Judul: Delesi Sinyal Sekresi Gen CalBsyn dalam Plasmid pGAPZα-proCalBsyn-egfp melalui Teknik Mutagenesis Terarah.
Abstrak: ProCalBsyn merupakan gen penyandi Candida antartica lipase B yang dibuat secara sintetik dalam plasmid pGAPZα-proCalBsyn-egfp (4839 bp). Sekuen proCalBsyn masih mengandung sinyal sekresi native (ss-CalBsyn), sementara plasmid pGAPZα memiliki sinyal sekresi mating-factor-α.(MFα). Tujuan dari penelitian ini adalah mendelesi sinyal sekresi ss-CalBsyn, mengintroduksi situs EcoRI serta transformasi plasmid mutan ke E.coli TOP10F’. Delesi ss-CalB dilakukan dengan teknik mutagenesis terarah melalui proses PCR. Sepasang primer F-mCalB dan R-mCalB serta high-fidelity DNA-polymerase G-Hifi digunakan untuk amplifikasi. Hasil amplifikasi PCR diperoleh plasmid mutan berupa DNA linear berukuran 4780 bp. Setelah direstriksi dengan enzim EcoRI dan ligasi, plasmid mutan ditransformasikan kembali ke E.coli. Transformasi menghasilkan lebih dari 60 koloni transforman. Analisis PCR menunjukkan 3 dari 9 klon hasil isolasi plasmid yang dianalisis terindikasi membawa plasmid mutan yaitu klon 7, 19 dan 20. Ketiga klon tersebut menunjukkan adanya pita gen mCalBsyn (970 bp).
Keyword: mutagenesis terarah, mutasi delesi, sinyal sekresi native CalB, proCalBsyn, plasmid pGAPZα

Judul: Konstuksi Vektor Dan Ekspresi Protein Rekombinan Lipase Candida Antarctica (Calb) Dengan Cellulose Binding Module (Cbm) Pada Pichia Pastoris
Abstrak: Gen CalBsyn telah dikonstruksi secara sintetik untuk menyandi Candida antarctica lipase B (CALB). Enzim tersebut memiliki peranan penting sebagai biokatalis yang efektif di bidang bioteknologi dan industri. Sekuens gen CalBsyn telah dimodifikasi dengan mengintroduksi mutasi pada tiga asam amino, yaitu V210I, A281E, dan V221D untuk meningkatkan termostabilitas enzim tersebut. Fragmen gen cellulose binding module (cbm) endoglukanase I (egl1) dari Trichoderma reesei difusikan pada ujung karboksil gen CalBsyn pada plasmid rekombinan pGAPZα-CalBsyn. CBMmerupakan suatu domain protein yang umum dijumpai pada enzim selulase dan berfungsi dalam pengikatan enzim pada matrik selulosa. Dalam penelitian ini CBM digunakan untuk memfasilitasi imobilisasi CALB pada matrik selulosa melalui fusi dari dua protein tersebut. Penelitian ini bertujuan mengkonstruksi vektor ekspresi gen CalBsyn yang difusi dengan cbm dan mengekspresikan CALB pada Pichia pastoris SMD1168H. Baik plasmid maupun gen cbm dipotong dengan enzim ClaI. Plasmid rekombinan pGAPZα-CalBsyn-cbm dikonstruksi dengan cara meligasikan gen cbm ke dalam plasmid pGAPZα-CalBsyn. Plasmid rekombinan pGAPZα-CalBsyn-cbm diklon dan diseleksi pada Eschericia coli TOP10F’. Plasmid rekombinan pGPAZα-CalBsyn telah berhasil diintroduksi ke dalam genom P. pastoris SMD1168H melalui metode elektroporasi. Efisiensi transformasi yang diperoleh sebesar 1,01 x 102 cfu/μg DNA. Analisis ekspresi protein rekombinan dilakukan terhadap beberapa galur rekombinan P. pastoris terpilih. Uji aktivitas lipase secara kualitatif pada media seleksi menunjukkan bahwa galur transforman P. pastoris yang diperoleh positif mensekresikan lipase rekombinan (CALB) dan memiliki aktivitas lipolitik. Uji aktivitas lipase secara kuantitatif dari salah satu galur transforman P. pastoris menunjukkan bahwa aktivitas enzim mencapai 6,35 Units/ml pada jam ke-48. Analisis protein dengan SDS-PAGE menunjukkan bahwa CALB berhasil diekspresikan secara ekstraseluler dengan ukuran sekitar 45 kDa.
Keyword: Candida antarctica lipase B, cellulose binding module, recombinant Pichia pastoris

Judul: Faktor-Faktor yang Memengaruhi Permintaan Impor Kopi oleh Jepang.
Abstrak: Jepang merupakan negara dengan tingkat konsumsi kopi keempat tertinggi di dunia. Volume impor kopi Jepang pada tahun 2019 mencapai 470 ribu ton. Indonesia merupakan salah satu negara eksportir kopi terbesar ke Jepang, namun dalam sepuluh tahun terakhir mengalami penurunan volume ekspor. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis kondisi pasar kopi Jepang serta menganalisis faktor-faktor yang memengaruhi impor kopi oleh Jepang. Penelitian menggunakan data panel periode 2005-2018 dari sepuluh negara. Variabel independen yang digunakan berupa GDP riil per kapita Jepang, nilai tukar dolar AS terhadap yen Jepang, total konsumsi kopi Jepang, dan harga impor kopi oleh Jepang. Metode kuantitatif menggunakan analisis regresi, sedangkan metode kualitatif menggunakan analisis deskriptif. Mayoritas konsumen kopi di Jepang memiliki rentang umur 40-59, dengan jenis kopi yang disukai adalah kopi instan, dan dikonsumsi di rumah. Hasil analisis regresi menunjukkan bahwa nilai tukar dolar AS terhadap yen Jepang berpengaruh signifikan dan memiliki hubungan negatif terhadap permintaan impor kopi oleh Jepang.
Keyword: Coffee market, import demand, Japan, panel data