PROCESS FOR THE PREPARATION OF CYSTAMINE DERIVATIVES HAVING AN ONCOSTATIC ACTIVITY

Abstract: 1. Method for the preparation of compounds of formula : see diagramm : EP0097550,P6,F1 in which one of the radicals A' or B' and A or B represents NO and the other represents a hydrogen atom characterised in that one carries out the nitrosation of the carbamate of formula I : see diagramm : EP0097550,P6,F2 in which R is a radical protecting the alcohol function and which is hydrolyzable in an acid medium.

Description: PROCEDE DE PREPARATION DE DRIVES DE LA CYSTAMINE A ACTIVITE ONCOSTATIQUE. La presente invention concerne un procédé de préparation de dérivés de la cystamine présentant une activité oncostatique. La demande de brevet français n 79 15672, déposée le 19 octobre 1979 au nom de 1'AGENCE NATIONALE DE VALORISATION DE LA RECHERCHE (ANVAR), décrit notamment de nouveaux composés à activité oncostatique ayant la formule suivante EMI1.1 Ces produits sont égalemont actifs en mélange comme cela a été démontré dans les exemples du brevet français mentionné précédemment. La présente invention concerne un nouveau procédé de préparation de ce type de composés et un procédé particulier permettant de séparer l'un de ces produits qui présente des propriétés particulierement avantageuses. Selon le procédé de la présenteinvention, on prépare les composes de formule : EMI2.1 dans laquelle l'un des radicaux A' ou B' et A ou B représente -NO et l'autre représente un atome d'hydrogène, par nitrosation du carbamate de formule I EMI2.2 dans laquelle R est un radical protecteur de la fonction alcool hydrolysable en milieu acide. Dans le procédé selon la présente invention, la nitrosation est effectuée, de préférence, par un nitrite de métal alcalin dans l'acide formique. Parmi les radicaux protecteurs de la fonction alcool, il faut citer notamment le radical trityle. Cette réaction de nitrosation est conduite, de préférence, à une température comprise entre 5 et 20 C. Le carbamate de formule (I) peut être préparé notamment par action du dérivé de cystéamine dc formule XI R-S-(CH2)2-NH2 (II) sur le chloro-2 éthylisocyanate. Le produit direct de nitrosation constitué d'un mélange d'sombres est utilisable à titre de médicament pour ses propriétés oncostatiques, au même titre que les mélanges mentionnés dans le brevet français précédent. Les différents composants du mélange de nitrosation peuvent être sépares par des procédés connus, en particulier la cristallisation fractionnée. Selon l'invention, par cristallisation fractionnée dans un mélange éther-acétate d'éthyle, on peut isoler 11 isomère mixte de formule EMI3.1 cet isomère n'ayant pu être préparé par synthèse directe. La présente invention concerne également l'application à titre de médicament des mélanges. obtenus par la mise en oeuvre du procédé selon la présente invention ainsi que de l'isomère mixte Ces différents éléments présentent des propriétés oncostatiques et peuvent être utilisés au meme titre et dans des conditions qui ont été décrites dans le brevet français précédent. D'autres caractéristiques du procédé selon l'invention apparaitront a la lecture de l'exemple ci-après. EXEMPLE Procedé de synthèse d'un mélange de divers isomères selon la présente invention - S-trityl N-chloro-2 éthylcarbamoylcystéamine Une solution de 100 cm d'éther anhydre et de 2,8 g (88x10-4 4 mole) de S-tritylcystéamine est agite à environ OOC et additionnée goutte a goutte de 0,77 cm3 (9xlO 3 mole) d'isocyanate de chloro-2 éthyle. A la fin de l'addition, on laisse le mélange revenir à la tempé rature ambiante et on maintent l'agitation durant 12 heures, Le précipité crème formé est essoré, lavé à éther glace et seche dans un dessicateur sous vide sur anhydride phosphorique. F = 80-850C On recueille 3 g de poudre crème qui cristallise du dichlorométhane sous forme d'aiguilles crème. F = 96-97 C. Analyse : C24 H25 S N2 O C1 (424,5) calculé (%) : C 67,84 H 5,88 N 6,59 trouvé (t) : C 67,52 H 5,92 N 6,27 - Obtention de la CNCC par nitrosation de la S-trityl N-chloro-2 éthylcarbamoylcystéamine On dissout 424,5 mg (10-3 mole) du S-trityl carbamate précédent dans 5 cm d'acide formique pur a température ambiante. I1 y 2 de suite une coloration jaune de la solution et formation d'un precipité de triphénylcarbinol. Le mélange réactionnel est alors amené à environ 10 C et ensuite additionné de 276 mg (4x10-3 mole) de nitrite de sodium durant 1 heure. Le précipité de triphénylcarbinol est essoré et les eaux-mbres sont additionnées de 50 cm d'eau distillée glacée. L'huile orangée formée est extraite par 3 x 50 cm3 d'acétate d'éthyle. Les phases organiques rassemblées sont lavées à l'eau distillée (2 x 50 cm3) avec une solution saturée glacée de bicarbonate de sodium aqueux (50 cm3) puis à l'eau distillée jusqu'd pH neutre, La solution organique est ensuite séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec sous vide. On détecte en ccm (éluant : éther-hexane 8-2) deux spots visibles à l'U.V., Rf = 0,15 et 0,4. tes deux produits (rendement global 70 %) sont séparés sur colonne de silice sèche (Kieselgel 60, 70-230mesch, Merck) avec un éluant constitué d'un mélange d'éther et d'hexane 7-3. te premier produit majoritaire (Rf = 0,4) cristallise dans un mélange d'éther et d'hexane (v/v). Cristaux jaunes F = 77-78 C. Rendement 60 %. Ce produit comparé à la CNCC est en tous points identique à celle décrite dans le précédent brevet français (Analyse. IR, RMN, 1H, HPLC). Par cinq recristallisations successives de cette CNCC, constituee d'un mélange d'isomères, dans de l'éther-acétate d'éthyle (15-1), il est possible d'isoler l'isomère mixte pur. On obtient alors un composé de formule brute C10H18S2N6O4Cl2 ayant un point de fusion de 83-84 C ayant un spectre infrarouge (KBr)v cm-1 de : (NH) 3325 ; (CH) 3000, 2960, 2930, 2910 ; (C=O) 1690 ; (amide) 1525 ; (N-NO) 1480 et un spectre de RMN (CDC13) de NH : (m) centré à 7,40 ppm ; 2 2 H échangeables à D2O CH2-N : (m) centré à 4,17 ppm ; 4 H - NO NH-CH2 ; CH2Cl (avec NO côté soufre) ; (m) centré à 3,80 ppm ; 6 H CH2C1 (avec NO côté chlore) : (t) centré à 3,49 ppm ; 2 H S CH2 (NO côté chlore) : (t) centre à 2,99 ppm ; 2 H S CH2 (NO côté soufre) : (m) centré à 2,71 ppm ; 2 H. Le second produit Rf = 0,15 obtenu lors de la nitrosation du S-tritylcarbamate a pu être également isolé par chromatographie sur silice. Son rendement est inférieur a 5 %. Il a été identifié par RMN du proton comme étant un dérivé nitrosé de la cystéamine Spectre de RMN (CDCl3) HS : (t) 1,15 ppm Formule : EMI6.1 1) A = H, B = NO 2) A = NO, B = H. Des tests pharmacodynamiques ont permis de déterminer pour l'isomère mixte une DL 50 aigue par voie intrapéritonéale de 95 mg/kg,

