اليوم ان شاء الله بنحكي في معمل جديد اسمه ال
chromatography ال chromatography هي تقنية لفصل
الخليط من المواد إلى مكوناتها عندي خليط من المواد
من عند المواد لأفصل كل مكون على حدة في البداية
نحكي مقدمة عن هذه الطريقة و كيف تم اكتشافهافي
عندنا عالم اسمه michael twist هاد عالم روسي استخدم
هذه التقنية لفصل أصباغ النباتات وورقة النباتات
تحتوي على عدة أنواع من الأصباغ قام في فصل هذه
الأصباغ بطريقة أطلق عليها اسم chromatography حكى
أن chromatography تعني written color
chromatography تعني written color معناها الكتابة
بالألوانلأن هو استخدم هذه الطريقة لفصل أصباق
النباتات فأطلق عليها إن هي الكتابة بالألوان إنها
تستخدم للمواد الملونة لأن هو فصل مواد ملونة فصل
أصباقيحكي لإن معظم المواد المحيطة فينا هي حوالينا
هي عبارة عن خليط من مادتين أو أكتر most material
in our surroundings are a mixture of two or more
compounds إن معظم المكونات في الهواء الجوي أو
حوالينا في أي مكان هي عبارة عن خليط هذا الخليط إما
بيكون homogeneous أو heterogeneousالخليط إما بيكون
خليط متجانس homogenous أو خليط غير متجانس
heterogeneous إيش يعني homogenous are uniform in
composition؟ homogenous معناه خليط متجانس إنه
عبارة عن عدة مكونات ولكن يظهر كمادة واحدةزي مثلا
الهواء الجو اللي حوالنا يحتوي على عدة أنواع من
الغازات لكن هل مبين كل غاز؟ لأ مبين إن هو مكوّن
واحد heterogeneous إن ال mixture are not uniform
إنه عندنا خليط من عدة مكونات لكن مبين إن هذا يحتوي
على أكثر من مادة زي مين؟زي الزيت مع الميه تخلط
الزيت مع الميه مبين وبيفصلوا لطبقتين فمبين ان هو
عبارة عن اكثر من مادة عبارة عن مادتين واضحين مش
متجانسينهي مثال مكتوب أن الـ air هو عبارة عن
homogeneous mixture أما ال oil في ال water لما
يكون زيت مع مي فهو heterogeneous غير متجانس بيحكي
لي سواء الخليط كان homogeneous أو heterogeneous
نقدر نفصله نعمل separated by physical method بطرق
فيزيائية عدة، إذا سواء الخليط كان عندى متجانس أو
غير متجانس بقدر أفصل مكوناته باستخدام عدة طرق في
طرق فيزيائيةكيف بدأ اختار الطريقة؟ احنا عندنا عدة
طرق للـ separation كيف بدأ اختار الطريقة المناسبة
لفصل الخليط بناء على الـtype of mixture على نوع
الخليط على الـdifference in the chemical
properties على الخصائص الكيميائية لالمكتشرمثلا أنا
هختار طريقة الفصل بناء على نوع الخليط أو بناء على
الخصائص الكيميائية يعني مثلا من طرق الفصل مثلا
عندنا الـ centrifugation الـ centrifugation يمكن
أخدته بالمقدمة أن استخدام جهاز centrifugeبيفصل
بناءً على الكثافة الدم مثلا نفصله باستخدام هذا
الجهاز باستخدام الـ centrifuge مثلا زي ما استخدمنا
isolation زي ما عزلنا الكازين من الملك هي هذه
طريقة فصل أنه أنا بس أخدت الكازين من كل مكونات
الحليب كانت الطريقة اسمها isolationمثلا عملية
precipitation أني أرسم مكون وأسيب الباقي وفي عندنا
تقنية chromatography وفي عندنا مثلا ال evaporation
التبخر أعمل تبخر زي مثلا مي مع ملح ببخر المي و بخل
الملح مثلا ال extraction استخلاص أعمل استخلاص
للمادة كل هدول طرق لالفصل اليوم احنا الطريقة اللي
بدنا ناخدها هي ال chromatographyبحكي للـ
chromatography مستخدمة بشكل واسع لفصل ال mixture
of compound into individual component لفصل الخليط
إلى مكوناته إنه بيخلي كل المادة لحال هذه التقنية
مستخدمة بشكل واسع لفصل الخليطاش معنى
chromatography؟ chromatography لأنه في البداية
استخدموها لفصل الألوان، لأصباغ النباتات، فأطلقوا
عليها أنها مستخدمة ل separation of color، لفصل
الألوان، ولكن في الوقت الحالي today ال
chromatography تعنيفصل ال color و ال colorless
substance إنها تستخدم للمواد الملونة و غير
الملونة، فإن هي قديما أول ما اكتشفت التقنية كانت
فقط بيعتقدوا إنها المواد الملونة، ولكن في اليوم
الحاضر هي المواد الملونة و غير الملونةالـ
chromatography هي طريقة فيزيائية physical method
for separation of mixture to its component
لمكوناته بناء على two face باستخدام two face طوران
حاجة بنسميها stationary face و حاجة بنسميها ال
mobile face إذن هي تقنية فيزيائية أو طريقة
فيزيائيةلفصل الخليط إلى مكوناته باستخدام two phase
ال mobile phase و ال stationary phase ايش هو ال
stationary phase ال stationary phase هو عبارة عن
الجزء الصلب بيكون solid مدعم ب glass بجزاز او
بتكون عبارة عن paper عن ورقة اذا ال stationary
phase هو الطور الساكن هو الطور الساكن بيكون عبارة
عنطبعا ورقة ممكن تكون صلبة هي ورقة صلبة تكون مدعمة
من الخلف بزجاج أو ألمانيون عشان تحميها من التكسر
وممكن تكون عبارة عن بابا خصائصها بتكون برس
material هي مادة مثقبة ال stationary phase هي مادة
مثقبة برس material ليش؟ عشان تسمح بدخول السائلThe
sample is carried by a particular solvent called
mobile phase كنت انا كيف تقنيتها دي بيكون في عندي
ورقة اسمها stationary phase هذا الطور الساكن هاي
بحط عليها العينات الخليط اللي انا بده افصله بحط
نقطة من الخليط اللي انا بفصله على ال stationary
phase على الطور الساكن في عندي حاجة اسمها ال
mobile phase ال mobile phase هو الطور المتحرك
بيكون عبارة عن غاز او liquid او ساعلوجدت الورقة
الـ stationary phase اللي أنا حطيت عليها الخليط
بقى حطها بغمرها في ال mobile phaseبغمر الورقة في
ال mobile phase بيبدأ ال mobile phase اللي هو
عبارة عن سائل أنه يمر عبر هذه الورقة زي مثلا ال
tissue paper لما تحطيها بمي بتتبلل بالمي بيمر المي
عبر ال tissue paper و هان هيك ال stationary phase
هي الورقة بيكون عليها الخليط أنا حطة نقطة من
الخليط عليها و بغمرها في ال mobile phase اللي هو
عبارة عن سائل بيمر السائل في هذه الورقةطول ما هو
بيمشي السائل بيفصل معاه الخليط لمكوناته على هيئة
نقاط كل .. كل مكوّن من هذه المكونات بيعطينا نقطة
في مكان معين فالـ Mobile phase هو عبارة عن الـ
solvent اسمه ممكن نحكي عنه الـ solvent أو الـluent
هو بيكون liquid أو gas الـ mobile phase نبقى
الستروزا stationary phaseالستشينري فيس هو جزء
الصلب بيكون عبارة عن ورقة ممكن و هي صلب بتكون
مدعمة بجلاس أو ألمنيوم ال mobile face عبارة عن
solvent اللي you want liquid أو غاز بيكون سائل أو
غازبغمر ال stationary phase في ال mobile phase
بحكي لي بعدين ال mobile phase بيمر عبر ال
stationary phase هيبدأ يمر داخل ال stationary
phase الورقة أنا لما أغمرها في السائل بيمشي السائل
فيها للأعلى فبيمر ال mobile phase عبر ال
stationary phaseطب في عندنا عدة مصطلحات، في عندنا
حاجة بنسميها affinity affinity هي المحبة معناها أو
التجاذب affinity تعني المحبة أو التجاذب هي
attraction or force between .. natural attraction
or force between two انسان هو التجاذب الطبيعي
للمواد مع بعضها البعض تجاذب الطبيعي للمواد مع
بعضها البعضمثلًا المي والسكة هاد بولر و هاد بولر
بيدوبوا ببعض يعني هما محببين لبعض فهما نفس الخصائص
فبيدوبوا ببعض لذن ال affinity هي التجاذب الطبيعي
للمواد مع بعضها البعض adsorption في أن adsorption
و absorption adsorption هي adhesion or stickness
of substance to the surface of another substance
والتصاق مادة على سطح مادة أخرىالتصاق مادة على سطح
مادة أخرى التصاق المادة بس على السطح بدون اختراق
التركيب الداخلي للمادة هاي ال absorptionabsorption
التصاق مادة على سطح مادة أخرى absorption معناها أن
المادة تخترق التركيب الداخلي للمادة الأخرى مش
التصاق فقط على السطح وإنما اختراق التركيب الداخلي
للمادة فيها نوعين رابط يوتيوب هاي بوضح الفرق بين
ال absorption و ال absorption إذا حبين تطلعوا عليه
هنا توضيح لتقنية ال chromatography نيجي أول شي على
اليسار في عندنا هنا الورقة البيضة هذه الورقة هي ال
stationary phase لذن الورقة هي الطور الساكن اللي
حكينا عنها انها stationary phase بتكون solid بتكون
مدعمهلجت؟ الخليط انا وان بده احطه .. المكونات ..
