## Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati
(J-BEKH)
Volume 9, Issue 2, Nov 2022
Article History Received: Okt 21 2022 Accepted: Nov 02 2022
Isolation and Characterization of Pathogenic Microbes Origin in Strawberry ( Fragaria sp.) Based on Koch's Postulates
(Isolasi dan Karakterisasi Mikroba Patogen Asal Buah Stroberi ( Fragaria sp.) berdasarkan Postulat Koch)
Rizal Koen Asharo 1 *, Reni Indrayanti 1 , Aldira Putri Damayanti 1 , Hilda Arsyah Eka Putri 1 , Saskia Nabilah 1 , Pinta Omas Pasaribu 1
1 Biology Study Program, Universitas Negeri Jakarta
*Corresponding author: koenindo@gmail.com Abstrak Abstract Stroberi  ( Fragaria sp.)  merupakan  tanaman hortikultura  dari  benua  Amerika.  Buah  stroberi memiliki rasa khas manis dan menyegarkan, serta banyak  mengandung  vitamin  dan  antioksidan yang  berguna  bagi  kesehatan  tubuh.  Namun, stroberi juga mudah mengalami kerusakan akibat mikroorganisme  pembusuk  bila  kondisinya memungkinkan seperti adanya perlukaan, kondisi suhu,  dan  kelembaban  yang  sesuai.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengisolasi  mikroba  patogen yang  menyebabkan  penyakit  pada  buah  stroberi yang  bergejala  dan  membuktikan  bahwa  patogen tersebut  benar  menyebabkan  penyakit.  Metode yang  digunakan  adalah  Postulat  Koch,  kemudian dilakukan  analisis  secara  deskriptif.  Hasil penelitian  menunjukkan  penyakit  busuk  lunak pada  buah  stroberi  ditandai  dengan  bagian  buah yang  busuk  terlihat  basah,  berwarna  sedikit kecoklatan,  berlendir,  terdapat  benang-benang halus  berwarna  putih  dan  mengeluarkan  bau busuk. Persentase IP (keterjadian penyakit) 100% dan KP (keparahan penyakit) 92.66%, berdasarkan scoring besar kerusakan merupakan yang paling tinggi.
Kata  kunci: Postulat  Koch,  Stroberi,  Mikroba Patogen, Busuk Basah
Strawberry  (Fragaria  sp.)  is  a  horticultural  plant originating from the Americas. Strawberries have a distinctive  sweet  and  refreshing  taste,  and  contain lots of vitamins and antioxidants that are useful for body  health.  But  strawberries  are  also  easily damaged.  This  damage  can  be  caused  by  spoilage microorganisms such as bacteria and fungi that can grow  if  conditions  permit  such  as  the  presence  of appropriate  temperature  and  humidity  conditions. In  this  experiment,  aims  to  isolate  patogenic microorganisms that cause disease in symptomatic strawberries  and  prove  that  these  patogens actually  cause  disease  using  Koch's  Postulates method and then descriptive analysis is carried out. From  the  experimental  results,  it  was  found  that soft  rot  disease  in  strawberries  was  characterized by  rotten  fruit  parts  that  looked  wet,  slightly brownish  in  color,  slimy,  there  were  fine  white threads and emitted a foul odor with a percentage of IP (disease occurrence) of 100% and KP (disease severity)  of  92.66%  where  based  on  the  score  the damage was the highest.
Keywords: Koch's Postulates, Strawberry, Patogenic
Microbes, Wet Rot
How to Cite : Asharo, R. K., Indrayanti, R., Damayanti, A. P., Putri, H. A. E., Nabilah, S., & Pasaribu, P. O. (2022). Isolation And Characterization Of Patogenicmicrobes Origin In Strawberry ( Fragaria Sp.) Based On Koch's Postulates. Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen Dan Keanekaragaman Hayati (J-BEKH) , 9(2), 51-61. 10.23960/jbekh.v9i2.269

## PENDAHULUAN
Stroberi ( Fragaria sp.) merupakan tanaman perdu dengan batang pendek dan daun yang tersusun rapat. Buahnya berupa buah  semu  yang  merupakan  hasil  dari pembesaran  jaringan  dasar  bunga  atau receptacle (Winarsari,  2016).  Biji  stroberi berukuran  kecil  dan  tersebar  di  seluruh permukaan buah. Pada umumnya, stroberi memiliki  bentuk  buah  bulat  mengerucut berwarna  merah  dengan  rasa  manis-asam yang  khas.  Warnanya  yang  menarik  dan rasanya  yang  segar  membuat  buah stroberi  banyak  digemari  masyarakat. Stroberi  adalah  jenis  buah  yang  paling banyak  digemari  masyarakat  luas  karena stroberi memiliki banyak manfaat terutama  untuk  kesehatan  serta  nilai ekonominya  yang  tinggi.  Masyarakat biasanya  mengkonsumsi  buah  stroberi secara langsung atau  diolah menjadi  selai, jus,  yoghurt,  manisan,  sirup,  maupun  es krim  (Budiman,  2008).  Stroberi  pertama kali  dijumpai  di  wilayah  Amerika  dan terdistribusi  luas  hingga  Eropa  dan  Asia (Chehri et al . 2010), termasuk di Indonesia.
