GONADOSOMATIC INDEX TIKUS JANTAN ( Rattus norvegicus ) SETELAH
PAPARAN EKSTRAK DAUN MIMBA ( Azadirachta indica )

## SEBAGAI SENYAWA ANTIFERTILITAS
Alam Rivky Saputra *1 , Agung Janika Sitasiwi 2 , Tyas Rini Saraswati 3
Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro * Corresponding author: saputraalam061@gmail.com

## Abstract
Neem  leaves  is  one  part  of  the  neem  tree  (Azadirachta  indica)  containing  antifertility  compounds  which  can suppress the rate of male rat reproduction. The purpose of this study is to examine Gonadosomatic Index after exposure of neem leaves ethanol extract as antifertility compounds. This study is an experimental study with a Completely Randomized Design (CRD), using 12 male rats devided into 4 treatment groups and 3 replications. P0 is a control with aquades treatment, P1, P2, and P3 (neem leaves ethanol extract with each dose of 60, 80, and  100  mg/kgBW/day).  The  treatment  was  administered  orally  wiht  a  volume  of  1  ml  for  14  days.  The  main parameters are testicular weight, body weight and GSI. Body weights were measured every 7 days. Surgery was done  after  the  treatment  ends  for  measuring  testicular  weight  and  testicular  isolation  continued  by  measuring GSI  values.  GSI  value  is  determined  from  body  weight  and  testicular  weight.  The  results  were  analysed  using ANOVA  at  95%  confidence  level.  The  analysis  results  showed  that  there  were  no  significant  differences (P>0.05) in the body weight and testicular weight parameters, but there were a significant different (P<0.05) in GSI  values.  The  test  results  of  GSI  values  show  the  different  decrements  in  the  treatment  of  P2.  Based  on  the results of the test, it could be concluded that the exposure of neem leaves ethanol extract at doses of 60, 80, 100 mg/kgBW/day for 14 days of exposure time can cause antifertility effect in male rats.
Keywords : Neem leaves, GSI, rat reproduction, body weight, testicular weight.

## PENDAHULUAN
Tikus  merupakan  hama  utama tanaman  padi  di  Indonesia  yang  dapat menyebabkan  kerusakan  pada  tanaman padi  dari  mulai  di  persemaian  sampai panen,  bahkan  sampai  penyimpanan. Kerusakan  akibat  tikus  sawah  di  negara- negara  Asia  mencapai  10-15%  setiap tahun  (Singleton,  2003),  sedangkan  di Indonesia luas serangan tikus sawah setiap tahun  rata-rata  mencapai  lebih  dari 100.000 ha.
Berbagai  alternatif  pengendalian telah  dilakukan  dalam  usaha  mengatasi masalah  tikus,  baik  secara  kultur  teknis, fisik  mekanik,  maupun  secara  kimia.
Dinas Pertanian Perkebunan dan Kehutanan  telah  melakukan  beberapa pendekatan  penanggulangan  hama  tikus yaitu  dengan  cara  gropyokan,  emposan dan pemberian umpan beracun rodentisida.  Metode  yang  digunakan tersebut di atas ternyata tingkat keberhasilannya  masih  rendah  (Setiabudi ey al. , 2015).
Chateau & Boehm (1995) menyatakan bahwa perkembangan populasi  hama  tikus  sawah  yang  pesat salah  satunya  sangat  dipengaruhi  oleh tingginya  laju  reproduksi  tikus.  Tikus memiliki  laju  reproduksi  yang  sangat tinggi  dengan  jumlah  anak  yang  relatif
Alam Rivky Saputra et al. : Gonadosomatic Index Tikus Jantan ( Rattus norvegicus ) Setelah Paparan Ekstrak Daun Mimba ( Azadirachta indica ) sebagai Senyawa Antifertilitas
banyak perkelahiran selama musim kawin sepanjang  tahun.  Laju  reproduksi  tikus yang  tinggi  perlu  diseimbangkan  dengan cara  menekan  laju  reproduksi  melalui pengendalian  fertilitas  (fertility  control). Pengendalian  fertilitas  salah  satu  caranya yaitu  dengan  menggunakan  tanaman Mimba.  Tanaman  Mimba  merupakan tanaman yang bernilai ekonomis dan kaya akan manfaat. Daun hingga akarnya dapat dimanfaatkan  dalam  kehidupan  manusia. Bagian-bagian Mimba banyak dimanfaatkan  dalam  berbagai  bidang, tetapi manfaat daun Mimba belum banyak diketahui oleh banyak masyarakat (Biswas et al ., 2002).
Mimba  mengandung  bahan  aktif azadirachtin,  meliantriol,  salanin,  nimbin, nimbidin  dan  bahan  lainnya  (Burrow et al .,  2001).  Azadirachtin  mengandung sekitar  17  komponen  dan  terdapat  di semua  bagian  tanaman,  terutama  biji (Kardinan,  2000).  Senyawa  azadirachtin memiliki  aksi  sebagai  repelan  (penolak), racun  sistemik,  racun  kontak,  zat  anti fertilitas  dan  penghambat  pertumbuhan (Nurtiati, 2001).
Seiring penelitian tentang pemanfaatan  tanaman  mimba,  terutama pada  biji  dan  daunnya  dapat  digunakan sebagai  antifertilitas  baik  pada  hewan jantan maupun betina (Priya et al ., 2012). Roop et  al., (2005)  menyatakan  bahwa  uji Mimba ini dapat menghambat
folikulogenesis pada tikus albino. Kandungan di dalam ekstrak daun Mimba memiliki  efek  antifertilitas  sementara ( reversible ),  anti  implantasi  dan  dapat mengakibatkan  abortus  (Morovati et  al. 2008).  Pemanfaatan  daun  mimba  pun telah banyak dibuktikan di dalam masyarakat sebagai antifertilitas pada pria tanpa  menurunkan  libido  (Suryawanshi, 2011).
Menurut  penelitian  Balai  Penelitian dan  Konsultasi  Industri  Laboratorium (BPKI), di dalam daun mimba mengandung flavonoid 1,56% dan senyawa bioaktif triterpenoid  0,39%  yang berpengaruh  terhadap  infertilitas  hewan jantan dan betina. Alkaloid dapat menekan sekresi hormon reproduksi yaitu testoteron sehingga proses spermatogenesis terganggu. Flavonoid mampu menghambat enzim aromatase yaitu enzim yang  mengkatalis  konversi  androgen menjadi  estrogen  yang  meningkatkan hormon testoteron.
Hasil  penelitian  Gufron  (2005) membuktikan  bahwa  pemberian  ekstrak daun  Mimba  dengan  dosis  200  mg/kgBB pada  tikus  putih  dapat  menurunkan kuantitas  dan  kualitas  spermatozoa.  Hasil penelitian Auta & Hasan (2016) menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak daun  Mimba  berpengaruh  terhadap  bobot testis,  LH  (Leautinizing  Hormone),  FSH (Follicle  Stimulating  Hormones)  dan
testosteron.  Hal  ini  diduga  berpengaruh pada  bobot  testis  dan  Indeks  Kematangan Gonad  (Gonadosomatic  Index).  Menurut Rustidja  (2001),  Indeks  Kematangan Gonad  (Gonadosomatic  Index)  adalah suatu metode kuantitatif untuk mengetahui tingkat  kematangan  yang  terjadi  pada gonad.  Indeks  Kematangan  Gonad  yaitu suatu  hasil  perbandingan  bobot  testis dengan  bobot  tubuh  kemudian  dikalikan 100%.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  berlangsung  selama  2 bulan. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Biologi Struktur dan Fungsi Hewan,  Departemen  Biologi,  Fakultas Sains dan Matematika, Universitas
Diponegoro, Semarang. Rancangan penelitian  yang  digunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  4 perlakuan dan 3 ulangan.
Alat yang diperlukan dalam penelitian ini adalah seperangkat  kandang pemeliharaan  tikus  dan  perlengkapannya, neraca analitik, pinset, tabung erlenmeyer, gelas  ukur  100  ml,  kompor  listik,  jarum suntik  3ml,  label  kecil  dan  besar,  tempat pakan  dan  minum,  sekam  padi,  sarung tangan dan s et al at bedah.
Bahan yang diperlukan dalam penelitian  ini  adalah  hewan  uji  berupa tikus putih (Rattus norvegicus ). Bahan uji
berupa kloroform, daun mimba ( Azadirachta indica ) dan NaCl fisiologis.

## Persiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  yaitu berupa  tikus  ( Rattus  norvegicus )  jantan berumur  2  bulan,  dengan  rata-rata  bobot badan  100-200  g.  Hewan  uji  diaklimasi pada  kondisi  laboratorium  selama  2 minggu  agar  dapat  beradaptasi  dengan dengan  kondisi  lingkungan  yang  baru. Selama proses aklimasi tikus diberi pakan standar  (HI-PROVITE  Medicated  594), dengan  pemberian  pakan  dan  minum secara ad libitum.

