## VARIASI PROFIL PROTEIN DAGING SAPI YANG DIBUNGKUSDAUN PEPAYA DENGAN ELEKTROPHORESIS SDS-PAGE
Tri Ade Saputro* 1 , Sri Darmawati 2 , Endang T.M 3
1 Universitas Mandala Waluya Kendari
2 Universitas Muhamaadiyah Semarang
3 Universitas Muhammadiyah Semarang
1 e-mail : triadesaputro13@gmail.com

## Abstrak
Daging merupakan bahan pangan yang penting dalam memenuhi kebutuhan gizi.Protein pada daging lebih mudah dicerna  dibanding  protein  yang  berasal  dari  tumbuhan (nabati).  Daun pepaya  merupakan  tanaman obat- obatan  karena  mengandung  senyawa alkaloida dan  enzim proteolitik,  papain,  khimopapain, dan lisosom, yang berguna  pada  proses  pencernaan  dan  mempermudah  kerja  usus Dalam pepaya terkandung enzim-enzim protease (pengurai protein)  yaitu  papain dan kimopapain.  Kedua  enzim ini mempunyai kemampuan  menguraikan ikatan- ikatan dalam  melekul  protein  sehingga  protein terurai menjadi  polipeptida  dan  dipeptide.Berdasarkan  penelitian yang dilakukan di dapatkan hasil sebagai berikut pada  tiap  sampelnya  sampel  dengan  rendaman  daun  papaya selama  10  menit memiliki  11  pita  protein,  sampel  rendaman  daun  papaya  selama  20  menit  memiliki 16  pita protein dan sampel rendaman  daun  papaya  selama  30  menit  memiliki 15 pita protein.

## Keywords: prifil protein, daging sapi, SDS page, elektroforesis

## Abstract
Beef  is  an  important  food  ingredient  in  meeting  nutritional  needs.  Protein  in  beef is   easier   to   digest than  protein  from  plants  (vegetables).   Papaya   leaf     is   a medicinal plant  because  it  contains alkaloids and proteolytic  enzymes,  papain, khimopapain,    and   lyosomes,   which  are    useful   in   the    digestive    process    and facilitate  the  work  of  the  intestines.  Papaya  contains  protease  enzymes  (protein  decomposers),  papain  and khimopapain.  Both of these enzymes  have the  ability to decompose the bonds in the protein  molecule  so that  the protein breaks down into polypeptides and dipeptides. Based on the research done in getting the following results in  each  sample,  samples  marinated  with  papaya  leaf  for  10  minutes  have 11 protein bands, samples  marinated during 20 minutes have 16 protein bands and samples marinated for 30 minutes have 15 protein bands.
Kata Kunci: prifil protein, beef, SDS page, elektroforesis

## 1. PENDAHULUAN
Daging  merupakan  bahan  pangan yang  bernilai  giziz  tinggi  karena  kaya  akan protein,  lemak,  mineral,  serta  zat  lain  yang sangat dibutuhkan  oleh  tubuh  (Wijayanti  et al.,  2011).  Ada  beberapa  jenis  daging  salah satunya  daging  sapi  yang  merupakan  salah satu  komoditi  peternakan    mengandung nurtrisi yang sangat baik, nerupa air, protein lemak    ,mineral    dan    sedikit  karbohidrat (Nurwantoro, et al., 2012 ) .  Disetiap tshunnya kebutuhan akan daging sapi selalu meningkat sementara    pemenuhan    akan  kebutuhan
tersebut selalu negatif, yang artinya permintaan  lebih  tinggi  dari  pada  suplai daging  (Agustina  et  al.,  2015).  Daging  sapi memiliki  sumber  protein  berkulaitas  tinggi yaitu 20-25 gram protein (Wijayanti et   al., 2011). Berbagai   penelitian telah  dilakukan untuk  melihat  dan  mengamati  kualitas protein  salah  satunya  penelitian  yang dilakukan (Leygonie  et  al.,  2012), Impact of freezing  and  thawing  on  the  quality of meat. Dalam penelitian ini tidak ditemukan hasil  perbedaan  yang  signifikan  antara sampel  tersebut  namun    penulis    mencatat
bahwa  waktu  penyimpanan  sampel  telah mempengaruhi hasil.
Tanaman papaya ( Carica Papaya L.) adalah  tanaman  jenis  buah-buahan  yang banyak dibudidayakan  di  Indonesia,  hal  ini disebabkan  karena  pepaya  mudah  tumbuh dan memiliki banyak kadungan vitamin yang bermanfaat  bagi  manusia  (Yulianti,  2015). Selain  mengandung        banyak        vitamin didalam    buah,    batang    dan  daun    juga mengandung  enzim  protease  yangdapat digunak  sebagai  pemecah  dan    pengurai molekul-molekul  protein  (Iskandar  and Edison, 2015).
Berdasarkan    itu    semua  peneliti ingin melakukan penelitian yang bertemakan “Gambaran  profil  protein daging sapi yang direndam daun papaya

## 2. METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian dilakukan dengan dua tahapan yaitu separasi protein  daging  sapi  dengan  SDS-PAGE. Separasi protein dengan SDS-PAGE menurut metode Loemmli (1970) disiapkan plat glas, spaser, sisit yangtelah dibersihkan dengan  detergen  dan  alcohol  70%  untuk pencetak  gel.  Setelah  alat  pencetak  gel disiapkan,dimasukkan 4   ml   larutan 1% gel sebagai  pemisah,  kemudian  ditambahkan butanol  untuk  untuk  menutup  permukaan larutan  secukupnya,  ditinggu  30-60  menit sampai  terjadi  polimerasi. Selanjutnya  gel dibersihkan  dengan penyemprotan aquades ke permukannya, sisisr dimasukkan dan gel pemampat yang disiapkan dimasukkan  pula, ditunggu    selama  30  menit  atau  sampai terjadi  polimerasi,  sisir  diambil  gel  siap untuk digunakan. Selanjutnya gel yang telah mengalami polimerasi dipasang pada Biorat mini  protein  II,  kemudian  ditambahkan larutan elektroda buffer pH 8,3.
Perbandingan  sampel  larutan  buffer 4:1  (v/v),  setelah  itu  dipanaskan  selama 2menit  dalam  air  mendidih  .  Selanjutnya sampel  siap  dimasukkan  ke  dalam  gel, setelah  itu  diberi  aliran  listrik  dengan tegangan100 volt hingga bromo phenol blue keluar dari bagian bawah gel.
Selanjutnya  gel  diwarnai  dengan 0,1%  Coomassie  Brilliant  Blue  R-250 selama 30-60 menit hingga pita-pita protein terwarnai.
Selanjufirya
untuk rnenghilangkan wama     pada     gel     yang tidak  mengandung  protein  diberi  larutan destaining,    larutandestaining    diganti3-4 kali  hingga  gel  tampak  bersih.  Kemudian untuk  menentukan  berat  molekul  protein yang  diinginkan  dihitung  Rfnya  dan diplotkan  pada  grafik  logaritrnik  dari  Rf marker protein yang berat molekulnya telah diketahui.
Setelah  itu  hasil  yang  didapatkan disajikan secara deskriptif dengan menggunakan  aplikasi    corel    DRAW    X4 dimana  data  hasil  penelitian  ditabulasikan diolah dan disajikan dalam bentuk narasi

## 3. HASIL
Analisa profil protein yang dilakukan  menggunakan  metode  SDS PAGE  terhadap  daging  sapi  yang  tidak direndam  daun  papaya  dan  direndam  daun papaya  10,  20  dan  30  menit
A B
Gambar  1. Gambar  A  hasil elektroforesis
SDS  PAGE  yang  direndam daun papaya S1 tanpa perendaman,  S2  direndam  10 menit,  S3  direndam  20  menit dan  S4  direndam  30  menit. Gambar  B  visualisasi  profil protein  daging  sapi  yang direndam daun pepaya
© (2020) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia

## 4. PEMBAHASAN
Pita  protein  pada  gel  itu  terbentuk oleh pengaruh separasi protein. Aliran listrik mempengaruhi molekul  protein   bermigrasi dari kutup  negatif menuju  kutup  positif dan molekul protein tersebut bermigrasi berdasarkan    berat  molekul  dan  tingkat migrasi dalam medan listrik.
Berdasarkan penelitian yang dilakukan  diperoleh  hasil  sebagai  berikut pada sampet tanpa rendaman daun    papaya memeliki    11    pita protein  dengan  nilai berat  molekul 225 kDa, 124 kDa, 68 kDa, 37 kDa,23 kDa, 19 kDa, 14 kDa 13 kDa, 13 kDa, 10 kDa dan 4 kDa. Sampel dengan  rendaman daun    papaya  selama  10  menit  memiliki  11 pita protein  dengan  nilai  berat  molekul 225 kDa, 124 kDa, 42 kDa, 23 kDa, 20 kDa, 14 kDa, 14 kDa, 13 kDa, 10 kDa, dan 6  kDa.  Pada  sampel  rendaman  daun  papaya selama  20  menit  meliki  16  pita  protein dengan  berat    molekul    225    kDa,    134 kDa,106  kDa,  84  kDa,  68  kDa,  54  kDa, 46kDa,  28  kDa,  22kDa,  21kDa,  21  kDa, 14 kDa, 14 kDa, 13 kDa, 10 kDa  6  kDa.  Pada sampel    rendam  daun  papaya  memiliki  15 pita  protein  dengan  berat  molekul  225  kDa, 136 kDa, 121 kDa, 100 kDa, 51 kDa, 24 kDa, 21 kDa, 19 kDa, 14 kDa, 13 kDa,  13  kDa 11  kDa,  11  kDa,  10 kDa, dan 7 kDa.

