Trong Hồng quân Công nhân và Nông dân, chiếc xe này được thiết kế cho các nhiệm vụ liên lạc, trinh sát và chiến đấu bảo vệ các đơn vị trên đường hành quân, cũng như hỗ trợ trực tiếp cho bộ binh trên chiến trường. T-38 được sử dụng đại trà trong chiến dịch Ba Lan của Hồng quân năm 1939, chiến tranh Liên Xô-Phần Lan 1939-1940 và trong các trận chiến của thời kỳ đầu Chiến tranh Vệ quốc Vĩ đại. Những chiếc xe tăng duy nhất còn sót lại của loại này đã chiến đấu ở mặt trận cho đến tận năm 1944, và trong các đơn vị huấn luyện và tiểu đơn vị hậu phương, chúng được sử dụng cho đến khi chiến tranh kết thúc.