بسم الله الرحمن الرحيم رح يكون موضوعنا اليوم إن
شاء الله الـ Hemoglobin F في السين أو يسمى بالـ
Acid Elution Test هذا الفحص الغرض منه إنه نطلع على
الـ distribution of Hemoglobin F in the red cells
يعني شوف كيف Hemoglobin F موزع بين الخلايا وهذا
بيساعدني في تشخيص الـhereditary persistence of
Hemoglobin Fإذا كنتوا فاكرين قلنا الـ Hereditary
Persistence of Hemoglobin F هذه حالة مرضية بيظل
الـ Hemoglobin F يتصنع فيها طول الحياة طيب
Hemoglobin F مرتفع طب شو بده يعرفني يعني إيش سببه؟
هل هو جاي من ثلاثينية؟ هل هو في خلل في نوع تاني من
الـ Hemoglobin أدى الارتفاع هذا؟ فبالتالي هذه
الحالة أو هذا الفحص بيساعد في تشقيص الـ Hereditary
Persistence of Hemoglobin F شغلة تانية في حالة ما
أنا أكونشاكة يعني مثلًا الست الحامل تكون في عندها
مشكلة مثلًا الحالات اللي بيسموها انفصال في المشيمة
انفصال جزءي في المشيمة هنا بيكون فيه خوف أنه صار
اختلاط بين دم الأم والطفل طبعًا هو في الوضع
الطبيعي مافيش مشكلة إلا إذا كانت الأم فصيلة تسالب
والطفل فصيل Tomoger هيك هتنتقل خلايا من الطفل إلى
أمه ويصير عند الأم immunization يعني هتتوّن
antibodiesلخلايا الطفل هذا وممكن اتموته انتوا
عارفين قصة الـ RH والفصيلة الدم قلتلكم انه عند
الولادة ممكن تنتقل خلايا الدم واحنا بنعطي إبرة الـ
Anti-D بتنحل المشكلة لكن لو خلال الحمل صار انتقال
لبعض الخلايا وهذا الطفل صدفت فصيلته كانت موجبة
والأم سالبةهنا ممكن الأم تكون أساة مضادة تنتقل
لنفسي الحمل وتقضي عليه أو تتعمل عنده مضاعفات
وتكسير في الدم فبالتالي إذا أنا كنت شاك أنه صار
اختلاط بين دم الأم والطفل ممكن أخد عينة من الأم أو
أشوف هل في عند الأم خلايا من خلايا الطفل طبعا
خلايا الطفل هتبين أنه في عندي خلايا موزعة خلال الـ
Blood Film فيها كمية كبيرة من Hemoglobin F تمام؟
إذاً in determining the presence of fetal red
cells in the maternal circulation during pregnancy
المشكلة أنه خلال الحمل مش لازم تصير الشغل هذه إيش
بالزمن الـreagent؟ بالزمن fixative solution اللي
هو 80% إيثانال بالزمن fetal cell buffer عبارة عن
acidic bufferهنفهم لإيش بعدين بلزمني صبغة هيلزمني
إيرثروسين بيه و إيرليخستان اللي هي متوكزيلين
هلزمني كوبلينجار للصباغة و هلزمني إيش water bath
العين
اللي بستخدمها هي Venus blood مجموعة في Editaممكن
ناخده من fingertip من الأصبع أو من skin puncture
يعني for the best result الدم لازم يعني ينشغل خلال
6 ساعات الأولى من جمع العينة لكن لو احنا حطينا
العينة في التلاجة ممكن اخد نتائج تظل تعطيني نتائج
كويسة لمدة أصبعين الآن بعمل سمير باخد عينة البلط
بعمل وينها سمير عادية و بعمللها fixation خلال
ساعتين من تحضيرهاتمام عشان ما تتغيرش الـ
morphology تحت الخلايا ويتأثر Hemoglobin F بداخل
الخلايا إذا حضرت سمير عملتلها fixation الخطوة اللي
بعد هيك بتبين في الـ principle blood smear هذه
اللي عملتلها fixation بعمللها incubation مع citric
acid bufferCitric Acid Buffer الـ BH تبعته حامضية
3.2 إلى 3.3 عند هذه الـ BH هتلاقي أن أنواع
الهيموجلوبين الأخرى other than hemoglobin F
هيصيرلها إليوشن من الخلية إليوشن هتنحل وتخرج من
الـ Red Blood Cell بينما Hemoglobin F هيظل في داخل
الخليةإذن Hemoglobin F عند هذه الـ pH مقاومة لـ
elution من خلية الدم الأحمر بينما أنواع أخرى تم
إزالة من خلية الدم الأحمر الأنواع الأخرى من الـ
Hemoglobin هتطلع من الخلية تمام؟ الـ slides are
stained with hematoxilin طبعا بعد الخطوة هذه تمام؟
أنا طلعت أنواع الـ Hemoglobin الأخرى من الخلايا
تظل عندي بس من Hemoglobin F فلكن أصبغ الخلايا عشان
أشوفهابصبغها بصبغتين الصبغة الأولى اللي هي
hematoxilin عشان تصبغ عند ال white blood cells
نيوكلياي والاريثروسين عشان تصبغ ال RBCs تمام بعد
هيك بشوف الشريحة تحت تحت المايكروسكوب وبطلع قشة
خلايا مصبوغة هي اللي هتكون فيها Hemoglobin F
الخلايا المش مصبوغة هيكون مافيش فيها أصلا كان
Hemoglobin F تمام؟وبحسب نسبة الخلايا اللى موجود
فيها hemoglobin F زى إذا كنتوا فاكرين ما حسبنا
نسبة ال reticulocyte يعني بعد كل ال RBCs وبعد
الخلايا اللى فيها hemoglobin F وبحسب النسبة
المئوية لإلها هاد الطريقة بالتفصيل هاد الطريقة
احنا مش راح نشتغلها يعني بس بنذكرها ذكر تمام ماشي
اش احنا اللى بنشوفهالصورة اللي على الشمال الصورة
اللي على الشمال في عندي عدد كبير من الخلايا فيها
Hemoglobin F ملاحظين كيف المصبوغة بينما الخلايا
الفاضية هذه مافيش فيها Hemoglobin F فبالتالي أنواع
ال Hemoglobin اللي فيها طلعت وخلاص يعني ماضلش فيها
حاجة تنسبغ نيجي إلى هنا هذه يعني blood film عادي
لشخص normal كل الخلايا اللي عنده مش مصبوغةبعد خلية
واحدة قد تكون reticulocyte لأن الـ reticulocyte مش
هيطلع الـ Hemoglobin اللي فيها، تمام؟ هنحكي هذا
الكلام، إذا هذا فيلم فيه عدد من خلايا فيها
Hemoglobin F بينما هنا لأ، هيكون فيلم Normal،
مافيش عنده نسبة عالية من Hemoglobin F بحسب نسبة
الـ RBCs اللي بتحتوي طبعاً بنعدد زي ما قلتلكمبحسب
ال number of RBCs اللي فيها Hemoglobin F وبجيب
النسبة المئوية بجيب ال number في ال fieldات اللي
عديتها على ال total number لل RBCs وبضرب في 100%
فبطلع عندي نسبة ال RBCs اللي فيها Hemoglobin F
طيب،
هنا عندي بعض النقاط بدنا نشوفها أول حاجة ال
reticulocyte may resist elutionand would therefore
give the appearance of cell containing hemoglobin
F توي شفناها قولتلكم هذه الخلية ممكن تكون
reticulocyte reticulocyte لأن ال cell membrane
بتاعها قوي و لسه قلية جديدة و young فبالتالي مش
هتسمع لأي نوع من ال hemoglobin غالبا أنه يطلع منها
تمام الشغل التاني the degree of illusion of adult
hemoglobin may vary from patient to patient يعني
حتى ال hemoglobin بيختلف درجة ال illusion من شخص
إلى شخصحسب الـ Cell Membrane وحسب طبيعة الخلايا
تمام؟ الآن الـ Ethyl Alcohol احنا متعودين نستخدم
كحول Absolute Alcohol للـ Fixation لكن هنا بنستخدم
80% لو استخدمت كحول أعلى من 80% ممكن يؤدي لخروج
Hemoglobin F كمان من الخلايا تمام؟ لو استخدمت كحول
أقل من 80% ممكن يغير الـ Morphology للخلايا يعمل
Morphologic Alteration للخلاياوبالتالي هتتلف
الخلايا عندي ومش هقدر أشوفها إذن التركيز اللي
بستخدمه فقط 80% طيب،
انشوف إيش الفرق في حالة الـ Hereditary Resistance
of Hemoglobin F وفي حالات الثلاثيمية وتوزيع
Hemoglobin F كيف بيكون في الخلايا في الـ
Hereditary Resistance هتلاقي إن Hemoglobin Fطبعاً
بدي أذكركم بس إيش هو الـ Hereditary Resistance
قلتلكم Hemoglobin F بظال طول الحياة يتصنع بنسبة
معينة طب كيف بدي أفرقه عن الناس اللي عندها خلل في
الـ Hemoglobin مثلا ونتيجة خلل في نوع معين من الـ
Hemoglobin أو في الـ Chain بتاعة الـ Hemoglobin
هيعلق أنواع تانية من الـ Hemoglobin زي مثلا حالة
الـ Thalassemia حالة الـ Sickness الأنيميا الـ
Acquired Oblastic Anemia الحالتها دي كلها و
الحالات اللي لها علاقة بالـ Hemoglobin وBatters
اللي ممكن يرتفع فيها Hemoglobin F كيف بدي أفرقهم؟
هي Hereditary Persistence أو فيتا الهمoglobin طبعا
Hereditary Persistence أو فيتا الهمoglobin هتلاقي
أنه Hemoglobin F مثلا عند الشخص هذا نسبة
Hemoglobin F قوله 20% هتلاقي الـ 20% موزعين في كل
الخلايا بالتساوي يعني كل خلية هيكون فيها مصبوغة
جزئيا ليش؟ لأنه فيها نسبة من Hemoglobin F زيها زي
الخلية اللي جنبها زي اللي جنبها زي اللي جنبها يعني
كل الخلايا فيه تجانس في كمية Hemoglobin F بداخلها
بينما الحالات المرضية الأخرى هتلاقي في عندك خلايا
بذاتها هي اللي فيها Hemoglobin F والخلايا التانية
مافيش فيها Hemoglobin F فبالتالي، إيش الفرق بين
الفلمان؟ في الـ Hereditary Resistance هتلاقي فيه
عندك صباغة بلون فاتح لكل الخلايا إيش إنه فيها نسبة
كلها من Hemoglobin Fبينما في حالات المرضية الأخرى
هتلاقي عندك بعض الخلايا لازالت مختفظة بـ
Hemoglobin F ومسبوغ فيها سباقه قوية بينما خلايا
تانية مافيش فيها Hemoglobin F ومش مسبوغة بسباقه
قوية تقريبا زي الفيلم اللي شوفناته وإنه في كمية
كبيرة من الخلايا مسبوغة وخلايا مش مسبوغة هذا ممكن
يكون لحالة ثلاثيميا أو حالة شكل سلقانية تمام؟ أو
Hemoglobin B بغض النظر إيش نوعهاطيب، في عندنا نقطة
بهمة كتير اللي هي الـ pH إحنا أعطينا Range معين
للـ pH ما يقلش عن 3 أو 1 وما يزيدش عن 3 أو 3 لو ..
لو قل الـ pH هذا راح يخلي Hemoglobin F يطلع من
الخلايا طب لو زاد عن 3 أو 3 هيمنع أنواع الـ
Hemoglobin أخرى أنها تطلع من الخلايا يعني لا ينزل
عن 3 أو 1 ولا يزيد عن 3 أو 3، تمام؟شغل تانية درجة
الحرارة لو زادت عن 25 درجة خلال الـ Fixation ممكن
تمنع الـ Elution للـ Normal Hemoglobin صحيح هذه
الطريقة حساسة تغيرات فيها كتير أو الـ Reaction
بتاعها تحضيره كتير بيغلب وما بتستخدمش على نطاق
واسع فإحنا بس يعني بنذكرها دكتور إحنا بحكي بس الـ
Principle وفايدتها أما يعني حتى لما شغلناهاكانت
مرة تظبط ومرة ما تظبطش لأن الـ «Reagent» بتاعتها
ممكن يكون تحضيرها فيه مشكلة يعني مافيش إلها
«Reagent» يهزة بتيجي ونشتغل عليه لأ الـ «Reagent»
بتاعها بتحضر وبياخد وقت في التحضير ومش دايما بيعطي
نتائج كويسة فإحنا بس بنكتفي بذكر الـ «Principle»
تاعتها وفائدتها والأخطاء اللي ممكن نقع فيها هذه
الطريقة موجودة يوم ما تفكروا تشتغلوها هي موجودة
معاكم يعطيكم العافية