આ પરીક્ષણ કામ કરે છે કારણ કે રક્ત પ્રોટીન હેમોગ્લોબિનમાં લોહ એક ઉત્પ્રેરક તરીકે કામ કરે છે, અન્ય રાસાયણિક પદાર્થોના ઇલેક્ટ્રોનને હટાવવાના પરિણામે રાસાયણિક ફીનોલ્ફથાલિન રંગહીનથી ગુલાબીથી ઝડપથી કેવી રીતે વળે છે તે ઝડપથી વધી જાય છે.