Judul: Validasi Metode Deteksi Alergen Kedelai dan Aplikasinya dalam Pengembangan Isolat Protein Kedelai dan Susu Kedelai Hipoalergenik
Abstrak: Alergi pangan merupakan reaksi imunologi yang diperantarai oleh imunoglobulin E dan disebabkan oleh alergen yang berupa protein. Kedelai merupakan salah satu dari delapan jenis kelompok pangan yang dapat menyebabkan alergi. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa kedelai merupakan penyebab utama alergi pada anak maupun orang dewasa di berbagai negara. Ratarata penderita alergi kedelai menunjukkan reaksi alergi setelah mengkonsumsi 10 mg kedelai. Untuk mendeteksi jumlah yang sedikit tersebut, dibutuhkan metode analisis yang sensitif dan akurat. Metode yang paling sering digunakan adalah ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) dalam bentuk kit, karena praktis dan dapat menghitung alergen spesifik kedelai. Kit ELISA yang beredar di pasaran cenderung mahal, sehingga diharapkan pengembangan metode ELISA menggunakan serum penderita alergi kacang dapat dijadikan alternatif yang lebih murah. Kedelai adalah bahan pangan nabati yang mengandung protein tinggi (±35%), sehingga sering dijadikan alternatif asupan protein bagi anak-anak penderita alergi susu sapi, penderita lactose intolerance, dan kaum vegetarian. Produksi kedelai terus meningkat setiap tahunnya. Peningkatan kesadaran masyarakat pada sifat fungsional kedelai menjadi faktor pendorong peningkatan konsumsi kedelai. Hal-hal tersebut dapat meningkatkan resiko alergi kedelai. Untuk mengurangi resiko tersebut, saat ini banyak dikembangkan teknologi proses untuk memodifikasi struktur protein menjadi hipoalergenik. Salah satu diantaranya adalah teknologi hidrolisis protein enzimatik yang dianggap efektif dalam menurunkan alergenitas kedelai namun dapat menimbulkan rasa pahit. Berdasarkan penelitian terdahulu, enzim papain diketahui dapat menurunkan alergenitas protein kedelai dan mampu meminimalkan rasa pahit. Penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi kinerja metode ELISA untuk pengujian alergenisitas isolat protein kedelai dengan menggunakan serum penderita alergi kacang, mengkarakterisasi sifat kimia protein isolat protein kedelai (IPK), hidrolisat IPK, susu kedelai, dan hidrolisat susu kedelai dengan elektroforesis SDS-PAGE, menguji reaktivitas imunologi protein susu kedelai, hidrolisat IPK, dan hidrolisat susu kedelai secara kualitatif dengan imunoblotting dan secara kuantitatif dengan ELISA, serta mengoptimasi proses hidrolisis untuk mendapatkan hidrolisat susu kedelai hipoalergenik. Metode ELISA menggunakan serum penderita alergi kacang untuk menguji alergenitas protein kedelai adalah metode yang valid. Metode ini memiliki limit deteksi sebesar 0.41 μg/mL dan limit kuantifikasi sebesar 1.37 μg/mL dengan akurasi dan presisi yang baik. Profil berat molekul IPK berkisar antara 21.1-148 kDa. Hidrolisat IPK (HCl 8 N selama 4 jam) memiliki berat molekul 21.1-49.7 kDa. Hidrolisat IPK (papain 6% selama 1 jam) memiliki berat molekul dibawah 25 kDa. Profil berat molekul susu kedelai GMO (Tiga Roda Super) berkisar antara 18.4-105.8 kDa dan kedelai susu non-GMO (lokal varietas Galunggung) berkisar antara 12.6-124.1 kDa. Hidrolisat susu kedelai GMO dan non-GMO memiliki berat molekul dibawah 12.6 kDa. Hidrolisat IPK asam (HCl 8N) selama 4 jam masih dapat membentuk 1 pita alergen (26.6 kDa/Gly m Bd 28 K). Hidrolisat IPK enzimatik (papain 6% w/w) selama satu jam tidak terbentuk pita alergen. Terdapat 6 pita protein alergen pada susu kedelai GMO dan 9 pita protein alergen pada susu kedelai non-GMO. Perlakuan hidrolisis dengan papain 6% (w/w) selama 45 menit pada suhu 500C mampu menurunkan alergenitas susu kedelai yang ditandai dengan tidak terbentuknya pita alergen pada hasil immunoblotting dan penurunan nilai OD ELISA. Perlakuan hidrolisis papain 5.55% (w/w) selama 37.47 menit pada suhu 55.790C dapat menghasilkan hidrolisat susu kedelai non-GMO dengan resiko alergi rendah dan dapat diterima secara organoleptik. Metode ELISA menggunakan serum
Keyword: alergen, ELISA, hidrolisis, kedelai, papain

Judul: Glikasi Isolat Protein Kedelai Berbagai Varietas Dengan Laktosa Dalam Upaya Menurunkan Alergenisitas
Abstrak: Isolat protein kedelai (IPK) adalah salah satu produk dari kedelai yang memiliki sifat fungsional yang baik sehingga banyak digunakan oleh industri pangan sebagai bahan formulasi berbagai makanan dan minuman. Glikasi banyak dilakukan untuk meningkatkan fungsionalitas protein dan mengurangi alergenisitas. Penelitian ini bertujuan menentukan derajat glikasi berbasis konjugat IPK-laktosa, amino bebas, dan laktosa serta mengetahui profil berat molekul dan alergenisitas IPK dan konjugat IPK-laktosa. Isolat protein diperoleh dengan metode pengaturan pH. Glikasi IPK dengan laktosa dilakukan dalam kondisi pH 9.5 dan suhu 95 °C selama 0, 30, 60, dan 90 menit. Lama waktu inkubasi optimum ditentukan berdasarkan pada selang waktu inkubasi yang menunjukkan derajat glikasi tertinggi. Sampel yang digunakan adalah kedelai impor (GMO dan non-GMO) dan kedelai lokal (Anjasmoro, Detam-1, dan Grobogan). Penentuan derajat glikasi pada produk konjugat IPK-laktosa dilakukan menggunakan beberapa basis pengukuran diantaranya adalah berdasarkan basis metode TBA, analisis HPLC, dan analisis Bradford. Profil berat molekul protein dianalisis menggunakan elektroforesis SDS-PAGE. Alergenisitas IPK dan konjugat IPK-laktosa dianalisis menggunakan ELISA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin lama waktu inkubasi maka semakin besar pula derajat glikasi yang dihasilkan. Peningkatan derajat glikasi berlangsung signifikan selama 60 menit waktu inkubasi. Hasil elektroforesis SDS-PAGE menunjukkan profil berat molekul IPK Detam-1 berkisar antara 11.8-170.2 kDa. Profil berat molekul IPK GMO, non-GMO, Anjasmoro, dan Grobogan secara berturut-turut yaitu berkisar antara 11-147.7 kDa, 12.9-150.3 kDa 11.3-144.2 kDa, dan 10.7-159.0 kDa. Perlakuan glikasi dengan laktosa selama inkubasi pada suhu 95 °C dapat menghilangkan ataupun menurunkan intensitas pita protein yang diduga merupakan protein alergen mayor pada kedelai yaitu Gly m Bd 60K, Gly m Bd 30K atau P34, dan Gly m Bd 28K. Hal ini menunjukkan telah terjadi perubahan struktur protein yang diduga sebagai alergen mayor pada kedelai. Adanya perubahan struktur pada protein tersebut maka perlakuan glikasi memiliki potensi dalam menurunkan alergenisitas pada IPK. Reaktivitas imunologi hasil uji ELISA menunjukkan perlakuan glikasi selama 60 menit pada suhu 95 °C dapat menurunkan nilai optical density (OD) konjugat IPK-laktosa yang menandakan penurunan alergenisitas IPK berbagai varietas meskipun tidak dapat menghilangkannya secara menyeluruh.
Keyword: derajat glikasi, isolat protein kedelai (IPK), konjugat IPK-laktosa, penurunan alergenisitas

Judul: Tree berdiameter lima adalah graceful
Abstrak: This manuscript presents some proofs that every tree of diameter five is graceful. A graceful tree is a graph which has a graceful labelling. This labelling assigns absolute difference of connected vertices, such that the resulting edge labels are mutually distinct. There are three theorems to be considered. First theorem proves that every tree of diameter four is graceful. Second theorem proves that every tree of diameter five is graceful or nearly graceful. The third theorem improves the second theorem and shows that every tree of diameter five is nearly graceful, which can be transformed into graceful using some certain patterns.
Keyword: Graf, Pelabelan graceful, Bogor Agricultural University, Institut Pertanian Bogor, IPB