本銃の初の実戦投入は第一次世界大戦（青島の戦いなど日独戦争）であった。以降、三八式歩兵銃は日本軍（海軍にも供与）の主力小銃としてシベリア出兵、満洲事変、第一次上海事変、日中戦争（支那事変）、張鼓峰事件、ノモンハン事変等で使用されている。