Judul: Purifikasi Protein Rekombinan Human Interferon α-2a dengan Kromatografi Afinitas dan Filtrasi Gel.
Abstrak: Protein hIFNα-2a memiliki kemampuan sebagai antivirus, antikanker, dan imunomodulator, namun waktu paruhnya dalam tubuh rendah akibat bobot molekulnya yang kecil. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa bobot molekul hIFNα-2a dapat ditingkatkan melalui fusi dengan human serum albumin (HSA). Penelitian terkait optimasi purifikasi protein fusi dan non fusi ini belum dilakukan. Penelitian ini bertujuan menentukan teknik purifikasi yang menghasilkan protein paling murni dan menentukan titik isoelektrik protein. Protein diproduksi dalam methylotropic yeast Pichia pastoris. Protein fusi dan non fusi dipurifikasi menggunakan dua teknik, yaitu kromatografi afinitas dan kromatografi filtrasi gel. Hasil Dot Blot mengkonfirmasi validitas protein. Kromatografi afinitas menghasilkan protein yang lebih murni. Oleh karena itu, yield protein fusi dan non fusi fraksi kromatografi afinitas lebih rendah dibandingkan kromatografi filtrasi gel. Yield protein non fusi sebesar 13.6 mg/L, sedangkan protein fusi sebesar 0.8 mg/L. Titik isoelektrik protein non fusi sebesar 6, sedangkan protein fusi sebesar 6.5.
Keyword: human interferon α-2a, kromatografi afinitas, kromatografi filtrasi gel, purifikasi

Judul: Stabilitas Protein Rekombinan Interferon Alfa-2b Manusia Pada Pichia Pastoris.
Abstrak: Protein rekombinan interferon alfa-2b manusia (rhIFNα-2b) merupakan protein terapeutik yang diaplikasikan untuk penanganan hepatitis dan kanker. Pengembangan bentuk sediaan rhIFNα-2b yang stabil tetap menjadi tantangan. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari stabilitas rhIFNα-2b pada tiga parameter, yaitu suhu, pH dan kondisi lama penyimpanan. Overproduksi rhIFNα-2b dilakukan menggunakan sistem ekspresi Pichia pastoris (P. pastoris) yang ditumbuhkan pada media Buffered Methanol Complex (BMMY) pada suhu 30 °C selama 48 jam dan 2% metanol sebagai induser. MinimateTM tangensial flow filtration system dengan molecular weight cut off (MWCO) 5 kDa digunakan pada proses filtrasi protein. Protein yang telah difiltrasi kemudian dipurifikasi dengan AKTA purifier 10 system menggunakan kolom His-trap. Kuantifikasi protein menggunakan bicinchoninic acid assay menunjukkan bahwa yield rhIFNα-2b hasil purifikasi sebesar 10.92 mg/L (OD600 = 2.3). Karakterisasi bobot molekul menggunakan analisis Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) dan Western Blot menunjukkan bahwa protein tersebut merupakan rhIFNα-2b dengan bobot molekul sekitar 24 kDa. Karakterisasi identitas protein berbasis spektrometri massa Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of Flight/ Time Of Flight (MALDI-TOF/ TOF) menginformasikan bahwa protein tersebut teridentifikasi sebagai hIFNα-2b dengan urutan asam amino yang mewakili 22% dari sekuen secara keseluruhan. Analisis SDS-PAGE non reducing dan software Image J menunjukkan bahwa peningkatan suhu, kondisi pH asam dan basa serta kondisi lama penyimpanan telah memacu terjadinya aggregasi dan degradasi rhIFNα-2b. Uji 3-[4.5-dimethyltiazol-2il]-2.5-diphenylltetrazolium bromide (MTT) menunjukkan bahwa aggregasi dan degradasi menurunkan aktivitas antiproliferasi rhIFNα-2b terhadap sel MCF-7. Kondisi kenaikan suhu, pH asam dan basa serta lama penyimpanan dapat mempengaruhi stabilitas rhIFNα-2b. Kondisi stabil rhIFNα-2b dicapai pada suhu 4 °C, pH 7 selama 2 hari waktu inkubasi. Data tersebut dapat digunakan untuk mengembangkan formulasi rhIFNα-2b sebagai protein terapeutik.
Keyword: rhIFNα-2b, Pichia pastoris, stabilitas, aggregasi, degradasi

Judul: Keberagaman Bambu Marga Schizostachyum Nees di Jawa
Abstrak: Marga Schizostachyum merupakan bambu berdiameter buluh kecil, berdinding tipis, beruas panjang dengan percabangan pada satu buku yang sama besar. Catatan pertama marga Schizostachyum di Jawa sejak tahun 1829 bersamaan dengan terbitnya Schizostachyum blumei Nees. Hingga 2001, tercatat ada 10 jenis bambu Schizostachyum di Jawa yaitu: S. brachycladum (Kruz) Kruz, S. iraten Steudel, S. aequiramosum Widjaja, S. silicatum Widjaja, S. zolingeri Steudel dan Schizostachyum sp. Namun masih terdapat beberapa jenis Schizostachyum yang perlu diidentifikasi dan dicari sebarannya secara alami. Penelitian dilakukan dari September 2017 hingga 2019 dengan metode eksplorasi. Sampel bambu dikoleksi dari Malingping, Lebak, Bogor, Sumedang, Kuningan, Pekalongan, Batang, Purwokerto, Malang, Jember, Probolinggo dan Banyuwangi sebanyak 49 spesimen. Pengamatan morfologi menggunakan 24 karakter vegetatif dan 12 karakter generatif. Analisis data dilakukan dengan SIMQUAL (Similarity for Qualitative Data), SM (Simple Matching) dan SAHN (Sequential, Aglomerative, Hierarchical and Nested), menggunakan metode UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmethic Mean) pada software NTSys pc. 2.02i. Dalam penelitian ini, sekitar 13 jenis bambu marga Schizostachyum ditemukan di Pulau Jawa, 6 diantarnya jenis baru, 1 catatan baru dan 1 jenis penemuan kembali. Jenis-jenis bambu Schizostachyum di Pulau Jawa yaitu: Schizostachyum abrorii, S. aequiramosum, S. brachycladum, S. biflorum, S. castaneum, S. iraten, S. jatigedensis, S. hartanai, S. batangensis, S. silicatum, S. sengkol dan S. widjajai. Hasil analisis morfologi menunjukkan bahwa bambu Schizostachyum di Jawa mengelompok menjadi 4 kelompok berdasarkan posisi dan lebar daun pelepah buluh serta bentuk aurikel pelepah buluh. Kelompok pertama terdiri dari Schizostachyum abrorii, S. brachycladum dan S. zollingeri. Kelompok kedua terdiri dari Schizostachyum aequiramosum, S. castaneum dan S. jatigedensis. Kelompok ketiga terdiri dari Schizostachyum batangensis, S. widjajai, S. iraten dan S. sengkol. Kelompok keempat terdiri dari Schisostachyum hartanai, S. biflorum dan S. silicatum.
Keyword: bambu, Jawa, Schizostachyum