Judul: Pengembangan potensi aktinobakteri endofit tanaman obat sebagai penghasil inhibitor lipase pankreas
Abstrak: Salah satu strategi yang paling menjanjikan untuk penurunan berat badan adalah dengan menghambat penyerapan lemak oleh lipase pankreas. Tanaman yang digunakan sebagai penghasil inhibitor lipase pankreas ini diantaranya adalah Alpinia galanga (lengkuas), Kaempferiae galanga (kencur), Zingiber cassumunar (bangle), Guazuma ulmifolia, Murraya paniculata (kemuning) dan Kaempferiae rotunda (kunci pepet). Namun penggunaan tanaman obat ini dapat mempunyai beberapa kendala yaitu membutuhkan bahan baku yang banyak dan membutuhkan waktu yang lama. Oleh karena itu dibutuhkan alternatif baru dengan menggali sumber daya mikrob yang terdapat di dalam jaringan tanaman yang disebut dengan mikrob endofit. Mikrob endofit diharapkan dapat menghasilkan senyawa bioaktif yang sama dengan tanaman inangnya. Salah satu mikrob endofit adalah aktinobakteri yang memiliki potensi tinggi dalam memproduksi beragam senyawa bioaktif, diantaranya adalah, senyawa antibakteri, antitumor dan inhibitor enzim. Tujuan penelitian ini adalah mendapatkan isolat aktinobakteri endofit asal tanaman obat yang mampu menghasilkan inhibitor lipase pankreas, mengkaji keragaman morfologi dan molekuler aktinobakteri endofit penghasil lipase pankreas, mengkarakterisasi senyawa inhibitor lipase pankreas yang dihasilkan oleh isolat aktinobakteri endofit, dan mengetahui kemampuan aktinobakteri endofit terpilih dalam menghasilkan inhibitor lipase pankreas melalui studi komparasi aktivitasnya dengan tanaman inangnya dan tanaman hasil kultur jaringan bebas mikrob endofit. Media yang digunakan untuk mengisolasi aktinobakteri endofit adalah humid acid vitamin agar. Keragaman morfologi diobservasi berdasarkan pengamatan langsung terhadap koloni aktinobakteri endofit dan secara mikroskopis. Aktivitas inhibitor lipase pankreas diukur menggunakan spektrofotometer. Identifikasi isolat terpilih dilakukan berdasarkan analisis gen 16S rRNA. Ektraksi senyawa bioaktif dilakukan menggunakan pelarut etanol, etil asetat, dan n-heksan. Pemeriksaan fitokimia meliputi pemeriksaan alkaloid, sterol dan triterpenoid, saponin, polifenol dan tanin serta flavonoid. Uji toksisitas dilakukan dengan menggunakan larva udang Artemia salina yang berumur 48 jam. Profil senyawa dikaji menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Untuk mengetahui peran isolat aktinobakteri endofit dalam menghasilkan inhibitor lipase pankreas, digunakan tanaman terpilih bebas endofit hasil kultur jaringan, dan dibandingkan dengan aktivitas inhibitor lipase pankreas tanaman yang tumbuh di alam, dan kultur murni aktinobakteri endofitnya. Pada penelitian ini diperoleh 35 isolat aktinobakteri endofit dari beberapa tanaman obat, yang terdiri atas 12 isolat dari rimpang kunci pepet, 9 isolat dari rimpang bangle, 6 isolat diperoleh dari rimpang lengkuas, 5 isolat dari rimpang kencur, dan 3 isolat dari daun kemuning. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semua isolat aktinobakteri endofit tersebut memiliki kemampuan inhibitor lipase pankreas yang beragam. Nilai penghambatan terendah yaitu 6.1% dan nilai penghambatan tertinggi yaitu 96.5%. Selanjutnya 5 isolat dengan aktivitas inhibitor lipase pankreas tinggi dipilih untuk diuji lebih lanjut kemampuan inhibitor lipase pankreasnya yaitu AEBg4, AEBg10, AEBg12, AELk3, dan AEKp9. Nilai aktivitas inhibitor lipase pankreas menunjukkan bahwa isolat AEBg12 (95.3%) memiliki kemampuan yang lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol positif yaitu orlistat (93.6%). Untuk ke 4 isolat yang lain yaitu AEBg4, AEBg10, AELk3, dan AEKp9 diperoleh nilai aktivitas yang lebih rendah jika dibandingkan dengan orlistat. Hasil identifikasi secara morfologi makroskopis, mikroskopis dan berdasarkan 16S rRNA menunjukkan kelima isolat terpilih merupakan Streptomyces spp. Identifikasi molekuler berdasarkan sekuen parsial 16S rRNA menunjukkan bahwa aktinobakteri endofit AEBg4, AEBg10, dan AEBg12 memiliki kemiripan paling tinggi dengan Streptomyces sp. S170 yaitu masingmasing sebesar 93, 99, dan 98%. Isolat AEBg4 memiliki kemiripan sebesar 92% dengan type strain S. lannensis JCM 16578T. AEKp9
Keyword: Aktinobakteri endofit, bangle (Zingiber cassumunar), inhibitor lipase pankreas, Streptomyces sp. AEBg12