L'ambassade d'Espagne près le Saint-Siège est la mission diplomatique permanente la plus ancienne du monde. Elle a été créée en 1480 par le roi Ferdinand le Catholique en nommant son premier ambassadeur Gonzalo de Beteta, chevalier de Santiago. Parmi les résultats politiques de cette activité, on peut citer le soutien papal à la Reconquête de Grenade, la répartition du Nouveau Monde entre l'Espagne et le Portugal à travers la “"Bula Inter Caetera"” en 1493 (voir le traité de Tordesillas), la Sainte-Ligue pour lutter contre les Turcs, qui culmine par la victoire de Lépante en 1571.