Judul: Identifikasi dan Kloning Gen CalBsyn ke dalam Plasmid pJ912-AGα-RFP di Escherichia coli
Abstrak: Sistem tampilan permukaan khamir telah menjadi teknik yang semakin popular untuk rekayasa protein dan pembuatan pustaka protein. Protein heterolog yang ditampilkan pada permukaan sel khamir diekspresikan dalam bentuk fusi dengan suatu protein penahan atau protein permukaan. Protein CALB (Candida antratica Lipase B) yang disandikan oleh gen sintetik CalBsyn dapat ditingkatkan efektivitasnya melalui ekspresi pada permukaan sel khamir. Plasmid pJ912-AGα- RFP mengandung gen penyandi protein permukaan, AGα (Agglutinin-α) dan gen penyandi protein penanda ekspresi, RFP (Red fluorescent protein). Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh konstruksi vektor pJ912-AGα-RFP-CalBsyn untuk ekspresi protein CALB rekombinan pada permukaan sel khamir Pichia pastoris melalui kloning gen CalBsyn ke dalam plasmid pJ912-AGα-RFP pada Escherichia coli. Gen CalBsyn tanpa sinyal sekresi natifnya diperoleh dari plasmid pJ912- CALB melalui amplifikasi PCR menggunakan pasangan primer mCalB-Sal-F dan mCalB-His-Sal-R. Gen mCalBsyn yang diperoleh berukuran panjang 1004 bp. Baik gen mCalBsyn maupun plasmid pJ912-AGα-RFP dipotong dengan enzim restriksi SalI, kemudian diligasi dan ditransformasi ke dalam E. coli dengan metode kejut panas. Transformasi menghasilkan 11 koloni transforman putatif yang selanjutnya dipurifikasi menjadi koloni-koloni tunggal. Analisis PCR dengan primer AOX1-F dan mCalB-His-Sal-R menunjukkan adanya 34 koloni tunggal dari klon yang dianalisis terindikasi positif membawa plasmid rekombinan pJ912-AGα-RFPCalBsyn.
Keyword: agglutinin-α, Candida antartica Lipase B, sistem tampilan permukaan khamir, Pichia pastoris

Judul: Delesi Sinyal Sekresi Gen CalBsyn dalam Plasmid pGAPZα-proCalBsyn-egfp melalui Teknik Mutagenesis Terarah.
Abstrak: ProCalBsyn merupakan gen penyandi Candida antartica lipase B yang dibuat secara sintetik dalam plasmid pGAPZα-proCalBsyn-egfp (4839 bp). Sekuen proCalBsyn masih mengandung sinyal sekresi native (ss-CalBsyn), sementara plasmid pGAPZα memiliki sinyal sekresi mating-factor-α.(MFα). Tujuan dari penelitian ini adalah mendelesi sinyal sekresi ss-CalBsyn, mengintroduksi situs EcoRI serta transformasi plasmid mutan ke E.coli TOP10F’. Delesi ss-CalB dilakukan dengan teknik mutagenesis terarah melalui proses PCR. Sepasang primer F-mCalB dan R-mCalB serta high-fidelity DNA-polymerase G-Hifi digunakan untuk amplifikasi. Hasil amplifikasi PCR diperoleh plasmid mutan berupa DNA linear berukuran 4780 bp. Setelah direstriksi dengan enzim EcoRI dan ligasi, plasmid mutan ditransformasikan kembali ke E.coli. Transformasi menghasilkan lebih dari 60 koloni transforman. Analisis PCR menunjukkan 3 dari 9 klon hasil isolasi plasmid yang dianalisis terindikasi membawa plasmid mutan yaitu klon 7, 19 dan 20. Ketiga klon tersebut menunjukkan adanya pita gen mCalBsyn (970 bp).
Keyword: mutagenesis terarah, mutasi delesi, sinyal sekresi native CalB, proCalBsyn, plasmid pGAPZα

Judul: Impact Of water policy on poverty reduction and women roles in water management In Zimbabwe
Abstrak: Water management is a key factor in the battle to remove the scourge of extreme poverty and to build secure and prosperous lives for people in the developing world. The water sector in Zimbabwe is complicated by the large number of actors; it is interwoven within various ministries. The research used secondary data and review of literature to evaluate how the current water policy has contributed towards marginalising women and the poor. It looked at how actors can also marginalise or put other actors at risk thereby undermining their role through prioritisation of certain projects, stakeholder participation and usage policy. From a descriptive analysis it is found that women are further relegated and marginalised. The poor are further impoverished through marginalisation and vulnerability. The policy environment favours business and state interests against those of grassroots actors and women. It recommends the establishment of home grown pro- poor water management strategies.
Keyword: