Das Boot lief am 8. April 1940 um 11:30 Uhr von Wilhelmshaven aus und am 27. April 1940 um 11:50 Uhr wieder dort ein. Auf dieser 20 Tage dauernden und 2.777 sm über und 426 sm unter Wasser langen Unternehmung südlich der Lofoten wurden keine Schiffe versenkt. Diese Fahrt fand im Rahmen des Unternehmens Weserübung, der deutschen Invasion Norwegens, bzw. der Operation Hartmut statt. Der Einsatz war frustrierend, da viele der abgeschossenen Torpedos nicht richtig funktionierten (siehe: Torpedokrise). So blieben beispielsweise die Torpedoangriffe auf den britischen Kreuzer HMS "Effingham" wirkungslos.