How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289

## ccccccccccc

## PENDAHULUAN
Globalisasi  dan  urbanisasi  berdampak  pada segala aspek kehidupan, utamanya terhadap perubahan kebiasaan makan dan gaya hidup. Hal ini sejalan dengan meningkatnya  kejadian  obesitas  di  masyarakat. Prevalensi  obesitas  di  Indonesia  meningkat  pesat  baik pada  masyarakat  dengan  tingkat  ekonomi  tinggi  hingga rendah dikarenakan adanya perubahan pola dan pilihan makan dari makanan tradisional ke produk olahan yang sering kali lebih tinggi lemak dan gula 1 .
Di  Indonesia,  sebanyak  40,1%  penduduk  usia lebih  dari  3  tahun  memiliki  kebiasaan  mengonsumsi makanan  manis  lebih  dari  1  kali  sehari,  sedangkan
sebanyak  61,27%  memiliki  kebiasaan  mengonsumsi minuman  manis  lebih  dari  1  kali  sehari 2 .  Menurut Lumbuun  dan  Kodim  (2017),  konsumsi  fruktosa  yang tinggi dapat menyebabkan HDL menurun, LDL meningkat, hiperurisemia, hipertrigliserida, hipertensi, dan resistensi insulin  yang  dapat  berakibat  pada  terjadinya  Toleransi Glukosa  Terganggu  (TGT) 3 .  Atom  karbon  untuk  gliserol dan  asil-KoA  yang  disediakan  oleh  fruktosa  dapat menginduksi de  novo  lipogenesis (DNL).  Hal  ini  akan menyebabkan  terjadinya  sintesis  trigliserida  dan peningkatan kadar lemak dalam hepar yang berdampak terhadap  penurunan  sensitivitas  insulin 4 .  Hal  ini menandakan  bahwa  tingkat  konsumsi  minuman  manis

## Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus

## Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus
Ayuningtyas Dian Ariestiningsih 1 *, Anggun Rindang Cempaka 2 , Inggita Kusumastuty 2 , Aladhiana Cahyaningrum 3 , Sindi Setiawati 1 , Diandra Arintya 1 , Ulul Azmi 1 , Putri Salwa 1 , Huzaifah Malahayati 1 , Rizka Azhari Wibowo 1 , Dian Handayani 4
1 Program Studi Sarjana Ilmu Gizi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
2 Program Studi Profesi Dietisien, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
3 Program Doktor Ilmu Kedokteran, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
4 Program Studi Magister Ilmu Gizi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
RESEARCH STUDY Versi Bahasa
OPEN ACCESS
INFO ARTIKEL
Received: 12-06-2023
Accepted: 15-02-2024 Published online: 07-06-2024
*Koresponden: Ayuningtyas Dian Ariestiningsih ayudian.fk@ub.ac.id

## DOI:
10.20473/amnt.v8i2.2024.278- 289
Tersedia secara online: https://e- journal.unair.ac.id/AMNT
Kata Kunci: Prediabetes, Lemak, Aorta, Daun Kelor (Moringa Oleifera)

## ABSTRAK
Latar Belakang: Konsumsi minuman dan makanan kemasan dengan kandungan tinggi fruktosa mengalami peningkatan beberapa tahun terakhir. Hal ini meningkatkan risiko terjadinya  sindrom  metabolik,  meliputi  resistensi  insulin,  gangguan  profil  lipid,  dan peningkatan tekanan darah. Kandungan senyawa bioaktif dalam daun kelor ( Moringa Oleifera )  sebagai  antioksidan  diketahui  mampu  memperbaiki  metabolisme  lemak dan glukosa darah.
Tujuan: Adapun tujuan penelitian ini adalah mengkaji pengaruh serbuk daun kelor dan kuersetin  dalam  pengendalian  kondisi  sindrom  metabolik  dengan  mengidentifikasi profil lipid dan ketebalan aorta pada prediabetes mellitus (pre DM).
Metode: Penelitian ini menggunakan studi eksperimental dengan pendekatan post test only control group design dengan 35 tikus putih Wistar jantan ( Rattus Novergicus ) yang dikelompokkan menjadi 5 yaitu  kelompok K0 (pakan  standar), E1 (selama 16 minggu disonde fruktosa 66%), E2 (selama 12 minggu disonde fruktosa 66%), E3 (sonde fruktosa 66%  +  kuersetin  50  mg/kgBB),  dan  E4  (sonde  fruktosa  66%  +  serbuk  daun  kelor  500 mg/kgBB).  Metode  pemeriksaan  profil  lipid  melibatkan  ekstraksi  serum  dan  tes enzimatik, penimbangan digunakan untuk massa jaringan lemak putih, sementara aorta diperiksa  dengan  mikroskop  cahaya  dan  analisis  gambar  histologi.  Pengujian  data menggunakan One Way ANOVA . Hasil: Kadar  kolesterol High  Density  Lipoprotein (HDL)  (nilai p-value 0,000),  total kolesterol  (nilai p-value 0,004),  dan  ketebalan  dinding  aorta  (nilai p-value 0,002) berbeda signifikan antarkelompok perlakuan dengan hasil terbaik secara berturut-turut yaitu  pada  kelompok  E2,  kelompok  E1,  dan  kelompok  K0.  Tidak  terdapat  perbedaan kadar trigliserida, Low Density Lipoprotein (LDL) kolesterol, dan massa jaringan lemak putih yang signifikan antar kelompok perlakuan.
Kesimpulan: Pemberian serbuk  daun kelor selama 4 minggu menunjukkan perbaikan profil lipid dan ketebalan dinding aorta pada kondisi prediabetes mellitus.
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
yang  tinggi  dapat  meningkatkan  risiko  terjadinya prediabetes  dan  jika  dibiarkan  akan  menyebabkan individu  menderita  penyakit  Diabetes  Melitus  Tipe  2 (DMT2).
Diabetes  Melitus  (DM)  merupakan  salah  satu penyakit  degeneratif  dengan  tanda  hiperglikemia  serta dapat  berpengaruh  terhadap  metabolisme  karbohidrat, lemak,  dan  protein 5 .  Diabetes  melitus  terdiri  dari beberapa jenis antara lain tipe 1, tipe 2, dan gestasional. Akan  tetapi,  95%  dari  seluruh  kasus  diabetes  di  dunia merupakan DMT2 6 . Jumlah penyandang DM di Indonesia pada  penduduk  usia  15  tahun  menurut  data  Riset Kesehatan  Dasar  meningkat  menjadi  2% 2 .  Tahap  awal gejala penyakit DM dikenal dengan prediabetes mellitus (pre DM) atau Impaired  Glucose  Regulation (IGR) yang ditandai oleh peningkatan kadar glukosa darah dari kadar normal, tetapi tidak cukup untuk menjadi DM yaitu kadar glukosa  darah  puasa  sebesar  100-125  mg/dL,  toleransi glukosa 140-199 mg/dL, dan/atau HbA1C 5,7- 6,4% 7-9 .
Dislipidemia  merupakan  suatu  kondisi  adanya peningkatan  kadar  lemak  dan  kolesterol  dalam  darah yang  disebabkan  oleh  metabolisme  lipid  tidak  normal. Dislipidemia  ditandai  dengan  penurunan  kadar  HDL, peningkatan  LDL,  kolesterol  total,  dan  trigliserida 10 . Penyandang DMT2 yang mengalami dislipidemia menjadi salah  satu  prediktor  sebagai  faktor  risiko  penyakit kardiovaskular  (CVD)  pada  DM 6 .  Gangguan  metabolik yang  disebabkan  oleh  DMT2  menyebabkan  lipolisis meningkat  dan  lipogenesis,  sehingga  meningkatkan jumlah VLDL yang selanjutnya diedarkan di sirkulasi darah sehingga kadar trigliserida dalam darah menjadi tinggi 11 . Menurut Rantung et al . (2014), gangguan metabolik pada kondisi  DMT2  akan  menyebabkan  aliran  asam  lemak bebas pada hati meningkat, kemudian akan menginduksi produksi  trigliserida 12 .  Trigliserida  akan  disintensis menjadi  VLDL  yang  kemudian  akan  menyebabkan tingginya  kadar  LDL  di  aliran  darah.  Hal  ini  dapat meningkatkan  risiko  penebalan  dinding  aorta  hingga risiko penyakit ateroskeloris 13 .
Penatalaksanaan  prediabetes,  DMT2dan  faktor risikonya  seperti  gangguan  profil  lipid  dapat  diatasi dengan pemberian obat dan perubahan pola hidup. Pada era  ini  masyarakat  banyak  mengonsumsi  obat  anti diabetes sintesis. Namun penggunaan obat anti diabetes sintesis  dapat  menimbulkan  efek  samping  bagi penderitanya.  Oleh  sebab  itu,  pangan  fungsional  dapat dijadikan bahan pengobatan alternatif yang relatif aman dan  murah.  Pangan  fungsional  lokal  seperti  daun  kelor ( Moringa  Oleifera )  dapat  ditemukan  dengan  mudah  di Indonesia.  Kelor  diketahui  dapat  memperbaiki  kadar tekanan  darah,  glukosa  darah,  dan  profil  trigliserida 14 .
Selain itu, senyawa bioaktif antioksidan dan antidiabetes di  dalam  daun  kelor  dilaporkan  dapat  memperbaiki kondisi  hiperglikemia  dan  hiperkolesterolemia.  Hasil penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Monika dan Lestariyana.  (2014)  bahwa  kandungan  kuersetin  yang terdapat dalam daun kelor dapat menurunkan resistensi insulin  dengan  cara  meningkatkan  kadar  hormon adiponektin  yang  diproduksi  jaringan  adiposa  pada model  hewan  diabetes 15 .  Tanaman  kelor  memiliki aktivitas  antioksidan  dan  senyawa  aktif  yang  tinggi terutama  di  bagian  daunnya.  Penelitian  yang  dilakukan oleh  Putra et  al .  (2016)  menyatakan  bahwa  kandungan
antioksidan  pada  daun  kelor  meliputi  alkaloid,  saponin, steroid/triterpenoid, tanin, fenolat, dan flavonoid 16 . Hasil penelitian  Aborhyem et  al. (2016)  melaporkan  bahwa daun  kelor  dapat  memperbaiki  profil  lipid  pada  tikus hiperlipidemia melalui penurunan kadar kolesterol total, kadar LDL, dan kadar trigliserida dan peningkatan kadar HDL  kolesterol  sehingga  dapat  memperbaiki  indeks aterogenik 17 . Penelitian  mengenai  pengaruh  kelor  seperti bagian  biji,  buah,  akar,  fraksi  air,  dan  ekstrak  daun terhadap perbaikan profil lipid dan ketebalan aorta tikus Wistar jantan sudah dilakukan sebelumnya. Akan tetapi, penelitian  mengenai  pengaruh  pemberian  serbuk  daun kelor terhadap perbaikan profil lipid dan ketebalan aorta pada  tikus  Wistar  jantan  yang  diinduksi  diet  tinggi fruktosa  belum  pernah  dilakukan.  Oleh  karena  itu, berdasarkan latar belakang dan uraian tersebut, peneliti tertarik  menilai  efektivitas  serbuk  daun  kelor (Moringa Oleifera) dan  kuersetin  dalam  memperbaiki  profil  lipid dan  ketebalan  aorta  tikus  Wistar  jantan  yang  diinduksi dengan diet tinggi fruktosa.

## METODE
Penelitian ini merupakan true experimental study dengan  pendekatan post-test-only  control  group  design secara in  vivo. Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Penelitian Hewan Coba dan Laboratorium Patologi Klinis Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang untuk pemeliharaan dan pembedahan hewan coba serta untuk pengukuran profil lipid. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan  September  2021  hingga  Februari  2022,  yang dilakukan setelah mendapatkan persetujuan dari komisi etik  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Mataram  dengan nomor 182/UN18.F7/ETIK/2021.
Sampel  penelitian  dikelompokkan  menjadi  5 dengan jumlah sampel sebanyak 5 ekor di tiap kelompok ditambah dengan cadangan 2 ekor untuk masing-masing kelompok.  Besaran  sampel  dihitung  berdasarkan  rumus Frederer  (1991).  Kelompok  perlakuan  terdiri  dari kelompok K0 (Kelompok Kontrol Normal), E1 (Kelompok Kontrol  DMT2),  E2  (Kelompok  Kontrol  Prediabetes),  E3 (Kelompok  Intervensi  Kuersetin),  dan  E4  (Kelompok Intervensi Serbuk Daun Kelor). Setelah dilakukan adaptasi selama  7  hari,  dilakukan  randomisasi  sampel  yang kemudian dipuasakan selama 12 jam untuk diukur kadar glukosa  darah  sebelum  diinduksi  diet  tinggi  fruktosa. Kemudian untuk kelompok E1, E2, E3, dan E4 diberikan pakan  standar  AIN-93  M  dan  diet  tinggi  fruktosa  66% dengan  cara  disonde.  Sebelum  dilakukan  pembedahan, sampel diukur kadar glukosa darahnya untuk memastikan sampel dalam kondisi Diabetes Melitus untuk kelompok E1 dan Prediabetes untuk kelompok E2.
Dosis  fruktosa  yang  diberikan  adalah  9  g/kg BB/hari dengan konsentrasi 66%. Dosis serbuk daun kelor sebesar  500  mg/kgBB  dan  dosis  kuersetin  sebesar  50 mg/kg  BB  dengan  konsentrasi  4%.  Penelitian  Romero- Nava  (2017)  menunjukkan  bahwa  pemberian  fruktosa sebesar  66%  dapat  menghasilkan  peningkatan  glukosa darah,  kolesterol,  LDL,  dan  trigliserida 18 .  Berdasarkan penelitian  Villarruel-Lopez  (2018),  pemberian  serbuk daun  kelor  sebesar  500  mg/kg  BB  pada  tikus  diabetes diketahui  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah 19 . Pemberian  serbuk  daun  kelor  dilakukan  melalui  sonde
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
sehingga  perlu  dilarutkan  dengan  aquades  sebelum diberikan kepada hewan coba.
Daun  kelor  yang  digunakan  diperoleh  dari perkebunan  kelor  di  Kecamatan  Selaparang,  Kota Mataram,  Lombok,  Provinsi  Nusa  Tenggara  Barat  (NTB) yang  telah  dinyatakan  bebas  dari  hama  dan  telah dilakukan  determinasi  di  Laboratorium  Biologi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  (MIPA) Universitas Mataram. Daun kelor yang telah dideterminasi  selanjutnya  dilakukan  uji  fitokimia  untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung di dalam serbuk  daun  kelor.  Uji  fitokimia  serbuk  daun  kelor dilakukan  di  Laboratorium  Penelitian  Terpadu  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Udayana,  Bali.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia,  serbuk daun kelor yang digunakan memiliki kandungan alkaloid, flavonoid,  tannin,  dan  fenol.  Kandungan  fitokimia  yang paling  tinggi  yaitu  polifenol  dengan  rata-rata  864,09 ± 8,91 mgGAE/100 g, sedangkan kuersetin sebesar 30,33 ± 4,82 mg/g.
Bahan  pemeliharaan  hewan  coba  berupa  pakan AIN – 93M,  minum  sesuai  keinginan,  fruktosa  dengan konsentrasi 66%, dan sekam. Bahan untuk pemeriksaan terdiri dari kuersetin sediaan dari Sigma. dan serbuk daun kelor  dari  provinsi  NTB,  bahan  sebagai  pendukung pemeliharaan  hewan  coba  seperti  sarung  tangan, alkohol, dan tisu kering. Bahan untuk pemeriksaan profil lipid  diantaranya  reagen  dan  serum  darah.  Alat pemeliharaan  dan  induksi  hewan  coba  yang  digunakan untuk penelitian diantaranya yaitu kandang hewan botol minum, timbangan digital merk Tanita-KD 100, dan sonde lambung  untuk  pemberian  larutan  fruktosa  dan  kelor. Alat yang digunakan untuk pembuatan serbuk daun kelor yang  terdiri  dari  neraca  digital  dengan  ketelitian  0,001 mg,  blender,  serta  ayakan  dengan  ukuran  104  mesh. Pengambilan  sampel  darah  menggunakan  alat  tabung serum tutup merah, tabung hemtokrit, tabung reaksi, alat injeksi  dan  alat  penunjang  laboratorium  lainnya  seperti glukometer, spektrofotometer, sentrifuge, tabung reaksi, pisau  bedah,  mikropipet,  tip,  penangas  air,  dan  alat injeksi 5 cc.
Tahap  pertama  yaitu  melakukan  determinasi daun  kelor  dari  NTB  sebagai  bahan  untuk  melakukan intervensi,  yang  dilanjutkan  dengan  pembuatan  serbuk daun kelor disertai menghitung kadar air, kadar abu, dan melakukan  uji  fitokimia  terhadap  flavonoid  serta  uji kandungan asam amino. Tahap kedua dilakukan dengan memberikan diet tinggi fruktosa 66% dosis 9 g/kg BB pada tikus  Wistar  jantan  selama  12  minggu  untuk  membuat tikus  model  prediabetes.  Pemeriksaan  yang  digunakan untuk menetapkan bahwa tikus menagalami prediabetes yaitu pemeriksaan kadar Glukosa Darah Puasa (GDP) dan Glukosa  Darah  2  Jam  Post  Prandial  (GD2JPP)  dengan metode Point  Off  Care  Test (POCT)  yaitu  sampel  darah diambil dari vena lateralis ekor tikus, hasilnya dinyatakan dalam  satuan  mg/dL.  Tahap  ketiga  merupakan  tahap pemberian  diet  tinggi  fruktosa  untuk  membuat  tikus model  DMT2  (E1),  dan  melakukan  intervensi  dengan memberi  serbuk  daun  kelor  selama  4  minggu  (E4)  dan
kuersetin  sebagai  gold  standart  selama  4  minggu  (E3). Pemberian diet tinggi fruktosa pada tahap 3 merupakan kelanjutan  dari  tahap  dua,  yaitu  tikus  kelompok perlakuan yang dikondisikan menjadi prediabetes (E1, E3, dan E4) dilanjutkan pemberian diet tinggi fruktosa yang diberikan selama 4 minggu. Tahap keempat merupakan tahap  terakhir  yaitu  melakukan  uji  terhadap  parameter dari  variabel  terikat  untuk  mengetahui  efek  intervensi serbuk daun kelor dan kuersetin.
Data  kadar  profil  lipid  tikus  diperoleh  melalui tahapan  menganastesi  tikus  Wistar  terlebih  dahulu dengan  cara  diinjeksi  menggunakan  ketamin,  kemudian menggunakan  spuit  darah  tikus  diambil  dari  jantung. Sampel darah yang sudah diambil kemudian dimasukkan ke  dalam Vacutainer  yellow  top dan  dengan  kecepatan 5000  rpm  disentrifugasi  selama  10  menit  untuk memperoleh  serum  yang  digunakan  sebagai  bahan  uji parameter  profil  lipid.  Massa  jaringan  lemak  putih  dan ketebalan  organ  aorta  diambil  setelah  tikus  di- euthanasia .  Massa  jaringan  lemak  putih  diukur  dengan mengambil  lemak  putih  bagian visceral (lemak epididimal,  perirenal,  dan  omental)  dan  lemak  bagian subkutan  (lemak  inguinal).  Kemudian  masing-masing bagian  diletakkan  pada  cawan  petri  dan  ditimbang menggunakan  neraca.  Total  massa  lemak  putih didapatkan  dengan  menjumlahkan  berat  lemak visceral dan lemak subkutan. Untuk ketebalan aorta, organ aorta tikus  diambil  kemudian  organ  difiksasi  selama  24  jam menggunakan larutan formalin, kemudian dibuat sediaan histologis,  dan  diwarnai  dengan Hematoxylin-Eosin (HE) sesuai  dengan  prosedur  standar  yang  dilakukan  di Laboratorium  Patologi  Anatomi  Fakultas  Kedokteran Universitas  Brawijaya.  Pengamatan  gambaran  histologi aorta menggunakan mikrometer dilakukan untuk melihat penebalan  dinding  aorta.  Preparat  diamati  di  bawah mikroskop  cahaya  menggunakan  perbesaran  400  kali yang terhubung dengan software Image Pro . Pengukuran ketebalan dinding aorta dengan  prosedur menarik garis tegak  lurus  pada  tunika  intima  garis  terdalam  hingga tunika  adventisia  garis  terluar.  Data  yang  diperoleh dianalisis  menggunakan Statistical  Product  and  Service Solutions (SPSS)  versi  22.  Uji Shapiro-Wilk dilakukan untuk  mengetahui  normalitas,  dilanjutkan  uji  variansi homogenitas.  Uji One  Way  ANOVA dilanjutkan  dengan Post  Hoc Tukey untuk  mengetahui  perbedaan antarkelompok perlakuan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Asupan  pakan  tikus  diperoleh  dengan  metode food weighing atau penimbangan makanan, yaitu pakan yang diberikan pada masing masing tikus dalam satu hari ditimbang  terlebih  dahulu  dan  dicatat,  selanjutnya apabila terdapat pakan yang tidak termakan habis (sisa) ditimbang kembali dan dicatat, kemudian dihitung selisih asupannya.  Data  peningkatan  berat  badan  didapatkan dari  perbedaan  berat  badan  akhir  dan  awal  perlakuan. Rerata asupan pakan dan perubahan berat badan hewan coba disajikan pada Tabel 1.
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
Tabel 1. Rerata Asupan Pakan dan Peningkatan Berat Badan Hewan Coba pada Setiap Kelompok Perlakuan
Kelompok Perlakuan Asupan Pakan (g) Fruktosa (ml) Total Energi (kkal) Peningkatan Berat Badan (g) K0 23,96 ± 4,75 0,00 ± 0,00 73,14 ± 14,50 17,83 ± 25,16 E1 28,09 ± 5,25 3,26 ± 0,20 94,58 ± 16,47 52,17 ± 22,33 E2 23,60 ± 8,13 3,35 ± 0,52 81,09 ± 25,99 31,17 ± 37,12 E3 25,03 ± 4,14 3,04 ± 0,14 85,47 ± 12,86 46,17 ± 23,03 E4 26,80 ± 5,03 3,07 ± 0,17 90,12 ± 15,77 48,33 ± 28,22 p-value* 0,611 0,000 0,294 0,211
K0:  Pakan  standar;  E1:  Pakan  standar,  fruktosa  66%  16  minggu;  E2:  Pakan  standar,  fruktosa  66%  12  minggu;  E3:  Pakan standar, fruktosa 66% 16 minggu, kuersetin selama 4 minggu; E4: Pakan standar, fruktosa 66% 16 minggu, serbuk daun kelor 4 minggu, *uji statistik One Way ANOVA
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  rerata  asupan makanan  dan  energi  total  tertinggi  pada  perlakuan  E1, sedangkan  terendah  pada  kelompok  E2.  Hasil  uji One Way ANOVA menunjukkan p=0,611 (p>0,05), maka tidak ada  perbedaan  signifikan  rerata  asupan  pakan antarkelompok  perlakuan  yang  diamati.  Tidak  terdapat perbedaan  rerata  total  energi  yang  signifikan antarkelompok perlakuan. Asupan pakan pada kelompok diabetes  atau  kelompok  perlakuan  dengan  diet  tinggi fruktosa  66%  (E1)  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  (K0)  namun  secara  statistik  tidak berbeda.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  perlakuan  terkait diet  tinggi  fruktosa  dengan  dosis  yang  diberikan  pada kelompok  E1  memberikan  pengaruh  terhadap  asupan pakan  hewan  coba  meski  tidak  signifikan.  Penambahan induksi  fruktosa  pada  kelompok  E1  dibandingkan kelompok  K0  menyebabkan  total  asupan  energi  untuk kelompok  E1  lebih  tinggi  daripada  kelompok  K0. Pemberian diet tinggi fruktosa  memberikan efek secara fisiologis  dan  mempengaruhi  kerusakan  metabolik seperti  terjadi  peningkatan  insulin,  trigliserida,  dan perkembangan  perlemakan  hati 20 .  Pemberian  fruktosa 66%  selama  2  minggu  menyebabkan  mRNA  reseptor insulin  di  otot  rangka  dan  hati  secara  signifikan  lebih rendah dibandingkan dengan tikus yang diberi diet chow standar 21 ,  sehingga  pada  penelitian  ini  digunakan  diet tinggi  fruktosa  66%.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  rerata  kadar  glukosa  darah  puasa  tikus  pre  DM yaitu  124  ±  8  mg/dL  dan  kadar  GDP  tikus  DMT2  yaitu 298,67±23,86  mg/dL,  sedangkan  kadar  GD2JPP  pada kelompok  tikus  pre  DM  adalah  152  ±  18,36  mg/dL  dan kadar GD2JPP pada kelompok tikus DMT2 yaitu 325,17 ± 33,98  mg/dL.  Kadar  glukosa  darah  ini  berbeda  nyata dengan  kelompok  tikus  sehat  yang  tidak  diberikan  diet tinggi fruktosa, yaitu kadar GDP tikus sehat yaitu 79,67 ± 7,37 mg/dL dan GD2JPP yaitu 102,33 ± 4,32 mg/dL. Pakan  yang  digunakan  memiliki  kandungan  zat gizi  protein,  lemak,  dan  karbohidrat  secara  berurutan sebesar 5,65%, 2,12%, dan 65,89%. Berdasarkan proporsi tersebut  menunjukkan  bahwa  lebih  dari  50%  pakan terdiri  dari  karbohidrat.  Asupan  karbohidrat  berlebih akan  menyebabkan  beberapa  masalah  kesehatan  salah satunya  adalah  DMT2.  Hal  tersebut  karena  karena
karbohidrat yang  berlebih akan  menyebabkan tingginya kadar  glukosa  dalam  tubuh  karena  karbohidrat  diserap oleh  tubuh  dalam  bentuk  glukosa  sehingga  dapat meningkatkan  sekresi  dari  hormon  insulin.  Konsumsi karbohidrat dalam jumlah berlebih dapat menyebabkan pengubahan karbohidrat menjadi lemak di dalam tubuh yang  terjadi  di  hati.  Kelebihan  asupan  lemak  dapat disimpan  dalam  bentuk  trigliserida  kemudian  dipecah menjadi gliserol dan asam lemak bebas. Akumulasi lemak dalam  bentuk  trigliserida  dapat  menyebabkan  adanya peningkatan berat badan 22 . Tabel  1  menunjukkan  bahwa  peningkatan  berat badan  tertinggi  terdapat  pada  kelompok  E1,  sedangkan peningkatan  berat  badan  terendah  terdapat  pada kelompok K0. Uji normalitas menghasilkan nilai p=0,929 (p>0,05),  distribusi  data  normal.  Uji  homogenitas menghasilkan nilai p=0,716 (p>0,05), menunjukkan data homogen.  Hasil  uji ANOVA menunjukkan  nilai  p=0,204 (p>0,05),  artinya  perubahan  berat  badan  tikus  tidak berbeda  secara  signifikan  antarkelompok  perlakuan. Meskipun  perubahan  berat  badan  antarkelompok perlakuan  tidak  berbeda  secara  statistik,  namun  terjadi peningkatan berat badan pada semua kelompok di akhir penelitian. Peningkatan berat badan kelompok diabetes atau kelompok yang diberi diet tinggi fruktosa 66% (E1) lebih  tinggi  daripada  kelompok  kontrol  atau  kelompok yang  tidak  diberi  diet  tinggi  fruktosa  66%  (K0).  Hal  ini menandakan  bahwa  diet  tinggi  fruktosa  memengaruhi kenaikan berat badan hewan coba.
Fruktosa tidak memicu terjadinya produksi leptin dan  insulin  sehingga  menimbulkan  rasa  lapar  dan keinginan  untuk  mengonsumsi  lebih  banyak  makanan sumber  energi 23 .  Kelompok  yang  diberikan  diet  normal memiliki  peningkatan  berat  badan  yang  rendah dikarenakan asupan energi yang dikonsumsi juga rendah jika dibandingkan  dengan  kelompok diet tinggi fruktosa tinggi  lemak.  Simpanan  lemak  maupun  protein  akan dipecah  melalui  proses  glukoneogenesis  pada  kondisi tubuh  kekurangan  energi.  Cadangan  lemak  maupun protein  semakin  menipis  jika  hal  tersebut  terjadi  terus- menerus  sehingga  menyebabkan  berat  badan  dapat menurun 24 .
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
Tabel 2. Rerata Kadar Kolesterol Total, Trigliserida, LDL, dan HDL Serum Hewan Coba Setiap Kelompok Perlakuan
Kelompok Perlakuan Trigliserida (mg/dL) HDL (mg/dL) LDL (mg/dL) Kadar Kolesterol Total (mg/dL) K0 37,17 ± 14,40 31,98 ± 3,24 b 13,7 ± 4,12 64,00 ± 7,04 b E1 54,83 ± 12,25 13,28 ± 1,63 a 18,33 ± 5,32 38,83 ± 11,79 a E2 31,00 ± 22,57 34,22 ± 4,63 b 15,03 ± 5,32 50,50 ± 8,12 a E3 51,67 ± 32,46 23,23 ± 7,93 ab 17,65 ± 4,39 53,67 ± 11,38 a E4 47,33 ± 13,38 32,95 ± 7,52 b 18,32 ± 4,29 49,50 ± 9,83 a p-value* 0,251 0,000 0,153 0,004
K0:  Pakan  standar,  E1:  Pakan  standar,  fruktosa  66%  16  minggu,  E2:  Pakan  standar,  fruktosa  66%  12  minggu,  E3:  Pakan standar, fruktosa 66% 16 minggu, kuersetin selama 4 minggu, E4: Pakan standar, fruktosa 66% 16 minggu, serbuk daun kelor 4  minggu,  *uji  statistik One  Way  ANOVA, data  adalah mean ±  standar  deviasi,  “a,b,ab”  menunjukkan  perbedaan  dalam kelompok ( p < 0,05)
Tabel  2  menunjukkan  hasil  nilai  rata-rata  dan deviasi standar untuk setiap parameter menggunakan uji deskriptif.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  kelompok  E2, yang  merupakan  kelompok  kontrol  prediabetes  dengan diet  tinggi  fruktosa,  memiliki  rerata  kadar  trigliserida yang  paling  rendah.  Di  sisi  lain,  kelompok  E1,  yang merupakan  kelompok  kontrol  DMT2  dengan  diet  tinggi fruktosa, memiliki rerata kadar trigliserida yang tertinggi. Rerata kadar trigliserida tidak  berbeda  secara signifikan dari kelima kelompok perlakuan berdasarkan uji One Way ANOVA . Penelitian Masnunah (2019) menunjukkan hasil yang  sejalan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  pada kelompok  nondiabetes  mellitus,  kelompok  DM  tanpa ekstrak  daun  kelor,  dan  kelompok  perlakuan  DM  yang diberi daun kelor sebanyak 200 mg/kg BB; 400 mg/kg BB; 600 mg/kg BB 25 . Kadar trigliserida hasil penelitian ini sebesar 20 – 101  mg/dL,  termasuk  dalam  rentang  normal.  Hal  ini disebabkan oleh salah satu faktor seperti asupan energi atau  lemak  yang  memiliki  peran  dalam  meningkatkan kadar  trigliserida  serum.  Makanan  sumber  lemak  jenuh yang  dikonsumsi  dalam  jumlah  berlebih  dapat menyebabkan  lipogenesis  juga  meningkat  serta  asam lemak bebas yang selanjutnya berikatan dengan gliserol yang  akan  membentuk  triasilgliserol.  Peningkatan sintesis  trigliserida  dalam  hepar  terjadi  pada  kondisi asupan lemak yang meningkat, hal ini akan menyebabkan kadar trigliserida darah mengalami peningkatan.
Kelompok kontrol negatif (K0) memiliki nilai lebih tinggi daripada kelompok kontrol positif (E2) yang hal ini tidak sesuai dengan teori bahwa tikus dengan DM yang diakibatkan resistensi insulin akan mengalami peningkatan trigliserida. Insulin merupakan inhibitor dari hormon  sensitif  lipase  dan  meningkatkan  aktivitas Lipoprotein  Lipase  (LPL).  Kadar  insulin  pada  DM berkurang sehingga aktivitas hormon sensitif lipase akan meningkat yang menyebabkan lipolisis sedangkan untuk aktivitas  LPL  akan  menurun  sehingga  menyebabkan hidrolisis dari kadar trigliserida menurun 25 .
Kadar trigliserida yang dimiliki oleh kelompok E1 paling  tinggi  disebabkan  oleh  kelompok  ini  hanya diberikan fruktosa saja tanpa pemberian perlakuan yang lain.  Fruktosa  pada  proses  glikolisis  dapat  melalui  jalan
pintas  dengan  dikatalisis  oleh  enzim  fruktokinase  akan membentuk  fruktosa  1-fosfat.  D-gliseraldehida  dan dihidroksi aseton fosfat akan terbentuk dari pemecahan fruktosa  1-fosfat  oleh  aldolase  B  melalui  enzim  gliserol dehidrogenase. Kemudian direduksi menjadi gliserol dan dengan  bantuan  enzim  gliserolkinase  difosforilasi menjadi gliserol-3-fosfat. Gliserol-3-fosfat diubah menjadi  diasilgliserol  3-fosfat  pada  proses  esterifikasi dengan  asam  lemak  bebas  fatty  acyl-CoA  sebagai prekursor pembentukan trigliserida 26 . Konsumsi  fruktosa  dalam  jangka  lama  dapat meningkatkan massa lemak dan juga meningkatkan stres oksidatif  pada  sel  endotel  yang  dapat  menyebabkan kenaikan  tekanan  darah,  risiko  obesitas,  dan  resistensi insulin 27 .  Ketiadaan  insulin  dapat  menyebabkan peningkatan  trigliserida.  Selain  itu,  resistensi  insulin dapat  meningkatkan  produksi Very  Low  Density Lipoprotein (VLDL)  yang  mengarah  pada  pembentukan partikel  sisa  aterogenik  yang  kaya  akan  trigliserida  dan LDL 28 . Kelompok E3 memiliki rerata trigliserida tertinggi kedua  setelah  kelompok  E1.  Penelitian  Pitoyo  (2012) menunjukkan  hasil  yang  berbeda  bahwa  terjadi penurunan  secara  signifikan  untuk  kelompok  yang diberikan  kuersetin  dosis  50  mg/kg  BB  dibanding kelompok  kontrol  obesitas 29 .  Faktor  yang  kemungkinan dapat  terjadi  apabila  efek  kuersetin  tidak  berpengaruh terhadap penurunan trigliserida karena kuersetin sebagai senyawa aktif obat memiliki masalah kelarutan dalam air yang  berpengaruh  pada  bioavaibilitas  yang  rendah  di dalam tubuh 30 . Adapun  kelompok  E4  memiliki  rata-rata trigliserida  yang  berada  di  tengah-tengah,  artinya  tidak tinggi  dan  tidak  rendah.  Hal  ini  memiliki  kesimpulan bahwa  terjadi  penurunan  trigliserida  yang  kurang maksimal  yang  dapat  disebabkan  oleh  proses  ekstraksi yang dilakukan dengan pelarut air kurang optimal dalam menarik senyawa bioaktif pada daun kelor dibandingkan dengan  proses  ekstraksi  dengan  menggunakan  pelarut etanol 31 .
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  rerata  kadar  HDL serum  tertinggi  pada  kelompok  E2  dan  dilanjutkan dengan  kelompok  E4  (diberikan  intervensi  daun  kelor),
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
sedangkan  kelompok  kontrol  DMT2  (E1)  memiki  kadar HDL terendah. Hal ini menunjukkan bahwa serbuk daun kelor  yang  diberikan  dapat  meningkatkan  kadar  HDL serum  tikus.  Berdasarkan  hal  ini,  kelompok  E2  memiliki kadar  HDL  terbaik.  Hal  tersebut  dikarenakan  pada kelompok  E2  durasi  pemberian  fruktosa  paling  singkat dibandingkan pada kelompok E1, E3, dan E4. Uji Kruskal Wallis menghasilkan nilai p=0,000 (p<0,05), menunjukkan perbedaan kadar HDL serum antarkelompok perlakuan. Berdasarkan hasil uji statistik didapatkan  bahwa  serbuk  daun  kelor  secara  signifikan memiliki  pengaruh  pada  kadar  HDL  hewan  coba. Penelitian  Saryono  (2017)  sejalan  dengan  penelitian  ini yaitu  daun  kelor  yang  diberikan  dalam  dosis  tunggal dapat  meningkatkan  rerata  kadar  HDL  diduga  karena kandungan  vitamin  C  dan  senyawa  flavonoid  di dalamnya 32 .
Rerata HDL serum pada kelompok E4 yang tinggi disebabkan  oleh  pemberian  serbuk  daun  kelor  selama masa perlakuan yaitu selama 4 minggu (28 hari). Serbuk daun  kelor  varietas  NTB  dalam  penelitian  ini  memiliki kandungan  antioksidan  seperti  alkaloid,  flavonoid, tannin, dan kuersetin. Kandungan alkaloid yang ada pada daun  kelor  dapat  memediasi  penurunan  lemak  dalam darah (hipolipidemik) dengan cara meningkatkan regulasi aktivitas enzim lipolitik atau dengan merangsang ekskresi kolesterol menjadi asam empedu melalui feses sehingga akan meningkatkan kadar HDL 17 .
Kandungan  flavonoid  yang  ada  pada  daun  kelor dapat  mencegah  proses  oksidasi  LDL  dan  menghambat aktivasi  enzim  HMG  Co-A  Reduktase  yang  akan mengakibatkan penghambatan pembentukan mevalonat dari  HMG  Co-A  yang  akan  membentuk  kolesterol sehingga dapat meningkatkan kadar HDL 33,34 . Kandungan tanin  berfungsi  dalam  menghambat  enzim  HMG-CoA reductase  yang  berperan  dalam  proses  pembentukan kolesterol.  Hal  tersebut  menyebabkan  penurunan pembentukan  Apo-B100  dan  peningkatan  reseptor  LDL sehingga terjadi penurunan kolesterol LDL dan VLDL 35 . Kuersetin  dapat  menghambat  peroksidasi  lipid dengan  cara  pelekatan  ion  logam  yang  berperan  dalam pembentukan  ROS  dengan  cara  menetralkan  radikal bebas.  Selain  itu  bentuk  kuersetin-3-O-glukosida  dapat meningkatkan  ekspresi  reseptor  LDL  sehingga  berfungsi memperbaiki  profil  lipid  melalui  penurunan  kadar  LDL, trigliserida,  kolesterol  total,  dan  meningkatkan  HDL 36 .
Jumlah  kuersetin  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  50  mg/kg  BB,  hal  ini  mengacu  pada  penelitian sebelumnya  bahwa  dosis  minimal  yang  menimbulkan efek  bermakna  pada  penurunan  kadar  glukosa  darah adalah  50  mg/kgBB  setiap  hari  melalui  sonde  per  oral. Pada  penelitian  ini  efektifitas  kuersetin  dalam meningkatkan HDL tidak signifikan dibandingkan serbuk daun  kelor  yang  terbukti  dari  rerata  kadar  HDL  pada kelompok E4 yang lebih tinggi daripada kelompok E3. Hal ini  disebabkan  oleh  kandungan  antioksidan  selain kuersetin  seperti  alkaloid,  tannin,  dan  flavonoid  yang banyak terdapat di serbuk daun kelor.
Rendahnya rerata serum HDL pada kelompok E1 menunjukkan  bahwa  kadar  HDL  pada  kondisi  diabetes mellitus  mengalami  penurunan  yang  disebabkan  oleh perubahan metabolisme lemak akibat adanya gangguan resistensi  insulin  yang  menyebabkan  hormon  lipase  di
jaringan  adiposa  menjadi  aktif  dan  berakibat  pada peningkatan  proses  lipolisis  trigliserida.  Hal  tersebut dapat menyebabkan asam lemak bebas meningkat secara berlebihan,  kemudian  akan  diubah  menjadi  trigliserida dan menjadi bagian VLDL di hati sehingga menghasilkan VLDL yang kaya akan trigliserida. VLDL tersebut lalu akan mengalami  proses  pertukaran  dengan  kolesterol  ester dari  HDL  sehingga  menghasilkan  HDL  yang  kaya  akan trigliserida  tetapi  kurang  kolesterol  ester  yang  akhirnya menyebabkan penurunan dari HDL serum karena mudah untuk dikatabolisme oleh ginjal 37,38 .
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  rerata  kadar  LDL serum tertinggi hingga terendah secara berurutan adalah kelompok  E1,  E4,  E3,  E2,  dan  K0.  Hasil  uji One  Way ANOVA didapatkan  nilai  p=0,153  (p>0,05),  artinya  tidak berbeda  secara  signifikan  rerata  kadar  LDL  serum  antar kelompok.  Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  daun  kelor  dosis  300,  500,  dan  700 mg/kg BB/hari pada tikus putih jantan yang diinduksi diet tinggi  lemak  tidak  memberikan  pengaruh  pada  rasio kadar kolesterol LDL plasma darah 39 . Hal ini kemungkinan disebabkan  oleh  stres  karena  penggunaan  sonde. Kelompok  E3  dan  E4  mendapatkan  2  kali  sonde  yakni fruktosa  serta  kuersetin  atau  kelor.  Menurut  Budiyono dan  Candra  (2013)  keadaan  stres  dapat  menyebabkan sintesis  trigliserida  dan  sekresi  VLDL  meningkat  yang diikuti oleh peningkatan LDL dan penurunan HDL 40 . Kadar  LDL  serum  tertinggi  terdapat  pada kelompok E1. Kondisi  hiperglikemia pada diabetes akan meningkatkan kadar LDL yang disebabkan oleh gangguan metabolisme lemak. Gangguan tersebut dapat menyebabkan  hormon  lipase menjadi  aktif  sehingga lipolisis  trigliserida  meningkat  pada  jaringan  adiposa, akibatnya  asam  lemak  bebas  yang  dihasilkan  berlebih. Peningkatan kadar asam lemak bebas akan menyebabkan oksidasi LDL densitas rendah yang bersifat aterogenik 41 . Kadar LDL pada kelompok E3 dan E4 lebih rendah jika dibandingkan kelompok E1. Adanya penurunan kadar LDL  serum  pada  tikus  yang  diberikan  intervensi  daun kelor  disebabkan  oleh  kandungan  senyawa  antioksidan yang  terdapat  pada  serbuk  daun  kelor  tersebut. Flavonoid dapat menghambat penyerapan fruktosa pada GLUT 2 pada mukosa usus yang bersifat nonkompetitif 42 . Menurut Umarudin et al. (2012), tanin diduga berperan sebagai  penghambat  oksidasi  LDL 43 .  Antioksidan  juga dapat berperan sebagai inhibitor lipoprotein lipase pada metabolisme  lemak,  sehingga  jumlah  trigliserida  dalam hepar dan lipolisis menurun 44 .
Penurunan kadar LDL serum pada kelompok tikus yang  diberikan  kuersetin  disebabkan  oleh  kelompok hidroksil aromatik yang berperan sebagai scavenger kuat dalam melawan ROS maupun radikal bebas lainnya serta kemampuan  meningkatkan  aktivitas  enzim  endogen misalnya SOD, CAT, dan GSH-Px. Kuersetin dan polifenol yang  terdapat  dalam  daun  kelor  mampu  memperbaiki kondisi dislipidemia melalui peningkatan ekspresi PPAR- γ  dan  penurunan  SREBP -1c  pada  hepar  tikus  sehingga sintesis  trigliserida  menurun.  Diperkirakan  kuersetin dapat  menjadi  ligan  yang  mampu  mengikat  reseptor tersebut sehingga memengaruhi resistensi insulin melalui kontrol transkripsi resistin atau gen sel adiposa lainnya 15 . Rerata  kadar  kolesterol  total  pada  Tabel  2 tertinggi  pada  kelompok  K0,  sedangkan  terendah  pada
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
kelompok  E1.  Hasil  uji One  Way  ANOVA menunjukkan bahwa  rerata  kadar  kolesterol  total  serum  antar kelompok  perlakuan  berbeda  signifikan  dengan  nilai p=0,004  (p<0,05).  Uji Post  Hoc menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  antara  kelompok  perlakuan  K0 dengan  perlakuan  lainnya  secara  signifikan  yang ditunjukkan  dari  notasi  berbeda  pada  tiap  perlakuan. Berdasarkan  hasil  uji  statistik  dapat  diketahui  bahwa kadar kolesterol total serum pada kelompok kontrol (K0) lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  DMT2(E1). Perbedaan kadar kolesterol antara kelompok K0 dengan E1  tidak  sejalan  dengan  penelitian  Susanti  dkk. 45 yang menyatakan  diet  tinggi  fruktosa  60%  selama  8  minggu dapat  meningkatkan  kadar  kolesterol  total,  LDL  dan trigliserida secara signifikan pada tikus.
Profil  lipid  pada  hewan  coba  yang  diberi  diet tinggi  fruktosa  dapat  menyebabkan  kadar  kolesterol total,  LDL,  trigliserida,  dan  kadar  protein  total meningkat 46 .  Kadar  kolesterol  total  serum  meningkat karena  metabolisme  fruktosa  yang  difosforilasi  oleh enzim  fruktokinase  menjadi  fruktosa  1-fosfat  kemudian diubah menjadi dihidroksi aseton fosfat dan gliseraldehid 3-fosfat membentuk gliserol 3-fosfat dan asetil-KoA. Asil- KoA  yang  diubah  dari  asetil-KoA  kemudian  berikatan dengan gliserol 3-fosfat membentuk trigliserida 23 . Kadar trigliserida  yang  meningkat  dapat  menyebabkan peningkatan  katabolisme  HDL.  Kadar  HDL  yang  rendah akan  menyebabkan  peningkatan  kolesterol  total  dalam darah. Hal ini dipengaruhi oleh kolesterol yang beredar di dalam darah tidak kembali ke hepar 4 . Kadar  kolesterol  total  serum  pada  kelompok  K0 yang  tinggi  dapat  dipengaruhi  oleh  faktor  tidak  adanya pre-test  sehingga  kadar  kolesterol  total  serum sebelumnya  tidak  diketahui.  Kemungkinan  besar  yang menyebabkan  kadar  kolesterol  total  serum  kelompok kontrol  (K0)  lebih  tinggi  dibandingkan  kelompok DMT2(E1) karena kadar kolesterol total serum kelompok K0  sudah  tinggi  sebelum  dilakukan  penelitian.  Kadar kolesterol total serum pada kelompok E4 (kelompok yang diintervensi  serbuk  daun  kelor)  lebih  rendah  yaitu 49,50±12,26  mg/dl  dibandingkan  dengan  kelompok  E2 yaitu 50,50±8,12 mg/dl. Hal ini berarti adanya penurunan
kolesterol total serum pada kelompok E4 meskipun tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok E2 dan E4.
Beberapa faktor yang diduga dapat memengaruhi menurunnya  kadar  kolesterol  total  serum  yaitu  hewan coba  diberi  diet  tinggi  fruktosa  selama  28  hari  dengan bersamaan  intervensi  serbuk  daun  kelor,  akibatnya terjadi  ketidakseimbangan  asupan  fruktosa  yang berpotensi meningkatkan kolesterol total serum dengan asupan  antioksidan,  sehingga  peningkatan  kadar kolesterol total serum tidak dapat dicegah 47 . Faktor lain yang  memengaruhi  penurunan  kadar  kolestetol  total serum  yang  tidak  signifikan  yaitu  lamanya  waktu intervensi serbuk daun kelor dan dosis pemberian serbuk daun kelor. Faktor dosis memengaruhi penurunan kadar kolesterol  total  serum  dibuktikan  oleh  penelitian  Zuhdi Falla et  al .  (2016)  yang  mengungkapkan  bahwa  hewan coba yang diinduksi diet aterogenik dengan intervensi air ekstrak  daun  kelor  600  mg/kg  BB  dapat  menurunkan kolesterol  total  serum  namun  tidak  signifikan 47 . Peningkatan dosis dapat berpotensi dalam menurunkan kolesterol  total  serum  karena  kadar  antioksidan  yang terkandung bertambah banyak sehingga dapat menghambat  pembentukan  kolesterol 47 .  Perununan kadar  kolesterol  yang  tidak  signifikan  juga  dipengaruhi oleh  aktivitas  senyawa  antioksidan  yang  terkandung dalam serbuk daun kelor rendah.
Senyawa  dalam  daun  kelor  yang  berfungsi sebagai  antioksidan  diantaranya  flavonoid,  polifenol, tanin  dan  kuersetin.  Daun  kelor  meregulasi  sistem metabolik dengan menghambat lipogenesis melalui jalur Nf-kb  dan  meningkatkan  sensitivitas  sekresi  insulin sehingga  proses  pembentukan  kolesterol  seperti  LDL, VLDL  dan  TG  dapat  dihambat 48 .  Senyawa  flavonoid  di dalam  daun  kelor  diketahui  dapat  menghambat  HMG- KoA reduktase sehingga mampu menurunkan kolesterol total serum. HMG-KoA reduktase merupakan enzim yang membantu  dalam  proses  pembentukan  kolesterol  di hati 49 .  Tanin  dapat  menyebabkan  turunnya  kadar kolesterol  total  serum  melalui  mekanisme  peningkatan ekskresi asam empedu 50 .
Gambar 1. Rerata Massa Jaringan Lemak Putih
Rerata  massa  jaringan  lemak  putih  tikus  yang tersaji  pada  Gambar  1  menunjukkan  bahwa  kelompok terendah  terdapat  pada  kelompok  kontrol  (K0), sedangkan  tertinggi  terdapat  pada  kelompok  kontrol prediabetes (E2). Hasil uji beda menunjukkan p = 0,010 (p
< 0,05), dapat diartikan terdapat perbedaan rerata massa jaringan  lemak  putih  antarkelompok  perlakuan  yang signifikan. Hasil uji lanjut menunjukkan bahwa kelompok kontrol  normal  (K0)  memiliki  perbedaan  signifikan dengan kelompok lainnya.
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
Massa  jaringan  lemak  antara  kelompok  kontrol (K0) berbeda  dengan kelompok lainnya (E1, E2, E3, dan E4).  Hal  ini  diduga  terjadi  karena  perbedaan  dalam konsumsi  fruktosa.  Kelompok  kontrol  normal  tidak diberikan  fruktosa,  sedangkan  kelompok  lainnya  diberi intervensi  66%  fruktosa  dengan  dosis  9  mg/kg  BB.  Diet tinggi  fruktosa  dapat  meningkatkan  akumulasi  jaringan lemak  putih  pada  manusia  dan  hewan  coba.  Hasil  ini sejalan  pada  penelitian  Bursac et  al .  (2014)  bahwa terdapat  peningkatan  akumulasi  jaringan  lemak  putih viseral  pada  tikus  yang  mengonsumsi  60%  fruktosa selama  9  minggu  dibandingkan  dengan  tikus  yang mengonsumsi diet normal 51 .
Asupan fruktosa yang tinggi dapat memengaruhi faktor sistemik yang terlibat dalam peningkatan jaringan lemak  putih.  Beberapa  faktor  sistemik  yang  berperan yaitu peningkatan asupan energi fruktosa yang dimediasi oleh  resistensi  leptin,  kerja  antagonis glucagon-like peptide-1  receptor (GLP-1R)  di  otak,  dan  peradangan jaringan  lemak  putih  viseral 52 .  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  konsumsi  66%  fruktosa  (9  mg/kg  BB) meningkatkan massa jaringan lemak putih tikus.
Jaringan  lemak  putih  adalah  jaringan  adiposa yang  dominan  pada  manusia  dan  berhubungan  dengan diabetes  dan  penyakit  kardiovaskular.  Jaringan  lemak putih membentuk sebagian besar lamak tubuh dan peran utamanya  dalam  penyimpanan  kelebihan  trigliserida
makanan  dapat  berkembang  melalui  hipertrofi  seluler saat  terjadi  obesitas 53 .  Jaringan  lemak  yang  mengalami peningkatan  ukuran  sel  (hipertrofi)  menyebabkan retikulum  endoplasma  sel  mengalami  hipoksia  lokal, adiposit  mati,  dan  infiltrasi  makrofag.  Hal  ini menyebabkan  peningkatan  sekresi  sitokin  proinflamasi yang  mengakibatkan  inflamasi  lokal  dan  sistemik sehingga mengganggu persinyalan insulin pada resistensi insulin 54 . Pemberian kuersetin dan serbuk daun kelor tidak mempengaruhi  massa  jaringan  lemak  putih  pada  tikus yang  diberi  diet  tinggi  fruktosa  karena  tidak  ada perbedaan  massa  jaringan  lemak  putih  pada  tikus kelompok  E1,  E2,  E3,  dan  E4.  Hal  ini  dapat  disebabkan oleh  aktivitas  antioksidan  daun  kelor  yang  digunakan tergolong antioksidan lemah (> 500 ppm), yaitu dengan nilai  IC 50 1312,99  ±  10,04  ppm.  Nilai  IC 50 yang  semakin rendah  menunjukkan  aktivitas  antioksidannya  yang semakin  kuat.  Nilai  IC 50 serbuk  daun  kelor  lebih  tinggi pada  penelitian  ini  apabila  dibandingkan  dengan penelitian  Ardiansyah  (2021)  yaitu  daun  kelor  dari Kabupaten  Cianjur  yang  telah  diekstrak  menunjukkan nilai  IC 50 sebesar  81,35  ±  0,57  ppm,  menunjukkan golongan  antioksidan  kuat 55 .  Aktivitas  antioksidan  daun kelor  yang  lemah  dapat  menjadi  penyebab  massa jaringan  lemak  antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok perlakuan tidak berbeda.
Gambar 2. Rerata Ketebalan Dinding Aorta
Gambar 2 menunjukkan bahwa rerata ketebalan aorta  tikus  tertinggi  ditemukan  pada  kelompok  kontrol diabetes  (E1),  sedangkan  kelompok  kontrol  (K0) menunjukkan  nilai  terendah.  Uji One  Way  ANOVA menghasilkan p = 0,002 (p < 0,05), dapat diartikan rerata ketebalan  aorta  antarkelompok  perlakuan  terdapat perbedaan yang signifikan. Hasil uji lanjut dapat diketahui bahwa  kelompok  kontrol  diabetes  (E1)  memiliki perbedaan yang signifikan dengan kelompok lainnya.
Ketebalan  dinding  aorta  pada  kelompok  E1 cenderung  lebih  besar  daripada  E2  dimana  intervensi fruktosa pada kelompok E1 dilakukan dengan waktu yang lebih lama yaitu selama 19 minggu dibandingkan dengan E2  selama  15  minggu.  Hasil  penelitian  Yoo et  al. (2017) menunjukkan  tikus  yang  diintervensi  dengan  larutan fruktosa  30%  selama  8  minggu  dapat  menginduksi penambahan  total  berat  lemak  dan  ketebalan  dinding tunika  media  aorta  secara  signifikan  yang  dapat menyebabkan disfungsi endotel 56 .
Dinding  aorta  yang  mengalami  penebalan merupakan tahap lanjutan setelah pembentukan sel busa (foam cell) yang berasal dari menumpuknya lipid intrasel di  dinding  arteri  saat  kondisi  aterosklerosis.  Oksidasi NADH  atau  NADPH  pada  sel  menyebabkan  terjadinya stres  oksidatif  yang  merangsang  endotelium  untuk mengekspresikan  molekul  adhesi  misalnya vascular  cell adhesion molecule-1 dan intercellular adhesion molecule- 1. Lalu  monosit  menginfiltrasi  sel  endotel.  Makrofag terbentuk setelah monosit masuk ke dinding intima arteri melalui  mediasi  MCSF (macrophage-colony  stimulating factor). MCSF juga mengekspresikan scavenger reseptor sehingga  terjadi  fagositasi  makrofag  mengubah  LDL teroksidasi menjadi sel busa 57,58 . Inflamasi yang terjadi akan semakin berat karena MCSF  yang  punya  peran  dalam  pembentukan  sel  busa mampu  merangsang  pengeluaran  sitokin  proinflamasi diantaranya  TNF- α,  IFN - ɤ ,  dan  lymphotoxin.  Mediator fibrogenik  serta platelet  derived  growth  factor juga
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
dihasilkan setelah monosit masuk ke dinding arteri yang akan menyebabkan migrasi serta proliferasi sel otot polos dari  tunika  media  ke  tunika  intima.  Lesi  terbentuk  dari fatty  streak  atau  bercak  lemak  yang  disertai  dengan adanya  migrasi  dan  proliferasi  sel  otot  polos  yang terstimulasi  akibat  dari growth  factor seperti platelet derived  growth  factor .  Akumulasi  yang  terjadi  pada matriks  ekstraseluler  seperti  kolagen,  jaringan  ikat fibroblas,  dan  juga  serat  elastin  pada  tunika  intima berperan dalam terjadinya penebalan dinding aorta 59,60 . Meskipun  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan terhadap  asupan  fruktosa  antarkelompok  perlakuan, dapat  diketahui  kerusakan  metabolik  internal  tetap terjadi  pada  kelompok  tikus  yang  diberikan  diet  tinggi fruktosa  66%.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Febrianingsih  (2019)  yang  menyatakan  bahwa  tidak semua  tikus  mengalami  obesitas,  tetapi  karena  asupan energi  bersumber  dari  fruktosa  dapat  menyebabkan metabolik internal terganggu yaitu berupa pembentukan sel busa maupun penebalan dinding aorta pada tikus 20 .
Kelompok E3 yang diberikan intervensi kuersetin selama  4  minggu  menunjukkan  hasil  penebalan  dinding aorta yang lebih rendah dibandingkan dengan kelompok E4 (diberikan intervensi daun kelor selama 4 minggu). Hal ini membuktikan bahwa intervensi kuersetin cenderung lebih  menurunkan  ketebalan  aorta  tikus  yang  diabetes dibandingkan  dengan  intervensi  daun  kelor.  Salah  satu antioksidan yang dapat mencegah aterosklerosis antara lain alkaloida maupun flavonoid seperti kuersetin. Tikus yang  diberi  intervensi  kuersetin  menunjukkan  plak aterosklerotik lebih sedikit, sehingga hal ini menunjukkan bahwa  kuersetin  dapat  menghambat  pembentukan daerah  aterosklerotik  di  aorta  tikus  dengan  diet  tinggi fruktosa. Terbukti bahwa kuersetin mampu menghambat poliferasi dari berbagai reseptor faktor pertumbuhan dan pada  jalur  ROS  serta  transkripsi  gen  yang  menginduksi peradangan pada sel endotel yang merupakan penyebab dari penebalan dinding aorta 61 .
Penurunan  ketebalan  aorta  pada  tikus  yang diberikan  intervensi  daun  kelor  dibuktikan  pada penelitian  sebelumnya  bahwa  daun  kelor  ( Moringa Oleifera )  memiliki  efek  antioksidan  yakni  sebagai modulator sel inflamasi. Hal ini dibuktikan oleh penelitian terdahulu oleh Randriamboavonjy et al . (2019) yaitu tikus hipertensi  yang  diintervensi  daun  kelor  750  mg/kgBB selama  4  minggu  dapat  menurunkan  ketebalan  dinding aorta  tikus  secara  signifikan  melalui  peningkatan bioavailabilitas NO 62 . Kelompok perlakuan yang diberikan kuersetin  dan  daun  kelor  mengalami  penurunan ketebalan  aorta  karena  antioksidan  dalam  daun  kelor ( Moringa Oleifera ) dapat memicu penurunan penyerapan  kolesterol  dan  penurunan  reaksi  inflamasi kemudian  menghambat  aterosklerosis  sehingga  tebal dinding pembuluh darah aorta akan berkurang 63 .

## KESIMPULAN
Penelitian  ini  memberikan  kesimpulan  bahwa serbuk  daun  kelor (Moringa  Oleifera) yang  diberikan sebesar  500  mg/kg  BB  pada  hewan  coba  tikus Wistar jantan  tidak  memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap asupan pakan, perubahan berat badan, kadar trigliserida, LDL,  dan  massa  jaringan  lemak  putih,  dan  berpengaruh pada  peningkatan  kadar  HDL  serta  penurunan  total
kolesterol  dan  ketebalan  aorta.  Perlu  dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis serbuk daun kelor dan lama masa perlakuan yang tepat untuk memengaruhi kadar  trigliserida,  LDL,  dan  massa  jaringan  lemak  putih. Selain itu untuk melarutkan serbuk daun kelor disarankan menggunakan  etanol  dibandingkan  air  karena  pelarut etanol  dapat  mengekstrak  lebih  banyak  zat  aktif  yang terdapat  pada  tanaman  sehingga  intervensi  yang diberikan dapat menunjukkan adanya perbedaan antara kelompok  yang  diberi  serbuk  daun  kelor  dengan kelompok yang tidak diberi serbuk daun kelor.
Kelebihan dalam penelitian ini adalah menggunakan  model  hewan  induksi  yang  fenotipnya mirip dengan penyakit manusia dan variabel yang mudah dikontrol serta dalam pemeliharaannya tidak membutuhkan  ruangan  yang  luas.  Penelitian  ini  juga dapat  mencakup  peneluan  infromasi  baru,  kontribusi terhadap  ilmu  pengetahuan,  pemecahan  masalah, pengembangan kebijakan, dan meningkatkan pemahaman  tentang  suatu  fenomena.  Selain  itu, penelitian juga dapat meningkatkan keterampilan analitis dan  metodologis  peneliti.  Penelitian  ini  memiliki kekurangan yaitu memerlukan durasi waktu relatif lama dan dosis pemberian fruktosa yang tinggi sehingga dapat meningkatkan  risiko  terjadinya  diare  maupun  kematian pada hewan coba (tikus).

## ACKNOWLEDGEMENT
Penulis  utama  dan  koresponding  author berkontribusi dalam penentuan ide penelitian, bertanggung jawab terhadap pelaksanaan penelitian, dan penulisan  manuskrip.  Anggota  peneliti  pertama  sampai dengan  ke  empat  berkontribusi  dalam  penentuan  ide penelitian,  identifikasi  teknis  metode  penelitian,  dan bertanggung  jawab  terhadap  pelaksanaan  penelitian. Anggota  peneliti  ke  lima  sampai  dengan  ke  sepuluh bertugas  dalam  proses  pemeliharaan  dan  perawatan hewan  coba,  pencatatan  kondisi  hewan  sebelum  dan selama  perlakuan  serta  pengumpulan  data  dan  analisis parameter  penelitian.  Penulis  utama  dan  koresponding author  adalah  kontributor  dalam  pengembangan  ide dasar  penelitian  dan  pemilik  payung  penelitian  besar terkait peran daun kelor terhadap perbaikan kondisi DM.
Seluruh  penulis  berperan  serta  dalam  melakukan finalisasi manuskrip dengan aktif.

## Konflik Kepentingan dan Sumber Pendanaan
Semua penulis tidak memiliki conflict of interest terhadap artikel ini. Penelitian ini didanai oleh Direktorat Jenderal  Pendidikan  Tinggi,  Riset,  dan  Teknologi Kementerian  Pendidikan,  Kebudayaan,  Riset,  dan Teknologi  yang  telah  membiayai  penelitian  ini  melalui Hibah Penelitian Pemula (HPP) Tahun 2022.

## Kontribusi Penulis
ADA,  ARC,  IK,  DH:  penentuan  ide  penelitian, identifikasi  teknis  metode  penelitian,  dan  bertanggung jawab terhadap pelaksanaan penelitian; AC, SS, DA, UA, PS,  HM,  RAW:  proses  pemeliharaan  dan  perawatan hewan  coba,  pencatatan  kondisi  hewan  sebelum  dan selama  perlakuan  serta  pengumpulan  data  dan  analisis parameter penelitian.
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289

## REFERENSI
1. Setyawati, V. A. V. & Rimawati, E. Pola Konsumsi Fast  Food  dan  Serat  sebagai  Faktor  Gizi  Lebih pada  Remaja. Unnes  Journal  of  Public  Health 5 , 275-284 (2016).
2. Kemenkes.  Laporan  Riskesdas  2018  Nasional. (2018).
3. Lumbuun,  N.  &  Kodim,  N.  Pengaruh  Konsumsi Fruktosa  pada  Minuman  Kemasan  terhadap Toleransi Glukosa Terganggu pada Kelompok Usia Dewasa  Muda  di  Perkotaan  Indonesia. Jurnal Epidemiologi  Kesehatan  Indonesia 1 ,  19-23 (2017).
4. Kuswandari, L. S. Pengaruh Pemberian Diet High Fat  High  Fructose  Modifikasi  Ain-93M  Terhadap Jumlah Sel Beta dan Histopatologi Pankreas Tikus Sprague  Dawley  Jantan  Model  Obesitas. (Universitas Brawijaya, 2019).
5. Refdanita, Musnelina, L., Teodhora & Aprianis, H. H. U. Gambaran Terapi Diabetes dengan Penyakit Penyerta  Hiperlipidemia  di  Rumah  Sakit. Jurnal Endurance 6 , 103 – 113 (2021).
6. Association, A. D. Classification and Diagnosis of Diabetes: Standards of Medical Care in Diabetes- 2020. Diabetes Care 43 , (2020).
7. Pham,  N.  M.,  Eggleston  K.  Prevalence  and Determinants  of  Diabetes  and  Prediabetes among  Vietnamese  Adults. Diabetes  Res  Clin Pract . 2-9 (2016)
8. Yudkin, J. S., Montori, V. M. The Epidemic of Pre- diabetes: The Medicine and The Politics. BMJ . 1-6 (2014).
9. World  Health  Organisation.  Diabetes  mellitus: Report  of  a  WHO  Study  Group. World  Health Organisation. GenevaSwitzerland . 25-36 (2006).
10. Pekerti, A. C., Kurniasari, F. N. & Kusumastuty, I. Jus  Jambu  Merah  dan  Jeruk  Siam  Menurunkan Trigliserida pada Wanita Dislipidemia. Indonesian Journal of Human Nutrition 6 , 1-9 (2019).
11. Wari,  A.  T.,  Muhlishoh,  A.,  Nurzihan,  N.  C . Hubungan  Indeks  Glikemik  dan  Beban  Glikemik Makanan  Terhadap  Kadar  LDL  Dan  RLPP  Pasien Diabetes  Mellitus  Tipe-2.  (Universitas  Kusuma Husada Surakarta, 2022).
12. Rantung,  A.  A.,  Umboh,  A.  &  Mantik,  M.  F.  J. Hubungan  Hiperkolestrolemia  dengan  Obesitas pada Siswa SMP Eben Haezar Manado. e-CliniC 2 , (2014).
13. Alhakmani, F., Kumar, S. & Khan, S. A. Estimation of  Total  Phenolic  Content,  In-Vitro  Antioxidant and  Anti-Inflammatory  Activity  of  Flowers  of Moringa Oleifera. Asian Pac J Trop Biomed 3 , 623- 627 (2013).
14. Adawiyah,  R.,  Sartika,  F.  &  Arfianto,  F.  Potensi Ekstrak Akar Kalakai (Stenochlaena palutris Bedd) sebagai  Antihiperlipidemia  yang  Diuji  Secara  In Vivo. Jurnal Pharmascience 7 , 62-71 (2020).
15. Monika, A. & Lestariana, W. Pengaruh Pembeian Kombinasi Kuersetin dan Glibenklamid terhadap Kadar Kolesterl LDL pada Tikus Diabetes Melitus Tipe 2. JKKI 6 , 27 – 36 (2014).
16. Dwika,  W.,  Putra,  P.,  Agung,  A.,  Oka Dharmayudha, G. & Sudimartini, L. M. Identifikasi
Senyawa  Kimia  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor. Indonesia Medicus Veterinus Oktober 5 , 464-473 (2016).
17. Aborhyem,  S.,  Ismail,  H.,  Agamy,  N.  &  Tayel,  D. Effect of Moringa Oleifera on Lipid Profile in Rats. Journal of High Institute of Public Health 46 , 8 – 14 (2016).
18. Romero-Nava,  R.,  Zhou,  D.,  Garcia,  N.,  Ruiz- Hernandez,  A.,  Si,  Y.,  Sanchez-Munoz,  F., et  al.
Evidence  of  Alterations  in  The  Expression  of Orphan Receptors GPR26 and GPR39 Due to The Etiology  of  The  Metabolic  Syndrome. Journal  of Receptors and Signal Transduction 37 , 1-8 (2017). 19. Villarruel-López,  A.,  Lopez-de  la  Mora,  D.  A., Vazquez-Paulino,  O.  D.,  Puebla-Mora,  A.G., Torres-Vitela, M. R., Guerrero-Quiroz, L. A., et al. Effect  of  Moringa  Oleifera  Consumption  on Diabetic Rats. BMC Complement Altern Med 18 , (2018).
20. Febrianingsih,  E.  Pengaruh  Pemberian  Diet  High Fat  High  Fructose  Aorta  Tikus  Sprague  Dawley Jantan  Model  Obesitas.  (Universitas  Brawijaya, 2019).
21. Catena, C., Giacchetti, G., Novello, M., Colussi, G., Cavarape, A., Sechi, L. A. Cellular Mechanisms of Insulin Resistance in Rats with Fructose-induced Hypertension. Am  J  Hypertens 16 ,  973-978 (2003).
22. Siregar NS. Karbohidrat. Jurnal Ilmu Keolahragaan 13 , 38 – 44 (2014).
23. Rahmawati,  Y.  W.,  Ulfa,  E.  U.  &  Rachmawati,  E. Pengaruh  Ekstrak  Metanol  Daun  Kayu  Kuning (Arcangelisia flava (L.) Merr) terhadap Histopatologi Aorta Tikus Wistar Hiperlipidemia.
e-Jurnal Pustaka Kesehatan 4 , 241 – 248 (2016).
24. Astuti, I. L. P. Pengaruh Pemberian Diet High Fat High  Fructose  Modifikasi  AIN-93M  terhadap Kadar  Serum  Trigliserida  dan  Low  Density Lipoprotein pada Tikus (Rattus Norvegicus) Galur Sprague  Dawley  Jantan.  (Universitas  Brawijaya, 2019).
25. Masnunah.  Efek  Ekstrak  Daun  Kelor  (Moringa Oleifera) Terhadap Kadar Trigliserida Tikus Jantan Galur  Sprague  Dawley  Diabetes  Melitus  yang Diinduksi  Streptozotocin.  (Universitas  Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, 2019).
26. Horton,  J.  D.,  Goldstein,  J.  L.  &  Brown,  M.  S. SREBPs:  Activators  of  The  Complete  Program  of Cholesterol and Fatty Acid Synthesis in The Liver.
Journal  of  Clinical  Investigation 109 ,  1125 – 1131 (2002).
27. Haris, S. & Tambunan, T. Hipertensi pada Sindrom Metabolik. Sari Pediatri 11 , 257-263 (2016).
28. Hassing,  H.  C.,  Surendran,  R.  P.,  Mooij,  H.  L., Stroes, E. S., Nieuwdorp, M., Dallinga-Thie, G. M. Pathophysiology of hypertriglyceridemia. Biochim  Biophys  Acta  Mol  Cell  Biol  Lipids 1821 ,
826 – 832 (2012).
29. Pitoyo,  F.  L.  H.  &  Fatmawati,  H.  The  Effect  of Quercetine  to  Reduced  Trigliceride  and  Blood Glucose  Level  in  Animal  Model  Diet-Induced Obesity. Jurnal Medika Planta 1 , 36 – 46 (2012). 30. Cahyani,  M.  Formulasi  dan  Uji  Pelepasan
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
Kuersetin  Ekstrak  Daun  Jambu  Biji  (Psidium Guajava  L.)  pada  Mikroemulsi  dalam  Basis  Gel Menggunakan  Virgin  Coconut  Oil  (VCO)  sebagai Fase  Minyak.  (Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim, 2017).
31. Wardani,  E.,  Sunaryo,  H.,  Sopiani,  M.  Z.  & Fatahillah,  M.  Aktivitas  Antihipertrigliserida  dan Antihiperglikemik  Ekstrak  Daun  Kelor  (Moringa Oleifera  Lam.)  pada  Tikus  Hipertrigliserida Diabetes. Media Farmasi 12 , 199 – 212 (2015).
32. Handayani, S., Saryono & Hernayanti. Effek Daun Alpukat  (Persea  Americana  M.)  dan  Daun  Kelor (Moringa Oleifera L.) terhadap Peningkatan Kadar HDL  Pada  Model  Tikus  Putih  Hiperlipidemia. Jurnal Keperawatan Soedirman 12 , 47-55 (2017). 33. Utami,  T.  B.  Aktivitas  Penghambat  Enzim  HMG- CoA Reduktase dan Peroksidasi Lipid dari Sepuluh Tanaman  Indonesia  Secara  Ex  Vivo.  (Sekolah Tinggi Farmasi Bandung, 2017).
34. Satrianawaty, L. D., Sumarno, T. M. & Prabowo, S. Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun  Kelor (Moringa Oleifera) Terhadap Kadar Kolesterol Hdl Tikus  Putih  (Rattus  Norvegicus)  Jantan  Galur Wistar  Hiperglikemia  dengan  Induksi  Aloksan. Jurnal Medical Hang Tuah 17 , 30-43 (2019)
35. Agustina,  D.  &  Murwani  R,  H.  Pengaruh Pemberian  Jus  Biji  Pepaya  (Carica  Papaya  L.) Terhadap Rasio Kolesterol LDL:HDL Tikus Sprague Dawley Dislipidemia. Journal of Nutrition College
2 , 302 – 311 (2013).
36. Lin M, Zhang J, & Chen X. Bioactive flavonoids in Moringa  Oleifera  and  Their  Health-promoting Properties. J Funct Foods 47 , 469-479 (2018).
37. Malau,  S.  R.  Hubungan  Kadar  Glukosa  Darah Puasa dengan Profil Lipid pada Diabetes Melitus Tipe  2.  (Universitas  HKBP  Nommensen  Medan, 2014).
38. Pratiwi,  W.  R.,  Hediningsih,  Y.  &  Isworo,  J.  T. Hubungan  Kadar  Glukosa  Darah  Dengan  Kadar HDL  (High  Density  Lipoprotein)  Pada  Pasien Diabetes Melitus Tipe 2. Jurnal Labora Medika 5 , 29 – 34 (2021).
39. Maulana,  A.  R.,  Seto,  P.  &  Rahmat,  B.  Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Kelor (Moringa Oleifera) terhadap  Rasio  Kadar  LDL/HDL  Kolesterol  pada Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus)  Dislipidemia. (Universitas Mataram, 2017).
40. Wahyu, B. & Aryu, C. Perbedaan Kadar Kolesterol Total  dan  Trigiserida  sebelum  dan  setelah Pemberian  Sari  Daun  Cincau  Hijau  (Premna Oblongifolia  Merr)  pada  Tikus  Dislipidemia.
Journal of Nutrition College 2 , 118 – 125 (2013).
41. Putri,  S.  R.  &  A,  D.  I.  Obesitas  sebagai  Faktor Resiko  Peningkatan  Kadar  Trigliserida. Jurnal Majority 4 , 78 – 82 (2015).
42. Wulandari,  L.,  Nugraha,  A.  S.  &  Azhari,  N.  P. Penentuan Aktivitas
Antioksidan dan Antidiabetes Ekstrak Daun Kepundung (Baccaurea racemosa Muell.Arg.) secara In Vitro. Jurnal Sains Farmasi & Klinis 7 , 60-68 (2020).
43. Umarudin, Susanti, R. & Yuniastuti, A. Efektifitas Ekstrak Tanin  Seledri Terhadap  Profil Lipid Tikus Putih  Hiperkolesterolemi. Unnes  Journal  of  Life
Science 1 , 78 – 85 (2012).
44. Zulviyati. Uji Aktivitas Antioksidan dan Antihiperlipidemia Ekstrak Daun Kepuh (Sterculia foetida): Metode DPPH dan Hambatan Lipase In Vitro. (Universitas Jember, 2015).
45. Susanti, N., Rahmawati, E. & Kristanti, R. A. Efek Diet  Tinggi  Fruktosa  terhadap  Profil  Lipid  Tikus Rattus Rattus norvegicus Strain Wistar. Journal of Islamic Medicine 3 , 26 – 35 (2019).
46. Rajesh,  R.  &  Venugopal,  S.  High  Fructose  Diet- induced Metabolic Syndrome and The Functional Abnormalities in The Liver and Kidney oOf Wistar Albino Rats. Natl J Physiol Pharm Pharmacol 11 ,
156 – 159 (2020).
47. Zuhdi,  F.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Air (Moringa  Oleifera  Lam.)  terhadap  Kadar Kolesterol  Total  dan  Trigliserida  Serum  Tikus Putih  (Rattus  norvegicus)  Strain  Wistar  yang Diberi  Diet  Aterogenik.  (Universitas  Brawijaya, 2016).
48. Wardhani,  T.  M.  Pemanfaatan  Tanaman  Kelor (Moringa  Oleifera  Lam.)  sebagai  Sumber  Terapi Preventif  dan  Kuratif  pada  Pasien  Perlemakan Hepar  dengan  Sindrom  Metabolik. SCRIPTA SCORE Scientific Medical Journal 1 , 1-12 (2020).
49. Maryani,  P.  E.,  Ulfa,  E.  U.  &  Rachmawati,  E. Pengaruh  Ekstrak  Metanol  Daun  Kayu  Kuning (Arcangelisia  flava  (  L.)  Merr.)  terhadap  Kadar Kolesterol Total dan Trigliserida Tikus Hiperlipidemia. e-Jurnal  Pustaka  Kesehatan 4 ,
241 – 248 (2016).
50. Zulviana, E., Rahman, N. & Supriadi, S. Pengaruh Pemberian Ekstrak Buah Kelor (Moringa Oleifera) Terhadap Penurunan Kadar Kolestrol pada Darah Hewan Mencit (Mus musculus). Jurnal Akademika Kimia 6 , 15-20 (2017).
51. Bursac, B. N., Vasiljevic, A. D., Nestorovic, N. M., Velickovic,  N.  A.,  Milutinovic,  D.  D.  V.,  Matic,  G. M., et  al. High-fructose  Diet  Leads  to  Visceral Adiposity and Hypothalamic Leptin Resistance in Male  Rats  -  Do  Glucocorticoids  Play  A  Role? Journal of Nutritional Biochemistry 25 , 1-9 (2014).
52. Burmeister, M. A., Ayala, J., Drucker, D. J. & Ayala, J.  E.  Central  Glucagon-like  Peptide  1  Receptor- induced Anorexia Requires Glucose Metabolism- mediated  Suppression  of  AMPK  and  Is  Impaired by  Central  Fructose. Am  J  Physiol  Endocrinol Metab 304 , 677-685 (2013).
53. Zwick, R. K., Guerrero-Juarez, C. F., Horsley, V. & Plikus,  M.  V.  Anatomical,  Physiological,  and Functional  Diversity  of  Adipose  Tissue. Cell Metabolism 27 , 68-83 (2018).
54. Item, F. & Konrad, D. Visceral Fat and Metabolic Inflammation:  The  Portal  Theory  Revisited. Obesity Reviews 13 , 30-39 (2012).
55. Ardiansyah,  A.  Aktivitas  Antioksidan  Daun  Kelor (Moringa Oleifera Lam) Segar dan Kering dengan Metode  DPPH.  (Universitas  Bhakti  Kencana, 2021).
56. Yoo,  S.  Y.,  Ahn,  H.  &  Park,  Y.  K.  High  Dietary Fructose  Intake  on  Cardiovascular  Disease Related Parameters in Growing Rats. Nutrients 9 , 1-12 (2017).
How to cite: Ariestiningsih, A. D., Cempaka, A. R., Kusumastuty, I., Cahyaningrum, A., Setiawati, S., Arintya, D., Azmi, U., Salwa, P., Malahayati, H., Wibowo, R. A., & Handayani, D. (2024) Moringa Leaf Powder Improves Lipid Profiles and Aortic Thickness in Wistar Rats Model of Prediabetes Mellitus: Pemberian Serbuk Daun Kelor terhadap Perbaikan Profil Lipid dan Ketebalan Aorta pada Tikus Model Prediabetes Melitus. Amerta Nutrition, 8(2), 278 – 289.
e-ISSN: 2580-1163 (Online) p-ISSN: 2580-9776 (Print) Ariestiningsih dkk. | Amerta Nutrition Vol. 8 Issue 2 (Juni 2024). 278-289
57. Rocha,  V.  Z.  &  Libby,  P.  Obesity,  Inflammation, and Atherosclerosis. Nat Rev Cardiol 6 , 399 – 409 (2009).
58. Bobryshev, Y. V., Ivanova, E. A., Chistiakov, D. A., Nikiforov,  N.  G.  &  Orekhov,  A.  N.  Macrophages and Their Role in Atherosclerosis: Pathophysiology  and  Transcriptome  Analysis. Biomed Res Int 2016 , 1-12 (2016).
59. Sakakura,  K.,  Nakano,  M.,  Otsuka,  F.,  Ladich,  E., Kolodgie,  F.  D.,  Virmani,  R.  Pathophysiology  of Atherosclerosis  Plaque  Progression. Heart  Lung and Circulation 22 , 399 – 411 (2013).
60. Karakas,  M.  &  Koenig,  W.  The  Role  of Inflammation in Atherosclerosis - An Update. Der Klinikarzt 39 , 140 – 146 (2010).
61. Halkos, M. E., Nicholas, J., Li, S. K., Burke, J. R. &
Milner,  R.  Endovascular  Management  of  Blunt Abdominal  Aortic  Injury. Vascular 14 ,  223 – 226 (2006).
62. Randriamboavonjy,  J.  I.,  Heurtebise,  S.,  Pacaud, P., Loirand, G. & Tesse, A. Moringa Oleifera Seeds Improve Aging-related Endothelial Dysfunction in Wistar  Rats. Oxid  Med  Cell  Longev 2019 ,  1-8 (2019).
63. Chumark,  P.,  Khunawat,  P.,  Sanvarinda,  Y., Phornchirasilp,  S.,  Morales,  N.  P.,  Phivthong- Ngam,  L., et  al. The  In  Vitro  and  Ex  Vivo Antioxidant  Properties,  Hypolipidaemic  and Antiatherosclerotic Activities of Water Extract of Moringa Oleifera Lam. leaves. J Ethnopharmacol 116 , 439 – 446 (2008).