Le régiment participe à son premier combat, le , lorsque six de ses compagnies prennent part à la bataille de New Bern, en Caroline du Nord. Le reste du régiment arrive dans la région, le . L'unité part ensuite pour le fort Monroe, en Virginie, du au , et à Fredericksburg du au . À Culpeper, en Virginie, le , le "48th Pennsylvania" rejoint l'armée de Virginie sous les ordres du général John Pope. Il passe les quelques semaines suivantes à participer à la campagne de Virginie septentrionale, prenant part à la seconde bataille de Bull Run (-) et à la bataille de Chantilly (). La campagne du Maryland est engagée ensuite en septembre et l'unité participe aux batailles de South Mountain () et d'Antietam (-).