Selama beberapa bulan pertama perang dengan Amerika Serikat setelah serangan terhadap Pearl Harbor, Jepang juga sebelumnya telah berencana untuk menggunakan senjata biologis terhadap Amerika. Dalam Pertempuran Bataan pada Maret 1942, Jepang dianggap telah melepaskan 200 pon kutu pembawa penyakit, sekitar 150 juta serangga, masing-masing dalam sepuluh serangan terpisah. Tetapi, menyerahnya pasukan Amerika menjadikan rencana itu tidak diperlukan. Pada awal Juli 1944 dalam Pertempuran Saipan, ketika perang berlangsung antara A.S. melawan Jepang, kutu-kutu terinfestasi penyakit wabah lagi-lagi ingin digunakan untuk melawan kombatan Amerika. Tetapi, kapal selam Jepang yang membawa kutu-kutu itu ditenggelamkan oleh kapal selam Amerika "USS Swordfish" di lepas pantai Chichi-jima. Sekitar November 1944, Jepang berhasil meluncurkan total 9.300 bom-bom bakar dan antipersonnel yang dibawa oleh balon yang dirancang untuk naik ke ketinggian 30.000 kaki, yang tersapu ke arah timur oleh arus jet ke daratan Amerika Serikat. Bom-bom itu menewaskan enam warga sipil Amerika di dekat Bly, Oregon, menabrak sebuah peternakan di Medford, Oregon, dan menyebabkan arus pendek pada jaringan kabel yang memasok listrik untuk pompa pendingin reaktor nuklir di fasilitas produksi Proyek Manhattan di Situs Hanford, Washington (tetapi perangkat keselamatan cadangan memulihkan listrik dengan segera). Dalam Pertempuran Iwo Jima, serangan biologis lain dipertimbangkan untuk melawan invasi Amerika. Pilot Shoichi Matsumoto kemudian menceritakan cara dua pesawat layang membawa patogen yang seharusnya ditarik ke atas pertempuran dan dilepaskan, tapi pesawat layang,yang seharusnya lepas landas dari daratan Jepang ke pangkalan udara Matsumoto di Distrik Pingfang untuk persiapan serangan, tidak sampai di tujuan.