أنا هأبدأ تزوير وهنبدأ محاضرة إحنا
إن شاء الله ما عملنا طبعاً معمل الـ Laser المعمل
sorry المصال والمنعة هجيت هأعطيكم الـ Outline الليلة
إن شاء الله واضح
الشاشة عندكم أهو واضح
واضح طيب ثم هجيت عندي علم المناعة والأفضل، طبعًا
هم عارفين لأن هو العلم اللي بيهتم في دراسة
الأنسجينات والأشياء المضادة لها واتفاقرات ما
بينهم طبعًا إحنا هندرس التقنيات الخاصة في علم
الأفضل والمناعة إيش الكتاب ممكن نعتمده إحنا؟ طبعًا
هنعمل إن شاء الله الكورسات خلال الـPowerPoint
وهندرس الـPowerPoint فجبنا دي كتابين، أنا أعتقدهم
كتابين كثير مهمين اللي هو «Practical Immunology»
الطبعة الرابعة لـ «Frank» وعندي الـ Multi-Practical
Manual Precision طبعًا هذا يتطور فيه الـ Manual من
الـ Odisha طبعًا علم المناعة زي ما حكينا إحنا هندرس
التطبيقات المعملية والمخبرية في مجال المناعة
السريرية والمصال وتقييم أجهزة المناعة إحنا طبعًا
هنعطيكم جزء عملي وجزء نظري إن شاء الله هتفتحوا مع
الدكتور أحمد طبعًا إحنا إن شاء الله هنحاول نغطي
جوانب العملية في المعمل هذا طبعًا إيش المعامل؟ يعني
زي ما حكيت أكرر هو تقريبًا 14 معمل لكن إحنا طبعًا في
معامل يعني نركز عليها في الشغل العملي وفي معمل جرد
نظري هتكون هنا أول معمل الشغل اللي هناخده اليوم
هو بالعن الـ Agglutination Reactions التفاعلات الـ
Agglutination هناخد تطبيق عليه المعمل الثاني،
يعني عند هذول اثنين يتظبر معمل واحد اللي هو هناخد
له معمل الـ Rheumatoid Factor و CRP، C-Reactive Protein
المعمل الثالث هناخد على الـ Anti-ASO اللي هو Anti
-Streptolysin O طبعًا المعمل الرابع هناخد على
الـ Fibrinogen Test المعمل الخامس الـ Torch اللي هو
طبعًا عبارة عن Toxoplasma عبارة عن Rubella عبارة
عن Cytomegalovirus والـ Herpes عبارة عن مجموعة من
الفيروسات والبكتيريا اللي بتعمل الإجهاض عند
النساء الحوامل ندرسها، ندرس المسببات وندرس كيف
نجري الفحص بأنفسنا المعمل السابع هيكون الـReaction
تقن جديد لعملية الـPrecipitation عندي المعمل
الثامن لابل الـImmunoassay المعمل التاسع
الـImmunochromatography المعمل العاشر هنتكلم عن
الـHepatitis Markers وعن الـHIV هنتكلم عن
الـAutoimmunity والـImmunofluorescence تقنية هنأخذ
الـBattered من الـfluorescence طبعًا آخر ثلاث معامل
أو آخر معملين هدول عبارة عن نظرية أكثر من عملي
هنشتغل نظرية، ممكن نشتغل واحدة بعد شهر تعملي اللي
هي Complement
fixation Complement Fixation و الـ Flowcytometry
و الـ other techniques بالنسبة للصوت الشريف، إحنا
عم نسجل مع المحاضرة إن شاء الله هنزلها مسجلة،
هتسمعوها كويس
طب إحنا هنروح إن شاء الله على بداية المعمل الأول
هأكون .. هأكون اللي فرع ال .. ال .. ال
Agglutination إن شاء الله فهنا هناخد المعمل الأول
طب
الكل معي حاليًا
Hello أهو معاد بيقول
ما الوصفة اللي عندك وصفة اللي عند ال net لأ موجود
موجود خلاص تمام تمام شايفين
المعمل الأول كل شايفه؟ ‏- أه ‏- أنت جينا نبدأ ال
reaction إحنا طبعًا حكينا معاهم الأول عبارة عن
Agglutination طبعًا إحنا الـ immune system نعرف هو
