凯瑟琳與亨利八世懷孕六次，最後只生下女儿玛丽，其餘都早夭。情勢對她非常不利，因為亨利害怕女性繼承王位，會引發第二次玫瑰戰爭，而且舊約聖經说：「弟娶兄嫂者會无后代」。1525年，亨利认定凯瑟琳不能为他生下男性继承人，便和女侍官安妮·博林发生了婚外情。安妮·博林以美色勾引诱惑亨利，慫恿他與凱瑟琳離婚，並與教宗決裂，因为无论如何亨利八世都要把凱瑟琳从王后之位除掉将情妇安妮·博林扶正。于是他指使親信兼首相托马斯·沃尔西（樞機、大法官）向教宗申请离婚，並派遣大臣威廉·奈特前去罗马教廷遊說，理由是凯瑟琳与亚瑟的短暂婚姻裡有圆房的事实。这给教宗克勉七世出了大难题，因為之前1527年他曾在羅馬之劫中被西班牙軍俘虜，不想再得罪勢力強大的西班牙帝國（西班牙国王查理五世是凯瑟琳的姪子），况且此一婚姻是前任教宗亲自批准的。