Uji Efektifitas Gel Ekstrak Sambung Nyawa ( Gynura Procumbens (Lour.)Merr. ) Terhadap Penyembuhan Luka Pada Kelinci
Hiperglikemia
Sri Rejeki Handayani*, Ganet Eko Pramukantoro Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi email: handayanijeki@yahoo.co.id
(tanggal diterima: 31-01-2020 , tanggal disetujui: 28-12-2020)

## INTISARI
Kondisi hiperglikemia bisa menghambat proses penyembuhan luka. Pemberian gel  ekstrak daun sambung nyawa (Gynura procumbens (Lour.)Merr.) menjadi salah satu pilihan penyembuhan. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efek  gel  ekstrak  daun  sambung  nyawa  (Gynura procumbens  (Lour.)Merr.)  terhadap  menyembuhkan  luka  pada  hewan  uji  dalam  kondisi hiperglikemia.  Target  khusus  yang  ingin  dicapai  adalah  memperoleh  obat  alam  berkhasiat menyembuhkan luka pada kondisi hiperglikemia dengan gel ekstrak daun sambung nyawa (Gynura procumbens (Lour.)Merr.), dan mengetahui dosis efektifnya.
Penelitian  ini  menggunakan  kelinci  putih  sebanyak  5  ekor.  Pengujian  dilakukan  dengan membuat luka sayat pada punggung hewan uji hiperglikemia dengan  diinduksi aloksan. Aktivitas penyembuhan  luka  dilihat  dengan  membagi  punggung    hewan  uji  menjadi  5  bagian  yang  diberi perlakuan sesuai kelompoknya. Kelompok perlakuan dan kelompok kontrol  positif dioles dengan gel 2 x sehari selama 9 hari dan dilakukan pengukuran panjang luka pada hari ke 1, 3, 5, 7, dan 9. Aktivitas  penyembuh  luka  diabetik  ditunjukkan  dengan  cara  menghitung  panjang  luka  masing- masing perlakuan dan dianalisa dengan uji Anova satu jalan dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil  uji  aktivitas  penyembuhan  luka  menunjukkan  bahwa  kelompok  gel  ekstrak  daun sambung nyawa dengan konsentrasi 5% mampu menyembuhkan paling efektif, dengan persentase penyembuhan luka sebesar 67,00%.
Kata kunci : hiperglikemia, penyembuhan luka, sambung nyawa

## ABSTRACT
Hyperglycemia can inhibit the wounds healing process. Giving life-sustained leaf extract gel (Gynura procumbens (Lour.) Merr.) Is one of the healing options. The  goal of this study is to prove that the gel extract (Gynura procumbens (Lour.) Merr.) Leaf extract gel is able to heal  wounds in hyperglycemic  test  animals.  The  specific  target  to  be  achieved  is  to  obtaining    natural  medicines that  effective  to  healing  wounds  in  hyperglycemia  conditionand  with  the  gel  of    sambung  nyawa extract (Gynura procumbens (Lour.) Merr.) and  knowing the effective dosage.
This  study  used  5  white  rabbits.  Testing  is  done  by  making  a  wound  on  the  back  of  DM alloxan-induced test animals. Wound healing activity is seen by dividing the backs of test animals into  5  parts  which  are  treated  according  to  their  groups.  The  treatment  group  and  the  positive control group were applied with gel twice a day for 9 days and measured the length of the wound on days 1, 3, 5, 7, and 9. Diabetic wound healing activity was shown by calculating the wound length of each treatment and analyzed with the Anova test one way with a 95% confidence level.
The results of the study   wound healing activity test showed that the grafted leaf extract with  a  concentration  of  5%  was  able  to  heal  the  best,  with  a  percentage  of  wound  healing  of 67.00%.
Keyword : hyperglycemia, wound healing, sambung nyawa
Effectiveness o f Sambung Nyawa Extract Gel ( Gynura Procumbens (Lour.) Merr. ) on  Wounds Healing i n Hyperglycemia Rabbit

## 1. PENDAHULUAN
Kondisi    hiperglikemia  bisa  mempengaruhi  proses  penyembuhan  luka, dikarenakan  pada  kondisi  ini  menyebabkan  pengerasan  dan  penyempitan pembuluh  darah,  sehingga  akan  menghambat  mobilisasi  oksigen  dan  beberapa unsur  yang  berperan  pada  proses  penyembuhan  luka,  seperti:  trombosit  yang berperan  pada  proses  penutupan  luka,  limfosit  dan  leukosit  yang  berfungsi mengatasi  infeksi,  serta  kolagen  dan  glutation  yang  berperan  dalam  perbaikan luka  [1].  Luka  pada  kondisi  hiperglikemia  bisa  meningkatkan  kecenderungan terjadinya  luka  diabetik  yang  merupakan    komplikasi  kronik  pada  penderita Diabetes Melitus (DM)
Salah satu pencegahan yang bisa dilakukan adalah perawatan luka dengan menjaga  kondisi  tetap  lembab  ( moist  wound  healing), penanganan  infeksi  dan rekurensi luka. Tujuan utama perawatan luka adalah sesegera mungkin mendapat kesembuhan  dan  mencegah    kekambuhan  setelah  proses  penyembuhan. Perawatan  rutin  luka,  pengobatan  infeksi,  dan  perawatan  dirumah  sakit membutuhkan  biaya  yang  sangat  besar  dan  menjadi  beban  dalam  sistem pemeliharaan kesehatan [2].
Dengan mempertimbangkan keuntungan kondisi lembab dan menghindarkan dari infeksi pada luka diabetes, pemakaian gel dari ekstrak bahan alam yang mempunyai khasiat antibakteri bisa sangat membantu untuk mencegah progres  kerusakan  dari  luka  pada  kondisi  hiperglikemia  menjadi  luka  diabetik. Salah satu bahan  alam  yang  mempunyai  khasiat  antibakteri  adalah ekstrak  daun sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.)Merr. ).
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya,  daun  sambung  nyawa  dilaporkan memiliki  kandungan  flavonoid,  tanin,  saponin  dan  triterpenoid  [3].  Tanaman  ini berkhasiat  sebagai  antidiabetes,  antiinflamasi,  antivirus  herpes  simpleks  [3], antioksidan  [4],  antimikroba  [5].  Penelitian  tentang  sediaan  topikal  ekstrak sambung  nyawa  dalam  bentuk  sediaan  topical  belum  ada.  Khasiat  antiinflamasi, antioksidan,  dan  antimikroba,  pada  ekstrak  daun  sambung  nyawa  mampu digunakan dalam sediaan topical untuk  merawat luka diabetes dan terhindar dari perubahan menjadi ulkus diabetik. Pada penelitian sejenis, penggunakan gel bahan alam yang mempunyai khasiat sama dengan daun sambung nyawa terbukti efektif digunakan sebagai bahan  perawatan luka diabetes [6].

## 2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. ALAT DAN BAHAN
Blender  (tecstar),  neraca  kasar  (onhause),  neraca  hewan,  erlenmeyer, corong, kain flanel, spuit, labu takar, ayakan no 30 mesh, beker gelas, gelas ukur, tabung  reaksi,  kandang  tikus,  glukotes,  skapel/silet,  kapas,  mistar.  Bahan  sampel yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  daun  sambung  nyawa  yang  diperoleh dari  daerah  Tawangmangu,  Kabupaten  Karanganyar,  Jawa  Tengah.  Bahan  kimia yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  etanol  96%  (Shafgufta    Laboratory), aloksan  monohidrat  (Sigma  Aldrich),  Carboxy  Methyl  Cellulose  (CMC)  Na  0,5% (Yuyu),  larutan  fisiologis  (NaCl  0,9%)  aquadest  (ROFA),  Bioplacenton  Gel  (Kalbe
Farma),  Etil  klorida  spray  (Walter  Ritter),  gliserin  (Wilmar),  polietilen  glikol (PEREGO).

## 2. 2. CARA KERJA
Determinasi  Tanaman.  Tahap  awal  penelitian  ini  adalah  menetapkan kebenaran  sampel  daun  sambung  nyawa  dengan  ciri-ciri  mikroskopis  dan makroskopis  dari  tanaman  tersebut  dan  mencocokkan  ciri-ciri  morfologis  yang ada pada tanaman terhadap kepustakaan Flora of Java [6] dan dibuktikan di unit Laboratorium Farmakognosi, Universitas Setia Budi, Surakarta.
Pembuatan  Serbuk.  Pembuatan  serbuk  daun  sambung  nyawa  dilakukan dengan  cara  :  mencuci  daun  sambung  nyawa  dengan  air  mengalir  hingga  bersih, kemudian  dilakukan  perajangan  menjadi  bagian  yang  tipis  dan  kecil,  dilanjutkan pengeringan  dengan  menggunakan  oven  pada  suhu 50°  sampai  kering kemudian simplisia  kering  tersebut  diserbukkan  dengan  cara  diblender  dan  diayak  dengan menggunakan ayakan ukuran 40 mesh.
Pembuatan  Ekstrak.  Proses  pembuatan  ekstrak  etanol  daun  sambung nyawa dilakukan dengan cara maserasi (1:10) dengan menggunakan etanol 96 % sebagai cairan penyari. Serbuk daun sambung nyawa ditimbang 500 g, dimasukkan ke dalam botol maserasi kemudian dituangi dengan etanol 96 % (1 : 7,5), ditutup dan dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya, sambil sesekali diaduk. Cairan hasil  ekstraksi  disaring  dengan  kain  flanel  lalu  dengan  kertas  saring..  Ampas kemudian dimaserasi dengan cara yang sama dan dibiarkan selama 2 hari sambil sesekali  diaduk  hingga  meperoleh  10  bagian  pelarut.  Filtrat  dipekatkan  dengan rotary evaporator pada suhu 50ºC, hasilnya disebut ekstrak etanol daun sambung nyawa.
Pembuatan  suspensi  aloksan,  Suspensi  aloksan  dibuat  dengan  cara melarutkan  serbuk  aloksan  sebanyak  2,5  gram  dalam  NaCl  0,9%  hingga  volume 100 ml. Pembuatan gel ekstrak daun sambung nyawa. Gel dibuat dalam beberapa konsentrasi:
Tabel 1. Komposisi gel ekstrak etanol daun sambung nyawa
Formula dan Komposisi bahan (g) Nama bahan K(-) F1 F2 F3 Ekstrak daun sambung nyawa - 1 2,5 5 Na-CMC 5 5 5 5 Gliserin 10 10 10 10 Propilenglikol 5 5 5 5 Aquadest ad 100 100 100 100
Pembuatan gel ekstrak etanol daun sambung nyawa basis Na-CMC. Ekstrak daun  sambung  nyawa  dilarutkan  dalam  propilen  glikol.  Na-CMC  dimasukkan  ke dalam  sebagian  dari  aquadest  yang  telah  dipanaskan  di  penangas  air,  dibiarkan sesaat  agar  mengembang,  kemudian  diaduk  sampai  homogen.  selanjutnya ditambahkan  gliserin,  dan  ekstrak  yang  telah  dilarutkan  dalam  propilenglikol,
serta aquades ad 100 ml diaduk sampai terbentuk gel yang homogen, dan dikemas dalam wadah gel [7].
Pengujian gel ekstrak daun sambung nyawa Uji fisik untuk sediaan gel meliputi Organoleptik, Sediaan gel yang diamati meliputi  bentuk,  warna,  dan  bau.  Uji  homogenitas.  dilakukan  dengan  cara  visual yaitu  mengoleskan  gel  pada  lempeng  kaca  kemudian  diamati  di  bawah  lampu apakah  warnanya  tercampur  seragam  atau  tidak  [8].  Uji  pH  dilakukan  dengan menggunakan pH stick, dengan cara 1 gram gel dilarutkan dalam aquadest sampai 10  mL.  Diukur  larutan  gel  dengan  menggunakan  pH  stick,  dan  dibandingkan dengan  pH  standard.  Uji  viskositas  dilakukan  dengan  memasukkan  sebanyak  25 gram  gel  ke dalam cup, selanjutnya dipasang spindle dengan ukuran  2 dan  rotor [9].
Uji  daya  sebar,  Uji  daya  sebar  merupakan  pengujian  untuk  mengetahui kemampuan  gel  untuk  menyebar  apabila  diaplikasikan  ke  kulit.  Cara  yang dilakukan  yaitu  dengan  menimbang  1  g  gel  dan  diletakkan  pada  tengah  cawan petri.  Kaca  yang  satu  kemudian  ditimbang  dan  diletakkan  kaca  tersebut  di  atas massa gel kemudian didiamkan selama 1 menit, diameter yang tersebar kemudian diukur dua posisi. Diameter penyebaran basis dapat diukur dengan panjang rata- rata diameter penyebaran gel. Beban diberi 50 gram kemudian diletakkan di atas basis dan kembali diukur diameter penyebaran. Penyebaran diteruskan dan tetap ditambah  beban  sebanyak  50  gram  kemudian  dicatat  diameter  penyebaran  (cm) [10].
Induksi  aloksan,  Hewan  uji  diberikan  aloksan  dengan  dosis  175  mg/kgBB kelinci  secara  intraperitonial.  Pada  hari  ke-3  setelah  pemberian  dilakukan pemeriksaan kadar gula darah kelinci. Kelinci dinyatakan DM jika kadar gula darah plasma sewaktu ≥ 200 mg/dL[11].
Pembuatan luka pada punggung hewan uji. Hewan uji yang digunakan yaitu kelinci  ( Oryctolagus  cuniculus )  jenis  Australian  yang  sudah  dewasa,  sehat,  berat badan 2,5–3 kg kg sebanyak 5 ekor, yang kondisi hiperglikemia. Induksi luka pada punggung  kelinci  dengan  cara:  kelinci  dicukur  bulunya,  kemudian  dianastesi menggunakan  etil  klorida  spray  ditunggu  10  detik  dengan  durasi  30  detik. Punggung kelinci dibagi menjadi 5 area dan selanjutnya dilakukan biopsi masing- masing area sepanjang 2 cm dengan kedalaman 2 mm.
Uji aktivitas penyembuhan luka. Kelinci yang telah dibuat luka  selanjutnya dioleskan ± 0,1 gram gel ekstrak daun sambung nyawa  kemudian ditutup dengan kain kasa dan plester, dilakukan 2 kali sehari pagi dan sore. Pengukuran diameter luka dilakukan pada hari  ke 1, 3, 5, 7, dan 9, dengan menggunakan mistar [12].

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Fisik Gel
Hasil uji fisik gel bisa dilihat di Tabel 2. Dari hasil uji fisik Gel, terlihat bahwa semua  formulasi  memenuhi  persyaratan    pH  gel  yang  dikehendaki  yaitu  pada rentang  4,5-6,5.  pH  gel  yang  terlalu  asam  akan  menyebabkan  iritasi,  dan  jika terlalu basa akan menyebabkan kulit menjadi kering [13].
Tabel 2. Hasil Uji fisik Gel Ekstrak Daun Sambung Nyawa
Jenis Uji Fisik Hasil Uji Fisik K(-) F1 F2 F3 Pustaka Warna kuning pucat hijau hijau tua hijau tua kehitaman Sesuai warna ekstrak Organoleptik Aroma aroma ekstrak aroma ekstrak aroma ekstrak Sesuai aroma ekstrak Homogenitas homogen  Homogen  homogen homogen homogen pH 6 6 6 6 4,5-6,5 Viskositas (dpa.s) 200 290 300 350 Daya Sebar (cm) 3,55 4,15 3,8 3,65 3-5 Daya Lekat (detik) 6,50 6,23 6,28 6,38
Semua  gel  homogen,  dengan  melihat  secara  mikroskopis  dengan perbesaran 40 kali, tidak tampak adanya butiran kasar, sehingga memenuhi syarat homogenitas  [14].  Daya  sebar  menurun  dengan  kenaikan  konsentrasi  zat  aktif, seiring dengan kenaikan viskositasnya, serta kenaikan daya lekatnya.

## Uji Aktivitas Penyembuhan Luka
Uji  aktivitas  penyembuhan  luka  pada  hewan  uji  hiperglikemik,  dimulai dengan induksi aloksan pada hewan uji, dan ditunggu sampai kadar glukosa darah sewaktu  ≥  200  mg/dL.  pada  hari  ketiga  setelah  pemberian  aloksan,  dilakukan pengukuran  kadar  glukosa  darah  sewaktu,  yang  menunjukkan  bahwa  hewan  uji sudah  dalam  kondisi  hiperglikemia,  karena  kadar  glukosa  darah  sewaktu  sudah mencapai  ≥ 200 mg/dL. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan lagi pada hari ke 9 dan ke 12 setelah pemberian aloksan. Pengamatan dan pengukuran panjang luka  dilakukan  pada  hari  ke-1,  3,  5,  7dan  9.  Data  hasil  pengukuran  ditampilkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Data hasil rata-rata pengukuran panjang luka  dan % penyembuhan luka (PL)
Rata-rata pengukuran panjang luka(cm) hari ke-  Persentase penyembuhan luka (% ) Kelompok 0 1 3 5 7 9 Kontrol negative 1,80 1,70 1,40 1,22 1,14 0,96 46,67 F1 2,00 1,94 1,50 1,22 1,10 0,94 53,00* F2 2,10 1,90 1,54 1,16 1,06 0,90 57,14* F3 2,00 1,62 1,22 0,96 0,84 0,66 67,00* Kontrol positif 2,20 1,84 1,38 1,08 1,00 0,82 62,73* Ket: Kontrol negatif : perlakuan dengan basis gel F1 : perlakuan dengan gel ekstrak daun sambung nyawa 1 % F2 : perlakuan dengan gel ekstrak daun sambung nyawa 2,5% F3 : perlakuan dengan gel ekstrak daun sambung nyawa 5 % Kontrol positif: perlakuan dengan Bioplacenton gel (*) : berbeda  bermakna dengan kontrol negatif
Penyembuhan  luka  secara  makroskopis  dapat  dilihat  dari  adanya penurunan  ukuran  luka  yang  bisa  dilihat  dengan  parameter  persentase penyembuhan luka (%PL). Penyembuhan luka secara makroskopis pada hari ke-9 yang  paling  baik  adalah  pada  kelompok  F3,  dengan  nilai  %  PL  sebesar  67,00, bahkan  lebih  besar  dari  kontrol  positif  dengan  nilai    yaitu  62,73,  dan  secara statistik menunjukkan berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0,005).
Kenaikan  konsentrasi  ekstrak  daun  sambung  nyawa  pada  formula  gel berbanding  lurus  dengan  kenaikan  persentase  penyembuhan  luka  dengan perbedaan  yang  bermakna.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ada  pengaruh  ekstrak daun sambung nyawa terhadap proses penyembuhan luka.
Kemampuan    ekstrak  daun  sambung  nyawa  dalam  proses  penyembuhan luka disebabkan adanya flavonoid yang berperan secara signifikan meningkatkan aktivitas  enzim  antioksidan,  bekerja  dengan  menghambat    proses    peroksidasi lipid  dan  dapat  menangkap  radikal  bebas,  selain  itu  dapat  mencegah  dan memperlambat  kematian  sel,  serta  meningkatan  vaskularisasi  pada  daerah  luka [15].  Penghambatan  peroksidase  lipid  dipercaya  dapat  meningkatkan  serabut kolagen dan vaskularisasi, serta mencegah kerusakan sel, dan membantu sintesis DNA [16]. Selain itu adanya senyawa saponin berperan dalam penyembuhan luka dengan  mekanisme  menstimulasi  pembentukan  kolagen  tipe  1  yang  berperan penting dalam proses penutupan luka dan meningkatkan epitelisasi jaringan [17].

## 4. KESIMPULAN
Ekstrak  daun  sambung  nyawa  bisa  dibuat  formulasi  gel  dan    memenuhi persyaratan  uji  fisik  gel.  gel  ekstrak  daun  sambung  nyawa  yang  mampu menyembuhkan  luka  hiperglikemia  paling  besar  adalah  konsentrasi  gel  5%, dengan nilai persentase penyembuhan luka sebesar 67,00%.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan    terimakasih    kepada    Hibah  Internal    Universitas  Setia  Budi  yang telah mendanai penelitian ini.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
[1]. Wound  Source, How  Diabetes  Impacts  Wound  Healing ,  2017, https://www.woundsource.com/blog/how-diabetes-impacts-wound- healing#:~:text=High%20blood%20glucose%20causes%20stiffening,comp lications%20in%20diabetes%20wound%20healing.
[2]. Hariani L, Perawatan ulkus diabetes, 2019, (online) journal.unair.ac.id/filerPDF/02.%20Perawatan%20Ulkus%20Diabetes.pdf.
[3]. Mou  K.M.  ,  Dash  P.R.,  A  comprehensive  review  on  Gynura  procumbens leaves, International Journal of Pharmacognosy ,2016, Vol. 3(4): 167-174.
[4]. Sinaga  M.S,  Siagian  P.D.,  Ariska  R.,  Pemanfaatan  ekstrak  daun  sambung nyawa  ( gynura  procumbens [lour].merr)  sebagai  antioksidan  pada  minyak
kelapa menggunakan pelarut metanol, Jurnal Teknik Kimia USU , 2017, Vol. 6, No. 2 (Juni 2017).
[5]. Bakhtra  D.D.A.,  Jubahar  J.,  Yusdi  E.,  Uji  Aktivitas  Fraksi  Dari  Ekstrak  Daun Sambung  Nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour)Merr.)  Terhadap  Bakteri Shigella dysenteriae, Jurnal Farmasi Higea , 2018, Vol. 10, No. 1.
[6]. Aminanto  S,  Ruhyana3,  Prihatiningsih  D,  Efektivitas gel  aloe  vera sebagai primary  dressing pada  luka  diabetes  melitus  di  praktik  perawatan  luka indaryati  sleman  yogyakarta,  Naskah  Publikasi,  Stikes  Aisyah,  Yogyakarta, 2015.
[7]. Aponno,  J.  V,  Yamlean,  P.V.Y.  &  Supriati,  H.S.,  Uji  Efektivitas  Sediaan  Gel Ekstrak  Etanol  daun  Jambu  Biji  ( Psidium  guajava  Linn )  Terhadap Penyembuhan  Luka  yang  Terinfeksi  Bakteri  Staphylococcus  aureus  pada Kelinci  ( Orytolagus  cuniculus )., Jurnal  Ilmiah  Farmasi ,  3(3),  2014,  pp.279– 286.
[8]. Hasyim, N., Pare, K. L., Junaid, I., Kurniati, A., Formulasi dan Uji Efektivitas Gel  Luka  Bakar  Ekstrak  Daun  Cocor  Bebek  ( Kalanchoe  pinnata  L .)  pada Kelinci  ( Oryctolagus cuniculus ). Majalah  Farmasi  dan  Farmakologi ,  2012, 16(2), pp.89–94.
[9]. Miladiyah  I,  Prabowo  BR.,  Ethanolic  extract  of Anredera  cordifolia (Ten.)Steenis  leaves  improved  wound  healing  in  guinea  pigs. Univ  Med. 3(1):4–11. DOI: http://dx.doi.org/10.18051/UnivMed, 2012, v31.4-11.
[10]. Guyton A. C., Hall J. E., Buku Ajar Fisiologi Kediokteran , Edisi 11, Penerjemah: Irawati Setawan, EGC, Jakarta, 2007, 89.
[11]. Langi,  Y.A.,    Penatalaksanaan  Ulkus  Kaki  Diabetes  Secara  Terpadu, Jurnal Biomedik, 2011, Volume 3, Nomor 2, Juli 2011, hlm. 95-101 [12]. Medicinal  herb  index  in  Indonesia  (Indeks  tumbuhan-tumbuhan  di Indonesia, Jakarta : PT Eisai Indonesia, 1986, 85.
[13]. Misra H, Soni M, Silawat N, Mehta D, Mehta BK, Jain DC, Antidiabetic Activity of  Medium-Polar  Extract  From  The  Leaves  of  Stevia  Rebaudiana  Bert. (Bertoni)  on  Alloxan-Induced  Diabetic  Rats. J  Pharm  Bioallied  Sci. ,  2011, 3(2):242-8.
[14]. Roza,R.L, Afriant R., Edward Z, Faktor Risiko Terjadinya Ulkus Diabetikum pada Pasien Diabetes Mellitus yang Dirawat Jalan dan Inap di RSUP Dr. M. Djamil  dan  RSI  Ibnu  Sina  Padang, Jurnal  Kesehatan  Andalas ,  ,  2015,  4(1), 244-248.
[15]. Suharmiati,  Pengujian  bioaktifitas  antidiabetes  melitus  tumbuhan  obat. Cermin Dunia Kedokteran, 2003, www.kalbe.co.id.
[16]. Tjahjadi,  V., Mengenal,  Mencegah,  Mengatasi  Silent  Killer  Diabetes ,  Pustaka Widyamara, Semarang, 2010, 4.
[17]. Watkins D, Cooperstein SJ, Lazarow A, Effect of alloxan on permeability of pancreatic islet tissue in vitro, 2008, www. ajplegacy.physiology.org