Al año siguiente, estalló la Guerra Peninsular y los "Grenadiers à Cheval", junto con dos regimientos de infantería de la Guardia Joven recién creados y algunos artilleros de la Guardia, formaron parte del 2º Cuerpo del Ejército de España de Bessières, y estuvieron presentes en Madrid durante el Levantamiento del 2 de Mayo, donde fue herido su primer cirujano, Gauthier. Luego hicieron campaña en el noroeste del país. El 14 de julio, Bessières, con unos 14 000 hombres, se enfrentó a dos cuerpos españoles masivos de unos 22 000 hombres, no muy lejos de Valladolid. Algunos escuadrones del regimiento vieron una acción breve pero decisiva en la Batalla de Medina de Ríoseco, ya que apoyaron el ataque de la infantería del general Merle, que repelió a los españoles en Medina y más allá, ganando la batalla.