Pengaruh Perawatan Luka Bakar Derajat II Menggunakan Ekstrak Etanol Daun Sirih ( Piper betle Linn.) Terhadap Peningkatan Ketebalan Jaringan Granulasi pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan Galur Wistar
Reza Fitra Kusuma Negara*, Retty Ratnawati**, Dina Dewi SLI*

## ABSTRAK
Luka  bakar  sering  terjadi  di  rumah  dan  paling  banyak  ditemukan  adalah  luka  bakar  derajat  II.  Daun  sirih ( Piper betle Linn.) adalah bahan alam yang memiliki kandungan aktif seperti saponin, tannin, flavonoid, minyak atsiri dan diduga dapat membantu mempercepat proses penyembuhan luka, khususnya pembentukan jaringan granulasi. Jaringan granulasi merupakan pertumbuhan jaringan baru yang terjadi ketika luka mengalami proses penyembuhan  dan  pembentukannya  merupakan  salah  satu  komponen  penting  dalam  penyembuhan  luka. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh perawatan luka bakar derajat II secara topikal menggunakan ekstrak daun sirih ( Piper betle Linn.) terhadap peningkatan ketebalan jaringan granulasi pada tikus putih ( Rattus norvegicus) jantan  galur  Wistar.  Desain  penelitian  menggunakan true  experiment  post  test dilakukan  terhadap hewan coba tikus putih ( Rattus norvegicus) jantan galur Wistar. Sampel diambil dengan teknik rancangan acak kelompok (RAK) dan dibagi dalam empat kelompok yaitu 3 perlakuan ekstrak daun sirih: konsentrasi 15 %, 30 %, 45 %, dan kelompok kontrol dengan normal saline 0,9 %. Data yang diukur adalah ketebalan jaringan granulasi pasca perawatan luka bakar selama 14 hari. Analisis data  menggunakan uji one way ANOVA dengan p = 0,04 (p < 0,05). Melalui uji post hoc test didapatkan bahwa perlakuan yang paling signifikan ditunjukkan oleh konsentrasi daun sirih 45 % dengan p = 0,03 (p < 0,05). Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa perawatan luka bakar derajat  II  menggunakan  ekstrak  etanol  daun  sirih  ( Piper  betle Linn.)  mempengaruhi  peningkatan  ketebalan jaringan granulasi.
Kata kunci : Ekstrak daun sirih ( Piper betle Linn), Ketebalan jaringan granulasi, Luka bakar derajat II.
Effect of Betel Leaves ( Piper Betle Linn.) Extract Topical Treatment to the Thickness of Granulation Tissue in Male White Rats ( Rattus norvegicus) Strain Wistar with Second Degree Burn

## ABSTRACT
Burn most often occurs at home and it was known that second degree burn is the highest case prevalence. Sirih leaf ( Piper betle Linn.) is a natural material which has active compounds such as saponin, tannin, flavonoid, and essential oil. Those compounds are suspected to accelerate wound healing process, especially in granulation tissue formation. Granulation tissue is a new growing tissue that occurs when the process of wound healing is in progress, and its formation is one of the most important components in wound healing. The aim of this study is to investigate the effect of sirih leaves ( Piper betle Linn.) extract topical treatment to the thickness  of granulation tissue  in  male  white  rats  ( Rattus  norvegicus) strain  Wistar  with  second  degree  burn.  This  study  used  true experimental post test design. Samples were selected by randomized block design and divided into four groups,3 groups were treated by using Piper betle Linn . extract with different concentration: 15 %, 30 %, 45 %, and normal saline 0.9 % was used as control. The thickness of granulation tissues were measured after 14 days treatment. One way ANOVA test showed there were significant differences of granulation tissue thickness among the groups with p = 0.04 (p < 0.05). Post hoc test showed that 45 % was the best concentration to optimize granulation tissue formation with p = 0.03 (p < 0.05). From this study it can be concluded that the second degree burn treatment by using ethanol extract of sirih leaves ( Piper betle Linn.) was able to increase the thickness of granulation tissue.
Keywords : Granulation tissue thickness, Sirih extract ( Piper betle Linn.), Second degree burn.
*   Program Studi Ilmu Keperawatan, FKUB **  Lab Ilmu Faal, FKUB

## PENDAHULUAN
Luka  bakar  merupakan  luka  yang  unik karena  luka  tersebut  meliputi  sejumlah  besar jaringan  mati  (eskar)  yang  tetap  berada  pada tempatnya  untuk  jangka  waktu  yang  lama. 1
Luka bakar paling sering terjadi di rumah dan paling  banyak  ditemukan  adalah  luka  bakar derajat  II. 2 Kelompok  terbesar  dengan  kasus luka bakar adalah anak-anak kelompok usia di bawah 6 tahun. Puncak insiden kedua adalah luka bakar akibat kerja, yaitu pada usia 25-35 tahun.  Kelompok  ini  sering  kali  memerlukan perawatan  pada  fasilitas  khusus  luka  bakar. 3 Oleh  karena  itu,  perawatan  luka  bakar memegang  peranan  penting  dalam  proses penyembuhan luka.
Penyembuhan  luka  adalah  suatu  bentuk proses  usaha  untuk  memperbaiki  kerusakan yang terjadi pada kulit. Fisiologi penyembuhan luka  secara  alami  akan  melewati  beberapa fase,  yaitu  fase  haemostasis,  fase  inflamasi, fase proliferasi, dan fase maturasi. 4 Pada fase proliferasi,  terjadi  proses  kontraksi  luka, epitelisasi,  dan  pembentukan  jaringan granulasi.
5 Jaringan granulasi adalah pertumbuhan jaringan baru yang terjadi ketika luka  mengalami  proses  penyembuhan,  terdiri atas  pembuluh-pembuluh  kapiler  yang  baru dan  sel-sel  fibroblas  yang  mengisi  rongga tersebut. 6 Pembentukan  jaringan  granulasi adalah  tahap  yang  penting  dalam  fase proliferasi dan penyembuhan luka. 7 Jadi, peran perawat  dalam  perawatan  luka  seperti pemilihan  balutan  hingga  pemilihan  larutan pembersih  luka  menjadi  sangat  penting  untuk mempercepat proses penyembuhan luka. Larutan  pembersih  luka  yang  dianjurkan adalah  cairan  normal  salin.  Normal  salin merupakan  cairan  fisiologis  dan  tidak  akan membahayakan  jaringan  luka.  Perawat menggunakan cairan salin untuk mempertahankan  permukaan  luka  agar  tetap lembab  sehingga  dapat  meningkatkan perkembangan  dan  migrasi  jaringan  epitel, tetapi  penelitian  terdahulu  menyimpulkan bahwa  normal  salin  sama  sekali  tidak mempengaruhi pembentukan jaringan granulasi. 8 Saat ini, penelitian untuk pengobatan luka
bakar  menggunakan  bahan-bahan  herbal mulai  banyak  dilakukan  oleh  para  peneliti.
Salah  satu  bahan  herbal  yang  digunakan untuk mengobati luka adalah Piper betle Linn. atau sirih. Sirih merupakan salah satu tanaman yang  banyak  tumbuh  di  Indonesia.  Secara tradisional sirih dipakai sebagai obat sariawan, sakit tenggorokan, obat batuk, obat cuci mata, dan perdarahan pada hidung atau mimisan. 9 Daun  sirih  mengandung  molekul-molekul bioaktif  seperti  saponin,  tannin,  minyak  atsiri, flavonoid,  dan  fenol  yang  mempunyai kemampuan untuk membantu proses penyembuhan  luka  serta  nutrisi  yang dibutuhkan  untuk  penyembuhan  luka  seperti vitamin A dan vitamin C. 10,11 Tannin membantu proses penyembuhan luka melalui
peningkatan  jumlah  pembentukan  pembuluh darah  kapiler  dan  sel-sel  fibroblas. 12 Molekul bioaktif  lain  yang  mempunyai  peran  sebagai antimikroba adalah minyak atsiri. 13,14 Flavonoid dan  fenol  berperan  sebagai  antioksidan  yang berfungsi  untuk  menunda  atau  menghambat reaksi  oksidasi  oleh  radikal  bebas. 15 Berdasarkan fenomena yang telah disebutkan di  atas  maka  perlu  diteliti  potensi  daun  sirih untuk  terapi  luka  bakar,  khususnya  dalam mempengaruhi peningkatan ketebalan jaringan granulasi.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengidentifikasi  ketebalan  jaringan  granulasi pada  perawatan  luka  bakar  derajat  II  pada tikus  putih  ( Rattus  norvegicus) jantan  galur Wistar dengan pemberian ekstrak etanol daun sirih.  Manfaat  penelitian  ini  bagi  akademisi adalah  diharapkan  dapat  digunakan  sebagai informasi,  referensi,  dan  kajian  bagi  para akademisi keperawatan dalam mengembangkan penelitian selanjutnya, terutama  tentang  perawatan  luka  bakar dengan  daun  sirih.  Manfaat  bagi  praktisi adalah  hasil  penelitian  ini  dapat  dijadikan sebagai  dasar  teori  dan  bahan  kajian  yang berkaitan  dengan  perawatan  luka  bakar derajat  II  dan  jika  penelitian  terbukti memberikan efek terhadap ketebalan granulasi,  maka  dapat  menjadi  inovasi  baru pemanfaatan  daun  sirih  sebagai  penyembuh luka  dan  dapat  dikembangkan  sebagai  terapi komplementer yang efektif dan efisien.

## BAHAN DAN METODE

## Desain Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian true- experiment  post-test dengan  kelompok eksperimen  dan  kontrol.  Pengukuran  hanya dilakukan setelah pemberian perlakuan selesai . 16 Pada  rancangan  ini  terdapat  3  kelompok eksperimen dan 1 kelompok kontrol. Kelompok eksperimen  diberi  perlakuan  yaitu  dengan terapi ekstrak daun  sirih  15 %,  30 %,  dan  45 %.    Kelompok  kontrol  adalah  kelompok  yang diberikan normal salin (NaCl) 0,9 %

## Kriteria Sampel
Sampel yang digunakan adalah tikus putih ( Rattus  norvegicus )  jantan  galur  Wistar,  yang berumur 75-90 hari karena proliferasi sel pada usia  pertumbuhan  ini  cepat  sehingga mendukung  proses  penyembuhan  luka.  Berat badan tikus 150-200 gram.

