Những năm đầu đời 
Vương nữ sinh ngày 12 tháng 2 năm 1864 tại Cung điện Vương thất Madrid, là người con út trong số năm người con của Isabel II của Tây Ban Nha và Francisco de Asís của Tây Ban Nha sống đến tuổi trưởng thành. Infanta được rửa tội vào ngày 14 tháng 2 năm 1864 và được đặt tên là María Eulalia Francisca de Asís Margarita Roberta Isabel Francisca de Paula Cristina María de la Piedad. Cha mẹ đỡ đầu của María Eulalia là Roberto I xứ Parma và chị gái Margherita của Parma.