## ABSTRAK

## ABSTRACT

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition) ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Volume 10, No. 02, September 2017
Siomai merupakan salah satu makanan pokok yang menggunakan bahan pelengkap (tambahan) makanan berupa saus. Pada saat sekarang ini banyak siomai yang dijual dengan menggunakan sepeda ontel yang ditaruh di bagian belakang sepeda. Akan tetapi dalam kenyataannya kebersihan dari siomai sering juga terabaikan salah satunya karena banyaknya udara dan debu yang masuk ke makanan siomai. Penelitian ini mempunyai tujuan utuuk menguji adanya cemaran bakteri Coliform yang terdapat pada olahan saus yang dijual sebagai pelengkap makanan pada siomai dan mengidentifikasi  adanya  kandungan  bakteri  Escherichia  coli  yang  terdapat  pada  olahan  saus  yang  dijual  sebagai pelengkap  makanan  siomai.  Metode  penelitian  ini  adalah  penelitian  survey  lapangan  dengan  pengambilan  sampel secara acak dan deskriptif untuk mengetahui keberadaan bakteri Coliform pada beberapa produk olahan saus yang terdapat  pada  makanan  siomai.  Pengambilan  sampel  penelitian  dilakukan  mengambil  10  sampel  olahan  saus  dari makanan siomai yang ada di area kampus di Surakarta. Pemeriksaan bakteri Coliform dilakukan di Laboratorium Biologi UNS, Surakarta dengan uji most probable number (MPN), uji Escherichia coli dan pewarnaan gram. Dari uji Most Probable Number melalui uji praduga dan penegasan sampel uji coba menunjukkan hasil positif Coliform, dari hasil pewarnaan gram bakteri yang ditemukan termasuk ke dalam golongan bakteri gram negatif dan dari hasil uji biokimia  bakteri-bakteri  yang  ditemukan  pada  sampel  termasuk  spesies  Enterobacter  dan  Escherichia  coli.  Hasil pengujian yang didapat dari semua uji tidak memenuhi syarat yang telah ditetapkan dalam SNI 01-3546-2004 tentang
2 batas maksimum Angka Lempeng Total (ALT) pada saus tomat adalah 2 x 10  koloni/g sedangkan menurut Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia nomor HK. 00.06.1.52.401, batas maksimum Most Probable Number (MPN) Coliform pada saus tomat adalah 100 koloni/g.

## Kontaminasi Bakteri Coliform pada Saus Siomai dari Pedagang Area Kampus di Surakarta
Contamination of Coliform Bacteria from Seller in Surakarta's University Area
Liss Dyah Dewi Arini  dan Rahaju Muljo Wulandari *
APIKES Citra Medika Surakarta
* Corresponding author: leeansz_fortune@yahoo.com
Kata kunci : olahan saus siomai, most probable number, uji biokimia, pewarnaan gram, coliform
Siomai is one food that use complementary materials (additional) that is sauce. At the present time, siomai sold bicycle that was placed on the back of bicycle. But in the reality, the siomai becomes less clean because of the amount of dust and dirty air entered into the siomai, and often this problem is ignored. This research have a goal to test the existence of Coliform bacteria contaminationon sauce that sold for complementary food especially for siomai, and to identify the content of Escherichia coli bacteria that found in sauce preparations that sold for complementary siomai.This research method is a survey field research with random sampling and descriptive to know the existence of Coliform bacteria in some of the processed products of sauce contained in siomai food. Sampling for this research is done by taking 10 sample sauce from siomai food that's all around campus in Surakarta. Coliform bacterial examination was performed at Biology Laboratory of UNS, Surakarta with the most probable number (MPN) test, Escherichia coli test and gram staining. From the test of Most Probable Number through test of presumption and confirmation of test sample showed positive result of Coliform, from the result of gram staining of bacteria found belonging to class of gram negative bacteria and from biochemical test result of bacteria found in samples including Enterobacter species and Escherichia coli .Test results obtained from all tests do not meet the requirements specified in SNI 01-3546-2004 about the maximum number of total plates while according to the Regulation of the Head of the Food and Drugs Agency of the Republic of Indonesia HK number. 00.06.1.52.401, the maximum limit of most probable number (MPN) coliform in tomato sauce is 100 coloni/g.
Keywords: processed siomai sauce, most probable number, biochemical test, gram stain, coliform
kan setiap hari untuk memenuhi kebutuhan bagi pemeliharaan,  pertumbuhan,  kerja  dan  peng-
Makanan adalah bahan-bahan yang dima-
Kontaminasi bakteri patogen pada makanan dan  minuman  dapat  menyebabkan  berbagai macam  penyakit  diantaranya  typhoid,  diare, keracunan  makanan  dan  lain  sebagainya (Siagian,  2002).  Penyakit-penyakit  ini  akan lebih mudah menjangkiti orang yang mengalami penurunan daya tahan tubuh karena faktor dari dalam (intrinsik) maupun dari luar (ekstrinsik). Oleh karena itu, untuk  menjamin kesehatan dan keselamatan  konsumen,  harus  dilakukan pemeriksaan laboratorium bakteriologik secara berkala (Lesmana, 2003).
Saus yang seharusnya mengandung gizi dan vitamin yang baik untuk tubuh yang didapat dari buah  tomat,  cabai  dan  bumbu-bumbu  serta rempah-rempah  yang  di  gunakan,  dengan pengolahan yang sehat dan benar tanpa menam-
gantian sel tubuh yang rusak ( 2012). Sugianto,
Namun  pangan  juga  dapat  sebagai  sarana penggangu  kesehatan  bagi  manusia  karena pangan  dapat  terkontaminasi  oleh  cemaran fisik,  kimia  maupun  mikrobia.  Makanan berfungsi  untuk  memelihara  proses  tubuh dalam  pertumbuhan  atau  perkembangan  serta mengganti  jaringan  tubuh  yang  rusak, memperoleh energi untuk melakukan aktivitas sehari-hari,  mengatur  metabolisme  dan berbagai keseimbangan air, mineral, dan cairan tubuh  yang  lain,  juga  berperan  di  dalam mekanisme pertahanan tubuh terhadap berbagai penyakit  (Notoatmodjo,  2003).  Akan  tetapi makanan  juga  sering  terkontaminasi  oleh kontaminan kimia dan kontaminan biologi.
Salah satu kontaminan biologi yang paling sering  dijumpai  pada  makanan  adalah  bakteri golongan Coliform yaitu Escherichia  coli . Echerichia coli berasal dari tinja manusia dan hewan,  tertular  ke  dalam  makanan  karena perilaku  penjamah  yang  tidak  higienis, pencucian  peralatan  yang  tidak  bersih, kesehatan  para  pengolah  dan  penjamah makanan  serta  penggunaan  air  pencuci  yang mengandung coliform , E. coli ,  dan  faecal coliform (Susanna dan Hartono, 2003).
bahkan zat-zat berbahaya tapi pada olahan saus yang dijual secara bebas, yang berlabel maupun tidak  berlabel,  harga  mahal,  standar,  hingga harga/kg,  menambahkan  berbagai  zat  berba- haya di dalamnya dengan cara pengolahannya yang  sangat  menjijikan  penggunaan  pepaya busuk berbelatung, kulit singkong yang sudah busuk  juga  serta  penggunaan  zat  pengawet, MSG  berlebihan,  zat  pewarna  tekstil,  boraks dan  formalin.  Dan  saus-saus  yang  tercemar mikroba yaitu Coliform, S. aureus , dan kapang berdam-pak  buruk  bagi  kesehatan  tubuh masyarakat yang mengkonsumsinya (Karlah, et al. , 2014).
Bahan  makanan  merupakan  kebutuhan manusia  yang  sangat  mendasar  karena berpengaruh terhadap eksistensi dan ketahanan hidup  manusia.  Pangan  dalam  UU  RI  No.  7 tahun  1996  diartikan  sebagai  segala  sesuatu yang  berasal  dari  sumber  hayati  dan  air,  baik yang  diolah  maupun  tidak  diolah,  yang diperuntukkan sebagaimakanan atau minuman bagi  konsumsi  manusia,  termasuk  bahan tambagan  pangan,  bahan  baku  pangan danbahan  lain  yang  digunakan  dalam  proses penyiapan,  pengolahan  dan  atau  pembuatan makanan atau minuman (Kartika et al., 2004).
Saus tomat adalah cairan kental (pasta) yang terbuat  dari  bubur  buah  berwarna  menarik (biasanya merah), mempunyai aroma dan rasa yang  merangsang.  Walaupun  mengandung  air dalam  jumlah  besar,  saus  mempunyai  daya simpan  panjang  karena  mengandung  asam, gula,  garam  dan  seringkali  diberi  pengawet. Saus  tomat  dibuat  dari  campuran  bubur  buah tomat  dan  bumbu-bumbu.  Pasta  ini  berwarna merah  muda  sesuai  dengan  warna  tomat  yang digunakan (Imelda, 2009).

## Bahan Makanan
Bahan Makanan dan Siomai
Gangguan Kesehatan Akibat Bahan makanan Bahan  pangan  dapat  bertindak  sebagai
perantara  atau  substrat  untuk  tumbuhnya mikroorganisme  yang  bersifat  patogenik terhadap  manusia.  Penyakitmenular  yang cukup berbahaya seperti tipes, kolera, disentri, TBC,  poliomilitis  dengan  mudah  disebarkan melalui  bahan  pangan.  Sebagai  akibat  dari meningkatnya  perjalanan  dan  perdagangan pangan  secara  internasional,  maka  penyakit yang  disebabkan  bahan  pangan  dari mikroorganisme telah menjadi perhatian utama dunia (Djaja, 2003).
Makanan  tidak  saja  bermanfaat  bagi manusia,  tetapi  juga  sangat  baik  untuk pertumbuhan  mikroba  yang  patogen.  Oleh karena  itu,  untuk  mendapat  keuntungan  yang maksimum  dari  makanan,  maka  sanitasi makanan  harus  dijaga.  Gangguan  kesehatan yang  dapat  terjadi  akibat  makanan  dapat dikelompokkan  menjadi  keracunan  makanan dan penyakit bawaan (Siahaya et al. , 2016).
d.    Kontaminasi Mikroba
Makanan  juga  dapat  terkontaminasi  oleh mikroba.  Beberapa  mikroba  pembuat  racun baik exotoxin maupun endotoxin, adalah yang tergolong Salmonella,  Staphylococcus, Clostridium,  Bacillus  cocovenans,  Bacillus cereus .

## Kontaminasi Mikroba
Makanan  juga  dapat  terkontaminasi  oleh mikroba.  Beberapa  mikroba  pembuat  racun baik exotoxin maupun endotoxin, adalah yang tergolong Salmonella,  Staphylococcus, Clostridium,  Bacillus  cocovenans,  Bacillus cereus (Kusumaningsih, 2010).
Uji Most Probable Number (MPN) Coliform MPN adalah metode pemeriksaan air yang dilakukan  untuk  mengetahui  kontaminasi akibat  bakteri Coliform dan Coli tinja.  Peng-
a.  Keracunan Bahan Makanan
Keracunan,  secara  spesifik  diartikan  seba- gai  keadaan  yang  menimbulkan  gangguan gastrointestinal  (GI)  yang  mendadak,  dalam waktu  2-40  jam  setelah  makan  dengan  me- nimbulkan gejala muntah-berak, dapat bertahan 1-2 hari atau 7 hari atau lebih. b.  Penyakit Bawaan Bahan Makanan
Bahan makanan yang beracun (asli) seperti tanaman yang mengandung HCN, asam oxalate dan  fluor  organic  (singkong,  caladium, dieffenbachia,  poinsettia,  philodendron); berbagai  jenis  jamur Amanita,  Helvella ; pembentuk  mycotoxin: Aspergillus  flavus, Penicillium ,  dan Fusarium ;  algae, seperti Pyrrophyceae, Cyanophyceae, Chrysophyceae ; hewan,  seperti  invertebrata  ( dinoflagelata, anemones, starfish, sea cucumber ), vertebrata
( balloon  fishes,  fugu  fishes,  hati  hiu )  dan mamalia.
c.    Diare
Penyakit  diaremerupakan  salah  satu penyakit  berbasis  lingkungan.  Penyakit  diare
tinja berbentuk cair atau setengah cair (setengah padat),  kandungan  air  tinja  lebih  banyak  dari biasanya lebih dari 200 g atau 200 ml/24 jam. Diare infeksi dapat disebabkan Virus, Bakteri, dan  Parasit.  Diare  akut  sampai  saat  ini  masih merupakan  masalah  kesehatan,  tidak  saja  di negara berkembang tetapi juga di negara maju. Penyakit diare masih sering menimbulkan KLB (Kejadian  Luar  Biasa)  dengan  penderita  yang banyak  dalam  waktu  yang  singkat.  Tingginya kejadian  diare  disebabkan  karena  foodborne infections  dan  waterborne  infections  yang d i s e b a b k a n   b a k t e r i   S a l m o n e l l a   s p p , Campylobacter  jejuni,  Stafilococcus  aureus, Bacillus  cereus,  Clostridium  perfringens dan Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC).
masih merupakan masalah kesehatan terbesar di Indonesia  karena  masih  buruknya  kondisi sanitasi  dasar,  lingkungan  fisik  maupun rendahnya  perilaku  masyarakat  untuk  hidup bersih dan sehat. Hal ini berkaitan dengan faktor makanan,  imunitas  terhadap  infeksi  dan ketergantungan psikologi.
Diare adalah buang air besar (defekasi) dengan
amatan sampel yang positif dapat dilihat dengan mengamati  adanya  kekeruhan  dan  gelembung gas pada sampel (Sunardi, 2014).
Uji Escherichia coli
Empat  tahap  analisis  untuk  pengujian Escherichia coli adalah Uji Pendugaan dengan metode  MPN (most  probable  number),  Uji penguat  pada  medium  selektif,  Uji  lengkap dengan  medium  lactose  broth,  serta  Uji Identifikasi  denganmelakukan  reaksi IMViC (indol,  methyl  red,  Vogues-Praskauer,  dan citrate). Jadi untuk dapat menyimpulkan E. coli berada  pada  air  atau  makanan  diperlukan seluruh  tahapan  pengujian  di  atas.  Apabila dikehendaki untuk mengetahui serotipe dari E. coli yang diperoleh untuk memastikan apakah E.coli tersebut patogen atau bukan maka dapat dilakukan  uji  serologi.  Meskipun  demikian, beberapa  serotipe  patogen  tertentu  seperti O157:H7 yang ganas tidak dapat diuji langsung dengan pengujian 4 tahap ini dan memerlukan pendekatan  analisis khusus  sejak  awal  (Cut Nuria, 2009).

## Pewarnaan Gram
Pewarnaan gram ini bertujuan untuk mlihat bakteri  bersifat  gram  positif  atau  negatif  dan bentuknya. Pewarnaan Gram atau metode Gram a d a l a h   s u a t u   m e t o d e   e m p i r i s   u n t u k membedakan  spesies  bakteri  menjadi  dua kelompok  besar,  yakni  gram  positif  dan  gram negatif,  berdasarkan  sifat  kimia  dan  fisik dinding  sel  mereka.  Metode  ini  diberi  nama berdasarkan  penemunya,  ilmuwan  Denmark Hans  Christian  Gram  (1853–1938)  yang mengem-bangkan  teknik  ini  pada  tahun  1884 untuk  membedakan  antara pneumokokus dan bakteri Klebsiella pneumonia (Lestari, 2012).
Pada  uji  pewarnaan  Gram,  suatu  pewarna penimbal  (counterstain)  ditambahkan  setelah metil ungu, yang membuat semua bakteri gram negatif  menjadi  berwarna  merah  atau  merah muda.  Pengujian  ini  berguna  untuk  mengkla-
Natrium  Clorida  (NaCl), Lactose  Broth (LB) Merck, aquadest, Briliant Green Lactose Bile 2% (BGLB) Broth, Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) HIMEDIA, Nutrient Agar (NA) Merck, Kliger Iron Agar (KIA), Sulfida, Indol and  Motility  (SIM),  Simmons  Citrate  Agar, Lysin  Iron  Agar  (LIA),  Kristal  Violet,  Lugol, Alkohol 96% OneMed dan Safranin.

## Cara Kerja
Pengujian Angka Lempeng Total (ALT)
Sampel dipipet sebanyak 25,0 ml ke dalam erlenmeyer  yang  telah  berisi  225  ml  larutan pengencer Natrium Clorida (NaCl) dan dikocok sampai  homogen.  Selanjutnya  dilakukan pengenceran secara serial sehingga didapatkan yang  sesuai. Dari  masing-masing hasil pengenceran  sampel  dipipet 1,0  ml  ke  dalam cawan petri steril, kemudian dituangkan 15-20 ml media Plate Count Agar (PCA), yang telah d i c a i r k a n   d a n   d i d i n g i n k a n   h i n g g a temperaturnya 45 (Karlah, 2014). °C Percobaan  dilakukan secara  triplo  dan disertakan cawan petri yang mengandung media dan larutan pengencer yang tidak mengandung sampel sebagai  kontrol  uji  (blanko).  Setelah media membeku,  inkubasi  cawan  petri  pada

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat
Bahan
sifikasikan  kedua  tipe  bakteri  ini  berdasarkan perbedaan struktur dinding sel mereka (Lestari, 2012).
Autoclave All American No.75X, Laminar Air  Flow  OMRON  H3BA,  Memmert  Modell 200  incubator,  Microscoph  Olympus  CX21, Adam  Pgw  1502i  Precision  Balance,  Cimarec Hotplate,  Brand  Micropipette,  Lemari Pendingin,  Jarum  Ose,  Spritus,  bule  tip,  Kaca Preparat Sail Brand, Kacapenutup Sailing Boat dan alat-alat gelas Pyrex.
suhu 37 C selama 24 jam dengan posisi terbalik. °
Dihitung koloni yang tumbuh pada setiap cawan petri. Angka total bakteri dalam 1 gram sampel adalah  dengan mengalikan  jumlah  rata-rata koloni  pada cawan  petri  dengan  faktor pengenceran yang digunakan (Karlah, 2014).

## Pengujian  Most  Probable  Number  (MPN) Coliform
Pengujian MPN dilakukan dua tahap, yaitu Uji Praduga ( Presumtif Test ) yang kemudian dilan- jutkan  dengna  Uji  Penegasan  (C onfirmative Test ).
1.    Uji Praduga
Ditimbang  25  gram  sampel  kemudian ditambahkan 225 ml Lactose Broth (LB) Merck dan  dikocok  homogen  hingga  diperoleh suspensi  dengan  pengenceran  10-1.  Disiapkan dua  tabung  reaksi  masing-masing  berisi  9  ml LB.  Dari  hasil  homogenisasi  pada  penyiapan -1 sampel dipipet 1 ml pengenceran 10  ke dalam tabung  LB  pertama  hingga  diperoleh  suspensi
-2 dengan  pengenceran  10   dan  dikocok  sampai homogen kemudian dibuat pengenceran hingga
-3 10  (Karlah, 2014).
Untuk  setiap  pengenceran  disiapkan  3 tabung  reaksi  berisi  9  ml Lactose  Broth (LB) yang  dilengkapi  tabung  durham  kedalam  tiap tabung dari masing-masing seri dimasukkan 1 ml suspensi pengenceran. Diinkubasi pada suhu 35-37°C  selama  24-48  jam.  Setelah  24  jam dicatat dan diamati perubahan warna biakan dan adanya gas yang terbentuk di dalam tiap tabung. Kemudian untuk tabung yang tidak membentuk gas  diinkubasi  dilanjutkan  hingga  48  jam  dan dicatat  tabung-tabung  yang  menunjukkan  uji positif (warna biakan menjadi kuning dan ada gas dalam tabung durham) (Karlah, 2014). 2.   Uji Penegasan
Biakan  tabung  yang  menunjukkan  uji praduga  positif  dipindahkan  satu  sengkelit  ke dalam tabung reaksi berisi 10 ml Briliant Green Lactose  Bile 2%  (BGLB) Broth yang  telah dilengkapi  tabung  durham.  Seluruh  tabung
diikubasi  pada  suhu  37°C  selama  24-48  jam. Dilakukan  pengamatan  adanyapembentukan gas.  Pernyataan  hasil  uji  MPN Coliform ini yaitu  jumlah  tabung  yang  positif  dicatat  dan dirujuk pada tabel MPN. Angka yang diperoleh menyatakan jumlah bakteri coliform dalam tiap gram/tiap ml sampel yang diuji (Karlah, 2014).
Identifikasi Escherichia Coli
Masing-masing  biakan  positif  pada  uji konfirmasi  bakteri coliform ,  diambil  satu sengkelit dan diinokulasikan pada media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA), dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam (Imelda, 2009). Dipilih koloni warna hijau dengan kilap logam dan bintik biru kehijauan dari media EMBA dan digoreskan  pada  media  miring Nutrient Agar (NA).  Setelah  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama  24  jam  selanjutnya  dilakukan  uji biokimia  untuk  identifikasi Escherichia coli dengan  uji  IMViC  (Indol, Methyl  Red , Voges- Proskauer, dan Citrate ) (Wang, 2011).

## Pewarnaan Gram Bakteri
Biakan  media  miring  NA  pada  uji Eschericia  coli dan  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37°C.  Secara  aseptis  diambil  1  ose sampel  diletakkan  pada  masing-masing  kaca preparat  kemudian  sampel  dipanaskan  diatas api Bunsen hingga terfiksasi. Satu tetes kristal violet diteteskan di atas kaca preparat tersebut kemudian  didiamkan  selama  30  detik.  Setelah itu,  kaca  preparat  dibilas  dengan  aquades (Lestari, 2012).
Larutan  Lugol  diteteskan  di  atas  kaca preparat kemudian didiamkan selama 1 menit. Setelah  itu,  kaca  preparat  dibilas  dengan aquades.  Kemudian  diteteskan  etanol  95%  di atas kaca preparat kemudian didiamkan selama 30  detik.  Setelah  itu,  kaca  preparat  dibilas dengan  aquades  mengalir  hingga  warnanya hilang.  Teteskan  1  tetes  safranin  di  atas  kaca preparat kemudian didiamkan selama 1 menit. Setelah  itu,  kaca  preparat  dibilas  dengan
5)   Medium Simmon Citrate
a) Mensterilkan jarum ose dengan cara mem- fiksasi ujungnya.
b) Mengambil tabung yang berisi bakteri dan mensterilkan mulut tabung dengan menggu- nakan api bunsen.
c)  Mengambil  bakteri  dengan  cara  mema- sukkanj  arum  ose  ke  dalam  tabung  yang berisi sampel bakteri.
d)  Mengambil  tabung  reaksi  berisi  medium simmon  citrate,  kemudian  mensterilkan mulut  tabung  dengan  menggunakan  api bunsen.
e)  Memasukkan  bakteri  ke  medium  dengan cara  hanya  dioleskan  di  permukaan  tanpa ditusuk.

## Uji Biokimia
Uji  Biokiimia  dilakukan  dengan  menggu- nakan  media  KIA,  SIM,  LIA  dan  Citrate.  Uji Biokimia dilakukan dengan cara sebagai berikut 1)   Mengambil Bakteri
a) Mensterilkan  tangan  menggunakan  sabun anti septik.
b) Mensterilkan jarum ose loop dan jarum ose needle  dengan  cara  dipanaskan  di  atas  api bunsen  sampai  ujung  jarum  ose  needle memerah.
c) Mengambil sampel bakteri.
2)   Medium SIM
a) Mensterilkan  jarum  needle  dengan  cara memfiksasi ujungnya.
b) Mengambil tabung yang berisi bakteri dan mensterilkan  mulut  tabung  dengan  meng- gunakan api bunsen.
c) Mengambil  bakteri  dengan  cara  mema- sukkan jarum needle ke dalam tabung yang berisi sampel bakteri.
d) Mengambil  tabung  reaksi  berisi  medium SIM, dan mensterilkan mulut tabung dengan menggunakan api bunsen.
e) Memasukkan  bakteri  ke  medium  SIM dengan  cara  inokulasi  yaitu  jarum  tegak menusuk  media  sampai  menembus  bawah tabung.
f)  Mensterilkan mulut tabung kembali dengan menggunakan  api  bunsen  lalu  menutup mulut tabung dengan kapas.
3)   Medium KIA
a)  Mensterilkan  jarum  needle  dengan  cara mengfiksasi ujungnya.
b) Mengambil tabung yang berisi bakteri dan mensterilkan  mulut  tabung  dengan menggunakan api bunsen.
c)  Mengambil  bakteri  dengan  cara  mema- sukkan jarum needle ke dalam tabung yang berisi sampel bakteri.
d) Mengambil  tabung  reaksi  berisi  medium KIA, kemudian mensterilkan mulut tabung dengan mengagunakan api bunsen.
e)  Memasukkan  bakteri  ke  medium  dengan cara memiringkan jarum needle sampai me- nyentuh bagian pinggir dari dasar tabung.
f)  Mensterilkan mulut tabung kembali dengan menggunakan  api  bunsen  lalu  menutup mulut tabung dengan kapas.
4)   Medium LIA
a)  Mensterilkan  jarum  needle  dengan  cara mengfiksasi ujungnya.
b) Mengambil tabung yang berisi bakteri dan mensterilkan  mulut  tabung  dengan  meng- gunakan api bunsen.
c)  Mengambil  bakteri  dengan  cara  mema- sukkan jarum needle ke dalam tabung yang berisi sampel bakteri.
d)  Mengambil  tabung  reaksi  berisi  medium LIA, kemudian mensterilkan mulut tabung dengan menggunakan api bunsen.
e)  Memasukkan  bakteri  ke  medium  dengan cara  memiringkan  jarum  needle  sampai menyentuh  bagian  pinggir  dari  dasar tabung.
f)  Mensterilkan mulut tabung kembali dengan menggunakan  api  bunsen  lalu  menutup mulut tabung dengan kapas.
aquades mengalir. Setelah pembilasan terakhir, kaca preparat dikeringkan dan diamati di bawah mikroskop (Lestari, 2012).

## Uji Escherichia coli
Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  kultur bakteri  pada  media  EMBA  berwarna  hijau metalik (Karlah et al. , 2014).
Pewarnaan Gram
Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  peng- amatan preparat dengan pewarnaan safranin dan kristal  violet  di  bawah  mikroskop,  bekteri tampak berwarna merah (bakteri gram negatif) (Karlah et al. , 2014).
Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  kultur bakteri  pada  tabung  reaksi  di  dalam  tabung durham terdapat ruang kosong yang berisi udara yang  panjangnya  minimal  ada;ah  sepertiga panjang tabung durham (Karlah et al. , 2014).
Uji Biokimia Hasil posotif Escherichia coli ditunjukkan dengan  uji  KIA    muncul  warna  merah(positif mengandung  Indol)    pada  kultur  bakteri  dan positif Coliform jika  pada  uji  KIA  tidak  ada sulfide  (tidak  ada  warna  hitam  pada  kultur bakteri)  dan  pada  uji  SIM  minimal  terdapat motilitas  atau  pergerakan  dari  bakteri.  Untuk identifikasi  bakteri  dengan  uji  biokimia  KIA, SIM,  LIA  dan  Citrate  yang  merupakan  media penentu identifikasi bakteri adalah pada uji KIA dan SIM, sedangkan uji LIA dan Citrat sifatnya memperkuat  hasil  uji  KIA  dan  SIM (Laboratorium Mikrobiologi USB, 2017).

## HASIL
Hasil penelitian disajikan pada tabel I (Hasil MPN Coliform Uji Praduga Pada Saus Siomai), tabel  2  (Hasil  MPN Coliform Uji  Penegasan Pada Saus Siomai ), tabel 3 (Hasil Identifikasi Coliform ) dan tabel 4 (Hasil Uji Biokimia pada Uji KIA, SIM, LIA dan Citrate).
1.  Hasil  Pengujian  Most  Probable  Number (MPN) Coliform (Tabel 1,2 dan Gambar 1,2) 2.   Hasil Uji Identifikasi Escherichia coli (Ta- bel 3 dan Gambar 3)
3.   Hasil Pewarnaan Gram (Gambar 4)
4.   Hasil Uji Biokimia (Tabel 4 dan Gambar 5,
6, 7, 8)

## Objek Penelitian
Obyek penelitian adalah tujuh sampel saus siomai  yang  didapatkan  dari  penjual  siomai keliling yang ada di kampus di area Surakarta yang diambil secara acak (random sampling).

## Variabel Penelitian
Variabel-variabel  dalam  penelitian  ini meliputi:
1. Variabel Bebas
Variabel  bebas  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah pengenceran sampel saus
-1 -2 -3.
yaitu peng-enceran 10 , 10 , 10
2. Variabel Terikat Variabel terikat dalam penelitian ini adalah jumlah koloni bakteri dan jenis bakteri.
3. Variabel Terkendali
Variabel  terkendali  dalam  penelitian  ini adalah  variabel  yang  diusahakan  sama  untuk setiap perla-kuan meliputi suhu inkubasi, waktu inkubasi, dan jenis media.

## Cara Pengumpulan Data

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan menggunakan:
Uji Most Probable Number 1)  Uji Praduga
Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  kultur bakteri  pada  tabung  reaksi  di  dalam  tabung durham terdapat ruang kosong yang berisi udara yang  panjangnya  minimal  ada;ah  sepertiga panjang tabung durham (Karlah et al. , 2014).
2)  Uji penegasan

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  UPT  Labo- ratorium  Terpadu    Universitas  Sebelas  Maret Surakarta.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan Juli-Agustus 2017.
f) Mensterilkan mulut tabung kembali dengan menggunakan  api  bunsen  lalu  menutup mulut tabung dengan kapas.
No Sampel Coliform (APM/gr) Coliform (APM/100 gr) Standar Coliform (APM/100 gr) Keterangan 1 2 35 3500 100 TMS 2 3 35 3500 100 TMS 3 4 35 3500 100 TMS 4 5 35 3500 100 TMS 5 6 35 3500 100 TMS 6 7 35 3500 100 TMS 7 8 35 3500 100 TMS
Sumber : Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia nomor HK. 00.06.1.52.4011 Tahun 2008 Keterangan : APM/gr : Angka Paling Mungkin/gram TMS : Tidak Memenuhi Syarat

## SP 1           SP 2           SP 3            SP 4            SP 5              SP 6          SP 7            KN
Keterangan: SP : Sampel; KN : Kontrol Negatif
Gambar 1. Hasil MPN Coliform Uji Praduga Pada Saus Siomai Tabel 2. Hasil MPN Coliform Uji Penegasan Pada Saus Siomai No Sampel Coliform (APM/gr) Coliform (APM/100 gr) Standar Coliform (APM/100 gr) Keterangan 1 1 >1100 >110000 100 TMS 2 2 >1100 >110000 100 TMS 3 3 9,2 920 100 TMS 4 4 >1100 >110000 100 TMS 5 5 >1100 >110000 100 TMS 6 6 >1100 >110000 100 TMS 7 7 >1100 >110000 100 TMS
Sumber : Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia nomor HK. 00.06.1.52.4011 Tahun 2008 Keterangan : APM/gr : Angka Paling Mungkin/gram TMS : Tidak Memenuhi Syarat
SP 1         SP 2          SP 3       SP 4            SP 5            SP 6         SP 7           KN Keterangan : SP : Sampel; KN : Kontrol Negatif
Gambar 2. Hasil MPN Coliform Uji Penegasan Pada Saus Siomai
Tabel 1. Hasil MPN Coliform Uji Praduga Pada Saus Siomai
Tabel 3. Hasil Identifikasi Coliform
No Sampel Warna Kultur Keterangan 1 2 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 2 3 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 3 4 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 4 5 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 5 6 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 6 7 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik + 7 8 biru kehitaman dengan kilat hijau logam/metalik +
Keterangan : + : Positif Coliform

## SP 1                       SP 2                          SP 3                      SP 4

## SP 5                     SP 6 SP 7                       KN
Keterangan : SP : Sampel; KN : Kontrol Negatif Gambar 3. Hasil Identifikasi Coliform
SP 1                               SP 2 SP 3                                 SP 4 SP 5                           SP 6                          SP 7 Keterangan : SP : Sampel
Gambar 4. Hasil Pengamatan Pewarnaan Gram Bakteri pada Mikroskop
No Sampel KIA SIM LIA Citrate Keterangan 1 2 A/AG S- - - + A/AG S- + Enterobacteria 2 3 A/AG S- - - + K/AG S- + Enterobacteria 3 4 A/AG S- - + + K/A S- + Escherichia coli 4 5 A/AG S- - - + K/A S- + Enterobacteria 5 6 A/AG S- - - + K/A S- + Enterobacteria 6 7 A/AG S- - - + K/A S- + Enterobacteria 7 8 A/AG S- - - + K/A S- + Enterobacteria
Tabel 4. Hasil Uji Biokimia pada Uji KIA, SIM, LIA dan Citrate
Keterangan : A/AG S-  : atas asam, bawah asam, ada gas, tidak ada sulfida - - +         : sulfida tidak ada, indol tidak ada, motilitas ada - + +         : sulfida tidak ada, indol positif, motilitas ada - - -          : sulfida, indol dan motilitas tidak ada A/AG S-   : atas asam, bawah asam, ada gas, tidak ada sulfida K/AG S-   : atas basa, bawah basa, ada gas, tidak ada sulfida
K/A S-      : atas basa, bawah asam, tidak ada sulfida +               : positif Coliform
SP 2        SP 3      SP 4      SP 5         SP 6         SP 7          SP 8     Kontrol Keterangan : SP : Sampel
Keterangan : SP : Sampel Keterangan : SP : Sampel
Keterangan : SP : Sampel
Gambar 5.  Hasil Uji Biokimia pada Uji KIA
SP 2           SP 3       SP 4       SP 5             SP 6           S P 7           SP 8
Gambar 6.  Hasil Uji Biokimia pada Uji SIM
SP 2         SP 3       SP 4     SP 5          SP 6           SP 7           SP 8   Kontrol
Gambar 7.  Hasil Uji Biokimia pada Uji Citrate
SP 2           SP 3        SP 4        SP 5            SP 6          SP 7          SP 8

## Identifikasi Escherichia coli
EMBA  bersifat  selektif  differensial  dalam menumbuhkan Escherichia  coli karena  dalam media ini mengandung eosin yang dapat meng- hambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dan hanya  dapat  menumbuhkan  bakteri  gram  ne- gatif. Laktosa dan zat pewarna eosin serta me- tilen  blue  mampu  membedakan  antara  bakteri yang  memfermentasir  laktosa  dengan  non- fermenter.  Koloni Escherichia  coli tersebut kelihatan biru kehitaman dengan kilat hijau lo- gam/metabolik  yang  disebabkan  besarnya kuantitas  asam  yang  dihasilkan  dan  pengen- dapan  zat  pewarna  di  atas permukaan  per- tumbuhan.
Media  Eosin  Methylene  Blue mempunyai keistimewaan  mengandung  laktosa  dan  ber- fungsi  untuk  memilah  mikroba  yang  mem- fermentasikan  laktosa  seperti S.  aureus,    P. aerugenosa, dan Salmonella .  Mikroba  yang mem-fermentasi  laktosa  menghasilkan  koloni dengan inti berwarna gelap dengan kilap logam. Sedangkan  mikroba  lain  yang  dapat  tumbuh koloninya  tidak  berwarna.  Adanya  eosin  dan metilen  blue  membantu  mempertajam  perbe- daan tersebut. Namun demikian, jika media ini digunakan pada tahap awal karena kuman lain juga  tumbuh  terutama P.aerugenosa dan Salmonella  sp. dapat  menimbulkan  keraguan. Bagaiamana  pun  media  ini  sangat  baik  untuk mengkonfirmasi  bahwa  kontaminan  tersebut adalah E.coli (S.N., 2014).

## PEMBAHASAN
Pengujian Most Probable (MPN) Coliform Pengujian MPN menggunakan media Lactose Broth (LB) dan tabung durham. LB merupakan media pembenihan selektif, di dalam media ini mengandung  laktosa  dan  garam  empedu  (bile salt)  yang  mengidentifikasi  adanya  bakeri Coliform yang tumbuh. Coliform adalah kelom- pok bakteri gram negatif berbentuk batang yang pada  umumnya  menghasilkan  gas  jika  ditum- buhkan  dalam  medium  laktosa  dan  terben- tuknya asam ditandao dengan perubahan warna biakan  menjadi  putihatau  kuning.  Tabung durham  digunakan  untuk  mengetahui  adanya pembentukan  gas  oleh  bakteri  yang  terdapat dalam sampel tersebut. Tahap ini masih meru- pakan uji presumtif (Cho et al ., 2010).
Media  yang  digunakan  untuk  mengetahui ada tidaknya kehadiran bakteri coliform (bakteri Gram negatif) berdasarkan terbentuknya asam dan  gas  yang  disebabkan  karena  fermentasi laktosa  oleh  bakteri  golongan coli .  Terben- tuknya asam dilihat dari kekeruhan pada media laktosa  dan  gas  yang  dihasilkan  dapat  dilihat dalam tabung durham berupa gelembung udara. Tabung  dinyatakan  positif coliform jika  ter- bentuk  gas  sebanyak  10%  atau  lebih  dari  vo- lume  di  dalam  tabung  durham  (Pertiwi et  al. , 2016).
Uji  konfirmasi  digunakan  media  selektif yaitu Brilliant Green Lactose Bile 2% (BGLB). Selain  mengandung  laktosa,  BGLB  juga mengandung Brilliant  Green yang  dapat menghambat  pertum-buhan  bakteri  Gram positif.
Berdasarkan Tabel 1 dan 2 di atas menun- jukkan  bahwa  sepuluh  (7)  saus  siomai  yang diperiksa  mengandung  bakteri Coliform yang diperiksa mengandung bakteri Coliform dengan jumlah bakteri Coliform yang tidak memenuhi syarat  mutu  kesehatan  yang  tercantum  dalam Peraturan  Kepala  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  Republik  Indonesia  nomor  HK. 00.06.1.52.4011  yaitu  maksimal  100  APM/g.
Adanya  bakteri Coliform di  dalam  makan- an/minuman  menunjukkan  kemungkinan adanya mikroba yang bersifat enteropatogenik dan  atau  toksigenik  yang  berbahaya  bagi kesehatan.
Agar EMBA merupakan media padat yang dapat  digunakan  untuk  menentukan  jenis bakteri coli dengan  memberikan  hasil  positif dalam tabung. EMBA yang menggunakan eosin dan  metilen  blue  sebagai  indikator  membe- rikanperbedaan yang nyata antara koloni yang meragikan laktosa dan yang   tidak. Untuk me-
ngetahui jumlah bakteri E.coli umumnya digu- nakan tabel  Hopkins yang lebih dikenal dengan nama MPN (Most Probable Number) atau tabel JPT (jumlah perkiraan terdekat), tabel tersebut dapat digunakan untuk memperki-rakan jumlah

## Pewarnaan Gram
Dari Gambar 4 dapat diketahui bahwa bakteri yang  terlihat  dari  hasil  pengamatan  di  bawah mikroskop adalah bakteri berwarna merah sete- lah proses pewarnaan. Hal ini disebabkan kare- na perbedaan struktur dinding sel. Dinding sel bakteri Gram negatif mengandung lipida yang tinggi, sehingga sewaktu pencucian dengan la- rutan  pemucat  menyebabkan  pembesaran  lu- bang pori-pori dan meningkatkan permeabilitas zat  warna.  Pencucian  menyebabkan  kompleks zat  warna  pertama  terlepas.  Sedangkan  pada dinding  sel  bakteri  Gram  positif  mengandung lipida  rendah,  sehingga  sewaktu  penambahan alkohol terjadi dehidrasi dan pengecilan lubang pori-pori. Hal ini yang menyebabkan zat warna tetap terikat dan sel tetap berwarna ungu (Karlah et al. , 2014).
Pada  sel  Gram-negatif,  alkohol  mening- katkan porositas dinding sel dengan melarutkan lipid lapisan luar. Oleh sebab itu, efek pencucian alkohol  membuat  sel-sel  menjadi  kehilangan warna atau tidak berwarna. Karena hanya sel-sel Gram  negatif  yang  mengalami  kehilangan warna  sehingga  sel-selnya  menyerap  pewarna tandingan.  Sedangkan  Gram-positif  memper- tahankan  warna  ungu  dari  pewarna  primer (Bambang et al. , 2014).
nik lain (Bambang et al. , 2014). Contoh bakteri Coliform adalah Esherichia  coli dan Entereobacter  aerogenes. Bakteri Coliform menghasilkan  zat  ethionine  yang  pada  pene- litian  menyebabkan  kanker.  Bakteri-bakteri pembusuk  ini  juga  memproduksi  bermacam- macam racun seperti Indole, skatole yang dapat menimbulkan  penyakit  bila  berlebih  di  dalam tubuh.  Adanya  bakteri Coliform di  dalam makanan  menunjukkan  kemungkinan  adanya mikroba  yang  bersifat  enteropatogenik  dan toksigenik  yang  berbahaya  bagi  kesehatan (Aditia dan Muthiadin, 2015).
Bakteri Coliform adalah  bakteri  indikator keberadaan  bakteri  patogenik  lain.  Lebih tepatnya,  sebenarnya,  bakteri Coliform adalah bakteri  indikator  adanya  pencemaran  bakteri patogen. Penentuan Coliform menjadi indikator pencemaran  dikarenakan  jumlah  koloninya pas-ti  berkorelasi  positif  dengan  keberadaan bakteri  patogen.  Selain  itu,  mendeteksi Coliform jauh  lebih  murah,  cepat,  dan sederhana daripada mendeteksi bakteri patoge-
Uji  biokimia  dilakukan  dengan  uji  KIA, SIM,  Citrate  dan  LIA  digunakan  untuk  me- ngetahui jenis Coliform yang terdapat di dalam sampel. Hasil yang didapatkan menunjukkan se- mua  sampel  sampel  1,  2,  4,  5,  6  dan  7  me- ngandung Enterobacter di dalamnya dan sampel 3  mengandung  bakteri Escherichia  coli .  Pada Uji  SIM  jika  indol  menunjukkan  hasil  positif (ditunjukkan  dengan  adanya  wrana  merah) mengandung  arti  bahwa  sampel  mengandung Escherichia coli . Hasil uji biokimia dapat dilihat pada Tabel 4.
Uji KIA hasil yang didapatkan adalah A/AG S-,  A/AG  S-,  A/AG  S-,  A/AG  S-,  A/AG  S-, A/AG S-, A/AG S-, yang artinya adalah bahwa pada  ketujuh  siomai  setelah  dilakukan  uji  KI bakteri  uji  menunjukkan  sifat  asam  yang ditunjukkan  dengan  warna  kuning  pada permukaan  atas  tabung  reaksi  dan  kuning terdapat  ruang  kosong  (berisi  gas)  pada  per- mukaan  bawah  tabung  reaksi,  dan  tidak  ada sulfida  yang  ditunjukkan  dengan  tidak  ada warna hitam pada bakteri uji di tabung reaksi. Uji  KIA  ini  digunakan  sebagai  penguat  dalam identifikasi bakteri.
Uji SIM hasil yang didapatkan adalah - - +, - - +, - + +, - - +, - - +, - - +, dan - - +.  Hasil - - + artinya  adalah    bahwa  tidak  ada  sulfida  pada bakteri  uji  dalam  tabung  rekasi  yang  ditun-
Uji Biokimia
Uji LIA hasil yang didapatkan adalah A/AG S-, K/AG S-, K/A S-, K/A S-, K/A S-, K/A S- dan K/A  S. Tanda A/AG  S-  artinya  adalah  setelah dilakukan  uji  LIA  sampel  menunjukkan  sifat asam  yang  ditunjukkan  dengan  warna  kuning pada permukaan atas tabung reaksi dan kuning terdapat  ruang  kosong  (berisi  gas)  pada permukaan bawah tabung reaksi, dan tidak ada sulfida  yang  ditunjukkan  dengan  tidak  ada warna hitam pada bakteri uji   di tabung reaksi. Tanda K/AG S- artinya adalah sampel menun- jukkan  sifat  alkali  yang  ditunjukkan  dengan warna ungu pada permukaan atas tabung reaksi dan kuning terdapat ruang kosong (berisi gas) pada permukaan bawah tabung reaksi, dan tidak ada sulfida yang ditunjukkan dengan tidak ada warna  hitam  pada  bakteri  uji  di  tabung  reaksi dan  tanda  K/A  S-  artinya  adalah  sampel menunjukkan  sifat  alkali  yang  ditunjukkan dengan  warna  ungu  pada  permukaan  atas tabung  reaksi  dan  kuning  dan  tidak    terdapat ruang  kosong  (berisi  gas)  pada  permukaan bawah tabung reaksi, dan tidak ada sulfida yang ditunjukkan dengan tidak ada warna hitam pada bakteri uji di tabung reaksi.
uji yang dibuktikan dengan tidak adanya warna merah pada  bakteri uji dalam tabung reaksi dan terdapat motilitas atau pergerakan dari bakteri- bakteri dalam tabung reaksi.
saluran kemih nosokomial, dan 10% dari kasus peritonitis  pascaoperasi.  Bakteri  ini  juga  me- miliki  beberapa  kegunaan  bagi  manusia,  na- mun,  misalnya, Enterobacter  cloacae diguna- kan  dalam  kontrol  biologis  penyakit  tanaman (Anaesthetist) (Zuanita, 2014).
Uji Citrate hasil yang didapatkan adalah ke semua sampel menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan  dengan  warna  biru  pada  tabung rekasi uji. Hasil positif ini menunjukkan bahwa bakteri uji termasuk dalam golongan Coliform . Namun hasil uji citrate ini sifatnya lemah dan yang  menentukan  kuatnya  identifikasi  bakteri adalah pada uji KIA.
Bakteri Enterobacter merupakan  patogen nosokomial  oportunistik  yang  menyebabkan lebih  banyak  infeksi  termasuk  sampai  dengan 5% dari septicemias didapat di rumah sakit, 5% dari  pneumonia  nosokomial,  4%  dari  infeksi
jukkan dengan tidak adanya warna hitam   pada bakteri uji, tidak mengandung indol pada bakteri
Pencemaran  limbah  dalam  suatu  perairan mempunyai hubungan dengan jenis dan jumlah mikroorganisme  dalam  perairan  tersebut.  Air buangan kota dan desa yang berpenduduk padat tidak hanya meningkatkan pertumbuhan bakteri koliform akan tetapi juga meningkatkan jumlah bakteri patogen seperti Salmonella , Shigella dan Vibrio cholera (Zuanita, 2014).
Infeksi  pada  luka  mungkin  ringan  tetapi sering berlanjut dengan cepat (setelah beberapa jam), dengan perkembangan lesi kulit bullous, selulitis, dan miositis dengan nekrosis. Karena cepatnya  kemajuan  dari  infeksi,  maka diperlukan  pengobatan  antibiotik  sesuai sebelum  konfirmasi  dengan  kultur  didapat. Diagnose didapat melalui kultur organisme pada media laboratorium standar (Khaq et al. , 2016). Escherichia coli mengacu pada sekelompok bakteri yang biasanya ditemukan dalam makan- an  dan  air.  Kebanyakan  dari  bakteri  ini  tidak berbahaya, tetapi beberapa jenis dapat menye- babkan penyakit. Penyakit akibat E. coli timbul saat  bakteri  ini  melepaskan  racun  yang dinamakan  Shiga  sehingga  membuat  orang sakit. Racun E. coli paling sering menyebabkan masalah  perut  dan  usus,  seperti  diare  dan muntah.  Sebagian  kecil  kasus  infeksi  bisa mengancam jiwa, sementara penderita yang lain akan  pulih  setelah  sekitar  satu  minggu. Anak- anak,  orang-orang  dengan  gangguan  sistem kekebalan  tubuh,  dan  orang  tua  berada  pada risiko tertinggi akibat serangan E. coli (Yunita, 2015).
Strain E.  coli yang  menimbulkan  penyakit hidup dalam usus hewan memamah biak seperti sapi, rusa, dan kambing. E. coli biasanya tidak menyebabkan masalah bagi hewan, tapi ketika kotoran  atau  sumber  air  dari  hewan  yang
Escherichia  coli merupakan  anggota  flora normal  usus  yang  berperan  penting  dalam sintesis  vitamin  K,  konversi  pigmen-pigmen empedu,  asam-asam  empedu  dan  penyerapan zat-zat  makanan. E.  coli termasuk  ke  dalam bakteri  heterotrof  yang  memperoleh  makanan berupa  zat  organik  dari  lingkungannya  karena tidak  menyusun  sendiri  zat  organik  yang dibutuhkannya (Adi, 2010). Salah satu strain E. coli yang bersifat toonosis adalah seritip 0157. Manusia dan ternak merupakan reservoir utama E. coli 0157:H7. Air dan makanan yang terce- mar  oleh  kotoran  hewan  atau  manusia  yang mengandung E. coli 0157:H7 berfungsi sebagai sumber infeksi. E. coli 0157:H7 ini dapat me- nyebabkan  diare  berdarah  yaitu  hemolytik uremik  syndrome  (illes)  yang  berasal  dari makanan. Infeksi E. coli 0157:H7 yang patogen pada  manusia  yaitu  bersifat  verotoksigenik yang telah menyebabkan 16.000 kasus penyakit melalui makanan ( food borne disease ) dan 400 orang  meninggal  di  Amerika.  Semakin  tinggi tingkat  kontaminasi  bakteri coliform ,  semakin tinggi  pula  risiko  kehadiran  bakteribakteri patogen  lain  yang  biasa  hidup  dalam  kotoran manusia dan hewan (Bambang et al. , 2014).
terinfeksi kontak dengan manusia maka infeksi dapat terjadi. Kebanyakan orang yang terinfeksi E.  coli mendapatkannya  dari  makanan  yang terkontaminasi, susu yang tidak dipasteurisasi, atau air yang tidak dimasak. Selain hal di atas, daging  mentah  juga  dapat  membawa E.  coli. E.coli juga  dapat  menyebar  antar  manusia melalui  kontak  dengan  kotoran  yang terkontaminasi (Yunita, 2015).
mengolah  daging  mentah,  atau  setelah  mela- kukan  aktivitas  lain  dengan  potensi  terkon- taminasi  merupakan  cara  efektif  mencegah infeksi E. coli. Untuk membunuh E. coli dalam makanan,  pastikan  Anda  memasak  daging sampai  matang.  Daging  harus  dimasak
0 setidaknya  sampai  suhu  70 C.  Semua  piring yang kontak dengan daging mentah sebaiknya dicuci  dengan  sabun  antiseptik.  Namun  perlu diingat bah-wa seseorang masih dapat terkena E. coli yang berasal dari buah-buahan segar dan sayuran (Cho et al., 2010).
Pada  penelitian  Djaja  (2003)  disebutkan bahwa  kontaminasi Escherichia  coli pada pedagang  kaki  lima  disebabkan  karena kontaminasi  bahan  makanan (51,8%), kontaminasi pewadahan (18,8%), kontaminasi air  (18,8%),  kontaminasi makanan  disajikan (18,8%),  kontaminasi  tangan  (12,9%)  dan kontaminasi makanan matang (10,6%). Dalam hal ini, terjadinya kontaminasi Escherichia coli pada  pasar  tradisional  dan  swalayan  dapat disebabkan oleh hal di atas.
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  saus siomai  tercemar  dengan E.  coli. Karena  tidak dilakukan  pemeriksaan  di  tempat  pengolahan maka  diperkirakan  cemaran  tersebut  dapat berasal  dari  pengolah  pangan,  peralatan  yang digunakan  maupun  lingkungan  tempat pengolahan  yang  tercemar E.  coli  ( Yunita, 2015).  Mencuci  tangan  menggunakan  sabun setelah  menggunakan  kamar  kecil,  setelah
Sanitasi  yang  kurang  baik  dari  penjamah makanan atau penjual dapat menjadi sumber pe- nyakit  bagi  konsumen  dan  dapat  menyebar kepada  masyarakat.  Peranannya  dalam  suatu penyebaran penyakit dengan cara kontak antara penjamah  makanan  yang  menderita  penyakit menular dengan konsumen yang sehat (Kim dan Kim,  2012).  Kontaminasi  terhadap  makanan oleh  penjamah  makanan  yang  sakit,  misalnya batuk  atau  luka  di  tangan,  dan  pengolahan makanan dengan air tercemar Escherichia coli atau  penanganan  makanan  oleh  penjamah makanan  yang  sakit  atau  pembawa  kuman (Zaenab, 2008).
Beberapa penyakit yang sering timbul akibat bakteri Escherichia coli adalah penyakit diare , bakteri Escherichia  coli yang  menyebabkan diare sangat sering ditemukan diseluruh dunia. Bakteri ini diklasifikasikan oleh ciri khas sifat- sifat virulensinya dan setiap grup menimbulkan penyakit  melalui  mekanisme  yang berbeda
Infeksi  saluran  kemih,  penyebab  yang  pa- ling  sering  dari  infeksi  saluran  kemih  dan merupakan  penyebab  infeksi  saluran  kemih pertama  pada  kira-kira  90%  wanita  muda. Gejalanya yaitu sering kencing, disuria, herma- turia,  dan  piura.  Kebanyakan  infeksi  ini  dise- babkan oleh Escherichia coli dengan sejumlah tipe antigen O. Sepsis, bila pertahanan tubuh ibu tidak  kebal, Escherichia  coli dapat  memasuki aliran  darah  dan  menyebabkan  sepsis. Meningitis, Escherichia  coli merupakan  salah satu  penyebab  utama  meningitis  pada  bayi. Bakteri Escherichia coli dari kasus meningitis ini  mempunyai  antigen  KI.  Mekanisme virulensi yang berhubungan dengan antigen KI tidak diketahui (Tambunan, 2010).
a.  Sampel  2,  3,  4,  5,  6,  7  dan  8  positif mengandung bakteri Coliform dengan MPN Coliform tertinggi pada sampel 2 dan 8 yaitu >1100 APM/g dan terendah adalah sampel 6 dan 10 yaitu 210 APM/g.
b.  Sampel  2,  3,  5,  6,  7  dan  8  positif mengandung  bakteri Enterobacter dan sampel 4 mengandung bakteri Escherichia coli.
c.  Dari hasil pewarnaan gram pada sampel 2, 3,
4,  5,  6,  7  dan  8  semua  bakteri  termasuk golongan bakteri gram negatif.
d.  Hasil pengujian yang didapat dari semua uji ALT  dan  MPN Coliform tidak  memenuhi syarat yang telah ditetapkan dalam SNI 01- 3546-2004 tentang batas maksimum Angka Lempeng  Total  (ALT)  pada  saus  tomat
2 adalah 2 x 10  koloni/g sedangkan menurut Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan  Republik  Indonesia  nomor  HK. 00.06.1.52.401,  batas  maksimum  Most Probable  Number  (MPN) Coliform pada saus tomat adalah 100 koloni/g.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa Pemerintah  dan  Pemerintah  Daerah  bersama dengan  instansi  yang  terkait  masih  perlu melakukan pengawasan makanan terhadap saus tomat  yang  banyak  dikonsumsi  masyarakat sesuai dengan pasal 68 UU No. 18 Tahun 2012 tentang Pangan. Pengawasan makanan, seperti pada  saus  tomat  bertujuan  untuk  melindungi masyarakat  konsumen  terhadap  kemungkinan peredaran  makanan  yang  tidak  memenuhi standar  dan  persyaratan  kesehatan  yang  dapat merugikan atau membahayakan kesehatan. Hal ini serupa juga dengan hasil penelitian Nadifah et al. (2014) meskipun sampel diambil dari satu pasar tradisional di Sleman, namun merek saus tomat  yang  diperiksa  adalah  saus  tomat  yang beredar di Yogyakarta. Hasil penelitian ini dapat memberikan  gambaran  tentang  kontaminasi
Penulis ucapkan terima kasih kepada Direk- torat Penelitian dan Pengabdian Kepada Masya- rakat  sesuai  dengan  Surat  Perjanjian  Pelak- sanaan  Penugasan  Penelitian  Dosen  Pemula Bagi  Dosen  Perguruan  Tinggi  Swasta  Antara Direktorat  Riset  dan  Pengabdian  Masyarakat Direktorat  Jenderal  Penguatan  Riset  dan Pengembangan  Kementerian  Riset,  Teknologi dan  Pendidikan  Tinggi  dengan  Kopertis Wilayah VI Nomor 048/K6/SP2H/PPM/2017, tanggal  21  April  2017 dan  Antara  Kopertis Wilayah  VI  dengan  Apikes  Citra  Medika S u r a k a r t a N o m o r :   0 8 9 / K 6 / S P 2 H /
seperti yang sudah diutarakan. Gejalanya yaitu diare  yang  merupakan buang  air  besar  yang encer  dengan  frekuensi  4x  atau  lebih  dalam sehari, kadang disertai muntah, badan lesu atau lemah, panas, tidak nafsu makan, bahkan darah dan  lendir  dalam  kotoran.  Diare  bisa  me- nyebabkan  kehilangan  cairan  dan  elektrolit sehingga  bayi  menjadi  rewel  atau  terjadi gangguan  irama  jantung  maupun  perdarahan otak (Falamy et al. , 2012).
bakteri pada saus tomat.
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan pada  saus  siomai,  maka  diperoleh  kesimpulan sebagai berikut :

## KESIMPULAN
UCAPAN TERIMA KASIH
PENELTIAN /2017. Penulis juga ucapkan teri- ma kasih kepada Ketua yayasan Internusa dan Direktur Apikes  Citra  Medika  Surakarta  yang telah  memberikan  izin  penelitian  dan  juga kepada UPT Laboratorium Terpadu UNS yang telah memberikan izin penelitian.
Aditia,  Lasinrang  dan  Muthiadin,  Cut.  2015.  Uji  Kualitas Mikrobiologis  Pada  Makanan  Jajanan  di  Kampus  II Universitas  Islam  Negeri  (UIN)  Alauddin  Makassar. Biogenesis. Vol 3, No. 2 hal 119-123. ISSN 2302-1616.
Cut  Nuria,  Maulita,    dkk.  2009.  Uji  Kandungan  Bakteri Escherichia Coli Pada Air Minum Isi Ulang Dari Depot Air Minum Isi Ulang Di Kabupaten Rembang. Jurnal-Jurnal Ilmu Pertanian. Volume 5 no (1) hal 27-35. Djaja. I.M. 2003. Kontaminasi E. coli pada makanan dari tiga jenis  tempat  pengelolaan  makanan  (TPM)  di  jakarta selatan . Jurnal Makara Kesehatan Vol. 12. Hal. 36-41.
Bambang, Andrian G; Fatimawali dan Kojong, Novel S. 2014. Analisis  Cemaran  Bakteri Coliform Dan  Identifikasi Escherichia coli Pada Air Isi Ulang Dari Depot Di Kota Manado. Pharmacon . Vol. 3 No. 3. ISSN 2302 – 2493. BPOM  RI.  2008.  Pengujian  Mikrobiologi  Pangan. InfoPOM . Vol. 9, No. 2. ISSN 1829-9334.
Cho, Joon-Il; Cheung, Chi-Yeun; Lee, Sun-Mi; Ko, Soo-Il; Kim,
Kyu-Heon; Hwang, In-Sun; Kim, Seung-Hwan; Cho, Soo- Yeol,  Lim,  Chul-Ju;  Lee,  Kwang-Ho;  Kim,  Keun-Sung And  Ha,  Sang-Do.  2010.  Assessment  Of  Microbial Contamination Levels Of Street-Vended Foods In Korea. Journal of Food Safety 31 (2011) 41–47.
Falamy, Ryan; Warganegara, Efrida dan Apriliana, Ety, 2012. Deteksi  Bakteri Coliform pada  Jajanan  Pasar  Cincau Hitam  di  Pasar  Tradisional  dan  Swalayan  Kota  Bandar Lampung. Majority  (Medical  Journal  Of  Lampung University) .  ISSN 2337-3776.
Imelda Gea, Santi. 2009. Hygiene Sanitasi dan Analisa Cemaran Mikroba yang Terdapat Pada Saus Tomat dan Saus Cabai Isi  Ulang  yang  Digunakan  di  Kantin  di  Lingkungan Universitas  Sumatera  Utara. Skripsi .  Universitas Sumatera Utara.
Karlah, L. R. Mansauda; Fatimawali dan Novel, Kojong. 2014. Analisis Cemaran Bakteri Coliform Pada Saus Tomat Jajanan Bakso Tusuk Yang Beredar Di Manado. Jurnal Ilmiah Farmasi. UNSRAT. Volume 3 no (2) hal
Kartika, Emma, Siti Khotimah, Ari Hepi Yanti. 2014. Deteksi Bakteri  Indikator  Keamanan  Pangan  Pada  Sosis  Daging Ayam Di Pasar Flamboyan Pontianak. Probiont. Volume 3, 2: 111-119.
Khaq,  Khanifa  Nurul  dan  Dewi,  Lusiawati.  2016.  Deteksi Cemaran  Bakteri  Koliform  Dan Salmonella  Sp. Pada Tempe Yang  Dikemas  Daun  Pisang  Di  Daerah  Salatiga. Agric. Vol. 28, No. 1 dan No.2, Juli & Desember 2016: 79 – 86.
Kusumaningsih,  Anni.  2010.  Beberapa  Bakteri  Patogenik Penyebab Foodborne  Disease Pada  Bahan  Pangan  Asal Ternak. Makalah Balai Besar Penelitian Veteriner Bogor hal 103-111.
Laboratorium Mikrobiologi. 2017. Surakarta : Universitas Setia Budi.
Lesmana,  M.  2003. Enterobacteriaceae: Salmonella  &  Shi- gella . FK Universitas   Trisakti, Jakarta.
Lestari, Rina. 2012. Pewarnaan Sederhana, Negatif, Kapsul dan Gram. Makalah. Sekolah  Tinggi  Ilmu  Kesehatan Yogyakarta.
Nadifah,  Fitri;  Bhoga,  Maria  Yashita  dan  Presetyaningsih,
Yuliana. 2014. Kontaminasi Bakteri Pada Saus Tomat Mie Ayam di Pasar Condong Catur Sleman Yogyakarta Tahun 2013. Biogenesis .  Vol 2, No. 1, Juni 2014, hal 30-33. ISSN 2302-1616. DAFTAR PUSTAKA Notoatmodjo,  S.  2003, Pendidikan  dan  Perilaku  Kesehatan . Jakarta : Rineka  Cipta.
Pertiwi, Devi Pebriani; Latifa, Roimil, Dan  Chamisjiatin, Lise. 2016. Analisis Kandungan Bakteri Koliform Pada Bakso Bakar Di Pasar Minggu Kota Malang. Prosiding Seminar Nasional II  Tahun  2016,  Kerjasama  Prodi  Pendidikan Biologi  FKIP  Dengan  Pusat  Studi  Lingkungan  Dan Kependudukan  (PSLK)  Universitas  Muhammadiyah Malang.
Rompre, Annie; Servais, Pierre, Baudart, Julia; Roubin,  Marie- Rene´e  de-  and  Laurent,  Patrick.  2001.  Detection  and enumeration  of coliforms in  drinking  water:  current methods  and  emerging  approaches. Journal  of Microbiological Methods 49 (2002) 31–54.
S.  N.,  Madueke,    S.  Awe  And  A.  I.,  Jonah.  2014. Microbiological Analysis Of Street Foods Along Lokoja- Abuja  Express  Way,  Lokoja. American  Journal  of Research Communication Vol 2(1). Siagian, A. 2002. Mikroba Patogen Pada Makanan dan Sumber Pencemarannya . SNI 01-3546-2004 Saus Tomat . Jakarta : . Dewan Standarisasi Nasional.
Siahaya,  Griennasty  Clawdya.  2016.  Total  Mikroba  Dan Escherichia  coli Pada  Pangan  Jajanan. 2-TRIK:  Tunas- Tunas Riset Kesehatan . Volume VI Nomor 4, November 2016 ISSN: 2089-4686.
Sunardi.  2014.  Pemeriksaan  Most  Probable  Number  (MPN) Bakteri Coliform Dan Coli Tinja  Pada  Jamu  Gendong Yang  Dijual  Di  Pasar  Besar  Kota  Palangkaraya. Karya Tulis  Ilmiah. Program  Studi  D  III  Farmasi  Universitas Muhammadyah Palangkaraya.
Susanna, D, Hartono, B. 2003. Pemantauan Kualitas Makanan Ketoprak  Dan    Gado-Gado  Di Lingkungan  Kampus  UI Depok, Melalui  Pemeriksaan    Bakteriologis .  FKM  UI, Depok.
Tambunan, Samuel. 2010. Hygiene Sanitasi dan Pemeriksaan Kandungan  Bakteri. Escherichia  coli pada  Es  Kolak Durian yang Dijajakan Di Jalan Dr. Mansyur Kelurahan Padang  Bulan  Kota  Medan  Tahun  2010. Skripsi FKM. USU Medan.
Wang,  Y.  Ye.  2011.  Substractive  Inhibition  Assayfor  the Detection  of Escherichia  coli 0157:H7  Using  Surface Plasmon Resonance. Sensors. 2011 (11) : 2728 : 2739. Yunita,  Nur  Halimah.  2015.  Identifikasi  Dan  Karakterisasi Bahaya  Bakteri  Patogen  Pada  Pangan  Jajanan  Anak Sekolah Di Bogor. Tesis. Bogor : Institut Pertanian Bogor. Zaenab.  2008. Kasus  Keracunan  Makanan .  Kesehatan Lingkungan Makassar.
Zuanita,  Dwi Astalia;  Suarjana,  I  Gusti  Gusti  dan  Rudyanto, Mas Djoko. 2014. Cemaran Coliform pada Daging Ayam Pedaging yang Dijual di Swalayan di Denpasar. Indonesia Medicus Veterinus . 3(1) : 26-31 ISSN : 2301-7848.