Uji Efek Antimikroba Ekstrak Ethanol Stroberi (Fragaria vesca L. ) Terhadap Staphylococcus epidermidis
Eka Selvia*, Aulia Abdul Hamid**, Endang Sri Wahjuni***

## ABSTRAK
Staphylococcus  epidermidis adalah  flora  normal  pada  manusia  namun  pada  keadaan  tertentu  dapat menyebabkan infeksi nosokomial pada manusia yang berkaitan dengan penggunaan alat-alat medis yang dapat berakibat  sepsis.  Buah  stroberi  mengandung  kombinasi  ellagitanin,  proanthocyanin,  dan  anthocyanin  yang berkerja  secara  sinergis  sebagai  antimikroba.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan  adanya  efek antimikroba ekstrak ethanol stroberi di Indonesia terhadap Staphylococcus epidermidis. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan menggunakan metode tube dilution untuk mengetahui nilai kadar hambat minimal (KHM) dan kadar bunuh minimal (KBM). Konsentrasi ekstrak ethanol stroberi yang digunakan adalah  2  %,  1,5  %,  1  %,  0,5  %,  dan  0  %.  Nilai  kadar  hambat  minimal  (KHM)  tidak  dapat  ditentukan  karena kekeruhan  ekstrak.  Kadar  bunuh  minimal  (KBM)  didapatkan  pada  konsentrasi  1,5  %.  Hasil  uji  ANOVA menunjukan  bahwa  semakin  tinggi  konsentasi  ekstrak  ethanol  stroberi  maka  semakin  rendah  pertumbuhan bakteri S. epidermidis (p < 0,05; koefisien korelasi ekstrak ethanol stroberi = - 0,999). Kesimpulan dari penelitian adalah ekstrak etahnol stroberi mampu menghambat pertumbuhan bakteri S. epidermidis.
Kata kunci : Ekstrak ethanol stroberi, Staphylococcus epidermidis
Antimikrobial Effect of Strawberry (Fragaria vesca L) Ethanol Extract to

## Staphylococcus epidermidis

## ABSTRACT
Staphylococcus epidermidis is a normal flora but under certain condition can make nosocomial infection in  human  especially  related  to  the  use  of  medical  equipment  that  can  cause  sepsis.    Strawberry  contains combination  of    ellagitanin,  proanthocyanin,  and  anthocyanin  which  are  potential  as  antimicrobial  compounds. Therefore,  the  objective  of  this  research  is  to  prove  the  antimicrobial  effect  of  Indonesian  strawberry  which  is extracted  by  ethanol  to  suppress  the  growth  of Staphylococcus  epidermidis. This  research  was  a  laboratory experimental  study  using  tube  dilution  methode  to  determine  the  minimal  inhibition  concentration  (MIC)  and minimal bactericidal concentration (MBC). The concentration of strawberry extract used for dilution tube were 2 %, 1.5 %, 1 %, 0.5 %, and 0 %. MIC of strawberry extract can not determined because it was clouded. MBC of strawberry  extract  was  1.5  %.  The  result  of  ANOVA  test  showed  that  the  higher  concentration  of  strawberry extract, the more bacterial growth decrease significantly (p < 0.05; strawberry extract correlation coefficient =  - 0.999).  It was concluded that strawberry extract had antimicrobial effect to Staphylococcus epidermidis.
Keywords : Strawberry ethanol extract, Staphylococcus epidermidis
* Lab Ilmu Penyakit Mata, RSSA-FKUB
** Lab Ilmu Faal, FKUB
***Program Studi Pendidikan Dokter, FKUB

## PENDAHULUAN
Staphylococcus  epidermidis adalah  flora normal pada manusia yang banyak ditemukan dikulit  dan  pada  keadaan  tertentu  dapat menyebabkan  penyakit  pada  manusia.  Infeksi yang  disebabkan  oleh
Staphylococcus epidermidis paling  sering  dikaitkan  dengan peralatan  medis,  seperti  penggunaan  kateter dan  dapat  pula  terjadi  pada  pasien  dengan imunitas  yang  rendah. 1 Sebagian    bakteri  ini resisten  dengan  berbagai  jenis  antibiotik  dan menjadi  penyebab yang  sangat  penting  untuk infeksi nosokomial. 2
Di  negara  maju,  infeksi  nosokomial mempunyai angka kejadian 2-12 % dari semua penderita yang dirawat dirumah sakit.  Dengan Staphylococcus epidermidis sebesar 10 % dari semua  bakteri  penyebab  kejadian  infeksi nosokomial. Untuk negara berkembang seperti Indonesia,  angka  kejadian  infeksi  nosokomial belum diketahui dengan pasti. 3
Keanekaragaman  hayati  dan  tanaman obat yang tumbuh di Indonesia memungkinkan pengembangan  manfaat  dari  senyawa  aktif yang  terkandung  di  dalamnya.  Hal  ini membuka kesempatan  untuk mencari sumber antimikroba yang berasal dari tumbuhan, baik jenis  sayuran  maupun  buah-buahan  yang sering dikonsumsi masyarakat. Fragaria vesca L.  atau  lebih  dikenal  dengan  buah  stroberi
merupakan  salah  satu  sumber  penting fitokimia yang  mempunyai  banyak  manfaat bagi kesehatan manusia. Stroberi mengandung  asam  askorbat  dan  senyawa phenolik,  yang  terdiri  dari    asam  fenolat ,
anthosianin , protosianidin dan flavanoid.  Efek dari  senyawa  tersebut  berperan  sebagai perlindungan terhadap sel kanker, pencegahan penyakit  jantung ischemic,  antitumorgenic , anti-inflamasi, anti-alergi, anti-mutagenic hingga  mempunyai  fungsi  sebagai  anti- mikroba. 4
Dalam  suatu  penelitian  di  Bulgaria menunjukan  bahwa  stroberi  mempunyai  daya hambat  yang  kuat  terhadap Salmonella, Escherichia coli, dan kelompok Staphylococcus pada umumnya . Daya hambat dari  ekstrak  stroberi  ini  merupakan  proses yang kompleks antara ellagitannin, anthocyanidin, dan proanthocyanidin. 5
Oleh  karena  itu,  pada  penelitian  ini  ingin diteliti lebih lanjut apakah ekstrak buah stroberi ( Fragaria  vesca L .) di  Indonesia  mempunyai efek  antibakteri  terhadap Staphylococcus epidermidis.

## BAHAN DAN METODE
Dalam penelitian ini digunakan rancangan penelitian dengan design eksperimental labor- atorium (True experiment-post test only control group  design) dengan  menggunakan  metode dilusi tabung ( tube dilution test) untuk menge- tahui efektivitas ekstrak stroberi ( Fragaria ves- ca L .) sebagai  antimikroba  terhadap  bakteri Staphylococcus  epidermidis secara in  vitro . Metode  dilusi  tabung  meliputi  2  tahap,  yaitu tahap  pengujian  bahan  di  media  broth  yang ditujukan  untuk  menentukan  kadar  hambat minimal (KHM), dan tahap penggoresan pada media agar padat yang ditujukan untuk menen- tukan kadar bunuh minimal (KBM).
Penelitian  dilakukan  pada  bulan    Juni- Oktober  2011  di  Laboratorium  Farmakologi dan  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran  Univer- sitas  Brawijaya  Malang.Variabel  bebas  dalam penelitian  ini  adalah  ekstrak  buah  stroberi dengan konsentrasi 2 %, 1,5 %, 1 %, 0,5 %, 0 %  yang  ditentukan  melalui  penelitian pendahuluan.

## HASIL
Pada penelitian ini digunakan konsentrasi ekstrak  ethanol  stroberi (Fragaria  vesca L .) yaitu 2 %, 1,5 %, 1 %, 0,5 % dan 0 %. Tingkat kekeruhan  dari  hasil  uji  dilusi  tabung  tidak dapat  digunakan  untuk  menentukan  kadar hambat  minimal  (KHM)  ekstrak  ethanol  buah stroberi (Fragaria  vesca L .) terhadap  bakteri Staphylococcus  epidermidis .  Hal  ini  karena ekstrak ethanol buah stroberi yang diuji dalam keadaan  keruh,  sehingga  kekeruhan  bakteri tidak dapat diketahui dalam menentukan KHM.
Hasil  rata-rata  perhitungan  jumlah  koloni Staphylococcus  epidermidis yang  tumbuh pada  media  NAP  dapat  dilihat  pada  Tabel  1 dan Gambar 1. Pada Gambar 1 menunjukkan penurunan  rata-rata  jumlah  koloni  hingga  nol dari  konsentrasi  ekstrak  1  %  dan  1,5  %  dan tidak terdapat pertumbuhan koloni sama sekali pada konsentrasi ekstrak 1,5 % dan 2 %.
Tabel  1.  Jumlah  koloni Staphylococcus epidermidis pada media NAP agar
KBM  adalah  konsentrasi  terendah  dari antimikroba  yang  dapat  membunuh  bakteri dilihat dari tidak tumbuhnya koloni bakteri pada media  NAP.  Maka  dapat  disimpulkan,  nilai KBM  ekstrak  ethanol  stroberi  terhadap Staphylococcus  epidermidis berada  pada konsentrasi  1,5  %  karena  tidak  ditemukan pertumbuhan dari koloni bakteri.
Tes  normalitas  dilakukan  untuk  menguji data terdistribusi secara normal atau tidak. Jika signifikansi  (p)  >  0,05  maka  data  pada penelitian  ini  terdistribusi  data  normal. Kemudian  dilanjutkan  pengujian  homogenitas data.  Hasil  pengujian  homogenitas  data menunjukan  bahwa  data  tidak  homogen  (p  < 0,05),  sehingga  diperlukan  transformasi  data untuk  menghomogenkan  data.  Setelah dilakukan  transformasi  data,  didapatkan  hasil data  yang  homogen  (p  >  0,05).  Hasil  uji one
way ANOVA  didapatkan  adanya  pengaruh pemberian  perlakuan  ekstrak  ethanol  stroberi terhadap pertumbuhan koloni bakteri Staphylococcus epidermidis (p < 0,05) Uji post  hoc Tukey merupakan  uji perbandingan berganda (multiple comparisons). Uji  ini  dapat  menunjukan pasangan  kelompok  sampel  (kelompok konsentrasi  ekstrak  dan  jumlah  koloni)  yang memberikan  perbedaan  signifikan  dengan  ke- lompok  yang  tidak  memberikan  perbedaan signifikan. Dari hasil uji post hoc Tukey dapat diketahui  bahwa  ada  perbedaan  yang signifikan  pada  setiap  pasangan  kelompok sampel,  yang  ditunjukkan  dengan  angka signifikansi rata-rata sebesar 0,000 (p < 0,05) pada seluruh pasangan kelompok sampel.
Pada output  table  homogeneous  subsets diketahui  perbedaan  rata-rata  yang  signifikan. Pada homegeneous  subset ini  lima  kelompok sampel  masuk  dalam  lima subsets yang berbeda  sehingga  masing-masing  konsentrasi yakni  0  %;  0,5  %;  1  %  memiliki  perbedaan yang signifikan antara satu dan yang lain. Hasil pada homogenous  subsets ini  sesuai  dengan hasil  yang  telah  didapat  pada  uji post  hoc Tukey .
Uji  korelasi  dan  regresi  digunakan  untuk menunjukkan  adanya  hubungan  antara peningkatan konsentrasi ekstrak dan penurunan  jumlah  koloni Staphylococcus epidermidis yang  tumbuh.  Uji  korelasi  yang digunakan  adalah  uji  korelasi  Pearson.  Dari analisis  korelasi  Pearson  ekstrak  ethanol stroberi    terhadap  jumlah  koloni  bakteri Staphylococcus  epidermidis diperoleh  hasil yang bermakna, yaitu nilai signifikansi sebesar 0,000  (p  <  0,05).  Hal  ini  diperjelas  dengan koefisien  korelasi  (R)  sebesar  -0,999  untuk ekstrak  ethanol  stroberi.  Korelasi  negatif menunjukkan  bahwa  terdapat  hubungan antara  konsentrasi  ekstrak  ethanol  stroberi dengan  jumlah  koloni  bakteri Staphylococcus epidermidis yang  tumbuh,  dimana  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka  semakin sedikit jumlah koloni bakteri yang tumbuh.

## PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek  antimikroba  ekstrak  ethanol  stroberi ( Fragaria  vesca L .) terhadap  bakteri
0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 0 0,5 1 1,5 2 ju mlah ko lo n i Sta p h yl o co cc u s ep id er m id is

## Dosis ekstrak ethanol stroberi
Gambar  1  Uji  kepekaan  ekstrak  ethanol stroberi terhadap Staphylococcus … jumlah koloni
Staphylococcus  epidermidis secara in  vitro . Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah  dilusi  tabung  dengan  menggunakan nutrient  agar  broth untuk  menentukan  kadar hambat minimal (KHM) dan nutrient agar plate untuk mengetahui kadar bunuh minimal (KBM).
Dalam penelitian digunakan 5 konsentrasi ekstrak ethanol stroberi yaitu 0 %, 0,5 %, 1 %, 1,5  %,  dan  2  %.  Konsentrasi  ekstrak  ethanol stroberi  yang  digunakan  pada  penelitian  ini merupakan  hasil  dari  beberapa  kali  penelitian pendahuluan.
Kadar  hambat  minimal  (KHM)  pada penelitian  ini  diamati  dengan  melihat konsentrasi  terendah  masing–masing  ekstrak yang mengalami kekeruhan setelah diinkubasikan  18-24  jam.  Pada  penelitian  ini, tingkat  kekeruhan  tidak  dapat  diamati  karena warna  dasar  masing-masing  ekstrak  yang gelap. Dengan tidak dapat diketahui kekeruhan dari  masing-masing  tabung  maka  KHM  tidak dapat ditentukan.
Jumlah koloni yang diamati kemudian diuji kembali  dengan  uji  ANOVA  satu  arah,  uji korelasi, dan uji regresi. Dari uji komparatif one way ANOVA  didapatkan  nilai  signifikansi sebesar  0,00  (p  <  0,05)  untuk  kedua  ekstrak. Dari uji tersebut dapat diketahui bahwa sampel yang digunakan adalah homogen, terdistribusi normal,  dan  membuktikan  bahwa  terdapat pengaruh  ekstrak  sebagai  antimikroba terhadap bakteri . Pada uji komparatif one way ANOVA didapatkan hasil yang bermakna. Dari uji  korelasi  didapatkan  hasil  yang  signifikan yaitu 0,000 (p < 0,05) dan korelasi negatif yang menunjukkan    bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  ethanol  stroberi  maka semakin sedikit koloni bakteri yang tumbuh.
Stroberi  mengandung  senyawa  fenolat pada  jaringan  tanaman  dan  buah.  Aktivitas antimikroba  dari  senyawa  fenolat  tersebut sudah  banyak  diteliti  dan  dipelajari  dapat melawan  patogen  yang  menyerang  tanaman itu  sendiri  ataupun   patogen yang menyerang manusia.  Aktifitas  antimikroba  dari  ekstrak ethanol stroberi terhadap bakteri patogen pada manusia  mempunyai  sensitivitas  yang berbeda-beda. 6 Kemampuan  ekstrak  ethanol menghambat  dan  membunuh  pertumbuhan bakteri Streptococcus  epidermidis selain karena    kandungan  senyawa  fenolat,  juga karena  adanya bahan-bahan aktif lain  seperti
ellagitannin,  proanthocyanidin,  dan  anthocya- nidin  yang  bekerja  secara  sinergis  sebagai antimikroba. 5 Sementara  ethanol  sebagai pelarut mekanisme kerjanya merusak membran  plasma,  denaturasi  protein  dan melarutkan lipid. 7
Pada penelitian ini telah dibuktikan bahwa ekstrak stroberi mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis sesuai dengan hasil studi pustaka beberapa  jurnal  bahwa  zat  aktif  pada  stroberi bersifat clear inhibiton terhadap Staphylococcus  epidermidis Efek  antimikroba dari ekstrak ethanol stroberi bisa dipertahankan  pada  suhu  yang  rendah  atau disimpan dalam lemari pendingin. 8 Ketidakstabilan  suhu  dalam  hal  penyimpanan ektrak  ethanol  stroberi  merupakan  salah  satu kelemahan dalam panelitian ini.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa ekstrak ethanol stroberi ( Fragaria vesca L ) mempunyak  efek  antimikroba  terhadap Staphylococcus epidermidis, dengan :
1. Pemberian  ekstrak  ethanol  stroberi (Fragaria  vesca L .) mampu  menghambat pertumbuhan    bakteri Staphylococcus epidermidis secara in vitro .
2. Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak ethanol stroberi (Fragaria vesca L .) maka semakin  rendah  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus epidermidis.
3. Pada  ekstrak  ethanol  stroberi (Fragaria vesca L .) tidak  dapat  ditentukan  kadar hambat  minimal  karena  kekeruhan  dari ekstrak dengan metode dilusi tabung,
4. Pada  penelitian  ini  didapatkan  KBM ekstrak  ethanol  stroberi (Fragaria  vesca
L. ) terhadap Staphylococcus  epidermidis adalah konsentrasi 1,5 %.

## SARAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  diajukan beberapa saran antara lain :
1. Diperlukan  penelitian  lanjutan  mengenai efek  antimikroba  ekstrak  ethanol  stroberi secara in vivo untuk melihat
farmakokinetik,  farmakodinamik,  dan  efek
toksik  dari  bahan-bahan  aktif  yang terkandung.
2. Perlu dilakukan analisis terhadap kandungan  aktif  dalam  ekstrak  ethanol stroberi    di  Indonesia  melalui  ekstraksi
murni ( pure extraction).
3. Perlu  dilakukan  penelitian  dengan menggunakan dekok stroberi di Indonesia untuk  mengetahui  efek  antimikrobanya terhadap Staphylococcus epidermidis.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Goldmann DA dan Pier GB. Pathogenesis of  Infections  Related  to  Intravascular Catheterization. Clin Microbiol Rev . 1993;
6(2):176-92.
2. Eiff von C, Peters G, Heilmann C.  Patho- genesis  of  Infections  due  to  Coagulase- Negative Staphylococci (Abstract). Lancet Infect Dis. 2002; 2(11):677-85.
3. Guntur. The Role of Cafepime : Empirical Treatment  in  Critical  Treatment.  Jakarta: Dexa Media. 2007. hlm 59-62.
4. Svarcova I, Heinrich J, Valentova K. Berry Fruits  as  A  Source  of  Biologically  Active Compounds : The Case of Lonicera caeru- lea . Biomed Pap Med Fac. Czech Repub: Univ Palacky Olomouc. 2007; 151(2):163-
174.
5. Badjakov  I,  Nikolova  M,  Gevrenova  R, Todorovska  E,  Atanassov.  Bioactive Compound in Small Fruits and Their Influ- ence on Human Helath. Agro Bio Institute .
. 2008. 583-586.
6. Puupponen-Pimia R, Nohynek L, Meier C, Kahkonen M, Heinonen M, Hopia A et al . Antimicrobial Properties of Phenolic Com- pounds from Berries . J Appl Microb . 2001;
90:494–507.
7. Dzen  SM,  Roekistiningsih,  Santoso  S, Winarsih  S. Bakteriologi  Medik .  Malang: Tim  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas Brawijaya. 2003. hlm 122-123.
8. Liisa  JN.  Berry  Phenolics:  Antimicrobial Properties  and  Mechanisms  of  Action Against  Severe  Human  Pathogens .  Law- rence  Erlbaum  Associates  :  Nutrition  and Cancer . 2006 ; 54(1):18–32.