21 октября 1805 года "Mars", под командованием капитана Джорджа Даффа, входил в состав колонны вице-адмирала Катберта Коллингвуда в битве при Трафальгаре. Он был третьим кораблём в линии между "Belleisle" и "Tonnant". Вслед за "Royal Sovereign", флагманом Коллингвуда, "Mars" попытался прорвать линию франко-испанского флота, при этом попав под сильный огонь сразу четырёх кораблей противника — 74-пушечных "San-Juan-Nepomuceno, Pluton, Monarca" и "Algesiras". В 13:15 корма "Mars" была обстреляна французским "Pluton", в результате чего был убит капитан Дафф и командование перешло к Уильяму Хеннаху, первому лейтенанту "Mars". Вынужденный вести бой сразу с несколькими кораблями, "Mars" был серьёзно повреждён и потерял 29 человек убитыми и 69 ранеными.