Buah  stroberi  memiliki  rasa  khas  manis dan menyegarkan, serta banyak mengandung vitamin, fisetin, dan memiliki level  tinggi  antioksidan  dibandingkan buah  lainnya. Kandungan  gizi  stroberi per 100  gram  berat buah  yang  dapat  dimakan mengandung  energi  140  kJ,  protein  0,8 gram,  lemak  0,5  gram,  karbohidrat  7,6 gram, vitamin C 53 mg, serat 1,7 gram dan air 90,6 gram (Verheij dan Coronel, 1997). Selain  mempunyai  kandungan  gizi  yang tinggi  buah  stroberi  juga  mengandung ellagic  acid ,  yang  merupakan  antitoksin, anti  radikal  bebas,  anti  karsinogenik  dan anti  mutagen  (Poincelot,  2004).  Bagian yang  dapat  dimakan  dari  buah  stroberi mencapai  96%  dengan  kandungan  air mencapai 89,9% (Rukmana, 1998).
Stroberi  merupakan  buah  yang  memiliki nilai  ekonomi  yang  tinggi,  namun  juga mudah  mengalami  kerusakan.  Hal  ini disebabkan oleh tekstur buah yang lembut dan  tidak  memiliki  serat  sehingga  sangat sensitive terhadap gesekan fisik, suhu, dan sinar.  Selain  itu,  stroberi  memiliki  kadar
air tinggi (89,9%) sehingga mikroorganisme  akan  tumbuh  dengan cepat. Laju respirasi stroberi sangat tinggi yaitu  20-40mg  CO 2 /kg/jam  proporsional dengan  laju  kerusakan  buah  (Santoso  dan Purwoko  1986).  Respirasi  adalah  proses yang  pembakaran  karbohidrat  pada makhluk  hidup  oleh  oksigen  menjadi energi  CO 2 dan  H 2 O.  Intensitas  respirasi dianggap  sebagai  ukuran  laju  jalannya metabolisme.  Laju  respirasi  yang  tinggi akan  mengakibatkan  umur  simpan  yang pendek  (Pantastico,  1997).  Selain  itu, mikroba  pembusuk  dapat  tumbuh  bila kondisinya memungkinkan seperti adanya pelukaan-pelukaan,  kondisi  suhu,  dan kelembaban  yang  sesuai  dan  sebagainya. Mikroba  pembusuk  pada  buah  dan sayuran  merupakan  factor  pembatas utama  dalam  memperpanjang  masa simpan buah (Utama, 2001).
Berdasarkan  data  Badan  Pusat  Statistik (2021),  pada  tahun  2014  produksi  buah stroberi di Indonesia mencapai 58.884 ton, 94%  dari  hasil  produksi  tersebut  berasal dari  Provinsi  Jawa  Barat.  Namun,  pada tahun  2015  produksi  buah  stroberi menurun  hingga 54% menjadi 31.801 ton. Pada  tahun  2016,  produksi  buah  stroberi kembali  mengalami  penurunan  menjadi 12.091 ton. Pada tahun 2017, produksinya sedikit  meningkat  menjadi  12,225  ton. Pada  tahun  2018  produksi  buah  stroberi kembali  menurun  menjadi  8.531  ton,  dan pada  tahun  2019  menurun  menjadi  7.501 ton.  Penurunan  produksi  buah  stroberi yang sangat signifikan terutama disebabkan  oleh  adanya  penyakit  yang menyerang  tanaman  stroberi  maupun buah stroberi pasca panen. Penyakit busuk pada  buah  stroberi  yang  disebabkan  oleh jamur  dan  bakteri  belum  banyak  diteliti (Hanif  dan  Ashari,  2008).  Penyakit  pada buah  stroberi  diantaranya  disebabkan oleh  jamur.  Beberapa  jenis  jamur  patogen yang  paling  sering  ditemukan  yaitu Botrytis cinerea yang menimbulkan bercak kelabu, Colletotrichum  acutatum yang menyebabkan  busuk  antraknosa,  dan Phytophthora cactorum yang
menyebabkan  busuk  kulit  buah  (Yuliasari et  al .,  2015).  Selain  jamur,  beberapa bakteri  seperti Erwinia  carotovora dan Pseudomonas  marginalis juga  dapat menyebabkan  penyakit  berupa  busuk lunak  pada  buah  stroberi  (Yuliasari et  al ., 2015).
Pestisida  sintetik  sampai  saat  ini merupakan  bahan  yang  paling  banyak digunakan  para  petani  untuk  mencegah timbulnya penyakit pada tanaman stroberi.  Namun,  penggunaan  pestisida sintetik  tidak  sepenuhnya  efektif  karena dapat  membunuh  organisme  yang  bukan sasarannya,  seperti  bakteri  atau  jamur yang  menguntungkan  bagi  tanah  dan tanaman. Selain  itu, pestisida  sintetik juga dapat menyebabkan  resurgensi,  fenomena resistensi, dan peningkatan hama sekunder  (Rahayu et  al .,  2012).  Oleh karena  itu,  diperlukan  adanya  pestisida yang dapat bekerja secara langsung dalam mengendalikan patogen penyebab penyakit pada tanaman tanpa mempengaruhi organisme  lainnya. Supaya dapat  menentukan  agen  pengendali patogen  yang  sesuai,  maka  diperlukan identifikasi  terhadap  patogen  tersebut, identifikasi  dapat  dilakukan  dengan menggunakan metode Postulat Koch.
