## Potensi toksisitas tumbuhan mangrove
Rhizopora mucronata terhadap larva nyamuk Aedes aegypti
The toxicity potency of mangrove plant of Rhizopora mucronata on the Aedes aegypti larvae

## Usman
Program Magister Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia sainusman@ymail.com

## Abstrak
Mangrove  jenis Rhizopora  mucronata merupakan  sumber  daya  hayati  yang  banyak  ditemukan  di daerah pesisir pantai Indonesia, diantaranya pesisir pantai Kalimantan Timur. R. mucronata digunakan oleh  masyarakat  sebagai  obat  tradisional  karena  mengandung  senyawa  kimia  aktif.  Penelitian  ini dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder,  dan  toksisitas  terhadap  larva Aedesa egypti dari ekstrak etanol batang, akar dan daun mangrove R. mucronata . Hasil uji fitokimia, diketahui  ekstrak  etanol  jaringan  akar  mangrove R.  mucronata mengandung  senyawa  golongan; flavonoid,  senyawa  fenolik,  triterpenoid,  dan  saponin.  Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dari ekstrak batang yaitu flavonoid, senyawa fenolik, steroid, tanin, dan saponin. Sedangkan ekstrak daun mengandung senyawa metabolit sekunder golongan; senyawa fenolik, triterpenoid, tanin dan saponin. Ekstrak  etanol  ketiga  bagian  jaringan  mangrove R.  mucronata bersifat  tidak  toksik  terhadap  larva Aedes  aegypti dengan  nilai  LC 50 >  1000  ppm.  Berdasarkan  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada  ketiga  bagian  jaringan  mangrove R.  mucronata dapat  dieksplor  lebih  lanjut  bioaktivitasnya sehingga tumbuhan ini dapat bermanfaat bagi manusia.
Kata kunci: Aedes aegypti ; metabolit sekunder; Rhizopora mucronata ; toksisitas

## Abstract
Rhizopora  mucronata ,  a  type  of  mangrove,  is  a  biological  resource  that  often  found  in  Indonesia’s coastal  areas,  including  the  coast  of  East  Kalimantan. R.  mucronata is  used  by  the  community  as  a traditional medicine because it contains active chemical compounds. This research was conducted to determine the content of secondary metabolite compounds and toxicity to Aedes egypti larvae from the ethanol  extract  of  the  stems,  roots  and  leaves  of  the R.  mucronata .  From  the  results  of  the phytochemical  test,  it  is  known  that  the  ethanol  extract  of R.  mucronata root  tissue  contains flavonoids, phenolics, triterpenoids, and saponins. The secondary metabolite compounds contained in the stem extract are flavonoids, phenolics, steroids, tannins and saponins. Meanwhile, the leaf extract contains  secondary  metabolite  compounds  of  phenolics,  triterpenoids,  tannins  and  saponins.  The ethanol extract of the three parts of R. mucronata tissue is non-toxic to Aedes aegypti larvae with LC 50 values > 1000 ppm. Based on the content of secondary metabolite compounds in the three parts of the R. mucronata tissue, its bioactivity can be further explored so that this plant can be useful for humans.
Keyword: Aedes aegypti ; Rhizopora mucronata ; secondary metabolites, toxicity
Diajukan: 1 Agustus 2021 Direvisi: 30 Oktober 2021 Diterima: 16 November 2021

## Pendahuluan
Indonesia  memiliki  hutan  mangrove  tertinggi  di dunia  baik  dari  segi  luas  area  maupun  jumlah  spesies yang  tersebar  di  pulau-pulau  besar  seperti  Sumatera, Jawa,  Kalimantan,  Sulawesi  dan  Papua  (FAO,  2007; Spalding,  dkk.,  2010).  Provinsi  Kalimantan  Timur
memiliki hutan mangrove kurang lebih 950.000 ha, atau sekitar  21,9%  dari  luas  hutang  mangrove  Indonesia. Wilayah  di  Kalimantan  Timur  yang  banyak  ditumbuhi tanaman  mangrove  yaitu  Delta  Mahakam,  Bontang, Kabupaten Kutai Kartanegara (Muara Badak, Marangkayu,  dan  Sanga-Sanga),  Penajam  Paser  Utara, Kabupaten  Paser,  dan  daerah  Tanjung  di  Kabupaten
Berau.  Jenis  tanaman  mangrove  yang  tumbuh  subur  di wilayah  tersebut  didominasi  oleh  jenis Rhizophora  Sp , Avicenna  Sp , Sonneratia  Sp , Bruguiera  cylindrica , Ceriops  tagal ,  dan Nypa  fruticans (Imanuddin  & Simorangkir, 2012).
Mangrove  jenis R.  mucronata memiliki  banyak manfaat yang bersinggungan langsung dengan kehidupan  manusia  seperti  manfaat  ekologi,  sebagai sumber  pangan,  papan,  dan  obat.  Ekstrak  dan  bahan mentah  dari  tumbuhan  mangrove  telah  digunakan  oleh masyarakat pesisir untuk keperluan pengobatan tradisional,  untuk  mengobati  penyakit;  diare,  malaria, cacar, asma, diabetes, demam, pembengkakan, rematik, penyakit  kulit,  hepatitis,  diuretik,  kusta,  antitumor, leukemia, antikanker, antivirus, gondok, obat pelangsing, antimuntah, dan penyakit beriberi (Purnobasuki,  2014;  Yovo,  dkk.,  2017;  Abidin  dkk., 2013). Penelitian sebelumnya telah melaporkan mengenai  khasiat  dari  tumbuhan  mangrove  yang meliputi;  insektisida,  racun  ikan,  pengusir  nyamuk, antivirus,  serta  aktivitas  antimikroba  (Tariwari  dkk., 2014).  Daun R.  mucronata digunakan  untuk  mengobati diare  atau  gangguan  motilitas  lambung,  kulit  kayu R. mucronat a  juga  memiliki  sifat  anti  diare  (Yunita. Puspitasar dkk., 2017).
Masyarakat  memanfaatkan  tumbuhan  mangrove sebagai  obat  tradisional  karena  memiliki  kandungan senyawa kimia aktif yang sangat bermanfaat. Kandungan  kimia  aktif  tanaman  mangrove  adalah senyawa  golongan  alkaloid,  steroid,  triterpen,  senyawa fenolik,  flavonoid,  stilben,  carotenoid,  triterpen, antosianin, antosianidin, inositol, saponin, alkohol rantai panjang,  tannin,  asam  amino,  benzoquinon,  kumarin, quinin,  chalcon,  senyawa  lipid,  forbol  ester,  rotenone, polifenol,  benzofuran,  limonoid,  sulfur  alkaloid, prosianidin,  gibberellin,  dan  xiloccensins  Senyawa- senyawa  tersebut  berperan  sebagai  bioaktif  yang digunakan  dalam  dunia  pengobatan  (Harborne,  1987). Bagian  dari  jaringan  tumbuhan  mangrove  yang digunakan  sebagai  bahan  obat  adalah  bagian  dari jaringan  akar,  kayu  batang,  kulit  kayu,  daun,  ranting, bunga,  dan  buah  (Arora,  K.  dkk.,  2014;  Revathi,  dkk., 2014).

## Metode Penelitian

## Persiapan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah bagian jaringan akar, batang dan daun mangrove R.  mucronata yang  dikumpulkan  dari  kawasan  pantai Sambera,  Muara  Badak,  Kalimantan  Timur.  Sampel bagian  jaringan  akar,  batang  dan  daun  mangrove R. mucronata dicuci dan dikeringkan tanpa terkena sinar matahari  langsung.  Tahap  berikutnya  ketiga  sampel tersebut  dihaluskan,  kemudian  diekstraksi  dengan menggunakan  pelarut  metanol  70%  dengan  cara maserasi selama 3 × 24 jam sehingga diperoleh  ekstrak metanol  dari  ketiga  sampel.  Hasil  ekstraksi  dipisahkan
dari  pelarutnya  menggunakan  rotary  evaporator  pada suhu 40°C sampai diperoleh ekstrak kental metanol dari ketiga  sampel.  Ketiga  ekstrak  yang  diperoleh  disimpan dalam  desikator  untuk  persipan  uji  fitokimia  dan  uji toksisitas terhadap larva nyamuk.

## Uji fitokimia
Uji  fitokimia  ekstrak  metanol  bagian  jaringan akar,  batang  dan  daun  mangrove R.  mucronata dilakukan  secara  kualitatif  berdasarkan  perubahan warna  dari  setiap  pereaksi.  Senyawa  fitokimia  yang diuji  meliputi:  Uji  alkaloid  (dengan  tiga  jenis  reagen: Meyer,  Wagner,  dan  Dragendorff),  flavonoid,  senyawa fenolik,  steroid,  triterpenoid,  tanin,  dan  saponin (Usman, dkk., 2019; Kachkoul, dkk., 2018).

## Uji toksisitas
Uji  tosisitas  terhadap  larva  nyamuk A.  aegypti dilakukan di Laboratorium Entamologi Jurusan Kesehatan  Lingkungan  Politeknik  Kesehatan  Surabaya. Larva  nyamuk A.  aegypti diperoleh  dari  Laboratorium Entomologi  Jurusan  Kesehatan  Lingkungan  Politeknik Kesehatan  Surabaya.  Larva  nyamuk A.  aegypti yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  larva  instar  III, larva  ini  memiliki  ciri-ciri  fisik  yaitu  duri-duri  dada (spinae)  jelas  terlihat,  corong  pernafasan  (siphon)  yang agak  gemuk  dan  berukuran  panjang  sekitar  4-7  mm (Usman,  dkk.,  2020).  Uji  toksisitas  ekstrak  metanol jaringan akar, batang dan daun mangrove R. mucronata terhadap larva nyamuk A. aegypti menggunakan metode BSLT.  Variasi  konsentrasi  ekstrak  metanol  dari  ketiga sampel  yang  digunakan  yaitu  :  1000  ppm,  2500  ppm, 5000  ppm,  7500  ppm  dan  10000  ppm.  Kemudian masing-masing  ekstrak  disaring  dengan  menggunakan kertas saring Whatman untuk mendapatkan ekstrak yang bersih.  Sebagai  kontrol  digunakan  akuades  tanpa ditambahkan  ekstrak.  Jumlah  larva  yang  digunakan untuk  masing-masing  perlakuan  dan  kontrol  adalah  25 larva,  selanjutnya  larva  dimasukkan  ke  dalam  100  ml larutan  dari  masing-masing  ekstrak  sampel  dengan variasi  konsentrasi  yang  telah  ditentukan  sebelumnya, dan  pengujian  ini  dilakukan  pada  suhu  kamar,  serta pengamatan  dilakukan  setelah  24  jam  kemudian dihitung  larva  nyamuk  yang  mati,  sehingga  nilai  LC 50 melalui  persamaan  regresi  yang  diperoleh  dari  grafik antara nilai probit terhadap log konstrasi.

## Hasil dan Pembahasan
Kandungan senyawa metabolit sekunder R. mucronata
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  berhasil diidentifikasi dari ekstrak metanol bagian jaringan akar, batang, dan daun mangrove R. mucronata selengkapnya disajikan  pada  Tabel  1.  Senyawa  metabolit  sekunder yang  terkandung  pada  ekstrak  metanol  bagian  jaringan akar  mangrove R.  mucronata adalah  flavonoid, Senyawa  fenolik,  triterpenoid,  dan  saponin.  Kemudian ekstrak metanol bagian jaringan  batang  mengandung
Tabel 1
Hasil uji fitokimia ekstrak metanol bagian jaringan; akar, batang, dan daun tumbuhan mangrove R. mucronata Uji Fitokimia dan Pereaksi Ekstrak Metanol dan Hasil Pengamatan Akar Batang Daun Alkaloid Dragendorff Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Posotif (+) larutan berwarna jingga positif (+) larutan berwarna jingga Mayer Negatif (-) tidak terbentuk endapan Posotif (+) terbentuk endapan putih Posotif (+) terbentuk endapan putih Flavanoid Mg + Amil Alkohol (HCl 37% & etanol 95% Positif (+) larutan berwarna merah muda Positif (+) larutan berwarna merah muda Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Senyawa fenolik  FeCl 3 5 % Positif (+) larutan berwarna biru– kehitaman Positif (+) larutan berwarna biru– kehitaman Positif (+) larutan berwarna biru– kehitaman Steroid Anhidrida acetat + asam sulfat pekat Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Positive (+) larutan berwarna hijau Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Triterpenoid Anhidrida acetat + asam sulfat pekat Positive (+) larutan berwarna merah Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Positive (+) larutan berwarna merah Tannin FeCl 3 1 % Negatif (-) tidak terjadi perubahan warna Positif (+) larutan berwarna biru/hitam Positif (+) larutan berwarna biru/hitam Saponin HCl 2 N Positif (+) Terbentuk busa stabil Positif (+) Terbentuk busa stabil Positif (+) Terbentuk busa stabil
Keterangan:  (-) = tidak terdeteksi;  (+) = terdeteksi
Tabel 2
Hasil uji toksisitas ekstrak metanol ketiga bagian jaringan mangrove R. mucronata terhadap larva nyamuk
A. aegypti Ekstrak Metanol Konsentrasi (ppm) Total Populasi Jumlah Kematian % Mortalitas Log C Probit Lc 50 (ppm) Akar 1.000 25 0 0 3,00 0,00 14.421 2.500 25 0 0 3,39 0,00 5.000 25 2 8 3,69 3,59 7.500 25 3 12 3,87 3,82 10.000 25 4 16 4,00 4,01 Daun 1.000 25 0 0 3,00 0,00 12.589 2.500 25 1 4 3,39 3,25 5.000 25 3 12 3,69 3,82 7.500 25 3 12 3,87 3,82 10.000 25 5 20 4,00 4,17 Batang 1.000 25 0 60 3,00 0,00 14.859 2.500 25 0 68 3,39 0,00 5.000 25 1 80 3,69 3,25 7.500 25 1 88 3,87 3,25 10.000 25 8 96 4,00 4,53
senyawa  golongan;  alkaloid,  flavonoid,  senyawa fenonolik,  steroid,  tanin,  dan  saponin.  Sedangkan ekstrak metanol dari bagian jaringan batang menggandung  senyawa  golongan  alkaloid,  fenolik, triterpenoid,  tanin,  dan  saponin.  Hasil  penelitian sebelumnya  dilaporkan  bahwa  kandungan  senyawa fitokimia  mangrove R. mucronata adalah tanin, steroid, triterpene, dan senyawa fenolik (Sachithanandam, dkk., 2019).  Ekstrak  metanol  daun  mangrove R.  mucronata mengandung  senyawa  bioaktif  seperti  senyawa  fenolik, saponin,  terpenoid,  dan  flavonoid  (Gurudeeban,  2016). Hasil  uji  fitokimia  yang  dilakukan  oleh  Kumari,  dkk., (2015) menyatakan bahwa kandungan senyawa bioaktif ekstrak  daun  mangrove R.  mucronata yaitu  saponin, flavonoid,  antrasen,  dan  tannin.  Menurut  Ravikumar dan  Gnanadesigan  (2012),  ekstrak  akar  mangrove R. mucronata mengandung golongan alkaloid, flavonoid, kumarin, dan polifenol. Senyawa sesquiterpen  (3-hidroksi-3,7,11-trimetil-9-  oksododeka- 1,10-diena)  atau  mucronaton  dan  dua  senyawa  ester triterpenoid pentasiklik baru (3-beta-E-caffeoyltaraxerol dan 3-beta-Z-caffeoyltaraxerol), masing-masing diisolasi dari ekstrak buah R. mucronata (Laphookhieo, dkk., 2004).

