Judul: Production of Recombinant Protein L1 HPV 52 Using the Hansenula polymorpha Expression System
Abstrak: Human papillomavirus (HPV) tipe 52 adalah strain berisiko tinggi kanker serviks di seluruh dunia, termasuk Indonesia. Kanker serviks menempati urutan keempat kanker paling umum di seluruh dunia. WHO merilis strategi global yang komprehensif untuk menurunkan angka dari penyakit kanker serviks. Strategi ini menekankan tiga langkah penting: vaksinasi HPV, skrining, dan pengobatan. Harga vaksin HPV yang mahal saat ini menjadi kendala bagi masyarakat untuk melakukan vaksinasi. HPV 52 merupakan HPV asli Indonesia yang dapat digunakan sebagai dasar untuk memproduksi vaksin HPV, sehingga dapat menekan biaya produksi menjadi relatif lebih murah. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kondisi optimum produksi protein L1 HPV 52 pada sistem ekspresi H. polymorpha melalui pemberian 17 jenis media sintetik dan juga mengamati pengaruh dihilangkannya komponen trace element solution dan vitamin solution pada media sintetik optimal terhadap produksi protein rekombinan L1 HPV 52 pada sistem bioreaktor. Tahapan penelitian yang dilakukan antara lain, penentuan kurva pertumbuhan H. polymorpha, optimasi media, kultivasi sel inang untuk sintesis protein rekombinan dan lisis. Analisis kualitatif dilakukan pada protein rekombinan menggunakan Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Ekspresi protein rekombinan divisualisasikan menggunakan westren blot (WB) dan dot blot. Konsentrasi kuantitatif protein L1 HPV 52 ditentukan menggunakan analisis enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) dan bicinchoninic acid assay (BCA). Hasil data yang diperoleh bahwa penggunaan media SYN6 lebih baik dari pada media BSM1 dan BMMY setelah inkubasi 48 jam. Media SYN6 hasil dialisis dan pemurnian protein dengan metode BCA diperoleh konsentrasi protein total 985,6 µg/mL dan 81,65 µg/mL. Hasil penelitian menunjukkan bahwa produksi protein rekombinan L1 HPV 52 yang optimal diperoleh pada media SYN6.10 dibandingkan 16 varian media lainnya pada skala labu kocok dan berdasarkan hasil analisis kurva pertumbuhan dalam bioreaktor. Penelitian ini berhasil mengadaptasikan media SYN6.10b untuk diberlakukan pada bioreaktor 1 liter dengan menghilangkan komposisi trace element solution dan vitamin solution serta menerapkan fermentasi dengan fase fed batch metanol melalui penambahan metanol 0,3% setelah 24 jam fermentasi.
Keyword: Hansenula polymorpha, L1 HPV 52, optimasi, protein rekombinan, SYN6.10b

Judul: Molecular Dynamics Simulation And Purification Of Chimeric L1/L2 Protein From Human Papillomavirus Type 52 Expressed In Escherichia coli BL21 DE3 Host
Abstrak: Human Papillomavirus (HPV) adalah virus yang dapat menyebabkan infeksi pada manusia dan terkait dengan berbagai jenis kanker, khususnya kanker serviks. Salah satu jenis HPV yang berisiko tinggi adalah tipe HPV 52 yang dapat menyebabkan kanker. Pencegahan infeksi HPV melalui vaksinasi adalah tindakan yang sangat penting. Saat ini, terdapat lima jenis vaksin HPV profilaksis yang telah dihasilkan dari protein kapsid mayor L1 dan telah mendapatkan izin serta tersedia di pasaran. Pengembangan baru untuk bahan baku vaksin profilaksis bertujuan untuk meningkatkan kemampuan vaksin HPV dalam melawan berbagai jenis HPV dengan menggunakan protein chimeric. Protein kapsid HPV terdiri atas protein mayor L1 yang memiliki kemampuan self-assembled/perakitan sendiri sebagai virus like particles (VLP) secara mandiri, dan interaksi antibodi dengan protein L2 memainkan peran penting dalam respon imun. Sel B mengeluarkan antibodi yang mengikat antigen. Bagian spesifik dari antigen yang dikenali oleh antibodi yaitu epitop sel B sehingga ketika berikatan akan memicu respon antibodi. Pengembangan vaksin profilaksis berbasis chimeric adalah cara efisien untuk menggabungkan sifat antigenik dan imunogenik dari kedua protein ini tanpa persaingan dan mencapai efek aditif. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi stabilitas protein chimeric L1/L2 HPV 52 yang dihasilkan melalui ekspresi pada bakteri E. coli BL21 (DE3). Metode yang digunakan melibatkan pendekatan bioinformatika, termasuk validasi melalui simulasi dinamika molekuler dan pemodelan 3D, serta tahap pemurnian protein untuk memperoleh protein chimeric yang murni. Protein chimeric ini diharapkan dapat digunakan sebagai bahan baku potensial untuk vaksin profilaksis terhadap penyakit yang disebabkan oleh infeksi HPV. Penelitian ini memiliki dua tahapan dalam tahap pelaksanaannya. Tahapan pertama adalah analisis bioinformatika yang digunakan untuk memprediksi struktur 3 dimensi (3D) protein chimeric L1/L2 HPV 52 menggunakan berbagai alat pemodelan seperti Alphafold, Robetta, dan I-Tasser, dengan perbaikan melalui Galaxy Refinement. Validasi model dilakukan dengan memeriksa plot Ramachandran. Kemudian, stabilitas model divalidasi melalui simulasi dinamika molekuler dengan memperhitungkan parameter-parameter seperti Root Mean Square Deviation (RMSD), Root Mean Square Fluctuation (RMSF), Radius Gyrasi (Rg), dan Solvent Accessible Surface Area (SASA). Tahapan kedua yaitu melibatkan analisis in vitro dengan memurnikan protein L1/L2 HPV tipe 52 menggunakan teknik kromatografi afinitas dan high performance liquid chromatography (HPLC). Histag kemudian dihilangkan menggunakan sumo protease untuk mendapatkan protein chimeric murni berukuran sekitar 55 kDa kemudian hasil dikarkterisasi secara kualitatif dengan SDS-Page dan western blot dan secara kuantitatif untuk mengetahui total protein menggunakan kit BCA assay. Hasil identifikasi dikonfirmasi melalui SDS-PAGE dan Western blot, yang menunjukkan pengikatan dengan antibodi poliklonal anti-L1 HPV tipe 52. Berdasarkan hasil analisis bioinformatika, model protein chimeric L1/L2 yang dibuat dengan menggunakan Alphafold adalah yang terbaik. Validasi model dengan Ramachandran plot menunjukkan bahwa model ini memiliki nilai yang paling sesuai, yaitu sebesar 94,20%. Evaluasi stabilitas protein chimeric L1/L2 HPV 52 melalui simulasi dinamika molekuler menunjukkan bahwa protein ini sangat stabil, seperti yang ditunjukkan oleh analisis RMSD, RMSF, SASA, rg, dan ikatan hidrogen. Hasil analisis in vitro dengan pemurnian protein telah berhasil dilakukan dengan hasil visualisasi melalui SDS-PAGE dengan berat molekul sekitar 68 kDa. Validasi lebih lanjut dengan Western blot mengkonfirmasi bahwa protein chimeric L1/L2 memiliki berat molekul sekitar 55 kDa. Hasil penelitian ini menunjukkan potensi protein chimeric L1/L2 sebagai bahan baku yang efektif untuk vaksin profilaksis terhadap
Keyword: HPV, Molecular dynamics, Purification, Recombinant Protein

Judul: Karakteristik Nilai Kuat Tumpu Baut pada Kayu Meranti Merah (Shorea spp.) dan Merbau (Intsia spp.) menurut Beberapa Diameter Baut dan Arah Pembebanan Serat Kayu
Abstrak: Kekuatan tumpu baut merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi kekuatan sambungan kayu dalam menahan beban pada konstruksi bangunan struktural. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui nilai kekuatan tumpu baut menggunakan tiga ukuran diameter baut dengan arah pembebanan serat kayu pada jenis kayu (meranti merah dan merbau). Pengujian yang dilakukan terdiri atas sifat fisis, sifat mekanis, dan kuat tumpu baut dengan bentuk ukuran telah dimodifikasi yang mengacu pada standar BS-373 (1957) dan ASTM D 5764-97a (Reapproved 2002). Hasil penelitian menunjukan bahwa kayu merbau memiliki nilai kuat tekan sejajar dan tegak lurus serat serta kuat tumpu baut lebih besar dibandingkan kayu meranti merah. Faktor yang mempengaruhi kuat tumpu baut adalah jenis kayu, diameter baut, dan arah pembebanan. Ukuran diameter baut memberikan pengaruh yang nyata terhadap kuat tumpu baut dimana terdapat kecenderungan diameter baut yang semakin besar akan mengakibatkan nilai kekuatan tumpu baut semakin menurun.
Keyword: kekuatan tumpu baut, sifat fisis dan mekanis, baut