Postulat  Koch  merupakan  suatu  metode untuk mengetahui penyebab suatu penyakit  yang  disebabkan  oleh  agenbiotik non  obligat  (Falkow,  1988).  Terdapat empat  criteria  Postulat  Koch  untuk menetapkan bahwa suatu patogen spesifik merupakan penyebab suatu penyakit, para peneliti  harus  (1)  menemukan  patogen yang sama pada setiap individu sakit yang diteliti.  (2)  mengisolasi  patogen  dari individu  yang  menderita  sakit  yang  sama dan  membiakkan  mikroba  dalam  biakan murni,  (3)  menginduksi  penyakit  itu  pada individu percobaan dengan cara memindahkan  mikroba  patogen  dari biakan,  (4)  mengisolasi  mikroba  patogen yang sama dari individu percobaan setelah penyakit  itu  berkembang  (Campbell et  al ., 2003).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengisolasi  dan  mengidentifikasi  patogen
penyebab  penyakit  pada  buah  stroberi dengan menggunakan Postulat Koch.

## METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilaksanakan dari bulan
November  2021  sampai  bulan  April  2022. Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Fisiologi  Tumbuhan,  Program  Studi Biologi, Universitas Negeri Jakarta.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  kaca  objek,  kaca  penutup,  cawan petri,  mikroskop,  tissue,  pinset,  gunting, kantong plastik, kertas label, alat tulis, alat semprot, kamera, masker, gelas erlemeyer, gelas  ukur,  pipet,  autoclave,  sendok, laminary  air  flow .  Bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  media  PDA ( Potato  Dextrose  Agar )  (Kentang  250 gram;  dextrose  20  gram,  agar  20  gram dalam 1000 ml akuades), akuades, alkohol 70%, alkohol 90%, 30 buah stroberi segar dan  buah  stroberi  yang  menunjukkan gejala penyakit layu.

## Prosedur Penelitian
Metode  yang  digunakan  sesuai  dengan penelitian  pendahuluan  yang  dilakukan oleh  Ningsih et  al .,  (2012).  Penelitian dimulai  dengan  pembuatan  media  PDA dan  sterilisasi  alat.  Media  PDA  ( Potato Dextrose  Agar )  merupakan  media  semi sintetik. Winda (2009) menyatakan bahwa Potato dextrose agar merupakan salah satu media  yang  paling  baik  digunakan  untuk membiakkan  suatu  mikroorganisme,  baik itu  cendawan/jamur,  bakteri,  maupun  sel hidup. Agar dekstrosa kentang merupakan media  yang  cocok  untuk  kultur  karena ekstrak  kentang  merupakan  sumber karbohidrat,  dekstrosa  (kelompok  gula, baik  monosakarida  maupun  polisakarida) sebagai  nutrisi  tambahan  untuk  kultur, dan  agar  merupakan  media  tumbuh  yang baik  untuk  kultur  karena  mengandung cukup banyak air.
Media  disiapkan  dengan  membuat  kaldu kentang terlebih dahulu, kemudian didinginkan  sambil  disaring  ke  dalam Erlenmeyer  untuk  mendapatkan  ekstrak kentang  murni,  ditambahkan  sukrosa  dan diukur  pH  (5,6±0,2).  Kemudian  campuran kaldu  dengan  sukrosa  diaduk,  dipanaskan di  atas  hot  plate  dan  dihomogenkan menggunakan magnetic  stirrer .  Kemudian ditambahkan Nutrient Agar sampai homogen. Media yang telah dihomogenkan kemudian  disterilisasi  dengan autoclave selama 20 menit pada suhu 121°C.
Isolasi  dilakukan  dengan  menyemprotkan alkohol  pada  permukaan  buah  stroberi. Kulit  stroberi  dipotong  kotak  kecil, setengah  terinfeksi  dan  setengah  sehat menggunakan pisau bedah steril,
kemudian  potongan  kecil  kulit  stroberi ditempatkan  pada  media  PDA.  Kultur diinkubasi selama 4 hari pada suhu kamar berkisar  antara  25 – 30°C.  Mikroorganisme yang  tumbuh  disekitar  potongan  kulit buah  stroberi  diambil  dengan  cara dilingkarkan  kemudian  menggunakan metode streak  plate digoreskan  pada media  PDA  steril.  Hasil  purifikasi diinkubasi  kembali  selama  4  hari  pada suhu  kamar  berkisar  antara  25 – 30°C. Isolat  murni  yang  diperoleh  selanjutnya dideskripsikan  secara  morfologi  dan dilakukan  pewarnaan  sederhana  untuk mengetahui bentuk mikroba yang didapatkan.  Preparat  tersebut  kemudian diamati  di  bawah  mikroskop  dengan perbesaran 400x.
Isolat  yang  diperoleh  diinokulasikan  ke dalam  30  buah  stroberi  sehat  untuk membuktikan bahwa patogen yang diisolasi adalah patogen penyebab penyakit  dengan  menggunakan  Postulat Koch.  Menurut  Koch,  keempatnya  harus dipenuhi  untuk  menentukan  hubungan
sebab  akibat  antara  parasit  dan  penyakit (Semangun,  1996). Semangun (1996) juga menyatakan  bahwa  Koch  menyatakan bahwa untuk menentukan suatu organisme sebagai penyebab suatu penyakit,  organisme  tersebut  harus memenuhi  sejumlah  syarat,  syaratnya adalah organisme tersebut selalu berasosiasi dengan inangnya dalam semua insiden  penyakit,  organisme  tersebut (patogen)  dapat  diisolasi  dan  dibiakkan menjadi  kultur  murni,  hasil  isolasi  bila diinokulasikan  pada  tanaman  sehat  akan menghasilkan  gejala  penyakit  yang  sama dengan  tanaman  yang  terkena  penyakit, dan  dari  tanaman  yang  terkena  penyakit, dan  dari  tanaman  yang  terkena  penyakit. Telah  diinokulasi,  hasil  isolasi  sama dengan  hasil  isolasi  pertama.  Buah  yang sehat terluka  oleh penggerek  gabus.  Isolat pada  media  diambil  dengan  cork  corer dengan  diameter  yang  sama,  kemudian diinokulasikan  ke  dalam  luka  pada  buah. Luka  kemudian  ditutup  dengan  tisu  steril yang  dibasahi  dengan  air  suling  steril, kemudian  ditutup  rapat  pada  area  luka. Buah yang disuntikkan kemudian diinkubasi selama 7 hari pada suhu kamar.
