Penulis Ning Harmanto 1 , Innes Maulidya 2 , Waras Nurcholis 2,3 
Afiliasi 1 PT. Mahkotadewa Indonesia, Jl. Gaharu No.AA1, Jakarta Utara, DKI Jakarta, Indonesia
2 Unit Kandang Hewan Percobaan, Pusat Studi Biofarmaka Tropika, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
3 Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia

## Kata Kunci
 Antidiabetes
 Glukosa darah
 HbA1C
 JAMSI
Keyword  Antidiabetic
 Blood glucose
 HbA1C
 JAMSI.
Diterima 3 Januari 2019
Direvisi 30 Januari 2019 Disetujui 20 Maret 2019 * Penulis Koresponding
Waras Nurcholis email: wnurcholis@apps.ipb.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan khasiat JAMSI, Jamu antidiabetes PT. Mahkotadewa Indonesia, secara  preklinis  pada  tikus  diabetes  yang  diinduksi  dengan  streptozotocin.  Tikus  jantan  Sprague  Dawley sebanyak  36  ekor  dibagi  secara  acak  menjadi  6  kelompok  (masing-masing  kelompok  6  tikus):  kelompok normal,  kelompok  kontrol  diabetes  (diinduksi  +  air  saline),  kelompok  kontrol  positif  (diinduksi  + Glibenclamide 2.5 mg/kg BB), dan tiga kelompok perlakuan (diinduksi + JAMSI dengan dosis 0.27, 0.81, dan 1.62  ml/kg  BB).  Perlakuan  diberikan  selama  28  hari  setelah  diinduksi  dengan  streptozotocin.  Pemberian JAMSI 1.62 ml/kg BB terbukti mempengaruhi penurunan kadar glukosa darah dan hemoglobin terglikosilasi (HbA1C)  dibandingkan  kelompok  diabetes.  Hasil  ini  mengindikasikan  bahwa  JAMSI  berkhasiat  sebagai antidiabetes.

## ABSTRACT
This  study  was  aimed  to  investigate  the  antidiabetic  efficacy  of  JAMSI,  an  antidiabetic  Jamu  from  PT. Mahkotadewa Indonesia, in streptozotocin induced diabetic rats. Thirty-six male rat Sprague Dawley were randomly divided into 6 groups (six rats in each group): normal group, diabetic control group (induced + oral saline), positive control group (induced + oral Glibenclamide 2.5 mg/kg body weight), and three treatment group (induced + oral JAMSI with 0.27, 0.81, and 1.62 ml/kg body weight). Treatments were administrated for 28 days after induced with streptozotocin. Ingestion of the JAMSI with dose of 1.62 ml/kg body weight affected blood glucose decrease and decreased glycosylated hemoglobin (HbA1C) levels compared to that in the diabetic control group. These results indicate that JAMSI possess antidiabetic propriety.
PENDAHULUAN Diabetes melitus (DM) merupakan salah satu penyakit  sindrom  metabolit yang dicirikan oleh beberapa parameter diantaranya kelebihan karbohidrat ( hyperglycemia ),
lipid ( hyperlipedemia ), protein ( hyperaminoacidemia ),  dan rendahnya insulin
( hypoinsulinaemia ) (Zhang et al. 2014). Sampai saat ini, prevalensi  kejadiaan  DM  dari  beberapa  kajian  masih cukup tinggi. Pada tahun 2013 data dunia menunjukkan terdapat  382  juta  orang  mengalami  diabetes,  dan angka  tersebut  diprediksi  akan  semakin  meningkat menjadi  592  juta  pada  2035  (Guariguata  et  al.  2014). Berdasarkan  Pusat  Data  dan  Informasi,  Kementrian Kesehatan  (2014)  menunjukkan  bahwa  pada  tahun 2013  terdapat  sekitar  12  juta  orang  di  Indonesia  yang mengalami  DM.  Penyakit  DM  dapat  membahayakan untuk  penderitanya  karena  dapat  menyebabkan
Khasiat Jamu Antidiabetes pada Tikus Sprague Dawley yang Diinduksi Streptozocin
(Efficacy of Antidiabetic Jamu in Streptozotocin -Induced Diabetic Rats)
komplikasi diantaranya terjadinya gagal ginjal  (Koye et al.  2019), dry  eye  syndromne (Burda  et  al.  2013) , neuropati  (Mora et  al. 1998), hipertensi, jantung  serta stroke  (Takeda  et  al.  2014).  Selain  itu,  penderita  DM berpotensi  mengalami  kematian  dua  kali  lebih  tinggi dibandingkan  yang  bukan  penderita  DM.  Untuk  itu perlu  diupayakan  untuk  menanggulangi  penyakit  DM, salah  satunya  dengan  memanfaatkan  tanaman  obat yang cukup banyak di Indonesia.
PT.  Mahkotadewa  Indonesia  telah  mengembangkan jamu  antidiabetes  yang  dinamai  JAMSI  yang merupakan  ramuan  dari  beberapa  tanaman  obat antidiabetes  Indonesia.  Untuk  itu,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengevaluasi  khasiat  sediaan  jamu JAMSI  sebagai  antidiabetes  pada  hewan  uji  tikus  yang diinduksi dengan streptozotocin berdasarkan parameter  bobot  badan,  kadar  glukosa  darah,  dan HbA1C.

## METODE Bahan
JAMSI  jamu  antidiabetes  diperoleh  dari  PT. Mahkotadewa Indonesia. Sediaan JAMSI 100 ml dibuat dengan komposisi air (70 ml), madu (20 ml), gula aren (10  g),  ekstrak Phaleria  macrocarpa (120  mg),  ekstrak Andrographis  paniculata (120  mg),  dan  ekstrak Morinda  citrifolia (64  mg).  JAMSI  dibuat  menjadi  3 dosis,  yaitu  0.27,  0.81,  dan  1.62  ml/kg  BB  untuk digunakan  dalam  perlakuan  terhadap  hewan  uji. Sementara  itu,  hewan  uji  yang  digunakan  adalah  tikus Sprague  Dawley  jantan  usia  12  minggu  dengan  berat sekitar  200-250  g  yang  diperoleh  dari  Pusat  Pengujian Hewan  dan  Makanan  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  (BPOM).  Hewan  uji  dikandangkan  secara berkelompok 2-3 ekor per kandang dengan suhu ruang kandang  25  C  dengan  kelembapan  60-70%.  Pakan diberikan  15  gram  per  hari  dan  minum  diberikan ad libitum .

## Uji In Vivo Antidiabetes Jamu JAMSI
Induksi  diabetes. Hewan  dipuasakan  selama 16  jam, diperiksa  kadar  glukosa  dalam  darah  dengan menggunakan  strip  test  Accu  check  untuk  mengetahui kondisi  basal  hewan  percobaan  tersebut.  Hewan  coba diinduksi  dengan  streptozocin  (STZ)  (Sigma,  St Louis,MO)  dengan  dosis  40  mg/kg  BB  yang  dilarutkan dalam  buffer  sitrat    0.05  M  pH  4.5  diinjeksikan  intra peritoneal.  Setelah  48  jam  hewan  dicek  kadar  gula dalam  darahnya  dengan  Accu  check  ®  dan  diambil
serumnya  untuk  diperiksa  kadar  glukosa  dalam  darah serta persentase HbA1C.
Perlakuan. Hewan coba dibagi menjadi 6 kelompok masing-masing  kelompok  terdiri  dari  6  ekor  tikus. Kelompok  perlakuan  meliputi  kelompok  normal, kelompok  kontrol  diabetes  (diinduksi  STZ  +  air  saline), kelompok kontrol positif (diinduksi STZ + Glibenclamide 2.5 mg/kg BB), dan tiga kelompok perlakuan (diinduksi STZ  +  JAMSI  dengan  dosis  0.27,  0.81,  dan  1.62  ml/kg BB).  Perlakuan  diberikan  per  oral  dengan  sonde lambung  selama  4  minggu.  Kadar  glukosa  darah ditentukan  dari  sampel  darah  hewan  yang  telah dipuasakan 16 jam dengan menggunakan Accu Check® sebanyak  6  kali,  yaitu  sebelum  induksi  STZ,  48  jam setelah  induksi  STZ,  hari  ke  7,  14,  21  dan  28  setelah pencekokan. Selain itu, sebelum induksi perlakuan dan setelah  perlakuan  28  hari  dilakukan  analisis  kadar HbA1C  dalam  darah  dengan  menggunakan  kit  untuk tikus,  yaitu  Rat  Hemoglobin  A1c  Assay  Kit  (Crystal Chem,  USA)  dengan  metode  analisis  sesuai  petunjuk pabrikan.  Bobot  badan  tikus  ditentukan  tiap  hari  dan dirata-rata setiap satu minggu selama percobaan untuk melihat khasiat jamu yang diberikan dalam mempertahankan bobot badan hewan percobaan.

## Analisis Statistik
Data  disajikan  dalam  bentuk  nilai  rata-rata  SEM. ANOVA dilakukan untuk mengetahui adanya perbedaan antara  perlakuan  dengan  menggunakan  program  SPSS 25.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyakit  DM  salah  satu  indikatornya  adalah  adanya penurunan  berat  badan  (Lau  2010).  Induksi  STZ menunjukkan  keberhasilan  untuk  mencapai  kondisi diabetes  pada  semua  kelompok  yang  diinduksi dibandingkan dengan kelompok normal yang ditunjukkan  dengan  menurunnya  bobot  badan  tikus (Gambar  1).  Pada  hari  ke  14  sampai  dengan  hari  28 menunjukkan data bobot badan semua kelompok lebih rendah  signifikan  dibandingkan  dengan  kelompok normal  ( p <  0.05).  Setelah  28  hari  perlakuan  dengan jamu  JAMSI  menunjukkan  bahwa  pada  dosis  0.81  dan 1.62  mg/kg  BB  terjadi  peningkatan  bobot  badan dibandingkan  dengan  kontrol  diabetes  dan  kontrol positif glibenklamid (2.5 mg/kg BB). Penggunaan JAMSI pada  kedua  dosis  tersebut  menunjukkan  kenaikan bobot  badan  setelah  21  hari  perlakuan.  Dengan
Khasiat Jamu Antidiabetes pada Tikus Sprague Dawley yang Diinduksi Streptozocin
demikian, penggunaan jangka panjang dapat mencegah penurunan bobot badan hewan coba tikus.
Gambar  2  dan  3  secara  berurutan  menunjukkan kadar  glukosa  darah  dan  perubahannya  sebelum  dan setelah  perlakuan  dengan  JAMSI.  Kadar  glukosa  darah yang  berlebih  menjadi  indikator  awal  terjadinya  DM. Hal  ini  juga  terlihat  pada  penelitian  ini  yaitu  hewan dengan  darah  dibandingkan  kelompok  normal.  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  induksi  STZ  pada  dosis  40 mg/kg  BB  berhasil  membuat  tikus  perlakuan mengalami  diabetes.  Penggunaan  JAMSI  pada  jangka panjang  (28  hari)  menunjukkan  mampu  menekan kenaikan glukosa darah dibandingkan dengan kelompok kontrol diabetes ataupun kontrol glibenklamid  sebagai  obat  diabetes  komersial.  Selama 28  hari  perlakuan,  JAMSI  pada  dosis  1.62  ml/kg  BB merupakan yang terbaik dalam menekan glukosa darah dan  menyerupai  dengan  glibenklamid  (2.5  mg/kg  BB) sebagai obat DM komersial (Gambar 3). Khasiat sebagai antidiabetes  dari  sediaan  jamu  JAMSI  karena  adanya kandungan  ekstrak  tanaman P . macrocarpa , A . paniculata , dan M. citrifolia . Dalam penelitian terpisah menunjukkan  bahwa  ketiga  tanaman  tersebut berkhasiat  sebagai  antidiabetes.  Easmin  et  al.  (2017) melaporkan bahwa tanaman P . macrocarpa berkhasiat sebagai antidiabetes melalui mekanisme penghambatan  enzim  -glukosidase.  Penelitian  lain dengan  menggunakan  tanaman A . paniculate yang
dilakukan  secara in  vivo pada  hewan  coba  tikus  telah berhasil  membuktikan  khasiat  antidiabetes  melalui induksi  STZ  semuanya  mengalami  kenaikan  glukosa meka nisme molekuler pensinyalan senyawa insulin (Augustine  et  al.  2014). M.  citrifolia telah dilaporkan  memiliki  khasiat  sebagai  antioksidan yang  tinggi  dan  berkhasiat  sebagai  antidiabetes (Ahmad  et  al.  2016).  Dengan  demikian, penggunaan  ketiga  tanaman  dalam  jamu  JAMSI sangat  baik  dalam  memberikan  khasiat  sebagai antidiabetes yang dibuktikan dalam penelitian ini.
Hemoglobin  terglikosilasi  (HbA1C)  merupakan  salah satu  parameter  lain  terjadinya  penyakit  DM.  Hal tersebut  terjadi  karena  dalam  kondisi  glukosa  darah tinggi  (hiperglikemia)  maka  kelebihan  glukosa  akan bereaksi  dengan  protein  sehingga  menghasilkan hemoglobin  terglikosilasi  (HbA1C)  (Jeffcoate  2004). Kadar HbA1C sebelum perlakuan dan setelah perlakuan tersaji  pada  Gambar  4.  JAMSI  terbukti  dapat menurunkan  kadar  HbA1C  dibandingkan  dengan kontrol  diabetes  dengan  khasiat  penurunannya  tidak berbeda nyata dengan standar glibenklamid pada dosis 2.5  mg/kg  BB.  Kadar  HbA1C  pada  kelompok  normal menunjukkan tidak berbeda nyata antara sebelum dan setelah perlakuan, sementara pada kelompok
Gambar 1. Perubahan bobot badan tikus sebelum perlakuan, setelah induksi dengan streptozotocin (STZ) dan selama perlakuan pada 7, 14, 21, dan 28 hari. Nilai disajikan dalam rata-rata  SEM. *Berbeda signifikan dibandingkan kelompok Normal pada  = 0.05 berdasarkan uji Tukey.
Harmanto et al. perlakuan  menunjukkan  perubahan  yang  besar.  Hal tersebut  mengindikasikan  bahwa  induksi  STZ  telah berhasil membentuk kondisi diabetes pada hewan coba tikus  yang  digunakan.  Dengan  demikian,  penggunaan
JAMSI  benar-benar  terbukti  berkhasiat  sebagai antidiabetes  baik  berdasarkan  kemampuan  dalam menurunkan glukosa darah maupun menurunkan kadar HbA1C.

## SIMPULAN
JAMSI  dengan  dosis  1.62  ml/kg  BB  terbukti  secara preklinis  sebagai  antidiabetes  pada  hewan  uji  tikus yang diinduksi diabetes dengan streptozotocin. Evaluasi lebih  lanjut  perlu  dilakukan  khususnya  untuk
parameter biokimia lebih diperbanyak (seperti hormon insulin,  lipid  peroksida,  dan  perubahan  metabolit melalui studi metabolomik) dan potensi penggunaannya dalam menanggulangi penyakit diabetes  yang  komplikasi  dengan  penyakit  yang  lain.
Gambar  2. Kadar  glukosa darah  pada  tikus  normal, diabetes,  dan  perlakuan  setelah 0,  2,  7, 14,  21,  dan  28  hari pemberian JAMSI. Nilai disajikan dalam rata-rata  SEM.
Gambar 3 . Persentase perubahan kadar glukosa darah pada tikus normal, diabetes, dan perlakuan setelah 7, 14, 21, dan 28 hari pemberian JAMSI. Persentase perubahan didasarkan pada kadar glukosa darah setelah induksi STZ. Nilai disajikan dalam rata-rata  SEM. * Signifikan (p < 0.05) dibandingkan kelompok diabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
[Kemenkes]  Kementrian  Kesehatan.  2014.  Situasi  dan Analisis Diabetes. Jakarta (ID)
Ahmad AN, Mat Daud Z ‘Azuan, Ismail A. 2016. Review on  potential  therapeutic  effect  of  Morinda citrifolia L. Current Opinion in Food Science . 8:62– 67
Augustine  AW,  Narasimhan  A,  Vishwanathan  M, Karundevi  B.  2014.  Evaluation  of  antidiabetic property  of  Andrographis  paniculata  powder  in high fat and sucrose-induced type-2 diabetic adult male rat. Asian Pacific Journal of Tropical Disease.
4:S140–47
Burda N, Mema V, Mahmudi E, Selimi B, Zhugli S, et al. 2013. Prevalence of dry eye syndrome at patients with  diabetus  melitus  TIP  2. Journal  of  Acute Disease . 2(1):48–51
Easmin S, Sarker MZI, Ghafoor K, Ferdosh S, Jaffri J, et al.  2017.  Rapid  investigation  of  α-glucosidase inhibitory activity of Phaleria macrocarpa extracts using  FTIR-ATR  based  fingerprinting. Journal  of Food and Drug Analysis. 25(2):306–15
Guariguata  L,  Whiting  DR,  Hambleton  I,  Beagley  J, Linnenkamp U, Shaw JE. 2014. Global estimates of diabetes  prevalence  for 2013  and  projections  for 2035. Diabetes  Research  and  Clinical  Practice. 103(2):137–49
Jeffcoate SL. 2004. Diabetes control and complications: the  role  of  glycated  haemoglobin,  25 years  on. Diabetic Medicine. 21(7):657–65
Koye  DN, Magliano DJ, Reid  CM, Pavkov  ME,  Chadban SJ,  et  al.  2019.  Trends  in  Incidence  of  ESKD  in People  With  Type  1  and  Type  2  Diabetes  in Australia,  2002-2013. American  Journal  of  Kidney Diseases . 73(3):300–308
Lau  DCW.  2010.  Diabetes  and  weight  management. Primary Care Diabetes . 4:S24–30
Mora  F,  Lluch  I,  Ascaso  J,  Pascual  I,  Sempere  J,  et  al. 1998.  Esophageal  motor  disorders  in  diabetes mellitus  patients  with  slight  cardiovascular neuropaty. Gastroenterology. 114:A233
Takeda  K,  Nakamura  K,  Yagi  T,  Tatumi  T,  Moriguchi  J,
Ikeda  M.  2014.  The  effect  of  sitagliptin  on  blood pressure  in  hypertension  with  diabetes  melitus. Journal  of  the  American  Society  of  Hypertension . 8(4, Supplement):e110–11
Zhang  X,  Cui  X,  Li  F,  Wang  S,  Liu  X,  et  al.  2014. Association  between  diabetes  mellitus  with metabolic syndrome and diabetic
microangiopathy. Experimental  and  Therapeutic Medicine . 8(6):1867–73.
Gambar 4. Kadar HbA1C pada tikus normal, diabetes, dan perlakuan sebelum (hari ke-0) dan setelah (hari ke-28) perlakuan  JAMSI.  Nilai  disajikan  dalam  rata-rata  SEM.  Nilai  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda  pada  waktu perlakuan yang sama menunjukkan berbeda signifikan pada p < 0.05.