Постепенно экспортируемый отсюда табак набирал популярность в Европе, вследствие чего плантации его расширялись, требуя все новых и новых земель. Это обострило конфликты с местными индейцами, поухотанами, и другими, которых пытались также превращать в рабов. В марте 1622 года индейцы во главе с новым вождем вероломно напали на колонию, убив 347 человек. По рассказу Джона Смита, который сам не был в колонии с 1609 года, но записал свидетельства очевидцев, индейцы беспрепятственно проникли за укрепления, неся в руках продукты на продажу: оленину, индеек, рыбу и фрукты, а затем внезапно выхватили ножи, томагавки, воспользовавшись также всем, что попалось им под руку, и устроили кровавую резню. События вошли в историю как «Джеймстаунская резня».