Aan de Lakensepoort stonden kanonnen opgesteld. De zolder van het Lakenspui werd gebruikt om graan, zout en buskruit op te slaan. In de 17e eeuw bood het poortgebouw enkele jaren onderdak aan de glasmanufactuur van Giovanni Savonetti en zijn zoon Francesco. Tijdens de epidemie van 1651 werden er zieken ondergebracht. In 1658 stelden de lakenfabrikanten Damiens en Jacobs er hun weefgetouwen op en in 1667 werd het gebouw weer een kruitmagazijn. De zuidoostelijke toren was vanaf 1645 een kerkelijke gevangenis en kreeg vandaar de naam Bisschopstoren. Sommige cellen waren zo nauw dat de gevangenen er verplicht waren rechtop te staan. Enkele keren was de Lakensepoort de ingang waarlangs nieuwe machthebbers Brussel betraden: in 1686 kreeg landvoogd Francisco Antonio de Agurto er de stadssleutels overhandigd en in 1746 de zegevierende maarschalk Maurits van Saksen na het Beleg van Brussel.