Pendant la Seconde Guerre d'indépendance italienne, Girolamo est envoyé en Toscane où il organise le corps militaire des "Chasseurs des Apennins". Il prend ensuite les commandes d'une division de volontaires de Toscane dans le d'armée français et il débarque à Livourne sous les commandes du prince Jérôme-Napoléon Bonaparte. De là, il prend la direction de toutes les troupes qui se dirigent vers la Lombardie. Suspecté d'être favorable aux ambitions de Jérôme-Napoléon Bonaparte qui désirait s'emparer du trône de l'Italie centrale, Girolamo Calà Ulloa doit se démettre de ses fonctions dans l'armée de Toscane.