بسم الله الرحمن الرحيم راح نبدأ مع بعض بإذن الله
في الجزئية الثانية من المادة اللي هي تتعلق بالـ
Leukemia بأنواعها وتصنيفها نواصل مع بعض في أنواع
الـ Acute Leukemia طبعا حكينا قبل هيك عن الـ Acute
Lymphoid Leukemia حكينا عن الـ classification لها
كاف الـ 1 و الـ 2 و الـ 3 الـ Acute Myeloid
Leukemia بتقسم على حسب الـ bone marrow blast
morphology حسب الـ predominant cell الموجودة في
الـ bone marrow الـ morphology اللي قيلها ال
degree of cell maturation حسب عند أي stage وقفت
الخلية cytochemical stains الـ immunophenotyping
ممكن أسميها Acute Granulocytic Leukemia بس المشهور
أكثر Acute Myeloid Leukemia طبعاً هي بتاخد تقسيمات
زي ما حكينا من M0 إلى M7 نيجي لتفاصيل الـ Acute
Myeloid Leukemia اللي هي Acute Non-Lymphoblastic
Leukemia أول حاجة هي زي ما قلنا من M0 إلى M7 هناخد
كل واحدة إيش خصائص الخلايا الموجودة فيها بدايةً نيجي
للـ M0 و M1 هدول الاثنتين يعني في تشابه بينهم عشان
هيك احنا بناخدهم من باب انه كيف نفرق بينهم أول شيء
الاثنتين هدول بلاقي فيهم Myeloblast لكن الـ M0
بتكون الـ Myeloblast Early Myeloblast الـ M1 Late
Myeloblast طب إيش بتفرق الـ Early Myeloblast عن
الـ Late Myeloblast الـ Early Myeloblast بلاقي الـ
Myelobroxidase إنزايم فيها موجود بكمية ضئيلة جداً
Ultra Structural لدرجة إنه بالـ Myelobroxidase
Stain العادية الـ Cytochemical Stain بعتنيش
Positive إذا الـ M0 Myelobroxidase Negative MbO
Stain Negative الـ M1 هي برضه Myeloblast لكن في
مرحلة متقدمة متطورة أكثر من اللي موجودة في الـ M0
هذه ممكن أشوف فيها بداية الـ Azorophilic granules
بشكل خفيف ممكن أشوف فيها الـ Myelobroxidase لو
عملته هذا هيعطيني Positive ممكن أشوف فيها الـ Auer rods
الـ Auer rods ما هي عبارة عن Azorophilic granules، صح؟
فبالتالي الفرق بينهم في Myelobroxidase هنا هتلاقي
أن Myelobroxidase مع الـ maturation هتزيد ال
activity بتاعتها بدايةً هذا هتكون كميته قليلة جداً
ويعطيني بالـ cytokinical stain العادية Negative
بأكدها بالـ immunophenotype الـ M1 AML without
maturation إيش أصدوا without maturation يعني بس
بشوف فيها Blast هدول الاثنتين بشوف فيهم بس Blast
AML without maturation يعني ما بشوف في المراحل
التالية زي الـ Promyelocyte و الـ Myelocyte and so
on إيش مميزات الخلية؟ Monomorphic with one or more
distinct nuclei بشوف فيها نيوكليولاي Blast cell
occasional Auer rods and at least a 3% Myeloperoxidase
positive يعني هذه ممكن أميزها أن هذه بأورود
والميولوبروكسداز يعني إذا نجد الـ Auer rods معنى الكلام
هي M1 إذا أعطتني الميولوبروكسداز Positive غالبا هي
M1
طيب نيجي لـ M2 M2 AML with maturation بشوف فيها
Blast خدوا بقى لكوا يا بنات بأكد هنا أنه احنا
بنحكي عن acute يعني في الـ bone marrow لازم الـ
blast يكون على الأقل 20% عشان أعتبرها Blast عشان
أعتبرها Acute طبعاً M2 AML with maturation يعني هنا
بلاقي Blast Cell بلاقي Myeloblast 50% أو أكثر
Myeloblast بلاقي Other Stages يعني هدول الاثنتين بس
Myeloblast لكن في هذه ممكن أشوف Promyelocyte ممكن
أشوف فيها أو الـ Auer rods ممكن أشوف فيها برضه يعني Other
