ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291
Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN ANTIJAMUR KULIT BATANG KRANGEAN( Litsea cubeba Pers.)
ANTIBACTERIAL AND ANTIFUNGAL ACTIVITIES OF KRANGEAN’S STEM BARK ( Litsea cubeba Pers.)
Mamik Ponco Rahayu, Ismi Rahmawati, Wahyu Listiantoro, dan Wayndy Chrisantoso
Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Email :pi_er@yahoo.co.id
_____________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Litsea cubeba Pers atau krangean merupakan tanaman tradisional yang banyak dimanfaatkan sebagai antidiare, obat penyakit kulit, dan antiseptik. Tanaman ini selain mengandung minyak atsiri juga komponen lain seperti tanin, saponin, flavonoid, dan alkaloid. Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui  aktivitas  fraksi  n-heksan,  etil  asetat,  dan  air  dari  ekstrak  etanolik kulit  batang  krangean sebagai antibakteri dan antijamur terhadap E.Coli ATCC 25922; C. albicans ATCC 10231. Penyarian kulit batang krangean dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%, dilanjutkan fraksinasi dengan pelarut n-heksan, etil asetat, dan air. Pengujian aktivitas antibakteri dan antijamurmenggunakanmetode  difusi  dan  dilusi.  Metode  difusiuntuk  mengukur  diameter  daerah hambatan  terhadap  pertanaman bakteri, dengan  konsentrasi sediaan  uji 50%,  25%, dan 12,5%.Metode  dilusi  (pengenceran tabung),  berupa seri  pengenceran  dalam  berbagai  konsentrasi sediaan uji, yaitu 50%, 25%; 12,5%, 6,25%; 3,12%; 1,56%; 0,78%; 0,39%; dan 0,195%.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  fraksi  n-heksan  dari  ekstrak  etanolik  kulit  batang krangean mempunyai aktivitas paling tinggi dibandingkan fraksi lain terhadap E.coli ATCC 25922 dan C.albicans ditunjukkan dengan rata-rata diameter  hambat yang paling besar.Uji  aktivitas antibakteri terhadap E.coli ATCC 25922 dan C.albicans dengan metode difusi, fraksi n-heksan, pada konsentrasi 50% memiliki daya hambat dengan rata-rata 30 ± 0,00 mm dan 20,4 ± 0,58 mm. Fraksi n-heksan dapat  membunuh E.Coli ATCC  25922 dan C.  albicans ATCC  10231 dengan Konsentrasi Bunuh Minimum berturut-turut adalah 1,56%; dan 0,39%. Hasil Identifikasi fitokimia menunjukkan fraksi n- Heksan mengandung minyak atsiri dan triterpenoid .
Kata kunci: Kulit Batang Krangean, fraksi, E.coli ATCC 25922, C.albicans ATCC 10231 _____________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Litsea cubeba Pers or Krangean is a traditional medicinal plant widely used as an antidiarrheal, skin diseases, as well as antiseptic agent. In addition to essential oils, this herb also contains various components  such  as  tannins,  saponins,  flavonoids  and  alkaloids.  The  purpose  of  the  study  was to determine the activities of n-hexane fraction, ethyl acetate, and water from the ethanolic extract of the Krangean stem bark as antibacterial and antifungal properties against E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 25923 and C. albicans ATCC 1023.
Krangean stem bark extraction was conducted by maceration method using 70% ethanol as solvent,  followed  by  fractionation  with  n-hexane,  ethyl  acetate,  and  water  as  solvent. Antibacterial and  antifungal  activities were  determined  by diffusion  and  dilution  method.  Diffusion  method  was used  to measure  the  diameter  of  the inhibitory area  against  bacteria colonies with  concentrations used were 50%, 25%, as well as 12.5%. Dilution method (dilution tubes), was conducted in serial dilutions of various concentrations, 50%, 25%; 12.5%, 6.25%; 3.12%; 1.56%; 0.78%; 0.39%; and 0.195%.
The results showed that n-hexane fraction of the ethanolic extract of the Krangean’ stem bark had the highest activity against E. coli ATCC 25922 and C. albicans ATCC 10231 compared to other fractions, based on the average of diameter inhibition values. The diffusion method showed that n- hexane fraction at concentration of 50% had inhibitory activity against E. coli ATCC 25922, and C. albicans ATCC 10231 with the average inhibitory power were 30 ± 0,00 mm and 20,4 ± 0,58 mm, respectively. n-Hexane fraction could kill E. coli ATCC 25922, and C. albicans ATCC 10231 with the
Minimum  Killing Inhibitory Concentration  (MKC) value  were 1.56%,  and  0.39%,  respectively.The presence  of  essential  oils  and  triterpenoid  in n-hexane  fraction  were  detected  in  the preliminary phytochemical tests.
Keywords: Krangean’s stem bark, fractions, E.coli ATCC 25922, C.albicans ATCC 10231
Pendahuluan Krangean  ( Litsea  cubeba Pers.) menurut  sejarah  pengobatan  tradisional China  digunakan  pada  penderita  asma, gangguan pencernaan, sebagai antiseptik, obat kejang urat atau otot, dan antibakteri  (Muchtaridi et  al. 2005). Penelitian  sebelumnya menurut  Wang
(2010)  diketahui  minyak  atsiri  dari batang  (termasuk  kulit  batang)  krangean memberikan aktivitas antimikroba terhadap  bakteri E.coli dengan  nilai diameter  hambat  30,2  mm  serta  kadar hambat  minimum  (KHM)  280  µg/ml. Mardhiah  (2010) melaporkan tentang isolasi  minyak  atsiri  daun  krangean secara destilasi dengan alat stahl dan uji aktivitas  antibakteri  dengan  metode difusi  agar.  Minyak  krangean  pada konsentrasi  10  %v/v  membentuk  zona bening terhadap E.coli, dengan diameter 7,33 mm, sementara pada konsentrasi 15 %v/v  membentuk  zona  bening  terhadap E.Coli dengan diameter 6,66 mm. Hasil- hasil  penelitian  tersebut menunjukkan bahwa  kulit  batang  krangean  memiliki aktivitas  antibakteri  karena  memiliki senyawa  yang  sama. Senyawa  tersebut antara lain minyak atsiri juga
mengandung  saponin, tanin,  flavonoid, dan alkaloid yang umumnya mempunyai aktivitas  antibakteri  (Azah  dan  Susiarti 1999; Zulnely et  al. 2003). Penelitian ekstrak kulit  batang krangean serta  hasil fraksinasi perlu dilakukan untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri dan
antijamur terhadap E.Coli ATCC  25922, dan C. albicans ATCC 10231. Penyarian  ekstrak  kulit  batang krangean dalam penelitian ini menggunakan  metode  maserasi  dengan pelarut  etanol  70% dan  difraksinasi dengan  n-heksan,  etil  asetat,  dan  air. Pelarut pada fraksinasi berbeda polaritasnya  karena  kandungan  senyawa kimia  yang  terdapat  dalam  kulit  batang krangean  mempunyai  polaritas  yang berbeda-beda  sehingga dapat diketahui fraksi  yang  paling aktif. Uji  aktivitas dilakukan  dengan  metode  difusi  dan dilusi, terhadap E.Coli ATCC 25922, dan C. albicans ATCC 10231.Tujuan penelitian untuk  mengetahui adanya aktivitas  antibakteri dan  antifungi sehingga  diketahui  fraksi  teraktif  dan Konsentrasi  Bunuh Minimal  (KBM) dari ekstrak  etanol  70%  dari  kulit  batang krangean dan fraksi  n-heksan,  etil asetat, dan air terhadap E.Coli ATCC dan C. albicans ATCC 10231. Metode penelitian Bahan
Bahan  sampel  yang  digunakan kulit batang krangean. Bakteri dan jamur uji yang digunakan E.Coli ATCC 25922, dan C.  albicans ATCC  10231.  Medium yang  digunakan    medium Saboround Glucosa    Agar    (SGA)    dan    Saboround Glucosa    Cair    (SGC). BHI  ( Brain  Heart Infunsion ), Nutrient  Agar,  Mueller Hinton  Agar (MHA), Sulfide  Indol Motilitas (SIM), Kliger  Iron  Agar (KIA), Lysin  Iron  Agar (LIA),  Citrat, Endo  Agar
(EA).  Bahan  kimia  yang  digunakan pelarut  n-heksan,  etil  asetat,  air  dan etanol  70  %,  aqua destillata steril, DMSO  1%,    larutan  Standar  Brown  II, silika  gel  GF  254,  kloroform,  FeCl 3 1%, pereaksi  anisaldehid - asam  sulfat, kotrimoksazol.
Alat
Alat-alat  yang  digunakan    labu erlemeyer  (pyrex),  pembakar  spritus, kasa, kaki tiga, selang, corong kaca, dan penangas  air,  timbang  analitis,  tabung reaksi,  gelas  ukur  (pyrex),  pipet  volume, labu takar, cawan petri, inkas, jarum ose, pinset,  pembakaran  spritus,  rak  tabung, ayakan nomor 40, oven, seperangkat alat Rotary Evaporator,Sterling – Bidwell, plat KLT , detektor sinar 254 dan 366 nm. Alat uji aktivitas antibakteridigunakan
autoklaf,  inkubator,  kotak  septis,  inkas, jarum  ose,  tabung  reaksi,  oven,  lampu spiritus,  beaker  glass,  pipet  ukur,  dan batang pengaduk.
Jalannya Penelitian Identifikasi tanaman
Tahap  pertama  penelitian  ini adalah  melakukan  identifikasi  tanaman krangean yang bertujuan untuk menghindari kesalahan dalam pengumpulan  bahan  serta  menghindari kemungkinan tercampurnya bahan dengan tanaman lain. Tanaman krangean diidentifikasi  di  Laboratorium  Biologi Farmasi,  Fakultas  Farmasi,  Universitas Gajah Mada Yogyakarta.
Pembuatan ekstrak dan fraksinasi.
Serbuk  kulit  batang  krangean diperoleh  dari kulit  batang  krangean, dicuci  dengan  air  mengalir setelah  itu dikeringkan dalam ovenpada suhu 40 o C, setelah  kering  dibuat  serbuk  dan  diayak
dengan  ayakan  no.  40.Serbuk  kulit batang  krangean  kemudian diekstraksi secara  maserasi  menggunakan  pelarut etanol  70%,  hasil  maserasi dipekatkan menggunakan evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental. Hasil maserasi dilanjutkan fraksinasi  mengunakan  n- heksan, etil asetat, dan air. Hasil fraksi n- heksan  dan  etil  asetat  dipekatkan menggunakan  evaporator  pada  suhu 40 o C pada  fraksi  air  dipekatkan menggunakan waterbath.Identifikasi minyak  atsiri. Identifikasi  senyawa
minyak  atsiri  menggunakan  KLT  yaitu, fase  diam  silika  gel  GF  254  dan  fase gerak  kloroform  :  benzene  (1  :  1) dideteksi  pada  sinar  UV  ada  bercak gelap,  disemprot  dengan    pereaksi anisaldehid-asam  sulfat  agar  timbul warna  hijau (Harborne 1987).
Uji  aktivitas  bakteri dan  jamur metode difusi dan dilusi
Uji aktivitas dengan metode  difusi ditentukan  dengan  cara  mengukur diameter daerah hambat dengan konsentrasi  50%,  25%  dan  12.5%, menggunakan media MHA dalam cawan petri  yang  mempunyai  diameter  dan ketebalan  media  tertentu..  Satu  sumuran diisi pelarut  sebagai  kontrol  positif (Kotrimoksazol dengan konsentrasi trimetoprim 0,8% b / v dan sulfametoksazol 4  % b / v ), kontrol  negatif    DMSO  1%, lainnya diisi dengan  sediaan  ekstrak, fraksi  n-heksan,  etil  asetat  dan  air dari kulit batang krangean dengan konsentrasi 50%, 25%, dan 12,5%.
Uji  aktivitas dengan metode dilusi dilakukan  terhadap  fraksi  teraktif untuk menentukan  konsentrasi  daya bunuh  minimum  (KBM)  yaitu  berupa
satu  seri  pengenceran  dalam  berbagai konsentrasi  sebagai  berikut  50%,  25%; 12,5%,  6,25%;  3,12%;  1,56%;  0,78%; 0,39%; 0,20%. Kontrol positif antibakteri adalah suspensi  kotrimoksazol dengan konsentrasi  trimetoprim 0,8% b / v dan sulfametoksazol 4  % b / v dan  antijamur adalah  ketokonazol; dan  kontrol  negatif adalah DMSO 1%.
Hasil dan Pembahasan
Hasil Identifikasi  tanaman  krangean ( Litsea  cubeba Pers . ) dan  rendemen ekstrak.
Tanaman  yang  digunakan  dalam penelitan  ini  adalah  tanaman  krangean yang telah diidentifikasi di Laboratorium Biologi  Farmasi,  Fakultas  Farmasi, Universitas  Gajah  Mada,  Yogyakarta. Ekstrak kental kulit batang krangean yang didapat  adalah  45,313  gram  dengan rendemen  15.10%.Hasil  rata-rata  serta prosentase rendemen fraksi n-heksan, etil asetat,  dan  air  secara  berturut-turut adalah 1,94  gram  dengan  rendemen 19,40%;  2,414 gram  dengan  rendemen 24,14%;  42,33  gram  dengan  rendemen 43,33%. Organoleptis  fraksi  n-heksan warna  kuning,  bentuk  kental,  bau  khas aromatic; fraksi  etil  asetat berwarna kuning  tua,  bentuk  kental,  bau  khas aromatis.  Sedangkan  fraksi  air  berwarna coklat, bentuk kental, tidak berbau Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri dan antijamur ekstrak dan fraksi-fraksi Masing – masing  sediaan  galenis  dibuat dalam tiga konsentrasi yaitu 50 % b/v, 25 %  b/v,  dan  12,5  %  b/v.  Pelarut  dan kontrol  negatif  yang  digunakan  untuk membuat  konsentrasi  menggunakan DMSO  1%  karena  DMSO  1%  selain tidak  bersifat  toksis  juga  mampu
membantu  sampel  uji  dalam  berdifusi sehingga meningkatkan aktivitas antibakteri. Hasil  pengujian  aktivitas antibakteri dapat  dilihat pada  tabel  1  di bawah  ini,  fraksi  n-heksan,  etil  asetat, dan air dari ekstrak etanolik kulit batang krangean terhadap E.Coli ATCC 25922menunjukkan  daya  hambat,  ini dibuktikan  dengan  adanya  daerah jernih di sekitar sumuran yang tidak ditumbuhi bakteri. Kontrol  positif (kotrimoksazol) memiliki rata-rata daya hambat 30,33 ± 0,01mm, pada kontrol negatif yang berisi DMSO 1% tidak memiliki daya hambat.
Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa makin  tinggi  konsentrasi  fraksi  makin besar  kemampuan  aktivitas  antibakteri. Fraksi n-heksan merupakan fraksi teraktif, karena  memiliki  daya  hambat  lebih efektif  terhadap E. Coli ATCC  25922 dibandingkan  fraksi  etil  asetat  dan  air. Hal  ini  kemungkinan disebabkan  pada fraksi n-heksan mampu menarik senyawa non polar diantaranya minyak atsiri serta triterpenoid. Namun  belum  diketahui pasti senyawa  manakah  yang  bersifat antibakteri  terhadap E. Coli ATCC 25922. Aktivitas  antibakteri  fraksi  n- heksana berhubungan dengan senyawa – senyawa  alam  yang  terkandung  di dalamnya.  Golongan  senyawa  yang mempunyai  aktivitas antibakteri  yang dimaksud  masih  belum  diketahui  pasti karena untuk mengetahuinya dibutuhkan isolasi  lebih  lanjut  hingga  ke  tingkat senyawa murninya.  Mekanisme  aksi antibakteri terpenoid  belum diketahui sepenuhnya,  tetapi  diperkirakan  adanya kerusakan membran bakteri olehsenyawa – senyawa lipofilik (Cowan 1999).
Tabel 1.  Diameter  hambat  ujiaktivitas  antibakteri  secara  difusi  terhadap E.Coli ATCC 25922 Sediaan uji Konsentrasi Rata-rata diameter hambat (mm) Ekstrak etanol 50 % 20±1,00 25 % 14,67±1,53 12,5 % 8±2,65 Fraksi n-Heksan 50 % 30±0,00 25 % 26±1,00 12,5 % 24,67±0,58 Fraksi Etil asetat 50 % 20±2,00 25 % 17,67±0,58 12,5 % 12,67±2,52 Fraksi Air 50 % 19,67±1,53 25 % 17,33±0,58 12,5 % 9±1,00 Kontrol positif ( + ) 30,33±0,01 Kontrol negatif ( - ) 0 Hasil pengujian aktivitas antibakteri pada tabel 1, fraksi n-heksan, etil  asetat,  dan  air  dari  ekstrak  etanolik kulit batang krangean terhadap
E.Coli ATCC  25922 menunjukkan  daya hambat,  ini  dibuktikan  dengan  adanya daerah  jernih  di  sekitar  sumuran  yang tidak  ditumbuhi  bakteri.  Hasil  uji aktivitas antibakteri terhadap E.Coli ATCC 25922secara difusi dapat dilihat fraksi n- heksan  berturut-turut  pada  konsentrasi 50%,  25%  dan  12,5%  yaitu  memiliki rata-rata  daya  hambat  30  mm,  26  mm, dan  24,67  mm. E.Coli merupakan  gram negatif  yang    memiliki  tiga  lapisan  pada dinding  selnya  yaitu  berupa  lipoprotein, liposakarida  dan  peptidoglikan  (Pelczar 1988).  Menurut  Tortora  (1986),  adanya lipoprotein dan liposakarida pada bakteri gram  negatif dapat menghambat  zat antimikroba untuk mencapai
peptidoglikan,  sehingga  kerusakan  sel
dapat  dihindari.  Hal  inilah  yang menjadikan E.Coli lebih resisten
terhadap  senyawa  yang  terkandung dalam fraksi n Heksan.
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri metode  dilusi    pada  tabel  2dapat  dilihat bahwa  uji  aktivitas  antibakteri E.Coli ATCC  25922pada  tabung  1  yang  berisi BHI  dan  fraksi  n-heksan  serta  pada tabung 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 dengan konsentrasi  berturut-turut    yaitu 50%, 25%;  12,5%,  6,25%;  3,12%;  1,56%; 0,78%; 0,39%; 0,20% serta pada tabung 11  berisi  BHI  dengan  suspensi  bakteri. Nampak  hanya  pada  tabung  8,  9,  10, yaitu  konsentrasi  0,78%;  0,39%;  dan 0,20%    positif  atau  adanya  pertanaman bakteri,  menunjukkan  bahwa  makin besar  konsentrasi  dari  fraksi  n-heksan makin tinggi aktivitas antibakteri terhadap E.Coli ATCC 25922.
Tabel 2. Hasil aktivitas antibakteri metode dilusi dari fraksi n-heksan terhadap E.Coli ATCC 25922 NO Konsentrasi % Inokulasi Endo agar Fraksi n-heksan I II III 1 Kontrol (-) - - - 2 50 - - - 3 25 - - - 4 12,5 - - - 5 6,25 - - - 6 3,12 - - - 7 1,56 - - - 8 0,78 + + + 9 0,39 + + + 10 0,20 + + + 11 Kontrol (+) + + +
Keterangan : (-)  : tidak ada pertumbuhan bakteri
(+)  : ada pertumbuhan bakteri.
Standard  Brown  II  dalam  medium  BHI  mempunyai  perbandingan pengenceran 1:1000
Tabel 3. Diameter hambat uji aktivitas antijamur secara difusi
Terhadap Candida albicans Sediaan uji Konsentrasi Rata rata diameter hambat (mm) Ekstrak Etanol 50 % 13,67 ± 1,53 25 % 12,67 ± 0,58 12,5 % 11,67 ± 0,58 Fraksi n-Heksan 50 % 20,33 ± 0,58 25 % 16,00 ± 1,00 12,5 % 15,67 ± 1,15 Fraksi Etil asetat 50 % 14,67 ± 0,58 25 % 12,33 ± 1,15 12,5 % 11,67 ± 1,53 Fraksi Air 50 % 14,00 ± 1,73 25 % 10,67 ± 0,58 12,5 % 10,33 ± 1,15 Kontrol positif ( + ) 34,67 ± 0,58 Kontrol negatif ( - ) 0 0 0
Penelitian  ini  membuktikan  pada konsentrasi  1,56%  merupakan kadar terendahfraksi  n-heksan yang  dapat membunuh E.Coli ATCC 25922. Berdasarkan  tabel  3  menunjukan hasil  penelitian  bahwa  fraksi  n-heksan memiliki daya hambat yang paling efektif terhadap C. albicans ATCC 10231dibandingkan  fraksi  etil  asetat,  air dan  ekstrak    etanolik  kulit  batang krangean.  Hal  ini    dapat    dilihat    dari hasil    tersebut    bahwa    fraksi    n-heksan dan  kontrol  positif  (ketokonazole) lebih efektif  menghambat C.  albicans ATCC 10231.  Hasil rata-rata  diameter  hambat fraksi  n-heksan  konsentrasi  50%,  25%, dan    12,5%  berturut-turut  adalah 20,3±0,58 mm;  16  mm±1,00;dan 15,6±  1,15 mm,  sedangkan  kontrol positif  (ketokonazole)  memiliki  rata-rata diameter  hambat  34,6  mm.    Pengujian
aktivitas  antijamur  secara  difusi  ini menggunakan  kontrol  negatif  DMSO 1%  yang dalam  pengujian ini tidak aktif dalam  menghambat C.  albicans ATCC 10231.Berdasarkan  tabel  diatas  fraksi  n- heksan dalam menghambat pertumbuhan C.  albicans ATCC  10231 mempunyaiaktivitas antijamur yang terbesar dibandingkan fraksietil asetat, air dan  ekstrak  etanol  70%  kulit  batang krangean.Kontrol  positif  yang  dipakai dalam penelitian ini adalah ketokonazole,karena  mekanisme  kerja ketokonazole  berdasarkan  pengikatan pada  enzimsitokrom  P450,  sehingga sintesa  ergosterol  yang  perlu  untuk pembinaan  membransel  jamur,dirintangi dan  terjadi  kerusakan  membran.  Pada penggunaan sistemik,sistem enzim manusia juga dapat dirintangi (Tjay et al. 2007).
Tabel 4. Hasil pengujian aktivitas antijamur fraksi n-heksan kulit batang krangeanterhadap C. albicans ATCC 10231 NO Konsentr asi % Inokulasi Fraksi n-heksan I II III 1 Kontrol (-) - - - 2 50 - - - 3 25 - - - 4 12,5 - - - 5 6,25 - - - 6 3,12 - - - 7 1,56 - - - 8 0,78 - - - 9 0,39 - - - 10 0,20 + + + 11 Kontrol (+) + + +
Berdasarkan  tabel 4  dapat  dilihat bahwa fraksi  nheksan  memilikidaya bunuh terhadap C. albicans ATCC 10231. Konsentrasi BunuhMinimum (KBM) fraksi n-heksan yang  dapat  membunuh C. albicans ATCC 10231 adalah konsentrasi0,39%. Berdasarkan  nilai  KBM  dari  kedua organisme  di  atas  menunjukkan    bahwa fraksi  n  heksan  lebih  poten  sebagai antifungi dibandingkan sebagai antibakteri.Minyak atsiri karangean mungkin menembus dan menghancurkan  dinding  sel  jamur C.albicans lebih  mudah  dibanding bakteri E.coli . Dinding  sel  bakteri E.coli berisi  tiga  komponen  yaitu  lipoprotein membran  terluar  yang  mengandung molekul  protein  yang  disebut  porin  dan lipopolisakarida, sedangkan C.albicans dindingnya terdiri dari ergosterol,  ergosterol  adalah  komponen sterol  yang  bersifat  lipofilik. Adanya perbedaaan  struktur  dan  komponen dinding  sel  tersebut  yang  menyebabkan Eschericia coli sebagai gram negatif lebih resisten. Minyak  atsiri  yang  bersifat lipofilik  lebih  mudah  menembus  sel jamur C.albicans dibandingkan  terhadap dinding bakteri E.coli yang lebih bersifat polar (Jawetz  et  al,  2001). Minyak  atsiri yang  terkandung  dalam  kulit  batang krangean mempunyai pengaruh terhadap penghambatan jamur C.albicans .
Senyawa  penyusun  minyak  atsiri  dapat berupa  sesquiterpen  yang  merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit  isopren.    Senyawa  sesquiterpen mempunyai  efek  yang    cukup  besar sebagai  antimikroba,  antifungi  dan antibiotik  (Ali  et  al  .,  2008;  Guo  et  al.,
2008).    Mekanisme  antimikroba  diduga dengan  cara    merusak  membran  sel jamur  sehingga  terjadi    kebocoran  ion dari sel jamur (Padmini  et al ., 2010 ).
Mekanisme penghambatan
antibakteri  pada  minyak  atsiri  diduga yaitu  mengganggu  proses  terbentuknya membran  atau  dinding  sel,  sehingga membran atau dinding sel tersebut tidak terbentuk atau terbentuk tidak sempurna. Minyak atsiri juga merusak permeabilitas barier  dalam  mikroorganisme  sehingga mempunyai  aktivitas  antibakteri  dan antijamur.  Mekanisme  penghambatan antibakteri  pada  triterpenoid, diduga senyawa  triterpenoid  termasuk  senyawa yang  merupakan  komponen  aktif  dalam obat. Senyawa triterpenoid akan bereaksi dengan  porin  (protein  transmembran) pada  membran  luar  dinding  sel membentuk  ikatan  polimer  yang  kuat sehingga mengakibatkan rusaknya porin. Rusaknya  porin  yang  merupakan  pintu keluar masuknya substansi, akan mengurangi  permaebilitas  dinding  sel yang  akan  mengakibatkan  sel  akan kekurangan nutrisi sehingga
pertumbuhan  terhambat  atau  mati. Senyawa  ini  banyak  digunakan  untuk menyembuhkan penyakit gangguan kulit. Triterpenoid  memiliki  sifat  antijamur, insektisida,  antibakteri  dan  antivirus (Reapina 2007). Senyawa terpenoid yang bersifat    lipofilik    dapat  menyebabkan gangguan  pada  membran  sel  fungi dan dapat  melarutkan  lipid  yang  terdapat dalam membran    sel    (Cowan  1999; Panda et all 2010)
1. Hasil  identifikasi  fraksi  teraktif secara  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT)
Identifikasi  senyawa  secara  KLT hanya  dilakukan  pada  fraksi n -heksan karena  fraksi  n-heksan  merupakan  fraksi yang  mempunyai  aktivitas  antibakteri paling  aktif  terhadap S.  aureus ATCC
25923.  Identifikasi  ini  dilakukan  untuk mengetahui senyawa kimia yang terkandung  pada  fraksi  n-heksan,  yaitu senyawa  yang  bersifat  non  polar  seperti minyak atsiri dan triterpenoid.
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis minyak atsiri kulit batang krangean.
Identifikasi  minyak atsiri  secara Kromatografi  Lapis  Tipis  menggunakan fase  diam  silika  gel  GF  254  dan  fase gerak  kloroform  :  benzene  (1  :  1). Sebagai  penampak  noda,  dipakai pereaksi anisaldehid-asam sulfat.
Identifikasi  minyak  atsiri  menurut Harborne  (1987)  menimbulkan  warna hijau,  merah,  coklatsetelah  disemprot dengan anisaldehid-H 2 SO 4 sesuai dengan gambar 1 menghasilkan 4 bercak, setelah dideteksi pada sinar UV 254 memberikan  peredaman  pada  lempeng KLT  dan  pada  deteksi  sinar  UV  366 menunjukkan  fluoresensi. Lempeng  KLT setelah  disemprot  dengan  pereaksi anisaldehida-asam sulfat 1% dan
dipanaskan pada suhu 110 o C selama 5- 10  menit  terlihat  warna  merah  muda. Identifikasi  minyak  atsiri  pada  fraksi  n- heksan  menunjukkan  hasil  yang  sama dengan pustaka, sehingga dapat disimpulkan  bahwa  fraksi  n-heksan positif  mengandung  senyawa  minyak atsiri.
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis triterpenoid kulit  batang  krangean . Identifikasi triterpenoid secara Kromatografi  Lapis  Tipis  menggunakan fase  diam  silika  gel  GF  254  dan  fase gerak n-heksan : etil asetat (1 : 1). Identifikasi  triterpenoid  menurut Harborne  (1987)  setelah  disemprot menggunakan pereaksi anisaldehid-
H 2 SO 4 dan dipanaskan pada suhu 100 o C selama  10  menit  terlihat  noda  berwarna ungu  atau  biru.  Identifikasi  triterpenoid menurut  gambar 2 menghasilkan  2 bercak,  setelah  dideteksi  dengan  sinar UV  254  memberikan  peredaman  pada lempeng KLT. Hasil pada deteksi UV 366 kromatogram  menunjukkan  fluoresensi. Identifikasi  triterpenoid  pada  fraksi  n- heksan  menunjukkan  hasil  yang  sama dengan pustaka, sehingga dapat disimpulkan  bahwa  fraksi  n-heksan positif mengandung senyawa
triterpenoid.
c b a
Gambar 1. Profil KLT minyak atsiri,deteksia. sinar UV 254 nm ; b. sinar UV 366 nm; c.pereaksi semprot anisaldehid-H 2 SO 4

## Kesimpulan
Fraksi  n-heksan  dari  ekstrak etanol 70 % kulit batang krangean ( Litsea cubeba Pers . ) mempunyai  aktivitas antibakteri dan  antijamur paling  tinggi terhadap E.Coli ATCC  25922dan C. albicans ATCC 10231.

## Daftar pustaka
Ali,  N.A.,  Martina  W.,  N.  Arnold,  U. Lindequist,  L.  Wessjohan,  2008,
Essential  Oil  Composition  from Oleogum  Resin  of  Soqotraen Commiphora kua,Rec. Nat. Prod. 2 (3) : 70- 75, www.acgpubs.org/RNP Azah,  N  dan  S.  Susiarti.  1999. Litsea cubeba (Lour) Persoon Essential-oil plants.  Plant  Resources  of  South- East  Asia  19.  Prosea .  Bogor Indonesia. pp 123 126 Cowan,    M.M.,    1999,    Plant    Products as  Antimikrobial    Agents,  Clinical
Microbiology  Review,    12    (4)    :
564 – 582,  http:  //www. heart- intl.net/HEART/120104/Plant
Productsas Antimicrobi.pdf Guo,  L.,  Jin-zong  W.,  Tin  H.,  Tong C.,and  Khalid  R.,  2008,  Chemical Composition, Antifungal and Antitumor  Properties  of  Ether Extracts  of  Scapania  verrucosa Heeg.  and  its  Endophytic  Fungus Chaetomium  fusiforme  Molecules, 13 : 2114-2125, DOI: 10.3390/molecules 13092114, www.mdpi. org/molecules Harbone,  J.B,  1987, Metode  Fitokimia
Penuntun  dan  Cara  modern Menganalisa  Tumbuhan, Edisi  III, Penerbit ITB, Bandung.
Jawetz,  E.  Melnick,  J.L.,  dan  Adelberg, F.A.,  2001, Review  of  Medical Mikrobiology, Ed  16 th ,  California: Lange Medical Publication. Diterjemahkan oleh Gerald Bonang.  FK,  UKL,  Atmajaya, Jakarta. 300-303. Mardhiah,  Y.  2010,  Aktivitas  antibakteri edible film dari pati topika yang di inkorporasi  dengan  minyak  atsiri daun attarasa [ Litsea Cubeba (Lour.) Pers . ]. Skripsi
Gambar 2. Profil KLT triterpenoid, deteksi a. sinar UV 254 nm; b. sinar
UV 366 nm; c. pereaksi anisaldehid-H 2 SO 4 c b a
Aktivitas Antibakteri  Dan Antijamur  Kulit Batang Krangean ~100 Muchtaridi, A. Apriyantono, A. Subarnas,
dan  S.  Budijanto.    2005.    Analisis Senyawa  Aktif  dari  Minyak  Atsiri Kulit  Batang  Ki  Lemo  (Litsea cubeba  lour.  Pers)  yang  Menekan Aktivitas Lo-komotor Mencit. Jurnal  Farmasi  Indonesia  16  (1): 63-69 Padmini, E.A., Valarmathi, A., and Rani,
M.U., 2010, Comparative Analysis of  Chemical  Composition  and Antibacterial  Activities  of  Mentha spicata  and  Camellia  sinennsis.
Asian J. Exp. Biol. Sci, 1 (4) : 772 - 781, http://www.ajebs.com/vol-
4/9a.pdf
Panda,  K.,  S.S.  Brahma  and  K.  Dutta,
S.,    2010,    Selective    Antifungal
Action    of    Crude  Extracts    of Cassia    fistula    L.:    A    Preltminary Study    on    Candida    and Aspergillus    spesies,  Malaysian Journal of  Microbiology,  6(1):62- 68, http://web.usm.my/mjm/issues/vol6 no1/research9.pdf Reapina,  Elsadora  M.  2007.
Kajian aktivitas  antimikroba  ekstrak  kulit mesoyi (cryptocaria massoia) terhadap  bakteri  pathogen  dan pembusukan pangan
[skripsi]. http://www.repository.uin- suska.ac.id/1925/7/EM.pdf Sudewo.  2004. Tanaman  Obat  Populer,
Jakarta: Agromedia Pustaka. Tortora  GJ.  1996.  Microbiology:  an
Introduction.California: The Benyarnin Publishing CompannyInc. Wang,  H.,  Liu,  Y.,  2010,  Chemical Composition  and  Antibacterial
Activity  of  Essential  Oils  from Different  Parts  of Litsea  cubeba. Chem Biodiver, 7: 229-235. Zulnely  2003.  Sifat  fisiko  kimia  minyak kilemo  ( Litsea  cubeba )  asal
Kuningan,  Jawa  Barat.  (Physico- chemical properties of essential oil of Litsea cubeba (Kilemo) originated  from  Kuningan,  West Java). Jurnal  Penelitian  Hasil Hutan.