UTILIZATION OF A CHOLECALCIFEROL DERIVATIVE

Abstract: 1. The use 24,24-difluoro-1 alpha, 25-dihydroxycholecalciferol in the manufacture of a medicament for the treatment of osteoporosis.

Description: Verwendung eines Cholecalciferolderivates Die Erfindung beruht auf dem Auffinden von neuen physiologischen Eigenschaften des 24,24-Difluor-ia,25- dihydroxycholecalciferols, das weiter unten die fluorierte Verbindung genannt wird. Insbesondere wurde gefunden, dass die fluorierte Verbindung gegen Osteoporose und bei der Verhütung des Milchfiebers wirksam ist. Die fluorierte Verbindung kann daher bei der Behandlung der Osteoporose durch Verabreichung einem an dieser Krankheit leidenden Patienten einer effektiven Dosis der fluorierten Verbindung, sowie bei der präventiven Behandlung des Milchfiebers durch Verabreichung einem trächtigen Wiederkäuer einer effektiven Dosis der fluorierten Verbindung verwendet werden. Dementsprechend betrifft die Erfindung die fluorierte Verbindung als Wirkstoff zur Behandlung der Osteoporose oder zur Prophylaxe des Milchfiebers. Die Erfindung betrifft ferner die Verwendung der fluorierten Verbindung für die obigen Behandlungen, sowie pharmazeutische Präparate auf der Basis der fluorierten Verbindung für diese Behandlungen und entsprechende Behandlungsmethoden bestehend aus der Verabreichung der fluorierten Verbindung. Die obigen Aktivitäten können in den folgenden Ver suchen nachgewiesen werden: a) Antirachitische Aktivität Weissen Leghorn-Küken wird unter UV-freier Beleuchtung eine Vitamin D-arme, 1% Calcium und 0,7% Phosphor enthaltende Diät yegeben. Die in Propylenglykol gelöste Testverbindung wird während 21 Tagen den am Anfang des Versuchs 1 oder 2 Tage alten Küken oral verabreicht. Kontrolltiere werden mit dem Vehikel behandelt. Die Küken werden am Tag nach dem letzten Behandlungstag seziert und das Tibiaaschengewicht wird ermittelt. Es werden 9 oder 10 Küken für jede Behandlungsgruppe und für die Kontrollgruppe verwendet. Die mittleren Tibiaaschengewichte ausgedrückt in mg sind in der nachfolgenden Tabelle I angegeben. Die Resultate zeigen, dass die fluorierte Verbindung eine beträchtliche antirachitische Aktivität aufweisen. Tabelle I Dosis (ng/Küken/Tag) Mittleres Tibiaaschengewicht (mg) 0 120,7 + 5,9 1 111,5 + 4,7 3 151,1 + 8,2 10 227,1 + 8;2 30 244,8 + 7,4 b) Intestinale Calcium-Absorption bei Küken Weissen Leghorn-Küken wird während 21 Tagen unter UV-freier Bestrahlung eine Vitamin D-arme Diät gegeben. Eine Einzeldosis der Testverbindung, gelöst in Propylenglykol, wird den Tieren oral verabreicht. Danach werden zu 45 verschiedenen Zeitpunkten 2 pCi Ca (Chlorid) oral ver- abreicht und die Serumradioaktivität 45 Minuten nach Verabreichung des Isotops gemessen. In jeder Versuchsperiode werden Kontrolltiere verwendet, denen nur das Vehikel verabreicht wird. In jeder Behandlungsgruppe und jeder Kontrollgruppe werden 10 oder 11 Küken verwendet. Die in der Tabelle II für la,25-Dihydroxycholecalciferol (Verbindung A) und für die fluorierte Verbindung (B) gegebenen Resultate zeigen, dass letztere eine lang andauernde intestinale Calcium-Absorption (96 Stunden nach 100 ng Einzeldosis) bewirkt und daher bei der Verhütung des Milchfiebers bei trächtigen Wiederkäuern verwendbar ist. Tabelle II Behandlung Zeit Anzahl Küken Serum 45Ca (Std.) (cpm/0,2 ml) Vehikel 0,2 ml 24 11 992 + 81 Verbindung A 100 ng 11 1800 + 181 Verbindung B 100 ng 11 2064 + 170 