Judul: Produksi Antibodi Anti-Coxiella Burnetii Untuk Deteksi Q Fever Pada Ruminansia Dengan Metode Imunohistokimia
Abstrak: Q fever merupakan penyakit zoonosis yang disebabkan oleh bakteri gram negatif Coxiella burnetii dan terdistribusi luas di seluruh dunia. Gejala klinis pada hewan ternak bersifat tidak konsisten dan tidak spesifik. Teknik diagnosa yang baik merupakan salah satu langkah pencegahan dan pengendalian penyakit Q fever. Salah satu komponen penting untuk diagnosa adalah antibodi. Produksi antibodi anti-C. burnetii dapat dilakukan untuk menunjang diagnosa baik secara serologis (ELISA, Western blot), immunochromatographic strip (imunostrip) maupun imunohistokimia. Penelitian ini bertujuan memproduksi antibodi poliklonal anti-C. burnetii dan mengkarakterisasinya. Antibodi tersebut kemudian digunakan untuk mendeteksi antigen dengan metode imunohistokimia. Antibodi poliklonal diperoleh dari induksi isolat C. burnetii pada kelinci. Antibodi ini diharapkan mampu mengikat antigen isolat lapang pada organ limpa, paru-paru dan hati sapi dari Rumah Potong Hewan (RPH) di Medan yang sebelumnya telah dikonfirmasi positif C. burnetii. Produksi antibodi poliklonal dilakukan pada dua ekor kelinci New Zealand White (NZW) jantan berumur 10-16 minggu. Kelinci tersebut diinduksi dengan imunogen C. burnetii strain Nine Mile (NM) II. Imunisasi pertama dilakukan dengan mengemulsikan imunogen dengan Complete Freund’s Adjuvant (CFA) untuk menginduksi antibodi secara perlahan. Boosting dilakukan menggunakan imunogen yang sama dan penambahan Incomplete Freund’s Adjuvant (IFA) yang dilakukan pada hari ke-14 pasca induksi. Pemanenan serum dilakukan pada hari ke-24 pasca induksi. Antibodi terhadap C. burnetii dianalisis menggunakan teknik Dot Blot yang menunjukkan adanya reaksi positif warna keunguan dengan penambahan substrat Tetramethylbenzidine (TMB) mengindikasikan bahwa IgG telah terbentuk. Serum yang diperoleh dipurifikasi menggunakan metode presipitasi dengan amonium sulfat saturasi 35 %. Setelah dialisis dengan PBS pH 7.4 dilakukan filtrasi gel dengan matriks Sephadex G-75. Hasil konsentrasi akhir protein yaitu sebesar 11.3 μg μl-1. Profil protein imunogen dan antibodi yang dihasilkan dilihat menggunakan Sodium Dodecyl Sulfate Poly Acrylamide Gel Electrophoresis (SDS PAGE). Pewarnaan Coomassie blue menunjukkan pita pada berat molekul 170 kDa, 100 kDa, 65 kDa, 50 kDa dan 25 kDa. Pita 170 kDa merupakan fragmen IgG yang tidak terdenaturasi, sedangkan pita dengan bobot molekul 50 kDa merupakan antibodi heavy chain (rantai berat) dan bobot molekul 25 kDa sebagai light chain (rantai ringan). Kompatibilitas antibodi dan antigen dianalisis menggunakan Western blot. Adanya pita berwarna keunguan menunjukan adanya reaksi imun positif yang mengindikasikan bahwa serum yang dihasilkan mampu mengikat antigen C. burnetii. Pita tersebut menunjukkan berat molekul 35.5 kDa yaitu outer membrane protein NM II, pita 51.4 kDa merupakan hypothetical membrane protein NM II sedangkan 58.284 kDa sebagai chaperonin (Grol) soluble protein NM II (Kowalczewska et al. 2011). Pengujian antibodi dilakukan dengan terlebih dahulu melakukan preparasi sampel organ limpa yang telah difiksasi dalam formalin. Isolasi protein dilakukan dengan menginkubasi sampel dalam larutan lisis buffer yang mengandung 2% sodium dodecyl sulfat (SDS) pada suhu 100 oC selama 20 menit dilanjutkan dengan inkubasi pada suhu 60 oC selama 2 jam. Hasil isolasi kemudian dianalisa dengan Dot Blot. Hasil menunjukkan adanya warna keunguan akibat adanya reaksi antara antibodi dan antigen C. burnetii. Pemeriksaan dilanjutkan dengan melakukan SDS PAGE dan Western Blot. Selain itu dilakukan juga pemeriksaan dengan metode imunohistokimia. Sampel yang digunakan berupa limpa, paruparu dan hati sapi asal Rumah Potong Hewan (RPH) Kota Medan yang sebelumnya telah dikonfirmasi positif Q Fever oleh Nasution et al. (2014).
Keyword: Q fever, sapi, Coxiella burnetii, antibodi poliklonal, imunohistokimia

Judul: Molecular Detection of Zoonosis Q fever in Ruminants in East Java
Abstrak: Q fever merupakan salah satu penyakit zoonotik strategis di Indonesia yang keberadaannya masih diabaikan. Persebaran penyakit zoonotik Q fever mencakup hampir seluruh negara di dunia, kecuali New Zealand, Norwegia, Islandia, dan French Polynesia. Pemerintah Indonesia melalui Keputusan Menteri Pertanian Republik Indonesia (Kepmentan) no.237/KPTS/PK.400/M/3/2019 menetapkan Q fever sebagai salah satu Zoonosis Prioritas yang perlu mendapatkan prioritas baik dalam pencegahan, pengendalian maupun penanggulangannya. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri Gram negatif Coxiella burnetii yang bersifat parasit obligat intraseluler. Bakteri ini diklasifikasikan oleh Center of Diseases Control and Prevention ke dalam kelompok agen infeksius yang berpotensi digunakan untuk senjata biologis. Data surveillance Q fever pada hewan di dunia masih terbatas dan menyebabkan distribusi penyakit ini sulit dideteksi. Kesulitan dalam deteksi dini penyakit ini terutama disebabkan oleh gejala klinis yang tidak khas bahkan sering terjadi infeksi subklinis. Maka dari itu Q fever sering diabaikan dalam diferensial diagnosa, sehingga penyakit ini tetap berada pada kelompok ternak dan menimbulkan kerugian ekonomi dalam jangka panjang. Temuan kasus Q fever di Indonesia terutama dilaporkan terdapat pada ruminansia pada rentang tahun 2006 – 2019 dengan cakupan wilayah meliputi Jakarta, Jawa Barat, Yogyakarta, Bali, dan Sumatera Utara. Keberadaan penyakit ini di Jawa Timur belum dikaji ulang sejak penelitian terakhir di tahun 1976. Jawa Timur dikenal sebagai salah satu propinsi yang memiliki kontribusi besar dalam penyediaan pangan asal hewan di Indonesia. Identifikasi dan deteksi penyakit Q fever penting untuk dilakukan, terutama sebagai upaya penyusunan langkah pengendalian terjadinya wabah di manusia. Penelitian ini dilakukan untuk mendeteksi secara molekuler keberadaan bakteri penyebab zoonosis Q fever pada ternak ruminansia di Propinsi Jawa Timur. Penelitian ini dilakukan sejak bulan September 2015 hingga September 2020 yang terdiri dari dua tahap. Tahap pertama merupakan tahapan optimasi metode imunohistokimia untuk mendeteksi keberadaan bakteri C.burnetii di Kabupaten Bogor yang pernah dinyatakan sebagai wilayah endemis penyakit Q fever. Penelitian ini mengambil sampel organ dari sapi dan domba kurban dari wilayah Kabupaten Bogor pada tahun 2015 dan 2016 yang kemudian dideteksi dengan imunohistokimia menggunakan antibodi poliklonal Rabbit anti-C.burnetii, diperoleh dari FKH IPB dan diamati perubahan gambaran histopatologinya dengan pewarnaan Haematoxyline-Eosin (HE). Tahap kedua penelitian adalah penelitian utama dengan tujuan mendeteksi secara molekuler keberadaan bakteri C.burnetii pada ruminansia di Jawa Timur. Sampel penelitian tahap kedua berupa organ hati, limpa, ginjal, paru-paru, dan jantung ruminansia yang diambil dari rumah potong hewan di Surabaya, Malang, dan Madura. Sampel organ yang didapatkan dideteksi secara molekuler dengan metode nested polymerase chain reaction (nested PCR) menggunakan primer dari gen Outer Membrane Protein (OMP) dan gen 16S rRNA kemudian dikonfirmasi dengan imunohistokimia dan diamati perubahan histopatologi dengan pewarnaan HE. Bakteri C.burnetii terdeteksi positif pada organ paru-paru dan limpa sapi kurban di Kabupaten Bogor dengan metode imunohistokimia yang telah dimodifikasi dan dioptimasi. Hasil pemeriksaan imunohistokimia menunjukkan adanya imunoreaksi positif terhadap antibodi C.burnetii pada 4 dari 19 sampel (21%) sapi kurban tahun 2015 dan 3 dari 10 sampel (30%) sapi kurban tahun 2016. Perubahan gambaran histopatologi yang tampak pada sampel positif meliputi kongesti, infiltrasi sel radang, akumulasi mukus, hingga adanya fibrosis pada paru-paru. Pada organ yang positif uji imunohistokimia terhadap bakteri C.burnetii tidak didapatkan lesi patologis yang konsisten. Hal ini diduga berkaitan dengan
Keyword: Coxiella burnetii, Indonesia, kambing lokal, Q fever, zoonosis

Judul: Socioeconomic and psychological variables influencing household debt
Abstrak: The overall objective of this study was to examine factors influencing total debt, total debt payment, and patterns of debt payments. The study examined the impacts of both psychological (credit attitudes and perception of future income) and socioe- conomic variables on total debt, total debt payment and patterns of debt payments. A conceptual model for this study was developed by incorporating the theory of borrower risk, the economic and psychological economic theory of borrowing, and the results of previous studies. This model identifies socioeconomic and psycholog- ical variables that influence total debt, total debt payment, and patterns of debt payments. Socioeconomic variables included in the model are gender, race, mari- tal status, employment status, household size, age, education, and household assets. Psychological variables are credit attitudes toward the use of credit, and perception of future income. This study used data from the 1989 Survey of Consumer Finances. The survey was sponsored by the Federal Reserve in cooperation with some other federal agencies. Data for the survey were collected by the Survey Research Center at the University of Michigan between August 1989 and March 1990. dst ...
Keyword: Gender