Jane Stewart war eine uneheliche Tochter des schottischen König James IV. Stuart und seiner Geliebten Agnes Stewart, Tochter von James Stewart, 1. Earl of Buchan. Sie heiratete 1537 Malcolm Fleming, 3. Lord Fleming (Haus Fleming), dieser fiel in der Schlacht bei Pinkie Cleugh am 10. September 1547. Aus dieser Ehe hatte sie zwei Töchter: