## Sineol dalam Minyak Kayu Putih sebagai Pelangsing Aromaterapi
Irmanida Batubara 1,2* , Irma Herawati Suparto 1,2 , Fiqa Annisa Rakhmatika 1
1 Departemen Kimia, FMIPA, Institut Pertanian Bogor, Indonesia
2 Pusat Studi Biofarmaka Tropika, LPPM, Institut Pertanian Bogor, Indonesia

## ABSTRACT
Cajuput  is  one  of  plants  containing  essential  oil  with  cineole  as  a  major component.  This  aim  of  study  is  to  separate  cineole  in  cajuput  oil  and  to  analyze  its potency  as  slimming  aromatherapy  through in  vivo  assay .  The  essential  oil  was fractionated  by  column  chromatography  resulting  23  fraction  (F1-F23).  Cajuput  oil, cineole,  and  F9  were  analyzed  by  gas  chromatograph-mass  spectrometer,  and  the slimming aromatherapy potency was studied on white adult male Sprague-Dawley rats. Inhalation result of cineole showed that the average body weight of rats after 5 weeks treatment  period  was  lower  than  that  of  the  normal  and  the  control  groups  which consumed high cholesterol feed. In conclusion, cineole is a compound that is potential in slimming aromatherapy.

## PENDAHULUAN
Minyak  kayu  putih  merupakan  salah  satu  minyak  atsiri  yang  diperoleh  dari  hasil penyulingan daun kayu putih. Minyak kayu putih ini memiliki manfaat yang cukup besar, baik  bagi  perekonomian  masyarakat  sekitar  hutan  maupun  kegunaannya  sebagai  obat- obatan, bahan insektisida, dan bahan wangi-wangian (Perum Perhutani 2004). Minyak ini juga memiliki bau dan khasiat yang khas. Khasiat utama dari minyak kayu putih adalah untuk melancarkan peredaran darah dengan melebarkan pori-pori kulit sehingga badan menjadi  lebih  hangat  dan tidak  akan  mengganggu  pernafasan  kulit  karena  adanya  sifat dari  minyak  kayu  putih  yang  mudah  menguap  (Agoes  2010).  Menurut  Angela  &  Davis (2010), minyak atsiri kayu putih dapat meningkatkan monosit dalam darah tikus setelah 15 hari diberi asupan oral minyak atsiri.
Komponen  utama  dari  minyak  kayu  putih  merupakan  golongan  terpenoid. Komponen  terbesarnya  merupakan  1,8-sineol  yang  merupakan  senyawa  monoterpena. Senyawa  1,8-sineol  berperan  sebagai  antimikrob,  antioksidan,  kekebalan  tubuh, analgesik,  dan  spasmolitik  (Angela  &  Davis  2010).  Selain  itu,  senyawa  1,8-sineol  juga berpotensi  sebagai  antiinflamasi  (Juergens et  al .  2003). Kajian mengenai tanaman kayu putih khususnya senyawa 1,8-sineol sebagai pelangsing aromaterapi belum dilakukan. Di sisi lain, menghirup minyak atsiri dapat memberi efek melangsingkan seperti menghirup

## Kata Kunci
 Fraksinasi kolom
 Minyak kayu putih
 Pelangsing aromaterapi
 Sineol
Diterima 3 Maret 2016
Direvisi 12 Agustus 2016
Disetujui 29 Desember 2016

## *Penulis korespondensi
Irmanida Batubara
Pusat Stusi Biofarmaka Tropika LPPM IPB Jl. Taman Kencana No. 3, Bogor 16128 Email: ime@apps.ipb.ac.id

## Penulis

## Afiliasi
grape  fruit  oil ,  kencur,  sirih  merah,  lengkuas  merah, dan  sereh  wangi  ataupun  menggemukkan  seperti lavender oil dan minyak lempuyang (Shen et al. 2005a; Shen et al. 2005b Batubara et al. 2013; Batubara et al. 2014;  Darusman et  al. 2014;  Batubara et  al. 2015; Damayanti et al. 2015;). Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan  memisahkan  1,8-sineol  yang  terkandung dalam  minyak  atsiri  kayu  putih  dan  menganalisis potensinya  sebagai  pelangsing  aromaterapi  secara in vivo . Kandungan sineol dalam minyak atsiri kayu putih diharapkan berkhasiat sebagai pelangsing aromaterapi.

## METODE
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  minyak kayu  putih  dari  Balai  Penelitian  Rempah  dan  Obat (Balittro), Bogor, pakan standar tikus, pakan kolesterol tinggi, propylthiouracil (PTU),  akuades,  aseton, n - heksana,  metanol,  dietil  eter,etanol,  etil  asetat, kloroform, silika gel, dan pelat aluminium jenis silika gel G 60 F 254 dari  Merck.  Hewan  uji  yang  akan  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  tikus  putih  jantan  galur Sprague-Dawley yang  diperoleh  dari  Balai  Penelitian Ternak Bogor.
Metode  penelitian  yang  dilakukan  meliputi penentuan  eluen  terbaik  dengan  KLT,  pemisahan dengan  kromatografi  kolom,  identifikasi  senyawa dengan  GC-MS.  Kemudian,  inhalasi  minyak  atsiri, sineol, dan hasil pemisahan kromatografi kolom selama 5  minggu  terhadap  hewan  uji  yang  telah  melewati masa  adaptasi  selama  2  minggu.  Bobot  pakan  tiap kelompok  hewan  uji  ditimbang  setiap  hari  dan  bobot badan setiap hewan uji ditimbang setiap minggu. Pada minggu ke-5 setelah masa perlakuan, lemak  hewan uji dikeluarkan  dari  tubuhnya  untuk  ditentukan  deposit lemaknya.  Seluruh  prosedur  pada  hewan  uji  sudah disetujui oleh Komisi Etik Hewan IPB dengan nomor 04- 2013 IPB.
Sebanyak 2,5 gram minyak kayu putih dipisahkan menggunakan pengemasan kolom sebanyak 40 dengan diameter  2  cm  dan  tinggi  kolom  30  cm.  Saat pengemasan kolom, jumlah silika gel adalah 15-20 kali jumlah  distilat  dan  perbandingan  tinggi  adsorban  dan diameter  kolom  adalah  8:1.  Minyak  atsiri  kayu  putih dipisahkan  dengan  kolom  kromatografi  menggunakan elusi  gradien  (peningkatan  kepolaran),  eluen  yang digunakan  adalah  eluen  terbaik  hasil  KLT.  Eluat ditampung setiap 3 mL dalam tabung reaksi yang telah diberi nomor kemudian diuji dengan KLT menggunakan eluen  terbaik.  Spot  pemisahan  dideteksi  di  bawah
lampu  UV  dengan  λ  254  nm  dan  366  nm.  Eluat  yang memiliki  R f dan  pola  KLT  yang  sama  digabungkan sebagai satu fraksi.
Minyak  atsiri  kasar,  fraksi  9,  dan  fraksi  13  yang diperoleh  diinjeksikan  ke  dalam  injektor  GC-MS (Shimadzu-QP-5050A) dengan menggunakan kolom DB- 5  MS  (dimensi  0.25  mm  x  30  m)  dan  gas  pembawa Helium dengan laju alir 42 mL/menit. Suhu injektor dan detektor  sama,  yaitu  250  °C  sedangkan  suhu  kolom yang  digunakan  adalah  suhu  terprogram,  yaitu  diawali dengan 80 °C ditahan selama 2 menit kemudian diubah perlahan-lahan  dengan  laju  kenaikan  suhu  sebesar  5 °C/menit  hingga  suhunya  mencapai  250  °C  ditahan selama 5 menit. Kondisi spektrometer massanya adalah energi ionisasi 70 eV, mode ionisasinya adalah Electron Impact  Ionisation (EI), split  ratio :  25.0,  dan  area deteksinya  adalah  40-500  m/z.  Setiap  puncak  yang muncul  dalam  kromatogram  ion  total  diidentifikasi dengan  menganalisis  hasil  spektum  massa  yang terdapat pada library index MS.
Uji  aktivitas  aromaterapi  digunakan  tikus  putih jantan galur Sprague-Dawley yang sehat, berumur ±2.5 bulan  dengan  bobot  kisaran  167  g,  dan  berjumlah  30 ekor.  Setiap  2  ekor  ditempatkan  dalam  satu  kandang dengan ukuran 20×20×30 cm 3 . Proses adaptasi kondisi fisiologis,  nutrisi,  dan  lingkungan  tikus  tersebut dilakukan  selama  2  minggu.  Semua  kelompok  tikus diberi pakan standar tikus dengan dosis 20 g/ekor/hari dan  diberi  minum  akuades  secara ad  libitum .  Masa adaptasi  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  pengenalan lingkungan  baru  bagi  tikus  yang  akan  digunakan sebagai hewan uji.
Uji inhalasi minyak atsiri kasar, sineol, dan fraksi lain yang mengandung sineol dalam jumlah sedikit dari minyak  atsiri  kayu  putih  secara in  vivo dilakukan berdasarkan  pada  modifikasi  metode  Batubara et  al. (2013).  Kelompok  tikus  yang  dijadikan  kontrol  negatif (kelompok  I)  tetap  diberi  pakan  standar  tikus  dengan dosis  20  g/ekor/hari  dan  diberi  akuades  secara ad libitum selama  masa  perlakuan,  yaitu  5  minggu  tanpa diinhalasi.  Tikus-tikus  yang  diberi  pakan  kolesterol tinggi sebanyak 20 g/ekor/hari dikelompokkan menjadi 4  kelompok,  yaitu  kelompok  II,  III,  IV,  dan  V  serta  air minum akuades yang ditambahkan PTU 0.1% secara ad libitum. Masing-masing  kelompok  tersebut  terdiri  atas 6  ekor  tikus.  Kelompok  II  tidak  diberikan  perlakuan aromaterapi,  sedangkan  kelompok  III,  IV,  dan  V  diberi perlakuan  aromaterapi  selama  5  minggu.  Kelompok  III diinhalasi  minyak  atsiri  kasar kayu  putih,  kelompok  IV
diinhalasi  sineol,  dan  kelompok  V  diinhalasi  fraksi  lain yang mengandung sineol dalam jumlah sedikit, masing- masing  kelompok  diinhalasi  dengan  dosis  0.1%.  Bobot badan  masing-masing  tikus  dari  semua  kelompok ditimbang  seminggu  sekali.  Jumlah  feses  dan  urin  dari semua kelompok tikus ditimbang setiap tiga hari sekali.
Pada  minggu  ke-5  setelah  masa  perlakuan, masing-masing  tikus  dari  setiap  kelompok  perlakuan, yaitu kelompok I, II, III, IV, dan V dipuasakan selama 12 jam.  Tikus  disedasi  (pembiusan)  dengan  cara menyuntikkan  ketamin  (80  mg/kg  bobot  badan)  dan xilazin  (10  mg/kg  bobot  badan)  secara  intraperitoneal. Setelah  tikus  tidak  sadarkan  diri  kemudian  proses pembedahan  dilakukan.  Lemak  pada  bagian  perut kanan  dan  kiri  serta  bagian  testis  kanan  dan  kiri dikeluarkan.  Keadaan  lemak tersebut diamati, ditimbang  bobotnya,  dan  ditentukan  persentasenya terhadap  bobot  badan  tikus  masing-masing.  Data bobot  pakan  yang  dikonsumsi,  bobot  feses  dan  urin yang  dihasilkan,  bobot  badan  serta  bobot  deposit lemak  hewan  uji  yang  diperoleh  dianalisis  dengan metode  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dan Analysis  of Variance (ANOVA) pada  taraf  kepercayaan  95%  (α  = 0.05)  dilanjutkan  dengan Duncan’s  multiple  range test menggunakan SPSS 16.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Minyak  atsiri  kayu  putih  yang  digunakan berwarna  kuning  terang  dengan  Kadar  sineol  sebesar 67.74% serta memiliki wangi yang khas seperti minyak kayu  putih.  Hal  ini  sesuai  dengan  SNI  06-3954-2006 (BSN 2006) yang menyatakan bahwa minyak atsiri kayu putih  berwarna  kekuningan,  kadar  sineol  yang terkandung  lebih  besar  dari  65%  dan  memiliki  wangi yang  khas  seperti  minyak  kayu  putih  pada  umumnya. Selain  itu  juga  terkandung  -pinena  dan  o-simena dengan  kadar  sekitar  7%  (Tabel  2).  Kandungan  sineol pada  minyak  kayu  putih  yang  digunakan  jauh  lebih besar  dari  pada  kandungan  sineol  yang  terdapat  pada minyak  kayu  putih  yang  digunakan  oleh  Muchtaridi et al. (2016) yang hanya sebesar 22.45%.
Minyak  atsiri  kayu  putih  dipisahkan  dengan kromatografi  kolom  menggunakan  eluen  terbaik dengan  sistem step  gradient (peningkatan  kepolaran). Eluen  yang  digunakan  berupa n -heksana  murni, campuran  antara n -heksana  dan  kloroform  dengan perbandingan  9:1  sampai  1:9,  kloroform  murni, campuran  antara  kloroform  dan  etil  asetat  dengan perbandingan  9:1  sampai  1:9  serta  etil  asetat  murni dan dihasilkan sebanyak 23 fraksi (Tabel 1). Fraksi 9, 10, 11,  dan  13  memiliki  rendemen  terbanyak  sebesar 4.46%,  4.25%,  4.23%,  dan  2.63%  dengan  jumlah  noda
Tabel 1. Hasil Fraksinasi minyak atsiri kayu putih dengan teknik elusi gradien kromatografi kolom Fraksi ke- Jumlah noda pada KLT Bobot (g) Rendemen (%) 1 1 0.0129 0.56 2 1 0.0152 0.66 3 1 0.0138 0.59 4 1 0.0240 1.04 5 2 0.0414 1.79 6 2 0.0285 1.23 7 6 0.0442 1.91 8 4 0.0366 1.58 9 4 0.1035 4.46 10 2 0.0985 4.25 11 3 0.0981 4.23 12 3 0.0462 1.99 13 5 0.0610 2.63 14 4 0.0260 1.12 15 4 0.0200 0.86 16 2 0.0340 1.47 17 2 0.0104 0.45 18 1 0.0127 0.55 19 2 0.0142 0.61 20 2 0.0225 0.97 21 1 0.0260 0.01 22 3 0.0223 0.96 23 3 0.0155 0.67
pada  fraksi  9  sebanyak  4  noda,  fraksi  10  sebanyak  2 noda,  fraksi  11  sebanyak  3  noda,  dan  fraksi  13 sebanyak 5 noda. Pada keempat fraksi tersebut, sineol diduga berada pada fraksi 9. Fraksi 9 dan 13 dianalisis lebih  lanjut  dengan  GC-MS  untuk  diindentifikasi komponen  kimianya  dan  diuji  aktivitasnya  secara in vivo . Dengan menggunakan kromatografi gas- spektrometri  massa,  diketahui  bahwa  fraksi  9  dan  13 memiliki  kadar  1,8-sineol  sebesar  5.70%  dan  1.25% (Tabel  2).  Pada  fraksi  9,  komponen  lain  yang teridentifikasi  pada  minyak  atsiri  kayu  putih  tidak ditemukan  kembali,  namun  terdapat  komponen  lain yaitu α -terpineol dan viridiflorol dengan kadar sebesar 9.13%  dan  11.77%.  Pada  fraksi  13  menunjukkan terdapat  4  komponen  utama  yang  teridentifikasi  yaitu sineol  (1.25%),  diisooktil  adipat  (6.48%),  Cis-1,3,3- trimetil-2-oxabisiklo  [2.2.2]  oktan-5-ol  (3.69%),  dan 4,4,8-trimetiltrisiklo  [6.3.1.0(1,5)]  dodekana-2,9-diol (2.21%). Struktur senyawa dominan pada minyak  kayu
putih dapat dilihat pada Gambar 1.
Uji in  vivo dari  minyak  atsiri  kasar,  sineol,  dan fraksi  9  dilakukan  terhadap  tikus  putih  jantan  galur Sprague-Dawley selama  5  minggu  dengan  konsentrasi 0.1%. Bobot badan tikus diukur satu minggu sekali dan dipantau  perubahannya  akibat  perlakuan.  Hasilnya ditunjukkan  pada  Gambar  2.  Berdasarkan  gambar tersebut,  diketahui  bahwa  semua  kelompok  tikus memiliki  peningkatan  bobot  badan  di  setiap minggunya.  Namun,  pada  minggu  ke-1  terjadi penurunan bobot badan yang  dikarenakan tikus masih beradaptasi  dengan  pakan  kolesterol  tinggi  yang diberikan.  Pada  akhir  masa  perlakuan  terlihat  bahwa kelompok  IV  memiliki  rerata  bobot  badan  paling rendah dibandingkan dengan kelompok lainnya.
Tabel  3  menjelaskan  rerata  bobot  badan  tikus pada  awal  dan  akhir  perlakuan.  Kelompok  IV  memiliki bobot  yang  paling  rendah  (199.60  g)  dan  berbeda signifikan  dibandingkan  kelompok  lainnya  dengan  nilai
Tabel 2. Konsentrasi senyawa dominan dalam minyak atsiri kasar, F9, dan F13 Golongan Senyawa Minyak kayu putih (%) F9 (%) F13 (%) Monoterpena α -pinena 7.83 - - β -pinena 4.18 - - m-simena 2.06 - - Limonena 2.40 - - o-simena 7.45 - - Cis-1,3,3-trimetil-2-oxabisiklo [2.2.2] oktan-5-ol - - 3.69 Monoterpena alkohol 1.8-sineol 67.74 5.70 1.25 α -terpineol - 9.13 - Seskuiterpena Viridiflorol - 11.77 - 4,4,8-trimetiltrisiklo[6.3.1.0(1,5)] dodekana-2,9- diol - - 2.21 Polimer Diisooktil adipat - - 6.48
Gambar 1. Senyawa yang terkandung dalam minyak atsiri kayu putih
p<0.05.  Berdasarkan  hal  tersebut,  inhalasi  sineol berpotensi  menurunkan  bobot  badan  hewan  uji.  Efek penurunan  bobot  badan  dapat  disebabkan  oleh tergertaknya  jaringan  adipose  coklat  (Nurcholis et  al . 2013).  Tabel  4  menunjukkan  konsumsi  pakan  tikus setiap  minggu  selama  masa  perlakuan.  Berdasarkan hasil  tersebut,  terlihat  bahwa  konsumi  pakan  tikus pada kelompok II, III, IV, dan V tidak berbeda signifikan, namun  pada  kelompok  I  menunjukkan  hasil  yang berbeda  signifikan  dengan  p<0.05.  Terlihat  bahwa, kelompok  I  memiliki  konsumsi  pakan  terendah dibandingkan  dengan  kelompok  lainnya,  yaitu  sebesar 138.83  g.  Jika  dilihat,  kelompok  IV  tidak  menunjukkan
hasil  yang  berbeda  signifikan  pada  konsumsi  pakan namun  pada  hasil  penentuan  bobot  badan  justru menunjukkan hasil yang sebaliknya. Hal ini menunjukkan bahwa inhalasi sineol tidak mempengaruhi konsumsi pakan namun dapat menurunkan bobot badan tikus.
Penentuan  bobot  deposit  lemak  dianalisis  pada minggu  akhir  perlakuan  setelah  tikus  dipuasakan selama  12  jam.  Hasil  yang  didapatkan  terlihat  pada Tabel  4.  Rerata  bobot  deposit  lemak  yang  didapatkan pada  setiap  kelompok  tidak  menunjukkan  hasil  yang berbeda  signifikan  (P>0.05).  Hasil  yang  tidak  berbeda siginifikan  pada  kelompok  pakan  kolesterol  pada  5,
Gambar 2. Perubahan rerata bobot badan tikus tiap kelompok selama masa perlakuan
Tabel 3. Rerata bobot badan tikus pada awal dan akhir perlakuan
Kelompok Bobot Awal (g) (p>0.05) Bobot Akhir (g) (p<0.05) (I)     Pakan Standar 167.00±14.28 a 206.67±15.41 b (II)   Tinggi Kolesterol (TK) 170.67±12.54 a 222.50±13.56 b (III)  TK + Minyak Atsiri 161.40±14.22 a 219.00±12.66 b (IV)  TK + Sineol 155.80±8.52 a 199.60±15.53 a (V)   TK + F9 167.00±14.55 a 226.83±19.80 b
Angka yang diikuti oleh huruf superscripts yang sama tidak berbeda signifikan pada taraf uji (P>0.05) ( Duncan’s multiple range test )
Tabel 4. Rerata bobot pakan tikus perminggu (g/ekor) selama masa perlakuan dan rerata bobot deposit lemak tikus
Kelompok Jumlah pakan (g) (p<0.05) Deposit lemak (g) (p<0.05) (I)     Pakan Standar 138.83±5.72 b 2.51±0.55 a (II)   Tinggi Kolesterol (TK) 157.73±1.17 a 3.20±0.60 a (III)  TK + Minyak Atsiri 163.54±0.95 a 3.80±0.60 a (IV)  TK + Sineol 160.79±1.27 a 3.44±0.59 a (V)   TK + F9 162.31±1.10 a 4.01±0.60 a
Angka yang diikuti oleh huruf superscripts yang sama tidak berbeda signifikan pada taraf uji (P>0.05) ( Duncan’s multiple range test )
dapat  disebabkan  karena  dengan  konsumsi  kolesterol dan  lemak  lebih  tinggi,  maka  energi  berlebih  yang dihasilkan akan terdeposit dalam bentuk lemak. Hal ini terbukti dari kencenderungan pada pakan standar yang memiliki bobot deposit lemak terendah. Ganong (2003) menyatakan bahwa pemberian PTU dapat menyebabkan  terhambatnya  hormon  tiroid  yaitu dengan  mengurangi  pengeluaran  kolesterol  dari sirkulasi sehingga terjadi peningkatan kolesterol dalam darah yang tertimbun dalam bentuk lemak.

## SIMPULAN
Minyak atsiri kayu putih dipisahkan menggunakan teknik kromatografi untuk mendapatkan senyawa  penyusunnya.  Secara in  vivo inhalasi  sineol dapat  berpotensi  sebagai  pelangsing  aromaterapi tanpa mengurangi konsumsi pakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes  A.  2010. Tanaman  Obat  Indonesia .  Jakarta  (ID): Salemba Medika.
Angela  ES,  Davis  WL.  2010.  Immune-modifying  and antimicrobial effects of eucalyptus oil and simple inhalation  devices. Alternative  Medicine  Review.
15 (1):33-47.
[BSN] Badan Standarisasi Nasional. 2006. Minyak Kayu Putih . SNI 06-3954-2006. Jakarta.
Batubara  I,  Anggraeni  A,  Darusman  LK.  2013.  Inhalasi aroma  temulawak  terhadap  bobot  badan  tikus. Jurnal Bahan Alam Indonesia . 8(3):187-191. Batubara  I,  Suparto  IH,  Sadiah  S,  Matsuoka  R,
Mitsunaga  T.  2013.  The  Effect  of  Zingiber zerumbet  Essential  Oils  and  Zerumbone Inhalation  on  Body  Weight  of  Sprague  Dawley Rat. Pakistan Journal  of  Biological  Sciences.
16(19):1028-1033.
Batubara  II,  Assaat  LD,  Irawadi  TT,  Mitsunaga  T, Yamauchi  K.  2014.  Effect  Of  Sniffing  Of  Kencur (Kaemferia Galangal) Essential Oils In Rats . Acta Horticulturae. (ISHS) 1023:123-127.
Batubara  I,  Suparto  IH,  Sadiah  S,  Matsuoka  R, Mitsunaga  T.  2015.  Effects  of  Inhaled  Citronella
Oil and Related Compounds on Rat Body Weight and  Brown  Adipose  Tissue  Sympathetic  Nerve. Nutrients . 7(3):1859-1870.
Damayanti R, Batubara I, Suparto IH. 2015. Essential Oil of  Red  Galangal  ( Alpinia  galanga (L)  Willd) Rhizome as Slimming Aromatherapy. International Journal of Pharma and Biosciences .
6(1):(P)283-289.
Ganong  WF.  2003.  Buku  Ajar  Fisiologi  Kedokteran Ganong Ed. 22. Jakarta (ID): EGC.
Darusman  LK,  Batubara  II,  Utami  MR.  2014. Fractionation of active components from Piper cf fragile  essential  oil  as  aromatherapy  or  anti- obesity. Acta Horticulturae. (ISHS) 1023:23-28 Juergens  UR,  Dethlefsen  U,  Steinkamp  G,  Gillissen  A,
Repges  R,  Vetter  H.  2003.  Anti-inflammatory activity  of  1.8-cineol  (eucalyptol)  in  bronchial asthma:  a  double-blind  placebo-controlles  trial. Respiratory Medicine. 97:250-256.
Muchtaridi, Tjiraresmi A, Febriyanti R. 2016. Analysis of Active Compounds in Blood Plasma of Mice After Inhalation  of  Cajuput  Essential  Oil  ( Melaleuca laecadendron L.). Indonesian Journal of
Pharmacy. 26(4):219-227.
Nurcholis  W,  Batubara  I,  Suparto  IH,  Sadiah  S, Mitsunaga  T.  2013.  Pengaruh  inhalasi  aroma temulawak  terhadap  syaraf  simpatik  dan  suhu jaringan  adiposa  coklat. Jurnal  Bahan  Alam Indonesia. 8(4):270-273 Perum  Perhutani.  2004. Statistik  Perum  Perhutani 1999-2003 . Jakarta (ID): Direksi Perum Perhutani. Shen J, Niijima A, Tanida M, Horii Y, Maeda K, Nagai K. 2005a.  Olfactory  stimulation  with  scent  of grapefruit  oil  affects  autonomic  nerves,  lipolysis and  appetite  in  rats. Neuroscience  Letters.
380:289 – 294.
Shen J, Niijima A, Tanida M, Horii Y, Maeda K, Nagai K. 2005b.  Olfactory  stimulation  with  scent  of lavender  oil  affects  autonomic  nerves,  lipolysis and  appetite  in  rats. Neuroscience  Letters.
383:188 – 193.