يكون positive، إذا لا يحتوي، هيكون negativeفكيف
الـ principle مبدأ عمل الفحص أنه بيجي عنده amino
acid with aromatic ring حمض أميني بيحتوي على حلقة
بنزين بحط عليه concentrated nitric acid
concentrated nitric acid HNO3 في وجود قاعدة قوية
زي الـ NaO2 في وجود NaO2 ليش هييجي يعمل الـ nitric
acid لحمض الأميني اللي يحتوي على بنزين ring؟بيعمل
Nitration of Benzene Ring بيضيف Nitration of
Benzene Ring بيضيف NO3 على حلقة البنزين Nitric
Acid بيضيف NO3 على حلقة البنزين بيسميها Nitration
of Benzene Ring إذن هو Amino Acid with Benzene
Ring زائد Concentrated Nitric Acid مع Concentrated
HNO3 في وجود NOH بيصير Nitration of Benzene Ring
بنزين ريال يحتوي على يلو color إذا صار يلو color
إذا positive إذا negative إذا لا يحتوي على بنزين
ريالفي الملاحظة اللي تحت بيحكيلي عن الأحماض
الأمنية اللي بتحتوي على بنزين رينج، مين هم الأحماض
الأمنية اللي بتحتوي على بنزين رينج؟ هم تلات، في
الـTyrosine وTryptophan وPhenylalanine، تلت أحماض
أمنية فقط تحتوي على بنزين رينج، هم الـTyrosine
وTryptophan وPhenylalanineفي حالة التيروزين
والتريبتوفان بتكون activated، contain activated
بنزين ريكو حلقة البنزين بتكون نشطة فبتقدر تتفاعل
بسهولة مع الـnitric acid مع الـconcentrated nitric
acid بيصيريلها نيتراشن بيعطين لون يلولكن في حالة
الفلن الألانين لا تتفاعل مع نيترك أسن لأنها بتكون
حلقة البنزين غير ناشطة فمش هيتفاعل ولا هيعطيني لهم
إذا الأحمض الأمينية تلاتة عند حلقة البنزين هم
التيروزينTryptophan فين الألانين؟ ولكن مين النشطة
و هيعطيني positive مع فحص ال Xanthopretic test بس
تيروزين لـ Tryptophan أما الفين الألانين هيعطيني
negative مش هيتغير اللون لأن حلقة البنزين غير نشطة
فى فحص الـ xantoproteic test من هيعطينى positive
فقط التيروزين والتريبتوفان وكمان أي بروتيل يحتوي
على التيروزين أو التريبتوفان فى تركيبه فالبروتين
هو عبارة عن مجموعة من الأحماض الأمنية مرتبطة مع
بعضها البعض بروابط مبتدية إذا كان أحد الأحماض
الأمنية هذه تيروزين أو تريبتوفان أو الأثنين معاها
هيعطينى positiveأوضح بمعادلة إن الـ Thyrosine مع
Concentrated Nitric Acid مش مهم إن الـ Structure
إنه يعطيني Nitration of بنزين رنج Yellow Color
وإذا اتفاعل برضه الـ Tryptophan مع Concentrated
Nitric Acid هيصير برضه عمليت Nitration of بنزين
رنج وهيعطيني Yellow Color لأن الـ Thyrosine و الـ
Tryptophan يحتوي على Activated Benzene Ring لكن لو
اتفاعلنا الفل الأليان مع الـ Concentrated Nitric
Acid مايتفعلش، مش هيعطيني Yellow Colorليش؟ لأن
حلقة البنزين اللي موجودة في الفيلم الألانين غير
ناشطة، من أكتر
طب كيف خطوات العمل؟ خطوات العمل بجيب لتيوب، glass
tube، بحط عليها واحد مل من الحمض الأميني أو من
المحلول اللي أنا أعطاتكيا، أنا مش عارف حمض أميني
أو بروتين، مهم محلول اللي أنا أعطاتكيا، بتحط منه
واحد مل، بتحط عليه واحد مل من ال nitric acid من ال
HNO3، بعدين بتسخنيه على اللهةلما نيسخن على اللهب
بحطه في الراك يبرد بعد ما تبرد شوية لـ tube بضيف
عليها اتنين نيل من الانهيواتش من القاعدة ليش هذه
الانهيواتش؟ عشان تزود شدة اللون بضيف انهيواتش
لزيادة شدة اللون والله إذا تغير اللون إلى yellow
إذا هذا حمض أميني أو بروتين يحتوي على بنزين ريل
إذا ماتغيرش اللون إذا لا يحتوي على بنزين ريل
الفحص اللي بعد هيك هو الـ Hopkin Cool أو الـ
Glycosilic Acid Reaction اللي هو اسمها؟ Hopkin
Cool أو Glycosilic Acid Reaction إيش الهدف من
الفحص؟ لكشف عن وجود لتريبتوفعل بيكشف عن
لتريبتوفعل، مش معناه لتريبتوفعل لأنه هذا بيدور على
حاجة نسميهاالدول جروب هي مجموع موجودة بس في الـ
tryptophan إذا موجود ال tryptophan هيعطيني
positive إذا مش موجود هيعطيني negative فهو
positive مع ال tryptophan أو أي بروتين يحتوي في
تركيبه على ال tryptophan هبقاش ال principle المبدأ
إنه بجيب الحمض الأمين اللي عندسي ال tryptophan أو
البروتين و أضيف عليه cooking pool reagent مع H2SO4
concentrated sulfuric acidبتكوّنلي هذا الـ
Sulfuric Acid هي مسؤولة عن تكوين to formation of
violet ring بتكوّنلي حلقة في الوسط، تفصل solution
من الأيلى جزاين، بتكون حلقة لون هموم، violet ring،
الـ Sulfuric Acid بتكوّنلي violet ring، بتكوّنلي
حلقة لون هموم، إذا اتكوّنت هذه الحلقة، معناها إنه
فحص positive، معناه إنه هذا المركب هو tryptophan
أو بروتين يحتوي على tryptophanإذا لم تتكون إذا أنه
نيجاتيف لا يحتوي على الـ tryptophan طب
كيف ال procedure في وقت العمل؟ بجيب ال class tube
بحط فيها واحد mil من ال solution من المحلول اللي
انا اعطيتكيها سواء tryptophan او غيرها و بحط عليها
واحد mil من ال hook and pull reaction و بعمل mix
أجيب ال tube و بحط عليها واحد mil من ال solution
مع واحد mil من ال hook and pull و بعمل mixبعدين
بمسك التيوب بميلها بشكل مائل و بحط فيها من 3 إلى 4
مل من ال H2SO4 Concentrated Sulphuric Acid على
الجدار بضيفه ال Sulphuric Acid و بشكل تدريجي مش
مرة واحدة و بحرص على أني ما أرجش التيوببمسك لتيوب
بشكل ما واضيف على الجدار من 3 إلى 4 مل من ال
concentrated sulphuric acid بشكل تدريجي بدون رج
لتيوب بعد ما اخلص باعدل لتيوب شواش بدون معرجها
باعدلها إذا دونت عندي حلقة لونها violetإذا هذا
positive، يحتوي على الـ tryptophan، هو tryptophan،
يمكن أن يناسب الـ tryptophan أو protein يحتوي على
tryptophan، إذا ما اتكونتش الحلقة، إذا الـ
negative، لا يوجد tryptophan، لا يحتوي على الـ
tryptophan
بس اللي بعد هيك هو ال melons test ال melons test
هو للكشف عن وجود التيروزين objective to detect the
presence of tyrosine ليش؟ لأن التيروزين يحتوي على
phenol group هو بالت ال phenol group اللي في
التيروزين إذا موجود أنا تيروزين عنده هيعطيني
positive إذا مش موجود هيعطيني negative فهو
positive مع التيروزين أو أي بروتين يحتوي على
التيروزين غير هيك بيعطيني negativeايش هي الـ
Phenol Group؟ هي حلقة بنزين مرتبطة بـ OH، Hydroxyl
Group Attached to Benzene Ring إذا عندى حلقة بنزين
مرتبطة بـ Hydroxyl Group، فهذه بيسميها Phenol
Group، وهي موجودة في حالة تيروزين، بيحكي للـ Melon
Reagent عبارة عن مكونات contain mercury andNitric
acid هتش أنوادري و Mercury و هدول المكونين هم
toxic و corrosive و بسبب حروب و مهيج irritant
فبدنا نتعامل مع ال Mercury reaction بحوار طب ايش
ال principle اللي
