21 октября 1805 года "Colossus", под командованием капитана Джеймса Морриса, входил в состав колонны вице-адмирала Катберта Коллингвуда в битве при Трафальгаре. Он был шестым кораблем в линии между "Bellerophon" и "Achille". Вслед за передовыми кораблями эскадры "Colossus" прошёл через линию франко-испанского флота между 74-пушечными Swiftsure и "Argonaute". Вступив в бой с "Argonaute" он обменивался с ним бортовыми залпами в течение 10 минут, в результате чего французский корабль потерявший убитыми и ранеными больше 160 человек, прекратил огонь и вышел из боя. Тогда "Colossus" орудиями левого борта открыл огонь по "Swiftsure" и находящемуся рядом с ним 74-пушечному испанскому кораблю "Bahama". "Swiftsure", получивший несколько бортовых залпов с близкого расстояния, начал дрейфовать и вскоре оказался за кормой "Colossus". Тогда Colossus пенес огонь на "Bahama", который вскоре спустил флаг. Экипаж "Swiftsure" восстановил контроль над судном и попытался обстрелять корму "Colossus", но тот уклонился от выстрелов и повернувшись правым бортом дал по "Swiftsure" бортовой залп, сбив у него бизань-мачту. В это время HMS "Orion" под командованием Эдварда Кодрингтона прошел сквозь дым, и пройдя за кормой "Swiftsure", дал по нему несколько разрушительных залпов. "Swiftsure" лишился грот-мачты, у него был поврежден штурвал, и разбиты несколько орудий. Капитан Виллемадрин пытался оказать сопротивление, но в конечном итоге сдался, потеряв 68 человек убитыми и 123 ранеными во время боя.