AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI N-HEKSAN, ETIL ASETAT DAN AIR EKSTRAK ETANOL DAUN PARIJOTO ( Medinilla speciosa Blume) TERHADAP Propionibacterium acnes DAN Staphylococcus epidermidis
Lilis Sugiarti 1 , Dieta Maudy Andriyani 2 , Mera Putri Pratitis 3 , Ratna Setyani 4 1,2,3,4 Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Cendekia Utama Kudus Email: lilis_suwarno@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Prevalensi jerawat pada usia remaja (15-18 tahun) mencapai 80-85%. Jerawat merupakan salah satu penyakit kulit autoinflamasi yang terkait dengan autoimmun. Kebutuhan akan pengembangan obat herbal  menjadi  salah  satu  solusi  untuk  mengatasi  jerawat.  Tanaman  herbal  di  Indonesia  telah menarik banyak perhatian karena telah banyak memecahkan permasalahan terkait dengan beberapa penyakit kulit yang disebabkan oleh autoimun. Salah satu tanaman herbal yang dipercaya berkhasiat obat oleh masyarakat di lereng Gunung Muria adalah tanaman parijoto ( Medinilla speciosa Blume). Tujuan penelitian adalah mengetahui aktivitas antibakteri dari beberapa fraksi ekstrak etanol daun parijoto  terhadap  bakteri  penyebab  jerawat  ( P.  acnes dan S.  epidermidis). Metode  penelitian dilakukan dengan menguji aktivitas antibakteri dari berbagai tingkat kepolaran fraksi ekstrak etanol daun parijoto terhadap bakteri P. acnes dan S. epidermidis. Ekstrak etanol daun parijoto difraksinasi bertingkat dengan menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat, dan air. Masing-masing fraksi yang diperoleh diidentifikasi fitokimia secara kualitatif, selanjutnya dibuat seri konsentrasi 100; 75; 50; 25;  12,5;  6,25  mg/mL  dengan  kontrol  negatif  (aquadest  steril  dan  DMSO)  dan  kontrol  positif (klindamisin  2  µg/1  mL)  dan  dilakukan  pengujian  terhadap  bakteri P.  acnes dan S.  epidermidis dengan metode difusi cakram. Hasil yang didapatkan dianalisis dengan menggunakan uji One Way Anova, korelasi da regresi. Fraksi n-heksan dan etil asetat  dapat menghambat aktivitas bakteri P. acnes dan S.  epidermidis mulai  konsentrasi  50  mg/mL  dan  semakin  membesar  seiring  dengan bertambahnya  konsentrasi.  Pada  fraksi  air  dapat  menghambat  aktivitas  bakteri P.  acnes mulai konsentrasi 25 mg/mL sedangkan pada S. epidermidis dimulai pada konsentrasi 12, 5 mg/mL. Hasil uji  korelasi  menunjukkan  hubungan  yang  yang  sangat  kuat  dengan  nilai Asymp  Sig  (2-  tailed) > 0,05  dengan  pengaruh  konsentrasi  ekstrak  terhadap  diameter  zona  hambat  sebesar 80,5  sampai 97,3% .  Fraksi  n-heksan,  etil  asetat,  dan  air  dari  ekstrak  etanol  daun  parijoto  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis dengan  aktivitas antibakteri tergolong lemah sampai sedang. Nilai KHM pada fraksi n-heksan dan etil asetat adalah pada konsentrasi 50 mg/mL, sedangkan pada fraksi air pada konsenstarasi 12,5 sampai 25 mg/mL. Pada fraksi n-heksan dan etil asetat aktivitas antibakterinya lebih sensitif terhadap Staphylococcus epidermidis dibandingkan terhadap Propionibacterium acnes , sedangkan pada fraksi air sebaliknya.
Kata  Kunci : Medinilla  speciosa Blume,  Fraksinasi, Propionibacterium  acnes,  Staphylococcus epidermidis .

