## Original Research
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN KAYU MANIS ( Cinnamomum burmannii blume ) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Porphyromonas gingivalis DENGAN METODE DISC DIFFUSION
Rina Nabila a , Cicih Bhakti Purnamasari b , Alhawaris c
a Program Studi Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Mulawarman, Samarinda, Indonesia b Laboratorium Pendidikan Kedokteran, FakuItas Kedokteran, Universitas MuIawarman, Samarinda, Indonesia c Laboratorium Oral Biologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Mulawarman, Samarinda, Indonesia
Korespondensi: rinanabila06@gmail.com

## Abstrak
Periodontitis merupakan penyakit tertinggi keenam di seluruh dunia dengan Porphyromonas gingivalis sebagai salah satu bakteri penyebabnya. Daun kayu manis ( Cinnamomum burmannii blume ) menunjukkan beberapa  aktivitas  antimikroba,  seperti  antibakteri  dan  anti-jamur.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak C.  burmannii  blume terhadap  pertumbuhan Porphyromonas gingivalis . Desain penelitian yang digunakan adalah the post-test only control group design . Bakteri P. gingivalis ditumbuhkan  pada  medium Blood  Agar  Plate (BAP)  diberi  perlakuan  menggunakan  ekstrak etanol C.  burmannii  blume dengan  konsentrasi  sebesar  10%,  20%,  30%,  40%,  dan  50%.  Pengulangan dilakukan sebanyak 5 kali. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol C. burmannii blume tidak membentuk  zona  hambat  di  sekitar  paper  disc  terhadap  pertumbuhan P.  gingivalis pada  semua konsentrasi. Ekstrak etanol C. burmannii blume tidak memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan Porphyromonas gingivalis.
Kata kunci: Antibakteri, Daun kayu manis ( Cinnamomum burmannii blume ), Porphyromonas gingivalis

## Abstract
Periodontitis is the sixth highest disease worldwide with Porphyromonas gingivalis as one of the causative bacteria. Cinnamon (Cinnamomum burmannii blume) leaves exhibit several antimicrobial activities, such as antibacterial and anti-fungal. This study was conducted to determine the antibacterial activity of C. burmannii blume extract on the growth of P. gingivalis. The research design used was the post-test only control group design. P. gingivalis bacteria grown on Blood Agar Plate (BAP) medium were treated with ethanol extract of C. burmannii blume with concentrations of 10%, 20%, 30%, 40%, and 50%. Repetition is done  5  times.  The  results  showed  that  the  ethanolic  extract  of  C.  burmannii  blume  did  not  form  an inhibitory zone around the paper disc on the growth of P. gingivalis at all concentrations. The ethanolic extract of C. burmannii blume does not have antibacterial activity on the growth P. gingivalis.
Keywords: Antibacterial, Cinnamon leaves (Cinnamomum burmannii blume), Porphyromonas gingivalis

## PENDAHULUAN
Penyakit periodontal merupakan salah satu penyakit yang paling luas di masyarakat, dengan jenis  yang  paling  sering  terjadi  adalah  gingivitis dan  periodontitis. 1 Periodontitis  didefinisikan sebagai penyakit radang pada jaringan pendukung gigi yang disebabkan oleh mikroorganisme.  Penyakit  ini  mengakibatkan kerusakan  ligamen  periodontal  dan  tulang alveolar  disertai  meningkatnya  kedalaman probing,  resesi,  atau  keduanya. 2 Penelitian Kassebaum  (2010),  penyakit  periodontitis  kronis adalah  kondisi  keenam  yang  paling  umum  dan mempengaruhi 10,8% atau 743 juta orang berusia 15-99  tahun  di  seluruh  dunia.  Demikian  pula insidensi  periodontitis  kronis  berdasarkan  usia tidak  berubah  secara  signifikan  selama  dua dekade sebelumnya antara tahun 1990 dan 2010, yaitu  696  kasus  per  100.000  orang  pada  tahun 1990 dan 701 kasus per 100.000 orang per tahun pada tahun 2010. 3
Periodontitis  terjadi  karena  meningkatnya pembentukan  biofilm  plak  dan  virulensi  bakteri yang disebabkan oleh ketidakseimbangan antara imunitas  host  dan  bakteri. 1 Salah  satu  yang terlibat  pada  patogenesis  periodontitis  adalah Porphyromonas  gingivalis ,  yang  merupakan bakteri  gram-negatif  anaerob. 4 Bakteri  ini  dapat dideteksi pada pasien dengan jaringan periodontal sehat di daerah sulkus subgingiva dan merupakan  bagian  dari  flora  normal,  tetapi apabila populasi bakteri meningkat akan berubah menjadi  pathogen  dan  dapat  menyebabkan akumulasi plak. 1
Belakangan  ini  minat  masyarakat  untuk menggunakan  bahan-bahan  alami  semakin meningkat.  Hal  ini  dibuktikan  dengan  semakin
banyaknya  industri-industri  yang  menggunakan tumbuh-tumbuhan sebagai bahan dasar. Kenyataan ini mendorong dilakukannya penelitian-penelitian tentang tumbuhan-
tumbuhan  yang  secara  tradisional  sering digunakan  untuk  mencegah  atau  mengobati berbagai  penyakit. 5 Indonesia  sendiri  dipenuhi dengan  banyak  jenis  tanaman  yang  memiliki banyak  khasiat.  Salah  satu  tanaman  yang berkhasiat yaitu tanaman kayu manis ( Cinnamomum  burmannii  blume ). C.  burmannii telah menunjukkan aktivitas analgesik, antibakteri, anti-diabetes, anti-jamur,
antioksidan,  antirematik,  anti-trombotik,  dan anti-tumor. 6 Hasil penelitian yang dilakukan oleh
Jailani  (2015)  menunjukkan  bahwa  daun  kayu manis mengandung sekitar 0,5-0,7%
sinamaldehida,  dengan  kandungan  utamanya adalah eugenol sekitar 70-95% dan sinamilasetat 3-4  %.  Terdapat  30  studi  yang  berbeda mengevaluasi  bahwa  tanaman  kayu  manis memiliki  potensi  sebagai  anti-mikroba.  Bakteri yang  sudah  diteliti  antara  lain Enterobacter aerogenes,  Enterobacter  cloacae,  Haemophilus
Influenza, Helicobacter pylori, Klebsiella pneumonia,  Proteus  mirabilis,  Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium,
Staphylococcus albus, dan Yersinia enterocolitica . Hal ini membuktikan bahwa tanaman kayu manis telah  menunjukkan  potensi  aksi  anti-mikroba terhadap berbagai bakteri. 7 Sedangkan data yang menunjukkan  aktivitas  antibakteri  dari  kayu manis terhadap Porphyromonas gingivalis belum ditemukan.  Berdasarkan latar belakang tersebut, perlu  dilakukan  penelitian  ini  yang  bertujuan untuk menguji aktivitas ekstrak daun kayu manis terhadap pembentukan zona hambat pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian True
eksperimental yang menggunakan desain penelitian the post-test only control group design.
Digunakan uji Disc Diffusion untuk melihat respon pertumbuhan bakteri terhadap agen antibakteri.
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah  daun  kayu  manis  ( C.  burmannii  blume ) yang bentuknya bagus tidak ada kecacatan, daun berwarna hijau tua yang diperoleh dari Bontang, Kalimantan  Timur.  Sedangkan  bakteri  yang digunakan dalam penelitian ini adalah bakteri P. gingivalis standar ATCC 33277 yang diperoleh dari Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Gigi  Universitas  Jember.  Penelitian  ini  telah mendapat  persetujuan ethical  clearance dari Komisi  Etik  Fakultas  Kedokteran  Universitas Mulawarman dengan nomor surat NO. 22/KEPK- FK/III/2021.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah daun kayu manis ( C. burmannii blume ) dan etanol  96%,  kertas  label, blank  disc ,  sediaan bakteri P.  gingivalis , chlorhexidine  gluconate
0,2%,  aquadest  sterile,  GasPak  Generator envelope    ,  NaCl,  blood  agar,  sheep  blood ,  APD, dan kertas saring Whatman no. 42.

## Alat
Peralatan yang digunakan adalah alat tulis, timbangan,  peniris,  lemari  pengering, blender , corong buchner, laboratory bottle, rotary vacuum evaporator , toples kaca, timbangan analitik, oven,
ose,  pinset,  bunsen,  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi, micropipet ,  jangka  sorong/penggaris, spidol, incubator ,  gelas  laboratorium/ breaker glass , autoclave,  vortex,  petridish,  anaerob  jar,
dan spektofotometer .

## Metode
1. Sterilisasi alat Alat-alat  yang  akan  digunakan  disterilisasi terlebih dahulu sebelum digunakan menggunakan autoclave dengan suhu 121°C selama  15-30  menit.  Alat  yang  tidak  dapat disterilkan menggunakan autoclave
disterilkan dengan etanol 96%.
2. Pembuatan ekstrak etanol daun kayu manis Daun kayu manis ( C. burmannii ) dicuci bersih dan  dikeringkan  dalam  lemari  pengering selama  5  hari  pada  suhu  40°C.  Daun  yang sudah kering dihaluskan dengan cara diremas dan  diblender.  Daun  yang  sudah  halus dimaserasi dengan pelarut etanol sebanyak 2 L dan dikocok selama 5 menit. Setelah 4 hari proses  maserasi  dihentikan,  dilanjutkan dengan melakukan penyaringan menggunakan kertas saring Whatman no. 42. Ekstrak  yang  disaring  kemudian  dipekatkan dengan menggunakan rotary vacuum evaporator dan  akan  didapatkan  ekstrak daun kayu manis yang kental 8.

## 3. Pembuatan media
Pada  penelitian  ini  menggunakan  media Blood  Agar  Plate  (BAP)  yang  dibuat  dengan cara  menimbang  Blood  Agar  Base  (BAB) sebanyak 40 gram. Untuk 40 gram blood agar base membutuhkan 1 liter aquadest. Tetapi dikarenakan  adanya  penambahan  sheep blood  sebanyak  50  ml,  aquadest  yang ditambahkan  sebanyak  950  ml,  lalu  aduk hingga  merata.  Sterilkan  media  dengan autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit. Tuangkan  blood  agar  base  dan  hangatkan pada  suhu  ruangan  terlebih  dahulu. Tambahkan 5-7% atau 50 ml sheep blood dan
homogenkan.  Kemudian  dituang  ke  dalam petridish dengan diameter 10 cm yang telah disterilisasi terlebih dahulu.
4. Pembuatan Suspensi Bakteri P. gingivalis Pembuatan  suspensi  bakteri P.  gingivalis dilakukan dengan menyiapkan tabung reaksi yang  telah  berisi  5  ml  NaCl  steril  lalu inokulasikan 1-2 ose bakteri hasil peremajaan biakan  murni P.  gingivalis kedalam  tabung reaksi.  Homogenkan  dengan  menggunakan Vortex  mixer .  Tingkat  kekeruhannya  diukur
menggunakan spektrofometer dengan absorbansi  0,132  pada  panjang  gelombang 625 nm hingga didapatkan tingkat kekeruhan 0,5 McFarland. Jika terlalu keruh tambahkan NaCl  dan  jika  kurang  keruh  tambahkan bakteri P.  gingivalis NaCl.  Kemudian dihomogenkan kembali menggunakan Vortex mixer hingga  didapatkan  tingkat  kekeruhan
0,5 McFarland 9 .
5. Uji antibakteri
Untuk uji antibakteri digunakan media Blood Agar  Plate  (BAP)  yang  sudah  disiapkan  dan sudah  dalam  suasana  anaerob.  Media  yang telah  disiapkan  kemudian  dibuat  menjadi  7 bagian menggunakan spidol di bagian bawah petridish untuk menandakan masing-masing ekstrak  etanol  daun  kayu  manis  ( C.
burmannii )  dengan  konsentrasi  10%,  20%, 30%, 40%, 50%, clorhexidine gluconate 0,2%
dan aquadest steril .
Pertama-tama,  celupkan  kapas  lidi  steril ( cotton  buds )  ke  dalam  tabung  yang  berisi suspensi  biakan  bakteri P.  gingivalis ,  lalu dioleskan  perlahan  dan  secara  merata  ke seluruh  bagian  permukaan  media  BAP. Pencelupan  dan  pengolesan  ini  dilakukan beberapa  kali  untuk  memastikan  seluruh
permukaan  terkena  olesan  dari  suspensi bakteri tersebut secara merata.
Kemudian, tempelkan paper disc yang telah direndam  dengan  konsentrasi  10%,  20%, 30%, 40%, 50%, Clorhexidine gluconate 0,2% dan aquadest  steril menggunakan  pinset steril  sambil  dilakukan  penekanan  ringan pada  media  yang  telah  ditandai  dengan spidol.  Lakukan  pengulangan  sebanyak  lima kali  pada  konsentrasi  10%,  20%,  30%,  40%, 50%, Clorhexidine  gluconate 0,2%  dan aquadest  steril .  Setelah  itu,  petridish diinkubasikan  dalam  inkubator  pada  suhu 35°C  selama  24  jam. Suasana  anaerob  di dalam  lingkungan  untuk  pertumbuhan bakteri P.  gingivalis didapatkan  dengan menggunakan anaerob jar yang di dalamnya terdapat GasPak Generator envelope CO2.
6. Pengukuran zona hambat
Setelah dilakukan inkubasi 24 jam dilakukan pengukuran zona hambat atau zona inhibisi. Dilakukan pengukuran setiap zona bening di sekitar  disc,  pengukuran  zona  hambat dilakukan  menggunakan  jangka  sorong 10 . Pengukuran  dilakukan  dengan  mengukur diameter  zona  hambat  lalu  dikurangkan dengan diameter disc.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  dilihat  dengan  mengukur zona hambat yang ditandai dengan terbentuknya daerah bening di sekitar paper disc pada masing- masing kelompok konsentrasi uji yaitu 10%, 20%, 30%, 40%, 50% dan kelompok kontrol positif serta kontrol  negatif  setelah  24  jam  diberikan perlakuan.
Gambar 1. Hasil penelitian Pemberian Ekstrak Daun Kayu Manis ( C. burmannii blume) terhadap Bakteri Porphyromonas gingivalis
Zona bening tidak terlihat di sekitar paper disc yang telah diberikan ekstrak daun kayu manis dengan  konsentrasi  10%,  20%,  30%,  40%,  50% serta kontrol negatif. Hanya pada kontrol positif yang menunjukkan adanya zona bening di sekitar paper  disc tersebut.  Kemudian  pengukuran dilakukan menggunakan jangka sorong dan data yang diperoleh dimasukkan dalam tabel berikut.
Tabel 1. Hasil zona hambat pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis pada ekstrak daun kayu manis ( C. burmannii blume ) Konsentrasi % Pengulangan Mean (mm) I II III IV V 10% - - - - - - 20% - - - - - - 30% - - - - - - 40% - - - - - - 50% - - - - - - Clorhexidine gluconate 0,2% 5,7 5,3 4,4 4,1 6 5,17 Aquadest - - - - - -
Pada tabel di atas menunjukkan hasil bahwa tiap  konsentrasi  uji  ekstrak  daun  kayu  manis dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40% dan 50% tidak  menunjukkan  zona  hambat  terhadap pertumbuhan  bakteri P.  gingivalis yang  telah dilakukan  pengulangan  sebanyak  lima  kali.
A quadest steril sebagai kontrol negatif juga tidak menunjukkan terbentuknya zona hambat terhadap  bakteri P.  gingivalis .  Sementara Clorhexidine  gluconate 0,2%  sebagai  kontrol positif terbentuk zona hambat terhadap bakteri P. gingivalis berdiameter rata-rata 5,17 mm dengan diameter disc sebesar 6 mm. Menurut David dan Stout (1971) kekuatan daya antibakteri berdasarkan  diameter  zona  hambat  dibagi menjadi  empat  kategori  yaitu  sangat  kuat  (zona hambat lebih dari 20 mm), kuat (zona hambat 10- 20  mm),  sedang  (zona  hambat  5-10  mm)  dan lemah (zona hambat kurang dari 5 mm). 11
Tumbuhan kayu manis memiliki kandungan sinamaldehid, sinamat, asam sinamat dan beberapa jenis senyawa minyak atsiri sebagai komponen  utamanya.  Kandungan  metabolit sekunder  pada  suatu  tanaman  dipengaruhi  oleh beberapa faktor baik internal maupun eksternal. Faktor  internal  seperti  gen  dan  faktor  eksternal diantaranya  seperti  cahaya,  suhu,  kelembaban, pH,  kandungan  unsur  hara  didalam  tanah  dan ketinggian  tempat.  Ketinggian  tempat  yang berbeda  akan  menghasilkan  suhu  yang  berbeda pula.  Ketinggian  tempat  merupakan  salah  satu faktor yang berpengaruh terhadap pertumbuhan suatu tanaman. Serangkaian proses metabolisme pada tanaman akan terganggu sehingga senyawa yang  dihasilkan  dari  proses  tersebut  akan berbeda pada setiap ketinggian tempat. 12 Faktor- faktor tersebut dapat mempengaruhi jumlah zat antibakteri  yang  terdapat  pada  sampel.  Hal  ini dapat  menyebabkan  tidak  terbentuknya  zona hambat  dikarenakan  ketidakmampuan  dalam merusak  membran  sel  dan  mengganggu  proses fisiologis sel. 13
P.  gingivalis merupakan  bakteri  anaerob gram-negatif yang berada di subgingiva biofilm. 14
Bakteri  Gram  negatif  memiliki  cara  untuk melindungi membran selnya dari penetrasi bahan antibakteri.  Dinding  sel  bakteri  gram  negatif mempunyai  struktur  yang  lebih  kompleks  tetapi lebih tipis dibandingkan dinding sel bakteri gram positif. Bakteri gram negatif memiliki 2 membran, yaitu  membran  sitoplasma  dan  membran  luar (outer membrane) dan adanya ruang periplasmic. 15 Outer  membran  tersusun  atas lipopolisakarida  (LPS)  yang  terdiri  dari  lipid  A, rantai pendek gula dan antigen O. Antigen O dan polisakarida berperan dalam mencegah penetrasi senyawa  hidrofobik  ke  dalam  membran  sel. Adanya  struktur  membran  luar  yang  kompleks inilah  yang  membatasi  akses  senyawa  aktif antibakteri  ke  dalam  membran  sel.  Hal  ini menjadikan  bakteri  gram  negatif  lebih  resisten terhadap senyawa aktif antibakteri. 16
Namun  pada  penelitian  yang  dilakukan oleh  Zhang  (2017)  menyatakan  bahwa  eugenol menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang  kuat terhadap  pertumbuhan  bakteri  Porphyromonas gingivalis ditandai. Eugenol menyebabkan kebocoran  asam  nukleat  dan  protein  dari  sel. 17
Sedangkan  Sinamaldehida  berperan  dalam penghambatan  pertumbuhan  bakteri  dengan cara  menurunkan  polaritas  dan  meningkatkan permeabilitas  dalam  waktu  dan  konsentrasi tertentu. 18
Selain  disebabkan  oleh  kandungan metabolit  sekunder  dari  daun  kayu  manis  ( C. burmannii  blume )  dan  struktur  bakteri  yang digunakan, tidak terbentuknya zona hambat bisa juga  disebabkan  oleh  faktor  lain  seperti konsentrasi  ekstrak  uji  yang  digunakan.  Tidak terbentuknya zona hambat ini dapat disebabkan karena senyawa aktif tersebut tidak terdeteksi di dalam  konsentrasi  yang  sudah  ditentukan.  Jika
konsentrasi  uji  yang  dipilih  semakin  tinggi  maka jumlah  senyawa  aktif  yang  terkandung  pada konsentrasi  uji  memiliki  jumlah  lebih  banyak. 19
Berbeda  dengan  penelitian  terdahulu  yang dilakukan Qomar, ekstrak daun kayu manis pada konsentrasi 20% dapat membentuk zona hambat pada bakteri anaerob. 20
Pada penelitian ini, metode yang digunakan adalah disc  diffusion .  Metode  uji  antibakteri sendiri terbagi menjadi dua, yaitu difusi dan dilusi. Metode difusi terdiri dari disc diffusion, sumuran dan parit. Peneliti memilih metode disc diffusion dikarenakan  metode  ini  memiliki  beberapa kelebihan  dan  kekurangan.  Kelebihannya  yaitu mudah  untuk  dilakukan,  tidak  membutuhkan peralatan  khusus  dan  relatif  murah.  Sedangkan kekurangannya  yaitu  zona  hambat  yang terbentuk  sangat  bergantung  pada  kondisi inkubasi,  inokulum,  predifusi  dan  ketebalan medium. 21-22 Pada  penelitian  ini  menggunakan suhu inkubasi 35° 𝐶 dan inkubasi dilakukan selama 24 jam. Penelitian yang dilakukan Ohara-Nemoto menunjukkan bahwa bakteri P. gingivalis tumbuh pada  suhu  35° 𝐶 23 .  Namun  berbeda  dengan penelitian  Pujiastuti,  ekstrak  daun  sirih  merah ( Piper crocatum ) menunjukkan zona hambat pada bakteri P.  gingivalis di  suhu  inkubasi  37° 𝐶 24 . Kemudian, ketebalan medium pada panelitian ini tidak  dilakukan  pengukuran  sehingga  ketebalan media  Blood  Agar  Plate  (BAP)  tidak  dapat diketahui. 21
Media  pertumbuhan  bakteri  merupakan nutrisi  yang  dibutuhkan  oleh  mikroorganisme untuk  pertumbuhan  secara  in  vitro. 25 Media pertumbuhan  harus  mengandung  nutrisi  yang dibutuhkan  untuk  pertumbuhan  bakteri. 26 Pada BAP  kebutuhan  akan  protein  tercukupi  dengan adanya sheep  blood. 27 Perkembangan  bakteri
pada blood  agar yang  mengandung  5% sheep blood dapat meningkatkan pigmentasi dari koloni
jenis Porphyromonas spp .. P. gingivalis merupakan  organisme asaccharolytic yang bergantung  pada  substrat  nitrogenous  untuk energi. Selain itu bakteri ini juga memanfaatkan peptida untuk tumbuh secara efisien, serta hemin yang berisi senyawa seperti albumin, transferrin dan laktoferin untuk mendukung
pertumbuhannya. 28 Selain  itu, P.  gingivalis juga membutuhkan membutuhkan ketersediaan vitamin K di lingkungannya. 29

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pengolahan  data  yang  sudah  dilakukan  peneliti, dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  Daun Kayu  Manis  ( C.  burmannii  blume )  tidak menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terhadap pertumbuhan P. gingivalis.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  kepada  drg.  Cicih
Bhakti  Purnamasari,  M.Med.Ed  dan  Bapak Alhawaris,  S.Si.,  M.Kes  sebagai  pembimbing, Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Gigi Universitas Jember sebagai penyedia bakteri, Fakultas  Kedokteran  Universitas  Mulawarman, Program  Studi  Kedokteran  Gigi  Universitas Mulawarman,  serta  seluruh  staf  Laboratorium Farmakologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Mulawarman dan UPTD. Laboratorium Kesehatan Pemerintah Provinsi Kalimantan Timur dan semua pihak  yang  telah  membantu  pelaksanaan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Dharmawati,  I.  G.  A.,  Mahadewa,  T.  G.  B.  &
Widyadharma, I. P. E., Antibacterial Activity of Lumbricus  Rubellus  Earthworm  Extract Against  Porphyromonas  Gingivalis  as  the Bacterial Cause of Periodontitis. Macedonian Journal of Medical Sciences. 2019.
2. Carranza, F. A., Newman, M. G., Takei, H. H. & Klokkevold, P. R., Clinical Periodontology. 13th Edition  ed.  Los  Angeles,  California:  Elsevier. 2018.
3. Frencken,  J.  E.  et  al., Global  epidemiology  of dental  caries  and  severe  periodontitis – a
comprehensive  review. Birmingham,  UK: Journal of Clinical Periodontology. 2017.
4. Mysak,  J.  et  al.,  Porphyromonas  gingivalis: Major  Periodontopathic  Pathogen  Overview.
Journal of Immunology Research. 2014.
5. Miksusanti,  Betty  Sri  Laksmi,  J.,Rizal  syarief,
Bambang  pontjo,  Gatot  tri  mulyadi., ,Antibacterial  Activity  Of  Temu  Kunci  Tuber
( Kaempheria pandurata ) Essential Oil Against Bacillus  cereus ,  Med  J  Indones2009.,  vol  18 No1:11
6. Al-Dhubiab, B. E., Pharmaceutical applications and  phytochemical  profile  of  Cinnamomum burmannii. Saudi Arabia: PHCOG REV. 2012.
7. Ranasinghe, P. et al., Medicinal properties of ‘true’ cinnamon (Cinnamomum zeylanicum): a systematic  review. BMC  Complementary  and Alternative Medicine. 2013.
8. Mpila,  D.,  Fatimawali,  &  Wiyono,  W.  UJI AKTIVITAS  ANTIBAKTERI  EKSTRAK  ETANOL
DAUN  MAYANA  (Coleus  atropurpureus  [L]
Benth)  TERHADAP  Staphylococcus  aureus,
Escherichia coli DAN Pseudomonas aeruginosa SECARA IN-VITRO. Jurnal of MIPA .
2012.
9. Siahaan,  S.  P.,  Isnindar,  &  Rialita,  A.  UJI
AKTIVITAS  ANTIBAKTERI  INFUSA  BIJI  BUAH LANGSAT (Lansium domesticum Cor.) Terhadap Salmonella Typhi. Jurnal Mahasiswa Fakultas Kedokteran Untan, 2014.
10. Hudzicki, J. Kirby-Bauer Disk Diffusion Susceptibility Test Protocol. American Society for Microbiology . 2016.
11. Davis, W.W and Stout, T.R. Disc Plate Methods of Microbiological Antibiotic Assay.
Microbiology. 1971; p. 659-665.
12. Katuuk,  R.,  Wanget,  S.,  &  Tumewu,  P. Pengaruh  Perbedaan  Ketinggian  Tempat Terhadap  Kandungan  Metabolit  Sekunder Pada Gulma Babadotan (Ageratum conyzoides L). COCOS . 2019.
13. Suryati,  N.,  Bahar,  E.,  &  Ilmiawati.  Uji Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  Aloe  vera Terhadap  Pertumbuhan  Escherichia  coli Secara  In  Vitro. Jurnal  Kesehatan  Andalas , 2017; p. 518-521.
14. Enersen, M. Porphyromonas gingivalis fimbriae. Journal of Oral Microbiology . 2013.
15. Murwani, S., Santosaningsih, D., & Ramadhona,  A.  Protein  Pattern  of  Outer
Membrane  Protein  Salmonella  Typhi  That
Isolated  Using  N-Octyl  Glucoseide  and
Sarcosyl. Maj. Kedok. Unibraw . 2002.
16. Yuhyi,  A.  N.,  Praharani,  D.,  &  W.,  M.  The Inhibition  Effect  of  Manalagi  Apple  (Malus sylvestris  Mill.)  Extract  to  The  Growth  of Porphyromonas  gingivalis. PROSIDING  THE 3th  DENTISTRY  SCIENTIFIC  MEETING  OF JEMBER . 2016.
17. Zhang, Y., Wang, Y., Zhu, X., Cao, P., Wei, S., & Lu, Y. Antibacterial and antibiofilm activities of eugenol  from  essential  oil  of  Syzygium aromaticum  (L.)  Merr.  &  L.  M.  Perry  (clove) leaf against periodontal pathogen Porphyromonas gingivalis. 2017. 18. Shen, S., Zhang, T., Yuan, Y., Lin, S., Xu, J., & Ye,
H.  Effects  of  cinnamaldehyde  on  Escherichia coli  and  Staphylococcus  aureus  membrane. 2015.
19. Clarissa,  C.,  Amir,  M.,  &  Asfirizal,  V.  Uji Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Tahongai (Kleinhovia hospita linn) terhadap Pertumbuhan Bakteri Actinobacillus actinomycetemcomitans  In-vitro. J.  Ked. Mulawarman, 2020; p. 7 .
20. Qomar,  M.  S.,  Budiyanto,  M.  A.,  Sukarsono, Wahyuni, S., & Husamah. Efektivitas berbagai
Konsentrasi  Ekstrak  Daun  Kayu  Manis (Cinnamomum burmannii [Ness.] BI) terhadap
Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  epidermidis. Jurnal  Biota . 2018.
21. Pelczar, M.J., E.S.Chan. Dasar-dasar
Mikrobiologi  Edisi  ke-2. Jakarta:  Penerbit
Universitas Indonesia. 1988.
22. Bonang  G. Mikrobiologi  Untuk  Profesi Kesehatan Edisi 16. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. 1992.
23. Ohara-Nemoto, Y., Rouf, S., Naito, M., Yanase, A.,  Tetsuo,  F.,  &  Ono,  T.  Identification  and Characterization  of  Prokaryotic  Dipeptidyl- peptidase  5  from  Porphyromonas  gingivalis. THE  JOURNAL  OF  BIOLOGICAL  CHEMISTRY. 2014.
24. Pujiastuti,  P.,  &  Lestari,  S.  Perbedaan Efektifitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Sirih Merah (Piper crocatum) pada Porphyromonas gingivalis  dan  Streptococcus  viridans.  JKG Unej, 12(1), 2015; p. 1 – 4.
25. Harti, A.S. Mikrobiologi Kesehatan. Yogyakarta: CV. Andi offset. 2014.
26. Atlas, Ronald M. Handbook of Microbiological Media fourth Edition Volume 1. United States Of America: CRC Press. 2004.
27. Krihariyani.,  D.,  Woelansari.,  E.  D.,  &
Kurniawan, E. Pola Pertumbuhan Staphylococcus  aureus  Pada  Media  Agar
Darah  Manusia  Golongan  O,  AB,  dan  Darah
Domba  Sebagai  Kontrol.  Jurnal  Ilmu  Dan
Teknologi Kesehatan. 2016; p. 191 – 200.
28. Widodo,  S.  A.,  Kusumawardani,  B.,  & Fatmawati, D. W. Identification of Anaerobic
Bacteria Cell Shape Based on Colony Color in
Gingival Crevicular Fluid of Chronic  Gingivitis and Chronic Periodontitis. Artikel Ilmiah Hasil Penelitian Mahasiswa. 2014.
29. Septiwidyati, T. R., & Bachtiar, E. W. The Role of Porphyromonas gingivalis Virulence Factors in Periodontitis Immunopathogenesis. dentika
Dental Journal. 2020.