DERIVATIVES WITH A URONIC ACID STRUCTURE, THEIR PREPARATION AND THEIR BIOLOGICAL APPLICATIONS

Abstract: 1. Derivatives possessing a uronic acid structure, characterised in that they correspond to formula III : see diagramm : EP0082793,P28,F1 in which R1 represents a reactive group selected from . a halide, preferably a chloride or a bromide . a -O-imidoyl group, or . together with the adjacent -OR2 substituant, an orthoester group, or again . a -O-alkenyl group, preferably -O-allyl, or . an OH group which is free or is blocked by a protective grouping selected from the aliphatic or aromatic radicals, in particular in the group comprising an alkyl radical containing from 1 to 4 carbon atoms such as methyl, a substituted alkyl radical such as benzyl, an acyl such as acetyl, benzoyl or chloroacetyl, or an alkenyl radical containing from 1 to 4 carbon atoms such as allyl or vinyl, assuming that, when R1 represents a methoxy group, OR4 is different from such a group, R2 , R3 and R4 , the three of which cannot all be identical in the case of glucuronic derivatives, R3 and R4 also being different from an acetyl group when R1 and R2 together form an orthoester, R2 and R3 being different from a benzyl group when R1 represents a chlorine atom and R4 represents a methyl group, or when R1 represents a -O-alkyl group and R4 a hydrogen atom, represent . an alkenyl group, preferably an allyl group, . a hydrogen atom or . an OH group blocked by a protective grouping as defined above for R1 , R6 represents a hydrogen atom or a protective group as defined above, or the salts of these derivatives, with the exclusion of iduronic acid derivatives in which R1 , R2 and R3 all represent a benzyl group and R6 represents a methyl group.

Description: "Nouveaux dérivés à structure acide uronique, leur préparation st leurs applications biologiques L'invention est relative à de nouveaux dérivés à structure acide uronique et à leur procédé de synthèse. Elle concerne également les applications de ces dérivés, notamment, comme intermédiaires de synthèse osidique, substrats d enzymes, haptènes et réactifs de laboratoires. L'invention concerne plus particulièrement des dérivés des épimères acide D-glucuronique et acide L-iduronique. On rappelle que ces épimères répondent respectivement aux formules suivantes : (I) et (II) EMI1.1 acide D-glucuronique acide L-iduronique Des motifs uroniques répondant à ces structures entrent dans la constitution des chaînes osidiques de composés biologiquement actifs.de grande importance. En particulier, de tels motifs sont présents dans divers mucopolysaccharides naturels tels que l'héparine, lthéparane sulfate, les chnodroîtines et autres. De nombreus travaux de la demanderesse ont porté sur la mise au point de moyens permettant d'obtenir par voie de synthèse des oligosaccharides correspondant à des fragments de mucopolysaccharides tels que ceux définis cidessus ou correspondant à desdérivés de ces fragments. Les recherches effectuées à cet égard ont montré, notamment, en ce qui concerne les motifs à structure uronique, que pour conférer à une position donnée une réactivité suffisante permettant de l'impliquer, par exemple, dans une réaction de glycosylation, et/ou pour introduire, de manière spécifique, en des positions données, des substi tuants choisis, certains types de groupes protecteurs devaient être utilisés. Or, en ce qui concerne plus particulièrement les structures acide iduronique, seuls quelques exemples de dérivés ont été décrits dans la littérature, à savoir,plus spé cialement par KISS et al, Tetrahedron, 32, 1399-1402 (1976) et Srivastava et al dans Carb.Res. 60(1978), 315-316. De plus, la méthode d'oxydation sélective utilisée pour la synthese de ces dérivés conduit à de faibles rendements et ne s'est pas avérée reproductible. On conçoit donc qu'une telle méthode ne peut être utilisée pour fixer des motifs acide L-iduronique sur descomposés de prix élevé. Fn fait, l'activation des dérivés uroniques de l'art antérieur, pour les impliquer dans une réaction de glycosylation n'a pas été envisagée par les auteurs cidessus. Afin de disposer de motifs appropriés, en particu lier pour les synthèses ci-dessus, les inventeurs ont été alors amenés à rechercher des moyens permettant d'accéder aisément aux structures acide D-glucuronique et acide L-iduronique en tant que telles et aux dérivés recherchés. L'invention a donc pour but de fournir de nouveaux dérivés d'acide D-glucuronique et d'acide L-iduronique dotés d'uneréactivité suffisante leur permettant d'être engagés dans des réactions de glycosy lation en tant qu'agents glycosylants ou en tant'qu'agents glycosylés (dans ce cas jouant le rôle d'aglycone selon la terminologie courante). invention a également pour but de fournir de nouveaux dérivés permettant, grâce à la nature de leurs groupements protecteurs, l'introduction, de manière spécifique,en des positions données, de groupes substituants choisis. Elle vise, en outre, à fournir de nouveaux dérivés dotés d'une réactivité suffisante leur permettant d'être engagés dans des réactions de glycosylation en tant qu'agents glycosylants ou en tant qu'agents glycosylés et permettant, grâce à la nature de leurs groupements protecteurs, l'introduction, de manière spécifique, en des positions données, de groupes substituants choisis. Elle a également pour but de fournir des moyens permettant d'élaborer les structures des acides en question, en particulier celle de l'acide L-iduronique et d'accéder aisément aux dérivés réactifs ci-dessus. L'invention vise également les applicationsde ces dérivés en synthèse osidique,notamment pour l'élaboration d'oligosaccharides correspondant, en particulier, à des fragments, ou des dérivés de fragments, des composés naturels ci-dessus, ou encore pour l'éla- boration de glycosides utilisables comme réactifs biologiques, notamment comme substrats d'enzymes et/ou réactifs de laboratoires. Elle vise également les applications de ces dérivés en tant que déterminants antigéniques où,conjugués à des agents depoids moléculaire élevé, ils peuvent induire, chez les animaux, la formation d'anticorps dirigés contre eux-memes Elle vise également les applications de ces conjugués en vue de -la -fabrication dlimmunoabsorbants utilisables, notamment, pour la purification des anticorps ci-dessus ou de tout autre substance ayant une affinité à leurégard. Les dérivés à structure acide uronique de l'invention sont caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule (III) : EMI4.1 dans laquelle les substituants -OR1 à-OR6 sont choisis parmi un groupe réactif c'est-à-dire un groupe activateur permettant d'utiliser le dérivé uronique en tant qu'élément glycosylant ou en tant qu'élément glycosylé dans une réaction de glycosylation, ce groupe pouvant être un halogénure,en particulier un chlorure ou un bromure, un groupe -O-imidoyle, ou, conjointement avec un substituant voisin, un groupe orthoester, ou encore un atome d'hydrogène, ou un groupe fonctionnalisable constituant l'amorce d'un bras conjugable, tel qu'un -O-alcényle notamment un -O-allyle ou ce bras conjugable luimeme sous forme protégées des fonctions -OH bloquées par des groupements protecteurs, ces groupements étant identiques ou différents les uns des autres, compatibles entre eux et avec le ou les groupe (s) réactifs et inertes vis-à-vis des réactions dans lesquelles, le cas échéant, on souhaite engager le monosaccharide, les groupements étant choisis avantageusement parmi les radicaux aliphatiques ou aromatiques, en particulier, dans le groupe comprenant un radical alcoyle de 1 à atomes de carbone, en particulier méthyle, un radical alcoyle substitué, tel que benzoyle, un radical acyle tel tel qu'acétyle, benzoyle ou chloroacétyle, ou un radical alcényle de 1 4 atomes de carbone, tel qu'allyle ou vinyle, ou les sels formés à partir de ces dérivés, à l'exclusion du (benzyl 2,3 di-0-benzyl A B -L-idopyranose)uronate de méthyle, étant entendu également que dans les dérivés glucuroniques avec un groupe réactif comme ci-dessus,R2 à R4 ne peuvent pas être tous trois identiques, et R1 et R sont différents d'un groupe méthyle (ce groupe étant difficilement éliminable) On remarquera que les dérivés à structure iduronique de l'invention comprennent des dérivés semi-ouverts et des dérivés ouverts. On appelle dérivé semi-ouvert un dérivé activé ou potentiellement activable sur une position. Un dérivé semi-ouvert à droite est un dérivé capable d'être engagé par sa position 1 dans une réaction avec un autre composé. Un dérivé semi-ouvert à gauche comporte une seule fonction libre, plus spécialement un seul groupe -OH libre susceptible d'être engagé dans une réaction. Un dérivé ouvert est donc un dérivé semiouvert à droite et à gauche et peut donc être utilisé comme agent glycosylant ou glycosylé selon les cas. Un tel dérivé renferme alors un groupe protecteur temporaire, c'est-à-dire éliminable indépendamment des autres groupes protecteurs présents, en recréant un alcool. Les dérivés de l'invention à structure Dglucuronique sont des dérivés ouverts. Selon une autre disposition avantageuse de l'invention, les groupes protecteuers R2 et R3 et le cas échéant, R4 sont différents et éliminables séquentiellement sans altération de la structure uronique et de la fonction carboxyle. Cette disposition présente l'intérêt, au cours de réactions ultérieures, de pouvoir introduire à la place de tous ces groupes protecteurs des substituants différents entre eux ou, en variante, d'introduire seulement un ou plusieurs substituants et de libérer les groupes -OH des positions restantes. Dans des dérivés préférés del'invention, le groupe réactif occupe la position 1. Dans d'autresdérivés préférés, ce groupe réactif occupe la position Il. Une famille préférée de dérivés de l'invention correspond aux dérivés d'acide D-glucuronique de formule (IV) : EMI6.1 dans laquelle -OR1 représente un groupe réactif choisi parmi 1 un groupe activateur permettant d'engager le dérivé glucuronique dans une réaction de gly cosylation en tantqu'agent glycosylant, tel qu'un halogénure, en particulier un chlorure ou un bromure, un groupe -O-imidoyle, un groupe orthoester conjointement avec R2 20 un groupe fonctionnel ou fonctionnalisable tel qu'un radical -O-alcoyle-substitué ou alcényle tel que -O-allyle,ou ces groupes protégés, 30 un groupe -OH ; ; - R2 à R4, identiques ou différents, représentent un groupe protecteur tel qu'un radical alcoyle de 1 à 3 atomes de carbone, en particulier méthyle, alcoyle substitué, tel que benzyle, acyle, tel qu'acétyle, benzoyle ou chloroacétyle, ou alcényle, tel qu'allyle ou vinyle, -R6 représente un radical aliphatique ou aromatique, en particulier un radical alcoyle de 1 à 4 atomes de carbone ou alcoyle substitué tel que benzyle, et les sels de ces dérivés, à l'exclusion des acides D-glucuronique définis ci-dessus. Dans un groupe préféré de dérivés d'acide uronique > R4 représente un groupe temporaire formant un ester ou un éther avec le groupe -OH qu'il protège. Ce groupe temporaire est avantageusement choisi parmi les radicaux du type monochloroacétyle, acétyle, benzyle, p-méthoxybenzyle, allyle ou vinyle, ou analogues. Des produits préférés de ce groupe renferment un radical R1 représentant un groupe allyle ou vinyle. De tels produits présentent l'avantage de porter-en positions let t des substituants éliminables sélectivement sans par ailleurs altérer les groupements en positions 2,3 et 6. Dans un autre groupe préféré, R1 représente un atome d'hydrogène, ce qui permet l'introduction souhaitée en position 1, d'un groupe réactif tel qu'un halogénure ou un imidate, ou encore la réalisation d'une réaction de glycosylation. Dans un autre groups préféré, R1 représente un groupe activateur tel que défini ci-dessus, ce qui permet d'engager le monosaccharide, par exemple, dans une réaction de glycosylation. Un autre groupe préfére de produits renferme un groupe nq représentant uii atome d'hydrogène, n1 reDrésentant alors avantageusement un groupe fonctionnalisable tel que défini plus haut. Dans ces différents groupes n2 et R3 peuvent être identiques et représentent, par exemple, un groupe acyle notamnent benzyle. En variante, ils peuvent différer l'un de l'autre. Une autre famille préférée de dérivés de l'in- vention correspond aux dérivés de l'acide L-iduronique de formule (V) EMI8.1 dans laquelle les substituants présentent les significations générales données ci-dessus en rapport avec la formule TII. Dans un groupe préféré de dérivés d'acide Liduronique, R1 et R2 représentent un orthoester. Dans tan autre groupe préféré, R1 représente un groupe activateur tel qu'un halogénure. Dans encore un autre groupe préféré, R1 représente un radical alcoyle ou alcoyle. Des produits préférés de ces groupes renferment avantageusement un groupe temporaire en position 4. D'autres produits particulièrement préférés de ces groups renferment en outre des substituants R2 et R3 différents, ce qui permet au cours d'opérations ulté rieures de soumettre ces groupes à des traitements différents et par là d'introduire des groupes de substituticn différents sur le motif. Dans le cas où, par exemple, R2 représente un groupe acyle tel qu'un groupe acétyle et R3 un groupe benzyle, il est possible d'introduire en position 2 un groupe sulfate à la place du groupe acétyle, puis de libérer en po sition 3 le radical -OH blogué par le groupe benzyle. On dispose ainsi selon une voie aisée d'un motif constitutif de chaînes d'héparine ou d'héparane sulfate. D'autres produits préférés renferment des substituants R2 et R3 différents l'un de l'autre. L'invention vise également un procédé de synthèse de ces dérivés. Selon ce proccdé, on introduit sur un mono saccharine à structure uron i qi;e des groupes protecteurs compatibles entre eux, autorisant le traitement sélectif d'une position donnée sur laquelle on désire introduire un groupe réactif ou, le cas échéant, un groupe protec teur donné. On appellera groupe protecteur intermédiaire un groupe utilisé durant le processus de synthèse puis éliminé pour le mise en place d'un groupe réactif ou d'un groups protecteur final, c'est-à-dire correspondant au groupe protecteur souhaité sur le monosaccharide de l'invention. On peut introduire, fin le départ, un ou plusieurs groupes protecteurs f finaux. En variante, l'introduction d'un ou plusieurs groupements protecteuers intermédiaires permet, dans un premier temps, cie traiter une position donnée, puis lorsque le groupement désiré a été introduit dans cette position, de traiter indépendamment le ou les positions occupécs par ce ou ces groupes intermédiaires et, le cas échéant, successivement, aux fins d'introduction de grou pes protecteurs finaux différents Pour préparer, par exemple, un monosaccharide comportant un groupe vinyle, on élabore avantageusement un dérivé allyle dans lequel tous les groupes -OH des fonctions alcool sont bloqués par des groupements protecteurs finaux ou, le cas échéant, intermédiaires. On soumet ce monosaccharide allyle à l'action d'un agent d'alcoylation afin de bloquer le groupe -OH de la fonction carboxyle. Le monosaccharide à groupe allyle ainsi protégé est alors soumis, par exemple, à l'action d'un complexe de rhodium en présence de diazabicyclo-octane, ce qui conduit à l'éther vinylique correspondant. On remorquera que dans le cas ou un groupe temporaire a été introduit en une position donnée, il est ensuite possible d éliminer ce groupe temporaire et de recréer en cette position un alcool utilisable pour une réaction de glycos-alaliorl tandis que le groupe vinyle peut être, à son tour, soumis à une ou plusieurs réactions pour allonger la chaîne. A partir d'un dérivé l-O- vinyle protégé, il est possible,par exemple, d'élaborer un groupe réactif tel qu'un imidate. A cet effet, on soumet avantageusement le dérivé vinyle à l'action de drivés mercuriques tels que de l'oxyde mercurique et du chlorure mercurique ce qui permet de récréer un alcool que i'on soumet alors à l'action dtun agent d'imidoylation tel que le trichlornacétonitrile. I1 est également possible d'obtenir un imidate à partir d'un dérivé 1-0-hydroxylé obtenu par hydrolyse acide d'un glycoside et en particulier d'un méthyl glycoside. De manière classique, les monosaccharides à structure uronique halogénés sont avantageusement obtenus par action d'un agent d'halogénation sur un groupe acyle, lui-même obtenu,le cas échéant, par acy lation d'un alcool. On peut également les obtenir par action du réactif de Vilsmeier sur un dérivé hydroxylé en position 1. On peut également préparer un monosaccharide comportant un groupe orthoester en opérant avantageusement à partir du dérivé halogéné correspondant. Selon un mode préféré d'obtention, on soumet le dérivé halogéné en présence d'un accepteur de protons tel que de la sym-collidine, à l'action d'un alcool. Selon une disposition avantageuse de l'invention, les monosaccharides à structure L-iduronique sont préparés à partir du 3-O-benzyl-L-iduronate de méthyle lui-meme élaboré à partir d'un dérivé de type D- > lu- cofuranoside en procédant comme suit. 011 met en oeuvre un dérivé d'&alpha;-D-glucofurano- side de formule (VI): suivante EMI11.1 dans laquelle les groupements R7 à R9 identiques ou différents les uns des autres, représentent un groupe de blocage. En particulier etR8 forment un groupe isopropylidène et R8 un groupe benzyle. Le monosaccharide de formule VI est traité de manière à agir sélectivement sur l'un ou autre des groupes -OH en position 5 ou 6, afin d'obtenir le passage d'une. structure D-gluco à une structure L-ido en position 5 et le passage d'une structure alcool primaire à une structure acide carboxylique en position 6. On procéde alors à un réarrangement de la forme furanose en la forme pyranose. Le traitement sélectif des groupes -OH de la chaine-gluco et l'utilisation de la channe formée pour passer du cycle glucofuranoside au cycle idofuranoside puis idopyranoside sont effectués comme suit. Les groupements -CH2OH et -CHOH respectivement en positions 6 et 5 sont successivement transformés comme suit 1- passage de -CH2OH à -CH2OTr, où Tr représente un groupe trityle. L'-glucofuranoside II de départ est traité pour bloquer sélectivement le groupe -OH en position 6. A cet effet, il est avantageux d'opérer avec du chlorure de trityle. 2- passage de -CHOH à-CHOR10 où R10 est un groupe r blocage. Un groupe de blocage préféré correspond au cas où R10 représente un groupe benzoyle. Pour son in troduction, on utilisera chlorure de benzoyle. 3- passage de -CFI2OTr à -CH2 Oli. Le déblocage du groupe hydroxyle est avantageu sement réalisé avec de l'acide paratoluène sul fonique, ou encore., avec une solution de tri fluorure de bore dans le méthanol ou analogue. 4- passage de -CH2OH à -COOH. On utilise, pour cette étape, un réactif permettant de passer à la forme acide carboxylique. Cette transformation s'effectue avantageusement en utilisant une solution d'oxyde de chrome dans de l'acide sulfurique. 5- passage de -CHOBz à -CHOH. Le produit précédemment obtenu est traité par de la soude. On repasse ensuite à la forme acide. Four éliminer les cations, on utilise avec avantage une résine acide échangeuse de cations. 6- passage de -COOH à -COOMe, où Me représente un groupe méthyle. L'estérification est réalisée de façon classique par action notamment de diazométhane. 7- passage de -CHOH à -CHOTf,où Tf représente le groupe triflyle. On introduit en position 5 un groupement très réactif, tel qu'un tosylate, un mésylate ou de manière préférée un groupement triflyle. On effectue alors la réaction avec de l'anhydride triflique. 8- passage de -CHOTF à -CHOTFA, TFA représentant le groupe trifluoroacétate (avec inversion de configuration du carbone en position 5 ). On effectue une substitution nucléophile avec inversion de Walden. Cette réaction est avantageusement réalisée avec du trirluoroacé- tate de sodium. 9- passage de -CHOTFA à -CHOH. On traite le produit avec du méthanol puis on procède avantageusement à une chromatographie aux fins de purification. 10- rflarrangoment du cycle. On opère avec avantage en milieu acide, en particulier en présence d'acide trifluoracétique. Un mélange acide trifluoroacétique/eau de l'ordre de 9/1 s'avère spécialement approprié. L'invention vise également en tant que produits intermédiaires, les furanosides à structure D-gluco et L-ido et lesidopyranosides obtenus à l'issue des étapes 2 à 8 ci-dessus. En ce qui concerne plus particulièrement le composé de structure acide L-iduronique de formule V obtenu dan, lequel R1 représente un groupe alcoyle, en particulier méthyle, on notera qu'il peut être saponifié puis soumis à une réaction d'hydrogénation catalytique aux fins d'obtention d'un motif acide L-iduronique. Ce composé peut etre encore acylé, transformé en halogénure puis en ortho-ester. Le groupement protecteur en position Il peut être éliminé permettant ainsi l'introduction d'un autre groupe protecteur temporaire en position 4. Moyennant un choix convenable du groupement protecteur en position LI, et selon la nature de l'ortho- ester, il est possible, à partir de ces composes de structure V , d'effectuer une réaction de glycosylation suivie d'une élimination sélective du groupement protecteur en position 4 ; cette position peut ainsi être engagé dans une autre réaction de glycosylation. Enfin, l'ester o le groupement acyle formé en position 2 au cours de la première réaction de gly cosylation peut être éliminé, régénérant ainsi une fonction -OH que l'on peut sulfater,si souhaité. Selon un autre mode de réalisation, on prépare un monosaccharide du L-idose possédant, en positions 1,2,3 et 4 des groupements protecteurs souhaités puis on oxyde chimiquement, sans altérer les groupements protecteurs ci-dessus, la seule fonction alcool primaire en position 6 restée libre, puis on oxyde en groupe en acide carboxylique. Les monosaccharides à structure D-glucuronique sont plus spécialement élaborés à partir de dérivés de glucose avec mise en jeu des techniques classiques pour l'introduction des groupes souhaités. On remarquera, dans cette synthèse, que le passage de la structure D-gluco à la structure L-ido au stade acide méthylester, passage réalisé grâce à l'utilisation d'un groupe triflate et de trifluoroacétate desodium, permet d'effectuer l'in version souhaitée au stade méthyl ester. Ces conditions sont les seules mises au point à ce jour pour permettrecetteréaction. Lesmoyens mis en oeuvre scion l:invention llour obtenir les dérivés définis ci-dessus, en particulier les dérivés à structure iduronique, présentent l'avantage, par rapport aux techniques connues jusqu'à présent, de permettre une mise en oeuvre aisée et reproductible. Grâce à la grande souplesse de ces moyens, il est possible d'accéder à des dérivés à structure uronique capables de donner lieu à divers types d'enchainements selon une stéréochimie préférée grâce à leur réactivité. Fn outre, selon le type des groupes protec teurs choisis, il est possible après engagement dans un type donné de réaction d'introduire sélectivement à leur place un groupe de substitution donné et/ou de libérer des groupes -OH. Il est ainsi possiblede disposer d'oligosaccha rides comportant des motifs uroniques, substitués de manière spécifique tels que rencontrés par exemple dans les chaines de riolécules biologiquement actives ci-desslJF On considère plus particulièrement à cet égard l'intérêt de pouvoir accéder aisément à un dérivé de l'acide L-iduronique -2-0-sulfate,substrat de l'enzyme L-iduronate sulfatase. De même, la sulfatation mise au point par la Demanderesse de l'acide D-glucuronique permet d'envisager la synthèse de dérivés de cet acide sulfatés pouvant être utilisés comme substrats d'enzymes. De telles synthèses ne sont possibles que grâce au jeu de groupements protecteurs décrits ci-dessus. L'invention vise également l'application des dérivés d'acide uronique de l'invention à la synthèse de glycosides présentant un intérêt biologique tels que les substrats d'enzymes de la famille des glycosidases De tels glycosicies résultent par exemple de la condensation des dérivés de l'invention avec du para-nitrophénol ou de la méthylumbeliiférone ou de leurs dérivés. A cet effet, on peut mettre en oeuvre une réaction du type Koenigs-4norr, bien