عندي خليط عندي كتيوب مليانة فيها خليط من المكونات
و بده افصلها باخد منها نقطة بحطها على هذه الورقة
على ال stationary phase في موقع مهينتمام؟ و بعدين
باخد هذه الورقة اللي صار عليها الخليط بغمرها في
داخل ال mobile face ال mobile face هو الجزء الأزرق
اللي تحت احنا هالجيت بالصورة اللي على الشمال
الورقة البيضة هي ال stationary face التور الساكن
حطيت عليها نقطة من هذا الخليط و الخليط كان عبارة
عن عدة مكونات هي تحت ملونة في منها أصفر و أحمر و
أزرق انها تحتوي على عدة مكونات
الجزء الأزرق اللي تحت هو عبارة عن liquid عن سائللا
جاتش بدي يسير بدي مر هذا السائل عبر الـ stationary
phase بيسير يمشي فيه عبر خاصية الـ capillary
action الخاصية الشعرية لأن ال stationary phase
حكينا أنها مادة مثقبة porous material فبيمر السائل
ال mobile phase عبرها وبيصعد للأعلى وبيظل يمشيطيب
كيف ده تفصل المواد طول ما هو بيمشي بيفصل الخليط
لعدد مكونات كل واحدة بتوجف في مكان بناء على إيش؟
بناء على الـ polarity وبناء على ال solubilityكيف؟
إن الورقة اللي أنا بستخدمها ال stationary face
بيكون إلها خصائص يعني ممكن تكون polar أو ممكن تكون
non polar على اعتبار مثلا ال stationary face هذه
اللي استخدمتها هي polar و ال mobile face برضه
بيكون إله خصائص إذا ال stationary face كان polar
إذا ال mobile face non polarتمام انا بدي اعتبر ال
stationary phase هنا ان هو polar و ال mobile phase
non polar اجت من اللي بيمشي ال mobile phase هو
اللي بيصعد ال stationary phase سابتة مدام ال
mobile phase اللي بيصعد هو non polar فالمواد اللي
في الخليط إذا كانت non polar هتمشي مع ال mobile
phase لفوق تمشي معاه إذا كانت polar هتقف لتحت عند
ال stationary phase هتظلها سابتة تحت ومش هتمشي
لأنها بتحب ال stationary fast هي خصائصها polar زي
ال stationary fast إذا هتوجه فتحت و تدلها مدزجة
فيه في ال stationary مش هتمشي مع ال mobile اللي
تكون خصائصها زي ال mobile fast مثلا non-polar زيه
بتمشي معاه للأعلىففي بعد الفاص اللي بيحكي لي هي
separation سهم و حطليها في الصورة التانية اللي على
اليمين ماشي ال mobile face السائل الأزرق و طلع
الورق لفوق و هو بيمشي بيفصل المكونات هالجت اللي
تحت ضاله المربعات أو المستطيلات الزرق هاي معناها
مدامها ضالت لتحت ملزقة إذا ان هي بتحب ال
stationary face هي محببة خصائصها نفس خصائص ال
stationary faceاللي بتضلها ملزقة تحت خصائصها نفس
خصائص ال stationary phase يعني إذا ال stationary
polar إذا هي polar زيه مابتحبش ال mobile فماطلعتش
معاه اللي بعدها بتكون أقل polarity اللي بعدها أقل
اللي بتطلع للآخر إذا هي نفس خصائص ال mobile phase
فطلعت معاه للآخريعني ال affinity المحبة للي تحت
دلت بنسجة تحت تكون ال affinity عالية مع ال
stationary face اللي فوق الأصفر الدوائر الأصفر
مدامها طلعت مع ال mobile face وطلعت للآخر إذا إن
هي ال affinity عالية مع ال mobile faceالـ
chromatography technique ايش عملتلي؟ عملتلي
analyze عملتلي تحليل حللتلي ال mixture لها عدة
مكونات عملتلي identify انه عرفتني هذا ال mixture
شو مكوناته purify عملتلي تنقية بدل ما كان خليط من
عدة مكونات صار كل مكون لحالعملت لي quantify كمي
أنه أنا عرفت هذا الخليط مكون من أكم من مادة يحتوي
على أكم من مادة يعني هو فصل لعدة مواد كل واحد في
منطقة مثلا الأصفر هي مادة أحمر مادتين ودوائر
السودة هي تلت مواد والمستطيلات هي أربع مواد إذا
هذا الخليط يتكون من أربع موادهنا التفصيل للي
توحكناه كله تقنية الـ separation is based on fact
that برص solid absorbed different substance to
different extreme depend on polarity أنه عندنا
مادة بتكون برص اللي هي عبارة عن stationary phase
تكون بورص material مادة مثقبة أنا هحط عليها القليل
اللي انا بده افصله وهيتم الفصل او انها تلتصق في
هذه ال stationary phase المكون اذا لتصق في ال
stationary phase او انه يمشي مع ال mobile phase
ومايلزجش بناء على ايش؟ بناء على ال polarity على
القطبية اذا ال stationary polar اذا المواد ال
polar هتضلهم لزجة فيه والمواد ال non polar هتطلع
لفوقإذا الـ stationary non-polar إذا المواد الـ
non-polar بتضالهم لزجة فيه و الـ polar بيطلع لفاهa
mixture to be separated is first applied to an
immovable برة solid إذا المكتشر الخليط اللي أنا
بده أفصله وين بحطه أول إشي بالبداية بحطه على ال
stationary ولا على ال mobile لأ بأسقطه في ال
stationary phase في البرة ال solid material اللي
هي المادة المثقبة اللي بتكون عبارة عن ورقة حكاية
أو ألمنيوم أو سليكا اللي هي اسمها stationary phase
