Uji Aktivitas Antibakteri dan Antijamur Dari Kombinasi Minyak Nyamplung (Calophyllum Inophyllum L.) Dengan Virgin Coconut Oil Dan Pengembangannya Sebagai Face
Antibacterial Activities and Anti-Fungus From Combination Of Tamanu Oil (Calophyllum Inophyllum L.) With Virgin Coconut Oil And Its Development As A Face Oil
Anif Nur Artanti 1 , Khairunisa Nursita Rahmawati 2 , Rita Rakhmawati 2 , Fea Prihapsara 2 1 Sekolah Vokasi, Universitas Sebelas Maret
2 Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret email: anif.apt@staff.uns.ac.id
<1spa si>
(tanggal diterima: 28-01-2020 , tanggal disetujui: 23-04-2020)
<1spasi> <1spasi>

## INTISARI
Face  oil  merupakan  salah  satu  sediaan  yang  digunakan  untuk  perawatan  kulit.  Dalam pengembangan  formulasinya,  perlu  ditambahkan  komponen  bahan  sebagai  antimikroba,  seperti minyak nyamplung dan VCO. Minyak nyamplung dikombinasikan dengan VCO pada seri konsentrasi 25:75,  40:60,  50:50,  60:40  dan  75:25%  (v/v)  yang  kemudian  diuji  antibakteri  serta  antijamur terhadap  Propionibacterium  acnes  dan  Malassezia  furfur  .  Pengujian  dilakukan  dengan menggunakan metode difusi cakram serta diamati diameter zona hambat.
Formula  kombinasi  minyak  nyamplung  dan  VCO  yang  memiliki  aktivitas  antimikroba tertinggi akan dikembangkan menjadi sediaan face oil. Selanjutnya pada sediaan tersebut dilakukan uji sifat fisik sediaan diantaranya uji stabilitas, organoleptis, pH, homogenitas, daya sebar, serta uji kadar air selama 4 minggu penyimpanan pada suhu ruang.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi minyak nyamplung dan VCO yang memiliki aktivitas antibakteri paling tinggi adalah seri konsentrasi 25:75 dan 50:50% (v/v) (DDH=12,33 mm), namun kombinasi minyak tersebut tidak memiliki aktivitas antijamur (DDH=0 mm). Hasil analisis data uji sifat fisik diuji menggunakan Repeated Measures ANOVA dengan Post Hoc Bonferroni dan diketahui bahwa sediaan face oil stabil selama 4 minggu penyimpanan, namun pada uji pH sediaan face oil mulai tidak stabil pada minggu ke-3 dan ke-4.
<1spasi>
Kata kunci : Antibakteri, antijamur, jerawat, nyamplung, VCO. <1spasi> <1spasi>

## ABSTRACT
Face oil is one of the preparations used for skin care. In developing the formulation, it is necessary to add component ingredients as antimicrobial agents, such as nyamplung oil and  VCO. Nyamplung oil is combined with VCO in the concentration series 25:75, 40:60, 50:50, 60:40 and 75: 25%  (v  /  v)  which  are  then  tested  for  antibacterial  and  antifungal  properties  against Propionibacterium  acnes  and  Malassezia  furfur.  The  test  is  carried  out  using  the  disc  diffusion method and the inhibition zone diameter is observed.
The combination formula of nyamplung  oil and VCO which  has the highest antimicrobial activity will be developed into a face oil preparation. Furthermore, the physical properties of the preparations  were tested including stability, organoleptic, pH, homogeneity,  dispersal, and  water content tests for 4 weeks of storage at room temperature.
The results showed that the combination of nyamplung oil and VCO which had the highest antibacterial activity was a series of concentrations of 25:75 and 50: 50% (v / v) (DDH = 12.33 mm), but the combination of these oils did not have antifungal activity (DDH = 0 mm). The results of the analysis of physical properties test data were tested using Repeated Measures ANOVA with Post Hoc
Bonferroni and it was found that the face oil preparations were stable for 4 weeks of storage, but in the pH test the face oil preparations began to be unstable at the 3rd and 4th weeks.
<1spasi>
Keyword : Antibacterial, antifungal, acne, nyamplung, VCO. <1spasi> <1spasi>

## 1. PENDAHULUAN
Di Indonesia, hampir setiap orang pernah mengalami jerawat [1]. Penyebab timbulnya  jerawat  dapat  diakibatkan  oleh  keberadaan  mikroorganisme,  seperti Propionibacterium acnes dan Malassezia furfur [2]. Pengobatan jerawat dengan anti jerawat  berbahan  kimia  seperti  benzoil  peroksida,  asam  salisilat,  sulfur,  dan triklosan  memiliki  sifat  bakteriostatik  yang  kuat  [3],  namun  salah  satu kelemahannya yaitu pemakaian yang tidak tepat dapat menyebabkan potensi iritasi pada kulit akan semakin tinggi [4]. Pendekatan lain yang  dapat digunakan untuk mengatasi jerawat, salah satunya adalah dengan merawat kulit menggunakan face oil karena dapat memperkuat skin barrier. Semakin kuat skin barrier, maka potensi kulit untuk mengalami masalah baik jerawat, kemerahan dan iritasi akan semakin rendah  [5].  Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan  pencarian  antibakteri  dan  antijamur dari bahan alam yang kemudian diformulasikan menjadi sediaan berupa face oil.
Indonesia merupakan negara tropis yang memiliki keanekaragaman hayati tinggi,  salah  satunya  adalah  tanaman  nyamplung  (Calophyllum  inophyllum  L.). Minyak  nyamplung  memiliki  komponen  zat  aktif  sebagai  bahan  antibakteri  dan antijamur yang diduga berasal dari kandungan flavonoid [6], alkaloid, dan saponin [7].  Selain  itu  tanaman  yang  juga  memiliki  potensi  untuk  dikembangkan  sebagai bahan  baku  kosmetik  dan  memiliki  sifat  antibakteri  adalah  Virgin  Coconut  Oil (VCO). VCO dapat menghasilkan senyawa-senyawa esensial yang mengandung asam laurat, sehingga bersifat sebagai antibakteri [8]. Formula face oil yang berbau harum didapatkan dengan mencampurkan VCO dengan bunga mawar sehingga diperoleh aroma  mawar.  Mawar  tidak  hanya  berfungsi  sebagai  corigen  odoris,  tapi  juga berpotensi  sebagai  antibakteri  dan  antijamur  karena  mengandung  kuersetin  dan kaempferol yang merupakan senyawa flavonoid yang bersifat polar [9].
Pada penelitian ini perlu dilakukan analisis lebih lanjut mengenai aktivitas antimikroba  dari  kombinasi  minyak  nyamplung  dan  VCO  yang  telah  dicampur dengan  bunga  mawar  sebagai  alternatif  untuk  menutupi  bau  khas  dari  kedua minyak  tersebut.  Minyak  nyamplung  dan  VCO  akan  dikombinasikan  dalam beberapa  seri  konsentrasi  diantaranya  25:75,  40:60,  50:50,  60:40  serta  75:25% (v/v). Variasi konsentrasi yang digunakan mengacu pada penelitian Leguillier et al. (2015),  yang  menunjukkan  bahwa  minyak  nyamplung  pada  konsentrasi  0,4% memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis, Propionibacterium  acnes,  dan  lain  sebagainya.  Kombinasi  minyak  tersebut  diuji antibakteri menggunakan P. acnes serta antijamur menggunakan M. furfur dengan menggunakan metode difusi cakram. Metode difusi kertas cakram ini merupakan metode yang sering digunakan untuk mengetahui adanya aktivitas antimikroba [10] dan memiliki beberapa kelebihan yaitu jumlah zat uji yang digunakan dapat diatur [11], dapat dilakukan lebih banyak pengujian dalam satu kali kegiatan [12], cepat,
mudah  dan  murah  karena  tidak  menggunakan  alat  khusus  [13].  Setelah  itu  akan dibuat  formulasi  sediaan  face  oil  menggunakan  seri  konsentrasi  terpilih berdasarkan nilai diameter zona hambat tertinggi. Sediaan face oil kemudian akan diuji sifat fisik, diantaranya uji stabilitas, organoleptis, pH, homogenitas, daya sebar serta uji kadar air..

## 2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. ALAT DAN BAHAN
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain timbangan analitik (Ohaus PA214 SKZO), hotplate (IKA C-MAG HS 7), peralatan gelas standar (Pyrex), vortex  (Gemmy  VM  300),  LAF,  autoklaf,  inkubator  (MEMMERT),  bunsen,  cawan petri,  pinset,  tabung  reaksi,  jarum  ose,  mikropipet,  tip  (Axygen  &  Thermo), anaerobic  jar  (Anaerocult),  flakon,  moisture  analyzer  (OHAUS  MB23),  pH  meter (OHAUS),  dan mikroskop.
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu sampel  uji berupa minyak nyamplung  yang diperoleh dari UKM Panggung Sinergi Lestari Jogjakarta, bunga mawar yang diperoleh dari desa Mriyan kabupaten Boyolali, VCO grade A, media  Brain  Heart  Infusion  Agar  (BHIA)  dan  Brain  Heart  Infusion  Broth  (BHIB) (Himedia),  media  Potato  Dextrose  Agar  (PDA)  (Merck),  kertas  cakram  (±6  mm) (Marcherey-Nagel),  Alkohol  70%,  Propionibacterium  Acnes  ATCC  11827  dan Malassezia furfur ATCC 12078 yang didapatkan dari laboratorium Mikrobiologi IPB, aquadest,  klindamisin  (Phzer),  nystatin  (Metiska  Farma),  dan  kloramfenikol (Bernofarm).

## 2. 2. CARA KERJA Proses Pencampuran VCO dengan Bunga Mawar
Dua  kilogram  bunga  mawar  (Rosa  damascena)  diambil  kelopaknya,  dicuci dengan air mengalir sampai bersih dari kotoran dan bahan-bahan asing, ditiriskan, dan diangin-anginkan sampai bebas dari sisa air. Bunga mawar kemudian dipotong tipis-tipis dan diambil sebanyak 50 g kemudian dimasukkan ke dalam 250 mL VCO yang telah dipanaskan pada suhu 60°C. Campuran tersebut kemudian dipanaskan lagi selama 1 jam dan suhu dijaga pada 60°C. Diamkan beberapa saat sampai minyak tidak  panas.  Minyak  yang  diperoleh  kemudian  disaring.  (Sutarmi  dan  Rozaline, 2005).

