Judul: Partial Characterization and Purification of Thermotoga neapolitana Beta-glucosidase Recombinant Enzyme
Abstrak: Sakarifikasi adalah konversi selulosa menjadi glukosa untuk diproses lebih lanjut menjadi bioetanol. Sakarifikasi butuh enzim selulolitik yang salah satunya adalah beta-glukosidase. Enzim beta-glukosidase rekombinan dari bakteri termofilik T. neapolitana yang telah berhasil diekspresikan pada P. pastoris pada penelitian terdahulu. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan karakterisasi parsial dan purifikasi enzim beta-glukosidase T. neapolitana rekombinan. Uji aktivitas dan stabilitas enzim menggunakan glucose test kit yang mengukur kandungan glukosa hasil produk reaksi serta selubiosa sebagai substratnya. Enzim dipurifikasi dengan kromatografi kolom afinitas menggunakan resin Ni-NTA. Hasil menunjukkan bobot molekul dari enzim beta-glukosidase sebesar 53,66 kDa. Karakterisasi parsial menunjukkan pH dan suhu optimum enzim berada pada pH 6,5 dengan aktivitas 2,513 U/mL dan suhu 80℃ dengan 5,579 U/mL. Stabilitas dipertahankan diatas 50% selama 24 jam setelah terpapar pada pH 4,5 dan 7,5 serta 4 jam pada suhu 100℃. Nilai aktivitas spesifik enzim ekstrak kasar diperoleh sebesar 8,599 U/mg dan fraksi kolom sebesar 48,365 U/mg dengan tingkat kemurnian sebesar 6 kali., Saccharification is cellulose conversion into glucose for further processing into bioethanol. This process requires cellulolytic enzymes, one of them is beta-glucosidase. Recombinant beta-glucosidase enzyme from thermophilic bacterium T. neapolitana has been successfully expressed in P. pastoris from previous works. This study aims to partially characterize and purify the recombinant T. neapolitana beta-glucosidase enzyme. Enzyme activity and stability test were measured using glucose test kit that quantify the glucose product of the reaction using cellubiose as the substrate. Enzymes were purified by affinity column chromatography using Ni-NTA resin. Results showed that the beta-glucosidase enzyme has a molecular weight of 53.66 kDa. Partial characterization showed that optimum pH and temperature were at pH 6.5 with a value of 2.513 U/mL and 80℃ with 5.579 U/mL. Enzyme activities were maintained stable above 50% after 24 hours exposure at pH 4.5 and 7.5 and 4 hours exposure at 100℃. Specific activity of crude extract enzyme was 8.599 U/mg and column fraction was 48.365 U/mg with a purity level of 6 times.
Keyword: Beta-glucosidase, chromatography, characterization, P. pastoris, purification

Judul: Isolasi Dan Penapisan Kapang Penghasil Β-Glukosidase Dan Karakterisasi Enzim Yang Dihasilkan
Abstrak: Tumbuh-tumbuhan menghasilkan karbohidrat dalam bentuk pati dan lignoselulosa. Selulosa tidak bisa dimanfaatkan sebagai sumber energi oleh ternak unggas karena hewan tersebut tidak memiliki mikroorganisme rumen yang mampu mencerna selulosa. Beberapa cara pengolahan limbah dilakukan dengan menggunakan bantuan mikrob yang dapat menghasilkan enzim selulolitik. Selain kapang, enzim selulase juga dihasilkan oleh siput dan rayap. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi kapang yang dapat menghasilkan enzim β-glukosidase, memproduksi dan mengkarakterisasi enzim. Sebanyak 22 isolat yang menunjukkan aktivitas β-glukosidase dengan menghasilkan daerah hitam pada medium yang mengandung eskulin, berhasil diisolasi. Kapang yang menghasilkan aktivitas β-glukosidase tertinggi (RM 3D) diidentifikasi sebagai Aspergillus foetidus (Naka.) Thom dan Raper. Produksi enzim β-glukosidase dari Aspergillus foetidus (Naka.) (RM 3D) pada medium yang mengandung 3% polard pada suhu ruang, dan waktu inkubasi 6 hari menghasilkan aktivitas sebesar 3.56 U/ml. Aktivitas optimum enzim β-glukosidase berada pada pH 5.0 dan suhu 60 ºC. Enzim β-glukosidase relatif stabil pada pH 4.2 - 5.0. Enzim β-glukosidase juga stabil pada penyimpanan suhu 28 dan 40 ºC, tetapi tidak stabil pada suhu 80 ºC. Aktivitas β-glukosidase meningkat dengan adanya penambahan kation-kation Mg2+, Ba2+, Ca2+, Mn2+, dan Co2+ dengan konsentrasi akhir 1mM. Aktivitas β-glukosidase meningkat setelah penambahan EDTA dan ion Fe2+ dengan konsentrasi akhir 5 mM. Aktivitas β-glukosidase menurun setelah penambahan kation Cu2+ dan Zn2+, baik dengan konsentrasi akhir 1 mM maupun 5 mM. Aktivitas spesifik β-glukosidase meningkat 2 kali lipat setelah pemekatan dengan menggunakan pelarut organik aseton pada tingkat kejenuhan 80%, tetapi kadar proteinnya menurun 64%. Hasil analisis SDS-PAGE memperlihatkan adanya 4 pita protein yang terbentuk, masing-masing dengan berat molekul 134.9, 104.7, 87.1, dan 41.7 kDa. Hasil analisis zimografi menunjukkan bahwa enzim β-glukosidase Aspergillus foetidus (Naka.) (RM 3D) mempunyai berat molekul 134.9 kDa.
Keyword: Karakterisasi, Energy sources, Celluldytic enzyme, Aspergillus foetidus, Polusacharide, Carbohydrate

Judul: Studi yuridis formal bagi posisi Indonesia dalam sengketa blok ambalat di perairan laut Sulawesi
Abstrak: Indonesia memiliki 17.504 pulau dan merupakan begara maritim terbesar dunia. Hal tersebut memberikan suatu tantangan tersendiri bagi Indonesia, di antaranya mengenai masalah pulau terluar yang terdapat memicu konflik perbatasan. Konflik Blok Ambalat merupakan konflik yang terjadi antara Indonesia dengan Malaysia.
Keyword: