Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Senyawa Fenolik Makroalga Coklat Sargassum sp.

## Sri Sedjati*, Suryono, Adi Santosa, Endang Supriyantini dan Ali Ridlo
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Kampus UNDIP Tembalang, Semarang 50275 Email : sedjati69@gmail.com

## Abstract
Present research was to evaluated the antioxidant activities of extracts from macroalga Sargassum sp.  In this study, seven filtrates from maceration (methanol pa and technical grade, ethanol  pa  and  techinal  grade,  methanol  technical  grade  50%,    infused  hot  water,  boiled water) were analyzed for total phenolic compound (TPC) and for antioxidant activities (DPPH method).    The  results  revealed  that  the  water  filtrates  possessed  more  TPC  and  antioxidant antivity than alcoholic filtrates, and the highest was water filtrate from boiled Sargassum sp. (TPC  =1,36±0,01  mgGAE/g    dry  weight;  %  inhibtion  DPPH  =  81,35±0,42  %). The  high  positive correlation  between  TPC  and  antioxidant  activity  (r  =  0.99  )  suggested  that  phenolic compound  were the mayor antioxidant components.  The effect of TPC (dependent variable) on DPPH radical inhibition (independent variable) with regression formula y = 55,39 x + 5,18.
Keywords : Sargassum sp., phenolic compound, antioxidant activity.

## Abstrak
Penelitian ini mengevaluasi potensial aktivitas antioksidan ekstrak Sargassum sp.  Pada kajian ini, 7 filtrat hasil maserasi (metanol pa dan teknis, etanol pa dan teknis, metanol teknis 50%,  perendaman  air  panas/ hot  infused ,  dan  perebusan  dengan  air)  dianalisis  kandungan total  fenoliknya  (TPC)  dan  aktivitas  antioksidannya  (metoda  DPPH).    Hasil  penelitian  ini mengungkapkan bahwa filtrat air memiliki kandungan TPC dan antioksidan yang relatif lebih tinggi dibanding filtrat alkohol dan yang tertinggi adalah filtrat hasil perebusan Sargassum sp. (TPC =1,36±0,01 mgGAE/g  berat  kering;  inhibisi DPPH = 81,35±0,42 %), Korelasi positif yang tinggi  antara  TPC  dan  aktivitas  antioksidan  (r  =  0.99)  menunjukkan  bahwa    kandungan senyawa  fenolik  merupakan  komponen  utama  yang  menghasilkan    aktivitas    antioksidan. Pengaruh    TPC  (variabel  bebas)    terhadap  inhibisi  radikal  DPPH  (variabel  terikat)    sesuai dengan persamaan regresi  y = 55,39 x + 5,18.
Kata kunci : Sargassum sp.,  senyawa fenolik,  aktivitas antioksidan.

## PENDAHULUAN
Alga laut diketahui banyak mengandung senyawa bahan alam yang bersifat  bioaktif.    Beberapa  senyawa  di antaranya memiliki efek “ pharmaceutical ” sekaligus  berfungsi  sebagai  kosmetik, sehingga  muncul  istilah    “ cosmeceutical ”.
Arti  dari  istilah  tersebut  menunjukkan karakter suatu  produk  yang  berada  pada katagori  kosmetik  dan  obat  ( drugs ) (Agatonovic-Kustrin et  al .,  2016).  Ekstrak alga laut banyak digunakan untuk bahan
perawatan kulit, karena dapat merangsang  regenerasi  kulit,  mengurangi kerutan,  mengurangi  stres  oksidatif  dan meningkatkan sintesis kolagen (Fitton et al.,
2016). Produk perawatan kulit “ cosmeceutical ”
harus dapat memperbaiki fungsi dan struktur kulit, selain dapat  meningkatkan  penampakan  kulit (Wang et al., 2015)
Menurut  Fitton et  al .  (2016),  sebuah perusahaan  bioteknologi  asal  Australia, Marinova telah mengembangkan
senyawa  bahan  alam  dari  alga  coklat Undaria  pinnatifida dan Fucus  fesiculosus sebagai  bahan  kosmetik.    Esktrak Undaria pinnatifida (fukoidan  89,6%,  polifenol  <2%, karbohidrat  netral  48,8%,  sulfat  27,4%, kation  9%)  terbukti  bersifat skin  protecting ,
sedangkan ekstrak
Fucus
fesiculosus (fukoidan 58,6%, polifenol 33,7%, karbohidrat  netral  43,7%,  sulfat  10,1%, kation  3%)  dapat  mereduksi  noda-noda penuan,  meningkatkan  kecerahan  kulit dan sebagai pelembab sekaligus pelembut kulit.
Sargassum sp., merupakan salah satu alga  coklat  yang  kaya  bahan  bioaktif,  di antaranya:  alginat,  fukoidan,  fucoxantin, dan  phlorotannin  (senyawa  fenolik  yang khas pada alga coklat). Senyawa-senyawa tersebut banyak diaplikasikan untuk produk kosmetik  perawatan  kulit,  karena  bisa berfungsi  sebagai  bahan  pengemulsi ( emulsifier ),  pemutih  kulit  ( skin  whitening ), pencegah  penuaan  ( anti-ageing ),  anti kerutan  ( anti-wrinkle ),  pencegah  alergi, maupun sebagai antioksidan.
Menurut  Uppala  (2015),  ekstrak  alga dapat digunakan dalam formula kosmetik dengan  2  tujuan  yang  berbeda,  sebagai eksipien  ( emulsifier atau stabilizer )  dan sebagai bahan bioaktif terapeutik (antioksidan, antibakteri, anti-inflamasi, dll).
Salah  satu  alga  coklat, Sargassum duplicatum merupakan  salah  satu  jenis rumput  laut  coklatdari  Indonesia    yang berpotensi            sebagai            antioksidan karena  mengandung  zat-zat  aktif  seperti fukoidan  dan komponen fenolik (Lim et al ., 2002).    Jenis  komponen      fenolik      yang banyak   dijumpai   pada rumput laut coklat adalah  phlorotanin yang  berkisar  antara 0.74%  sampai  5.06%  (Samee et al ., 2009).
Pemicu utama
masalah penuaan/kerusakan  kulit  adalah  stres oksidatif, yang terjadi secara alamiah dan dipicu  faktor  lingkungan  (seperti  radiasi sinar  matahari/UV,  asap/polusi  udara). Menurut Fitton et al ., 2016, struktur sel alga mempunyai kemiripan dengan struktur kulit manusia, sehingga dapat diasumsikansenyawa  bahan  alam  yang ditemukan  di  sel  alga  dapat  bermanfaat
bagi kulit.  Alga laut merupakan organisme fotosintetik  yang  sering  terpapar  sinar matahari  dan  oksigen  tinggi,  keduanya merupakan  pemicu  terbentukknya  radikal bebas  dan  agen  pengoksidasi  (oksidator) yang  kuat.    Radikal  bebas  dan  oksidator berpotensi merubah struktur dan fungsi sel, namun pada kenyataannya sel alga tidak mengalami  kerusakan.  Fenomena  ini membuktikan  bahwa  alga  laut  memiliki mekanisme  pertahanan  anti  oksidatif  dan mengandung senyawa antioksidan.
Berdasarkan  peluang  tersebut,  perlu dilakukan  penelitian  tentang  kandungan senyawa-senyawa  tersebut    dan  melihat potensi  antioksidannya.    Penelitian  ini merupakan langkah awal untuk pengembangan bahan alami laut, khususnya  ekstrak Sargassum sp.    untuk perluasan  produk  kelautan,      memasuki dunia industri kosmetik.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan potensi antioksidan Sargassum sp. dan menganalisis kandungan  senyawa  fenoliknya  ( total phenolic  content ).    Tolak  ukur    aktivitas antioksidan ditentukan berdasar kemampuannya  sebagai      penangkal radikal  bebas  ( free  radical  scavenging activity ).

## MATERI DAN METODE
Materi  utama  yang  digunakan adalah  makroalga  coklat Sargassum  sp . yang  diperoleh  dari  perairan  Teluk  Awur, Jepara.  Materi  pendukung  berupa  kertas saring, aluminium  foil ,  bahan  kimia  untuk proses  ekstraksi  dan  uji/analisis  kimiawi. Bahan  kimia  tersebut  meliputi  :Etanol  dan metanol (pro analisis dan teknis), aquades, natrium  karbonat  (Na 2 CO 3 ),  asam  galat, dan  asam  askorbat/vitamin  C.Reagen berupa DPPH ( 2,2-diphenyl-1-
picrylhydrazyl ), dan Follin-Ciocalteau.
Alat-alat  yang  digunakan  berupa pralatan  gelas  (gelas  piala, erlenmeyer , gelas  ukur,  corong,  tabung  reaksi,  vial, pengaduk), neraca analitik, mikropipet, hot platemagnetic stirrer , magnetic bar,vortex/homogenizer, cuvet kaca , spektrofotometer UV-Vis.
Preparasi sampel sebelum digunakan penelitian  dimulai  dari  perendaman Sargassum sp.  segar  dengan  air  tawar, pencucian  dengan  air  mengalir  dan pengeringan.    Pengeringan  dilakukan dengan  cara  diangin-anginkan  sampai kering, dihaluskan dengan blender, kemudian  disimpan  dalam  wadah  kedap udara.
Ekstraksi menggunakan metode maserasi.  Sebanyak  1g Sargassum sp. kering  dilarutkan  dengan  20  ml  pelarut (1:20).  Pelarut  yang  digunakan  adalah etanol  (pa  dan  teknis),  metanol  (pa  dan teknis), metanol teknis 50 %, dan aquades (panas/ infused dan  perebusan).    Ekstraksi dilakukan  dengan  proses  maserasi  24  jam pada  suhu  kamar  (dikombinasi  dengan pengadukan  30  menit  menggunakan magnetic bar di awal maserasi). Perlakuan maserasi dengan air panas /infused menggunakan  aquades  panas  (100 o C), sedangkan perlakuan
perebusan dilakukan  dengan  memanaskan  sampel menggunakan hot plate magnetic stirrer (100 o C; 30 menit, kemudian dimaserasi  24  jam  pada  suhu  kamar.  Hasil maserasi  disaring  menggunakan  kertas saring  (Whatman  no.1).  Filtrat  disimpan menggunakan vial kecildibungkus aluminium  foil dan  dianalisis  TPC  ( total phenolic  content ),  dan  RSA  ( free  radical scavenging activity ).
Uji TPC ( Total Phenolic Content )
Penentuan  TPC  filtrat  menggunakan reagen  Folin-Ciocalteau,  sesuai  dengan metode  Norra et  al .(2016)  dengan  sedikit modifikasi.  Masing-masing filtrat sebanyak 200  µl  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi kecil  dan  ditambah  dengan  1  ml  reagen Folin-Ciocalteau  (diencerkan  10  kali    lipat dengan  aquades).    Setelah  5  menit  dari proses  pencampuran,  ditambahkan  2  ml natrium  karbonat  (Na 2 CO 3 7,5%  w/v). Campuran  dihomogenasi  dengan vortex dan  diinkubasi    selama  120  menit  pada suhu kamar.  Absorbansi filtrat diukur pada panjang  gelombang  765  nm  dengan menggunakan  Spektrofoto-meter  (model Agilent  Cary  60  UV-Vis.) .  Nilai  TPC diekspresikan  sebagai  ekivalen  mg  asam galat  (GAE)/g  berat  kering  sampel.Kurva
standar asam galat yang dipakai adalahy =  0,016x  +  0,013  (r²  =  0,992).  Kandungan total fenolik dihitung menggunakan rumus:
Total Fenolik = 𝑎𝑥𝑉/1000
𝐺
Keterangan a   = konsentrasi asam galat (mg/L)
V  = volume total larutan uji (ml) G = massa sampel (g)
1000 = faktor konversi terhadap volume total larutan (ml)
Uji RSA ( Free Radical Scavenging Activity )
Uji  RSA  dilakukan  dengan  metode DPPH  (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl).    Uji DPPH  menggunakan  metode  Norra et  al .
(2016).  Masing-masing  filtrat  sebanyak 100 µl  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  kecil ditambah dengan 2,9 ml DPPH (konsentrasi 0,004% dalam metanol). Setelah 120 menit masa  inkubasi  (suhu  kamar  dan  kondisi tanpa cahaya), larutan diukur absorbansinya pada panjang gelombang serapan  maksimum  dari  DPPH  (515  nm). Persentase    inhibisiradikal  bebas  DPPH dihitung menggunakan  rumus :
In.  DPPH (%) = (𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙) 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 𝑥 100
Keterangan A blanko = Abs. DPPH tanpa sampel

## A sampel = Abs. sampel + DPPH
Kurva  standar  asam  ascorbat    yang dipakai adalah  y = 3,93x + 7,82 (r² = 0,907) dan  potensi  antioksidannya  diekspresikan sebagai  ekivalen  mg  asam  ascorbat/  g berat kering sampel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kandungan total fenol Sargassum sp. dari  Perairan  Teluk  Awur,  Jepara  berkisar dari  0,11±0,01  mgGAE/g  sampai  dengan 1,36±0,01  mgGAE/g    berat   kering.  Pelarut air  dapat  menarik  lebih  banyak  senyawa fenolik dibanding pelarut alkohol. Maserasi dengan pelarut metanol teknis 50% dapat menarik senyawa fenolik sebesar 0,44±0,03 mgGAE/g    berat    kering,  sedangkan dengan air panas ( infused hot water ) total fenoliknya  meningkat  menjadi  0,95±0,03 mgGAE/g    berat    kering.      Perebusan selama  30  menit  (suhu  100 o C)  dan
dilanjutkan dengan proses maserasi 24 jam menghasilkan  kandungan  total  fenolik tertinggi,  yaitu  1,36±0,01  mgGAE/g    berat kering (Gambar 1).
Penelitian  sejenis  sudah  dilakukan oleh Wai et al . (2015), total TPC Sargassum polycystum dari  Sabah  (Malaysia)  yang diperoleh  secara  maserasi  50%  etanol (1:10)  selama  2  jam  dengan  suhu  65 o C adalah 0,37±0,01 mgGAE/g  berat  kering. Ozgun
(2015) meneliti beberapa makroalga  coklat  dari  Teluk  Iskenderun (Turki)  yang  dimaserasi  dengan  metanol (4 o C; 20 jam), TPC berkisar antara 0,36±0,04 sampai  1,31±0,03  mgGAE/  g  berat  kering, dan yang tertinggi adalah TPC Sargassum schimperi.

## Keberadaan senyawa ini menjadikan
Sargassum  polycystum memiliki  potensi antioksidan  lebih  tinggi  dibanding  rumput laut Eucheuma  denticulatum dan Kappahycus alvarezzi.
Hwang et  al. (2010)  juga  meneliti Sargassum  hemiphyllum (perairan  Penghu County, Taiwan, namun diekstraksi dengan metode  maserasi  air  panas.    Ekstraknya memiliki  potensi  antioksidan  (IC 50 )  sebesar 410 mg/L.
Karakter  pelarut  yang  dipakai  untuk proses ekstraksi menentukan tipe senyawa fenolik yang terekstrak (Liyana-Pathirana & Shahidi, 2005). Senyawa fenolik alga coklat secara  alamiah  bersifat  bipolar,  jadi  bisa terdapat    sebagai  senyawa  non  polar sampai  polar (Wei et  al .,  2003).  Kombinasi alkohol  dan  air  dapat  mengambil golongan senyawa fenolik yang cenderung  lebih  polar,  seperti  flavonoid, catechin,  rutin ,  dan quercetin (Spigno et al., 2007).    Konsentrasi  alkohol  yang  tinggi dapat  mengekstrak  pigmen,  ataupun lemak, sehingga kadar fenol yang terambil relatif  lebih  kecil  .Luo et  al .  (2010)  juga meneliti  tentang  kandungan  fenolik  pada beberapa spesies genus Sargassum.
Gambar 1. TPC Filtrat Sargassum sp.(1) metanol teknis ; (2) metanol pa. ; (3) etanolteknis ; (4) etanol pa. ; (5) metanol teknis 50%; (6) air panas/ infused ; (7) perebusan 30 menit
0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1 2 3 4 5 6 7 To ta l F e n o l ( mg G A E/ g Sa rg a ss um sp . k e rin g ) Filtrat Sargassum sp . dengan berbagai pelarut
Gambar 2. Inhibisi  (%)  Filtrat Sargassum sp.  terhadap Radikal  DPPH  :  (1)  metanol teknis  ;  (2) methanol  pa.  ;  (3)  etanol  teknis  ;  (4)  etanol  pa.  ;  (5)  methanol  teknis  50%;  (6)  air panas/ infused ; (7) perebusan 30 menit
Gambar 3. Pengaruh TPC terhadap Inhibisi (%) DPPH Filtrat Sargassum sp.:(1) metanol teknis ;
(2) metanol pa. ; (3) etanol teknis ; (4) etanol pa. ; (5) methanol teknis 50%; (6) air panas/ infused ; (7) perebusan 30 menit
Senyawa  fenolik  dari  genus  ini  memiliki kepolaran  medium  (semi  polar  sampai polar).  Pendapat  ini  didukung  oleh Bambang (2013), senyawa fenolik
Sargassum sp. lebih banyak larut di etanol dibanding  etil  asetat  dan  n-heksana. Senyawa fenolik makroalga, termasuk alga coklat menunjukkan beberapa bioaktivitas
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 1 2 3 4 5 6 7 Pe rs e n (% ) in h ibi si sa mpe l te rh a d a p D PP H Filtrat Sargassum sp . dengan berbagai pelarut y = 55,39 x + 5,1 r = 0,99 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 1 2 Pe rs e n (% ) in h ibi si sa mpe l te rh a d a p D PP H
Total Fenol (mgGAE/g Sargassum sp. kering)
seperti  antioksidan,  antiradical,  antialergi, antiradang, dan antiradiasi UV (Berthon et. al .,  2017).    Fungsi  lainnya  adalah  sebagai penghambat  pelepasan  histamin  ketika terjadi peradangan kulit, sehingga mampu mencegah  terjadinya  dermatitis  atopic (Heo et al ., 2009).
Fungsi  senyawa  fenolik  sebagai  anti oksidan  bisa  dilihat  dari  kemampuan senyawa  tersebut  sebagai  penangkal radikal  bebas  ( free  radical  scavenging ). Semakin  tinggi  persen  inhibisi  terhadap radikal bebas sintetis (DPPH), semakin besar potensi  antioksidannya.  Filtrat  air  (metode perebusan) menghasilkan potensi antioksidan  tertinggi  (81,35±0,42  %).  Jika diekivalenkan dengan kurva standar asam ascorbat,  maka  setara  dengan  0,37±0,01 mg/g Sargassum sp. kering
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa filtrat air memiliki potensi antioksidan tertinggi.  Penelitian Kuda et al. (2005)  juga  sama,  ekstrak  air  alga  coklat berpotensi antioksidan lebih tinggi dibanding  ekstrak  etanol.    Secara mendasar  terdapat  hubungan/korelasi antara kandungan polifenol dan bioaktivitas  penangkal  radikal  bebas.  Heo et  al .  (2009)  menyatakan  polifenol Sargassum sp. adalah senyawa phlorotannin,    yang  merupakan  oligomer dari phloroglucinol ( fucol,  phlor-ethol,  dan eckol )
Total  fenolik  dari Sargassum sp. berkorelasi positif terhadap potensi antioksidan  (Tao et  al .,  2009;  Luo et  al ., 2010).    Peningkatan    konsentrasi  TPC meningkatkan persentase inhibisinya terhadap  radikal  bebas,  jadi  potensi antioksidannya tergantung konsentrasi.
Korelasi  ( Pearson  correlation )antara variabel  TPC  sampel Sargassum sp.  dan persentase inhibisinya terhadap DPPHsangat kuat.  Nilai korelasi positif yang mendekati  1  menunjukkan  bahwa  TPC memberi  sumbangan  yang  sangat  tinggi terhadap  potensi  antioksidan  alga  coklat tersebut.

## KESIMPULAN
Filtrat  air Sargassum sp.  (metode perebusan  30  menit)  memiliki  kandungan
fenol  terbesar,  yaitu:  1,36±0,01  mgGAE/g berat    kering.    Persentase  inhibisi  radikal bebasnya (DPPH) juga paling besar, yaitu : 81,35±0,42 %. Senyawa fenoliknya cenderung bersifat polar dan lebih banyak terlarut  di  air  dibanding  pelarut  alkohol. Pengaruh  variabel  bebas  TPC  terhadap variabel terikat  inhibisi DPPH sesuai dengan persamaan  regresi  liniernya  :  y  =  55,39  x + 5,1 (r = 0,99).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  reviewer  dan  semua  pihak  yang telah  membantu  dalam  penyelesaian penulisan karya ilmiah ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agatonovic-Kustrin, S, D. W. Morton, and P. Ristivojevic.  2016.  Assessment  of Antioxidant Activity in Victorian Marine Algal Extracts Using High Performance Thin-Layer
Chromatography and
Multivariate  Analysis. Journal  of Chromatography A., 1468: 228–35. Bambang, B. S, S. Kumalaningsih, Susinggih W  and  Hardoko.  2013.Polyphenol Content  and  Antioxidant  Activities  of Crude Extract from
Brown  Algae  by  Various  Solvents. J.
Life Sci. Biomed., 3(6): 439-443 Berthon,  J.,  R.  Nachat-Kappes,  M.  Bey,
Jean-Paul C., I. Renimel, and E. Filarire. 2017.    Marine  Algae  as  Attractive Source  to  Skin  Care. Free  Radical Research, 51(6): 555-567.
Fitton,  H.  J,  T.  Oddie,  D.  Stringer,  and  S.  K.
Marinova.  2016.  Marine  Plant  Extracts Offer  Superior  Dermal  Protection  OH. (March): 51–54.
Heo, S.J., Ko S.C., Cha S.H., Kang D.H.  Park H,S.,  and  Choi  Y.    Effect  of Phlorotannins  isolated  from  Ecklonia cava  on  Melanogenesis  and  Their Protective  Effect  Against  Photo- oxidative  Stress  Induced  by  UV-B Radiation. Toxicol.  in  Vitro ,  23  :  1123- 1130
Hwang,  Pai-An,  Chwen-Herng  W.,  Shu-Yun G.,  Shih-Yung  C.,  and  Deng-Fwu  H. 2010. Antioxidant  and  Immune- Stimulating  Activities  of  Hot-Water Extract  from  Seaweed  Sargassum
Hemiphyllum. Journal  of  Marine Science and Technology, 18(1): 41–46.
Ismail, A., Hong T.S.,  Antioxidant  Activity of Selected  Commercial  Seaweeds. Mal. J. Nutr. , 8 : 167-177 Kuda  T.,  Tsunekawa  M.,  Goto  H.,  Araki  Y. 2005.    Antioxidant  Properties  of  Four Edible  Algae  Harvested  in  The  Noto Peninsula  Japan. J.  Food  Comp. Anal., 18 : 625-633. Liyana-Pathirana, C., Shahidi F. Optimization  ofextraction  ofphenolic compounds from wheat using response  surface  methodology. Food Chem., 93:47–56.
Lim,  S.N,  Cheung  P.C,  Ooi  V.E,  and  Ang P.O.        2002.            Evaluation      of antioxidative      activity      of      extracts from   a   brown   seaweed, Sargassum siliquastrum. J  Agric  Food  Chem . 50(13):3862-3866.
Luo, H. Y., Bin W., Chun-Guang Y., You-le Q. and Chuan-ling S.  2010.  Evaluation of antioxidant  activities  of  five  selected brown seaweeds from China. Journal of  Medicinal  Plants  Research, 4(18)  : 2557-2565,
Machu, L., L. Misurcova , J. V. Ambrozova , J. Orsavova , J. Mlcek, J. Sochor  and T. Jurikova.  2015.  Phenolic Content and Antioxidant  Capacity  inAlgal  Food Products. Molecules, 20: 1118-1133
Ozgun,  S.,    F.  Turan.    2015.    Biochemical composition of some brown algaefrom  Iskenderun  Bay,  the northeastern Mediterranean coast of Turkey. J.  Black  Sea/Mediterranean Environmen t ,  21(2): 125-134
Samee  H,  Li  ZX,  Lin  H,  Khalid  J,  and  Guo, YC.    2009.    Antiallergic    effects    of ethanol extracts from brown seaweeds. Journal  of  Zhejiang University Science B .,10(2):147-153 Spigno, G., Tramelli L., and De Faveri  D. M. 2007.    Effects  of  extraction  time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc  phenolics. J. of Food Engine., 81 (1): 200-208. Tao  W.,  Rosa,  Gudrun  A.    2009.    Total
Phenolic Coumpound, Radical
Scavenging  and  Metal  Chelation  of Extract from Iceland Seaweeds. Food Chem. , 116 : 240-248.
Uppala,  L.  2015.  A  Review  on  Active Ingredients from Marine Sources Used in  Cosmetics. SOJ  Pharm  Phamr  Sci., 2(3): 1–3.
Wai, C., Foong F., Chun Wai H., Wilson T. L. Y.,  Faridah  A.,  and  Chin  P.  T.  2015. Effects  of  Phenolic  Antioxidants Extraction from Four Selected
Seaweeds  Obtained  from  Sabah PrePrints DOI  :  10.7287/peerj.prepri nts.1249v1
Wang, H. M. D., C. C. Chen, P. Huynh, and J.  S.  Chang.  2015.  Exploring  the Potntial  of  Using  Algae  in  Cosmetics. Bioresource Technology ., 184:355-362 Wei Y., Li Z., Hu Y., Xu Z.  Inhibition of Mouse Liver  Lipid  Peroxidation  by  Hight Molecular  Weight  Phlorotannins  from Sargassum  kjellmanianum. J.  Appl. Phycol., 15 : 507-511.