Judul: Asal-Usul dan Hubungan Kekerabatan Sapi Galekan Berdasarkan Genom D-loop DNA Mitokondria
Abstrak: Sapi Galekan merupakan salah satu hewan ternak lokal Indonesia. Sapi lokal Indonesia sebagai sumber daya genetik yang berasal dari persilangan antara sapi asli Indonesia dengan sapi yang berasal dari luar yang telah masuk ke Indonesia dan telah ditetapkan sebagai sapi lokal Indonesia. Sapi Galekan diperkirakan berasal dari persilangan antara Bos indicus dan Bos javanicus CERZA. Pernyataan lain diperkirakan merupakan hasil persilangan antara Peranakan ongole (PO) dengan sapi Bali. Informasi genetik mengenai sapi Galekan belum tercatat dengan baik dan masih terdapat perbedaan data penelitian. Penelusuran sejarah asal-usul dan hubungan kekerabatan sapi dapat dilakukan dengan menganalisis daerah d-loop DNA mitokondria (mtDNA). Setiap individu yang memiliki indukan yang sama akan memiliki tipe mtDNA yang sama. Hal ini disebabkan mtDNA diturunkan melalui garis maternal. Sapi lokal merupakan salah satu hewan ternak yang memiliki peran penting terhadap kehidupan manusia dan industri ternak Indonesia. Persilangan dan pengembangan sapi lokal Indonesia menyebabkan terbentuknya keragaman genetik dan keterkaitan atau hubungan kekerabatan diantaranya. Penelitian ini diharapkan dapat membantu peningkatan program pemuliaan dan pelestarian sapi Galekan. Data molekuler telah menghasilkan informasi mengenai sejarah dan nenek moyang rumpun sapi. Untuk memahami tentang pewarisan induk atau secara maternal pada sapi Galekan, kami mengalisis urutan nukleotida daerah d-loop serta menganalisis hubungan kekerabatan (filogenetik) antara sapi Galekan dengan sapi Pasundan dan sapi Donggala. Sampel darah sapi yang digunakan sebanyak 30 sampel yaitu 16 sampel dari sapi Galekan yang diambil melalui vena jugularis sapi Galekan dari Unit Pelaksana Teknis Daerah (UPTD) Pusat Pembibitan Ternak dan RPH Dinas Pertanian dan Pangan Kabupaten Trenggalek, Provinsi Jawa Timur, Indonesia. 11 sampel DNA sapi Pasundan berasal dari Pusat Penelitian untuk Bioteknologi, Badan Riset dan Inovasi Nasional (BRIN) dan 3 sampel sapi Donggala berasal dari koleksi sampel Prof. Dr. Jakaria, S. Pt., M.Si. Fakultas Peternakan, IPB. Sampel darah tersebut diamplifikasi dengan metode PCR (Polymerase Chain Reaction). Amplifikasi daerah d-loop dilakukan menggunakan sepasang primer AF22 dan AF23 yang mengapit ujung 3’ gen cyt b hingga ujung 3’ daerah d-loop. Data sekuen d-loop diedit dan disejajarkan dengan sekuen referensi dari Genbank menggunakan CrustalW dalam program MEGA 7.0. Perhitungan jarak genetik menggunakan perhitungan pairwise distance dan rekonstruksi pohon filogenetik dianalisis menggunakan metode Neighbor-Joining (NJ) berdasarkan model Kimura-2- parameter (K2P). Hasil sekuensing didapatkan runutan sekuen d-loop DNA dengan panjang bervariasi yang disebabkan oleh insersi maupun delesi. Terdapat ruas berulang (tandem repeat) dengan panjang 22 nt ditemukan dalam runutan basa nukleotida 11 sampel sapi Galekan dengan motif GTACATAATATTA dan ATGTAATAA. Hasil analisis filogenetik di daerah d-loop menunjukkan dua clade (kelompok); Bos indicus dan Bos javanicus CERZA. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa sapi Galekan berasal dari dua garis keturunan maternal seperti sapi lokal Indonesia lainnya. Sapi Galekan memiliki hubungan kekerabatan yang dekat dengan spesies pembanding dari sapi Pasundan dan sapi Donggala.
Keyword: local cattle, maternal, Bos indicus, Bos javanicus CERZA