P. 1



# OAR Box 

# 1827 Prepped byCharmelle Mathews



# Document

Number: 

# 136 ) ll-A- 6 Docket Number: 

# A-90-0 7

Printed 11/19/200812:40:48PM Sheet 136 of 147P. 2

' I ' I



## P384-16421 9
Validatio no f

Chemica lan dBiologica l Technique s fo r

Evaluatio no f

Vapor s i n Ambien t Air/Mutagenicit yTestin g o f Twelv e(12 ) Vapor-Phas eCompound s

Researc hTriangl eInst
. Researc hTria-Kgl ePark , N C
Prepare dfo r Healt hEffect s Researc hLab
. Researc hTriangl ePark , N C

Ma r 8 4 

# Qliiil l ..Air — !';'

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### U.S

. Dc5srtrr,ir, tofCternisr: * foiloitt! Technica l Ififpsmalwi f.-..• f\r-.-"'j*-"-. s j

### . . * \ 1 ' • i

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### ED8U-16U21 S

' ' ' ' < EPA-600/1-84-00 5 ! Marc h198 4

i VALIDATIO

N OF CHEMICAL ANDBIOLOGICAL TECHNIQUE S FO REVALUATION OF VAPOR S I

N AMBIENT AIR/MUTAGENICIT YTESTIN GOF TWELVE (12 ) VAPOR-PHAS E COMPOUND S

b y

Thoma s J . Hughe s Charle s Sparacino StevenFrazte r , Researc hTriangl e Institut e

P.O . Box1219 4 Researc hTriangl e Park , N C 2770 9

i

Contrac t No . 68-02-3170-08 2

i i

Projec t Office r

Larr y D . Claxton Geneti c Toxicology Division

HEALT H EFFECT S RESEARC H LABORATORYj OFFIC E O F RESEARC H AND DEVELOPMEN T U S ENVIRONMENTA L PROTECTIO NAGENC Y RESEARC H TRIANGL E HARK , NC 2771 1

NATIONA L TECHNICA L ! INFORMATIO NSERVIC E U i :V'fyti:\: •• c:»M t = ; | i??-s."M::: . . i ::;: .

I 

### P. 3P. 4

T ' : 1 i f i

- I ..•-..-flWcrt , TECHNICAL REPOR

T OAT A (Plcaie read

Instruct:?TMonthercverze before completing/ l . REPOR TNO . 

### EPA-600/1-84-00 5 3 . RECIP , 'LE.NT S ACCESSIO NNO . 4 . TITL E AN O SUBTITL E 

### Validatio n o fChemica l an d Biologica l Technique s fo rEvalu
atio n o fVapors i n Ambien tAir/Mutagnnicit yTestin g o f Twelv e (12 ) Vapor-Phas e Compounds 5 . REPOR TOAT E 

### Marc h 1984 6 . PERFORMIN G ORGANIZATIO N COO E
7 . AUTMORIS I 

### Thoma s J . Hughes , Charle s Sparacin oandSteve nFrazie r 8 . PERFORMIN G ORGANIZATIO N REPOR TN C

9 . PERFORMIN G ORGANIZATIO N NAM E AN O AOORES S 

### Researc h Triangl e institut e 

### Pos tOffic eBo

x12194 ResearchTriangl ePark ,N C 27709-219 4 10 . PROGRA M ELEMEN TNO . 11 . CONTRACT/GRANT 1 NO . 

### 68-02-3170-08 2 12 . SPONSORIN G AG-NC YNAM E AN O AOORES S 

### U.S . Environmenta l Protectio nAgenc y Healt hEffect s Researc hLaborator y Geneti c Toxicolog y

Division , Geneti c Bioassa y Branc h(MD68 ) Researc hTriangl e Park , N C 2771 1 13 . TYP E O FREPOR TAN O P6RIO O COyERE C 14 . SPONSORIN G AGENC YCOO E 

### EPA/600/1 1 19 . SUP'LEMENTAR YNOTE S

16 . ABSTRAC T


### Th e overal l objectiv e o f thi s researc hwa s t o furthe r validat e Ame s

mutagenicit y

preincubatio nsystem fo r detectio no f vapor s i nambien t air . Parameter s fo r detectio no f vapor s inth e Ames/Salmonell a mutagenicit y assa y wer e investigate dand1 2 vapor-phas e ccmpound s wer e teste dfo r mutageni c potentia l i nth e abov e validate dprotoco l wit hstrain s TA97 , TA9 8 andTA100 , bot' i wit handwithou t Aroclor-induce dhamste r andra t live r S9 . The 1 2 vipor-phas e compound s teste dwere : methylen e chloride , formaldehyde , trichloroethylene , ethylen e dichloride , epichlorohydrin , nitropropane , nitrobenzene , hydroge nsulfide , bucene , propylene , acetylene , andethylen e oxide . Ethylen e oxide , epichlorohydrin , ethylen e dichlorid e andmethylen e chlorid e wer e mutagenic .

«.EYAOP" S »N O JCC'JMts rANALYSI S

IS . ^:ST^IBJ7:0.- < iTy7Z'*tN 

### Releas er o Publi c ! U-classifie d :: . raics i -nciassnie d EPAf."-<

:j!- l :.H... *_;7 ) D« I viou l l5i''C « • » mcur t

### P. 5

&

DISCLAIME R

TH E INFORMATIO NI NTHI S DOCUMENT HA S BEE NFUNDE D WHOLL Y O RI NPAR T B YTH E UNITE D STATE S ENVIRONMENTA L PROTECTIO N AGENC YUNDE RCONTRAC T NO . 68-02-317 0 T O TH E RESEARC H TRIANGL E INSTITUTE . I T HA S BEE NSUBJECTE D T O TH E AGENCY' S PEE RAN D ADMINISTRATIV E REVIEW , AN D HA S BEE NAPPROVE D FO RPUBLICATIO N A S A NEP ADOCUMENT .

i i

## P. 6

FOREWOR D

Th e man

ybenefit s o f ou r modern , developing , industria l societ yar e accompanie db

ycertai nhazards . Carefu l assessmen t o f the relativ e ris k o f existin g andne wman-mad e environmenta l hazard s i s necessar yfo r the establish

men t o f soundregulator ypolicy
. Thes e regulation s serv e t o enhanc e th e qualit y o f ou r environmen t i norde r t o promot e th e publi c healt handwelfar e andthe productiv e capacit yo f ou r Nation' s population
. Th e complexitie s o f environmenta l problem s originat e i nth e dee pinter

dependen t relationship s betwee nth e variou s physica l andbiologica l segment s o f man' s natura l andsocia l world . Solution s t o thes e environmenta l problem s requir e a nintegrate dprogra mo f researc handdevelopmen t usin g inpu t froma numbe r o f disciplines
. Th e Healt hEffect s Researc hLaboratory , Researc h Triangl e Park , N C andCincinnati , C H conduct s a coordinate denvironmenta l healt hresearc hprogra mi ntoxicology , epidemiolog yandclinica l studie s usin g huma nvoluntee r subjects
. Wid i range s o f pollutant s knowno r suspecte d t o caus e healt hproblem s ar e studied
. Th e researc hfocuse s o nai r pollutants , wate r pollutants , toxi c substances , hazardou s wastes , pesticides , andnon-ionizin g radiation
. Th e laborator yparticipate s i nthe developmen t andrevisio no f ai r andwate r qualit ycriteri a andhealt hassessmen t document s o npollutant s fo r whic hregulator yaction s ar e bein g considered
. Direc t suppor t t o th e regulator yfunctio no f th e Agenc yi s provide di nth e formo f exper t testimony andpreparatio no f affidavit s a s wel l a s exper t advic e t o tho Administrato r t o assur e th e adequac yo f environmenta l regulator ydecision s involvin g th e protectio n o f the healt han dwelfar e o f al l U.S . inhabitants
.

F.Cordo nHueter.Ph.D . Directo r Healt hEffect s Researc hLaborator y



### il lP. 7

Abstrac t

Th e overal l objective o f thi s researc hwa s t o furthe r validat e a ® Tena xcollection/Ame s mutagenicit y preincubatio nsyste m fo r detection
o f vapor s i nambien t air . Recover y studie s fro

m Tena xwer e performe d wit hthre e vapor-phas e compound s tha t possesse da wid e rang e o f vapo r pressure s (i.e. , epichlorohydrin , methylen e chlorid e an dnitrobenzene) . Parameter s fo r detectio no f vapor * i nthe Ames/Salmonell a mutagenicit y
assay wer e investigate dan d1 2 vapor-phas e compound s wer e teste dfor mutageni c potentia l i nthe above validate dprotoco l wit hstrain s TA97 , c TA9 8 an

dTA100 , bot hwit han dwithou t Aroclor-induce dhamste r an drat live r S9 . Th e 1 2 vapor-phas e compound s testedwere : methylen e chloride , formaldehyde , trichloroethylene , ethylen e dichloride , epichlorohydrin , nitiopropane , nitrobenzene , hydroge nsulfide , butene , propylene , acetylene , an

dethylen e oxide . Result s suggeste dthat : (1 ) recoverie s o f a mode l vapor-phas e



### ® compoundfro

m Tena xresi nrangedfro m 2 2 t c 2 9 percent ; (2 ) log-phas e cell s andth e preincubatio ntechniqu e w„r e the preferre dmethod s for detectio no f vapor-phas e mutagens ; (3 ) the maximu m linea r mutageni c respons e wa s detecte dwit h1 0 minute s preincubation , inful l vials , wit h

no shakingduringpreincubation ; (4 ) solven t type an dmetaboli c activatio ndi daffec t mutageni c potential , an d(5 ) ethylen e oxide , epichlorohydrin , ethylen e dichlorid e an dmethylen e chlorid e wer e mutagenic .



### i vP. 8



### Tabl e o f Content s Pac e Foreword . Il l Abstrac t I V 1. 0 Introductio n1 2. 0 Material s andMethod s 2 2. 1 Biologica l Technique s 2 2. 2 Cheiuca l Technique s 3 3. 0 Result s andDiscussio n1 1 3. 1 Determinatio no f Cel l Typ e andAssa yCondition s fo r Detectio no f Vapor-Phas e Compound s i nth e Ames/Salmonell a Mutagenicit yAssay1 1 3. 2 Toxi c andMutageni c Potentia l o f Twelv e (12 ) Vapor-Phas e Compound s 1 9 3. 3 Recover yStudie s o f Vapor s fro mTenax®Resi n2 5 4. 0 Recommendation s fo r Futur e Studie s 2 6 5. 0 Projec t Summar y2 7 5. 1 Monthl yTas k Repor t (TR-1 ) 2 8 5. 2 Cost/Schedul e Statu s Repor t (PR-2 ) 2 9 5. 3 Cumulativ e Budge t Performanc e 3 0 5. 4 Complete dMilestone s fo r EP AContrac t 68-21-3170-08 2 3 1 APPENDI X Ra wToxicit yandMutagenicit yDdt a o f Twelv e (12 ) Vapor-Phas e Compound s i nth e toes/Salmonella Assa y

# P. 9

1. 0 Introductio n Extractabl e organi c mixture s fro m ambien t ai r particulat e matte r
ar e mutageni c inthe Ames/Salmonell a uiutagenicity assay . However , ambien t ai r vapor s have no t bee ntestedinthe Ames/Salmonell a assa y becaus e adequat e chemica l an dbiologica l technique s ar e no t presentl y availabl e fo r thi s analysis . I naddition , i t ha s bee nestimate dtha t vapor-phas e compound s (i.e. , vapor s ar e compound s tha t ar e gase s at ambien t temperatur e an dpressure ) may

be 50-fol dmor e mutageni c than ambien t ai r particulat e matter . Vapor s fro m industria l center s an d mobil e an

denergy

productio nsource s ar e potentia l healt hhazards . Chemica l an

dbiologica l technique s mus t therefor e b e develope dt o evaluat e th

e mutageni c potentia l o f ambien t ai r vapors . Thi s researc h evaluate dpur e ambien t *i r vapor-phas e compound s an dmethod s for thei r detection . Thi s projec t furthe r evaluate da Tenaxcollection/Ame s mutagenicit y preincubatio nsyste m fo r detectio no f vapor s inambien t ai r (Hughe s et al. , EMS , 1982) . Pur e vapor-phas e compound s wit ha wide range o f vapor pressure s wer e utilize dt o evaluat e the adsorption/desorptio nchar acteristic s o f thes e compound s fro m Tenaxresin . Method s for th e detectio no f vapor-phas e mutagen s ina preincubationmodificatio no f Ames/Salmonell a mutagenicit y assay wer e als o investigated .P.1 0

2. 0 Material s an

dMethod s 2. 1 Biologica l Technique s Salmonell a typhimurium strain s TA9 8 an dTA10 0 wer e suppliedb y Dr . Bruc e Ames , Departmen t o f Biochemistry , Universit y o f California , Berkeley , California . Stationary-phas e cell s wer e grow novernigh t (1 6 hours ) wit hshakinga t 5 0 RPM ; log-phas e cell s wer e grow nonthe day

o f th e experimen t b y inoculatinga fres hnutrien t brot hcultur e wit ha heav y inoculu

m o f fres hovernigh t cultur e (1:1 0 dilution ) an dshaking the cultur e for 4 hour s a t 5 0 RPM . Incubationtemperature s wer e 37° C ( + 0.5°C) . Plate s wer e incubate dfor 4 8 hours , an dcolonie s wer e counted wit hanArte x88 0 automati c cel l counter , calibrate db y comparisonwit h hand-counte dplate s an dplasti c disk s wit hknow ncolon y counts . Solvents , liqui d.in dgaseou s compound s wer e o f th e highes t qualit y available
. Th e DMS O wa s spectrophometri c grad e an dthe ethano l wa s 100 % absolut e grade . Th e liqui dtes t compound s wer e purchase dfromFishe r Scientifi c an dth e gaseou s compound s wer e purchase dfro mMatheso n Scientifi c Company . Ra t live r S 9 wa s derive dfro mmal e Sprague-Dawle y rat s andhamste r live r S 9 wa s derive dfrommal e Syria nGolde nhamsters . Bot hrat s andhamster s wer e induce dwit hAroclo r 125 4 a t 50 0 mg/k g fiv e day s befor e sacrifice
. Preincubatio nvial s containe d(pe r plate) : 50 0 (J l o f 5 % S 9 mix , 10 0 p i o f bacteria , 10 0 p i o f solven t wit htes t compound , and60 0 p i o f overla yagar . Eac hvia l couuaine dth e content s fo r thre e plates . Half

ful l vial s di dno t contai noverla yagar . Preincubatio nwa s performe da t 37° C i nseale done-dra mglas s vial s i na temperature-controlle dexposur e chambe r tha t completel ysurrounde dth e glas s via l (Isotem p , Fishe r

### P.1 1

Scientific) . Toxicit y wa s determine db y platingapproximatel y 1,00 0 colonie s o

nhistidine-suppleraentedagar . A viabilit y

indexwa s calculate db

y comparingth

e numbe r o f colonie s presen t o na dosedplat e t o a solven t contro l plate . A viabilit y

indexbelo

w 50 % (wher e greate r than50 % o f the bacteria l populatio nwa s killed ) indicatedexcessive toxicity . A

positive mutageni c respons e fo r TA97 , TA9 8 an dTA10 0 wa s define da s a t leas t a two-fol dincreas e i nspontaneou s revertant s ove r backgroundat tw

o increasingdos e levels . 2. 2 Chemica l Technique s Th e fiv

e gaseou s sample s (hydroge nsulfide , ethylen e oxide , acetylene , l-'»utene , ao dpropylene ) wer e prepare dinsolution s fo r bioassay

testing . ^ Ethanol/va s chose na s the solven t for al l samples , excep t acetylene , becaus e i t offeredexcellen t solubilit y characteristic s for thes e gases , solutionstability , eas e o f analysis , an dha s been reportedt o be relativel y nontoxi c to the Salmonell a bacteria . The ga s concentratio nineac hsampl e wa s determine db y ga s chromatographi c analysis . Standard s wer e prepare db y fillinga nevacuate d0. 5 lite r ga s bul b wit hth

e appropriat e ga s an dallowingthe pressur e t o equilibrat e to 1 atmosphere . Sample s wer e withdraw nthrougha septu m inth e bul bwit ha gas-tigh t syring e an dchromatographe dona 6 ' chromosorb10 2 packe d1/4 " glas s GC colum

nb y F I detection . The sampl e mas s injectedwa s determine d fio m th e densit y

o f the ga s at ST P a s reportedinthe literature . Duplicat e injection s wer e mad e for eachpoin t an da respons e curve o f a t leas t thre e point s wa s establishe dfor eac hspecie s (se e Figur e 2.2-1) .P.1 2



## i HYDROGEN

SULFID E M
- BUTENE 3 PROPYLENE
« ACETYLEN E 5 ETHYLEN E OXID E (X-SCAL E 2 5 UGS/DIV. )

MRS S (MICRDGRRMS I
Figur e 2.2-1 . Respons e Curve s fo r Ame s Assa yVapor-Phas e Samples .P.1 3



# CHROMATOGRAPHI C CONDITION S COLUM N - CHROMOSORB 10 2 l/«t" GLAS S PACKED CARRIE R- «i OML/MI N

NITROGEN T (INJ ) - 20 0 DEGREE S CENTIGRADE T (DET ) - 20 0 DEGREE S CENTIGRADE
HYDROGE N SULFIDE : TEMP . - 5 0 DEGREE S CENTIGRADE DETECTO R- FI D8 XE-1 2 1-BUTENE : TEMP . - 12 0 DEGREE S CENTIGRADE DETECTO R- FI D25 6 XE-l l PROPYLENE : TEMP . - 12 0 DEGREE S CENTIGRADE DETECTO R- FI D51 2 XE-1 2 ETHYLENE OXIDE : TEMP . - 12 0 DEGREE S CENTIGRADE DETECTOR; - FI D51 2 xE-1 1 

# ACETYLENE : TEMP . - 10 0 DEGREE S CENTIGRADE DETECTO R- FI D12 8 XE-1 0

## aExcssseassc ;

Bioassay

sample s wer e prepare db y diffusin gthe subjec t ga s int o the appropriat e solvent . Du e t o analysis , solubility , an dsampl e degradatio nproblem s associate dwit hGH E (glycerol:water:ethano l i c a 2:2: 1 rati o [v/v]) , ethano l wa s th e preferre dsolven t for al l the fiv e gaseou s samples , excep t acetylene , wher e aceton e wa s utilize da s th e solvent . Th e solven t wa s place di na ga s washin gbottl e fitte dwit ha frithe dcylinde r diffuse r (CorningB1770 ) andth e ga s allowe dt o bubbl e throughthe solven t for approximatel y 1 0 minutes . A

moderat e positive bac kpressur e wa s maintaine dt o enhanc e dissolution . Ethylen e oxide , 1-butene , an

dpropylen e wer e prepare da t 0° C t o increas e thei r solubility ; hydroge nsulfid e an dacetylen e wer e prepare da t ambien t temperatures . Th e sample s wer e transferre dt o Teflon-cappe dvials , maintaine da t thei r preparatio ntemperature , andimmediatel ydelivere d fo r Ame s biotesting
. Aliqrot s o f eac hsampl e wer e remove dfo r ga s chromatographi c analysis
. Analysi s o f th e sample s wa s performe do na Chromosor b10 2 packe dG C columnwit hF I detection
. Triplicat e injection s wer e mad e fo r eac h sampl e andth e concentration s determine dfro mth e mea n(se e Tabl e 2.2-2) .<9\ P.1 5



### Tabl e 2.2-2 . Summary o f Gaseou s Sample s Prepare dfo r Ame s Bioassa y

Testin g
Sampl e Hydroge n: Ethylen e < Acetylen e 1-Buten e Propylen e sulfid e

axide Concentratio n

17. 5 111. 3 31. 5 

### 1. 3 6. 3 (Mg/^ D Temp<



### c »ratur e 1 5 

### 0 2 0 0 0 (°C ) Solven t

Ethano l Ethano l Aceton e Ethano l Ethano lr « 

# i
Fo r the desorptio nstudie s o f vapor s fro m Tenaxresin , glas s cartridge s (2 1 x3 cm ) wer e loade dwit hca . 1 2 grams o f Tena xresin . Eac ho f thre e cartridge s wa s spike dwit h26 0 ngmethylen e chlorid e an d 20 0 ngepichlorohydri nusinga permeatio nsystem . Th e cartridge s wer e , store dapproximatel y 4 8 hour s a t -17° C prio r t o desorption. . They wer e
remove dfro

m storag e an

dimmediatel y

desorbe da t 250°C . Th e desorptio n apparatu s (Figur e 2.2-2 ) consiste do f glass , Teflo nor stainles s stee l surface s an

dwa s configure di nsuc ha manne r a s t o minimiz e unnecessary deadvolume . Flowin gheliu m carrie r ga s (4 0 ml/min ) wa s use dt o pas s the descrbe dmateria l througha 3-wa y valv e (positionAB ) t o a coile d1 mete r lengt ho f Teflo ntubing(1.3 5 min . ID ) whic hwa s partiall y immersedinliqui dnitroge n(LN_) . Purgingwa s continue dfor 3 0 minute s t o ensur e complet e remova l an dentrapmen t o f the volatiles . At the en d

o f thi s perio dthe LN . bat hwa s replace db y anice/H., 0 bath . Afte r equilibratio n(~

5 minutes ) the 3-wa y valv e wa s manipulate d(positionBC ) t o stopheliu

m flo w an dt o brin gthe syring e inline . Th e trapped volatile s wer e collecte din1. 0 ml Glt E an ddischarge dfro

m the syring e throug hth

e coil
. Th e GH E solutio npasse dint o a 1 ral collectionvia l whic hwa s immerse dinanice/H, 0 bath . Th e solutio nWJ S immediatel y analyze db

ypurg e an

dtrapGC wit hHal l electrolyti c conductivit y detection
. Syste man dsolven t blank s wer e prepare dandanalyze dwit h the samples . Standard s wer e prepare db yspikinp aliquot s o f vehicl e (CKK ) wit h epiclilorhydri nandmethylen e chlorid e stoc k solution s i nethanol . Thrtf- e i poin t standar dcurve s wer e determine d(o r 9 3 n g t o 31 0 n g injecte dlo r methylen e chlorid e and10 S ng t o 36 2 n g injecte dfo r t\.ithlorohyd r in
. I' I ' I P.1 7



### Ga s chromatograph

y wa s performe dona Fisher-Victoree nserie s 440 0 ga s chromatographfittedwit ha naqueou s sampl e purg e an dtrapapparatus . A 0. 5 m l aliquo t o f tue sampl e o r standar dwa s dilute dt o4. 0 mi s wit h deionized , purge dwater , transferre dt otbe purg e apparatu s an dpurge d ont oa Tena xG C trapfo r 1 2 minute s wit hnitroge ncarrie r gas . The Tena xtrapwa s the nheate dt o300° C andthe volatile s passe dont oa 6 ' 1 % SP-100 0 onCarbopa kBcolum nwit h3 1 tal/minnitroge ncarrie r flow . Th e temperatur e program wa s 60°/ 2 minute s t o220° C a t 6°/min . Th e compound s wer e detecte do na Traco r 70 0 Hal l electrolyti c conductivit y detecto r an

dthe pea kare a electronicall y integrated . Th e minimu m L0 D (limi t o f detection ) fo r epichlorhydri nan

dmethylen e chlorid e wa s 5 ng .

### ft * I n

1 m l Syring e 

### Tenon Cartridge

IMlgf

iTamp . Iy Dotorpiio n FDwvic

«

JWs y H«ou t



### LN ,wKE/M, 0 Bet h Ifot/H t 

### O Bet h

Fir.ur c2.2-2 . Srhrm.i tl co f l!,en»., ldesorp tion/vapo rcollectio n device .P.1 9

3. 0 Result s andDiscussio n 3. 1 Determinatio no f Cel l Typ e an dAssay

Condition s for Detectio n
o f Vapor-Phas e Compound s inthe Ames/Salmonell a Mutagenicit y / / Assay Parameter s investigate dfor detectio no f vapor s i nthe Ames / Salmonell a mutagenicit y assay

included : toxicit y ao dmutagenicit y testingo f styren e oxid e ( a vapor-phas e mutagen ) wit hlog - an d stationary-phas e cell - o f TA10 0 wit hthe preincubatio nandplat e incor poratio ntechniques , mutagenicit y testin j o f methylen e chlorid e i nth e plat e incorporatio nandpreincubatio ntechniques , the effec t o f headspac e volume an

ddifferen t type s o f shaking(duringpreincubation ) onthe mutageni c potentia l o f vapor-phas e mutagen s (styren e oxid e an dmethylen e chloride) . Th e effec t o f solvent s an dmetaboli c activatio no nthe i mutageni c potentia l o f vapor-phas e mutagens , an dthe effec t o f preincu batio ntim

e (frc m 1 0 t o 6 0 minutes ) a t 3 7C C onthe mutageni c potentia l

o f styren e oxid e wer e als o investigated . Th e result s fro m thes e experi i ment s wer e full y discusse di nthe progres s report s for thi s task , an d wil l be summarize dhere . Result s suggeste dtha t log-phas e cell s an dthe preincubatio n procedur e wer e the cor e sensitive techniqu e for detectio no f vapor-phas e mutagens . Two experiment s demonstrate dtha t the preincubatio nprocedur e permitte ddetectio no f styren e oxid e (SO ) mutagenicit y at dose s simila r t o thos e inthe plat e incorporationprocedure , an dlog-phas e cell s wer e
mor e sensitive t o the mutageni c effect s o f S OthanstAticn-iry-phas c cell s o f Salmonell a strai nTA1C 0 (se c Figure s 3.1- 1 an d3-.1-2) . Toxici' y
w.-» s significantl y

highe r i

nth e preincubatio nprocedure - thani nthe



### 1 1P.2 0

1.29 0

1.20 0 1.14 0 1.11 0 1.03 0 1.03 0 97 0 91 0 86 0 80 0 74 0 71 0 66 0 60 0 54 0 49 0 43 0 37 0 31 0 26 0 20 0 

### -



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- 7 4 > , 10 0 9 8 9 4 9 0 8 6 8 2 7 8 7 4 7 0 6 6 6 2

5 4 5 0 4 6 4 2 4 0 3 8 3 6 9

10020 030 040 0SO O 60 070 060 090 0 Conctntntio no

f SryrtneOnd tUg/plm ) 1.00 0
Figur e 3.1-1 . Plat e incorporatio no f styren e oxid e wit hlog

- and

stationary-phas e cell s o f Salr.one l l a strai nTAlO O (Expericier. t 2) . Symbol s are : Mutagenicit yt o stationary-phas e cell s ( • •) ; toxicit yt o stationary-phas e cell s ( 0 0) ; mu:.agcnicit yt o log-phas e ( AA) , toxicit yt o log-phas e cell s (.1 1^ . Spontaneou s background s (mea no f thro e p.-ites ) were : log-phas e cells , 22 1 revertant s and stationary-phas e cells , 20 4 revertants .P.2 1

60 070 080 0 Concentrationo lStyreneOxide(jig/plate) 1.00 0

Figur e 3.1-2 . Preincubatio no f styren e oxid e wit hlog

- andstationary

phas e cell s o f Salmonell a strai nTAlO O (Experimen t 2) . Symbol s are : Mutagenicit yo f stationary-phas e cell s ( • •) ; toxicit yo f stationary-rphas e cell s (0——0) ; mutagenicit yo f log-phas e cell s ( AA) ; toxicit yo f log-phas e cell s ( £ A) . Spontaneou s backpround s (mean o f thre e plates ) were : log-phas e cells , 27 6 revertants , andstationary-phas e cell s 26 0 revertants .



### 1 3

### plat e incorporatio nprocedur e an dlog-phas e cell s wer e mor e sensitive t o th e toxi c effect s o f S O(compar e Figure s 3.1.- 2 and3.1.-2 , respectively). " Th e highe r toxicit y i nthe preincubatio nprocedur e wit h log-phas e cell s indicate da close r associatio no f bacteri a an dtes t compound , whic hwa s on e o f the majo r advantage s o f the liqui dsuspensio n preincubatio ntechniqu e whe ntestingvapoi'-phas e mutagens . Whe nprein cubatio ntime s o f 5 t o3 0 minute s (i n5-minut e intervals ) wer e evaluated , th e maximu

m linea r mutageni c respons e o f S Owit hTAlO Owa s detecte da t 1 0 minute s (se e Figur e 3.1-3) . Aninitia l experimen t evaluate dpreincu batio ntime s fro

m 1 0 t o6 0 minute s an dresult s suggeste dtha t the mor e linea r preincubatio ntim e for vapor-phas e mutage ndetectio nwa s below 3 0 minute s a t 37° C (dat a no t shown) . Th e effec t o f headspac e volum e an dshakingmethod s onthe mutageni c potentia l o f S O i nth e preincubatio nassa ywa s als o investigated
. Log-phas e cell s o f TAlO O wer e preincubate di none-dra m vial s tha t wer e eithe r ful l o r hjlf-full
. Bot htype s o f vial s wer e preincubate dfo r 3 0 minute s a t 37° C an dshake nbythre e differen t type s o f shaker s (wrist ,

i 

### rotato r androlle r drum) . Result s wer e simila r wit heithe r ful l o r half-ful l vial s an danytyp e o f shaking ; headspac e volum e andmetho do f shakin g di dno t significantl yincreas e th e mutageni c potentia l o f SO . I naddition , result s wit hlog-phas e cell s andful l vial s tha t wer e no t shaken ; 

### produce da significantl ygreate r numbe r o f revertont s tha ndi d
anytyp e o f shaking
. Consequently , th e mos t sensitiv e metho dfo r detectio no f vapor-phas e mutagen s wa s establishe da s preincubatio nwit h log-phas e cell s i nf;1 1 vial s tha t wer e no t shake ndurin g preincubation
.

i 

### Thi s protoco l wa s utilize di nth e testin g o f th e 1 2 vap0r-ph3.s e mutagen s



### 14P.2 3

7 " »

10 0 20 0 30 0 40 0 W O 60 0 70 0 Styren e Onitfe (ug/plite ) BO O 30 0


### Figur e 3.1-3 . Effec t o f varyin g preincubatio ntim e o n th e mutageni c

potentia l o f styren e oxid e t o TAlOO ; vial s ver c ful l I and preincubate da t 37° C i n a dryvei l bat hvit hn o shaking
. Log-phas e cells , growno n th e dayo f th e ! experi=ien t wer e utilized
. Symbol s are : 0 mi n (plat e incorporatio n( ^ 0) ; 5 r,i n( • • ) ; 1 0 rr.i

n ; ( g Q) . 1 5 

### j.i n ( Ak) 

### . n o mi n ( 0 0) ; 2 5 | ( QQ) ; and3 0mi n( i 1 ) preincubatio ntime
. Spontaneou s backgroun drate s average dfrom15 0t o 200revertants/plate
.

1 5I i P.2 4

discusse di nSectio n3. 2 o f thi s report . Sinc e thes e experiment s wer e performe dwit honl yone chemica l (SO) , additiona l experiment s shoul dbe conducte dt o confir m thes e finding s wit hadditiona l Vdpor-phas e compound s
an dwit hS 9 metaboli c activation . Th e effect s o f solvent s an dS 9 metaboli c activatio nonthe mutageni c potentia l o f vapor-phas e mutagen s wa s als o investigated . S Oan d methylen e chlorid e (MC ) wer e teste dwit hTAlO Oi nth e preincubatio n procedur e (ful l vial s a t 37° C for 1 0 minute s wit hno shakingduring preincubation) , wit handwithou t the additio no f 5 % hamste r live r S S (HLI ) i nthe followingsolvents : GHE , DMS Oan dethanol . Log-phas e cells , whic hwer e regrow nfro m a stationary-phas e cultur e onthe day o f the experiment , wer e utilized . Result s indicate dtha t the additio no f S 9 inhibite dth e mutageni c potentia l o f S O andslightl yincrease dth e mutageni c potentia l o f M C (Figur e 3.1-4) . Th e effec t o f DMSO , GH E and ethano l o nth e mutageni c potentia l o f S O withou t S 9 additio ni s summarize di nFigur e 3.1-5 . Th e thre e solvent s demonstrate dsimila r mutageni c responses , bu t mutageni c activit ywa s highes t i nDMS O followe d byGHE . , Mutageni c activit ywa s depresse dbu t presen t wit hethanol . Th e magnitud e o f th e mutageni c respons e ma yb e du e t o th e abilit yo f th e solven t t o permeat e cel l membranes . Aglycerin:ethano l solven t (2: 1 rati o v/v ) mayb e preferre dove r GHE , sinc e th e additio no f wate r coul d inhibi t compoun dsolubility , andma ytherefor e inhibi t th e mutageni c respons e o f wate r insolubl e vapor-phas e mutagens . Thes e result s suggeste dtha t th e solven t syste mfo r th e Tena xadsorption/desorptio n uni t shoul db e investigate dfurthe r vit hregar dt o th e effec t tha t solvent s ma yhav e o nmutageni c potentia l o f vapor-phas e mutagens .



### 1 6P.2 5

0 5 0 10 0 25 0 50 0 Concentratio n [pg/plate ) 1.00 0

Figur e 3.1-4 . Effec t o f solven t (GHE ) andS 9 metaboli c activatio no nth e

mutageni c potentia l o f styren e oxid e an dmethylen e chlorid e wit hT.AIOO . Symbol s are : •—styren e oxid e + S9 ; A—styren e oxid e - S9 ; o—methylen e chlorid e + S9 ; A—methylen e chlorid e

- S9 . Spontaneou s backgroun dvalue s were : 15 4 revertant s wit hS 9 and15 9 revertant s withou t S9 . 

### 1 7

# .r 

# i r P.2 6

•.-: : .' J



### DMSO

GH E

0 50 ; 100 25 0 50 0 Concentratio n [/jg/plate ] 

### Ethano l

1.000

Figur e3;
. 1-5
. Summar yGrap ho f

th eTestin g o f

Styren eOxid ewit hTAlOO , Withou t S 9 Addition
. (Se eFigure s 1- 3 fo r Detail s o f IExperiment. )P.2 7

Vapor-phas e compound s als o shoul db e testedbot hwit han dwithou t S 9 addition . 3. 2 Toxi c an

dMutageni c Potentia l o f Twelve (12 ) Vapor-Phas e Compound s Th e preincubatio ntechniqu e develope dabove wa s utilize dt o tes t twelve (12 ) vapor-phac e compounds : m.-thylen e chlorid e (MC) , formaldehyd e (FM) , trichloroethylen e (TRC) , ethylen e dichlorid e (EDC) , epichlorohydri n (EC) , nitropropan e (NP) , nitrobenzen e (NB) , hydroge nsulfid e (HS) , buten e (BT) , propylen e (PP) , acetylen e (AC) , an det ,v ylene oxid e (EO) . Sample s wer e evaluate dfo r toxicit y a t five dose s befor e mutagenicit y

testingwit han dwithou t additio no f ra t live r S9 . t (Methylen e chlorid e wa s no t teste dfor toxi c potentia l becaus e previou s experiment s wit hthi s chemica l ha destablishe dthe nontoxi c doses , an d the five gase s tested[H_S , butene , propylene , acetylen e an dethylen e oxide ] wer e no t testedfor toxi c potentia l du e t o difficult y o f sampl e preparation. ) Th e ra w dat a for the toxicit y testingo f the remaining si xcompound s ar e containe di nthe Appendi xan dar e summarizedi nTabl e 3.2-1 . Formaldehyd e wa s highl y toxi c a t dose s greate r than10 0 yg/plate ; the othe r five compound s wer e les s toxic . Mutagenicit y

testingparameter s were : ?og-phas e cell s o f TA97 , TA9 8 ar.dTAlO O(regrow nonthe da

y o f the experimen t fro m a novernigh t stationary-phas e brot hculture) ; five doses , triplicat e plates/dose , an d 10 0 p i o f solvent/plate . Acetylen e va s dilute din-cetonc ; H„S , butene , propylen e an

dethylen e oxid e wa s dilutedi nethanol , an dthe remaining compound s wer e dilute dinGH E (glycerin:water:ethanol ) i na 2:12: 1 rati o ® (v/v) . GH E ha s bee nestablishe da s the solvent-of-choic e for the Tenax desorptio nunit/Ame s preincubatio nsyste m (EP A contrac t . -02-2724) .



### 19

# 5? P.2 8



### Tabl e 3.2-1 . Summar yo f the Toxi c Potentia l o f Si xVapor-Phas e Compound s

Dose s TestedNontoxi c Dose s

((jg/plate ) -S 9 +S9 C 

### b!

Formaldehyd e 1000 , 500 , 250 , 10 0 25 0 100 , 1. 0 Trichloroethylen e 10,000 , 3,333 , 100 0 33 3 1,000 , 333 , 10 0 Ethylen e Dichlorid e 1000 , 500 , 250 , 100 0 100 0 100 , 5 0 Epichlorohydri n10,000 , 3,333 , 1,000 , 3,33 3 3,33 3 Nitropropan e 10,000 , 3,333 , 1,000 , 10,00 0 3,33 3 333 , 10 0 Nitrobenzen e 10,000 , 3,333 , 1,000 , 3,33 3 3,333 ? 333 , 10 0 3 

### TA100 , triplicat e plates/dose , 200-100 0 colonie s onhistidine-suppleraented media
. j Dos e a t whichth

e viabilityindexwa s greate r than50% . j C 

### Ra t live r S 9 fro

mSprague-Dawleyrat s inducedwit hAroclo r 1254 . Lowes t nontoxi c dos e wa s chosenfor highes t mutagenicitydos e level . jCompound s wer e teste dwit h5 % mal e Syria nGolde nhamste r live r S 9 (HLI )

an dmal e Sprague-Dawley ra t live r S 9 (CSD ) an dwithou t S 9 addition . The protoco l condition s wer e preincubatio nfo r 1 0 minute s a t 37° C i nful l vial s wit hno shakingduringpreincubation . Raw dat a an

ddos e respons e graph s for the mutagenicit y testingo f th e 1 2 vapor-phas e compound s ar e containe di nth e appendix . Th e dat a
ar e qualitativel y summarize di nTabl e 3.2-2 . Methylen e chloride , ethylen e dichloride , epichlorohydri nan dethylen e oxid e wer e mutagenic . Approximat e initia l slop e value s for thes e four compound s ar e containe d c i nTabl e 3.2-3 . Criteri a for a positive mutageni c respons e onstrain s TA97 , TA9 8 an

dTAlO Ower e define da s a mutageni c respons e a t tw o increasingdos e level s tha t wa s a t leas t twic e the spontaneou s background values . Fro

m evaluatio no f the approximat e slop e values , the positive mutageni c vapor s canb e rankedfro m hight o lo

w a s follows : Ethylen e oxid e > Epichlorohydri n> Ethylen e dichlorid e > > methylen e chloride . Ethylen e oxid e an depichlorohydri nwer e strongdirect-actin gbas e substitutio nmutagens , ethylen e dichlorid e wa s a moderat e direct-acting bas e substitutio nmutagen , andmethylen e chlorid e wa s a wea kdirect actin g jframeshif t mutagen . Additio no f S 9 di dno t increas e nutagcni c activity , andi nth e case s o f ethylen e dichlorid e andethylen e oxide , actuall ydecrease dmutageni c activit ysignificantly
. I t shoul db e note dtha t hightes t concentration s o f th e gaseou s compound s (H 0 S , butene , propylene , acetylen e andethylen e oxide ) wer e difficul t t o obtai ni nliqui dsuspension
. Th e highes t mutagenicit ytes t dos e wa s limite db yth e solubilit yo f th e tes t ga s i nth e tes t solven t (aceton e fo r acetylen e andethano l fo r th e othe r fou r gases) . Fo r



### 2 1P.3 0



### Tabl e 3.2-2 . Mutagenicityo f Twelve Vapor-Phas e Compound s Vapo r Compoun

d TA9 7 TA9 8

-S 9 RL I HL I -S 9 RL I HL I TAlOO -S9 RLI HL I Methylen

e Chlorid

e (GHE ) Formaldehyd

e (GHE ) Trichloroethylen

e (GHE ) Ethylen e Dichlorid

e (GHE ) - Epichlorohydri n(GHE ) •• * Nitropropan

e (GHE ) Nitrobenzen

e (GHE ) H 2 

### S b

### (ETOH ) Butene b

### (ETOH ) Propylene 5 

### (ETOH ) Acetylen e (acetone ) Ethylen e Oxide b

### (ETOH ) V * W + 

### U +

+• • •• • •••- *



### + + Preincubation , 37°C , 1 0 minutes , ful l vials , no shaking , Isotcmp . b . Ga s a t roo

mtemperature . Ranking

TA9 7 TAlO O TA9 8 legend :

W + 

### 2-3 " 2- 3 2- 4 +

3- 5 3- 5 4-1 0 + •



### 5- 8 5- 8 10-2 5 ++ •



### > 8 > 8 >2 5 -Mutageni c ratio s a t greates t response . vrevertant s vit hsarr>le . Mutageni c rati o •

» -?,
. : ,—*— — s 

### V

rtvort.int s insolventP.3 1



### Tabl e 3.2-3 . Approximat e Initia l Slop e Value s for Mutageni c Vapor-Phas e

Compound s

TA9 7 TA9 8 TA10 G -S 9 RL I HL I -S 9 RL I HL I -5 9 RL I HL I Methylen e Chlorid e - 0.0 5 0.0 8 0.0 8 - Ethylen e Dichlcrid e ----- - 0.6 0 - * Epichlorohydrin e 0.9 2 0.8 6 0.8 2 - - 0.0 3 2.3 5 2.0 1 1.6 3 Ethylen e Oxid e - - - - - - 5.1 2 - 3.1 8



### 23

### example , the highes t tes t dos e for buten e wa s 13 0 pg/plate , for acetylen e
wa s 3 1 pg/plat e an dfo r ethylen e oxid e wa s 11 1 pg/plate . Propylen e "a s solubl e i nethano l an dthe highes t dos e obtaine dwa s 62 6 pg/plate . H. S
wa s solubl e i nethano l a t a highdos e o f 1,75 0 |Jg/plate . Additiona l experiment s shoul db e conducte dwit hthes e vapor s i nthe gaseou s state , wher e muc hhighe r dos e level s canb e attained . Furthe r testin gwit h ethylen e oxid e shoul dprov e beneficia l i nthe compariso no f mutageni c testin gprocedure s for vapor-phas e mutagens . Ethylen e oxid e i s a ga s a t
roo m temperature , an

di s als omutageni c i nliqui dsuspension . Compariso n
o f dat a o f ethylen e oxid e insolutio nan dif : the gaseou s stat e shoul d provid e aninsigh t a s t othe effect s o f liquificatio n(a s performe dwit h the Tena xdesorptio nunit ) onthe mutageni c potentia l o f gases . I t may b e possibl e t ocoo l the vapor s afte r Tena xdesorptio nan dexpose dthe

m directl y

t othe bacteria l tes t system .

### 3. 3 Recover y Studie s o f Vapor s fro m Tena xResi n Recover y

o f epichlorohydri nwa s 22 % an d29 % fo r tw

oo f the spiked cartridges , bu t wa s no t detecte di na third . I na previou s stud y (EP A contrac t No . 68 - 02-2724 ) o f tw ocompound s chemicall y relate dt o epichlorohydrin , simila r recovery wa s observe d(ethylen e oxide , 20 % an d propylen e oxide , 28%) . Methylen e chlorid e wa s no t detecte di nan y o f th e thre e samples . Th e poo r recovery

o f thes e compound s i s probabl y du e t osevera l complementin gfactors . Epoxide s wil l readil y hydrolyz e t oglycol s in solution s o f acidi c pH(GHE ha s a p Ho f 5.0 ) o r a t elevate dtemperature s i nthe presenc e o f moisture , thu s some los s o f epichlorohydri nmay be expected . Th e failur e t orecove r methylen e chlorid e may b e du e t opoo r solubilit y

i nthe vehicle . Fro m thes e observations , i t i s suggeste d tha t pur e ethano l b e useda s th e recovery vehicl e for cryotrappe d volatiles . Som

e change s indesorptio nan dpurg e time s coul dbe implementa l infutur e studie s t oincreas e overal l recovery . Th e recovery

stud y o f nitrobenzen e wa s no t completed . Severa l problem s wer e encountere dwit hth e G C analysi s o f thi s compoundinthe GH E vehicl e an

danacceptabl e limi t o f detectio nwa s no t obtaine dfor a n environmentall y

realisti c sample .



### 2 5P.3 4



### 4. 0 Recommendation s for Futur e Testin g 1 . Evaluat e plasti c bag s a s exposur e chambers . 2 . Tes t vapor-phas e compound s wit hthe new Salm^.°ll a teste 

### strain , TA102 , whic hi s effectiv e indetectin go.idative mutagens . 3 . Radiolabe l vapor-phas e compound s t > evaluat e the amoun t o f vapo r tha t i s actuall y absorbe db

y th e bacteri a an

dtes t system . 4 . Evaluat e th s effec t tha t solvents , shakingan* amoun t o f headspac e i nth e preincubatio nvial s have o nthe mutageni c potentia l o f poten t vapor-phas e mutagens .



### 26P.3 5



### 5. 0 Projec t Summary 5. 1 Monthl y

Tas kRepor t (TR-1 ) 5. 2 Cost/Schedul e Statu s Repor t (PR-2 ) 5. 3 Cumulative Budge t Performanc e 5. 4 Complete dMilestone s for EPA Contrac t 68-21-3170-08 2

2 7P.3 6



## MONTHL YTAS KREPOR T(TR-1 )

FO R PHOJECT

S SUPPOHTE O C

Y INDUSTRIA LENVIRONMENTA LRESEARC H LABORATOR Y OFFIC E O FRESEARC H &DEVELOPMENT/ENVIRONMENTA LPROTECTIO N AGENCY

RESEARC H TRIANGL E PARK . NJRT H CAROLIN A2771 1 

### Validatio no f

Chemica landBiologica lTechnique s fo rEvaluatio no f Vapor s i n TOATDTITL

EAmbientAir/Mutaeenicit vTestin go f TVPIV P

### (,?. y a p 

### ,^-pv, n g o

### r^^., ^ . . COMPANY,nivisin

wResearc hTriangl eInstitute ,Chemistr yandLif eScience s Grou p

CONTRACTOR' S TAS KLEAOE R (FO R THI S TO/TD )

NAME . 

### Thoma

s J . H-ighe s TITL EGeneti cToxicologis t «ni«« «RTI ,Bldg . 3 ?nnn E541-614 8
Researc hTriangl ePark ,N C /ipeon F 2770 9
EPATAS:' . OFFICE R (FO R THI S TO/TO )

_ 

### Dr . Larr vClaxto n CONTRACTORS PROJEC TMANAGER(FO R OVERALL CONTRACT )

NAM E Dr . FnrPs tMivn n TITL E Manage r 

### AnnnFS S RTI/PCED ,Bldg . 9 PHON E

### 541-591 7
Researc hTriangl ePark , N C ?IPCOD

E

### ?77n o EPAPROJECTO?FICE R (FO R OVERAL LCONTRACT ! Alic eD . Cagno n



### 6, 8 2 ,113 , 1, 7 CONTRAC TNUMBE R 

### 59 8 

# . ° 0,8, 2 , , M M D D YY, , 0 , 6 3_o0

_ 8 - 3 

# 0

TO/T D NUMBE R t>. POR TPERIO D CNOIN C OAT E TAS KSTAR TOAT C 10/15/8 2
W « , TrnaT , 06A30/8 3 59 8 59 8 CUMULATIV E MANHOUR S EXPENDE D T O LIAT C CURHENTTAOCE T ESTIl.'iT' . A T COW>l.'.TiO N VARIANC E A TCCi'UlIlO N PF'.OGHES S DESCRIPTIO N A3. ' .'RACT : \% (KEYPUNCHE D AN O PRINTEO'I N TH E IERL/RT P MONTHL YSTATU S REPORT. ) 1 0' 1 Result s suggeste dthat : (1 ) recoverie s o f a | 02 | mode l vapor-phas e conpoun dfro mTena xresi n [~QT ] range dfro m2 2 t o 29% ; (2 ) lop-phas e cell s an d | 04 | th e preincubatio ntechniqu e wer e th e preferre d | 05 ) method s fo r detectio no f vapor-phas e mutagers ; 

### 7 7 

# > [ :t

- i



### 06 (3 ) th e maximu mlinea r mutageni c respons e wa s 

### 07 0 8 detecte dwit h1 0 minute s preincubation , i n ful l vials , wit hn o shakin g durin g preincubation ; C9 l (4 ) solven t typ e an dmetaboli c activatio ndi d [ 10 | effec t mutageni c potential , an d (5 ) ethylen e | n | oxide , epichlorohydrin , ethylen e dichlorid e [12 ] an dmethylen e chlorid e wer e mutagenic
. i t « S b
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### ANOT E T O TH E AUTHOR : UltTCC-WrttTl.liOSMtl'M C s«'i;:ii«. («o i -;.it-f.i 1 3 AV2: 3 L. km

'e l ISlLC&.i, (1 1 Tti ! JtC'l l l»»l? l K'I.W I I*II«*!:UI M i U i TH | tuif.«-'.\.i;<( a l*»i u «•!» •»f , Il l C«U.S--IOl l l«l>r . v>t»»i ulii. i (li^ii^r^illil'M^i j
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MATERIA L WHIC H RUN S OVE R 1 H E I J LI N tLIMI TWIL L I' L THUfi C A I f. O

THI S I'nB M I S V

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t. ir. TH E COMPREHENSIV E PROGRES S DESCRIPTIO N RtCJwItAC D O *TH *I-" " POL'J.'C TOFH:tf l

FO R US E BRANC H CHIE F B YINITIALS : ItT.L/HT P EPAinrp i 30 7 1

. INCLUD E A S MAJO R ITE M I N I E RL.'UT P ?'0NT111

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. PROJEC

TREQURE S TO P f.'AMGEI.'E M AHMiilO:;

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. Vt S CZ3 N 0 C D 

### 2S | Reproduce d Iro m < L

. ^COST/SCHEDUL E STATU S REPOR T(PR-2 )

_Researc h Triangl e Institut e ,, . , . , „„ Ar , „„ . 24,96 4 Contracto rname : Estimate d contrac tcos t, » ' . r > , „ , (excluding feel EP Aprojec t»»ir„ - Pr
- Lfirr y"axto n M M D D YY 6M 0 . 2 

### 3 , 1 |7i P

Cont rje tfJo . 

# k

.^ l i2 

# Ei I UL i i i 

# S 18 1 C 1 3 Thoma s J . Hughes , Geneti c Toxicol . Contracto rprojec tmanage rname , titl e Signatur e 1 /

(J

Dat e
T.vA/71 ) No . En d o l reportin g perio d Performanc e data * ( I I Wor k breakdow n structur e

Na . Nam e Chemica l validatio n Ami ; s validatio n Mutagenicit y studie s Report s Contrac t Cumulativ e cos tt o dat e (SlOQO's ) Budqet' d costs (2 1 Wor k schedule d (BCWS I 6. 0
9. 0
9. 0
0. 7 0. 5

Genera l an d administrativ e Managemen tresev r (3 ) Woi k p-Pilo'mer l (DCWP ) 6. 0
8. 8
9. 0
0. 7 0. 5 Actua l cost t

o l wor kpeilorme d (ACWP ) 

### 6. 0
8. 8
9. 0
0. 7 0. 5 Varianc e

(51 Schedul e

0 0 (6 )

Cos t

0 0

^C Cos ta tcompletio n (SlOOO's )

(7 ) BudQ-Me d 

### 3. 4
5. 7
11. 5
2. 0 2. 4 (8 ) ,

Lates t revise d estimat e



## F T (9 )

Varianc e +2. 6


### +3. 1
-2. 5
-1. 3 -1. 9

17(23 ?-

1 ? 5 Tota l

^excluding

Ice) 2 C 27 2 1 ? ] ia]}\

17 J3JJ 4 a^l C 1 7 3 9 Sli-.v

•0 4JJ4 4 4 1 4 44 7« t4 1 J J 1 4 

## rI. I DSU O Ill l 

## F T c 34 I tU it I I t f g 7«7 7 7 | 

# i

a AI I cost s are exclusiv e o l lee .«,-«.-•. .



### - . " "

5 3 Cumulativ e Budge t Performanc e (Jun e 30 , 1983 ) EP A Contrac t No . 68-02-3170-08 2



### 2 6
2 4

2 2
2 0
1 8
(1000s ) 1 6



### 1 4
1 2

1 0
8

6


### 4 

# r 

# "7 / / / / / / / / 

# r/ / / / / / / 

# ? / / / / / 

### / / / / ; / / / / / / / / / / /

i/ 

### i/ 

# i / 2 

# 7 i /

"' " "N" " D J F MAMJ 198 2 198 3

Tim e

3 0 .. . ,

i
i

i

i

i

•

i 

### i



## i

!

1



### !

j

1


### i

### 5. 4 Complete dMilestone s for EP A Contrac t 68-21-3170-08 2

Jun e 30 , 198 3 P.3 9



### M l Wor kPla nsubmitte d M 2 Projec t organizationa l meetin gwit h EP A Projec t Office r M 3 Chemica l validatio nstudie s starte d M 4 Ames/preincubatio nstudie s started M 5 Ames/preincubatio nstudie s complete d M 6 Compound s teste dfor mutagenicit y i n preincubatio nassay M 7 Chemica l validatio nstudie s complete d M 8 Fina l Repor t complete d Dat e Planne d 10/21/8 2 10/28/8 2
11/1/8 2 11/1/8 2 1/15/8 3 1/15/8 3 t o 5/30/8 3 5/30/8 3 6/30/6 3 Dat e

Achieve d 10/19/8 2 10/28/8 2
11/1/8 2 11/1/8 2 2/4/8 3 3/18/8 3
5/22/8 3 6/30/8 3



### 3 1P.4 0

Appendi x
Raw Toxicit y

an dMutagenicit y

Dat a o f Twelve (12 ) Vapor-Phas e Compound s inthe Ames/Salmonell a Assay



### 3 2P.4 1



### Tabl e o fContent s Pajtje Compute r Legend3 4 Toxicit y

Dat a Toxicit y

o f Formaldehyd e (FM ) 3 6 Toxicit y

o f Trichloroethylen e (TRC ) 3 9 Toxicit y

o f Ethylen e Dichlorid e (EDC ) 4 2 Toxicit y

o f Epichlorohydri n(EC ) 4 5 Toxicit y

o f Nitropropan e (NP ) 4 8 Toxicit y

o f Nitrobenzen e (NB ) 5 1 Mutagenicit y

Dat a Mutagenicit y

o f Methylen e Chlorid e (MC ) 5 4 Mutagenicit y

o f Formaldehyd e (FM ) 6 6 Mutagenicit y

o f Trichloroethylen e (TRC ) 7 8 Mutagenicit y

o f Ethylen e Dichlorid e (EDC ) 9 0 Mutagenicit y

o f Epichlorohydri n(EC ) t 

### 10 2 Mutagenicit y

o f Nitropropan e (NP ) 11 4 Mutagenicit y

o f Nitrobenzen e (NB ) 12 6 Mutagenicit y

o f Hydroge nSulphid e (HS ) 13 8 Mutagenicit y

o f Buten e (BT ) 15 0 Mutagenicit y

o f Propylen e (PP ) 16 2 Mutagenicit y

o f Acetylen e (AC ) 17 2 Mutagenicit y

o f Ethylen e Oxid e (EO ) 18 6



## 3 3P.4 2

Legen dfo r Compute r Outpu t

EX P DAT E = Dat e o f the experiment . Tes t typ e = Plat e incorporation , spot , preincubation , o r tga r wel l tes t Dilutio n= Microliter s o f S 9 i non e m l o f S 9 mi x Mixtur e = Microliter s o f S 9 ni xpe r plat e Chemica l = Cod e fo r chemica l teste d Strai n= Salmonell a strai nuse d Plate d= Microliter s o f S 9 mi xplate dfo r sterilit y plat e Technicia n= Cod e for th e technicia nwho performe dthe wor k Contrac t No . = Contrac t numbe r o f projec t Activatio n= Cod e numbe r fo r th e hatc ho f S 9 mi x

Blan k fo r testin g withou t S 9 Batc h= Cod e fo r th e strai nbatc h Colonie s = Numbe r o f colonie s o nS 9 sterilit yplat e

Generall yblan k i f S 9 wa s steril e S05 ^ = Solven t (Dimethylsulfoxide )
P = Positiv e control s P-0 1 = Sodiumazid e P-0 2 = 9-Aminoacridin e P-0 3 = 2-Nitrofluoren e P-0 4 = 2-Aminoanthracen e ST D DE V

= Standar ddeviatio no f replicat e plat e count s Q/ C = Qualit ycontro l column A= Acceptable , i.e. , withi nth e range s specifie dfo r eac hprojec t N/ A= No t acceptabl e VR= Viabilit yratio , th e rati o o f survivin g colonie s wit hsampl e t o th e survivin g colonie s o f th e solven t contro l TO X= Toxicit y- a nasteris k appear s i nthi s columnfo r th e lowes t dos e wit ha viabilit yrati o o f 0. 5 o r greate r

(continued )



### J iP.4 3



### Legendfor Compute r Outpu t (completed )

M R= Mutageni c rati o- the rati oo f the numbe r o f revertant s wit h sampl e ove r the numbe r o f revertant s wit hthe solven t contro l ME C = Minimu

m effectiv e concentration , the lowes t dos e wit ha M Ro f 2. 0 o r greate r fo r TA9 8 an dTAlOO , an

d3. 0 o r greate r fo r TA1535 , TA153 7 o r TA153 8
Pleas e not e tha t fo r the outagenicit y data , th e positiv e control s an dthe sample s ar e i nunit s o f micrograms/plate , whil e th e solven t control s ar e i nunit s o f microliters/plate . 

### V

3 5TOXICIT YO FF M -TAlO O P.4 4

TOXI C EX P DATE : TES T TYPE : DILUTION : 

### MIXTURE : I T Y

03288 3 0 5 CHEMICAL : F M STRAIN : TAIO O 

### PLATED = TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : 6ATCH : C27 3 COLONIES =
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T B

G PLAT E B I COUN T PG PLAT E

COUN T 

## c : B G AVERAG E COUN T STDDE V

COUN T 

### V

R T O

S l 9 9 0.C 0

1.0 0 ICO.0 0 250.0 0 500.0 0 1000.0 0 25 6

45 1 22 4 14 3 0 49 5 17 4

46 8 24 1 0 0 39 1 36 0

53 5 24 4 14 9 0 12 3 263. 3

484. 7 236. 3 97. 3 0 . 0 336. 3 

### 93. 2

44. 4 10. 8 64. 3 O. C 191. 9 1. 0

1. 8 0. 9 0. 4 o.o : 1. 3 TOXICIT Y EX P DATE : 03288 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : K2 0 MIXTURE : 50 0 CHCMICAL : F M STRAIN : TAIO O 

### PLATED : 1C 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : CSDC0 2 BATCH : C27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E B : COUN T PG PLAT E c :

COUN T B

G AVERAG E COUN T STDDEV

COUN T 

### V

R TO .
S l 9 9 0.G 0

1.C 0 100.0 0 250.0 0 500.0 0 1300.0 0 25 6

31 0 25 1 15 C 2 1 0 17 4

35 0 27 5 10 9 9 0 36 C

30 5 33 6 15 2 8 C 263. 3

321. 7 287. 3 137. 0 12. 7 0. 0 93. 2

24. 7 43. e 24. 3 7. 2 O. t 1. 0

1. 2 1. 1 0.5 i 0. 0 0. 0P.4 5



### R E V E R T A N T C 0 U N T S=SOLVEN T PsPOSITIV E N=ANTHRAKIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM=F M STRAIN:10 0 DATE:03288 3 ACTIV = ACT*:0 5 PLO T O F AVGCOUNTOOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIN D i i 550. 0 •

! i 500. 0 •

450. 0 •

400. 3 •

350. 0

300. 0 •

250. 0 •

200. 0 •

150. 0•

1C0. 0

5 0 . 0 •

0 . 0 • 

### 1 0 IC C DOS E I NMICF.OGPAH S 

### i:o o i : J I



### 3 7r t 

### ^



## v r F T A N T C 0 U N T UAit-03288 3 ACTIV=CSD00 2 ACT*=O E

i i 330. 0 •



### ; t i 300. 0 •

270. 0 •

240. 0 •

210. 0 •

180. 0 •



### 150. 0•

120. 0

90. 0 •

60. 0 •



### 30. C

0. G 

### PLO T O F AVGC0UNT«DOS E SYMBO LI S VALU EO F SPIN D



### 1 0 IO

C 10C 0 1 P Ci DOS EI N

MICROGRAM S

### P.4 7



### # TOXICIT YO F TR C - TAlO O

TOXI C EX P DATE : TES T TYP E OILUTION : MIXTURE : SOLVENT / POSITIV E S l 9 9


### i I T Y

03268 3 : 0 5 • •

DOS E LEVE L 0.0 0 100.0 0 333.0 0 000.0 0 33d3.G 0 10000.0 0 CHEMICAL : TRC

STRAI N PLATED : : TAlO O -TECHNICIAN : LG M PLAT E A : COUN T B G 

### 25 6 41 0 41 0 15 1 l b 1 7 PLAT E B :

COUN T P G 

### 17 4 33 2 36 7 20 3 0 5 2 CONTRAC T NO. :

ACTIVATION : BATCH : C27 3 COLONIES :

PLAT E C : COUN T BG 

### 36 0 3C 2 44 6 22 1 0 2 2 AVERAG E

COUN T 263. 3 348. 0 407. 7 191. 7 

### 5. 3 30. 3 •1914fc2

ST DDE V COUN T 93. 2 55. 7 39. 6 36. 4 

### 9. 2 18. 9 

### :

, ! i V R
1. 0 1. 3 1. 5 0. 7 0. 0 0. 1 T O

TOXICIT Y EXF OATE : 03288 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE = 50 0 CHEMICAL : TRC STRAIN : 

### TAlO O PLATED : 12 0 TECHNICIAN : L'G

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : 

### CSD0C 2 BATCH : C27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E COS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : B G PLAT E B : CCUN T ? G PLAT E

COUN T 

## c :

P G AVERAG E COUN T ST DDE V

COUN T 

### V

R TC )

- 1 9 9 C O O

ICC.C O 333.0 0 100C.C 0 3333.C O KOOC.C O 25 6

11 9 42 9 5 1 0 0 17 4

36 5 43 6 18 7 0 0 36 C

41 0 36 3 4 6 

## c 0 263. 3

29F. C 416 . C 94. 7 0. 0 0. 0 93. 2

156. ^ 2*.8 80. 0 0. 0 0. 0 1. 0

1. 1 1. 6 0. 4 0. 0 

## o. e

### ' I ' ! P.4 8



### S=SOLVEN T P=POSITIV E N=ANTHRAMIN E W/ OS 9 »:TES T COMPOUN Dj C0N=19148 2 , CHEM:TR CSTRAIN:10 0 DATE=0328& 3 ACTIV : ACTX=05 ]

PLO T O F AVGCCUNToDOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN Dj

R E V r 

### R T A f j 

### T C 0 

## u u 

### T 450. 0 •

400. 0 • !

350. 0 •

300. 0 •

250. C •

200. C •

150. 0 •

100. C •



### 50. 0 •

0. 0 • 1 0 . - 4 - < 

### IO C 1PC 0 . - yyy . 

### 1 0 0 c DOS E I NMICROGRAM S

### S=S0LVEN T P:PCSITIV EN:ANTHRAMIN EW/ OS 9 *:TES T COMPOUN D

C0N:19148 2 CHEM:TR CSTRAIN=10 0 DATE:03286 3 ACTIV:CSD0C 2 ACT*:0 5 PLO T O F AVGCOUNT«DOS E SYMBO LI S VALU EO r SPIN D P.4 9

R E V E R T A N T C 0 

### u N T 450. 0 •

400. 0 •

350. 0 •

300. 0

250. C •

200. 0 «

•

150. 0•

100. 0•

50. 0 •

O. C • 

### 1 0 IO C DOS EI N

MICROGRAM S 10C 0 COO !



### 4 1TOXICIT YO FEC C - TAlO O P.5 0

TOXI C EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : 

### MIXTURE = I T Y

03288 3 0 5 CHEMICAL : ED C STRAIN : 

### TAlO

O PLATED : TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. :

ACTIVATION : BATCH : 

### C27 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV

E DOS E LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E e : 

### COUNT B

G PLAT E C : COUNT P

G AVERAGE COUN T ST OOE V COUN T V

R TO X
S l 9 9 0.0 0

50.CO 100.0 0 250.0 0 500.0 0 1000.0 0 25 6

48 3 46 7 34 7 38 8 32 7 17 4

48 4 53 0 15 4 34 2 26 9 36 0

42 7 37 5 36 4 40 4 3 4 3 263. 3

464. 7 457. 3 288. 3 378. 0 313. 0 9 J . 2

32. 6 78. 0 116. 6 32. 2 38. 9 1. 0

1. 8 1. 7 1. 1 1. 4 1. 2 TOXICIT Y EX P DATE : 03268 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 50 0 CHEMICAL : ED C STRAIN : TAIO C PLATED = IC O TECHNICIAN : LG M 

### CONTRAC T NO. : 19148 2 ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : C27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLATE

COUN T A : 

### P G PLAT E COUN T B : 

### BG PLATE COUN T 

## c : PG AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T V

R TO X
S l 9 9 

## o.c o

5C.0 0 100.C O 250.0 0 500.0 0 1300.0 0 25 6

41 0 42 4 44 0 50 6 30 8 17 4

42 8 46 2 36 5 44 2 23 4 36 0

45 7 39 2 56 7 43 2 263. 3

375. 3 447. 7 399. 0 505. 0 324. 7 9J. 2

76. 2 20. 6 38. 0 

### 62. 5 100 . c 1. 0

1. 4 1. 7 1. 5 1. 9 1. 2

42

## ff P.5 1

" | • i



### S:S0LVEN T P:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM=ED C STRAIs:10 0 DATE=0328e 3 ACTIV : ACT«:Q 5

PLO T O F AVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

R E V r R T A N T C 0 

## u r , T I I 

### 550. 0 • ! • 500. 0 • ! i i 

### 450. 0 •

400. 0 •

350. 0 •

300. 0 •

250. 0 •

200. 0 •

150. 0 •

.1 0 0. 0 •

50. 0 •

0. 0 • 

### 1 0 IPO 130 0 1 CC C DOS E INMICROGRAM S



### 4 3S=SOLVEN T 

### P:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 *=TES T COMPOUN D

C0N=19148 2 CHEM=ED CSTRAIN=10 0 DATE:03288 3 ACTIV:CSD00 2 ACT*:0 5 PLO T O F AVGCOUNT*DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D!

P 

### r V r R T A N T C 0 

### u N T 55fr» « •

500. 0 •

450. 0 •

400. 0 •

350. 0 •

i i ! 3CC. 0 •

250.. 0 •

200. 0 •

150. 0•

100. C •

50. 0 •

0 . 0 • 

### 1 0 IO C DOS E I N

MICROGRAM S 100 0 I I 300 0



### 44

### TOXICIT YO F E C - TAlO O 

## P.5 3

TOXI C EX P DATE : TES T TYP E DILUTION ^ MIXTURE = SOLVENT / POSITIV E S l 9 9 I T Y

03288 3 : 0 5 • • CHEMICAL : E C

STRAIN : PLATED = TAlO O TECHNICIAN : LG

M DOS E PLAT E A : LEVE L C

C 0.0 0 100.0 0 333.0 0 1000.0 0 3333.0 0 10000*0 0 TOXI C EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : MIXTURE : I T Y

03288 3 

## : cs I : 

### 2 0 50 0 )UN

T B G 25 6 26 7 37 5 36 9 42 5 8 0 PLAT E B :

COUN T BG 17 4 55 4 53 2 3* 2 53 7 12 4

CHEMICAL : STRAIN : PLATED : TAlO O

ICO TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. :

ACTIVATION : BATCH : C27 3 COLONIES :

PLAT E C : COUN T B

G 36 0 43 3 52 3 50 2 59 9 16 7 AVERAG E

COUN T 263. 3 41B. 0 476. 7 404. 3 520. 3 123. 7 CONTRAC T NO. : 191*8 2

ST DDEV COUN T 93. 2 144. 1 88. 2 85. 7 88. 2 43. 5 19148 2 ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : C27 3 COLONIES : V R
1. 0 1. 6 1. 8 1. 5 2. 0 0. 5 

### TC X

SOLVENT / DOS EPLAT EA : PLAT EB : POSITIV ELEVE LCOUN T B GCOUN T B G 

### Sl 0.0 0

100.0 0 333.0 0 1000.0 0 3333.0 0 10000.0 0 25 6

46 3 39 1 62 4 68 3 0 17 4

53 3 30 4 43 8 74 5 0 PLAT E COUN T 36 0 40 5 33 7 45 0 62 4 0 

# c : B G AVERAG E COUN T 263. 3 467. 0 3«4. 0 504. 0 6c4. 0 0. 0 ST DDEV

COUN T 93. 2 64. 1 43. 9 104. 1 60. 5 0. 0 

### V

R
1. 0 I. P 1. 3 

# 1. ° 2. 6 O. C 

### TO X

A 5

### P.5 4

S = SOLVEN TP:P0SITIV E N = ANTHRAMIN E U/ O S 9 *= T E S TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:E C STRAIN:10 0 DATE:Q3288 3 ACTIV = ACTX=0 5 PLO TO F AVGCOUNT«OOS E SYMFO L I S VALU E O F SPIN D
i I 550. 0 •

! | ! 500. 0 •

» ! <»50. 0 •

400. 0 • 

## ! ! i 350. 0 •

!

300. 0

250. 0

200. 0

150 . C

100. 0

50. 0



### o . e 

### • 

## 10u o
DOS E I N

MICROGRAM S IC'J W 1000 3



### 4 6P.5 5



### S:SOLVEN T P:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 «:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:E CSTRAIN=10 0 DATE=03288 3 ACTIV=CSD0C 2 ACTX=C 5

PLO T O F AVGCOUNT*DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

R r V E R T A N T C 0 U N T 900. 0 •

! i i ! 800. 0 •

700. 0 •

600. 0 •

500. 0 •

400. 0 •

300. 0 •

200. 0

1CO. O •

0 . 0 • 

### 1 0 10 0 DCS E I N

MICROGRAM S 13C 0 1 C OO C



### 47

### P.5 6



# r- TOXICIT YOF NP - TA10 C

TOXI C EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : MIXTURE : I T Y

03288 3 

### 0 5 • CHEMICAL : N P

STRAIN : TAIO O PLATED : TECHNICIAN : LGM CONTRAC T NO , ACTIVATION : BATCH : 

### C27 3 COLONIES : 1914E 2

SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG E STDDEV POSITIV E LEVE L COUN T BGCOUN T BGCOUN T BGCOUN T COUN T S l 9 9 0.0 0

100.0 0 333.0 0 1000.0 0 3333.0 0 10000.0 0 25 6

47 8 47 9 36 5 19 0 27 7 17 4

43 1 38 7 46 0 23 4 22 5 36 0

39 6 30 5 28 3 32 6 24 5 263. 3

435. 0 390. 3 369. 3 250. 0 249. 0 93. 2

41. 1 87. 0 68. 6 69. 4 26. 2 

### V

R
1. 0 1. 7 l. S 1. 4 0. 9 0. 9 

### TO X

TOXICIT Y EX P DATE : 03288 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : SO O CHEMICAL : N P STRAIN : 

### TAlO O PLATEC : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : C27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E S l 9 9 DOS E

LEVE L CO O IOC.0 0 333.3 0 1000.0 0 3333.0 0 10000.0 0 PLAT E A !

COUN TB

C 25 6 49 1 39 3 40 1 46 2 6 2 PLAT E e :

COUN T BG 17 4 30 9 47 5 33 4 39 6 7 5 PLAT E

COUN T 36 0 39 3 50 8 44 5 35 6 7 6 

## c : F G AVERAG E COUN T 263. 3 396. 7 458. 7 3 = 3. 3 404. 7 77. 7 STDDEV

CCUN T 9». 2 91. 2 59. 2 55. 9 53. 5 3. 8 V

R

I. C 1. 7 1. 5 1. 5 0. 3 TO X

### P.5 7

S:SOLVCN T P:POSITlV E K:&NTHR4MIN E U/ OS 9 .:TES T CC-POUN D C0N:l t 

### ?148 2 CHEM:N P STRAIN:10 0 CATE=03288 3 ACTIV = ACTx=0 S

PLO T O F AVGCOUNT*DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D
450. C •

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350. 0

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### P.5 8

S:SOLVEN TP:PCSITIV E N=ANTHRAMIN E U/O S 9 *:TES TCOMPOUN D C0N:19l4-8 2 CHEM:N P STRAIN=10 0 DATE:03268 3 ACTIV:CSD00 2 ACT*:Q 5

300. 0

250 . C

200 . C

150. C

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50. 0 • ! PLO TO FAVGCOUNT«DOS E SYMPO L I S VALU E OFSRIN D
450. 0 •

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MICROGRAM S 100 3 1 C CC C



### 5 0

### P.5 9

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TOXI C EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : MIXTURE : I T Y

03268 3 

### 0 5 • • CHEMICAL : N B

STRAIN : TAlO O PLATEC : TECHNICIAN : LG M
SOLVENT / DOS E PLAT E A I PLAT E B : POSITIV E LEVE L COUN T BGCOUN T B G CONTRAC T NO. : 19148 2 ACTIVATION : BATCH : C27 3 COLONIES :

S l 9 9 0.0 0

100.C O 333.0 0 1000.0 0 3333.0 0 10000.0 0 T O XI C I T Y EX P DATE : 03288 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : 50 0 25 6 25 7 36 7 15 1 17 9 17 4

24 3 30 2 21 8 23 0 PLAT E C :

COUN T B G 36 0 0 0 17 b 15 4 AVERAG E

COUN T 263. 3 166. 7 223. 0 181. 7 187. 7 ST DDE V

COUN T 93. 2 144. 5 195. 6 

### V

R
1. 0 0. 6 

# o.e 33. 9 36. 7

CHEMICAL : N

B STRAIN : TA1C 0 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 19146 2 ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : C27 3 COLONIES :

SOLVENT / DOS E PLAT E A ! POSITIV E LEVE L COUN T B GCOUN T B G S l 9 9 0 . CO

100.C O 333.0 0 1000.0 0 3333.0 0 10COD.O C 25 6

39 2 «7 0 33 9 19 4 30 2 AT E B :

UN T B G 

### 17 4 37 9 30 0 18 4 

### 6 1 3 PLAT E

COUN T 

### 36 0 43 1 35 5 16 6 27 3 

### * 6 

# c : B G AVERAG E COUN T 263. 3 400. 7 375. 0 229. 7 157. 7 133. 7 0. 7 0. 7

ST DDF V COUN T 93. 2 27. 1 86. 7 95. 1 137. 2 161. 2 

### V

R
1 1 1 0 0 0 • 3



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R E V E P T A \ T C 0 

### u N T S:SOLVEN TF:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ O S 9 »:TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:N E STRAIN:1C 0 OATE:03288 3 ACTIV : ACT * :0 5

; t 275. 0 •

i ! S 250. 0 •

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! t ; 200. 0 •

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150. 0•

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i ; i C O • PLO TO FAVGCOUNT»DOS E SYMBO L I S VALU E OFSPIN D

NCTE : 0 1 1 0 IO C OOS E I N

MICPOGRA" S 1 OP S HA DMISSIN GVALUE S O KWE P E OU T C F RfcN'G E 1 C C0 . - -- 4 . 

### i :co t

52# P.6 1

S=SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRAMJN E W/ O S 9 «:TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM=N B STRAIN:1C 0 DATE=03288 3 ACTIV:CSD00 2 ACTX:0 b PLO TO FAVGCOUNT*DOS E SYMEO L I S VALU E O FSPIN O

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### r . T 

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### u N T 450. 0 • i i f j 400. 0 •

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150 . C

100 . C

50. 0 •

C O •

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### i: • occ DOS E I N MICROGRAM S

5 3MUTAGENICIT YO F M C - TA9 7 P.6 2

MUTAGENICIT Y EX P PATE : 03168 3 CHE M ICAL : M C TES T TYPE : C 5 STRAIN : TA9 7 DILUTION : : PLATED : MIXTURE = TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : ACTIVATION : PATCH : C17 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E COS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T B G PLAT E e :

COUN T P G FLAT E

COUN T c :

P. G AVERAG E COUN T S T DDE V



### COUN T G/ C M

R ME C

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### 16 3

4T 3 

### 124 1 12 ° 15 1 15 3 17 7 11 ° 14 4

15 ? 112 3 14 5 16 2 13 ? 12 5 :3 e 16 0

51 7 82 9 17 3 14 7 15 3 12 9 13 2 155. 7

426. C 1364. 3 150. 7 153. 3 145. 0 143. 7 129. 7 10. ?

83. 8 212. 2 25. 3 7. 8 11. 4 28. 9 9. 7 A

A A I. C 2. 7 6. 8 1. 0 1. 3 0. 9 C 9 CF . MUTAGENICIT Y EX P TATE : C31PF. 3 CHEMICAL : 

### M C TES T TYPE : C 5 STRAIN : T49 7 DILUTION : l : 2 0 C 

### LATC: : 13 0 MIXTURE : 5C 0 TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 1914B 2

ACTI V ATIO'« : C SDC 3 2 BATCH : C17 3 COLON T 

### ES =
SOLVENT / POSITIV E COS E

LEVE L FLAT T

CCU'. T A : 

### B G PLAT E F. : C?'UN T BG FLAT E COUN T c : E G AV^FAG E COUN T ST DDFV

COUN T C/ C M

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S l 9 9 P I 3 4 F 2 3 4 O.O C

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### IB ? 1 CI O 92 C 17 1 17 B 22 6 21 7 23 3 17 5

143 7 9 3 3 13 8 19 4 .223 ?? 3 22 0 2C 2

140 1 91 3 17 6 1BF 22 c 2 if

. 1.-6. 3

1272. 7 922. C 161. 7 1H6. 7 217. C 220. 0 2 2 2. 0 

### 14. 3

227. 5 I C I 20. 6 B . l 1 0

. P

. 3 . 0 7 . ? 1. 3

6 . 8 4 . 9 0 . 9 I. C 1. 2 1. 2 1. 2 M U TA0 E N I C I TY EX P DiTE : TES TTYF E DILUTION : 1 MIXTURE : f>0 1

3 3 1 r. 8 3 

### C5 CHEMICAL : M C

'••TRAIN : ~ A

9 7 PLATF.: = 1 0 0 

### TECH?'ICIiN = Lf-

M CONTRAC T NO. : 1914& 2

ACTIVATION : 

### HEPA3 1 Bt T C H: C1 7 3 COLOME S =
SGLVTM / POSITIV E DOS E

LEVE L F LA

T r A : COUN T EG PL'.T E * :

CO'JN T B G FLAT L

CCUN T c :

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### 2 9 9 C 4 0 4 C C O

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### 22 7

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### lbC 21 ° 2? * 19 4 2C S 17 7 23 2

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### ?2 0 ?4 4 

### 19 7 16 2

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9 4 4. 3 1436. 3 217. 7 215. 3 21 c 

### -. 7 2 31. 3 191. 7 3?. *

4C. 7 

### 75. 7 27. C 1C. 5 19. 9 22. ° 12. 9

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S:SOLVEM TP:FOSlTIV E N':ANTHRAMIN E W/ O S 9 *:TES TCOMPOUN D CON:10148 2 CHEM:M C STRAIN:9 7 DATE=0318e 3 ACTIV : ACTt:0 5

PLO TO FAVGC0UNT«D0S E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

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200. C •



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5 5

### S=SOLVEN T P:PCSIT!V E N:ANTHRA U 

### 1 N E W/ OS 9 *=TES T COMPOUN D

C0N:19146 2 CHEM=M CST»AIN=9 7 DATE:03188 3 ACTIV:CSD00 2 ACT* : 0 5 PLO TO FAVC-COUNT*OOS E SYMPO L I S VALU E OFSPIN D

R E V E R T A N T C 0 

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1400. 0
1300. C
12C0. C
1100. 0
1500. 0
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700. 0
6 0 0

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1 1 • t 1 • 1 1 • I • 4 1

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### ic ; ICC O 

### 1 3 : oo ECS E I N MICROGRAM S
5 6

### P.6 5

S:SOLVEN TP:F0SIT!V E N=ANTHRAHIN E U/ O S 9 «:TES TCOMPCUN O CC\:l=14e 2 CHt**sH C ST=AIN=9 7 DATE:03186 3 ACTIV:HEP*0 1 ACTX=O S PLO TO FAVT-COUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E OFSPIN D
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1300. 0
1203. C
1 1 CC C
1C0C. C

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### eoo. :
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200. C
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I C IC C HOS E I N KICROGRAK 5 

### l rr . D 1 P 3 Q 0



## 5 7

### P.6 6

MUTAGENICIT YO FM C TA9 8
H U TAG EX P DATE : TES TTYPE : 

### D I LO T I ON : MIXTURE : E N

I C 03168 3 0 5 T Y

CHEMICAL : STRAIN : T A PLATED : TECHNICIA N M

C 9 8 LG « CONTRAC T NO. 1

ACTIVATION : BATCH : C17 3 

### COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

CCUN T A : B G PLATE E : COUN T B

G PLAT E C : COUN T B

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T O/ C M

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S l » 1 P 2 9 9 0 3 0 3 0.0 0

1.3 0 2.0 0 1330.0 0 2500.C O 5?C0.0 0 7500.0 0 1C00C3 0 2 7

23 ? 25 9 5 ? 5 3 4 7 4 ? 5 4 2 6

16 0 ?8 9 5 5 7 4 7 0 6 1 5 9 2 2

17 2 34 4 5 9 5 7 5 6 5 9 5 6 25. 0

159. 0 297. 3 55. 7 61. 3 57. 7 56. 3 56. 3 2. 6

40. 3 43. 1 3. 1 11. 2 11. 6 6. 4 2. 5 A

A A 1. 0 7. 6 11. 9 2.2 2. 5 2. 3 2. 3 2. 3 M UT A E N

I C I T Y EX P DATE : C3168 3 TES T TYP" : 0 5 DILUTION : K2 0 MIXTURE = 50 0 CHEMICAL : M C STRAIN : 

### TA9 8 ^LATED : 10 9 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO-. : 19146 2

ACTIVATION''' : CSDCC 2 BATCH : C17 3 

### COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E 

## Dor LEVL L PLAT E

COUN T A : E G PLAT E P ; COUN T P G "LAT E

COUN T 

## c : P G AVERAG E COUN T S T DCE V

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1. 0 0 2.3 0 15:3.3 0 2 5 3 3 . C0 5 3 3 C C0 75CCC 0 1 3 3 3C3 C 5 3

16C S 166 3 7 3
= 4 4 5 R 4 f 7 3 1

135 8 166 3 6 4 9 2 1 4 9 4 8 7 3 9

155 9 163 4 9 6 7 3 2 4 8 8 t 8 41. 0

1538. 3 1653. 3 84. 0 86. 3 27. 7 Re. 7 P C 7 11. 1

132. 5 16. 7 1 2 . C 11. 6 15. 8 5 . 0 11. F N

A A A I . C 36. e 40. 3 2 . 0 2 . 1 0 . 7 2 . 2 2 . 0 M U TAG E X F DATE : TES T TYPE : DILUTION : MIXTU'rE = '. Z

U I C I T Y 03168 3 CHEMICAL : M C 3 C 

### . STRAIN : 

### Tig s l : 2 0 PLATED : 13 0 O CTECHNICIAN : LC- M 

### CONTRAC T NO. : 1914P. 2 ACTIVATION' : HEPAC 1 BATCH : C17 3 CO LC M F S =
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E B" . COUN T B 

### G PLAT E C :

COUN T EC

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### 2. °

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195. 2 12 1 .= > 5 . ? 9 . 3 21. 7 8 . 5 16. 5 1. 3

44. C b C Z 1 . 9 2 . 3 2. E 2 . 6 2 . cR

E V E R T A N T C 0 

### u N T S::OLVEN TP:PCSITIV E N = ANTHRA«IN E W/ O S 9 »:TES TCOMPOUN D

C0V:1914e 2 CHE M = MC STRAIN:9 8 DATE:03186- 3 ACTIV : ACTX:0 5

PLO TO FAVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

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300. 0 •

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240. C •

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### S-SOLVEN T P = PCSITIV EN = ANTHF . A M

IN EW/ OS 9 «=TES T COMPOUN D : 0 N = 19146 2 CHE M

= M CSTJ.AI N

= 9 8 

### 0AT E= C3186 3 ACTIV=CSD,) 2 AC U= 0 ' PLO T O F AVGCOUNT.DOS ESYMBO LI S VALU EO F SPIN D

R E V E R T A N T C 0 

## u N T 

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MICROGRAM S



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### VlBb 3 ACT1V=HEPA0 1

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## i : co 1 3 3 03

6 1MUTAGENICIT YO F " C - TA1C 0

MUTAGENICIT Y EX P DATE : 03168 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : CHEMICAL : M C .STRAIN : TAlO O PLATE? : TECHNICIAN : LG M CONT°AC T NO , ACTIVATION : RATTH : C17 3 COLONIES : 19146 2

SOLVENT / DOS E POSITIV E LEVE L S l 9 9 P I 0 1 P 2 C l O.O C

1.3 C 2.3 0 1000.C O 250CC 0 5300.0 0 7*90.0 0 lvwDtO O PLAT E

COUN T 

### 12R 79 4 7C 3 15 7 15 2 15 3 13 1 15 1 A : 

### F G PLAT E C3UN T 

### 17 8 72 4 39 9 12 5 13 0 14 5 11 9 15 0 

## c > : 9 G PLAT E COUN T 

### 16 3 54 4 60 1 13 7 19 8 11 ° 12 3 16 3 

## c : PG AVERAG E COUN T 156. 3 687. 3 567. 7 139. 7 130. 3 139. 0 124. 3 154. 7 ST DDE V

COUN T 25. 7 129. 0 154. 7 16. 2 2 2 . C 17. 8 

### 6. 1 7. 2 O/ C



### A A A M R
1. 0 4. 4 3. 6 0. 9 O. P 

## 0. ° O. P 1. 0 ME C

M UT A

G N

I C I T Y EX« > DATE : 031S8 3 TES T TYPr : o * DILUTION : K2 0 MIXTURE : =-

3 0 CHEMICAL : MC

STRAIN : 

### Tiio o PLATED : IC O TECHNICIAN : LG M CGNTFAC T NO. : 19148 2 ACTIVATION : CSDC0 2 BATCH : ci7 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT T t :

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C?U\ T ^ G PLA T

CCUN T 

## c :

F G AVERAG E CCUN T ST DDE V

CCUN T C/ C M

R 

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S l P I T 2 9 9 0 4 C C O

1.3 C 2.0 0 1303.3 0 ?503.C 0 5:33.3 0 7=03.5 0 1 3 3 3 C 5 0 15 6

137 7 76< . l c f 2 4 * 

### 15 3 

### U 7 15 : 16 6

l.?2 6 72 ? 1 9 9 16 C 16 4 17 4 14 9 14 9

12* 3 63 3 1P 2 1* 7 15 6 17 5 17 9 157. 0

1194. 3 730. 3 1*9. 0 1°7. 3 156. 7 172. 0 1 fc0. C 8. 5

1C5. 1 5 2 . C 8. ° 5 0 . C 7. 0 4. 4 16. 5 1. 0

7. 6 4. 7 1. 2 1. 2 1. 3 1. 1 1. 0
M UT A I C I T Y EX P TATE : 331:6 3 TES T TYFE* . f 5 DILUTION : I ! 2 C M|XTUi-E = 53 3 C«E"ICAL : M C STFAIN : Til3 3 PLATE" : 1 T O TECHNICIAN : LG ! CCNTPAC TNO. : 1914e ? ACTIVATION : HEP£C 1 c ATCH : en 3 COLONIES :

SOLVENT / POSIT I v. ; LEVE L PLAT : CCUN T t :

P G PL'T E •? : CCUN T r - G P LAT F

CCUN T AVERAG E

COUN T S T D DE V

CCUN T Q/y M

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S l° 9 P IC 4 F 23 4 

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### 1.3 0 1 C 3 C 3 3 2 5 3 3 . C 3 5 . i 0 C 3 C T: :•:..; 3 133C 1 C

O 13 3 t--> 1 3 ^ < • 

### l c 

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56 ? 1* 4 1 18 0 1 ? 5 19 C 16 7 16 ° 13 4
< t Bit 17 3 3 16 7 19 3 23 3 l* 3 19 C 1 3 4. 3

549. 0 1536. 0 1 7 6. 3 1 •:. ? . 3 1 = 5. 0 1 6 3. 7 162. 7 1. 5

57. 7 199. 5 10. 6 4. 3 5. 0 2 1 . 4 11. 6 1 4 1 1 1 1 1 1 1



### 6 2P.7 1



# r
S:SOLVEN T P:PCSITIV E \ : AN T H P A " I N E W/ OS< = « = TES T COMPOUN D C0N:1914e 2 CHEM:M CSTRAIN=1C 0 DATE:C3188 3 ACTIV : ACT*:C 5

PLO T O F AVCCOUNT'DCS E SYM60 LI S VALU E O F SPIN D

R E V E R T A N T C n 

### u N T 9 00. C •

800. 0 •

700. 3 •

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630. 0 *

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400. 3

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200 . 0

1 0C . 0



### C C • 1 013 3 ;CS EI N»ICF.OGRA u S 

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6 3

### P.7 2

S:SOLVEN T P:POSITIV E N:AN T H P AMIN E W/ OS 9 «:TES T COMPOUN D C0N:1914P 2 CHEM=M CSTRAIN=10 0 OATC:031PS 3 ACT1V:CSD00 2 ACTX:0 5

PLO T O F AVGCOUNT*DOS E SYM60 LI S VALU EO F SPIN D

R E V r R T A N T C 0 

## u N T 1500. C
1400. 0
1300. 0
1203. 0
1103. 0
133C. C
900. 0
6CG. 0
700. 0
6 0C. 0
500. 0
40C C •

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i •

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300. 0
20C. C •
100. 0•

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### 1 0 1C 3 DOS EI N

MICROGRAM S 133 3 .--- * y 

### 1 .'CO O

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S:SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRA*IN E W/ O S 9 »:TES TCOMPOUN D C0 N = 1°148 2 CHEM:M C STRAIN'slC O D ATE : 3 3 1 6 3 3 ACTIV:HEFA0 1 »CT *= 0 5 PLO TO FAVCCOUNT«DOS E SYMPO L I S VALU E O FSPIN D

R E V r R T A N T C 0 

## u N T 1800. 0•

1600. 0•

1400. C •

1200. 3 •

1 00C 0

60C 0 •

60G. C

400 ,

200. 0

C C • 1 013 C COS E I N MICROGRAM : IC ! ..... . 1 CCC C

6 5MUTAGENICIT YO F F M - TA9 7 P.7 4

MUTAGENI C EX P DATE : 04078 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : T Y CHEMICAL : F M STRAIN : TA9 7 P.LATEO : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : ACTIVATION : BATCH : DC6 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A :

6 G PLAT E B ! COUN T B G PLAT E C :

COUN T B G AVERAG E

COUN T ST O DE V

COUN T O / C M

R MEC
S l F l P 2 9 9 0 2 0 2 0.0 0

50.0 0 100.0 0 1.C 0 5.0 0 10.0 0 50.0 0 100.0 0 15 3

39 6 57 7 4 5 7 8 4 4 10 6 6 1 U l

50 3 56 6 4 2 9 1 7 3 15 3 9 4 B9

33 1 59 5 9 4 9 5 9 8 13 7 7 9 117. 7

410. 0 579. 3 60. 3 68. 0 71. 7 132. 0 78. 0 32. 5

86. 9 14. 6 29. 2 8 . 9 27. C 23. 9 16. 5 A

A A 1. 0 3 . 5 4 . 9 0 . 5 0 . 7 0 . 6 1 . 1 0 . 7 M U TAG E X P DATE : TES T TYP E DILUTION : E N

I C 04078 3 I 0 5 l : 2 0 MIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : F M STRAIN : TA9 7 PLATED : IC O TECHNICIAN : LG M CONTRAC T 'NO. : 19148 2 ACTIVATION : CSDC0 2 BATCH : 006 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A :

B G PLAT E COUN T B :

B G PLAT E C : COUN T B G AVERAG E

COUN T ST DDE V

COUN T O/ C M

R ME C

S l P I P 2 9 9 0 4 C 4 C O O

1.OJ 0 2.C C 1.0 0 5.0 0 10.0 0 50.C O 103.0 0 15 1

65 4 91 1 7 0 10 6 6 3 16 5 lb l 17 4

88 6 121 7 6 9 11 3 13 7 14 3 23 5 18 1

71 6 1 1 " 2 8 8 9 8 13 6 19 * 12 3 16e. 7

752. 0 1106. 7 75. 7 105. 7 118. 7 174. 3 169. 7 15. 7

120. 1 169. 9 10. 7 7. 5 30. = 27. 6 58. 3 1. 0

4. 5 6. 6 0-» 4 0. 6 0. 7 1. 0 1. 3 MUTAGENICIT Y EX » DATE : 04078 3 TES T TYPE : 3 5 DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : 53 0 CHEMICAL : FM STRAIN : TA9 7 PLATEC : 13 0 TECHNICIAN : LG M CONTRAC TNO. : 19146 2 ACTUATION : HEPAC I BATCH : DC6 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A :

B G PLAT E e : COUN T F G PLAT E C :

COUN T 6 G AVERAG E

COUN T ST DDE V

COUN T 0 / C M

R ME C

S l Q 9 f' l G 4 P 2 0 4 0.0 0

0.5 0 1.3 0 1.0 0 5.0 0 10.0 0 50.0 0 100.3 0 11 °

2S 1 79 3 11 1 11 6 9 2 13 6 16 S 12 2

43 5 91 7 12 2 13 9 11 6 16 8 19 6 17 6

39 * 76 3 15 3 17 1 17 7 2 0 1 15 7 139. 0

373. 7 630. 0 127. 7 142. 0 128. 3 169. 0 173. 7 Zc. I

74. 3 75. 6 20. 1 27. 6 43. 6 31. 5 20. 1 I. C 2 ' 7 | 6 . 0 0. 9 1 . 0 0.9 ; 1. 2

6 6f * B *-i."j,tt«
. *!•'*«* ; I
S:SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E y/ 0 S 9 *=TES TCOMPOUN D £QN:19148 2 CHEM:F M STRAIN:9 7 DATE:04078 3 ACTIV : ACT*:C 5

PLO TO FAVGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

R E V 

### r R T A N T C 0 

### u N T 900. 0 •

• ; I ! 800. 0 •

700. 0 •

600. 0•

500. 0 •

HOC O •

300. 0 •

200. 0 •

100. 0•

C O • 1 010 0 •3S EI NMICROGRAM S 1 Cl - 0 ..... . 

## iicco o

67P.7 6

i : 

### S:$OLVEN T P=P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 «:TES T COMPOUN D

C0N:1914B 2 CHEM:F M STRAIN:9 7 DATE:P4078 3 ACTIV:CSD00 2 ACT* : 0 5 PLO T OF AVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

i i 

### 1100. 0 •

I 

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R r V r R T A N T C 0 U N T 1000. 0 •

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### 900. 0 •

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### 800. 0 •

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### 700. 0 •

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### 6 00. 9 •

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i 

### 500. 0 •

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### ; i 

### 400. 0 •

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### 300. 0 •

i 

### ; i 

### 200. 0 •

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### 100. 0 •

I I I 

### 0. 0 • 1 0 IC G DOS E I N MICROGRAM S 133 3 4 - -. 4 . 

## i coo cP.7 7

S:SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ O S 9 *=TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:F M STRAIN:9 7 DATE:04076 3 ACTlV:HEFA0 1 ACTX:0 5 PLO TO FAVGCOUNT'DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

R r V E R T A N T C 0 u N T 900. 0 •

800. 0 •

7U0. C •

600. 0•

500. 0 •

400. 0 *

300. 0 •

200. 0 •

100. 0•

C O • 1 0 1 0 0 ico o 1 oCO O DOS E I N MICROGRAM S

6 9

### MUTAGENICIT YO F F M - TA9 8 P.7 8



### MUTAGENICIT Y EXP DATE : 04078 3 CHEMICAL : 

### F M TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 8 DILUTION : : PLATED = MIXT"D.r = 

### TE-CHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 19146 2

ACTIVATION : BATCH : 

### D06 3 COLONIES :
SO.VENT / POSITIV E DOSE

LEVE L PLAT E A :

COUN T B

G PLAT E B : COUN T BG PLAT E C :

COUN T BG AVERAG E

COUN T ST ODEV

COUN T G/ C M

R 

### ME C

S l 9 9 F l G 3 P 2 0 3 0.0 0

1.0 0 2.0 0 l.G O 5. 0 0 10.0 0 50.0 0 100.0 0 1 9

8 2 22 2 2 5 1 6 3 1 2 4 5 6 1 9

13 9 34 1 2 4 1 9 2 7 2 7 2 6 1 7

14 ? 26 7 1 4 2 3 3 5 2 2 3 2 18. 3

121. 0 276. 7 21. 0 19. 3 31. 0 24. 3 38. 0 1. 2

33. 8 60. 1 6. 1 3. 5 4. 0 2. 5 15. 9 1. 0

6. 6 15. 1 1. 1 1. 1 1. 7 1. 3 2. 1 M UT A G EX P DATE : 

### TES T TYPE ! DILUTION : E N

I C 04078 3 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : F

M STRAIN : 

### TA9 8 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO .

ACTIVATION : BATCH : 

### DC6 3 COLONIES : : 191 4 8 2

CSD00 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E B : COUN T B

G PLAT E C : CCUN T E

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T G/ C M

R 

### ME C

S l 9 9 P I 3 4 P 2 0 4 0.0 0

1.0 0 2.0 0 1.0 0 5.0 0 ICO' J 50.0 0 100.0 0 2 2

79 3 156 7 3 3 2 3 2 5 3 5 3 0 3 2

66 6 169 6 3 1 3 3 3 0 4 4 3 7 2 3

67 9 157 3 2 7 2 9 3 6 3 0 4 7 25. 7

779. 3 1612. 0 30. 3 28. 3 31. 0 36. 3 38. 0 5. 5

94. 2 72. 6 3. 1 5. 0 6. 6 7. 1 8. 5 1. 0

30. 3 62. 7 1. 2 1. 1 1. 2 1. 4 1. 5 MUTAGENICIT Y EX P DATE : 04078 3 TES T TYPE : 3 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 50 0 CHEMICAL : F * STRAIN : 

### TA9 6 PLATEC : IC O TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : HEPAC I 

### BATCH : DC6 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T E

G PLAT E B : COUN T B

G PLAT E C

t COUN T F

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUNT O/ C V

### R 

### ME C

S l P I P 2 9 9 0 4 C 4 C O O

0.5 9 1.0 0 1.0 0 5.0 0 10.C O 50.0 0 100.0 0 4 1

i9 e 74 7 2 9 2 2 4 1 3 5 3 5 3 5

26 2 eo e 4 2 3 3 3 6 2 6 4 9 2 6

23 6 67 2 3 7 4 2 4 C 3 6 3 6 34. 3

232. 7 742. 3 36. 0 32. 3 39. 0 32. 3 40. 0 7 . 5

32. 3 68. 1 6 . 6 I C C 2.6 ' 5 . 5 7 . 8 1 . 0

6 . 8 21. S 1 . 1 1 . 3 1 . 1 1 . 3 1 . 2

7 0P.7 9

' I ' i



### S=SOLVEN T P=P0SITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:F M STRAIN:9 8 DATE=04078 3 ACTIV : ACTX:0 5 PLO T OF AVGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIN D

R E V E R T A N T C 0 

### u N T 275. 0 •

250. 0 •

225. 0

200 . C

175. 0

150. 0

125. 0

100. 0

75. C

50. C

25. 0

0. 0 • 1 0 ICO DCS E I N MICROGRAM S 1C0 O ..... . 1000 0



### 7 1

### S=SOLVEN T P:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D

C0N=19149 2 CHEM:F M STRAIN:9 8 DATE=04078 3 ACTIV:CSD00 2 ACTX:0 5 PLO T OF AVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D P.8 0



### R E V E R T A N T C 0 

## u N T 1800. 0 • t 

### ; ! ; 1600. 0 •

1400. 0 •

; ! i i 

### 1200. 0 •

1900. 0 •

8.00. 0

600. 0 •

400. 0 •

23C. 0 •

0. 0 • 1 0 10 0 DOS E INMICROGRAM S 100 0 1 300 0



### 7 2P.8 1



### S:S0LVEN T P:POSlTIV E N : ANTHP . A * IN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:F M STRAIN:9 8 DATE:04078 3 ACTlV:HEPA0 1 ACTX:0 5 PLO T O F AVGCOUNT»DO', E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

P r V E R T A N T C 0 U N T ! 900. 0 •

800. 0 •

700. 0 •

!

600. 0•

5C0. O

400. 9•

300. 0

200. 0

1 00. 0

0 . 0 • 

### 1 0 10 0 DOS E I N

MICROGRAM S 100 0 10CC 0



### 7 3

### MUTAGENICIT YO F F M - TAlO O

M UT A G ZXP DATE : TES T TYP E DILUTION : 

### MIXTURE : E N

1 C 04078 3 : 0 5 T Y

CHEMICAL : STRAIN : T A 

### PLATED : TECHNICIAN F

M 10 0 CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : BATCH : 

### D06 3 COLONIES : 

### LG M SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E B : COUN T BG PLAT E

COUN T 

# c : B G AVERAG E COUN T ST DDE V

COUN T O/ C M

R 

### MEC

S l P I P 2 9 9 0 1 0 1 0.0 0

1.0 0 2.0 0 1.0 0 5.0 0 10.0 0 50.0 0 IOC.0 0 12 2

27 8 58 7 13 3 13 7 13 9 8 1 17 4 9 2

28 4 49 3 11 3 7 1 10 6 8 0 16 5 11 4

23 9 40 6 8 * 11 * 8 4 7 4 13 1 109. 3

267. 0 495. 3 110. 3 107. 7 109. 7 78. 3 156. 7 

### 15. 5

24. 4 90. 5 24. 1 33. 6 27. 7 3. 8 22. 7 1. 0

2. 4 4. 5 1. 0 1. 0 ) . . 0 0. 7 1. 4 M UT A G EX P DATE : 

### TES T TYPE : DILUTION : E N

I C 04078 3 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : F

M 

### ' STRAIN : 

### TAlO O PLATEC : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : D96 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T B

G PLAT E B I COUN T BG PLAT E

COUN T c : B G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T Q/ C M

R 

### MEC

S l 9 9 P I 0 4 P 2 C 4 C O O

1 . C O 2.0 0 1.0 0 5.0 0 10.0 0 50.0 0 100.0 0 14 3

69 0 150 6 8 3 7 7 12 4 12 8 23 3 16 7

97 0 199 9 8 9 6 1 10 6 15 2 17 4 14 3

92 2 172 0 6 3 7 E 9 3 12 9 13 3 151. 0

860. 7 1741. 7 85. 0 72. 0 107. 7 136. 3 160. 0 13. 9

149. 7 247. 2 3. 5 9. 5 15. 6 13. 6 50. 3 1. 0

5. 7 11. 5 0. 6 0. 5 0. 7 0. 9 1. 2 M UT A G EX P DATE : 

### TES T TYPE : 

### DILUTION : E N

I C 04078 3 0 5 i : 2 C MIXTURE : 5C 3 I T Y CHEMICAL : F M STRAIN : TAIO O 

### 'PLATED : 13 0 TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 1914fc 2 ACTIVATION : HEPAC I 

### BATCH : D36 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### B G PLAT E CCUN T B : 

### F G PLAT E C . COUN T B G AVERAG E

COUN T ST DDE V

CCUN T O/ C M.

R 

### ME C

S l P I P 2 9 9 0 4 0 4 C O O

0.5 0 1.0 3 1.0 0 5.0 0 10.0 0 50.0 0 100.0 0 13 C

30 2 23 6 18 6 19 6 1 0 6 13 6 14 7 12 0

41 7 23 1 19 3 19 0 10 7 6 8 18 2 11 1

45 6 36 7 16 0 15 1 1 1 1 7 5 12 6 120. 3

392. 3 278. 0 179. 7 179. 0 106. 7 93. 7 151. 7 9 . 5

6C 9 77. 1 17. 4 24. 4 2 . 1 36. 6 26. 3 I . C

3 . 3 2« o 1. 5 1. 5 0 . c 3 . 6 1 . 3

### S:S0LVEN T P:P0SITIV E N=ANTHRAMIN E W/ OS 9 «:TES T COMPOUN D

COW:19148 2 CHEM:F M STRAIN:10 0 DATE:04078 3 ACTIV : ACTX:D 5 PLO T OF AVGCOUNT*DOS E STMBO L I S VALU E OF SPIN D

R Z V E R T A N T C 0 

### u N T 

### ; t 550. 0 •

! ! ; 500. 0 •

450. D •

400. 0 •

350. 0 •

300. 0 •

250. 0 •

200. 0 •

150. 0•

100. 0•

50. 0 •

0 . 0 • 

### 1 0 IC O DOS EI N

MICROGRAM S 100 0 1 C0 0 0



### 75P.8 4

S:S0LVEN TPsPOSITIV E N:ANTHRAMIN E U/ C S 9 «:TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:F M STRAIN:10 0 DATE:04078 3 ACTIV:CSD00 2 ACTX:0 5 PLO TO FAVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

R r V E R T A N T C 0 

### u N T 1800. 0*

• 

### ! ! i 1600. 0•

! • ; ! 1400. 0•

! 1200. 0•

10CC Q •

800. 0 •

600. 0•

400. 0 •

200. 0 •

0 . 0 • 1 0 1 0 J DCS E I N MICROGRAM S 10C 0 •—•. 

### ; oo oP.8 5



### S:SOLVEN T P=POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N=19148 2 CHEM:F M STRAIN:10 0 DATE=04076 3 ACTlV=HEPA0 1 ACTX:0 5 PLO T OF AVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIN D

R E V r R T A N T C 0 

## u 450. 0 •

!

400. 0 •

350. 0 •

i 

### ! ! ; 300. 0 •

250. 0 •

200. 0 •

150. 0 •

100. 0 •

50. 0 •

0. 0 • 1 0 IC C DOS E I N MICROGRAM S 

### IC O ..... .

1 0 0 01

### -r-- - MUTAGENICIT YO F FR C- TA9 7 P.8 6



### MUTAGENICIT Y EXF DATE : 04078 3 CHEMICAL : TRC TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 7 DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 19148 2



### ACTIVATION : BATCH : D06 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T BG PLAT E B :

COUN T PG PLAT E

COUN T 

## c : BG AVERAG E COUN T ST D DE V

CCUN T O/ C M

R ME

C
S l 9 9 P I 0 2 P 2 0 2 0.0 0

50.0 0 100.0 0 3.0 0 

### 10.0 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 15 3

39 6 

### 57 7 6 4 5 0 13 1 11 4 3 6 U l

50 3 56 6 

### 12 0 6 5 14 9 7 8 7 8 

### 8 9

33 1 59 5 9 1 12 9 12 7 11 6 7 5 117. 7

410. 0 579. 3 98. 3 

### 81. 3 135. 7 102. 7 63. 0 32. 5

86. 9 14. 6 19. 1 42. 0 11. 7 21. 4 23. 4 A

A A 1. 0 3 . 5 4 . 9 0 . 8 0 . 7 1. 2 0 . 9 0 . 5 M U TAG EX P DATE : 

### TES T TYP E DILUTION : E N

I C 04C78 3 : 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 50 0 T Y CHEMICAL : TRC STRAIN : TA9 7 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : 036 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : B G PLAT E P : COUN T C G PLAT E

COUN T 

## c : B G AVERAG E CCUN T ST DDEV

COUN T O/ C M

R 

### ME C

S l F l P 2 9 9 0 4 0 4 0.0 0

1.0 0 2.0 0 3.0 0 10.0 0 33.C O 100.0 0 333.0 0 15 1

65 4 91 1 17 8 9 8 U l 6 4 11 5 17 4

88 6 121 7 13 5 9 1 14 2 12 8 12 8 16 1

71 6 119 2 9 2 1* 1 13 3 9 6 9 2 163. 7

752. 0 1136. 7 135. 0 110. 0 127. 7 96. 0 111. 7 15. 7

120. 1 169. 9 43. 0 27. 1 15. 6 32. 0 16. 2 1. 0

4. 5 6. 6 0. 6 0. 7 0. 8 0. 6 0. 7
M UT A G EX P DATE : TES T TYPE DILUTION : E N

I C C4078 3 : 0 5 i : 2 0 FIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : TR C STRAIN : 

### TA9 7 PLATEC : 13 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 ?

ACTIVATION : 

### HEPAC 1 BATCH : 

### D06 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : B G PLAT E COUN T B : B G PLAT E C : COUN T B

G AVERAG E COUN T ST DDLV

COUN T C/ C *'

R 

### ME C

S l P I P 2 9 9 0 4 C 4 0.0 0

0.5 0 l.CC 3.0 0 10.C O 3 3 • w o 103.0 0 333.C O 11 9

29 1 79 3 14 3 8 1 15 1 6 9 12 3 12 2

43 5 91 7 11 2 14 3 15 7 9 6 14 6 

### 17 6

39 5 76 3 10 6 15 2 13 1 13 2 13 C 13°. C

373. 7 830. 0 120. 3 125. 3 146. 3 106. 3 133. 0 32. 1

74. 3 75. 6 19. 9 36.' 7 13. 6 22. 7 11. 6 I . C

2 . 7 6 . 0 0.9 ' 0 . 9 1. 1 C H 1 . 0

7 6P.8 7



### S=SOLVEN T P:P0SITIV E N=ANTHRAM1N E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N=19148 2 CHEH=TR C STPAIN:9 7 DATE:04078 3 ACTIV : ACTX:0 5

PLO T OF AVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIN D

R E V E R T A N T C 0 

### u N T 900. 0 •

i i 

### ! ! 800. 0 •

700. 0 •

600. 0•

500. 9•

400. 0 •

300. 0 •

200. 0 •

100. 0•

0 . 0 • 

### 1 0 10 0 DOS E INMICROGRAM S 130 C 1C0C 0

7 9P.8 8

9 r V E R T A N T C 0 

### u N T S=SOLVEN TPsPOSITIV E NsANTHRAMIN E W/O S 9 «:TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM.:TR C STRAIN:9 7 DATE:04078 3 ACTIV:cSD00 2 ACTX=0 5 PLO TO FAVGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E OFSPIN D i i 

### 1100. 0• P

1000. 0•

900. 0 •

800. 0 •

700. 0 •

600. 0 •

500. 0 •

400. 0 •

300. 0 •

200. 0 •

100. 0•

C O • 1 0 10 0 DOS E I N MICROGRAM S 100 0 ! C C 0 0

8 0P.8 9



### S:SOLVEN T P:P0SITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 «:TES T COMPOUN D C0N:191482 . . CHEM:TR CSTRAIN:9 7 DATE:04078 3 ACTIV:HEPA0 1 ACT X 

### :0 5

PLO T O F AVGCOUNT«DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

R r V E R T A N T f ; 0 U N T 900. 0

800. 0

700. 0

600. 0

500. 0

400. 0

300. 0

200 . 0

100. 0

C O i 

### I ;

• ; i t ; i 

### ! • • i • i • • i i t i • \ i • • • i i ; i • ; •

•S • • i i ; • • 

### 1 0 10 0 COS E I N

MICROGRAM S 1C 0 0 . ..... . 

### i :o o



### 8 1

### MUTAGENICIT YO F TR C - TA9 8

MUTAGENI C EX P DATE : 04078 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE = T Y CHEMICAL : TRC 

### STRAIN : TA9 8 PLATED : TECHNICIAN S LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : BATCH : D06 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOSE

LEVE L PLATE A :

COUN T B

G PLAT E B : COUN T BG PLAT E

COUN T c : BG AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T C/ C H

R 

### ME C

S l 5 9 P I 0 3 P 2 0 3 0.0 0

1.0 0 2.0 0 3.0 0 10.G O 33.0 0 100.0 0 333.0 0 1 9

8 2 22 2 1 5 2 7 1 6 1 7 4 5 1 9

13 9 34 1 2 0 2 6 1 7 1 2 2 0 1 7

14 2 26 7 1 7 1 8 1 7 1 7 2 2 18. 3

121. 0 276. 7 17. 3 23. 7 16. 7 15. 3 29. 0 1. 2

33. 8 60. 1 2. 5 4. 9 0. 6 2. 9 13. 9 A

A A 1. 0 6. 6 15. 1 0. 9 1. 3 0. 9 4. 8 1. 6 M UT A G E X P DATE : TES T TYPE : DILUTION : 

### E N

I C 04078 3 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 5C 0 I T Y CHEMICAL : TR C 

### STRAIN. * TA9 8 PLATED : ICO TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2 ACTIVATION : CSD00 2 BATCH : 

### D06 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLATE

COUN T A : 

### B G PLAT E B : COUN T BG PLAT E

COUN T 

## c : E G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T O/ C M

R 

### ME C

S l 9 9 P I 0 4 P 2 0 4 0.0 0

1.0 0 2.0 0 3.0 0 10.0 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 2 2

79 3 156 7 2 4 2 4 2 1 3 6 4 1 3 2

86 6 169 6 3 6 2 9 2 9 2 1 3 1 2 3

67 9 157 3 3 1 2 1 3 1 3 4 3 4 25. 7

779. 3 1612. 0 30. 3 24. 7 27. 0 30. 3 35. 3 5. 5

94. 2 72. 8 6. 0 4. 3 ii . 3 rt.l 5. 1 1. 0

30. 3 62. 7 1. 2 1. 0 1. 1 1. 2 1. 4 MUTAGENICIT Y EX P DATE : 04078 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : SCO CHEMICAL : TRC 

### STRAIN : TA9 8 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 1914e 2

ACTIVATION : HEPAC I 

### BATCH : 006 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E OOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T B

G PLATE B : COUN T C

G PLATE c : COUN T B

G AVERAG E COUN T ST D DE V

COUN T G/ C M R

S l 9 9 F l 3 4 P 2 0 4 C C O

Q.5 0 1.C 0 3.0 0 10.0 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 4 1



### 19 6 74 7 2 5 2 2 4 0 2 7 3 4 3 5

26 2 6 0 6 2 7 3 6 2 8 2 3 3 8 2 6

23 6 67 2 3 0 2 6 4 0 4 1 4 0 34. 3

232. 7 742. 3 27. 3 28. 0 36. 0 3 0. 3 37. 3 7 . 5

32. 3 66. 1 2 . 5 7 . 2 6 . 9 9 . 5 3 . 1 6.8 .

2 1 . 8 

### o.'e C R 1. 1 0 . 9 1. 1

82P.9 1



### S:S0LVEN T PsPOSITIV E NsANTHRAKIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEMsTR C STRAIN:9 8 DATE:04078 3 ACTIV : ACTX:0 5

PLO T OF AVGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

R E V E R T A N T C 0 U N T 275. 0 •

250. 0

225. 0

I 200. 0•

i i 175. 0•

• i i 150. 0•

i i i 125. 0•

i i i 100. c •

I I I 75. 0 •

i i • 50. 0 • 

### ; t i 25. C • ! S i i C O • 1 0 IO C DOS E I N MICROGRAM S 100 0 . . - - • - ICOO O

8 3P.9 2



### S:SOLVEN T PsPOSITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 *=TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:TR C STRAIN:9 e OATE:04078 3 ACTIV:cSD00 2 ACTX:0 5

PLO T OF AVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

R E V E R T A N T C 0 U N T 1800. 0 •

• ! i i 

### 1600. 0 •

!

1400. C •

1200. 0

1000. 0 •

800. 0 •

600. 0 •

400. 0 •

200. 0 •

0. 0 • 

### 1 0 .. . - . 10 0 100 0 1 3 0 0 0 DOS E I NMICROGRAM S


### 8 4P.9 3



### SsSOLVEN T PsPOSITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 *:TES T COMPOUN D C0N=19148 2 CHEM:TR CSTRAIN=9 8 DATE=04078 3 ACTIVsHEPAO l ACTX:0 5

PLO T O F AVGCOUNT.DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D i 900. 0 •

; i 

### ; i 800. 0 •

; i ! P ; 700. 0 •

• ! i ' i R 600. 0 •' E ! V! E ! 

## a ! T500. 0 • A! N ! T!



### ; C 400. 0 • 0 ! U » N ! ! T! i 300. 0 •

i i
•P ! i 200. 0 •



### ; ; 100. 0•

I I ! S *** 

### ; ** 0 . 0 •

—•••-.. -•-—•.-.- -,-.-• . 

### 0 , 1 1 0 IC C100 0 1300 0 DOS E I N

MICROGRAM S
8 5P.9 4



### MUTAGENICITYO

F TR C TAlO O
MUTAGENI C EX P DATE : 04078 3 TES TTYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE S 

### T Y CHEMICAL : TR

C STRAIN : 

### TAlO

O PLATED = TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : ACTIVATION : BATCH : 006 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAGE STDDE V POSITIV E LEVEL COUN

T B GCOUN

T B GCOUN

T E GCOUN

T COUN

T O/ C M

R ME C
S l 9 9 P I 0 1 F 2 0 1 CO O

1.0 0 2.0 0 3.0 0 10.0 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 12 2

27 8 58 7 13 0 14 4 8 2 12 4 12 1 9 2

28 4 49 3 7 5 10 7 8 4 11 4 9 2 11 4

23 9 40 6 8 3 10 6 7 6 11 5 9 7 109. 3

267. 0 495. 3 96. 0 119. 0 80. 7 117. 7 103. 3 15. 5

24. 4 90. 5 29. 7 21. 7 4. 2 

### 5. 5 15. 5 A

A A 1. 0 2. 4 4. 5 0. 9 1. 1 0. 7 1. 1 0. 9 MUTAGENI C EXP DATE : 04076 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : I

t 2 0 MIXTURE : 50 0 T Y CHEMICAL : TR

C STRAIN : 

### TAlO

O PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO.:.19148 2 ACTIVATION, : CSD0C 2 BATCH- : D0 6 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIVE DOS E

LEVEL PLAT E A :

COUN T B G PLAT E B : COUNT BG PLAT E

COUN T c : B G AVERAGE COUN T ST D DE V COUNT O/ C M

R ME

C
S l F l P 2 9 9 0 4 0 4 CC O

1.0 0 2.0 0 3.0 0 1CC 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 1 43

69 0 150 6 1 2 8 1 0 8 6 8 15 0 8 8 16 7

97 0 199 9 1 2 5 1 2 3 6 3 8 4 6 8 1 4 3

92 2 172 0 8 6 7 2 4 2 1 0 7 151. C

860. 7 1741. 7 113. 0 131. 0 57. 7 113. 7 78. 0 13. 9

149. 7 247. 2 23. 4 26. 2 13. 8 33. 5 14. 1 A

A A 1 . 0 5 . 7 11. 5 0 . 7 0 . 7 0. 4 C 8 0 . 5 M U TAG EX P DATE : TES T TYP : DILUTION : 

### E NI C

04078 3 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : TRC STRAIN : 

### TAlO O PLATED: 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : HEPAC I BATCH : 

### DC6 3 COLONIES :
SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG E STD DEV POSITIVE LEVE L COUN T B GCOUNT BGCCUNT PGCOUNT CCUN T O/ C W



### F . ME C
S l P I P 2 9 9 0 4 C 4 0.0 0

0.5 0 1.0 0 3.0 0 10.0 0 33.0 0 100.0 0 333.0 0 13 0

3C 2 23 6 16 3 17 7 15 0 14 5 16 7 12 0

41 7 23 1 15 9 19 1 18 8 22 0 17 4 U l

45 8 36 7 15 1 16 7 17 7 18 5 14 7 120. 3

392. 3 278. 0 1 6 4. 3 176. 3 171. 7 ie3. 3 162. 7 9. 5

RC. 9 77. 1 16. 7 12. 1 19. 6 37. 5 14. 0 1. 0

3. 3 2. 3 1. 4 1. 5 1. 4 1. 5 1. 4

8 6P.9 5



### SsSOLVENT P:P0SITIVE NsANTHRAMIN E W/ O S 9 »sTES T COMPOUND C0N:19148 2 CHEM:TR C STRAINMO O DAT E = 04078 3 ACTIV : ACTx':0 5

PLO T OF AVGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

R E V E R T A N T C t ) 

### U N T i i 

### 550. 0 •

i t 

### ! 500. 0 •

450. 0 •

400. 0 •

350. 0 •

300. 0 •

250. 0 •

200. 0 •

150. 0 •

100. 0 •

50. 0 •

0. 0 • i o l ; o DOS E I NM I 'ROGRAM S 

# uo ; 1 0 

### 0 0 0

### SssOLVEN T PsPOSITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 .sTES T COMPOUN D

C0Nsl9148 2 CHEMsTR C STRAINslO ODATEs04078 3 ACTIV:CSD00 2 ACTX:0 5 PLO T OF AVGCOUNT»DCS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D P.9 6



### R E V E R T A N T C 0 U N T 1800. 0 •

» • ! t 

### 1600. 0 •

! ! i i 

### 1400. 0 •

12C0. 0 •

1000. 0

800. 0 •

600. 0 •

400. 0 •

200. 0 •

0. 0 • 

### 1 0 .. . _ . 10 0 1P0 0 1000 0 DOSE IN'MICROGRAM S



### 8 8

### SsSOLVEN T PsPOSITIV E NsANTHRAMIN E W/ OS 9 *=TES T COMPOUN D

C0NS19148 2 CHEHsTR C STRAINslO OOATEs04078 3 ACTIVsHEPAO l ACTXr0 5 PLO T O F AVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D
450. 0 •

R E V E R T A N T C 0 

## u N T 400. 0

350. 0

300. 0

250. 0

2 00. 0 /
150. 0 !

4 1 

### • !

•

•

•



### 100. 0 •

50. 0

0. 0 • 1 0 io o DOS E IN

MICROGRAM S 100 9 i i 1 1



### 89

## .VS

T MUTAGENICI T 

### YOF ED C TA9 7
MUTAGENI C EX P DATE. ' 04088 3 TES TTYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : I T Y CHEMICAL : ED C 

### STRAIN : TA9 7 PLATED = TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2



### ACTIVATION : BATCH : 

### D07 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : B G PLAT E B : COUN T BG PLAT E C :

COUN T B

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T Q/ C M

R 

### M E

S l 9 9 P I 0 2 P 2 0 2 0.0 0

50.0 0 100.0 0 50.0 0 100.0 0 250.0 0 500.0 0 ICOO.O O 18 8

73 5 187 5 19 2 22 9 18 7 17 6 20 2 19 3

83 2 228 5 20 3 19 6 19 2 20 2 21 9 19 4

66 4 224 9 23 0 22 2 16 5 16 7 18 6 191. 7

743. 7 2136. 3 208. 3 215. 7 181. 3 181. 7 202. 3 3. 2

B4. 3 227. 0 19. 6 17. 4 14. 4 18. 2 16. 5 A

A A 1. 0 3. 9 U . l 1. 1 1. 1 0. 9 0. 9 1. 1 M UT A G EX P DATE : 

### TES T TYPE DILUTION : E N

I C 04068 3 : 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 59 0 I T Y CHEMICAL : ED C 

### STRAIN : TA9 7 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LGM CONTRAC T NO. : 15148 2 

### ACTIVATION : CSDOO I BATCH : 

### D07 3 COLONIES :
SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG E STDDEV POSITIV E LEVE L COUN T B GCOUN T BGCOUN T EGCOUN T COUN T O/ C M R 

### M E

S l P I P 2 9 9 0 4 0 4 0.0 0

1.0 0 2.0 0 50.0 0 100.C O 250.0 0 500.0 0 ICOO.O O 22 8

67 8 171 3 21 7 19 > 16 5 21 4 23 3 21 5

70 3 160 8 16 3 25 3 16 4 26 2 19 5 22 5

69 8 167 3 21 4 21 3 18 2 24 3 0 222. 7

6^3. 0 1798. 0 198. 0 220. 0 177. 0 239. 7 142. 7 6. 8

13. 2 80. 5 30. 3 30. 1 11. 4 24. 2 125. 0 1. 0

3. 1 8. 1 0. 9 I. G 0. 6 1. 1 0. 6 MUTAGENICIT Y EX P DATE : 04088 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : 59 0 SOLVENT / POSITIV E DCS E

LEVE L CHEMICAL : ED C



### STRA T f A9 7 PLATED : 13 0 TECHNICIAN : PLAT E COUN T A : 

### B G PLAT E COUN T LG

M B : B G CONTRAC T NO. : 19148 2



### ACTIVATION : HEPAO I BATCH : 

### DC7 3 COLONIES :

PLAT E COUN T 

## c : B G AVERAG E COUN T ST DDE

V CCUN T Q/ C M

R 

### M E

S l P I P 2 9 9 0 4 0 4 0.0 0

0.5 0 1.C 0 50.0 0 100.0 0 250.0 0 500.0 0 300.0 0 24 2

37 6 113 5 22 6 21 2 24 3 28 9 9 19 9

34 4 114 7 19 1 24 4 21 4 28 5 17 3 18 1

35 9 105 9 23 0 23 3 21 4 22 2 16 4 207. 3

360. 3 1127. 0 215. 7 229. 7 223. 7 265. 3 122. 0 31. 3

17. 0 25. 0 21. 5 16. 3 16. 7 37. 6 98. 0 I. C

1. 7 5. 4 1. 0 1. 1 1. 1 1. 3 0. 6



### 9 0

# to' P.9 9



### S:S0LVENT PsPOSITIVE NsANTHRAMIN E W/ O S 9 *sTES T COMPOUND C0Nsl9148 2 CHEMsED C STRAIN:9 7 DATE:04088 3 ACTIV : ACTx:0 5

R E V E R T A N T C 0 

## u N T 2250. 0 • t i i 

## ! 200C 0 •

; i 

### ! ; 1750. 0 •

• i i 

### ; 1500. 0 . •

; i i 

### ; 1250. 0 •

; ; t i 

### 10C0. 0 •

f I I I 

### 750. 0 • » i i i 

### 500. 0 • ; i i i 

### 250. 0 •

! 

## s

, i
t 

### 0. 0 • PLOT OF AVGCOUNT'DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIND

1 0 10 0 130 0 DOS E I NMICROGRAM S

9 1

### P. 1



# .W S=S0LVEN T P=P0SITIV E N=ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D

C0N=19148 2 CHEM=ED C STRAIN=9 7 DATE=0408e 3 ACT1V=CSD00 1 ACTX=C 5

R r V r T A N 

### T C 0 

## u N T 1800. 0 •

• ; i 

### !
• 

### f 

### ! ; •
• 

### t t i 

### •
• i 

### • ; i
• i 

### ; i i
• 

### • i 

### ; i
• t 

### ; t i
• i t t i 

### 1600. 0

1400. 0

1200. 0

1000. 0

f 00. 0

600. 0



### 4c :

200. 0



### 0. 0 PLO T OF AVGCOUNT.OOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

IC IC C 10C C 

## i

## :o c DCS E I N "UROGRAM S

### P. 2

f'•• •

S=SCLVEN TP=POSITIV E N=A"NTHRAMIN E W/ 0 S 9 •= TES TCOMPOUN D

C0N=19H8 2 CHEM^D C STRAIN=9 7 DATE=040fe8 3 ACTJVrHCPAO l ACTX=0 ^ PLO TO FAVGCOUNT«DOS E SYMBO L I S VALU E OFSPIN D ! t 1100. 0i

» ! ! ; 1000. 0•

! I ! 900. 0 •

| ! ! 800. 0 •

! ! i 700. 0 •

! ! 600. 0

500. 0

400. 0

300. 0

200. G

100. 0

0 . 0 1 0 10 0 DOS E I N

MICROGRAM S 1C0 0 1 C O



### 93

## P. 3

> # MUTAGENICIT YO F ED C - TA9 8

MUTAGENICIT Y EX P DATE : 04088 3 CHEMICAL : ED C TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 8 DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 19146 2 ACTIVATION : PATCH : 007 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E S I 9 9 P I 0 3 P 2 0 3 DOS E

LEVE L 0.0 0 1.C 0 2.0 0 50.0 0 IOC.C O 25C.0 0 SOC.0 0 1C0C.0 0 PLAT E

COUN T 2 7 16 1 26 4 4 0 4 4 4 4 5 2 3 7 A : B G PLAT E B : COUN T B G 4 1 16 3 26 5 4 3 0 3 4 4 0 2 6 PLAT E C

COUNi " B G 3 1 14 1 42 4 3 0 3 2 4 5 2 9 2 5 AVERAG E

COUN T 33. 0 155. 0 317. 7 35. 0 35. 3 41. 0 40. 3 29. 3 ST DDE V

CCUN T 7. 2 12. 2 92. 1 7. 1 7. 6 6. 1 11. 5 f . 7 O/ C M

R 

### M E

1. 0 4. 7 9. 6 1. 1 1. 1 1. 2 1. 2 0. 9 MUTAGENICIT Y E X P DATE : 

### 04oee 3 CHEMICAL : ED C TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 8 DILUTION : U2 0 PLATED : IC O TECHNICIAN : LG M MIXTURE : 5C Q CONTRAC T N O ACTIVATION : BATCH : D07 3 C'OLOME S = : i°i«8 2

CSD00 1

SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 9 9 0 4 0 4 DOS E

LEVE L 0.0 0 1.0 0 2.0 0 50.0 0 100.0 0 250.C O 500.0 0 1CGG.C 0 PLAT EA :

COUN T E G 3 C 91 5 183 9 3 2 2 2 4 9 3 9 4 9 PLAT E B :

COUN T B G 4 2 80 3 l c 4 8 3 6 4 7 3 3 3 5 6 5 PLAT E C :

COUN T P G 4 2 99 0 202 0 4 4 5 2 3 6 4 2 41 AVERAG E

COUN T 41. C 902. 7 1935. 7 37. 3 40. 3 39. 3 38. 7 51. 7 ST C DE V

COUN T 1. 7 c «». l 91. 1 6 . 1 16. 1 8 . 5 3 . 5 12. 2 0 

## /c

'« 

### u 1 M R

1. 3 22. 0 47. 2 0. 9 1. 0 1. 0 0. ° 1. 3 

### Mf .

M UT A

G EX P CATE : TES T TYP E DILUTION : E N

I C C4088 3 0 5 l : 2 0 V.IXTUFE : 50 0 I T Y CHEMICAL : ED C STRAIN : TA9 8 PLATED : IC O TECHNICIAN : LG M CONTRAC T VO. : 191*8 2 

### ACTIVATION : HEPAC I BATCH : D07 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 9 9 0 4 C 4 COS E

LEVE L 0.0 0 0.5 0 1.C 0 50.C O 10C.C C 250.0 0 500.0 0 1000.C O PLAT E

COUN T 4 0 21 6 104 6 5 4 4 0 4 0 5 C 4 3 A : BG PL& T E P : COUN T P G 4 2 2e 8 98 6 4 2 3 9 3 9 4 3 3 0 PLAT Ec :

COUN T P G 4 C 2 3 5 110 7 4 6 41 4 2 5 2 3 4 AVERAG E

COUN T 40. 7 246. 3 10*6. 3 47. 3 40. 0 40. 3 46. 3 35. 7 ST C

### rr. v

CCU M 1. 2 27. * 60. 5 6 . 1 l . C l » b 4 . 7 6 . 7 C/r M R

1. 0 6 . 1 25. 7 1. 2 1. 0 1. 0 1. 2 

### vr .

9 4

# P. 4



# I S:sOLVEN T P:P0SITIV E N=«NTHRAMIN E W/ 0 S 9 »s?E$ 1 COMPOUN D

C0N:19148 2

! ! 330. 0 •

I ! | 300. 0 *

| ! ! 270. 0 •

! ! 240. 0



### 210. 0

160. 0

150. C

12C. C

90. 0

6 0

. C

30. 0

0 . 0 

### CHEM=ED CSTRAIN: Q 

### 8

PLO T O F AVGCOUNT.OOS E DATL":04088 3 ACTIV : ACT*=0 5 SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

1 0 IC C DCS E I N

MICROGRAM S &CC- 0 i re c

### P. 5

!«-> " ( » S=SOLVEN T PrPOSlTIV E N=ANTHRAMIN E U/ O S 9 *=TEi T COMPOUN D

C0N=19148 2 CHEM=ED C STRAIN=9 8 DATE=04088 3 ACTIV=CSD00 1 ACT*=C 5

PLO T O F AyGCOUNT*DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

F. E V E P T A N T C 0 

## u N T 2250. 0 •

2000. 0 •

1750. 0 •

i
. i 

## ! i 

### 1500. 0 4

-

1250. 0 •

10CC. C

750. 0 •

500. 0 •

250. 0 «

0. 0 • 

### 1 0 

### 10 0 1C0 0 DOS E I NMICROGRAM S 1 0 C 0 C



### 9 6P. 6



# rr -ym- t -.utjuw— <ipi^i^p.".jw*«^i *•l.iiliniMti " II.;IJ.^^-' Ffcwn ••^-^•m.yy^^gJP»-.»i|gifWiM»y^^)BB»^|W)l^ty>qy^^|^ i .rBHiun^i ^ m«,jij i w^jw^ |

\ & ' S=SOLVEN TP=PCSITIV E N=ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 «=TES TCOMPOUN D

C0N=19148 2 CHEM=ED C STRAIN=9f i DATE=04088 3 ACTIV=HEFA0 1 ACTXr 0 5 PLO TO F AVGCOUNT.DCS E SYMBO LI S VALU E OF SFIN D ; i 1100. 0•

1000. 0•

900. 0 •

R E V E R T A N T C 0 U r! T 800

. 0

700. 0

600. 0

500. 0

400

. C

300. 0 •

t j
• • • • •

• i i i • ;
t
•

200. 0 •

100. 0•

0 . 0 • 1 0 IC C DOS E I N MICROGRAM S 10C 0 lfO O

97P. 7

g n niml.lpa-U.j l ',j.»ji! i»«i.ui«im.p»_u-.1 1 'vmnwwii^nmefpemma^m^mf iwnww.u wm-y u um -^wji ti*w» w,i,u i



### MUTAGENICIT YO

F ED C - TA10 0

MUTAGENI C EX P DATE* . C4088 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : SOLVENT / DOS E POSITIV E LEVE L T Y CHEMICAL : EDC STRAIN : 

### TA10 0 PLATED : TECHNICIAN : LG

M

S I 9 9 0.0 0 P I 0 1 1.C 0 P 2 0 1 2.0 0

50.0 0 100.0 0 250.0 0 500.0 0 1000.0 3 MUTAGENI C EX P DATE : 04088 3 TES T TYPE : 

### C 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 50 0 PLAT E COUN T 33 9 60 3 7B 3 37 1 28 4 35 1 34 4 57 2 A : 

### 8 6 PLAT E B : COUN T B

G 32 0 59 8 102 3 34 3 T2 0 35 0 32 7

I T Y CHEMICAL : ED C STRAIN : TAIO O 

### PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. :

ACTIVATION : BATCH : 

### 007 3 COLONIES : 19146 2

PLAT E COUN T 24 8 56 8 90 9 30 1 19 2 34 4 32 3 56 1 c : e G AVERAG E COUN T 302. 3 589. 7 935. 0 338. 3 232. 0 348. 3 331. 3 589. 7 ST ODEV

COUN T 48. 0 18. 9 120. 0 35. 2 47. 2 3. 8 11. 2 40. 5
CONTRAC T NO . ACTIVATION : BATCH : 

### DC7 3 COLONIES : : 19146 2

CSD00 1 Q/ C M R

N A A A 1. 0 2. 0 3. 0 1. 1 0. 8 1. 2 1. 1 2. 0 

### ME C

SOLV'NT / FOSITIV E S I F I P 2 9 9 0 4 0 4 DOS E LEVE L 0.0 0 1.0 0 2 . 0 0 50.0 0 100.0 0 250.0 0 503.0 0 1C00.0 0 PLAT E

COUN T 26 6 96 5 219 3 23 6 35 2 21 2 23 0 20 2 A : 

### P G PLAT E e : 

### COUN T R

G 25 6 152 2 262 2 29 3 31 1 23 0 20 2 24 1 PLAT E C :

COUN T 8 6 24 5 150 7 251 5 19 4 33 9 22 1 16 1 22 0 AVERAG E

COUN T 255. 7 1332. 7 2443. 3 241. 0 334. C 221. 0 197. 7 221. 0 ST D DE V

COUN T 

### 10. 5 315. C 223. 3 49. 7 

### 21. 0 9 . 0 34. 7 1<». 5 fi/C M R MC C
N A A A 1. 0 5 . 2 9 . 6 0 . 9 1. 3 0. ? O. P 0 . 9 U NIC IT Y E X P CATE : C4088 3 T!IS T TYPE : 0 5 DILUTION : 1 : 2 0 

### MIXTURE : 50 0 CHEMICAL : IO C STRAIN : TAIO O 

### PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CGNTRAC T NO .

ACTIVATION : 

### BATCH : P07 3 COLONIES : : 191 4 8 2

HEPAC 1

SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 9 9 C 4 0 4 DOS E LCVE L O.CO 0.5 0 1.0 0 50.0 0 100.0 0 250.0 0 5 0 0 . C0 1000.0 0 PLAT E

COUN T 27 2 55 4 142 2 2* 4 26 b 26 3 2P E 26 2 A : 

### SG PLAT E « : COUN T P.

G 21 3 60 3 161 7 28 2 30 6 25 6 34 3 19 4 FLAT E C :

COUN T P

G 27 5 57 1 146 7 27 4 26 1 35( > 29 7 16 3 AVERAG E

COUN T 253. 3 576. 0 1 5 0 2. 0 r G

### o . c 277. 7 292. 3 309. 3 213. 0 ST DDE

V CCUN T 35 . P 24. 9 102. 1 5. 3 24. 7 55. 2 29. 5 61. 7 

### G/ C

N A A MR 

### 'E

C
1. 0 j o



### 9S

### P. 8

UJW^PcHHWB H • JIPU. I •i»yiMiti!I.L l •*tA.jpi» W M'\WM^JF''l»iT *"IHWPH. i

. .» « ipBUfii i

1


# - 1 S:SOLVEN TP:P0SITIV E NZANTHRAMIN' E W/C S 9 *:TES TCOMPOUN D

C0N=19146 2 CHEM:ED C STRAIN=10 0 CATE:Q4086 3 ACTIV : ACTX-Q 5

PLO TO F AVGCOUNT.DOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D
900. 0 • 

## ! ! i i 

### 600. 0 *

! ! ! i 700. 0 • 

## ! i i ! 600. 0 •

i i 

## ! i 500. 0 • 

## • !
400. 0

300. 0• 5

200. C

100. 0•

!

0 . 0 • 

## i o m o
COS E I N-ICROGRA- S 1 0 00 

### i:oc o

9 9P. 9

pi ; IJUHf f^HJ*m'aw^''J ^

iflBJ , . ; •^jgMjjiiippRpj j


# i

R r V E R T A N T C 0 

### u N T S = 

### S0LVEN T P:P0SITIVE N:ANTHRAMIN E U/ 0 S 9 «:TES T COMPOUND C0N:19148 2 CHEM=ED C STRAINMO O DATE=04088 3 ACTI V = CSD00 1 A'CT

* = 0 5 PLOT OF AVGCOUNT.OOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIND ; 2750. 0 •

i 

### ; t 2500. 0 •

! P ! 2250. 0 •

2000. 0

1750. 0

1500. 0 •

1250. 0

1 C GO. 0 •

750. C •

500. 0 •

250. 0 •

0. 0 • 1 0 ICO COS E I NMICROGRAM ? 100 0 1 COCO

10 0P.1 0



### S=SOLVEN T P:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D C0N=19148 2 CHEM:ED C STRAIN:10 0 DATE=04088 3 ACTIV:HEPA0 1 ACTX:0 5 PLO T OF AVGCOUNT.OOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIND

R E V r R T A N T C 0 

## u N T 1500. 0 • i 

### • 1400. 0 •

• i 

### 1300. 0 •

i 

### ! 1200. 0 •

• i 

### 1100. 0 •

I I 

### 1000. 0 •

I I 

### 900. 0 •

i i 

## eoo. o•

i i 

### 700. 0 •

! i 

### 6 00. 0 •

; • 500. 0 •

; i 

### 400. 0 •

I I 

### 300. 0 •

' S i 

### 200. 0 •

i 

### • 100. 0 •

I I 

### 0. 0 - » ! 0 1 0 IO C DOS EI N

MICROGRAM S 1 C O0 1 i , J0 cP.1 1



### . V ' MUTAGENICIT YO F E C - TA9 7 y> 

### | MUTAGENICIT YCONTRAC T NO. : 19148 2 EX P DATE. * 04088 3 CHEMICAL : E C ACTIVATION : TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 7 BATCH ! D07 3 DILUTION : : PLATED : COLONIES : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG E ST DDEV G/ C M

RMEC POSITIV E LEVE L COUN T B GCOUN T BGCOUN T B 6 COUN T COUN T S I 9 9 0.0 0 18 8 19 3 19 4 191. 7 3. 2 A l. C P I 0 2 50.0 0 73 5 83 2 66 4 743. 7 84. 3 A 3. 9 P 2 0 2 100.0 0 187 5 228 5 224 9 2136. 3 227. 0 A 11. 1 33.0 0 25 8 26 0 24 5 254. 3 8. 1 1. 3 100.0 0 32 1 33 7 29 1 316. 3 23. 4 1. 6 333.0 0 51 3 47 5 54 0 509. 3 32. 7 2. 7 1C00.0 0 86 6 92 2 97 2 920. 0 53. 0 i 4. 8 * 3333.0 0 114 5 110 1 112 4 1123. 3 22. 0 5. 9 MUTAGENICIT YCONTRAC T NO. : 19148 2 EX P DATE : 04088 3 CHEMICAL : E C ACTIVATION : CSD00 1 TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 7 BATCH : D07 3 DILUTION : i : 2 0 PLATED : 10 0 COLONIES : MIXTURE : 50 0 TECHNICIAN : LG M SOLVENT / DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLATE*C : AVERAG E STDDEV G/ C M

RME C POSITIV E LEVE L COUN T B GCOUN T BGCOUN T BGCOUN T COUN T S I 9 9 0.0 0 22 8 21 5 22 5 222. 7 6. 8 N A 1. 0 F I C 4 1.0 0 67 8 70 3 69 6 633. 0 13. 2 A 3. 1 ?2 0 4 2.0 0 171 3 180 8 187 3 1798. 0 80. 5 A 8. 1 33.0 0 18 8 24 3 21 2 214. 3 27. 6 1. 0 100.0 0 22 0 25 6 30 3 258. 7 40. 1 1. 2 333.0 0 45 5 57 2 43 1 486. 0 75. 4 2. 2 1000.C O91 2 72 0 95 5 862. 3 125. 1 ; 3. 9 • 3333.C O82 2 70 4 54 7 691. 0 L38. 0 3. 1 MUTAGENICIT YCONTRAC TNO. : 1?14? 2 

### EXP DATE : 04088 3 CHEMICAL : EC ACTIVATION : HEPA0 1 TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 7 BATCH : C07 3 DILUTION : K2 0 PLATED = 10 0 COLONIES : MIXTURE : 50 0 TECHNICIAN : LGK, SOLVENT / DOS E PLATE A : PLAT E P : PLAT E C : AVERAG E ST DDEV G/ C M 

### P ME C POSITIV E LEVE L COUN T P GCOUN T eGCOUN T P GCOUN T CCUN T S I 9 9 0.0 0 24 2 19 9 16 1 207. 3 31. 3 N A ' 1. 0 P I 0 4 0.5 0 37 8 34 4 35 ° 3b0. 3 17. 0 N A 1. 7 P 2 0 4 1.G 0 113 5 114 7 109 9 1127. 0 25. 0 A 5. 4 33.0 0 21 5 19 2 22 2 239. 7 15. 7 i 1. 0 IOC.0 0 20 5 25 5 242 ' 234. 0 25. 9 1. 1 333.0 033 929 930 1 313. 022.51. 5 1000.0 082 482 461 2820. 06. 94. 0• 3333.0 0130 8 118 6126 01252. C 60. 4 ; 

### b. C

10 2

### P.1 2 

# ip S=SOLVEN T P:POSITIV E N=ANTHRAMIN E U/ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D

C0N=19146 2 CHEM:E C STRAIN:S 7 DATE:04C88 3 ACTIV : ACTX=0 5

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2250. 0 •

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0. 0 • 

### 1 C irc o l ric e CCS E If . "IC^CGRA^ S



### 103P.1 3


# i S:SOLVENT P:P0SITIVE N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 *:TES T COMPOUND

C0N:19148 2 CHEM:E C STRAIN=9 7 DATE:0408b 3 ACTIV=CSD0C 1 ACT*=0 5

PLO T OF AVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D
1800. 0 •

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R E V r R T A N T C 0 U \ T CON:1 9

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900. 0
600. C
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500. 0
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300 . 0
200 . C
100. 0


### 0. 0 S:SOLVEN T P:PCSlTIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 «:TES T CGMPGUN D 148 2 CHEM

= EC STRAIN:9 7 " DATE:C4068 3 ACT1V:HEPA0 1 ACTX=0 5 PLO T OF AVGCOUNT.OOS E SYMBO L I S VALU E OF SPIN D
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MICROGRAM S



### 10 5

1P.1 5



### # • ! M UT A G EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : MIXTURE : SOLVENT / POSITIV E S I 9 9 P I C 3 P 2 0 3 MUTAGENICIT YO F E C - TA9 8

E N I C I T YCONTRAC T NO. : 19148 2 0436e 3 CHEMICAL : E C ACTIVATION : 

### : 0 5 STRAIN : TA9 8 EATCH : 

### 007 3 : PLATEE = COLONIES :

TECHNICIAN : LC M DOS E PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG E ST DDE V Q/ C M

RME C LEVE L COUN T B GCOUN T B GCOUN T B GCOUN T COUN T 0.0 0 2 7 4 1 3 1 33. 0 7. 2 A 1. 0 1.0 0 16 1 16 3 14 1 155. G12. 2 A 4. 7 2.0 0 26 4 26 5 42 4 317. 7 92. 1 A 9. 6 33.0 0 3 b2 6 2 8 30. 7 4, 6 0. 9 100.C O2 8 2 6 3 0 28. 0 2. 0 0. 8 333.0 0 4 0 3 6 4 1 39. 7 1. 5 1. 2 1C00.C 0 3 3 5 2 4 5 43. 3 9. 6 1. 3 3333.0 0 6 G4 2 6 4 55. 3 11. 7 1. 7 MUTAGENICIT YCONTRAC TNO. : 19146 2 

### EX P CATE : 04088 3 CHEMICAL : E C ACTIVATION : CS000 1 TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 8 BATCH : 007 3 DILUTION : i : 2 0 PLATED : 10 0 COLONIES : , MIXTURE : 50 0 TECHNICIAN : LGM i SOLVENT / OOS C PLAT E A : PLAT E B : PLAT E C : AVERAG C STDDEV Q/ C M

R"E C POSITIV E LEVE L COUN T E GCOUN T 8 GCOUN T PGCOUN T CCUN T S I 9 9 0.0 0 3 9 4 2 4 2 41. 0 1. 7 N A 1. 0 PI C 4 1.CO91 5 80 3 99 0 902. 7 94. 1 A 22. C P 2 C 4 2.CO183 9 194 8 202 C 1935. 7 91. 1 A 47. 2 33.C O4 1 4 4 3 7 40. 7 3. 5 ! 1. 3 ICO.C O4 4 5 0 4 4 4fc. O3. 5 1. 1 333.C C 4 5 4 6 5 0 47 . Z2. 6 1. 1 ' ICOO.O C 5 7 6 5 6 7 63. 0 5. 3 1. 5 3333.0 0 6 2 e i 7 3 72. 0 9. 5 l. e MUTAGENICIT YCCNTRAC TNO. : 191*8 2 

### EX P Ltvz:

r*C5E 3 CHEMICAL : E C ACTIVATION : HEPAP I 

### TES T TYPE : ; 

### 0 5 STRAIV : TA9 8 PATCH : CC7 3 DILUTION : i : 2 0 PLATEC : IC C CCLCME S = MIXTURE : 50 0 TECHNICIAN : LG M SOLVTNT / COS E PLATE A : PLAT E F : FLAT E C : AVERAG E ST C PEV G/ C M

RME C POSITIV E LEVE L CCUN T B GCOUN T B

GCOUN T B

GCOUN T COUNT i 

### S I 9 9 0.0 0 4 0 4 2 4 0 40. 7 1. 2 N A 1. 0 F I 0 * 0.5 0 21 6 28 8 23 5 246. 3 37. 3 A 6. 1 P 2 0 4 1.0 C 1C4 6 98 6 110 7 1346. 3 60. 5 A 25. 7 33.0 0 2 8 5 2 4 4 41. 3 12. 2 1. 0 100.C O4 6 4 9 4 3 *b. C 3. C 1. 1 333.C O5 9 5 1 4 9 53. 0 5. 3 1. 3 1 COO.C O7 6 7 1 5 3 68. 3 9. 3 1. 7 3333.C O8 9 8 5 6 4 86. 0 2. 6 2. 1



### 106

# r P.1 6



# L * S:SOLVENT P:P0SITIVE N : AN* T H RA MIN E W/ 0 S 9 «:TES T COMPOUND , C0N:19146 2 CHEM:E C STRAIN:9 6 DATE:04088 3 ACTIV : ACTX:0 5

