## Potensi Antibakteri Ekstrak Etanol dan Etil Asetat Daun Benalu
Dendrophtoe pentandra terhadap Klebsiella pneumoniae Penghasil ESBL
ABSTRAK ABSTRACT

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition) ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Antibacterial Potency of Dendrophtoe petandra Ethanol and Ethyl Asetat Leaves Extract against ESBL Producting Klebsiella pneumoniae
Ardy Prian Nirwana dan Indah Tri Susilowati
*
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta *Corresponding author: ardypriannirwana@gmail.com
Volume 10, No. 1, Maret 2017
Antibiotik yang diberikan berlebihan, tidak adekuat dan monoton, dapat mengurangi efektifitas antibiotik, sehing- ga menimbulkan resistensi terutama pada bakteri. Resitensi Klebsiela sp terhadap antibiotik disebabkan salah satunya karena  mampu  menghasilkan  enzim  extended  spectrum  β-lactamase  (ESBL).  ESBL  merupakan  enzim  yang  dapat menghidrolisis penicillin, cephalosporin generasi I, II, III dan aztreonam. Dendropthoe pentandra mengandung senyawa metabolit sekunder yang bersifat bakterisida. Penelitian ini bertujuan mengetahui potensi antibakteri ekstrak etanol dan etil asetat daun D.pentandra terhadap K.pneumoniae penghasil ESBL.
Hasil skrining fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol dan etil asetat D.pentandra, keduanya mengandung senyawa antibakteri seperti flavonoid, alkaloid, terpenoid, tanin, dan saponin. Konsentrasi hambat tumbuh minimum untuk ekstrak etanol dan etil asetat adalah 50% dengan rata-rata diameter zona hambat radikal secara berturut-turut adalah  7,25  mm  dan  7,38  mm.  Uji  sensibilitas  menunjukkan  bahwa  bakteri  resisten  terhadap  antibiotik  cefotaxim, ceftazidim, dan ceftriaxone tetapi sensitif terhadap ciprofloxacin. Ekstrak etanol dan etil asetat D.pentandra pada kon- sentrasi 100% memiliki potensi antibakteri terhadap K.pneumonia lebih baik dibanding kontrol antibiotik beta-laktam dengan zona penghambatan radikal secara berturut-turut adalah 13,55 mm dan 15,38 mm.
Daun  D.  pentandra  diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  dan  etil  asetat.  Kan- dungan  antibakteri  diidentifikasi  secara  kualitatif    dengan  uji  skrining  fitokimia.  Desain  penelitian  adalah  deskriptif eksperimental dengan mengukur zona hambat radikal. Uji pendahuluan dan daya hambat bakteri dilakukan dengan me- tode difusi cakram dikomparasikan dengan kontrol antibiotik cefotaxim, ceftazidim, ceftriaxone dan ciprofloxacin.
Kata kunci: ekstrak etanol, ekstrak etil asetat, daun benalu Dendrophtoe pentandra, K.pneumoniae, ESBL
Antibiotics were given excessive, inadequate and monotonous, can reduce the effectiveness of antibiotics, causing resistance, especially in  bacteria. Klebsiela sp  antibiotic-resistant infections caused  one  of  them  for  being  able  to produce  the  enzyme  extended  spectrum  β-lactamase  (ESBL).  ESBL  is  an  enzyme  that  can  hydrolyze  penicillin, cephalosporin generation I,  II,  III  and  aztreonam.  Dendropthoe  pentandra contain secondary metabolites that  are bactericidal. This study aims to determine the antibacterial potency of ethanol and ethyl acetate extracts of the leaves D.pentandra against ESBL-producing K.pneumoniae.
Phytochemical screening results showed that ethanol and ethyl acetate extracts D.pentandra, both containing anti- bacterial  compounds  such  as  flavonoids,  alkaloids,  terpenoids,  tannins  and  saponins.  The  minimum  growth  inhibitory concentration for ethanol and ethyl acetate extract is 50% with an average diameter of inhibitory zone radical respectively are  7.25  mm  and  7.38  mm.  Sensibility  test  showed  that  bacteria  resistant  to  the  antibiotic  cefotaxime,  ceftazidim,  and ceftriaxone but sensitive to ciprofloxacin. The ethanol extract and ethyl acetate D.pentandra at 100% concentration has antibacterial activity against K. pneumoniae better than control beta-lactam antibiotics with a zone of inhibition of ra- dical respectively is 13.55 mm and 15.38 mm.
D. pentandra leaf mistletoe a extracted using maceration method with 96% ethanol and ethyl acetate. The content of antibacterial identified qualitatively phytochemical screening test. The study design was descriptive experimentally by measuring the inhibition zone radical. Preliminary test and the inhibition of bacteria carried by disc diffusion method dikomparasikan control antibiotic cefotaxime, ceftazidim, ceftriaxone and ciprofloxacin.
Keywords: ethanol extract, ethyl acetate extract, Dendrophthoe pentandra leaves, K.pneumoniae, ESBL

## PENDAHULUAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui potensi antibakteri ekstrak etanol dan etil asetat daun D.pentandra terhadap  pertumbuhan K.pneumonia dikomparasikan dengan antibiotik kontrol uji pembentukan ESBL pada bakteri se- suai  standar  CLSI  ( Clinical  and  Laboratory Standars Institute ) (2011), serta antibiotik kon-
Antibiotik  dikonsumsi  secara  berlebihan, tidak  memadai,  monoton  dapat  menimbulkan resistensi  terutama  pada  bakteri  gram  negatif. Bakteri gram negatif yang paling sering diisolasi di  ICU  anak  di  antaranya  adalah Escherichia coli dan Klebsiella pneumoniae . Sumber bakte- remia  tersering  adalah  infeksi  saluran  kemih dan  pneumonia. Klebsiela  sp merupakan  salah satu bakteri dari famili Enterobacteriaceae peng- hasil  enzim  extended  spectrum  β-lactamase (ESBL)  yang  resisten  terhadap  cefotaxime  di Jerman pada tahun 1983 (Adisasmito, 2004). ESBL  berasal  dari  mutasi β -laktamase  yang menyebabkan  peningkatan  aktivitas  enzimatik β-lactamase  sehingga  enzim  ini  dapat  menghi - drolisis chepalosporin generasi III dan aztreonam (Pajirau, 2010). Resistensi mikroba yang meluas terhadap  obat-obatan  mendorong  pentingnya penggalian sumber antimikroba dari bahan alam. Tanaman obat diketahui potensial dikembangkan lebih  lanjut  pada  penyakit  infeksi  namun  masih banyak  yang  belum  dibuktikan  aktivitasnya  se- cara  ilmiah  (Agustiningsih,  2010).  Salah  satu sumber  alam  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai obat  adalah  tanaman  benalu Dendropthoe  pen- tandra .
Dendrophtoe pentandra merupakan jenis be- nalu yang masuk dalam suku Loranthaceae yang dapat  memarasit  berbagai  jenis  tumbuhan  inang, semak  maupun  pohon  (Sunaryo,  2008).  Daun D.pentandra memiliki  khasiat  antibakteri,  hal ini dibuktikan pada penelitian Anita et. al ., (2014), dimana  ekstrak  metanol  daun D.  pentandra me- ngandung  senyawa  yang  bersifat  bakterisida  ter- hadap  bakteri  di  antaranya  adalah  flavonoid,  al- kaloid, steroid, polifenol, dan kuinon.
trol positif yang digunakan adalah ciprofloxacin.
Daun benalu Dendrophtoe pentandra , inku- bator,  ohse,  pembakar  spirtus, object  glass, mi- kroskop, neraca, gelas ukur, pipet ukur, saringan, batang pengaduk, clinic pipet, paper disc, cipro- floxacin,  ceftriaxon,  ceftaszidime,  cefotaxime, DMSO,  sampel  bakteri K.pneumoniae penghasil ESBL, Mac  Conkey ,  media  uji  biokimia,  kovac, barried, metyl red, FeCl  10%, KOH 40%, Stan- 3 dard Mc farland no. 0,5, Nutrient agar , aquades , Nutrient  broth , Nutrient  agar  plate ,  NaCl  0,9% steril,  HCl  2M,  NaCl,  reagen  Wagner,  reagen Dogendarf, reagen Meyer HCl pekat, etanol 96%, etil asetat.

## BAHAN DAN METODE
Alat dan bahan

## Cara Kerja
Persiapan Sampel
Sampel  daun D.pentandra dikeringkan  di bawah sinar matahari secara tidak langsung de- ngan cara ditutup dangan kain hitam selama 6 hari, kemudian dilanjutkan di dalam inkubator
o dengan suhu 50 C (Andriyani et. al ., 2010).

## Ekstraksi
Daun D.pentandra kering  digiling  hingga halus  dan  diayak,  selanjutnya  ditimbang.  Seba- nyak masing-masing 100 gram sampel yang telah dihaluskan, dimaserasi dalam 750 ml etanol 96% dan etil asetat selama 5 hari sambil diaduk-aduk. Dilakukan  penyaringan  dengan  kertas  saring. Ekstrak  yang  diperoleh  dilakukan  pengeringan dengan Rotavapour hingga  kental.  Hasil  ekstrak berwarna kental hitam kehijauan.

## Analisis skrining fitokimia
1) Skrining  flavonoid dilakukan dengan cara ditambahkan serbuk Mg dan 2 ml HCl 2N pada 2  mL  larutan  ektrak.  Senyawa  flavonoid  akan menunjukkan warna jingga sampai merah.
2) Skrining alkaloid dilakukan dengan cara 3 ml larutan ekstrak ditambahkan dengan 1 ml HCl 2N
Uji Hasil Etanol Etil Asetat 1 Flavonoid (+) Jingga (+) Jingga 2 Alkaloid (+) Endapan putih (+) Endapan putih 3 Tanin (+) Endapan coklat kehijauan (+) Endapan coklat kehijauan 4 Terpenoid (+) Cincin coklat (+) Cincin coklat 5 Saponin (+) Busa (+) Busa
Uji aktivitas antibakteri ekstrak benalu meng- gunakan  metode  difusi  disk  yang  telah  dimodifi-
8 kasi. Suspensi bakteri K.pneumonie (10  CFU/mL) disebar merata pada media Nutrient Agar dengan teknik  swab,  selanjutnya,  kertas  cakram  ditetesi dengan variasi konsentrasi masing-masing ekstrak D.pentandra , kontrol negatif (aquades steril), dan untuk  mengkonfirmasi  resistensi  sampel  bakteri terhadap  antibiotik,  digunakan  kontrol  antibiotik beta-laktam  dari  golongan  Cephalosporin (Ceftriaxon,  cefotaxime,  dan  ceftazidime)  control positif  dengan  antibiotic  ciprofloxacin.  Cawan petri kemudian diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24  jam. Amati  adanya  diameter  zona  hambat  ra- dikal yaitu daerah jernih tanpa pertumbuhan bak- teri    (CLSI,  2011;  Pajirau,  2010;  Widyaningtyas et. al ., 2014).
dan 6 ml air suling, kemudian dipanaskan selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat diperiksa dengan pereaksi Mayer terbentuk endapan putih. 3) Skrining  saponin dilakukan  dengan  sampel ditambahkan aquades. Kemudian dikocok vertikal selama 10 detik. Hasil uji positif jika timbul busa stabil  selama  10  menit  (Harborne,  1987 dalam Sukandar et. al ., 2008).
4) Skrining    tanin dilakukan  dengan  cara  seba- nyak 1 mL larutan ekstrak uji direaksikan dengan FeCl3  10%,  adanya  tanin  ditunjukkan  dengan terbentuknya warna biru tua atau hitam kehijauan. 5) Skrining  terpenoid dilakukan  dengan  cara bahan uji dilarutkan dengan kloroform, kemudian ditambahkan  dengan  asam  asetat  anhidrat  seba- nyak 0,5 ml, selanjutnya ditambahkan 2 ml asam sulfat  pekat  melalui  dinding  tabung.  Adanya triterpenoid  ditandai  dengan  terbentuknya  cincin kecoklatan  atau  violet  pada  perbatasan  larutan, sedangkan  adanya  steroid  ditandai  dengan  ter- bentuknya cincin biru kehijauan (Padmasari et. al ., 2013).

## Uji Daya Hambat Difusi Cakram Pembuatan Standar Kekeruhan Larutan
Larutan  asam  sulfat  0,36  N  sebanyak 99,5 ml dicampurkan dengan larutan BaCl .2H O 2 2 1,175 % sebanyak 0,5 mL dalam erlenmeyer ke- mudian  dikocok  sampai  terbentuk  larutan  yang keruh. Kekeruhan ini dipakai sebagai standar ke- keruhan suspensi bakteri uji. Pembuatan suspensi bakteri  uji  bakteri  uji  pada  media  agar  miring diambil dengan kawat ose steril lalu disuspensi- kan  ke  tabung  yang  berisi  2  mL  larutan  NaCl 0,9  %  hingga  diperoleh  kekeruhan  yang  sama dengan  standar  kekeruhan  larutan  Mc.  Farland (Ngajowa et. al ., 2013).
Hasil Analisis Skrining Fitokimia
Tabel 1. Hasil uji skrining fitokimia  ekstrak daun D.pentandra
Skrining fitokimia dilakukan untuk menge- tahui metabolit sekunder dalam ekstrak D.pen- tandra yang bersifat antibakteri (Tabel 1).
Uji antibakteri ekstrak D.pentandra
Berdasarkan  Tabel  1.  Baik  ektrak  etanol dan etil asetat mengandung flavonoid, alkaloid, tannin, terpenoid dan saponin.

## Uji sensibilitas kontrol antibiotik
Tabel  2.  Menunjukkan  bahwa  sampel  bak- teri K. pneumonie resisten terhadap kontrol anti- biotik  beta-laktam  dan  sensitif  terhadap  cipro- floxacin
Uji antibakteri ekstrak D.pentandra Hasil uji pendahuluan menunjukkan bahwa konsentrasi  hambat  tumbuh  minimum  untuk
ekstrak  etanol  dan  etil  asetat  sama  yaitu  pada konsentrasi ekstrak 50%, konsentrasi ini dijadi- kan patokan untuk uji selanjutnya (Tabel 3).
Klebsiella  pneumoniae merupakan  ba- kteri  Gram  negatif  dan  dikategorikan  ke  da- lam  anaerob  fakultatif,  bakteri  ini  termasuk dalam famili Enterobacteriaceae (Jawetz et al., 2008).  Bakteri  golongan  Enterobacteriaceae banyak  ditemukan  mengalami  resistensi  ter- hadap  antibiotik  golongan  beta-laktam,  hal ini  terjadi  salah  satunya  disebabkan  oleh penggunaan  antibiotik  yang  tidak  bijak (Pajirau,  2010;  Sari,  2015).  Resistensi  bakteri terhadap  antibiotik  golongan  beta-laktam terjadi  karena  bakteri  mampu  menghasilkan ESBL  yang  merupakan  enzim  plasmid  yang memerantarai  terjadinya  hidrolisis  dan  inak- tivasi  dari  antibiotika  beta-laktam  termasuk

## Tabel 2. Hasil Uji Sensibilitas
Antibiotik Interpretasi Sensibilitas (CLSI, 2011) Rata-rata diameter zona hambat (mm) Sensitif Intermediet Resisten Ciprofloxcacin ≥ 21 16–20 ≤ 15 26,125 Cefotaxime ≥ 26 23–25 ≤ 22 6 Ceftazidime ≥ 21 18–20 ≤ 17 13,25 Ceftriaxone ≥ 23 20–22 ≤ 19 6 Tabel 3. Pendahuluan Antibakteri Konsentrasi Rata-rata zona hambat radikal (mm) Etil Asetat Etanol 100% 10,875 11,75 50% 7,375 7,25 25% 6 6 12,5%, 6 6 6,25%, 6 6 3,125% 6 6
1,6525% 6
6
Gambar 1. Hasil Uji Difusi Cakram
PEMBAHASAN
sefalosforin  generasi  ketiga,  penisilin  dan aztreonam (Irawan, 2012). Pengujian skrining dan  konfirmatif  untuk  mengetahui  kemam- puan K.pneumoniae dalam  menghasilkan ESBL dapat dilakukan dengan uji sensibilitas menggunakan  beberapa  antibiotik,  di  antara- nya  adalah  Ceftazidime,  Cefotaxime,  dan Ceftriaxone (CLSI, 2011).
Hasil  uji  antibakteri  metode  difusi  cakram (Gambar  1)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol dan etil asetat D.pentandra pada konsentrasi 100% memiliki  potensi  antibakteri  yang  lebih  baik  da- lam  menghambat  pertumbuhan K.pneumoniae dibandingkan  dengan  kontrol  antibiotik  ESBL (cefotaxime,  ceftazidime,  dan  ceftriaxone).  Po- tensi  penghambatan  ini  dikarenakan  kandungan antibakteri  dalam  kedua  ekstrak  tersebut  antara lain;  flavonoid,  alkaloid,  terpenoid,  tanin  dan  sa- ponin.
Flavonoid memiliki aktivitas sebagai anti-
bakteri  karena  dapat  mendenaturasi  protein  sel dan  merusak  membran  sel  bakteri.  Mekanisme flavonoid  sebagai  antibakteri  berhubungan  de- ngan  pembentukan  ikatan  kompleks  dengan  pro- tein  pada  membran  (protein-fenol)  sehingga  me- nyebabkan  permiabilitasnya  turun.  Ikatan  kom- pleks  yang  telah  terbentuk  kemudian  terurai  dan berpenetrasi ke dalam sel sehingga terjadi koagu- lasi  protein  dan  menyebabkan  enzim  bakteri  ti- dak aktif. Akibatnya dinding sel bakteri tidak ter- bentuk  dengan  baik  sehingga  terjadi  kebocoran sel  dan  bakteri  mati  (Zabadi,  2011). Alkaloid  se- bagai agen antibakteri bekerja dengan cara meng- hambat  sintesis  dinding  sel  bakteri  dan  meng- ganggu  komponen  penyusun  peptidoglikan,  se- hingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut. Me- kanisme  antibakteri  steroid  yaitu  dengan  meng- hambat  sintesis  dinding  sel  bakteri  dengan  cara menghasilkan  membran  sehingga  menyebabkan kebocoran pada liposom yang merupakan penyu- sun  dinding  sel  bakteri  (Ambarsari,  2013).  Tanin diduga  dapat  mengkerutkan  dinding  sel.  Rusak- nya dinding sel akan menyebabkan terhambatnya perumbuhan  sel  bakteri,  dan  pada  akhirnya  bak- teri  akan  mati.  Secara  umum  adanya  kerja  suatu bahan  kimia  sebagai  zat  antibakteri  dapat  meng- akibatkan  terjadinya  perubahan-perubahan  yang mengarah  pada  kerusakan  hingga  terhambatnya pertumbuhan sel bakteri tersebut (Retnowati et. al ., 2011).
Walaupun  demikian  tidak  ada  di  antara  va- riasi  konsentrasi  ekstrak  etanol  dan  etil  asetat yang memiliki potensi penghambatan menyamai antibiotik  ciprofloxacin,  hal  ini  bisa  terjadi  ke- mungkinan  karena  antibiotik  merupakan  dosis tunggal  yang  kemampuan  bakteriosidalnya  telah teruji. Rieuwpassa dan Hatta (2009) menjelaskan bahwa  ciprofloxacin  merupakan  agen  generasi kedua,  salah  satu  obat  sintetik  derivat  quinolon. Mekanisme kerjanya adalah menghambat aktivi- tas DNA gyrase bakteri, bersifat bakterisidal de- ngan spektrum luas terhadap bakteri Gram-positif maupun negatif.
Berdasarkan  Gambar  1.  ekstrak  etil  asetat D.  pentandra yang  memiliki  potensi  antibakteri lebih dibanding ekstrak etanol 96%. Septiana dan Asnani  (2012)  menjelaskan  bahwa  hasil  total etanol dalam suatu bahan dengan metode ekstrak- si baik menggunakan 1 maupun 2 tahap, didapat- kan  total  fenol  (flavonoid,  tannin)  paling  tinggi pada  pelarut  etil  asetat  diikuti  oleh  etanol  dan yang paling rendah adalah aquades, kemungkinan hal inilah yang menyebabkan potensi antibakteri ekstrak etil asetat yang lebih baik.

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol dan etil asetat pada konsentrasi D.pentandra memiliki potensi antibakteri  dalam  menghambat  pertumbuhan K.pneumoniae penghasil ESBL lebih baik dari- pada antibiotik cefotaxime, ceftazidime.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustiningsih,  E.T.  2010.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Benalu  Jambu  Air  ( Dendrophthoe  falcata (L.f.) Ettingsh)  Terhadap  Escherichia  coli  Dan Staphylococcus aureus . Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Ambarsari,  M.A.  2013.  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi  N-Heksan Ekstrak  Etanol  Daging  Buah  Sirsak  ( Annona  muricata L.) Terhadap Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Shigella sonnei dan Serta Bioautografinya. Skripsi. Univer- sitas Muhammadiyah Surakarta
Andriyani, D., Utami, P I., Dhiani, B A. 2010. Penetapan Kadar Tanin  Daun  Rambutan    ( Nephelium  lappaceum .L  )  Secara SpektrofotometrI Ultraviolet Visibel. Pharmacy 07 (02): 1-11. Anita, A.,Siti, K & Yanti, A.H. 2014. Aktivitas Antibakteri Ek- strak Daun Benalu Jambu Air ( Dendropthoe pentandra (L.) Miq) Terhadap Pertumbuhan Salmonella typhi . Probiont 3 (2): 268 – 272
CLSI  (Clinical  and  Laboratory  Standarts  Institute).  2011.  Per- formance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-First  Informational  Supplement.  Replaces  M100- S20 and M100-S20-U. Vol. 31 No. 1
Irawan, D., Hamidah., Purwati., Triyono, E.A., & Bramantono. 2012.  Profil  Penderita  Sepsis  Akibat  Bakteri  Penghasil ESBL. Jurnal Penyakit Dalam 13 (1): 63-68 Jawetz, Melnick, dan Adelberg. 2008. Mikrobiologi Kedokteran Edisi 23. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC Ngajowa, M., Abidjulua, J & Kamua, V.S. 2013. Pengaruh Anti- bakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa ( Pometia pinnata ) ter- hadap Bakteri Staphylococcus aureus secara In vitro. Jurnal MIPA Unsrat Online 2 (2): 128-132
Padmasari, P D., Astuti, K W., Warditiani, N K. 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Rimpang Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.). Jurnal Farmasi Udayana 2 (4): 1-4 Pajirau, A. 2010. Infeksi Oleh Bakteri Penghasil Extended-Spec- trum Beta-Lactamase (ESBL) Di RSUP Dr. Kariadi Sema-
rang: Faktor Risiko Terkait Penggunaan Antibiotik. Artikel Ilmiah. Program Pendidikan Sarjana Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang Retnowati, Y., Bialangi, N & Posangi, N.W. 2011. Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Pada Media Yang Diekspos Dengan Infus Daun Sambiloto (Andrographis paniculata). Saintek Vol 6, No 2
Rieuwpassa, I E dan Hatta, M. 2009. Deteksi Mutasi Gen Gyrase A Porphyromonas gingivalis Resisten terhadap Ciprofloxacin berdasarkan  teknik  Polymerase  Chain  Reaction.  Jurnal  Ke- dokteran Yarsi 17 (1) : 011-020
Sari, M. 2015. Uji Bakteriologis dan Resitensi Antibiotik Terha- dap Bakteri Escherichia coli dan Shigella sp Pada Makanan Gado-gado  di  Kantin  UIN  Syarif  Hidayatullah  Jakarta. Skripsi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Univer- sitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta Septiana, A T dan Asnani, A. 2012. Kajian Sifat Fisiokimia Ek- strak  Rumput  Laut  Coklat Sargassum  duplicatum meng- gunakan berbagai pelarut dan Metode Ekstraksi. Agrointek
Sukandar,  D.,  Hermanto,  S.,  &  Lestari,  E.  2008.  Uji  Toksisitas Ekstrak  Daun  Pandan  Wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Jurnal Valensi 1 (2): 63-70 Sunaryo. 2008. Pemarasitan Benalu Dendrophthoe pentandra (L.) Miq. pada Tumbuhan Koleksi Kebun Raya Cibodas, Jawa Barat. Bidang Botani, Puslit Biologi – LIP. Jurnal Natur Indonesia 11(1): 48-58
Widyaningtias, N. M. S. R., Yustiantara, P. S., & Paramita, N. L. P.V.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Terpurifikasi Daun sirih hijau ( Piper betle L.) Terhadap Bakteri Propioni- bacterium acnes. Jurnal Farmasi Udayana  3 (1): 50-53 Zabadi,  F.  2011.  Daya  Hambat  Fraksi  Semipolar  Ekstrak  Etanol Daun  Benalu  Mangga  ( Dendrophthoe  petandra (L.)  Miq.) Terhadap  Pertumbuhan  Escherichia  coli  Serta  Brine  Shrimp Lethality Test. Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Muham- madiyah Surakarta
6 (1): 22-28