PREVALENSI PROTOZOA USUS PADA KUKANG SUMATERA ( Nycticebus coucang )

## MELALUI PENGGUNAAN BERBAGAI MACAM  MEDIA PENGAWET DAN KONSENTRASI BERBEDA DI PUSAT REHABILITASI YIARI CIAPUS, BOGOR
THE PREVALENCE OF INTESTINAL PROTOZOAN IN SUMATRAN SLOW LORIS ( Nycticebus coucang ) THROUGH THE USE OF VARIOUS KINDS OF MEDIA AND DIFFERENT CONCENTRATIONS OF PRESERVATIVES IN THE REHABILITATION CENTER YIARI CIAPUS,
BOGOR
Nora Rukmana 1 *, Emantis Rosa 1 , Wendi Prameswari 2
1 Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Lampung
2 International Animal Rescue Indonesia *norarukmana@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  jenis  protozoa,  jumlah  ookista  dan  prevalensi  kukang sumatera  (Nycticebus  coucang)  yang  terinfeksi  protozoa  usus    dengan  menggunakan  berbagai macam media pengawet dan konsentrasi berbeda. Penelitian ini dilakukan pada lima ekor kukang sumatera.  Pengambilan sampel dilakukan pada malam hari dan diawetkan pada berbagai macam media  kontrol  (tanpa  larutan),  alkohol  70%,  alkohol  80%,  formalin  5%,  dan  formalin  10%. Penelitian  ini  menggunakan  dua  metode  yaitu  metode  pemeriksaan  natif  dan  metode  apung. Pemeriksaan  sampel  dilakukan  di  Laboratorium  Diagnostik,  YIARI  dan  Laboratorium  Biologi, Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Lampung.    Hasil  pemeriksaan dengan  metode  natif  diperoleh  dua  kelompok  protozoa  yaitu  protozoa  parasitik  dan  protozoa  non parasitik.  Protozoa parasitik diperoleh tiga famili yaitu Eimeriidae, Endamobidae, dan Balantiidae dengan empat jenis yaitu Isospora sp., Cryptosporidium parvum, Entamoeba coli, dan Balantidium coli.    Sedangkan  hasil  identifikasi  Protozoa  non  parasitik  hanya  ditemukan  famili  Oxytrichidae dengan satu jenis yaitu Oxytricha granulifera.  Hasil perhitungan dengan metode apung diperoleh ookista  Eimeria  sp.  dengan  jumlah  200  sel/gram.    Prevalensi protozoa  usus  melalui  penggunaan berbagai  macam  media  dan  konsentrasi  berbeda  pada    kukang  sumatera  yaitu  2%  pada  kontrol, 9,2% pada alkohol 70%, 13% pada alkohol 80%, 5,8% pada formalin 5%, dan 5,4% pada formalin 10%.    Media  alkohol  80%  menjadi  rekomendasi  paling  bagus  sebagai  media  pengawet  protozoa usus dibandingkan dengan alkohol 70%, formalin 5%, dan formalin 10%.
Kata kunci: Nycticebus coucang, protozoa usus,protozoa parasitik, protozoa non parasitik

## ABSTRACT
The  purpose  of  this  study  to  determine  the  types  of  protozoa,  total  oocysts,  and  prevalence  of sumatran  slow  loris  (Nycticebus  coucang)  were  infected  intestinal  protozoa  by  using  a  variety  of media and different concentrations of preservative. The study was conducted at five sumatran slow loris.  Sampling was conducted at night and preserved on a variety of media (control/ no solution), alcohol  70%,  alcohol  80%,  formalin  5%,  and  formalin  10%.    This  study  uses  two  methods  of collation method native and floating method.  Examination of samples conducted in the laboratory diagnostics,  YIARI  and  biological  laboratory,  Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Sciences, Lampung University.  The results of the examination by the method native obtained two groups of protozoa an parasitic protozoa and non parasitic protozoa.  A parasitic protozoan retrieved three of the family Eimeriidae, Endamobidae, and Balantiidae with four types Isospora sp., Cryptosporidium parvum,  Entamoeba  coli,  dan  Balantidium  coli.    While  the  results  of  the  identification  of  non parasitic protozoa found only Oxytrichidae family is Oxytricha granulifera.  The result of calculations with floating method of Eimeria sp. oocysts 200 cells/gram.  The prevalence of intestinal protozoa by  using  a  variety  of  media  and  different  concentrations  of  preservative  on  sumatran  slow  loris include 2% in control, 9,2% in alcohol 70%, 13% in alcohol 80%, 5,8% in formalin 5%, and 5,4 in formalin  10%.    The  media  alcohol  80%  being  the  most  flattering  recommendation  as  intestinal protozoa preservative media compared with alcohol 70%, formalin 5%, and formalin 10%.
Keyword: Nycticebus coucang, intestinal protozoa, parasitic protozoa, non parasitic protozoa

