Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Kulit Buah Pinang ( Areca catechu ) dan Daun Kayu Manis ( Cinnamomum burmanni )
Cytotoxic Activity of Pinang Fruit Leather ( Areca Catechu ) and Cinnamon Leaf Ethanol Extract
Herdwiani W 1 , Soemardji AA 2 , Elfahmi 2 , Tan MI 3 Nabila K 1 , Anita K 1 1 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Surakarta, Indonesia, 2 Sekolah Farmasi Institut Teknologi Bandung, 3 SITH Institut Teknologi Bandung, herdwiani@gmail.com 1

## ABSTRAK
Tanaman  pinang  ( Areca  cathecu )  dan  kayu  manis  ( Cinnamomum  burmannii )  adalah tanaman tradisional yang diduga memiliki khasiat sebagai antikanker. Penelitian ini dimaksudkan untuk mengetahui efek sitotoksik dari ekstrak etanol kulit buah pinang ( Areca catechu ) terhadap kultur sel kanker payudara T47D & ekstrak etanol daun  kayu manis ( Cinnamomum burmannii ) terhadap kultur sel kanker kolon WiDr
Simplisia yang diperoleh selanjutnya dimaserasi untuk memperoleh ekstrak etanol kulit buah pinang dan daun kayu manis. Metode yang digunakan dalam pengujian aktifitas sitotoksik adalah  MTT  ( 3-[4,5-dimetilthiazol-2yl]-2,  5-difeniltetrazolium bromide)  untuk  mendapatkan  nilai IC 50 .
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kulit  buah  pinang  tidak  memiliki  efek sitotoksik terhadap kultur T47D  dan memiliki nilai  IC 50 467, 34 μg/mL. Ekstrak daun kulit kayu manis tidak memiliki efek sitotoksik terhadap kultur WiDr dan memiliki nilai IC 50 405,69 μg/ml.
Kata kunci :  Kayu manis, pinang, sitotoksik , T47D, WiDr.

## ABSTRACT
The  areca  plant (Areca  cathecu) and  cinnamon (Cinnamomum  burmannii) have anticancer properties.  The aim of this research is to know the cytotoxic effect of Areca catechu of  ethanol  extract  on  T47D  breast  cancer  cell  culture  and Cinnamomum  burmannii leaves  of ethanol extract on WiDr colon cancer cell culture.
The obtained simplicia macerated to obtain ethanol extract of pinang peel and cinnamon leaves. The method used in testing cytotoxic activity was MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2yl] -2, 5- diphenyltetrazolium bromide) to obtain IC 50 values.
The results showed that ethanol extract of pinang peel  and cinnamon leaf did not have cytotoxic  effect  on  T47D  culture  with  IC 50 467,34 μg/mL and on WiDr culture  with IC 50 405,69 μg/ml.
Key word : Areca cathecu, Cinnamomum burmannii, cytotoxic, T47D, WiDr

## PENDAHULUAN
Kanker  adalah  suatu  penyakit yang ditandai dengan adanya pertumbuhan  sel-sel  jaringan  tubuh yang  tidak normal. Sel-sel kanker akan berkembang dengan cepat, tidak terkendali,  dan  akan  terus  membelah diri, selanjutnya menyusup ke jaringan sekitarnya  dan terus menyebar (metastase)  (Katzung,  2002).  Kanker merupakan penyebab
kematian
terbesar kedua setelah penyakit
kardiovaskular (Sukardiman et al . 2004).
Kanker payudara merupakan salah satu jenis  kanker  yang  banyak  diderita  oleh kaum  wanita.  Jumlah  kasus  kanker payudara pada tahun 2014 pada wanita sebanyak  48.998  kasus  di  Indonesia (WHO,  2014). Perkembangan  penyakit kanker  kolon  di  Indonesia  semakin meningkat tiap tahunnya, dan insidensinya adalah nomor ketiga
setelah  kanker  paru  dan  kanker payudara (Riskesdas, 2013).
Penelitian  khususnya  terhadap pengembangan dan penemuan antikanker yang aman dan efektif mutlak diperlukan. Usaha menemukan antikanker  yang  lebih  spesifik  dan sensitif dapat dilakukan melalui pemanfaatan tanaman obat yang diduga berkhasiat sebagai antikanker. Tanaman tradisional yang diduga memiliki  khasiat  sebagai  antikanker adalah tanaman pinang ( Areca cathecu ) dan kayu manis ( Cinnamomum burmannii ).
Pinang  mengandung  alkaloid, flavonoid,  terpenoid,  fenolik,  dan  tanin (IARC, 2004). Aktivitas sitotoksik secara in vitro terhadap sel leukemia L1210 dari ekstrak etanol biji pinang diperoleh nilai IC 50 24,73 µg/ mL (A’yun, 2016). Aktifitas sitotoksik  ekstrak  biji  pinang  diduga salah satunya disebabkan oleh flavonoid  yang  mampu  menghambat proliferasi  pada  berbagai  sel  kanker pada  manusia,  namun  tidak  toksik terhadap sel normal manusia (Ren et al . 2003).
Kandungan  senyawa  aktif  dari tanaman kulit kayu manis adalah minyak atsiri,  safrole,  sinamaldehid,  eugenol, tanin, damar, kalsium oksalat, flavonoid, saponin  serta  kandungan  gizi  lainnya seperti  gula,  protein,  lemak  kasar  dan pektin. Sinamaldehid
mampu menghambat  proliferasi,  invasi,  dan pertumbuhan tumor. Sinamaldehid yang diisolasi  dari C.    cassia juga  telah terbukti  memiliki  efek  antiangiogenesis atau pengahmabt pertumbuhan
pembuluh  darah  baru  dan  dapat disimpulkan  bahwa  sinamaldehid  dan derivatnya  memiliki  aktivitas  antitumor (Kwon et  al. 1998).  Berdasarkan penelitian  dari  Lean-Teik  Ng  dan  Shu- Jing  Wu    (2009)  potensi  antiproliferatif sinamaldehid dengan IC 50 9,76±0,67 M sebaik  dengan  obat  antikanker  5- fluorouracil  dengan  IC 50 9,57±0,61  M.
Anjarsari  (2013)  melaporkan  bahwa destilat  kayu  manis  mempunyai  efek sitotoksik  pada  sel  T47D  dengan  nilai IC 50 sebesar 75 µg/ml. Minyak atsiri kulit kayu  manis  memiliki  nilai  IC 50 terhadap kultur  sel  WiDr.  Ekstrak  etanol  kayu manis mempunyai efek imunostimulator yang ditandai dari kenaikan jumlah sel T CD4 dan T CD8 (Hasan et al. 2013 ).
Penelitan ini dimaksudkan untuk mengetahui  efek  sitotoksik    ekstrak etanol kulit buah pinang ( Areca catechu ) terhadap  kultur  sel  kanker  payudara T47D & ekstrak etanol daun Kayu Manis ( Cinnamomum burmannii ) terhadap kultur sel kanker kolon WiDr.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  ekstraksi  maserasi , alat identifikasi  senyawa  aktif,  alat Sterling- Bidwell ,  s entrifuge Sigma  3K12  (B. Braun  Biotech  International), Laminar Air  Flow  class  II (Labconco),  ELISA reader (SLT  240  ATC), Nebauer Haemocytometer (Olympus  CKX41), mikroplate  96  sumuran  (Nunclone), mikroskop  inverted, magnetic  stirrer dan  kamera  digital  dan  alat-alat  gelas lazim.
Reagen uji sitotoksik MTT (Axiovert-25),  serbuk  kulit  buah  pinang dan kayu manis, etanol p.a, etanol 96%, reagen identifikasi senyawa aktif, kultur sel T47D, kultur  sel WiDr,  media  RPMI 1640 (Gibco), Fetal Bovine Serum (FBS)
10%, v/v (Gibco), larutan PBS ( Phosphat  Buffered  Saline )  pH  7,2  ; Natrium  Dodesil  Sulfat  10%  dalam  HCl 0,1  N  sebagai stopper, penisillin- streptomisin 1% v/v (Gibco).

## METODE  PENELITIAN
1.  Pembuatan  serbuk  kulit  buah pinang & daun kayu manis
Simplisia  yang  diperoleh  kemudian diserbuk  dan  diayak  dengan  ayakan No.40 untuk memperoleh serbuk
simplisia . Serbuk  dilakukan  penetapan kadar air.

## 2.  Pembuatan ekstrak
Ekstrak  etanol  kulit  buah  pinang  dan ekstrak  etanol  daun  kayu  manis diperoleh  dengan  metode  maserasi. Sebanyak 250 gram serbuk dimasukkan dalam  botol  cokelat  ditambah  etanol 96%  1875  mL.  Maserasi  dilakukan kurang  lebih  selama  5  hari  dengan penggojogan. Setelah 5 hari ditambahkan pelarut etanol 96%
secukupnya  sampai  diperoleh  sari sebanyak  2500  ml.  Kemudian  disaring dengan  kain  flannel.  Maserat  yang didapat dipekatkan dengan rotary
evaporator (suhu  tetap  dijaga  pada 40 o C-50 o C)    sampai  diperoleh  ekstrak kental.
3.  Standarisasi ekstrak Identifikasi  kandungan  senyawa  kimia ekstrak  etanol  kulit  buah  pinang  dan daun  kayu  manis  dilakukan  secara kualitatif  dengan  uji  reagen  dan  uji penegasan  dengan  KLT  (Kromatografi Lapis Tipis).
4.  Uji aktivitas sitotoksik Metode yang digunakan dalam pengujian  aktifitas  sitotoksik  adalah metode  MTT  ( 3-[4,5-dimetilthiazol-2yl]- 2, 5-difeniltetrazolium bromide). Larutan uji sebanyak 100 μL
disuspensikan dengan 100 μL sel dalam medium  RPMI  1640  ( Foetal  Bovine Serum (FBS)  10%  v/v  penisillin- streptomisin 1% v/v) (kepadatan 2 x 10 4 sel/sumuran) kemudian  dimasukkan ke dalam microplate 96.  Sel  diinkubasi selama 24 jam dalam inkubator CO 2 5 % dengan  kelembapan  yang  sesuai. Sampel dimasukan dalam plate dengan variasi kadar 500 µg/ml; 250 µg/ml ; 125 µg/ml;  62,5  µg/ml;  31,25  µg/ml  ;  15,6 µg/ml;  7,8  µg/ml.  Selanjutnya sampel diinkubasi  dalam  inkubator  CO 2 5  % selama  24  jam.  Sel  yang  hidup  akan bereaksi dengan reagen MTT
membentuk  warna  ungu  (formazan).
Media sel selanjutnya dibuang,
ditambahkan  110  μL  reagen  MTT  ke setiap sumuran, termasuk kontrol media (tanpa  sel).  Setelah  diinkubasi  4  jam, ditambahkan  100  μL  SDS (Sodium Dodecyl Sulfate ) 10 % untuk menghentikan  reaksi  antara  sel  hidup dan diinkubasi over night (24 jam) pada suhu kamar di tempat gelap. Pada akhir inkubasi serapan dibaca dengan ELISA reader pada  panjang  gelombang  570 nm.
Data absorbansi masing- masing sumuran, kemudian dikonversikan  dalam  persen  viabilitas sel dengan menggunakan persamaan :
%  viabilitas  =    (a-b)/(c-b)  100%.
Keterangan  :  a=absorbansi  sel perlakuan; b=absorbasi kontrol media; c=absorbansi kontrol sel
Nilai IC 50 ( Inhibitor Concentration 50),  dihitung  dengan  menggunakan persamaan regresi linear yang menggambarkan hubungan antara persen  (%)  viabilitas  sel  T47D  dengan log  konsentrasi  sampel  uji  (Setyawan 2006). Y = bx + a Keterangan : x = log konsentrasi  senyawa;  y  =  persen viabilitas sel dan IC 50 = anti log x

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1.  Serbuk kulit buah pinang & daun kayu manis
Kulit  buah  pinang  yang  digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari Desa Topobali  Kabupaten  Flores  Timur –NTT dan  daun  kayu  manis  yang  yang diperoleh dari desa Jambu, Ambarawa, Kabupaten  Semarang,  Jawa  Tengah.
Hasil determinasi
tanaman menunjukkan  bahwa  tanaman  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah tanaman  pinang  ( Areca  catechu )  dan tanaman  kayu  manis  ( Cinnamomum burmanni) .  Kadar  air  serbuk  kulit  buah pinang  diperoleh  sebesar  8,9%  dan serbuk daun kayu manis adalah sebesar 7,5%.

## 2. Ekstrak simplisia
Ekstrak  etanol  kulit  buah  pinang menghasilkan rendemen
6,35%.
Ekstrak  etanol  daun  kayu  manis menghasilkan rendemen 7,99 %.

## 3.  Standarisasi ekstrak
Hasil  identifikasi  kandungan    senyawa kimia  ekstrak  etanol  kulit  buah  pinang dan  kulit  kayu  manis  secara  kualitatif dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil identifikasi senyawa kimia dengan uji warna  ekstrak  kulit  buah  pinang  dan  daun  kayu manis.
Golongan senyawa Hasil Alkaloid + Saponin + Flavonoid + Tanin + Triterpen +
Pemeriksaan  KLT  ekstrak  kulit  buah pinang dapat dilihat pada gambar 1.
a b c
Gambar  1.  a)  sebelum  penyemprotan,  b)  deteksi pada sinar UV 254 nm, c) deteksi pada sinar UV 366 nm.
Pemeriksaan  KLT  terhadap    senyawa sinamaldehid dan flavonoid yang diketahui  memiliki  aktivitas  antioksidan dan  antiproliferatif  (Kuo et  al. 2005). Diperoleh hasil seperti pada gambar 2.
a.  sinamaldehid
UV 254 nm            UV 366 nm          visibel
G ambar  2.  Profil  KLT  sinamaldehide  dan  ekstrak etanol  daun  kayu  manis  (E)  dengan  fase  diam Silicagel 60 F 254 , fase gerak butanol - asam asetat - air  (3:1:1)  dan  disemprot  dengan  aluminium chlorida serta dideteksi sinar UV a) 254 nm, b) 365, c) visibel.
a.  Flavonoid

## UV 254 nm    UV 366 nm      visible
Gambar 3. Profil KLT flavonoid  rutin (R) dan ekstrak etanol  kulit  kayu  manis  (E)  dengan  fase  diam Silicagel 60 F 254 , fase gerak butanol - asam asetat - air  (3:1:1)  dan  disemprot  dengan  aluminium chlorida serta dideteksi sinar UV a) 254 nm, b) 365,
c) visibel.
4. Hasil  uji  sitotoksik. Persamaan ekstrak etanol kulit buah pinang adalah y  =  -75.381x  +  251.24,  (r  =  0.934). Berdasarkan  persamaan  linear  ini didapatkan nilai IC 50 dari ekstrak etanol kulit  buah  pinang  sebesar  467,  34 μg/mL.  Berdasarkan  kajian  pustaka yang  dilakukan  oleh  Mamonto et  al. (2014),  kulit  buah  pinang  mengandung senyawa flavonoid yang juga dibuktikan melalui uji kualitatif menggunkan metode tabung. Sebagian besar senyawa  flavonoid  diduga  mampu menghambat  proliferasi  pada  berbagai sel  kanker  manusia  (Ren et  al .  2003). Senyawa flavonoid merupakan metabolit  sekunder  yang  terkandung pada  pinang  yang  memiliki  khasiat antikanker mempunyai sifat kepolaritasan  yang  bersifat  semipolar.
Kepolaritasan  ini  diharapkan  dapat menembus  sel  kanker  yang  bersifat non-polar  sehingga  dapat  memberikan efek terhadap penghambatan sel kanker.
Hasil  aktifitas  sitotoksik  ekstrak  kulit buah pinang dapat dilihat pada gambar 4
Gambar 4. Morfologi sel kanker payudara T47D  setelah  pemberian  ekstrak  etanol kulit  buah  pinang  (a)  konsentrasi  1000 µg/ mL; (b) konsentrasi 15,63 µg/ mL Hasil  aktifitas  sitotoksik  ekstrak  daun kayu manis dapat dilihat pada gambar 5
a) b) Gambar  4.  Morfologi  sel  WiDr  dari  ekstrak  etanol daun  kayu  manis  sebelum  diberi  MTT,  a) konsentrasi 500 μg/ml; b) konsentrasi 31,25 μg/ml Persamaan regresi linear yang diperoleh dari ekstrak etanol daun kayu manis yaitu y = -43,67x + 163,9 dan nilai r  =  0,983.  Nilai  IC 50 dihitung  dengan memasukan  nilai  y  sebesar  50% sehingga  diperoleh  nilai  antilog  x sebagai IC 50 yaitu 405,69 μg/ml.
Kematian  sel  tersebut  disebabkan adanya senyawa yang mampu memicu apoptosis  sel.  Ekstrak etanol  kulit kayu manis mengandung beberapa metabolit sekunder  yang  bersifat  antikanker, diantaranya sinamaldehid dan flavonoid.  Jenis  sinamaldehid  yang terkandung  dalam  kayu  manis  adalah trans-cinnamaldehyde, alpha-amyl cinnamaldehyde dan trans-cinnamic alcohol (Elahi et  al. 2004).  Sedangkan golongan  flavonoid  yang  terkandung dalam  kayu  manis  adalah  quarsetin, kaempferol, luteolin, rutin dan
pelargonidin  (Jayaprakasha et  al.
2000). Penelitian terdahulu menyatakan bahwa kandungan sinamaldehid yang merupakan senyawa aktif dalam minyak kayu manis  mampu menginduksi  apoptosis  melalui  induksi apoptosis mitochondrial  permeability transition (MPT)  (Ka et  al .  2003). Peningkatan  permeabilitas  membran mitokondria akan meyebabkan pengeluaran sitokrom c yang mengaktivasi  caspase  3  dan  dapat menyebabkan terjadinya apoptosis (Mitzutani et  al .  2005).  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  terdahulu  bahwa kandungan  sinamaldehid  dari  minyak
a
.
b
atsiri  kulit  kayu  manis  mempunyai  efek sitotoksik  terhadap  sel  kanker  kolon WiDr  yaitu  IC 50 sebesar  13,70  μg/ml (Herdwiani, 2014). Kandungan flavonoid juga telah terbukti mampu menghambat proliferasi  pada  berbagai  sel  kanker pada  manusia.  Flavonoid  menghambat ekspresi  enzim  topoisomerase  I  dan topoisomerase II yang berperan pembentukan  DNA  (Ren  et  al.  2003). Namun  rendahnya  aktivitas  sitotoksik ekstrak etanol dan n -heksana daun kayu manis terhadap sel WiDr ini kemungkinan disebabkan oleh rendahnya  kadar  sinamaldehid  dan flavonoid  pada  daun  kayu  manis  yang berefek sitotoksik.
Flavonoid merupakan agen kemopreventif  dengan  menghambat protein COX-2, selain itu flavonoid juga menghambat protein COX-2
independen lainnya seperti Akt dan NF- kB.  Akt  mempunyai  peranan  penting dalam  regulasi  pertahanan  siklus  sel dan  proliferasi  sel  kanker  dengan mempengaruhi status phosporilasi berlebihan  baik  dari Akt.  Sehingga blokade  signal  tersebut  menyebabkan hambatan pertumbuhan dengan penghentian  siklus  sel  dan  apoptosis dari  sel  kanker.  NF-kB  adalah  faktor transkripsi  yang  terlibat  dalam  fungsi seluler yang luas, di antaranya apoptosis  dan  kontrol  siklus  sel. Penelitian  yang  dilakukan  oleh    Pan et al. (2002), menjelaskan bahwa flavonoid dapat menginduksi penghentian fase G1 pada siklus sel. Aktivitas antikanker juga ditunjukkan  flavonoid  melalui  induksi apoptosis. Flavonoid menghambat ekspresi  enzim  topoisomerase  I  dan topoisomerase II. Inhibitor enzim topoisomerase akan menstabilkan kompleks topoisomerase dan menyebabkan  DNA  terpotong  dan mengalami kerusakan. Kerusakan DNA dapat  menyebabkan terekspresinya protein  proapoptosis  seperti  Bax  dan Bak  dan  menurunkan  ekspresi  protein-
protein  antiapoptosis  yaitu  Bcl-2  dan Bcl-Xl, yang menyebabkan pertumbuhan sel kanker terhambat (Pan et  al. ,  2002).  Flavonoid  telah  terbukti mampu  menghambat  proliferasi  pada berbagai  sel  kanker  pada  manusia namun  bersifat  tidak  toksik  pada  sel normal manusia (Ren et al. 2003).
Ekstrak  kayu  manis  berpotensi menghambat berbagai pertumbuhan sel tumor  secara in  vivo dan  mampu menekan perkembangan sel melanoma secara in  vivo .  Efek  antikanker  dari ekstrak  kayu  manis  dimediasi  oleh induksi  apoptosis  dan  blokade  NF-kB dan AP1 dan gen targetnya adalah Bcl- 2  dan  Bcl-xL  (Kwon et  al. 2010). Berdasarkan  penelitian  Lean-Teik  Ng dan  Shu-Jing  Wu,  Sinamaldehid  yang terkandung  dalam  kayu  manis  memiliki aktivitas antiproliferatif paling kuat pada sel Hep G2 dan sinamaldehid juga dapat menginduksi  sinyal  apoptosis.  Aktivitas
Cinnamomum
cortex diketahui berdasarkan  pada  stimulasi  sistem reticuloendothelial (RES)  dan  telah terbukti  terkait  erat  dengan  produksi TNF ( Tumor necrosis factor ) (Haranaka et  al. 1985). Cinnamaldehyde mampu menginduksi  apoptosis  sel  melalui reactive oxygen species (ROS), sehingga  menginduksi mitochondrial permeability transition (MPT) dan sitokrom C lepas dalam sitosol (Ka et al. 2003).

## KESIMPULAN
Ekstrak kulit buah pinang tidak memiliki efek sitotoksik terhadap kultur sel T47D dan memiliki nilai IC 50 = 467, 34 μg/mL. Ekstrak  daun  kulit  kayu  manis  tidak memiliki  efek  sitotoksik  terhadap  kultur sel WiDr dan memiliki nilai IC 50 = 405,69 μg/ml.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Kemenristek Dikti atas Hibah Penelitian Dosen Pemula.

## DAFTAR PUSTAKA
A’yun, 2016, Aktivitas sitotoksik ekstrak etanol biji pinang (Areca catechu)  terhadap  sel  leukemia L1210, Skripsi, Universitas Setia Budi Anjarsari,  E,Y.,(2013):  Potensi  destilat kayu manis ( Cinnamomum burmanni ) sebagai agen ko=kemoterapi Doxorubicin melalui  induksi  apoptosis  pada sel  kanker  payudara  T47D, Skrispsi,  Yogyakarta,  Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Depkes, 1985, Sediaan Galenika, Jakarta, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.
Elahi EN et al . 2004. Protein binding and
metabolism influence the relative skin  sensitization  potential  of cinnamic  compounds. Chem Res Toxicol 17:301-310.
Haranaka et  al. 1985.  Antitumor activities  and  tumor  necrosis factor  producibility  of  traditional chinese  medicines  and  crude drugs. Cancer Immunol Immunother 20:1-5. Hasan  FA,  Sri  M,  Rositawati  I.  2013. Efek  imunostimulator  ekstrak etanol kayu manis ( Cinnamomum burmanii ) terhadap peningkatan jumlah sel T  CD4  dan  T  CD8  pada  mencit balb/c. Program studi Kedokteran  Hewan  Universitas Brawijaya.
Herdwiani W., Fransiska L, Sari R, Yolanda,
Rica,  Zahra,  Ikawati  Z,  Hertiani  T., (2014):  Uji  keamanan  dan  uji aktifitas  sitotoksik  minyak  kayu manis  ( Cinnamomum  burmannii ) untuk  menghasilkan  fitofarmaka antikanker, Indonesian  Journal  of Pharmaceutical Science and Technology , 1 , 2014 IARC,    2004,  Tobacco  smoke  and involuntary smoking, IARC
Monogr  Eval  Carcinog  Risk Hum; 83:1-1438 Jayaprakasha  GK,  Jagan  M,  Rao  L, Sakariah  KK.  2000.  Chemical composition  of  the  flower  oil  of Cinnamomum zaylanicum Blume. J  Agric  Food  Chem
48:4294-4295.
Ka  H et  al. 2003.  Cinnamaldehyde induces  apoptosis  by  ROS- mediated mitochondrial permeability  transition  in  human promyelocytic  leukimia  HL-60. Cancer Lett 196:143-152. Katzung, B.G. 2002. Farmakologi Dasar dan  Klinik .  Buku  2.  Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, penerjemah. Jakarta : Salemba  Medika.  Terjemahan dari : Basic & Clinical Pharmacology . hlm 449-462. Kuo  YC,  Lin  YL,  Liu  CP,  2005, Antimicrobial agent and chemotherapy,  J  Chin  Med Assoc, 68(6):272-5 Kwon,  B.M., Lee, S.H., dan Choi, S.U., (1998):  “Synthesis  and in vitro cytotoxicity of cinnamaldehydes to human solid tumor cells, Archives of Pharmacology  Research , 21 ,
147 –152.
Kwon, H.K., Hwang, J.S., So, J.S., Lee, C.G.,  Anupama,  S.,  Ryu,  J.H., Won,  K.J.,  Byoung,  S.K.,  Im, C.R., Lee, S.H., Zee, Y.P.,  dan
Im,  S.H.,    (2010):  cinnamon extract induces tumor cell death through inhibition of Nf_kappa B and Ap1, BMC Cancer , 10 , 392-
98.
Lean-Teik  Ng  dan  Shu-Jing  Wu.  2009.
Antiproliferative activity of Cinnamomum cassia constituents and effects of pifithrin-alpha  on  their  apoptotic signaling  pathways  in  hep  G2 cells. Hindawi Publishing
Corporation
Evidence-Based
Complementary  and  Alternative Medicine 2011:1-6. Mamonto,  I.S.,  Runtuwene,M.R.J  dan
Wehantow,  F.,  2014.  Aktifitas antioksidan    Ekstrak  Kulit  Biji Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria  Giseke),  Jurnal  Ilmiah Farmasi-UNSTRAT, 3: 263-272.
Pan MH, Chen WJ, Lin S, Ho CH, Lin JK. 2002.  Tangeretin  induces  cell cycle  through  inhibiting  cyclin dependent kinase 2 & 4 activities as well as elevating cdk inhibitor p21 in human colorectal carcinoma cells. Carcinogenesis . Oxford University Press 23:1677-1684. Ren W, Qiao Z, Wang H, Zhu L, Zhang L.  2003.  Flavonoids:  Promising Anticancer Agent. Medical Research Review 23:519-534. Riskesdas  (Riset  Kesehatan  Dasar), (2013): Badan  Penelitian  dan Pengembangan Kesehatan , Kementerian Kesehatan  RI. Sukardiman,  Sismindari  and  Noor
Cholies  Zaini,  2004,  Anticancer activity of Pinostrobin and AndrographolideProceeding  of Congress of Pharmaceutical
Future,  Tokyo  Japan,  October 2005. WHO,  2014,  The  Global  burden  of disease, World Health Organization.