Judul: Isolasi dan Kloning Gen Penyandi Fitase dari Bacillus subtilis AQ1 dengan Teknologi Gateway
Abstrak: Fitase merupakan enzim yang dapat mengkatalisis reaksi pemecahan asam fitat untuk membebaskan fosfor dan nutrien yang terdapat dalam kompleks fitat sehingga dapat mengurangi efek antinutrisi dari asam fitat. Enzim ini sangat penting sebagai bahan tambahan pakan ternak monogastrik. Teknik rekayasa genetika diperlukan untuk menghasilkan DNA rekombinan penyandi gen fitase yang lebih stabil dengan produktivitas yang tinggi. Gen phy diisolasi dari bakteri Bacillus subtilis AQ1 yang telah terbukti menghasilkan fitase. Penelitian ini bertujuan menyisipkan gen penyandi fitase pada vektor donor dan vektor ekspresi dengan teknik kloning Gateway. Gen phy hasil kloning ditransformasikan ke dalam E.coli BL21-Star. Ekspresi fitase rekombinan dalam E.coli BL21-Star dapat terlihat dari hasil uji aktivitas fitase pada jam ke-6, ke-12, dan ke-24 yang masing-masing memiliki aktivitas sebesar 1.989 U/mL, 2.988 U/mL, dan 3.331 U/mL. Hasil aktivitas ini menunjukkan bahwa gen fitase yang dikloning dengan metode Gateway dapat terekspresi dalam E.coli BL21-Star.
Keyword: Fitase, asam fitat, Bacillus subtilis AQ1, kloning Gateway

Judul: Telaah pengklonan gen protease dari Bacillus stearo thermophilus ke dalam Escherichia coli
Abstrak: Fragmen-fragmen genom dari Bacillus stearothermophilus, yang dipotong secara parsial dengan Eco RI atau HindIII, telah diklon dalam Escherichia coli dengan teknik shot gun cloning menggunakan plasmid pRK415 sebagai vektornya untuk gen protease. Media agar MacConkey (Jennings dan Beacham, 1989) dengan sedikit modifikasi dipakai untuk deteksi koloni pembawa plasmid rekombinan atau plasmid nonrekombinan. Media tersebut terdiri dari 10 g tripton, 5 g ekstrak kha­ mir, 10 g laktose, 0.075 g neutral red, 15 g agar dalam 1 L dH20, pH diatur pada 7 .4. Untuk deteksi ekspresi gen protease, media tersebut ditambahkan 2 % susu skim. Media ini dinamakan SMMCA (skim milk modified MacConkey agar). Penghilangan kristal violet, garam empedu dan garam memberikan hasil yang baik untuk deteksi koloni-koloni tersebut. Sel koinpeten untuk keperluan pengklonan disiapkan dengan metode miniprep, sesuai prosedur Lederberg dan Cohen (1974) dengan sedikit modifikasi, dilakukan dengan cara mensentrifusi 1.5 mL kultur fase log dalam tabung mikro setelah sebe­lumnya diinkubasikan selama 30 menit pada 0°C. Pelet sel dicuci dengan 1 mL 0.1 M CaC12 dingin, kemudian sel disuspensikan dalam 0.5 mL 0.1 M CaC12 dingin dan diinkubasikan pada 0°C selama 20 menit, sentrifusi terakhir dilakukan dan pelet sel disuspensikan dalam 0.2 mL 0.1 M CaC12 dingin, pada kondisi ini sel siap digu­ nakan untuk transformasi. Isolasi DNA kromosom dengan metode Marmur (1961) mendapatkan DNA dengan kualitas yang cukup baik, dan dapat dipakai untuk keperluan kloning, walauiv pun dilakukan tidak sampai pada tahap pemurnian lanjutan seperti penghilangan RNA dan pemekatan. Dari 500 mL kultur fase log diperoleh lebih kurang 2 mg DNA kromosom. ...
Keyword: Escherichiacoli, Proteinase

Judul: Socioeconomic and psychological variables influencing household debt
Abstrak: The overall objective of this study was to examine factors influencing total debt, total debt payment, and patterns of debt payments. The study examined the impacts of both psychological (credit attitudes and perception of future income) and socioe- conomic variables on total debt, total debt payment and patterns of debt payments. A conceptual model for this study was developed by incorporating the theory of borrower risk, the economic and psychological economic theory of borrowing, and the results of previous studies. This model identifies socioeconomic and psycholog- ical variables that influence total debt, total debt payment, and patterns of debt payments. Socioeconomic variables included in the model are gender, race, mari- tal status, employment status, household size, age, education, and household assets. Psychological variables are credit attitudes toward the use of credit, and perception of future income. This study used data from the 1989 Survey of Consumer Finances. The survey was sponsored by the Federal Reserve in cooperation with some other federal agencies. Data for the survey were collected by the Survey Research Center at the University of Michigan between August 1989 and March 1990. dst ...
Keyword: Gender