## EFEK PENAMBAHAN KITOSAN TERHADAP PERUBAHAN JUMLAH TOTAL  HEMOSIT  DAN  DAYA  TAHAN  TERHADAP  STRES
SALINITAS PADA UDANG VANAME ( Litopenaeus vannamei )
Effect  of  Addition  Chitosan  to  Total  Haemocyte  Count  Changes  and  Salinity  Stress Tolerance of White Shrimp ( Litopenaeus Vannamei )
Okky Hermawan 1 , Woro Hastuti Satyantini 2 dan Prayogo 2 .
1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Departemen Manajemen Kesehatan Ikan dan Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya *okky-h-10@fpk.unair.ac.id

## Abstrak
Udang  vaname  ( Litopenaeus  vannamei )  merupakan  suatu  komoditas  unggulan  industri  perikanan Indonesia.  Pada  budidaya  udang  vaname,  muncul  beberapa  kendala,  yaitu  adanya  serangan  penyakit  yang disebabkan  oleh  virus  dan  bakteri.  Hal  tersebut  dapat  diatasi  dengan  pemberian  imunostimulan  untuk pencegahan  penyakit  melalui  peningkatan  sistem  imun  udang.  Kitosan  adalah  salah  satu  bahan  yang  dapat digunakan sebagai imunostimulan. Kitosan dapat meningkatkan sistem imun. Stres merupakan respon fisiologis yang  terjadi  saat  hewan  berusaha  mempertahankan  kondisi  tubuhnya  dari  perubahan  lingkungan.  Faktor lingkungan  seperti  suhu,  oksigen  terlarut  dan  salinitas  dapat  menyebabkan  terjadinya  perubahan  jumlah  total hemosit. Jumlah total hemosit dapat digunakan untuk mengetahui status kesehatan udang.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  penambahan  kitosan  pada  pakan  terhadap  perubahan jumlah  total  hemosit  dan  daya  tahan  terhadap  stres  salinitas  pada  udang  vaname  ( Litopenaeus  vannamei ). Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  eksperimental  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan empat perlakuan serta empat ulangan. Perlakuan yang digunakan adalah penambahan kitosan sebesar 0 mg/kg pakan (A1), 250 mg/kg pakan (A2), 500 mg/kg pakan (A3) dan 1000 mg/kg pakan (A4). Parameter yang diamati adalah jumlah total hemosit selama 14 hari pemeliharaan, 24 jam dan 48 jam setelah uji stres salinitas, kelangsungan  hidup  saat  uji  stres  salinitas  dan  kualitas  air.  Data  dianalisis  menggunakan  Analisis  Varian (Anova) dan dilanjutkan dengan Uji Jarak Berganda Duncan .
Hasil penelitian  yang dilakukan  menunjukkan bahwa penambahan kitosan pada pakan selama 14 hari pemeliharaan dan selama 24 jam setelah uji stres salinitas memberikan pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05) terhadap jumlah total hemosit udang vaname dengan jumlah total hemosit tertinggi diperoleh pada perlakuan A2 (250 mg kitosan/kg pakan). Empat puluh delapan jam setelah uji stres salinitas tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah total hemosit udang vaname dan kelangsungan hidup udang vaname.
Kata kunci : Udang Vaname, Kitosan, Hemosit, Uji Stres Salinitas

## Abstract
White shrimp is a one of leading commodity fisheries industry in Indonesia. There are some constraints in its culture, caused by viruses and bacteria. But it can be solved by increasing the immune system of shrimp. Chitosan  is  one  of  the  materials  that  can  be  used  as  an  immunostimulant.  Chitosan  can  stimulate  the  immune system.  Stress  is  a  physiological  response  that  occurs  when  the  animals  try  to  maintain  condition  of environmental  changed.  The  environmental  factor  such  as  temperature,  dissolved  oxygen  and  salinity  may change total haemocyte count. Total haemocyte count can be used to know the health status of the shrimp.
The purpose of research to determine the effect of addition chitosan on feed to total haemocyte count changes and salinity stress tolerance. The method of  research used experimentaly method by using completely random design (RAL) with four treatments and four repetitions. Treatments which were used addition chitosan 0 mg/kg  diet  (A1),  250  mg/kg  diet  (A2),  500  mg/kg  diet  (A3)  and  1000  mg/kg  diet  (A4).  The  main  parameter which was observed were total haemocyte count changes for 14 days, 24 hours and 48 hours after salinity stress test,  survival  rate  at  salinity  stress  test  and  water  quality.  The  results  were  analyzed  by  Analysis  of  Varian (Anova) continued by Duncan’s Multiple Range Test.
The result showed that chitosan addition in feed for 14 days and 24 hours after salinity stress test, gave the significantly different (P<0.05) to total haemocyte count of white shrimp with the highest of total haemocyte
count  obtained  in  treatment  of  A2.  Fourty  eight  hours  after  salinity  stress  test  did  not  give  the  significant different to total haemocyte count and survival rate of white  shrimp.
Key word: Vannamei Shrimp, Chitosan, Haemocyte, Salinity Stress Test

## PENDAHULUAN
Udang  vaname  ( Litopenaeus  van- namei )  merupakan  suatu  komoditas  ung- gulan  industri  perikanan  Indonesia.  Mun- cul beberapa kendala pada budidaya udang vaname  yaitu  adanya  serangan  penyakit yang  disebabkan  oleh  virus  dan  bakteri (Sukenda  dkk.,  2007). Salah  satu  upaya untuk  pencegahan  penyakit  adalah  dengan meningkatkan  sistem  imun  udang  dengan cara  pemberian  imunostimulan  (Pujiati dkk., 2013).
Salah  satu  bahan  imunostimulan adalah  kitosan  (Sukenda  dkk.,  2007). Suptijah  (2006)  menyatakan,  bahwa  kito- san  dapat  merangsang  sistem  imun  dan bersifat antibakteri. Meshkini et al. (2012) melaporkan  bahwa  penggunaan  kitosan pada pakan sebagai imunostimulan mampu meningkatkan  total  sel  darah  putih  pada ikan rainbow trout ( Onocorhynchus mykiss ).
Subyakto (2000) menyatakan, bahwa  stres  merupakan  respon  fisiologis yang  terjadi  saat  hewan  berusaha  mem- pertahankan kondisi tubuhnya dari kondisi lingkungan,  contohnya  adalah  salinitas. Salinitas  dapat  mempengaruhi  perubahan jumlah total hemosit. Hal ini sesuai dengan pernyataan  Van  de  Braak et  al .  (2002), bahwa  faktor  lingkungan  seperti  suhu, Salinitas dan oksigen terlarut dapat menye- babkan  perubahan  jumlah  total  hemosit pada Crassostrea  virginica di  alam. Manoppo  (2011)  dan  Putri  dkk.  (2013) menyatakan  bahwa  jumlah  total  hemosit dapat  digunakan    untuk  memantau  status kesehatan  udang  karena  hemosit  krustasea memainkan  peranan  penting  dalam  sistem pertahanan  tubuh  udang  terhadap  patogen seperti  virus,  bakteri,  fungi,  protozoa  dan metazoa.  Jumlah  total  hemosit  juga  dapat bervariasi  berdasarkan  beberapa  faktor, salah  satunya  disebabkan  oleh  stres lingkungan.
Beberapa keunggulan yang dimiliki oleh  kitosan  salah  satunya  yaitu  dapat digunakan  sebagai  bahan  imunostimulan, maka  perlu  dilakukan  penelitian  tentang pengaruh  penambahan  kitosan  terhadap perubahan  jumlah  total  hemosit  dan  daya tahan  terhadap  stres  salinitas  pada  udang vaname ( L. vannamei ).

## METODOLOGI Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan Agustus–September 2014 di Laboratorium  Pendidikan  Fakultas  Perika- nan  dan  Kelautan  Universitas  Airlangga Surabaya.

## Materi Penelitian
Peralatan Penelitian
Alat  yang  digunakan  terdiri  atas akuarium berukuran (50x30x30) cm 3 , aera- tor,  selang  aerasi,  timbangan  digital,  gelas ukur,  kompor  listrik,  Beaker  glass,  tabung berskala,  alumunium  foil,  refraktometer, pH  meter, Dissolve  Oxygen (DO)  kit,  ter- mometer,  gunting,  sterofoam,  mikroskop, syringe , ammonia test kit , pipet, microtube dan haemositometer.

## Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam pene- litian  ini  adalah  udang  vaname  stadia  de- wasa dengan panjang 10-11 cm, air tawar, air  laut,  kitosan  dari  limbah  cangkang kepiting  bakau,  pakan  udang  (pelet), akuades, HCl 1 N, NaOH 3,5 %, NaOH 50
%,  alkohol  70  %,    antikoagulan  (30  mM trisodium citrate, 0.34 M sodium chloride, 10 mM EDTA, pH 7.5)  dan asam asetat 1 %.

## Metode Penelitian
Rancangan  penelitian  mengguna- kan  metode  eksperimental  dengan  Ranca- ngan  Acak  Lengkap  (RAL)  satu  faktor
dengan  4  taraf  perlakuan,  untuk  mem- perkecil  kekeliruan  maka  setiap  perlakuan diberi  pengulangan  sebanyak  4  kali  se- hingga diperoleh 16 unit percobaan.

## Prosedur Kerja Persiapan Penelitian
Peralatan  yang  digunakan  dicuci sampai bersih kemudian dibilas dengan air tawar.  Peralatan  yang  sudah  bersih  di- sterilkan  dengan  larutan  khlorin  150  ppm. Kemudian, peralatan dikeringkan di bawah sinar matahari.

## Pembuatan Kitosan
Kitosan  diperoleh  melalui  turunan kitin  yang  berasal  dari  limbah  cangkang kepiting  bakau.  Masduki  (1996) dalam Djamaludin (2009) menerangkan, pembua- tan  kitosan  dibagi  menjadi  tiga  tahap. Tahap  pertama  disebut  demineralisasi, yaitu  perendaman  kulit  kepiting  dalam larutan HCl 1 N dengan perbandingan 1:7 selama  8  jam.  Tahap  kedua  adalah  de- proteinasi,  yaitu  perendaman  hasil  demi- neralisasi  dalam  NaOH  3,5  %  selama  1 jam pada suhu 90°C. Tahap terakhir adalah deasetilasi,  yaitu  perendaman  hasil  depro- teinasi  dalam  NaOH  50%  pada  suhu 100°C.  Hasil  kitosan  yang  sudah  jadi tersebut dalam bentuk bubuk.

## Persiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  pada penelitian  adalah  udang  vaname  yang berasal  dari  Balai  Pengembangan  Budi- daya  Air  Payau  (BPBAP)  Situbondo. Udang  vaname  stadia  dewasa  terpilih  ter- sebut  memiliki  panjang  10-11  cm.  Sebe- lum diberi perlakuan, udang vaname diak- limatisasi  selama  satu  minggu  pada  akua- rium  dengan  kepadatan  10  ekor  setiap akuarium  dan  diberi  aerasi  pada  kondisi laboratorium. Kualitas air dijaga agar tetap pada  kisaran  optimal  untuk  pemeliharaan udang, yaitu suhu air media berkisar antara 27,5-29  ºC;  pH  7,2-7,4;  kandungan  oksi- gen terlarut (DO) 4,00-8,00 mg/L, salinitas sebesar  32–35  ppt,  dan  ammonia  sebesar
0,03-0,23  mg/L  (Eloovara,  2001;  KPPKP, 2012; Putri dkk., 2013).

## Persiapan Pakan
Menurut  Hafiluddin  dan  Triajie (2011)  yang  telah  dimodifikasi,  prosedur pembuatan  larutan  kitosan  250  mg/kg pakan  adalah  serpihan  kitosan  ditimbang sebanyak  250  mg,  kemudian  melarutkan- nya ke dalam asam asetat 1 % sebanyak 10 ml  dan  diaduk  sampai  larut  kemudian dimasukkan  ke  dalam  gelas  ukur,  setelah itu  dimasukkan  akuades  ke  dalam  gelas ukur  hingga  volumenya  mencapai  300  ml untuk  memudahkan  pencampuran  ke  da- lam  pakan.  Untuk  pembuatan  larutan kitosan  500  ppm  dan  1000  ppm  pro- sedurnya  sama  dengan  pembuatan  larutan kitosan 250 ppm.
Pakan yang digunakan dalam pene- litian ini adalah berupa pakan udang vana- me  komersial  (pelet)  dengan  kandungan protein 36 %, serat kasar 4 %, lemak 5 %, kadar  air  12  %  dan  kadar  abu  15  %. Larutan  kitosan  sesuai  dosis  perlakuan (250 mg, 500 mg dan 1000 mg) kemudian dicampurkan  ke  dalam  1  kg  pakan komersial untuk masing-masing perlakuan. Setelah  tercampur  antara  pakan  komersial dengan  larutan  kitosan,  campuran  pakan udang  tersebut  di- repele t  atau  dicetak ulang  sehingga  bentuk  dan  ukurannya kembali ke ukuran awal.
Pakan  udang  vaname  diberikan sebanyak  3  %  dari  total  berat  tubuh. Frekuensi pemberian pakan dilakukan tiga kali  sehari,  yaitu  pukul  09.00  WIB,  13.00 WIB dan 17.00 WIB (Putri dkk., 2013).

## Uji Stres Salinitas
Uji  stres  salinitas  adalah  suatu  uji perlakuan  salinitas  yang  dapat  dinaikkan atau  diturunkan  dengan  tujuan  untuk  me- ngetahui  tingkat  ketahanan  tubuh  pada udang vaname. Uji stres dilakukan dengan cara  memindahkan  hewan  uji  dari  akua- rium pemeliharaan dengan salinitas 30 ppt ke  dalam  akuarium  pemeliharaan  dengan salinitas  20  ppt.  Menurut  Taqwa  dkk. (2012),  tingkat  kematian  rentan  terjadi
akibat  adanya  perubahan  salinitas  yang diduga disebabkan oleh perubahan osmotik yang terlalu besar. Menurut Meshkini et al. (2012), uji stres salinitas dilakukan selama
48  jam.  Pengamatan  jumlah  total  hemosit dilakukan pada 24 jam dan 48 jam setelah uji  stres  salinitas.  Pengamatan  kelangsu- ngan  hidup  hewan  uji  dilakukan  setiap  6 jam sekali.

## Parameter Pengamatan
Parameter  utama  pada  penelitian ini  adalah  jumlah  total  hemosit  atau Total Haemocyte  Count (THC)  dan  kelangsu- ngan  hidup  saat  uji  stres  salinitas.  Para- meter pendukung pada penelitian ini meli- puti:  suhu,  pH,  salinitas,  (DO),  kadar ammonia  dan  pengamatan  fisiologis  pada udang vaname saat uji stres salinitas.

## Analisis Data
Analisis statistik menggunakan Analisis Varian (Anova) untuk mengetahui pengaruh  pemberian  kitosan  dengan  dosis yang  berbeda  terhadap  perubahan  jumlah total  hemosit  dan  kelangsungan  hidup udang  vaname.  Untuk  mengetahui  letak perbedaan  pengaruh  antar  perlakuan  dilan- jutkan  dengan  Uji  Jarak  Berganda  Duncan ( Duncan’s  Multiple  Range  Test )  (Kus- riningrum, 2009).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Data jumlah total hemosit pada hari ke-0  (sebelum  perlakuan),  selama  14  hari pemeliharaan  yang  diberi  kitosan  dengan dosis  yang  berbeda,  24  jam  dan  48  jam setelah  uji  stres  salinitas  pada  udang vaname terdapat pada Tabel 1.
Tabel 1. Jumlah Total Hemosit Udang Vaname ( L. vannamei ) Perlakuan Rata-rata ( x ) jumlah total hemosit udang vaname ( x10 6 sel/ml ) + SD Hari ke-0 Hari ke-14 24 jam setelah uji stres salinitas 48 jam setelah uji stres salinitas A1 20,9 25,95 b + 3,61 32,09 c + 3,67 39,78 a + 3,63 A2 20,9 36,58 a + 8,19 51,15 a + 4,30 31,43 a + 4,99 A3 20,9 21,54 bc + 0,62 28,80 c + 6,33 37,36 a + 2,96 A4 20,9 23,61 bc + 0,84 39,45 b + 1,39 34,79 a + 2,25
Berdasarkan  hasil  sidik  ragam  di- ketahui  bahwa  perlakuan  pemberian  kito- san  dengan  dosis  yang  berbeda  menun- jukkan  hasil  perbedaan  yang  nyata (p<0,05)  terhadap  jumlah  total  hemosit selama  14  hari  pemeliharaan  udang  va- name.  Berdasarkan  hasil  Uji  Jarak  Ber- ganda  Duncan,  maka  diketahui  bahwa jumlah  total  hemosit  tertinggi  adalah  A2 (36,58  x10 6 sel/ml).  Jumlah  total  hemosit terendah adalah A3 (21,54 x10 6 sel/ml).
Uji  stres  salinitas  pada  udang  va- name  menunjukkan  hasil  perbedaan  yang nyata  (p<0,05)  terhadap  jumlah  total  he- mosit selama 24 jam setelah uji stres  Sali- nitas.  Berdasarkan  hasil  Uji  Jarak  Ber- ganda  Duncan,  maka  diketahui  bahwa
jumlah  total  hemosit  tertinggi  (p<0,05) adalah  A2  (51,15  x10 6 sel/ml).  Jumlah total  hemosit  terendah  adalah  A3  (28,80 x10 6 sel/ml).
Pemberian  kitosan  pada  pakan  me- nunjukkan  hasil  tidak  berbeda  nyata  (p <0,05)  terhadap  jumlah  total  hemosit  se- lama 48 jam setelah uji stres salinitas pada udang  vaname.  Pada  perlakuan  A2  terjadi penurunan  jumlah  total  hemosit,  se- dangkan  pada  perlakuan  A1  masih  terjadi peningkatan  jumlah  total  hemosit  pada udang vaname.
Data  tingkat  kelangsungan  hidup udang  vaname  selama  14  hari  pemeli- haraan,  24  jam  dan  48  jam  saat  uji  stres salinitas terdapat pada Tabel 2.
Tabel 2. Tingkat Kelangsungan Hidup Udang Vaname ( L. vannamei )
Perlakuan 14 hari pemeliharaan (%) Uji stres salinitas Rata-rata ( x ) + SD 24 jam (%) 48 jam (%) A1 100 100 96,88 96,88 a + 0,33 A2 100 100 96,88 96,88 a + 0,33 A3 100 100 94,44 94,44 a + 0,59 A4 100 100 96,88 96,88 a + 0,33
Berdasarkan  hasil  sidik  ragam  di- ketahui  bahwa  uji  stres  salinitas  menun- jukkan  tidak  berbeda  nyata  (p>0,05) terhadap  tingkat  kelangsungan  hidup udang vaname.
Respon  fisiologi  udang  vaname selama 48 jam uji stres salinitas menunjukkan  bahwa  udang  vaname  pada perlakuan  A2  (250  mg/kg  pakan)  telah berenang  secara  normal  dan  merespon pakan  yang diberikan pada 12 jam setelah uji  stres  salinitas.  Sementara  udang vaname  pada  perlakuan  A1  (kontrol)  baru menunjukkan  berenang  secara  normal  dan merespon  pakan  pada  24  jam  setelah  uji stres salinitas.

## Pembahasan
Penggunaan  beberapa  imunostimu- lan  terbukti  dapat  meningkatkan  respon imun  pada  ikan  (Meskini et  al .,  2012).
Peningkatan jumlah total hemosit tertinggi terjadi  pada  perlakuan  A2  (250  mg/kg pakan)  dibandingkan  perlakuan  lainnya selama  14  hari  pemeliharaan.  Hal  tersebut memperlihatkan bahwa pada perlakuan A2 dapat  meningkatkan  jumlah  total  hemosit pada  udang  vaname  dibandingkan  dengan perlakuan  A1  (kontrol).  Hal  ini  diduga karena  kitosan  yang  komponen  utamanya glukosamin  mirip  dengan  lipopolisakarida dapat  merangsang  organ  limfoid  yang merupakan  organ  hematopoetik  pada udang untuk memproduksi hemosit.
Kondisi  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian Salfira (1998) tentang pengaruh pemberian lipopolisakarida terhadap sistem kekebalan udang  windu,  yang  menyatakan  bahwa lipopolisakarida  dapat  meningkatkan  jum- lah total hemosit.
Hemosit  disintesis  oleh  jaringan hematopoietik yang  merupakan  sepasang epigastric  nodule .  Produksi  tersebut  dila- kukan  untuk  mencapai  keadaan  homeo- statis  pasca  introduksi  imunostimulan. Jaringan  tersebut  terletak  tepat  di  bagian dorsal  pada  lambung  bagian  depan ( anterior  stomach ),  yaitu  tempat  sintesa hemocyanin.  Bila  imunostimulan  dapat meningkatkan  hemocyanin,  maka  secara langsung  akan  terjadi  pula  peningkatan hemosit (Ekawati dkk., 2012).
Jumlah total hemosit selama 24 jam setelah  uji  stres  salinitas  pada  udang vaname  tertinggi  dicapai  pada  perlakuan A2  (51,15  x10 6 sel/ml).  Pada  uji  stres salinitas,  semua  perlakuan  mengalami  pe- ningkatan  jumlah  total  hemosit.  Tayibu (2012)  menyatakan  bahwa,  peningkatan jumlah  total  hemosit  tersebut  diakibatkan oleh  kontraksi  jantung  yang  meningkat sebagai  upaya  homeostatis  yang  dikem- bangkan  karena  keadaan  lingkungan  yang berubah.
Pada  saat  48  jam  setelah  uji  stres salinitas,  pada  perlakuan  A2  (31,43  x10 6 sel/ml) mengalami penurunan jumlah total hemosit  yang  signifikan,  sementara  pada perlakuan  A1  (39,78  x10 6 sel/ml)  justru mengalami  peningkatan.  Hal  ini  menun- jukkan  udang  vaname  pada  perlakuan  A2 sudah  berada  dalam  keadaan  homeostasi karena  jumlah  total  hemosit  berangsur normal  sementara  pada  perlakuan  A1  ma- sih  mengalami  stres  karena  masih  belum mencapai  keadaan  homeostasi.  Hal  ini ditunjukkan  dengan  jumlah  total  hemosit pada perlakuan A1 yang masih meningkat. Pada  penelitian  ini,  dosis  optimum pemberian  kitosan  melalui  pakan  pada udang  vaname  adalah  sebesar  250  mg/kg
pakan.  Pada  perlakuan  A3  dan  A4  juga dapat memberikan pengaruh, namun demi- kian  ketika  pemberian  dosis  itu  melebihi batas  kemampuan  tubuh  justru  akan  ber- dampak negatif pada udang. Hal ini sesuai dengan  pendapat  Ekawati  dkk.  (2012) yang mengatakan bahwa ketika pemberian pakan  yang mengandung C. ceratosporum (salah satu bahan imunostimulan) melebihi batas  kemampuan  tubuh  untuk  meres- ponnya  justru  dapat  menurunkan  sistem kekebalan tubuh udang.
Stres  adalah  suatu  keadaan  dimana keseimbangan  atau homoestasis yang  nor- mal  pada  tubuh  udang  terganggu  atau terancam  oleh  faktor  eksternal  atau  faktor lingkungan.  Stres  diawali  dari  perubahan fisiologi  dan  diekspresikan  dalam  respon perilaku yang bertujuan untuk membangun kembali  keseimbangan  atau  kenyamanan dengan  melalui  memaksimalkan  fungsi respirasi  dan  osmoregulasi.  Hal  ini  dapat merugikan  apabila  terjadi  secara  kronis dan  berkepanjangan  (Wolffrom,  2004 dalam Tayibu, 2012). Osmoregulasi adalah  pengaturan  tekanan  osmotik  cairan tubuh  yang  layak  bagi  kehidupan  ikan sehingga proses-proses fisiologis tubuhnya berjalan  normal  (Rahardjo,  1980 dalam Taqwa, 2008). Kaligis (2010) menyatakan, bahwa  perubahan  salinitas  dapat  menye- babkan udang mudah stres dan kurang nafsu makan.
Berdasarkan hasil sidik ragam ting- kat kelangsungan hidup selama 48 jam se- telah  uji  stres  salinitas  menunjukkan  hasil tidak  berbeda  nyata.  Hal  ini  dikarenakan saat  uji  stres  salinitas,  terjadi  kematian pada  udang  vaname  di  setiap  perlakuan. Kematian  ini  diduga  udang  vaname  me- ngalami  stres  yang  berkepanjangan  akibat perubahan salinitas.
Stres  dapat  membuat  udang  men- jadi  lemah.  Hal  ini  dikarenakan  dalam keadaan  stres,  udang  akan  terlihat  kurang respon terhadap pakan yang diberikan. Jika hal  tersebut  berlanjut  secara  berkepanja- ngan, udang akan mudah terserang penya- kit apabila ada penyakit atau patogen asing yang  menyerang.  Hal  ini  sesuai  dengan
pendapat  Tidwell  (1998) dalam Evan (2009)  yang  menyatakan,  bahwa  mun- culnya  penyakit  merupakan  akibat  adanya interaksi  antara  agen  penyebab  penyakit, inang dan lingkungan. Dalam hal ini, ling- kungan  dapat  menjadi  stresor  (penyebab munculnya  penyakit),  karena  pada  saat lingkungan  memburuk,  seperti  adanya fluktuasi kualitas air secara ekstrim, udang mudah stres dan akibatnya rentan terhadap penyakit,  serta  dapat  mengakibatkan  ke- matian atau penurunan sintasan.
Lebih lanjut, Tayibu (2012) menya- takan,  bahwa  udang  vaname  yang  stres terlihat dari kurang respon terhadap pakan yang  diberikan  dan  cenderung  diam  di sudut akuarium. Dalam penelitian ini, pada rentang  waktu  12  jam  uji  stres  salinitas, rata-rata  udang  pada  perlakuan  A1  masih belum merespon pakan yang diberikan dan baru mulai merespon pakan yang diberikan pada  rentang  waktu  24  jam  uji  stres salinitas,  sementara  udang  pada  perlakuan A2  sudah  mulai  merespon  pakan  yang diberikan pada rentang  waktu  12 jam. Hal ini  mengindikasikan  bahwa  udang  pada perlakuan  A1  masih  berada  dalam  fase stres  sehingga  udang  tersebut  kurang respon  terhadap  pakan  yang  diberikan, sementara udang pada perlakuan A2 sudah dalam keadaan homeostasi sehingga udang sudah  dapat merespon  pakan yang diberikan.
Kualitas air meliputi salinitas, suhu, pH,  DO  dan  amoniak.  Salinitas  selama  14 hari pemeliharaan adalah 30 ppt sementara saat  uji  stres  diturunkan  hingga  mencapai 20 ppt. Suhu pada pagi hari berkisar 27-28 o C  dan  pada  sore  hari  yang  berkisar  28-29
o C. Hasil pengukuran pH selama penelitian berlangsung  berkisar  7,2-7,4.  Oksigen  ter- larut selama penelitian adalah 4,0-6,0 mg/l. Amoniak selama penelitian adalah berkisar 0,05-0,1  mg/l.  Kualitas  air  selama  pene- litian sesuai dengan pendapat dari Eloovara (2001)  bahwa  suhu  optimal  untuk  udang vaname  berkisar  27,5-29 o C,  Putri  dkk.
(2013)  bahwa  pH  optimal  untuk  udang vaname  berkisar  7,2-7,4,  nilai  amoniak udang  vaname  sebesar  0,03-0,23  mg/l  dan
KPPKP  (2011)  bahwa  kelarutan  oksigen optimal  pada  udang  vaname  berkisar  4,0- 8,0 mg/l.

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Penambahan  kitosan  pada  pakan selama  14  hari  pemeliharaan  dan  24  jam setelah  uji  stres  salinitas  memberikan pengaruh  terhadap  jumlah  total  hemosit udang vaname ( L. vannamei ). Jumlah total hemosit tertinggi diperoleh dengan penam- bahan  kitosan  250  mg/kg  pakan.  Penam- bahan  kitosan  pada  pakan  tidak  membe- rikan  pengaruh  terhadap  jumlah  total hemosit  48  jam  setelah  uji  stres  salinitas dan  kelangsungan  hidup  udang  vaname setelah uji stres salinitas.

## Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka disarankan  untuk  menambahkan  kitosan pada  pakan  komersial  dengan  dosis  250 mg/kg  pakan  untuk  meningkatkan  jumlah total hemosit dan daya tahan terhadap stres salinitas pada udang vaname ( L. vannamei ).

## DAFTAR PUSTAKA
Djamaludin,  A.  M.  2009.  Pemanfaatan Khitosan  Dari  Limbah  Krustasea Untuk  Penyembuhan  Luka  Pada Mencit  ( Mus  muscullus  albinus ).
Skripsi.  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam.  Institut Pertanian Bogor. Bogor. 41 hal.
Ekawati,  A.  W.,  H.  Nursyam,  E.
Widjayanto  dan  Marsoedi.  2012. Diatome Chaetoceros  ceratospo- rum Dalam  Formulasi  Pakan  Me- ningkatkan  Respon  Imun  Seluler Udang Windu ( Penaeus monodon ). Jurnal Exp. Science, II (1): 20-28.
Eloovara,  A.  K.  2001.  Shrimp  Farming Manual:  Practicial  Technology  For Intensive  Shrimp  Production.  Uni- ted States of America. Page 1-3.
Evan,  Y.  2009.  Uji  Ketahanan  Beberapa Strain Larva Udang Galah ( Macro- brachium  rosenbergii de  Man)
Terhadap  Bakteri Vibrio  harveyi. Skripsi.  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor. 51 hal.
Halifuddin  dan  H.  Triadjie.  2011.  Penam- bahan  Khitosan  Pada  Pakan  Ikan
Bandeng  ( Chanos  chanos )  Sebagai Penurun Cita Rasa Lumpur ( Geosmine ). Embryo, VIII (2): 126- 132.
Kaligis,  Y.  E.  2010.  Peningkatan  Sintasan dan  Kinerja  Pertumbuhan  Udang Vaname ( Litopenaeus vannamei ) di
Media Bersalinitas Rendah.
Disertasi.  Institut  Pertanian  Bogor.
Bogor. 160 hal.
Kepala  Pusat  Penyuluhan  Kelautan  dan Perikanan.  2011.  Budidaya  Udang Vaname  ( Litopenaeus  vannamei ). Jakarta. 52 hal. Kusriningrum.  2009.  Perancangan  Perco- baan.  Fakultas  Kedokteran  Hewan Universitas  Airlangga.  Surabaya. Hal. 1.
Meshkini,  S.,  A.  A.  Tafy,  A.  Tukmechi and  F.  F.  Pajuh.  2012.  Effects  of Chitosan  on  Hematological  Para- meters  and  Stress  Resistance  in Rainbow  Trout  ( Onocorhynchus mykiss ).  Veterinary  Research  Fo- rum, III (1): 49-54.
Pujiati, Sarjito dan Suminto.  2013. Penga- ruh  Penambahan  Tepung  Cacing Tanah ( Lumbricus rubellus ) Dalam Pakan  Buatan  Terhadap  Jumlah Total  Hemosit  dan  Aktivitas  Fago- sitosis  Udang  Vanname  ( Litope- naeus  vannamei ).  Jurnal  Manaje- men  Akuakultur  dan  Teknologi,  II (1): 66-74.
Putri,  F.M.,  Sarjito  dan  Suminto.  2013. Pengaruh  Penambahan Spirulina sp.  Dalam  Pakan  Buatan  Terhadap Jumlah  Total  Hemosit  dan  Akt- ivitas  Fagositosis  Udang  Vaname ( Litopenaeus vannamei ). Jurnal Fa- kultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Diponegoro, 1(2):  102- 112.
Salfira.  1998.  Pengaruh  Pemberian  LPS (Lipopolisakarida)  Dari  Dinding
Sel  Bakteri Vibrio  harveyi Terha- dap  Gambaran  Sistem  Kekebalan Non-Spesifik  Pada  Udang  Windu
( Penaeus  monodon Fabr.).  Tesis. Program  Pascasarjana.  Institut  Per- tanian Bogor. Bogor. 56 hal.
Subyakto  S.  2000.  Pengaruh  Kadar  1- ascorbyl-2-phosphate-magnesium (APM)  Pakan  Terhadap  Kadar Vitamin  C  Hati,  Asam  Lemak  n-6 dan  n-3  dan  Rasio  Hydroksi- prolin/Prolin  Tubuh  dan  Kinerja Pertumbuhan  Serta  Respon  Stres Juvenil Ikan Kerapu Tikus ( Cromi- leples  altivelis ).  Tesis.  Program
Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. 86 hal. Sukenda, Y., Tri Anggoro,
D., Wahyuningrum dan Rahman. 2007. Penggunaan Kitosan untuk Pengen-
dalian  Infeksi Vibrio  harveyi pada Udang  Putih Litopanaeus  van- namei .  Jurnal  Akuakultur  Indo- nesia, VI (2); 205-209. Suptijah,  P.  2006.  Deskriptif  Karakteristik Fungsional  dan  Aplikasi  Kitin  Ki- tosan.  Prosiding  Seminar  Nasional Kitin  Kitosan.  Departemen  Tek- nologi  Hasil  Perikanan.  Institut Pertanian Bogor. Bogor. 11 hal. Taqwa, F. H. 2008. Pengaruh Penambahan Kalium  Pada Masa  Adaptasi  Penu- runan  Salinitas  dan  Waktu  Peng- gantian  Pakan  Alami  Oleh  Pakan Buatan  Terhadap  Performa  Pasca- larva  Udang  Vaname  ( Litopenaeus vannamei ). Tesis. Institut Pertanian Bogor. Bogor. 100 hal. Taqwa, F. H., A. D. Sasanti dan K. Gaffar. 2012.  Kelangsungan  Hidup,  Kerja Osmotik  dan  Konsumsi  Oksigen Pascalarva  Udang  Galah  Selama Penurunan  Salinitas  Dengan  Air Rawa  Pengencer  Yang  Ditambah- kan  Kalium.  Prosiding  InSINas. Hal 98-102. Tayibu, H. 2012. Respon Fisiologi Juvenil Udang  Windu, Penaeus  monodon
Fabricius Pada  Bobot  dan Densitas Pemeliharaan Yang Berbeda Dalam
Wadah Terkontrol. Disertasi.
Program  Pascasarjana.  Universitas
Hasanuddin. Makasar. 179 hal.
Van  de  Braak,  K.  2002.  Haemocytic Defence  in  Black  Tiger  Shrimp ( Penaeus  monodon ).  PhD  Thesis. Wageningen  University.  Wageni- gen. The Netherlands. 168 page.