## Tinjauan Literatur

## KEFIR: MIKROBIOLOGI, SENYAWA BIOAKTIF, DAN MANFAATNYA PADA PENYAKIT NONINFEKSI
Tri Yudani Mardining Raras 1 

## Abstrak
Kefir semakin populer sebagai produk makanan fermentasi. Secara makroskopis butiran kefir memiliki struktur warna yang ireguler, multilobular, lengket dan berwarna kekuningan. Simbiosis mikrobiota antara bakteri  dan  khamir  merupakan  komponen  utama  dalam  biji  kefir.  Bakteri  yang  paling  banyak  ditemukan pada  butir  kefir  adalah  Lactobaccilus  sp.  dan  Lactococcus  sp.  sedangkan  khamirnya  didominasi  oleh Saccharomyces  sp.  dan  Kluveromyces  sp.  Kefir  mengandung  senyawa  bioaktif  seperti  eksopolisakarida, bioaktif peptida, bacteriocin dan biosurfaktan yang berpotensi meningkatkan manfaat kesehatan dari kefir. Tinjauan literatur ini bertujuan untuk mengulas kefir dari aspek mikrobiologi, kandungan senyawa bioaktif kefir  dan  pengaruhnya  sebagai  agen  imunomodulator  atau  imunostimulan  pada  artritis,  antialergi, antikolesterol dan penyakit noninfeksi lain. Kefir berpotensi untuk dikembangkan sebagai produk kesehatan dan  nutraseutikal  sesuai  dengan  pengaruhnya  terhadap  stimulasi  respons  imun,  antiartritis,  aktivasi imunitas  mukosa  intestinal,  perlindungan  dari  ulkus  peptikum,  antikanker,  antimutagenesis,  antialergi, menurunkan  kadar  kolesterol,  mengurangi  obesitas,  dan  antihipertensi.  Oleh  karena  itu,  kefir  sangat potensial  untuk  dieksplorasi  lebih  lanjut  dalam  penelitian  translasional  sebagai  salah  satu  bahan  aditif dalam produk pangan fungsional yang memberikan manfaat untuk kesehatan.
Kata kunci: bioaktif peptida, kefir, kesehatan, mikrobiota

## KEFIR: MICROBIOLOGY, BIOACTIVE COMPOUNDS, AND HEALTH BENEFIT IN NONINFECTIOUS DISEASES

## Abstract
Kefir is gaining popularity as food fermentation products. Macroscopically, kefir grain has an irregular, multilobular, firm, viscous and yellowish color structure. Microbiota symbiosis between bacteria and yeast is the  main  component  inside  the  kefir  grain.  Bacteria  that  are  commonly  found  in  kefir  grain are  Lactobacillus  sp.  and    Lactococcus  sp.  while  yeast  is  dominated  by  Saccharomyces sp.  and  Kluveromyces  sp.  Kefir  contains  bioactive  compounds  such  as  exopolysaccharides,  bioactive peptides, bacteriocin, and biosurfactants that promote health. This literature review aimed to review kefir from  a  microbiological  perspective,  content  of  kefir  bioactive  compounds,  and  their  effects  as immunomodulatory,  immunostimulating  agent,  antiallergic,  anticholesterol,  and  other  noninfectious diseases.  Due  to  its  positive  effect  on  immune  response  stimulation,  antiarthritis,  intestinal  mucosal activation,  peptic  ulcer  protection,  anticancer,  antimutagenesis,  antiallergy,  lowering  cholesterol  level, reducing  obesity,  and  antihypertension,  hereby  kefir  offers  great  potential  as  a  health  and  nutraceutical products. Therefore, kefir has the potential to be further explored in translational research as an additive in functional food products that provide health benefits.
Keywords: bioactive peptide, health benefits, kefir, microbiota
1 Departemen Biokimia-Biomolekuler, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya
 E-mail: daniraras@ub.ac.id

## Pendahuluan
Kefir  berasal  dari  Kaukasus  yang terletak  di  wilayah  sekitar  pegunungan  Tibet dan  Mongolia.  Di  daerah  asalnya, pengggunaan  biji  kefir  telah  populer  sejak 2000  tahun  sebelum  masehi.  Biji  kefir digunakan  untuk  membuat  minuman fermentasi  yang  dipercaya  bermanfaat  untuk kesehatan. Biji kefir yang ditumbuhkan dalam medium  seperti  susu,  akan  membentuk larutan  fermentasi  asam  yang  sedikit berkarbonasi membentuk aroma khas khamir. Susu  kefir  dapat  dibuat  baik  secara pasteurisasi  maupun  nonpasteurisasi  dari susu  sapi,  kambing,  unta,  domba  dan kerbau. 1
Kefir  grain  atau  butir  kefir  berukuran kecil,  berbentuk  seperti  brokoli  dan  memiliki permukaan  yang  halus. 2 Kefir  grain  tersusun dari  campuran  berbagai  mikroorganisme, seperti  bakteri  asam  laktat  contohnya laktobasilus,  laktokokus,  leuconostoc sebanyak  10 8 CFU/g,  bakteri  pembentuk asam asetat sebanyak 10 5 CFU/g dan khamir/ yeast  sebanyak  10 6 –10 7 CFU/g  (Gambar  1). Ketiganya secara bersama-sama membentuk matriks  polisakarida  dan  protein. 3 Interaksi antara  berbagai  mikroba  tersebut  termasuk ikatan  ionik,  hidrogen,  hidrofobik  atau pengaruh makro-molekul permukaan mikroba seperti  glikoprotein  dan  polisakarida  yang membentuk  butiran  kefir  atau  kultur  kefir. 3
Proses  koagregasi  pada  butiran  kefir
melibatkan  berbagai  mikroorganisme  dengan latar  belakang  genetik  berbeda  dengan perantaraan  molekul  spesifik  sehingga mampu  membentuk  biofilm  multispesies. 4 Salah  satu  faktor  yang  membedakan  kefir dengan  produk  susu  lain  adalah  proses fermentasi  yang  memerlukan  kefir  grain dengan kandungan cukup banyak khamir. 3,5 Kefir  grain  berwarna  kekuningan, diameter 0,3 cm, berbentuk seperti bunga kol dan agak keras. Susu fermentasi ini tersusun atas  protein  dan  matrik  polisakarida  sebagai tempat  tumbuh  berbagai  spesies  bakteri  dan jamur  yang  diperlukan  dalam  proses fermentasi  kefir. 3,6 Hal  yang      penting  dari proses fermentasi yaitu butiran kefir tidak larut dalam air, tapi ketika dicampur dengan susu, akan  mengembang  dan  menjadi  seperti gelatin,  polisakarida  yang  tersusun  atas duplikasi unit-unit heksasakarida. 7
Baik  bakteri  dan  yeast  pada  kefir  grain dibalut  oleh  matriks  polisakarida  yang mengandung  glukogalaktan  yang  disintesis oleh laktobasilus. Selain itu di dalam kefir juga terkandung  berbagai  metabolit  seperti  asam sitrat,  piruvat,  propionat,  butirat,  asetat  dan orotat  yang  merupakan  hasil  sekresi  dari bakteri  seperti  laktobasilus,  laktokokus  dan lain-lain.  Sebagai  tambahan  terhadap populasi  mikroorganisme  yang  berada  pada kefir,  susu  fermentasi  ini  juga  mengandung produk hasil fermentasi seperti asam organik dan berbagai senyawa volatil termasuk etanol, etil, asam amino, asetaldehid dan diasetil. 8,9

## Gambar 1. Makroskopis dan mikroskopis kefir
Keterangan: A). Kefir grain berwarna putih kekuningan seperti brokoli, B). Mikroskopis lapisan luar kefir dan lapisan dalam kefir, (C). Mikroskop elektron memperlihatkan adanya kombinasi bakteri bentuk batang, kokus, dan yeast. Panah hitam menunjukkan adanya bentuk bakteri kokus 101
Kefir  memiliki  kandungan  nutrisi  yang sedikit  berbeda  tergantung  macam  susu sebagai  bahan  dasar,  susu  kambing  atau sapi,  lama  waktu  fermentasi  serta mikrooganisme  yang  melakukan  fermentasi. Namun,  secara  umum  kefir  mengandung laktosa  (3-4%),  protein  (4-5%),  lemak  (3-4%) dan  alkohol  (0,4-2%)  dengan  pH  sekitar  4. Produk susu fermentasi ini juga kaya akan Vit B1, B12, asam amino, dan asam folat. 10
Banyak studi mengenai produk kefir yang menunjukkan  pengaruh  positif  terhadap kesehatan. 11 Analisis  kefir  grain  yang dilakukan  di  Brasilia  memperlihatkan  bahwa kefir  dapat  mempertahankan  eubiosis  dan memperbaiki  disbiosis. 12 Mikroba  yang bermanfaat  pada  kefir  juga  dapat  melindungi tubuh  dari  invasi  dari  mikroba  patogen  serta melawan  efek  sitotoksik  dari  toksin  mikroba patogen. 13 Beberapa  studi  menemukan bahwa  kefir  bisa  digunakan  sebagai antimikroba    melawan  Candida  albicans  dan Streptococcus pyogenes. 14 Fakta menemukan bahwa  kefir  sebagai  antibakteri  menjadikan minuman  ini  dilirik  sebagai  alternatif  untuk menyelesaikan  masalah  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik. 15 Kefir  juga  diduga  dapat membantu  untuk  terapi  keganasan.  Suatu studi  memperlihatkan  kemampuan  kefir sebagai  antiproliferatif  pada  sel  tumor sehingga  di  masa  depan  berpotensi  sebagai kandidat antitumor. 16
Penelitian  pada  tikus  model artritis  juga memperlihatkan  bahwa  kefir  bisa  digunakan sebagai  antiinflamasi. 17 Selain  itu,  beberapa gejala  alergi  mengalami  perbaikan  setelah konsumsi  minuman  fermentasi  bakteri laktobasilus  yang  juga  terkandung  dalam kefir. 18 Pada  dekade  terakhir  beberapa  studi membuktikan  bahwa  berbagai  macam organisme  yang  diisolasi  dari  butiran  kefir digunakan  untuk  terapi  beberapa  penyakit tidak  menular  melalui  perubahan  komposisi mikrobiota intestinal. 19,20
Banyaknya  manfaat  kesehatan  setelah mengkonsumsi kefir mendorong peneliti untuk
mengeksplorasi  kandungan  senyawa  bioaktif kefir.  Namun  demikian,  sampai  sekarang masih  sedikit  penelitian  yang  berhasil mengidentifikasi  senyawa  aktif  yang  berada dalam kefir ataupun kefir grain. Mereka hanya menemukan  beberapa  peptida  dengan  berat molekul  tertentu  yang  berperan  sebagai antiproliferasi  pada  kanker. 16 Senyawa butylated  hydroxyanisole  (BHA)  merupakan antioksidan dan yang paling sering ditemukan di kefir. Senyawa  BHA berada di lemak dan digunakan  pada  industri  makanan  sebagai preservatif.  Senyawa  BHA  memiliki  dampak positif pada kesehatan. Pada beberapa reaksi senyawa  ini  bisa  memperbaiki  stres oksidatif. 21
Tinjauan  literatur  ini  bertujuan  untuk mengulas  kefir  dari  aspek  mikrobiologi, kandungan  senyawa  bioaktif  kefir  dan pengaruhnya  sebagai  agen  imunomodulator atau  imunostimulan  pada  artritis,  antialergi, antikolesterol dan penyakit noninfeksi.

## Metode Penelusuran
Penelusuran  literatur  dalam  tinjauan  ini dilakukan  melalui  publikasi  jurnal  berbahasa Inggris  yang  terindeks  Google  Scholar  pada rentang  periode  2002-2022.  Kata  pencarian meliputi  bacteria,  kefir,  health  dan  immune. Publikasi  yang  mendukung  struktur  rencana tinjauan  kemudian  digunakan  sebagai referensi dalam tinjauan ini.

## Mikrobiologi Kefir

## Bakteri
Populasi mikroba dalam kefir grain telah digunakan  sebagai  contoh  dari  komunitas simbiosis.  Simbiosis  alami  ini  telah  banyak diidentifikasi  walaupun  sulit  sekali  untuk memisahkan  satu  mikroba  dengan  mikroba lainnya. Bakteri  dan  yeast  dalam  kefir  jika dipisahkan  menjadi  kultur  murni  akan  berkurang aktivitas  biokimianya  yang  menjadikan  bertambah kompleksnya studi mengenai bibit kefir.
Secara  umum  bakteri  asam  laktat  (10 8 -10 9 ) lebih  banyak  ditemukan  daripada  khamir/ yeast (10 5 -10 6 ) dan bakteri asam asetat (10 5 ), walaupun  tentu  saja  kondisi  proses fermentasi  berpengaruh  sangat  besar  pada pola ini. Pada Tabel 1 memperlihatkan daftar berbagai  bakteri  dan  yang  berhasil  diisolasi dari kefir dan bibit kefir dari seluruh dunia.
Berbagai  studi  menggunakan  metode tanpa  kultur  memperlihatkan  kesamaan dengan  studi  berbasis  kultur  yang menemukan  bahwa  secara  umum  populasi bakteri  didominasi  oleh  Firmicutes  dan Proteobacteria  dan  kefir  mengandung Streptococcus  pada  tingkatan  tertinggi dibanding  famili  yang  lainya. 6,22 Berdasar pemeriksaan sequensing gen 16S pada kefir grain  dan  cairannya,  ditunjukkan  bahwa butiran  kefir  mengandung    Laktobasilus, Laktokokus serta Acetobacter sebagai bakteri yang paling dominan. 23,24 Spesies yang paling banyak ditemukan dari Laktobasilus adalah L. kefiranofaciens,  L  kefiri  dan  L  parakefiri. 22
Apabila identifikasi mikroorganisme dilakukan pada cairan kefir saja, maka bakteri dominan yang ditemukan semakin bervariasi, termasuk Leuconostoc, Lactococcus, Lactobacillus, dan Acetobacter. 6,24 Selain  itu,  bakteri  yang berada di butiran kefir dalam jumlah minimal seperti  Lactococcus  dapat  menjadi  genus yang dominan pada cairan kefir pada kondisi tertentu. 22
Berkenaan  dengan  nonlactic  acid bacteria (LAB) yang berasosiasi dengan kefir, perlu  dicatat  bahwa  metode  tanpa  kultur memperlihatkan adanya  Acetobacter sebagai genus  yang  dominan  dalam  kefir  grain. Namun  demikian,  spesies  ini  tidak  umum diisolasi  menggunakan  metode  kultur sehingga  diduga  sebagai  kontaminan. 25,26
Demikian  juga  Bifidobacterium,  yang  dapat teridentifikasi  sebagai  mikrobiota  kefir menggunakan metode nonkultur namun tidak ditemukan  menggunakan  metode  berbasis kultur. 22

## Yeast/khamir
Keberadaan  khamir  di  dalam  kefiran sangat penting untuk menciptakan lingkungan untuk pertumbuhan bakteri kefir dengan cara memproduksi  asam  amino,  vitamin,  ethanol, CO 2 serta  merubah  pH.  Selain  itu,  khamir akan  memproduksi  metabolit  yang  mem- berikan  rasa  khas  kefir  ketika  diminum. 1 Namun,  terdapat  berbagai  macam  khamir; ada yang memiliki aktivitas fermentasi laktosa tapi  ada yang  tidak.  Termasuk  lokasi  tempat yeast  ditemukan,  ada  yang  berasal  dari permukaan  kefir  grain  tetapi  ada  pula  yang terletak  di  dalam  butiran  kefir.  Hal  ini tampaknya  berhubungan  dengan  fungsinya yang  berbeda  dalam  melakukan  fermentasi. Plessas  et  al.  (2017),  melaporkan  bahwa populasi yeast pada kefir yang diproduksi dari susu sapi dari berbagai negara memiliki profil yang berbeda. 27
Berbagai  spesies  Saccharomyces  telah diisolasi  dari  kefir  namun,  Saccharomyces cerevisiae  dan  Saccharomyces  unisporus merupakan  spesies  yang  paling  sering ditemukan. 28–30 Dari  seluruh  populasi  khamir pengguna  laktosa,  Kluyveromyces merupakan  spesies  yang  paling  dominan. Lebih  jauh  Kluyveromyces  marxianus  dan Kluyveromyces  lactis  merupakan  spesies yang  paling  umum  ditemukan. 29–31
Sedangkan untuk populasi  Candida tersusun atas  berbagai  spesies  dengan  prevalensi Candida holmii dan Candida kefyr. 28,32 Di luar tiga  genus  ini,  hanya  Pichia  yang  telah ditemukan  secara  teratur  khususnya  spesies Pichia fermentans. 32,33
Proporsi  khamir  dapat  berubah  sedikit dengan  yeast  yang  tidak  memfermentasi laktosa  seperti  Saccharomyces  seiring dengan  proses  fermentasi  yang  ber- langsung. 31 Identifikasi  berbasis  sequensing telah  mengidentifikasi  beberapa  khamir  yang sebelumnya  tidak  pernah  berkaitan  dengan kefir  seperti  Dekkera  anomala,  Issatchenkia orientalis  dan  Pichia  fermentans  atau campuran dengan spesies lain. 6,23
Tabel 1. Daftar bakteri dan khamir dari kefir grain dari seluruh dunia 27 Negara Asal Bakteri Dominan Khamir Dominan Taiwan Lactobacillus kefiranofaciens Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces unisporus, Issatchenkia occidentalis, Kluyveromyces marxianus, Tibet, China Pseudomonas spp., Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus kefiranofaciens, Lactococcus lactis, Lactobacillus kefiri, Lactobacillus casei Kazachstania unispora, Kluyveromyces marxianus, Saccharomyces serevisiae, Kazachstania exigua Irlandia Lactobacillus kefiranofaciens, Lactobacillus kefiri, Lactobacillus parabuchneri, Lactobacillus kefiranofaciens spp. Kefirgranum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus acidophillus, Lactobacillus parakefiri Turki Lactobacillus kefiranofaciens, Lactobacillus lactis Brazil Lactobacillus paracasei, Lactobacillus parabuchneri, Lactobacillus casei, kefiri, Lactococcus lactis, Acetobacter lovaniensis Kazachstania aerobia, Saccharomyces cerevisiae, Lachancea meyersii Slovenia Lactobacillus kefiranofaciens spp. Kefirgranum, Lactobacillus parakefiri, Lactobacillus kefiri Kluyveromyces marxianus, Kazachstania exiqua, Rhodosporidium kratochvilovae Argentina Lactobacillus plantarum Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces unisporus, Kluyveromyces marxianus Rusia Lactobacillus helceticus, Lactobacillus kefir, Lactobacillus parakefir Italia Lactobacillus kefiranofaciens, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus lactis Dekkera anomala Bulgaria Lactobacillus delbrueckii. Bulgaricus, Lactobacillus helveticus Kluyveromyces marxianus Belgia Lactobacillus kefiri, Lactobacillus kefiranofaciens, Leuconostoc mesenteroides, Lactococcus lactis, Lactococcus lactis spp. cremoris, Gluconobacter frateurii, Acetobacter orientalis, Acetobacter lovaniensis Kluyveromyces marxianus, Naumovozyma sp., Kazachstania khefir Afrika Selatan Leuconostoc spp., Lactococcus spp., Lactobacillus spp., Lactobacillus Zygosaccharomyces spp., Candida spp., Candida Malaysia Lactobacillus kefiranofaciens, Lactobacillus kefir
Analisis  mikroflora  dari  cairan  kefir  yang berasal  dari  berbagai  distrik  di  Brasilia teridentifikasi  beberapa  genus  yeast  yaitu Saccharomyces,  Candida, Kluyveromyces
dan Torulaspora. 34
Pada  Tabel  1  disajikan  daftar  spesies khamir  yang  ditemukan  pada  berbagai  negara. Identifikasi  dilakukan  baik  yang  dapat  di  kultur maupun yang tidak. 27

## Kandungan Senyawa Bioaktif dalam Kefir
Pada  beberapa  dekade  terakhir  banyak peneliti  kesehatan  untuk  beralih  pada  penyem-
buhan  penyakit  melalui  makanan  yang  dikenal dengan  sebutan  “functional  food”.  Makanan fungsional  ini  diketahui  mengandung  senyawa bioaktif  yang  dibuktikan  bisa  membantu penyembuhan  berbagai  penyakit.  Hasil  penelitian terhadap kefir menunjukkan kandungan beberapa senyawa bioaktif sebagai berikut:

## Eksopolisakarida
Eksopolisakarida (EPS) dengan struktur dan komposisi  berbeda  diproduksi  oleh  berbagai bakteri  asam  laktat  termasuk  Lactobacillus, Streptococcus,  dan  Leuconostoc. 35 Mereka merupakan karbohidrat yang berada di permukaan sel berfungsi melindungi bakteri.
Oleh  karena  tidak  menempel  langsung  di dinding sel, maka bisa dengan mudah terlarut di  medium.  Pada  kefir  senyawa  ini  disebut sebagai  kefiran.  Kefiran  mengandung  D- glukosa  dan  D-galaktosa  dengan  rasio  1:1. Namun, bakteri yang sama bisa memproduksi senyawa  kefiran  yang  berbeda  pada  media yang  berbeda  pula. 1 Kefiran  larut  dengan lambat  di  dalam  air  dingin  tapi  larut  dengan cepat di air panas membentuk larutan kental 2%.  Senyawa  EPS    sering  ditemukan  pada bakteri  yang  hidup  di  susu.  Sekresi  kefiran sangat tergantung pada media tempat bakteri yang memproduksinya. 36
Eksopolisakarida  yang  disekresikan oleh  bakteri  asam  laktat  memperlihatkan karakteristik  fisikokimia  untuk  digunakan sebagai food additive yang memberikan efek pengental. Lebih dari itu, EPS yang diperoleh dari  mikroorganisme  telah  diklasifikasikan sebagai  GRAS  (Generally  Recognized  As Safe) seperti bakteri asam laktat. 35
Berbagai  studi  memperlihatkan  bahwa kuantitas  dan  sifat  dari  EPS  tergantung  dari mikroba  yang  digunakan  pada  proses  dan kondisi  fermentasi  dan  komposisi  dari  media kultur. Sifat kimia dan fisika serta rheologi dari EPS  membuatnya  cocok  untuk  menjadi  ba- han aditif, yang digunakan sebagai stabilizer, dan  meningkatkan  viskositas. 37 Lebih  lanjut, bahwa  proses  biologis  EPS  membuktikan bahwa  senyawa  ini  dapat  dimanfaatkan sebagai  antioksidan,  agen  antitumor,  agen antimikrobial dan immunomodulator. 38

## Peptida Bioaktif
Peptida bioaktif adalah fragmen protein spesifik  dari  makanan  fungsional  yang memiliki  manfaat  untuk  mendukung  fungsi kesehatan  tubuh. 39 Sebagian  besar  peptida bioaktif  tersusun  antara  dipeptida  dan  20 residu  asam  amino  dengan  berat  molekul berkisar  antara  0,4  hingga  2  kDa. 40 Pada dasarnya,  peptida  bioaktif  dari  bahan makanan  dapat  diperoleh  melalui  hidrolisis enzimatis, fermentasi mikrobial dan fraksinasi.
Dari  ketiganya,  hidrolisis  secara  enzimatis adalah  cara  yang  paling  umum  untuk memproduksi  peptida  bioaktif.  Cara  tersebut menggunakan  enzim-enzim  digestif  dari pencernaan seperti tripsin dan pepsin. 39
Kefir memiliki peptida bioaktif yang telah teridentifikasi, antara lain kefiran, asam laktat, asam asetat, vesikel ekstraseluler, biofilm dan lain-lain.  Kefiran  merupakan  salah  satu  pep- tida  bioaktif  yang  dapat  bekerja  dengan spektrum  manfaat  kesehatan  yang  sangat luas yaitu sebagai   antioksidan, antiinflamasi, antimikroba,  antikanker  dan  antiaging .41 Peptida bioaktif dalam kefir diduga dilepaskan melalui proses degradasi oleh enzim-enzim di saluran  pencernaan.  Senyawa  peptida bioaktif  sebagian  besar  merupakan  hasil degradasi kasein oleh enzim amilase, pepsin dan protease dari pankreas. 42
Namun,  studi  simulasi  proses  digestif kefir dalam saluran pencernaan menyebutkan bahwa  berdasarkan  model  digestif  saliva, tidak  teridentifikasi  adanya  peningkatan peptida  bioaktif  dengan  keberadaan  enzim digestif  amilase.  Hal  ini  dikarenakan  enzim amilase tidak menyebabkan degradasi protein dan  peptida. 42 Keberadaan  enzim  pepsin dapat  mendegradasi  peptida  hingga ditemukan  fragmen  peptida  kefir  dengan berat  molekul  2-3  kDa.  Degradasi  semakin lengkap  dengan  adanya  enzim  protease pankreas.  Peptida  bioaktif  dengan  berat molekul lebih kecil yaitu 0,8–2 kDa ditemukan dengan  jumlah  yang  lebih  banyak.  Sehingga ditemukan sebanyak 30 jenis fragmen peptida setelah melewati tiga tahap digestif. 42

## Senyawa Antimikroba Bacteriocin
Salah  satu  kemampuan  kefir  dalam memberikan  efek  kesehatan  manusia dilakukan  dengan  cara  menghambat pertumbuhan bakteri patogen melalui sintesis senyawa  dengan  berat  molekul  rendah seperti  asam  organik  dan  senyawa antimikroba dengan berat molekul besar yang disebut bacteriocin. 43
Asam  organik  termasuk  asam  asetat  dan asam  laktat.  Senyawa  ini  telah  terbukti mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri gram  negatif  seperti  Helicobacter  pilory. 44
Berbagai  bakteriocin  disintesis  oleh  probiotik seperti lactacin B dari L. acidophilus, bifidocin B  diproduksi  oleh  Bifidobacterium  bifidum NCFB, plantaricin dari L. plantarum dan nisin dari Lactobacillus lactis. 45

## Biosurfaktan
Surfaktan  merupakan  akronim  dari surface active agent adalah komponen ampi- filik  berupa  bahan  aktif  yang  berfungsi  untuk mengurangi  tegangan  permukaan  antar  dua cairan.  Biosurfaktan  merupakan  surfaktan yang  diproduksi  oleh  mikrorganisme  contoh- nya bakteri. 46,47
Laktobasilus  merupakan  bakteri  domi- nan  yang  menyusun  kefiran.  Bakteri  ini memproduksi  senyawa  bioaktif  biosurfaktan. Molekul  ini  memiliki  banyak  sekali  manfaat baik  dari  kesehatan  maupun  lingkungan. Dalam  kaitanya  dengan  bidang  kesehatan, biosurfaktan  menunjukkan  mekanisme  peng- hambatan  adhesi  patogen  pada  sel  epitel jaringan  manusia  dan  secara  efektif menciptakan  suatu  penghalang  yang  bagi patogen yang akan melakukan kolonisasi. 48
Protein  permukaan  dari  Laktobasilus yaitu  co-aggregation-promoting  factor  (cpf) memperantarai  ko-agregasi  dengan  mikroba patogen  pada  manusia. 48 Fenomena  ini dipelajari  dengan  baik  pada  cavitas  oral  dan tractus urogenital serta tractus digestivus. 49,50
Studi  lain  dari  Rodrigues  memperlihatkan bahwa  biosurfaktan  yang  diproduksi  oleh Lactobacillus lactis dapat menghambat adhesi dari empat bakteri dan dua strain yeast yang diisolasi  dari alat  kesehatan  (explanted  voice prostheses).  Hasil  studi  memperlihatkan bahwa  biosurfaktan  terbukti  efektif  dalam mengurangi  laju  deposisi  awal,  termasuk mengurangi  jumlah  sel  bakteri  yang menempel setelah 4 jam hingga 90%. 51

## Efek  Konsumsi  Kefir  pada  Berbagai Penyakit Noninfeksi

## Kefir dan Aktivasi Sistem Imun
Peran  aktivasi  sistem  imun  dari pemberian  kefir  telah  dilaporkan  oleh  studi- studi  yang  dilakukan  baik  secara  in  vitro,  in vivo  hewan  coba  maupun  studi  pada manusia.  Studi  in  vitro  oleh  Hong  et  al. (2009),  mengemukakan  bahwa  pemberian supernatan  kefir  sangat  potensial  untuk menginduksi  peningkatan  produksi  sitokin proinflamasi IL-6 dan TNF-α serta penurunan sitokin  IL-1ß  dan  IL-12  pada  kultur  sel RAW264. 7 Pengaruh tersebut diduga kuat ter- jadi  melalui  jalur  TLR-2,  sehingga  dikatakan bahwa  kefir  berpotensi  untuk  mengaktivasi sistem  imun  seluler  dalam  mengatasi  infeksi patogen intraseluler. 52
Pada  hewan  coba,  peran  imuno- modulator  kefir  juga  diperlihatkan  dalam kemampuannya  menginduksi  peningkatan ekspresi  IgA  di  usus  halus  mencit  sehat. Ekspresi  IgA  dilaporkan  meningkat  optimal pada pemberian hari ke-2 dan ke-5. Prosedur pasteurisasi  kefir  memberikan  efek  pening- katan  IgA  yang  lebih  besar  pada  durasi pemberian yang  sama.  Selain  itu,  pemberian kefir  dan  kefir  pasteurisasi  juga  dilaporkan dapat meningkatkan ekspresi IL-4, IL-6, IL-10, IL-2, IFNγ, dan TNFα pada jaringan intestinal, dimana  dilusi  konsentrasi  dapat  memberikan perbedaan  respons  ekspresi.  Hal  tersebut memperlihatkan  bahwa  suplementasi  kefir dapat memberikan efek stimulasi sistem imun mukosa  intestinal  sesuai  dengan  besar kecilnya konsentrasi yang diberikan. 53 Selain  pada  intestinal,  peningkatan respons  imun  juga  terlihat  pada  jaringan bronkus  setelah  suplementasi  kefir.  Respons tersebut  berupa  peningkatan  jumlah  makro- fag,  sitokin  IL-α  dan  IgA.  Namun,  durasi peningkatan  IgA  dan  sitokin  IL-α  pada pemberian  kefir  memiliki  durasi  waktu  kerja yang optimal. Hal ini karena respons imun IgA diperlihatkan kembali menurun setelah
hari  ke-2  dan  ke-7  sejak  suplementasi dihentikan.  Sehingga  diindikasikan  bahwa kefir  memiliki  efikasi  durasi  kerja  dalam meningkatkan  aktivitas  fagositosis  makrofag dan  antibodi  di  jaringan  intestinal  dan bronkus.  Oleh  karena  itu,  kefir  memiliki potensi  keamanan  pada  penggunaan  secara periodik  dan  risiko  yang  minimal  untuk timbulnya stimulasi imun yang berlebihan. 54
Temuan tersebut diperkuat dengan studi yang  dilakukan  oleh  Adiloglu  et  al.  (2013), yang  menunjukkan  bahwa  konsumsi  kefir selama 6 minggu pada subjek manusia sehat dapat  meningkatkan  kadar  IL-5  dan  TNF-α serum  darah  setelah  6  minggu.  Kadar  ini kemudian  kembali  ke  kadar  awal  setelah minggu  ke-9.  Sebaliknya  kadar  IL-8  me- ngalami  penurunan  hingga  minggu  ke-9. Sementara  itu,  kefir  tidak  memberikan perbedaan yang signifikan pada kadar sitokin IL-1  dan  TGF-ß.  Temuan  tersebut  kemudian memberikan  indikasi  adanya  peran  kefir dalam  polarisasi  respons  imun  kepada  tipe Th1  serta  supresi  aktivasi  kemotaksis neutrophil  melalui  penurunan  IL-8.  Peran stimulasi  IgA  juga  dapat  terlihat  dari peningkatan  sitokin  IL-5  setelah  pemberian kefir. 55

## Kefir dan Artritis
Artritis  merupakan  radang  pada persendian  tulang.  Terdapat  beberapa  jenis artritis yang dibedakan dari sisi etiologi, antara lain  rheumatoid  artritis,  osteoartritis  dan  gout artritis.  Proses  inflamasi  menjadi  titik persamaan  dari  semua  etiologi  artritis  ter- sebut.  Adanya  edema  atau  bengkak  pada area  persendian  menjadi  salah  satu  mani- festasi utama pada artritis. 56–58
Artritis  rheumatoid  disebabkan  oleh proses  inflamasi  kronis  dari  proses  autoimun yang  dimulai  dari  inflamasi  sendi  dan  dapat meluas  menjadi  keluhan  sistemik. 57 Salah satu faktor penyebab patogenesis rheumatoid artritis  adalah  peningkatan  produksi  sitokin proinflamasi,  kemokin  dan  presentasi autoantigen  secara  terus  menerus  oleh  sel
dendritik  yang  diinduksi  dengan  kolagen. Stimulasi  tersebut  menyebabkan  manifestasi erosi pada persendian. 59 Studi yang dilakukan oleh  Chen  et  al.  (2021),  pada  hewan  model rheumatoid  artritis  memperlihatkan  bahwa kefir  dapat  memberikan  efek  penurunan derajat gejala inflamasi yang signifikan melalui supresi sitokin-sitokin proinflamasi dan supresi jalur NF-kB serta MAPK. Selain itu, kefir juga menghambat  maturasi  sel  dendritik  pada limpa  dan  menurunkan  persentase  Th1  dan Th17. 60
Efek  hambatan  inflamasi  dari  kefir  juga diperlihatkan  pada  mekanisme  edema  yang diinduksi  dengan  dekstran.  Dikatakan  bahwa edema  pada  kaki  tikus  menurun  76%  dalam waktu  2  jam  dari  pemberian  kefir.  Induksi edema  dengan  menggunakan  karagen  dapat terhambat sebesar 62% dalam durasi waktu 3 jam.  Persentase  hambatan  52%  nampak dalam  waktu  2  jam  setelah  pemberian  kefir pada edema yang diinduksi histamin. 14 Selain itu, studi lain menyebutkan bahwa skor artritis menurun  setelah  pemberian  peptide  kefir disertai  dengan  penurunan  erosi  tulang  di sendi pergelangan kaki. Hal tersebut didukung dengan  skor  histologi  yang  me-ngalami perbaikan  setelah  pemberian  kefir.  Kefir diindikasikan  sebagai  substansi  yang menjanjikan  sebagai  terapi  artritis  reumatoid di  masa  yang  akan  datang  dengan  kajian penelitian yang masih terus diperlukan. 17

## Kefir dan Mukosa Intestinal
Mukosa intestinal merupakan area yang memiliki  kontak  secara  langsung  dengan lingkungan eksternal tubuh melalui makanan. Oleh  karena  itu,  mukosa  intestinal  memiliki tantangan  untuk  melindungi  tubuh  dari  invasi patogen  tanpa  mengganggu  pertumbuhan mikrobiota  mutual.  Untuk  tujuan  ini,  epitel saluran  GI  dibantu  oleh  serangkaian  per- tahanan  fisiologis,  misalnya  mukus,  enzim pencernaan,  asam,  dan  kumpulan  jaringan limfoid  terbesar  di  tubuh  berupa  gut- associated lymphoid tissue (GALT). 61
Jaringan GALT merupakan bagian dari sistem imun  adaptif  yang  akan  menjadi  tempat diferensiasi  sel-sel  imun  sekaligus  tempat efektor bagi patogen asing. 62
Konsumsi  probiotik  secara  teratur mampu  menstimulasi  parameter  imunitas pada  GALT,  jaringan  limfoid  sekunder  dan sirkulasi  perifer. 63 Probiotik  adalah  mikroba hidup yang  dapat  ditemukan pada  makanan, terutama  makanan  yang  melalui  proses fermentasi.  Manfaat  kesehatan  dari  probiotik diperoleh  melalui  hambatan  perlekatan patogen,  produksi  asam,  hidrogen  peroksida dan  bakteriosin,  sehingga  dapat  mendukung terutama keseimbangan komposisi mikrobiota di  mukosa  intestinal.  Mikroorganisme  pro- biotik  memiliki  kemampuan  mengeluarkan senyawa  yang  menguntungkan  melalui  dua mekanisme  yaitu  dampak  langsung  dari mikroba  atau  secara  tidak  langsung  melalui metabolit dari mikrobanya atau sering disebut biogenik. 10
Derivat  kefir  dari  Lactobacillus  kefiri dibuktikan  dapat  menurunkan  mediator inflamasi  di  Peyer’s  patches  intestinal  dan limfonodi  mesenterika.  Sebaliknya  sitokin antiinflamasi  IL-10  mengalami  kenaikan. Selain  itu,  meningkatkan  kadar  igA  pada feses  dan  mengembalikan  keseimbangan diversitas dari mikrobiota intestinal. 64 Manfaat serupa didapatkan  dari  pemberian  susu kefir pada  hewan  model  imunisasi  toksin  kolera. Susu  kefir  mampu  meningkatkan  imunitas mukosa  melalui  peningkatan  kapasitas produksi  IgA  dan  IgB  pada  jaringan  limfoid intestinal. Efek ini sangat signifikan ditemukan pada hewan model berusia muda, sedangkan pada  hewan  berusia  tua  pengaruh  ini  tidak memberikan hasil yang signifikan. 65
Penelitian yang dilakukan oleh Medrano et al. (2011) menyebutkan bahwa pemberian kefir  selama  2  hari  optimal  dalam meningkatkan ekspresi sel dendritic dan sel T (CD4+  dan  CD8+)  baik  di  limpa,  limfonodi mesenterika  dan  Peyer’s  patch  intestinal hewan model. 66
Penelitian  lebih  lanjut  sangat  direkomen- dasikan untuk standarisasi komponen bioaktif kefir dalam upaya untuk menjelaskan secara lebih rinci mekanisme kefir dalam memodulasi mikrobiota  intestinal,  sehingga  penggunaan kefir  dapat  memberikan  manfaat  lebih  luas untuk  mencegah  maupun  menata  laksana penyakit akibat ketidakseimbangan mikrobiota intestinal. 19

## Kefir dan Ulkus Peptikum
Ulkus  peptikum  merupakan  penyakit kronis  yang  diderita  hampir  10%  populasi penduduk  dunia.  Ulkus  peptikum  pada lambung  disebabkan  oleh  karena  beberapa mekanisme  antara  lain  penurunan  resistensi mukosa terhadap keberadaan asam lambung, induksi  obat-obatan  NSAID  dan  infeksi Helicobacter  pylori.  Manifestasi  dari  ulkus peptikum  berupa  luka  yang  umumnya  terjadi di  lambung  dan  sebagian  di  proksimal duodenum. 67
Meskipun kefir bersifat asam, beberapa studi mengungkapkan manfaat baik dari kefir untuk keadaan ulkus peptikum. Efek preventif kefir  diperlihatkan  pada  tikus  model  induksi indomethacin. Terdapat penurunan erosi mu- kosa  dan  ulserasi  pada  lambung  tanpa mempengaruhi  jumlah  sekresi  mukus  pada lambung. 68 Studi  lain  memperlihatkan  hasil yang serupa dimana kefir mencegah ulserasi lambung  setelah  paparan  iradiasi  gamma melalui  sifat  antioksidan,  antiapoptosis  dan proteksi sinar radioaktif. 69
Kefir juga dapat menyeimbangkan ROS dan  NOS  secara  sistemik  sehigga  dapat mencegah  efek  samping  ulserasi  dari  obat- obatan  NSAID.  Efek  sistemik  juga  terjadi sebagai  pencegahan  kerusakan  makro- molekul  dan  apoptosis  sel  darah. 70 Per- cepatan  penyembuhan  luka  merupakan manfaat  yang  dapat  diperoleh  dari  konsumsi kefir. Hal ini karena kefir dapat menghambat invasi bakteri patogen pada luka dan induksi rekruitmen  sel-sel  imun  yang  mendukung untuk mereduksi waktu penyembuhan. 71

## Kefir dan Efek Antikanker
Pada  hewan  model  inokulasi  tumor, kefir memberikan efek imunostimulan melalui peningkatan  signifikan  pada  jumlah  sel  T (CD4+  dan  CD8+),  persentase  limfosit  dan ekspresi gen TNF-α. Respons tersebut linear dengan  penurunan  volume  tumor  dan peningkatan jumlah sel yang berada di tahap awal  apoptosis.  Dikatakan  bahwa  pemberian kefir  sebelum  inokulasi  tumor  memberikan hasil  yang  lebih  baik  dibandingkan  post- inokulasi,  oleh  karena  itu  kefir  direkomen- dasikan untuk eksplorasi lebih lanjut sebagai prevensi terhadap munculnya perkembangan jaringan kanker. 72
Kefir  mampu  memberikan  efek  pe- nurunan viabilitas sel pada kultur glioblastoma U87  cell  line.  Efek  sitotoksik  kefir  pada  sel tersebut  lebih  optimal  pada  paparan  24  jam seiring dengan peningkatan konsentrasi kefir. Hal ini menimbulkan peluang pengembangan kefir  sebagai  terapi  komplementer  maupun substitusi pada kanker. 73 Penelitian  tersebut diperkuat  oleh  Hatmal  et  al.  (2018),  yang menemukan  bahwa  manipulasi  kondisi fermentasi  kefir  dapat  meningkatkan  efek superioritas  kefir  sebagai  antikanker. Dikatakan  bahwa  rasio  kefir:susu  sebesar 10%  dengan  fermentasi  selama  48  jam  di suhu  4  °C  memberikan  hasil  yang  paling signifikan  pada  sel  kanker  K562  dan HCT116. 74
Selain  potensial  sebagai  inhibitor pertumbuhan  sel  kanker,  kefir  juga  me- ningkatkan  sensitivitas  terhadap  terapi  pada sel  kanker  yang  mengalami  resistensi pengobatan (multi drugs resistance). Adanya induksi  akumulasi  ROS,  penurunan  ekspresi gen  dan  protein  transporter  adenosine triphosphate  binding  cassete  (ABC)  serta penurunan  pompa  efluks  pada  sel  kanker, sehingga  dikatakan  kefir  memberikan harapan  baru  pada  pasien  kanker  yang menerima  terapi  doxorubicin  yang  sering mengalami permasalahan resistensi.
Disinyalir  bahwa  aktivitas  anti-
karsinogenesis  kefir  terjadi  melalui  prevensi dan supresi inisiasi tumor. Dalam hal ini kefir bersifat  inhibitor  aktivitas  enzim  yang berperan  dalam  konversi  prokarsinogen menjadi  karsinogen  serta  aktivator  pada sistem  imun. 75 Lebih  lanjut  kefir  dapat  me- ningkatkan protein bax sebagai proapoptosis. Kefir juga dapat menurunkan sekresi TGF-α, TGF-β  and  Bcl2  sehingga  dapat  menekan proliferasi sel. 76
Berbagai  bukti  penelitian  telah memberikan  hasil  yang  menjanjikan  terkait penggunaan  kefir  sebagai  antitumor, antiproliferasi, dan stimulasi apoptosis seperti pada  kanker  kolorektal,  limfoma  maligna, kanker  payudara,  dan  kanker  paru-paru.  Hal tersebut  memunculkan  sebuah  kesempatan untuk penggunaan kefir sebagai terapi kanker yang efektif dan minimal efek samping. 76

## Kefir sebagai Antimutagenesis
Mutagenesis  adalah  proses  terbentuk- nya  mutasi  pada  molekul  DNA  berupa perubahan  sekuen  ataupun  penataan  ulang pada kromosom. Mutasi dapat terjadi karena faktor  paparan  bahan  mutagen  dari lingkungan  seperti  logam  berat  dan  radiasi. Hal  ini  menjadi  perhatian  yang  sangat  besar oleh  karena  dampak  yang  terjadi  adalah ireversibel  sehingga  dapat  mempengaruhi keberlangsungan  organisme  hidup  dan populasinya. Keberadaan radikal bebas ROS menyebabkan  mutagenesis  melalui  per- lekatan  pada  basa  nukleotida  dan fragmentasi DNA. 77
Kefir  memiliki  efek  antimutagenik  yang dimediasi  oleh  kemampuannya  sebagai antioksidan,  hambatan  peroksidase  asam linoeat  dan  induksi  enzim-enzim  anti- oksidan. 78 Sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Grishina  et  al.  (2011),  bahwa efek  antigenotoksisitas  dari  kefir  pada  sel kanker  colon  manusia.  Inkubasi  kefir  dapat menghambat  kerusakan  DNA  dan  mem- berikan  efek  antioksidan  yang  lebih  tinggi daripada susu nonfermentasi. 79
Kefir memiliki kandungan yang tertinggi untuk asam  oleat,  asam  plamitat,  vaccinic, eicosaneoic,  erucic  dan  asam  linoleat.    Uji AMES  susu  fermentasi  kefir  dan  yogurt memperlihatkan  adanya  inhibisi  yang  lebih besar  daripada  susu  nonfermentasi. 80 Kefir disinyalir  dapat  menurunkan  tingkat  ke- rusakan  DNA  melalui  peningkatan  aktivitas DNA  repair  dan  menghambat  apoptosis  sel. Kefir  melindungi  regio  stem  sel  epithelial kolon  yang  merupakan  area  paling  sensitif terkena  kerusakan  DNA  akibat  ion  radiasi. 81
Kefir  juga  melindungi  kripte  kolon  sekaligus merangsang  regenerasi  kripte  dari  paparan radiasi sinar X pada mencit B6C3F1. 82 Pada jaringan  paru,  pemberian  kefir  dosis  rendah pada  tikus  model  fibrosis  subkronis menunjukkan  adanya  efek  yang  positif  pada jaringan paru pada tikus yang dipapar dengan bleomycin,  namun  apabila  dosis  kefir ditingkatkan  menjadi  tinggi,  maka  justru memiliki  efek  sebaliknya  yaitu  memperparah fibrosis. 83,84

## Kefir sebagai Antialergi
Kefir  dapat  menggeser  produksi  sitokin pada  sel  limpa  melalui  peningkatan  aktivitas Th1  dibandingkan  Th2.  Selain  itu,  terdapat efek  supresi  IgE  pada  pemberian  kefir  yang terjadi melalui peningkatan ekspresi gen Cd2, Stat4  dan  Ifnr  yang  berpengaruh  terhadap pergeseran keseimbangan Th1/Th2.. Adanya penurunan  ekspresi  sistem  komplemen berperan dalam regulasi supresi kadar IgE. 85
Efek  antialergi  kefir  juga  dilaporkan  pada aplikasi  kefir  susu  kedelai  pada  atopi  yang diinduksi  ovalbumin  pada  hewan  coba. Penurunan  kadar  IgE  dan  IgG1  juga  di- laporkan  pada  penggunaan  kefir  susu kedelai. 86
Pada  mencit  model  asthma  bronchiale, kefir  secara  signifikan  menekan  hiper- responsivitas  saluran  nafas.  Hal  tersebut karena  adanya  efek  penurunan  total  sel-sel inflamasi  terutama  eosinofil  pada  cairan bronkoalveolar.  Demikian  juga  dengan  kadar sitokin  IL-4,  IL-13  dan  IgE  yang  mengalami
penurunan  hingga  mencapai  kadar  normal. Analisis  histologi  juga  memperlihatkan penurunan eosinofil pada jaringan paru serta produksi  mukus  dari  sel  goblet  pada  saluran nafas. 87
Kandungan  bakteri  pada  kefir  telah dianalisis  dengan  metode  PCR-DGGE  dan 16S  rDNA  sequensing.  Studi  tersebut memperoleh  data  adanya  bakteri  jenis Lactobacillus di dalam kefir. 88 Bakteri tersebut memiliki  aktivitas  pada  produksi  Th1  dan sitokin  proinflamasi  oleh  makrofag  dan bermanfaat untuk memberikan keseimbangan Th1/Th2  yang  sangat  penting  bagi  sistem imun inang. 52

## Kefir dan Kolesterol
Suatu  studi  memperlihatkan  bahwa suplementasi  Lactobacillus  plantarum  MA2 yang berada diisolasi dari kefir Tibet memiliki kemampuan  aktivitas  menurunkan  kadar kolesterol  dan  trigliserida  darah  serta  hepar pada  tikus  diet  tinggi  kolesterol.  Sebaliknya, kadar  kolesterol  dan  trigliserida  dalam  feses menunjukkan  peningkatan.  Ditambah  lagi dengan  adanya  diversitas  populasi  yang membaik  untuk  bakteri  Escherichia  coli, bakteri  asam  laktat  dan  Bifidobacteria  pada feses. Sehingga produksi bahan organik yang diperlukan  dalam  sintesis  kolesterol  dapat ditingkatkan ekskresinya melalui feses. 89 Suplementasi  kefir  pada  diet  selama  8 minggu dapat menurunkan kadar serum total kolesterol  dan  trigliserida  serta  kolesterol pada  hepar.  Hambatan  absorbsi  kolesterol diperlihatkan  dengan  adanya  peningkatan ekskresi  sterol  fecal  setelah  pemberian  kefir susu  kedelai. 90 Menariknya,  hasil  yang berbeda  diungkapkan  pada  studi  konsumsi kefir  dengan  subjek  manusia  bahwa  tidak terdapat  efek  penurunan  kadar  kolesterol yang  signifikan  setelah  pemberian  kefir. Diperkirakan  bahwa  optimasi  jumlah  koloni bakteri yang terkandung dalam kefir serta tipe bakteri  mempengaruhi  terjadinya  perbedaan efek tersebut. 91

## Kefir dan Obesitas
Disbiosis  mikrobiota intestinal  berkaitan erat  dengan  obesitas.  Penyakit  kardio- vaskuler  berkaitan  erat  dengan  obesitas. Dilaporkan bahwa jumlah bifidobakterial pada anak dengan berat badan normal lebih tinggi, sedangkan  Staphylococcus  aureus  lebih tinggi  pada  anak  dengan  berat  badan berlebih.  Studi  kohort  pada  bayi  usia  satu bulan  menunjukkan  bahwa  level  kolonisasi Bacteroides fragilis berhubungan erat dengan peningkatan  BMI  pada  anak  di  usia  10 tahun. 92
Penggunaan  kefir  untuk  obesitas  dan dislipidemia telah dilakukan baik pada hewan model  maupun  manusia.  Studi  pada  hewan telah memberikan hasil yang relatif konsisten akan  manfaat  kefir  dalam  memperbaiki dislipidemia,  menurunkan  berat  badan,  berat lemak  visceral  dan  komorbiditas  terkait obesitas. 93 Salah  satunya  adalah  penelitian yang dilakukan oleh Kim et al.  (2017), yang menunjukkan  bahwa  pemberian  kefir  dapat menurunkan  berat  badan  pada  tikus  diet tinggi  lemak.  Jalur  perbaikan  dislipidemia tersebut  terjadi  melalui  induksi  keragaman mikrobiota  Lactobacillus,  total  yeast  dan Candida  serta  meningkatkan  gen  terkait regulasi  oksidasi  asam  lemak  baik  di  hepar maupun jaringan adiposa. 94
Obesitas  dan  dislipidemia  dapat menimbulkan  berbagai  gangguan  metabolik dan  kardiovaskuler.  Aterosklerosis    me- rupakan  salah  satu  komplikasi  dari  keadaan dislpidemia  pada  obesitas.  Manfaat  kefir sebagai  antiobesitas  dan  komplikasi aterosklerosis  ditunjukkan  pada  penelitian dengan  model  mencit  knockout  ApoE  -/-. Intervensi  kefir  selama  12  minggu  dapat menurunkan  aterosklerosis  melalui  pe- nurunan  stres  oksidatif  dan  penurunan akumulasi  makrofag  serta  pelepasan  sitokin IL-1β  and  TNF-α.  Hasil  ini  mengindikasikan bahwa konsumsi kefir dapat bermanfaat untuk mencegah dan terapi aterosklerosis. 95
Adapun  studi  pada  manusia
menunjukkan  bahwa  suplementasi  minuman kefir  selama  8  minggu  pada  wanita  obesitas post-menopause  dapat  menurunkan  kadar dan  rasio  lipoprotein  dibandingkan  pada mereka  yang  mengkonsumsi  susu  rendah lemak. 96 Studi  metaanalisis  pada  subjek manusia  menunjukkan  bahwa  pemberian susu  fermentasi  secara  signifikan menurunkan  BMI  dan  direkomendasikan sebagai  salah  satu  tata  laksana  obesitas meskipun  studi  pada  populasi  yang  lebih besar masih diperlukan. 97

## Kefir sebagai Antihipertensi
Studi  efek  antihipertensi  dari kefir  telah dilakukan  pada  hewan  model  hipertensi spontan.  Dikemukakan  bahwa  pemberian kefir  selama  9  minggu  dapat  memperbaiki profil  hemodinamik  termasuk  tekanan  darah yang  terjadi  melalui  hambatan  kefir  terhadap proses  hipertrofi  ventrikel  jantung,  perbaikan kontraktilitas  otot  jantung  dan  penurunan aktivitas  simpatis  dari  saraf  autonom. 98 Studi lain menginformasikan bahwa perbaikan jalur gut-brain  axis  pada  pemberian  kefir  jangka panjang  diduga  berperan  besar  dalam mekanisme  penurunan  tekanan  darah  oleh pemberian kefir. 99
Andrade  et  al.  (2021),  mengungkapkan bahwa efek antihipertensi dari kefir juga dapat diperoleh  pada  pemberian  akut  maupun kronis.  Dimana  kefir  bertindak  sebagai inhibitor  angiostensin-converting  enzyme (ACE)  dan  mendukung  keseimbangan produksi vasodilator nitrit oksida. 100

## Kesimpulan
Kefir tersusun dari kombinasi mikroflora bakteri  maupun  yeast  yang  memberikan peluang manfaat baik untuk kesehatan. Oleh karena  itu,  kefir  sangat  potensial  untuk dieksplorasi  lebih  lanjut  dalam  penelitian translasional  sebagai  salah  satu  bahan  aditif dalam  produk  pangan  fungsional  yang memberikan manfaat untuk kesehatan.

## Daftar Pustaka
1.   Rosa  DD,  Dias  MMS,  Grześkowiak  ŁM, Reis  SA,  Conceição  LL,  Peluzio  MDCG.
Milk kefir: Nutritional, microbiological and health  benefits.  Nutr  Res  Rev.  2017;  30 (1):82–96.
2.   Schwan RF, Magalhães-Guedes KT, Dias
DR.  Kefir  -  Grains  and  Beverages:  A Review. Sci Agrar Parana. 2015; 14(1):1– 9.
3.   Garrote GL, Abraham AG, De Antoni GL.
Microbial  Interactions  in  Kefir:  A  Natural Probiotic Drink. Biotechnol Lact Acid Bact
Nov Appl. 2010; (1980):327–40.
4.   Nejati  F,  Junne  S,  Neubauer  P.  A  Big World in Small Grain: A Review of Natural Milk Kefir Starters. Microorganisms. 2020; 8(2).
5.   Tamime  AY.  Fermented  Milks:  A
Historical Food with Modern Applications– a  Review.  Eur J  Clin  Nutr. 2002;  56:S2– 15.
6.   Marsh AJ, O’Sullivan O, Hill C, Ross RP,
Cotter PD. Sequencing-Based Analysis of the  Bacterial  and  Fungal  Composition  of
Kefir  Grains  and  Milks  from  Multiple
Sources. PLoS One. 2013; 8(7). 7.   R i m a d a   P S ,   A b r a h a m   A G .
Polysaccharide  Production  by  Kefir Grains  During  Whey  Fermentation.  J Dairy Res. 2001; 68(4):653–61.
8.   Güzel-Seydim  ZB,  Seydim  AC,  Greene AK, Bodine AB. Determination of Organic Acids  and  Volatile  Flavor  Substances  in Kefir  during  Fermentation.  J  Food Compos Anal. 2000; 13(1):35–43.
9.   Rattray  FP,  O’Connell  MJ.  Fermented Milks: Kefir. Encycl Dairy Sci Second Ed. 2011; 518–24.
10.  Ötles S, Çagındı Ö, Akçiçek E. Probiotics and Health. 2003; 4:369–72.
11.  Singh  RK,  Chang  HW,  Yan  D,  Lee  KM, Ucmak D, Wong K, et al. Influence of Diet on  the  Gut  Microbiome  and  Implications
for Human Health. J Transl Med. 2017; 15 (1):1–17.
12.  Maldonado Galdeano C, Perdigón G. The
Probiotic  Bacterium  Lactobacillus  casei Induces  Activation  of  the  Gut  Mucosal Immune System through Innate Immunity.
Clin  Vaccine  Immunol.  2006;  13(2):219– 26.
13.  Kim DH, Jeong D, Kim H, Kang IB, Chon JW, Song KY, et al. Antimicrobial Activity of  Kefir against  Various  Food  Pathogens and Spoilage Bacteria. Korean J Food Sci
Anim Resour. 2016; 36(6):787–90.
14.  Rodrigues KL, Carvalho JCT, Schneedorf JM.  Anti-Inflammatory  Properties  of  Kefir and  Its  Polysaccharide  Extract. Inflammopharmacology.  2005;  13(5–
6):485–92.
15.  Marques  VD,  Franzolin  MR,  Sanabani SS,  Vigerelli  H,  Piazza  RMF,  Pimenta DC,  et  al.  A  New  Class  of  Antimicrobial Molecules  Derived  from  Kefir,  Effective against  Pseudomonas  aeruginosa  and Methicillin  Resistant  Staphylococcus aureus (MRSA) strains. Sci Rep. 2020; 10 (1):1–13.
16.  Gao J, Gu F, Ruan H, Chen Q, He J, He G.  Induction  of  Apoptosis  of  Gastric Cancer Cells SGC7901 In Vitro by a Cell- Free Fraction of Tibetan kefir. Int Dairy J .
2013; 30(1):14–8.
17.  Lai  Y,  Ko  C,  Chen  H,  Chen  C.  Anti ‐ Inflammatory  Effect  and  Bone  Protection of  Kefir  Peptides  in  a  Rat  Model  of Adjuvant ‐ Induced  Rheumatoid  Arthritis. FASEB J. 2019; 33(S1).
18.  Dębińska  A,  Sozańska  B.  Fermented Food  in  Asthma  and  Respiratory Allergies—Chance  or  Failure?.  Nutrients. 2022; 14(7):1420.
19.  Peluzio  M  do  CG,  Dias  M  de  M  e., Martinez  JA,  Milagro  FI.  Kefir  and Intestinal  Microbiota  Modulation: Implications in Human Health. Front Nutr. 2021; 8(February):1–15.
20.  Bell  V,  Ferrão  J,  Pimentel  L,  Pintado  M, Fernandes  T.  One  Health,  Fermented Foods, and Gut Microbiota.  Foods. 2018; 7(12).
21.  Sirirat D, Jelena P. Bacterial Inhibition and Antioxidant Activity of Kefir Produced from Thai  Jasmine  Rice  Milk.  Biotechnology. 2010; 9(3):332–7.
22.  Dobson A, O’Sullivan O, Cotter PD, Ross
P,  Hill  C.  High-Throughput  Sequence- Based  Analysis  of  the  Bacterial Composition  of  Kefir  and  an  Associated Kefir  Grain.  FEMS  Microbiol  Lett.  2011; 320(1):56–62.
23.  Garofalo  C,  Osimani  A,  Milanović  V,
Aquilanti L, De Filippis F, Stellato G, et al. Bacteria and Yeast Microbiota in Milk Kefir Grains  from  Different  Italian  Regions.
Food Microbiol. 2015; 49(1):123–33. 24. Korsak N, Taminiau B, Leclercq M, Nezer
C, Crevecoeur S, Ferauche C, et al. Short Communication:  Evaluation  of  the Microbiota  of  Kefir  Samples  using Metagenetic  Analysis    Targeting  the  16S and  26S  Ribosomal  DNA  Fragments.  J Dairy Sci. 2015; 98(6):3684–9. 25.  Pintado J, Ruiz P, Cremades J, Masaló I,
Jiménez  P,  Oca  J.  Experimental Colonization  of  Ulva  spp.  with  Algal- Epiphytic  Antagonistic  Bacteria  as  a Strategy  for  Pathogen  Control  in Integrated  Multi-Trophic  Aquaculture Recirculating  Systems.  In:  Aquaculture Europe “Book of abstracts Aquaculture '16 20-23 2016 Edimburgh”. 2016. p. 788–9. 26.  Witthuhn  RC,  Schoeman  T,  Britz  TJ.
Characterisation  of  the  Microbial Population  at  Different  Stages  of  Kefir Production  and  Kefir  Grain  Mass Cultivation. Int Dairy J. 2005; 15(4):383–9. 27. Plessas  S,  Nouska  C,  Mantzourani  I,
Kourkoutas  Y,  Alexopoulos  A, Bezirtzoglou  E.  Microbiological Exploration  of  Different  Types  of  Kefir Grains. Fermentation. 2017; 3(1):1–10.
28.  Marquina D, Santos A, Corpas I, Muñoz J,
Zazo J,  Peinado JM.  Dietary Influence of Kefir  on  Microbial  Activities  in  the  Mouse Bowel.  Lett  Appl  Microbiol.  2002;  35 (2):136–40.
29.  Latorre-García  L,  Del  Castillo-Agudo  L,
Polaina  J.  Taxonomical  Classification  of Yeasts  Isolated  from  Kefir  Based  on  the Sequence  of  Their  Ribosomal  RNA Genes.  World  J  Microbiol  Biotechnol. 2007; 23(6):785–91.
30.  Diosma  G,  Romanin  DE,  Rey-Burusco MF, Londero A, Garrote GL. Yeasts from Kefir  Grains:  Isolation,  Identification,  and Probiotic  Characterization.  World  J
Microbiol Biotechnol. 2014; 30(1):43–53. 31.  Simova  E,  Beshkova  D,  Angelov  A,
Hristozova  T,  Frengova  G,  Spasov  Z. Lactic  Acid  Bacteria  and  Yeasts  in  Kefir Grains  and  Kefir Made  from Them.  J  Ind
Microbiol Biotechnol. 2002; 28(1):1–6.
32.  Abraham  AG,  De  Antoni  GL. Characterization of Kefir Grains Grown in Cows’ Milk and in Soya Milk. J Dairy Res. 1999; 66(2):327–33.
33.  Wang SY, Chen HC, Liu JR, Lin YC, Chen MJ. Identification of Yeasts and Evaluation of  Their  Distribution  in  Taiwanese  Kefir and  Viili  Starters.  J  Dairy  Sci.  2008;  91 (10):3798–805.
34.  Miguel  MG  da  CP,  Cardoso  PG,
Magalhães  KT,  Schwan  RF.  Profile  of Microbial  Communities  Present  in  Tibico (Sugary  Kefir)  Grains  from  Different Brazilian  States.  World  J  Microbiol Biotechnol. 2011; 27(8):1875–84.
35.  Ruas-Madiedo  P,  Hugenholtz  J,  Zoon  P.
An  Overview  of  the  Functionality  of Exopolysaccharides  Produced  by  Lactic Acid  Bacteria.  Int  Dairy  J.  2002;  12(2– 3):163–71.
36.  Ismaiel  AA,  Ghaly  MF,  El-Naggar  AK.
Some  Physicochemical  Analyses  of  Kefir Produced  under  Different  Fermentation
Conditions. J Sci Ind Res. 2011; 70(5):365
–72.
37.  Guérin  M,  Robert-Da  Silva  C,  Garcia  C, Remize  F.  Lactic  Acid  Bacterial Production  of  Exopolysaccharides  from Fruit  and  Vegetables  and  Associated
Benefits. Fermentation. 2020; 6(4).
38.  Kumar  AS,  Mody  K,  Jha  B.  Bacterial Exopolysaccharides  -  A  Perception.  J Basic Microbiol. 2007; 47(2):103–17.
39.  Korhonen  H,  Pihlanto  A.  Bioactive Peptides:  Production  and  Functionality. Int Dairy J. 2006;16(9):945–60.
40.  Zaky AA, Simal-Gandara J, Eun JB, Shim JH,  Abd  El-Aty  AM.  Bioactivities, Applications, Safety, and Health Benefits of Bioactive Peptides From Food and By- Products:  A  Review.  Front  Nutr.  2022;  8 (January):1–18.
41.  Vieira  CP,  Rosario  AILS,  Lelis  CA,
Rekowsky  BSS,  Carvalho  APA,  Rosário DKA,  et  al.  Bioactive  Compounds  from Kefir  and  Their  Potential  Benefits  on Health:  A  Systematic  Review  and  Meta- Analysis.  Oxid  Med  Cell  Longev.  2021; 2021.
42.  Liu Y, Pischetsrieder M. Identification and Relative  Quantification  of  Bioactive Peptides  Sequentially  Released  during Simulated  Gastrointestinal  Digestion  of Commercial  Kefir.  J  Agric  Food  Chem. 2017; 65(9):1865–73. 43.  Bermudez-Brito M, Plaza-Díaz J, Muñoz- Quezada  S,  Gómez-Llorente  C,  Gil  A. Probiotic Mechanisms of Action. Ann Nutr Metab. 2012; 61(2):160–74.
44.  Russell JB, Diez-Gonzalez F. The Effects of  Fermentation  Acids  on  Bacterial Growth.  Adv  Microb  Physiol.  1998; 39:228–34.
45.  Nielsen DS, Cho GS, Hanak A, Huch M, Franz  CMAP,  Arneborg  N.  The  Effect  of Bacteriocin-Producing  Lactobacillus plantarum  Strains on  the  Intracellular pH of  Sessile  and  Planktonic  Listeria monocytogenes  Single  Cells.  Int  J  Food Microbiol. 2010; 141(SUPPL.):S53–59. 46.  Mulligan  C,  Gibbs  B.  Types,  Production
and  Applications  of  Biosurfactants.  Vol. 70,  Proceedings-Indian  National  Science Academy Part B. 2004. p. 31–56. 47.  Satpute  SK,  Płaza  GA,  Banpurkar  AG. Biosurfactants’  Production  from Renewable  Natural  Resources:  Example of  Innovativeand  Smart  Technology  in Circular  Bioeconomy.  Manag  Syst  Prod Eng. 2017; 25(1):46–54.
48.  Satpute SK, Kulkarni GR, Banpurkar AG,
Banat  IM,  Mone  NS,  Patil  RH,  et  al. Biosurfactant/s  from  Lactobacilli  species: Properties,  Challenges  and  Potential Biomedical  Applications.  J  Basic Microbiol. 2016; 56(11):1140–58.
49.  Voltan S, Castagliuolo I, Elli M, Longo S, Brun  P,  D’Incà  R,  et  al.  Aggregating Phenotype  in  Lactobacillus  crispatus Determines  Intestinal  Colonization  and TLR2  and  TLR4  Modulation  in  Murine Colonic  Mucosa.  Clin  Vaccine  Immunol. 2007; 14(9):1138–48.
50.  Azizah  N,  Qonitun  U,  Raras  TYM, Prawiro  SR.  Probiotics  Lactobacillus Reuteri  Increase  Levels  of  β-Defensin1, sIgA  and  Decrease  Number  of Staphylococcus aureus Bacteria Colonies in  Vaginal  Mucosa  on  Puerperal  Mice Model  Infected  with  Staphylococcus aureus. J Kebidanan. 2020; 9(1):71. 51.  Rodrigues  LR,  Teixeira  JA,  van  der  Mei HC,  Oliveira  R.  Physicochemical  and Functional  Characterization  of  a Biosurfactant  Produced  by  Lactococcus lactis  53.  Colloids  Surfaces  B Biointerfaces. 2006; 49(1):79–86.
52.  Hong WS, Chen HC, Chen YP, Chen MJ.
Effects  of  Kefir  Supernatant  and  Lactic Acid Bacteria Isolated from Kefir Grain on Cytokine  Production  by  Macrophage.  Int
Dairy J. 2009; 19(4):244–51.
53.  CG  Vinderola,  Duartei  J,  Thangavel  D, Pergidon G, Farnworth E, Matar C. Distal Mucosal  Site  Stimulation  by  Kefir  and Duration of The Immune Response. Eur J Inflamm. 2005; 3(2):15–24.
54.  Vinderola  CG,  Duarte  J,  Thangavel  D, Perdigón  G,  Farnworth  E,  Matar  C. Immunomodulating  Capacity  of  Kefir.  J Dairy Res. 2005; 72(2):195–202.
55.  Adiloglu  AK,  Gonulates  N,  Isler  M,  Senol A.  The  Effect  of  Kefir  Consumption  on Human  Immune  System:  A  Cytokine Study. Mikrobiol Bul. 2013; 47(2):273–81.
56.  Berenbaum  F.  Osteoarthritis  as  an Inflammatory Disease (Osteoarthritis is not Osteoarthrosis!).  Osteoarthr  Cartil.  2013; 21(1):16–21.
57.  Bullock  J,  Rizvi  SAA,  Saleh  AM,  Ahmed SS, Do DP, Ansari RA, et al. Rheumatoid Arthritis:  A  Brief  Overview  of  the Treatment.  Med  Princ  Pract.  2019;  27 (6):501–7.
58.  Saigal  R,  Agrawal  A.  Pathogenesis  and Clinical  Management  of  Gouty  Arthritis.  J Assoc  Physicians  India.  2015;  63 (DECEMBER2015):56–63.
59.  Leung  BP,  Conacher  M,  Hunter  D, McInnes IB, Liew FY, Brewer JM. A Novel Dendritic  Cell-Induced  Model  of  Erosive Inflammatory  Arthritis:  Distinct  Roles  for Dendritic  Cells  in  T  Cell  Activation  and Induction  of  Local  Inflammation.  J Immunol. 2002;169(12):7071–7. 60.  Chen  CF,  Li  HP,  Chao  YH,  Tu  MY,  Yen CC,  Lan  YW,  et  al.  Suppression  of Dendritic Cell Maturation by Kefir Peptides Alleviates  Collagen-Induced  Arthritis  in Mice.  Front  Pharmacol.  2021;  12 (October):1–14.
61.  Silverthorn  DU.  Human  Physiology  An Integrated Approach. England. 2016.
62.  Mörbe  UM,  Jørgensen  PB,  Fenton  TM, von  Burg  N,  Riis  LB,  Spencer  J,  et  al. Human Gut-Associated Lymphoid Tissues (GALT); Diversity, Structure, and Function.
Mucosal Immunol. 2021; 14(4):793–802.
63.  Britti  MS,  Roselli  M,  Finamore  A, Merendino  N,  Mengheri  E.  Regulation  of Immune  Response  at  Intestinal  and
Peripheral  Sites  by  Probiotics.  Biologia.
2006; 61(6):735–40.
64.  Carasi  P,  Racedo  SM,  Jacquot  C,
Romanin  DE,  Serradell  MA,  Urdaci  MC. Impact of Kefir Derived Lactobacillus kefiri on  the  Mucosal  Immune  Response  and Gut  Microbiota.  J  Immunol  Res.  2015; 2015.
65.  Thoreux  K,  Schmucker  DL.  Kefir  Milk Enhances  Intestinal  Immunity  in  Young but Not Old Rats. J Nutr. 2001; 131(3):807 –12.
66.  Medrano  M,  Racedo  SM,  Rolny  IS, Abraham  AG,  Pérez  PF.  Oral Administration  of  Kefiran  Induces Changes in the Balance of Immune Cells in  a  Murine  Model.  J  Agric  Food  Chem.
2011; 59(10):5299–304.
67.  Kuna  L,  Jakab  J,  Smolic  R,  Raguz-Lucic N,  Vcev  A,  Smolic  M.  Peptic  Ulcer Disease:  A  Brief  Review  of  Conventional Therapy and Herbal Treatment Options. J
Clin Med. 2019; 8(2).
68.  Orhan  YT,  Karagözlü  C,  Sario ǧ lu  S, Yilmaz O, Murat N, Gidener S. A Study on the  Protective  Activity  of  Kefir  against Gastric  Ulcer.  Turkish  J  Gastroenterol. 2012; 23(4):333–8.
69.  Fahmy  HA,  Ismail  AFM.  Gastroprotective Effect  of  Kefir  on  Ulcer  Induced  in Irradiated Rats. J Photochem Photobiol B Biol. 2015; 144:85–93.
70.  Barboza KRM, Coco LZ, Alves GM, Peters
B,  Vasquez  EC,  Pereira  TMC,  et  al. Gastroprotective  Effect  of  Oral  Kefir  on Indomethacin-Induced  Acute  Gastric Lesions  in  Mice:  Impact  on  Oxidative Stress. Life Sci. 2018; 209(May):370–6. 71.  Bourrie  BCT,  Willing  BP,  Cotter  PD.  The Microbiota  and  Health  Promoting Characteristics  of  the  Fermented Beverage  Kefir.  Front  Microbiol.  2016;  7
(MAY):1–17.
72.  Badr  El-Din  NK,  Shabana  SM,
Abdulmajeed  BA,  Ghoneum  M.  A  Novel Kefir  Product  (Pft)  Inhibits  Ehrlich  Ascites Carcinoma  in  Mice  via  Induction  of Apoptosis  and  Immunomodulation.  BMC Complement Med Ther. 2020; 20(1):1–12.
73.  Fatahi  A,  Soleimani  N,  Afrough  P. Anticancer  Activity  of  Kefir  on Glioblastoma  Cancer  Cell  as  a  New Treatment.  International  Journal  of  Food
Science. 2021;2021.
74.  Hatmal  MM,  Nuirat  A,  Zihlif  MA,  Taha
MO.  Exploring  the  Influence  of  Culture Conditions  on  Kefir  ’  S  Anticancer Properties.  J  Dairy  Sci  .  2018;  101 (5):3771–7.
75.  Sarkar  S.  Potential  of  Kefir  as  a  Dietetic Beverage  –  a  Review.  Br  Food  J.  2007; 109(4):280–90.
76.  Sharifi M, Moridnia A, Mortazavi D, Salehi M,  Bagheri  M,  Sheikhi  A.  Kefir:  a Powerful  Probiotics  with  Anticancer Properties. Med Oncol. 2017; 34(11):1–7.
77.  Theodorakis  CW.  Mutagenesis.  In:
Encyclopedia  of  Physical  Science  and Technology. 3 rd Edition. 2003.
78.  Liu JR, Chen MJ, Lin CW. Antimutagenic and  Antioxidant  Properties  of  Milk-Kefir and  Soymilk-Kefir.  J  Agric  Food  Chem. 2005; 53(7):2467–74.
79.  Grishina  A,  Kulikova  I,  Alieva  L,  Dodson
A,  Rowland  I,  Jin  J.  Antigenotoxic  Effect of Kefir and Ayran Supernatants on Fecal Water-Induced  DNA  Damage  in  Human
Colon Cells. Nutr Cancer. 2011; 63(1):73
–9. 80.  Guzel-Seydim  ZB,  Seydim  AC,  Greene AK,  Taş  T.  Determination  of antimutagenic  Properties  of  Acetone Extracted Fermented Milks and Changes in Their Total Fatty Acid Profiles Including Conjugated  Linoleic  Acids.  Int  J  Dairy Technol. 2006; 59(3):209–15. 81.  Matsuu  M,  Shichijo  K,  Okaichi  K,  Wen CY,  Fukuda  E,  Nakashima  M,  et  al.  The Protective  Effect  of  Fermented  Milk  Kefir on  Radiation-Induced  Apoptosis  in Colonic Crypt Cells of Rats. J Radiat Res. 2003; 44(2):111–5. 82.  Teruya  K,  Myojin-Maekawa  Y, Shimamoto F, Watanabe H, Nakamichi N, Tokumaru  K,  et  al.  Protective  Effects  of
the  Fermented  Milk  Kefir  on  X-Ray Irradiation-Induced  Intestinal  Damage  in B6C3F1 Mice. Biol Pharm Bull. 2013; 36 (3):352–9.
83.  Griana  TP,  Raras  TYM,  Mintaroem  K, C h o z i n   I N ,   W i l u j e n g   C S . Immunosuppressive Activity of Goat Kefir in  a  Rat  Model  with  Bleomycin-Induced Pulmonary  Fibrosis.  Pharmacogn  J. 2020; 12(6):1594–9.
84.  Raras  TYM,  Hidayati  N,  Wardhani  SO.
High  Doses  of  Kefir  Accelerate  Lung- Injury  Progression  in  Bleomycin-Induced Pneumonitis  in  Rats.  Jundishapur  J  Nat Pharm Prod. 2021; 16(3).
85.  Hong  WS,  Chen  YP,  Chen  MJ.  The Antiallergic  Effect  of  Kefir  Lactobacilli.  J Food Sci. 2010; 75(8):244–53.
86.  Liu J-R, Wang S-Y, Chen M-J, Yueh P-Y, Chin-Wen  Lin.  The  Anti-Allergenic Properties of Milk Kefir and Soymilk Kefir and  Their  Beneficial  Effects  on  the Intestinal Microflora. J Sci of Food Agric. 2006; 86:2527–33.
87.  Lee MY, Ahn KS, Kwon OK, Kim MJ, Kim MK,  Lee  IY,  et  al.  Anti-Inflammatory and Anti-Allergic  Effects  of  Kefir  in  a  Mouse Asthma  Model.  Immunobiology.  2007;
212(8):647–54.
88.  Chen  HC,  Wang  SY,  Chen  MJ.
Microbiological  Study  of  Lactic  Acid Bacteria  in  Kefir  Grains  by  Culture- Dependent  and  Culture-Independent Methods. Food Microbiol. 2008; 25(3):492 –501.
89.  Wang Y, Xu N, Xi A, Ahmed Z, Zhang B, Bai  X.  Effects  of  Lactobacillus  plantarum MA2  Isolated  from  Tibet  Kefir  on  Lipid Metabolism  and  Intestinal  Microflora  of Rats  Fed  on  High-Cholesterol  Diet.  Appl Microbiol Biotechnol. 2009; 84(2):341–7. 90.  Liu J-R, Wang S-Y, Chen M-J, Chen H-L, Yueh  P-Y,  Lin  C-W.  Hypo- cholesterolaemic Effects of Milk-Kefir and Soyamilk-Kefir  in  Cholesterol-Fed Hamsters. Br J Nutr. 2006; 95(5):939–46.
91.  St-Onge  MP,  Farnworth  ER,  Savard  T,
Chabot  D,  Mafu  A,  Jones  PJH.  Kefir Consumption does not alter Plasma Lipid
Levels  or  Cholesterol  Fractional
Synthesis  Rates  Relative  to  Milk  in Hyperlipidemic  Men:  A  Randomized Controlled Trial. BMC Complement Altern Med. 2002; 2:1–7. 92.  Zhuang L, Chen H, Zhang S, Zhuang J, Li Q,  Feng  Z.  Intestinal  Microbiota  in  Early Life  and  Its  Implications  on  Childhood Health.  Genomics,  Proteomics
Bioinforma. 2019; 17(1):13–25.
93.  Bourrie BCT, Richard C, Willing BP. Kefir in  the  Prevention  and  Treatment  of Obesity  and  Metabolic  Disorders.  Curr Nutr Rep. 2020; 9(3):184–92.
94.  Kim DH, Kim H, Jeong D, Kang IB, Chon JW,  Kim  HS,  et  al.  Kefir  Alleviates Obesity and Hepatic Steatosis in High-Fat Diet-Fed  Mice  by  Modulation  of  Gut Microbiota  and  Mycobiota:  Targeted  and Untargeted  Community  Analysis  with Correlation  of  Biomarkers.  J  Nutr Biochem. 2017; 44:35–43. 95.  Tung  MC,  Lan  YW,  Li  HH,  Chen  HL,
Chen SY, Chen YH, et al. Kefir Peptides Alleviate  High-Fat  Diet-Induced Atherosclerosis  by  Attenuating Macrophage Accumulation and Oxidative Stress in ApoE Knockout Mice.  Sci Rep. 2020; 10(1):1–15. 96.  Fathi  Y,  Ghodrati  N,  Zibaeenezhad  MJ,
Faghih  S.  Kefir  Drink  Causes  a Significant  Yet  Similar  Improvement  in Serum Lipid Profile, Compared with Low-
Fat  Milk,  in  a  Dairy-Rich  Diet  in Overweight  or  Obese  Premenopausal Women:  A  Randomized  Controlled  Trial.
J Clin Lipidol. 2017; 11(1):136–46.
97.  Mohammadi  H,  Ghavami  A,  Faghihimani Z, Sharifi S, Nattagh-Eshtivani E, Ziaei R, et al. Effects of Probiotics Fermented Milk Products  on  Obesity  Measure  Among Adults:  A  Systematic  Review  and  Meta- Analysis of Clinical Trials. J Funct Foods . 2021; 82(April):104494.
98. Silva-Cutini MA, Almeida SA, Nascimento AM, Abreu GR, Bissoli NS, Lenz D, et al. Long-Term  Treatment  with  Kefir Probiotics  Ameliorates  Cardiac  Function in  Spontaneously  Hypertensive  Rats.  J Nutr Biochem. 2019; 66:79–85.
99.  de  Almeida  Silva  M,  Mowry  FE,  Peaden SC,  Andrade  TU,  Biancardi  VC.  Kefir Ameliorates  Hypertension  via  Gut–Brain Mechanisms  in  Spontaneously
Hypertensive  Rats.  J  Nutr  Biochem. 2020; 77:108318.
100.  de  Andrade  TU,  Schumacker  KS,
Coutinho G, Rezende MS, Ronchi SN, et al.  Chronic  and  Acute  Effects  of  Kefir: The  Role  of  Angiotensin  Converting Enzyme Inhibition Instead of Nitric Oxide
Balance.  Brazilian  J  Pharm  Sci.  2021; 57:1–8.
101. Leite AM de O, Miguel MAL, Peixoto RS,
Rosado  AS,  Silva  JT,  Paschoalin  VMF. Microbiological,  Technological  and Therapeutic Properties of Kefir: A Natural
Probiotic Beverage. Brazilian J Microbiol. 2013; 44(2):341–9.