## 5. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian dapat disimpulkan        sebagai    berikut    pada  tiap sampelnya.    Pada    daging    sapi  yang  tidak direndam  daun  pepaya  menunjukan  banyak pita  mayor  dengan  berat  molekul  225  kDa, 124 kDa, 68 kDa, 37 kDa, 23 kDa, 19 kDa, 14  kDa,  13  kDa,  10  kDa  ,  dan  hanya memiliki   dua   pita   minor dengan nilai Rf 0,61 dengan BM 14 kDa dan Rf 0,62 dengan BM  13  kDa.  Pada      daging      sapi      yang direndam  daun  pepaya  selama  10  menit memiliki empat  pita  minor  dengan nilai  Rf 0,58  BM  14  kDa,  Rf  0,61 BM 14, Rf 0,63 BM 13 dan 0,81 BM 10 kDa. Hasil berbeda ditunjukan pada sampel   yang direndam daun
pepaya  selama  20  menit  dan  sampel  yang direndam daun pepaya selama 30  menit,  jumlah  pita  mayor  sangat  sedikt jika      dibandingkan      dengan  sampel pertama   dan   kedua.   Pada daging    sapi yang      direndam    daun  pepaya  selama  20 menit  pita  mayor terdapat pada sampel yang memiliki  nila  Rf  0,90  BM  6  kDa sedangkan  pada      daging      sapi      yang direndam daun    pepaya    selama    30    menit terdapat pada Rf 0,08 BM 225 kDa, Rf 0,78 BM 11 kDa, Rf 0,80 BM 10 dan Rf 0,87 BM 7 kDa.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  K.K.,  Program,  M.,  Dokter,  P.,
Veteriner, L.M., Hewan, F.K., Udayana, U.,2015. Daya Ikat Air , pH ,  Warna  ,  Bau  dan  Tekstur  Daging Sapi  Bali  dan  Daging  Wagyu Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner 4, 16–24.
Darmawati,  S  dan  Haribi  R.  2010. Analisis
Protein Pilli Salmonella typhi ilsolatRS.  Kariadi  Semarang  dengan Elektroforesis  SDS-PAGE. Fakultas Ilmu  Kesehatan  dan  Keperawatan Universitas
Muhammadiyah Semarang. Jurnal Litbang Unimus.
Hidayah  L,  2013 Uji  Aktivitas  Enzim Bromalin  dan  Uji  Enzim  Papain. Jurusan Peternakan Negeri Jember. Ikmalia    (2008), Analisa    Profil  Protein Isolat Excherichia Coli S1 Hasil Dari Iradiasi Sinar Gamma, Fakultas Sains dan  Teknologi  Universitas  Islam Negeri Syariff Hidayatullah Jakarta. Iskandar,  A.,  Edison,  R.,  2015.Pengaruh
Dosis Enzim Papain terhadap Rendemen  dan  Kualitas  Virgin Coconut Oil ( VCO ) ( The Effect of Papain Enzyme Rate on the Yield and Quality of Virgin Coconut Oil [ VCO ]) 3, 82–93.
Komaruddin M dan Salim. 2006, Pemberian Perasan  Daun  Pepaya  Pada  Aya; Respon  Patofisilogik  Hepar.  J.  Sain Vet;37-43
Leygonie,  C.,  Britz,  T.J.,  Hoffman,  L.C., 2012. Impact of freezing and thawing on  the  quality  of  meat :  Review. MESC 91, 93–98. Nurwantoro, V., P., Bintoro, A., M., Legowo, A.,  Purnomoadi.,  L.,  D.,  Ambara, A.Prokoso,  Dan,  S.,  Mulyani,  2012. Nilai  Ph  Kadar  Air  ,  Dan  Total Escherichia  Coli  Daging  Sapi  Yang Dimarinasi Dalam Jus Bawang Putih
1, 20–22. Widjiati,  Anike  Rahmawati,  Sri  Mumpuni dan Bambang Sekitar. 2012. Identifikasi Protein Epidermal Growth Factor  (EGF)  46  kDa  Hasil Maturasi Oosit Sapi Perah Secara in
Vitro. Kedokteran  Hewan  Airlangga Surabaya.  Jurnal  Kedokteran  Hewan Vol.6 No. 1 Wijayanti,  M.R.,  Pertanian,  F.,  Maret,  U.S., 2011.  Analisis  preferensi  konsumen dalam  membeli  daging  sapi  di  pasar tradisional kabupaten karanganyar.
Yulianti, A.T.N.K. dan D.L., 2015. Pemanfaatan  Ekstrak  Daun  Pepaya Terfermentasi The Kampong Chicken Meat Quality 51–55.
Wibowo, M. S. 2010.Elektroforesis.Sekolah Farmasi          Institut  Teknologi Bandung.