1453년에 메흐메트 2세가 이끄는 오스만 투르크군에게 포위되던 콘스탄티노플을 지키기 위해, 당시 제노바령이였던 히오스 섬에서 그리스, 제노바인으로 구성된 용병군인들을 이끌고 왔다(콘스탄티노폴리스의 함락 참고). 그는 개인적으로 자금을 대고 부대를 조직하여, 이 원정을 이끌었으며, 도착 직후에는 비잔티움 제국의 황제 콘스탄티누스 11세의 명령에 따라 육군 방위 사령관에 임명되었다. 주스티니아니는 육군들을 효과적으로 이끌었고 서로 다투던 제노바, 그리스, 베네치아인들을, 오스만군들이 그들의 성벽에 낸 구멍들을 수리하는데 집중시켜냈다. 이는 론고의 카리스마가 비잔티움의 군대를 압도적인 적들에게 맞서 장기간 버티게 해준 최소한의 이유였다.