## KORELASI FLAVONOID TOTAL DENGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK DAN FRAKSI DAUN PURING KURA ( Codiaeum variegatum L.)
Hendy Suhendy, Dhea Sinta Nurjanah * , Ira Rahmiyani
Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Bakti Tunas Husada *Email: dheashinta21@gmail.com
Received: 04/07/2024 , Revised: 31/07/2024 , Accepted: 02/08/2024, Published: 08/08/2024

## ABSTRAK
Puring  kura  ( Codiaeum  variegatum L.)  memiliki  potensi  sebagai  antioksidan  alami  karena kandungan  flavonoidnya  yang  dapat  menetralisir  radikal  bebas  dengan  cara  mendonorkan elektron  kepada  senyawa  radikal  bebas.  Flavonoid  berperan  penting  dalam  aktivitas antioksidan,  di  mana  semakin  tinggi  konsentrasi  flavonoid,  semakin  besar  aktivitas antioksidannya. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan korelasi nilai kesetaraan flavonoid total  dengan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan  fraksi  daun  puring  kura.    Ekstrak  dan  fraksi daun  puring  kura  dipantau  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dan  dilakukan penetapan  flavonoid  total  dan  aktivitas  antioksidan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis metode  DPPH.  Ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksan  menunjukkan  nilai  kesetaraan flavonoid total berturut-turut sebesar 66,690; 96,512 dan 66,184 mg QE/g sampel, sedangkan nilai  kesetaraan  aktivitas  antioksidan  adalah  60,109;  33,938  dan  32,836  mg  AAE/g  sampel. Fraksi gabungan 4 menunjukkan nilai kesetaraan flavonoid paling tinggi sebesar 299,615 mg QE/g  sampel,  sedangkan  nilai  kesetaraan  aktivitas  antioksidan  tertinggi  dimiliki  fraksi gabungan  6  yaitu  sebesar  288,599  mg  AAE/g  sampel.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan fraksi daun puring kura tidak dipengaruhi oleh kandungan flavonoid total  karena pada daun puring  kura  terdapat  senyawa  lain  yang  dapat  memberikan  aktivitas  antioksidan  seperti senyawa fenolik lain selain flavonoid atau senyawa-senyawa golongan terpenoid.
Kata kunci : Antioksidan, Codiaeum variegatum , flavonoid total, puring kura.

## ABSTRACT
Croton ( Codiaeum variegatum L.) has potential as a natural antioxidant due to its flavonoid content, which can neutralize free radicals by donating electrons to them. Flavonoids play an important  role in  antioxidant  activity, where the higher the concentration  of  flavonoids, the greater the antioxidant activity. This research aims to determine the correlation equivalence values between total flavonoid and antioxidant activity of croton leaves extract and fractions, and their correlation. The extract and fractions of croton leaves were monitored using thin- layer  chromatography  (TLC)  and  the  determination  of  total  flavonoids  and  antioxidant activity  was  conducted  using  UV-Vis  spectrophotometry  using  the  DPPH  method.  Ethanol, ethyl  acetate,  and  n-hexane  extracts  showed  total  flavonoid  equivalence  values  of  66.690, 96.512,  and  66.184  mg  QE/g  sample,  while  the  equivalence  values  of  antioxidant  activity were  60.109,  33.938,  and  32.836  mg  AAE/g  sample,  respectively.  Combined  fraction  4 exhibited the highest total flavonoid equivalence value at 299.615 mg QE/g sample, whereas
Suhendy et al./Pharmacoscript, Volume 7, No, 2, Agustus 2024, 312 - 330
Suhendy et al.;Korelasi Flavonoid Total dengan…..Pharmacoscript Volume 7 No. 2, Agustus 2024
combined  fraction  6  had  the  highest  antioxidant  activity  equivalence  value  at  288.599  mg AAE/g  sample. The  antioxidant  activity  of  croton  leaf  extract  and  fractions  was  not influenced  by  the  total  flavonoid  content.  This  is  because  the  croton  leaves  contain  other compounds that can contribute to antioxidant activity, such as other phenolic compounds in addition to flavonoids or terpenoid compounds.
Keywords : Antioxidant, Codiaeum variegatum, croton, flavonoid total.

## PENDAHULUAN
Radikal bebas masih banyak dibahas di  dunia  kesehatan  hingga  saat  ini,  karena kebanyakan  penyakit  disebabkan  oleh proses  oksidasi  berlebih  di  dalam  tubuh. Proses  oksidasi  diakibatkan  oleh  radikal bebas yang bersifat reaktif karena memiliki elektron yang tidak berpasangan, yang  menangkap  elektron  dari  suatu molekul untuk mencapai kestabilan (Halliwell  dan  Gutteridge,  2015).  Radikal bebas yang terus meningkat dapat menjadi penyebab  terjadinya  stres  oksidatif  dan
menyebabkan
timbulnya penyakit degeneratif seperti kardiovaskular,
diabetes  melitus,  dan  kanker  (Sharifi-Rad dkk., 2020). Hal tersebut ditunjang dengan prevalensi penyakit degeneratif tahun 2018 yang  mengalami  peningkatan  sebesar 65,7%  jika  dibandingkan  dengan  tahun 2013 (Kemenkes RI, 2018).
Untuk  mengatasi  bahaya  radikal bebas, maka diperlukan senyawa antioksidan,  yang  merupakan  senyawa yang  dapat  melindungi  sel-sel  dari kerusakan  dengan  menetralkan  radikal bebas. Antioksidan dapat berupa antioksidan  alami  yang  dapat  melindungi
tubuh dari bahaya radikal bebas, sedangkan  antioksidan  sintetik  berpotensi memberikan  efek  samping  berbahaya karena  sifat  karsinogeniknya  (Devitria, 2020).  Oleh  karena  itu,  antioksidan  alami dipilih  sebagai  alternatif  antioksidan  yang lebih aman.
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi menjadi  antioksidan  alami  adalah  puring kura  (Salim  dkk.,  2018).  Saat  ini,  puring kura  banyak  ditanam  dan  dikenal  sebagai tanaman hias.
Gambar 1. Tanaman puring kura
Secara empiris, puring kura dimanfaatkan sebagai obat demam, antijamur,  antidiare,  dan  analgetik  (Sawiji dan  Sukmadiani,  2021).  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Nuraini  dkk.  (2022), menyebutkan  bahwa  daun  puring  kura memiliki  isolat  yang  diduga  kuat  sebagai golongan flavonoid.  Selain itu, kandungan
flavonoid  dalam  ekstrak  daun  puring  kura sangat  tinggi  yaitu  antara  33,1%  hingga 37,63%  (Bijekar  dan  Gayatri,  2015; Nuraini dkk., 2022).
Flavonoid  memiliki  sifat  sebagai antioksidan dengan mendonorkan elektron kepada  senyawa  radikal  bebas  sehingga efek toksiknya dapat dinetralisir (Rodríguez De Luna dkk., 2020).
Flavonoid  diketahui  berperan  penting terhadap  aktivitas  antioksidan,  yang  mana semakin  tinggi  konsentrasi  flavonoid, maka semakin tinggi aktivitas antioksidannya (Nur dkk., 2019).
Salah  satu  jenis  puring,  yaitu  puring merah ( Codiaeum variegatum (L.) Rumph) terbukti memberikan aktivitas antioksidan. Pengujian  metode  DPPH  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  pada  daun  puring merah  memiliki  aktivitas  antioksidan sedang  dengan  IC 50 sebesar  245,94  mg/L.
Fraksi  air  dan  etil  asetat  menunjukkan aktivitas  antioksidan  yang  kuat  dengan IC 50 masing-masing  sebesar  23,80  mg/L dan 16,46 mg/L (Salim dkk., 2018).
Daun puring kura merupakan tanaman  yang  masih  satu  genus  dengan puring  merah.  Berdasarkan  kesamaan tingkat  taksonomi  tersebut  daun  puring kura  diduga  memiliki  potensi  aktivitas antioksidan yang sama dengan daun puring merah. Oleh sebab itu, penelitian ini perlu
dilakukan  untuk  membuktikan  aktivitas antioksidan  daun  puring  kura  serta korelasinya dengan flavonoid total.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini  yaitu  pengering  simplisia, rotary evaporator (IKA  RV-8), herb  grinder (Getra),  chamber,  lampu  UV  (ultraviolet)
(Camag),  plat  KLT  GF 254 (Mercks), tabung  eppendorf,  spektrofotometer  UV- Vis (Genesys Thermo Scientific), mikropipet, kuvet, dan alat-alat laboratorium lainnya.
Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  antara  lain  serbuk  simplisia daun  puring  kura,  etanol  70%  (PT Brataco),  etil  asetat  (PT  DPH),  n-heksan (PT  DPH),  kloralhidrat  70%  LP,  asam klorida  (HCl)  2N  (Merck),  besi  (III) klorida  (FeCl 3 )  1%  (Merck),  gelatin  1%, natrium  hidroksida  (NaOH)  (Merck), ammonia  encer,  amil  alkohol,  kloroform, serbuk Mg, etanol 96%, toluen, anisaldehid-asam sulfat, Lieberman Burchard  (asam  asetat  anhidrat  dan  asam sulfat  pekat),  Dragendorff  (bismuth  nitrat dan  kalium  iodida),  Mayer  (merkuri  (II) klorida dan kalium  iodida), eter, silika  gel H60,  kuersetin  p.a.  (Sigma  Aldrich), alumunium  klorida  (AlCl 3 )  10%,  natrium
asetat,  asam  askorbat  p.a.,  2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl  (DPPH)  (Sigma  Aldrich), sitroborat, etanol p.a, metanol p.a.

## Jalannya Penelitian

## 1. Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan  di Herbarium Jatinangor,
Laboratorium
Taksonomi  Tumbuhan,  Jurusan  Biologi,
FMIPA Universitas Padjajaran, No. 25/HB/11/2023.

## 2. Preparasi Sampel
Daun  puring  kura  sebanyak  3  kg,  di sortasi  basah  dan  dicuci  sampai  bersih dengan  air  mengalir,  ditiriskan,  dan dikeringkan  pada  suhu  45 o C.  Dilakukan sortasi  kering  kemudian  diblender  dan diayak sehingga diperoleh serbuk simplisia yang lebih halus dan seragam.

## 3. Karakterisasi Simplisia
Pemeriksaan  karakterisasi  simplisia terdiri dari parameter yang bersifat khusus (spesifik) dan umum (non-spesifik).
Parameter spesifik diantaranya makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar  sari  larut  air  dan  etanol  serta skrining  fitokimia.  Sedangkan,  parameter non-spesifik  meliputi  penetapan  kadar  air, kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, kadar abu larut air, dan susut pengeringan.

## 4. Ekstraksi  Simplisia  Daun  Puring Kura
Maserasi bertingkat digunakan untuk mengekstraksi  senyawa  dalam  simplisia daun  puring  kura,  menggunakan  pelarut yang  memiliki  polaritas  berbeda  yaitu  n- heksan, etil asetat, dan etanol 70%. Serbuk simplisia daun puring kura sebanyak 500 g direndam  5  liter  n-heksan,  didiamkan selama  3x24  jam  dengan  diaduk  beberapa kali  dan  pelarut  diganti  setiap  24  jam. Selanjutnya, disaring dan residu dikeringkan  kemudian  dilakukan  kembali ekstraksi  menggunakan  etil  asetat  dan etanol  70%  menggunakan  cara  yang serupa. Setiap ekstrak cair yang diperoleh, dipekatkan  kemudian  diuapkan  hingga ekstrak  mengental  kemudian  dihitung rendemennya.

## 5. Pemantauan Ekstrak Daun Puring
Kura  dengan  Kromatografi  Lapis Tipis (KLT)
Pemantauan  masing-masing  ekstrak daun  puring  kura  dilakukan  menggunakan fase gerak yang sesuai dan silika gel GF 254 sebagai fase diamnya. Hasil dipantau pada lampu  UV  254  dan  366  nm.  Setelah  itu disemprot menggunakan penyemprot bercak  H 2 SO 4 10%  sebagai  penampak bercak universal serta sitroborat dan DPPH 0,2% sebagai penampak bercak spesifik.
6. Penetapan Flavonoid Total Ekstrak  Daun  Puring  Kura  yang Setara dengan Kuersetin
Larutan pembanding kuersetin dibuat  deret  konsentrasi  (40-130  µL). Pengujian  dilakukan  dengan  cara  100  µL kuersetin  ditambahkan  dengan  300  µL metanol,  AlCl 3 10%  dan  natrium  asetat  1 M  masing-masing  sebanyak  20  µL,  dan 560  µL  aquadest.  Selanjutnya  dilakukan pengujian terhadap larutan ekstrak dengan prosedur yang sama. Blanko yang digunakan  yaitu  400  µL  metanol,  20  µL AlCl 3 10% dan 20 µL natrium asetat 1 M, serta 560 µL aquadest. Dilakukan inkubasi campuran dengan waktu 30 menit. Setelah itu,  diukur  absorbansinya  pada  panjang gelombang 415 nm. Pengulangan pengukuran  dilakukan  6  kali  pada  tiap ekstrak.  Absorbansi  setiap  konsentrasi larutan  pembanding  digunakan  untuk pembuatan  kurva  kalibrasi  kuersetin  dan digunakan  untuk  menghitung  total  kadar flavonoid  sampel  sebagai  nilai  kesetaraan (ekuivalen)  dalam  g  kuersetin  per  100  g ekstrak (g QE/100 g) (Chang dkk., 2002).

## 7. Penetapan  Aktivitas  Antioksidan

## Ekstrak Daun Puring Kura
Larutan  stok  DPPH  dibuat  dengan konsentrasi  50  µg/mL.  Asam  askorbat dibuat larutan stok dengan konsentrasi 200 µg/mL.  Sedangkan  konsentrasi  larutan
ekstrak  dibuat  10.000  µg/mL.  Dibuat  6 variasi  konsentrasi  dari  larutan  stok  asam askorbat,  diambil  10-35  µL  (dilakukan triplo),  dimasukkan  ke  tabung  eppendorf, lalu  ditambahkan  metanol  p.a.  sebanyak 125  µL  dan  750  µL  larutan  DPPH. Diinkubasi  30  menit  di  ruangan  yang tertutup  dan  gelap.  Selanjutnya  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 517  nm sehingga  diperoleh  persen peredaman  masing-masing  konsentrasi, lalu dibuat kurva kalibrasi. Untuk pengujian sampel, diambil 12,5 µL larutan ekstrak,  ditambahkan  metanol  p.a.  hingga 125  µL  dan  750  µL  larutan  DPPH (disiapkan  6x).  Absorbansi  diukur  untuk menentukan  persentase  peredaman sampel yang selajutnya dimasukkan ke persamaan regresi  asam  askorbat  untuk  menghitung aktivitas  antioksidan  yang  dinyatakan sebagai  kesetaraan  asam  askorbat,  yaitu mg ascorbic  acid  equivalent (AAE/g sampel) (Celep dkk., 2015).

## 8. Fraksinasi Ekstrak Terpilih
Metode  Kromatografi  Cair  Vakum (KCV)  digunakan  untuk  proses  fraksinasi. Silika  gel  H60  dituang  ke  dalam  kolom lalu  ditambahkan  fase  gerak  dengan polaritas  rendah  dibantu  perataan  bagian atas  adsorben,  nyalakan  vakum  sampai semua fase gerak turun. Campuran sampel dan adsorben (1:1) dimasukkan, kemudian
vakum  dinyalakan.  Lalu  dimasukkan kertas  saring  yang  sesuai  diameter  kolom. Fase  gerak  menggunakan  sistem  elusi gradien  dengan  kombinasi  kloroform- metanol dan metanol-air dengan perbandingan  mulai  dari  10:0  sampai  1:9 untuk  masing-masing  kombinasi  pelarut, setiap  pengeluasian  kolom  di  vakum. Fraksi-fraksi  yang  dihasilkan  dipantau dengan KLT, dengan fase gerak kloroform-metanol-air  (8:2,5:0,5)    dan disemprot menggunakan penampak bercak universal.  Fraksi-fraksi  yang  mempunyai kesamaan profil KLT kemudian digabungkan.
9. Penetapan  Flavonoid  Total  dan Aktivitas Antioksidan Fraksi Daun Puring Kura Dilakukan dengan mengikuti prosedur yang sama dengan yang dilakukan pada ekstrak daun puring kura. Analisis Data
Analisis data dilakukan menggunakan SPSS versi 29
menggunakan One  Way  ANOVA dan diikuti  oleh post-hoc  Tukey .  Korelasi flavonoid total dengan aktivitas antioksidan ditentukan menggunakan korelasi Pearson .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Determinasi Tanaman
Tanaman  puring  kura  dideterminasi agar  keaslian  identitas  sampel  tanaman yang  akan  diteliti  dapat  teridentifikasi. Berdasarkan surat determinasi No. 25/HB/11/2023,  dinyatakan  bahwa  puring kura,  dengan  nama  latin Codiaeum variegatum (L.)  Blume  dipastikan  sebagai tanaman  yang  digunakan  sebagai  sampel penelitian.
2. Preparasi Sampel
Sortasi basah dilakukan untuk memisahkan bagian  yang tidak diinginkan seperti  daun  busuk,  berlubang,  dan ditumbuhi  jamur.  Pencucian  dilakukan untuk  menghilangkan  pengotor  yang menempel  sehingga  diperoleh  simplisia yang  bersih.  Selanjutnya  dikeringkan  agar kadar  airnya  dapat  berkurang  sehingga mencegah  pertumbuhan  mikroorganisme dan  simplisia  tidak  mengalami  kerusakan dengan  cepat.  Lalu  dilakukan  sortasi kering  untuk  memisahkan  bagian  yang tidak  diinginkan.  Kemudian  diblender untuk  mendapatkan  serbuk  simplisia  dan dilakukan  pengayakan  agar  diperoleh serbuk  simplisia  yang  seragam.  Serbuk simplisia  yang  diperoleh  sebanyak  595 gram dengan rendemen 19,833%.

## 3. Karakterisasi Simplisia

## 3.1 Parameter Spesifik
Gambar  2. Pengamatan  mikroskopik  simplisia daun puring kura a. Epidermis atas b. Epidermis bawah c. Berkas pembuluh  d.  Pembuluh  kayu  dengan penebalan tangga e. Serabut sklerenkim f. Stomata parasitik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan secara  organoleptik  meliputi  pengamatan bentuk,  aroma,  warna,  dan  rasa.  Simplisia
segar  berbentuk  bulat  telur  bergelombang, permukaannya licin dan mengkilap, beraroma khas, berwarna kombinasi merah,  kuning,  hijau,  dan  coklat  serta rasanya pahit. Sedangkan serbuk simplisia berbentuk  serbuk  halus,  memiliki  aroma khas,  berwarna  hijau,  dan  berasa  pahit.
Selanjutnya dilakukan pemeriksaan
mikroskopik agar fragmen-fragmen pengenal yang ada dalam daun puring kura dapat  teridentifikasi.  Berdasarkan  hasil pemeriksaan  mikroskopik,  secara  umum hasilnya  sesuai  dengan  fragmen  pengenal seperti  yang  tertera  pada  penelitian (Nuraini dkk., 2022). Tertera pada Gambar 2 hasil pengamatan mikroskopik.
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun puring kura
Golongan Senyawa Sampel Simplisia Ekstrak n- Heksan Ekstrak Etil Asetat Ekstrak Etanol 70% Alkaloid + + - - Flavonoid + - + + Saponin + - - + Tanin - - - - Polifenol + - + + Kuinon + - + + Steroid - + + - Triterpenoid + - - - Monoterpenoid dan Seskuiterpenoid + + + -
Keterangan :  (+) = Terdeteksi (-) = Tidak terdeteksi
b f e a c d
Kadar  sari  larut  air  dan  etanol
memberikan informasi mengenai banyaknya komponen yang mampu tertarik  oleh  pelarut  yang  digunakan. Kadar  sari  larut  air  memberikan  perkiraan tentang  kandungan  senyawa  yang  mampu terekstraksi  oleh  pelarut  polar  seperti  air, sedangkan kadar sari larut etanol memberikan  perkiraan  tentang  senyawa yang  dapat  larut  dalam  pelarut  dengan kepolaran yang lebih rendah dibandingkan air.  Kadar  sari  larut  air  simplisia  daun puring  kura  adalah  sebanyak  27,633%, sedangkan kadar sari larut etanol sebanyak 22,267%.  Selanjutnya,  dilakukan  skrining fitokimia  untuk  memperoleh  informasi mengenai jenis senyawa yang ada di dalam simplisia dan masing-masing ekstrak daun puring  kura.  Hasil  yang  diperoleh  tidak terlalu  berbeda  dengan  yang  dilakukan oleh  Nuraini  dkk.,  (2022).  Terlampir  pada Tabel  1  data  skrining  fitokimia  simplisia dan ekstrak daun puring kura.

## 3.2 Parameter Non Spesifik
Pemeriksaan  parameter  non  spesifik untuk  kadar  air  memiliki  persyaratan umum kadar air simplisia yaitu tidak lebih dari  10%,  maka  kadar  air  simplisia  daun puring  kura  memenuhi  syarat  yang ditetapkan (FHI, 2017). Hasil pemeriksaan parameter  non  spesifik  simplisia  daun puring kura tertera pada Tabel 2.
Tabel  2. Hasil  pemeriksaan  parameter non  spesifik  simplisia  daun puring kura
Penetapan Rataan Hasil ± SD Kadar Air 4,667% ± 1,154 Kadar Abu Total 9,417% ± 0,202 Kadar Abu Tidak Larut Asam 1,233% ± 0,284 Kadar Abu Larut Air 7,433% ± 0,722 Susut Pengeringan 6,870% ± 0,052 4. Ekstraksi  Simplisia  Daun  Puring Kura Penggunaan metode maserasi bertingkat  dapat  menghasilkan  ekstrak dengan  kandungan  senyawa  yang  berbeda polaritasnya  secara  bertahap  sehingga dapat  memberikan  rendemen  ekstrak  yang maksimal.  Ekstrak  etanol  memiliki  % rendemen paling tinggi,  artinya pada daun puring  kura  banyak  mengandung  senyawa polar.  Etanol  merupakan  pelarut  universal yang dapat mengekstraksi berbagai senyawa sehingga menghasilkan rendemen yang  paling  tinggi  (Warnis  dan  Artika, 2021).  Rendemen  ekstrak  terlihat  pada Tabel 3 di bawah ini.
Tabel  3. Rendemen  ekstrak  daun  puring kura Ekstrak Rendemen Ekstrak (%) n-Heksan 3,30% Etil Asetat 3,99% Etanol 70% 22,33%
Dalam  etanol  70%,  mengandung 30%  air  yang  dapat  mendukung  proses ekstraksi  dengan  memungkinkan  larutnya sebagian  senyawa  ke  dalam  etanol  dan sebagian  senyawa  lain  larut  dalam  air. Semakin tinggi konsentrasi etanol, kepolaran  pelarutnya  cenderung  lebih rendah (Bawekes dkk., 2023).
5.

## Pemantauan Ekstrak

## Menggunakan KLT
Pemantauan  ekstak  menggunakan KLT  dilakukan  untuk  mengidentifikasi pola kromatogram dan menentukan keberadaan senyawa flavonoid dan senyawa  yang  dapat  memberikan  aktivitas antioksidan  dalam  ekstrak  daun  puring kura.  Profil  kromatogram  setiap  ekstrak dapat dilihat pada Gambar 3.. (1) (2) (3)
Gambar  3. Pemantauan  ekstrak  (1)  n-heksan,  eluen:  n-heksan-etil  asetat  (8,5:1,5),  (2)  etil  asetat,  eluen:  n- heksan-etil  asetat  (7:3),  (3)  etanol  70%,  eluen:  kloroform-metanol-air  (8:2,5:0,5),  (a)  disemprot dengan  H 2 SO 4 10%,  (b)  disemprot  dengan  sitroborat  dan  diamati  pada  sinar  UV  366  nm,  (c) disemprot menggunakan DPPH 0,2%.
:  bercak  yang  menandakan  adanya  korelasi  antara  senyawa  flavonoid  dan  senyawa  yang memberikan
aktivitas antioksidan.
Pola  kromatogram  dari  masing- masing  ekstrak  menunjukkan  beberapa bercak  dengan  nilai  Rf  yang  beragam  dan dari  ketiga  ekstrak  tersebut  diperoleh bercak  biru  terang  setelah  disemprot sitroborat,  yang  diduga  sebagai  senyawa flavonoid  dan  ketika  disemprot  DPPH 0,2%  muncul  bercak  kuning  berlatar belakang  ungu  yang  diduga  sebagai senyawa yang memberikan aktivitas
antioksidan. Ekstrak n-heksan dengan fase gerak n-heksan-etil asetat (8,5:1,5) menunjukkan  bercak  yang  diduga  sebagai flavonoid dan memberikan aktivitas antioksidan  pada  nilai  Rf  0,892,  ekstrak etil  asetat  dengan  fase  gerak  n-heksan-etil asetat  (7:3)  pada  nilai  Rf  0,923,  dan ekstrak  etanol  70%  dengan  fase  gerak kloroform-metanol-air (8:2,5:0,5) ada pada nilai Rf 0,861.
c a a a b b b c c
6. Hasil  Penetapan  Flavonoid  Total

## Ekstrak  Daun  Puring  Kura  yang Setara dengan Kuersetin
Penetapan kandungan flavonoid total dalam ekstrak daun puring kura ditentukan menggunakan  metode  spektrofotometri sinar  tampak  dengan  pereaksi  alumunium klorida  (AlCl 3 ).  Kadar  yang  diperoleh dipresentasikan  sebagai  %  b/b  ekivalen kuersetin (QE).
Penambahan  pereaksi  AlCl 3 agar terbentuk  kompleks  yang  mengakibatkan panjang  gelombang  bergeser  ke  arah batokromik.  Selain  AlCl 3 ,  natrium  asetat ditambahkan  agar  panjang  gelombang tetap  ada  pada  daerah visible (Anwar  dan Triyasmono,  2016).  Reaksi  AlCl 3 dengan senyawa  flavon/flavonol  pada  C4  yang dimiliki  gugus  keto  dan  pada  C3  atau  C5 gugus  hidroksil,  membentuk  senyawa kompleks yang stabil (Anwar dan Triyasmono, 2016 ; Suhendy dkk., 2022).
Tabel  4. Nilai  kesetaraan  flavonoid  total ekstrak  daun  puring  kura  dengan kuersetin Sampel Rataan Nilai Kesetaraan Flavonoid (mg QE/g sampel) ± SD Ekstrak Etanol 66,690 ± 1,414 a Ekstrak Etil Asetat 96,512 ± 3,603 b Ekstrak n-Heksan 66,184 ± 3,376 a
Keterangan:    a-b  =  huruf  yang  berbeda  dalam  satu
kolom
menandakan terdapat perbedaan  bermakna  dengan  Sig. (p<0,05).
Perbedaan  yang  signifikan  (p<0,05) ditunjukkan  oleh  ekstrak  etil  asetat  yang memiliki  nilai  kesetaraan  flavonoid  total tertinggi dibanding ekstrak lainnya. Sementara  itu  antara  ekstrak  etanol  dan ekstrak n-heksan, tidak terdapat perbedaan yang  signifikan  ditunjukkan  dengan  nilai signifikansi (p>0,05).
Tingginya flavonoid total ekstrak etil asetat  diakibatkan  karena  etil  asetat termasuk  pelarut  semi  polar  sehingga pelarut  ini  memiliki  kecenderungan  untuk mengekstrak  senyawa  flavonoid  yang memiliki polaritas sedang, sehingga senyawa polar sampai nonpolar dapat larut dengan  baik.  Dalam  pelarut  etil  asetat, senyawa  flavonoid  seperti  flavon  dan flavanon  yang  cenderung  bersifat  semi polar dapat larut dengan baik (Puspa Yani dkk.,  2023).  Sementara  itu,  ekstrak  n- heksan memiliki nilai kesetaraan flavonoid total  paling  rendah,  yang  menunjukkan bahwa  dalam  pelarut  nonpolar,  senyawa flavonoid  yang  mampu  terlarut  jumlahnya sedikit.
7. Hasil Penetapan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Puring Kura Penetapan aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode peredaman  radikal  DPPH.  Pemilihan metode  ini  berdasarkan  pengerjaannya relatif mudah dilakukan, prosesnya sederhana, memberikan hasil cepat,
sensitif dalam mendeteksi aktivitas antioksidan,  dan  memerlukan  sedikit sampel  untuk  pengujian.  Hasil  penetapan aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  puring kura terlampir pada Tabel 5.
Tabel  5. Nilai  kesetaraan  aktivitas antioksidan ekstrak daun puring  kura  dengan  asam askorbat Sampel Rataan Nilai Kesetaraan Aktivitas Antioksidan (mg AAE/g sampel) ± SD Ekstrak Etanol 60,109 ± 2,890 a Ekstrak Etil asetat 33,938 ± 1,297 b Ekstrak n-Heksan 32,826 ± 1,129 b
Nilai kesetaraan
aktivitas antioksidan  yang  paling  tinggi  terhadap asam  askorbat  ditunjukkan  oleh  ekstrak etanol, yang memiliki perbedaan signifikan (p<0,05) dengan ekstrak lainnya, sedangkan ekstrak etil asetat tidak memiliki  perbedaan  secara  signifikan dengan ekstrak n-heksan (p>0,05).
Aktivitas  antioksidan  yang  paling tinggi dimiliki oleh ekstrak etanol meskipun  jika  dibandingkan  ekstrak  etil asetat, kandungan flavonoid  totalnya lebih rendah,  Hal  tersebut  bisa  disebabkan karena  etanol  termasuk  ke  dalam  pelarut polar  yang  dapat  mengekstrak  senyawa polar  selain  flavonoid  seperti  seperti fenolik  dan  senyawa-senyawa  golongan terpenoid  (Heim,  Tagliaferro  dan  Bobilya, 2002). Senyawa-senyawa tersebut memiliki  sifat  antioksidan  yang  kuat  dan
berkontribusi  pada  aktivitas  antioksidan. Selain  itu  kadar  flavonoid  yang  tinggi belum  tentu  memberikan  aktivitas  yang tinggi juga.
Ekstrak  etanol  dapat  mengandung senyawa flavonoid  yang bersifat polar dan lebih  spesifik.  Flavonoid  polar  memiliki banyak  gugus  -OH  (hidroksil)  yang memiliki  peran  terhadap  penghambatan radikal bebas. Mekanisme utama penghambatan radikal bebas oleh senyawa antioksidan  adalah  ketika  senyawa  radikal bebas  menerima  (akseptor)  atom  hidrogen atau  elektron  dari  gugus  yang  dapat menyumbangkan hidrogen sehingga terbentuk  senyawa  yang  lebih  stabil (Hassanpour dan Doroudi, 2023). Berdasarkan  hal  tersebut,  dapat  dikatakan bahwa semakin polar senyawa flavonoidnya, maka semakin besar aktivitas antioksidannya. Dengan kata lain, semakin banyak hidrogen yang didonorkan oleh  gugus  hidroksil,  maka  kemampuan reduksi  terhadap  DPPH  juga  semakin tinggi (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Adapun  senyawa  flavonoid  yang spesifik, tergantung pada struktur senyawanya.  Flavonoid-flavonoid  yang memiliki gugus -OH di atom karbon 3’, 4’,
3,  gugus  keto  di  C4,  dan  ikatan  rangkap C2=C3  memberikan  aktivitas  antioksidan yang  tinggi  (Heim,  Tagliaferro  dan Bobilya,  2002).  Berdasarkan  aktivitas antioksidan  dan  nilai  rendemen,  maka
ekstrak  etanol  dilanjutkan  ke  tahap fraksinasi.
8. Fraksinasi  Ekstrak  Etanol  70%

## Menggunakan KCV
Proses fraksinasi menggunakan metode  KCV  dilakukan  pada  ekstrak terpilih  yaitu  ekstrak  etanol  daun  puring kura.  Tujuan  dari  proses  fraksinasi  ini adalah  agar  senyawa-senyawa  dalam ekstrak terpisah berdasarkan tingkat polaritasnya.  Pemilihan  metode  fraksinasi KCV  disebabkan  karena  kemampuannya memisahkan  sampel  dalam  jumlah  besar dengan  waktu  singkat.  Silika  gel  H60 digunakan  sebagai  fase  diam  pada  KCV, sementara  fase  geraknya  berupa  secara gradien  menggunakan  dua  kombinasi pelarut,  di  mana  proses  diawali  dengan penggunaan pelarut polaritas rendah (nonpolar), diikuti dengan beberapa kombinasi pelarut yang semakin meningkat polaritasnya. Kombinasi pelarut pertama,  kloroform-metanol  untuk  fraksi 1-10  dan  yang  kedua  kombinasi  metanol- air untuk fraksi 11-20, dengan perbandingan  secara  bertahap  mulai  dari 10:0  sampai  1:9  untuk  masing-masing kombinasi pelarut. Pemilihan metode elusi gradien  didasarkan  pada  pemisahannya yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan metode isokratik. Isokratik hanya menggunakan satu pelarut sebagai pengelusinya  sedangkan  metode  gradien
pengelusinya berbeda kepolarannya (Nuraini dkk., 2022).
Dari  hasil  fraksinasi  menggunakan KCV,  diperoleh  20  fraksi  yang  memiliki variasi  warna  yang  beragam.  Sebelum dilakukan pemantauan fraksi menggunakan KLT, fraksi diuapkan terlebih  dahulu  hingga  diperoleh  fraksi kental.  Setelah  fraksi-fraksi  mengental, selanjutnya  setiap  fraksi  dipantau  dengan tujuan agar senyawa-senyawa yang terpisah  selama  proses  pemisahan  dapat terpantau dan teridentifikasi. Hasil pemantauan dari setiap fraksi dapat dilihat pada Gambar 4.
(a)
(b)
(c)
Gambar  4. Pemantauan  fraksi,  fase  gerak kloroform-metanol-air (8:2,5:0,5) (a) dipantau pada UV 254 nm, (b)  UV 366 nm (c) disemprot dengan penampak bercak H 2 SO 4 10%. F1  F2      F3       F4      F5     F6      F7     F8      F9     F10   F11   F12    F13    F14    F15    F16   F17   F18   F19    F20 F1  F2      F3       F4      F5     F6      F7     F8      F9     F10   F11   F12    F13    F14    F15    F16    F17    F18   F19    F20 F1   F2   F3    F4      F5     F6      F7     F8      F9     F10   F11   F12    F13    F14    F15    F16   F17   F18   F19    F20
Hasil  dari  KLT  fraksi,  terlihat  bahwa setiap  fraksi  memiliki  pola  kromatogram yang  bervariasi.  Fraksi-fraksi  dengan  pola kromatogram  serupa  digabungkan  dan  dari penggabungan  fraksi  tersebut  diperoleh  8 fraksi gabungan di antaranya fraksi gabungan  pertama  (fraksi  2  dan  3),  fraksi gabungan  kedua  (fraksi  4),  fraksi  gabungan ketiga  (fraksi  5  dan  6),  fraksi  gabungan keempat  (fraksi  7),  fraksi  gabungan  kelima (fraksi  8),  fraksi  gabungan  keenam  (fraksi 9),  fraksi  gabungan  ketujuh  (fraksi  10-13),
dan  fraksi  gabungan  kedelapan  (fraksi  14- 17).
9. Hasil  Penetapan  Flavonoid  Total dan  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi Daun Puring Kura
Flavonoid total dan aktivitas antioksidan  setiap  fraksi  gabungan  daun puring kura ditetapkan dengan menggunakan  prosedur  yang  sama  seperti pada  ekstrak.  Hasil  dari  penetapan  dapat dilihat pada Tabel 6.
Tabel 6. Hasil penetapan flavonoid total dan aktivitas antioksidan fraksi gabungan daun puring kura
Sampel Rataan Nilai Kesetaraan Flavonoid (mg QE/g sampel) ± SD Rataan Nilai Kesetaraan Aktivitas Antioksidan (mg AAE/g sampel) ± SD FG 1 86,795 ± 6,483 a 216,166 ± 3,491 a FG 2 25,897 ± 2,248 b 194,583 ± 5,066 b FG 3 150,897 ± 3,312 c 185,590 ± 4,823 b FG 4 299,615 ± 6,521 d 197,690 ± 3,024 b FG 5 92,243 ± 3,580 a 238,403 ± 3,825 c FG 6 213,397 ± 3,580 e 288,599 ± 6,217 d FG 7 175,897 ± 5,359 f 174,962 ± 4,950 e FG 8 10,192 ± 1,720 g 189,351 ± 3,039 b
Keterangan :  a-g  = terdapat perbedaan yang signfikan (p<0,05) antar kelompok pada satu kolom. = nilai kesetaraan paling tinggi.
Gambar 5. Pemantauan fraksi gabungan terpilih, fase gerak kloroform-metanol-air (7,5:3:0,5) (a) disemprot dengan H 2 SO 4 10%, (b) disemprot sitroborat, (c) disemprot DPPH 0,2 satuan.
a c b
Perbedaan
yang signifikan ditunjukkan  oleh  fraksi  gabungan  4  dengan fraksi  gabungan  lainnya  dengan  nilai signifikansi  (p<0,05).  Fraksi  gabungan  6 dengan  aktivitas  antioksidan  paling  juga berbeda  signifikan  (p<0,05)  dengan  fraksi lainnya.
Berdasarkan pertimbangan bahwa fraksi  gabungan  6  memiliki  aktivitas antioksidan yang paling tinggi dan rendemen  yang  paling  besar  dibandingkan fraksi  gabungan  4,  maka  fraksi  tersebut dipilih  untuk  dilakukan  KLT  kembali sebagai  pengujian  kualitatif  untuk  melihat keberadaan senyawa flavonoid dan senyawa yang  memberikan  aktivitas  antioksidan. Hasil KLT terlampir pada Gambar 5.
10. Analisis  Korelasi  Flavonoid  Total dengan Aktivitas Antioksidan
Ekstrak  dan  Fraksi  Daun  Puring

## Kura
Analisis  korelasi  flavonoid  total  dan aktivitas  antioksidan  dilakukan  terhadap ekstrak  dan  fraksi  daun  puring  kura.  Hasil analisis korelasi dapat dilihat pada Tabel 7. Tabel  7. Hasil korelasi  flavonoid  total  dan aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan fraksi daun puring kura
Parameter Antioksidan Koefisien Korelasi (r) IC DPPH Ekstrak -0,229 IC DPPH Fraksi 0,200
Analisis  korelasi  flavonoid  total  dan aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  puring
kura  dilakukan  menggunakan  uji  korelasi Spearman dan hasilnya menunjukkan bahwa flavonoid  total  dengan  aktivitas  antioksidan tidak berhubungan secara signifikan (p>0,05)  karena  koefisien  korelasi  bernilai negatif.  Berbeda  dengan  ekstrak,  analisis korelasi  flavonoid  total  terhadap  aktivitas antioksidan fraksi daun puring kura menggunakan  korelasi Pearson karena  data terdistribusi  normal  (p<0,05).  Hasil  analisis memiliki  nilai  korelasi  positif  yang  berarti flavonoid  total  memiliki  hubungan  positif dengan  aktivitas  antioksidan  fraksi  tetapi tidak signifikan. Tidak adanya korelasi pada ekstrak  dan  fraksi  bisa  disebabkan  karena bukan hanya flavonoid yang dapat memberikan aktivitas antioksidan, tetapi ada juga  senyawa  lain  yang  lebih  kuat  atau efektif  daripada  flavonoid  (Salim  dkk., 2018).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat menunjukkan  flavonoid  total  paling  tinggi, sedangkan  aktivitas  antioksidan  tertinggi ditunjukkan oleh ekstrak etanol  karena pada ekstrak  ini  terdapat  senyawa  yang  dapat memberikan  aktivitas  antioksidan  selain flavonoid  seperti  fenolik  dan  senyawa- senyawa golongan terpenoid. Fraksi gabungan  4  memiliki  nilai  kesetaraan flavonoid  yang  paling  tinggi.  Namun,  nilai
Suhendy et al.;Korelasi Flavonoid Total dengan…..Pharmacoscript Volume 7 No. 2, Agustus 2024
kesetaraan  aktivitas  antioksidan  tertinggi ada pada fraksi gabungan 6.
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan fraksi  daun  puring  kura  tidak  dipengaruhi oleh  kandungan  flavonoid  total  sehingga penelitian  lebih  lanjut  terkait  dengan  total senyawa metabolit sekunder selain flavonoid yang memberikan aktivitas antioksidan  disarankan,  dan  perlu  juga dilakukan penelitian terkait profil keamanan meliputi uji toksisitas dan efek samping dari ekstrak dan fraksi daun puring kura.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  K.  and  Triyasmono,  L.  (2016) Kandungan  Total Fenolik,  Total Flavonoid,  dan  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Etanol Buah  Mengkudu ( Morinda  citrifolia L  .),  Jurnal Pharmascience,  3(1),  pp.  83–92. https://jps.ppjpu.unlam.ac.id/
Bawekes, S. M., Yudistira, A., & Rumondor, E. M. (2023). Uji
Kualitatif Kandungan Senyawa Kimia Perasan Jeruk Nipis ( Citrus
aurantifolia Swingle  ).  Pharmacon,
12(3),
373–377.
https://doi.org/10.3579
9/pha.12.2023.49269
Bijekar,  S.,  &  Gayatri,  M.  (2015).
Phytochemical  profile  of Codiaeum variegatum (L.)  Bl.  International Journal of Pharmacology and
Pharmaceutical Sciences, 2 (3), 22–31. http://ijppsjournal.org
Celep,  E.,  Charehsaz,  M.,  Akyüz,  S.,  Acar, E. T., & Yesilada, E. (2015). Effect of in  vitro  gastrointestinal  digestion  on the bioavailability of phenolic components and the antioxidant potentials of some Turkish fruit wines. Food Research International, 78, 209– 215.  https://doi.org/10.1016/j.foodres. 2015 .10.009
Chang, C. C., Yang, M. H., Wen, H. M., & Chern,  J.  C.  (2002).  Estimation  of total  flavonoid  content  in  propolis  by two complementary colometric methods.  Journal  of  Food  and  Drug Analysis, 10(3), 178–182. https://doi.org/10.38 212/2224- 6614.2748
Departemen  Kesehatan  RI.,  Direktorat
Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.,  &  Direktorat  Pengawasan Obat  Tradisional.  (2000).  Parameter Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan Obat. Edisi IV.
Devitria, R. (2020). Uji Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Daun Ciplukan  menggunakan  Metode 2,2- Diphenyl  1-Picrylhydrazyl (DPPH). Jurnal  Penelitian  Farmasi  Indonesia, 9(1),  31–36.  https://doi.org/10.51887/ jpfi.v9i1. 800

## Pharmacoscript Volume 7 No. 2 Agustus 2024
Halliwell, B.  and Gutteridge, J.M.C. (2015)
Free Radicals in Biology and
Medicine (5th edn). Oxford University Press. Available
at: https://doi.org/https://doi.
org/10.1093/acprof:oso/97801987174
78.001.0001.
Hassanpour,  S.  H.,  &  Doroudi,  A.  (2023).
Review  of  The  Antioxidant  Potential of  Flavonoids  as  A  Subgroup  of Polyphenols  and  Partial  Substitute  for Synthetic Antioxidants. Avicenna Journal of Phytomedicine, 13(4), 354– 376.https://doi.org/10.22038/AJP.202
3.21774
Heim,  K.E.,  Tagliaferro,  A.R.  and  Bobilya,
D.J.  (2002)  ‘Flavonoid  antioxidants: Chemistry,  metabolism  and  structure- activity  relationships’,  Journal  of Nutritional  Biochemistry,  13(10),  pp. 572–584. Available at: https://doi.org/10.1016/S0955- 2863(02 )00208-5.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
(2018).  Laporan  Nasional  Riskesdas 2018.  Jakarta:  Balitbang  Kemenkes RI, hal 156.
Kementerian  Republik  Indonesia.  (2017).
Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  II.
Jakarta:
Direktorat
Jenderal
Kefarmasian Dan Alat Kesehatan. Nur,  S.,  Sami,  F.  J.,  Awaluddin,  A.,  &
Afsari,  M.  I.  A.  (2019).  Korelasi Antara  Kadar  Total  Flavonoid  dan Fenolik  dari  Ekstrak  dan  Fraksi  Daun Jati  Putih  ( Gmelina  Arborea Roxb.)
Terhadap Aktivitas Antioksidan. Jurnal  Farmasi  Galenika  (Galenika Journal  of  Pharmacy)  (e-Journal), 5(1), 33–42.
https://doi.org/10.22487/j24428744.20 19.v5.i1.12034
Nuraini,  M.,  Zustika,  D.  S.,  &  Lestari,  T.
(2022).  Karakterisasi  Simplisia  dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Ekstrak Daun Puring Kura ( Codiaeum variegatum L).  Prosiding  Seminar Nasional  Desiminasi,  2,  232–243. https://ejurnal.universitas-bth.ac.id Puspa Yani,  N. K. L., Nastiti, K., & Noval,
N.  (2023).  Pengaruh  Perbedaan  Jenis Pelarut  Terhadap  Kadar  Flavonoid Total  Ektrak  Daun  Sirsak  ( Annona muricata L.).  Jurnal  Surya  Medika,
9(1),  34–44.  https://doi.org/10.33084 /jsm.v9i1.5131
Rodríguez  De  Luna,  S.  L.,  Ramírez-Garza, R. E., & Serna Saldívar, S. O. (2020). Environmentally Friendly Methods for Flavonoid  Extraction  from  Plant Material:  Impact  of  Their  Operating Conditions  on  Yield  and  Antioxidant Properties.  Scientific  World  Journal, 2020.
https://doi.org/10.1155/2020/6792069 Salim,  E.,  Hasnirwan,  &  Sartika,  S.  (2018).
Uji  Aktivitas  Antioksidan,  Toksisitas dan  Kandungan  Fenolik  Total  dari Daun Puring Merah ( Codiaeum variegatum (L.)  Rumph). Jurnal Kimia Universitas Andalas , 7 (2), 1–8. www.kimia.fmipa.unand.ac.id
Sawiji,  R.  T.,  &  Sukmadiani,  N.  W.  A.
(2021).  Formulasi  Sediaan  Salep Ekstrak  Daun  Puring  ( Codiaeum variegatum L.) Dengan Basis Hidrokarbon Dan Larut Air. Indonesian  Journal  of  Pharmacy  and Natural Product, 4(2), 68–78. https://doi.org/10.35473/ijpnp.v4i2.11
87
Sayuti, K., & Yenrina, R. (2015). Antioksidan  Alami  dan  Sintetik  (D.
Fahrezionaldo  &  S.  Y.  (eds.);  I).
Andalas University Press
Sharifi-Rad, M., Anil Kumar, N. V., Zucca,
P.,  Varoni,  E.  M.,  Dini,  L.,  Panzarini,
E.,  Rajkovic,  J.,  Tsouh  Fokou,  P.  V., Azzini, E., Peluso, I., Prakash Mishra, A.,  Nigam,  M.,  El  Rayess,  Y.,
Beyrouthy, M. El, Polito, L., Iriti, M., Martins,  N.,  Martorell,  M.,  Docea,  A. O.,  Sharifi-Rad,  J.  (2020).  Lifestyle, Oxidative  Stress,  and  Antioxidants:
Back and Forth in
the Pathophysiology  of  Chronic  Diseases.
Frontiers  in  Physiology,  11(July),  1– 21.
https://doi.org/10.3389/fphys.2020.00 694
Suhendy,  H.,  Afdal  Alif,  &  Ira  Rahmiyani.
(2022).  Korelasi  Kadar  Fenolik  dan Flavonoid  Total  Terhadap  Aktivitas Antioksidan  Beberapa  Ekstrak  Daun Afrika  ( Venornia  amygdalina Delile.) Menggunakan  Metode  FRAP  (Ferric
Reducing Antioxidant Power). Medical Sains : Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 7(2), 71–82. https://doi.org/10.37874/ms.v7i2.2 92
Suhendy,  H.,  Astuti,  N.,  &  Gustaman,  F.
(2022).  Kajian  Fitokimia  Pigmen Warna  Ungu  dan  Profil  Antioksidan pada Ekstrak Bunga Harendong ( Melastoma malabatrichum L.). Journal  of  Pharmacopolium  (Vol.  5,
Issue  2).    http://ejurnal.universitas- bth.ac. id/ index.php/P3M_JoP
Warnis, M. and Artika, L. (2021)
‘Perbandingan Rendemen Dan Kandungan  Kimia  Ekstrak  Daun Jambu Mete (Anacardium Occidentale L.)  Dengan  Beberapa  Jenis  Pelarut’, JKPharm  Jurnal  Kesehatan  Farmasi, 3(1), pp. 63–69. Available at: https://doi.org/10.36086/jkpharm.v3i1. 907.
Yulianti,  W.,  Ayuningtyas,  G.,  Martini,  R.,
Pharmacoscript Volume 7 No. 2 Agustus 2024
&  Resmeiliana,  I.  (2021).  Pengaruh
Metode Ekstraksi dan Polaritas Pelarut Terhadap  Kadar  Fenolik  Total  Daun Kersen  ( Muntingia calabura L).
Jurnal  Sains  Terapan,  10(2),  41–49. https://doi.org/10.29244/jstsv.10.2.41- 4