## Jurnal Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati
ISSN : 2338-4344

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya akan  flora  dan  fauna  salah  satunya  jenis primata  eksotis  yang  melimpah.    Jenis primata di Indonesia yang mencapai 36 jenis dan  memiliki  nilai  estetika  yang  tinggi  dan sering  diperdagangkan.    Salah  satu  dari primata  yang  memiliki  nilai  eksotis  yaitu kukang sumatera.
Kukang  sumatera  dikategorikan  sebagai spesies yang langka dikarenakan banyaknya ancaman  serius  terhadap  kelestariannya. Hal itu dikarenakan tingginya tingkat perburuan dan perdagangan ilegal, rendahnya  tingkat  kelahiran  yang  hanya menghasilkan  satu  anak  dalam  satu  tahun, serta  infeksi  penyakit.    Salah  satu  penyakit yang dapat menginfeksi kukang yaitu protozoa  parasitik  (protozoa  usus).    Infeksi protozoa  dapat  disebabkan  oleh  lingkungan habitat  atau  sumber  pakan  yang  tidak higienis.    Keberadaan  protozoa  parasitik (protozoa  usus)  dapat  berubah  sesuai dengan kondisi dan suhu lingkungan (Herdaus,2015).
Protozoa usus mempunyai siklus hidup yang berbeda  dalam  setiap  spesies  dan  mampu berkembang dalam kondisi usus yang sesuai dan  jumlah  asupan  makanan  yang  cukup. Protozoa  usus  memiliki  dampak  negatif dalam kehidupan kukang yang menyebabkan tidak  nafsu  makan,  berat  badan  berkurang, diare bahkan terjadi kematian  (Assafa et.al ,. 2004).
Kukang  sumatera  termasuk  dalam  status Appendix  I  berdasarkan Convention  on International Trade in Endangered Spesies of
Wild Flora and Fauna (CITES) (CITES,2007).
Berdasarkan  kategori International  Union  for
Conservation  of  Nature and  Natural Resources (IUCN)  (2013)  bahwa  kukang sumatera berstatus vulnerable (rentan) (IUCN,2013).
Protozoa usus terdiri atas amebae, flagellata, dan cilliata.  Amebae yang berada di saluran pencernaan  adalah Entamoeba  histolytica, Entamoeba coli, Entamoeba hartmani, Endolimax nana, Iodamoeba butschlii, Dientamoeba frgailis , dan Blastocystis hominis .    Protozoa  usus  yang  termasuk  ke dalam  flagellata  yaitu Giardia  lamblia.
Sedangkan  protozoa  usus  yang  termasuk cilliata adalah Balantidium coli (Yulfi,2006).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui jenis  dan  jumlah  ookista,  dan  prevalensi protozoa  usus  yang  menginfeksi  kukang sumatera  ( N.coucang )  dalam  perbedaan media pengawet dan konsentrasi di kandang rehabilitasi YIARI Ciapus, Bogor.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Januari sampai April 2016 yang dilakukan dalam dua tahapan  yaitu  pengambilan  sampel  feses dilakukan  di  kandang  Rehabilitasi  Satwa Primata  YIARI  di  Ciapus,  Bogor  dan pemeriksaan sampel di Laboratorium Diagnostik Parasitologi YIARI dan Laboratorium  Biologi  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas
Lampung.
Alat dan Ba han Alat dan Bahan di Lapangan Alat yang digunakan yaitu es balok, jelly pack beku, cooler box , botol plastik 30 ml, sendok, sarung  tangan,  kertas  label,  alat  tulis  dan kamera  digital  sedangkan  bahan  yang digunakan  meliputi  feses  kukang  sumatera, alkohol  70%,  alkohol  80%,  formalin  5%  dan formalin 10%.

