URDAMYCINES, THEIR PREPARATION, STREPTOMYCES FOR THEIR PREPARATION AND THEIR USE

Abstract: 1. Claims (for the Contracting States : BE, CH, DE, FR, GB, IT, LI, LU, NL, SE) Urdamycin A of the formula I see diagramm : EP0182208,P18,F2 1. Claims (for the Contracting State AT) A process for the preparation of a compound with an antibiotic action by aerobic fermentation of Streptomyces, which comprises a) fermenting the strain Streptomyces fradiae DSM 3093 and b) extracting the urdamycins from the culture medium.

Description: Urdamycine, Verfahren und Streptomyceten-Stamm zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung Aus einer Bodenprobe aus Tansania wurde ein Mikroorganismenstamm isoliert, der als Streptomyces fradiae identifiziert und bei der Deutschen Sammlung von Mikroorganismen (DSM), 3400 Göttingen, Grisebachstrasse 8, unter der Hinterlegungs-Nr. DSM 3093 hinterlegt wurde. Dieser Stamm ist wie folgt charakterisiert: Sporenoberfläche: Sm Sporenrnorphologie: Sa Chromogenität: C Luftmycelfarbe: cinnamomeus In einer eine Kohlenstoff- und Stickstoffquelle sowie die üblichen anorganischen Salze enthaltenden Nährlösung produziert der Stamm DSM 3093 als Urdamycine bezeichnete pharmakologisch wirksame Verbindungen. Diese Urdamycine sind also erhältlich durch Fermentation des Stammes DSM 3093 und Isolierung aus dem Mycel und insbesondere aus dem Fermentationsmedium. Durch Extraktion des Kulturfiltrats mit einem organischen Lösemittel, das mit Wasser nicht oder nur wenig mischbar ist, erhält man farbige Extrakte, aus denen nach Abtrennen der lipophilen Bestandteile und Auftrennen des Rohproduktes durch Chromatographie sechs Fraktionen erhalten werden. Durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule (Fliessmittel: Chloroform/Methanol oder Methylenchlorid/Methanol) werden beispielsweise die folgenden Fraktionen erhalten: Fraktion Farbe Urdamycin Formel 1 gelb B II 2 rot E III 3 gelbrot A 1 4 blau D 5 rot C 6 orange F IV Die chemischen Formeln, soweit sie ermittelt sind, sind in den Patentansprüchen wiedergegeben. Für Urdamycin C und D wurde bisher die Struktur noch nicht ermittelt; diese Verbindungen sind durch eine Reihe physikalischer Daten charakterisiert (Beispiele). Die Urdamycine wirken antibakteriell und tumorhemmend und können daher in Form pharmazeutischer Präparate zur Behandlung von bakteriell verursachten Infektionen oder zur Behandlung bei Tumorerkrankungen an Mensch und Tier verwendet werden. Die Urdamycine sind Glykoside, aus denen sich in bekannter Weise, beispielsweise durch saure Hydrolyse oder Methanolyse, alle 0-glykosidisch gebundenen Zucker abspalten lassen. Hierbei entsteht aus Urdamycin A das literaturbekannte Antibiotikum Aquayamycin (N. Imamura et al., Chem.Pharm.Bull. 29(6) 1788-1790 (1981)). Die Urdamycine B bis F führen bei der sauren Hydrolyse bzw. Methanolyse zu neuen Aglykonen, die als Urdamycinone B bis F bezeichnet werden. Diese neuen Verbindungen sind ebenfalls antibakteriell und tumorhemmend. Neben der Abspaltung der Zucker sind die Urdamycine und auch die daraus hergestellten Urdamycinone aufgrund ihrer funktionellen Gruppen in vielfältiger Weise chemischen Abwandlungen zugänglich, wobei Produkte erhalten werden können, die ebenfalls antibakterielle und tumorhemmende Wirkung zeigen. Die Erfindung betrifft somit den Streptomyceten-Stamm DSM 3093, ein Verfahren zur Fermentation unter Verwendung dieses Stammes, wobei die Urdamycine A bis F gebildet werden, die Urdamycine A bis F und deren Verwendung als antibakterielle bzw. tumorhemmende Mittel bzw. ihre Verwendung in antibakteriellen und tumorhemmenden Mitteln sowie als Zwischenprodukte zur Herstellung antibakteriel ler und tumorhemmender Substanzen. Weitere Aspekte der Erfindung und deren bevorzugte Ausgestaltungen sind in den Patentansprüchen niedergelegt bzw. im folgenden näher erläutert. Anstelle des Stammes DSM 3093 können natürlich auch seine Mutanten und Varianten eingesetzt werden, soweit sie Urdamycin A bis F produzieren. Solche Mutanten können in an sich bekannter Weise durch physikalische Mittel, beispielsweise Bestrahlung wie mit Ultraviolett- oder Röntgenstrahlen, oder chemische Mutagene, wie beispielsweise Ethansulfonsäuremethylester (Ethylmethylsulfononat, EMS) oder 2-Hydroxy-4-methoxy-benzophenon (MOB) erzeugt werden. Als bevorzugte Kohlenstoffquellen für die aerobe Fermentation eignen sich assimilierbare Kohlenhydrate und Zuckeralkohole wie Glucose, Lactose oder D-Mannit sowie kohlenhydrathaltige Naturprodukte, wie Malzextrakt. Als stick stoffhaltige Nährstoffe kommen in Betracht: Aminosäuren, Peptide und Proteine sowie deren Abbauprodukte wie Peptone oder Tryptone, ferner Fleischextrakte, gemahlene Samen, beispielsweise von Mais, Weizen, Bohnen, Soja oder der Baumwollpflanze, Destillationsrückstände der Alkoholherstellung, Fleischmehle oder Hefeextrakte, aber auch Ammoniumsalze und Nitrate. An anderen anorganischen Salzen kann die Nährlösung beispielsweise Chloride, Carbonate, Sulfate oder Phosphate der Alkali- oder Erdalkalimetalle, Eisen, Zink und Mangan enthalten. Die Bildung der Urdamycine A bis F verläuft besonders gut in einer Nährlösung, die etw 2 % Fleischmehl, 10 % Malzextrakt und 1 % Calciumcarbonat, jeweils bezogen auf das Gewicht der gesamten Nährlösung, enthält. Die Fermentation erfolgt aerob, also beispielsweise submers unter Schütteln oder Rühren in Schüttelkolben oder Fermentern, gegebenenfalls unter Einführen von Luft oder Sauerstoff. Die Fermentation kann in einem Temperaturbereich von etwa 18 bis 400C, vorzugsweise bei etwa 25 bis 30 C, insbesondere bei 27 bis 280C erfolgen. Unter diesen Bedingungen zeigt die Kulturbrühe im allgemeinen nach 2 bis 4 Tagen eine nennenswerte antibiotische Wirkung. Vorteilhaft kultiviert man in mehreren Stufen, d.h. man stellt zunächst eine oder mehrere Vorkulturen in einem flüssigen Nährmedium her, die dann in das eigentliche Produktionsmedium, die Hauptkultur, beispielsweise im Volumenverhältnis 1:10, überimpft werden. Die Vorkultur erhält man beispielsweise, indem man ein versportes Mycel in eine Nährlösung überimpft und etwa 148 bis 72 Stunden wachsen läRt. Das versporte Mycel kann erhalten werden, indem man den Stamm etwa 7 Tage auf einem festen oder flüssigen Nährboden, beispielsweise Hefe-Malz-Agrar, wachsen lässt. Der Fermentationsverlauf kann anhand des pH-Wertes der Kultur, dem Mycelvolumen, durch Dünnschichtchromatographie oder Ausprüfen der biologischen Aktivität überwacht werden. Die Isolierung der Urdamycine A bis F aus dem Kulturmedium erfolgt nach bekannten Methoden unter Berücksichtigung der chemischen, physikalischen und biologischen Eigenschaften der Produkte. Zum Testen der Antibiotika-Konzentration im Kulturmedium oder in den einzelnen Isolierungsstufen kann die Dünnschichtchromatographie, beispielsweise auf Kieselgel mit Chloroform/ Methanol als Laufmittel verwendet werden, wobei die Menge der gebildeten Antibiotika zweckmässig mit einer Eichlösung verglichen wird. Die Antibiotika können aus der unfiltrierten Kulturbrühe mit einem mit Wasser nicht oder nur wenig mischbaren organischen Lösemittel wie Chloroform oder Ethylacetat extrahiert werden. Da sich jedoch die Antibiotika nur zum geringen Teil im Mycel befinden, ist es vorteilhaft, die Kulturbrühe vom Mycel zu trennen, beispielsweise durch Zentrifugieren oder Filtrieren, vorzugsweise unter Zugabe von Filterhilfsmitteln, und die Antibiotika aus dem Über- stand bzw. Filtrat zu isolieren, zweckmässig im leicht sauren bis neutralen pH-Bereich, vorzugsweise bei pH 6 bis 7. Zur Extraktion der Antibiotika aus dem Überstand bzw. Filtrat verwendet man zweckmässig mit Wasser wenig oder nicht mischbare organische Lösemittel, insbesondere chlorierte Kohlenwasserstoffe, wie Chloroform oder Methylenchlorid oder Ester wie Ethylacetat. Die farbigen Extrakte werden, gegebenenfalls nach Eindampfen und Aufnehmen in einem polaren organischen Lösemittel, durch Fällen mit einem unpolaren Lösemittel, zweckmässig einem Kohlenwasserstoff wie Petrolether, von stark lipophilen Bestandteilen befreit, die bis zu etwa 80 % des Gesamtextraktes ausmachen können. Aus dem Rückstand können die Urdamycine A bis F durch Chromatographie isoliert werden. Die Zusammensetzung der Urdamycin-Fraktionen kann je nach der Zusammensetzung des Nährmediums schwanken. Beispielsweise werden in einem Medium aus 2 % Malzextrakt, 2 % Destillationsrückstand aus der Ethanolgewinnung, 0,5 % Natriumchlorid und 0,1 % Natriumnitrat (jeweils Gew.-%) Urdamycin A und C in etwa gleicher Menge produziert, während in anderen Medien das Mengenverhältnis bis zu 6:1 betragen kann. Zur Isolierung der Urdamycine aus dem entfetteten Rohextrakt wird dieser zweckmässig über eine Kieselgel-Säule gereinigt, wobei sich als Fliessmittel Gemische aus niedermolekularen Chlorkohlenwasserstoffen und Alkanolen, beispielsweise Chloroform und Methanol im Volumenverhältnis 4:1 oder Methylenchlorid und Methanol im Volumenverhältnis 85:15, bewährt haben. Die in Form verschiedenfarbiger Zonen adsorbierten Komponenten werden nacheinander in Form verschiedenfarbiger Eluate eluiert, in denen jeweils eines der Urdamycine angereichert ist. Zur Isolierung der reinen Urdamycine können die üblichen Verfahrensschritte Verwendung finden, wie Chromatographie, Gelfiltration oder Fällung aus ihren Lösungen in geeigneten organischen Lösemitteln. Besonders bewährt hat sich eine Chromatographie an Kieselgel, wobei als Laufmittel eine Mischung aus einem niederen halogenierten Kohlenwasserstoff und einen niederen Alkanol, beispielsweise Methylenchlorid/Ethanol oder Chloroform/i4ethanol in einem Volumenverhältnis von beispielsweise 9: :1 Verwendung findet, gefolgt von einer Gelfiltration an geeigneten Medien wie Hydroxyalkoxypropyldextranen (lipophile SEPHADEX LH-Marken) mit einem niederen Alkanol wie Methanol und anschliessendes Ausfällen, beispielsweise durch Eintropfen einer konzentrierten Lösung des Urdamycins in einem polaren organischen Lösemittel wie Aceton in ein unpolares Lösemittel, insbesondere einen Kohlenwasserstoff wie Petrolether oder n-Hexan. Die reinen Urdamycine sind amorphe Feststoffe, die in Lösung in Abhängigkeit vom pH-Wert Indikatoreigenschaften haben. Die Verbindungen sind in stark polaren Lösemitteln wie Aceton, Methanol, Ethanol, Tetrahydrofuran oder Dimethylsulfoxid gut löslich, mässig löslich in Chlorkohlenwasserstoffen wie Chloroform oder Methylenchlorid und unlöslichen Wasser oder Alkanen. Die Substanzen sind im festen Zustand und die Lösungen im pH-Bereich von 3 bis 9, insbesondere von 5 bis 8, stabil. Die Verbindungen lassen sich damit in übliche galenische Zubereitungen einarbeiten. Die antibakterielle Wirkung kommt sowohl gegen grampositive wie gram-negative Bakterien zur Geltung, wie beispielsweise im Platten-Agardiffusiontest in vitro (10 l/ lestrondell, 6mn Durchmesser) gezeigt werden kann, wo sich bei verschiedenen Keimen eine minimale Hemmkonzentration im Bereich von > 0,03 bis < 0,3 Wg/ml sind beispielsweise: Achromobacter geminiani, Bacillus brevis, B. subtilis, Arthrobacter aurescens, A. crystallopoiete, Brevibacetrium flavum sowie verschiedene Streptomyceten, darunter z.B. S. antibioticus, S. violaceoruber, S. prasinus, S. lavendulae, glaucescens und S. viridochromogenes. Die tumorhemmende Wirkung konnte an menschlichen und tierischen Tumorzellen in vitro gezeigt werden. Die Überführung der Urdamycine in die entsprechenden Aglykone, die rdamycinone, erfolgt in an sich bekannter Weise durch Hydrolyse oder Methanolyse in Gegenwart starker Säuren. Geeignet sind beispielsweise Gemische aus Methanol, Wasser und mrifluoressigsäure im Volumenverhältnis 2:2:1 oder Methanol, Wasser und konzentrierter Schwefelsäure im Volumenverhältnis 2:1:0,1, in denen die reinen oder rohen Urdamycine 10 Minuten bis 3 Stunden bei Temperaturen von 0 bis 10000, vorzugsweise 20 bis 60µC, insbesondere bei Zimmertemperatur, zur Reaktion gebracht werden. Die Reaktionsgemische werden dann mit Wasser verdünnt, beispielsweise mit dem etwa zehnfachen Volumen an Wasser, und mit einem mit Wasser wenig oder nicht mischbaren organischen Lösemittel, beispielsweise einem niederen Chlorkohlenwasserstoff oder Ester wie Chloroform oder Ethylacetat, extrahiert. Nach Auswaschen von restlicher Säure aus der organischen Phase mit Wasser und weitgehender oder vollständiger Abtrennung des organischen Lösemittels kann eine Reinigung durch Chromatographie oder vorteilhaft Gelfiltration erfolgen, wobei die gleichen Verfahrensschritte wie bei der Isolierung der Urdamycine Verwendung finden können. Wie bereits erwähnt, ist das Urdamycinon A identisch mit dem Antibiotikum Aquayamycin. Die Erfindung eröffnet also einen neuen Weg zur Herstellung dieses Antibiotikums. Die Urdamycinone B bis F sind neue Verbindungen, die, wie erwähnt, ebenfalls antibakterielle und tumorhemmende Wirkung zeigen. In den folgenden Beispielen wird die Erfindung näher erläutert. Prozentangaben beziehen sich auf das Gewicht, wenn nichts anderes angegeben ist. Mischungsverhältnisse bei Flüssigkeiten beziehen sich auf das Volumen, sofern keine anderen Angaben gemacht sind. Beispiel 1: a) Herstellung einer Sporensuspension des Produzenten stammes: 100 ml Nährlösung (4 g Hefeextrakt, 10 g Malzextrakt, 4 g Glucose, 1 1 Leitungswasser, pH-Wert vor dem Sterilisieren 7,3, 20 g Agar zur Verfestigung) in einem 500 ml Erlenmeyerkolben mit einem seitlichen Einstich werden mit dem Stamm DSM 3093 beimpft und 72 Stunden bei 27C und 120 pM auf der rotierenden Schüttelmaschine inkubiert. Anschliessend werden 20 ml Kulturflüssigkeit auf 50 ml Agar im 500 ml Erlenmeyerkolben gleichmässig verteilt und dekantiert. Die Kulturen werden 10 - 14 Tage bei 2700 inkubiert. Die nach dieser Zeit entstandenen Sporen eines Kolbens werden mit 500 ml entionisiertem Wasser, das einen Tropfen eines handelsüblichen nichtionischen Tensids enthält, abgeschwemmt und bei -220C aufbewahrt. b) Herstellung einer Kultur bzw. Vorkultur des Produzen tenstammes im Erlenmeyerkolben. Ein 500 ml Erlenmeyerkolben mit einem seitlichen Einstich und 100 ml einer Nährlösung der Zusammensetzung 2 % Fleischmehl, 10 % Malzextrakt, 1 % Calciumcarbonat und Wasser ad 100 (pH 7,2 vor dem Autoklavieren) wird mit einer auf einem Schrägröhrchen gezogenen Kultur oder mit 0,2 ml Sporensuspension angeimpft und auf einer Schüttelmaschine bei 120 UpM und 270C inkubiert. Die maximale Antibiotikumproduktion ist nach 72 Stunden erreicht. Zum Animpfen von 10, 20, 25 und 100 1 Fermentern genügt eine 148 Stunden alte Submerskultur (5 %) aus der gleichen Nährlösung. Beispiel 2: Ein Fermenter von 10 1 Fassungsvermögen wird unter folgenden Bedingungen betrieben: Bei 270C Inkubationstemperatur und 250 UpM des Rührers werden 4 Liter Luft pro Minute in die Kulturflüssigkeit (Medium wie in Beispiel la) eingeleitet. Durch wiederholte Zugabe weniger Tropfen ethanolischer Polyollösung kann die Schaumentwicklung unterdrückt werden. Das Produktionsmaximum wird nach ca. 48 Stunden erreicht. Die Ausbeuten liegen bei ca. 10 mg/l Urdamycin A. Zur Fermentation von Urdamycin C und D erweist sich folgende Nährlösung als optimal: 2 % Malzextrakt, 2 % Rückstand aus der Ethanoldestillation (Distiller solubile), 0,5 % NaCl, 0,1 % NaN03, pH-Wert vor dem Sterilisieren 7,3. Das Produktionsmaximum für die Urdamycine C und D liegt im Bereich von 72 bis 96 Stunden. Die Ausbeuten liegen bei 2 - 5 mg/l Kulturflüssigkeit. Beispiel 3: Eine gemäss einem der vorhergehenden Beispiele erhaltene Kulturbrühe wird zur Isolierung der Urdamycine A bis F folgendermassen aufgearbeitet: Die Kulturbrühe wird durch eine Filterpresse unter Zusatz von 2 9% Filterhilfsmittel (Diatomeenerde) filtriert. Das Mycel, das nur geringe antibiotische Aktivität aufweist, wird verworfen. Das Kulturfiltrat wird bei pH 7 erschöpfend mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wird getrocknet und eingedampft. Der ölige Verdampfungsrückstand wird mit reichlich Petrolether übergossen. Der ausgefallene Niederschlag wird abzentrifugiert und getrocknet und als Urdamycin-Rohprodukt weiter verarbeitet. Das Rohprodukt wird an einer Kieselgel-Säule (Kieselgel 60, unter 0,08 mm) mit Chloroform/Methanol (4:1) chromatographiert. Man eluiert nacheinander die folgenden Fraktionen, in denen jeweils eines der Urdamycine vornehmlich angereichert ist: Fraktion 1 (gelb): Urdamycin B Fraktion 2 (rot) : Urdamycin E Fraktion 3 (gelbrot): Urdamycin A Fraktion 4 (blau): Urdamycin D Fraktion 5 (rot): Urdamycin C Fraktion 6 (orange): Urdamycin F Beispiel 4: Die Fraktion 3 aus Beispiel 3 wurde an einer Kieselgelsäule mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1) und anschliessend an einer Säule aus SEPHADEX BH 20 in Methanol nachgereinigt. Das jeweils aus der Hauptzone eluierte Urdamycin A wird zuletzt in wenig Aceton gelöst und durch Eintropfen dieser lösung in den 20-fachen Überschuss n-Hexan ausgefällt. Der so erhaltene gelbrote Feststoff zersetzt sich bei 1600C und hat die folgenden Eigenschaften: Zirkular-Dichroismus-Spektrum in Methanol: max [e]24) = 456 (+5000), 400 (-9000), 328 (+35000), 290 sh (+11000), 261 (-5000), 232 nm (+38000). Die Elementaranalyse des bei 600C im Hochvakuum getrockneten Urdamycin A ergibt C = 60,47%, H = 6,66, kein Stickstoff und Schwefel nachweisbar. Mol.-Masse: 845 gemäss FAB-Massenspektrum (negative Ionen) Das Elektronenspektrum zeigt folgende Maxima: Ethanol (gelbrot): # max (#) = 440 sh (5400), 426 (5500), 319 nm (4500). Ethanol/NaOH (ultramarinblau): Xmax 580 (5400), 404 (1700), 325nm (8100) IR(KBr): 3430; 1728; 1657sh; 1650; 1639; 1620; 1580-1 UV (Ethanol) :Amax (±) = 440 sh (5400); 426 (5500); 319 (4500) nm (Ethanol/HCl) :#max (#) = wie Ethanol (Ethanol/NaOH):#max(#) = 580 (5400); 404 (1700); 325 (8100) nm H-NMR (200 MHz, d6-Aceton):6= 0,51 (d, J= 6,5 Hz, 5C-CH3); 1,16 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,17 (s, 3-CH3); 1,24 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); 1,33 (o, J= 3 x ca. 12 Hz, 3,-Ha); 1,38 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,4-2,0 (komplex, 8H, 2C-H2, 3C-H2, 2A-H2, 3A-H2); 1,95 u. 2,04 (dd u. d, J= 15 u. 2 bzw. 15 Hz, 4-H2); 2.20 (o, J= 13,5, 2 Hz, 3'-He); 2,37 (o, J= 13, 12, 12 Hz, 2B-Ha); 2,55 (o, J= 13, 5, 2 Hz, 2B-He); 2,56 u. 2,90 (dd u. d, J= 13, 2 bzw. 13 Hz, 2-H2); 2,94 (o, J= 9, 9, 4 Hz, 5'-H**); 3,19 (o, J= 9, 9, 4 Hz, 4B-H**); 3,27 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 5B-H); 3,28 (o, J= 3x 2 Hz, 4C-H); 3,53 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 6'-H); 3,56 (m, 3B-H); 3,58 (o, J= 3x ca. 2 Hz, 4A-H); 3,68 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5C-H); 3,81 (8, OH*); 3,82 (o, J= 12, 9, 5 Hz, 4'-H); 4,03 (d, J= 5 Hz, OH*); 4,09 (d, J= 5 Hz, OH*); 4,24 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,42 (s, OH*); 4,63 (d, J= 4 Hz, OH*); 4,64 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 1B-H); 4,93 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 2'H); 5,02 (d, J= 2 Hz, 1A-H); 5,32 (d, J= 3 Hz, OH*); 5,33 (d, J= 2 Hz, 1C-H); 6,53 (d J= 10 Hz, 5-H); 6,93 (d, J= 10 Hz, 6-H); 7,68 (d, J= 8 Hz, 10-H); 7,99 (d, J= 8 Hz, 11-H); 12,38 (s, 8 OH*) ppm * Signale verschwinden nach Austausch mit CD30D ** Signale werden nach CD3OD-Austausch zu dd, J= 9 u. 9 Hz (200 MHz, d6-DMSO):6= 0,38 (d, J= 6,5 Hz, 5C-CH3); 1,04 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,08 (s, 3-CH3); 1,14 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); ca. 1,2 (verd., 3,-Ha); 1,3- 1,8 (kompl., 8H, 2C-, 3C-, 2A- u. 3A-H2); 1,75 u. 1,86 (2d, J= je 15 Hz, 4-H2); 2,00 (o, J= 13, 5, 2 Hz, 31-He); 2,14 (o, J= 13, 10, 10 Hz, 2B-Ha); 2,39 u. 2,74 (2d, J= je 13 Hz, 2-H2); ca. 2,5 (verd., 2B-He); 2,72 (dd, J= 2 x 10 Hz, 5'-H); 3,04 (dd, J= 2 x 10 Hz, 4B-H); 3,10 (dq, J= 10 u. 6 Hz, 5B-H); 3,22 (o, J= 12, 9, 5 Hz, 4'-H); 4,13 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,30 (d, J= 6 Hz, OH*); 4,47 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 1B-H); 4,82 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 2'-H); 4,84 (d, J= 5 Hz, OH*); 4,85 (s,1A-H); 4,90 (d, J= 6 Hz, OH*); 5,10 (s, OH*); 5,11 (d, J= 5 Hz, OH*); 5,12 (s, 1C-H); 5,65 (s, OH*); 6,39 (d, J= 10 Hz, 5-H); 6,73 (d, J= 10 Hz, 6-H); 7,55 (d, J= 8 Hz, 10-H); 7,84 (d, J= 8 Hz, 11-H); 12,26 (s, 8-OH*) ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch CD (Methanol): #extr.(024x10-4) = 456(+0,5); 400(-0,9); 328(+3,5); 290sh (+1,1); 261(-0,5); 232(+3,8) nm a24 (c= 0,1 Aceton)= + 32 D Beispiel 5: (Urdamycin B) 450 mg der gelben Fraktion aus der Vortrennung gemäss Beispiel 3 werden an Kieselgel (Chloroform/Methanol = 9:1) und SEPHADEX LH 20 (Methanol) chromatographiert. Man erhält nach Eintragen der gesättigten Aceton-Lösung in n-Hexan neben 15 mg Urdamycin E 370 mg Urdamycin B, als gelben, amorphen Feststoff. IR(KBr): 3400; 1750sh; 1705sh; 1694; 1668; 1626; 1589 cm UV (Methanol :#max(#)= 403(3900); 268(27200) nm (Methanol/HCl) Amax(E)= wie Methanol (Methanol/NaOH):#max(#)= 505(3600); 315sh(3800); 266(17300); 248(14100) nm 1H-NMR (200 MHz, d6-DMSO): Urdamycin Ba) Urdamycinon Bb) 2-Ha : 3,24 d (17) 3,33 d (17) 2-He : 3,08 dd (17, 2) 3,21 dd (17, 1) 3-CH3 : 1,35 s 1,49 s 4Ha : 3,07 d (15) 3,10 d (14,5) 4-He : 2,74 dd (15, 2) 2,90 dd (14,5, 1,5) 5-H : 7,57 d (8) 7,61 d (8) 6-H : 7,89 d (8) 7,95 d (8) 10-H : 7,76 d (8) 7,76 d (8) 11-H : 8,26 d (8) 8,31 d (8) 2'-H : 4,83 dd (10, 2) 4,92 dd (11,5, 1,5) 3'-Ha : ca. 1,2, verdeckt 1,23 o (3x ca. 12)c) 3'-He : 2,46 o (13, 5, 2) 2,46 o (13, 5, 2) Urdamycin Ba) Urdamycinon Bb) 4'-H : 3,70 o (12, 9, 5) 3,76 o (12, 9,5, 5) 5'-H : 3,07 dd a 3,11 dd (8,5, 8) 6'-H : ca. 3,4, komplex 3,50 dq (9,5, 6) 6'-CH3 : 1,29 d (6) 1,37 (6) b) 4,85 d (5) 3,82 s 4,92 d (5) 4,22 breit 5,04 s (3-OH) 4,22 breit 5,13 d (5) CD (Methanol): #extr. ( 020x10-4) = 415(+0,2); 375(+0,03); 330(+0,2); 271(-1,8); 227(+0,8) nm Beispiel 6: (Urdamycin C) 400 mg der zweiten, grösseren roten Fraktion aus der Vortrennung nach Beispiel 3 werden durch Chromatographie an Kieselgel (Methylenchlorid/Ethanol = 9:1) und SEPHADEX LH 20 (Methanol) gereinigt und als Feststoff durch Eintropfen einer gesättigten Aceton-Lösung in n-Pentan ausgefällt. Ausbeute 310 mg, Rf: Rf-Wert auf Kieselgel Dünnschichtplatten (20x20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,51 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,15 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C51H60019 (9.77.04) ? Ber. C 62,7 H 6,2 Fp.: 200°C (Zersetzung) Gef. 63,4 6,7 IR (KBr): 3420; 1732; 1705sh; 1640; 1605 cm UV (Methanol) :Ämax(±)= 510(12600); 410sh (6300); 308(14800); 237sh(23600); 226(25300) nm (Methanol/HCl):#max(#)= 510(12600); 310(15400); 226(26900) nm (Methanol/NaOH): #max(#)= 625sh (10400); 600(12100); 414(5500); 326(12000); 238(30000) nm 1H-NMR (200 MHz, d6-Aceton):6= 0,39 (d, J= 6,5 Hz, 5C-CH3); 1,12 (s, 3-CH3); 1,13 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,22 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); 1,23 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,2-1,6 (kompl., 2C-H2, 3C-H2, 2A-H2, 3A-H2); 1,8-2,2 (kompl., verd., u.a. 4-H2); 2,18 (o, J= 13,5,2 Hz, 3,-He); 2,58 (o,J= 13,5,2 Hz, 2B-He); 2,70 u. 3,16 (dd u. d, J= 13,2 u. 13 Hz, 2He u. 2-Ha); 2,92 (verd . ***, 5'-H); 3,06 (o, J= 9,9,4,5 Hz, 4B-H**); 3,33 (s, breit, 4C-H); ca. 3,3 (verd. 5B-H); 3,48 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 6'-H); ca. 3,5 (verd., 3B-H); 3,55 (s, breit, 4A-H); 3,63 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5C-H); 3,79 (o, J= 12, 9 u. 5 Hz, 4'-H); 3,80 (s, OH*); 4.05 (d, J= 4,5 Hz, OH); 4,10 (d, J= 4,5 Hz, OH*); 4,20 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,56 (s, OH*); 4,59 (d, J= 3,5 Hz, OH*); 4,60 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz, 1B-H); 4,75 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz; 2'-H); 5,00 (s, 1-H); 5,29 (s, OH*); 5,44 (s, 1C-H); 6,20 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,05 (d,lH, J= 10 Hz); 7,06 (2d, 2H, J= je 8 Hz); 7,47 (2d, 2H, J= 8 Hz); 7,96 (d,lH, J= 2 Hz); 9,10 (s, OH*); 13,16 (s, OH*) ppm (200 MHz, d3-Acetonitril):d = 0,51 (d, J= 6,5 Hz, 5C-CH3); 1,22 (s, 3-CH3); 1,24 (d, J= 6,5 HZ, 5A-CH3); 1,32 (2d, J= je 6 Hz, 5B u. 6'-CH3); 1,4-1,8 (komplex, 8H); 1,8-2,1 (kompl., verd., u.a. 4-H2); ca. 2,3 (verd., 31-He); 2,56 (d, J= 6 Hz, OH*); 2,60 (o, J= 13,5,2 Hz, 2B-He); 2,72 u. 3,14 (dd u. d, J= 13 u. 2 bzw. 13 Hz, 2-H2); 2,97 (o, J= 9,9,5 Hz, 5'-H**); 3,15 (o, J= 9,9,4 Hz, 4B-H**); 3,30 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 5B-H); 3,46 (s,breit, 4C-H); ca. 3,5 (verd., 3B-H); 3,56 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 6'-H); 3,63 (s, breit, 4A-H); 3,71 (dq, j= 6,5 u. 1 Hz, 5C-H); 3,82 (o, J= 12,9,5 Hz, 4'-H); 4,07 (d, J= 3,5 Hz, OH*); 4.21 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,41 (s, OH*); 4,51 (d, J= 2 Hz, OH*); 4,66 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 1B-H); 4,83 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz, 2'-H); 5,08 (s, 1A-H); 5,46 (s, 1C-H); 6,24 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,13 (3d, 3H, J= 10,8,8 Hz); 7,51 (2d, J= je 8 Hz, 2H); 7,69 (s, OH*); 7,89 (d, 1H, J= 1,5 Hz); 13,14 (s, OH*) ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch, ** Signale werden nach D20-Austausch zum dd, die kleine Kopplung JH-OH) entfällt, *** Signal ist nach D20-Austausch als dd, J= 9 u. 9 Hz, sichtbar 13C-NMR (50,3 MHz, CD3CN, DEPT):# = 16,4 (o, C-6C); 16,8 (o, C-6A); 17,9 (o, C-6B); 18,2 (o, C-7'); 23,8 (u, C-3C); 24,7 (u. C-3A); 25,0 (u, C-2A); 25,7 (u, C-2C); 29,4 (o, C-13); 36,9 (u, C-C-2B); 39,6 (u, C-3'); 43,3 (u, C-4); 54,2 (u, C-2); 66,5 (o, C-4C); 67,0 (o, C-4A); 67,1 (o, C-5C); 71,4 (o, C-5B); 71,5 (o, C-2'); 72,0 (o, C-6'); 74,6 (-, C-3); 75,9 (o, C-5A); 76,1 (o, C-3B); 76,4 (o, C 4B); 77,7 (o, C-4'); 78,4 (o, c-5'); 82,0 (-, C 4a); 82,7 (-, C-12b); 95,2 (o, C-1A); 95,5 (o, C-lC); 101,7 (o. C-lB); 112,3 (-, C-7a); 115,6 (o); 115,9 (-); 118,3 (o); 123,6 (-); 125,0 (-); 127,9 (-); 132,3 (-); 133,9 (-); 133,8 (o); 134,1 (o); 138,1 (o); 143,1 (-, C-9?); 144,7 (-); 156,2 (-, C-8?); 159,1 (-); 159,6 (-); 187,2 (-, C-7?); 204,5 (-, C-1) ppm CD (Methanol):extr.(821 x10 4)= 500 (-0,5); 336 (+1,7); 283 (-1,2); 248 (+2,9); 236 (+2,2); 223 (+4,8) nm Beispiel 7: (Urdamycin D) 240 mg der blauen Fraktion aus der Vortrennung nach Beispiel 3 werden an Kieselgel (Methylenchlorid/Methanol = 85:15) und SEPHADEX LH 20 (Methanol) chromatographiert. Man erhält 85 mg Urdamycin D, 18 mg Urdamycin A und 50 mg Urdamycin C. Urdamycin D wird in wenig Aceton aufgenommen und als blaues, amorphes Pulver aus n-Hexan ausgefällt, Rf: Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20x20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,17 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C54H65N017 (1000,12)? Ber. C 64,9 H 6,6 N 1,4 Fp.: 220 C (Zersetzung) Gef. 64,1 6,5 1,5 IR (KBr): 3420; 1735; 1710 sh; 1690; 1668; 1595 cm 1 UV (Methanol) :#max(#)= 575 (11200); 328 (11600) nm (Methanol/HCl) AmaX(e)= wie Methanol (Methanol/NaOH):#max(#)= 635 sh (7200); 600 (8500); 412 (4200); 324 (7500); 270sh (17600); 222 (32400) nm 1H-NMR (200 MHz, d6-Aceton):d = 0,41 (d, J= 6,5 Hz, 5C CH3); 1,07 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); 1,12 (s, CH3); 1,13 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,20 (s, 3-CH3); 1,22 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,2-1,6 (komplex. 2C-H2, 2A H2, 3C-H2, 3A-H2); 1,8-2,2 (komplex, u.a. 4-H2, 31-He); 2,58 (o, J= 13,5,2 Hz, 2B-He); 2,70 u. 3,20 (dd u. d, J= 13,2 u. 13 Hz, 2-H2); 2,91 (dd, J= 9 u. 9 Hz, 5'-H); 2,95 (dd, J= 9 u. 9 Hz, 4B-H); 3,24 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 5B-H); 3,26 (br. s, 4C-H); 3,42 (dq, J= 9 u.6 Hz, 6'-H); 3,53 (m, 3B-H); 3,57 (br. s, 4A-H); 3,64 (dq, J= 6,5 u. 1 Hz, 5C-H); 3,77 (o, J= 12,9,5 Hz, 4'-H); 4,17 (dq, J= 6,5 u. 1,5 Hz, 5A-H); 4,59 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 1B-H); 4,60 (breit, OH*); 4,77 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz, 2'-H); 5,00 (d, J= 1,5 Hz, 1A-H); 5,26 (breit, OH*); 5,46 (d, J= 1 Hz, 1C-H); 6,16 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,06 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,20 (dt, IH, J= 7,5 u. 1,5 Hz); 7,29 (dt, 1H, J= 7,5 u. 1,5 Hz); 7,62 (dd, IH, J= 7,5 u. 1,5 Hz); 7,63 (dd, 1H, J= 7,5 u. 1,5 Hz); 8,12 (s, 1H); 8,25 (d, J= 1,5 Hz, lH); 11,26 (breit, OH*) ppm (200 MHz), d8-Dioxan):d = 0,37 (d, J= 6,5 Hz, 5C CH3); 1,05 (d, J= 6 Hz, SB-CH3); 1,08 (s, CH3); 1,10 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,12 (s, 3-CH3); 1,21 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,26-1,8 (komplex, 2C-, 3C-, 3A-H2); 1,8-2,2 (komplex, u.a. 4-H2); 2,12 (verd. 31-He**); 2,50 (o, J= 13,5,2 Hz, 2B-He**); 2,65 u. 3,10 (dd, J= 13 u. 2 Hz bzw. verd., 2-H2); 2,78 2,96 (kompl., 5'-H u. 4B-H); 3,06-4,00 (komplex, 5B-H, 6'-H, 5C-H, 4'-H); 3,20 (br. s, 4C-H); 3,46 (br. s, 4A-H); 4,06 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,21 (s, OH*), 4,42 (s, OH*); 4,45 (dd, J= 10 u. 1 Hz, 1B-H); 4,76 (dd, J= 10 u. 1 Hz, 2'-H); 4,79 (s, OH*); 4,93 (s, 1A-H); 5,42 (s, 1C-H); 6,10 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,03 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,19 (dt, IH, J= 8 u. 1 Hz); 7,28 (dt, 1H, J= 8 u. 1 Hz); 7,51 (dd, 1H, J= 8 u. 1 Hz); 7,59 (dd, 1H, J= 8 u. 1 Hz); 8,10 (d, 1H, J= 1 Hz); 8,21 (s, 1H); 10,76 (s, OH oder NH*); 13,25 (breit, OH oder NH*) ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch, ** Signale sind nur im D20-ausgetauschten Spektrum zu erkennen 13C-NMR(200 MHz, d6-DMSO, DEPT): o= 16,3 (o, C-6C); 16,9 (o, C-6A); 18,1 (o, C-6B); 18,1 (o, C-7'); 24,0 (u, C-2A); 24,0 (u. C-3A); 29,5 (o, C-13); 30,6 (o); 65,1 (o, C-4C); 65,2 (o, C-4A); 65,2 (o, C 5C); 70,1 (o, C-5B); 70,3 (o, C-2'); 71,4 (o, C 6'); 74,3 (o, C-3B); 74,3 (o, C-5A); 75,2 (o, C 4B); 75,8 (o, C-4'); 76,7 (o, C-5'); 74,2 (-, C-3); 80,7 (-, C-4a); 82,4 (-, C12b); 91,8 (o, C-1A); 94,0 (o, C-1C); 100,9 (o, C-1B); 107,4 (-); 111,3 (-, C-7a?); 115,2 (-); 117,3 (o); 120,0 (o); 122,7 (-): 126,5 (-) 126,7 (-); 127,9 (-); 129,3 (-); 132,5 (o); 136,1 (-); 141,7 (-, C-9?); 142,1 (-); 154,9 (-, C-8?); 158,5 (-); 185,9 (-, C-7?); 203,9 (-, C-1) ppm CD (Methanol): #extr. (024x10-4) = 440(+0,1); 395(-0,3); 350(+1,0); 320sh(-0,4); 278(-1,5); 245(+2,0); 226(+5,9) nm Beispiel 8: (Urdamycin E) 190 mg der bei der Vortrennung nach Beispiel 3 zuerst aufgefangenen roten Zone werden an Kieselgel (Chloroform/ Methanol = 85:15) und SEPHADEX LH 20 (Methanol) chromatographiert. Man erhält neben 60 mg Urdamycin B und 10 mg Urdamycin A 50 mg Urdamycin E, das durch Eintropfen einer gesättigten Aceton-Bösung in n-Hexan als roter, amorpher Feststoff ausfällt. Rf-Wert auf Kieselgel Dünnschichtplatten (20x20 cm,0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,61 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,45 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C44H58017S (891,0) Ber. C 59,3 H 6,6 S 3,6 Gef. 59,4 6,7 2,3 IR (KBr): 3430; 1733; 1700 sh; 1635; 1610 sh cm UV (Methanol) : Ämax (E)= 460 (4500); 310 (6300) nm (Methanol/HCl) : Amax(e)= 460 (5000); 305 (6300) nm (Methanol/NaOH) : #max(#)= 480 (5200); 315 (5000); 225 (16300) nm H-NMR (200 MHz, CD3CN): 6= 0,45 (d, J= 6,5 Hz, SC-CH3); 1,10 (d, J= 6,5 Hz, 5A-CH3); 1,12 (s, 3-CH3); 1,19 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); 1,33 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,3-2,3 (komplex, 2C-H2, 2A-H2, 3C-H2, 3A-H2, 4 H2, 3'-Ha, 3'He); 2,46 (o, J= 13,5,2 Hz 2B-He); 2,47 (s, S-CH3); 2,49 u. 2,70 (dd u. d, J= 13 u. 2 bzw. 13 Hz, 2-H2); 2,85 (dd, J= 9 u. 9 Hz, 5'-H); 3,08-3,60 (komplex, 4B-H, 5B-H, 4C-H, 6'-H, 3B-H, 4A-H, 5C-H); 3,71 (o, J= 12,9,5 Hz, 4'-H); 3,98 (s, OH*); 4,04 (s, OH*); 4,10 (dq, J= 6,5 u. 1,5 Hz, 5A-H); 4,32 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz, 1B-H); 4,35 (s, OH*); 4,68 (dd, J= 10 u. 1 Hz, 2'-H); 4,76 (s, 1A H); 5,06 (s, 1C-H); 6,41 (s, 6-H); 7,60 (d, J= 8 Hz, 10-H); 7,87 (dd, J= 8 u. 1 Hz, 11-H); 12,48 (breit, OH*) ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch 13C-NMR (50,3 MHz, CD3CN, DEPT):a= 14,8 (o, CH3-S); 17,0 (o, C-6C); 17,4 (o, C-6A); 18,4 (o, C-6B); 18,8 (o, C-7'); 23,9 (u, C-3C); 25,2 (u, C-3A); 25,5 (u, C-2A); 26,2 (u, C-2C); 29,9 (o, C-13); 37,5 (u. C-2B); 40,1 (u, C-3'); 45,8 (u, C-4); 54,9 (u. C-2); 67,1 (o, C-4C); 67,5 (o, C-4A); 68,0 (o, C-5C); 71,7 (o, C-5B); 72,0 (o, C-2'); 72,6 (o, C-6'); 76,1 (-, C-3); 76,5 (o, C-5A); 76,7 (o, C-3B); 77,1 (o, C-4B); 78,3 (o, C-4'); 78,9 (o, C-5'); 82,4 (-, C-4a); 84,6 (-, C-12b); 95,2 (o, C-1A); 95,6 (o, C-1C); 102,3 (o, C-1B); 105,8 (o, C-6); 115,1 (-, C-7a); 119,8 (o, C-11); 132,2 (-, C-lla); 134,6 (o, C-10); 134,8 (-, C-6a); 138,1 (-, C-9); 138,4 (-, C-12a); 158,5 (-, C-8); 165,2 (-, C-5); 183,4 (-, C-12); 190,1 (-, C-7); 203,4 (-, C-1 ) ppm CD (Methanol):Xextr. 822x1 0-4)= 495 (-0,2); 460 (+0,1); 420 (-0,4); 325 (+1,1); 253 (+2,9); 226 (+0,3) nm Beispiel 9: (Urdamycin F) Durch Chromatographie der gesammelten Nachzonen (100 mg) aus verschiedenen Vortrennungen nach Beispiel 3 an Kieselgel (Chloroform/Methanol = 9:1) und SEPHADEX LH 20 (Methanol) erhält man 20 mg chromatographisch einheitliches Urdamycin F, Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20x20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,44 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,11 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen) C43H58018 (862.9) Ber. C 59,9 H 6,9 Gef. 59,5 7,3 IR (KBr): 3440; 1727; 1694; 1666; 1635; 1608 cm UV (Methanol) :#max(#) = 460sh (2900); 432 (4300); 278 (5900); 250 (7700); 218 (30900) nm (Methanol/HCl) Amax(C)= wie Methanol (Methanol/NaOH):Amax(C)= 565 (4500); 277 (6600); 226 (25900) nm CD (Methanol):#extr.(026x10-4)= 495 (-0,3); 450 (+0,2); 350 (-1,1); 310sh (-0,1); 275 (+1,5); 243 (-0,3) nm Beispiel 10: Hydrolyse von Urdamycin A: a) 250 mg Urdamycin A werden in 50 ml einer Mischung aus Trifluoressigsäure, Wasser und Methanol (1:2:2) 10 Min. bei Raumtemperatur gerührt. Die Säure wird durch Verteilung zwischen Methylacetat und Wasser entfernt, die organische Phase wird am Rotationsverdampfer zur mrockene eingeengt, in Methanol aufgenommen und an SEPHADEX LH 20 (Methanol) chromatographiert. Man erhält 160 mg Urdamycinon A (=Aquayamycin) in chromatographisch einheitlicher Form. Durch Eintropfen einer gesättigten Aceton Lösung in n-Hexan erhält man das Hydrolyseprodukt als orangefarbenen, amorphen Feststoff, Rf-Wert auf Kieselgel Dünnschichtplatten (20x20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,59 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen bzw. 0,24 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen) b) 490 mg Urdamycin A werden in 70 ml einer Mischung aus Methanol und Wasser (5:2) gelöst und mit 20 Tropfen konzentrierter Schwefelsäure versetzt. Es wird 30 Min. bei Raumtemperatur gerührt (im Dünnschichtchromatogramm kann dann kein Ausgangsprodukt mehr nachgewiesen werden). Es wird mit 200 ml Wasser verdünnt und mit einer gesättigten wässrigen Bariumhydroxid-Lösung neutralisiert (pH Meter). Es wird mit 200 ml Methanol verdünnt und das Bariumsulfat durch Zentrifugieren abgetrennt. Man entfernt die Lösemittel im Rotationsverdampfer und chromatographiert den festen Rückstand an SEPHADEX LH 20 (Methanol) und erhält neben 220 mg Urdamycinon A 212 mg des Disaccharids Oliv-Rho, das zur weiteren Reinigung an Kieselgel (Merck KG 60-Fertigsäule, Ether/Petrolether= 1 : 1) chromatographiert wird. Man erhält 40 mg des Disaccharids als farblosen Sirup. Urdamycinon A (= Aquayamycin) C25H26O10 (486,5) Ber. C 61,7 H 5,4 Gef. 61,3 5,4 IR (KBr): 3420; 1724; 1660 sh; 1655 sh; 1641; 1623; 1582; 1565 cm-1 UV (Methanol) : #max(#)= 440 sh (4500); 420 (4600); max 315 (4300); 230 (17700) nm (Methanol/HCl) : #max(#)= wie Methanol (Methanol/NaOH) : #max(#)= 565 sh (3500); 530 (3700); max 385 (2600); 317 sh (6300); 281 (10500); 230 (16400) nm H-NMR (200 MHz, d6-DMSO):#= 1,11 (s, 3-CH3); 1,20 (verd., 3'-Ha); 1,25 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,83 u. 2,05 (dd u. d, J= 15 u. 2 bzw. 14-H2); 2,22 (o, J= 13,5,2 Hz, 3'-He); 2,42 u. 2,80 (dd u. d, J= 13 u. 2 bzw. 13 Hz, 2-H2); 2,88 (o, J= 9,9,4 Hz, 5'-H**); 3,34 (m, 4'-H); 4,78 (dd, J= 11 u. 2 Hz, 2'-H); 4,96 u. 5,04 (2d, J= 4 bzw. 5 Hz, 5'-OH* u. 4'-oH*); 5,12 (s, OH*); 5.26 (s, OH*); 6,38 (d, J= 10 Hz, 5-H); 6,70 (d, J= 10 Hz, 6-H); 7,53 (d, J= 8 Hz, 10-H); 7,82 (d, J= 8 Hz, 11-H); 12,20 (s, 8-OH*) ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch, ** Signal wird nach D20-Austausch zum dd, J= 9 u. 9 Hz CD (Methanol): #extr. (024xx10-4)= 450 (+0,3); 395 (-0,4); 300 sh (+1,3); 267 (+1,4); 247 (-0,2); 230 sh (+1,6) nm 20 (C= 1, Dioxan): + 159 aD Beispiel 11: Hydrolyse von Urdamycin B a) 45 mg Urdamycin B werden in 50 ml Methanol gelöst und mit 10 Tropfen konzentrierter Schwefelsäure versetzt. Nach 2 1/2 h ist alles Ausgangsmaterial umgesetzt (DC, Chloroform/Methanol= 8:2). Die Mischung wird in Wasser gegossen und dreimal mit je 50 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten Chloroformphasen werden im Rotationsver dampfer zur Trockene eingedampft und an SEPHADEX LH 20 (Methanol) chromatographiert. Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 x 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,60 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,39 mit Methy lenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). b) 20 mg Urdamycin B werden in 10 ml trockenem Tetrahydro furan gelöst und mit 3 Tropfen konzentrierter Schwefel säure versetzt. Nach 2 Tagen wird die Mischung in Wasser gegossen, 3mal mit je 50 ml Chloroform extrahiert und zur Trockene eingeengt. Es wird an Kieselgel (Präpara tive Schichtplatte, 20 x 20 cm, Methylenchlorid/Methanol= 85:15) und anschliessend an SEPHADEX NH 20 (Methanol) chromatographiert. Man erhält 8 mg Urdamycinon B als gelben, amorphen Feststoff. IR (KBr): 3410; 1704; 1673; 1635; 1592 cm UV (Methanol) Xmax (E)= 404 (6000); 286,5 (35000) nm (Methanol/HCl) : Xmax (±)= wie Methanol (Methanol/NaOH): #max (e)= 500 (6000); 315 sh (7000); 266,5 (26000); 250 sh (23000) nm CD (Methanol): # extr. (025x10-4)= 495 (-0,2); 410 (+0,3); 3.25 (+0,2); 264 (-2,3) nm Beispiel 12: Urdamycinon C 40 mg Urdamycin C werden in 20 ml einer Mischung aus Methanol und Wasser (2:1) gelöst und mit 20 Tropfen konz. Schwefelsäure versetzt. Nach 24 h Rühren wird auf Eis gegossen, 3 mal mit je 50 ml Chloroform extrahiert und zur Trockene eingeengt. Man chromatographiert an Kieselgel (Präparative Schichtplatte 20 x 40 cm, Methylenchlorid/ Methanol= 9:1) und SEPHADEX LH 20 (Methanol). Der anfallende rote Farbstoff wird durch Eintropfen einer gesättigten Aceton-Lösung in n-Hexan ausgefällt. Man erhält 20 mg Urdamycinon C als roten, chromatographisch einheitlichen amorphen Feststoff. Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 x 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,25 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C33H30O12 (618,6)? Ber. C 64,1 H 4,9 Fp.: über 3500C Gef. 63,6 5,5 -1 IR (KBr): 3420; 1726; 1708 sh; 1640; 1604 cm UV (Methanol) : Amax (C)= 513 (13200); 311 (15700); 227 (28000) nm (Methanol/HCl) : Amax (E)= wie Methanol (Methanol/NaOH): Amax (e)= 630 sh (11500); 600 (12400); 412 (5000); 323 (9600); 240 (30400) nm H-NMR (200 MHz, d6-Aceton):6= 1,18 (s, 3-CH3); 1,21 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1.23 (o, J= 12, 11 u. 11 Hz, 3,-Ha); 2,1 (dd, J= 12 u. 12 Hz 4-H2); 2,41 (o, J= 12,5,2 Hz, 3'-He); 2,78 (dd, J= 13 u. 2 Hz, 2-He); ; 2,96 (dd, J= 10 u. 9 Hz, 5'-H); 3,23 (d, J= 13 Hz, 2-Ha); 3,41 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 6'-H); 3,70 (o, J= 11,9,5 Hz, 4'-H); 3,87 (s, OH*); 4,14 (breit, 1-2 OH*); 4,70 (dd, J= 10 u. 1,5 Hz, 2'H); 4,74 (s, OH*); 4,90 (s, OH*); 5,26 (s, OH*); 6,14 (d, 1H, J= 10 Hz); 6,99 (d, 1H, J= 10 Hz); 7,03 (d, 2H, J= 8 Hz); 7,43 (d, 2H, J= 8 Hz); 7,87 (d, 1H, J= 2 Hz); 9,00 (breit, OH*); 13,16 (breit, OH*) ppm * Signale verschwinden nach Austausch mit CD3OD C-NMR (50,3 MHz, d6-DMSO, APT): 6= 18,1 (o, C-7'); 29,6 (o, C-13); 30,6 (o); 43,7 (u, C-4); 52,0 (u, C-2); 70,6 (o, C-2'); 71,4 (o, C-6'); 74,9 (u, C-3); 75,8 (o, C-4'); 76,7 (o, C-5'); 78,3 (u, C-4a); 80,1 (u, C-12b); 111,0 (u, C-7a?); 114,9 (o) ; 114,9 (o); 115,3 (u); 117,3 (o); 122,1 (u); 223,8 (u); 129,0 (u); 131,4 (u); 132,5 (u); 133,2 (o); 133,5 (o); 138,2 (o); 140,7 (u, C-9?); 143,7 (u); 154,9 (u, C-8?); 158,7 (u); 159,0 (u); 186,1 (u) ppm (50,3 MHZ, CD3OD): 6= 18,5 (C-7'); 30,2 (C-13); 30,7; 40,9 (C-3'); 45,0 (C-4); 53,1 (C-2); 72,3 (C-2') 73,3 (C-6'); 76,4 (C-3); 77,4 (C-4'); 78,6 (C-5'); 79,7 (C-4a); 81,6 (C-12b); ca. 113 (C-7a?); 116,1; 116,1; ca. 117; 119,5 123,9; 125,8; 129,6; 133,1; 134,5; 134,6; 134,7; 138,3; ca. 142 (C-9?); 145,4; ca. 157 (C-8?); 160,6; 160,8; ca. 188 (C-7?); ca. 208 (C-1) ppm CD (Methanol): #extr. (024x10-4) = 520 (+0,6); 420 (0); 340 (+1,0); 314 (-0,6); 295 (0); 275 (-0,6); 246 (+0,9); 239 (+0,7); 221 (+3,8) nm Beispiel 13: Urdamycinon E 30 mg Urdamycin E werden in 20 ml einer Mischung aus Methanol und Wasser (2:1) gelöst und mit 10 Tropfen konz. Schwefelsäure versetzt. Nach 1 h wird die Mischung in Wasser gegossen, 3mal mit je 30 ml Chloroform extrahiert und im Rotationsverdampfer zur Trockene eingeengt. Den festen Rückstand chromatographiert man an Kieselgel (Präparative Schichtplatte, 20 x 20 cm, Methylenchlorid/ Ethanol= 9:1) und SEPHADEX LH 20 (Methanol). Man erhält 18 mg Urdamycinon E als roten, amorphen Feststoff. Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 x 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,61 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen bzw. 0,45 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C26H28010S (532,6) IR (KBr): 3420; 1721; 1679; 1634; 1605 sh; 1580 sh cm1 UV (Methanol) : Ämax (e)= 480 (6700); 282 (12800); (Methanol/HCl) : Xmax (e)= wie Methanol (Methanol/NaOH): Xmax (±)= 480 sh (7300); 350 sh (4500); 275 (11400); 225 (16800); CD (Methanol): Xextr. (e25x104)- 500 (-0,5); 360 (-0,2); 315 (+0,03); 292 (+1,1); 276 (+0,6); 250 (+2,6) nm Beispiel 14: Urdamycin A-pentaacetat: 60 mg Urdamycin A werden in 15 ml einer Mischung aus Acetanhydrid und Pyridin (2:1) gelöst und 7 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wird auf Eis gegossen, 3 mal mit je 50 ml Chloroform extrahiert und am Rotationsverdampfer zur Trockene eingedampft. Pyridin-Reste entfernt man durch mehrmaliges Aufnehmen und Eindampfen mit Toluol. Es wird an Kieselgel (Präparative Schichtplatte, 20x40 cm, Chloroform/Methanol = 98:2) chromatographiert und das gelbe Hauptprodukt n SEPHADEX LH 20 (Säule 50x2,5 cm, Methanol) nochmals chromatographiert. Man erhält 23 mg Urdamycin-pentaacetat der Formel VII als gelben Feststoff, Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20.20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,83 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,91 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). C53H66 22 (1055,1) Ber. C 60,3 H 6,3 Fp.: 185 C Gef. 60,4 6,4 IR (KBr): 3470; 1783; 1741; 1667; 1632; 1599 cm-1 UV (Methanol) : #max(E)= 355(4300); 313(4900); 257(15900) nm (Methanol/HCl) : #max(#)= wie Methanol (Methanol/NaOH): AmaX(e)= 395sh (2600); 375sh (3500); 327(7400); 253(10400) nm 1 H-NMR (200 MHz, CDCl3): 6= 0,50 (d, J= 6,5 Hz, SC-CH3); 1,18 (d, J= 6,5 Hz, SA-CH3); 1,19 (d, J= 6 Hz, 5B-CH3); 1,25 (s, 3-CH3); 1,27 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,2-2,2 (komplex, 13H); 2,00, 2,04, 2,06 u. 2,10 (4s, 5', 3B-, 4B- und 4C-OAc); 2,36 (o, J= 13,5, 2 Hz, 2B-He); 2,48 (s, 8-OAc); 2,52 u. 2,80 (d. u. dd., J= 13 bzw. 13 u. 2 Hz, 2-H2); 3,44 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 5B-H); 3,48 (s, breit, 4A-H); 3,57 (s, OH*); ca. 3,6 (verd., 6'-H); 3,68 (dq, 6,5 u. 2 Hz, 5C-H); 3,87 (dq, J= 6,5 u. 2 Hz, 5A-H); 4,04 (m, 4'-H); 4,06 (s, OH*); 4,56 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 1B-H); 4,67 (o, J= 3x ca. 2 Hz, 4C-H); 4,6-4,8 (verd., 2'-H); 4,74 u. 4,82 (2 dd, J= je 9 u. 9 Hz, 5'- u. 4B-H); 4,90-5,02 (kompl., 1A-H u. 3B-H); 5,46 (d, J= 2 Hz, 1C-H); 6,41 (d, J= 10 Hz, 5-H); 6,85 (d, J= 10 Hz, 6-H); 8,02 (d, J= 8 Hz, 10-H); 8,13 (d, J= 8 Hz, 11-H) ppm *) Signale verschwinden nach CD3OD-Austausch CD (Methanol): #extr. (022x10-4)= 340 (-1,4); 280 (+4,3); 250(+3,2); 226(+5,8) nm EMI28.1 Beispiel 15: 3-(2',3',7'-Tridesoxy-ss-D-arabino-hexopyranos-2'-yl)-4- hydroxy-7-methoxy-9-methyl-naphthacen-5,12-chinon Bei der Hydrolyse von Urdamycin B in Methanol/Schwefelsäure gemäss Beispiel 11 kann man aus dem Eluat bei der Chromatographie als Nebenprodukt das Naphthacen-chinon der Formel IX isolieren: Durch Eintropfen einer gesättigten Methylenchlorid-Lösung in n-Pentan erhält man 12 mg eines chromatographisch einheitlichen, gelben, amorphen Feststoffs. C26H2407 (448,5) IR (KBr): 3440; 1670; 1627 cm 1 UV (Methanol : Amax(E)= 410(7300); 305(31500); 243sh (29200); 225(42500) nm (Methanol/HCl) : Amax(e)= wie Methanol (Methanol/NaOH): #max(#)= 500(6400); 293(31700); 243 (30100); 219(33700) nm 1H-NMR (200 MHz, d6-DMSO): 6= 1,26 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,29 (o, J= 3x 12 Hz, 3'-Ha); 2,24 (o, J= 12,5, 2 Hz, 3'-He); 2,50 (s, 9-CH3); 2,89 (dd, J= 9 u. 9 Hz, 5'-H); 3,34 (dq, J= 9 u. 6 Hz, 6'-H); 3,54 (o, J= 12,9, 5 Hz, 4'-H); 3,88 (s, 7-OCH3); 4,79 (dd, J= 9 u. 1,5 Hz, 2'-H); 4,97 u. 5,05 (2d, J= je 4 Hz, 4'-OH* u. 5'-OH*); 7,13 (s, 8-H); 7,24 (s, 10-H); 7,33 (d, J= 8 Kz, 2-H); 7,43 (d, J= 8 Hz, 1-11); 8,13 (s, 2H, 6-H u. 11-H); 12,42 (breit, 4-OH*); ppm * Signale verschwinden nach D20-Austausch CD(Methanol): #extr.(024x10-4) = 390sh (+0,3), 335sh (+0,2); 290 (-0,4); 245sh (+0,4) nm EMI29.1 Beispiel 16: 3-(2',3',7'-Tridesoxy-ss-D-arabino-hexopyranos-2'-yl)-4- hydroxy-7-ethoxy-9-methyl-naphthacen-5,12-chinon Bei der Hydrolyse von Urdamycin B gemäss Beispiel 11, jedoch unter Einsatz von Ethanol anstelle von Methanol, erhält man entsprechend Beispiel 15 aus 20 mg Urdamycin B 5 mg des Naphthacen-chinons der Formel X. C27H2607 (462,5) 1H-NMR (80 MHz, d6-Aceton):6= 1,35 (d, J= 6 Hz, 6'-CH3); 1,35 (o, J= 3x 12 Hz, 3'-Ha); 1,43 (t, J= 6,5 Hz, Ethoxy CH3); 2,35 (o, J= 12,5, 2 Hz, 3'-He); 2,50 (s, 9-CH3); 3,05 (dd, JO 9 u. 9 Hz, 5'-H); 3,40 (dq, J= 6 u. 9 Hz, 6'-H); 3,75 (o, J= 12,9, 5 Hz, 4'-H); 4,18 (q, J= 6,5 Hz, Ethoxy-OCH2); 4,87 (dd, J= 10 u. 2 Hz, 2'-H); 7,02 (s, 8-H); 7,32 (s, 10-H); 7,47 (d, J= 8 Hz, 2-H); 7,85 (d, J= 8 Hz, 1-H); 8,02 u. 8,06 (2s, 6-H u. 11-H) ppm EMI30.1

Claims: Patentansprüche: 1 . Urdamycine, erhältlich durch aerobe Fermentation von Streptomyces fradiae DSM 3093 und Isolierung aus dem Kulturmedium. 2. Urdamycin A bis F, erhältlich durch aerobe Fermentation von Streptomyces fradiae DSM 3093, Extraktion des Kultur mediums mit einem wenig oder nicht mit Wasser mischbaren organischen lösemittel, Entfernung stark lipophiler Be standteile und Chromatographie an Kieselgel unter Ver wendung einer Mischung aus einem niederen Chlorkohlen wasserstoff als Hauptbestandteil und einem niederen Alkanol als untergeordnetem Bestandteil als Laufmittel, wobei die rdamycine in der Reihenfolge B, E, A, D, C und F eluiert werden. 3. Urdamycin A der Formel I EMI31.1 4. Urdamycin B der Formel II EMI32.1 5. Urdamycin E der Formel III EMI32.2 6. Urdamycin F der Formel IV EMI33.1 7. Urdamycin C, gekennzeichnet durch einen Schmelzpunkt von 2000C (unter Zersetzung); einen C-Gehalt von etwa 63,4 %, einen Gehalt von etwa 6,7 %; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1732, 1705 (sh), 1640 und 1605 cm 1; UV-Banden (in Methanol) X (E) 510 (12600), 410 (6300, sh) 308 (14800), 237 (23600, sh) und 226 nm (25300) bzw. (in Methanol/HCl) Amax (e) 510 (12600), 310 (15400) und 226 nm (26900) bzw. (in Methanol/NaOH) Amax (E) 625 (10400, sh), 600 (12100), 414 (5500), 326 (12000) und 238 nm (30000); ein Zirkular-Dichroismus Spektrum in Methanol #extr. (021 . 10-4= 500 (-0,5), 336 (+1,7), 283 (-1,2), 248 (+2,9), 236 (+2,2) und 223 nm (+4,8); sowie einen Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschicht platten (20.20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,51 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,15 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). 8. Urdamycin D, gekennzeichnet durch einen Schmelzpunkt von 2200C (unter Zersetzung); einen C-Gehalt von etwa 64,1 %, einen H-Gehalt von etwa 6,5 % und einen N-Ge halt von etwa 1,5 %; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1735, -1 1710 (sh), 1690, 1668 und 1595 cm 1; UV-Banden (in Methanol mit und ohne HCl Amax (E ± 575 (11200) und 328 nm (11600) bzw. (in Methanol/NaOH) 635 (7200, sh), 600 (8500), 412 (4200), 324 (7500), 270 (17600, sh) und 222 nm (32400); einen Zirkular-Dichroismus-Spektrum in Methanol ext r. (e24 10 4)= 440 (+0,1), 395 (-0,3), 350 (+1,0), 320 sh (-0,4), 278 (-1,5), 245 (+2,0) und 226 nm (+5,9); sowie einen Rf-Wert auf Kieselgel-Dünn schichtplatten (20 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Lauf strecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,17 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). 9. Verfahren zur Herstellung von antibiotisch wirksamen Verbindungen durch aerobe Fermentation von Streptomy ceten, dadurch gekennzeichnet, dass man den Stamm S. fradiae DSM 3093 fermentiert, aus dem Kulturmedium die antibiotisch wirksamen Komponenten extrahiert und ge gebenenfalls auftrennt. 10. Streptomyces fradiae DSM 3093. 11. Verwendung der Urdamycine nach Anspruch 1 bis 8 bzw. der nach Anspruch 9 erhaltenen Verbindungen zur Her stellung von Heilmitteln. 12. Verwendung von Urdamycin A gemäss Anspruch 3 zur Her stellung von Aquayamycin. 13. Verwendung der Urdamycine B bis F gemäss den Ansprüchen 4 bis 8 zur Herstellung der Aglykone. 14. Verfahren zur Herstellung von Urdamycinon B bis F, da durch gekennzeichnet, dass man aus Urdamycin B bis F gemäss den Ansprüchen 4 bis 8 die O-glykosidisch gebun denen Zucker sauer abspaltet. 15. Urdamycinon B der Formel V EMI35.1 16. Urdamycinon E der Formel VI EMI35.2 17. Urdamycinon F der Formel VII EMI35.3 18. tirdamycinon C, erhältlich aus IJrdamycin C gemäss An spruch 7 durch saure Abspaltung der O-glykosidisch gebundenen Zuckermoleküle. 19. Urdamycinon D, erhältlich aus Urdamycin D gemäss An spruch 8 durch saure Abspaltung der O-glykosidisch gebundenen Zuckermoleküle. 20. Urdamycinon C, gekennzeichnet durch einen Schmelzpunkt ueber 350 C; einen C-Gehalt von etwa 63,6 % und einen H Gehalt von etwa 5,5 ; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1726, 1708 (sh), 1640 und 1604 cm-1; UV-Banden (in Me- thanol, mit und ohne HCl) Agar (E) 513 (13200), 311 (15700) und 227 nm (28000); bzw. (in Methanol/NaOH) 630 (11500, sh) 600 (12400), 412 (5000), 323 (9600) und 240 nm (30400); ein Zirkular-Dichroismus-Spektrum in Methanol #extr. (024.10-4)= 520 (+0,6), 420 (0), 340 (+1,0), 314 (-0,6), 295 (0), 275 (-0,6), 246 (+0,9), 239 (+0,7) und 221 nm (+3,8); sowie einen Rf Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 . 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,15 mit Methy lenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen). 21. Verwendung von Urdamycinon B bis F gemäss den Ansprüchen 15 bis 20 zur Herstellung von Heilmitteln. 22. Urdamycin A bis F gemäss den Ansprüchen 3 bis 8 und tir- damycinon B bis F gemäss den Ansprüchen 15 bis 20 zur An wendung in Heilverfahren. Patentansprüche bsterreich: 1. Verfahren zur Herstellung antibiotisch wirksamer Verbin dungen durch aerobe Fermentation von Streptomyceten, da durch gekennzeichnet, dass man a) den Stamm Streptomyces fradiae DSM 3093 fermentiert und b) die Urdamycine aus dem Kulturmedium extrahiert. 2. Verfahren zur Herstellung antibiotisch wirksamer Verbin dungen durch aerobe Fermentation von Streptomyceten, da durch gekennzeichnet, dass man a) den Stamm Streptomyces fradiae DSM 3093 fermentiert, b) die Urdamycine aus dem Kulturmedium extrahiert und c) die Urdamycine auftrennt. 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktion des Kulturmediums mit einem organischen Lösemittel durchgeführt wird, das mit Waser wenig oder nicht mischbar ist, stark lipophile Bestandteile aus dem Extrakt entfernt werden und durch Chromatographie an Kieselgel mit einem Elutionsmittel, das aus einem niede ren Chlorkohlenwasserstoff als Hauptbestandteil und einem niederen Alkanol als untergeordnetem Bestandteil besteht, die Urdamycine in der Reihenfolge Urdamycin B der Formel II, EMI37.1 EMI38.1 Urdamycin D, gekennzeichnet durch einen Schmelzpunkt von 220 C (unter Zersetzung); einem C-Gehalt von etwa 61,4%, einen H-Gehalt von etwa 6,5% und einen N-Gehalt von etwa 1,5%; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1735, 1710 (sh), 1690, 1668 und 1595 cml; UV-Banden (in Methanol mit und ohne HCl #max (#) 575 (11200) und 328 nm (11600) bzw. (in Methanol/NaOH) 635 (7200, sh), 600 (8500), 412 (4200), 324 (7500), 270 (17600, sh) und 222 nm (32400); ein Zirkular-Dichroismus-Spektrum in Methanol #extr. (024. 10-4)= 440 (+0,1), 395 (-0,3), 350 (+1,0), 320 sh (-0,4), 278 (-1,5), 245 (+2,0) und 226 nm (+5,9); sowie einen Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 . 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,17 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen), Urdamycin C, gekennzeichnet durch eine Schmelzpunkt von 200 C (unter Zersetzung); eine C-Gehalt von etwa 63,4%, einen H-Gehalt von etwa 6,7%; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1732, 1705 (sh), 1640 und 1605 cm 1; UV-Banden (in Methanol) max (E) 510 (12600), 410 (6300, sh) 308 (14800), 237 (23600, sh) und 226 nm (25300) bzw. (in Methanol/HCl) Amax (e) 510 (12600), 310 (15400) und 226 nm (26900) bzw. (in Methanol/NaOH) iax (e) 625 (10400, sh), 600 (12100), 414 (5500), 326 (12000) und 238 nm (30000); ein Zirkular-Dichroismus-Spektrum in Methanol X extr. (021 . 10-4 = 500 (-0,5), 336 (+1,7), 283 (-1,2), 248 (+2,9), 236 (+2,2) und 223 nm (+4,8); sowie einen Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschichtplatten (20 . 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,51 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,15 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen), und EMI39.1 4. Verfahren zur Herstellung von Urdamycinon B bis F, da durch gekennzeichnet, dass man aus Urdamycin B bis F gemäss Anspruch 3 die O-glykosidisch gebundenen Zucker sauer abspaltet und Urdamycinon B der Formel V, EMI40.1 Urdamycinon E der Formel VI, - EMI40.2 Urdamycinon F der Formel VII, EMI40.3 Urdamycinon C, gekennzeichnet durch einen Schmelzpunkt über 350 C; einen C-Gehalt von etwa 63,6% und einen H Gehalt von etwa 5,5%; IR-Banden (in KBr) bei 3420, 1726 1708 (sh), 16140 und 1604 cm 1; UV-Banden (in Methanol, mit und ohne HCl) X max (E) 513 (13200), 311 (15700) und 227 nm (28000); bzw. (in Methanol/NaOH) 630(11500, sh) 600 (12400), 412 (5000), 323 (9600) und 240 nm (30400); ein Zirkular Dichroismus-Spektrum in Methanol # extr. (024.10-4)= 520 (+0,6), 420 (0), 3140 (+1,0), 314 (-0,6), 295 (0), 275 (-0,6), 246 (+0,9), 239 (+0,7) und 221 nm (+3,8); sowie einen Rf-Wert auf Kieselgel-Dünnschicht platten (20 . 20 cm, 0,25 mm Schichtdicke, Laufstrecke 15 cm) von 0,52 mit Chloroform/Methanol (4:1 Volumen) bzw. 0,15 mit Methylenchlorid/Ethanol (9:1 Volumen) und Urdamycinon D erhält. 5. Verfahren zur Herstellung von Aquayamycin, dadurch ge kennzeichnet, dass man als Ausgangsprodukt Urdamycin A gemäss Anspruch 3 einsetzt.

Inventors: DRAUTZ, HANNELORE, DR., JONES, PETER, G. DR., PAULUS, ERICH F. DR., ROHR, JURGEN, DR., SHELDRICK, GEORGE M. PROF. DR., ZAHNER, HANS, PROF. DR., ZEECK, AXEL, PROF. DR., Rohr, Jürgen, Dr., Zähner, Hans, Prof. Dr.
Applicants: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT
Application year: 1985
Main classification: C07H15
IPC codes: A61K31, C12P19, C07H17, A61P31, A61P35, C07D309, C07H15, C12R1