Jurnal Farmasi Indonesia, November 2014, hal 146-157
Vol. 11 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Uji Aktivitas Diuretik Ekstrak Etanol Kombinasi Daun Putri Malu ( Mimosa pudica L.) dan Daun Pacar Kuku ( Lawsonia inermis L.) pada Tikus Jantan Galur Wistar
Diuretic Activity of Combiation of Putri Malu ( Mimosa pudica L.) and Pacar Kuku ( Lawsonia inermis L.) Leaves Extract on Wistar Male Rats
DWI NOVITA EKA SARI 1 , FRANSISKA LEVIANA*, 1 , KISRINI 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518
2 Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret Jln. Ir Sutami No 36-A Kentingan Surakarta 57126 Telp 0271-646994 * Korespondensi: fransiska.leviana@gmail.com
(Diterima 21 Juli 2014, disetujui 20 Agustus 2014)
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Daun  putri  malu  ( Mimosa pudica L.) dan pacar  kuku (Lawsonia inermis L.) dapat  digunakan sebagai  peluruh  kencing  (diuretik).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  diuretik kombinasi  ekstrak  etanol  daun  putri  malu  dan  daun  pacar  kuku  serta  dosis  efektifnya  pada  tikus jantan galur wistar. Sebanyak 35 ekor tikus dibagi menjadi 7 kelompok: kontrol positif furosemida (1,44 mg/200 g BB), kontrol negatif CMC 0,5%, ekstrak putri malu (20 mg/200 g BB), ekstrak pacar kuku (50 mg/200 g BB), kombinasi ekstrak etanol putri malu dan pacar kuku (10 : 25 mg/200 g BB; 5 : 37,5 mg/200 g BB; dan 15 : 12,5 mg/200 g BB). Pengamatan dilakukan pada tiap jam selama 6 jam,  kemudian  jam  ke  12  dan  24.  Efek  diuretik  diperoleh  dengan  menghitung  volume  urin kumulatif  dan  AUC.  Data  diolah  dengan  ANAVA  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  Tukey  HSD. Hasil penelitian kombinasi ekstrak etanol daun putri malu dan pacar kuku memiliki efek diuretik. Kombinasi ekstrak memiliki efek diuretik lebih besar dibanding ekstrak tunggal. Kombinasi ekstrak etanol putri malu dan pacar kuku dengan dosis (5 mg/200 g BB : 37,5 mg/200 g BB) dan dosis (15 mg/200 g BB : 12,5 mg/200 g BB) memiliki aktivitas diuretik yang sebanding dengan kontrol positif.
Kata kunci : Putri malu, pacar kuku, kombinasi, diuretik.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Putri  malu (Mimosa  pudica L.)  and  pacar  kuku (Laswonia  inermis L.)  leaves  can  be  used  as diuretic agent. This research aimed to find out the diuretic effect of combination of putri malu and pacar kuku leaves ethanol extract as the effective dose on Wistar male rat.  The tested animal used consisted  of  35  rats,  divided  into  7  groups:  furosemida  positive  control  (1,44  mg/200  g  BW), negative control CMC 0.5%, extract of putri malu leaves (20 mg/200 g BW), extract of pacar kuku leaves (50 mg/200 g BW), combination of putri malu and pacar kuku leaves ethanol extract (10 : 25 mg/200 g BW; 5 : 37,5 mg/200 g BW; 15 : 12,5 mg/200 g BW). Observation was conducted every hour  for  6  hours, and  then  at  12  and  24  hours.  The  diuretic  effect  was  obtained  by  estimating cumulative  urine  volume  and  AUC  (Area  Under  The  Curve).  The  data  was  processed  using  one- way variance analysis followed by Tukey HSD test. The result of research the combination of putri malu and  pacar  kuku leaves  ethanol  extract  has  a  diuretic  effect.  The  extract  combination  had
diuretic effect higher than the single extract. The combination of putri malu and pacar kuku leaves ethanol extract dose of 5 mg/200 g BW : 37,5 mg/200 g BW and 15 mg/200 g BW : 12,5 mg/200 g BB  had diuretic activity compatible to the positive control.
Keywords : Mimosa pudica L., pacar kuku, combination, diuretic.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Diuretik berperan dalam penyembuhan beberapa penyakit, hal ini berkaitan dengan penyembuhan penyakit tertentu,  terutama  yang  berhubungan dengan penurunan tekanan darah melalui  pembuangan  air  dalam  darah pada penyakit hipertensi dan pembuangan zat-zat tertentu pada penyakit  ginjal  (batu  ginjal),  serta  asam urat  tinggi  (Permadi  2002).  Salah  satu obat yang bekerja sebagai diuretik adalah furosemida,  efek  diuretiknya  cepat timbul  dan  sangat  cocok  digunakan untuk  keadaan  akut,  namun  sangat disayangkan pemakaian furosemida dapat menimbulkan efek samping
gangguan  keseimbangan  cairan  dan elektrolit  terutama  ion  natrium  dan kalium.  Kedua  ion  ini  banyak  yang diekskresikan sehingga bisa menimbulkan hiponatriumia dan hipokalemia (Erlina et al. 2006).
Obat  kimia  dan  tanaman  obat diuretik mempunyai kesamaan dalam hal fungsinya.  Kelebihan  lain  dari  tanaman obat  adalah  aman  dikonsumsi,  efektif menyembuhkan  penyakit  tanpa  efek samping dan harganya terjangkau
(Permadi  2002).  Kombinasi  tanaman banyak  dilakukan  dalam  masyarakat.
Kombinasi
dimaksudkan untuk
memperoleh  efek  sinergisme,  sehingga berperan  besar  dalam  efikasi  formulasi herbal.  Efek  sinergisme  dari  ekstrak diharapkan  dapat  mempengaruhi  atau berinteraksi satu sama lain dengan tujuan meningkatkan
kelarutan juga
meningkatkan  bioavailabilitas  satu  atau beberapa  zat  dari  ekstrak  (Mukherjee et al. 2011).
Tanaman yang dapat dipakai sebagai diuretik  di  antaranya  adalah  daun  putri malu ( Mimosa pudica L.) dan daun pacar kuku  ( Lawsonia  inermis L.).  Ekstrak etanol daun putri malu dengan dosis 100 mg/kg  BB tikus  dan  200  mg/kg  BB tikus menunjukkan  aktivitas  diuretik  yang lebih  tinggi  dibandingkan  ekstrak  air daun  putri  malu  (Baghel et  al. 2013). Ekstrak air dan ekstrak etanol daun pacar kuku  menunjukkan  aktivitas  diuretik pada  dosis  250  mg/kg  BB tikus  dan  500 mg/kg BB tikus, Ekstrak etanol menunjukkan  aktivitas  yang  relatif  lebih besar  bila  dibandingkan  dengan  ekstrak air (Reddy et al. 2011).
Daun  putri  malu  dan  daun  pacar kuku  sama-sama  memiliki  efek  diuretik. Penelitian  terhadap  kombinasi  keduanya belum  pernah  dilakukan.  Maka  pada penelitian  ini,  kombinasi  keduanya diharapkan  dapat  menimbulkan  efek sinergisme  yang  mampu  meningkatkan efektifitas  efek.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  efek  diuretik  dari kombinasi  ekstrak  daun  putri  malu  dan daun  pacar  kuku,  membandingkan  efek diuretik  kombinasi  ekstrak  putri  malu dan  daun  pacar  kuku  dengan  ekstrak tunggalnya,  serta  mengetahui  dosis kombinasi  ekstrak  daun  putri  malu  dan daun  pacar  kuku  yang  memiliki  aktivitas diuretik  sebanding  dengan  kontrol positif.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Daun putri malu,  daun pacar kuku, tikus  putih  jantan  galur  wistar  umur  2-3 bulan berat 130-200 g, furosemida tablet, aquades  steril,  CMC,  etanol  70%,  asam asetat  glasial,  asam  sulfat  pekat,  FeCl 3 , HCl pekat, serbuk magnesium.

## Alat
Panci,  erlenmeyer,  kompor  listrik, timbangan  hewan  uji  kepekaan  0,1  g, timbangan  analitik  (satorius)  kepekaan 0,1  mg  dan    0,01  mg,  spuit  injeksi volume 5 ml, jarum oral tikus ukuran 15 ml,  oven,  evaporator, moisture  balance, botol.

## Pengumpulan Bahan
Daun  putri  malu  dan  daun  pacar kuku  diambil  dan  dikumpulkan  dari tanaman putri malu dan pacar kuku yang bersih,  segar,  bebas  dari  penyakit,  yang terdapat  di  Wonogiri,  Propinsi  Jawa Tengah.

## Pengeringan dan Penyerbukan
Pengeringan  dilakukan  dalam  oven pada  suhu  50 0 C.  Daun  putri  malu  dan daun  pacar  kuku  yang  sudah  kering diserbuk  dengan  mesin  penyerbuk  atau blender,  lalu  diayak    dengan  ayakan  no. 40 dan disimpan.

## Pembuatan Ekstrak Etanol
Pembuatan ekstrak etanol daun putri malu dan daun pacar kuku menggunakan metode  maserasi.    Sebanyak  400  g serbuk daun putri malu dan 400 g serbuk
daun pacar kuku masing-masing dimaserasi  dengan  menggunakan  3  liter etanol  70%  selama  5  hari  dengan sesekali dikocok. Selama proses maserasi bahan  direndam  dalam  wadah  bermulut besar, ditutup rapat, disimpan terlindung dari  cahaya  langsung.  Setelah  maserasi, rendaman  diperas  menggunakan  kain flannel,  kemudian  ampas  dibilas  dengan bahan ekstraksi 0,6  liter, hingga diperoleh ekstrak cair,  selanjutnya dilakukan penguapan. Penguapan
dilakukan dengan  evaporator pada suhu 50°C sampai diperoleh ekstrak kental.
Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Identifikasi alkaloid dilakukan dengan  menambahkan  sebanyak  1  ml larutan sampel dengan HCl 2N kemudian  ditambahkan  pereaksi  Mayer (kalium      tetraiodomerkuat)        terjadi endapan  menggumpal  berwarna  putih atau  kuning  yang  larut  dalam  metanol, dengan Bauchardat lapisan yang terbentuk berupa endapan coklat sampai hitam (Robinson 1995).
Identifikasi flavonoid
dilakukian dengan  cara mengambil  sebanyak  5  ml larutan  sampel  ditambahkan  5  ml  etanol dan dipanaskan selama lima menit dalam tabung  reaksi.  Selanjutnya  ditambah beberapa  tetes  HCl  pekat.  Kemudian ditambahkan  0,2  g  bubuk  Mg.  Hasil positif  ditunjukkan  dengan  timbulnya warna  merah  tua  selama  3  menit (Robinson 1995).
Identifikasi saponin dilakukan dengan  cara  mengambil  5  ml  larutan sampel dipanaskan, kemudian didinginkan  lalu  dikocok kuat-kuat selama  10  detik.  Terbentuk  buih  yang stabil, saponin positif bila pada penambahan  larutan  asam  klorida  2N buih tidak hilang (Robinson 1995).

## Uji Efek Diuretik
Tikus  uji  diadaptasikan  selama  1 minggu  di  laboratorium  dan  dipuasakan selama  12  jam  sebelum  perlakuan, namun  tetap  diberi  minum.  Hewan  uji dibagi  menjadi  7  kelompok  perlakuan masing-masing  terdiri  dari  5  tikus. Kelompok I kontrol  positif  furosemida (1,44  mg/200  g  BB  tikus),  kelompok  II kontrol  negatif  CMC  0,5%;  kelompok  III ekstrak tunggal daun putri malu
20  mg/200  g  BB;  kelompok  IV ekstrak tunggal  daun  pacar  kuku  50  mg/200  g BB;  kelompok  V kombinasi  ekstrak etanol  daun  putri  malu  dan  pacar  kuku ½  :  ½ (10  mg/200  g  BB:  25  mg/200  g BB);  kelompok  VI kombinasi  ekstrak etanol  daun  putri  malu  dan  pacar  kuku ¼  : ¾  (5  mg/200  g  BB :  37,5  mg/200  g BB);  kelompok  VII kombinasi  ekstrak etanol  daun  putri  malu  dan  pacar  kuku ¾ : ¼ (15 mg/200 g BB : 12,5 mg/200 g BB).
Pemberian perlakuan dilakukan secara per oral. Tikus ditempatkan dalam kandang  metabolisme  dan  sampel  urin ditampungkan  dan  diukur  pada  tiap  jam selama 6 jam pertama, kemudian jam ke- 12 dan ke 24.

## Analisis Data
Data  yang  diambil  pada  uji  diuretik adalah  volume  urin  tiap  waktu  dan volume  urin  kumulatif  dari  tiap  hewan uji  pada  setiap  kelompok  perlakuan, pengambilan  data  dilakukan  tiap  jam selama  6  jam,  kemudian  jam  ke  12  dan 24  (Depkes  1993).  Data  yang  diperoleh kemudian  dijadikan  sebagai  luas  daerah di  bawah  kurva  ( area  under  the  curve) dengan rumus trapezium yaitu:
[ AUC] tn 1 - tn = 2 ) t - (t V + V 1 - n n n 1 - n
.....(1)
Keterangan :
[ AUC]  : Area di bawah kurva
V n : Volume urin pada jam ke - n V n-1
: Volume urin pada jam ke- (n-1)
Dari  perhitungan  AUC  juga didapat dihitung % daya diuretik dengan rumus:
% daya diuretik =
AUCk 100% AUCk x - AUCp .....(2) Keterangan : AUCp : AUC tiap perlakuan AUCk : AUC kontrol negatif Data yang diperoleh terlebih dahulu diuji distribusinya dengan uji Kolmogorov-Smirnov,  uji  Anova,  dan dilanjutkan  dengan  uji Tuk ey  HSD dengan kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengeringan  daun  putri  malu  dan  pacar kuku menunjukkan  hasil  pada  Tabel  1. Serbuk  yang  didapatkan  memiliki  nilai susut  pengeringan  pada  Tabel  2.  Hasil ekstraksi daun putri malu dan pacar kuku ditunjukkan  pada  Tabel  3.  Hasil identifikasi kandungan senyawa menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  putri malu  dan  pacar  kuku  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  dan  tanin
(Tabel 4).
Tabel 1. Hasil pengeringan bobot kering terhadap bobot basah daun putri malu dan pacar kuku
Tanaman Bobot  basah (g) Bobot  kering (g) Rendemen (%) Putri malu 4000 640 16,00 Pacar kuku 4000 750 18,75
Tabel  2. Hasil penetapan susut pengeringan serbuk daun putri malu dan pacar kuku
Simplisia Susut pengeringan (%) Daun putri malu 7,3±0,26 Daun pacar kuku 8,1±0,35 Tabel 3. Hasil pembuatan ekstrak etanol daun putri malu dan pacar kuku Tanaman Berat serbuk (g) Berat ekstrak (g) Rendemen (%) Putri malu 400 75,7 19 Pacar kuku 400 86,2 21
Tabel 4. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak etanol dan serbuk daun putri malu dan pacar kuku
Uji Hasil Pustaka Serbuk Ekstrak (Robinson 1995) Alkaloid Terbentuk kekeruhan, Endapan berwarna coklat Terbentuk kekeruhan, Endapan berwarna coklat Ada kekeruhan atau endapan warna coklat dan ada endapan warna putih atau kuning Flavonoid Timbul warna merah Timbul warna merah tua Timbulnya warna merah, kuning atau  jingga pada lapisan amil alkohol Saponin Buih yang stabil Buih yang stabil Buih yang mantap tinggi 1- 10 cm + HCl 2N buih tidak hilang Gambar  1  menunjukkan  bahwa puncak volume urin yang dihasilkan dari masing-masing kelompok perlakuan berbeda-beda. Beberapa kelompok
menunjukkan  volume  puncak  pada  jam pertama dan beberapa kelompok volume puncak  pada  jam  kedua.  Namun setelah mulai  jam  ketiga  dan  selanjutnya mengalami penurunan. Hal ini menandakan  bahwa  aktivitas  puncak diuresis  terjadi  pada  awal  pemberian perlakuan,  kemudian  efek  diuresis  mulai menurun setelah beberapa jam pemberian perlakuan. Puncak  efek  diuresis  yang  terjadi pada  jam  pertama  terdapat  pada kelompok perlakuan furosemida,
kelompok kombinasi ekstrak etanol putri malu  dan  pacar  kuku  (¼  :  ¾),    dan kombinasi  ekstrak  etanol  putri  malu  dan pacar kuku (¾ : ¼). Puncak efek diuresis pada  jam  kedua  terjadi  pada  kelompok ekstrak  etanol  putri  malu,  ekstrak  etanol pacar kuku, dan kombinasi ekstrak etanol putri malu dan pacar kuku (½ : ½) yang kemudian  mengalami  penurunan  di  jam berikutnya.
Gambar 1. Kurva rata-rata volume urin kelompok perlakuan ekstrak putri malu dan pacar kuku pada waktu pengamatan tiap jam selama 6 jam (n=5).
Tabel 5. Data rata-rata volume urin waktu pengamatan tiap 6 jam pada kelompok perlakuan ( mean ± SD) Kelompok perlakuan Volume urin (ml) pada jam 6 12 24 Kontrol positif (Furosemida) 1,52±0,52 0,96±0,54 0,82±0,20 Kontrol negatif (CMC 0,5%) 0,20±0,17 0,33±0,14 0,52±0,11 Ekstrak putri malu 20 mg/200 g BB 0,65±0,14 0,23±0,13 0,57±0,12 Ekstrak pacar kuku 50 mg/200 g BB 0,86±0,16 0,33±0,14 0,69±0,29 Ekstrak putri malu dan pacar kuku (½ : ½) 0,77±0,26 0,50±0,07 0,86±0,27 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¼  : ¾) 1,46±0,47 0,60±0,29 0,71±0,20 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¾ : ¼) 1,11±0,31 0,57±0,14 0,64±0,30
Gambar 2.  Kurva rata-rata volume urin waktu pengamatan tiap 6 jam pada kelompok perlakuan.
Pengamatan  volume  urin  pada  jam ke  6,  12  dan  24  juga  dilakukan  untuk melihat  aktivitas  diuretik  masih  berefek hingga jam ke 24. Tabel 5 dan Gambar 2 menunjukkan  bahwa  volume  urine  yang dihasilkan  setelah  perlakuan  meningkat pada 6 jam pertama, kemudian menurun pada  6  jam  berikutnya  dan  meningkat lagi pada 12 jam berikutnya. Furosemida meningkat  pada  jam  ke  6  kemudian mengalami  penurunan  pada  jam  ke  12 dan  24.  Hal  ini  sesuai  dengan  teori bahwa  furosemida  memiliki  aktivitas pada jam ke 4-6 jam dengan efek puncak pada  jam  ke  1-2  setelah  obat  diberikan (Depkes 1993).
Volume  urin  rata-rata  tiap  waktu perlakuan  kemudian  digunakan  untuk menghitung  urin  kumulatif  tiap  waktu perlakuan.  Tabel 6  dan  Gambar  3 menunjukkan  urutan  volume  urin  dari yang  terbanyak  yang  dihasilkan  pada hewan  uji  adalah  kontrol  positif, kombinasi putri malu dan pacar kuku (¼ :  ¾),  kombinasi  putri  malu  dan  pacar kuku ( ¾ : ¼), kombinasi putri malu dan pacar  kuku  (½  :  ½),  pacar  kuku,  putri malu,  dan  volume  paling  sedikit  pada perlakuan  kontrol  negatif  karena  kontrol negatif  tidak  memiliki  efek  diuretik.
Tabel 6. Data rata-rata volume urin kumulatif
Kelompok perlakuan Volume kumulatif pada jam ke - 6 12 24 Kontrol positif (Furosemida) 1,52 2,48 3,30 Kontrol negatif (CMC 0,5%) 0,20 0,53 1,05 Ekstrak putri malu 20 mg/200 g BB 0,65 0,88 1,46 Ekstrak pacar kuku 50 mg/200 g BB 0,86 1,19 1,89 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (½ : ½) 0,77 1,28 2,14 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¼  : ¾) 1,46 2,06 2,77 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¾ : ¼) 1,11 1,68 2,32
Gambar 3. Kurva  volume  urin  kumulatif  tiap  6  jam  waktu  pengamatan  pada  masing-masing  kelompok perlakuan uji (n=5).
Tabel 7. Data AUC tiap jam pengamatan pada masing-masing kelompok perlakuan
Perlakuan AUC 0-6 6-12 12-24 0-24 Kontrol positif (Furosemida) 4,56±1,56 7,44±2,63 10,68±2,95 22,68±6,80 Kontrol negatif (CMC 0,5%) 0,6±0,52 1,56±0,49 5,08±0,93 7,26±1,09 Ekstrak putri malu (20 mg/200 g BB) 1,94±0,42 2,64±0,49 4,26±1,60 8,82±1,69 Ekstrak pacar kuku (50 mg/200 g BB) 2,58±0,50 3,58±0,79 6,14±1,06 12,32±1,56 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (½ : ½) 2,3±0,80 3,8±0,67 8,22±1,40 14,52±2,48 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¼  : ¾) 4,38±1,43 6,18±1,95 8,08±1,61 18,64±3,93 Ekstrak putri malu dan pacar kuku  (¾ : ¼) 3,32±0,96 5,02±1,20 7,2±1,85 15,56±3,13
Gambar 4. Histogram daya aktivitas diuretik pada tiap kelompok perlakuan.
Data volume urin rata-rata
selanjutnya  dihitung  AUC ₀₋₆ ,  AUC ₆₋₁₂ , AUC ₁₂₋₂₄ ,  AUC ₀₋₂₄ dan  %  aktivitas diuretik.  Data  AUC  dapat  dilihat  pada Tabel  7.  Analisis  statistik  Anova  satu jalan  dilakukan  pada  AUC ₀₋ 6,  AUC  6- 12,  AUC12- ₂₄ ,  dan  AUC0-24  yang digunakan untuk melihat efek diuretik.
Hasil  uji Post  Hoc  test  Tukey  HSD pada  data  AUC ₀₋₆ menunjukkan  tidak ada perbedaan bermakna antara
kelompok  furosemida  dengan  kombinasi ekstrak  putri  malu  :  pacar  kuku  dosis (¼  :  ¾)  dan  dosis  (¾  :  ¼).  Jadi  dapat
disimpulkan bahwa pada jam ke 0-6, dua kelompok  dosis  kombinasi  ekstrak  putri malu : pacar kuku, yaitu dosis ¼ : ¾ dan dosis ¾ : ¼, memiliki efek diuretik yang sebanding dengan furosemida.
Hasil  uji Post  Hoc  test  Tukey HSD data  AUC 6-12 menunjukkan  hasil  yang sama  dengan AUC ₀₋₆ yaitu tidak  ada perbedaan  bermakna  antara  kelompok furosemida  dengan  kombinasi  ekstrak putri malu : pacar kuku dosis (¼ : ¾) dan dosis  (¾  :  ¼).  Jadi  dapat  disimpulkan bahwa pada jam ke 6-12, dua kelompok kombinasi  ekstrak  putri  malu  :  pacar
kuku  dosis  (¼  :  ¾)  dan  dosis  (¾  :  ¼) memiliki  efek  diuretik  yang  sebanding dengan furosemida.
Hasil  uji  P ost  Hoc  test  Tukey  HSD pada data  AUC 12-24 menunjukkan  hasil yang  berbeda  dengan  data  AUC 0-6 dan AUC 6-12 yaitu  tidak  ada  perbedaan bermakna  terjadi  antara  kelompok furosemida  dengan  semua  kelompok kombinasi  ekstrak  putri  malu  :  pacar kuku.    Jadi  dapat  disimpulkan  pada  jam 12-24,  ketiga  dosis kombinasi  ekstrak putri  malu  :  pacar  kuku  memiliki  efek diuretik yang sebanding dengan furosemida. Hasil  uji Post  Hoc  test  Tukey HSD
pada  data  AUC ₀₋₂₄ menunjukkan  tidak ada perbedaan bermakna antara
kelompok  furosemida  dengan  kombinasi ekstrak  putri  malu  :  pacar  kuku  (¼  :  ¾) saja.  Jadi  dapat  disimpulkan  pada  jam 0-24,  hanya  kombinasi  ekstrak  putri malu: pacar kuku (¼ : ¾) yang memiliki efek  diuretik  yang  sebanding  dengan furosemida.
Hubungan  aktivitas  diuretik  dengan AUC  yaitu  semakin  besar  nilai  AUC maka  aktivitas  diuretik  yang  dihasilkan akan  lebih  besar  pula.  Aktivitas  diuretik dapat  dilihat  dari  hasil  persentase diuretik (Gambar 4).  Gambar 4 menunjukkan  urutan  aktivitas  diuretik dari  yang  terkecil  ke  terbesar  yang dihasilkan  hewan  uji  adalah  pada perlakuan    putri  malu,  pacar  kuku, kombinasi putri malu dan pacar kuku (½ :  ½),  kombinasi  putri  malu  dan  pacar kuku (¾ : ¼), kombinasi putri malu dan pacar kuku (¼ : ¾) dan kontrol positif.
Hasil Post  Hoc  test  Tukey  HSD terhadap  persen  diuretik  menunjukkan tidak  ada  perbedaan  bermakna  antara kelompok  furosemida  dengan  kombinasi ekstrak  putri  malu  :  pacar  kuku  dosis (¼ :  ¾)  dan  dosis  (¾  :  ¼).    Jadi  dapat disimpulkan bahwa berdasarkan persentase  diuretik,  aktivitas  diuretik yang  sebanding  dengan  furosemida adalah  dua  kelompok  kombinasi  ekstrak putri malu : pacar kuku dengan dosis (¼ : ¾) dan (¾ : ¼).
Penelitian  Reddy et  al. (2011) mengenai aktivitas diuretik ekstrak etanol pacar kuku  dengan dosis 250 mg/200 g Bb  tikus  menghasilkan  volume  urin sebesar 7,3 ml, pada penelitian ini pacar kuku  dengan  dosis  250  mg/200  g  Bb tikus menghasilkan volume urin sebanyak  1,89  ml.  Sedangkan  penelitian Baghel et  al.    (2013)  mengenai  aktivitas diuretik  ekstrak  etanol  putri  malu dengan  dosis  100  mg/200 g  Bb  tikus volume  urin  yang  dihasilkan  sebesar 2,52  ml,  pada  hasil  penelitian  ini  putri malu  dengan  dosis  100  mg/200 g  Bb tikus  menghasilkan  volume  urin  sebesar 1,46  ml.  Jadi,  hasil  pada  penelitian  ini berbeda dengan hasil penelitian sebelumnya, hal ini mungkin disebabkan daerah tumbuhnya tanaman yang berbeda, sehingga kandungan kimia yang dihasilkan  pun  berbeda,  proses  ekstraksi yang digunakan pada penelitian sebelumnya,  sehingga  proses  ekstraksi dapat berjalan sempurna dan menghasilkan ekstrak yang lebih baik. Berdasarkan  penelitian  Tultul et  al.
(2010)  menyebutkan  ekstrak  air  daun putri  malu  memiliki  efek  diuretik  yang signifikan  dengan  peningkatan  ekskresi
elektrolit. Secara tidak langsung senyawa alkaloid (mimosin) menyebabkan
tekanan natriuresis. Namun, belum dapat dipastikan  apakah  aktivitas  diuretik  ada kaitannya  dengan  senyawa  mimosin  (Li et  al. 2007).  Alkaloid  sebagai  diuretik bekerja  secara  langsung  pada  tubulus dengan  cara  meningkatkan  ekskresi  Na + dan  Cl -. Dengan  meningkatnya  ekskresi Na + juga akan meningkatkan ekskresi air dan menyebabkan volume urin
bertambah.  Sedangkan  ekstrak  daun pacar kuku mengungkap adanya senyawa  polar seperti  flavonoid  yang kemungkinan bertanggung jawab
memiliki  aktivitas  diuretik  (Reddy et  al.
2011).  Flavonoid  dapat  meningkatkan volume  urin  dengan  cara  meningkatkan laju  kecepatan  glomerulus.  Selain  itu flavonoid  dapat  menghambat  reabsorbsi elektrolit  di  tubulus,  sehingga  terjadi peningkatan  Na + dan  air  dalam  tubulus dan  terjadi  peningkatan  volume  air (Jouad et al. 2011).
Berdasarkan  mekanisme  tersebut, kemungkinan  flavonoid  bekerja  lebih aktif  sebagai  diuretik  dibandingkan alkaloid, sehingga  pada  dosis  kombinasi putri malu : pacar kuku (¼ : ¾) memiliki efek  diuretik  lebih  besar  dari  kombinasi ektrak lainnya. Adanya senyawa alkaloid dan  flavonoid  pada  kombinasi  ekstrak etanol putri malu dan pacar kuku  diduga bekerja  secara  sinergisme  terhadap  tikus putih jantan galur wistar.

## KESIMPULAN
Kombinasi ekstrak etanol daun  putri malu ( Mimosa pudica L.) dan daun pacar kuku  ( Lawsonia  inermis L.)  mempunyai efek  diuretik  pada  tikus  putih  jantan galur  wistar. Kombinasi  ekstrak  etanol daun    putri  malu    dan  daun pacar  kuku memberikan  efek  diuretik  lebih  besar dibanding  ekstrak  tunggal  daun  putri malu  dan  daun  pacar  kuku. Kombinasi ekstrak etanol daun  putri malu dan daun pacar  kuku  dengan  perbandingan  dosis (¼  :  ¾)  dan  (¾  :  ¼)    memiliki  aktivitas yang sebanding dengan kontrol positif.

## DAFTAR PUSTAKA
Baghel  A,  Rathore  DS,  Gupta  V.  2013. Evaluation of diuretic activity of different extracts  of Mimosa  pudica Linn.
Pakistan  Journal  of  Biological  Sciences.
16:1223-1225.
[Depkes]  Departemen  Kesehatan.  1993. Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia  dan  Pengujian  Klinik.  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 167-169. Erlina FB, Imelda EP, Andani, Rustam. 2006. Perbandingan  efek  diuretika  serta  kadar natrium  dan  kalium  darah  antara pemberian ekstrak etanol daun tempuyung  dengan  furosemida. Jurnal
Sains dan Teknologi Farmasi. 11:76-80.
Jouad  H,  Lacaille-Dubois  M.  2001.  Effect  of the  flavonoid  extract  from Spregularia purpurea Pers.  on  arterial  blood pressure and renal fuction in normal and hypertensive rats. Journal of Ethnopharmacology. 76:156-163. Li N, Yi F, Christina M Sundy, Li Chen, Molly L  Hilliker,  Dustin  K,  Daniel  B,  Pin-Lan Li.  2007. Expression  and  actions  of HIF prolyl-4-hydroxylase  in  the  rat  kidneys.
Am.  J.  Physiol.  Renal  Physiol.  292:207-
216.
Mukherjee PK, Ponnusankar S dan Venkatesh
P.  2011.  Synergy  in  herbal  medicinal products. Indian Journal of Pharmaceutical Education and Research. 45:210-217.
Permadi  A.  2002. Tanaman  Obat  Pelancar Air  Seni.  Jakarta:  Penebar  Swadaya.    8- 18.
Reddy  CK,  Sandya  L, Sandeep  D,  Ruth Salomi  K,  Ngarjuna  S,  Padmanabha Reddy  Y.  2011.  Evaluation  of  diuretic activity  of  aqueous  and  ethanolic extracts of Lawsonia inermis L. leaves in rats. Asian  Journal  of  Plant  Science  and Research. 1:28-33.
Robinson  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tingkat  Tinggi.  Edisi  6. Padwaminata,  penerjemah;  Bandung: ITB  Bandung.  Terjemahan dari: The Organic Constituents of Higher Plants.
Tultul  KS,  Meitei  UD,  Sanjebam  R, Khumbong S. 2010. Diuretic property of aqueous  extract  of  leaves  of Mimosa pudica Linn.  on  experimental  albino rats. Journal of Natural Products. 3:172- 178.