## ABSTRAK

## ABSTRACT

## J

## MULTIPLIKASI DENDROBIUM WALTER OUMAY DALAM MEDIUM NEW PHALEONOPSIS

## MULTIPLICATION OF DENDROBIUM WALTER OUMAY IN NEW PHALAEONOPSIS MEDIUM

## Kartinah Wiryosoendjoyo, Edy Prasetya
Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi, Surakarta
Perkembangbiakan Dendrobium secara in vitro dengan metode kultur jaringan umumnya dilakukan dengan eksplan pseudobub muda. Pemotongan pseudobulb muda merugikan petani anggrek, karena dari pseudobulb muda ini kelak akan menghasilkan kuncup bunga. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan tumbuh nodus dari pseudobulb tua anggrek Dendrobium secara in vitro.
Medium dasar yang digunakan adalah medium New Phaleonopsis (NP). Penambahan zat pengatur tumbuh (zpt) adalah kombinasi furfuril amino purin (kinetin) dan α-Naphtalena Acetic Acid (NAA) kadar 0, 1, 2, 3 dan 4 ppm dengan metode Mohr yang dimodifikasi. Pengirisan eksplan pada nodus.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan zpt NAA dan kinetin dapat merangsang pertumbuhan mata tunas pseudobulb tua dan pseudobulb muda anggrek Dendrobium Wolter Oumay. Nodus pseudobulb tua tumbuh paling baik pada medium dengan kombinasi zpt NAA 2 ppm dan kinetin 2 ppm. Mata tunas pseudobulb muda tumbuh baik pada medium NP dengan penambahan NAA 4 ppm.
Kata kunci: Eksplan psudobulb tua Dendrobium, medium New Phaleonopsis, protokorm.
Dendrobium proliferation in vitro by tissue culture method is generally performed by young pseudobulb explants. Cutting young pseudobulb adverse orchid farmers, because the young pseudobulb will produce flower buds later. This study was aimed to find out the ability of the nodes grow from an old pseudobulb Dendrobium in vitro.
The basic medium used is the medium of New Phalaenopsis (NP). The addition of plant growth regulators (PGR) is a combination of furfuryl amino purine (kinetin) and α- Naphtalena Acetic Acid (NAA) of 0, 1, 2, 3 and 4 ppm levels with a modified Mohr method. The excision of explants was conducted at the nodes.
The results showed that the addition of PGR NAA and kinetin could stimulate the buds growth of old pseudobulb and young pseudobulb of Dendrobium Wolter Oumay. Nodes of old pseudobulb were grown best on medium with combination of 2 ppm NAA and 2 ppm kinetin. The buds of young pseudobulb were grown well in the NP medium with the addition of 4 ppm NAA.
Keywords: Explant of old pseudobulb of Dendrobium, New Phalaenopsis medium, protocorm.

## PENDAHULUAN
umlah anggrek terbanyak yang tumbuh di daerah tropis adalah Dendrobium. Berbagai jenis Dendrobium sangat  diminati  oleh  masyarakat,  karena  menghasilkan  bunga  yang  cantik  dan  warna  yang  menawan. Dibandingkan  dengan  jenis  anggrek  lain  mahkota  bunga  Dendrobium  tidak  mudah  rontok.  Dendrobium
Indonesia mempunyai anggrek genus Dendrobium yang terdiri dari 1500 species (Astuti, http://www.daneprairie.com: Agroteknologi ).Sebagai negara yang memiliki banyak jenis anggrek, Indonesia kurang memanfaatkan dan menangani sumber  alamnya  secara  optimal,  padahal  penyebaran  anggrek  cukup  besar  di  daerah  tropis,  yaitu  80  %  genus  dan speciesnya berada di Asia Tenggara (Ariyadi, http://digilib.uns.ac.id/).
mempunyai batang simpodial (Solvia, 2008).

## MULTIPLIKASI DENDROBIUM WALTER OUMAY DALAM MEDIUM NEW PHALEONOPSIS
Perbanyakan  anggrek  secara  vegetatif  dilakukan dengan  cara  menumbuhkan  jaringan-jaringan  vegetatif atau  kultur  jaringan  seperti  akar,  daun,  batang  atau mata tunas pada media buatan berupa cairan atau padat secara  aseptik.  Dengan  metode  ini  dapat  diharapkan perbanyakan tanaman dapat dilakukan secara cepat dan berjumlah banyak, serta sama dengan induknya (Anonim 1 http://www.anggrek.org/budidaya-tanaman-anggrek. htm1/5 ).
Kartinah  (2003)  melakukan  penanaman  eksplan  daun dan pseudobulb anggrek Dendrobium dengan menggunakan medium Vacin & Went yang ditambah zat pengatur tumbuh NAA  dan  kinetin.  Eksplan  daun  diperoleh  dari  daun  muda tanaman anggrek dewasa, hanya menghasilkan pertumbuhan kalus.  Eksplan  pseudobulb  diambil  dari  pseudobulb  muda, tinggi kira-kira 2 cm mampu menghasilkan planlet. Utami  dkk  (2007)  menggunakan  medium  New Phaleonopsis  yang  ditambah  zat  pengatur  tumbuh NAA  untuk  kultur  somatik  embryogenesis  anggrek bulan. Medium ini ternyata juga baik untuk kultur in vitro selain  anggrek  bulan.  Bahkan  Kartinah  (2009) berhasil melakukan penanaman eksplan daun Stevia pada medium dasar New Phaleonopsis.
Zat  pengatur  tumbuh  sangat  diperlukan  sebagai komponen  medium  bagi  pertumbuhan,  perkembangan dan  diferensiasi.  Diferensiasi  selular  dan  morfogenesis in  vitro terutama  dipengaruhi  oleh  interaksi  antara konsentrasi  auksin  dan  sitokinin  yang  diberikan  pada medium  kultur.  Manipulasi  rasio  sitokinin  –  auksin  dapat mempengaruhi organogenesis. Perbandingan auksin/sitokinin tinggi memacu pembentukan akar, perbandingan sebaliknya akan  memacu  pembentukan  tunas.  Jika  perbandingan auksin – sitokinin seimbang hanya terbentuk kalus (George & Sherrington, 1984).
tanaman dengan eksplan pseudobulb tua anggrek Dendrobium. Penelitian  ini  juga  bermanfaat  untuk  membantu  pelestarian anggrek  langka  atau  yang  hampir  punah,  sehingga mendukung pelestarian biodiversitas negara Indonesia.
Eksplan yang digunakan adalah nodus dari pseudobulb tua. Jenis anggrek yang digunakan adalah Dendrobium Wolter Oumay; bunga berwarna putih, tanaman ini rajin berbunga dan bermanfaat untuk bunga potong. Medium dasar yang digunakan adalah medium NP. Zat pengatur tumbuh yang ditambahkan  pada  medium  adalah  auksin  dan  sitokinin, sebab diferensiasi selular dan morfogenesis in vitro terutama dipengaruhi  oleh  interaksi  antara  konsentrasi  auksin  dan sitokinin  yang  diberikan  pada  medium  kultur.  Auksin  yang digunakan adalah α-Naphtalena Acetic Acid (NAA). Sitokinin yang digunakan adalah 6-Furf uril Amino Purin (kinetin). Dari perlakuan tersebut diharapkan dapat diperoleh tanaman baru dengan  sifat  yang  sama  dengan  induknya  dalam  waktu yang singkat.

## METODE PENELITIAN Populasi  dan Sampel
Populasi penelitian ini adalah anggrek Dendrobium di  daerah  Surakarta.  Sampel  yang  digunakan  adalah anggrek Dendrobium Wolter Oumay pada bulan Maret 2010.

## Jalannya Penelitian
Dilakukan pembuatan medium New Phaleonopsis dengan penambahan zat pengatur tumbuh kinetin dan NAA, kombinasi dalam satuan ppm:
1.
NAA 0 0 1 2 3 4 kinetin 0 4 3 2 1 0
Perkembangbiakan  Dendrobium  dengan  pseudobulb tua mempunyai manfaat besar bagi petani anggrek karena membantu  petani  anggrek  mendapatkan  tanaman  baru dengan  kualitas  yang  sama  dengan  induknya,  tanpa menunda  masa  panen  bunga.  Penelitian  ini  bermanfaat memberi informasi ilmiah tentang keberhasilan perbanyakan
Pseudobulb  tua  dipotong,  disterilkan  dengan  larutan NaOCl  5  %  selama  15  menit,  NaOCl  2,5%  selama  10 menit,  dicuci  aquadest  steril,  dan  disterilkan  alkohol 70% lima menit, dibilas aquadest steril tiga kali, dibiarkan dalam Erlenmeyer steril yang berisi beberapa ml aquadest steril,  dibiarkan  selama  2  hari.  Mata  tunas  dipotong 2.

## Kartinah Wiryosoendjoyo, Edy Prasetya
3.
4.
5.
6.
Pseudobulb  muda  (tinggi  1  –  2  cm)  dipotong, disterilkan dengan larutan NaOCl 5% selama 10 menit, NaOCl 2,5% selama 10 menit, dicuci aquadest steril, disterilkan  dengan  alkohol  70%  satu  menit,  dibilas aquadest  steril  tiga  kali;  mata  tunas  diambil  secara aseptis, ditanam pada medium NP dengan kombinasi zpt seperti di atas.
Inkubasi dilakukan pada suhu kamar.
Pengamatan  pertumbuhan  eksplan  tiap  seminggu, tolok  ukur  pertumbuhan  adalah  adanya  pembesaran mata tunas, kalus, protokorm atau planlet. Penggunaan analisa statistik dengan tolok ukur adanya pertumbuhan planlet, karena tujuan akhir penanaman eksplan adalah untuk mendapatkan planlet.
Analisis data pengamatan dengan uji Kruskal-Wallis.
Hasil Pengamatan:
Pertumbuhan planlet eksplan pseudobulb tua anggrek Dendrobium:
Medium  NP
+ N/F (ppm)
Penanaman A Penanaman B Penanaman C Penanaman D Penanaman E Jumlah eksplan tumbuh 0/0 0 0 0 0 0 0 0/4 0 0 0 0 0 0 1/3 0 0 0 0 0 0 2/2 0
0 0 1 1 2 pl
3/1 0 0 0 0 0 0 4/0
0 0 0 0 0 0
Pertumbuhan planlet eksplan pseudobulb muda anggrek Dendrobium:
Medium  NP + N/F (ppm) Penanaman A Penanaman B Penanaman C Penanaman D Penanaman E Jumlah eksplan tumbuh 0/0 0 0 0 0 0 0 0/4 0
0 0 0 0 0
1/3 0 0 0 0 0 0 2/2 0 0
0 0 0 0 3/1
0 0 0 0 0 0 4/0 0 1 1 0 1 3 pl Pl = planlet, 0= tak ada pertumbuhan   atau   hanya tampak adanya respon pertumbuhan., NP = medium New Phaleonopsis, N = zpt NAA, F = zpt kinetin.
Keterangan:
Pembahasan
dengan  pendapat  George  &  Sherrington  (1984),  yang menyatakan bahwa  pemberian sitokinin bersama-sama dengan  auksin  pada  medium  kultur  dapat  memacu pembelahan sel dan morfogenesis.
Respon pertumbuhan mata tunas yang berasal dari pseudobulb  tua  berbeda  dengan  respon  mata  tunas pseudobulb muda. Perbedaan ini disebabkan kandungan hormon  tumbuh  yang  berbeda.  Pseudobulb  tua  tidak mengandung hormon tumbuh cukup banyak; pendapat ini didukung hasil pertumbuhan eksplan pada medium dasar  saja  (tanpa  penambahan  zpt)  yang  tidak menunjukkan respon pertumbuhan. Pseudobulb muda mengandung  hormon  tumbuh  golongan  sitokinin; pendapat ini didukung hasil pertumbuhan planlet pada eksplan  yang  ditanam  pada  medium  dasar  dengan penambahan  zpt  NAA  saja.  Penanaman  eksplan  pada medium dasar dengan penambahan kadar zat pengatur tumbuh (zpt) berbeda akan menghasilkan pertumbuhan yang  berbeda  juga.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat George & Sherrington (1984) yang menyatakan bahwa diferensiasi  selular  dan  morfogenesis in  vitro terutama dipengaruhi  oleh  interaksi  antara  konsentrasi  auksin Data pengamatan yang disajikan adalah pengamatan empat  minggu  setelah  penanaman  eksplan,  dari  hasil penanaman  eksplan  tanpa  kontaminasi.  Masa  inkubasi eksplan  selama  empat  minggu  sudah  cukup  untuk disimpulkan,  karena  respon  pertumbuhan  sudah terlihat nyata.
Pertumbuhan eksplan pseudobulb tua pada medium NP dengan penambahan zpt NAA saja tidak menghasilkan pertumbuhan.
Pertumbuhan eksplan pseudobulb tua pada medium NP dengan penambahan 1 ppm NAA dan 3 ppm kinetin menunjukkan  adanya  sedikit  respon.  Tampak  mata tunas  mulai  membesar,  tetapi  ternyata  tak  mampu melanjutkan pertumbuhannya. Bila inkubasi dilanjutkan, pertumbuhan mengalami kemunduran, ditandai dengan warna berubah menjadi kecoklatan, dan akhirnya mengalami kematian.
secara aseptis, ditanam pada medium NP dengan kombinasi zpt seperti di atas.
Penelitian ini menggunakan zat pengatur tumbuh (zpt) auksin (NAA)  dan sitokinin (kinetin). Hal ini sesuai
Pertumbuhan eksplan pseudobulb tua pada medium

## MULTIPLIKASI DENDROBIUM WALTER OUMAY DALAM MEDIUM NEW PHALEONOPSIS
NP dengan penambahan 2 ppm NAA dan 2 ppm kinetin menunjukkan  adanya  pertumbuhan  yang  baik.  Respon pertumbuhan  mata  tunas  tertinggi  pada  medium  ini. Eksplan yang ditanam berjumlah 20 potong, pertumbuhan yang  diperoleh  11  potong,  dua  diantaranya  membentuk tunas. Hasil  pertumbuhan  ini  menunjukkan  penambahan NAA 2 ppm dan kinetin 2 ppm dapat memacu pertumbuhan mata  tunas  pseudobulb  tua.  Ternyata  nodus  pseudobulb tua  membutuhkan  penambahan  hormon  auksin  dan sitokinin seimbang.
Pada medium NP dengan penambahan NAA 3 ppm dan  kinetin  1  ppm    diperoleh  respon  pertumbuhan berupa pembesaran mata tunas. Perlakuan sub kultur terhadap  hasil  pertumbuhan  tidak  menunjukkan pertumbuhan yang berlanjut. Jadi, medium NP dengan penambahan  3  ppm  NAA  dan  1  ppm  kinetin  kurang baik untuk pertumbuhan mata tunas.
Pada medium NP dengan penambahan kinetin 4 ppm diperoleh  respon  pertumbuhan  berupa  pembesaran mata  tunas.  Tampak  pertumbuhan  mata  tunas  hampir tidak ada.
Dari adanya hasil respon pertumbuhan pada medium dasar  dengan  penambahan  NAA  2  ppm  dan  kinetin 2  ppm,  serta  NAA  3  ppm  dan  1  ppm,  perlu  dilakukan penanaman  lanjutan  terhadap  mata  tunas  pseudobulb tua  dengan  medium  dasar  NP,  penambahan  zpt  NAA dan  kinetin  berkisar  satu  sampai  tiga  ppm.  Kombinasi zpt  dengan  kisaran  sempit  dapat  menunjukkan  dengan tepat kombinasi zpt yang paling sesuai untuk merangsang pertumbuhan  planlet.  Misalnya  dengan  kombinasi  zpt NAA dan kinetin berturut-turut 1/3; 1,5/2,5; 2/2; 2,5/1,5 dan  3/1.  Cara  tersebut  akan  mampu  menunjukkan penambahan  zpt  yang  paling  tepat  untuk  merangsang pertumbuhan  mata  tunas  pseudobulb  tua  anggrek Dendrobium.
Penggunaan  eksplan  berupa  pseudobulb  muda, berukuran tinggi satu sampai dua centimeter (sebagai kontrol) menghasilkan respon pertumbuhan yang baik pada penambahan NAA 4 ppm. Eksplan yang ditanam
berjumlah  20  potong,  pertumbuhan  yang  diperoleh 10  potong,  tiga  diantaranya  membentuk  tunas. Dari hasil  pengamatan  terlihat  bahwa  batang  anggrek (pseudobulb)  muda,  berukuran  tinggi  satu  sampai  dua centimeter, menunjukkan pertumbuhan yang lebih cepat dibandingkan  pseudobulb  tua.  Hasil  pertumbuhan  ini menunjukkan penambahan NAA 4 ppm dapat memacu pertumbuhan mata tunas pseudobulb muda. Pseudobulb muda yang sedang tumbuh banyak mengandung hormon sitokinin,  sehingga  penambahan  NAA  saja  mampu menghasilkan pertumbuhan mata tunas. Adanya interaksi sitokinin dalam eksplan dan auksin (NAA) dalam medium mampu menghasilkan pertumbuhan tunas.
Oleh  karena  data  pertumbuhan  tidak  terdistribusi secara  normal,  maka  digunakan  uji  statisik  dengan  uji Kruskal Wallis dilanjutkan uji Mann Whitney. Disimpulkan pada  batang  tua  tidak  ada  beda  nyata  pada  semua medium; terjadinya pertumbuhan karena faktor kebetulan. Pada eksplan batang muda  terdapat beda nyata, medium terbaik dengan penambahan NAA 4 ppm.
Data yang didapatkan di laboratorium diketahui bahwa pseudobulb  muda  anggrek  Dendrobium  sangat  baik untuk  eksplan.  Pseudobulb  tua  dapat  digunakan  sebagai eksplan,  tetapi  tingkat  keberhasilan  lebih  rendah  dan berbagai  kesulitan  harus  ditanggulangi,  terutama perlakuan sterilisasi dan kerasnya pseudobulb.
Kesimpulan:
Daftar Pustaka:
1 Anonim : Budidaya Tanaman Anggrek , http://www.anggrek.org/ budidaya-tanaman-anggrek.htm1/5 : diakses 26 Maret 2009, jam 13.23.
-
-
Eksplan  nodus  dari  pseudobulb  tua  anggrek Dendrobium  dapat  tumbuh  membentuk  tunas pada medium NP ditambah NAA 2 ppm dan kinetin 2 ppm.
Eksplan nodus dari pseudobulb muda anggrek Dendrobium dapat tumbuh membentuk tunas pada medium NP ditambah NAA 4 ppm.

## Kartinah Wiryosoendjoyo, Edy Prasetya
Astuti Y (2008): Agroteknologi Dan Peluang Bisnis Dendrobium sp , Staf Pengajar Fak. Manajemen Agribisnis UMB. http://www. daneprairie.com:Agroteknologi .  Diakses  26  Maret  2009  jam 13.10.
George, E.F & Sherrington P.D (1984): Plant Propagation by Tissue Culture. Handbook and Directory of Commercial Laboratories . Exegetics Limited. Kartinah  Wiryosoendjoyo  (2003): Pembiakan  Dendrobium  C.K.Ai Menggunakan Eksplan Daun dan Pseudobulb . Dipublikasikan dalam Seminar Nasional “Strategi Bersaing di Era Pasar Bebas”, Universitas Setia Budi, Surakarta.
Kartinah  Wiryosoendjoyo  (2009): Short  Cut  Penanaman  Eksplan Daun  Stevia  Pada  Medium  New  Phaleonopsis. Biomedika, Jurnal Ilmiah Biologi & Kesehatan ISSN No.1979 – 035X, Vol 2 No.2, September 2009, halaman 167 – 172.
Ludi Antoro Ariyadi, http://digilib.uns.ac.id/abstrak_2939_budidaya -anggrek-dendrobium). Akses 20 April 2009 jam 20.10. Solvia  N  (2008): Mengenal  dan  Memelihara  Anggrek  Dendrobium . Spmabogor.net. Website Alumni SPMA Bogor. Akses 5 April 2009. Utami EDS, Sumardi I, Taryono, Semiarti (2007): Pengaruh α- Naphtaleneacetic  Acid  (NAA)    Terhadap  Embriogenesis Somatik  Anggrek  Bulan  Phaleonopsis amabilis (L.)  Bl. Biodiversitas,  volume  8,  nomor  4,  halaman  295  –  299.
2 Anonim : Teknik Produksi Bibit Anggrek . Media Pertanian Online Anda,  , diakses 26 Maret 2009, jam 13.20.