Penetapan  skor  dilakukan  dengan  cara membuka  penutup  luka  pada  buah stroberi kemudian  mengamati  luka masing-masing stroberi  dari total stroberi yang  terinfeksi.  Kemudian  sortir  stroberi berdasarkan  gejala  penyakit  yang  terlihat pada  kulit.  Skor  penyakit  mengacu  pada Rai, et  al (2019)  dapat  dilihat  pada  Tabel 1.  Data  penetapan  skor  gejala  penyakit akibat  isolate  mikroba  patogen  kemudian digunakan  untuk  menghitung  intensitas serangan  penyakit  dengan  persamaan yang  digunakan  dalam  penelitian  dari Khairani, et  al .  (2017)  yaitu:  Disease Incidence (IP) dan Disease Severity (KP).
Tabel 1. Penentuan skor serangan penyakit yang disebabkan oleh isolate mikroba pada stroberi mengacu Rai, et al (2009)
Skor Deskripsi 0 Berwarna merah segar, berbentuk padat, berbau harum, tidak terjadi kebusukan 1 Terjadi perubahan warna namun warna dominan tetap merah, tidak terjadi perubahan bentuk 2 Warna menjadi lebih gelap, tidak terjadi perubahan bentuk, tidak terdapat patogen berwarna hitam atau putih
3 Berubah warna menjadi lebih gelap, tidak berubah bentuk, ada patogen berwarna hitam atau putih
4 Berubah warna menjadi kecoklatan, berubah bentuk menjadi lunak, terdapat patogen berwarna hitam dan putih
5 Warna buah dan daun menjadi kecoklatan, bentuk menjadi lunak seperti selai, terdapat patogen hitam dan putih, mengeluarkan aroma busuk Pengukuran insiden penyakit (IP)
menggunakan rumus:
𝐼𝑃 = 𝑛 𝑁 𝑥 100% ………………………...…(1)
dimana: n : jumlah tanaman yang terinfeksi N : jumlah tanaman yang diamati.
Pengukuran  keparahan  penyakit  (KP) menggunakan rumus:
𝐾𝑃 = 𝛴 (𝑛 𝑥 𝑣) 𝑁 𝑥 𝑍 𝑥 100% …………………… (2)
dimana:
n : jumlah tanaman yang terinfeksi pada skorke-i v : skorke-i N : jumlah tanaman yang diamati V : skor tertinggi terdapat pada acuan penilaian (Tabel 1).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gejala  penyakit  layu  tanaman  stroberi menunjukkan  tanaman  yang  mengalami pembusukan  pada  perakaran  tanaman, pangkal  batang  mengalami  perubahan warna menjadi coklat, pada daun terdapat bercak  berwana  coklat  dan  tanaman mengalami kekerdilan.
Terjadinya kelayuan  pada  tanaman  kemungkinan diakibatkan  oleh busuknya perakaran  dan berubahnya  warna  pangkal  batang  dan daun  tanaman  menjadi  warna  coklat  yang mengakibatkan terganggunya proses
fisiologis  sehingga  menyebabkan  tanaman layu.  Bahkan  pada  kondisi  yang  serius tanaman akan mengalami kematian. Pada penelitian ini, sampel yang digunakan  adalah  30  buah  stroberi ( Fragaria sp.) dan stroberi yang digunakan  harus  yang  telah  terserang patogen.  Sebelum  melakukan  percobaan, stroberi  harus  dibusukan  selama  7  hari agar  terdapat  patogen  atau  daerah  yang sakit  sebagai  sampel  untuk  diisolasi  dan diinokulasi.  Kondisi  makroskopis  stroberi awalnya berwarna merah segar, berbentuk padat dan sedikit keras, berbau harum,  serta  warna  daun  hijau,  namun setelah  dibusukan  ditemukan  ciri-ciri morfologi  gejala  penyakit  busuk  lunak pada  buah  stroberi,  yaitu  bagian  buah yang  busuk  terlihat  basah,  berwarna sedikit  kecoklatan,  berlendir,  terdapat benang-benang  halus  berwarna  putih  dan mengeluarkan  bau  busuk.  Pengamatan gejala  penyakit  secara  visual  pada  buah stroberi  ini  memiliki  gejala  terserang jamur  patogen  yaitu  gejala  busuk antraknosa.  Penyakit antraknosa  dicirikan dengan  adanya  bercak  coklat  kehitaman pada  permukaan  buah  yang  selanjutnya meluas  menjadi  busuk  lunak,  pada  bagian tengah  bercak  terdapat  kumpulan  titik- titik  hitam  yang  terdiri  dari  sekelompok seta  dan  konidia  jamur.  Penyakit antraknosa  disebabkan  oleh  beberapa spesies  jamur Colletotrichum antara  lain Colletotrichum  acutatum , C.  fragariae dan C. gloeosporoides (Agrios, 2005). Tahap ini sesuai  dengan  criteria  Postulat  Koch  yang
pertama  yaitu  mikroba  patogen  harus berasosiasi  atau  terdapat  pada  tanaman yang menunjukan gejala sakit.
Pada  metode  pertama,  hasil  penelitian diperoleh  satu  jenis  mikroba  patogen  yaitu jamur Colletotrichum fragariae (Gambar 1).
Gambar  1.  Hasil  purifikasi  mikroba  patogen pada buah stroberi bergejala busuk didapatkan  biakan  murni  jamur Colletotrichum fragariae.
Pada  metode  kedua,  hasil  penelitian diperoleh  satu  jenis  patogen  yaitu Colletotrichum  acutatum (Gambar  2) . Hasil isolasi dan identifikasi menunjukkan bahwa secara  makroskopis  koloni  patogen  terlihat berwarna  putih  keabu-abuan  dengan tekstur  seperti  kapas  dan  memiliki  pola sebaran  koloni  yang  beraturan.  Ciri-ciri tersebut  sesuai  dengan  literature  bahwa koloni  patogen  merupakan Colletotrichum acutatum (Benyahia, 2003).
Gambar  2.    Hasil  isolasi  jamur  patogen  pada buah  stroberi  bergejala  busuk didapatkan  isolate Colletotrichum acutatum.
Selanjutnya  setelah  terdapat  patogen  atau gejala  penyakit,  buah  stroberi  langsung diambil sedikit kemudian diinokulasi pada buah yang sehat. Setelah 7 hari diinokulasi pada  buah  yang  sehat,  didapatkan  hasil bahwa  stroberi  yang  diberikan  patogen dari  isolasi  pertama  menunjukan  gejala yang  sama  dengan  gejala  pada  stroberi awal.  Kondisi  makroskopis  stroberi  yang awalnya berwarna merah segar, berbentuk padat dan sedikit keras, berbau harum,  serta  warna  daun  hijau  menjadi menimbulkan  gejala  busuk  akibat  adanya patogen.  Gejala  busuk  yang  ditimbulkan adalah  dimana  awalnya,  pada  permukaan buah  yang  dilukai  memunculkan  air sehingga  menjadi  basah.  Luka  pada  buah berbentuk  cekung  dan  berwarna  lebih gelap  dibandingkan  jaringan  sehat  di sekitarnya.  Warna  daerah  perlukaan menjadi  keruh  yang  disebabkan  oleh jaringan  buah  yang  rusak.  Terdapat benang-benang halus berwarna putih pada permukaan  buah.  Warna  daun  berubah menjadi kecoklatan. Tekstur buah menjadi lembek  dan  tidak  berbentuk.  Luka  yang ditimbulkan  melebar  dan  menghasilkan bau  busuk.  Hal  ini  sesuai  dengan  criteria Postulat Koch ketiga yaitu mikroorganisme  yang  dikultur  kemudian dimasukan  ke  dalam  organ  yang  sehat
maka  akan  menyebabkan  penyakit  yang sama.
Menurut  Kuchareck  dan  Bartz  (1994), bakteri  patogen  penyebab  busuk  lunak akan  masuk  kejaringan  buah  dan menghasilkan enzim yang menghancurkan ikatan  antar  sel  dan  menimbulkan  luka. Luka  tersebut  akan  memunculkan  cairan dari  jaringan  yang  rusak  sehingga  terjadi busuk  lunak.  Menurut  Agrios  (2005), bakteri dapat menyebabkan suatu penyakit pada inang apabila terjadi kontak antara  patogen  dengan  tanaman  inang. Selain  itu,  mikroorganisme  pembusuk dapat tumbuh bila kondisinya memungkinkan  seperti  adanya  pelukaan- pelukaan,  kondisi  suhu,  dan  kelembaban yang sesuai dan
sebagainya.
Mikroorganisme pembusuk pada buah dan sayuran  merupakan  faktor  pembatas utama  dalam  memperpanjang  masa simpan  buah  (Utama,  2001).  Hal  ini  juga disebabkan oleh tekstur buah yang lembut dan  tidak  memiliki  serat  sehingga  sangat sensitif  terhadap  gesekan  fisik,  suhu,  dan sinar.  Selain  itu,  stroberi  memiliki  kadar air tinggi (89,9%) sehingga mikroorganisme  akan  tumbuh  dengan cepat. Laju respirasi stroberi sangat tinggi yaitu  20-40  mg  CO 2 /kg/jam  proporsional dengan  laju  kerusakan  buah  (Santoso  dan Purwoko 1986).
Jenis patogen  yang  terdapat pada stroberi dapat  diidentifikasi  melalui  pengamatan secara  mikroskopis.  Namun,  berdasarkan kajian  literatur,  beberapa  jenis  jamur patogen  yang  turut  dapat  ditemukan pada buah  stroberi  busuk  antara  lain Botrytis cinerea (bercak  kelabu), Colletotrichum acutatum (busuk antraknosa), dan
Phytophthora cactorum (busuk kulit buah)
(Hartman  dan  Kaiser,  2008).  Bakteri  yang menyebabkan  penyakit  busuk  lunak  pada buah  stroberi  termasuk  pada  famili Enterobacteriaceae yaitu Erwinacarotovora dan Pseudomonas
marginalis (Yuliasari et  al .,  2015).  Selain itu,  bakteri  penyebab  busuk  lunak  pada buah  strobe  adalah  bakteri  dari  genus Weeksella .  Bakteri  ini  merupakan  bakteri Gram Negatif yang akan masuk ke jaringan
buah  kemudian  menghasilkan  enzim  yang akan  menghancurkan  ikatan  antar  sel  dan menyebabkan  luka.  Luka  tersebut  akan menimbulkan  adanya  cairan  dari  jaringan yang  rusak  sehingga  terjadi  busuk  lunak (Yuliasari et al ., 2015).
Serangan  jamur Colletotrichum sp.  yang berhasil diisolasi dari buah stroberi busuk (Gambar  3)  dapat  menyebabkan  seluruh buah  mengering  dan  mengerut,  Hal  ini juga  dinyatakan  oleh  Martoredjo  (2010), bahwa  gejala  antraknosa  mula-mula berupa  bercak  kecil  yang  selanjutnya dapat  berkembang  menjadi  lebih  besar. Gejala tunggal cenderung berbentuk bulat, tetapi  karena  banyaknya  titik  awal  gejala maka  gejala  yang  satu  dengan  yang  lain sering  bersatu  hingga  membentuk  bercak yang  besar  dengan  bentuk  tidak  bulat. Pada  gejala  yang  sudah  cukup  besar, sering  dibagian  tepinya  coklat  dan dibagian  tengahnya  putih.  Bercak  yang terbentuk  umumnya  agak  cekung  atau berlekuk  dan  dimulai  dari  bagian tengahnya  mulai  terbentuk  aservulus jamur  yang  berwarna  hitam,  yang biasanya  membentuk  lingkaran  yang berlapis.
Gambar  3.    Hasil  pengamatan  mikroskopis jamur Colletotrichum sp.  yang berhasil  diisolasi  dari  buah stroberi bergejala busuk.
Menurut  Semangun  (2007),  serangan jamur Colletotrichum sp.  mula-mula
membentuk  bercak  coklat  kehitaman,  lalu meluas  menjadi  busuk  lunak.  Pada  bagian tengah  bercak  terdapat  kumpulan  titik- titik hitam yang terdiri atas kelompok seta dan  konidium  jamur.  Koloni  jamur berwarna  putih  dengan  hifa  menebal seperti  kapas  dan  halus  serta  tepi  koloni rata. Bagian bawah koloni jamur berwarna putih  hingga  krem  muda  dengan  pusat koloni  berwarna  merah  muda  hingga keunguan. Hal ini sesuai dengan pernyataan  Barnett  dan  Barry  (2003), bahwa jamur anggota genus Colletotrichum memiliki karakteristik makromorfologis  koloni  berwarna  putih dan  tekstur  koloni  halus  seperti  kapas. Jamur  anggota  genus Colletotrichum merupakan  jamur  golongan  Ascomycota yang  secara  teleomorph  dikenal  juga sebagai  jamur  anggota  genus  Glomerella, dikarenakan  telah  ditemukannya  struktur reproduksi  seksual  berupa  askospora. Secara  aseksual Colletotrichum sp.  dapat memproduksi  konidiospora/konidia  dan secara  seksual  mampu  memproduksi askospora (Cannon et al ., 2012; De Silva et al .,  2017).  Menurut  Zakaria  dan  John (2000)  perkecambahan  konidia  terjadi dengan  munculnya  tonjolan  kecil  tabung kecambah pada ujung konidia. Appresorium  umumnya  diproduksi  oleh tabung  kecambah  atau  hifa.  Bentuk  dari appressorium dapat dikategorikan
menjadi  empat  jenis,  yaitu  bundar ( globose ),  setengah  bundar  ( subglobose ), bercuping  ( lobed )  dan  sangat  bercuping ( very lobed ). Appresorium dapat berwarna terang hingga coklat gelap.
Untuk  mengetahui  tingkat  keparahan penyakit  pada  buah  stroberi  dilakukan dengan  cara  menghitung  banyaknya  buah yang  terserang  patogen  dibagi  dengan jumlah total buah yang diamati. Perhitungan  dilakukan  dengan  cara memberikan  penilaian  atau  scoring penyakit  terlebih  dahulu.  Setelah  itu,
dilakukan perhitungan IP (Insiden Penyakit)  dan  KP  (Keterjadian  Penyakit). Berdasarkan  table  hasil  perhitungan diatas,  tingkat  keterjadian  penyakit  dari keseluruhan kelompok buah stroberi yaitu sebesar 100% dimana presentase tersebut sangat  besar  untuk  tingkat  keterjadian penyakit.  Pada  ketiga  kelompok,  semua kelompok  memiliki  tingkat  insiden  atau keterjadian penyakit sebesar 100%. Hal ini membuktikan bahwa patogen yang menginfeksi buah stroberi sangat kuat dan hal ini juga menandakan jika buah stroberi sangat  mudah  terkena  patogen.  Hal  ini didukung  oleh  pernyataan  Kurnia  (2005) yang mengatakan bahwa budidaya stroberi  di  Indonesia  belum  dilakukan secara optimal karena kurangnya pengolahan  lahan  dan  tidak  maksimalnya teknik  pemupukan  serta  pemeliharaan yang  diterapkan  petani  menyebabkan tanaman  ini  rentan  dari  serangan patogen penyebab  penyakit  busuk  pada  buah stroberi.
Gambar  4.  Buah  stroberi  yang  telah  diberi perlakuan  sesuai  Postulat  Koch oleh  mikroba  patogen  jamur Colletotrichum sp.