عبارة عن Biological system طبعًا بيهتم بدراسة
الميكروبات طبعًا والحماية ضد الميكروبات، تمام؟ إحنا
نعرف الـ immune system ليتم حماية الجسم يعني جهاز
المناعة عم يحمي الجسم عن عدة طرق طبعًا إحنا بنعرف
إنه الطرق الحماية كثيرة كثير معناها أو هتبرع
فبالنظر الـ Calcium تنتهي طرق الحماية باستخدام
أجسام مضادة لدى العوامل اللي نحكي الغريبة عن الجسم
زي الفيروسات، زي البراسيت، زي الميكتيريا هذه طبعًا
بالنهاية بتستخدم لدى الأجسام المضادة إيش تعريف
الاندجينات؟ أكيد مرة معكم بتعرفي إن الـAntigen هي
أي مادة قادرة على استحداث جهاز المناعة على إنتاج
أجسام مضادة، يعني مثلًا عنصر A لو حقناه في جسم وكان
عنصر B تم تكوين أجسام مضادة له Anti-A فهو يُعتبر
Antigen، إذًا الـAntigen any substance that are
capable طبعًا أركيب الـH under appropriate
conditions of inducing the formation of antibody
and reacting specifically with antibody يعني بتخلي
الجسم ينتج أجسام ضده خاصة له يعني A مينتج ضده H،
Anti-A، B، Anti-B الـGet Anti-A متفاهميش غير مع A،
مابتفاهم مع B، لأنه specifically خاص له، تمام؟
طبعًا هذه الأنتجينات، these antigens مليكلوز may
have several antigenic determinations called
Epitopes يكون على سطحها طبعًا المركبات، هذه
المركبات اللي بيسموها Epitopes هذه Epitopes هي
القادرة على حد الجسم على إنتاج أجسام مضادة، تمام؟
ممكن الأنتجين واحد يكون على سطحه عدة Epitopes،
Multi Epitopes وممكن يكون واحد بقى، حسب، ممكن يكون
single antigen may be bind مع عدة antibody، يعني
مثلًا الأنديجين مثلًا نحكي بي على سطحه ABC هذا
الأنديجين على سطحه ABC قادر على يعمل… يخلّي الجسم
يعمل Anti-A، Anti-B، Anti-C، تمام؟ في الحالة هذه،
هذا الأنديجين فيه Several Epitopes على سطحه طيب،
إيش ال… نحكي طبيعة الأنديجين أو إيش طبيعة
الأنديجينات ممكن تكون؟ ممكن تكون البروتينات ممكن
يكون Polysaccharides ممكن يكون Nucleic acid ممكن
يكون Lipids ممكن يكون combined يعني بروتين مع
Polysaccharides أو بروتين مع سكر أو بروتين مع
Lipids طبعًا ممكن يكون combined طبعًا أقوى الأجيينات
هي عبارة عن البروتينات أكثر شيء the vast
majority of immunogenes are proteins طبعًا دي أغلب
مدى التخدعات إيه؟ لأ طبعًا البروتينات بتيجي مركبة
بتيجي Glycoproteins بتيجي Lipoproteins طبعًا هذه
مركبة بين مثلًا الـ «ليبوبروتين» «Lipids» مع
«بروتين» «Glycoprotein» «Lipids» مع «سكر» طبعًا
الـ «Polysaccharides» طبعًا يعتبر ضعيف شوية في
تكوين الأجيينات طبعًا pure polysaccharides الـ
«ليبوبروت» والـ «Polysaccharides» are good
immunogenic الـ «Nucleic acid» تتور، sorry الـ
«Polysaccharides» تتور مجيدًا الـ «Nucleic acid»
تعتبر fully immunogenic إن هي خالي جنة بتعمل
طبعًا تحرير الجسم وعندي الـ «Lipids» غالبًا ما تكونش
أردوجينات بيكون هابتين، إيش الهابتين؟ الهابتين
عبارة عن مادة تدخل الجسم غير قادرة على استحداد أو
يجعل الجسم يحث الجسم على إنتاج أجسام مضادة، لكن هذه
المادة من ترتبط مع مركب ثاني، تصبح أردوجينيعني
نعتبرها في البداية Incomplete Antigen مجرد إرتباط
مع مركب ثاني صارت Antigen في الحالة إيش بيصير؟
قادرة على جهة الجسم يرتبط بجهة الجسم إنه يحثوا على
تكوين أجسام مضادة، تمام؟
طب إيش الأجسام المضادة؟ الأجسام المضادة هي أطبعًا
اسمها إشارة عن إيه؟ إشارة عن البروتين طبعًا إيش
نوع البروتين؟ طبعًا نحن نعرف الـGamma Globulin
Gamma Globulin طبعًا الأجسام المضادة عن البروتين
يتم إفرازه بوسط الجسم في حالة مناعية طبعًا ينتج منه
خلايا يسمونها الـB-Lymphocyte الـB-Lymphocyte، ده
هنعرف المناعة في الجسم يكون Humoral أو يكون
Cellular Cellular هي خلايا، نحكي مناعة خلوية بتتم
ع طريق الخلايا B-Lymphocyte و الـ Humoral اللي هي
الـ «تبت شف هي أنساق الأجسام المضادة» اللي يتبع
الطريق على طريق الـ B-Lymphocyte طيب، إيش أنواع
الأجسام المضادة؟ عدة أنواع، اللي هي مجموعة كلمة
ماجد اللي هي IgG وهي أكثر انتشار، 70% تقريبًا وهي
تنتج في حالة الـSecond Response يعني لو الإنسان
اتعرض لمرض معين أول ما ينتج، ينتج الـIgM، First
Response، بعد ذلك المرة الثانية ينتج الـ IgG بشكل
أسرع وأقوى فعند الـ IgA وبيسموه طبعًا الـ
Secretions Immunoglobulins يفرز بالثوائر والفرزات
عند الـ IgE يفرز الحالات الحساسية الـ Allergy
والبراسيط Infection وعند الـ IgD آخر شيء اللي هو
طبعًا موجود على سطح الخلايا Surface of B cells
طبعاً دورها مش كثير بس لبطء أكثر شيء بالـ
Hypersensibility
هي الأجسام المضادة عندها تسمين الـ IgG
هي الـ IgE هي الـ IgD الـ IgA والـ IgM فلاحظوا أن
الأجسام المضادة تتكون من Long Chain و Light Chain و
Heavy Chain Light Chain اللي جاي من العظام و Heavy
Chain اللي طويلة يعني طبعاً هذا الـ IgG، الـ IgE،
الـ IgD نفس الشيء يتكون من Two Light Chain و Two
Heavy Chain الـ IgM بتكون من مركبين أو من اثنين
اثنين زي وحدات الـ IGD بتكون من أربع Light Chain
و أربع Heavy Chain طبعاً مرتبطين مع بعض بـ .. طبعاً
الـ Joining .. تسموها طبعاً Joining Chains طبعاً
يفرض للـ Security والـ IGA بتكون من خمسة، بين
تمارين طب إيش الـ Nature of Antibody Reaction؟ إيش طبيعة التفاعلات؟ هم هدول اللي زي
الـ IGM هم هدول اللي .. إيش يا معاذ؟ حمزة رجع
الصورة اللي قبل تمام الأطراف
اللي هي Epitope مثلاً الـ IGM هدولة ليها Epitope
صحيح هذه الأطراف هي برة Epitope وهي برة تفاعلات
الأجسام المضادة مع الـ Antigen طبعاً هذي بيسموها فيها
تسمية الـFC الفاب والـFC الـFragment
Crystallization والفاب اللي هي الـFragment Antigen
Antibody Reaction هذه هي اللي بيقول الفاب اللي هي
عبارة عن Antigen Antibody Reaction هي الطرف هذا
الـEpitopes هي موجودة على سطح الخلايا الأنتيجينات
على أنتيجين فالـ Epitopes تتفاعل مع الـ FAB اللي
موجود هنا الـ FAB اللي هي الـ Fragment Antibody
Binding موجود هنا وتحت يسمونه FC الـ Fragment
Crystallization هذه غالباً ممكن ترتبط على سطح خلية
حمراء أو تتركن على سطح أو سطح خلية معينة طبعاً لها
دور برتبط بس مش مع الأنتيجينات مع الخلايا الحمراء
بالكامل، تمام؟ فإحنا المنطقة هاي العلوية شايفين اللي
ملونها؟ هي عبارة عن الـFAB وهي اللي تتودي لارتباط
الـFAB مع الـEpitopes الموجودة على سطح الـAntigen
طيب،
هل يجت لو صار عندي التفاعل بين الـAntigen
والـAntibody؟ التفاعل بين الـAntigen والـAntibody
له خصائص معينة هذه الخصائص طبعاً specific يعني
خصائص خاصة جداً بين الـAntigen والـAntibody أول
شيء مفهوم الـKey والـLock أحنا نعرف كل جثة اللي
مفتاح خاص فيه، صح ولا لأ؟ هل يجت؟ التفاعل ما بين
الانتيجن مضادة والأنتيجن نفس الحكاية الـCombining
site of antibody is located in the FAB الحكي لكم
عليه، الـFAB region، يرتبط مع الـepitopes
الموجودة على سطح الانتيجينات هذه تعتبر specific،
يعني بتلاقي مثلاً أنه تجيبينها لأشكال أنه مثلاً الـ
Gene خاصة بس قلت بتليها يعني مثلاً ال Gene
Salmonella هيقوم بتلي مع أنتي بودي ضد الـ Salmonella
ومع أنتي بودي ضد Epitope معين فإذن أول خاصية أن
التفاعل عندي يبقى عن Lock and Key Concepts الخاصية
الثانية بتفاعل الـGene مع الانتي بودي Non-covalent
Bond إيش هالـ Non-covalent Bond؟ يعني مش مرتبط
برواية سهمية وبالتالي، وبالتالي، هيكون عيش عبارة عن
"reversible"، الخاصية الثالثة يعني كيف؟ أكيد لو
طلعت رابطة السهمية، عبارة عن رابط السهمية عبارة عن
رابطة في حياتها ذات كربون وهي قوية جداً وصعب جداً
تفكك، لكنها لأ، برضه مثل رابطة تانية، زي رابطة
هيدروجينية أو رابطة أضعف شوية، أضعف وبالتالي، فهو
مرتبط برابط هيدروجينية أو مرتبط برابط بيقول له
Electrostatic Bonds أو الـ Van der Waals Forces
كلها هي بـHydrophobic Bonds وتتسب لضعيفها،
بتتكسر بسرعة، عشان يكون تسبب الخاصية الثالثة
الـReverse، بالكيد يعني، يعني لو صحيح أنتي تفاعل
أدجي نقطة بطيئة، أنا ممكن أعكس التفاعل أتكهم من بعض
طيب، إيش يعني الـ Affinity و الـ Avidity؟ الـ
Affinity هي قوة الارتباط أو قوة التفاعل بين الـ
Antigen و Single Antigenic Determinant و Single Combining Site
of the Antibody كمان مرة، الـ Affinity Antibody
Affinity is the strength of the reaction between
single antigenic determinant and a single
combining site of the antibody، تمام؟ طب الـ
Avidity، الـ Avidity عبارة عن قياس كامل، يعني أجيز
لـأنتيجين فيه على سطحه three Epitopes A وB وC أجيز
الـ Affinity بقييس قوة ارتباط الـA مع الـAnti-A أو
قوة ارتباط الـB مع الـAnti-B أو قوة ارتباط الـC مع
الـAnti-C أجيز الـAffinity لأ، بقييس overall
Reaction بقييس قوة ارتباط هم كلهم مع الـAntigen
فالـAvidity is the measure of the overall
strength of binding of the antigen with many
antigenic determinants and multivalent antibodies تمام؟
هذه تعريف من الـ Affinity و الـ Avidity لاحظوا
أندي هان مثلاً، هان عبارة عن الـ light chain اللي
حالها أو جزء من الـ light chain و جزء من الـ
sphere فعندي و Single Determinant، إرتباط واحد فعندي
هان تبقى قوة إرتباط واحد وواحدة، لاحظوا عندي هان،
عندي هان دكتور، عندي Slide الجميل بس الـ Affinity
و الـ Avidity؟ آه، الـ Affinity شايفينها؟ الـ
Affinity كمان مرة فينت هي عبارة عن قوة ارتباط بين
single antigenic determinant يعني مع واحدة
Epitope and a single combining site مع واحدة ASK يعني
واحدة قبل واحدة بس بقص قوة ارتباطها فينما الـ
Avidity نحكي المجموع الكلي للإرتباط The overall
strength of binding of the antigen with many
antigenic determinants on multi-valent antibodies
يعني قوة الارتباط الكلي، هنا بتوضحلي أكثر، لاحظوا
عندي هنا، مثلاً هنا الصالين هنا Monovalent Affinity
وهنا Avidity، ليش Avidity؟ هانا أخذ المجموع
كامل، هانا أخذ القوة واحدة بس أخد قوة ارتباط واحد،
واحد، هنا أخدلي اثنين بقى، مع أن في الديانة اثنين،
أخدلي اثنين، هنا أخدلي إيه؟ أخدلي واحد، اثنين،
ثلاثة، أربعة، خمسة من المرتبطين، أخذنا خمسة من
المرتبطين، فأعطبي هنا Multivalent Avidity، تمام؟
إيش الـSpecificity؟ من خلال الـActivity
و Sensitivity، الـSpecificity تعريفها بـ Ability of
an individual antibody combining site to react
with only one antigenic اللي هي زي ما نحن بحكي أن
هذا يعني أجسام مثلاً الـ Anti-A يرتبط ليه بس مع
الـA، يرتبط ليه مش مع الـB ولا الـC، هذا سماه
Specificity، تمام؟ لو ارتبط مع الـB أو الـC، صار
Non-specific Reaction فأنا ارتبط على التفاعلات الـ
Antigen and Body الـ Specific، تمام؟ I get Cross
-reactivity، Cross-reactivity، the ability of
antibody combining site to react with more
than one antigen، يعني أنت إيه، ارتبطلي مع إيه،
لكن واحد ارتبطلي معه بـيه، من الاثنين اللي معه بـيه
صار Cross-reactive، إنه ما ارتبطليش مع الـ
Specific تبعه، بل ارتبطلي مع واحد ثاني، يسموه
Cross-reactivity، طب الـ Sensitivity عادةً هي قدرة
جسم البرنامج للحصول على Antigen حتى لو كان مخفف في
الـ Dilution، يعني إن الـSensitivity، أنا مثلاً عندي
Antigen موجود في، موجود، كدهش بقدر أنا أكشفها
للـ Antigen حتى لو كان مخفف في الـDilution، هذا يعتبر
الـSensitivity، والمعيلية الـSensitivity هو المكان
الفحص أقوى في الـDetection للـAntigen، والمكان أحسن
لنا كمختبرات، كيف يعني؟ أنا عندي مكان جهازين، جهاز
Sensitivity له أعلى من جهاز ثاني لأ بدور على اللي
Sensitivity أعلى لأنه هذا هيكتشفلي الـAntigens حتى
في العينات اللي فيها الـAntigen المخططية فهمنا كيف؟
تمام يا حمزة؟ تمام، تمام، بس معاذ؟ بس الله تمام،
تمام طبعاً شريف سمعنا كويس، أه؟
أنا مش شايف لا شريف ولا أكرم ولا عبادة على كل حال،
كمان مرة، أعيد لكم كمان مرة الـGate Specificity، زي
ما حكيناه اللي هي Ability of an individual
antibody combining sites to react with one
antigenic site، يعني A ضد Anti-A، بس الـCrossing
Activity، عندك الـAnti-A بتفعلي مع A وB، تمام؟
الـSensitivity، Cross Reactivity with respect to
ability of individual antibodies to locate even if
it is greater than one يعني إنه أنا بقدر أعمل
تفاعل حتى في حال إنه كان إيه؟ كان شو اسمه؟
خلاص تمام، شريف بعدي، بيحكي إن أنا بأحاضر، أنا
مسجد، إن شاء الله خير، تمام، إن شاء الله، طيب
عرفت أيش العوامل، أيش العوامل بتأثيرها على
التفاعلات الـ Antigen-Antibody؟ طبعا احنا زي ما
