Penulis Eka Budiarti 1 , Irmanida Batubara 1,2 , Auliya Ilmiawati 1
Afiliasi
1 Departemen  Kimia,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  IPB  University,  Bogor,
Jawa Barat, 16680, Indonesia.
2 Pusat Studi Biofarmaka Tropika, IPB University, Indonesia.
Kata Kunci  ABTS
 Adenostema lavenia
 Antiglikasi
 Asteraceae
 DPPH
 Sphagneticola trilobata

## Keywords
 ABTS
 Adenostema lavenia
 antiglication
 Asteraceae
 DPPH
 Sphagneticola trilobata
Diterima 5 Agustus2019 Direvisi 30 Oktober 2019 Disetujui 8 November 2019

## *Penulis Koresponding
Irmanida Batubara email: ime@apps.ipb.ac.id

## ABSTRAK
Tumbuhan  Asteraceae  dilaporkan  mengandung  metabolit  sekunder  tinggi  yang  aktif sebagai  antioksidan.  Senyawa  antioksidan  juga  digunakan  untuk  mencegah penuaan/reaksi  glikasi.  Penelitian  ini  bertujuan  menentukan  aktivitas  antioksidan  dan antiglikasi  7  tumbuhan  Asteraceae.  Daun Adenostema  lavenia , Ageratum  conyzoides , Dichrocephala integrifolia , Galinsoga parvifolia , Synedrella nodiflora , Mikania micrantha , dan Sphagneticola  trilobata masing-masing  diekstraksi  menggunakan  air.  Ekstrak kemudian  ditentukan  kandungan  total  fenol,  flavonoid,  dan  aktivitas  antioksidan menggunakan metode 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) dan 2,2’-azino-bis(3 ethylbenzothiazoline-6-sulfonic  acid (ABTS) , serta  aktivitas  antiglikasi.  Ekstrak  dengan kadar total fenolik dan flavonoid tertinggi adalah ekstrak M. micrantha. Ekstrak A. lavenia memiliki  aktivitas  antioksidan  terhadap  DPPH  tertinggi  dengan  nilai  IC 50 sebesar  121,82 μg/mL  dan A.  conyzoides tertinggi  terhadap ABTS  dengan  kapasitas  sebesar  4,51  mg trolox  ekivalen  (TE)/g  ekstrak.  Aktivitas  antiglikasi  tertinggi  pada  ekstrak G.  parvifolia sebesar  90,67%  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan  ekstrak A.  lavenia (87,87%)  dan S. trilobata (87,38%).  Secara  keseluruhan  ekstrak A.  lavenia dan S.  trilobata baik dikembangkan sebagai antioksidan dan antiglikasi.

## ABSTRACT
Asteraceae plants are reported consisted of antioxidant component. Antioxidant also can be  used  to  prevent  aging/glycation  reactions.  This  study  aims  to  determine  antioxidant and  antiglycation  activities  of  7  Asteraceae  plants.  The  leaves  of  Adenostema  lavenia, Ageratum  conyzoides,  Dichrocephala  integrifolia,  Galinsoga  parvifolia,  Synedrella nodiflora,  Mikania  micrantha,  and  Sphagneticola  trilobata  were  extracted  using  water. The  total  phenolic,  total  flavonoid  content,  antioxidant  activity  against  1,1-diphenyl-2- pikrilhidrazil (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3 ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS), and antiglycation activities of all extract then were determined. The extract with the highest total phenolic and total flavonoid content was M. micrantha.  A. lavenia extract had the highest antioxidant activity against DPPH with IC 50 of 121.82 μg/mL, while A. conyzoides had  the  highest  antioxidant  activity  against  ABTS  of  4.51  mg  trolox  equivalent  (TE)/g extract.  The  highest  antiglycation  activity  was  found  on  G.  parvifolia  extract  of  90.67% which is not significantly different with the activity of A. lavenia extract (87.87%) and S. trilobata  (87.38%).  In  general,  A.  Lavenia  and  S  trilobata  could  be  developed  as antioxidant and antiglycation agent.

## Potensi Beberapa Ekstrak Tumbuhan Asteraceae sebagai Antioksidan dan Antiglikasi
The Potency of Asteraceae Plants Extracts as Antioxidant and Antiglycation Agent
Eka Budiarti et al .

## PENDAHULUAN
Glikasi adalah reaksi kimia nonenzimatik antara gula pereduksi dan gugus amino dari protein, asam nukleat atau  fosfolipid  akan  membentuk Advanced  glycation end  product (AGEs)  yang  merupakan  penyebab penuaan (Povichit et  al. 2010).  Selain  reaksi  glikasi, radikal  bebas  juga  dapat  memicu  terbentuknya  AGEs (Yagi et  al. 2013).  Untuk  menghambat  pembentukan AGEs  dapat  digunakan  suatu  bahan  yang  dapat menghambat  reaksi  glikasi  dan  radikal  bebes  seperti bahan  antioksidan.  Reaksi  glikasi  dapat  dihambat menggunakan  zat  antiglikasi  sedangkan  radikal  bebas dapat dihambat menggunakan antioksidan (Giancomoni dan Rein 2001).
Beragam cara dilakukan untuk mendapatkan bahan antiglikasi  maupun  antioksidan  baik  melalui  jalur sintesis maupun menggunakan bahan alami. Selama ini tumbuhan dapat digunakan sebagai sumber antioksidan  alami  (Bernatoniene et  al. 2011)  dan  juga dapat  menjadi  sumber  antiglikasi. Di  antara  kerajaan plantae,  famili  Asteraceae  merupakan  famili  terbesar kedua. Beberapa jenis tumbuhan famili ini dimanfaatkan  sebagai  antioksidan,  antibakteri,  dan antiinflamasi,  hal  ini  disebabkan  karena  famili  ini memiliki komponen senyawa bioaktif, seperti seskuiterpena, triterpen pentasiklik, diterpena,  lakton, alkohol,  alkaloid,  tanin,  polifenol,  flavonoid,  saponin, dan  sterol  yang  dapat  digunakan  untuk  bahan pengobatan (Wegiera et al. 2012; Erturk dan Demirbag 2003). Adenostemma  lavenia merupakan  salah  satu jenis  tumbuhan  Asteraceae  yang  sering  dianggap sebagai gulma/pengganggu namun memiliki kandungan yang  bermanfaat. A.  lavenia mengandung  flavonoid, alkaloid,  dan  terpenoid  yang  tinggi  (Kusumawati et  al. 2003;  Fauzan et  al. 2017)  yang  berpotensi  sebagai antioksidan  (Stallings  dan  Lupo  2009).  Berdasarkan penelitian  yang  telah    dilaporkan,  tumbuhan  ini mengandung  senyawa  penghambat  tirosinase  dan antioksidan yaitu 11- hydroxylated  kauranic  acid (Ko et al. 2008,  Fauzan  et  al  2017).  Selain A.  lavenia , tumbuhan  Asteraceae  lain  juga  berpotensi  untuk dikembangkan sebagai antioksidan dan antiglikasi.
Pada  penelitian  ini  digunakan A.  lavenia dan  6 tumbuhan  Asteraceae  yang  penampakannya  mirip dengan A.  lavenia dan  diharapkan  memiliki  aktivitas antioksidan dan antiglikasi yang tinggi. Tumbuhan yang digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu A.  lavenia , Ageratum  conyzoides,  Dichrocephala  integrifolia, Galinsoga  parviflora,  Synedrella  nodiflora,  Mikaina micrantha, dan Sphagneticola  trilobata .  Penelitian  ini
bertujuan  menentukan  aktivitas  antioksidan  dan antiglikasi ekstrak air 7 tumbuhan.

## METODE Bahan
Jenis tumbuhan yang digunakan yaitu A. lavenia, A. conyzoides, D. integrifolia, G. parviflora S. nodiflora, M. micrantha, dan S.  Trilobata yang  dikoleksi  dari  Unit Konservasi  dan  Budidaya  Biofarmaka  TropBRC  di Darmaga, Bogor, Jawa Barat, Indonesia. Seluruh bahan tumbuhan dideterminasi di LIPI Biologi Cibinong Jakarta dan  voucher  specimen  disimpan  di  Pusat  Studi Biofarmaka  Tropika  LPPM  IPB.  Bahan  kimia  yang digunakan  yaitu  etanol  96%,  methanol  99.8%,  2,2’- diphenylpicryl  hydrazyl  (DPPH),  asam  askorbat,  bovine serum albumin (BSA), dan 2,2’-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic  acid  (ABTS)  yang  dibeli dari  Sigma-Aldrich,  St  Louis,  Amerika  Serikat;  Glukosa, fruktosa,  pereaksi  Follin  Ciocalteu,  natrium  karbonat, asam  galat,  aluminium  klorida  heksahidrat,  kalium asetat,  kuersetin,  dan  kalium  persulfat  dibeli  dari Merck,  Whitehouse  station,  Amerika  Serikat;  Buffer fosfat (pH 7,4) dan akuades.

## Preparasi Sampel
Tujuh  tumbuhan  famili  Asteraceae  dibersihkan  dan dikeringkan. Pengeringan dilakukan menggunakan oven pada suhu 40 ℃ . Setelah kering, masing-masing sampel digiling hingga menjadi serbuk dengan ukuran 80 mesh. Kemudian  serbuk  kering  sampel  ditentukan  kadar  air dan  kadar  abunya  mengacu  pada  metode  standar AOAC (2016).

## Ekstraksi Sampel
Ekstraksi  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut air pada suhu 50 ℃ . Simplisia ditimbang sebanyak 20 g, lalu dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan ditambahkan pelarut dengan nisbah 1:10 selama 3 jam. Ekstrak  disaring  menggunakan  kain  blacu  dan dilanjutkan dengan kertas saring Whatmann, lalu filtrat yang  diperoleh  dipekatkan  dengan  penguap  putar hingga  diperoleh  ekstrak  kering.  Rendemen  ekstrak kemudian  ditentukan  berdasarkan  bobot  keringnya menggunakan konversi kadar air.

## Penentuan Total Fenolik
Penentuan  total  fenolik  mengacu  pada  metode Singleton et  al. (1999).  Kandungan  fenolik  total ditentukan dengan pereaksi Folin-Ciocalteu menggunakan  pelat  96-sumur . Dua  puluh  mikroliter ekstrak  ditambahkan  dengan  110  µL  pereaksi  Folin-
Ciocalteu  lalu  ditambahkan  70  µL  larutan  natrium karbonat,  diinkubasi  pada  suhu  25  ±  2 ℃ selama  30 menit  dan  diukur  absorbansnya  pada  panjang gelombang  765  nm.  Asam  galat  digunakan  sebagai standar dengan konsentrasi 5, 10, 30, 50, 70, dan 100 µg/mL.  Total  fenolik  dilaporan  sebagai  asam  galat ekivalen (GAE)/g ekstrak.

## Penentuan Total Flavonoid
Penentuan  total  flavonoid  mengacu  pada  metode Lee et al. (2011). Kandungan flavonoid total ditentukan menggunakan  aluminium  klorida.  Sebanyak  10  µL ekstrak  dicampur  dengan  60  µL  metanol,  10  µL aluminium  klorida  (10%  w/v),  10  µL  potassium  asetat (1M),  dan  110  µL  akuades  pada  pelat  96-sumur dan diinkubasi  pada  suhu  ruang  selama  30  menit. Absorbans  diukur  pada  panjang  gelombang  415  nm. Kuersetin  digunakan  sebagai  standar  dengan  deret konsentrasi sebesar 6,25, 12,5, 25, 50, dan 100 µg/mL. Total flavonoid dilaporkan sebagai g kuersetin ekivalen (KE)/g ekstrak.

## Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH.
Penentuan  aktivitas  antioksidan  DPPH  mengacu pada metode Batubara et al. (2009). Seratus mikroliter ekstrak dan 100 µL DPPH (2.45 mg DPPH dalam 50 mL etanol)  ditambahkan  ke  dalam  masing-masing  sumur dari  pelat  96-sumur. Setelah diinkubasi 30 menit  pada suhu ruang, absorbans diukur pada panjang gelombang 514  nm.  Asam  askorbat  digunakan  sebagai  kontrol positif. Aktivitas antioksidan terhadap DPPH dilaporkan sebagai konsentrasi penghambatan radikal 50% (IC 50 ).

## Uji Aktivitas Antioksidan Metode ABTS.
Penentuan  aktivitas  antioksidan  ABTS  mengacu pada  metode  Re et  al. (1999).  Larutan  ABTS  radikal disiapkan  dengan  cara  mencampurkan  10  mL  ABTS  7 mM dengan 5 mL K 2 S 2 O 8 2,45 mM selama 12-16 jam di tempat  gelap.  Sebanyak  180  µL  ABTS  radikal  tersebut direaksikan  dengan  20  µL  ekstrak  dan  diinkubasi  pada suhu  ruang  selama  15  menit.  Absorbans  campuran kemudian  diukur  pada  panjang  gelombang  734  nm. Trolox digunakan  sebagai  standar  dan  aktivitas antioksidan dilaporkan dalam mg Trolox ekivalen (TE)/g ekstrak.

## Uji Aktivitas Antiglikasi
Penentuan  aktivitas  antiglikasi  mengacu  pada metode  Povichit et  al. (2010). Ekstrak  masing-masing sampel  dilarutkan  dalam  akuades  sampai  konsentrasi
ekstrak 1000 μg/mL. Aminoguanidin digunakan sebagai standar.    Seluruh  larutan  uji  tersebut  diinkubasi  pada suhu  60°C  selama  40  jam.  Setelah  inkubasi,  larutan kemudian  dipipet  sebanyak  100  µL  ke  dalam  sumur pelat  96-sumur.  Jumlah  relatif  BSA  yang  terglikasi diukur  menggunakan  fluorometer  pada  panjang gelombang eksitasi 330 nm dan emisi 440 nm.

## Analisis Statistika
Analisis  statistika  diperlukan  untuk  mengetahui  ada atau tidaknya perbedaan yang signifikan dari hasil yang diperoleh  pada  7  ekstrak  tumbuhan.  Analisis  statistika dilakukan  menggunakan  program  SPSS  16.0  dengan analisis  menggunakan One  Way ANOVA  dan dilanjutkan dengan  analisis lanjutan berupa uji Duncan dengan menggunakan selang kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar Air dan Kadar Abu
Penentuan kadar air dan kadar abu dilakukan untuk mengetahui  kualitas  bahan  yang  digunakan,  selain  itu, kadar  air  juga  digunakan  sebagai  koreksi  untuk penentuan rendemen ekstrak. Kadar air dan kadar abu 7  sampel  yang  digunakan  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Kadar air seluruh sampel berbeda nyata pada α =0,05. G.  parviflora memiliki  kadar  air  tertinggi  yaitu  9,29% dan terendah dimiliki S. nodiflora yaitu 7,05%. Kadar air yang  baik adalah kadar air yang kurang dari 10%, agar tumbuhnya  jamur  dan  kapang  pada  bahan  dapat dikurangi (Salamah dan Farahan 2014). Kadar air semua sampel  yang  digunakan  tergolong  baik  menurut Farmakope Herbal Indonesia (FHI) dan Materia Medika Indonesia  (MMI)  (Ditjen  POM  1995).  Hal  ini  juga menunjukkan  bahwa  proses  pengeringan  sebelum analisis lebih lanjut telah berlangsung dengan baik. Kadar  abu  digunakan  untuk  mengetahui  kandungan mineral  dalam  suatu  simplisia.  Kadar  abu  tertinggi diperoleh  pada D.  integrifolia sebesar  13,86%  dan kadar  abu  terendah  pada S.  trilobata sebesar  9,15% yang tidak berbeda nyata dengan kadar abu A. lavenia . Semakin tinggi kadar abu simplisia maka semakin besar kandungan  logam  mineral,  garam  organik,  dan  garam anorganiknya. Dalam hal ini, D. integrifolia mengandung  logam  mineral,  garam  organik,  atau garam  anorganik  yang  tinggi,  namun  kadar  abu  yang didapat masuk memenuhi syarat FHI yaitu kurang dari 14% (Ditjen POM 1995).

## Rendemen
Ekstraksi merupakan proses pengambilan kandungan  kimia  yang  dapat  larut  sehingga  terpisah dari bahan yang tidak  dapat  larut  dengan pelarut  cair. Dengan  diketahui  senyawa  aktif  yang  dikandung simplisia  akan  mempermudah  pemilihan  pelarut dengan  cara  ekstraksi  yang  tepat  (Ditjen  POM  1995). Pemilihan  metode  ekstraksi  didasarkan  pada  sifat bahan atau senyawa, efektivitas yang berkaitan dengan jumlah  senyawa  yang  terekstraksi,  dan  efisiensi meliputi  biaya  dan  waktu  (Harvey  2009).  Metode ekstraksi  yang  digunakan  yaitu  maserasi  dengan  suhu 50 ℃ selama  3  jam  menggunakan  pelarut  air.  Metode ini  dipilih  karena  cukup  mudah  dilakukan  dan  tidak membutuhkan  waktu  yang  lama  serta  air  merupakan pelarut  pengekstraksi  yang  diizinkan  oleh  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  (BPOM)  Republik Indonesia  (Ditjen  POM  1995).  Ekstraksi  pada  7  jenis tumbuhan  dilakukan  menggunakan  pelarut  air  dengan perbandingan 1:10 (b/v). Rendemen ekstrak air ketujuh tumbuhan  ditunjukkan  pada  Tabel  2. A.  lavenia memiliki rendemen tertinggi yaitu sebesar 34,18%  dan M.  michranta memiliki  rendemen  terendah  yaitu sebesar 12,16%.

## Kandungan Total Fenolik
Penentuan  kandungan  total  fenolik  dilakukan denggan  metode  Folin-Ciocalteu  (metode  kesetaraan asam galat). Reagen Folin-Ciocalteu yang mengandung fosfomolibdat-asam  fosfotungstat      berperan  sebagai agen  pengoksidasi  akan  bereaksi  dengan  senyawa fenolik  di  dalam  ekstrak/fraksi  membentuk  senyawa kompleks molibdenum-tungstat berwarna biru (Singlnton et al. 1999; Chen et al. 2012). Pembentukan kompleks  warna  biru  ini  sebanding  dengan  jumlah senyawa  fenolik  yang  terkandung  dalam  suatu  sampel (Dai  dan  Mumper  2010).  Senyawa  fenolik  merupakan senyawa  kimia  yang  terdiri  dari  gugus  hidroksil  (-OH) yang  terikat  langsung  dengan  gugus  hidrokarbon aromatik. Gugus hidroksil dalam senyawa fenolik dapat mendonorkan  atom  hidrogen  melalui  mekanisme transfer  elektron  sehingga  proses  oksidasi  dapat dihambat, sehingga dapat digunakan sebagai antioksidan.  Semua  senyawa  fenolik  termasuk  fenol sederhana  dapat  bereaksi  dengan  pereaksi  Folin- Ciocalteu  (Heim et  al. 2002)  Senyawa  fenolik merupakan  salah  satu  metabolit  sekunder  kelas  besar yang  terdiri  dari  beberapa  macam,  salah  satunya flavonoid.
Tabel 1. Kadar Air Dan Kadar Abu 7 Sampel Tumbuhan
Sampel Kadar Air (%) ± SD Kadar Abu (%) ±SD A. conyzoides 7,980 ± 0,374 b 11,20 ± 0,45 c A. lavenia 7,973 ± 0,119 b 9,63 ± 0,08 b D. integriolia 9,287 ± 0,017 d 13,86 ± 0,34 e G. parviflora 8,522 ± 0,416 bc 12,47 ± 0,28 d M. michranta 9,104 ± 0,227 cd 11,33 ± 0,11 c S. nodiflora 7,048 ± 0,581 a 12,23 ± 0,17 d S. trilobata 8,786 ± 0,062 cd 9,15 ± 0,05 a
Keterangan: Huruf yang berbeda di belakang angka pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang signifikan pada  =0.05.
Tabel 2. Rendemen, Total Fenolik, dan Total Flavonoid Ekstrak Air, Fraksi Air, dan Fraksi Kloroform
Ekstrak Rendemen (%) ± SD Total Fenolik (mg GAE/g ekstrak) ± SD Total Flavonoid (mg KE/g ekstrak) ± SD A. conyzoides 15,71 ± 1,49 c 10,14 ± 0,05 b 0,80 ± 0,06 b A. lavenia 34,18 ± 4,75 f 12,83 ± 0,42 c 0,48 ± 0,11 a D. integrifolia 17,53 ± 0,87 d 17,18 ± 0,57 d 1,41 ± 0,09 c G. parviflora 14,06 ± 2,73 b 4,75 ± 0,64 a 1,28 ± 0,06 c M. michranta 12,16 ± 2,38 a 19,05 ± 0,19 e 4,35 ± 0,26 g S. nodiflora 14,91 ± 1,55 b 10,76 ± 0,70 b 2,34 ± 0,17 f S. trilobata 19,77 ± 2,51 e 9,96 ± 0,04 b 2,03 ± 0,04 e
Keterangan: Huruf yang berbeda di belakang angka pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang signifikan pada  =0.05
107 Asam galat (asam 3,4,5-trihidroksibenzoat),
senyawa  fenolik  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  tinggi  (Marjoni et  al. 2018),  digunakan  dalam penelitian  ini  sebagai  standar.  Total  fenolik  yang diperoleh  pada  ekstrak  air  7  jenis  tumbuhan ditunjukkan  pada  Tabel  2.  Total  fenolik  tiap  ekstrak berbeda  nyata  pada  α=0,05  dan  total  fenolik  tertinggi ditemukan  pada  ekstrak M.  michranta sebesar  19,05 mg  GAE/g  ekstrak  dan  terendah  pada G.  parviflora sebesar  4,75  mg  GAE/  g  ekstrak.  Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan oleh Idris et al. (2018), ekstrak  air M.  michranta memiliki  total  fenolik  lebih kecil  dibandingkan  hasil  penelitian  ini  yaitu  sebesar 11,00  mg  GAE/g  ekstrak.  Kadar  fenolik  yang  tinggi diharapkan  akan  menunjukkan  aktivitas  antioksidan yang tinggi.

## Kandungan Total Flavonoid
Flavonoid  merupakan  kelompok  senyawa  fenolik yang  paling  umum  ditemukan  pada  tumbuhan  yang juga  berperan  sebagai  antioksidan.  Prinsip  penentuan total flavonoid dengan AlCl 3 adalah dengan pembentukan  kompleks  stabil  antara  AlCl 3 dengan C-4 gugus keto dan setiap C-3 atau C-5 gugus hidroksil dari flavon  dan  flavonol  (Chang et  al. 2002)  membentuk warna kuning (Popova et al. 2004).
Kuersetin  digunakan  sebagai  standar  pada  penentuan total  flavonoid  karena  kuersetin  tergolong  flavonol yang memiliki gugus keto pada C-4 dan gugus hidroksi pada  C-3  atau  C-5  yang  bertetangga  sehingga  mudah dideteksi dengan metode ini (Azizah et al. 2014). Total flavonoid  ekstrak  air  pada  penelitian  terangkum  pada Tabel  2.  Ekstrak  pada  penelitian  ini  memiliki  total flavonoid yang berbeda nyata satu dengan lainnya dan nilai  tertinggi  ditemukan  pada  ekstrak M.  michranta yang  juga  memiliki  total  fenolik  paling  tinggi. Sementara  total  fenolik  terendah  ditemukan  pada A. lavenia .  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  total flavonoid  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  hasil penelitian Idris et al. (2018) yaitu hanya sebesar 11,33 mg  KE/g  ekstrak.    Total  fenolik  seluruh  ekstrak  pada
penelitian  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  total flavonoid.  Hal  ini  dapat  dipahami  karena  fenolik merupakan  kelompok  senyawa  yang  lebih  besar dimana  di  dalam  terkandung  senyawa  flavonoid  dan senyawa  fenolik  lainnya.  Seperti  halnya  total  fenolik, dengan  total  flavonoid  yang  tinggi  diharapkan  akan memberikan  aktivitas  antioksidan  dan  antiglikasi  yang tinggi.

## Aktivitas Antioksidan Metode DPPH
Aktivitas antioksidan menggunakan metode penangkapan  radikal  bebas  stabil  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil)  menggunakan  prinsip  donasi  atom hidrogen  dari  substansi  yang  diujikan  pada  radikal DPPH  (Molyneux  2004).  Aktivitas  antioksidan  awalnya ditentukan  pada  konsentrasi  ekstrak  1000  g/mL  dan hasilnya  dilaporkan  dalam  %  penghambatan  (Tabel 3). Penghambatan reaksi penangkapan radikal DPPH pada tiap ekstrak  air pada konsentrasi 1000 µg/mL  berbeda nyata  pada  α=0,05  yaitu  mulai  dari  11,89%  pada ekstrak D.  integrifolia hingga  91,28%  pada  ekstrak A. lavenia .
Untuk memastikan aktivitas tiap ekstrak, ditentukan pula nilai IC 50 antioksidannya. Semakin rendah nilai IC 50 , maka  semakin  tinggi  aktivitas  antioksidannya  suatu bahan  yaitu  radikal  bebas  dapat  ditangkap  oleh senyawa  antioksidan  hanya  dengan  konsentrasi  yang rendah.  Nilai  IC 50 antioksidan  seluruh  ekstrak terangkum pada Tabel 3. Hasilnya menunjukkan bahwa nilai  ini  berbeda  nyata  satu  dengan  lainnya  pada α=0,05  dan  nilai  terendah  ditemukan  pada  ekstrak  air A.  lavenia yang  nilainya  tidak  berbeda  nyata  dengan ekstrak S.  trilobata. Lima  ekstrak  tumbuhan  lainnya tidak  berpotensi  sebagai  antioksidan  menurut Molyneux  (2004)  karena  memiliki  IC 50 lebih  besar  dari 1000  μg/mL  (Tabel  3).  Aktivitas  antioksidan  seluruh ekstrak  pada  penelitian  ini  tidak  sebaik  asam  askorbat sebagai  kontrol  positif  yang  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 4,06 μg/mL.
Aktivitas antioksidan berhubungan dengan kandungan  total  fenolik  dan  flavonoid.  Namun,  tidak selalu  berkorelasi  positif  dengan  kandungan  total fenolik.  Pada  penelitian  ini,  tingginya  kandungan  total fenolik/flavonoid  dari  ekstrak  tidak  memiliki  korelasi tinggi dengan aktivitas antioksidannya, terbukti dengan hasil uji korelasi Pearson dengan nilai r=0,452 (korelasi cukup)  antara  kandungan  total  fenolik  dengan  inhibisi antioksidannya  dan  signifikan  pada  level  0,05.  Namun korelasi  antara  total  flavonoid  dengan  antioksidannya rendah,  dengan  r=-0,397.  Ekstrak M.  michranta yang memiliki  kandungan  fenolik  dan  flavonoid  tertinggi dibandingkan  ekstrak  lainnya,  memiliki  aktivitas penangkapan  radikal  DPPH  yang  lemah.  Hal  ini menunjukkan bahwa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas  antioksidan  tidak  hanya  senyawa  golongan fenolik dan flavonoid, namun juga senyawa lain seperti terpenoid.  Salah  satu  terpenoid  yang  dilaporkan memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  dalam A. lavenia  dan  S.  trilobata adalah  11- hydroxylated kauranic acid (Ko et al. 2008; Ma et al. 2013; Fauzan et al  2017).  Selain  itu,  aktivitas  flavonoid  sebagai antioksidan  bergantung  pada  struktur  molekulnya (Bhaigyabati et al. 2014).

## Aktivitas Antioksidan Metode ABTS
Aktivitas antioksidan ditentukan juga menggunakan metode  peredaman  radikal  ABTS  yang  dilaporkan sebagai  kapasitas  antioksidan  pada  sampel  yang dinyatakan  dalam  mg trolox ekivalen  (TE)/g  ekstrak (Wang et  al. 2004,  Shaich et  al. 2015).  Aktivitas
antioksidan  ABTS  ketujuh  ekstrak  disajikan  pada  Tabel 3. Hasil menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan ABTS bervariasi  dan  berbeda  secara  nyata  pada  α=0,05. Aktivitas  antioksidan  ABTS  tertinggi  ditemukan  pada ekstrak A.  conyzoides yang  diikuti  oleh  ekstrak S. nodiflora dan S.  trilobata. Sedangkan  aktivitas antioksidan ABTS terendah ditemukan pada  ekstrak M. michranta yang tidak berbeda nyata dengan ekstrak G. parvifolia .
Metode
ABTS dan DPPH menggunakan spektrofotometer  untuk  mengukur  penurunan  nilai absorbansi  karena  menangkal  radikal  bebas  (Shalaby dan  Shanab  2013).    Hasil  dari  kedua  metode  ini  tidak selalu berkorelasi, hal ini disebabkan jenis radikal bebas dan  mekanisme  penangkapan  radikal  bebas  yang berbeda.  Berdasarkan  uji  korelasi  Pearson  diperoleh nilai  r=0,591  (korelasi  kuat)  antara  nilai  inhibisi  DPPH dengan  aktivitas  ABTS  dan  signifikan  pada  level  0,01. Berdasarkan  hubungan  aktivitas  antioksidan  ABTS  dan kandungan  fenolik  dan  flavonoid  total  menunjukkan bahwa  tidak  berkorelasi  positif  yang  ditunjukkan  oleh nilai r=-0,206 untuk total fenolik dan -0,433 untuk total flavonoidnya.

## Aktivitas Antiglikasi
Antiglikasi  merupakan  zat  yang  dapat  menghambat terjadinya  reaksi  glikasi  protein  yang  menghasilkan advanced  glycation  end  products (AGEs).  AGEs diproduksi  melalui  reaksi Maillard yang  ditandai dengan  adanya  asam  amino  teralkilasi,  residu fluoresens,  dan  ikatan  silang  intramolekul  maupun
Tabel 3. . Aktivitas Antioksidan DPPH , ABTS, dan Antiglikasi Tujuh Ekstrak Air
Ekstrak Aktivitas antioksidan Inhibisi glikasi (%) ± SD (1000 µg/mL) Inhibisi DPPH (%)±SD (1000 µg/mL) IC 50 DPPH (µg/mL)±SD ABTS (mg TE/g ekstrak) ± SD A. conyzoides 50,05±0,74 d 1054,10±54,37 c 4,51±0,05 f 17,99±4,39 a A. lavenia 91,28±1,39 f 121,82±15,84 b 3,38 ± 0,17 c 87,87±11,17 c D. integriolia 11,89±2,38 a >2000 2,08 ± 0,73 b - G. parviflora 23,33±2,26 b >2000 0,44 ± 0,08 a 90,67 ± 8.83 c M. michranta 24,01±0,20 b 1713,95±29,27 d 0,32 ± 0,05 a - S. nodiflora 37,32±0,59 c >2000 4,39 ± 0,09 e - S. trilobata 77,96±1,32 e 148,91 ±12,51 b 4,06 ± 0,02 d 87,38±1,76 c Asam askorbat - 4,06 ± 0,03 a - - Aminoguanidin - - - 73,00  ± 3,26 b
Keterangan:
 Huruf yang berbeda di belakang angka pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang signifikan pada  =0.05.
 Tanda (-) menunjukkan bahwa sampel tidak menunjukkan bahwa sampel tidak memiliki aktivitas antiglikasi pada 1000  g/ml
intermolekul.  BSA  yang  merupakan  sumber  amina, dapat  digunakan  sebagai  target  terjadinya  glikasi protein.  Protein  yang  terglikasi  akan  menghasilkan radikal  bebas  50  kali  lebih  banyak  daripada  protein yang tidak terglikasi (Setiawan dan Suhartono 2005). Penentuan  aktivitas  antiglikasi  pada  ekstrak  air dilakukan  dengan  menggunakan  konsentrasi  1000 μg/mL dan hasilnya dapat dilihat pada Tabel 3. Aktivitas antiglikasi ketujuh sampel berbeda nyata pada α=0,05. Aktivitas  antiglikasi  tertinggi  ditemukan  pada  ekstrak air G.  parviflora yang  berdasarkan  analisis  statistika tidak  berbeda  secara  signifikan  dengan  aktivitas A. lavenia dan S.  trilobata .  Aktivitas  antiglikasi  semua sampel  dibandingkan  dengan  kontrol  positif,  yaitu amionoguanidin  pada  konsentrasi  yang  sama  dan menunjukkan  ketiga  sampel  dengan  aktivitas  tertinggi lebih  baik  dibandingkan  control  positif.  Sementara ekstrak D.  integrifolia,  M.  michranta, dan S.  nodiflora tidak dapat menghambat reaksi glikasi.
Glikasi  dapat  dihambat  melalui  beberapa  mekanisme seperti  menghambat  produksi  basa  shiff  dan  produk amadori,  menghambat  perbanyakan  produk  amadoi pada  fase  selanjutnya,  menghambat  agregasi  AGEs, mengurangi  pembentukan  AGEs  melalui  pencegahan oksidasi  produk  amadori  dan  glukosidasi  katalisis logam, dan aktivitas antioksidan (Zahra et al. 2016, Dil et al . 2019). Antioksidan juga dapat menangkal radikal bebas seperti oksigen reaktif yang dapat mempercepat proses  glikasi  sehingga  antioksidan  dapat  menjadi sumber  antiglikasi  (Ndlovu et  al. 2013).  Namun,  nilai aktivitas  antiglikasi  tidak  selalu  berkorelasi  positif dengan  nilai  aktivitas  antioksidan.  Hal  ini  disebabkan karena  kedua  aktivitas  tersebut  memiliki  mekanisme reaksi yang berbeda. Berdasarkan uji korelasi Pearson, aktivitas antiglikasi berkorelasi dengan inhibisi oksidasi DPPH dengan nilai r=0,603 (korelasi kuat) pada α=0,05, sedangkan  dengan  aktivitas  antioksidan  ABTS  tidak berkorelasi  (r  =-0,019).  Pada  penelitian  ini  juga  tidak ditemukan  hubungan  antara  aktivitas  antiglikasi dengan  total  fenolik  dan  flavonoid  yang  ditunjukkan oleh nilai r=-0,104 untuk total fenolik dan -0,299 untuk total flavonoid.

## SIMPULAN
Ekstrak  ketujuh  tumbuhan  Asteraceae  pada penelitian  ini  memiliki  aktivitas  antioksidan  dan antiglikasi  yang  berbeda-beda.  Untuk  dikembangkan sebagai bahan antiglikasi dan antioksidan, ekstrak air A. lavenia yang  memiliki  IC 50 antioksidan  DPPH  sebesar 121,82 μg/mL dan inhibisi glikasi 87,87 %, serta ekstrak
air S.  trilobata yang  memiliki  IC 50 antioksidan  DPPH sebesar 148.91μg/mL, kapasitas antioksidan ABTS 4,06 mgTE/g  ekstrak,  dan  penghambatan  glikasi  87,38% dapat dipilih.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  menyampaikan  terima  kasih  kepada Kemenristekdikti  yang  memberikan  dana  pada Penelitian  Dasar  Unggulan  Perguruan  Tinggi  (PDUPT) No. 4160/1T3.LI/PN/2019.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC].  The  Association  of  Official  Analytical  Chemist. 2016.  Official  Methods  of  Analiysis  Ed  ke-20. Washington  DC  (US):  Association  of  Official Analytical Chemist.
Azizah  DN,  Kumolowati  E,  Faramayuda  F.  2014. Penetapan  kadar  flavonoid  metode  AlCl 3 pada ekstrak metanol kulit buah kakao ( Theobromo cacao L.) Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi . 2(2): 45-49. Batubara  I,  Mitsunaga  T,  Ohashi  H.  2009.  Screening antiacne  potency  of  Indonesian  medical  plants: antibacterial,  lipase  inhibition,  and  antioxidant activities. J. Wood Sci . 55:230-235.
Bernatoniene J, Masteikova R, Davalgiene J, Peciura R, Gauryliene  R,  Bernatoniene  R.  2011.  Topical application  of calendula  officinalis (L);formulation and  evaluation  of  hydrophilic  with  antioxidant activity. Journal of Medicinal Plant Research. 5:868- 877.
Bhaigyabati  T,  Devi  P,    Bag  G.  C.2014.  Total  flavonoid content and antioxidant activity of aqueous rhizome extract  of  three Hedychium Species  of  Manipur Valley. Research Journal of Pharmaceutical
Biological and Chemical Sciences . 5(5): 970-976. Chang  CC,  Yang  MH,  Wen  HM,  Chern  JC.  2002.
Estimation of total flavonoid content  in propolis by two  complementary  colorimetric  methods. Journal of Food and Drug Analysis . 10:178-182.
Chen  CM,  Lin  CY,  Lin  LC,  Wan  TC.  2012.  Antioxidant activity and total phenolic contents of various Toona sinensis extracts. African  Journal  of  Biotechnolog y. 11:13831-13837.
Dai  J,  Mumper  RJ.  2010.  Plant  phenolic:  extraction, analysis  and  their  antioxidant  and  anticancer properties. Molecules . 15:7313-7352.
Dil  FA,  Ranjkesh  Z,  Goodarzi  MT,  2019.  A  systematic review of antiglycation medicinal plants. Diabetes & Metabolic  Syndrome:  Clinical  Research  &  Reviews . 13(2):1225-1229
Eka Budiarti et al .
Ditjen  POM.  1995.  Farmakope  Indonesia.  Edisi keempat.  Jakarta  (ID)  :  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Erturk  O,  Demirbag  Z.  2003. Scorzonare  mollis Bieb (Compositae) bitkisinin antimikrobial aktivasi. Cerve Komura. 12:27-31.
Fauzan A, Praseptiangga D, Hartanto R, Pujiasmanto B. 2017. Characterization of the chemical composition of Adenostemma  lavenia (L.)  Kuntze  and Adenostemma  platyphyllum Cass. Earth  and Environmental Sceince . 102(2018): 1-8.
Giancomoni  PU,  Rein  G.  2001.  Factors  of  skin  aging share common mechanisms.
Journal
Biogerontology . 2:219-229. Harvey  D.  2009. Analytical  Chemistry  2.0  Electronic versions . McGrawHill.
Heim  KE,  Tagliaferro  AR,  Bobilya  DJ.  2002.  Flavonoid antioxidants: chemistry,metabolism
and
structure-activity  relationship .  Journal  ofNutritional Biochemistry. 13:572-584.
Idris A, Linatoc AC, Surayya MM, Aisha MA, Mohd FAB. 2018.  Effect of  light  intensity  of  the  total  flavonoid and  total  phenolic  contents  of Mikaina  mihranta and Tridax procumbens . 10(4):1-7.
Ko  HH,  Chang  WL,  Lu  TM.  2008.  Antityrosinase  and antioxidant  effect  of  ent-kaurane  diterpenes  from leaves  of  Broussonetia  papyrifera. Journal  Natural Product. 71: 1930-1933.
Kusumawati  I,  Djatmiko  W,  Rahman  A,  Studiawan  H, Ekasari  W.  2003.  Eksplorasi  keanekaragaman  dan kandungan  kimia  tumbuhan  obat  di  hutan  tropis Gunung Arjuno. Jurnal Bahan Alam Indonesia . 2(3) : 100 – 104.
Lee  SH,  Sancheti  SA,  Bafna  MR,  Sancheti  SS,  Seo  SY. 2011. Acetylcholineterase inhibitory and antioxidant properties of Rhododendron yedoense var. Poulhanense  bark . Journal  of  Medicinal  Plants Research . 5:248-254.
Ma  BJ,  Wen  CN,  Gao  Y,  Ren  FC,  Wang  F,  Liu  JK.  2013. Ent- kaurane  diterpenoids  from  the Wedelia trilobata.  Natural  Product  and  Bioprospect. 3:  107- 111.
Marjoni  MR,  Nofita  D,  Rahmi  N,  Saifullah,  Najia  NA. 2018. Phenolic compound, flavonoids and antioxidant  activity  of  Arum  Manis  leaves. International Journal of Green Pharmacy .12(3): 1-6. Molyneux, P. 2004. The Use of The Stable Free Radical
Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant  Activity. Journal  of  Science  and Technology . 26 (2): 211-219.
Ndlovu  G,  Gerda  F,  Maleva  T,  Werner  C,  Vanessa  S. 2013.  In  vitro  determinationof  the  anti-aging potential  of  four southern  african medicinal  plants. BMC  Complementary  and  Alternative  Medicine . 13:1-7.
Popova  M,  Bankova  V,  Butovska  D,  Petkov  V.  2004. Validated  methods  for  the  quantification  of biologically  active  constituents  of  poplar-type propolis. Phytochemical Analysis . 15: 235–240. Povichit GV, Phrutivorapongkul A, Suttaji M, Chaiyasut C,  Leelapornpisid  P.  2010.  Phenolic  content  and  in vitro  inhibitory  effects  on  oxidation  and  protein glycation  of  some  Thai  medicinal  plants.  Pak. J. Pharm. Sci . 2(4): 403-408.
Re  R,  Pellegrini  N,  Proteggente  A,  Pannala  A,  Yang  M, Evans CR. 1999. Antioxidant activity applying an
improved ABTS radical cation decolorization
assay. Free  Radical  Biology  and  Medicine .  26:1231- 1237.
Salamah  N,  Farahan  L.  2014.  Uji  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol herba  pegagan ( Centella asiatica (L.) Urb) dengan metode fosfomolibdat. Pharmaciana .
4:23-30.
Setiawan  B,  Suhartono  E.  2005.  Stress  oksidatif  dan peran  antioksidan  pada  diabetes  melitus. Majalah kedokteran Indonesia. 55(2):87-90.
Shaich  KM,  Tian  X,  Xie  J.  2015.  Reprint  of  hurdles  and pitfalls  in  measuring  antioxidant  efficacy  a  critical evaluation of ABTS, DPPH, and ORAC assays. Journal of Functional Foods . 1-15.
Shalaby  EA,  Shanab  SMM.  2013.  Review:  Antioxidant compounds,  assays  of  determination  and  mode  of action. African Journal Pharmacy andPharmacology . 7:528-539.
Singleton VL, Orthofer R, Lamuela-Raventos RM. 1999.
Analysis  of  total  phenol  and  other  oxidation substrates  and  antioxidants  by  means  of  folin- ciocalteu  reagent. Methods  in  Enzymology .  299C: 152-178.
Stallings AF, Lupo MP. 2009. Practical uses of botanicals in  skin  care. Journal  of  Clinical  Aesthetic Dermatology . 2:36-40.
Wang CC, Chu CY, Chu KO, Choy KW, Khaw KS, Rogers MS,  Pang  CP.  2004. Trolox -equivalent  antioxidant capacity  assay  versus  oxygen  radical  absorbance capacity assay in plasma. Clinical Chemistry . 50:952- 954.
Wegiera M, Smolarz HD, Jedruch M, Korczat M, Kopron K.  2012.  Cytotoxic  effect  of  some  medicinal  plant from  Asteraceae  family  on  J-45.01  leukemic  cell line—pilot  study. Acta  Policy  Pharmacology. 69(2): 1-8.
Yagi  S,  Drouart  N,  Bourgaud  F,  Henry  M,  Chapleur  Y, Mattar  DL.  2013.  Antioxidant  and  antiglycation properties of Hydnora johannis roots . South African Journal of Botany . 84:124-127.
Zahra U, Kartika Y, Batubara I, Darusman LK, Maddu A. 2016. Short  communication: Screening the  potency of Zingiberaceae leaves as antioxidant and antiaging agent. Nusantara Bioscience . 8:221-225.