Arenan var värd vid de Olympiska sommarspelen 1960 samt värd för finalerna vid Europamästerskapet i fotboll 1968 och 1980 samt Världsmästerskapet i fotboll 1990. Roms Olympiastadion är även hemmaarena för Serie A-lagen SS Lazio och AS Roma. Stadion var värd för finalen i UEFA Champions League den 27 maj 2009.