حكينا الـ Antigen Antibody Reaction طبعا هي تقريبا
زي ما حكينا فيها لخصائص معينة عرفت الـ Affinity
بتحكيلك، بهير الـ Affinity of the Antibody for the
Antigen، the more stable will be the interaction
كل ما زادت الـ Affinity، كل ما زادت ثبات التفاعل،
طبعا وبالتالي، this is في الواقع اللي يمكن تفحص
الانتيجين هو الـ Enhanced يعني تقدر تفحص على
الانتيجين أكثر، فكل ما زادت قوة تفحص الانتيجين
الـ ability، reaction between multi-valent antigen
وmulti-valent antibody are more stable and thus
easier to detect برضه كل ما زادت الـ ability كل ما كان
برضه أحسن في عملية detection للتفاعلات الـ Antigen
Antibody Ratio نسبة الانتيجين والانتيبودي الانتيجين
كتير أو زادت نسبة الانتيجين كثيرا بأثر عليها وكثرت
بتأريجها ولازم تكون نسبة معقولة فالـ Ratio بين
الانتيجين والانتيبودي الانتيجين انتيجين انتيجين انتيجين
انتيجين انتيجين انتيجين انتيجين انتيجين انتيجين
انتيجين
الـ Physical Form of the Antigen، طبيعة الـ
Antigen لو كانت مثلا دائبة في المحلول soluble و
لو كانت غير دائبة فمثلا لو كانت دائبة في المحلول
soluble هي تستخدم تفاعلات بيسموها precipitation
لو كانت مثلا مش دائبة ممكن تستخدم agglutination
فـPhysical form of the antigen إلها دورة طيب، إيش
التفاعلات اللي بيصير معنا؟ عندي precipitation
reaction، عندي agglutination reaction، طبعا هذه
التفاعلات أو نحكي طريقة الكشف عن الantigen، عندي
complement fixation، عندي الـELISA وعندي
الـImmunofluorescence
حسنًا، دعونا نعود إلى أساسي الـ Agglutination الـ
Agglutination اسمها Agglutination of Clumping of
Particles يعني أن A وB ملابساتهم مع بعض هم يسمونها
Clumping هذا عبارة عن Agglutination الـ
Agglutination يتلقى إذا كان الأنتيجين مزدوج من جسمه
أنتباطية اسمه Isoagglutination يعني مرتبط مع
أنتباطيته يسمونه Isoagglutination تمام؟ This term
is commonly used for blood groupings احنا طبعا
نسميها blood groupings لأنه أنا في استخدام الـ
agglutination في الفحص عن نوع الدم احنا اخذنا في
المعمل المقدمة كيف نعمل نوع الدم اخذنا طبعا NPA و
اخذنا one drop من blood أحدهم طبعا و عملنا على ال
slide وشوفنا ال agglutination فبالحالة هايلو حصلت
أجلوتينيشن يعني reaction positive لو حصلت بشكل
أجلوتينيشن reaction negative، تمام؟
طيب،
احنا عشان الـTiming تبعنا تقريبا عشان المعمل بتوقف
شوية صغير على الـGate لأنه احنا هلأ طبعا نسخة
مجربة من الـZoom
و بعدين ان شاء الله احنا بروحكك هوقف شوية تمام؟
تمام شوية و برجع ال meeting اذا ضايق الدقيقة
النتيجة على اراد ال meeting يكون نص ساعة لازم تعمل
تجديد و بعدين بوقفها و بعدين برجع ال meeting هنوقف
هن يعني؟ اه اه هوقف شوية دي كتير و بعدين برجعكم
ماشي؟ ببقى مش في خصوص المادة هتنزلنا اياها ولا
كده؟ اه هنزلنا اياها ان شاء الله طب ناخد أقل
البنانات ولا الـKF؟ ناخد أقل البنانات؟ شوية، شوية،
بس خليني عشان ماديش أحصار الـ… الـ… الـ… الـ… الـ…
الـ… الـ… الـ… الـ… الـ… الـ… الـ… الـ… الـ… الـ…
الـ… الـ…