Ana Luisa Peluffo gab ihr Debüt als Schauspielerin 1948 in einer kleinen Rolle im Abenteuerfilm "Tarzan in Gefahr". Trotz dieser Rolle in einer Hollywood-Produktion beschränkte sich ihr Schaffen anschließend fast ausschließlich auf mexikanische Filme. Ausnahmen bildeten unter anderem das 1956 erschienene, italienische Historiendrama "Die Sklavinnen von Karthago". 1978 spielte Peluffo die Hauptrolle im Drama "Flores de papel", das im selben Jahr am Wettbewerb der Internationalen Filmfestspiele Berlin teilnahm.