Judul: Potensi Aktivitas Antioksidan dan Antimutagenik
Metabolit Ekstraseluler Bakteri Endofit Daun Cengkeh (Syzygium aromaticum L.).
Abstrak: Bakteri endofit merupakan bakteri yang hidup di dalam jaringan tanpa menyebabkan gangguan atau kerusakan pada inangnya. Studi menunjukkan bahwa bakteri endofit tumbuhan dapat memproduksi dan mensintesis senyawa bioaktif yang sama seperti inangnya. Bioaktivitas yang dimiliki senyawa tersebut dapat berpotensi sebagai antioksidan dan antimutagenik. Antioksidan berfungsi sebagai penghambat toksisitas radikal bebas. Radikal bebas diketahui merupakan salah satu mutagen pemicu mutasi DNA. Oleh karena itu, aktivitas antioksidan suatu senyawa juga memiliki potensi sebagai senyawa antimutagenik. Ekstrak cengkeh Syzygium aromaticum L. diketahui telah memiliki banyak manfaat dibidang kesehatan. Kelompok bakteri Bacillus sp. juga telah banyak diteliti memiliki manfaat sebagai antioksidan dan antikanker. Informasi aktivitas antioksidan dan antimutagenik ekstrak bakteri endofit Bacillus sp. dari daun cengkeh belum tersedia, hingga saat ini. Oleh karena itu tujuan dari penelitian ini ialah mengisolasi dan menganalisis bakteri endofit kelompok Bacillus sp. dari daun cengkeh yang memiliki aktivitas antioksidan dan antimutagenik. Penelitian ini dilakukan dengan beberapa tahap yaitu, dengan isolasi bakteri endofit, uji patogenisitas, identifikasi bakteri berdasarkan analisis molekuler berbasis 16S rRNA, ekstraksi senyawa bioaktif bakteri, selanjutnya penentuan aktivitas antioksidan menggunakan radikal 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), dan metode yang digunakan dalam menganalisis kemampuan ekstrak bakteri endofit sebagai agen antimutagenik adalah uji dekolorisasi, efek paparan sinar UV dan uji viabilitas sel, sedangkan aktivitas antimutagenik dianalisis baik secara in vitro dan di level seluler menggunakan khamir Saccharomyces cerevisiae sebagai organisme model. Pendeteksian senyawa aktif asal ekstrak bahan aktif bakteri endofit menggunakan LC-MS. Jumlah bakteri endofit yang berhasil diisolasi dari daun cengkeh sebanyak 10 isolat, diketahui hanya diperoleh satu isolat P1U2 yang dinyatakan tidak patogen terhadap manusia (ditandai dengan tidak terbentuknya zona bening pada media blood agar). Berdasarkan hasil uji karakteristik isolat P1U2 memiliki koloni berwarna kuning, bentuk koloni sel bakteri pada media nutrient agar melingkar, dengan sel yang berbentuk basil, termasuk bakteri gram positif dan memiliki spora. Berdasarkan analisis sekuens 16S rRNA, P1U2 memiliki nilai similarity tertinggi sebesar 99,65% dengan Fictibacillus sp. Ekstraksi ekstraseluler menggunakan pelarut etil asetat diperoleh rendemen sebesar 0,079%. Hasil uji aktivitas antioksidan diketahui bahwa ekstrak P1U2 memiliki nilai IC50 sebesar 161 ppm. Uji antimutagenik dilakukan menggunakan mutagen senyawa toksin hijau malakit. Penambahan ekstrak mengurangi kemampuan S. cerevisiae mendekolorisasi hijau malakit, namun penambahan ekstrak P1U2 mampu meningkatkan viabilitas sel khamir. Berdasarkan analisis efek paparan sinar UV, penambahan ekstrak P1U2 (161 ppm) mampu mempertahankan viabilitas khamir S. cerevisiae dalam menangkal mutagen UV. Hasil analisis LC-MS ekstrak P1U2 menunjukkan keberadaan senyawa quercetin, benzofuran, asam linolenat, euparin, dan aeruginosin. Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa quercetin merupakan salah satu senyawa fenol dominan pada cengkeh. Senyawa ini diduga berpotensi besar sebagai antioksidan dan antimutagenik.
Keyword: Antioksidan, Bacillus, Bakteri endofit, Daun cengkeh, Radikal bebas