the component of the mixture then get washed
وبعدين بغمره حكاية البر السايماتيريال اللي هي ال
stationary phase بغمرها في ال solvent اللي بنسميه
mobile phase بعدين ال mixture بيصيرله separated by
different بناء على إيش؟ بناء على ال attraction،
بناء على ال polarity مع ال stationary phase و ال
mobile phase، بناء على أي مبدأ، بناء على مبدأ
like، dissolve likeلذن بعد ما أحط المواد على ال
stationary phase بغمرها في ال mobile phase بيبدأ
يصعد ال mobile phase عبر ال stationary phase
وهيمشي معاه مواد هتمشي معاه مكونات الخليط بناء على
إيش، بناء على ال polarity، بناء على ال affinity،
بناء على ال attractionالتجادب بينها وبين الـ Face
إذا هي والله متحبة و Affinity وقوة تجادب عالية
وخصائصها الـ Polarity نفس خصائص الـ Stationary إذا
هتظلها ملزجة في الـ Stationary مش هتصعد للأعلى إذا
خصائصها و الـ Affinity و التجادب قوي مع الـ Mobile
Face إذا هي هتصعد مع الـ Mobile Face للأعلىif the
stationary phase is polar إذا الـ stationary كانت
polar إذا أن الـ polar component المكونات اللي
بتكون موجودة في الخليط كانت polarهي هتلزج في ال
stationary phase مش هتطلع لفوق و ال non-polar هي
اللي هتطلع أسرع للأعلى لكن لو ال stationary phase
is non-polar إذا ال non-polar هي اللي هتتجادب مع
ال stationary و تضلها تحت و ال polar هو اللي هيصعد
للأعلى بقوة أعلىأو بواجهة أقل الـ separation
depends on several factors عملية الفصل بتعتمد على
عدة عوامل عملية الفصل بتعتمد على عدة عوامل في
عندنا عاملين رئيسيين وفي عندنا التالت أول عامل هي
solubility solubility with mobile faceأول عامل الـ
solubility with mobile face اللي مكتوب هنا الـ
solvent الـ solvent معناه ال mobile face إذا كان
بيدوب في ال mobile face له نفس خصائص ال mobile
face إذا هو هيصعد للأعلى العامل التاني ال
attractionbetween compound and silica اللي هي قوة
التجاذب بين المادة اللي موجودة في الخليط والسيليكا
اللي هي ال stationary phase ال attraction يعني
التجاذب مع ال stationary phase إذا هي متجاذبة أو
حابة لل stationary إذا هتظلها في الأسفل إذا أول
عاملين رئيسيا يعتمد عليهم تقنية الفصل هي
solubility with mobile phaseوالـ Attraction with
stationary face وهذا هو نفسه الـ principle لما
أعمل اليوم أنه أنا بدي أعمل فصل لخريطة من مكونات
من عدة مكونات بناء على أيش بده يفصل، بناء على أي
مبدأ، بناء على مبدأ ال solubility with mobile face
أنه مدى الذائبية مع ال mobile face و ال attraction
مع الstationary phase ومدى التجاذب مع الـ
stationary phase والله إذا هي متجاذبة مع ال
stationary phase هتضلها لتحت ومش هتطلع إذا هي
solubility مع ال mobile phase اللي هي عالية
ويزائبة في ال mobile phase إذا هتصعد للأعلى تالت
عامل هو ال structure of compound ليه الحجم؟التالت
عامل يقصد فيه ال size حجم المادة اللى موجودة في
الخليط اللى بدي تمفصلها إذا حجمها كبير هتمشي بشواش
هتكون بطيقة في المشي وبالتالي مش هتمشي كتير هتكون
ملزقة لتحت أكتر لكن إذا كان حجمها صغير هتمشي أسرع
إيش مميزات ال chromatography ال advantage of
chromatography أول حاجة كان separate complex
mixture with greater precision أنها بتفصل خليط من
عدة مكونات بدقة عالية بتفصل خليط بدقة عالية يعني
لو في مادتين متشابهاتولكن بيختلفوا زي البروتين
مثلا هو عبارة عن سلسلة من أحمض أمينية لو في عندي
نوعين من البروتين هما نفس سلسلة أحمض الأمينية بس
بيختلفوا بحمض أميني واحد بتقدر تفصلوا هذه التقنية
تفصلهم عن بعضCan purify any soluble or volatile
substance if right adsorbent material, carrier
fluid and operating condition are employed بتقدر
تعملي تنقية لأي خليط من أي مواد، من عدة مواد تقدر
تنقي الخليط، أنه تخلي كل مكوّن لحال، بشرط أن
أستخدم ال stationary phase المناسب، ال mobile
phase المناسب والتقنيات و الخطوات إجراء التجربة
الصحيحةexact quantitative analysis is done even
from a trace compound بقدر أعمل منها quantitative
analysis اللي هو تحليل كمي أعرف كمية اربعة small
material consumption اللي هو هذه التقنية بتستهلكش
مواد كتيرة، مواد بسيطة ال quantization has a broad
linearity range الها مدى واسع، الها مدى واسع من
المواد اللي تقدر تفصلهاستة analyze of several
compounds can be done during one run بقدر أفصل
أكتر من خليط مرة واحدة يعني بجيب ال stationary
phase اللي بده أحط عليه الخليط بقى بحط خليط في
مكان بحط نقطة من هذا الخليط في مكان تاني نقطة من
