ટાડોગ્લીકન (સેલ દિવાલની 60-90%) હોય છે.