Judul: Aktivitas Antioksidan Karboksimetil Kitosan Pupa Ulat Sutra (Bombyx mori L.) dan Efeknya pada Peroksidasi Lipid Human Plasma Secara In Vitro.
Abstrak: Stres oksidatif memainkan peran besar dalam perkembangan penyakit-penyakit terkait dengan pola hidup, seperti kanker dan kardiovaskuler (Rahman 2003; Huy et al. 2008). Penanganan baik preventif maupun kuratif terhadap penyakit-penyakit tersebut dapat dilakukan melalui pengubahan pola hidup, konsumsi pangan harian, maupun pengobatan medis. Pengubahan pola konsumsi pangan dapat dilakukan dengan beberapa cara, diantaranya dengan meningkatkan konsumsi makanan yang sehat dan kaya antioksidan. Karboksimetil kitosan (KMK) adalah salah satu jenis turunan kitosan yang dipercaya banyak memberikan manfaat terhadap kesehatan, antara lain sebagai antioksidan, anti hipertensi, anti inflamatori, anti mikrobial, dan anti kanker (Ngo et al. 2015). Selain cangkang hewan krustasea, pupa ulat sutra yang merupakan limbah industri sutra juga merupakan sumber alternatif dari kitosan beserta turunannya (Zhang et al. 2000; Zhu dan Zhang 2016). Hal ini menunjukkan bahwa limbah ini berpotensi sebagai bahan sumber antioksidan KMK. Penelitian ini merupakan upaya untuk mempelajari potensi pupa ulat sutra sebagai sumber antioksidan KMK serta kemampuannya dalam penghambatan peroksidasi lipid human plasma melalui uji in vitro. Penelitian ini menggunakan desain eksperimental dan dilakukan dalam dua tahap, yaitu tahap pendahuluan dan tahap penelitian utama. Tahap penelitian pendahuluan bertujuan untuk menentukan perlakuan (molaritas NaOH, terdiri dari 5 M, 10 M, dan 15 M) terbaik dalam pembuatan KMK serta melakukan uji karakteristik fisiko-kimia KMK. Produk KMK terbaik ditentukan berdasarkan karakteristik fisiko-kimia yang paling mendekati nilai standar. Penelitian utama dimaksudkan untuk melakukan analisis toksisitas, aktivitas antioksidan, dan penghambatan peroksidasi lipid human plasma secara in vitro. Analisis toksisitas dilakukan dengan uji Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Analisis aktivitas antioksidan dilakukan dengan uji 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazil (DPPH). Analisis penghambatan peroksidasi lipid human plasma dilakukan dengan uji Thiobarbituric Acid Reactive Species (TBARS). Pupa ulat sutra sebagai substansi utama dalam penelitian diperoleh dari beberapa industri pemintalan sutra di Wajo, Sulawesi Selatan dan Pati, Jawa Tengah yang menggunakan ulat sutra dengan spesies dan galur yang sama. Kemudian, pupa diolah untuk memperoleh kulit pupa dan selanjutnya diproses menjadi kitosan. Karakteristik fisiko-kimia kulit pupa ulat sutra, yaitu nilai rendemen 20 %; kadar air 1.19±0.01 %; kadar abu 9.01±0.33 %; kadar lemak 4.22±0.19 %; nitrogen total 11.22±0.20 %; serta berwarna coklat tua, berbau tengik, dan berbentuk serpihan. Karakteristik fisiko-kimia kitosan pupa ulat sutra, yaitu nilai rendemen 14; kadar air 6.58±0.37 %; kadar abu 0.09±0.04 %; kadar lemak 0.94±0.04 %; nitrogen total 5.63±0.01 %; derajat deasetilasi (DD) 79.88±0.62 %; serta berwarna coklat muda, tidak berbau, dan berbentuk serbuk kasar. Nilai karakteristik fisiko-kimia kitosan telah memenuhi standar KMK yang dikeluarkan oleh EFSA (2009), kecuali nilai DD. Namun demikian, nilai DD ini telah memenuhi standar GRAS associate (2012) yang menetapkan standar nilai DD kitosan berkisar 75-95 %. Pada penelitian ini, kitosan kemudian disintesis menjadi KMK melalui proses alkalisasi dengan NaOH, karboksimetilasi dengan asam monokloroasetat, dan netralisasi dengan etanol 96 %. Proses alkalisasi kitosan menjadi KMK dilakukan dengan menggunakan tiga molaritas NaOH (5 M, 10 M, dan 15 M). Hasil analisis memperlihatkan bahwa nilai rendemen KMK berkisar 113.79-115.94 %, kadar air KMK berkisar 10.80-11.99 %, kadar abu berkisar 0.04-0.37 %, nitrogen total berkisar 4.06-4.76 %. KMK yang dihasilkan memiliki nilai kelarutan berkisar 93.39-99.28 %, nilai pH KMK berkisar 4.01-4.22, dan nilai viskositas KMK berada pada kisaran
Keyword: antioksidan, karboksimetil kitosan, peroksida lipid, toksisitas