## Tinjauan Literatur

## PERAN HESPERIDIN DAN DIOSMIN PADA TERAPI COVID-19 BERDASARKAN STUDI IN SILICO
Raihan Shaquille Bukit 1 , Julia Ramadhanti 2 , Vycke Yunivita 2 

## Abstrak
Corona  Virus  Disease-19  (COVID-19)  yang  disebabkan  oleh  Severe  Acute  Respiratory  Syndrome Corona  Virus  2  (SARS-CoV-2)  menyebar  dengan  cepat  di  seluruh  dunia.  Para  peneliti  berupaya  untuk menemukan terapi untuk penyakit ini.  Strategi penemuan terapi ini salah  satunya dengan menggunakan obat  di  luar  indikasi  asalnya  (drug  repurposing)  yang  lebih  cepat  diperoleh  dan  terjangkau  dibandingkan penemuan obat baru. Hasil skrining terhadap obat yang sudah tersedia dan senyawa alami, menunjukkan hesperidin  dan  diosmin  memiliki  potensi  untuk  menginhibisi  siklus  hidup  SARS-CoV-2.  Hesperidin  dan diosmin  dalam  bentuk  Micronized  Purified  Flavonoid  Fraction  (MPFF),  sebelumnya  digunakan  sebagai pengobatan  insufisiensi  vena  kronik.  Tujuan  penulisan  kajian  ini  yaitu  untuk  mengkaji  potensi  hesperidin dan  diosmin  dalam  menginhibisi  jalur  infeksi  COVID-19.  Metode  yang  digunakan  yaitu  metode  tinjauan pustaka naratif dengan pencarian literatur melalui database Google Scholar, Pubmed, dan ScienceDirect. Hasil kajian yang dilakukan menunjukkan dari 2012 jurnal didapatkan 16 jurnal in silico yang menunjukkan target pengobatan pada infeksi COVID-19 pada hesperidin dan diosmin di antaranya dapat menghambat reseptor Angiotensin Converting Enzyme 2 (ACE2) yang menjadi tempat SARS-CoV-2 berikatan dengan sel  inang,  menghambat  aktivitas  Transmembrane  Serine  Protease  2  (TMPRSS2),  menghambat  proses proteolitik  dengan  menghambat  enzim  3Clpro,  menghambat  aktivitas  RNA  dependent  RNA  polymerase (RdRp)  yang  menghambat  pembentukan  protein  struktural  SARS-CoV-2.  Selain  itu,  hesperidin  dapat menghambat  aktivitas  protein  virus  nucleocapsid  dan  menghambat  sitokin  pro-inflammatory.  Sebagai kesimpulan, hesperidin dan diosmin dapat menjadi kandidat yang potensial dalam menginhibisi COVID-19.

## Kata kunci: COVID-19, diosmin, hesperidin

## THE ROLE OF HESPERIDIN AND DIOSMIN IN COVID-19 THERAPY

## Abstract
Corona Virus Disease-19 (COVID-19) caused by Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) dramatically spread around the world. Researchers have been trying to find a therapy for this disease. Drug repurposing is one of strategies for faster and affordable finding for new drug therapy of COVID-19  therapy.  Screening  results  for  available  drugs  and  natural  compounds  for  drug  repurposing showed that hesperidin and diosmin have the potential to inhibit the life cycle of SARS-CoV-2. Hesperidin and  diosmin  in  the  form  of  Micronized  Purified  Flavonoid  Fraction  (MPFF),  were  previously  used  as  a treatment for chronic venous insufficiency. The purpose of writing this study was to examine the potential of hesperidin and diosmin in inhibiting the COVID-19 infection. The method used in this literature review is the narrative  literature  review  method  by  searching  the  literature  through  the  Google  Scholar,  Pubmed,  and ScienceDirect databases. The results of the study conducted showed that from 2012 journals, 16 in silico journals were obtained which showed that the treatment targets for COVID-19 infection in hesperidin and diosmin include inhibiting the Angiotensin Converting Enzyme 2 (ACE2) receptor as target site of  SARS- CoV-2  binding  to  host  cells;  inhibiting  the  activity  of  Transmembrane  Serine  Protease  2  (TMPRSS2); inhibiting the proteolytic process by inhibiting the 3Clpro enzyme; inhibiting the activity of RNA dependent RNA  polymerase  (RdRp)  which  inhibits  the  formation  of  the  SARS-CoV-2  structural  protein.  In  addition, hesperidin can inhibit the activity of viral nucleocapsid proteins and inhibit pro-inflammatory cytokines. In conclusion, hesperidin and diosmin can be potential candidates for inhibiting COVID-19.
Keywords: COVID-19, diosmin, hesperidin
1 Fakultas Kedokteran, Universitas Padjajaran
2 Divisi Farmakologi dan Terapi, Departemen Ilmu Biomedik, Fakultas Kedokteran, Universitas Padjajaran
 E-mail: v.yunivita@unpad.ac.id

## Pendahuluan
Pada  akhir  Desember  2019,  penyakit pneumonia yang tidak diketahui penyebabnya ditemukan  di  sebuah  rumah  sakit  di  Kota Wuhan, China. Penyakit ini menyebar dengan cepat  di  China  bahkan  ke  seluruh  dunia, sehingga pada akhir Januari 2020, Organisasi Kesehatan  Dunia  (WHO)  mengumumkannya sebagai  wabah  sindrom  pernafasan  akut yang  parah  (SARS)  yang  disebabkan  oleh virus  corona  baru  (SARS-CoV-  2).  Saat  ini penyakit  ini  dikenal  sebagai  penyakit coronavirus 2019 (COVID-19). 1 SARS-CoV-2  mengalami  berbagai mutasi,  ada  klasifikasi  menurut  WHO  dan untuk  Variants  of  Concern  (VOCs)  seperti Alpha  (B.1.1.7),  Beta  (B.1.351),  Gamma (P.1),  Delta  (  B)  varian.  .1.617.2),  Omicron (B.1.1.529),  dan  Variants  of  Interest  (VOI) seperti  Epsilon  (B.1.427  dan  B.1.429);  Zeta (P.2);  Eta  (B.1.525);  Theta  (P.3);  Iota (B.1.526); Kappa (B.1.617.1); Lambda (C.37) dan Mu (B.1.621). Klasifikasi CDC untuk VOC seperti  Epsilon  (B.1.427  dan  B.1.429)  dan VOI  seperti  Eta  (B.1.525);  Iota  (B.1.526); Kappa  (B.1.617.1);  Zeta  (P.2);  Mu (B.1.621,B.1.621.1)  dan  B.1.617.3.  Sudah ada  vaksin  COVID-19  seperti  vaksin BNT162b2,  vaksin  mRNA-1273,  vaksin Ad26.COV2.S,  vaksin  ChAdOx1  nCoV-19, dan vaksin NVX-CoV-2373, serta tujuh vaksin lainnya yang berbasis protein dan tidak aktif.
Vaksin  BNT162b2  memiliki  efikasi terhadap  varian  Alpha  sebesar  87%  dan varian  Beta  sebesar  75%.  Vaksin  mRNA- 1273  sangat  efektif  melawan  semua  varian, kecuali  Omicron,  yang  efektivitasnya  tidak diketahui.  Kemanjuran  vaksin  Ad26.COV2.S terhadap  varian  Omicron  belum  diketahui. Vaksin  ChAdOx1  nCoV-19  mengalami penurunan  netralisasi  in  vitro  varian  B.1.1.7 yang memiliki efektivitas 70,4% dibandingkan dengan  varian  non-B.1.1.7  yang  memiliki efektivitas  81,5%.  Kemanjuran  vaksin ChAdOx1  nCOV-19  tidak  diketahui  ke- manjurannya terhadap varian Omicron.
Vaksin  yang  tersedia  tidak  dapat sepenuhnya  efektif  terhadap  semua  varian, oleh  karena  itu  diperlukan  terapi  lain  untuk mengatasi  penyakit  ini. 2 Para  peneliti  terus berupaya  menemukan  terapi  yang  dapat digunakan untuk COVID-19, termasuk meng- gunakan  drug  repurposing  yang  merupakan pengembangan dari penggunaan baru obat di luar  penggunaan  aslinya.  Drug  repurposing merupakan  strategi  yang  efektif  dalam  me- nemukan  terapi  penyakit  baru  yang disebabkan  oleh  agen  infeksi  yang  dapat menyebar  dengan  cepat,  seperti  pandemi COVID-19. 3 Penelitian  lebih  lanjut  mengenai obat-obat  yang  menjadi  kandidat  terapi COVID-19,  seperti  Hydroxychloroquine, Baricitinib,  Dexamethasone,  dan  Remdesivir tidak  bermanfaat  secara  klinis  untuk  terapi COVID-19. 4
Hesperidin  dan  diosmin  dalam  bentuk sediaan MPFF (Micronized Purified Flavonoid Fraction),  sebelumnya  untuk  pengobatan Insufisiensi  Vena  Kronik. 5 Dalam  suatu penelitian, hesperidin dan diosmin merupakan senyawa  flavonoid  yang  berpotensi  meng- hambat  COVID-19. 6 Tujuan  penulisan  kajian ini  yaitu  untuk  mengkaji  potensi  hesperidin dan  diosmin  dalam  menginhibisi  jalur  infeksi COVID-19.  Penelitian  ini  diharapkan  dapat menggali  lebih  dalam  peran  hesperidin  dan diosmin dalam terapi COVID-19.

## Metode Penelusuran
Desain  penelitian  ini  adalah  metode studi  tinjauan  pustaka  naratif.  Penelusuran jurnal dilakukan menggunakan mesin pencari elektronik  Google  Scholar,  Pubmed,  dan Elsevier,  dengan  menggunakan  kata  kunci “Hesperidin  AND  COVID-19”  dan  “Diosmin AND  COVID-19”  antara  tahun  2018  hingga Maret  2022.  Kriteria  inklusi  yaitu  literatur diterbitkan  minimal  tahun  2018,  berdasarkan kata  kunci,  full  text,  dan  relevansi.  Kriteria eksklusi yaitu duplikasi literatur, bahasa selain Bahasa  Indonesia  dan  Bahasa  Inggris, preprints, protokol, dan referensi abstrak.
Pencarian artikel: Google Scholar, Pubmed, ScienceDirect dengan menggunakan kata kunci: “Hesperidin AND COVID-19” and “Diosmin AND COVID-19”
Hasil (n = 1.865)
Hasil pencarian yang diproses kembali (n = 508) Hasil pencarian yang tidak diproses kembali (n = 8)
Literatur yang relevan dengan penelitian ini (n = 16)
Literatur disaring kembali dengan kriteria inklusi
(preprints, protokol, referensi abstrak, dan literatur selain bahasa Indonesia dan bahasa Inggris) Hasil pencarian yang diproses kembali
(n = 500)

## Kriteria Inklusi
Kriteria inklusi yang digunakan yaitu full text dan literatur dipublikasikan minimal tahun 2018
Hasil pencarian yang tidak diproses kembali disebabkan karena literatur yang tidak relevan (berdasarkan judul atau abstrak), tidak full text, dan literatur yang duplikasi (n = 1357)
Literatur diproses kembali dengan melihat judul atau abstrak dengan isi literatur, terdapat literatur yang tidak membahas hal detail mengenai hesperidin atau diosmin.
Gambar 1.  Metode pencarian literatur

