Judul: Activity of Bacillus cereus INT1c and Bacillus thuringiensis SGT3g AHL-Lactonase on Xanthomonas oryzae pv. oryzae and Pseudomonas syringae pv. glycinea Patogenicity Inhibition
Abstrak: Quorum sensing (QS) is a mechanism of communication between bacterial cells mediated by autoinducer (AI) signal molecules and depend on density of bacterial cells. AI is a signal molecules that secreted, accumulated, reabsorbed, and recognized by bacteria to regulate the expressions of target genes. QS on Gram-negative bacteria use N-acyl homoserine lactone (AHL) AI types as signal molecules. The high level of AHL in the cell will be responded by activating cell regulatory protein. Regulatory proteins help the expression of pathogens genes. Xanthomonas oryzae pv. oryzae and Pseudomonas syringae pv. glycinea are phytopatogenic Gram-negative bacteria that perform quorum sensing using Nacyl homoserine lactone (AHL) signal to regulate expression of their patogenicity genes. X. oryzae pv. oryzae causes pustule disease on paddy (Oryzae sativa) and P. syringae pv. glycinea cause leaf blight disease on soybean (Glycine max). One of natural approaches to inactivate their quorum sensing mechanisms was by degrading the signal molecules using AHL-lactonase from Bacillus cereus INT1c and Bacillus thuringiensis SGT3g. This study was conducted to test the ability of B. cereus INT1c and B. thuringiensis SGT3g AHL lactonase activity in degrading AHL to inhibit X. oryzae pv. oryzae and P. syringae pv. glycinea patogenicity. AHL degradation activity had been confirmed in B. cereus INT1c and B. thuringiensis SGT3g using Chromobacterium violaceum as bioindicator with inhibition index 0.23 and 0.12, respectively. Inhibition test by using tobacco plants was used to determine which is the most effective to inhibit phytopatogen in vivo. B. cereus INT1c was more effective to inhibit X. oryzae pv. oryzae patogenicity (85.62%) whereas B. thuringiensis SGT3g was more effective to inhibit P. syringae pv. glycinea pathogenicity, it was up to 90.51%. The highest inhibition activity of B. cereus INT1c was showed in IRBB7 varieties (93.69%) and the lowest was in Kencana Bali varieties (65.65%) on the in vivo test on paddy. Whereas in vivo on soybean test showed that B. thuringiensis SGT3g inhibition activity in Anjasmara and Wilis varieties were not much different, it was 96% and 95,35%, respectively.
Keyword: AHL-lactonase, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, phytopatogen inhibition activity, quorum sensing

Judul: Aktivitas Quorum Quenching Ahl-Laktonase Bacillus Sp. Ntt3a Dan Bacillus Cereus Int1c Terhadap Pseudomonas Syringae
Abstrak: Proses penghambatan Quorum Sensing (QS) dapat dilakukan melalui suatu proses yang disebut Quorum Quenching. Salah satu mekanisme QQ adalah adalah dengan cara degradasi enzimatis untuk mencegah akumulasi senyawa sinyal QS “Asil Homoserin Lakton (AHL)” sehingga gen-gen yang ekspresinya dikendalikan oleh mekanisme QS tidak dapat diekspresikan. Beberapa gen yang ekspresinya dikontrol oleh mekanisme QS diantaranya adalah gen penyandi faktor-faktor virulensi bakteri, sintesis antibiotik, dan beberapa enzim hidrolitik. AHL-laktonase merupakan salah satu enzim QQ yang menghidrolisis cincin lakton pada senyawa AHL. Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas AHL-laktonase Bacillus sp. NTT3a dan B. cereus INT1c serta menguji potensinya sebagai agens biokontrol terhadap P. syringae. Penelitian ini terdiri dari beberapa percobaan yaitu pembuatan kurva pertumbuhan kedua kultur Bacillus, penentuan aktivitas AHL-laktonase terhadap C. violaceum sebagai bioindikator, produksi dan pemekatan AHL-laktonase menggunakan pengendapan amonium sulfat, uji penghambatan swarming motility terhadap P. syringae, bioesei penghambatan patogenisitas P. syringae pada buncis, dan penghitungan populasi P. syringae pada buncis yang busuk menggunakan metode cawan hitung. Pengamatan terhadap pertumbuhan kultur kedua Bacillus tersebut menunjukkan fase lag pada periode 1 jam pertama, dilanjutkan dengan fase log pada periode 2-3 jam setelah inkubasi. Fase stasioner tercapai setelah 15 jam inkubasi. Penentuan aktivitas AHL-laktonase dilakukan dengan cara mengukur zona QQ yang terbentuk disekitar kertas cakram yang mengandung supernatan kultur atau enzim pekat. Hasil pengujian menunjukkan bahwa kedua Bacillus tersebut menghasilkan AHL-laktonase ekstrasel dan intrasel. Pemekatan enzim kasar menggunakan amonium sulfat pada persen saturasi 70% menghasilkan konsentrasi protein tertinggi. Nilai Indeks zona QQ tertinggi diperoleh dari enzim kasar pekat Bacillus sp. NTT3a yang diendapkan pada 60% saturasi amonium sulfat, sedangkan hasil pemekatan enzim kasar B. cereus INT1c tidak menyebabkan terbentuknya zona QQ. Nilai indeks QQ enzim kasar Bacillus sp. NTT3a hasil pemekatan 1.16 kali lebih tinggi dibandingkan supernatannya. Uji aktivitas enzim kasar pekat Bacillus sp. NTT3a hasil pengendapan menggunakan amonium sulfat pada 60% saturasi menghasilkan Indeks zona QQ tertinggi, sedangkan hasil pemekatan enzim kasar B. cereus INT1c tidak ada yang menghasilkan zona QQ. Nilai Index Quorum Quenching (IQQ) enzim kasar Bacillus sp. NTT3a yang telah dipekatkan meningkat 1.16 kali lebih tinggi dibandingkan dengan supernatannya. Aktivitas Quorum Quenching kedua Bacillus menghambat swarming motility P. syringae dan menurunkan pertumbuhan koloni fitopatogen ini. Swarming motility P. syringae pada cawan kontrol mencapai 12.25 mm, sedangkan pada agar cawan agar yang telah diinokulasi Bacillus sp. NTT3a dan B. cereus INT1c P. syringae berturut-turut hanya 3.0 mm dan 3.3 mm. Aplikasi kedua Bacillus tersebut juga dapat mereduksi gejala busuk pada buncis yang disebabkan oleh P. syringae. Rata-rata panjang gejala busuk pada buncis kontrol positif mencapai 6.4 cm sedangkan gejala busuk pada buncis yang telah disemprot Bacillus sp. NTT3a dan B. cereus INT1c terlebih dahulu berturut-turut hanya 4.55 dan 3.92 cm. Data populasi P. syringae menunjukkan adanya penurunan. Penurunan populasi ini diduga disebabkan leh adanya kompetisi nutrisi antara P. syringae dengan kedua Bacillus pada kondisi percobaan yang dilakukan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kedua Bacillus penghasil AHL-laktonase tersebut berpotensi untuk dikembangkan sebagai agen hayati untuk mengendalikan penyakit yang disebabkan oleh Pseudomonas syringae pada buncis.
Keyword: AHL-laktonase, Bacillus cereus INT1c, Bacillus sp, NTT3a, Pseudomonas syringae, Quorum Quenching

Judul: Cycle Hamilton pada Graf Lengkap, Graf Regular, dan Graf 2-Connected 4-Regular Berorder Kurang dari Sepuluh
Abstrak: Suatu graf disebut graf Hamilton apabila graf tersebut memuat cycle Hamilton, yaitu cycle yang melewati setiap vertex tepat satu kali. Menentukan keberadaan cycle Hamilton pada suatu graf dapat menggunakan syarat cukup yang berupa teorema-teorema yang telah diperkenalkan sejak tahun 1950-an. Beberapa syarat cukup yang dibahas dalam karya ilmiah ini adalah syarat cukup yang berhubungan dengan graf lengkap dan graf regular. Suatu graf lengkap berorder 𝑛������ ≥ 3 dan graf r-regular berorder 𝑛������ ≤ 2𝑟������ + 1 merupakan graf Hamilton, Karena kedua graf tersebut memuat cycle Hamilton. Selanjutnya, syarat cukup tersebut digunakan untuk menentukan keberadaan cycle Hamilton pada graf 2-connected 4- regular berorder kurang dari 10.
Keyword: graf Hamilton, graf regular, graf lengkap, graf 2-connected 4-regular