connue de l'homme de l'art, dans laquelle on met en présence un halogénure de sucre, un aglycone (avec lequel on peut établir la liaison) et un agent capteur de l'acide halohydrique formé. On notera particulièrement, en ce qui concerne l'acide iduronique, que la liaison glycosidique est établie alors que la structure acide uronique est déjà élaborée. Cette disposition permet la glycosylation de produits ou substances telles que des protéines ou des supports solides qui ne pourraient pas supporter les étapes de synthèse du procédé de l'art antérieur évoqué ci-dessus dans lequel la liaison glycosidique est établie avant l'élaboration de la structure acide iduronique. Les substrats d'enzymes élaborés à partir de monosaccharides de l'invention permettent avantageusement d'étudier la spécificité de diverses enzymes, en particulier d'enzymes dégradant lshéparine, notamment de la L-iduronidase, la n-glucuronidase et la L-iduronate sulfatase. Les glycosides obtenus par fixation des monosaccharides de l'invention, par exemple sur la méthylumbelliférone constituent des composés précieux comme substrats utilisables en fluorescence. Dans d'autres applications, les moiiosaccha- rides de l'invention sont utilisés pour l'élaboration de substrats radioactifs. Ces substrats peuvent être obtenus en mettant en oeuvre un glycoside de départ radioactif cu en réduisant les groupes nitrophényl- glycosides évoqués ci-d'e-ssus pour'les études d'enzymes en groupe amine, soumis ensuite, par exemple, à une réaction d'acétylation avec de l'anhydride acétique tritié selon les techniques classiques On notera également dans cette application l'intérét de pouvoir disposer d'un dérivé possédant déjà la structure acide uronique. On conçoit, en effet, l'importance de la réduction au minimum du nombre des étapes auxquelles on doit soumettre le composé radio-actif pour l'élaboration d'un glycoside donné conpte-tenu de son prix élevé. Selon un autre aspect de l'invention de grand intérêt, les monosaccharides renfermant un groupe fonctionnalisable sur le carbone anomère ouvrent la voie à l'introduction de chaînes capables de jouer le rôle de bras ancreurs utilisables dans diverses applications biologiques. Selon encore un autre aspect, certains gly osides peuvent être transformés en bras ancreurs et permettent la fixation à une protéine, constituant ainsi des antigènes artificiels. A cet effet, on soumet, par exemple, un glycoside tel que le dérivé de p-nitrophényl glycoside, évoqué ci-dessus, à une réaction de réduction, ce qui conduit au dérivé p-amino phényl glycoside correspondant et ce dernier, par réaction classique de couplage diazoïque est alors engagé dans uen liaison impliquant par ailleursles résidus aromatiques et, en particulier tyrosine des protéines. De tels antigènes sont utilisés chez l'animal pour induire la formation d'anticorps qui peuvent être purifié. et utilisés conte réactifs immunologiques. A partir d'un glycoside tel qu'cvoriue ci-dessus ou d'un substituant fonctionalisable d'un dérivé d'acide uronique, il est possible d'élaborer, des bras ancreurs variés comportant notamment (1) un radical alcoyle de 2 à 10 atomes de carbone, comportant en bout de chaîne un groupe -OH, éventuel lement protégé ou engagé dans un groupe fonctionnel (2) un radical alcényle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone. Des charnels de type (1) correspondent avantageusement à des radicaux, alcoylène-glycol,,a-dihy- droxypropyle, ou ss hydroxyéthyle, &gamma;-hydroxypropyle et sont utilisables pour la constitution de réactifs biologiques. Les chaînes (1) et (2) ci-dessus renferment avantageusement en outre un ou plusieurs groupements éther et/ou amine intercalaire et/ou un groupe fonctionnel terminal renfermant de l'azote tel qu'une fonction amine ou un groupe terminal éther, carboxyle ou aldéhyde. Des chaînes à termina son amino, particulièrement préférées sont du type alcoxy-alcoylamine dans lequel les groupes alcoxy etalcoyle renferment ensemble de 3 à 5 atomes de carbone, de préférence de 4 à 10, avantageusement de l'ordure de 10. De telles chaînes sont avantageusement obtenues à partir des dérivés allyle de l'invention selon le procédé décrit dans la demande de brevet FR 78 10 558 au nom de l'AGENCE NATIONALE DE VALORISATION DE LA RECHERCHE. La réactivité du groupe allyle permet, en effet, l'articulation d'un grand nombre de réactions, et par là, l'obtention de chaînesde longueur et de nature modulables, à caractère hydrophile précieux pour les applications biologiques. Pour l'allongement de la chaîne, on a recours aux réactions classiques de la synthèse organique, qui seront aisément misesen oeuvre par l'homme de l'art en fonction de la chaîne souhaitée. il est, par exemple, possible d'obtenir une chaîne terminée par un groupement fonctionnel alcool, en particulier par ozonolyse de la double liaison du groupe allyle puis do recourir à une tosylation et, enfin, de faire réagir le dprivo, tosylé avec un azicle. L'azide obtenu présente un double intérêt. Il s'agit, d'une part, d'un composé stable. D'autre part, par réduction, selon les techniques classiques, il permet d'obtenir aisément des chaînes de substitution à groupe amino terminal particulièrement précieuses pour la constitution des immunoadsorbants de l'invention. Les monosaccharides à bras ncrers tels qu'évoqués ci-dessus constituent de précieux réactifs biologique utilisables, en particulier, sous forme immobilisée sur des supports solides afin de constituer des immunoabsorbants. Ces immunoabsorbants peuvent particulièrement servir à la purification des anticorps obtenus ci-dessus, ou encore à la purification de toute s ubstance ayant pour eux de l'affinité. Ils peuvent également être utilisés dans des techniques de dosage mettant à profit cette affinité. Des supports solides appropriés sont constitués par exemple par des polysaccharides, tels - que la cellulose, l'agarose ou l'agarose réticulé (notamment celui commercialisé sous la marque SEPHAROSE par PHARMACIA), ou des polymères mixtes renfermant outre les polysaccharides ci-dessus des polymères tels que des polyacrylamides (notamment ceux commercialisés sous les marques ULTROGEL et MAGNOGEL par IBF), ou encore des silices greffées portant des groupements fonctionnels appropriés. Les monosaccharides de l'invention peuvent également constituer des haptènes conjugables à des supports solubles, tels que la BPA (albumine de sérum bovin) ou la poly-lysine, destins à la préparation d'anticorps polyclônaux o monoclônaux. outre leur utilisation comme déterminants antigéniques, les produits de l'invention sont précieux comme produits de référence pour des études structurales. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaitront dans les exemples qui suivent et en se référant aux figures 1 à 16. Les références numériques utilisées dans ces figures pour désigner les dérivés sont également reprises dans les exemples. Dans ces figures, les symboles utilisés présentent les significations suivantes A représente un groupe allyle, un groupe -C6H5, Bn un groupe benzoyle, Tr un groupe trityle, R6 un groupe -OAc ou -OBz, avec Ac représentant un groupe acétyle et nz un groupe benzoyle, Me un groupe méthyle P un groupe vinyle, NCA lln groupe monochloroacétyle, > Tf un groupe tri flyle, t-Bu un groupe tertio-butyle et SnBu3 le radical tributyl stanyle. Les formules illustrant les composés des exemples 1 à 5 sont rapportées Fur les figures 4 et 2 EXEMPLE 1: Préparation de l'acide (allyl-4-O-acétyl-2,3 di-O-benzyl-&alpha;-D-glucopyranoside) uronique (composé 8a) On effectue cette synthèse à partir du glucose, selon les étapes a) à g) suivantes a) préparation de l'allyl&alpha;-D-glucopyranoside (composé 1) Une solution d'acide chlorhydrique gazeux (18 g) dans de l'alcool allylique (600 ml) est chauffée à 70 C. On ajoute alors du glucose anhydre (300 g) et on -maintient à cette température pendant 3 heures. La réaction peut etre suivie en chromatographie sur couche mince (c.c.m.) dans le solvant méthanol/chloroforme (1/4,v/v). La solution brune obtenue après 3 heures est concentrée à sec, sous vide, neutralisée par une solution concentrée d'ammoniaque (50 ml) puis concentree à nouveau Åa sec. Au résidu obtenu, on ajoute del'acétone (500 ml), on porte Åa ébullition et on maintient ainsi jusqu'à dissolution totale. Après refroidissement, le liquide est décanté. Le résidu est denouveau soumis au meme traitement jusqu'à ce que l'analyse en c.c.m. de l'extrait montre un épuisement du résidu en dérivé I ou bien une trop forte contamination de l'extrait par des impuretés. Une partie de la première fraction extraite (12 g) est chromatographiée sur silice. On recupère le dérivé I qui peut être cristallisé dans un mélange acétone/éther (6,59: pf 95-990c) . Le reste du produit peut etre purifié selon le meme processus. b) préparation de l'allyl 4,6-O-benzylidène-&alpha;-D-glucopyra- noside (composé 2) Le composé 4 (37 g) est dissous dans du diméthylformamide (200 ml). Du diméthoxytoluène (41 g) est alors ajouté suivi d'acide paratoluène sulfonique hydraté (130 mg). Après 2 heures de chauffage (bain-marie) sous vide et reflux, la réaction est terminée (c.c.m. méthanol/chloro forme, 2/25,v/v). Le solvant est évaporé. Le sirop est dissous dans du méthanol (le minimum), cette solution est versée goutte à goutte dans une solution aqueuse de bicar bonate de sodium (6,3 g dans 320 ml d'eau). Le précipité obtenu est recristallisé dans l'éthanol (21 g ; p.f. 120-1210,C).Les eaux-méres livrent encore du produit 2. Rendement total (37 g ; 71,4%). ct préparation de l'aliyl 2.3-di-O-benzyl- 4,6-O-benzyli- dène-&alpha;-D-glucopyranoside (composé 3) Le composé 2 (45 g) est dissous dans du DMF anhydre (500 ml). De l'hydrure d sodium (28 g d'une dispersion à 50% dans l'huile) est ajouté. Après 30 minutes, le mélange est refroidi à 0 C et on ajoute alors, goutte à goutte, du bromure de benzyle (52 ml). La réaction est suivie en c.c.m. (éther/hexane, 1/1, v/v). On ajoute ensuite lentement du méthanol (150 ml), évapore à sec et reprend par du chloroforme. La phase chloroformique est lavée avec de l'eau, séchée sur sulfate de sodium. Après évaporation du solvant, le résidu est cristallisé dans un mélange éther/hexane (36,5 g : PF 83-84 C). Ce produit est légèrement contaminé par une impureté migrant plus haut en c.c.m. (éther/hexane : 1/1 ; v/v). d) préparation de l'allyl 2,3-di-O-benzyl- -D-glucopyrano- side - (composé 9 A une solution du composé 3 (56 g) dans le méthanol (1 1!, on ajoute de l'eau (450 ml) puis de l'acide paratoluène sulfonique hydraté (17 g). Après 2 heures à 80 C, on laisse refroidir le mélange, on évapore le solvant et on reprend le résidu par du chloroforme (1 1), La solution chloroformique est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre, puis sechee sur sulfate de sodium. On obtient ainsi un sirop jaune pale (48 g) qui est engagé dans l'étape suivante (synthèse du composé 5 e) Préparation de l'allyl 2,3-di-O-benzyl-6-O-trityl-&alpha;- s-glucopyranoside (composé 5) et de son analogue 4-O-acétylé (composé 6a) Le dérivé 4 obtenu (48 g) est dissous dans de la pyridin (250 ml) et du chlorure, de trityle (38,5 g) est ajouté. Après 1 heure à 100 C, la réaction est terminée (c.c.m. éther/hexane, 1/1, v/v) . A la solution précédente, on ajoute de l'anhydride acétique (200 ml). Après une nuit, la réaction est complète (c.c.m.; éther/hexane, 1/2, v/v). On évapore à sec, reprend le résidu par du chloro forme (500 ml), lave la phase chloroformique avec une solu tion de sulfate acide de potassium à 10% avec de l'eau et sèche sur sulfate de sodium. Le chloroforme est évaporé. On obtient ainsi le compose Ga qui est engagé tel quel dans la réaction de préparation du composé 7a. f) Préparation de l'allyl 4-O-acétyl-2,3-di-O-benzyl-&alpha;- D-glucopyranoside (composé 7a) Le dérivé 6a obtenu est dissous dans du chloroforme (500ml). A cette solution, refroidie àO C, on ajoute goutte à goutte sous agitation, une solution de trifluorure de bore dans le méthanol (20w, 120ml). La réaction est suivie c.c.m. (toluène/acétone, 10/2 ,v/v). Le mélange réactionnel est transvasé dans une ampoule à -décanter. La phase chloroformique est lavée par de l'eau (2 fois 100 ml) par une solution saturée de bicarbonate de sodium, puis avec de l'eau jusqu'à pH neutre. Après séchage, et évaporation, le résidu obtenu est introduit sur une colonne de gel de silice (500 g) équilibrée dans le toluène. Après élut ion de la plupart des impuretés par le toluène pur, le produit est élué par un mélange toluène/acétone (10/2,v/v). On obtient ainsi 48 g du compose I/a qui sera engagé directement dans la synthèse du composé a Une partie du composé 13a a été obtenue pure : [&alpha;]êD Dê = +Ilo (chloroforme). Ses spectres IR et Rt1N, de meme que l'analyse élémentaire, confirment la structure. g) Préparation de l'acide (allyl-4-O-acétyl-2,3-di-O- benzyl-&alpha;-D-glucopyranoside) uronique (composé 8a)- Une solution du compose 7a (48 g) dans l'acétone (800 ml) est refroidie à -5 C. On ajoute ensuite goutte à goutte, une solution de trioxyde de chrome (30 g) dans l'acide sulfurique (3,5 M : 125 ml). On laisse le mélange revenir à la température ambiante. La réaction est controlée en c.c.m. (méthanol/chloroforme, l/l0,v/v) A la fin de la réaction, le mélange réactionnél est versé' dans de l'eau (500ml). Le produit est extrait par le chloroforme (3 fois 250ml). La phase chloroformique est lavée à l'eau jusqu'à pH neutre, séchée sur sulfate de sodium et concentrée à sec. Le sirop obtenu (83 g) est utilisé tel quel pour la prépa ration du composé 9a. EXEMPLE 2: Préparation de l'acide (allyl 4-0-benzoyl-2,3 di-O-benzyl-&alpha;-D-glucopyranoside) uronique (com posé 8b) et du méthyl ester correspondant (composé 9b) Dans une premiere étape, on prépare tout d'abord l'allyl 4-O-benzoyl-2,3-di-O-benzyl-6-O-trityl-&alpha;-D glucopyranoside (composé 6b) et l'allyl 4-O-benzoyl-2,3- di-O-benzyö-&alpha;-D-glucopyranoside (composé 7b) 1) - préparation des composés 6b et 7b Le compose 6b est obtenu comme il est décrit pour 6a à la solution pyridinique du compose 5, on ajoute alors du chlorure de benzoyle (1,5 équivalents) et la réaction est suivie en c.c.m. (acétate d'éthyle/benzene,l/20,v/v). L'excès de chlorure de benzoyle est détruit par addition d'un excès de méthanol.Après évaporation Åa sec, le résidu, repris par du chloroforme, est lavé avec une so lution de KHSO4 a' lOx, avec del'eau, séché et concentre à sec. Le sirop obtenu est engagé tel quel dans la synthèse du composé 7b Ce sirop (105 g, obtenu à partir de 30g de composé 3 ) est dissous rions du chloroforme (300 ml). De l'acide paratoluène sulfonique (76 g de mollohydrate dans 100 ml de méthanol) est ajouté. Après une nuit, la réaction est terminée (c.c.m., acétate d'éthyl/chloroforme, 1/20,v/v). La phase chloroformique est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre, séchée et concentrée àsec. Le sirop obtenu (98 g) est chromatographié sur une colonne de gel de silice (1,2 kg), éluée avec du chloroforme (0,6 1) puis avec un mélange acétate d'éthyle/chloroforme (1/20,v/v). On obtient ainsi le dérivé 7b pur (30 g) qu'on engage tel quel dans l'étape de préparation du composé 8b- EXE!!PLF. 3 Préparation de l'(allyl 4-O-acétyl-2,3-di-O-benzyl-&alpha;-D- glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 9a) Le sirop obtenu à l'étape de préparation du compose 8a est dissous dans de l'éther (300 ml). Une solution éthérée de diazométhane est alors ajoutée jusqu'à disparition du composé 8a , (c.c.rn. éther/hexane), 1/1, v/v. Après acidification par l'acide acétique, les solvants sc.nt évaporés. Le résidu obtenu (53 g) est dissous dans l'éthanol à chaud. Le dérivé 9a cristallise au refroidissement. Après recris tallisation, on obtient ce composé 9a pur (18,4g)-pf 85-86 C - [&alpha;]D20 = + 12 (1,2 chloroforme). Ce produit est caractérisé nar ses spectres IR,RMN et par son analyse élémentaire. A partir du filtrat de cristallisation, on obtient encore 7,6 g du composé 01. Le rendementglobal en 9a, à partir du composé 2 est de 38%. EXEMPLE 4: Préparation du (prop-1'-ényl 4-O-acétyl-2,3-di-O-benzyl &alpha;-D-glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 10a) Le dérivé 9a (4 g) est dissous dans un mélange d'éthanol (119 ml) de benzène (51 ml) et d'eau (17ml). On ajoute ensuite du diazabicyclo octane (170 mg) et on porte Åa reflux. On ajoute Åa la solution bouillante du chlorure de Tris (tri phénylphosphine)-rhodium (I) (550 mg). L'éhullition est maintenue pendant 4 heures (c.c.m., éther/hexane, 1/l,v/v). A la fin de la réaction, la solution est filtrée et les solvants sont éliminés. Le résidu est chromatographié sur gel de silice (150 g) dans un mélange acétate d'éthyle/ chloroforme (1,50, v/v). On obtient le composé ¯1a, (3,25 g 81%) qui cristallise dans l'éthanol. [&alpha;]D20 = +12 (1, chloroforme). PF 900 C.La structure est confirme par l'analyse élémentaire et les spectres RMN et IR. EXEMPLE 5 Préparation de 1' acide (allyl 2,3-di-O-benzyl-&alpha;-D- glucopyranoside) uronique et de l'(allyl 2,3-di-0 benzyl- -D-glucopyranoside) uronate de méthyle (composés 11 et 12 Le composé 8t (1,9g) est dissous dans du méthanol (40 ml). On ajoute alors de la soude (5N) en quantité suffisante pour avoir une concentration de 1 M en soude. La réaction est suivie en c.c.m. (méthanol/chloroforme, 1/4,v/v). Quand elle est terminée, on ajoute de l'eau (100 ml). On lave avec de l'éther, on acidifie et on extrait le produit à l'éther. La phase étherée acide est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre. Le dérivé il n'est pas isolé. Il est méthylé par une solution éthéree de diazométhane, donnant ainsi le composé 12 (900 mg : 56%) qui est alors purifié sur une colonne de gel de silice (éther/hexane, 1/1,v/v). [&alpha;]D20=+1 35.2 (1,3,chloroforme). Ses spectres IR et RMN et son analyse élémentaire confirment sa structure. De la même manière, le dérivé i1 et donc 12 peuvent être obtenus à partir de 0a à 9h EXEMPLE 6 Préparation du (prop-1'-ényl 2,3-di-O-benzyl-&alpha;-D glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 13. 1 A partir du composé 12 - Le dérivé 12 est traité par le complexe au rhodium comme décrit pour 9a Le composé 13 est obtenu avec un rendement de 90%. Il est caractérisé par ses spectres IR et RMN. De plus, traité par de l'anhydride acétique (lml pour 180 mg de 9a), il donne Je composé 10a 20 A partir de 10a ou 1Ob. Méthode a : Le dérivé 10a (350 mg) est dissous dans le méthanol (5ml). Du méthanolate de sodium (0,2ml, 2M) est ajouté. Après 1 heure à température ambiante, la réaction est arretée par addition de résine dowex-50-H+. Après filtration, le produit 15 est obtenu, contaminé par un peu de produit résultant de l',c· #-élimination. La réaction se fait de la meme façon à partir de ich Méthode b : Le dérivé 13 peut etre obtenu à- partir de 10a ou lob de la façon décrite pour 12, à partir de 9a ou 9b. EXEMPLE 6 A (voir figure 3) Application du composé 13 à la synthèse du disaccharide 15 A une solution de monosaccharide 13 (0, 215 g : 0,5 mmole) dans le dichlorométhane (3 ml), on ajoute le monosaccharide 14 (0,49 g ; 1 mmole) dans du dichlorméthane (3 ml) puis des tamis 4 en poudre. On refroidit le mélange à 0 C, puis on'ajoute e la sym-collidine (0,16 ml), et du triflate d'argent (0,3g). Après 1 heure, le mélange est dilué avec du dichloromethane (50 ml). J,es solides sont essorés, puis la solution est lavée avec une solution à 5% de bicarbonate de sodium, avec de l'eau puis du sulfate acide de potassium à 10% et à nouveau avec de l'eau. On obtient ainsi après évaporation 591 mg de résidu. Après purification sur silice dans un mélange toluéne/acétone 30/1 (v/v), on récupère 211 mg de disaccharide 15 pur. EXEMPLE 7 - (voir figure 4) - Préparation du (bromo 2,3-di-0-benzyl-4-0- acétyl- -D-glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 25) Synthèse du composé 19 A une solution de 16 (32 g ; 85,5 mmoles) dans la pyridine (250 ml), on ajoute du chlorure de trityle (28,6 g ; 1,2 eq) puis on chauffe à 800C. Une.nouvelle addition de chlorure de trityle (4,6 g ; 0,2 eq) est faite après 3 heures de réaction. Lorsque la formation de 17 est complète (c.c.m. silice ; méthanol/chloroforme, 1/20, v/v) on refroidit la solution jusqu'à OOC, puis on ajoute du chlorure de benzoyle (15 ml ; 1,5 eq). Après une nuit, 18 est formé quantitativement. Du méthanol (150 ml) est alors ajouté goutte à goutte au mélange réactionnel qui est ensuite concentré à sec. Le résidu obtenu est repris dans du méthanol (500 ml) contenant de l'acide paratoluène-sulfonique (95 g). Après 2 heures de réaction, le mélange réactionnel est transvasé dans une ampoule à décanter contenant de l'eau glacée (2 1). Le produit 19 est extrait au chloroforme puis engagé tel que dans l'étape suivante. Une partie de ceproduit a été purifiée. L'analyse du spectre IR confirme la structure. C'est une gomme incolore.20 - 610 (chloroforme). Synthèse du composé 23 Le sirop obtenu à l'étape précédente (95 g) est dissous dans l'acétone ( 1 1), puis à la évolution, refroidie à OOC, on ajoute goutte à goutte, une solution d'oxyde de chrome (52 g) dans l'acide sulfurique 3,5 N (220 mI). Après 2 heures de réaction, le mélange réactionnel est versé dans de l'eau glacée (1 1). Le produit 20 est extrait du chloroforme (5.x 200 ml). La phase chloroformique est lavée jusqu'à pH neutre, séchée et concentrée à sec. Au résidu obtenu ci-dessus, dissous dans le méthanol (650 ml), on ajoute goutte à goutte de la soude en solution dans l'eau (20 g dans 50 ml), puis on chauffe le mélange à 500C. Après une nuit,la solution obtenue est concentrée partiellement, puis versée dans l'eau (1,5 1). La phase aqueuse estensuite lavée avec de l'éther puis, après acidification par l'acide chlorhydrique, le produit 21 est extrait à l'éther. La phase éthérée est séchée sur sulfate de sodium, puis concentrée à sec, livrant une masse jaune (50 g) qui contient 20. Ce réside (50 g) est dissous dans un mélange d'acide acétique et d'acide trifluoroacétique (15/1, v/v, 615 ml). A cette solution, agitée à 1000C, on ajoute de l'eau (160 ml). Après une nuit on évapore à sec et élimine les traces d'acide acétique, évaporé ration de toluène. Le résidu formé en partie de 21 non hydrolysé et de 22 est dissous dans l'éther (400ml). A cette solution, on ajoute à OOC, une solution éthérée de diazométhane jusqu'à complète méthylation (c.c.m. silice étherhexane, 2/1 v/v). L'excès de diazométhane est alorsdétruit par l'acide acétique puis le mélange réactionnel est concentré à sec. Le résidu est purifié sur une colonne de gel de silice (200 g) éluée d'abord par du chloroforme pur, puis par un mélange chloroforme/ether, 3/l,v/v. On obtient ainsi 23 (8,6 g ; 22,2 mmoles, 26% par rapport à 16). Le dérivé 23 est cristallin p.f. 122-123 OC. L'analyse élémentaire et le spectre de RMN confirment sa structure. Synthèse du composé 24 A une solution de 23 (3,9 g ; 10 mmoles) dans la pyridine (50 ml), on ajoute deW'anhydride acétique (4 ml, 42 mmoles). Après 2 heures, le mélange réactionnel est évaporé à sec. On obtient ainsi 24 (4,62 g ; 98%). Synthèse du composé 25 A une solution de 24 (1,4 g) dans le dichlorométhane 30 ml et l'acétate d'éthyle (3ml), on ajoute du tétrabromure de titane (1,5 g). La solution est agitée toute la nuit à température ambiante. Après dilution par du dichlorométhane, le mélange réactionnele st versé dans l'eau glacée. La phase organique dst lavée avec du bicarbonate à 5% dans l'eau, séchée et concentrée. Le résidu est chromatographié sur silice (50 g, ether/hexane, 1/l,v/v). On obtient ainsi le composé 25 (920 mg, 62%) c'est un sirop incolore [&alpha;]D20 = +97,5 (c = 1, chloroforme). L'analyse élégentaire et le spectre de RMN confirment la structure. EXEMPLE Ya - (voir figure 5) Application du composé 25 à la synthèse du disaccharide 27 On effectue cette synthèse à partir des dérivés 25 et 26. Une solution du dérivé 26 (432 mg, 3mmoles) dans le dichlorométhane (10 ml) est agitée à 0 C en présence de tamis moléculaire 4 A (0,5 g), de driérite (1 g) et de carbonate d'argent eraichement préparé (0,42 g.). Après refroidisse ment à OOC, on ajoute, goutte à goutte, une solution du composé c5 (490 ng, 1 mmole) dans le dichlorométhane (6ml). La réaction dure deux heures, le mélange réactionnel est ensuite filtré. Après évaporation à sec et chromatographie 'sur gel de silice du résidu, (solvant : acétate d'éthyle/chl chloroforme, 1,6 v/v), on obtient le dérivé 27. La structure du dérivé 27 est confirmée par son analyse élémentaire et son spectre de RMN. Pouvoir rotatoire [&alpha;]D20 = 39 ; chloroforme; PF - 156-159 C. EXEMPLE 8 - (voir figure 6) Préparation du (trichloro acétimidyl 2,3- di-O-benzyl-4-O-acétyl) uronate de méthyle (composé 29) Syntiîcsc du composé 10a Le dérivé 10a (11,4 g) est dissous dans un mélange acétone/eau (5/1 ; v/v ; 350 ml). On ajoute à cette solution de l'oxyde mercurique (13,5 g), puis, goutte à goutte, une solution de chlorure mercurique dans le mélange acétone/eau (17 g dans î16 ml). Après 5 minutes, le mélange est filtré puis les solvants sont évaporés. Le résidu, repris par du chloroforme (300 ml) est lavé avec une solution saturée d'iodure de potassium puis avec de liteau. Après séchage et évaporation à sec, le résidu est purifié sur colonne de gel de silice (200 g hexane/ acétate d'éthyle, 1/l,v/v). On obtient ainsi 28 (6 g ; 57,5%). C'est un solide, p.f. 104-106 C. [&alpha;]20:-4,5 D (1,2 chloroforme). Le spectre de RMN et l'analyse élémentaire confirment la structure. Synthèse du composé 22 A une solution du composé îOa (3,46 g ; 8 mmoles), et de trichloroacétonitrile (8 ml ; 10 eq) dans le dichlrométhane (80ml), on ajoute de l'hydrure de sodium (135 mg). L'évolution de la réaction est suivie en c.c.m. (chloroforme/acétate d'éthyle ; 1/1 ; v/v). Après filtration, la solution est concentrée à sec, puis le résidu est séché par évaporation de benzène avant d'être engagé dans la réaction avec 29. EXEMPLE 8A - (voir également figure 6) - Application du composé 29 à la synthèse du disaccharide 31 Synthèse du disaccharide 31 Le produit 29 obtenu ci-dessus (à partir de 8 mmoles de 28) est dissous dans du dichlorométhane (40ml) contenant le dérivé 30 (1,1 g ; 7,6 mmoles). A cette solution, on ajoute goutte à goutte, une solution de trifluoroéthérate de bore dans le dichlorométhane (0,6 eq). L'évolution de la réaction est con tôlée en c.c.m. (chloroforme/acétate d'éthyle, 6/1 v/v). Du bicarbonate de sodium solide est ajouté jusqu'à neutralisation, puis la phase dichlorométhane est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre. Après séchage et évaporation des solvants, le sirop obtenu est chromatogrÅaphié sur gel de silice (200 g, chloroforme/ acétate d'éthyle, 8/1, v/v). On obtient ainsi le composé 31 (1,56 g). L'autre anomère -D-glucuronosyl) est également obtenu en quantité moindre (250 mg). 29 est en tout point analogue au produit 31 décrit dans la demande de brevet FR 82 00621 au nom de la Demanderesse. EXEMPLE 9 - (voir figure 7) Préparation du (trichloroacétimidyl benzyl-4-O-allyl-&alpha;-D-glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 38) SYNTHESE DU DERIVE 37 Le composé 32 est allyle de façon classique classique (hydrure de sodium, bromure d'allyl dans le diméthylformamide) pour donner le composé 33. Celui-ci est. alors soumis à.une suite de réactions identiques à celles décrites ei-dessus pour le compose 28. (détritylation, oxydation, hydrolyse, méthylation). A ce stade, le produit est purifié sur un colonne de gel de silice (200 g ; chloroforme/acétate d'éthyle 10/1 ; v/v). On obtient le composé 37 sous forme de sirop [&alpha;]D20 + 23,50 (1, chloroforme). le spectre IR et l'analyse élémentaire confirment la structure. SYNTHESE DE 3R Le composé 37, traité (comme il est décrit polir 17), par le trichloroacétonitrile en présence d'hydrure de sodium conduit à l'imidate 38 qui est engagé dans la synthèse de 40. EXEMPLE 9A - (voir également figure 7) Application du composé 38 à la préparation du disaccharide 40 SYNTHESE DlJ DISACC}IARIDE r10 A une solution de 38 (615 mg ; 1,1 mmole) et de 39 (300 mg ; 1 mmole) dans le dichlorométhane (5 ml), cn ajoute, à 200C, une solution de trifluoro- éthérate de bore (1 mmole) dans le dichlorométhane (10 ml). La réaction est suivie en t.l.c. (acétone/toluéne ; 1/10 : v/v). Le mélange réactionnel est dilué avec du dichlorométhane puis neutralisé avec du bicarbonate de sodium (500 mg). La solution obtenue est lav ée avec une solution saturée de chlorure de sodium séchée, puis concentrée à sec. Le résidu est chromatographié sur colonne de gel de silice (50 g ; tolllène/é'her isopropylique ; 4/1 ; v/v). On obtient ainsi 40 (147 mg; [&alpha;]D20 + 11 chloroforme-) et l'isomère (162 mg; [&alpha;]D20 + 48 - 1, chloroforme-). L'analyse élémentaire et l'étude des spectres de RMN coiifirment les structures des produits. Les formules des exemples 10 à 12A sont représentés sur la figure 8. EXEMPLE 10 Préparation du prop-1'-ényl 2,3-di-O-benzyl 4-O-chloroacétyl- -D-glucopyranoside) uronate de méthyle (composé 41) Cette synthèse est effectuée à partir du composé 13 de l'exemple 6 ou (prop-1'-éthyl-2,3-di-O- benzyl-&alpha;-D-glucopyranoside) uronate de méthyle en procédant comme suit On dissout 2,8 g du compos 13 cyans 30 ml de pyridine (6,56 mmoles) . Apres refroidissement à 0 C, on ajoute goutte a goutte 10 ml d'une solution de 2 ml de chlorure de chloroacétyle dans 20 ml de dichlorométhane. Après 30 minutes, on évapore à sec, on reprend le residu par 200 ml de chloroforme, on lave avec une solution à 10 % de KH S04, puis avec de l'eau on sèche et on concentre. Le sirop obtenu est chromatographié sur gel de silice (200 g; éluant AcOiEt /hexane; 1/3; v/v). On obtient ainsi 2,7 g de composé 41 pur sous forme de sirop (rendement 80 %): [&alpha;]D20 = + 2 (c = 1,5; chloroforme). L'analyse élémentaire et le spectre de RMN confirment la structure attendue. EXEMPLE 11 Préparation du (2,3-di-O-benzyl-4-O-chloroacétyl D-glucopyranose) uronate de méthyle (composé 42) On dissout 2, 7 g (5,3 mmoles) du dérive 41 dans 80 ml d'un mélange acétone/eau (5/l; v/v). De l'oxyde mercurique (3,1 g) est ajouté suivi d'une solution de chlorure mercurique (3,9 g) dans l'acétone (27 ml). Apres 5 minutes, les sels sont éliminés par filtration. Après concentration a sec, le résidu est repris par du chloroforme. La phase chloroformique est lavée avec une solution de KI à 10 % puis avec de l'eau. Après évaporation, le produit est cristallisé dans un mélange acétate d'éthyle/llexane. On, obtient 2 g d'un solide de pf 105-1070C; []&alpha;D20 = - 4,70 (eq, l; chloroforme). L'analyse élémentaire et l'étude en RMN confirment la struc ture (rendement 80 %). EXEMPLE 12 Préparation du (1-bromo-2,3-di-O-benzyl-4-O chloroacétyl-&alpha;-D-glucopyranosyl) uronate de méthyle (composé 43) On dissout 2 g (4,30 mmoles) du compost 42. dans 50 ml de dichlorométhane On ajoute 4,8 ml (34,4 mmoles) de sym-collidine à 0 C suivie de bromure de bromométhylène diméthyl ammonium (17 mmoles) préparé selon HEPBURN D.R. et HUDSON H.R.J. Chem. Soc. Perkin I (1976) 754-757. Après 4 heures de réaction, le mélange est dilué par 100 ml de dichlorométhane, puis versé dans de l'eau glacée. Après lavage avec de l'eau glacée, le solvant est évaporé. Après chromatographie sur gel de silice (20 g; éluant hexane/acétate d'éthyle, 2/1; v/v), on obtient 2,06 g de composé 43 sous forme d'un sirop (rendement 90 %). [&alpha;]D20 = + 82,50 (c = 1,5; chloroforme). L'analyse élémentaire et l'étude en lN confirment la structure. EXEMPLE 12A Application du composé 43 à la synthèse du disaccha ride 45 ou (3,0-acétyl-1,6-anhydro-2-azido-4-O- [(2,3-di-O-benzyl)-4-O-chloroacétyl-Y-D-glucopyrano syl) uronate de méthyl] ss-D-glucopyranose A une solution de 870 mg (3,8 mmoles) de composé 44 dans le dichlorométhane, on ajoute 1 ge de drié rite (0,5 g de tamis moléculaires 4 , en poudre et 0,525 g de carbonate d'argent fraîchement préparé. Après 2 heures d'agitation,on ajoute goutte à goutte, à OOC, 670 mg (1,3 mmoles) du composé 43. Après 6 jours, les solides sont élimines par filtration. Le sirop obtenu après concentration est chromatographié sur gel de silice (50 g; éluant : chloroforme/acétate d'éthyle; 4/1, v/v). On. ob tient le disaccharide 1 sous forme de mousse (421 mg; 50 %). [&alpha;]D20 = - 170 fc = 1; chloroforme). L'analyse élémentaire confirme la structure. L'étude en RMN con firne la configuration ss de la liaison interglycosidique. EXEMPLE 13 - (voir figure 9) Préparation du (3-O-benzyl-&alpha;-4-glucopyranoside) iduronate de méthyle (composé 56) de formule EMI39.1 On effectue cette synthèse à partir du composé 46 selon les étapes suivantes 1) introduction d'un groupe benzoyle en position 5, 2) méthylation de la fonction carboxyle en po sition 6 3) isomérisation du groupe 0tl en position 5, ss - formation du cycle pyranique. 1) - réaction de benzoylation 63 g de 3-O-benzyl-1,2-O-isopropylidène&alpha;-D-glucofuranoside (composé 46, sont dissous dans 500 nil de pyridine anhydre. On ajoute 85 g de chlorure de trityle et on chauffe à 80 C pendant une heure. On obtient ainsi le composé 47 Pouvoir rotatoire: [&alpha;]D20 = -34.7 , chloroforme. La structure de ce composé a été cot1firmo par ses spectrees IR et RMN, ses analyse élémentaire est correcte. Le mélange est ensuite refroidi à 0 C et on ajoute 45 ml de chlorure de benzoyle. Après une nuit, on détruit l'excès des réactifs par addition de 300 ml de méthanol. Le mélange obtenu, évaporé à sec, est repris par du chloroforme. La phase chloroformique est lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium et concentrée. On obtient ainsi le composé 8. Le sirop obtenu est dissous dans 400 ml de chloroforme. Après addition de 100 ml d'une solution d'acide paratoluène-sulfonique 5 M dans le méthanol, la solution est laissée à 4 C pendant une nuit. On obtient, après lavage à l'eau de la phase organique, 215 g d'un mélange. Le composé est obtenu par chromatographie de ce mélange sur gel de silice dans le solvant éther-hexane 2/1 (v/v). On obtient ainsi 36 g du composé 49. Pouvoir rotatoire: [&alpha;]D20 = 65,3 , chloroforme. La structure du composé 49 aété confirmée par ses spectres IR et RiiH. 2 ) - méthylation de la fonction carboxyle en position 6 Le composé 49 (1,88 g) est dissous dans l'acétone (20 ml). On ajoute, goutte à goutte à -500C 3,5 ml d'une solution de CrO3 (13 g) dans H2SO11, 3,5 14 3 (29 ml). On laisse la température remonter et on laisse une heure dans ces conditions. Le mélange réactionnel est alors versé dans la glace et le produit est extrait au chloroforme. Après lavage à l'eau et séchage, on évapore à sec. On obtient le composé 50. Le mélange obtenu est dissous dans du méthanol (20 ml), on ajoute ensuite 10 ml de soude 1 N et on laisse une nuit à température ambiante. Lemélange réactionnel est alors passé au travers d'une colonne (25 ml) de résine Dowex 50 sous forme H au préalable rincée avec du méthanol. Le produit- est obtenu par concentration de ltéluat. On obtient ainsi le composé t)1 Ce composé est dissous dans l'éther et méthyle de façon classique par le diazométhane. On obtient, après évaporation, le composé 52 (1,08 g; 70,4%). 'Pouvoir rotatoire @ - 270, chloroforme. D L'analyse élémentaire trouvée du composé. 52 est correcte. Sa structure est de plus confirmée par ses spectres IR et RMN. 30) isomérisation du groupe -Oi en position 5 A une solution d'anhydride triflique (0,8 ml) dans le dichlorométhane (16ml), refroidie à -20 C, on ajoute goutte à'goutte une solution de pyridine (0,8ml) dans le dichlorométhane (8ml). On ajoute ensuite, à -100C, goutte à goutte, 800 mg de composé 52 dissous dans du dichlorométhane (8ml). Après une heure à -500C, le mélange réactionnel est versé dans un mélange d'eau et de glace (8ml) contenant 160 mg de bicarbonate de sodium. On agite jusqu'à séparation des deux phases organique et aqueuse. La phase organique est lavée par HCl 3%, H20, NaCl saturé, séchée et concentrée. On obtient ainsi le composé 53 Le sirop est repris par du DMF (îOml). On ajoute du trifluoroacétate de sodium (1,6g) et chauffe à 80 C pendant 3 heures. On obtient ainsi le composé 54 Après évaporation, reprise par du dichlorométhane, lavage à l'eau et séchage, le résidu est repris par du méthanol puis le solvant est évaporé après une heure. Après chroma tographie sur colonne dans le solvant éther-hexane 2/1, on obtient le composé 55: 450 mg: 56,2%). pouvoir rotatoire : 20 =-33 chloroforme. La structure du composé 55 est confirmée par ses spéctres IR et RMN. L'analyse élémentaire trouvée est correcte. 4 ) formation du cycle pyradique Cette synthèse est effectuée à partir du composé 55 Le composé 55 (200 mg) est dissous dans un mélange acide trifluoroacétique/eau 9/1.). Après 15 minutes, les solvants sont évaporés. Le résidu est cristallisé dans de l'acétate d'éthyle/hexane. On obtient ainsi 110 mg de composé 5G. Les caractéristiques de ce dérive sont les suivantes spectre IR: dans CHCl3, &gamma;en cm-1: 3450 (OH), 3080 3060, 3030 (CH2: benzyle) et 1740 (COOCH3) - spectre RMN: # en ppm par rapport au TMS: 3,75 (s, 3H+ COOMe 4,98 (1H+), 7,30 (s, 5H+, C6H5) - pouvoir rotatoire: : [&alpha;]D20 = + 13 , methanol, - analyse élémentaire pourD calculé trouvé C14H18O7 C 56,37 56,17 H 6,08 5,85 - P.F.................... 125-126 C EXEMPLE 14 - (voir figure 10) Préparation des composés 57 et 58 ou 1,2,4-tri-O acétyl-3-O-benzyl-&alpha;,ss-L-methyl idopyranuronate une solution du composé 56 (3 g) préparé selon la demande debrevet FR t!o 82 00621 au nom de la Demanderesse danq un mélange de pyridine anhydre (20 ml) et d'anhydride acétique (10 ml) est agitée à à 0 C, à l'abri de l'humidité, pendant S h. Le mélange réactionnel est évaporé à sec, évaporé avec du toluène (4x20ml), et séché sous vide. Le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice (150g). L'élution par le mélange toluène : acétate d'éthyle (4 : 1 v/v) donne, par ordre d'élution - une fraction de tête composé de dérivés furanniques, - le composé 58 (anomère &alpha;), sirop, (170mg, 4%), D D - - 430 ; (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDC1 3 : 6,23 (s, 1H, H-1) - le composé 1 (anomère ss), cristallisant dans un mé- lange éther-hexane, (2,688 g, 63%), P.F. : 112-113 C, [&alpha;]D =+9 (c : 1, chloroforme) R.M.N. (CDCl3) : # : 6,08 (d, 1H, H-1, J1,2 : 1,5 Hz). Les anomères &alpha; et ss 57 et 58 ne, sont pas séparc;s lorsqu'on procède à la succession des synthèses décrits. Leur mélanqe est utilise directement sous forme de sirop pour les réactions ultérieures. EXEMPLE 15 - (voir également figure 10) Préparation du bromure de 2,4-di-O-acétyl-3-O benzyl-ss-L-méthyl idopyranuronyle (composé 59) Un mélange d'acétates 57 et 58 (212 mg, 0,5mM) est dissous dans du dichlorométhane anhydre (5ml) et de l'acétate d'éthyle anhydre (0,5ml). Du tétrabromure de titane (250 mg, 0,7mM) est ajouté en une seule fois, et le mélange réactionnel est agité 24 h à la température ambiante à l'abri de l'humidité. Après refroidissement à OOC et dilution avec du dichlorométhane, la phase organique est lavée avec de l'eau glacée (3 fois), séchée (sulfate de sodium), filtrée et évaporée pour donner 59 sous forme d'un sirop légèrement colore (217 rng, 96%), R.M.N.(CDC13) : : 6,41 (s,lH,H-1). Ce composé, très instable est immédiatement engagé dans les réactions suivantes. Les formules des composés des exemples 16 à 19A sont représentées sur les figures 10 et 11. EXEMPLE 16 Préparation du 4-0-acétyl-3-0-benzy1-1,2-0- méthoxyéthylidène- -L-méthyl idopyranuronate (composé 60) Une solution du bromure 59 (fraichement préparé à partir de 0,425 g, 1mM, de mélange d'acétates 57 et 58) dans du dichlorométhane anhydre (lOml) est agitée à la température ambiante sous atmosphère d'argon sec. De la sym-collidine (0,66ml, 5 mM) et du méthanol anhydre (0,40ml, 10mM) sont successivement ajoutés, et le mélange réactionnel est agité 20 h dans ces conditions. Après dilution avec du dichlorométhane (50ml), la phase organique est lavée avec une solution saturée aqueuse d'hydrogénocar- bonate de sodium, avec de l'eau, séchée (sulfate de so dium), filtrée et évaporée. Le résidu est chromatogra phié sur une colonne de gel de silice (20g). L'élution par le mélange hexane : acetate d'éthyle t3:2 v/v, contenant 0,5t de triéthylamine) donne # sous forme d'un sirop pur (302mg, 76% à partir de 57 et 58), = -21 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDCl3) :#: D 5,52 (d, 1H, H-1, J1,2 : 3Hz) EXEMPLE 17 Préparation du 4-O-acétyl--O-benzyl-1,2-0-tert- butoxyét}ylidène-j-L-méthyl idopyranuronate (composé 61) Une solution de bromure 59 (fraichement préparé Åa partir de 2,122 g, 5mM, de mélange d'acétates57 et58 dans du dichlorométhane anhydre (20ml) est agitée Åa la température ambiante sous atmosphère d'argon sec. De la sym-collidine (2,65 ml,20mIT) et du tert-butanol anhydre (3ml, 30mM) sont successivement ajoutés, et le mélange réactionnel est agité 15 h dans ces conditions. Après traitement identique à celui décrit pour le composé 60, le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice (120g).L'élution par le mélange hexane:acétate d'éthyle (2:l,v/v, contenant 0,5% de triéthylamine) donne 61 sous forme d'un sirop pur (1,542g, 70% à partir de 57 et 58, [&alpha;]D =-23 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDCl3) :#: 5,48 (d, 1H, H-1, J1,2 : 2,5 Hz). EXEMPLE 18 Préparation du 3-O-benzyl-1,2-tert-butoxyéthyli dène-&alpha;-L-méthyl idopyranuronate - (composé 62) Une solution de l'orthoester 61 (484mg, lllnFl) dans le méthanol anhydre (15ml) est refroidie e -200C ous agitation et atmosphère d'argon sec. Du carbonate de potassium anhydre (60 mg) est ajouté, ]e mélange réac tionnel est agité 5h dans ces conditions. Les solides sont essorés, le filtrat est évaporé et le résidu est repris dans du chloroforme (50ml). La phase organique est lavée avec de l'eau glacée (3 fois) séchée (sulfate de sodium), filtrée et évaporée. Le résidu est chromatographié rapi dement sur une colonne cie gel de silice (25g). L'élution par le mélange hexane :acétate d'éthyle (2:1, v/v, contenant 0,5X de triéthylamine), donne, par ordre d'élution - le composé insaturé 64 (31mg, 7%) sirop, [&alpha;]D=-+103 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDCl3) :#: 6,27 (d.ded., 1H, H-4, J3,4 : 5Hz, J2,4 : 1Hz), 5,67 (d, 1H, H-1, J1,2 : Hz). - une fraction principale (271mg, 62%), qui est cristallisée dans un mélange éther-hexane pour donner 62 (123mg, 28%), P.F. : 68-69 C; [&alpha;]D= -19 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (UDC13) 5,41 (d, iii, H-1, J1,2 : 2Hz), 2,85 (d, 1H, Ctt-4, J : 12Hz, échangé avec D2 O) Au cours de la chromatographie sur silice, et lors des essais de cristallisation de 62, un composé nouveau de Rf légèrement supérieur à celui de 13 appairait. Une chromatographie sur gel de silice des eaux-mères de cris tallisation de 62 permet d'isoler quelques fractions pures de ce nouveau composé 65 (41 mg, 11%), sirop, [&alpha;]D=+21 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDCl3) :#: 5,83 (d, 1H, H-1, 2 2 : 4,5Hz). Dans le cadre de la succession des synthèses envisagées selon l'invention,afin d'éviter'la formation de 65 le sirop brut de 62. n'est pas chromatographié, mais utilisé immé- diatement pour la réaction suivante. EXEMPLE 19 3-O-benzyl-4-O-chloroacétyl-1,2-O-tert-buto xyéthylidène-&alpha;-L-méthyl idopyranuronate. (composé 63) Une solution de l'orthoester 62 (220mg), 0, 5mM) dans le méthanol anhydre (10ml) est refroidie à -200C sous agitation et atmosphère d'argon sec. Du carbonate de potassium anhydre (40mg) est ajouté et le mélange réactionnel est agit pen dant 5 h dans ces conditions. Les solides sont essorés, le filtrat est évaporé et le résidu est repris dans du chlo roforme (50ml). La phase organique est lavée rapidement avec de l'eau glace (3 fois), séchée (sulfate de sodium), filtrée et évaporée. Le résidu est immédiatement dissous dans de la pyridine anhydre (4ml) et du dichlorométhane anhydre (2ml). Après refroidissement à -20 C sous atomes phère d'argon sec, une solution de chlorure de chloroacétyle (0,1ml, 1,25mM, fraîchement distillé) dans le di chlorométhane anhydre (lml) est ajoutée goutte à goutte Le mélange réactionnel. est agité dans ces conditions pendant 30 mn, puis versé dans un mélange eau-glace (100ml). Après agitation pendant 15 mn, le mélange est extrait avec du chloroforme (3x20ml). Les phases organiques sont lavées avec de l'eau glacée, avec une solution aqueuse à 2% d'hydrogénocarbonate de sodium, avec de l'eau, séchéos (sulfate de sodium),filtréeset évaporées. Le résidu est chromatographié rapidement sur une colonne de gel de silice (12g). L'élution par le mélange hexane:acétate d'éthyle (5:2, v/v, contenant 0,2% de triéthylamine) donne, par ordre d'élution - le composé insaturé 64 (15mg, 8%), l'orthoester 63 sirop (145mg, 61% à partir de 12), D= +19 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CdCl3) :#: 5,45 (d 1H, H-l, J, : 2,5Hz), 5,24 (d.de d., 1H, H-4, J3,4: 2,5Hz, J4,5 : 1,5Hz), 4.00 (s, 2H, Cl-CH2-COO-). EXEMPLE 19A - (voir figure 12) Application du composé 63 à la synthèse du disaccharide 67 Composé : Méthyl 6-O-benzoyl-3-O-benzyl-2-benzyloxycar bonylamino-2-désoxy-4-O-désoxy-4-O-(2,4-di-O-acétyl-3-O benzyl-&alpha;-L-méthyl idopyranuronyl)-&alpha;-D- glucopyranoside. Une solution de l'orthoester (!7 (80mg, 0,2mM) et de l'alcool 66 (52mg, 0, 1mM) dans du chlorobenzene anhydre (eml) est chauffée à 1400C sous agitation et'léger courant d'argon sec. Après distillation lente de 6ml de solvant, une solution de perchlorate de 2,6 diméthylpyridinium (0,002mM fraîchement préparé selon N.K. KOCHETKOV; A.F. BOCHKOV, T.A. SOKOLOVSKAIA et V.J. SNTATKOVA,Carbonhdr. Res., 16 (1971) 17-27, dans le chlorobenzène (2ml) est ajoutée goutte à goutte en 15 mn. avec distillation simultanée de solvant (2 ml). Le mélange réactionnel est alors agité pendant 1 h, dans ces conditions, avec addition de solvant frais (10ml) et distillation simultanée de telle sorte que le volume réactionnel reste constant et égal à 2 ml. Après refroidisement et dilution avec du chloroforme, la phase organique est lavée avec une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium, avec de l'eau, séchée (sulfate de so diurn), filtrée et évaporée. Le résidu est chromatographie sur une colonne de gel de silice (159). L'élution par le mélange hexane : acétate d'éthyle (4:3,v/v) donne, par ordre d'élution - le produit de départ 66 (20mg, 38%), - une fraction homogène en chromatographie sur couche mince (54mg). Le spectre de R.fj.N. de cette fraction montre la présence de plusieurs signaux O-mathyl (#:3,35-3,50) dus aux méthyl glycosides provenant du réarrangement de 1'orthoester 63. Cette fraction est cristallisée dans un mélange éthanol-eau, et recristallisée dans un mélange acétate d'éthyle-hexane pour donner 67 (44 mg, 50%), P.F. : 120-1210c, [&alpha;] D = +170 (c : 1, chloroforme), R.M.N. (CDCl3) : conforme i la structure attendue. EXEMPLE 20 - (voir figure 13) Préparation du (méthyl-@,3-di-O-benzyl-&alpha;-L- glucopyranoside) iduronate de méthyle (composé 79) Cette synthèse est effectuée selon les étapes 1 à 7 suivantes. Etape 1 : synthèse du monosaccharide 69 On prépare ce monosaccharide à partir du composé 68 obtenu selon la technique de N L Holder et B. Fraser Reid, Canadian Journal of Chemistry, 51 (1973) page 3357. A une solution du composé 68(1 g, 12,67 mM) dans le di chlorométhane (20 ml), on ajoute du chlorure de tosyle (0,55 g), Duis de la diméthylaminopyridine (16 mg) et en fin, de la triéthylamine (0,7 ml). Après agitation sous courant d'azote à l'abri de l'humidité, pendant environ 14 heures, la réaction est arrêtée par addition de glace et d'eau. Après dilution du mélange réactionnel avec du dichlorométhane (50 ml) la phase dichlorométhane est la vée avec de l'acide chlorhydrique 2 X, puis une solution saturée de bicarbonate de sodium, et enfin avec de l'eau jusqu'à pH neutre. Après séchage et évaporation, on ob tlent un résidu, à savoir le dérivé 69 (1,4 g. 97 t) qui et engagé tel quel dans la synthèse du dérivé 70. EtaDe 2 : synthèse du dérivé 70. Le monosaccharide69 (31,8 g) et de l'iodure de sodium (39 g) sont dissous dans de l'acétonitrile (250 ml), puis la solution est portée à reflux pendant 3 heures. Après refroidissement du mélange réactionnel, le précipité blanc formé est filtré. Le filtrat est concentré, le rési du est repris par du chloroforme, puis la phase chlorofor- mique est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre, séchée sur sulfate de sodium et concentrée