## Toksisitas mangrove R. mucronata
Uji  toksisitas  ekstrak  metanol  bagian  jarinagn akar,  daun,  dan  batang R.  mucronata terhadap  larva nyamuk A.  aegypti instar  III  dengan  menggunakan metode  BSLT.  Variasi  konsentrasi  ekstrak  metanol ketiga  bagian  jaringan  tumbuhan  mangrove  yaitu  0 (Kontrol),  1.000, 2.500,  5.000,  7.500, dan  10.000  ppm. Hasil  uji  toksisitas  ekstrak  metanol  ketiga  bagian jaringan R. mucronata disajikan pada Tabel 2.
Sifat toksisitas suatu ekstrak dapat diketahui dari hasil  perhitungan  nilai Lethal  Concentration 50% (LC 50 ).  Semakin  kecil  nilai  LC 50 suatu  sampel  atau ekstrak maka semakin kuat sifat toksisitasnya demikian pula  sebaliknya  semakin  besar  nilai  LC 50 berarti semakin lemah sifat toksisitasnya (tidak bersifat toksik). Menurut  Meyer,  dkk.,  (1982), menyatakan  bahwa tingkat  toksisitas  suatu  ekstrak  dikategorikan  sebagai berikut:
LC 50 < 30 ppm = sangat toksik 30 ppm ≤ LC 50 < 100 ppm = Toksik
100 ppm ≤ LC 50 ≤ 1000 ppm = Toksik Sedang LC 50 > 1.000 ppm = Tidak toksik
Berdasarkan  hasil  perhitungan  nilai  LC 50 sebagaimana  yang  disajikan  pada  Tabel  3,  ekstrak metanol  bagian  jaringan  akar,  daun,  dan  batang tumbuhan  mangrove R.  mucronata memiliki  nilai LC 50 >  10.000  ppm,  sehingga  ekstrak  metanol  ketiga bagian jaringan tumbuhan mangrove R. mucronata tidak bersifat  toksik  terhadap  larva  nyamuk A. aegypti .
Namun  ekstrak  metanol  jaringan  daun  mangove  lebih bersifat toksik terhadap A. aegypti dibandingkan ekstrak lainnya  dengan  nilai  LC 50 12.589  ppm.  Semakin  kecil nilai  LC 50 dari  suatu  sampel  maka  semakin  bersifat toksit (Yamin,  dkk., 2020).
Sifat  toksik  dari  suatu  sampel  tanaman  mungkin disebabkan  oleh  senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung  pada  setiap  ekstrak  tanaman,  misalnya senyawa golongan flavonoid, fenolik, triterpenoid, tanin yang  merupakan  penyebab  kematian  larva  nyamuk A.  aegypti .  Senyawa-senyawa  tersebut  dapat  bertindak sebagai  racun  yang  akan  mengganggu  alat  pencernaan larva  apabila  senyawa  ini  masuk  ke  dalam  tubuh  larva (Lenny,  2006;  Roni  &  Hanny,  2016).  Utami  (2010) melaporkan bahwa senyawa metabolit sekunder seperti; flavonoid,  steroid,  saponin,  dan  tanin,  memiliki  efek beracun terhadap serangga. Senyawa golongan flavonoid  menunjukkan  efek  toksik,  antifeedant,  dan antimikroba  atau  sebagai  pelindung  tanaman  dari mikroorganisme  yang  bersifat  pathogen.  Steroid mempunyai  efek  menghambat  perkembangan  larva. Saponin  merupakan  senyawa  yang  bersifat  aktif  dalam menurunkan  produktivitas  kerja  enzim  pencernaan  dan penyerapan  makanan,  sedangkan  senyawa  tannin menurunkan  kemampuan  makan  (Rohimatun,  dkk., 2011).

## Simpulan
Ekstrak  metanol  bagian  jaringan  akar R. mucronata mengandung  senyawa  golongan;  flavonoid, senyawa  fenolik,  triterpenoid,  dan  saponin.  Ekstrak batang  mengandung  senyawa  golongan;  alkaloid, flavonoid, senyawa  fenolik,  steroid, tanin, dan  saponin. Sedangkan ekstrak daun mengandung senyawa golongan; alkaloid, senyawa fenolik, triterpenoid, tanin, dan  saponin.  Ekstrak  metanol  ketiga  bagian  jaringan mangrove R.  mucronata tidak  bersifat  toksik  terhadap larva  nyamuk A.  aegypti ,  masing-masing  dengan  nilai LC 50 > 10.000 ppm

## Daftar Pustaka
FAO. 2007. The  World’s Mangroves 1980-2005. Forest Resources  Assessment  Working  Paper  No.  153. Food  and  Agriculture  Organization  of  The  United Nations. Rome : FAO.
Spalding  M,  Kainuma  M,  Collins  L.  2010.  World  atlas of mangroves. Earthscan. London.
Imanuddin  dan  Simorangkir.  (2012).  Analisis  Vegetasi Kawasan  Hutan  Mangrove  di  Teluk  Pangempang Kecematan Muara Badak Kabupaten Kutai Kartanegara.  Jurnal  Kehutanan  Tropika  Humida. April  2012. 5 (1): 15-24.
Purnobasuki,  H.  (2014).  Potensi  Mangrove  Sebagai Tanaman  Obat  (Prospect  Of  Mangrove  As  Herbal Medicine), Biota, 9(2): 1– 6.
Yovo  HO-D,  Vodouhe  FG,  and  Sinsin  B.  2017. Ethnobotanical  Survey  of  Mangrove  Plant  Spesies Used  as  Medicine  from  Ouidah  to  Grand-Popo Districts,  Southern  Benin.  American  Journal  of Ethnomedicine. 4 (18), p. 1-6. DOI: 10.21767/2348- 9502.100008.
Abidin,  N.  A.  Z.  Halim  N.  A.  H.  and  Ropisah,  2013, Basic  Study  of  Chemical  Constituents  in  R. apiculata Species, The Open Conference Proceedings Journal, 4(Suppl-2, M7) 27-28. Faculty of  Applied  Science,  Universiti  Teknologi  MARA Negeri Sembilan, Ka. Malaysia
Tariwari  C.  N.  Angaye,  Ohimain  E.I.,  Siasia  E.P., Asaigbe  P.I.,  and  Finomo  O.A.  2014.  Larvicidal activities  of  the  leaves  of  Niger  Delta  mangrove plants  against  Anopheles  gambiae.  Sky  Journal  of Microbiology Research. 2(7), p. 045 – 050.
Yunita  E.  Puspitasar,  Aniek  M.  Hartiati,  Eddy Suprayitno.  2012.  The  Potency  of Rhizophora mucronata Leaf  Extract  as  Antidiarrhea.  Journal  of Applied Sciences Research, 8(2): 1180-1185.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern  Menganalisis  Tumbuhan.  Terjemahan  K. Padmawinata  dan  I.  Soediro.  Institut  Teknologi Bandung, Bandung
Arora  K,  Nagpal  M,  Jain  U,  Jat  RC,  and  Jain  S.  2014. Mangroves: A Novel Gregarious Phyto Medicine for Diabetes. International  Journal  of  Research  and Development  in  Pharmacy  and  Life  Sciences .  3(6),
p. 1244 1257. https://www.ijrdpl.com/index.php/ijrdpl/issue/view/ 42 Revathi P, Senthinath T.J,
Thirumalaikolundusubramanian  P,  and  Prabhu  N. 2014.  An  Overview  of  Antidiabetic  Profile  of Mangrove  Plants. Int  J  Pharm  Pharm  Sci .  6  (3),  p. 1-5.
https://innovareacademics.in/journal/ijpps/Vol6Issue 3/8756.pdf
Usman, Amir M.M, Erika F, Nurdin M, and Kuncoro H. 2019. Antidiabetic activity of leaf extract from three types of mangrove originating from sambera coastal region Indonesia. Res. J. Pharm. Technol . 12 (4), p. 1707–1712. DOI: 10.5958/0974-360X.2019.00284.1
Kachkoul,  R.,  Houssaini,  T.S.,  El  Habbani,  R.,  Miyah, Y.,  Mohim,  M.,  Lahrichi,  A.  2018.  Phytochemical Screening  and  Inhibitory  Activity  of  Oxalocalcic Crystallization  of  Arbutus  unedo  L.  Leaves. Heliyon. 4(12)e01011. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2018. e01011.
Usman,  Megawati,  Malik  M.,  Ekwanda  R.R.M.,
Hariyanti  T.  2020.  Toksisitas  Ekstrak  Etanol Mangrove Sonneratia alba Terhadap  Larva Nyamuk Aedes  aegypti .  Jurnal  Sains  dan  Kesehatan.  2,  3,  p. 222-227.
Sari N. 2017. Uji Aktivitas Larvasida Ekstrak n-Heksan,
Etil  Asetat  dan  Etanol  96%  Akar  Napas  Tumbuhan Bakau  Minyak  (Rhizophora  apiculata  Blume.) Terhadap  Larva  Nyamuk  Aedes  aegypti  L.  Skripsi. Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar.
Sachithanandam V., Lalitha P., Parthiban A., Mageswaran  T.,  Manmadhan  K.,  and  Sridhar  R. 2019.  Hindawi,  Evidence-Based  Complementary and Alternative Medicine. 21 pages. https://doi.org/10.1155/2019/4305148 Gurudebaan, S., Kaliamurthi,
S., and Thirugnanasambandam, R. 2016. Positve Regulation of Rhizophora muco Poir Extracts on Blood Glucose and Lipid Profil in Diabetic Rats. iMedPub Journals. May 2016. 2 (2): 1-8.
Kumari, C.S., Yasmin, N., Hussain, M.R., Babuselvam, M. 2015. Invitro Anti-inflammatory and Antiartheritic  Property  of Rhizopora  mucronata Leaves.  International  Journal  of  Pharma  Sciences and Research. 6 (3): 482–485.
Ravikumar S, Gnanadesigan M, 2012. Hepatoprotective and  Antioxidant  Properties  of R.  mucronata Mangrove Plant in CCl4 Intoxicated Rats. Journal of Experimental dan Clinical Medicine 4(1):66-72.
Laphookhieo,  S,  Karalai,  C,  Ponglimanont  C.  2004.
New  sesquiterpenoid  and  triterpenoids  from  the fruits of R. mucronata . Chemical and Pharmaceutical. 52, p. 883–885.
Meyer,  B.N.,  Ferrigni,  N.R.,  Putnam,  J.E.,  Jacobsen, L.B., Nichols, D. E., Mc. Laughlin, J.L. 1982. Brine Shrimp:  A  Convenient  General  Bioassay  for  Active Plant  Constituents.  Journal  of  Medicinal  Plant Research,  Plant  Medica.  45(5),  p. 31-34.  DOI: 10.1055/s-2007-971236
Yamin, Y., Kasmawati, H., Allo, L.T.L. 2020. Skrining Fitokimia  dan  Uji  Toksisitas  Ekstrak  dan  Fraksi Kulit  Batang  Kumbou  (Artocarpus  elastica  Reinw. ex  Bl)  dengan  Metode  Brine  Shrimp  Lethaly  Test (BSLT).  Pharmauho:  Jurnal  Farmasi,  Sains,  dan Kesehatan. 6(1),  p. 15-19.
Lenny,  S.  2006.  Isolasi  dan  Uji  Aktifitas  Kandungan Kimia  Utama  Puding  Merah  dengan  Metoda  Uji Brine Shrimp. USU Repository:Universitas Sumatera Utara
Koneri,  R.,  dan  Pontororing,  H.H.  2016.  Uji  Ekstrak Biji Mahoni (Swietenia macrophylla) terhadap Larva Aedes  aegypti  Vektor  Penyakit  Deman  Berdarah. Jurnal MKMI, Vol. 12 No. 4, p. 216-223.
Utami,  S.  2010.  Aktivitas  insektisida  bintaro  (Cerbera odollam  Gaertn)  terhadap  hama  Eurema  spp.  pada skala laboratorium. Jurnal Penelitian Hutan Tanaman. 7, 4, p. 211–220.
Rohimatun,  S.S.  (2011).  Bintaro  (Cerbera  manghas) sebagai  pestisida  nabati.  Warta  Penelitian  Dan Pengembangan Tanaman Industri, 17(1), 1-4.