## Alat dan Bahan di Laboratorium
Alat  yangdigunakan  pada  saat  pemeriksaan sampel  di  laboratorium  meliputi  gelas  ukur, saringan, spatula, gelas objek, gelas beaker, gelas penutup, mikroskop cahaya, mikrometer okuler, mikrometer objektif, lemari  es,  timbangan  digital,  pipet  tetes,  alat tulis, sentrifugasi, dan kamera digital sedangkan  bahan  yang  digunakan  meliputi feses  kukang  sumatera,  larutan  NaCl  jenuh, dan  aquades.    Larutan  NaCl  jenuh  dibuat dengan  cara  melarutkan  NaCl  dengan  1 liter aquades sampai kristal NaCl tidak dapat larut lagi di dalam aquades.

## Cara Kerja

## Metode Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel kukang sumatera dilakukan  selama  20  hari  terhadap lima  ekor kukang  sumatera  bernama  Atep,  Bebeb, Harendong, Kamilo, dan Loco.
Pengambilan  sampel  dilakukan  pada  malam hari  sebanyak  3-5  gram  dari  masing-masing individu  kukang  sumatera  dengan  cara ditunggu sampai kukang melakukan defekasi.    Setelah  kukang  melakukan defekasi  diambil  fesesnya  dan  dimasukkan dalam  botol  plastik  30  ml  yang  sudah  berisi alkohol  70%,  alkohol  80%,  formalin  5%,
formalin  10%  dan  (kontrol/tanpa  larutan media). Botol plastik yang sudah dimasukkan  sampel  feses  diberi  label  dan disimpan  dalam cooler  box yang  berisi jelly pack beku.    Kemudian,  sampel  disimpan dalam  kulkas  dengan  suhu  3°C  untuk menghindari perkembangan
telur.
Pemberian  label  pada  sampel  feses  meliputi nama kukang, kondisi feses, lokasi pengambilan, waktu dan tanggal
pengambilan, cuaca, dan larutan media yang digunakan (Shaikenov et al. 2004).

## Metode Pemeriksaan Sampel
Pemeriksaan sampel feses kukang sumatera dilakukan dengan menggunakan dua metode yaitu  metode  pemeriksaan  natif  dan  metode apung.    Metode  pemeriksaan  natif  meliputi feses kukang sumatera yang sudah disiapkan,  ditimbang  sebanyak  3  gram  dan dimasukkan ke dalam gelas beaker. Kemudian  ditambahkan  57  ml  aquades dihomogenkan  dan  disaring  dengan  kain kasa  dan  ditempatkan  pada  gelas  beaker. Hasil  saringan  diambil  dengan  pipet  tetes sebanyak  3-5  tetes  di  gelas  objek  dan diperiksa  di  bawah  mikroskop  (Rinaldi et  a l. 2014).
Pemeriksaan  sampel  dengan  metode  apung meliputi  feses  segar  kukang  sumatera diambil sebanyak 2 gram dilarutkan ke dalam 3  ml  aquades  dan  dihomogenkan  di  dalam gelas beaker. Setelah itu disaring menggunakan  kain  kasa  berukuran  10x10 cm.    Kemudian  ditambahkan  10  ml  larutan NaCl jenuh dan dihomogenkan (Taylor et.al .,
2007).    Setelah  homogen  larutan  disaring kembali  dengan  kain  kasa  dan  dituang  ke dalam  tabung sentrifugasi sampai  3/4.
Tabung disentrifugasi selama  5  menit dengan  kecepatan  1500  rpm.    Setelah disentrifugasi ,  larutan  yang  terdapat  pada permukaan  diambil  dengan  spatula  dan diteteskan  di  atas object  glass .    Kemudian ditutup  dengan cover  glass dan  diperiksa  di bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  100x (okuler  x  objektif)  (Natadisastra  dan  Agoes, 2009).

## Analisis Data
Analisis  data  dilakukan  secara  deskriptif. Penentuan angka prevalensi didapat menggunakan  rumus  menurut  Gaspersz (1991):
Prevalensi = 𝑁 𝑆 x 100 %
dimana: N : jumlah kukang sumatera positif terinfeksi protozoa S : jumlah total kukang sumatera yang diperiksa
Untuk mengetahui jumlah ookista digunakan rumus menurut Colville (1991) dan Nolan (2006):
Jumlah ookista = Ookista yang ditemukan pada kamar hitung x 100 (sel/gram)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  Identifikasi  Protozoa  Usus  pada Kukang  Sumatera  ( N.  coucang )  dengan Metode Natif
Hasil identifikasi protozoa usus yang menginfeksi  kukang  sumatera  menggunakan metode natif ditemukan tiga famili dan empat jenis  protozoa  parasitik  (Gambar  1)  serta satu  famili  dan  satu  jenis  protozoa  non- parasitik (Gambar 2).
Gambar  1.  Hasil  pengamatan  protozoa parasitik  pada  kukang  sumatera (Ket:  A). Isospora sp.  (400x), B). Cryptosporidium parvum (400x), C). Entamoeba coli (400x), D). Balantidium coli (400x))
Gambar  2.    Hasil  pemeriksaan  protozoa  non parasitik    ( Oxytricha  granulifera)

## pada kukang sumatera
Perhitungan  Ookista  pada  Sampel  Feses Kukang  Sumatera  ( N.  coucang )  dengan
Metode Apung Hasil pemeriksaan sampel dengan menggunakan metode apung dari
total sampel feses diperoleh hasil bahwa sampel feses kukang sumatera positif terinfeksi ookista Eimeria sp. yang ditunjukkan pada Tabel 2.
A B D C D
Tabel 2.  Hasil perhitungan ookista pada sampel feses kukang sumatera ( N. coucang ) dengan metode apung
Keterangan:  (P.1):  Pengambilan  ke-1  ;  (U.1):  Ulangan  1;  (U.2):  Ulangan  2;  (U.3):  Ulangan  3;  (-): Tidak terinfeksi protozoa
Hasil  identifikasi  ditemukan  dua  ookista
Eimeria, sp.  pada  media  alkohol  70%  dan alkohol 80%. Hal ini kemungkinan dikarenakan  didukung  oleh  suhu  daerah ciapus bogor pada saat pengambilan sampel feses  kukang  Harendong  antara  24°-25°C sehingga  menyebabkan Eimeria sp.  dapat menginfeksi  lebih  cepat  dan  mudah  untuk mempertahankan  hidupnya.    Selain  itu  juga adanya  feses  tikus  liar  di  dalam  kandang kukang  harendong.    Hal  ini  sesuai  dengan Safar  (2010)  bahwa  infeksi  famili  Eimeriidae terjadi  karena  adanya  kontak  langsung dengan  kotoran  tikus  liar.    Infeksi  famili  ini lebih  sering  terjadi  di  negara  yang  sedang berkembang  dibanding  dengan  negara  maju dan famili Eimeriidae dapat hidup lama di air dan  tidak  dapat  bertahan  hidup  pada pengeringan.  Ookista  Eimeria  sp.  yang menginfeksi  kukang  sumatera  ditunjukkan pada Gambar 3.
(100x)
Gambar  3.    Ookista eimeria sp.  yang ditemukan pada kukang sumatera  ( N.  coucang )  dalam larutan alkohol 70% dan alkohol 80%

## Prevalensi Protozoa Usus melalui Media
Pengawet dan Konsentrasi Berbeda pada Kukang Sumatera ( N. coucang ) Prevalensi protozoa usus melalui
penggunaan media pengawet dan konsentrasi  berbeda  ditemukan  prevalensi berdasarkan  media  alkohol  80%  sebesar 13%  dibandingkan  dengan  tanpa  larutan media, media alkohol 70%, formalin 5%, dan formalin 10% (Tabel 3).
Tabel 3.  Prevalensi protozoa usus pada kukang sumatera ( N. coucang ) berdasarkan media pengawet dan konsentrasi berbeda
Prevalensi  protozoa  usus  lebih  banyak ditemukan pada media alhohol dibandingkan dengan media formalin.  Hal ini kemungkinan dikarenakan pada media alkohol tidak terlalu merusak  dinding  sel  dari  protozoa  dan  tidak menyebabkan lisis yang berlebihan.  Menurut Shields  dan  Carlson  (1996)  menyatakan bahwa  alkohol  lebih  cepat  menembus jaringan  dan  dapat  digunakan  dalam  jangka waktu yang lama dengan melakukan pergantian  tanpa  merusak  jaringan  dan mengakibatkan lisis yang berlebihan.
Sedangkan  formalin  mengawetkan  dalam jangka  waktu  lama  tanpa  pergantian.    Akan tetapi,  media  tersebut  menyebabkan  hewan- hewan kecil menjadi lisis atau hilang.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1.  Hasil  identifikasi  protozoa  parasitik  pada
feses  kukang  sumatera  menggunakan metode  natif  diperoleh  tiga  famili  yaitu
Eimeriidae, Endamoebidae,
dan
Balantiidae dengan empat spesies protozoa yaitu Isospora sp.,
Cryptosporidium parvum , Entamoeba coli , dan Balantidium  coli .    Sedangkan  hasil
identifikasi  protozoa  non  parasitik  hanya diperoleh  satu  famili  yaitu  Oxytrichidae dengan satu spesies Oxytrichia
granulifera .
2.  Hasil  jumlah  perhitungan  ookista  dengan metode  apung  ditemukan  ookista Eimeria sp. dengan jumlah 200 sel/gram.
3.  Prevalensi protozoa usus yang menginfeksi kukang sumatera pada feses yang  tidak  diberi  larutan  media  sebesar 2%, feses yang diberi alkohol70% sebesar  9,2%,  feses  yang  diberi  alkohol 80%  sebesar  13%,  feses  yang  diberi formalin  5%  sebesar  5,8%,  dan  feses yang  diberikan  formalin  10%  sebesar 5,4%.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Hindi,  A.  I.  2009. A  Practical  Guide  to Diagnostic Medical Parasitology .
Islamic  University  of  Gaza  Press. Islamic University of Gaza.
Assafa,  D.,  E.  Kibru,  S.  Nagesh,  S. Gebreselassie,  F.  Deribe,  dan  J.  Ali. 2004. Medical  Parasitology .  Ethiopia Public  Health  Training  Initiative.  The Carter Center, The Ethiopia Ministry of Health,  and  The  Ethiopia  Ministry  of Education. Pp 150.
[CITES] Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Flora and Fauna.
2007. Appendices [Internet]. Terdapat pada: http://cites.org/eng/app/appendices.ph p .  Diakses pada: 11 Nov 2015.
Colville,  J.  1991. Diagnostic  Parasitologu  for Veterinary Technicians . American Veterinery  Publications  Inc.  5782.
Thornwood,  Drive  Goleta,  California 93177. Pp 19-26. Herdaus,  D.  D.  2015.  Identifikasi  Dan Prevalensi  Protozoa  Parasitik  Pada Sampel Feses Gajah Sumatera ( Elephas  Maximus  Sumatranus )  Di Pusat Konservasi Gajah,Taman Nasional Way Kambas [Skripsi] . Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Lampung. Lampung.
[IUCN].  2013. Nycticebus  coucang :  The IUCN red list of threatened species. Geneva  (CH)  :  IUCN.  Version  2014.2 [Internet].
Terdapat
pada: http://www.iucnredlist.org/details/ 39759/0 . Diakses pada 11 Nov 2015.
Natadisastra, D., R. Agoes. 2009. Parasitologi  kedokteran:  ditinjau  dari organ  tubuh  yang  diserang .  Penerbit
buku kedokteran EGC. Jakarta.
xxi+450hlm.
Nolan,  T.  2006.  McMaster  Egg  Couting Technique [Internet].
Terdapatpada: http://cal.vet.upenn.edu/ projects/parasit06/website/mcmaster.ht m. Diakses pada 12 Nov 2015.
Rinaldi L,  Levecke  B,  Boscoa  A,  Ianniello  D, Pepe P, Charlier
J, Cringolia G,Vercruyss  J.  2014.  Comparison  of individual  and  pooled  faecal  samples
in sheep for the assessment of gastrointestinal strongyle infection inteAity  and  anthelmintic  drug  efficacy using McMaster and  Mini-FLOTAC. Veterinary Parasitology 6(11) : 1-8 .
Shaikenov BS, Rysmukhambetova AT,
Massenov  B,  Deplazes  P,  Mathis  A,
dan Torgerson  PR.  2004.  Shot  Report  :
The  use  of  a  polymerase  chain reaction to detect Echinococcus granulosus (G1  Strain)  egg  in  soil sample. American  Journal of  Tropical Medicine Hygiene . 71(4): 441-443.
Sucitrayani,  P.T.E.,  I.  B.  M.  Oka.,  M. Dwinata.  2014.  Prevalensi  Infeksi Protozoa  Saluran  Pencernaan  Pada Kucing Lokal ( Felis catus ) di Denpasar. Buletin  Veteriner  Udayana . 6(2):2085-2495.
Taylor,  M.  A.,R.L.  Coop.,  R.L.Wall.  2007.
Veterinary parasitology . 3rd ed. Blackwell  publishing  Ltd.  Oxford  :  xxvi + 874 hlm.
Yulfi,  H.  2006. Protozoa  Intestinalis .  USU Repository. Medan Sumatera Utara
. Zaman, V. 1997. Atlas Parasitologi Kedokteran edisi II. Hipokrates. Jakarta
---This page left blank---