Judul: Organophosphate Insecticide Sensing Using
Phosphotriesterase (PTE) Enzyme Derived from Sphingobium fuliginis ATCC
27551 Based-on pH-ISFET Sensor Measuremen
Abstrak: Paraoxon (diethyl (4-nitrophenyl) phosphate) was chosen as a model compound of organophosphate insecticide because of their high toxicity level toward human health, animals and environment. Phosphotriesterase (PTE) as one of the potential organophosphorus hydrolase enzymes has a special ability in degrading the paraoxon in various concentration. This research aims to produce the PTE derived from Sphingobium fuliginis and evaluate its ability of PTE in hydrolyzing the paraoxon. The preparation of microbial PTE production was successfully obtained by cultivating the inoculum of Sphingobium fuliginis in LB-medium. The purified PTE was obtained by the purification process using DEAE-Toyopearl Column equilibrated by 20mM of PPB (pH=7.2). PTE enzyme assay was observed by spectrophotometric UV-vis with measured absorbance is 410nm and it was examined on two different types of the buffer which is NaHCO3 buffer 100mM (pH=8.5) and Glycine-NaOH buffer 50mM (pH=9.5). The expression of PTE was confirmed by SDS-PAGE analysis. The measurement for the time-course of pH decreased in the presence and the absence of PTE was evaluated by using the pH-ISFET sensor. The best result showed that LB-medium was chosen as the most suitable medium for Sphingobium fuliginis cultivation due to its perfect nutrients content. The molecular mass of PTE subunits protein was well-expressed in 35kDa. Moreover, the amount of paraoxon concentration and the PTE’s performance such as PTE’s specific activity, productivity, sensitivity and the higher amount of total protein of PTE (mg) was performed well in 100mM NaHCO3 buffer pH 8.5. PTE’s Km value obtained on 8.106 µM and its maximum rate velocity (Vmax) showed in 2.497 unit paraoxon mg-1 protein. Lastly, the time course of pH decreased dramatically when the PTE applied to the system. It showed a rapid detection for less than 2-5 seconds the hydrolyzation of paraoxon has been already finished. So that, PTE has been confirmed able to recognize the paraoxon in various concentration in rapid detection.
Keyword: Organophosphate insecticide, Paraoxon, pH-ISFET, Phosphotriesterase, Sphingobium fuliginis ATCC 27551

Judul: Penginderaan Insektisida Organofosfat Menggunakan Enzim Phosphotriesterase (PTE) Berasal dari Sphingobium fuliginis ATCC 27551 Berdasarkan Pengukuran Sensor pH-ISFET
Abstrak: Paraoxon (dietil (4-nitrophenyl) fosfat) dipilih sebagai senyawa model insektisida organofosfat karena tingkat toksisitasnya yang tinggi terhadap kesehatan manusia, hewan dan lingkungan. Phosphotriesterase (PTE) sebagai salah satu enzim organofosfat hidrolase potensial memiliki kemampuan khusus dalam mendegradasi paraoxon dalam berbagai konsentrasi. Penelitian ini bertujuan untuk menghasilkan PTE yang berasal dari Sphingobium fuliginis dan mengevaluasi kemampuan PTE dalam menghidrolisis paraokson. Persiapan produksi mikroba PTE berhasil diperoleh dengan mengolah inokulum Sphingobium fuliginis dalam medium-LB. PTE murni diperoleh dengan proses pemurnian menggunakan DEAE-Toyopearl Column diseimbangkan oleh 20mM PPB (pH = 7,2). Uji enzim PTE diamati dengan spektrofotometri UV-vis dengan absorbansi terukur 410nm dan diperiksa pada dua jenis penyangga yang berbeda yaitu penyangga NaHCO3 100mM (pH = 8.5) dan penyangga Glycine-NaOH 50mM (pH = 9,5). Ekspresi PTE dikonfirmasi oleh analisis SDS-PAGE. Pengukuran untuk jangka waktu penurunan pH ada dan tidak adanya PTE dievaluasi dengan menggunakan sensor pH-ISFET. Hasil terbaik menunjukkan bahwa medium LB dipilih sebagai media yang paling cocok untuk budidaya Sphingobium fuliginis karena kandungan nutrisi yang sempurna. Massa molekul protein subunit PTE diekspresikan dengan baik dalam 35kDa. Selain itu, jumlah konsentrasi paraoxon dan kinerja PTE seperti aktivitas spesifik PTE, produktivitas, sensitivitas dan jumlah total protein PTE (mg) yang lebih tinggi diperoleh dengan baik dalam 100mM NaHCO3 buffer pH 8.5. Nilai Km PTE yang diperoleh pada 8,106 μM dan kecepatan laju maksimumnya (Vmax) ditunjukkan pada 2,497 unit protein paraoxon mg-1. Terakhir, rentang waktu pH menurun secara dramatis ketika PTE diterapkan pada sistem. Ini menunjukkan deteksi cepat selama kurang dari 2-5 detik hidrolisasi paraokson telah selesai. Sehingga, PTE telah dipastikan dapat mengenali paraoxon dalam berbagai konsentrasi dalam deteksi cepat.
Keyword: Insektisida organofosfat, Paraoxon, pH-ISFET, Phosphotriesterase, Sphingobium fuliginis ATCC 27551

Judul: Cycle Hamilton pada Graf Lengkap, Graf Regular, dan Graf 2-Connected 4-Regular Berorder Kurang dari Sepuluh
Abstrak: Suatu graf disebut graf Hamilton apabila graf tersebut memuat cycle Hamilton, yaitu cycle yang melewati setiap vertex tepat satu kali. Menentukan keberadaan cycle Hamilton pada suatu graf dapat menggunakan syarat cukup yang berupa teorema-teorema yang telah diperkenalkan sejak tahun 1950-an. Beberapa syarat cukup yang dibahas dalam karya ilmiah ini adalah syarat cukup yang berhubungan dengan graf lengkap dan graf regular. Suatu graf lengkap berorder 𝑛������ ≥ 3 dan graf r-regular berorder 𝑛������ ≤ 2𝑟������ + 1 merupakan graf Hamilton, Karena kedua graf tersebut memuat cycle Hamilton. Selanjutnya, syarat cukup tersebut digunakan untuk menentukan keberadaan cycle Hamilton pada graf 2-connected 4- regular berorder kurang dari 10.
Keyword: graf Hamilton, graf regular, graf lengkap, graf 2-connected 4-regular