Pengaruh Pemberian Ekstrak Adas  ( Foeniculum vulgare Mill ) Pada Tikus Laktasi Terhadap Sel Neuroglia Anak Tikus
Effect of Fennel Extract ( Foeniculum vulgare Mill) on Lactation Rats

## Against Neuroglia Cells of Rat Pups
Dwi Ningsih, Dewi Ekowati, Opstaria Saptarini, Vivin Nopiyanti Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Surakarta
Email korespondensi dwiningsih.apt@gmail.com (tanggal diterima: 28-02-2020 , tanggal disetujui: 14-08-2020)
<1spasi> <1spasi>

## INTISARI
Air  Susu  Ibu  (ASI)    merupakan  makanan  bayi  alamiah  yang  kaya  akan  nutrisi  dan mengandung faktor imunologis yang lebih tinggi dibanding dengan susu formula.  Hasil penelitian sebelumnya terkait efek laktagogum, tanaman adas terbukti memiliki efek laktagogum, dilihat dari parameter  berat  badan  anak,  jumlah  dan  diameter  kelenjar  mammae,  dan  dapat  meningkatkan jumlah  protein  dalam  air  susu  hewan  uji.    Penelitian  mengenai  pengaruh  ekstrak  adas  terhadap perkembangan otak anak belum pernah dilakukan. Pada penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun dan batang adas pada tikus laktasi terhadap  perkembangan otak anak dilihat dari jumlah sel neuroglia anak tikus yang disusui.
Ekstrak adas dibuat dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Hewan uji yang digunakan adalam penelitian adalah tikus putih, dibagi menjadi 6 kelompok yaitu, kontrol normal,  kontrol  tanpa  obat  (cmc-na  0,5%),  pembanding  obat  asifit  (67,86  mg/KgBB),  kelompok ekstrak etanol daun dan batang adas dosis 315 mg/kg BB, 630 mg/kg BB, dan 945 mg/Kg BB.
Hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun dan batang adas dosis 315 mg/kg BB, 630 mg/kg BB, dan 945 mg/Kg BB memiliki pengaruh terhadap kenaikan jumlah  sel  glia  pada  anak  tikus.  Tidak  terdapat  perbedaan  efek  yang  signifikan  pada  dosis  315 mg/KgBB dan 630 mg/KgBB. Ekstrak etanol daun dan batang adas dosis 945 mg/kg BB mempunyai pengaruh signifikan dalam menaikkan jumlah sel glia pada otak anak tikus yang disusui.
Kata kunci : adas ( Foeniculum vulgare Mill);  daun; ASI; Glia

## ABSTRACT
Breast milk is a natural baby food that is rich in nutrients and contains higher immunological factors compared to formula milk. The results of previous studies related to the effect of lactagogue, Foeniculum  vulgare Mill  proved  to  have  a  laktagogum  effect,  viewed  from  the  parameters  of  the child's weight, the amount  and diameter of  the mammary  gland, and can  increase the amount of protein in the milk of test animals. Research about the effect of fennel extract on children's brain development has never been done. This study aims to determine the effect of Foeniculum vulgare Mill leaf and stem extract administration on lactation mice on the development of a child's brain as seen from the number of neuroglia cells of breastfed rat.
Foeniculum vulgare Mill extract was made by maceration method using 96% ethanol solvent. The test animals used in the study were white rats, divided into 6 groups namely, normal control, control without drugs (cmc-na 0.5%), comparison of asifit drugs (67.86 mg/Kg body weight), ethanol extract groups of leaves and stems fennel dosage 315 mg/kg body weight, 630 mg/kg body weight, and 945 mg / kg body weight.
The  results  of  the  research  that  have  been  carried  out  show  that  the  ethanol  extract  of Foeniculum vulgare leaves and stems dose 315 mg/kg BW, 630 mg/kg BW, and 945 mg/kg BW has an influence on the increase in the number of glia cells on breast-fed rat. There was no significant difference in effect at doses of 315 mg/KgBB and 630 mg / KgBB. The ethanol extract of Foeniculum
vulgare leaves and stems of 945 mg/kg BW has a significant effect on increasing the number of glia cells in the brains of breast-fed rat..
Keywords: Foeniculum vulgare Mill; leaves; breast milk, glia

