Judul: Peranan β-Karoten dan Nutrasetikal Galohgor dalam Proliferasi, Diferensiasi, dan Ekspresi Gen pada Sel Epitel Usus (CMT-93) dan Mammae (HC11)
Abstrak: Pangan yang memiliki khasiat untuk kesehatan, baik untuk pencegahan maupun pengobatan, disebut sebagai nutrasetikal (Kalra 2003; Syamsudin 2013). Salah satu nutrasetikal yang biasa dikonsumsi oleh masyarakat Sunda secara turun temurun untuk meningkatkan kesehatan dan produksi air susu ibu (ASI), khususnya pada masa nifas (postpartum), adalah Galohgor. Nutrasetikal Galohgor terbuat dari 56 jenis tanaman. Selain mengandung berbagai senyawa aktif dan berbagai jenis zat gizi makro, yang cukup banyak terdapat dalam nutrasetikal Galohgor adalah β-karoten (Roosita et al. 2003; Pratiwi 2010). β-karoten merupakan provitamin A yang dapat diubah menjadi retinal, retinol, atau asam retinoat pada berbagai sel tubuh (Bhatti et al. 2003). Metabolisme retinal menjadi asam retinoat memerlukan serangkaian enzim aldehida dehidrogenase yang merupakan hasil ekspresi kelompok gen ALDH (Jackson et al. 2011). Asam retinoat berperan dalam pengaturan ekspresi gen koneksin. Koneksin adalah molekul protein yang menyusun gap junction. Gap junction merupakan struktur pada membran sel berupa saluran penghubung antara dua sel yang berdekatan atau bertetangga (Baldi et al. 2008; Gropper et al. 2009; Solomon 2001). Struktur gap junction sangat dominan pada sel-sel kelenjar mammae yang aktif mensintesis kasein, yaitu pada periode laktogenesis. Perkembangan gap junction yang baik sangat penting untuk mempertahankan sintesis dan sekresi air susu (ASI) karena peranannya dalam menjaga permeabilitas membran sitoplasma, metabolisme, dan diferensiasi sel (Cruciani dan Mikalsen 2006; Neville 2009; Talhouk et al. 2005). Sebagian besar zat gizi untuk proses fisiologis dan metabolisme dalam tubuh, termasuk sintesis susu, berasal dari makanan hasil proses penyerapan zat gizi di sel usus. Sel usus dan sel mammae memiliki perbedaan peranan dalam tubuh serta memiliki lingkungan intraseluler dan ekstraseluler yang berbeda. Oleh karena itu, dalam studi in vitro ini digunakan sel galur murni CMT-93 dan HC11. CMT-93 mampu menunjukkan fenotipe sel epitel usus, sedangkan sel HC11 dengan induksi hormon dan faktor pertumbuhan dapat menunjukkan fenotipe kelenjar mammae pada kondisi in vivo. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan bahwa β-karoten dalam nutrasetikal Galohgor berperan dalam proses laktogenesis dan menganalisis mekanisme β-karoten dalam nutrasetikal Galohgor dalam proliferasi, diferensiasi, dan ekspresi gen pada sel epitel usus (CMT-93) dan sel kelenjar mammae (HC11). Penelitian ini dilaksanakan di tiga laboratorium utama, yaitu Laboratory of Food and Enviromental Science, Division Food Science and Biotechnology, Faculty of Agriculture, Kyoto University, Japan; dan Laboratorium Embriologi dan Laboratorium Layanana Terpadu, Fakultas Kedokteran Hewan IPB. Penelitian dilaksanakan pada bulan Januari hingga Oktober 2013. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain β-karoten dengan kemurnian 99% (Sigma) yang dilarutkan dalam pelarut tetrahydrofuran (THF) (Sigma) hingga konsentrasi akhir dalam medium 1.25%. Nutrasetikal Galohgor dibuat dari 56 jenis tanaman dengan dua metode berbeda, yaitu drum dryer untuk Galohgor serbuk, dan ekstraksi menggunakan etanol untuk Galohgor ekstrak. Medium kultur sel terdiri atas DMEM (Gibco) dan RPMI 1640 (Biowest). Jenis antibiotik yang digunakan meliputi penisilin, streptomisin, dan gentamisin. Hormon dan faktor pertumbuhan yang digunakan untuk proliferasi dan diferensiasi HC11 meliputi insulin, EGF, hidrokortison, dan prolaktin (Sigma). Serum yang digunakan untuk kedua jenis sel adalah heat-inactivated Fetal Bovine Serum (FBS). Kit 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) (Roche) digunakan untuk analisis proliferasi sel. Kit Rneasy (Qiagen) digunakan untuk isolasi RNA dan One-Step RT-PCR Pre Mix Kit (Intron Biotechnology) digunakan untuk analisis reverse transriptase
Keyword: Galohgor Nutraceutical, Mammary gland cell line HC11, Beta carotene, Gene expression, Cell proliferation, Cell differentiation, Milk production, Postpartum mothers, Medicinal plants

Judul: Pengembangan Kultur Mamosfir Asal Sel Kelenjar Susu Macaca fascicularis dan Responnya Terhadap Pemberian Genistein
