Judul: Aktivitas Antioksidan dan Sitotoksisitas Ekstrak Pigmen yang Berasal dari Bakteri yang Berasosisasi dengan Spons Laut
Abstrak: Poor lifestyle and environmental factors, including free radicals exposure, can cause degenerative diseases. Free radicals such as Reactive Oxygen Species (ROS) are naturally generated in the cells during metabolism. ROS is stabilized by indigenous antioxidants that are naturally present in the cells. Besides indigenous antioxidants, dietary antioxidant intake protects the body from free radicals that can trigger degenerative diseases. One of the antioxidant sources is bio-pigment, which can be produced by plants and microbes, including bacteria. The production of pigment from bacteria has advantages such as faster production and being environmentally friendly. The pigmented bacteria can live in various habitats, including in the oceans. Marine bacteria can form a symbiotic mutualism relationship with other organisms, such as sponges. Bacteria associated with sponges produce secondary metabolites similar to the hosts. The colored body of the sponge is thought to be caused by the presence of the associated pigmented bacteria. Several previous studies have reported various biological activities of pigments produced by bacteria associated with sponges, such as antimicrobial, anticancer, and antioxidant. In this study, isolate AGS112 and SAB E-64 produce yellow-red and bright yellow intracellular pigments, respectively, that might have antioxidant activity. Thus, this study aimed to determine the antioxidant and cytotoxicity activity of pigments derived from marine sponge-associated bacteria, followed by its function in the antioxidative genes expression regulation in the model organism Schizosaccharomyces pombe. This study was initiated by the rejuvenation of 2 bacterial isolates, AGS112 and SAB E-64. AGS112 was identified based on 16S rRNA. Meanwhile, SAB E64 had been identified in previous studies as Kocuria marina, which belongs to the actinobacteria group. Furthermore, the production and extraction of pigment produced by B. haikouensis AGS112 and K. marina SAB E-64 were carried out using chloroform and methanol, respectively. The crude pigment extracts were then analyzed using UV-Vis to determine the maximum wavelength absorption of each pigment, followed by the total phenolic and flavonoid measurements. In addition, the cytotoxicity activity test was carried out using the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) method. The two crude pigment extracts were then fractionated using the Thin Layer Chromatography (TLC) method, followed by bio-autography TLC analysis. The selected active fraction was isolated using the TLC-preparative method. Then, both crude pigment extracts and the active fraction extracts were tested for their antioxidant activity against DPPH radicals. The pigment extract with more potent antioxidant activity was then selected to be analyzed in vivo using model organism S. pombe through oxidative stress response assay (spot assay and TPC method), followed by relative gene expression analysis of sod1 and ctt1 genes using qRT-PCR. The metabolite profiling of the selected active fraction extract was analyzed using Liquid Chromatography Mass-Spectrophotometry (LC-MS). Based on the 16S rRNA gene, AGS112 has the closest similarity to Bacillus haikouensis C-89 (99%). The yields of crude pigment extracts of B. haikouensis AGS112 and K. marina SAB E-64 were 12.57% and 19.7% (w/v), respectively. The BSLT results showed that the LC50 values of each crude pigment extract were <1000 µg/mL that indicated the crude pigment extracts at certain concentrations is classified as cytotoxic compound and may have
Keyword: Antioxidant, DPPH, Pigment, Schizosaccharomyces pombe, Sponge-associated bacteria

Judul: Potency of Bacterial Yellow Pigment Extract as a Source of Natural Antioxidants
