アンボンはオランダが1599年に基地を建設して以来のモルッカ諸島の中心地であり、天然の良港を中心として要塞と航空基地が構築されていた。連合軍の守備兵力は3,000名（オーストラリア軍1,200名、蘭印軍400名、現地軍1,400名）であった。アンボンの攻略に任じられたのは第38師団歩兵第228連隊を基幹とする東方支隊（支隊長：第38歩兵団長伊東武夫少将、兵力5,300名）と呉第1特別陸戦隊（呉一特、兵力750名）であった。第38師団は香港攻略戦を完遂した後、1月12日に香港を出発し蘭印作戦に参加していた。