ZJUFanLab/TCMChat-dataset-600k huggingface dataset:
中文名:多药耐药性英文名:multidrugresistance，multipledrugresistance中文别名:多药抗药性，多重抗药性，多重耐药性多药耐药性（MDR）是指对一种药物具有耐药性的同时，对其他结构不同，作用靶点不同的抗肿瘤药物也具有耐药性。
多药耐药性是导致抗感染药物治疗和肿瘤化疗失败的重要原因之一，2010年出现的“超级细菌”也是多药耐药性的一种。
原因多药耐药性的产生是由于细胞解除药物活性的分子发生变异或过度表达引起的。
细菌的多药耐药性主要与内酰胺酶的变异引起的，而肿瘤细胞的多药耐药性是由于细胞膜上过度表达外排抗肿瘤药物的蛋白引起的，如P-糖蛋白的过度表达。
治疗有几种逆转和克服耐药性的策略1.使用没有交叉耐药性的药物2.抑制引起多药耐药性蛋白的功能，克服耐药性3.用维拉帕米逆转耐药性（肿瘤细胞）
蛋白质组学（Proteomics）一词，源于蛋白质（protein）与基因组学（genomics）两个词的组合，意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。
蛋白质组本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识，这个概念最早是由MarcWilkins在1995年提出的。
蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明  蛋白质组学及攻克提供理论根据和解决途径。
通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。
确实，那些世界范围内销路最好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。
因此，蛋白质组学研究不仅是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益。
蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征。
蛋白质组(Proteome)的概念最先由MarcWilkins提出，指由一个基因组(genOME)，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质(PROTein).蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别，它随着组织、甚至环境状态的不同而改变.在转录时，一个基因可以多种mRNA形式剪接，并且，同一蛋白可能以许多形式  蛋白质组学进行翻译后的修饰.故一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物，蛋白质组中蛋白质的数目有时可以超过基因组的数目.蛋白质组学(Proteomics)处于早期“发育”状态，这个领域的专家否认它是单纯的方法学，就像基因组学一样，不是一个封闭的、概念化的稳定的知识体系，而是一个领域.蛋白质组学集中于动态描述基因调节，对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定，鉴定疾病、药物对生命过程的影响，以及解释基因表达调控的机制.作为一门科学，蛋白质组研究并非从零开始，它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技术的一种延伸.多肽图谱依靠双向电泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE)和进一步的图象分析；而基因产物图谱依靠多种分离后的分析，如质谱技术、氨基酸组分分析等.90年代初期开始实施的人类基因组计划，在经过各国科学家近10年的努力下，已经取得了  蛋白质组学巨大的成就。
不仅完成了十余种模式生物（从大肠杆菌、酿酒酵母到线虫）基因组全序列的测定工作，还有望在2003年提前完成人类所有基因的全序列测定。
那么，知道了人类的全部遗传密码即基因组序列，就可以任意控制人的生老病死吗？
其实并不是这么简单。
基因组学（genomics）虽然在基因活性和疾病的相关性方面为人类提供了有力根据,但实际上大部分疾病并不是因为基因改变所造成。
并且，基因的表达方式错综复杂，同样的一个基因在不同条件、不同时期可能会起到完全不同的作用。
关于这些方面的问题，基因组学是无法回答的。
所以，随着人类基因组计划的逐步完成，科学家们又进一步提出了后基因组计划，蛋白质组（proteome）研究是其中一个很重要的内容。
目前，在蛋白质功能方面的研究是极其缺乏的。
大部分通过基因组测序而新发现的基因编码的蛋白质的功能都是未知的，而对那些已知功能的蛋白而言，它们的功能也大多是通过同源基因功能类推等方法推测出来的。
有人预测，人类基因组编码的蛋白至少有一半是功能未知的。
因此，在未来的几年内，随着至少30种生物的基因组测序工作的完成，人们研究的重点必将转到蛋白质功能方面，而蛋白质组的研究正可以完成这样的目标。
在蛋白质组的具体应用方面，蛋白质在疾病中的重要作用使得蛋白质组学在人类疾病的研究中有着极为重要的价值。
基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。
很显然，不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。
mRNA经翻译产生蛋白质，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组(proteome)。
同理，不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也不尽相同。
蛋白质是基因功能的实施者，因此对蛋白质结构，定位和蛋白质-蛋白质相互作用的研究将为阐  人类蛋白质组计划明生命现象的本质提供直接的基础。
生命科学是实验科学，因此生命科学的发展极大地依赖于实验技术的发展。
以DNA序列分析技术为核心的基因组研究技术推动了基因组研究的日新月异，而以基因芯片技术为代表的基因表达研究技术为科学家了解基因表达规律立下汗马功劳。
在蛋白质组研究中，二维电泳和质谱技术的黄金组合又为科学家掌握蛋白质表达规律再铸辉煌。
蛋白质组学(proteomics)就是指研究蛋白质组的技术及这些研究得到的结果。
蛋白质组学的研究试图比较细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。
更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能。
蛋白质研究1.蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。
2.翻译后修饰：很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化，糖基化，酶原激活等。
翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式，因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明蛋白质的功能具有重要作用。
3.蛋白质功能确定：如分析酶活性和确定酶底物，细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。