Vehikel 0,2 ml 48 11 769 + 90 Verbindung A 100 ng 11 1006 + 133 Verbindung B 100 ng 11 1539 + 99 Vehikel 0,2 ml 72 10 647 + 69 Verbindung A 200 ng 11 710 + 62 Verbindung B 100 ng 11 1164 + 90 Vehikel 0,2 ml 96 10 586 + 70 Verbindung B 100 ng 10 998 + 61 c) Verhütung der durch EHDP-induzierten Blockierung der Mineralisierung bei Ratten Männliche Charles River Ratten werden 10 Tage mit Dinatrium-äthan-1-hydroxy-1 ,1-diphosphonat (EHDP) behandelt. Die Verbindung wird in destilliertem Wasser in einer Konzentration von 2 mg/0,2 ml/Ratte jeden Tag subcutan verabreicht. Die fluorierte Verbindung wird in Propylenglykol jeden Tag oral verabreicht. Am Tag nach der letzten Be handlung werden die Ratten seziert und deren Tibia durch Silberimprägnierung der Knochensalze behandelt. Die Breite der Epiphysenplatte wird mit einem Mikroskop gemessen. Zur Ermittlung der Aktivität wird die dosisabhängige Verengerung der durch EHDP-Induktion erweiterten Epiphysenplatte gemessen. In jeder Behandlungsgruppe werden 10 Ratten verwendet. Es werden auch positive (EHDP allein) und negative (Vehikel allein) Kontrollgruppen von 10 Ratten in jedem Versuch verwendet. Die in der Tabelle III angegebenen Resultate zeigen, dass die fluorierte Verbindung die Calcifizierung der Tibiaepiphysenplatte bei EHDP-blockierten Ratten bewirkt. Tabelle III Dosis Mittlere Breite der Epiphysenplatte (ng/Ratte/Tag) (Mikron) 0 1182 + 51 1 839 + 18 3 674 + 18 10 540 + 16 30 412 + 9 Vehikel-Kontrollen (kein EHDP) 440 + 2 Die fluorierte Verbindung kann in Tagesdosen im Bereich von etwa 50-200, vorzugsweise 100 ng zur Behandlung der Osteoporose verabreicht werden. Sie werden vorzugsweise oral, z.B. in Form von Tabletten, Kapseln oder Elixieren verabreicht, können aber auch parenteral, insbesondere subcutan, intramuskulär, intravenös oder intraperitoneal, z.B. in Form von sterilen Lösungen oder SuspeSsio- nen, verabreicht werden. Etwa 50 bis 200 ng der fluorierten Verbindung werden mit pharmazeutisch anwendbaren Hilfsstoffen, wie Vehikeln, Trägern, Excipientien, Bindemitteln, Konservierungsmitteln, Stabilisierungsmitteln und/oder Geschmackstoffen, in einer Einzeldosis vermischt. Beispiele von Hilfsmittel, die in Kapseln verwendet werden können, sind Bindemittel, wie Maisstärke oder Gelatine; Excipientien, wie Dicalciumphosphat; Zersetzungsmittel, wie Maisoder Kartoffelstärke oder Alginsäure; Gleitmittel, wie Magnesiumstearat; Süsstoffe, wie Sucrose; Geschmacksmhtttel, wie Pfefferminze. Es können andere Materialien, wie Ueberzüge zur Modifizierung des Aspektes der Einzeldosen, verwendet werden. Tabletten können z.B. mitSchellack, Zucker oder beide überzogen werden. Ein Sirup oder Elixier kann die Aktivsubstanz, Sucrose als Süssmittel, Methyl- und Propylparaben als Konservierungsmittel, einen Farbstoff und einen Geschmackstoff, wie Orangearoma, enthalten. Sterile Präparate zum Injizieren können in üblicher Weise dadurch hergestellt werden, dass man die fluorierte Verbindung in einem Vehikel, wie Injektionswasser, einem in der Natur vorkommenden pflanzlichen Oel, wie Sesamöl, oder einem synthetischen fetten Bindemittel, wie Aethyloleat, auflöst oder suspendiert. Es können auch Puffer, Konservierungsmittel und Antioxidantien zugesetzt werden. Die fluorierte Verbindung kann in Tagesdosen im Bereich von etwa 30-500 ug zur Verhütung des Milchfiebers trächtigen Wiederkäuern, insbesondere trächtigen Kühen, vorzugsweise ein bis vier