Judul: Cloning of Triacylglycerol Lipase (TGA) and Carboxylesterase (CES) Bacillus velezensis mlp-2  for Modification of Polyester Fabrics.
Abstrak: Poliester adalah polimer yang mengandung gugus fungsional ester dalam rantai utamanya. Sebagai serat sintetis poliester memiliki keunggulan jika dibandingkan dengan serat sintetis lainnya. Kuat, tidak mudah kusut, mudah dibersihkan dan murah adalah beberapa keunggulannya, dibalik kelebihan tersebut kelembapan yang rendah serta sifat hidrofobik menjadi kekurangannya apabila digunakan sebagai bahan baku tekstil. Untuk mengubah sifat hidrofobik poliester menjadi hidrofilik dilakukan modifikasi permukaan, sehingga poliester menjadi lebih mudah menyerap air, pewarna dan nyaman digunakan sebagai bahan baku tekstil. Modifikasi permukaan secara enzimatik menggunakan enzim hidrolase lipolitik adalah metode yang efektif, efisien dan ramah lingkungan. Enzim lipolitik triasilgliserol lipase (EC 3.1.1.3) dan karboksilesterase (EC 3.1.1.1) bekerja pada ikatan ester karboksil, dihasilkan oleh mikroba dan sudah diaplikasikan untuk berbagai bidang industri termasuk industri tekstil. Bakteri dari genus Bacillus diketahui sebagai penghasil enzim hidrolase lipolitik. Pada penelitian ini dilakukan kloning gen triasilgliserol lipase (TGA) dan karboksilesterase (CES) dari Bacillus velezensis mlp-2 untuk mendapatkan enzim triasilgliserol lipase serta karboksilesterase yang mampu diaplikasikan untuk modifikasi permukaan poliester. Penelitian ini dibagi menjadi tiga tahap. Tahap pertama adalah isolasi dan kloning gen triasilgliserol lipase (TGA) dan karboksilesterase (CES) dari B. velezensis mlp-2. Kloning gen TGA, CES beserta promotornya pada vektor plasmid pJET 1.2 blunt dan pGEMT dan transformasi pada sel inang Escherichia coli DH5α. Hasil ekspresi gen TGA dan CES yang berupa protein enzim triasilgliserol lipase dan karboksilesterase dianalisa sekuen asam amino untuk mengetahui hubungan kekerabatan, motif sekuen asam amino, struktur model dan triad katalitiknya. Analisa sekuen asam amino protein TGA dan CES dilakukan dengan mensejajarkan terhadap protein enzim yang sama dari bakteri pembanding dilanjutkan dengan prediksi struktur model 3D menggunakan server online https://swissmodel.expasy.org/. Tahap kedua adalah produksi enzim intraseluler rekombinan triasilgliserol lipase dan karboksilesterase pada media Luria Bertani. Enzim yang dihasilkan diuji aktivitasnya hidrolisisnya, diukur kadar proteinnya dan dikarakterisasi spesifisitasnya terhadap substrat, pengaruh pH, suhu, inhibitor, aktivator, deterjen, pelarut organik dan ion. Tahap ketiga adalah aplikasi enzim triasilgliserol lipase dan karboksilesterase untuk modifikasi kain poliester. Aplikasi modifikasi permukaan kain poliester dilakukan dengan merendam kain poliester pada masing-masing kelompok perlakuan. Kelompok perlakuan meliputi enzim rekombinan triasilgliserol lipase, karboksilesterase, enzim lipase komersial C. rugosa (Amano), enzim lipase non rekombinan B. velezensis mlp-2, kontrol positif (NaOH) serta kontrol negatif (Air). Parameter yang diamati antara lain hidrofilisitas, penyerapan warna, kandungan karboksil dan pengamatan morfologi permukaan kain menggunakan mikroskop electron Isolasi gen Triasilgliserol lipase (TGA) dan Karboksilesterase (CES) dari B. velezensis mlp-2 mendapatkan gen TGA berukuran 645 bp dan gen CES berukuran 1449 bp. Kloning dan ekspresi gen TGA serta CES beserta native promotornya pada inang Escherichia coli DH5α menghasilkan enzim lipase dan karboksilesterase rekombinan intraseluler. Aktivitas enzim TGA dan CES rekombinan intraseluler adalah 0.25 U/mL dan 0.23 U/mL dengan berat molekul 25 kDa dan 50kDa. Enzim TGA mempunyai spesifisitas pada substrat lemak ester p-nitrophenyl-octanoat (C10) dan p-nitrophenyl-palmitate (C16). Enzim CES mempunyai spesifitas pada substrat p-nitrophenyl-asetate (C2) dan p-nitrophenyl-butirat (C4). TGA optimal pada pH 8 suhu 40 °C sedangkan CES optimal pada pH 7 dan suhu 40 °C. Ion logam Mg2+, Mn2+, K+ dan Zn2 menurunkan aktivitas enzim TGA dan CES, sedangkan ion Ca2+ meningkatkan aktivitas pada kedua enzim tersebut. Penambahan inhibitor EDTA (Ethylene Diamine
Keyword: kloning gen, karboksilesterase, modifikasi permukaan, poliester, triasilgliserol lipase

Judul: Isolation and Cloning of Thermo-halotolerant Lipase Gene from Bacillus tequilensis isolated from Lainea Hot Spring in Southeast Sulawesi
Abstrak: Kebutuhan lipase oleh berbagai bidang industri dengan aplikasi yang beragam membuat lipase perlu diproduksi secara cepat dan banyak. Namun lipase yang diproduksi saat ini belum sepenuhnya sesuai dengan industri yang memerlukan pemrosesan dengan kondisi suhu tinggi dan pelarut organik serta interaksi ion dalam larutan seperti kadar garam atau salinitas. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi bakteri penghasil lipase termo-halotoleran dari sumber air panas, mengkloning dan mengekspresikan gen penyandi lipase serta karakterisasi biokimia lipase termo-halotoleran. Pengayaan dilakukan sebelum mengisolasi bakteri lipolitik dari habitat ekstrim seperti sumber air panas. Pengayaan dilakukan secara langsung pada habitat asli atau in situ enrichment. Bakteri lipolitik diisolasi dari sampel hasil pengayaan in situ dengan metode Spread Plate pada media Rhodamin B–Agar. Isolat bakteri lipolitik diidentifikasi berdasarkan gen 16S rRNA. Gen penyandi lipase diisolasi dengan teknik PCR menggunakan degenerate primer. Gen lipase diklon pada vektor pGEM-T Easy kemudian ditransformasi ke Escherichia coli DH5α untuk preservasi gen dan diklon pada vektor pET24a, ditransformasi ke E. coli BL21 (DE3) pLysS untuk diekspresikan. Ekspresi LipA_BTeq dilakukan 2 perlakuan yaitu mengikutsertakan sekuen signal peptida dan diekspresikan tanpa signal peptida (lipase mature). Analisis massa molekuler protein enzim lipase dilakukan dengan SDS-PAGE dan zimogram. Selain itu dilakukan analisis struktur 3D serta kekerabatan dalam Family lipase dianalisis menggunakan aplikasi MEGA XI. Karakterisasi lipase yang dilakukan adalah suhu optimum, pH optimum, stabilitas enzim terhadap salinitas (larutan NaCl), spesifisitas substrat, ketahanan terhadap pelarut organik, serta pengaruh ion logam. Tujuh belas isolat berhasil diisolasi dari sampel hasil pengayaan. Gen lipase dari 5 isolat bakteri lipolitik berhasil diklon dengan kode isolat HSAS, HSDS2, HSC3.1, HSC3.2 dan HSB3. Hasil identifikasi terhadap isolat HSAS, memiliki tingkat kemiripan 99.5% dengan Bacillus tequilensis strain A13 dengan panjang gen lipase (LipA_Bteq) 639 bp yang menyandikan 213 asam amino dengan 31 asam amino di awal sekuen merupakan sekuen signal peptida. Hasil ekspresi gen lipase menunjukkan perlakuan lipase mature memiliki aktivitas spesifik lebih tinggi (17 ± 1.12 U/mg) daripada yang memiliki signal peptida (8 ± 1.11 U/mg), sehingga lipase mature dipilih untuk dikarakterisasi. Hasil analisis SDS-PAGE dan Zimogram menunjukkan berat protein LipA_Bteq sebesar ~20 kDa. Hasil tersebut dikonfirmasi pula analisis MEGA XI yang membentuk klad dengan subfamily lipase I.4. LipA_Bteq memiliki suhu optimum 30 oC, dan memiliki rentang stabilitas suhu 30 oC - 60 oC dengan rata-rata aktivitas relatif 98 %. LipA_Bteq memiliki ketahanan terhadap konsentrasi NaCl 0.1M sampai 3M, dan memiliki aktivitas optimum pada konsentrasi NaCl 2 M. LipA_Bteq digolongkan sebagai lipase halotoleran karena membutuhkan NaCl untuk mencapai aktivitas optimum. Untuk parameter pH, LipA_Bteq memiliki aktivitas tertinggi pada pH 8. LipA_Bteq memiliki preferensi yang baik pada substrat C6 (rantai pendek). Kehadiran ion logam (Fe3+, Cu2+, Mg2+, Ca2+, Na+, dan Mn2+) dengan konsentrasi 100 mM dalam campuran reaksi mampu meningkatkan aktivitas LipA_Bteq. Disisi lain Zn2+ menurunkan aktivitas lipase sampai 83%. Penambahan pelarut organik 50% metanol, isopropanol dan etanol menurunkan aktivitas enzim, sedangkan kehadiran butanol dan n-heksan meningkatkan aktivitas enzim sebesar 12 % dan 20 % secara berurutan., The need for lipase by various industrial fields with diverse applications makes lipases need to be produced quickly and in large quantities. However, the lipases produced today are not fully suitable
Keyword: lipase bakteri, kloning gen lipase, lipase termo-halotoleran

Judul: The Effects of Variance of Interest rate to Variance of Annuity Future Values
Abstrak: Time value of money is a concept that refers to the difference of the value of money due to time difference. The value of money for present time would not be the same as the value of money in the future. The value of money for present time is called as Present Value (PV) of the money and the value of money for future time is called Future Value (FV) of the money. Determination the value of money, for present and future time, depends on the time and rate of return. The value of money is determined by several factors such as inflation, fluctuation of interest rates, and government policy in securities and taxation. Due to fluctuation of the value of money we need a FV formulation, it is useful for knowing whether an investment can be profitable or not, and this information is useful also in budget analysis. Annuity is defined as a series of payments made for a specific period. The payment, fixed or varied, can be made at the beginning or at the end of the period. Annuity paid at the beginning of the period is called annuity-due and annuity paid at the end of the period is called immediate annuity-certain. The accumulated value of the annuity after few years later is called as a final value or a future value. Burnecki et al. (2003) have discussed about the FV of a fixed-rate annuity in which payments are made according to the arithmetic or geometric series. They have also examined FV for annuities in which payments are made according to arithmetic or geometric series with random rates of interest. This paper examines FV for annuity-due in which payments are made according to arithmetic or geometric series with interest rates as a random variable, which is normal distribution ,  . Future value formula is expressed in recursive form. FV for annuity-due which payments are made according to the arithmetic or geometric series with random rates of interest is calculated by theoretical way and simulation way. The random rates of interest is denoted as k k i  i  , where k i an independent random variable; i is a constant and k  is a random variable which has normal distribution ,  . By using the determined parameters, a sequence of random rates of interest are generated for theoretical calculation. Meanwhile for the simulation, the random rates of interest is generated 1000 times for the simulation. The generated data give mean value, variance, and standard deviation. Moreover, error of mean value, variance, and standard deviation from the theoretical and simulation results are calculated. Error calculation uses Symmetric Mean Absolute Percentage Error (SMAPE). The smaller the value of SMAPE is the more accurate the simulation. The interest rate variances are varied from 0.000036 to 0.0001 to study the relationship between variance of rates of interest and variance of future value. The theoretical and simulation results show that when the variance of random rates of interest increases, then the variance of FV increases linearly. FV of the annuity-due in
Keyword: