标题：现代医学实验方法
基本信息
编者:汪谦 
出版社：人民卫生出版社
页码：1095 页
出版日期：2009年
ISBN：9787117106672
装帧：精装
开本装帧：265×193×556毫米
开本：16
统计：1,308页
定价：&yen;105.50
内容简介
近年来，新的医学实验方法不断涌现，技术革新日新月异，因此，从医学研究的前沿性考虑，我们根据本书编委会的讨论意见，于2005年8月召开的首届中国现代医学研究方法暨学科交叉创新研讨会（CSMECKI会议）上组织了《现代医学实验方法》的修订再版工作。本次修订再版共有11位新编委和32位新参编人员加入，修订历时2年时间。新完成的第2版《现代医学实验方法》全书共200万字，收集了近年来最新的实验方法。主要内容包括形态学方法、细胞功能研究方法、亚细胞结构、蛋白质与细胞因子、分子生物学方法、免疫学、医学化学分析方法、整体与器官功能、动物及疾病模型、科研设计和统计学分析等10个方面。
目录
第一篇 形态学方法
第一章 形态学电镜技术
第一节 透射电镜技术
一、基本原理
二、超薄切片技术
三、观察及记录
第二节 扫描电镜技术
一、概况
二、扫描电镜的生物样品制备
三、铸型扫描技术
第三节 冷冻制样和冷冻蚀刻电镜技术
一、物理固定（冷冻固定）
二、快速冷冻方法
三、冷冻蚀刻样品制备
四、冷冻蚀刻图像的解释
五、冷冻置换法
六、冷冻超薄切片技术
第四节 免疫电镜技术
一、概述
二、铁蛋白免疫电镜技术
三、酶免疫电镜技术
四、胶体金免疫电镜技术
五、其他免疫电镜技术
第五节 电镜原位杂交技术
一、概述
二、几种电镜原位杂交技术操作程序
三、电镜原位杂交的注意事项
第六节 电镜酶细胞化学技术
一、基本原理
二、样品制备基本流程
三、常用的电镜酶细胞化学方法
四、电镜酶细胞化学的注意事项
第七节 电镜X射线显微分析技术
一、基本原理和检查方法
二、生物样品制备方法
三、电镜X射线显微分析技术在生物医学领域中的应用
第八节 电镜放射自显影技术
一、放射性核素标记
二、电镜放射自显影样品制备
第九节 负染色技术
一、染色液
二、染色方法
三、注意事项
四、负染色结果的判读
第十节 原子力显微镜
一、概述
二、原子力显微镜操作方法
三、原子力显微镜的应用
第二章 逆行追踪及免疫细胞化学方法
第一节 辣根过氧化物酶法
一、基本原理
二、主要仪器设备
三、主要试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第二节 荧光素逆行标记法
一、原理及应用
二、仪器设备
三、试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第三节 免疫荧光法
一、原理及应用
二、主要仪器设备
三、主要试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第四节 酶标记抗体法
一、原理及应用
二、主要仪器设备
三、主要试剂
四、染色步骤
五、注意事项
第五节 非标记抗体过氧化物酶-抗过氧化物酶法（PAP法）
一、原理及应用
二、主要仪器设备
三、主要试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第六节 抗生物素蛋白.生物素.过氧化物酶复合体法（ABC法）
一、原理及应用
二、仪器设备
三、主要试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第七节 HRP逆行追踪与免疫细胞化学（PAP法）结合法
一、原理及应用
二、仪器设备和试剂
三、实验步骤
四、注意事项
第八节 荧光素逆行标记与免疫荧光结合法
一、原理及应用
二、仪器设备
三、主要试剂
四、实验步骤
五、注意事项
第九节 双重和多重免疫标记
一、基本原理
二、标记方法
第十节 免疫组织化学染色操作的注意事项、对照设计及结果判断
一、免疫组织化学染色操作的注意事项
二、对照设计
三、免疫组织化学染色结果的判断
第三章 扫描共聚焦显微镜技术
第一节 基本原理
一、激光光源
二、激光共聚焦显微镜的成像原理
三、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构
四、激光扫描共聚焦显微镜在生物医学研究领域的应用
第二节 荧光定性、定量测量
一、标本的制备
二、激光扫描共聚焦显微镜扫描和采集样品图像的一般步骤
三、荧光探针的性质
四、荧光的定性和定量测量
第三节 实验分析、功能和应用
一、实验分析的信息形式
二、直方图分析
三、动态观察
四、荧光光漂白后的光恢复——活细胞内分子运动的测定
五、细胞间通讯的测定
六、免疫荧光的定量测定
七、生物活性物质活性封闭解封闭的测定
八、细胞膜流动性的测定
九、细胞断层扫描与三维重建
十、黏附细胞分选
十一、细胞激光显微外科术
第四节 常用荧光染料的染色方法
一、用BCECF测定pH值
二、用SNARF定量定比例测定pH值
三、用Indo-1测量细胞内Ca2+
四、用Fluo-3测定细胞内Ca2+
五、用CFDA测定细胞间通讯
六、用DiBAC测定膜电位的变化
七、用Rhodamine123标记活细胞的线粒体
八、用AO荧光染色显示RNA和DNA
九、用PI和EB荧光染色显示DNA
第四章 形态测量学方法
第一节 目镜测微器定量分析
一、概述
二、测量工具的使用方法
三、二维图像的测量
四、三维结构参数的计算
第二节 定量分析的影响因素
一、误差分析
二、切片组织变化对估计的影响
三、切片厚度的影响
四、抽样原则
第三节 计算机图像分析和三维结构重建
一、概述
二、图像分析仪简介
三、图像分析仪工作程序
四、三维结构重建切片的制作、定位和图像输入
第五章 常规组织形态学研究方法
第一节 HE染色的应用和局限性
一、HE染色原理
二、染液及溶液的配制
三、染色程序和方法
四、染色结果
五、HE染色的应用和局限性
六、HE染色常见问题及其处理方法
第二节 固定液的选择及要点
一、常用固定剂的成分和作用
二、常用固定液
三、固定液的选择及应用要点
第三节 特殊细胞的形态学鉴定方法
一、肺泡Ⅱ型细胞
二、胃腺上皮细胞
三、潘氏细胞
四、产肽激素细胞（APUD细胞）
五、肾小球旁细胞
六、垂体细胞
七、松果体细胞
八、胰岛细胞
九、嗜铬细胞
十、肥大细胞
十一、神经元的鉴定方法
十二、神经胶质细胞
十三、神经干细胞
第六章 原位分子杂交及应用
第一节 原位分子杂交组织化学技术基本原则
一、杂交前准备
二、杂交
三、杂交后处理
四、杂交后显示
五、对照实验和原位杂交结果的判断
第二节 原位杂交探针制备和标记
一、探针制备
二、探针标记
三、核苷酸探针标记
第三节 常见原位杂交方法
一、组织和细胞的原位分子杂交
二、荧光原位杂交
三、原位末端标记技术（PRINS）
四、原位聚合酶链反应（ISPCR）
第二篇 细胞功能检测方法
第七章 普通细胞培养方法
第一节 培养室仪器设备及试剂
一、培养室仪器、器械及器皿
二、培养试剂
第二节 细胞分离技术
一、梯度沉降分离法
二、等密度沉降分离法
三、流式细胞仪分离法
第三节 原代分离细胞培养
一、原理和应用
二、实验步骤
三、注意事项
第四节 细胞克隆化
一、有限稀释法
二、平皿克隆分离法
三、软琼脂克隆分离法
四、单细胞显微操作法
第五节 组织块培养
一、原理和应用
二、实验步骤
三、注意事项
第六节 器官培养方法
一、表玻皿器官培养法
二、不锈钢金属网格法
三、Maximow单盖片法
四、Wolff培养法
五、扩散盒培养法
第七节 无血清培养
一、无血清培养基的组成
二、在原代培养细胞中的应用
三、注意事项
第八节 体内细胞培养及细胞培养新技术
一、体内细胞培养（动物体内细胞接种）
二、细胞培养新技术
第九节 细胞培养中饲（滋）养细胞的制备及成纤维细胞的去除
一、饲（滋）养细胞和成纤维细胞的制备
二、细胞培养中多余成纤维细胞的去除
第十节 细胞培养中污染检测和排除
一、污染的概念
二、污染种类及表现
三、污染的预防及消除
四、支原体污染的对策
第十一节 培养细胞的观察
一、细胞培养常规检查（活细胞直接观察）
二、细胞生物学检测
第十二节 培养细胞的冻存、复苏与运输
一、细胞冻存
二、复苏方法
三、细胞运输
第八章 特殊细胞培养方法及细胞培养方法的应用
第一节 胚胎干细胞的分离培养和纯化
一、试剂及其配制
二、胚胎干细胞和培养
三、饲养层细胞的制备
四、胚胎干细胞的鉴定
五、胚胎干细胞的建系
第二节 神经细胞培养方法
一、概述
二、实验动物及动物年龄的选择
三、培养方法
四、培养神经细胞的观察和鉴定
五、注意事项
第三节 神经干细胞分离培养与纯化
一、实验动物及动物年龄的选择
二、大鼠神经干细胞的分离培养（新生大鼠脑皮质）
三、人类神经干细胞分离培养
四、神经干细胞的传代与纯化
五、神经干细胞的鉴定
六、神经干细胞系的建立
第四节 肝细胞、Kupffer和Ito细胞的分离与培养
一、概述
二、细胞的分离与培养
三、注意事项
第五节 血管平滑肌细胞的分离与培养
一、血管平滑肌细胞培养方法
二、原代培养的平滑肌形态及其鉴别
第六节 心肌细胞的分离与培养
一、概述
二、乳鼠心肌细胞的分离与培养
三、成年鼠心肌细胞的分离与培养
第七节 内皮细胞的分离与培养
一、培养方法
二、内皮细胞的鉴定
三、注意事项
第八节 造血干细胞培养
一、造血干细胞的采集
二、造血干细胞的分离和保存
三、造血干细胞的体外扩增
第九节 人外周血淋巴细胞短期培养
一、仪器设备
二、培养方法
第十节 特殊免疫细胞的培养
一、LAK细胞的制备
二、TIL细胞的制备
三、胸腺上皮细胞培养
第十一节 脂肪细胞培养
一、脂肪细胞来源
二、脂肪细胞的分离纯化与鉴别
三、培养方法
四、脂肪细胞生物学性状观察
第十二节 人皮肤成纤维细胞培养
一、试剂
二、实验步骤
第三篇 亚细胞结构及功能检测方法
第四篇 蛋白质与细胞因子的功能检测
第五篇 分子生物学方法
第六篇 免疫学方法
第七篇 医学化学分析方法
第八篇 整体功能与器官功能检测方法
第九篇 实验动物、动物手术和动物模型
第十篇 医学科研设计、统计学分析、医学科研结果的计算机处理
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