## KOMPOSIT KOLAGEN FIBRIL-ALGINAT SEBAGAI KANDIDAT MEMBRAN HIDROGEL
SKIN SUBSTITUTE
Faiq Nadiatul Mardia Asa 1*) ,Sri Sumarsih 2 , Andi Hamim Zaidan 3 , Mochammad Zaki Fahmi 4 , Dyah Hikmawati 5 , Suryani Dyah Astuti 6
1 Prodi S2 Teknobiomedik, Sekolah Pascasarjana, Universitas Airlangga, Surabaya, email: faiq.nadia@gmail.com
2 Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya, email: sri-s@fst.unair.ac.id
3 Fisika, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya, email: andi-h-z-i@fst.unair.ac.id

## Abstrak
Telah  dilakukan  sintesis  membran  hidrogel  komposit  berbahan  kolagen,  alginat  sebagai kandidat skin substitute. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui sifat fisikokimia dari membran hidrogel komposit kolagen-alginat. Metode yang dilakukan yaitu dengan teknik kering udarakan yang dicetak pada mika tipis selama tujuh hari pada suhu ruang. Hasil sintesis dikarakterisasi  dengan  PSA  untuk  mengetahui  distribus  ukuran  nanopartikel  perak,  FTIR, penentuan morfologi dengan SEM, uji absorbsi dengan larutan PBS (Phospate Buffer Saline) uji  kuat  tarik,  uji  elongasi,  uji  sitotoksisitas  dan  uji  antibakteri.  Hasil  analisis  FT-IR  pada membran  memperlihatkan  serapan  kolagen  dan  alginat  yang  ditunjukkan  dengan  munculnya pergeseran pita serapan pada membrane  komposit  yaitu adanya  Amida  I dari kolagen,  gugus karbonil  (C=O)  dari  alginat.  Hasil  pengujian  SEM  membran  komposit  tanpa  nanopartikel perak  menunjukkan  penebalan  dinding  dan  pori  yang  lebar,  sedangkan  membran  dengan penambahan nanopartikel perak ukuran pori lebih kecil. Berdasarkan hasil pengujian absorbsi menunjukkan  semakin  banyak  komposisi  kolagen  pada  membran  maka  semakin  menurun lama membran hidrogel komposit menyerap larutan. Hasil pengujian kuat tarik menunjukkan nahwa  semakin  banyak  komposisi  kolagen  pada  membran  hidrogel  komposit  maka  semakin tinggi nilai kuat tariknya. Hasil uji elongasi menunjukkan semakin banyak komposisi kolagen maka semakin menurun nilai elongasinya.
Kata kunci : membran hidrogel, kolagen, alginat

## Abstract
Composite  hydrogel  membran  had  been  synthesized  made  from  collagen  and  alginate  as  a skin  substitute  candidate.   The  purpose of  this  research  is to  know  the  characteristics  of  fisikokimia composite  membrane  hidrogel  collagen-alginate.  The  method  employed  in  this  study  by  the  air  dry method  on  a  glass  for  seven  days  at  room  temperature.  The  results  of  the  membrane  was characterized  with  FTIR,  determain  morfology  by    SEM,  the  ability  of  absorbtion membranes,membrane  strength,  and  membrane  elongation.  Result  of  FT-IR  data  analysis  in  the membranes  showed  the  existance  of   alginate  and  collagen  absorbance,  which  was  indicated  by  the
emergence of typical absorbance band such as of \ amide I of collagen and carbonyl Group (C = O) of  alginate.  The  test  results  of  composite  membrane  hidrogel  collagen-alginate  by  SEM  showed thickening  of  the  wall  and  the  wide  pore.  Membrane  absorption  was  decreased  with  many compositions of collagen The results show that the effect of the addition of the collagen composition makes  the  mechanical  properties  of  hydrogel  membrane  lower  than  the  membrane  with  lower collagen  compositions  displayed  on  the  tensile  strength  of  the  membrane.  Elongation  test  results showed  that  the  addition  of  the  collagen  composition  gives  the  effect  of  a  decrease  in  the  value  of elongation.
Key words : composite hidrogel membrane, collagen, alginate

## 1. PENDAHULUAN
Meningkatnya  kebutuhan  skin  substitute untuk  permasalahan  luka  bakar  dan  luka  dalam banyak  dikembangkan  yang  digunakan  untuk menggantikan  secara  permanen  kerusakan  kulit atau  memberi  penutupan  luka  sementara. Penggunaan bahan yang sesuai dengan karakterisasi  kulit  merupakan  hal  pokok  yang harus  dipenuhi  skin  substitute  karena  potensinya sebagai  pendukung,  pembentuk,  dan  pelindung epidermal.  Fungsi  utama  skin  substitute  untuk membatasi  kehilangan  cairan  pada  transdermal, infeksi, serta mengurangi kemungkinan terjadinya jaringan hipertropik dengan mempercepat penutupan  luka  dan  pemulihan  akhir  pasien (Kempf et al., 2011). Skin substitute yang tersedia saat  ini  lebih  banyak  mengandung  unsur  porcine atau  babi  seperti  pada  kolagen  maupun  mukosa intestinal dari babi (Reema et al., 2014).
2. Tinjauan Pustaka
2.1   Kolagen Fibril
Kolagen merupakan golongan protein komponen  utama  dari  jaringan  ikat  vertebrata, yang  membentuk  sekitar  25%  sampai  35%  dari kandungan  protein  tubuh.  kolagen  adalah  protein yang  mana  bertanggung  jawab  untuk  menjaga integritas  struktural  dan  fungsi  mekanik  jaringan dalam  organisme  selular  paling  multi.  Kolagen telah  diidentifikasi  dalam  jaringan  mamalia  lebih dari 27 bentuk. Variasi  dalam komposisi kolagen memenuhi  persyaratan  mekanik  yang  luas  untuk berbagai  fungsi  dan  pemuatan  kondisi.  Diantara berbagai  macam  tipe  kolagen,  tipe  I  kolagen adalah yang paling banyak dalam tubuh manusia. Kolagen  tipe  I  memiliki  struktur  fibril  yang menyediakan  dasar  struktural  untuk  menahan kekuatan tarik, geser atau kompresi dan terutama dapat ditemukan dalam jaringan struktural seperti kulit,  tendon,  ligamen,  pembuluh  darah  tulang
rawan  dan  di  yuybagian  organik  dari  tulang  dan gigi (Babtiste et al., 2014).
Kolagen  fibril  merupakan  komponen utama  dari  matriks  ekstraselular  (ECM)  dan penghubung  jaringan  seperti  tulang  dan  tendon, serta pada jaringan kornea. Serupa dengan alginat, kolagen  hidrogel  telah  digunakan  untuk  berbagai aplikasi termasuk penelitian tentang kesesuaiannya dengan stroma sel sumsum tulang, sebagai  scaffold  untuk  rekayasa  teknik  jaringan tulang rawan, dalam bentuk penyokong pembuluh darah,  dan  untuk  aplikasi  dalam  penyembuhan luka  serta  sebagai  situs  pro-angiogenik  untuk transplantasi islet. Kolagen fibril pada kolagen tipe I  memiliki  pola  periodik  karakteristik  60-70  nm. Gambaran  nano-topografi  yang  sangat  periodik diyakini  penting  untuk  adhesi  dan  pertumbuhan sel (Mahmoud et al., 2015).
Kolagen  terdapat  pada  hampir  25%  dari total  massa  protein  pada  mamalia  yang  ada  di tulang, jaringan ikat, tendon, pembuluh darah, dan kulit.  Pada  kulit,  kolagen  berhubungan  dengan protein  lain,  seperti  elastin,  membentuk  matriks dasar  fleksibel  dan  lentur  yang  menggabungkan sel-sel  kulit  hidup,  pembuluh  darah,  kelenjar sebaceous,  serta  komponen  lain  dari  matriks ekstraselular.
Setiap molekul kolagen pada ekstraseluler  matriks  kulit  terbentuk  dari  3  tiga rantai  protein  heliks  yang  selanjutnya  dirangkai menjadi superheliks. Molekul prokolagen tripleheliks  dalam  sel  fibroblast  dan  kemudian disekresikan  ke  dalam  ruang  ekstraseluler  seperti pada  Gambar  1  Pada  ruang  ekstraselular,  rantai heliks menjalani proses proteolitik, yang memungkinkan  secara  spontan  merangkai  rantai menjadi  lebih  besar,  serta  fibril  yang  lebih kompleks  yang  distabilkan  oleh  ikatan  kovalen. Pertautan  berkas  kolagen  pada  gambar  2.2 memberikan  kekuatan  tarik  pada  kulit  yang mendukung  struktur  khusus  dalam  kulit  (Cynthia et al., 2010).
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Faiq Nadiatul Mardia Asa
Gambar  1.  Pembentukan  berkas  fiber  pada kolagen (Cynthia et al.,2010).
Kolagen  adalah  protein  struktural utama  yang  terdapat  pada  ekstraseluler matrik.  Berbagai  penggunaan  kolagen dalam  biomaterial  untuk  rekonstruksi  dan regenerasi  jaringan  telah  menunjukkan bahwa  kolagen  memainkan  peran  aktif dalam  mediasi  adhesi    dan  migrasi  sel karena  potensinya  untuk  berinteraksi dengan sel.  Mengatasi  kelemahan kolagen yang  mudah  terdegradasi  dan  sifat mekanis  yang  lemah,  maka  dibutuhkan ikatan  silang  kimia  melalui  hibridisasi dengan polimer sintetis maupun polisakarida alam (Lin Sang et al. , 2011).
2.2 Alginat
Alginat  adalah  suatu  polisakarida bahan  alam  yang  diperoleh  dari  alga  coklat. Alginat yang terdapat di alga coklat kebanyakan  dalam  bentuk  asam  karboksilat yang  disebut  asam  alginat  serta  kebanyakan garam  anorganik  tidak  larut  dalam  air, sehingga  yang  sering  digunakan  untuk keperluan  industri  adalah  garam  natrium maupun kalium alginat.
Alginat  merupakan  kopolimer  linear yang mengandung lebih 700 residu asam-asam uronat yaitu  β-D asam mannuronat (M) dan α- L  asam  guluronat  (G)  dengan  ikatan  1,4. Rantai alginat yang hanya mengandung residu asam  guluronat  disebut  kompleks  G,  rantai alginat  yang  hanya  mengandung  residu  asam mannuronat  disebut  kompleks  M  dan  rantai alginat  yang  hanya  mengandung  residu  asam guluronat  serta  asam  mannuronat  disebut
kompleks  G-M  (Khasima  et  al.,  2011). Struktur  kimia  alginat  dapat  dilihat  pada gambar 2.
Gambar 2. (a) Asam β-D-mannuronat. (b) Asam α-L-guluronat (c) Struktur molekul natrium alginat (Khasima et al. , 2011)
Natrium  alginat  dapat  membentuk  gel  dengan adanya  kation-kation  divalent  seperti  Ca2+. Ion  kalsium  menggantikan  natrium  dalam alginat,  mengikat  molekul-molekul  alginat yang  panjang  sehingga  membentuk  gel. Alginat dengan kandungan G (asam guluronat) yang  tinggi  akan  membentuk  gel  lebih  kuat dibandingkan dengan alginat dengan kandungan M (asam mannuronat) yang tinggi. Proses  pembentukan  gel  oleh  alginat  seperti pada Gambar 3 menunjukkan kalsium menggantikan  natrium  sehingga  terjadi  ikatan molekul-molekul alginat yang panjang.
Gambar 3.  Pembentukan gel blok homopolimer dari persimpangan asam α- L-guluronat dengan ion kalsium.
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
Pengikatan kation divalen oleh alginat (Bruchet et al. , 2015)

## 2.3  Hidrogel
Hidrogel  terbentuk  melalui  proses gelasi  (Gulrez  et  al.,  2011).  Pada  awalnya, sebelum  terjadi  proses  interkoneksi  jaringan polimer,  material  dasar  hidrogel  adalah berbentuk  polimer  bercabang  yang  tersebar dalam cairan pelarut. Proses interkoneksi antar cabang  polimer  kemudian  menghasilkan polimer  bercabang  dalam  ukuran  yang  lebih besar  yang  dibarengi  dengan  penurunan derajat  solubilitasnya.  Proses  ini  berlanjut sampai  dengan  tercapainya  titik  gelasi  (gel point),  yaitu  titik  dimana  hidrogel  mencapai kestabilan  secara  struktur.  Pada  umumnya hidrogel  memiliki  struktur  yang  berongga dengan  ukuran  lebar  yang  bervariasi  baik dalam skala nano dengan ukuran diameter 50- 200  nm  (Scanning  Electron  Microscopy— SEM)  dengan  area  permukaan  seluas  ~300 m2/gram  (Brunauer  Emmet  Teller—BET), maupun  skala  mikro  (~300  μm)  tergantung jenis  material  dan  teknik  sintesis  yang diterapkan (Kimura et al., 2011).
Hidrogel adalah sistem semisolid yang dibentuk  dari  kombinasi  satu  atau  lebih polimer  hidrofilik.  Hidrogel  sering  digunakan untuk  pengobatan  luka  dan  luka  bakar  karena kemampuannya  untuk  menyerap  lebih  banyak air  dari  pada  beratnya  sendiri.  Hidrogel berfungsi sebagai bahan ganti yang mengurangi  potensi  iritasi  ketika  kontak dengan  jaringan  dan  struktur  serupa  lainnya. Hidrogel  mampu  menjaga  kelembapan  yang mendukung  penetrasi  oksigen  (Ali  et  al., 2011).
Keuntungan penggunaan hidrogel untuk penanganann luka dan luka bakar adalah sebagai berikut (Ali et al., 2011):
1. Bioadhesi gel ke permukaan luka tinggi, hal  ini  juga  memudahkan  perawatan karena  meningkatnya  kontak  dengan luka.
2. Struktur hidrogel memfasilitasi kelembaban  dan  permeabilitas  uap  air
yang  diperlukan  untuk  menyembuhkan daerah luka. 3. Kesulitan yang khususnya terkait dengan  aplikasi  untuk  membuka  luka tidak terlihat dalam penggunaannya.
4. Dapat  dengan  mudah  dihilangkan  dari situs  aplikasi  ketika  terdapat  efek samping.
2.4 Hidrogel Kolagen Fibril-Alginat
Hidrogel alginat telah banyak digunakan  untuk  enkapsulasi  sel,  transplatasi sel, drug delivery, dan aplikasi teknik rekayasa jaringan.  Menurut  Mahmud  (2015),  meskipun penggunaan  alginat  yang  telah  luas  dikenal karena  sifatnya  yang  banyak  menguntungkan untuk  aplikasi  teknik  rekayasa  jaringan, alginat kurang spesifik dalam interaksi dengan sel mamalia.
Hidrogel kolagen fibril yang dikompositkan  dengan  alginat  untuk  dapat meningkatkan  potensinya  dalam  aplikasi  skin substitute.  Kolagen  mudah  untuk  terdegradasi dan  memiliki  sifat  mekanik  yang  lemah. Alginat  yang  merupakan  polisakarida  alam mampu  membentuk  ikatan  silang  kimia dengan kolagen fibril yang dapat menghasilkan strategi efektif untuk
peningkatan  sifat  kolagen  (Lin  Sang  et  al.,
2011).
. 2.5 Fourier Transform Infra Red (FTIR)
Karakterisasi  sampel  dengan  uji  FTIR dilakukan  dengan  menggunakan  alat  Jasco FT/IR 5300 pada rentang bilangan gelombang 4000-600  cm-1.  Sebelumnya  sampel  dan serbuk  KBr  dihaluskan  dalam  satu  cawan dengan  penempa  hingga  halus  dan  merata kemudian dicetak dalam cetakan dan diberikan pembebanan hingga diperoleh sampel berbentuk palet tipis dengan ketebalan kurang dari 1 mm. Data yang diperoleh dari uji FT-IR berupa  puncak  spektrum  serapan  karakteristik gugus fungsi yang digambarkan sebagai kurva transmitansi (%) terhadap bilangan gelombang (cm-1).

