Penulis Bagem Br Sembiring 1 *, Nurliani Bermawie 1 , Molide Rizal 1 , Andriana Kartikawati 1
Afiliasi 1 Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat, Jl. Tentara Pelajar No. 3 Bogor, Indonesia
Kata Kunci  ubi jalar ungu
 jambu biji Australia
 teknik ekstraksi
 aktivitas antioksidan
Keywords  Ipomoea batatas
 Psidium guajava
 antioxidant activity
 extraction techniques
Diterima 27 Agustus 2019
Direvisi 23 Desember 2019
Disetujui 16 April2020 *Penulis Koresponding
Bagem Br Sembiring1 email: anna.sembiring@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Daun  ubi  jalar  ungu  dan  daun  jambu  biji  dikenal  sebagai  tanaman  obat  dan  telah  banyak dimanfaatkan  untuk  membantu  mengatasi  berbagai  masalah  kesehatan.  Kandungan  senyawa bioaktif yang bermanfaat bagi kesehatan dipengaruhi oleh mutu bahan baku dan teknik ekstraksi. Penelitian  ini  bertujuan  mendapatkan  teknik  ekstraksi  terstandar  daun  ubi  jalar  ungu  dan  daun jambu biji Australia untuk menghasilkan aktivitas antioksidan yang tinggi. Tahap kegiatan meliputi penanganan  bahan  baku,  analisis  mutu  simplisia,  ekstraksi,  dan  pengujian  aktivitas  antioksidan. Kegiatan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  faktorial  yang  terdiri  dari  2  faktor  yaitu konsentrasi  pelarut  etanol  (50,  70  dan  96%)  dan  lama  ekstraksi  (2,  3,  4  jam).  Parameter  yang diamati  yaitu  mutu  simplisia,  rendemen  ekstrak  dan  aktivitas  antioksidan . Hasil  penelitian diperoleh kandungan flavonoid simplisia daun ubi jalar ungu sebesar 1,30% dan daun jambu biji Australia  2,72%.  Rendemen  ekstrak  berkisar  antara  8,4-68,2%  dan  21,2-53,8%.  Nilai  IC 50 untuk aktivitas  antioksidan  terkecil  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  yaitu  33,34  bpj  hasil  ekstraksi  dengan etanol 70% selama 2 jam dan daun jambu biji Australia nilainya 10,10 bpj hasil ekstraksi dengan pelarut etanol 96% selama 3 jam. Aktivitas antioksidan ekstrak daun jambu biji Australia lebih kuat dibandingkan ekstrak  daun ubi jalar  ungu. Konsentrasi pelarut  berpengaruh terhadap rendemen ekstrak dan kekuatan aktivitas antioksidan.

## ABSTRACT
The  leaves  of  purple  sweet  potato  and  guava  are  known  as  medicinal  plants  and  have  been widely used to help overcome various health problems. Health benefits are thought to be related to  the  content  of  its  bioactive  compounds.  The  content  of  bioactive  compounds  is  in  addition influenced by the quality of raw materials and extraction techniques. The study aims to obtain a standardized  extraction  process  of  purple  sweet  potato  leaves  and  Australian  guava  leaves  to produce high antioxidant activity. The research activity includes handling raw materials, analyzing the quality of simplicity, extraction, and testing antioxidant activity. The experiment uses factorial Completely  Randomized  Design  consisting  of  2  factors,  namely  the  concentration  of  ethanol solvent  (50,  70  and  96%)  and  extraction  time  (2,3,4  hours).  The  parameters  observed  were simplicia  quality,  extract  yield  and  IC 50. The  results  showed  that  the  flavonoid  content  of  purple sweet potato leaves was 1.30% and purple guava leaves 2.72%. Yield of extracts ranged from 8.4 to  68.2%  and  from  21.2  to  49.4%.  The  lowest  IC 50 value  for  antioxidant  activity  of  purple  sweet potato  leaf extract  was  33.34  ppm  extracted  with  70%  ethanol  for  2  hours.  Meanwhile,  the  IC 50 value of Australia guava leaf was 10.10 ppm that extracted with 96% ethanol for 4 hours. Guava leaf has higher antioxidant activity than purple sweet potato leaf extracts.  The concentration of solvent affected the extract yield and antioxidant activity of the extract.
Pengaruh Teknik Ekstraksi Daun Ubi Jalar Ungu ( Ipomoea batatas ) dan Daun Jambu Biji ( Psidium guajava ) terhadap Aktivitas Antioksidan
The Effect of Extraction Techniques of Purple Sweet Potato (Ipomoea batatas) and Guava Leaves (Psidium guajava) on Antioxidant Activities
Pengaruh Teknik Ekstraksi Daun Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) dan Daun Jambu Biji ( Psidium guajava ) terhadap Aktivitas Antioksidan

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  berguna mengatasi  kerusakan  oksidatif  akibat  radikal  bebas dalam  tubuh  (Wulansari  dan  Chairul  2011).  Tanaman obat  dapat  bermanfaat  meningkatkan  daya  tahan tubuh,  mencegah  dan  menyembuhkan  penyakit,  serta memulihkan  kesehatan.  Tubuh  yang  memiliki  daya tahan  tubuh  kuat  tidak  mudah  diserang  oleh  penyakit yang  disebabkan  oleh  virus,  bakteri  maupun  jenis lainnya.  Senyawa  aktif  yang  terkandung  didalam tanaman  obat  memiliki  beragam  sifat  terapeutik. Berbagai efek terapi yang terkait dengan tanaman obat termasuk  sifat  anti-inflamasi,  antivirus,  antitumor, antimalaria, dan analgesic (Aye et al . 2019).
Antioksidan diperlukan untuk melindungi tubuh dari serangan radikal bebas. Menurut (Kikuzaki et al . 2002) antioksidan  sangat  bermanfaat  bagi  tubuh  untuk menunda,  memperlambat  dan  mencegah  terjadinya proses oksidasi.
Antosianin  merupakan  salah  satu  jenis  flavonoid yang  berasal  dari  tumbuh-tumbuhan  dapat  berfungsi sebagai  antioksidan  (Jaya  2013).  Daun  ubi  jalar  ungu merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  obat  yang mengandung  antosianin.  Di  dalam  tanaman  tersebut terkandung metabolit sekunder golongan flavonoid dan tanin yang memiliki kekuatan aktivitas antioksidan yang lebih  tinggi  dibandingkan  α  tokoferol  /vitamin  E (Sulastri et  al .  2013).  Selain  itu  flavonoid  berpotensi sebagai  anti  virus  Dengue  DENV-2  (Zandi et  al .  2011) (Jassim & Naji 2003).  Daun ubi jalar ungu dibuat dalam bentuk infus pada konsentrasi 0,25% ataupun dimakan sebagai  sayuran  dapat  memberi  efek  terhadap peningkatan trombosit (Khaerani et al . 2014); (Johnson et al. 2010). Di dalam daun ubi jalar ungu juga terdapat senyawa fenolik seperti: asam kafeat, asam klorogenat, asam 3,5-di-okafeoilkuinat dan asam 3,4-di-o- kafeoilkuinat.  Selain  itu  juga  terdapat  senyawa polifenol  yang  bermanfaat  meningkatkan  kekebalan tubuh  sehingga  mampu  melawan  virus  yang menyerang  tubuh  (Sulastri et  al .  2013).    Menurut Dipahayu et  al .  (2017),  ekstrak  etanol  daun  ubi  jalar ungu  dapat  meredam  radikal  bebas  sebesar  80,43% dan  juga  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah setelah perlakuan selama 14 hari.