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### P.1 8

S=SOLVEN T P:P0SITIV E N = ANTH RA * I N E U/ 0 S 9 *:TES T COMPOUN D C O:19148 2 CHEM:E C STRAIN:9 8 DATE:Q40PR 3 ACTIV:HEPA0 1 ACT»=0 5 PLO T O F AVGCOUNT.OOS E SYMPO L I S VALU E O F SPIN O

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### P.1 9

MUTAGENICIT YC

F EC - TAlO O

M UT A GE N I EX P DATE : 04088 3 TES T TYPE : 0 5 OILUTION : I MIXTURE : SOLVENT / DOS E POSITIV E LEVE L S I 9 9 0.0 0 P I 0 1 1.0 0 PZ 0 1 2.0 0

33.0 0 100.0 0 333.0 0 1 ICG.0 0 3333.0 0 CIT Y

CHEMICAL : EC STRAI N PLATE T ; TAlO O TECHNICIAN : LG

M PLATE A I COUN T BG 

### 33 9 60 3 78 3 61 2 83 4 119 9 225 8 220 0 PLAT E B :

COUN T e G 

### 32 0 59 8 102 3 

### 44 4 67 9 149 2 241 4 221 2 CONTRAC T NO. :

ACTIVATION : BATCH : 

### DC7 3 COLONIES :

PLAT E C : AVERAG E COUN T BGCOUN T 24 8 302. 3 56 8 589. 7 90 9 905. 0 44 5 500. 3 88 5 866. 0 141 2 1367. 7 236 5 2345. 7 216 2 2191. 3 19146 2

ST DDEV COUN T 48. 0 18. 9 120. 0 96. 7 27. 9 151. 4 79. e 26. 1 Q/ C M

R

N A 1. 0 A 2. 0 A 3. 0 

### 1. 7 2. « 4. 5 7. 8 7. 2 ME C

MUTAGENI C ZVP DATE : C4C88 3 TES TTYPE : C 5 DILUTION : I I 2 0 MIXTURE : 50 C 

### T Y CHEMICAL : E C STRAIN : 

### TA1C 0 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2



### ACTIVATION : CSDOO I BATCH : 

### D07 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT EA :

COUN T B

G PLAT EP : COUN T P G PLAT E C :

CCUN T P

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T G/ C M

R 

### ME C

S I P I P 2 9 9 0 4 C 4 C O O

1.0 0 2.C C 33.0 0 1C0.C 0 333.C O 1C0C.3 0 3333.0 0 26 6

96 9 21R 3 25 6 44 8 121 0 224 4 241 5 25 6

152 2 262 2 28 1 35 1 1C0 8 156 7 226 2 24 5

150 7 251 5 25 5 36 9 66 6 201 6 228 9 255. 7

13 3 2. 7 2443. 3 264. 7 389. 3 961. 3 2042. 3 2322. 0 10. 5

315. 0 223. 3 14. 2 51. 6 275. 0 189. 9 bl. 7 N

A A A 1. 0 5. 2 9. 6 1. 0 1. 5 3. 8 8. 0 9. 1 M UT A 3 EX P DATE : TTS T TYP : DILUTION : : E N

I C 04088 3 : 0 5 i : 2 0 W 

### IXTU=?E : 5C C I T Y CHEMICAL : EC STRAIN : TAIO O PLATEQ s 1C 0 TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO.' . 19148 2



### ACTIVATION : HEPAC I BATCH : 

### DC7 3 COLONIES :
SOLVENT / POSiTiv r DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T B

G PLAT E CCUN T 

## e : B G PLATE C : COUN T P

G AVERAG E COUN T S T DDE V

COUN T Q/ C MR KE C
S I P I P 2 9 9 0 4 0 4 

### CO O

C.5 0 1 . C O 33.0 0 100.0 0 333.0 0 1 CCC.CO 3333.0 0 2 7 2

55 4 142 2 18 ? 3 5 3 51 4 241 6 2«-9 2 2 1 3

6 0 3 lbl 7 

### 20 1 3 9 7 7 9 7 

### 146 0 241 7 2 7 5

5 7 1 146 7 1S 8 3 3 3 5 0 6 

### 101 5 241 2 253. 3

576. 0 

### 1502. 0 160. 3 361. C 605. 7 1630. 3 24<«C. 3 3 ?

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### 1 . 0 2 . 3 5 . Q 

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C0N:19148 2 CHEM:E C STRAIN:1C 0 DATE:04088 3 ACTIV : . ACTX = 

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PLO T OF AVGCOUNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O F SFIN D\

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### P.2 2

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# f S=SOLVEN T P:P0SITIV E N:ANTHRAMJN E

### U/ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D

C0N:19148 2 CHEM:E CSTRAIS=10 0 DATE=04068 3 ACTIV:HEPAO 1 ACTXrQ 5

PLO T O F AVGCOUNT.OOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

R E V E R T A N T C 0 

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### 1 0 IO C CCS E I N

MICROGRAM S 1CC 0


# X 113

### i P.23

MUTAGENICIT YC F N P TA9 7

1 UT A

G EX F DATE : TES T TYPE : DILUTIO N MIXTURE : E N

I C I T Y :42be 3 CHEMICAL : N P ; 0 5 STRAIN : TA9 7 : PLATED :

TECHNICIAN : Lr . H CONTRAC T VO. : ACTIVATION : BATCH : 027 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A :

B G PLAT E CCU'. T t : 

### PLAT E

COUN T c :

B G 

### AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T G/ C M

R ME C

S I P I P 2 9 9 0 2 0 2 o.o c 50 . 0 0 1C0.C C 33 . C O IOC.C O 333.0 3 1 0 G0 . 0 C 

### 3333.C C 13 2

56 2 122 2 14 2 12 S 9 6 12 0 9 6 12 4

47 3 85 1 11 3 1 2 3 11 7 9 6 12 5 11 5

34 6 139 3 9 8 12 2 9 5 13 & 1C 6 123. 7

463. 3 1155. 3 117. 7 123. 3 1C2. 7 116 . C 139. 0 8. 5

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### 12n 14 3 1 2 0 11 5 PLAT E e :

COUN T -.G 12 4 47 3 95 1 14 5 i4 * 14 S 13 9 7 6 CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : BATCH. * o?7 3 [COLONIES :
PL**T E c : COUN TBG AVERAG E

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### 277. 1 9 . 1 7 . 8 

### 14. 0 

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M CONTRAC T NO. : 19146 2 

### ACTIVATICN : 

## csooo 2 BATCH : 027 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

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5 = 9 1 "fc c 15 4 14 5 1 6 a 17 1 15 C li t

6 = 9 12: 7 1 -« . l'- 5 17 4 17 t 1 7 : 1 2 =

71 6 114 9 13 3 18 9 17 5 16 3 16 5 

### 12r. C

6 

### 71. 3 1 1 5 S. C 1 4 c . 3 173. C 174. C 16°. 7 161. 7 5 . 3

63. 2 94. 6 11. 6 24. 3 5 . 0 6 . 1 

### 1 C 4 1. 3

5 . 2 9 . 0 1. 1 1. 3 1. 3 1. 3

MUTAGENICIT Y ZxP DATE : 04?t» 3 CHEMICAL : -i-i TES TTYP: : 3 5 STRAIN : TA= 7 3ILU7ION : i : 2 0 hLATEO : 1 - 3 2 MIXTURE : 51 3 TECHNICIAN : ; C C T^AC TNO. : ACTIVATIC N : Hi BATCt- : 0 2 7 3 COLON!: s = 1 9 1 * • e- 2 P A 1

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A

COUN T ti

l PLAT E T3UN T PLAT :

CCU\ T b O A

V LF i C L CU\ T ST DOE V

CCUN T U/ C *" ? ME C

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### 11. 

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7. c i. : 1. 2 1.. . 1. 5

12 6upjWUWPUSaspp e lif^llf.jjii^.^^^pg^lW^^pij i

CC N

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1400. 0
1303. 0
1230. C
1KC. C
R1033. 0

3 U N T S:SOLVEN TP=FCSITIV E N:ANTHRAVIN E k /$ S 9 *:TES TCOMPOUN D :19148 2 CHEH:N 3 STRAIN : 9 7 DATE::42«ie 3 ACTIV : ACT*:©? "

PLO TOF AVGCOUNT'DOS E SYMBO LI S VALU E C F SPIN D ! • 

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### 100. c • ! ; 0. 0 •

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## i o ir e DOS EI NMICROGRAM S 10: 0 

### ico : o

12 7P.3 7


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# T l'WP^^^^?ft^i^»iw^^.Vi W

S:SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E w/ 0 S 9 «:TES TCOMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:N 3 STRAIN:9 7 DATE:C4266 3 ACTIV:CSD00 2 A3TX:C 5 PLO TO

FAVGC3UNT*D0S E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

V r R T A N T 

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I I c c • I C 10 0 DOS E I N MCRCCP.AM S 1CC 0 10 0 J O

12 6

### P.3 8

S=SOLVEN TP:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 *:TES TCOMPOUN D C0N=19146 2 CHEM:N B STRAIN:9 7 0ATE:C4268 3 ACTiV:HCPA0 1 ACT*=0 5

1100. 0

1000. 0

900. 0

300. 0

700. 0

60C. 0

&C0. 0

400. 0

3 C 0

. 0

200. C

100. 0

0. 0 PLO TO F AVGCCUNT'DOS C SYMBO LI S VALU E OF SPIN D



### SOTE : 3 1 1 0 IC C PCS EI N

*ICR - .-RAM S 1 O^ S HA DMISSIN GVALUE S O RWER ECU T O f RANG E 1 C0 CCMUTAGENICIT YO F N B- TA9 S P.3 9

MUTAGENICIT Y E X P DATE : 04288 3 CHEMICAL : N B TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 6 DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO. : 1914E 2 ACTIVATION : BATCH : 027 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A :

B G PLAT E B : COUN T B G PLAT E C :

COUN TB G 

### AVEPAG E

COUN T ST DDEV

COUN T G/ C M

R ME C
S I P I P 2 9 9 0 3 0 3 3.0 C

1.0 0 2.C O 33.0 0 100.C O 333.0 0 lCOO.C u 3333.0 0 1 3

21 4 34 6 2 6 3 1 3 2 3 2 2 0 1 4

19 2 34 3 3 1 3 9 2 7 3 2 7 4

17 1 32 1 2 0 3 1 2 9 3 2 2 9 1C. 3

192. 3 336. 7 25. 7 33. 7 29. 3 32. 0 13. 7 5 . 5

21. 5 13. 7 5 . 5 4 . 6 2 . 5 0 . 0 

### 11. 1 N A

A A l . C I F . 7 32. 7 2 . 5 3 . 3 

### 2. e 3 . 1 il. P MUTAGE N I C •iX P DATE : C4268 3 TES TTYPE : C 5 DILUTION : 1. *2 0 MIXTURE : SC O 

### I T Y C-EMICAL : N

B 

### STRAIN : TA9 8 PLATED : 13 0 TECHNICIAN : LGM CONTRAC T NC. : 1914P 2 ACTIVATION : CSDCC 2 BATCH : D27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

COUN T A : 

### EG PLAT E 6 : COUN T [)

G PLAT E COUN T C f B G AVERAG E COUN T ST ODE V

COUN T Q/ C Mf

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S I P I P2 9 9 0 4 C 4 

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1.0 0 2.0. 0 33.C O 100.0 0 333.C C 1CCC.C G 3333.C C 3 C

62 2 16P 6 4 2 4 5 4 7 4 9 3 6 4 2

67 3 166 1 4 1 bC 3 6 3 3 4 4 4 2

6fc 2 17« 4 3 8 3 6 4 6 4 9 4 5 36. 0

658. 0 1713. 7 4 C 3 43. 7 43. C 42. 7 42. 3 6. 9

31. 7 70. 7 2. 1 7. 1 6. 1 11 . C 3. A l. C

17. 3 45. 1 1. 1 1. 2 1. 1 •1. 1 1. 1 MUTAGENICIT Y EX P DATE : C42&8 3 TES T TYPE : 

### 0 5 DILUTION : i ; 2 0 MIXTURE : 53 0 CHEMICAL : N B STRAIN : TA5 3 

### PLATED : ICC TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO , A C TI VATIC* . : PATCH : D37 3 COLONIES : : 1914E 2

HEFA7 1

SOLVENT / POSITIV E COSE

LEVE L PLAT E A :

CCUN T b

G PLAT E fa: CCUN T b & PLAT E

COUN T 

## c : 6 6 AVERAG E COUN T ST C DE V

COUN T C/ C M

R 

### ME C
S I P I P 2 0 4 0 4 0.3 0

0.5 0 1.3 3 33.C O 100.0 0 333.3 0 1CC C 3 C 3333.0 0 4 3

40 7 35 1 4 6 4 2 4 7 

### 3 1 2 R 4 0



### 57 4 121 3 3 2 5 4 3 2 4 2 3 5 3 1

6C 7 174 7 2 7 4 2 3 = 2 5 4 2 3F. 0

52C 3 1 4 3 7 . C 35. G 46. C 3 C

. 3 32. 7 35. 0 1C7. 2

2 77. 2 9 . F 6 . 9 7 . 5 8 . 6 7 . 3 

### i . c

13. a 3 7 . f 0 . ° J1. 2 l . C 

### c . c

13 0

### P.4 0

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### TES T C0MP01i« n

CG N = 19146 2 CHE M

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### ATE = 0 

### 42££ 3 A CTl5 = A'CT X

### = ! PLO T O F AVGCCUNT.DUS E SYMBO LI S VALU EO F SPIN D

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300. 0•

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### i : c 1CC 3 

### i c o : c COS E I N VICRCGPAM S

13 1P.41

S:SOLVEN TP:FDSITIV E N:ANTHPAMIN E k/ 0 S 9 *:TES TCOMPOUN D CCN:19148 2 CHEM:N 3 STRAIN=9 6 pATE:C42cS 3 ACTIV:CSOOC 2 ACTX:C 5

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• I ! ; • PLO TG F AVGCOUNT.OOS E SYMBO LI S VALU E O F SPIN D

10

. IC G DOS E I N MICRO-RAM S 100 0 1 0C'. 0



### 132P.4 2

S:SOLVEN TP=f&$ITIV E N:ANTHRAMIN E k/ 3 S 9 «:TES TCOMPOUN D ; C0U=19148 2 CH.CM:N 3 STRAIN:9 6 DATE:C42ee 3 ACTIV:h£PA0 1 ACTX:3 5



### T A N T !
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1400. 0 •
1300. 0 •
1200. 0 •
1100. 0 •
1000. 0 • 900. 0 •
800. 0 •
700. : •
6C0 . C

SCO. "

400. 0

3 0 0. 3

200. 3
10C C •
C C • PLO TC FAVGCOUNT.DCS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

I C IC C DOS E I N MICROGRAM S 103 0



### 133

### MUTAGENICIT YC F N B - TA10 C P.43

MUTAGENICIT Y E X P DATE : 04256 3 CHEMICAL : N B TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TAIO O DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M 

### CONTRAC T NO. ; ACTIVATION : BATCh : D27 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE : PLAT E A :

.COUNT BG PLAT E B :

COUN T bG PLAT E c :

COUN TBC 

### AVERAG E

COUN T ST DOEV

CCUN T O/ C M

R 

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S I P I P 2 9 9 0 1 0 1 0.0 0

1.0 0 2.0 G 33.C C 100.3 3 333.3 0 lCCCO C 3333.C O 11 4

35 5 92 0 13 4 9 6 11 1 9 1 11 3 11 3

28 9 87 7 13 3 12 7 15 3 9 5 10 8 12 3

12 7 91 3 13 5 15 2 1C 9 9 8 9 9 116. 7

257. 0 9C3. 3 134. 0 125. 0 124. 3 94. 7 106. 7 5 . 5

117. 3 23. 1 1. 0 2 8 . 1 24. 3 3 . 5 7 . 1 1. 0

2. 2 7. 7 1. 1 1. 1 1. 1 C d 0. 9 MUTAGENICIT Y E X P CATE : C42C6 3 TES T TYPE : 0 5 

### DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : b'cO CHEMICAL : N B 

### STRAIn : TAlO O PLATED : IC C TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NC : 19146 2

A C TIVATICN : CSO0C 2 BATCH : D27 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E

CCUN T A : 

### 3 0 PLAT E r 

### ' CCUN T \3 • 

### PLAT E C :

COUN T 6 0 AVERAG E

COUN T ST DOE

V COUN T Q/ C M

R 

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S I P I P 2 0 4 C 4 O.O C

l.C C 2.C C 33.3 0 1 0 3.0 0 333.3 0 1 C0 C 0 c 3333.0 0 13 1

10* 6 161 9 11 6 11 2 13 7 15 5 12 4 17 1

112 1 61 4 13 0 11 5 12 6 13 ? 12 7 14 2

91 9 51 7 13 5 12 7 19 3 14 2 13 7 14h. G

1C45. 3 9*3. 3 127. 3 

## ue. c 152. C 145. C 129. 3 2 3
. 7

110. 1 570. 2 9 . 8 7 . 9 35. 9 8 . 9 6 . 6 l . C

7 . 1 6 . 6 

## 0. ° 0 . 5 l . G l . C 0 . 9 M U TA ICIT Y 

### Ex P DATE : :42t'.t 3 TES T TYPE : 3 5 DILUTION : l : 2 0 MIATURE : 5I C CHEMICAL : N B STRAIN : 

### TA1C C FLATEC : 13 C TECHNICIAN : L3 H CCNTFAC TNO. : 19148 2 ACTIVATION : HEPA; I BATCH : D?7 3 COLONIES :


### SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

COUN T b G PLAT E s :

COUN T E O PLAT E

COUN T 

## c : B O A V LP A GE CCU.. T S T DDE V

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### 333.C O 1 ? 0 C 0 3 3333.O C 16 3

116 6 222 6 12f i 14 7 13 C 12 4 7 c IS C

IC* ? 2; : 4 13 4 12 9 13 6 11 2 11 ° 13 1

9c 3 2 2 8 7 11 9 12 6 12 3 12 3 8 7 1 5 c . 0

1C72. 7 21 7 2. 3 127. 0 134. r 12r. 7 119. 7 94. 7 24. 9

1C3. 5 148. 9 7 . 5 11. 4 6 . 5 6 . 7 21. 5 l . C

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13 4P.4 4

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0 J N T S:SOLVEN TP:P3SITIV E N = ANT'H R A M I N E W/ 0 S 9 *:TES TCOMPOU'J O C0N:1914c 2 ChEM:N B STRAIN:1C 0 CATE:Q42P8 3 ACTIV : AC U = 0 5

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13 5P.4 5

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I I I 

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13 6

### P.4 6

—••-- —



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### ACTX:0 5

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i 

### ! ! ! 2000. 0 •

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### C C PLO T O F AVGCOoNT*COS E SYMBO LI S VALU E C F SPIN D

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### 137P.4 7

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### Dl r 

### 3 COLO ' IES :

SOLVENT / 'OSITIV E DOS E

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COUN T b G FLAT E S* .

COUN T i.O FLAT E C :

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COUN T ST DOE V

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### TES T TYPE : :• : DILUTION : i : 2 3 <*iXTU?E : 4 k • I T Y 

### CHEMICAL : H S ST=.tl i : Ti- 7 PLATL ! : 1" : TECHNICIAN : C" S CC!.T°tC T VO. : 19l4c 2 ACTIVATION : CSO:C ? hiTCI. : Dl- 2 CLCMTS :
SOLV-ILT / »OSIT;V : oo?- :

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SOLVENT / POSITIV E DOS E

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17 3

### MUTAGENICIT YC F A C - TA9 7

MUTAGENICIT Y E X P DATE : 04276 3 CHEMICAL : A C TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 7 DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M CONTPAC T NO. ; ACTIVATION : BATCH : D26 3 COLONIES : 19148 2

SOLVENT / POSITIV E S I5 7 P I 0 2 P 2 0 2 DCS E

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C
1 . 0 2 . 0 4 . 1 0 . 7 0 . 7 0 . 7 O. b 0 . 7 MUTAGENICIT Y ZXP DATE : 34276 3 TES TTYPE : C

5 DILUTION : K2 0 MIXTURE : 5C C CHEKICAL : STRAIN : T A PLATED : 1 3 TECHNICIAN A

C 9 7 LG M CONTPAC TNG. : 19148 2

ACTIVATION : CSCC 2 BATCH : D26 3 COLONIES :

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLAT E A :

CCUN T 3 0 PLAT E B :

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43 6 86 5 12 5 13 1 11 4 15 2 11 7 16 2

46 0 76 3 14 5 13 4 15 ? 13 6 12 3 167. 3

479. 3 322. 7 13b. 3 135. 3 144. 7 136. 3 131. 3 15. 7

?4. 7 53. 2 10. 3 5 . 1 26. 6 12. 7 19. 9 A

A A 1. 3 2 . ° 4 . 9 0 . 8 0 . 6 0 . 9 0 . 6 O.t : MUTAGENICIT Y EX P DATE : C427c 3 TES TTYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 5 C CHEMICAL : A C STRAIN : TA9 7 PLATED : IC O TECHNICIAN : LG M CONTRAC TNC. : 1914S 2 ACTIVATION : HEPAC I BATCH : D2b 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L FLAT E

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43. 8 135. 1 3 . 6 26. 9 34. 8 2 . 1 13. 0 l . C

3 . 7 4 . a 0 . 7 0 . 6 0 . 7 0 . 7 C. 7

17 4

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### S:SOLVEN T P:POSITIV E N:ANTHRA»IN E U/ 0 S 5 *=TES T COMPOUN D C0N:19148 2 CHEM:A C STRAIN:9 7 - DATE:04278 3 ACTIV : ACT*£:C b

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### S:SOLVEN T P:P0SITIV E N:AN T HR-4 M IN E U/ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D CON:l9148 2 CHEM:A C STRAIN:9 7 DATE:C4278 3 ACTIV:CSDC0 2 ACT X : 0 5 PLO TC FAVGC0UNT*D0S E SYMBO L I S VALU E O FSPIN O

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### 17 6S:SOLVEN TP:POSITIV E N:ANTH R A-" IN E U/ 0 S 9 »:TES TCOMPOUN D

C0N:19143 2 CH£M:A C STRAIN:9 7 DATE:0427S 3 ACTIV:HEPA0 1 ACTX:P 5 PLO TOFAVGCOUNT-DDS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D 

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17 7

### MUTAGENICIT YC F A C - TA9 8

MUTAGENICIT Y EX P DATE : 34278 3 CHEMICAL : A C TES T TYPE : 0 5 STRAIN : TA9 8 DILUTION : : PLATED : MIXTURE : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO .

ACTIVATION : 

### BATCH : D26 3 COLONIES : 19146 2

SOLVENT / POSITIV E DOS E

LEVE L PLffT E A :

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### PLAT E e :

COUN T BG PLAT E C :

COUN T BG AVERAG E

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77 4 14 9 22 2 6 1 4 2 6 1 8 2 2

88 3 17 5 2 3 2 C 2 3 2 0 2 5 

### 25. 7

774. 7 17C. 0 21. 3 27. 7 17. 3 27. 7 23. 3 6 . 4

108. 0 19. 0 2 . 1 6 . 6 3 . 1 8 . 6 5 . 5 1. 0

30.I j 6 . 6 0 •% j 1. 1 0 . 7 1 . 1 C 9 ! MUTAGENICIT Y E X P DATE : 3427t 3 TES TTYPE : 0 5 

### DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : 53 C CHEMICAL : A C STRAIN : TA? « 

### PLATED : 1C 3 TECHNICIAN : L

C CONTRAC T NO. : 15146 2

ACTIVATION : CSD23 2 BATCH : £26 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E S I 5 7 P I 0 4 F 2 C 4 DOS E

LEVE L
l.C C 2. 3 3 G.3 0 1 . C 3 3.0 C 10.C O 31.O C M UT A C E N I EX P DATE : 34276 3 TES T TYPE : 0 5 

### DILUTION : i : 2 0 MIXTURE : 5 ' . 0 SOLVENT / POSITIV E S I 5 7 p- 1 0 4 P 2 C 4 DOSE

LEVE L 0 • v c 

### C 5 3 1.3 ? 0.3 3 1. 0 0 3.0 0 10.3 0 31 . 3 3 PLAT E

COUN T 2 5 42 - 95 9 2 6 2 5 2 3 3 4 3 3 A 

### : PLAT E COUN T 4 2 39 9 102 4 4 3 2 5 1 " 3 3 3 9 PLAT E C :

COUN T B C 3 6 39 7 8 C 1 9 3 1 ? e 

### 2 4 3 2 AVERAN E

COUN T 34. 3 405. 0 T3C 3 2 C 3 27. 0 23. 3 29. 3 34. 7 STO DE V

CCUN T 

### 6 . 6 21. 6 UO. 5 12. 3 3 . 5 4 . 5 5. C 3 . 3 CIT Y CHEMICAL : A C STRAIN : TA9 6 

### PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG

M FLAT E A : PLAT E I C COUN T B

GCOUN T E C

CONTFAC T NC . ACTIVATIO N

: BATCH : 026 3 COLONIES : : 19148 2

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### 133 3 3 8 2 6 2 9 i e 2 6 PLAT E

COUN T 5 3 

### 75 4 106 2 3 7 3 2 2 2 2 9 

### 3 0 c : BC AVLPAG E 

### COUN T 3 C 3 756. 0 1159. 7 3 6 . C 31. 7 3 C. 3 23. 3 2 9. 0 ST D DE V

COUN T 14. 0 4 9 . 1 124. 3 2 . 0 5 . 5 9 . 1 5 . 5 1. 0 G/ C M

R
A A A 1 . 0 11.3 ! 

