《德意日三国同盟条约》在1940年9月27日由大日本帝国與纳粹德国及意大利王國在柏林签署。此项协定正式确立了柏林-羅馬-東京軸心国同盟关系，并被认为是对美国的警告：要么保持中立，要么腹背受敌。条约中，三国同意在未来10年他们会“支持及与对方互相合作……以期实现她们建立与维持新秩序的目标，以期提倡互惠互利与有关人民之福祉” 。三国确认对方的势力范围，并承诺“以政经与军事之力，协助任何仍未参与战争而被攻击的一方”。而条款中的攻击者不包括苏联。条约补充1936年的德日协定和反共产国际协定之不足，并消除德国与日本因1939年苏德互不侵犯条约而起的嫌隙。后来，匈牙利王國（1940年11月20日）、罗马尼亚王國、斯洛伐克共和國（1940年11月23日）加入簽署三國同盟正式加入轴心國。保加利亚王國在1941年3月1日加入。