بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أشرف
المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين طلابنا
الأعزاء نرجو من الله الكريم أن تكونوا جميعا بخير
وبصحة جيدة تحدثنا في المحاضرة السابقة عن فحص يعتبر
من أهم الفعوصات التي تستخدم في تقييم قدرة الرجل
على الإنجاب وهو فحص تحليل السائل المنوي تحت مصطلح
Seminal Analysis قررناخلال الحديث عن هذا الفحص عن
عدة معايير مهمة كالـ volume الـ pH الفسكوسيتي الـ
concentration الـ count الـ motility بأقسامها
متمثلة في الـ progressive motile الـ non
progressive motile الـ non motile spermatozoa
انتقلنا للحديث عن الـ morphology انتقلنا للحديث عن
بعض الفحوصات المتعلقة بنشاط الـ sperm زي الـ
fructose test هذه معظمها فحوصاتلها علاقة بالـ
Seminal Fluid جميعها يتم إجراءها و يتم إنجازها في
المختبر وبعضها لا يتم تطرق إليها مثل فحص الفرقتوز
على سبيل المثال اليوم سوف نتحدث عن موضوع جديد له
علاقة بالآلية المتبعة و الطرق المستخدمة لتحضير
عينة الساقل للحقن المجهري أو للتلقيح الصناعي
التقليدي المسمى باسمIVF In Vitro Fertilization
ولكن قبل أن نتحدث عن هذه الآليات وهذه الطرق التي
يمكن أن تستخدم من أجل تحضير عينة السائل دعونا
نتكلم عن مصالحات طبية مهمة جداً لها علاقة بالـ XY
ولها علاقة بالـ Seminal Fluid من أشهرها Aspermia
فالـ Aspermia معناها أنعدم وجود seminal fluid هذا
الرجل لا يستطيع أن يعمل ejaculation فبالتالي في
عنده seminal fluid ال volume الخاص فيه zero مافي
عنده seminal أو semen volume مافي عنده semen
volume so the definition of a spermia is no
seminal fluid وينطبق عليها مصطلحين hypospermia
وhyperspermiaالـ Hyper-Spermia زيادة في الـ volume
في الحجم بيتجاوز الـ 5.5 ملي لتر أما الـ Hypo
-Spermia نقصان في الـ volume لكي يكون أقل من 2 ملي
لتر لأننا اتفقنا أن الـ normal volume للـ seminal
fluid 2 ملي لتر فزيادته و نقصانه له مصطلح معين
يليه مصطلح مهم جدا و هو أكثر انتشارا هو عبارة عن
الـ Oligospermiaالـ Ologospermia معناها نقصان في
عدد الحيوانات المنوية في كل واحد مليليتر لكي تصل
إلى أقل من 20 مليون حيوان في المليلتر الواحد يليه
مصطلح مهم ويعتبر من المصطلحات الأكثر انتشارا و
الأهم وهي مصطلح الـ Azospermia فالـ Azospermia
معناها عدم وجود سبيرماتوزوة في الـ seminal fluid
so the leak of sperm in the semen جدش بتتمثلهذه
العملية وهذا المصطلح مصطلح الازوسبيرميا يمثل 2% أو
يتواجد بمعدل 2% من ال total males population يعني
بمعنى أخر كل 100 male وكل 100 men فيهم اتنين
مصابين بالازوسبيرميا أيضا وجدوا ان الازوسبيرميا
تتواجد بمعدل 10-15% من الذكور المشخصين بأنهم
infertile هذا المصطلح مصطلحمهم وخاطير في نفس
اللحظة خدوا بالك في مصطلحين انهم علاقة بال
asospermia asospermia as general term و asospermia
after centrifugation ال asospermia as general term
انه تكنولوجيست عامل scanning للشريحة مالجاش فيها
sperm وضع انه عدد ال sperm zero فبالتالي
asospermia في تكنولوجيست اخر و emperiologist اخر
اكتر ضراية بالعملفأخد العينة ك total sample وضعها
في test tube وعملها centrifugation أخد جزء من ال
sediment وعملها scanning ماوجد sperm فبسميه
aspermia after centrifugation وهو المصطلح الأدق
لأن ممكن أنا لما أعمل mixing و أخد 50 micro أو 10
micro و أعملها scanning ومالاجيش لو أنا عملت
mixing كويس أو عملت centrifugation للعينة يعني
جمعتها ورصبتها وعملت لها concentrationواخدت من الـ
sediments ممكن ألاقي sperm او اتنين او تلاتة لأن
هذا بيأثر على طبيعة علاج المريض فيما بعد فمهم جدا
بعد ما ألاقي مصطلح Azospermia في العينة و أعمل فحص
للعينة و ألاقيها Azospermia أعملها centrifugation
و أفحصها مرة تانية عشان أقول Azospermia after
centrifugation أو لجت واحد sperm after
centrifugation فهذا المصطلح مهم جداهنتكلم عنه لما
نصل إلى الـ testicular biopsy كيف المصطلح
الازوسبيرميا after centrifugation بلعب دور كبير
ومهم في تحديد هل هذا الذكر أو هذا الرجل يلجأ إلى
ال testicular biopsy أو لا وإن لجأ إلى ال
testicular biopsy ما طبيعة ال biopsy هنتكلم في
عيندي أربع أنواع أسبابها بشكل أساسي أسباب
الازوسبيرميا قد تكون ال blockage على طول ال
reproductive tractأو قد يكون عندي abnormality في
ال hormone level وأشهرهم in FSH and H-testosterone
قد يكون عندي مشكلة في ال ejaculatory duct قد يكون
عندي مشكلة أساسية وظيفية أو تركيبية في ال
testicular وال testicular أو ال testis هي المصنع
الأساسي لإنتاج الاسبيرميا وبناء على هذا تم تقسيم
الاسبيرميا إلى قسمين أساسيين obstructive aspermia
و non-obstructive aspermiaفطالما تم تقسيم الـ
Azospermia إلى Obstructive وNon-obstructive
Azospermia ما هو الفرق؟ ما هو الفرق بين الـ
Obstructive وNon-obstructive Azospermia؟ الـ
Obstructive Azospermia وجدوا أن أكثر أسباب توجودها
هي عبارة عن Blockage في الـ Vase Difference أو الـ
Epidermis أو الـ Ejaculatory Duct فقط Blockage؟ لأ
واجهته ممكن يكون سبب آخر إن الـ Congenital Absence
في الـ Vast Difference إبداد مصر وإيجاكلوتريدارت
تبشوفوا الفرق بين ال blockage و الcongenital
absence ال blockage إن هذا علم الذكر أو هذا الرجل
تعرض إلى حادث معين عمل وجود blockage وانسداد في
هذه القنوات المذكورة التلاتة أما الcongenital
absence .. absence .. absence وهو إن ال male خُلِق
وولد وجاء على قيد الحياة وماعندهش هدىالمُركّبات أو
واحد منهم ماعندهوش الـ Epidermis ماعندهوش ال vast
difference وماعندهوش ال ejaculatory duct وارد صحيح
وارد ماهي المشاكل والأسباب التي تؤدي إلى حدوث ال
blockage بشكل أساسي لأن ال blockage يُعتبر هو
الأكثر انتشارة من أشهر الأسباب في عندي trauma أو
injury في منطقة .. في منطقة خاصة بال reproductive
tract infection أو inflammation في عندي عملية
جراحية في منطقة ال pelvic areaفي عندي الـ
vasectomy وهو إن الـ vas deference تعرض للاستقصال
ذكر رجل مصاب بـ cystic fibrosis أو mutation في
الجين الخاص بالـ cystic fibrosis فهذا الـ mutation
أدى إلى حدوث مشكلة في الـ vas deference مما أدى
إلى وجود مشكلة في تطور الـ vas deference فأدى إلى
حدوث blockage في الـ vas deference بشكل أساسي إذن،
بناء على هذا الكلامفي أسباب معينة علاقة بالـ
Obstructive Azospermia وتطرقنا إليها بشكل و بآخر و
من أشهر اللي قلنا عنها هي الـ Blockage في الـ
Vasodifference اللي بتدمس و النوع التاني الـ
Ejaculatory duct واحد منهم أو التلاتة مع بعضنجي
للشق الأخر من أنواع الـ Azospermia اللي حكيناها
Non-obstructive Azospermia والمعصود بالـ Non
-obstructive Azospermia أن التلاتة المُركّبات
الأساسية أو التركيبات التلاتة الأساسية سواء كان
الـ Epidermis أو الـBase Difference أو
الـGeriatric Reduct بيكونوا سالمين 100% ما في
عندهم Blockage ولكن في أسباب أخرى عبارة عنأسباب
جانبية أدت إلى إنقاس معدل إنتاج الـ sperm فبالتالي
هذه الـ external factor أو الـ other factor هي
اللي أثرت على المصنع بشكل أساسي ولم تؤثر على عوامل
أخرى خلّينا نشوف إيش ممكن الأسباب التي تؤدي إلى
الـ non-obstructive azospermia الـ non-obstructive
azospermia المقصود فيها أن التلت تركيباتالأساسية
اللي اتكلمنا عليها Vas deferens Epidermis جاكولاتي
ردكت Normal there is no blockage in this tipule or
in this tract ولكن there is another external
factor أثرت على الـ testis بشكل أساسي منها الـ
genetic causes أسباب ورثية من أشعر الـ Klinefelter
والـ Klinefelter هو عبارة عن male with two copies
of X chromosome فهذا يؤدي إلىوجود ضمور في الـ
testis مما يؤدي إلى إنقاس معدّى لإنتاج الـ spermia
أيضًا من أسباب الوراثية التي تؤدي إلى non
-obstructive azospermia أو بشكل أساسي الـ
azospermia ولكن non-obstructive هي وجود micro
-deletion في الـ Y-Chromosome لأن الـ Y-Chromosome
يحتوي على جينات تلعب دورة مهمة وأساسية وحساسة في
إنتاج الحيوانات المنويةفلو صار microdilation في
الـY كرمز وملاجينات أساسية معناه لـ production
rate will be declined هرمون abnormality or
imbalance ومن أشهر هذه الحالات وجود ما يُعرف اسمه
الـ Hypogonadotropic Hypogonadotropic يعني نقصان
في مستوى الهرمونات التي تفرز من مناطق معينة الجناد
ومن أشهر هذه الهرمونات التستيستيرون الذي يلعب دورة
مهمة في إنتاج وتطور ومدوجالحيوانات المنوية أيضًا
Hypogonadism من حيث الـGonadism أيضًا من أشهر
الأسباب أيضًا Hyperprolactinemia
بمعنى آخر زيادة مستوى هرمون البرولاكتين زي ما
البرولاكتين بيعمل infertility مؤقت عند الفيميل
أيضًا البرولاكتين قد يؤدي ويعمل بشكل سلبي على
المادة فبالتالي لازم للبرولاكتين يصير فيه عنده
عملية معالجة في حالة ارتفاعه من أسباب الهرمونية
أيضًا الـ Androgen-resistant أنه في عندي Androgen
-hormone وفي عندي Sex-hormone ولكن الـ Receptor مش
شغال عشان تستقبله فبالتالي لا يؤد الوظيفة المقلوبة
فيه سبب تاني من أسباب الـ Azoospermia ولكن الـ Non
-obstructive Azoospermia سيرتولي سيل Only Syndrome
وهي عبارة عن مشكلة في السيرتولي السيل التي تلعب
دورة مهمة في تطور وانضاجالحيوانات المنوية
spermatogenic arrest تستكل failure to produce full
mature sperm cell انه تستشغالة ولكن في عندها ضعف
في منطقة معينة أو في مرحلة معينة من مراحل التطور
ونضوج الحيوانات المنوية فبالتالي بيعطيني sperm
ولكن هذا ال sperm لا يكون ناضج بالشكل المطلوب أو
بالكيفية المطلوبةسبب آخر من أسباب الـ azoospermia
ولكن الـ non-obstructive ال trauma ال radiation ال
varicosein أيضا كيدنفيريا ال diabetes .. ال
diabetic أو ال diabetes ال cirrhosis هذه كلها
تعتبر من الأسباب التي تؤدي وتساهم في حدود ال non
-obstructive azoospermia ال non-obstructive
azoospermia في مصطلح تاني من المصطلحات الطبية
المهمةas in to zoospermia وهذا المصطلح مقصود فيه
أنه فيها عندي ك technologist عندي عينات عينات هذه
فيها sperm motility أو sperm motile ولكن في عندي
reduction في كمية ونسبة الحيوانات المنوية المتحركة
حتى تصل إلى أقل من 40% ورغم أنه ال normal range ل
ال total motile 42% عفوا 40%بس لـ Progressive 32%
فبالتالي لو صار في عندي reduction in the
percentage of total sperm motile less than 40% هذا
المصطلح بسميه سينو ذي سبيرميا طب شو أسبابه؟ شو
العوامل الممكن تسبب و تأثر على ال sperm motility؟
في عندي عدة عوامل من أول عوامل التي تؤثر سلبا عن
ال sperm motility ال Vercosyl دوال الخصية اخدوا
بالك ال Vercosyl هو عبارة عن تضخم في بعض الأوردةأو
التي تحيط بالـ testes تعتبر reversible بمعنى آخر
إنه ممكن يصير علاج إلها و ترجع مرة تانية هذا يعتبر
مشكلة مؤقتة تزال بعملية جراحية في عندي مشكلة أيضًا
seminal tract infection في عندي antisperm antibody
لأن الـ antibody هيعمل قتل للـ sperm ويفقد قدرته
على حركة فيما بيعمل reduction poor nutrition عندي
مشكلة في التخزينةما عنده كمية كافية من ال fractose
ما بتناول فواكه بكمية كافرة ما بتناول مصادر ال
fractose فبالتالي هيفقد ال sperm قدرته على الحركة
بسبب فقدانه العنصر الأساسي للحركة ال smoking ال
alcohol intake ال caffeine ال tobacco consumption
هذا كلها تعتبر من أسباب التي تؤدي إلى نقصان مستوى
ونسبة حركة الحيوانات المنوية هذه بشكل أساسيمن
الأسباب الأخرى التي تساهم في نقصان معدل ونسبة تحرك
الحيوانات المنوية هو التعرض لبعض الـ toxic agents
زي الناس الـ farmers الناس اللي بتشتغل في البنزينة
الناس اللي بتشتغل كمزارعين الناس اللي بتشتغل في
مصنع البطاريات الناس اللي بتشتغل في المناجم الفحم
تتعرض لكمية كبيرة جدا من ال organic solvent أو
المواد التي تعتبر مواد سامةالمشكلة ليست في التعرض،
المشكلة في كمية التعرض ووقت التعرض و ال
concentration اللي بتتعرض إليه الإنسان يعني ممكن
أي إنس إحنا في حياتنا اليوم دي متتعرض ولكن جنتيش
متتعرض، أنت ممكن تتعرض ساعة، من إزاي اللي بيشتغل
في البنزينة بدوام 12 ساعة؟ ومش اللي بيشتغل في
الفحم و في منجم الفحم بدوام ممكن يصل إلى 24 ساعة،
متواصل أو متقطع فبالتالي في عنده duration لل
exposure كمية، توقت عالي جدا، فبيعمل مشاكل في ال
spare motilityأيضًا الـ Age بيلعب دور عكسي في
وجهية الدراسات أن هناك علاقة سلبية ما بين الـ Age
و percentage of sperm motility تحت مصطلح Negative
Correlation between the Male Age and the
Percentage of Sperm Motile كل ما زاد ال Age قل
الموتلتي كل ما قل ال Age زاد الموتالي ال sperm
أيضًا ال Cancer بيلعب دور سلبي لأنه طول ما في عندي
Cancerفي عند الـ Radiotherapy، في عند الـ
Chemotherapy وكلهم يؤثر سلبًا على مصنع الحيوانات
المنوية وفيأثر سلبًا على الحيوانات المنوية
الموجودة في الـ edited mass ويؤثر سلبًا على
الحيوانات المنوية التي ما زالت تُخلق فبالتالي، دي
بيعمل reduction عندى في عدد ال sperm المتحارب في
عنده مصطلح آخر اسمه Teratospermia ما المقصود بهذا
المصطلح Teratospermia معناه إن في أنا عند spermفي
عندى spermatozoa وفي عندى mature sperm ولكن معدل
ال .. او نسبة .. نسبة ال sperm اللى يعتبر up
normal form عالى جدا up normal form يعني ميجارو
head، pen head، double tail، two mid piece يعني
بمعنى اخر انا عملت scanning للعينة لجيت عدد ومستوى
ونسبة ومعدل تواجد ال up normal form spermatozoa
عالى جدابالتالي بسميها Teratospermia Teratospermia
شو أسبابها؟ شو ال most common؟ شو الفكرة التي تؤدي
إلى حدوث Teratospermia؟ أول حاجة ال infection ال
chronic infection كل ما اتعرضت أو حنعرف إيش عن ال
chronic infection أو كيف ال chronic infection بسبب
تغيب في أشكال الحيوانات خدوا بالكوا أربطوها و
هنتكلم عنها بشكل مستفيد تكلمنا عن المحاضرة الفاتتة
Coronic infection يعني ال immune system هيشتغل
يعني في عندي white pieces هتهاجل للمنطقة هذه هتفرز
ال white pieces كمية كبيرة جدا من ال free radical
فتديني ROS Reactive Oxygen Species هذي بتعملي
degradation في ال DNA و في المorphology بتاعة ال
sperm ببساطة جدا Smoking و ال alcohol intake تؤدي
إلى Teratospermia عدم وجود اتزان و تناور طعام صحي
تؤدي إلى Teratospermiaالـ Obesity تعتبر من أهم
العوامل التي تساعد في وجود Teratospermia الـ Drug
الذي يتم تناوله بغير وصفة طبية أو بغير جرعة طبية
بعض الأدوية تؤثر سلبة أيضًا وجود ال trauma في
منطقة ال testicular تؤثر على ال morphology الخاص
بالـ spermatozoa كل هذه المصطلحات وكل هذه الأسباب
تؤدي إلى حدوث مشاكل في عملية إنتاجأو تطور أو مدوج
الـ spermatozoa مصطلح آخر بنسميه polyospermia
polyospermia وهو عبارة عن مصطلح المقصود فيه زيادة
عدد الحيوانات المنوية في السائل لتصل إلى أكثر من
200 مليون خلية أو 200 مليون sperm per milliliter
increase in the total number of spermatozoa to
arrive 200 million per milliliterطبعا هذا العدد
مهول يعتبر ومش كل زيادة في العدد تعتبر زيادة
إيجابية فبالتالي الزيادة قد تكون سلبية ببساطة جدا
تصور أن أنت عندك كمية كبيرة جدا قد كل المدرسة أو
كل الجامعة في حالة من حالات التصقيد سوف تخرج من
بوابة صغيرة جدا سوف يحدث تدافع عند عملية الخروج
مما يؤدي إلى وجود إصابات وقد يؤدي إلى اختناقات على
صعيد بسيط جداعلى الوضع الحالي فمباناك لو كان عندك
200 مليون sperm هيخرجوه بشكل دفقات متتالية هيصير
في اندي نوع من أنواع إعاقة في الحركة إعاقة في
الحركة يعني تدمير يعني ال fertility chance حدجه و
حدجيه عند المال طبعا it is usually associated with
a decrease in the volume of ejaculatory matter هذا
السبب اللي بيؤدي إلى زيادة الحجز زيادة العددإن ال
volume بدل ما يكون خمسة فيهم 200 مليون كان فيها
واحد مل فيهم 200 مليون فمن أهم أسباب زيادة ال
concentration of sperm أو دعنا نسميها زيادة ال
count of sperm هو عبارة عن حدوث reduction في ال
sperm volume في ال seminal volume it may be a
cause of infertility since such high concentration
can be difficult to their movement طبعا زيادة في
العدديودى الى تزاحم أثناء المسير في رحلة ال
fertilization فالتزاحم هذا هيكون تزاحم عكسى فهيمنع
من حركة ال despair ما تزوى بشكل المطلوب و بشكل
المناسب لأن فيه تدافع طبعا it is important
condition in male fertility because white cell
weak in the sperm and can't damage its genetic
material طبعا أيضا من أهم المصطلحاتوجود بعض ال
white pieces تؤثر سلبًا على هذه العملية طبعًا وجود
ال white pieces لها علاقة بحاجة بتسميها
Pyrospermia أو حاجة بتسميها present of leukocyte
in seminal fluid طبعًا وجود ال leukocyte في ال
seminal fluid معناه أنه في عندى infection ال
infection هيهاجر كمية كبيرة جدًا من ال white
pieces لدى المكان فبالتالي هيعملها destruction
ببساطة جدا وجود ال white pieces هيعمل رُس رُس
هيعمل destruction لgenetic material فيؤدي إلى فشل
ال sperm في قدرته على عملية الإخصاب while the
blood cell released powerful substance called
reactive oxygen species which destroy organism
that cause infection unfortunately أو للأسف بشكل
كبير جداوجدوا إن الرُس بتأثر سلبًا بشكل كبير جدًا
على الـ sperm DNA على الـ sperm motility وعلى الـ
sperm movement طبعًا فادوا بالكواخر تلت نقاط اللي
لهم علاقة بمصطلح وجود حاجة بنتسميها leukospermia
وليكوسبيرميا بيسموها وجود الـ leukocyte بكميات
كبيرة جدًا في الـ seminal fluid هذه رقم تلاتة
النقطة رقم تلاتة ونقطة رقم أربع ونقطة رقم خامسة
إلها علاقة بمصطلح اسمه leukospermia أو Pyrospermia
وهذا المصطلح Leukospermia أو Pyrospermia هي عبارة
عن present of leukocyte in seminal fluid with high
number طبعا هذه المفروض في هنا عنوان جديد خلصنا من
المصطلحات التطبيقية المهمة سننتقل إلى موضوع جديد
كيف يتم تحضير عينات السائل من أجل ال ART أو ال X
أحد تقنيات ال ART طبعا في البداية في عندي مصطلحالـ
IVF In Vitro Fertilization فيها عند مصطلح الـ IGSI
وفيها عند مصطلح ال IUI إيش يعني ال IUI اختصارها
Intrauterine Insemination وهي ببساطة جدا هي إيصال
لـ spermatozoa الناضجة إلى الرحم
متى بنستخدمها إذا كان في مواجهة عنيفةمن قبل الـ
Female Piers الموجودة في منطقة الـ cervic ومنطقة
الفيجاينة لـ spermatozoa أو ال spermatozoa لا تقدر
تقطع هذه المسافة فبيجي الطبيب بياخد ال spermatozoa
بيعملها preparation بيحطها في انبوبة اسمها
catheter tube very thin و بيحطنها داخل الفاجاينة
الخاصة بالفيميل أو ببعناء آخر داخل الرحم الخاص
بالفيميل مرورا بالفاجاينة و السيرفيكال فبيقصر
المسافة اللي هتمشيها ال spermatozoa و بيقصروبيقلل
معدل الأخطار اللي بتوجهها الـ spermatozoa هذا
المصطلح بنسميه IUI intrauterine insemination يعني
الحقن داخل الرحم طبعا هذه بنعملها إذا كان الفيمايل
قبيعية 100% ولكن في عندى مشكلة في ال motility
الخاصة بال male spermatozoa شو السبب منها؟ شو
الهدف منها؟ تقليلالمصاعب والمخاطر اللي يتواجهها
الـ spermatozoa خلال رحلة ال fertilization في
منطقة ال cervical أو منطقة الفاجينة مرتبطة على الـ
leukocyte و الـ antisperm antibody و خلافه طيب ال
sperm process for IVF كيف يتم تحضير العينة؟ أو
خلال عملية تحضير العينة، شو بيصير؟طبعا خلال .. أو
فكرة تحضير العينة و الفكرة الأساسية للتحضير العينة
ومبدأ تحضير العينة يقوم على مبدأ أساسي هو عزل
الحيوانات المنوية الجيدة التي تعتبر normal form و
good motile فبالتالي طالما في عندي عزل للحيوانات
المنوية الجيدة إذا سوف يتم التخلص من ال similar
fluid أو ال similar plasma يتم التخلص من خلالها من
العوامل التي تعمل decapacitation والمقصود بال
decapacitationيعني فقدان الحيوانة المنوية القدرة
على الإخصاب إبعاد وعزل الـ dysfunctional والرُس
producing sperm بمعنى آخر إبعاد الـ sperm بـ
dysfunction اللي ممكن يفرس كمية كبيرة جدا من الرُس
اللي بتدمر الحيوانات المنوية الأخرى التخلص من الـ
leukocyte لأن الـ leukocyte جالب شوية حكينا ممكن
تفرس كمية كبيرة جدا من الرُس التخلص من البكتيريامن
أن البكتيريا تلعب سلبًا ودورًا سلبيًا على
الحيوانات المنوية المتبقية وتحسين قدرة الـ sperm
من حيث الحركة والمحافظة على المادة الوراثية بالشكل
الكامل بالإضافة إلى المحافظة على الـ Acrosome
Reaction والمحافظة على الـ sperm في حالة Normal
Form إذن هذه الخمس نقاط، خمس نقاط أساسية تحدث خلال
عملية الـ Sperm Processing for IVF-CorIgZ من أجلها
يتم المحافظة على الـ sperm يتم المحافظة على الـ
sperm و الـ acrosome .. sperm morphology و الـ
acrosome reaction و الـ motility الخاصة بالـ sperm
كيف يتم المحافظة على هذه الأمور؟ من خلال التخلص من
الحيوانات المنوية الميتة التخلص من البكتيريا
التخلص من الكورات الدم البيضاء و التخلص من الـ
seminal plasma التي قد تحتوي على الـ ant sperm
antibody أو إذا كان طبعاً للملاي يصنع antibody ضد
نفسهأو يحتوي على الـ Decapitation Factor هذه أهم
خمسة نقاط أساسية أهم خمسة نقاط أساسية ما هي الطرق
التي تستخدم في عملية ال isolation أول طريقة تستخدم
في عملية ال isolation و ال extraction و ال
processing هي طريقة بسيطة جدا تسمى simple dilution
and washing simple dilution and washing هنتكلم
عنها بالتفصيل النقطة التانية أو الطريقة التانية هي
ال swarm up و من اسمهاسباحة للأعلى النقطة التالتة
و الطريقة التالتة هي density أو density gradient
centrifugation density gradient gradient
centrifugation بمعنى آخر الفصل بناء على الكثافة
المتدرجة في عندي simple dilution and washing في
عندي sperm swarm up في عندي density gradient
centrifugationطبعا هذه التلت نقاط أو التلت عوامل
أو التلت طرق ان صح التعبير الأكثر استخداما والأكثر
شيوعا ولكن حاليا الأكثر استخداما الطريقة التانية
أو التالتة والأكثر على الإطلاق والأكثر استخداما في
مختبرات ال IWF هي الطريقة التالتة اللي لها علاقة
بال credit خلينا ناخد الطريقة الأولى اللي اسمها
simple dilution and washingببساطة جدًا خلال هذه
العملية يتم فصل الـ spermatozoa عن الـ seminal
fluid بما يحتويه فصل ال spermatozoa عن ال seminal
fluid بما يحتويه هذا البرنامج يحفظ قدرة البرنامج
للتواصل بشكل كبير بما يحتوي على البرنامج بما يحتوي
على البرنامج بما يحتوي على البرنامج بما يحتوي على
البرنامج بما يحتوي على البرنامج بما يحتوي على
البرنامج بما يحتوي على الهذه الطريقة الأولى، يعني
أكثر .. أو أكثر الحالات التي يستخدم معها الطريقة
الأولى الـ simple dilution and washing مثل .. إذا
كان في عندي immune disorder إذا كان في عندي male
factor أو حالات عدم إنجاب غير معروفة السبب طبعا
هذا ال .. هذا ال technique بيحتاج dilution و
centrifugation طبعا ال sperm بيصير له washing ب
solution يحتوي على ال antibioticوبعض الـ
Supplemental Protein ومن أشهرهم الـ albumin يُضاف
يعني كإن أنا بستخدم media هذه ال media فيها
Antibiotic plus Supplemental Protein like albumin
بضيفها على عينة السمن بمعدل 1 إلى 1، 2 إلى 2
وخلافه ولكن الأكثر استخدام من ال ratio one to one
ال media sterile of the equal volume from the
seminal fluid يعني ال ratio ما بين ال media
المستخدمةالتي تحتوى على الـ Supplement Protein و
الـ Antibiotic إلى كمية السمن الفلويد لازم تكون 1
ل 1 بمعنى انا اضفت او بدي اعمل Washing ل 1ml من
العينة بدي اضيف 1ml من الـ Sample فباتشي بعمل
Mixing للعينة و بقيس كده عندى ال volume تدريجى
عندى 5mlإذا لازم أضيف عليهم خمسة mil من ال media
بعملها good mixing بعدين بضيفها في test tube و
بعملها centrifugation ع باستخدام طبعا ال
centrifuge طبعا ال centrifugation لها زمن معين و
سرعة معينة فبعملها centrifugation على تلاتمية دورة
300G لمدة عشر دقائق فهتفصلن مركبين أو طبقتين ال
cinnamon في الأسفل و ال supernatant كلها في الأعلى
removing with sterile pipet طبعا هنا for 10 minute
and then the supernatant is very careful remove
طبعا ال supernatant أنا مابديه لإنه فيه كل ال
depressed فيه كل ال decomposition factor فيه كل
العوامل اللي ممكن تأثر سلبا على ال sperm فبعمل
removing لل supernatant بسحبه بال sterile pipet او
ال dropper و برميهالـ Palette أو الـ Sediment
الموجود بعملها Resuspension و بضيف عليها بعد كده
واحد ملي من نفس ال media و بعملها Mixing و
Centrifugation لمدة خمس دقائق على نفس السرعة 300G
برفع ال supernatant و برميه بتخلص منه و بعمله
discard بعد كده بعمل Resuspension لل Palette و
بضيف عليها واحد مل من نفس ال media أنا كده بكون
غسلتها مرتين ممكن أغسلها كمان مرة مافيش مشكلة بضيف
واحد مل مرة تانيةmixing centrifugation على 300G
لمدة خمس دقائق بتخلص من ال super net and بضيف او
بعمل resuspension لل sediment الموجود او للبلد
الموجود طبعا كده ال sediment بتكون جاهزة لعملية ال
IUI for example جاهزة لعملية ال IVF for example
بناء على طبيعة العينة او طبيعة ال process اللي انا
بدي استخدامهطبعا استخدمت عشر دقائق و بعدين عشر
دقائق و بعدين عشر دقائق يعني ممكن تاخد ل minimum
تلاتين دقيقة العملية ككل ما بين عملية ال first
centrifugation حتى ال last time أو ال last step
centrifugation طبعا مهم جدا جابل ما أكون جهزت
العينة و بعدتها ل ال empirical lab أو لعملية الحقن
بشكل أساسي لازم أعمل evaluationللعينة او للبلد او
لل cinnamon ان اشوف ماجدش فيه متايل sperm ماجدش
فيه count sperm بعد كده اعملها preparation
preparing for insemination insemination يعني الحقن
الحقن اي ماقصود فيه برجع بأكد ان هذه العملية بتاخد
لها كمية قليلة جدا من الوقت يعني تلاتين الاربعين
دقيقة يعني مش الوقت الكبير المرحلة التانية من
المرحلة التي تستخدم او الطريقة التانية طريقة ال
swarm upطبعاً طريقة this warm-up هي أكثر الطرق
التي يتم فيها استخدامها في ال research على سبيل
المثال و ال I.O.I. ال research و ال I.O.I. طبعاً
في هذه العملية أو عملية this warm-up ال principle
أساسي الخاص فيها أنه فقط ال spermatozoa التي
بتعتبر pest motility أو pest motile .. pest motile
spermatozoa هي التي تستطيع السباحة للأعلى يعني هنا
بفصل فقط ال motile sperm عن باقي ال spermatozoa عن
باقي ال depressedعن باقي الأمور التي لا نريد أن
تتواجد مع العينة ليه؟ لأن ببساطة جدا الحيوانات
المنوية الأكثر صحة الأكثر قدرة على الحركة التي
تعتبر حركتها طبيعية هي التي تستطيع أن تسبح للأعلى
طب ليه تسبح للأعلى؟ هنعرف ليه سميت أصلا سواقة طبعا
this procedure is very easy to perform and allowed
recovery for good number of progressive
spermatozoaفي مجموعة Normal Spermatozoa أو مجموعة
Normal Spermic طبعاً في البداية هذه الطريقة لديها
عديد من المفاتيح منها على سبيل المثال إنه بيعمل
reduction في percentage of normal chromatin
condensation in spermatozoa بيعمل why pellets
