Η Γουίδερσπουν γεννήθηκε στη Νέα Ορλεάνη της Λουιζιάνα από τους Τζον και Μπέτι Γουίδερσπουν. Ο πατέρας της γεννήθηκε στη Γεωργία και ήταν ωτορινολαρυγγολόγος και στο παρελθόν υπηρέτησε ως αντισυνταγματάρχης του αμερικανικού στρατού. Η μητέρα της κατάγεται από το Τενεσί και έχει διδακτορικό στην παιδιατρική νοσηλευτική. Η Γουίδερσπουν υποστήριξε ότι είναι απόγονος του Τζον Γουίδερσπουν, που ήταν ο έκτος πρόεδρος του Πανεπιστημίου Πρίνστον και υπογράφων την Διακήρυξη της Ανεξαρτησίας των Ηνωμένων Πολιτειών. Εξαιτίας της δουλειάς του πατέρα της ως στρατιωτικού, η Γουίδερσπουν έζησε στο Βιζμπάντεν της Δυτικής Γερμανίας για τέσσερα χρόνια όταν ήταν παιδί. Αφού επέστρεψε στις ΗΠΑ, πέρασε τα παιδικά της χρόνια στο Νάσβιλ του Τενεσί.