Pengaruh Pemberian Kacang Hijau ( Phaseolus radiatus L.) terhadap Pencegahan Peningkatan Kadar Glukosa Darah pada Tikus ( Rattus novergicus ) Galur Wistar Bunting
Debby Amalia Briliansari*, Bambang Prijadi**, Fajar Ari Nugroho***

## ABSTRAK
Selama  kehamilan  terjadi  peningkatan  kadar  glukosa  darah  seiring  bertambahnya  usia  kehamilan. Pilihan  sumber  karbohidrat  yang  tepat  diperlukan  agar  kadar  glukosa  darah  terkontrol  selama  kehamilan, sehingga  dapat  mencegah  terjadinya  diabetes  melitus  gestasional.  Kacang  hijau  mengandung  serat  larut tinggi dan memiliki indeks glikemik rendah. Kandungan tersebut dapat mengurangi penyerapan karbohidrat dalam  tubuh,  sehingga  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui pengaruh pemberian kacang hijau terhadap pencegahan peningkatan kadar glukosa darah pada tikus putih Wistar yang bunting. Penelitian ini bersifat true experimental in vivo dengan rancangan post test only with control group design . Sampel yang digunakan adalah tikus Wistar usia 2-3 bulan yang bunting. Tikus dibagi dalam empat kelompok yaitu kelompok normal tidak diberi kacang hijau (P0), perlakuan 1 diberi kacang hijau 0,3 g/hari (P1), perlakuan 2 diberi kacang hijau 0,6 g/hari (P2), dan perlakuan 3 diberi kacang hijau 1,2 g/hari (P3). Diketahui bahwa kacang hijau mampu mencegah peningkatan kadar glukosa darah pada tikus Wistar bunting,  meski  tidak  signifikan  (p  =  0,494).  Dosis  efektif  kacang  hijau  adalah  0,6  g/ekor/hariyang  mampu mengontrol kadar glukosa darah sebesar 88,60 + 8,17 mg/dl.
Kata kunci: Glukosa darah, Kacang hijau, Kehamilan.
Mung Bean  ( Phaseolus radiatus L.) Effect on Preventing Increased Blood Glucose in Pregnant Wistar Rat

## ABSTRACT
During pregnancy, blood glucose will increaseas the age of pregnancy become older. An alternative of carbohydrate  are  needed  to  control  blood  glucose  level  during  pregnancy.  So,  it  can  prevent  gestasional diabetes mellitus. Mung bean have high  soluble fiber and low glycemic index. It can decrease carbohydrate absorption in digestion, so that blood glucose level will decrease. The aim of this study  was to find out mung bean effect on preventing  increased blood glucose in pregnant rat. The method  used was experimental in vivo with post test only with control group design. This study involve 2-3 months old pregnant rat. They were divided into four groups, they were control group (P0),  and three treatment groups consist of mung bean 0.3 g/day (P1), 0.6 g/day (P2), and 1.2 g/day (P3) respectively. The result showed that mung bean was able to prevent blood glucose increased level in pregnant rat, although not significant (p = 0.494). It was concluded that the dose of mung bean which effective to control blood glucose level (88.60 + 8.17 mg/dl) was 0.6 g/day.
Keywords: Blood glucose,Mung bean,Pregnancy.
* Program Studi S1 Kebidanan, FKUB
** Laboratorium Biokimia-Biomolekuler, FKUB *** Program Studi Gizi, FKUB

## PENDAHULUAN
Kehamilan  menyebabkan  terjadinya banyak  perubahan  hormonal  dan  metabolik sehingga  kebutuhan  energi  dan  zat  gizi lainnya  meningkat  selama  kehamilan. Metabolisme  dan  kebutuhan  energi  pada tubuh  ibu  semakin  meningkat  seiring pertumbuhan janin. 1 Salah satu metabolisme ibu  yang  mengalami  perubahan  adalah metabolisme glukosa.
Pada trimester kedua dan ketiga, terjadi peningkatan  resistensi  insulin  hingga  80%. Resistensi  insulin  yang  semakin  meningkat seiring  usia  kehamilan  yang  bertambah, menyebabkan  kadar  glukosa  ibu  semakin tinggi. Keadaan tersebut dapat meningkatkan  resiko  terjadinya  diabetes melitus  gestasional.  Menurut American
Diabetes  Association (ADA)  tahun  2000,
diabetes melitus gestasional terjadi 7% pada kehamilan  setiap  tahunnya.    Prevalensi diabetes gestasional bervariasi yaitu 1-14%. Di  Indonesia,  prevalensi  diabetes  melitus gestasional berkisar 1,9-3,6% pada kehamilan  umumnya. 2 Sementara  pada   ibu hamil  dengan  riwayat  keluarga  diabetes melitus,  prevalensi  diabetes  gestasional sebesar  5,1%. 3 WHO  memperkirakan penderita  diabetes  melitus  di  Indonesia meningkat hingga 250% menjadi sekitar 21,3 juta pada tahun 2030. 4 Salah  satu  cara  untuk  mencegah terjadinya diabetes adalah dengan mengatur asupan  karbohidrat.  Karbohidrat  merupakan sumber energi utama yang dibutuhkan untuk pertumbuhan  dan  perkembangan  janin selama kehamilan. 5 Maka dari itu, diperlukan pilihan  sumber  karbohidrat  yang  tepat  bagi ibu  hamil  agar  kadar  glukosa  darah  ibu terkontrol  dan  kebutuhan  energi  janin  tetap terpenuhi.  Banyak  sumber  karbohidrat  yang dapat menjadi pilihan asupan makanan bagi ibu hamil, antara lain hasil olahan dari padi- padian  atau  serealia,  umbi-umbian,  kacang- kacangan,  dan  gula.  Salah  satu  jenis
kacang-kacangan yang baik untuk dikonsumsi  oleh  ibu  hamil  adalah  kacang hijau. 6
Kacang  hijau  merupakan  tumbuhan kacang-kacangan  yang  mudah  dijumpai  di Indonesia.  Kacang  hijau  telah  dikenal  baik untuk  kesehatan.  Kacang  hijau  memiliki kandungan karbohidrat dan serat yang baik.
7 Kacang  hijau  mengandung  karbohidrat rendah  yaitu  19  g/100  g,  jauh  lebih  rendah dibandingkan  beras  yang  mengandung karbohidrat  79,95  g/100  g,  dan  kentang 35,11 g/100 g. Kandungan serat yang tinggi pada tumbuhan ini sekitar 7,6 g/100 g, lebih tinggi dibandingkan beras yang mengandung serat 1,3 g/100 g, dan kentang 3,2 g/100 g. 8 Suatu penelitian di Amerika membuktikan  bahwa  diet  serat  yang  tinggi mampu  memperbaiki  pengontrolan  gula darah, menurunkan peningkatan insulin yang berlebihan di dalam darah serta menurunkan kadar  lemak  darah. 9 Pemberian  kacang merah  yang  juga  mengandung  serat  tinggi, dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah pada  tikus  Wistar  jantan  model  diabetes melitus. 10
Selain  rendah  karbohidrat  dan  tinggi serat, kacang hijau juga memiliki nilai indeks glikemik  yang  rendah  sebesar  28,87.  Nilai indeks glikemik dikategorikan rendah apabila <55,  kategori  sedang  55-70,  dan  kategori tinggi  >70. 11,12 .  Pangan  dengan  indeks glikemik rendah dapat memperbaiki respons glukosa  darah  dan  mengonsumsi  makanan yang  memiliki  nilai  indeks  glikemik  rendah membantu menurunkan kadar glukosa darah secara  perlahan  sehingga  akan  membantu mengontrol  kadar  glukosa  darah  dalam tubuh. 11,13
Berdasarkan  uraian  di  atas,  kacang hijau  berpotensi  sebagai  pilihan  nutrisi  bagi ibu hamil. Selain harga yang terjangkau dan mudah  dijumpai  di  Indonesia,  kacang  hijau mengandung  banyak  zat  gizi  yang dibutuhkan  oleh  ibu  hamil.  Oleh  karena  itu, penelitian  ini  dirancang  sebagai  tahap  awal
untuk  mengetahhui  pengaruh  pemberian kacang  hijau  ( Phaseolus  radiatus L.) terhadap  pencegahan  peningkatan  kadar glukosa darah pada tikus putih strain Wistar ( Rattus novergicus ) Bunting.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  bersifat true  experimental in vivo dengan rancangan post test only with control  group  design .  Sampel  yang digunakan  adalah  tikus  wistar (Rattus novergicus) usia  2-3  bulan  yang  bunting sebanyak 24 ekor. Tikus dibagi dalam empat kelompok yaitu kelompok normal tidak diberi kacang  hijau  (P0),  perlakuan  1  (P1)  diberi kacang  hijau  0,3  g/ekor/hari,  perlakuan  2 (P2)  diberi kacang hijau 0,6 g/ekor/hari, dan perlakuan  3  (P3)  diberi  kacang  hijau  1,2
g/ekor/hari. Kacang hijau disondekan selama 18  hari  dengan  melarutkan  tepung  kacang hijau  dalam  aquades.  Kadar  glukosa  darah diukur    sesudah  perlakuan  dengan glukometer  Nesco,  dengan  mempuasakan tikus selama 12 jam terlebih dahulu.

## HASIL

## Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Sesudah Pemberian Kacang Hijau
Pemeriksaan  kadar  glukosa  darah dilakukan  sesudah  perlakuan.  Sebelum perlakuan  dan  saat  perlakuan  tidak dilakukan pemeriksaan kadar glukosa darah. Sampel  darah  diambil  dari vena  lateralis pada ujung ekor tikus. Rerata kadar glukosa darah dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Rerata kadar glukosa darah sesudah pemberian kacang hijau
Gambar  1  menunjukkan  hasil  glukosa darah  tertinggi  tampak  pada  kelompok  P1 yaitu 100,20+14,62 mg/dl dan terendah pada kelompok  P0  yaitu  87,20+21,22  mg/dl. Sementara  kelompok  P2  memiliki  rata-rata kadar  glukosa  darah  mendekati  rata-rata kadar  glukosa  darah  pada  kelompok  P0, yaitu  88,60+8,17  mg/dl.  Tingginya  kadar glukosa  darah  pada  kelompok  P1  dalam penelitian  ini  kemungkinan  disebabkan  oleh beberapa  faktor  yang  dapat  mempengaruhi
kadar  glukosa  darah.  Beberapa  faktor tersebut antara lainfaktor hormonal dan usia kehamilan tikus, nilai indeks glikemik kacang hijau sesudah pengolahan, serta faktor stres tikus akibat kesalahan prosedur.
Hasil  uji  normalitas  data  menunjukkan bahwa data terdistribusi normal p = 0,692 (p >  0,05).  Selanjutnya  dilakukan  uji homogenitas varian data yang menunjukkan bahwa data homogen p = 0,064 (p > 0,05), hal  ini  menunjukkan  bahwa  seluruh  sampel
87,2 100,2 88,6 91,2 80 85 90 95 100 105 P0 P1 P2 P3 Re ra ta k ad ar glu ko sa (m g/d l) Kelompok
yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah sama dan sejenis.
Karena memenuhi uji normalitas dan uji homogenitas, dilanjutkan dengan uji one-way ANOVA.  Hasil  uji one-way ANOVA menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang signifikan  pada  semua  perlakuan  p  =  0,494
(p > 0,05), hal ini menunjukkan bahwa tidak terdapat  perbedaan  yang  signifikan  pada kadar  glukosa  darah  tikus  sesudah pemberian kacang hijau selama 18 hari.

## PEMBAHASAN

## Karakteristik Sampel
Karakteristik  sampel  yang  digunakan adalah  tikus  putih  ( Rattus  novergicus) galur Wistarbetina  yang  bunting  dengan  umur rata-rata 2-3 bulan dan dalam keadaan sehat selama  penelitian.  Sampel  penelitian berjumlah 24 ekor tikus yang dibagi menjadi 4  kelompok  perlakuan  secara  acak  agar tikus  memiliki  peluang  yang  sama  untuk menjadi sampel pada tiap perlakuan.
Pada penelitian ini, usia kehamilan tikus tidak  sama  dan  tidak  bisa  ditentukan. Perbedaan usia kehamilan ini menyebabkan perbedaan  hormonal  selama  kehamilan pada  setiap  tikus,  sehingga  mempengaruhi kadar  glukosa  darah.  Mekanisme  hormon kehamilan  dalam  mempengaruhi  kadar glukosa  darah  adalah  dengan  memicu terjadinya  resistensi  insulin.  Resistensi insulin  menyebabkan  peningkatan  glukosa darah  selama  kehamilan.  Hormon  utama yang  berperan  penting  dalam  terjadinya resistensi  insulin  dalam  kehamilan  adalah hormon plasenta (hPL). 14 Pada  penelitian  ini,  faktor  hormonal seperti  hormon  plasenta  pada  tikus  tidak diteliti.  Namun,  faktor  hormonal  pada  tikus mungkin  menjadi  salah  satu  faktor  terbesar yang  mempengaruhi  kadar  glukosa  darah sesudah perlakuan.
Pemberian  Kacang  Hijau  pada  Tikus Bunting Kacang hijau dengan dosis 0,3, 0,6, dan 1,2 g/ekor/hari secara berturut-turut diberikan  per  oral  melalui  sonde  pada kelompok  P1,  P2,  dan  P3.  Pada  penelitian ini, kacang hijau dipilih karena mengandung serat  larut  yang  tinggi.  Serat  mampu membentuk  karbohidrat  kompleks  sehingga mengurangi  daya  cerna  karbohidrat. Keadaan  tersebut  dapat  menurunkan pelepasan  glukosa  sehingga  kadar  glukosa dapat terkontrol. 15
Hasil  penelitian  terdahulu  menunjukkan bahwa diet serat tinggi yang diberikan pada 80  partisipan  selama  2  minggu  dapat menurunkan  kadar  glukosa  postprandial, atau  kadar  glukosa  2  jam  sesudah  makan. Karbohidrat kompleks dan serat larut mampu menghambat penyerapan glukosa. Kemampuan  serat  larut  dalam  mengurangi daya  cerna  karbohidrat,  menyebabkan karbohidrat  seperti  disakarida  maupun polisakarida  dalam  makanan  akan  tercerna dan  terserap  lebih  lambat. 16 Hal  ini menjelaskan  mekanisme  kadar  glukosa menjadi  lebih  rendah  pada  2  jam  sesudah makan. 17 Serat  mampu  menurunkan  kadar glukosa postprandial dengan tiga mekanisme, yaitu serat makanan meningkatkan  viskositas  usus  halus  dan menghambat  difusi  glukosa,  mengikat glukosa  dan  mengurangi  konsentrasi glukosa dalam usus halus, menghambat aksi α-amilase  melalui  selaput  pati  dan  enzim serta  dapat  langsung  menghambat  enzim. Mekanisme-mekanisme tersebut menurunkan kadar penyerapan glukosa dan konsentrasi glukosa postprandial. 18.19
Pada penelitian ini, kadar glukosa darah tikus  yang  diukur  adalah  kadar  glukosa puasa, yaitu tikus dipuasakan selama 12 jam sebelum  pengambilan  sampel  darah. Indikator  tersebut  berbeda  dengan  indikator dalam  penelitian  Yuan  (2014),  yang
menggunakan indikator kadar glukosa darah 2  jam  sesudah  makan.  Perbedaan  indikator yang  diukur  mungkin  menjadi  salah  satu penyebab  hasil  penelitian  ini  berbeda dengan hasil penelitian tersebut. 16 Sementara  peneliti  lain  menyebutkan bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang signifikan  pada  kadar  glukosa  puasa sesudah pemberian serat larut berupa pektin selama 3 minggu. 20 Hasil penelitian tersebut memperkuat  dugaan  bahwa  serat  larut berpengaruh  terhadap  kadar  glukosa  darah puasa berbeda dengan kadar glukosa darah 2 jam setelah makan.
Selain  kandungan  serat  larut  yang tinggi,  kacang  hijau  dipilih  dalam  penelitian ini  karena  memiliki  indeks  glikemik  yang rendah.  Indeks  glikemik  adalah  respon glukosa darah terhadap makanan dibandingkan  dengan  respon glukosa  darah terhadap  glukosa  murni. 21 Setiap  bahan pangan  memiliki  indeks  glikemikyang  akan mempengaruhi  kadar  glukosa  darah  dalam tubuh.
Mengonsumsi  makanan  dengan  indeks glikemik  rendah  dianjurkan  untuk  penderita diabetes  melitus.  Makanan  dengan  indeks glikemik  rendah  membantu  penderita diabetes  melitus  dalam  mengontrol  berat badan,  meningkatkan  sensitivitas  tubuh terhadap  insulin,  menjaga  kadar  glukosa tetap  terkontrol,  mengurangi  resiko  penyakit kardiovaskular  dan  membantu  mengontrol kadar  kolesterol.  Pada  ibu  hamil,  makanan dengan  indeks  glikemik  rendah  bermanfaat untuk mencegah diabetes melitus gestasional,  mengontrol  kolesterol  ibu,  dan memberikan  rasa  kenyang  yang  bertahan lama  sehingga  pola  makan  ibu  tetap terjaga. 22 Indeks  glikemik  suatu  bahan  pangan dipengaruhi oleh beberapa faktor, diantaranya kandungan serat pangan dalam bahan  pangan.  Mekanisme  serat  pangan dalam mempengaruhi indeks glikemik adalah dengan  menurunkan  efisiensi  penyerapan karbohidrat, sehingga menghambat peningkatan  glukosa  darah  secara  cepat dalam tubuh. 23
Semakin  tinggi  kandungan  serat  suatu pangan,  maka  semakin  rendah    indeks glikemik makanan tersebut. Semakin rendah indeks glikemik, maka kemampuan karbohidrat  untuk  menaikkan  kadar  glukosa darah  akan  semakin  turun,  sehingga mengonsumsi bahan pangan dengan indeks glikemik  rendah  dapat  mengontrol  kadar glukosa darah. 11
Selain  dipengaruhi  oleh  kadar  serat pangan,  faktor  lain  yang  mempengaruhi indeks  glikemik  adalah  proses  pengolahan. Proses  pengolahan  mempengaruhi  daya cerna dan daya serap suatu bahan pangan. Semakin  tinggi  daya  cerna  dan  daya  serap suatu  makanan  maka  semakin  cepat menaikkan  kadar  glukosa  darah,  sehingga semakin  tinggi  pula  nilai  indeks  glikemik makanan tersebut . 24 Proses  pengolahan  yang  dapat mempengaruhi  indeks  glikemik  diantaranya adalah  pengecilan  ukuran  (penepungan). Penepungan  menyebabkan  ukuran  partikel suatu  makanan  menjadi  lebih  kecil  dan memperbesar  luas  permukan  yang  dapat diserang  oleh  enzim,  sehingga  semakin cepat pencernaan dan penyerapan karbohidrat.  Oleh  sebab  itu,  semakin  kecil ukuran  partikel  suatu  makanan  maka  nilai indeks  glikemik  makanan  tersebut  akan semakin tinggi. 24
Dalam  penelitian  ini,  kacang  hijau diberikan  dalam  bentuk  pengolahan  berupa tepung,  hal  ini  memungkinkan  indeks glikemik  pada  kacang  hijau  menjadi  lebih tinggi  dibandingkan  sebelum  pengolahan, sehingga  dapat  mempengaruhi  hasil  akhir penelitian.  Namun,  pada  penelitian  ini  nilai indeks  glikemik  kacang  hijau  sebelum  dan sesudah pengolahan tidak diukur.
Dari  penjelasan  di  atas,  faktor-faktor yang  mungkin  mempengaruhi  hasil  akhir penelitian  berkaitan  dengan  kacang  hijau
antara  lainpengaruh  serat  larut  terhadap kadar  glukosa  darah  puasa,  yang  berbeda dengan  kadar  glukosa  darah  2  jam  setelah makan,  dan  proses  pengolahan  berupa penepungan,  yang  mungkin  menyebabkan nilai  indeks  glikemik  kacang  hijau  menjadi lebih tinggi.

## Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Sesudah
Pemberian Kacang Hijau Pada  penelitian  ini,  darah  sampel diambil  dari vena  lateralis pada  ujung  ekor, kemudian  kadar  glukosa  diukur  dengan glukometer.  Dari  hasil  analisis  data  telah diketahui  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan yang  signifikan  pada  kadar  glukosa  darah tikus semua kelompok p = 0,494 (p > 0,05). Dari  semua  kelompok  perlakuan,  hanya kelompok  P2  yang  memiliki  rerata  kadar glukosa  darah  mendekati  kelompok  P0, artinya  pemberian  kacang  hijau  dosis  2 sebesar  0,6  g/ekor/hari  mampu  mencegah peningkatan kadar glukosa darah pada tikus bunting,  meski  tidak  signifikan  secara statistik. Selain faktor-faktor yang telah dijelaskan,  faktor  kemungkinan  lain  yang mempengaruhi  hasil  akhir  penelitian  adalah perlakuan  hewan  coba  atau handling
procedure .  Berbagai handling  procedure pada  hewan  coba  tikus  yang  meliputi perawatan  tikus,  pembersihan  kandang, penggantian sekam, penyondean, pengambilan sampel darah, injeksi subkutan, penimbangan  berat  badan,  dan  dekapitasi, menyebabkan  peningkatan  denyut  jantung dan  tekanan  darah  pada  tikus,  sehingga menimbulkan stres. 25 Handling  procedure yang  dilakukan dalam penelitian ini meliputi perawatan tikus, pembersihan  kandang,  penggantian  sekam, penyondean,  dan  pengambilan  sampel darah. Handling  procedure yang  tidak dilakukan dalam penelitian ini meliputi injeksi subkutan,  penimbangan  berat  badan,  dan dekapitasi.  Namun,  seberapa  besar  tingkat
stres  tikus  tidak  diukur  pada  penelitian  ini. Dalam  penelitian  ini,  tidak  dilakukan pengukuran  denyut  jantung  dan  tekanan darah  pada  tikus,  sehingga  tidak  dapat diketahui  seberapa  besar  tingkat  stres  tikus akibat handling  procedure .  Tikus  dalam kondisi  stres  dapat  ditunjukkan  dengan kadar glukosa darah tikus di akhir penelitian yang cenderung meningkat. Kondisi tersebut dapat terjadi dikarenakan  stres  merangsang  pengaktifan seluruh  sistem  saraf  simpatis,  sehingga salah  satu  efeknya  adalah  peningkatan konsentrasi glukosa darah. 27 Hal ini menjelaskan bahwa stres yang dialami oleh tikus pada penelitian ini dapat mempengaruhi  kadar  glukosa  darah, sehingga mempengaruhi hasil akhir penelitian.

