## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN SPRAYABLE HYDROGEL YANG MENGANDUNG LENDIR SIPUT ( Achatina fulica )

## TERHADAP Staphylococcus aureus
Ungsari Rizki Eka Purwanto 1* , Endang Diyah Ikasari 2 1-2 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Yayasan Pharmasi Semarang Email: ungsaririzki@stifar.ac.id

## ABSTRAK
Lendir siput ( Achatina fulica ) kaya akan protein achasin yang memiliki sifat antibakteri. Kandungan achasin  tersebut  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  termasuk  bakteri  penyebab  jerawat Staphylococcus  aureus ,  sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai  kosmetik  antijerawat.  Salah  satu pengembangan  sediaan  kosmetik  adalah  sediaan  kosmetik sparyable  hydrogel .  Bentuk  sediaan sprayable hidrogel yang dapat disemprotkan dapat memberi keuntungan lebih dari sediaan gel karena mengandung pelembab yang lebih tinggi sehingga bisa meningkatkan kelembapan kulit pada kondisi peradangan karena jerawat. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui daya hambat sediaan gel terhadap bakteri Staphylococcus aureus . Lendir siput diformulasikan dalam sediaan sprayable hidrogel dengan variasi konsentrasi lendir yaitu 10%, 20%, dan 30% menggunakan alginat rumput laut cokelat dan aloe vera  gel  base sebagai  basisnya.  Metode  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar dengan cara sumuran. Evaluasi karakteristik fisik sediaan gel meliputi organoleptik, homogenitas, daya sebar, pH, dan viskositas. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa sediaan sparyable hydrogel lendir siput  dengan  konsentrasi  30%  memiliki  aktivitas  penghambatan  tertinggi  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dengan zona hambat yaitu 0,94+0,01 mm.
Kata Kunci : lendir, siput, hydrogel , antibakteri, jerawat

## ABSTRACT
Snail (Achatina fulica) mucus is rich in achasin protein which has antibacterial properties. The Achasin content can inhibit the growth of bacteria, including the acne-causing bacteria Staphylococcus aureus, so it can be used as an anti-acne cosmetic. One  of the developments in cosmetic preparations is the sparyable hydrogel cosmetic preparation. The sprayable hydrogel dosage form that can be sprayed can provide more benefits than gel preparations because it contains higher moisturizers so it can increase skin moisture in conditions of inflammation due to acne. The aim of this research was to determine the inhibitory power of gel preparations against Staphylococcus aureus bacteria. Snail mucus is formulated in a sprayable hydrogel preparation with varying mucus concentrations, namely 10%, 20% and 30% using aloe vera gel base as the base. Method Antibacterial activity was carried out using the agar disk diffusion  method.  Evaluation  of  the  physical  characteristics  of  the  gel  preparation  includes organoleptics,  homogeneity,  spreadability,  pH,  and  viscosity.  The  results  of  this  study  show  that  the snail  mucus  sparyable  hydrogel  preparation with  a  concentration of  30%  has  the  highest  inhibitory activity against Staphylococcus aureus bacteria with an inhibition zone of 0.94+0.01 mm.
Keywords: mucus, snail, hydrogel, antibacterial, acne
Cendekia Journal of Pharmacy ITEKES Cendekia Utama Kudus P-ISSN 2559 – 2163           E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 8, No. 1, Januari 2024 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id

## LATAR BELAKANG
Kenaekaragaman  hewani  dan  hayati  telah  digunakan  oleh  beberapa  generasi,  tak hanya  sebagai  obat  namun  juga  untuk  kosmetik  perawatan  kulit.  Bahan  berkhasiat  yang memiliki sejumlah kandungan zat aktif yang mendukung untuk perawatan kulit salah satunya adalah  lendir  siput.  Keunggulan  lendir  siput  dari  bahan  baku  kosmetik  yang  lain  adalah kandungan lengkap untuk kebutuhan kulit seperti allantoin, kolagen, elastin, dan asam glikolat bersama  dengan  glikoprotein  achasin  dan  mukopolisakarida  (El  Mubarak,  Lamari  and Kontoyannis, 2013).
Menurut Otsuka dalam Huda dan Marhamah (2016), anti-bakteri terdapat pada lendir bekicot dalam bentuk protein achasin dapat menghambat pembentukan lapisan peptidoglikan dan  bagian  umum  bakteri  yakni  membran  sitoplasma.  Pada  penelitian  tersebut  juga menunjukkan  bahwa  lendir  siput  memiliki  daya  hambat  terhadap  bakteri Staphyloacoccus aureus , dimana bakteri ini adalah salah satu bakteri penyebab jerawat (Misbahul Huda, 2016).
Selain  itu,  kandungan  allantoin  pada  lendir  siput  merupakan  senyawa  aktif  yang aman  dan  efektif  untuk  perlindungan  kulit,  membantu  melawan  kerusakan  kulit  dengan membantu  proliferasi  sel  dan  penyembuhan  luka.  Asam  glikolatnya  memiliki  kemampuan yang  sangat  baik  untuk  menembus  kulit,  meningkatkan  sintesis  kolagen  oleh  fibroblas, memodulasi  degradasi  matriks  dan  sintesis  kolagen  melalui  sitokin  yang  dilepaskan  oleh keratinosit  untuk  mempercepat  pergantian  epidermis  (Laneri et  al. ,  2019).  Kandungan- kandungan  tersebut  tentu  saja  dapat  mendukung  penyembuhan  dari infeksi  jerawat.  Jerawat adalah penyakit yang sangat kompleks dengan unsur patogenesis melibatkan kerusakan pada epidermis keratinisasi, sekresi androgen, fungsi sebaceous, pertumbuhan bakteri, peradangan, dan imunitas.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  lendir  siput  sangat  potensial  digunakan  dalam kosmetik untuk mengatasi jerawat. Stratum korneum pada kondisi berjerawat kurang terhidrasi dan  kurang  mampu  mengikat  air  dibandingkan  kulit  normal.  Kulit  yang  berjerawat  perlu terhidrasi dengan baik agar peradangan dan kemerahan mereda (Lee dkk., 2014), sehingga agar dapat meningkatkan hidrasi kulit maka, lendir siput tersebut dapat diformulasikan dalam bentuk sprayable  hydrogel .  Gel  yang  dapat  disemprotkan  memungkinkan  aplikasi  kulit  di  tempat infeksi  dengan  risiko  kontaminasi  minimal  (Geh  dkk.,  2019).  Pada  penelitian  ini  akan dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  sediaan sprayable  hydrogel lendir  siput  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi lendir siput dalam sediaan terhadap daya hambat bakteri Staphylococcus aureus. Adapun penelitian ini adalah penelitian lanjutan  dari  Ikasari  dan  Purwanto  (2022)  dimana  sebelumnya  telah  mengoptimasi  alginat rumput laut cokelat dan aloe vera base gel pada sediaan sprayable hydrogel dengan kandungan lendir siput (Ikasari and Purwanto, 2022).

## METODE PENELITIAN

## J enis dan objek penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimental dan objek penelitian ini adalah diameter hambat sediaan sprayable hydrogel terhadap Staphylococcus aureus.

## Sampel dan Teknik Sampling
Sampel  pada  penelitian  ini  adalah  lendir  siput  yang  didapat  dari  CV.  Keong  Sumber
Makmur. Adapun bahan tambahan lain yang diformulasikan dalam sediaan sprayable hydrogel adalah  alginat  yang  diekstrak  dari  rumput  laut cokelat  Sargassum  polycystum (Deakultura Nursery),  basis  gel Aloe  vera (Kimia  Utama  Sari),  gliserin  dan  DMDM-Hydantoine  (Subur Kimia  Jaya).  Teknik  pengambilan  sampel  dilakukan  secara  acak  sederhana  ( simple  random sampling ),  dimana  setiap  sediaan sprayable  hydrogel yang  dihasilkan  memiliki  kesempatan yang sama untuk diuji.

## Tahapan Penelitian Ekstraksi Alginat dari Rumput Laut Cokelat (Sargassum polycystum)
Alginat yang diesktrak nantinya adalah dalam bentu Na-alginat. Natrium alginat yang merupakan  bahan  pembentuk  gel  dari  sediaan  diperoleh  melalui  ekstraksi  alginat  dari  alga coklat ( Sargassum polycystum ). Metode ekstraksi natrium alginat menggunakan metode jalur asam (Jayasinghe, Jinadasa and Sadaruwan, 2022). Pertama-tama alga coklat dibersihkan dari kotoran  yang  menempel  lalu  dipotong  kecil-kecil,  dicuci  dan  dijemur  selama  2-3  hari, kemudian direndam menggunakan CaCl2 1% selama 30 menit dan dicuci. Perendaman kedua dilakukan dengan HCl 5% selama 30 menit dan dicuci. Setelah itu ditambahkan larutan KOH 0,5%  selama  60  menit  pada  suhu  50-60°C  dan  dicuci.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  Na 2 CO 3 2,25% pada suhu 50-60°C selama 1 jam dan disaring. Filtrat yang diperoleh direbus dengan NaOCl  10%,  diaduk  dan  didiamkan  selama  5 jam.  Pengendapan  dengan  HCl  5%  dilakukan hingga  terbentuk  endapan  asam  alginat,  dicuci  dan  disaring.  Setelah  itu  dinetralkan  dengan Na 2 CO 3 10% pada pH 6-7, diaduk dan disaring. Pemurnian dilakukan dengan isopropanol 95% dan  dikeringkan  pada  suhu 50-60°C  selama  17  jam,  kemudian  digiling  hingga  diperoleh natrium alginat dalam bentuk bubuk. Sampel natrium alginat yang diekstraksi dianalisis gugus fungsinya berdasarkan hasil spektral yang muncul dari FT-IR.

## Pembuatan Sediaan Sprayable Hydrogel Lendir Siput (Achatina fulica)
Tabel 1.   Formula  Sprayable  Hydrogel  Lendir  Siput
Bahan (%) Formula ke 1 2 3 Lendir siput 10 20 30 S-Alginat 13,6 13,6 13,6 Aloe vera gel base 16,4 16,4 16,4 Glycerine 5 5 5 DMDM Hydantoin 0,2 0,2 0,2 Aquadest ad 100 ad 100 ad 100
Sediaan sprayable  hygrodel dibuat  dengan  netto  sebanyak  30  gram.  Na-alginat ditambah  aquadest  panas  dengan  perbandingan  1:1.  Selanjutnya  ditambahkan  satu  per  satu bahan  lainnya  (tabel  1)  secara  berurutan  yaitu Aloe  vera  base  gel ,  lendir  siput,  DMDM- Hydantoine dan di-add dengan aquadest. Campuran dihomogenkan selama 5 menit. Evaluasi sediaan meliputi homogenitas, pH, viskositas, daya sebar, daya lekat.

## Evaluasi Karakteristik Fisik Sedia Sprayable Hydrogel Uji Homogenitas
Pengamatan  dilakukan  secara  visual,  dapat  dibantu  dengan  menggunakan  kaca
pembesar.  Sediaan  krim  pada  bagian  atas,  tengah dan  bawah  diambil,  diletakan  di  atas  kaca objek  dan  ditutup  dengan  kaca  objek  lainnya.  Kemudian  kedua  kaca  objek  tersebut  ditekan sedemikian hingga menjadi lapisan sediaan yang setipis mungkin untuk mempermudah dalam pengamatan homogenitas sediaan.

## Uji pH
Sediaan  diuji  dengan  menggunakan  pH  meter  (Trans  Instruments  Walklab  Series), yang telah dikalibrasi.

## Uji Daya Sebar
Sediaan hydrogel ditimbang sebanyak 0,5 gram. Krim diletakan diatas kaca bulat pada bagian tengah. Kaca yang telah ditimbang dilekatan diatas kaca pertama, ditunggu selama 5 menit, diukur diameter empat kali pada tempat yang berbeda. Percobaan  yang sama dilakukan dengan diberi beban yang ditambah secara konstan (50 gram) bervariasi (50, 100, 150, 200, 250, 300 dan 350 gram) hingga sediaan krim tidak menyebar lagi.

## Uji Daya Lekat
Sediaan hydrogel ditimbang sebanyak 0,5 gram. Krim diletakan di atas object glass dan  ditutup dengan object glass lainnya. Object glass diberi beban 50 gram, ditunggu selama 5 menit. Bagian samping object glass dibersihkan dari krim yang tidak merata. Pengukuran daya lekat dilakukan dengan menjepitkan object glass pada alat dan ditarik tuas alat, kemudian dicatat waktu yang dibutuhkan kedua object glass lepas.

## Uji Viskositas
Viskositas sediaan krim diukur  menggunakan  Viskometer Brookfield DV-1 PRIME.

## Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Sprayable Hydrogel Terhadap Staphylococcus aureus
Uji  aktivitias  antibakteri  ini,  sebelumnya  telah  mendapatkan  persetujuan  etik  dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan (KEPK) Stifar Yayasan Pharmasi Semarang dengan nomor sertifikat 491/YP-NA/KEPK/STIFAR/EC/V/2023.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  disterilkan  terlebih  dahulu  di  dalam  autoklaf  pada suhu 121ºC selama 15 menit. Jarum Ose dibakar dengan api bunsen.

## Pembuatan Media Agar Miring
Diambil  Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  2,8  g  dilarutkan  dalam  100  mL aquadest menggunakan erlenmeyer. Selanjutnya dihomogenkan dengan stirrer di atas hot plate sampai mendidih. Sebanyak 5 ml dituangkan pada tabung reaksi steril dan ditutup dengan sumbatan kapas.  Media  disterilkan  dalam  autoklaf  dengan  suhu 121ºC  selama  15  menit,  kemudian dibiarkan  pada  suhu  ruangan  selama  kurang lebih  30  menit  sampai  media  memadat  pada kemiringan 30ºC. Media agar miring digunakan untuk inokulasi bakteri.

## Peremajaan Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923
Agar miring NA steril disiapkan, diambil masing-masing satu ose biakan bakteri Staphylococcys aureus ATCC 25923 dengan ose bulat kemudian digoreskan pada permukaan NA miring dan diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Media NA sebanyak 10 mL disiapkan dalam tabung reaksi steril. Bakteri hasil dari peremajaan  yang  berumur  1  x  24  jam  diambil  satu  ose  dimasukkan  dalam media  NA. Kemudian diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu 37 o C dan, disetarakan dengan larutan ½ Mc Farland dengan rentang 0,08- 0,1. Biakan cair yang kekeruhannya setara dengan ½ Mc Farland mempunyai populasi 1,0 x 10 8 CFU/ml.

## Pembuatan Media Pengujian
Lapisan  dasar  dibuat  dengan  menuangkan  masing-masing  50  mL  NA  ke masing- masing 3 cawan petri, lalu dibiarkan sampai memadat. Setelah memadat, permukaan lapisan dasar ditanam 5 pencadang baja yang diatur jaraknya agar daerah pengamatan tidak bertumpu. Kemudian,  suspensi  bakteri  dicampurkan  ke dalam  media  pembenihan  NA.  Setelah  itu, dituangkan 50 mL campuran suspensi dan media pembenihan tersebut ke dalam tiap cawan petri  yang  diletakan pencadang  sebagai  lapisan  kedua.  Setelah  lapisan  kedua  memadat, pencadang diangkat  secara  aseptik  menggunakan  pinset  dari  masing-masing  cawan  petri, sehingga terbentuk sumur-sumur yang akan digunakan dalam uji bakteri.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri dengan Metode Sumuran
Uji ini dilakukan dengan metode sumuran dengan cara meletakkan cylinder cup di atas lapisan pertama media NA yang sudah memadat, kemudian dituang campuran suspensi Staphylococcus aureus ATCC 25923 sebanyak 3,0 μl ke dalam 20 ml media NA dan lapisan media NA kedua, dibiarkan memadat. Cylinder cup diangkat, dimasukkan sebanyak 50 μl ke dalam  sumuran  sediaan  spraydable  hydrogel  dengan  konsentrasi  10%,  20%  dan  30%.  Gel klindamisin sebagai kontrol positif sedangkan larutan formula basis sebagai kontrol negatif. Cawan diinkubasi 1 x 24 jam pada suhu 37 o C kemudian diukur diameter hambat pertumbuhan Staphylococcus aureus ATCC 25923 dengan menggunakan alat jangka sorong.

## Pengamatan Zona Bening
Pengamatan  zona  bening  dilihat  dari  lingkaran  (zona)  bening  yang  terang ( clear zone ) yang terbentuk di sekitar lubang dan diukur menggunakan penggaris atau jangka sorong. Lalu catat diameter zona yang terbentuk.

## Analisis Data
Data  hasil  daya  hambat sprayable  hydrogel lendir  siput  dianalisis  secara  statistic dengan oneway  anova dengan  bantuan software SPSS 16.0  untuk  mengetahui  pengaruh konsentrasi sprayable  hydrogel lendir  siput  terhadap  daya  hambatnya  terhadap Staphylococcus aureus.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Lendir siput pada penelitian ini didapatkan dari salah satu peternakan siput di daerah Sragen (Keong Sumber Makmur). Sebelum diformulasikan, lendir siput diidentifikasi secara kualitatif kandungan proteinnya dengan menggunakan pereaksi ninhidrin. Sampel lendir siput ditempatkan pada cawan porselen, ditambahkan basa NaOH 1 M, dipanaskan dengan pereaksi ninhidrin 1%, dan diamati perubahan yang terjadi.
Uji ninhidrin menunjukkan adanya perubahan warna dari merah muda menjadi ungu. Secara teori, hasil positif ninhidrin akan berwarna biru, ungu, atau kuning, bergantung pada jenis asam amino penyusunnya. Pada uji ninhidrin, warna ungu pada larutan disebabkan oleh reaksi  antara  asam  alfa-amino  dan  ninhidrin.  Senyawa  ninhidrin  yang  sangat  teroksidasi menyebabkan dekarboksilasi oksidatif asam α-amino, menghasilkan hidrindantin, CO 2 , NH 3 , dan  aldehida.  Kombinasi  senyawa  NH 3 ,  hiddantin,  dan  ninhidrin  memberikan  warna  biru keunguan  pada  sampel  lendir  siput  yang  diujikan  (Gambar  1).  Tujuan  uji  ninhidrin  adalah untuk mendeteksi keberadaan asam amino bebas pada zat yang diuji.
Gambar 1. Hasil warna reaksi sampel lendir sipit dengan ninhydrin
Gambar 2. Spektra IR a) Sampel Lendir Siput b) Baku Allantoin (Sigma, no.cat 05670)
Identifikasi  kandungan  lendir  siput  dilanjutkan  dengan  identifikasi  menggunakan instrument FT-IR (Agylent). Spektra IR sampel lendir siput kemudian dibandingkan dengan spektra  IR  baku  allantoin  (Gambar  2).  Hasil  perbandingan  kedua  spektra  IR  tersebut menunjukkan bahwa sampel lendir siput juga mengandung allantoin. Gugus khas NH 2 yakni ditunjukkan  pada  bilangan  gelombang  3336  cm -1 untuk  sampel  dan  3338  cm -1 untuk  baku allantoin; gugus NH 2973 cm -1 untuk sampel dan 2974 cm -1 untuk baku allantoin; H-N-C 1508
a)
b)
cm -1 untuk sampel dan 1523 cm -1 untuk baku allantoin; C=O baik sampel dan baku allantoin ada pada bilangan gelombang 1685 cm -1 ; dan gugus khas C-NH 2 1051 cm -1 untuk sampel dan 1077 cm -1 untuk baku allantoin (Dinica et al. , 2021).
Selanjutnya, Na-alginat yang akan digunakan untuk salah satu basis gel, diidentifikasi terlebih dahulu setelah diesktrasi dari rumput laut cokelat. Hasil spektra natrium alginat dari rumput  laut  cokelat  Sargassum  polycystum  yang  telah  dilakukan  analisis  gugus-gugus fungsinya  pada  gambar  3,  ditemukan  adanya  gugus  -OH  dengan  intensitas  sedang  yang ditunjukkan  pada  bilangan  gelombang  3265  cm -1 pada  sampel  dan  3262  cm -1 pada  baku. Ditemukan  pula  gugus  C=O  pada  bilangan  gelombang  1560,  gugus  C-O  dengan  intensitas tajam  pada  bilangan  gelombang  1027  dan  gugus  Na  dalam  isomer  alginat  pada  bilangan gelombang  1418.  Dari  hasil analisa  gugus  fungsi  tersebut  menunjukkan  hasil  bahwa  gugus- gugus  fungsi  tersebut  merupakan  gugus  fungsi  yang  terdapat  pada  struktur  kimia  natrium alginat (Fenoradosoa et al. , 2010).
Gambar 3. Spektra IR a) Sampel Na-alginat dari Rumput Laut Cokelat  b) Baku Na-Alginat (Sigma, no.cat 180947)
Setelah  bahan-bahan  selesai  diidentifikasi,  maka  bahan  aktif  lendir  siput  beserta eksipiennya  dibuat  ke  dalam  bentuk  sediaan sprayable  hydrogel. Pada  pengukuran  pH didapatkan bahwa semakin tinggi konsentrasi lendir siput, pH yang dihasilkan semakin turun, hal ini dikarenakan lendir siput yang bersifat asam.  Sediaan dengan konsentrasi lendir siput 10% memiliki pH 7,07+0,02; 20% memiliki pH 6,73+0,02; 30% memiliki pH 6,54+0,01. Uji pH   bertujuan untuk melihat keamanan suatu sediaan saat digunakan pada kulit dan juga  untuk mengetahui  kadar  asam  dan  basa dari  suatu  sediaan, terutama  pada  sediaan  topikal.
Hasil  evaluasi  uji  viskositas  sediaan sprayable  hydrogel lendir  siput  menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  kadar  lendir  siput,  semakin  tinggi  pula  nilai  viskositasnya.  Sediaan dengan  konsentrasi  lendir  siput  10%  memiliki  viskositas  2.856+57,12  cps;  20%  memiliki
a)
b)
viskositas  3.003+7,44  cps;  30%  memiliki  viskositas  3.552+39,94  cps.  Semakin  tinggi viskositasnya, semakin tinggi hambatan aliran formulasinya. Hal ini mempengaruhi daya sebar dan  daya  rekat  formulasi  hidrogel  Jika  kekentalannya  terlalu  tinggi  maka  gel  akan  sulit dihilangkan  dan  diaplikasikan  sehingga  sulit  untuk  diaplikasikan  secara  merata  pada  kulit. Meski semakin meningkat viskositasnya, sediaan masih dapat disemprotkan. Hal ini terlihat pada nilai daya sebar sediaan yang masih memenuhi rentang persyaratan 5-7 cm (Esterina and Zuraida,  2017).  Sediaan  dengan  konsentrasi  lendir  siput  10%  memiliki  daya  sebar  5,3+0,27 cm; 20% memiliki daya sebar 5,7+0,188 cm; 30% memiliki daya sebar 5,98+0,08 cm. Evaluasi daya lekat menunjukkan bahwa sediaan dengan konsentrasi lendir siput 10% memiliki daya lekat  4,54+0,05  detik;  20%  memiliki  daya  lekat  4,58+0,11  detik;  30%  memiliki  daya  lekat 4,84+0,05 detik. Tujuan pengujian adhesi adalah untuk mengukur seberapa erat formulasi gel melekat  pada  kulit  saat  diaplikasikan  untuk  memastikan  penghantaran  obat  yang  optimal (Mangkey, Yamlean and Siampa, 2023).
Uji aktivitas antimikroba yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode difusi sumur. Keunggulan metode ini adalah dapat mengamati aktivitas antibakteri dari segala arah, baik dari permukaan, lapisan tengah, maupun  lapisan bawah sampel, serta mampu menampung sampel dalam jumlah yang lebih banyak.
Kontrol  positif  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  gel  klindamisin  yang banyak digunakan dalam terapi kulit berjerawat. Klindamisin adalah  antibiotik  lincosamide yang  digunakan  untuk  mengobati  infeksi  serius  yang  disebabkan  oleh  bakteri  dengan  cara menghambat  pertumbuhannya.  Mikroorganisme  Gram  positif  yang  rentan  terhadap klindamisin termasuk spesies Actinobacteria, Eubacteria, Lactobacillus, Peptostreptococcus, Propionibacterium, dan Staphylococcus.
Tabel 2. Data Zona Hambat Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Sprayable Hydrogel Lendir
Siput Terhadap Staphylococcus aureus Pengujian ke- Diameter daya hambat (mm) 10% 20% 30% Kontrol positif 1 0,726 0,832 0,930 1,634 2 0,729 0,834 0,934 1,637 3 0,732 0,836 0,937 1,640 4 0,736 0,840 0,940 1,643 5 0,741 0,843 0,942 1,645 Rata-Rata 0,733 0,837 0,937 1,640 SD 0,006 0,004 0,005 0,004
Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri  sediaan sprayable  hydrogel lendir  siput  yang diuji secara statistik oneway anova dengan bantuan software SPSS. Data hasil uji normalitas dan  uji  homogenitas  yang  didapat  nilai  signifikansi    0,05  artinya  data  zona  hambat terdistribusi  normal  dan  homogen.  Hasil  uji  anova  memiliki  nilai  signifikasi    0,05  yang menunjukan adanya perbedaan bermakna pada setiap kelompok perlakuan formulasi masing- masing.  Data  ujipasca  anova  didapatkan  perbedaan  bermakna  pada  setiap  konsentrasi,  baik antara kontrol positif dengan formulasi konsentrasi lendir siput 10%, 20% dan 30%. Adapun nilai daya hambat terbesar dihasilkan dari lendir siput konsentrasi 30% pada sediaan, meskipun masih  berada  di  bawah  kemampuan  control  positifnya.  Hal  ini  bisa  menjadi  acuan  untuk penelitian  selanjutnya  agar  dapat  ditingkatkan  konsentrasi  kandungan  lendir  siput  sehingga diperoleh konsentrasi yang paling efektif dalam sediaan sprayable hydrogel.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Lendir siput dalam sediaan sprayable hydrogel memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Ada perbedaan yang signifikan pada setiap konsentrasi lendir siput  dalam  sediaan sprayable  hydrogel dengan  daya  antibakterinya.  Adapun  daya  hambat terbesar dihasilkan oleh lendir siput dengan konsentrasi 30%.

## Saran
Penelitian lebih lanjut diperlukan dengan menguji sediaan sprayable hydrogel lendir siput dengan konsentrasi yang lebih tinggi, juga terhadap bakteri yang lain.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Yayasan Farmasi Semarang atas dukungan finansial terhadap penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Dinica, R. M. et al. (2021) ‘Allantoin from valuable romanian animal and plant sources with promising  anti-inflammatory  activity  as  a  nutricosmetic  ingredient’, Sustainability (Switzerland) , 13(18). doi: 10.3390/su131810170.
Esterina and Zuraida (2017) ‘Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Gel Ekstrak Etanol 70% Daun Bangun-Bangun  (Plectranthus  Amboinicus  (Lour.)  Spreng.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Pseudomonas Aeruginosa’, Indonesia Natural Research Pharmaceutical Journal , Vol 2, No, pp. 59–66.
Fenoradosoa, T. A. et al. (2010) ‘Extraction and characterization of an alginate from the brown seaweed Sargassum turbinarioides Grunow’, Journal of Applied Phycology , 22(2), pp. 131–137. doi: 10.1007/s10811-009-9432-y.
Ikasari, E. D. and Purwanto, U. R. E. (2022) ‘Optimization of Alginate from Brown Algae (Sargassum  polycystum)  and  Aloe  vera  base  gel  in  Sprayable  Hydrogel  containing Snail  Mucus  (Achatina  fulica)  to  Increase  Skin  Moisture’, Proceeding  of  The  2nd Mandala  Waluya  –  International  Conference  on  Pharmaceutical  Science  and Practice , pp. 12–22.
Jayasinghe, G. D. T. M., Jinadasa, B. K. K. K. and Sadaruwan, N. A. G. (2022) ‘Pathway of sodium  alginate  synthesis  from  marine  brown  algae,  Sargassum  wightii  from  Sri Lanka’, Discover Food , 2(1). doi: 10.1007/s44187-021-00001-5. Laneri, S. et al. (2019) ‘Dosage of Bioactive Molecules in the Nutricosmeceutical Helix aspersa Muller Mucus and Formulation of New Cosmetic Cream with Moisturizing Effect’:, https://doi.org/10.1177/1934578X19868606 , 14(8), pp. 1–7. doi:
10.1177/1934578X19868606.
Mangkey,  T.  E.  L.,  Yamlean,  P.  V.  Y.  and  Siampa,  J.  P.  (2023)  ‘Formulation  and  Test  of Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Avocado Peel (Persea americana Mill.) Using  Na-CMC  and  Carbopol  Base  Against  Staphylococcus  aureus’, Pharmacon , 12(1), pp. 127–132.
Misbahul Huda, M. (2016) ‘Effect of Snail Mucus (Achatina fulica) on The Growth Of Positive Bacteria’, Jurnal Analis Kesehatan , 5(1), pp. 547–555.
El Mubarak, M. A. S., Lamari, F. N. and Kontoyannis, C. (2013) ‘Simultaneous determination of  allantoin  and  glycolic  acid  in  snail  mucus  and  cosmetic  creams  with  high
performance  liquid  chromatography  and  ultraviolet  detection’, Journal  of Chromatography A , 1322, pp. 49–53. doi: 10.1016/J.CHROMA.2013.10.086.