Judul: Isolasi dan kriopreservasi Primordial Germ Cell (PGC) menggunakan krioprotektan DMSO untuk pembentukan germline chimera ayam gaok
Abstrak: Ada sekitar 31 spesies ayam asli di Indonesia dan beberapa spesies sudah semakin berkurang populasinya. Populasi ayam gaok di Madura semakin berkurang dan hanya terdapat sekitar 2000 ekor, populasinya akan semakin berkurang jika tanpa adanya inovasi dalam aspek reproduksi. Meskipun pendekatan bioteknologi telah dikembangkan melalui isolasi dan kriopreservasi dari PGC, tetapi tingkat keberhasilan metode ini belum konsisten. PGC adalah sel embrio awal spermatozoa atau oosit, yang dikumpulkan selama tahap perkembangan embrio. Sel-sel ini dapat dibedakan dari sel-sel lain berdasarkan bentuk spesifik morfologinya. PGC berbentuk bulat, mempunyai diameter 14 sampai 19 mikron, mempunyai inti besar dan lemak rekratif di sitoplasmanya, PGC dapat dikoleksi dari darah embrio pada stadium 14 sampai 16. Ada beberapa metode yang dikenal untuk mengisolasi PGC, salah satu metode adalah dengan sentrifugasi menggunakan nycodenz. Metode ini relatif sederhana dan efisien untuk membekukan PGC di masa depan. Beberapa aspek dalam metode ini memerlukan studi lebih lanjut, termasuk isolasi dan koleksi PGC, serta konsentrasi krioprotektant optimal untuk pembekuan. Beberapa peneliti menggunakan krioprotektant DMSO untuk membekukan PGC di spesies unggas, karena DMSO menunjukkan toksisitan yang rendah. Penelitian ini dilakukan dalam 3 tahapan : 1. Isolasi dan koleksi PGC pada perkembangan embrio pada stadium 14-18. 2. Menggunakan konsentrasi DMSO (2.5%, 5% dan 10%) dalam medium untuk pembekuan PGC. 3. Transfer PGC ayam gaok segar dan beku ke embrio resipien (ayam White Leghorn) untuk pembentukan germline chimera. Penelitian ini menunjukkan bahwa morfologi dari PGC ditandai dengan bentuk yang bulat, mempunyai inti besar yang tidak simetris, bagian luarnya tampak sebagai suatu cincin cerah di bawah membran sel. PGC dapat dengan mudah dibedakan dari sel darah merah, karena PGC mempunyai inti. Rataan jumlah PGC-sirkulasi dari koleksi sampel selama perkembangan embrio stadium 14 adalah 42.9, jumlah ini meningkat 51 sel PGC pada stadium 15. Jumlah PGC pada stadium 14 sampai 15 berbeda lebih tinggi daripada stadium16, 17 dan 18; yaitu 45 sampai 61sel dan 32.6 sampai 42.9 sel.
Keyword: Gaok chicken, number PGC-circulated, cryopreservation, germline chimera

Judul: IPB (Bogor Agricultural University)
Abstrak: Primordial Germ Cells (PGC) merupakan sel prekursor sel gamet jantan maupun betina. Sel ini berasal dari lapis epiblast kemudian bermigrasi melewati mesenterium menuju rigi kelamin. Pada umur 13.5 hari pascakoitus (hpk) sel ini berada di rigi kelamin dan sudah mengalami determinasi jenis kelamin. Primordial Germ Cells (PGC) bersifat totipoten dengan gen penanda OCT-4, sehingga PGC diharapkan dapat digunakan dalam terapi penyakit degenaratif ataupun pada kasus infertilitas. Penelitian ini betujuan untuk profiling protein di dalam conditioned medium (CM) dari sel testikuler mencit umur 5 hari, mengkarakterisasi PGC dan menganalisis kemampuan CM dalam menginduksi PGC menjadi sel gamet jantan yang haploid. Penelitian tahap pertama bertujuan untuk mengkarakterisasi perkembangan sel testikuler dan mengidentifikasi spermatogonial stem cells (SSC) dalam kultur in vitro. Sel testiskuler dari mencit umur 5 hari di kultur dalam Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) yang ditambahkan serum 10%, kemudian diinkubasi pada suhu 37 °C, 5% CO2. Perkembangan sel diamati selama 6 hari yang meliputi viabilitas dan population doubling time (PDT). Sel kultur hari ke-1, ke-3 dan ke-6 diwarnai dengan pewarna Periodic Acid Schiff (PAS) untuk mengidentifikasi dan mengukur luas sel testikuler. Secara spesifik, identifikasi