Cuando, en 1626, Fernando I Gonzaga murió, la situación de la familia era trágica: Vicente subió al poder consciente de ser el último miembro masculino de la rama principal, su matrimonio precedente no estaba anulado (cosa que hacía imposible unas nuevas nupcias) mientras estaba pendiente una posible condena de parte de la Santa Sede. Además su salud era endeble, a pesar de tener solamente 33 años. Quedaba designar una rama menor de la familia que sucediese a la principal. Las mayores potencias europeas prestaron atención a aquella cuestión, prometiendo apoyo por su candidato favorito: España y el Sacro Imperio Romano Germánico por la rama de los Gonzaga de Guastalla y Francia, por la rama de Nevers. Esta última fue favorecida por Vicente y su jefe, Carlos Gonzaga-Nevers, pariente de su padre, fue aceptado, no obstante la opinión contraria del emperador, y así fue asegurada la sucesión dinástica. En la Navidad de 1627, a punto de morir, Vicente aceptó el matrimonio de Carlos de Rethel (hijo de Carlos Gonzaga-Nevers) con su propia sobrina María Gonzaga, hija de su difunto hermano mayor, el duque Francisco IV y de Margarita de Saboya. Celebrada la boda, Vicente II expiró: el rechazo del emperador Fernando II de aprobar la sucesión de Carlos Gonzaga-Nevers sería causa de guerra.