## Pembuatan Ekstrak Daun Sirih
Daun  sirih  hijau  yang  telah  tersertifikasi diperoleh  dari  Balai  Materia  Medica  di  kota Batu pada bulan Januari 2013. Daun sirih yang diambil  adalah  daun  berwarna  hijau  muda sampai hijau tua.  Sebanyak 100 gram serbuk daun  sirih  ( Piper  betle Linn)  direndam  dalam etanol hingga volume 1000 ml, dikocok selama 30 menit lalu dibiarkan selama 24 jam sampai mengendap.  Hasil  rendaman  dimasukkan  ke dalam  labu  evaporasi.  Labu  evaporasi dipasang  pada  evaporator  dan  isi water  bath dengan  air  sampai  penuh.  Semua  rangkaian alat  dipasang,  termasuk rotary  evaporator , pemanas water bath (diatur sampai 70-80 °C), disambungkan dengan aliran listrik. Kemudian ditunggu  sampai  larutan  etanol  berhenti menetes pada labu penampung (± 1,5 sampai 2  jam  untuk  satu  labu).  Hasil  yang  diperoleh kira-kira sepertiga dari bahan alam kering.Hasil ekstraksi dimasukkan dalam botol hasil ekstrak dan disimpan dalam freezer .

## Pembuatan Konsentrasi Ekstrak Daun Sirih
Ekstrak  daun  sirih  dicampurkan  vaselin dengan menggunakan rumus:
Keterangan: = konsentrasi larutan (%)
= massa zat terlarut (mg)
= massa larutan (mg)
Massa  larutan  ditetapkan  dengan  jumlah 50  mg  karena  jumlah  tersebut  dapat menutupi  luas  luka  sebesar  2  x  2  cm 2 sesuai  studi  pendahuluan  yang  telah dilakukan peneliti.
Pembuatan  konsentrasi  ekstrak  daun  sirih dilakukan  dengan  menambahkan  vaselin sebanyak  50  mg  sesuai  rumus  di  atas, sehingga didapatkan hasil sebagai berikut:
 Konsentrasi 15 %
7,5  mg  ekstrak  daun  sirih  dicampurkan dengan 50 mg vaselin.
 Konsentrasi 30 %
15  mg  ekstrak  daun  sirih  dicampurkan dengan 50 mg vaselin.
 Konsentrasi 45 %
22,5  mg  ekstrak  daun  sirih  dicampurkan dengan 50 mg vaselin.

## Pembuatan Luka Bakar Derajat II
Area  kulit  yang  akan  dibuat  luka  bakar didisinfeksi,  ditunggu  sampai  alkohol  kering. Anastesi dilakukan pada area kulit yang akan dibuat  luka  bakar  menggunakan  lidokain  non adrenalin  50  %.  Kassa  dipasang  dan dibungkuskan pada balok (styrofoam) berukuran 2 x 2 cm. Balok yang sudah dilapisi dan  dibungkus  kassa  dicelupkan  dengan  air panas  (suhu  98 o C)  selama  3  menit.  Balok yang  berbungkus  kassa  ditempelkan  pada hewan coba selama 30 detik. Kassa diangkat lalu luka dikompres dengan aquades selama 1 menit  untuk  mencegah  luka  bakar  menyebar atau bertambah parah.

## Perawatan Luka Bakar Derajat II
Kelompok  perlakuan  luka  dibersihkan terlebih  dahulu  menggunakan  normal  salin kemudian  diolesi  ekstrak  daun  sirih konsentrasi 15 %, 30 %, dan 45 %. Setelah itu luka ditutup dengan kassa steril dan diplester. Kelompok  kontrol  dibersihkan  dengan  normal salin  0,9  %  saja  lalu  ditutup  dengan  kassa steril.

## Metode Pengumpulan Data
Metode  pengumpulan  data  dengan melakukan pengamatan mikroskopis ketebalan jaringan granulasi dalam preparat HE jaringan kulit tersebut dianalisa menggunakan program
OlyVIA ( viewer for histology examination ) dan AutoCAD 2009 dengan perbesaran 40x.

## Identifikasi Granulasi
Proses  identifikasi  jaringan  granulasi dengan mengukur ketebalan jaringan granulasi mulai  dari  ujung  permukaan  luka  turun  ke dermis  yang  lebih  rendah  di  mana  proliferasi sel fibroblas berakhir. 17 Pengukuran dilakukan pada tiga area yang berbeda, yakni di sisi kiri dasar  luka,  pertengahan  dari  dasar  luka,  sisi kanan  dari  dasar  luka,  kemudian  ditarik  garis penghitungan  sejumlah  sembilan  garis,  lalu diambil  nilai  rata-rata  dari  semua  garis penghitungan.  Slide  preparat  vertikal  hasil pewarnaan  HE  dipindai dan  diolah  dengan program OlyVIA ( viewer  for  histological examination ), kemudian ditentukan perbesaran 40x, dilakukan print screen dan dimasukkan ke dalam proram AutoCAD 2009.
Analisis Data Hasil penelitian dianalisis dengan program IBM ® SPSS ® Statistics  20  dengan  uji normalitas data menggunakan uji Kolomogorov-Smirnov , uji homogenitas menggunakan test of  homogenity of variance , o ne-way ANOVA , dan uji post hoc Tukey HSD.

## HASIL
Pada  hari  ke-15,  tikus  dimatikan  dan dilakukan  pembedahan  untuk  mengambil jaringan  luka  yang  masih  tersisa.  Tujuan pengambilan  jaringan  luka  ini  untuk mendapatkan gambaran luka secara histologis. Pencitraan luka yang diamati adalah panjang jaringan granulasi dengan menggunakan  mikroskop  Olympus  kemudian dikonversi dengan program OlyVIA ( viewer for histology examination ).
Gambar 1. Ketebalan jaringan granulasi dengan pengecatan HE menggunakan mikroskop OLYMPUS XC10  (40x). Garis merah menunjukkan jaringan granulasi yang terbentuk pada luka. Keterangan: (A) Kelompok kontrol (normal saline 0,9 %), (B) Perlakuan ekstrak daun sirih ( Piper betle L.) 15  %, (C) Perlakuan ekstrak daun sirih ( Piper betle L.) 30 %, (D) Perlakuan ekstrak daun sirih ( Piper betle L.) 45 %.
Pada  kelompok  perawatan  luka  dengan normal  saline  0,9  %  didapatkan  rata-rata ketebalan  granulasi  sebesar  1,1  µm  (standar deviasi  ±  0,65  µm).  Jaringan  granulasi  yang terbentuk  merupakan  yang  paling  tipis dibandingkan  dengan  semua  kelompok  perla- kuan. Pada kelompok perawatan luka dengan ekstrak  daun  sirih  konsentrasi  15  %  didapat- kan rata-rata ketebalan granulasi sebesar 2,41 µm  (standar  deviasi  ±  1,48  µm).  Jaringan
granulasi  yang  terbentuk  lebih  tebal dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol.  Pada kelompok  perawatan  luka  dengan  ekstrak daun  sirih  konsentrasi  30  %  didapatkan  rata- rata  ketebalan  granulasi  sebesar  2,47  µm (standar  deviasi  ±  0,73  µm).  Jaringan  granu- lasi  yang  terbentuk  lebih  tebal  dibandingkan dengan kelompok kontrol dan kelompok perla- kuan ekstrak daun sirih konsentrasi 15 %. Pa- da  kelompok  perawatan  luka  dengan  ekstrak
A B C D
daun  sirih  konsentrasi  45  %  didapatkan  rata- rata  ketebalan  granulasi  sebesar  2,84  µm (standar  deviasi  ±  1,01  µm).  Jaringan  granu- lasi  yang  terbentuk  merupakan  yang  paling tebal dibandingkan semua kelompok lainnya.
Berdasarkan  data  di  atas  dapat  diambil kesimpulan bahwa perawatan luka bakar dera- jat II dengan ekstrak daun sirih dapat mening- katkan  ketebalan  granulasi  sebesar  2,41  µm pada konsentrasi 15 %, 2,47 µm pada konsen- trasi 30 %, dan 2,84 µm pada konsentrasi 45 %.

## Analisis Data
Hasil uji normalitas data setelah dilakukan tes Kolmogorov-Smirnov didapatkan  nilai  sig- nifikansi  sebesar  0,2  (p  >  0,05)  sehingga  H 1 diterima  dan  berarti  data  ketebalan  granulasi pada  kelompok  perlakuan  maupun  kelompok kontrol  berdistribusi  normal.  Pengujian  dapat dilanjutkan  dengan  uji  homogenitas  atau keragaman  data  menggunakan test  of  homo- geneity of variance. Melalui tes ini didapatkan nilai signifikansi p adalah 0,105 ( p > 0,05). Jadi dapat  disimpulkan  bahwa  data  tersebut mempunyai ragam yang homogen.
Selanjutnya  yaitu  pengujian one-way ANOVA dengan  selang  kepercayaan  95  % atau  taraf  kesalahan  5  %.  Hasil  uji one-way ANOVA dari  ketebalan  granulasi  pada semua kelompok perlakuan didapatkan nilai signifikasi sebesar  0,04  (p  <  0,05).  Dengan  demikian dapat disimpulkan bahwa penggunaan ekstrak daun sirih ( Piper betle L.) pada perawatan luka bakar  derajat  II  mampu  meningkatkan ketebalan jaringan granulasi. Hasil uji post hoc test menggunakan  uji Tukey HSD didapatkan hasil    perbedaan  yang  signifikan  antara  ke- lompok  perlakuan  ekstrak  daun  sirih  konsen- trasi 45 % dengan kelompok kontrol yaitu nor- mal  salin  0,9  %.  Sementara  untuk  ekstrak daun sirih konsentrasi 15 %, 30 %, dan 45 % tidak terdapat perbedaan yang signfikan.

## PEMBAHASAN
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  perawatan  luka  bakar derajat  II  menggunakan  ekstrak  etanol  daun sirih  ( Piper  betle L.)  terhadap  ketebalan  jarin- gan granulasi pada tikus putih ( Rattus novergi- cus) jantan galur Wistar.
Pada  penelitian  ini  digunakan  empat  ke- lompok  perlakuan,  dengan  tiga  perlakuan menggunakan ekstrak daun sirih dan satu per- lakuan  menggunakan  normal  salin  0,9  %  se- bagai  kelompok  kontrol.  Kelompok  perlakuan dengan  ekstrak  daun  sirih  ( Piper  betle L. ) diberikan  dengan  tiga  konsentrasi  berbeda yaitu 15 %, 30 %, dan 45 %. Ketebalan jarin- gan granulasi dianalisis pada hari ke-15 kare- na  fase  proliferasi  luka  bakar  derajat  II  men- capai puncaknya pada hari ke-15. 17
Dari  hasil  penelitian  didapatkan  rerata ketebalan  granulasi  yang  terbentuk  pada  ke- lompok kontrol (normal saline 0,9 %) sebesar 1,1  µm  dan  nilai    tersebut  merupakan  nilai yang  paling  rendah  di  antara  kelompok lainnya.  Hal  ini  dikarenakan  normal  salin merupakan  larutan  yang  bersifat  isotonik  se- hingga  tidak  menyebabkan  kerusakan  ter- hadap jaringan  baru  dan  tidak  mempengaruhi fungsi  dari  fibroblas  dan  keratinosit  dalam penyembuhan luka. 22 Penelitian lain yang ber- judul The effects of antiseptics on the healing of wounds: a study using the rabbit ear cham- ber juga  menyimpulkan  bahwa  normal  salin tidak mempengaruhi  aliran darah  dalam  pem- buluh  kapiler  yang  terdapat  pada  jaringan granulasi. 8
Setelah  dilakukan  uji  perbandingan berganda  rata-rata  ketebalan  jaringan granulasi,  didapatkan  hasil  kelompok  kontrol (normal  saline  0,9  %)  berbeda  signifikan dengan kelompok perlakuan ekstrak daun sirih 45 % dengan p value = 0,037 (α < 0,05). Nilai ketebalan jaringan granulasi yang tinggi dapat terjadi karena pada luka bakar derajat II, fase proliferasi sel mencapai puncaknya  pada hari ke-15. 17
Jaringan  granulasi  adalah  pertumbuhan jaringan  baru  yang  terjadi  ketika  luka mengalami  proses  penyembuhan,  terdiri  atas pembuluh-pembuluh kapiler yang baru dan sel- sel  fibroblas  yang  mengisi  rongga  tersebut sehingga  ketebalan  jaringan  granulasi  yang terbentuk  bergantung  pada  angiogenesis (pembentukan  pembuluh  darah  kapiler)  dan banyaknya  sel-sel  fibroblas  yang  berprolifer- asi. 6 Salah  satu  proses  penyembuhan  luka yang  baik  ditandai  dengan  kualitas pembentukan  jaringan  granulasi.  Semakin tebal jaringan granulasi yang terbentuk, proses penyembuhan  luka  yang  berlangsung  akan
semakin  singkat. 18 Peningkatan  ketebalan jaringan  granulasi  yang  terbentuk  pada kelompok perlakuan ekstrak daun sirih diduga karena  efek  kandungan  senyawa  aktif  yang berasal  dari  ekstrak  etanol  daun  sirih.  Hasil ekstraksi  etanol  daun  sirih  mengandung beberapa  kandungan  senyawa  aktif  seperti saponin,  tannin,  flavonoid,  fenol,  dan  minyak atsiri.  Kandungan  tersebut  dapat  membantu proses penyembuhan luka dengan mekanisme seluler  yang  berbeda-beda,  yaitu  sebagai antiinflamasi, antimikroba, dan antioksidan.
Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  ( Piper  betle L.)
sebagai Antiinflamasi Aktivitas  antiinflamasi  ekstrak  daun  sirih diperkirakan karena adanya senyawa golongan  flavonoid,  saponin,  dan  tannin.
Mekanisme  flavonoid  dalam  menghambat proses  terjadinya  inflamasi  melalui  berbagai cara, yaitu dengan menghambat permeabilitas kapiler,  metabolisme  asam  arakidonat,  serta sekresi  enzim  lisosom,    sel  neutrofil  dan  sel endothelial.  Mekanisme  antiinflamasi  saponin adalah  dengan  menghambat  pembentukan eksudat dan menghambat kenaikan permeabilitas vaskular. Tannin juga mempunyai  aktivitas  antiinflamasi,  namun mekanisme  kerjanya  sebagai  antiinflamasi belum  dijelaskan  secara pasti. 19 Vagashiya et al (2007) dalam penelitiannya mengungkapkan bahwa efek antiinflamasi akut dan  kronis  serbuk  kasar  daun  sirih    dengan dosis  300  mg/kg  dan  digunakan  natrium diklofenak sebagai kelompok kontrol. Studi ini menunjukkan  bahwa Piper  betle L. mempunyai  aktivitas  antiinflamasi  yang  efektif dilihat  dari  penurunan  luas  edema  pada  tikus putih pada 1, 2, dan 3  jam pertama.
Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  ( Piper  betle L.) sebagai Antimikroba
Sirih  mengandung  senyawa  aktif  minyak atsiri dengan komponen fenol alam dari kavikol (chavicol  paraallyphenol),  kavibetol,  dan eugenol. Kavikol memberi bau khas pada sirih dan  mempunyai  daya  antimikroba  lima  kali lebih  kuat  daripada  fenol  biasa.  Efek antimikroba yang dimiliki senyawa aktif minyak atsiri  dapat  menghambat  pertumbuhan beberapa  jenis  bakteri. 21 Reveny  (2011) mengemukakan  bahwa  senyawa  tannin  dan
flavonoid  yang  terdapat  dalam  ekstrak  daun sirih  merah  mempunyai  aktivitas  antibakteri yang  baik.  Hasil  uji  antimikroba  menunjukkan bahwa    ekstrak  etanol  80  %,  fraksi  n-heksan dan  fraksi  etilasetat  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli,
Staphylococcus  aureus ,  dan  jamur Candida albicans . Hasil penelitian ini juga menunjukkan bahwa  semakin  besar  konsentrasi  ekstrak yang  diberikan  maka  akan  menghasilkan daerah  hambat  yang  semakin  besar.  Hal  ini disebabkan  semakin  banyak  zat  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak  maupun  fraksi tersebut. 14
Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  ( Piper  betle L.) sebagai Antioksidan
Antioksidan  mampu  menetralisir  radikal bebas yang dapat menyerang dan menyebabkan kerusakan pada sel-sel protein, lipid,  dan  karbohidrat.  Radikal  bebas  mampu mengganggu integritas, struktur, dan fungsi sel sehingga  dibutuhkan  antioksidan  untuk menetralisir  dampak  negatif  radikal  bebas tersebut.  Daun  sirih  mempunyai  zat  yang bersifat sebagai antioksidan, seperti fenol dan flavonoid.  Cara  kerja  antioksidan  adalah dengan  memutus  reaksi  berantai  dari  radikal bebas  sehingga  dapat  mencegah  kerusakan jaringan.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh Mun’im et  al .  (2010)  menunjukkan  bahwa terdapat peningkatan
presentase penyembuhan  luka  yang  dilihat  dari penyempitan  luas  area  luka  pada  konsentrasi 20  %  dan  40  %  jika  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  yang  menggunakan  normal saline. Hal tersebut diduga karena infusa daun sirih  merah  dapat  menghambat  proses inflamasi  melalui  penangkapan  radikal  bebas oleh  antioksidan.  Manigahua et  al .  (2009) dalam  penelitiannya    menyimpulkan  bahwa ekstrak  etanol  daun sirih  mempunyai  aktivitas antioksidan  yang  lebih  kuat  daripada  asam askorbat,  DMSO  (dimethyl  sulphoxide),  dan BHT (butylated hydroxytoluene). Metode yang digunakan  dalam  penelitian  tersebut  adalah DPPH (2,2difenil-1-pikrilhidrazil) sebagai sumber radikal bebas. 23,10
Ekstrak  etanol  daun  sirih  tidak  hanya memiliki efek sebagai antiinflamasi, antibakteri, dan  antioksidan,  tetapi  juga  mengandung nutrisi  yang  dibutuhkan  untuk  penyembuhan
luka  misalnya  vitamin  A  dan  vitamin  C. Kandungan  tersebut  diduga  bekerja  secara sinergis  sehingga  dapat  menghasilkan penyembuhan  luka  secara  optimal  pada  luka bakar. 10 Pada  proses  penyembuhan  luka,  vitamin A  berperan  meningkatkan  pembentukan kolagen,  diferensiasi  sel  epitel,  dan meningkatkan  imunitas.  Selain  itu,  vitamin  A berperan mempercepat fase inflamasi ke fase proliferasi  dengan  meningkatkan  monosit  dan makrofag  ke  daerah  luka.  Makrofag  berasal dari monosit yang berfungsi untuk membersihkan bakteria dan debris dari daerah luka. Makrofag menghasilkan faktor pertumbuhan yang diperlukan untuk proliferasi sel-sel  fibroblas  dan  angiogenesis.  Selain  itu, makrofag  berperan  dalam  regenerasi  dermis dan  proliferasi  epidermis.  Vitamin  C merupakan komponen penting yang diperlukan untuk  proses  hidroksilasi  prolin  dan  lisin menjadi  prokolagen  yang  penting  untuk sintesis  kolagen.  Selain  berperan  dalam sintesis  kolagen,  vitamin  C  juga  berperan meningkatkan fungsi neutrofil dan angiogenesis.  Karbohidrat  dan  protein merupakan  sumber  energi  terpenting  yang diperlukan  dalam  sintesis  kolagen.  Bahan mineral,  yaitu  seng  berperan  dalam  sintesis kolagen dan proses epitelisasi. 10
Pada hari ke-4, jaringan nekrotik pada tiap sampel  mulai  terbentuk.  Jaringan  nekrotik dapat  menghalangi  pemberian  ekstrak  daun sirih  yang  diberikan  secara  topikal  sehingga proses  penyembuhan  luka  yang  berlangsung menjadi kurang optimal. Pada hari ke-12 luas area  luka  pada  tiap  sampel  mulai  mengecil. Luas area luka pada kelompok perlakuan rata- rata  sama  besarnya  dan  tidak  menunjukkan adanya  perbedaan bermakna.  Luas  area luka paling kecil ditunjukkan oleh kelompok kontrol (normal  saline).  Hal  ini  karena  normal  saline merupakan  larutan  yang  bersifat  isotonik sehingga hanya mempengaruhi penyembuhan luka bakar secara superficial. 16 Hasil penelitian yang  menunjukkan  tidak  terdapat  perbedaan signifikan  antar  kelompok  daun  sirih disebabkan  peneliti  kurang  dalam  hal eksplorasi  konsentrasi  optimal  ekstrak  daun sirih.  Konsentrasi  yang  digunakan  hanya  tiga, yaitu  15 %,  30 %,  dan  45 %  sehingga  belum diketahui  potensi  konsentrasi  ekstrak  daun
sirih  yang  optimal  dalam  hal  penyembuhan luka  bakar,  khususnya  dalam  meningkatkan ketebalan jaringan granulasi.
Pengeringan  daun  sirih  dengan  proses menggunakan sinar matahari juga
berpengaruh  terhadap  kandungan  daun  sirih. Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Sutjipto et  al . (2009)  tentang  pengaruh  cara  pengeringan terhadap  perubahan  fisiokimia  daun  kumis kucing  ( Orthosipon  stamineus Benth)  dengan menggunakan  metode  diangin-anginkan  pada suhu kamar, sinar matahari, oven listrik 50 o C, udara  sisa  pembakaran  bersuhu  60 o C,  dan aliran udara panas bersuhu 60 o C memberikan hasil  metode  pengeringan  dengan  diangin- anginkan  pada  suhu  kamar  merupakan metode  terbaik  bagi  kandungan  flavonoid dalam daun kumis kucing. 24
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa terdapat pengaruh perawatan luka bakar dera- jat  II  menggunakan  ekstrak  etanol  daun  sirih dalam meningkatkan ketebalan jaringan granu- lasi pada luka bakar derajat II sehingga dapat disimpulkan  bahwa  hipotesis  yang  diajukan adalah  benar.  Selain  itu,    didapatkan  kes- impulan bahwa penelitian ini memiliki validitas internal yang tinggi ditandai dengan perbedaan signifikan  antara  kelompok  perlakuan  dan kontrol berdasarkan analisis uji one way ANO- VA,  namun  masih  diperlukan  uji  lebih  lanjut tentang  farmakokinetik,  farmakodinamik,  tok- sisitas,  dan  efek  ekstrak  daun  sirih  ini  pada hewan coba dan clinical trial pada manusia.

## Keterbatasan Penelitian
Eksplorasi  konsentrasi  yang  digunakan peneliti  dalam  studi  pendahuluan  masih  ku- rang, yaitu hanya 3 kelompok konsentrasi se- hingga  belum  diketahui  potensi  konsentrasi ekstrak daun sirih yang optimal dalam proses penyembuhan  luka  bakar,  khususnya  dalam mempengaruhi peningkatan ketebalan jaringan granulasi.

## Implikasi Keperawatan
Untuk  dapat  diaplikasikan  secara  klinis, masih  diperlukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  standarisasi  bahan  aktif  apa  saja yang  dapat  digunakan.  Penelitian  lebih  lanjut diperlukan  untuk  mengetahui  konsentrasi ekstrak  daun  sirih  ( Piper betle L.) yang aman dan tepat untuk agar dapat berfungsi sebagai
obat  luka  bakar  derajat  II  sehingga  dapat digunakan sebagai pengobatan komplementer maupun  alternatif  untuk  berbagai  kalangan masyarakat di Indonesia.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  rata-rata peningkatan  ketebalan  granulasi  pada  ke- lompok  yang  mendapat  perlakuan  ekstrak daun sirih ( Piper betle L.)  15 % sebesar 2,41 µm, 30 % sebesar 2,47 µm, dan 45 % sebesar 2,84 µm. Pada kelompok kontrol dengan nor- mal saline 0,9 %, rata-rata ketebalan granulasi sebesar  1,1  µm.  Pemberian  ekstrak  etanol daun  sirih  ( Piper  betle L.)  berpengaruh  ter- hadap  peningkatan  ketebalan  jaringan  granu- lasi pada perawatan luka bakar derajat II tikus putih  ( Rattus  novergicus )  jantan  galur  Wistar dengan  nilai  signifikansi  sebesar  0,04  (p < 0,05).

## SARAN
Perlu  penelitian  lebih  lanjut  mengenai perbedaan  ketebalan  granulasi  pada  jaringan normal dengan jaringan yang mengalami pros- es  penyembuhan  luka  setelah  dirawat menggunakan  ekstrak  daun  sirih  ( Piper  betle L.). Serta penelitian tentang ekstrak daun sirih sebagai  obat  perawatan  luka  bakar  derajat  II dalam  bentuk  sediaan  yang  lain  seperti  sedi- aan  obat  padat  atau  semi  padat  (krim  atau gel).

## DAFTAR PUSTAKA
1. Smeltzer  SC,  Brenda  GB. Buku  Ajar Keperawatan  Medikal-Bedah  Brunner  & Suddarth. Waluyo  dkk  (Penerjemah).  Vol 3.  Edisi  ke-8.  Jakarta:  EGC.  2002.  Ter- jemahan dari: Brunner & Suddarth’s Text- book  of  Medical-Surgical  Nursing.  Su- zanne CS (Editor). 8 th Ed.
2. Nurdiana,  Hariyanto,  dan  Musrifah. Perbedaan  Kecepatan  Penyembuhan  Lu- ka Bakar Derajat II antara Perawatan Luka Menggunakan  Virgin  Coconut  Oil  ( Cocos nucifera )  dan  Normal  Salin  pada  Tikus
Putih  ( Rattus  novergicus )  Strain  Wistar.
2008. (Online). (http://elibrary.ub.ac.id/bitstream/1234568 9/18039/1/Perbedaan-kecepatan penyembuhan-luka-bakar-derajat-II- antara-perawatan-luka-menggunakan- virgin coconut-Oil-%28Cocos- nucifera%29-dan  normal-salin-pada-tikus- putih-%28Rattus-norvegicus%29-strain-
wistar.pdf. Diakses 13 Maret 2012)
3. Schwartz SI, Shires GT, Spencer FT. Inti- sari  Prinsip-prinsip  Ilmu  Bedah .  Laniyati dkk  (Penerjemah).  Edisi  ke-6.  Jakarta: EGC.  2000.  Terjemahan  dari  :  Principles of Surgery. Seymour IS (Editor).
4. Majewska  I,  Gendaszewska-Darmach  E. Proangiogenic Activity of Plant Extracts in Accelerating  Wound  Healing  ─  A  New Face  of  Old  Phytomedicines . Acta  Bio- chimica Polonica . 2011; 58(4): 449-460.
5. Rahmawati.  Pengaruh  Stimulasi  Elektrik terhadap  Pengurangan  Luas  Luka  pada Penyembuhan  Luka  (Debth  Wound ) . Jurnal  Pendidikan  Mutiara  Ilmu .  2009; 4(2):102-107.
6. Tim  Widyatama. Kamus  Keperawatan .
Jakarta : Widyatama. 2010.
7. Romo  T. Medscape  Reference:  Drugs, Diseases,  &  Procedures,  Skin  Wound Healing. 2012. (Online), http://emedicine.medscape.com/article/88 4594-overview#aw2aab6b5.  Diakses  19 November 2011. 8. Gannon  R.  Nursing  Times.  Fact  File: Wound  Cleansing:  Sterile  Water  or  Sa- line?. 2007. (Online). (http://www.nursingtimes.net/fact-file wound-cleansing-sterile-water-or- saline/201829.article,  diakses  21  Novem- ber 2012).
9. Soemiati A, Elya B. Uji Pendahuluan Efek Kombinasi  Antijamur  Infus  Daun  Sirih ( Piper betle L.), Kulit Buah Delima ( Punica granatum L.),  Dan  Rimpang  Kunyit  ( Cur- cuma  domestica Val.)  Terhadap  Jamur- Candida  albicans . Makara  –  Seri  Sains . 2002; 6(3): 149-154.
10. Mun’im    A,  Azizahwati,  Fimani  A. Pengaruh  Pemberian  Infusa  Daun  Sirih Merah  ( Piper cf .  fragile, Benth)  secara Topikal terhadap Penyembuhan Luka Pa- da Tikus Putih Diabet. Hibah Awal DRPM Universitas  Indonesia.  No  Kontrak  : 2512/H2.R12/PPM.01  Sumber  Penda- naan/2010. Depok : UI. 2010.
11. Vikash C, Shalini T, Verma NK, Singh DP, Chaudhary SK, Asha R. Piper betel: Phy- tochemistry, Traditional Use & Pharmaco- logical  Activity  -  a  Review. International Journal  of  Pharmaceutical  Research  and Development ( IJPRD ).  2012;  4(4):216-
223.
12. Li K, Diao Y, Zhang H, Wang S, Zhang Z, Yu B, Huang S, Yang H. Tannin Extracts from Immature Fruits of Terminalia Chebu- la Fructus Retz.  Promote  Cutaneous
Wound  Healing  in  Rats . BMC  Comple- mentary  and  Alternative  Medicine .  2011 ; 11 (86).
13. Arambewela  LSR,  Arawwawala  LDAM, Kumaratunga  KG,  Dissanayake  DS, Ratnasooriya  WD,  Kumarasingha  SP.  In- vestigations  on Piper  betle Grown  in  Sri
Lanka. National  Center  for  Biotechnology Information , 2011; 5(10):159-163. (Online). (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/ PMC3263050/.  Diakses  9  September
2012).
14. Reveny J.  Daya  Antimikroba Ekstrak dan Fraksi  Daun  Sirih  Merah (Piper  betle
Linn.). Jurnal  Ilmu  Dasar .  2011;  12(1):6- 12.
15. Widyastuti  N.  Pengukuran  Aktivitas  Anti- oksidan dengan Metode CUPRAC, DPPH, dan  FRAP  serta  Korelasinya  dengan Fenol  dan  Flavonoid  pada  Enam  Tana- man. Skripsi. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Per- tanian Bogor. 2010.
16. Nursalam. Konsep  dan  Penerapan Metodologi  Penelitian  Ilmu  Keperawatan: Pedoman  Skripsi,  Tesis,  dan  Instrumen Penelitian Keperawatan . Edisi ke-2. Jakar- ta: Salemba Medika. 2011. 17. Moenadjat  Y. Luka  Bakar:  Masalah  dan Tatalaksana .  Edisi  ke-4.  Jakarta:  Balai Penerbit FKUI. 2009.
18. Paglinawan  R,  Colic  M,  Simon  M.    A Comparative Study of the Influence of Dif- ferent  Pressure  Levels  Combined  with Various  Wound  Dressings  on  Negative Pressure Wound Therapy (NPWT) Driven Wound Healing. Presented at the Europe- an  Tissue  Repair  Society .  2008  Septem- ber 10-12. Republic of Malta.
19. Yaman I, Durmus AS, Ceribasi S, Yaman M. Effects of Nigella sativa and Silver Sul- fadiazine  on  Burn  Wound  Healing  Rats. Veterinarni  Medicina .  2010;  55(12):619- 624.
20. Fitriyani  A,  Winarti  L,  Muslichah  S,  Nuri. Uji  Antiinflamasi  Ekstrak  Metanol  Daun Sirih  Merah  ( Piper  crocatum Ruiz  &  Pav ) pada Tikus Putih. Majalah Obat Tradision- al . 2011; 16(1):34-42.
21. Vagashiya Y, Nair R, Chanda S. Investiga- tion  of  Some  Piper  Species  for  Anti- Bacterial  and  Anti-Inflammatory  Property. International  Journal  of  Pharmacology . 2007 ; 3(5):400-405.
22. Salami, Ayodeji A., Imosemi, Innocent O., Owoeye,  Olatunde  O.  Comparison  of  the Effect  of  Chlorhexidine,  Tap  Water,  and Normal  Saline  on  Healing  Wounds. Int  J Morphol. 2006; 24(4):673-676. 23. Hendrayani  SF.  Pengaruh  Beberapa Ekstrak  Daun  Sirih ( Piper  betle L)  ter- hadap  Pertumbuhan Candida  albicans . Tesis.  Tidak  diterbitkan.  Bogor  :  Institut Pertanian Bogor. 2005.
24. Manigauha A, Ali H, Maheshwari MU. An- tioxidant  Activity  of  Ethanolic  Extract  of Piper  betel Leaves. Journal  of  Pharmacy Research. 2009; 2(3):491-494.
25. Sutjipto,  Wahyu  JP,  Widiyastuti  Y. Pengaruh Cara Pengeringan terhadap Pe- rubahan  Fisikokimia  Daun  Kumis  Kucing (Orthosipon  stamineus Benth ) . The  Jour- nal  of  Indonesian  Medicinal  Plant .  2009; 2(1):24-27.