## 1. PENDAHULUAN
Air Susu Ibu (ASI)  merupakan makanan bayi alamiah yang kaya akan nutrisi dan  mengandung  faktor  imunologis  yang  lebih  tinggi  dibanding  dengan  susu formula. Ditinjau dari segi kesehatan pemberian ASI sangat menuntungkan, karena dapat  menurunkan  angka  kematian  bayi  serta  membantu  involusi  uterus  dan menjarangkan  kehamilan  pada  ibu. World  Health  Organization (WHO) merekomendasikan pemberian ASI eksklusif sekurang-kurangnya selama 6 bulan pertama dan dilanjutkan dengan makanan pendamping sampai usia 2 tahun [1].
Berdasarkan data UNICEF pada tahun 2013,  sebanyak 136,7 juta bayi lahir di seluruh dunia dan hanya 32,6 % dari mereka yang disusui secara eksklusif dalam 6 bulan pertama. Bayi yang tidak diberi ASI eksklusif di negara industri lebih besar meninggal  dari  pada  bayi  yang  diberi  ASI  eksklusif,  sementara  di  negara berkembang hanya 39% ibu-ibu yang memberikan ASI eksklusif. Di Indonesia data cakupan  pemberian  ASI  pada  tahun  2014  sebesar  80%,  maka  secara  nasional cakupan pemberian ASI eksklusif sebesar 52,3 % belum mencapai target [2].
Upaya yang dilakukan ibu menyusui dalam meningkatkan produksi ASI salah satunya  dengan  penggunaan  obat  yang  dapat  meningkatkan  atau  memperlancar pengeluaran air susu (Laktagogum). Laktagogum sintetis tidak banyak dikenal oleh masyarakat dan harganya relatif mahal, sehingga perlu dicari penggunaan alternatif dari  laktagogum  [1].  Masyarakat  Indonesia  memiliki  tradisi  atau  kebiasaan memanfaatkan potensi alam, karena Indonesia merupakan salah satu negara yang kaya akan berbagai jenis tanaman yang berkhasiat sebagai tanaman obat. Tanaman yang  berkhasiat  sebagai  laktogogum  alami  contohnya  tanaman  adas  ( Foeniculum vulgare Mill.).
Tanaman  adas  merupakan  jenis  tanaman  yang  dapat  tumbuh  sepanjang tahun hingga mencapai tinggi 2 meter. Tanaman ini tumbuh subur di daerah dengan ketinggian 10 – 2500 diatas permukaan laut dan memerlukan cuaca sejuk dan cerah untuk  menunjang  pertumbuhannya  [4].  Tanaman  adas  mengandung  senyawa alkaloid, saponin, tanin, flavonoid, triterpenoid [5]. Senyawa alkaloid dan saponin yang terkandung dalam buah pepaya dapat meningkatkan produksi sekresi air susu pada  tikus  menyusui.  Alkaloid  dan  saponin  meningkatkan  produksi  hormon prolaktin  melalui  mekanisme  penghambatan  dopamin,  sedangkan  saponin  juga dapat meningkatkan aktivitas hormon oksitosin pada sel miopitel yang terdapat di sekeliling alveoli dan duktus [1].
Beberapa penelitian telah membuktikan bahwa tanaman adas memiliki efek laktagogum. Infusa daun adas dengan dosis 60 gram/300 ml yang diberikan selama 15  hari  dapat    meningkatkan  produksi  air  susu  yang  berdampak  terhadap meningkatnya berat badan anakan tikus putih [6].  Ekstrak etanol daun dan batang adas  mempunyai  efek  laktagogum  dilihat  dari  parameter  berat  badan  anak  tikus yang disusui induknya, ekstrak etanol daun dan batang adas dapat meningkatkan
berat  badan  anak  tikus  [7].  Ekstrak  adas  memiliki  pengaruh  signifikan  dalam meningkatkan protein dalam air susu hewan uji[8].
Kelenjar  mammae  terdiri  atas  banyak  lobus,  tiap  lobus  terbagi  menjadi lobulus,  dan  tiap  lobulus  terdiri  atas  alveoli.  Pada  masa  laktasi  lumen  alveoli dipenuhi  sekret,  sehingga  lumen  alveoli  akan  tampak  meregang  seiring  dengan meningkatnya  aktivitas  menyusui  (9).  Pemberian  ekstrak  daun  dan  batang  adas memiliki efek meningkatkan jumlah lobus alveoli pada kelenjar ASI tikus menyusui, dengan dosis efektif sebesar 630 mg/KgBB [9].
Air  susu  ibu  sangat  kaya  akan  sari  makanan  yang  mempercepat pertumbuhan sel otak dan perkembangan sistem saraf. Air susu ibu mengandung Asam Arakhidonat (AA) termasuk kelompok omega 6 (enam) yang terbentuk dari Asam Likonat (AL) dan DHA ( Dekosa Heksanoat Acid ) kelompok omega 3 (tiga) yang terbentuk dari Asam Linolenat (ALA) dan nutrisi lain seperti protein, laktose dan lemak  lainnya  yang  merupakan  zat  yang  dapat  merangsang  pertumbuhan  dan perkembangan  otak  bayi.  Ukuran  yang  paling  baik  untuk  menentukan perkembangan otak adalah sel neuroglia karena mengandung berbagai macam sel yang  secara  keseluruhan  menyokong,  melindungi  dan  sebagai  sumber  nutrisi  sel saraf [3].
Berdasarkan  bukti  dari  beberapa  penelitian  yang  menunjukkan  potensi tanaman adas sebagai laktagogum, maka perlu dilakukan penelitian untuk melihat pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  batang  dan  daun  adas  pada  tikus  menyusui terhadap  gambaran  otak  anakan  tikus . Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak  daun  dan  batang  adas  pada  tikus menyusui terhadap peningkatan jumlah sel neuraglia anakan tikus dan mengetahui dosis  optimal  yang  berpengaruh  terhadap  peningkatan  jumlah  neuraglia  anakan tikus.