à sec. On obtient un sirop qui est chromatographié sur une colonne de gel de silice (200 g, éther-hexane, 1/1, v/v). On obtient ainsi le dérivé iodé 70 (24,7 g 71,5 X). [&alpha;]D20 = 240 (1, chloro forme) Le spectre infrarouge, le spectre de RMN et l'analyse élé mentaire confirment la structure de 70. Retape 3 : synthèse du dés: vé 71 A une solution du dérivé 70 dans de la pyridine anhydre (200 mi),, on ajoute de l'anhydride acétique (43 ml). Acres environ 14 heures sous agitation, la réaction est terminée. Le mélange reactionnel est concentré à sec, puis le résidu est purifié--sur une colonne de gel de si-- lice, sous pression, dans un solvant acétate d'éthylehexane (1/6, v/v). Les fractions pures sont regroupées. On obtient ainsi le produit 71. (16,5 g, 70 X). Ce produit se présente sous forme d'un sirop. [&alpha;]D20 = + 4,5 (1,3, chloroforme). L'analyse élémentaire ainsi que l'analyse du spectre infrarouge confirment la structure. Glace 4 : synthèse de7? A une solution du dérivé 11-(4 g) dans de la pyridine (100 ml), refroidie à OOC, on ajoute du fluorure d'argent (AgF, 6,9 g). Après deux heures et demie. le mé- lange réactionnel est versé dans un mélange contenant du chloroforme et de l'éther (1/4, v/v, 1 1). La suspension obtenue est passée au travers d'un filtre plissé. Le filtrat est concentré à sec, puis le résidu est renris dans du chloroforme (500 ml). La phase chloroformique est lavée avec du sulfate acide de potassium en solution à 10 % dans l'eau, puis avec de l'eau jusqu'a pH neutre. Après séchage sur sulfate de sodium et concentration à sec, on obtient un résidu (2,7 q), qui est chromatographié sur une colonne de silice (200 g) (éluant : acétate d'éthyle-hexane, 1/4, v/v). Les fractions contenant le produit 72 sont regroupées et après évaporation des solvants, on obtient un produit cristallin (1,62 g, 54 %). PF : 81-82 C, [&alpha;]D25 = - 200 (1, chloroforme). L'analyse du spectre infrarouge, l'analyse élémentaire et l'anaiyse du spectre de résonnance magnétique nucléaire confirment la structure du composé 72 Etape 5 : synthèse du dérivé 73 Le produit 72(2 g) est dissous dans du méthanol (2n ml) et du chloroforme (20 ml). A cette solution. on ajoute du méthanolate de sodium (2 M, 2 ml). Après 1,5 heure, la réaction de désacétylation est terminée. Le mé- lange réactionnel est dilué avec du chloroforme. La phase chloroformique est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre, séchée, puis évaporée à sec. On obtient ainsi un résidu, le composé 72 (1,8 2, 100 %). I1 est immédiatement dissous dans du tétrahydrofuranne (50 ml), puis de lthydrure;- de bore (BH3, 1M) dans le tétrahydrofuranne : (10 ml) est ensuite ajouté. Après une heure de réaction, l'excès d'hy drure de bora: est détruit par addition d'éthanol. A la fin du degagement gazeux, le mélange réactionnel est dilué par addition de tétrahydrofuranne (100 ml). De la soude 3 M (12 ml) est ensuite ajoutée. suivie d'eau oxygénée (120 volumes, 8 ml). Après 2 heures de chauffage à 50 C. la réaction est arrêtée. La solution est versée dans du chloroforme (500 ml), puis la phase organique ainsi obtenue est lavée avec de l'eau, de l'acide chlorhydrique 2 (t, puis enfin avec de l'eau jusqu'à pH neutre. On obtient ainsi une phase chloroformique très laiteuse, qui devient limpide au cours du séchage sur sulfate de sodium. Après filtration, le chloroforme est évaporé puis le résidu obtenu est chromatographié sur silice (200 g chloroformeméthanol, 30/1, v/v) On obtient ainsi le dérivé de l'idosé 73 (1,05 g, 55 %). Ce produit se présente sous forme d'un sirop. [&alpha;]D20 = + 85,5 (1, chloroforme). L'analyse élémentaire ainsi que l'analyse en RMN confirment la structure attendue. Etape 6 : synthèse du dérivé 76 Cette synthèse est effectuée à partir du drivé 73 en une seule étape (les intermédiaires7 et 75 ne sont pas isolés). A une solution du dérivé73 (2,25 g, 6 mrt) dans le dichlorométhane (50 ml), on ajoute successivement de la diméthylaminopyridine (60 mg ; 0,24 mM) de la triéthylamine (1,7 ml : 12 mM) et du chlorure de trityle (2,5 g ; 9 mM). Après environ 14 heures, la réaction est terminée. On obtient ainsi en solution le dérivé 74 On ajoute alors au mélange réactionnel de la diméthylaminopyridine (150 mg). de la triéthylamine (1,7 ml) et du chlorure de benzoyle (1,05 ml). Après' 6 jours, le dichlorométhane est éliminé par passage d'un courant d'azote et remplacé par du diméthylformamide (40 ml). Le mélange réactionnel est chauffé à 700C pendant une nuit. On ajouté alors Åa nouveau du chlorure de benzoyle (1 ml) et de la triéthylamine (1,7 ml), puis on maintient le chauffage Åa 70 C pendant 2 jours. Le diméthylformamide est ensuite évaporé, puis le résidu est repris par du chloroforme, la phase chloroformique est lavée avec de l'eau, avec une solution saturée de bicarbonate de sodium, puis avec une solution d'acide chlorhydrique 2 M et enfin avec de l'eau jusqu'à pH neutre. Après séchage, le chloroforme est évaporé, ce qui permet d'obtenir le composé 75. Celui-ci est immédiatement soumis a une réaction pour éliminer le groupe trityle afin d'obtenir le dérivé 76 Le résidu contenant le dérivé 75 est dissous dans 25 ml de chloroforme et on ajoute à cette solution 10 ml d'une solution d'acide paratoluènesulfonique monohydrate dans le méthanol (1 i'). Après -4 heures de réaction à température ambiante, la réaction est terminée. Le mélange réactionnel est alors dilué avec du chloroforme, lavé avec de l'eau, seche puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est chromatographie sur gel de silice (200 g, ether-hexane, 3/1, v/v). Le dérivé 76 est ainsi obtenu à l'état pur (1,5 g : 52 %). Ce dérivé se présente sous forme d'un sirop. [&alpha;]D20 = - 8 (l, chloroforme). L'analyse du spectre infrarouge et du spectre RÉIN confirment la structure du produit attendu. Etape 7 : synthèse du composé 70 Cette synthèse est effectuée directement à partir du dérivé 76 sans isoler les intermédiaires 77 et 78. A la solution du composé76 (1.2 g) dans l'acétone (20 ml), on ajoute, goutte à goutte, après refroidissement à OOC, une solution (2,9 ml) d'oxyde de chrome (CrO3 : 1,17 g) dans l'acide sulfurique 3,5 M (5 ml). Après 30 minutes d'agitation à 0 C, la température est ramenée à l'ambian- te. La réaction évolue pendant 3 heures. Le mélange réactionnel est ensuite versé dans une amboule à décanter contenant de l'eau glacée (100 ml). Le produit formé est extrait par du chloroforme (3 x 50 ml). La phase chloroforme mique est lavée avec de l'eau jusqu'à pH neutre, puis séchée sur sulfate de sodium, filtrée et concentrée 3 sec. Le résidu obtenu (le composé 77) est dissous dans du méthanol (130 ml). On ajoute à cette solution de la soude 3 M t-17 ml) puis on laisse le mélange sous agitation pendant environ 14 heures. Après acidification nar l'acide sulfurique, le composé 78 est extrait à l'éther, puis immédiatement méthylé par du diazométhane selon la méthode classique pour donner le composé 79 Après évaporation de l'éther, le composé 79 est obtenu pur au moyen d'une chromatographie sur gel de silice (50 g ; éther-hexane ; 4/1 ; v/v). Les fractions Du res contenant le dérivé 79 sont rassemblées et les solvants sont éliminés. On obtient ainsi le dérivé 79 de l'acide iduronique (587 mg, 59 x nar ranport au drivé 76. Ce produit se présente sous forme d'un sirop. [&alpha;]D25 = +980 (2,65, chloroforme). L'analyse en RMN, l'analyse en infrarouge et l'analyse élémentaire confirment la structure attendue. EXEMPLE 20A (voir figure 13) Application du composé 79 à la synthèse du di saccharide 81 Cette synthèse s'effectue à partir du monosac charide 70 préparé comme ci-dessus et du monosaccharide 80 préparé selon la technique de H. Paulsen et W. Stenzel, chemische Berichte 111 (1978) 2234-2247. A une solution du comnosé7.9 (200 mq, 0,5 mM) dans le dichloromethane (10 ml), on ajoute successivement le composé 80 (0,450 g) de la sym-collidine (150 ul) et du triflate d'argent (260 mg). Le mélange réactionnel est maintenu à 0 C sous courant d'azote et sous agitation à l'abri de l'humidité et de la lumière pendant 3 heures. Il est ensuite dilué avec du dichlorométhane (100 ml) puis les solides sont éliminés par filtration sur filtres plissés. La solution obtenue est lavée avec une solution saturée de bicarbonate de sodium avec de l'eau et. avec de l'acide sulfurique 2 M, puis à nouveau avec de l'eau jusqu'à pS neutre. . Après séchage sur sulfate de sodium et évapora- tion du dichlorométhane, le résidu obtenu est chromatogra- phiè sur gel de silice (50 g : chloroforme/acétate d'éthylu ; 15/1 : v/v). On obtient ainsi le dérivé 81 pur (327 mg, 82 .). Le produit se présente sous forme d'un sirop. [&alpha;]D20 = +570 (1, chloroforme). L'analyse en RMN de meme que l'analyse élémentaire confirment la structure et l'anomérie du disaccharide 81. EXEMPLE 21 - Synthèse du trisaccharide 86 de formule EMI55.1 Cette synthèse est réalisée en 3 étapes (voir figure 15) Tout d'abord, on procède à la glycosylation de l'orthoester d'un dérivé d'acide L-iduronique. On élimine ensuite sélectivement le groupe monochloroacétyle, puis on fait reagir l'un des alcools formés avec un disaccharide. 1) - Glycosylation de l'orthoester 63 par l'alcool l'enzy lique Une solution de l'orthoester 63 (118mg 0,25 mM) obtenu comme durit ci-dessus et d'alcool benzylique (0,15 ml, 15 mM, fraîchement distillé) dans du chlorobenzène anhydre (10 ml) est chauffée à 1400C à l'abri de l'humidité. Après distillation lente de 8 ml de solvant, une solution de perchlorate de 2,6-diméthylpyridinium (2,5 M) dans le chlorobenzène (2ml) est ajoutée goutte à goutte en 30 mn avec distillation simultanée e solvant (2ml). Le mélange réactionnel est alors agité 30 mn dans ces conditions, avec addition goutte à goutte de solvant frais et distillation simultanée, de telle sorte que 1 volume réactionnel reste constant et égal à environ 2 ml. Après refroidissement et dilution avec du chloroforme (50 ml), la phase organique est lavée avec une solution aqueuse à 5 d'hydrogénocarbonate de sodium, avec delteau, séchée (sulfate de sodium) filtrée et évaporée. Le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de si lice (8 g). L'élution par le mélange hexane-acétate d'éthyle (2 : l, v/v) nermet d'obtenir une fraction contenant le mélange 82 de glycosides &alpha; et ss qui n'ont pas été séparés à ce stade (102 mg, 81%), R.M.N. (90 MHz, CDCl3) # : 7,30 (m, 10H, 2 Ph, 3,98 (s, 2H, Cl-CH2-CO), 3,74 (s, 3H, CooHe), 2,08 et 2,03 (2s, 3H au total, OAc forme ss et &alpha; ; ss : &alpha; # 2 : 1). 2) - O-démonochloracétylation sélective Une solution du mélange 82 précédent (102 mg) dans de la pyridine (5ml) et de l'éthanol absolu (lml) est chauffée à 1000C pendant 20 min. en présence de thiourée (25mg). Après refroidissement, le mélange réactionnel est évaporé à sec et le résidu est repris par un mélange eau-chloroforme (1:1, v/v, 50 ml). La phase organique est lavée avec de l'eau, séchée (sulfate de sodium), filtrée et évaporée. Le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice (10 g). L'élution par le mélange acétate d'éthyle-hexane (4:3, v/v) permet d'isoler (par ordre d'élution) : - le glycoside ss 83 (26mg, 25%), sirop incolore, [&alpha;]D + 70 (c1, chloroforme) R.M.N. (90MHz, CdCl3) :#: 7,30 (m, 10H, 2 Ph) ; 5,05 (m, 1H, H2); 4,90 (d, 1H, H1, 1,2 J=2Hz); 3,78 (s, 3H, COOMe); 3,12 (1H, OH, échangé avec D2O); 2,05 (s, 3H, OAc). - le glycoside &alpha; 84 (511 mg, 50% à partir de 63) sirop incolore, [&alpha;]D - 65 (c1, chloroforme) R.M.N. (90 MHz, CdCl3) :#: 7,30 (m, 10H, 2 Ph); 5,05 (2H, H1 et H2, constantes de couplage très faibles pour J 1,2 # 1Hz); 3,78 (s, 3H, COOMe); 2,80 (1H, OH, échangé avec D2O); 2,06 (s, 3H, OAc). 