Waren de relaties tussen Frans en Karel nog goed in 1540, toen Karel een bezoek bracht aan Parijs, slaan die om na de moord op de Franse ambassadeur Antoine de Rincon in 1541. Antoine de Rincon kwam net terug van Constantinopel, waar hij had onderhandeld met het Ottomaanse hof, in verband met de nakende oorlog met het Heilig Roomse Rijk, toen hij werd onderschept en vermoord door de keizerlijke troepen. Op 12 juli 1542 verklaarde Frans de oorlog, het begin van de Italiaanse Oorlog (1542-1546). Geldproblemen en een tekort aan manschappen dwongen Frans aan de onderhandelingstafel. De oorlog had uiteindelijk niets opgeleverd.