الخليط التاني في نفس الورقة بقدر أفصل أدت خليط أدت
أنواع من الخليط ممكن خليط اتنين تلاتة في نفس ال
stationary phase في نفس التقنية في نفس المرةالـ
chromatography is a fast analysis method هي طريقة
سريعة و آخر إشي أنه حالياً صارت instrumentation
صارت عبارة عن أجهزة صارت automation بدل ما نعملها
بشكل يدوي اتم تقنية الفصل باستخدام أجهزة
في عندنا سؤال is this a pure substance or mixture؟
انه هل المادة اللي عندي هي مادة عبارة عن مادة نقية
بتتكون من مكون واحد ولا هي عبارة عن خليط كيف
بتعرف؟ انا أعطيتك مادة وحكيتلك اعرفيها هل هي pure
substance ولا mixture؟كيف بدك تعرفي؟ بيحكيلي
بنشتغل تقنية لـ chromatography بشكل عام، هذا ملخص
للـ slide هاي أن أنا بدي أشتغل تقنية لـ
chromatography هنكتب للـ TLC TLC هو نوع من أنواع
الكروماتوجرافي هنتعرف عليه لقدام هي اختصارها thin
layer chromatographyTLC Thin Layer Chromatography
بشكل عام انا كيف بده اعرف بده اجاوب عليها ده
السؤال هل هي pure مادة نقية ولا خليط بدي اشتغل
تقنية ال chromatographyوأشتغلها بعد ما يفصل الخليط
أو يمشي ال mobile phase عبر ال stationary phase
إذا أعطاني نقطة واحدة أنه في مكان واحد نقطة واحدة
إذا هذه pure substance مادة نقية لأنه ماعطانيهش
غير مكون واحد إذا أعطاني أكتر من نقطة في أكتر من
مكان فهذا معناه أنه كان mixture كان عبارةعن خليط
وفصل إلى عدة مكونات وبالتالي أنا بقدر أعرف ال
number of components in a mixture بقدر أعرف عدد
مكونات الخليط كيف بده يعرف عدد مكونات الخليط؟ لإنه
بعد ما يفصل أكم نقطة أعطاني مثلا إذا أعطاني تلاتة
إذا هو عبارة عن تلات مكونات إذا أعطاني بس نقطين
إذا هو عبارة عن مكوناتطيب are these compounds
identical؟ السؤال التاني انه بيحكيلي ان انا اعرف
هل هدول المواد identical شبه بعض انه عندك مادتين و
مش عارفين هل هم نفس المادة محطوطين في مكانين ولا
هم مادتين مختلفات كيف بدك تعرفي؟ برضه بيحكيلي
الإجابة اني بدي اشتغل ال chromatographic technique
بدي اشتغل تقنية ال chromatographyباخد من المادة
الأولى و بحطها على ال stationery face و المادة
التانية و بحطها برضه على الجانب التاني في نفس
الورقة كل واحدة في مكان و بحطها في ال mobile face
بغمرها و بيبدأ يفصل بحكي لي إذا فصلوا النقطتين
مقابل بعض في نفس المكان مقابل بعض إذا هم نفس
المادة إذا فصلوا كل واحدة في مكان إذا هم مادتين
مختلفةإذا أنا هشتغل التنتين و أعملهم فصل إذا تم
الفصل في نفس المكان إذا هو عبارة عن identical
substance أما إذا فصلوا كل واحدة في مكان بيكونوا
مواد مختلفة وكيف كمان بدي أعرف الزيادة؟ نحسب حاجة
الـ retention factor هنتعرف عليه لقدام لكن أنا
بشكل عام كيف بدأ أعرف هل هي identical ولا لأ نفس
المادة أشتغل تقنية ال chromatography إذا فصل
المكونين إجبال بعض في نفس المكان على الورقة مقابل
بعض إذا هم نفس المادة إذا كل واحدة في مكان إذا هم
مادتين مختلفةtype of chromatography أقسام لـ
chromatography لجهة ال chromatography مقسم إلى
قسمين بناء على ال stationary و بناء على ال mobile
phase ال chromatography مقسم إلى جزئين بناء على ال
stationary إليه تقسيمة و بناء على ال mobile إليه
تقسيمة بناء على ال mobile phase فيه نوعين إما
بستخدم ال mobile phase يكون gas، غاز أو بكون
liquidبناء على ال stationary face في منه column
على شكل عمود و في منه planner على شكل سطح مستوي
اذا بناء على ال stationary face في منه اتنين
column عمود او planner مستوي و ال planner في منه
thin layer chromatography و في منه paper
chromatographyهنا جدول بيوضح انه او انه ملخص هاي
ال slide المطلوب منها اصلا منها انه ال
chromatography تقسيم ال chromatography بناء على ال
mobile phase ان في عندنا liquid chromatography و
gas chromatography بس لذا تقسيم ال chromatography
بناء على ال mobile phase في منها liquid و في منها
gasالـ classification أما بناءً عن ال stationary
phase بناءً عن ال stationary phase حكينا في منها
planner مستوي و في منها column عمودي ال planner ال
chromatography بيحكي إنها separation technique
which ال stationary phase بيكون عبارة عن إبلان هي
تقنية فصلبيكون فيها الستاشينة اللي فيها سطور
التابت عبارة عن plan عبارة عن سطح مستول هذا سطح
المستول plan إما بيكون بابر ورقة أو بيكون جزيئات
صلبة زي السيليكا أو cellulose أو aluminium oxide
أو ion exchange resin ومدعمة من الخلف بجزاز أو
aluminiumإذا الـ plan chromatography planar
chromatography تقنية لفصل المواد بيكون فيها
الستشرينا رفاس عبارة عن plan عبارة عن سطح مستوي و
ال plan had ممكن يكون على شكلين ممكن يكون بابر و
ورقة الستشرينا رفاس عبارة عن بابر أو بيكون عبارة
عن جزء صلب مدعم بجزاز أو ألمنيومعشان بيكون الجزء
من الأمام بتكسر بسهولة، بيكون لين، فبيكون مدعم من
الخلف بجزء من الـ glass أو الالمنيوم فمنها نوعين
البلانار إما thin layer chromatography أو بابا الـ
thin layer هي اللي حكينا عنها اللي بتكون عبارة عن
.. لسه شينري فاس عبارة عن طبقة رفيعة، بتكون thin
layer، طبقة رفيعةفعشانها رفيعة بتكون سهلة التكسر
فهي مدعمة سبارتت بجلاز plastic أو aluminium بجزاز
أو plastic أو aluminium ال paper chromatography
paper chromatography ال stationary face بيكون
عبارة عن paper عبارة عن ورقة أما الجزء التاني هو
ال column chromatography اللي بيكون عبارة عن عمود
فال stationary face بيكون columnطيب ليش بنستخدم
تقنية ال chromatography؟ بيحكينا ال
chromatographic technique ممكن نستخدمها ك
qualitative و ك quantitative ممكن استخدمها ك
qualitative و quantitative ايش يعني qualitative؟
يعني اعرف نوع المادة، اعرف اسم المادة، مين هذه
المادةQualitative معناها جودة أو نوع المادة تحديد
نوع المادة كيبدا حدد نوع المادة بناء على حاجة
اسمها ال retention factor انه انا بحط خليط من
المواد على ال stationary face و بحطها بغمرها بال
mobile face و بيبدأ يفصل بيفصل في كل مكون إلى نقاط
كل نقطة في مكان اجيت وين وصلت هذه النقطة؟من عندها
بحسب حاجة لكل نقطة بحسب إيش اسمه retention factor
اللي هو عامل المحافظة كيف بيانحسب هاد؟ هو موجود في
آخر slide بس أنه بشكل عام ال retention factor هو
عبارة عن ال distance اللي هي المسافة اللي قطعتها
المادة، بكون أنا حاطة خط بداية اللي هو حاطيت من
عنده الخليط، النقطة وين أنت حاطيت الخليط، من وين
بدأتي، من هنا أنا حاطيت النقطة، بحسب المسافة اللي
قطعتها المادة من هذا الخط لوين وصلت بعد الفصل
المادة وين وصلت بعد الفصل يعني لو رجعنا لهذه
الصورة هل جت المواد بعد الفصل مثلا الحمرة انت حطيت
الخليط وين؟ من تحت من خط البداية من تحت صح؟ بدي
أحسب المسافة من خط البداية اللي عند الحمرة بدي
أجيس بالمسطرة جدش قطعت الحمرة مسافةتمام؟ على
المسافة اللى قطحها الـ mobile phase من البداية
لوين وصل يعني الجزء الأزرق السائل الأزرق هاد من
وين كان من البداية لفوق لجزء الأزرق لآخر وين وصل
هذه المسافة كلها برضه بده جثة في المسطرة ال
retention factor هو عبارة عن المسافة اللى قطعتها
المادة من خط البداية على المسافة اللى قطحها ال
solvent كامل من خط البداية لعند ما وصلهذه اسمها
retention factor إذاً ال retention factor هي
المسافة اللي قطعتها المادة أعلى المسافة اللي قطعها
ال solvent من خط البداية إلى وين وصل كده بيطلع
عندي رقم كل مادة إلها retention factor معروف
ومحفوظ في جدول وجدول علماء ومكتوبة في جدول برجع
لهذا الجدول بدور على الرقم اللي طلع معاهretention
factor اللي طلعت معاه بطلع بروح بدور في الجدول
مثلا ستة بروح أشوف قبل الستة مين هي المادة بس بطلع
أسمها و بكون عارفيتها، بعرفها مثلا نص، بروح للجدول
بطلع مين النص؟ مثلا لل glycine طلعت النص، إذا
المادة هي عبارة عن glycine ف qualitative analysis
كيف؟ من خلال أني أحسب ال retention factor
Quantitative determination برضه بيستخدم ك
quantitative quantitative يعني كمية يعني بتعرف
كمية المادة الموجودة جداش كميتها بيحكيلي هذا بيتم
معرفته بناء على ال intensity of a spot وبناء على
ال side of the spot بناء على شدة ال only spot هي
اللي جيت بعد ما يفصل المواد وبيعطينيها على شكل
نقاط spot بنسميها نقاطهذه النقطة جدّيش حجمها
الدائرة اللي طلعت معي جدّيش حجمها اللي هي صغيرة
ولا كبيرة طب الشد تعدها واضحة، نغامجة ولا إنها
خفيفة؟ هذه بتحدد لكمية المادة إذا كان مثلا حجمها
كبير إذا هي مادة موجودة بكمية كبيرة إذا حجمها صغير
موجودة بكمية أقل تمام، بدي أعرف بزيادة ال
quantitative analysis بيستخدموا جهاز اسمه الـ
densitometerجهاز اسمه densitometer يستخدم في تقنية
ال chromatography for quantitative determination
يعني هو جهاز instrument to detect the color .. the
intensity of color هو جهاز يستخدم لمقياس شدة لون
لثبوت اللي ظهر عندي في تقنية ال chromatography
عشان يعطيني quantitative determination لالمادةإذا
بيستخدم التقنية الـ chromatography for qualitative
و quantitative للكمي و الجودةpaper chromatography
ال paper احنا اليوم هنستخدم paper chromatography
ال paper chromatography حكينا ان ال stationary
phase عبارة عن paper و ال solvent ال mobile phase
بيكون ليكوين ال paper chromatography بحط عليها