التيروسين زي الـmineral reagent حكينا الـmineral
reagent هو عبارة عن مكونات نيترك أسد أتشانودري و
مالك مجرد ما أضيف الـmineral reagent على التيروسين
تيجي أول مكون اللي هو الـnitric acid يعمل نيتراشن
للبنزين يعمل نيتراشن لحلقة البنزين الموجودة في
التيروسينبعد ما يصيرلها نيتراشن بيجي الـ mercury
بيرتبط معها وبيتكون عندي لون أحمر طوبي إذا ان هو
تيروسين مع ميلون رياجينت وبيتكون عندي نيتراتي
تيروسين ميركاري كومبكس اللي هو تيروسين بيصيرله
نيتراشن ومرتبط معه mercury بنسميها نيتراتي تيروسين
ميركاري كومبكس شو اللونه بيكون بركره لون أحمر طوبي
إذا أن هو positive إذا أن هو التيروسين أو أي
بروتين يحتوي على التيروسيننحكي للملاحظة أن كل
الفينول اللى بتحتوي كل الفينول كل المركبات اللى
عندها فينول ال group اللى حلقة بنزينة مرتبطة ب OH
هتعطينا positive مع الفينول ريجال ان احنا حكينا بس
طب ايش ال principle
طيروسين طيروسين واضيف عليه melon reagent طيروسين
زي الـ melon reagent حكينا الـ melon reagent هو
عبارة عن مكونات نيترك أسد أتشانواتري و مركز مجرد
ما أضيف الـ melon reagent على الطيروسين تيجي اول
ايه؟ اول مكون اللي هو الـ nitric acid يعمل نيتراشن
للبنزينبيعمل Nitration لحلقة البنزين الموجودة في
الـ Tyrosine، بعد ما يصير لها Nitration، بيجي الـ
Mercury بيرتبط معها، وبيتكون عندى لون أحمر طوف،
اذا ان هو Tyrosine مع ميلونرياجنت، بيتكون عندى
Nitrated Tyrosine Mercury Complexاللي هو تيروسين
بسيريلو نيتراشن ومرتبط معاه ميركري، بتسميها
نيتراتي تيروسين ميركري كومبلاز، شو لونه؟ بيكون
فريكري، لون أحمر، طوبي، إذا ان هو positive، إذا ان
هو التيروسين أو أي بلوتين يحتوي على التيروسينبحكي
للملاحظة أن كل الفينول اللى بتحتوي كل الفينول كل
المراكبات اللى عندها فينول group هي حلقة بنزين
مرتبطة بهواتف متعطين positive مع الميلونريال أن
إحنا حكينا بس من الأحماض الأمنية التيروسين هو
الوحيد اللى عنده فينول group عنده حلقة بنزين
مرتبطة فيه هواتف لكن هل الطبيعة كلها في المراكبات
الكيميائية كلها فش غير التيروسين صح وفي الأحماض
الأمنية بسالثانية فيه مركبات تانية عند حلقة بنزين
مرتبطة بواعي فلو جيت اشتغلت عليها ال melon test
هتعطيني positive طب على فرض انا أعطيتك محلول
حكيتلك شوفيلي إيش هذا المحلول يسيغليلي عليها ال
melon شوفي تايروسين positive ولا نجده فجيت ان انت
اشتغلتيه و أعطاكي positive إذا هو هتتوقع إنه مركب
يحتوي على phenolgo تمام؟طب هل هو تيروسين ولا
مُركّب تاني؟ كيف بتتأكد هل هو تيروسين أو لا؟ لأن
في مُركّبات تانية تحتوي على Phenol Group؟ بشتغل
فحص الـNihidrine، مش الـNihidrine أول فحص أخدنا هو
مُخصص لـ Free Alpha Amino Group اللي موجودة في كل
الأحماض الأمنية، الـAmino Acidأنا هشتغل فحص الـ
Ninhydrin لما تشتغلي فحص الـ Ninhydrin إذا أعطاكي
positive إذا هو تيروسين لأن حمض أميني يحتوي على
free alpha amino group إذا أعطاني negative إذا هو
مرنكب تيميائي آخر يحتوي على phenol group غير
التيروسين
كيف ال procedure؟ خدت وقت إجراء التجربة، بجيب
التيور، بحط فيها واحد ميل من ال solution اللي أنا
أعطيتها على تلاتة drop من ال melon raisin و بعدين
بحطه في ال water bath لمدة خمسة minutes، في ماء
