Nepenthes mirabilis (Lour.) Druce Planlet at a Various Levels of Murashige & Skoog Medium Density In Vitro
Nadia Fakhriyati Arfa, Endang Nurcahyani * , Zulkifli, Tundjung Tripeni Handayani
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung Jalan Soemantri Brodjonegoro No.1. Bandar lampung, Indonesia, 35145 *Email: endang_nurcahyani@yahoo.com

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  variation  of  the  stomata  index  of  the  Kantong  Semar ( Nepenthes mirabilis ) planlet at a various medium density of the Murashige and Skoog. This study  used  a  Completely  Randomized  Design  using  one  factor  (medium  density  of  the Murashige and Skoog). We used 5 levels of medium density, i.e.: 1/16 MS, 1/8 MS, 1/4 MS, 1/2  MS,  and  MS.  Homogene ity  test  used  Levene’s  test  of  5%  significance  level,  then analysis of variance is carried out at 5% significance level and followed by Tukey test at 5% significance  level.  The  results  showed  that  the  lower  the  level  of  Murashige  and  Skoog medium density on the Nepenthes mirabilis plantlet, the stomata index also increased.
Keyword: stomata index, in vitro , Murashige and Skoog, Nepenthes mirabilis

## PENDAHULUAN
Nepenthes atau kantong semar merupakan  tumbuhan  karnivora  yang  di setiap  ujung  daunnya  memiliki  kantong yang  unik.  Kantong  yang  unik  ini  dapat menjebak  serangga  atau  hewan  kecil lainnya,  karena  di  dalam  kantongnya terdapat nectar  glands (kelenjar  madu) yang dapat memikat  serangga khususnya yang  menyukai  rasa  manis. Nepenthes memiliki  dinding  permukaan kantong  licin, sehingga ketika mendekati kantong serangga akhirnya terpeleset dan terperangkap  di  dalam  kantong  (Handoyo dan Sitanggang, 2006).
Potensi  sebagai  tanaman  hias  dan manfaat lain yang dimiliki oleh Nepenthes menjadikannya  tanaman  yang  banyak dicari.  Akibatnya,  keberadaannya  di  alam menjadi  terancam  karena  banyaknya ancaman  berupa  kebakaran  hutan  dan lahan, konversi lahan dan pelebaran jalan (Hernawati & Akhriadi, 2006). Oleh karena itu, Nepenthes  mirabilis termasuk  dalam kategori Appendix- 2.  Tanaman-tanaman
yang masuk
dalam
Appendix -2
merupakan tanaman yang terancam punah  namun  populasinya  lebih  banyak berada di alam (Anonymous, 1999).
Keberhasilan  dalam  penggunaan  metode kultur  jaringan  sangat  bergantung  pada medium yang digunakan. Umumnya medium  kultur  jaringan  tersusun  atas komposisi  hara  makro,  hara  mikro, vitamin,  gula,  asam  amino  dan  sumber organik, persenyawaan kompleks alamiah, buffer,  zat  pengatur  tumbuh  (terutama auksin dan sitokinin), dan bahan pemadat (Alitalia, 2008). Keberhasilan kultur jaringan  juga  dipengaruhi  oleh  keasaman medium.  Keasaman  medium  ditetapkan antara  5,6-5,8  karena  pH  yang  tinggi menyebabkan  unsur-unsur  seperti  besi, seng,  mangan,  tembaga,  dan  boron mengalami  presipitasi  sebagai  hidroksida sehingga tidak tersedia bagi jaringan yang dikulturkan,  sedangkan  pada  pH  rendah, unsur-unsur  seperti  kalsium,  belerang, dan fosfor menjadi tidak tersedia (Zulkarnain,2009).
Medium tanam kultur jaringan yang sering digunakan  adalah  medium  Murashige  & Skoog (MS). Medium
MS dapat diaplikasikan pada sejumlah besar spesies (Rosmaina, 2011) karena medium
MS  memiliki  kandungan  garam-garam yang lebih tinggi dari medium lainnya dan senyawa nitrat yang juga tinggi (Zulkarnain, 2009).
Stomata  juga  berperan  penting  bagi kehidupan tumbuhan, karena pori stomata merupakan  tempat  terjadinya  pertukaran gas  dan  air  antara  atmosfer  dengan sistem  ruang  antar  sel  yang  berada  pada jaringan  mesofil  di  bawah  epidermis (Mulyani,  2006).  Stomata  terdiri  atas  sel penjaga  dan  sel  penutup  yang  dikelilingi oleh  beberapa  sel  tetangga.  Stomata umumnya terdapat pada permukaan
bawah daun, tetapi ada beberapa spesies tumbuhan dengan stomata pada permukaan atas dan bawah daun. Bentuk atau  tipe  stomata  dibedakan  atas  4 macam, yaitu anomositik, anisositik, parasitik, dan diasitik (Rompas, 2011).
Setiap  sel  tumbuhan  mempunyai  struktur sel  epidermis  yang  berbeda.  Perbedaan struktur  sel  epidermis  yang  dimaksud dapat  berupa  bentuk  dan  susunan  sel epidermis,  letak  atau  kedudukan  stomata terhadap sel tetangga, arah membukanya stomata,  bentuk  stomata,  jumlah  sel epidermis dan stomata, serta jarak antara stomata  dan  panjang  sel  epidermis  dan stomata.  Ada  tidaknya  pengaruh  indeks stomata  pada  daun  planlet Nepenthes mirabilis masih  belum  banyak  diketahui.
Kajian  mengenai  indeks  stomata  pada tanaman  kantong  semar  juga  masih terbatas.  Oleh  sebab  itu,  penelitian  ini perlu dilakukan untuk memberikan informasi  ilmiah  tentang  stomata  pada planlet kantong semar khususnya
Nepenthes mirabilis .
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui karakter spesifik planlet Nepenthes mirabilis pada berbagai tingkat kepadatan medium  Murashige  &  Skoog  khususnya pada indeks stomata planlet tersebut.

## METODE PENELITIAN
Bahan-  bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  planlet Nepenthes mirabilis ,  alkohol  70%,  aquades,  Kalium Hidroksida  (KOH),  Asam  Chlorida  (HCl), serta bahan kimia medium MS ( Murashige & Skoog ) padat.
Penelitian ini dilakukan dengan pola dasar Rancangan
Acak Lengkap (RAL)
menggunakan  satu  faktor  yaitu  tingkat kepadatan  medium  MS  ( Murashige  & Skoog ), terdiri atas 5 taraf yaitu: 1/16 MS, 1/8 MS, 1/4 MS, 1/2 MS, dan MS.
Pembuatan
preparat stomata menggunakan metode Ruzin (1999). Daun planlet  dibuat  potongan-potongan  segi empat  dengan  sisi  ±  5  mm  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  berisi larutan  cloralhidrat  dalam  air  (5:1).  Tiap sel epidermis (E) ditandai dengan (x), tiap stoma (S) ditandai dengan (O). Setelah itu letakan  pada  gelas  benda,  preparat diamati  pada  3  bagian  daerah  yang berlainan. Indeks stomata besarnya dihitung dengan rumus:
Indeks Stomata: x 100%
Data kuantitatif dari setiap parameter di uji homogenitas  menggunakan  uji  Levene taraf  nyata  5%  kemudian  dianalisis menggunakan  Analisis  ragam  dilakukan pada taraf nyata 5% dan apabila diperoleh hasil  perbedaan  nyata  maka  dilanjutkan dengan uji Turkey pada taraf nyata 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  indeks  stomata  planlet Nepenthes mirabilis yang  ditanam  pada  berbagai tingkat  kepadatan  medium  Murashige  & Skoog  menunjukkan  bahwa  Uji  Levene pada  taraf  nyata  5%  menunjukkan  ragam kelima  medium  adalah  homogen  (P  > 0,05). Analisis ragam pada taraf nyata 5% juga  menunjukkan  bahwa  kepadatan medium Murashige & Skoog yang digunakan  berpengaruh  nyata  terhadap indeks  stomata Nepenthes  mirabilis (P  < 0,05).  Uji  lanjut  dengan  menggunakan  Uji Tukey yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  Uji  Tukey menunjukkan kepadatan medium 1/16 MS tidak berbeda nyata terhadap 1/8 MS dan 1/4  MS,  begitu  juga  dengan  kepadatan medium  1/4  MS  tidak  berbeda  nyata terhadap  1/2  MS  dan  MS.  Namun kepadatan  medium  1/16  MS  dan  1/8  MS memberikan pengaruh nyata terhadap 1/2 MS  dan  MS.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa semakin rendah tingkat kepadatan medium  Murashige  &  Skoog  pada  planlet Nepenthes mirabilis maka semakin
meningkat pula indeks stomatanya.
Perbandingan  indeks  stomata Nepenthes mirabilis disajikan  dalam  bentuk  grafik pada Gambar 1.
Berdasarkan  Gambar  1,  hasil  dari  grafik indeks stomata planlet
Nepenthes mirabilis (Lour.) Druce mengalami
penurunan  seiring  dengan  meningkatnya kepadatan  medium  MS.  Karena  itu,  dari gambar  terlihat  bahwa  medium  yang optimum  dalam  indeks  stomata  planlet Nepenthes  mirabilis yaitu  pada  medium 1/6  MS  serta  tidak  berbeda  nyata  pada medium  1/8  MS.  Terlihat  pula  bahwa semakin  tinggi  tingkat  kepadatan  medium MS, maka indeks stomata yang dihasilkan juga semakin rendah.
Stomata  juga  terdiri  atas  sel  penjaga  dan sel penutup yang dikelilingi oleh beberapa sel  tetangga.  Stomata  umumnya  terdapat pada  permukaan  bawah  daun,  tetapi  ada beberapa  spesies  tumbuhan  dengan stomata pada permukaan atas dan bawah daun. Bentuk atau tipe stomata dibedakan atas 4 macam, yaitu anomositik, anisositik, parasitik, dan diasitik (Rompas, 2011).  Stomata  pada  permukaan  bawah daun planlet Nepenthes mirabilis disajikan pada Gambar 2.
Berdasarkan  Gambar  2.  terlihat  stomata daun planlet Nepenthes mirabilis berbentuk  ginjal  dan  tergolong  tipe anomositik  seperti  pada  tumbuhan  dikotil pada  umumnya.  Stomata  ini  teramati dalam  posisi  terbuka,  serta  terlihat  porus atau celah yang terbuka.
Pada  stomata  terdapat  sel  penutup  yang dikelilingi  sel  tetangga  yang  biasanya berkembang  dari  sel  protoderm  yang berdekatan  dengan  sel  induk  stomata, tetapi  dapat  juga  berkembang  dari  sel induk  stomata.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Fahn  (1991)  bahwa  pada tanaman dikotil, sel penjaganya berbentuk ginjal.  Stomata  daun Nepenthes  mirabilis tergolong tipe anomositik. Tipe anomositik adalah  tipe  sel  tetangga  yang  memiliki kesamaan  bentuk  dan  ukuran  dengan  sel epidermis disekitarnya.
Tabel  1.  Uji  Tukey  indeks  stomata  planlet
Nepenthes mirabilis dengan berbagai tingkat kepadatan medium MS Kepadatan Medium MS Indeks Stomata (%) Ȳ ± SE 1/16 14,986 ± 0,784 a 1/8 10,580 ± 1,645 a ¼ 9,352 ± 2,159 ab ½ 7,534 ± 1,741 b 1 3,805 ± 0,637 b Keterangan: Angka  yang  diikuti  oleh huruf  yang  sama  tidak beda nyata pada taraf 5%.
BNJ (0.05) = 6,41
Gambar 2. Permukaan bawah daun planlet Nepenthes mirabilis , menunjukkan stomata daun (A) MS, (B) 1/2 MS, (C) 1/4 MS, (D) 1/8 MS, (E) 1/16 MS; E = epidermis, ST = sel tetangga, P = porus, SP  = sel penutup.

## KESIMPULAN
Perlakuan  medium  1/16  MS  memberikan pengaruh  nyata  paling  baik  pada  stomata daun  planlet Nepenthes  mirabilis serta
tidak  berbeda  nyata  dengan  medium  1/8 MS . Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin rendah tingkat kepadatan medium
Murashige & Skoog pada planlet
14,986 a
10,58 a 9,352 ab 7,534 b
3,805 b -4 1 6 11 16 1/16  1/8 1/4 1/2 1 In d e k s S to m a ta (% ) Kepadatan  Medium MS
C D E A B ST SP P E ST P E SP ST P SP E P ST E SP P ST E SP Gambar 1. Grafik indeks stomata planlet Nepenthes mirabilis dengan berbagai tingkat kepadatan medium MS
Nepenthes mirabilis maka semakin meningkat pula indeks stomatanya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alitalia,  Y.  (2008).  Pengaruh  Pemberian BAP dan NAA Terhadap Pertumbuhan  dan  Perkembangan Tunas Mikro Kantong Semar
(Nepenthes  mirabilis) Secara in vitro . (Skripsi). Bogor: Program Studi
Hortikultura Fakultas pertanian.
Institut Pertanian Bogor.
Anonymous. (1999). Convention on International  Trade  in  Endangered Species  Of  Wild  Fauna  And  Flora . Seventeenth  Meeting  of  The  Plants Committee Geneva (Switzerland).
Fahn,  A.  (1991). Anatomi  Tumbuhan (Edisi ke-3). Yogyakarta: Universitas
Gajah Mada.
Handoyo  F.  dan  Sitanggang  M.  (2006).
Petunjuk Praktis Perawatan Nepenthes . Depok: Agromedia. Hernawati dan Akhriadi P. (2006). A Field Guide to The Nepenthes of Sumatra . PILI-NGO Movement Mulyani, Sri. (2006). Anatomi
Tumbuhan . Yogyakarta: Kanisius.
Rompas,  Yulanda.  (2011).  Struktur  Sel
Epidermis dan Stomata Daun Beberapa Tumbuhan Suku Orchidaceae. Jurnal  Biologos ,  1(1),
1-7.
Rosmaina. (2011). Laju Multiplikasi Nenas ( Ananas  comosus L)  pada  Media Dasar  MS  Hasil  Perlakuan  BA  dan NAA secara In Vitro. Jurnal
Agroteknologi , 1(1), 32-37.
Ruzin,  S.E.  (1999). Plant  Microtecnique and  Microscopy .  New  York:
Oxford University Press. Zulkarnain. (2009). Kultur Jaringan Tanaman,  Solusi  Perbanyakan Tanaman  Budi  Daya. Jakarta: PT. Bumi Aksara Nepenthes Team, BP Conservation
Programme. Padang.