Judul: Peningkatan Ekspresi Transien Gen Eritropoietin (EPO) dengan Penambahan Asam Valproat dalam Sel CHO-K1 yang Diadaptasi
Abstrak: Eritropoietin (EPO) merupakan protein terapeutik yang banyak dimanfaatkan oleh penderita gagal ginjal untuk meningkatkan produksi sel darah merah. Protein EPO dapat diproduksi secara cepat dengan sistem ekspresi gen transien (TGE). Namun kendala dari TGE adalah produksi protein yang dihasilkan lebih rendah dibandingkan sistem ekspresi gen stabil (SGE). Penelitian sebelumnya menginformasikan bahwa inhibitor histon deasetilase (iHDACs), seperti asam valproat (VPA), dapat meningkatkan produksi protein rekombinan dalam sel mamalia dan mempunyai pengaruh yang berbeda-beda untuk tiap sel mamalia. Besarnya peningkatan dan pengaruh VPA terhadap produksi protein EPO pada sel CHO-K1 yang diadaptasi belum diketahui. Oleh karena itu untuk melihat besarnya peningkatan dan pengaruh VPA terhadap produksi protein EPO dalam sel CHO-K1 suspensi dilakukan beberapa parameter dan metode penelitian seperti optimasi konsentrasi lipofektamin sebagai agen transfeksi, optimasi konsentrasi VPA, karakterisasi protein EPO, pengukuran yield protein EPO, pengukuran densitas serta viabilitas sel CHO-K1. DNA plasmid pJ603-EPO berhasil ditransfeksikan ke dalam sel CHO-K1 dengan perbandingan konsentrasi DNA-lipofektamin yang paling optimum dan efisien untuk menghantarkan DNA plasmid pJ603-EPO masuk ke dalam sel CHO-K1 adalah 1:3. Protein EPO yang terekspresi secara ekstraseluler ke dalam media CHO-SFM berhasil dideteksi keberadaannya dengan anti-EPO pada ukuran sekitar 37 kDa. Struktur 5 N-glikosilasi pada glikoprotein EPO terkonfirmasi positif pada ukuran sekitar 22 kDa setelah dilakukan pemotongan dengan enzim N-glikosidase F. Konsentrasi VPA sebesar 4 mM merupakan konsentrasi yang paling optimum untuk meningkatkan ekspresi protein EPO. Penambahan VPA 4 mM pada produksi protein EPO yang diproduksi selama 12 hari menghasilkan yield protein EPO sebesar 14 mg/L, lebih tinggi 2 kali lipat dibandingkan produksi protein EPO tanpa penambahan VPA sebesar 7 mg/L. Data dalam penelitian ini menunjukkan bahwa VPA memiliki pengaruh yang kuat terhadap TGE. Ekspresi transien EPO dalam sel CHO-K1 suspensi yang diadaptasi meningkat hingga 2 kali lipat. Studi ini juga menunjukkan bahwa optimalisasi konsentrasi VPA sangat bermanfaat untuk mendapatkan peningkatan maksimum dalam ekspresi protein yang diinginkan.
Keyword: Asam valproat, CHO-K1, Eritropoietin, Inhibitor HDACs, TGE

Judul: Preparasi Peptida Bioaktif dari Konsentrat Tempe Koro Benguk Menggunakan Reaktor Membran Enzimatis
Abstrak: Kacang koro benguk memiliki potensi sebagai sumber peptida bioaktif. Fungsionalitas peptida bioaktif dapat ditingkatkan dengan proses fermentasi dan hidrolisis menggunakan enzim alkalase secara kontinu. Terdapat beberapa parameter yang berpengaruh dalam hidrolisis protein koro benguk secara kontinu dengan reaktor membran enzimatis yaitu rasio konsentrasi enzim terhadap konsentrasi substrat (E/S) dan residence tim. Penelitian ini bertujuan memproduksi peptida bioaktif tempe koro benguk secara kontinu dengan menggunakan reaktor membran enzimatis dan mempelajari parameter terhadap produksi peptida bioaktif. Penelitian dilakukan dalam beberapa tahap: proses pembuatan tempe koro benguk, isolasi dan karakterisasi protein tempe koro, filtrasi enzim alkalase, serta produksi kontinu peptida bioaktif dengan faktor E/S dan residence time.Karakteristik fungsional yang diamati antara lain kapasistas antioksidan, penghambatan angiotensin converting enzyme (ACE), total fenol, dan kadar protein. PES membran dengan MWCO 5 kDa digunakan dalam tahapan produksi kontinu peptida bioaktif berdasarkan rejeksi enzim dan profil tekanan transmembran pada filtrasi enzim alkalase. Permeat dengan perlakuan E/S 10% dan residene time=9 jam memiliki karakteristik fungsional terbaik. Selanjutnya, hidrolisat yang didapatkan dari kondisi optimum dipisahkan menggunakan PES membran dengan berbagai nilai MWCO (2 dan 4 kDa). Membran dengan 2 kDa menghasilkan permeat dengan profil fungsionalitas yang tinggi. Nilai IC50 antioksidan (metode DPPH) dari permeat hasil terbaik yaitu 7,56 ± 0.30 μg/mL, IC50 antioksidan (metode FRAP) yaitu 12,51 ± 0.40 μg/mL, dan IC50 penghambatan ACE yaitu 0,60 μg/mL. Penelitian ini menunjukkan bahwa produksi peptida yang memiliki aktivitas penghambatan ACE dan antioksidan dapat dilakukan dengan mengadopsi kombinasi metode fermentasi dan in vitro proteolisis secara kontinu dalam reaktor membran enzimatis., Velvet bean has potential as a source of bioactive peptides. The functionality of bioactive peptides can be improved by fermentation and continuous hydrolysis using alcalase enzyme. There are several parameters that influence continuous hydrolysis of velvet bean protein using enzymatic membrane reactor, namely the ratio of enzyme concentration to substrate concentration (E/S) and residence time. This study aims to produce bioactive peptides of velvet bean tempeh continuously using enzymatic membrane reactor and study the parameters for the production of bioactive peptides. This research was conducted by producing velvet bean tempeh, isolation and analysis of velvet bean tempeh protein, filtration of alcalase enzyme, and continuous production of bioactive peptides with factors E/S and residence time. Functional characteristics observed were antioxidant capacity, angiotensin converting enzyme (ACE) inhibition,total phenolic compound, and protein. PES membrane with MWCO 5 kDa was used in the continuous production of bioactive peptides based on enzyme rejection and transmembrane pressure profiles on alcalase enzyme filtration. Permeate produced with E/S= 10% and residence time= 9 hours had the best functional characteristics. Furthermore, the hydrolysate obtained from the optimum conditions was separated using PES membrane with various MWCO values (2 and 4 kDa). The 2 kDa membrane produces a permeate with a high functionality profile. The antioxidant IC50 value (DPPH method) was 7.56 ± 0.30 μg/mL, antioxidant (FRAP method) IC50 was 12.51 ± 0.40 μg/mL, and the ACE inhibition IC50 was 0.60 μg/mL. This study shows that the production of peptides that have ACE inhibitory and antioxidant activity can be carried out by adopting a combination of continuous fermentation and in vitro proteolysis methods in
Keyword: Alcalase, bioactive peptide, enzymatic membrane reactor, tempeh, velvet bean tempeh

Judul: Perencanaan Lanskap Pulau Kecil Banda Naira-Maluku sebagai Kawasan Wisata
Abstrak: Studi hi bertujuan membuat rencana kawasan wisata Banda Naira untuk mendukung keberadaan Taman Laut Banda dengan mempertimbangkan aspek sejarah, sosial budaya, ekologi, ekonomi, dan aspek-aspek penuujang lainnya. Kepulauan Banda secara geografis terletak antara 129'44" - 130~04" BT dan 5'45" - 6'06" LS. Secara administratif Banda Naira dengan luas 450 ha dibatasi oleh Pulau Gunung Api di sebelah barat, Pulau Banda Besar di sebelah selatan dan timur, serta Laut Banda di sebelah utara.
Keyword: