Judul: Karakterisasi enzim protease pemecah keratin dari isolat termofil OB.p
Abstrak: Usaha untuk memperoleh mikroba sebagai penghasil enzim protease terus dilakukan mengingat kemudahan dibanding tumbuhan dan hewan yaitu pertumbuhan dan efisiensi waktu serta biaya. Dewasa ini, terjadi kecenderungan untuk memproduksi enzim tersebut dari mikroba-mikroba yang mampu bertahan dalam. lingkungan yang ekstrim seperti suhu yang tinggi. Tujuan penelitian ini adalah melakukan penapisan (screening) terhadap isolat- isolat Streptomyces sp. yang berasal dari tanah hutan di Kalimantan dan tanah gambut di Riau serta isolat-isolat yang berasal dari tanah kompos di Korea untuk memperoleh isolat termofil yang mampu memproduksi enzim protease pemecah keratin. Hasil penapisan terhadap Streptomyces sp. menunjukkan tidak satupun isolat di antara 10 isolat mampu bertahan hidup pada suhu tinggi. Dari 10 isolat asal Korea, satu isolat termofil terpilih (OB.p) selanjutnya digunakan untuk produksi dan karakterisasi enzim yang dihasilkan. Enzim protease pemecah keratin dari isolat termofil tersebut telah dikarakterisasi. Isolat ditumbuhkan dalam media yang mengandung keratin pada suhu 70°C. Dalam penelitian ini, sebagai sumber keratin digunakan tepung bulu ayam. Beberapa media yang diuji merupakan pengenceran dari media Luria Bertani yang ditambah keratin, yakni mengandung: (1) ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCI 1% yang diencerkan 4 kali dengan akuades dan ditambah keratin 5%, (2) ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCl 1% yang diencerkan 10 kali dan ditambah keratin 5%, buffer fosfat 5 mM, CaCl₂ 5 mM. pH media yang digunakan adalah pH 6 hingga 8. Aktivitas enzim diuji menggunakan metode Walter (1984) dengan menggunakan kasein dan keratin sebagai substrat. Media optimal yang digunakan untuk produksi enzim mengandung ekstrak khamir 0.5%, tripton 1%, NaCl 1% yang diencerkan 4 kali dan ditambah keratin 5% dengan nilai pH 8 selama 6 hari. Supernatan bebas sel diperoleh dengan cara mensentrifugasi dingin filtrat pada kecepatan 4000 rpm selama 30 menit. Ekstrak kasar enzim diperoleh dengan cara menambahkan amonium sulfat 50% (b/v) pada suhu rendah. Endapan enzim yang diperoleh disuspensikan kembali dalam buffer fosfat 0.02 M pH 7. Karakterisasi enzim yang dilakukan meliputi penentuan pH optimum, suhu optimum, pengaruh kation divalen, daya tahan panas enzim pada suhu optimumnya dan suhu yang lebih tinggi, pengaruh beberapa senyawa inhibitor dan penentuan berat molekul enzim. Enzim memiliki pH optimum 7 dan suhu optimum 55°C. Aktivitas enzim meningkat 2.3 kali dengan adanya penambahan 2 mM NiCl, dan 2.1 kali dengan penambahan 2 mM CoCl2. Aktivitas enzim dihambat oleh 1 mM MgCl2. Enzim ini tidak tahan panas pada suhu 55°C maupun 70°C. EDTA 1 mM sangat menghambat aktivitas enzim ini sementara penghambatan oleh PMSF 1 mM tidak sebesar penghambatan oleh EDTA 1 mM. Hasil SDS-PAGE terhadap ekstrak kasar maupun dialisat memberikan masing-masing 2 pita protein dengan berat molekul ekstrak kasar adalah 44.9 dan 35.4 kDa sedangkan pita-pita hasil dialisis berada pada berat molekul 55.7 dan 45.9 kDa. Kesemua pita ini menunjukkan aktivitas proteolitik seperti diperlihatkan pada analisis zimogram.
Keyword: 

Judul: Isolasi dan pemilahan mikroba termofil penghasil enzim-enzim ekstraseluler
Abstrak: Penggunaan enzim yang dihasilkan oleh mikroorganisme yang berasal dari lingkungan yang ekstrim seperti suhu yang tinggi (termofil) dan pH yang tinggi (alkalofil) telah berhasil mengatasi keterbatasan penggunaan enzim sebagai biokatalis. Mikroorganisme yang dapat hidup pada lingkungan yang ekstrim banyak terdapat di berbagai wilayah Indonesia. Akan tetapi penelitian mengenai enzim-enzim ekstrim tersebut belum banyak dilakukan di Indonesia. Tujuan dari penelitian ini adalah melakukan isolasi dan pemilahan terhadap mikroorganisme yang diperoleh dari beberapa wilayah di Indonesia yang menghasilkan enzim-enzim ekstraseluler seperti protease, amilase, selulase pada suhu yang tinggi (termofil) dan pH yang tinggi (alkalofil), serta melakukan analisis enzim- enzim yang potensial untuk digunakan di industri. Dalam penelitian digunakan mikroba yang sudah diisolasi dari Kawah Sikidang-Dieng, tanah horison O pada kedalaman 5-15 cm dari hutan tropis Batu Ampar Kalimantan Timur (Streptomyces dan mikroba alkalofil), mikroba dari gigi biawak yang ada di tempat pembiakan di Perumahan Bintaro Jakarta, dan mikroba ekstrim halofilik dari Bledug Kuwu, Grobogan (Jawa Tengah). Selain itu juga dilakukan pengambilan sampel berupa tanah, lumut, dan air, yang berasal dari sumber air panas Pancuran Tujuh di Baturaden, Jawa Tengah. Isolasi mikroba termofil dilakukan mulai suhu 50°C, sedangkan mikroba alkalofil dilakukan pada media Luria Agar (LA) pH 10. Mikroba yang dapat hidup pada suhu 70°C atau lebih ditumbuhkan pada media Thermus. Sedangkan untuk pemilahan (uji selektif) mikroba penghasil enzim protease, selulase, dan amilase ditumbuhkan pada media LA, Yeast and Mold (YM) atau Thermus yang mengandung susu skim 2%, a-selulosa1,2%, atau soluble starch 0,3%. Analisis enzim protease dilakukan dengan metode Bergmeyer et al. (1983) dan analisis enzim amilase dilakukan dengan metode Bernfield (1955). Untuk penentuan berat molekul protein enzim protease, filtrat enzim diendapkan dengan (NH4)2SO4 sebanyak 35% (w/v) dan filtrat enzim yang mengendap dilarutkan lagi dalam buffer universal pH 8. Kemudian dilakukan dialisis dengan metode Harris (1989) menggunakan kantong dialisis ukuran 12.000 D (SIGMA). Penentuan berat molekul enzim protease dilakukan dengan SDS-PAGE dan teknik zimogram. Dari hasil isolasi dan pemilahan mikroba-mikroba termofil dan alkalofil yang menghasilkan enzim protease dan amilase ekstraseluler berdasarkan pembentukan zona bening (halo) dan kemampuan tumbuhnya, diperoleh beberapa isolat yang potensial untuk diteliti lebih lanjut. Isolat-isolat tersebut adalah isolat 40 A yang berasal dari gigi biawak, isolat A3 dan Streptomyces 961-1 yang berasal dari hutan tropis Batu Ampar Kalimantan Timur, dan isolat 2A1PT dan 2A2PT yang berasal dari sumber air panas Pancuran Tujuh Baturaden, Jawa Tengah. Sedangkan dari analisis enzim protease dan amilase terhadap isolat-isolat potensial tersebut diperoleh hasil isolat 40 A menghasilkan enzim protease dengan aktivitas proteolitik yang tinggi, termasuk protease netral, dan mempunyai kisaran suhu optimum yang cukup luas yaitu 45-60°C. Isolat A3 menghasilkan protease yang unik yaitu aktif pada kisaran pH (buffer universal + kasein) yang luas yaitu 5.9-10, dan aktivitas proteasenya sangat tinggi (12,10-18,96 U/mg protein). Isolat 2A1PT dan 2A2PT menghasilkan enzim amilase dengan aktivitas optimum pada suhu 60°C. Isolat 2A1PT menghasilkan enzim protease yang lebih tinggi aktivitasnya dibandingkan dengan isolat 2A2PT. Sedangkan isolat Streptomyces 961-1 menghasilkan enzim protease dan amilase dengan aktivitas yang jauh lebih kecil dibandingkan dengan isolat 40A, A3, dan 2A1PT. Dari hasil penentuan berat molekul enzim protease isolat A3 diperkirakan isolat A3 menghasilkan sekitar enam
Keyword: 

Judul: Implementation of Spatio-Temporal Change Query in Relational Database.
Abstrak: Geographic object changes in various views. Object changes are recorded using a model of static storage. No historical connection between old version data and new version data has been built. For that, a storage model of spatio-temporal queries that can analyze spatio-temporal changes has been developed. The object changes the geometry are grouped according to the taxonomy of Spatio-Temporal Pattern Change. This research has been able to apply the query patterns change including born, expand, merge, contract, split, normal and die. This query based on geometric (area) changes. The implementation of spatio-temporal change queries represents an object changes continuously with easy, change detection is done by comparing two versions of data. Keyword: spatio-temporal change query, spatio-temporal change pattern.
Keyword: