Penulis Daniek Viviandhari 1  , Rini Prastiwi 1 , Elva Fitriani Puspitasari 1 , Pegi Perdianti 1 Afiliasi 1 Fakultas  Farmasi  dan  Sains,  Universitas  Muhammadiyah  Prof.  Dr.  HAMKA,  Jakarta  Timur,  DKI Jakarta, 13470
Kata Kunci  kolesterol total  LDL
 Luffa acutangula (L.)
Roxb  trigliserida
Keywords  total cholesterol
 LDL-C
 Luffa acutangula (L.)
Roxb
 triglycerides
Diterima 3 Maret 2020 Direvisi 4 Mei 2020 Disetujui 4 Juni 2020

## *Penulis Koresponding
Daniek Viviandhari email: daniek.viviandhari@uha mka.ac.id

## ABSTRAK
Data  nasional  menunjukkan  prevalensi  penyakit  jantung  koroner  sebesar  3,6%.  Prevalensi dislipidemia  sekitar  35,9%.  Dislipidemia  mempunyai  hubungan  kausal  dengan  penyakit kardiovaskular.  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya,  ekstrak  etanol  70%  buah  oyong  terbukti memiliki  aktivitas  antihiperlipidemia.  Penelitian  bertujuan  mempelajari  aktivitas  dari  fraksi ekstrak  etanol  70%  buah  oyong  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  total,  lipoprotein  densitas rendah  (LDL),  dan  trigliserida  pada  hamster  hiperlipidemia.  Sejumlah  32  ekor  hamster  dibagi menjadi  8  kelompok.  Kelompok  kontrol  negatif,  kontrol  normal,  kontrol  positif  (menggunakan atorvastatin  dosis  1,24  mg/kg  BB),  kontrol  positif  (fenofibrat  dosis  12,35  mg/kg  BB),  fraksi  n- heksan, fraksi air, fraksi etil asetat (dosis fraksi 36,75 mg/kgBB), dan ekstrak etanol (dosis ekstrak 240  mg/kgBB).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  hamster  kelompok  fraksi  (n-heksan,  etil asetat, dan air) dan kelompok  ekstrak  etanol mengalami  penurunan kadar kolesterol total, LDL, dan trigliserida. Analisis statistik menggunakan oneway ANOVA menunjukkan terdapat pengaruh pada  perlakuan  yang  diberikan  (p=0,005).  Uji  Tukey  menunjukkan  kelompok  fraksi  etil  asetat memberikan efek setara dengan kontrol positif dengan persen penurunan kadar kolesterol total, LDL, dan trigliserida berturut-turut sebesar 56,03%, 52,14%, dan 59,51%. Fraksi etil asetat  (dosis 36,75 mg/kgBB) adalah fraksi yang paling efektif  dalam  menurunkan kadar kolesterol total, LDL, dan trigliserida.

## ABSTRACT
National  data  shows  the  prevalence  of  coronary  heart  disease  is  3,6%.  The  prevalence  of dyslipidemia is around 35,9%. Dyslipidemia has a causal relationship with cardiovascular disease. Based  on  previous  research,  70%  ethanolic  extract  of  Ridge  Gourd  has  been  shown  to  have antihyperlipidemic activity. This study aimed to study the activity of 70% ethanolic extract fraction of  Ridge  Gourd  in  decreasing  the  levels  of  total cholesterol,  low-density  lipoprotein  (LDL-C),  and triglycerides  in  hyperlipidemic  hamsters.  A  total  of  32  hamster  were  divided  into  8  groups. Negative  control,  normal  control,  positive  control  (using  atorvastatin  dose  1,24  mg/kg  body weight),  positive  control  (fenofibrate  dose  12,35  mg/kg  body  weight),  ethyl  acetate  fraction,  n- hexane  fraction,  water  fraction  (fraction  doses  36,75  mg/kg  body  weight),  and  ethanol  extract group (extract dose of 240 mg/kg body weight). The results showed that fraction group (n-hexane, ethyl acetate, water) and ethanol extract group experienced a decrease in total cholesterol, LDL-C, and  triglycerides  levels.  Statistical  analysis  with  one-way  ANOVA  showed  an  effect  on  the treatment given (p = 0,005). Tukey's test showed that ethyl acetate fraction group had an effect comparable to positive control with a decrease in total cholesterol,  LDL-C, and triglycerides level by  56,03%,  52,14%,  and  59,51%  consecutively.  Ethyl  acetate  fraction  (doses  36,75  mg/kg  body weight) was the most effective fraction in reducing total cholesterol, LDL-C, and triglycerides.

## Aktivitas  Fraksi  Ekstrak  Etanol
Luffa  acutangula (L.)  Roxb.  terhadap  Penurunan Kolesterol pada Hamster Hiperlipidemia
Activity  of  Ethanol  Fraction  of  Luffa  Acutangula  (L.)  Roxb.  on  Cholesterol  Reduction  in  Dyslipidemic Hamster

## PENDAHULUAN
Penyakit  kardiovaskuler,  seperti  jantung  koroner, penyakit  jantung  rematik,  dan  lain-lain,  merupakan penyebab  pertama  kematian  di  dunia.  Setiap  tahun, lebih  banyak  orang  meninggal  akibat  penyakit kardiovaskuler dibandingkan kematian akibat penyebab yang lain (WHO, 2017). Hiperkolesterolemia, peningkatan  LDL,  dan  rendahnya  HDL  erat  kaitannya dengan  peningkatan  risiko  penyakit  jantung  koroner (PJK)  dan  morbiditas  serta  mortalitas  serebrovaskular, dimana LDL menjadi target utama (Dipiro et al. 2017).
Statin  merupakan  obat  lini  pertama  bagi  pasien hiperkolesterolemia  karena  merupakan  monoterapi yang  paling  efektif  dan cost-effective pada  pasien penyakit jantung koroner, sedangkan fibrat merupakan pilihan  utama  untuk  pasien  dengan  hipertrigliserida (Dipiro et al. 2017). Meskipun demikian, statin memiliki efek  samping  utama  yaitu  mialgia  (nyeri  otot  atau kelemahan  otot),  terutama  jika  penggunaannya bersamaan  dengan  golongan  fibrat  (Cid-Conde  & López-Castro, 2015).
Alternatif  terapi  antihiperkolesterolemia  adalah dengan obat bahan alam. Buah oyong adalah salah satu dari  sekian  banyak  tanaman  berkhasiat  obat.  Berbagai penelitian menunjukkan bahwa buah oyong berkhasiat sebagai antihiperlipidemia, antihiperglikemia, antioksidan,  antiulser,  analgetik,  antikanker,  dan hepatoprotektor  (Pimple et  al. 2011;  Pimple et  al. 2012; Juma et al. 2013; Suryanti et al. 2015; Shendge & Belemkar 2018).
Senyawa kimia yang terkandung pada buah oyong di antaranya  adalah  flavonoid,  saponin,  dan  glikosida (Velmurugan et  al. 2011).  Saponin  juga  dapat menghambat penyerapan lemak makanan di usus atau menghambat aktivitas lipase pankreas (Ossamulu et al. 2014).
Penelitian  yang  dilakukan  sebelumnya  oleh Marpaung et  al. (2015)  mengenai  efektivitas  ekstrak etanol  90%  buah  oyong  terhadap  penurunan  kadar kolesterol  total  pada  hewan  uji  tikus  putih  didapatkan persentase penurunan sebesar 30,7% pada dosis efektif 70 mg/200g BB (Marpaung et al. 2015). Penelitian lain oleh  Purwanti  (2012)  tentang  efek  antihiperlipidemia ekstrak  etanol  70%  buah  oyong  pada  hewan  uji  tikus dengan  perlakuan  diet  tinggi  kolesterol  dan  lemak didapatkan  persentase  penurunan  kolesterol  total sebesar 31,81% pada dosis efektif 40mg/ 200 g BB dan persentase penurunan trigliserida sebesar 32,17% pada dosis efektif 40 mg/200 g BB.
Berdasarkan hasil penelitian pendahuluan tersebut, akan  dilakukan  penelitian  terhadap  fraksi  ekstrak
etanol dari buah oyong terhadap hamster sirian jantan dengan  pakan  tinggi  kandungan  kolesterol.  Proses fraksinasi  merupakan  tahap  penarikan/pengambilan senyawa  dari  ekstrak  menggunakan  dua  jenis  pelarut yang  tidak  bercampur.  Fraksi  diharapkan  mampu mereduksi  kadar  kolesterol  total,  trigliserida,  dan  LDL dengan  persentase  penurunan  yang  lebih  baik dibandingkan  ekstrak.  Analisa  kuantitatif  senyawa flavonoid total juga perlu dilakukan untuk mengetahui berapa kadar flavonoid terkandung dalam buah oyong. Dalam  penelitian  ini  fraksinasi  dilakukan  untuk memisahkan  senyawa  berdasarkan  kepolarannya tergantung  pada  pelarutnya,  sehingga  diketahui  fraksi yang  efektif  untuk  menurunkan  kolesterol  total, trigliserida, dan LDL pada hewan uji hamster.
Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari aktivitas dari  pengaruh  pemberian  fraksi  ekstrak  (fraksi  etil asetat, fraksi n-heksan, fraksi air) buah oyong terhadap penurunan  kadar  kolesterol  total,  trigliserida,  dan  LDL pada  hamster  syrian  jantan  yang  tinggi  lemak  serta untuk  mengetahui  fraksi  manakah  yang  beraktivitas terbaik  untuk menurunkan  kadar  kolesterol  total, LDL, dan trigliserida.

## METODE
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Farmakologi, Laboratorium  Fitokimia,  dan  Laboratorium  Patologi Klinik,  Fakultas  Farmasi  dan  Sains  Universitas Muhammadiyah  Prof.  DR.  HAMKA  pada  bulan  April hingga  Juli  2018.  Penelitian  telah  memperoleh persetujuan  kaji  etik  nomor  02/18.09/039  dan  nomor 02/18.09/040  yang  diterbitkan  oleh  Komisi  Etik Penelitian Kesehatan Universitas Muhammadiyah Prof. Dr.  HAMKA.  Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah vacuum  rotary  evaporator (Eyela,  Jepang), vortex, waterbath, timbangan analitik (Ohaus, Jerman), oven,  blender,  kandang  hamster  jantan,  timbangan berat  badan, centrifuge, mikropipet,  mikrotube, mikroplate,  dan  fotometer  klinik  (varta-506,  Jerman), serta alat lain yang biasa digunakan pada penelitian di laboratorium.
Bahan  uji  adalah  buah  oyong.  Bahan-bahan  kimia yang digunakan dalam penelitian ini adalah pensuspensi  (Na-CMC),  kuersetin,  AlCl3,  natrium asetat, methanol, ketamin, dan pelarut yang digunakan untuk  membuat  ekstrak  dan  fraksi  yaitu  etanol  70%, etil  asetat,  n-heksan,  dan  akuades.  Selain  itu  peneliti juga  menggunakan  pereaksi  tetes  untuk  penapisan fitokimia.  Obat  pembanding  yang  digunakan  adalah atorvastatin 10 mg generik produksi PT. Hexpharm Jaya yang  dibeli  di  apotik  Generik,  Tegal  Parang  Jakarta
Selatan  dan  fenofibrat  200  mg  generik  produksi  PT Medikon Prima Laboratories Tangerang, Indonesia yang dibeli  dari  Apotek  Kimia  Farma.  Bahan  kit  diagnosis yang  digunakan  adalah  Reagen  kit  kolesterol  total, LDL,dan trigliserida (Human, Jerman). Bahan penginduksi  adalah  pakan  tinggi  lemak  (campuran kuning telur dan lemak sapi).
Hewan uji pada penelitian ini adalah hamster sirian jantan  sejumlah  32  ekor,  berumur  3-4  bulan,  dengan berat  badan  50-100  gram.  Hewan  didapatkan  dari Institut Pertanian Bogor (IPB) pada Fakultas Peternakan Bagian Non Ruminansia dan Satwa Harapan. Penelitian menggunakan 8 kelompok hewan uji yang terdiri dari 4 ekor hamster.

## 1. Pengumpulan  Bahan,  Determinasi  Tumbuhan,  dan Identifikasi Hewan
Bahan  penelitian  ini  adalah  buah  oyong.  Buah oyong  didapatkan  dari  Balitro  (Badan  Penelitian Tanaman Rempah dan Obat). Determinasi dilakukan di Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor, bagian  Herbarium  Bogoriense.  Identifikasi  hewan dilakukan  di  Laboratorium  Mamalogi  Bidang Zoologi, Pusat Penelitian Biologi-LIPI, Cibinong.

## 2. Pembuatan Ekstrak dan Fraksi Buah Oyong
Sebanyak  25  kg  buah  oyong  segar  dicuci,  lalu dirajang,  dan  dikeringkan. Setelah  didapatkan  buah oyong  kering  sebanyak  1,3  kg,  dihaluskan,  dan diayak  menggunakan  ayakan mesh 40,  sehingga didapatkan  serbuk  buah  oyong  752  gram. Selanjutnya  dimaserasi  menggunakan  etanol  70%, sehingga  didapatkan  maserat,  lalu  diuapkan pelarutnya menggunakan vacuum rotary evaporator (suhu  50°C).  Setelah  didapatkan  ekstrak  kental  lalu difraksinasi menggunakan pelarut n-heksan. Diperoleh  fraksi  n-heksan  serta  fraksi  air.  Fraksi  air lalu difraksinasi dengan pelarut etil asetat, sehingga diperoleh  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  air.  Secara keseluruhan diperoleh 3 (tiga) fraksi yaitu fraksi etil asetat, fraksi air, dan fraksi n-heksan.

## 3. Persiapan Hewan Uji
Hamster diaklimatisasi selama 7 hari. Rancangan penelitian  menggunakan  rancangan  acak  lengkap, jumlah  minimal  perkelompok  mengikuti  rumus Federer:
(t-1) (n-1) ≥ 15  ...................................................  (1) t: jumlah kelompok perlakuan uji n: jumlah pengulangan tiap perlakuan
Sehingga  hewan  percobaan  yang  digunakan dalam  penelitian  adalah  sebanyak  32  ekor,  terbagi dalam  8  kelompok  yang  terdiri  dari  4  ekor  yaitu kelompok  kontrol  negatif  (pakan  dengan  kadar lemak  tinggi  dan  Na  CMC  0,5%),  kelompok  kontrol normal  (diberi  pakan  standar  dan  Na  CMC  0,5%), kelompok  kontrol  positif  (pakan  dengan  kadar lemak  tinggi  dan  atorvastatin),  kelompok  kontrol positif  (pakan  dengan  kadar  lemak  tinggi  dan fenofibrat),  kelompok  fraksi  etil  asetat  (pakan dengan  kadar  lemak  tinggi  dan  suspensi  fraksi  etil asetat),  kelompok  fraksi  n-heksan  (pakan  dengan kadar  lemak  tinggi  dan  suspensi  fraksi  n-heksan), kelompok  fraksi  air  (pakan  dengan  kadar  lemak tinggi  dan  suspensi  fraksi  air)    yang  diberikan  dosis fraksi  36,75  mg/kgBB,  kelompok  ekstrak  etanol (pakan  dengan  kadar  lemak  tinggi  dan  suspensi ekstrak  etanol)  yang  diberi  dosis  ekstrak  240 mg/kgBB. Dosis fraksi 36,75 mg/kgBB diperoleh dari penelitian  pendahuluan  bahwa  dosis  yang  paling signifikan dari ekstrak buah oyong dalam penurunan kolesterol total  dan LDL  adalah  dosis 40 mg/  200  g BB pada hewan uji tikus (Purwanti, 2012). Kemudian dosis  dikonversi  untuk  hamster  menjadi  240 mg/kgBB.  Berat  ekstrak  kental  yang  digunakan untuk  fraksi  135,18  g.  Dosis  yang  diaplikasikan adalah  dosis  fraksi  etil  asetat  (dengan  berat  fraksi 20,7 g), maka berdasarkan perhitungan pada rumus 6, dosis fraksi etil asetat menjadi 36,75 mg/kgBB.
4. Uji  Penapisan  Fitokimia  Ekstrak  serta  Fraksi  Buah Oyong
Uji fitokimia dilakukan dengan tujuan mengidentifikasi  kandungan  alkaloid,  flavonoid, tanin,  fenol,  saponin,  terpenoid,  dan  steroid  dalam buah oyong.
5. Pemeriksaan Karakteristik Mutu Fraksi Buah Oyong Pemeriksaan  meliputi  pemeriksaan  organoleptis (pemeriksaan  bentuk,  warna,  bau,  dan  rasa), penetapan kadar air (menggunakan alat karl fischer titration),  penetapan  kadar  abu  total,  serta perhitungan rendemen.
Kadar abu (%) = ....................  (2) Rendemen ekstrak = ............................................................................ (3) Rendemen fraksi = ............................................................................ (4)
6. Perhitungan dan Penetapan Dosis Buah Oyong
Dosis ekstrak
berdasarkan penelitian pendahuluan  adalah  40  mg/200  g  BB  (Purwanti 2012). Dikonversikan ke dosis hamster menjadi 240 mg/ kg BB.
HED (mg/ kg BB) = ......... (5) Dosis fraksi etil asetat=
............................................................................ (6)
Dosis fraksi yang digunakan adalah 36,75 mg/ kg BB.

## 7. Pembuatan Sediaan Pembanding dan Sediaan Uji
Sediaan  pembanding  yang  digunakan  adalah atorvastatin dosis 1,24 mg/kg BB (Wells et al. 2015) dan  fenofibrat  12,35  mg/kg  BB  (Wells et  al. 2015). Semua  sediaan  uji  dan  pembanding  dibuat  dalam bentuk  sediaan  suspensi  menggunakan  Na-CMC 0,5%.  Dosis  ketamin  yang  digunakan  adalah  40 mg/kg BB (Pirade 2015).

## 8. Pembuatan Pakan Tinggi Lemak
Sebanyak  1,75  g  lemak  sapi  dipanaskan.  Setelah lemak meleleh, lalu ditambahkan 3,5 g kuning telur, kemudian diaduk hingga homogen. Lalu ditambahkan  air  sebanyak  15  mL  kemudian  diaduk dengan  kecepatan  tinggi  hingga  dihasilkan  korpus emulsi  kemudian  sisa  air  ditambahkan  hingga volume 100 mL dan diaduk hingga homogen. Pakan untuk  diet  tinggi  lemak  dibuat  baru  setiap  hari untuk dua minggu perlakuan.
9. Penetapan Kadar Flavonoid Total
a. Kurva Standar Kuersetin
Sebanyak  10  mg  kuersetin  dilarutkan  ke dalam  10  mL  pelarut  methanol.  Diambil sebanyak 5 mL kemudian diencerkan dengan 10 mL pelarut methanol hingga diperoleh konsentrasi 500 ppm. Konsentrasi kurva standar kuersetin yang digunakan adalah 4, 6, 8, 10 dan 12  ppm.  Dipipet  sebanyak  20  µL  dari  masing- masing  konsentrasi,  ditambahkan  20  µL alumunium  klorida  10%,  20  µL  natrium  asetat, 180 µL akuades dan diinkubasi pada suhu kamar selama  1  jam  (60  menit).  Pembacaan  absorban menggunakan microplate reader dengan panjang gelombang 415 nm (Farasat et al. 2013).
b. Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Kental
Ekstrak  kental  ditimbang  100  mg  lalu dilarutkan  dalam  10  mL  methanol  kemudian dipipet  20  µL  ke  dalam well  microplate , ditambahkan  20  µL  alumunium  klorida  10%,
20  µL  natrium  asetat,  180  µL  akuades kemudian  diinkubasi  (suhu  kamar  (25°C) selama 30 menit). Pembacaan absorban pada panjang  gelombang  415nm  (Farasat et  al.
2013).
y = bx ± a  .................................................. (7) Keterangan: y: Absorbansi sampel
x: Konsentrasi flavonoid
a, b: Konstanta
c. Pembuatan Larutan Uji Fraksi n-heksan
Fraksi  n-heksan  ditimbang  sebanyak  200 mg dilarutkan terlebih dahulu dengan DMSO, kemudian dimasukkan dalam labu ukur 10 mL kemudian  ditambahkan  metanol  hingga batas,  lalu  dipipet  20  µL  ke well  microplate, ditambahkan  20  µL  alumunium  klorida  10%, 20  µL  natrium  asetat,  180  µL  akuadest  dan diinkubasi  (suhu  kamar  (25°C)  selama  30 menit). Pembacaan absorban dilakukan triplo pada  panjang  gelombang  415  nm  (Farasat et al. 2013).
d. Pembuatan Larutan Uji Fraksi Air
Sebanyak  50  mg  fraksi  air  dilarutkan  ke dalam  10  mL  methanol  lalu  dipipet  20  µL  ke dalam well  microplate ,  ditambahkan  20  µL alumunium klorida 10%, 20 µL natrium asetat, 180  µL  akuades  dan  diinkubasi  (suhu  kamar (25°C)  selama  30  menit).  Pembacaan absorban  dilakukan  triplo  pada  panjang gelombang 415 nm (Farasat et al. 2013).
e. Pembuatan Larutan Uji Fraksi Etil Asetat
Sebanyak  20  mg  fraksi  etil  asetat dilarutkan dalam 10 mL methanol lalu dipipet 20 µL ke dalam well microplate , ditambahkan 20 µL alumunium klorida 10%, 20 µL natrium asetat, 180 µL akuadest dan diinkubasi  (suhu kamar  (25°C)  selama  30  menit).  Pembacaan absorban  dilakukan  triplo  pada  panjang gelombang 415nm (Farasat et al. 2013). =
.................................................................. (8)
Aktivitas Fraksi Ekstrak Etanol Luffa acutangula (L.) Roxb. terhadap Penurunan Kolesterol
pada Hamster Hiperlipidemia 49

## 10. Perlakuan  terhadap  Hewan  Uji  dan  Metode Pengambilan Darah
Setelah  diaklimatisasi,  hamster  diberi  pakan tinggi  lemak  selama  14  hari,  kemudian  dibius dengan ketamin i.m dan pengambilan sampel darah hewan  uji  dilakukan  via  sinus  orbitalis,  untuk dilakukan  pengecekan  kadar  kolesterol,  LDL,  dan trigliserida  awal.  Hamster  dibuat  hiperlipidemia dengan  cara  pemberian  emulsi  campuran  kuning telur (10 g) dan lemak sapi (5 g), dengan cara lemak sapi  dilelehkan,  lalu  ditambahkan  kuning  telur kemudian diaduk. Lalu ditambahkan air sebanyak 15 mL  kemudian  diaduk  dengan  kecepatan  tinggi hingga  dihasilkan  korpus  emulsi  lalu  sisa  air ditambahkan  sampai  volume  100  mL  dan  diaduk hingga  homogen.  Volume  pakan  tinggi  lemak  yang diberikan  untuk  satu  hamster  adalah  1  ml  setiap hari.  Pakan  dengan  kadar  tinggi  lemak  dibuat  baru setiap harinya untuk perlakuan selama dua minggu. Setelah  hamster  hiperlipidemia,  kemudian  diberi fraksi  etil  asetat,  fraksi  n-heksan,  fraksi  air,  dan ekstrak  etanol  70%  buah  oyong  selama  14  hari. Hamster  kemudian  diberikan  obat  pembanding atorvastatin  dan  fenofibrat  pada  kelompok  kontrol positif  secara  peroral  1x  sehari  pada  siang  hari selama  14  hari,  untuk  mengetahui  perbandingan aktivitas  penurunan  kadar  kolesterol,  LDL,  dan trigliserida  diantara  pembanding  dengan  kelompok uji  buah  oyong.  Setelah  itu,  dilakukan  pengambilan darah  untuk  mengukur  kadar  kolesterol  total,  LDL, dan trigliserida akhir.

## 11. Pengukuran  Kadar  Kolesterol  Total,  LDL,  dan Trigliserida Pada Darah Hamster
Kadar  kolesterol  total  ditentukan  menggunakan metode  enzimatik  fotometrik  atau Cholesterol Oxidase  Phenol  Aminophenazone (CHOD-PAP) dengan  pereaksi kit  dan fotometer  klinik.  Sebanyak 10 µL serum diambil menggunakan mikropipet, lalu dicampur  reagen  kolesterol  sebanyak  1000  µL  ke dalamnya.  Larutan  divorteks  lalu  diinkubasi  (suhu 25°C  selama  10  menit).  Kadar  sampel  dibaca menggunakan fotometer klinikal.
Kadar LDL diukur dengan cara mengambil serum sebanyak 100 μL, lalu dimasukkan dalam microtube dan  ditambah  reagen  pengendap  LDL  1000  μL, larutan  kemudian  divorteks  dan  diinkubasi  dengan temperatur 37°C selama 10 menit, lalu disentrifugasi selama 15 menit. Larutan didiamkan 1 jam.  Setelah  itu  diambil  supernatan  100  μL  dan dimasukkan  ke  dalam microtube, kemudian ditambah  reagen  enzim  (kit  kolesterol  total)  1000
μL. Larutan campuran lalu dihomogenkan kemudian diinkubasi  (suhu  25°C  selama  10  menit).  Kadar sampel  LDL  kolesterol  dibaca  menggunakan fotometer klinikal.
Kadar trigliserida diukur dengan cara mengambil serum  10  µL  dengan  mikropipet,  kemudian ditambahkan 1000 µL reagen trigliserida. Setelah itu vorteks  larutan  dan  inkubasi  (suhu  37°C  selama  5 menit).  Pembacaan  kadar  sampel  pada  fotometer klinikal.

## 12. Analisa Data
Persentase  penurunan  kadar  kolesterol  total, LDL, dan trigliserida dilakukan uji normalitas dan uji homogenitas.  Bila  data  termasuk  normal  dan homogen, analisa dilanjutkan menggunakan metode oneway ANOVA.  Jika  hasil  uji  analisis oneway ANOVA  terdapat  pengaruh  signifikan,  analisa  data dilanjutkan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui kelompok  yang  memiliki  perbedaan  yang  signifikan dengan  uji  Tukey  untuk  mengetahui  perbedaan antarkelompok.

## HASIL & PEMBAHASAN

## 1. Determinasi Tanaman dan Hewan
Hasil  menunjukan  bahwa  tanaman  yang digunakan adalah buah oyong ( Luffa acutangula (L.) Roxb.), termasuk dalam suku Cucurbitaceae. Hewan yang  digunakan  adalah  hamster  jantan  sirian ( Mesocricetus  auratus ).  Hamster  Syrian  cukup banyak dipilih sebagai model hewan karena mudah terjadi  hiperkolesterolemia  dari  induksi  diet  tinggi lemak  dan  mudah  dalam  penanganan,  meskipun hasil  lesi  aorta  (aterosklerosis)  inkonsisten  (Dillard et  al. 2010;  Xiangdong et  al. 2011).  Penelitian  ini belum  pada  tahap  aterosklerosis  sehingga  hamster masih cukup representatif sebagai model hewan uji.

## 2. Penapisan  Fitokimia  Fraksi  Ekstrak  Etanol  Buah Oyong
Berdasarkan  Tabel  1,  hasil  pengujian  fitokimia memberikan  hasil  bahwa  fraksi  dan  ekstrak  etanol buah oyong mengandung flavonoid, saponin, tanin, fenol,  alkaloid,  dan  steroid.  Kandungan  flavonoid terdapat  pada  semua  fraksi  dan  ekstrak  etanol. Studi  fitokimia  menunjukkan  bahwa  buah  oyong mengandung  flavonoid,  fenol,  antrakinon,  protein, asam  lemak,  saponin,  sapogenin,  asam  oleanolat, karotenoid,  triterpen,  dan komponen volatil  (Jyothi et  al. 2010; Suryanti et  al. 2015; Manikandaselvi et al. 2016;  Shendge  &  Belemkar,  2018).  Kandungan zat  aktif  yang  diduga  paling  berpotensi  untuk
menurunkan  kolesterol  adalah  flavonoid,  saponin, dan tanin.

## 3. Karakteristik Mutu Ekstrak dan Fraksi Buah Oyong
Berdasarkan  uji  organoleptis,  ekstrak  dan  fraksi buah  oyong  memiliki  bentuk  kental,  bau  khas,  rasa pahit,  dan  warna  kecoklatan.  Hasil  pengujian  kadar air  yaitu  6,62  %.  Kadar  air  yang  direkomendasikan oleh BPOM yaitu dibawah 10% (BPOM, 2014). Maka kadar air pada ekstrak dan fraksi pada penelitian ini telah  memenuhi  syarat.  Apabila  kadar  air  melebihi 10%  dapat  mengakibatkan  terjadinya  proses enzimatik  dan  juga  kerusakan  akibat  adanya mikroba.  Kadar  abu  yang  diperoleh  adalah  4,11%. Standar  mutu  yang  ditetapkan  untuk  kadar  abu yaitu  dibawah  8%  (BPOM,  2014).  Sehingga  kadar abu  yang  diperoleh  memenuhi  standar  yang ditetapkan.  Bila  melebihi  8%  maka  dapat mempengaruhi  aktivitas  biologis  buah  oyong.  Hasil perhitungan  rendemen  yaitu  rendemen  ekstrak etanol  70%  sebesar  24,2%,  rendemen  fraksi  n- heksan  3,85%,  rendemen  fraksi  etil  asetat  15,31%, dan rendemen fraksi air sebesar 96,61%.

## 4. Kadar Flavonoid Total
Penetapan kadar flavonoid total dilakukan untuk menentukan kandungan flavonoid pada fraksi buah oyong.  Persamaan  yang  didapatkan  dari  kurva kalibrasi  standar  kuersetin  (Gambar  1)  digunakan untuk menghitung kadar flavonoid total pada semua fraksi  dan  ekstrak  etanol.  Data  pada  Tabel  2 menunjukkan  bahwa  kadar  flavonoid  total  paling
tinggi  (36,42  mg  QE/gram  sampel)  terdapat  pada fraksi  etil  asetat.  Flavonoid  merupakan  senyawa semi polar sehingga mudah larut pada pelarut semi polar  yaitu  etil  asetat.  Beberapa  penelitian menunjukkan  bahwa  kandungan  flavonoid  dalam fraksi etil asetat lebih tinggi jika dibandingkan pada fraksi atau ekstrak lain (Madaan et al. 2011; Yakubu et al. 2014; Park & Kim 2017).

## 5. Kadar Kolesterol Total, LDL, dan Trigliserida
Penurunan  kadar  kolesterol  total  terbesar terdapat  pada  kelompok  kontrol  positif  serta  fraksi etil  asetat  yaitu  sebesar  62,89%  dan  56,03% (Gambar 2). Pada Gambar 3, persentase penurunan terbesar  kadar  LDL  juga  pada  kelompok  kontrol positif  dan  fraksi  etil  asetat  yaitu  sebesar  67,30% dan 52,14%. Sedangkan pada gambar 4, persentase penurunan  terbesar  kadar  trigliserida  yaitu  pada kelompok  kontrol positif dan fraksi etil asetat yaitu sebesar 66,23% dan 59,51%.
Kelompok  fraksi  etil  asetat  memiliki  aktivitas menurunkan  kadar  kolesterol  total,  LDL,  dan trigliserida  dengan  persentase  lebih  besar  daripada ekstrak  etanol,  fraksi  air,  dan  fraksi  n-heksan. Kemungkinan  besar  adalah  akibat  banyaknya kandungan  flavonoid  pada  fraksi  etil  asetat  (Tabel 2).
Tabel 1. Hasil Penapisan Fitokimia Fraksi Ekstrak Etanol Buah Oyong
No. Uji Penapisan Ekstrak Etanol Fraksi n-heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 1. Alkaloid - + - - 2. Flavonoid + + + + 3. Saponin + - + + 4. Tanin + - + + 5. Fenol + - + + 6. Terpenoid - - - - 7. Steroid - + + - Keterangan: (+) menyatakan hasil positif mengandung senyawa (-) menyatakan hasil negatif Tabel 2. Rata-Rata Penetapan Kadar Flavonoid Total Buah Oyong
Sampel Rata-Rata Kadar (mgQE/gr sampel) SD KV Ektrak Etanol 70% 8.47 0.37 4.35 Fraksi n -heksan 3.48 0.10 2.95 Fraksi Etil Asetat 36.42 0.99 2.72 Fraksi Air 21.28 0.92 4.31 Keterangan : SD: Standar Deviasi/Simpangan Baku KV: Koefisien Variasi
Gambar 1. Kurva Kalibrasi Standar Kuersetin
Gambar 2. Persentase Rata-Rata Penurunan Kadar Kolesterol Total
Gambar 3. Persentase Rata-Rata Penurunan Kadar LDL
Gambar 4. Persentase Rata-Rata Penurunan Kadar Trigliserida
Flavonoid  menurunkan  kadar  kolesterol  melalui penghambatan sintesis kolesterol dan meningkatkan ekspresi reseptor LDL, serta memperbaiki  metabolisme  kolesterol in  vivo (Zeka et al. 2017). Flavonoid merupakan antioksidan yang dapat  mengatasi  radikal  bebas  sehingga  dapat mengatasi  peroksidasi  lipid  yang  merupakan  awal terbentuknya  aterosklerosis  (Dashora et  al. 2013). Flavonoid mengatasi hiperkolesterol dengan menurunkan aktivitas HMG-CoA reductase, meningkatkan ekspresi reseptor LDL, dan meningkatkan  aktivitas  lipoprotein  lipase  serta lesitin  kolesterol  asil  transferase  (Zeka et  al. 2017). Penelitian  lain  menyebutkan  bahwa  flavonoid  dan tanin  mampu  menghambat  aktivitas  kolesterol esterase  pankreas  dan  menghambat  pembentukan misel  kolesterol,  serta  mengikat  asam  empedu (Adisakwattana & Chanathong, 2011).
Selain  kandungan  utama  flavonoid,  buah  oyong juga  mengandung  saponin  dan  tanin.  Saponin  dan tanin  diketahui  juga  dapat  menurunkan  kadar kolesterol. Tanin sebagai antihiperkolesterol diduga melalui mekanisme penghambatan absorbsi kolesterol di intestinal dan penghambatan adipogenesis.  Tanin  termasuk  antioksidan  yang berfungsi sebagai penangkal radikal bebas dan juga
mengaktifkan  enzim  antioksidan  (Kumari  &  Jain 2012).  Saponin  dapat  menghambat  penyerapan asam lemak bebas dan menghambat aktivitas lipase pankreas yang kemudian berdampak pada penurunan triasilgliserol pada usus (Ossamulu et al. 2014;  Marrelli et  al. 2016).  Penelitian  lain menyebutkan  bahwa  saponin  dapat  menurunkan kadar  kolesterol  melalui  peningkatan  metabolisme kolesterol,  menghambat  sintesis  kolesterol,  dan memfasilitasi  transpor  kolesterol  terbalik,  namun tidak  menghambat  absorpsi  kolesterol  (Chen et  al. 2017).

## 6. Analisis Statistik
Hasil  uji  awal  menunjukkan  bahwa  data terdistribusi normal dan juga homogen. Pada tabel 3 dan  4,  uji  ANOVA  satu  arah  menunjukkan  nilai  P  = 0,005  (p  ≤  0,05)  yang  bermakna  pemberian  fraksi ekstrak  buah  oyong  mempunyai  pengaruh  secara signifikan pada turunnya kadar kolesterol total, LDL, dan  trigliserida  pada  hewan  uji.  Uji  Tukey menunjukan  data  persentase  penurunan  kadar kolesterol  total,  LDL,  dan  trigliserida  darah  pada kontrol positif (atorvastatin/fenofibrat) tidak mempunyai perbedaan bermakna dengan kelompok fraksi  etil  asetat,  namun  memiliki  perbedaan bermakna  dengan  kontrol  normal,  kontrol  negatif,
Tabel 3. Hasil Penapisan Fitokimia Fraksi Ekstrak Etanol Buah Oyong
Kelompok Hamster Kadar Kolesterol Total (mg/dl) Kadar LDL (mg/dl) Awal Akhir % Penurunan Awal Akhir % Penurunan Kontrol Normal Rata-rata 164.00 163.25 0.35 89.50 92.00 -2.45 SD 13.14026 10.50000 2.64479 19.20930 22.00000 4.53099 KV 8.01236 6.43185 761.08940 21.46290 23.91304 -185.30880 Kontrol Negatif Rata-rata 520.50 531.25 -15.92 263.25 330.00 -53.19 SD 42.61846 30.31363 3.69387 54.59770 56.53907 4.32817 KV 8.18799 5.70610 -163.80810 20.73980 17.13305 -16.64522 Kontrol Positif (atorvastatin) Rata-rata 443.50 156.75 64.46 294.75 86.75 69.30 SD 45.58874 18.55397 4.51956 55.50000 15.47847 9.12741 KV 10.27931 11.83666 7.01169 18.82950 17.84262 13.17038 Fraksi n -heksan Rata-rata 547.75 473.75 13.57 268.25 219.50 16.75 SD 36.00347 53.64932 7.00684 76.86510 44.03407 6.69905 KV 6.57298 11.32439 51.64430 28.65420 20.06108 40.00030 Fraksi Air Rata-rata 492.25 320.50 35.39 244.00 167.50 29.74 SD 89.27999 75.90564 5.32753 83.23860 49.19010 10.43071 KV 18.13712 23.68350 15.05589 34.11410 29.36722 35.07008 Fraksi Etil Asetat Rata-rata 428.25 186.75 56.03 199.00 104.00 52.09 SD 56.12700 9.74252 3.760381 43.69590 7.52773 10.67389 KV 13.10610 5.21687 6.71137 21.95700 7.23819 20.48830 Ekstrak Etanol 70% Rata-rata 351.00 164.75 28.89 186.25 132.75 29.36 SD 32.40370 35.51877 5.19485 39.26300 39.86121 8.90458 KV 9.23182 21.55919 17.98148 21.08080 30.02728 30.33413 P Value 0.005 0.005
fraksi  air,  fraksi  n-heksan,  dan  ekstrak  etanol  70%. Artinya,  fraksi  etil  asetat  memiliki  kemampuan untuk menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, dan LDL paling efektif.

## SIMPULAN
Fraksi ekstrak (etil asetat, n-heksan, dan air) dengan dosis  36,75  mg/kgBB  dan  ekstrak  etanol  dengan  dosis 240  mg/kg  BB  buah  oyong  memiliki  aktivitas menurunkan kadar kolesterol total, LDL, dan trigliserida pada  hamster  model  hiperlipidemia.  Fraksi  etil  asetat dosis  36,75  mg/kgBB  merupakan  fraksi  yang memberikan efek sebanding dengan kontrol positif dan merupakan fraksi yang paling efektif dalam menurunkan  kadar  kolesterol  total,  LDL,  dan trigliserida.  Perlu  penelitian  lanjutan  terkait  uji toksisitas  dan  isolasi  senyawa  aktif  yang  berkhasiat sebagai  antihiperlipidemia,  mengingat  belum  pernah dilakukan  uji  ini  agar  didapatkan  isolat  senyawa  aktif dari  fraksi  sebagai  antihiperlipidemia  dan  dapat dilanjutkan tahap formulasi sediaan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adisakwattana  S  and  Chanathong  B.  2011.  α- glucosidase  inhibitory  activity  and  lipid-lowering mechanisms  of  Moringa  oleifera  leaf  extract. Eur Rev  Med  Pharmacol  Sci .  15:803–808.  PMID: 21780550.
[BPOM]  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan.  2014. Peraturan  Kepala  BPOM  tentang  Persaratan  Mutu Obat Tradisional. BPOM RI.
Chen Z., Yan-Li L, Wen-Ping W, Ya-Ya L, Yan-Hua L, Jing H, Jin H, and Hong S. 2017. Effects of Saponin from Trigonella Foenum-Graecum Seeds on Dyslipidemia. Iranian  Journal  of  Medical  Sciences . 42(6):577–585. PMCID: PMC5684379, PMID: 29184266.
Cid-Conde
L. and López-Castro J. 2015.
Hypercholesterolemia  —  Statin  Therapy  — Indications,  Side  Effects,  Common  Mistakes  in Handling,  Last  Evidence  and  Recommendations  in Current
Clinical Practice. England (44): Hypercholesterolemia, Sekar Ashok Kumar, IntechOpen. DOI: 10.5772/59622.
Dashora  N,  Chauhan  LS  and  Kumar  N.  2013. Luffa
Acutangula (Linn.)  Roxb.  var. Amara (Roxb.)  A
Consensus  Review.  4(2):835–846. International

## Tabel 4. Pengukuran Kadar Trigliserida dan Uji Statistik
Kelompok Hamster Kadar Trigliserida (mg/dL) Awal Akhir % Penurunan Kontrol Normal Rata-rata 135.00 132.25 2.03 SD 17.83 17.85 3.04 KV 13.20 13.50 149.70 Kontrol Negatif Rata-rata 419.00 465.00 -11.10 SD 33.41 28.71 2.53 KV 7.97 6.17 -22.79 Kontrol Positif (fenofibrat) Rata-rata 460.75 157.25 66.23 SD 58.56 40.32 5.38 KV 12.71 25.64 8.13 Fraksi n -heksan Rata-rata 412.75 354.25 14.27 SD 57.91 54.08 2.20 KV 14.03 15.26 15.47 Fraksi Air Rata-rata 371.25 242.25 34.59 SD 40.40 20.54 2.88 KV 10.88 8.48 8.33 Fraksi Etil Asetat Rata-rata 413.50 165.00 59.51 SD 82.37 31.37 1.21 KV 19.92 19.01 2.03 Ekstrak Etanol 70% Rata-rata 422.00 311.00 26.03 SD 66.31 41.81 4.09 KV 15.71 13.44 15.72 P Value 0.005
Journal of Pharma and Bio Sciences . 4(2):835 – 846. ISSN 0975-6299.
Dillard  A,  Matthan  NR  and  Lichtenstein  AH.  2010.  Use of  hamster  as  a  model  to  study  diet-induced atherosclerosis. Nutrition and Metabolism . 7(1): 89. DOI: 10.1186/1743-7075-7-89.
DiPiro  JT,  Robert  LT,  Gary  CY,  Gary  RM,  Barbara  GW,
Posey LM. 2017. Pharmacotherapy: A
Pathophysiologic  Approach.  USA  (1):McGraw-Hill Education.
Farasat M., Ramazan-Ali KN, Seyed MBN, and Foroogh N. 2013. Antioxidant Properties of two Edible Green Seaweeds from Northern Coasts of the Persian Gulf. Jundishapur  Journal  of  Natural  Pharmaceutical Products .  8(1):47–52.  PMCID:PMC3941885,  PMID: 24624186.
Juma A., Mst Rabeya P, Md Shamim AA, Md Rashedul I, Sk Mizanur R, Md Zahirul K, Inin T, ABM Anwarul B, Mohammed  R.  2013.  Antihyperglycemic  and Antinociceptive  Activity  of  Methanolic  Extract  of Luffa  acutangula Fruits. Adv.  in  Nat.  Appl.  Sci. 7(78):435–441.
Jyothi  V,  Srinath  A,  and  Jyothi  A.  2010.  The Pharmacognostic,
Phytochemical and
Pharmacological  Profile  of  Luffa  Acutangula. International  Journal  of  Pharmacy  and  Technology . 2(4):512–524.
Kumari  M  and  Jain  S.  2012.  Tannins:  An  Antinutrient with  Positive  Effect  to  Manage  Diabetes. Research Journal of Recent Sciences. 1(12):70–73.
Madaan  R,  Bansal  G,  Kumar  S  and  Sharma  A.  2011.
Estimation  of  Total  Phenols  and  Flavonoids  in Extracts  of  Actaea  spicata  Roots  and  Antioxidant Activity  Studies. Indian  Journal  of  Pharmaceutical Sciences . 73(6):666–669. DOI: 10.4103/0250-
474X.100242
Manikandaselvi  S,  Vadivel  V.  and  Brindha  P.  2016. Review  on Luffa  acutangula L.:  Ethnobotany, phytochemistry, nutritional value and pharmacological properties. International Journal of Current  Pharmaceutical  Review  and  Research . 7(3):151–155. ISSN: 0976 822X.
Marpaung  MP,  Rusli  R,  dan  Fitriani  VY.  2015.    Efek Penurunan  Kadar  Kolesterol  Total  Ekstrak  Etanol Buah  Oyong,  hlm  147–154.  Proceeding  of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences (Prosiding Seminar Nasional Kefarmasian). Volume I. Samarinda  (62):  Fakultas  Farmasi,  Universitas Mulawarman.  DOI:  10.25026/mpc.v1i1.20.  ISSN: 2614-4778.
Marrelli M, Conforti F, Araniti F, Statti GA. 2016. Effects of  Saponins  on  Lipid  Metabolism:  A  Review  of Potential  Health  Beneﬁts  in  the  Treatment  of Obesity. Molecules. 21(1404:20. DOI: 10.3390/molecules21101404.
Ossamulu  IF,  Helmina  OA,  Ali  AJ;  Evans  CE,  Henry  YA. 2014. Hypolipidemic Properties of Four Varieties of Eggplants  (Solanum  melongena  L.). International Journal  of  Pharmaceutical  Science  Invention . 3(8):47–54. ISSN (Online): 2319 – 6718, ISSN (Print): 2319 – 670X.
Park M. and Kim M.  2017. Analysis of Antioxidant and Anti-Inflammatory  Activities  of  Solvent  Fractions from Rhynchosia nulubilis Cultivated with Ganoderma lucidum Mycelium . Preventive Nutrition and Food Science . 22(4):365–371. DOI:
10.3746/pnf.2017.22.4.365.
Pimple BP, Kadam PV, and Patil MJ. 2011. Antidiabetic and  Antihyperlipidemic  Activity of Luffa  Acutangula Fruit Extracts In Streptozotocin Induced Niddm Rats. Asian  Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research . 4(2): 156–163.
Pimple  BP,  Kadam  PV,  and  Patil  MJ.    2012.  Protective effect  of  Luffa  acutangula  extracts  on  gastric ulceration  in  NIDDM  rats:  Role  of  gastric  mucosal glycoproteins and antioxidants. Asian Pacific Journal of  Tropical  Medicine.  Hainan  Medical  College. 5(8):610–615.  DOI:  10.1016/S1995-7645(12)60126- 6.
Pirade  FP.  2015.  Perbandingan  Pengaruh  Anestesi Ketamin-Xylazin  dan  Ketamin-Zoletil  terhadap Fisiologis  Kucing  Lokal  (Felis  domestica).  [Skripsi]. Makassar  (ID):  Fakultas  Kedokteran,  Universitas Hassanudin.
Purwanti  S.  2012.  Efek  Antihiperlipidemia  Ekstrak Etanol 70% Buah Oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) pada  Tikus  Putih  Jantan  yang  diberi  Diit  Tinggi Kolesterol dan Lemak. [Skripsi]. Depok (ID): Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Indonesia.
Shendge  PN  and  Belemkar  S.  2018.  Therapeutic potential  of  luffa  acutangula:  A  review  on  its traditional uses, phytochemistry, pharmacology and toxicological  aspects. Frontiers  in  Pharmacology . 9:1177. DOI: 10.3389/fphar.2018.01177.
Suryanti  V,  Marliyana  SD  dan  Wulandari  T.    2015. Antioxidant  activity,  total  phenolics  and  flavonoids contents  of Luffa acutangula (L.) roxb fruit. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research . 7(1):220– 226.
Velmurugan  V,  George  S,  Surekha  P.  2011. Phytochemical  and  Biological  Screening  of  Luffa cylindrica  Linn  Fruit. International  Journal  of PharmTech Research . 3(1):1582–1585.
Wells  BG,  DiPiro  JT,  Schwinghammer  TL,  DiPiro  CV. 2015.  Pharmacotherapy  Handbook  Ninth  Edition. New York (US): McGraw Hill Education.
[WHO]  World  Health  Organization.  2017.  Cardio- Vascular  Diseases.  May  2017:1–6.  Available  at: https://www.who.int/news-room/fact- sheets/detail/cardiovascular-diseases-(cvds).
Xiangdong L, Yuanwu L., Hua Z, Liming R, Qiuyan L, Ning L.  2011.  Animal  models  for  the  atherosclerosis
research:  A  review. Protein  and  Cell .  2(3):189–201. DOI: 10.1007/s13238-011-1016-3.
Yakubu OE, Nwodo OFC, Joshua P, Nnaemeka UM, Odu AD, Okwo F. (2014) Fractionation and determination of total antioxidant capacity, total phenolic and total flavonoids  contents  of  aqueous,  ethanol  and  n- hexane  extracts  of  Vitex  doniana  leaves. African Journal  of  Biotechnology .  13(5):693–698.  DOI: 10.5897/ajb2013.13225.
Zeka K, Ketan R, Randolph RJA, Roberta B, and Matteo M.  2017.  Flavonoids  and  Their  Metabolites: Prevention in Cardiovascular Diseases and Diabetes.
Diseases . 5(3):19. DOI: 10.3390/diseases5030019.