## 2.6 Scanning Electron Microscope (SEM)
Karakterisasi  sampel  dengan  uji  FTIR dilakukan  dengan  menggunakan  alat  Jasco FTIR  5300  pada  rentang  bilangan  gelombang 4000-600  cm-1.  Sebelumnya  sampel  dan
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Faiq Nadiatul Mardia Asa
serbuk  KBr  dihaluskan  dalam  satu  cawan dengan  penempa  hingga  halus  dan  merata kemudian dicetak dalam cetakan dan diberikan pembebanan hingga diperoleh sampel berbentuk palet tipis dengan ketebalan kurang dari 1 mm. Data yang diperoleh dari uji FT-IR berupa  puncak  spektrum  serapan  karakteristik gugus fungsi yang digambarkan sebagai kurva transmitansi (%) terhadap bilangan gelombang (cm-1).

## 2.7 Uji Absorpsi
Derajat penggembungan merupakan suatu parameter  untuk  mengetahui  terjadinya  ikatan polimer  sehingga  diketahui  kekuatan  suatu bahan  untuk  menahan  air.  Tingkatan  atau keteraturan  ikatan  dalam  polimer  ditentukan melalui  persentase  penambahan  berat  polimer setelah  mengalami  penggembungan.  Jika polimer  hidrogel  mengembang  (swelling) dalam  mediumnya,  ini  menunjukkan  bahwa hidrogel mampu mengabsorpsi medium cairnya  tanpa  larut  didalamnya.  Kemampuan absorpsi  penutup  luka  yang  sesuai  dengan kemampuan  absorpsi  plester  komersil  yakni 195,6990%. Pengukuran
persentase penggembungan ditentukan
berdasarkan persamaan, yaitu: (Muthoharoh, 2012). 2.8 Uji Kuat Tarik
Prinsip  kuat  tarik  adalah  menghitung besarnya  beban  tarik  maksimum  per  satuan luas.  Kekuatan  tarik  merupakan  gaya  tarik maksimum  yang  dapat  ditahan  oleh  bahan selama pengukuran berlangsung hingga bahan terputus,  sehinga  kuat  tarik  dari  suatu  kasa sangat  berpengaruh  terhadap  kualitas  dari bahan  tersebut.  Pengujian  kekuatan  tarik  ini nantinya  untuk  mengetahui  seberapa  besar nilai  kuat  tarik  paduan  yang  dihasilkan. Kecepatan  penarikan  yang  digunakan  pada semua  sampel  adalah  sama,  sehingga  tidak mempengaruhi nilai kuat tarik yang dihasilkan.
2.9 Uji Kemuluran (Elongation at break)
Prinsip elongasi adalah besarnya pertambahan  panjang  yang  diakibatkan  oleh beban  tarikan  pada  saat  putus.  Nilai  elongasi atau persen perpanjangan merupakan perubahan  panjang  maksimal  bahan  sebelum terputus. Nilai elongasi atau persen
perpanjangan  dari  suatu  bahan  juga  sangat berpengaruh  terhadap  kualitas  dari  bahan tersebut. Besarnya elongasi menentukan keelastisan  atau  keuletan  (ductility)  suatu material.  Nilai  elongasi  untuk  kulit  manusia berada  pada  kisaran  30-115%.  Bila  nilainya mendekati nol maka material tersebut merupakan  material  yang  rapuh  (Annaidh, 2012).

## 3. METODE PENELITIAN
3.1 Sintesis komposit kolagen-alginat- nanopartikel perak
Tahap  awal  pembuatan  membran  hidrogel dimulai dengan melarutkaan alginat 3%w/v  atau sebanyak  3  gram  dalam  50  ml  aquades  dengan menggunakan  pengaduk  magnetik  selama  ±  1 jam.  Selanjutnya  melarutkan  kolagen  dengan variasi  komposisi  berat  antara  lain  1%,  2%,  3%, 4% dan 5% (w/v) dalam 25 ml asam sitrat selama ± 3 jam dalam suhu ruang dengan menggunakan pengaduk  magnetik..  Larutan  alginat  yang  sudah terbentuk  akan  ditambahkan  larutan  kolagen pertetes dengan dilakukan pengadukan menggunakan  pengaduk  magnetik  sampai  kedua larutan  homogen,  lalu  ditambahkan  CaCO3 sebanyak  0,06  gram    dan  GDL  sebanyak  0,214 gram  dengan  tetap  melakukan  pengadukan  pada larutan  alginat-kolagen.  Hidrogel  yang  telah terbentuk dari ketiga larutan dituang pada cetakan untuk  membentuk  membran  dengan  metode kering udara pada suhu ruang selama ± 7 hari dan selanjutnya dilepaskan dari cetakan.

## 3.2 Uji FTIR (Fourier Transform Infra Red)
Karakterisasi  sampel  dengan  uji  FTIR dilakukan dengan menggunakan alat Jasco FT/IR 5300 pada rentang bilangan gelombang 4000-600 cm-1.  Sebelumnya  sampel  dan  serbuk  KBr dihaluskan  dalam  satu  cawan  dengan  penempa hingga halus dan merata kemudian dicetak dalam cetakan  dan  diberikan  pembebanan  hingga diperoleh  sampel  berbentuk  palet  tipis  dengan ketebalan kurang dari 1 mm. Data yang diperoleh dari  uji  FT-IR  berupa  puncak  spektrum  serapan karakteristik  gugus  fungsi  yang  digambarkan sebagai kurva transmitansi (%) terhadap bilangan gelombang (cm-1).

## 3.3 Uji SEM
Untuk mengetahui morfologi permukaan pada membran hidrogel komposit yang terbentuk, maka
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Faiq Nadiatul Mardia Asa
dilakukan  Uji  SEM.  Pengujiannya  dengan memotong  spesimen  lalu  dilapisi  dengan  emas. Struktur  mikro  membran  hidrogel  komposit diselidiki  dengan  pengukuran  geometris  pada pemindaian elektron mikrograf.

## Uji Absorpsi
Uji kemampuan absorbsi  membran hidrogel komposit dilakukan dengan menginkubasi membran hidrogel komposit pada pH 7,4  dalam larutan  phosphate  buffer  saline  (PBS)  pada  suhu ruang.  Penghitungan  berat  basah  membran hidrogel komposit dilakukan selama beberapa kali dengan  memberi    membran  filter  paper  yang digunakan  untuk  menghilangankan  air  serapan pada  permukaan  kemudian  segera  ditimbang dengan timbangan digital.

## 3.4 Uji Mekanik
Pengujian  kekuatan  tarik  merupakan  salah satu  uji  mekanik  yang  dilakukan  dengan  mesin tensile IMADA tipe HV-1000N. Sebelum sampel diletakkan  pada  mesin  tensile  tersebut,  tebal membran diukur dahulu. Nilai beban penarik dan perubahan panjang sampel pada saat putus dicatat. Hasil  yang  akan  diperoleh  adalah  nilai  tensile strength dan elongation dari bahan yang diuji.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  sampel  dengan  FTIR  dilakukan untuk  mengetahui  gugus  fungsi  yang  terdapat pada  sampel.  Pengujian  MTT  asaay  untuk mengetahui  sitotoksisitas  sampel.  Pengujian  pH untuk  mengetahui  besarnya  nilai  pH  pada membran  yang  terbentuk.  Pengujian  SEM dilakukan untuk mengetahui morfologi permukaan  membran  yang  telah  terbentuk. Pengujian  absorpsi  dilakukan  untuk  mengetahui kemampuan  membran  dalam  menahan  air. Pengujian  mekanik  dilakukan  untuk  mengetahui kemampuan  membran  untuk  menahan  beban dengan tanpa mengalami putus.

## 4.1 Uji FTIR
Pembuatan  membran  hidrogel  komposit bahan  utamanya  antara  lain  bubuk  natrium alginat  dan  kolagen.  Kedua  bahan  utama tersebut  diuji  FTIR  untuk  mengetahui  gugus fungsi  yang  terdapat  di  dalam  masing-masing bahan utama untuk dijadikan acuan
pencocokan dengan uji FTIR sampel membran komposit.  Pada  tahap  pengujian  bahan  yang akan  diuji  larutkan  dengan  KBr  yang kemudian  diuji  dengan  alat  FTIR.  Membran yang  diuji  dengan  spektroskopi  FTIR  akan menghasilkan grafik spektrum yang menggambarkan nilai bilangan gelombang dan % transmitansi.
Hasil analisis dari spektroskopi FTIR yang didapatkan  dari  kolagen  dan  alginat  yang merupakan  bahan  utama  akan  menjadi  acuan untuk  menunjukkan  adanya  interaksi  kedua bahan  utama  tersebut  pada  membran  hidrogel komposit.  Pada  hasil  spektroskopi  membran hidrogel  komposit  menunjukkan  kesamaan serapan  pada  gelombang  yang  dimiliki  oleh kedua bahan dasar utama.
Pada gambar 4 yang merupakan spektrum serapan  kolagen  terdapat  dominasi  gugus amida  yang  menunjukkan  bahwa  kolagen merupakan  turunan  asam  amino.  Spektrum serapan  kolagen  terdapat  gugus  hidroksil  (O- H)  yang  muncul  pada  bilangan  gelombang 3488  cm-1.  Gugus  N-H  (stretching)  muncul pada  bilangan  gelombang  3299  cm-1.  Gugus amida  I,  II,  dan  III  merupakan  pita  serapan yang  khas  dari  kolagen  berdasarkan  struktur kimianya.  Amida  I  adalah  faktor  penting dalam  memahami  struktur  sekunder  dari protein.  Gugus  amida  I  ditunjukkan  pada bilangan gelombang 1650 cm-1 yang merupakan vibrasi C=O (stretching). Sedangkan  Amida  II  menunjukkan  adanya struktur  heliks.  Gugus  amida  II  ditunjukkan pada  bilangan  gelombang  1571  cm-1  yang merupakan  vibrasi  N-H  (bending).  Adanya amida  III  ditunjukkan  pada  serapan  bilangan gelombang  1448  cm-1.    Gugus  amina ditunjukkan pada serapan bilangan gelombang 1216  cm-1  yang  merupakan  vibrasi  C-N stretching.
Gambar 4. Spektrum FTIR kolagen
Pada  gambar  5  merupakan  spektrum serapan  alginat  yang  memiliki  pita  serapan yang  khas  yaitu  gugus  karboksil  berdasarkan struktur  kimia  alginat.  Gugus  hidroksil  (O-H) ditunjukkan pada serapan bilangan gelombang 3271  cm-1  dan  1408,97  cm-1    yang merupakan  vibrasi  O-H  stretching.  Gugus hidroksil  pada  alginat  menunjukkan  pita  yang melebar  dikarenakan  adanya  ikatan  hidrogen antar molekul. Gugus karbonil yang merupakan pita serapan yang khas dari alginat ditunjukkan pada serapan bilangan gelombang 1593  cm-1  yang  merupakan  vibrasi  C=O stretching.  Gugus  alkil  (-CH-)  ditunjukkan pada  panjang  gelombang  1089,17  cm-1. Sedangkan  gugus  karbonil  ditunjukkan  pada bilangan gelombang 1022,79 cm-1
Gambar 5. Spektrum FTIR Alginat
Gambar  6  merupakan  hasil  uji  FTIR membran  hidrogel  komposit.  Pada  spektrum ini  muncul  serapan  bilangan  gelombang 1600,93  cm-1  yang  menunjukkan  gugus fungsional  C=O  (karbonil)  pada  alginat  dan juga  gugus  C=O  (amida  I)  pada  kolagen. Bilangan gelombang 1545,65 cm-1 menunjukkan  gugus  N-H  (amida  II)  pada kolagen.  Pada  serapan  bilangan  gelombang 1467  cm-1  menunjukkan  gugus  fungsional  C- N  (amida  III)  dari  kolagen.  Sedangkan  gugus
fungsional  C=O  (hidroksil)  dari  alginat ditunjukkan  pada  bilangan  gelombang  1412 cm-1. Serapan bilangan gelombang 1035 cm-1 merupakan  gugus  fungsional  C-O  (hidroksil) dari alginat.
Gambar 6. Spektrum FTIR komposit kolagen-
alginat
Pada membran hidrogel komposit menunjukkan  bahwa  terjadi  interaksi  antara dua  bahan  utama  yaitu  alginat  dan  kolagen. Masing-masing  gugus  fungsional  dari  kedua bahan  utama  muncul  pada  spektrum  serapan infra  red.  Gugus  amida  I,  II  dan  III  yang merupakan  dominasi  gugus  pada  kolagen muncul  pada  spektrum  FTIR  membran hidrogel komposit. Gugus karbonil dari alginat juga  muncul  pada  spektrum  FTIR  membran hidrogel  komposit.
Tabel  1. Hasil  pengujian  FTIR  pada  sampel Membran Komposit Gugus/ Ikatan Kolagen Alginat Komposit Amida (N-H) 3299 - 3266,92 Amida I (C=O) 1650 - 1600,93 Amida II (N-H) 1571 - 1545,64 Amida III (C-N) 1448 - 1467,02 Amina (C-N) 1216 - - Karbonil (C=O) - 1593,56 1600,93 Hidroksi - 1408,97 1411,97
4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 23.0 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 72.5 cm-1 %T 3542,38 3488,36 3299,43 1650,53 1571,59 1448,63 1216,53 1138,28 1062,30 987,43 873,57 790,60 661,64 577,55 527,38
l (O-H) Alkil (C-H) - 1089,17 - Karbonil (C=O) - 1022,79 1035,45 Pada membran hidrogel komposit menunjukkan  bahwa  terjadi  ikatan  antara  dua bahan  utama  yaitu  alginat  dan  kolagen. Masing-masing  gugus  fungsional  dari  kedua bahan  utama  muncul  pada  spektrum  serapan infra  red.  Gugus  amida  I,  II  dan  III  yang merupakan  dominasi  gugus  pada  kolagen muncul  pada  spektrum  FTIR  membran hidrogel komposit. Gugus karbonil dari alginat juga  muncul  pada  spektrum  FTIR  membran hidrogel  komposit.
Pada  hasil  spektrum  serapan  membran hidrogel  kolagen  fibril-alginat-nanopartikel perak  tidak  muncul  gugus  baru  dan  hanya terjadi pergeseran panjang gelombang.
Seluruh panjang gelombang pada hasil serapan spektrum komposit yang terbentuk mengalami pergeseran  panjang  gelombang  seperti  pada hasil  FTIR  membran  komposit  ditunjukkan spektrum serapan bilangan gelombang 1600,93 cm-1  yang  merupakan gugus Amida I yang merupakan karakteristik yang khas dari kolagen. Amida I adalah faktor penting dalam pemahaman struktur sekunder dari protein (Su Rong et al., 2009). Pada bilangan 1600,93 cm- 1    juga    menunjukkan  gugus  karbonil  dari alginat. Spektrum serapan tersebut menunjukkan bahwa terjadi pergeseran bilangan gelombang yang menunjukkan adanya  interaksi  dari  kolagen  dan  alginat. Ikatan  antara  gugus  karbonil  (C=O)  pada alginat  dengan  gugus  amida  (N-H)  pada kolagen  menghasilkan  ikatan  kimia  berupa ikatan hidrogen.
Penentuan  Morfologi  Membran  Hidrogel Komposit  dengan  SEM  ( Scanning  Electron Microscope)
Morfologi  permukaan  sampel  mebran hidrogel  komposit  dapat  diamati  dengan menggunakan.  Pengamatan  dengan  SEM
memerlukan coating terlebih dahulu dikarenakan sampel membran hidrogel komposit  yang  bahan  utamanya  merupakan polimer  alam  tidak  akan  tertembak  elektron yang  menyebabkan  sampel  rusak  karena berongga pada saat pengamatan dengan SEM. Pelapisan  menggunakan  emas  atau  Au (Aurum). Hasil yang ditunjukkan dari pengamatan  sampel  dengan  menggunakan SEM dapat dilihat pada gambar 7.
Gambar 7.
Penampang
morfologi membran komposit alginat-kolagen
Analisis  uji  morfologi  dengan  SEM  ini didapatkan  gambaran  permukaan  membran yang bewarna gelap dan terang. Warna terang pada  gambar  hasil  tersebut  menunjukkan permukaan  membran  yang  lebih  tinggi dibandingkan  yang  bewarna  gelap.  Sehingga warna yang terlihat gelap merupakan pori dari sebuah membran. Pada gambar 4. ditunjukkan menunjukkan  permukaan  yang  berpori  besar dan berdinding tebal.

## Uji Kemampuan Absorpsi
Pengujian  kemampuan  absorpsi  bertujuan untuk  mengetahui  besarnya  penyerapan  air (swelling)  yang  mampu  dilakukan  oleh membran hidrogel. Ukuran  membran hidrogel yang digunakan untuk pengujian ini adalah 1 x 1 cm, yang kemudian dilakukan penimbangan untuk  mengetahui  berat  awal  membran hidogel  komposit.  Selanjutnya  membran direndam dalam larutan PBS ber-pH 7 selama 12  jam.  Larutan  PBS  didapatkan  dari melarutkan  satu  tablet  PBS  dalam  100  ml
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Faiq Nadiatul Mardia Asa
aquades.  Selanjutnya  dilakukan  penimbangan membran hidrogel komposit untuk mengetahui berat  akhir  setelah  perendaman  dengan  PBS selama  12  jam.  Masing-masing  membran hidrogel  dilakukan  pengulangan  sebanyak  3 kali,  yang  kemudian  dilakukan  perhitungan presentase  rata-rata  nilai  absorpsi  (swelling) membran hidrogel komposit. Hasil perhitungan  presentase  nilai  rata-rata  absorpsi membran hidrogel komposit dapat dilihat pada Lampiran  10.  Presentase  banyaknya  air  yang terserap  oleh  membran  hidrogel  komposit dapat  dihitung  dengan  persamaan  1  dan  hasil perhitungan  rata-rata  presentase  absorpsi membran hidrogel komposit ditunjukkan pada Tabel 5.
Gambar 8. Grafik  kemampuan  absorpsi membran hidrogel komposit. Tabel 2. Rata-rata presentase kemampuan absorpsi Variasi komposisi kolagen Kuat tarik (N/mm 2 ) Standar deviasi 1% 3,07 ±0,69 2% 1,25 ±0,62 3% 0,77 ±0,25 4% 3,73 ±1,33 5% 3,74 ±1,05
Berdasarkan Tabel 2. dapat diketahui rata- rata  nilai  presentase  kemampuan  absorpsi masing-masing  membran  hidrogel  komposit kolagen-alginat-nanopartikel  perak  dengan variasi  komposisi  kolagen  1%,  2%,  3%,  4%
dan 5% antara lain 196% ± 8,02 ; 152% ± 4,04 ;  131%  ±  3,61  ;  122%  ±  5,51  dan  108%  ± 10,02.  Berdasarkan  hasil  analisis  tersebut menunjukkan  perbedaan  nilai  presentase penyerapan air (swelling) dari masing- masing variasi  komposisi  kolagen  pada  membran hidrogel  komposit.  Hal  ini  didukung  dengan hasil  uji  statistik  dari  data  uji  absorpsi  yang diketahui  signifikansi  pada  uji  ANOVA sebesar  0,000  (P  <  0,05)  sehingga  dapat disimpulkan  data  uji  absorpsi  memiliki minimal  satu  pasangan  kelompok  yang berbeda.  Nilai  rata-rata  presentase  absorpsi membran mengalami penurunan seiring dengan kenaikan komposisi kolagen. Presentase absorpsi sangat bergantung pada  sifat  hidrofilik  dan  mikro  membran, karena  kolagen  dan  alginat  merupakan  bahan hidrofilik maka keduanya memiliki kemampuan  untuk  mempertahankan  struktur membran  tetap  solid.  Kolagen  yang  memiliki sifat  mekanik  yang  rendah  menyebabkan kolagen  tidak  dapat  mempertahankan  struktur membran  berpori  saat  dibawa  keluar  dari larutan PBS. Sebaliknya, alginat yang memiliki sifat elastisitas yang tinggi dibanding kolagen  dapat  membantu  struktur  membran berpori. Hal tersebut menyebabkan presentase rata-rata  absorpsi  akan  menurun  seiring dengan  meningkatnya  penambahan  kolagen. Namun demikian, membran ini dapat dikatakan  sebagai  membran  hidrogel  karena memiliki  presentase  rata-rata  absorpsi  >  90% (Muthoharoh,  2012).  Pada  sampel  2  yang memiliki nilai absorpsi optimum dibandingkan sampel lainnya dikarenakan memiliki komposisi  alginat  dan  kolagen  yang  ideal dimana  komposisi  alginat  masih  lebih  besar dibandingkan  kolagen  dan  komposisi  kolagen tidak  terlalu  kecil.  Hal  tersebut  didukung dengan  nilai  standar  deviasi  yang  kecil  dan data  uji  statistik  dengan  ANOVA.  Hasil  uji statistik  data  uji  absorpsi  terdapat  perbedaan nyata  pada  perlakuan  untuk  kolagen  1%  dan perlakuan  kolagen  2%.  Pada  sampel  dengan komposisi alginat dan kolagen yang seimbang sampel cenderung menurun kekuatan absorpsinya.  Alginat  sebagai  agen  pembentuk gel  berkurang  kemampuan  absorpsinya  ketika
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
komposisi  kolagen  diperbanyak,  hal  ini membuat  semakin  banyak  rantai  alginat  yang berikatan dengan kolagen sehingga kemampuan  mengembangnya  akan  menurun sehingga membran menjadi semakin kuat. Hal tersebut  didukung  dengan  hasil  uji  statistik data  uji absorpsi untuk  perlakuan  kolagen 3% yang  tidak  terdapat  perbedaan  nyata  dengan data uji absorpsi untuk perlakuan kolagen 4%. Pada  sampel  dengan  komposisi  alginat terbesar  memiliki  nilai  absorb  yang  tinggi dikarenakan  masih  belum  banyak  terjadi ikatan  antara  rantai  alginat  dan  kolagen.  Hal ini membuat membran lebih banyak menyerap larutan  sehingga  membran  mudah  rapuh  dan mudah hancur.  Hal tersebut didukung dengan hasil uji stasistik dengan ANOVA dimana data uji absorpsi untuk perlakuan kolagen 4% tidak berbeda  nyata  dengan  data  uji  absorpsi  untuk perlakuan kolagen 5%.

## UJI MEKANIK
Parameter  penting  untuk  karakteristik mekanik  yang  diukur  dan diamati  dari sebuah membran  hidrogel  adalah  kekuatan  tarik  dan elongasi.  Pengujian  tensile  strength    atau  uji tarik dan elongasi dilakukan untuk mengetahui kakarteristik  mekanik  membran  pada  masing- masing  komposisi  dengan  menggunakan persamaan  2.4.  dan  elongasi  menggunakan persamaan  2.5.  Hasil  pengujian  tarik  sampel membran hidrogel komposit dapat dilihat pada Tabel.3
Tabel 3. Data pengukuran kuat tarik membran hidrogel komposit Variasi komposisi kolagen Kuat tarik (MPa) Standar deviasi 1% 3,07 ±0,69 2% 1,25 ±0,62 3% 0,77 ±0,25 4% 3,73 ±1,33 5% 3,74 ±1,05
Gambar  9 .  Grafik  kuat  tarik  membran hidrogel
komposit kolagen-alginat-
nanopartikel perak
Pada  membran  hidrogel  komposit dengan  variasi  komposisi  kolagen  1%,  2%, 3%,  4%  dan  5%  (w/v)  mempunyai  nilai  kuat tarik masing-masing sebesar 3,07 MPa ± 0,69 ;  1,25  MPa  ±  0,62  ;  0,77  MPa  ±  0,25  ;  3,73 MPa  ±  1,33  dan  3,74  MPa  ±  1,05  yang ditunjukkan  pada  Gambar  5.8.  Terdapat  nilai yang menurun signifikan pada sampel 2 dan 3. Hal tersebut dikarenakan pada sampel 2 dan 3 terjadi kesalahan prosedural ketika pencetakan yaitu  saat  dilakukan  uji  tarik  sampel sebenarnya  belum  benar-benar  kering.  Waktu pengeringan  yang  berbeda  pada  sampel  2  dan 3 dibandingkan sampel yang lain berpengaruh pada  tingkat  kekeringan  sampel.  Sampel dengan  waktu  pengeringan  yang  lebih singkat menghasilkan  kondisi  sampel  yang  lembab dan mudah robek. Pada sampel 1 dikarenakan memiliki  komposisi  kolagen  terkecil sehingga memiki nilai uji tarik yang kecil dibandingkan sampel  4  dan  5  yang  memiliki  komposisi kolagen  terbanyak.  Sampel  4  dan  5  yang memiliki  nilai  kuat  tarik  lebih  tinggi dibandingkan sampel lainnya dikarekan kolagen memiliki kemampuan untuk meningkatkan kekuatan mekanik membran. Tabel  4.  Data  pengukuran  elongasi  membran hidrogel komposit Variasi komposisi kolagen Elongasi (%) Standar deviasi
1% 15,08 ±2,5 2% 10,69 ±1,3 3% 7,42 ±1,4 4% 5,62 ±0,9 5% 4,43 ±0,6
Gambar  10. Grafik  elongasi  membran hidrogel komposit kolagen-alginat- nanopartikel perak Pada  Tabel  4  elongasi  membran hidrogel
komposit kolagen-alginat- nanopartikel  perak  pada  variasi  komposisi kolagen  1%,  2%,  3%,  4%  dan  5%  (w/v) memiliki nilai masing-masing sebesar 15,08% ± 2,5 ; 10,69% ± 1,3 ; 7,42% ± 1,4 ; 5,63% ± 0,9  dan  4,43%  ±  0,6.  Hasil  tersebut menunjukkan bahwa semakin besar komposisi kolagen maka nilai elongasi semakin menurun.
Pada kelima sampel membran hidrogel komposit hanya sampel 2 dan 3 yang belum  memenuhi  standart  kuat  tarik  untuk scaffold    kulit  manusia  pada  bagian  abdomen menurut  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Annaid  et  al,    2011  yakni  dengan  range  nilai UTS  1-24  MPa.  Kesalahan  prosedur  pada waktu  sintesis  pada  sampel  2  dan  3  membuat nilai kuat tarik dari kedua bahan tersebut tidak sesuai dengan standart. Hal tersebut berbanding  lurus  dengan  nilai  standar  deviasi (standar  error)  kedua  bahan  yang  cenderung besar  dibandingkan  dengan  sampel  lainnya. Nilai  kuat  tarik  optimum  ditunjukkan  pada sampel  1  dibandingkan  sampel  lainnya  dilihat
dari  standar  deviasinya.  Berdasarkan  hasil  uji statistik  data  uji  kuat  tarik  untuk  perlakuan kolagen  2%  dan  3%  tidak  ditemukan perbedaan  yang  nyata.  Hal  mendukung  hasil pengukuran  dengan  alat  uji  tensile  dimana sampel  2  dan  3  yaitu  pada  penambahan kolagen  2  %  dan  4%  yang  mengalami kesalahan  prosedural.  Pada  sampel  4  dan sampel  5  memiliki  nilai  kuat  tarik  tertinggi namun standar deviasinya juga tinggi dibanding  sampel  lain  sehingga  hasil  kedua sampel  ini  kurang  representatif.  Hal  tersebut dapat  dikarenakan  beberapa  faktor,  salah satunya  karena  ketebalan  yang  tidak  merata sehingga  nilai  kuat  tarik  yang  didapat  kurang representatif.
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  data  uji kuat tarik untuk perlakuan kolagen 4% dan 5% diketahui  tidak  terdapat  perbedaan  yang signifikan.  Nilai  kuat  tarik  sampel  yang tergolong  kecil  menunjukkan  sampel  belum optimum  dikarenakan  tidak  terdapat  gugus fungsi  baru  hanya  terjadi  ikatan  fisik  yang dikarenakan  terjadinya  pergeseran  panjang gelombang  spektrum  serapan  pada  hasil  uji FTIR  membran  hidrogel  komposit.  Perlu penambahan crosslinker untuk memperbanyak ikatan  silang  antara  kolagen  dan  alginat.    Hal tersebut  juga  diperkuat  dengan  hasil  uji statistik  data  uji  kuat  tarik  untuk  perlakuan kolagen  1%  yang  tidak  ada  perbedaan  nyata dengan  perlakuan  kolagen  2%  dan  3%  serta perlakuan  kolagen  4%  dan  5%.  Meskipun demikian hasil uji ANOVA data uji kuat tarik memiliki  nilai  signifikansi  sebasar  0,002  (P  < 0,05)  yang  berdasarkan  hasil  tersebut  dapat disimpulkan  minimal  terdapat  satu  pasang kelompok perlakuan yang berbeda.
Hasil elongasi dari kelima sampel menunjukkan bahwa semakin besar komposisi kolagen maka nilai elongasi semakin menurun. Pada  sampel  1  yang  memiliki  komposisi kolagen  paling  rendah  memiliki  nilai  elongasi tertinggi  dikarenakan  perbandingan  kolagen lebih  sedikit  dibandingkan  alginat  yang merupakan  polimer  alam  yang  memiliki  sifat elastis  yang  tinggi.  Penambahan  komposisi kolagen  yang  terlalu  tinggi    seperti  pada
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
sampel  4  dan  5  akan  menghasilkan  membran dengan  sifat  yang  kaku  atau  getas  (brittle) (Krisna, 2011).  Hal  tersebut  didukung  dengan uji  statistik  data  uji  elongasi  untuk  perlakuan kolagen  4%  dan  5%  yang  tidak  memiliki perbedaan  nyata.  Nilai  elongasi  optimum ditunjukkan  pada  sampel  2  dimana  standar deviasi  sampel  2  cenderung  kecil  dibanding keempat sampel lainnya. Sampel 2 menunjukkan nilai representatif dimana komposisi kolagen dan alginat dapat dikatakan ideal  karena  komposisi  alginat  lebih  besar dibanding  kolagen,  namun  komposisi  kolagen juga  tidak  terlalu  kecil  sehingga  membran tidak  terlalu  elastis  dan  tidak  terlalu  kaku. Hasil  tersebut  didukung  dengan  hasil  uji statistik  data  uji  elongasi  untuk  perlakuan kolagen  2%  yang  tidak  memiliki  perbedaan nyata dengan sampel 1% dikarenakan keduanya  masih  memiliki  komposisi  alginat yang  lebih  besar  dibanding  ketiga  perlakuaan kolagen lainnya.

