Judul: Study of Functional Properties and Antioxidant Activity of Catfish Protein Isolate Hydrolysate
Abstrak: Antioksidan merupakan suatu senyawa yang mampu mencegah terjadinya reaksi oksidasi. Salah satu sumber antioksidan yang saat ini banyak diteliti adalah peptida. Peptida hasil hidrolisis protein dilaporkan mempunyai kapasitas sebagai antioksidan yang cukup potensial. Beberapa penelitian in vitro menunjukkan bahwa hidrolisat protein ikan memiliki bioaktifitas sebagai agen antioksidan. Sumber antioksidan dari peptida ikan yang cukup potensial adalah ikan lele oversize atau ukuran besar (kurang dari 5 ekor/kg) yang pemanfaatannya belum optimal sebagai lele konsumsi. Salah satu cara memproduksi peptida bioaktif adalah dengan proses enzimatis. Penelitian ini bertujuan umum untuk memperoleh hidrolisat dari isolat protein daging ikan lele dengan kemampuan sebagai antioksidan. Tujuan khusus penelitian ini adalah mengkarakterisasi isolat protein ikan lele, mengevaluasi hidrolisat dari isolat protein daging ikan lele sebagai sumber potensial antioksidan, dan mengidentifikasi peptida antioksidan dari hidrolisat isolat protein ikan lele. Penelitian terdiri dari tiga tahap. Tahap pertama, adalah karakterisasi sifat fungsional isolat protein ikan lele (Clarias sp.). Produksi isolat protein dengan metode pergeseran pH (pH-shift) pada pH 11 untuk melarutkan protein dan pH 5,5 untuk pengendapan protein. Isolat protein yang dihasilkan dievaluasi kadar proksimat berupa kadar air, kadar protein, kadar lemak dan kadar abu, kandungan asam amino dan sifat fungsional protein. Tahap kedua, tentang karakterisasi dan sifat kapasitas antioksidan dari peptida bioaktif hasil hidrolisis isolat protein ikan lele. Hidrolisat protein ikan lele diperoleh dari hasil hidrolisis isolat protein ikan lele dengan enzim papain dan bromelin. Evaluasi dari hidrolisat protein ikan lele meliputi kondisi hidrolisis, dan kapasitasnya sebagai antioksidan dengan metode DPPH dan PFRAP. Tahap ketiga, adalah identifikasi peptida antioksidan dari hidrolisat isolat protein ikan lele. Hidrolisat dengan kapasitas antioksidan terpilih difiltrasi dengan membran 3 kDa dan selanjutnya dikarakterisasi peptidanya menggunakan Nano LC Ultimate 3000 series system Tandem Q Exactive Plus Orbitrap high-resolution mass spectrometry. Identifikasi peptida antioksidan pada peptida yang dihasilkan dilakukan berdasarkan database BIOPEP dan penelusuran literatur. Isolat protein ikan lele mengandung asam-asam amino kelompok hidrofobik dan aromatik sebagai asam amino potensi antioksidan. Isolat protein penelitian ini memenuhi standar FAO dengan kadar protein 90,46% (bk). Sifat fungsional isolat protein ikan lele yang dihasilkan memiliki kemampuan pembentuk gel pada konsentrasi 5%, penyerapan minyak 4,08 g/mL, penyerapan air 3,38 g/mL, Kapasitas emulsi 1,52 mL/mL dan stabil selama waktu pengamatan 90 menit, Kapasitas busa 0,89 mL/mL, dan 0,64 g/mL densitas kamba. Hidrolisat protein hasil hidrolisis isolat protein ikan dipengaruhi oleh perbedaan waktu hidrolisis. Perbedaan waktu hidrolisis berpengaruh nyata terhadap nilai derajat hidrolisis dan kapasitas antioksidan oleh enzim papain dan bromelin, kecuali daya reduksi besi dengan enzim bromelin. Hidrolisis isolat protein ikan selama 30 menit oleh enzim papain dan bromelin menghasilkan hidrolisat protein dengan derajat hidrolisis, scavenging radikal DPPH, dan daya reduksi ion besi (PFRAP) masing-masing sebesar 37,77 ± 2,99% dan 48,82 ± 0,90%, 59,58 ± 0,05% (15,83 mg/L AEAC) dan 49,52 ± 6,01% (13,07 mg/L AEAC), dan 0,80 ± 0,02 dan 0,44 ± 0,06. Hidrolisat dengan waktu hidrolisis selama 30 menit dengan enzim papain dari hidrolisat isolat protein ikan memiliki kapasitas sebagai antioksidan. Selanjutnya hidrolisat tersebut diultrafiltrasi dengan membran ukuran 3 kDa. Hasil fraksinasi berdasarkan berat molekul, peptida dengan ukuran < 3 kDa menghasilkan kapasitas antioksidan berupa scavenging radikal DPPH dan daya
Keyword: antioxidants, bioactive, catfish, peptides, papain, bromelain