spermatozoa are in close contact with other cell
depressed anticocyte at the bottom of the tube
beginning exposure to the high level of ROS طبعا
طالما فقط ال spermatozoa التي تتميز بالجودموتالي
التي تسبح في الأعلى إذا أنا هفقد كمية كبيرة جدا من
ال spermatozoa في ال centrifugation و هدلها في
البلد وجودها في البلد يعني قريبة من ال leukocyte
قريبة من ال leukocyte يعني قريبة من ال ROS قريبة
من ال ROS يعني عندي ال ROS هيأثّر ال spermatozoa و
هيعمل لي destructure لهاعشان كده بلاقي عدد
الحيوانات المنوية التي تسبح للأعلى قليل جداً قد
تكون Normal Motile ولكن قد لا تكون Normal
Morphology أو Normal Sperm Condensation المادة
الوراثية مش هتكون .. ممكن ما تكونش Normal بنسبة
100% فبالتالي هذه تُعتبر من الطرق التي تُستخدم
طبعا أكثر استخدام هذه الطريقة في عملية الـ I.O.I
بسميتها Intra-UterineIn Semination كيف انا هتشتغل
هذه الفريقة و كيف بتتم ببساطة جدا بجيب عينة ال
seminal fluid بعمل mixing بينها و بين ال media
اسمها IOI media بنسبة 1 إلى 2 شو يعني 1 إلى 2؟
بمعنى اخر انا عندي 1ml سيمن بضيف عليها 2ml washing
culture media او IOI media او بسموها washing media
أو swarm up media اللي هي مسميات كتيرة عندى 1 مل
بضيف عليها 2 مل من ال media بعمل mixing طبعا هذا
في ال sterilized tube و بعمله centrifugation لمدت
10 دقائق على 2200 rpm بعد كده بتخلص من كل ال
supernatant ماليش علاقة بيه بعمله discard و moving
بعدين بضيف عليه نفس ال media بكمية معينة 1 مل 1.5
مل بناء على كمية البلة الموجودةولكن عملية إضافة ال
media هنا بت cool بشكل very slowly وعلى الجدار
الداخل للأنبوبة يعني باخد بالاسترالي و أضربها 1
mil أو 2 mil بإنها ماجدش عندي حجم ال pellet عندي
حجم ال pellet أو ال sediment 1 mil باخد 2 mil و
بميل الأنبوبة و بنزل السائل أو ال solution أو ال
media على الجدار الداخل للأنبوبة عشان مايصيرش drop
مرة واحدة مع ال sedimentبعد كده باخد الأنبوبة هذه
و بضيف ثراج بشكل مائل بزاوية 45 درجة و بحطه في ال
incubator لمدة 45 دقيقة على 37 درجة مائوية طبعا
هذه الإيمالة أو بزاوية 45 بالـdenis landship بساعد
ال spermatozoa أنها تسبح بسهولة نحو السطح فبالتالي
ما بيكون فيه قوة كبيرة جدابتواجد الـ spermatozoa
تقيق عملية السباحة للأعلى بالفعل الـ gravity فأنا
عملت عملية إيمان لإلها عشان أتقلل المسافة اللي
هتقطعها ال spermatozoa وما أجهد ال sperm لإن أنا
محتاج حركته في عملية ال fertilization بعد ما اتخلص
ال 40 أو ال 45 دقيقة باجي بطلع ال أنبوبة برفعها
باجي supernatant بعد ما كانت clear صار تربط معناه
في spermatozoa صعدت للأعلىباخد كل الـ supernatant
اللي فيه spermatozoon و بضيفه في الـ sterile test
tube و بعمل evaluation للعينة من حيث ال count و من
حيث ال motility جدّيش فيها sperm و جدّيش فيها
متغير ال spermطبعاً هذه صورة بتوضح الكلام فيها
عندى test tube ضفت العينة واحد منه وضفت عليها
اتنين من ال media عملتلها mixing ثم تخلصت
centrifugation وتخلصت من السبرانيتل ضفت media أخرى
تتناسب مع كمية ال sediment الموجودة ضفتها وقمت
بوضعها في راك بزاوية 45 درجة مئوية ودخلتها ال
incubator على 37 درجة .. عفوا ضفتها في الراك
بزاوية 45 درجةبعدين أدخلت الراك بالأنبوبة داخل من
كيبيتو على درجة حرارة 37 درجة موية لمدة من 20 ل 40
دقيقة بعد كده هرفع الأنبوبة هلاجي ال supernatant
تيربت بعد ما كان clear دليل أنه في spermatozoon
باخد كل ال super net worth اللي موجود بالأعلى دون
ما ألامس ال sediment و بضيفها في مبوبة جديدة بعدين
باخد منه عشرة micro بعمله assessment علشان أشوف كم
في عندي sperm count و كم في عندي motile و كم في
عندي عدد من حيث عدد ال sperm طبعا هذه الطريقة
مابتحتاج skill معينة طريقة سهلة جدا رخيصة جدا
مابتحتاج لدست تيوب و media و أكثر استخدامها لل IVF
التقليدي بالإضافة
الطريقة التالتة التي تعتبر هي أكثر الطرق استخداما
طريقة الـDensity Gradient Centrifugation يعني
الفصل باستخدام الكثافة المختلفة أو طبقة الكثافية
المختلفة طبعاهذه التقنية هي تقنية مهمة جدًا لتختار
عدد كبير أو عدد كبير من مطايل السبرماتوزوة في حالة
عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد
عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد عدد
ع
العينات التي تُصنف على أنها Oligospermia أو
Teratospermia أو Asinodyspermia طبعاً، in this
method, good quality sperm can be separated from
dead sperm أمر طبيعي، from leukocyte، from other
compounds of the seminal plasma by density
discontinuous gradient ماهي المقصود فيه؟ ال
density discontinuous gradient يعني كثافة متدرجة
غير متصلةمن حيث الكثافة ما بقول كل لنبوبة 90%
كثافتها هنحكي عنها إشي عن كثافة متدرجة أو كثافة
غير متواصلة فكرتها إنه أنا بفصل ال good sperm من
حيث ال quality عن ال other spermatozoa عن ال bad
quality sperm عن ال dead sperm عن ال ecocide عن ال
depress عن ال other material فكيف أنا بدي أشتغلها
ببساطة جدا ببساطة جدا بجيب test tube بضيف فيها
عندي two type of media نفس ال mediaولكن with
different concentrations كدا بسميها two types of
media من حيث ال density وليس من حيث النوع two
types of media according to density not according
to composition فنفرض إن ال media الأولى تركيزة 40
و ال media الأولى كثافتها 40 و ال media التانية
كثافتها 80 فباخد ببساطة جدا بجيب ال test tube بضيف
عليهاtop layer 40% يعني بمعنى أخر بجيب ال media
اللي كثافتها 80% و أضيف واحد منه بعدين كده بجيب ال
media اللي كثافتها 40% و أضيف واحد منه آخر بشرط أن
الإضافة تكون بشكل مائل عشان مايصير strong mix
between two type of media فهتكون ال layer السفلة
لها علاقة بال media اللي كثافتها 80% بينما ال
layer العلوية لها علاقة بال media اللي كثافتها 40%
بعدين بجيب 2ml .. طبعا خدوا بالكوا النسبة لازم
تكون 1 إلى 1 حطت 1ml من ال media الأولى هتكون 1ml
من ال media التانية و 1ml من ال seminal fluid أو
العينة حطت 2ml 80% و 2ml 40% بعدين ضفت العينة و
قلت هتكون 2ml من عينة ال semen ما بعمل mix؟وعملية
الإضافة بتكون بشكل very slowly على الجدار الداخل
للأنبوبة عشان مايصيرش mix بين الطبقات الداخلية من
الأسفل لأعلى media 8% و2% و140% ورقم 3 seminal
flow بعمله centrifugation على 300xg لمدة 20 minute
بطلّع الأنبوبة بكل بساطة و بدون استأجال عشان
ماعملش mix حلاجة في عندي انقسام separatingمن
الأعلى للأسفل سيكون في الأعلى الـ Seminal Fluid
يليه بالـ sperm, other debris, bacteria,
dipethylamin, immature, non mature, spermatozoa,
pellet, other target يعني سيكون عندي فقط طبقتين
الطبقة العلوية هي الـ Seminal Fluid بكل ما ذكرنا و
الطبقة السفلية هي ال pellet اللي فيها ال target
بأخد
كل الطبقة العلويةبدون أعمل أي touch لل ballot و
برميها بعملها discard we don't need it بعد كده
transfer the spare ballot to the new tube and then
add 5ml of your spare wash في ناس بتاخد ال ballot
لتسة تيوب جديدة و في ناس أصلا بتضيف على ال ballot
مباشرة و بتعملها mixing من pure media و pure wash
media خمسة ميل بضيفه على ال ballot بعمله
resuspensioncentrifugation لمدة 10 دقائق على 500
XG بعمل remove all the pure sperm washing except
the last one mil بمعنى أخر بعد ما أضفت الخمسة mil
وعملت centrifugation لمدة عشر دقائق باخد ال test
tube برفع أربع mil من الخمسة mil برميهم و بخل أخر
واحد mil اللي فيه spermatozoa اللي أنا بديها اللي
سميتها target spermatozoa ممكن أخد منها عشرة micro
و أعمل evaluation للعينة و أشوف كميةالـ sperm من
حيث ال concentration وقداش كمية ال sperm من حيث
motility as percentage طبعا هذه شكل ال conical
test tube أنا أضفت ال layer الأولى 2 mil وليكن من
الميدة التركيزة أو كثفتها 80 بعض الأحيان 90 وطبقة
تانية 2 mil من الميدة اللي كثفتها 40وبعض الأحيان
طبعا 45 فهو بنادأ بناء على شركة على شركة في شركة
بتعمل 80 اربعين وفي شركة بتعمل 90 اربعين و45
اربعين وكذا بعد انضفت اتنين ميل من العينة ادخلتهم
ال centrifugation بعد انتهاء ال centrifugation
اللي جات فيه عند كل السيمون الفلويد في الأعلى بما
يحتوي من material unwantedوالـ Target ماتيريا
الموجودة في الـ Sediment بتخلص من الـ Supernatant
وبضيف عليها خمسة مل من Pure Washing Solution
بعملها Mixing و Centrifugation بعد كده بتخلص من
أربع مل وبترك الواحد مل كما هو و هو اللي فيه
Target إذا الواحد مل الأخير هو اللي فيه Target
Spermatozoa with high quality باخد منها عشرة micro
بعملها evaluation assessment عشان يشوف كدهش ال
total countكداش ال concentration، كداش ال
motility، كداش ال progressiveotype، و كده بتكون
العين جاهزة لل exit سنستكفي بهذا القدر ان شاء الله
على أمل أن نلتقي في محاضرات مستقبلية تم تم في حفظ
الوريعات