В 1736 году, в связи с началом русско-турецкой войны, штат полка был доведен до 1 160 человек в 10 ротах. В 1737 году было разрешено, помимо малороссийских и запорожских (черкас) казаков, принимать в полк венгерцев, валахов, трансильванцев и молдаван. К 1740 году полк насчитывал 1 045 человек. Сербский гусарский полк принимал участие в штурме Очакова, сражениях при реке Прут и Хотине.