可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。
另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。
Clontech的荧光蛋白表达系统就是研究蛋白质在细胞内定位的一个很好的工具。
蛋白质生物合成4.对人类而言，蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康，主要指促进分子医学的发展。
如寻找药物的靶分子。
很多药物本身就是蛋白质，而很多药物的靶分子也是蛋白质。
药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。
在基础医学和疾病机理研究中，了解人不同发育、生长期和不同生理、病理条件下及不同细胞类型的基因表达的特点具有特别重要的意义。
这些研究可能找到直接与特定生理或病理状态相关的分子，进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。
细胞甚至亚细胞研究不同发育、生长期和不同生理、病理条件下不同的细胞类型的基因表达是不一致的，因此对蛋白质表达的研究应该精确到细胞甚至亚细胞水平。
可以利用免疫组织化学技术达到这个目的，但该技术的致命缺点是通量低。
LCM(LaserCaptureMicrodissection)技术可以精确地从组织切片中取出研究者感兴趣的细胞类型，因此LCM技术实际上是一种原位技术。
取出的细胞用于蛋白质样品的制备，结合抗体芯片或二维电泳-质谱的技术路线，可以对蛋白质的表达进行原位的高通量的研究。
很多研究采用匀浆组织制备蛋白质样品的技术路线，其研究结论值得怀疑，因为组织匀浆后不同细胞类型的蛋白质混杂在一起，最后得到的研究数据根本无法解释蛋白质在每类细胞中的表达情况。
虽然培养细胞可以得到单一类型细胞，但体外培养的细胞很难模拟体内细胞的环境，因此这样研究得出的结论也很难用于解释在体实际情况。
因此在研究中首先应该将不同细胞类型分离，分离出来的不同类型细胞可以用于基因表达研究，包括mRNA和蛋白质的表达。
LCM技术获得的细胞可以用于蛋白质样品的制备。
可以根据需要制备总蛋白，或膜蛋白，或核蛋白等，也可以富集糖蛋白，或通过去除白蛋白来减少蛋白质类型的复杂程度。
相关试剂盒均有厂商提供。
二维电泳分离蛋白质蛋白质样品中的不同类型的蛋白质可以通过二维电泳进行分离。
二维电泳可以将不同种类的蛋白质按照等电点和分子量差异进行高分辨率的分离。
成功的二维电泳可以将2000到3000种蛋白质进行分离。
电泳后对胶进行高灵敏度的染色如银染和荧光染色。
如果是比较两种样品之间蛋白质表达的异同，可以在同样条件下分别制备二者的蛋白质样品，然后在同样条件下进行二维电泳，染色后比较两块胶。
也可以将二者的蛋白质样品分别用不同的荧光染料标记，然后两种蛋白质样品在一块胶上进行二维电泳的分离，最后通过荧光扫描技术分析结果。
胶染色后可以利用凝胶图像分析系统成像，然后通过分析软件对蛋白质点进行定量分析，并且对感兴趣的蛋白质点进行定位。
通过专门的蛋白质点切割系统，可以将蛋白质点所在的胶区域进行精确切割。
接着对胶中蛋白质进行酶切消化，酶切后的消化物经脱盐/浓缩处理后就可以通过点样系统将蛋白质点样到特定的材料的表面（MALDI-TOF）。
最后这些蛋白质就可以在质谱系统中进行分析，从而得到蛋白质的定性数据;这些数据可以用于构建数据库或和已有的数据库进行比较分析。
LCM-二维电泳-质谱的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线，除此以外，LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。
即通过LCM技术获得感兴趣的细胞类型，制备细胞蛋白质样品，蛋白质经荧光染料标记后和抗体芯片杂交，从而可以比较两种样品蛋白质表达的异同。
Clontech最近开发了一张抗体芯片，可以对378种膜蛋白和胞浆蛋白进行分析。
该芯片同时配合了抗体芯片的全部操作过程的重要试剂，包括蛋白质制备试剂，蛋白质的荧光染料标记试剂，标记体系的纯化试剂，杂交试剂等。
对于蛋白质相互作用的研究，酵母双杂交和噬菌体展示技术无疑是很好的研究方法。
Clontech开发的酵母双杂交系统和NEB公司开发的噬菌体展示技术可供研究者选用。
关于蛋白质组的研究，也可以将蛋白质组的部分或全部种类的蛋白质制作成蛋白质芯片，这样的蛋白质芯片可以用于蛋白质相互作用研究，蛋白表达研究和小分子蛋白结合研究。
Science，Vol.293，Issue5537，2101-2105，September14，2001发表了一篇关于酵母蛋白质组芯片的论文。
该文主要研究内容为：将酵母的5800个ORF表达成蛋白质并进行纯化点样制作芯片，然后用该芯片筛选钙调素和磷脂分子的相互作用分子。
最后有必要指出的是，传统的蛋白质研究注重研究单一蛋白质，而蛋白质组  吸血虫蛋白质组学研究学注重研究参与特定生理或病理状态的所有的蛋白质种类及其与周围环境(分子)的关系。
因此蛋白质组学的研究通常是高通量的。
适应这个要求，蛋白质组学相关研究工具通常都是高度自动化的系统，通量高而速度快，配合相应分析软件和数据库，研究者可以在最短的时间内处理最多的数据研究意义随着人类基因组计划的实施和推进，生命科学研究已进入了后基因组时代。
在这个时代，生命科学的主要研究对象是功能基因组学，包括结构基因组研究和蛋白质组研究等。
尽管现在已有多个物种的基因组被测序，但在这些基因组中通常有一半以上基因的功能是未知的。
目前功能基因组中所采用的策略，如基因芯片、基因表达序列分析(Serialanalysisofgeneexpression,SAGE)等，都是从细胞中mRNA的角度来考虑的，其前提是细胞中mRNA的水平反映了蛋白质表达的水平。
但事实并不完全如此，从DNAmRNA蛋白质，存在三个层次的调控，即转录水平调控(Transcriptionalcontrol)，翻译水平调控(Translationalcontrol)，翻译后水平调控(Post-translationalcontrol)。
从mRNA角度考虑，实际上仅包括了转录水平调控，并不能全面代表蛋白质表达水平。
实验也证明，组织中mRNA丰度与蛋白质丰度的相关性并不好，尤其对于低丰度蛋白质来说，相关性更差。
更重要的是，蛋白质复杂的翻译后修饰、蛋白质的亚细胞定位或迁移、蛋白质－蛋白质相互作用等则几乎无法从mRNA水平来判断。
毋庸置疑，蛋白质是生理功能的执行者，是生命现象的直接体现者，对蛋白质结构和功能的研究将直接阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。
蛋白质本身的存在形式和活动规律，如翻译后修饰、蛋白质间相互作用以及蛋白质构象等问题，仍依赖于直接对蛋白质的研究来解决。
虽然蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多，但正是这些特性参与和影响着整个生命过程。
蛋白质组学书籍传统的对单个蛋白质进行研究的方式已无法满足后基因组时代的要求。
这是因为：(1)生命现象的发生往往是多因素影响的，必然涉及到多个蛋白质。
(2)多个蛋白质的参与是交织成网络的，或平行发生，或呈级联因果。
(3)在执行生理功能时蛋白质的表现是多样的、动态的，并不象基因组那样基本固定不变。