## Keterbatasan Penelitian
Adanya confounding  factor yang  tidak bisa  dikendalikan  oleh  peneliti  yaitu:  faktor hormonal  dan  usia  kehamilan  tikus,  nilai indeks  glikemik  kacang  hijau,  serta  faktor stres  tikus.  Faktor-faktor  tersebut  dapat mempengaruhi  kadar  glukosa  darah, sehingga  mungkin  mempengaruhi  hasil penelitian.

## KESIMPULAN
Pemberian  kacang  hijau  ( Phaseolus radiatus L.)  mampu  mencegah  peningkatan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  putih  galur Wistar  ( Rattus  novergicus )  bunting,  meski tidak  signifikan  secara  statistik.Dosis  efektif kacang  hijau  dalam  mencegah  peningkatan kadar glukosa darah pada tikus adalah dosis 2  yaitu  0,6  g/ekor/hari,  dengan  rata-rata kadar  glukosa  darah  sebesar  88,60+8,17 mg/dl.

## SARAN
 Perlu  kolaborasi  dengan  pakar  ilmu  gizi untuk  dilakukan  pengukuran  nilai  indeks glikemik  kacang  hijau  sebelum  dan sesudah  pengolahan  untuk  mengetahui perubahan  nilai  indeks  glikemik  kacang hijau.
 Perlu  kolaborasi  dengan  pakar  ilmu  gizi untuk  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut tentang  pemberian  kacang  hijau  dalam bentuk  olahan  lain,  seperti  kacang  hijau rebus.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Rahmaniar A, Nurpudji AT, Burhanuddin B.  Faktor-Faktor  yang  Berhubungan dengan Kekurangan Energi Kronis pada Ibu Hamil di Tampa Padang, Kabupaten
Mamuju,  Sulawesi  Barat. Media  Gizi Masyarakat  Indonesia .  2013;  2(2):  98-
103.
2. SoewondonoP  dan  Laurentius  P. Prevalence, Characteristics, and Predictors of Pre-Diabetes in Indonesia . J Med .2011.20(4):283-294.
3. Maryunani A. Buku Saku Diabetes Pada Kehamilan .  Jakarta:  Trans  Info  Media. 2008.
4. SugondoS. Buku  Ajar  Ilmu  Penyakit Dalam:  Obesitas. Sudoyo  AWdkk (Editor).  Jakarta:  Pusat  Penerbitan Departemen  Ilmu  Penyakit  Dalam Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jilid III. Edisi Ke-4. 2006. 5. MaryanahSNNdkk. Asuhan  Kebidanan Antenatal . Jakarta: EGC. 2006.
6. JafarN. Diabetes  Mellitus .  Makassar: Prodi Ilmu Gizi FKM UNHAS. 2004.
7. DiahMD. Kandungan Gizi Kacang Hijau . (Online).2010.
http://diahmd.student.umm.ac.id/2010/0
6/25/kandungan-gizi-kacang- hijau/ . Diakses 27 Februari 2014.
8. USDA. Basic Report 20044, Rice, white,
long-grain, regular, raw, enriched . USDA
National Nutrient Database for Standard
Reference  Release  27.  The  National Agricultural  Library.  (Online).  2014. http://www.nal.usda.gov.  Diakses  24 Oktober 2014. 9. Joseph  G. Manfaat  Serat  Bagi Kesehatan Kita . Bogor: Institut Pertanian Bogor.2002. 10. Farman S. Pengaruh Pemberian Ekstrak Kacang  Merah  (Vigna  angularis) terhadap  Penurunan  Kadar  Glukosa Darah  Tikus  Wistar  Jantan  yang  Diberi Beban  Glukosa .  Semarang:  Media Medika  Muda  Fakultas  Kedokteran Universitas Diponegoro.2012.
11. Powel  KF,  Holt  SH  and  Miller  JC. International  Table  of  Glycemic  Index Load Values. Am J Clin Nutr . 2002 ; 76:5- 56.
12. Eliasson AC. Strach in Food . Woodhead Publishing Limited Cambridge England.2004. 13. Liljeberg HGM, Åerberg AKE, Björk IME. Effect  of  the  Glycemic  Index  and
Content of Indigestible Carbohydrates of Cereal-Based  Breakfast  Meals  on Glucose  Tolerance  at  Lunch  in  Healthy Subjects. Am  J  Clin  Nutr .1999;  69(4): 647-655.
14. Barbour,  Linda  A.,  Carriee  McCurdy et al .  Cellular  Mechanisms  for  Insulin Resistance  in  Normal  Pregnancy  and Gestational  Diabetes .Diabetes  Care.
2007; 30(2): S112-S119.
15. SantosoA. Serat Pangan ( Dietary Fiber ) dan  Manfaatnya  Bagi  Kesehatan. Magistra .2011; 75: 35-40.
16. YuanJYF et al . The Effects of Functional Fiber on Postprandial Glycemia, Energy Intake, Satiety, Palatability and Gastrointestinal Wellbeing: A Randomized  Crossover  Trial. Nutrition Journal .2014; 13(76): 1-9.
17. KabirAUl et  al .  Anti-Hyperglycemic
Activity  Of  Centella  asiaticais  Partly Mediated  By  Carbohydrase  Inhibition And Glucose-Fiber Binding. BMC
Complementary and Alternative Medicine . 2014; 14(31):1-14. 18. Chandalia  M et  al .  Beneficial  of  High Dietary Fiber Intake in Patient with Type 2 Diabetes and Hypercholesterolemia. N
Engl J Med . 2000;342(19):1392.
19. Ou S, K Kin-Chor, Y Li and L Fu. In Vitro Study  of  Possible  Role  of  Dietary  Fiber in  Lowering  Postprandial  Serum Glucose. J Agric Food Chem . 2001; 49: 1026-1029.
20. SavastanoDM et al . Effect of Two Dietary
Fibers  on  Satiety  and  Glycemic Parameters:  a  Randomized,  Double- Blind,  Placebo-Controlled,  Exploratory Study. Nutrition Journal .2014; 13(45): 1- 11.
21. Rimbawan  dan  Albiner  Siagian. Indeks Glikemik  Pangan .  Bogor:  Penebar
Swadaya.2004. 22. Itokindo.  Apa  itu  Glikemik  Indeks  (GI) dan  Manfaatnya.Manajemen  Modern
dan  Kesehatan  Masyarakat.  (Online). 2011.http://www.itokindo.org.  Diakses
26 Oktober 2014. 23. AstawanM. Tetap Sehat dengan Produk Makanan Olahan. Solo: Tiga Serangkai.2004. 24. KusnandarF.  Apa  yang  Dimaksud Indeks Glikemik?. (Online). 2010.http://itp.fateta.ipb.ac.id/id/index2.p hp?option=com_content&do_pdf=1&id= 140. Diakses 27 Februari 2014.
25. BalcombeJP,  Neal  DB,  Chad  S. Laboratory  Routines  Cause  Animal Stres. American Association for Laboratory Animal Science . 2004; 43(6): 42-51. 26. Guyton. Fisiologi Manusia dan Mekanisme  Penyakit. Petrus  Andrianto (Penerjemah).Edisi ke-3. Jakarta: EGC.2000.
Pengaruh Substitusi Sari Umbi Bit ( Beta vulgaris L . )  terhadap Kadar Kalium, Pigmen Betalain dan Mutu Organoleptik Permen Jeli
Fazanurivana Hanifan*, Amalia Ruhana**, Dwi Yuni Nur Hidayati***

## ABSTRAK
Salah  satu  masalah  kesehatan  yang  banyak  dijumpai  di  Indonesia  adalah  penyakit  kardiovaskular seperti hipertensi. Umbi bit merah  bermanfaat untuk menurunkan tekanan darah dan sebagai antioksidan. Pengolahan umbi bit merah menjadi permen jeli dapat digunakan sebagai alternatif makanan kudapan untuk mencegah  hipertensi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  substitusi  sari  umbi  bit  merah terhadap  kadar  kalium,  kadar  pigmen  betalain  serta    mengetahui  mutu  organoleptik  yang  meliputi  tekstur, warna,  rasa  dan  aroma  pada  permen  jeli.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  dengan rancangan acak lengkap (RAL). Perlakuan yang digunakan adalah sebagai berikut P0 (air 40 % dan gula 60 %), P1 (sari umbi bit 70 % dan gula 30 %), P2 (Sari umbi bit 60 % dan gula 40 %), P3 (Sari umbi bit 50 % dan  gula  50  %),  P4  (sari  umbi  bit  40  %  dan  gula  60  %).  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  ada  pengaruh signifikan antara penambahan sari umbi bit pada permen jeli terhadap kandungan kalium (p < 0,001) dan pigmen  betalain  (p  <  0,001),  dengan  kandungan  kalium  dan  pigmen  betalain  tertinggi  pada  perlakuan  P2 yaitu  sebesar  153,79  mg/100  g  dan  1,356  mg/100  g.  Kelompok  P3  merupakan  hasil  perlakuan  terbaik dengan  kadar  kalium  151,17  mg/100  g,  kadar  pigmen  betalain  1,288  mg/100  g,  serta  persentase  tingkat kesukaan panelis terhadap aroma (P3) 100 %, rasa (P3) 96 %, tekstur (P2 dan P3) 92 % dan warna (P2 dan P3) 96 %. Kesimpulan dari penelitian ini adalah permen jeli dengan substitusi sari umbi bit dan gula dapat meningkatkan kadar kalium dan pigmen betalain serta mutu organoleptik.
Kata kunci: Kalium, Mutu Organoleptik, Permen Jeli, Pigmen Betalain, Umbi Bit Merah.
Substitution Effect of Red Beet ( Beta vulgaris L . ) Juice to Potassium Concentration, Betalain Peigment,and Organoleptic Quality of Jelly Candy

## ABSTRACT
One  of  the  health  problems  that  are  encountered  in  Indonesia  is  cardiovascular  diseases,  such  as hypertension.  Red  beet  contains  a  lot  of  benefit  including  lowering  blood  pressure  and  plays  as  an antioxidant. Processing of red beets into jelly candy can be an alternative food to  prevent hypertension. This research aim was to know the influence of the substitution of red beet juice contains of potassium, betalain peigments and the organolepticquality (texture, color, taste, and aromatic) of jelly candy. The methods used was randomized complete desaign. The treatment groups were P0 (water 40 % and sugar 60 %), P1 (red beets juice 70 % and sugar 30 %), P2 (red beets juice 60 % and sugar 40 %), P3 (red beet juice 50 % and sugar  50  %),  and  P4  (red  beet  juice  40  %  and  sugar  60  %).  Results  showed  that  there  was  significant influence between the substitution of red beets juice in jelly candy on the potassium content (p < 0.001) and betalains  pigment  (p  <  0.01).  The  highest  potassium  content  (153.79  mg/100  g)  and  betalains  pigments (1.356 mg/100 g) were found in P2. Whereas the group P3 was the best treatment with potassium level was 151.17 mg/100 g, betalain pigments level was 1.288 mg/100 g and the percentage of panelist liking score were  aroma  (P3)  100  %,  taste  (P3)  96  %,  color  (P2  and  P3)  92  %  and  texture  (P2  and  P3)  96  %.  This research  concluded  that  jelly  candies  with  a  substitution  of  red  beets  juice  and  sugar  can  increase  the potassium concentration, betalain pigments and organoleptic quality.
Keywords : Betalain pigments, Jelly candy, Organoleptik, Potassium, Red beet.
* Program Studi Ilmu Gizi, FKUB
**Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya

## PENDAHULUAN
Kejadian  hipertensi  di  dunia  mencapai 33,1  %  dari  seluruh  kejadian  penyakit  yang ada.  Prevalensi  hipertensi  pada  penduduk umur lebih dari 18 tahun di Indonesia adalah sebesar  31,7  %  dan  terdapat  10  provinsi yang  memiliki  prevalensi  di  atas  angka nasional,  salah  satunya  adalah  provinsi Jawa Timur yang merupakan urutan tertinggi kedua  dengan  prevalensi  37,4  %  setelah provinsi  Kalimantan  Selatan  dengan prevalensi 39,6 %. 1
Hipertensi  adalah  arus  tekanan  darah sistolik ≥140 mmHg atau arus tekanan darah diastolik  ≥90  mmHg.    Hipertensi  sering disebut  dengan sillent  killer atau  pembunuh diam-diam  karena  penderita  hipertensi mengalami  kejadian  tanpa  gejala  selama beberapa  tahun  dan  kemudian  mengalami stroke atau gagal jantung fatal. 2
Umbi  bit  merupakan umbi yang tinggi antioksidan  karena  mengandung  pigmen betalain yang merupakan kombinasi  pigmen ungu  betacyanin  dan  pigmen  kuning betaxhanthin  yang  dapat  berfungsi  sebagai pewarna  alami. 3 Dari  penelitian  yang  ada, umbi  bit  diketahui  dapat  menurunkan tekanan darah seseorang dengan meminum 200 ml/ hari. Rata-rata tekanan darah sistolik menurun  11,48  mmHg  sedangkan  tekanan diastolik 5,75 mmHg. 4
Kalium  merupakan  ion  intraseluler  dan dihubungkan dengan mekanisme pertukaran natrium.  Peningkatan  asupan  kalium  dalam diet  telah  dihubungkan  dengan  penurunan tekanan  darah  karena  kalium  memicu natriuresis  yaitu  dapat  memicu  kehilangan natrium  lewat  urin. 5 Sementara  antioksidan yang terdapat dalam pigmen betalain adalah senyawa  yang  dapat  melindungi  sistem biologis dalam tubuh. Adanya stres oksidatif yaitu  ketidakseimbangan  antara  radikal bebas  dan  antioksidan  dalam  tubuh  dapat mengganggu  vasorelaksasi  dari  endotel yang dapat mengakibatkan adanya hipertensi. 6
Permen  jeli  adalah  salah  satu  bentuk makanan  olahan  dari  pendidihan  campuran gula  dan  air  atau  sari  buah  dengan  bahan pembentuk  gel  yang  berpenampilan  jernih transparan serta mempunyai tekstur dengan kekenyalan tertentu.  Pemanfaatan umbi  bit digunakan  sebagai  permen  jeli    karena permen  jeli  merupakan  makanan  ringan yang  praktis  dan  disukai  oleh  berbagai kalangan  masyarakat.  Selain  itu,  umbi    bit mengandung  kalium  dan  pigmen  betalain yang  bersifat  sebagai  antioksidan  sehingga permen jeli bit yang dihasilkan dapat menjadi permen  jeli  tinggi  kalium  dan  antioksidan yang  dapat  digunakan  sebagai  pengobatan alternatif untuk pasien hipertensi.
Pigmen  yang  terdapat  dalam  umbi    bit juga  dapat  memberikan  warna  ungu kemerahan  yang  akan  membuat  permen menjadi  menarik  tanpa  penambahan pewarna sintetis. 7,8 Pengujian terhadap mutu organoleptik  dilakukan  dengan  tujuan  untuk mengetahui  tingkat  kesukaan  konsumen terhadap permen jeli bit. 9
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh    substitusi  sari  umbi bit  terhadap  kadar  kalium,  pigmen  Betalain serta mutu organoleptik pada permen jeli bit.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  menggunakan  metode rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  25 sampel  dari  masing-masing  perlakuan dengan 5 kali pengulangan.  Perlakuan yang digunakan adalah:
P0= 40 % air : 60 % gula  pasir P1= 70 % sari umbi  bit : 30 % gula pasir P2 = 60 % sari umbi  bit : 40 % gula pasir P3= 50 % sari umbi  bit : 50 % gula pasir Variabel  independen  adalah  sari  umbi  bit dan  gula.  Sedangkan  variabel  dependen adalah  kadar  kalium,  pigmen  betalain  dan mutu  organoleptik.  Pembuatan  resep
permen  jeli  bit,  bahan  dikelompokkan menjadi dua bagian yaitu bahan A terdiri dari gelatin  dan  sari  bit  sedangkan  bahan  B terdiri  dari  gula  pasir,  sari  bit,  asam  sitrat, glukosa,  dan  vanili.  Setelah  umbi  diubah dalam  bentuk  sari,  langkah  selanjutnya adalah  dengan  mencampur  (bahan  A) hingga  larut  kemudian  disisihkan  terlebih dahulu.    Sari  bit  dengan  agar-agar  direbus kemudian bahan B dimasukkan secarabertahap  hingga  mendidih.  Adonan bahan A dan bahan B dicampur hingga suhu mencapai  90  °C.Larutan  dituang  kedalam cetakan  dan  didinginkan  pada  suhu  ruang selama  24  jam.  Uji  kalium  dan  uji  pigmen betalain dengan menggunakan uji spektrofotometer. Analisis statistik menggunakan software SPSS 16 dengan uji oneway  ANOVA  untuk  kadar  kalium  dan pigmen  betalain  serta  uji  Kruskall Wallisuntuk mutu organoleptik.

## HASIL

## Kandungan Kalium Permen Jeli Bit
Kadar kalium dari sampel bervariasi dari 68,131  mg  sampai  153,79  mg.  P2  memiliki kandungan  kalium  tertinggi  dibandingkan dengan  perlakuan  permen  jeli  bit  lainnya. Sementara  P0  memiliki  kandungan  kalium terendah. Hasil uji statistik one way ANOVA pada  tingkat  kepercayaan  95  %  (p  <  0,05) menunjukkan  bahwa  semakin  banyak proporsi  sari  umbi  bit  memberikan perbedaan  yang  signifikan  (p  <  0,001) terhadap kandungan kalium.

## Kandungan  Pigmen  Betalain  Permen  Jeli Bit
Kandungan  pigmen  betalain  berkisar antara  0  mg  hingga  1,351  mg.  P2  memiliki kandungan  pigmen  betalain  tertinggi sedangkan  P0  memiliki  kandungan  pigmen betalain  terendah.  Hasil  uji  statistik  Kruskal Wallis pada tingkat kepercayaan 95 % (p  < 0,05)  menunjukkan  bahwa  semakin  banyak
proporsi  sari  umbi  bit  memberikan perbedaan  yang  signifikan  (p  <  0,001) terhadap kandungan pigmen betalain.

## Mutu Organoleptik Permen Jeli Bit Aroma
Persentase tertinggi penerimaan panelis terhadap  aroma  permen  jeli  ditunjukkan pada  sampel  perlakuan  P3  yaitu  sebesar 100  %.  Sementara  persentase  penerimaan panelis  yang  terendah  ditunjukkan  pada sampel perlakuan P1 sebesar 84 %. Hasil uji statistik dengan tingkat kepercayaan 95 % (p <  0,05)  menunjukkan  bahwa  penambahan sari  umbi  bitdalam  pembuatan  permen  jeli tidak memberikan perbedaan yang signifikan (p = 0,063).

## Rasa
Persentase tertinggi penerimaan panelis terhadap  rasa  permen  jeli  ditunjukkan  pada sampel  perlakuan  P3  yaitu  sebesar  96  %.
Sementara  persentase  penerimaan  panelis yang  terendah  ditunjukkan  pada  sampel perlakuan P1 yaitu sebesar 48 %.
Hasil  uji  statistik  dengan  menggunakan Kruskal Wallis pada tingkat kepercayaan 95 %  (p  <  0,05)  menunjukkan  bahwa penambahan sari umbi bit dalam pembuatan permen  jeli  memberikan  perbedaan  yang signifikan (p < 0,001).

## Tekstur
Persentase tertinggi penerimaan panelis terhadap  tekstur  permen  jeli  ditunjukkan pada  sampel  perlakuan  P0  yaitu  sebesar 100  %.  Sementara  persentase  penerimaan panelis  yang  terendah  ditunjukkan  pada sampel  perlakuan  P1  dan  P4  yaitu  sebesar 60 %.  Hasil  uji  statistik  Kruskal  Wallis  pada tingkat  kepercayaan  95  %  (p  <  0,05) menunjukkan bahwa penambahan sari umbi bit  dalam  pembuatan  permen  jeli memberikan perbedaan yang signifikan (p = 0,010).

## Warna
Persentase tertinggi penerimaan panelis terhadap warna permen jeli ditunjukkan pada sampel  perlakuan  P0,  P2,  dan  P3  yaitu sebesar  96  %.  Sementara  persentase penerimaan panelis yang terendah ditunjukkan pada sampel perlakuan P4 yaitu sebesar  80  %.  Hasil  uji  statistik  dengan menggunakan  Kruskal  Wallispada  tingkat kepercayaan  95  %  (p  <  0,05)  menunjukkan bahwa  penambahan  sari  umbi  bitdalam pembuatan  permen  jeli  memberikan perbedaan yang signifikan (p = 0,010).

## Penentuan Taraf Perlakuan Terbaik
Kandungan  gizi  diberi  bobot  tertinggi yaitu  0,25  karena  memiliki  penilaian  yang lebih  terhadap  produk.  Bobot  rasa  0,2; tekstur  0,15;  warna  0,1;  aroma  0,05.  Nilai hasil  perlakuan  terbaik  didapatkan  dari perhitungan  nilai  efektifitas  masing-masing perlakuan.  Sehingga  diperoleh  hasil  yang ditunjukkan  pada  Gambar  2  dengan perlakuan  terbaik  dari  permen  jeli  bit berdasarkan  kandungan  kalium,  pigmen betalain,  dan  mutu  organoleptik  adalah  P3.
Tabel 1. Perbandingan kadar kalium dan pigmen betalain Mutu gizi P0 P1 P2 P3 P4 Kailum 68,131 139,07  153,79  151,17  146,61 Pigmen Betalain 0,000 1,044 1,351 1,306 1,238
Gambar 1. Penilaian mutu organoleptik permen jeli bit
P0 P1 P2 P3 P4 Suka 92 84 88 100 88 Tidak Suka 8% 16 % 12 % 0% 12 % 0% 25% 50% 75% 100% Per sen tase Aroma P0 P1 P2 P3 P4 Suka 92% 48% 84% 96% 88% Tidak Suka 8% 52% 16% 4% 12% 0% 25% 50% 75% 100% Per sen tase Rasa P0 P1 P2 P3 P4 Suka 10060%92%92%60% Tidak Suka 0% 40% 8% 8% 40% 0% 25% 50% 75% 100% Per sen tase Tekstur P0 P1 P2 P3 P4 Suka 96% 92% 96% 96% 80% Tidak Suka 4% 8% 4% 4% 20% 0% 25% 50% 75% 100% Per sen tase Warna
0,5 0,41763076 0,72526806 0,82623624 0,52278074 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 P0 P1 P2 P3 P4 NH
Gambar 2. Penilaian perlakuan terbaik permen jeli bit (Tambahkan figure legend)

## PEMBAHASAN
Kandungan Kalium pada Permen Jeli Bit Rata-rata kandungan kalium permen jeli pada  masing-masing  taraf  perlakuan berkisar antara 68,131–153,79 mg. Kandungan  kalium  dalam  sari  umbi  bit hampir  menyerupai  kadar  kalium    dalam pisang  sebesar    435  mg/100  g  Sedangkan kalium  dalam  sari  umbi  bit  adalah  434,656 mg/100  g. 10 Terjadinya  naik  turun  kadar kalium  pada  keseluruhan  perlakuan  dapat dipengaruhi  oleh  faktor-faktor  selama pengolahan  permen  jeli.  Faktor-faktor  yang perlu diperhatikan antara lain seperti jumlah dan jenis bahan yang digunakan, kecepatan mengaduk,  waktu  perebusan,  suhu,    serta metode penyimpanan.
Lama pemasakan yang berbeda-beda di setiap  perlakuan  disebabkan  karena konsentrasi  gula  dan  jumlah  air  yang ditambahkan dalam pembuatan permen jeli. Penggunaan  air  dalam  jumlah  yang  tepat mempengaruhi  efisiensi  proses  pemasakan dan  penggunaan  energi.  Jadi  diharapkan proses  pemasakan  bisa  dilakukan  dengan suhu  rendah  dengan  waktu  yang  lebih singkat. Semakin sedikit air yang digunakan maka  proses  pemasakan  semakin  cepat meskipun  dengan  menggunakan  suhu rendah. 11
Suhu  berhubungan  dengan  daya  larut gula  dalam  pembuatan  permen.  Kekentalan dari  sukrosa  berbanding  lurus  dengan konsentrasi dan berbanding terbalik dengan suhu.  Kekentalan  sangat  berpengaruh terhadap tekstur produk yang dihasilkan. 12 Pada sampel P1 memiliki kandungan air yang  paling  banyak  yang  berpengaruh terhadap  pemasakan  permen  jeli  semakin lama  dalam  mencapai  suhu  yang  sesuai. Proses  pemanasan  dapat  menyebabkan penurunan  kadar  kalium  sehingga  kadar kalium pada sampel memiliki nilai terendah. Hal  ini  didukung  oleh  penelitian,  bahwa proses  pemanasan  dengan  perebusan menyebabkan penurunan kadar kalium lebih banyak  apabila  dibandingkan  dengan pengukusan. 13

## Kandungan Pigmen Betalain Permen Jeli Bit
Rata-rata  kandungan  pigmen  betalain permen  jeli  pada  masing-masing  taraf perlakuan  berkisar  antara  0–1,351  mg.  Sari umbi bit yang ditambahkan pada permen jeli memiliki  kandungan  pigmen  betalain sebesar  55,447  mg,  sedangkan  gula  tidak memiliki  kandungan  pigmen  betalain. Semakin  banyak  penambahan  proporsi  sari umbi  bit  maka  kandungan  pigmen  betalain pada permen jeli semakin meningkat.
Betalain  sangat  rentan  terhadap  panas dengan suhu optimal pemanasan ±65 °C. 14
Kandungan betalain umbi bit merah sebesar 127,62  mg/  100  g. 15 Kandungan  betalain dalam  sari  umbi  bit  merah  lebih  kecil  jika dibandingkan dengan umbi bit merah. Hal ini karena  dalam  proses  pembuatan  sari  umbi bit  merah  dengan juicer masih  banyak betalain yang tertinggal pada ampas. Hal ini ditandai  dengan  adanya  warna  merah  dari ampas tersebut.
Paparan    cahaya  juga  dapat mempengaruhi  penurunan  kadar  betalain pada permen jeli bit.  Peningkatan intensitas cahaya  berdampak  pada  degradasi  warna sirup bit merah yang semakin besar. 15 Hal ini serupa  dengan  pendapat  Azeredo  dkk (2007),  bahwa  degradasi  betasianin  akan meningkat  dengan  meningkatnya  paparan cahaya 16 .  Lama  penyinaran  menyebabkan stabilitas  betasianin  semakin  menurun  dan meningkatkan  kerusakan  betasianin.adanya absorbsi  cahaya  menyebabkan  bagian ikatan rangkap dalam betalain akan terputus, sehingga intensitas warna menurun.
Penggunaan sari umbi bit dalam jumlah banyak  pada  sosis  daging  sapi,  akan meningkatkan aktivitas antioksidannya. 17 Hal ini  disebabkan  karena  pigmen  betalain dalam  umbi  bit  merupakan  senyawa antioksidan. Kandungan betasianin sebanyak 5,7 mg/ 100 g memiliki antioksidan sebanyak 13 %. 18 Mutu Organoleptik Aroma Persentase penerimaan panelis terhadap  aroma  permen  jeli  bit  berkisar antara  84-100  %  dengan  persentase tertinggi  pada  P3  dan  terendah  pada  P1. Semakin  banyak  sari  umbi  bit  yang ditambahkan,  aroma  cenderung  berbau tanah.  Petriana  dkk  (2012),  berpendapat mengenai penambahan sari umbi bit dengan konsentrasi  2,5-12,5  %  dalam  pembuatan sirup  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi
konsentrasi  sari  umbi  bit  merah  yang ditambahkan,  semakin  tidak  disukai  oleh panelis. 15 Hal ini disebabkan karena adanya aroma yang berbau tanah. 19
Rasa Persentase penerimaan panelis terhadap rasa permen jeli bit berkisar antara 48-96  %  dengan  persentase  tertinggi  pada
P3  dan  terendah  pada  P1.  Pada  perlakuan P3 memiliki penerimaan tertinggi disebabkan oleh rasa manis selain ditimbulkan dari gula juga  berasal  dari  umbi  bit  sehingga  pada sampel  tersebut  rasa  disukai  oleh  panelis karena komposisi perbandingan yang sesuai antara gula dan sari umbi bit.
Semakin  banyak  sari  umbi  bit  yang ditambahkan,  penerimaan  terhadap  rasa semakin rendah. Hal ini membuktikan bahwa bau  tanah  mempengaruhi  rasa  yang terdapat  pada  permen  jeli  bit.  Berdasarkan penelitian  Wahyuni  (2011)  menyatakan bahwa  semakin  banyak  penambahan  kulit buah  naga  super  merah  memperoleh persentase  kesukaan  terendah. 20 Hal  ini disebabkan  karena  masih  ada  rasa  langu yang  terdapat  pada  kulit  buah  naga  super merah.

## Tekstur
Persentase  penerimaan  terhadap tekstur permen jeli bit tertinggi pada P2 dan P3  yaitu  92  %,  sedangkan  persentase terendah pada perlakuan P1 yaitu 60 %. Hal ini  menunjukkan  bahwa  panelis  tidak menyukai produk yang lembek. Tekstur yang lembut  atau  lembek  karena  tingginya kandungan air dalam produk.
Berdasarkan  penelitian  (Hasniarti, 2012)  menyatakan  bahwa  semakin  rendah sari  buah  yang  ditambahkan  pada  permen jeli  maka  persentase  penerimaan  terhadap tekstur  permen  jeli  semakin  tinggi. 8 Hal  ini disebabkan  karena  konsentrasi  gula  yang tinggi berpengaruh pada efisiensi pemasakan yang lebih cepat.

## Warna
Presentase  tertinggi  permen  jeli  bit adalah  P2  dan  P3  yatu  sebesar  96  %. Sementara presentase terendah P4 yaitu 80 %.  Hal  ini  disebabkan  karena  gula  yang dibentuk  atau  saat  dipanaskan  membentuk karamelisasi  sehingga  menghasilkan  warna yang lebih gelap daripada penambahan sari umbi bit yang banyak. Hal ini didukung oleh Koswara  (2009)  bahwa  pembentukan karamel  dapat  membantu  mempertajam warna produk. 21
Berdasarkan penelitian Wahyuni (2011) menunjukkan  bahwa  semakin  sedikit penambahan  kulit  buah  naga  super  merah pada  permen  jeli  maka  memiliki  persentase kesukaan  tertinggi. 20 Hal  ini  disebabkan karena  warna  permen  jeli  dengan penambahan kulit buah naga merah dengan persentase  rendah  memiliki  warna  merah bening.

## Penentuan Taraf Perlakuan Terbaik
Sampel  yang  memiliki  nilai  perlakuan terbaik adalah sampel P3 hal ini disebabkan karena  adanya  komposisi  yang  seimbang antara  pemberian  sari  umbi  bit  dan  gula sehingga  secara  keseluruhan  memiliki  nilai tertinggi  oleh    panelis  diikuti  dengan kandugan kalium dan  pigmen  betalain  yang tinggi.      Sementaranilai  perlakuan  terendah adalah  sampel  P1.  Hal  ini  dikarenakan penilaian  panelis  terhadap  produk  yang rendah juga memiliki kandungan kalium dan betalain yang paling rendah.

## Implikasi terhadap Bidang Gizi
Menurut  segi  kandungan  gizi  kalium, kandungan kalium  pada  sampel  permen  jeli paling  banyak  memiliki  kandungan  153,79 mg/100 g setara dengan 3 buah permen jeli. Untuk  memenuhi  target  sumber  kalium  (10 % AKG) jumlah permen jeli bit yang harus di konsumsi  adalah  sebanyak  305,6  gram permen  jeli  bit.  Apabila  1  buah  permen  jeli memiliki berat sekitar 38,4 gram, maka untuk
memenuhi  target  tersebut,  seseorang  harus mengkonsumsi  8  buah  permen  jeli  atau 307,2 gram.
Keterbatasan Penelitian Kurangnya kontrol waktu dan pengadukan pada saat perebusan sari umbi bit sehingga akan mempengaruhi pemerataan suhu dalam adonan permen jeli bit.  Selain  itu,  juga  pengaruh  kurangnya kontrol  penyimpanan  pada  saat  umbi  bit sebelum  diproses  dan  saat  pendinginan permen  jeli.  Sehingga  umbi  bit  mengalami oksidasi sehingga kandungan betalain dalam permen  jeli  berkurang.    Warna  yang dihasilkan  pada  permen  jeli  tidak  terlalu bening  karena  tidak  dilakukan  penyaringan terlebih  dahulu  sebelum  adonan  permen dimasukkan ke dalam cetakan.

## KESIMPULAN
Terdapat  pengaruh  positif  antara penambahan  sari  umbi  bit  dengan kandungan kalium dan pigmen betalain serta mutu organoleptik pada permen jeli bit.

## SARAN
Berdasarkan  hasil  yang  didapat  dari penelitian  ini,  maka  disarankan  pada penelitian selanjutnya untuk mengukur kadar gula, mutu fisik serta pengaruh penyimpanan terhadap  kandungan  kalium  dan  betalain dari  permen  jeli  bit.    Selain  itu,  dapat diberikan  bentuk  olahan  lain  dari  bit  yang dapat  mempertahankan  kandungan  kalium dan betalain agar tetap tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Riset  Kesehatan  Dasar.  Jakarta:  Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan,  Departemen  Kesehatan, Republik Indonesia. 2007.
2. Aisyiyah  FN.  Faktor  Resiko  Hipertensi pada  Empat  Kabupaten/Kota  dengan Prevalensi  Hipertensi  Tertinggi  di  Jawa dan Sumatera . Skripsi. Bogor: Departemen  Gizi  Masyarakat  Institut Pertanian Bogor.2009. 3. Yenawaty  L.  Pengaruh  Suhu  dan  Batas
Waktu  Penggorengan  terhadap  Aktivitas Antioksidan  “Snack  Mie  Pelangi”  yang Disuplementasi  dengan  Sawi  Hijau ( Brassica  juncea ),  Bit  ( Beta  vulgaris ), Kunyit ( Curcuma domestica val.). Skripsi. Semarang:  FakultasTeknologi  Pertanian Universitas Katolik Soegijapranata. 2011.
4. Halim  SS.  Pengaruh  Jus  Beet (Beta vulgaris  L.) terhadap  Tekanan  Darah. Skripsi.    Bandung:  Fakultas  Kedokteran Universitas Kristen Marantha. 2011.
5. Kerry  J  and  D  Ledward. Meat Processing . New York: CRC press. 2001.
6. Barasi M. Nutrition at a Glance .  Hermin (Penerjemah). Jakarta: Penerbit Erlangga. 2009. Hlm 52. 7. Maslachah  dkk.  Hambatan  Produksi
Reactive  Oxygen  Species  Radikal
Superoksida  (O 2- )  oleh  Antioksidan
Vitamin  E  (α-  tocopherol)  padaTikus Putih (Rattus norvegicus) yang Menerima Stressor Renjatan Listrik. Media Kedokteran Hewan . 2008; 24(1). 8. Hasniarti.  Studi  Pembuatan  Permen Buah  Dengen (Dillenia  serrata Thumb .). Skripsi.  Makassar:  Jurusan  Teknologi
Pertanian Universitas Hasanuddin. 2012.
9. Mastuti.  Identifikasi  Pigmen  Betasianin Pada  Beberapa  Jenis  Inflorescence Celosia . Jurnal Biologi Universitas Gajah
Mada . 2010. 10. Triyastuti.  Pengaruh  Konsumsi  Pisang
Ambon (Musa  paradisiaca S ) terhadap Tekanan  Darah  Lansia  Penderita
Hipertensi Sedang di Panti Sosial Tresna Werdhasabai  Nanaluihsi  cincin . Skripsi. Padang:  Pogram  Studi  Ilmu Keprawatan Fakultas Kedokteran Universitas Andalas. 2012. 11. Safitri AA. Studi Pembuatan Fruit Leather Mangga-Rosella. Makassar:Fakultas Pertanian Universitas Hasanudin. 2012. 12. Purba AS. Pengaruh Variasi Konsentrasi Sukrosa  terhadap  Kualitas  Permen  Jelly
Daun Pepaya (Carica papaya L. ). Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Teknobiologi Program  Studi  Biologi.Universitas  Atma Jaya. 2011. 13. Pambudi ND. Pengaruh Metode Pengolahan  terhadap  Kelarutan  Mineral Keong  Mas  dari  Perairan  Situ  Gede Bogor . Skripsi.  Bogor:  Program  Studi Teknologi  Hasil  Perairan.  Fakultas Perairan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut Pertanian Bogor. 2011.
14. Willianto  J.  Stabilitas  Antioksidan  dari
Ekstrak  Bit  Merah (Beta  vulgaris) terhadap  pH  dan  Suhu . Skripsi.
Tangerang:  Fakultas  Teknologi  Industri Program  Studi  Teknologi  Pangan Universitas Pelita Harapan. 2011. 15. Petriana  G,  Lydia  NL,  Yohanes  M. Pengaruh  Intensitas  Cahaya  terhadap Degradasi  Warna  Sirup  yang  Diwarnai Umbi  Bit  Merah (Beta  vulgaris  L.  Var. rubra  L.). Salatiga:  Program  Studi  Kimia, Fakultas  Sains  dan  Matematika. Universitas  Kristen  Satya  Wacana. 2012.
16. Azeredo  HMC,  AN  Santos,  ACR  Souza, kcb  Mendes,  MIR  Andrade.  Betacyanin Stability  during  Processing  and  Storage of    Microencapculated  Red  Beet  root Extract. American  Journal  of  Food Technology . 2000; 2(4):307-312.
17. Winanti  ER,  Andriani  EN.  Pengaruh
Penambahan Bit (Beta vulgaris) sebagai Pewarna  Alami  terhadap  Karakteristik Fisikokimia  dan  Sensori  Sosis  Daging . Jurusan  Teknologi  Hasil  Pertanian Fakultas  Pertanian  Universitas  Sebelas Maret. 2013.
18. Saneto B. Karakterisasi Kulit Buah Naga Merah (H polyrhizus) . Jurnal Teknosains Pangan . 2013; 2(4).
19. Tomezak  D  Wand  Zielinska.  Effect  of Fermentation  Conditions  on  Red  Beet
Leaven  Quality. Polish  Journal  of  Food and  Nutrition  Science .  2006;  15(4):436- 444. 20. Wahyuni  R.  Pemanfaatan  Kulit  Buah Naga Super Merah (Hylicereus costaricensis) sebagai Sumber Antioksidan  dan  Pewarna  Alami  pada Pembuatan  Jelly. Jurnal  Teknologi Pangan . 2011; 2(1):68-85.
21. Koswara  S.  Teknologi  Pembuatan Permen . (Online). 2009. http://eBookPangan.com.
Pengaruh Ion Asing terhadap Kinerja Elektroda Selektif Ion Metanil Yellow Berbasis Aliquat 336-Kitosan sebagai Carrier Membran serta Aplikasinya pada Sampel Tahu
Bheta Sari D*, Atikah**, Hermin Sulistyarti**

## ABSTRAK
Elektroda  selektif  ion  (ESI)  metanil  yellow  tipe  kawat  terlapis  telah  dibuat  menggunakan  bahan  aktif aliquat  336-kitosan,  bahan  pendukung  campuran  polivinilklorida  (PVC),  dan  pemlastis  dioktiloftalat  (DOP) dengan  perbandingan  aliquat  336:kitosan:PVC:DOP  =  0,5%:5  %:34,5  %:60%  b/b  dilarutkan  dalam  pelarut tetrahidrofuran  (THF)  (1:3  b/v).  Namun,  ESI  ini  belum  diuji  selektifitasnya.  Maka,  pada  penelitian  ini  ingin diketahui  pengaruh  ion  asing  terhadap  kinerja  ESI  metanil  yellow  tipe  kawat  terlapis  bermembran  aliquat 336-kitosan  serta  aplikasinya  pada  sampel  tahu.  Pengaruh  ion  asing  ditentukan  dengan  menentukan koefisien selektivitas (K i,j ) membran dengan metode larutan tercampur. Larutan yang diukur mengandung ion utama metanil yellow dengan rentang konsentrasi 10 -5 –10 -2 M dan ion asing benzoat (C 7 H 5 O 2- ), klorida (Cl - ), dan asetat (CH 3 COO - )dengan konsentrasi tetap 10 -3 M. Hasil penelitian menunjukkan keberadaan ion asing C 7 H 5 O 2- , Cl - , CH 3 COO - tidak mempengaruhi kinerja ESI yang ditunjukkan oleh nilai K i,j kurang dari 1, dengan urutan  selektivitas  C 7 H 5 O 2- >CH 3 COO - >Cl - .  Aplikasi  pada  penentuan  kadar  metanil  yellow  secara potensiometri  menggunakan  ESI  metanil  yellow  tipe  kawat  terlapis  berbasis  aliquat  336-kitosan  hasilnya dibandingkan dengan metode standar spektrofotometri menggunakan uji-t dengan tingkat kepercayaan 90% menunjukkan  hasil  tidak  berbeda  secara  bermakna,  sehingga  ESI  ini  dapat  digunakan  sebagai  metoda alternatif untuk pengukuran kadar metanil yellow dalam tahu.
Kata kunci: Aliquat 336, Elektroda selektif ion metanil yellow, Ion asing, Kitosan,Validasi.

## The Influence of Interfering Ions to The Performance of Coated Wire Methanyl Yellow Ion Selective Electrode (MY-ISE) Based on Chitosan Membrane and Its Application in Tofu Sample

## ABSTRACT
Coated  wire  methanyl  yellow  ion  selective  electrodes  (MY-ISE)  was  prepared  using  active  material aliquat 336-chitosan, supporting material of a mixture of polyvinylchloride (PVC) and dioctylphtalate (DOP) with ratio of aliquat 336:chitosan:PVC:DOP = 0.5%:5%:34.5%:60% dissolved in THF (1:3 b/v). However, the selectivity of MY-ISE has not been studied. Therefore, this research was conducted to learn the influence of interfering ions to the performance of MY-ISE and its application to the determination of methanyl yellow in tofu. The influence of interfering ions was done by determining the selective coefficients (K i,j ) membrane with a mixed solution method, containing the primary ion metanil yellow with concentration range 10 -5 –10 -2 M and interfering ions of benzoate (C 7 H 5 O 2- ), chloride (Cl - ), and acetate (CH 3 COO - )with fixed concentration of 10 -3 M. The results indicated that methanyl yellow ISE performance was not affected by the choosen interfering ions  shown  by  K i,j value  of  less  than  1,  with  sequence  selectivity  of  C 7 H 5 O 2- >CH 3 COO - >Cl - .  The  results obtained from the application of MY-ISE on the determination of methanyl yellow ion in tofu were compared to the standard method spectrophotometry using statistical t-student test with level of confidence 90%, and showed no significant difference with those resulted from standart method spectrophotometry. So, MY-ISE can be used as an alternative method for the measurement of methanyl yellow in tofu.
Keywords: Aliquat 336,Chitosan, Interfering ions, Methanil yellow ion selective electrodes, Validation.
* Program Studi Farmasi, FKUB ** Jurusan Kimia, Fakultas MIPA UB

## PENDAHULUAN
Metanil yellow adalah pewarna sintesis golongan senyawa azo (warna tar batubara), yang digunakan secara luas untuk mewarnai bahan  makanan  yang  berbeda  di  banyak negara  berkembang  meskipun  dilarang penggunaannya  menurut  peraturan  Menteri Kesehatan  Nomor  1168/Menkes/PER/1999. Metanil  yellow  berbahaya  bagi  kesehatan dan menyebabkan kerusakan irreversibel . 1
Metode  analitis  metanil  yellow  secara kuantitatif untuk metanil yellow dalam bahan makanan  adalah  metoda  spektrofotometri sinar  tampak.  Untuk  analisis  rutin, sederhana,  cepat  dan  biaya  yang  efektif metode  spektrofotometri  terlihat  diperlukan. Meskipun  metode  spektrofotometri  memiliki akurasi  yang  tinggi,  metode  ini  memerlukan pereaksi,  instrumentasi  yang  mahal  dan tenaga ahli untuk mengoperasikannya. 2 Oleh karena itu, perlu diciptakan alat analisis yang murah,  cepat,  tidak  perlu  tenaga  ahli  untuk mengoperasikannya  dan  memenuhi  akurasi dan  presisi  yang  tinggi.  Pada  penelitian  ini digunakan  metode  sensor  potensiometri menggunakan  elektroda  selektif  ion  (ESI) metanil  yellow  bermembran  aliquat  336- kitosan  sebagai  sensor  ionnya  untuk mendeteksi metanil yellow.
Pada  penelitian  sebelumnya  ESI metanil  yellow  telah  dibuat  menggunakan aliquat  336  0,5  %:kitosan  5  %:PVC  34,5
%:DOP  60  %.  Harga  faktor  Nernst  yang dihasilkan  59,68  mV/dekade  konsentrasi, rentang  konsentrasi10 -5 –10 -2 M,  waktu perendaman  selama  25  menit  dengan  limit deteksi  0,929.10 -5 M  (3,487  ppm),  waktu respon  50  detik  dan  usia  pakai  membran selama  7  hari.  Sebelumnya  juga,  telah  diuji pH  dan  suhu  dan  didapatkan  kondisi optimum  pada  pH  6-7  dan  suhu  25–30 0 C. Namun,  ESI  metanil  yellow  ini  belum  diuji terhadap keberadaan ion asing.
Ion  asing  adalah  ion  selain  ion  utama yang  telah  ditentukan  dan  terdapat  dalam larutan sampel sehingga dapat mempengaruhi  pengukuran  potensial  sel. 3
Ion  asing  yang  diteliti  pengaruhnya  dalam penelitian ini antara lain ion asetat (CH 3 COO - ), ion klorida (Cl - ) dan ion benzoat (C 7 H 5 O 2- ). Ion-ion tersebut merupakan bahan tambahan yang biasa terdapat dalam makanan seperti tahu  yang  dapat  mengganggu  pengukuran ion metanil yellow. Ion asetat (CH 3 COO - ) dan ion  benzoat  (C 7 H 5 O 2- )  yang  diteliti merupakan bahan pengawet pada makanan, sedangkan  ion  klorida  (Cl - )  merupakan bahan  perasa  pada  makanan.  Pemiihan konsentrasi  ion-ion  tersebut  digunakan konsentrasi ion tetap sebesar 10 -3 M.
Tahu  merupakan  suatu  produk  yang terbuat  dari  hasil  penggumpalan  protein kedelai.  Tahu  dikenal  masyarakat  sebagai makanan sehari-hari yang umumnya sangat digemari serta mempunyai daya cerna yang tinggi.  Banyak  penjual  yang  menambahkan bahan tambahan lain di dalam tahu tersebut, baik  yang  dilarang  maupun  yang  tidak dilarang. Pewarna metanil yellow merupakan bahan  tambahan  makanan  pada  tahu  yang dilarang  atau  tidak  boleh  ada  dalam makanan (0 ppm) menurut peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1168/Menkes/PER/1999.
Validasi  merupakan  konfirmasi  melalui pengujian dan pengadaan bukti yang objektif bahwa  persyaratan  tertentu  untuk  tujuan khusus  dipenuhi.  Hasil  uji  yang  absah apabila  hasil  validasinya  diperoleh  akurasi (ketepatan)  dan  presisi  (kecermatan)  yang baik.  Akurasi  dinyatakan  dengan  nilai recovery yang  dihitung  dari  kadar  terukur dibagi dengan kadar diketahui dikalikan 100 %, jika nilainya berada pada rentang 90-110 %  maka  metode  ini  dikatakan  baik.  Presisi metode  analisis  dihitung  berdasarkan coefficient  of  variation (CV)  yang  dihitung dari  simpangan  baku  dibagi  nilai  rata-rata dikalikan 100 %, jika nilainya kurang dari 2 % maka metode ini presisinya baik. Metode uji memegang  peranan  yang  sangat  penting dalam  memperoleh  hasil  uji  dengan  akurasi
dan  presisi  tinggi. 5 Oleh  karena  itu,  tujuan penelitian  ini  adalah  melakukan  validasi metode  ESI  metanil  yellow  untuk  pengujian kadar  metanil  yellow  dalam  tahu.  Lalu dilakukan  uji  t  (keberartian)  dilakukan  untuk mengetahui  apakah  kedua  metode  tidak memiliki  perbedaan  yang  nyata.  Hipotesis nol  (H 0 )  menyatakan  bahwa  kedua  metode memberikan  hasil  yang  sama  atau  tidak berbeda nyata.

## BAHAN DAN METODE
Prosedur  Pembuatan  ESI  Metanil  Yellow Tipe Kawat Terlapis Berbasis Aliquat 336- Kitosan
Dari  penelitian  sebelumnya,  didapatkan kondisi optimum yang terdiri dari aliquat 336
0,5 %:kitosan  5 %:PVC  60 %:DOP  34,5 %. Proses  awal  yang  dilakukan  adalah mengekstraksikan  aliquat  336  Cl  dengan larutan  baku  metanil  yellow  sampai  didapat aliquat  336  metanil  yellow  lalu  dicampur dengan  kitosan,  pemlastis,  kemudian ditambah  pelarut  THF  3  ml  dengan perbandingan berat komposisi membran:volume  THF  =  1:3.  Setelah  itu, ditambahkan  PVC  sedikit  demi  sedikit.
Selanjutnya,  diaduk  dengan  pengaduk magnetik  selama  3  jam  sampai  diperoleh larutan  yang  homogen  dan  tidak  terdapat gelembung  udara.  Pelapisan  membran dilakukan dengan mencelupkan ujung kawat platina  ke  dalam  larutan  membran  sampai larutan  membran  menempel  dan  melapisi seluruh  permukaan  kawat  platina.  Proses pencelupan  elektroda  tersebut  dilakukan beberapa  kali  sehingga  diperoleh  membran yang tipis dan merata. Elektroda yang telah terlapisi  membran  dikeringkan  pada  suhu ruang  (25 o C)  dan  dipanaskan  dalam  oven suhu  50 o C  selama  12  jam  agar  ketahanan membran  meningkat.  Setelah  dioven, elektroda didinginkan pada suhu ruang.
Pengaruh Ion Asing terhadap Kinerja ESI Metanil  Yellow  Tipe  Kawat  Terlapis Berbasis Aliquat 336-Kitosan Penentuan koefisien selektivitas menggunakan  metode  larutan  tercampur yang  dilakukan  dengan  mengukur  potensial larutan yang mengandung ion utama metanil yellow  pada  rentang  konsentrasi  linier  yang telah  ditentukan  sebelumnya  yaitu  pada larutan  metanil  yellow  10 -5 –10 -2 M.
Selanjutnya  dilakukan  pula  pengukuran potensial  larutan  metanil  yellow  10 -5 –10 -2 M dengan  penambahan  larutan  natrium  asetat (NaCH 3 COOH),  garam  (NaCl),  natrium benzoat  (C 7 H 5 O 2 Na)  yang  masing-masing mengandung  ion  pengganggu  (NaCH 3 COO - 10 -3 M,  Cl - 10 -3 M  dan  C 7 H 5 O 2- 10 -3 M)  dan ditambah  akuades  sampai  volume  total  50 ml.  Kemudian  dilakukan  pengukuran sebanyak  3  kali  pengulangan.  Potensial yang diperoleh dari hasil pengukuran larutan yang  hanya  mengandung  ion  utama  saja maupun  dengan  penambahan  ion  asing disubstitusikan dalam suatu persamaan dan dibuat  kurva  hubungan  antara  -log  [metanil yellow] dengan K I,j , jika K I,j > 1 maka ESI metanil  yellow  lebih  merespon  secara selektif ion asing daripada ion metanil yellow sendiri,  yang  berarti  ion  asing  tersebut mengganggu kinerja ESI metanil yellow.

## Aplikasi  ESI  Metanil  Yellow  Tipe  Kawat Terlapis Berbasis Aliquat 336-Kitosan
Sampel  dicuci  atau  dibersihkan  dari pengotornya. Lalu ditimbang 1 gram sampel dan  dilarutkan  dalam  10  ml  aquades  dan dikocok  dengan  vortex  selama  30  menit. Kemudian,  larutan  sampel  disaring.  Diambil 0,5  ml  filtrat  dalam  tabung  dan  tambahkan dengan  aquades  sampai  3  ml.  Lalu ditambahkan  50  µL  HCl  1  N  sampai terbentuk  warna  merah  muda. 5 Hasilnya dibandingkan dengan metode spektrofotometri  sinar  tampak.  Data perhitungan diuji t untuk mengetahui apakah kedua  metoda  berbeda  secara  bermakna atau tidak.

## HASIL
Pengaruh Ion Asing terhadap ESI Metanil Yellow Berbasis Aliquat 336-Kitosan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  sebelumnya  telah  diukur  ion metanil  yellow  tanpa  ion  asing  yang menunjukkan  faktor Nernst 59,7 mV/dekade yang hampir mendekati faktor Nernst teoritis yaitu  59,2  mV/dekade.  Sementara  pada pengukuran  ion  metanil  yellow  dengan  ion asing  benzoat,  klorida  dan  asetat  juga menunjukkan Nernstian (Tabel 1).
Tabel  1.  Hasil  faktor  Nernst  ion  metanil yellow  tanpa atau dengan ion asing Penentuan Panjang Gelombang Maksimum  Dengan  Spektrofometri  Sinar Tampak Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  konsentrasi  metanil  yellow 10 -4 M.  Panjang  gelombang  maksimum dalam  penentuan  metanil  yellow  secara spektrofotometri  pada  pembentukan  ion metanil  yellow  (kuning-hijau)  memiliki absorbansi maksimum pada kisaran panjang gelombang pada sinartampak yaitu 400,0 nm dengan  nilai  absorbansi  0,272  sesuai dengan warna komplementernya (violet).
Gambar  1.  Profil  spektrum  dari  konsentrasi 10 -4 M
Pembuatan Kurva Baku dan Uji Linieritas Uji  linieritas  dilakukan  untuk  melihat adanya  hubungan  linier  antara  konsentrasi analit  dengan  respon  (serapan)  yang ditandai  dari  nilai  koefisien  korelasinya  (R 2 ) pada analisis regresi linier y = a + bx. Kurva linier  dapat  dilihat  pada  Gambar  2,  dengan persaman  garis  regresiy=  0,007x  +  0,052. Dapat  dibuktikan  dengan  nilai  koefisen korelasi  =  0.999  hampir  mendekati  1  yang berarti  menunjukkan  adanya  korelasi  positif antara konsentrasi dengan absorbansi. Nilai intersept  (a)  yang  kecil  menunjukkan kesalahan  metode  kecil.  Linieritas  berada pada 10 -6 –10 -4 M.
Gambar 2.  Kurva baku konsentrasi metanil yellow dengan metode spektrofotometri

## Pembuatan  Kurva  Baku  ESI  dan  Uji Linieritas
Sebelumnya telah diuji linieritas metode ESI  metanil  yellow  berbasis  aliquat  336- kitosan  yaitu  pada  10 -5 –10 -2 M.  Lalu  diplot pada  kurva  baku  (Gambar  3).Berdasarkan hasil  perhitungan  diperoleh  persamaan  y= 58,75x + 271,5.
Gambar  3.  Kurva  baku  metode  ESI  metanil yellow berbasis aliquat 336-kitosan

## PEMBAHASAN

## Pengaruh Ion Asing terhadap Kinerja ESI
Metanil  Yellow  Berbasis  Aliquat  336- Kitosan
Harga  koefisien  selektivitas  untuk semua  konsentrasi  ion  metanil  yellow  dari 10 -5 –10 -2 M  menghasilkan  harga  Ki,j  kurang dari  1.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa konsentrasi ion C 7 H 5 O 2- , Cl - CH 3 COO - 10 -3 M tidak  mengganggu  selektivitas  ESI  metanil yellow berbasis aliquat 336-kitosan. Hasilnya dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Koefisien  selektivitas  (K i,j )  ESI metanil  yellow  berbasis  aliquat  336-kitosan terhadap Ion C 7 H 5 O 2- , Cl - dan CH 3 COO -
Berdasarkan  nilai  K i,j pada  Tabel  2 maka  urutan  selektivitas  dari  ESI  metanil yellow  berbasis  aliquat  336-kitosan  dari  ion yang  paling  direspon  sampai  yang  kurang direspon  adalahC 7 H 5 O 2- >  CH 3 COO - >Cl - . Harga koefisien ESI metanil yellow berbasis aliquat  336-kitosan  dipengaruhi  oleh konsentrasi  ion  metanil  yellow.  Hal  tersebut
dikarenakan  perubahan  konsentrasi  ion metanil  yellow  dapat  mengubah  perubahan permitivitas  atau  konstanta  dielektrik  ( Ɛ ). Sehingga  harga  Ki,j  juga  mengalami perubahan  sesuai  dengan  konsentrasi metanil  yellow.  Pada  umumnya  harga koefisien selektivitas suatu ion dalam larutan tetap,  akan  tetapi  beberapa  diantaranya dapat  berubah-ubah  akibat  pengaruh konsentrasi  ion  di  dalam  larutan  dan kekuatan  interaksi  membran  ESI  terhadap ion utama dan ion pengganggu. Konsentrasi ion  pengganggu  berpengaruh  pada  harga koefisien  selektivitas.  Semakin  besar konsentrasi ion pengganggu. Semakin besar harga  koefisien  selektivitas,  semakin  besar gangguan  ion  pengganggu  terhadap  kinerja ESI.
Selektivitas  ESI  tergantung  pada  jari- jari  ion,  entalpi  hidrasi  dan  energi  bebas solvasi. Jari-jari ion berbanding lurus dengan hidrofobisitas  suatu  ion.  ESI  akan  lebih selektif  terhadap  ion  yang  lebih  hidrofobik. Sehingga  dengan  jari-jari  ion  yang  semakin besar  maka  hidrofobisitasnya  juga  semakin tinggi.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa,  jari-jari ion  utama  metanil  yellow  lebih  besar dibandingkan  dengan  ion  asing  sehingga menyebabkan ion metanil yellow lebih cepat mencapai  fasa  antar  muka  membran  dan mempermudah  difusi  ion-ion  dalam  lapisan rangkap  listrik  untuk  mengontrol  potensial Donnan antara membran dan larutan analit, sehingga  ion  asing  akan  ditolak  keluar  oleh membran.  Ion  metanil  yellow  lebih  berdifusi dengan membran  jika  dibandingkan dengan ion asing CH 3 COO - , C 7 H 5 O 2- dan Cl - . Urutan besar  jari-jari  ion  dari  yang  terbesar  hingga terkecil yaitu C 7 H 5 O 2- >CH 3 COO - > Cl - .
Selektivitas  ESI  juga  dipengaruhi entalpi  hidrasi  (∆H O )dan  energi  bebas standar (∆G O ) dari ion-ion yang disensornya. Entalpi  hidrasi  (∆H O )berbanding  lurus dengan  energi  solvasi  dan  harga  Ki,j,  yaitu semakin kecil entalpi hidrasi maka mobilitas ion  untuk  mencapai  fasa  antar  muka
membran semakin besar dan semakin cepat melewati lapis rangkap listrik sehingga akan mengontrol potensial Donnan. ∆H O
berbanding  terbalik  dengan  jari-jari  ion  dan berbanding  lurus  dengan  kuadrat  kerapatan muatan,  sehingga  semakin  besar  jari-jari suatu  ion  maka  ∆H O ion  semakin  kecil sedangkan jika kerapatan muatan suatu ion semakin besar maka akan mempunyai ∆H O yang semakin besar pula. Sementara energi solvasi  adalah  kemampuan  suatu  ion  untuk mengikat  molekul  air.  Semakin  kecil  harga energi  solvasi  maka  ion  tersebut  sedikit mengikat  air  dan  lebih  mengikat  pada  ion metanil yellow. 1
Ketika ESI metanil yellow dicelupkan ke dalam  larutan  analit,  terjadi  difusi  ion-ion dalam  lapisan  rangkap  listrik  sebagai potensial  Donnan  pada  fasa  antar  muka membran-larutan.  Ion-ion  akan  berdifusi melewati  bidang helmhoz luar  (OHP)  dan mengalami  pelepasan  kulit  hidrasinya.  Ion akan  semakin  sulit  terhidrasi  jika  jari-jari hidrasi kecil dan entalpi semakin positif, oleh karena itu laju difusinya semakin tinggi. Ion- ion  yang  telah  melepas  kulit  hidrasinya setelah melewati bidang OHP akan berdifusi menuju  ke  membran  melewati  bidang helmhoz dalam  (IHP).  Skema  lapis  rangkap listrik yaitu pada Gambar 4.
Gambar 4. Skema lapis rangkap listrik pada fasa   antar muka ESI metanil yellow
Dalam  membran  terdapat  gugus  HR dan berkedudukan tetap di dalam membran sebagai  gugus  penukar ion.  Pada  gugus ini terjadi  pertukaran  ion  metanil  yellow  dari membran  dengan  ion  metanil  yellow  dari larutan pada fasa antar muka. Ion CH 3 COO - , ion  C 7 H 5 O 2- ,  dan  ion  Cl - adalah  ion  kontra bagi membran. Ion hidrofobik dan berjari-jari paling  besar  akan  lebih  cepat  mencapai antar  muka  membran-larutan  dan  melewati lapis  rangkap  listrik  sehingga  akan mengontrol  potensial  Donnan.  Pada kesetimbangan  Donnan,  jumlah  anion  dan kation yang berdifusi ke dalam membran dan larutan  adalah  sama.  Selama  penukar  ion tetap  berada  pada  permukaan  membran, gugus  penukar  kation  akan  bermuatan negatif,  maka  anion  lain  yang  berada bersama-sama  dalam  larutan  sampel  akan ditolak  keluar  membran  sehingga  tidak berperan  sebagai  menimbulkan  potensial Donnan.  Selain  itu,  proses  ini  juga ditentukan  oleh  kemampuan  ion  dalam melampaui  energi  solvasi  agar  dapat menembus  bidang helmhoz. Ion  yang memiliki koefisien difusi besar akan berdifusi lebih cepat melewati lapis rangkap listrik dan mengontrol  potensial  Donnan  dibandingkan dengan  ion  yang  memiliki  koefisien  difusi lebih kecil. 1
Aplikasi  ESI  Metanil  Yellow  Berbasis Aliquat 336-Kitosan pada Sampel Tahu Berdasarkan hasil pengukuran konsentrasi  metanil  yellow  dalam  dua sampel  tahu  (A  dan  B)  dengan  metode potensiometri  dan  metode  spektrofotometri dapat  dilihat  pada  Tabel  3,  dapat  dilihat bahwa  presisi  kedua  metode  sangat  baik,
yaitu  mendekati  100%.  Namun,  akurasi kedua metode agak rendah, yaitu mendekati 90%  dan  metode  standar  mempunyai akurasi  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan metode potensiometri.
Tabel  3.  Perbandingan  hasil  pembacaan  sampel  tahudengan  metode  potensiometri  dan  metode spektrofotometri
Perbandingan penentuan kadar metanil yellow  dalam  sampel  tahu  A  dan  B  dengan spektrofotometer  sinar  tampak  dan  ESI metanil  yellow  berbasis  aliquat  336-kitosan ditunjukkan pada Tabel 3. Berdasarkan hasil uji  t  Uji-t  dengan  tingkat  kepercayaan  90%, diperoleh nilai t hitung untuk sampel tahu A dan B  sebesar  0,253  dan  1,542  yang menunjukkan  lebih  kecil  dibandingkan dengan  nilai  t tabel sebesar  2,132.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  metode  potensiometri memberikan hasil yang tidak berbeda secara bermakna  dengan  metode  spektrofotometri. Hal  tersebut  membuktikan  bahwa  metode potensiometri  dengan  menggunakan  ESI metanil  yellow  berbasis  aliquat  336-kitosan dapat  digunakan  sebagai  metode  alternatif selain  metode  standar  spektrofotometer sinar  tampak  dalam  menentukan  kadar metanil yellow dalam tahu.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa: Keberadaan  ion  asing  (C 7 H 5 O 2- ,  Cl - CH 3 COO - )10 -3 M  tidak  mengganggu  kinerja ESI  metanil  yellow  tipe  kawat  terlapis  pada rentang  10 -5 -10 -2 M  karena  nilai  K i,j yang
dihasilkan kurang dari 1. Urutan respon ESI metanil  yellow  dari  ion  yang  lebih  direspon sampai  yang  kurang  direspon  adalah C 7 H 5 O 2- > CH 3 COO - >Cl - . Metode ESI metanil yellow  dapat  digunakan  sebagai  metode alternatif  penentuan  kadar  metanil  yellow dalam sampel tahu

## DAFTAR PUSTAKA
1. Pratim  P,  Kaushik  S,  Panchali  T,  and Goutam  P.  Development  of  a  Visible Spectrophotometric  Method  for  the Quantitative  Determination  of  Metanil Yellow  in  Different  Food  Sample. International  Journal  of  Pharma  and  Bio Sciences . 2013; 4(2):685 – 692.
2. D’Angelo  et  al.  Rapid,  Sensitive,  Micro
Scale  Anion  Membranes.  Biionic Potensials with NO 3- - Cl - , NO 3- - Br - , Br - -Cl - Couples. J Phys Chem. 2001; 75:554-
561.
3. Wijanarko  A,  Atikah,  Fardiyah  Q. Pengaruh  Ion  Asing  terhadap  Kinerja
Elektroda  Selektif  Ion  (ESI)  Cd  (II)  Tipe
Kawat  Terlapis  Berbasis  D2EHPA  Serta Aplikasinya  pada  Penentuan  Kadar Kadmium  Dalam  Air  Sungai. Kimia Student Journal . 2013. 2(2):546-552.
4. Koswara  S. Teknologi  Pengolahan Kedelai  Menjadikan  Makanan  Bermutu .
Jakarta: Pustaka Sinar Harapan. 1995.
5. Mulja  M  dan  Hanwar  D.  Prinsip-Prinsip Cara  Berlaboratorium  yang  Baik  (Good Laboratory  Practice). Majalah  Farmasi Airlangga .2003; 3(2).