El Mark V fue empleado por primera vez en la Batalla de Hamel el 4 de julio de 1917, cuando 60 tanques contribuyeron al éxito del asalto de las unidades australianas contra las líneas alemanas. Participó en ocho importantes ofensivas antes del fin de la guerra. Las tropas canadienses y estadounidenses se entrenaron con tanques Mark V en Inglaterra en 1918, mientras que el 301° Batallón de Tanques Pesados estadounidense participó en tres acciones en el sector británico del Frente Occidental a fines de 1918. Sin embargo, el Cuerpo de Tanques canadiense no entró en combate y fue disuelto tras el final de la guerra. Aproximadamente unos 70 tanques Mark V fueron enviados para apoyar a los Rusos Blancos en la Intervención aliada en la Guerra Civil Rusa y en la Campaña del Norte de Rusia. La mayoría fueron capturados por el Ejército Rojo. Cuatro fueron retenidos por fuerzas estonias y dos por Letonia.