В 1526 году, в начале седьмой итальянской войны (Война Коньякской лиги), где император и папа оказались на противоположных сторонах, Луис отправился в Неаполитанское королевство вместе с новым вице-королём Уго де Монкадой, чтобы собрать войска против Рима (в конечном итоге Рим был разграблен 6 мая 1527 года). Он заболел в Сан-Марино и попросил у папы Климента VII разрешения приехать в Рим для лечения. Он был госпитализирован в городе и скончался там 17 августа.