بسم الله الرحمن الرحيم موضوع المعمل اليوم
الـ reticulocyte count اللي هو عد خلايا ال
reticulocyte بداية خلينا نعرف إيش هي الـ
reticulocyte وإيش الفائدة من عد الـ reticulocyte
وهنتعلم كيف نعدها تحت الميكروسكوب الـ reticulocyte
هي عبارة عن immature RBCs تحتوي على بقايا
cytoplasmic RNA يعني هي RBCs فقدت نواتها لكن تبقى
فيها بقايا من الـ RNA وبعض الـ organelles زي
الميتوكندرية والـ ribosomes طبعا إحنا عارفين الـ
maturation stages بتاعة الـ erythrocyte تبدأ بالـ
pronormoblast، mesopheric normoblast،
polychromatic normoblast، orthochromic normoblast
فالـ Atlas stages هذه كلّياتها وين بتكون؟ بتكون في
البون مارو يعني في الوضع الطبيعي مفروض ما أشوفش أي
واحدة منها دول في الـ Peripheral blood بعد هيك
بتفقد الخلية نواتها مع بقاء بقايا من الـ RNA والـ
mitochondria في خلية بسميها Polychromatic
erythrocyte البولي كروماتيك اللي هي الخلية اللي بتعطي
تغير بولي كرومازي يعني تعدد في لون الـRBCs اللي هي
الـreticulocyte طب ليش سميناها بوليك؟ يعني ليش
بتعمل تغير في لون الـRBCs؟ لأنه بقايا الـRNA اللي
في الخلية هتاخد صبغة الميثيلين بلو والـ Erythrocyte
نفسها هتاخد صبغة الـ Eosin فهتظهر الخلية بلون ما
بين الأحمر الـ Pink اللي هو جاي من الـ Eosin و الـ Blue
و ما بين الـ Methylene Blue الأزرق يعني هتاخد لون
Pink على زرق شوية الزرق هذا جاي من وين؟ من بقايا
الـ RNA اللي موجود في الخلية وسميت Reticulocyte
لأن هذه البقايا بتبقى عاملة في داخل الخلية زي الـ
reticulum زي الشبكة من هنا أجى اسم reticulocyte
بعد هيك بيصير عندي الـ mature erythrocyte اللي
بتعيش 120 يوم في الـ peripheral blood طيب احنا من
كل الكلام هذا بدنا الـ reticulocyte فلقيت الـ
reticulocyte بتتصنع وين؟ في البون مارو يعني لما
بتفقد الـ orthochromic normoblast نوعها وين
بتكون؟ بتكون في البون مارو بتفقد النواة وبتتحول لـ
reticulocyte اللي هي الخلية محور كلامنا اليوم خلية
الـ reticulocyte خلية الـ reticulocyte هذه تمكث في
البون مارو من يومين إلى تلات أيام في الوضع الطبيعي
قبل ما تطلع على الـ peripheral blood بعد هيك بتطلع
على الـ peripheral blood وهي في الـ peripheral
blood بتقعد يوم واحد بس وبتتحول لـ mature
erythrocyte يعني فترة مكثها في الـ peripheral
blood هتكون فقط يوم واحد يعني مش هلاقيها هتطول في
الـ peripheral blood في الوضع الطبيعي تمام؟
إيش فايدة الـ reticulocyte count?
إحنا قولنا إنه الـ reticulocyte
بتتكون وبتقعد يوم واحد في الـ peripheral blood
صح؟ بعد ذلك تتحول إلى mature erythrocyte فبالتالي
أنا لما بحاول أعمل عد للـ reticulocyte بدي أشوف
هل الـ bone marrow شغالي كويس وبينتج خلايا RBCs
ولا فيه مشكلة يعني هي بتعكسلي الـ effectiveness of
red cell production from bone marrow الـ
reticulocyte إنها normal يعني يعني نقول مثلا من نص
إلى واحد ونص في المية يعني من نص الـ RBCs إلى 1.5
RBCs في المية Reticulocyte إذا كان العدد طلع معايا
في هذا الـ Range معنى الكلام إنه الـ Reticulocyte
إنتاجها كويس يعني البون مارو شغال كويس ضمن الـ
Normal Range لا أكثر ولا أقل إذا كانت عدد الـ
Reticulocyte أقل من نص معنى الكلام إنه في كسل في
البون مارو البون مارو ما بينتج Erythroid cells
بشكل جيد لو كان الـ Reticulocyte أعلى من 1.5 بقول إنه
فيه «اريثرويد هايبربلاشيا» يعني خلايا الـ RBCs فيه
نشاط زائد في تصنيعها فأدى إلى خروج reticulocyte
بشكل أكبر من الطبيعي طيب، خلينا مع بعض نحاول نفهم
من وين الـ Normal Range هذه أجت، تمام؟ إحنا بدنا
نستنتجها، فلنفرض إحنا اتفقنا إن عمر الـ RBCs 100 يوم
100 إلى 120 يوم ناخد كمتوسط 100 يوم يعني كل 100
يوم بيصير تغيير كامل لكل الـRBCs اللي في
الـPeripheral Blood صح؟ يعني في اليوم الواحد قدش
بتتغير؟ يعني إذا أنا بالـ100 يوم بصرف 100 شكل مثلا
باليوم الواحد قدش بصرف؟ 1% شكل صح؟ وهدي نفس الشيء
إذا بالـ100 يوم كل الـRBCs بتتغير باليوم الواحد،
1% من الـ RBCs هيتغير طيب 1%
هيتغير إيش هيطلع بداله؟ هيطلع بداله reticulocyte
يعني هتكون نسبة الـ reticulocyte هي نفسها نسبة الـ
RBCs اللي اتصرفت يوميًا يعني هينزل Reticulocyte بما
يعادل 1% من الـWhole Blood أو من الـTotal RBCs
الموجودة في الـPeripheral Blood بمعنى إن الـNormal
Range 1% طبعا إحنا ما فيش عندنا Target دايما بنحط
Range بنحط من نص إلى 1.5% يعتبر within Normal
Range طبعا إذا ثبتنا الـ «بون مارو» نسبة الـ
reticulocyte 1% ثم الـ «بون مارو» تقوم بتغيير
تقريبًا 1% من خلايا الأخرى كل يوم كل يوم تتغير
تقريبًا 1% من الـ reticulocyte من الـ «اربسيز»
يومياً وبتتم استبدالها بـ reticulocyte الـ absolute
count هيكون اللي هو إيش يعني absolute count؟ العدد
بالـ «مايكروليتر» أو بالـ «مليمتر المكعب» هيكون من
25 .. هنتعلم كيف نحسبه من 25 إلى 75 ألف بير مايكرو
لتر
أمتى ممكن يزيد عدد الـ reticulocyte؟ عدد الـ
reticulocyte ممكن يزيد في حالات ما بيكون في
activation للـ bone marrow أو hyper stimulation
للـ bone marrow أمتى ممكن يصير hyper stimulation
للـ bone marrow؟ لو كان في خلل في الـ peripheral
blood يعني أثر على الـ RBCs أدى لمثلاً تكسير في
الـ RBCs نزيف أدى لفقدان كمية من الـ RBCs قد يكون
acute أو chronic أي سبب من الأسباب اللي أدت لنقص
مكونات الدم وعملت Hypoxia في الأنسجة تمام؟ هنا من
ضمن الأنسجة اللي هيصير عندها Hypoxia الـ kidney
الـ kidney بيفرز هرمون الـ erythropoietin الـ
erythropoietin هيعمل stimulation للـ bone marrow
إنه يطلّع RBCs عشان يتعوض الخلل اللي صار في الأنسجة
عشان تتعوض الـ Hypoxia أو تحل مشكلة الـ Hypoxia
اللي صايرة بالأنسجة، تمام؟ إذا الـ bone marrow
شغال كويس، حيطلّع وحيصير فيه stimulation أكثر من
الطبيعي عشان يطلّع خلايا تسد العجز اللي صار من
الحالات هذه الـ Thalassemia، Sidroblastis Anemia
Acute and Chronic Blood Loss، Hemolytic Anemia
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy بس الـ Bone Marrow
وكان فيه كسل لأنه مافيش عناصر للتصنيع لكن يوم ما
ياخد علاج هيرجع الـ Bone Marrow يتنشط ويصنع خلايا حتى
هيكون الـ reticulocyte count عندهم أكبر من الطبيعي
لأنه بدي يساعد العالج المشكلة اللي صارت برضه بعض
الـ Medications اللي ممكن تنشط الـ Bone Marrow هترفع
عند الـ reticulocyte count طيب الـ reticulocyte
standing كيف أنا بدي أشتغل أو بدي أعمل
الـ reticulocyte فلقيت لو جينا على الـ Wright Stain
العادية الصبغة العادية اللي هي الجيمسا والليشمان
و الـ Wright اللي بسبق فيها الـ Blood Film بالطريقة
اللي احنا حكينا عنها هتظهر الـ reticulocyte
polychromatic يعني لون pink على زرق شوية أو ممكن
تكون macrocytic يعني أكبر شوية من الـ erythrocyte
بس هذا مش مقياس يعني مش كل الـ reticulocyte هتظهر
واضحة بالـ Blood Film و برضه حسب الصبغة ما هي ممكن
يكون فيه خلل معين بالصبغة يأثر عليهم الخلايا فما
أميز الـ Reticulocyte من خلالها عشان هيك أنا ما
بنفع أعد الـ Reticulocyte من خلال الـ Blood Film
العادي بعد الـ Reticulocyte بطريقة مختلفة هلأ راح
نشوفها مع بعض تمام الـ
Reticulocyte Staining كيف بعملها؟ باستخدم أصباغ
بسميها «vital dyes» أو «supravital stains»
الأصباغ هذه بتصبغ الخلايا وهي viable وهي حية يعني
أنا إذا عملت الـ blood film أول حاجة فردت بعد
هيك جففت الـ blood film بعدين عملت fixation طبعا
الخطوات هذه ما بتخلي أي خلية viable كل الخلايا
هتموت إذا بنعمل fixation وتجفيف و fixation هتموت
الخلايا أنا عشان أصبغ الـ RNA والـ Organelles اللي
في قلب الخلية لازم الخلية تبقى حية عشان الصبغة
تقدر تدخل من الـ Cell Membrane وتصبغ المكونات اللي
في داخل الخلية فمن الأصباغ الـ Supravital Stains
اللي بأستخدمها صبغة الـ New Methylene Blue بريليانت
كريزلي بلو بيور أزاربي هذه صبغات أنا ممكن أستخدمها
بتعمل الـ precipitation للـ RNA والـ organelles
و بتعمل filamentous network of reticulum بتعمل عندي
شبكة من الـ organelles موجودة في داخل الخلية وبتكون
واضحة جدا وماخدة لون الصبغة اللي أنا حطيتها عليها
تمام هيك؟ هي عندنا صورة كتير واضحة زي ما أنتم
شايفين هذا فيلم تم إعداده بعد صباغة الخلايا بالـ
Supravital Stains الخلايا
زي ما أنتم شايفين ماخدة اللون الأزرق مش اللون الـ
Pink لأنها مسبوقة بالـ New Methylene Blue هي مش
هتاخد اللون Pink هنا هناك كانت تاخد اللون Pink
لأننا كنا نستخدم صبغتين مع بعض مخلطين الـ Eosin و
الـ Methylene صح؟ هنا لأ صبغة واحدة اللي هي الـ
Methylene Blue فهتظهر الخلايا كلها باللون الـ Blue
بينما الخلايا اللي فيها reticulocyte هتكون أكبر
شوية من الخلايا اللي mature شوية صغيرة أكبر وممكن
يكون حجمها قريب منها أو زيها هنلاقي فيها زي شبكة
من الترسبات اللي هي ناتجة عن الـRNA وبقايا
الـorganelles الموجودة في الخلية إذن هذا هو شكل
الـreticulocyte إن شاء الله ربنا يقدر ونصبغ
ونشوفها ونعدها ونتعرف عليها
هي شكل آخر هنا ملاحظين هذا blood film عادي هي
reticulocyte اللي مشاور عليها خلايا أكبر شوية وما
أخد لون على زرق بس مش كتير مميز يعني عشانك ما
تميزها من خلال blood film العادي لأ بعدها من خلال
الفيلم اللي تم إعداده بالـ super vital stain زي هذا
هي في عندي هنا هي reticulocyte وهي reticulocyte 177
في المئة نسبة مئوية خمسة عشر على ألف في المئة خلت راح
تشوفوها
بالطريقة قلت لكم إياها أنا وإن شاء الله ربنا نقدر
الظروف ونشتغلها مع بعض إنه بعمل mixing لـ equal
volume بعد هيك بعمل incubation مع بعض وبحطها على
10X عشان أجيب الـ field بعد هيك العد يا بنات بده
أختار منطقة مكونة من الـ monolayer طبقة واحدة من
الخلايا تمام؟ وأحط على 100X وأحط الـ oil وأبلش
أعد، أبلش إيش أعد طيب هنا طريقة الحسابات بتاعتي بدي
أجيب نسبة الـ reticulocyte بجيب عدد الـ reticulocyte
اللي أنا عديتها في ألف مثلاً عديت خمسة عشر في الألف
بقول في المئة على ألف، أشهد الألف اللي هي عدد الـ RBCs
الكل اللي أنا عديت فيه تمام؟ بطلع عندي نسبة الـ
reticulocyte هاي عندنا example احنا عدينا 25
reticulocyte في ألف الـ reticulocyte count بيساوي
25 في 100 على 1000 بطلع 2.5% إيش يعني؟ يعني نسبة
الـ reticulocyte للـ whole blood 2.5 2.5 من الـ
RBCs في المئة 2.5% من الـ RBCs أش reticulocyte
في واحد أقول والله طريقة العد هذه شوية صعبة يعني
أنا بدي أجي تحت الـ field أعد 200، 1000 خلية، شيء
بيزّق فراحت تكر شغلة بسيطة هيك اسمها الـ Miller
disk هذا عبارة عن قرص شفاف بنحط على العدسة العينية
بيصير يظهر عندي هذا المنظر، إيش المنظر هذا؟ هذا الـ
field الكلي الخارجي، الدائرة الخارجية، هذه عبارة
عن الـ field والمربع اللي في الوسط هو عبارة عن الرسم
اللي رسمها عبارة عن مربع A وفيه كمان مربع صغير
مساحة المربع الصغير تساوي المساحة الكلية كويس؟
مساحة المربع الصغير بتشكل تساوي المساحة الكلية تساوي
المربع A طب إيش الفائدة منها هذه؟ أه بدل ما أنا
أعد الـ RBCs في كل الـ field هذا بروح بعد في
المربع B مثلاً طلع عندي 50 خلية إذا في المربع A كم
خلية؟ 50×9 450 خلية، أكيد على حاله عداش الـ RBCs
طيب عدينا الـ RBCs في المربع الصغير وعرفنا قد إيش
العدد في المربع الكبير طب بالنسبة للـ reticulocyte
الـ reticulocyte عددها بيكونش كتير فمش راح أتغلب
لو عديتها في المربع A كله يعني بعد الـ reticulocyte
في المربع الكبير كله ولنفرض طلع عندنا عشرة إذا عدد
الـ reticulocyte عشرة مقابل 450 RBCs تمام؟ بننتقل على
field ثاني وبكرر نفس العملية هذا بيسهل عليا عشان
ما أظلش أعد خلايا بالألوف يعني بعد تسع الكمية وبضرب
9 هي هنا بقول لك هو عدد reticulocyte في الـ Square A
بس في أكثر من field مش في field واحد نجمعهم مع بعض
طلع العدد معاه 100 فكان عدد reticulocyte لكل اللي
عدّوا 100 وعدد الـ RBCs لكل اللي عدّوا 500 طبعاً الـ
500 كانت في المربع B بس في أكثر من field يعني في
fields متعددة فضرب الـ 500 في 9 أه وأه العدد الـ
reticulocyte على عدد الـ RBCs الكلي زي ما قلنا عدد
الـ reticulocyte على عدد الـ RBCs الكلي في 100%
فبتطلع عندنا نسبة الـ reticulocyte يعني هذه
طريقة مبسطة احنا مش هنشتغل فيها إحنا هنعد الـ field
كله ونعد قد إيش في reticulocyte عشان نتعلم منها طيب
كيف طريقة تسجيل النتائج أول حاجة قلنا احنا على الـ
percent count صح؟ قلنا بنسجل كنسبة مئوية في عندي
طريقة ثانية الـ absolute reticulocyte count اللي
هو الـ actual number للـ reticulocyte في الـ
microliter أو في الـ liter بسبب الوحدة اللي أنا
بستخدمها كيف بعمله هذا؟ كيف بحسبه؟ بحسبه عن طريق
النسبة اللي طلعت لي بضربها في عدد الـ RBCs الكلي
يعني is calculated by multiplying the reticulocyte
percent by the RBCs count and divided by 100 طبعاً
هذه لأن أنا عملتها كنسبة مئوية يعني hundred
reticulocyte مثلاً اثنين في المئة فممكن أكتبها اثنين
من مئة أو أقسم على مئة for example هنا بقول الـ
critical site كانت اثنين في المئة والـ RBCs اثنين
ومليونين من عشرة في عشرة أقص اثنين كيف بدي أحسبها
هذه اثنين تمام ضرب اثنين ومليونين من عشرة في عشرة
أقص اثنين مقسومة على مئة اللي هي تاعة النسبة
المئوية بطلع عندي أربعة وأربعين اللي هي هتطلع 440
ألف لكل microliter 440 ألف لكل microliter تمام هيك؟
نأتي لـ Corrected reticulocyte count وضروري نفهمه و
نعرف إيش مدلوله الآن احنا اتفقنا إن reticulocyte
count لازم يعكس عندي Total Production of Red Cells
لازم يعكس عندي نشاط النخاع وإنتاجه للـ RBCs بغض
النظر عن تركيز الـ RBCs in the peripheral blood
يعني بغض النظر عن عدد الـ RBCs اللي بيطلع معايا في
الـ CBC في الـ Microliter أو في المليمتر المكعب
طيب، توضيح يعني أكثر لهذه النقطة The reticulocyte
count ممكن يزيد لسببين الـ reticulocyte count ممكن
يزيد لسببين السبب الأول أنه فعليًا زاد إنتاج الـ
reticulocyte من الـ نخاع هذا السبب اللي احنا
بدنا إياه أو احنا بدنا نوصل له احنا بدنا نعرف أنه
أو نوصل لإن أي زيادة في الـ reticulocyte لازم
تكون بسبب زيادة في إنتاجها من الـ نخاع السبب
الثاني أنه عدد الـ RBCs في الـ peripheral blood
قليل فالعدد اللي طلع من الـ reticulocyte قفّ في عدد
قليل من الـ RBCs ولما أجيت أنا أحسب النسبة كنسبة
مئوية طلعت عالية يعني تخيلي عندي شخصين واحد فيهم
الـ RBCs عنده 2 مليون وواحد 4 مليون كويس؟ أبو 2
مليون اثنين بيطلعوا نفس عدد الـ reticulocyte
يومياً يعني هذا بيطلع مثلاً ألف reticulocyte وهذا
بيطلع ألف reticulocyte قالت لو جيت أحسب النسبة لكل
واحد الـ 1000 الأولى هتتخفف في 2 مليون والـ 1000
الثانية هتتخفف في 4 مليون صح؟ يعني الأول اللي الـ
RBCs عنده 2 مليون هتبقى النسبة عنده ضعف اللي عنده
الـ RBCs 4 مليون ليش؟ لأنه فعليًا الـ RBC الـ
Reticulocyte اتخففت في عدد أقل من الـ RBCs عند
الأولاني يعني ممكن الأولاني يلاقي الـ Reticulocyte
عنده مثلاً 4% والثاني 2% هل معنى الكلام إنه الأول
إنتاج للـ reticulocyte أنشط؟ لا وإنما لأن الـ
reticulocyte اتخففت بعدد أقل من الـ RBCs في الـ
circulation عشان هيك احنا لازم نوجد حل لهذا الموضوع
لازم إذا كان في عندنا زيادة في الـ reticulocyte تعكس
زيادة فعلية في نشاط النخاع مش لأنه الـ
reticulocyte اتخففت في عدد قليل من الـ RBCs عشان
هيك بدنا نعمل correction الـ correction هذا يعني
كأنه أي شخص الـ RBC عنده Normal لو كانت الـ
RBC عنده Normal قد إيش هذا عدد الـ Reticulocyte
هذا قد إيش بيكون في هذه الحالة يعني مثلاً اللي قلنا
عنهم الاثنين توي المثال اللي أنا ضربته قلت لكم
الأول بيطلع عنده نسبة 4% والثاني 2% لكن هم فعليًا
يعني نفس الكمية منتجة فأنا بدي أخلي أول 4% يوصل
لـ 2% كأنه الـ RBCs يعني أنت افترض أن الـ RBCs عنده
طبيعية وفي هذه الحالة قد إيش بدها تكون نسبة
الـ Reticulocyte بهذا الطريق خليني نشوف في الـ slide
الجاية مثال برضه يعني بيوضح حد أو بعزز هذا المفهوم
خليني نفهمه اللي ما فهمتش هذا المثال هيفهم الثاني و
تجه لـ مثالبقول لك Compare the following two
patients عندك مريضين patient number one عنده
hematocrit 42% و reticulocyte طلعت معاه 1% patient
2 الـ hematocrit 21% و reticulocyte طلعت عنده 2%
ماذا؟ هذا تقريباً نفس اللي قلناه ما هو الـ
Hematocrit كأنه بيعبر عن عدد الـ RBCs مصبوط؟ يعني
هذا عنده الـ RBCs أكثر من هذا عشان هيك هذا طلعت
الـ reticulocyte عنده 1% وهذا 2% patient 2
theoretically has one-half as many red cells as
patient 1 يعني نظريًا المريض رقم 2 هذا عنده نصف عدد
الخلايا للمريض الأول صح؟ but has the same number
of reticulocyte as patient 1 ليش؟ لأنه قلنا هو
عنده نفس عدد reticulocyte بتاع patient 1 الاثنين
بنتجوا نفس العدد لكن الأول اتخفف في 42% في عدد
أكبر والثاني اتخفف في 21% في عدد أقل عشان هيك لازم
أعمل حاجة بسميها correct reticulocyte إيش هو هذا؟
بقول الـ Patient Hematocrit كويس مقسوم على الـ 45%
إيش هذا الـ 45% اللي هو الـ Normal Hematocrit الـ
Normal Hematocrit مضروب في الـ reticulocyte count
يعني لو كان عندي نشوف مثلاً هذا قبل 2% بدنا نقول 2%
تمام مضروب في الـ Patient Hematocrit اللي هو 21 على
45 اللي هو الـ Normal Hematocrit هيطلع تقريباً 1%
فأنا هيك بكون اتعامل مع المريض أو طلعت نتيجة كما
لو كان عدد الـ RBCs عنده Normal والـ Hematocrit
عنده 45 يعني كأني بقول هذا المريض رقم 2 كم ستكون
الـ Reticulocyte عنده لو كان الـ Hematocrit عنده 45
% بهذا الطريق بقدر أعرف قد إيش فعليًا الـ bone
marrow vintage reticulocyte اللي هي بضرب الـ
percent count اللي أنا حسبته في ال patient
hematocrit مضروب على 45% طبعاً يا بنات لو كان الـ
hematocrit normal هيكون الـ patient hematocrit
تقريباً 45 فكأني ضربت في واحد يعني مش هتفرق معايا
أو هيظل الرقم اللي أنا حسبته زي ما هو أمتى هتفرق
لو كان الـ hematocrit قليل for example if a patient
presenting with a reticulocyte count 10% with a
hematocrit 22% the corrected reticulocyte would be
corrected reticulocyte count بنقول 10% مضروب في الـ
patient hematocrit اللي هو 22 على 45 اللي هو الـ
normal hematocrit بتطلع عندي 4.9 من 10% يعني
تخيلوا بدل ما كانت الـ reticulocyte عنده 10% أنا
حسبتها صح 4.9 من 10% كما لو كان الـ RBCs عنده
عددها طبيعي ما تش بدها تقول نسبة reticulocyte عندك
طيب نأتي
لشيء كمان اللي هي reticulocyte production index
إيش بتعني؟ هذه ببساطة احنا اتفقنا يا بنات من
الأساس إن الـ reticulocyte بتقعد يوم واحد في الـ
peripheral blood صح؟ طيب لو كان الـ bone marrow
بيشتغل تحت stress يعني مطلوب منه يطلع خلايا أكثر من
الطبيعي فيه نزيف فيه تكثير فيه أي سبب فصار الـ
bone marrow يشتغل بنشاط أكثر من الطبيعي هيك هيصير
يطلع reticulocyte immature احنا قلنا الـ
reticulocyte
تلاتة دُغري بتطلع على الـ blood prior to maturation
in the bone marrow this is detected by nucleated
RBCs يعني حتى هنلاقي nucleated RBCs زي
polychromatic macrocyte shift cells اللي هي الـ
reticulocyte polychromatic nucleated RBCs
وـ reticulocyte هنشوفهم في الـ peripheral blood في
الـ circulation to correct for the increased time
spent in maturation in the peripheral blood يعني
عشان أعدل أو أعمل correction للوقت لزيادة اللي
بتقعد الـ reticulocyte في الـ peripheral blood الـ
reticulocyte production index is calculated بحسب
حاجة اسمها reticulocyte production index كيف
بحسبه؟ بأخذ الـ corrected reticulocyte count على
عدد الأيام اللي ممكن تقعدها الـ RBC الـ
reticulocyte في الـ peripheral blood تمام؟ لغاية
ما تتحول لـ mature RBCs هذا جدول بيقول لك قداش متوقع
الـ reticulocyte بتقعد في الـ peripheral blood
بناء على الـ hematocrit يعني لو كان الـ hematocrit
طبيعي 45 هتقعد يوم واحد زي ما اتفقنا لو كان 35
هتقعد يوم ونص لو كان 25 هتقعد يومين لو كان 15
هتقعد تلت أيام، تمام؟ فبالتالي أنا عشان أحسب الـ
reticulocyte production index بدي أشوف الـ
hematocrit والله كان الـ hematocrit 25 بدي أقسم
الـ corrected reticulocyte count على عدد الأيام
على كم قلنا 25 بدي أقسم على 2 لو كان 35 بدي أقسم
الـ corrected count على 1.5 and so on هاي عندنا
مثال بيقول لك a patient with reticulocyte count هذه
مثالة بتقول لك إنه لو كان المريض عنده الـ
reticulocyte count 12% والـ hematocrit 25% قداش
الـ reticulocyte production index الـ reticulocyte
production index هيكون 7% مضروب في 25% على 45%
إيش هذا؟ أول شيء بنحسب الـ corrected count هذا الـ
count العادي 12% هو أول شيء بنحسب الـ «corrected
count» تمام؟ و الـ «corrected count» بنضربه في 2
فهيك 3.3% الـ «reticulocyte production index» هيك
«reticulocyte production index» أو «reticulocyte
count» «reticulocyte count» هنا بيقول لك «newborn» من
2.5 إلى 6 في الـ «adult» من نصف إلى 1.5 أو إلى 2 الـ
Absolute reticulocyte count 25 إلى 75 في 10 أو 9
per liter اللي هي 250 إلى 750 ألف بالـ Microliter
الـ reticulocyte production index المفروض يكون 3
أو أكثر عشان يكون الـ bone marrow استدل على إنه شغال
كويس وما فيش فيه مشاكل طيب،
هنا عندنا بعض النقاط للمناقشة هنا بيقول لك when
using EDTA as anticoagulant the blood may be
stored for 24 hours يعني لو أنت استخدمتي EDTA
ممكن تخزني الدم 24 ساعة وبيعطيكي نتائج مقبولة لكن
يُفضل أنك تعمليها من 6 إلى 8 ساعات maximum لأنه بعد
هيك هيبدأ ينزل عدد الـ reticulocyte قبل شوي هيبدأ ينزل
لأنه هيبدأ يتحول لـ mature يعني في عدد منها هيتحول
لـ mature RBCs صح؟ في الـ tube الظروف كلها مواتية
فتلاقيها هتبدأ تتحول لـ Mature RBCs The presence
of high blood glucose لو كانت نسبة السكر عالية أو
استخدمت الهيبارين كـ Anticoagulant في الصباغة طبعًا
هنا هيعطيني بالـ Staining للـ reticulocyte هتظهر
reticulocyte بلون فاتح
طيب بيقول لك في صبغات إحنا الصبغة اللي بنستخدمها
عندنا اللي هي الـ New Methylene Blue بيقول لك ممكن
تستخدم الـ Brilliant Cresyl Blue بس يعني مشكلتها
أنها بتعطي inconsistency في الـ staining مش كتير
جيدة الـ Pure Azure ممتازة بنستخدمها بنفس
التركيز والطريقة بتاعة الـ New Methylene Blue الوقت
مهم يعني أحيانًا إذا كان الوقت مش كافي هيطلع عندي
العدد قليل لأن مش كل الـ reticulocyte انصبغت فلازم
أعطي الـ reticulocyte وقت كافي عشان تنصبغ مش أقل
من 10 دقائق إحنا عادة بنتركها تلت ساعة أو أكثر
بنلاقي الخلايا والـ RNA أخذ صبغة جيدة وظهرت بشكل
كثير واضح الـ reticulocyte هنا بيقول لك لا يُنصح بأنك
تعمل counter stain ثاني للـ reticulocyte إيش يعني
counter stain ثاني يعني تصبغي صبغة ثانية للـ
reticulocyte إحنا بنعملها بالطريقة اللي قلت لكم
عليها بنصبغ بعدين بنفرد وبعدين تمام؟ في ناس بتحب
تصبغها كمان مرة بالـ hematologist خاصة إذا كانت
تحفظ الشريحة على فترات طويلة لأن الصبغة اللي هي
هذه الـ New Methylene Blue دغري بيفتح لونها بيقول لك لا يُنصح
أنك تصبغيها بصبغة ثانية كيف بنصبغها بصبغة ثانية؟
فلأن بعد ما يجهزوا الشريحة تحت الـ reticulocyte
تمام؟ بنفترضوا إن هذه هي الـ Blood Smear و بنبدأ
فيها صباغة من أول وجديد بنعمل Fixation و بنعمل
Staining بالجمزة أو بالـ Right Stain هيك الـ Counter
Stain بتنعمل يعني صبغة فوق صبغة مُطلقًا لا يُنصح فيها
كثير ليش؟ لأن أحيانًا تعمل الـ precipitation الصبغة
نفسها الـ Counter Stain و الـ precipitate دي قد تظهر
كإنها reticulocyte يعني ممكن تلخبطني مع الـ
reticulocyte إحنا قلنا من الأساس إنه أنا بحط equal
volume من الـ blood إلى الصبغة، تمام؟ في بعض
الأحيان بيقول لك لأ إذا كان الـ hemoglobin قليل يعني
الـ blood الـ RBCs فيه قليلة يفضل إني أزود كمية الـ
blood شوية عن نسبة الصبغة، تمام؟ لو كان الـ
Hemoglobin أعلى من الطبيعي بنقلل كمية الـ RBCs عن
الصبغة يعني هو عند الناس الـ Normal بيكون فيه
تساوي كمية الصبغة مع كمية الـ Blood لكن لو الـ
Hemoglobin قليل بنزيد الـ RBCs لو الـ Hemoglobin
عالي بنقلل الـ RBCs عشان يصير تناسب بين كمية الـ
RBCs و الصبغة و تنصبغ تلاتة بشكل جيد أي طيب، في
ملاحظة ثانية برضه إحنا بنعمل mixing للصبغة مع
الـ blood و بنعمل لهم incubation في الـ water bath
فدلوقتي الحالة الـ incubation كافية لإنه بعض
الخلايا تترسب وتبدأ تفصل حسب كثافتها الـ
reticulocyte من الخلايا اللي كثافتها قليلة فهتطلع
لفوق ليش؟ لأنها أقل maturity عشان هيك لازم ضروري
جدا قبل ما آخذ الـ drop عشان أفرد لازم أعمل good
mixing وإلا بأخذ عينة مش متجانسة هتكون طبقات ممكن
آخذ من طبقة الـ reticulocyte أو آخذ من الطبقة اللي
ما فيش فيها reticulocyte هيطلع عند الـ count خطأ
عشان هيك ضروري جدًا عملية الـ mixing
طيب هنا أقول لك لو أنا سبقت كويس واتبعت الخطوات كويس
هيبقى عندي يعني وعديت أكثر من field هيبقى عندي فرق
بين كل 500 erythrocyte بس نصف reticulocyte يعني
نسبة الخطأ هتكون أقل من point one percent لو أنا
اتبعت الخطوات كويس سبقت كويسة هنا بيقول لك في automated
procedure في طريقة يعني بتغنيني عن الطريقة الـ
manual هذه باستخدام الـ flow cytometry بنصبغوها بـ
fluorescent dye اللي هي الـ reticulocyte بتعطيني
نتائج أفضل من الطريقة الـ manual طيب، هلاقي يا
بنات reticulocyte عبارة عن حبيبات في داخل الخلية
طيب، هل هتلخبطني مع الـ Howell Jolly body و الـ Heinz
body اللي هي الـ inclusion bodies اللي حكينا عليها
ولا لأ؟ خلينا نشوف الجدول الجاي بعمل مقارنة ما
بينهم هذه الأشياء اللي ممكن تلخبطني مع الـ
reticulocyte أول حاجة الـ Howell Jolly body الـ Howell
Jolly body بيظهر بالـ Wright stain بس الـ reticulocyte
ما بتظهر بالـ Wright stain يعني أنا بالـ Wright stain
لو عملت وشفت الحبيبات هذه بعرف أن هو الـ Howell Jolly body
بينما الـ reticulocyte ما بتبين الـ Heinz Body و الـ
Pappenheimer التانيين بنصبغهم بالـ
Supravital Stain طب كيف نفرقهم عن بعض من شكلهم؟
الـ Heinz Body بيبقى على شكل حبيبات يعني كتل صغيرة
أو حبيبات صغيرة منفصلة عن بعض عند الـ Cell
Membrane يعني حبة أو اثنتين أو ثلاث مثلًا هيك
ثنتين لاصقين عند الـ Cell Membrane وكبيرة شوي بينما الـ
Pappenheimer تبقى زي شبكة في وسط الخلية نيجي للـ
Pappenheimer Bodies Pappenheimer Bodies عبارة عن
حبيبات الحديد فيها حديد محتواها من الـ Iron فبالتالي
لو أنا اتلخبطت فيها ممكن أصبغ بصبغة خاصة بالحديد
عشان يتفرق لي ما بين الـ reticulocyte وما بين
الـ Pappenheimer bodies الصبغة هذه اللي هي
الـ Prussian blue stain في Hemoglobin H bodies طبعًا
بتظهر كـ greenish blue inclusion في الخلية
هيك بنكون خلصنا مع بعض Reticulocyte Count
يعطيكم ألف عافية