بسم الله الرحمن الرحيم موضوع هذه المعمل رح يكون
الـ Osmotic Fragility Test ماذا نعني بفحص الـ
Osmotic Fragility Test الـ Osmotic Fragility Test
is a measure بس أحط المشير بس is a measure of the
ability of the red cells to take up fluid without
lysing طيب، هذا الكلام بيخلينا نتوقف عن بعض
المعلومات، نرجعها مع بعضطبعا يا بنات إحنا عارفين
إن الـ Erythrocyte بتحتفظ بشكلها لو كان المحلول
isotonic إيش يعني isotonic؟ يعني تركيز الأملاح
بداخل الـ Erythrocyte نفس تركيز الأملاح بالـ fluid
اللي هي محطوطة فيه قداش هذا التركيز ال isotonic؟
ال isotonic solution تقريبا 85 من 100%
صواضيوميكلورايل اللي هو هذا شايفينه؟85 من 100 في
المياء Sodium Chloride إذن ننزل على الصورة اللي
تحت الـ Isotonic solution هي عند هذا التركيز
الخلايا تحافظ على شكلهاكيف يعني تحافظ على شكلها؟
لأ، بيطلع منها fluid و لا بدخل لها fluid يعني كمية
السوائل اللي بتطلع منها الميه اللي بتطلع نفس كمية
الميه اللي بتدخل فبالتالي بيظل شكل الـ Erythrocyte
ثابت وهذا هو التركيز اللي ربنا خلق البلازمة فيه
يعني البلازمة isotonic وإلا كان الـ Erythrocyte
كلها خربت طيب، نتخيل إنه زاد تركيز المحلول اللي
محطوطة فيه الـ RBCsهنلاحظ إن السوائل هتبدأ تطلع من
الـ Erythrocyte الميّه هتبدأ تطلع وتصير الخلية
تنكمش بنسميه ash shrinking زي الصورة اللي على
الشمال طبعا؟ طيب، الآن لو تركيز المحلول انخفض يعني
صار أقل من 85 من 100 هتبدأ السوائل تدخل في الـ
Erythrocyte هتبدأ الخلية تنتفخهتبدأ تصير كراوية
Spherocyte لحد معين بعد هيك هيصيرلها Lysis
هيصيرلها rupture لأنها ما راح تقدر تتحمل دخول
fluids أكتر من هيك طيب اليوم احنا شغلنا في مرحلة
من isotonic لhybotonic احنا
حكينا ان الخلية في الـhybotonic solution هتصير
Spherocyteوبعد هيك حيصيرلها rupture طيب عند أي
تركيز حيصيرلخلية rupture؟ خلّينا نشوف خلّينا نشوف
التركيز هذه اللي عاليمين التركيز هذه تركيز ل
solution Sodium Chloride يتدرج من 1% بعدين نيجي لل
isotonic اللي هو 85% من 100%بعد هيك بنبلش في الـ
Hypotonic solution 75% من 100، 65% من 100، 65% من
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100،وين الـ
Erythrocyte هيصير الهالايسز بمعنى لو أنا دخلتها في
محلول Hybotonic هل هيصيرلها مجرد ما المحلول يصير
Hybotonic هل هيصير الهالايسز؟ احنا قولنا لأ بتدخل
في مرحلة Spherocytosis و بعدها تصير الهالايسز يعني
مثلا هل عند 75%؟ هل عند 65%؟ لأ عند 60%؟ عند 55%؟
طيب السؤال عند أي تركيز بيصير الهالايسز بيصير
Hemolysis للخلايا؟عند أي تركيز طبعاً هذا بيعتمد
على الخلايا نفسها يعني مش كل الخلايا هيصيرلها
license عند نفس النقطة يعني يا بنات قيلوا معايا أن
الخلايا الـ Normal مثلا بيصيرلها license عند 40
يعني هي بتظل مقاومة للـ Hybotonic solution مقاومة
للتخفيف وتنتفخ وتصير Spherocyteمثلًا عند 40 مش
هتقدر تقاوم هيصيرلها Rapture تمام؟ طيب تخيلوا
معايا خلية أصلا هي Spherocyte أصلا هي منتفخة طيب
الخلية الـ Spherocyte عند وين هيصيرلها Lice؟ أكيد
هيصيرلها قبل يعني هتكون أقل مقاومة للمحلول الـ
Hybotonic صح؟ أقل مقاومة لدخول السوائل فيها مظبوط؟
بمعنى إنها more fragile إنها هشة أكثرواضحة الصورة
هذه؟ يعني إحنا ببساطة بدنا نشوف لما المحلول يتحول
من isotonic لhybotonic وين الخلية بده يبدأ يصير
لها lysis باعتمد على عوامل هالأت راح ندرسها مع
بعض، تمام؟ تفهم؟ نشوف كمان مرة التعريف الـ Osmotic
Fragility Test is a measure of the ability of the
red cells قدرة الخلايا إنها تاخد fluid without
lysisto take up fluid without lysing تمام؟ or it
is a test to measure red blood cell resistance to
hemolysis ممكن أقاس مقاومة الخلايا للـ hemolysis
when exposed لما بنعرضها ل series of increasingly
dilute saline dilution يعني لما بعمل saline مخفف
طبعا بالتدريج بدي أشوف قدرة الخلايا على مقاومة هذا
الـ Hypotonic solution لوين راح توصلطبعًا مش كل
الخلايا هتقاوم بنفس الدرجة في خلايا حيصر
الـHelices عند 65 وفي خلايا حيصر الـHelices بعدين
عند 30 مثلًا فهذا موضوعنا اليوم Osmotic Fragility
مدى هشاشية أو حساسية الخلية لتغير أو انخفاض الضغط
الأسمازي لسائل المحيط في الخليةأو مدى مقاومتها
لتغير الضغط الأسماسي عندما توضع في محاليل متناقصة
من ناحية الشكل إيش هي العوامل اللي بتأثر على الـ
Osmotic Fragility؟ طبعا الـFragility هنا بدنا نفهم
إنها هشاشية هي عكس الـResistance عكس المقاومة يعني
الخلية اللي بتكون more fragile يعني دُغر بتتسر
بتكون أقل مقاومة less resistantThe primary factor
affecting the osmotic fragility test is the shape
of red cell which in turn depend on يعني بتعتمد
بشكل أساسي على الشكل بتاع الخلية الشكل يعني إله
علاقة بشغلتان بالـ volume وال surface area عدنا
راح نفهم كيف شغل تانية بتعتمد عليها مهمة جدا اللي
هي الـ functional state of cell membraneهل الـ
Cell Membrane تاع الخلية هذه تعبان؟ هل في مشكلة؟
ولا هو طبيعي؟ خلّينا نشوف تفصيل العوامل هذه بعدين
أول حاجة اللي هو الـ Shape قلنا الـ Surface to
Volume Ratio أكيد يا بنات كل ما كانت الخلية
Surface Area إلها كبيرة مقارنة بالـ Volume هيكون
عندها فرصة أكبر إنها تفردوتصير Spherocyte قبل ما
يصير الـ helices يعني هتكون more resistant and
less fragile إذن increased surface to volume ratio
يعني بدياكي ببساطة تتخيل تنتين، two cells واحدة
فيهم target cell target cell سطحة مجعد، ليش؟ لأن
فيها أكثر من نتوق وSpherocyte مين فيهم هتتحمل دخول
السوائل أكتر؟أكيد هتقولي ليه الـ Target سلب صح؟
ليش؟ لأن الـ Surface Area للـ Target Cell كبيرة
يعني مساحة سطحة كبيرة فبالتالي راح تتحمل دخول
Fluids أكتر من الـ Spherocyte لذن كل ما زادت الـ
Surface Area بتكون الخلية more resistant to
Hemolysis and has decreased fragility والـ
Fragility إلها هتكون أقلThe larger the amount of
red cell membrane كل ما كان الممبران أكبر يعني ال
surface area أكتر in relation to the size of the
cell the more fluid is the cell capable to
absorbing before rupturing يعني الخلية بتقدر
تستوعب ال fluid أكتر لما يصير لها rupture طيب إيش
في عندي حالات؟ أول حاجة Iron deficiency anemia إيش
علاقة Iron deficiency anemia؟ خلايةمحتوها من الـ
Hemoglobin قليل يعني الخلايا هتكون الـ Hello Area
فيها في الوسط كبيرة يعني الـ Surface Area هتكون
إلها كبيرة بمعنى إن الخلية هتستوعب الـ Fluids كثير
إذن هذه الخلايا في الـ Iron Deficiency Anemia
هتكون الـ Fragility إلها قليلة والـ Resistance
إلها عالية هتتحمل دخول Fluid لأن الخلايا أصلا
فاضية من جوا Thalassemiaلأن فيها Target Cell كتير
السلسيمية صح و بعدين Hypochromic بتكون Sickle Cell
Anemia شكل الخلية الـ Sickle Cell لها Surface Area
كبيرة فبالتالي بتتحمل دخول Fluids كتير Liver
Disease Liver Disease ليش؟ لأنها بتتميز بوجود
Target Cells عدد كبير فكل مكان فيه Target Cells
هتكون الـFragility فيه قليلة والـResistance عالية
تمام؟ إذن أول عامل increase surface to volume
ratio فحكينا الأمثلة الـ target cell والـ
hypochromic cells والـ sickle cells هنا هدول بتكون
الـ fragility فيهم قليلة والـ resistance عالية الـ
resistance لاقاش لدخول لـ fluids في الخلية بدون ما
يصير الهالايسز يعني كل ما دخل fluid فيها هتفرد
أكتر وتتحمل أكتر
الـ target cell has the largest surface area
amount of membrane for its size and therefore
shows decreased fragility هنا بقولك ال target cell
أكبر surface area as the red cell takes in fluid
it becomes more round يعني زي ما قولنا المرحلة
الأولى الخلية بتاخد fluid بتصير دائرية بتصير
spherocyte بعد الـ spherocytosis بيصير ال herapter
طيب it therefore follows thatالـ Spherocyte لها
أصغر surface area ما بين الخلايا عشان هيك ربتشار
بسرعة أسرع واحدة يصللها ربتشار اللي هي الـ
Spherocyte لأنه لها fragility عالية حساسيتها
للسائل أو هجاشكتها عالية لتخفيف الملح في السائل
عشان هيك هذا الفحص يستخدم بشكل أساسي لتشقيص حالات
الـ Spherocytosis التشقيص الصحيح للـ Spherocytosis
بيجي من خلال الـ Osmotic Fragility Test Decreased
Surface to Volume Ratio Increased Osmotic
Fragility and Decreased Resistance وين بشوفه؟ في
حالات الـ Hemolytic Anemiaحالات الـ Hereditary
Spherocytosis وفي كل حالة بلاقي فيها Spherocyte
طيب
الشغل التالتة اللي هي مهمة جدا الـ functional
state of cell membrane الـ functional state يعني
قدش عمر ال RBCs يعني في RBCs عمرها يوم في RBCs
عمرها 120 يوم أكيد اللي عمرها يوم هتتحمل أكتر من
اللي عمرها 120 يوم طيب إذاوين فيه reticulocyte؟
هتكون المقاومة عالية و الـ fragility قليلة تمام؟
the aged erythrocyte will be hemolyzed easily
hence the more healthy cell membrane، the less
fragile cells، such as reticulocyte افهمنا
reticulocyte، reticulocyte يبارك عن young cell
فبالتالي المقاومة بتكون عالية و ال fragility قليلة
طيب، قالت lesplenectomy، طب شو علاقة lesplenectomy
بالموضوع؟هلأ أنتوا عارفين إنه الخلايا لما بتمر عبر
الـSpleen فيه هناك Blood vessels ضيقة جدا مرور
الخلايا يوم عن يوم طبعا الخلايا عشان تمر في هذه
الـSphincters في هذه الـSphincters وفي هذه
الـBlood vessels الدقيقة جدا هتنضغط الخلية شوية و
بتغير شكلها عشان توائم المكان و بعدين ترجع
لطبيعتها عشان هيك الـEarthocytes تتميز بإنها
Flexibleعملية مرور الخلايا بالاماكن الضيقة جداً
هتأثر على الـ Cell Membrane يوم عن يوم هينقذ الـ
Cell Membrane لكن لو شخص ماعندهاش Spleen هتلاقي
خلايا مش هتمر عبر المصافي هادي فبالتالي الـ Cell
Membrane هيكون إلها أفضل الـ Resistance إلها هتكون
عالية و الـ Fragility قليلة طيب الـ Polycythemia
إيش علاقة الـ Polycythemia بالقصة هذه كلها؟الـ
Polycythemia خلايا عددها كبير فبالتالي طالما خلايا
RBCs كتير عددها عدد مرات مرورها على الـ spleen
هيكون أقل يعني لما يكون واحد عنده RBCs مثلا 3
مليون وواحد عنده الـ RBCs 6 مليون الـ 3 مليون هتمر
عدد مرات أكتر هيجيها الدور أسرع يعني هتمر مثلا
مثلابنقول في الدقيقة الواحدة هتمر مثلا مرتين،
ماشي؟ بينما لما يكون العدد 6 مليون هيجيها الدور كل
دقيقة مرة، ليش؟ لأنه هيزير فزاحهم، هيصير العدد
بتاع الخلايا أكتر فبالتالي عدد المرات مرورها على
الـSpleen هيصير أقل وبالتالي تأثير الـCell
Membrane تأثير الـSpleen على الـCell Membrane
هيكون أقل إذن الحالات اللي بتحكي عن الـfunctional
state وجود reticulocyte splenectomy and
polycythemia، هذه الحالاتبتزيد فيها الـ resistance
لأن الـ functional state للـ cell membrane تبقى
very good specimen
العينة اللي بستخدمها بستخدم عينة دم مسحوبة بـ
heparin ما بنفع أستخدم Sodium citrate ولا إيديتا
لأن Sodium citrate والإيديتا والأجزالات هذه عبارة
عن أملح هتأثر عندي على التركيز احنا بنحكي عن تركيز
زي ما عادنا هنشوف ما بنفع أستخدم غير Sodium
heparinالفحص لازم أشتغله خلال ساعتين من السنة بالـ
Collection عشان ما يتأثر الـ cell membrane أو خلال
6 ساعات إذا أنا حطيت العينة في التلاجة هنا
برجع بذكرك بالـ principle in the osmotic fragility
test holy blood is added to a varying
concentration of buffered sodium chloride solution
يعني بجيب تركيز مختلفة من الـ sodium chloride
solutionوبحط الخلايا فيها تمام في الـ wrong
temperature بعد هيك طبعا هنا بوضح لك في ال
isotonic في الصورة هذه ال isotonic الخلايا إيش
بيصير فيها واضشرحناها ده و الhypertonic و
الhybotonic بعد ما بحط الخلايا يعني أنا بجيب تركيز
مختلفة بحط الخلايا فيها بعد فترة معينة من ال
incubation تمام بشوف أديه صار hemolysis في كل
واحدة من هذه الأنابيب كيف بعرف ال hemolysisهنفهم
كيف، هنقرأ الـ Hemolysis على الـ Spectrophotometer
ونعرف درجة الـ Hemolysis اللي صارت في كل أنبوبة من
الأنابيب هذه الطريقة،
بدي أحضر الـ Dilution هذا كيف؟ تلعبوا معايا إيش
بلزمني؟ بلزمني Buffered Sodium Chloride تركيزه 1%
وبلزمني Distilled Water نيح؟ هلقيت؟بحضّر عندى 14
تيوب 14 تيوب تمام؟ والـ 14 هدول برقمهم من 1 إلى 14
شو بدي أعمل فيهم؟ باجى على الـ tube الأول باخد من
الـ Sodium Chloride اللى تركيزه 1% 10 ML يعني قداش
تركيز الأنبوبة هيكون 1% أنا ماعملت أي تخفيف ماضفتش
أي حاجة تمام؟باجعل أنبوبة تانية باخد 8.5 ML من
السوديا ميكلورايد بحط عليها 1.5 ML دستيلت واتر
تمام؟ تخفيف قدش هيصير 85% لأن أنا أخد 8.5 وكملتهم
1.5 مل دستيلت واتر فهيكون التخفيف 85% خدوا بالك
لغاية هنا Isotonic Saline هلاقيت بعد هيك هبدأ أدخل
في الـ Hybotonic Saline كيف بدي أحضر؟بجيب زي ما
انتوا شايفين 7.5 Sodium Chloride إلى 2.5 مية 6.5
إلى 3.5 6 إلى .. هذه غلطة على فكرة هذه 4 مش 5 5.5
إلى 4.5 هيك بكون شغلت على الـ 14 يوم قدرت فيهم هذه
التخفيفات الأنبوبة الأولى 1% 85 من 100% 75 من 100%
لأخره لغاية ما أوصل لأخر أمبوبة على فكرة هي مش
مبينة بالعرض أخر أمبوبة تركيزها Zero Zero يعني
هيكون فيها ميّه لحالها مش هيكون فيها حاجة تانية
غير الميّه طيب الأكثر عندي 14 أمبوبة كل أمبوبة
فيها عشان 10 ML من التركيز اللي أنا بديها كل
أمبوبة فيها 10 ML من التركيز اللي أنا بديها طيب
الآنكيف .. يعني كيف بدي أعمل الخطوة اللي بعد هيك؟
بدي أجيب كمان 14 أنبوبة على RAV تانية كويس؟ بعد ما
أعمل mixing وأحضر التركيزات هذه بدي كل أنبوبة من
هدول أقسمها نصين كيف يعني؟ أجل الأنبوبة الأولى
اللي تركيزها واحد أخد منها 5 ML في الأنبوبة
التانية اللي رقمها واحد أجعل الأنبوبة التانيةاللي
تركيزها 85 من 100 أخد منها 5 ML على الأنبوبة رقم 2
الأنبوبة رقم 3 خمسة ML على الأنبوبة رقم 3 هيك إيش
بيصير معايا؟ بيصير عندي 14 و14 كأنه Duplicate يعني
كل واحدة منها تنتين فيهم خمسة ML من التركيز اللي
أنا بديها يعني كل عشرة حضرتهم قسمتهم نصين طب إيش
الهدف من الكلام هذا؟ إنه كل عينة بدأت شغلها مرتين
زيادة تأكيد للنتيجة، بسفبالتالي بعد ما حضرت العشرة
بقسمهم من النص 5 5 في كل واحدة فبيكون عندي 14 14
متماثلين يعني من 1 ل 14 من 1 ل 14 أنا بيب نفس
التركيز كل واحدة فيهم فيها 5 ML من المحلول اللي
أنا حضرته بالتركيز المرهوب تمام هيك؟ طيب إذا أنا
أول خطوة حضرت التخصيفات إيش بعد هيك بدي أعمل؟ بدي
أضيف عليهم الخلاياعشان أشوف وين الخلايا بدأت تكسر
تمام
هي زي ما قلنا ابنقل 5 ml بعد هيك باجي باخد 50
microliter على كل أمبوبة من ال blood 50 microliter
على كل أمبوبة من ال 28 أمبوبة بعمل good mixing كيف
ال mixing؟ بدي أعمله by gentle inversion يعني بديش
أعمل mix جامد بحيث أنهمثلًا الـ mix نفسه يؤثر
ويعمل hemolysis أنا بدي الـ hemolysis يكون بسبب
اختلاف الضغط الأسمازي مش بسبب أي عوامل أخرى بعد ما
أعمل mix ما بدي أسوي بترك الأنابيب تلاتين دقيقة في
ال room temperature بعد هيك بعمل mix كمان مرة و
بعمل centrifuge هلقيت بعد ال centrifuge شوفوا
معايا إيش بده يطلع centrifuge خمس دقائقلما نطلع
الأنابيب من الـ centrifuge راح نشوف هذا الشكل إيش
فعلياً اللي إحنا شايفينه من الشمال بنبدأ الأنبوب
رقم 1 اللي هو فيه أعلى تركيز وكل ما اتجهنا لليمين
التركيز بيكون للـisotonic الـ saline بيكون أقل طيب
الأنابيب الأولى لو لاحظنا هنلاقي خلايا مترسبة تحت
وسائل clear مافيش فيه أي لونأول أمبوبوتاني واحدة
وتالت واحدة طيب على إيش بدل هذا السائل الـ Clear
طالما السائل Clear وماصارش فيه تلون معناته إنه
ماصارش Hemolysis إمتى ببدأ الـ Hemolysis يصير لما
يصير تلون في السائل الآن التلون هذا بدل على إن الـ
Hemoglobin طلع من الخلايا وعمل تلوين للـ
Supernatant معنى الكلام إنه العينة اللي عندى تحملت
تخفيف التركيز في هذه الأنبوبة وفي هذه لغاية
الأنبوبة هذه هنا بيكون فعليًا بدأ الـ License
تمام؟ ممكن أنا أقرأ درجة الـ License عن طريق تراءة
هذا اللون باستخدام الـ Spectrophotometer هيك في
هذا الاتجاه كل ما توجهنا في هذا الاتجاه فهيزيد الـ
Licenseهيزيد في أمبوب تلت أربع قنابيب بعد هيك
هنلاقي ثابت في اللون إيش يعني صار ثابت في اللون؟
ثابت في اللون إنه صار Complete Hemolysis يعني مثلا
لو أجت قرأت أخر أمبوب تاني نفس القراقة هيكونوا أخر
تنتين تمل الـ Hemolysis فيهم يعني كل القلايا صار
فيها Hemolysis أنا فعليا باجي أول أمبوبة صار فيها
Lysis خفيفهتلاقي اللي بعدها أكتر طبعاً بستدل عليه
من خلال قراءة الـ Spectrophotometer اللي بعدها
أكتر لغاية ما آخر أنابيب هتلاقي الـ Lysis ثبت يعني
صار 100% للخلايا Lysis طيب خلّينا نقارن الحالة هذه
بالحالة اللي تحتها الحالة التانية الأنبوب الأولى
ماصارش فيها Lysis بس بعد هيك صار Lysis معنى الكلام
أن الخلايا اللي أنا ضفتهم في المجموعة التانية هدول
الخلاياmore fragile، less resistant ما اتحمله
تخفيف اللي هو تركيز الملح قد تكون هذه الخلايا
Spherocyte عشان هيك بدأ الـ Lysis فيها مبكراً وهذا
الفرق ما بين الـ Normal وما بين الـ Spherocyte الـ
Normal بيبدأ الـ Lysis متأخر بينما الـ Spherocyte
بيبدأ الـ Lysis مبكر إذنبعد هيك أنا طلعت القنابيب
و قلت لكم إيش الموجود في القنابيب بدي أخد القراءة
540 نانومتر إيش بدي أخد قراءته الـ Supernatant كل
الـ Supernatant هذا بدي أقرأه سجّل رقم لـ YouTube
و أخد قراءة الـ Supernatant أسجله جنبها الـ
Absorbance لإلها حيصير عندي 14 قراءة و 14 قراءة،
تمام؟ طيب، بنشوف بعدين إيش بدنا نعمل حاجة اسمها
الـ Pearson Hemolysisإيش هو الـ Percent Hemolysis؟
بمعنى قداش صار Hemolysis في كل أنبوبة من هذه
الأنابيب كيف؟ عن طريق الـ Absorbance لكل أنبوبة
على أحدها على الـ Absorbance لأنبوبة 14 طب ليش
اختارنا Absorbance لأنبوبة 14؟ لأنه صار فيها
Complete Hemolysis يعني 100% Hemolysisفأنا بدي
أشوف مثلًا أنبوبة رقم 4 أو 5 يعني بدي أشوف الـ
Absorbance اللي لها الـ Absorbance ده 14 يعني نسبة
الـ Hemolysis اللي صار فيها للـ Total Hemolysis في
100% فأكون حسبت نسبة الـ Hemolysis لكل أنبوبة على
حدة The results of the test may then be graphed
with the percent Hemolysis on the vertical axis
and the Sodium Chloride concentration على الـ X
-axisخلّينا نشوف الرسمة بتوقع تطلع معايا تطلع
معايا هنا نسبة الـ Hemolysis اللي أنا حسبتها لكل
أنبوبة الـ Percent Hemolysis تمام و هنا تركيز الـ
Sodium Chloride هنا تركيز Sodium Chloride لو أخدته
بالكم هو بدأ التركيز من هنا يعني الأنبوبة رقم 1
على اليمين و راح للشمالعشان ال curve طلع معايا زي
ما انتوا شايفين في الأول مافيش Hemolysis مافيش
مافيش Hemolysis بعد هيك بدأ ال Hemolysis يزيد
لغاية وارتفع القنابيب هذه هي اللي بيزيد فيها ال
Hemolysis هنلاحظ ارتفاع شديد في ال percent أو نسبة
ال Hemolysisبعد هيك هنلاقي ثبات في القراءة قلتلكم
أخر قنابيب بيصير فيها ثبات في القراءة وهذا شكل ال
curve و بتقولولي ليش خطين لأنه احنا فعليا عملنا
مجموعتين من القنابيب ماشي فممكن احنا نرسم لكل
مجموعة curve او نجيب المتوسط و نرسم curve واحد
صعبوا
معايا هي ال normal normally ال hemolysis ببدأ
مابيناللي هو خمسة وخمسين تقريباً وبنتي عند خمسة
واربعين هي الـ Normal، شايفينه؟ اللي في الوسط
الحالات الـ Hereditary الـ Serocytosis هيبدأ الـ
Hemolysis قبل ممكن يبدأ من خمسة وستين من مية حالات
الـ Sickle Cell Anemia والحالات اللي بتقل فيها الـ
Fragility والثلاثيميا والـ Iron Deficiency هتلاقي
بعد يمكن عند خمسة واربعين من مية أو أقل بدأ الـ
Hemolysis
طيب، في عندنا بعض النقاط لازم ناخد بالنا منها معظم
النقاط هذه بتركز على شغل واحدة إنه أنا بدّي الـ
Hemolysis يكون فعلاً جاي بسبب تغير تركيز الأملاح
Hemolysis أثموذي ما إله علاقة بأي عوامل إضافي قدّت
للـ Hemolysis إذن أحياناً بيكون Hemolytic organism
في الـ Sample بتعمل عندي False Result طيب، هنا في
عندي شغلةفي حالات الـ Severe Anemia or other
conditions حالات أنيميا أو حالات فيها عدد الـ RBCs
قليلة ممكن تبقى النتائج عندى مش كتير دقيقة
فبالتالي هو بقولك لو كان في عندنا Severe Anemia
ممكن أنا أزود كمية ال blood على كل الأنابيب يعني
احنا قولنا 50 لكن لو كانت حالة Severe Anemia عشان
أحصل على نتائج أفضل بزود كمية ال blood مثلا ممكن
أخد 70، 80 بس على كل الأنابيب نفس الكمية باخد عشان
أزود كمية ال RBCsوالقراءة تكون ايه كويسة؟ حالات
الـ Recent Blood Transfusion واحد لما بنتقله دم
جديد طبعا الدم بيبقى فيه نسبة من الـ RBCs الدم
المخزن في التلجات عند نقل الدم بيبقى نسبة من الـ
RBCs اتسرت صار لها Hemolysis هذه لما تدخل للدم لو
أنا جيت ساحبت عينة مباشرة بعد نقل الدم ممكن يكون
فيه نسبة Hemolysis جاية من نقل الدم لو كانت العينة
Old برضه حيصير فيها Hemolysisالـ pH مهمة عشان هيك
قلنا Buffered Saline بستخدم Saline مضبوطة الـ pH
بتاعته 7.4 من 10 طيب
زي ما قلنا الـ Anticoagulant اللي ينصح فيه Heparin
مابستخدمش لا أجزالات ولا سترات ولا إيديتا لأنهم
هدول عبارة عن أملاح Sodium citrate Sodium edita
Sodium أجزالات هيأثروا على الضغط أو تركيز الأثماز
اللي أنا بشتغل عليههنا شغلة مهمة بقولك لما بتيجي
بتسحب العيناء تاخد العند العلامة بالظبط طبعا في
قنبوب الهيبارين تاخد العند العلامة وبعد هيك بتيجي
بتعمل mixing gently عشان ما تكسريش الخلايا والعينة
كلها بتتعامل معاها بشكل gentleعشان مايصيرش عندك أي
Hemolysis Accidental بسبب مثلا أنه انت عملتي Rough
Dislodgement عملتي أي حاجة عنيفة شوية ممكن تكسر
عندك الخلايا وتأثر على النتيجةهك بنكون خلصنا موضوع
الـ Osmotic Fragility وبنخلص لإنه الـ Osmotic
Fragility فحص مهم جدا بنأكد لتشخيص حالات الـ
Spherocytosis يعني هو بشكل أساسي هذا الفحص بيأكد
عندي أو بعمل confirmation لحالات الـ Spherocytosis
يعطيكوا العافية