## EFEK PAPARAN PROFILIN Toxoplasma gondii TERHADAP KADAR CHEMERIN
PADA TIKUS Rattus norvegicus STRAIN WISTAR
Agustin Iskandar*  , Dearikha Karina Mayashita**, Fathi Nabila Alim**

## Abstrak
Obesitas merupakan masalah kesehatan masyarakat global yang terkait dengan morbiditas, mortalitas, dan  keterbatasan  fungsional.    Di  saat  yang  bersamaan,  prevalensi  penyakit  menular  karena  infeksi  juga menunjukkan adanya peningkatan. Hal ini menimbulkan dugaan adanya keterkaitan antara infeksi dengan obesitas. Profilin merupakan bagian dari parasit Toxoplsma gondii yang dapat berikatan dengan TLR-11 dan memicu ekspresi IL-12 serta sitokin proinflamasi lain, yang diduga dapat menyebabkan obesitas. Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui  efek  paparan  profilin T.  gondii terhadap  kadar  chemerin  sebagai  adipositokin proinflamasi.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratorium  dengan  rancangan true eksperimental-post test only control group design, menggunakan tikus ( Rattus norvegicus ) strain Wistar, yang diberi dua perlakuan yakni diet normal dan diet hiperkalori. Kemudian diinjeksi profilin dosis 15, 30, 45 mcg/mL. Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaan kadar chemerin yang signifikan (p = 0,038; ). Hasil uji post- hoc Tukey  didapatkan perbedaan bermakna pada kelompok profilin dengan dosis 30 mcg/mL yang diberi diet hiperkalori. Uji kolerasi dan regresi linier pada kelompok diet normal menunjukkan hubungan yang kuat antara dosis profilin dengan kadar chemerin (r = 0,600) dan R 2 = 0,360 yang dapat diartikan bahwa ada pengaruh dosis profilin pada kenaikan kadar chemerin yaitu sebesar 36%. Pada kelompok diet hiperkalori didapatkan hubungan sangat kuat antara dosis profilin dengan kadar chemerin (r = 0,078) dan R 2 = 0,609 yang berarti bahwa pengaruh dosis profilin pada kenaikan kadar chemerin sebesar 60,9%. Kesimpulan penelitian ini adalah paparan profilin Toxoplasma gondii menyebabkan peningkatan kadar chemerin pada tikus strain Wistar.
Kata kunci: chemerin, obesitas, profilin, Toxoplasma gondii .
THE EFFECT OF Toxoplasma gondii ’s PROFILIN EXPOSURE ON CHEMERIN LEVEL IN

## Rattus norvegicus STRAIN WISTAR

## Abstract
Obesity is a global public health problem related with morbidity, mortality and functional limitations. At the  same  time,  the  prevalence  of  infectious  diseases  due  to  infection  also  showed  an  increase.  These suggested that there is a link between obesity and infection. Profilin is a part of the Toxoplsma gondii parasite which  can  bind  to  TLR-11  and  trigger  the  expression  of  IL-12  and  other  proinflammatory  cytokines,  and allegedly  can  cause  obesity.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of  exposure  to  profilin T.  gondii on chemerin levels as proinflammatory adipocytokines. This research is a laboratory experimental study with a true experimental post-test only control group design, using rats ( Rattus norvegicus ) Wistar strain, which were given two treatments namely a normal diet and a hypercalory diet, then injection of profilin at a dose of 15, 30, 45 mcg/mL. The results showed a significant difference in chemerin levels (p = 0.038;). The Tukey post-hoc test found significant differences in the profilin group with a dose of 30 mcg/mL given a hypercalory diet. The correlation and linear regression tests in the normal diet group showed a strong relationship between the dose of profilin and the chemerin level (r = 0.600) and R 2 = 0.360 which can be interpreted that the effect of the dose of profilin on the increase in chemerin levels was 36%. In the hypercalorie diet group, there was a very strong association between the dose of profilin and the chemerin  level  (r = 0.078) and R 2 = 0.609 which can be interpreted that the effect of dose profilin on the increase in chemerine levels was 60.9%. The conclusion of this study is that exposure to Toxoplasma gondii profilin caused an increase in chemerin levels in Wistar rats.
Keywords: chemerin, obesity, profilin, Toxoplasma gondii .
*Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya ** Program Studi S1 Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
 E-mail: agustin_almi@yahoo.co.id
Pendahuluan Obesitas merupakan masalah kesehatan  masyarakat  global  yang  terkait dengan morbiditas, mortalitas, dan keterbatasan  fungsional,  tetapi  memiliki pilihan yang terbatas untuk mengintervensinya. Dalam upaya menemukan langkah baru dalam pencegahan  dan  intervensi,  dibutuhkan penelitian lebih lanjut mengenai patogenesis dari obesitas. Secara konsisten, meningkatnya  penanda  inflamasi  telah dilaporkan memiliki korelasi dengan obesitas.
Namun,  masih  belum  dapat  diketahui bagaimana  hubungan  sebab-akibat  antara keduanya.
Berdasarkan  hasil  Riskesdas  pada tahun  2013,  prevalensi  penduduk  laki-laki dewasa obesitas sebanyak 19,7 persen, lebih tinggi  dari  tahun  2007  (13,9%)  dan  tahun 2010 (7,8%), sedangkan prevalensi obesitas perempuan dewasa (> 18 tahun) 32,9 persen, naik 18,1 persen dari tahun 2007 (13,9%) dan 17,5  persen  dari  tahun  2010  (15,5%). Peningkatan  yang  signifikan  ini  menjadi momok  tersendiri  bagi  bangsa  indonesia, mengingat obesitas dapat memicu sejumlah penyakit kronis yang seringkali berujung pada kematian. 1
Di  saat  yang  bersamaan,  prevalensi penyakit  menular  karena  infeksi  juga menunjukkan  adanya  peningkatan.  Konsep mengenai obesitas yang dipicu oleh penyakit infeksi pertama kali disampaikan oleh Lyons pada  tahun  1982  namun  hanya  mendapat sedikit  sorotan. 2 Kemudian  Backhed et  al . (2004), melaporkan bahwa flora normal usus meregulasi  penyimpanan  lemak. 3 Pada penelitian  lain  didapatkan  korelasi  antara perubahan  komposisi  normal  flora  dengan kejadian  obesitas. 4 Dalam  bidang  parasit, infeksi  yang  diduga  dapat  menyebabkan obesitas adalah Toxoplasma gondii . 5
Toxoplasmosis  merupakan  penyakit zoonosis,  yakni  penyakit  pada  hewan  yang
dapat  ditularkan  ke  manusia.  Penderita toxoplasmosis  sering  tidak  memperlihatkan suatu gejala klinis yang jelas sehingga dalam menentukan diagnosis penyakit toxoplasmosis  sering  terabaikan  dalam praktek dokter sehari-hari. 6 Adanya hubungan antara serologi positif T. gondii dan obesitas.  Individu  dengan  serologi  positif T. gondii memiliki  dua  kali  kemungkinan mengalami  obese  dibandingkan  dengan individu  seronegatif.  Secara  signifikan, individu  dengan  obese  juga memiliki    kadar antibodi  IgG  yang  lebih  tinggi  dibandingkan individu nonobese. 5 Hubungan  antara T.  gondii dengan disregulasi  jaringan  adiposa  sudah  banyak diteliti.  Profilin  adalah  protein  yang  dimiliki oleh T. gondii yang dapat berikatan dengan TLR-11 inang kemudian memicu ekspresi IL- 12  dan  sitokin  proinflamasi  lain.  Penelitian sebelumnya menunjukkan adanya perbedaan kadar profilin yang bermakna antara individu obese dengan individu yang sehat. Penelitian ini  juga  menyebutkan  bahwa  peningkatan kadar  profilin  pada  individu  obese berhubungan  dengan  peningkatan  IL-6  dan IL-12 sebagai sitokin inflamasi pada individu obese,  walaupun  dengan  korelasi  yang lemah. 6 Penelitian sebelumnya juga melaporkan adanya perbedaan kadar profilin
T.  gondii ,  adiponektin  dan  omentin  yang bermakna antara individu obese yang disertai sindroma  metabolik  dengan  individu  obese tanpa  sindroma  metabolik,  tetapi  tidak ditemukan  perbedaan  kadar  insulin  dan indeks resitensi insulin yang bermakna pada keduanya. 7
Chemerin  adalah  protein  kemoreaktan yang berfungsi sebagai ligan untuk reseptor chemokin-like  receptor  1 (CMKLR1)  dan memiliki  peran  dalam  kekebalan  adaptif. Chemerin  disekresikan  sebagai  protein  aktif 18  kDa  dan  mengalami  proteolisis ekstraselular pada serin protease C-terminal untuk  menghasilkan  16  kDa  chemerin  aktif. Konsentrasi  chemerin  aktif  dalam  plasma
manusia  sebanyak  3,0  nmol/L  sedangkan pada  serum  manusia  4,4  nmol.  Ekspresi CMKLR1  dan  sekresi  chemerin  turut  serta dalam regulasi adipogenesis. 8 Chemerin dan CMKLR1  diekspresikan  dalam  jumlah besar pada jaringan adiposit serta ekspresi tersebut megalami up-regulation pada  jaringan adiposa Pssammomys obesus , model hewan coba  obesitas  dan  diabetes  tipe  2,  yang mengalami  obesitas. 9 Akan  tetapi  efek paparan  profilin T.  gondii terhadap  kadar chemerin belum diketahui.  Berdasarkan latar belakang  tersebut,  diperlukan  penelitian untuk  mengetahui  efek  paparan  profilin T. gondii terhadap  kadar  chemerin  pada  tikus
( Rattus norvegicus ) strain Wistar.

## Bahan dan Metode
Desain Penelitian Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental laboratorium dengan rancangan true  eksperimental-post  test  only control  group  design yang  bertujuan  untuk mengetahui  dan  membandingkan  beberapa kelompok perlakuan. Penelitian ini menggunakan tikus ( Rattus  norvegicus ) strain Wistar pada perlakuan satu dan pada perlakuan  dua  dibuat  model  obese  dengan diet  hiperkalori.  Penelitian  dilakukan  di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya pada bulan februari sampai juli 2017. Penelitian ini telah mendapat  persetujuan  dari  Komisi  Etik
Fakultas  Kedokteran  Universitas  Brawijaya dengan nomor surat 134/EC/KEPK/04/2017.

## Sampel Penelitian
Sampel  penelitian  berjumlah  35  ekor tikus  Wistar jantan  berusia  3-5  bulan,  berat antara  50-100  gram  yang  diadaptasikan selama    2  minggu  di  Laboratorium  Parasit FKUB  dengan  pemberian  diet  standar sebelum  diberi  perlakuan.  Selanjutnya dilakukan  skrining  dengan  kriteria  inklusi sebagai berikut:  a). Tikus strain Wistar sehat,
b).  Jantan,  umur  3-5  bulan,  dan  c).    Berat antara 50-100 gram.
Kelompok Perlakuan Penelitian ini menggunakan 3 perlakuan, yang terdiri dari kelompok kontrol kelompok perlakuan 1 dengan dosis paparan profilin  15,  30,  45  mcg/mL  serta  kelompok perlakuan  2  dengan  diberi  hiperkalori  diet dengan dosis paparan profilin sebesar 15, 30, 45 mcg/mL Tiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus.  Pada  perlakuan  satu,  model  obese dibuat dengan cara pemberian diet hiperkalori menurut Nascimento et al ., 2008. 10

## Variabel Penelitian
Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini adalah pemberian profilin Toxoplasma gondii . Variabel  tergantung  dalam  penelitian  ini adalah  kadar  chemerin  pada  tikus strain Wistar.

## Pemeliharaan  Hewan  Coba  dan  Injeksi Profilin
Hewan  percobaan  dipelihara  dalam kandang  yang  dibersihkan  setiap  hari. Kandang  diletakkan  dalam  ruangan  yang berventilasi  cukup  dengan  suhu  ruangan berkisar 28-32 °C. Makanan dan  minuman diberikan  sepuasnya  ( ad  libitum )  dalam bentuk  diet  standar.  Pada  hari  pertama, keenam  kelompok  perlakuan  diberi  injeksi profilin
Toxoplasma gondii secara intraperitoneal  dengan  dosis  15,  30,  45 mcg/mL.  Tiga  minggu  kemudian  dilakukan injeksi  profilin  yang  kedua.  Selama pemeliharaan dari hari ke-1, kelompok kontrol dan  perlakuan  1  (P1)  diberi  diet  standar, sedangkan  kelompok  perlakuan  2  (P2) diberikan  pakan  diet  hiperkalori.  Selama  2 minggu sekali, berat badan tikus pada semua kelompok dihitung dan dicatat.
Pengukuran Kadar Chemerin dengan Metode ELISA Berikutnya, tikus   dibius menggunakan ketamin  50  mg  sebanyak  0,4 – 0,5  ml. Pembedahan tikus dilakukan untuk mengambil  sampel  serum  darah.  Darah disentrifugasi  dengan  kecepatan  3000  rpm selama 10 menit. kemudian diambil serumnya untuk  dimasukkan  ke  dalam  tabung eppendorf dan diisimpan dalam suhu -20 o C. Pengukuran  kadar  chemerin  dilakukan dengan  metode  ELISA  menggunakan  Kit Chemerin.

## Hasil
Serum  dikumpulkan  sesuai  kelompok perlakuan dan diukur menggunakan Elisa Kit Chemerin.  Tabel  hasil  pengukuran  rerata berat badan dari ketujuh kelompok perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1.
Hipotesis  awal  (H0)  adalah  tidak terdapat  pengaruh  yang  signifikan  antara pemberian  dosis  paparan  profilin  dengan kadar  chemerin.    Hipotesis  alternatif  (H1) yang diajukan yakni terdapat pengaruh yang signifikan  antara  pemberian  dosis  paparan
profilin  dengan  kadar  chemerin.  Berdasar hasil  uji  ANOVA  didapatkan  nilai  yang signifikan  yakni  p  =  0,038  α =  0,05, sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa  hipotesis H0  ditolak  dan  H1  diterima.  Maka,  terdapat perbedaan signifikan antara pemberian dosis paparan profilin dengan kadar chemerin pada sedikitnya dua kelompok perlakuan.
Hasil  uji post  hoc menunjukkan  nilai signifikansi  0,035  pada  perlakuan  kontrol yang  dibandingkan  dengan  kelompok paparan  profilin  dengan  dosis  30  mcg/mL yang  diberi  diet  hiperkalori    menunjukkan adanya perbedaan bermakna.
Hasil uji korelasi Pearson pada kelompok perlakuan yang hanya diberi paparan profilin saja  menunjukkan  nilai  korelasi  0,600  yang dapat diartikan terdapat hubungan yang kuat antara  paparan  dosis  profilin  dengan perubahan  kadar  chemerin.  Nilai  positif  (+) menunjukkan  bahwa  semakin  besar  dosis profilin yang dipaparkan maka semakin tinggi kadar chemerin. Nilai signifikansi menunjukkan  0,018  (p  <  0.05)  maka  dapat dinyatakan  bahwa  terdapat  hubungan bermakna  antara  perbedaan  dosis  paparan profilin dengan kadar chemerin.
Tabel 1. Rerata dan delta berat badan tikus. Kelompok Berat Badan (g) Rerata Delta Kontrol 183 90,4 Profilin 15 mcg/mL 189,72 83,40 Profilin 30 mcg/mL 184,32 113,20 Profilin 45 mcg/mL 174,56 70,60 Profilin 15 mcg/mL + Diet Hiperkalori 234,44 159,4 Profilin 30 mcg/mL + Diet Hiperkalori 222,2 149,60 Profilin 45 mcg/mL + Diet Hiperkalori 222,08 146,2 Tabel 2. Pengukuran rerata kadar chemerin. Kelompok  Keterangan Rerata Kadar Chemerin (pg/mL) 1 Kontrol 42,76 2 Profilin 15 mcg/mL 47,47 3 Profilin 30 mcg/mL 60,20 4 Profilin 45 mcg/mL 53,07 5 Profilin 15 mcg/mL + Diet Hiperkalori 53,54 6 Profilin 30 mcg/mL + Diet Hiperkalori 64,25 7 Profilin 45 mcg/mL + Diet Hiperkalori 58,01
Hasil  uji  korelasi  pada  kelompok perlakuan  yang  diberi  paparan  profilin  dan diet  hiperkalori  menunjukkan  nilai  korelasi
0,780  yang  berarti  ada  hubungan  yang sangat kuat antara pemberian diet hiperkalori disertai dengan paparan dosis profilin dengan perubahan  kadar  chemerin.  Nilai  positif  (+) menunjukkan  bahwa  semakin  besar  dosis profilin  yang  dipaparkan  disertai  pemberian diet  kalori  maka  kadar  chemerin  semakin tinggi.
Berdasarkan model summary kelompok perlakuan  satu,  didapatkan  nilai  koefisien korelasi  R  =  0,600.  Nilai  ini  dapat diintrepretasikan  bahwa  ada  hubungan  kuat antara dosis profilin dengan kadar chemerin yang  bersifat  positif.  Didapatkan  nilai  R 2 = 0,360 yang dapat diartikan bahwa pengaruh dosis  paparan  profilin  pada  kenaikan  kadar chemerin sebesar 36%. Sedangkan sisanya, 64%  dipengaruhi  oleh  faktor  lain  diluar pemberian dosis.
Berdasarkan model summary kelompok perlakuan  dua,  didapatkan  nilai  koefisien korelasi  R  =  0,780.  Nilai  ini  dapat diintrepretasikan  bahwa  ada  hubungan sangat  kuat  antara  dosis  profilin  serta pemberian  diet  hiperkalori  dengan  kadar chemerin  yang  bersifat  positif.  Didapatkan nilai R 2 = 0,609 yang dapat diartikan bahwa pengaruh  dosis  paparan  profilin  pada kenaikan  kadar  chemerin  sebesar  60,9%. Sedangkan sisanya, 39,1% dipengaruhi oleh faktor  lain  diluar  pemberian  dosis  dan  diet hiperkalori.

## Pembahasan
Toxoplasma  gondii dikenal  sebagai parasit  patogen  yang  mampu  menginfeksi mamalia  pada  sel  yang  berinti. 11 Bagian profilin  dari T.  gondii dapat  mengaktifasi TLRs dan menyebabkan infeksi. 6 Chemerin adalah faktor imunomudulator atau  adipositokin  yang  disekresi  secara predominan oleh jaringan adipose dan kulit.
Selain  berperan  dalam  homeostasis  energi, adiposit  juga  mensekresi  sitokin  yang berperan dalam signaling antar sel dan dalam diferensiasi sel.  Chemerin juga terlibat dalam signaling autokrin/parakrin  pada  proses diferensiasi adiposit, serta stimulasi lipolisis. 12 Chemerin  dikode  oleh tazarotene- induced  gene2 (TIG2)  yang  juga  dikenal sebagai retinois acid receptor responder gene 2 (RARRES2). Meskipun hepar dan jaringan adiposa  merupakan  tempat  utama  produksi chemerin,  akan  tetapi  dilaporkan  beberapa jaringan  lain  juga  memproduksinya  seperti kelenjar  adrenal,  plasenta,  pankreas,  paru dan kulit. 13
Profilin dari T. gondii berikatan dengan TLR-11 yang selanjutnya akan meningkatkan sitokin proinflamasi  IL-12. Kemudian sitokin proinflamasi IL-12 akan merangsang sel NK dan sel T untuk mensekresi sel fagostitik dan sel inflamasi lainnya. 14 Sel NK tersebut juga mengekspresikan chemokin-like  receptor  1 yang  merupakan  reseptor  dari  chemerin. Meningkatnya sitokin proinflamasi seperti IL- 12  merupakan  pertanda  awal  terjadinya disfungsi  adiposit. 6 Keadaan  inflamasi adiposit oleh sitokin proinflamasi inilah yang memicu sekresi dari chemerin. Secara umum, produksi  chemerin  diregulasi  oleh  berbagai mediator  inflamatori  dan  metabolik  yang secara umum terdiri dari: a). Agonis reseptor nuklear  (retinoid, vitamin D, gluko kortikoid); b). Faktor-faktor yang berperan dalam proses metabolik (asam lemak, insulin, glukosa); dan c).  Mediator  imunomodulator  (sitokin inflamasi akut dan kronis, lipo polisakarida). Paparan profilin T. gondii akan meningkatkan sekresi  chemerin  melalui  mekanisme inflamasi oleh aktivasi TLRs. 13,15
Berdasarkan data pengukuran chemerin pada  Tabel  5  dapat  diketahui  bahwa  kadar chemerin  mengalami  peningkatan  pada pemberian  dosis  profilin  15,  30,  dan  45 mcg/mL pada perlakuan 1 maupun perlakuan 2.  Pada  perlakuan  1,  didapatkan  kadar chemerin  tertinggi  pada  dosis  30  mcg/dL
kemudian  diikuti  oleh  pemberian  dosis  45 mcg/dL  dan  kadar  terendah  pada  dosis  15 mcg/dL.
Pada perlakuan 2, paparan profilin yang disertai  dengan  diet  hiperkalori  juga meningkatkan  kadar  chemerin.  Didapatkan kadar  chemerin  tertinggi  pada  dosis  30 mcg/dL  kemudian  diikuti  oleh  pemberian dosis  45  mcg/dL  dan  kadar  terendah  pada dosis  15  mcg/dL.  Hasil  penelitian  ini menyatakan  bahwa  paparan  profilin mempunyai  efek  meningkatkan  kadar chemerin pada perlakuan 1 dan perlakuan 2.
Hasil  analisis post  hoc menunjukkan perbedaan yang bermakna (p < 0,05), hanya pada perbandingan antara kelompok kontrol dengan  kelompok  profilin  yang  diberi  diet hiperkalori  dengan  nilai  signifikansi  sebesar 0,035. Chemerin sebagai adipositokin diduga memiliki  peran  dalam  patogenesis  obesitas karena  berkorelasi  dengan  beberapa penanda  sindrom  metabolik,  termasuk  IMT, leptin,  akumulasi  lemak  visceral  abdomen dan obesitas. 9,16
Pemberian  diet  hiperkalori  selama  14 minggu  dapat  meningkatkan  obesitas  pada tikus  Wistar  dan  menunjukkan  beberapa karakteristik  yang  umumnya  terkait  dengan obesitas  manusia,  seperti  tekanan  arterial tinggi,  resistensi  insulin,  hiperglikemia, hiperinsulinemia, hiperleptinemia dan dislipidemia. 10 Ada  korelasi  yang  positif  antara peningkatan kadar serum dengan keseluruhan  regulasi  adipogenesis  dan peningkatan  penanda  inflamasi  pada  model hewan obesitas  dan obesitas yang diinduksi diet. 17 Sehingga peningkatan chemerin pada perlakuan  ini  dipengaruhi  oleh  dua  faktor yakni  oleh  infeksi  profilin T.  gondii dan  diet hiperkalori.  Kedua  faktor  tersebut  saling berkaitan dengan kejadian obese pada tikus, namun  masih  belum  dapat  dijelaskan bagaimana  mekanisme  keduanya  hingga menyebabkan  kejadian  obese.  Sehingga belum  dapat  dikonfirmasi  faktor  yang  lebih
dominan  berperan  terhadap  peningkatan kadar chemerin.
Pada  perlakuan  satu  tidak  didapatkan perbedaan  yang  bermakna,  hal  ini  dapat disebabkan  oleh  bias  pengukuran  dan aktivasi  dari  kadar  chemerin.  Chemerin disekresikan  sebagai  proprotein  aktif  18  kD yang  diproses  menjadi  bentuk  16  kDa  aktif yang  bertanggung  jawab  pada  aktivitas pengikatan  reseptor  dan  fisiologis. 15 Keterbatasan  pengukuran  menggunakan ELISA chemerin adalah mendeteksi chemerin dalam bentuk prochemerin dan bioaktif. Maka untuk  mendeteksi  chemerin  dalam  bentuk bioaktif  dilakukan Tango  Assay dengan menggunakan CMKLR-1  Tango  Assay , didapatkan  kadar  protein  chemerin  serum total dan tingkat chemerin bioaktif kira-kira 2 kali lipat lebih tinggi pada model tikus obesitas dibandingkan dengan tikus kontrol. Selanjutnya,  konsentrasi  chemerin  bioaktif lebih tinggi 3 kali lipat dibanding kadar protein chemerin  total  dalam  serum. 18 Studi  lain melaporkan  bahwa  terdapat  dua  macam aktivasi chemerin yakni dengan memproduksi nabati  bioaktif  pertama  dengan  aktivitas sangat  rendah  dan  memproduksi  chemerin bioaktif kedua yang diaktifkan sepenuhnya. 19 Peningkatan  kadar  chemerin  pada infeksi T.  gondii dapat  mengganggu metabolisme lemak dan kembali mencetuskan inflamasi yang mengakibatkan keadaan  obese.  Pada  akhirnya  juga  akan mengganggu  mekanisme  glukosa uptake pada  tubuh  sehingga  memcetuskan resistensi insulin. 18
Pada  penelitian  ini  kadar  chemerin ditentukan  menggunakan  sampel  serum sebagai  indikator  tunggal.  Penelitian  oleh Weng  C, dkk (2017),  terdapat  perbedaan kadar chemerin pada serum, jaringan adiposa dan  arteri  pada hewan coba yang diberikan diet  tinggi  lemak. 20 Peningkatan  chemerin berkolerasi  secara  positif  hanya  pada pengukuran  jaringan  adiposa  dan  arteri,
sedangkan  pada  serum  hasilnya  tidak signifikan.
Pada  penelitian  ini  memiliki  satu kelompok  kontrol  dan  dua  perlakuan  yakni perlakuan satu hanya diberi infeksi profilin T. gondii dan perlakuan dua yang diberi infeksi profilin  dan  diet  hiperkalori.  Hal  ini menyebabkan  terjadinya  bias  kejadian obesitas antara perlakuan satu dan perlakuan dua.  Belum  dapat  dipastikan,  peningkatan chemerin  pada  keadaan  obese  disebabkan oleh infeksi profilin T. gondii atau akibat dari diet  hiperkalori  yang  diberikan.  Sehingga dibutuhkan  penelitian  lebih  lanjut  dengan menambahkan  kelompok  perlakuan  yang hanya  diberi  diet  hiperkalori  saja  untuk mengkonfirmasi  hubungan  efek  paparan profilin T.  gondii terhadap  peningkatan chemerin.
T.  gondii dapat  diisolasi  menggunakan metode  inokulasi  hewan  laboratorium  dan kultur  jaringan  pasien  dengan  sekresi, ekskresi, cairan tubuh, pengambilan jaringan melalui biopsi, dan jaringan lesi makroskopik yang  diambil  dari  pasien post  mortem . Spesimen  tersebut  tidak  hanya  digunakan untuk  isolasi  saja  melainkan  dapat  dipakai untuk mendeteksi DNA T. gondii menggunakan  teknik  PCR. 21 Diharapkan apabila  sarana  dan  prasarana  laboratorium telah  memenuhi,  agar  dilakukan  inokulasi hewan  coba  menggunakan Toxoplasma gondii dengan  komponennya  yang  lengkap.
Sehingga  dapat  menjelaskan  mekanisme infeksi T.  gondii terhadap  kadar  chemerin pada host.

## Kesimpulan
Paparan  profilin Toxoplasma  gondii meningkatkan  kadar  chemerin  pada  tikus ( Rattus  norvegicus) strain  Wistar  baik  pada pemberien  diet  normal  hiperkalori.  Injeksi profilin  30  mcg/dL  dan  diet  hiperkalori meningkatkan kadar chemerin paling optimal
dibandingkan  dengan  dosis  15  dan  30 mcg/dL.

## Saran
Penelitian  selanjutnya  menggunakan chemerin  di  jaringan  lemak  sehingga  dapat menggambarkan  efek  pemberian  profilin terhadap  inflamasi  adiposit.  Diperlukan  pula penelitian lebih lanjut dengan menginokulasikan  parasit T.gondii secara utuh  sehingga  dapat diketahui  dengan jelas kaitan infeksi T. gondii dengan obesitas.

## Daftar Pustaka
1. (Riskesdas)  Riset  Kesehatan  Dasar.
Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan  Kementerian  RI  tahun. (Online). 2013. http://www.depkes.go.id/resources/downl oad/general/Hasil%20Riskesdas%20201 3.pdf . Diakses: 2 Oktober 2016.
2. Lyons  MJ,  Faust  IM,  Hemmes  RB, Buskirk,DR,  Hirsch  J  &  Zabriskie  JB.  A Virally Induced Obesity Syndrome in Mice.
Science . 1982; 216:82 – 85.
3. Backhed F, Ding H, Wang T, Hooper LV, et  al.  The  Gut  Microbiota  as  An Environmental Factor that Regulates Fat
Storage. Proceedings  of  the  National Academy of Science of United States of America . 2014; 01(44):15718-15723.
4. Ley RE et al. Obesity Alters Gut Microbial
Ecology. Proceedings  of  the  National Academy of Sciences of the United States of America . 2005; 102(31):11070 – 11075. 5. Reeves  GM,  Mazaheri  S,  Snitker  S,
Langenberg P, Giegling I, Hartmann AM,
et al .  A Positive Association between T. gondii Seropositivity  and  Obesity. Front Public Health . 2013; 1:73.
6. Iskandar  A, et al. The Level of Profilin and Interleukin-12 in Obese Patients Infected by Toxoplasma  gondii :  A  Correlation Study  Between Toxoplasma  gondii
Infection  and  Obesity. International Journal  of  Infectious  Diseases .  2011; 45:361. 7. Iskandar  A,  Indra  MR,  Satuman,  Firani NK,  Wihastuti  TA.  The  Levels  of Toxoplasma gondii Profilin and Adiponectin in Obese Patients Complicated  with  or  without  Metabolic Syndrome  as  Compared  to  Non-Obese Patients. Asian Pacific Journal of Tropical Disease . 2016; 6(4):265-268.
8. Iskandar A., et al . The Level of Chemerin and Adipocyte Fatty Acid Binding Protein in Toxoplasma gondii Seropositive Obese Individuals. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Disease. 2017; 7(2).
9. Bozaoglu K, Bolton K, McMillan J, Zimmet P, Jowett J,  Collier G, Walder K, Segal D.
Chemerin  Is  a  Novel  Adipokine Associated  with  Obesity  and  Metabolic Syndrome. E ndocrinology. 2007; 148(10): 4687 – 4694.
10. Nascimento  AF, et  al .  A  Hypercaloric Pellet-Diet  Cycle  Induces  Obesity  and Comorbities  in  Wistar  Rats. Arq  Bras
Endocrinol Metabol. 2008; 52(6):968-974. 11. Olgica D and Vladimir M. Murine Model of Drug-induced Reactivation of Toxoplasma gondii . Acta Protozool . 2001; 40:99 – 106.
12. Li  Y,  Shi  B,  Li  S.  Association  between Serum  Chemerin  Concentrations  and Clinical  Indices  in  Obesity  or  Metabolic Syndrome: A Meta-Analysis. PLoS ONE . 2014; 9(12):e11391. 13. Mattern  A,  Zellmann  T,  Beck-sickinger AG. Processing, Signaling, and Physiological  Function  of  Chemerin. International  Union  of  Biochemistry  and Molecular  Biology  Journal. 2014;  66 (1):19-26.
14. Yarovinsky  F.  Innate  Immunity  to
Toxoplasma  gondii Infection. Nature Reviews Immunology. 2014; 109 – 121. 15. Zabel  BA,  Kwitnewski  M,  Banas  M, Zabieglo  K., et  al. Chemerin  Regulation and  Role  in  Host  Defense. American Journal  of  Clinical  and  Experimental Immunology . 2014; 3(1):1-19.
16. Shin HY, Lee DC, Chu SH, Jeon JY, Lee MK, Im JA, Lee JW. Chemerin Levels are Positively  Correlated  with  Abdominal Visceral Fat Accumulation. Clin Endocrinol .  2012;  77(1):47-50.  doi: 10.1111/j.1365-2265.2011.04217.x. 17. Rourke JL, Dranse HJ, Sinal CJ. Towards An Integrative Approach to Understanding the  Role  of  Chemerin  in  Human  Health and Disease. Obes Rev . 2013; 14(3):245- 62. doi: 10.1111/obr.12009.
18. Ernst  MC,  Sinal  CJ.  Chemerin:  at  the Crossroads of Inflammation and Obesity. Trends in Endocrinology and Metabolism.
2010; 21(11):660-667.
19. Du  XY,  Zabel  BA,  Myles  T, et  al . Regulation  of  Chemerin  Bioactivity  by Plasma Carboxypeptidase N, Carboxypeptidase B (Activated Thrombin- Activable  Fibrinolysis  Inhibitor),  and
Platelets. J  Biol  Chem .  2009;  284:751 – 758.
20. Weng  C,  Shen  Z,  Li  X , et  al.  Effects  of Chemerin/CMKLR1  in  Obesity-Induced Hypertension and Potential Mechanism. American Journal of Translational Research . 2017; 9 (6):3096 – 3104.
21. Hill  D,  JP  Dubey. Toxoplasma  gondii :
Transmission, Diagnosis and Prevention. Clinical Microbiology and Infection. 2002; 8(10):634 – 640.