Judul: The Activity of NADP(H) Oxidoreductase and Quinine Production of Elicitated Cells Culture of Cinchona ledgeriana Moens
Abstrak: Tanaman kina (Cinchona ledgeriana) merupakan tanaman industri penghasil senyawa sekunder alkaloid kinolin. Salah satu senyawa alkaloid kinolin yang sangat potensial adalah kinin. Kinin dapat dimanfaatkan sebagai obat malaria, antioksidan, dan pengaya flavor dalam produk minuman ringan. Kulit batang kina umumnya dipanen untuk diekstrak alkaloidnya. Lamanya budidaya dan waktu panen tanaman, serta lamanya waktu pemulihan tanaman setelah dipanen merupakan beberapa kendala dalam upaya mempertahankan dan meningkatkan produksi kinin secara konvensional. Untuk mengatasi masalah tersebut, peningkatan produksi kinin dengan sistem kultur in vitro melalui metode kultur sel diharapkan menjadi solusi. Kultur sel tergolong efisien baik dari segi bahan baku maupun waktu, tidak bergantung iklim dan musim, serta produksi dapat ditingkatkan secara berkelanjutan. Metode kultur sel biasanya dilakukan dengan elisitasi, yaitu suatu teknik untuk menciptakan kondisi stres (cekaman) yang menyebabkan perubahan fisiologi dan biokimia sehingga meningkatkan produksi senyawa sekunder. Elisitasi dilakukan dengan menambahkan senyawa yang dinamakan elisitor. Apabila penggunaan elisitor dapat meningkatkan produksi suatu metabolit sekunder, maka aktivitas enzim-enzim pada lintasan biosintesis metabolit sekunder tersebut diduga juga meningkat. Untuk kinin, hal ini menimbulkan pertanyaan tentang enzim mana pada lintasan biosintesis kinin yang nyata terelisitasi oleh perlakuan yang diberikan. Sejauh ini, informasi mengenai enzim yang berperan dalam pembentukan alkaloid kinolin, khususnya kinin masih sangat terbatas. Diketahui bahwa enzim yang terdekat dalam jalur biosintesis kinin adalah NADP(H) oksidoreduktase. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas NADP(H) oksidoreduktase pada kultur sel kina yang dielisitasi dan mengetahui keterkaitan aktivitas enzim tersebut dengan produksi alkaloid kinin. Penelitian ini dibagi menjadi beberapa tahapan. Tahap pertama merupakan tahap kultur suspensi sel. Tahap kedua, dilakukan ekstraksi dan fraksinasi senyawa alkaloid dari hasil kultur yang dielisitasi, kemudian dianalisis melalui HPLC, untuk mengetahui konsentrasi kinin dalam sel. Tahap ketiga merupakan uji aktivitas enzim. Pada tahap ini, dilakukan ekstraksi serta pengukuran kadar protein kasar, dan dilanjutkan dengan pengujian aktivitas enzim dengan substrat kinin dan koenzim NADP dengan metode fluorometri. Kultur sel kina dielisitasi menggunakan asam absisat (ABA) dan paklobutrazol (PBZ) yang dikombinasikan dengan susbtitusi gula alkohol berupa sorbitol dan manitol. Perlakuan terdiri dari lima kombinasi, yaitu: (1) K (tanpa elisitor), (2) A3K (ABA 3 mg/L + sukrosa 30 g/L); (3) A3S (ABA 3 mg/L + sorbitol 5.3 g/L + sukrosa 20 g/L); (4) P7M (PBZ 7 mg/L + manitol 5.3 g/L + sukrosa 20 g/L); dan (5) P7-3M (PBZ 7 mg/L yang dimasukkan pada minggu ketiga kultur + manitol 5.3 g/L + sukrosa 20 g/L). Sel dipanen setelah berumur 7 minggu dan dianalisis pertumbuhan, biomassa, alkaloid kinin, dan aktivitas enzim NADP(H) oksidoreduktase hasil kultur yang dielisitasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pertumbuhan sel terbaik pada minggu ke-7 diperoleh pada kultur dengan media yang tidak diberi elisitor (kontrol). Pertumbuhan dan biomassa terbaik untuk kultur dengan media yang mengandung elisitor, terdapat pada perlakuan A3S dan A3K, sedangkan kultur dengan media yang ditambah PBZ, baik perlakuan P7M dan P7-3M menghasilkan pertumbuhan dan biomassa sel terendah. Aktivitas enzim biosintesis alkaloid kinolin, NADP(H) oksidoreduktase, terdeteksi pada kontrol dan semua perlakuan elisitasi. Penambahan elisitor pada kultur berpengaruh dalam meningkatkan aktivitas enzim. Aktivitas enzim tertinggi terdapat pada perlakuan P7M (165.42 μM/mg protein) dan A3S (156.37 μM/mg protein) yang bersesuaian dengan akumulasi/produksi senyawa
Keyword: biosynthetic enzyme, paclobutrazol, quinoline alkaloids, elicitor, fluorometry

Judul: Produksi Kinin dan Kinidin dalam Kultur Sel Kina (Cinchona ledgeriana Moens) dengan Elisitor Filtrat Cendawan Endofit dan Metil Jasmonat.
Abstrak: Tanaman kina mengandung senyawa berupa alkaloid kinolin yang khasiatnya telah lama dipercaya sebagai antimalaria. Seiring berjalannya waktu, tanaman kina kini telah dikenal juga sebagai bahan pemberi rasa pahit bagi minuman ringan, sebagai antiinflamasi, antiaritmia, antidiabetes, antiobesitas, antioksidan, sitotoksisitas terhadap sel kanker payudara, bahan kosmetik, dan sebagai pestisida alami. Kulit batang kina menghasilkan 12-13% alkaloid, 70-90% nya berupa kinin, 1% kinidin dan sisanya alkaloid lain. Sebagai alkaloid terbesar dalam tanaman kina, kinin bermanfaat terutama sebagai senyawa antimalaria, antipiretikum, bahan pemberi rasa pahit bagi minuman ringan dan bahan kosmetika, sedangkan kinidin dikenal sebagai obat antiaritmia, epilepsi, demensia dan anti depresi. Secara konvensional, kinin dan kinidin dipanen langsung dari kulit batang tanaman kina yang berumur 7-12 tahun. Tanaman kina yang telah kehilangan kulitnya membutuhkan waktu paling sedikit dua tahun untuk memulihkan kembali jaringan yang hilang. Masa panen dan masa pemulihan yang lama serta jumlah tanaman kina yang berkurang tiap tahunnya mengakibatkan Indonesia harus mengimpor kulit batang kina, sebesar 80% dari kapasitas olah pabrik kina yang ada. Hal tersebut mendorong dilakukannya kultur suspensi sel kina secara in vitro sebagai alternatif dalam upaya memproduksi alkaloid kinolin. Namun, hasil alkaloid kinin dan kinidin pada penelitian sebelumnya masih sangat rendah bila dibandingkan dengan yang diekstrak langsung dari kulit batang kina. Oleh karenanya penelitian lanjutan untuk menemukan elisitor terbaik masih terus dilakukan hingga saat ini. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat produksi kinin dan kinidin yang dihasilkan oleh suspensi sel Cinchona ledgeriana dengan menambahkan elisitor filtrat cendawan dan metil jasmonat dan untuk mengetahui kemampuan antibakteri dari alkaloid kinolin dari ekstrak kasar suspensi sel kina. Kultur suspensi sel dilakukan dengan membiakkan kalus remah dalam suatu wadah berisi media WP (Wood Plant) cair dan diberi elisitor berupa metil jasmonat (MeJA) dan kombinasinya dengan prazat L-triptopan (Trp) atau filtrat dari dua galur cendawan endofit (Diaporthe sp M13 dan Diaporthe sp M23) asal tanaman kina. Pertumbuhan suspensi sel diukur dengan metode non- destruktif yaitu Cell Volume after Sedimentation (CVS). Pengujian viabilitas sel dilakukan dalam dua cara, yaitu dengan pewarnaan 2,3,5-trifenil tetrazolium klorida (TTC) pada minggu ke-empat dan ke-tujuh serta dengan fluoresen diasetat (FDA) pada minggu ke-tujuh. Ukuran sel diamati pada mikroskop tanpa menggunakana cahaya fluorescence dan panjang serta lebarnya diukur menggunakan software Image Raster. Suspensi sel berumur tujuh minggu dipanen untuk diekstraksi di dalam Soxhlet, dan dilanjutkan dengan analisis HPLC untuk kandungan alkaloid kinin dan kinidinnya. Hasil ekstraksi alkaloid juga digunakan untuk uji aktivitas antibakteri dengan metode sumuran menggunakan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli sebagai bahan ujinya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa K (kontrol) mengalami pertumbuhan suspensi sel tertinggi di minggu ke-empat dan ke-tujuh yaitu sebesar 3.64 mL dan 4.48 mL, kemudian diikuti oleh suspensi sel pada perlakuan S1M (filtrat Diaporthe sp. M23, disaring millipore). Hasil pengujian dengan TTC menunjukkan bahwa viabilitas tertinggi pada minggu ke-empat dan ke-tujuh ada pada K dengan nilai berturut-turut 75.33% dan 26.67%. Berdasarkan hasil statistik, viabilitas sel K di minggu ke-empat berbeda secara signifikan dibandingkan dengan semua perlakuan lain, sementara viabilitas K pada minggu ke-tujuh tidak berbeda nyata dengan beberapa perlakuan yaitu S1M, M1U (MeJA 1 mg/L), M5U (MeJA 5 mg/L) dan M1T (MeJA 1 mg/L + Trp 2
Keyword: antibakteri, alkaloid kinolin, kultur in vitro

Judul: Penggunaan Teorema Homeomorphy 2-Manifold dan Teorema Euler Poincare pada Torus 𝑇�� dan Simplicial Complex 𝐾��
Abstrak: Two dimensional topological spaces are said to be homeomorphic if they have the same topological invariant, where one of topological invariant used is an Euler characteristic. Homeomorphy 2-Manifold’s Theorem and Euler Poincare’s Theorem are used to distinguish two topological spaces. Homeomorphy 2-Manifold’s Theorem uses Euler characteristic to identify two dimensional topological spaces. Euler Poincare’s Theorem is an alternative way to find Euler characteristic with Betti number, which is topological invariant as well. The objective of this paper is to investigate the homeomorphism of torus 𝑇����� and simplicial complex 𝐾�����. Topological space torus and simplicial complex 𝐾����� have the same Euler characteristic, which is two. Based on Homeomorphy 2-Manifold’s Theorem topological space torus 𝑇����� and simplicial complex 𝐾����� is homeomorphic.
Keyword: simplicial, torus, Euler, homeomorphism, topology