Dies geschah erst mit dem Ausbruch des Deutsch-Dänischen Krieges, für den die "Sperber" am 11. Februar 1864 aktiviert wurde. Das Kanonenboot wurde der III. Flottillen-Division zugeteilt und nahm am Seegefecht bei Jasmund (1864) gegen dänische Kriegsschiffe teil. Während des Gefechts musste die "Sperber" ihr Schwesterschiff "Hay" abschleppen, da dessen Maschinenanlage zusammengebrochen war. Nach Kriegsende wurde das Schiff wieder auf dem Dänholm außer Dienst gestellt.