او-۲۶ هشت بار به میدان رزم فرستاده شد. نخستین مرتبه آن صرف مین‌ریزی گردید که باعث غرق شدن سه کشی تجاری و آسیب دیدن یک ناو جنگی بریتانیایی گشت. در مرتبه دوم به عنوان نخستین او-بوت در دوران جنگ وارد دریای مدیترانه شد که اتفاق خاصی در جریان آن نیفتاد. مرتبه سوم در سفری کوتاه راهی اقیانوس اطلس گردید و سه کشتی تجاری را غرق کرد. مرتبه چهارم در جابه‌جایی نیروها در عملیات در نروژ، به کار گرفته شد. هنگام بازگشت از یکی از این ماموریت‌های ترابری، یک کشتی تجاری ۵۲۰۰ تنی را غرق کرد. پس سه سفر گشتی بی‌حادثه دیگر، روز ۲۰ ژوئن سال ۱۹۴۰ عازم هشتمین مأموریت خود گشت. پس غرق کردن سه کشتی تجاری در ۳۰ ژوئن و وارد آوردن آسیب به یک کشتی تجاری در روز بعد، اصابت دو اژدر از دو کشتی جنگی بریتانیایی، آن را مجبور به آمدن به سطح کرد. در این شرایط پس از تحمل حمله هوایی یک بمب‌افکن دشمن، خدمه او-بوت را به دست خود غرق کرده و بیشترشان به اسارت درآمدند.