Dalam Peperangan Italia Alfonso mempertahankan posisinya yang genting di antara kekuatan yang bersaing dengan fleksibilitas dan kewaspadaan dan benteng Ferrara yang tak tertandingi; ia memasuki Liga Cambrai melawan Venesia dan tetap menjadi sekutu Louis XII dari Prancis bahkan setelah Paus Julius II berdamai dengan Venesia; ketika Bolognesi memberontak melawan Julius dan menjatuhkan patung perunggu Michelangelo dari Paus dari atas gerbang, Alfonso menerima pecahan dan menyusunnya kembali sebagai meriam bernama "La Giulia", yang dia tempatkan di benteng castello: pada tahun 1510 Julius mengekskomunikasikannya dan mengumumkan vasalnya yang kalah, sehingga menambah Ferrara ke Negara Gereja; Alfonso kemudian berjuang melawan tentara Venesia dan Kepausan, memenangkan Pertempuran Polesella, menangkap Bologna, dan memainkan peran utama dalam kemenangan Prancis di Pertempuran Ravenna (1512). Keberhasilan ini didasarkan pada artileri Ferrara, diproduksi di pengecoran sendiri yang merupakan yang terbaik pada masanya. Dalam kedua potretnya oleh Titian, ("Bandingkan ilustrasi di atas") ia berpose dengan lengannya di mulut salah satu meriamnya.