Judul: Identifikasi penggulung daun tanaman pisang Erionota thrax (Lepidoptera: Hesperiidae) berdasarkan DNA barcoding dan morfologi
Abstrak: Tanaman pisang adalah salah satu tanaman budidaya yang menunjukkan adanya interaksi antara tumbuhan dengan serangga, diantaranya dengan penggulung daun tanaman pisang larva Erionota thrax (Lepidoptera: Hesperiidae). Distribusi penggulung daun tanaman pisang ini di Asia Tenggara, termasuk Indonesia. Erionota thrax memiliki beberapa subspesies yang masing-masing didefinisikan berdasarkan karakter morfologi fase imago, karena pada fase larva menunjukkan adanya kesamaan. Ciri spesies E. thrax belum dideskripsi secara lengkap sehingga sering ditemukan kesulitan pada saat proses identifikasi spesies ini. Identifikasi Erionota dapat dilakukan dengan mempelajari ciri morfologi yang meliputi genitalia dan pola sayap, serta melalui pendekatan molekuler DNA barcoding. Oleh karena itu penelitian ini bertujuan mengidentifikasi E. thrax berdasarkan sekuen gen mitokondrial DNA Cytochrome c Oxidase I (COI) pada larva dan karakter morfologi unik pada imago, serta mengeksplorasi variasi genetik pada diversitas haplotipe dan nukleotida populasi E. thrax di Indonesia. Koleksi sampel penggulung daun tanaman pisang dilakukan di sepuluh lokasi pada lima pulau utama di Indonesia, yaitu: Sumatera (Bangka, Metro, Lampung Timur), Jawa (Serang, Cibinong-Bogor, Bantul), Kalimantan (Sambas), Sulawesi (Gorontalo, Palu) dan Papua (Sorong). Identifikasi morfologi dilakukan pada sampel imago penggulung daun tanaman pisang berdasarkan genitalia dan karakter pola sayap yaitu dua spot kuning pada sel diskal. Tahap identifikasi melalui DNA barcoding meliputi Ekstraksi DNA, amplifikasi dan sequencing gen COI. Tahap analisis bioinformatik meliputi Basic Local Alignment Search Tool-Nucleotide (BLAST-N) di NCBI (www.ncbi.nml.nih.gov), analisis jarak genetik dan konstruksi pohon filogeni. Penelitian ini berhasil mendapatkan sekuen DNA gen COI dengan ukuran 630 pb dari empat puluh individu larva penggulung daun tanaman pisang. Konstruksi pohon filogeni empat puluh sekuen DNA larva penggulung daun tanaman pisang hasil penelitian ini dilakukan bersama dengan tiga sekuen DNA dari GenBank yaitu gen COI E. thrax, Erionota sp., dan Suastus gremius. Hasil rekonstruksi pohon filogeni juga menunjukkan adanya pengelompokan larva penggulung daun tanaman pisang berdasarkan lokasi populasi menjadi dua klade yaitu populasi Sundaland (Sumatera, Jawa, Kalimantan, dan Papua), dan populasi Sulawesi. Klade yang terbentuk didukung oleh data distribusi yang sesuai dengan wilayah distribusi Indo-Malaya dan Australasia. Hal tersebut menunjukkan bahwa gen COI dapat digunakan untuk menganalisis hubungan evolusi dan kekerabatan antara larva penggulung daun tanaman pisang di wilayah Indo-Malaya dan Australasia. Berdasarkan gen COI pada E. thrax populasi Sundaland terdapat enam haplotipe di Sumatera, Jawa, Kalimantan, dan Papua yang teridentifikasi sebagai E. thrax thrax serta satu haplotipe E. thrax populasi Sulawesi yang teridentifikasi sebagai E. thrax hasdrubal. Beberapa populasi pada subspesies E. thrax thrax memperlihatkan adanya haplotipe yang sama. Hal ini mengindikasikan adanya aliran genetik antar populasi yang tergantung pada jarak geografis, karena adanya perdagangan pisang sebagai tanaman inang E. thrax serta perpindahan materi genetik antar pulau melalui transportasi laut. Selanjutnya pada penelitian ini diperoleh informasi bahwa sampel imago penggulung daun tanaman pisang termasuk ke dalam E. thrax dengan ciri karakter genitalia jantan berupa sklerotisasi yang kuat pada cincin lateral dan lengan ventral process pada masing-masing basal lateral process. Terdapat beberapa karakter yang membedakan antara populasi Sundaland dan populasi Sulawesi. Ciri genitalia jantan E. thrax populasi Sundaland memiliki M-shape uncus yang pendek; melengkung ujung lateral process yang tumpul dan mencapai eksrimitas uncus pada dorsal dorsum; elongate dorsal ring loop yang luas; panjang valva
Keyword: Erionota thrax, haplotype, population, COI gene, genitalia character