Uzyskał tytuł księcia Toskanii w zamian za wsparcie Karola V Habsburga podczas tzw. wojen włoskich przeciwko Francji w 1537. W następnych latach dążył do rozszerzenia wpływów co zostało ukoronowane zdobyciem Sieny w kwietniu 1555. W 1569 został koronowany przez papieża Piusa V na wielkiego księcia Toskanii.