Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum ) Terhadap Tikus Putih Jantan dan Gambaran Histologi
Pankreas
Antidiabetic Activity Test of Clove Leaf Ethanol Extract ( Syzygium aromaticum ) Against Male White Rats and Histological of the Pancreas
Chemayanti Surbakti 1* , Pricella Aqwilla Br Ginting 2 , Hafizhatul Abadi 3 , Yoksan Duha 4 1* Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara
2,3,4 Fakultas Farmasi dan Kesehatan Umum, Institut Kesehatan Helvetia Medan email: chemasurbakti@gmail.com ; chemayantisurbakti@usu.ac.id
(tanggal diterima: 19-01-2022 , tanggal disetujui: 16-03-2022)

## INTISARI
Diabetes adalah penyakit kronis yang disebabkan oleh gangguan sekresi  insulin. Cengkeh ( Syzygium Aromaticum ) merupakan tanaman tradisional untuk efek hipoglikemik dilaporkan secara ilmiah  memiliki  potensi  antidiabetes.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  aktivitas  antidiabetes ekstrak etanolik daun cengkeh dan menguji histologi pankreas tikus.  Dengan pelarut etanol 70%, serbuk  daun  cengkeh  diekstraksi  dengan  metode  maserasi.  Uji  antidiabetes  ekstrak  etanol  daun cengkeh menggunakan aloksan dosis 150 mg/kgBB. Uji ekstrak etanol dilakukan terhadap kelompok hewan uji dengan dosis 100, 200 dan 300 mg/kg BB.
Hasil  penelitian  menunjukan  ekstrak  daun  cengkeh  mempunyai  aktivitas  antidiabetes. Penurunan kadar gula darah berturut-turut memiliki persentase 55,61%, 64,06% dan 73,06% untuk ekstrak dosis 100; 200 dan 300 mg/kg BB, dan 65,83% untuk kontrol positif. Pengamatan histologis pankreas mencit kelompok kontrol negatif menunjukkan bahwa struktur pulau Langerhans berubah, mengecil, tidak teratur, degenerasi sel dan piknosis. Ekstrak daun cengkeh yang diinduksi aloksan dosis  masing-masing  100,  200,  dan  300  mg/kgBB,  pada  kelompok  perlakuan  dan  kontrol  positif menunjukkan struktur pulau Langerhans yang berbeda, massa sel lebih banyak, regenerasi sel, dan tidak  ada  sel  yang  mengalami  degenerasi  dan  piknosis.  Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  ekstrak daun cengkeh dapat menurunkan kadar gula darah dengan dosis efektif 300 mg/kgBB dan ekstrak daun cengkeh mampu memperbaiki sel-sel pulau langerhans pankreas.
Kata kunci : Syzygium aromaticum ; Antidiabetes; Aloksan; Histologi

## ABSTRACT
Diabetes  is  a  chronic  disease  caused  by  impaired  insulin  secretion.  Clove  (Syzygium Aromaticum) is a traditional plant for its hypoglycemic effect which has been scientifically reported to have antidiabetic potential. This study aims to determine the antidiabetic activity of the ethanolic extract of clove leaves and to knowing the histology of the pancreas of rats.
With  70%  ethanol  solvent,  clove  leaf  powder  was  extracted  by  maceration  method. Antidiabetic test of clove leaf ethanol extract using alloxan at a dose of 150 mg/kgBW. The ethanol extract test was carried out on each group of test animals with doses of 100, 200 and 300 mg/kg BW.
The  results  showed  that  clove  leaf  extract  had  antidiabetic  activity.  The  percentage  of decrease in blood glucose levels was 55.61%, 64.06% and 73.06% for the extract dose of 100; 200 and 300 mg/kg BW, and 65.83% for positive control. Histological observation of the pancreas of mice in the negative control group showed that the structure of the islets of Langerhans changed, shrank, irregular, cell degeneration and pyknosis. Clove leaf extract induced by alloxan at doses of 100, 200, and  300  mg/kgBW,  in  the  treatment  and  positive  control  groups  showed  different  islets  of Langerhans structure, more cell mass, cell regeneration, and no cells degenerated and pycnosis. The
conclusion of this research is that clove leaf extract can relieve blood sugar levels with an effective dose of 300 mg/kgBB and clove leaf extract can repair pancreatic islets of  Langerhans cells.
Keyword: Syzygium aromaticum; Antidiabetic; Aloxan; Histology

## 1. PENDAHULUAN
Diabetes  adalah  persoalan  kesehatan  sejumlah  manusia  terpenting  yang semakin  umum  di  semua  negara.  Perkiraan  saat  ini  menunjukkan  bahwa  sekitar ±463  juta  orang  dewasa  di  seluruh  dunia  menderita  diabetes,  dan  jumlah  ini diperkirakan menjadi ±578 juta pada tahun 2030 dan 700 juta pada tahun 2045 [1]. Diabetes  melitus  merupakan  salah  satu  penyakit  metabolik  dengan  gejala meningkatnya  gula  dalam  darah,  yang  mengakibatkan  perubahan  struktur  pulau Langerhans yang disebabkan oleh sekresi insulin yang abnormal dan progresif [2]. Obat tradisional sudah lama dikenal masyarakat Indonesia. Hingga saat ini, walaupun  obat-obatan  sintetis  telah  banyak dijual  dengan  berbagai  produk,  obat tradisional  tetap  digunakan  oleh  masyarakat  karena  efek  sampingnya  dianggap lebih  aman.  Senyawa  yang  terkandung  dalam  obat  tradisional  secara  biologis bersifat aktif dapat mempengaruhi sel organisme hidup [3]. Cengkeh ( Syzygium aromaticum ) merupakan batang berbunga tidak berair aromatik  dari  pohon    family  Myrtaceae  [4].  Cengkeh  dilaporkan  secara  ilmiah memiliki potensi antidiabetes, berdasarkan hasil analisis KLT yang dilakukan Ika Trisharyanti,  daun cengkeh mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid, triterpenoid, terpenoid  dan  saponin.  Penelitian  sebelumnya  oleh  Wahyulianingsih  dkk, menyatakan  bahwa  kandungan  flavonoid total  yang  terdapat  pada  daun  cengkeh sebanyak  73,08  mgRE/g  ekstrak  dengan  kadar  7,308%.  Flavonoid  inilah  diduga menjadi agen antidiabetes [5],[6].
Prinsip dari metode uji adalah induksi aloksan melalui pembuluh darah vena pada ekor tikus. Pemberian agent hipoglikemik secara oral yang mengurangi kadar gula  darah  dibandingkan  dengan  kelompok  uji  kontrol  positif.  [3].  Kemudian seluruh hewan coba didislokasi serviks. Organ pankreas diambil dan dibedah untuk persiapan histologis.
Salah  satu  usaha  dalam  menegakkan  diagnosis  pengamatan  terhadap jaringan yang mengalami gangguan adalah dengan menganalisis keadaan histologis organ-organ yang yang terindikasi mengalami kerusakan akibat pengaruh penyakit, zat toxic atau  proses  mutagenik  lainnya  dan  mengamati  transisi  morfologi  dan strukturnya [7].
Untuk menghitung tingkat kerusakan pankreas dilakukan dengan membuat preparat histologi pankreas tikus dengan cara cara pankreas difiksasi, didehidrasi, clearing , diembedding kemudian dilakukan perwarnaan HE. Selanjutnya preparat histologi diamati dengan menggunakan mikroskop.
Berdasarkan penelitian tersebut, peneliti tertarik untuk meneliti uji aktivitas antidiabetes  ekstrak  ethanol  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum )  tikus  putih jantan dan gambaran histologi pankreas.

## 2. METODE PENELITIAN
2.1 ALAT DAN BAHAN seperangkat  alat  kaca,  glucometer  dan  mikroskop.  Bahan  yang  digunakan adalah daun cengkeh, aloksan monohidrat (Sigma Aldrich), Metformin Hidroklorida (Hexpharm), CMC-Na (Sigma Aldrich), NaCl fisiologis (Merck), etanol 70%, formalin 10%,  etanol  absolut  (Merck),  xylene  (Merck),  hematoksilin  (Merck)  dan  eosin (Mercks).
2.2. CARA KERJA

## Pembuatan Simplisia
Sampel  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum )  yang  dikumpulkan  diolah sesuai dengan tahapan pembuatan simplisia yang memenuhi standar menurut FHI, 2008 [8].

## Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Pemeriksaan  karakteristik  simplisia  yaitu  penentuan  kadar  air  dan penentuan kadar abu, penentuan kadar sari dalam air, penentuan sari larut etanol, penentuan kadar abu tidak larut asam, penentuan kadar abu total [9].

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut ethanol sehingga didapatkan ekstrak kental ethanol daun cengkeh  [10] .

## Pembuatan    Suspensi    Ekstrak    Etanol Daun Cengkeh
Ditimbang      ekstrak      ethanol      daun      cengkeh  dosis  100,  200,  dan  300 mg/kgBB  dengan  gelas  arloji,  ditambahkan  suspensi  Carboxymethyl  selullosa sodium,  digerus  hingga  tercampur  merata.  Volume  dipenuhi  dengan  suspense Carboxymethyl selullosa sodium sampai garis tanda [10].

## Penyiapan     dan     Perlakuan     Hewan Percobaan
Digunakan 25 ekor tikus galur  wistar  jantan  umur  2-3  bulan,  dengan berat badan ±180 gram. Tahap persiapan meliputi masa adaptasi selama satu minggu Uji Aktivitas Antidiabetes
Tikus dipuasakan selama 24 jam, dosis aloksan yang digunakan 150  mg/kg BB.  Setelah 3 hari tikus disuntikkan bahan penginduksi, kemudian KGD diperiksa. Hewan uji yang KGD ≥200 mg/dL dipilih sebagai hewan percobaan. Diamati pada hari  ke-  0,  7  dan  14.  Kemudian  darah  diambil  melalui  ujung  ekor  tikus  secara intravena,  KGD  diukur  dengan  alat  glucometer.  Kemudian  setiap  kelompok diberikan:
a.  Kumpulan  I ( kontrol negatif )     : Carboxymethyl selullosa sodium 0,5% b.  Kumpulan II ( kontrol positif )  : metformin 50 mg/kg BB
c.  Kumpulan III
: ekstrak 100  mg/kg BB
d.  Kumpulan IV : ekstrak 200  mg/kg BB e.  Kumpulan  V : ekstrak  300  mg/kg BB
Setelah perlakuan diberikan, semua hewan percobaan dikorbankan dengan metode dislokasi serviks. Jaringan pankreas diambil dan dipotong dengan mikrotom untuk dibuat preparat histologi dengan pengecatan  HE.

## Pembuatan  Preparat  Histologi  Pankreas Tikus Uji
Dilaksanakan dengan memfiksasi pankreas pada larutan formaldehid  10,0% selama satu jam, diulangi  pada  larutan  formaldehid  10,0% yang berbeda. Pankreas yang  telah  mendekati  kondisi  awal  dikurangi  cairan  dari  jaringan  menggunakan larutan etanol absolut  selama satu jam, masing-masing sebanyak 2 kali.  Pankreas yang  mengalami dehidrasi kemudian di clearing dengan larutan xylene. Selanjutnya pankreas  dibenamkan  dan  dilakukan  pemotongan,  diikuti  dengan  pewarnaan hematoksilin eosin (HE). Setelah pewarnaan, preparat ditutup kaca penutup  yang direkatkan  dengan  entelan.  Selanjutnya  preparat  histologi  diamati  dengan menggunakan mikroskop untuk menghitung tingkat kerusakan pankreas [7].

## Kriteria Pengamatan Perubahan Histologi Pankreas
Pengamatan perubahan histologi struktur pulau langerhans (degenerasi dan nekrosis) dilakukan secara deskriptif pada satu bagian jaringan dari setiap pankreas tikus uji. Pengamatan dilakukan pada 5 area lapang penglihatan yang dipilih secara random.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Penentuan Karakteristik simplisia
Hasil   penentuan   karakteristik serbuk simplisia daun cengkeh  terlihat pada tabel dibawah ini
Tabel 1. Hasil   pemeriksaan   karakteristik   simplisia Penentuan Daun Cengkeh Penentuan  % air 4 ,39% Penentuan % sari larut air 35,64% Penentuan % sari laut dalam etanol 30,38% Penentuan % abu total 5,92% Penentuan % abu tidak larut asam 4,93%

## Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Hasil   pengukuran   KGD  selama 14  hari  terhadap  lima kumpulan hewan uji yang diinduksi aloksan dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. KGD Tikus Uji (mg/dL)
Tritmen H 0 H 1 H 7 H 14 Kontrol Negatif 92,40 ± 7,635 281,80 ± 71,026 271,20 ± 70,368 265,40 ± 65,202 Kontrol Positif 103,20 ± 11,032 385,80 ±128,997 242,60 ± 83,954 131,80 ± 28,543 Dosis 100 mg/KgBB 94,60 ± 14,553  351,00 ± 81,483 265,60 ± 89,058
155,80 ± 45,861 Dosis 200 mg/KgBB 81,60 ± 10,334  356,20 ± 92,958 254,40 ± 81,273 128,00 ± 11,895 Dosis 300 mg/KgBB 88,80 ± 5,167 424,80 ±136,743 295,00 ± 86,171 114,40 ± 37,760 Data ditampilkan dalam bentuk Mean ± Standar Deviasi (SD) Keterangan : H0 : KGD awal H1 : KGD setelah induksi aloksan H7 : KGD hari ke-7 H14 : KGD hari ke-14
Berdasarkan  tabel  di  atas,  terbukti  dengan  penginduksian  aloksan monohidrat dengan takaran 150 mg/kg BB pada hewan percobaan meningkatkan KGD  pada  hari  ke-14.    Menurut  Dewi  (2013),  aloksan  sangat  cepat  sampai  ke pankreas, mekanismenya diawali oleh pengambilan yang cepat oleh sel Langerhans [11].  Pembentukan  ROS  merupakan penyebab utama perusakan sel yang ditandai dengan proses pengurangan aloksan dalam sel beta langerhan. Perusakan sel beta langerhan dapat menyebabkan menjadi berkurang granul-granul pembawa insulin di dalam sel β pankreas, sehingga meyebabkan peningkatan KGD [12].

## Penurunan Kadar Glukosa Darah (KGD)
Berdasarkan  hasil  %  KGD  darah    pada    hewan    pengujian  selama  14  hari, persentase berkurangnya KGD pada   dosis   300   mg/kg BB   adalah sebesar 73,06%, lebih besar dibandingkan dengan persentase berkurangnya KGD  dosis 100 mg/kg BB  dan  dosis  200  mg/kg  BB  yakni  sebesar  55,61%  dan  64,06%.  Persentase berkurangnya KGD pada ekstrak dosis 300 mg/kgBB juga lebih besar. Berbanding dengan  Metformin  yang  menjadi  kontrol  positif,  dimana    penurunan    penurunan KGD  sebesar 65,83%.
Hasil tersebut sama dengan dengan laporan sebelumnya oleh Ika Trisharyanti (2017) menuliskan  bahwa daun  cengkeh  mengandung  metabolit  sekunder  alkaloid, fenolic,  flavonoid,  triterpenoid,  dan  saponin. Kandungan  flavonoid  dalam  daun cengkeh diduga kuat sebagai agen antidiabetes yang dapat menurunkan KGD pada tikus uji.
Tabel 3. Penurunan KGD
Tritmen % Pengurangan KGD Hari ke-7 Hari ke-14 Kontrl negatif 3,76 % 5,81 % Kontrol positif 37,11 % 65,83 % Dosis 100 mg/kgBB 24,33 % 55,61 % Dosis 200 mg/kgBB 28,57 % 64,06 % Dosis 300 mg/kgBB 30,55 % 73,06 %
Berkurangnya  KGD  disebabkan  karena  obat  golongan  biguanid  berfungsi mencegah  menghasilkan  glukosa  yang  berlebih  dengan  penurunan  proses pembentukan  zat  gula  dari  non  karbohidrat  di  hati.  Obat  golongan  biguanid  ini memiliki daya  posporilasi  dan  diaktifkannya enzim protein (AMPK) di hati, yang memberikan sejumlah efek terapeutik, termasuk penghambatan dan pembentukan senyawa glukosa dan lipid [13].

## Pengamatan   Histologi   Pankreas
Gambaran  histologi  pankreas  tikus    kontrol  negatif  diinjeksikan    dengan aloxsan takaran 150 mg/kg BB dan hanya diberi CMC-Na 0,5% menunjukan struktur pulau  langerhans  yang  mengalami  perubahan,  mengecil,  jumlah  massa  sel  yang berkurang  dan  ditemukannya  sel  yang  mengalami  degenerasi  hingga  nekrosis. Kelompok   positif   yang   diinduksi   dengan aloksan menunjukan struktur   pulau langerhans    yang  jelas,  tampak  banyak  sel  yang  mengisi  pulau  langerhans,  tidak
ditemukan  sel  yang  mengalami  degenerasi  dan  piknosis.  Sedangkan  kelompok ekstrak    takaran    100;  200    dan    300  mg/kg  BB  memperlihatkan  struktur  pulau langerhans  tampak  jelas,  massa  sel  yang  banyak  mengalami  regenerasi,  tidak ditemui sel-sel merasai kematian dan kerusakan.
Kandungan  flavonoid  daun  cengkeh  berfungsi  sebagai  pencegah  spesies oksigen  yang  reaktif.  Pemberian  senyawa  phenol,  termasuk  flavonoid  dapat menyerap  spesies  oksigen  yang  reaktif  dan  memperkecil  stress  oxidatif  setelah diberikan  aloxan.    Senyawa  antioksidan  ini  dapat  membaguskan  sel  dengan beberapa  cara  kerja,  diantaranya  melalui  peningkatan  enzim  catalase    yang mengubah  H 2 O 2 menjadi  O 2 dan  H 2 O  yang  tidak  membahayakan  untuk    sel    dan pertumbuhannya [14].
Bertambahnya senyawa-senyawa antioksidan dalam sel-sel dapat menekan sejumlah  spesies  oksigen  yang  reaktif  sehingga  dapat  membantu  membalikkan mutu  dan  sifat  dan  menambah  kemungkinan  untuk  hidup  sel  [15].  Makin  bagus struktur  histologi  organ  pankreas  diperkirakan  disebabkan  oleh  senyawa antioksidan/flavonoid      yang      terkandung  didalam  ekstrak  daun  cengkeh  yang mampu menarik dan melakukan pengurangan jumlah  spesies oksigen reaktif, yang bertanggung  jawab  atas  nekrosis  pada  sel  β  pankreas.  Pengamatan    histologi pankreas ditunjukkan pada gambar 1 .
Gambar 1. Pengamatan   histologi   pankreas Keterangan: K(-) : kontrol negatif (40x)
K(+) : kontrol positif (40x)
T1 : dosis 100,0 mg/kg BB (40x) T2 : dosis 200,0 mg/kg BB (40x)
T3 : dosis 300,0 mg/kg BB (40x)
PL : Pulau Langerhans
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  terdapat  perbedaan  dengan  penelitian sebelumnya, menurut Sintawahyu (2019) pemberian senyawa eugenol dari bunga cengkeh  pada  takaran  10,0  mg/kg  BB  ,  juga  menunjukkan  adanya  perbaikan  sel pankreas  [16].  Kelebihan  dari  penelitian  ini  membuktikan  bahwa  hanya  dengan menggunakan  ekstrak  tanpa  isolasi  sudah  dapat  menurunkan  KGD  dan memperbaiki  jaringan  pankreas  pada  hewan  uji,  dapat  dijadikan  alternatif  dan informasi kepada masyarakat  salah satu tumbuhan  yang dapat menurunkan KGD dengan biaya yang terjangkau.

## Hasil Analisis Data
Berdasarkan          hasil          analisis          One-Way  ANOVA    untuk    hari    ke-14 memiliki    Fhitung=  10,746  >  Ftabel=  2,87,  jadi  Ha  diterima  dimana  Ha  memiliki perbedaan yang signifikan.
Hasil yang diperoleh,  bahwa data tersebar normal pada hari sebelum induksi aloxan  (H0),  setelah  induksi  aloksan  atau  hari  pertama  diberikan  ekstrak  (H1), diberikan  ekstrak  (H7),  dan  diberikan  ekstrak  (H14)  (p  ≤  0,05).  Tidak  ada perbedaan nyata antara kumpulan ekstrak 100, 200, 300 mg/kg BB dengan kontrol positif sedangkan kontrol negatif terdapat perbedaan dengan ekstrak 100, 200, 300 mg/kg BB, kontrol positif.

## 4. KESIMPULAN
Diperoleh  simpulan  bahwa  ekstrak  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum ) dapat  menurunkan  KGD  tikus  uji.  Dosis  efektif  ekstrak  daun  cengkeh  dalam penurunan  KGD  tikus  uji  adalah  takaran  300  mg/kg  BB  dengan  %  penurunan 73,06%. Gambaran histologi pankreas  tikus  uji  mengalami  perubahan struktur pulau  langerhans  ditandai  dengan  adanya  sel  yang  mengalami  degenerasi  dan nekrosis.  Ekstrak  daun  cengkeh  mampu  memperbaiki  sel-sel  pulau  langerhans pankreas.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis berterima kasih kepada Kementerian Ristek RI yang sudah memberi kesempatan  meneliti  sehingga  penulis  bisa  melaksanakan  penelitiannya  dengan baik.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
[1] A. A. Ibrahim, M. S. Abdussalami, J. Appah, A. H. Umar, A. A. Ibrahim, and K. D. Dauda,  “Antidiabetic  effect  of  aqueous  stem  bark  extract  of  Parinari macrophylla in alloxan- induced diabetic Wistar rats,” vol. 6, 2021.
[2] G.  S.  Prihanti,  R.  Mochammad,  K.  Katjasungkana,  B.  R.  Novitasari,  and  S.  R. Amalia, “Antidiabetic Potential of Matoa Bark Extract (Pometia pinnata ) in Alloxan-Induced Diabetic Male Rat Strain Wistar (Rattus norvegicus),” vol. 11, no. 8, pp. 88–97, 2020, doi: 10.31838/srp.2020.8.13.
[3] D. Ningsih, E. S. Rejeki, and D. Ekowati, “Aktivitas Antidiabetes Jamur Lingzhi (Ganoderma lucidum) pada Tikus Putih Jantan,” vol. 6, no. 3, pp. 12–18, 2009.
[4] El-Kabumaini, Tanaman  Rempah-Rempah .  Bandung:  CV  Aulia  Publishing, 2014.
[5] M. Asif et al. , “Antidiabetic activity of aqueous extract of sigesbeckia orientalis (St. paul’s wort) in alloxan-induced diabetes model,” Brazilian J. Pharm. Sci. , vol. 55, pp. 1–10, 2019, doi: 10.1590/s2175-97902019000218408.
[6] W. Wahyulianingsih, S. Handayani, and A. Malik, “Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Cengkeh (Syzygium Aromaticum (L.) Merr & Perry),” J.
Fitofarmaka  Indones. ,  vol.  3,  no.  2,  pp.  188–193,  2016,  doi: 10.33096/jffi.v3i2.221.
[7] A. L. H. Bayyinatul Muchtaromah, Tias Pramesti Griana, “Gambaran Histologi Pankreas Tikus Diabetes Mellitus Kronis Yang di Cekoki Daun Centela Asiatica (L.) Urban Dalam Bentuk Segar, Rebusan dan Ekstrak Etanol,” J. Integr. SAINS DAN Islam , vol. VOL. 2, No, no. ISSN: 2089-0699, p. 42, 2019.
[8] H.  P.  Maliangkay  and  R.  Rumondor,  “Uji  Efektifitas  Antidiabetes  Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia Mangostana L) Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Yang Diinduksi Aloksan,” Chem. Prog. , vol. 11, no. 1, 2018, doi: 10.35799/cp.11.1.2018.27909.
[9] Departeman kesehatan Republik Indonesia, Materia Medika Indonesia , Edisi II. Jakarta: Dirjen POM, 1978.
[10]  Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia, Farmakope  Indonesia  Herbal , Edisi I. 2013.
[11]  D. F. Rindiatika DF, W. Syafil, and R. K. Sari, “Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol  Daun  Kina  Ledger  (  Cinchona  ledgeriana  Moens)  dan  Kina  Succi  ( Cinchona  succirubra  Pavon),” Med.  Plants ,  2017,  [Online].  Available: http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/84105.
[12]  I.  L.  Dewi,  “Uji  Aktivitas  Antidiabetes  Ekstrak  Etanol  Daun  Salam  (Eugenia polyantha)  Terhadap  Tikus  Galur  Wistar  yang  diInduksi  Aloksan,” Naskah Publ. Fak. Farm. Univ. Muhammadiyah Surakarta , pp. 1–14, 2013.
[13]  U.  N.  Afifah,  “Uji  Aktivitas  Antidiabetes  Ekstrak  Etanol  96%  Buah  Pare  ( Momordica charantia L.) Terhadap Tikus Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan,” Progr. Stud. Farm. Fak. Farm. Univ. Muhammadiyah Surakarta , pp. 1–13, 2017.
[14]  G.  Brahmachari,  “Bio-flavonoids  with  promising  anti-diabetic  potentials :  A critical survey,” Oppor. Chall. Scope Nat. Prod. Med. Chem. - Res. Signpost , vol. 661, no. 2, pp. 187–212, 2011.
[15]  M.  Madihah,  F.  Alfina,  and  Y.  Y.  Gani,  “Blood  Glucose  Level  And  Pancreas Histological  Section  Of  Mice  (  Mus  Musculus  L.)  Induced  By  Alloxan  After Treatment Of Curcuma Mangga Val. Rhizome Extract,” J. Biol. Udayana , vol. 20, no. 2, p. 64, 2016, doi: 10.24843/jbiounud.2016.v20.i02.p04.
[16]  S.  Utami,  I.  M.  Sudarma,  and  C.  D.  Hamdin,  “Efek Pemberian  Eugenol Isolat Bunga Cengkeh ( Syzygium aromaticum ) terhadap Histologi Pankreas Tikus Diabetes ( Eugenol Eff ect of Clove Flower ( Syzygium aromaticum ) Isolate on Histology Pancreas of Diabetic Rat ),” vol. 17, no. 2, pp. 160–163, 2019.