En 1627 al morir su primo Vicente II Gonzaga, último descendiente de la línea directa de los Gonzaga pasó a recibir el derecho de sucesión del ducado de Mantua, encontrándose con la oposición del duque de Saboya Carlos Manuel I, que tenía la mira en el marquesado. También sufrió la oposición del Imperio y de España que no veían con buenos ojos una presencia francesa a las puertas del ducado de Milán. Todo esto causó la guerra de sucesión de Mantua.