Gambar 5. Penetapan skor mengacu pada Rai, et al 2009.
Tabel 2. Data pengamatan keterjadian penyakit pada buah stroberi ( Fragaria sp.) Keadaan buah Jumlah buah stroberi yang diamati (buah) IP (%) Tidak bergejala 0 0 Bergejala 30 100 Total 30 100 Tabel 3. Data pengamatan keparahan penyakit pada buah stroberi ( Fragaria sp.) Skor Jumlah buah stroberi yang diamati (buah) n x v N x Z KP(%) 0 0 0 150 92,66 1 0 0 2 0 0 3 2 6 4 7 28 5 21 105 Berdasarkan tabel 2 pada hasil pengamatan  keterjadian  penyakit  pada buah stroberi,  didapatkan hasil  100%.  Hal tersebut menunjukkan bahwa keseluruhan buah  stroberi  yang  diberi  perlakuan berupa  inokulasi  jamur  positif  terserang penyakit.  Gejala  yang  ditimbulkan  sama seperti  buah  stroberi  awal  dimana suspensi  jamur  didapatkan.  Sehingga  dari hasil  ini dapat menunjukkan  bahwa jamur patogen Colletotrichum sp.  merupakan jamur  asli  yang  mampu  menyerang tanaman stroberi berdasarkan uji Postulat
Koch. Selanjutnya berdasarkan tabel 3, persentase  keparahan  penyakit  seluruh kelompok  perlakuan  menunjukkan  nilai yaitu sebesar 92,66%. Hal ini menandakan jika  kerusakan  yang  disebabkan  oleh patogen  ini  sangat  tinggi.  Menurut
McCartney  (1994)  dan  Brown, et  al . (1995),  faktor  lingkungan  juga  turut mempengaruhi  perkembangan  penyakit antara  lain  adalah  suhu,  kelembaban udara,  curah  hujan,  dan  sinar  matahari, sehingga hal-hal  tersebutlah  yang memicu keberagaman  skor  yang  ada  pada  data hasil penelitian.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  penyakit  busuk  lunak  pada  buah stroberi ditandai dengan bagian buah yang busuk  terlihat  basah,  berwarna  sedikit kecoklatan,  berlendir,  terdapat  benang- benang  halus  berwarna  putih  dan mengeluarkan  bau  busuk.  Penyakit  busuk lunak  pada  buah  stroberi  ini  disebabkan oleh  jamur  patogen Colletotrichum sp.
Gejala penyakit pada buah stroberi setelah diinfeksi  serupa  dengan  gejala  yang  sama timbul  dari  buah  sakit  bergejala  pertama kali,  ini  menandakan  jika  hal  ini  sesuai dengan  kriteria  Postulat  Koch.  Persentase IP  (insiden  penyakit)  sebesar  100%  dan KP  (keparahan  penyakit)  sebesar  92,66% dimana hal ini menandakan jika kerusakan yang disebabkan oleh patogen ini terhadap stroberi sangat tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Abadi,  A.  L.  (2003).  Ilmu  Penyakit Tumbuhan III. Bayumedia. Malang Agrios,  G  N.  2005.  Plant  Pathology  5th Editon. San Diego California. Academic Press. I. N. 635 p Agrios,  G.  N.  (1996). Ilmu  Penyakit Tumbuhan . Yogyakarta:  Gadjah Mada University Press. Hal. 330.
Anonim.  (2001).  Report  on  Plant  Disease.
University  of  Illinois  Extension Departement of Crop Sciences.
Badan  Pusat  Statistik.  2021. Produksi Tanaman Buah-buahan. Diakses dari https://www.bps.go.id/indicator/5 5/62/6/produksi-tanaman-buah- buahan.html. Barnet,  H.  L.  and  B.  B  Hunter.  (1987). Illustrated Genera of Fungi Imperfecti. Macmillan, New York. Barnett  HL,  &  Barry  BH.  (2003).  Ilustrased Genera  of  Imperfect  Fungi,  4  th  ed, American Phythopathological Society Press, St. Paul Benhamou,  N  dan  I.  Chet.  (1993).  Hyphal Interactions  Between  Trichoderma harzianum  and  Rhizoctonia  solani: Ultrastructure and Gold Cytochemistry  of  the  Mycoparasitic process.  Phytopathology  83:  1062- 1071
Benyahia  H.  (2003).  New  Disease  Reports.
National  Institute  of  Agronomic Research,  Laboratory  of  Citrus
Improvement  and  Biotechnology, Kenitra, BP 1055, Morocco.
Brown et  al .  (1995).  The  Effect  of  Coffee Leaf  Rust  on  Foliation  and  Yield  of Coffee  in  Papua  New  Guinea. Crop
Prot . 14 (7). 589-592
Budiman,  S.  (2008). Berkebun  Stroberi Secara  Komersil .  Jakarta:  Niaga Swadaya.
Campbell,  Neil  A,  Jane  B  Reece,  dan Lawrence  G.  Mitchell.  (2003). Biologi  Edisi  Kelima  Jilid  2 .  Jakarta: Penerbit Erlangga Cannon PF, Damm U, Johnston PR, Weir BS. (2012). ‘Colletotrichum  – current status and future directions’, Studies in Mycology, no.73, hal. 181 – 213
Chehri,  K,  Saeed,  TJ,  Kasa,  RNR,  Saeed,  A  &
Baharuddin  S.  (2010) .  ‘Occurrence of Fusarium spp. and Fumonisins in stored  wheat  grains  marketed  in Iran’, Toxins, vol. 2, pp. 2816 -23. CMI. (1981). Description of Patogenic Fungi and Bacteria. Commonwealth Micological  Instutute  England.  Pp. 1616 Darwis,  V.  (2007). Budidaya,  Analisis Usaha tani, dan Kemitraan Stroberi Tabanan,  Bali, Jakarta:  Pusat Analisis Sosial Ekonomi dan Kebijakan  Pertanian  De  Silva  DD, Crousc  PW,  Adesd  PK  and  Hyde  K,
2017,  ‘Life  Styles  of  Colletotrichum Species  and  Implications  for  Plant Biosecurity’,  Fungal  Biology,  no.31, hal. 155-168
Hanif,  Z.,  &  Ashari,  H.  (2018).  Pengaruh Pemberian  Pupuk  Kalium  Nitrat (KNO 3) terhadap Hasil Panen Buah
Stroberi  ( Fragaria  x  ananassa ). JurnalPenelitianJeruk dan Buah Subtropika. Hartman  dan  Kaiser.  (2008).  Strawberry Fruit  Rots. Agriculture  &  Natural Resources . (1-5). Kurnia,  A.  2005. Petunjuk  Praktis  Budidaya Stroberi . Jakarta: Agromedia Pustaka. Hal 14. Martoredjo,  T.  (2010).  Ilmu  Penyakit  Pasca Panen. Bumiaksara. Jakarta. MCCartney,  HA.  (1994).  Spore  Dispersal: Environmental and Biological Factors In Ecology of Plant Patogen. Wallingford. CAB  International .  Pp 172- 181.
Pantastico,  ER.  B.  (1989). Fisiologi  pasca panen .  Diterjemahkan  kamariyani. UGM. Yogyakarta.
Poincelot, R.P. (2004). Sustainable Horticulture:  Today  and  Tomorrow .
Prentice Hall. New Jersey. 870 p. Rahayu, R., Ahmad, I., Ratna, E.S., Tan, I., dan Hariani,  N.  (2012).  Present  status for  carbamate,  pyrethroids  and phenylpyrazole insecticide resistance  to  German  cockroach,  in Indonesia. Journal  of  Entomology, 9 (6), 361-367.
Rukmana,  R.  (1998). Stroberi  Budidaya  dan Pasca panen . Kanisius. Yogyakarta Rukmana.  1998.  Membudidayakan  Buah Stroberi. PPM. Jakarta.
Santoso,  B.  B.  dan  Purwoko  B.  S.  (1995).
Fisiologi  dan  Teknologi  Pasca  Panen Tanaman  Hortikultura. Indonesia Australia Eastern Universities Project. Santoso,  B.B.  dan  B.S.  Purwoko.  (1986). Fisiologi  dan  teknologi  pasca  panen tanaman  hortikultura. Indonesia Australia Eastern Universities Project , Bogor. 187 hlm. Semangun,  H.  (2007).  Penyakit-Penyakit Tanaman  Hortikultura  di  Indonesia.
Gajah  Mada  University  Press.
Yogyakarta. Semangun,  Haryono.  (2006).  Pengantar Ilmu Penyakit Tumbuhan. Yogyakarta: UGM Press Strobel,  J.  W.  (1963).  Assistant  Plant Pathologist Sub-Tropical Experiment Station. Florida Agricultural  Experiment  Stations Journal Series No 1777.
Utama,  I.  M.  S.  (2001). Penanganan Pascapanen  Buah  dan  Sayuran
Segar.  Makalah  forum  konsultasi teknologi. Universitas Udayana. Bali. 25 hlm Utama, M. S. (2001). Penanganan pascapanen buah dan sayuran segar. Makalah “Forum Konsultasi Teknologi” Dinas Pertanian Tanaman Pangan Provinsi Bali. Verheij,  E.  W.  M.  dan  R.  E  Coronel,  (1997). Sumberdaya Nabati Asia Tenggara 2.
Penerjemah  S.  Danimihardja;  H. Sutarno;  N.W  Utami  Dan  D.S.H. Hopsen.  Jakarta:  Gramedia  Pustaka
Utama.
Winarsari,  A.  A.  (2016).  Pengaruh  Laju
Aliran  dan  Lama  Waktu  Ozonisasi
Terhadap  Kualitas  Buah dan Perkembangan Penyakit Jamur Kelabu  ( Botrytis  cinerea Pers.) pada
Buah  Stroberi.  Skripsi.  Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran. Yuliasari,  M.  M., Kawuri,  R.,  &  Proborini,  M. W.  (2015).  Isolasi  dan  identifikasi bakteri  penyebab  penyakit  busuk lunak  pada  buah  stroberi  ( Fragaria x ananassa ). Metamorfosa: Journal of Biological Sciences , 2 (1), 23-28. Yuliasari,  M.  M.,  Kawuri,  R.,  dan  Proborini, M. W. (2015). Isolasi dan Identifikasi
Bakteri  Penyebab  Penyakit  Busuk Lunak pada Buah Stroberi (Fragaria x  ananassa ).  Jurnal  Metamorfosa  II
(1):23-28. Zakaria,  M.,  &  John,  A  B.  (2000). ‘Morphology  and  Cultural  Variation Among Colletotrichum Isolates Obtained  from  Tropical  Forest Nuseries’  Journal  of  Tropical  Forest Science, vol.12, no.1, hal.1