因此要对生命的复杂活动有全面和深入的认识，必然要在整体、动态、网络的水平上对蛋白质进行研究。
因此在上世纪90年代中期，国际上产生了一门新兴学科－蛋白质组学（Proteomics），它是以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象。
可以说蛋白质组研究的开展不仅是生命科学研究进入后基因组时代的里程碑，也是后基因组时代生命科学研究的核心内容之一。
研究背景虽然第一次提出蛋白质组概念是在1994年，但相关研究可以追溯到上世纪90年代中期甚至更早，尤其是80年代初，在基因组计划提出之前，就有人提出过类似的蛋白质组计划，当时称为HumanProteinIndex计划，旨在分析细胞内的所有蛋白质。
但由于种种原因，这一计划被搁浅。
90年代初期，各种技术已比较成熟，在这样的背景下，经过各国科学家的讨论，才提出蛋白质组这一概念。
国际上蛋白质组研究进展十分迅速，不论基础理论还是技术方法，都在不断进步和完善。
相当多种细胞的蛋白质组数据库已经建立，相应的国际互联网站也层出不穷。
1996年，澳大利亚建立了世界上第一个蛋白质组研究中心：AustraliaProteomeAnalysisFacility(APAF)。
丹麦、加拿大、日本也先后成立了蛋白质组研究中心。
在美国，各大药厂和公司在巨大财力的支持下，也纷纷加入蛋白质组的研究阵容。
去年在瑞士成立的GeneProt公司，是由以蛋白质组数据库“SWISSPROT”著称的蛋白质组研究人员成立的，以应用蛋白质组技术开发新药物靶标为目的，建立了配备有上百台质谱仪的高通量技术平台。
而当年提出HumanProteinIndex的美国科学家NormsnG.Anderson也成立了类似的蛋白质组学公司，继续其多年未实现的梦想。
2001年4月，在美国成立了国际人类蛋白质组研究组织（HumanProteomeOrganization,HUPO）,随后欧洲、亚太地区都成立了区域性蛋白质组研究组织，试图通过合作的方式，融合各方面的力量，完成人类蛋白质组计划（HumanProteomeProject）。
可以说，蛋白质组学的发展既是技术所推动的也是受技术限制的。
蛋白质组学研究成功与否，很大程度上取决于其技术方法水平的高低。
蛋白质研究技术远比基因技术复杂和困难。
不仅氨基酸残基种类远多于核苷酸残基（20/4）,而且蛋白质有着复杂的翻译后修饰，如磷酸化和糖基化等，给分离和分析蛋白质带来很多困难。
此外，通过表达载体进行蛋白质的体外扩增和纯化也并非易事，从而难以制备大量的蛋白质。
蛋白质组学的兴起对技术有了新的需求和挑战。
蛋白质组的研究实质上是在细胞水平上对蛋  蛋白质组学书籍白质进行大规模的平行分离和分析，往往要同时处理成千上万种蛋白质。
因此，发展高通量、高灵敏度、高准确性的研究技术平台是现在乃至相当一段时间内蛋白质组学研究中的主要任务。
当前在国际蛋白质组研究技术平台的技术基础和发展趋势有以下几个方面：样品制备通常可采用细胞或组织中的全蛋白质组分进行蛋白质组分析。
也可以进行样品预分级，即采用各种方法将细胞或组织中的全体蛋白质分成几部分，分别进行蛋白质组研究。
样品预分级的主要方法包括根据蛋白质溶解性和蛋白质在细胞中不同的细胞器定位进行分级，如专门分离出细胞核、线粒体或高尔基体等细胞器的蛋白质成分。
样品预分级不仅可以提高低丰度蛋白质的上样量和检测，还可以针对某一细胞器的蛋白质组进行研究。
对临床组织样本进行研究，寻找疾病标记，是蛋白质组研究的重要方向之一。
但临床样本都是各种细胞或组织混杂，而且状态不一。
如肿瘤组织中，发生癌变的往往是上皮类细胞，而这类细胞在肿瘤中总是与血管、基质细胞等混杂。
所以，常规采用的癌和癌旁组织或肿瘤与正常组织进行差异比较，实际上是多种细胞甚至组织蛋白质组混合物的比较。
而蛋白质组研究需要的通常是单一的细胞类型。
最近在组织水平上的蛋白质组样品制备方面也有新的进展，如采用激光捕获微解剖(LaserCaptureMicrodissection,LCM)方法分离癌变上皮类细胞。
样品分离和分析利用蛋白质的等电点和分子量通过双向凝胶电泳的方法将各种蛋白质区分开来是一种很有效的手段。
它在蛋白质组分离技术中起到了关键作用。
如何提高双向凝胶电泳的分离容量、灵敏度和分辨率以及对蛋白质差异表达的准确检测是目前双向凝胶电泳技术发展的关键问题。
国外的主要趋势有第一维电泳采用窄pH梯度胶分离以及开发与双向凝胶电泳相结合的高灵敏度蛋白质染色技术，如新型的荧光染色技术。
质谱技术是目前蛋白质组研究中发展最快，也最具活力和潜力的技术。
它通过测定蛋白质的质量来判别蛋白质的种类。
当前蛋白质组研究的核心技术就是双向凝胶电泳－质谱技术，即通过双向凝胶电泳将蛋白质分离，然后利用质谱对蛋白质逐一进行鉴定。
对于蛋白质鉴定而言，高通量、高灵敏度和高精度是三个关键指标。
一般的质谱技术难以将三者合一，而最近发展的质谱技术可以同时达到以上三个要求，从而实现对蛋白质准确和大规模的鉴定。
蛋白质组研究的新技术做过双向凝胶电泳的人一定会抱怨它的繁琐、不稳定和低灵敏度等缺点。
发展可替代或补充双向凝胶电泳的新方法已成为蛋白质组研究技术最主要的目标。
目前，二维色谱(2D-LC)、二维毛细管电泳(2D-CE)、液相色谱－毛细管电泳(LC-CE)等新型分离技术都有补充和取代双向凝胶电泳之势。
另一种策略则是以质谱技术为核心，开发质谱鸟枪法(Shot-gun)、毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)等新策略直接鉴定全蛋白质组混合酶解产物。
随着对大规模蛋白质相互作用研究的重视，发展高通量和高精度的蛋白质相互作用检测技术也被科学家所关注。
此外，蛋白质芯片的发展也十分迅速，并已经在临床诊断中得到应用。
研究设备蛋白质组生物信息学蛋白质组数据库是蛋白质组研究水平的标志和基础。
瑞士的SWISS-PROT拥有目前世界上最大，种类最多的蛋白质组数据库。
丹麦、英国、美国等也都建立了各具特色的蛋白质组数据库。
生物信息学的发展已给蛋白质组研究提供了更方便有效的计算机分析软件；特别值得注意的是蛋白质质谱鉴定软件和算法发展迅速，如SWISS-PROT、Rockefeller大学、UCSF等都有自主的搜索软件和数据管理系统。
最近发展的质谱数据直接搜寻基因组数据库使得质谱数据可直接进行基因注释、判断复杂的拼接方式。
随着基因组学的迅速推进，会给蛋白质组研究提供更多更全的数据库。
另外，对肽序列标记的从头测序软件也十分引人注目。
蛋白质组学技术的发展已经成为现代生物技术快速发展的重要支撑，并将引领生物技术取得关键性的突破。
为帮助生命科学领域的工作者全面掌握蛋白质组学的技术与方法、实验难点与关键点、研究前沿与热点，本技术平台将为客户提供蛋白组学技术服务，包括双向凝胶电泳、等电聚焦、生物质谱分析及非凝胶技术。
双向凝胶电泳双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。
由于双向电泳技术在蛋白质组与医学研究中所处的重要位置，它可用于蛋白质转录及转录后修饰研究，蛋白质组的比较和蛋白质间的相互作用，细胞分化凋亡研究，致病机制及耐药机制的研究，疗效监测，新药开发，癌症研究，蛋白纯度检查，小量蛋白纯化，新替代疫苗的研制等许多方面。
近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。
等电聚焦等电聚焦（isoelectricfocusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。
等电聚焦凝胶电泳依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。
载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续的pH梯度。
蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场中移动；当蛋白质迁移至其等电点位置时，其静电荷数为零，在电场中不再移动，据此将蛋白质分离。
生物质谱生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术，其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子之间的荷质比（M/E）的差异来分离并确定分子量。
对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽键）成肽段，对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。
目前常用的质谱包括两种：基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和电喷雾质谱（ESI-MS）。
飞行时间质谱MALDI的电离方式是Karas和Hillenkamp于1988年提出。
MALDI的基本原理是将分析物分散在基质分子（尼古丁酸及其同系物）中并形成晶体，当用激光（337nm的氮激光）照射晶体时，基质分子吸收激光能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使样品分子电离。
它从固相标本中产生离子，并在飞行管中测定其分子量，MALDI-TOF-MS一般用于肽质量指纹图谱，非常快速（每次分析只需3~5min），灵敏（达到fmol水平），可以精确测量肽段质量，但是如果在分析前不修饰肽段，MALDI-TOF-MS不能给出肽片段的序列。
电喷雾质谱（ESI-MS）ESI-MS是利用高电场使质谱进样端的毛细管柱流出的液滴带电，在N2气流的作用下，液滴溶剂蒸发，表面积缩小，表面电荷密度不断增加，直至产生的库仑力与液滴表面张力达到雷利极限，液滴爆裂为带电的子液滴，这一过程不断重复使最终的液滴非常细小呈喷雾状，这时液滴表面的电场非常强大，使分析物离子化并以带单电荷或多电荷的离子形式进入质量分析器。
ESI-MS从液相中产生离子，一般说来，肽段的混合物经过液相色谱分离后，经过偶联的与在线连接的离子阱质谱分析，给出肽片段的精确的氨基酸序列,但是分析时间一般较长。
目前，许多实验室两种质谱方法连用，获得有意义的蛋白质的肽段序列，设计探针或引物来获得有意义的基因。
随着蛋白质组研究的深入，又有多种新型质谱仪出现，主要是在上述质谱仪的基础上进行改进与重新组合。
核酸与蛋白质是构成生物体的主要大分子。
随着人类基因组等大量生物体全基因组序列的破译和功能基因组研究的展开，生命科学家越来越关注如何用基因组研究的模式开展蛋白质组学的研究。
正因如此，《Nature》、《Science》在2001年2月公布人类基因组草图的同时，分别发表了“Andnowfortheproteome”和“Proteomicsingenomeland”的述评与展望，将蛋白质组学的地位提到前所未有的高度，认为蛋白质组学将成为新世纪最大战略资源---人类基因争夺战的战略制高点之一。
样品处理系统蛋白质组学虽然问世时间很短，但已经在研究细胞的增殖、分化、异常转化、肿瘤形成等方面进行了有力的探索，涉及到白血病、乳腺癌、结肠癌、膀胱癌、前列腺癌、肺癌、肾癌和神经母细胞瘤等，鉴定了一批肿瘤相关蛋白，为肿瘤的早期诊断、药靶的发现、疗效判断和预后提供了重要依据。
鉴于蛋白质组学发展前景的重要性和技术的先进性，西方各主要发达国家纷纷投巨资全面启动蛋白质组的研究。
如美国国立卫生研究院，美国能源部、欧共体等均启动了不同生物蛋白质组的研究并取得明显进展，一批高质量的研究论文相继在国际著名学术刊物发表。
由于蛋白质组学研究比基因组学研究更接近实用，有着巨大的市场前景，企业与制药公司也纷纷斥巨资开展蛋白质组研究。
独立完成人类基因组测序的Celera公司已宣布投资上亿美元于此领域；日内瓦蛋白质组公司与布鲁克质谱仪制造公司联合成立了国际上最大的蛋白质组研究中心。
为了促进国家与地区性的蛋白质组的发展、合作与交流，成立了国际人类蛋白质组组织(HUPO)，在法国召开了首届国际蛋白质组大会，并迅即在北美、欧洲、韩国、日本成立了相应的分支机构。
蛋白质组学已成为西方各主要发达国家、各跨国制药集团竞相投入的“热点”。
启动研究在国家支持下，中国科学院生物化学研究所、军事医学科学院、复旦大学与北京师范大学等单位迅速启动了蛋白质组研究，建立并组合了二维电泳蛋白质组分离技术、图象分析技术和蛋白质鉴定的质谱技术；先后举办了三次全国性的蛋白质组学术研讨会，并在国际上较早提出了功能蛋白质组学的研究战略。
我国蛋白质的色谱/电泳二维分离，二维芯片电泳分离，质谱在线鉴定等方面均取得了重要进展，并得到了国际同行的认同，具有一定优势。
其中由军事医学科学院牵头的“人类肝脏蛋白质组计划”成为世界“人类蛋白质组计划”的重要组成部分之一。
重要成就虽然我国蛋白质组学研究启动不久，我国科学家已经在重大疾病如肝癌、维甲酸诱导白血病细胞凋亡启动模型及维甲酸定向诱导胚胎干细胞向神经系统分化的模型等比较蛋白质组研究以及一些重要生理和病理体系的蛋白质组成分研究方面获得了重要成就。
在胚胎干细胞诱导向神经干细胞方向分化前后  蛋白质组学新技术分离出了19个与定向诱导神经分化相关的蛋白；在HL-60细胞凋亡研究中初步筛选到21个凋亡相关蛋白。
已进行了肝癌细胞系及正常肝细胞蛋白质组的比较分析研究，发现了两者间不同的蛋白表达群；自行建立了肝癌高/低转移细胞系，进行了原位食管癌/转移食管癌间的比较蛋白质组研究，初步发现了一批与肿瘤转移相关的蛋白质群。
通过蛋白质芯片技术对肺癌病人和正常人血清中的蛋白质谱的对比分析，找到了15个差异蛋白并利用BiomarkerPattern分析软件建立了肺癌诊断分类树模型。
初步盲筛结果表明，这15个分子标志可能成为临床诊断肺癌的新指标，有重要应用价值。
在大规模人胎肝蛋白表达谱方面初步鉴定出500个高丰度蛋白，150个磷酸化相关蛋白等等。
这些研究证明了我国的蛋白质组学技术平台已能支撑一定规模的研究，为我国在该研究领域争得了一席之地，也为未来的发展奠定了良好的基础。
目前，由军事医学科学院牵头的973计划项目和由上海生命科学院牵头的863计划项目集中了国内十余家优势单位，针对严重影响我国人民健康的重大疾病和重要生命科学问题开展“重大疾病的比较蛋白质组研究”和“重要生理、病理体系的功能蛋白质组研究”。
力争在3~5年内建立国际领先水平的蛋白质组学研究通用技术平台，发现一批有重要生命科学价值或与重大疾病相关的蛋白质，为探索基因转录,翻译调控的规律、获得重大疾病预警、诊断标志物和新药研究的靶标作出贡献。
目前，国内已有若干蛋白质组学研究中心或重点实验室相继成立，如复旦大学蛋白质研究中心，军事医学科学院蛋白质组中心，高等院校蛋白质组学研究院，中国科学院蛋白质组学重点实验室和中国医学科学院蛋白质组学研究中心等。
其中高校蛋白质组研究院是由国内多所高校、临床单位和国内外有关公司联合建立的研究机构，是我国高校大规模打破学校界限，与国内外多方面力量联手，进军蛋白组组学研究领域所采取的新举措。
统一协调有关国内研究的中国人类蛋白质组组织（ChineseHUPO）和蛋白质组专业委员会等也在筹备中。
在基础研究方面近两年来蛋白质组研究技术已被应用到各种生命科学领域，如细胞生物学、神经生物学等。
在研究对象上，覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围，涉及到各种重要的生物学现象，如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。
在未来的发展中，蛋白质组学的研究领域将更加广泛。
在应用研究方面蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶标最有效的方法之一。
在对癌症、早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治疗方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景，目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。
在技术发展方面蛋白质组学的研究方法将出现多种技术并存，各有优势和局限的特点，而难以象基因组研究一样形成比较一致的方法。
除了发展新方法外，更强调各种方法间的整合和互补，以适应不同蛋白质的不同特征。
另外，蛋白质组学与其它学科的交叉也将日益显著和重要，这种交叉是新技术新方法的活水之源，特别是，蛋白质组学与其它大规模科学如基因组学，生物信息学等领域的交叉，构成组学（omics）生物技术研究方法，所呈现出的系统生物学（SystemBiology）研究模式，将成为未来生命科学最令人激动的新前沿。
体细胞免疫疗法也称为生物免疫细胞疗法中的细胞治疗方法，是目前国际公认的最具应用前景的治肝技术。
主要根据细胞与分子免疫学原理，诱发人体自身产生大量对病毒具有免疫杀伤作用的特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），对HBV进行精确性、特异性、靶向性、主动式攻击，杀灭体内HBV病毒。
体细胞疗法的具体方法是通过科技手段将病人体内的单个核细胞提取出来，用特殊方法在患者体外将其培养成为树突状细胞（DC），赋予其专杀病毒的抗原信息，再使其数量成千万倍增多，成为专门攻击杀伤病毒的“细胞导弹”。
这种特殊的“导弹”能精确“瞄准”病毒进行杀伤，却不会伤及正常的肝细胞。
然后将这种负载抗原信息的DC细胞回输到患者体内，在患者体内形成大量针对乙肝病毒的免疫杀伤细胞（CTL），从而针对血液和肝细胞中的病毒产生主动性和靶向性攻击，迅速准确地杀灭病毒（包括变异病毒），使患者在短时间内康复。
病毒变异后，使病毒e抗原不能产生，以致检查e抗原为阴性，但病毒复制依然在暗中进行，极易发生肝硬化和肝坏死。
在过去，由于检测上的手段还无法对病毒基因变异作出准确的诊断。
伴随高通量病毒基因变异检测系统和组合式生物芯片检测跟踪系统的出现和临床应用，对病情的诊断将更加精确科学，避免误诊和误治。
临床证明：携带病毒时间越长，病毒越容易发生变异；用药治疗时间越久、种类越多，病毒越容易发生变异。
而体细胞治疗能有效杀灭病毒，提高免疫力，进而阻止病毒发生变异。
体细胞疗法：新技术打破肝病传统药物治疗耐药瓶颈，目前，常规的西药和传统的中药是通过持续抑制乙肝病毒的复制、清除或减轻肝脏的炎症、坏死，而阻延疾病进展，但很难从根本上祛除病毒。
“体细胞疗法”完全摆脱了单一的药物治病的概念，它是从人体内采集出单核细胞，进行体外特殊培养，使其发育成树突细胞并大量扩增后与效应肽或靶向肽结合，成为专门攻击杀伤病毒的“细胞导弹”。
[1]每个人都有感染乙肝病毒的机率，为何有些人未患病？
这是由于人体自身的免疫系统在起着巨大的作用。
相反，患了乙肝久治不愈的人问题同样出在免疫系统，即免疫细胞不清除病毒，医学上称为“免疫耐受”，才导致病情发展和久治不愈。
解决问题就必须打破免疫耐受，恢复人体免疫细胞的功能，激活和增强其自身免疫功能杀伤病毒的潜力，用自己的细胞治自己的肝病，通过内力来杀灭和清除病毒，才能打破免疫耐受，从根本上解决问题。
正如美国生物学家戴利说：如果说20世纪是药物治疗的时代，那么21世纪将是细胞治疗的时代。
心室纤颤（ventricularfibrillation，VF，简称室颤）全称心室纤维性颤动，简称室颤，是指患者的心肌突然丧失了整体的协调性，呈不规则的收缩，因而不能将血液泵出的临床危险状态。
心室扑动（Ventricularflutter）简称室扑，是介于室速和室颤之间的一种过渡心律，室扑发生后患者的心肌呈无力状态的快速收缩，使其心输出量明显下降，甚至为零。
室扑的持续时间很短，一般在数分钟内就会转为室颤，少数患者转为室速。
室扑常常是室颤的先兆，是仅次于室颤的最严重的心律失常。
室扑时心肌基本丧失收缩力，因此机体的血流基本处于停顿的状态，其临床意义接近于室颤。
因此室扑的现场抢救与室颤相同。
心室颤动是临床上最危险的心律失常，是心脏停搏的常见类型之一。
由于室颤时患者的心脏丧失了整体的收缩-舒张功能，因而无法泵血，此时其心输出量为零，血液循环中断，从而使患者即刻处于临床死亡状态，必须在4min内得到正确抢救，否则无生还希望。
?室颤分为原发性室颤（Primaryventricularfibrillation）和继发性室颤（Secondaryventricularfibrillation）两种。
前者指室颤发生之前无心力衰竭、低血压或休克等循环障碍的情况，患者仅仅是在心脏异常的基础上发生了一时的心电功能性障碍，也就是说多数患者的心脏虽然有较广泛的累及2支以上的冠脉硬化狭窄，但发病时并未出现严重的组织结构的直观改变，室颤的发生是由于局部心肌缺血导致的可逆性心电活动紊乱的结果，临床上该型室颤导致的猝死占心脏性猝死的80%～90%。
后者指继发于严重的各种疾病尤其是终末期心脏病的患者，或患者的心脏发生了结构学​、形态学​、组织学​上的严重病变，如大面积心肌梗死、严重的心肌炎和心肌病、心室破裂、心脏压塞、心内机械性梗阻和主动脉夹层等。
现场抢救原发性室颤患者是院前急救最有意义且又最重要的医疗行动，如果抢救成功，患者很少留下后遗症。
而继发性室颤患者的预后较差，即使复苏成功，住院病死率仍为50%～70%。
室颤的主要临床表现：有意识丧失；心音及脉搏消失；呼吸于数十秒钟后停止；皮肤、黏膜发绀或苍白；部分患者有短暂抽搐及大小便失禁；多数患者瞳孔散大。
P波、QRS波、T波及等电位线消失，代之以宽大畸形的正弦波，其顶端和底部均呈钝圆形，无法区分该波的正负；频率在150～250次/min；节律基本匀齐；室扑的振幅在发生的初始较大，但不久会越来越小，并很快成为室颤的心电图征象。
导致室颤的最常见原因是心电不稳定，可能与下述因素有关：①急性冠脉综合征导致的心脏局部供血障碍：血栓形成和冠脉痉挛；②缺氧导致的一系列病理生理改变：如交感神经兴奋、无氧代谢造成乳酸等大量代谢产物增加及心肌细胞代谢异常如细胞内钙离子、钠离子超负荷蓄积及钾离子丢失等；③再灌注产生的超氧自由基大量增加，细胞膜离子泵活性改变和局部电生理紊乱；④缺血心肌组织和非缺血心肌组织之间的明显的代谢差异；⑤心肌的基础状态：以往有慢性心肌损伤、心肌肥厚、低血钾、长Q-T间期等易感状态在心肌缺血的触发下则更易于发生致命性心律失常。
现场急救时只要诊断一旦确立，就应立即对患者实行非同步直流电复律，该法是治疗室扑和（或）室颤的惟一有效的手段。
方法：首次200J，如无效则可逐渐增加至360J，同时辅以其他心肺复苏方法。
注意：院前急救现场如有除颤器，必须首先为患者电击除颤，绝不能因为实施其他抢救措施（如胸外心脏按压、气管插管、注射利多卡因等）而延误电击除颤。
如果现场无除颤器则实施常规复苏，包括持续胸外心脏按压、人工呼吸以及药物的应用，同时呼叫有除颤器的急救人员迅速到达发病现场，或在持续复苏的状态下将患者就近送到有除颤设备的医院。
?心室颤动的药物治疗心跳骤停时，急救人员首先进行基本生命支持、电除颤、适当的气道管理，然后再进行药物治疗。
药物治疗是心脏骤停患者高级生命支持的重要部分。
2005年美国心脏学会(AHA)心肺复苏和心脏急救指南指出心脏停搏时复苏药物应在脉搏检查后、除颤器充电时或除颤后尽早给药，给药时不应中断CPR。
1.肾上腺素肾上腺素(adrenaline，epinephrine，AD)同时具有α和β-肾上腺素能样作用，具有增加全身血管阻力；增加动脉收缩和舒张压；正性肌力、正性节律、正性传导；增加冠状动脉和脑部循环血流的作用。
另外β-肾上腺素能样作用还能兴奋高位和低位起搏点，室颤时能使细颤转为粗颤，有利于复律。
肾上腺素是CPR的首选药物，可应用于对最初电击治疗无效的心室颤动及无脉性室速、心脏停搏或无脉性电生理活动等情况。
但该药的β-肾上腺素能样作用是否有利于复苏仍有争议，因其可能增加心肌氧耗和减少心内膜下心肌灌注。
目前肾上腺素用于心脏骤停的复苏多采用美国心脏病学会推荐的成人标准剂量，为5min内静注lmg，称为标准剂量肾上腺素(standard-doseepinephrine，SDE)。
自80年代以来，以Brown为代表的一批学者，进行大剂量肾上腺素(high-doseepinephrine，HDE)(0.2mg/kg)治疗心脏骤停的研究。
研究表明，在心肺复苏治疗中，与标准剂量相比，HDE可以明显增加脑灌注、冠状动脉压以及心肌血供，增加自主循环恢复(ROSC)率，明显提高心室电除颤的成功率。
但也有相反的报导，大剂量肾上腺素并没有提高心脏骤停患者的存活率和神经系统功能的恢复。
CRP时肾上腺素常规给药方法为首次静脉推注lmg，每3～5min重复1次，可逐渐增加剂量(1、3、5mg)，也可直接使用5mg。
从周围静脉给药时应在推药后再快速推注5～l0ml液体，以保证药物能够到达心脏。
气管内给药吸收作用良好，最佳给药剂量尚不清楚，但至少应是静脉内给药的2～2.5倍。
心内注射危险性较大，且不宜停止按压而做心腔内注射，所以不推荐常规使用。
另外，还要注意心脏复律后肾上腺素的副作用。
肾上腺素可提高中心动脉压，以增加心脏灌注，但同时兴奋心肌、增快心率，此对复苏极为不利，如心率过快可诱发再次室颤，应及时注射β-受体阻滞剂拮抗[5]。
尽管肾上腺素是CPR中最常应用也是研究最多的血管升压素，但在人类和动物试验中表明它既有益处也有毒性作用，并且不增加存活率，目前没有前瞻性的临床试验证明肾上腺素能改善心脏骤停患者的长期预后。
2．血管加压素血管加压素(vasopressin)又称抗利尿激素，是由垂体后叶分泌的内源性血管加压肽,能选择性地收缩非重要脏器组织的阻力血管，而不影响包括心、脑等重要脏器组织的血流。
其升高血压的作用主要通过V1和V2两种受体介导的。
V1受体主要调节升压作用；V2受体主要调节抗利尿作用。
有报道，心肺复苏成功的患者血液中血管加压素的浓度明显高于心肺复苏失败者，这提示复苏成功的患者体内较高浓度的血管加压素可提高器官的灌注率和复苏的成功率。
血管加压素可直接通过V1a受体和(或)通过增加内源性儿茶酚胺、非儿茶酚胺类介质、血管紧张素Ⅱ及内皮素的缩血管效应，使外周血管收缩，从而提高冠状动脉灌注压，降低冠状静脉PCO2及减轻酸血症，增加心肌血流量，提高ROSC率。
而且血管加压素在ROSC后不会造成心动过速，在复苏后期不增加心肌耗氧量。
新近一项国际多中心的研究中[6]，1219例院外心脏骤停的患者被随机分至静注40U的血管加压素组和静注2mg的肾上腺素组，对这些室颤或无脉性电活动的患者，两组患者的存活入院率和出院率是相似的，无明显差别。
结果说明，血管加压素和肾上腺素对CPR的治疗都可以产生较好的疗效，二者在心脏停搏短时间内的治疗效果相似。
另外，研究发现，如果心脏停搏时间较长，血管加压素治疗效果特别好，这是因为酸血症时儿茶酚胺类药物作用迟钝，而血管加压素作用不受影响。
有研究指出，当患者发生持续性窒息时，内源性肾上腺素被耗尽并导致进一步的缺氧，此时联合应用肾上腺素和血管加压素能够获得比单纯使用肾上腺素多3倍的冠状动脉灌注压，提示血管加压素能够在长时间缺氧的情况下增强肾上腺素的作用。
而且肾上腺素与血管加压素的联合应用较单用肾上腺素，可更快改善冠状动脉灌注压,增加左心室心肌血流量，提高心肺复苏的成功率。
血管加压素还可通过V2受体介导的扩张血管作用，改善因多次使用肾上腺素后所致的周围脏器灌注不足。
2005年AHA心肺复苏和心血管急救指南指出由于血管加压素与肾上腺素作用相同，也可作为CPR的一线选择药物，在治疗无脉性心脏骤停中，无论是第一次或以后，都可以用40U的血管加压素代替等效的肾上腺素。
另外，血管加压素与肾上腺素合用效果优于单用肾上腺素或者单用血管加压素。
3.β受体阻滞剂循证医学资料表明，到目前为止，β受体阻滞剂是唯一能被证明可以降低SCD发生率的药物，能使室颤阈值升高60-80%，但在CPR中的地位并未得到应有的重视。
2006年美国AHA、ACC和及欧洲心脏病协会(ESC)共同发出的室性心律失常治疗及猝死预防的指南[7]中,对β受体阻滞剂在室性心律失常治疗中的作用给予高度重视及评价。
指南认为:做为安全有效的抗心律失常药物,β受体阻滞剂是室性心律失常药物治疗的中流砥柱,对于未合并或合并心功能不全的心脏病患者,都能有效地治疗室性早搏、室性心律失常,减少猝死率。
指南推荐意见指出,绝大部分室速与室颤的治疗,包括器质性心脏病及遗传性室性心律失常都是β受体阻滞剂治疗的Ⅰ类或Ⅱa类指征。
目前,除β受体阻滞剂外,在随机的临床试验中,现有的抗心律失常药物都没有显示出对恶性室性心律失常或猝死的预防有益处[8]。
交感风暴，又称猝死风暴，是交感神经兴奋后的瀑布效应，循环中儿茶酚胺浓度可升高几百倍、甚至几千倍。
研究表明，低剂量的交感兴奋剂，就可逆转Ⅰ类和Ⅲ类抗心律失常药物的作用。
2006年室速治疗的指南中,将室速风暴或称交感风暴定义为24内患者自发两次以上的室颤或快速室速需要电转复紧急处理的症候群。
除少数室速风暴发生在心脏结构正常的患者,多数发生在伴有严重心脏疾病的患者。
室速风暴时可以是单形性,也可以是多形性室速。
对于多形性室速的交感风暴,β受体阻滞剂是单独使用的、最有效的药物,应当首选,并建议静脉给药[9]。
在心肺复苏中，室颤和电击对于机体来说是双重不良应激，会加强激活交感神经，连续除颤2-3次以上，可激发交感神经剧烈激活，产生电除颤抵抗，除颤和常规的抗心律失常药物难以奏效。
临床研究发现电击抵抗性室颤患者电除颤多次失败后，静脉给予β受体阻滞剂，患者需要电除颤的次数减少，并且易于除颤成功。
在抢救反复发作室颤的患者时，多次电除颤等其它办法无效，特别是在心肌缺血或梗死存在时，静脉应用β受体阻滞剂可以收到意想不到的结果。
4.胺碘酮室颤发生时，对电除颤不成功或室颤反复发作难以维持窦律者，应及时静脉注射胺碘酮。
静脉注射胺碘酮初始剂量为300mg，3-5min后再推注150mg,继之按1mg/min持续静脉滴注6小时，再减量至0.5mg/min,每日最大剂量不超过2g。
溴苄胺和利多卡因已不被推荐。
胺碘酮作用于钠、钾和钙通道，并对α-受体和β-受体有阻滞作用。
对于心力衰竭合并室颤患者，胺碘酮可作为首选用药。
此时胺碘酮较其他抗心律失常药物作用更强，效果更好，而致心律失常的副作用更小[10]。
胺碘酮主要副作用是低血压和心动过缓，应用时注意给药速度。
如出现临床症状，可给予补液、加压素、正性肌力药或临时起搏。
以往常规使用碱性药已另有认识，即室颤早期的酸中毒属呼吸性，碱性药无效。
当抢救时间持续5-10分钟以上，出现代谢性酸中毒，此时应用碱性药是合理的。
另外，CPR早期不应常规使用呼吸兴奋剂，应以保持气道通畅、人工辅助呼吸和维持有效血液循环为主，只有在自主呼吸功能恢复后，为提高呼吸中枢的兴奋性才推荐应用呼吸兴奋剂。
对VF进行除颤时，有效除颤能量可选择150~360J，但没有明确论证最佳能量水平。
用双相波除颤器首次除颤150~200J是合理的，如需连续除颤，可不必增加电能量。
用单相波除颤器首次除颤360J是合理的。
如果首次除颤成功，以后再发VF，那么应选择首次成功除颤的能量。
电极粘贴的面积要求为80cm2，两个电极总面积不少于150cm2,足够大的电极可减少电阻，增加电流量。
电极板放置的部位有下列数种:心尖区一胸前、心尖区一后背肩胛下、前胸一后背肩胛间。
有研究认为，取心尖区一后背肩胛下部位，使电能量直接贯穿心脏，效果最佳。
两个电极间要有足够距离，其间的皮肤不可沾上盐水、导电膏之类。
电极板不应裸露，应包以盐水纱布，电击时要给予电极板足够的压力，女性病人电极板的安放应避开乳房。
2000年AHA心肺复苏指南建议，发生VT后立即电击除颤，如果室颤持续则再次除颤，直到进行3次程序性电击治疗。
在3次电击过程中，不需重新开始CPR。
如果3次除颤后没有ROSC恢复再进行CPR。
然而研究发现，连续3次电击的方式使从第一次电击到第一次胸部按压延迟了37s，心肌的氧和代谢底物消耗，再次电击增加的益处降低，电击效率降低。
此时如果重新CPR或许比再次电击更有价值，因为短期胸部按压可以提供氧和能量底物，使除颤后(VF终止)恢复灌注心律的可能性增加。
2006年新指南提出当出现VF或无脉室速(VT)时，急救者应该首先进行胸部按压，然后给予1次电击并立即恢复CPR，并尽可能不间断胸外心脏按压。
5个周期(约2min)的CPR后再检查患者的心律，可利用AED分析心律，必要时进行另一次电击。
胸部按压后，如果未能转律，AED则会提示急救者即刻再次进行CPR。
当电击后灌注心律存在时，胸部按压一般不会诱发VF。
近年来对原发性室颤的预防进行了不少探索性的研究，但至今尚无被公认的有效措施。
淋巴瘤样肉芽肿(lymphomatoidgranulomatosisLG)是血管炎和肉芽肿反应的一种少见类型本病的特征是各种组织均发生血管营养性、血管破坏性病变和肉芽肿反应，并伴以广泛的非典型性淋巴增殖性浸润主要累及肺脏，也可累及肺外组织它在组织病理上具有与韦格内肉芽肿(Wegener肉芽肿)和非典型性淋巴瘤相似的几种特征，既往认为本病是韦格内肉芽肿的一种亚型因其与韦格内肉芽肿具有相似的坏死性血管炎，且有进展为恶性淋巴瘤倾向，还曾称作多形性网状细胞增多症恶性血管炎和肉芽肿病。
但Liebow(1972)最早从临床病理证实本病是一个独立疾病。
淋巴瘤样肉芽肿病散见于各年龄组由Liebon于1972年首先报告其为系统性血管浸润性伴有血管中心坏死性肉芽肿反应的血管炎其发病原因不明病变原发于肺部可侵入皮肤肾脏和中枢神经系统对此病的性质尚有争论。
1984年Jaffe提出其是一种血管中心性免疫增生性病变(angiocentricimmunoproliferativelesionAIL)曾名为多形性网状细胞增生症(polymorphicreticulosis，PMR)。
1988年Caulard通过电镜和组织学研究，发现本病有异常的T-cellphenotype，推测可能为血管中心性T淋巴瘤的变异，目前称之为血管中心性免疫增殖性病变(Angiocentricimmuno-proliferativelesionAIL)或血管中心性淋巴瘤(angiocentriclymphoma)。
本病可发生于任何年龄，平均年龄为50岁，发病年龄最小者为8岁最大者为85岁，以20～60岁最多见。
两性均可发病男性略多于女性，男女发病比例为1.7∶1死亡率为60%。
主要侵犯肺部表现为坏死性肉芽肿和坏死性血管炎伴异形淋巴样细胞浸润，部分最后发展为淋巴瘤有人认为是淋巴瘤的变形。
从组织病理上看本病既有血管炎改变，又有肉芽肿反应这些改变符合变态反应。
从而推测淋巴瘤样肉芽肿可能是一种伴有变态反应的肿瘤性疾病伴有的变态反应可能是针对尚未证实的一种肿瘤抗原的抗原抗体反应。
体内免疫反应失调或损伤性疾病如肾移植病毒性肝炎、干燥综合征及类风湿关节炎，常并发淋巴瘤样肉芽肿，这种相关作用及淋巴瘤样肉芽肿，与非典型性淋巴网状细胞浸润有一定的相似性。
用慢性免疫抑制治疗某些先天性免疫缺损状态如Wishkott-Aldrich综合征、Louis-Bar综合征，偶尔也可并发淋巴瘤样肉芽肿以上临床观察说明淋巴瘤样肉芽肿可能是一种继免疫失调或受损而发生的免疫增生性疾病，也有人考虑过自身免疫机制对淋巴瘤样肉芽肿的致病作用另据部分患者存有T淋巴细胞功能不全有肾移植后发生LYG的病例以及LG和类风湿性关节炎或干燥综合征伴发故考虑免疫异常和LYG的发生可能有关部分患者在病程中检出EB病毒感染的证据嗜异性凝集试验阳性故提示病毒可能参与其发病过程此外，部分病例可发展为非霍奇金淋巴瘤中的血管中心性淋巴瘤(angiocentriclymphomaAL)，因此有作者认为LG是淋巴瘤前期阶段甚至将全部LYG归入恶性淋巴瘤的少见特殊类型。
发病机制还不很清楚有人认为是淋巴瘤的变形。
表现为坏死性肉芽肿和坏死性血管炎伴异形淋巴样细胞浸润就实验模型来说慢性同种异体抗原刺激能激活宿主的慢性免疫活性细胞，并诱致非典型性淋巴增殖及淋巴样组织发生肿瘤。
病毒对本病的发病可能起重要作用它可通过改变宿主的膜抗原性而启动自身免疫反应，或通过致肿瘤病毒直接刺激网状内皮系统增生而造成非典型性或明显的淋巴网状细胞增殖到目前为止，仍不能排除某些环境因素对本病的诱发作用。
抗原抗体反应免疫失调、病毒感染和环境因素等可能为单个因素也可能为多种因素的综合作用，而导致本病的发生。
淋巴瘤样肉芽肿主要侵犯结外器官，累及的器官依次为肺(80%)、皮肤(40%～50%)中枢神经系统(30%)肝(25%)、肾、骨髓眼等而浅表淋巴结受累少见。
本病的病理特征表现为浸润细胞是由具有浆细胞样特征的非典型性淋巴网状细胞及少量中性粒细胞或嗜酸粒细胞组成的。
非典型性淋巴网状细胞主要以成熟的淋巴细胞和浆细胞占优势此类细胞比成熟淋巴细胞有较大的胞体和较多的细胞质具有免疫母细胞的许多特征常显示为有丝分裂相本病血管炎性改变较明显，但并不一定同时具有几个系统的坏死性血管炎改变有的有典型的白细胞破碎性或原发性纤维蛋白样坏死性血管炎它是一种血管破坏性和血管营养性病变，主要累及中小动脉和静脉。
脉管病变是由非典型性淋巴网状细胞浸润所造成的浸润细胞可使血管内皮隆起血管内膜增厚，造成管腔狭窄最后发生血栓性闭塞和广泛性血管坏死和血管重新形成。
根据浸润细胞的类型及坏死范围可分为Ⅲ级G1：主要由小淋巴、组织及浆细胞浸润，无不典型淋巴细胞及免疫母细胞，一般无坏死。
G2：形态学介于G1和G3之间的过渡类型。
G3：浸润细胞以非典型淋巴细胞为主多形性的炎症背景常不明显，坏死较突出。
G3又称血管中心性淋巴瘤。
上述增生的淋巴细胞电镜及免疫学检测证实属外周T细胞主要为T4，通常不能检出TCR基因重组。
本病出现的细胞浸润在组织学上表现为显著活跃增生这就使病变具有了恶性变的特征。
但它又与淋巴瘤不同细胞浸润变化呈多样性成熟与未成熟的淋巴样细胞常混合存在，可伴有广泛坏死性严重血管炎，甚至在距离浸润灶很远的部位也可见有坏死性血管炎而浸润灶附近的淋巴组织却不受侵犯，这些都与淋巴瘤显著不同。
然而，某些病例也可发展为免疫母细胞肉瘤或非典型性淋巴肉瘤，从而提示在本病与淋巴瘤之间可能存在一定的关系一致认为LG是一种独特的多形性细胞浸润形成的血管中心性淋巴瘤。
PCR和原位杂交强烈提示EB病毒参与肺血管中心性淋巴瘤的发病开始曾认为这些病变是周围T细胞淋巴瘤，因为免疫分型研究证实它是以表达T细胞相关抗原的不典型细胞为主。
最近PCR和免疫组化证实有大的、不典型、EBV阳性B细胞单克隆亚群，提示很多LYG型血管中心性淋巴瘤实际上为EBV阳性B细胞淋巴瘤伴大量反应性T细胞。
然而有些病变表现为周围T细胞淋巴瘤，这些肿瘤为EBV阴性。
上述病理改变可累及气管支气管肺、脾肾、脑及淋巴结。
肺脏常受侵犯，通常为多发性结节性浸润。
病变大小不同在梗死样坏死区偶有空洞形成是本病肺部浸润的特征。
有时病变也可为泛发性，同时伴有多发性肺脓肿表现为一叶肺或一侧肺化脓性改变或破坏Saldmm认为，本病发生的肺坏死与韦格内肉芽肿不同前者主要是凝固性坏死后者则为液化性坏死。
某些病例尚可见到肺部机化性愈合区又发生完全性透明变性，还有些病例除有特征性血管向心性浸润外，尚可见有显著的成纤维细胞增生但无非典型性淋巴网状细胞并且坏死的程度也很轻。
除广泛性血管炎和坏死外常可见有由非典型性淋巴组织细胞浸润形成的肺实质肿块和结节现已证明本病的某些组织学特征对预后有一定影响在炎性浸润灶内半数以上浸润细胞为非典型性淋巴网状细胞，提示预后不良而浸润细胞主要为小淋巴细胞或者浆细胞大于10%，预后较好坏死的程度对预后无影响。
神经系统也是本病常见的受累部位。
尸解发现脑膜血管和脑实质有典型性且具有浆细胞样多形细胞广泛浸润在广泛坏死区内可见有神经细胞丧失和白质碎裂，也可见有脑血管局灶性阻塞伴管壁坏死，管壁呈非典型性淋巴网状细胞浸润血栓形成，管腔狭窄和动脉瘤形成。
部分死亡病例尸解时尚可见脑和脊髓内有广泛性坏死区，可伴有免疫母细胞肉瘤，个别病例尸解时发现中脑和脑桥有广泛坏死，其脑组织由非典型性淋巴组织细胞所取代。
皮损的组织学所见与肺所见相似可见到轻到重度皮肤血管中心性和血管破坏性血管炎及混合细胞性肉芽肿性浸润也可见到不典型的淋巴网状细胞，但嗜酸细胞少见。
可出现皮肤附属结构如汗腺和神经的继发炎症和破坏。
深静脉一旦受累，则可因邻近脂肪组织坏死而导致脂膜炎从超微结构上看，组织细胞增生表现出一定特点，包括细胞膜边缘波动、高尔基器发育良好以及胞浆内微丝、微管的聚集等。
皮下组织受累时典型改变为局灶性脂肪坏死，并伴有异物反应。
肾脏的组织学改变表现有典型淋巴网状细胞浸润性结节这种改变类似梗死并可见有坏死和血管炎动静脉闭塞，病变只见于肾实质而肾小球无改变肝脏的病理特征表现为在肝实质内可见有散在的局灶性浸润大块坏死性病变在坏死区内可见有大量胶原沉着血管周围有致密的非典型淋巴组织细胞浸润等。
LYG的临床表现与其他类型肺淋巴瘤有较大重叠主要受累器官为肺(80%)、皮肤(40%～45%)中枢神经系统(30%)肝(25%)；其次为肾、消化道骨髓和眼等。
全身症状包括发热、周身不适乏力、体重减轻、关节疼痛和皮肤损害等。
通常在出现症状14个月内死于泛发性肺部病变和继发感染。
因其主要侵犯肺部故最常见的主诉为下呼吸道症状如咳嗽咯血胸痛及呼吸困难。
有30%出现神经系统损害表现为精神错乱、共济失调、癫痫发作及颅神经功能障碍等。
尸解发现肝、脾淋巴结肾心脏和胃肠道均可受侵犯肺外的主要表现在皮肤可见于40%～45%病例。
皮损主要为浸润性红色斑块及皮下或真皮结节亦可发生溃疡斑丘疹或红斑性损害。
多对称发生于下肢和臀部，亦可泛发全身。
皮损可先于肺部损害或同时发生而且常伴全身症状，如发烧、倦怠、体重下降肌痛及关节痛等胸外症状常见因不同部位受累而出现相应临床表现。
1.呼吸系统呼吸道症状常为主诉，病人大多有咳嗽、咳痰呼吸困难或气喘、胸痛等。
肺部受累是本病最常见的早期表现常伴有不同程度的发热消瘦少数患者也可只有肺部X线异常而无临床症状有些患者起病时就有肺部受累呈进行性发展另有一些患者也可在病程之中发生进行性肺部受累病变主要位于两下肺野尤以两肺外带为多见肺尖部很少受累病变几乎总是呈双侧性，并且波及范围很广但也可为非对称性。
虽然肺部病变具有淋巴瘤的特征但很少有双侧肺门淋巴结肿大，淋巴结肿大仅发生在其他器官系统而且表现也不典型。
临床病情与淋巴瘤相似的患者，约1/3可出现肺空洞可因大咯血而死亡肺实质大片破坏引起呼吸衰竭也是本病的主要死亡原因本病发生呼吸道受累的范围一般不大，但有时也可以呼吸道病变为主要临床特征，表现为阻塞性细支气管炎，这是由于大量炎性细胞浸润和纤维组织增生导致细支气管溃疡形成、破坏和闭塞所造成的也可发生肺叶支气管部分阻塞这是由于坏死组织和炎性细胞广泛侵犯支气管内膜所造成的肺实质内梗死样坏死，细胞高度浸润性结节，大块肺损害，广泛性肺实变及非典型性间质性肺浸润等均可发生。
非典型性淋巴组织细胞浸润侵犯肺动脉肺静脉，偶尔也可引起这些脉管闭塞和广泛性肺实质坏死此时可造成严重咳嗽和呼吸困难2.神经系统表现有周围神经病脑神经麻痹和各种中枢神经系统症状及体征。
神经系统受累时可出现失语、头痛、感觉异常偏瘫、共济失调、精神错乱抽搐等。
可发生于肺病变以前、中间、甚至肺部病变缓解时。
周围神经病变多为非对称性中枢神经系统病变可累及脑和脊髓的任何部位可出现Bell麻痹、暂时性失明复视突眼视力下降或眩晕；常见症状包括失语、轻偏瘫失明运动失调、截瘫、动眼神经麻痹、脑神经麻痹、头痛感觉异常、意识模糊昏迷抽风四肢瘫视神经水肿、耳聋面瘫感觉迟钝、脑水肿脑膜脑炎等。
周围神经受累出现下肢感觉异常。
可发生在其他系统病变出现之前，甚至当肺内病变在不断消退缓解时中枢神经系统病变仍可在不断发展。
一个患者多发生上述症状中的一种或数种神经系统病变的发生与预后直接相关一旦神经系统受累，其死亡率高达80%以上。
3.皮肤肺外最常见受累部位是皮肤为大片浸润性红斑结节、溃疡，皮肤损害发生率占40%～50%。
有10%～25%病人以首发皮肤损害出现；皮损可以先于肺脏受累2～9年出现。
Liebow报告的一组40例患者，16例(42.5%)出现了皮肤损害，由于皮肤损害发生率高、活检容易以及病变的典型组织学所见，因此在疑诊淋巴瘤样肉芽肿时应仔细进行皮肤科检查最常见的典型的皮损所见是1～4cm大小红紫色斑疹丘疹或为硬而隆起的皮下结节(有时发生溃疡)，直径2～3cm多位于肢体。
病损可发生于任何部位，但常见于臀部、腹部、大腿股部和下肢。
修复过程常伴有瘢痕和色素沉着。
其他皮损为非特异性改变如小泡广泛的鳞癣、斑状脱发、局部无汗和环状斑块皮下结节有时很大偶尔也可为其主要临床表现主要皮肤损害也可表现为开始呈红色最后转变成铜钱色硬结状的皮下损害。
皮肤损害通常与肺部病变同时发生，但可发生在肺部病变之前或之后数月到数年有无皮肤损害与预后无关。
4.肾脏受累约半数患者有肾脏组织学改变但无临床症状。
临床上明显肾脏受累罕见而尸检可发现LG改变。
5.其他其他病变10%的患者可有肝大肝功能衰竭。
少数病人有淋巴结肿大脾大和腹水等肝大也可为本病的早期表现由于本病广泛浸润肝脏可造成进行性肝功能衰竭而死亡多数病例可出现淋巴结肿大个别病例可出现巨脾并伴有淋巴瘤样肉芽肿浸润可引起白细胞减少。
并发症：最常见的并发症为呼吸困难，尤其见于纵隔或肺的淋巴结肿大者临床病情与淋巴瘤相似的患者，约1/3可出现肺空洞，可因大咯血而死亡。
也可发生肺叶支气管部分阻塞肺实质大片破坏引起呼吸衰竭也是本病的主要死亡原因。