Judul: Pengembangan Teknologi Perbanyakan Dendrobium Melalui Embriogenesis Somatik Berbasis Bioreaktor
Abstrak: Dendrobium merupakan komoditas anggrek yang bernilai ekonomi tinggi dan banyak diminati pasar. Kebutuhan pasar dalam negeri akan anggrek ini mencapai 704 460 tangkai per tahun, namun produk tersebut didominasi oleh produk impor. Dipihak lain, Indonesia memiliki cukup banyak varietas unggul baru (VUB) Dendrobium yang berpotensi besar untuk dikembangkan dan bersaing dipasaran dengan produk impor. Permasalahan yang dihadapi pada pengembangan VUB Dendrobium lokal skala komersial adalah ketersediaan benih bermutu yang terbatas. Penyediaan benih bermutu secara konvensional untuk tujuan komersial tidak mungkin diandalkan. Teknologi perbanyakan klonal anggrek Dendrobium yang ada saat ini masih bersifat konvensional dan sederhana dengan produktivitas yang rendah dan kapasitas produksi yang masih sangat terbatas. Oleh karena itu ketersediaan teknologi perbanyakan yang efektif dan efisien sangat diperlukan untuk menunjang perkembangan dan kemajuan agribisnis Dendrobium di Indonesia. Teknologi perbanyakan masal benih Dendrobium yang efektif dan efisien berhasil dikembangkan melalui embriogenesis somatik berbasis bioreaktor. Inisiasi kalus embriogenik (KE) dilakukan dengan menanam tunas pucuk plantlet kultivar D. Indonesia Raya ‘Ina’ pada medium IM-3 padat (1/2 MS + 1.5 mg L-1 TDZ + 0.5 mg L-1 BA + 20 g L-1 sukrosa + 2 g L-1 gelrite). Kultur diinkubasi pada fotoperiode terang 12 jam di bawah lampu fluorescent dengan intensitas cahaya 13 μmol m-2 s-1 pada suhu 23.5 ± 1.1°C selama ± 1 bulan. KE terinisiasi ± 7.1 hari setelah kultur diinkubasi dengan 98.7% pembentukan KE. Proliferasi KE dilakukan dalam tiga tahap, yaitu: (1) Proliferasi awal KE, dilakukan menggunakan teknik thin cross section (TCS) KE primer dan mengkulturkannya pada medium IM-3+ padat (IM-3 + 150 mL L-1 air kelapa) hingga periode kultur 5 bulan dengan interval subkultur 1 bulan. Inisiasi proliferasi awal KE berlangsung secara cepat 8.3 hari setelah inkubasi kultur dengan 98.6% pembentukan KE, dan 3.12 tingkat multiplikasi; (2) Penyiapan kultur starter dilakukan dengan mengkulturkan KE hasil proliferasi awal dalam medium PM-12+ cair (1/2 MS + 0.5 mg L-1 TDZ + 0.10 mg L-1 BAP + 150 mL L-1 air kelapa + 20 g L-1 sukrosa + 150 mg L-1 L-Prolin). Kultur diatur dengan tingkat kepadatan 3 g KE per 25 mL media cair dalam erlenmeyer 100 mL dan digoyang di atas shaker selama 3-5 periode kultur hingga kalus memasuki fase awal pertumbuhan cepat/eksponensial (periode kultur 9-13 bulan) dan siap digunakan sebagai kultur starter. Tahap ini menghasilkan 98.2% KE, 5.58 tingkat multiplikasi kalus, serta mampu menekan pencoklatan kalus hingga 4% dengan kondisi kalus remah, hijau segar, dan tidak hiperhidrik; (3) Produksi masal KE dilakukan dengan menanam KE dalam airlift bioreactor 500 mL berisi 250 mL medium Bio-3 (1/2 MS + 0.5 mg L-1 TDZ + 0.1 mg L-1 BA + 150 mg L-1 LProlin). Kultur diinkubasi pada tingkat aerasi 2.5 volume O2 per volume media per menit (vvm) dan kepadatan kalus 10 g per 250 mL media. Proliferasi dilakukan hingga KE memasuki fase stasioner dan siap untuk dikecambahkan, diperoleh 6.85 tingkat multiplikasi KE, 98.3% pembentukan KE dengan 6.1% malformasi morfologi kalus (3.3% kalus fenolik, 1.5% kalus masif, dan 1.3% kalus hiperhidrik). Regenerasi KE dilakukan dengan mengeringkan kalus selama 7 hari pada suhu 18 ± 2°C, selanjutnya KE yang sudah dikeringkan dikulturkan pada medium perkecambahan
Keyword: bioreaktor, Dendrobium, embriogenesis somatik, perbanyakan masal, proliferasi kalus