3) - Glycosylation de l'alcool 84 à l'aide du disaccha ride 85 Une solution de l'alcool 84 (22 mg, 50 M), et du bromure 85 # (57 mg, 70 M) dans du dichlo méthanc anhydre (1,5 ml) est agitée à l'abri de la lumière etde l'humidité en présence de tamis moléculaire 4 (poudre, 50 mg). Le mélange réactionnel est refroidi à -200C et de la sym-collidine (110 l) et du triflate d'argent (26 mg, 100 M) sont ajoutés successivement. Le mélange réactionnel est agité 2h dans ces conditions, dilué avec du dichlorométhane (50 ml) les solides sont essorés et le filtrat est lavc avec une solution aqueuse glacée d'HCl O,i, avec de l'eau, avec une solution aqueuse à 5% d'hydrogénocarbonate de sodium, avec de l'eau, séché (sulfate de sodium), filtré et évaporé. Le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice (8 g; gel 230-400 mesh). L'élution par le mélange toluène-acétate d'éthyle (5:1, v/v) permet d'isoler le trisaccharide P sous forme d'un sirop incolore (50 mg, 86%). Le spectre R.M.N. (270 MHz, CDCl3) est conforme avec la structure attendue. EXEMPLE 22 - (voir figure 16) - Application du dérivé d'acide L-iduronique 87 de formule EMI57.1 à la synthèse de glycosides utilisables en tant que substrats d'enzymes, de formule EMI58.1 Synthese d composé P7 Le composé 87 (demande de brevet FR No 82 01575 ; 900 mg ; 2 mmoles) est dissous dans du dichloroéthane (20 ml). On ajoute alors du tributyl Stannyl Phénol (88 ; 2,5 pmoles) puis du chlorure stannique (2,5 mmoles). Après 5 heures, le mélange réactionnel est dilué avec du dichlorométhane, lavé avec une solution de bicarbonate sodium, puis avec de l'eau. Le résidu obtenu après séchage et évaporation des solvants (1,03 g) est directement hydrogéné. Pour cela, il est dissous dans du méthanol, puis la solution est agitée sous atmosphère d'hydrogène en présence de Pd/C (5% ; 0,5 g) pendant 3 heures. Le catalyseur est alors éliminé par filtration puis la solution est concentrée à sec. Le résidu est acétylé par l'anhydride acétique en présence de pyridine, livrant ainsi m (420 mg) purifié sur une colonne de gel de silice (100 g ; Ether/hexane ; 3/1 ; v/v). Le spectre de RMN et l'analyse élémentaire confirment la structure de 89. Synthèse des composés 93 et 95 A une solution de 89 (400 mg) dissous dans l'acide acétique glacial (2,5 ml) on ajoute goutte à goutte, sous agitation et à 0 C, un mélange (lml) constitué d'anhydride acétique (16 volumes) et d'acide nitrique (5 volumes). Après deux heures à 35 C, le mélange réactionnel est versé dans de l'eau glacée puis les produits f'ormés (90 et 91) sont extraits au chloroforme. La phase chloroformique est lavée avec du bicarbonate h 5% dans l'eau, séchée puis concentrée à sec. I,es produits 90 et 91 formés dans un rapport d'environ 2/1, sont séparés par chromatographie sur gel de silice (25 g ; éther/hexane, l/l,v/v). On obtient ainsi 90 pur (23 mg), 91 pur (19 mg) et une fraction contenant à la fois 90 et 91 non séparés. 92 et ils sont dissous dans du méthanol à OOC. On ajoute goutte à goutte, de la soude 4N, jusqu'à pH basique. Lorsque lthydrolyse est complète de la résine Dowex 50 H+ est ajoutée de façon à désioniser la solution. On obtient après lyophilisation, les compos 43 (11 mg) et 95 (10 mg). Leurs spectres de RMN confirment leurs structures. 0n notera que divers substituants peuvent être indroduits sur le glycoside 89 après étape de condensation. Ainsi, dans d'autres essais, les groupes protecteurs ont été éliminés tous ensemble. Cette opération a étalement été effectuée successivement sur les positions 2 et/ou 3 et/ou 4. Des substituants spécifiques ont été introduits, notamment, des groupes SO De nombreux glycosides ont été ainsi préparés. On 3. a également obtenu d'autres glycosîdes en utilisant des dérivés d'acide L-iduronique et D-glucuronique comprenant des substituants différents de ceux du dérivé 87

Claims: REVENDICATIONS I. Dérivés possédant une structure acide uronique > caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule III EMI60.1 dans laquelle les substituants -ORl à OR6 sont choisis parm . un groupe réactif c'est-à-dire un groupe activateur permettant d'utiliser le dérivé uronique en tant qu'élément glycosylant ou en tant qu'élément glycosylés dans une réaction de glycosylation, ce groupe pouvant être un halogénure en particulier un chlorure ou un bromure, un groupe -O-imidoyle, ou, conjointement, avec un substituant voisin, un groupe orthoester, ou encore un atome d'hydrogène, ou un groupe fonctionnalisable constituant l'amorce d'un bras conjugable, tel qu'un -O-alcényle notamment un -O-allyle ou ce bras conjugable luimême sous forme protégée. des fonctions -OH bloquées par des groupements protecteurs, ces groupements étant identiques ou différents les uns des autres, compatibles entre eux et avec le ou les groupe (s) réactifs et inertes vis-à-vis des réactions dans lesquelles, le cas échéant, on souhaite engager le monosaccharide, les groupements étant choisis avantageusement parmi les radicaux aliphatiques ou aromatiques, en particulier, dans le groupe comprenant un radical alcoyle de i à 4 atomes de carbonate, en particulier, méthyle, un radical alcoyle substitué, tel que benzyle, un radical acyle tel tel qu'acétyle, benzoyle ou chloroacétyle, ou un radical alcényle de l 0 4 atomes de carbonate, tel qu'allyle ou vinyle, ou les sels formés à partir de ces dérivés, à l'exclusion du (benzyl 2 > 3- di-O-benzyl G , ss-L-idopyranose)uronate de méthyle, étant entendu également que dans les dérivés glucuroniques avec un groupe réactif comme ci-dessus, 'à R4 ne peuvent pas être tous trois identiques, et Ri et R4 sont différents d'un groupe méthyle (ce groupe étant difficilement éliminable). 2. Dérivés selon la revendication i, caractérisés en ce que les groupes protecteurs R2 et R3, et le cas échéant R4, sont différents et éliminables séquentiellement sans altération de la structure uronique et de la fonction carboxyle. 3. Dérivés selon la revendication i, caractérisés en ce qu'ils comportent un groupe réactif en position l ou en position 4. 4. Dérivés selon la revendication l, caractérisés par le fait qu'il s'agit de dérivés d'acide D-glucuronique de formule IV EMI61.1 dans laquelle -ORl représente un groupe réactif choisi parmi: 10 un groupe activateur permettant d'engager le dérivé glucuronique dans une réaction de gly collation en tantqu'agent glycosylant, tel qu'un halogénure, en particulier un chlorure ou un bromure, un groupe -O-imidoyle, un groupe orthoester conjointement avec R2 i 20 un groupe fonctionnel ou fonctionnalisable tel qu'un radical -O-alcoyle-substitué ou alcényle tel que -O-allyle ou ces groupes protégés, 30 un groupe -OH - R2 à R4, identiques ou différents, représentent un groupe protecteur tel qu'un radical alcoyle de l à 3 atomes de carbonate, en particulier méthyle, alcoyle substitué, tel que benzyle, acyle, tel qu'acétyle, benzoyle ou chloroacétyle, ou alcényle, tel qu'allyle ou vinyle, -R6 représente un radical aliphatique ou aromatique, en particulier un radical alcoyle de l à 4 atomes de carbone ou alcoyle substitué tel que benzyle, et les sels de ces dérivés, à l'exclusion des acides D-glucu- ronique définis ci-dessus. 5. Dérivés selon larevendication 4, caractérisés en ce que R4 représente un groupe temporaire formant un ester ou un éther avec le groupe -OH qu'il protège, ce groupe temporaire étant choisi parmi les radicaux monochloroacétique , acétyle, benzyle ou p-méthoxybenzyle, allyle, vinyle ou analogue. 6. Dérivés selon la revendication 4, caractérisés en ce que R1 représente un atome d'hydrogène ou bien R4 représente un atome d'hydrogène et R1 un groupe fonctionalisable. 7. Dérivés selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'il s'agit de dérivés de l'acide L-iduronique de formule V EMI63.1 dans laquelle les substituants présentent les significations données ci-dessus. 8. Dérivés selon la revendication 7, caractérisés en ce cas R1 et R2 représentent un orthoester, ou bien que R1 est choisi dans le groupe comprenant un groupe activateur tel qu'un halogénure, un radical alcoyle ou un radical alcoxyle. 9. Dérivés selon la revendication 8, cararactérisés en ce que R4 est un groupe temporaire possédant les significations données ci-dessus et R2 et R3 sont différents l'un de l'autre. 10. Procédé de préparation de dérivés d'acide uronique selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on introduit sur un monosaccharide à structure uronique des groupes protecteurs compatibles les uns avec les autres permettant le traitement sélectif d'une position donnée sur laquelle on désire introduire un groupe réactif, ou, le cas échéant, un groupe protecteur donné. 11. Procédé selon la revendication lO, caractérisé en ce que pour préparer un dérivé d'acide L-iduronique de formule V ci-dessus, on traite un dérivé d' o < -D-glucofuranoside de formule VI EMI64.1 dans laquelle les groupes R7 à R9 peuvent être identiques ou différents les uns desautres et représentent un groupe de blocage, R7 et R8 formant, en particulier un groupe isopropylidène et R9 un groupe benzoyle, de manière à agir sélectivement sur l'un ou l'autre des groupes -OH en positions 5 ou 6, et à obtenir ainsi le passage d'une structure D-gluco à une structure L-ido en position 5, le passage d'une structure alcool primaire à une structure acide carboxylique en position 6, et l'utilisation de la chaîne idofuranose formée pour constituer un cycle idopyranoside. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé e n ce que le traitement des groupes -CH2OH < f-CHOH en positions respectivement 6 et 5 de la structure furanose comprend - le blocage sélectif du groupe -OH en position 6, par exemple en utilisant du chlorure de trityle, ou analogue, - le blocage sélectif du groupe - OH de -CHOH en position 5, avantageusement par un groupe protecteur temporaire tel que benzoyle, - le déblocage sélectif du groupe -OH en position 6 afin d'obtenir un groupe -CH2OH, - l'oxydation du groupe -CH2OH en un groupe-COOH, en utilisant un agent d'oxydation tel que de l'oxyde chromique, - le déblocage du groupe -OH en position 5 et la transformation, si souhaitée, du groupe -COOH en position 6 en un groupe ester, en utilisant un agent d'estérification approprié, - l'introduction en position 5 d'un groupe réactif tel qu'un tosylate, un mésylate, un groupe triflyle, ou analogue, - l'inversion de configuration du carbone en position 5, par exemple, en utilisant un trifluoroacétate, - l'élimination du groupe fonctionnel en position 5, selon les techniques habituelles et - le réarangement du cycle pour passer d'un cycle idofuranosique à un cycle idopyranosique, en opérant, par exemple, en milieu acide. 13. Application des dérivés uroniques selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, à la synthèse de glycoside utilisable en biologie. 14. Application selon la revendication 12 pour préparer des substrats d'enzymes, comprenant la fixation du dérivé d'acide uronique à un aglycone, tel qu'un paranitrophénol, de la méthyl-umbelliférone, ou leurs dérivés. 15. Application selon la revendication 12, pour préparer des substrats radioactifs, comprenant la fixation d'un dérivé d'acide uronique à un glycoside radioactif ou à un glycoside traité, après l'étape de condensation du dérivé uronique avec un aglycone, afin d'être radioactif. i6. Application selon la revendication 12 pour préparer des antigènes artificiel:, et par là > des anticorps spécifiques, ainsi que des immunoabsorbants, comprenant la fixation sur un support soluble ou insoluble d'un dérivé d'acide uronique, ou d'un glycoside de ce dérivé, ce dérivé d'acide uronique et ce glycoside possédant un bras d'ancrage. 17. Application selon la revendication 16, caractérisé en ce quele bras d'ancrage comprend 1) un radical alcoyle de 2 à 10 atomes de carbonate, comprenant en bout de chaine, un groupe -OH, le cas échéant protégé ou engagé dans un groupe fonctionnel, 2) un radical alcényle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone et correspondant avantageu sement aux radicaux alcoylène-glycol &alpha;ss- hydroxypro pyle, ou ss -hydroxyéthyle,-hydroxypropyle, lesdites chaînes l et 2) contenant avantageusement en outre un ou plusieurs groupes éther et/ou amine intercalaire et/ou un groupe fonctionnel terminal comprenant de l'azote tel qu'un groupe amino ou encore un groupe terminal éther, carboxyle ou aldéhyde.

Inventors: CHOAY, JEAN, JACQUINET, JEAN-CLAUDE, PETITOU, MAURICE, SINAY, PIERRE
Applicants: D.R.O.P.I.C. (SOCIETE CIVILE)
Application year: 1982
Main classification: C07H7
IPC codes: C07H7, C08B37, C07H3, C07H9, C07H11