Judul: Extraction of Proteins Allergen from Winged Beans Seed, Asian Swamp Eel and Rice Snails to Produce Skin Prick Test Reagents
Abstrak: Alergi pangan merupakan suatu kondisi yang tidak diinginkan yang disebabkan oleh reaksi antibodi imunoglobin E (IgE) terhadap protein makanan. Prevalansi jenis alergi terbilang tinggi terutama pada kelompok bayi dan anakanak usia dini. Gejala yang timbul akibat alergi pangan antara lain kulit kemerahan dan gatal, bibir menebal, mual, diare, bersin, sulit bernafas, pusing hingga pingsan. Untuk menghindari alergi tersebut, masyarakat cenderung menghindari makanan yang diduga menimbulkan alergi, terutama makanan berprotein tinggi secara menyeluruh sehingga dapat berdampak buruk bagi pertumbuhan anak-anak karena keterbatasan sumber-sumber protein pangan. Alergenitas protein pangan bersifat tidak menentu, dapat berubah sesuai dengan jumlah, jenis dan kondisi protein serta kondisi fisiologis penderita alergi. Oleh karena itu, diperlukan uji diagnosis alergi agar penderita, khususnya anak-anak, dapat dipastikan protein penyebab alergi pada saat itu sehingga hanya secara selektif menghindari pangan sumber protein alergen tersebut. Tes alergi yang dilakukan untuk mengetahui jenis pangan yang menyebabkan seseorang tersebut alergi pada saat itu adalah Skin Prick Test atau uji tusuk kulit. Pereaksi yang digunakan untuk uji tusuk kulit adalah ekstrak protein pangan. Bahan pangan yang digunakan adalah biji kecipir (Psophocarpus tetragonolobus L), tutut (Filopaludina javanica (von dem Busch, 1844)) dan belut sawah (Monopterus javanensis La Cepéde, 1800). Ketiga jenis makanan lokal ini merupakan sumber protein yang murah dan cukup melimpah di Jawa Barat sehingga anak-anak yang tidak alergi terhadap protein-protein ini tidak perlu menghindari jenis makanan ini. Sejauh ini belum ada penelitian yang spesifik membahas mengenai alergi ketiga sampel bahan makanan tersebut. Pada penelitian ini, ekstraksi protein tutut dan belut sawah menggunakan variasi beberapa macam ekstrak atau bufer. Penggunaan pelarut yang sesuai berperan penting dalam proses ekstraksi protein karena dapat meningkatkan rendemen dan aktivitas protein alergen yang dihasilkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengekstraksi protein alergen dari biji kecipir (segar dan rebus) pada titik isoelektriknya, serta tutut dan belut (segar dan rebus) menggunakan berbagai bufer (bufer tris glisin/TG, bufer tris glisin DTT/TGD, dan bufer posphate bufer saline/PBS) dan mengakarakterisasi ekstrak protein alergen yang dihasilkan dengan uji elektroforesis SDS-PAGE, immunoblotting dan ELISA menggunakan sera 10 subjek hasil seleksi, dan menguji reaktivitas ekstrak protein biji kecipir, tutut dan belut sawah untuk keperluan diagnosis alergi pangan dengan metode uji tusuk kulit pada subjek penderita alergi pangan di klinik alergi. Hasil ekstraksi protein biji kecipir segar (KS) menghasilkan rendemen ekstrak protein sebesar 30.06%. Hasil ekstraksi protein biji kecipir rebus (KR) menghasilkan rendemen ekstrak protein sebesar 1.41%. Hasil ekstraksi protein belut sawah segar menggunakan bufer TG (BSTG) menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen sebesar 8.87%, belut sawah segar menggunakan bufer TGD iv (BSTGD) sebesar 4.92% dan belut sawah segar menggunakan bufer PBS (BSPBS) sebesar 3.46%. Hasil ekstraksi protein belut sawah rebus menggunakan bufer TG (BRTG) menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen sebesar 3.60%, belut sawah rebus menggunakan bufer TGD (BRTGD) sebesar 2.59% dan belut sawah rebus menggunakan bufer PBS (BRPBS) sebesar 1.93%. Hasil ekstraksi protein tutut segar menggunakan bufer TG, TGD dan PBS menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen masing-masing adalah sebesar 7.01%, 14.31% dan 4.84%. Hasil ekstraksi protein tutut rebus menggunakan bufer TG, TGD dan PBS menghasilkan ekstrak protein dengan rendemen masing-masing adalah 4.54%, 4.14% dan 3.65%. Profil protein yang dihasilkan dari biji kecipir
Keyword: food allergy, extract allergen, skin prick test, winged bean (Psophocarpus tetragonolobus L), asian swamp eel (Monopterus javanensis La Cepéde, 1800), rice snails (Filopaludina javanica (von dem Busch, 1844))