GLYCERINE DERIVATIVES FOR PHOSPHOLIPIDS SYNTHESIS

Abstract: New derivatives of glycerine having the formulas (I, II and III), wherein the symbol Z represents the methyl rest, a beta-unsaturated alkyl rest, an alkyl-aryl rest or a benzyl rest, or a cation equivalent, wherein the symbols R<1> and R<2>, being similar or different, represent a hydrogen atom, a rest R or an acyl rest -COR or a trityl rest with the proviso that it is in the position 1 or 3, wherein R represents an alkyl rest optionally unsaturated and/or substituted by halogen, hydroxy, carboxy, cyclo-alkyl or aryl, wherein the symbol X represents O, NH or N(R<3>) and the symbol R<3> when the symbol X represents O or NH represents an alkyl rest optionally unsaturated and/or substituted by halogen, amino, methyl-amino, dimethyl-amino, trimethyl-ammonio, hydroxy, carboxy, cyclo-alkyl or aryl, or when X is O, also D- or L-20-tert.-butyl-oxycarbonyl-amino-2-tert.-butyloxycarbonylethyl, 1,2- or 2,3-isopropylidene-dioxypropyl, 1,2-, 1,3 or 2,3-dibenzyloxy-propyl, 1,2,3,4,5-penta-benzyloxy-cyclohexyl or N-alkyl-amino-alkyl, or else when X is NH, also 1,2-dihydroxypropyl and when X is N(R<3>), of similar or different meaning, represent hydrogen or an alkyl rest optionally unsaturated and/or substituted by halogen, cyclo-alkyl or aryl. The compounds of the invention are valuable intermediates and have, at least partially, an anti-tumoral activity.

Description: Die Erfindung betrifft neue Glycerinderivate zur Synthese von Phospholipiden, wie Diester-, Monoester-, Monoäther-, Äther/ Ester- und Diäther-phospholipiden und entsprechendLvr Phosphorsäureamid-Analoga. Glycerinphosphatide sind biologisch und technisch äusserst wichtige Substanzen. Die Isolierung reiner, einheitlicher Glycerinphosphatide aus natürlichen Geweben ist ausserordentlich schwierig und kostspielig. Ihre Synthese ist vor allem dann problematisch, wenn Glycerinphosphatide hergestellt werden sollen, in denen Glycerin mit ganz bestimmten Resten in ganz bestimmter Stellung acyliert sein soll. E. Cubero Robles et al (Rec. Trav. Chim. 86 (1976), 762; Biochtm. Biophys. Acta 187 (1969), 520) beschreiben zum Beispiel eine Synthese von Glycerinphosphatiden mit gemischten Fettsäureresten durch Acylierung von 1-Palmitoyl-sn-glycerin3-phosphorcholin und Fettsäureanhydriden in Gegenwart von Na2O. Bei diesem Verfahren findet jedoch in hohem Masse ein Austausch der Acylgruppen statt, wodurch die Selektivität, d. h. ganz gezielte Einführung bestimmter Acylreste, in bestimmter Stellung stark vermindert wird (vgl. K. M. W. Keough, P. J. Davis, Biochemistry 18 (1979), 1453). Ein weiterer Nachteil dieses Verfahrens ist es, dass während der Acylierungsstufe-in erheblichem Masse auch eine Wanderung des Phosphorsäurerests aus der 3- in die 2-Stellung erfolgt. Auch bei der Reacylierung von Monoacyl-glycerinphosphorsäureestern können Umlagerungen sowohl von Fettsäuren als auch von Phosphatresten auftreten (vgl. A. Plückthun und E. A. Dennis, Biochemistry (1982), 21, 1743 - 1750; H. Eibl, Chem. Phys. Lipids (1980), 26, 405 - 429; H. Eibl, Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Application: Chapter 2: Phospholipid Synthesis (1981), 19 - 50; C. G. Knight, Ed., Elsevier, Amsterdam). Der Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zugrunde, Ausgangsprodukte und Wege zur Herstellung von Glycerinphosphatiden (Phospholipiden) bereitzustellen, bei denen die genannten Probleme nicht auftreten und die eine definierte Verteilung von Acyl-, Alkyl- und Phosphatresten über die Positionen 1, 2 und 3 des Glycerinmoleküls erlauben. Diese Aufgabe wird mit der vorliegenden Erfindung gelöst. Gegenstand der Erfindung sind Glycerinderivate der Formeln I, II und III EMI2.1 worin Z Methyl, gegebenenfalls einen Phenylrest enthaltendes Alkyl mit einer C-C-Mehrfachbindung in Stellung, Benzyl oder ein Aguivalent eines physiologisch verträglichen Kations, vorzugsweise Methyl, ist, R1 und R2 gleich oder verschieden sind und ein Wasserstoffatom, den Rest R oder den Acylrest -COR bedeuten, in 1- oder 3-Stellung auch Trityl, R Alkyl mit 1 bis 24 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Hydroxy- oder Carboxyalkyl mit 2 bis 24 Kohlenstoffatomen bedeutet, wobei Alkyl geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, und worin eine Hydroxy und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, X die Bedeutung O, NH oder N(R3) besitzt, und R3, wenn X = O ist, Alkyl mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Hydroxy- oder Carboxyalkyl oder auch J\mino-, Methylamino-, Dfimethyl- amino- oder TrimethylammonioaIkyl mit 2 bis 20 Xohlenstoffatamen, wobei Alkyl geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kar, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, bedeutet, worin eine y7droxy- und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, D- oder L-2-tert.-Butyloxycarbonylamino-2-tert.-butylOxy-carbonyl- äthyl, 1,2- oder 2,3-Isopropyliden-dioxy-propyl, 1,2-, 1,3oder 2,3-Dibenzyloxy-propyl, 1,2, 3,4,5-Pentabenzyloxy-cyclo- hexyl oder Aminoalkyl und N-Alkylaminoalkyl mit 2 bis 14 Kohlenstoffatomen in den Alkylresten, worin die Aminogruppen auch Schutzgruppen enthalten können, bedeutet, wenn X = NH ist, Alkyl mit 1 bis 20 Kohlenstoff atomen oder Halogen-, Hydroxy- oder Carboxyalkyl oder auch Amino-, Methylamino-, Dimethylamino- oder Trirnethylammonioalkyl mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen, wobei Alkyl geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, oder 1,2-Dihydroxypropyl bedeutet, worin eine Hydroxy- und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, und, wenn X = N(R3) ist, verschieden oder vorzugsweise gleich ist und Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen oder Halogenalkyl mit 1 bis 12, vorzugsweise 2 bis 12 Kohlenstoffatomen, worin eine Alkylgruppe geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kann und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, bedeutet. Eine Alkylgruppe kann verzweigt oder vorzugsweise geradkettig sein und kann Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten. Eine Alkylgruppe mit einer Doppelbindung ist zum Beispiel der als Schutzgruppe dienende Allylrest. Cycloalkyl ist zum Beispiel Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Methylcyclopentyl und vorzugsweise Cyclohexyl. Ein Arylrest ist insbesondere ein solcher mit 6 bis 1 4 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise Naphthyl-(1) oder -(2), und insbesondere Phenyl. Eine mit einem Phenylrest substituierte Alkylgruppe ist zum Beispiel die als Schutzgruppe dienende Benzylgruppe. Eine Acylgruppe -COR leitet sich insbesondere von gesättigten und ungesättigten natürlichen Fettsäuren ab, wie zum Beispiel von Behen-, Laurin-, Stearin-, Palmitin-, Myristin-, Caprinoder Arachinsäure, sowie von öl-,-Linol- oder Arachidonsäure und von höher ungesättigten Fettsäuren. Halogen kann Fluor, Brom oder Jod sein, und ist insbesondere Chlor. Ein physiologisch verträgliches Xation Z ist vorzugsweise ein ein-, zwei- oder dreiwertiges physiologisch verträgliches Kation, wie z. B. Natrium, Kalium, Calcium und insbesondere Lithium. Wenn Z Alkyl bedeutet mit tUnsättigung handelt es sich vorzugsweise um Alkyl oder dessen Homologe. Schutzgruppen für die Hydroxygruppe sind zum Beispiel Benzyl, Allyl, Trityl, Tetrahydropyranyl, Mesyl und Tosyl; für die Carboxygruppe zum Beispiel tert.-Butyl. Die Vorstufen der Verbindungen der Formeln, II oder III mit freien Hydroxygruppen am Phosphor können analog einem für Glycerinderivate bekannten Syntheseweg erhalten werden (vgl. zum Beispiel D. Arnold, E. U. Weltzien und 0. Westphal, Liebigs Ann. Chem. 709 (1967), 234 bis 239; H. U. Weltzien und 0. Westphal, Liebigs Ann. Chem. 709 (1967), 240 bis 243; H. Eibl u. O. Westphal, Liebigs Ann. Chm. 709 (1967), 244 bis 247;) vorzugsweise werden sie nach einem der in der deutschen Patentanmeldung P 31 30 867 der gleichen Anmelderin vom 4. August 1981 oder in der deutschen Patentanmeldung "Neue D-mannitderivate als Ausgangsprodukte zur Synthese von Phospholipiden" der gleichen Anmelde-in vom gleichen Anmeldetag für ähnliche Verbindungen bekannten Verfahren hergestellt. Die berührung in den Methylester erfolgt dann in an sich bekannter Weise, zum Beispiel durch Umsetzung mit Methanol. Die Herstellung der Glycerinderivate der Formeln I, II oder III, in denen Z ein Äquivalent eines physiologisch verträglichen Kations ist, kann insbesondere durch Unsetzung des entsprechenden Methylesters (Z = CH3) mit einem Halogenid von Z, z. B. mit Lithiumbromid, erfolgen. Es hat sich gezeigt, dass man ausgehend von den Zwischenprodukten der Formeln I, II oder III auf einfache und wirtschaftliche Weise Glycerinderivate mit verschiedenen Resten stellungsspezifisch und mit hoher Selektivität herstellen kann. Die Verbindungen der Formel I führen zu Phospholipiden natürlicher Xonfiguration (sn-3-Phosphate), die der Formel II und III zu Verbindungen mit nicht natürlicher Konfiguration (sn-1- oder -2-Phosphate). Die vorstehend und nachstehend genannten Glycerinderivate können sowohl als optisch reine Stereoisomere als auch als Racemate vorliegen. Bei zwei gleichkettigen Fettsäuren oder Alkylresten und einem Phosphatrest sind drei Stereoisomere möglich; bei zwei ungleichen Fettsäuren oder Alkylresten und einem Phosphatrest sind sechs Stereoisomere möglich, die alle aus den Zwischenverbindungen I, II und III erhalten werden können. Die Methylgruppe in Formel I, II und III ist in vieler Hinsicht entsprechenden Benzylgruppen überlegen. Sie besitzt ausreichende Stabilität für die notwendigen Reaktionsschritte, beispielsweise sind die Phospborsäuremethylester der Formeln I, II und III stabil bei katalytischer Hydrogenolyse, saurer Trityl- und Propenylabspaltung unter den gewählten Bedingungen. Mit Lithiumbromid ist die Methylgruppe leicht und ohne Destruktion des Phospholipidmoleküls wieder entfernbar. Gegenstand der Erfindung ist deshalb auch ein Verfahren zur Weiterverarbeitung der Verbindungen der Formeln I, II oder III zur Herstellung von Phospholipiden, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man a) zur Herstellung von Diester-phospholipiden mit gleichen Acylresten von einer Verbindung ausgeht, in der R1 und R2 = Wasserstoff bedeutet, diese acyliert und danach mit Lithi umbromid demethyliert, oder b) zur herstellung von 1)iester-phospholipiden : :nit unleichen Acylresten von einer Ausgangsverbindung ausgeht, in der R1 und R2 verschieden sind und ?Ll Alkanoyl, Benzyl allyl oder Trityl und Rê Alkanoyl, Benzyl oder Allyl bedeutet, wobei ein Rest RÚ oder Rê eine Alkanoylgruppe ist, eine Benzyl-, Allyl- oder Tritylgruppe RÚ oder Rê abspaltet, die freiwerdende Hydroxylgruppe acyliert und danach mit Lithiumbromid demethyliert, oder c) zur Herstellung von Monoester-phospholipiden von einer Aus gangsverbindung ausgeht, in der R1 und R2 verschieden sind und RÚ Alkanoyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, R2 Allvl, wobei ein Rest RÚ oder Rê eine Alkanyl gruppe ist und mit Lithiumbromid demethyliert, oder d) zur Herstellung von Monoäther-phospholipiden von einer Ver bindung ausgeht, in der R und R2 verschieden sind und R1 Alkyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, R2 Alkyl, Ben zyl oder Allyl, wobei ein Rest R1 oder R eine Alkylgrup pe ist, und mit Lithiumbromid demethyliert, oder e) zur Herstellung von Äther/Ester-phospholipiden von einer Verbindung ausgeht, in der R1 und R2 verschiedensin und RÚ Alkyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, Rê Alkyl, Benzyl oder Allyl, wobei ein Rest R1 oder R2 eine Alkylgruppe ist, eine Benzyl-, Allyl- oder Tritylgruppe RÚ oder Rê abspal tet, die entstehende Hydroxygruppe acyliert, und danach mit Lithiumbromid demethyliert, oder f) zur Herstellung von Diäther-phospholipiden von einer Ver bindung ausgeht, in der RÚ und Rê Alkyl sind, und mit Lithiumbromid demethyliert, und wenn erforderlich oder erwünscht, in einer nach a) bis f) erhaltenen Verbindung auf an sich bekannte Weise vorhandene Schutzgruppen abspaltet und/oder den Phosphor enthaltenden Rest aminiert oder in einen anderen Phosphor enthaltenden Rest überführt, wobei die Abspaltung von Benzyl, Allyl oder Trityl auch nach der Aminierung oder überführung in einen anderen Phosphor enthaltenden Rest erfolgen kann. Nach diesen Verfahren ist auch die Überführung einer Verbindung der Formel I, II oder III in eine andere Verbindung der Formel I, II oder III mit anderen Resten R11 R2 R3 oder Z möglich. Wenn erwünscht oder zweckmässig, können die Verfahren auch so durchgeführt werden, dass man von einem nach einer der Verfahrensstufen erhaltenen Produkt ausgeht und die restlichen Ver fahrensstufen durchführt. Unter Berücksichtigung aller im Molekül vorhandenen Reste ist es zum Beispiel auch möglich, die Reihenfolge der einzelnen Verfahrensstufen zu vertauschen. Die Acylierung einer freien Hydroxygruppe kann durch Umsetzung mit Säurechloriden in Gegenwart von Triäthylamin oder Pyridin durchgeführt werden (vgl. H. Eibl und 0. Westphal, Liebigs Ann. Chem. 709 (1967), 244). Es ist aber auch möglich, nach an sich bekannten anderen Acylierungsmethoden (zum Beispiel wie von Gupta et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 74 (1977), 4315 beschrieben) zu arbeiten. Besonders einfach gelingt die Acylierung mit freier Fettsäure und Dicyclohexylcarbodiimid in Gegenwart von Dimethylaminopyridin. Die Abspaltung der Tritylgruppe erfolgt unter schwach sauren Bedingungen, vorzugsweise bei einem pH-Wert von 4 bis 6, wobei der günstigste Wert unter Berücksichtigung der übrigen Substituenten im Molekül leicht eruiert werden kann. Die Allyl- und Benzylschutzgruppen sind hierbei vollkommen stabil. Die Reaktion kann in einem wässrigen oder wässrig-organischen, aber auch in einem rein organischen Medium, wie zum Beispiel in absolutem Äthanol, in Gegenwart von HCl oder H2SO4 durchgeführt werden. Das organische Lösungsmittel kann dabei ein mit Wasser mischbares oder aber auch ein mit Wasser nur teilweise oder nur wenig mischbares inertes Lösungsmittel sein. Die Reaktion erfolgt, insbesondere beim Arbeiten in einem Zweiphasensystem, vorteilhafterweise unter starkem Rühren. Die Temperatur beträgt im allgemeinen 20 bis 800C. Zur Verbesserung der Löslichkeit kann es zweckmässig sein, einen höheren Alkohol, wie zum Beispiel Propanol-(2), in kleiner Menge zuzusetzen. Die Abspaltung der Benzylgruppe erfolgt durch katalytische Hydrogenolyse. Die Reaktionsbedingungen entsprechen dabei den üblichen Bedingungen. Insbesondere führt man die Hydrogenolyse in einem inerten Lösungsmittel, wie zum Beispiel Äthanol, in Gegenwart eines Palladium- oder Platin/Palladium-Katalysators durch, vorzugsweise bei Raumtemperatur und unter Normaldruck (vgl. H. Eibl et al, Liebigs Ann. Chemie, 738 (1970), 161). Die Abspaltung der Allylgruppe (Umlagerung in Propenyl und nachfolgende Abspaltung von Propenyl) kann nach zwei verschiedene Methoden erfolgen, nämlich 1) unter alkalischen Bedingungen, wie zum Beispiel mit Kalium-tert.-butylat in Dimethylformamid und anschliessende Spaltung mit Brom in gepufferter Lösung bei einem pH-Wert um 5 bis 6, oder 2) durch Umlagerung in Gegenwart eines Palladium- (Kohle) -Katalysators unter Bildung der unter diesen Bedingungen instabilen, spontan abspaltenden Propenylgruppe, wobei zweckmässigerweise in 80 %-igem Methanol, welches in der wässrigen Phase 20 % Ameisensäure enthält, bei Rückflusstemperatur gearbeitet wird. Im allgemeinen ist die Variante 1, d. h. die Abspaltung mit Brom, bevorzugt. Zur Abspaltung der Propenylgruppe in 1-Stellung kann auch Jod verwendet werden (Eibl und Lands, Biochemistry 9 (1970), 423). Während aber eine Abspaltung der Propenylgruppe in 2-Stellung mit Jod überhaupt nicht möglich ist, lässt sich eine solche Abspaltung überraschenderweise mit Brom vollständig und in wenigen Minuten durchführen. Die Demethylierung des Phosphorsäuremethylesters mit Lithiumbromid erfolgt durch Kochen in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, vorzugsweise in Methyläthylketon. Die Aminierung des Phosphor enthaltenden Restes kann in an sich bekannter Weise erfolgen (vgl. z. B. H. Eibl u. A.Nicksch, Chem. Phys. Lipids, 22 (1978), 1; W. Diembeck und H. Eibl, Chem. Phys. Lipids, 24 (1979), 237), ebenso die nachträgliche Alkylierung einer freien Aminogruppe. Erfindungsgemässen Verbindungen der Formel I und II kommt auch eine grosse Bedeutung aufgrund ihrer besonderen Wirksamkeit auf das Wachstum von Tumoren zu. Es wurde gefunden, dass insbesondere die Glycerinderivate der allgemeinen Formel I und II, in denen R1 den Rest -(CH2)m-CH3, worin m 13 - 19 ist, bedeutet, R2 ein Wasserstoffatom und, wenn X = 0 ist, R3 Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, durch Hydroxy oder Trityloxy M-substituiertes Alkyl mit 2 bis 11 Kohlenstoffatomen, durch Carboxy oder tert.-Butyloxycarbonyl S-substituiertes Alkyl mit 1 bis 11 Kohlenstoffatomen, 2-(Amino- oder tert. Butyloxycarbonylamino)-2-tert.-butyloxycarbonyl-äthyl, 1,2 Dihydroxy- oder 1,2-Isopropylidendioxy-propyl, Pentahydroxyoder Pentabenzyloxy-cyclohexyl, oder durch Brom, Amino, Methylamino, Dimethylamino, Trimethylammonio, tert.-Butyloxycarbonylamino, tert. - Butyloxycarbonyl-methylamino #-sub- stituiertes Alkyl mit 3 - 11 Kohlenstoffatomen bedeutet, wenn X = NH ist, R Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, durch Brom, Hydroxy, Trityloxy, Amino, Methylamino, Dimethylamino oder Trimethylammonio W-substituiertes Alkyl-mit 2 - 11 Kohlenstoffatomen, durch Carboxy oder tert.-Butyloxycarbonyl ±C-substituiertes Alkyl mit 1 bis 11 Kohlenstoffatomen oder 1,2-Dihydroxy- oder 1,2-Isopropylidendioxy-propyl bedeutet, und, wenn X = N (R ) ist, R verschieden oder vorzugsweise gleich ist und Alkyl mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen oder W-Chloralkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, eine ausgeprägte tumorwachstumshemmende Wirkung besitzen. Diese Wirkung zeigen sowohl die optisch reinen Verbindungen als auch die Racemate. Eine besonders gute Wirkung zeigen Verbindungen der Formel II und insbesondere I, in denen RÚ n-Octadecyl, R Wasserstoff, X = O und R 3-Trimethylammoniopropyl bedeuten. Die ausgeprägte tumorwachstumshemmende Wirkung der erfindungsgemässen Lyso-Verbindungen (1-Alkyl-2-OH) beruht zum Teil auf einem völlig neuen Wirkprinzip. Sie werden durch Acyltransferasen nicht oder nur sehr langsam entgiftet. Dies be ruht bei einigen der erfindungsgemässen Lysoverbindungen, bei denen der Rest R3 z. B. eine durch Amino- oder alkylsubstituiertes Amino ±-substituierte Alkylgruppe mit mehr als 3 Kohlenstoffatomen ist, darauf, dass zwischen P und N mindestens 3 Methylengruppen liegen, wie z. B. in der Gruppierung EMI11.1 In einem solchen Fall greifen Acyltransferasen nicht mehr an; Phosphorlipasen A2 greifen noch an, die Acyltransferasen können aber nicht mehr reacylieren. Die Verbindungen der Formeln I und II, in denen R1 den Rest -(CH2)m-CH3, worin m 13 bis 19 ist, und R2 einen Acylrest C0R bedeutet, wirken als in natürlicher Form vorliegende Vorläufer der vorstehend genannten tumorwirksamen Substanzen. Sie gehen mit Phospholipase A2 in vivo in die aktiven Substanzen über. Die 1-Alkyl-2-acyl-glycerinderivate sind im Gegensatz zu den 1-Alkyl- 2-OH- Verbindungen, in die sie erst enzymatisch überführt werden, nicht hämolytisch; sie können deshalb problemlos höher dosiert werden. Dabei ist es günstig, Matrixmoleküle mit stabilen Ätherstrukturen zu verwenden, die durch Phospholipase A2 nicht gespalten werden, wie insbesonders z. B. 1-Octadecyl-2-oleyl-Verbindungen. Die Wirksamkeit von Verbindungen auf das Wachstum von Tumoren wird zweckmässig an Tumoren in Versuchstieren bewiesen. Hierfür kommen verschiedene experimentelle Tumoren zur Verwendung, beispielsweise der Ehrlich-Ascites-Tumor, ein Methylcholanthren-induzierter Tumor und ein Myelom-Tumor in Mäusen, ferner ein chemisch induzierter Rattentumor. Die Anti Tumor-Substanzen werden parenteral in die tumortragenden Versuchstiere verabreicht. Bevorzugt wird die intravenöse und die intra- bzw. subkutane Applikation. Auch die orale Applizierbarkeit ist bei entsprechend höherer Dosierung des Anti-Tumormittels und bei einer physiologisch verträglichen Zubereitung, z. B. in Kapseln, nicht ausgeschlossen. Gegenstand der Erfindung sind deshalb auch Arzneimittel, die eine oder mehrere der oben genannten tumorwachstumshemmenden Verbindungen der Formel I oder II als Wirkstoff enthalten. Neben den üblichen pharmazeutischen Konfektionierungsund/oder Verdünnungsmitteln können diese Arzneimittel neben den Verbindungen der Formel I und II zur Unterstützung der Therapie gegebenenfalls auch noch weitere Wirkstoffe enthalten, sofern diese mit den erfindungsgemässen Verbindungen zusammen keine unerwünschten Nebenwirkungen zeigen. Die Dosierungs- und Anwendungsweise entspricht im wesentlichen den für die Anti-Tumormittel der DE-OS 2 619 686 angegebenen Bedingungen, wobei aber aufgrund der höheren Wirksamkeit auch geringere Dosierungen und/oder eine weniger häufige Verabreichung in Frage kommen können. Als Dosierung hat es sich bei der parenteralen Applikation zweckmässig erwiesen, etwa 0,05 bis 5 mg/kg Körpergewicht einzusetzen. Um die Anti Tumormittel über längere Zeit im Kreislauf persistieren zu lassen, ist es häufig sinnvoll, die Mittel täglich oder in 2- bis 3-tägigen Abständen zu applizieren. Als besonders günstige Arzneimittelzusammensetzung hat sich eine solche erwiesen, bei der die erfindungsgemässe Wirkstoffkomponente aus einer Mischung aus ca. 80 - 95 Gew.-% 1-Alkyl-2-acyl-Verbindung und ca. 20 - 5 Gew.-% 1-Alkyl-2-OH Verbindung besteht. Eine solche Zusammensetzung ist aufgrund des höheren Gehalts an 1-Alkyl-2-anyl-Verbindung nicht hämolytisch. In den nachfolgenaen Schemen A, B und C sind die Möglichkeiten der Variation im Phosphor enthaltenden Rest (polarer Bereich) aufgezeigt, ohne sie darauf zu beschränken (A: Phospholipide; B und C: Phosphatidsäureamide). Ausgehend von den Triphosphosäureestern (A) oder den entsprechenden Phosphorsäureamiden (B, C) können alle wesentlichen Phospholipide natürlicher Membranen oder deren Analoga auf einfache Weise dargestellt werden. Durch das erfinaungsgemässe Verfahren werden die bekannten Nachteile der Synthese von Glycerinphosphatiden, insbesondere die Wanderung der Acylreste und/oder des Phosphorsäurerestes, ver mieten Es hat sich gezeigt, dass die Verbindungen der Formeln I, II und III sehr gute Ausgangsmaterialien zur Herstellung von Glycerinphosphatiden sind, wobei jeder einzelne Verfahrensschritt unter Bedingungen durchgeführt werden kann, durch die die übrigen Substituenten nicht beeinflusst werden. Zusammenfassend kann also festgestellt werden, dass das erfindungsgemässe Verfahren eine sehr selektive, einfache und wirtschaftliche Methode zur Herstellung von Phospholipiden darstellt, die vor allem für die stereo- und stellungsspezifische Darstellung von Glycerinphosphatiden mit zwei oder drei verschiedenen Resten von Bedeutung ist. Die nachfolgenden Beispiele erläutern die Erfindung weiter, ohne-sie darauf zu beschränken. Schema A: Diester-, Monoester-, Äther/Ester-, Monoäther- und Diätherphospholipide (R = Glyceringrundkörper mit Resten R1 und R2; x = O). EMI14.1 Phosphatidylester (x = 0 - 20) EMI14.2 <tb> <SEP> 0 <tb> 2) <SEP> RO-P-O-(CH2)y-Br <tb> 2) <SEP> R0-P1-0-(CH2) <SEP> y <tb> <SEP> OCH3 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> Ii <tb> <SEP> ------ <SEP> RO-P-O-(CH2) <SEP> -Br <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> OLi <tb> <SEP> Phosphatidylbromalkylester <tb> <SEP> (y <SEP> = <SEP> 2 <SEP> - <SEP> 20) <tb> <SEP> 0 <SEP> + <tb> <SEP> RO-P-O-(CH2) <SEP> -N(CH),H <tb> <SEP> a1) <SEP> N(CH3)2H <SEP> 0 <tb> <SEP> Pr.osphatidy-1-(N.N)-Dime <tb> <SEP> thyl-Alkanol2min <tb> <SEP> 0 <SEP> 0 <tb> <SEP> + <tb> <SEP> a2) <SEP> N(CH3)H2 <SEP> RO-P-O-(CH2)y¯N <SEP> CH3 <SEP> H2 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> Phosphatidsl-N-Methyl <tb> <SEP> Alkanolamin <tb> <SEP> a3) <SEP> NH3 <SEP> Phosphatidyl-Alkanolamin <tb> <SEP> <SEP> (3 <tb> <SEP> ii <SEP> 0 <tb> <SEP> b) <SEP> N(CH3)3 <SEP> R0-P-0- <SEP> (CIl2)yN <SEP> Ï <SEP> 0 <tb> <SEP> Phosphatidylcholin <tb> Schema A (Fortsetzung) : EMI15.1 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> ll <tb> 3) <SEP> RO-P-O-(CH <SEP> ) <SEP> -O-Tr <tb> <SEP> OCH3 <SEP> > <SEP> RO-P-O-(CH2)y¯0H <tb> <SEP> OCH <SEP> (I <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ON;a <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hydrolyse <SEP> 0Na <tb> <SEP> Na <SEP> H <SEP> CO <SEP> Phosphatidyl-Hydroxyalkyl <tb> <SEP> ester <SEP> (y <SEP> = <SEP> 2 <SEP> - <SEP> 20).kr <SEP> = <tb> <SEP> Trityl <SEP> J <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 1 <SEP> X <tb> <SEP> 4) <SEP> RO-P-0- <SEP> 6/ <tb> <SEP> 4) <SEP> RO-P-O-(CH2)z-C <tb> <SEP> OCH3 <SEP> ri <SEP> 0 <tb> <SEP> a) <SEP> RO-P-O-(CH2)z-C <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> QNa <SEP> L <SEP> OH <tb> <SEP> a1 <SEP> saure <SEP> Hydrolyse; <SEP> Phosphatidyl-Carboxyelkyl <tb> <SEP> Na <SEP> H <SEP> C03 <SEP> ester <SEP> (Z <SEP> = <SEP> 1 <SEP> - <SEP> 20) <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> Ir <SEP> ,NH-BOC <tb> <SEP> 5) <SEP> RO-P-O-CH2-CH <SEP> 0 <tb> <SEP> N <tb> <SEP> OCH3 <SEP> Cs <SEP> + <tb> <SEP> O-C(CH3)3 <SEP> 0 <tb> <SEP> ; <SEP> í <SEP> 3 <tb> <SEP> RO-P-O-CH2-CH <SEP> e <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ONa <SEP> > <SEP> N <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hydrolyse; ; <tb> <SEP> Na <SEP> H <SEP> CO3 <SEP> Phosphatidyl-Serin <tb> <SEP> (BOC <SEP> = <SEP> tert.-Butoxycarbonyl) <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 1 <tb> <SEP> 6) <SEP> RO-P-O-CH2-CH <SEP> - <SEP> CH2 <tb> <SEP> 21 <tb> <SEP> OCH3 <SEP> 0 <SEP> C0 <tb> <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 0 <tb> <SEP> Y <SEP> RO-P-O-CH2-CH-CH, <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hydrolyse <SEP> ONa <SEP> OH <SEP> OH <tb> <SEP> Na <SEP> H <SEP> C03 <SEP> t <SEP> Phosphatidyl-Glycerin <tb> Schema A (Fortsetzung : EMI16.1 <tb> <SEP> P <tb> <SEP> t <tb> <SEP> o <tb> <SEP> 1( <SEP> im <tb> 7) <SEP> RO-P-O <SEP> ju, <tb> <SEP> OCH3 <SEP> GL <SEP> Cw <SEP> q <tb> <SEP> lt <tb> <SEP> > <SEP> RO-P-O <SEP> <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <tb> <SEP> a1) <SEP> Kat. <SEP> OLi <tb> <SEP> a1) <SEP> c3Y <tb> <SEP> genolyse <SEP> Phosphatidyl-Inositol <tb> <SEP> (B <SEP> = <SEP> Benzyl) <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 11 <tb> <SEP> 8) <SEP> RO-P-O-(CH2)y¯!IH¯BOC <SEP> O <tb> <SEP> OCH3 <SEP> RO-P-O-(CH <SEP> ) <SEP> -WH <tb> <SEP> 3 <SEP> RO-P-O-(CH2) <SEP> -H <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ; <SEP> 0 <tb> <SEP> al) <SEP> Saure <SEP> H--rolyse <SEP> Phosphatidyl-Äthanolamin <tb> <SEP> (y <SEP> = <SEP> 2 <SEP> - <SEP> 20); <tb> <SEP> BOC <SEP> = <SEP> Butoxycarbonyl <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 9) <SEP> RO-P-O-(CH2)y¯N¯BOC <tb> <SEP> OCH3 <SEP> CH3 <tb> <SEP> - <SEP> zu <SEP> Phospatidyl-N-ethyl-äta <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ; <SEP> nolamin <SEP> (y <SEP> = <SEP> 2 <SEP> - <SEP> 20) <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hrolyse <SEP> BOC <SEP> = <SEP> Butoxycarbonyl <tb> Schema B: Diester-, Monoester-, Äther/Ester-, Monoäther- und Diätherglycerinphosphorsäureamide (R = Glyceringrundkörper mit den Resten R1 und R2; X = NH). EMI17.1 Phosphatidsäureamide (X = 0-20) Schema B (Fortsetzung): EMI18.1 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> s <tb> 2) <SEP> RO-P-NH- <SEP> (CH,)Z <SEP> Br <tb> <SEP> OCH3 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 11 <tb> <SEP> RO-P-NH- <SEP> RO-P-NH- <SEP> (CHZ)Z <SEP> Br <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> i <SEP> OLi <tb> <SEP> Phosphatidsäure-Bromalkylamide <tb> <SEP> o <SEP> 0 <tb> <SEP> (z=2- <SEP> 12) <tb> <SEP> - <SEP> bRO-P-NH-(CH <SEP> ) <SEP> -N(CH <SEP> )2H <tb> <SEP> a1) <SEP> N(CH3)2HROPNH <SEP> <SEP> 2 <SEP> ZN <SEP> (CH3) <SEP> 3 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> Phosphatidsäure-N <SEP> ,N-dimethyl <tb> <SEP> aminoalkylamid <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 2) <SEP> N(CH3)H2 <SEP> ,P <SEP> gH¯(CH2)z¯N(CH3)H2 <tb> <SEP> 32o&commat; ; <tb> <SEP> Phosphatidsäure-N-methyl <tb> <SEP> aminoalkylamid <tb> <SEP> 0 <SEP> 0 <tb> <SEP> a3) <SEP> t4H3 <SEP> RO-P-NH- <SEP> (CH2) <SEP> N <SEP> 3 <tb> <SEP> 0' <SEP> t.rH3 <SEP> 8C) <SEP> e <tb> <SEP> Phosphatidsäure-aminoalkyl <tb> <SEP> amid <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> b) <SEP> N(CH3)3 <SEP> 8 <SEP> Ï <SEP> 2 <SEP> Z <SEP> 3 <SEP> 3 <tb> Phosphatidsäure-N,N,N-trimethyl-aminoalkylamid Schema B (Fortsetzung) : EMI19.1 <tb> <SEP> o <tb> 3) <SEP> RO-P-NH-(CH2)Z <SEP> OTrityl <SEP> O <tb> <SEP> OCH3 <SEP> - <SEP> bRO-P-NH-(CH2)z-OH <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ONa <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hydrolyse; <SEP> Phosphatidsäure-hydroxyalkyl <tb> <SEP> NaHCO3 <SEP> amid <tb> <SEP> O, <SEP> O <tb> 4) <SEP> RO-P-NH-tCH2)z-C <tb> <SEP> OCH <SEP> 0 <tb> <SEP> OCH3 <SEP> (CH3) <SEP> 3 <SEP> O <SEP> 0 <tb> <SEP> > <SEP> RO-P-NH-(CH2)z-CB <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ONa <SEP> XONa <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ONa <tb> <SEP> a <SEP> ) <SEP> saure <SEP> Hydro- <SEP> Phosphatidsäure-carboxyalkyl <tb> <SEP> lyse; <SEP> amid <tb> <SEP> NaHCO3 <tb> <SEP> 0 <tb> <SEP> ll <tb> 5) <SEP> RO-P-NH-CH2-CH- <SEP> CH2 <tb> <SEP> OCH3 <SEP> O, <SEP> / <tb> <SEP> C <tb> <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 0 <tb> <SEP> 3 <SEP> 0 <tb> <SEP> > <SEP> RO-P-NH-CH <SEP> -CH-CH <tb> <SEP> 1 <SEP> 2, <SEP> 2 <tb> <SEP> a) <SEP> LiBr <SEP> ONa <SEP> OH <SEP> OH <tb> <SEP> a1) <SEP> saure <SEP> Hydro- <SEP> Phosphatidsäure-dihydroxy <tb> <SEP> lyse; <SEP> propylamid <tb> <SEP> NaHC03 <tb> Schema C: Diester-, Monoester-, Äther/Ester-, Monoäther- und Diätherglycerin-phosphorsäuredialkylamide (R = Glyceringrundkörper mit den Resten R1 und R2; X = N(R3)). EMI20.1 <tb> <SEP> " <SEP> (CH2)x-CH3 <tb> 1) <SEP> ROPN\ <tb> <SEP> OCH <SEP> (CL{BrYCH3 <SEP> ( <SEP> ,(CH2)xCH3 <tb> <SEP> LiBr <SEP> 1 <SEP> N: <tb> <SEP> LiBr <SEP> OLi <SEP> ( <SEP> CH, <tb> <SEP> 0Li <SEP> 2 <SEP> Y <SEP> 3 <tb> <SEP> Phosphatidsäure-N,N-dialkyl <tb> <SEP> amid <tb> <SEP> 0 <tb> " <SEP> ( <SEP> 2) <tb> 2) <SEP> RO-P-N/ <SEP> X <tb> <SEP> (CH2)yCl <tb> <SEP> OCH3 <SEP> 0 <tb> <SEP> ,'CH2' <SEP> /(CH2)XCl <tb> <SEP> ? <SEP> RO-P-No <tb> <SEP> LiBr <SEP> OLi <SEP> (CH2)y-cl <tb> <SEP> OLi <SEP> 2 <SEP> Y <tb> <SEP> Phosphatidsäure-N,N-bis <tb> <SEP> (chloräthyl)-amid <tb> Beispiele Diester-Phospholipide gleichkettig a) 1 .2-Dibenzyl-sn-Glvcerin Ausgangsprodukt ist 3.4-Isopropyliden-D-Mannit (C.F. Wiggins, J. Chem. Soc. 13, 1946). Eine Lösung von 0.1 Mol in 1 1 Toluol wird mit 0.5 Mol K-tert. Butylat versetzt und unter Rückfluss gekocht. Man tropft unter Rühren 0.5 Mol Benzylchlc- rid ein. Nach Abschluss der Reaktion (DC-Kontrolle) wird äas Reaktionsgemisch mit Wasser extrahiert und die Toluolphase einrotiert. Der Rückstand wird zur Deacetonierung in 1 1 Methanol/2-Propanol 1:1 (v/v) aufgenommen, mit 50 ml 2N-H2S04 versetzt und unter Rückfluss gekocht. Nach Vollständigkeit der Reaktion (DC-Kontrolle) wird mit 1 1 Diisopropyläther versetzt und zweimal mit 1 1 Wasser gewaschen. Die Diiso propylätherphase wird einrotiert und das Zwischenprodukt, 1.2.5.6-Tetrabenzyl-D-Mannit wird chromatographisch an Kie selgel gereinigt. Die Ausbeuten liegen bei 90 - 95 %. 1.2.5. 6-Tetrabenzvl-D-Mannit (C34 H38 O6 ; 542,68) ber: C 75.25 H 7.06 gef: C 75.11 H 6.99 1.2.5.6-Tetrabenzyl-D-Mannit (0.1 Mol) wird in 500 ml Benzol gelöst und portionsweise mit Bleitetraacetat (ca. 0.1 Mol) versetzt, bis das Ausgangsprodukt vollständig umgesetzt ist (DC-Rontrolle). Man wäscht zweimal mit jeweils 500 ml Wasser, rotiert die Benzolphase ein und nimmt den Rückstand in GO ml Methanol auf. Die Lösung der Aldehyde in Methanol wird por- tionsweise mit NaBH4 (ca. 0.1 Mol) versetzt. Nach Beendi- gung der Reaktion wird mit 500 ml Diisopropyläther versetzt - und mit Wasser gewaschen. Die Diisopropylätherphase wird einrotiert und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert. Die Ausbeute an 1.2-Dibenzyl-sn-glycerin beträgt 95 % ; Dreh wert &alpha; # = - 0,48 (in Substanz) 1.2-Dibenzyl-sn-Glycerin (C17 H20 O3; 272,35) ber: C 74,97 H 7,40 gef: C 74,91 H 7,40 b) Phosphorylierung 1.2-Dibenzyl-sn-Glycerin (0.1 Mol) werden in 500 ml THF gelöst und mit Triäthylamin (0.2 Mol) versetzt. Man tropft die Lösung unter starkem Rühren bei 15 C zu Phosphoroxychlorid (0.15 Mol) in 100 ml THF. Nach Beendigung der Reaktion (SC- Kontrolle) wird vom ausgefallenen Triäthylaminhydrochlorid abfiltriert, mit 100 ml Toluol versetzt und im Vakuum bei 40 OC einrotiert (Entfernung von überschüssigem POCl3). Der ölige Rückstand besteht hauptsächlich aus 1.2-Dibenzyl-sn- Glycero-3-Phosphorsäuredichlorid, das in 500 ml THF gelöst und tropfenweise mit Triäthylamin (0.3 Mol) und dann mit den entsprechenden Alkoholen, z.B. N-BOC-Serin-tert.-Butyl- ester (0,15 Mol) (BCC = Butyloxycarbonyl) versetzt wird. Nach Beendigung der Reaktion wird mit Methanol (1 blol) versetzt und nach vollständiger Reaktion aufgearbeitet. Man gibt 500 ml Diisopropyläther zu und extrahiert die organische Phase mit Wasser. Die Diiscpropylätherphase wird einrotiert und der Rückstand an Kle- selgel chromatographiert. Man erhält 1. 2-Dibenzyl-sn-Glyce- ro-3-Phospho-Methyl-N-BOC-Serin-tert. Butylester in Ausbeuten von 80 %. 1.2-Dibenzyl-sn-Glycero-3-Phospho-Methyl-N-BOC-Serin-tert. Butvlester (C30H44NO 10P; 609,67) ber: C 59,10 H 7,28 N 2,30 P 5,08 gef: C 58,95 H 7,31 N 2,17 P 5,01 c) Katalytische Debenzvlierung 1.2-Dibenzyl-sn-Glycero-3-Phospho-Methyl-N-BOC-Serin-tert. Butylester (0.1 Mol) werden in 400 ml THF gelöst und mit 10 g Pd/C (10 % Pd auf Aktivkohle) und 1 g Palladiumschwarz versetzt. Man belässt unter Rühren solange unter H2-Atmosphäre, bis die H2-Aufnahme abgeschlossen ist Die Reaktion läuft quantitativ ab. Man filtriert den Katalysator ab und entfernt das Lösungsmittel im Vakuum. Der ölige Rückstand wird direkt weiter umgesetzt. sn-Glvcero-3-Phospho-M.ethyl-N-BOC-Serin-tert. Butylester (C16 H32 N 010 P; 429,415) ber: C 44,75 H 7,51 N 3,26 P 7,21 gef: C 44,59 H 7,39 N 3,14 P 7,12 Durch entsprechende Umsetzung mit anderen Alkoholen können weitere zentrale Zwischenprodukte erhalten werden, zum Beispiel: sn-Glycero-3-Phospho-Methyl-Bromoäthylester ( H14 Br O6 P; 269,07) ber: C 26,78 H 5,25 P 11,51 gef: C 26,63 H 5,21 P 11,01 d) Acylierung Die Zwischenprodukte mit zwei freien Hydroxylgruppen in sn-1 und sn-2-Position des Glycerins können nun mit den gewünschten Fettsäuren umgesetzt werden, beispielsweise mit Palmitinsäure oder mit ölsäure. Dazu werden 0.1 Mol in 300 ml Methylenchlorid gelöst, mit den Fettsäuren (0.25 Mol) in 200 ml Methylenchlorid, mit Dicyclohexylcarbodiimid (0.25 Mol) und 4-Dimethyl-Aminopyridin (0.05 Mol) versetzt. Unter Rühren bei 20 C wird nach Abschluss der Reaktion vom ausgefallenen Harnstoff abfiltriert, mit Wasser gewaschen unc die Methylenchloridphase einrotiert. Der Rückstand wird an Kieselgel durch Chromatographie gereinigt. Die Ausbeute an acyliertem Produkt beträgt 95 %. 1.2-Dioleoyl-sn-Glycero-3-Phospho-Methyl-N-BOC-L-Serintert. Butylester (C52 H96 N 010 P; 926,32) ber: C 65,17 H 10,10 N 1,46 P 3,23 gef: C 64,86 H 10,11 N 1,47 P 3.17 e) Demethylierung Der Phosphorsäurediester mit dem geschützten Serin (0.1 Mol) wird mit einer Lösung von LiBr (0,5 tlol) in Äthylmethylketon, 500 mol, versetzt und 60 Min. unter Rückfluss gekocht. Die Spaltung ist quantitativ. Man versetzt mit Diisopropyläther und extrahiert mit Wasser. Die Diisopropylätherphase wird einrotiert und der Rückstand direkt weiter umgesetzt. f) Abspaltung der Serinschutzgruppen Der Rückstand aus e) (0.1 Mol) wird in 300 ml Methylenchlorid gelöst und bei 0 OC mit 150 ml Trifluoressigsäure versetzt. Nach Zusatz von 30 ml 70 % HClO4 wird 60 Min. bei 0 C gerührt. Die Spaltung ist vollständig. Man versetzt mit 300 ml Chloroform, 600 ml Wasser und 600 ml Methanol. Die Chloroformphase wird in 600 ml 1M NaHCQ3 versetzt. Nach Zusatz von 600 ml CH3OH wird kräftig geschüttelt und die Chloroformphase nach Phasenseparation einrotiert. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert. Die Ausbeute beträgt 95 % bezogen auf den Phosphorsäuretriester. 1.2-Dioleoyl-sn-Glycero-3-Phosphoserin ( 42 H77 N Na 010 P; 810,05) ber: C 62,28 H 9,58 N 1,73 P 3,82 gef: C 62.09 H 9,41 N 1,49 P 3,69 gemischtkettig¯ a) Phosphorylierung 1 -Trityl-2-Benzyl-sn-Glycerin (0.1 Mol) wird in 500 ml THF gelöst und mit Tri äthylamin (0.2 Mol) versetzt. Man tropft die Lösung bei 15 C unter starkem Rühren zu Phosphoroxychlorid (0.15 Mol) in 100 ml THF. Nach Beendigung der Reaktion wird filtriert, mit 100 ml Toluol versetzt und im Vakuum bei 40 OC einrotiert (überschüssiges Triäthylamin und Phosphoroxychlorid werden abgezogenj. Der Rückstand, hauptsächlich 1-Trityl 2-Benzyl-sn-Gllzcerc-3-Phosphodichlorid, wird in 500 ml THF aufgenommen und mit Triäthylamin (0.3 Mol) versetzt. Man tropft in diese Lösung beispielsweise Bromalkanole (0.2 ol) bei 30 OC ein und versetzt nach Beendigung der Reaktion mit Methanol (1 Mol). Die Methanolyse ist bei 30- C rasch abgeschlossen (ca. 2 Std.). Man versetzt mit 500 ml Diisopropyl äther und extrahiert die organische Phase mit Wasser. Die Diisopropylätherphase wird einrotiert. b) Detritvlierung Der ölige Rückstand (0.1 Mol) aus a) wird in 500 ml CH30H, die 5 ml konz. H2SO4 enthalten, aufgenommen und auf 50 C erwärmt. Die Reaktion ist nach 10 Min. vollständig, man kühlt auf 0 C und filtriert den kristallinen Trityl-Methyl äther ab. Nach Zusatz von Chloroform, 500 ml, wird mit 500 ml iM NaHCO3 gewaschen (pH der wässrigen Phase soll mindestens 5 betragen). Die Chloroformphase wird über Na2SO4 getrocknet und einrotiert. c) 1. Acylierung Der Rückstand aus a) wird in 500 ml Methylenchlorid aufgenommen und mit Palmitinsäure (0.25 Mol) versetzt. Nach Zusatz von Dicyclohexylcarbodiimid (0.25 Mol) und 4-Dimethyl-Aminopyridin (0.05 Mol) wird bei 20 C für 3 Std. gerührt. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, wäscht das Filtrat mit Wasser und entfernt das Methylenchlorid im Vakuum. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert. Die Ausbeute beträgt 75 % bezogen auf 1-Trityl-2-Benzyl-sn-Glycerln. d) Katalytische Debenzylierung 1 -Palmitoyl- 2-Benzyl- sn-Glycero- 3-Phospho-Methyl-Bromoalkyl- ester (0.1 Mol) wird in Diisopropyläther, 500 ml, gelöst und mit 10 g Pd/C-oatalysator (10 % Pd) und 1 g Palladium- schwarz versetzt. Unter H2-Atmospnäre wird solance gerührt, bis die Wasserstoffaufnanme vollständig ist. Man erhält quantitativ 1 -Palmitoyl-sn-Glycero-3-hospho-Methyl-Bromo- alkylester. Vom Katalysator wird abfiltriert, THF vom Filtrat abgezogen und der Rückstand in 500 ml Tetrachlorkohlenstoff aufgenommen. e) Zweite Acylierung Die Tetrachlorkohlenstofflösung des Phosphorsäuretriesters (0.1 Mol) wird mit Dicyclohexylcarbodiimid (0.25 Mol) und Ölsäure (0.25 Mol) versetzt. Nach Zusatz von 4-Dimethyl Aminopyridin wird bei 20 C solange gerührt, bis die Reaktion vollständig ist (DC-Rontrolle). Man trennt den Niederschlag durch Filtration ab, extrahiert mit Wasser und engt die Tetrachlorkohlenstoffphase im Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatograph#iert. Man erhält 1-Palmitoyl-2-Oleoyl-sn-Glycero-3-Phospho-Methyl Bromoalkylester in Ausbeuten von ca. 95 %. f) Demethvlierung Der Phosphorsäuretriester (0.1 Mol) aus e) wird mit 0.5 Mol LiBr in 500 ml Äthylmethylketon versetzt und 60 Min. unter Rückfluss gekocht. Die Ausbeute an Li-Salz von 1-Palmitoyl-2 Oleoyl-sn-Glycero-3-Phospho-Bromoalkylester ist quantitativ. g) Aminierung Zur Aminierung der Bromoalkylester kann in an sich bekannter Weise verfahren werden (vgl. z. B. H. Eibl und A. Nicksch, Chem. Phys. Lipids 22 (1978) 1; W. Diembeck und H. Eibl, Chem. Phys. Lipids 24 (1979) 237). Die Umsetzung mit dem Amin, z. B. Trimethylamin, erfolgt z. B. in Chloroform/Propanol-(2) (1/1) als Lösungsmittel. h) Direkte Aminierung der Phosphorsäuretriester Die Phosphorsäuretriester (0.1 Mol) aus e) werden in 500 1 Chloroform gelöst und mit 500 ml 2-Propanol versetzt, das Trimethylamin (1 Mol) enthält. Nach 24 Std. bei 50 C ist die Reaktion vollständig. Man zieht das Lösungsmittel ab und versetzt mit jeweils 500 ml Chloroform, Methanol und Wasser. Die Chloroformphase enthält 1-Palmitoy1-2-Oleoyl- sn-Glycero-3-Phospho-N .N .N-Trimethylalkanolaminester. Man entfernt das Lösungsmittel und reinigt durch Chromatographie. Die Ausbeuten betragen mehr als 90 %. Monoester-Phospholipide a) Demethylierung Die Produkte der ersten Acylierung (gemischtkettig, Reaktion c)) werden mit LiBr demethyliert; so wird beispielsweise 1-Palmitoyl-2-Benzylsn-Glycero-3-Phospho-Methyl-Bromoalkylester (0.1 Mol) mit LiBr (0.5 Mol) in 500 ml Äthylmethylketon unter Rückfluss gekocht. Nach 60 Min. ist die Umsetzung quantite- tiv. Die Aminierung kann wie vorstehend unter g) beschrieben erfolgen , b) Katalvtische Debenzylierung 1-Palmitoyl-2-Benzyl-sn-Glycero-3-Phospho-N.N.N-Trimethyl- alkanolaminester (0.1 Mol) werden in Alkohol, 1 1, gelöst und mit 10 g Pd/C-atalysator (10 % Palladium auf Aktivkohle) und 1 g Palladiumschwarz versetzt. Man rührt bis zur Beendigung der Wasserstoffaufnahme. Die Debenzylierung erfolgt quantitativ. Man filtriert den Katalysator ab und entfernt das Lösungsmittel im Vakuum. Der Rückstand wird in 100 ml CHCl3 aufgenommen und mit 400 ml Aceton gefällt. Der Niederschlag wird abgesaugt und getrocknet. Monoäther-Phospholipide Die Monoäther-Phospholipide können auf völlig gleiche Weise wie die Monoester-Phospholipide dargestellt werden. Als Ausgangsprodukt wird in diesem Falle beispielsweise 1-Octadecyl-2-Benzyl-sn-Glycerin verwendet. Äther/Ester-Phos-holioide Man erhält Äther/Ester-Phospholipide, wenn man beispielsweise 1-Octadecyl-2-Benzyl-sn-Glycerin als Ausgangsprodukt verwendet und nach dem Verfahren für Diester-Phospholipide, gemischtkettig, voraeht. Nach der Phosphorylierung a) erfolgt jedoch sofort die katalytische Debenzylierung d) und die zweite Acylierung e). Dann wird, wie dort beschrieben, weiterverfahren. Diäther-Phospholipide 1,2-Diäther-sn-Glycerine können wie die 1,2-Diester-sn Glycerine in die entsprechenden Phospholipide umgewandelt werden, wenn man wie unter Diester-Phospholipiden, gleichkettig, verfährt und die Verfahrensschritte b), Phosphorylierung, e), Demethylierung und f), Abspaltung der Schutzgruppen, anwendet.