## UJI STATISTIK
Pengujian  statistik  digunakan  untuk menganalisis  data  yang  telah  diperoleh  dari penelitian  ini,  diantaranya  berdasarkan  uji absorpsi,  uji  kuat  tarik  dan  uji  elongasi.  Uji statistik  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu  uji  ANOVA  agar  dapat  diketahui  ada tidaknya  pengaruh  dari  perlakuan  yang diberikan.  Uji  ANOVA  dapat  dilakukan  jika memenuhi  beberapa  syarat  antara  lain  skala data  minimal  interval,  data  harus  terdistribusi normal dan homogen.
Pengujian statistik menggunakan program SPSS untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan  pada  masing-masing  kelompok perlakuan.  Hasil  uji  statistik  disajikan  pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil uji statistik.
DA TA U JI A B S ORP S I
Ke lom pok P erla kua n
N Data Hasil Uji ANOVA R ata -ra ta SD S igni fika nsi Ke sim pu lan
Kolagen 1% (d) 3  195,67 8,02 0,000 Ada beda makna Kolagen 2% (c) 3  151,67 4,04 Kolagen 3% (b) 3 131 3,61 Kolagen 4% (a,b) 3  120,67 5,51 Kolagen 5% (a) 3  107,67 10,02
DA TA U JI K
UA T TARI K
Kolagen 1% (a,b) 3 3,07 0,69 0,002 Ada beda makna Kolagen 2% (a) 3 1,25 0,62
Kolagen 3% (a) 3 0,77 0,25 Kolagen 4% (b) 3 3,73 1,33 Kolagen 5% (b) 3 4,34 1,05
DA TA U JI E L
ON GA S I Kolagen 1% (c) 3 15,09 3,02 0,000 Ada beda makna Kolagen 2% (b,c) 3 10,65 1,59 Kolagen 3% (a,b) 3 7,50 1,66 Kolagen 4% (a) 3 5,68 1,12
Kolagen 5% (a) 3 4,43 0,74
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
Hasil  uji  normalitas  untuk  data  uji absorpsi  menunjukkan  signifikansi  sebesar 0,875  (P  >  0,05).  Nilai  signifikansi  dari  hasil uji  normalitas  pada  data  uji  kuat  tarik  sama dengan  hasil  uji  normalitas  data  uji  absorpsi. Pada  data  uji  elongasi  juga  menunjukkan kesamaan  nilai  signifikansi  dengan  data  uji absorpsi dan data uji ku
at  tarik.  Nilai  signifikansi  dari  ketiga data  uji  lebih  dari  0,05  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  data  terdistribusi  normal. Oleh  sebab  itu,  data  tersebut  tidak  terdapat penyiN/mm2  ngan  dan  dapat  dilakukan  uji lanjutan.
Hasil  uji  homogenitas  pada  data  uji absorpsi,  data  uji  kuat  tarik  dan  data  uji elongasi  menunjukkan  bahwa  ketiga  data  uji tersebut  homogen  sehingga  dapat  dilakukan uji ANOVA. Hasil uji homogenitas data untuk uji  absorpsi  memiliki  signifikansi  sebesar 0,555  (P>0,05).  Pada  data  uji  kuat  tarik memiliki  signifikansi  sebesar  0,09  dan  untuk data  uji  elongi  nilai  signifikansinya  sebesar 0,221.  Berdasarkan  hasil uji homogenitas  dari ketiga  data  tersebut  diketahui  bahwa  data tersebut  homogen  yang  memenuhi  syarat untuk melakukan uji ANOVA yang dilakukan untuk dapat mengetahui ada tidaknya perbedaan antar kelompok perlakuan.
Hasil  uji  ANOVA  untuk  data  uji absorpsi menunjukkan nilai signifikansi sebesar  0,000  (P  <  0,05)  sehingga  pada  data uji  ini  diketahui  terdapat  minimal  satu pasangan  kelompok  perlakuan  yang  berbeda. Uji selanjutnya yaitu Post Hoc Test yang mana diketahui tidak ada perbedaan yang nyata pada perlakuan  kolagen  3%  dan  perlakuan  kolagen 4%.  Pada  data  uji  absorpsi  perlakuan  kolagen 4%  dan  perlakuan  kolagen  5%  hasil  uji  Post Hoc  Test  juga  menunjukkan  tidak  ada perbedaan  yang  nyata.  Hasil  yang  berbeda ditunjukkan  pada  data  uji  perlakuan  kolagen 1% dan perlakuna kolagen 2% yang diketahui terdapat  perbedaan  yang  nyata  dari  keduanya dibandingkan  data  uji  absorpsi  perlakuan kolagen 3%, 4% dan 5%.
Hasil  uji  ANOVA  untuk  data  uji  kuat tarik  menunjukkan  nilai  signifikansi  sebesar 0,002  (P  <  0,05)  sehingga  pada  data  uji  ini diketahui  terdapat  minimal  satu  pasangan kelompok  perlakuan  yang  berbeda.  Pengujian selanjutnya menggunakan Post Hoc Test yang mana  diketahui  data  uji  kuat  tarik  untuk perlakuan kolagen 1% tidak terdapat perbedaan yang nyata.  Pada data uji kuat tarik untuk  perlakuan  kolagen  2%  dan  3% menunjukkan tidak ada perbedaan yang nyata. Pada  data  uji  kuat  tarik  untuk  perlakuan kolagen 4% dan 5%.
Hasil uji ANOVA untuk data uji elongasi menunjukkan  nilai  signifikansi  sebesar  0,000 (P < 0,05) sehingga pada data uji ini diketahui terdapat  minimal  satu  pasangan  kelompok perlakuan  yang  berbeda.  Pengujian  lanjutan dengan  Post  Hoc  Test    menunjukkan  data elongasi untuk perlakuan kolagen 1% dan 2% tidak  ada  perbedaan  yang  nyata,  hal  tersebut sama  dengan  data  elongasi  untuk  perlakuan kolagen  4%  dan  5%.  Perbedaan  yang  nyata ditunjukkan  pada  data  uji  elongasi  untuk perlakuan  kolagen  1%  dan  4%,  serta  data  uji elongasi untuk perlakuan kolagen 1% dan 5%.

## 5. KESIMPULAN DAN SARAN
Membran hidrogel komposit kolagen fibril-alginat- nanopertikel  perak  mempunyai  karakter  berdasarkan hasil  FTIR  menunjukkan  bahan  baku  utama  sudah sesuai dengan gugus fungsinya dan kedua bahan sudah tercampur,  hasil  pengujian  SEM  membran  komposit tanpa  nanopartikel  perak  menunjukkan  penebalan dinding  dan  pori  yang  lebar,  sedangkan  membran dengan  penambahan  nanopartikel  perak  ukuran  pori lebih kecil, kemampuan absorbsi menunjukkan rentang nilai  rata-rata  membran  hidrogel  komposit  sebesar 107,67%  -  195,67%,  nilai  kuat  tarik  menunjukkan rentang  nilai  rata-rata  membran  hidrogel  komposit sebesar  0,77-3,74  MPa,  nilai  elongasi  menunjukkan rentang  rata-rata  membran  hidrogel  komposit  sebesar 4,43 - 15,08%.

## DAFTAR PUSTAKA
Annaidh,  A.N.,  Bruyèred,  K.,  Destrade, M.,  Gilchrista,  M.D.,  Otténio,  M.,. 2012.  Characterization  of  The
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
Anisotropic  Mechanical  Properties of Excised Human Skin. Journal of The  Mechanical  Behaviour  of Biomedical Materials , 3 : 139-148.
Baniasadi,  Mahmoud.,  Majid  Minary
Jolandan.  2015. Alginate-Collagen Fibril   Composite Hydrogel. Materials 2015, 8, 799-814. www.mdpi.com/journal/materials. Chattopadhyay, Sayani., Ronald T. Raines.2014. Collagen-Based Biomaterials for Wound Healing. Biopolymer. © 2014 Wiley Periodicals, Inc. Chawla, Reema., Amelia Seifalian, Nalem S. Moiemen, Peter E. Butler,  Alexander
M. Seifalian. 2014. The Use of Skin Substitute in The  Treatment  of  Burns. London : Elsavier Inc. Cunha,  Cristiana  Branco  da.,  Darinka  D. Klumpers,  Weiwei  A.  Li,  Sandeep T. Koshy, James C. Weaver,  Ovijit  Chaudhuri,  Pedro L. Granja, David J. Mooney. 2014. Influence  of the stiffness of three-  dimensional alginate/collagen-I interpenetrating networks on fibroblast biology. Elsevier. www.elsevier.com/locate/biomaterials .
Depalle,  Baptiste.,  Zhao  Qin,  Sandra  J.
Shefelbine, Markus J. Buehler.2014. Influence of cross-link  structure,  density  and mechanical   properties  in  the mesoscale deformation mechanisms of collagen fibrils. Journal  of  the  Mechanical Behavior of Biomedical Materials (2014). Elsevier.
Khasima,  Keita.,  Masano  Imail.  2011.
Advanced Membrane Material
from  Marine  Biological  Polymer and Sensitive Molecular-Size Recognition for Promising Separation  Technology.  Intech. http://www.intechopen.com/ Kempf, Margit., Yuki Miyamura, Pei-Yun Liu,  Alice  C.H.  Chen,  Hideki Nakamura, Hiroshi Shimizu, Yasuhiko Tabata, Roy M. Kimble, James R. McMillan. 2011.  A  denatured collagen microfiber scaffold seeded with   human fibroblasts and  keratinocytes  for  skin grafting.Elsevier. www.elsevier.com/ locate/biomaterials. Krisna, Dimas Damar Adi, 2011, Pengaruh Regelatinasi dan Modifikasi  Hidrotermal  terhadap Sifat  Fisik  pada  Pembuatan  Edible Film  Dari  Pati  Kacang  Merah
(Vigna angularis sp.), Tesis, Program  Magister  Teknik  Kimia, UNDIP, Semarang
Lee, Kuen  Yong., David J. Mooney.2012. Alginate: Properties and biomedical applications.Elsevier. www.elsevier.com/locate/ppolysci .
Nunamaker, Elizabeth A., Erin K. Purcell,
Daryl  R.  Kipke.  2006.  In  Vivo Stability and Biocompatibility of Implanted
Calcium  Alginate  Disks.  Wiley InterScience. www.interscience.wiley.com .
Sang,  Lin.,  Dongmei  Luo,  Songmei  Xu, Xiaoliang Wang, Xudong Li. 2011. Fabrication  and  evaluation  of biomimetic  scaffolds  by  using collagen– alginate fibrillar gels for potential tissue
engineering  applications.Elsevier. www.elsevier.com/ locate/msec.
Sang,  Lin.,  Xiaoliang  Wang,  Zhenhua Chen,  Jiao  Lu,  Zhongwei  Gu, Xudong Li.   2011.   Assembly  of collagen  fibrillar  networks  in  the presence of alginate.Elsevier. www.elsevier.com/locate/carbpol
Su,Xiu-Rong,et  al.,2009,  Characterization of Acid-Soluble Collagen from the Ceolomic  Wall  of  Sipunculida, Elsevier.
Zheng, Li., Hai Qing Lu,  Hong Song Fan,
Xing Dong Zhang. 2013. Reinforcement and chemical cross-linking in collagen- based   scaffolds  in  cartilage  tissue engineering: a
comparative study. Journal   Iran  Polymer  Vol.
22 page 833-842.