Abstrak: Kelenjar susu mengandung sel punca dewasa dengan kemampuan selfrenewal, yang diduga menjadi target utama untuk transformasi yang dapat menyebabkan kanker payudara. Mempelajari mekanisme pencegahan terjadinya kanker payudara harus menggunakan kultur sel kelenjar susu normal yang sampai saat ini belum tersedia secara komersial, model kultur kelenjar susu yang ada hanya mewakili populasi tertentu, yakni populasi wanita menopause. Mon yet ekor panjang (Macaca fascicularis) merupakan salah satu jenis satwa primata yang banyak dimanfaatkan dalam penelitian biomedis. Spesies ini mempunyai struktur kelenjar susu yang sama dengan manusia meliputi anatomi, endokrinologi, tahapan perkembangan, histologi serta profil lobus kelenjar susu. Penggunaan sel punca dari satwa primata sangat penting untuk menjembatani kesenjangan pengetahuan yang dihasilkan dari penelitian sel punca menggunakan rodensia untuk kepentingan uji klinis pada manusia. Penelitian ini bertujuan rnengernbangk:an model in-vitro sel kelenjar susu tiga dimensi (mamosfir) yang dapat memperkaya populasi sel punca kelenjar susu dan mampu berdiferensiasi menjadi sel-sel kelenjar susu. Pemberian genistein dievaluasi untuk melihat efeknya terhadap kemampuan sel dalam membentuk mamosfir dan mengekpresikan marka epitel, marka sel punca kelenjar susu dan pluripotensi. Mamosfir yang dikembangkan ini berasal dari kultur sel kelenjar susu Macaca fascicularis (MfMG), hasil koleksi melalui metode biopsi, dikultur menjadi sel monolayer dan kemudian disimpan dalam keadaan beku. Sediaan sel beku diharapkan akan menjadi sumber sel untuk kultur mamosfir sehingga dapat menghindari atau mengurangi metode invasif pada hewan, apabila diperlukan kembali pengambilan jaringan kelenjar susu. Sel kelenjar susu dikultur dan dibuat sediaan beku dari setiap pasase selnya. Sel kelenjar susu dari sediaan beku ditumbuhkan kembali, dan pasase dilakukan setiap 7 hari. Populasi sel dihitung dan ditumbuhkan kembali untuk membentuk mamosfir turunannya. Validasi marka, sel epitel (CK18 dan CD24), sel punca kelenjar susu (ITGBI dan ITGA6) dan pluripotensi (NANOG, OCT4, SOX2) dilakukan pada setiap pasase menggunakan teknik Reverse Transcriptase quantitative Polymerase Chain Reaction (RT-qPCR). Diferensiasi sel punca dilakukan dengan teknik: kultur 2 dimensi dengan menumbuhkan sel pada lempeng kultur membentuk monolayer dan teknik 3 dimensi dengan menumbuhkan mamosfir pada matrigel untuk membentuk organoid, yang menyerupai kelenjar susu in vivo. Genistein ditambahkan pada populasi mamosfir dengan tiga konsentrasi berbeda yaitu 1 μM, 10 μM dan 100 μM. Sel tunggal asal MfMG berhasil dikultur dan mengekspresikan marka sel epitel, marka sel punca kelenjar susu, dan marka sel punca mesenkimal. Hasil ini menunjukkan bahwa model kultur sel ini dapat dijadikan model in vitro untuk memperoleh populasi sel punca kelenjar susu dan kultur sel inijuga dapat berfungsi sebagai reservoir populasi sel punca untuk rnernperoleh ku)tur sel punca tertentu di rnasa yang akan datang. Marnosfir dari sel sediaan beku MfM.G berhasiJ dikultur, terarnati pada hari ke-3 rnernbentuk sphere dan rnultiselular, jurnlah rnarnosfir menurun pada sphere turunannya tetapi menunjukkan peningkatan ekspresi sel punca kelenjar susu, seiring dengan penurunan marka sel epitel dan pluripotensi ada setiap pasase, hal ini menunjukkan bahwa marnosfir marnpu meningkatkan •OJ?ulasi sel punca dan bersifat rnultipoten. Sel punca kelenjar susu berhasil rtliferensiasi ditandai dengan ekspresi marka CSN2 dan regulator diferensiasi TAT5 dan GATA3. Pemberian genistein pada marnosfir meningkatkan jurnlah arnosfir sesuai dengan bertarnbahnya konsentrasi genistein dan terjadi ningkatan ekspresi marka sel punca kelenjar susu yang lebih tinggi dari rnarka .1epitel dan pluripotensi. Penernuan 1m rnenunjukkan
Keyword: Kelenjar susu, Sel Punca, Genistein, Mammosphere, Stem cells

Judul: Asymptotic Distribution of Estimator for the Intensity Function of a Doubly Periodic Poisson Process
Abstrak: In this manuscript, estimation of the intensity function of a doubly periodic Poisson process is discussed. It is assumed that only a single realization of the Poisson process is observed in a bounded window [0,n]. It is also assumed that the period of the intensity function is known. The rate of consistency and asymptotic normality of the estimator are formulated. Finally, a confidence interval for the local intensity function is also formulated.
Keyword: