Judul: Morphological Characterization, Ploidy Analysis, and In Vitro Anther  Culture of Phalaenopsis Orchid
Abstrak: Anggrek bulan (Phalaenopsis) merupakan salah satu genus penting dalam famili Orchidaceae yang bernilai ekonomi tinggi dan memiliki pasar yang besar di dalam maupun luar negeri. Varietas Phalaenopsis hibrida belum banyak diproduksi dalam negeri, sehingga untuk penyediaan bibit anggrek, pengusaha Indonesia masih tergantung pada varietas impor dari Taiwan dan Thailand. Indonesia perlu mandiri dalam memproduksi varietas hibrida sendiri, oleh karena itu, pemuliaan hibrida tanaman anggrek memerlukan galur murni sebagai tetua persilangan dalam merakit varietas hibrida. Galur murni dalam bentuk tanaman dihaploid (doubled haploid/ DH) dapat dihasilkan melalui kultur antera. Perakitan galur murni melalui perbanyakan konvensional umumnya dilakukan dengan penyerbukan sendiri sampai beberapa generasi yang membutuhkan waktu yang lama. Selain itu, penyerbukan terkadang gagal karena kuncup bunga yang belum menghasilkan (the abortion of immature pod) atau polong yang kosong (tanpa biji). Maka dari itu, teknologi androgenesis dapat diadopsi dalam pemuliaan tanaman hibrida. Informasi tingkat ploidi dari tanaman induk perlu diketahui sebelum dilakukan kultur antera. Tingkat ploidi tanaman donor berpengaruh terhadap respons tumbuh dan regenerasi tanaman dari kultur antera. Karakterisasi morfologi juga penting diamati karena berfungsi sebagai kelengkapan informasi sebelum genotipe tertentu dimanfaatkan untuk kegiatan pemuliaan tanaman. Tujuan umum penelitian ini adalah upaya memperoleh informasi awal dan protokol terbaik dalam merakit tetua galur murni Phalaenopsis hibrida secara in vitro. Sejauh ini belum ada protokol yang mampu menginduksi tanaman dihaploid anggrek, para peneliti masih melakukan penelitian lebih lanjut, oleh karena itu penelitian ini penting dilakukan. Penelitian ini terdiri atas tiga percobaan. Percobaan pertama yaitu menganalisis keragaman morfologi dan tingkat ploidi menggunakan flow cytometry pada Phalaenopsis hibrida kompleks yaitu tiga kultivar hibrida standar (WAL 1702, WAL 1819, WAL 1981), tiga kultivar hibrida novelty multiflora (WAL 3903, WAL 3904 dan WAL 3908) dan tiga Phalaenopsis spesies (Phalaenopsis amabilis (PAB), Phalaenopsis amboinensis (PAM), Phalaenopsis schilleriana (PSC)). Analisis flow cytometry dari sel daun muda dan ujung akar. Zea mays diploid digunakan sebagai standar internal untuk menghitung kandungan DNA inti sampel. Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaan karakter morfologi yang signifikan antara enam kultivar hibrida Phalaenopsis. Kultivar WAL 1819 memiliki ukuran tanaman dan bunga paling besar sedangkan kultivar WAL 3903 memiliki jumlah bunga terbanyak. Analisis flow cytometry menunjukkan Phalaenopsis kultivar dan spesies yang dianalisis mengalami kondisi endopoliploidi dengan pola ploidi 2C–16C. Kultivar hibrida standar yang berukuran lebih besar cenderung memiliki kandungan DNA lebih kecil (5,7– 11,4 pg) dibandingkan kultivar novelty multiflora (9,4 – 15,4 pg). Percobaan kedua bertujuan untuk mempelajari pengaruh stadia perkembangan bunga dan media kultur + kombinasi Zat Pengatur Tumbuh (ZPT). Stadia perkembangan bunga diambil dari beberapa kultivar dan diberi pra-perlakuan suhu dingin selama 24 dan 48 jam, kemudian kultivar dan waktu pendinginan dilakukan analisis uji T. Penelitian menggunakan kultivar hibrida kompleks (WAL 1702, WAL 3903 dan WAL 3904). Sebelum dikulturkan, antera diberi pra-perlakuan waktu suhu dingin 4°C selama 24 jam dan 48 jam. Penelitian ini terdapat dua faktor yaitu stadia perkembangan bunga (mekar, ½ mekar dan kuncup) dan media kultur (MD1, MD2, ND1, ND2). Hasil penelitian menunjukkan bahwa antera dapat membentuk kalus embriogenik. Stadia bunga mekar merupakan stadia bunga terbaik dalam menghasilkan kalus dari antera. Media kultur tidak berpengaruh nyata terhadap semua peubah yang diamati kecuali persentase antera pecah
Keyword: Anther culture, Culture medium, Flowcytometry, Flower development stage, Phalaenopsis