O ramo dos Gonzaga por si iniciado, chamado "Gonzaga-Guastalla", entrará em conflito com o ramo dos "Gonzaga-Nevers" em 1628 por ocasião da Guerra da Sucessão de Mântua: os pretendentes para a sucessão do duque Vicente II de Mântua (que morreu sem descendência) foram, de uma parte Ferrante II de Guastalla (apoiado pelos Habsburgos) e, de outra, Carlos I de Gonzaga-Nevers (apoiado pelo Reino de França e pelo Papa).