Judul: Extraction of Proteins Allergen from Winged Beans Seed, Asian Swamp Eel and Rice Snails to Produce Skin Prick Test Reagents
Abstrak: Alergi pangan merupakan suatu kondisi yang tidak diinginkan yang disebabkan oleh reaksi antibodi imunoglobin E (IgE) terhadap protein makanan. Prevalansi jenis alergi terbilang tinggi terutama pada kelompok bayi dan anakanak usia dini. Gejala yang timbul akibat alergi pangan antara lain kulit kemerahan dan gatal, bibir menebal, mual, diare, bersin, sulit bernafas, pusing hingga pingsan. Untuk menghindari alergi tersebut, masyarakat cenderung menghindari makanan yang diduga menimbulkan alergi, terutama makanan berprotein tinggi secara menyeluruh sehingga dapat berdampak buruk bagi pertumbuhan anak-anak karena keterbatasan sumber-sumber protein pangan. Alergenitas protein pangan bersifat tidak menentu, dapat berubah sesuai dengan jumlah, jenis dan kondisi protein serta kondisi fisiologis penderita alergi. Oleh karena itu, diperlukan uji diagnosis alergi agar penderita, khususnya anak-anak, dapat dipastikan protein penyebab alergi pada saat itu sehingga hanya secara selektif menghindari pangan sumber protein alergen tersebut. Tes alergi yang dilakukan untuk mengetahui jenis pangan yang menyebabkan seseorang tersebut alergi pada saat itu adalah Skin Prick Test atau uji tusuk kulit. Pereaksi yang digunakan untuk uji tusuk kulit adalah ekstrak protein pangan. Bahan pangan yang digunakan adalah biji kecipir (Psophocarpus tetragonolobus L), tutut (Filopaludina javanica (von dem Busch, 1844)) dan belut sawah (Monopterus javanensis La Cepéde, 1800). Ketiga jenis makanan lokal ini merupakan sumber protein yang murah dan cukup melimpah di Jawa Barat sehingga anak-anak yang tidak alergi terhadap protein-protein ini tidak perlu menghindari jenis makanan ini. Sejauh ini belum ada penelitian yang spesifik membahas mengenai alergi ketiga sampel bahan makanan tersebut. Pada penelitian ini, ekstraksi protein tutut dan belut sawah menggunakan variasi beberapa macam ekstrak atau bufer. Penggunaan pelarut yang sesuai berperan penting dalam proses ekstraksi protein karena dapat meningkatkan rendemen dan aktivitas protein alergen yang dihasilkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengekstraksi protein alergen dari biji kecipir (segar dan rebus) pada titik isoelektriknya, serta tutut dan belut (segar dan rebus) menggunakan berbagai bufer (bufer tris glisin/TG, bufer tris glisin DTT/TGD, dan bufer posphate bufer saline/PBS) dan mengakarakterisasi ekstrak protein alergen yang dihasilkan dengan uji elektroforesis SDS-PAGE, immunoblotting dan ELISA menggunakan sera 10 subjek hasil seleksi, dan menguji reaktivitas ekstrak protein biji kecipir, tutut dan belut sawah untuk keperluan diagnosis alergi pangan dengan metode uji tusuk kulit pada subjek penderita alergi pangan di klinik alergi. Hasil ekstraksi protein biji kecipir segar (KS) menghasilkan rendemen ekstrak protein sebesar 30.06%. Hasil ekstraksi protein biji kecipir rebus (KR) menghasilkan rendemen ekstrak protein sebesar 1.41%. Hasil ekstraksi protein belut sawah segar menggunakan bufer TG (BSTG) menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen sebesar 8.87%, belut sawah segar menggunakan bufer TGD iv (BSTGD) sebesar 4.92% dan belut sawah segar menggunakan bufer PBS (BSPBS) sebesar 3.46%. Hasil ekstraksi protein belut sawah rebus menggunakan bufer TG (BRTG) menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen sebesar 3.60%, belut sawah rebus menggunakan bufer TGD (BRTGD) sebesar 2.59% dan belut sawah rebus menggunakan bufer PBS (BRPBS) sebesar 1.93%. Hasil ekstraksi protein tutut segar menggunakan bufer TG, TGD dan PBS menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen masing-masing adalah sebesar 7.01%, 14.31% dan 4.84%. Hasil ekstraksi protein tutut rebus menggunakan bufer TG, TGD dan PBS menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen masing-masing adalah 4.54%, 4.14% dan 3.65%. Profil protein yang dihasilkan dari biji kecipir
Keyword: food allergy, extract allergen, skin prick test, winged bean (Psophocarpus tetragonolobus L), asian swamp eel (Monopterus javanensis La Cepéde, 1800), rice snails (Filopaludina javanica (von dem Busch, 1844))

Judul: Produksi Dan Aplikasi Ekstrak Protein Kacang- Kacangan Dan Produk Laut Sebagai Reagen Uji Alergi Makanan Dengan Metode Skin Prick Test (Spt)
Abstrak: Alergi pangan merupakan reaksi abnormal sistem kekebalan tubuh dalam merespon protein alergen dari makanan dan termasuk reaksi hipersensitivitas yang diperantarai oleh antibodi IgE (IgE-mediated). Alergen memicu sistem imun mensintesis imunoglobulin E (IgE), kemudian IgE terikat pada permukaan sel mastosit. IgE yang terikat pada sel mastosit membentuk ikatan silang dengan alergen yang sama pada paparan selanjutnya dan merangsang degranulasi sel melepaskan mediator patologik seperti histamin, protease dan leukotrien. Mediator-mediator ini menyebabkan gatal, bentol, bengkak, sesak nafas, batuk, dan reaksi yang terberat disebut syok anafilaksis. Sampai saat ini pengobatan dan pencegahan alergi makanan yang terbaik adalah menghindari semua penyebab alergi. Menghindari konsumsi makanan tertentu sebaiknya berdasarkan uji alergi seperti SPT (Skin prick test) dan uji tantangan (food challenge). Skin prick test (SPT) atau uji cukit kulit merupakan uji klinis yang umum digunakan untuk menentukan alergen penyebab alergi. Bahan utama SPT disebut dengan reagen SPT yaitu ekstrak protein yang dicukitkan pada lapisan epidermis kulit lengan bagian volar. Penelitian ini bertujuan memproduksi ekstrak SPT dari kacang kedelai, kacang tanah, kacang bogor, udang jerbung, ikan tongkol dan kerang hijau yang berasal dari bahan pangan lokal. Ekstraksi protein kacang-kacangan dilakukan dengan metode pengendapan pada titik isoelektrik dan produk laut dengan larutan bufer fosfat. Kemudian ekstrak dilarutkan dengan phospat buffer saline (PBS) dan diencerkan dengan larutan gliserol-saline mengandung fenol steril, dikemas dalam botol vial 5 mL dan disebut dengan reagen SPT. Spesifikasi reagen SPT mengacu pada standar European Pharmacopoeia Monograph on Allergen Products 2010:1063 meliputi kadar protein dengan metode Bradford, profil protein dengan metode Sodium dodcylsulfate polyacrilamine gel electrophoresis (SDS-PAGE), immunoblotting untuk menentukan berat molekul protein alergen dan IgE spesifik dengan metode Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Reagen SPT diujikan pada 40 subjek alergi dan non alergi makanan. Hasil SPT dan IgE spesifik digunakan untuk menghitung sensitivitas dan spesifitas reagen SPT. Protokol penelitian ini sudah lolos kaji etik penelitian oleh Komisi Etik Penelitian Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Diponegoro No.190/EC/FKM/2014. Rendemen dan recovery ekstrak protein kacang kedelai adalah 53.10% dan 23.50 g/100g kacang kedelai. Analisis SDS-PAGE mengidentifikasi sebanyak 14 pita protein dengan berat molekul:147 kDa, 102 kDa, 91 kDa, 82 kDa, 76 kDa, 66 kDa, 56 kDa, 30 kDa, 28 kDa, 23 kDa, 22 kDa, 20 kDa, 18 kDa dan 17 kDa. Sebanyak 14 subjek positif SPT dan hasil perhitungan sensitivitas dan spesifitas didapatkan sebesar 100%. Uji immunoblotting menunjukkan bahwa ekstrak protein kacang kedelai mengandung protein alergen dengan kisaran berat molekul antara 17 kDa sampai 61 kDa. Rendemen dan recovery ekstrak protein kacang tanah adalah 74.98% dan 30.43g/100g kacang tanah. Jumlah pita protein yang terdeteksi pada ekstrak kacang tanah sebanyak 10 pita dengan berat molekul: 122 kDa, 70 kDa, 57 kDa, 41 kDa, 37 kDa, 31 kDa, 20 kDa, 19 kDa, 18 kDa dan 17 kDa. Protein alergen kacang tanah ditunjukkan oleh pita dengan kisaran berat molekul antara 10 kDa sampai 49 kDa. Besarnya sensitivitas dan spesifitas reagen SPT kacang tanah adalah 90.9% dan 100% dengan tingkat kesalahan negatif 9.1%. Rendemen esktrak protein kacang bogor sebesar 53.58% dengan recovery sebesar 12.53g/100g kacang bogor. Sebanyak 14 pita protein ditemukan pada ekstrak kacang bogor dengan berat molekul:159 kDa, 115 kDa, 60 kDa, 51
Keyword: Kacang kedelai, kacang tanah, kacang bogor, udang jerbung, ikan tongkol, kerang hijau, IgE spesifik, skin prick test

Judul: Cycle Hamilton pada Graf Lengkap, Graf Regular, dan Graf 2-Connected 4-Regular Berorder Kurang dari Sepuluh
Abstrak: Suatu graf disebut graf Hamilton apabila graf tersebut memuat cycle Hamilton, yaitu cycle yang melewati setiap vertex tepat satu kali. Menentukan keberadaan cycle Hamilton pada suatu graf dapat menggunakan syarat cukup yang berupa teorema-teorema yang telah diperkenalkan sejak tahun 1950-an. Beberapa syarat cukup yang dibahas dalam karya ilmiah ini adalah syarat cukup yang berhubungan dengan graf lengkap dan graf regular. Suatu graf lengkap berorder 𝑛������ ≥ 3 dan graf r-regular berorder 𝑛������ ≤ 2𝑟������ + 1 merupakan graf Hamilton, Karena kedua graf tersebut memuat cycle Hamilton. Selanjutnya, syarat cukup tersebut digunakan untuk menentukan keberadaan cycle Hamilton pada graf 2-connected 4- regular berorder kurang dari 10.
Keyword: graf Hamilton, graf regular, graf lengkap, graf 2-connected 4-regular