El 2.º Regimiento de Marines fue reactivado en febrero de 1941 en San Diego, California. Esta vez el regimiento formó parte de la recientemente formada 2.ª División de Marines. El regimiento zarpó preparado para realizar operaciones de combate en cinco buques el 1 de julio en dirección al Pacífico Sur. En julio de 1942 formó parte de los refuerzos enviados a la 1.ª División de Marines durante la Batalla de Guadalcanal desarrollada entre 1942 y 1943. El 1.er Batallón 2.º Regimiento de desembarcó en las Islas Florida el 7 de agosto de 1942 con el 2.º Batallón 2.º Regimiento actuando en apoyo del desembarco del Regimiento Raider de los Marines en Tulagi.