1789年法國大革命，亞爾薩斯被分為上萊茵省和下萊茵省。亞爾薩斯人在法國大革命期間十分活躍。1789年7月21日，在接獲攻佔巴士底監獄的消息後，當地群眾攻佔史特拉斯堡市政廳，市府官員逃離，結束亞爾薩斯的封建制度。1792年，德利斯勒在史特拉斯堡創作出革命進行曲《馬賽曲》，之後成為法國國歌。一些法國大革命中知名的將領是來自亞爾薩斯，像是在瓦爾密戰役（Battle of Valmy）中獲勝的凯勒曼（François Christophe Kellermann），和在旺代戰爭中領導法蘭西共和國軍隊的克萊貝爾（Jean Baptiste Kléber）。