SSC menggunakan pewarnaan imunositokimia menggunakan antibodi OCT-4 dan CD90. Hasil penelitian menunjukkan PDT sel testikuler sebesar 0.63 hari dan viabilitas >90%. Persentase sel Sertoli-like meningkat selama kultur, begitu juga dengan sel fibroblast-like yang meningkat pada hari ke-3 dan menurun pada hari ke-6 walaupun tidak signifikan. Sementara itu, sel spermatogonia-like menurun dari hari ke-1 sebesar 54.3%, menjadi 18.7% pada hari ke-6. Luas sel testikuler meningkat signifikan setelah kultur selama 6 hari. Sel testikuler dan SSC di dalam kultur diduga menghasilkan growth factors di dalam niche. Pada akhir kultur (hari ke-6), medium kultur diganti dengan DMEM tanpa serum dengan tujuan sebagai sumber conditioned medium (CM). Penelitian tahap kedua dilaksanakan untuk menganalisis kandungan protein (profiling) serta kandungan hormon testosteron dalam conditioned medium yang diperoleh dari kultur sel testikuler. Profiling protein menggunakan liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS/MS), dan ditemukan 26 jenis protein yang berperan sebagai struktur sel dan proses seluler. Protein yang paling banyak diidentifikasi dalam CM adalah kolagen, yang terdiri atas beberapa jenis, yaitu: Collagen alpha-1(I) chain (Col1a1), Collagen alpha-2(I) chain (Col1a2), Collagen alpha-1(III) chain (Col3a1), Collagen alpha-1(IV) chain (Col4a1) dan Collagen alpha-2(V) chain (Col5a2). Kolagen berperan sebagai matrix extracellular (ECM) dan akan berinteraksi dengan reseptor. Konsentrasi testosteron di dalam CM adalah 0.542 ng/mL. Kandungan CM sel testikuler diharapkan mendukung proses perkembangan sel germinal. Penelitian tahap ketiga adalah karakterisasi fetus sumber rigi kelamin, serta karakterisasi rigi kelamin sebagai sumber PGC baik secara makroskopis maupun mikroskopis, serta perbanyakan PGC. Penelitian tahap ini menggunakan fetus mencit umur 13.5 hpk sebagai sumber rigi kelamin. Fetus diukur dan ditimbang, rigi kelamin diisolasi untuk preparat histologi dan dikultur. Rigi kelamin diwarnai dengan Hematoksilin Eosin (HE) dan pewarnaan immunositokimia menggunakan antibodi VASA sebagai penanda PGC. Perbanyakan PGC dilakukan dengan kultur in vitro selama 9 hari, medium yang digunakan adalah DMEM+Serum 15% dan DMEM+Serum 15% dengan perlakuan penambahan leukemia inhibitory factor (LIF) 1000 IU/mL. Sel kultur diwarnai pada hari ke-3, ke-6 dan ke-9 kultur dengan pewarnaan immunositokimia menggunakan antibodi OCT-4. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fetus umur 13.5 hpk dengan ukuran
Keyword: conditioned medium, PGC, proteomik, sel testikuler, spermatogenesis in vitro

Judul: Tinjauan Matematis pada Model Makroskopik dan Mikroskopik Arus Lalu-lintas
Abstrak: Traffic flow phenomenon can be described through mathematical model such as continuous dynamic model with an ordinary differential equation so that it can be solved with integral factors. In this paper three simple models of traffic flow are discussed, i.e, two macroscopic and one microscopic models. Macroscopic model formulates dynamics of the traffic flow that occurs on a large number of vehicles on a road. While the microscopic model explains drivers’ behavior in their interaction with other vehicles ahead, i.e, car-following model. This paper shows the existence of ordinary differential equation found in the traffic flow model and indicates some different representations in the context of the same model. It also reviews a simple model of traffic flow along a single link, which leads to some unexpected results, i.e, it can express the solution model in term of link outflows as well as trip time. In the microscopic model, simulation is done to illustrate the behavior of the drivers with a sensitivity coefficient as a benchmark parameter.
Keyword: