De à , le régiment combat sous les ordres de Burnside au sein du département de l'Ohio, se déplaçant au Kentucky et à l'est du Tennessee. Le régiment participe ainsi à la campagne de Knoxville. En , le régiment rejoint de nouveau l'armée de Potomac, et participe à la campagne du lieutenant général Ulysses S. Grant, connue sous le nom de Overland Campaign, ainsi qu'au Siège de Petersburg. Le régiment était particulièrement appréciée de Clara Barton, infirmière volontaire et fondatrice de la Croix-Rouge américaine, qui elle aussi était originaire du comté de Worcester.