标题：鸡传染性脑脊髓炎
鸡传染性脑脊髓炎-介绍
经种蛋传播，其子代在4周龄内出现临床症状与死亡，水平传播出现症状率很低。1932年美国首先报道此病，其后在世界各地陆续有此病流行的报告。在我国，1980年曾有疑似鸡脑脊髓炎的报道；1982年通过病理组织学方法，作出了此病的诊疗报告；1983年通过流行病学的调查、病理组织学的研究和人工发病等试验，确诊了此病，进一步证实AE在我国的存在。此后，广西、江苏、福建、上海、山东、内蒙古、黑龙江、河北、河南、江西等全国大多数商业化养禽地区都有此病的报道。有学者用ELISA检测方法，通过鸡胚敏感试验，发现许多未接种疫苗的产蛋鸡群已被感染，证明此病在集约化的禽场中已广泛存在，成为危害养鸡业的又一大敌。
鸡传染性脑脊髓炎-病原
鸡传染性脑脊髓炎病毒(AEV)属于小RNA病毒科的肠道病毒属。病毒粒子具有六边形轮廓，无囊膜，病毒直径约有26±0.4nm，呈20面体对称，其衣壳(或病毒粒子)由32或42个壳粒组成，病毒在氯化铯中的浮密度为1.31～1.33g/ml。马学恩对AEV的结构也有类似的报道。
病毒对氯仿、乙醚、酸、胰酶、胃蛋白酶及DNA酶有抵抗力，所有AEV的不同分离株属同一血清型，但各毒株的致病性和对组织的亲嗜性不同，大部分野外分离株为嗜肠性，且易经口传染给鸡并从粪便排毒，通过垂直传播或出壳早期水平传播使易感雏鸡致病，在这些病例中，一般表现有神经症状。野外分离株通过易感小鸡的脑内接种也能产生神经症状。
胚适应毒株与野毒株的致病性有明显的不同，胚适应株已失去野毒株的嗜肠道特性，因此经口给予胚适应株是不会传染的，病毒也不能在肠道中复制。非经口途径接种胚适应株不会在粪便中排毒。胚适应株是高度嗜神经性，通过脑内、皮下、肌肉等非经口方法接种可引起严重的神经症状。这种毒株一般不能水平传播。常用的胚适应毒株是VR株，用胚适应株接种易感鸡胚孵育至18天可出现特征性病变，如严重肌肉营养不良、胚体矮化、无论是自然野毒株或胚适应株，均可在敏感的雏鸡、鸡胚和鸡胚的多种细胞如脑细胞、成纤维细胞、肾细胞和胰细胞及神经胶质细胞上生长。细胞培养一般无细胞病变，用易感鸡胚于5～6天龄经卵黄囊接种是繁殖AEV最常用的方法。
鸡传染性脑脊髓炎-流行病学
自然感染见于鸡、雉、鹌鹑和火鸡、染，但雏禽才有明显的临诊症状。雏鸭、珍珠鸡等，鸡对本病最易感。各种日龄均可感雏鸽可被人工感染，但小鼠、豚鼠、家兔和猴对病毒的脑内接种有抵抗力。
经脑内接种很易在小鸡复制AE，此病可通过垂直传播，也能水平传播。AE的主要传播方式是消化道传播，感染鸡通过粪便排出病毒，其排毒时间约为5～14天，感染时鸡龄越小，排毒时间越长。病毒在环境中有较强的抵抗力，在垫料中可存活4周以上，易感鸡接触到被污染的饲料、饮水、用具等而被感染。垂直传播是本病主要的传播方式，产蛋鸡感染3周内所产的蛋带有病毒。一些严重感染的胚蛋在孵化后期死亡。大部分的鸡胚可以孵化出壳，但出壳的雏禽在出壳数天内陆续出现典型的临诊症状。一般在感染之后3～4周，种蛋内的母源抗体可保护雏鸡顺利出壳并不出现AE的临诊症状。
本病一年四季均可发生，发病率及死亡率随鸡群的易感鸡多少、病原的毒力高低、发病的日龄大小不同而有所不同。雏鸡发病率一般为40％～60％，死亡率10％～25％，甚至有更高，如毕英佐等报道广东某种鸡场用开产后一个月内的蛋孵出的1～6批雏鸡发生 AE，死亡率高达81％～100％。
鸡传染性脑脊髓炎-临床症状
经垂直传播而感染的小鸡潜伏期1～7天，经水平传播感染的小鸡，其潜伏期为11天以上(12～30天)。
此病主要发生于3周龄以内的雏鸡，笔者也曾多次确诊过于6～7周龄的石岐杂鸡发生AE的病例。在自然暴发的病例中，雏鸡出壳后就陆续发病，病雏最初表现为迟钝，精神沉郁，小鸡不愿走动或走几步就蹲下来，常以跗关节着地，继而出现共济失调，走路蹒跚，步态不稳，驱赶时勉强用跗关节走路并拍动翅膀。病雏一般在发病3天后出现麻痹而倒地侧卧，头颈部震颤一般在发病5天后逐渐出现，一般呈阵发性音叉式的震颤；人工刺激如给水加料、驱赶、倒提时可激发。有些病鸡趾关节卷曲、运动障碍、羽毛不整和发育受阻，平均体重明显低于正常水平。部分存活鸡可见一侧或两侧眼球的晶状体混浊或浅蓝色褪色，眼球增大及失明。
发病早期小鸡食欲尚好，但因运动障碍，病鸡难以接近食槽和水槽而饥渴衰竭死亡。在大群饲养条件下，鸡只也会互相践踏或继发细菌性感染而死亡。中成鸡感染除出现血清学阳性反应外，无明显的临诊症状及肉眼可见的病理变化。产蛋鸡感染后产蛋下降16％～43％。产蛋下降后1～2周恢复正常。孵化率可下降10％～35％，蛋重减少，除畸形蛋稍多外，蛋壳颜色基本正常。
鸡传染性脑脊髓炎-病理变化
剖检变化一般内脏器官无特征性的肉眼病变，个别病例能见到脑膜血管充血、出血。如细心观察可偶见病雏肌胃的肌层有散在的灰白区。成年鸡发病无上述病变。组织学病变主要病变集中在中枢神经系统和部分内脏器官如肌胃、腺胃、胰腺、心肌和肾脏等，而周围神经无病变，这是一个重要的鉴别诊断要点。
中枢神经主要显示病毒性脑炎的病变，如神经元变性，胶质细胞增生和血管套现象。
在延脑和脊髓(特别是腰脊髓)灰质中可见神经元中央染色质溶解、神经元细胞肿大、树突和轴突消失、细胞核偏移或消失，仅剩下染色均匀的粉红色或紫红色神经元残迹。在中脑、小脑的分子层、延脑和脊髓中发现有胶质细胞增生灶。脑组织内有以淋巴细胞性管层为主的血管套现象。
内脏器官的病变表现为淋巴细胞灶性增生，在腺胃粘膜和肌层、胰腺、肌胃、肾等器官切片中均有发现。
1日龄脑内接种发病的鸡及6日龄鸡胚卵黄囊接种后孵出的病鸡，其相应器官的组织切片均不同程度地发现上述的病理学变化。
鸡传染性脑脊髓炎-诊断鉴别
初步的诊断根据雏禽出壳后陆续出现瘫痪、早期食欲尚好、剖检无明显的特征性肉眼变化，追踪到其种鸡有短暂的产蛋下降，且某段时间内孵出的多批小鸡需分发到不同地方饲养，但均出现麻痹、震颤和死亡等情况，结合组织病理学特征性变化，即可作出初步的诊断。确诊应进行实验室诊断。[1]病原的分离与鉴定1．病原的分离采多只出现典型症状的小鸡脑组织混合，按常规方法制备脑组织悬液，脑内接种1日龄无AE母源抗体或SPF雏鸡，每只接种0.03ml，接种后1～4周龄内出现典型的症状。收集有典型症状的病鸡的脑、胰腺作继代用的种毒。也可将病料通过卵黄囊途径接种5～7日的易感鸡胚，接种后12天检查部分鸡胚是否有胚胎萎缩、爪卷曲、肌营养不良等特征性变化，但野外分离病毒常不能使SPF鸡胚产生病变，需盲传3～4代，才能适应鸡胚产生病变。其余让其孵化至出雏，出壳后10天内便可见AE的症状出现，此时，取其病雏的脑、腺胃、胰腺等作病理组织学的检查。
2.病原的鉴定  病毒的检查可用荧光抗体技术(FA)，直接从病鸡的脑、胰腺和腺胃中检出AE病毒抗原。其方法是将病料制成6～7&micro;m厚的冷冻切片，固定于载玻片上．空气干燥；用4℃丙酮固定10min，倾去丙酮液，空气干燥；用抗AEV的特异性荧光抗体于室温染色30min，经pH7.4的磷酸盐缓冲盐水冲洗20min，然后加盖玻片，并用pH7.4的缓冲甘油封片。在荧光显微镜下检查，阳性鸡的组织中可见黄绿色的荧光。此时，还可用琼脂扩散疑集试验(AGP)，将病料接种SPF鸡或鸡胚，取发病鸡或鸡胚的脑、胃肠和胰等制备待检琼扩抗原，用已知AE阳性血清检查病毒的存在。血清学诊断1．病毒中和试验(VN)  将VR株10倍系列稀释的病毒液0．5ml中加等量的5倍稀释的被检血清，置37℃作用60min后，各取约0．2ml，接种于SPF鸡胚的卵黄囊内，置37℃孵育观察，至18日胚龄时，观察鸡胚的特征性病变，计算EID50。从病毒对照的 EID50减去上述的EID50值的对数差异计算中和指数，中和指数在1.0以上，视为抗体阳性。
2．鸡胚敏感试验  经蛋黄囊途径对6日龄的鸡胚接种100EID50/0.1ml的AE鸡胚适应株，接种后观察12天，检查鸡胚有无特征性病变，如果100％鸡胚有病变，种鸡被认为易感的，50％以下有病变表明鸡群有免疫力，中间数表明鸡群免疫不全或有近期的感染。
3．琼脂扩散凝集试验(AGP)  利用AE-VR鸡胚适应株或分离的野毒株分别接种 SPF鸡胚，收集发病胚的脑、胃肠和胰腺制成琼脂扩散抗原。在含20％NaCl和0.5％苯酚的0.8％琼脂凝胶中，用这种抗原进行AGP试验检测AE抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。
4．酶联免疫吸附试验(ELISA)  此法已广泛被国外采用于评价母鸡AE抗体的水平或作免疫效果的监测。美国IDEXX公司有商品化的试剂盒面市。此法与VN有良好的可比性，能定量检测血清中的AE抗体水平，加上每次可同时检测大量的血清样品，并容易将结果输入计算机软件程序中进行处理，因此，适用于禽场进行AE抗体的快速检测和评价AE抗体水平。其ELISA滴度用ET表示，同时用协同变异百分率(CV)表示群体内抗体的整齐度。
此外，还有间接免疫荧光和被动血凝抑制试验检测鸡血清中AE抗体的报道。鉴别诊断1．与有脚弱、瘫痪等症状的疾病区别
鸡新城疫：有呼吸道症状，拉绿粪，存活鸡有头颈扭曲的症状，腺胃及消化道有出血。HI抗体明显增高，组织学虽有病毒性脑炎的病变，但腺胃、肌胃、胰腺等内脏器官组织学无淋巴细胞灶性增生，分离病毒能凝集鸡的红细胞。
马立克氏病：临诊死亡一般发生在70日龄以后，而有内脏肿瘤病变和外周神经病变，如单侧性的坐骨神经肿大。AE无外周神经系统的病变。病毒性关节炎自然感染多发于4～7周龄鸡，病鸡跛行，跗关节肿胀，鸡群中有部分鸡呈现发育迟缓、嘴脚苍白、羽毛生长不良等，心肌纤维间有异噬细胞浸润。
其他细菌感染如葡萄球菌、大肠杆菌等引起的关节炎可引起关节的红肿热疼等炎症症状。
维生素E、硒缺乏：肉眼可见脑软化，小脑充血、出血、肿胀和脑回不清等病变，组织学病变如局部缺血性坏死，脱髓鞘等。硒缺乏病可见腹部皮下有多量液体积聚，有时呈蓝紫色，有些鸡肌肉苍白，胸肌有白线状坏死的肌纤维。补充维生素E、硒合剂能控制病情。
维生素B2缺乏：常发生于2周龄雏鸡。雏鸡脚趾向内弯曲，腿麻痹，行走困难，剖检时见坐骨神经比正常肿大3～4倍。幼雏维生素B2缺乏是由种鸡群B2缺乏引起的，每只鸡每天喂服维生素B25mg可得到改善。
维生素B1缺乏、烟酸缺乏、维生素D3缺乏也会引起脚弱症状，适当地补充能控制病情，改善症状。
中毒性因素：药物中毒如抗球虫药拉沙星菌素使用时间过长或与氯霉素合用；莫能霉素或盐霉素与红霉素、氯霉素、枝原净等同时使用，会使雏鸡脚软，共济失调等。另外近年来因使用含氟过高的磷酸氢钙而造成的氟中毒，雏鸡腿无力，走路不稳，严重时出现跛行或瘫痪，剖检见鸡胸骨发育与日龄不符，腿骨松软，易折而不断，主要原因是高氟进入机体后与血钙结合成不溶性氧化物使血钙降低，为补充血钙，骨钙不断释放而导致骨钙化不全。引起产蛋下降2．与引起产蛋下降，但无明显的症状和不引起鸡死亡的疾病的区别
产蛋下降综合征：产蛋严重下降，持续时间长，恢复后产蛋很难达到原来水平，且蛋壳变白色，产无壳蛋、软壳蛋或畸形蛋。减蛋后1周取输卵管的刮落物作病料接种鸭胚，可分离到能凝集鸡血细胞的腺病毒。
传染性支气管炎：有呼吸性症状，产蛋下降，畸形蛋增加，蛋的品质变化，蛋清稀薄如水。
非典型新城疫：只有产蛋下降，鸡无明显的症状，减蛋1周后，HI抗体明显上升。
低致病力毒株引起的禽流感：只有产蛋下降，通过血清学及病原分离进行鉴别。
鸡传染性脑脊髓炎-防制措施
(一)防制措施1．加强消毒与隔离措施，防止从疫区引进种苗和种蛋。
2．鸡感染后一个月内的蛋不宜孵化。
3．AE发生后，目前尚无特异性疗法。将轻症鸡隔离饲养，加强管理并投与抗生素预防细菌感染，维生素E、维生素B1、谷维素等药可保护神经和改善症状。重症鸡应挑出淘汰。全群还可用抗AE的卵黄抗体(康复鸡或免疫后抗体滴度较高的鸡群所产的蛋制成)作肌肉注射，每只雏鸡0.5～1.0ml，每日1次，连用2天。(二)免疫接种1．活毒疫苗一种用1143毒株制成的活苗，可通过饮水法接种，鸡接种疫苗后1～2周排出的粪便中能分离出AE病毒，这种疫苗可通过自然扩散感染且具有一定的毒力，故小于8周龄的鸡只不可使用此苗，以免引起发病。处于产蛋期的鸡群也不能接种这种疫苗，否则可能使产蛋量下降10％～15％，持续时间从10天至2周。建议于10周以上，但不能迟于开产前4周接种疫苗。在接种后不足4周所产的蛋不能用于孵化，以防仔鸡由于垂直传播而导致发病。
另一种AE活苗常与鸡痘弱毒苗制成二联苗。一般于10周龄以上至开产前4周之间进行翼膜刺种，接种后4天，在接种部位出现微肿，结出黄色或红色肿起的痘痂，并持续3～4天，第9天于刺种部位形成典型的痘斑为接种成功。因制苗的种毒为鸡胚适应毒株，病毒难以在个体间扩散，那些没接种的鸡就会处于易感状态。为了避免遗漏接种鸡，应至少抽查鸡群中5％的鸡只作痘痂检查，无痘痂者应再次接种。使用这种胚适应苗，疫苗在鸡胚连续传代会发生神经适应性，故偶见部分后备鸡群翼翅接种AE苗后2周内可能出现神经系统疾病的免疫副反应。
2．灭活疫苗AE灭活苗用AEV野毒或AR-AE胚适应株接种SPF鸡胚，取其病料灭活制成油乳剂苗。这种疫苗安全性好，免疫接种后不排毒、不带毒，特别适用于无AE病史的鸡群。可于种鸡开产前18～20周或产蛋鸡作紧急预防接种。灭活苗价格较高，且要逐只抓鸡注射，但免疫效果确实，从而达到通过母源抗体保护雏鸡的目的。