Judul: Ekspresi Enzim Rekombinan MMLV-Reverse Transcriptase di Sistem Ekspresi Escherichia coli BL21 Menggunakan Metode Autoinduksi
Abstrak: Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV) memiliki enzim transkripsi balik atau reverse transcriptase yang dapat mengubah RNA menjadi cDNA. Selama pandemi Covid-19, terjadi peningkatan permintaan reverse transkriptase yang merupakan komponen penting dari alat pendeteksi virus corona. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan mempelajari ekspresi enzim rekombinan Moloney Murine Leukemia Virus-Reverse Transcriptase (MMLV-RT) serta mendapatkan waktu dan media inkubasi optimum menggunakan metode autoinduksi. Protein rekombinan MMLV-RT diproduksi di sistem ekspresi Escherichia coli yang telah disisipi plasmid pembawa gen MMLV-RT. Plasmid pD451-SR diregulasi dengan promotor T7 untuk mengekspresikan MMLV-RT. Beberapa penelitian terdahulu menggunakan isopropyl -D-thiogalactopyranoside (IPTG), namun dalam penelitian ini menggunakan laktosa yang memiliki harga lebih murah dibandingkan IPTG sehingga dapat mengurangi biaya produksi. Sel inang E. coli BL21 ditransformasi dan dikulturkan dalam empat media autonduksi, yaitu media Luria Bertani, 2XYT, Imperial College, dan Terrific Broth. Protein rekombinan MMLV-RT diekspresikan paling optimum di media Imperial College dengan waktu inkubasi 96 jam. Protein MMLV-RT memiliki kelarutan yang baik berdasarkan uji solubilitas dan sebagian besar protein MMLV-RT terlarut pada fraksi supernatan hasil ekstraksi. Protein rekombinan MMLV-RT dipurifikasi menggunakan Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) dan mendapatkan konsentrasi sebesar 10,117 mg/mL. Aktivitas enzim MMLV-RT yang diproduksi dalam studi ini diuji dan menunjukkan aktivitas spesifik sebesar 629,4 U/mg.
Keyword: Autoinduksi, Ekspresi, MMLV-RT, Purifikasi, Transkripsi balik

Judul: Expression of Synthetic Gene Encoding for Nucleocapsid in Escherichia coli
Abstrak: SARS-CoV-2 adalah virus yang menyebabkan pneumonia akut pada manusia yang dikenal sebagai penyakit COVID-19. Salah satu upaya dalam penanganan COVID-19 adalah dengan menyediakan bahan uji diagnostik berupa uji serologis. Pemeriksaan ini penting untuk mengidentifikasi yang dapat digunakan untuk uji serologis adalah protein N sebagai protein struktural virus SARS-CoV-2. Salah satu komponen utama yang dapat digunakan untuk uji serologis tersebut diantaranya antigen asal protein N sebagai protein struktural virus SARS-CoV-2. Penelitian ini bertujuan untuk membuat protein rekombinan N SARS-CoV- 2 menggunakan sistem ekspresi Escherichia coli. Sebanyak 1089 nukleotida yang mengkode 362 asam amino N SARS-CoV-2 dioptimasi kodonnya, disintesis, dan diklon ke vektor pET-14b. Plasmid tersebut kemudian diekspresikan dalam E.coli BL21DE3 dan diinduksi dengan 1.0 mM Isopropyl-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG). Sel diperoleh dilisis menggunakan bufer denaturasi yang mengandung 7 M urea karena terindikasi adanya pembentukan badan inklusi pada protein target. Protein rekombinan yang diperoleh selanjutnya didialisis untuk menghilangkan pengotor dan dipekatkan menggunakan PEG-6000 yang menghasilkan rendelmen 0.992 mg/mL. Analisis protein rekombinan N SARS-CoV-2 dilakukan menggunakan teknik SDS-PAGE yang menghasilkan protein target berupa protein spesifik 37 kDA. Aplikasi protein rekombinan N SARS-CoV-2 pada teknik ELISA terhadap sampel serum darah manusia menunjukan terjadinya reaksinya antigen-antibodi dengan hasil rata-rata densitas optik yaitu ada 0.603 pada orang yang divaksinasi dan 0.135 pada orang yang tidak divaksinasi. Penelitian ini mengungkapkan bahwa produksi protein rekombinan N SARS-COV-2 dapat dilakukan dalam sistem ekspresi E.coli dalam kondisi terdenaturasi, sehingga metode tersebut lebih efektif dalam memproduksi protein sebagai bahan dasar dalam pengujian imunodiagnostik.
Keyword: Codon-optimized, Escherichia coli BL21DE3, Recombinant protein, Synthetic gene SARS-CoV-2 Nucleocapsid

Judul: Pengaruh Konsep Lanskap Keraton Ngayogyakarta Hadinigrat terhadap Lanskap Kota Yogyakarta
Abstrak: Kota Yogyakarta merupakan kota yang menjadi pusat kebudayaan Jawa dengan adanya Keraton Yogyakarta dan bekas Kerajaan Mataram Islam. Sebagai sebuah kota dengan latar historis kerajaan yang kuat dan legilimasi keraton yang sampai saat ini masih cukup kuat, maka kehidupan keraton mempengaruhi pula kehidupan rakyat Kota Yogyakarta. Keraton dan kawasan kerajaan dibangun berdasarkan konsep-konsep filosofis yang menghasilkan wujud fisik penuh makna dan merupakan cikaI bakaI Kota Yogyakarta. Namun dalam perkembangannya, dengan adanya pengaruh pendatang dan globalisasi, malta banyak terjadi pergeseran nilai dan kebudayaan serta filosofi yang melingkupinya Hal. ini dikhawatirkan akan semakin mengaburkan identitas Kota Yogyakarta.
Keyword: