Yuzaki lazerli desorbsiya/ionizatsiya

Yuzaki lazerli desorbsiya/ionizatsiya (SALDI) – bu biomolekulalar, polimerlar va kichik organik molekulalarning massa spektrometriya tahlili uchun ishlatiladigan yumshoq lazerli desorbsiya usuli hisoblanadi. Oʻzining birinchi variantida Koichi Tanaka kobalt-glitserin suyuq matritsasidan foydalangan va keyingi ilovalar grafit -glitserin suyuq matritsasi hamda gʻovakli kremniyning qattiq yuzasini oʻz ichiga olgan. Gʻovakli kremniy buzilmagan molekulyar ionlarni oson aniqlash imkonini beruvchi birinchi matritsasiz SALDI sirt tahlilini ifodalaydi, bu gözenekli kremniy yuzalar, shuningdek, yoktomol darajasida kichik molekulalarni tahlil qilishni osonlashtirdi. Hozirgi vaqtda nanomateriallar kabi boshqa noorganik matritsalardan foydalangan holda lazerli desorbsiya/ionlash usullari koʻpincha SALDI variantlari sifatida qaraladi. Misol tariqasida, silikon nanosimlar, shuningdek, Titania nanotube massivlari (NTA) kichik molekulalarni aniqlash uchun substrat sifatida ishlatilgan. SALDI oqsillarni va oqsil-oqsil komplekslarini aniqlash uchun ishlatiladi. Anʼanaviy SALDI bilan toʻgʻridan- toʻgʻri tahlil real vaqtda (DART) ion manbasini oʻz ichiga olgan atrof- muhit massa spektrometriyasining kombinatsiyasi boʻlgan „ambient SALDI“ deb nomlangan tegishli usul ham namoyish etildi. SALDI MSda eng muhim texnikalardan biri hisoblanadi va koʻplab ilovalarga ega.
link=//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/27/SALDI.jpg/286px-SALDI.jpg|thumb|286x286px| Yuzaki lazerli desorbsiya / ionlashning sxematik diagrammasi. Koʻk doiralar sirt zarralarini, qizil doiralar analit molekulalarini va zaryadlangan qizil doiralar zaryadlangan analitni ifodalaydi.

 Tarix 
Koichi Tanaka oqsillar ustida birinchi muvaffaqiyatli SALDI tajribalarini oʻtkazdi, keyinchalik Sunner va Chen 2-150 grafit zarralarini ishlatdilar. Past molekulyar ogʻirlikdagi analitlar, peptidlar va kichik oqsillarni tahlil qilish uchun substrat va glitserindagi analitlarning eritmalari sifatida. Birinchi sirt yordamida lazerli desorbsiya/ionizatsiya MS (SALDI-MS) tajribalari. 1999-yilda Siuzdak laboratoriyasida oʻtkazildi, bu kichik molekula metabolitlari va peptidlarni nanostrukturali kremniy yuzasi yordamida tahlil qilish imkonini beradi. Nanostrukturalar boʻyicha keyingi ishlar desorbsiya/ionlanish, massa diapazoni, sirt mustahkamligi va sezuvchanligini oshirish uchun gʻovakli sirtga ftorlangan „boshlovchi“ molekulalarni qoʻshishni oʻz ichiga oladi. Boshqa sirtga asoslangan SALDI-MS yondashuvlari ham ishlab chiqilgan, shu jumladan 2000-yilda faollashtirilgan uglerod zarralarining yupqa qatlami alyuminiy tayanchga biriktirilgan 1999-yildagi nanostrukturali kremniy tajribalaridan beri tadqiqot asosan yangi nanomateriallarni joriy etishga qaratilgan. substrat sifatida, sezgirlikni oshirish, ommaviy diapazonni kengaytirish va ushbu texnika yordamida tahlil qilinadigan namunalar toifalarini kengaytirish.

SALDI tizim biologiyasida, xususan, metabolomikada potentsial ilovalar bilan istiqbolli usul sifatida joriy etilgan. SALDI substratlari sifatida nanomateriallarning kiritilishi analitik kimyo tadqiqotchilarini jalb qildi. Bunday materiallarga uglerod nanotubalari (CNT), Ag, Pt, Au kabi metall nanozarralar va nanostrukturali sirtlar kiradi. Substratlarning bunday rivojlanishi SALDI ning yanada rivojlanishiga imkon berdi.

Xususan, kremniy (DIOS)-MSda desorbsiya/ionlashning rivojlanishi va keyinchalik nanostruktura-inisiator massa spektrometriyasi (NIMS) va nano-yordamli lazer desorbsiyasi/ionizatsiyasi (NALDI) ham eʼtiborni tortdi. tahlilchi olimlar. Keyinchalik bu usullar yarimoʻtkazgichlarga asoslangan SALDI tadqiqotlari uchun etalonga aylandi.

SALDI ning asosiy printsipi lazerdan energiyani yutib, keyin energiyani maqsadli namunaga oʻtkazadigan vositaga tayanadi. Energiyaning asosiy qismi namuna molekulalari oʻrniga substratga tushadigan ushbu texnikalar sinfi yumshoq ionlash usullari deb nomlanadi. SALDI ning rivojlanishi matritsa yordamida lazerli desorbsiya/ionizatsiya (MALDI) modifikatsiyasi sifatida boshlangan. Ilgari texnika MALDI matritsa molekulalarining ionlanish aralashuvidan aziyat chekdi. SALDI MALDI ning organik matritsasi oʻrniga odatda noorganik komponentlardan iborat maxsus substratlarning faol yuzasini almashtirdi.

SALDI uch bosqichli jarayondir. Birinchi bosqich asosan namunalarni substrat bilan aralashtirish bilan bogʻliq. Ikkinchi bosqichda lazer impulslari aralashmaga qoʻllanadi, bu yerda substrat lazer energiyasini oʻzlashtiradi va uni namuna molekulalariga oʻtkazadi. Yakuniy bosqichda desorbsiya va ionlanish sodir boʻladi va potentsial farq hosil boʻlgan ionlarni massa analizatoriga tezlashtiradi.

 Substratlar 
Substrat yuzasi analit molekulalarining adsorbsiyasi, desorbsiyasi va ionlanishida katta rol oʻynaydi. Bu rolga asosan substratning kimyoviy va fizik xususiyatlari taʼsir qiladi. Ushbu jismoniy xususiyatlar orasida optik yutilish koeffitsienti, issiqlik sigʻimi va issiqlik oʻtkazuvchanligi mavjud.

1) Optik assimilyatsiya koeffitsienti: chunki bu substratning yutilish qobiliyatini oshiradi va energiyani yutishda koʻproq issiqlik hosil qiladi.

2) Issiqlik sigʻimi: bu pasayganda, bir xil issiqlik miqdori kattaroq harorat oshishiga olib keladi.

3) Issiqlik oʻtkazuvchanligi: bu pasayganda, substrat yuqori haroratni yaxshiroq ushlab turadi; shuning uchun analitlarning adsorbsiyasi, desorbsiyasi va ionlanishi tezroq va samaraliroq sodir boʻladi.

SALDI-MS da qoʻllanadigan nanomateriallarning uchta klassi mavjud. Yaʼni, uglerodga asoslangan, yarimoʻtkazgichga asoslangan va metallga asoslangan.
link=//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/f/f4/Nanotubos_tipos.png/220px-Nanotubos_tipos.png|thumb| Uglerod nanotubalarining shakllari: koʻp yoki bitta devorli uglerod nanotubalari

 Uglerod nanotubalari va uglerodga asoslangan 
Uglerod nanotube atamasi oʻralgan grafen varaqli silindrga ishora qiladi. CNT bitta devorli (SWNT) yoki koʻp devorli (MWNT) boʻlishi mumkin. SWNTʼlar UVdan uzoq infraqizilgacha boʻlgan elektromagnit nurlanishdagi ideal qora jismning mukammal simulyatorlaridir. Ular super qora (kimyoviy ishlangan nikel-fosfor qotishmasi) kabi avvalgi materiallarga qaraganda yaxshiroq ishlashni namoyish etadilar. Bu CNT ni lazerli massa spektrometriya ilovalari uchun kerakli materialga aylantiradi. Shuning uchun ular 1991-yilda kashf etilganidan beri tadqiqotchilarni oʻziga jalb qildi.

 Grafen sirt materiali sifatida 
Grafen – 2004-yilda kashf etilgan mashhur uglerod nanomaterialining bir turi. U analit molekulalarini samarali biriktira oladigan katta sirt maydoniga ega. Boshqa tomondan, grafen qatlamidagi analitlar uchun desorbsiya/ionizatsiya samaradorligi uning oddiy mono qatlamli tuzilishi va noyob elektron xususiyatlari bilan oshirilishi mumkin. Aminokislotalar, poliaminlar, saratonga qarshi dorilar va nukleozidlarni oʻz ichiga olgan qutbli birikmalar muvaffaqiyatli tahlil qilinishi mumkin. Bundan tashqari, qutbsiz molekulalar grafenning hidrofobik tabiati tufayli yuqori aniqlik va sezgirlik bilan tahlil qilinishi mumkin. Anʼanaviy matritsa bilan solishtirganda, grafen qutbsiz birikmalar uchun yuqori desorbsiya / ionlanish samaradorligini namoyish etadi. Grafen substrati analitlarni ushlab turish uchun substrat vazifasini bajaradi va lazer nurlanishida energiyani analitlarga oʻtkazadi, bu esa analitlarni osongina desorbsiyalash/ionlash va matritsaning aralashuvini bartaraf etish imkonini beradi. Substrat materiali sifatida grafendan foydalanish tahlil qiluvchi moddalarning parchalanishini oldini olishi va yaxshi takrorlanuvchanlik va yuqori tuzga chidamliligini taʼminlashi koʻrsatildi.

 Nanostrukturali yarimoʻtkazgichga asoslangan SALDI 
Gʻovakli kremniy SALDI uchun samarali substrat boʻlib xizmat qildi, uning gʻovakli tuzilishi analitlarni ushlab turishga yordam berdi va uning noyob optik faolligi lazer energiyasini adsorbatga samarali oʻtkazdi. Bu biologik kichik molekulalarning keng doirasini tahlil qilish uchun samarali boʻldi. yaqinda desorbsiya uchun portlovchi bugʻlanishni qoʻllash natijasida nanostrukturali Imaging massa spektrometriyasi (NIMS) nomli yangi texnika joriy etildi.

SALDI substrati sifatida gözenekli kremniy sirtining mexanizmi uch bosqichni oʻz ichiga oladi:

1) Adsorbsiya: analit silanol guruhlari yordamida vodorod bogʻlanishi orqali gʻovakli kremniy bilan adsorbsiyalanadi.

2) Elektron qoʻzgʻalish: lazer zarbasi kremniyni qoʻzgʻatadi va sirt qatlamida erkin elektronlar va musbat zaryadlar hosil qiladi. Bu protonni tahlil qiluvchi moddalarga osonlikcha beradigan silanol guruhlarining kislotaliligini oshiradi.

3) Termal faollashtirish: analitlar termal faollashadi va sirtdan ajralib chiqadi.

Asboblarlink=//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/b/b9/Schematic_illustration_of_SALDI_instrument. JPG/220px-Schematic_illustration_of_SALDI_instrument. JPG|thumb| SALDI asbobining sxematik tasviri
SALDI MALDI-ni takomillashtirish sifatida MALDI-ga juda oʻxshash asbobdan foydalangan. U analit va substrat materiallaridan tashkil topgan namuna aralashmasini qoʻzgʻatish uchun mas’ul boʻlgan impulsli lazer hosil qilish uchun lazer manbasidan foydalanadi. Asbobning narigi tomonida analizatorlarni massa-zaryad nisbati (m/z) boʻyicha ajratuvchi massa analizator va detektor joylashgan. Analitlar potentsial farqni qoʻllash orqali analizatorga tezlashtiriladi.

 Biokimyoviy 

 Metabolik profilni aniqlash 
Metabolomika boʻyicha ish va tadqiqotlar ortib borishi bilan yangi oʻrganish yondashuvlarini joriy qilish uchun yangi texnikalar zarur edi. SALDI-MS va toʻgʻridan-toʻgʻri tahlilli mass-spektrometriya (DAMS) oilasi metabolomikada yangi yondashuvlar sifatida joriy etildi. Goodacre va boshqalar. xamirturushni oʻrganish uchun DIOS-MS texnikasidan foydalangan. Ular xamirturush tomonidan ajratilgan xamirturush metabolitlarini tasvirlab berdilar, bu xamirturushning metabolik „izi“ ga erishish mumkinligini koʻrsatdi. Oldingi tadqiqot ishida xuddi shu guruh elektrosprey ionizatsiyasi bilan toʻgʻridan-toʻgʻri infuzion massa spektrometriyasini (DIMS) ishlatgan. Ular koʻp sonli yovvoyi turlar va mutantlarning metabolik profillarini oʻrganishdi; va potentsial biomarkerlarni aniqlash uchun maʼlumotlarni tahlil qilish uchun matematik usullar qoʻllanilgan.

Mass-spektrometriyani tasvirlash

SALDI sichqonchaning yuragi va miya toʻqimalarini tasvirlash uchun ishlatilgan. Bu birinchi erishilgan SALDI-MS edi. SALDIda boʻlgani kabi, lazer toʻqima orqali oʻtishi va uning ostidagi qatlam tomonidan soʻrilishi kerak, qalinligi cheklovchi omil boʻladi va tadqiqotchilar toʻqimalar boʻlimiga organik matritsani kiritish orqali bu omilni engishga muvaffaq boʻlishdi. Bu texnikada qoʻllanadigan turli jarayonlarni hisobga olish va texnikani yaxshilagan modifikatsiyani koʻrsatish uchun matritsali kengaytirilgan sirt yordamida lazer desorbsiyasi/ionlashtiruvchi massa spektrometriyasi (ME-SALDI-MS) deb nomlandi.

Miya toʻqimalarida dori molekulalarining tarqalishini, keyin miya toʻqimalarida xolesterin tarqalishini va Gerbera jamesonii gul poyasida saxaroza tarqalishini tasvirlash uchun koʻproq ish olib borildi. Dori molekulalari va ularning metabolitlarini bevosita tahlil qilish uchun biosuyuqliklar ham oʻrganilgan.

 

Turkum:Pages with unreviewed translations