Stages ممكن في بعض الحين أشوف Myeloblast وممكن
أشوف Myelocyte وممكن أشوف Metamyelocyte والمراحل
الـ Mature أكثر يعني إذا شفت فيه Maturation يعني
علامات الـ Maturation موجودة غالبا بتكون AML M2
Dysplastic myeloid differentiation may be
present يعني أحيانا بتبقى لاقي فيه Dysplasia يعني
الخلايا الـ Maturation بتاعها مش طبيعي صح فيه
Maturation لكن فيه Abnormality في الـ Maturation في
أشكال الخلايا طيب نيجي للـ M3 هذه مشهورة من إنها
Acute Myelocytic Leukemia الخلية الشائعة هنا اللي
هي الـ Promyelocyte with heavy Azorophilic
granulation بلاقي فيها كمية كبيرة جدا من الـ
Azorophilic granules والـ granules تبقى فيها كبيرة
وواضحة ممكن اللي ألاقي فيها Auer rods بكمية كبيرة
وملحوظة لدرجة إنها بتعمل Auer rods bundles حزم من
الـ Auer rods وهذه بتعمل Confirmation للـ
diagnosis في Variant منها ممكن ألاقي الـ granules
فيها Small وثمينتها قليلة يعني الـ M3 Variant لكن
الـ Common اللي هي الـ Promyelocyte with heavy
granulation هذه بيسميها M3 نيجي للـ M4 Acute
Myelomonocytic هذه زي الـ M2 يعني بلاقي فيها
Myeloid مع الـ Maturation، آه لكن بلاقي كمان أكثر
من 20% Promonocyte and Monocyte يعني مش .. لا
تقتصر على الـ Myeloid cells اللي هي الـ Myeloblast
و الـ Promyelocyte و الـ Myelocyte و الـ
Metamyelocyte، لأ بلاقي فيها Other بلاقي فيها
Stages أخرى من الـ Monocytic Maturation عشان هي
قسمها Myelomonocytic يعني بلاقي فيها Myeloid
cells و بلاقي فيها Monocytic cells الـ M5 بتتميز
بإنها Monocytic طبعاً في منها two variant M5A
بلاقي 80% منها Monoblast is poorly differentiated
M5B بلاقي فيها 80% Monoblast Promonocyte or
Monocyte is well differentiated يعني بفرقوا عن بعض
إنه هذي بس بلاقي فيها Monoblast لكن الـ M5B بلاقي
فيها Other Maturation stage من الـ Monocytic
series بلاقي Monoblast, Promonocyte وممكن ألاقي
Monocyte الـ M6 Acute Erythrocytic Leukemia طبعا
بلاقي تقريبا أكثر من 50% من الـ Nucleated cells
with Multinucleated form and Cytoplasmic bridging
هنا بلاقي أن الخلية نفسها Dysplastic يعني شكلها مش
طبيعي بذر شاب شكلها مش منتظم بلاقي فيها Nucleus
أحيانا عاملة Multi-nucleation بلاقي الـ Cytoplasm
عامل بعض الـ Abnormalities الـ Myeloblast ممكن أشوف
فيها Myeloblast فوق الـ 30% إذن هذه الخلايا اللي
قلنا عنها Dysplastic Nucleated Red Cells أصلها
Erythroid عشان هي أصلها اسمها Acute Erythrocytic
Leukemia الـ M7 Megakaryoblastic Anemia هذه عادة
بلاقي Heterogeneous Blast Population with
Cytoplasmic Clefts اللي هي بتاعة الـ Megakaryoblast
الخلية Megakaryoblast تتميز بأنها خلية كبيرة فيها
نتوءات طالعة من الـ Cytoplasm على شكل حبيبات زي
الزوائد يعني طبعاً هذه بتعطيني Platelet Peroxidase
Positive هذه Acute Megakaryocytic Leukemia طيب
نيجي عليهم يعني من ناحية Morphology نشوفهم أول
حاجة الـ M1 الـ M1 زي ما قلت لكم Myeloblast without
Maturation يعني بشوف في الـ Blood Film بس
Myeloblast وهذا الـ Film لو أنا شفته في بعض الأحيان
ممكن أقول M0 أو M1 طب إيش اللي بيخليني أقول M0 أو
M1؟ وجود الـ Auer rods هنا بيقول إنها M1 مش M0 لو مش
موجود الـ Auer rods لازمني أعمل Myeloperoxidase إذا
طلعت Positive غالبا بتكون M1 إذا طلعت Negative
بتكون M0 The Bomber هلاقي فيه أكثر من 90% Blast
and less than 10% Promyelocyte يعني الـ Most Common
اللي هي المشكلة بتحصل في الكبار أكثر منها في الأصغر
سناً هاي الـ Auer rods واضح في الخلايا شايفينه هذه
العصية الصغيرة طيب
نيجي للـ AML M2
myeloplastic with maturation قلنا هذه بلاقي فيها
myeloblast myelocyte myelocyte myelocyte myelocyte
myelocyte myelocyte myelocyte myelocyte myelocyte
myelocyte myelocyte
فيها كروموسوم الـ Translocation ما بين ثمانية و واحد
و عشرين كروموسوم ثمانية و كروموسوم واحد و عشرين زي ما
أنتم شايفين فينا Blast Cells تمام و فينا mature
neutrophil Hypogranulated Polymorphonuclear
Leukocytes يعني فيها Hypogranulation فهذه من
علامات الـ Dysplastic Maturation
This occurs in older adults برضه بتفصل في الكبار
أكثر منها في الصغار طيب
نيجي لـ M3، M3 قلنا فيها هي اللي فيها الـ
hypergranular والـ hypogranular، الـ hypergranular
برومييلوسيتك سلز طبعا هي بتتميز بوجود
البرومييلوسيت، بلاقي البون مارو في أكثر من 30%
بلازما، تعتبر من الأنواع الـ virulent ليش؟ لأنه لما
بياخد المريض العلاج بتبقى الخلايا تحت اللوكيميا
هذه الـ helibroma helicid يصير الـ helices أو
يصيرها destruction، الخلايا هذه فيها حبيبات
الحبيبات هذه فيها مواد بتعمل coagulation and بتبعوا
fibrinolysis، يعني بتشجع عملية الـ coagulation and
fibrinolysis، وطبعا هذه تؤدي يعني بتنشط الـ
coagulation والـ fibrinolysis، هذا بيؤدي لإيش؟ لـ
disseminated intravascular coagulation، فعادة
بيتبعوا هذا bleeding، وبتكون الـ prognosis سيئة على
المريض، عادة بتحصل في عمر متوسط 39 سنة، بتتميز هذه بـ
Translocation 15 إلى 17 بـ chromosomal
translocation، هذه الخلايا الـ Promyelocyte فيها
أزوروفيليك جرانيول زي ما أنتم شايفين هيها، والـ
granules فيها كتير واضحة، طيب نيجي للنوع الثاني
اللي هو الـ Hypogranular Promyelocyte leukemia
بتتميز بوجود Promyelocyte بس الـ Promyelocyte هذه
hypogranular يعني الـ granules فيها قليلة وبتشكل
الـ blast فيها تلاقي أكثر من 30% في الـ bone marrow
نفس الشيء ممكن العلاج يتسبب بالـ DIC وفيها
translocation 15-17 chromosomal translocation، هاي
الخلايا Promyelocyte بس الـ granules عيطها fine، M4
AML M4، م4 زي ما حكينا هي acute myelomonocytic
leukemia، acute myelomonocytic يعني فيها myeloid
precursors و monocytic precursors، طبعا هذه الـ
precursors بشوفها سواء في الـ bone marrow أو في
الـ peripheral blood، دايما لما يكون في الـ leukemia
monocytic precursors، هذه الـ Monocytic Precursors
لها القدرة على إنها تعمل Infiltration في الـ body
تشوف في أماكن خارج Extra Medullary Sites، يعني ممكن
تعمل Infiltration في أماكن مختلفة من الجسم أكثر من
اللي هي الـ Granulocytic Types، تشوفين الـ
Monocytic Precursors موجودة هنا بشكل واضح
Monoblast، هدول Monoblast وهدول اللي فيهم fissure
Pro Monocytes، الـ M5 طبعا بتتميز بإنها acute
monocytic leukemia، أكثر من 80% من الـ non
-erythroid cells عبارة عن monocytic و monocytic
«مونوبلاستيك» «مونوبلاستيك» «مونوبلاستيك»
«مونوبلاستيك» «م
This form is further divided into تنقسم إلى
نوعين، M5A و M5B، M5A عبارة عن purely differentiated
leukemia، كيف يعني؟ هلاقي أكثر من 80% من الخلايا
monoblast، M5B والـ differentiated الـ 80% هدول
هتلاقي منهم monoblast، promonocyte، و monocyte، تمام؟
هنا M5A أعتقد يعني هذه لأن اللي موجودين بس Blast
اعتبرت M5A، ليش؟ عندي other stages من الـ Monocyte
التي رزقها هذه M5B، لأن موجود فيها Monoblast، موجود
فيها Promonocyte، عشان أحط المؤشر بس، موجود فيها
Monoblast، موجود فيها Promonocyte، hybromonocyte اللي
بتتميز بوجود single fissure في الخلية، موجود فيها
mature monocyte، علشان هيك بنعتبرها M5B، الـ M6
طبعا بيسميها Erythroleukemia لأن بتتميز بإن الـ
erythroblast بتلاقيها predominant في الـ bone
marrow، وزي ما قلت لكم الخلايا بتلاقيها dysplastic
يعني في abnormality في الـ maturation، الخلايا شوفوا
كيف إن هو يعني فيها segmentation، طبعا هذه حاجة
abnormal، طبعا إلها ثلاث مراحل من ناحية الـ
Morphology، المرحلة الأولى إني بلاقي Abnormal
Normoblast موجودة بكمية كبيرة، هذه المرحلة الأولى
المرحلة الثانية Erythroleukemia، هيصير زيادة في الـ
Erythroblast والـ Myeloblast، ممكن تتطور للمرحلة
الثالثة إنها تتحول لـ Myeloblastic Leukemia، تتصير
M1 أو M2 أو M4، تمام؟ هذه هي المراحل بتاعة الـ M6
طبعا شايفين فيها الأنيميا لأن هي أساسا بتضرب الـ
Erythroid precursors، شايفين كلها هذه Erythroid
precursors، الـ
M7، طبعا الـ M7 بتتميز بإنها acute megakaryoblastic
leukemia، عبارة عن rare disorder بتتميز بـ extensive
proliferation of megakaryoblast اللي هي موجود برضه a
typical megakaryocyte and thrombocytopenia، الخليط
الـ Megakaryoblast هذه هي بتتميز بأن الـ cytoplasm
بتاعها قليل وغامق كتير وفيه نتوءات أو بروزات على
شكل plebs موجودة حوالين الخلية يعني
جزئية الـ cytochemistry، الأصباف الأساسية اللي
بنستخدمها الـ Special Stains اللي بنستخدمها عشان
نميز بين أنواع اللوكيميا زي ما قلنا إن اللوكيميا
لازم أستخدم لها Special Stains عشان أتميز عند
الخلايا عن بعض لأن أحيانا كتير الـ Blast بيكون
صعب جدا أفصل يعني أفصلها، بيبقى تشابه كتير كتير
فيها خاصة في حالات اللوكيميا فبيكون من الصعوبة
بمكان أني أفصلها عن بعض عشان هيك أنا بستخدم
Special Stain أو اللي بسميه Cytochemistry
Cytochemistry لأن التفاعل الكيميائي بيصير في داخل
الخلية، طيب بداية بدي أفصل الـ AML عن الـ ALL أستخدم
الـ myeloperoxidase، أحنا عارفين إن الـ myeloid
والـ monocytic precursors، هأخدوا بالكم، الـ myeloid
والـ monocytic بتحتوي على الـ myeloperoxidase
فبالتالي هتعطيني positive بينما الـ lymphoid
هتعطيني negative، تمام؟ واللي بيعمل يعني واللي بيدعم
هذه الصبغة أو بيأكدها أو بيعمل لها confirmation
برضه هي إن تطلع معايا نتائج مش كتير واضحة بالـ
Myeloperoxidase أو يعني في شك فيها، ممكن أؤكد نتيجتي
بالـ Sudan Black، Sudan Black بيعطيني نفس نتائج
Myeloperoxidase، بيعطيني في الـ AML positive وفي الـ
ALL بيعطيني negative، تمام؟ إذا نرجع تاني
Myeloperoxidase تعطيني positive في الـ acute Myeloid
Leukemia يعني بالـ Myeloid Cell وبالـ Monocytic
Cell بينما في الـ Myeloperoxidase بتعطيني Negative طيب في
حالة الـ Myeloperoxidase بتعطيني فيها Negative في
الـ AML إيش هي قلناها اللي هي الـ M0 لأن لسه
الأنزيم بيكونش متكون لدرجة إنه يقدر يعطيني
Positive Reaction Visible أقدر أشوفه فبالتالي الـ
M0 هتعطيني AML Negative و ALL Negative هذه الملاحظة
مهمة الـ MPO روح تعطيني في التنتين negative طيب،
الآن احنا فصلنا إذا كانت مثلا acute myeloid والـ
acute lymphocytic leukemia طبعا، بس ما فصلنا الـ
myeloid عن الـ monocyte بنيجي بالـ non-specific
stress الـ non-specific stress بتفصل ليه؟الـ
Myeloid بتعطيني Negative Non-specific stress بينما
الـ Monocytic اللي هي فيها M4 و M5 فيها Monocytic
cells هتعطيكي Non-specific stress Positive تمام؟
إذن الـ Non-specific stress فصلي الـ Myeloid عن
الـ Monocytic الـ Monocytic بتعطيني Positive
الـ Myeloid في الـ Non-specific stress بتعطيني
بتعطيني Negative طيب بعد هيك بنيجي للـ BAS الـ BAS
الـ BAS عادة بتعطيني positive في الـ lymphoid الـ
common أن الـ BAS بتعطيني positive في الـ lymphoid
بالإضافة للـ M6 من الـ myeloid تعطيني يعني للـ
lymphoid precursor و للـ erythroid precursor
بتعطيني positive لـ M6 و لـ ALL طيب نيجي للـ acid
phosphatase الـ acid phosphatase عادة بيعطيني في
الـ AML negative وفي الـ ALL في الـ T cell acute
lymphocytic leukemia هيعطيكي positive اللي هو مين؟
الـ acid phosphatase إذا كنتوا فاكرين أكثر حاجة
استخدمناها للفصل أو تمييز الـ Hairy cell leukemia
الـ Hairy cell leukemia طيب acute lymphoblastic leukemia
reactivity with specialists تمام؟ هلاقيت الـ L1
تعطيني بالـ peroxidase أو Sudan black negative الـ
Non-specific stress نيجاتيف الـ BAS positive زي ما
قلنا الـ BAS بالمفايد بتعطيني positive الـ
L2 نفس الأشياء و L3 نفس الأشياء لكن هنا في
عندي exception بدنا ناخد بالنا منه يعني هو هنا الـ
peroxidase و Sudan black ماشي طبقنا عليهم هم بس
هنا في exception للـ Sudan black الـ L3 بتتميز
الخلايا بتاعتها إنها Vacuolated إذا كنتوا فاكرين
وقلنا إيش سبب الـ Vacuoles سبب الـ Vacuoles يعني
إنه فيه fat في قلب الخلية ولما أنا بحط الكحول للـ
fixation بتدوب الـ fat هذه وبتترك مكانها فجوات الـ
Sudan black صبغة مخصصة لصبغ الـ fat فبالتالي
أكيد هتعطيني positive مع الـ L3 ليش؟ لأن الخلية
فيها fat فبالتالي يعتبر الـ Sudan black هنا
exception لـ L1 و L3 لأنه يعطي معاها
positive تمام؟ exception الوحيد اللي هو Sudan
black positive في الـ L3 بأكتب عن نقطة هذه نيجي
للـ Immunophenotyping الـ Immunophenotyping
بيستخدم بشكل يعني أكثر وبشكل أساسي للتمييز بين
أنواع الـ B والـ T لمفوسايت والدرجة الـ Maturation
لها الـ A بالنسبة للخلايا أو الـ بتعتمد على
إيش؟ أن الخلايا خلال الـ Maturation لها بتتميز
عليها الـ CDs اللي هي الـ Clusters of
Differentiation طبعا هذه كل مرحلة من مراحل الـ
Maturation بتاع الخلية بتميز وجود CDs مختلفة عن
المرحلة اللي قبلها فمن خلال معرفتنا لنوع الـ CD
الموجود على سطح الخلية نقدر نعرف أي Stage من
الخلية وصلت لهالـ إيش؟ لأن الـ … يعني ممكن بتلاحظوا
في الـ … في الـ Lymphocytic Maturation مافيش عندي
هالـ Morphological Changes اللي ممكن ألاحظها زي
الـ Myeloid الـ Myeloid كنا نقدر نميز كثير الـ
Myeloblast عن الـ Promyelocyte عن الـ لكن الـ
Lymphocyte من Lymphoblast و Promyelocyte الـ
mature lymphocyte كثير في تقارب بالـ بالـ
Morphology لها فاحنا بدنا نلجأ لطريقة أخرى
للتمييز وطبعا طريقة دقيقة وبتحدد عندي في أي مرحلة
أو بتحدد عندي في أي مرحلة الخلية من الـ Maturation
الـ بتعتمد على أن أنا بدور على CD معين مثلا Body
Flow Labeled Antibody بـ Fluorescence إذا كان مرتبط
الخلية بهذا Labeled Antibody طبعا فيه Direct و
Indirect هحكيهم بالـ Slide اللي بعدها عشان في
رسمة بالتوضيح هحكيهم بالتفصيل لكن أنا بشكل أساسي
بدور على Marker معين بضيف له Antibody labelled ب
Fluorescence إذا ارتبط فيه، هيعطيني واميد الآن
بمرر الخلايا هذه على الـ Flow Cytometer فهيعد
الخلايا اللي هي labelled بالـ Fluorescence ويحدد
مين الخلايا الـ Positive لهذا الـ Marker ومين
الخلايا الـ Negative بالنسبة للـ Principle، هشرحها
في الـ Slide ده في عندي Direct أو Indirect Labeling
للـ Antigen يعني أنا بدي أتخيل عندي هذه الخلية
عليها يعني Marker معين أنا بدور عليه بشوف هل الـ
Marker هذا موجود ولا لأ بجيب له Antibody و بربطه
فيه في عندي طريقتين للشغل في طريقة Indirect اني
أنا مباشرة بجيب Antibody labelled بـ Fluorescence خاص
بهذا الـ Antigen و بربطه فيه طبعا إذا كان ارتبط
خلاص بعد هيك بعمل Washing عشان أغزل الـ Excess من
هذا الـ Antibody الزيادة من هذا الـ Antibody بدي
أغسلها عشان ما تعملش عندي خلال في القراءة فإيش
اللي بيضل عندي؟ هيضل عندي كل الخلايا المرتبطة بالـ
Antibody labelled وبتم عدها من خلال جهاز
Flow Cytometer هذه الطريقة إيش؟ Direct سميناها
Direct لأن الـ Antibody اللي أنا استخدمته Directly
ارتبط بالـ Antigen الطريقة الثانية اللي هي
Indirect بيكون في عندي Two Antibodies واحد فيهم
بيرتبط مباشرة بالـ Antigen اللي أنا بدور عليه أو
الـ Marker اللي أنا بدور عليه الآن بيكون في عندي
Antibody للـ FC portion للـ Antibody الأولاني يعني
في عندي Primary Antibody ارتبط و الـ Secondary
Antibody راح يرتبط بالـ Primary طب فإيش هيرتبط؟
هيرتبط بالـ FC portion الآن الـ Second Antibody هو
اللي labelled الـ Second Antibody هو اللي labelled فالآن
بعمل Washing بعمل بعد الـ Washing يعني طبعا بشيل أي
Antibody مرتبطش يعني عندي Washing أولاني بعمله في
المرحلة هذه بشيل عندي أي Primary Antibody مرتبطش
بيبقى عندي مين اللي مرتبط الـ Primary Antibody مع
الـ Antigen هو اللي بيبقى عندي في الـ Reaction
Mixture الآن باضيف الـ Labelled Antibody Labelled
Antibody هيرتبط مع الـ Antibody اللي كان مرتبط على
سطح الخلية ويتكون عندي هذا الـ Complex الـ Complex
هذا هيمر على جهاز الـ Flow Cytometer ويقرأ الـ
Fluorescence له الآن برضه قبل ما أمرره الخطوة
الأخيرة لازم أعمل Washing عشان أتخلص من أي
Labelled Unbound Antibody يعني هنا في عملية
Washing مرتين أتخلص من الـ Antibody الـ Unbound في
المرحلة الأولى و أتخلص من الـ Antibody الـ Unbound
في المرحلة الثانية طبعا هنا سميناها Indirect لأن
كان في Antibody المرتبط مباشرة بالـ Antigen أنا
قصدت الـ Antibody المرتبط بالـ Antibody الـ Primary
الـ Secondary Antibody اللي تم قياسه مش الـ Primary
Antibody هيك بنكون عرفنا كيف الارتباط بيكون
Direct أو Indirect نيجي
للـ TdT اللي هو Terminal Deoxynucleotidyl Transferase هذا
عبارة عن DNA Polymerase يكون موجود في الـ B و الـ T
precursors في الـ Lymphoid precursors يعني في الـ
Stem cells عادة بلاقي بـ High levels في تقريبا 90%
% من حالات الـ lymphoblastic leukemia ممكن أحدده
باستخدام برضه labelled antibody وباستخدام الـ flow
cytometry زي ما حكينا طوي عن الـ cluster of
differentiation عدّي هفرزلكم جداول ونُميز الخلايا
من خلال أشياء معينة في الشرائح القادمة هيكون
الموضوع أوضح بشكل واحد طيب، نيجي إلى
الـClassification بناء على الـ Cell Markers الـAML
والـALL حناخد أول إشي الـAML الـAML بتتميز غالبا
بوجود الـCD13 و33 هدول الاتنين بيكونوا positive
فيها بينما الـTDT negative ليش؟ لأنها لأنه بيكون
positive في الـ lymphoid precursors ما بيكون في
الـ myeloid precursors الآن نيجي لحاجات خاصة يعني
مثلا الـ M6 بلاقي فيها الـ glycophorin A positive
تمام الـ M7 بلاقي فيها الـ CD41 و 42 و 61 positive
اللي هي الـ acute megakaryoplastic leukemia هنا
بتم يعني الـ ALL في منها Precursor B ALL في عندي B
ALL وفي عندي T Acute Lymphoblastic Leukemia طبعا
الـ Markers اللي بدنا نصنف بناء عليها اللي هي CD
CD19, 22, TDT, 10 Intracytoplasmic chains Surface
Immunoglobulin CD7, CD3 والـ Morphology related to
which type الـ 1 أو الـ 2 أو الـ 3 أول حاجة لـ
Precursor B ALL في منها تلت أنواع نوع بيسموه
Common ALL Common ALL بتلاقي الـ 19 و 22 و الـ TDT
و العشرة positive تمام؟ الـ Null type بتفرق عنها
إن العشرة فيها negative CD10 فيها negative لمّا
بيكون مش مكتوب حاجة يعني حاجة مش مميزة يعني لا
بقدر أقول ممكن تكون positive أو negative مش بشكل
منتظم يعني مش دايما positive ومش دايما negative
فبالتالي لمّا المنطقة الضباطية هذه اللي ماعليهاش
positive أو negative يعني لا تستخدم في التمييز أو
في تحديد هذه الأنواع من الـ Locateالـ Pre-B cell
الـ Pre-B cell هلاقيهم تقريبا متشابهة الـ CD10
variable ممكن يبقى positive أو negative إيش بزيد
عليها؟ الـ Intra-cytoplasmic chain إيش هي الـ
Intra-cytoplasmic chain؟ الـ Intra-cytoplasmic
chain هو عبارة عن الـ surface immunoglobulin وهو
عمال بتصنع في داخل الـ cytoplasm يعني هو لسه ما
طلعت على فتح الخلية هنا بلاقي في الـ Pre-B cell
positive بعدين بيجي عند الـ قولنا الـ precursor
قسمناها لتلاتة بتيجي عند الـ BALL وبتيجي عند الـ
TALL الـ BALL طبعا الـ CD10 فيها negative والـ
surface immunoglobulin negative الـ TALL فيها الـ
CD10 positive هلقيت الـ null type ممكن تكون L1 أو
L2 طبعا common ممكن تكون أي نوع الـ Null Type قلنا
L1 أو L2 الـ Pre-B برضه قد تكون L1 أو L2 الـ BALL
غالباً L3 الـ TALL TALL قلتلكم الـ CD10 فيها بتكون
Positive تتميز الـ T بالـ CD7 والـ CD3 فدول اتنين
بيكونوا Positive وممكن تكون على شكل L1 أو L2 ماشي
يعني على شكل الخلايا ماخدة الـ Criteria
المورفولوجي تاعة الـ L1 أو الـ L2 طيب
نيجي إلى الـ Classification هل هي B أو T
-Lymphocyte؟ يعني بناء على الـ Markers معينة هنشوف
إذا كانت B Lineage أو T الـ B بتشكل 80% والـ T
بتشكل 20% الـ Markers اللي هنفصل من خلالها الـ B
عادة الـ TdT بتكون فيها positive فكل ما تخلية M
mature بتكون فيها الـ TdT positive يعني في عندي في
الـ Bra B وفي عندي Common وفي عندي Pre-B يعني الـ
Bra B مرحل السابق للـ Pre-B بعدين ال mature B
هتلاقي فيهم الـ TdT positive بس في ال mature هتصير
negative لأن مع ال matureation هتلاقيها بلشات
تختفي الـ Cd19 هتلاقيها positive في كل الـB
الـCD10 positive ما عدا في الـBra B الـSurface
immunoglobulin هو احنا المفروض نقول الـCytoplasmic
immunoglobulin لأنه بظهر في مراحل الـSurface يعني
هو أول شي بظهر في الـCytoplasmic على سطح الخلية
فبالتالي الـCytoplasmic ممكن نلاقيه في الـPre-B
وفي الـMature B تمام؟ بعد هيك في الـ Surface
Immunoglobulin هتلاقيه بس في الـ Mature B لأن كل
الـ Cytoplasmic طلع على سطح الخلية وصار على شكل
Surface Immunoglobulin طيب نيجي للـ T الـ T عادة
بتتميز بالـ CD7 إنها positive والـ TDT برضه
positive طبعاً في عند الـ Pre-T و Mature-T الـ CD2
بيفرق أن الـ Pre-T بيبقى فيها Negative والـ Mature
-T بيكون فيها Positive طبعاً هذا بالزمن في ال
classification لنوع الـ acute lymphoblastic
leukemia اللي هي B أو T lymphoblast حطيت هذه
الصورة بس عشان يعني تاخدوا فكرة إيش اللي بيصير
فعلياً هي الـ Maturation بتاع الـ B-cell قلتلكم الـ
Maturation الشكل تقريبا متشابه جدا في الـ
lymphocyte maturation فبنميز من خلال الـ markers
كل مرحلة معينة من مراحل الـ maturation تتميز ب
markers معينة يعني في ال early stages بتلاقي
الـTDT positive لكن بعد هيك بتبدأ الـTDT بتختفي في
ال mature الـHLA-DR والـCD19 بتكون positive على
طول للآخر الـCD20 في مرحلة معينة بتظهر وبعدين
بتختفي الـ CD10 برضه نفس الأشي في مراحل بتكون
موجودة فيها المراحل بتكونش الـ immunoglobulin برضه
ممكن تكون موجودة مع الـ maturation بتبدأ تظهر على
سطح الخلية، تمام؟ هي صورة تانية للـ B cell
maturation هذه بس صور توضحية يعني هي الـ
progenerator cell الخلية الأولى هتلاقي فيها الـ
TdT positive اللي بعدها اللي بعدها بعد هيك الـ TdT
بطل positive طيب، نيجي للـ Markers مثلا هذه بتتميز
بالـ CD 3419 هذه 3419 و 10 TDT هذه هتلاقي في عندك
TDT positive زي ما قلنا اللي هي الـ Pre-B cell
فيها 19 و 10 و 20 و 22 يعني الشاهد في الموضوع أن
كل مرحلة من المراحل هذه بتتميز بـ Markers خاصة
فيها الـ Chronic Lymphocytic Leukemia و الـ Pro
-Lymphocytic Leukemia برضه إلها Markers الـ Hair
Cell Leukemia برضه إلها Markers الـ Wild Storm
Heavy Chain Disease برضه إله Markers معينة الملطب
الميلومة إلها Markers معينة هيك بتتمييز الـ B Cell
Leukemia من خلال الـ Immunophenotyping عشان نعرف
أي Stage اللي هي عاملة الخلية فيها Proliferation
الـ T Cell نفس الإشي برضه كل مرحلة من المراحل بتاعة
الـ Maturation للـ T cell هتلاقي إلها Markers خاصة
فيها