العينات بحمل عليها العينات ان انا بدي احط الخليط
من المواد على ال paper على ال stationary phase على
هيئة ال spot بحط نقطة من هذا الخليط على هذه الورقة
بعدين الورقة بغمرها في ال solvent بغمرها dipped
into a solvent بغمرها في ال mobile phase بيبدأ
يطلع يمشي ال mobile phase عبر ال stationary phase
بيمشي السائل للأعلى بناء على خاصية ال capillary
action الخاصية الشعرية و طول ما هو ماشي السائل
بتنفصل الخليط إلى مكوناته بناء على إيش حكينا
الفصل؟ بناء على ال solubility و ال attractionمدى
ذائبيتها في الـ Mobile Face ومدى تجاذبها مع الـ
Stationary Face إذا أنا ده تكرار الكلام كلهالـ
principle of paper chromatography الـ capillary
action هى شىه هى movement of liquid within the
space of a porous material هى حركة ال mobile phase
عبر ال stationary phase ال capillary action هى
عبارة عن movement of liquid اللى هو ال mobile
phase within a porous material اللى هى ال
stationary phase بس بتعبير آخر هى حركة ال mobile
phase عبر ال stationary phaseالـ Liquid اللي هو
الـ mobile phase بيتحرك عبر ال paper بسبب أن
الجاذبية ال attraction التجاذب أقوى من قوة
الجاذبيةبناء على أي مبدأ هيتم الفصل وبناء على إيش
حكينا بناء على like dissolve like وبناء على ال
solubility مع ال mobile phase و ال affinity أو ال
attraction with stationary phase إذا ال principle
لو بدي ألخصه هو حاجتين ال affinity with mobile ال
affinity أو attraction with stationary phase و
solubility with mobile phaseالـ Thin Layer
Chromatography هي تقنية لفصل المواد بيكون فيها الـ
stationary phase عبارة عن Thin Layer عبارة عن طبقة
خفيفة رفيعة of silica بتكون عبارة عن هذا الطبقة
سيليكا أو ألمنيوم سيليكا مدعمة بجزاز أو ألمنيوم
برضه لتدعيمإذا الـ thin layer chromatography هي
عبارة عن سيليكا بيكون ال stationary phase ورقة
رفية من السيليكا مدعمة بجزاز أو ألمنيوم السيليكا
جيل هتكون هي ال stationary phase أما ال solvent هو
ال mobile phase إذا ال thin layer chromatography
بدك تكون عارفة إن هي عبارة عن سيليكا ال stationary
phase عبارة عن سيليكا و ال solvent هو ال mobile
phaseإيش مبدأ الفصل ال principle ملخص ال principle
كله حكيناه إنه عبارة عن affinity with stationary
phase و attraction with mobile with stationary
phase و solubility with mobile phase لجيت هذا
الكلام اللي هجيت مكتوب في ال principle كله تكرار
للي قلناها different compound in sample mixture
travel different distance according to how
stronglythey interact with the stationary phase
and mobile phase بيحكيلي المواد بتمشي اللي موجودة
في الخلط بتنفصلها و بتمشي مسافات مختلفة كل واحدة
بتقف في مكان في مسافة مختلفة في مكان مختلف بناء
على ال attraction بناء على ال interact بناء على
التجادب مع ال stationary phase و ال mobile phase
المواد اللي موجودة في الخليط بتختلف في قوة ذائبية
والالتصاق مع ال stationary أو مع ال mobile phase
ال mobile phase اللي هو ال liquid أو ال eloquent
نفس مسمى
وهو يرتفع ببطء بيقول إن السائل اللي هو الـ mobile
phase بيمشي عبر الـ stationary phase اللي موجود في
الـ thin layer كروماتجرافي بالخاصية الشعرية بالـ
capillary action separation of compound is based
on the competition of the solute and the mobile
phase for binding substances بيقول لي إن فصل
المواد بناء على التنافس بين ال mobile phase و ال
stationary phase على هذه الموادمين ياخد مواد أكتر
وهذا بناء على solubility انا جيت اللي احنا
بنستخدمها هي thin layer chromatography و الـ thin
layer حكينا انه عبارة عن silica gel و السيليكا هي
polar فبيحكي لي if normal phase اذا احنا استخدمنا
silica gel as stationary phase ال stationary phase
يكون عندنا silica gel فهو polar فانا لو حطيت
مادتين بيختلفوا في ال polarity تمام؟المادة اللي
هتكون Polar، More Polar، Stronger Attraction
والسيلكا، مدام خصائصها Polar، المادة هي Polar، إذا
ان بتشبه خصائص السيلكا، هي Polar زيها، إذا انها
تلزج في الـstationary phase في السيلكا ومش هتمشي
للأعلى أما المواد الـNon Polar هي اللي هتمشي
لأعلى، move higherup to the plate فهتمشي أعلى
الأسرع للأعلى مع ال mobile phase لأن خصائصها تشبه
خصائص ال mobile هي non polar زي ال mobile لأن ال
stationary silica وهي polar فهذا
ال principle كله كلام زي اللي حكيناه ملخص ال
principle كله بكلمتين هي عبارة عن attraction with
stationary phase و solubility with mobile phase
