Judul: Optimasi produksi dan karakterisasi protease dari isolat 9b3 (bacillus circulans)
Abstrak: Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui kondisi optimal produksi protease dari isolat 9b3 (Bacillus circulans), yang meliputi jenis media, pH awal media, dan waktu inkubasi optimal serta upaya pemisahannya. Disamping itu dalam penelitian ini juga dikaji beberapa karakteristik protease yang diproduksi meliputi pengaruh aktifitas enzim terhadap perubahan pH dan suhu, stabilitas panas enzim, dan penentuan tetapan kinetika reaksi Michaelis-Menten (KM). Media yang digunakan untuk memproduksi protease dari isolat 963 (Bacillus circulans) adalah media sintetis dan alami yang mengandung protein. Kasein 1% dan bekatul 10% dengan kadar protein total 9,19% digunakan sebagai sumber protein pada media sintetis. Media alami yang digunakan adalah limbah cair hunkwe, air rendaman kedelai, dan limbah cair tahu dengan kadar protein masing-masing sebesar 8,28; 2,05; dan 2,36%. Aktifitas protease yang dihasilkan dari fermentasi dengan media sintetis cenderung rendah karena sintesis protease terepresi oleh adanya glukosa. Aktifitas protease tertinggi yaitu 0,220 U/ml dihasilkan dari fermentasi selama 64 jam dengan media alami air rendaman kedelai dengan pH awal 10. Untuk mendapatkan perlakuan pemurnian terbaik dengan teknik salting out, dilakukan percobaan pengendapan protein enzim pada berbagai konsentrasi garam amonium sulfat, yaitu 20, 40, 60, dan 80% jenuh. Konsentrasi amonium sulfat yang menghasilkan tingkat pemurnian tertinggi (2,52 kali) adalah 60 % jenuh.. Pengaruh aktifitas terhadap perubahan pH diuji dengan terlebih dahulu mengukur aktifitas protease pada pH 8. Bila pH diturunkan menjadi 7,6 maka aktifitas mengalami penurunan sebesar 8,98%. Jika pH dinaikkan menjadi 8,4 maka aktifitas mengalami kenaikkan cukup tinggi, yaitu mencapai 37,45 %. Dengan demikian protease tersebut merupakan protease alkalis, seperti protease dari Bacillus pumillus yang optimum pada pH 8 (Satiawihardja, et. al., 1997) serta protease dari B. licheniformis yang optimum pada pH 9,010,0 (Laksmi dan Tedjokusumo, 1994). Pengaruh perubahan suhu inkubasi terhadap aktifitas protease diuji dengan membandingkan aktifitas protease pada suhu 37, 47, dan 57 °C. Peningkatan suhu inkubasi dari 37 °C hingga 57 °C akan semakin meningkatkan aktifitas protease sebesar 77,23%. Hal ini mendekati suhu optimum protease B. licheniformis pada 50°C (Laksmi dan Tedjokusumo, 1994) tetapi berbeda dengan protease dari B. panilus yang memiliki aktifitas tertinggi pada suhu 37°C (Satizwihardja, et al. 1997) Untuk menguji pengaruh suhu dan waktu inkubasi terhadap aktifitas protease digunakan suhu 37 dan 57°C. Pada suhu 57 °C, inkubasi selama 30 dan 50 menit berakibat kehilangan aktifitas protease yang cukup besar, yaitu sebesar 49,81 dan 71,56 %. Bila inkubasi dilakukan pada suhu 37 °C selama 20 dan 30 menit berakibat hilangnya aktifitas protease sebesar 18,52 dan 20,63 %. Hal ini menunjukkan ketahanan enzim terhadap panas sangat rendah bila dibandingkan dengan protease dari B. licheniformis yang masih memiliki 77% aktifitasnya setelah pemanasan selama 60 menit pada pH dan suhu optimumnya. Tetapan Michaelis-Menten (KM) ditentukan dengan mengukur aktifitas protease pada berbagai konsentrasi substrat kasein, yaitu 0,25; 0,5; 1; 1,5; 2; dan 2,5%. Nilai Ku yang diperoleh adalah 0,4913 terhadap substrat kasein dengan kecepatan maksimum (Vmaks) sebesar 0,1411 U/ml, tidak jauh berbeda dibandingkan protease dari B. licheniformis yang memiliki K, sebesar 0,57 terhadap substrat kasein (Suhartono, 1990).
