После смерти бездетного Фердинандо в 1626 году престол унаследовал его брат Винченцо II, также на протяжении долгих лет остававшийся бездетным. Таким образом, внимание тех, кто питал интерес к Мантуанскому герцогству, обратилось на практически позабытую Марию Гонзага. 25 декабря 1627 Марию выдают замуж за Карла Неверского, поддерживаемого Францией, так как её союз с представителем младшей ветви рода Гонзага подкрепит права Неверских герцогов на престол. В тот же день умирает Винченцо II, смерть которого все ждали с минуты на минуту, и престол наследует его дальний родственник, Карло I Гонзага, с сыном которого обвенчали Марию. Но это не устроит Испанию, Австрию и Савойю, из-за чего начнется Война за мантуанское наследство, полностью разорившая Мантую.