## Hesperidin dan Diosmin
Hesperidin  (C 28 H 34 O 15 )  terdapat  pada buah jeruk seperti buah jeruk (Citrus sinensis) dan  jeruk  lemon  (Citrus  limon)  Kandungan hesperidin  pada  sari  buah  jeruk  sekitar  200- 600 mg/L, sari buah lemon sekitar 38-410 mg/ L,  dan  jeruk  bali  (Citrus  paradisi)  sekitar  20- 170  mg/L.  Banyaknya  kandungan  hesperidin juga  tergantung  pada  masing-masing  bagian buah,  misalnya  kulit  buah  mengandung  16 kali  lebih  banyak  hesperidin  dibandingkan bagian  buah  lainnya,  seperti  bulir  jeruk. 7
Senyawa  ini  banyak  digunakan  sebagai suplemen  makanan  tunggal  atau  dalam kombinasi  dengan  senyawa  bioflavonoid lainnya  untuk  pengobatan  dan  pencegahan gangguan  pembuluh  darah  sebagai  obat herbal  antiinflamasi  dan  antioksidan  (Tabel 1). 8
Selain  itu,  ada  flavonoid  lain  seperti diosmin  yang  dapat  ditemukan  pada  buah jeruk  dan  lemon.  Diosmin  memiliki  beberapa aktivitas  biologis  penting,  seperti  efek antioksidan,  antiinflamasi,  dan  antiapoptosis. Diosmin  pertama  kali  digunakan  pada  tahun 1969  sebagai  agen  terapi  untuk  gangguan inflamasi.  Saat  ini,  diosmin  digunakan sebagai  agen  terapeutik  untuk  Chronic Venous Disease (CVD) dan wasir (Tabel 2). 8,9

## SARS-CoV-2
SARS-CoV-2  menyebar  luas  dari  Kota Wuhan,  Provinsi  Hubei,  China  ke  seluruh dunia. Dinamakan virus corona karena bentuk spike pada permukaannya seperti mahkota di bawah  pengamatan  mikroskop  elektron. Novel  coronavirus  ini  memiliki  kemiripan >70% dengan SARS-CoV. 10 Pada 12 Februari 2020,  Organisasi  Kesehatan  Dunia  (WHO) dan International Committee on Taxonomy of Viruses meresmikan nama Novel Coronavirus sebagai Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus  2  (SARS-CoV-2)  dan penyakitnya,  Coronavirus  Disease  2019
(COVID-19) dan ditetapkan sebagai pandemi oleh WHO pada 11 Maret 2020. 11
Virus  ini  termasuk  ribonucleic  acid (RNA)  sense  positif  envelope  berukuran antara  60  nm  sampai  140  nm.  Virus  SARS- CoV-2  terdiri  dari  empat  struktur  protein utama  dan  beberapa  protein  tambahan lainnya.  Protein  utama  adalah  spike glikoprotein  (S),  envelope  glycoprotein  (E), membrane  glycoprotein  (M),  dan nucleocapsid  glycoprotein  (N). 10,11 Virus SARS-CoV-2  masuk  ke  sel  inang  melalui reseptor  ACE-2,  melalui  spike  protein  (S), protein  ini  diaktifkan  oleh  transmembran protease  serine  2  (TMPRSS2).  Setelah aktivasi protein S, virus akan mengalami fusi pada permukaan sel inang. Virus yang sudah berada  di  permukaan  sel  akan  melepaskan genom  RNA  (+)  yang  akan  ditranslasikan  ke dalam  Open  Reading  Frame  (ORF)  1a  dan ORF  1b.  ORF  1a  dan  ORF  1b  akan ditranslasikan menjadi poliprotein (pp) 1a dan pp1ab.  Terjadi  proses  proteolitik  pada  pp1a dan  pp1ab  yang  menghasilkan  protein  non- struktural.  Beberapa  protein  non-struktural akan  membentuk  RNA  dependent  RNA polymerase  (RdRp).  Selanjutnya  terjadi replikasi genom RNA (+) menjadi genom RNA (-). Terjadi perubahan RNA genom (-) menjadi RNA genom (+) dan terjadi proses transkripsi menjadi  RNA  subgenomik.  RNA  subgenomik diterjemahkan  menjadi  protein  struktural  dan protein  aksesori  seperti  nukleokapsid  (N), spike (S), membran (M), amplop (E). Protein S,  M,  E,  ini  akan  masuk  ke  dalam Endoplasmic  Reticulum-Golgi  Intermediate Compartment  (ERGIC).  Protein  N  akan masuk  ke  bentuk  nukleokapsid  dan bergabung  dalam  ERGIC.  Pada  bagian ERGIC,  nukleokapsid  akan  bertemu  dengan protein struktural lain dan membentuk vesikel kecil  yang  akan  dikeluarkan  dari  sel  inang melalui  proses  eksositosis. 12 Infeksi  virus SARS-CoV-2  akan  memicu  aktivasi  kaskade inflamasi atau kaskade sitokin. Aktivasi sel T dan  multiplikasi  sel  T  terjadi, lalu  sel  T  akan
Sitokin  akan  mengaktifkan  sel  B,  makrofag, dan sel NK. Sel B, makrofag, dan sel NK akan mensekresi sitokin seperti Interleukin (IL)-1β, IL-6,  Tumor  Necrosis  Factor  (TNF)-α,  IFN
(Interferon)-γ.  Semakin  banyak  sitokin  akan menyebabkan  badai  sitokin  dan  rentan berkembang  menjadi  Acute  Respiratory
Distress Syndrome (ARDS). 1,13

## Tabel 1. Peran hesperidin berkaitan dengan terapi COVID-19
No. Referensi Potensi Hesperidin Protein Target 1  Haggag YA et al. 1 Hesperidin  dapat  menghambat  produksi sitokin pro-inflamasi Sitokin  pro-inflamasi seperti  Interleukin  (IL)- 1β, IL-6, Tumor Necrosis Factor  (TNF)-α,  IFN (Interferon)-γ 2  Utomo RY et al. 6 Hesperidin  memiliki  afinitas  yang  kuat terhadap beberapa protein target seperti Protease  Domain  sebesar  -13,51  kkal/ mol, Spike glycoprotein-RBD (-9,61 kkal/ mol),  Subunit  S2  (-9,37  kkal/mol), kompleks PD-ACE2-S (- 10,67 kkal/mol), TMPRSS2 (-12,71 kkal/mol) P r o t e a s e   D o m a i n ( 6 L U 7 ) , S p i k e g l y c o p r o t e i n - R B D (6VSB),  S2  Subunit ( 6 L X T ) ,   P D - A C E 2 complex-S  (6VW1),  dan TMPRSS2 3  Tomic N et al. 14 Hesperidin  memiliki  afinitas  paling  tinggi dibandingkan  ligan  lain  seperti Artemisinin dan Chloroquine dengan nilai docking -5,8 kkal/mol (Mpro), -10,0 kkal/ mol  (PLpro),  dan  -8,1  kkal/mol  (spike glycoprotein) Mpro,  Plpro,  dan  spike glycoprotein 4  Laksmiani NPL et al. 15 Hesperidin  memiliki  afinitas  paling  kuat yang  berikatan  dengan  TMPRSS2 dibandingkan senyawa diskrining lainnya dengan  nilai  docking  -9,74  kkal/mol.
Selain  itu,  hesperidin  memiliki  nilai docking  ACE2  (-7,13  kkal/mol), TMPRSS2 (-9,74 kkal/mol), RdRp (-5,39 kkal/mol), 3Clpro (-6,79 kkal/mol), PLpro (-6,47 kkal/mol) ACE2, TMPRSS2, RdRp, 3Clpro  (Mpro),  dan PLpro 5  Maulydia NB et al. 16 Interaksi  hesperidin  dengan  SARS-CoV- 2  Mpro  menunjukkan  afinitas  tertinggi dengan  nilai  docking  (-8,6  kkal/mol) dibandingkan  dengan  Nelfinavir  (-8,5 kkal/mol),  Hesperitin  (-7,3  kkal/mol), Sakuranetin  (-7,1  kkal/mol).  ), Isosacuranetin  (-7,2  kkal/mol),  Tetra-O- Methylscutallerin (-6,8 kkal/mol) Mpro 6  Cahyono B et al. 17 Hesperidin  memiliki  nilai  docking  yang lebih  rendah  dibandingkan  senyawa  lain yang  diskrining  kecuali  protein  target
PLpro,  dengan  nilai  docking  untuk  spike glikoprotein  ( − 18,0779  kkal/mol),  3Clpro ( − 25,3755  kkal/mol),  PD-ACE2 ( − 20,3862  kkal/mol),  dan  PLpro ( − 17,2118 kkal/mol) Spike  glycoprotein, 3Clpro, dan PD-ACE2
No. Referensi Potensi Hesperidin Protein Target 7 Tallei TE et al. 18 Hesperidin  merupakan  salah  satu senyawa  yang  paling  kuat  dibandingkan dengan  senyawa  lain  yang  diskrining. Nilai docking -10,44 kkal/mol (6VXX) dan -8,3 kkal/mol (6LU7) Protein  S  (6VXX)  dan Mpro (6LU7) 8 Vyshnava SS et al. 19 Afinitas  tertinggi  pada  inti  protein  spike dengan  molekul  hesperidin  adalah  -8,0 kkal/mol Inti  protein  spike (1WNC) 9 Khanal P et al. 20 Binding  Free  Energy  (BFE)  hesperidin dengan  protein  spike  adalah  -7,57  kkal/ mol,  sedangkan  dalam  bentuk  aglikon (hesperitin)  menunjukkan  afinitas  yang lebih rendah, yaitu -6,93 kkal/mol. Dalam bentuk  turunan  asetil,  menunjukkan afinitas  yang  lebih  kuat  untuk  turunan hesperidin  monoasetil  (-7,82  kkal/mol) dan turunan hesperidin pentaasetil (-8,39 kkal/mol) Protein spike 10  Basu A et al. 21 Hesperidin  berikatan  dengan  fragmen protein  spike  dan  ACE2  yang  memiliki energi  ikat  -8,99  kkal/mol,  lebih  kecil dibandingkan  senyawa  lain  seperti Emodin  (-6,19  kkal/mol),  Anthraquinone (-6,15  kkal/mol),  Rhein  (-8,73  kkal/mol), Chrysin  (-6,87  kkal/mol),  Chloroquine (-8,98  kkal/mol),  Hydroxychloroquine (-7,82 kkal/mol) Fragmen protein spike – ACE2 11  Rathinavel T et al. 22 Hesperidin  menunjukkan  nilai  docking tertinggi  -9,0  kkal/mol  dengan  protein virus nucleocapsid (6M3M) P r o t e i n v i r u s nucleocapsid 12  Balmeh N et al. 23 Melalui skrining di antara 1033 senyawa obat  herbal,  terpilih  35  senyawa  yang efektif  terhadap  4  reseptor  (ACE2,
TMPRSS2,  GRP78,  AT1R),  hesperidin menempati  urutan  ke-2  dengan  nilai docking terbesar untuk TMPRSS2, yaitu - 9,9 kkal/mol) TMPRSS2

## Tabel 2. Peran diosmin berkaitan dengan terapi COVID-19
No. Referensi Potensi Diosmin Protein Target 1 Utomo RY et al. 6 Diosmin  memiliki  potensi  terbaik dibandingkan  senyawa  seperti  Curcuma longa,  Citrus  sp.,  Caesalpinia  sappan, Alpinia  galanga,  Lopinavir,  Nafamostat, Camostat,  dalam  menghambat  infeksi COVID-19  pada  Target  Protease
Domain, Spike glycoprotein-RBD (-14,77
kkal/  mol),  Subunit  S2  (-9,48  kkal/mol), kompleks  PD-ACE2-S  (-9,01  kkal/mol),
dan TMPRSS2 (-14,16 kkal/mol) P r o t e a s e   D o m a i n ( 6 L U 7 ) , S p i k e g l y c o p r o t e i n - R B D
(6VSB),  S2  Subunit ( 6 LXT ) ,   PD -A CE 2 complex-S  (6VW1),  dan TMPRSS2
Tabel 1. Peran hesperidin berkaitan dengan terapi COVID-19 (lanjutan)
No. Referensi Potensi Diosmin Protein Target 2 Kouznetsova VL et al. 24 Diosmin termasuk di antara 13 senyawa teratas  dalam  afinitas  interaksi  energi dengan  protein  spike  -  reseptor  ACE2 dengan  Docking  Free  Energy  (DFE) sebesar -9,8 kkal/mol di sites 1 dan -7,8 kkal/mol di sites 2 Protein spike - reseptor ACE2 3. Artese A et al. 25 Diosmin  termasuk  dalam  14  senyawa terbaik dengan nilai docking untuk 3Clpro sebesar -6,85 kkal/mol, ACE2 sebesar  - 6,86 kkal/mol, ACE2/spike sebesar -6,12 kkal/mol,  dan  RdRp  sebesar  -8,07  kkal/ mol 3Clpro, ACE2, ACE2/ spike, dan RdRp 4. Behloul N et al. 26 Diosmin  termasuk  dalam  40  senyawa terbaik  yang  memiliki  energi  ikatan  -8 kkal/mol pada interaksi RBD-ACE2 RBD-ACE2 5. Elghoneimy LK et al. 27 Nilai  docking  diosmin  terhadap  SARS- CoV-2 RdRp dalam bentuk Apo adalah - 91,55  kkal/mol  dan  jumlah  ikatan hidrogen  tertinggi  menunjukkan  ikatan hidrogen  tertinggi  dibandingkan  ligan lainnya RdRp Potensi  Hesperidin  dan  Diosmin  dalam Menghambat Infeksi COVID-19
Dalam  penelitian  Utomo  RY  et  al. (2020), hesperidin memiliki afinitas yang kuat terhadap  beberapa  protein  target  seperti Protease  Domain  sebesar  -13,51  kkal/mol, Spike  glycoprotein-RBD  (-9,61  kkal/mol), Subunit  S2  (-9,37  kkal/mol),  PD-ACE2 kompleks  –S  (-10,67  kkal/mol),  TMPRSS2  (- 12,71 kkal/mol). 6 Pada penelitian Pojskic L et al.  (2020),  hesperidin  memiliki  afinitas  paling tinggi  dibandingkan  ligan  lain  seperti  Arte- misinin dan Chloroquine dengan nilai docking -5,8  kkal/mol  (Mpro),  -10,0  kkal/mol  (PLpro), dan  -8,1  kkal/mol  (spike  gliko-protein  ). 14 Penelitian  Laksmiani  NPL  et  al.  (2020), menunjukkan  hesperidin  memiliki  afinitas paling  kuat  dibandingkan  senyawa  lainnya yang sudah diskrining, yang berikatan dengan TMPRSS2  dengan  nilai  docking  -9,74  kkal/ mol. 15 Hesperidin memiliki nilai docking ACE2
(-7,13  kkal/mol),  TMPRSS2  (-9,74  kkal/mol), RdRp  (-5,39  kkal/mol),  3Clpro  (-6,79  kkal/ mol), PLpro (-6,47 kkal/mol).
Dalam  penelitian  Maulydia  NB  et  al. (2022),  interaksi  hesperidin  dengan  SARS- CoV-2  Mpro  menunjukkan  afinitas  tertinggi dengan  nilai  docking  (-8,6  kkal/mol)  diban- dingkan  Nelfinavir  (-8,5 kkal/mol),  Hesperidin (-7,3  kkal/mol),  Sakuranetin  (-7,1  kkal/mol), Isosacuranetin  (-7,2  kkal/mol),  Tetra-O- Methylscutallerin  (-6,8  kkal/mol). 16 Menurut penelitian  Cahyono  B  et  al.  (2021),    hes- peridin  memiliki  nilai  docking  yang  lebih rendah  dibandingkan  senyawa  lain  yang sudah  diskrining  kecuali  ikatannya  dengan protein  target  PLpro,  dengan  nilai  docking untuk  spike  glikoprotein  ( − 18,0779  kkal/mol), 3Clpro  ( − 25,3755  kkal/mol),  PD-ACE2
( − 20.3862  kkal/mol),  dan  PLpro  ( − 17.2118 kkal/mol). 17 Penelitian Tallei TE et al. (2020), hesperidin  merupakan  salah  satu  senyawa terkuat  dibandingkan  senyawa  lain  yang sudah diskrining. Nilai docking adalah -10,44 kkal/mol untuk protein S (6VXX) dan -8,3 kkal/ mol untuk Mpro (6LU7). 18
Penelitian  Vyshnava  SS  et  al.  (2021), afinitas  tertinggi  untuk  inti  protein  spike dengan hesperidin adalah -8,0 kkal/mol. 19

## Tabel 2. Peran diosmin berkaitan dengan terapi COVID-19 (lanjutan)
Penelitian  Khanal  P  et  al.  (2021),  Binding Free Energy (BFE) hesperidin dengan protein spike  sebesar  -7,57  kkal/mol,  sedangkan dalam  bentuk  aglikon  (hesperitin), menunjukkan afinitas yang lebih rendah, yaitu -6,93 kkal/mol. 20 Dalam bentuk turunan asetil, menunjukkan  afinitas  yang  lebih  kuat  untuk turunan  hesperidin  monoasetil  (-7,82  kkal/ mol) dan turunan hesperidin pentaasetil (-8,39 kkal/mol).  Penelitian  Basu  A  et  al.  (2020), menunjukkan  bahwa  hesperidin  berikatan dengan  fragmen  protein  spike  dan  ACE2 yang memiliki energi ikat sebesar  -8,99 kkal/ mol,  lebih  kecil  dibandingkan  senyawa  lain seperti  Emodin  (-6,19  kkal/mol), Anthraquinone (-6,15 kkal/mol ), Rhein (-8,73 kkal/mol),  Chrysin  (-6,87  kkal/mol), C h l o r o q u i n e   ( - 8 , 9 8   k k a l / m o l ) , Hydroxychloroquine (-7,82 kkal/mol). 21 Dalam  penelitian  Rathinavel  T  et  al. (2021), hesperidin menunjukkan nilai docking tertinggi  -9,0  kkal/mol  dengan  viral  protein nucleocapsid (6M3M). 22 Penelitian Balmeh et al.  (2020),  melalui  skrining  di  antara  1033 senyawa  obat  herbal,  terpilih  35  senyawa yang  efektif  terhadap  4  reseptor  (ACE2, TMPRSS2,  GRP78,  AT1R),  hesperidin menempati  urutan  kedua  yang  memiliki  nilai docking terbesar untuk TMPRSS2, yaitu  -9,9 kkal/mol). 23 Penelitian oleh Haggag YA et al.
(2020),  hesperidin  dapat  menghambat produksi sitokin pro-inflamasi. 1
Dalam  studi  Kouznetsova  VL  et  al. (2022),  diosmin  termasuk  di  antara  13 senyawa  teratas  dalam  afinitas  interaksi energi  dengan  protein  reseptor  spike  ACE2 dengan Docking Free Energy (DFE) sebesar - 9,8  kkal/mol  di  sites  1  dan  -7,8  kkal/mol  di sites  2. 24 Penelitian  oleh  Utomo  RY  et  al. (2020),  diosmin  memiliki  potensi  terbaik dibandingkan  dengan  senyawa  seperti Curcuma  longa,  Citrus  sp.,  Caesalpinia sappan,  Alpinia  galanga,  Lopinavir, Nafamostat,  Camostat,  dalam  menghambat infeksi  COVID-19  pada  target  Protease Domain, Spike glikoprotein-RBD (-14,77 kkal/
mol),  Subunit  S2  (-9,48  kkal/mol),  kompleks PD-ACE2-S  (-9,01  kkal/mol),  dan  TMPRSS2 (-14,16  kkal/mol). 6 Penelitian  Artese  A  et  al. (2020),  menunjukkan  bahwa  diosmin termasuk  dalam  14  senyawa  terbaik  dengan nilai docking untuk 3Clpro sebesar -6,85 kkal/ mol,  ACE2  sebesar  -6,86  kkal/mol,  ACE2/ spike  sebesar  -6,12  kkal/mol,  dan  RdRp sebesar -6,12 kkal/mol. -8,07 kkal/mol. 25
Dalam penelitian Behloul N et al. (2020), diosmin  termasuk  dalam  40 senyawa  terbaik yang memiliki energi ikatan  -8 kkal/mol pada interaksi  RBD-ACE2,  dan  penelitian Elghoneimy  LK  et  al.  (2021),  menunjukkan bahwa nilai docking diosmin terhadap SARS - CoV-2  RdRp  dalam  bentuk  Apo  adalah -91,55  kkal/mol  dan  jumlah  ikatan  hidrogen tertinggi  menunjukkan  ikatan  hidrogen tertinggi  dibandingkan  ligan  lainnya. 26,27 Rangkuman  potensi  hesperidin  dan  diosmin dalam  menghambat  infeksi  COVID-19 ditunjukkan pada Gambar 2.
Berdasarkan beberapa penelitian tersebut  di  atas,  hesperidin  berpotensi menghambat  infeksi  COVID-19,  seperti menghambat  ikatan  virus  SARS-CoV-2 dengan  ACE2,  menghambat  aktivitas TMPRSS2,  menghambat  proses  proteolitik dengan menghambat enzim 3Clpro, menghambat RdRp aktivitas yang menyebabkan  terganggunya  pembentukan protein,  faktor  struktural,  menghambat aktivitas  protein  virus  nucleocapsid,  dan menghambat produksi sitokin pro-inflamasi.
Selain  itu,  diosmin  berpotensi  meng- hambat  infeksi  COVID-19,  seperti  meng- hambat  ikatan  virus  SARS-CoV-2  dengan ACE2,  menghambat  aktivitas  TMPRSS2, menghambat proses proteolitik dengan meng- hambat  enzim  3Clpro,  dan  menghambat aktivitas RdRp yang menyebabkan gangguan pembentukan  protein  struktural.  Namun, model  in  vivo  yang  digunakan  untuk menyetujui  kemanjuran  hesperidin  dan diosmin  dalam  menghambat  infeksi  COVID- 19 memerlukan penyelidikan lebih lanjut.
TMPRSS2 mengaktifkan protein S Protein S membuat terjadi fusi envelope virus dengan membran sel Virus kemudian melepaskan RNA genome (+) ke sel ORF 1a dan ORF 1b yang dihasilkan RNA genome akan ditranslasikan menjadi pp1a dan
Terjadi proses proteolitik dengan enzim 3Clpro yang mengakibatkan pp1a dan pp1ab dipecah dan menghasilkan protein non-
Beberapa protein non- struktural membentuk RNA dependent RNA polymerase (RdRp) Virus SARS-CoV-2 ber- ikatan dengan reseptor ACE-2 dengan PerubahanTerjadi replikasi RNA genome (+) menjadi- yang menyebakan RNA genome (-) oleh RdRp Terjadi perubahan RNA genome (-) menjadi RNA (+) oleh RdRp Transkripsi menjadi RNA subgenomic Transkripsi menjadi RNA subgenomik
Translasi RNA subgenomic menjadi protein struktural dan protein aksesoris (N,S,M,E) Protein Struktural (S,M,E) masuk ke dalam ERGIC Protein N menuju nukleokap- sid nucleocapsid dan masuk ke dalam ERGIC Berbagai komponen bergabung di ERGIC dan membentuk partikel virus baru Eksositosis Infeksi virus SARS-CoV-2 memicu aktivasi cytokine cascade Aktivasi sel T dan perbanyakan sel T
Sel T akan menghasilkan sitokin dalam jumlah yang banyak Sel T akan menghasilkan sitokin dalam jumlah yang banyak Sitokin akan mengakti- vasi sel B, makrofag,
Sel B, makrofag, dan sel NK akan mensekresikan Sitokin akan mengaktivasi sel B, makrofag, dan sel NK Sekresi IL-1β Sekresi IL-6
Sekresi TNF-α Sekresi IFN-γ Badai Sitokin Kerusakan pada paru- paru dan organ vital lainnya
Hesperidin Diosmin
Inhibit
Gambar 2. Peran hesperidin dan diosmin pada patogenesis dan patofisiologi COVID-19

## Kesimpulan
Diketahui  sebelumnya,  hesperidin digunakan  sebagai  pengobatan  penyakit pembuluh  darah  dan  diosmin  untuk insufisiensi  vena  kronik.  Senyawa  flavonoid ini berpotensi menghambat infeksi COVID-19. Hesperidin dapat menghambat infeksi COVID -19  dengan  cara  menghambat  pengikatan virus  SARS-CoV-2  dengan  ACE2, menghambat  aktivitas  TMPRSS2, menghambat  proses  proteolitik  dengan menghambat  enzim  3Clpro,  menghambat aktivitas  RdRp,  yang  menyebabkan terganggunya  pembentukan  protein struktural,  menghambat aktivitas  protein viral nucleocapsid,  dan  menghambat  produksi sitokin pro-inflamasi. Diosmin berperan dalam menghambat  infeksi  COVID-19,  seperti menghambat  pengikatan  virus  SARS-CoV-2 dengan  ACE2,  menghambat  aktivitas TMPRSS2,  menghambat  proses  proteolitik dengan  menghambat  enzim  3Clpro,  dan menghambat  aktivitas  RdRp  yang menyebabkan  gangguan  pembentukan protein  struktural.  Selain  itu,  hesperidin  dan diosmin  yang  mudah  diperoleh  dari  sumber sebagai  buah  jeruk  berpotensi  digunakan sebagai  terapi  infeksi  COVID-19.  Namun dalam  penyelidikan  lebih  lanjut,  uji  in  vitro diperlukan  untuk  mengetahui  efektivitas hesperidin  dan  diosmin  dalam  menghambat infeksi  COVID-19  dan  untuk  membuktikan studi  in  silico  yang  disebutkan  sebelumnya tentang  hesperidin  dan  diosmin  dalam menghambat infeksi COVID-19.

## Daftar Pustaka
1.  Haggag Y, El-Ashmawy N, Okasha KM.  Is Hesperidin  Essential  for  Prophylaxis  and Treatment  of  COVID-19  Infection?.  Medi- cal  Hypotheses.  2020;  144:109957.
DOI:10.1016/j.mehy.2020.109957 2.   Cascella M, Rajnik M, Aleem A, Dulobohn
SC, Napoli RD. Features, Evaluation, and Treatment  of  Coronavirus  (COVID-19) [Internet].  2022.  P.  1–4.  Available  from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/ NBK554776/
3.   Mahdian  S,  Habibi  AE,  Zarrabi  M.  Drug
Repurposing  Using  Computational Methods  to  Identify  Therapeutic  Options for  COVID-19.  J  Diabetes  Metab  Disord. 2020;  19(2):  691–699.  doi:  10.1007/ s40200-020-00546-9
4.   Drożdżal S, Rosik J, Lechowicz K, Machaj
F,  Szostak  B,  Przybyciński  J,  Lorzadeh
S,  Kotfis  K,  Ghavami  S,  Łos  MJ.  An
Update  on  Drugs  with  Therapeutic Potential  for  SARS-CoV-2  (COVID-19) treatment.  Drug  Resist  Updat.  2021 Dec:59:100794.  doi:  10.1016/ j.drup.2021.100794
5.   Mansilha  A,  Sousa  J.  Pathophysiological
Mechanisms  of  Chronic  Venous  Disease and  Implications  for  Venoactive  Drug Therapy. Int J Mol Sci. 2018; 2018 Jun; 19
(6): 1669. doi: 10.3390/ijms19061669.
6.   Utomo  RW,  Ikawati  M,  Putri  DDP,
Salsabila  IA,  Meiyanto  E.  The Chemopreventive  Potential  of  Diosmin and  Hesperidin  for  COVID-19  and  Its Comorbid Diseases. Indonesian Journal of Cancer Chemoprevention. 2020;11(3):154 –67.  Doi:  http://dx.doi.org/10.14499/ indonesianjcanchemoprev11iss3pp154- 167
7.   Meneguzzo  F,  Ciriminna  R,  Zabini  F,
Pagliaro  M.  Hydrodynamic  Cavitation- Based  Rapid  Expansion  of  Hesperidin- Rich Products from Waste Citrus Peel as a  Potential  Tool  Against  COVID-19. (Online).    2020.  [cited  2022  Apr  12];
A v a i l a b l e   f r o m :   h t t p s : / / www.researchgate.net/profile/Francesco- M e n e g u z z o / publication/340538886_Hydrodynamic_Ca v i t a t i o n - based_Rapid_Expansion_of_Hesperidin-
8.  Gandhi GR, Vasconcelos ABS, Wu DT, Li
HB, Antony PJ, Li H, Geng F, Gurgel RQ, Narain  N,  Gan  RY.  Citrus  Flavonoids  as Promising  Phytochemicals  Targeting Diabetes  and  Related  Complications:  A Systematic Review of In Vitro and In Vivo Studies.  Nutrients.  2020;  12(10):1–32. doi: 10.3390/nu12102907.
9.  Bozda  M,  Eraslan  G.  The  Effect  of
Diosmin Aagainst Lead Exposure in Rats ‡.  Naunyn  Schmiedebergs  Arch Pharmacol.  2020  Apr;  393(4):639-649. doi: 10.1007/s00210-019-01758-4.
10.  Singhal  T.  A  Review  of  Coronavirus Disease-2019  (COVID-19).  Indian  J Pediatr.  2020;  87(4):  281–286. doi: 10.1007/s12098-020-03263-6.
11.  Astuti  I  &  Ysrafil.  Severe  Acute Respiratory  Syndrome  Coronavirus  2 (  SARS-CoV-2  ):  An  Overview  of  Viral Structure  and  Host  Response.  Diabetes Metab  Syndr.  2020;  14(4):  407–412. doi: 10.1016/j.dsx.2020.04.020. 12.  Harrison AG, Lin T, Wang P. Mechanisms of  SARS-CoV-2  Transmission  and Pathogenesis.  Trends  Immunol.  2020 Dec;  41(12):  1100–1115.  doi:  10.1016/ j.it.2020.10.004.
13.  Zhang Y, Geng X, Tan Y, Li Q, Xu C, Xu
J,  et  al.  New  Understanding  of  the Damage  of  SARS-CoV-2  Infection Outside  the  Respiratory  System.  Biomed Pharmacother.  2020;  127:110195.  doi: 10.1016/j.biopha.2020.110195. 14.  Tomic N, Pojskic L, Kalajdzic A, Ramic J,
Kadric  NL,  Ikanovic  T,    Maksimovic  M, Pojskic  N.  Screening  of  Preferential Binding  Affinity  of  Selected  Natural Compounds  to  SARS-CoV-2  Proteins using  In  Silico  Methods.  Eurasian  J  Med Oncol. 2020; 4(4):319–23. doi: 10.14744/ ejmo.2020.72548.
15.  Laksmiani NPL,  Larasanty  LPF,  Santika AAGJ,  Prayoga  PAA,  Dewi  AAIK,  Dewi NPAK.  Active  Compounds  Activity  from
the Medicinal Plants Against SARS-CoV-2 using In Silico Assay. Biomed Pharmacol J.  2020;  13(2):873–81.  doi:  https:// dx.doi.org/10.13005/bpj/1953.
16.  Maulydia NB, Tallei TE, Ginting B, Idroes R,  illian  DN,    Faradilla  M.  Analysis  of Flavonoid  Compounds  of  Orange  (Citrus sp.) Peel as Anti-Main Protease of SARS- CoV-2:  A  Molecular  Docking  Study.  IOP Conf  Ser  Earth  Environ  Sci.  2022; 951:012078.  doi:  10.1088/1755- 1315/951/1/012078.
17.  Cahyono B, Amalina ND, Suzery M, Bima DN. Exploring the Capability of Indonesia Natural  Medicine  Secondary  Metabolite as  Potential  Inhibitors  of  SARS-CoV-2 Proteins  to  Prevent  Virulence  of  COVID- 19:  In  silico  and  Bioinformatic  Approach. Open  Access  Maced  J  Med  Sci.  2021; May  20;  9(A):336-342.  doi:  https:// doi.org/10.3889/oamjms.2021.5945. 18.  Tallei  TE,  Tumilaar  SG,  Niode NJ,  Fatimawali,  Kepel  BJ,  Idroes R,  Effendi  Y,  Sakib  SA,  Emran  TB. Potential  of  Plant  Bioactive  Compounds as  SARS-CoV-2  Main  Protease  (Mpro) and  Spike  (S)  Glycoprotein  Inhibitors:  a Molecular  Docking  Study.  Scientifica (Cairo).  2020  Dec  23:2020:6307457.  doi: 10.1155/2020/6307457.
19.  Vyshnava  SS,  Kumar  KD,  Panjala  S, Paramasivam  K,  Rao  DM,  Rani  R.  A Computational Approach on the Activity of Hesperidin  as  Antagonist  for  Proteins  of SARS-CoV-2.  Letters  in  Applied NanoBioScience.  2021;  10(3):2571-
2 5 7 7 2 0 . D O I : 1 0 . 3 3 2 6 3 /
LIANBS103.25712577.
20.  Khanal P, Chawla U, Praveen S, Malik Z,
Malik  S,  Yusuf  M,  Khan  SA,  Sharma  M. Study  of  Naturally-derived  Biomolecules as  Therapeutics  against  SARS-CoV-2
Viral  Spike  Protein.  J  Pharm  Res  Int. 2021;  33(Issue  28A):211–20.  doi: 10.9734/jpri/2021/v33i28A31524.
21.  Basu  A,  Sarkar  A,  Maulik  U.  Molecular Do c k i n g   S t u d y   o f   P o t e n t i a l Phytochemicals  and  Their  Effects on  the
Complex  of  SARS-CoV2  Spike  Protein and  Human  ACE2.  Sci  Rep.  2020; 10:17699.    doi:  https://doi.org/10.103.8/ s41598-020-74715-4. 22.  Rathinavel  T,  Meganathan  B, Kumarasamy  S,  Ammashi  S, Thangaswamy  S,  Ragunathan  Y, Palanisamy  S.  Potential  COVID-19  Drug from  Natural  Phenolic  Compounds Through  in  Silico  Virtual  Screening Approach.  Biointerface  Res  Appl  Chem. 2021;11(3):10161–73.  doi:  https:// d o i . o r g / 1 0 . 3 3 2 6 3 / BRIAC113.1016110173.
23.  Balmeh  N,  Mahmoudi  S, Mohammadi  N,
Karabedianhajiabadi  A.  Predicted Therapeutic  Targets  for  COVID-19 Disease  by  Inhibiting  SARS-CoV-2  and Its  Related  Receptors.  Informatics  Med Unlocked. 2020:20:100407. doi: 10.1016/ j.imu.2020.100407. 24.  Kouznetsova  VL,  Zhang  A,  Miller  MA, Tatineni  M,  Greenberg  JP,  Tsigelny  IF. Potential  SARS-CoV-2  Spike  Protein-
ACE2  Interface  Inhibitors:  Repurposing FDA-approved  Drugs.  J  Explor  Res Pharmacol.      2022;7(1):17-29  .  doi: 10.14218/JERP.2021.00050.
25.  Artese A, Svicher V, Costa G, Salpini R, Di  Maio  VC,  Alkhatib  M,  et  al.  Current Status  of  Antivirals  and  Druggable Targets  of  SARS  CoV-2  and  Other Human  Pathogenic  Coronaviruses.  Drug Resist  Updat.  2020  Dec:53:100721.  doi: 10.1016/j.drup.2020.100721.
26.  Behloul  N,  Baha  S,  Guo  Y,  Yang  Z,  Shi R,  Meng  J.  In  Silico  Identification  of Strong  Binders  of  the  SARS-CoV-2 Receptor-Binding  Domain.  Eur  J
Pharmacol.  2021 Jan  5:890:173701.  doi: 10.1016/j.ejphar.2020.173701.
27.  Elghoneimy  LK,  Ismail  MI,  Boeckler  FM, Azzazy  HME,  Ibrahim  TM.  Facilitating SARS  CoV-2  RNA-Dependent  RNA Polymerase  (RdRp)  Drug  Discovery  by the  Aid  of  HCV  NS5B  Palm  Subdomain Binders:  In  Silico  Approaches  and Benchmarking.  Comput  Biol  Med.  2021 Jul:134:104468.  doi:  10.1016/ j.compbiomed.2021.104468.