Judul: Optimasi Produksi Protein Rekombinan Human Interferon α-2a Fusi dan Non Fusi yang Diproduksi dalam Pichia pastoris.
Abstrak: Protein Interferon α-2a manusia (hIFNα-2a) merupakan protein sitokin yang banyak digunakan sebagai obat hepatitis dan terapi kanker. Teknik fusi protein hIFNα-2a menghasilkan produk degradasi akibat adanya aktivitas protease, sehingga perlu dilakukan analisis faktor pertumbuhan dan produksi. Penelitian ini bertujuan mendapatkan kondisi optimum produksi meliputi perlakuan media, waktu, suhu inkubasi serta konsentrasi induksi metanol untuk menghasilkan konsentrasi protein hIFNα-2a yang lebih tinggi pada Pichia pastoris. Metode analisis hasil optimasi menggunakan western blot, kemudian dilanjutkan dengan produksi protein pada semua kondisi optimum dan dipurifikasi dengan kromatografi afinitas, dikarakterisasi dot blot, SDS-PAGE dan dilakukan pengukuran konsentrasi protein. Produksi protein hIFNα-2a fusi dan non fusi didapatkan optimal pada media BMGY-BMMY dengan penambahan inhibitor protease dan induksi metanol dengan konsentrasi 1.5% v/v pada suhu inkubasi 30 °C selama 72 jam. Konsentrasi optimal protein hIFNα-2a fusi sebesar 3.97 mg/L dan konsentrasi protein hIFNα-2a non fusi sebesar 47.64 mg/L.
Keyword: BCA assay, interferon α-2a, BMGY-BMMY, Pichia pastoris, western blot

Judul: Stabilitas Protein Rekombinan Interferon Alfa-2b Manusia Pada Pichia Pastoris.
Abstrak: Protein rekombinan interferon alfa-2b manusia (rhIFNα-2b) merupakan protein terapeutik yang diaplikasikan untuk penanganan hepatitis dan kanker. Pengembangan bentuk sediaan rhIFNα-2b yang stabil tetap menjadi tantangan. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari stabilitas rhIFNα-2b pada tiga parameter, yaitu suhu, pH dan kondisi lama penyimpanan. Overproduksi rhIFNα-2b dilakukan menggunakan sistem ekspresi Pichia pastoris (P. pastoris) yang ditumbuhkan pada media Buffered Methanol Complex (BMMY) pada suhu 30 °C selama 48 jam dan 2% metanol sebagai induser. MinimateTM tangensial flow filtration system dengan molecular weight cut off (MWCO) 5 kDa digunakan pada proses filtrasi protein. Protein yang telah difiltrasi kemudian dipurifikasi dengan AKTA purifier 10 system menggunakan kolom His-trap. Kuantifikasi protein menggunakan bicinchoninic acid assay menunjukkan bahwa yield rhIFNα-2b hasil purifikasi sebesar 10.92 mg/L (OD600 = 2.3). Karakterisasi bobot molekul menggunakan analisis Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) dan Western Blot menunjukkan bahwa protein tersebut merupakan rhIFNα-2b dengan bobot molekul sekitar 24 kDa. Karakterisasi identitas protein berbasis spektrometri massa Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of Flight/ Time Of Flight (MALDI-TOF/ TOF) menginformasikan bahwa protein tersebut teridentifikasi sebagai hIFNα-2b dengan urutan asam amino yang mewakili 22% dari sekuen secara keseluruhan. Analisis SDS-PAGE non reducing dan software Image J menunjukkan bahwa peningkatan suhu, kondisi pH asam dan basa serta kondisi lama penyimpanan telah memacu terjadinya aggregasi dan degradasi rhIFNα-2b. Uji 3-[4.5-dimethyltiazol-2il]-2.5-diphenylltetrazolium bromide (MTT) menunjukkan bahwa aggregasi dan degradasi menurunkan aktivitas antiproliferasi rhIFNα-2b terhadap sel MCF-7. Kondisi kenaikan suhu, pH asam dan basa serta lama penyimpanan dapat mempengaruhi stabilitas rhIFNα-2b. Kondisi stabil rhIFNα-2b dicapai pada suhu 4 °C, pH 7 selama 2 hari waktu inkubasi. Data tersebut dapat digunakan untuk mengembangkan formulasi rhIFNα-2b sebagai protein terapeutik.
Keyword: rhIFNα-2b, Pichia pastoris, stabilitas, aggregasi, degradasi

Judul: Konsep Taman Rumah Tinggal Tradisional Masyarakat Adat Osing di Desa Kemiren, Kecamatan Glagah, Kabupaten Banyuwangi.
Abstrak: Masyarakat adat Osing merupakan salah satu masyarakat tradisional di Indonesia yang memiliki nilai adat istiadat dan budaya yang khas. Masyarakat adat Osing merupakan masyarakat asli dari Banyuwangi yang juga disebut sebagai Wong Blambangan. Masyarakat adat Osing memiliki cara tersendiri untuk memanfaatkan dan melestarikan nilai adat istiadat, budaya, dan sumber daya yang berdasarkan kepada weluri sesepuh Osing. Hal ini secara tidak langsung mempengaruhi pola tata ruang lanskap yang ada di sekitarnya, termasuk tata ruang permukiman dan taman rumah tinggal tradisional Osing. Desa Kemiren adalah desa yang masih mempertahankan nilai budaya masyarakat adat Osing di Banyuwangi. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metode deskriptif-kualitatif melalui pengambilan data informasi terkait budaya dan sejarah dari dokumen adat serta wawancara tokoh adat atau keyperson yang diverifikasi melalui observasi lapang. Penelitian ini megidentifikasi pola ruang, filosofi, orientasi, dan elemen pembentuk permukiman, rumah tinggal, dan taman tradisional Osing Desa Kemiren. Elemen-elemen lanskap permukiman masyarakat Osing, Desa Kemiren, meliputi bangunan (rumah tinggal warga, masjid, paglak, rumah ketua adat), ruang terbuka (makam Buyut Cili dan makam umum), aksesibilitas (jalan utama Kemiren), air (sungai dan belik), serta vegetasi (sawah dan tegalan). Elemen pembentuk rumah tinggal dan taman tradisional Osing antara lain bale, jrumah, pawon, amper, pendopo, ampok, lumbung, bancangan, lumpang alu, dan panjer kiling. Konsep taman rumah didasari oleh pemenuhan kebutuhan sehari-hari dan upacara adat masyarakat Osing.
Keyword: Desa Kemiren, masyarakat adat Osing, pola permukiman, taman rumah