Optimasi Formula Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan ( Crhysanthemum cinerariaefolium (Trevir.) Vis.) menggunakan Kombinasi Asam Stearat dan Setil Alkohol sebagai Repelan dengan

## Metode Simplex Lattice Design
Optimization Lotion Formula Of Chrysant Flower Ethanol Extract (Crhysanthemum cinerariaefolium (Trevir.) Vis.) By Using Combination Of Stearic Acid and Cetyl Alcohol the Repellent with Simplex Lattice Design Method
Rifkarosita Putri Ginaris, Rina Herowati, TN. Saifullah Sulaiman Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jl. Letjen Sutoyo-Mojosongo, Surakarta-57127 Telp.0271-852518 email: Rifkarosita04@gmail.com
(tanggal diterima: 17-06-2020 , tanggal disetujui: 23-11-2021)

## INTISARI
Demam  berdarah dengue (DBD),  penyakit  infeksi  disebabkan  oleh  virus Dengue yang ditularkan dari orang ke orang melalui gigitan nyamuk dengan pengendalian vektor menggunakan repelan  bahan  alami.  Bunga  Krisan  ( Crhysanthemum  cinerariaefolium (Trevir.)  Vis.)  mengandung flavonoid, saponin dan polifenol yang berkhasiat sebagai repelan terhadap nyamuk Aedes aegypti. Sediaan lotion dengan kombinasi asam stearat dan setil alkohol digunakan untuk meningkatkan daya lekat dan pengental. Tujuan penelitian ini adalah membuat sediaan lotion menggunakan kombinasi asam  stearat  dan  setil  alkohol  untuk  mendapatkan  mutu  fisik  optimum  serta  mendapatkan konsentrasi  ekstrak  etanol  bunga  krisan  yang  efektif  sebagai lotion repelan  terhadap  nyamuk A. aegypti dan efek aman pada kulit.
Ekstraksi bunga krisan dilakukan menggunakan etanol 70%. Ekstrak etanol bunga krisan kemudian dilakukan orientasi dosis dengan konsentrasi 1,2%. Formulasi lotion ekstrak etanol bunga krisan  dibuat  menjadi  7  formulasi  dengan menggunakan  basis  asam  stearat  dan  asam  stearat, Formula I 9,00 : 8,00 %, Formula II 15,00 : 2,00 %, Formula III 11,00 : 6,00 %, Formula IV 15,00 : 2,00 %, Formula V 13,00 : 4,00 %, Formula VI 7,00 : 10,00 %, Formula VII 11,00 : 6,00 %.  Penentuan formula  optimum  menggunakan  metode Simplex  Lattice  Design menggunakan  program Design Expert. Formula optimum yang didapat, kemudian diuji stabilitas fisik meliputi viskositas, daya lekat, daya sebar dan pH. Stabilitas fisik diuji menggunakan metode One Way Anova dilanjutkan dengan Tuckey HSD . Uji iritasi dengan metode Human 4 hour patch test dan uji hedonik dengan memberikan pertanyaan kepada probandus . Hasil  yang  didapatkan  menunjukkan  aktivitas  farmakologi  ekstrak  etanol  bunga  krisan sebagai daya tolak nyamuk pada konsentrasi 1,2% dengan kombinasi optimum asam stearat dan setil alkohol  yaitu  asam  stearat  7%  dan  setil  alkohol  10%  mendapatkan  mutu  fisik  optimum menggunakan metode Simplex Lattice Design . Dapat disimpulkan formula optimum lotion ekstrak etanol bunga krisan tidak memiliki stabilitas mutu fisik yang baik berdasarkan parameter daya lekat, daya  sebar,  pH  dan  viskositas  selama  penyimpanan  30  hari  dan  formula  optimum lotion ekstrak bunga krisan tidak menyebabkan iritasi pada kulit dan cukup dapat diterima oleh probandus. Kata kunci : Bunga krisan; lotion ; asam stearat; setil alkohol; repelan

## ABSTRACT
Chrysanthemum  flower  ( Crhysanthemum  cinerariaefolium (Trevir.)  Vis.)  contains flavonoids,  saponins  and  polyphenols  which  are  efficacious  as  repellents  against Aedes  aegypti mosquitoes.  Lotions  with  a  combination  of  stearic  acid  and  cetyl  alcohol  are  used  to  improve
adhesion  and  thickening.  The  purpose  of  this  study  was  to  make  a  lotion  preparation  using  a combination  of  stearic  acid  and  cetyl  alcohol  to  obtain  optimum  physical  quality  and  obtain  an effective  concentration  of  chrysanthemum  flower  extract  as  a  repellant  lotion  against A.  aegypti mosquitoes and a safe effect on the skin.
Chrysanthemum  extraction  was  carried  out  using  70%  ethanol.  Chrysanthemum  ethanol extract was then dose oriented with a concentration of 1.2%. Chrysanthemum flower ethanol extract lotion formulations were made into 7 formulations using stearic acid and stearic acid bases, Formula I 9.00: 8.00%, Formula II 15.00: 2.00%, Formula III 11.00: 6.00 %, Formula IV 15.00: 2.00%, Formula V 13.00: 4.00%, Formula VI 7.00: 10.00%, Formula VII 11.00: 6.00%. Determination of the optimum formula using the Simplex Lattice Design method using the Design Expert program. The optimum formula is obtained, then tested for physical stability including viscosity, adhesion, dispersion and pH. Physical stability was tested using the One Way Anova method followed by Tuckey HSD. Irritation test with the method of Human 4-hour patch test and hedonic test by giving questions to probandus.
Chrysanthemum extract concentration of 1.2% has pharmacological activity that functions as a repellent power of mosquitoes. The optimum combination of stearic acid and cetyl alcohol, 7% stearic acid and 10% cetyl alcohol, get optimum physical  quality with the Simplex Lattice Design method. The optimum formula of chrysanthemum flower ethanol extract lotion does not have good physical quality stability based on the parameters of adhesion, dispersion, pH and viscosity during 30-day  storage.  The  lotion  irritation  test  results  obtained  an  irritation  index  of  0,  so  it  can  be concluded that the optimum formula of chrysanthemum extract lotion extract does not cause skin irritation and is quite acceptable to probandus.
Keywords : Chrysant flower; lotion; stearic acid; cetyl alcohol; repellent; A. aegypti

## 1. PENDAHULUAN
Demam  berdarah dengue (DBD)  adalah  penyakit  infeksi  disebabkan  oleh virus Dengue yang  ditularkan  dari  orang  ke  orang  melalui  gigitan  nyamuk, sebagaimana  yang  telah  diketahui  nyamuk  penular  (vektor)  penyakit  DBD  di Indonesia adalah A. aegypti, A. albopictus dan A. scutellaris , tetapi sampai saat ini yang menjadi vektor utama dari penyakit DBD adalah A. aegypti (1). Pemanfaatan tanaman di Indonesia, dapat dilakukan salah satunya dengan pembuatan  repelan  dari  bahan  alami. Penolak  topikal  atau  repelan  seperti  DEET memerlukan aplikasi konstan dan aplikasi ulang pada kulit, pakaian, atau permukaan lain untuk  mencegah  nyamuk  di  permukaan  kulit . Salah satu tanaman di Indonesia yang berkhasiat sebagai repelan adalah bunga krisan ( Crhysanthemum cinerariaefolium (Trevir.) Vis.) yang mengandung senyawa flavonoid, saponin (2) dan polifenol (3). Proses  pembuatan lotion dilakukan  dengan  mencampurkan  fase  air  dengan  fase minyak  beserta  emulgator.  Penambahan  variasi  konsentrasi  Asam  stearat  dalam formula  akan  meningkatkan  daya  sebar  (4),  di  mana  basis  ini  berfungsi  sebagai emulgator dan solubilizing agent menjadikan lotion lebih lunak. Setil alkohol selain berfungsi sebagai emulgator digunakan sebagai bahan pengental ( stiffening agent ) dapat  meningkatkan  viskositas lotion ,  sehingga  akan  meningkatkan  daya  lekat  di permukaan  kulit  lebih  lama  (5).  Kombinasi  asam  stearat  dan  setil  alkohol  untuk mengetahui kestabilan fisik lotion (6). Metode  SLD  ( Simplex  Lattice  Design )  digunakan  untuk  mendapatkan kombinasi  setil  alkohol  dan  asam  stearat  sebagai  emulgator  yang  menghasilkan formula dengan mutu fisik optimum. Formulasi ekstrak etanol bunga krisan dalam sediaan lotion dengan  kombinasi  setil  alkohol  dan  asam  stearat  sebagai  repelan,
diharapkan lebih dapat memiliki stabilitas fisik yang baik berdasarkan parameter uji daya lekat, daya sebar, pH dan viskositas dalam penyimpanan pada sediaan yang akan mempengaruhi aktivitas dan daya tolak nyamuk yang lebih lama.

## 2. METODE PENELITIAN 2.1. ALAT DAN BAHAN
Alat-alat penelitian yang digunakan adalah sangkar nyamuk ukuran 50 x 35 x 40 cm 3 . Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah yaitu tanaman bunga  krisan.  Bahan  lain  yang  digunakan  dengan  kualitas Pharmaceutical  Grade (Tingkat  Farmasi)  yaitu  asam  stearate(Merck),  setil  alcohol(Brataco),  paraffin cair(Merck),  gliserin(Merck),  triethanolamine(Merck),  asam  benzoat(Merck), aquadestilata(Brataco),  etanol 70%(Brataco),  silica  gel(Merck),  ammonia(Merck), hewan uji yang digunakan adalah nyamuk A. aegypti betina yang berumur 4 hari.

## 2.2. JALANNYA PENELITIAN

## Determinasi Tanaman
Dilakukan  determinasi  tanaman  untuk  menetapkan  kebenaran  tentang sampel yang digunakan dalam penelitian. Sampel yang digunakan adalah bunga dari tanaman krisan yang berkaitan dengan ciri-ciri morfologis yang ada pada tanaman krisan berdasarkan kepustakaan. Determinasi dilakukan di Laboraturium Biologi, Universitas Gadjah Mada (UGM), Yogyakarta.

## Pembuatan Serbuk
Menimbang  bunga  krisan  yang  telah  dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu 40 o C,  lalu  diserbuk  dengan  mesin  penyerbuk,  kemudian  diayak  dengan  ayakan nomor 40. Serbuk yang tidak terayak dihaluskan lagi sampai semua serbuk terayak.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Bunga Krisan
Menimbang  serbuk  kering,  dimasukkan  ke  dalam  botol  dan  ditambahkan pelarut etanol 70%. Campuran serbuk kering dan etanol 70% ditutup dan disimpan selama 5 hari dengan sesekali digojok 3 kali sehari berulang-ulang (7). Hasil yang diperoleh disaring dengan kain flannel, kemudian pelarut diuapkan dengan vacum rotary evaporator suhu 40 o C sampai diperoleh ekstrak kental.

## Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Etanol Bunga Krisan
Identifikasi ekstrak dilakukan dengan  menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Identifikasi flavonoid dilakukan dengan fase diam silica gel GF254 dan fase gerak gerak n-butanol: asam asetat: air (4: 1: 5) dengan pereaksi semprot uap ammonia yang akan memberikan warna kuning. Identifikasi saponin dilakukan dengan fase diam silica gel GF254 dan fase gerak kloroform: methanol: air (64: 50: 1) dengan peraksi Liebermen Burchardar yang akan memberikan warna biru-ungu. Identifikasi  polifenoldilakukan  dengan  fase  diam  silica  gel  GF254  dan  fase  gerak kloroform: etil asetat: asam formiat (0,5: 9: 0,5) dengan pereaksi FeCl 3 10% warna hitam (8).
Variasi Dosis Optimum Ekstrak Etanol Bunga Krisan Optimasi  ekstrak  bunga  krisan  menggunakan  basis lotion standar  dengan konsentrasi  optimal.  Berdasakan  penelitian  sebelumnya,  pada  konsentrasi  0,4%
dapat  membunuh  nyamuk  100%  (9).  Variasi  dilakukan  dengan  orientasi  dosis aktivitas  farmakologi  yang  berfungsi  sebagai  daya  tolak  nyamuk  dengan konsentrasi 0,1%; 0,2%; 0,4%; 0,6%; 0,8%, 1% dan 1,2%.
Formula Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan
Tabel 1. Formula lotion ekstrak etanol bunga krisan
Bahan F I (%) F II (%) F III (%) F IV (%) F V (%) F VI (%) F VII (%) Ekstrak bunga krisan 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 PEG 400 3,60 3,60 3,60 3,60 3,60 3,60 3,60 Asam stearat 9,00 15,00 11,00 15,00 13,00 7,00 11,00 Setil Alkohol 8,00 2,00 6,00 2,00 4,00 10,00 6,00 Propil paraben 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 Metil Paraben 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 Gliserin 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 TEA 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80 Aquadestilata ad 100 100 100 100 100 100 100
Formula lotion ekstrak etanol bunga krisan, dibuat dengan kombinasi asam stearat dan setil alkohol dengan konsentrasi yang berbeda.
Pembuatan Sediaan Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan Fase  minyak,  antara  lain  asam  stearat,  setil  alkohol  dan  propil  paraben, dimasukkan ke dalam cawan dan dipanaskan di atas penangas air dengan suhu 80 o C. Fase  air,  seperti  PEG  400,  gliserin,  TEA,  metil  paraben  dan  sisa  aquadestilata dimasukkan ke dalam cawan dan dipanaskan di atas penangas air dengan suhu 80 o C. Menuang fase minyak ke dalam fase air sedikit demi sedikit ke dalam mortir panas sambil  diaduk  secara  perlahan  sampai  terbentuk  massa  yang  kental,  hingga diperoleh  basis lotion yang  dingin  pada  suhu  40 o –45 o C,  kemudian  ditambahkan ekstrak bunga krisan, diaduk sampai homogen dan terbentuk lotion ekstrak etanol bunga krisan (10).
Uji Aktivitas Repelan Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan
Uji aktivitas repelan dilakukan dengan menggunakan semua formula lotion ekstrak etanol bunga krisan, sebagai repelan anti nyamuk A. aegypti diuji dengan menggunakan  alat  yang  terbuat  dari  sangkar  berukuran  50  x  35  x  40  cm 3 diberi lubang sirkuer berdiameter 15 cm, masing-masing sangkar berisi 25 ekor nyamuk A.  aegypti berjenis  kelamin  betina  berumur  4-5  hari  yang  telah  dipuasakan sebelumnya. Pengujian dilakukan pada lengan kiri dengan mencuci tangan terlebih dahulu menggunakan etanol, kemudian ditutupi dengan sarung tangan yang tidak dapat ditembus nyamuk. Sampel lotion ekstrak etanol bunga krisan, dioleskan pada lengan  kiri  probandus sebanyak 100  mg  secara  merata,  sedangkan  lengan  kanan sebagai kontrol positif menggunakan produk yang mengandung DEET di pasaran seperti  produk  bermerk  X  (11).  Pengujian  sampel  ekstrak  dilakukan  seperti
perlakuan  pertama,  dengan  kontrol  negatif  menggunakan  basis lotion. Pengujian dilakukan setiap 1 jam sekali selama 6 jam berturut-turut.
Pengamatan jumlah nyamuk yang hinggap dilakukan selama 10 detik, catat jumlah  nyamuk  yang  hinggap,  kemudian  lengan  digerakkan  untuk  mengusir nyamuk  yang  hinggap  dan  selanjutnya  dipaparkan  kembali  selama  10  detik berikutnya.  Kegiatan  ini  dilakukan  10  kali  ulangan  pada  setiap  lengan,  baik  yang diberi  perlakuan  maupun  kontrol  (12).  Perlakuan  setiap  masing-masing konsentrasi  ekstrak  dilakukan  replikasi  sebanyak  4  kali  setiap  jamnya.  Selama pengujian, lengan tidak dicuci dan perlakuan tidak ditambah atau dikurangi.
Pengamatan  dan  perhitungan  dilakukan  untuk  mengetahui  daya  proteksi. Daya proteksi adalah lama waktu sediaan yang masih menunjukkan adanya daya repelan >90% proteksi. Dihitung menggunakan rumus:
Daya proteksi = 𝐾 − 𝐾 𝐾 x 100 %
Keterangan: K = jumlah nyamuk pada lengan kontrol negatif P = jumlah nyamuk yang hinggap pada perlakuan
Uji Organoleptis
Pemeriksaan  organoleptis  dilakukan  dengan  memeriksa  fisik  dari  sediaan lotion yang  sudah  bercampur  dengan  basis  meliputi  warna,  bau,  dan  konsistensi (13).