Keyword: 

Judul: Karakterisasi protease baru dari baru dari beberapa isolat vibrio sp. asal laut
Abstrak: Protease merupakan biokatalisator yang memiliki nilai komersial yang tinggi. Protease mikroba memiliki potensi yang cerah untuk terus dikembangkan dalam rangka suplai kebutuhan protease yang terus meningkat. Produsen protease mikroba yang telah banyak diteliti dan dikembangkan adalah kapang dan bakteri gram positif. Sebenarnya beberapa bakteri gram negatif telah dilaporkan memiliki kemampuan proteolitik. Akan tetapi, protease dari bakteri gram negatif asli Indonesia belum banyak diteliti dan dikembangkan. Dari golongan Vibrio sp. yang berasal dari perairan laut Jawa Timur diharapkan diperoleh protease-protease baru dengan sifat-sifat yang menguntungkan. Seleksi awal mikroba penghasil protease ekstraselular dari sebanyak 54 isolat Vibrio sp. dilakukan dengan membandingkan nilai Indeks Proteolitik (IP) sehingga ditetapkan sepuluh isolat potensial yang memiliki nilai IP tertinggi. Seleksi lanjutan dilakukan dengan menentukan aktivitas kaseinolitik dari ekstrak kasar enzim yang diproduksi oleh kesepuluh isolat potensial tersebut. Dari tahap ini ditetapkan empat isolat terpilih yang memiliki aktivitas tertinggi yaitu: W4.3B, S9.4P, W4.2B dan W3.6B. Karakterisasi protease dilakukan terhadap ekstrak kasar enzim yang dihasil- kan oleh keempat isolat terpilih. Enzim-enzim ini aktif pada kondisi alkali dengan aktivitas optimum pada pH 8. Suhu optimum untuk aktivitas kaseinolitiknya berkisar antara 50-60°C. Enzim-enzim tersebut bersifat relatif stabil terhadap pemanasan pada suhu 50°C, bahkan untuk isolat S9.4P dan W3.6B aktivitas tersisa setelah pemanasan selama 60 menit masih melebihi setengah dari aktivitas awal. EDTA (1, 5, 10 mM) menunjukkan efek penghambatan yang lebih kuat di- bandingkan dengan PMSF/ fenilmetilsulfonil fluorida (1, 5, 10 mM). Penghambatan oleh EDTA maksimal pada taraf konsentrasi 1 mM untuk protease dari isolat $9.4P, W4.2B dan W3.6B serta taraf konsentrasi 5 mM untuk protease dari W4.3B sehing- ga aktivitas yang tersisa berturut-turut 24.45%, 21.95%, 39.68% dan 45.41%. Penghambatan oleh PMSF maksimal hanya menyebabkan penurunan hingga aktivitas tersisa sebesar 66.58% (taraf konsentrasi 5 mM) untuk protease dari isolat W4.3B sedangkan untuk yang lain sebesar 86.09% (S9.4P), 65.87% (W4.2B) dan 71.18% W3.6B) pada taraf konsentrasi 10 mM. ( Pada percobaan penambahan ion logam dalam bentuk garam kloridanya (2 mM) langsung terhadap ekstrak kasar enzim, protease dari isolat W4.3B meningkat aktivitasnya dengan penambahan ion logam Zn dan K masing-masing sebesar 59.61 % dan 58.64%. Protease dari isolat S9.4P sedikit meningkat aktivitasnya dengan penambahan ion Ca dan Co masing-masing sebesar 22.46% dan 22.21%, begitu juga dengan protease dari isolat W3.6B yang meningkat aktivitasnya sebesar 26.48% dan 35.00% karena penambahan ion Zn dan Mg. Penambahan ion logam relatif tidak berpengaruh pada protease dari isolat W4.2B. Penambahan beberapa ion logam dalam benuk garam kloridanya (2mM) pada ekstrak kasar enzim yang telah dihambat dengan EDTA (1 mM) menunjukkan terjadinya pemulihan aktivitas. Terlihat pula adanya pengaruh kombinasi ion logam ter- hadap fenomena pemulihan aktivitas tersebut. Aktivitas protease tersisa setelah penghambatan oleh EDTA untuk masing-masing isolat sebagai berikut: 34.60% (W4.3B), 30.66% (S9.4P), 32.51% (W4.2B), dan 39.97% (W3.6B). Aktivitas pro- tease dari isolat W4.3B setelah ditambah ion logam adalah 78.48% (Ca), 110.24% (Zn), 122.59% (Ca, Zn), 19.83% (K) dan 44.24% (Na). Untuk isolat S9.4P sebagai berikut: 83.75% (Ca), 65.86% (Zn), 96.40% (Ca, Zn), 92.39% (Co). Sedangkan pada isolat W4.2B adalah 79.15% (Ca), 89.41% (Zn), 92.95% (Ca, Zn). Dan pada isolat yang terakhir, W3.6B, sebagai berikut: 90.09% (Ca), 77.96% (Zn), 116.93%
Keyword: 

Judul: Tree berdiameter lima adalah graceful
Abstrak: This manuscript presents some proofs that every tree of diameter five is graceful. A graceful tree is a graph which has a graceful labelling. This labelling assigns absolute difference of connected vertices, such that the resulting edge labels are mutually distinct. There are three theorems to be considered. First theorem proves that every tree of diameter four is graceful. Second theorem proves that every tree of diameter five is graceful or nearly graceful. The third theorem improves the second theorem and shows that every tree of diameter five is nearly graceful, which can be transformed into graceful using some certain patterns.
Keyword: Graf, Pelabelan graceful, Bogor Agricultural University, Institut Pertanian Bogor, IPB