Judul: Karakterisasi enzim protease pemecah keratin dari isolat termofil OB.p
Abstrak: Usaha untuk memperoleh mikroba sebagai penghasil enzim protease terus dilakukan mengingat kemudahan dibanding tumbuhan dan hewan yaitu pertumbuhan dan efisiensi waktu serta biaya. Dewasa ini, terjadi kecenderungan untuk memproduksi enzim tersebut dari mikroba-mikroba yang mampu bertahan dalam. lingkungan yang ekstrim seperti suhu yang tinggi. Tujuan penelitian ini adalah melakukan penapisan (screening) terhadap isolat- isolat Streptomyces sp. yang berasal dari tanah hutan di Kalimantan dan tanah gambut di Riau serta isolat-isolat yang berasal dari tanah kompos di Korea untuk memperoleh isolat termofil yang mampu memproduksi enzim protease pemecah keratin. Hasil penapisan terhadap Streptomyces sp. menunjukkan tidak satupun isolat di antara 10 isolat mampu bertahan hidup pada suhu tinggi. Dari 10 isolat asal Korea, satu isolat termofil terpilih (OB.p) selanjutnya digunakan untuk produksi dan karakterisasi enzim yang dihasilkan. Enzim protease pemecah keratin dari isolat termofil tersebut telah dikarakterisasi. Isolat ditumbuhkan dalam media yang mengandung keratin pada suhu 70°C. Dalam penelitian ini, sebagai sumber keratin digunakan tepung bulu ayam. Beberapa media yang diuji merupakan pengenceran dari media Luria Bertani yang ditambah keratin, yakni mengandung: (1) ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCI 1% yang diencerkan 4 kali dengan akuades dan ditambah keratin 5%, (2) ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCl 1% yang diencerkan 10 kali dan ditambah keratin 5%, buffer fosfat 5 mM, CaCl₂ 5 mM. pH media yang digunakan adalah pH 6 hingga 8. Aktivitas enzim diuji menggunakan metode Walter (1984) dengan menggunakan kasein dan keratin sebagai substrat. Media optimal yang digunakan untuk produksi enzim mengandung ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCl 1% yang diencerkan 4 kali dan ditambah keratin 5% dengan nilai pH 8 selama 6 hari. Supernatan bebas sel diperoleh dengan cara mensentrifugasi dingin filtrat pada kecepatan 4000 rpm selama 30 menit. Ekstrak kasar enzim diperoleh dengan cara menambahkan amonium sulfat 50% (b/v) pada suhu rendah. Endapan enzim yang diperoleh disuspensikan kembali dalam buffer fosfat 0.02 M pH 7. Karakterisasi enzim yang dilakukan meliputi penentuan pH optimum, suhu optimum, pengaruh kation divalen, daya tahan panas enzim pada suhu optimumnya dan suhu yang lebih tinggi, pengaruh beberapa senyawa inhibitor dan penentuan berat molekul enzim. Enzim memiliki pH optimum 7 dan suhu optimum 55°C. Aktivitas enzim meningkat 2.3 kali dengan adanya penambahan 2 mM NiCl, dan 2.1 kali dengan penambahan 2 mM CoCl2. Aktivitas enzim dihambat oleh 1 mM MgCl2. Enzim ini tidak tahan panas pada suhu 55°C maupun 70°C. EDTA 1 mM sangat menghambat aktivitas enzim ini sementara penghambatan oleh PMSF 1 mM tidak sebesar penghambatan oleh EDTA 1 mM. Hasil SDS-PAGE terhadap ekstrak kasar maupun dialisat memberikan masing-masing 2 pita protein dengan berat molekul ekstrak kasar adalah 44.9 dan 35.4 kDa sedangkan pita-pita hasil dialisis berada pada berat molekul 55.7 dan 45.9 kDa. Kesemua pita ini menunjukkan aktivitas proteolitik seperti diperlihatkan pada analisis zimogram.
Keyword: 

Judul: Pemilihan isolat bakteri termofilik penghasil enzim proteolitik pemecah keratin dari daerah Minahasa
Abstrak: Keratin merupakan sumber protein potensial karena dihasilkan dalam jumlah yang cukup besar, terutama dari hasil limbah pengolahan unggas. Pemanfaatan keratin terbatas karena daya cernanya yang sangat rendah, sehingga perlu dilakukan eksplorasi terhadap enzim yang mampu menghidrolisis keratin (keratinase). Isolat bakteri termofilik penghasil protease dari daerah Tompaso dan Lahendong, Minahasa diuji kemampuannya menghidrolisis keratin. Dari beberapa isolat yang diuji, dihasilkan tiga isolat yang memiliki aktivitas keratinolitik yang cukup tinggi, yaiti isolat 1.2; 2.15, dan 4.3, semua berasal dari daerah Tompaso. Bulu itik utuh yang telah dibersihkan dan dikeringkan, digunakan sebagai sumber keratin untuk pemilahan. Produksi enzim dari ketiga isolat tersebut dilakukan pada suhu 70 °C dan pH 7 selama waktu optimum produksi enzim yang telah ditentukan sebelumnya. Media yang digunakan adalah media yang digunakan oleh Friedrich dan Antranikian (1996) untuk menumbuhkan bakteri Fervidobacterium pennavorans penghasil enzim keratinase termostabil. Komposisi media terdiri atas garam-garam, ekstrak khamir, tripton, larutan mineral, dan vitamin. Enzim yang dihasilkan kemudian diendapkan dengan amonium sulfat, menggunakan konsentrasi pengendapan optimum, yang juga ditentukan dahulu untuk masing-masing isolat. Pengendapan dilanjutkan dengan pelarutan kembali dalam buffer fosfat volume minimal dan dilakukan proses desalting dengan cara dialisis menggunakan tabung dialisis dengan kemampuan menahan molekul ber-BM 12.000 Da atau lebih. Hasil dialisat enzim diuji aktivitasnya terhadap keratin azure. Pengujian dilakukan pada suhu 70 °C dan pH 7 selama 4 -5 hari, dan diperoleh hasil bahwa enzim dari ketiga isolat tersebut memiliki aktivitas terhadap keratin azure. Karakterisasi enzim dilanjutkan dengan menguji pH dan suhu optimum aktivitas enzim terhadap keratin azure sebagai substrat. Enzim dari isolat 1.2 memiliki pH optimum 9, enzim dari isolat 2.15 memiliki pH optimum 6, dan enzim dari isolat 4.3 memiliki pH optimum 7. Ketiga enzim memiliki suhu optimum pada 70 °C, sesuai dengan suhu pertumbuhan isolat bakteri penghasilnya. Aktivitas enzim tertinggi dimiliki oleh enzim dari isolat 2.15. Karakterisasi enzim dari isolat ini dilanjutkan dengan menguji ketahanan panas enzim pada suhu 80 °C, dengan substrat kasein. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa aktivitas kaseinolitik enzim menurun cukup besar setelah dipanaskan selama satu jam, walaupun demikian, aktivitas enzim setelah dipanaskan selama sepuluh jam tidak berbeda jauh bila dibandingkan dengan aktivitas enzim setelah pemanasan satu jam. Penentuan berat molekul enzim dilakukan dengan metode SDS-PAGE dan zimogram. Terdapat dua fraksi protein yang diperoleh dari SDS-PAGE, masing- masing memiliki berat molekul 57.553 Da dan 9.747 Da, sedangkan dari zimogram diperoleh dua fraksi enzim dengan berat molekul 57.553 Da dan 14.074 Da. ..dst
Keyword: pemanfaatan, ekplorasi enzim, isolat bakteri, berat molekul

Judul: Implementation of Spatio-Temporal Change Query in Relational Database.
Abstrak: Geographic object changes in various views. Object changes are recorded using a model of static storage. No historical connection between old version data and new version data has been built. For that, a storage model of spatio-temporal queries that can analyze spatio-temporal changes has been developed. The object changes the geometry are grouped according to the taxonomy of Spatio-Temporal Pattern Change. This research has been able to apply the query patterns change including born, expand, merge, contract, split, normal and die. This query based on geometric (area) changes. The implementation of spatio-temporal change queries represents an object changes continuously with easy, change detection is done by comparing two versions of data. Keyword: spatio-temporal change query, spatio-temporal change pattern.
Keyword: