## Efek Antihiperlipidemia Kombinasi Ektrak Kelopak Bunga Rosella dan Ekstrak Daun Bawang Kucai
Antihyperlipidemic Effect of Combination Roselle Petal Extracts and Garlic Chives Leaves extract
Dwi Ningsih 1 , Samuel Budi Harsono 2, Anas Diah Kusumawati 3 , Dinda Nur Mahmudah 4 1,2,3,4 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Surakarta ________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian untuk mengetahui aktivitas antihiperlipidemia dari kombinasi ekstrak etanol kelopak bunga rosella  dan daun bawang kucai  pada tikus hiperlipidemia. Untuk mengetahui  potensi  efek  dari  kombinasi  bawang  kucai  dan  rosella,  hewan  uji  dibagi  menjadi tujuh  kelompok  perlakuan,  terdiri  dari  kelompok  kontrol  hiperlipidemia,  kelompok    rosella  (500 mg/KgBB),  kelompok  daun  kucai  (110  mg/KgBB),  kelompok  kombinasi  kelopak  bunga  rosella dan  daun  bawang  kucai  masing-masing  125:82,5  mg/KgBB,  250:55  mg/KgBB,  dan  375:27,5 mg/KgBB.
Hasil  uji  kadar  kolesterol  total  didapatkan  persen  penurunan  kadar  kolesterol  total kelompok  rosella  tunggal  (500  mg/KgBB)  sebesar  11,49%,  kelompok  daun  kucai  tunggal  (110 mg/KgBB)  sebesar  13,70%,  kelompok  kombinasi  kelopak  bunga  rosella  dan  daun  bawang kucai  125:82,5  mg/KgBB,  250:55  mg/KgBB,  dan  375:27,5  mg/KgBB,  masing-masing  sebesar 40,60%;  46,80%,  dan  32,80%.  Hasil  uji  kadar  trigliserida  didapatkan  persen  penurunan  kadar trigliserida  kelompok  rosella  tunggal  (500  mg/KgBB)  sebesar  16,40%,  kelompok  daun  kucai tunggal (110 mg/KgBB) sebesar 27,68%, kelompok kombinasi kelopak bunga rosella dan daun bawang  kucai  125:82,5  mg/KgBB,  250:55  mg/KgBB,  dan  375:27,5  mg/KgBB,  masing-masing sebesar 18,67%; 45,24%, dan 15,76%.
Kombinasi ekstrak etanol rosella dan  daun bawang kucai 250:55 mg/KgBB lebih efektif menurunkan  kolesterol  total  dan  trigliserida  darah  hewan  uji  dibanding  dosis  tunggalnya masing-masing maupun kombinasi dosis lainnya.
Kata kunci : daun bawang kucai, kelopak bunga rosella, kolesterol, trigliserida ________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Research  was  conducted  to  determine  the  antihyperlipidemic  activity  of  the combination of Roselle Petal AndGarlic Chives Leaves ethanol extracton hyperlipidemic rats. To determine  the  potential  effects  of  a  combination  of  garlic  chives  leaves  and  rosella,  the  test animals were divided into seven treatment groups consisting of a hyperlipidemic control group, rosella group (500 mg / KgBW), garlic chives leaves group (110 mg / KgBW), the combination of Roselle  Petal  And  Garlic  Chives  Leaves  respectively  125  :  82.5  mg  /  KgBW,  250  :  55  mg  / KgBW, and 375 : 27.5 mg / KgBW.
Total  cholesterol  test  results  obtained  percent  reduction  in  total  cholesterol  rosella group  (500  mg  /  KgBW)  amounted  to  11.49%,  garlic  chives  leaves  group  (110  mg  /  KgBW) amounted  to 13.70%,  the  combination  of  roselle  petal  and  garlic  chives  leaves125  :  82.5 mg  / KgBW, 250 : 55 mg / KgBW, and 375 : 27.5 mg / KgBW, respectively by 40.60%; 46.80% and 32.80%.  The  test  results  obtained  percent  decrease  in  triglyceride  levels  of  triglyceride  levels rosella  group  (500  mg  /  KgBW)  amounted  to  16.40%,  garlic  chives  leaves  group  (110  mg  / KgBW) amounted to 27.68%, combination of roselle petal and garlic chives leaves 125 :82.5 mg / KgBW, 250 : 55 mg / KgBW, and 375 : 27.5 mg / KgBW, respectively by 18.67%; 45.24% and 15.76%.
The  combination  of  roselle  petal  and  garlic  chives  leaves250  :  55  mg  /  KgBW more effective to reduce total cholesterol and triglyceride blood of test animals than others.
Keyword : garlic chives leaves, roselle petal, cholesterol, triglyserides ________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Kelopak bunga rosella dan daun kucai  merupakan  tanaman  obat  yang berkhasiat sebagai antihiperlipidemia.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Verly  (2014)  menyebutkan  bahwa ekstrak  etanol  daun  bawang  kucai 0,022 g/200gBB pada tikus putih jantan galur wistar dapat menurunkan kolesterol  total.  Kandungan  fitokimia dari  ekstrak  etanol  daun  bawang  kucai adalah  sulfur,  saponin,  flavonoid  dan triterpenoid.
Penelitian Pooja (2009)
menyebutkan  bahwa  ekstrak  etanol kelopak  bunga  rosella  500  mg/KgBB tikus  putih  jantan  galur  wistar  dapat menurunkan  kadar  kolesterol  total sebesar 26,33%, menurunkan trigliserid sebesar  74,20%,  menaikkan  kadar kolesterol  HDL  sebesar  36,17%  dan menurunkan  kadar  kolesterol  LDL sebesar  27,35%.  Kandungan  fitokimia ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella adalah antosianin, flavonoid dan polifenol.
Kombinasi  obat,  merupakan salah  satu  cara  untuk  mendapatkan efek  yang  optimal  dalam  pengobatan. Kombinasi  obat  dengan  mekanisme kerja yang berbeda sangat
memungkinkan  untuk  menghasilkan efek  yang  sinergis,  sehingga  dosis masing –  masing  obat  bisa  dikurangi.
Dengan pengurangan dosis diharapkan efek  samping  yang  ditimbulkan  oleh obat  bisa  dikurangi.  Pada  penelitian  ini dilakukan kajian tentang efek antihierlipidemia dari kombinasi kelopak bunga rosella dan bawang kucai.Tujuan dari  penelitian  ini  adalah    memberikan data ilmiah mengenai efek
antihiperlipidemia dari kombinasi rosella  dan  kucai  dan  mencari  dosis kombinasi  efektif,  sehingga  menjadi alternatif untuk
pengobatan hiperlipidemia yang lebih potensial.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Kelopak  bunga  rosella  dan  daun bawang  kucai  yang  diperoleh  dari
Tawangmangu  karanganyar,  alkohol 70%, aquadestilata, CHOD-PAP, reagen kolesterol kit, reagen trigliserida  kit  dari  Diasys  ( D d iagnostic System ),  pakan  tikus  (BR2),  kuning telur  puyuh,  minyak  babi,  serbuk  Mg,
alkohol asam kloria, pelarutamil alkohol,  asam  klorida  2N,  plumpum asetat,  NaOH  40%,  anhidrida  asetat, H 2 SO 4 pekat, FeCl 3 5%, CMC.
Alat
Satu set alat maserasi, , timbangan elektrik, beaker glass , vacum , oven , rotary evaporator , blender  dan  ayakan  no.40, moisture balance , spuit injeksi, jarum suntik oral, easytouch  blood  cholesterol  test  strips , mikrohematokrit, sentrifuge tipe  T121, tabung sentrifuge ,  mikropipet,  dan fotomer stardust.

## Pengambilan bahan
Kelopak bunga rosella dan daun kucai  diperoleh  dari  Tawangmangu Karanganyar.
Identifikasi  kelopak  bunga  rosella dan daun bawang kucai Makroskopis serbuk
Makroskopis kelopak bunga rosella  dan  daun  bawang  kucai  dapat diperoleh dengan melihat serbuk, dilihat warna, bentuk dan ukuran serbuk.

## Pembuatan ekstrak
Serbuk  kelopak  bunga  rosella dan daun bawang kucai masing-masing sebanyak  250  gram,  ditambahkan dengan  pelarut  etanol  70%  masing- masing  sebanyak  1875  ml,  kemudian disimpan  dalam  botol  dan  ditutup, didiamkan  selama  5  hari  maserat disaring dengan kain flannel dan kertas saring.  Maserat  dipindah  dalam  bejana tertutup dipekatkan dalam rotary evaporator dengan  suhu  40 0 C  sampai dihasilkan ekstrak kental. Ekstrak ditimbang sesuai dosis  yang diinginkan kemudian dilarutkan dengan aquadest. Identifikasi kandungan kimia ekstrak Identifikasi Antosianin. Ekstrak etanol kelopak  bunga  rosella  ditambahkan  5 ml air, filtrat kemudian ditambah NaOH, jika terbentuk warna biru/violet menunjukkan adanya antosianin. Identifikasi Flavonoid.
Ekstrak kelopak bunga ditimbang sebanyak 0,5 gram  dicampur  5  ml  air  panas,  lalu ditambahkan 0,1 gram serbuk Mg, 2 ml alkohol  asam  klorida  (1:1)  dan  pelarut amil  alkohol.  Campuran  dikocok  kuat- kuat  kemudian  dibiarkan  memisah reaksi positif ditunjukkan dengan adanya  warna  merah  atau  kuning jingga pada lapisan amil alkohol.
Identifikasi saponin. Ekstrak rosella dan daun bawang kucai masing- masing  0,5  gram  dimasukkan  dalam tabung  reaksi,  kemudian  ditambah  air panas  10  ml,  didinginkan  lalu  dikocok kuat-kuat  selama  10  detik.  Uji  positif bila  terbentuk  buih  yang  mantap setinggi  1-10  cm  pada  penambahan  1 tetes asam klorida 2N buih tidak hilang.
Identifikasi sulfur. Ekstrak bawang  kucaiditambah  dengan  1  ml NaOH 40 %dan 1 ml larutan  plumbum
asetat  lalu  amati  perubahan  warna yang  terjadi.  Adanya  sulfur  ditandai dengan perubahan warna larutan kecoklatan.
Identifikasit  riterpenoid. Ekstrak daun  bawang  kucai  dilarutkan  dalam 100 ml air panas. Filtrat yang diperoleh ditambah  dengan    3  tetes  asam  asetat anhydride  dan  3  tetes  H 2 SO 4 pekat. Timbulnya  warna  merah  jingga  atau ungu  menandakan  uji  positif  terhadap triterpenoid,  sedangkan  warna  biru menunjukan uji positif untuk steroid.
Identifikasi  polifenol. Ekstrak  kelopak bunga  rosella  diambil  1  ml  tambahkan dengan  2  tetes  larutan  FeCl 3 5%. Terbentuknya  warna  hijau  atau  hijau biru  menunjukkan  adanya  senyawa fenol.

## Uji antihiperlipidemia
Hewan  uji  diaklimatisasi  selama 7  hari.  Selama  aklimatisasi  tikus  diberi makan  dan  minum,  hewan  yang  berat badannya  turun  dari  5%  dari  berat badan semula tidak digunakan .
Hewan uji diinduksi hiperlipidemia  dengan  kuning  telur puyuh  dan  lemak  babi  selama  14  hari. Hewan hiperlipidemia diberikan
perlakuan selama 14 hari, dan dilakukan  pengukuran  kadar  kolesterol total dan trigliserida pada hari ke-1, 14, dan 21. Data kadar kolesterol total dan trigliserida  dianalisa  dengan  analisa varian  satu  arah  dilanjutkan post  hoc test .
Pemeriksaan  kadar  Kolesterol  total dan trigliserida
Kadar  kolesterol  dan  trigliserida total hewan uji diukur dengan mengambil  serum  darah  tikus  melalui vena  mata  pada  hari  ke-0  ke-14  dan
hari ke-21.  Penentuan kadar kolesterol total dengan cara menggunakan metode  CHOD-PAP  yaitu  sebagai berikut  :  darah  diambil  melalui  vena mata  menggunakan  microhematocrit sebanyak 1,5 ml kemudian dimasukkan centrifuge dengan kecapatan 3000 rpm selama  15  menit.  Kemudian  serum diambil  sebanyak  10μl  serum  dan ditambah  1000  μl  pereaksi  kolesterol selanjutnya diinkubasi selama 20 menit
pada suhu 20-25 o C. Selanjutnya menggunakan  alat  fotometer  stardust microlab  lalu  absorbansi  yang  terbaca dicatat  dan  diketahui  kadar  kolesterol total (mg/dl).
Penentuan  kadar  trigliserida  Dengan metode  GPO-PAP  yaitu  darah  diambil melalui vena mata sebanyak pengambilan  darah  sebanyak  1,5-2  ml kemudian  darah  tersebut  dimasukkan ke  sentrifuge  dengan  kecepatan  3000 rpm selama 15 menit. Serum diambil 10 µl  ditambah  1000  µl  reagen  trigliserida didiamkan  selama  30  menit  pada  suhu kamar.  Dengan  alat  fotometer stardus pada  λ  500  nm  kemudian  baca  dan catat kadar trigliserida.
HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil pembuatan serbuk . Hasil pembuatan  serbuk  daun  bawang  kucai didapatkan  rendemen  sebesar  3.31% dan rosella sebesar 6.67% (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil pembuatan serbuk Simplisia Bobot basah (g) Bobot serbuk (g) Rendemen (%) Daun kucai 4000 250.0 3.13 Rosella 5000 333.3 6.67

## Hasil ekstraksi
Hasil  ekstraksi  serbuk  daun bawang  kucai  250  g  didapatkan  ektrak kental  sebanyak  59  g  dan  rendemen sebesar 23,6 %. Hasil ekstraksi serbuk kelopak bunga rosella 250 g didapatkan ekstrak  kental  sebanyak  110  g  dan rendemen sebesar 44 % (Tabel 2).
Tabel 2. Rendemen ekstrak
Simplisia Berat serbuk (gram) Berat ekstrak (gram) Rendem en (%) Bawang kucai 250 59 23,6 Rosella 250 110 44 Identifikasi kandungan kimia Identifikasi ekstrak daun bawang kucai meliputi identifikasi saponin,  flavonoid,  triterpenpoid  dan sulfur.  Hasil  identifikasi  kandungan kimia  ekstrak  dari  daun  bawang  kucai menunjukkan
adanya saponin,
flavonoid, triterpenoid dan sulfur (Tabel 3 dan 4). Ekstrak  kelopak  bunga  rosella menunjukkan
adanya flavonoid, antosianin dan polifenol (Tabel 4).

## Hasil uji kadar kolesterol total
Pemeriksaan  kadar  kolesterol total  dilakukan  sebanyak  3  kali,  pada hari ke-0, hari ke-14, dan hari ke-21.
Hari  ke-0  adalah  profil  kadar kolesterol saat hewan belum mengalami  perlakuan  apapun.  Hari  ke- 14  hewan  uji  telah  diberikan  diet  tinggi lemak  berupa  minyak  babi  dan  kuning telur  puyuh,  sehingga  kadar  kolesterol total  serum  darah  meningkat  signifikan (f<0.05),  dan  pada  hari  ke-21  setelah pemberian perlakuan terlihat penurunan kadar kolesterol yang signifikan (f<0.05) (Tabel 5).
Tabel 3. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak dari daun bawang kucai Kandungan kimia  Hasil pengamatan Keterangan Pustaka Saponin Buih stabil + Buih setinggi 1-10 cm stabil Flavonoid Jingga pada lapisan amil alkohol + Merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol Sulfur Larutan berwarna kecoklat + Larutan berwarna kecoklatan Triterpenoid Hijau + Hijau biru
Tabel 4. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak kelopak bunga rosella
Kandungan kimia  Hasil pengamatan  Keterangan  Pustaka Flavonoid Jingga pada lapisan amil alkohol + Merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol Antosianin Biru + Larutan berwarna hijau biru Polifenol Larutan berwarna hitam + Larutan berwarna hijau, biru, merah ungu, hitam yang kuat
Keterangan : (positif): mengandungan senyawa kimia
Gambar 1. Histogram rata-rata kadar kolesterol total semua perlakuan
To : Kadar kolesterol awal T1 : Kadar kolesterol setelah induksi hiperlipidemia T2 : Kadar kolesterol setelah 7 hari perlakuan
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Klp 1 Klp 2 Klp 3 Klp 4 Klp 5 Klp 6
Klp 7
kad ar k o le st er o l ( m g/dl ) Kelompok perlakuan T0 T14
T21
Tabel 5. Rata-rata kadar kolesterol total serum darah tikus jantan galur wistar Kelompok Rata-rata kadar kolesterol total  (mg/dL) Kenaikan (mg/dL) ∆T 1 (T14-T0) Penurunan (mg/dL) ∆T 2 (T14-T21) % penurunan kadar kolesterol T0 T14 T21 Kelompok 1 93,2 94,2 93,6 - - - Kelompok 2 128 177,8 178,8 49,8 -1,0 - Kelompok 3 94,4 141,0 124,8 46,6* 16,2* 11.49 Kelompok 4 93,6 156,2 134,8 62,6* 21,4* 13.70 Kelompok 5 96,8 142,6 95,8 45,8* 46,8* 32.82 Kelompok 6 84,6 147,8 106,6 63,2* 41,2* 27.88 Kelompok 7 96,8 147,2 104,6 50,4* 32,8* 28.94 Keterangan   :  *) berbeda signifikan terhadap kontrol hyperlipidemia Kelompok 1   : Kontrol normal
Kelompok 2   : Kontrol hiperlipidemia Kelompok 3   : Kkstrak etanol kelopak bunga rosella 100% (500 mg/KgBB) Kelompok 4 : Ekstrak etanol daun bawang kucai 100% (110 mg/KgBB) Kelompok 5   :  Ekstrak  etanol  kelopak  rosella  dan  daun  bawang  kucai  250:55
mg/KgBB Kelompok 6 :  Ekstrak  etanol  kelopak  rosella  dan  daun  bawang  kucai  375:27,5 mg/KgBB
Kelompok 7 :  Ekstrak  etanol  kelopak  rosella  dan  daun  bawang  kucai  125:82,5 mg/KgBB
Tabel 6. Hasil rata rata kadar trigliserida pada tikus jantan galur wistar
Kelompok Rata-rata kadar trigliserida Kenaikan   Penurunan   %Penurunan kadar trigliserida (mg/dL) (mg/dl) (mg/dl) T0 T14 T21 ∆ T 14-T0 ∆ T 14-T21 1 68,4 70,2 72,2 - - - 2 79,4 148,2 a) 149,4 68,8 -1,2 - 3 94,8 164,6 a) 137,6 b) 69,8 27 b) 16,40% 4 91 167,6 a) 121,2 b)c) 76,6 46,4 b) c) 27,68% 5 84,4 157,4 a) 86,2 b) 73 71,2 b) 45,24% 6 84 158,6 a) 133,6 b)c) 74,6 25 b) c) 18,67% 7 88 161,8 a) 131,6 b)c) 73,6 30 b) c) 15,76%
Keterangan :
a) berbeda signifikan terhadap kontrol normal
b) berbeda signifikan terhadap kontrol hipertrigliserida
c) berbeda  signifikan  terhadap  kelompok  ekstrak  etanol  kelopak  rosella  dan  daun bawang kucai (250 : 55 mg/KgBB)
Berikut dapat digambarkan profil histogram kadar trigliserida hewan uji selama perlakuan.
Gambar 2. Histogram rata-rata kadar trigliserida semua perlakuan
Baik  dari  histogram    kadar kolesterol total (gambar 1) dan trigliserida  (gambar  2)  menunjukkan bahwa penurunan kadar kolesterol total dan  trigliserida  lebih  tinggi  pada kelompok kombinasi di banding kelompok tunggal. Kelompok 5
(ekstrak etanol  kelopak  bunga rosella dan  daun  bawang  kucai  250:55  mg/Kg BB mempunyai efek menurunkan kadar kolesterol  dan  trigliserida  paling  tinggi dibandingkan  dengan  kelompok  hewan uji yang lain, dengan persen penurunan kadar  kolesterol  total  sebesar  32.82%
dan penurunan kadar trigliserida 45,24%. Aktivitas penurunan kadar
kolesterol  total  pada  ekstrak  etanol daun  bawang    kucai  diduga  karena adanya  flavonoid,  saponin,  triterpenoid dan  sulfur.  Senyawa  sulfur  tersebut dimungkinkan akan menginhibisi
hidroksi-metilglutaril-KoA (HMG-KoA)
yang  terdapat  pada  sintesis  kolesterol (Choudhary  dan  Raghuveer  2008). Sedangkan pada ekstrak etanol kelopak  bunga  rosella  mempunyai aktivitas  menurunkan  kadar  kolesterol total  diduga  karena  adanya  flavonoid, polifenol  dan  antosianin.  Kandungan
flavonoid,  polifenol  dan  antosianin dimungkinkan sebagai penangkap radikal  bebas.  Antosianin    menurut Pooja  dan  D’meloo  (2009)    memiliki aktivitas antioksidan dengan mengurangi kelebihan oksidatif. Kelebihan oksidatif dapat mengakibatkan  aktivitas  radikal  bebas didalam  tubuh  menjadi  lebih  besar. Adanya kelebihan radikal bebas merupakan salah satu penyebab penyakit kardiovaskuler seperti hiperlipidemia (Webb 2006). Kandungan  saponin  dalam  ekstrak dapat berikatan dengan kolesterol pada lumen intestinal sehingga dapat mencegah reabsorpsi kolesterol (Berawi  dan  Andhini  2013).  Aktifitas saponin  juga  dapat  berikatan  dengan asam empedu, sehingga dapat menurunkan sirkulasi enterohepatik asam empedu dan meningkatkan ekskresi kolesterol (Akanji et al. 2009).

## KESIMPULAN
Kombinasi  ekstrak  etanol  rosella dan    daun  bawang  kucai  250:55 mg/KgBB  lebih  efektif  menurunkan kolesterol  total  dan  trigliserida  darah
0 50 100 150 200 Klp 1 Klp 2 Klp 3 Klp 4 Klp 5 Klp 6 Klp 7 Kad ar Trig lis erid a (m g/d l) Kelompok perlakuan T0 T14 T21
hewan  uji  dibanding  dosis  tunggalnya masing-masing maupun kombinasi dosis lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Bimakr  M.  ,  2010,    Comparison  of Different  Extraction  Methods  for The Extraction of Major Bioactive Flavonoid Compounds from Spearmint ( Mentha Spicata L.) Leaves. Food Bioprod Process ,  hlm: 1-9. Choudhary, Raghuveer. 2008. Beneficial Effect of Allium Sativum  and  Allium  Tuberosum on  Experimental  Hyperlipidemia and  Atherosclerosis.  Pak  J
Physiol. Volume 4. Nomor 2 : 7- 8.
Hirunpanich  V,  Upaiat  A,  Morales  N.P,
Bunyapraphatsara  N,  Sato  H, Herunsale  A,  Suthisiang  C.
2005.  Hypocholesterolemic  and antioxidant  effects  of  aqueous extract  from  the  dried  calyx  of Hibiscus sabdariffa in hypercholesterolemic rats. J Ethnopharmacol.  Bangkok.  Hlm 103, 252-60.
Krumel  DA.  Medical  Nutrition  Therapy for  Cardiovascular  Disease.  In  :
L. Kathleen Mahan, Sylvia Escott- Stump,  editors.  Krause’s Food  and  Nutrition  Therapy. 12th  edition.  Philadelphia,  USA – Saunders Elsevier; 2008.p.833;61 Pooja  OC,  D’mello  P.  2009.  Atioxidant
and  Antihyperlipidemic  Activity of Hibiscus  sabdariffa Linn
Leaves  and  Calyces  extract  in
rats. Indian Journal of Experimental Biology. Vol. 47.pp 276-282
Rahayuningsih,  S.E.,  2011,  Prevention of  atherosclerosis  should  start since  childhood  (genetic  risk), Dipresentasikan Pada 15 th Indonesia Congress Of Pediatrics KONIKA 15, MENDAO. Silitonga  RS.  2008.  Daya  Inhibisi Ekstrak  Daun  Jati  Belanda  dan Bangle Terhadap Aktifitas Lipase Pankreas Sebagai Antiobesitas.  [skripsi].  Bogor: Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam. IPB [WHO] World  Health  Organization . 2011. WHO maps noncomunicable  disease  trends in all coutries. [terhubung berkala] http://www.who.int/entity
/mediacentre/new/releases/2011 [24 Maret 2013]