Cenevizli bir denizciyken Bizans İmparatoru XI. Konstantinos'un yardım çağrılarına uyarak 29 Ocak 1453'te 700 kişilik özel ordusuyla birlikte şehri savunmak için Konstantinopolis'e gelmiştir. İmparator kendisini Edirnekapı bölgesinde görevlendirir. Şehri savunmasına karşılık, fethin son günü savaşta yaralanan Giustiniani Longo aldığı kılıç darbesiyle ağır yaralandığından ötürü gemisine taşınınca, onun savaş alanını terk ettiğini fark eden adamları da mevzilerini terk ederek gemilerine dönmüş, bu durum savunma mevzilerinin seyrekleşmesine yol açmıştır. Giovanni Giustiniani Longo'nun yaralanması, şehrin alınmasında önemli bir an olmuş; gelişen durumu fark eden ve iyi değerlendiren Fatih Sultan Mehmed, askerlerini daha da yüreklendirerek surları süratlice aşmalarını ve çeşitli kollardan şehre girmelerini sağlamıştır. Giovanni Giustiniani Longo, aldığı yaradan dolayı şehri terk etmiş ve iki gün sonra İstanköy Adasında ölmüştür. Gürz darbesi ya da bir okçu tarafından vurulduğu tahmin edilmektedir.