Journal of Vocational Health Studies
www.e-journal.unair.ac.id/index.php/JVHS
DIFFERENCES VALUE OF PT AND APTT IN EXAMINATION OF ELECTROMECHANICAL AND PHOTO-OPTICAL METHOD

## PERBEDAAN NILAI PT DAN APTT PADA PEMERIKSAAN METODE ELEKTROMEKANIK DAN FOTO-OPTIK
Beytri Ramadhani 1* , Paulus B . Notopuro 2
1 Student of Medical Technology Laboratory, Department of Health, Faculty of Vocational Studies, Universitas Airlangga, Surabaya-Indonesia.
2 Department of Clinical Pathology, Faculty of Medicine, Universitas Airlangga, Surabaya-Indonesia.
A B S T R A C T
Background: Examination of Prothrombin Time (PT) and Activated Partial Thromboplastin Time (APTT) in hospitals and clinical laboratories by utilizing the use of different instruments and methods. Examination of PT and APTT can be implemented through electromechanical or photo- optical techniques to detect changes in plasma turbidity with addition can affect the increase in plasma viscosity. This method principle is that addition can affect the increase in plasma viscosity, Purpose: To analyze the differences in the values of PT and APTT between the electromechanical method and the photo-optical method. Method: Analytical observation, 32 plasma citrate without interference and hemolysis were examined at the Clinical Pathology Laboratory of RSU Haji Surabaya and the Ultra Medica Main Clinics Laboratory in Surabaya. The study used SPSS 24.0 program to determine whether there were  PT and APTT values with an electromechanical and photo-optical method. Result: The result of PT and APTT with the electromechanical method was significantly higher than without interference. In hemolytic samples, the result of PT with the electromechanical method was significantly higher than the PT result with the photo-optical method. Meanwhile, the result of APTT with the electromechanical method was significantly lower than the APTT result with the photo-optical method in hemolytic samples. Conclusion: There were significant differences in PT and APTT results between electromechanical and photo- optical in samples without interference and hemolytic. It is due to the difference in the detection principle between the two methods.

## A B S T R A K
Latar belakang: Pemeriksaan terhadap Prothrombin Time (PT) serta Activated Partial Thromboplastin Time (APTT) pada rumah sakit dan laboratorium klinik dengan memanfaatkan penggunaan instrumen maupun metode yang berlainan. Dalam memeriksa PT serta APTT  dapat  dilaksanakan  melalui  teknik  foto  elektromekanik  dengan  pendeteksian terhadap perubahan kekeruhan plasma. Metode ini berprinsip bahwa penambahan dapat mempengaruhi  peningkatan  terhadap  viskositas  plasma.  Tujuan:  Untuk  menganalisis perbedaan nilai PT dan APTT antara metode elektromekanik dan metode foto-optik. Metode: Observasional analitik, 32 plasma sitrat tanpa interferensi dan hemolisis diperiksa di Laboratorium Patologi Klinik RSU Haji Surabaya dan Laboratorium Klinik Utama Ultra Medica di Surabaya. Penelitian ini menggunakan program SPSS 24.0 untuk menentukan apakah ada perbedaan nilai PT dan APTT dengan metode elektromekanik dan foto-optik. Hasil: Hasil PT dan APTT dengan metode elektromekanik secara signifikan lebih tinggi daripada tanpa interferensi. Dalam sampel hemolitik, hasil PT dengan metode elektromekanik secara signifikan lebih tinggi daripada hasil PT dengan metode foto-optik. Sementara itu, hasil APTT dengan metode elektromekanik secara signifikan lebih rendah daripada hasil APTT dengan metode foto-optik. Kesimpulan:  Terdapat perbedaan hasil PT dan APTT yang signifikan antara metode elektromekanik dan foto-optik pada sampel tanpa interferensi dan hemolitik. Hal ini disebabkan oleh perbedaan prinsip deteksi antara kedua metode.
Research Report Penelitian

## A R T I C L E   I N F O
Received 05 June 2020 Revised 31 May 2021 Accepted 14 June 2021 Online 31 July 2021
Correspondence : Beytri Ramadhani
E-mail : beytri.r@gmail.com
Keywords: PT, APTT, Electromechanical method,
Photo-optical method
Kata kunci:
PT, APTT, Metode elektromekanik, Metode foto-optik
Journal of Vocational Health Studies p-ISSN: 2580–7161; e-ISSN: 2580–717x DOI: 10.20473/jvhs.V5.I1.2021.17-21 Copyright © Journal of Vocational Health Studies. Open access under Creative Commons Attribution-Non Commercial-Share A like 4.0 International Licence (CC-BY-NC-SA)
Beytri Ramadhani et al .  |  Journal of Vocational Health Studies 05 (2021): 17-21 18

## PENDAHULUAN
Layanan pemeriksaan laboratorium klinik adalah suatu bagian dari layanan kesehatan yang paling dibutuhkan oleh dokter dalam menunjang diagnosis maupun pemantauan terhadap penyakit. Sebagaimana pemeriksaan terhadap faal hemostasis yang diperlukan, agar dapat diketahui fungsi tubuh sebagai pertahanan keenceran darah serta penutupan terhadap dinding pembuluh darah yang rusak ketika terjadi kerusakan. Menurut Aryati (2004) dan Durachim and Astuti (2018) bahwa faal hemostasis memiliki keterlibatan terhadap sistem koagulasi, fibrinolisis, vaskuler serta trombosit.
Pemaparan dari Bakta (2007) dan Hillman et al . (2011) dalam memeriksa faal hemostasis diantaranya Prothrombin Time (PT) dan Activated Partial Thromboplastin Time (APTT) adalah suatu uji yang dilakukan agar dapat diketahui waktu untuk membentuk trombin. Pemeriksaan terhadap PT dilaksanakan bersamaan dengan APTT menjadi suatu titik awalan dalam penyelidikan pendarahan secara berlebih maupun pembekuan yang dialami, disertai pengevaluasian terhadap PT serta APTT yang dihasilkan bersamaan. Dokter dapat mendapatkan petunjuk mengenai sebab gangguan dari pembekuan ataupun pendarahan. Uji tersebut memiliki makna yakni menjadi diagnosis pada pemberian informasi diperlukan atau tidak pemeriksaan selanjutnya.
Jenis pemeriksaan PT serta APTT pada rumah sakit ataupun pada laboratorium klinik dengan memanfaatkan penggunaan instrumen maupun metode yang berlainan. Menurut Lippi et al . (2013) dan Castellone (2011) untuk pemeriksaan faal hemostasis diantaranya PT serta APTT dapat dilaksanakan melalui metode elektromekanik ataupun foto-optik. Pada metode elektromekanik yang berada di peralatan otomatis dapat melakukan pendeteksian terhadap kekeruhan plasma yang berubah pada saat tahapan koagulasi menjadi intensitas cahaya yang berubah diperoleh dari fotodioda. Dalam pemeriksaan dengan memanfaatkan penggunaan metode elektromekanik, varian oleh sampel hemolisis yang dihasilkan dapat menjadi cukup besar dan berbentuk sebagai dampak pada pemendekan koagulasi yang dihasilkan dikarenakan pengaktifan pada faktor-faktor jaringan, akan tetapi dapat berbentuk pemanjangan dari pendeteksian koagulasi yang dihasilkan dikarenakan terdapat reagen koagulasi yang dipengaruhi dalam penggunaannya. Lipemik mempengaruhi pemeriksaan koagulasi yakni berupa pemanjangan terhadap pemeriksaan koagulasi yang dihasilkan dikarenakan terjadinya kekeruhan. Pada sampel ikterik secara umum terdapat kadar bilirubin sampai dengan diatas 1,5 mg/ dL yang mampu memberikan pengaruh terhadap pemeriksaan koagulasi. Sementara metode foto-optik berprinsip pada penambahan reagen yang dapat mengalami peningkatan pada viskositas plasma.
Penggunaan metode yang berbeda pada pemeriksaan PT serta APTT, dapat memperoleh hasil nilai yang berbeda dari suatu metode terhadap metode yang lain. Didasari oleh pemaparan latar belakang di atas, dengan demikian peneliti melaksanakan penelitian tentang perbedaan nilai PT dan APTT pada pemeriksaan metode elektromekanik dan foto-optik.

## MATERIAL DAN METODE
Penelitian ini menggunakan observasional analitik dan penggunaan sampel dengan memanfaatkan sampel plasma sitrat yang didapatkan dari pasien yang melakukan pemeriksaan PT dan APTT di RSU Haji Surabaya pada bulan Februari – Maret 2020 sebanyak 32 sampel dengan metode foto-optik menggunakan alat otomatis Sysmex CA-600 series . Waktu pengambilan sampel hingga pemeriksaan tidak boleh lebih dari 2 jam.  Kriteria inklusi pada penelitian ini adalah sampel tanpa interferensi (sampel plasma sitrat tidak dalam kondisi hemolisis, ikterik dan lipemik) dan sampel hemolisis (darah lisis sehingga menyebabkan plasma berwarna merah) dengan umur dan jenis kelamin yang tidak ditentukan. Kriteria eksklusi pemeriksaan sampel lebih dari 2 jam dari pengambilan sampel. Sampel yang sesuai dengan kriteria dilakukan pemeriksaan PT dan APTT dengan metode elektromekanik di Laboratorium Klinik Ultra Medica Surabaya. Instrumen yang menggunakan metode ini adalah thrombostat. Sampel dikelompokkan berdasarkan kriteria sampel (sampel tanpa interferensi dan hemolisis). Data hasil pemeriksaan dengan metode elektromekanik dan alat otomatis dianalisis menggunakan program SPSS 24.0 dengan uji beda Wilcoxon dan Paired T Test . Dinyatakan signifikan secara statistik apabila nilai p<0.05.

## HASIL
Data hasil penelitian diperoleh dari hasil pemeriksaan PT dan APTT menggunakan metode elektromekanik dan metode foto-optik. Sampel yang digunakan berupa plasma sitrat dari Rumah Sakit Umum Haji Surabaya dengan jumlah 32 sampel yang terdiri dari 22 sampel tanpa interferensi dan 10 sampel hemolisis.
Tabel 1, menggambarkan hasil PT kelompok sampel hemolisis dan tanpa interferensi dengan metode elektromekanik berdistribusi normal (p>0.05). Sedangkan, nilai PT kelompok sampel hemolisis dan tanpa interferensi dengan metode foto-optik tidak berdistribusi normal (p<0.05). Hasil APTT kelompok sampel hemolisis dan tanpa interferensi dengan metode elektromekanik maupun foto-optik berdistribusi normal.
Dari hasil pemeriksaan uji statistik yang digunakan pada pemeriksaan PT, menggunakan uji non-parametrik Wilcoxon karena terdapat dua sampel
Beytri Ramadhani et al .  |  Journal of Vocational Health Studies 05 (2021): 17-21
Pada Tabel 3, nilai Sig. (2- tailed ) sebesar 0.030 (tanpa interferensi) yang berarti terdapat perbedaan signifikan (p<0.05) antara metode elektromekanik dengan metode foto-optik pada pemeriksaan APTT dengan sampel tanpa interferensi. Sedangkan, pada sampel hemolisis nilai Sig. (2- tailed ) sebesar 0.211 yang berarti tidak terdapat perbedaan signifikan (p<0.05) antara metode elektromekanik dengan metode foto- optik pada pemeriksaan APTT dengan sampel hemolisis.
yang tidak terdistribusi normal. Sedangkan uji statistik yang digunakan pada pemeriksaan APTT adalah uji parametrik Paired T Test karena semua sampel berdistribusi normal.
Pada Tabel 2, nilai Asymp. Sig. (2- tailed) sebesar 0.000 (tanpa interferensi) dan 0.005 (hemolisis) yang berarti terdapat perbedaan signifikan (p<0.05) antara metode elektromekanik dengan metode foto-optik pada pemeriksaan PT dengan sampel tanpa interferensi maupun sampel hemolisis.
Tabel 1. Uji normalitas Shapiro-Wilk
Metode Shapiro-Wilk Statistic df Sig. PT Elektromekanik (Sampel tanpa interferensi) .973 22 .783 Foto-optik (Sampel tanpa interferensi) .718 22 .000 Elektromekanik (Sampel hemolisis) .894 10 .189 Foto-optik (Sampel hemolisis) .767 10 .006 APTT Elektromekanik (Sampel tanpa interferensi) .953 22 .365 Foto-optik (Sampel tanpa interferensi) .949 22 .303 Elektromekanik (Sampel hemolisis) .866 10 .091 Foto-optik (Sampel hemolisis) .951 10 .684 Tabel 2. Uji Wilcoxon pemeriksaan PT
Z Asymp. Sig. (2- tailed ) Tanpa Interferensi -4.078 .000 Hemolisis -2.805 .005 Tabel 3. Uji Paired T Test pemeriksaan APTT df Sig. (2-tailed) Tanpa Interferensi 21 .030 Hemolisis 9 .211

## PEMBAHASAN
Jenis pemeriksaan faal hemostasis diantaranya PT serta APTT adalah suatu uji yang dilakukan agar dapat diketahui waktu untuk membentuk trombin. Pemeriksaan terhadap PT dilaksanakan bersamaan dengan APTT menjadi suatu titik awalan dalam penyelidikan pendarahan secara berlebih maupun pembekuan yang dialami, disertai pengevaluasian terhadap PT serta APTT yang dihasilkan bersamaan,. Dokter dapat mendapatkan petunjuk mengenai sebab gangguan dari pembekuan ataupun pendarahan. Untuk pemeriksaan faal hemostasis diantaranya PT serta APTT dapat dilaksanakan melalui metode elektromekanik ataupun foto-optik.
Pada metode elektromekanik yang berada di peralatan otomatis dapat melakukan pendeteksian terhadap kekeruhan plasma yang berubah  pada saat tahapan koagulasi menjadi intensitas cahaya yang berubah diperoleh dari fotodioda.
Kelebihan menggunakan metode foto-optik adalah alat dijalankan secara otomatis, menggunakan tata langkah yang sederhana sehingga mudah dalam penggunaan, hasil yang diperoleh lebih teliti, tepat dan cepat. Sedangkan, kekurangan dari metode ini adalah varian oleh sampel hemolisis yang dihasilkan dapat jadi cukup besar dan dapat sebagai dampak pada pemendekan koagulasi yang dihasilkan dikarenakan pengaktifan pada faktor-faktor jaringan, akan tetapi dapat berbentuk pemanjangan dari pendeteksian
Beytri Ramadhani et al .  |  Journal of Vocational Health Studies 05 (2021): 17-21 20
koagulasi yang dihasilkan dikarenakan terdapat reagen koagulasi yang dipengaruhi dalam penggunaannya. Lipemik mempengaruhi pemeriksaan koagulasi yakni berupa pemanjangan terhadap pemeriksaan koagulasi yang dihasilkan dikarenakan terjadinya kekeruhan. Menurut Lippi et al . (2013) dan Castellone (2011) pada sampel ikterik secara umum terdapat kadar bilirubin sampai dengan diatas 1.5 mg/dL yang mampu memberikan pengaruh terhadap pemeriksaan koagulasi. Sementara, metode foto-optik berprinsip pada penambahan reagen yang dapat mengalami peningkatan pada viskositas plasma.
Metode elektromekanik  pada  penelitian ini menggunakan alat thrombostat yang memiliki sistem pengukuran mekanikal dan terdapat sebuah sensor memonitor bola yang berputar untuk mendeteksi gumpalan atau perubahan viskositas plasma di bagian bawah kuvet. Kelebihan dari metode elektromekanik adalah tidak ada pengaruh dari sampel ikterus dan lipemik (Laga et al ., 2006). Namun, menurut CLSI sampel hemolisis kemungkinan dapat menyebabkan terbentuknya clot dan aktivasi faktor pembekuan. Menurut Lippi et al. (2013), plasma yang mengandung hemoglobin bebas dapat dikaitkan dengan pelepasan molekul membran sitoplasma dan plasma (misalnya, faktor jaringan, protease, fosfolipid dan adenosindifosfat (ADP) yang dapat menghasilkan aktivasi palsu dari pembekuan darah dan trombosit sehingga akan mempengaruhi hasil akhir. Hal ini berlaku untuk metode foto-optik maupun elektromekanik. Kekurangan dari metode elektromekanik adalah masih dilakukan pemipetan secara manual sehingga dapat mempengaruhi keakuratan dalam pemipetan sampel maupun reagen.
Tidak terdapat perbedaan pada hasil pemeriksaan APTT antara metode elektromekanik dan metode foto- optik dengan sampel hemolisis. Hal ini dapat disebabkan oleh adanya penundaan sampel. Secara teoritis hasil PT maupun APTT dengan metode elektromekanik lebih rendah daripada metode foto-optik. Namun, karena adanya penundaan sampel yang dikerjakan dengan alat elektromekanik menyebabkan faktor labil V dan VIII rusak sehingga akibatnya hasil APTT dengan sampel hemolisis tidak berbeda bermakna. Terdapat sejumlah sebab yang mengakibatkan pengujian statistik yang dihasilkan tidak signifikan antara lain:
1. Terdapat outliers yakni keanehan pada data. Hal ini dapat dikarenakan individu yang memang unik berbeda dari kebanyakan. Akibatnya error standar, standar deviasi dari rata-rata yang akan dapat meningkat.
2. Sampel berukuran kecil juga dapat mengakibatkan pengujian statistik yang dihasilkan tidak mendapatkan pembuktian (Widhiarso, 2012).
Adanya perbedaan nilai PT maupun APTT pada pemeriksaan metode elektromekanik dan foto-optik dapat disebabkan oleh pemipetan yang kurang akurat pada alat trombostat karena masih dilakukan secara manual serta keterbatasan pada penelitian ini yaitu 1. Sampel mengalami penundaan waktu pemeriksaan. Sebaiknya plasma sitrat yang digunakan untuk pemeriksaan PT maupun APTT dilakukan dalam jangka waktu maksimal 2 jam atau sesegera mungkin. Penundaan waktu pemeriksaan dapat menyebabkan hasil pemeriksaan memanjang yang diakibatkan oleh CO 2 yang keluar dari plasma sehingga pH plasma sitrat meningkat yang mengakibatkan perubahan faktor V dan VIII.  Kedua faktor tersebut dapat menghambat aktivitas faktor-faktor pembekuan lainnya karena mempunyai sifat labil. Selain itu, faktor-faktor pembekuan yang terdapat di dalam plasma memiliki waktu paruh atau ketahanan yang berbeda (Price and Wilson, 2005).
2. Sampel hemolisis tidak dilakukan pengukuran kadar hemoglobin. Perlunya pengukuran kadar hemoglobin plasma (Hb bebas) untuk menyeragamkan kondisi hemolisis yang dibuat secara manual pada pemeriksaan ini.
3. Tidak disertakannya sampel dengan ikterik dan lipemik karena keterbatasan dalam pengumpulan jumlah sampel dengan kondisi ikterik dan lipemik.

## KESIMPULAN
Terdapat perbedaan hasil PT yang signifikan antara metode elektromekanik dan foto-optik pada sampel tanpa interferensi dan hemolitik dan hasil APTT antara kedua metode pada sampel tanpa interferensi. Sedangkan hasil APTT pada sampel hemolisis tidak ada perbedaan yang signifikan antara kedua metode.  Hal ini disebabkan oleh perbedaan prinsip deteksi antara kedua metode.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti berterima kasih kepada Departemen P atologi K linik Rumah Sakit Umum H aji Surabaya dan Laboratorium Klinik Ultra Medica Surabaya yang sudah memfasilitasi penelitian ini dan dosen pembimbing Paulus Budiono Notopuro, dr., Sp.PK yang sudah memberikan waktu dan bimbingannya sehingga penelitian dapat terselesaikan serta seluruh keluarga maupun rekan-rekan peneliti yang sudah mendukung dalam penelitian. Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan terhadap banyak pihak yang berkaitan pada penelitian yang telah dilaksanakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Aryati, 2014. Peran Patologi Klinik secara Holistik : Tantangan Masa Kini dan Masa Mendatang. In: Kedokteran, F. (Ed.), Pengukuhan Jabatan Guru Besar Dalam Bidang Ilmu Patologi Klinik. Universitas Airlangga, Surabaya, pp. 1–56. Bakta, I.M., 2007. Hematologi Klinik Ringkas. Buku Kedokteran, EGC, Jakarta.
Castellone, 2011. Interference of Hemolysis, Icteric & Lipemia Coagulation Testing. Elit. Learn. Durachim, A., Astuti, D., 2018. Bahan Ajar Teknologi Laboratorium Medik (TLM): Hemostasis. Kementrian Kesehatan RI, Jakarta.
Hillman, R.S., Ault, K.A., Leporrier, M., Rinder, H.M., 2011. Hematology in Clinical Practice, 5 th. ed. Mc Graw Hill, New York.
Laga, A.C., Cheves, T.A., Sweeney, J.D., 2006. The Effect of Sample Hemolysis on Coagulation Test Results. Am. J. Clin. Pathol. 126, 748–755.
Lippi, G., Plebani, M., Favaloro, E.J., 2013. Interference in Coagulation Testing: Focus on spurious hemolysis, Icterus and Lipemia. Semin. Thromb. Hemost. 39, 258–266.
Price, S.A., Wilson, L.M.C., 2005. Patofisiologi Klinik Proses-Proses Penyakit. EGC, Jakarta.
Widhiarso, W., 2012. Hasil Uji Statistik dan Penulisan Butir yang Kurang Tepat.