Uji Resistensi Vektor Demam Berdarah Dengue terhadap Insektisida yang Digunakan untuk Fogging dan Abatisasi
di Kota Solo

## ABSTRAK

## ABSTRACT
PENDAHULUAN

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition)
ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Available online at www.biomedika.ac.id
Test of Resistance Against Dengue Hemmorrhagic Fever Vector Insecticide Used for Fogging and Abatisasi in Solo
Tri Mulyowati  dan  Edy Prasetya Fakultas Ilmu kesehatan Universitas Setia Budi
Volume 9, No. 2, September 2016
Demam Berdarah Dengue (DBD) merupakan penyakit yang disebabkan oleh Virus Dengue yang ditularkan dari orang ke orang melalui gigitan nyamuk Aedes aegypti yang merupakan vector yang paling utama dan Aedes albopictus yang merupakan vector sekunder. Tahun 2014 sampai pertengahan bulan Desember tercatat penderita DBD di 34 pro- vinsi  di  Indonesia  sebanyak  71.668  orang  dan  641  diantaranya  meninggal  dunia.  Sedikitnya  20  dari  51  Kelurahan yang ada di Kota Solo dinyatakan sebagai daerah endemis Demam berdarah diantaranya yang terbanyak adalah di Wilayah Kelurahan Kadipiro, Mojosongo dan Nusukan. Penggunaan insektisida secara terus menerus akan menimbul- kan resistensi sehingga perlu dilakukan penelitian tentang uji resistensi insektisida tersebut.Tujuan penelitian ini ada- lah  mengetahui    resistensi  vektor  DBD  terhadap  insektisida  yang  dipakai  untuk  fogging  dan  abatisasi  di  Kota  Solo, manfaat penelitian ini adalah agar hasil yang diperoleh bisa dijadikan evaluasi untuk program pengendalian vektor DBD secara tepat.
Hasil dari penelitian ini adalah Larva Ae.aegypti asal daerah lokasi 1 (Kelurahan Mojosongo) dikategorikan rentan  karena nilai rerata AV kurang  dari nilai cut off positive, sedangkan larva Ae.aegypti asal daerah lokasi 2) di- kategorikan rentan dan larva Ae.aegypti asal daerah  lokasi 3  (Kelurahan Nusukan ) dikategorikan rentan
Penelitian ini  menggunakan eksperimental laboratorium. Insektisida yang  digunakan adalah insektisida untuk fogging yaitu malathion sedangkan insektisida untuk abatisasi yaitu abate atau temefos. Uji resistensi yang dilakukan menggunakan metode Biokemis .
Kata kunci: Resistensi, insektisida, demam berdarah dengue
Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) is a disease caused by Dengue viruses are transmitted from person to person through the bite of Aedes aegypti mosquito that is the vector that is most important and Aedes albopictus which is a se- condary vector. From 2014 until mid-December recorded DHF patients in 34 provinces in Indonesia as many as 71 668 people and 641 of them died. At least 20 of the 51 village in the city of Solo declared a dengue endemic area including most of the largest in the region Village Kadipiro, Mojosongo and Nusukan. The use of insecticide continuously will cause resistance so that the necessary research on insecticide resistance test tersebut.Tujuan this study was to deter- mine the dengue vector resistance to insecticides used for fogging and abatisasi in Solo, the benefits of this research is that the results obtained can be used as an evaluation for dengue vector control program appropriately.
This study used an experimental laboratory. Insecticides are used insecticides for fogging that while insecticide malathion to abatisasi namely abate or temefos. Resistance tests were performed using biochemical methods. The results of this study are areas where the larvae Ae.aegypti origin 1 (village Mojosongo) categorized as vulne- rable as the average value of AV is less than positive cut-off value, while the larvae Ae.aegypti regional origin location 2) categorized as vulnerable and larvae Ae.aegypti origin location areas 3 (Sub Nusukan) categorized as vulnerable
Keywords: resistance , insecticide , dengue fever
Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  merupa kan penyakit yang disebabkan oleh Virus Dengue yang  ditularkan  dari  orang  ke  orang  melalui  gi-
gitan  nyamyk Aedes  aegypti yang  merupakan vektor yang paling utama dan Aedes albopictus yang  merupakan  vektor  sekunder. Tahun  2014 sampai  pertengahan  bulan  Desember  tercatat
Penelitian  tentang  uji  resistensi  vektor  de- mam berdarah dengue terhadap insektisida yang dipakai untuk fogging dan abatisasi di Kota Solo bisa  dijadikan  pihak  dinas  kesehatan  setempat untuk  evaluasi  program  dalam  pengendalian DBD  di  Kota  Solo  sehingga  insektisida  yang digunakan bisa tepat sasaran dan kasus bisa ter- kurangi.  Permasalahan  yang  akan  di  kupas  da- lam  penelitian  ini  ada  yaitu  bagaimana  status resistensi vektor demam berdarah dengue terha- dap  insektisida  yang  digunakan  untuk  fogging dan  abatisasi  di  Kota  Solo  dan  bagaimana  pe- ngaruh pemakaian insektisida yang sudah digu- nakan untuk fogging dan abatisasi terhadap vek- tor  Demam  berdarah  dengue  di  Kota  Solo.  Tu- juan penelitian ini adalah untuk Mengetahui sta- tus  resistensi  vektor  demam  berdarah  dengue
penderita DBD di 34 provinsi di Indonesia se- banyak 71.668 orang dan 641 diantaranya me- ninggal dunia (Depkes, 2015).
Sedikitnya  20  dari  51  Kelurahan  yang  ada di Kota Solo dinyatakan sebagai daerah endemis Demam  berdarah  diantaranya  yang  terbanyak adalah di Wilayah Kelurahan Kadipiro, Mojoso- ngo dan Nusukan. Bulan Januari 2015 Kelurahan Kadipiro ada 2 orang yang meninggal dan bebe- rapa  warga  terserang  penyakit  DBD  sehingga pihak  Dinas  Kesehatan  Kota  Surakarta  melaku- kan  fogging  dalam  radius  200  meter  (Dinkes Solo, 2015).
Pencegahan yang sudah dilakukan di daerah yang terkena Demam berdarah diantaranya fogg- ing dan abatisasi selain itu juga pemantauan jen- tik berkala dan abatisasi selektif yang diberikan di  area  yang  tidak  memungkinkan  dilakukan pengurasan.  Pemberantasan  Sarang  Nyamuk Massal  juga  sudah  dilakukan  setiap  tahun  pada bulan  April  dan  September  akan  tetapi  kasus Demam Berdarah Tersebut masih selalu ada dan sampai  menimbulkan  Kejadian  Luar  Biasa,  hal ini ada kemungkinan bahwa vektor demam ber- darah dengue tersebut sudah mengalami resisten terhadap insektisida yang dipakai untuk fogging dan abatasi di daerah tersebut.
terhadap insektisida yang digunakan untuk fogg- ing  dan  abatisasi  di  kota  Solo  dan  mengetahui pengaruh pemakaian insektisida yang sudah di- gunakan  untuk  fogging  dan  abatisasi  terhadap vektor Demam Berdarah Dengue di Kota Solo
Prosedur  kerja  dalam  penelitian    ini  adalah dengan pengambilan nyamuk yang ada di Kota Solo terutama daerah endemis diambil tiga kelu- rahan  yaitu  Kelurahan  Mojosongo,  Kelurahan kadipiro  dan  Kelurahan  Nusukan.  Pengujian Resistensi dengan metode Biokemis

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini  dilaksanakan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Ga- jah Mada Yogyakarta.

## Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimental la- boratorium. Insektisida yang dipakai adalah in- sektisida yang dipakai untuk fogging yaitu Ma- lathion dan insektisida yang dipakai untuk aba tisasi yaitu abate atau temefos.

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah:    Aspirator,  ovitrap,  ependof,  blue  tip, yellow  tip,  conical  tup,  pipet,  grinder,  gelas plastik, pipet, kertas s aring, kandang nyamuk, nampan plastik, batang lidi, mikroplate gambar sumuran , botol, kapas, thermometer, timer, test kit, elisa reader.

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah: larutan gula 10 %, marmut, rebusan hati ayam  yang  dipotong  –  potong  ,    larva  nyamuk hasil rearing, Aceton, PBS 0,02 ml, Fat Blue B, SDS 5 %, Aquadest, Asam asetat, Nyamuk Lab, larva nyamuk Aedes albopictus.
Prosedur Kerja
Data yang diperoleh dari hasil uji biokemis adanya variasi warna berupa intesitas warna, ha- sil reaksi enzim esterase non spesifik yang diva- lidasi dengan pembacaan spektrofotometer pada panjang gelombang 450 nm .
1. Pengambilan Nyamuk Uji
a. Nyamuk uji diambil dari telur dari ovitrap yang dipasang di rumah warga  Kelurahan Kadipiro, Kelurahan Mojosongo dan Kelu- rahan Nusukan  Kota Solo b. Telur  di bawa ke Laboratorium Parasitologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta c. Telur óang sudah terkumpul di kembangbiak- kan menjadi larva
d. Larva di beri makan hati ayam yang sudah di potong –potong
e. Setelah menjadi Pupa dipindahkan ke sang- kar nyamuk sehingga nyamuk dewasa tidak bisa terbang
f. Nyamuk dewasa di beri makan darah mencit sampai kenyang kemudia setiap hari dikasih makan air gula 10% setelah 2 sampai 3 hari dikasih ovitrap dan seterusnya sama dengan cara di atas.
2. Pengujian Resistensi dengan metode Bio- kemis
a. Larva  dan dibuat homogenate dengan pe- nambahan 0,5 ml larutan PBS
b. 50 µl homogenate dimasukkan dalam su- muran mikroplat, ditambah 50 µl substrat (α naftil asetat), dibiarkan 60 detik.
c. Ditambah 50 µl coupling reagent, reaksi di- biarkan 10 menit
d. Pada saat waråa merah berangsur – angsur berubah biru reaksi dihentikan dengan pe- nambahan 50 µl as asetat 10 %.
e. Intensitas  warna  yang  terjadi  menggambar- kan aktivitas enzim esterase non spesifik dari masing-masing  nyamuk    yang  diuji  dan  di-
f. Intensitas warna yang terjadi diukur secara kuantitatif maupun kualitatif
g. Pengukuran  secara  kuantitatif  dapat  dilaku kan  dengan  menggunakan Spektrofotometer pada λ 450 nm. Hasil pembacaan absorbance value (AV) dianalisis secara deskriptif obser- vasional  untuk  menentukan  harga cut  off positive . Penentuan harga cut off positive di- ambil  dengan  menggunakan  patokan  rerata AV kontrol negatif + 2SD

## Analisis Data
Hasil uji biokemis yang dinilai   secara kwa- litatif  dilakukan  melalui  pengamataå    terhadap perubahan  warna  yang  terjadi  pada  mikroplate, diamati berdasarkan adanya intensitas warna ha- sil reaksi enzim esterase non spesifik yang dite- tapkan  menurut  kriteria  empiris  yaitu  dengan skor 0= tidak berwarna, 1= biru muda, 2= biru kehijauan dan 3= biru tua, sedangkan yang dini- lai  secara  kwantitatif  juga  ditetapkan  menurut kriteria empiris dengan pembacaan AV menggu- nakan ELISA reader pada λ 450 nm yaitu nilai AV <0,700= rentan (SS), AV = 0,700-0,900 (to- leran/SR), AV>0,900 = resisten (RR).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
ukur secara kuantitatif menggunakan Spek- trofotometer pada λ 450 nm.
Gambar 1. Secara visual dari gambar lokasi 2 juga menunjukkan warna kuning dan biru
Uji Biokemis merupakan uji yang digunakan untuk mendeteksi resistensi nyamuk terhadap in- sektisida yang sangat esensial berdasarkan kuan- tifikasi  enzim  .  kelebihanya  informasi  status  re- sistensi  yg  diperoleh  lebih  cepat  dan  dapat  me- nunjukkan mekanisme resistensi yang diukur pa- da serangga secara individu (Soenjono, J.S, 2011 diacu dalam Widiarti, 2005). Penentuan nilai cut off positive diambil dengan menggunakan patok- an rerata AV kontrol negatif +2 SD, yaitu 0,337 + 2 (0,090) = 0,517 untuk daerah lokasi 1 .  0,541 + 2 (0,058)  = 0,657  untuk daerah lokasi 2 dan 0,176 + 2 (0,028) = 0,232  untuk daerah lokasi 3. Berdasarkan  patokan  tersebut,  maka  larva  yang berasal  dari  daerah  dapat  digolongkan  kedalam beberapa kategori, yaitu susceptible (rentan) apa- bila  nilai  rerata AV  kurang  dari cut  off  positive , resisten  sedang  (RS)  apabila  nilai  rerata AV  sa- ma  dengan  dan  lebih  besar  dari cut  off  positive dan  lebih  rendah  dari  kontrol  positif,  sedangkan resisten tinggi (RT) apabila nilai rerata AV lebih besar dari kontrol positif.
Larva Ae.aegypti asal daerah lokasi 1 (Kelu- rahan Mojosongo) dikategorikan rentan  karena nilai rerata AV kurang  dari nilai cut off positive , sedangkan larva Ae.aegypti asal daerah lokasi 2) dikategorikan  rentan  dan  larva Ae.aegypti asal daerah    lokasi  3  (Kelurahan  Nusukan)  dikate- gorikan rentan.
Tabel 1. Status kerentanan larva nyamuk Ae.aegypti dari daerah lokasi 1, lokasi 2 dan lokasi 3 di Kota Surakarta
Asal larva Jml larva Skor uji biokemis <2=SS 2,0-2,5=SR 2,6-3,0=RR Lokasi 1 30 100 % 0% 0% Lokasi 2 30 100% 0 % 0 % Lokasi 3 30 100% 0 % 0 % Kontrol - 3 100% 0% 0% Kontrol + 3 0% 0% 100%
memiliki  status  rentan  dengan  jumlah    100  %, daerah lokasi 2  memiliki status rentan dengan jumlah 100% dan daerah lokasi 3  memiliki sta- tus rentan dengan jumlah 100%.
Tabel 2. Rerata nilai Absorbance value (AV) dari aktivitas enzim esterase nonspesifik larva Ae.aegypti yang berasal dari daerah lokasi 1, lokasi 2, lokasi 3
No Asal larva Rerata AV Kontrol negatif SD 1 Lokasi 1 0,282 0,337 0,090 2 Lokasi 2 0,326 0,541 0,058 3 Lokasi 3 0,124 0,176 0,028
Berdasarkan  Tabel  2    menunjukkan  bahwa daerah lokasi 1 yang diamati menggunakan Spek- trofotometer pada  λ  450  nm  mempunyai  rerata AV sebesar 0,282 dengan   rerata kontrol negatif sebesar 0,337  dan  SD sebesar 0,090, daerah lo- kasi 2  mempunyai rerata AV sebesar 0,326, kon- trol negatifnya 0,541  dan SD sebesar 0,058, se- dangkan daerah lokasi 3  rerata AV 0,124 kontrol negatif 0,176  SD 0,028
Penelitian  sebelumnya  yang  telah  dilakukan menjelaskan  bahwa Enzim esterase non spesifik adalah enzim yang sangat penting untuk detoksi- fikasi insektisida yang bisa menyebabkan serang- ga menjadi resisten, dan meningkatnya enzim es- terase terkait adanya warna yang dihasilkan dan adanya    hidrolisis  substrat  (Widiarti  dkk,  2001. diacu dalam Yasutomi,K. 1976)
Hasil uji biokemis yang diamati secara kwa- litatif menunjukkan bahwa pada daerah lokasi 1
3 Berdasarkan tabel  di atas bahwa populasi Ae.aegypti - larva dari daerah lokasi 1 ,dikategori
-
kan rentan sebanyak 100%. Daerah lokasi 2 di kategorikan  rentan  100%,  dan  daerah  lokasi  3 - dikategorikan rentan sebesar 100%, resisten se Uji biokemis dang 0% dan resisten tinggi 0%.
Hasil  di  atas  walaupun    hasil  yang  didapat- kan  dari  ketiga  lokasi  masih  rentan  akan  tetapi pengujian status resistensi vektor demam berda- rah dengue perlu dilakukan secara berkala untuk
Tabel 3. Gambaran status resistensi larva Ae.aegypti yang berasal dari daerah lokasi 1, lokasi 2 dan  lokasi 3  di Kota Surakarta  terhadap insektisida organofosfat dengan uji biokemis
Status resistensi Wilayah penelitian Lokasi 1 Lokasi 2 Lokasi 3 Rentan 30(100%) 30(100%) 30(100%) Resistensi sedang (0%) 0(0%) 0(0%) Resistensi tinggi 0(0%) 0(0%) 0(0%) Total 30(100%) 30(100%) 30(100%)
mendapatkan  data  yang  lebih  detail  untuk  pe- mantauan terjadinya resistensi, sehingga terjadi- nya  resistensi  bisa  diketahui  lebih  awal  untuk strategi pengendalian vektor DBD.
Insektisida  yang  dipakai  untuk  fogging  dan abatisasi di daerah endemis DBD Kota Surakar- ta  masih  rentan  artinya  insektisida  tersebut  ma sih bisa dipakai untuk program selanjutnya dan belum perlu di ganti.

## KESIMPULAN
Insektisida Anonim, 2015. . . http://id.wikipedia.org/wiki/Insektisida diakses tanggal 25 maret 2015. DAFTAR PUSTAKA Widiarti,  Boewono.T.D,  Mardihusodo,J.S.  2011.  Uji  Biokimia
Kerentanan Anopheles aconitus terhadap Insektisida Orga- nofosfat dan Karbamat di kabupaten Jepara. Buletin Pene- litian Kesehatan. 29(3).
Depkes,  2015. Demam  Berdarah  Biasanya  Mulai  Meningkat  di Januari . http://www.depkes.go.id/article/view/15011700003/ demam-berdarah-biasanya-mulai-meningkat-di-januari.html. diakses tanggal 27 Maret 2015 Dinkes, 2015. DBD menyerang Solo . http://www.merdeka.com/ peristiwa/awal-tahun-dbd-menyerang-dua warga-solo-me- ninggal.html. diakses tanggal 27 Maret 2015.
Ghiffari dkk. 2013. Deteksi resistensi insektisida sintetik piretroid pada Aedes  aegypti (L  )  Strain  Palembang  menggunakan teknik Polymerase  Chain  Reaction . Aspirator Vol  5  No  2 hal 37-44.
Soenjono,J.S. 2011. Status kerentanan nyamuk Aedes sp terha- dap malathion dan aktivitas enzim esterase non spesifik di Wilayah Kerja Kantor Kesehatan Pelabuhan Bandar Udara Sam Ratulangi Manado. JKL .1(1)