مغليه لمدة خمسة minutes، بعدين بطلع، إذا تغير
اللون و اتكون عندي break red، إذا هو positive، إذا
ما تغيرش اللون، ماعطانيش ال precipitate break red،
إذا هو negative
الفحص اللي بعد هي اسمه Sakaguchi Test Sakaguchi
Test ال objective منه لكشف عن الأحماض الأمنية اللي
بتحتوي على Iguanidia Migrum وهو فقط ال Arginine
موجودة في Iguanidia Migrum في ال Arginine فحص خاص
لل Arginine أنه بيحتوي على Iguanidia Migrumال
ساكيا جوشي تيست اناش ناخد لا لبرنسيب اللي هو
للطريقة بس انه ال objective هو لل guanidine مجروم
اللي موجودة فيه اللي هجنين و ال positive انه
يعطيني لون red color
الفحص اللي بعد هي اسمه lip sulfite test أو sulfur
test ايش ال objective منه؟ للكشف عن ال self
-hydrayl group تدور على ال self-hydryl group
الموجودة وين ال self-hydryl group؟ في الحمض
الأميني cysteine وموجودة كمان في ال cysteine
وموجودة في الميثيونين ال self-hydryl group موجودة
في ثلاثة، cysteine, cysteine, methionineولكن بتكون
في الـ cysteine و الـ cysteine free ال مثيولين
بتكون not free بتقدرش تتفاعل لأنه بيكون مربوطة
برابطتين carbon من جهة و carbon أخرى من جهة أخرى
فغير قادر على كسر الرابط و أنه يتفاعل فهو negative
في حالة ال مثيولين و positive في حالة ال cysteine
و ال cysteine و أي بروتين يحتوي عليهتمام إذا للـ
lead sulphide test أو الـ sulphur test اللي كاشف
عن ال sulphohydryl group الموجودة في ال 16 أو ال
16 مثيلين نيجاتر لإنها not freeماشي ال principle
أني بجيب الحمض الأميني مثلا سيستين أو سيستان بضيف
عليها 10% من ال NaOH في وجود حرارة heat بيعطيني
Sodium Sulphate بجيب سيستين أو سيستان مع 10% NaOH
في وجود حرارة بتكون عندي Sodium Sulphate بضيف
عليها 10% Lead Acetate بيعطيني حاجة بتسميها Lead
Sulphateالليد سالفايت هذا عبارة عن ال precipitates
لونه أسود، 60 أو سيستان، مع 10% النيوهاتش في وجود
حرارة، بيعطيني Sodium Sulfate، بضيف عليه 10% ليد
أسيتات، بيعطيني Lead Sulfide ب precipitates لونه
أسود، يعني positive، يعني بتحتوي على 60 أو سيستان
هنا بيوضحنى ان الميثيونين وال سيستين التنتين
بيحتوى على sulfur group بس ليش الـ 16 بس هي اللى
بتعطينى positive لو دينا ال structure الميثيونين
تشوفوا ال S و N مرتبطة في CH2 من جهة و CH3 من جهة
فهي مرتبطة من الجهتين و صعب تكسير هذه الرابطة
فبنقدرش نكسرها عشان تتفاعل ما يتفاعل فهي not free
أما في حالة ال cysteine فهي free هي الأس فوق
مرتبطة في H من جهة و free من جهة أخرى تقدر تتفاعل
و تحت معادلات لبرنسبل الفحص cysteine مضيف عليه
النيوهاتش في وجود حرارة بيعطيني صوديوم سالفايت
مضيف عليها lead 10% من lead أسيتات بيعطيني lead
سالفايت ال precipitate لونه أسوديكون ال recipe
اللي هو هنا اسمهكيف خطوات العمل؟ بحط واحد مل من ال
solution أنا أعطيتكيا في تيووب بحط واحد مل منه على
واحد مل من ال sodium hydroxide ده نيو هاتش مع خمسة
دروب من عشرة فالمية lead acetate بحطهم كلهم مع بعض
و بعمل math بعدين بحطه في ال water bath لمدة خمسة
منه بطلعه من ال water bath إذا صار لونه أسود فيه
نراسب أسود is a positive يحتوي على ال system إذا
ما اتغيرش اللون is a negative ليحتوي على ال system