القياس الطيفي الكتلي  القياس الطيفي الكتلي، المعروف أيضا باسم (MS/MS أو MS2)، هو تقنية تستخدم في التحليل الفعال حيث يتم الجمع بين اثنين أو أكثر من أجهزة التحليل الكتلي معا باستخدام خطوة رد فعل إضافية لزيادة قدراتهم على تحليل العينات الكيميائية.  الاستخدام الشائع للرادف-MS هو تحليل الجزيئات الحيوية، مثل البروتينات والببتيدات.  جزيئات عينة معينة يجب ان تكون لمؤينة اولا ثم يتم فصل هذه الجزيئات بواسطت المطياف الأول (MS1 المعينة)، يفصل هذه الأيونات بنسبة كتلة إلى شحنة (غالبا ما تعطى على أنها م / ض أو م / س). يتم اختيار أيونات نسبة m/z معينة قادمة من MS1 ثم يتم تحويلها إلى أيونات أصغر جزء، على سبيل المثال عن طريق الانفصام الناجم عن الاصطدام، أو تفاعل الجزيئات الأيونية، أو الدمج الضوئي. ثم يتم إدخال هذه الشظايا في مطياف الكتلة الثانية (MS2)، الذي بدوره يفصل الشظايا بنسبة m/z الخاصة بهم ويكتشفها. خطوة التشظي تجعل من الممكن تحديد وفصل الأيونات التي لديها نسب m/z متشابهة جداً في مطياف الكتلة العادية.  يشمل قياس الطيف الكتلي الثلاثي رباعي الروبولي (qqq)، رباعية وقت الطيران (Q-tof)، ومطياف الكتلة الهجين.  تستخدم مطياف الكتلة الرباعية الثلاثية رباعية الروبولات الأولى والثالثة كمرشحات كتلة. عندما تمر التحليلات في رباعية الروبول الثاني، التفتت يستمرّ من خلال الصطدام مع غاز. عادة ما تستخدم لصناعة الأدوية.  Link to original page  يجمع مطياف الكتلة Q-tof بين أدوات TOF ورباعية الروبول c، والتي تسبب دقة الكتلة العالية للأيونات المنتج، والقدرة على الكميات الدقيقة، وقابلية تطبيق تجربة التشظي. هذه طريقة لقياس الطيف الكتلي تحدد نسبة تجزئة الأيونات (m/z) خلال وقت قياس الطيران.  يتكون مطياف الكتلة الهجين من أكثر من جهازي تحليل كتلة.  يمكن إنجاز مراحل متعددة من فصل التحليل الشامل مع عناصر مطياف الكتلة الفردية المنفصلة في الفضاء أو باستخدام مطياف كتلة واحدة مع خطوات MS مفصولة في الوقت المناسب. بالنسبة لقياس الطيف الكتلي في الفضاء، غالباً ما يتم ملاحظة العناصر المختلفة في الاختزال، مما يعطي نوع محدد الكتلة المستخدم.  في قياس الطيف الكتلي في الفضاء، يتم فصل عناصر الفصل مادياً ومتميزة، على الرغم من وجود اتصال مادي بين العناصر للحفاظ على الفراغ العالي. ويمكن أن تكون هذه العناصر قطاعات، ناقل الحركة رباعية، أو وقت الطيران. عند استخدام رباعية الروبول متعددة، فإنها يمكن أن تعمل على حد سواء التحليلات الشامل وغرف الاصطدام.  ونُوّج شائع للتحليلات الشامل (analyzer) – الكتلة الرباعية Q; س – تردد الراديو اصطدام رباعية; TOF – محلل كتلة وقت الطيران؛ ب – القطاع المغناطيسي، و E – قطاع الكهرباء. ويمكن الجمع بين هذا الوَصَن للإشارة إلى مختلف الأدوات الهجينة، على سبيل المثال QqQ ' – مطياف كتلة رباعية رباعية ثلاثية؛ QTOF – رباعية الوقت من الطيران مطياف كتلة (أيضا QqTOF); وBEBE - أربعة قطاعات (الهندسة العكسية) مطياف الكتلة.  من خلال القيام بالتماثل الطيفي الكتلي في الوقت المناسب، يتم إنجاز الفصل مع الأيونات المحاصرين في نفس المكان، مع خطوات فصل متعددة تجري بمرور الوقت. ويمكن استخدام أيون رباعي أو فورييه تحويل الرنين السيكترون (FTICR) ل هذا التحليل. يمكن لأدوات التراكب أداء خطوات متعددة من التحليل، والتي يشار إليها أحيانًا باسم (MS)(MS إلى "n")غالباً لا يتم الإشارة إلى عدد الخطوات، n، ولكن في بعض الأحيان يتم تحديد القيمة؛ على سبيل المثال يشير MS3 ثلاث مراحل من الانفصال. جنبا إلى جنب في الوقت أجهزة MS لا تستخدم وسائط وصفها بعد ذلك، ولكن عادة جمع كل المعلومات من السلائف مسح الأيونات ومسح أيون الأصل من الطيف بأكمله. كل تكوين مفيدة يستخدم طريقة فريدة من نوعها من تحديد الشامل.  عندما يتم تنفيذ MS جنبا إلى جنب مع تصميم في الفضاء، يجب أن تعمل في صك واحد من مجموعة متنوعة من وسائط. هناك عدد من مختلف الاجهزة ترادف MS / MS التجريبية ولكل وضع تطبيقاتها الخاصة ويوفر معلومات مختلفة. يستخدم نظام MS في الفضاء اقتران مكونين من أجهزة القياس التي تقيس نفس نطاق الطيف الكتلي ولكن مع تجزئة متحكم فيها بينهما في الفضاء، بينما ينطوي التصلب المتعدد جنباً إلى جنب في الوقت المناسب على استخدام مصيدة أيونية.  هناك أربع تجارب المسح الرئيسية الممكنة باستخدام MS / MS: السلائف مسح الأيونات، مسح أيون المنتج، مسح الخسارة محايدة، ورصد رد فعل مختارة.  بالنسبة لمسح أيونات السلائف، يتم اختيار أيون المنتج في محلل الكتلة الثاني، ويتم مسح الكتل الأولية في محلل الكتلة الأول. لاحظ أنّ [السلائف] أيون مرادفة مع أصل أيون وننتج مع ابنة أيون مهما الاستعمال من هذا [أنثروبومورسم] شروط يكون غير مشجع.  في أيون المنتج المسح الضوئي، يتم اختيار أيون السلائف في المرحلة الأولى، ويسمح لتجزئة ومن ثم يتم مسح جميع الجماهير الناتجة في محلل كتلة الثانية والكشف في كاشف التي يتم وضعها بعد محلل كتلة الثانية. عادة ما يتم تنفيذ هذه التجربة لتحديد التحولات المستخدمة في القياس الكمي بواسطة MS جنبا إلى جنب.  في مسح خسارة محايدة، يقوم محلل الكتلة الأول بمسح جميع الكتل. يقوم محلل الكتلة الثانية أيضا بالمسح، ولكن في إزاحة مجموعة من محلل كتلة الأولى. يتوافق هذا الإزاحة مع خسارة محايدة لوحظت عادةً لفئة المركبات. في فحص الخسارة المستمرة المحايدة، يتم رصد جميع السلائف التي تخضع لفقدان محايد مشترك محدد. للحصول على هذه المعلومات، يتم مسح كلا التحليلات الكتلة في وقت واحد، ولكن مع إزاحة الكتلة التي ترتبط مع كتلة المحايد المحدد. وعلى غرار المسح الضوئي للسلائف الأيونات، تفيد هذه التقنية أيضا في التحديد الانتقائي لفئة المركبات ذات الصلة الوثيقة في الخليط.  في مراقبة التفاعل المحدد، يتم تعيين كل من المحللين الشاملين إلى كتلة مختارة. هذا الوضع مشابه لمراقبة أيونات مختارة لتجارب التصلب العصبي المتعدد. وضع تحليل انتقائي، والذي يمكن أن يزيد من الحساسية.  تجزئة أيونات مرحلة الغاز أمر ضروري لقياس الطيف الكتلي جنبا إلى جنب ويحدث بين مراحل مختلفة من التحليل الشامل. هناك العديد من الطرق المستخدمة لتفتيت الأيونات وهذه يمكن أن تؤدي إلى أنواع مختلفة من التشرذم وبالتالي معلومات مختلفة حول بنية وتكوين الجزيء.  غالبا، عملية التأين يكون بما فيه الكفاية عنيفة أن يترك الأيونات الناتجة مع طاقة داخلية كافية لتفتيت داخل مطياف الكتلة. إذا استمرت أيونات المنتجات في حالة عدم التوازن لفترة معتدلة من الوقت قبل تفكك تلقائيًا، تسمى هذه العملية تجزئة الفوقا. يشير تجزئة المكتشطة الفوهة إلى الحث الهادف للتجزئة في المصدر عن طريق زيادة إمكانات المكتشطة الفوهة على الأدوات القائمة على الرذاذ الكهربائي عادة. على الرغم من أن التجزئة في المصدر تسمح لتحليل التجزئة، فإنه ليس من الناحية الفنية قياس الطيف الكتلي الترادفي إلا إذا تم تحليل كتلة الأيونات (مؤقت الاستقرار:metastable) أو اختيار قبل تفكك تلقائي ويتم تنفيذ المرحلة الثانية من التحليل على الأجزاء الناتجة. غالباً ما يستخدم التجزئة في المصدر بالإضافة إلى قياس الطيف الكتلي جنباً إلى جنب (مع تجزئة ما بعد المصدر) للسماح بخطوتين من التشظي في نوع MS3 زائف من التجربة.  تجزئة ما بعد المصدر هو في معظم الأحيان ما يتم استخدامه في تجربة قياس الطيف الكتلي جنبا إلى جنب. ويمكن أيضا أن تضاف الطاقة إلى الأيونات، التي عادة ما تكون متحمسة بالفعل اهتزازي، من خلال الاصطدامات بعد المصدر مع ذرات أو جزيئات محايدة، وامتصاص الإشعاع، أو نقل أو التقاط الإلكترون من قبل أيون مشحونة مضاعفة. ينطوي الانفصام الناجم عن الاصطدام (CID)، الذي يسمى أيضًا بالتفكك المنشط بشكل تصادمي (CAD)، على اصطدام أيون بذرة محايدة أو جزيء في مرحلة الغاز والتفكك اللاحق للايون. على سبيل المثال، ضع في اعتبارك:  <chem>{AB+} + M -> {A} + {B+} + M</chem>  حيث أيون AB + يصطدم مع الأنواع المحايدة M وينهار في وقت لاحق. يتم وصف تفاصيل هذه العملية من خلال نظرية الاصطدام. ونظراً لاعتراض اختلاف في التكوين، يمكن أن يكون هناك نوعان رئيسيان مختلفان من الـ CID: '1' نوع الشعاع (حيث تكون الأيونات السليفة مجزأة أثناء الطيران) و (2) من نوع مصيدة الأيونات (حيث تكون الأيونات السليفة محصورة أولاً ثم تُجزت).  وهناك نوع ثالث وأكثر حداثة من تجزئة CID هو انفصام تصادمي عالي الطاقة (HCD). (HCD) هو تقنية CID محددة لمطياف كتلة المدار الذي يحدث تجزئة خارج فخ أيون، يحدث ذلك في خلية HCD (في بعض الأدوات المسماة "أيون توجيهmultipole HCDهو تجزئة من نوع التراكب الذي تبين أن له خصائص من نوع الحزم.  الطاقة التي يتم إطلاقها عند نقل إلكترون أو التقاطه بواسطة أيون مشحون مضاعفة يمكن أن تحفز التشظي.  إذا تم إضافة إلكترون إلى أيون موجب مشحون، يتم تحرير طاقة كولوم. إضافة الإلكترون الحر يسمى الايكتر القبض على الانفصام (ECD) ويمثلها:  formula_1  لمضاعفة جزيء مبروتز.  ويسمى إضافة إلكترون من خلال أيونات تفاعل انفصام نقل الإلكترون (ETD). على غرار الانفصام في التقاط الإلكترونات، يؤدي ETD إلى تفتيت الكاتيونات (مثل الببتيدات أو البروتينات) عن طريق نقل الإلكترونات إليها. اخترعه دونالد ف. هانت، جوشوا كون، جون إ. ب. سيكا وجارود مارتو في جامعة فرجينيا.  لا تستخدم ETD الإلكترونات الحرة ولكنها تستخدم الأنيونات الجذرية (مثل الجمرة الخبيثة أو الأزوزبينزين) لهذا الغرض:  formula_2  حيث A هو anion.  تَدَمّر بشكل عشوائي على طول العمود الفقري الببتيد (ج وإيونات z) بينما تُترك السلاسل الجانبية والتعديلات مثل الفوسفور سليمة. هذه التقنية تعمل بشكل جيد فقط للأيونات الدولة تهمة أعلى (z>2)، ولكن بالنسبة إلى تفكك الناجم عن الاصطدام (CID)، ETD مفيد لتفتيت الببتيدات أطول أو حتى البروتينات بأكملها. وهذا يجعل هذه التقنية مهمة لبروتيوميكس من أعلى إلى أسفل. مثل الكثير من النماء في مرحلة الطفولة المبكرة، ETD فعالة للببتيدات مع تعديلات مثل الفوسفور.  نقل الإلكترون وتفكك الاصطدام العالي الطاقة (EThcD) هو مزيج ETD وHCD حيث يتم إخضاع السلائف الببتيد في البداية إلى تفاعل أيونات أيونات الفلورانثين في فخ أيونات خطية، والذي يولد c - و z -ions] ] في الخطوة الثانية يتم تطبيق تجزئة HCD جميع الأيونات على جميع الأيونات المشتقة من ETD لتوليد الأيونات b- و y- قبل التحليل النهائي في محلل الارمدى. تستخدم هذه الطريقة التجزئة المزدوجة لتوليد أيونات وبالتالي أطياف MS/MS الغنية بالبيانات لتسلسل الببتيد وتوطين PTM.  ويمكن أن يحدث التجزؤ أيضاً مع أنواع غير مُتَجَرَّعة، حيث يتم نقل الإلكترون من الأنواع إلى كاشفات الموجبة في انفصال نقل الإلكترونات السالب (NETD)  formula_3  بعد هذا الحدث نقل، الإلكترون نقص anion يخضع لإعادة ترتيب داخلي وشظايا. NETD هو التماثلية أيون/أيون من انفصال الإلكترون (EDD).  NETD متوافق مع تفتيت الببتيد والبروتينات على طول العمود الفقري في السندات Cα-C. الشظايا الناتجة عادة ما تكون أيونات من نوع المنتج أو أيونات من نوع x.  انفصال الإلكترون (EDD) هو طريقة لتفتيت الأنواع الأيونية في قياس الطيف الكتلي. وهو بمثابة وضع مضاد سلبي لإمساك الإلكترونات بالانفصام. يتم تنشيط الأيونات المشحونة بشكل سلبي عن طريق التشعيع مع إلكترونات الطاقة الحركية المعتدلة. والنتيجة هي طرد الإلكترونات من الجزيء الأيوني الأم، الذي يسبب التفكك عن طريق إعادة التركيب.  رد فعل بين الببتيدات المشحونة بشكل إيجابي والكواشف الموجبة، المعروف أيضا باسم انفصال نقل الشحن (CTD)، وقد ثبت مؤخرا كمسار تفتيت الطاقة العالية البديلة لحالة منخفضة الشحن (1 + أو 2 +) الببتيدات. الآلية المقترحة من CTD باستخدام الهيليوم الكاتيون كما الكاشف هو:  <math>\ ce