## ABSTRACT
The prevalence of acne in adolescents (15-18 years) reaches 80-85%. Acne is an autoinflammatory skin disease associated with autoimmune. The need for the development of herbal medicines is one solution to deal with acne. Herbal plants in Indonesia have attracted a lot of attention because they
Cendekia Journal of Pharmacy STIKES Cendekia Utama Kudus P-ISSN 2559 – 2163          E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 4, No. 2, November 2020 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id
have  solved  many  problems  related  to  several  skin  diseases  caused  by  autoimmune.  One  of  the herbs that are believed to have medicinal properties by the people on the slopes of Mount Muria is the  parijoto  plant  (Medinilla  speciosa  Blume).  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the antibacterial  activity  of  several  ethanol  extract  fractions  of  parijoto  leaves  against  acne-causing bacteria  (P.  acnes  and  S.  epidermidis).  The  research  method  was  carried  out  by  testing  the antibacterial activity of various levels of polarity in the ethanol extract fraction of Parijoto leaves against P. acnes and S. epidermidis bacteria. Ethanol extract of fractionated parijoto leaves using n-hexane, ethyl acetate, and water solvents. Each fraction obtained was identified phytochemically qualitatively, then a concentration series of 100 was made; 75; 50; 25; 12.5; 6.25  mg / mL with negative  control  (sterile  aquadest  and  DMSO)  and  positi ve  control  (clindamycin  2  µg  / mL)  and testing of P. acnes and S. epidermidis bacteria by disk diffusion method. The results obtained were analyzed using the One Way Anova test, correlation and regression. The fraction of n-hexane and ethyl  acetate  can  inhibit  the  activity  of  P.  acnes  and  S.  epidermidis  bacteria  from  50  mg  /  mL concentration and get bigger as the concentration increases. In the water fraction it can inhibit the activity of P. acnes bacteria starting at a concentration of 25 mg / mL whereas in S. epidermidis it starts  at  a  concentration  of  12,  5  mg  /  mL.  Correlation  test  results  showed  a  very  strong relationship with the value of Asymp Sig (2- tailed)> 0.05 with the effect of extract concentration on the inhibition zone diameter of 80.5 to 97.3%. The fraction of  n-hexane, ethyl acetate, and water from ethanol extract of parijoto leaf has antibacterial activity against Propionibacterium acnes and Staphylococcus  epidermidis  with  antibacterial  activity  classified  as  weak  to  moderate.  The  MIC value in the n-hexane and ethyl acetate fractions was at a concentration of 50 mg / mL, whereas in the water fraction at concentrations 12.5 to 25 mg / mL. In the n-hexane and ethyl acetate fractions the  antibacterial  activity  is  more  sensitive  to  Staphylococcus  epidermidis  compared  to Propionibacterium acnes, whereas in the reverse water fraction.
Keywords :  Medinilla  speciosa  Blume,  Medinilla  speciosa  Blume  leaf’s  fraction,  Minimum Inhibitory Concentration, Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis.

## LATAR BELAKANG
Kulit merupakan bagian terluar dari tubuh yang terdiri atas 2 lapisan yaitu lapisan dermis  dan  epidermis  (Browns  &  Burns,  2005).  Kulit  memiliki  sifat  asam  dan  sensitif terhadap  kebanyakan  mikroorganisme.  Beberapa  mikroorganisme  yang  berkoloni  di  kulit memperoleh asupan makanan dari dalam kulit diantaranya yaitu asam amino, asam lemak, garam, urea dan air (Sari dkk., 2015). Hal tersebut menyebabkan mikroorganisme tumbuh dan berkembang sehingga terjadi infeksi kulit, salah satunya jerawat.
Jerawat  merupakan  gangguan  yang  sering  terjadi  pada  permukaan  kulit  wajah, leher,  dada  dan  punggung  (Sawarkar  dkk.,  2010).  Beberapa  faktor  penyebab  jerawat diantaranya faktor genetik, ras, musim, psikis, hormonal atau adanya infeksi bakteri, namun pada  umumnya  penyebab  timbulnya  jerawat  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri  (Meilina  & Hasanah,  2018).  Penyakit  infeksi  bakteri  ini  terjadi  karena  adanya  penyumbatan  pada kelenjar pilosebasea sehingga terjadi inflamasi yang diakibatkan oleh penyumbatan dalam saluran yang ada pada lapisan epidermis (Tranggono dan Latifah, 2007). Bakteri yang dapat menyebabkan  jerawat  yaitu Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis . Bakteri  tersebut  berperan  dalam  pembentukan  jerawat  dengan  ikut  serta  dalam  proses
fotogenesis yang menghasilkan lipase, yang bertugas untuk memecahkan asam lemak bebas yang terdapat dalam kulit (Mulyani dkk., 2017).
Prevalensi  paling  tinggi  penderita  jerawat  antara  80-85%  terjadi  pada  remaja  usia 15-18  tahun,  sebanyak  12%  pada  usia  lebih  dari  25  tahun,  dan  sebanyak  3%  pada  usia antara 35-44 tahun (Ramdani dan Sibero, 2015). Penyakit jerawat pada umumnya diobati dengan menggunakan antibiotik, akan tetapi penggunaan antibiotik dalam jangka panjang dapat  menyebabkan  resistensi  mikroba  (Mulyani  dkk.,  2017).  Oleh  karena  itu  diperlukan alternatif lain dengan memanfaatkan bahan alam yaitu tanaman parijoto.
Tanaman  parijoto  merupakan  tanaman  yang  tumbuh  di  daerah  pegunungan  salah satunya  di  lereng  Gunung  Muria  Kabupaten  Kudus,  Jawa  Tengah  pada  ketinggian  1602 meter  diatas  permukaan  laut  (Hanum  dkk.,  2017).  Menurut  penelitian  Sugiarti  dan Fitrianingsih  (2018)  ekstrak  etanol  daun  parijoto  dapat  menghambat  aktivitas  bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  aureus dimulai  pada  konsentrasi  6,25 mg/mL.  Hasil  penelitian  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  parijoto  berpotensi sebagai  antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri  penyebab  jerawat,  sehingga  perlu dikembangkan lebih lanjut dengan mencari fraksi teraktifnya.

## BAHAN METODE PENELITIAN

## Jenis penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  kuantitatif  dengan  menggunakan  metode eksperimental untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi teraktif dari ekstrak etanol daun parijoto ( Medinilla speciosa Blume) terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis .  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  dengan  variabel  bebas yang terdiri atas 6 konsentrasi (100,75,50,25, 12,5, 6,25 mg/mL) dan variabel terikat zona bening  yang  terbentuk  di  sekitar  cakram  yang  telah  berisi  ekstrak  yang  mengandung  zat aktif sebagai penghambat aktivitas bakteri uji. Percobaan yang dilakukan dalam penelitian ini direplikasi sebanyak 5 kali.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  peralatan  gelas,  jarum  ose,  bluetip, mikropipet, pipet tetes, kompor listrik, erlenmeyer, cawan petri, cawan porselen,  autoclaf, inkubator (Yenaco), oven (One Med), blender, Laminar Air Flow (LAF), hotplate magnetic stirer (WINA  Instrument  Type:208), Vortex ( Thermo  Sciencetific ),  spektofotometer  UV, timbangan  analitik  (Pioneer  dan Great  Scale ), Moisture  Balance ,  pinset,  bunsen,  korek, kain flanel, alumunium foil, dan ayakan mesh 40, corong pemisah, rotary evaporator (RE 100-Pro), Kertas Whatman No. 42.
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  daun  parijoto,  etanol  70%, aquadest, n-heksan, etil asetat, DMSO ( Dimethyl Sulfoxide ), Nutrient Borth , Nutrient Agar , HCl  pekat,  Magnesium,  FeCl 3 1%,  HCl  2N,  H 2 SO 4 ,  kapsul Clindamycin 150  mg, Propionibacterium acnes ATCC 27853 dan Staphylococcus epidermis ATCC 3126.

## Determinasi
Derterminasi  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengidentifikasi  tanaman  dengan menetapkan  ciri-ciri  makroskopis  dan  mencocokkan    morfologis  dari  tanaman  yang  akan
diteliti  terhadap  pustaka  yang  ada.  Identifikasi  tanaman  ini  dilakukan  di  Laboratorium Ekologi dan Biositematik, Fakultas Biologi Universitas Diponegoro, Semarang. Ekstraksi dan Fraksinasi Daun Parijoto
1. Maserasi
Serbuk  daun  parijoto  yang  telah  diperoleh  dimaserasi  dengan  menggunakan  etanol 70% dengan perbandingan 1:10. Maserasi dilakukan selama 24 jam dengan dilakukan remaserasi  sebanyak  3  kali.  Maserat  yang  didapatkan  disaring  dengan  menggunakan kain flanel dan ditampung dalam wadah kaca yang tidak tembus cahaya. Maserat yang diperoleh  dikumpulkan  dan  dipekatkan  dengan  menggunakan rotary  evaporator dengan suhu 40°C.
2. Fraksinasi Ekstrak etanol difraksinasi dengan pelarut bertingkat yaitu pelarut n-heksan, etil asetat, dan  air.  Ekstrak  etanol  sebanyak  20  gram  dilarutkan  dengan  sedikit  etanol  dan ditambahkan 100 mL aquadest, kemudian di masukkan kedalam corong pisah. Setelah itu ditambahkan pelarut n-heksan sebanyak 100  mL, digojok perlahan-lahan. Larutan yang  telah  tercampur,  ditunggu  beberapa  menit  sampai  larutan  memisah  dan  diambil fraksi n-heksan. Residu yang dihasilkan difraksinasi kembali dengan pelarut etil asetat. Pelarut  etil  asetat  ditambahkan  sebanyak  100  mL,  digojok  perlahan  dan  ditunggu sampai larutan memisah dan didapatkan fraksi etil asetat dan fraksi air serta dilakukan pengulangan sampai larutan bening (Nuari dkk., 2017). Ketiga fraksi yang dihasilkan dipekatkan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 40°C.

## Skrining fitokimia
1. Identifikasi  Flavonoid  :  Fraksi  daun  parijoto  ditimbang  masing-masing  sebanyak  0,5 gram dilarutkan dengan etanol dan ditambahkan 0,1 gram Mg dan 5 tetes HCl pekat. Apabila terbentuk warna jingga, maka positif mengandung flavonoid (Harborne, 1987).
2. Identifikasi Tanin : Fraksi daun parijoto ditimbang masing-masing sebanyak 0,5 gram dilarutkan dengan 10 mL aquadest, selanjutnya disaring dan difiltrat ditetesi dengan 3 tetes  FeCl 3 1%.  Apabila  terbentuk  warna  hijau  kehitaman,  maka  positif  mengandung tanin (Harborne, 1987).
3. Identifikasi  Saponin  :  Fraksi  daun  parijoto  ditimbang  masing-masing  sebanyak  0,5 gram dilarutkan dengan aquadest panas dan ditambah dengan HCl kemudian dikocok. Apabila  terbentuk  busa  yang  stabil,  maka  positif  mengandung  saponin  (Harborne, 1987).

## Pembuatan konsentrasi ekstrak
Pembuatan  larutan  induk  (konsentrasi  100  mg/mL)  yaitu  dengan  menimbang  500 mg masing-masing fraksi dan dilarutkan ke dalam 5 mL DMSO. Pembuatan konsentrasi 75 mg/mL dilakukan dengan menimbang masing-masing fraksi sebanyak 375 mg, dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dilarutkan dengan 5 mL DMSO. Konsentrasi 50 mg/mL dibuat dengan  mengambil  sebanyak    2,5  mL  dari  larutan  induk  (konsentrasi  100  mg/mL)  dan dilarutkan  dengan  2,5  mL  DMSO.  Pengenceran  bertingkat  dilakukan  sampai  konsentrasi 6,25 mg/mL. Masing-masing konsentrasi yang telah disiapkan digunakan untuk merendam cakram beberapa menit dan cakram ditiriskan dalam cawan petri steril hingga kering.

## Penyiapan Kontrol Negatif dan Kontrol Positif
Kontrol negatif yang digunakan pada penelitian ini yaitu DMSO dan aquadest steril serta  kontrol  positif  yaitu clindamycin .  Konsentrasi clindamycin yang  digunakan  yaitu 2
µg/mL  (Aida  dkk.,  2016),  kemudian  cakram  direndam  dan  ditiriskan  dalam  cawan  petri steril hingga kering.

## Uji terhadap Bakteri
Suspensi  bakteri  dengan  kepadatan  sel  setara  0,5  McFarland  yang  telah  disiapkan diambil  100  µL  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  steril  kemudian  ditambahkan nutrient agar , setelah itu digoyangkan membentuk angka delapan secara pelan-pelan, apabila media telah  memadat  maka  cakram  yang  telah  dijenuhkan  dengan  masing-masing  konsentrasi fraksi dan kontrol (positif dan negatif) dimasukkan ke dalam media dengan jarak yang telah ditentukan kemudian diinkubasi selama 18 jam pada suhu 37°C. Uji ini dilakukan sebanyak 5 kali pengulangan.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  diolah  dengan  menggunakan  perangkat  komputer software SPSS 16.0 ( Statistic Program for Social Science ) menggunakan uji One Way ANOVA, uji korelasi da regresi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia No.  Metabolit Sekunder Uji Kualitatif Hasil Ekstrak Etanol Fraksi N- Heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 1 Flavonoid Terbentuk warna jingga ++ + ++ + 2 Tanin Terbentuk warna hijau kehitaman ++ + + ++ 3 Saponin Tidak terbentuk busa stabil + - - -
Keterangan: positif dua banyak mengandung senyawa tersebut (++), positif satu sedikit mengandung senyawa tersebut (+), negatif mengandung senyawa tersebut (-)
Tabel 2. Diameter Zona Hambat Fraksi Daun Parijoto terhadap Bakteri Propionibacterium acnes Perlakuan Diameter Zona Hambat Fraksi Daun Parijoto (mm) Propionibacterium acnes Konsentrasi (mg/mL) Ekstrak etanol (Sugiarti & Fitrianingsih, 2018) Fraksi N-Heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 6,25 1,6 - - - 12,5 2,7 - - - 25 3,1 - - 2,7 ± 1,8 b 50 4,9 2,0 ± 0,5 c 1,5 ± 0,5 a 3,5 ± 1,0 b 75 - 3,5 ± 0,5 b 2,4 ± 0,4 b 6,0 ± 0,5 a 100 6,9 5,0 ± 0,5 a 3,7 ± 0,3 c 6,0 ± 1,0 a Klindamycin (2 ug/ml) 11,0 ± 0,5 d 11,3 ± 0,4 d 11 ± 0,5 c Aq steril - - - DMSO - - -

## Tabel 3. Diameter Zona Hambat Fraksi Daun Parijoto terhadap Bakteri
Staphylococcus epidermidis Perlakuan Diameter Zona Hambat Fraksi Daun Parijoto (mm) Staphylococcus epidermidis Konsentrasi (mg/mL) Ekstrak etanol (Sugiarti & Fitrianingsih, 2018) Fraksi N-Heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 6,25 0,2 - - - 12,5 0,9 - - 1,5 ± 0,9 c 25 1,8 - - 3,0 ± 0,5 bc 50 3,5 2,5 ± 0,5 y 2 ± 0,5 a 3,5 ± 0,5 b 75 - 4,0 ± 0,5 x 4 ± 0,5 b 4,2 ± 0,7 ab 100 5,1 6,5 ± 0,5 w 8,2 ± 0,8 c 5,0 ± 1,3 a Klindamycin (2 ug/ mL) 11,5 ± 0,7 z 11,5 ± 0,5 d 11,5 ± 0,7 d Aq steril - - - DMSO - - -
Keterangan: huruf a,b,c,d pada tabel diatas menunjukkan beda nyata pada setiap konsentrasi dengan α sebesar 5%.

## Gambar 1. Diagram Batang Diameter Zona Hambat Fraksi N-Heksan terhadap Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
Gambar 2. Diagram Batang Diameter Zona Hambat Fraksi Etil Asetat terhadap Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
1,5 a 2,4 a 3,73 b 2 a
4 b
8,17 c 0 2 4 6 8 10 50 mg/mL 75 mg/mL 100 mg/mL D ia m et er Z on a H am ba t Konsentrasi P.acnes S.epidermidis

## Gambar 3. Diagram Batang Diameter Zona Hambat Fraksi Air terhadap Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis

## Pembahasan
Determinasi  tanaman  merupakan  tahap  awal  yang  dilakukan  sebelum  penelitian. Determinasi  dilakukan  bertujuan  untuk  mengetahui  kebenaran  dari  simplisia  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  dan  kekeliruan  pengambilan  bahan  tanaman.  Berdasarkan hasil determinasi tanaman, teridentifikasi bahwa tanaman yang digunakan yaitu Medinilla spesioca Blume dengan nama  daerah parijoto. Serbuk daun parijoto yang  telah dilakukan maserasi menghasilkan ekstrak kental berwarna hijau tua kehitaman dengan tekstur lengket, mudah dicuci dan memiliki bau yang khas sebanyak 66,3 gram dengan rendemen 20,7%. Metode  maserasi  digunakan  karena  memiliki  beberapa  kelebihan  diantaranya  yaitu  biaya relatif  murah,  alat-alat  yang  digunakan  sederhana,  dan  merupakan  metode  ekstraksi  yang tidak tahan panas sehingga senyawa yang akan diambil tidak rusak atau hilang tetapi proses ekstraksi  membutuhkan  waktu  yang  lama  agar  analit  melarut  sempurna  (Yovitasari  dkk., 2018;  Leba,  2017).  Proses  maserasi  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  70%. Dalam  peelitian  Azis  dkk.  (2014)  pelarut  etanol  dengan  konsentrasi  70%  merupakan konsentrasi  yang  optimal  dalam  proses  ekstraksi  daun  salam  India  dengan  menghasilkan jumlah  bahan  aktif  yang  optimal,  selain  itu  memiliki  harga  yang  ekonomis.  Titik  didih etanol  yaitu  70°C  sehingga  dengan  suhu  yang  digunakan  dalam  ekstraksi  dapat  menarik semua  komponen  yang  terkandung  dalam  simplisia,  selain  itu  etanol  juga  mempunyai gugus OH - dengan sifat polar dan gugus CH 2 CH 3 dengan sifat non polar.
Ekstrak  selanjutnya  dilakukan  fraksinasi  dengan  menggunakan  pelarut  bertingkat yaitu n-heksan, etil asetat dan air. Penggunaan pelarut n-heksan bertujuan agar kandungan senyawa  yang  bersifat  nonpolar  dapat  tersari  dalam  pelarut  tersebut.  Pelarut  etil  asetat digunakan dengan tujuan agar kandungan senyawa yang bersifat semi polar dapat tersari, sedangkan  pelarut  air digunakan  bertujuan  untuk  kandungan  senyawa yang bersifat  polar larut dalam pelarut tersebut (Andriyanto dkk., 2016). Berdasarkan skrining fitokimia baik ekstrak  maupun  fraksi  daun  parijoto  mengandung  flavonoid  dengan  terbentuknya  warna jingga  dan  mengandung  tanin  dengan  terbentuknya  warna  hijau  kehitaman.  Senyawa flavonoid  yang    diduga  tersari  dalam  pelarut  etil  asetat  adalah  flavonoid  aglikon  seperti isoflavon, flavanon, flavonol termetoksilasi yang cenderung larut dalam pelarut semi polar (Markham, 1998; Nugraha dkk., 2017).
Kandungan  saponin  pada  semua  fraksi  menunjukkan  hasil  negatif  karena  tidak terbentuk  busa  stabil  berbeda  dengan  ekstraknya  yang  positif  mengandung  saponin,  hal tersebut  disebabkan  karena  daun  yang  digunakan  sebagai  sampel  yaitu  daun  yang  sudah tua. Menurut Fenwick et al . (1991) dan Francis et al . (2002), dalam daun yang sudah tua mengandung saponin yang lebih sedikit dibandingkan pada daun yang muda (Hidayah dkk., 2013).  Selain  itu,  karena  saponin  bersifat  polar  yang  mudah  larut  dalam  air  dan  etanol sehingga saponin tertarik dalam ekstrak etanol (Firawati & Pratama, 2018).
Menurut  Davis  &  Stout  (1971)  diameter  zona  hambat  digolongkan  menjadi  4 kategori yaitu ≤ 5 mm tergolong kategori lemah, 6-10 mm tergolong kategori sedang, 11- 20 mm tergolong kategori kuat dan ≥ 21 mm tergolong kategori sangat kuat. Diameter zona hambat    fraksi  n-heksan  daun  parijoto  terhadap  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acnes pada konsentrasi 100; 75; 50; mg/ml berturut-turut adalah 5,0; 3,5; 2,0; mm dengan kategori  lemah,  sedangkan  pada  konsentrasi  25;  12,5;  6,25;  mg/ml  tidak  menunjukkan adanya  daya  hambat  terhadap  bakteri.  Sedangkan  terhadap  bakteri Staphylococcus epidermidis menunjukkan  diameter  zona  hambat  terbesar  terdapat  pada  konsentrasi  100 mg/mL sebesar 6,5 ± 0,5 mm dengan kategori sedang. Diameter terendah ditunjukkan pada konsentrasi 50 mg/mL yaitu sebesar 2,5 ± 0,5 mm. Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dari fraksi n-heksan ekstrak etanol daun parijoto baik terhadap bakteri Propionibacterium acnes maupun Staphylococcus epidermidis adalah pada konsentrasi 50 mg/ml dengan rata- rata diameter zona hambat sebesar 2,0 mm dan 2,5 mm.
Uji  antibakteri  pada  fraksi  etil  asetat  mampu  menghambat  aktivitas  pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes pada konsentrasi 100; 75; 50  mg/mL berturut-turut yaitu 3,7;  2,4;  1,5  mm  yang  tergolong  dengan  kategori  lemah  sedangkan  pada  konsentrasi  25; 12,5;  6,25  mg/mL  tidak  menunjukkan  adanya  diameter  zona  hambat  terhadap  bakteri. Aktivitas antibakteri terbesar fraksi etil asetat terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis ditunjukkan  pada  konsentrasi  100  mg/mL  dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  8,2  mm dengan kategori sedang, pada konsentrasi 75 dan 50  mg/mL menunjukkan diameter zona hambat  berturut-turut  yaitu  4  dan  2  mm  dengan  kategori  lemah,  sedangkan  pada konsentrasi  25;  12,5;  6,25  mg/mL  tidak  menunjukkan  adanya  daya  hambat  terhadap bakteri. Konsentrasi hambat minimum fraksi etil asetat terhadap bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis yaitu pada konsentrasi 50 mg/mL dengan diameter zona hambat yaitu 1,5 dan 2 mm.
Uji  antibakteri  pada  fraksi  air  terhadap Propionibacterium  acnes terlihat  adanya zona hambat pada konsentrasi 100, 75, 50 dan 25 mg/mL berturut-turut sebesar 6.0, 6.0, 3.5 dan  2.7  mm  dengan  kategori  sedang  sampai  rendah.  Diameter  zona  hambat  terbesar terdapat  pada  konsentrasi  75  mg/mL  sebesar  6  ±  0,5  mm  dengan  kategori  sedang. Konsentrasi hambat minimum terdapat pada konsentrasi 25 mg/ml yaitu sebesar 2,7 ± 1,8 mm.  Sedangkan  diameter  zona  hambat  bakteri Staphylococcus  epidermidis pada konsentrasi 100, 75, 50, 25 dan 12,5 mg/mL berturut-turut sebesar 5.0, 4.2, 3.5, 3.0 dan 1.5 mm dengan kategori lemah. KHM ditunjukkan pada konsentrasi 12,5 mg/mL yaitu sebesar 1,5 ± 0,9 mm.
Hasil penelitian Sugiarti & Fitrianingsih (2018) menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun parijoto dapat menghambat pertumbuhan bakteri pada konsentrasi 6,25; 12,5; 25; 50 dan 100 mg/mL  terhadap bakteri Propionibacterium acnes dengan diameter zona hambat
berturut-turut  yaitu  1,6;  2,72;  3,06;  4,94  dan  6,85  mm  dengan  kategori  lemah  sampai sedang,  sedangkan  pada  bakteri Staphylococcus  aureus berturut-turut  sebesar  0,17;  0,87; 1,78;  3,46;  dan  5,07  mm  dengan  kategori  lemah.  Setelah  ektrak  etanol  difaksinasi bertingkat  dengan  pelarut  non  polar,  semi  polar  dan  polar  ternyata  menunjukkan  hasil aktivitas  antibakteri  yang  berbeda-beda,  walaupun  secara  umum  aktivitasnya  tergolong masih  sama  yaitu  dalam  kategori  rendah  sampai  sedang.  Ekstrak  etanol  aktivitas antibakterinya menunjukkan tren yang sama dengan fraksi air baik terhadap kedua bakteri uji.  Hal  ini  bisa  dimengerti  karena  keduanya  sama-sama  menggunakan  pelarut  polar. Namun  berbeda  dengan  fraksi  n-heksan  dan  etil  asetat,  dimana  kedua  fraksi  ini  aktivitas antibakterinya  lebih  sensitif  terhadap Staphylococcus  epidermidis dibandingkan  terhadap Propionibacterium acnes .
Aktivitas  pertumbuhan  bakteri  dihambat  dengan  adanya  metabolit  sekunder  yang terkandung dalam fraksi, diantaranya yaitu flavonoid dengan mekanisme menyerang gugus fosfat  pada  membran  sitoplasma  sehingga  terjadi  kerusakan  membran  dan  tanin  yang bereaksi  dengan  membran  sel  dan  menghambat  enzim  essensial  atau  materi  genetik sehingga  terjadi  ikatan  hidrofobik  yang  menyebabkan  denaturasi  dan  gangguan metabolisme (Saputra & Anggraini, 2016). Hal tersebut dapat disebabkan karena perbedaan antara kedua bakteri yang memiliki sifat dan ketahanan berbeda-beda terhadap antibakteri meskipun  bakteri  tersebut  termasuk  dalam  golongan  bakteri  yang  sama  dan  perbedaan kandungan  senyawa  yang  terserap  dalam  kedua  pelarut  tersebut  (Wahdaningsih  dkk., 2014).
Nilai korelasi yang didapatkan dari masing-masing fraksi terhadap kedua bakteri uji yaitu  0,986  sampai  0,898.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  terdapat  hubungan  yang  erat antara konsentrasi masing-masing fraksi dengan diameter daya hambat bakteri. Data kemudian diuji lanjut dengan uji regresi linier, terhadap bakteri Propionibacterium acnes dengan nilai R²  =    0,8754  sampai  dengan  0,9734  yang  berarti  87,54%  lebih  aktivitas  antibakteri dipengaruhi  oleh  konsentrasi  fraksi  dan  sisanya  dipengaruhi  oleh  faktor  lain.  Hasil  uji regresi linier masing-masing fraksi terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis didapatkan nilai R 2 =0,8057 sampai dengan 0,9673 yang berarti 80,57% lebih aktivitas antibakterinya dipengaruhi oleh konsentrasi fraksi dan sisanya dipengaruhi oleh faktor lain.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Fraksi  n-heksan,  etil  asetat,  dan  air  dari  ekstrak  etanol  daun  parijoto  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis dengan  aktivitas  antibakteri  tergolong  lemah  sampai  sedang.  Nilai  KHM  pada  fraksi  n- heksan dan etil asetat adalah pada konsentrasi 50 mg/mL, sedangkan pada fraksi air pada konsenstarasi  12,5  sampai  25  mg/mL.  Pada  fraksi  n-heksan  dan  etil  asetat  aktivitas antibakterinya  lebih  sensitif  terhadap Staphylococcus  epidermidis dibandingkan terhadap Propionibacterium acnes , sedangkan pada fraksi air sebaliknya.

## Saran
Disarankan  dilakukan  penelitian  terhadap  daun  parijoto  yang  muda  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  yang  lebih  baik  dan  dilanjutkan  penelitian  lebih  lanjut dengan uji in-situ maupun in-vivo.

## DAFTAR PUSTAKA
Aida, A. N., Suswati, E., & Misnawi. (2016). Uji In Vitro Efek Ekstrak Etanol Biji Kakao ( Theobroma cacao ) sebagai Antibakteri terhadap Propionibacterium acnes . e-Jurnal Pustaka Kesehatan , 4(1) , 127–131.
Andriyanto, B. E., Ardiningsih, P., & Idiawati, N. (2016). Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Belimbing Hutan ( Baccaurea angulata ). JKK , 5(4) , 8–13.
Azis,  T.,  Febrizky,  S.,  &  Mario,  A.  D.  (2014).  Pengaruh  Jenis  Pelarut  Terhadap  Persen Yieldalkaloiddari Daun Salam India (MURRAYA KOENIGII). Teknik Kimia , 20(2) , 1–6.
Brown,  R.  G.,  &  Burns,  T.  (2005). Lecture  Notes  on  Dermatologi (8  ed.).  Jakarta: Erlangga.
Davis,  W.  W.,  &  Stout,  T.  R.  (1971).  Disc  Plate  Method  of  Microbiological  Antibiotic Assay. American Society for Microbiology , 22(4) , 659–665.
Firawati, & Pratama, M. I. (2018). Isolasi dan Identifikasi Senyawa Saponin Daun Bungkus (Smilax  rotundifolia)  menggunakan  Metode  Spektrofotometri  Ultraviolet. JF  FIK UINAM , 6(2) , 116–121.
Hanum,  A.  S.,  Prihastanti,  E.,  &  Jumari.  (2017).  Ethnobotany  of  utilization,  role,  and philosopical  meaning  of  parijoto  (Medinilla,  spp)  on  Mount  Muria  in  Kudus Regency, Central Java. American Institute of Physics , 1–6.
Harborne,  J.  B.  (1987). Metode  Fitokimia  penuntun  modern  menganalisis  tumbuhan (II). Bandung: ITB.
Hidayah,  N.,  Hisan,  A.  K.,  Solikin,  A.,  Irawati,  &  Mustikaningtyas,  D.  (2013).  Uji Efektivitas  Ekstrak  Sargassum  muticum  Sebagai  Alternatif  Obat  Bisul  Akibat Aktivitas Staphylococcus aureus . Journal of Primary Education , 2(1) , 1–9. Leba,  M.  A.  U.  (2017). Ekstraksi  dan  Real  Kromatografi (1  ed.).  Yogyakarta:  Penerbit Deepublish.
Meilina & Hasanah. (2018). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis ( Garnicia Mangostana L.) terhadap Bakteri Penyebab Jerawat . , Farmaka, 16(2) , 322-328. Mulyani, Y. W. T., Hidayat, D., Isbiyantoro, & Yeny Fatimah. (2017). Ekstrak Daun Katuk ( Sauropus  Androgynus (L)  Merr)  sebagai  Antibakteri  Terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis . Jurnal Farmasi Lampung , 6(2) , 46–54.
Nuari, S., Anam, S., & Khumaidi, A. (2017).  Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Ekstrak  Etanol  Buah  Naga  Merah  ( Hylocereus  polyrhizus (F.A.C.Weber)Briton  & Rose). Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) , 2(2) , 118–125.
Nugraha,  A.  C.,  Prasetya,  A.  T.,  &  Mursiti,  S.  (2017).  Isolasi,  Identifikasi,  Uji  Aktivitas Senyawa  Flavonoid  sebagai  Antibakteri  dari  Daun  Mangga. Indonesian  Journal  of Chemical Science , 6(2) , 91–96.
Octaviani,  I.,  Sidharta,  B.  B.  R.,  &  Purwijantiningsih,  L.  M.  E.  (2016).  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Parioto (Medinilla Speciosa) terhadap Escherichia Coli dan Staphylococcus aureus , 1–12.
Saputra,  O.,  &  Anggraini,  N.  (2016).  Khasiat  Belimbing  Wuluh( Averrhoa  bilimb i  L.) terhadap Penyembuhan Acne Vulgaris . Majority , 5(1) , 76–80.
Sari, I. P., Wibowo, M. A., & Arreneuz, S. (2015). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Teripang Butoh  Keling  ( Holothuria  Leucospilota )  dari  Pulau  Lemukutan  terhadap  Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis. JKK , 4(4) , 21–28. Sawarkar, H. A., Khadabadi, S. S., Mankar, D. M., Farooqui, I. A. & Jagtap, N. S. (2010).
Development  and  biological  evaluation  of  herbal  anti-acne  gel. 2010 ,  vol. 02 (3),  p. 2028-2031.
Sugiarti,  L.,  &  Nafi’ah,  L.  N.  (2018).  Potensi  Antibakteri  Sediaan  Gel  Handsanitizer Ekstrak  Buah  Parijoto  (Medinilla  speciosa  Blume)  terhadap  Bakteri  Patogen Escherichia coli dan Staphylococus aureus . PROSIDING HEFA 3rd 2018 , 211–219. Sugiarti, L., & Fitrianingsih, S. (2018). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Parijoto (Medinilla Speciosa Blume) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes Dan  Staphylococcus  aureus. Cendekia  Journal  of  Pharmacy  STIKES  Cendekia Utama Kudus , 2(1) , 60–67. Tranggono, R. I., & Latifah, F. (2007). Buku Pegangan Ilmu Pengantar Kosmetik . Jakarta: PT Gramedia Pustaka utama.
Wahdaningsih, S., Untari, E. K., & Fauziah, Y. (2014). Antibakteri Fraksi n-Heksana Kulit Hylocereus polyrhizus Terhadap Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes. Pharm Sci Res ISSN 2407-2354 , 1(3) , 180–193.
Yovitasari, Retnaningsih, A., & Elsyana, V. (2018). Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sirsak ( Annona  muricata L.)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa dengan Metode Difusi Agar. Jurnal Farmasi Malahayati ,
1(1) , 1–4.