标题：香蕉细菌性枯萎病菌
病原介绍
菌体短杆状，两端钝圆，大小0.5×15(μm)，鞭毛1～3根极生，革兰氏染色阴性。牛肉汁琼脂培养基上，菌落污白色或灰黄色，近圆形。青枯菌根据其致病性和产酪氨酸酶情况，分为三个生理小种。1号生理小种(Race1)能侵害33科许多种寄主植物，特别是茄科和菊科植物，不侵害三倍体香蕉。2号生理小种(Race2)，侵害芭蕉属的香蕉、大蕉、蕉麻和羯尾蕉，但不侵害茄科植物。3号生理小种(Race3)是一个低温小种，只侵害马铃薯和番茄。2号小种又区分为高毒、低毒、无毒菌株及昆虫传和非昆虫传菌株。已知2号小种的主要变株包括B、D、H、R、SFR和F型，它还在不断产生新的变株。[1]
分布情况
亚洲有菲律宾、印度尼西亚、印度等东南亚国家，美国（夏威夷）、墨西哥、中南美洲和加勒比海各国（留尼汪、格林纳达、危地马拉、伯利兹、萨尔瓦多、洪都拉斯、哥斯达黎加、巴拿马、特立尼达和多巴哥、哥伦比亚、委内瑞拉、圭亚那、苏里南、秘鲁、巴西等）。非洲和太平洋岛屿曾有报道，但未最后证实。[2]
寄主
青枯假单胞菌小种2主要侵染芭蕉属(Musa spp.)和蝎尾蕉属 (Heliconia spp.)记录有Muse acuminataspp.errans、小果野蕉M.acuminata spp.microcarpa、M.angustigemma、野蕉M.balbisiana、香牙蕉M.cavendishii、 M.ornata、粉芭蕉M.balbisiona、大蕉M.sapientum、蕉麻M.textilis、Heliconia acuminata、蝎尾蕉H.bihai、H.imbricata、H.latispatha。接种能侵染芭蕉、香蕉、大蕉、蝎尾蕉等几乎所有品种，有些能侵染其它寄主如番茄。[2]
症状
香蕉细菌性枯萎病是维管束病害，各发育阶段均感病。幼年植株感病，迅速萎蔫而死亡，中间叶片锐角状破裂，不变黄。成株期感病，首先内部叶片近叶柄处变脏黄色，叶柄崩溃，叶片萎蔫而死亡，同时从里到外的叶片逐渐脱落、干枯，根出条开裂，叶鞘变黑。感病植株若开始结果，果实停止生长，香蕉畸形，变黑皱缩。若仅成熟的果实感病，外部可能没有症状，果肉变色腐烂。感病假茎横切面可见维管束变绿黄色至红褐色，甚至黑色，尤其是里面叶鞘和果柄、假茎、根围及单个香蕉上均有暗色胶状物质及细菌菌溢。香蕉果肉最终当果皮开裂后形成灰色干腐的硬块。
香蕉细菌性枯萎病很容易与香蕉镰刀菌萎蔫病（即巴拿马病）的内部症状相混淆，诊断时必须仔细观察内部和外部症状结合病原菌的分离。巴拿马病最初发病是最老的叶片或最低的叶片开始变黄、萎蔫而变褐，然后扩展至内部叶片，果实上没有症状。而香蕉枯萎病往往内部三张叶片变黄或淡绿色，后扩展至外；且果实上有症状。[2]
病原特点
该病原为非荧光群，rRNAⅡ群，一束极鞭，无色素、细胞积累 PHB，不从蔗糖形成果聚糖，水解明胶弱，不水解淀粉和七叶苷，几乎所有菌株还原硝酸；许多硝化产气，40℃不生长；氧化酶阳性，精氨酸双水解酶阴性，许多产生酪氨酸酶，（香蕉上分离的不产酪氨酸酶），2%NaCl肉汤不生长。能利用乙酸盐、乌头酸盐、L-丙氨酸、D-丙氨酸、?-氨基丁酸、L-天冬氨酸、天冬酰氨、丁酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、葡萄糖酸盐、D-葡萄糖、L-谷氨酸、甘油、 L-组氨酸、?-羟基丁酸、异丁酸、?-酮戊二酸、L-苹果酸、L-脯氨酸、丙酸盐、糖二酸盐、丙酮酸、琥珀酸盐、蔗糖和海藻糖为碳源；不能利用脂酸、核糖醇、 L-阿拉伯糖、纤维二糖、赤藓糖醇、戊二酸、甘氨酸、菊粉、2-酮葡糖酸、乳糖、丙二酸、甲基延胡索酸、麦芽糖、密三糖、L-鼠李糖、水杨苷、D-酒石酸、D-木糖等为碳源。从果糖、葡萄糖、甘油、蔗糖产酸不产气，不能从苦杏仁苷、糊精、赤藓糖醇、菊粉、密二糖、密三糖、水杨苷产酸；DNA G+C mol%为 66.5%～68%。[2]
发病规律
该细菌在香蕉或羯尾蕉的病株、病残体、根颈等组织中越冬，能在土中存活18个月。通过吸芽、病果、病土和流水、修剪、移栽工具及昆虫等进行传播。该茵通过伤口侵入根系维管束，或由昆虫传带侵入花序维管束，然后沿木质部导管扩散至薄壁细胞，溶解细胞壁并继续繁殖、积累，引起维管组织病变，造成植株萎蔫。蕉园里根与根接触也可传播。低温降低或延缓病害发展，高温、强风有利本病的发生发展。[1]
生物学特性
香蕉细菌性枯萎病菌主要在病残植株、繁殖材料如根茎等上越冬，病菌在土壤中存活可达18个月。
病菌通过伤口侵入根系维管束或由昆虫侵入花序维管束，沿着木质部导管扩散至薄壁细胞，溶解细胞壁，积累细菌引起萎蔫。根根接触传染可能与线虫的侵染有关，并且伤口与接种源多均使根部感病机会增多。栽培措施如摘除叶片、修剪根出条、收获果实、摘除花芽及农业工具造成伤口均有利于病菌的传播蔓延。病菌由昆虫传带是该病一个重要的蔓延途径。昆虫接触病株雄花蕊上的细菌菌脓携带细菌，传至健康植株的花蕊上，由花梗、花序的自然孔口、病果的干裂处及根出条的切点侵入植株引起发病。Budden Hagen等1962年证明，仅5%的昆虫携带细菌，主要有蜜蜂、黄蜂等昆虫。
由于该病通过机械伤口侵染根部或由昆虫传播至花序，环境因子对该病的影响程度相对较小。低温可降低或延缓病害发展，土壤湿度有利于病菌的存活和扩散，发病较重。高温、高湿、强风等有利于造成伤口的因子均有利于发病。
成株在侵染后，症状约在6周至三个月左右出现。系统侵染导致水份传导的障碍而引起萎蔫。
青枯伯克氏菌变异较大。Hayward 1964年根据其从3个已糖醇和3个二糖的产酸情况不同分为4个生物型。Buddenhagen等1962年据致病性和产酪氨酸酶情况不同分成三个小种，小种1主要侵染烟草和其它茄科作物，强烈产酪氨酸酶；小种2侵染香蕉和蝎尾蕉，不产酪氨酸酶；小种3侵染马铃薯、番茄，酪氨酸酶弱。何礼远等1982年研究了中国引起桑青枯病的病原，建议为小种4或生物型5。Cook等1989年利用核酸酶切片断多型性(RFLP)将200个菌株（包括所有生物型和小种）的青枯伯克氏菌分为二组35群，第一组包括所有菌株的小种1（生物型3、4、5）；第二组为小种2、3和小种1（生物型1），相似系数分别高达78%和62%，且与地理分布相对应：第一组90%的菌株来自亚洲和澳大利亚，第二组98%的菌株来自美洲。小种2又据地理分布的不同分为三个群（即24，25，28群）。从RFLP的分析可以得出以下结论，青枯伯克氏菌是一个古老而同质的分类群体，由于长期的进化与地理隔离，形成了大量的异质菌株，但其种仍不象过去认为的那样是多变的。青枯伯克氏菌小种2（生物型1）亦是多变的。在培养过程中迅速产生变异，具体可根据Kel-manTTC培养基上的菌落形态，将高毒、低毒、无毒菌株及昆虫传与非昆虫传菌株区分开。Stovel 1972年列出小种2的主要变株有B、D、H、R、SFR、F型，其中B型能引起香蕉迅速萎蔫，D主要从蝎尾蕉分离，引起叶片畸形，萎蔫慢；R同D，对香蕉无毒害，在TTC上迅速形成红色色素；SFR是高毒菌株， TTC上形成小、圆形、流质状的菌落，昆虫传。Woods等1985年报道，洪都拉斯1476株病株上分离的病菌，有F、SFR、AFV型，F型占73%，菌落大，流质状；AFV占17%，菌落小，无流质状变株，引起非典型的症状。[2]
传播途径
该病原小种2通过土壤、水、带菌根茎、病土、病果、修剪根出条的刀具及移栽时污染的工具等传播，昆虫传播是其中一个重要的传播途径。而其余小种传播的主要途径是通过如马铃薯块茎等繁殖材料，自然传播机率较小。[2]
检验方法
由于香蕉细菌性枯萎病容易与巴拿马病相混淆，产地检疫时必须仔细观察症状。如果果实上表现症状，且绿茎上有黄色指状物，果实内有坚硬褐色干腐，表明是细菌性枯萎病，而非镰刀菌萎蔫。
香蕉细菌性萎蔫病菌是青枯伯克氏菌小种2，可根据其在含TTC的培养基上的菌落形态与其他小种相区分，并将小种2的昆虫传菌株与其他菌株区分。因此检验的第1步应用酪蛋白胨葡萄糖（CPG）含TTC的培养基（Kelman，1954）分离，观察典型菌落，即粘、有色菌落。然后测定纯培养菌的生理生化特征，接种香蕉或番茄测定其致病性，主要生理生化指标测定见表1。国际上均采用含95个代谢底物的Biolog系统。此系统能鉴定86个属566个G－和35属250个G+细菌。为了鉴定香蕉细菌性枯萎病菌（小种2），应进一步测定纯分离菌的生物型和小种，方法是在Hayward基础培养基上，糖产酸情况及烟草过敏性反应情况，(1964):NH4PO41.0g/l,KCl0.2g/l,MgSO47H2O0.2g/l,蛋白胨1.0g/l,1%溴麝香草酚蓝0.3ml,琼脂15g/l,PH7.1;2.TTC培养基(Kelman 1954):蛋白胨1.0,葡萄糖5.0,水解酪蛋白1.0,琼脂15g,PH7.0.灭菌后冷却至55℃加1%TTC钠盐水溶液至终浓度0.005%
青枯伯克氏菌的其它检验鉴定方法如Cook(1989)利用DNA探针检测RFLP多型性，Gillings等(1992)的PCR基因扩增技术，Stead(1992)脂肪酸分析，EPPO的免疫荧光染色及其他血清学方法如ELISA(Robinson 1992)等，均为快速鉴定该菌提供了方便。[2]
防治方法
（1）实行植物检疫，防止传入无病区。禁止从亚太地区进口香蕉切花材料，对进口香蕉组培苗也要进行检疫。
（2）搞好蕉园的卫生，发现病株尽早挖除并销毁。在病香蕉园用过的疏伐吸芽、剪叶、采果工具，不准带入无病香蕉园，必要时用甲醛浸泡消毒。
（3）病园土壤要耕翻曝晒、休闲或轮作，最好在干旱季节进行效果更好。
（4）适时摘除雄花序，防止昆虫把雄花穗上的细菌带到无病的雄花蕊上，生产上要在雄花开放和苞片脱落之前，把雄花序摘除。（5）选用抗病品种，提倡使用拮抗微生物。[3]
法律规定
有关检疫规定　香蕉细菌性枯萎病是我国公布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》中规定的二类危险性病害，应严格限制自疫区引进种苗和带土寄主植物，入境后需隔离检疫，对传病昆虫应严格检疫。[4]