Judul: Isolasi dan Karakterisasi Protein Kacang Kedelai, Kacang Tanah dan Kacang Bogor Untuk Pembuatan Isolat Alergen
Abstrak: Alergi merupakan salah satu reaksi hipersensitivitas yang memiliki manifestasi klinik yang cukup fatal, sehingga diagnosis alergi menjadi sangat penting dilakukan agar reaksi ini dapat dicegah. Namun, saat ini Indonesia masih mengimpor isolat protein alergen untuk keperluan diagnosis alergi, karena pembuatan isolat alergen membutuhkan suatu penelitian yang cukup rumit terlebih dahulu. Oleh karena itu penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk membuat isolat alergen. Kacang-kacangan merupakan golongan pangan penyebab alergi yang sulit diidentifikasi kerena jenisnya yang beragam, sehingga kacang kedelai, kacang tanah dan kacang bogor menjadi prioritas dalam penelitian ini. Kajian literatur menunjukkan bahwa isolat alergen kacang yang digunakan untuk diagnosis alergi merupakan suatu protein crude karena fraksi dan jenis protein yang bersifat alergenik berbeda-beda pada setiap individu. Berdasarkan hal tersebut, maka penelitian ini bertujuan: (1) mengisolasi protein kacang kedelai, kacang tanah dan kacang bogor; (2) mengkarakterisasi isolat protein dengan uji elektroforesis SDS-PAGE, immunoblotting, dan ELISA; (3) mengidentifikasi penggunaan bentuk crude isolat protein kacang untuk diagnosis alergi; dan (4) menguji reaktivitas isolat protein kacang. Tahapan penelitian meliputi isolasi dan karakterisasi. Sebelum diisolasi, total protein awal masing-masing sampel diukur terlebih dahulu dengan metode Kjeldahl. Isolasi protein kacang dilakukan dengan metode pengaturan pH, kemudian kemurnian isolat dianalisis dengan metode Bradford. Tahap karakterisasi dilanjutkan dengan elektroforesis SDS-PAGE, immunoblotting dan ELISA. Untuk pengujian immunoblotting dan ELISA, digunakan serum yang diambil dari 30 penderita alergi pangan yang berbeda-beda (serum 1-6: penderita alergi kacang; serum 7-30: penderita alergi makanan laut (ikan, udang, kerang, kepiting)), dan 1 orang yang tidak mengalami alergi sebagai kontrol negatif. Informasi alergi para penderita ini diketahui melalui proses wawancara. ..dst
Keyword: alergi pangan, isolat alergen, diagnosis alergi

Judul: Produksi Dan Aplikasi Ekstrak Protein Kacang- Kacangan Dan Produk Laut Sebagai Reagen Uji Alergi Makanan Dengan Metode Skin Prick Test (Spt)
Abstrak: Alergi pangan merupakan reaksi abnormal sistem kekebalan tubuh dalam merespon protein alergen dari makanan dan termasuk reaksi hipersensitivitas yang diperantarai oleh antibodi IgE (IgE-mediated). Alergen memicu sistem imun mensintesis imunoglobulin E (IgE), kemudian IgE terikat pada permukaan sel mastosit. IgE yang terikat pada sel mastosit membentuk ikatan silang dengan alergen yang sama pada paparan selanjutnya dan merangsang degranulasi sel melepaskan mediator patologik seperti histamin, protease dan leukotrien. Mediator-mediator ini menyebabkan gatal, bentol, bengkak, sesak nafas, batuk, dan reaksi yang terberat disebut syok anafilaksis. Sampai saat ini pengobatan dan pencegahan alergi makanan yang terbaik adalah menghindari semua penyebab alergi. Menghindari konsumsi makanan tertentu sebaiknya berdasarkan uji alergi seperti SPT (Skin prick test) dan uji tantangan (food challenge). Skin prick test (SPT) atau uji cukit kulit merupakan uji klinis yang umum digunakan untuk menentukan alergen penyebab alergi. Bahan utama SPT disebut dengan reagen SPT yaitu ekstrak protein yang dicukitkan pada lapisan epidermis kulit lengan bagian volar. Penelitian ini bertujuan memproduksi ekstrak SPT dari kacang kedelai, kacang tanah, kacang bogor, udang jerbung, ikan tongkol dan kerang hijau yang berasal dari bahan pangan lokal. Ekstraksi protein kacang-kacangan dilakukan dengan metode pengendapan pada titik isoelektrik dan produk laut dengan larutan bufer fosfat. Kemudian ekstrak dilarutkan dengan phospat buffer saline (PBS) dan diencerkan dengan larutan gliserol-saline mengandung fenol steril, dikemas dalam botol vial 5 mL dan disebut dengan reagen SPT. Spesifikasi reagen SPT mengacu pada standar European Pharmacopoeia Monograph on Allergen Products 2010:1063 meliputi kadar protein dengan metode Bradford, profil protein dengan metode Sodium dodcylsulfate polyacrilamine gel electrophoresis (SDS-PAGE), immunoblotting untuk menentukan berat molekul protein alergen dan IgE spesifik dengan metode Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Reagen SPT diujikan pada 40 subjek alergi dan non alergi makanan. Hasil SPT dan IgE spesifik digunakan untuk menghitung sensitivitas dan spesifitas reagen SPT. Protokol penelitian ini sudah lolos kaji etik penelitian oleh Komisi Etik Penelitian Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Diponegoro No.190/EC/FKM/2014. Rendemen dan recovery ekstrak protein kacang kedelai adalah 53.10% dan 23.50 g/100g kacang kedelai. Analisis SDS-PAGE mengidentifikasi sebanyak 14 pita protein dengan berat molekul:147 kDa, 102 kDa, 91 kDa, 82 kDa, 76 kDa, 66 kDa, 56 kDa, 30 kDa, 28 kDa, 23 kDa, 22 kDa, 20 kDa, 18 kDa dan 17 kDa. Sebanyak 14 subjek positif SPT dan hasil perhitungan sensitivitas dan spesifitas didapatkan sebesar 100%. Uji immunoblotting menunjukkan bahwa ekstrak protein kacang kedelai mengandung protein alergen dengan kisaran berat molekul antara 17 kDa sampai 61 kDa. Rendemen dan recovery ekstrak protein kacang tanah adalah 74.98% dan 30.43g/100g kacang tanah. Jumlah pita protein yang terdeteksi pada ekstrak kacang tanah sebanyak 10 pita dengan berat molekul: 122 kDa, 70 kDa, 57 kDa, 41 kDa, 37 kDa, 31 kDa, 20 kDa, 19 kDa, 18 kDa dan 17 kDa. Protein alergen kacang tanah ditunjukkan oleh pita dengan kisaran berat molekul antara 10 kDa sampai 49 kDa. Besarnya sensitivitas dan spesifitas reagen SPT kacang tanah adalah 90.9% dan 100% dengan tingkat kesalahan negatif 9.1%. Rendemen esktrak protein kacang bogor sebesar 53.58% dengan recovery sebesar 12.53g/100g kacang bogor. Sebanyak 14 pita protein ditemukan pada ekstrak kacang bogor dengan berat molekul:159 kDa, 115 kDa, 60 kDa, 51
Keyword: Kacang kedelai, kacang tanah, kacang bogor, udang jerbung, ikan tongkol, kerang hijau, IgE spesifik, skin prick test

Judul: Cycle Hamilton pada Graf Lengkap, Graf Regular, dan Graf 2-Connected 4-Regular Berorder Kurang dari Sepuluh
Abstrak: Suatu graf disebut graf Hamilton apabila graf tersebut memuat cycle Hamilton, yaitu cycle yang melewati setiap vertex tepat satu kali. Menentukan keberadaan cycle Hamilton pada suatu graf dapat menggunakan syarat cukup yang berupa teorema-teorema yang telah diperkenalkan sejak tahun 1950-an. Beberapa syarat cukup yang dibahas dalam karya ilmiah ini adalah syarat cukup yang berhubungan dengan graf lengkap dan graf regular. Suatu graf lengkap berorder 𝑛������ ≥ 3 dan graf r-regular berorder 𝑛������ ≤ 2𝑟������ + 1 merupakan graf Hamilton, Karena kedua graf tersebut memuat cycle Hamilton. Selanjutnya, syarat cukup tersebut digunakan untuk menentukan keberadaan cycle Hamilton pada graf 2-connected 4- regular berorder kurang dari 10.
Keyword: graf Hamilton, graf regular, graf lengkap, graf 2-connected 4-regular