Claims: Neue Glycerinderivate zur Synthese von Phospholipiden Patentansprüche 1. Glycerinderivate der Formeln I, II und III EMI32.1 worin Z Methyl gegebenenfalls einen Phenylrest enthaltendes Alkyl mit einer C-C-MehrEachbindung in stellung, Benzyl oder ein ÄquivaLent eines physiologisch verträglichen Kations ist, RÚ und Rê gleich oder verschieden sind und ein Wasserstoffatom, den Rest R oder den Acylrest -COR bedeuten, in 1- oder 3-Stellung auch Trityl, R Alkyl mit 1 bis 24 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Hydroxy- oder Carboxyalkyl mit 2 bis 24 Kohlenstoffatomen bedeutet, wo bei Alkyl geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Drei fachbindungen enthalten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6.Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, und worin eine Hydroxy- und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, X die Bedeutung 0, NH oder N (R3) besitzt, und R3, wenn X = 0 ist, Alkyl mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Amino-, Methylamino-, Dimethylamino-, Trimethylammonio-, Hydroxy- oder Carboxy alkyl mit 2 bis 20 Kohlenstoffatomen, wobei Alkyl geradket tig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthal ten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, bedeutet, worin eine Amino-, Hydroxy- und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, oder D- oder L-2-tert.-Butyl oxycarbonylamino-2-tert. -butyloxycarbonyl-äthyl-, 1,2- oder 2,3-Isopropylidendioxy-propyl-, 1,2-, 1,3- oder 2,3-Dibenzyl oxy-propyl-, 1,2 r 3,4,5-Pentabenzyloxy-cyclohexyl- oder N- Alkylaminoalkyl mit 2 bis 14 Kohlenstoffatomen in den Alkyl resten, worin die Aminogruppen auch Schutzgruppen enthalten können, bedeutet, wenn X = NH ist, Alkyl mit 1 bis 20 Koh lenstoffatomen oder Halogen-, Amino-, Methylamino-, Dimethyl amino-, Trimethylammonio-, Hydroxy- oder Carboxyalkyl mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen, wobei Alkyl geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann, oder 1,2-Dihydroxypropyl bedeutet, worin eine Amino-, Hydroxy- und/oder Carboxygruppe auch eine Schutzgruppe enthalten kann, und, wenn X = N(R3) ist, gleich oder verschieden ist und Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen oder Halogenalkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen bedeutet, worin eine Alkylgruppe geradkettig oder verzweigt und Doppel- oder Dreifachbindungen enthalten kann, und durch Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder durch Arylreste substituiert sein kann. 2. Glycerinderivate der Formel I oder II nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass R1 den Rest -(CH2)m-CH3, worin 2. m 13 - 19 ist, und R einen Acylrest COR bedeutet. 3. Glycerinderivate der Formel I oder II nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass RÚ den Rest -(CH2)m-CH3, worin 2 m 13 - 19 ist, bedeutet, R ein Wasserstoffatom und, wenn X = 0 ist, R3 Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, durch Hydroxy oder Trityloxy ±J-substituiertes Alkyl mit 2 bis 11 Kohlenstoffatomen, durch Carboxy oder tert.-Butyloxycarbonyl CJ-substituiertes Alkyl mit 1 bis 11 Kohlenstoffatomen, 2-(Amino- oder tert. - Butyloxycarbonylamino)-2-tert. - butyloxycarbonyl-äthyl, 1 , 2-Dihydroxy- oder 1,2-Isopropylidendioxy-propyl, Pentahydroxy- oder Pentabenzyloxy-cyclohexyl, oder durch Brom, Amino, Methylamino, Dimethylamino, Trimethylammonio, tert. - Butyloxycarbonylamino, tert. - Butyloxycarbonylmethylamino t-substituiertes Alkyl mit 3 - 11 Kohlenstoffatomen bedeutet, wenn X = NH ist, R3 Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, durch Brom, Hydroxy, Trityloxy, Amino, Methylamino, Dimethylamino oder Trimethylammonio S-substituiertes Alkyl mit 2 - 11 Kohlenstoffatomen, durch Carboxy oder tert. Butyloxycarbonyl ±J-subst. Alkyl mit 1 bis 11 Kohlenstoffatomen oder 1,2-Dihydroxy- oder 1,2-Isopropylidendioxy-propyl bedeutet, und, wenn X = N(R3) ist, R3 verschieden oder gleich ist und Alkyl mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen oder W-Chloralkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet. 4. Verfahren zur Weiterverarbeitung der Verbindungen der Formeln I, II oder III nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Herstellung von Phospho- lipiden, dadurch gekennzeichnet, dass man a) zur Herstellung von Diester-phospholipiden mit gleichen Acylresten von einer Verbindung ausgeht, in der R1 und R2 = Wasserstoff bedeutet, diese acyliert und danach mit Lithiumbromid demethyliert, oder b) zur Herstellung von Diester-nhospholipiden mit gleichen Acylresten von einer Ausgangsverbindung ausgent, in der R1 und R2 verschieden sind und RÚ Alkanoyl, Benzyl, Allyl oder Trityl und R2 Alkanoyl, Benzyl oder Allyl bedeutet, wobei ein test R oder ê eine Alkanoylgruppe ist, eine Benzyl-, Allyl- oder Tritylgruppe RÚ oder Rê abspaltet, die freiwerdende nydroxylgruppe acyliert und danach mit bithiumbromid demethyliert, oder c) zur Herstellung von Monoester-phospholipiden von einer Aus gangsverbindung ausgeht, in der R1 und R2 verschieden sind und R1 Alkanoyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, R2 Allyl, wobei ein Rest R oder R2 eine Alkanoyl gruppe ist, und mit Lithiumbromid demethyliert, oder d) zur Herstellung von Monoäther-phospholipiden von einer Ver bindung ausgeht, in der R1 und R2 verschieden- sind und R1 R2 Alkyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, R Alkyl, Benzyl oder Allyl, wobei ein Rest R1 oder R2 eine Alkylgruppe ist, und mit Lithiumbromid demethyliert, oder e) zur Herstellung von Äther/Ester-phospholipiden von einer Ver bindung ausgeht, in der RÚ und Rê verschieden sind und RÚ Alkyl, Benzyl, Allyl oder Trityl bedeutet, Rê Alkyl, Benzyl oder Allyl, wobei ein Rest R1 oder R2 eine Alkylgruppe ist, eine Benzyl, Allyl- oder Tritylgruppe R1 oder R2 abspaltet, die entstehende Hydroxygruppe acyliert und danach mit Lithi umbromid demethyliert, oder f) zur Herstellung von Diäther-phospholipiden von einer Ver bindung ausgeht, in der RÚ und Rê Alkyl sind, und mit Li thiumbromid demethyliert, und wenn erforderlich oder erwünscht, in einer nach a) bis f) erhaltenen Verbindung auf an sich bekannte Weise vorhandene Schutzgruppen abspaltet und/oder den Phosphor enthaltenden Rest amssiert oder in einen anderen Phosphor enthaltenden Rest überführt, wobei die Abspaltung von Benzyl, Allyl oder Trityl auch nach der Aminierung oder Uberführung in einen anderen Phosphor enthaltenden Rest erfolgen kann. 5. Arzneimittel enthaltend eine oder mehrere Verbindungen der Formel I oder II nach Anspruch 2 oder 3. 6. Arzneimittel nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass sie als Wirkstoff eine Mischung aus ca. 80 - 95 Gew.-% einer 1-Alkyl-2-acylverbindung nach Anspruch 2 und ca. 20 - 5 Gew.-% einer 1-Alkyl-2-OH-Verbindung nach Anspruch 3 enthalten.

Inventors: EIBL, HANSJORG, PROF. DR., Eibl, Hansjörg, Prof. Dr.
Applicants: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FORDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V.
Application year: 1983
Main classification: C07F9
IPC codes: C07C43, C07F9, A61K31, A61P35