Judul: Kriopreservasi Benih dan Tunas In Vitro Pepaya (Carica papaya L.) dengan Metode Vitrifikasi
Abstrak: Kriopreservasi adalah metode penyimpanan plasma nutfah pada temperatur yang sangat rendah (-196 0C) sehingga metabolisme terhenti dan karakter genotipe dan fenotipe tidak berubah. Pusat Kajian Hortikultura Tropika (PKHT) IPB memiliki beberapa koleksi kultivar unggul papaya, yaitu kultivar Caliso untuk pepaya berukuran kecil (500-800 g), kultivar Callina untuk pepaya berukuran sedang (800-1200 g) dan kultivar Sukma untuk pepaya berukuran besar (lebih dari 1200 g). Penyimpanan plasma nutfah ketiga kultivar pepaya tersebut perlu dilakukan dengan metode kriopreservasi karena bahan genetik pepaya mudah berubah saat ditanam di lapangan. Kriopreservasi pepaya dapat dilakukan dengan menggunakan benih maupun tunas. Kriopreservasi tunas pucuk pepaya ini harus didukung dengan kultur in vitro. Kultur in vitro adalah metode perbanyakan secara aseptik dengan menggunakan komposisi media dan zat pengatur tumbuh sehingga arah pertumbuhan dan perkembangan eksplan dapat ditentukan. Tujuan umum dari penelitian adalah mendapatkan protokol kriopreservasi yang paling tepat untuk pepaya kultivar Sukma, Callina, dan Caliso, sehingga plasma nutfah kultivar pepaya tersebut dapat terpelihara. Penelitian terdiri dari tiga rangkaian percobaan. Percobaan pertama adalah kriopreservasi benih pepaya kultivar Sukma, Callina, dan Caliso dengan perlakuan loading dan lama perendaman benih dalam plant vitrification solution 2 (PVS2). Percobaan kedua adalah propagasi tunas pepaya kultivar Sukma secara in vitro dengan aplikasi NAA dan BA. Percobaan ketiga adalah kriopreservasi tunas pepaya kultivar Sukma dengan perlakuan prakultur, loading, serta dehidrasi dengan PVS2 dan modifikasi PVS2. Pada percobaan pertama, benih yang digunakan adalah benih kultivar Sukma, Callina, dan Caliso. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap faktorial dengan dua faktor. Faktor pertama adalah perlakuan loading dengan dua taraf, yaitu dengan perlakuan loading dan tanpa perlakuan loading. Faktor kedua adalah lama perendaman dalam PVS2 dengan 3 taraf, yaitu 15, 30, dan 45 menit. Jumlah perlakuan dalam percobaan adalah 6 perlakuan dengan tiga kali ulangan, sehingga terdapat 18 satuan percobaan. Pada setiap satuan percobaan digunakan 50 benih. Pengamatan dilakukan setiap hari, dari hari pertama setelah semai hingga hari ke-21. Variabel yang diamati pada percobaan pertama adalah daya berkecambah (DB, %), kecepatan tumbuh benih (KCT, %/etmal), indeks vigor (IV, %), dan potensi tumbuh maksimal (PTM, %). Pada percobaan kedua, propagasi tunas secara in vitro hanya dilakukan pada pepaya kultivar Sukma. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak kelompok dengan satu faktor, yaitu konsentrasi BA pada media MS yang telah diperkaya dengan NAA 0.5 mg L-1. Jumlah perlakuan dalam percobaan adalah 6, yaitu kontrol (MS tanpa tambahan ZPT), MS + NAA 0.5 mg L-1, MS + NAA 0.5 mg L-1 + BA 0.5 mg L-1, MS + NAA 0.5 mg L-1 + BA 1.0 mg L-1, MS + NAA 0.5 mg L-1 + BA 1.5 mg L-1, dan MS + NAA 0.5 mg L-1 + BA 2.0 mg L-1. Setiap perlakuan diulang empat kali sehingga terdapat 24 satuan percobaan. Setiap satuan percobaan terdiri dari 5 botol kultur. Setiap botol kultur berisi 4 eksplan tunas, sehingga terdapat 480 eksplan di dalam 120 botol kultur. Pengamatan dilakukan setiap minggu sekali selama 8 minggu setelah tanam untuk mengetahui pertumbuhan dan perkembangan eksplan. Variabel yang diamati yaitu tinggi eksplan, jumlah ruas eksplan, jumlah tunas, jumlah daun, persentase eksplan membentuk akar, dan persentase eksplan membentuk kalus.
Keyword: Kata kunci: dehidrasi, kultur in vitro, krioprotektan, loading, prakultur