Na het uitbreken van de Peloponnesische Oorlog tussen de Griekse machten Athene en Sparta, bleef de stad in de Delische Bond, hoewel de meeste steden op het Chalcidische schiereiland Athene afvielen. Dit duurde tot de stad in 424 v. Chr. werd bedreigd door troepen van de Spartaanse generaal Brasidas, toen wisselde Acanthus van kant. In 421 kwamen Athene en Sparta overeen om de gewapende conflicten te beëindigen. Hoewel de Vrede van Nicias zorgde voor de autonomie van de stad, was Acanthus verplicht belasting te betalen aan Athene. Acanthus kreeg waarschijnlijk pas na 405 v.Chr. volledige vrijheid, nadat Athene bij de Slag bij Aegospotami in de opnieuw aangewakkerde oorlog tegen Sparta een nederlaag leed.