标题：重组人生长激素
简介
重组人生长激素
拼音名：Chongzu Ren Shengzhangjisu
英文名：Recombinant Human Somatropin
书页号：2000年版二部-494
该品是由191个氨基酸残基或N端有一甲硫氨酸的192个氨基酸残基组成的蛋白，可加适量赋形剂或
稳定剂。含重组人生长激素量应为标示量的90.0%～110.0%。
生产过程中，用体内生物测定方法测定其生物效价，每1mg蛋白效
价不得少于2.5单位。
重组人生长激素中残余宿主DNA和宿主细胞蛋白为与生产过程相关的、潜在的特异性杂质，必须在生
产过程中严格控制，其限度应符合有关规定。
性状
该品为白色冻干粉末。
鉴别
（1）取该品，加水制成每1ml中含2mg的溶液后，加入等体积的样品缓冲液（取浓缩胶缓冲液
2.5ml、20%十二烷基硫酸钠2.5ml、0.1%溴酚蓝溶液1.0ml、87%甘油3.5ml，加水至10ml），再加β-巯基乙
醇至终浓度为5%，置水浴中3分钟，放冷，作为供试品溶液；另取重组人生长激素对照品或甲酰化重组人生
长激素对照品，同法制备，作为对照品溶液。取对照品溶液和供试品溶液各5μl，加至样品孔，照电泳法（附录
Ⅴ F 第五法，银染色）试验，供试品主成分迁移率应与相应的对照品迁移率一致。
（2）在相关蛋白质检查项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与相应的对照品（重组人生长激
素或甲酰化重组人生长激素对照品）的保留时间一致。
（3）取该品适量，用水制成每1ml中含2mg的溶液，取150μl，加三羟甲基氨基甲烷-醋酸缓冲液（取氯
化钙0.294g、三羟甲基氨基甲烷12.11g，加水400ml使溶解，再用5mol/L醋酸溶液调节pH值至8.5，加
水至500ml)150μl、胰蛋白酶溶液[取经TPCK处理的胰蛋白酶适量，用1mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液
(pH5.0）制成每1ml中含1mg的溶液]10μl，混匀，置37℃水浴中4小时，加冰醋酸60μl终止反应，作为供试
品溶液；另取重组人生长激素或甲酰化重组人生长激素对照品适量，同法制备，作为对照品溶液。照高效液相
色谱法（附录Ⅴ D）试验，以辛基硅烷键合硅胶为填充剂（5～10μm）；以0.1%三氟醋酸溶液为流动相A，
0.1%三氟醋酸的乙腈溶液为流动相B，进行梯度洗脱。流速为每分钟1.0ml；柱温为35℃；检测波长
为214nm。
时间 流动相A 流动相B
0分 100% 0%
20分 80% 20%
45分 75% 25%
70分 50% 50%
75分 20% 80%
取对照品溶液和供试品溶液各100μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品的肽图谱应与对照品
的肽图谱一致。
检查
相关蛋白质 取该品适量，用0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（pH7.5）制成每1ml
中含1mg的溶液，作为供试品溶液；另取重组人生长激素或甲酰化重组人生长激素对照品适量，同法制备，
作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定，以丁基硅烷键合硅胶为填充剂（5～10μm）；0.05mol/L
三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（pH7.5）-正丙醇（约为71:29）为流动相，调节流动相中正丙醇比例使人生
长激素主峰保留时间为30～36分钟；流速为每分钟0.5ml；柱温为45℃；检测波长为220nm。取系统适用性
试验用溶液[取重组人生长激素对照品或甲酰化重组人生长激素对照品，用上述三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓
冲液制成每1ml中含2mg的溶液，加过氧化氢溶液使终浓度为0.01%(ml/ml），在4℃放置5小时后，每
1ml加4.5mg的L-甲硫氨酸]20μl注入液相色谱仪，重组人生长激素主峰与氧化的重组人生长激素峰之间
的分离度应符合规定。取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积归一化法计算，总相关蛋白
质含量不得过10.0%。
高分子蛋白质 取该品适量，照含量测定项下方法检查，按面积归一化法计算，高分子蛋白质含量不得
过4.0%。
无菌 取该品，依法检查（附录Ⅺ H 薄膜过滤法），应符合规定。
水分 取该品，照水分测定法（附录Ⅷ M 第一法 A）测定，含水分不得过10.0%。
细菌内毒素 取该品，依法检查（附录Ⅺ E），每1mg重组人生长激素中含内毒素的量应小于5EU。
含量测定
照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以适合分离分子量为5000～60000球状蛋白的色谱用亲水硅胶为填充
剂；以0.395%碳酸氢铵溶液为流动相；流速为每分钟0.6ml；检测波长为214nm。取系统适用性试验用溶液
（取人生长激素单体-二聚体对照品，用流动相制成每1ml中含1.5mg的溶液）20μl注入液相色谱仪，以人生
长激素单体和二聚体之间的峰谷高与二聚体的峰高之比作为分离度，分离度应不大于0.6。
测定法 取该品，加流动相制成每1ml中含1.0mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取
重组人生长激素对照品适量，同法则定。按外标法以峰面积计算。
测定方法
方法名称：重组人生长激素的测定—高效液相色谱法-分子排阻色谱法 
应用范围：该方法采用高分子排阻色谱法测定重组人生长激素的含量。
该方法适用于重组人生长激素。
方法原理：供试品制成磷酸盐缓冲液（pH7.0）的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长214nm处检测重组人生长激素的吸收值，计算出其含量。
试剂：1. 异丙醇
2. 磷酸盐缓冲液（pH7.0）
仪器设备：1. 仪器 
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
适合分子量为5000-60000球状蛋白的色谱用亲水硅胶为填充剂。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件 
2.1 流动相：异丙醇+磷酸缓冲液= 3+97
2.2 检测波长：214nm
2.3 柱温：室温
2.4 流速：0.6mL/min
试样制备：1. 磷酸盐缓冲液（pH7.0）
无水磷酸氢二钠5.18g，磷酸二氢钠3.65g，加水950mL，用85%磷酸溶液调pH值至7.0，加水至1000mL。
2. 称取供试品
精密称取该品粉末适量。
3. 对照品溶液的制备
精密称取重组人生长激素单体与二聚体混合对照品适量，用磷酸盐缓冲液制成每1mL含1.0mg的溶液。
4. 供试品溶液的制备
供试品置于索氏提取器中，加磷酸盐缓冲液溶解并定量稀释成每1mL含1.0mg的溶液，混匀，作为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长214nm处测定重组人生长激素单体与二聚体的吸收值，计算出其含量。
参考文献：中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.413。
类别
生长激素类药。
贮藏
密闭，2～8℃保存。
制剂
注射用重组人生长激素
重组人生长激素注射液
作用
一、调整内分泌系统恢复接近青春期水平，平衡情感波动，使乳房重新发育、增大上提、增加弹性并可推迟更年期。　　
二、能激活并维护免疫系统的正常工作，提高免疫抗病能力，使人体减少生病。　　
三、激活细胞的活性电子、振荡分子，使停止分裂的皮肤底层细胞再生长，活性电子吸附水分子使皮肤含水量增加，使面部深裂皱纹变浅，肤色光亮、变白、细嫩有弹性，恢复青春皮肤质地。　　
四、促进肌肉生长，阻止肌肉萎缩，从而消耗身体脂肪，尤为突出的是消耗人体的中心脂肪（肠、肝、腹腔内的脂肪和腹部、腰部的皮下脂肪），使肌肉和脂肪的排列恢复到青春状态。　　
五、是最有效的复苏性功能的物质，支持正常腺体功能，提高性欲望内分泌指数，使微血管开通。　　六、秃头、白发的改变，通过脑下垂体分泌化学信息，使头发毛囊细胞复活，充分增加养份，使酵素增加（白发成因=酵素减少），直接刺激垂死毛囊恢复生长。　　
七、调节人体中枢神经，促进脑细胞新陈代谢，增强记忆力、改善睡眠及缓解失眠、精神紧张、焦虑状态。对早老性痴呆症和老年性痴呆症具有辅助治疗作用。　　
八、促进心、肝、肾、胰岛等脏腑细胞的再生，恢复肝、肾、胰岛功能活力，对乙肝病毒带菌者；大小三阳；谷丙转氨酶超高；血糖超高；尿蛋白超高等肝病、肾病、糖尿病具有辅助疗效。　　
九、能促进伤口的愈合，重生烧伤的皮肤，减少局部水肿和疤痕的形成。　　
十、促进骨细胞对钙质的吸收和储存，防治骨质疏松。　　
十一、能增强体力，使人精力充沛，长时间工作而无疲劳感。　　
十二、能改善人的脾气，使人信心十足、情绪高涨，使人们焕发出年轻时的精神面貌。