Em 18 de agosto de 1572, o casamento da irmã do rei Margarida e Henrique de Navarra foi celebrado em Paris. Isabel estava grávida e estava hospedada em Fontainebleau, no campo. A cerimônia de casamento passou e as festividades começaram no dia seguinte. Na sexta-feira, 22 de agostoo recesso governamental para o casamento terminou e as comemorações foram concluídas. O que aconteceu a seguir tem sido objeto de conjecturas por mais de quatrocentos anos. Basta dizer que, quem quer que o tenha ordenado ou sancionado, ocorreu um dos massacres mais sangrentos da história da França. Durante o massacre do Dia de São Bartolomeu, pelo menos três mil protestantes foram mortos somente em Paris. O almirante Gaspar de Coligny foi descaradamente assassinado durante toda a turbulência. Isabel, quando contada por seus servos que seu marido havia ordenado o massacre, pediu perdão a Deus por Carlos. A matança não parou naquele dia. Dezenas de milhares de protestantes em toda a França morreram depois. As guerras religiosas recomeçaram com força total.