## Formulasi Konsentrasi Sampel Uji
Sediaan face oil dibuat dengan cara mencampurkan minyak nyamplung dan VCO, kemudian dihomogenkan dengan vortex. Pada penelitian ini terdapat 5 seri konsentrasi, diantaranya:
Tabel 1. Formulasi Sediaan Face Oil
Seri Konsentrasi Minyak Nyamplung (mL) VCO (mL) 25:75% (v/v) 2,5 mL 7,5 mL 40:60% (v/v) 4 mL 6 mL 50:50% (v/v) 5 mL 5 mL 60:40% (v/v) 6 mL 4 mL 75:25% (v/v) 7,5 mL 2,5 mL
Formulasi  sediaan  face  oil  diperoleh  dari  seri  konsentrasi  yang  memiliki aktivitas antimikroba tertinggi.

## PEMBUATAN MEDIA DAN STERILISASI
Media BHIB sebanyak 3 g, BHIA sebanyak 4,7 g, PDB sebanyak 2,8 g dan PDA sebanyak  3,9  g  masing-masing  dilarutkan  dengan  100  mL  aquadest.  Selanjutnya masing-masing media dipanaskan dan diaduk sampai homogen [14]. Cawan petri yang  telah  dicuci  bersih  kemudian  disterilkan  dalam  inkubator  (180°C  selama  2 jam).  Alat-alat  yang  tidak  tahan  pemanasan  tinggi  seperti  tip,  cakram,  dan  lain sebagainya disterilkan menggunakan autoklaf (121°C selama 15 menit) (Herrani, 2015). Pada uji antijamur, ditambahkan 100 ppm/mL kloramfenikol supaya media tidak terkontaminasi oleh bakteri [15].

## PEMBUATAN SAMPEL PENGUJIAN
Pada penelitian ini seri konsentrasi sampel uji yang digunakan adalah 100% minyak nyamplung, ekstrak minyak mawar dengan VCO, serta kombinasi minyak tersebut dengan seri konsentrasi 25:75; 40:60; 50:50; 60:40; dan 75:25% (v/v) [16]. Pada uji antibakteri, kontrol positif yang digunakan adalah antibiotik klindamisin konsentrasi 100 ppm sebanyak 20 µL, sedangkan pada uji antijamur adalah nistatin 100 ppm sebanyak 20 µL. Kontrol negatif pada kedua uji adalah aquadest 20 µL.

## PEMBUATAN SUSPENSI MIKROBA
Pembuatan suspensi P. acnes dan M. furfur dilakukan menggunakan teknik cawan tuang (pour plate) dengan cara 1 mL mikroba yang telah dikultur (jumlah koloni 10^8  CFU/mL)  kemudian dilarutkan  ke dalam aquadest steril (tabung A) sampai 10 mL (jumlah koloni 10^7 CFU/mL). Pengenceran kedua dilakukan dengan diambil 1 mL dari tabung A kemudian dilarutkan dengan aquadest sampai 10 mL (tabung B) (jumlah koloni 10^6   CFU/mL). Pada uji antibakteri, bakteri diencerkan sampai didapat jumlah koloni 10^6   CFU/mL, sedangkan pada uji antijamur, koloni jamur diencerkan sampai didapat jumlah koloni 10^5  CFU/mL. Suspensi M. furfur dibuat dengan cara menambahkan NaCl pada media PDA [17].

## PROSEDUR UJI ANTIMIKROBA
Sebanyak 1 mL suspensi P. acnes (10^6 cfu/mL) ditambahkan ke dalam 15 mL BHIA cair dan 1 mL suspensi M. furfur (10^5 cfu/mL) ditambahkan ke dalam 15 mL PDA cair. Setelah kedua media agar memadat, kertas cakram (6 mm) diletakkan pada masing-masing bagian pada media dan diteteskan dengan sampel uji, kontrol positif, dan kontrol negatif sebanyak 20 µL serta dilakukan replikasi sebanyak tiga kali.  Pada  uji  antibakteri,  cawan  dimasukkan  dalam  anaerobic  jar  dan  disimpan selama ±5 hari. Sedangkan pada uji antijamur M. furfur, cawan disimpan di suhu ruang selama 24 jam.

## PENGUKURAN DIAMETER ZONA HAMBAT
Hasil  pengujian  aktivitas  antimikroba  ini  menggunakan  parameter  zona hambat  dengan  mengamati  daerah  zona  hambat  yang  tampak  lebih  jernih  dari daerah sekitarnya. Ketentuan antibakteri adalah sebagai berikut : daerah hambatan
20 mm atau lebih berarti sangat kuat, daerah hambatan 10-20 mm berarti kuat, 5- 10 mm berarti sedang, dan daerah hambatan 5 mm atau kurang berarti lemah [18].

## EVALUASI SIFAT FISIK SEDIAAN FACE OIL
Dilakukan uji sifat fisik pada sediaan face oil dengan seri konsentrasi terpilih meliputi uji stabilitas, organoleptis, homogenitas, pH, daya sebar, dan uji kadar air dimana pengujian dilakukan selama 4 minggu dan diamati tiap minggunya.

## UJI STABILITAS
Sediaan  face  oil  disimpan  pada  suhu kamar  (28  ±  2  ºC) selama  4  minggu, kemudian dilakukan pengamatan organoleptis, homogenitas, pH, daya sebar, dan uji kadar air dengan pengamatan setiap 1 minggu sekali [19].

## UJI ORGANOLEPTIS
Pengamatan  secara  visual  menggunakan  panca  indera  untuk mendiskripsikan konsistensi, warna dan aroma dari sediaan face oil [20].

## UJI HOMOGENITAS
Sebanyak  0,5  g  sediaan  face  oil  diteteskan  pada  sekeping  kaca  objek  dan dilihat di bawah mikroskop [20].

## UJI pH
Pengukuran  pH  dilakukan  dengan  menggunakan  pH  meter  dengan  cara mencelupkan  elektroda  pH  meter  ke  dalam sampel,  didiamkan  dan  hasilnya  bisa dilihat pada layar pH meter [21].

## UJI DAYA SEBAR
Uji daya sebar dilakukan dengan menimbang sediaan face oil sebanyak 0,5 g dan diberi beban 150 g selama 1 menit [22].

## UJI KADAR AIR
Timbang sampel sebanyak ±0,5 g, ratakan sampel di atas pan. Alat Moisture Balance akan memanaskan sampel hingga menunjukkan nilai kadar air sampel yang terbaca konstan (±10 menit) [23].

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN PENYIAPAN BAHAN
Pada  proses  penyiapan  bahan,  bunga  mawar  diambil  kelopaknya  dan dipotong kecil-kecil yang bertujuan untuk meningkatkan luas permukaan, sehingga dapat  mempersingkat  waktu  pemanasan  pada  saat  proses  pencampuran  dengan VCO [24]. Pada penelitian ini dilakukan pemanasan pada suhu 60°C yang bertujuan untuk  menghasilkan  minyak  yang  bening  dan  mengurangi  kadar  air  [25].  Ketika bunga dipanaskan dengan VCO pada suhu 60°C selama 1 jam, terjadi kontak antara VCO  dengan  bunga  mawar  sehingga  lemak  dalam  minyak  mampu  mengekstrak aroma  wangi  yang  dihasilkan  oleh bunga  mawar [26].  Senyawa  pengaroma  pada bunga  mawar  adalah  fenil  etil  alkohol,  sitronelol,  dan  geraniol  [27].  Menurut penelitian [26], semakin lama dan semakin tinggi suhu proses pemanasan, senyawa pengaroma  yang  terkandung  dalam  bunga  mawar  akan  semakin  berkurang,
sehingga pada penelitian ini pemanasan hanya dilakukan selama 1 jam pada suhu 60°C.

## PENGUJIAN ANTIBAKTERI
Pada penelitian ini, pengujian antibakteri dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya aktivitas antibakteri pada sampel minyak nyamplung, VCO, dan kombinasi minyak tersebut dengan seri konsentrasi 25:75, 40:60, 50:50, 60:40, dan 75:25% (v/v)  terhadap  bakteri  P.  acnes  (10^6  CFU/mL).  Metode  uji  aktivitas  antibakteri yang digunakan adalah metode difusi cakram. Bakteri P. acnes diinkubasi di dalam anaerobic jar karena bakteri tersebut bersifat anaerob yaitu tidak membutuhkan oksigen untuk pertumbuhannya [28].
Kontrol negatif yang digunakan dalam penelitian ini adalah aquadest karena sampel  yang  diujikan  tidak  dilakukan  pengenceran.  Hasil  zona  hambat  kontrol negatif  adalah  0  mm.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penggunaan  pelarut  aquadest tidak mempengaruhi hasil uji antibakteri dari sampel.  Sedangkan kontrol positif yang  digunakan  adalah  antibiotik  klindamisin  20  µL.  Hasil  diameter  hambat klindamisin  adalah  45  mm.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  klindamisin  memiliki aktivitas antibakteri yang kuat (>20 mm) [18].  Pada cakram antibiotik klindamisin didapatkan zona yang jernih, sehingga dapat diartikan bahwa klindamisin memiliki aktivitas menghambat bahkan membunuh bakteri P. acnes tersebut.
(a) (b) (c)
Gambar 1. Hasil Uji Antibakteri: (a) 100% Minyak Nyamplung (atas), Kontrol Positif (kiri), dan Kontrol Negatif (kanan); (b) Seri Konsentrasi 25:75% (v/v) (kiri) dan Seri Konsentrasi 75:25% (v/v) (kanan); (c) Seri Konsentrasi 50:50% (v/v) (atas), Seri Konsentrasi 60:40% (v/v) (kiri), dan Seri Konsentrasi 40:60% (v/v) (kanan)
Data yang diperoleh kemudian dianalisis menggunakan uji non parametrik Kruskal Wallis dengan post hoc Mann Whitney. Pada analisis Mann Whitney (Tabel 2) didapatkan hasil yaitu kontrol negatif tidak berbeda signifikan dengan 100% VCO (p>0,05),  sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  100%  VCO  tidak  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  P.  acnes  sama  seperti  kontrol  negatif.  Selain  itu  semua  seri konsentrasi  berbeda  signifikan  terhadap  kontrol  positif  (klindamisin)  (p<0,05), sehingga  tidak  dijumpai  seri  konsentrasi  optimal  yang  dapat  menyamai  aktivitas antibakteri klindamisin dalam menghambat pertumbuhan P. acnes.
Pada Tabel 2 dapat dilihat bahwa VCO yang telah dilarutkan denngan bunga mawar  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri,  sehingga  pada  semua  seri  kombinasi minyak  tersebut,  VCO  tidak  berpengaruh  dalam  penurunan  nilai  diameter  zona hambat. Menurut penelitian [29], VCO tidak memiliki aktivitas antibakteri terhadap
beberapa bakteri yaitu Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes dikarenakan VCO mengandung sedikit asam lemak bebas dan tidak adanya senyawa monolaurin. Selain itu, dapat dilihat bahwa 100% minyak nyamplung  memiliki  tingkat  aktivitas  antibakteri  yang  paling  tinggi.  Hal  ini disebabkan karena efek antibakteri minyak nyamplung yang diperkirakan berasal dari kandungan flavonoid, alkaloid, dan saponin [30].
Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat sampel pada bakteri P. Acnes
Konsentrasi Sampel Uji Diameter Zona Hambat ± SD (mm) Aktivitas Antibakteri 100% Minyak Nyamplung 19,67 ± 0,47 𝑎 Sedang 100% VCO yang terekstrak bunga mawar 0 𝑏 Tidak aktif 25% Minyak Nyamplung : 75% VCO 11 ± 0,47 𝑐 Lemah 40% Minyak Nyamplung: 60% VCO 12 ± 0,00 𝑐 Lemah 50% Minyak Nyamplung : 50% VCO 12 ± 0,47 𝑐 Lemah 60% Minyak Nyamplung : 40% VCO 12,33 ± 0,00 𝑐 Lemah 75% Minyak Nyamplung : 25% VCO 12,33 ± 0,00 𝑑 Lemah Kontrol positif (klindamisin) 45 ± 0,00 𝑒 Kuat Kontrol negatif ( aquadest ) 0 𝑏 Tidak aktif
Keterangan  :  Huruf  yang  berbeda  di  belakang  angka  menunjukkan  perbedaan  signifikan berdasarkan  hasil  uji  statistic  menggunakan  software  SPSS  10  dengan  post-hoc  Mann  Whitney (p<0,05)

## PENGUJIAN ANTIJAMUR
Pengujian  antijamur  dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas  antijamur  dari sampel minyak nyamplung, VCO dan kombinasi kedua minyak tersebut dengan seri konsentrasi  25:75,  40:60,  50:50,  60:40,  dan  75:25%  (v/v)  terhadap  M.  furfur (jumlah  koloni  10^5  CFU/mL).  Metode  uji  aktivitas  antijamur  yang  digunakan adalah metode difusi cakram. Kontrol negatif yang digunakan dalam penelitian ini adalah aquadest dengan DDH 0 mm (Tabel 3).
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambat sampel pada jamur M. Furfur
Konsentrasi Sampel Uji Diameter Zona Hambat ± SD (mm) Aktivitas Antijamur 100% Minyak Nyamplung 0 𝑎 Tidak aktif 100% VCO 0 𝑎 Tidak aktif 25% Minyak Nyamplung : 75% VCO 0 𝑎 Tidak aktif 40% Minyak Nyamplung: 60% VCO 0 𝑎 Tidak aktif 50% Minyak Nyamplung : 50% VCO 0 𝑎 Tidak aktif 60% Minyak Nyamplung : 40% VCO 0 𝑎 Tidak aktif 75% Minyak Nyamplung : 25% VCO 0 𝑎 Tidak aktif Kontrol positif (nistatin) 16,3 ± 0,58 𝑏 Sedang Kontrol negatif (aquadest) 0 𝑎 Tidak aktif
Hasil ini menunjukkan bahwa penggunaan aquadest sebagai kontrol negatif tidak  berpengaruh  terhadap  hasil  uji  antijamur  dari  sampel.  Kontrol positif  yang digunakan  pada  uji  antijamur  adalah  nistatin  100  ppm  sebanyak  20  µL  dan diperoleh  hasil  Diameter  Daya  Hambat  (DDH)  nistatin  adalah  16,3  mm.  Hal  ini
menunjukkan bahwa nistatin memiliki aktivitas antijamur tergolong sedang (16-20 mm). Pada cakram nistatin didapatkan zona yang jernih, sehingga dapat diartikan bahwa nistatin memiliki aktivitas menghambat bahkan membunuh M. furfur.
Pada penelitian ini didapatkan hasil bahwa 100% minyak nyamplung, 100% VCO, dan semua seri konsentrasi dari kombinasi antara minyak nyamplung dan VCO tidak memiliki aktivitas dalam menghambat pertumbuhan jamur M. furfur dilihat dari tidak terbentuknya DDH pada media PDA. Hal ini menunjukkan bahwa minyak nyamplung dengan konsentrasi 100% maupun kombinasinya dengan menggunakan seri  konsentrasi  VCO  tidak  menghambat  pertumbuhan  M.furfur.  Jamur  dengan golongan  Malassezia  memiliki  sifat  afinitas  tinggi  terhadap  senyawa  yang mengandung  komponen  lemak.  Pada  penelitian  [31],    diketahui  bahwa  jamur  M. furfur akan mengalami pertumbuhan yang lebih pesat jika pada media agar yang digunakan  ditambahkan  lemak  seperti  minyak  zaitun,  minyak  kelapa  dan  asam oleat. Hal ini dikarenakan M. furfur bersifat lipofilik, yaitu dapat berkembang biak dalam lipid.

## Uji Sifat Fisik Sediaan
Formulasi sediaan face oil diperoleh dari hasil uji antimikroba yang memiliki aktivitas  antibakteri  tertinggi,  yaitu  pada  seri  konsentrasi  25:75%  serta  50:50% (v/v). Pada uji stabilitas formulasi sediaan face oil dilakukan pengamatan sifat fisik yang dilakukan selama 4 minggu masa penyimpanan pada suhu kamar (±25°C) dan dilakukan pengamatan tiap minggunya.

## a. Uji Organoleptis
Pengamatan organoleptis dilakukan secara subjektif dengan menilai warna, bau,  dan  konsistensi  dari  sediaan  yang  dihasilkan.  Sediaan  face  oil  ini  memiliki aroma khas (nutty) dari minyak nyamplung hingga penyimpanan sampai dengan minggu ke-3 sediaan face oil ini masih beraroma sama.

## b. Homogenitas
Pengamatan  homogenitas  bertujuan  untuk  melihat  penyebaran  zat  aktif dalam  sediaan.  Hasil  pengamatan  homogenitas  menggunakan  mikroskop  dengan perbesaran 40x pada sediaan face oil dengan kombinasi 25:75% dan 50:50% (v/v) yang  disimpan  pada  suhu  ruang  (±25°C)  selama  4  minggu  masa  penyimpanan menunjukkan hasil yang homogen.  Hal ini ditandai dengan ukuran partikel yang sama ketika diamati di bawah mikroskop.
Gambar 2. Hasil Uji Homogenitas Sediaan face Oil dengan Perbesaran 40x: (a) Seri Konsentrasi 25:75% (v/v) dan (b) seri Konsentrasi 50:50% (v/v)
(a) (b)

## c. pH
Pengukuran pH ini bertujuan untuk mengetahui apakah sediaan face oil yang dibuat yang telah aman dan tidak mengiritasi kulit saat digunakan. Menurut SNI 16- 4399-1996, syarat pH sediaan topikal yang baik adalah sesuai dengan pH alami kulit, yaitu 4,5-8,0. Rata-rata nilai pH pada formulasi 25:75% (v/v) adalah 6,03 sedangkan pada  formulasi  50:50%  (v/v)  yaitu  5,64,  sehingga  kedua  formulasi  berada  pada rentang pH sediaan topikal yang baik. Pada penelitian [32], diketahui pH minyak nyamplung  dengan  metode  cold  pressed  yaitu  sebesar  4,11.  Semakin  besar konsentrasi minyak nyamplung pada sediaan face oil, maka nilai pH sediaan akan semakin asam. Namun, dalam penelitian ini, sediaan face oil pada seri konsentrasi 25:75% dan 50:50% (v/v) masih memenuhi syarat nilai pH sediaan topikal yaitu 4,5-8,0 (Gambar 3).
Gambar 3. Hasil Uji pH Sediaan Face Oil kombinasi minyak nyamplung dan VCO pada konsentrasi 25 : 75 % (v/v) dan konsentrasi 50 : 50 % (v/v)

## d. Daya Sebar
Daya  sebar  adalah  kemampuan  penyebaran  sediaan  untuk  merata  saat diaplikasikan di kulit. Persyaratan daya sebar untuk sediaan topikal adalah 5-7 cm. Pada uji daya sebar sediaan face oil, didapatkan nilai rata-rata pada seri konsentrasi 25:75% (v/v) yaitu 6,95 cm sedangkan seri konsentrasi 50:50% (v/v) yaitu 6,82 cm. Hal  ini  dikarenakan  sediaan  face  oil  pada  seri  konsentrasi  25:75%  (v/v)  lebih banyak  mengandung  VCO  (75%  VCO),  sehingga  sediaan  face  oil  seri  konsentrasi 25:75%  (v/v)  lebih  encer  jika  dibandingkan  dengan  formulasi  50:50%  (v/v). Semakin  cair  konsistensi  sediaan  face  oil,  maka  semakin  besar  daya  sebarnya. Meskipun  demikian,  hasil  daya  sebar  semua  seri  konsentrasi  sediaan  face  oil memenuhi syarat. Daya sebar dari kedua sediaan face oil tersebut sesuai dengan standar  daya  sebar  sediaan  topikal  yang  baik.  Berdasarkan  hasil  pengujian  daya sebar diketahui bahwa kedua sediaan face oil pada konsentrasi 25 : 75 % dan 50 : 50 % stabil selama 4 minggu penyimpanan.
Gambar 4. Hasil Uji Daya Sebar Sediaan Face Oil kombinasi minyak nyamplung dan VCO pada konsentrasi 25 : 75 % (v/v) dan konsentrasi 50 : 50 % (v/v)

## e. Uji Kadar Air
Uji kadar air bertujuan untuk memberikan batas maksimal tentang besarnya kandungan air di dalam bahan, semakin tinggi kadar air dapat menurunkan aktivitas biologi  sediaan  dalam  masa  penyimpanan  [33].    Uji  kadar  air  dilakukan  dengan menggunakan  alat  moisture  balance.  Dari  hasil  yang  diperoleh  sediaan  face  oil dengan formulasi 25:75% (v/v) memiliki kadar air sebesar 1,95%, sedangkan pada formulasi  50:50%  (v/v)  didapatkan  nilai  kadar  air  sebesar  1,93%  (Gambar  5). Menurut  penelitian  [34],  minyak  nyamplung  memiliki  kadar  air  sebesar  0,41%. Peningkatan nilai uji kadar air pada penelitian ini dipengaruhi oleh bahan berupa bunga  mawar  yang  digunakan  masih  dalam  keadaan  basah  sehingga  menambah kandungan H_2O pada sediaan face oil sehingga nilai kadar airnya semakin tinggi. Berdasarkan hasil uji kadar air diperoleh hasil bahwa kedua sediaan face oil stabil selama 4 minggu penyimpanan.
Gambar 5. Hasil Uji Kadar Air Sediaan Face Oil kombinasi minyak nyamplung dan VCO pada konsentrasi 25 : 75 % (v/v) dan konsentrasi 50 : 50 % (v/v)
2±0.29 2±0.10 1,92±0.24 1,89±0.18
1,98±0.42
1,96±0.14 1,94±0.13 1,85±0.15 1,6 1,7 1,8 1,9 2 2,1 Minggu ke-1 Minggu ke-2 Minggu ke-3 Minggu ke-4 Kad ar A ir ± SD Lama Penyimpanan Kombinasi 25:75% (v/v)
Kombinasi 50:50% (v/v)

## 4. KESIMPULAN
Kombinasi minyak nyamplung dengan VCO (seri konsentrasi 25:75, 40:60, 50:50,  60:40,  dan  75:25%  (v/v))  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  dengan kategori  lemah  terhadap  Propionibacterium  acnes  dilihat  dari  adanya  diameter zona hambat pada setiap seri konsentrasi (±12 mm). kombinasi minyak nyamplung dengan VCO (seri konsentrasi 25:75, 40:60, 50:50, 60:40, dan 75:25% (v/v)) tidak menunjukkan  aktivitas  antijamur  terhadap  Mallasezia  furfur.  Formulasi  sediaan face  oil  dari  kombinasi  minyak  nyamplung  dan  VCO  memenuhi  persyaratan  fisik berupa homogenitas, pH, dan daya sebar, setelah penyimpanan selama 3 minggu.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih penulis sampaikan kepada Universitas Sebelas Maret Surakarta yang telah mendanai penelitian ini melalui hibah PNBP UNS pada skema penelitian tahun pendanaan 2020.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
[1]. Wasitaatmadja, S., 2010, Akne Vulgaris Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin edisi 6, Balai Penerbit FK UI, Jakarta.
[2]. Lavers, I., 2011, Acne: The Importance of Timely Intervention, British J. School Nurs, 6(8), pp.379-384.
[3]. BPOM RI, 2009, Bahan-Bahan Kosmetik Sebagai Anti Acne, Badan Pengawas Obat  dan  Makanan  Edisi  10,  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik Indonesia, Jakarta.
[4]. Aqsha,  A.  C., Shafinaz, N.  R.,  Dea,  A. P.,  Nadya,  A., Stefany,  V.  A.,  Ikhfan,  T. J., Halima, S. H., Novi, A. A. S., Deva, G. C. dan Rif’atul, I. E., 2016, Profil Pemilihan dan  Penggunaan  Produk  Anti-Jerawat  yang  Tepat  pada  Mahasiswa,  Jurnal Farmasi Komunitas, 3(1), pp.18-22.
[5]. Lam, A. T. H., 2010, Lipids in Skin Barrier Function, Skin and Allergy Specialists, Colorado.
[6]. Cowan, M. M., 1999, Plant products as antimicrobial agents, Clin Microbiol Rev.
[7]. Soetan, Oyekunie, M. A., Aaiyelaagbe, O. O. dan Fafunsi, M. A., 2006, Evaluation of  The  Antimicrobial  Activity  of  Saponins  Extract  of  Sorghum  bicolor  L. Moench., African J Biotech, pp.2405-2407.
[8]. Tumbel, L. K., Wowor, P. M. dan Siagian, K. V., 2017, Uji Daya Hambat Minyak Kelapa  Murni  (Virgin  Coconut  Oil)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Enterococcus faecalis, Jurnal e-Gigi, 5(1), pp.100-105.
[9]. Harborne,  J.  B.,  1987,  Metode  Fitokimia.  Edisi  ke-2,  Institut  Teknologi Bandung, Bandung.
[10]. Bailey, W. R dan Scott, E., 1962, Diagnostic Microbiology a Texbook for The Isolation  and  Identification  of  Pathogenic  Microorganisme,  The  C.  V.  Mosby Company, Saint Louis.
[11]. Jawetz, E., Melnick, J. L. dan Adelberg, E. A., 1986, Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan Edisi XVI, EGC Press, Jakarta.
[12]. Haryati, S. D., Darmawati, S. dan Wilson, W., 2017, Perbandingan Efek Ekstrak Buah  Alpukat  (Persea  americana  Mill)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri
Pseudomonas  aeruginosa  dengan  Metode  Disk  dan  Sumuran,  Prosiding Seminar Nasional Implementasi Penelitian dan Pengabdian Masyarakat untuk Peningkatan Kekayaan Intelektual.
[13]. Katrin,  D.,  Idiawati,  N.  dan  Sitorus,  B.,  2015,  Uji  Aktivitas  Antibakteri  dari Ekstrak  Daun  Malek  (Litsea  graciae  Vidal)  terhadap  Bakteri  Stapylococcus aureus dan Escherichia coli, JKK, 4(1), pp.7-12.
[14]. Andrianto, K., 2012, Efek Antibakteri Polifenol Biji Kakao pada Streptococcus mutans, Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember.
[15]. Basarang, M. dan Rianto, M. R., 2018, Pertumbuhan Candida sp. dan Aspergilus sp.  Dari  Bilasan  Bronkus  Penderita  Tuberkulosis  Paru  pada  Media  Bekatul, Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan, 9(18), pp.74-82.
[16]. Leguillier, T., Bornet, M. L., Lemus, C., Ralliard, D. R., Lebouvier, N., Hnawia, E., Nour, M., Aalbersberg, W., Ghazi, K., Raharivelomanana, P. dan Rat, P., 2015, The  Wound  Healing  and  Antibacterial  Activity  of  Five  Ethnomedical Calophyllum  inophyllum  Oils:  An  Alternative  Therapeutic  Strategy  to  Treat Infected Wounds, Plos One, pp.1-20.
[17]. Putri, R. K. dan Habib, I., 2007, Daya Antifungi Ekstrak Etanol Daun Beluntas (Pluchea indica L.) terhadap Malassezia sp. secara In Vitro, Mutiara Medika, 7(1), pp.7-17.
[18]. Davis,  W.  W.  dan  Stout,  T.  R.  (1971).  Plate  Methods  of  Microbiological Antibiotic Assay. Applied Microbiology, 22 (4): 666-670.
[19]. Iswanda, R., dan Sihombing, L. K., 2017, Formulasi, Uji Stabilitas Fisik dan Uji Aktivitas  secara  In  Vitro  Sediaan  Spray  Antibau  Kaki  yang  Mengandung Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper betle L.), Pharm Sci Res, 4(3), pp.121-131.
[20]. Ansel, H. C., 2008, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Keempat, UI Press, Jakarta.
[21]. Utami, E. R. dan Suyono, 2012, Pengaruh Pemberian Teh Kombucha terhadap Kestabilan pH Serum Darah Rattus norvegicus, UNESA Journal of Chemistry, 1(2), pp.26-30.
[22]. Sayuti, K. S., 2015, Formulasi dan Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel Ekstrak Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.), Jurnal Kefarmasian Indonesia, 5(2), pp.74-82.
[23]. Lindani,  A.,  2016,  Perbandingan  Pengukuran  Kadar  Air  Metode  Moisture Analyzer dengan Metode Oven pada Produk Biskuit Sandwich Cookies di PT Mondelez Indonesia Manufacturing. Institut Pertanian Bogor.
[24]. Ncube,  N.  S.,  Afolayan,  A.J.  dan  Okoh,  A.  I.,  2008,  Assesment  Technique  of Antimicrobial  Properties  of  Natural  Compounds  of  Plant  Origin:  Current Methods and Future Trends, African Journal of Biotechnology, 7(12), pp.1797- 1806.
[25]. Zulfadli,  T.,  2018,  Kajian  Sistem  Pengolahan  Minyak  Kelapa  Murni  (Virgin Coconut  Oil)  dengan  Metode  Pemanasan,  International  Journal  of  Natural Sciences and Engineering, 2(1), pp.34-41.
[26]. Yulianingsih, Amiarsi, D. dan Sabari, S., 2007, Teknik Enfleurasi dalam Proses Pembuatan Minyak Mawar, J. Hort, 17(4), pp.393-398.
[27]. Boskabady, M. H., Shafei, M. N., Saberi, Z. dan Amini, S., 2011, Pharmacological Effects of Rosa damascena, Iranian Journal Of basic Medical Sciences, 14(40), pp.295-307.
[28]. Strauss,  J.  S.,  Krowchuk,  D.  P.,  Leyden,  J.  J.,  Lucky,  A.  W.,  Shalita,  A.  R.  dan Siegfried,  A.  C.,  2007,  Guidelines  of  Care  for  Acne  Vulgaris  Management, Journal of American Academy of Dermatology.
[29]. Silalahi,  J.,  Yademe,  T.  P.  dan  Putra,  E.  D.,  2014,  Antibacterial  Activity  of Hydrolyzed Virgin Coconut Oil, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 7(2), pp.90-94.
[30]. Hasibuan, S., Sahirman dan Yudawati, N. M. A., 2013, Karakteristik Fisikokimia dan  Antibakteri  Hasil  Purifikasi  Minyak  Biji  Nyamplung  (Calophyllum inophyllum L.), Agritech, 33(3), pp.311-319.
[31]. Vijayakumar,  R.,  Muthukumar,  C.  dan  Kumar,  T.,  2006,  Characterization  of Malassezia furfur and its Control by Using Plant Extracts, Indian J Dermatol, 51(2), pp.145-148.
[32]. Rejeki,  S.  dan  Wahyuningsih,  S.  S.,  2015,  Formulasi  Gel  Tabir  Surya  Minyak Nyamplung (Tamanu Oil) dan Uji Nilai SPF secara In Vitro, University Research Colloquium, pp.97-103.
[33]. Najib, A., Malik, A., Ahmad, A. R., Handayani, V., Syarif, R. A., dan Waris, R., 2017, Standarisasi Ekstrak Air Daun Jati Belanda dan The Hijau, Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 4(2), pp.241-245.
[34]. Balitbang  Kehutanan,  2008,  Nyamplung  Clophyllum  inophyllum  L.  Sumber energi  Biofuel  yang  Potensial  Pusat  Litbang  Hutan  Tanama,.  Departemen Kehutanan, Bogor.