López exigiu que o Brasil não intervisse no Uruguai, mas o Império invadiu o país em meados de 1864. A resposta paraguaia veio em 12 de outubro de 1864, quando o navio "Marquês de Olinda" foi capturado. Nele estava o governador de Mato Grosso, coronel Frederico Carneiro de Campos. Posteriormente, houve a invasão paraguaia da província do Mato Grosso, fato inicial da guerra.