Abstrak: Keanekaragaman yang dimiliki oleh mikrob dapat menghasilkan berbagai senyawa metabolit sekunder yang unik dan menunjukkan perannya dalam bidang industri dan farmakologi. Penggunaan metabolit sekunder seperti pigmen bakteri saat ini menarik perhatian untuk diteliti, karena pigmen bakteri memiliki banyak keunggulan baik dalam produksi maupun aktivitasnya. Bakteri penghasil pigmen dapat ditemukan di berbagai habitat mulai dari laut hingga tanah rizosfer. Pigmen yang disintesis oleh bakteri pada habitat tertentu merupakan bentuk mekanisme adaptasi sel bakteri untuk kelangsungan hidup di dalam habitatnya. Bakteri dapat memproduksi berbagai jenis pigmen seperti melanin, prodigiosin, pyocyanin, violacein, karotenoid, dan lain-lain. Pigmen bakteri telah banyak dilaporkan memiliki aktivitas biologis termasuk antioksidan, antimikroba, antikanker, dan sun protection. Penelitian sebelumnya telah berhasil mengisolasi bakteri penghasil pigmen kuning yang berasal dari tanah rizosfer dan bakteri yang berasosiasi dengan spons. Pigmen dari beberapa bakteri tersebut diduga memiliki potensi sebagai antioksidan. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan menentukan aktivitas antioksidan secara in vitro dari ekstrak pigmen kuning bakteri dan dilanjutkan pada khamir Schizosaccharomyces pombe ARC039 yang digunakan sebagai organisme model. Penelitian ini diawali dengan meremajakan dan mengekstraksi pigmen kuning dari 14 isolat bakteri menggunakan pelarut metanol. Ekstrak yang diperoleh kemudian ditentukan aktivitas antioksidannya menggunakan radikal DPPH. Dua isolat yang memiliki aktivitas antioksidan terbaik diidentifikasi berdasarkan gen 16S rRNA dan kemudian dipilih untuk dianalisis lebih lanjut terkait aktivitas antioksidannya berdasarkan pelarut ekstraksi dan radikal yang berbeda. Ekstrak dari pelarut yang memiliki aktivitas antioksidan terbaik dipilih untuk dilakukan fraksinasi dengan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan dilanjutkan bioautografi antioksidan. Fraksi aktif yang diperoleh dari uji bioautografi antioksidan kemudian diisolasi menggunakan metode KLT preparatif. Fraksi aktif tersebut kemudian ditentukan aktivitas antioksidannya terhadap radikal DPPH dan ABTS. Ekstrak kasar pigmen dan fraksi aktif terpilih kemudian diuji pada level seluler menggunakan organisme model S. pombe ARC039 untuk mengetahui respon toleransi khamir terhadap cekaman oksidatif (H2O2) dan aktivitas mitokondrianya. Selanjutnya, senyawa metabolit yang terkandung dalam fraksi aktif terpilih dianalisis menggunakan liquid chromatography massspectrophotometry (LC-MS/MS). Analisis aktivitas antioksidan dari 14 isolat bakteri penghasil pigmen kuning menunjukkan bahwa isolat SAB E-3 dan SAB E-6 memiliki aktivitas antioksidan terbaik dalam meredam radikal DPPH. Hasil identifikasi berdasarkan gen 16S rRNA menunjukkan bahwa SAB E-3 memiliki kemiripan dengan Pseudomonas oryzihabitans IAM 1568 (99,37%) dan SAB E-6 memiliki kemiripan dengan Micrococcus aloeverae AE-6 (98,18%). Kedua isolat tersebut kemudian diekstraksi menggunakan beberapa pelarut organik untuk mengetahui pengaruh pelarut ekstraksi terhadap aktivitas antioksidan. Ekstrak kasar pigmen dari kedua isolat yang diekstraksi menggunakan metanol mengandung senyawa fenolik dan flavonoid tertinggi yang mungkin berkontribusi terhadap aktivitas antioksidan. Selain itu, berdasarkan analisis UV-Vis, kedua ekstrak kasar pigmen yang dihasilkan oleh masing-masing bakteri diduga sebagai karotenoid. Ekstrak kasar pigmen dari P. oryzihabitans SAB E-3 dan M. aloeverae SAB E-6 yang diekstraksi menggunakan metanol memiliki aktivitas antioksidan terbaik dalam meredam radikal DPPH dengan nilai IC50 masing-masing sebesar 190,73 µg/mL dan 248,14 µg/mL, sedangkan aktivitas antioksidan terhadap radikal ABTS memiliki nilai IC50 masing-masing sebesar 187,71 µg/mL dan 983,79 µg/mL. Oleh sebab itu, kedua ekstrak ini dipilih untuk dilakukan fraksinasi dan dilanjutkan uji bioautografi. Hasil analisis bioautografi menunjukkan bahwa ekstrak P. oryzihabitans SAB E-3 memiliki lima fraksi aktif dan M. aloeverae SAB E-6 memiliki tiga fraksi
Keyword: Antioksidan, LC-MS/MS, ekstrak pigmen kuning, KLT, S. pombe

Judul: Disain dan Ujicoba Mesin Pendingin Tipe Terowongan Angin
Abstrak: Mesin pendingin tipe terowongan angin terdiri dari mesin kompresor dan kondesor, biower, evaporator dan terowongan angin. Udara dihembuskan blower, mengalir melewati evaporator sampai komoditi melalui terowongan angin. Karena menyinggung evaporator inilah suhu udara turun.
Keyword: