Judul: Ekspresi dan Purifikasi Protein Inti Virus Hepatitis B (HBcAg) pada Inang Escherichia coli.
Abstrak: Hepatitis merupakan suatu peradangan pada organ hati yang dapat disebabkan oleh gaya hidup yang kurang baik, kelainan sistem kekebalan tubuh, dan infeksi mikroorganisme termasuk virus. Terdapat beberapa jenis hepatitis, yaitu hepatitis A, B, C, D, E, dan G. Hepatitis B merupakan salah satu jenis hepatitis yang berbahaya karena efek jangka panjangnya dapat menyebabkan sirosis dan kanker hati. Penyakit hepatitis B tersebar di seluruh dunia dan negara berkembang seperti Indonesia memiliki angka kejadian yang tinggi. Virus hepatitis B memiliki dua protein struktural, yaitu hepatitis B surface antigen (HBsAg) dan hepatitis B core antigen (HBcAg). HBsAg, anti-HBs, HBcAg, dan anti-HBc pada serum darah merupakan beberapa penanda serologi pada infeksi hepatitis B dan digunakan untuk diagnosa tingkat keparahan infeksi. Protein HBcAg memiliki imunogenisitas yang tinggi dan berpotensi untuk dikembangkan menjadi vaksin terapeutik bagi penyakit hepatitis B kronis. Keragaman genetik dari virus berperan penting dalam pengembangan terapi yang lebih efektif. Virus hepatitis B memiliki keragaman genetik yang tersebar secara khas di dunia. Virus hepatitis B subgenotipe B3 merupakan tipe virus hepatitis B yang dominan di Indonesia khususnya di pulau Jawa. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mensintesis protein HBcAg virus hepatitis B subgenotipe B3 pada inang Escherichia coli sebagai kontribusi terhadap pengembangan vaksin terapeutik hepatitis B di Indonesia. Ekspresi protein rekombinan HBcAg menghasilkan produk berupa protein fusi (Thioredoxin–His(6)tag–HBcAg). Plasmid pET32a-HBcAg diintroduksikan ke E. coli BL21 (DE3) pLysS. Konfirmasi keberhasilan transformasi dilakukan menggunakan seleksi antibiotik, PCR koloni, pemotongan gen dengan enzim restriksi, dan sekuensing nukleotida. Transforman ditumbuhkan pada media Luria- Bertani (LB) yang mengandung antibiotik ampisilin dengan agitasi. Induksi ekspresi protein rekombinan HBcAg dilakukan dengan penambahan isopropyl-β- D-thiogalactopyranoside (IPTG). Lisis sel dilakukan menggunakan metode bekucair yang dilanjutkan dengan sonikasi. Protein fusi yang dihasilkan dipurifikasi menggunakan kromatografi afinitas logam dengan resin TALON® Clontech. Bobot molekul protein fusi diperkirakan menggunakan perangkat lunak DNAMAN versi 9 dan dianalisis menggunakan Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE), analisis dot-blot, dan analisis western-blot. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa protein HBcAg berhasil diekspresikan dengan pada inang E. coli (DE3) pLysS dalam bentuk protein fusi yang soluble dengan bobot molekul sekitar 38.5 kDa. Ekspresi protein rekombinan optimum dengan penambahan 0.3 mM IPTG dan purifikasi optimum dilakukan menggunakan larutan buffer pH 8.
Keyword: protein inti, hepatitis B, subgenotipe B3, protein terapeutik

Judul: Imunogenisitas Kandidat Vaksin Oral Lactococcus lactis Rekombinan HBcAg dan IFNα-2b untuk Pencegahan Hepatitis B.
Abstrak: Hepatitis merupakan peradangan pada organ hati yang disebabkan infeksi virus, dan dapat memicu kondisi akut dan kronis. Virus Hepatitis B merupakan penyebab utama sirosis dan kanker hati di wilayah endemik, terutama Indonesia. Virus Hepatitis B subgenotipe B3 merupakan jenis virus yang banyak tersebar di Indonesia, dan memiliki dua protein struktural utama yaitu HBsAg dan HBcAg. Antigen inti Hepatitis B (HBcAg) dilaporkan sebagai komponen virus yang bersifat antigenik, dapat menginduksi sel T dan sel B spesifik yang tinggi dibandingkan HBsAg. Rekombinan HBcAg sudah dikembangkan sebagai kandidat vaksin oral di dalam vektor ekspresi Lactococcus lactis NZ3900. IFNα- 2b merupakan protein imunomodulator terhadap sistem imun adaptif yang sudah disetujui sebagai agen terapeutik untuk penyakit hepatitis B. Kebutuhan protein IFNα-2b untuk penanganan penyakit hepatitis cukup tinggi, maka sediaan protein rekombinan IFNα-2b dikembangkan di dalam vektor L. lactis pNZ8148 untuk dapat digunakan dalam sediaan vaksin oral. Kombinasi kedua protein tersebut diharapkan dapat menghasilkan respon antibodi yang lebih tinggi. Penelitian ini bertujuan menganalisis ekspresi protein rekombinan IFNα-2b yang sudah dikonstruksi menggunakan validasi western blot. Reaksi imunogenisitas dari kandidat vaksin L. lactis rekombinan HBcAg dan IFNα-2b diuji secara in vivo pada mencit Balb/c betina. Respon antibodi yang terbentuk dianalisis menggunakan ELISA, dan jenis imunoglobulin yang ada di dalam serum dianalisis menggunakan MagPix®. Protein rekombinan IFNα-2b pada L. lactis NZ3900 berhasil diekspresikan secara ekstraseluler melalui purifikasi kromatografi filtrasi gel, yang tervalidasi positif dengan anti- IFNα-2b pada ukuran 19 kDa. Imunisasi yang diberikan pada hewan uji menghasilkan respon imun humoral (IgG) total yang optimal di hari ke- 35 dengan rataan konsentrasi 4.96±1.03 mg/ml. Perlakuan tunggal dengan HBcAg menghasilkan respon IgG total lebih tinggi dibandingkan dengan kombinasi menggunakan IFNα-2b. Imunisasi oral menggunakan L. lactis rekombinan HBcAg mempertahankan imunitas mukosal dengan terbentuknya konsentrasi IgA yang lebih tinggi dibandingkan kontrol sampai hari ke-51. Ekspresi IgA yang tinggi mengindikasikan bahwa tingkat stress pada hewan uji rendah, karena stress menghasilkan persinyalan untuk produksi hormon yang dapat menekan ekspresi IgA. Penggunaan L. lactis rekombinan pada penelitian ini mendemonstrasikan bahwa pemberian imunisasi peroral dapat meningkatkan imunitas mukosal, tidak menimbulkan stress pada hewan uji. Sediaan kandidat vaksin bersifat aman karena tidak menghasilkan penurunan berat badan, tidak menghasilkan kerusakan jaringan hati hingga terjadi nekrosis, dan tidak terdapat kelainan pada organ limpa.
Keyword: HBcAg, IFNα-2b, IgA, L. lactis, vaksin oral

Judul: Tata tanaman pesanggrahan tamansari Yogyakarta periode tahun 1765-1812
Abstrak: Pesanggrahan Tamansari adalah taman yang dibangun pada tahun 1758-1765 M. Tata tanaman Pesanggrahan Tamansari Yogyakarta mengungkapkan keindahan dan sekaligus suatu misteri atau pertanyaan yang belum terjawab mengenai fungsi tanaman, susunan, dan lain-lain. Semua keindahan dan misteri masa. silam akan pupus bila tidak ada penggalian karya sejarah. Untuk itu diperlukan suatu penelitian tata tanaman Pesanggrahan Tamansari. Tujuan umum penelitian ini adalah mempelajari dan meneliti sejarah Pesanggrahan Tamansari dilihat dari segi tata tanamannya. Tujuan khusus penelitian ini adalah untuk mengetahui jenis tanaman; untuk menerangkan fungsi fisik, ekonomi, sosial budaya tanaman; untuk mengetahui susunan, komposisi dan tata letak tanaman; dan untuk menerangkan fungsi fisik, ekonomi, sosial budaya dari susunan, komposisi dan tata letak tanaman. Dari hasil penelitian didapatkan bahwa lansekap Pesanggrahan Tamansari dan pola utama tata tanamannya adalah simetris. Pola simetris Pesanggrahan Tamansari disesuaikan dengan pola simetris penataan lingkungan Kraton. Hal itu merupakan akibat dari pengaruh kuat Eropa pada kurun waktu abad ke-18...
Keyword: