Judul: Sintesis Antigen Afb1-Bsa Dan Konjugasi Antibodi Anti Afb1-Bsa Dengan Nanopartikel Emas Sebagai Pereaksi Imunostrip Untuk Mendeteksi Aflatoksin B1.
Abstrak: Aflatoksin B1 (AFB1) adalah mikotoksin yang berasal dari kapang Aspergillus spp. dan merupakan senyawa toksin paling potensial sebagai karsinogen, teratogen dan agen imunosupresif sehingga berbahaya bagi kesehatan manusia maupun hewan. Toksin AFB1 sering mengkontaminasi berbagai komoditas pertanian yang menjadi bahan pakan dan pangan yang dikonsumsi oleh hewan atau manusia. Hewan ternak yang mengkonsumsi pakan terkontaminasi AFB1 dapat terganggu kesehatan dan produktivitasnya serta meninggalkan residu aflatoksin pada produk dari hewan tersebut seperti susu dan daging. Residu aflatoksin pada hasil ternak dapat membahayakan kesehatan manusia bila hasil ternak tersebut dikonsumsi. Teknik deteksi yang handal untuk menentukan kualitas dan keamanan bahan pangan dan pakan sangat diperlukan sebagai upaya pengawasan kontaminasi AFB1 pada bahan pangan dan pakan. Metode deteksi terhadap AFB1 saat ini umumnya hanya dapat dilakukan di laboratorium seperti TLC, ELISA, dan HPLC. Metode uji yang sederhana, ekonomis, cepat, mudah, dan dapat digunakan terutama di lapangan seperti imunostrip sangat diperlukan untuk deteksi dini cemaran AFB1 pada bahan pangan dan pakan. Penelitian ini bertujuan untuk mensintesis antigen aflatoksin B1- Bovine Serum Albumin (AFB1-BSA) dan konjugasi antibodi anti AFB1-BSA terhadap nanopartikel emas sebagai pereaki untuk imunostrip. Penelitian ini meliputi sintesis dan karakterisasi antigen AFB1-BSA, purifikasi antibodi anti AFB1-BSA dan konjugasi antibodi anti AFB1-BSA dengan nanopartikel emas. Antigen AFB1-BSA disintesis dengan mereaksikan AFB1 murni dan bovine serum albumin (BSA) melalui reaksi carboxymethyloxime (CMO) sebagai reaksi penghubung. Keberadaan AFB1-CMO dideteksi dengan Thin Layer Chromatography (TLC). Kemudian Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS PAGE) digunakan untuk mengidentifikasi antigen AFB1-BSA dan antibodi anti AFB1-BSA. Antibodi anti AFB1-BSA diuji respon antibodinya melalui reaksi dengan antigen AFB1-BSA secara dot blot immunoassay (DBIA). Antibodi kemudian dipurifikasi menggunakan kolom HiTrap protein A HP. Kadar antibodi dihitung dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 280 nm dan dikarakterisasi menggunakan SDS-PAGE. Selanjutnya antibodi anti AFB1-BSA dikonjugasikan dengan nanopartikel emas. Seluruh pereaksi yang terdiri dari antigen AFB1-BSA, konjugat antibodi anti AFB1-BSA dengan nanopartikel emas, dan IgG anti rabbit digunakan untuk imunostrip serta ditentukan kondisi optimumnya. Hasil penelitian menunjukan AFB1-CMO tampak sebagai noktah biru dengan Rf= 0,45 pada uji TLC dan dibandingkan dengan AFB1 baku. Sementara antigen AFB1-BSA menunjukan pita protein tunggal berukuran 72 kDa pada analisis SDS PAGE. Antibodi anti AFB1 bereaksi spesifik terhadap antigen AFB1- BSA yang ditunjukkan dengan noktah cokelat dengan DBIA. Antibodi tersebut menunjukan pita protein tunggal berukuran 53,52 kDa. Konjugasi antibodi anti AFB1-BSA dengan nanopartikel emas menghasilkan warna merah keunguan yang dapat digunakan sebagai penanda untuk mendeteksi AFB1 pada imunostrip. Komposisi optimum imunostrip tercapai pada konsentrasi antigen AFB1-BSA 1- 1,5 mg/ml, IgG anti rabbit 0,1 mg/ml, dan konjugat antibodi anti AFB1-BSA dengan nanopartikel emas pada luasan 0,5x0,4 cm² yang ditandai dengan terbentuknya 2 garis berwarna merah keunguan pada daerah uji dan kontrol. Berdasarkan hal tersebut dapat disimpulkan bahwa pereaksi-pereaksi yang telah dihasilkan dari penelitian ini dapat digunakan untuk pengembangan imunostrip untuk mendeteksi AFB1.
Keyword: FB1-BSA, antibodi anti AFB1-BSA, nanopartikel emas, imunostrip

Judul: Pengembangan Immunostrip dengan Menggunakan Partikel Nano Emas untuk Melacak Aflatoksin M1 dalam Contoh Susu
Abstrak: Aflatoksin M1 (AFM1) merupakan metabolit hasil hidroksilasi aflatoksin B1 (AFB1). Ketika hewan ruminansia diberi pakan yang mengandung AFB1, maka AFB1 akan termetabolisme menjadi AFM1. AFM1 bersifat toksik akut dan kronis untuk hewan dan manusia. Metabolit aflatoksin tersebut menyebabkan penyakit berbahaya, diantaranya kerusakan hati akut, sirosis hati, memicu pertumbuhan tumor dan juga teratogen. Meskipun toksisitas AFM1 lebih rendah dibandingkan senyawa induknya AFB1, tetapi senyawa ini juga bersifat karsinogenik sehingga pada tahun 2002 telah diklasifikasikan sebagai karsinogen grup 1 oleh International Agency for Research on Cancer (IARC). AFM1 ini dapat termakan oleh manusia, terutama bayi dan anak-anak melalui susu segar, susu pasteurisasi, susu UHT, susu formula, dan air susu ibu (ASI). Mengingat bahaya AFM1 terhadap kesehatan, maka melacak keberadaan AFM1 dalam susu dan hasil olahannya sangat diperlukan untuk mencegah dampaknya pada masyarakat. Teknik melacak yang digunakan berperan penting dalam menentukan aman tidaknya susu dan hasil olahannya untuk dimakan. Penelitian ini dilakukan untuk mengembangkan teknik penapisan awal dengan memurnikan antibodi, sintesis antigen AFM1-BSA, konjugasi antibodi AFM1-partikel nano emas, serta uji mutu immunostrip yang dikembangkan untuk melacak AFM1 pada contoh susu. Kegiatan penelitian yang dilakukan meliputi pemurnian antibodi dari serum kelinci, sintesis antigen AFM1-BSA, pembuatan konjugat anti AFM1 dengan partikel nano emas, pengembangan dan uji mutu immunostrip. Antibodi yang digunakan merupakan antibodi poliklonal milik Balai Besar Penelitian Veteriner (BB LITVET) yang diperoleh dari serum kelinci yang diimunisasi dengan AFM1-BSA. Antibodi terhadap AFM1 diuji dengan teknik DBIA. Antibodi poliklonal dimurnikan melalui pengendapan menggunakan ammonium sulfat jenuh, kemudian dialisis dan difraksinasi menggunakan kolom HiTrap protein A HP. Kadar antibodi dihitung menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 280 nm dan antibodi G (Ig G) dikarakterisasi menggunakan teknik SDS-PAGE. Selanjutnya, Ig G dikonjugasikan dengan partikel nano emas (AuNP). Antigen AFM1-BSA disintesis dengan cara mereaksikan AFM1 baku dan BSA melalui reaksi dengan CMO sebagai reaksi penghubung. Seluruh pereaksi yang terdiri dari antigen AFM1-BSA, konjugat anti AFM1-AuNP dan Ig G kambing anti-Ig G kelinci diterapkan pada bahan strip dan ditentukan kondisi optimumnya. Pengujian mutu immunostrip dan pelacakan AFM1 dilakukan menggunakan immunostrip yang dikembangkan dan dibandingkan dengan immunostrip komersial (Agrastrip®). Contoh susu yang digunakan pada percobaan ini sebanyak 19 contoh terdiri dari 15 contoh susu murni, lima contoh susu komersial impor dan empat contoh susu yang ditambahkan dengan 0 – 1 ng/ml AFM1 baku. Hasil uji DBIA menunjukkan adanya reaksi khas antara antigen AFM1-BSA dengan antibodi terhadap AFM1-BSA dalam serum kelinci yang terlihat dengan terbentuknya noktah berwarna coklat setelah penambahan substrat DAB. Hasil fraksinasi menunjukkan bahwa antibodi tersebut merupakan antibodi G (Ig G) dengan rantai berat dan memiliki berat molekul 150 kDa dan 168,993 kDa. Ig G yang dikonjugasikan dengan AuNP adalah fraksi ke-3 dengan kadar 1,952 mg/ml. Kondisi optimum untuk konjugasi antibodi AFM1 dengan AuNP terjadi pada pH 8,5 dan penambahan 135 μl Ig G ke dalam 100 μl AuNP (0,01M), warna yang dihasilkan sama dengan atau mendekati warna larutan AuNP sebelum direaksikan. Kandungan antibodi dan AuNP pada kondisi optimum tersebut selanjutnya digunakan sebagai dasar untuk reaksi konjugasi dengan volume yang lebih banyak, sehingga dihasilkan endapan berwarna merah keunguan setelah larutan konjugat disentrifugasi dengan kecepatan 10.000 g selama 10 menit pada suhu empat
Keyword: immunostrip, partikel nano emas, aflatoksin M1, susu

Judul: Hamiltonian formulation for linear waves motion in two layers fluid
Abstrak: The surface wave could be considered as a wave that separates two fluids, namely water and air. Based on this assumption, it is introduced the interfacial wave, a wave between two layers of fluid with different density. The formulation of interfacial waves motion begins with deriving the base equation of irrotational ideal fluid. Furthermore, according to irrotational fluid assumption, the base equation can be stated in velocity potential. In this derivation, the fluids domain is assumed to be restricted by rigid lid boundary conditions, both at the upper and lower limit. Therefore, the interfacial waves motion can be explained in a hamiltonian formulation. In the hamiltonian formulation, total energy is defined as the sum of kinetic and potential energy. The hamiltonian system is obtained from reduction of kinetic energy by using the Dirichlet Neumann Operator. The resulted kinetic energy equation is nonlinear. Therefore, this form is linearized by first part of the Taylor expansion. This linearization gives a dispersion relation of linear wave. Based on this dispersion relation, the phase speed of the linear wave depends on the density ratio of the two layers fluid.
Keyword: