YuITC/Vietnamese-Legal-Documents huggingface dataset:
Chương 1. . QUY ĐỊNH CHUNG
1. Phạm vi điều chỉnh: Định mức kinh tế-kỹ thuật này được áp dụng để lập, giao kế hoạch và tính đơn giá sản phẩm phục vụ lập dự toán, thanh quyết toán các công trình, dự án, nhiệm vụ liên quan đến việc xác định sinh vật biến đổi gen bằng phương pháp phân tích định tính, định lượng axít deoxyribonucleic.
2. Đối tượng áp dụng: Định mức này áp dụng cho các cơ quan, tổ chức, cá nhân có hoạt động liên quan đến xác định sinh vật biến đổi gen bằng phương pháp phân tích định tính, định lượng axít deoxyribonucleic.
3. Căn cứ xây dựng định mức Định mức được xây dựng căn cứ theo: - Nghị định số 204/2004/NĐ-CP ngày 14 tháng 12 năm 2004 của Chính phủ về chế độ tiền lương đối với cán bộ công chức, viên chức và lực lượng vũ trang; - Thông tư số 06/2005/TT-BLĐTBXH ngày 05 tháng 01 năm 2005 của Bộ Lao động - Thương binh và Xã hội hướng dẫn phương pháp xây dựng định mức lao động trong các công ty nhà nước theo Nghị định số 206/2004/NĐ-CP ngày 14 tháng 12 năm 2004 của Chính phủ; - Quyết định số 32/2008/QĐ-BTC ngày 29 tháng 5 năm 2008 của Bộ trưởng Bộ Tài chính về việc ban hành chế độ quản lý, tính hao mòn tài sản cố định trong cơ quan nhà nước, đơn vị sự nghiệp công lập và các tổ chức có sử dụng ngân sách nhà nước.
4. Định mức thành phần Định mức kinh tế - kỹ thuật trong phát hiện sinh vật biến đổi gen bằng phương pháp phân tích định tính, định lượng ADN bao gồm các định mức thành phần sau:
4.1. Định mức lao động công nghệ Định mức lao động công nghệ (sau đây gọi là định mức lao động) là thời gian lao động cần thiết để sản xuất ra một sản phẩm. Nội dung của định mức lao động công nghệ bao gồm:
a) Nội dung công việc: bao gồm các thao tác cơ bản thực hiện các bước công việc cho hoạt động phát hiện sinh vật biến đổi gen bằng phương pháp phân tích định tính, định lượng ADN.
b) Định biên: số lượng và cấp bậc kỹ thuật từng bước công việc.
c) Định mức: thời gian lao động để sản xuất ra sản phẩm. Đơn vị tính là công nhóm/đơn vị sản phẩm; ngày công tính bằng 8 giờ làm việc.
4.2. Định mức vật tư và thiết bị Định mức vật tư và thiết bị gồm định mức dụng cụ, định mức thiết bị và định mức vật liệu:
a) Định mức dụng cụ: là thời gian sử dụng dụng cụ cần thiết để sản xuất ra sản phẩm. Thời hạn của dụng cụ: xác định bằng phương pháp thống kê, kinh nghiệm; đơn vị là tháng. Mức sử dụng các dụng cụ nhỏ, phụ được tính bằng 5% mức sử dụng các dụng cụ chính đã được tính định mức.
b) Định mức thiết bị: là thời gian sử dụng thiết bị cần thiết để sản xuất ra sản phẩm. Thời hạn (niên hạn tính khấu hao) của thiết bị theo quy định của Bộ Tài chính.
c) Định mức vật liệu: là số lượng vật liệu cần thiết để sản xuất ra sản phẩm.
Mức vật liệu phụ, vụn vặt và hao hụt được tính bằng 8% mức vật liệu chính đã được tính định mức.
5. Định mức này không quy định các công việc khảo sát, thu thập mẫu
6. Quy định chữ viết tắt TT Chữ viết tắt Nội dung viết tắt 1 Định mức KT-KT Định mức kinh tế-kỹ thuật 2 BHLĐ Bảo hộ lao động 3 TCVN Tiêu chuẩn Quốc gia 4 ĐVT Đơn vị tính 5 KS1 Kỹ sư bậc 1 6 KS4 Kỹ sư bậc 4 7 ADN Axít deoxyribonucleic 8 RNA Axít ribonucleic 9 CTAB Cetyltrimethylammonium bromide 10 PCR Phản ứng chuỗi trùng hợp (Polymerase chain reaction) 11 Real-time PCR Phản ứng PCR tức thời
7. Áp dụng định mức: Trong quá trình áp dụng Định mức kinh tế-kỹ thuật này, nếu có vướng mắc hoặc phát hiện bất hợp lý, đề nghị phản ánh về Bộ Tài nguyên và Môi trường để tổng hợp, điều chỉnh kịp thời.
Điều 1. Định mức lao động Điều 1. Tách chiết ADN. Đối với động vật, thực vật và vi sinh vật thì phương pháp tách chiết ADN được áp dụng theo các phương pháp khác nhau, như sau:
1.1. Nội dung công việc Phương pháp phân tích này dựa vào các tính chất cụ thể của trình tự ADN đích để xác định sự có mặt và định lượng ADN có nguồn gốc từ sinh vật biến đổi gen.
1.2. Định biên: nhóm 2 lao động gồm 1 KS1 và 1 KS4
1.3. Định mức: công nhóm/mẫu Bảng số 01 TT Công việc Mức 1 Tách chiết ADN 0,50 2 Đánh giá chất lượng và xác định hàm lượng ADN 0,25 3 Phát hiện và nhận dạng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật PCR 0,60 4 Định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật real- time PCR 0,60
a) Phương pháp chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ thực vật dựa trên CTAB Phương pháp này sử dụng để chiết ADN từ thực vật và các loại chất nền có nguồn gốc từ thực vật, do có khả năng loại bỏ các hợp chất polysacarit và polyphenol vốn có ảnh hưởng đến chất lượng ADN. Phương pháp này cũng có thể dùng cho các loại chất nền khác. Các bước tiến hành cơ bản: - Nghiền mẫu thử thành dạng bột mịn bằng cối chày sứ trong nitơ lỏng; - Phân giải mẫu bằng nhiệt với sự có mặt của CTAB, tùy thuộc vào loại chất nền, cần bổ sung thêm các enzyme khác vào đệm chiết như alpha amylaza để thủy phân tinh bột, enzyme proteinaza-K để loại trừ protein và enzyme Ribonucleaza để phân giải RNA; - Loại bỏ các tạp chất như các polysacarit và các protein bằng cloroform; - Kết tủa các ADN bởi isopropanol và rửa bằng ethanol.
b) Phương pháp chiết ADN từ các mẫu sinh học có nguồn gốc từ động vật dựa trên phenol/ cloroform Phương pháp này có thể dùng để chiết ADN ra khỏi các loại chất nền khác nhau. Phenol thường rất thích hợp để biến tính các protein và phá hủy các enzyme nucleaza. Các bước tiến hành cơ bản: - Nghiền mẫu thử thành dạng bột mịn bằng cồi chày sứ trong nitơ lỏng; - Phân hủy mẫu dưới sự có mặt của natri dodecyl sulfat và hàm lượng EDTA cao; tùy thuộc vào loại chất nền cần bổ sung thêm enzyme proteinaza-K để loại trừ protein và enzyme Rnaza để phân giải RNA; - Loại bỏ các tạp chất như các phân tử ưa mỡ, các chất polysacarit, các protein và các nuleaza bằng phenol và cloroform; - Kết tủa ADN cuối cùng bởi isopropanol và rửa bằng ethanol loại trừ các muối và cloroform còn dư.
c) Phương pháp chiết ADN đối với các mẫu sinh học có nguồn gốc từ vi sinh vật dựa trên phenol/cloroform Phương pháp này mô tả qui trình chiết và tinh sạch ADN đạt chất lượng dùng cho phản ứng PCR từ nấm men hoặc nấm sợi, hoặc các quần thể vi khuẩn được phân lập. Phương pháp này cũng thích hợp đối với việc truy nguyên ADN từ các sinh vật biến đổi gen trong các loại chất nền phức hợp cao.
Việc phân lập vi khuẩn ra khỏi chất nền, nuôi cấy vi khuẩn tăng thu sinh khối tế bào, sau đó tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn phân lập sẽ cho kết quả tin cậy nhất. Các bước tiến hành cơ bản: - Các vi khuẩn, nấm men hoặc nấm sợi bị phá vỡ và ADN được tách chiết đồng thời bằng cách nghiền trong hỗn hợp Tris-phenol-cloroform-EDTA-SDS với tốc độ cao trong sự có mặt của các hạt thủy tinh; - Đối với phản ứng PCR định lượng cần ủ mẫu với Rnaza để phân giải RNA; - Kết tủa ADN bằng ethanol.
Khoản 2.1. Định mức dụng cụ: ca/mẫu 2.1.1. Tách chiết ADN 2.1.2. Đánh giá chất lượng và xác định hàm lượng ADN của sinh vật biến đổi gen Bảng số 04 TT Danh mục dụng cụ ĐVT Thời hạn (tháng) Mức (ca/mẫu) 1 Áo BHLĐ cái 9 0,40 2 Bàn máy vi tính cái 72 0,15 3 Ghế máy vi tính cái 72 0,15 4 Chuột máy tính cái 6 0,15 5 Ổn áp (chung) 10A cái 48 0,04 6 Giá để dụng cụ, hóa chất cái 48 0,20 7 Đồng hồ treo tường cái 48 0,20 8 Kính bảo hộ cái 12 0,40 9 Khay đựng mẫu 45 vị trí cái 24 0,20 10 Hộp đựng đầu tip 10 ml tiệt trùng hộp 24 0,20 11 Hộp đựng đầu tip 200 ml tiệt trùng hộp 24 0,20 12 Máy trộn mẫu (vortex) cái 60 0,02 13 PIPETman loại 2 ml cái 36 0,05 14 PIPETman loại 10 ml cái 36 0,05 15 PIPETman loại 100 ml cái 36 0,05 16 PIPETman loại 1000 ml cái 36 0,05 17 Bút viết cái 6 0,02 18 Bút viết kính cái 6 0,02 19 Sổ hướng dẫn thí nghiệm quyển 24 0,02 20 Lò vi sóng 0,5 kW cái 36 0,02 21 Đèn neon 40W bộ 48 0,40 22 Máy hút ẩm 2 kW cái 36 0,02 23 Máy hút bụi 1,5 kW cái 36 0,01 24 Quạt thông gió 40W cái 12 0,06 25 Quạt trần 100W cái 60 0,06 26 Điện năng kW 0,75 2.1.4.
Định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật phản ứng real-time PCR Bảng số 06 TT Danh mục dụng cụ ĐVT Thời hạn (tháng) Mức (ca/mẫu) 1 Áo BHLĐ cái 9 0,96 2 Dép đi trong phòng đôi 6 0,96 3 Bàn máy vi tính cái 72 0,18 4 Ghế máy vi tính cái 72 0,18 5 Chuột máy tính cái 6 0,18 6 Ổn áp (chung) 10A cái 48 0,05 7 Đồng hồ treo tường cái 48 0,24 8 Hộp bảo quản mẫu hộp 24 0,48 9 Ống đỡ mao quản để ly tâm hộp 36 0,10 10 Hộp đựng tip 10 ml tiệt trùng hộp 24 0,48 11 Hộp đựng tip 200 ml tiệt trùng hộp 24 0,48 12 Máy trộn mẫu (vortex) 0,1 kW cái 72 0,03 13 PIPETman loại 2 ml cái 36 0,12 14 PIPETman loại 10 ml cái 36 0,12 15 PIPETman loại 100 ml cái 36 0,12 16 PIPETman loại 1000 ml cái 36 0,12 17 Bút viết cái 6 0,03 18 Bút viết kính cái 6 0,03 19 Sổ thí nghiệm quyển 48 0,03 20 Đèn neon 40W bộ 48 0,96 21 Máy hút ẩm 2 kW cái 36 0,06 22 Máy hút bụi 1,5 kW cái 36 0,01 23 Quạt thông gió 40W cái 12 0,16 24 Quạt trần 100W cái 60 0,16 25 Điện năng kW 1,67
a) Tách chiết ADN của các mẫu sinh học có nguồn gốc từ thực vật dựa trên CTAB Bảng số 02 TT Danh mục dụng cụ ĐVT Thời hạn (tháng) Mức (ca/mẫu) 1 Áo BHLĐ cái 9 0,80 2 Giá để dụng cụ, hóa chất cái 60 0,20 3 Đồng hồ treo tường cái 48 0,20 4 Đồng hồ hẹn giờ cái 24 0,07 5 Kính bảo hộ cái 3 0,80 6 Ống đong (loại 50, 100, 250 ml) ống 12 0,06 7 Hộp bảo quản mẫu 81 vị trí hộp 24 0,40 8 Khay đựng mẫu 45 vị trí cái 24 0,40 9 Hộp đựng đầu tip 10 ml tiệt trùng hộp 24 0,40 10 Hộp đựng đầu tip 200 ml tiệt trùng hộp 24 0,40 11 Máy trộn mẫu (vortex) cái 60 0,02 12 Phích đá giữ mẫu cái 24 0,40 13 PIPETman loại 2 ml cái 36 0,10 14 PIPETman loại 10 ml cái 36 0,10 15 PIPETman loại 100 ml cái 36 0,10 16 PIPETman loại 1000 ml cái 36 0,10 17 Bút viết cái 6 0,02 18 Bút viết kính cái 6 0,02 19 Sổ hướng dẫn thí nghiệm quyển 24 0,02 20 Chày, cối sứ bộ 12 0,02 21 Đèn neon 40W bộ 48 0,80 22 Máy hút ẩm 2 kW cái 36 0,05 23 Máy hút bụi 1,5 kW cái 36 0,01 24 Quạt thông gió 40W cái 12 0,13 25 Quạt trần 100W cái 60 0,13 26 Điện năng kW 1,39
b) Tách chiết ADN của các mẫu sinh học có nguồn gốc từ động vật dựa trên phenol/cloroform Áp dụng theo quy định tại mục a của 2.1.1 ở trên
c) Phương pháp chiết ADN đối với nấm men và/hoặc nấm sợi thu được từ thực phẩm dựa trên phenol/cloroform Bảng số 03 TT Danh mục dụng cụ ĐVT Thời hạn (tháng) Mức (ca/mẫu) 1 Áo BHLĐ cái 9 0,80 2 Giá để dụng cụ, hóa chất cái 60 0,40 3 Đồng hồ treo tường cái 48 0,40 4 Đồng hồ hẹn giờ cái 24 0,03 5 Kính bảo hộ cái 3 0,40 6 Ống đong (loại 50, 100, 250 ml) ống 12 0,06 7 Hộp bảo quản mẫu 81 vị trí hộp 24 0,40 8 Khay đựng mẫu 45 vị trí cái 24 0,40 9 Hộp đựng đầu tip 10 ml tiệt trùng hộp 24 0,40 10 Hộp đựng đầu tip 200 ml tiệt trùng hộp 24 0,40 11 Máy trộn mẫu (vortex) cái 60 0,02 12 Phích đá giữ mẫu cái 24 0,40 13 PIPETman loại 2 ml cái 36 0,10 14 PIPETman loại 10 ml cái 36 0,10 15 PIPETman loại 100 ml cái 36 0,10 16 PIPETman loại 1000 ml cái 36 0,10 17 Bút viết cái 6 0,02 18 Bút viết kính cái 6 0,02 19 Sổ hướng dẫn thí nghiệm quyển 24 0,02 20 Đèn neon 40W bộ 48 0,80 21 Máy hút ẩm 2 kW cái 36 0,05 22 Máy hút bụi 1,5 kW cái 36 0,01 23 Quạt thông gió 40W cái 12 0,13 24 Quạt trần 100W cái 60 0,13 25 Điện năng kW 1,39
Khoản 2.2. Định mức thiết bị: ca/mẫu 2.2.1. Tách chiết ADN Bảng số 07 TT Danh mục thiết bị ĐVT Công suất Mức (ca/mẫu) a Tách chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ thực vật dựa trên CTAB 1 Điều hòa nhiệt độ cái 2,20 0,13 2 Nồi hấp dụng cụ cái 2,00 0,02 3 Tủ hút độc cái 1,00 0,40 4 Tủ lạnh bảo quản mẫu cái 0,10 0,40 5 Máy ly tâm cái 0,30 0,03 6 Cân phân tích cái 0,01 0,03 7 Máy đo pH cái 0,02 0,03 8 Bình chứa nitơ lỏng cái 0,40 9 Máy ủ nhiệt cái 0,10 0,40 Điện năng kW 6,85 b Tách chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ động vật dựa trên phenol/cloroform Theo quy định tại mục a trên c Tách chiết ADN đối với nấm men, nấm sợi thu được từ thực phẩm dựa trên phenol/cloroform 1 Điều hòa nhiệt độ cái 2,20 0,13 2 Nồi hấp dụng cụ cái 2,00 0,03 3 Tủ hút độc cái 1,00 0,40 4 Tủ lạnh bảo quản mẫu cái 0,10 0,40 5 Máy ly tâm cái 0,30 0,03 6 Cân phân tích cái 0,01 0,03 7 Máy đo pH cái 0,02 0,03 8 Bình chứa nitơ lỏng cái 0,40 9 Máy ủ nhiệt cái 0,10 0,40 10 Máy nghiền bi cái 0,10 0,03 11 Điện năng kW 7,05 2.2.2. Đánh giá chất lượng và xác định hàm lượng ADN của sinh vật biến đổi gen Bảng số 08 TT Danh mục thiết bị ĐVT Công suất Mức (ca/mẫu) 1 Máy điều hòa cái 2,20 0,06 2 Tủ lạnh giữ mẫu cái 0,10 0,20 3 Máy ly tâm cái 0,30 0,01 4 Máy soi gel nối với máy tính cái 0,03 0,01 5 Bộ điện di ngang và nguồn điện cái 0,05 0,05 6 Máy đo pH để bàn cái 0,05 0,01 7 Cân phân tích cái 0,01 0,01 8 Máy đo quang phổ cái 0,05 0,08 9 Máy vi tính cái 0,40 0,08 10 Máy in laser A4 cái 0,40 0,01 12 Điện năng kW 1,67 2.2.3.
Phát hiện và nhận dạng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật PCR Bảng số 09 TT Danh mục thiết bị ĐVT Công suất Mức (ca/mẫu) 1 Máy điều hòa cái 2,20 0,16 2 Máy ly tâm cái 0,30 0,03 3 Tủ lạnh giữ mẫu cái 0,10 0,48 4 Cân phân tích cái 0,01 0,03 5 Máy soi gel nối với máy tính cái 0,03 0,12 6 Máy nhân gen (PCR) cái 0,30 0,06 7 Bộ điện di ngang và nguồn điện cái 0,05 0,12 8 Máy vi tính cái 0,40 0,09 9 Máy in laser A4 cái 0,40 0,01 11 Điện năng kW 4,06 2.2.4. Định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật real-time PCR Bảng số 10 TT Danh mục thiết bị ĐVT Công suất Mức (ca/mẫu) 1 Điều hòa nhiệt độ cái 2,20 0,16 2 Máy real-time PCR cái 0,45 0,18 3 Tủ lạnh bảo quản mẫu cái 0,10 0,48 4 Máy ly tâm cái 0,30 0,03 5 Tủ giữ mẫu đông lạnh (-20°C) cái 0,15 0,48 6 Máy vi tính cái 0,40 0,18 7 Máy in laser A4 cái 0,40 0,02 8 Máy photocopy cái 1,50 0,05 9 Điện năng kW 6,40
Khoản 2.3. Định mức vật liệu: tính cho 1 mẫu 2.3.1. Tách chiết ADN 2.3.2. Đánh giá chất lượng và xác định hàm lượng ADN của sinh vật biến đổi gen (tính cho 1 mẫu) Bảng số 14 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 Tris-Cl (1000 g/lọ) lọ 0,02 2 Na2EDTA (500g/lọ) lọ 0,001 3 H3BO3 (500g/lọ) lọ 0,002 4 Glycerol (1000 ml/lọ) lọ 0,005 5 Bromophenol blue (5g/lọ) lọ 0,0005 6 Nước cất khử ion vô trùng lít 1,00 7 Ethidium bromide (10 mg/lọ) lọ 0,05 8 Thang ADN chuẩn 1 kb (100 ml/ống) ống 0,05 9 Agarose (100 g/lọ) lọ 0,005 10 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,01 11 Găng tay hộp 0,04 12 Parafilm (0,1 x 38m) cuộn 0,001 13 Đầu côn loại 10 ml (1000 cái/túi) túi 0,05 14 Đầu côn loại 100, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,02 15 Đầu côn loại 1000 ml (500 cái/túi) túi 0,05 16 Cuvet nhựa cái 5,00 17 Ống eppendorf 1,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,025 2.3.3.
Phát hiện và nhận dạng ADN của sinh vật biến đổi gen: tính cho 1 mẫu - sử dụng 5 cặp mồi Bảng số 15 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 Các cặp mồi (Primers) nucleotide 0,005 2 Taq polymerase (100 units/lọ) lọ 0,05 3 dNTPs 100 mM, 1ml/lọ lọ 0,005 4 Ethidium bromide (10 mg/Iọ) lọ 0,10 5 Tris Cl (500 g/lọ) lọ 0,08 6 EDTA (500g/lọ) lọ 0,002 7 Glycerol (1000 ml/lọ) lọ 0,0005 8 Bromophenol blue (5g/lọ) lọ 0,0005 9 Nước cất khử ion vô trùng lít 1,50 10 Agarose (100 g/lọ) lọ 0,01 11 Thang ADN chuẩn 1 kb (100 ml/ống) ống 0,1 12 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,05 13 Găng tay (50 đôi/hộp) hộp 0,08 14 Khẩu trang (50 cái/hộp) hộp 0,08 15 Đầu côn loại 10 mI (1000 cái/túi) túi 0,05 16 Đầu côn loại 100 ml, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,04 17 Ống PCR 0,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,05 18 Ống eppendorf 1,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,01 2.3.4.
Định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen: tính cho 1 mẫu Bảng số 16 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 Các cặp mồi nucleotide nucleotide 0,005 2 Các trình tự nucleotide đặc hiệu chuỗi được đánh dấu huỳnh quang trình tự nucleotide 0,005 3 Nước cất khử ion vô trùng lít 0,005 4 LightCycle® Taqman Master CAT.No 04535286001 (bao gồm: FastStart Taq ADN Polymerase, đệm phản ứng, MgCl2 và dNTP (dùng dUTP thay thế dTTP) kít 0,17 5 LightCycle® Uracil N-glycosylase (tối ưu) kít 0,02 6 Đầu côn loại 10 ml (1000 cái/túi) túi 0,02 7 Đầu côn loại 100, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,02 8 Ống eppendorf loại 1,5 ml (500 cái/túi) túi 0,02 9 Ống mao quản cho phản ứng real-time PCR (96 ống/hộp) hộp 0,18 10 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,10 11 Găng tay (dùng 1 lần) hộp 0,06 12 Giấy A4 ram 0,02 13 Mực in hộp 0,004 14 Mực photocopy hộp 0,008 PHỤ LỤC QUY TRÌNH KỸ THUẬT PHÂN TÍCH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG AXIT DEOXYRIBONUCLEIC (Ban hành kèm theo Thông tư số 13/2013/TT-BTNMT ngày 21 tháng 6 năm 2013 của Bộ trưởng Bộ Tài nguyên và Môi trường)
a) Tách chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ thực vật dựa trên CTAB Bảng số 11 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 Nitơ lỏng lít 0,50 2 CTAB (500 g/lọ) lọ 0,001 3 RNase (25 mg) lọ 0,02 4 Na2EDTA (500 g/lọ) lọ 0,002 5 Tris-Cl (500 g/lọ) lọ 0,0002 6 Cloroform lít 0,01 7 2-isopropanol lít 0,0015 8 Nước cất khử ion vô trùng lít 0,02 9 Proteinase K (25 mg) lọ 0,05 10 Alpha amylase (100 mg) lọ 0,005 11 Ethanol lít 0,01 12 NaCl kg 0,0011 13 HCl 37% lít 0,005 14 NaOH kg 0,001 15 Ống Falcon 50 ml (25 ống/túi) túi 0,20 16 Ống Falcon 15 ml (50 ống/túi) túi 0,04 17 Khẩu trang dùng 1 lần (50 chiếc/hộp) hộp 0,08 18 Đầu côn loại 100, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,02 19 Đầu côn loại 1000 ml (500 cái/túi) túi 0,02 20 Ống eppendorf 1,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,03 21 Ống eppendorf 2 ml (1000 cái/túi) túi 0,005 22 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,01
b) Tách chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ động vật dựa trên phenol/cloroform Bảng số 12 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 Nitơ lỏng lít 0,50 2 Natri dodecyl sulfat (SDS) 100 g lọ 0,025 3 RNase (12 mg) lọ 0,04 4 Na2EDTA (500 g/lọ) lọ 0,004 5 Tris-Cl (500 g/lọ) lọ 0,002 6 Cloroform lít 0,0216 7 Phenol lít 0,025 8 Isoamyl alcohol lít 0,001 9 Nước cất khử ion vô trùng lít 0,02 10 Proteinase K (25 mg) lọ 0,16 11 Acid acetic băng lít 0,001 12 Ethanol lít 0,02 13 Kali acetat kg 0,001 14 Ống Falcon 50 ml (25 ống/túi) túi 0,2 15 Ống Falcon 15 ml (50 ống/túi) túi 0,04 16 Khẩu trang dùng 1 lần (50 cái/hộp) hộp 0,08 17 Đầu côn loại 100, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,02 18 Đầu côn loại 1000 ml (500 cái/túi) túi 0,04 19 Ống eppendorf 1,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,03 20 Ống eppendorf 2 ml (1000 cái/túi) túi 0,015 21 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,01
c) Tách chiết ADN đối với nấm men và nấm sợi thu được từ thực phẩm dựa trên phenol/ cloroform Bảng số 13 TT Danh mục vật liệu ĐVT Mức 1 RNase (25 mg) lọ 0,004 2 Na2EDTA(500 g/lọ) lọ 0,0006 3 Tris-CI (500 g/lọ) lọ 0,0002 4 Cloroform lít 0,0015 5 Phenol lít 0,0016 6 Isoamyl alcohol lít 0,0006 7 Nước cất khử ion vô trùng lít 0,02 8 Natri dodecyl sulfat (SDS) 100 g lọ 0,012 9 Acid acetic glacial lít 0,001 10 Ethanol lít 0,003 11 Kali acetat kg 0,001 12 Ống Falcon 50 ml (25 ống/túi) túi 0,10 13 Ống Falcon 15 ml (50 ống/túi) túi 0,10 14 Khẩu trang dùng 1 lần (50 cái/hộp) hộp 0,08 15 Đầu côn loại 100, 200 ml (1000 cái/túi) túi 0,03 16 Đầu côn loại 1000 ml (500 cái/túi) túi 0,02 17 Ống eppendorf 1,5 ml (1000 cái/túi) túi 0,01 18 Ống eppendorf 2 ml (1000 cái/túi) túi 0,01 19 Hạt thủy tinh 100 g lọ 0,01 20 Hóa chất sát trùng tiêu chuẩn lít 0,01
Điều 3. Phát hiện và nhận dạng ADN của sinh vật biến đổi gen (định tính) thông qua phản ứng chuỗi trùng hợp (kỹ thuật PCR). Nguyên tắc chung Phương pháp PCR dựa trên nguyên tắc bắt cặp đặc hiệu của các đoạn ADN có trình tự bổ sung và phản ứng kéo dài đoạn trình tự mồi nhờ enzym Taq ADN polymerase để khuyếch đại theo hàm mũ các đoạn ADN đích lên hàng triệu lần. PCR được xem như là một bản dịch đơn giản hóa của quá trình sao mã ADN mà quá trình này xuất hiện trong suốt thời kì phân chia tế bào. PCR bao gồm 3 bước chính: biến tính đoạn ADN, gắn mồi oligonucleotide tổng hợp, kéo dài mồi bởi ADN polymerase. Chu kì gồm 3 bước này được lặp đi lặp lại nhiều lần, mỗi lần làm tăng gấp đôi số lượng sản phẩm ban đầu. Sự khuếch đại này được tính theo công thức x(1+E)n với x là số lượng mẫu ban đầu, E là hiệu suất của quá trình khuếch đại, n là chu kì của phản ứng PCR. Sau một vài chu kì, sản phẩm tạo thành được tính bằng kích thước giữa hai đầu cuối 5’ của hai đoạn mồi. Các phương pháp phát hiện và nhận dạng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật PCR bao gồm các phương pháp như sau: Phương pháp đặc hiệu taxon - đích Taxon là cấp phân loại, đơn vị phân loại. Taxon đích là đơn vị phân loại của sinh vật biến đổi gen. Đây là phương pháp thông thường để phát hiện trình tự ADN trong một taxon đích, thường là một loài nhưng có thể là cấp phân loại nhỏ hơn hoặc cao hơn. Các phương pháp dựa vào taxon đích để đánh giá sự có mặt, chất lượng và số lượng ADN có nguồn gốc từ taxon và đôi khi còn được sử dụng là đơn vị chuẩn để định lượng tương đối vật liệu có nguồn gốc biến đổi gen. Ví dụ trình tự nucleotide của gen lectin Le1 đậu tương thu được từ Ngân hàng dữ liệu gen được sử dụng làm gen đơn đặc hiệu trong xác định đặc hiệu taxon đích để phát hiện thành phần từ đậu tương. Phương pháp sàng lọc PCR để phát hiện ADN của sinh vật biến đổi gen Phương pháp sàng lọc PCR là phương pháp phát hiện các yếu tố di truyền thông thường đối với một số sinh vật biến đổi gen (chẳng hạn như gen khởi động, gen kết thúc hoặc một số yếu tố di truyền được quan tâm khác). Phương pháp sàng lọc nhanh và đáng tin cậy một số lượng lớn các mẫu thử. Phát hiện sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật PCR chủ yếu dựa vào các cặp mồi đặc hiệu cho vùng promoter và terminator. Hầu hết các trình tự ADN chuyển vào hệ gen thực vật dưới sự điều khiển CaMV 35S promoter, chỉ có một vài trường hợp sử dụng các promoter biểu hiện đặc hiệu ở phần chuyển hóa như rễ, thân, hạt... hay các promoter cảm ứng. Hiện nay rất nhiều các cây trồng biến đổi gen đã được cấp phép trồng mang ít nhất một bản sao của 35S promoter và T-Nos terminator (phân lập từ gen tổng hợp nopaline ở Agrobacterium tumefaciens). Một gen khác được sử dụng khá phổ biến là gen chọn lọc kanamycin nptII phân lập từ Escherichia coli transposon 5.
Vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và virus khảm súp lơ (Cauliflower mosaic virus) đều nằm trong các danh mục các loài gây hại cho thực vật và đặc biệt virus khảm súp lơ ngoài gây bệnh cho súp lơ còn gây bệnh cho các thành viên khác thuộc họ Brassicceae (Cruciferae) cũng như họ Resedaceae và Solanaceae. Vì thế, kết quả dương tính từ các mẫu Brassicaceae, Resedceae và Solanaceae cần được xử lý cẩn thận. Để phân biệt giữa nhiễm virus và vật liệu biến đổi gen cần có phương pháp phát hiện virus. Đối với động vật biến đổi gen, thường các promoter sử dụng có nguồn gốc hoặc từ động vật như methallothionein (MT), thymidine kinase, b-actin, amylase, insulin, b-lactoglobulin, adiposite P2 ... hoặc từ virus động vật như Simian virus (SV40), Rous sarcoma virus (RSV)... Tuy nhiên do các promoter có nguồn gốc từ động vật dễ gây ra nhầm lẫn với promoter nội sinh của vật chủ, nên các promoter có nguồn gốc từ virus động vật có thể được sử dụng để sàng lọc sự có mặt của ADN có nguồn gốc động vật. Phương pháp nhận dạng cấu trúc đặc thù (event specific) để phát hiện trình tự gen đích của các sản phẩm biến đổi gen Phương pháp này được sử dụng nhằm phát hiện sự tổ hợp của các trình tự ADN được đưa vào hệ gen vật chủ, cấu trúc này chỉ tìm thấy trong các dòng có nguồn gốc từ sinh vật biến đổi gen. Trường hợp để phát hiện ngô T25/"LibertyLink" kháng lại thuốc diệt cỏ nhờ biến đổi gen trong các nguyên liệu thô bằng cách khuếch đại vùng nối giữa trình tự ADN có nguồn gốc từ promoter 35S-CaMV và gen pat (gen kháng thuốc trừ cỏ). Phương pháp này không phân biệt được các giống ngô mà chỉ sử dụng để phát hiện sự có mặt của đoạn gen chuyển trong hạt và cây ngô. Kích thước của đoạn gen đích sau khi khuếch đại bằng phản ứng PCR được xác định khi kích thước của sản phẩm PCR tương ứng với kích thước của đoạn ADN đích dự kiến. Các sản phẩm PCR được phân tích và xử lý bằng phương pháp điện di trên gel agarose và nhuộm bởi ethidium bromide. Gel agarose 1,5 % là thích hợp để phân tích các sản phẩm của PCR từ 150-1000 bp. Thang ADN chuẩn có kích thước trong khoảng 0,1-10kb để phân biệt độ lớn các đoạn nucleotide khác nhau.
Điều 4. Định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen bằng kỹ thuật real-time PCR. Real-time PCR có thể được hiểu là phản ứng PCR động (kinetic PCR) mà trong đó số liệu phân tích được thu nhận thông qua phản ứng PCR, chính vì vậy mà sự nhân bản các gen đặc hiệu và việc phát hiện các sản phẩm có thể được kết hợp trong cùng một bước tiến hành thông qua việc sử dụng các loại chất phát huỳnh quang trong phản ứng. Cường độ huỳnh quang biểu thị nồng độ sản phẩm PCR tạo thành. Phản ứng được xác định sau các điểm thời gian (hoặc các chu kì PCR) mà trong đó sự nhân bản trình tự đích sẽ được phát hiện đầu tiên. Giá trị này được biểu thị với tên gọi là ngưỡng chu kì Ct (cycle threshold), đây chính là thời điểm mà cường độ huỳnh quang lớn hơn giá trị huỳnh quang cơ sở. Lượng ADN đích được nhân bản càng nhiều thì tín hiệu phát huỳnh quang càng nhanh, do vậy mà giá trị Ct sẽ càng thấp. Trong real-time PCR, người ta thường sử dụng các loại thuốc nhuộm liên kết ADN sợi đôi (SYBR Green) để phát huỳnh quang, và các probe hoặc primer đặc hiệu chuỗi (trình tự) được đánh dấu huỳnh quang (TaqMan PCR). Thiết bị ổn nhiệt chu kỳ (máy PCR) đặc biệt được gắn với một module phát hiện tín hiệu huỳnh quang để theo dõi tiến trình phản ứng khi sự khuếch đại xảy ra. Tín hiệu huỳnh quang đo được phản ánh số lượng sản phẩm được khuếch đại trong mỗi chu kỳ. Trong phân tích định lượng ADN của sinh vật biến đổi gen và các sản phẩm có nguồn gốc biến đổi gen, cần thiết phải xác định một gen chuẩn - gen tham chiếu (là gen nội sinh của sinh vật chuyển gen) để chuẩn hóa phương pháp. Gen chuẩn này phải phù hợp với các điều kiện: i) trình tự có tính đặc hiệu cao; ii) có một bản sao duy nhất trong bộ gen đoa bội, iii) biểu hiện ổn định trong các dòng khác nhau của cùng một loài. Do vậy trong real-time PCR định lượng cần có hai loại phản ứng cho gen đích và cho gen tham chiếu. Đối với phương pháp này thì hiệu quả nhân bản của các mẫu chuẩn và các mẫu nghiên cứu được coi là như nhau. Để dựng đường chuẩn của gen đích cần tách chiết ADN tổng số của mẫu chuẩn (là ADN tách chiết từ vật liệu chuẩn đã được chứng nhận như ADN của sinh vật biến đổi gen hay ADN plasmid mang trình tự gen đích) và mẫu đối chứng âm (vật liệu chuẩn đã biết không chứa trình tự gen đích). Ví dụ: trong phân tích định lượng ADN từ các sản phẩm có nguồn gốc từ ngô chuyển gen Bt11, để dựng đường chuẩn của gen đích, ADN tổng số của ngô chuyển gen Bt11 (100% Bt là mẫu chuẩn đã được chứng nhận hợp lệ) và ngô không chuyển gen được tách chiết và định lượng. Pha loãng ADN của Bt11 thành các mẫu (M1-M6) mang số bản sao bộ gen đơn bội khác nhau như sau: M1:20000; M2:5000; M3: 1250; M4: 312; M5: 78; và M6: 19 (được biết bộ gen đơn bội của ngô có khối lượng 2,725 pg). Trộn ADN của Bt11 đã pha loãng với ADN của ngô không chuyển gen để đảm bảo lượng ADN ở mỗi mẫu là bằng nhau.
Để dựng đường chuẩn của gen tham chiếu - adh1, ADN tổng số của ngô không chuyển gen được tách chiết, định lượng và pha loãng thành các mẫu (S1-S6) mang số bản sao bộ gen đơn bội khác nhau như sau: S1: 183486; S2: 61162; S3: 20387; S4: 6796; S5: 2265; và S6:755 (được biết bộ gen đơn bội của ngô có khối lượng 2,725 pg). Hiệu chỉnh và tính toán kết quả Bằng cách sử dụng các mẫu đã được pha loãng với nồng độ đã biết để tạo ra một đường chuẩn cho cả gen chuẩn và gen đích. Đường chuẩn này thể hiện mối quan hệ tuyến tính giữa giá trị Ct và nồng độ ADN ban đầu, căn cứ vào đó có thể xác định được nồng độ ADN của các mẫu nghiên cứu căn cứ vào giá trị Ct của các mẫu này. Đầu tiên, ta phải xây dựng được 2 đường chuẩn cho gen chuẩn và gen đích. Trong đó một cột sẽ là nồng độ ADN, và cột còn lại sẽ là số bản sao của gen đó. Để định lượng tỷ lệ phần trăm sinh vật biến đổi gen đối với một mẫu, cần thiết phải xác định được 2 giá trị là số bản sao của gen đích và số bản sao của gen chuẩn. Tỷ lệ phần trăm (%) sinh vật biến đổi gen (GM) trong một mẫu là tỉ lệ % của số bản sao gen đích so với số bản sao gen chuẩn, được tính bằng công thức sau: Tỷ lệ % sinh vật biến đổi gen = (số bản sao của gen đích/số bản sao của gen chuẩn) x 100./.
Điều 1. Tách chiết ADN. Đối với động vật, thực vật và vi sinh vật thì phương pháp tách chiết ADN được áp dụng theo các phương pháp khác nhau, như sau:
a) Phương pháp chiết ADN các mẫu sinh học có nguồn gốc từ thực vật dựa trên CTAB Phương pháp này sử dụng để chiết ADN từ thực vật và các loại chất nền có nguồn gốc từ thực vật, do có khả năng loại bỏ các hợp chất polysacarit và polyphenol vốn có ảnh hưởng đến chất lượng ADN. Phương pháp này cũng có thể dùng cho các loại chất nền khác. Các bước tiến hành cơ bản: - Nghiền mẫu thử thành dạng bột mịn bằng cối chày sứ trong nitơ lỏng; - Phân giải mẫu bằng nhiệt với sự có mặt của CTAB, tùy thuộc vào loại chất nền, cần bổ sung thêm các enzyme khác vào đệm chiết như alpha amylaza để thủy phân tinh bột, enzyme proteinaza-K để loại trừ protein và enzyme Ribonucleaza để phân giải RNA; - Loại bỏ các tạp chất như các polysacarit và các protein bằng cloroform; - Kết tủa các ADN bởi isopropanol và rửa bằng ethanol.
b) Phương pháp chiết ADN từ các mẫu sinh học có nguồn gốc từ động vật dựa trên phenol/ cloroform Phương pháp này có thể dùng để chiết ADN ra khỏi các loại chất nền khác nhau. Phenol thường rất thích hợp để biến tính các protein và phá hủy các enzyme nucleaza. Các bước tiến hành cơ bản: - Nghiền mẫu thử thành dạng bột mịn bằng cồi chày sứ trong nitơ lỏng; - Phân hủy mẫu dưới sự có mặt của natri dodecyl sulfat và hàm lượng EDTA cao; tùy thuộc vào loại chất nền cần bổ sung thêm enzyme proteinaza-K để loại trừ protein và enzyme Rnaza để phân giải RNA; - Loại bỏ các tạp chất như các phân tử ưa mỡ, các chất polysacarit, các protein và các nuleaza bằng phenol và cloroform; - Kết tủa ADN cuối cùng bởi isopropanol và rửa bằng ethanol loại trừ các muối và cloroform còn dư.
c) Phương pháp chiết ADN đối với các mẫu sinh học có nguồn gốc từ vi sinh vật dựa trên phenol/cloroform Phương pháp này mô tả qui trình chiết và tinh sạch ADN đạt chất lượng dùng cho phản ứng PCR từ nấm men hoặc nấm sợi, hoặc các quần thể vi khuẩn được phân lập. Phương pháp này cũng thích hợp đối với việc truy nguyên ADN từ các sinh vật biến đổi gen trong các loại chất nền phức hợp cao. Việc phân lập vi khuẩn ra khỏi chất nền, nuôi cấy vi khuẩn tăng thu sinh khối tế bào, sau đó tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn phân lập sẽ cho kết quả tin cậy nhất. Các bước tiến hành cơ bản: - Các vi khuẩn, nấm men hoặc nấm sợi bị phá vỡ và ADN được tách chiết đồng thời bằng cách nghiền trong hỗn hợp Tris-phenol-cloroform-EDTA-SDS với tốc độ cao trong sự có mặt của các hạt thủy tinh; - Đối với phản ứng PCR định lượng cần ủ mẫu với Rnaza để phân giải RNA; - Kết tủa ADN bằng ethanol.
Điều 3. / Thông tư này có hiệu lực sau 15 ngày kể từ ngày đăng công báo.. Trong quá trình thực hiện, nếu có vướng mắc, đề nghị Ngân hàng Chính sách xã hội phản ánh về Bộ Lao động - Thương binh và Xã hội xem xét, giải quyết. Lê Duy Đồng (Đã ký)
Điều 2. Hiệu lực thi hành
1. Thông tư này có hiệu lực từ ngày 01 tháng 7 năm 2024.
2. Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về an toàn sản phẩm vật liệu nổ công nghiệp - thuốc nổ Octogen (HMX) số QCVN 12-17:2023/BCT có hiệu lực từ ngày 01 tháng 7 năm 2024.
Điều 10. Thiệt hại do tổn thất về tinh thần
1. Thiệt hại do tổn thất về tinh thần trong thời gian bị tạm giữ, tạm giam, chấp hành hình phạt tù quy định tại khoản 2 Điều 47 Luật TNBTCNN hoặc trong thời gian bị khởi tố, truy tố, xét xử, thi hành án mà không bị tạm giữ, tạm giam, thi hành hình phạt tù có thời hạn (bao gồm cả trường hợp thi hành hình phạt ngoài phạt tù) quy định tại khoản 5 Điều 47 Luật TNBTCNN được xác định như sau:
a) Một ngày lương tối thiểu được xác định bằng việc lấy mức lương tối thiểu do Nhà nước quy định áp dụng cho công chức làm việc trong các cơ quan hành chính nhà nước tại thời điểm giải quyết bồi thường chia cho 22 là số ngày làm việc bình quân của mỗi tháng; Ví dụ: Tại thời điểm ban hành Thông tư liên tịch này thì mức lương tối thiểu chung do Nhà nước quy định là 830.000 đồng, do đó một ngày lương tối thiểu sẽ là: 830.000 đồng : 22 = 37.723 đồng.
b) Thời gian để tính bồi thường thiệt hại được xác định kể từ ngày người bị thiệt hại bị tạm giữ hoặc bị khởi tố bị can cho đến ngày có bản án, quyết định của cơ quan có thẩm quyền trong hoạt động tố tụng hình sự xác định người đó không thực hiện hành vi vi phạm pháp luật hoặc không thực hiện hành vi phạm tội thuộc trường hợp được bồi thường quy định tại Điều 26 Luật TNBTCNN và hướng dẫn tại Điều 2 Thông tư liên tịch này. Trong đó phải xác định cụ thể số ngày bị tạm giữ, tạm giam, chấp hành hình phạt tù và số ngày được tại ngoại. Ví dụ 1: Ông A bị tạm giữ và bị khởi tố bị can từ ngày 01/12/2009; hết thời hạn tạm giữ, ông A tiếp tục bị áp dụng biện pháp ngăn chặn tạm giam. Đến ngày 01/3/2010 thì ông A được tại ngoại. Ngày 20/3/2010, cơ quan điều tra ra quyết định đình chỉ điều tra đối với ông A với lý do ông A không thực hiện hành vi phạm tội. Trong trường hợp này, xác định thiệt hại do tổn thất về tinh thần mà ông A được bồi thường như sau: - Số ngày thực tế bị tạm giữ, tạm giam là: 31 ngày (của tháng 12/2009) + 31 ngày (của tháng 01/2010) + 29 ngày của tháng 02/2010 = 91 ngày; - Số ngày không bị tạm giữ, tạm giam (tại ngoại) được bồi thường là 20 ngày (từ ngày 1/3/2010 đến 20/3/2010); - Số ngày được bồi thường tính theo mức lương tối thiểu là: (91 ngày x 3) + 20 ngày = 293 ngày; Trong ví dụ này, số tiền mà ông A được Nhà nước bồi thường là: 293 ngày x 37.723 đồng = 10.920.989 đồng.
Ví dụ 2: Ông B bị tạm giữ từ ngày 01/01/2010, Cơ quan điều tra đã 2 lần gia hạn tạm giữ, lần 1 vào ngày 03/01/2010, lần 2 vào ngày 06/01/2010 (Viện kiểm sát đã quyết định phê chuẩn quyết định gia hạn tạm giữ). Đến ngày 07/01/2010, Viện kiểm sát hủy bỏ quyết định tạm giữ và Cơ quan điều tra đã trả tự do cho ông B vì không đủ căn cứ để khởi tố bị can đối với ông B. Trong trường hợp này, xác định thiệt hại do tổn thất về tinh thần mà ông B được bồi thường như sau: - Số ngày thực tế ông B bị tạm giữ là: 8 ngày; - Số ngày được bồi thường tính theo mức lương tối thiểu là: 8 x 3 = 24 ngày; - Số tiền ông B được Nhà nước bồi thường là: 24 ngày x 37.723 đồng = 905.352 đồng. Ví dụ 3. Ông C bị khởi tố bị can (nhưng không bị tạm giữ, tạm giam) từ ngày 01/01/2010. Đến ngày 20/3/2010, Cơ quan điều tra quyết định đình chỉ điều tra đối với ông C với lý do ông C không thực hiện hành vi phạm tội. Trong trường hợp này, xác định thiệt hại do tổn thất về tinh thần mà ông C được bồi thường như sau: - Số ngày ông C được bồi thường là: 80 ngày (31 ngày của tháng 01/2010 + 29 ngày của tháng 02/2010 + 20 ngày của tháng 3/2010); - Số tiền ông C được Nhà nước bồi thường là: 80 ngày x 37.723 đồng = 3.017.840 đồng.
2. Thiệt hại do tổn thất về tinh thần trong trường hợp người bị thiệt hại chết quy định tại khoản 3 Điều 47 Luật TNBTCNN được xác định như sau:
a) Trường hợp người bị thiệt hại chết trong thời gian bị tạm giữ, tạm giam, chấp hành hình phạt tù mà không phải do lỗi của chính họ hoặc không do sự kiện bất khả kháng thì được bồi thường thiệt hại là ba trăm sáu mươi tháng lương tối thiểu chung do Nhà nước quy định tại thời điểm giải quyết bồi thường. Trong trường hợp này, không được tính thêm khoản tiền bồi thường thiệt hại do tổn thất về tinh thần theo quy định tại khoản 2 và khoản 5 Điều 47 Luật TNBTCNN và theo hướng dẫn tại khoản 1 Điều này;
b) Trường hợp người bị thiệt hại chết trong thời gian bị tạm giữ, tạm giam, chấp hành hình phạt tù mà do lỗi của chính họ hoặc do sự kiện bất khả kháng thì không được bồi thường thiệt hại do tổn thất về tinh thần theo quy định tại khoản 3 Điều 47 Luật TNBTCNN mà chỉ được bồi thường thiệt hại do tổn thất về tinh thần theo quy định tại khoản 2 Điều 47 Luật TNBTCNN và theo hướng dẫn tại khoản 1 Điều này;
c) Khoản tiền bồi thường thiệt hại do tổn thất về tinh thần là khoản tiền bồi thường chung cho thân nhân của người bị thiệt hại (vợ, chồng, cha đẻ, mẹ đẻ, cha nuôi, mẹ nuôi, con đẻ, con nuôi của người bị thiệt hại, người đã trực tiếp nuôi dưỡng người bị thiệt hại). Những người được bồi thường trong trường hợp này phải còn sống tại thời điểm người bị thiệt hại chết.
Khoản 1. Trong thời hạn 03 ngày làm việc, kể từ ngày thụ lý đơn yêu cầu bồi thường, thủ trưởng cơ quan tiến hành tố tụng có trách nhiệm bồi thường phải ra quyết định cử người đại diện thực hiện việc giải quyết bồi thường. Trường hợp thủ trưởng cơ quan có trách nhiệm bồi thường là người tiến hành tố tụng đã gây ra thiệt hại hoặc là vợ (hoặc chồng), ông nội, bà nội, ông ngoại, bà ngoại, cha đẻ, cha nuôi, mẹ đẻ, mẹ nuôi (bên vợ hoặc bên chồng), con đẻ, con nuôi, anh, chị, em ruột (bên vợ hoặc bên chồng), cháu nội, cháu ngoại của người tiến hành tố tụng đã gây ra thiệt hại hoặc của người bị thiệt hại (sau đây gọi chung là người liên quan) thì tập thể lãnh đạo cơ quan cùng thảo luận, thống nhất cử một đại diện lãnh đạo cơ quan chịu trách nhiệm về việc giải quyết bồi thường.
Điều 23. Tổ chức thực hiện. Trong quá trình thực hiện, nếu có vướng mắc hoặc chưa được hướng dẫn cần phải giải thích, hướng dẫn bổ sung, đề nghị các cơ quan, tổ chức, cá nhân phản ánh về Viện kiểm sát nhân dân tối cao, Tòa án nhân dân tối cao, Bộ Công an, Bộ Tư pháp, Bộ Quốc phòng, Bộ Tài chính, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn để có sự giải thích hoặc hướng dẫn bổ sung kịp thời./. KT. VIỆN TRƯỞNG VIỆN KIỂM SÁT NHÂN DÂN TỐI CAO PHÓ VIỆN TRƯỞNG THƯỜNG TRỰC Hoàng Nghĩa Mai KT. CHÁNH ÁN TÒA ÁN NHÂN DÂN TỐI CAO PHÓ CHÁNH ÁN THƯỜNG TRỰC Đặng Quang Phương KT. BỘ TRƯỞNG BỘ CÔNG AN THỨ TRƯỞNG Trung tướng Phạm Quý Ngọ KT. BỘ TRƯỞNG BỘ TƯ PHÁP THỨ TRƯỞNG Phạm Quý Tỵ KT. BỘ TRƯỞNG BỘ QUỐC PHÒNG THỨ TRƯỞNG Thượng tướng Nguyễn Thành Cung KT. BỘ TRƯỞNG BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN THỨ TRƯỞNG Nguyễn Đăng Khoa KT. BỘ TRƯỞNG BỘ TÀI CHÍNH THỨ TRƯỞNG Trương Chí Trung Mẫu số 01a. Ban hành kèm theo Thông tư liên tịch số 05/2012/TTLT-VKSNDTC-TANDTC-BCA-BTP-BQP-BTC-BNN&PTNT ngày 02 tháng 11 năm 2012 hướng dẫn thực hiện trách nhiệm bồi thường của Nhà nước trong hoạt động tố tụng hình sự CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc ----------------------------------- ĐƠN YÊU CẦU BỒI THƯỜNG THIỆT HẠI (Đối với cá nhân bị thiệt hại) Kính gửi:..............................................................................................................[1] Tên tôi là:................................................ Nam (nữ)............................................. Số chứng minh thư nhân dân.................. do Công an................. cấp ngày.......... Chỗ ở hiện nay:..................................................................................................... Theo Quyết định (Bản án) số............ ngày.......... tháng......... năm........ của Cơ quan (CQĐT, VKS, TA)............................................................................................. Về.......................................................................................................................... Tôi đề nghị Quý Cơ quan xem xét, giải quyết bồi thường thiệt hại theo quy định của Luật Trách nhiệm bồi thường của Nhà nước, bao gồm các khoản sau: I. Thiệt hại do tổn thất về tinh thần
1. Trường hợp bị tạm giữ, tạm giam, chấp hành hình phạt tù: - Số ngày bị tạm giữ/tạm giam/chấp hành hình phạt tù (từ ngày............... đến ngày............................):................... ngày. - Số tiền yêu cầu bồi thường: 3 x lương tối thiểu x.......... (ngày) = ........ (đồng). 1. Chi phí hợp lý cho việc cứu chữa, bồi dưỡng, phục hồi sức khỏe và chức năng bị mất, bị giảm sút, bao gồm: - Tiền thuốc:.......................... đồng. - Tiền viện phí:...................... đồng. - Tiền chi phí khác:................ đồng. - Cộng:............... đồng. (Kèm theo hồ sơ bệnh án, hóa đơn, chứng từ, xác nhận liên quan đến các chi phí trên).
3. Trường hợp sức khỏe bị xâm phạm: - Mức độ sức khỏe bị tổn hại:............................................................................... - Số tiền yêu cầu bồi thường:....................................................................... đồng II. Thiệt hại do tổn hại về sức khỏe 3. Chi phí hợp lý và thu nhập thực tế bị mất của người chăm sóc người bị thiệt hại trong thời gian điều trị: ............................................................................................................................... ............................................................................................................................... ............................................................................................................................... (Kèm theo giấy tờ chứng minh những khoản tiền trên) 3. Chi phí bảo quản tài sản, ngăn chặn thiệt hại tài sản: - Chi phí thực tế:............ đồng. (Kèm theo chứng từ, hóa đơn, tài liệu chứng minh chi phí bảo quản, ngăn chặn thiệt hại tài sản). V. Thiệt hại khác - Khoản tiền bị tịch thu, thi hành án, khoản tiền đặt cọc:............ đồng. - Khoản lãi tiền vay:.............. đồng. (Kèm theo hóa đơn chứng từ, biên nhận....chứng minh các khoản chi phí trên). VI. Tổng cộng số tiền đề nghị bồi thường:....................... đồng. Kính mong Quý Cơ quan xem xét, giải quyết bồi thường cho tôi về những thiệt hại trên theo quy định của pháp luật. ..., ngày............ tháng.......... năm.......... Người yêu cầu bồi thường (Ký và ghi rõ họ tên) Mẫu số 01b. Ban hành kèm theo Thông tư liên tịch số 05/2012/TTLT-VKSNDTC-TANDTC-BCA-BTP-BQP-BTC-BNN&PTNT ngày 02 tháng 11 năm 2012 hướng dẫn thực hiện trách nhiệm bồi thường của Nhà nước trong hoạt động tố tụng hình sự (áp dụng cho trường hợp người bị thiệt hại chết).
Ban hành kèm theo Thông tư liên tịch số 05/2012/TTLT-VKSNDTC-TANDTC-BCA-BTP-BQP-BTC-BNN&PTNT ngày 02 tháng 11 năm 2012 hướng dẫn thực hiện trách nhiệm bồi thường của Nhà nước trong hoạt động tố tụng hình sự (áp dụng cho trường hợp người bị thiệt hại chết) CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc ----------------------------------- BIÊN BẢN THƯƠNG LƯỢNG VIỆC BỒI THƯỜNG THIỆT HẠI Hôm nay, ngày........... tháng........... năm........., tại trụ sở Cơ quan:............................ Chúng tôi gồm có: I. Cơ quan có trách nhiệm bồi thường - Ông (Bà)................................ Chức vụ:.............................. làm đại diện - Ông (Bà)................................ Chức vụ:.............................. II. Người yêu cầu bồi thường Ông (Bà):.................................................................................................................. Số chứng minh thư nhân dân:.................. do Công an......................... cấp ngày.............. tháng............ năm.................. Địa chỉ:...................................................................................................................... Số điện thoại:............................................................................................................ Quan hệ với người bị thiệt hại:.................................................................................. ................................................................................................................................... Có sự tham gia của ông (bà)........................................ là người tiến hành tố tụng hình sự gây ra thiệt hại (nếu có). Đã cùng nhau tiến hành thương lượng bồi thường thiệt hại trên cơ sở Quyết định (Bản án) số.............. ngày........ tháng........ năm..... của Cơ quan............................ xác định người bị thiệt hại thuộc trường hợp được bồi thường, Đơn yêu cầu bồi thường thiệt hại của Ông (Bà)................................ kèm theo hóa đơn, chứng từ, tài liệu chứng minh các khoản thiệt hại đề nghị bồi thường và các quy định pháp luật hiện hành có liên quan.
Nội dung thương lượng cụ thể như sau: NỘI DUNG ĐƠN ĐỀ NGHỊ BỒI THƯỜNG NỘI DUNG THƯƠNG LƯỢNG BỒI THƯỜNG CÁC KHOẢN THƯƠNG LƯỢNG THÀNH GHI CHÚ STT Các khoản chi phí đề nghị bồi thường thiệt hại Số tiền Những khoản chi phí có hóa đơn, chứng từ, tài liệu chứng minh Những khoản chi phí không có hóa đơn chứng từ, tài liệu chứng minh Căn cứ quy định, chế độ, tiêu chuẩn, định mức của Nhà nước Căn cứ khác 1 2 3 4 5 6 7 8 I Thiệt hại do tổn thất về tinh thần: Số tiền bồi thường chung cho thân nhân người bị thiệt hại (Khoản 2 Điều 47 Luật TNBTCNN): 360 x mức tối thiểu = ... (đồng) 360 x mức tối thiểu = ........ (đồng) 360 x mức tối thiểu = ........ (đồng) II Thiệt hại vật chất: 1 Chi phí cứu chữa, bồi dưỡng, chăm sóc người bị thiệt hại trước khi chết, bao gồm: - Tiền thuốc: - Tiền viện phí: - Tiền chi phí khác: - Cộng ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) 2 Chi phí mai táng: - Tiền thuê xe: - Tiền quan tài: - Tiền hương nến: - Tiền vải liệm: - Chi phí khác: ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) 3 Tiền cấp dưỡng: - Tiền cấp dưỡng cho ông, bà, cha, mẹ: - Tiền cấp dưỡng cho con đẻ, con nuôi: - Tiền cấp dưỡng cho anh, chị, em: - Cộng: ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) 4 Thu nhập thực tế bị mất: ......... (đồng) 5 Thiệt hại do tài sản bị thu giữ, tạm giữ, kê biên, tịch thu: 5.1 5.2 5.3 Về tài sản: - Tên tài sản:................... - Đặc điểm của tài sản (hình dáng, màu sắc, kích thước, công dụng, năm sản xuất, xuất xứ tài sản, nơi mua tài sản........ - Tình trạng tài sản:......... - Giá trị tài sản khi mua: - Giá trị tài sản khi bị xâm phạm - Cơ quan ra quyết định thu giữ, tạm giữ, kê biên, tịch thu tài sản:................ - Mức yêu cầu bồi thường: Về thiệt hại do không sử dụng, khai thác tài sản: Thiệt hại thực tế: Chi phí bảo quản tài sản, ngăn chặn thiệt hại tài sản: - Chi phí thực tế: ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) ......... (đồng) 6 Thiệt hại khác: - Khoản tiền bị tịch thu, thi hành án, khoản tiền đặt cọc: - Khoản lãi tiền vay: ......... (đồng) ......... (đồng) III Tổng cộng số tiền đề nghị bồi thường ........ (đồng) * Nơi nhận tiền bồi thường (Kho bạc hoặc Cơ quan giải quyết bồi thường). * Hình thức nhận tiền bồi thường (tiền mặt hoặc chuyển khoản): 3. Ý kiến của cơ quan có trách nhiệm bồi thường:................................................... .................................................................................................................................. Biên bản đã được đọc cho mọi người tham gia thương lượng cùng nghe.
Chúng tôi thống nhất nội dung thương lượng thành ghi trong biên bản thương lượng này và cùng ký tên dưới đây: Người yêu cầu bồi thường (Ký và ghi rõ họ tên) .............., ngày............. tháng.......... năm............. Đại diện Cơ quan có trách nhiệm bồi thường (Ký và ghi rõ họ tên) Mẫu số 03a. Ban hành kèm theo Thông tư liên tịch số 05/2012/TTLT-VKSNDTC-TANDTC-BCA-BTP-BQP-BTC-BNN&PTNT ngày 02 tháng 11 năm 2012 hướng dẫn thực hiện trách nhiệm bồi thường của Nhà nước trong hoạt động tố tụng hình sự CƠ QUAN BỒI THƯỜNG -------- CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc --------------- Số:......../QĐ-.... ..........., ngày........... tháng......... năm........ QUYẾT ĐỊNH (V/v giải quyết bồi thường đối với THỦ TRƯỞNG CƠ QUAN Căn cứ Luật Trách nhiệm bồi thường của Nhà nước ngày 18 tháng 6 năm 2009; Căn cứ Thông tư liên tịch số 05/2012/TTLT-VKSNDTC-TANDTC-BCA-BTP- BQP-BTC-BNN&PTNT ngày 02 tháng 11 năm 2012 hướng dẫn thực hiện trách nhiệm bồi thường của Nhà nước trong hoạt động tố tụng hình sự của Viện kiểm sát nhân dân tối cao, Tòa án nhân dân tối cao, Bộ Công an, Bộ Tư pháp, Bộ Quốc phòng, Bộ Tài chính, Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn; Căn cứ Quyết định/Bản án số...... ngày..... tháng..... năm........ của...................... Căn cứ Biên bản thương lượng ngày.... tháng.... năm....... giữa cơ quan............. với Ông (Bà).................................. QUYẾT ĐỊNH:
4. Trường hợp người bị thiệt hại mất khả năng lao động: - Chi phí hợp lý cho người thường xuyên chăm sóc người bị thiệt hại:.... ............................................................................................................................... ............................................................................................................................... - Khoản tiền cấp dưỡng cho những người mà người bị thiệt hại đang thực hiện nghĩa vụ cấp dưỡng: + Tiền cấp dưỡng cho ông (bà), cha (mẹ):............... đồng. + Tiền cấp dưỡng cho con đẻ, con nuôi:................. đồng. + Tiền cấp dưỡng cho anh, chị, em:........................ đồng. + Cộng:................... đồng. (Kèm theo giấy tờ chứng minh những khoản tiền trên) III. Thu nhập thực tế bị mất hoặc bị giảm sút ............................................................................................................................... .............................................................................................................................. (Kèm theo tài liệu chứng minh thu nhập thực tế bị mất hoặc bị giảm sút) IV. Thiệt hại do tài sản bị thu giữ, tạm giữ, kê biên, tịch thu 4. Thu nhập thực tế bị mất:............... đồng. (Kèm theo tài liệu chứng minh thu nhập thực tế bị mất)
5. Thiệt hại do tài sản bị thu giữ, tạm giữ, kê biên, tịch thu:
5.1.