Tagen vor der Niederkunft, verabreicht werden. Die fluorierte Verbindung kann in Mengen von 30-500 ug in Fettsäuregranulaten zur oralen Verabreichung eingefügt werden. Sterile Präparate zum Injizieren und/oder zur topischen Verabreichung können in üblicher Weise dadurch hergestellt werden, dass man die fluorierte Verbindung in einem Vehikel, wie einem 5-l0%igen Aethanol Wasser-Gemisch, einem in der Natur vorkommenden pflanzlichen Oel, z.B.Sesamöl, einem synthetischen fetten Bindemittel, z.B. Aethyloleat, auflöst oder suspendiert. Zum Beispiel kann ein Präparat zum intravenösen Injizieren aus 2-3 ml einer 5-10%igen Aethanol-Wasser-Lösung enthaltend 30-500 Vg, vorzugsweise 30-400 ug, der fluorierten Verbindung bestehen. Ein Präparat zur topischen Verabreichung kann aus einer pflanzlichen Oellösung oder Oelsuspension enthaltend 30-500 ug, vorzugsweise 250-500 ug, der fluorier ten Verbindung bestehen. Die fluorierte Verbindung kann auch in ein Präparat zum intramuskulären Injizieren eingefügt werden, indem man 50-500 ug der fluorierten Verbindung in einem Vehikel, wie einem 5-l0%igen Aethanol-Wasser- oder Propylenglykol-Wasser-Gemisch suspendiert. Es können auch Puffer, Konservierungsmittel und/oder Antioxidantien zugesetzt werden. Beispiel Eine Kapsel bestehend aus 1. der fluorierten Verbindung 50 ng 100 ng 200 ng 2. Polyäthylenglykol 400 200 mg 200 mg 200 mg 3. butyliertem Hydroxyanisol 0,1 mg 0,1 mg 0,1 mg 4. Ascorbylpalmitat 1,0 mg 1,0 mg 1,0 mg kann dadurch hergestellt werden, dass man die Bestandteile 1, 3 und 4 in den Bestandteil 2 unter Stickstoffatmosphäre auflöst und in Kapseln abfüllt.

Claims: Patentansprüche 1. Das 24, 24-Difluor-la, 25-dihydroxycholecalciferol als Wirkstoff zur Behandlung der Osteoporose. 2. Das 24,24-Difluor-la,25-dihydroxycholecalciferol als Wirkstoff zur präventiven Behandlung des Milchfiebers. 3. Die Verwendung des 24,24-Difluor-la,25-dihydroxy- cholecalciferols zur Behandlung der Osteoporose. 4. Die Verwendung des 24,24-Difluor-la,25-dihydroxy- cholecalciferols zur präventiven Behandlung des Milchfiebers. 5. Präparate enthaltend das 24,24-Difluor-la,25dihydroxycholecalciferol, insbesondere etwa 50 bis 200 ng, vorzugsweise 100 ng, davon, in Kombination mit einem pharmazeutisch verwendbaren inerten Trägermaterial zur Behandlung der Osteoporose. 6. Präparate enthaltend das 24,24-Difluor-la,25- dihydroxycholecalciferol, insbesondere etwa 30 bis 500 ug davon, in Kombination mit einem pharmazeutisch verwendbaren inerten Trägermaterial zur präventiven Behandlung des Milchfiebers. 7. Methode zur Behandlung der Osteoporose, dadurch gekennzeichnet, dass man einem an Osteoporose leidenden Patienten eine effektive Dosis, insbesondere etwa 50 bis 200 ng, vorzugsweise etwa 100 ng, pro Tag, 24, 24-Difluor-la, 25-dihydroxycholecalciferol verabreicht. 8. Methode zur präventiven Behandlung des Milchfiebers bei Wiederkäuern, insbesondere Kühen, dadurch gekennzeichnet, dass man einem solchen Tier eine effektive Dosis, insbesondere etwa 30 bis 500 ug pro Tag, 24,24 Difluor-1&alpha;,15-dihydroxycholecalciferol vor der Niederkunft verabreicht. 9. Methode nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Verabreichung etwa 1 bis 4 Tage vor Niederkunft stattfindet.

Inventors: BORIS, ALFRED, PARTRIDGE, JOHN JOSEPH, USKOKOVIC, MILAN RADOJE
Applicants: F. HOFFMANN-LA ROCHE & CO. AKTIENGESELLSCHAFT
Application year: 1983
Main classification: A61K31
IPC codes: A61K31