David vom Stain war der zweitjüngste Sohn von Bernhard vom Stain und Anna vom Stain, die 1536 nach 14-jähriger Ehe Witwe wurde. Sie hatte sieben Kinder, sechs Söhne und eine Tochter. Nach dem Tod des Vaters wurde das Erbe im Losverfahren auf die sechs Söhne aufgeteilt. Da es aber nur drei Herrschaften zu vergeben gab, ging David vom Stain bei der Erbteilung am 11. August 1550 leer aus. Er wurde mit Geld abgefunden (16.776 fl.) und erhielt erst am 26. August 1550 von seiner Mutter ihren Teil der Herrschaft von Bühl übertragen, den sie bis dahin innehatte. Diese Herrschaft erstreckte sich nur über eine Hälfte von Bühl, da die andere von Georg von Ehingen beherrscht wurde. Nach der Übernahme der Herrschaft gründete David vom Stain im Jahr 1546 die Rittergesellschaft in Freiburg. Er heiratete Anna von Weiher, deren Familie das Weiherschlösschen in Emmendingen besaß. In seiner folgenden Herrschaft führte er in Bühl die Reformation ein, mit welcher er durch Gelehrte in Berührung kam (1553), und erbaute das Schloss Bühl. Aus Berichten ist zu entnehmen, dass er in seinem Leben die schönen Künste sehr schätzte und auch den Umgang mit gelehrten Männern. Zudem habe er sich als Soldat bewährt; es ist jedoch keine genaue Kriegsteilnahme bekannt. Es gibt Vermutungen der Teilnahme am Türkenkrieg 1542 und dem Krieg in Frankreich 1544. Im Schmalkaldischen Krieg 1546/47 kam die Herrschaft der Stain’schen Familie an die Habsburger und später unter die Oberhoheit des protestantischen Hauses Württemberg.