Lijn B is de eerste metrolijn van Italië en werd ontworpen in de jaren dertig van de twintigste eeuw. De lijn was bedoeld om het centraal station te verbinden met de wereldtentoonstelling, Esposizione 42, die in 1942 in Rome gehouden zou worden. Destijds werd de lijn E42-spoorlijn genoemd en het ontwerp sloot aan bij de technische specificaties van de elektrische spoorlijn Rome – Lido, waarmee ook uitwisseling van materieel plaatsheeft. De 'blauwe' lijn, met circa 300.000 passagiers per dag, is dagelijks geopend van 05:30 tot 23:30 uur, en op vrijdag en zaterdag zelfs tot 1:30 uur. Lijn B telt 22 stations, van het zuiden naar het noordoosten van Rome.