Jambu biji Australia memiliki ciri-ciri yang khas yaitu akar,  batang,  daun  dan  buah  berwarna  merah kecoklatan.  Daun  jambu  biji  mengandung  senyawa flavonoid (quecetin). Quercetin menghambat pembentukan  enzim  RNA  dalam  virus  Dengue.  Air rebusan  daun  jambu  biji  mampu  menghambat
pendarahan  akibat  demam  berdarah  Dengue,  dan mampu  meningkatkan  trombosit  100.000/mm3  dalam waktu 16 jam.  Menurut  Seo et al. (2014) daun jambu biji  mengandung  senyawa  kimia  terutama  tanin, guaijaverin,  karotenoid,  flavonoid,  terpenoid,  dan triterpenoid. Ekstraksi etanol daun jambu biji Australia secara  maserase  selama  24  jam  menghasilkan  ekstrak berwarna  coklat  tua  (Haryadi  &  Hidayati  2018).  Daun jambu  biji  telah  diformulasikan  menjadi  obat fitofarmaka anti diare.
Mutu ekstrak selain dipengaruhi oleh kualitas bahan baku  juga  dipengaruhi  oleh  teknik  ekstraksi  yang meliputi beberapa faktor yaitu, kehalusan bahan, jenis pelarut, konsentrasi pelarut, lama ekstraksi, perbandingan  bahan  dengan  pelarut.    Jenis  pelarut yang  digunakan  dalam  mengekstrak  suatu  bahan adalah  pelarut  yang  dapat  melarutkan  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  pada  bahan. Antosianin  bersifat  polar  sehingga  dapat  dilarutkan dengan  pelarut  etanol,  aceton,  dan  air.  Menurut Richter et  al. (2006)  tingkat  polaritas  antosianin termasuk  golongan  semipolar  (dielektrik  konstan  30- 40)  sedangkan  air  pelarut  sangat  polar  (dielektrik konstan  80).  Untuk mendapatkan  aktivitas  antioksidan ekstrak yang maksimal diperlukan teknik ekstraksi yang efektif.    Kegiatan  bertujuan  mendapatkan  teknik ekstraksi  terstandar  daun  ubi  jalar  ungu  dan  daun jambu  biji  Australia  dalam  menghasilkan  aktivitas antioksidan tinggi.

## METODE Bahan dan Alat
Bahan baku ekstraksi terdiri dari daun ubi jalar ungu dan daun jambu biji Australia yang diperoleh di daerah sekitar  Bogor,  bahan  kimia  yaitu  etanol,  metanol  (pa), DPPH  dan  peralatan  terdiri  dari  oven,  timbangan,  alat penepung,  ekstraktor,  rotavapor,  spektrofotometer UV-Vis dan alat-alat gelas lainnya.

## Penanganan Bahan Baku
Daun  ubi  jalar  ungu  diambil  yang  berwarna  hijau dan daun jambu biji Australia menggunakan daun tidak terlalu tua dan pucuk tidak dipakai sebagai bahan baku. Masing-masing  bahan  baku  dicuci  sampai  bersih dengan menggunakan air bersih lalu ditiriskan. Setelah airya  tiris,  dilakukan  pengeringan  menggunakan  alat pengering (oven) pada suhu 40-50⁰C untuk menghasilkan  bahan  baku  dalam  bentuk  simplisia. Khusus untuk daun ubi jalar ungu untuk mempercepat proses  pengeringan,  sebelum  dikeringkan  dilakukan
Sembiring et al . pemisahan  antara  batang  dengan  daun.  Lama pengeringan dilakukan sampai diperoleh daun ubi jalar dan  daun  jambu  biji  dapat  diremas  dengan  tangan menjadi serbuk.

## Analisis Mutu Simplisia
Bahan  baku  yang  sudah  diolah  menjadi  bentuk simplisia  dijadikan  serbuk  dengan  menggunakan  alat penepung.  Serbuk  yang  dihasilkan  dari  masing-masing bahan  dianalisis  mutunya  terutama  terhadap  kadar flavonoid dan unsur mineral (Na, Fe, K, P). Kandungan unsur  mineral  (Na,  Fe)  menggunakan  metode  AAS, unsur  P  dengan  metode  Kjeldahl,  unsur  K  dan  kadar flavonoid  dengan  Spektrofotometri  UV-  Vis  yang semuanya dianalisis di Laboratorium Uji Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat.

## Analisis Flavonoid
Sampel  ditimbang  sebanyak  1  g  dalam  labu  didih 100 m + 20 ml aceton p.a dan 2 ml HCl 25%, kemudian direfluk  di  penangas  air  pada  suhu  70°C  selama  30 menit,  didinginkan  lalu  disaring  dan  diulang  2  kali terhadap  ampasnya.  Hasil  penyaringan  disatukan    + aceton  hingga  tanda  batas  100  ml.  Filtrat  dipipet sebanyak 20 ml ke dalam corong pemisah + aquades 20 ml  dan  etil  asetat  15  ml  kemudian  dikocok  selama  15 menit.  Fase  aceton-air  (lapisan  bawah)  di  pisahkan  ke dalam  corong,  fase  etil  asetat  (lapisan  atas)  dibiarkan dalam  corong  pisah  sebelumnya.  Fase  aceton-air diekstrak 2 kali dengan 10 ml etil asetat. Ke dalam fase etil asetat + 40 ml aquades lalu dikocok dan dilakukan dua  kali.  Lapisan  atas  (fase  etil  asetat)  ditampung  ke dalam  labu  ukur  50  ml  +  etil  asetat  p.a  sampai  tanda garis.  Larutan  dipipet  sebanyak  10  ml  ke  dalam  labu ukur 25 ml + 0,5 ml larutan natrium asetat 0,5% dalam air  dan  2 ml  larutan  X  (2 g  AlCl 3 6H 2 0  +  100 ml  larutan as.  Asetat  5%  dalam  methanol  p.a).  Selanjutnya  di tambah as asetat 5% dalam methanol p.a sampai tanda garis  dan  larutan  dibiarkan  di  dalam  labu  ukur  selama 25 menit kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang  425  nm  dengan  menggunakan  larutan blanko (0,5 ml Na. sitrat 0,5% dalam labu ukur 25 ml + 2 ml larutan X + larutan as. Asetat5% dalam methanol p.a sampai tanda garis.