### 27.I i 0.9 ! 

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G/ C M

R
1. 0 1 C 6 30. 3 C 9 0 . 8 O.P . 0. 6 ' 

### o. e ME

C

ME C



### 17 8S:SOLVEN TP:P0SITIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S c«:TES TCOMPOUN D C0N:1914e 2 CHEM:A C STRAI N = 9 8 DATE:C4276 3 ACTIV : ACTX:'G 5

900. 0

0 

### u N T 700. 0

630. 0 830. 0 •

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» i ! ; ; • t ; ! i 3 3 C 0 • 43C 3

! 23C C •

i i PLO T O F AVGCOUNT'DOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN D

10C 0 •

! S 6. 0 • 1 0 1? 0 DOS E I N MICROGRAM S 100 0 1000 0

17 9.iW^' Ww^mfMmm^i 

# 1

S:SOLVEN TP=PCSITIV E N:ANTHRAMIN E w/ 0 S 9 <-:TES TCOMPOUN D C0N:i?14a 2 CHEM:A C STRAIN:9 8 DATE=C4276 3 ACTIV:CS000 2 ACTX=3 5 PLO TO FAVGCOuNT.DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D ! ; 110C. 0.

I !

0 U T 1000. 0•

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30C C •

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203. 0 •

100. 0•

0 . 0 • 

### s *

1 0 1 2 C DOS E I N MICROGRAM S 100 0 i » - - 4 - 100C 0

18 0p*-*" '

«: T V r * T A N T

0 U N T S : C0N:19143 2

• 1500. C •

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! ! 13CC. C •

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• 1 70C 3 •

t ; 6 C C 3 •

i i 530. 0 •

•

4 w« . . k

• " 1 ' 1

" " ' P.9 0

SOLVEN TP:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 «:TES TCOMPOUN O ' CHEM:A C STRAIN:9 8 DATE:C4278 3 ACT1V:HEPA0 1 ACTX:0t 1 j PLO TO FAVGCOUNT*DOS E ?YMBO L I S VALU E O FSPIN D | l 1

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I 3 03. C • 

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### ; C O • 

### ; C O • 1 3

1 3 IC O DOS E I N KICROGRAM S

18 1 100 3 1 0C C 0P.9 1

W^W^SI^^^f

! |L»ll|JLI».yillJ.^'*U.''UIH'j«tUliP»IH ^



### MUTAGENICIT YOF A C - TAlO O

M UT A G E X P DATE : TES T TYPE : DILUTION : MIXTURE : SOLVENT / POSITIV E E N

I : 34278 3 0 5 T Y

CHEMICAL : A C STRAIN : TAIO O PLATED : TECHNICIAN : LG

M

S I P I P 2 5 7 0 1 0 1 DOSE LEVE L 

## o.o c l.C C 2.0 0 0.3 0 l.C O 3.0 C 10.G O 31.0 0 PLAT E

COUN T 17 8 58 5 76 9 15 4 16 7 14 4 15 0 15 2 A : BG PLAT Ee : COUN T BG 19 7 54 8 B1 3 13 9 14 8 15 5 16 u 24 9 MUTAGENI C EX P DATE : 34278 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 53 0 I T Y CHEMICAL : A

C STRAIN : 

### TA10 3 PLATED : 13 0 TECHNICIAN : SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 5 7 0 4 0 4 DOS E LEVE L 

## o.c o 1. 0 0 2.0 0 0.3 0 1.3 3 3.0 0 10.0 0 31.0 0 PLAT E

COUN T 16 4 88 6 160 3 12 7 12 4 9 7 12 2 1 2 8 A : B G LG

M PLATE - 

### 9 : COUN T B

G 18 1 81 3 175 9 13 1 17 1 14 2 12 9 13 3 MUTAGE. N

ICIT Y EX P DATE : 34278 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 53 0 CHEMICAL : AC STKAIN : TA10 3 

### PLATED : 13 0 TECHNICIAN : LG

M SOLVENT / POSITIV E S I F l 92 5 7 0 4 3 4 DOS E . LEVE L C O O 0.5 ? l.C C 0.3 0 1. 0 0 3.0 0 10.3 0 3C0 C PLAT E

COUN T 21 6 101 6 18F 6 15 5 13 2 15 3 13 2 14 6 A : B G PLAT E B : COUN T D

G
87 6 176 5 16 5 19 6 14 6 15 6 16 4 CONTRAC T NO. : 19148 2



### ACTIVATION : BATCH : D26 3 COLONIES :

PLAT E CCUN T 17 9 59 8 67 4 17 0 14 9 13 7 16 3 24 0 

## c : B G AVERAG E COUN T 164. 7 577. 0 752. 0 154. 3 154. 7 145. 3 166. 3 227. 0 ST DDEV

COUN T 10. 7 25. 9 71. 0 15. 5 10. 7 5. 1 18. 2 30. 6
CONTRAC T NO. : 15146 2 ACTIVATION : CSDCC 2 BATCH : 

### 026 3 CCLCMES :
PLAT E COUN T 17 7 85 3 167 9 13 4 17 8 11 5 13 1 12 7 

## c : B G AVERAG E COUN T 174 . 0 664. 7 1660. 3 13C. 7 157. 7 119. 0 127. 3 129. 3 ST O DE V

CCUN T 5 . 9 47. 7 78. 0 3 . 5 29. 4 22. 5 4 . 7 3 . 2 CONTRAC TNO. : 19148 2 ACTIVATION*

. HE ' AC 1 BATCH : D?d 3 COLON!EJ
PLAT E c : COUN TB

G 15 3 112 1 177 3 15 9 15 3 14 6 15 6 12 2 AVERAG E

COUN T 199. 7 997. 7 1R3S. C 167. 7 CO. 3 1 4 9. 0 14S. 0 144. 7 ST D DE V

CCUN T 14. 2 113. 6 67. 7 15. 0 32. 6 3 . 6 13. 9 21. 2 G / C M R

A A A 

### 1. 0 3 . 1 4 . 1 0 . 3 0. 8 0. 8 0 . 9 1. 2

G/ C MR
1. 0 5 . 0 9 . 7 0 . 3 0 . 9 0 . 7 0 . 7 0 . 7

•/ C M R

5. C 9 . 1 O. c u . 6 

### 0. 7 0. 7 0 . 7 i • 

### MEC

MEC

ME C

18 2*m\u.m.9)*irBtf3Pmie*mm m tt&m!mi

mv ,o?:!S LVE J TP=P0SITIV E ^=»NTHRAMIN E W/ C S 9 .=TES TCOMPOUN D C0N=19148 2 CHEK=A C STRAIN=10 0 DATE=04278 3 ACTIV = ACT X = 0 5

0 u N T ! • ! • I ! • ! ! ! ! • ! ; ; • • i ! f • ; ; ! f • i i ! ; • ! ; i i • ; f i ! 1C0. 0•

{ 

### • I ! • 9U0. 3

600 . 0

700. 0

600. 0

500. 0

4CC ;

303. 0

200. 0 PLO TOF AVGCOUNT.OOS E SYMBO L I S VALU E O F SPIN O



### 0. 3
1 0 IC O DOS E I N

MICRCGPAM S 133 0 1 0 0 2 0P.9 3

S:SOLVEN TP=PCSITIV E N:ANTtl«M-IN E «* *S 9 «:T"S TCOMPOUN D C0N=19l4b 2 CHEM=A C STRAIN=1C 0 DATE**C42Jb 3 ACTIV=CSD00 2 ACTX=0 5

D U < J T 1800. 0 . i ! ! ! 1600. 0•

! i ! ; 1400, 0•

f I I ! 1200. 0•

! ; ! ! 1CG. G •

; ; ; i 63C C •

! ; ; ; 600. 0 •

; ; i !
' 40C 0 •

I I ! t

i ! O. C • PLC TOFAVGCOUNT.DO';' . SYM60 L I S VALU E OFSPIN D



### i f ir e DOS E I N

MICROGRAM S 100 0 1003 0



### 18 4P.9 4



### 403. C

200. 0

0. 0 • 1 0 IC C DOS E I N

MICROGRAM S 100 0 1C0C 0 

# SP.9 5
MUTAGENICIT YG F E O TA9 7

MUTAGENI C EX P DATE : 04278 3 TES TTYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : TY CHEMICAL : E O STRAIN : TA9 7 PLATED : TECHNICIAN : LG M SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 5 5 0 2 0 2

M UT A

G EX P DATE : TES T TYPE : DILUTION : MIXTURE : 50 0

DOS E LEVE L 0.G 0 50.0 0 100.0 0 1.0 0 3.0 0 11.0 0 37.0 0 111.0 3
E N I C 04278 3 0 5 i : 2 0 PLAT E

COUN T 12 7 31 « 7? 5 12 1 13 6 13 5 9 8 

### li e A : BG PLAT E COUN T 15 0 27 1 54 9 14 5 12 4 15 0 9 7 12 4 B : B G

T Y CHEMICAL : E O STRAIN : TA9 7 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG M SOLVENT / POSITIV E S I F l P2 5 5 0 4 0 4 OOS E

LEVE L 0.0 3 1.0 0 2.3 3 1.0 0 3 . O- C 11.0 0 37.3 0 111.0 0 »LAT E A :

COUN T B G 13 6 57 2 8 4 3 14 2 11 2 13 2 16 9 16 4 PLAT E e:

COUN T H G 16 3 4C 6 86 5 13 9 15 7 15 8 15 5 16 3 MUTAGENICIT Y EX P DATE : 04276 3 TES T TYPE : 0 5 DILUTION : l : 2 0 MIXTURE : 53 0 CHEMICAL : E O STRAIN : TA9 7 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : LG M SOLVENT / POSITIV E S I P I P 2 5 5 0 4 0 4 DOS E

LEVE L

0.5 0 l.C C 1.0 0 3. 0 0 11. 3 0 37.3 0 111.0 0 PLAT E

COUN T 15 S 73 1 102 7 15 4 15 1 15 3 14 7 14 1 A : B G PLAT E COUN T 14 3 67 3 85 3 15 1 16 0 14 6 15 7 16 7 & : B G CONTRAC T NO. :

ACtlVATION. * BATCH : D26 3 COLONIES : 19148 2

PLAT E COUN T 16 9 26 4 50 1 15 4 16 4 13 4 1C 6 11 6 

## c : B G AVERAG E COUN T 148. 7 2e4. 3 585. 0 140. 0 141. 3 139. 7 130. 3 119. 3 ST D DE V

COUN T 21. 0 29. 4 106. 7 17. 1 20. 5 9 . 0 4 . 9 4 . 2 CONTRAC T NO. : 1914e 2 ACTIVATION : CSD0C 2 BATCH : D26 3 COLONIES :

PLAT E C : COUN T B G 17 C <! 6 0 76 3 16 2 17 6 15 5 14 9 16 8 AVERAG E

COUN T 156. 3 475. 3 822. 7 147. 7 148. 3 148. 3 157. 7 165. 0 ST DDEV

COUN T 15. 0 84. 7 53. 2 12. 5 32. 9 14. 2 10. 3 2. 6
CONTRAC T NO . ACTIVATION : BATCH : D26 3 COLONIES : : 19146 2

HEPAC 1

PLAT E COUN T 14 5 64 4 76 1 15 5 16 7 17 7 17 3 14 2

18 6 

## c : R G AVERAG E COUN T 150. 0 684. 3 863. 3 163. 3 159. 3 158. 7 159. 0 150. 0 ST D OE V

COUN T 7 . 5 43. 6 135. 1 18. 3 8 . 0 16. 3 13. 1 14. 7 G/ C MR

A NAA 1. 0 1. 9 3 . ; 0 . 9 1. 0 0 . 9 0 . 7 O. S

ij/ C M R
1. 0 3 . 1 5 . 3 0 . 5 0 . ° 0 . 9 1. 3 1. 1

G/C M R
1. 3 4 . 6 5 . 9 1. 1 1. 1 1. 1 1. 1 1. 0 

# I

ME C

; J

'ME C

ME C

### S:SOLVENT P:P0SIT1V E N:ANTHRAMIN

E W/ 0 S 9 «-:TES

T COMPOUN

O CCN:i914a 2 CHEM:EOSTRAIN:9 7 DATE:04278 3 ACTIV : ACTX:C 5 P.9 6



### 80G. 0

700. 0

600. ? 900. 0 • ; ! ; i
• 

## !

• 

### T ;
• i 

## ! ; !
• 

## ! i i 

### ; 500. 0 • f ! ; f 42C. C • 

### ; j i 

### 300. 3 • • ! ! ; 230. 0 • ! i 

### PLOT O

F AVGCOUNT*DOS E SYMBOL I S VALU E O F SPIN D

1CC C

O. C 1 ? IC C DOS E I N MICROGRAM S 

### 1 03 0 1 00c

18 7

### S:SOLVEN T P:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ C S 9 *:TES T COMPOUN O

C0N:1514£. 2 CHEM:E OSTRAIN:9 7 DATE:C4276 3 ACTIV:CSD0C 2 ACTX:0 5

PLC T C F AVGCOUNT»DOS E - SYMBO L I S VALU E G F SPIN D

R T A 

### \ T
3 U N T 500 . C

800. 0 •

700. C •

600. 0

533. C •

403. 0 •

333. 0 •

< : J -j
. u •



## ic :

o. o • 1 0 13 ? DOSE I N

MICROGRAM S 13C 0 IOC 3 0



### 188

### S:SOLVEN T P:POSITIV E N:ANTHRAMIN E W/ 0 S 9 »:TES T COMPOUN D

C0N:19143 2 CHEM:E OSTRAIN:5 7 DATE=C4273 3 ACTIV:HEPA0 1 ACTi:0 5 

## 1

PLC TC FAVGCOUNT*DOS E ' SYMBO L I S VALU E O FSPIN D ! 900. 0 •

! ; ! 800. 0 •

!

700. 0 •

600. C •

5CC 0 • <i

l '

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•

4 0 0. 3 •

f

300. 0 •

! ; ; • 200. 0 •



### 13C : ! S

! i • i • i i O. C • I C IC O DOS E I N MICROGRAM S 1 000 1 0000



### 18 9

### P.9 9
MUTAGENICIT YC FE O - TA9 t 

# f l

MUTAGENI C EX P DATE : 3427B 3 

### TES TTYPE : 0 5 DILUTION : : MIXTURE : T Y CHEMICAL : E O STRAIN : TA9 8 PLATED : TECHNICIAN : LG M CONTRAC T NO . ACTIVATION : BATCH : 026 3 COLONIES : 1914e 2
) SOLVENT / POSITIV E DOSE

LEVE L PLAT E

COUN T A : BG PLAT E COUN T b : BG PLAT E COUN T 

## c : BG AVERAG E COUN T ST D DE V

COUN T w/ C M

R ME C
S I P I P 2 5 5 0 3 0 3 0.3 C

1.0 0 2.0 0 1.0 0 3.C C 11.3 0 37.C C 111.0 0 4 4

66 7 18 6 1 9 1 7 1 5 3 2 1 5 2 9

77 4 14 9 2 9 1 3 2 5 2 1 3 3 3 3

88 3 17 5 2 7 2 3 2 3 1 7 1 5 34. 3

774. 7 170. C 25. 0 17. 7 21. 0 23. 3 22. 3 8. 4

108. 0 19. 0 5. 3 5. 0 5. 3 7. B 9. 5 1. 0

22. 6 5. C 0. 7 0. 5 3. 6 0. 7 0. 7 M UT A G EX P DATE : TES T TYP E DILUTION : C N

I C C4276 3 : 0 5 i : 2 0 MIXTURE : 50 0 I T Y CHEMICAL : E O STRAIN : 

### TA9 6 PLATED : IOC TECHNICIAN : LG

M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : CSD0C 2 BATCh : D26 3 COLONIES : s



### SOLVENT / POSITIV E DOSE

LEVE L PLAT E A :

COUN T BG PLAT Ee :

COUN T BG PLAT E C :

COUN T B

G AVERAG E COUN T ST DOEV

COUN T G/ C M

R ME C

S I F l P 2 5 5 0 4 0 4 O.u C

1.0 0 2.0 C 1. 0 3 3.C C 11.0 0 37.0 0 111.D C 3 2

42 9 95 9 3 ? 3 3 3 0 4 3 3 8 3 2

39 5 102 4 4G 3 9 2 5 2 4 2S 3 3

38 7 80 8 3 1 2 9 3 3 2 4 3 4 32. 3

405. 0 930. 3 33. 7 33. 7 31. 0 32. 0 33. 3 0. 6

21. 6 110. 8 5. 5 5. 0 6. 6 13. 9 5. 3 l. C

12. 5 26. 6 1. 0 1. 0 1. 0 1. 0 

## 1. 0 M UT A

.G N I CI T Y IX. P DA-TE : ?/427e 3 TES TTYPE : 0 5 DILUTION : 1. * 2 0 MIXTURE : 5C 0 

### CTnEMICAL. *E O STRAIN : TA9 8 PLATED : 10 0 TECHNICIAN : L-

3 M CONTRAC T NO. : 19148 2

ACTIVATION : HEPAC I 

### bATCh : D26 3 COLONIES :
SOLVENT / POSITIV E DOSE

LEVE L FLAT E A :

CCUN T BO PLAT E•: :

COUN T BG PLAT E C :

COUN T B

G AVERAG E COUN T ST DDEV

COUN T u/ C M

R ME C

S I P i P 2 5 5 0 4 0 4 O.U C

0.5 0 1.0 3 l. C 3 3.0 0 11.0 0 37.3 0 111.0 3 4 6

71 1 109 4 4 1 3 7 3 1 3 2 3 6 1 6

83 9 133 3 3 8 4 2 2 8 3 4 3 6 5 5

75 4 136 2 3 9 3 0 2 5 3 0 3 6 35. C

755. 3 1159. 7 39. 3 36. 3 

### 2e. c 3 2. 0 36. 7 2 C 4

49. 1 124. 3 1 . 5 6 . 0 3 . 0 2 . 0 1. 2 l . C

19. 4 29. 7 1. 3 0 . c 

### 3 . 7 0 . 5 0 . 9

19 0

aate„ l -- I

S = SOLVE M P = P0SITIV E N=ANTHRAMIN E y/ C S 9 *=TES TCOMPOUN D C0?J = 191<»8 2 CHEMrE O STRAIN=9 8 DATE=C4278 3 ACTIV = ACTX=C 5 P.1

PLO TO FAV6C0UtvT*D0S E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

E V

T A N T

0 U N T 70C. C SOO. C •

i ! ! • 800. 0 •

! ! • ! • • i I i • • ! ! ! • ! ! ; i 400. 0 • 

## so :

300. 0 •

; i ! ! 20C. C •

i ! ! i ioo . r <• ! ! ! • 0. 0 • ; t

• 

# 1 s

1 0 IC C . . . 4 . . 100 3 IC O C O TOS E I N KICROGF.AM S

19 1

### P. 2

S = SOLV£N TP = PuSlTIv£ l ' *= ANTH R A M IN E y/ 0 S 9 *=TES TCOMPOUN D CON=l°145 2 CHEMrE C STRAIN=9 6 DATE-C4278 3 ACTIV=CSDC0 2 ACTX=: 5

1100. 0•
1000, 0•
QOO. O PLO TO FAVGCOU^T'DOS E SYMBO L I S VALU E O FSPIN D

1 « l

8 00. 0

700. 0 •

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-40C. C

33C. 0

20C. 0

100. c



### o . c 

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### i o

### i: :
COS E I N MICROGRAM S

19 2 100 0 *a4»««B»«*w.a.M4>«.»..«>.aaaa4«»»*..»a..a«4/..».*.a.»«..4).. a . aal o».B«i a IC O w CP. 3



### S=SOLVEN T P=POSITlV E NSAMTHRAMINF . ./ 0 S 9 *=TES T COMPOUN D C0N=19148 2 CHEM=E OSTRAIN=9 8 DATE=C4276 3 ACTIV=HEPA0 1

» 1500. 0 •

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### 1300. 0 •

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### 1000. 0 •

I 

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### 6GC. 0 •

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### 20G. 0 •

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### ice. a • ! ! S G. O•

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### ACT X= 05 '

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MICROGRAM S 1 3 C u ' 1 P 0 C - C 

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193

### MUTAGENICIT YO FE O -TA10 C P. 4



### UT A G X P DATE : ES T TYP E ILUTION = IxTURE = OLVENT / OSITIV E S I 5 5 P I 0 1 P 2 0 1 EN

I C I T Y 04278 3 : 0 5 • •
DOS E LEVE L 0. 0 0 

### i.: c 2.C C 1.0 0 3.C C 11.0 0 37.0 0 111.0 0 CHEMICAL : E O

STRAI N PLATED :

: TA10 0 TECHNICIAN : LG

M PLAT E A : COUN T B

G 

### 15 7 56 5 76 9 23 4 20 5 25 2 44 2 55 1 PLAT E

COUN T 

### 22 0 54 9 81 3 £6 6 22 3 24 7 38 0 59 0 B : 

### E> G CONTRAC T NO. : ACTIVATION : BATCH : D26 3 

### COLOME S =


### PLAT E COUN T 

### 11 0 59 8 67 4 2* 7 23 9 24 3 43 2 56 6 

# c : B G AVERAG E COUN T 162. 3 577. 0 752. 0 249. 7 222. 3 247. 3 416. 0 569. 0 19148 2

STDDEV COUN T 55. 2 25. 9 71. 0 17. 2 17. 0 

### 4. 5 3 3 i 3 

### 19. 7 Q/ C

A A A M R
1. 0 3. 6 4. 6 1. 5 1. 4 1. 5 2. 6 3. 5 ME

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### U TAG E H I C X FDATE : 04276 3 ES TTYPE : 0 5 

### RUTIOu = i : 2 0 IXTU?E = SCO T Y CHEMICAL : E O STRAIN : 

### TA10 3 PLATED = IC O TECHNICIAN : LG M CONTRAC TNO. : 19148 2 ACTIVATIO N CSO0C 2 BATCh : D26 3 COLOME S =
OLVENT / OSITIV E S I P I P 2 5 5 0 4 0 4 DOS E LEVE L C C C 1.0 0 

### 2.: o l.C C 

### 3.c : 

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COUN T 3G 15 2 8 6 i. 160 3 24 6 18 2 18 1 2 1 7 3C 2 U TAG E M I C I TY PLAT E 3 : CCUtJ TR

G 22 0 87 0 17* 9 28 1 2* 8 19 0 22 7 2 8 5

X P DATE : C427B 3 ES T TYPE : 0 5 ILUTIO.N= i : 2 0 IXTURE = 50 0 CHEMICAL : E O STRAIN : TAIC : PLATED = 10 0 TECHNICIAN : LG

M PLAT E COUN T 36 9 89 ? 167 9 18 3 IS a 18 4 19 7 2C 3 

## c : B t AVERAG E COUN T 2 4 7
. C 884. 7 1680. 3 236. 7 212. 7 133. 0 213. 7 263. 3 ST D DE V

COUN T 111. 0 14. C 78. 0 49. 7 48. 0 2 . 6 15. 3 52. 9 Q/ C M

R M£C

CONTRAC TNO. : 1914P. 2 ACTIVATION : HEFAC 1 BATCH : D2s 3 COLOME S = N A A A 1. 0 3. 6 6. S 1. 0 C. 9 0. 7 0. 9 1. 1 .1 1



### OLVENT / OSITIV E DOSE

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COUN T B

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COUN T B G AVERAG E

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0.5 0 1.C 0 l.C C 3.0 0 11.C C 37.0 0 III.O : 15 4

101 6 186( > 29 7 28 4 32 4 25 4 29 1 15 6

87 6 17b 5 1S 6 23 7 2° 5 26 9 41 3 16 7

110 1 177 3 16 5 19 6 26 4 3C 0 35 7 155. 0

997. 7 1308. 0 216. 0 239. 0 294. 3 264. 3 353. 7 7 . 0

113. 6 6 7
. 7 70. 5 4 4
. 0 30. 0 15. 5 61. 1 1. 0

b.l 11. 4 1. 4 1. 5 1. 9 1. 5 2 . 2

194

1 l Jl . -WJOWJUllil. . I. J T - 4 ,«tt t 

# 1P. 5



### S=SOLVEN T P=POSITIV E N=ANTHRAMIN E b/ C S 9 «=TES T COMPOUN O C0N=1914b 2 CHEM=E OSTRAIN=19 0 DAJE=C4278 3 ACTIV = ACTX=0 b

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S=S0LVEN TP=PCSITIV E U=ANTHR*MIN E W/ 0 S 9 *=TES TCOMPOUN G C0N = 19146 2 CHE M = E O STRAIN=K C DATE»C«.27fe 3 ACTIV=HEPA0 1 ACT*=0 5



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