## 2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  sonde  lambung,  set  alat prepasi jaringan, mikrosop trinokuler. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah  daun  dan  batang  adas,  etanol  teknis  96%  (Shafgufta  Laboratory),  larutan hematoksilin-eosin  untuk  pewarnaan  (Sigma-Aldrich)  dari  Meyers  Hematoxilin (Merck  1.09249.0500)  dan  Eosin  G-Lösung  0.5%  wässrig  (Merck  1.09844.1000). Hewan uji tikus putih betina berumur 3-3,5 bulan yang sedang menyusui dengan berat badan 200-300 g.

## 2. 2. Cara kerja Determinasi Tanaman Adas
Tahapan  pertama  penelitian  adalah  determinasi  tanaman  yang  dilakukan untuk  mengetahui  kebenaran  tanaman  yang  berkaitan  dengan  ciri-ciri  morfologi yang  ada  pada  tanaman  adas  sesuai  kepustakaan  dan  dibuktikan  di  Balai  Besar Tanaman Obat dan Obat Tradisional, Tawangmangu, Karanganyar, Jawa Tengah .

## Pengambilan Dan Pengeringan Batang Dan Daun Adas
Tanaman  adas  diambil  dari  daerah  Lereng  Gunung  Merapi,  Selo,  Boyolali, Jawa Tengah. Bagian tanaman yang digunakan adalah batang dan daun adas dengan cara dipetik, yang kemudian disortasi basah lalu dicuci dan dibersihkan dari kotoran dan  debu  yang  menempel,  kemudian  dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu  45 o C sampai didapatkan batang dan daun dengan kadar air tertentu, kemudian dilakukan sortasi kering.

## Pembuatan Serbuk
Sampel  yang  kering  kemudian  digiling  dengan  mesin  penggiling  dan dihaluskan  dengan  diblender  lalu  diayak  dengan  ayakan  nomor  40  sampai didapatkan serbuk batang dan daun adas yang diinginkan. Serbuk yang diperoleh disimpan  dalam  wadah  kering  tertutup  rapat  dan  dilakukan  pemeriksaan  secara organoleptis (10).

## Pembuatan ekstrak etanol batang dan daun adas
Ekstraksi serbuk batang dan daun adas dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96% dengan perbandingan 1:10. Serbuk batang dan daun adas ditimbang sebanyak 1 bagian lalu dimasukkan ke dalam bejana kemudian ditambahkan etanol 96%, direndam selama 6 jam pertama sambil sesekali diaduk kemudian  didiamkan  selama  18  jam.  Maserat  dengan  ampas  dipisahkan  dengan cara  filtrasi  menggunakan  kain  flanel.  Proses  penyarian  diulang  sekurang- kurangnya satu kali dengan jenis pelarut yang sama dan jumlah volume pelarutnya 1:5  dari  volume  pelarut  pada  penyarian  pertama.  Maserat  kemudian  dipekatkan dengan vacum rotary evaporator dengan suhu 40  sampai diperoleh ekstrak kental bebas dari pelarut [12].
Penetapan kadar lembab
Penetapan kadar lembab batang dan daun adas menggunakan alat moisture balance , dengan cara menimbang 2 gram serbuk batang dan daun adas kemudian dimasukkan  dalam  plat  alumunium  dengan  suhu  yang  digunakan  adalah  105 . Penandaan hasil analisa setelah selesai yaitu sampai diperoleh bobot konstan yang dilakukan  penimbangan  sebanyak  tiga  kali.  Kadar  susut  pengeringan  memenuhi syarat dimana suatu serbuk simplisia tidak boleh lebih dari 10%.

## Identifikasi kandungan senyawa kimia
Identifikasi  kandungan  senyawa  kimia  dilakukan  untuk  memastikan kebenaran zat kimia yang terkandung di dalam batang dan daun adas. Identifikasi dilakukan  terhadap  senyawa  golongan  alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid, triterpenoid.  Identifikasi  Alkaloid  menggunakan  pereaksi  pengendapan  dengan reagen  Mayer  (11) . Identifikasi  saponin  dengan  tes  buih  (12) , Identifikasi  tanin dengan pereaksi FeCl 3 1% (13). Identifikasi flavonoid dengan metode shibata (13). Identifikasi steroid/Triterpenoid dengan reaksi liebermanburchad [13].

## Penentuan dosis
Dosis pembanding (Asifit). Dosis penggunaan Asifit  pada manusia untuk sekali  pakai  sebesar  754  mg.  Hasil  konversi  dosis  dari  manusia  ke  tikus  dengan 13,572 mg/200 gram berat badan tikus (67,86 mg/Kg bb tikus).
Dosis ekstrak etanol batang dan daun adas. Dosis sediaan yang diberikan didasarkan  pada  penelitian  sebelumnya,  dengan  dosis  paling  efektif  631,6  mg ekstrak etanol daun adas dengan pemberian 2 kali sehari [14]. Dari dosis tersebut diperoleh variasi dosis pada kelompok pemberian ekstrak etanol daun dan batang adas sebesar 135 mg/Kg BB, 630 mg/Kg BB, dan 945 mg/Kg BB induk tikus.

## Pengelompokan dan perlakuan hewan uji
Hewan uji yang digunakan yaitu induk tikus betina yang sedang menyusui sebanyak 24 ekor yang dipelihara dalam kandang bersuhu 21°C, kelembaban 55% dan diberi pakan berupa pelet dan air ad libitium. Sebelum diberi perlakuan, tikus diadaptasi  selama  1  minggu  dengan  tujuan  untuk  membiasakan  pada  kondisi percobaan  dan  mengontrol  kesehatan  dan  dipuasakan  selama  ±  16 – 18  jam. Kemudian  tikus  dikelompokan  menjadi  6  kelompok  dimana  masing-masing kelompok terdiri dari 4 ekor tikus dengan perlakuan yang berbeda sebagai berikut: Kelompok normal tanpa perlakuan, Kelompok kontrol negatif (CMC 0,5%), kontrol obat (Asifit 67,86 mg/kg BB tikus), kelompok ekstrak etanol batang dan daun adas 315 mg/kg BB, 630 mg/KgBB, dan  945 mg/KgBB sampai hari ke 14 usia anak.

## Penyiapan preparat histologi
Pertama, hewan uji dikorbankan dengan cara decapitation (perusakan otak lewat  leher)  dan  dibedah,  kemudian  di  ambil  organ  otaknya.  Jaringan  kemudian difiksasi dengan menggunakan formalin 10% PA. Tujuan dari fiksasi untuk menjaga agar jaringan tetap normal dan tidak cepat rusak.
Kedua,  tahap  dehidrasi  untuk  mengeluarkan  air  yang  terkandung  dalam jaringan  dengan  menggunakan  etanol  berturut-turut  etanol  70%,  80%  dan  90% masing-masing selama 1 jam.
Ketiga,  tahap  clearing  atau  penjernihan  dilakukan  dengan  menggunakan xylene, dimulai dengan memasukkan jaringan ke dalam xylene I selama 20 menit, kemudian xylene II selama 20  menit dan selanjutnya xylene III selama 20 menit. kemudian dilakukan  embedding dimana tahap ini bertujuan untuk mengeluarkan cairan pada saat proses clearing dan mengganti dengan paraffin karena pada saat proses  clearing  cairan  dapat  mengkristal  didalam  jaringan  dan  menyebabkan jaringan mudah robek saat pemotongan.
Keempat, dilakukan tahap blocking yaitu proses pembuatan blok preparat agar organ dapat dipotong dengan mikrotom.
Kelima, proses pemotongan jaringan menggunakan mikrotom. Blok paraffin direkatkan diatas blok kayu dengan cara memanaskan salah satu sisi blok paraffin hingga sedikit mencar kemudian langsung ditempelkan. Blok paraffin dan blok kayu diletakan  pada holder (pemegang)  di  mikrotom  lalu  dikencangkan.  Jaringan dipotong dengan ketebalan 6 mikrometer. Potongan blok paraffin yang telah selesai dipotong  direndam  dalam  waterbath  dengan  suhu  air  37-40°C  hingga  potongan tersebut merenggang. Langkah selanjutnya dengan mengoleskan gliserin pada kaca
objek  secukupnya,  lalu  potongan  tersebut  diambil  menggunakan  kaca  objek  dan diletakkan pada hotplate.
Keenam,  dilakukan  tahap  deparafinasi  dan  rehidrasi  dengan  tujuan  untuk menghilangkan  parafin  dari  blok  paraffin  sehingga  lebih  mudah  untuk  diwarnai, selain itu rehidrasi dilakukan dengan tujuan agar zat pewarna tidak larut jika blok masih  mengandung  air.  Suhu  yang  dibutuhkan  untuk  pengeringan  yaitu  40-45°C setelah itu potongan siap untuk diwarnai dengan HE.
Ketujuh,  pewarnaan  dengan  HE (Hematoxylin-eosin) .  Jaringan  dimasukkan ke  dalam  pewarna  hematoxylin  selama  10  sampai  20  menit,  kemudian  diamati apakah  jaringannya  sudah  berwarna  ungu.  Selanjutnya,  jaringan  yang  sudah diwarnai tadi dicuci di bawah air mengalir selama 10 menit. Setelah itu, pewarnaan dilanjutkan dengan memasukkan sediaan ke dalam pewarna eosin selama 10 menit.

## Pemeriksaan histologi
Pembacaan  sampel  dilakukan  dengan  menghitung  jumlah  dan  mengukur diameter  lobus  alveoli  menggunakan  mikroskop  dengan  perbesaran  400x. perhitungan jumlah sel neuroglia preparat dilakukan pada tiga daerah, yaitu daerah ujung,  tengah,  dan  pangkal.  Tiap  derah  pengamatan  diperiksa  5  lapang  pandang mikroskop [1].

