Zu Beginn des Ersten Weltkriegs waren die "Lancieri di Aosta" Teil der IV. Kavalleriebrigade, die ihrerseits der 4. Kavalleriedivision unterstand. Bis Ende 1915 operierte das Regiment am unteren Isonzo, im Mai 1916 kämpfte es während der österreichisch-ungarischen Frühjahrsoffensive bei Asiago auf der Hochfläche der Sieben Gemeinden. Im Jahr 1917 übernahm es während der 11. Isonzoschlacht auf dem Bainsizza-Hochplateau Sicherungsaufgaben im Bereich des XXIV Armeekorps. Nach dem Durchbruch der Mittelmächte bei Karfreit in der 12. Isonzoschlacht versuchten die "Lancieri di Aosta" deren Vormarsch u. a. bei Cividale del Friuli und Fagagna zu bremsen. Im November zogen sie sich hinter den Piave zurück, wo sie wiederum Sicherungsaufgaben übernahmen. Anfang November 1918 waren sie an der italienischen Schlussoffensive in der Schlacht von Vittorio Veneto beteiligt.