Judul: Morphogenetic of Benthic Dinoflagellate Prorocentrum lima (Ehrenberg) F. Stein 1878 Potentially Toxic in Bintan Island, Belitung Island, Seribu Islands, and Karimunjawa Islands
Abstrak: Prorocentrum lima merupakan salah satu spesies Dinoflagellata bentik yang mampu memproduksi Okadaic Acid (OA) dan Dinophysistoxin (DTX’s), yang dapat menyebabkan Diarrhetic Shellfish Poisoning (DSP). Selain itu, P. lima juga berasosiasi dengan spesies penghasil ciguatoxin, Gambierdiscus toxicus, dan menyebabkan Ciguatera Fish Poisoning (CFP) di perairan tropis. Prorocentrum lima telah ditemukan di beberapa perairan di Indonesia, antara lain di Kepulauan Seribu dan Pulau Belitung (Widiarti 2002; Widiarti 2010; Widiarti 2011; Widiarti dan Pudjiarto 2015). Prorocentrum lima memiliki variasi morfologi yang luas dan keanekaragaman morfotipe yang tinggi (Hoppenrath et al. 2013; Zhang et al. 2015; Chomérat et al. 2018), tapi belum ada penelitian mengenai hal tersebut dari perairan Indonesia. Identifikasi secara detail terhadap karakter morfologi khusus, terutama dengan mikroskop elektron adalah sangat diperlukan. Selain itu, untuk mendukung identifikasi morfologi, diperlukan pula identifikasi secara molekular. Hal tersebut dapat digunakan untuk menghindari kesalahan identifikasi, yang dapat menjadi fatal apabila spesies toksik di suatu perairan diidentifikasi sebagai spesies non toksik. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk: mendeterminasi karakter morfogenetik P. lima di perairan Pulau Bintan, Pulau Belitung, Kepulauan Seribu, dan Kepulauan Karimunjawa; dan menentukan karakter dominan yang mencirikan P. lima berdasarkan karakter morfogenetik di empat lokasi perairan yang berbeda tersebut, beserta faktor lingkungan yang mempengaruhi. Pengambilan sampel dilakukan di perairan kepulauan dengan terumbu karang, yang terletak di wilayah dalam perairan Indonesia bagian barat yaitu perairan Pulau Bintan, Pulau Belitung, Kepulauan Seribu, dan Kepulauan Karimunjawa, pada bulan April hingga September 2018. Lokasi pengambilan sampel diprioritaskan pada daerah dengan kondisi terumbu karang yang telah mengalami kerusakan, karena berpotensi untuk menyediakan tempat tumbuh baru bagi bermacam makroalga yang merupakan substrat yang disukai oleh Dinoflagellata bentik yang toksik (deSylva 1994). Keempat lokasi pengambilan sampel memiliki kondisi terumbu karang dengan status sedang - cukup baik (Estradivari et al. 2009; Yusuf 2013; Susetiono et al. 2014). Thallus makroalga diambil secara acak di daerah rataan terumbu, kemudian dimasukkan ke dalam botol plastik yang telah berisi air laut. Makroalga dan air laut dalam botol plastik kemudian diaduk menggunakan mesin vortex (1250 rpm selama 1 menit). Selanjutnya air sampel disaring melalui saringan bertingkat dengan ukuran pori 125 dan 20 m. Pengamatan karakter morfologi dilakukan terhadap ukuran dan bentuk sel menggunakan Light Microscope/LM (Leica DM 500), sedangkan ukuran dan bentuk pori, jumlah pori dan daerah periflagellar diamati menggunakan Scanning Electron Microscope/SEM (ZEISS dengan tipe EVOIMA10). Karakterisasi molekular diperoleh dengan melakukan amplifikasi terhadap gen LSU 28rDNA, meliputi tahap isolasi, ekstraksi, amplifikasi, elektroforesis, dan sekuesing. Ekstraksi dilakukan menggunakan beads dan Mini-Plant Extraction Kit, maupun freeze-thaw yang dilanjutkan dengan metode Single Cell PCR. Analisis filogenetik dan nilai jarak genetik antar populasi dianalisis menggunakan perangkat lunak MEGA. Karakter dominan yang membedakan di setiap stasiun penelitian dianalisis menggunakan Analisis Diskriminan, sedangkan hubungan dengan faktor lingkungan dianalisis menggunakan Principal Component Analysis (PCA). Berdasarkan karakterisasi morfologi, terdapat tiga morfotipe P. lima di wilayah dalam perairan Indonesia bagian barat, yang sesuai dengan jumlah klaster berdasarkan Analisis Klaster, yaitu morfotipe 1 di Pulau Belitung yang sesuai dengan klaster pertama, morfotipe 2 di Kepulauan Seribu dan Kepulauan Karimunjawa yang sesuai dengan klaster kedua, serta morfotipe 3 di Pulau Bintan yang sesuai dengan klaster ketiga. Berdasarkan analisis molekular, P.
Keyword: analisis klaster, analisis molekular, karakter dominan, morfogenesis pulau, morfotipe