Poprvé hráli 13. srpna 1965 v Matrix klubu v San Franciscu. Na tomto koncertě vystoupili Marty Balin (zpěv), Paul Kantner (zpěv, doprovodná kytara) a Jorma Kaukonen (sólová kytara). Signe Toly Anderson (která zpívala na debutovém albu "Jefferson Airplane Takes Off") hrála na bicí. Baskytarista Jack Casady a bubeník Skip Spence (který byl později jedním z původních členů Moby Grape) se ke kapele připojili o dva měsíce později. Spencer Dryden se stal bubeníkem v červnu roku 1966 a téhož roku Grace Slick nastoupila jako zpěvačka a účinkovala na prvním koncertu pro Billa Grahama v legendárním Fillmore Auditorium v San Franciscu. Jefferson Airplane vystupovali na festivalech Berkeley Folk Music Festival, Monterey Jazz Festival, Monterey Pop Festival, Woodstock nebo Altamont. Proslavili se především hity „White Rabbit“ a „Somebody to Love“ z alba "Surrealistic Pillow". V roce 1968 se objevili na obálce časopisu Life a v roce 1996 byli uvedeni do Rock and Roll Hall of Fame.