Briguant un second mandat lors de l’élection présidentielle de 2020, il affronte l’ancien vice-président démocrate Joe Biden au cours d'une campagne restreinte et marquée par les conséquences de la pandémie. Annoncé battu quelques jours après le vote, Donald Trump refuse de concéder sa défaite, engage une soixantaine de , qui sont quasiment tous rejetés, et retarde la transition présidentielle. Le , l’assaut du Capitole est considéré comme une insurrection ou une tentative de coup d'État, et entraîne de vives réactions à son encontre, jusque dans son parti. La plupart de ses comptes sur les réseaux sociaux sont alors suspendus et il se voit banni de Twitter, tandis qu’une seconde procédure de destitution est lancée à son encontre, ce qui en fait le premier président américain à être mis deux fois en accusation. Il n’assiste pas à l'investiture de son successeur, une première aux États-Unis depuis 1869. Il est acquitté par le Sénat une seconde fois un mois plus tard.