retention factor حكينا عنه هو العامل المحافظة
بيحكي إنه كل مادة كيميائية لها retention factor
خاص فيها من خلالها بعرف هذه المادة كل مادة لها
retention factor خاص فيها أنا بحسب retention
factor بعد ما تفصل المواد بحسب لكل مادة retention
factorحكينا قانون ال retention factor إيش هو هو
المسافة اللي قطعتها المادة من البداية لون وصلت على
المسافة اللي قطعها ال solvent ال mobile phase من
البداية لون وصلت زي ما أنتوا شايفين هنا مثلا أجد
خط البداية اللي هو تحت أنا حاطيت الخليط من الخط
اللي تحت النقطة الحمراء مثلا بجيس المسافة بالمسطرة
من البداية لون هي وصلت على المسافة اللي مشيها
المحلو من خط البداية للنهايةوبشوفها بجسم على بعض
هذا الناتج وبيطلع عندي هذا ال retention factor
برجع للجدول المعروف و بشوف جداش لكل مادة the
stationary phase in thin layer chromatography نيجي
نحكي عن ال thin layer chromatographyالـ Thin Layer
Chromatography حكينا إن الـ Stachyna Rephase هي
عبارة عن Silica Gel و Silica Gel عبارة عن Polar
نيجي نتعرف على Silica Gel بيحكي إن Silica Gel is a
form of Silicon Dioxide هي عبارة عن Silicon
Dioxide بتكون من Silicon أتم من ذرات السيليكون
مرتبطة بجزيئات أكسجين ال structure الموجود فوق في
أقصى اليمين في الصورة من الأعلى هي عبارة عن ذرات
السيليكون الأسئعي مرتبطة مع الأكسجينوعلى السطح في
OH group attached to it إذا إن هي سيليكون ذرات من
السيليكون وموجود مرتبط معها أكسجين وعلى السطح في
OH الـ OH هي اللي خلتها بولا ال surface of silica
is بولا السطح عبارة عن OH فهو بولا can form
hydrogen bond ويقدر يعمل رابطة هيدروجينيةبما أنه
سطحها بولر إذا هو عبارة عن بولر وهي بيحكي اللي
بتكون مدعمة بألمنيوم أو جزاز وممكن تكون أصلا مش أي
نتس اللي كيكون نوع آخر لل stationary phase ممكن
يكون aluminium oxide يكون عبارة عن ألمنيوم مع
أكسوجين والسطح برضه قوات فهيكون بولر زيهابشكل عام
إن الـ stationary phase في الـ thin layer
كروماتجرافي عبارة عن سيليكون عبارة عن سيليكا جيل و
السيليكا على سطحها OH فالـ OH يعني polar فالـ thin
layer كروماتجرافي لو حكيتلك استخدام التقنية
الكروماتجرافي الـ thin layer كروماتجرافي بدك تفهمي
لحالك إن الـ stationary phase polar و ال mobile
phase non polarلو جبتلك هذا السؤال مثلا انه عندك
stationary phase عندك 10 layer chromatography و
عندك مادة A و مادة B A كانت polar و B non polar
مين اللي هتمشي إلى الفقر الأعلى أكتر؟ اذا انا بدي
افهم لحالي 10 layer chromatography إذا ال
stationary phase بدي يكون polar فالمادة A إذا كانت
هي ال polar هي اللي هتمشيإذا المادة A هي ال bowler
إذا ان هي مش هتمشي هي اللي هتضلها لتحت بس إذا
المادة B ال non bowler هي اللي هتمشي لفوق لأنه
thin layer chromatography بتدافع مع طول ال
stationary phase بيكون bowler فالمادة ال bowler
هتلزج و مش هتمشي للأعلى و المادة ال non bowler هي
اللي هتمشي للأعلىطب في عندنا تقنية fossil اسمها
Electrophoresis في عندنا احنا اليوم حكينا عن تقنية
ال chromatography في عندنا تقنية تانية اسمها
Electrophoresis لنقارن بين التقانيتين بحكيلي بناء
على ال definition بناء على التعريف ال
chromatography معناها fossil خليط من عدة مكونات
بناء على two phases اللي ال stationary phase و ال
mobile phaseإذن تقنية الـ chromatography هي فصل
خليط من المواد بناء على ال stationary phase و ال
mobile phase أما ال electrophoresis هي فصل خليط من
عدة مكونات بناء على الخصائص الكهربائية على ال
electrical field هو فصل بناء على الخصائص
الكهربائية ال electrophoresis أما ال
chromatography هو فصل بناء على stationary phase و
mobile phaseالعينة اللى ممكن استخدمها في حالة ال
chromatography ايش العينات اللى بقدر افصلها ممكن
افصل عينات تكون liquid ممكن تكون solid ممكن gas
بيقدر يفصل عينات تكون سائلة ممكن صلبة ممكن غازية
ال electrophoresis بيقدر يفصل عينات تكون سائلة و
صلبة فقط بيقدرش يفصل الغازالـ Principle المبدأ
للكرومتографية حكى هنا إن المبدأ الكرومتографي الـ
Principle هو attraction with stationary phase و
solubility with mobile phase أما الـ
Electrophoresis هي فصل بناء على الـ electrical
field بناء على الخصائص الكهربائية بناء على ال
electrical properties إذن هو فصل بناء على الخصائص
الكهربائيةالـ Principle لأ للـ Electrophoresis
بناء على الخصائص الكهربائية بناء على الـ
Chromatography بناء على ال attraction with mobile
phase with stationary phase with solubility with
mobile phase