JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika

## Isolasi dan Karakterisasi Kitosan dari  Cangkang Rajungan (Portunus pelagicus)
Irza Dewi Sartika 1 , Moch. Amin Alamsjah 2 Noor Erma Nasution Sugijanto 3 *
1 Program Studi Bioteknologi Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
3 Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya e-mail: 1 irza.dewisartika20@gmail.com , 3 * ermasugianto@yahoo.co.id ,

## Abstrak
Rajungan  (Portunus  pelagicus)  merupakan  spesies  (Crustacean),cangkangnya  tidak dimanfaatkan sehingga menimbulkan limbah yang dapat mencemari lingkungan untuk itu perlu diolah menjadi bahan yang  bernilai ekonomi seperti kitosan.
Penelitian ini bertujuan mengisolasi dan melakukan karakterisasi kitin dan  kitosan dari cangkang Rajungan.
Hasil penelitian menunjukkan rendemen kitin diperoleh 23,9873 ± 5,5573 % kitosan dari cangkang Rajungan diperoleh 13,2724 ±  1,9338 % dengan  derajat deasetilasi 70,73 ± 2,9143 %. Hasil penelitian ini menunjukkan kitosan dapat diisolasi dari cangkang rajungan .
Kata kunci: Rajungan (Portunus pelagicus), Kitosan, Isolasi

## Abstract
Portunus  pelagicus    is    Crustacean  species,  the  shells  polluted    the  environment,  so  it can   be processed to the valuable materials such as chitosan.
The  aims  of  the  study  is  to  isolate  and  characterization  of  the  chitosan  from  Portunus pelagicus
The results showed that the the yield obtained for extracted chitin was 23,9873 ± 5,5573 %  ,    chitosan  was    13.2724  ±    1,9338  % with  degree  of  deacetylation  70.73±  2,9143  %  from Portunus pelagicus . The result showed that chitosan can be isolated from Portunus pelagicus
Keywords: Portunus pelagicus, Chitosan, Heavy metals, Cu 2 +

## 1. PENDAHULUAN
Sumber  daya  laut  yang  sangat  melimpah  dan beragam  dapat  dimanfaatkan  seoptimal  mungkin  bagi kesejahteraan  manusia.  Organisme  laut  berpotensi tinggi  sebagai  bahan  berkhasiat.  Pandangan  ini  cukup beralasan,  karena  lingkungan  laut  dicirikan  dengan kisaran    kondisi  yang  sangat  luas  dan  beragam,  mulai dari  suhu,  tekanan,  nutrien  hingga  intensitas  cahaya matahari  (Rumengan,  2014).  Laut  merupakan  sumber bahan  alami  dengan  organisme  invertebrata  dari kelompok Molusca sp, Coelenterata sp ,  Annelida sp, Nematoda sp  dapat  dimanfaatkan  manusia  sebagai sumber  protein  maupun  bahan  berkhasiat  yang  lain. Salah satu sumber protein hewani yang berasal dari laut adalah    rajungan,  proteinnya  cukup  lengkap,  karena asam  amino  esensialnya  tinggi,  mudah  dicerna  tubuh,
serta merupakan sumber vitamin yang larut lemak dan air.  Di  daging  kerang  darah (Anadara  granosa) didapatkan vitamin larut lemak berupa A, D, E, dan K, sedangkan  vitamin  larut  air  terutama  B-kompleks seperti B-1, B-2, B-6 (piridoxin), B-12, dan niasin.
Rajungan hidup pada semua tipe perairan yaitu air tawar, estuari dan laut. terdistribusi dari daerah intertidal,  laut  dangkal  dan  ada  yang  mendiami perairan laut dalam (Nurdin, 2009).
Di  Indonesia  cangkang  rajungan  masih menjadi  limbah  yang  dibuang  dan  menimbulkan masalah bagi lingkungan. Data statistik menunjukkan  negara  yang  memiliki  industri pengolahan  hasil  laut  menghasilkan  sekitar  56.200 ton  limbah  pertahun  (Departemen  Kelautan  dan
Perikanan,  2000).  Limbah  cangkang  ini  sangat berpotensi  menjadi  produk  yang  lebih  bernilai, yaitu  kitin  dan  kitosan  dibandingkan  pemanfaatan yang  selama  ini  hanya  sebagai  bahan  penimbun tanah dan asesoris serta hiasan dinding.
Salah  satu  bahan  berkhasiat  dari  laut  adalah kitin  dan  kitosan.  Sumber  utama  kitin  dan  kitosan ialah cangkang Crustaceae sp , yaitu udang, lobster, kepiting,  kerang–kerangan,  rajungan  serta  hewan yang  bercangkang  lainnya,  terutama  yang  berasal dari laut (Hawab, 2005). Pasar dunia untuk produk turunan kitin menunjukkan bahwa oligomer kitosan adalah  produk  yang  termahal,  yaitu  senilai  $  USD 60.000/ton.
Penggunaan  kitosan  pernah  dilaporkan  antara lain  oleh  Dedeh et  al .,  (2012)  dan  Zury et  al.,
(2014)  kitosan  sebagai  carrier  untuk  elektroda. Moftah et  al .,  (2013),  Akhmad  dan  Motomizu (2013), Hanandayu et al., (2013), dan Darjito et al.,
(2014) menggunakan kitosan dan kitosan termodifikasi sebagai adsorben logam berat. Dalam penelitian  penurunan  kadar  logam  berat  yang dilakukan  Rahayu  (2007)  menyatakan  bahwa kitosan  dari  limbah  cangkang  rajungan  dapat menjadi adsorben pada logam berat merkuri. Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  pH adsorpsi  semakin  besar  penurunan  jumlah  ion merkuri (%). pH yang paling optimal adalah pH 5.
Cangkang  rajungan  juga  mengandung  kitin dan  kitosan  yang  merupakan  senyawa  biopolimer paling  banyak  kedua  ditemukan  di  alam  setelah selulosa,  atau  biopolimer  yang  mengandung nitrogen  (N)  terbanyak  yang  ada  di  alam.  Adanya N yang tinggi dalam polimer inilah yang membuat kitin  dan  kitosan  sangat  diminati  industri.  Adanya atom  nitrogen  dan  oksigen  pada  kitosan  dapat membentuk kompleks dengan logam berat. Kitosan memiliki  sifat-sifat  yang  dapat  digunakan  antara lain  untuk  pengolahan  limbah  cair  terutama meminimalisasi logam-logam berat, mengkoagulasi minyak/lemak,  serta  mengurangi  kekeruhan  atau sebagai  penstabil  minyak,  rasa  dan  lemak  dalam produksi  industri  pangan  (Rismana,  2004).  Secara definitif,  kitosan  merupakan  kitin  yang  telah mengalami deasetilasi dan menyisakan gugus asetil tidak lebih dari 40-45% (Lina et aI ., 2001). Namun demikian,  di  industri  lazim  digunakan  batasan deasetilasi  hingga  70%.  Tingkat  deasetilasi  ini
penting, sebab merupakan parameter yang mempengaruhi  karakteristik  seperti  kelarutan, reaktivitas  kimia,  dan  biodegradabilitas  kitosan yang  diperoleh  (Lamarque et  al., 2005).  Tingkat deasetilasi  dapat  berkisar  antara  30  hingga  95  % tergantung  pada  sumber  bahan  baku  dan  prosedur dalam proses pengolahannya (Martino et a l., 2005). Mengolah  cangkang  menjadi  kitosan  dapat dilakukan  melalui  tiga  proses  yaitu  deproteinasi yang  bertujuan  untuk  menghilangkan  sisa  protein dari daging kerang, demineralisasi untuk mengurangi  kadar  mineral  (CaCO3)  dengan menggunakan  asam  konsentrasi  rendah  untuk mendapatkan  kitin.  Selanjutnya  deasetilasi  untuk menghilangkan  gugus  asetil  dari  kitin  melalui pemanasan  dalam  larutan  alkali  kuat  dengan konsentrasi tinggi (Yunizal et al., 2001).
Berkaitan  dengan  hal  tersebut  diatas  pada penelitian  ini  dikaji  limbah  cangkang  Rajungan (Portunus  pelagis) yang  ada  di  Indonesia khususnya  di  Pantai  Kenjeran agar  dapat dimanfaatkan  sebagai  sumber  kitin  dan  kitosan. Sumber  untuk  isolasi  kitin  dan  kitosan  ini diutamakan  dari  bahan  dengan  nilai  ekonomi rendah  disamping  mengolah  limbah  cangkang menjadi produk kitosan yang bernilai jual.
Perairan Pantai Kenjeran ditengarai terkontaminasi  oleh  logam  berat  (Sudarmaji et  al .,
2004)  untuk  itu  perlu  dicari  solusi  bagaimana mengatasinya. Kitosan dilaporkan dapat menurunkan  kadar  logam  berat  (Rahayu,  2007) untuk  itu  kitosan  yang  dihasilkan  dari  Rajungan diuji  kemampuannya  dalam  menurunkan  atau mengadsorbsi  larutan  logam  berat  yang  dalam  hal ini sebagai model digunakan Cu 2+ .
2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Rajungan (Portunus pelagis) Taksonomi  Rajungan  menurut  Saanin  (1984) sebagai berikut : Filum : Arthropoda Kelas : Crustacea Sub kelas : Malacostraca Ordo : Eucaridae Sub ordo : Decapoda Famili : Portunidae Genus : Portunus Spesies : Portunus pelagis
Morfologi Rajungan dapat dilihat pada Gambar 1. Suku  Portunidae  mempunyai  karapas  atau  cangkang lebar  sekali,  lebarnya  dapat  mencapai  2/3  kali panjangnya. Dahi bergigi empat buah, gigi sebelah luar lebih besar dan lebih menonjol, gigi ini lebih rendah dan lebih  membulat  pada  individu  yang  belum  dewasa. Capit memanjang, kokoh, mempunyai duri sebanyak 9, 6, 5, atau 4 pada sisi depan.
Gambar 1. Deskripsi Rajungan (Portunus pelagis)
Menurut  Prianto  (2007),  walaupun  rajungan mempunyai  bentuk  dan  ukuran  yang  beragam tetapi  seluruhnya  mempunyai  kesamaan  pada bentuk  tubuh.  Chelipeds  terletak  di  depan  kaki pertama  dan  setiap  jenis  memiliki  struktur chelipeds  yang  berbeda-beda.  Chelipeds  dapat digunakan  untuk  memegang  dan  membawa makanan,  menggali,  membuka  kulit  kerang  dan juga  sebagai  senjata  dalam  menghadapi  musuh. Carapace  merupakan  kulit  yang  keras  atau  dengan istilah lain exoskeleton (kulit luar) berfungsi untuk melindungi organ bagian kepala, badan dan insang.
Mulut  rajungan  terbuka  dan  terletak  pada bagian  bawah  tubuh.  Beberapa  bagian  yang terdapat  di  sekitar  mulut  berfungsi  memegang makanan dan juga  memompakan air dari  mulut  ke insang.  Rajungan  memiliki  rangka  luar  yang  keras sehingga mulutnya tidak dapat dibuka lebar.
Menurut Juwana dan Kasijan (2000), rajungan  dan  kepiting  sebenarnya  satu  famili  atau satu  suku.  Karapasnya  mempunyai  pinggiran samping  depan  yang  bergerigi  dan  jumlah  giginya sembilan  buah.  Perutnya  atau  yang  biasa  disebut abdomen  terlipat  ke  depan  di  bawah  karapas. Abdomen jantan sempit dan meruncing ke depan.
Gambar 2. Morfologi Rajungan Jantan dan Betina (Juwana dan Kasijan, 2000) Keterangan : A = Rajungan jantan dilihat dari atas B = Rajungan jantan dilihat dari bawah C = Rajungan jantan dengan abdomen dibuka D = Rajungan betina dilihat dari atas E = Rajungan betina dilihat dari bawah F = Rajungan betina dengan embelan (pleopod)
Abdomen  betina  melebar  dan  membulat penuh dengan embelan, gunanya untuk menyimpan telur.
Bagian  tubuh  kepiting  juga  dilengkapi  bulu dan  rambut  sebagai  indera  penerima.  Bulu-bulu terdapat  hampir  di  seluruh  tubuh  tetapi  sebagian besar  bergerombol  pada  kaki  jalan.  Kepiting menemukan makanannya menggunakan rangsangan  bahan  kimia  yang  dihasilkan  oleh organ  tubuh.  Antena  memiliki  indera  penciuman yang  mampu  merangsang  kepiting  untuk  mencari makan. Ketika alat pendeteksi pada kaki melakukan  kontak  langsung  dengan  makanan, chelipeds dengan cepat  menjepit  makanan tersebut dan  langsung  dimasukkan  ke  dalam  mulut.  Mulut kepiting  juga  memiliki  alat  penerima  sinyal  yang sangat  sensitif  untuk  mendeteksi  bahan-bahan kimia.  Kepiting  mengandalkan  kombinasi  organ perasa  untuk  menemukan  makanan,  pasangan  dan menyelamatkan diri dari predator (Prianto, 2007).
Kepiting  termasuk  dalam  beberapa  suku (familia),  Portunidae  dan  seksi  (sectio)  Brachyura. Rajungan  ( Portunus  pelagis )  sering  berganti  kulit
secara teratur. Kulit kerangka tubuhnya terbuat dari bahan  berkapur  dan  karenanya  tak  dapat  terus tumbuh.  Jika  ia  akan  tumbuh  lebih  besar  maka kulitnya akan retak pecah dan dari situ akan keluar individu yang lebih besar dengan kulit yang masih lunak. Rajungan yang baru berganti kulit, tubuhnya masih  sangat  lunak.  Masa  selama  bertubuh  lunak ini  merupakan  masa  yang  sangat  rawan  dalam kehidupannya,  karena  pertahanannyapun  sangat lemah. (Juwana, 2000)

## 2.2 Kitosan
Kitosan  merupakan  senyawa  turunan  kitin, memiliki  struktur  (1,4)-2-Amino-2-Deoksi-β-D- Glukosa.  Sumber  kitosan  yang  sangat  potensial adalah  rangka  Crustaceae  (Muzzarelli,  1977). Kitosan  merupakan  polimer  alami  dengan  struktur molekul  yang  menyerupai  selulosa  bedanya terletak  pada  gugus  rantai  C-2  dimana  gugus hidroksi  (OH)  pada  C-2  digantikan  oleh  amina (NH2) (Hardjito, 2006).
Gambar 3. Rumus struktur selulosa, kitin dan kitosan
Secara  struktural,  kitosan  merupakan  polimer rantai  lurus  (straight-chain  polymer)  yang  terdiri dari  D-glukosamin  dan  N-asetil-D-glukosamin. Kitosan  mempunyai  rumus  umum  (C6H11NO4)n atau  disebut  sebagai  poli(2-amino-2-deoksi-β-D- glukosa) (Fernandez-Kim, 2004). Kitosan memiliki pKa  6,5  sehingga  kitosan  dapat  larut  dalam sebagian  besar  larutan  organik  yang  bersifat  asam dan memiliki pH kurang dari 6,5 termasuk format, asetat,  tartarat,  dan  asam  sitrat  (LeHoux  dan Grondin, 1993; Peniston and Johnson, 1980). Kandungan kitin dari beberapa sumber diantaranya di tabelkan pada Tabel 1:
Tabel 1 . Beberapa Sumber Organisme Penghasil Kitin dan Kitosan.
Sumber : Shirosi, (1981) dalam Knorr, (1984) No Jenis Organisme Kandungan Kitin (%) 1 Crustanceae 72,1 a - Kepiting 69,8 a - Lobster :(Nephops, dan Homarus) (60,8-77,0) a 2 Serangga - Kecoa 18,4 a - Lebah (27-35) a - Ulat sutra 44,2 a 3 Molusca - Kulit resmis 6,1 - Kulit tiram 3,6 4 Jamur - Aspergillus niger 42,0 b - Penicillium Chrysogenium 20,1 b - Saccharomyceae cereviciae 2,9 b - Lactarius vellerius (Mushroom) 19,0 b
Keterangan: a = Berat organik dari kutikula b = Berat kering dari dinding sel
Kitosan  tidak  larut  dalam  asam  fospat  dan asam  sulfat.  Kelarutan  kitosan,  kemampuannya terbiodegradasi,  reaktivitas,  dan  adsorbsi  oleh banyak  substrat  tergantung  dari  jumlah  gugus amino  yang  terprotonasi  dalam  rantai  polimer, selain dari perbandingan jumlah unit D-glukosamin yang  terasetilasi  dan  tidak  terasetilasi.  Gugus amina (pKa 6,2–7,0) akan terprotonasi dalam asam dengan  pKa  yang  lebih  rendah  dari  6,2,  sehingga kitosan dapat terlarut (Guibal, 2004; Kubota, 2000; Kurita,  2006;  Anthonsen  dan  Smidsroed,  1995; Rinaudo,  2006;  Sankararamakrishnan  dan  Sanghi, 2006).  Di  dalam  asam,  gugus  amina  pada  kitosan akan  terprotonasi  menjadi  ammonium  kuartener  (- NH3+)  sehingga  kitosan  menjadi  bermuatan positif.
Kitosan  dipilih  sebagai  polimer  yang  baik untuk aplikasi biomedis dan farmasetik karena sifat yang dimilikinya yaitu, kemampuannya terbiodegradasi,  biokompatibel,  memiliki  daya antimikroba,  dan  tidak  toksik.  Kitosan  ditemukan oleh  C.  Rouget  pada  tahun  1859.  Dia  menemukan bahwa  kitin  yang  telah  dididihkan  pada  larutan KOH juga dapat diperlakukan dengan NaOH panas maka  akan  terjadi  pelepasan  gugus  asetil  (proses
selulosa kitin kitosan
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika
deasetilasi)  yang  terikat  pada  atom  nitrogen menjadi  gugus  amino  bebas  yang  disebut  dengan kitosan (Zakaria, 2002).
Kitin  murni  mengandung  gugus  asetamida (NH-COCH3),  dan  kitosan  murni  mengandung gugus  amino  (NH2).  Perbedaan  gugus  ini  akan mempengaruhi sifat – sifat kimia senyawa tersebut (Roberts,1992).

## 2.3 Sifat-Sifat Kitosan
Kitosan  adalah  padatan  amorf  putih  yang tidak  larut  dalam  alkali  dan  asam  mineral  kecuali pada  keadaan  tertentu.  Keterlarutan  kitosan  yang paling  baik  ialah  dalam  larutan  asam  asetat  1%, asam  format  10%  dan  asam  sitrat  10%.  Kitosan tidak  dapat  larut  dalam  asam  piruvat,  asam  laktat, dan  asam-asam  anorganik  pada  pH  tertentu, walaupun  setelah  dipanaskan  dan  diaduk  dengan waktu yang agak lama. Keterlarutan kitosan dalam larutan  asam  format  ataupun  asam  asetat  dapat membedakan  kitosan  dan  kitin  karena  kitin  tidak dapat melarut dalam pelarut asam tersebut.
Kitosan  bermuatan  positif  karena  kelompok amina  pada  pH  asam,  yang  besarannya  tergantung pada  tingkat  deasetilasi,  dan  dengan  demikian kitosan  diklasifikasikan  sebagai  polielektrolit kationik, sedangkan polisakarida yang lain memberikan  muatan  netral  ataupun  anionik. (Hwang dan Shin, 2001).

## 2.4 Kegunaan Kitosan
Kitosan  merupakan  polimer  karbohidrat termodifikasi  yang  diperoleh  dari  deasetilasi  kitin serta  memiliki  karakteristik  yang  baik  dan  unik meliputi  kemampuannya  yang  biodegradable, biokompatibel,  bioaktif,  dan  non-toksik,  sehingga kitosan  telah  banyak  dipelajari  dan  diteliti  untuk penggunaan  dalam  bidang  bioteknologi,  water treatment, pertanian, farmasi, dan industri makanan (Kumar, 2000; Rinaudo, 2006; Shahidi dkk., 1999). Adanya  gugus  NH2  pada  kitosan  menjadi  alasan mengapa  kitosan  memiliki  potensi  yang  lebih  baik dibandingkan  kitin  pada  berbagai  aplikasi  yang berbeda (Honarkar dan Barikani, 2009).
Pada  aplikasi  tertentu  diperlukan  bobot molekul  kitosan  yang  spesifik.  Secara  umum, kitosan  dengan  bobot  molekul  yang  tinggi  tidak dapat terlarut dalam air. Kitosan yang terdegradasi akan  memiliki  bobot  molekul  yang  lebih  rendah sehingga  dapat  lebih  mudah  larut  dalam  air  dan memiliki  perbedaan  signifikan  dalam  aktivitasnya sebagai  antimikroba,  antitumor,  dan  aktivitas pertumbuhan tanaman dibandingkan kitosan dengan  bobot  molekul  yang  lebih  tinggi  (Hien dkk., 2012).
Kitosan  digunakan  dalam  berbagai  industri antara lain farmasi, kesehatan, biokimia, bioteknologi, pangan, pengolahan limbah, kosmetik,  agroindustri,  industri  tekstil,  industri perkayuan, industri kertas dan industri elektronika. Aplikasi khusus berdasarkan sifat yang dipunyainya  antara  lain  untuk  pengolahan  limbah cair  terutama  bersifat  resin  penukar  ion  untuk meminimalisasi logam-logam berat, mengkoagulasi minyak  /  lemak,  serta  mengurangi  kekeruhan, penstabil  minyak,  rasa  dan  lemak  dalam  produksi industri pangan. (Rismana, 2004).
Tabel 2. Aplikasi Kitosan dalam berbagai Bidang: (Suhartono, 2006)
Bidang Penggunaan Nutrisi Suplemen nutrisi Suplemen serat laut Pangan Nutraseutikal,  senyawa penyerap lemak Perisa Emulsifier Pembentuk tekstur Penjernih minuman Biomedis Mengobati luka Lensa kontak Membrane dialysis darah Antitumor Kosmetik Krim pelembab Produk perawatan rambut Lingkungan dan pertanian Penjernih air Mmenyimpan benih Pupuk dan fungisida Lain-lain Proses pembuatan kertas Penyerap  warna  pada
produk cat Bahan tambahan pakan
Kemampuan  kitosan  untuk  mengikat  logam dengan cara  mengkelat dihubungkan dengan kadar nitrogen  yang  tinggi  pada  rantai  polimernya. Kitosan  mempunyai  satu  kumpulan  amino  linier bagi  setiap  unit  glukosa.  Kumpulan  amino  ini mempunyai sepasang elektron yang dapat berkoordinasi  atau  membentuk  ikatan-ikatan  aktif dengan  kation-kation  logam.  Unsur  nitrogen  pada
setiap  monomer  kitosan  dikatakan  sebagai  gugus yang  aktif  berkoordinasi  dengan  kation  logam. (Hutahahean, 2001)
Isolasi  Kitosan  yang  dilakukan  dengan berbagai sumber bahan baku dan proses dirangkum dalam tabel berikut:
Tabel 3. Isolasi Kitosan dalam berbagai Penelitian :

## 2.5 Karakterisasi kitosan
Karakterisasi kitosan meliputi penentuan derajat deasetilasi, kadar air, rendeman, kelarutan (Kyoon No et al ., 2000), pH dan viskositas. Spektrum infra merah digunakan untuk penentuan derajat deasetilasi kitosan yang terbentuk. Frekuensi yang digunakan berkisar antara 4000
cm-1 sampai dengan 400 cm-1. Derajat deasetilasi kitosan ditentukan dengan metode base line yang ditentukan Domszy dan Robert serta Baxter (Khan et al ., 2002).
Kitosan yang diperoleh dianalisis dengan FTIR untuk mengetahui Derajat Deasetilasi (DD), dengan metode garis oleh Moore dan Robert,
Isolasi kitosan dari sumber nya & literature Bekicot (Triana, 2004) Rajungan ( Portunus pelagicus) (Matheis, 2012) Rajungan ( Portunus pelagicus) (Yuliusman, 2010) Rajungan ( Portunus pelagicus) (Sukma,2014) Rajungan ( Portunus pelagicus) (Rahayu, 2007) Deproteinase NaOH 3,5% 10:1 (v/b), 65 0 C NaOH 3,5% 1:10(w/v) 65 0 C 2 jam NaOH 1 M suhu 70 0 C, 1 jam NaOH 4% 1:10(b/v) suhu 100 0 C 12 jam NaOH 2,0 N 1:6 (b/v) suhu 80 0 C waktu 1 jam Demineralisasi HCl 1 N (15:1) (v/b), 40 0 C , 30 1 , 60 0 C HCL 1,0 N 1:15 (w/v)  waktu 30 I suhu 20- 25 0 C, suhu 60 0 C waktu 4 jam HCl 1 M suhu 60 0 C, waktu 1 jam HCl 2N 1:4(b/v) 24 jam padatan oven suhu 100 0 C waktu 24 jam HCl 1,5 N 1:12 (b/v) suhu 20-25 0 C
1 jam , di oven suhu 70- 80 0 C waktu 24 jam Depigmentasi NaOCl 0,315% 10:1 (v/b) 1 jam suhu 40 0 C Aseton NaOCl 0,315% 1:10(w/v) 30 I suhu 20-25 0 C - Etanol 96% 1:10(b/v) aquades panas:aseton = 1:1 - Identifikasi FTIR sebagai kitin FTIR sebagai kitin FTIR sebagai kitin FTIR sebagai kitin FTIR sebagai kitin Deasetilasi NaOH 60%, 20:1 (v/b) 100-140 0 C, 1jam, keringkan80 0 C waktu 24 jam NaOH 50% Suhu 100- 150 0 C waktu 6 jam NaOH 50%, suhu 100 0 C, 500 rpm, 1:15, waktu 45 menit 4 gr kitin+ 80 mL NaOH 70% suhu 100 0 C waktu 9,16,24 jam +NaOH 50% 1:20 (b/v) 70- 100 0 C waktu 30-120 I , 70-
80 0 C  24 jam Hasil Hasil kitosan DD 74,78% Hasil kitosan DD 65,47% Hasil  kitosan DD 52,58% Hasil  kitosan DD 87,96% Hasil  kitosan DD 79,65% Penggunaan Isolasi Kitosan sebagai adsorben logam berat Adsorben zat warna biru metilena Adsorpsi logam nikel Isolasi Kitosan sebagai adsorben logam berat Adsorben ion logam merkuri
seperti ditunjukkan dalam persamaan. Sampel ditambahkan KBr, dibuat pellet dan kemudian
ditentukan spektrumnya (Hanafi, dkk, 1999), kemudian derajat deasetilasi dapat dihitung dengan metode baseline dengan cara:
Keterangan : A1655   = nilai serapan pada 1655 cm-1
A3450   = nilai serapan pada 3450 cm-1 1,33 = perbandingan A1655 dengan A3450 pada derajat deasetilasi 100% Penetapan derajat deasetilasi kitosan ditentukan  dari  persentase  banyaknya  gugus  asetil yang  hilang  dan  berubah  menjadi  gugus  amina. Hasil  proses  deasetilasi  senyawa  kitin  adalah senyawa  kitosan  yang  memiliki  sifat  dapat  larut dalam  asam  asetat  encer.  Derajat  deasetilasi ditentukan  dengan  menghitung  serapan  pada panjang gelombang 1655 cm-1 dan 3450 cm-1.
Dalam  formulasi  sediaan  farmasetik,  kitosan harus  memiliki  persyaratan  seperti  berwarna  putih atau kekuningan,bentuk bubuk, pH 6,5-7,5, derajat deasetilasi  70-100%,  Kadar  air  ≤  10%,  Kadar  abu ≤ 2% Kadar nitrogen ≤ 5%, tidak berasa, dan tidak berbau (Protan Labortories. 1987).
Tabel 4. Standar mutu kitosan (Suhartono, 2006)
Parameter Standar Daewoo Korea Lab. Protan Jepang Penampakan Bubuk putih atau kuning Bubuk kuning Ukuran partikel 25-200 mesh Serpihan sampai serbuk Kadar air ≤ 10% ≤ 10% Kadar abu ≤ 0,5% ≤ 2% Kadar protein ≤ 0,3% - Derajat deasetilasi (DD) ≥ 70% ≥ 70% Viskositas 50-500 cps 200-2000 cps Ketidaklarutan ˂ 1% - Kadar logam berat. As. Pb ˂ 10 ppm - pH 7-9 7-8 Bau Tidak berbau Tidak berbau Khan et al., 2002
Tabel 5. Aplikasi kitosan berdasarkan derajat deasetilasi dan berat molekul (Suhartono, 2006)
No. Derajat Destilasi (%) Berat Molekul (kDa) Aplikasi Referensi 1. 85 - Pengikat kation Co, Ni, Ag, Zn Lima IS & C. Airoldi, 2004 2. 90 390 Transfeksi gen Kiang T et al ., 2004 3. 85 - Wound-healing dressing Min BM et al ., 2004 4. 80 - Antikanker Dhiman HK et al ., 2004 5. 90 - Antioksidan Je JY et al ., 2004 6. 75 150
Antitumor, drug delivery
Sakkinen M et al ., 2003 7. 58 5 Antitumor Qin C et al ., 2002 8. 92 87 Antimikroba Juma M et al ., 2002 9. 89 - Stimulator  proliferasi fibroblast kulit manusia Howling GI et al ., 2001
Karakteristik lain dari kitosan yaitu penentuan kadar  air.  Kadar  air  dihitung  dengan  mengukur pengurangan  berat  sampel  sebelum  dan  setelah pemanasan.  Sejumlah  sampel  dikeringkan  dalam oven  pada  suhu  1050C  selama  3  jam,  kemudian dikeringkan  dalam  eksikator  (  Suhartono,  2006  ) Selain  itu  penentuan  rendemen  kitosan  dihitung berdasarkan  perbandingan  berat  kitosan  dengan berat  sampel  limbah  cangkang  menggunakan rumus:
Rendemen = (Berat kitosan/Berat Limbah cangkang) x 100 %
Karakterisasi  kitosan  yang  lain  adalah kelarutan  menurut  (No et  al .,  2000).  Kitosan sebanyak 0,5 % (b/v) dilarutkan dalam asam asetat 1  %  (v/v),  lalu  difiltrasi.  Persentase  kelarutan kitosan  ditunjukkan  dengan  kitosan  yang  tersisa dibandingkan dengan kitosan awal .
Viskositas  kitosan  (Hwang et  al .,  1997) diukur menggunakan Ubbelohde dilution viscometer  yang  dicuci  dengan  akuades  dan dikeringkan terlebih dahulu. Larutan kitosan dibuat
dalam  berbagai  konsentrasi  dalam  pelarut  asam asetat  aqueous  0,1  M  dan  sodium  asetat  0,25  M. Masing-masing  sampel  ditempatkan  di  dalam viskometer  sebanyak  10  ml.  Sampel  diambil hingga  ke  labu  di  bagian  atas  viskometer  secara perlahan.  Waktu  yang  dibutuhkan  sampel  untuk mengalir  antara  dua  batas  yang  mengapit  labu tersebut dicatat. Sebagai blanko, digunakan pelarut asam asetat aqueous 0,1 M dan sodium asetat 0,25 M  dan  ditentukan  viskositasnya  dengan  cara  yang sama.  Viskositas  spesifik  dihitung  dengan  cara berikut:
Keterangan:
sp = viskositas spesifik (detik) t = waktu yang diperlukan untuk mengalirnya larutan sampel (detik) t 0
= waktu yang diperlukan untuk mengalirnya larutan solven (detik)
Melalui cara ini akan diperoleh nilai viskositas spesifik, yang tidak mempunyai satuan.

## 3. METODE PENELITIAN
Pada    penelitian  ini  dilakukan  isolasi  kitosan  dari cangkang rajungan (Portunus pelagis) yang diambil di Pantai Kenjeran . Pengolahan cangkang menjadi kitosan dilakukan melalui beberapa tahap yaitu:

## 3.1 Isolasi kitosan
Isolasi  Kitosan  dari  cangkang  rajungan  dengan mencuci  cangkang  dibawah  air  mengalir  hingga bersih  disikat  serta  dihilangkan  kotoran  ditiriskan, dijemur  dibawah  matahari,  lalu  digiling  hingga halus  menjadi  serbuk,  diayak  dengan  ukuran  100 Mesh.
3.2 Deproteinasi Bahan  ditimbang,  ditambahkan  NaOH  3%  1:6
(w/v)  dipanaskan  selama  30  menit  pada  85  °C dinetralkan  dengan  air  suling    hingga  pH  7  lalu disaring dengan penyaring Büchner, di oven 35 °C selama  24  jam  (Sinardi,  2013).  Hasil  berupa padatan bebas dari protein.
3.3 Demineralisasi
Sampel  ditambahkan  HCl  1  N  dengan perbandingan    1:10,  diaduk  pada  suhu  75°C dengan  waktu 1 jam   dinetralkan  hingga pH netral pH 7 dan disaring dipanaskan 35°C selama 24 jam. Hasil  isolasi  berupa  kitin  (Sinardi,  2013).  Pada proses  ini  dilakukan  pengulangan  sebanyak  2  kali untuk menghilangkan CaCO3 yang masih tersisa. 3.4 Deasetilasi
Sampel ditambahkan NaOH 45% 1:20 (b/v) dipanaskan suhu 110 o C dalam waktu 1 jam, lalu dinetralkan hingga pH 7 disaring lalu di oven suhu 80 o C selama 24 jam. Hasilnya berupa kitosan (Yen et al ., 2009 ).
3.5 Identifikasi dengan FTIR (Fourier
Transform Infra Red)
Membuktikan terbentuknya kitin dan kitosan, hasil isolasi dianalisa dengan dibuat pellet dengan KBr dan selanjutnya diamati spektrum IR nya dengan FTIR .

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penimbangan sampel cangkang awal hingga tahapan  hasil  deasetilasi  penelitian  ini  selengkapnya disajikan pada Tabel 6.
Tabel 6. Hasil penimbangan sampel cangkang hingga penimbangan tahapan hasil deasetilasi Sampel Penimbanga n awal (g) Hasil proses Deprotenasi (g) Hasil proses Deminer alisasi (g) Demineralisasi ke - II (g) Penamba han H 2 O 2 (g) Isolat Hasil Deasetilasi (g) Rj 1 100,5960 90,4107 30,1311 16,6975 13,1337 Rj 2 100,3363 90,3607 25,0302 19,0203 16,0056 11,4947 Rj 3 100,2473 89,3561 30,1102 23,1102 15,5273 15,3434 Rerata±SD 100±0.18118 90±0.594965 28±2.93899 16±0.58834 13±1.931389
Keterangan: Rj1 : cangkang rajungan ulangan ke-1 Rj2: cangkang rajungan ulangan ke-2 Rj3: cangkang rajungan ulangan ke-3

## 4.1 Spektrum FTIR Standar baku kitin dari BPPT
Spektrum FTIR standar baku kitin yang berasal dari BPPT, garis vertikal menunjukkan persentase transmitans dan garis horizontal menunjukkan bilangan gelombang. Karakterisasi kitin pada serapan FTIR kitin standar terlihat pita serapan gugus OH ditunjukkan pada puncak  3458,43,  pita  serapan  C-H  ulur  terlihat  pada
puncak  2926,57,  pita  serapan  C=O  ulur  terlihat  pada puncak 1637,61, pita serapan CH3 terlihat pada puncak 1420,65,  pita  serapan  C-O-C  terlihat  pada  puncak 1085,62  dan  pita  serapan  N-H  kibasan  terlihat  pada puncak  662,64  seperti  ditunjukkan  pada  Gambar  4 berikut.
107
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika
Gambar 4 . Spektrum FTIR standar baku kitin dari BPPT
4.2 Spektrum FTIR kitin Cangkang Rajungan
Hasil  dari  spektrum  FTIR  kitin    sampel  rajungan pada garis vertikal menunjukkan persentase transmitans dan garis horizontal menunjukkan bilangan gelombang. Pada  gambar  5  serapan  FTIR  untuk  kitin  hasil  isolasi dari rajungan  menunjukkan adanya pita  serapan  gugus
OH ditunjukkan pada puncak 3468,45, pita serapan C-H ulur terlihat pada puncak 2928,58 pita serapan C=O ulur terlihat  pada  puncak  1639,63,  pita  serapan  C-O-C terlihat  pada  puncak  1075,69  dan  pita  serapan  N-H kibasan terlihat pada puncak 616,71
4000.0 3000 2000
1500 1000 450.0 35.0 40 45 50 55 60 65 70 75.0 cm-1 %T 3458,43 2926,57 2345,69 1637,61 1420,65 1384,64 1323,66 1250,67 1154,63 1085,62 893,66
673,64 662,64 603,63 520,63 491,64 470,64 456,65 Per sen tase T ran sm itan si 4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 45.3 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 75.2 cm-1 %T 3468,45 2928,58 1639,63 1384,66 1315,69 1261,70 1204,70 1156,69 1118,68 1075,69 1030,69 953,72 616,71 P er sen ta se t ra n sm it an s Bilangan gelombang P er sen ta se t ra n sm it an s
Gambar 5. Spektrum FTIR kitin dari bahan baku cangkang Rajungan

## 4.3  Spektrum  FTIR  Standar  baku  kitosan  dari BPPT
Spektrum  FTIR  standar  kitosan  yang  berasal  dari BPPT  pada  garis  vertikal  menunjukkan  persentase transmitans dan garis horizontal menunjukkan bilangan gelombang. Pada gambar 6 menunjukkan serapan FTIR
kitosan standard dari BPPT terlihat pita serapan  gugus N-H  amida  ditunjukkan  pada  puncak  3435,54  pita serapan C-N terlihat pada puncak 2339,78 pita serapan N-H  amina  1654,67  dan  pita  serapan  C-O  alkohol 1076,64.
Gambar 6. Spektrum FTIR Standar baku kitosan dari BPPT

## 4.4 Spektrum FTIR Standar baku kitosan dari bahan baku cangkang Rajungan
Spektrum  FTIR  kitosan  yang  berasal  dari  bahan baku  rajungan  pada  garis  vertikal  menunjukkan persentase transmitans dan garis horizontal menunjukkan  bilangan  gelombang.  Pada  gambar  7 menunjukkan karakterisasi serapan FTIR untuk kitosan
hasil isolasi dari cangkang rajungan terlihat pita serapan gugus  N-H  amida  ditunjukkan  pada  puncak  3435,54 pita  serapan  C-N  terlihat  pada  puncak  2339,78  pita serapan  N-H  amina  1654,67  dan  pita  serapan  C-O alkohol 1076,64 seperti diperlihatkan pada Gambar 7 .
P er sen ta se t ra n sm it an s 4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 50.0 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 76 78 80.8 cm-1 %T 3850,69 3836,69 3817,69 3435,54 2921,66 2339,78 2151,78 1654,67 1423,71 1384,69 1321,72 1260,74 1156,67 1076,64 1029,65 898,74 670,72 601,70
591,70 579,70 566,70
535,71 521,71 503,71 491,72 478,72 462,72 Bilangan gelombang Pe rsen ta se t ra n sm it an s Bilangan gelombang 4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 5.0 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 61.0 cm-1 %T 3467,9 2925,26 1644,40 1423,51 1384,49 1324,54 1254,56 1153,51 1087,50 1033,51 893,58 557,48 526,48 496,49 468,49

## Bilangan gelombang
Gambar 7. Spektrum FTIR kitosan bahan baku cangkang Rajungan
Pada identifikasi hasil ekstraksi kitosan,  spektrum FTIR  sudah  dapat  dikatakan  identik  bila  dibandingkan dengan  kitosan  komersial  menurut  sarbon et  al .,  2014 dan  senyawa  baku  dari  BPPT.  Kitosan  komersial menurut  Sarbon et  al .,  2014  terdapat  pita  serapan  dari N-H amida pada bilangan gelombang 3369,11-3413,07 juga  terdapat  pada  baku  pada  BPPT  dengan  nilai 3435,54  sedangkan  pada  cangkang  rajungan  terdapat pada 3467,9.
Pita  serapan    C-O  alkohol  kitosan  komersial menurut  Sarbon et  al .,  2014  pada  rentang  1128,21- 1129,02 pada baku BPPT bernilai 1076,64, dan kitosan dari  rajungan  1087,50.  Pada  kitosan  hasil  ekstraksi Sarbon, et  al., 2014  pita  NH  amina  didapatkan  pada 1622,76-1623,92  cm-1  terlihat  pula  pada  baku  BPPT dengan  nilai  1654,67,  sedangkan  pada  kitosan  dari rajungan ditunjukkan pada 1644,40. Hal ini menunjukkan  adanya  pita  serapan  spesifik  N-H (bending)  pada  rentang  1640-1550  cm-1  yang  sesuai dengan  Pavia et al ., 2009.
Pada  spektra  FTIR  diatas  menunjukkan  bahwa FTIR  kitosan  yang  diisolasi  dari  rajungan  memenuhi kesesuaian spektra sampel dengan baku khususnya pada bilangan  gelombang  di  daerah  sidik  jari  (1500-500). Proses  deasetilasi  merupakan  proses  pembentukan kitosan dari kitin menggunakan NaOH untuk mengganti gugus  asetamida  dengan  gugus  amino.  Pada penggunaan NaOH dengan  konsentrasi dibawah 40  % dan suhu dibawah 100 0 C serta pengadukan yang tidak homogen  akan  mengakibatkan  terbentuknya  cairan dengan  viskositas  yang  tinggi  (Tsaih,  2003).  Hal  ini akan  mengakibatkan  rusaknya  sampel  yang  diisolasi untuk itu diperlukan penggunaan NaOH diatas 40% dan suhu  110 0 C  serta  pengadukan  yang  homogen  untuk mendapatkan  kitosan  yang  terbaik  dengan  viskositas yang stabil sehingga cairan tidak rusak dan mengental. Semakin  tinggi  konsentrasi  NaOH,  derajad  deasetilasi (DD)  semakin  besar,  namun  hal  ini  tidak  selalu memberikan  kenaikan  DD  yang  signifikan  (Tsaih  and Chen, 2002).

## 5. KESIMPULAN DAN SARAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  kitin  dan  kitosan dapat  diekstraksi  dari  cangkang  Rajungan  yang  mana bahan  tersebut  merupakan  limbah  yang  mencemari lingkungan dan memiliki nilai ekonomi rendah.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih penulis sampaikan kepada Pimpinan Sekolah  Pasca  Sarjana,  terima  kasih  juga  penulis
ucapkan  kepada  Staf  Laboratorium  Analisis  Fakultas Farmasi  atas  bantuan  penggunaan  alat  dan  bahan,  dan teman-teman seperjuangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali, Moftah, Ani Mulyasuryani, and Akhmad Sabarudin.
2013.  Adsorption  of  Cadmium  By  Silica Chitosan.  The  Journal  of  Pure  and  Applied Chemistry Research, 2 (2) : 62-66.
Albeson.,  Danny.,  Nybakken,  J.W.  1986.  Biologi  Laut. Suatu Pendekatan Ekologis. Gramedia. Jakarta.
Bachok, Z., P. L. Mfilinge & M. Tsuchiya. 2006. Food
Sources  of  Coexisting  Suspension-Feeding Bivalves as Indicated by Fatty Acid Biomarkers, Subjected to the Bivalves Abundance on a Tidal Flat.  Journal  of  Sustainability  Science  and Management. 1 : 92-111.
Cheman, Y.B., Rohman, A. 2012. Analysis of canola oil in  virgin  coconut  oil  using  FTIR  spectroscopy and chemometrics. J Food Pharm.Sci (2013), 5- 9
Dance,  S.P.,  Abbott  Cecilia.  2000.  Compendium  of Seashells. Odyssey. Rolling Hills, USA.
Darmono.  2001.  Lingkungan  Hidup  dan  Pencemaran  : Hubungannya  dengan  Toksikologl  senyawa Logam.Universitas Indonesia. UI•Press.jakana.
Darjito, D., Purwonugroho, D., & Ningsih, R., 2014, The Adsorption of Cr (VI) Using Chitosan-Alumina Adsorbent.  The  Journal  of  Pure  and  Applied Chemistry Research, 3 (2)
Debenay,  J.  P.  &  D.  L.  Tack.  1994.  Environmental conditions,  growth  and  production  of  Anadara senilis  (Linnaeus,  1758)  in  a  Senegal  Lagoon. Journal Mollusca Study. 60 : 113-121.
Departemen  Kelautan  dan  Perikanan.  2000.  Statistik Data Perikanan. Jakarta:
Departemen Kelautan dan Perikanan.
Fernandez-Kim,  S.-O.,  2004,  Physicochemical  and Functional  Properties  of  Crawfish  Chitosan  as Affected  by  Different  Processing  Protocols,  A Thesis  in  Department  of  Food  Science,  Seoul National University.
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika
Hanafi,  M.,  Syahrul  A.,  Efrina  D.,  dan  B.  Suwandi,,
1999. Pemanfaatan Kulit Udang untuk Pembuatan  Kitosan  dan  Glukosamin,  LIPI Kawasan PUSPITEK, Serpong.
Hardjito,  L.  2006.  Chitosan  Sebagai  Bahan  Pengawet Pengganti  Formalin.  Majalah  Pangan.  Media Komunikasi dan Informasi.
Hargono dan M. Djaeni, Pemanfaatan Kitosan dari Kulit Udang  sebagai  Pelarut  Lemak.  Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia Indonesia. Huang,  K.  S.,  Jeng-Shian  Cheng.,Fun-Eu  Lin.&  Shyh- Jer Lin. 2009. Preparation and Properties of PAA-Chitosan/SiO2 Hybrid Materials. Kun Shan University Taiwan. 1-20 Hien,  V.  D.,  D.  Q.  Huong,  dan  P.  T.  N.  Bich.  2010. Study of the Formation of Porous Hydroxyapatite  Ceramics  from  Corals  via Hydrothermal  Process.  Journal  of  Chemistry. Vol. 48 (5). P. 591 - 596.
Honarkar, H. and Barikani, M., (2009), Applications of biopolymers  I:  chitosan,  Published  online: SpringerVerlag.
Hutahaean,I.S.  2001.  Penggunaan  Kitosan  Sebagai
Penyerap  Logam  Zinkum(Zn2+)  Dan  Logan Kromium(Cr3+) dengan Metode
Spektrofotometri Serapan atom. Skripsi. Medan:
Jurusan Kimia FMIPA USU
Hwang  J,  Hong  S,  Kim  C.  1997.  Effect  of  molecular weight  and  NaCl  concentration  on  dilute solution properties of chitosan. J Food Sci Nutr 2:1-5.
Khan  TA,  Kok  K,  Hung  S.  2002.  Reporting  degree  of deacetylation values of chitosan:  the  influence  of  analytical  methods.  J  Pharm
Pharmaceut Sci
5:205-212.
Guillen,  M.D.  dan  Cabo,  N.,  1997,  Infrared Spectroscopy  in  the  Study  of  Edible  Oils  and Fats, J. Sci. Food Agri.,75:1-11.
Juwana, S. dan Kasijan Romimohtarto, 2000, Rajungan Perikanan,  Cara  Budidaya dan  Menu Masakan. Djambatan, Jakarta.
Khan  T.A.,  K.K.  Peh,  S.C.  Hung.  2002.  Reporting degree  of  deacetylation  values  of  chitosan:  the influence  analytical  methods.  Journal  of Pharmacological Science 5 (3): 205-212.
Knorr  D.  1982.  Function  properties  of  chitin  and chitosan. J Food Sci 47(36).
Kobayashi C.C, De Fernandes, K.C. Miranda, De Sonsa, and Silva Mdo R. 2004.
Candiduria  in  Hospital  Patients:  A  Study  Prospective Mycopathologia 158(1):49-52
Kumar,  Ravi,  N.,  V.,  Majeti.  2000.  A  review  of  chitin and chitosan applications. Reactive & Functional Polymers 46, 1-27.
Kurita,  K.  2001.  Controlled  functionalization  of  the polysaccharide  chitin.  Journal  of  Polimer Science. 26, 1921–71.
Kubota, N., Tastumoto, N., Sano, T. & Toya, K. (2000).
A  simple  preparation  of  half  Nacetylated chitosan  highly  soluble  in  water  and  aqueous organic  solvents.  Carbohydrate  Research,  Vol. 324, pp. 268–274.
Kurniasih,  D.,  Atikah,  A.,  &  Sulistyarti,  H.,  2012,  The Coated-Wire  Ion  Selective  Electrode  (CWISE) of  Chromate  Using  PVC-Membrane  Based  on Chitosan as A Carrier, The Journal of Pure and Applied Chemistry Research, 1 (1) : 33-40.
Kusriningrum,  R.  S.  2008.  Perancangan  Percobaan.
Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 43-63.
Kyoon No, Meyers SP. 1997. Preparation of Chitin and Chitosan. Di dalam:
Muzzarelli  RAA,  Peter  MG  (eds.).  Chitin  Handbook. European Chitin Society. Italy.
Mali,  S.,  M.V.E.  Grossmann,  M.A.  Garcia,  M.N. Martino,  and  N.E.  Zaritzky.  2005.  Micro- structural characterization of yam starch films. J. Carbohydrate Polymer 50: 379−386.
Matheis F. J. D. P. Tanasale, Amos Killay, dan Marsela S.  Laratmase,  2011,  Kitosandari  Limbah  Kulit Kepiting  Rajungan  (Portunus  sanginolentus  L.) sebagaiAdsorben  Zat  Warna  Biru  Metilena, Jurnal Natur Indonesia, 14 (2) : 165-171.
Mekawati,  Fachriyah,  E.  dan  Sumardjo,  D.,  (2000), Aplikasi Kitosan Hasil tranformasi Kitin Limbah Udang  (Penaeus  merguiensis)  untuk  Adsorpsi Ion  Logam  Timbal,  Jurnal  Sains  and Matematika,  FMIPA  Undip,  Semarang,  Vol.  8 (2), hal. 51- 54
Moosa, M.K., I. Aswandi dan A. Kasry.1985. Kepiting bakau,  Scylla  serrata  (Forskal)  dari  perairan Indonesia. LON-LIPI, Jakarta.
Muzzarelli RAA, Rochetti R, Stanic V, Weckx M. 1997.
Methods for the
determination of the degree of acetylation of chitin and chitosan. Di dalam: Muzzarelli RAA, Peter MG (eds.). Chitin Handbook. Grottamare:
European Chitin Soc.
No,  H.K.  Lee,  S.H,  Park,  N.Y  dan  Meyers,  S.P.2003. Comparison  Of  Phsycochemical  Binding  And
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika
Antibacterial  Properties  Of  Chitosans  prepared Without  And  With  Deprotei  Ization  process. Journal  of  agriculture  and  food  chemistry  51: 7659-7663
Nontji.  A.  2007.  Laut  Nusantara.  Penerbit  Djambatan  : Jakarta Nurdin,  J.,  N.  Marusin,  Izmiarti,  A.  Asmara,  R. Deswandi  dan  J.  Marzuki.  2006.  Kepadatan populasi  dan  pertumbuhan  kerang  darah Anadara  antiquate  L.  (Bivalvia:  Arcidae)  di Teluk  Sungai  Pisang,  Kota  Padang,  Sumatra Barat. Makara Sains, 10(2). 96-101.
Prianto, E. 2007. Peran Kepiting sebagai Spesies Kunci (Keystone  Spesies)  pada  Ekosistem  Mangrove. Prosiding Forum Perairan Umum Indonesia IV. Balai Riset Perikanan Perairan Umum. Banyuasin
Protan  Labortories.  1987.  Catioal  Polymer  for Recovering Valuabe by Products from Processing Waste Burgges. USA
Peniston,  Q.P.  and  Johnson,  E.,  1980,  Process  for  the Manufacture of Chitosan, US Patent 4.195.175 Rahayu,  L.  H.,  dan  Purnavita,  S.,  (2007),  Optimasi Proses  Deproteinasi  dan  Demineralisasi  pada Isolasi  Kitin  dari  Limbah  Cangkang  Rajungan (Portunus  pelagicus),  Prosiding:  Teori  Aplikasi Teknologi  Kelautan,  ITS  Surabaya,  hal.  III.8  – III.11.
Rakhmawati,  E.,  (2007),  Pemanfaatan  Kitosan  Hasil Deasetilasi  Kitin  Cangkang  Bekicot  Sebagai Adsorban  Zat  Pewarna  Remazol  Yellow, Surakarta ,Universitas Sebelas Maret.
Rahmadani.  2011.  Pemanfaatan  kitoan  dari  limbah cangkang  bekicot  sebagai  adsorben  logam tembaga..Medan.Universitas Negeri Medan
Reid, L. M., O‘Donnell, C. P., dan Downey, G., 2006, Recent technological advances for the determination of food authenticity, Trends Food Sci. Technol., 17:344-353
Rinaudo,  marguerite.  2006.  Chitin  and  Chitosan. Properties and applications. Progress in polymer science.Elsevier 31, 603-632
Rismiarti,  Z.,  Atikah,  A.,  &  Sulistyarti,  H.,  2013, Construction  and  Characterization  of  Coated Wire Oxalate Ion Selective Electrode Based on Chitosan,  The  Journal  of  Pure  and  Applied Chemistry Research, 3 (1) : 19-26
Rochima E. 2005. Aplikasi kitin deasetilase termostabil dari Bacillus papandayan
K29-14  asal  Kawah  Kamojang  Jawa  Barat  pada pembuatan  kitosan.  Tesis.  Bogor:  Program Pascasarjana, IPB.
Robert.  G.  A.1992.  Chitin  Chemistry.,  Nottingham Politechnic, McMillan, USA.
Rohman, Cheman, Y. B., Ismail, A and Puziah, H. 2011. FTIR  spectroscopy  combined  with  cheometrics for  analysis  of  cod  liver  oil  in  binary  mixture with  corn  oil.  International  Food  Research Journal. 18 : 736-740
Romimohtarto,  K  dan  S.  Juwana.  2007.  Biologi  Laut Ilmu Pengetahuan tentang Biota Laut. Djambatan. Jakarta.
Rumengan, I.F.M., Suryanto, E., Modaso, R., Wullur, S., Tallei,  T.E.  and  Limbong,  D.  2014.  Structural Characteristics  of  Chitin  abd  Chitosan  Isolated from  the  Biomass  of  Cultivated  Rotifer, Brachionus  rotundiformis.  International  Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 3(1):12-18.
Sabarudin, A., and Motomizu, S., 2013, Functionalization  of  Chitosan  with  3,  4,  5- Trihydroxy  Benzoic  Acid  Moiety  for  The Uptake  of  Chromium  Species,  The  Journal  of Pure  and  Applied  Chemistry  Research,  2  (1)  : 48-54.
Sankararamakrishnan,  N.  &  Sanghi,  R.  (2006). Preparation  and  characterization  of  a  novel xanthated  chitosan.  Carbohydrate  Polymers, Vol. 66, pp. 160–167.
Sarbon, S. kamaruzaman. 2014. Chitosan extracted from mud crab (Scylla olivicea) shells : physicochemical  and  antioxidant  properties. Food Sci Technol, 1-10, Springer Inc
Sasic,  S.,  dan  Ozaki,  Y.,  2010,  Raman,  Infrared,  and Near-Infrared. Chemical Imaging, 67 - 73, John Wiley and Sons, Inc., Hoboken.
Shahidi  F,  Synowiecki  J  (1991)  Isolation  and characterization of nutrients
and  value-  added  products  from  snow  crab (Chionoecetes  Opilio)  and  shrimp  (Pandalus Borealis)  processing  discards.  J  Agric  Food Chem 39(8):1527–1532
Shahidi,  F.  and  Abuzaytoun,  R.,  (2005),  Chitin,
Chitosan, And Co-Products: Chemistry, Production,  Applications,  And  Health  Effects, Advances In Food And Nutrition Research, Vol 49, Elsevier Inc.
Shimek,  R.L.  2008.  Crabs,  (Online).  Website  : www.reefkeeping.com. Diakses pada tanggal 10 Maret 2012.
Sinardi.  2013.  Pembuatan  karakterisasi  dan  aplikasi kitosan  dari  cangkang  kerang  hijau  (Mytulus
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Irza Dewi Sartika
virdis Linneaus) sebagai koagulan penjernih air. Bandung. ITB Srijanto,  B.,  (2003),  “Kajian  Pengembangan  Teknologi Proses  Produksi  Kitin  dan  Kitosan  Secara Kimiawi”,  Prosiding  seminar  Nasional  Teknik Kimia  Indonesia  2003,  Volume  I,  hal.  F01-1  – F01-5.
Stuart,  B.,  2004,  Infrared  Spectroscopy:  Fundamentals and  Apllications,  19-20,  33-34,  John  Wiley  & Sons, Inc., New York. Suhartono,  M.T.  2006.  Pemanfaatan  Kitin,  Kitosan, kitooligosakarida. Foodreview J (6) : 30-33
Triana.  2004.  Synthesis  of  chitosan  from  chitin  of escargot (Achatina  fulica). Biofarmasi J (2) 64- 68 Wang H, Fang YE, Yan Y. 2001. Surface modification of chitosan membranes by alkane vapor plasma. J Mat Chem 11: 1374-7
Watson,  S.,  Beydoun,  D.,  Scott,  J.  &  Amal,  R.,  2004. Preparation  of  nanosized  crystalline  TiO2 particles at low temperature for photocatalysis, J. Nanopart. Res., Volume 6, pp.193-207.
Widwiastuti,  H.,  Mulyasuryani,  A.,  &  Sabarudin,  A., 2013, Extraction of Pb2+ using Silica from Rice Husks Ash (RHA)–Chitosan as Solid Phase, The
Journal  of  Pure  and  Applied  Chemistry Research, 2 (1) : 42-47. 10.
W.  J.  Nybakken,  Biologi  Laut  Suatu  Pendekatan Ekologis, PT. Gramedia, Jakarta, 1988
Yuliusman  dan  Adelina,  P.W.,  2010,  Pemanfaatan
Kitosan  dari  Cangkang  Rajungan  pada  Proses Adsorpsi  Logam  Nikel  dari  Larutan  NiSO4, Prosiding  Seminar  Rekayasa  Kimia  dan  Proses 2010, ISSN : 1411-4216.
Yunizal  dkk,  (2001),  Ekstraksi  Khitosan  dari  Kepala Udang  Putih  (Penaeus  merguensis).  J.  Agric. Vol. 21 (3), hal 113-117
Yen  MT,  Yang  JH,  Mau  JL  (2009)  Physicochemical characterization of chitin and chitosan from crab shells. Carbohydr Polym 75:15–21
Zakaria,  M.  B.  ,  M.  J.  Jais.  ,  Wan-Yaacob  Ahmad.  , Mohd Rafidi Othman dan Z. A. Harahap. , 2002. Penurunan  Kekeruhan  Efluen  Industri  Minyak Sawit  (EIMS)  Oleh  Koagulan  Konvensional Dan  Kitosan.  Prosiding  Seminar  Bersama UKM-ITB  ke-5.  Universitas  Kebangsaan Malaysia. Malaysia.
Zeleny.  M.  1982.    Multiple  Criteria  Decision  Making.
Mc.Graw Hill. New York