## Uji homogenitas
Dilakukan dengan cara sediaan lotion ekstrak bunga krisan yang telah dibuat, masing-masing formula ditimbang 1-gram dan dioleskan sekeping kaca atau bahan transparan yang cocok, maka harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat butiran-butiran kasar (13).

## Uji Viskositas
Dilakukan dengan cara sediaan lotion ekstrak bunga krisan yang telah dibuat, masing-masing  formula  ditimbang  1  gram,  kemudian  diukur  dengan  viskositas menggunakan  viscometer  VT-04. Lotion dimasukkan  ke  dalam  cup  kemudian portable  viscometer dipasang,  dihidupkan  setelah  konstan  kemudian  angka  yang ditunjukkan pada jarum dicatat (13).

## Uji daya sebar
Dilakukan dengan cara Menimbang lotion 1 gram, diletakkan di tengah kaca bundar  dan  ditutup  dengan  kaca  penutup  yang  sudah  ditimbang  dan  biarkan  1 menit.  Diameter lotion yang  menyebar  (dengan  mengambil  panjang  rata-rata diameter  dari  beberapa  sisi)  diukur  kemudian  ditambahkan  50-gram,  100-gram, 150-gram,  200  gram,  sebagai  beban  tambahan.  Setiap  penambahan  beban didiamkan selama 1 menit setelah diameter lotion yang menyebar dicatat seperti yang sebelumnya (14).
Uji daya lekat
Uji daya lekat dilakukan dengan menimbang lotion 1 gram, dilekatkan di atas gelas  obyek  kemudian  ditekan  dengan  beban  1000-gram  selama  2,5  menit kemudian pasang gelas obyek pada alat tes setelah itu lepaskan beban seberat 20- gram dan dicatat waktunya hingga kedua obyek tersebut terlepas diulangi cara di atas pada setiap formula masing-masing 3 kali (15).
Penentuan tipe emulsi.
Metode pengenceran dilakukan lotion diencerkan dengan aquadest, apabila lotion menyebar  dan  tercampur  dengan  air,  maka  terjadi  fase  minyak  dalam  air (M/A)  Metode  pewarnaan  dilakukan lotion ditambahkan  pewarna Methylen  Blue yang  larut  air,  akan  didaptkan  hasil  emulsi  bewarna  biru  menunujukkan  bahwa emulsi mempunyai tipe M/A (16).
Uji pH lotion
Dilakukan  menggunakan  kertas  indikator  pH  untuk  melihat  tingkat keasaman  sediaan lotion dan  menjamin  sediaan  agar  tidak mengakibatkan  iritasi pada kulit. pH kulit manusia berada dalam rentang asam antara 4,5–6,5 (17).
Uji Iritasi
Uji iritasi dilakukan menggunakan metode Human 4-hour patch test, secara tertutup oleh 6 probandus (18). Bahan penutup terdiri dari kertas saring berbentuk bulat dengan diameter 2,5 cm, alumunium foil dan plaster. Lotion optimum ekstrak etanol bunga krisan diambil 0,1-gram untuk dioleskan pada permukaan lengan atas bagian dalam dengan luas 4 cm 2 secara merata, kemudian ditutup dengan penutup dan dilakukan juga basis lotion. Kulit tempat aplikasi diamati pada 0, 24, 48 dan 72 jam  (19).  Penilaian  derajat  iritasi  dengan  memberi  skor  0  sampai  3,  tergantung tingkat keparahan reaksi eritema dan edema pada kulit yang terlihat.

## Analisis hasil
Penentuan  formula  optimum  dilakukan  dengan  metode Simplex  Lattice Design menggunakan Software Design Expert. Data hasil pengujian mutu fisik lotion yang meliputi uji viskositas; pH; daya sebar dan daya lekat, dilakukan perbandingan stabilitas  fisik  selama  awal  pembuatan  sediaan  sampai  dengan  penyimpanan dianalisis  dengan  uji Mann  Whitne y  dengan  taraf  kepercayaan  0,05%.  Aktivitas repelan  dianalisis  dengan  metode  (Kolmogorov-smirnov),  data  yang  terdistribusi normal  dan  homogen  dilanjutkan  dengan  analisis  data  dengan one  way ANOVA ( Analysis of Variance ) dengan taraf sig. <0,05, jika berbeda bermakna dilakukan uji lanjut dengan menggunakan Uji Post Hoc Tuckey.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Etanol Bunga Krisan
Identifikasi  ekstrak  etanol  bunga  krisan  dilakukan  dengan  metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) yang menggunakan fase diam silika gel GF 254 dan fase  gerak  n-butanol:  asam  asetat:  air  (4:  1:  5)  menunjukkan  bahwa  hasil  positif berwarna kuning (20) mengandung senyawa flavonoid dilanjutkan dengan pereaksi semprot uap ammonia, diperoleh nilai Rf 0,71 yang menunjukkan bahwa ekstrak bunga krisan mengandung senyawa aktif kuersetin sesuai dengan jurnal penelitian sebelumnya  (25).  Hasil  positif saponin  ekstrak etanol  bunga  krisan  diidentifikasi KLT  yang  menggunakan  fase  diam  silika  gel  GF  254  dan  fase  gerak    kloroform:
methanol: air (64:50:1) dilanjutkan pereaksi Liebermen burchardar menunjukkan hasil  positif berwarna  biru  ungu (20)  dengan  nilai  Rf  0,82.  Hasil  positif polifenol ekstrak etanol bunga krisan diidentifikasi KLT yang menggunakan fase diam silika gel  GF  254  dan  fase  gerak  Kloroform:  etil  asetat:  asam  formiat  (0,5:9:0,5) menunjukkan hasil positif warna hitam (21) setelah disemprot pereaksi FeCl 3 10% dengan  nilai  Rf  0,41.  Berdasarkan  pengujian  identifikasi  kandungan  kimia  yang dilakukan  ekstrak  etanol  bunga  krisan  mengandung  senyawa  aktif  flavonoid, saponin dan polifenol yang menunjukkan memperoleh hasil sesuai dengan jurnal penelitian  sebelumnya  (3).  Senyawa  fenolik  dalam  ekstrak  etanol  telah diidentifikasi sebagai antioksidan alami krisan salju (26) .
Tabel 2. Hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Etanol Bunga Krisan Senyawa Fase Gerak Pereaksi Semprot Pustaka Hasil Percobaan Rf sampel Ekstrak ± SD Flavonoid n-butanol: asam asetat: air (4: 1: 5) uap amonia Kuning (20) Kuning 0,71 ± 35,5 Saponin kloroform: methanol: air (64:50:1) Liebermen burchardar Biru- Ungu (20) Biru-ungu 0,82 ± 41 Polifenol Kloroform: etil asetat: asam formiat (0,5:9:0,5) FeCl 3 10% Hitam (21) Hitam 0,41 ±20,5
Uji Efektivitas Repelan Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan Lama waktu sediaan menunjukkan adanya daya repelan >90% proteksi (21). Hasil  daya  proteksi lotion ekstrak  etanol  bunga  krisan  menunjukkan  persentase daya  proteksi  efektivitas  repelan  konsentrasi  yang  mengandung  1,2%  ekstrak bunga  krisan  mempunyai  rata-rata  daya  proteksi  yang  tertinggi  sebesar  85,21%. Kontrol positif menggunakan produk yang ada di pasaran yang mengandung DEET 15%  ( N,N-Diethyl-m-Toluamide ).  Piretroid  adalah  insektisida  dan  mungkin  juga memiliki sifat penolak serangga dan umumnya tidak berbahaya bagi manusia (26). Permethrin  adalah  zat  yang  bertindak  mirip  dengan  pyrethrum  alami  yang diekstrak dari bunga krisan (26). Permethrin adalah senyawa penolak sintetis yang diterapkan pada bahan tekstil sebagai penolak sintetis untuk mengurangi populasi nyamuk (27).
Gambar 1. Uji Repelan terhadap Nyamuk A. aegypti
Tabel 3. Daya proteksi lotion sebagai repelan terhadap nyamuk A. aegypti Konsentrasi (%) Daya proteksi (%) Rata- rata ± SD 1 2 3 0,1% 14,78 18,87 17,13 16,93 ± 2,05 0,2% 19,95 20,29 20,22 20,15 ± 0,18 0,4% 42,05 46,53 49,08 45,89 ± 3,56 0,6% 51,27 46,51 42,99 46,92 ± 4,16 0,8% 61,07 61,65 56,28 59,67 ± 2,95 1% 84,06 83,11 86,56 84,58 ± 1,78 1,2% 84,07 84,66 86,90 85,21 ± 1,49 Kontrol (-) 14,76 16,58 13,62 14,99 ± 1,49 Kontrol (+) 93,132 93,735 92,455 93,11 ± 0,64

## Hasil Penetapan Mutu Fisik menggunakan Simplex Lattice Design
Profil daya sebar memperoleh persamaan di atas (a), hasil pengukuran daya sebar lotion bunga krisan dari persamaan Simplex Lattice Design dapat diperoleh kesimpulan  bahwa konsentrasi  setil  alkohol  sangat  berpengaruh  terhadap  daya sebar lotion (23).
Gambar 2. Profil daya sebar
Y = 262 (A) + 323 (B) -506 (A) (B)
Gambar 3. Profil Viskositas
(b) Y = 3,05 (A) + 3,02 (B) + 3,7 (A)(B)
Profil  viskositas  memperoleh  persamaan  di  atas  (b),  semakin  banyak proporsi asam stearat, dan semakin banyak setil alkohol yang ditambahkan dalam formula  akan  menaikkan viskositas lotion .  Hasil  pengukuran  viskositas  sediaan lotion bunga  krisan  melalui persamaan Simplex  Lattice  Design mengetahui kekentalan lotion dapat diperoleh bahwa semakin tinggi konsentrasi setil alkohol, maka  viskositas  sediaan lotion semakin meningkat  (22).  Berdasarkan  hasil pengujian tersebut dapat disimpulkan bahwa uji viskositas sediaan lotion ekstrak etanol bunga krisan sesuai dengan jurnal sebelumnya (6).
Profil  daya  lekat  memperoleh  persamaan  di  atas  (c),  persamaan  di  atas didapatkan  data  bahwa  jenis stiffening  agent sangat  berpengaruh  terhadap  daya lekat yaitu di karenakan penambahan setil alkohol dapat meningkatkan viskositas (lebih kental), sehingga dapat meningkatkan waktu perlekatan lotion (23).
Gambar 4. Daya Lekat (c) Y = 28,4 (A) + 21,2 (B) - 56,8 (A) (B) Gambar 5. Uji pH
(d) Y = 4,77 (A) + 4,66 (B) + 1,74 (A) (B)
Profil  pH  memperoleh  persamaan  di  atas  (d),  persamaan  di  atas  bahwa pengujian  pH lotion bunga  krisan  dengan  penambahan  setil alkohol  dan  asam stearat dapat berpengaruh terhadap nilai pH lotion bunga krisan. Hasil Pengujian Stabilitas Fisik Formula Optimum Lotion
Tabel 4. Uji Viskositas Formula Optimum Lama Penyimpanan Viskositas (dPas) (cP) Hari 9 200 20000 Hari 16 250 25000 Hari 23 150 15000 Hari 30 100 10000 Rata-rata 175 17500
Hasil  uji  Viskositas lotion formula  optimum  di  atas,  menunjukkan  bahwa viskositas sediaan mengalami penurunan saat penyimpanan pada hari ke 23. Rata- rata viskositas yang dihasilkan sebesar 17500 cP, memenuhi syarat SNI 16-4399- 1996, yaitu in range 2.000 – 50.000 cP pada jurnal sebelumnya (23).
Tabel 5. Uji Daya Sebar Formula Optimum
Lama Penyimpanan Daya Sebar (cm) Hari 9 5,21 Hari 16 5,93 Hari 23 6,53 Hari 30 6,86 Rata-rata 6,13
Hasil  uji  daya  sebar lotion formula  optimum,  dengan  bertambahnya  setil alkohol  menunjukkan  bahwa  diameter  daya  sebar,  table  di  atas  daya  sebar mengalami perubahan dari hari 9 – hari 30 diperoleh rata-rata daya sebar 6,13 cm, bahwa  hasil  yang  diperoleh  masuk  dalam  range  daya  sebar  5-7  cm  yang menunjukkan konsistensi semi solid yang sangat nyaman dalam penggunaan.
Tabel 6. Uji Daya Lekat Formula Optimum
Lama Penyimpanan Daya Lekat (detik) Hari 9 34 Hari 16 34 Hari 23 36 Hari 30 33 Rata-rata 34,25
Hasil uji daya lekat lotion formula optimum, menunjukkan bahwa daya lekat lotion optimum  ekstrak  etanol  bunga  krisan  menghasilkan  rata-rata  daya  lekar 34,25 detik memenuhi syarat untuk daya lekat sediaan topikal adalah tidak kurang dari 4 detik (24).
Tabel 7. Uji pH Formula Optimum
Lama Penyimpanan pH Hari 9 4,67 Hari 16 4,63 Hari 23 4,71 Hari 30 4,62 Rata-rata 4,65
Hasil uji pH lotion formula optimum dilakukan selama 30 hari, menghasilkan lotion yang memiliki rata-rata pH sebesar 4,65 yang mengalami perubahan selama penyimpanan. Nilai pH tersebut masih berada pada range pH normal untuk kulit, karaena pH kulit tersebut rangenya 4,5-6,5 (23) .
Pengamatan fisik lotion termasuk pengamatan organoleptik, pengukuran pH, pengukuran  viskositas  (28) . Hasil  pengamatan  organoleptis lotion formula optimum, diperoleh warna lotion putih kecoklatan. Bau dari masing-masing formula lotion dengan  aroma  khas  bunga  krisan  dan  konsistensinya  agak  kental. Pengamatan homogenitas lotion formula optimum, menunjukkan bahwa lotion yang dihasilkan tercampur homogen, tidak menunjukkan adanya gumpalan.
Hasil Pengujian Iritasi dan Hedonik Lotion Ekstrak Etanol Bunga Krisan pada Kulit Manusia
Perlakuan  uji  iritasi  dilakukan  dengan  metode Human  4-hour  patch  test, secara tertutup oleh 6 probandus. Sampel lotion dioleskan dengan kulit seseorang untuk  mengukur  iritasi  dan  sensitivitas  kulit.  Skor  iritasi  dermal  dievaluasi berdasarkan jenis dan tingkat keparahan lesi yang dihasilkan (28).
Tabel 8. Hasil Uji Iritasi Lotion Edema Eritema Probandus 1 0 0 Probandus 2 0 0 Probandus 3 0 0 Probandus 4 0 0 Probandus 5 0 0 Probandus 6 0 0

## Tabel 9. Hasil Uji Hedonik Lotion
Tekstur Warna Aroma Suka Kurang Suka Tidak Suka Suka Kurang Suka Tidak Suka Suka Kurang Suka Tidak Suka Probandus 1 √ - - - - √ √ - - Probandus 2 - - √ - √ - - √ - Probandus 3 √ - - - √ - √ - - Probandus 4 - √ - - - √ √ - - Probandus 5 - √ - √ - - - - √ Probandus 6 √ - - - √ - - - √ Keterangan: Suka : 7 Kurang suka
: 6 Tidak suka : 5
Hasil  uji  iritasi lotion ekstrak  etanol  bunga  krisan  bahwa  keenam sukarelawan  uji  memperoleh  indeks  iritasi  0  edema  maupun  eritema  (reaksi kemerahan)  terhadap  semua  bahan  uji.  Berdasarkan  hal  tersebut,  ekstrak  etanol bunga  krisan  pada  konsentrasi  1,2%  tidak  menyebabkan  reaksi  kulit  dan berdasarkan  uji  Hedonik  yang  diberikan  pada  masing-masing  probandus  cukup dapat diterima.

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan yang telah dipaparkan, maka dapat disimpulkan bahwa Konsentrasi ekstrak bunga krisan sebesar 1,2% memiliki memiliki daya proteksi yang lebih tinggi sebagai lotion repelan terhadap nyamuk A. aegypti. Ekstrak bunga krisan kurang efektif sebagai lotion repelan dibandingkan dengan kontrol positif Autan® terhadap nyamuk A. aegypti dengan daya proteksi 85,21% kurang dari 90% proteksi. Kombinasi asam stearat dan setil alkohol dengan konsentrasi  asam  stearat  7%  dan  setil  alkohol  10%  dalam lotion ekstrak  bunga krisan  untuk  mendapatkan  mutu  fisik  optimum  dengan  metode Simplex  Lattice Design. Formula  optimum lotion ekstrak  etanol  bunga  krisan  memiliki ketidakstabilitas daya lekat, daya sebar, pH dan viskositas selama penyimpanan 30 hari. Formula lotion ekstrak bunga krisan tidak menyebabkan iritasi pada kulit dan cukup  dapat  diterima  oleh  probandus.  Saran  kepada  peneliti  selanjutnya  perlu dilakukan  uji  efektivitas lotion ekstrak  bunga  krisan  terhadap  jenis  nyamuk  lain. Perlu dilakukan orientasi konsentrasi optimal.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
(1) Fadlilah ALN, Cahyati WH dan Windraswara R. 2017. Uji Daya Proteksi Ekstrak Daun Pepaya ( Carica papaya L ) dalam Sediaan Lotion dengan Basis PEG 400 sebagai Repellent terhadap A. aegypti. Jurnal Care 5 (3).

## DOI: https://doi.org/10.33366/cr.v5i3.668
(2) Yeasmin  D et  al .  2016.  Phytochemical  Analysis  and  Antioxidant  Activity  of Three  Flower  Colours  Chrysanthemum  morifolium  Ramat. Intenational Journal of Biosciences (IJB) 9(2) : 69-77.
DOI: http://dx.doi.org/10.12692/ijb/9.2.69-77
(3) Mayangsari I, Umiana T, Sidharti L, Kurniawan B. 2015. The Effects of Krisan Flower ( Chrysanthemum morifollium ) Extract as Ovicide of Aedes aegpyti ’s Egg. Jurnal majority 4(5): 29-34.
(4) Megantara INAP et al . 2017. Formulasi Lotion Ekstrak Buah Rasberry ( Rubus rosifolius ) dengan Variasi Konsentrasi Trietanolamin sebagai Emulgator serta Uji  Hedonik  terhadap Lotion.  Jurnal  Farmasi  Udayana 6  (1):  1-5. DOI:10.24843/JFU. 2017.v06. i01.p01
(5) Murrukmihadi  M,  Ananda  R,  Handayani  TU.  2012.  Pengaruh  Penambahan Carbomer  934  dan  Setil  Alkohol  sebagai  Emulgator  dalam  Sediaan  Krim Ekstrak  Etanolik Bunga  Kembang Sepatu ( Hibiscus rosa-sinenis L.) terhadap Sifat  Fisik  dan  Aktivitas  Antibakteri  pada Staphylococcus aureus .  Jurnal Farmaseutik 8 (2): 152-156. DOI.org/10.22146/farmaseutik. v8i2.24069
(6) Nunik Kurniasih. 2016. Formulasi Sediaan Krim Tipe M/A Ekstrak Biji Kedelai ( Glycine max L): Uji Stabilitas Fisik dan Efek Pada Kulit. [Skripsi]. Surakarta: Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.
(7) Voigt  R.  1995. Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi. Diterjemahkan  oleh: Soendani Soendani Noerrono, Edisi V, Cetakan Kedua. Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada Press. hlm 366-367.
(8) Marliana SD, Suryanti V, Suyono. Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis  Tipis  Komponen  Kimia  Buah  Labu  Siam  ( Sechium  edule  Jacq.  Swartz ) dalam Ekstrak Etanol. Jurnal Biofarmasi 3 (1): 26-31.
DOI: http://dx.doi.org/10.52434/jfb.v11i2.859
(9) Simanjuntak  RE.  2006.  Pengaruh  pemberian  beberapa  konsentrasi  hasil maserasi bunga krisan ( Chryshanthemum cinerariaefolium ). [Skripsi]. Medan: Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Sumatera Utara.
(10) Mardikasari  SA,  Mallarangeng  ANTA,  Zubaydah  WOS,  Juswita  E.  2017. Formulasi  dan  Uji  Stabilitas  Lotion  dari  Ekstrak  Etanol  Daun  Jambu  Biji ( Psidium guajava L.) Sebagai Antioksidan. Jurnal Farmasi, Sains dan Kesehatan 3 (2): 28-32. DOI: http://dx.doi.org/10.33772/pharmauho.v3i2.3542.
(11) Pebrianti,  Yusriadi,  Faustine  I.  2015.  Uji  Aktivitas  Repelan Lotion Ekstrak Etanol Kulit Buah Langsat ( Lansium parasiticum Osbeck.) terhadap Nyamuk A. aegypti. Journal of Pharmacy 1 (2): 113 – 120.
DOI.org/10.22487/j24428744. 2015.v1.i2.6242
(12) Kardinan A dan Dhalimi A. 2010. Potensi adas ( Foeniculum vulgare ) sebagai bahan aktif lotion anti nyamuk demam berdarah ( A. aegypti ). Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik 21(1): 61-68. DOI: http://dx.doi.org/10.21082/bullittro.v21n1.2010.%25p
(13) Rahman  AG,  Astuti  IY,  Dhian  BA.  2013.  Formulasi Lotion Ekstrak  Rimpang Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) dengan Variasi Konsentrasi Trietanolamin sebagai Emulgator dan Uji Iritasinya. Pharmacy 10 (1): 41-54. DOI: 10.30595/pharmacy. v10i1.780
(14) Caesar  RY,  Hapsari  I,  Dhiani  BA.  2014.  Formulasi  dan  Aktivitas  Antibakteri Lotion Minyak Atsiri Buah Adas ( Foeniculum vulgare Mill). Media Farmasi 11 (1): 41-54. DOI: http://dx.doi.org/10.12928/mf.v11i1.1396
(15) Trilestari.  2002.  Hand  and  Body  Lotion:  Pengaruh  Penambahan  Nipagin, Nipasol  dan  Campuran  Keduanya  Terhadap  Stabilitas  Fisika  dan Efektifitasnya.  [Skripsi].  Yogyakarta:  Fakultas  Farmasi,  Universitas  Gadjah Mada.
(16) Anief M. 2000. Ilmu Meracik Obat Teori dan Praktek . Yogyakarta: UGM Press.
(17) Runadi D, Ridwan S, Sriwidodo. 2016. Aktivitas dan Formulasi Repelan Losio Ekstrak Etanol Limbah Hasil Penyulingan Minyak Nilam ( Pogostemon cablin Benth.) terhadap Nyamuk A. aegypti. Jurnal Farmaka 14 (2): 26-40. DOI: https://doi.org/10.24198/jf.v14i2.9288
(18) Jirova D et al . 2007. Comparison of human skin irritation and photo-irritation patch test data with cellular in vitro assays and animal in vivo data. AATEX 14: 359-365. DOI: 10.1111/j.1600-0536.2009. 01640.x
(19) Atif et al . 2013. In Vivo Skin Irritation Potential of a Cream Containing Moringa oleifera Leaf Extract. African Journal of Pharmacy and Pharmacology 7(6): 289- 293. DOI:10.5897/AJPP12.890
(20) Allen,  LV.  2009. Handbook  of  Pharmaceutical  Excipient,  Sixth  Edition .  USA: Pharmaceutical Press. hlm 697-699
(21) Nirwana WOC, Cahyani C, Nurhadianty V. 2016. Kajian Daya Proteksi Produk Repelan  Nyamuk  Demam  Berdarah  Dengue  dalam  Bentuk Lotion berbasis Minyak Atsiri Lokal (Minyak Sereh Wangi dan Minyak Nilam). Jurnal Kimia 11 (1): 1- 6.
(22) Setiawati  E,  Nursal  FK,  Elfiyani  R.  2014.  Pengaruh Peningkatan  Konsentrasi Setil  Alkohol  sebagai  Pengental  terhadap  Stabilitas  Fisik  Krim  tipe  M/A Ekstrak Rimpang Jahe Gajah (Zingiber Officinale R. ) [Skripsi] . Jakarta: Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah.
(23) Nur  Saadah  Daud,  Musdalipah  dan  Idayati.  2018.  Optimasi  Formula Lotion Tabir Surya Ekstrak Kulit Buah Naga Super Merah ( Hylocereus costaricensis) menggunakan Metode Desain D-Optimal. Jurnal Sains Farmasi & Klinis 5(2): 72. DOI:10.25077/jsfk.5.2.72-77.2018
(24) Ulaen et  al .  2012.  Pembuatan  Salep  Anti  Jerawat  dari  Ekstrak  Rimpang Temulawak ( Curcuma xanthorrhiza Roxb.). Jurnal Ilmiah Farmasi 3(2): 45-49.
(25) Sun QL et al. 2010. Flavonoids and  Volatiles in Chrysanthemum morifolium ramat  Flower  from  Tongxiang  County  in  China.  African  Journal  of Biotechnology 9 (25) : 3817 – 3821
(26) E.  Perdum et  al. ,  “An  analytical  approach  for  extraction  and  detection  of permethrin from functionalized textile materials,” Ind. Textila , vol. 70, no. 2, pp. 165–169, 2019, doi: 10.35530/it.070.02.1600
(27) Aguiar, A. R., Alvarenga, E. S., Oliveira, R. P., Carneiro, V. M. T., & Moura, L. G. (2018). Syntheses of epoxides, and structural analysis of (E)–N-hexyl-3-(trans- 3-methyloxiran-2-yl)prop-2-enamide  by  spectroscopic  techniques  and  DFT calculations. Journal of Molecular Structure , 1165 , 312–317. https://doi.org/10.1016/j.molstruc.2018.04.013
(28) I. Sopyan, R. D. Permata, D. Gozali, and I. S. K. Syah, “Formulation of lotion from black tea extract (Camellia sinensis linnaeus) as sunscreen,” Int. J. Appl. Pharm. , vol. 11, no. 1, pp. 205–209, 2019, doi: 10.22159/ijap.2019v11i1.29564.