## Analisis Hasil
Data  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini  berupa  data  kuantitatif  hasil penelitian dinyatakan sebagai rata-rata (mean). Sedangkan data kualitatif diperoleh dari  hasil  gambaran  histologi  sel  neuroglia dengan  pewarnaan  HE.  Analisis  data secara  statistik,  dilakukan  dengan  uji  statistik  non  parametik  Kruskal  Wallis. Kemudian uji dilanjutkan dengan Tukey Post Hoc Test Mann Whitney untuk melihat apakah terdapat perbedaan di antara masing-masing kelompok perlakuan.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil determinasi tanaman
Berdasarkan  hasil  determinasi  terhadap  tananam  yang  digunakan  dalam penelitian ini di Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional  (B2P2TOOT)  Tawangmangu  Jawa  Tengah,  dapat  disimpulkan  bahwa tanaman  yang  digunakan  adalah  benar  bahwa  tanaman  yang  digunakan  adalah tanaman adas ( Foeniculum vulgare Mill).

## Hasil Pembuatan simplisia kering
Hasil  pengeringan  dari  15.200  gram  bahan  segar  didapatkan  2.425  gram simplisia  kering,  sehingga  diperoleh  rendemen  kering  terhadap  basah  sebesar 15,95%.

## Hasil ekstraksi
Hasil  ekstraksi  1500  gram  serbuk  kering  daun  dan  batang  adas  dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%, didapatkan esktrak sebanyak 197,88  gram  (gambar  1).  Rendemen  ekstrak  terhadap  serbuk  kering  sebesar 13,19%.
Gambar 1. Serbuk daun adas
Hasil Penetapan kadar kelembapan ekstrak
Penetapan kadar kelembapan dilakukan dengan menggunakan alat moisture balance , didapatkan hasil sebesar 3,00%.
Hasil identifikasi kandungan kimia
Identifikasi  kandungan  kimia  serbuk  dan  ekstrak  etanol  daun  dan  batang adas dilakukan dengan reaksi warna menggunakan uji tabung. Berdasarkan hasil identifikasi  kualitatif  serbuk  dan  ekstrak  etanol  daun  dan  batang  adas,  dapat diketahui  bahwa  daun  dan  batang  adas  positif  mengandung  senyawa  alkaloid, saponin, tanin, flavonoid, triterpenoid (tabel 1).
Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan kimia serbuk dan ekstrak daun dan batang adas
Kandungan kimia Serbuk Ekstrak Pustaka Intepretasi hasil Alkaloid Mayer terbentuk endapan putih kekuningan Mayer terbentuk endapan putih kekuningan Terbentuk endapan putih kekuningan (11) + (alkaloid golongan III) Saponin Terbentuk busa Terbentuk busa Terbentuk busa setinggi 1cm yang stabil setelah dibiarkan selama 1 jam atau pada penambahan 1 tetes HCl 0,1N (12). + Tanin Warna hijau kehitaman Warna hijau kehitaman Warna hijau kehitaman pada reaksi dengan FeCl 3 (13) + Flavonoid Warna jingga pada lapisan amil alkohol Warna jingga pada lapisan amil alkohol Warna merah/kuning/jingga pada lapisan amil alkohol (13) + Steroid Terbentuk warna hijau kehitaman Terbentuk warna hijau kehitaman Positif apabila terbentuk warna biru tua atau hijau kehitaman (13) +

## Hasil pengamatan sel neuroglia otak anak tikus
Pengujian  efek  laktagogum  dilihat  dari  parameter  sel  neuroglia  anak  tikus  yang disusui adalah dengan cara memberikan ekstrak daun dan batang adas pada induk tikus dihari pertama setelah melahirkan. Sediaan uji diberikan 2 kali sehari sampai usia anak 14 hari.  Pengamatan sel neuroglia dilakukan dengan membuat preparat
histologi  potongan  melintang  bagian  tengah  dan  belakang  serebrum  otak    yang mengatur intelegensia dan dilakukan pengamatan  pada lapisan molekular antara bagian tengah dan belakang serebrum pada  hemisfer kiri dan kanan otak anak tikus. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan profil sel pada otak anak tikus pada semua perlakuan (gambar 2).
Kontrol tanpa obat Kontrol normal
Ekstrak daun dan batang adas 315 mg/Kg BB
Ekstrak daun dan batang adas 630 mg/Kg BB
Ekstrak daun dan batang adas 960 mg/Kg BB
Kontrol pembanding obat (asifit)
Gambar 2. Gambaran sel neuroglia pada lapisan ganglionik otak anak tikus yang disusui
Untuk  mengetahui  jumlah  sel  neuroglia  dilakukan  penghitungan  jumlah  sel neuroglia pada preparat otak dengan pengecatan hemoksilin-eosin dengan bantuan mikroskop.
Tabel 2. Data kuantitatif jumlah sel glia otak anak tikus Kelompok Jumlah Sel Glia Kontrol tanpa obat 488 b Kontrol normal 581 a b Ekst. Adas  315 mg/KgBB 804 a b Ekst. Adas  630 mg/KgBB 835 a Ekst. Adas  945 mg/KgBB 911 a b Asifit 67,86 mg/Kg BB 917 a a Berbeda signifikan dengan kontrol tanpa obat b Berbeda signifikan dengan kontrol pembanding obat (Asifit)
Berdasarkan hasil analisa data jumlah neuroglia, menunjukkan  bahwa ekstrak daun dan batang adas dosis 315 mg/KgBB, 630 mg/KgBB, dan 945 mg/KgBB mempunyai pengaruh signifkan terhadap jumlah sel neuroglia anak tikus.  Kenaikan dosis diikuti dengan kenaikan efek,  tetapi  ritme  kenaikan  efek  tidak  sebanding dengan  kenaikan  dosis  yang  diberikan. Dosis  315  mg/KgBB    tidak  terdapat  beda  signifikan  dengan  dosis  630  mg/KgBB  dan pengaruh  keduanya  berbeda  signifikan  jika  dibanding  dengan  kontrol  asifit.  Jumlah neuroglia otak anak tikus pada dosis 945 mg/KgBB mg/KgBB  tidak berbeda signifikan jika dibandingkan dengan kontrol obat  (tabel2).

