Aktivitas Antitusif Dan Ekspektoran Ekstrak Etanol, Fraksi Polar-Semi Polar Herba Meniran ( Phyllanthus niruri L.) Pada Marmut (C avia porcellus) Antitussive And Expectorant Activity of The Ethanol Extracts, Polar-Semi- Polar Fraction Meniran Herbs ( Phyllanthus niruri L.) on Guinea Pig ( Cavia porcellus )
Fakhruddin 1) , Arief Nurrochmad 2) ,Gunawan Pamudji W 1) (1) Program Studi Pasca Sarjana Ilmu Farmasi, Universitas Setia Budi Surakarta
(2) Program Studi Pasca Sarjana Ilmu Farmasi, Universitas Gadjah Mada Yogyakarta

## ABSTRAK
Phyllantus  niruri L.,  yang  merupakan  tanaman  liar,  memiliki  aplikasi  yang  luas  dalam pengobatan tradisional. Tujuan penelitian ini yaitu mengevaluasi aktivitas antitusif, ekspektoran, serta gambaran mekanisme antitusif herba meniran.
Hewan uji marmut jantan sebanyak 36 ekor dibagi menjadi 9 kelompok masing-masing kelompok terdiri dari 4 ekor marmut. Aktivitas antitusif ekstrak etanol dan fraksi polar-semi polar dinilai  dengan  prosentase  supresi  batuk  menggunakan  asam  sitrat  7,5%  sebagai  penginduksi selama  5  hari.  Aktivitas  ekspektoran  dievaluasi  dengan  melihat  konsentrasi  phenol  red  pada trakea marmut pada hari ke 7. Gambaran mekanisme dievaluasi dengan melihat perbandingan pemberian ekstrak herba meniran tunggal dengan kombinasi ekstrak herba meniran dan kodein gambaran  secara  sentral  pada  reseptor  opiod  dan  glibenklamide  secara  periferal  pada  ATP sensitive K + channel.
Hasil  penelitian  menunjukan  ekstrak  etanol  dan  fraksi  polar-semi  polar  dapat meningkatkan  supresi  batuk  dan  memberikan  supresi  sekresi  mukus  dalam  evaluasi ekspektoran.  Fraksi  polar-semi  polar  160  mg/kgBB  menunjukkan  nilai  antitusif  paling  efektif 63,57%. Frasi polar-semi polar 80 mg/kgBB menunjukkan penurunan sekresi phenol red sebesar 56,91%. Penelitian ini memberikan bukti bahwa meniran dapat digunakan sebagai antitusif dan supresi sekresi mukus. Herba meniran tidak memberikan gambaran mekanisme antitusif pada reseptor  opiod  atau  ATP  sensitive  K + channel.  Aktivitas  antitusif  herba  meniran  mungkin dimodulasi saraf sistemik atau perifer lainnya.
Kata Kunci: Phyllantus niruri L., asam sitrat, antitusif, ekspektoran.

## ABSTRACT
Phyllantus  niruri L.,  is  wild  plants,  has  wide  applications  in  traditional  medicine.  The purpose of this study is to evaluated antitussive, expectorant activity, and description antitussive mechanism of phyllantus herbs.
Test animal male guniea pigs as many as 36 divided into 9 groups each consisting of 4 guinea pigs. The antitussive activity of ethanol extract and polar-semi-polar fraction be observed on percentage cough suppression by giving a citric acid 7.5% for 5 days. The Expectorant activity was  evaluated  with  phenol  red  concentration  in  guinea  trachea  on  7  days.  The  mechanism description is evaluated by looking at the comparison of phyllantus herbs and combination ethanol extract phyllantus herbs  and  codeine  modulated  by  the  opioid  receptor  and  glibenclamide modulated by the ATP sensitiv.e K + channel.
The  research  showed  ethanol  extract  and  polar-semi-polar  fraction  increased  the suppression of citric acid induced by citric acid 7.5% and decreased the a supprssant of mucus secretion  on  evaluation  of  expectorant.  Polar-semi-polar  fraction  160  mg/kgBB  showed  the effective  activity  antitussive  63,57%.  Polar-semi-polar  fraction  80  mg/kgBB  showed  decreased phenol red secretion by 56,91%. This study provides evidence that phyllantus herbs can be used as  an  antitussive  and  a  suppressant  of  mucus  secretion. Phyllantus herbs  not  description  on mechanism  antitussive  modulated  by  the  opioid  receptor  and  ATP  sensitiv.e  K + channel.  The antitussive mechanism may be modulated by other systemic  nerves and peripheral nerves.
Keywords: Phyllantus niruri L., citric acid, antittusive, expectorant.

## PENDAHULUAN
Batuk  merupakan  mekanisme pertahanan  respiratorik  dimana  refleks ini  bekerja  mengeluarkan  sejumlah volume  udara  secara  mendadak  dari rongga  toraks  melalui  epiglotis  dan mulut.  Mekanisme  tersebut  dipicu  oleh benda  asing  dan  sekresi  lendir  yang telah  menumpuk  pada  jalan  nafas, sehingga material-material yang berada di sepanjang saluran respiratorik tersebut akan dilontarkan keluar. Selain sebagai mekanisme pertahanan
respiratorik,  batuk  juga  dapat  berfungsi sebaga i  ‘alarm’  yang  memberitahu
adanya gangguan pada sistem respiratorik  atau  sistem  organ  lainnya yang terkait (Setyanto, 2004). Antitusif golongan
opioid memang  menjadi  pilihan  utama  dalam pengobatan batuk, karena sangat efektif dalam  mengatasi  batuk,  tetapi  dengan tingginya  tingkat  efek  samping  sampai dengan  efek  kecanduan,  penggunaan obat  ini  menjadi  pertimbangan  dalam penanganan batuk. Sehingga dibutuhkan obat yang tidak hanya efektif tetapi  memiliki  efek  samping  yang rendah. Penggunaan meniran
( Phyllanthus niruri L) sebagai obat batuk tradisional  telah  dikenal  sejak  lama. Pada  jamu  meniran  digunakan  oleh masyarakat  Indonesia  untuk  mengatasi batuk.  Tidak  hanya  di  Indonesia, Malaysia  juga  menggunakan  meniran atau  yang  lebih  dikenal  dukong  anak dalam  mengatasi  batuk.  Meniran  juga digunakan pada 175 formulasi Ayurveda selama  2000  tahun  (Bagalkotkar  et  al., 2006). Menurut Thomas (1992) meniran sebanyak  3-7  batang  lengkap  (akar, batang,  daun,  buah)  dapat  digunakan
dalam  mengatasi  batuk.  Meniran  kaya akan  kandungan  flavonoid,  saponin, tanin,  alkaloid,  terpenoid  dan  lignan (Elfahmi et al., 2006; Mangunwardoyo et al.,  2009).  Kamferol,  quercetin,  dan luteolin  merupakan  senyawa  flavonoid yang berpotensi sebagai antitusif. Kuercetin dan kamferol dapat bertindak sebagai  antialergen.  Saponin  memiliki efek surfaktan sehingga memungkinkan memiliki efek mukolitik (Ziment, 2002).
Dalam  penelitian  ini,  digunakan ekstrak etanol dan fraksi polar- semipolar herba meniran untuk mengetahui aktivitas antitusif dan ekspektoran  secara in  vivo serta mengetahui gambaran mekanisme
antitusif  yang  diberikan  secara  sentral maupun periferal.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  peralatan  maserasi  yang  terdiri dari  botol  maserasi,  beaker  glass,  kain flannel,  corong  gelas  corong,  oven, timbangan  listrik  AEG-120  Shimadzu, labu takar, batang pengaduk, evaporator, alat timbang, spektrofotometer UV, alat bedah,
nebulizer ,  kertas  saring,  corong  pisah, plat KLT.

## Bahan
Bahan uji yang digunakan adalah herba meniran yang diperoleh dari Kecamatan Tawangmangu,
Kabupaten
Karanganyar,  Jawa  Tengah,  pelarut etanol  96%,  etil  asetat,  n-heksan, aquadest,  asam  sitrat,  phenol  red, kodein  fosfat,  glibenklamid,  gliseril guaiakolat,  natrium  hidroksida,  NaCl fisiologis, carboxy methylcellulose, silika gel 60 F254. Hewan uji yang digunakan
adalah marmut (Cavia porcellus)
dengan  bobot  badan  250-400  gram. Pada  pengujian  aktivitas  antitusif  dan ekspektoran,  marmut  yang  digunakan sebanyak  32  ekor  dan  dikelompokkan menjadi  8  kelompok  dengan  masing- masing kelompok berjumlah 4.
Jalannya penelitian 1.  Pembuatan  ekstrak  etanol  dan
fraksi herba meniran Tahap  pertama  adalah  pengumpulan dan preparasi sampel, kemudian dilakukan  pembuatan  ekstrak  herba meniran dengan cara maserasi. Ekstrak etanol  herba  meniran  yang  telah diperoleh kemudian dilakukan fraksinasi menggunakan kromatografi kolom.
Adapun perbandingan eluennya adalah etil n-heksan-asetat-etanol dengan perbandingan  (10:0:0,  7:3:0,  5:5:0,
3:7:0, 0:10:0, 0:7:3, 0:5:5, 0:3:7, 0:0:10).
Kemudian dilakukan KLT, dan dikelompokkan berdasarkan noda kromatogram yang sama.
2.  Pengujian  aktivitas  antitusif  dan ekspektoran
Hewan  uji  dikelompokkan  menjadi  8 kelompok uji, masing-masing kelompok uji terdiri dari 4 ekor marmut. Hewan uji dimasukan kedalam cember transparan (dimensi: 20x20x20) dan menit masing- masing  kelompok  diinduksi  dengan larutan asam sitrat 7,5 % menggunakan compressor nebulizer selama  5  menit setelah  pemberian  ekstrak  selama  60 menit  dan  dipulihkan  selama  24  jam untuk  dilakukan  perlakuan  yang  sama selama  5  hari.  Jumlah  batuk  yang dihasilkan  dihitung  selama  25  menit terhitung dari awal penginduksian asam sitrat. Persentase supresi batuk dinyatakan  dengan  membandingkan kelompok  yang  diberi  pelakuan  (Ct)
dengan  kelompok  yang  tidak  diberi perlakuan  (Cc)  dengan  menggunakan rumus [(Cc-Ct)/Cc x100%]. Pada hari 7 setelah  diinduksi  dengan  larutan  asam sitrat  7,5  %  masing-masing  kelompok diberi phenol red secara i.p. Setelah 30 menit  pemberian  phenol  red  masing- masing kelompok
dilakukan
pembedahan untuk mengisolasi trakea.
Trakea  segera  diekstraksi  dengan  3  ml larutan salin. Kemudian, larutan ekstrak trakea  ditambahkan  0,3  ml  1  M  NaOH dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 546 nm.
3.  Pengujian mekanisme supresi batuk.
Dosis  fraksi  polar-semi  polar  herba meniran  yang  memberikan  supresi batuk  paling  baik  digunakan  untuk melihat  mekanisme  supresi  batuk  yang diberikan  oleh  herba  meniran,  yaitu dosis  fraksi  160  mg/kgBB.  Pada perlakuan  ini  dibagi  menjadi  dua kelompok,  kelompok  yang  pertama fraksi polar-semi polar 160 mg/kgBB dan kodein  diberikan  diberikan  secara  p.o dan  kelompok  yang  kedua  fraksi  polar- semi  polar  160  mg/kgBB  p.o  dan glibenklamid secara i.p setelah 30 menit pemberian ekstrak. Masing-masing
kelompok  diberi  perlakuan  yang  sama seperti kelompok sebelumnya. 4.  Analisis Hasil Data yang diperoleh dari hasil pengamatan  uji  antitusif  berupa  nilai antitusif  dan  persentase  peningkatan sekresi  phenol  red  pada  pengujian ekspektoran.  Persentase  data  pada kelompok marmut (n=4) dibuat rata-rata ±  SEM  dan  disajikan  dalam  bentuk grafik.  Hasilnya  diuji  secara  statistik dengan menggunakan one-way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Pengujian aktivitas Antitusif
Nilai  antitusif  herba  meniran pada marmut yang diinduksi asam sitrat 7,5%  disajikan  pada  tabel  1  dalam bentuk  rata-rata  ±  SEM.  Data  antitusif digunakan  sebagai  parameter  aktivitas antitusif.
Hasil tersebut menunjukkan perbandingan aktivitas antitusif rata-rata pada  masing-masing  kelompok  hewan uji  selama  5  hari  perlakuan.  Adanya perbedaan  yang  signifikan  (p<0,05) pada aktivitas antitusif kelompok kontrol negatif dan kelompok ekstrak etanol 125 mg/kgBB  terhadap  kelompok  ekstrak etanol  250  mg/kgBB  dan  kelompok fraksi polar-semi polar 80 ; 160 mg/kgBB menunjukkan adanya efek dari perlakuan tersebut dan adanya aktivitas antitusif pada ekstrak herba meniran.
Peningkatan  aktivitas  antitusif ditunjukkan  pada  kelompok  ekstrak etanol dan fraksi polar-semi polar herba meniran.  Diduga  hal  ini  terjadi  karena adanya senyawa
spesifik yang terkandung  dalam  fraksi  polar-semi
polar herba meniran. Kandungan flavonoid yang terkandung dalam fraksi herba  meniran  diduga  memiliki  peran dalam aktivitas antitusif. Penelitian yang dilakukan oleh Cheong (1998) menyatakan  diantara  22  senyawa flavonoid,  quercetin  merupakan  salah satu  senyawa  yang  memiliki  aktivitas sebagai antialergi yang lebih baik dilihat berdasarkan nilai IC50 dalam
penhambatan  hexosaminidase  dari  sel
RBL-2H3.  Astraglin  mungkin  memiliki aktivitas antialergi dalam penekanannya terhadap  produksi  IL-4  dan  IL-13. Perubahan profil sitokin mungkin berkontribusi dalam  penghambatan IgE (Kotani,  2000).  Xylans  merupakan senyawa  polisakarida  yang  memiliki aktivitas  secara  biologis  yaitu  sebagai imunomodulator dan antitusif (Mellinger, 2005).
Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas antitusif  yang  dilakukan  herba  meniran yang  mengandung  senyawa  quercetin, astraglin,  xylans  mampu  memberikan efek  antitusif  pada  hewan  uji  marmut jantan yang diinduksi asam sitrat 7,5%.
Tabel 1. Hasil pengukuran supresi batuk herba meniran pada hewan uji marmut selama 5 hari perlakuan
No. Kelompok Supresi batuk (hari) % Rata-rata (%) ± SEM h1 h2 h3 h4 h5 1 Kontrol (-) CMC 0,5% 36,71 ± 18 16,94 ± 31 10,35 ± 59 41,75 ± 25 51,36 ± 22 31,42 ± 17,22 b 2 Kontrol (+) Kodein 10 mg /kg 62,78 ± 30 53,89 ± 27 81,11 ± 26 83,89 ± 11 76,67 ± 18 71,67 ± 12,83 a 3 Ekstrak Etanol 125 mg /kgBB 22,18 ± 28 28,78 ± 50 68,52 ± 26 34,62 ± 49 49,70 ± 35 40,76 ± 18,55 ab 4 Ekstrak Etanol 250 mg /kgBB 44,35 ± 4 56,94 ± 57 40,65 ± 36 69,58 ± 6 61,43 ± 14 54,59 ± 12,00 5 FP-SP 80 mg /kgBB 44,80 ± 11 68,79 ± 21 43,09 ± 42 75,26 ± 16 85,94 ± 14 63,57 ± 18,95 a 6 FP-SP 160 mg /kgBB 52,29 ± 29 51,40 ± 52 67,86 ± 34 87,86 ± 20 70,12 ± 25 65,87 ± 14,92 a Keterangan : a Berbeda signifikan terhadap kontrol (-) CMC 0,5% : FP-SP : Fraksi Polar-Semi polar
: b Berbeda signifikan terhadap kontrol (+) Kodein
Dosis optimal yang memberikan efek  antitusif  adalah  fraksi  polar-semi polar  dosis  160  mg/kgBB  karena dibandingkan  dengan  variasi  dosis ekstrak  etanol  125  ;  250  mg/kgBB menunjukkan peningkatan yang
signifikan. Sedangkan bila dibandingkan dengan fraksi polar-semi polar dosis 80 mg/kgBB efek antitusifnya tidak berbeda signifikan (p<0,05). Hasil Pengujian Aktivitas

## Ekspektoran
Ekstrak  etanol  dan  fraksi-fraksi herba  meniran  diujikan  pada  marmut yang  dilakukan  selama  5  hari  dengan menghitung  kadar  sekresi  phenol  red pada  trakhea,  setelah  hewan  uji  diberi perlakuan.
Hasil tersebut menunjukan konsentrasi  phenol  red  trakea  pada kelompok  ekstrak  etanol  125  ;  250
mg/kgBB  dan  kelompok  fraksi  polar-
semi polar 160 mg/kgBB tidak memberikan  efek  stimulasi  maupun penekanan sekresi mukus yang
signifikan  bila  dibandingkan  kelompok negatif.  Kelompok  fraksi  polar-semi polar 80 mg/kgBB menyebabkan penurunan  kadar  phenol  red  trakea secara signifikan dibandingkan
kelompok  negatif.  Hal  ini  diduga  pada dosis tersebut dapat memberikan aktivitas  penekanan  sekresi  mukus pada  trakea  marmut.  Produksi  musin distimulasi oleh sitokin seperti TNF- α IL- 4, IL-9, IL- 13, IL1β dan siklooksigenase- 2.  Dengan  demikian  senyawa  yang berperan dalam penghambatan produksi  sitokin  dapat  memberikan aktivitas  sebagai  penghambat  sekresi musin. Quercetin menghambat pelepasan  TNF- α  dan  menghambat ekspresi COX-2
yang secara
bersamaan  mengurangi  konsentrasi PGE-2  (Morikawa,  2003).  Lupeol  juga mungkin  terlibat  dalam  penekanan sekresi mukus karena mampu
mencegah  produksi  beberapa  mediator proinflamasi (Fernández, 2001).
Mekanisme  antitusif  dibedakan menjadi  dua  aksi,  secara  central  dan periferal.  Kelompok  fraksi  polar-semi polar  dosis  160  mg/kgBB  tunggal  tidak berbeda  signifikan  (p<0,05)  dengan kelompok  fraksi  polar-semi  polar  dosis 160  mg/kgBB  kombinasi  kodein  dan glibenklamid.
Hal ini mungkin menggambarkan mekanisme yang berbeda  pada  aktivitas  antitusif  herba meniran. Metil brevifolincarboxylate merupakan  turunan  kumarin  yang diisolasi  dari  daun  meniran  yang mungkin dapat berperan dalam aktivitas antitusif  karena  bekerja  dengan  cara menurunkan konsentrasi  Ca2+ melalui kanal kalsium (Iizuka et al ., 2006).
Penelitian  Kamei  &  Kasuya (1992)    menunjukkan  antagonis  kanal Ca2+ yang diberikan pada marmut tidak memberikan  supresi  batuk  secara signifikan, akan tetapi pemberiaan agen antitusif  seperti  morfin,  dihydrocodeine dan
dextrometrophan yang dikombinasikan dengan antagonis kanal Ca 2+ memberikan pengaruh yang signifikan terhadap supresi batuk. Hal ini mungkinkan  memberikan  gambaran efek  antitusif  dapat  dimediasi  oleh interaksi  dengan  kanal  Ca2+.  Hasil  ini juga mengkonfirmasi kemampuan antagonis kanal Ca2+ untuk menghasilkan efek antitusif. Berdasarkan hasil
penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa fraksi  polar-semi  polar  dosis  160 mg/kgBB  tidak  memberikan  gambaran
mekanisme  pada  reseptor  opioid  dan ATP-sensitive potassium channels,
mungkin aktivitas antitusif yang diberikan herba meniran menggambarkan mekanisme aksi antitusif yang berbeda.
Tabel 2. Hasil pengukuran kadar phenol red trakea marmut sebagai aktivitas ekspektoran herba meniran
No Kelompok Rata-rata (µg/ml) ± SEM Supresi sekresi mukus % 1 Kontrol (-) CMC 0,5% 9,91 ± 2,52 µg/ml - 2 Kontrol (+) Glyceril guaiacolat 16,35 ± 3,43 µg/ml a -64,98 3 Ekstrak Etanol 125 mg / kgBB 8,37 ± 1,71 µg/ml 15,54 4 Ekstrak Etanol 250 mg / kgBB 7,02 ± 2,31 µg/ml 29,16 5 FP-SP 80 mg / kgBB 4,27 ± 1,96 µg/ml 56,91 6 FP-SP 160 mg / kgBB 6,82 ± 2,95 µg/ml 31,18 Keterangan : a Berbeda signifikan terhadap kontrol (-) CMC 0,5% : FP-SP : Fraksi Polar-Semi polar
Tabel 3. Hasil pengukuran aktivitas antitusif herba meniran sebagai gambaran mekanisme pada hewan uji marmut selama 5 hari perlakuan
No. Kelompok Supresi batuk (hari) % Rata- rata (%) ± SEM h1 h2 h3 h4 h5 1 Kodein 10 mg/kg 62,78 ± 30 53,89 ± 27 81,11 ± 26 83,89 ± 11 76,67 ± 18 71,67  ± 12,83 2 Fraksi polar-semi polar 160 mg/kgBB 52,29 ± 29 51,40 ± 52 67,  86 ± 34 87,86 ± 20 70,12 ± 25 65,87  ± 14,92 3 Fraksi polar-semi polar 160 mg /kgBB + Kodein 10 mg/kg 62,86 ± 6 58,99 ± 22 72,58 ± 15 87,09 ± 16 78,74 ± 27 72,05  ± 11,47 4 Fraksi polar-semi polar 160 mg /kgBB + Glibenklamid 3 mg/kgBB 30,69 ± 23 54,17 ± 16 66,25 ± 25 58,61 ± 16 72,08 ± 14 56,36  ± 15,92 Phyltetralin,  nirtetralin  dan  niranthin menunjukkan aktivitas antiinflamasi
dengan  cara  menghambat  peningkatan IL- 1β (Kassuya et al ., 2005). Efek yang dihasilkan  pada  dosis  160  mg/kgBB berkebalikan dengan dosis 80 mg/kgBB. Efek ini mungkin terjadi karena aktivitas penekanan sekresi mukus telah
melewati  konsentrasi  efektif  minimum (KEM).  Namun  untuk  membuktikan  hal teresebut  perlu  dilakukan  penelitian
lebih  lanjut  mengenai  hubungan  antara dosis  masing-masing  ekstrak  terhadap tingkat sekresi mukus.

## Hasil Pengujian Mekanisme Aktivitas Antitusif Herba Meniran
Pengujian  mekanisme  antitusif berdasarkan jumlah batuk yang dihasilkan  hewan  uji  pada  pemberian obat tunggal dan
kombinasi.
Peningkatan dan penurunan nilai antitusif  mengambarkan  mekanisme
aktivitas antitusif dari senyawa perlakuan.  Nilai  antitusif  herba meniran pada marmut yang diinduksi asam sitrat 7,5% disajikan pada tabel dalam bentuk rata-rata ± SEM. Data antitusif digunakan sebagai parameter mekanisme antitusif.

## KESIMPULAN
Pemberian fraksi polar-semi polar  herba  meniran  (Phyllanthus  niruri L)  dengan  dosis  160  mg/kgBB  dapat memberikan  aktivitas  antitusif  paling efektif  berdasarkan  nilai  antitusif  yaitu 65,87  ±  14,92%  dan  fraksi  polar-semi polar  dengan  dosis  80  mg/kgBB memberikan  efek  penekanan  sekresi
mukus yaitu 56,91% berdasarkan konsentrasi  phenol  red  trakea  pada marmut  jantan  (Cavia  porcellus)  yang diinduksi dengan asam sitrat.
Pemberian fraksi polar-semi polar dosis 160  mg/kgBB  tidak  menggambarkan mekanisme  pada  reseptor  opioid  dan ATP-sensitive potassium channels.

## DAFTAR PUSTAKA
Bagalkotkar  G,  Sagineedu  SR,  Saad MS, Stanslas J. 2006. Phytochemicals from Phyllanthus niruri Linn. and their pharmacological  properties:  a review. Journal of Pharmacy and Pharmacology . 58:1559-1570.
Fernández  M.A,  Heras  B,  Garcia  M.D, Sáenz  M.T.  dan  Villar  A.  2001.
New insights into the mechanism of action of the anti ‐ inflammatory triterpene  lupeol. Journal  of
Pharmacy  and  Pharmacology ,
53(11), pp.1533-1539.
Iizuka  T,  Moriyama  H  dan  Nagai  M. 2006.  Vasorelaxant  effects  of methyl brevifolincarboxylate from the  leaves  of  Phyllanthus  niruri. Biological  and  Pharmaceutical Bulletin , 29 (1), pp.177-179.
Kamei  J  dan  Kasuya  Y.  1992. Antitussive  effects  of  Ca2+ channel  antagonists. European journal of pharmacology . 212(1),
pp.61-66.
Kassuya  C.A,  Leite  D.F,  de  Melo  L.V,
Rehder,  V.L.G  dan  Calixto  J.B. 2005. Anti-inflammatory properties  of  extracts,  fractions and lignans isolated from Phyllanthus amarus. Planta Medica , 71 (08), pp.721-726
Mellinger  C.G,  Carbonero  E.R,  Cipriani T.R, Gorin, P.A dan Iacomini M, 2005. Xylans from the Medicinal Herb Phyllanthus n iruri. Journal
of natural products , 68 (1), pp.129-132
Morikawa  K et  al .2003. Inhibitory  effect of  quercetin  on  carrageenan- induced inflammation in rats. Life Sciences , 74(6), pp.709-721
Setyanto  DB.  2004.  Batuk  Kronik  pada Anak: masalah dan tata laksana. Sari Pediatri .6: 64-70.
Thomas  ANS.  2007. Tanaman  Obat Tradisional 2 . Yogjakarta: Kasinus. hlm 82-84.
Zimen  I.  2002.  Herbal  Antitussives.
Pulmonary Pharmacology & Therapeutics . 15:327 –333.