Kadar flavonoid = A x 0,735/g
Keterangan:  Kadar flavonoid dihitung sebagai kuersetin A = Absorbansi sampel g = Berat kering sampel (gr)
Ekstraksi Kegiatan penelitian ekstraksi menggunakan Rancangan Acak Lengkap faktorial yang terdiri dari dua faktor.  Faktor  pertama  adalah  konsentrasi  pelarut etanol terdiri atas 3 taraf yaitu 50, 70 dan 96%. Faktor kedua adalah lama ekstraksi terdiri dari 3 taraf yaitu 2, 3, dan 4 jam.
Serbuk  simplisia  daun  ubi  jalar  ungu  dan  daun jambu  biji  (Australia)  masing-masing  ditimbang sebanyak  250  gr  kemudian  dicampur  dengan  pelarut etanol (Bratachem, p.a) pada konsentrasi yang berbeda 50%, 70% dan 95%. Perbandingan antara bahan dengan pelarut  adalah  1:5.  Selanjutnya  dilakukan  pengocokan menggunakan  alat  stirer  selama  2  jam,  3  jam  dan  4 jam. Setelah selesai dikocok masing-masing dimaserasi selama  24  jam  dan  proses  ekstraksi  dilakukan  dengan dua  ulangan.  Selesai  maserase  dilakukan  penyaringan menggunakan  kertas  saring  (Whatman)  di  atas  corong kaca  untuk  memisahkan  larutan  dengan  ampas.  Hasil penyaringan berupa filtrat diuapkan menggunakan alat penguap  berputar  ( rotary  evaporator )  dan  diperoleh hasilnya dalam bentuk pasta (ekstrak kental/oleoresin). Parameter  yang  diamati  yaitu  rendemen  ekstrak  dari masing-masing perlakuan.
Rendemen ekstrak (%) b/b =
Pengujian Aktivitas Antioksidan (IC 50 )
Ekstrak daun ubi jalar ungu dan ekstrak daun jambu biji  yang  sudah  diolah  menjadi  .ekstrak  kental  diuji aktivitas  antioksidannya  menggunakan  metoda  DPPH (2,2-Difenil-1pikrilhidrazil) (Molyneux 2004) (Mailandari 2012).  Konsentrasi  larutan  ekstrak  yang  telah  dibuat dipipet  sebanyak  0,5;  1;  1,5;  2;  dan  2,5  ml.  Masing- masing  diencerkan  dengan  metanol:  air  (1:1)  dalam labu ukur 10 mL sampai tanda batas sehingga diperoleh konsentrasi 50, 100, 150, 200, dan 250 µg/mL. Masing- masing  konsentrasi  dipipet  sebanyak  1  ml  larutan sampel  lalu  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi, ditambahkan  1  ml  larutan  DPPH  100  µg/ml, ditambahkan 2 mL metanol. Campuran dihomogenkan, didiamkan  selama  30  menit  ditempat  gelap.  Serapan larutan  diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  517  nm.  Efektivitas  antioksidan ditentukan  oleh  nilai  IC 50 ( Inhibition  concentration 50%).  Nilai  IC 50 menggambarkan  besarnya  konsentrasi dari  ekstrak  uji  yang  dapat  menangkap  radikal  bebas sebesar 50% yang ditunjukkan dengan persamaan garis regresi  linear  yang  menyatakan  hubungan  antara konsentrasi  senyawa  sampel  (X)  dengan  aktivitas antioksidan  rata-rata/inhibisi  (Y).  Pengujian  aktivitas
Pengaruh Teknik Ekstraksi Daun Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) dan Daun Jambu Biji ( Psidium guajava ) terhadap Aktivitas Antioksidan
antioksidan ekstrak dilakukan di Laboratorium Uji Balai Penelitian  Tanaman  Rempah  dan  Obat  dengan menggunakan metode DPPH.
% Aktivitas antioksidan =

## HASIL DAN PEMBAHASAN Mutu Simplisia
Kadar  unsur  mineral  P,  K,  Na  da  Fe  simplisia  daun ubi  jalar  ungu  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  daun jambu  biji  Australia.  Jumlah  unsur  Fe  daun  ubi  jalar ungu sebesar 236,39 bpj dan daun jambu biji Australia 216,42  bpj.  Kebutuhan  unsur  mineral  terhadap kesehatan manusia terus meningkat karena meningkatnya  asupan  radikal  bebas  dari  makanan,  air dan  udara  yang  tercemar  dan  menimbulkan  berbagai penyakit degeneratif  (Latief 2004). Kandungan mineral yang  tidak  cukup  di  dalam  tubuh  manusia  akan mengakibatkan  gangguan  metabolisme  dalam  tubuh dan  berpengaruh  pada  kesehatan.  Selain  unsur mineral,  kedua  jenis  simplisia  juga  mengandung senyawa golongan flavonoid. Kadar flavonoid simplisia daun ubi jalar ungu sebesar 1,30% dan daun jambu biji Australia  2,72%.  Kadar  flavonoid  daun  ubi  jalar  ungu
lebih  kecil  dibandingkan  dengan  daun  jambu  biji Australia (Tabel 1).
Senyawa  flavonoid  dapat  bermanfaat  sebagai antioksidan  dan  antibakteri.  Daun  ubi  jalar  ungu  dan daun  jambu  biji  Australia  mengandung  senyawa flavonoid,  saponin,  tanin  dan  polifenol  (Apriliyanti 2010)  (Indriani  2006).  Daun  ubi  jalar  mengandung garam-garam  mineral  seperti  kalium,  magnesium,  zat besi,  dan  fosfor,  senyawa  fenolik  seperti  asam  kafeat, asam  klorogenat,  asam  3,5-di-O-kafeoilkuinat,  dan asam  3,4-di-O-kafeoilkuinat,  senyawa  antioksidan,  dan beberapa  vitamin  (Simanihuruk  &  Sirait  2014).  Daun jambu  biji  mengandung  quersetin  yang  merupakan senyawa  golongan  flavonoid  jenis  flavonol  dan  flavon (Harborne  1989).  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol daun  jambu  biji  berasal  dari  senyawa  flavonoid (Indriani  2006).  Menurut  Patmi et  al .  (2008)  dalam (Nuari et al . 2017), senyawa flavonoid dapat berkhasiat sebagai  antiinflamasi,  antioksidan,  antikanker  dan antibakteri.

## Rendemen Ekstrak
Hasil  ekstraksi  dari  simplisia  (Gambar  1)  diperoleh rendemen rata-rata ekstrak daun ubi jalar ungu sesuai konsentrasi  pelarut  secara  berurut  yaitu  61,06%,
Tabel 1. Kadar Unsur Mineral dan Flavonoid Simplisia Daun Ubi Jalar Ungu dan Daun Jambu Biji Australia
Parameter Hasil Pengujian Metode Pengujian Daun Ubi Jalar Ungu Daun Jambu Biji Australia P (%) 0,44 0,28 Kjeldahl K (%) 9,67 2,30 Spektrofotometri Na (%) 0,22 0,30 AAS AAS Fe (ppm) 236,39 216,42 Flavonoid (%) 1,30 2,72 Spektrofotometri UV-Vis
Gambar 1 . Bahan Baku dan Ekstrak
(a) Daun Ubi Jalar Ungu  (B)Daun Jambu Biji Australia (C) Ekstrak Daun Ubi (D) Ekstrak Daun Jambu
40,66%  dan  9,6%  dan  berdasarkan  lama  ekstraksi adalah  34,93%,  37,33%  dan  38,93%.  Berdasarkan Gambar  2,  semakin  tinggi  konsentrasi  pelarut, rendemen  ekstrak  yang  dihasilkan  semakin  kecil  dan semakin  lama  proses  ekstraksi,  rendemen  ekstrak semakin tinggi. Konsentrasi pelarut  dan lama  ekstraksi saling  berinteraksi  dan  kedua  faktor  berpengaruh terhadap  rendemen  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu. Selanjutnya  rendemen  rata-rata  ekstrak  daun  jambu biji  Australia  menurut  Gambar  3  sesuai  urutan konsentrasi  pelarut  yaitu  46,03%,  44,66%  dan  26,86% dan  berdasarkan  lama  ekstraksi  adalah  38,53%,  43% dan  36,03%.  Konsentrasi  pelarut  dan  lama  ekstraksi berpengaruh  terhadap  rendemen  ekstrak  daun  jambu
biji  Australia.  Semakin  tinggi  konsentrasi  pelarut,  dan semakin  lama  waktu  ekstraksi  rendemen  rata-rata ekstrak  daun  jambu  biji  Australia  semakin  kecil. Menurut  Syahbirin et  al .  (2005),  rendemen  ekstrak merupakan  jumlah  senyawa  yang  terekstrak  oleh berbagai  macam  pelarut  dengan  tingkat  kepolaran yang  berbeda.  Semakin  tinggi  konsentrasi  pelarut tingkat  kepolarannya  semakin  rendah  (Ramadhan  & Phaza  2010).  Semakin  tingggi  nilai  konstanta dielektrikum  pelarut  yang  digunakan  pada  proses ekstraksi,  rendemen  ekstrak  yang  dihasilkan  semakin rendah dan sebaliknya (Yulianti et al . 2014).
Selain  konsentrasi  pelarut,  keberhasilan  proses ekstraksi  juga  dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut,  lama
Gambar 2 . Histogram Pengaruh Konsentrasi Pelarut dan Lama Ekstraksi terhadap Rendemen Ekstrak Daun Ubi Jalar Ungu
Gambar 3 . Histogram Pengaruh Konsentrasi Pelarut dan Lama Ekstraksi terhadap  Rendemen Ekstrak Daun Jambu Biji Ungu
ekstraksi  dan  metode  ekstraksi  (Susanti et  al. 2012). Sedangkan  menurut  (Xu et  al. 2013),  proses  ekstraksi dipengaruhi  oleh  waktu  dan  suhu  ekstraksi,  komposisi pelarut  dan  rasio  padatan  terlarut.  Ekstraksi  secara maserase merupakan salah satu metode ekstraksi yang paling  sederhana  tanpa  pemanasan  sehingga  senyawa flavonoid  yang  terkandung  di  dalam  bahan  tidak banyak mengalami kerusakan (Gupta & Rao 2012).
Ekstraksi  dengan  pelarut  etanol  50%  menghasilkan rendemen  ekstrak  tertinggi,  sedangkan  rendemen terkecil terdapat pada konsentrasi pelarut 96%. Hal ini disebabkan karena pelarut etanol 50% mengandung air lebih  banyak  dibandingkan  etanol  96%  pelarut  etanol 96%  lebih  mudah  teruapkan  dibandingkan  etanol  50% dan  70%.  Air  dapat  diuapkan  dengan  baik  pada  suhu tinggi,  tetapi  senyawa  aktif  dapat  mengalami kerusakan/terdegradasi karena sensitif terhadap panas.
Lama  ekstraksi  berpengaruh  terhadap  rendemen ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  dan  daun  jambu  biji Australia.  Menurut  (Bernatoniene et  al .  2011)  dalam (Wahyuni  &  Widjanarko  2014),  semakin  lama  waktu ekstraksi,  semakin  meningkat  penetrasi  pelarut  ke dalam  bahan  baku  sehingga  rendemen  ekstrak  yang dihasilkan  semakin  meningkat.  Hal  ini  sesuai  dengan rendemen  rata-rata  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  yang dihasilkan.  Lama  ekstraksi  sangat  berpengaruh terhadap  jumlah  ekstrak  yang  diperoleh  (Wibowo  dan Sudi 2004) dalam (Alfiana 2013) yang ditunjukkan oleh rendemen  ekstrak  yang  diperoleh  berbeda  dalam setiap  perubahan  waktu.  Tetapi  pernyataan  tersebut tidak sesuai dengan rendemen ekstrak daun jambu biji Australia,  karena  semakin  lama  proses  ekstraksi, rendemen  ekstrak  yang  dihasilkan  semakin  menurun. Hal  ini  disebabkan  karena  pelarut  kemungkinan  sudah mencapai titik jenuh.  Setelah mencapai waktu optimal jumlah  komponen  aktif  yang  terekstrak  ke  dalam pelarut semakin kecil yang ditunjukkan oleh rendemen ekstrak  yang  diperoleh  semakin  sedikit  bertambah. Pelarut  memiliki  batas  kemampuan  untuk  menarik  zat aktif  yang  terkandung  di  dalam  bahan,  sehingga walaupun  waktu  ekstraksi  diperpanjang  rendemen ekstrak  yang  dihasilkan  tidak  bertambah.  Menurut (Sembiring et  al .  2006),  semakin  lama  waktu  ekstraksi rendemen  ekstrak  sambiloto  yang  diperoleh  semakin tinggi sampai batas 6 jam pengadukan.

## Aktivitas antioksidan
Aktivitas  antioksidan  ditentukan  oleh  nilai  IC 50 , semakin  kecil  nilainya  maka  aktivitas  antioksidannya semakin kuat. Hasil pengamatan dengan metode DPPH diperoleh  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  daun  ubi  jalar  ungu pada  berbagai  konsentrasi  pelarut  berkisar  antara 33,34 – 75,00 ppm dan ekstrak etanol daun jambu biji Australia  pada  konsentrasi  yang  sama  berkisar  antara 10,10  -  33,41  ppm.  Menurut  Tabel  2  dan  3,  aktivitas ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  lebih  kecil  dibandingkan ekstrak daun jambu biji Australia yang ditunjukkan oleh nilai  IC 50 ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  lebih  besar dibandingkan  ekstrak  daun  jambu  biji  Australia.  Selain itu  kadar  flavonoid  ekstrak  daun  jambu  biji  Australia lebih  tinggi  yaitu  2,72%,  sedangkan  ekstrak  daun  ubi jalar ungu 1,30%. Berdasarkan nilai IC 50 terkecil, kedua jenis  ekstrak  termasuk  ke  dalam  kelompok  yang memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat, tetapi secara keseluruhan ekstrak daun jambu biji Australia aktivitas antioksidannya  lebih  kuat.  Suatu  senyawa  dikatakan sebagai  antioksidan  sangat  kuat  jika  nilai  IC 50 kurang dari  50,  kuat  (50-100),  sedang  (100-  150),  dan  lemah (15-200) (Molyneux 2004).
Nilai IC 50 terkecil ekstrak daun ubi jalar ungu sebesar 33,34  ppm  dihasilkan  dari  proses  ekstraksi  selama  2 jam  menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Hasil  tersebut sejalan  dengan  pernyataan  (Vanini et  al .  2009)  bahwa pelarut  etanol  70%  terbukti  efektif  mengekstraksi antosianin  buah  anggur.  Menurut  (Indraswari  2008) pelarut  etanol 70%  sangat efektif dalam menghasilkan jumlah  bahan  aktif  yang  optimal,  dimana  bahan penganggu hanya skala kecil yang turut ke dalam cairan pengekstraksi  (Indraswari  2008).  Selain  daripada  itu, etanol 70 % mudah ditemukan dan memiliki harga yang lebih  ekonomis  dibandingkan  dengan  etanol  90  %. Sedangkan  nilai  IC 50 terkecil  ekstrak  daun  jambu  biji Australia  adalah  10,10  bpj  dihasilkan  dari  proses ekstraksi  selama  3  jam  menggunakan  pelarut  etanol 96%.  Pelarut  etanol  bersifat  universal  artinya  mampu melarutkan zat yang bersifat polar, semi polar dan non- polar.  Nilai  IC 50 berpengaruh  terhadap  aktivitas penangkapan  radikal  bebas,  semakin  kecil  nilainya kekuatan  aktivitas  antioksidannya  dalam  menangkap radikal bebas semakin tinggi (Badarinath et al . 2010).
Windono et  al. (2001)  menyatakan  konsentrasi pelarut  berpengaruh  terhadap  nilai  IC 50 ekstrak  daun ubi  jalar  ungu  maupun  ekstrak  daun  jambu  biji Australia. Semakin tinggi konsentrasi  pelarut  ekstraksi, nilai  IC 50 rata-rata  ekstrak  semakin  kecil.  Nilai  IC 50 ekstrak daun ubi jalar ungu semakin kecil sampai batas konsetrasi  pelarut  70%  dan  meningkat  pada konsentrasi  96%.  Hal  ini  menunjukkan  senyawa  aktif yang  terkandung  di  dalam  daun  ubi  jalar  ungu  lebih banyak  terekstrak  ke  dalam  pelarut  etanol  70% dibandingkan etanol 50% dan 96%. Sedangkan ekstrak daun  jambu  biji  Australia  memiliki  nilai  IC 50 yang semakin  kecil  dengan  bertambahnya  konsentrasi pelarut  ekstraksi.  Menurut  (Yulianti et  al .  2014) semakin  tinggi  konsentrasi  etanol  yang  digunakan untuk  mengekstrak  stevia,  kadar  gula  yang  terekstrak semakin  tinggi.  Perbedaan  konsentrasi  pelarut menghasilkan ekstrak berbeda kualitas yang ditunjukkan  oleh  nilai  IC 50 yang  berbeda.  Dengan demikian  kekuatan  aktivitas  antioksidan  di  setiap ekstrak  di  dalam  menangkap  radikal  bebas  juga berbeda.  Hasil  pengujian  aktivitas  antioksidan  didapat persamaan  garis  untuk  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu
seperti yang ditunjukkan pada Tabel 2. Dari persamaan tersebut  digunakan  untuk  mencari  konsentrasi  efektif ekstrak  untuk  meredam  radikal  bebas  DPPH  atau  nilai IC 50 .  Sedangkan  persamaan  garis  untuk  ekstrak  daun jambu biji terdapat pada Tabel 3. Nilai IC 50 merupakan konsentrasi  efektif  ekstrak  yang  dibutuhkan  untuk meredam radikal bebas sebanyak 50% dari total DPPH, sehingga  nilai  50  disubstitusikan  untuk  nilai  y.  Setelah mensubstitusikan  nilai  50  pada  nilai  y,  akan  didapat nilai x sebagai nilai IC 50 .
Ekstraksi  melalui  pengocokan  menggunakan  alat pengaduk  terlebih  dahulu  sebelum  dimaserase  dapat mempercepat  keseimbangan  antara  pelarut  dengan bahan  sehingga  proses  ekstraksi  lebih  cepat.  Menurut (Winata  &  Yunianta  2015),  semakin  lama  waktu ekstraksi  kesempatan  bahan  bersentuhan  dengan pelarut  semakin  lama  sehingga  kualitas  ekstrak  yang diperoleh  semakin  meningkat  sampai  titik  optimum. Tetapi jika terlalu lama waktu ekstraksi menurut (Cikita et al . 2016) dapat merusak zat terlarut yang terdapat di dalam  bahan  dan  berpotensi  terjadi  penguapan senyawa kimia yang terekstrak. Hal ini ditunjukkan oleh nilai  IC 50 ekstrak  yang  dihasilkan  semakin  tinggi
Tabel 2. Pengaruh Konsentrasi Etanol dan Lama Ekstraksi terhadap Nilai IC 50 Ekstrak Daun Ubi Jalar Ungu
Perlakuan Persamaan Garis Nilai Y Nilai IC 50 Konsentrasi Pelarut (%) Lama Ekstraksi (jam) 50 2 Y = 1,0797 x + 2,91 50 43,62 3 Y = 0,6916 x -1,4683 50 75,00 4 Y = 1,001 x + 1,1813 50 48,77 70 2 Y = 1,2781 x + 7,907 50 33,34 3 Y= 0,739 x + 0,8479 50 66,61 4 Y = 1,0361 x + 1,7652 50 46,55 96 2 Y = 0,9067 x + 2,430 50 52,47 3 Y = 0,8963 x + 1,9052 50 53,66 4 Y = 0,8269 x + 1,8048 50 58,28
Tabel 3. Pengaruh Konsentrasi Etanol dan Lama Ekstraksi terhadap Nilai IC 50 Ekstrak Daun Jambu Biji Australia Perlakuan Persamaan garis Nilai Y Nilai IC 50 Konsentrasi Pelarut (%) Lama Ekstraksi (jam) 50 2 Y = 1,4222 x + 2,4761 50 33,41 3 Y = 1,3933 x +15,340 50 21,68 4 Y = 1,3076 x + 5,4961 50 34,04 70 2 Y = 2,1322 x +12,32 50 15,49 3 Y= 1,3027 x + 24,255 50 17,65 4 Y =2,7449 x + 6,1404 50 15,98 96 2 Y = 1,994 x + 20,292 50 13,04 3 Y = 2,7636 x + 16,981 50 10,32 4 Y = 4,4802 x + 4,745 50 10,10
terutama  pada  konsentrasi  pelarut  50%,  sedangkan konsentrasi pelarut 70% dan 96% nilai IC 50 -nya semakin kecil (Tabel 2).
Kemampuan ekstrak dalam mereduksi radikal bebas dipengaruhi  oleh  kualitas  ekstrak  dan  jumlah  ekstrak yang  digunakan.  Konsentrasi  pelarut  berpengaruh terhadap  kualitas  ekstrak  yang  dihasilkan.  Semakin tinggi  konsentrasi  pelarut  yang  digunakan  untuk mengekstrak  bahan,  kemampuan  ekstrak  yang dihasilkan  dalam  menangkap  radikal  bebas  semakin tinggi  yang  ditunjukkan  oleh  persentase  inhibisi. Penggunaan  ekstrak  daun  jambu  biji  Australia  lebih efektif menangkap radikal bebas (Gambar.2) dibandingkan  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  (Gambar  3). Pada  konsentrasi  yang  sama  ekstrak  daun  jambu  biji Australia  memiliki  kemampuan  menangkap  radikal bebas  lebih  besar  dibandingkan  ekstrak  daun  ubi  jalar ungu.  Penggunaan  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu sebanyak  20  ppm  dapat  mereduksi  radikal  bebas sebesar  33,46%,  jika  dengan  ekstrak  daun  jambu  biji Australia  dapat  mereduksi  sebesar  54,96%.  Hal  ini menunjukkan  kadar  senyawa  aktif  yang  berpotensi sebagai  antioksidan  lebih  tinggi  pada  ekstrak  daun jambu  biji  Australia.  Pernyataan  ini  didukung  oleh kadar  flavonoid  yang  lebih  tinggi  pada  simplisia  daun jambu  biji  Australia  dibandingkan  daun  ubi  jalar  ungu (Tabel  1).  Kekuatan  ekstrak  dalam  menangkap  radikal dapat  dilihat  dari  besarnya  persentase  inhibisi  dengan menggunakan  ekstrak  dalam  jumlah  yang  minimal. Ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  dapat  mereduksi  radikal bebas  dengan  optimum  sampai  batas  konsentrasi pelarut  70%,  selanjutnya  akan  mengalami  penurunan. Sedangkan  ekstrak  daun  jambu  biji  Australia,  semakin tinggi konsentrasi pelarut ekstraksi, aktivitas antioksidan  dalam  menangkap  radikal  bebas  semakin tinggi.  Semakin  banyak  senyawa  flavonoid  yang terekstrak  ke  dalam  pelarut,  kekuatan  aktivitas antioksidan  dalam  menangkap  radikal  bebas  semakin tinggi. Menurut Rohman et al. (2010) dan Perwiratami &  Suzery  (2014),  total  flavonoid  berbanding  lurus dengan aktivitas antioksidan.
Kekuatan  aktivitas  antioksidan  dipengaruhi  oleh total kandungan senyawa fenolik dan flavonoid (Hue et al .  2012)  (Islam et  al .  2009)  (Koncic et  al .  2013). Semakin  lama  bahan  diekstrak,  hasil  uji  ekstrak  yang diperoleh  setelah  diuji  terhadap  persentase  inhibisi semakin  berkurang  aktivitas  antioksidannya  untuk menangkap radikal bebas. Hal ini ditunjukkan oleh nilai IC 50 ekstrak  yang  semakin  tinggi.  Mutu  ekstrak  selain dipengaruhi oleh mutu simplisia juga dipengaruhi oleh
proses  ekstraksi  yang  meliputi  kehalusan  bahan,  jenis pelarut,  konsentrasi  pelarut,  lama  ekstraksi  dan  suhu (Sembiring  &  Suhirman  2014).  Kadar  bahan  aktif  dari suatu  ekstrak  sangat  ditentukan  oleh  kualitas  bahan baku  dan  proses  ekstraksi  yang  digunakan.  Etanol dalam  jumlah  banyak  dapat  menyari  senyawa  yang bersifat  polar,  semi  polar,  dan  non  polar  karena mekanisme  like  dissolves  unlike  yang  berarti  pelarut polar dengan konsentrasi besar dapat menyari senyawa metabolit  sekunder  yang  umumya  bersifat  semi  polar (Saifudin  2014).  Semakin  lama  waktu  kontak  antara pelarut  dengan  sampel,  maka  akan  semakin  banyak pula  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terekstrak. Kemurnian  etanol  yang  semakin  rendah  ternyata  juga menyebabkan  ekstrak  tanin  yang  diperoleh  semakin rendah (Marnoto et al . 2012).
Ekstraksi  antioksidan  tanaman  tergantung  pada kelarutan  komponen  antioksidan  dari  tanaman  dalam pelarut  (Spigno et  al .  2010).  Hasil  uji  karotenoid menunjukkan  bahwa  perbedaan  konsentrasi  pelarut berbeda  nyata  dimana  Sig  (0,000)  <  0,05  (Zendrato et al .  2014).  Oleh  karena  itu  perlu  dikaji  waktu  ekstraksi yang  optimal  sehingga  menghasilkan  ekstrak  yang memiliki  kuantitas  dan  kualitas  yang  baik  pula  (Lestari 2014).  Proses  ekstraksi  yang  terlalu  lama  akan mengakibatkan rusaknya kandungan zat warna  (Shinta &  Anjani  2008).  Ekstraksi  zat  warna  dari  kulit  manggis dengan  menggunakan  solven  etanol  pada  konsentrasi yang  berbeda  menunjukkan  penurunan  zat  warna seiring dengan semakin rendahnya konsentrasi pelarut yang digunakan. Ekstraksi zat warna dari kulit manggis pada  konsentrasi  pelarut  etanol  (70%-95%)  diperoleh hasil terbaik zat warna adalah pada konsentrasi etanol 95%,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  pelarut  maka  semakin  baik  pula  pelarut tersebut  dalam  mengekstrak  zat  warna  (Saraswati 2011).  Hal  ini  terjadi  akibat  dari  polaritas  etanol  yang menjadi  lebih  tinggi  karena  mengandung  lebih  banyak air,  dan  juga  dengan  semakin  banyak  air  di  dalam pelarut  maka zat warna akan terhidrolisis. Konsentrasi pelarut  yang  tinggi  akan  mempermudah  pemisahan hasil (zat warna) dari pelarut (Putri et al . 2013).

## SIMPULAN
Simplisia daun ubi jalar ungu mengandung flavonoid sebesar  1,30%  dan  daun  jambu  biji  Australia  2,72%. Konsentrasi  pelarut  dan  lama  ekstraksi  berpengaruh terhadap nilai IC 50 ekstrak. Aktivitas antioksidan ekstrak daun  jambu  biji  ungu  lebih  kuat  dibandingkan  ekstrak daun  ubi  jalar  ungu.  Nilai  IC 50 terkecil  ekstrak  daun
Sembiring et al . jambu  biji  Australia  sebesar  10,10  bpj  daun  ubi  jalar ungu sebesar 33,34 bpj. Proses ektraksi efektif daun ubi jalar  ungu  maupun  daun  jambu  biji  Australia  untuk menghasilkan  aktivitas  antioksidan  optimal  adalah ekstraksi dengan pelarut etanol 70% selama 2 jam dan menghasilkan  nilai  IC 50 masing-masing  sebesar  33,34 bpj dan 15,49 bpj.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Pada  kesempatan  ini  penulis  mengucapkan  terima kasih kepada Kepala Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat yang telah mendanai penelitian melalui PNBP tahun  2018  dan  Teknisi  yang  telah  membantu pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alfiana,  D.H. 2013. Ekstraksi  Minyak  Melati  (Jasminum Sambac)  Kajian  Jenis  Pelarut  dan  Lama  Ekstraksi [skripsi].  Jur  Teknol  Ind  Pertanian  Fak  Teknol Pertanian. Malang. Universitas Brawijaya.
Aye, M.M., Aung, H.T., Sein, M.M. & Armijos, C. 2019. A Review on the Phytochemistry, Medicinal Properties and  Pharmacological  Activities  of  15  Selected Myanmar Medicinal Plants. Molecules . 24 (2) : 293. Badarinath, A. V, Rao, K.M., Chetty, C.M.S., Ramkanth, S., Rajan, T.V.S., Gnanaprakash, K. 2010. A review on in-vitro antioxidant methods: comparisions, correlations  and  considerations. International Journal of PharmTech Research . 2 (2) : 1276–1285. Bernatoniene,  J.,  Masteikova,  R.,  Davalgiene,  J., Peciura,  R.,  Gauryliene,  R.,  Bernatoniene,  R., Majiene, D., Lazauskas, R., Civinskiene, G., Velziene, S.  2011.  Topical  application  of  Calendula  officinalis
(L.):  Formulation  and  evaluation  of  hydrophilic cream with antioxidant activity. Journal of Medicinal Plants Research . 5 (6) : 868–877.
Cikita  I,  Hasibuan  IH,  Hasibuan  R.  2016.  Pemanfaatan flavonoid ekstrak daun katuk ( Sauropus androgynus ( L ) Merr ) sebagai antioksidan pada minyak kelapa. J Tek Kim USU 5(1):45–51.
Dipahayu  D,  Soeratri  W,  Agil  M.  2017.  Formulasi  Krim Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Ubi  Jalar  Ungu (Ipomoea  batatas  (L.)  Lamk)  Sebagai  Anti  Aging. Pharm Sci Res 1(3):166–79.
Gupta PC, Rao C V. 2012. Pharmacognostical studies of cleome  viscosa  linn.  Indian  J  Nat  Prod  Resour 3(4):527–34.
Harborne  JB.  1989.  Methods  in  plant  biochemistry. Plant phenolics. Academic Press Ltd. Volume 1.
Haryadi  I,  Hidayati  N.  2018.  Ekstraksi  zat  warna  dari daun  jambu  biji  Australia  ( Psidium guajava L). Indones J Halal 1(2):97–101.
Hue S-M, Boyce AN, Somasundram C. 2012. Antioxidant activity,  phenolic  and  flavonoid  contents  in  the leaves  of  different  varieties  of  sweet  potato (’ipomoea batatas’). Aust J Crop Sci. Southern Cross Publishers 6(3):375.
Indraswari A. 2008. Optimasi pembuatan ekstrak daun dewandaru  ( Eugenia  uniflora L.)  menggunakan metode  maserasi  dengan  parameter  kadar  total senyawa fenolik dan flavonoid. Doctoral dissertation Fakultas Farmasi. Surakarta. Universitas Muhammadiyah. Indriani  S.  2006.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun jambu  biji  ( Psidium  guajava L).  J.llPertIndon 11(1):13–7.
Islam I, Shaikh AU, Shahidul IM. 2009. Antioxidative and Antimutagenic  Potential  of  Phytochemical  From Ipomoea  batatas (L.)  Lamm.  Int  J  Cancer  Res. 5(3):83–94.
Jassim  SAA,  Naji  MA.  2003.  Novel  antiviral  agents:  A medicinal  plant  perspective.  J  Appl  Microbiol 95(3):412–27.
Jaya  EFP.  2013.  Pemanfaatan  Antioksidan  dan Betakaroten  Ubi  Jalar  Ungu  pada  Pembuatan Minuman Non Beralkohol. Media Gizi Masy Indones. Hlm.54–7.
Johnson  R,  Moorthy  SN,  Padmaja  G.  2010.  Production of  high  fructose  syrup  from  cassava  and  sweet potato  flours  and  their  blends  with  cereal  flours. Sage  Publications  Sage  UK:  London,  England.  Food Sci Technol Int. 16(3):251–8.
Khaerani,  Barium  H,  Nonci  FY.  2014.  Efektivitas  Infusa Daun  Ubi  Jalar  ( Ipomea  batatas L)  terhadap Peningkatan Trombosit pada Mencit ( Mus musculus ). Jf Fik Uinam 2(1):24–7.
Kikuzaki H, Hisamoto M, Hirose K, Akiyama K, Taniguchi H.  2002.  Antioxidant  properties  of  ferulic  acid  and its  related  compounds.  J  Agric  Food  Chem. 50(7):2161–8.
Koncic  MZ,  Petlevski  R,  Kalođera  Z.  2013.  Antioxidant Activity  of  Ipomoea  batatas  L.  Lam.  Leaf  Grown  in Continental  Croatia  and  Its  Effect  on  Glutathione Level in Glucose-Induced Oxidative Stress. Int J food Prop. Taylor & Francis 16(5):964–73.
Lestari  P.  2014.  Ekstraksi  Tanin  Dari  Daun  Alpukat ( Persea  Americana Mill.)  Sebagai  Pewarna  Alami (Kajian Proporsi Pelarut dan Waktu Ekstraksi) [tesis]. Universitas Brawijaya.
Pengaruh Teknik Ekstraksi Daun Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) dan Daun Jambu Biji ( Psidium guajava ) terhadap Aktivitas Antioksidan
Mailandari  M.  2012.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Daun  Garcinia  kydia  Roxb.  dengan  Metode  DPPH dan  Identifikasi  Senyawa  Kimia  Fraksi  yang  Aktif [skripsi]. Universitas Indonesia.
Marnoto  T,  Haryono  G,  Gustinah  D,  Putra  FA.  2012. Ekstraksi  tannin  sebagai  bahan  pewarna  alami  dari tanaman  putrimalu  ( Mimosa  pudica )  menggunakan pelarut organik. Jurnal Reaktor 14(1):39–45.
Molyneux,  P.  2004.  The  use  of  the  stable  free  radical diphenylpicryl-  hydrazyl  (DPPH)  for  estimating antioxidant  activity. Journal  of  Science  and Technology . 26 (2) : 211–219.
Nuari  S,  Syariful  A,  Akhmad  K.  2017.  Isolasi  dan identifikasi  senyawa  flavonoid  ekstrak  etanol  buah naga  merah  (Hylocereus  polyrhizuz  (F.A.C.  weber) Briton  &  Rose).  Jurnal  Farmasi  Galenika.  2(2):118- 125.
Perwiratami,  C.  &  Suzery,  M.  2014.  Korelasi  fenolat total  dan  flavonoid  total  dengan  antioksidan  dari beberapa  sediaan  ekstrak  buah  tanjung  ( Mimusops Elengi ). Chemistry Progress. 7 (1) : 34–39.
Putri WS,  Warditiani  NK,  Larasanty LPF.  2013.  Skrining fitokimia  ekstrak  etil  asetat  kulit  buah  manggis ( Garcinia mangostana L.). Jurnal farmasi. Universitas Udayana. Vol.2(4):56–9.
Richter  P,  Toral  MI,  Toledo  C.  2006.  SubcriticalWater Extraction  and  Determination  of  Nifedipine  in Pharmaceutical  Formulations.  J  AOAC  Int.  AOAC International 89(2):365–368.
Rohman,  A.,  Riyanto,  S.,  Yuniarti,  N.,  Saputra,  W.R., Utami, R. & Mulatsih, W. 2010. Antioxidant activity, total  phenolic,  and  total  flavaonoid  of  extracts  and fractions  of  red  fruit  ( Pandanus  conoideus Lam). International Food Research Journal . 17 (1): 97–106. Saifudin  A.  2014.  Senyawa  Alam  Metabolit  Sekunder Teori,  Konsep,  dan  Teknik  Pemurnian  [buku]. Deepublish.  Universitas  Muhammadiyah  Surakarta. 117 hlm.
Saraswati D. 2011. Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Daun Sirih Terhadap Daya Hambat Escherichia Coli. Jurnal Health and Sport 3(2): 331-338.
Sembiring  BB,  Manoi  F,  Januwati  M.  2006.  Pengaruh nisbah  bahan  dengan  pelarut  dan  lama  ekstraksi terhadap  mutu  ekstrak  sambiloto  ( Andrographis paniculata Nees).  In:  Prosiding  Seminar  Nasional dan Pameran Tumbuhan Obat Indonesia. Hlm. 157– 63.
Sembiring  BB,  Suhirman  S.  2014.  Pengaruh  Cara Pengeringan dan Teknik Ekstraksi Terhadap Kualitas
Simplisia  dan  Ekstrak  Meniran.  Pros  Semin  Nas Pengemb Teknol Pertan. :509–513.
Seo J, Lee S, Elam ML, Johnson SA, Kang J, Arjmandi BH. 2014.  Study  to  find  the  best  extraction  solvent  for use with guava leaves ( Psidium guajava L.) for high antioxidant efficacy . Food Sci Nutr. 2(2):174–80. Shinta E, Anjani P. 2008. Pengaruh konsentrasi alkohol dan  waktu  ekstraksi  terhadap  ekstraksi  tanin  dan natrium bisulfit dari kulit buah manggis. In: Makalah Seminar Nasional Soebardjo Brotohardjono.
Surabaya.  Hlm.:31–34.
Simanihuruk  K,  Sirait  J.  2014.  Silase  kulit  buah  kopi sebagami pakan dasar pada kambing Boerka sedang tumbuh.  Jitv  [Internet].  2014;557–66.  Available from:
http://kalteng.litbang.pertanian.go.id/ind/pdf/all- pdf/peternakan/fullteks/semnas/pro10-82.pdf Spigno G, Dermiki M, Pastori C, Casanova F, Jauregi P. 2010.  Recovery  of  gallic  acid  with  colloidal  gas aphrons  generated  from  a  cationic  surfactant.  Sep Purif Technol. Elsevier 71(1):56–62.
Sulastri,  Erlidawati,  Syahrial,  Nazar  M,  Andayani  T. 2013. Antioxidant Activity of Extracted Ethanol from Purple  Sweet  Potato  Leaves  (  Ipomea  batatas  L  .) Cultivated  in  Saree  ,  Aceh  Besar.  Jurnal  Rekayasa Kimia dan Lingkungan 9(3):126–131.
Susanti A, Ardiana D, Gumelar G, YG B. 2012. Polaritas pelarut  sebagai  pertimbangan  dalam  pemilihan pelarut untuk ekstraksi minyak bekatul dari bekatul varietas  ketan  ( Oriza  sativa Glatinosa).  In: Simposium Nasional RAPI XI FT UMS. Hlm. 8–14. Syahbirin G, Batubara I, Setiawati T, Nulhakim L. 2005.
Senyawa aktif  daun  picung  (Pangium edule  Reinw.) sebagai  insektisida  botani  terhadap  ulat  gerayak ( Spodoptera litura F.)(Lepidoptera: Noctuidae). Pros Simp Nas Kim Bahan Alam XV :56–66.
Vanini  LS,  Hirata  TA, Kwiatkowski  A,  Clemente  E.2009.
Extraction  and  stability  of  anthocyanins  from  the benitaka  grape  cultivar  ( Vitis  vinifera L.).  Brazilian. Instituto de Technologia de Alimentos (ITAL). J Food Technol. 12(1/4):213–219.
Wahyuni  DT,  Widjanarko  SB.  2014.  Pengaruh  Jenis Pelarut  Dan  Lama  Ekstraksi  Terhadap  Ekstrak Karotenoid Labu Kuning Dengan Metode
Gelombang  Ultrasonik  [in  Press  April  2014].  J Pangan  dan  Agroindustri  [Internet].  3(2):390–401. Available from:
https://jpa.ub.ac.id/index.php/jpa/article/view/155
Sembiring et al .
Winata EW,  Yunianta. 2015. Ekstraksi Antosianin Buah Murbei  (Morus  alba  L.)  Metode  Ultrasonik  Bath (Kajian  Waktu  dan  Rasio  Bahan:Pelarut).  J  Pangan dan Agroindustri 3(2):773–83.
Wulansari  D,  Chairul.  2011.  Penapisan  Aktivitas Antioksidan  dan  Beberapa  Tumbuhan  Obat Indonesia  Menggunakan  Radikal  2,2-Diphenyl-1 Picrylhydrazyl (DPPH). Maj Obat Tradis. 16(1):22–25. Xu  Q,  Shen  Y,  Wang  H,  Zhang  N,  Xu  S,  Zhang  L.  2013.
Application  of  response  surface  methodology  to optimise  extraction  of  flavonoids  from  fructus sophorae. Food Chem. Elsevier 138(4):2122–2129. Yulianti  D,  Susilo  B,  Yulianingsih  R.  2014.  Influence  of extraction  time  and  ethanol  solvent  concentration to  physical-chemical  properties  stevia  leaf  extract (Stevia  Rebaudiana  Bertoni  M.)  Using  microwave
assisted  extraction  methods.  J  Bioproses  Komod Trop [Internet]. 2014;2(1):35–41.
Availablefrom:http://jbkt.ub.ac.id/index.php/jbkt/ar ticle/view/133/125
Zandi  K,  Teoh  BT,  Sam  SS,  Wong  PF,  Mustafa  M, Abubakar S. 2011. Antiviral activity of four types  of bioflavonoid  against  dengue  virus  type-2.  Virol  J. 8:10–11.
Zendrato  IA,  Swastawati  F,  Romadhon  R.  2014.
Ekstraksi Klorofil Dan Karotenoid Dengan Konsentrasi  Pelarut  Yang  Berbeda  Pada  Lamun (Enhalus  Acoroides)  Di  Perairan  Laut  Jawa.  J Pengolah dan Bioteknol Has Perikan. 3(1):30–39.