## Gambar 3. Histogram jumlah sel neuroglia
Tanaman  adas  memiliki  senyawa  aktif  alkaloid,  saponin  dan  flavonoid  yang bermanfaat untuk meningkatkan produksi air susu (laktagogum). Saponin bekerja dengan meningkatkan  aktivitas  hormon  oksitosin  pada  sel  mioepitel  yang  terdapat  disekeliling alveoli dan duktus. Alkaloid berperan sebagai agonis reseptor α – adrenergik yang terdapat dalam duktus kelenjar mammae  yang kerjanya sinergis dengan hormon oksitosin dalam ejeksi air susu (1). Senyawa flavonoid yang dapat meningkatkan air susu tikus menyusui dengan morfologi peningkatan berat badan anakan tikus (6).
Tanaman adas mengandung protein sebesar 9,5 % (33). Adas mengandung protein 22,6%, sehingga dengan adanya kandungan protein di dalam tanaman adas maka diduga juga dapat meningkatkan kadar protein air susu tikus menyusui (6).  Tanaman ini terbukti dapat meningkatkan kadar protein dalam ASI. Ekstrak etanol daun dan batang adas dapat meningkatkan kadar protein pada air susu  tikus menyusui dapat dilihat dari nilai kadar protein pada susu hewan menyusui (8).
Penelitian yang mengkaitkan efek laktagogum yang dimiliki dengan perkembangan anak yang disusui teutama untuk perkembangan otak belum banyak dilakukan, sehingga pada hasil efek  ekstrak adas pada sel  neuroglia anak belum dapat dibandingkan dengan
- 200 400 600 800 1.000 Jumlah Sel Glia Jumlah Sel Glia
penelitian lainnya. Hanya ditemukan satu penelitian oleh Kamariyah (2011) menyatakan bahwa  pemberian  fraksi  dari  ekstrak  daun  katu  dapat  meningkatkan  kadar  hormon prolaktin dan jumlah sel neuraglia pada dosis 48 dan 72 mg, akan tetapi data tidak dapat dilihat secara jelas data yang diperoleh. Jika dilihat dari zat uji, penelitian tersebut memakai fraksi, sedangkan pada penelitian ini zat uji berupa ekstrak, dari dosis fraksi ekstrak katu yang  diberikan  sebesar  48  dan  72  mg/200gram  berat  badan,  maka  ekstrak  daun  adas dengan dosis 945 mg/Kg BB atau setara dengan 189 mg/200gram BB menunjukkan bahwa efek ekstrak adas kemungkinan tidak berbeda jauh dengan efek fraksi daun katu. Penelitian terkait efek laktagogum tanaman adas pada tikus menyusui telah dilakukan dan terbukti  memberikan  efek  laktagogum.  Ekstrak  daun  dan  batang  adas  secara  signifikan dapat meningkatkan berat badan anak tikus yang disusui (7). Secara histologi juga telah diteliti, dan terbukti bahwa ekstrak daun dan batang adas pada dosis 630 mg/KgBB secara signifikan meningkatkan jumlah  dan diameter lobus alveoli pada kelenjar mammae tikus menyusui (21).
Penelitian  tentang  pengaruh  pemberian  ekstrak  adas  ini  melengkapi  penelitian- penelitian  sebelumnya  yang  berhubungan  dengan  aktivitasnya  sebagai  laktagogum. Penelitian tentang  pengaruh ekstrak adas terhadap sel glia ini, bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak ini bila digunakan pada ibu menyusui, terhadap kecerdasan dan memory pada  anak  yang  disusui.  Glia  dapat  memengaruhi  pengkodean  dan  konsolidasi  memori. Aktivasi  pensinyalan  Ca 2+ intraseluler  di  astrosit  dapat  menambah  atau  menekan  baik transmisi sinaptik inhibitory maupun transmisi eksitatory dan mempengaruhi perubahan kondisi  tergantung  pada  aktivitas  kortikal,  misalnya,  waktu  memori  istirahat  maupun bekerja  (36).    Microglia  dapat  menghapus  sinapsis  dengan  cara  tergantung  pada  kerja system  syaraf  (37).  Dari  beberapa  penelitian  terkait  efek  tanaman  adas  baik  pada  tikus menyusui maupun anakan yang disusui, menunjukkan bahwa ekstrak tanaman adas sangat potensial untuk dikembangkan sebagai laktagogum.

## 4. KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat  disimpulkan bahwa Pemberian ekstrak daun dan batang  adas  pada  dosis  315  mg/KgBB,  630  mg/KgBB,  dan  945  mg/KgBB mempunyai  pengaruh  secara  signifkan  terhadap  jumlah  sel  neuroglia  anak  tikus yang disusui induknya.  Dosis 315 mg/KgBB dan 630 mg/KgBB memiliki efek lebih kecil dari pda kontrol, dan dosis ekstrak adas 945 mg/KgBB memberikan pengaruh setara dengan kontrol asifit.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih atas terselesaikannya penelitian ini penulis sampakan kepada Septy Silviana Indragiri, Nur Indri Purwati, Annisa Try Chahya Stya Putri, para mahasiswa yang telah terlibat dalam rangkaian penelitian terkait efek laktagogum ekstrak adas.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
[1]. Kharisma Y, Ariyoga A, Sastramihardja SH. 2011. Efek ekstrak air buah pepaya (Carica papaya  L.)  muda  terhadap  gambaran  histologi  kelenjar  mamma  mencit  laktasi. Bandung  :  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Islam  Bandung,  Progam  Pascasarjana Progam Studi Ilmu Kedokteran Dasar Universitas Padjadjaran.
[2]. [Kemenkes  RI]  Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2015. Budidaya,  Panen dan Pascapanen Tanaman Obat . Jakarta : Kementerian Kesehatan RI.
[3]. Yahya. 2010. Air susu ibu dan kecerdasan anak. http:ayurai.wordpress.com/2009/04/ 22hubungan=antara-status-gizidengan-
kecerdasan-anak/diakses tanggal 10 Nopember 2019.
[4]. Hasanah  M.  2004.  Perkembangan  Teknologi  Budidaya  Adas  ( Foenicullum  vulgare Mill.). Jurnal Penelitian dan Pengembangan Pertanian . 23(4):139-144.
[5]. Utami P. 2008. Buku Pintar Tanaman Obat. Jakarta : PT. Agromedia Pustaka. Hal. 3-5.
[6]. Yana YD. 2017. Efektivitas Infusa Daun Adas ( Foeniculum vulgare L.) Pada Tikus Putih (Rattus sp.) Pasca Melahirkan Terhadap Pertumbuhan Anakan. [Skripsi]. Yogyakarta : Universitas Islam Negeri Sunan Kalijaga.
[7]. Putri, A.T.S, 2019, Uji Aktivitas Laktagogum Ekstrak Etanol Daun Dan Batang Adas ( Foeniculum  vulgare Mill)  Dengan  Parameter  Berat  Badan  Anakan  Tikus,  Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi.
[8]. Purwati, N.I., 2019, Uji Aktivitas Lactagogum Ekstrak Etanol Daun Dan Batang Adas ( Foeniculum vulgare Mill) Dengan Parameter Kadar Protein Air Susu Tikus Menyusui, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi.
[9]. Zourata LO, Daan VDH, Eline MVB, Hans JMS, John AMM, Laya S. Effect of aqueous extract of Acacia nilotica ssp adansonii on milk production and prolactin release in the rat.  [Online  Journal]  2004  [diunduh  16  Agustus  2019].  Tersedia  dari: http://joe.endocrinology-journals.org/cgi/ reprint/182/2/257.pdf
[10]. Anonim,  1978, Materia  Medika  Indonesia  Jilid  II ,  Jakarta,  Departemen  kesehatan Republik Indonesia.
[11]. Sastrohamidjojo. H, 1996, Sintesis Bahan Alam, Cetakan ke-1, Liberty, Yogyakarta.
[12]. Harborne.  1987. Metode  Fitokimia  dan  Penentuan  Cara  Modern  Menganalisa Tumbuhan .  Padmawinata  K,  Soediro  I,  Penerjemah;  Bandung:  Penerbit  ITB. Terjemahan dari: Phytochemical Methods.
[13]. Jork, H., Funk, W., Fischer, W., and Wimmer, H., 1990, Thin Layer Chromatography Reagent and Detection Methods, Vol. 1 a, 148, 152., 167, 207, 289. VCH publishers, USA.
[14]. Rifqiyati  N,  Sulistiyawati,  Sunaini.  2016.  Pengaruh  ekstrak  etanol  daun  adas (Foeniculum  vulgare  Mill)  pada  induk  tikus  (Rattus  norvegicus)  masa  laktasi terhadap pertumbuhan anak. Intregrated Lab Journal.
[15]. Sarker SD, Latif Z, Gray AI. 2006. Natural Product Isolation. Ed ke-2. Humana Press. Hlm 30-32, 340-342
[16]. Ansel  HC. 1989. Pengantar Bentuk  Sediaan Farmasi. Edisi IV . Farida I, penerjemah. Jakarta : Universitas Indonesia. Terjemahan dari: to Phamaceutical Dosage Form.
[17]. Djama  NT.  2018 . Pengaruh  konsumsi  daun  kacang  panjang  terhadap  peningkatan produksi ASI pada ibu menyusui. Jurnal Riset Kesehatan 14 : 5 – 10.
[18]. Indragiri, S.S., 2019, Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Batang Dan Daun Adas ( Foeniculum Vulgare Mill.) Terhadap Peningkatan Produksi Air Susu Dengan Parameter Histologi Kelenjar Mammae Pada Tikus Menyusui, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Surakarta.
[19]. Haryanto S. 2009. Ensiklopedi Tanaman Obat Indonesia . Yogyakarta: Palmal.
[20]. Herbie  T.    2015.  Kitab  Tanaman  Berkhasiat  Obat-226  Tumbuhan  Obat  Untuk Penyembuhan  Penyakit  dan  Kebugaran  Tubuh.  Yogyakarta:  Octopus  Publishing House.
[21]. Indragiri, S.S., 2019, Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Batang Dan Daun Adas ( Foeniculum Vulgare Mill.) Terhadap Peningkatan Produksi Air Susu Dengan Parameter Histologi
Kelenjar Mammae Pada Tikus Menyusui, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Surakarta.
[22]. Junqueira LC, Carneiro J, Kelley RO. 1997. Histologi Dasar . Edisi ke-8. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC.
[23]. Jusuf  AA.  2009. Histoteknik  Dasar. Depok:  Fakultas  Kedokteran,  Universitas Indonesia.
[24]. [Kemenkes RI] Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. 2013. Farmakope Herbal Indonesia Suplemen III . Edisi I. Jakarta: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.
[25]. [Kemenkes  RI]  Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2015. Profil  Kesehatan Indonesia 2014 . Jakarta : Kementerian Kesehatan RI.
[26]. Kristanti AN, Aminah NS, Tanjung M, Kurniadi B. 2008. Buku Ajar Fitokimia. Surabaya : Univeraitas Airlangga Press.
[27]. Leeson CR, Leeson TS, Paparo AA. 1996. Buku Ajar Histologi . Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC.
[28]. Ningsih RD, Zusfahair, Kartika D. 2016. Identifikasi senyawa metabolit sekunder serta uji  aktivitas  ekstrak  daun  sirsak  sebagai  antibakteri.  Purwokerto  :  Universitas Jenderal Sudirman.
[29]. Novitasari  AE,  Putri  DZ.  2016.  Isolasi  dan  Identifikasi  Saponin  pada  Ekstrak  Daun Mahkota Dewa dengan Ekstraksi Maserasi. Jurnal Sains Vol. 6.
[30]. Pearce, evelyn C. 2010. Anatomi Dan Fisiologi Untuk Paramedis. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama.
[31]. Plantamor.  2011. Tanaman  Adas. www://plantamor.com.  Di  akses  pada  tanggal  9 November 2018.
[32]. Prastowo EA. 2013. Standarisasi Simplisia . Surabaya: Universitas Airlangga.
[33]. Puspitawati  AS.  2010.  Perbandingan  efek  antifungi  minyak  atsiri  biji  adas (Foeniculum  vulgare  Mill.)  dengan  flukonazol  terhadap  pertumbuhan  Candida albicans secara in vitro. Surakarta : Universitas Sebelas Maret.
[34]. Rahmi J, Darwin E, Amir A. 2017. Korelasi kadar prolaktin dan oksitosin dengan lama amenore  laktasi  pada  ibu  menyusui  eksklusif.The  Southeast  Asian  Journal  Of Midwifery 3 : 33 – 39.
[35]. Sa’roni, dkk, 2004, Effectiveness of the Sauropus Androgynus (L.) Meer Leaf Extract In Increasing Mother’s Breast Milk P roduction, Media Litbangkes Vol XIV No 3 [36]. Halassa MM, Florian C, Fellin T, Munoz JR, Lee SY, Abel T, and others, 2009, Astrocytic modulation of sleep homeostasis and cognitive consequences of sleep loss, Neuron 61:213 – 9.
[37]. Fields, R.D., Araque, A.,  Johansen-Berg, H., Lim, S., Lynch, G., Nave, K., Nedergaard, M., Perez, R., Sejnowski, T., and Wake, H.,  2014,  Glial Biology in Learning and Cognition, The Neuroscientist Vol. 20(5) 426 – 431.
[38]. Kamariyah, N., 2011, Pengaruh Fraksi Ekstrak Daun Sauropus Androgynus (L). Merr (Katu) Terhadap Kadar Prolaktin Tikus Menyusui & Sel Neuroglia Anak Tikus, Fakulas Kedokteran, Universitas Airlangga, Surabaya .