## Ekstraksi Daun Mimba
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  bagian  daun  mimba (Azadirachta  indica  A.  Juss)  dengan kriteria warna daun hijau muda serta daun diambil  dari  pucuk  daun  hingga  2-3 tangkai  di  bawah  pucuk.  Sampel  daun mimba yang telah dikumpulkan dibersihkan dari kotoran, kemudian dikeringkan  menggunakan  oven  dengan suhu 45˚ - 50 ˚C.  Daun yang sudah kering kemudian  dibuat  menjadi  serbuk  dengan diblender. Ekstraksi daun Mimba menggunakan  etanol 70% dengan metode maserasi.  Kristanti  (2008)  menyatakan bahwa penggunaan ethanol sebagai pelarut  karena  alkohol  merupakan  pelarut universal  yang  baik  untuk  mengekstraksi semua golongan senyawa metabolit sekunder.
Alam Rivky Saputra et al. : Gonadosomatic Index Tikus Jantan ( Rattus norvegicus ) Setelah Paparan Ekstrak Daun Mimba ( Azadirachta indica ) sebagai Senyawa Antifertilitas

## Persiapan Bahan Uji
Dosis  ekstrak  daun  mimba  yang diberikan  adalah  60  mg/kgBB/hari,  80 mg/kgBB/hari,  dan  100  mg/kgBB/hari yang  dilarutkan  dalam  aquades  sebesar  1 ml.  Larutan  diberikan  secara  oral  dengan volume  1  ml  per  hewan  uji  yang  masing- masing  mengandung  ekstrak  daun  mimba 12 mg; 16 mg dan 20 mg.

## Pemberian Perlakuan dan Pengamatan
Pemberian  perlakuan  oral  dengan volume 1 ml per hewan uji, pada sore hari (pukul  16.00  –  17.00),  selama  14  hari berturut-turut.  Bobot  badan  tikus  diukur setiap  7  hari  sekali.  Konsumsi  pakan diukur  setiap  3  hari  sekali.  Konsumsi minum  diukur  setiap  hari.  Hari  ke-14 dilakukan  pembedahan  pada  tikus  uji. Pembedahan ini dilakukan untuk mengetahui  bobot  testis  kiri,  dan  testis kanan. Tikus yang telah dibedah, kemudian diambil testis kiri dan kanannya. Organ testis yang telah diambil kemudian diisolasi lalu ditimbang menggunakan  neraca  dengan  ketelitian 0,01 gram.
Pengamatan dilakukan dengan pengukuran  GSI.  GSI  ditentukan  dengan menggunakan rumus seperti yang dijelaskan  oleh  Auta  &  Hassan  (2016) sebagai berikut:
Keterangan :
GSI : Gonadosomatic Index BT  : Bobot Testis BB  : Bobot Badan

## Analisis Data
Data  bobot  badan  dan  bobot  testis tikus  dianalisis  dengan  ANOVA  dengan taraf kepercayaan 95%, dan taraf signifikansi  5%.  Hasil  analisis  yang menunjukkan perbedaan  bermakna adalah pada  parameter  GSI.  Hasil  ananlisi ANOVA  tersebut  kemudian  dilanjutkan dengan uji DMRT dengan taraf kepercayaan  95%  dan  taraf  signnifikansi 5%.  Analisis  data  menggunakan  program SPSS  ( Statistical  Product  of  Service Solution )for Windows versi 23.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelian  dari  pemberian ekstrak  daun  Mimba  terhadap  bobot badan, bobot testis, dan GSI (Gonadosomatic  Index)  disajikan  pada Tabel  1. Hasil  ANOVA  menunjukkan bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  daun Mimba  terhadap  bobot  badan  tikus  jantan yang ditunjukkan pada histogram (Gambar 1)  tidak  memberikan  perbedaan  yang bermakna  (p>0,05).  Hasil  data  tersebut menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak daun  mimba  tidak  mempengaruhi  bobot badan tikus jantan.
Bobot badan lebih banyak dipengaruhi oleh konsumsi pakan.
Pemberian ekstrak  daun   mimba    diduga
Tabel  1. Rerata  bobot  badan,  bobot  testis,  dan  GSI  tikus  jantan  setelah  pemberian  ekstrak  daun Mimba selama 14 hari
Parameter Perlakuan P0 PI P2 P3 x̄ ± SD x̄ ± SD x̄ ± SD x̄ ± SD Bobot Badan (g) 193,33 a ± 25,16 200,00 a ± 26,45 196,67 a ± 32,14 193,33 a ± 15,27 Bobot Testis (g) 2,23 a ± 0,34 2,41 a ±   0,37 2,05 a ±  0,34 2,27 a ±   0,23 GSI (%) 1,14 b ±  0,04 1,19 b ±   0,03 1,04 a ±  0,04 1,17 b ±  0,07
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  superskrip  yang  sama  pada  baris  yang  sama        menunjukkan  perbedaan  tidak  nyata  (p>0,05).  P0  : Kontrol dengan pelarut bahan uji akuades 1 ml/ekor/hari, P1 : Perlakuan dengan bahan uji konsentrasi 60 mg/kgBB/hari, P2 : Perlakuan dengan bahan uji konsentrasi  80 mg/kgBB/hari, P3 : Perlakuan dengan bahan uji konsentrasi 100 mg/kgBB/hari.
tidak  mempengaruhi  konsumsi  pakan hewan  uji.  Komposisi  pakan  tikus  yang diberikan  mengandung  kadar  air  13%, protein 17,5 – 19,5%, lemak 3%, serat 8%, abu  7%,  kalsium  0,9%,  dan  fosfor  0,6. Menurut  Upa et  al .,(2017)  pakan  ideal untuk tikus yang sedang tumbuh, minimal harus  memenuhi  kebutuhan  zat  makanan antara  lain  protein  12%,  lemak  5%, kalsium 0,9%, fosfor 0,6% dan serat kasar kira-kira 5%. Hal ini menunjukkan bahwa konsumsi  pakan  harian  yang  diberikan memiliki komposisi yang seimbang sehingga  tidak  mempengaruhi  bobot badan tikus.
Penelitian
Susetyarini (2013)
menunjukkan  bahwa  bobot  badan  setelah pemberian  senyawa  antifertilitas  pada tikus  jantan  yaitu  berkisar  190  –  240  g. Bobot  badan  tikus  jantan  pada  penelitian ini  yaitu  berkisar  193,33  –  200  g.  Hal tersebut  menujukkan  bahwa  bobot  badan masih dalam kisaran normal.
Hasil  ANOVA  pengaruh  pemberian ekstrak  etanol  daun  Mimba  terhadap
bobot  testis  tikus  yang  ditunjukkan  pada histogram (Gambar 2) tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna (p>0,05). Hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  pemberian ekstrak  daun  Mimba  tidak  mempengaruhi bobot  testis  tikus.  Hal  tersebut  berbeda dengan  penelitian  Apolonia  (2017)  yaitu pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba pada dosis 100 mg/kgBB dapat menyebabkan  penurunan  bobot  testis. Faktor  utama  yang  mempengaruhi  bobot testis adalah tubulus semeniferus. Tubulus semeniferus merupakan komponen penyusun  testis  yang  terbesar.  Apabila terjadi  kerusakan  atau  atrofi  sel-sel penyusun tubulus seminiferus akan terjadi penurunan  berat  testis  (Hardiyono  & Soekanto, 2013). Hasil penelitian memberikan  bukti  bahwa  komponen dalam  ektrak  daun  mimba  diduga  tidak mempengaruhi tubulus seminiferus, sehingga  tidak  terjadi  perbedaan  bobot testis.
Faktor  lain  yang  menyebabkan bobot testis tidak menunjukkan
Alam Rivky Saputra et al. : Gonadosomatic Index Tikus Jantan ( Rattus norvegicus ) Setelah Paparan Ekstrak Daun Mimba ( Azadirachta indica ) sebagai Senyawa Antifertilitas
perbedaaan bermakna diduga karena testis
telah mengalami
kematangan spermatozoa.  Dahril  (2016)  menyatakan bahwa tingkat kematangan testis dipengaruhi  oleh  struktur  dan  jumlah spermatozoa. Struktur spermatozoa normal  pada  tikus  yaitu  memiliki  bentuk kepala seperti kait pancing dan ekor lurus panjang, sedangkan spermatozoa abnormal mempunyai bentuk kepala tidak beraturan  atau  terlalu  bengkok  dan ekornya tidak kurus bahkan tidak berekor. Menurut  Nontamart et  al. (2013)  Jumlah sel  spermatozoa  pada  tikus  normal  yaitu berkisar antara 300 sampai 400 juta.
Hasil ANOVA pengaruh pemberian  ektrak  ethanol  daun  Mimba terhadap GSI total  tikus  yang ditunjukkan pada  histogram  (Gambar  3)  menunjukkan perbedaan  yang  bermakna  (p<0,05).  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun Mimba dapat menyebabkan Indeks Gonadosomatik  rendah.  Hasil  uji  Duncan menunjukkan  P0  tidak  berbeda  bermakna (P>0,05)  dengan  P1  dan  P3,  sedangkan P0,  P1  dan  P3  menunjukkan  perbedaan bermakna (p<0,05) dengan P2 ( Tabel 1 ).
Pemberian  ekstrak  etanol  daun mimba  dengan  dosis  60  mg/kgBB/hari (P1)  dan  dosis  100  mg/kgBB/hari  (P3) tidak  mampu  menurunkan  nilai  GSI, sedangkan  pemberian  ekstrak  etanol  daun mimba  dengan  dosis  80  mg/kgBB/hari (P2)  mampu  menurunkan  nilai  GSI.  Hasil
tersebut  tidak  sesuai  dengan  penelitian Muslichah (2013) yang menyatakan bahwa  tingkat  kematangan  gonad  dan bobot  gonad  pada  tikus  jantan  mengalami penurunan  seiring  dengan  peningkatan dosis ekstrak daun mimba yang diberikan.
Pemberian  ekstrak  etanol  daun mimba  yang  tidak  mampu  menurunkan nilai  GSI  pada  perlakuan  P1  dan  P3  ini diduga disebabkan karena variasi individu tiap  spesies  yang  berbeda.  Grandjean (2002) menyatakan bahwa variasi individu merupakan  umpan  balik  dosis  yang dibutuhkan  untuk  menghasilkan  respon yang  sesuai.  Tubuh  memiliki  kapasitas tertentu  untuk menahan  efek yang berpotensi  berbahaya  pada  paparan  bahan kimia  sehingga  dapat  menimbulkan  efek yang  berbeda.  Hal  tersebut  diduga  terjadi pada hewan uji kelompok P2.
Data  nilai  GSI  yang  diperoleh menunjukkan bahwa pemberian perlakuan pada  P2  memiliki  pengaruh  yang  paling besar  terhadap  penurunan  nilai  GSI dibandingkan  dengan  perlakuan  pada  P1 dan  P3.  Faktor  yang  mempengaruhi  nilai GSI  adalah  bobot  badan  dan  bobot  testis. Berdasarkan hasil uji ANOVA  yang telah dilakukan,  menunjukkan  bahwa  bobot testis  diduga  yang  paling  mempengaruhi nilai GSI pada penelitian ini. Hal ini dapat dilihat  dari  hasil  ANOVA  pada Tabel  1 . Rerata  bobot  testis  pada  P2  mengalami penurunan yang paling besar
Gambar 1. Histogram bobot tikus jantan setelah paparan ekstrak etanol daun mimba selama 14 hari
Gambar 2. Histogram bobot testis tikus jantan setelah paparan ekstrak etanol daun mimba selama 14 hari
Gambar 3. Histogram GSI tikus jantan setelah paparan ekstrak etanol daun mimba selama 14 hari
Alam Rivky Saputra et al. : Gonadosomatic Index Tikus Jantan ( Rattus norvegicus ) Setelah Paparan Ekstrak Daun Mimba ( Azadirachta indica ) sebagai Senyawa Antifertilitas
dibandingkan dengan P1 dan P3, sehingga menyebabkan  nilai  GSI  pada  P2  paling rendah  jika  dibandingkan  dengan  P1  dan P3.
Senyawa antifertilitas pada prinsipnya  bekerja  melalui  efek  hormonal yang  menghambat  laju  metabolisme  sel spermatogenik  dengan  cara  mengganggu keseimbangan hormon (Wiryawan, 2009). Wijayanti  (2016)  menyatakan  bahwa kandungan dalam daun mimba yang dapat memberikan efek antifertilitas yaitu saponin  dan  alkaloid.  Saponin  dan alkaloid  digunakan  sebagai  bahan  baku sintesis  hormon  steroid  dan  triterpenoid memiliki kaitan dengan biogenesis dengan steroid (Adnan, 2002). Hal tersebut diduga karena saponin  ikut masuk ke dalam jalur biosintesa steroid terutama hormon estrogen  sehingga  akan  dihasilkan  bahan yang  strukturnya  mirip  dengan  hormon tersebut.  Selanjutnya  bahan  ini  disekresi bersama  dengan  hormon  tersebut  dalam sel  target.  Bahan  tersebut  akan  masuk  ke sel  bersama  dengan  hormon,  selanjutnya akan menempati reseptor hormon.
Akibatnya  aksi  hormon  pada  sel  target akan berkurang.
Perlakuan  P1  diduga  konsentrasi ekstrak  daun  mimba  kurang  sehingga tidak  mampu  memberikan  efek  pada regulasi hormon reproduksi. Perlakuan P3 ekstrak yang diberikan diduga menyebabkan  kejenuhan  pada  reseptor
sehingga  tidak  mampu  menginduksi perubahan konsentrasi  hormon reproduksi dalam  tubuh  hewan  uji.  Kedua  hal tersebut  menyebabkan  GSI  pada  P1  dan P3  tidak  berbeda  bermakna  dengan  P0. Lehninger  (2003)  menyatakan  bahwa pengaruh  dari  peningkatan  hormon  pada sebagian  besar  sistem  yang  responsif adalah  ketika  reseptor  secara  relatif  pada saat keadaan jenuh sehingga menyebabkan  suatu  respon  hormon  yang maksimal. Respon hormon yang maksimal ini menyebabkan hormon reproduksi yang dihasilkan menjadi lebih banyak. Sehingga  tidak  mempengaruhi  GSI  pada P1 dan P3.
Penelitian Apolonia (2017)
menunjukkan  bahwa  histopatologi  testis setelah  perlakuan  ekstrak  daun  mimba memiliki  nilai  rata  –  rata  berat  testis,  sel Leydig,  dan  diameter  tubulus  seminiferus mencit  ( Mus  musculus )  yang  lebih  kecil dibanding  dengan  kelompok  kontrol.  Hal ini  menunjukkan  adanya  pengaruh  yang bermakna  dari  pemberian  ekstrak  daun mimba (Azadirachta indica A.Juss) Ukuran diameter tubulus seminiferus yang mengecil mencerminkan adanya hambatan spermatogenesis  dan  juga  kemungkinan disebabkan  penurunan  jumlah  sel  Leydig (Fitriyah,  2005).  Jumlah  sel  Leydig  yang menurun  pada  testis  diduga  disebabkan karena  senyawa  saponin  yang  ada  pada ekstrak  daun  mimba.  Menurut  Rekha  &
Chandrasekhara (2014),
pemberian saponin  menyebabkan  penekanan  sintesis asam  nukleat  dan  protein  di  dalam  sel Leydig  sehingga  sintesis  testosteron terhambat.
Hormon  lain  yang  sangat  berperan untuk  menstimulasi  fungsi  fisiologis  sel Leydig  adalah  LH.  Fungsi  utama  LH adalah  menstimulasi  sel  Leydig  untuk memproduksi hormon testoseron.
Stimulasi LH pada sel Leydig yang sedikit menyebabkan menurunnya sekresi
hormon  testosteron.  Sekresi  hormon testosteron yang menurun
akan
menghambat spermatogenesis dan menyebabkan turunnya bobot testis. Folicle Stimulating Hormone
(FSH) mengawali proses proliferasi spermatogenesis  dan  testosteron  berdifusi dari  sel  interstitial  yang  diperlukan  untuk pematangan  akhir  spermatozoa  (Agarwal ey  al. ,  2003).  Pembentukan  FSH  yang terhambat  menyebabkan  spermatogenesis akan  terganggu  dan  juga  menyebabkan turunnya  jumlah  sel  Sertoli  (Guyton  dan Hall,  2008).  Menurut  Boekelheide ey  al.
(2000),  terjadinya  penurunan  jumlah  sel Sertoli  mengindikasikan  kegagalan  fungsi sel  Sertoli  melindungi  sel-sel  germinal terhadap  apoptosis.  Kerusakan  sel  Sertoli akan mengganggu proses spermatogenesis. Lebih  lanjut  Lohiya ey  al. (2002) menyatakan  jika  fungsi  sel  Sertoli terganggu,  maka  sekresi  ABP,  suplai
nutrisi,  faktor  pertumbuhan,  laktat,  dan transferin  juga  terganggu  karena  zat-zat tersebut  sangat  dibutuhkan  dalam  proses spermatogenesis.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  mimba  pada  dosis  80 mg/kgBB/Hari  dengan  waktu  paparan selama 14 hari mampu  menunjukkan efek antifertilitas pada tikus jantan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini didanai dengan sumber  dana  selain  APBN  Fakultas  Sains dan  Matematika  Universitas  Diponegoro tahun anggaran 2018 sesuai Surat Penugasan Pelaksanaan Kegiatan Penelitian Nomor: 1754I/UN7.5.8/
PG/2018  dengan  ketua  proyek  penelitian Dr. Agung Janika Sitasiwi, M.Si.

## DAFTAR PUSTAKA
Adnan.  2002. Potensi  Tumbuhan  Sebagai Bahan  Pengatur  Fertilitas .  Makasar: Biologi, FMIPA, Universitas Muhammadiyah Makasar.
Agarwal  A,  RA  Saleh,  &  MA  Bedaiwi. 2003. Role of reactive oxygen species in  the  pathophysilogy  of  human reproduction. J. Fertil. Steril . 79(4):829-843.
Apolonia  M  &  Sukarjati.  2017.  Pengaruh ekstrak  biji  pepaya  ( carica  papaya l.) dan  ekstrak  daun  mimba  ( azadirachta indica a.juss)  dan  campuran  ekstrak biji  pepaya  (carica  papaya  l.)  dan
Alam Rivky Saputra et al. : Gonadosomatic Index Tikus Jantan ( Rattus norvegicus ) Setelah Paparan Ekstrak Daun Mimba ( Azadirachta indica ) sebagai Senyawa Antifertilitas
ekstrak  daun  mimba  (azadirachta indica a.juss) terhadap diameter tubulus  seminiferus,  sel  leydig  dan bobot  testis  mencit  (mus  musculus). Stigma  Journal  of  Science ,  10  (1):  5- 11.
Auta  T  &  AT  Hasan.  2016.  Reproductive toxicity  of  aqueous  wood-ash  extract of Azadirachta indica (neem) on male albino  mice. Asian  Pacific  Journal  of Reproduction, 2016 1-5.
Biswas  K,  I  Chattopadhyay  RK  Banerjee,
& U Bandyopadhyay. 2002. Biological  activities  and  medicinal properties  of  neem  (Azadirachta indica). Current Science , 82(11): 8-9.
Boekelheide  K,  SL  Fleming,  KJ  Johnson,
SR  Patel,  &  HA  Schoenfeld.  2000.
Role  of  Sertoli  cell  in  injury- associated testicular germ cell apoptosis. Proc.  Soc.  Exp.  Biol.  Med , 225(2):105-115.
Burrow  ME,  SM  Bone,  BM  Coelin,  LI Meinik,  BN  Duana,  SW  Canter,
TEWiese,  TE  Cleveland,  &  JA  Mc
Lachlan. 2001. Phytochemical Gliceolins Isolated from Soy Medicine Antihormonal Effect Through Estrogen Receptor Alpha and
Beta. J. Clin. Endocrinol. Metab . Apr.
86 (4) : 1750-1758.
Chateau  D  &  N  Boehm.  1995. Regulation of  Differentiation  and  Keratin  10 Expression by All Trans Retinoid Acid during  the  Estrous  Cycle  in  the  Rat Vaginal  Epithelium .  France:  Institute d’Histologic,  Faculte  de  Medicine,  4 Rue Kirschleger.
Dahril, Dasrul, D Dhita, & M Reza. 2016. Analisis  kualitas  sperma  tikus  putih ( Rattus  norvegicus )  dengan  makanan tinggi  kalori  pada  pemberian  ekstrak manggis ( Garciana mangostana ).
Jurnal Ilmiah Sains .4(2): 1-16 Fitriyah.  2005. Pengaruh  Ekstrak  Buah
Pinang  (Area  catechu)  Terhadap Hsitologi Testis Mencit (Mus musculus) . Bandung: Pendidikan Bahasa  Indonesia,  FKIP,  Univerista Pendidikan Indonesia. Grandjean P. 2002.
Individual susceptibility  to  toxicity. Toxicology Letters. 64(2):43-51.
Gufron  H.  2005.  Gambaran  Histologik Spermatogenesis  Tikus  Putih  ( Rattus norvegicus )  diberi  Makan  Terung Tukak  ( Solanum  forvum ). Jurnal Kedokteran Yarsi 2 . 2(1): 1-11.
Guyton  AC  &  JE  Hall.  2008. Buku  Ajar Fisiologi  Kedokteran .  Edisi  ke-11. Jakarta: EGC, Penerbit Buku
Kedokteran, Jakarta. Hardiyono  H  &  Soekanto  A.  2013. Pengaruh pemberian royal jelly peroral  terhadap  berat  testis  dan proporsi  berat  testis  terhadap  berat badan  tikus  Putih  (rattus  norvegicus strain  wistar)  jantan, Jurnal  Ilmiah Kedokteran, Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma , Surabaya.
10 (2): 176-182.
JK Roop, PK Dhaliwal & SS Guraya. 2005.
Extracts  of  Azadirachta  indica  and Melia azedarach seeds inhibit folliculogenesis in albino rats. Kardinan  A.  2000.  Pestisida  Nabati, Ramuan dan Aplikasi. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya.
Kristanti  AN.  2010.  Potensi  Ekstrak  Daun Pegagan  ( Centella  asciata ( L ) Urban ) Dosis  Tinggi  Sebagai  Antifertilitas Pada  Mencit  ( Mus  musculus )  Betina. Skripsi . Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Lehninger A, D Nelson, & MM Cox. 2003.
The  Principle  of  Biochemistry  2 nd :
United States: Academic Press.
Lohiya NK, B Manivannan, PK Mishra, N Pathak,  S  Sriram,  S  Bhande,  and  S
Panneerdoss. 2002. Chloroform extract of Carica papaya seeds induces long-term  reversible  azoospermia  in langur monkey. Asian. J. Androl , 4(1): 17-26.
Morovati M, M Mahmond,  & KM Ghazy. 2008. Sterility and Abortive Effects of the  Commercial  Neem  (Azadirachta indica  A.  Juss)  Extract  NeemAzal- T/S on Female Rat ( Rattus
norvegicus ).  Turk.J.  Zool.  32:  155- 162.
Muslichah  S  &  Wiratmo.  2013.  Efek antifertilitas  fraksi  n-heksana,  fraksi kloroform dan fraksi metanol biji saga ( Abrus precatorius L.) dan biji pepaya ( Carica  papaya L.)  terhadap  tikus jantan  galur  wistar. BOPTN/DIPA UNEJ, 2(1): 1-13.
Nontamart  N,  W  Tongjaroebuangan,  R
Srisawat. 2013. The memory enhancing effects of The Extract from the Fruit Hull of Mangosteen
(Garciana manggostana L.) in Healthy
Adult Male Rats. International Proceedings  of  Chemical,  Biological and Enviromental Engineering . 55(1):117-121. Nurtiati H & T Widya. 2001. Pemanfaatan bioinsektisida ekstrak daun
Azadirachta  indica A.  Juss.  sebagai pengendali  hayati  ulat  daun  kubis Plutella xyclostella. J. MIPA , 6 (1). OMAFRA Factsheet Anatomy. Priya GK, Saravanam,  & Renuka C. 2012.
Medicinal Plants with Potential Antifertility  Activity-A  Review  Of Sixteen  Years  of  Herbal  Madicine Research (1994-2010).
Int.J.
PharmTech Res 4: 485-488.
Rekha  S  &  S  Chandrasekhara,  2014. Antifertility  Effect  of  Ziziphus  jujuba mill. World  Journal of  Pharmacy and Pharmaceutical Sciences . 2(1):8-9. Rustidja R & CJJ Richter. 2001. Pengantar Ilmu  Reproduksi  Ikan.  Universitas
Brawijaya. Malang.
Setiabudi  J.  2015.  Analisis  prioritas kebijakan  pemanfaatn  burung  hantu
(Tyto  alba )  sebagai  pengendalian hama  tikus  Sawah  yang  ramah lingkungan  di  kabupaten  Semarang.
Indonesian Journal  of  Conservation . Vol  4,  No  1,  ISSN:  2252-9195.  Hlm. 67-73.
Singleton  GR.  2003.  Impacts  of  Rodoents on  Rice  Production  in  Asia. IRRI Discussion Paper Series
No.43.
International  Rice  Research  Institute.
Los Banos. Philipines.
Suryawanshi  JAS.  2011.  Neem-Natural Contraceptive  for  Male  and  Female- an Overview . Int.J. Biomol & Biomed . 1: 1-6.
Susetyarini  E.  2013.  Aktivitas  tanin  daun beluntas terhadap konsentrasi spermatozoa tikus putih jantan. Jurnal GAMMA. ISSN: 2086-3071. Hlm. 14- 20.
Upa  FT,  Saroyo  &  YK.  Deidy.  2017. Komposisi  pakan  tikus  ekor  putih ( Maxomys  hellwandii )  di  kandang. Jurnal Ilmiah Sains. 17(1): 1-6. Wijayanti  DN,  S  Muslichah,  &  E Puspitasari.  2016.  Pengaruh  ekstsrak metanol  biji  pepaya  tua  dan  ekstrak metanol  biji  pepaya  muda  (carica papaya  l.)  terhadap  kualitas  dan kuantitas  spermatozoa  tikus  putih jantan  (rattus  norvegicus). Jurnal Pustaka Kesehatan 4(3) :495-500.
Wiryawan  I  &  A  Ida.  2009.  Ekstrak  Biji Klabet  Menurunkan  Jumlah  Sel Spermatozoa pada Kelinci. Jurnal Veteriner , 10 (2) : 71-76.