Judul: Produksi dan karakterisasi biokimiawi protease eschericia coli DH5@ rekombinan
Abstrak: Xanthomonas campesimis pv glycines IFL merupakan isolat bakteri lokat penyebab penyakit bisul pada tanaman kedelai yang menghasilkan protease ekstraseluler dengan kisaran pH optimum luas dan suhu optimum yang cukup tinggi (30-70°C) Produksi dan aktivitas protease Xanthomonas dapat terhambat dengan adanya pembentukan gum xanthan Pengklonan gen protease X. campestris pv glycines IFL ke dalam E. call DH5a dengan menggunakan vektor pRK415 dimaksudkan untuk menghasilkan protease IFL. tanpa kehadiran produk lain sekaligus meningkatkan produksi dan aktivitas enzim tersebut. Penelitian ini bertujuan untuk memproduksi protease E. coli DiSa rekombinan dan melakukan karakterisasi biokimiawi protease rekombinan sekaligus membandingkannya dengan protease X. campestris pv. glycines IFL. selaku donor gen Tahap awal dari penelitian ini adalah pembuktian keberadaan gen protease pada rekombinan dengan cars mengintroduksikan kembali gen tersebut kepada X campestris mutan protease melalui proses konjugasi yang melibatkan tiga tetua (triparental mating). Introduksi gen rekombinan kepada X campestris mutan menyebahkan A campestris kembali mampu memproduksi protease dalam jumlah besar. Aktivitas spesifik (unit aktivitas'mg protein) dari protease X. campestris mutan, X. campestris (pRK415) dan X. campestris (pRK415 rekombinan) dengan waktu fermentasi 48 jam pada media LB adalah 0,045, 0,402 dan 0,051 dan pada media LCT (Limbab Cair Tatu) sebesar 0,077, 0,101 dan 0,176 Pengukuran aktivitas protease dilakukan dengan menggunakan metode Bergmeyer et al (1983) dan penentuan kadar protein dilakukan dengan metode Bradford (1976). Bakteri E. coli DHSx rekombinan yang ditumbuhkan pada media PYGB (Pepton 2%, ektrak khamir 1%, dan gliserol 3%) dengan waktu fermentasi 24 jam memberikan aktivitas protease terbesar dibandingkan bila bakteri tersebut ditumbuhkan pada media LB dan LCT skin 0.5%+ Ca 5mM Aktivitas protease yang dihasilkan pada kondisi optimum ini berkisar antara 0,032 0,042 Unit/ml. Penambahan skim pada media PYGB tidak menambah aktivitas protease yang dihasilkan Penelitian lebih lanjut untuk melihat ekspresi dari gen protease rekombinan pada E coli dilakukan dengan membandingkan karakterisasi biokimia dari enzim tersebut dengan protesse X campestris IFL. Dari hasil karakterisasi pH diketahui bahwa proscase yang dihasilkan oleh E. con DH5u rekombinan memiliki pH optimum 8.5 yang berbeda dengan při optimum dari protease X. campestris IFL yaitu 7.5. Pola penganult suhu terhadap aktivitas kedua enzim hampir sama dan dan suhu optimum keduanya adalah 60°C. Penambahan EDTA pada protease E cow DHSa rekombinan memberikan efek penghambatan yang lebih besar dengan aktivitas sisa 26.145% pada penambahan 5 mM sedangkan aktivitas sisa protease X campestris IFL. pada penambahan yang sama adalah 55% PMSF yang merupakan inhibitor spesifik strin ternyata menghambat protease E. coli DH5a rekombinan dengan aktivitas sisa sebesar 69.47% dan 34.86% pada penambahan 1 dan 5 mM sedangkan aktivitas sisa protease X. campestris IFL pada konsentrasi yang sama adalah 75% dan 25% Hasi karakterisasi biokimiawi protease menunjukan adanya kemiripan antara protease E coù DHSa rekombinan dengan protease X. campestris IFL Dari hasil zimogram dengan menggunakan pewama Comassie Blue diketahui bahwa enzim protease yang ada pada E. coù DHS rekombinan terdiri dari dua jenis dengan berat molekul kurang lebih 49.000 dan 45.000 dalton
Keyword: 

Judul: Telaah pemulihan aktivitas protease Escherichia coli DH5x rekombinan
Abstrak: Pengklonan gen protease Xanthomonas campestris pv. glycines IFL ke dalam E. coli DH5a dimaksudkan untuk meningkatkan produksi dan aktivitas enzim tersebut. Pengklonan tersebut telah berhasil dilakukan dimana fragmen EcoR1 berukuran 6,2 kb dari kromosom Xanthomonas campestris pv. glycines IFL digabungkan dengan vektor pRK 415 (10,5 kb; resisten terhadap tetrasiklin) yang telah dilinierkan dengan EcoRI lalu ditransformasikan ke dalam Escherichia coli DH5a sehingga dihasilkan Escherichia coli DH5a rekombinan (pMB8) yang mengandung insert berukuran 2,9 kb. Penelitian ini bertujuan untuk memperbaiki ekspresi protease rekombinan dengan cara: (1) melakukan subkloning insert dengan menggunakan vektor pIT101 (6,144 kb; resisten terhadap kanamisin dan gentamisin) dan inang E. coli JM107 serta (2) pemulihan/renaturasi aktivitas protease rekombinan. Target yang ingin dicapai ialah: (1) ukuran fragmen DNA penyandi protease yang lebih pendek daripada ukuran insert awal (2,9 kb) dan (2) peningkatan aktivitas protease rekombinan...
Keyword: 

Judul: Perencanaan lansekap stop over pada obyek wisat Pantai Soka, Tabanan Bali
Abstrak: Budaya tradisional masyarakat Bali memiliki suatu tata nilai yaitu tata nilai Tri Hita Karana, yang dapat dijadikan sebagai landasan konsep dalam pembagian tata ruang pada suatu tapak. Tata nilai Tri Hita Karana membagi ruang menurut tinggi­ rendah suatu tempat. Berdasarkan konsepsi tersebut maka ruang yang berorientasi ke arah gunung (kaja) memiliki nilai utama, daerah dataran (tengah) memiliki nilai madya, dan ke arah laut (kelod) memiliki nilai nista yang secara hirarkis tersusun dalam segmen utama, madya, nista. Ruang dengan nilai utama terdapat pada ruang non intensif, yaitu daerah persawahan, sedangkan yang memiliki nilai madya dan nista terdapat pada ruang intensif dan semi intensif.
Keyword: