Aktivitas Antibakteri dan Stabilitas Sediaan Gel Minyak Atsiri Daun Jeruk Purut ( Citrus hystrix folium)
Luky Hayuning Les 1 , Isnaeni 2 , Widji Soeratri 3 * 1 Magister Ilmu Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya
3 Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya
*Corresponding author: widjisoeratri@yahoo.com
Submitted: 8 Desember 2019 Accepted: 7 Februari 2020 Published: 29 Februari 2020

## Abstract
Introduction : Citrus leaves (Citrus hystrix folium) contain 1-1.5% essential oils, show antibacterial activity.The active ingredient content that contribute as antibacterial activity contains compounds with alcohol and aldehyde group  by  which  protein  of  bacterial  cell  is  denaturated. Objective :  to  evaluate  the  antibacterial  effectivity  and stability  of  gel  containing  essential  oil  isolated  from  Citrus  hystrix  leaves  against  Staphylococcus  epidermidis and Staphylococcus aureus. Methods : The essential oil gel  formulation  was  prepared  with  carbomer 940 as a gelling agent.The Antibacterial activity of gel containing the essential oil was evaluated against Staphylococcus epidermidis  and  Staphylococcus  aureus  with  gel  containing  1%  clindamycin  as      positive  control  by  the  agar diffusion  method. Results :  The  Gel  preparations  were  effective  against  Staphylococcus  epidermidis  and Staphylococcus aureus. The mean diameter of the growth  inhibition  zone before and after storage for 4  weeks were  16.75  mm,  dan    17.65  mm,  respectively.  The  inhibitory  activities  against  the  two  test  bacteria  were relatively  smaller  than  the  clindamycin  gel.  The  gel  had  good  physical  stability  indicated  by  no  changes  on consistency, color, odor, viscosity and pH observed during 4 weeks storage. The gel  produced a yellowish white color, and a distinctive odor of oranges, while the control gel showed a transparent yellow color and smelled of tween  . Conclusion :  The  citrus  essential  oil  gel  effectively  inhibited  the  growth  of  Staphylococcus  epidermidis and Staphylococcus aureus. It  was stable after storage for 4  weeks, therefore prospective for development  and study as a raw material for anti acne gels.
Keywords : antibacterial, stability, essential oil, Citrus hystrix folium

## Abstrak
Pendahuluan : Daun jeruk ( Citrus hystrix folium) mengandung minyak esensial 1-1,5%, menunjukkan aktivitas antibakteri.  Bahan  aktif  yang  berkontribusi  sebagai  aktivitas  antibakteri  mengandung  senyawa  dengan  gugus alkohol  dan  aldehida  yang  mendenaturasi  protein  sel  bakteri. Tujuan :  mengevaluasi  efektivitas  dan  stabilitas antibakteri gel yang mengandung minyak esensial hasil isolasi dari daun Citrus hystrix terhadap Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus  aureus . Metode :  Formulasi  gel  minyak  atsiri  dibuat  menggunakan  karbomer 940  sebagai gelling  agent .  Aktivitas  antibakteri  gel  yang  mengandung  minyak  atsiri  dievaluasi  terhadap Staphylococcus  epidermidis dan Staphylococcus  aureus dengan  gel  yang  mengandung  1%  klindamisin  sebagai kontrol positif dengan  metode difusi agar. Hasil :  Sediaan Gel efektif terhadap Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus  aureus .  Diameter  rata-rata  zona  hambatan  pertumbuhan  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan selama 4 minggu adalah 16,75 mm, dan 17,65 mm. Aktivitas hambatan terhadap dua bakteri uji relatif lebih kecil daripada  gel  klindamisin.  Gel  memiliki  stabilitas  fisik  yang  baik  ditunjukkan  dengan  tidak  adanya  perubahan pada konsistensi, warna, bau, viskositas dan pH yang diamati selama penyimpanan 4 minggu. Gel menghasilkan warna putih kekuningan dan bau jeruk yang khas, sedangkan gel kontrol menunjukkan warna kuning transparan dan  berbau  tween. Kesimpulan :  Gel  minyak  atsiri  jeruk  secara  efektif  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  epidermidis dan Staphylococcus  aureus ,  stabil  setelah  penyimpanan  selama  4  minggu,  oleh karena itu prospektif untuk dikembangkan sebagai bahan baku untuk gel anti jerawat.
Kata kunci: antibakteri, stabilitas, minyak atsiri, Citrus hystrix folium

## PENDAHULUAN
Jeruk  purut  ( Citrus  hystrix DC)  adalah  salah  satu tanaman  yang  mudah  dan  banyak  tumbuh  di Indonesia.Tanaman  ini  tumbuh  pada  tempat  yang cukup  matahari,  sesuai  dengan  kondisi  negara  tropis Indonesia.Tanaman  ini  banyak  dimanfaatkan  oleh masyarakat  di  Indonesia.  Daunnya  mengandung minyak  atsiri  1-1,5%,  steroid  triterpenoid,  dan  tanin 1,8% (Agusta, 2000; Hariana, 2007; Wiranto, 2007).
Minyak  atsiri  atau essential  oil merupakan  cairan lembut,  bersifat  aromatik,  dan  mudah  menguap  pada suhu  kamar.Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa minyak  atsiri  bersifat  sebagai  antivirus,  antibakteri, antijamur dan antiseptik.Minyak atsiri daun jeruk purut mengandung  linalool,  sitronelol,  stronelal,  sitronelil asetat,  geranil  asetat  yang  terdapat  gugus  alkohol  dan aldehid  dalam  strukturnya,  gugus  tersebut  dapat menyebabkan  denaturasi protein pada  bakteri  (Agusta, 2000; Hariana, 2007; Winarto, 2007).
Kajian  terkait  potensi  antibakteri  minyak  atsiri daun jeruk purut yang dikembangkan menjadi formula sediaan  gel  bermanfaat  untuk  mengevaluasi  peluang prospektif  untuk  memanfaatkan  minyak  atsiri  daun jeruk  purut  sebagai  bahan  aktif  sediaan  gel  untuk  anti bakteri.Telah  dilakukan  penelitian  pendahuluan  pada rebusan  daun  jeruk  purut  yang  diuji  daya  hambatnya terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus , diperoleh hasil bahwa terlihat sedikit daerah hambatan pada  media  uji.  Hasil  penelitian  pendahuluan menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  daun  jeruk  purut pada konsentrasi 0,5% mampu menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Ada  peluang bahwa  minyak  atsiri  daun  jeruk  purut  juga  berpotensi menghambat  pertumbuhan  bakteri  penyebab  jerawat Staphylococcus  epidermidis .Jerawat  adalah  salah  satu masalah pada kulit yang selama ini banyak meresahkan masyarakat  khususnya  pada  masa  pubertas.Jerawat menimbulkan blackhead , papules , pustules , nodules dan scarring pada  kulit  wajah.  Bakteri  flora  normal kulit  yang  banyak  menimbulkan  infeksi  pada  kulit antara  lain Propionybacteria , Staphylococcus dan Micrococcus (Tortora dkk., 2010).
Upaya telah banyak dilakukan termasuk perlakuan-perlakuan  khusus  untuk  mengobati  ataupun mencegah  timbulnya  jerawat  di  antaranya  dengan mencegah  pertumbuhan  bakteri  pada  saluran  folikel rambut  yang  dapat  menyebabkan  inflamasi,  untuk tujuan ini biasa digunakan antibakteri.Antibakteri dapat berasal  dari  senyawa  sintetik  seperti  clyndamycin, erithromycin,  benzoyl  peroksida,  azelaic  acid,  sulfur,
dan  yang  berasal  dari  alam  seperti  minyak  atsiri  dari daun jeruk purut (Baumann & Jonette, 2009).
Minyak atsiri dari golongan citrus juga dilaporkan mempunyai  efek  astringen,  sehingga  dapat  digunakan untuk  mengatasi  kelebihan  produksi  sebum  yang mengakibatkan jerawat.Untuk dapat diaplikasikan pada kulit  sebagai  antibaktei  maka  minyak  atsiri  perlu diformulasikan dalam bentuk sediaan tertentu, misalnya gel.
Bentuk  sediaan  gel  dianggap  memiliki  nilai estetika tinggi,sehingga sesuai untuk sediaan kosmetik. Gelling  agent yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  carbomer  940,  yang  banyak digunakan dalam sediaan gel, karena dalam penggunaannya  hanya  dibutuhkan  konsentrasi  kecil serta  memiliki  viskositas  dalam  air  yang  lebih  tinggi dibanding  tipe  carbomer  lain.  Carbomer  merupakan polimer sintetik  berat  molekul  tinggi  dari asam akrilat yang  mengalami cross linked dengan alil  sukrosa atau ester  alil  dari  pentaerithrio  (Rowe  dkk.,  2006).  Ketika didispersikan  ke  dalam  air  carbomer  membentuk larutan  bersifat  asam  yang  keruh  dengan  viskositas rendah.  Dengan  penambahan  basa  penetral  dapat meningkatkan  konsistensi  dan  mengurangi  kekeruhan carbomer.  Penetralan  larutan  dispersi  carbomer  oleh basa  yang  sesuai  akan  meningkatkan  pH,  sehingga terjadi  ionisasi  dari  gugus  karboksilat  pada  rantai carbomer  dengan  melepas  ion  H + (Florence,  1998). Polimer akan  mengalami  hidrasi  melalui pembentukan ikatan  hidrogen  antara  karboksilat  terionisasi  dengan molekul  air,  sehingga  polimer  mengembang  dan viskositas meningkat (Schott, 2000).
Carbomer  perlu  dinetralisasi  dengan  basa  untuk dapat  mengembang  dan  membentuk  gel,  sehingga dalam formula ditambahkan juga Trietanolamin.Mengingat  bahan  aktif  dalam  penelitian ini berupa minyak, maka perlu penambahan emulsifier tween  80.  Penambahan Ethylenediaminetetraacetic acid sebagai chelating agent bertujuan untuk mengikat spora  logam  yang  ada  dengan  membentuk  senyawa chelat,  sehingga  proses  oksidasi  yang  biasanya dikatalisis oleh spora logam tidak terjadi. Penambahan Butil Hidroksi Toluena juga dilakukan untuk mencegah oksidasi karena paparan cahaya. Oksidasi pada sediaan gel harus dicegah, karena dengan adanya oksidasi akan terjadi  penurunan  viskositas.  Propilen  glikol  juga ditambahkan  dalam  formula  ini  sebagai  humektan untuk  mencegah  penguapan  air  dan  meningkatkan penetrasi bahan obat (Rowe dkk., 2006).
Bakteri  uji  yangdigunakan  dalam  penelitian  ini adalah Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus ,  yang  sering  menyebabkan  masalah  pada  kulit seperti infeksi pada jerawat.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Daun  jeruk  purut  segar  diperoleh  dari  pasar tradisional,  Karangmenjangan  Surabaya,  pada  bulan April 2009, media nutrient agar (MERCK), Staphylococcus  aureus ATCC  653BP, Staphylococcus epidermidis yang  diperoleh  dari  SMF  Mikrobiologi RSUD  Dr.  Soetomo  Surabaya,  Tween  80,  Carbomer 940,  Propylen  glycol,  Methyl  paraben,  Trietanolamin, Butil Hidroksi Toluena, air suling, larutan salin.

## Alat
Seperangkat alat destilator, cawan petri, labu ukur, mikro pipet, disposable syringe , inkubator (Memmert),
Öse,  jangka  sorong,  timbangan  analitik,  mortir  dan stamper,  pH  meter  ( Schott  glass  mainz tipe  CG  842) viskometer (Ostwald).
Metode Isolasi minyak atsiri dari daun jeruk purut
Daun jeruk purut segar dimasukkan dan diletakkan di  atas  pelat  berlubang  dalam  ketel  destilasi.  Proses destilasi  dimulai  dengan  mengalirkan  uap  ke  dalam ketel  destilasi.  Uap  yang  digunakan  adalah  uap  jenuh atau  uap  yang  sangat  panas  dengan  tekanan  di  atas  1 atm yang mengalir dari bagian bawah simplisia.Minyak  yang  diperoleh  dipisahkan  dari  air destilatnya  menggunakan  corong  pisah,  kemudian minyak  yang  telah  dipisahkan  ditambah  dengan Na 2 SO 4 untuk menarik sisa air yang ada pada minyak.
Uji  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri  daun  jeruk purut
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode difusi agar  menggunakan  media nutrient agar.  Sampel minyak  atsiri  dan  larutan  baku  masing-masing  dipipet sebanyak  50  µL,  di  masukkan  ke  dalam  lubang  pada Cawan  petri  yang  sudah  mengandung  media  uji  dan bakteri  uji,  didiamkan  selama  30  menit  agar  terjadi difusi  larutan  sampel  ke  dalam  media  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18  jam.  Diamati adanya  daerah  hambatan  pertumbuhan  bakteri.Pada penelitian  ini  didapat  hasil  berupa  diameter  daerah hambatan  pertumbuhan  bakteri  (diameter  lubang  7 mm).

## Pembuatan gel minyak atsiri
Formula  basis  gel  terdiri  dari  komponen  seperti tersaji pada Tabel 1 berikut.
Tabel 1. Formula basis gel minyak atsiri No Bahan Jumlah (%) Kegunaan 1. Carbomer 940 0,5 Gelling agent 2. Tween 80 8 Emulsifier 3. Tri etanolamin 0,85 pembasa 4. Propilen glikol 15 humectant 5. EDTA 0,1 Chelating agent 6. BHT 0,05 antioksidan
Carbomer didispersikan ke dalam  air suling  bebas CO 2 ,  dikembangkan  selama  ±  20  menit,  kemudian diaduk  sampai  terbentuk  basis  gel.  Setelah  itu, ditambahkan Ethylenediaminetetraacetic  acid , Butil Hidroksi  Toluena,  Trietanolamin,  Propilen  glikol  ke dalam basis, dicampur sampai homogen. Minyak atsiri dilarutkan ke dalam Tween 80, kemudian ditambahkan ke  dalam  basis  gel  dan  diaduk  sampai  homogen.Sisa air  ditambahkan  ke  dalam  sediaan  dan  diaduk  sampai homogen.Sediaan didiamkan semalam untuk menghilangkan gelembung udara yang terjebak selama pengadukan.

## Pembuatan gel klindamisin
Secara  garis  besar,  pembuatan  gel  Klindamisin dilakukan  dengan  prosedur  yang  sama  seperti pembuatan  gel  minyak  atsiri.  Klindamisin  terlebih dahulu  dilarutkan  ke  dalam  propilen  glikol  lalu ditambahkan  ke  dalam  basis  gel  Tween  80  kemudian ditambahkan  ke  dalam  basis  gel  dan  diaduk  sampai homogen.

## Uji organoleptis
Dilakukan  pemeriksaan  organoleptis  meliputi konsistensi, bentuk, warna dan bau sediaan gel minyak atsiri.

## Pemeriksaan pH
Ditimbang gel  minyak atsiri 3 gram, ditambahkan air  suling  sampai  30  mL,  didispersikan  sampai homogen,  kemudian  diukur  pH  dengan  pH  meter ( Schott glass mainz tipe CG 842) .

## Pemeriksaan viskositas sediaan
Sediaan  dimasukkan  ke  dalam  cup  viskometer (Ostwald) sampai batas tanda kemudian dipasang rotor yang sesuai.Alat dinyalakan selama 1 menit.Kemudian angka yang ditunjukkan pada alat dicatat.

## Analisis data
Formula  yang  diperoleh  diamati  karakter  fisiknya meliputi  organoleptis,  pH,  viskositas  dan  daya hambatnya  terhadap  bakteri  uji.  Uji  stabilitas  sediaan gel  minyak  atsiri  dilakukan  selama  empat  minggu dengan mengamati organoleptis dan aktivitasnya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi dan identifikasi minyak atsiri
Dalam  penelitian  ini  digunakan  metode  destilasi uap air, karena proses dekomposisi  minyak lebih  kecil dibanding  destilasi  menggunakan  air.Hasil  penelitian pendahuluan  untuk  menguji    kandungan  minyak  atsiri
daun  jeruk  purut  menggunakan  kromatografi  gas menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  daun  jeruk  purut mengandung 23 macam senyawa (Tabel 2).  Sitronelal, sitronelol,  geraniol,  dan  sitronelil  asetat  merupakan komponen yang lebih besar dibanding yang lain.
Tabel 2. Hasil pengamatan kandungan minyak atsiri daun jeruk purut secara kualitatif No. Senyawa Jumlah (%) 1. Cyclopentane, 1-methyl-3-(1-methyl) 0,910 2. Bicycle (3,1,0) hexane, 4-methylen 3,823 3. 3-carene 0,061 4. Linalool 1,108 5. Citronellal 6,220 6. Cyclohexanol, 5-methyl-2-(1-methyl) 0,879 7. 6 octenal, 3,7-dimethyl 0,958 8. Citronellol 4,917 9. Geraniol 1,732 10. 2 hexanol,2,5-dimethyl 0,347 11. Citronellol acetate 2,865 12. Cyclohexanol, 2-(2-hydroxy-2-propyl) 0,231 13. Cyclohexene, 4-methyl 0,291 14. 1H-cyclopropana(a)naphthalene 0,140 15.   Caryophyllene 0,696 16.   Alpha-caryophyllene 0,135 17.   α- Farnesene 0,104 18. 1,5-heptadiene,2,5-dimethyl-3-met 0,094 19. Naphthalene 0,185 20. 1,6,10-dodecatrien-3-ol 0,675 21. 1,4-hexadiene,3,3,5-trimethyl 0,106 22. Cyclohexanol, 4-ethyl-4-methyl 0,310 23. Cyclohexanol,5-methyl-2-(1-methyl) 0,435

## Karakteristik fisik gel minyak atsiri
Hasil  uji  organoleptis  menunjukkan  bahwa karakteristik  fisik  sediaan  gel  minya  atsiri  dan  gel kontrol  yang  mengandung  klindamisin  hanya  berbeda baunya.  Gel  minyak  atsiri  daun  jeruk  purut  5% merupakan  gel  encer  berwarna  putih  kekuningan  dan
berbau  segar  khas  jeruk  purut,  sedangkan  gel klindamisin  1%  berbau  Tween  80  (Tabel  3).  Aroma Tween  gel  klindamisin  disebabkan  gel  tersebut  tidak mengandung  minyak  atsiri,  sehingga  aroma  tween tidak  dapat  tertutupi,  dibandingkan  gel  minyak  atsiri daun jeruk purut,  yang tidak beraroma tween.
Tabel 3. Performa sediaan gel sebelum dan setelah penyimpanan Waktu Penyimpanan (minggu) Gel minyak atsiri Gel Klindamisin Konsistensi, warna, bau pH Viskositas Konsistensi, warna, bau pH Viskositas 0 Encer, putih tulang, khas jeruk purut 6,37 6,0 cps Encer, kuning muda, bau tween 6,15 3,6 cps 3 Encer, putih tulang, khas jeruk purut 6,37 6,0 cps Encer, kuning muda, bau tween 6,15 3,6 cps 4 Encer, putih tulang, khas jeruk purut 6,38 6,0 cps Encer, kuning muda, bau tween 6,5 3,6 cps

## Uji aktivitas antibakteri
Dalam penelitian ini hanya digunakan satu macam konsentrasi  minyak  atsiri  yakni  sebesar  5%  dan klindamisin  sebesar  1%.  Berbeda  dengan  hasil penelitian  sebelumnya,  minyak  atsiri  jeruk  purut  pada penelitian  ini  mampu  menghambat Staphylococcus
aureus pada  konsentrasi  0,5%,  sedangkan  hasil  uji Agusta  (2000)  diperoleh  aktivitas  1-1.5%  Variasi aktivitas dapat disebabkan oleh perbedaan kualitas atau spesifikasi  simplisia  daun  jeruk  purut.  Untuk  itu, standarisasi  simplisia  perlu  dilakukan.  Hasil  uji aktivitas menunjukkan bahwa potensi gel minyak atsiri
terhadap  bakteri  uji  yang  digunakan  lebih  rendah dibandingkan  gel  klindamisin  pada  konsentrasi  1% (Gambar  1  dan  2).  Pada  penelitian  selanjutnya  perlu
dihitung  konsentrasi  hambat  minimum  sediaan  untuk menetapkan dosis efektif.
Gambar 1. Hasil uji aktivitas gel minyak atsiri 5% dan gel klindamisin 1% terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis
Gambar  2. Hasil uji aktivitas gel minyak atsiri (GM) 5% dan gel klindamisin (C) 1% terhadap bakteri Staphylococcus aureus setelah penyimpanan 1 (Gel M.1, C.1), 2 (Gel M.2, C.2), 3 (Gel M.3, C.3), dan 4 (Gel M.4, C.4) minggu Keterangan:  Gel M.1 = Gel minyak atsiri 5% pada penyimpanan 1 minggu
Gel M.2 = Gel minyak atsiri 5% pada penyimpanan 2 minggu Gel M.3 = Gel minyak atsiri 5% pada penyimpanan 3 minggu Gel M.4 = Gel minyak atsiri 5% pada penyimpanan 4 minggu Gel C.1 = Gel Clindamycin 1% pada penyimpanan 1 minggu Gel C.2 = Gel Clindamycin 1% pada penyimpanan 2 minggu Gel C.3 = Gel Clindamycin 1% pada penyimpanan 3 minggu Gel C.4 = Gel Clindamycin 1% pada penyimpanan 4 minggu
Aktivitas  antibakteri  gel  dengan  bahan  aktif minyak atsiri daun jeruk purut  disebabkan oleh fungsi minyak  atsiri  daun  jeruk  purut  sebagai  metabolit sekunder  tumbuhan  yang  mengandung  hidrokarbon monoterpen  (sitronelal),  hidrokarbon  monoterpen teroksigenasi  (linalool,  geraniol,  sitronelol,  dan sitronelil  asetat),  dan  hidrokarbon  monoterpen  ester (sitronelil  asetat)  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri (Sakovic  dkk.,  2010;  Lertsatitthanakorn  dkk.,  2010). Senyawa  linalool,  geraniol,  sitronelol  memiliki  gugus
hidroksi  dimana  gugus  terseut  memiliki  aktivitas sebagai antibakteri dengan mekanisme denaturasi/koagulasi  protein  dan  dapat  merusak membran  sitoplasma,  melisis  sel,  mempengaruhi metabolisme  sel,  serta  merusak  dinding  sel  bakteri (Ma’at,  2009;  Lertsatitthanakorn  dkk.,  2010;  Bauman 2011).  Minyak  atsiri  daun  jeruk  purut  juga mengandung  gugus  aldehid  yang  terdapat  pada senyawa  sitronelal  dan  linalool  yang  juga  mempunyai aktivitas denaturasi protein dan inaktivasi asam nukleat
Gel M.4 Gel M.3 Gel C.4 Gel C.3 Gel C.2 Gel C.1 Gel M.2 Gel M.1 Gel C.4 Gel M.4 Gel C.3 Gel M.3 Gel M.2 Gel M.1 Gel C.1 Gel C.2
pada  bakteri.  Sitronelil  asetat  merupakan  monoterpen ester  yang  dapat  mengganggu  membran  sitoplasma bakteri dan menyebabkan kebocoran sel. (Lertsatitthanakorn dkk., 2010; Bauman, 2011).

## Uji stabilitas sediaan gel
Hasil  uji  stabilitas  sedian  gel  minyak  atsiri  daun jeruk  purut  dan  gel  kontrol  menunjukkan  bahwa sediaan  stabil  selama  penyimpanan  1  minggu,  2 minggu,  3  minggu,  dan  4  minggu  pada  suhu  kamar. Stabilitas  ditunjukkan  dari  bentuk,  warna,  dan  bau sediaan  gel minyak atsiri daun jeruk purut 5% maupun gel  klindamycin  1%  yang  tidak  berubah  setelah penyimpanan.  Aktivitas  sediaan  gel  dan  gel  kontrol juga  stabil  setelah  penyimpanan  selama  4  minggu
(Tabel 4 dan 5). Pada uji stabilitas pH sediaan dan gel kontrol  dihasilkan  nilai  Kv  masing-masing  0,11%  dan 0,00%  atau  kurang  dari  6%  (Tabel  3),  maka  dapat disimpulkan  bahwa gel  minyak atsiri daun  jeruk  purut 5% dan gel klindamsin 1% stabil pada penyimpanan 3 minggu  dan  4  minggu.  Pada  uji  stabilitas  viskositas sediaan  pada  penyimpanan  3  minggu,  dan  4  minggu diperoleh  nilai  Koefisien  variasi:  0,00%  atau  kurang dari  6%  untuk  kedua  sediaan  gel,  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa gel  minyak atsiri daun  jeruk  purut 5%  dan  gel  klindamsin  1%  stabil  (Depkes  RI,  2014) pada  penyimpanan  3  minggu,  dan  4  minggu berdasarkan nilai viskositasnya.
Tabel 4. Hasil uji aktivitas antibakteri gel minyak atsiri daun jeruk purut 5% dan gel kontrol (klindamisin 1%) terhadap
Staphylococcus epidermidis sebelum dan setelah penyimpanan Penyimpanan Gel minyak atsiri 5% Gel clyndamycin 1% Diameter hambatan (mm) Kv (%) Diameter hambatan (mm) Kv (%) 0 minggu 17,3 4,13 30,0 1,77 1 minggu 17,5 30,1 2 minggu 16,6 29,7 3 minggu 15,9 28,8 4 minggu 16,2 29,4
Tabel 5. Hasil uji aktivitas antibakteri gel minyak atsiri daun jeruk purut 5% dan gel kontrol (klindamisin 1%)
terhadap Staphylococcus aureus sebelum dan setelah penyimpanan pada suhu
Penyimpanan Gel minyak atsiri 5% Gel klindamisin 1% Diameter hambatan (mm) Kv (%) Diameter hambatan (mm) Kv (%) 0 minggu 18,1 4,13 29,6 3,92 1 minggu 19,0 28,9 2 minggu 17,3 28,3 3 minggu 17,6 28,2 4 minggu 17,2 26,6
Nilai  viskositas  gel  klindamisin  lebih  rendah dibanding  gel  minyak  atsiri  daun  jeruk  purut. Fenomena  ini  dapat  disebabkan  oleh  penambahan klindamisin  yang  menyebabkan  penurunan  viskositas basis  gel.  Gugus  alkohol  yang  terdapat  pada  senyawa klindamisin  dapat  menimbulkan  terjadinya  ikatan hidrogen  antar  molekul  dengan  molekul  air,  sehingga mencegah  terbentuknya  ikatan  hidrogen  antara  gugus karboksilat  pada  molekul  carbomer  dengan  molekul air,  hal  ini  menyebabkan  terjadi  interaksi  antar  rantai polimer  melalui  ikatan  hidrogen  molekuler  dan  gaya van  der  walls,  sehingga  rantai  polimer  cenderung berkumpul seperti pada keadaan padat yang mengakibatkan terjadinya presipitasi (Schott, 2000).

## KESIMPULAN
Sediaan  gel  yang  mengandung  minyak  atsiri Citrus  hystrix folium  5%  efektif  menghambat pertumbuhan
Staphylococcus epidermidis dan
Staphylococcus aureus serta stabil setelah penyimpanan selama 4 minggu.
Berdasarkan  performa  fisik  bentuk,  warna,  bau, dan  konsistensi,  pH,  serta  viskositas,  sediaan  gel minyak  atsiri Citrus  hystrix folium  stabil  secara  fisik setelah penyimpanan selama 4 minggu.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Subakir yang  telah  berkontribusi  pada  pengujian  antibakteri selama proses  penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Agusta,  A.  (2000).  Aromaterapi:  Cara  Sehat  dengan Wewangian Alami. Jakarta: Penebar Swadaya. Baumann,  L.  &  Jonette,  K.  (2009).  Acne  (Type  1
Sensitive  Skin).  In:  Baumann  L  (ed.) Cosmetic Dermatology  Principles  and  Practice (2nd  ed); 121-126. New York: The McGraw-Hill Companies, Inc.
Departemen Kesehatan  RI.  (2014).  Farmakope Indonesia IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Hariana,  A.  (2007).  Tumbuhan  Obat  dan  Khasiatnya
Seri 1. Jakarta: Penebar Swadaya.
Lertsatitthanakorn, P., Taweechaisupapong, S., Arunyanart,  C.,  Aromdee,  C.  &  Khunkitti,  W. (2010).  Effect  of  Citronella  Oil  on  Time  Kill Profile,  Leakage  and  Morphological  Changes  of
Propionibacterium  acnes . Journal  of  Essential Oil Reasearch; 22; 270-274.
Ma’at, S. (2009). Sterilisasi dan Disinfeksi, Surabaya:
Airlangga University Press.
Rowe,  R.  C.,  Sheskey,  P.  J.  &  Owen,  S.  C.  (2006).
Handbook  Pharmaceutical  Excipients  (5th  ed.).
Washington: Pharmaceutical Press.
Sakovic, M., Glamočlija, J., Marin, P. D., Brkić, D. & van  Griensven,  L.  J.  (2010).  Antimicrobial Effects  of  Essential  Oil  of  Consumed  Medicinal Herbs  Using  an  In  Vitro  Model. Molecules;  15; 7532-7546.
Schott, H. (2000). Colloidal Dispersion. In: Gennaro A (ed) Remington,  The  Science  and  Practice  of Pharmacy (20th  ed.);  307-310.  New  York: Lippincott Williams and Wilkins.
Tortora,  G.  J.,  Funkr,  B.  R.  &  Case,  C.  L.  (2010). Microbiology:  An  Introduction  (10th  ed.).  San Francisco: Pearson Education.
Winarto.  (2007).  Tanaman  Obat  Indonesia  untuk Pengobatan  Herbal  Jilid  3.  Jakarta:  Karya  Sari Herba Medika.