标题：犬瘟病毒
犬瘟病毒概述
犬瘟（亦称犬瘟热）属于病原性病毒。主要侵犯狗科、鼬科动物。属于副粘液病毒。病毒粒子的直径为115—160毫微米。邓金（G．W．Dunkin）和莱德劳（P．P．Laidlaw）首先分离成功。感染的狗（尤其是幼狗）在4—5天的潜伏期后出现发热，流泪，流鼻涕，呕吐，腹泻，便粘液，有时有抽风、痉挛等症状。气管、膀胱、胆道粘膜细胞内可证明有包含体。  犬瘟病毒染色切片死亡率约50%。在鸡胚成纤维细胞、狗肾细胞的培养细胞中生殖其减毒的病毒可用为活疫苗。  犬瘟病毒模式图
  医用狗猫犬瘟病毒疫苗
环境生存力
1. 犬瘟病毒的环境生存力不强，常温干燥环境下仅能存活几个小时，在低温（零上几度）、阴暗环境下可以存活数周，在冷冻避光环境下可存活数年。  进口的犬瘟病毒疫苗
2. 常规消毒清洗即可灭活。
3. 主要传染途径是吸入病犬咳出的悬浮微粒，以及接触新鲜的分泌物（30分钟内），因此基本上是要与病狗近距离接触才会发生传染。 [1]
病理研究
概述犬瘟热(CD)是世界范围内广泛发生的一种犬的急性、高接触性的病毒传染病，其病原为犬瘟热病毒(CDV)，它于1905年首次报道，隶属于副黏病毒科麻疹病毒属，其自然宿主包括大部分的食肉目动物。它以早期双相热型、急性鼻卡他及随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重的胃肠炎和神经症状为特征，有些患病动物的鼻和足垫还表现过度角化。它是一种传染性强，临床症状多样，容易继发细菌和其他病毒的混合感染或继发感染，发病率高达80%，患病动物在康复后还易留有麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。常规免疫接种在正常情况下是一种高度有效的预防保护措施，但据报道，犬瘟热在德国、法国、日本、美国和芬兰等国家常规免疫执行很好的地区也会有不同程度的流行，这表明预防接种过的犬也可能发病，而发病机制可能存在新的变化。 
  犬瘟病毒外观
流行病范围CDV宿主广泛，犬科(犬、狐狸、豺、狼等)、鼬科貂、雪貂、黄鼬、白鼬、貉等)和浣熊科(海豹、熊猫、浣熊、白鼻熊等)、猫科(虎、豹、狮)动物均易感，但犬是主要的宿主，纯种犬比土种犬具有更明显的易感性，幼小动物比成年动物更易感。在狐、水貂等皮毛兽养殖场，犬瘟热可自然流行，雪貂自然发病的死亡率常达100%。现已有报道证实在患Pagets疾病的病人组织中检出了犬瘟热病毒核酸。由此可见，犬瘟热的感染范围在不断地扩大。 
传染源为患病动物和带毒动物。病毒存在于患病动物和带毒动物的鼻汁、泪液、血液、脑脊髓液、淋巴结、心包液、胸水，腹水等中，通过眼鼻分泌物、唾液、尿液和粪便向外排毒。有些病犬临床症状恢复后可长时间向外界排毒。 
传播途径主要是呼吸道，其次是消化道。胎儿可通过胎盘屏障而感染，造成流产和死胎。本病一年四季都可发生，但以冬季和早春季节多发。近年来，随着养犬业的发展，犬的交流调运频繁，发病周期性不再明显。 
发病机制自然感染途径主要是经上呼吸道。CDV经鼻、咽和上呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁桃体中增殖，24h内在组织巨噬细胞中增殖并扩散至整个细胞，从局部淋巴管到达扁桃体和支气管淋巴结。感染后2~4d病毒在扁桃体和咽后淋巴结、支气管淋巴结中繁殖。4~6d后CDV在脾脏淋巴滤泡、胃及小肠的固有层、肠系膜淋巴结和肝脏星形细胞内增殖，动物表现为最初的体温升高和白细胞减少。感染后第一周出现病毒血症，借助于血液循环，CDV散布到全身的淋巴器官、骨髓和上皮结构的固有膜，身体的所有分泌物中开始向外排毒。50%的犬于感染后迅速产生抗体，8~9d时即可测出。在感染后8~9d病毒进一步扩散到上皮组织和CNS组织，身体的所有分泌物中开始向外排毒，甚至处于亚临床感染阶段的犬也开始排毒。免疫水平良好的犬感染后14d具有了足够的CDV抗体，细胞介导的细胞毒性从大部分组织中清理病毒，动物不表现犬瘟热的临床症状，免疫水平差的犬在感染后9~14d病毒扩散到其组织，包括皮肤、内分泌腺、胃肠道上皮、呼吸道上皮、泌尿生殖道上皮等，呈现出病毒侵害多系统的临床症状。CDV在脑组织中主要表现为对血管壁细胞的激活过程继而引起神经胶质细胞反应，出现脱髓鞘性脑炎，在感染后3~4周时出现神经症状而死亡。 
出现症状CD的临床症状决定于毒株的毒力、环境、宿主年龄及免疫水平等各种因素。 
（一）多系统症状 温和型临床症状比较常见，出现精神沉郁、厌食、双相热和呼吸道症状。双相热表现为开始体温升高至40℃左右，持续8~18h，经1~2d无热期后，体温再度升高至40℃左右，3d~6d，出现暂时的发热和淋巴细胞减少。呼吸道症状最初表现为浆液性鼻汁，以后发展为粘液脓性并伴随咳嗽和呼吸困难。同时，病毒血症可能导致全身性的淋巴器官感染，包括脾脏、胸腺、淋巴结、骨髓、黏膜相关淋巴组织、胃肠道黏膜固有层巨噬细胞和肝脏枯否氏细胞。 
（二）皮肤损伤 可见到水泡性和化脓性皮炎，腹下皮肤常见有米粒大小的红色丘疹或化脓性丘疹，皮屑大量脱落，唇、眼、肛门皮肤增厚，鼻镜龟裂，母犬外阴肿胀。病程稍长者，足垫增厚、变硬甚至干裂，这是临床诊断的重要指征之一。  犬瘟热病毒
（三）神经症状 神经症状是该病的特点之一，通常在病的恢复期后7~21d出现神经症状，但也有部分犬刚开始发热时就表现出来，或者在严重的全身症状出现后伴随出现神经症状。癫痫发作、四肢轻瘫或后躯轻瘫、肌痉挛、共济失调是临床上经常看到的神经症状。神经症状的变化决定于病毒侵害神经系统的部位，大脑受损表现为癫痫、好动、转圈和精神异常；中脑、小脑、前庭和延髓受损表现为运动或站立姿势异常；脊髓受损表现为共济失调、反射异常；脑脊膜发炎表现为感觉过敏、颈背部肌肉强直。痉挛多见于颜面部、唇部和眼睑。CDV感染可能经过连续的神经系统传播进入而引起脑灰质和白质疾病，主要由病毒株决定。
病理变化（一）剖解变化 CDV为泛嗜性病毒，对上皮细胞和淋巴细胞有特殊的亲合力，因此病变分布非常广泛。部分病例皮肤可出现水疱性或脓包性皮炎，有些病例足底表皮角质增生；呼吸道黏膜有卡他性或浓性渗出液；消化道可见卡他性肠炎、胃粘膜出血、小肠前段出血；部分病犬脾脏和膀胱粘膜出血；在无并发症的情况下胸腺萎缩且可能呈胶冻状；肾上腺皮质变性；死于神经症状的病犬，脑膜充血、出血，脑室扩张，脑脊髓液增多。  犬瘟热病毒
（二）组织病理学变化 陈建国等报道，对病犬进行组织学检查可以发现，在很多组织细胞中有嗜酸性的核内和胞浆内包涵体，呈圆形或椭圆形，直径1~2μm。脾窦扩张淤血、出血，白髓和红髓淋巴细胞明显减少。肺泡壁增厚，毛细血管扩张、充血，肺泡腔内充满大量浆液、红细胞、巨噬细胞、中性白细胞、脱落的肺泡上皮细胞，在肺小叶的局部区域可见肺泡壁破裂发生肺气肿，肺小叶间隔增宽，细支气管壁炎性增厚。淋巴结被膜疏松、水肿、增厚，副皮质淋巴窦和髓质淋巴窦扩张，其内充满大量浆液、巨噬细胞、淋巴细胞等。肠上皮细胞变性、坏死、脱落，肠腔内充满大量的黏液、坏死脱落的上皮细胞、中性白细胞、单核细胞等，腺上皮粘液变形，杯状细胞增多，有嗜酸性白细胞反应，黏膜下层水肿、增厚，毛细血管扩张充血、出血。扎西英派等报道脊髓灰质中神经细胞肿胀，染色质溶解，神经细胞周围水肿，白质有大量空泡，因脱髓鞘而呈海绵状变化。 
医学诊断根据流行病学资料和临床症状，可以作出初步诊断。包涵体检查是诊断犬瘟热的辅助方法，最后的确诊需要依靠病毒的分离，病毒特异性抗原或抗体的检测和特异性核酸检测。 
（一）包涵体检查 包涵体检查是诊断犬瘟热的重要辅助方法。包涵体主要存在于膀胱粘膜、支气管上皮细胞和肾盂上皮细胞内。包涵体多数在细胞质内，1个细胞可能有1～10个多形包涵体，呈圆形或椭圆形。 
（二）电镜及免疫电镜检查 这是检查确定CDV感染简便快速的方法，制备电镜样品方法有：磷钨酸（PTA）负染色法、液相免疫电镜和超薄切片法。电镜观察的最佳病料是粪便，该诊断法从制样到镜下观察，整个过程只需要2～3h，可用于快速检查CDV粒子。 
（三）病毒的分离培养 CDV是具有囊膜的病毒，结构较脆，易被光和热灭活，对环境的抵抗力非常弱，因此病毒的分离成功率很低。病料采样部位、时间、样品的处理、病程类型、发病动物的抗病毒抗体的水平等因素对病毒分离成功与否有一定的影响，但最主要的是分离病毒的载体是否敏感和有效。闫喜军报道了我国犬瘟热病毒强毒株HBF-1培育成功，对研究犬瘟热发病机理以及犬瘟热疫苗的研究具有重要意义。 
（四）动物回归试验 雪貂最易感，死亡率接近100%，任何途径接种后均可在8～14d内死亡，或者选用断奶15d后的幼犬，皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀释病料悬液3～5ml。也可在鸡胚、小鼠、仓鼠中适应生长，但敏感性较低。 
（五）血清学诊断 刘润珍等用特异CD高免血清与金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）致敏，用协同凝集试验检测CDV，仅3～5min就可获得诊断结果。吴曙光等用CDV鸡胚成纤维细胞（CEF）弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体，用病貉肝脏制备琼脂扩散抗原，建立了琼脂扩散试验方法。与琼脂扩散试验相比较检出率提高20%。  医学研究犬瘟病的状态ELISA可用于评估犬瘟热的免疫和检测犬瘟热病毒。Soma T等[24]对比免疫过氧化物酶染色和抗体中和试验检测抗体效价，结果显示：免疫过氧化物酶染色可以检测到感染早期低水平的抗体。袁书智等应用直接荧光抗体染色法对CDV检测，可作为CDV是否感染的指标以及CD生前和死后诊断方法之一。Oyedele O I等建立了蚀斑减少中和法，评价疫苗接种效果和幼犬感染CDV的危险性。苏建青利用双抗体夹心的原理，建立了犬瘟热病毒胶体金免疫层析诊断试纸条。 [2]
（六）分子生物学诊断王宏俊等采用地高辛标记的cDNA为探针建立核酸探针检测CDV的方法，该方法特异性强、灵敏度高（0.1pg），临床初步应用结果表明该方法完全使用于临床检测。Frisk A L等用RT-PCR方法检测临床疑似病例样品中的犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因，实验结果显示：尽管所选取的引物的位置对RT-PCR的敏感性有很大的影响，但是这种核酸检测系统在对犬瘟热的生前诊断中表现出高度的特异性和敏感性。刘彩玉等根据GenBank中犬瘟热病毒H基因保守序列设计合成了内(FIP，BIP)、外(F3，B3)2对引物。通过对反应条件中内、外引物的比例、dNTP浓度、Mg2+浓度、反应温度和时间等条件逐一优化，成功建立了犬瘟热病毒的RT-LAMP检测方法。该方法与常规RT-PCR检测方法相比灵敏度高100倍。
犬瘟病毒的预防
在CD的预防时，要考虑细胞免疫与体液免疫两方面的因素。
预防CDV灭活苗或麻疹病毒疫苗都不能提供动物持久的免疫力，目前用于犬和经济动物的疫苗基本上是弱毒疫苗。但是弱毒疫苗的不足之处是热不稳定，对某些免疫缺陷幼犬和野生食肉动物的不安全性以及发生变态反应等，因此，人们已开始使用新技术研制新型疫苗，包括基因工程亚单位苗、重组病毒苗以及核酸疫苗等。  喷洒消毒水可杀灭部分犬瘟病毒
母源抗体可通过初乳转移给仔犬，幼犬母源抗体的半衰期是8.5d，多数仔犬的母源抗体在8~12周龄开始减弱，15周龄消失。另外可给犬注射犬瘟热单克隆抗体、犬瘟热免疫血清、免疫球蛋白、干扰素等。当血清中母源抗体下降到1：20以下时较易感，1：100以上时通常不易感，因此血清中和抗体滴度1：100是免疫接种的指示滴度[。母源抗体滴度不明的幼犬，一般初免为6周龄，二免为8~9周龄，三免为10~11周龄，以后每年接种一次。[2]
犬瘟病毒的治疗
治疗治疗原则为：对症治疗，控制细菌继发感染，维持体液平衡，增强抵抗力，控制神经症状。良好的护理是治疗成功的关键。治疗CD时一定在尽早大剂量使用高效价免疫血清的同时，进行以防止继发感染为中心的对症治疗与增强机体免疫功能的治疗，对于表现出神经症状的病犬，治疗的意义不大，症状进一步恶化者，可以考虑安乐死。
治疗方法为：干扰素700万IU，肌注，连用5d，犬瘟热病毒单克隆抗体5 mL，肌注，连用3～5d；消炎：使用适宜，广谱抗菌药，可配合抗病毒药物，静注，注意不要长期使用一种抗菌药，适量使用退烧药。输液以5%葡萄糖溶液、乳酸林格氏液为主，配以VC、VB6、ATP、辅酶A，在饮欲、食欲恢复前，保证每天输液量不低于400mL。另外可配合中药治疗如：金银花12g，连翘12g，板蓝根12g，黄柏15g，黄芩12g，水牛角15g，玄参12g，生地12g，知母12g，甘草15g，水煎，1d1剂，分2次经口给予。以上方法连用5d后，观察病犬情况，再根据情况进行治疗。  注射疫苗后在观察室查验反应
另一些最新的研究报道如：Alloferon1是从丽蝇体内分离出的活性多肽，体内试验结果表明对犬瘟热病毒感染的小鼠有明显的保护作用，有望成为犬瘟热防治的一种新型药物。口服苯妥英钠与静脉内注射盐酸普鲁卡因联合应用治疗神经型犬瘟热有良好的效果。体内外试验证明利巴韦林（RIB）能够抑制麻疹病毒的复制。EICAR是利巴韦林的类似物，在抑制CDV复制方面的活性强于利巴韦林，也同样均有浓度和时间依赖性。金丝桃素为藤黄科金丝桃属多年生草本植物的提取物，在先毒后药情况下可以有效抑制犬瘟热病毒的增殖。[2]  犬瘟病毒的治疗
  治疗犬瘟病毒的药物[3]