Claims: REVENDICATIONS 1) Procédé de préparation des composés de formule EMI7.1 dans laquelle l'un des radicaux A' ou B' et A ou B représente -NO et l'autre représente un atome d'hydrogène, caractérisé en ce qu'cn effectue la nitrosation du carbamate de formule I 5 EMI7.2 dans laquelle R est un radical protecteur de la fonction alcool hydrolysable en.milieu acide. 2) Procédé selon la revendication 1, caractérise en ce que la nitrosation est effectuée par le nitrite de sodium dans l'acide formique. 3) Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que R est le radical trityle. 4) Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisE en ce que la réaction est conduite entre 5 et 200C. 5) Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le carbamate de formule x est obtenu par réaction de la chloro-2 éthylisocyanate sur le dérivé de S-cystFamine correspondant. 6) Procédé de préparation du composé de formule EMI8.1 caractérisé en ce qu'on effectue une cristallisation fractionnée du mélange obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon l'une Ces revendications i à 5. 7) Composé ou mélange obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendications 1 à 6. 8) Le composé de fornule : EMI8.2 9) A titre de médicament à activité oncostatique, un composé ou un mélange selon l'une des revendications 7 et 8.

Inventors: IMBACH, JEAN-LOUIS, OIRY, JOEL
Applicants: ETABLISSEMENT PUBLIC DIT:  CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS)
Application year: 1983
Main classification: C07C149
IPC codes: C07C319, A61K31, A61P35, C07C323, C07C67, C07C313