Judul: Shrimp Allergen Detection Method Validation and Its Application in Protein Allergenicity Variation Test during Boiling Process.
Abstrak: Pangan laut (Seafood) mengandung berbagai macam zat gizi yang bermanfaat untuk kesehatan. Namun pangan laut dapat menimbulkan gangguan kesehatan seperti reaksi imunologis sistemik dan anafilaksis pada penderita alergi. Alergi merupakan reaksi abnormal dari sistem kekebalan tubuh yang dimediasi oleh imunuglobin E (IgE) dan termasuk dalam reaksi hipersensitivitas tipe I. Gejala alergi dapat berupa asma, diare, dan gatal. Dalam beberapa kasus alergi dapat menimbulkan kematian. Gejala alergi yang timbul menyebabkan penderita alergi menghindari pangan penyebab alergi. Namun protein pada pangan tetap dibutuhkan dalam tubuh, sehingga telah dikembangkan pangan hipoalergenik yang dapat menjadi alternatif pangan yang dapat dikonsumsi oleh penderita alergi. Untuk menguji pangan hipoalergenik, diperlukan metode analitik yang handal dan sensitif untuk melindungi pasien penderita alergi terhadap adanya kontaminasi silang atau kesalahan label pada kemasan pangan. Metode yang paling sering digunakan untuk analisis alergi di lapangan adalah ELISA dalam bentuk kit. Selain karena praktis, metode kit juga dapat menghitung alergen protein secara spesifik. Penggunaan antibodi spesifik menyebabkan kit ELISA yang beredar dipasaran cenderung mahal, sehingga diperlukan metode alternatif yang lebih murah yakni menggunakan serum darah penderita alergi. Dengan demikian perlu dilakukan validasi metode pengujian menggunakan serum darah dan didapatkan persamaan yang dapat memprediksi hasil pengujian menggunakan kit dari hasil pengujian menggunakan serum penderita alergi. Metode pengujian menggunakan serum dapat digunakan untuk menguji pengaruh proses pengolahan terhadap tingkat alergenisitas. Pengolahan dengan perlakuan panas pada perebusan menyebabkan protein terdenaturasi dan mengubah sifat alergenisitas dari udang. Data terkait perubahan sifat alergenisitas pada udang yang direbus di Indonesia belum banyak ditemukan sehingga perlu dilakukan karakterisasi terkait perubahan reaktivitas protein alergen untuk mengetahui tingkat alergenisitas udang selama proses perebusan. Tujuan dari penelitian ini yaitu melakukan validasi metode pada pengujian dengan serum penderita alergi, mendapatkan persamaan yang dapat memprediksi jumlah tropomyosin pengujian dengan kit dari hasil pengujian menggunakan serum, dan menganalisis pengaruh perebusan terhadap tingkat alergenisitas udang. Penelitian ini terbagi menjadi tiga tahap. Tahap pertama adalah validasi kinerja metode ELISA pada serum penderita alergi. Tahap kedua adalah Pengujian alergenisitas menggunakan standar untuk memprediksi hasil pengujian menggunakan kit dari hasil pengujian menggunakan serum. Tahap ketiga adalah aplikasi metode pengujian alergenisitas udang setelah perebusan dengan terlebih dahulu melakukan pengujian karakterisasi kimia ekstrak protein udang (Analisis kadar air, kadar protein kasar dan kadar protein terlarut) serta pengujian berat molekul menggunakan elektroforesis SDS PAGE. Metode ELISA menggunakan kit dan serum penderita alergi dalam menguji alergenisitas protein udang merupakan metode yang valid. Berdasarkan hasil penelitian, metode serum memiliki rata-rata LOD sebesar 4,34 μg/mL dan limit kuantifikasi sebesar 14,56 μg/mL dengan presisi yang baik. Perebusan pada udang dapat menurunkan kadar protein terlarut secara signifikan. Proses perebusan juga dapat mempengaruhi profil berat molekul protein ekstrak udang. Ekstrak udang mentah memiliki berat molekul 12.84 kDa sampai 106.78 kDa, dengan pita dominan pada 37.64, 29.40 dan 14.09 kDa. Sedangkan udang rebus memiliki pita polipeptida pada kisaran 29.96 kDa sampai 103.64 kDa, dengan pita dominan pada kisaran 37,18 dan 29.96 kDa. Protein yang tetap ada pada ekstrak udang rebus diduga adalah protein troponin, tropomyosin, paramyosin yang tahan terhadap pemanasan. Berdasarkan analisis alergenisitas perebusan tidak berpengaruh nyata terhadap tingkat alergenisitas pada udang
Keyword: allergy, ELISA, boiling, serum, shrimp, validation

Judul: The Changes of Molecular Weight Profiles and Allergenicity of Shellfish due to the Heat Processing
Abstrak: Shellfish merupakan salah satu kelompok pangan hasil laut yang diketahui menjadi sumber alergi bagi sebagian orang dan dikenali memberikan dampak yang nyata bagi kasus alergi di dunia. Shellfish dapat menyebabkan alergi pada orang atopik karena adanya kandungan protein alergen yang mampu berikatan dengan salah satu mediator penyebab reaksi hipersensitif yaitu IgE. Beberapa alergen yang terdapat pada kelompok shellfish yang telah diketahui adalah tropomiosin, arginin kinase, myosin light chain 2, sarcoplasmic calcium binding protein (SCBP), dan troponin 1. Konsentrasi protein alergen dari masing-masing spesies shellfish bervariasi. Bioaktivitas suatu protein, termasuk alergen dapat berubah karena adanya perubahan struktur molekul penyusunnya. Perubahan struktur dapat disebabkan proses pengolahan yang melibatkan panas, tekanan, fermentasi, dan interaksi dengan bahan lainnya. Proses pengolahan berpeluang dalam mengubah maupun merusak struktur epitop yang dimiliki oleh protein alergen sehingga kemampuannya dalam berikatan dengan IgE menjadi menurun bahkan hilang. Perubahan ini mempunyai pengaruh yang potensial terhadap perubahan alergenisitas suatu protein alergen. Proses pengolahan yang umum dilakukan terhadap produk hasil laut antara lain adalah perebusan, penggorengan dan pengalengan. Meskipun alergen dari berbagai jenis shellfish di dunia telah diidentifikasi, akan tetapi masih sedikit sekali studi mengenai pengaruh pengolahan terhadap profil ekstrak protein berbagai jenis shellfish yang ada di Indonesia serta sifat alergenisitasnya. Tujuan dari penelitian ini adalah mengidentifikasi keberadaan berbagai jenis protein alergen pada beberapa jenis shellfish yang banyak menyebabkan kejadian alergi di Indonesia dan perubahan reaktivitasnya akibat proses pengolahan dengan panas dan tekanan. Penelitian ini terbagi menjadi tiga tahap. Tahap pertama dilakukan untuk mendapatkan ekstrak protein 4 jenis shellfish (udang vaname, kepiting bakau, kerang hijau, dan cumi-cumi) yang banyak menyebabkan alergi dan banyak dikonsumsi baik segar maupun yang diolah dengan 3 jenis pengolahan (perebusan, penggorengan, dan autoklaf). Tahap kedua adalah karakterisasi ekstrak protein yang diperoleh meliputi analisis konsentrasi protein terlarut dan profil berat molekul protein. Tahap ketiga adalah pengujian efek pengolahan penggorengan, perebusan, dan autoklaf terhadap alergenisitas protein shellfish. Pengujian alergenisitas protein shellfish selama proses pengolahan secara kualitatif menggunakan immunoblotting dan kuantitatif menggunakan ELISA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa proses pengolahan berpengaruh terhadap perubahan konsentrasi komposisi gizi makro keempat jenis shellfish. Proses pengolahan berpengaruh terhadap penurunan kadar protein shellfish segar secara berfluktuatif, sedangkan pengolahan juga menurunkan solubilitas protein keempat jenis shellfish secara signifikan. Berdasarkan hasil uji elektroforesis SDS-PAGE ditemukan pita protein diduga alergen dengan berat molekul 33-38 kDa yang diduga sebagai alergen tropomiosin, 40 kDa diduga sebagai arginine kinase, dan 20 kDa diduga sebagai myosin light chain. Proses pengolahan mereduksi jumlah pita protein shellfish segar dalam rentang BM 10-260 kDa, bahkan proses autoklaf mereduksi pita protein pada rentang BM tersebut secara keseluruhan pada keempat jenis shellfish. Hasil uji reaktivitas IgE menunjukkan bahwa proses pengolahan autoklaf menurunkan alergenisitas udang vaname secara signifikan, secara berfluktuatif pada kerang hijau dan cumi-cumi, namun tidak menurunkan reaktivitas IgE terhadap ekstrak kepiting bakau. Hal ini terjadi karena dalam proses pengolahan kepiting dilakukan tanpa memisahkan daging dari cangkangnya dan hanya dibuka cangkang penutup karapasnya. Meski demikian, proses autoklaf tidak menghilangkan alergenisitas shellfish secara keseluruhan diduga karena masih terdapat epitop linier yang bersifat reaktif dengan berat molekul yang kecil. Adapun proses penggorengan justru meningkatkan reaktivitas IgE pada kepiting bakau dan cumi-cumi. Hasil immunoblotting
Keyword: alergenisitas, enzyme-linked immunosorbent assay, immunoblotting, protein, shellfish

Judul: Closed Knight’s Tour pada Papan Catur Berbentuk Persegi Panjang dengan Ukuran Maksimal 8 × 8
Abstrak: Closed Knight’s Tour merupakan langkah kuda yang mengunjungi setiap kotak pada papan catur tepat satu kali dengan langkah kuda berawal dan berakhir pada kotak yang sama. Graf yang terbentuk dari closed knight’s tour dinotasikan sebagai graf G(m,n), dengan m adalah banyaknya baris dan n adalah banyaknya kolom. Graf tersebut memuat Hamiltonian cycle. Sebuah graf terhubung G adalah graf bipartite jika dan hanya jika graf tersebut tidak memiliki cycle dengan panjang ganjil. Papan catur yang memenuhi syarat cukup untuk memiliki closed knight’s tour adalah papan catur berukuran 5 × 6, 5 × 8, 6 × 6, 6 × 7, 6 × 8, 7 × 8, dan 8 × 8.
Keyword: bipartite, closed knight’s tour, hamiltonian cycle, knight’s tour, teori graf