Potensi Antihiperpigmentasi Daun Michelia Alba : Studi In Silico Antihyperpigmentation Potential of Michelia Alba Leaves: In Silico

## Study
Felysia Isman 1 , Paundra Rizky Pratama 1 , Wahida Annisa Ermadayanti 2 , Cici Muarifah 2 , Arif Fadlan 2 * 1 Departemen Teknik Material dan Metalurgi, Institut Teknologi Sepuluh Nopember, Surabaya
2 Departemen Kimia, Institut Teknologi Sepuluh Nopember, Surabaya email: afadlan@chem.its.ac.id
(tanggal diterima: 8-3-2022 , tanggal disetujui: 27-9-2022)

## INTISARI
Michelia  alba secara  empiris  memberikan  efek  awet  muda  yang  berhubungan  dengan pembentukan melanin atau pigmen warna kulit oleh enzim tirosinase. Namun, hiperpigmentasi atau penggelapan kulit dan kelainan pigmen kulit lainnya seperti melasma dan bintik hitam dapat terjadi akibat pembentukan melanin yang berlebihan. Antihiperpigmentasi sintetik yang mampu menekan produksi  melanin  telah  banyak  digunakan,  tetapi  menunjukkan  efek  samping  yang  merugikan. Penelitian ini bertujuan mengkaji potensi M. alba sebagai agen antihiperpigmentasi alami. Penelitian dilakukan secara in silico pada senyawa-senyawa yang terkandung dalam daun M. alba melalui molecular docking terhadap enzim tirosinase (identitas PDB: 1BUG) yang dilanjutkan dengan  analisis  sifat  fisikokimia  dan  profil  penyerapan,  distribusi,  metabolisme,  ekskresi,  dan toksisitas (ADMET).
Hasil simulasi molecular docking senyawa cis -linalool oksida, trans -linalool oksida, linalool, β-elemena,  α-humulena,  dan  nerolidol  dalam  daun M.  alba terhadap  1BUG  menunjukkan  bahwa nerolidol, α-humulena, dan β-elemena memiliki skor penambatan yang lebih baik dari kontrol asam kojat  dan  hidrokuinon.  Nerolidol,  α-humulena,  dan  β-elemena  berinteraksi  dengan  1BUG  melalui ikatan  hidrogen,  interaksi  Van  der  Walls,  dan  interaksi  alkil/π-alkil  dan  π-  π stacking .  Seluruh senyawa tidak melanggar aturan Lipinski dan Veber berdasarkan analisis sifat fisikokimia. Seluruh senyawa juga memiliki profil penyerapan, distribusi, metabolisme, ekskresi, dan toksisitas yang baik berdasarkan parameter dalam masing-masing evaluasi tersebut dalam analisis ADMET.
Kata kunci : Michelia alba ; antihiperpigmentasi; molecular docking ; fisikokimia dan ADMET

## ABSTRACT
Michelia  alba empirically  provides  a  youthful  effect  associated  with  the  formation  of melanin or skin pigment by tyrosinase enzyme. However, the excessive formation of melanin results in hyperpigmentation and various dermatological disorders such as freckles, melasma, and age spots. Synthetic antihyperpigmentation, which suppress melanin production, have been widely used, but have shown adverse side effects. This study aims to examine the potential of M. alba as a natural antihyperpigmentation agent.
The in-silico research  was  conducted  on  the  compounds  contained  in M.  alba leaves through  molecular  docking  against  tyrosinase  enzyme  (PDB  ID:  1BUG)  followed  by  analysis  of physicochemical properties and absorption, distribution, metabolism, excretion, and toxicity profiles (ADMET). The molecular docking results of cis -linalool oxide, trans -linalool oxide, linalool, β-elemene, α-humulene, and nerolidol in M. alba leaves against 1BUG indicated that nerolidol, α-humulene, and β-elemene showed lower docking scores than kojic acid and hydroquinone as controls. Nerolidol, α- humulene, and β-elemene interacted with 1BUG via hydrogen bonding, Van der Walls, and alkyl/π- alkyl and π-π stacking interactions. All compounds did not violate Lipinski and Veber rules based on the analysis of physicochemical properties. All compounds also had good absorption, distribution, metabolism, excretion, and toxicity profiles based on the parameters in each of these evaluations in the ADMET analysis.
Keyword : Michelia alba ; antihyperpigmentation; molecular docking ; physicochemical and ADMET

## 1. PENDAHULUAN
Michelia  alba ,  tanaman  berbunga  keluarga  Magnoliaceae  yang  dikenal dengan  nama  cempaka  putih  atau  bunga  kantil,  diketahui  mengandung  berbagai senyawa aktif seperti alkaloida, benzil, dan asam benzoik [1]. M. alba secara empiris telah  digunakan  untuk  merawat  kulit  karena  memberikan  efek  awet  muda  [2]. Penelitian  mengungkap  bahwa  ekstrak M.  alba dapat  mengembalikan  jumlah kolagen total dalam sel human foreskin fibroblasts (Hs68) dan menghambat ekspresi enzim tirosinase yang berhubungan erat dengan melanin atau pigmen warna kulit [2-5].
Melanin  adalah  pigmen  utama  pewarna  kulit  yang  dihasilkan  melalui melanogenesis  oleh  enzim  tirosinase.  Melanin  terbentuk  dari  L-tirosina  yang mengalami  hidroksilasi  menjadi  3,4-dihidroksifenilalanina  dan  kemudian teroksidasi  lebih  lanjut  menjadi  dopaquinona.  Polarisasi  spontan  dopaquinona selanjutnya  menghasilkan  melanin  [6,7].  Pembentukan  melanin  yang  berlebihan menyebabkan terjadinya penggelapan kulit atau hiperpigmentasi, kelainan pigmen kulit  (melasma)  dan  bintik  hitam  [8].  Hal  ini  selanjutnya  dapat  diatasi  dengan penggunaan antihiperpigmentasi alami dari bahan alam atau sintetik.
Arbutin,  asam  kojat,  dan  hidroquinon  adalah  antihiperpigmentasi  sintetik yang  umum  digunakan  karena  mampu  menekan  produksi  melanin.  Akan  tetapi, agen  antihiperpigmentasi  ini  menunjukkan  efek  samping  yang  beragam  seperti bersifat sitotoksik dan menimbulkan dermatitis pada konsentrasi tinggi sehingga tidak  memuaskan  [9].  Antihiperpigmentasi  alami  selanjutnya  menjadi  target potensial  untuk  mengatasi  kelemahan  ini.    Antihiperpigmentasi  alami  dilaporkan dapat mengatasi produksi melanin yang berlebihan secara efektif dan aman [10].
Berdasarkan  uraian  tersebut,  perlu  dilakukan  studi  untuk  mengungkap potensi M.  alba sebagai  agen  antihiperpigmentasi  alami.  Dalam  penelitian  ini, potensi  senyawa-senyawa  yang  terkandung  dalam  daun M.  alba dikaji  secara in silico . Penelitian meliputi molecular docking senyawa-senyawa dalam daun M. alba terhadap  enzim  tirosinase  dan  analisis  sifat  fisikokimia  dan  profil  penyerapan, distribusi,  metabolisme,  ekskresi,  dan  toksisitas  (ADMET)  senyawa-senyawa tersebut.

## 2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. ALAT DAN BAHAN
Lenovo  Legion-520  Intel®  Core™  i7-7700HQ  CPU@2.80GHz  RAM  8.00GB NVIDIA  GeForce  GTX  1050  Ti  4GB  sistem  operasi  Windows  10  64-bit  berlisensi resmi, perangkat online bebas akses MCULE dengan program default berupa Indigo, OpenBabel, ChemAxon, dan AutoDockTools [11], SwissADME [12], dan pkCSM [13]. Struktur senyawa kimia dalam daun M. alba berupa cis -linalool oksida, trans -linalool oksida, linalool, β-elemena, α-humulena, dan nerolidol [14], struktur protein human tyrosinase (PDB: 1BUG, resolusi 2,70 Å) (https://www.rscb.org).

## 2. 2. CARA KERJA

## Molecular docking
Molecular docking senyawa dalam daun M. alba dilakukan terhadap protein human tyrosinase (1BUG) dengan MCULE. Asam kojat dan hidrokuinon digunakan sebagai  kontrol  [9].  Struktur  dua  dimensi  senyawa  (2D  mol)  disiapkan  dengan perangkat Indigo dalam MCULE melalui konversi struktur format SMILES atau InChI (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/).  Struktur  2D  mol  selanjutnya  dikonversi menjadi struktur tiga dimensi (3D mol) dengan OpenBabel atau ChemAxon dalam MCULE  dan  disimpan  dalam  bentuk  PDBQT  menggunakan  AutoDockTools (parameter default ) dalam MCULE. Protein 1BUG disiapkan dengan PyMOL melalui penghapusan  molekul pelarut  (air)  dan N -feniltiourea  (URS) ( native ligand ) yang kemudian diunggah dalam MCULE. Muatan Gasteiger dan atom-atom hidrogen polar selanjutnya  ditambahkan  kedalam  struktur  protein  [15]. Molecular  docking dilakukan  pada  koordinat  X  23,129  Å,  Y  101,558  Å,  Z  2,507  Å.  Hasil molecular docking dievaluasi dengan AutoDock Vina dalam MCULE (parameter default ) untuk empat pose terbaik.

## Analisis sifat fisikokimia dan ADMET
Analisis sifat fisikokimia dan ADMET senyawa dalam daun M. alba dilakukan dengan SwissADME [9] dan pkCSM [10].

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Molecular docking
Studi in  silico adalah  penapisan  maya  melalui  komputasi  yang  banyak digunakan dalam bidang penemuan obat ( drug discovery ) [16]. Studi in vitro dan in vivo selanjutnya digunakan untuk mengevaluasi hasil in silico [17]. Penapisan maya melalui molecular  docking secara  umum  digunakan  untuk  menganalisis  interaksi senyawa aktif dengan protein target [16,18,19,].
Molecular  docking dalam  penelitian  dilakukan  pada  senyawa cis -linalool oksida, trans -linalool oksida, linalool, β-elemena, α-humulena, dan nerolidol yang terkandung dalam daun M. alba terhadap protein target human tyrosinase (1BUG) menggunakan  perangkat molecular  docking online  MCULE.  Penelitian  dilakukan dengan kontrol berupa asam kojat dan hidrokuinon dan memberikan hasil empat pose terbaik untuk masing-masing senyawa dengan energi ikatan minimum. Skor penambatan yang menyatakan energi ikatan bernilai sebesar -4,4; -4,6; -4,1; -5,1; - 5,2;  -5,4  kkal/mol  untuk cis -linalool  oksida, trans -linalool  oksida,  linalool,  β- elemena,  α-humulena,  dan  nerolidol  (Tabel  1).  Skor  penambatan  asam  kojat  dan hidroquinon sebesar -4,1 kkal/mol dan -4,6 kkal/mol.
Skor penambatan nerolidol (-5,4 kkal/mol), α-humulena (-5,2 kkal/mol), dan β-elemena  (-5,1  kkal/mol)  lebih  baik  dari  asam  kojat  (-4,1  kkal/mol)  dan hidrokuinon  (-4,6  kkal/mol). cis -Linalool  oksida  dengan  skor  penambatan  -4,4 kkal/mol, lebih baik dari asam kojat, dan trans -linalool oksida dan linalool masing- masing  dengan  skor  penambatan  -4,6  kkal/mol  dan  -4,1  kkal/mol  berturut-turut lebih baik dari hidroquinon dan asam kojat. Elfiky et al. (2017) menyatakan bahwa skor  penambatan  yang  semakin  negatif  menggambarkan  kekuatan  ikatan  dan interaksi yang lebih baik [20].
Tabel 1. Hasil molecular docking dan interaksi senyawa daun M. alba terhadap 1BUG
Senyawa Skor docking (kkal/mol) Interaksi Ikatan hidrogen Van der Walls Alkil/π-alkil (π- π stacking) cis -Linalool oksida -4,4 Asn-93 Pro-20, Asn-260, Leu-18, Asp-17, Tyr-262, Cys-92, Gln- 107 Arg-245, His-244, Ile-241, Phe-261 trans -Linalool oksida -4,6 Cys-92, Asn-93 Tyr-262, Gly-259, Asn-260, Leu-18 Phe-261, Pro-19 Linalool -4,1 Asn-93 Gly-259, Asn-260, Tyr-262, Cys-92, Gln-107 Pro-19 β-Elemena -5,1 - Ser-229, Asn-110, Gln-107, Cys-92, Asp-17, Asn-93, Pro- 19, Tyr-262, Asn-260, Gly- 259 Phe-261 α-Humulena -5,2 - Gly-259, Asp-260, Tyr-262, Leu-18, Asn-93, Asp-17, Cys- 92, Gln-107 Pro-19, Phe-261 Nerolidol -5,4 Gly-259 Met-258, His-244, Asn-260, Asn-254, Asn-93, Tyr-262, Asp-17, Leu-18, Pro-20 Arg-245, Ile-241, Phe-261, Pro-19 Asam kojat -4,1 Asp-17 Gly-259, Asn-260, Tyr-262, Pro-19, Cys-92, Gln-107 (Phe-261) Hidroquinon -4,6 - Arg-245, Gly-259, Met-258, Asn-260, Ala-264, His-88, Phe-270, His-240, His-274 Ile-241 (Phe-261, His-244)
Skor  penambatan  nerolidol,  α-humulena,  dan  β-elemena  yang  lebih  rendah  dari kontrol  asam  kojat  dan  hidroquinon  mengindikasikan  bahwa  ketiga  senyawa merupakan kandidat antihiperpigmentasi yang potensial.
Molecular  docking dengan  perangkat Molegro  Virtual  Docker terhadap protein tirosinase jamur dengan ligan alami tropolone (PDB ID: 2Y9X) mengungkap nerolidol memiliki energi MolDock sebesar -79,8 kkal/mol yang sebanding dengan kontrol  asam  kojat  (-78,4  kkal/mol)  dan  tropolone  (-79,7  kkal/mol)  [21].  Studi molecular docking terbaru melaporkan bahwa senyawa puerarin dan daidzin dalam ekstrak Pueraria lobata memiliki afinitas ikatan terbaik terhadap human tyrosinase 1BUG  (-3,18  kkal/mol  dan  -3,43  kkal/mol)  [22].  Sementara  itu Cinnamomum camphora , Petroselinum  crispum , Syzygium  samarangense , Pittosporum  senacia subsp. Senacia , dan S. coriaceum dengan kandungan nerolidol dan α-humulena juga dilaporkan  mampu  menghambat  enzim  tirosinase  dengan  konsentrasi penghambatan sebesar 109,35-158,23 mg ekuivalen asam kojat/gram minyak atsiri [8].  Nerolidol  dan  β-elemena  dalam Lippia  origanoides dilaporkan  pula  dapat membentuk kompleks ion tembaga dan menghambat enzim tirosinase [21].
Interaksi  dan  mode  ikatan  senyawa  pada  1BUG  dapat  diketahui  melalui visualisasi hasil molecular docking . Senyawa daun M. alba berinteraksi dengan 1BUG melalui ikatan hidrogen, interaksi Van der Walls, dan interaksi alkil/π-alkil dan π-π stacking sebagaimana  dapat  dilihat  dalam  Tabel  1.  Nerolidol  dengan  skor penambatan  paling  rendah  (-5,4  kkal/mol)  berinteraksi  dengan  1BUG  melalui ikatan hidrogen dengan residu glisina-259.
a b c
Gambar 1. Visualisasi 2D hasil molecular docking . Nerolidol (a), α-humulena (b), dan β- elemena (c).
Nerolidol, α-humulena, dan β-elemena yang berpotensi sebagai antihiperpigmentasi  selanjutnya  juga  berinteraksi  secara  Van  der  Walls  melalui residu  asparagina-260,  glisina-259,  tirosina-262,  glutamina-107,  dan  sisteina-92 dalam 1BUG (Gambar 1). Residu fenilalanina-261 dalam 1BUG diketahui berikatan dengan nerolidol, α-humulena, dan β-elemena melalui interaksi alkil/π-alkil dan π- π stacking .  Residu  asparagina-260,  glisina-259,  dan  fenilalanina-261  diduga berperan  penting  dalam  interaksi  senyawa  dengan  1BUG.  Analisis  interaksi  dan mode  ikatan  antara  nerolidol,  α-humulena,  dan  β-elemena  dengan  residu  asam amino dalam 1BUG menunjukkan adanya hubungan dengan nilai skor penambatan yang lebih baik dari asam kojat. Nerolidol, α-humulena, dan β-elemena dalam daun M. alba merupakan kandidat agen antihiperpigmentasi potensial [21].

## Analisis sifat fisikokimia dan ADMET
Hasil analisis sifat fisikokimia dengan SwissADME menunjukkan cis -linalool oksida, trans -linalool  oksida,  linalool,  β-elemena,  α-humulena,  dan  nerolidol berpotensi  sebagai  kandidat  obat  (Tabel  2).  Semua  senyawa  memenuhi  aturan Lipinski dengan berat molekul (BM) 154,25-222,37 Dalton (< 500 Dalton), akseptor ikatan  hidrogen  (HBA)  0-2  (<  10),  donor  ikatan  hidrogen  (HBD)  0-1  (<  5),  dan
koefisien partisi oktanol/air (LogP) 1,38-4,53 (< 5) [23]. Semua senyawa memiliki penyerapan atau permeabilitas yang baik karena memenuhi seluruh kriteria aturan Lipinski [24]. Tabel 2 juga menunjukkan semua senyawa memiliki rotatable bonds 0-7 (<10) dan topological surface area 20,23 dan 29,46 Å 2 (<140 Å 2 ) sehingga tidak melanggar  aturan  Veber  [25].  Studi  lanjut  oleh  Chander  dkk.  da  tahun  2017 melaporkan 95% obat klinis memiliki BM 130–725, HBA 2–20, HBD 0–6, dan Log P -2  sampai  6,5.  Berdasarkan  hal    tersebut,    seluruh    senyawa    memenuhi  kriteria sebagai kandidat obat.
Tabel 2. Sifat fisikokimia senyawa daun M. alba Senyawa BM HBA HBD LogP RB TPSA cis -Linalool oksida 170,25 2 1 1,88 2 29,46 trans -Linalool oksida 170,25 2 1 1,38 2 29,46 Linalool 154,25 1 1 2,59 4 20,23 β-Elemena 204,35 0 0 4,53 0 0,00 α-Humulena 204,35 0 0 4,53 0 0,00 Nerolidol 222,37 1 1 3,86 7 20,23
BM  =  berat  molekul,  HBA  =  akseptor  ikatan  hidrogen,  HBD  =  donor  ikatan  hidrogen,  MLogP  = koefisien partisi oktanol/air, RB = ikatan yang dapat diputar, TPSA = topological polar surface area .
Hasil analisis ADMET untuk cis -linalool oksida, trans -linalool oksida, linalool, β-elemena,  α-humulena,  dan  nerolidol  menggunakan  pkCSM  (Tabel  3) menunjukkan  bahwa  seluruh  senyawa  memiliki  penyerapan  yang  baik  dengan persentase  91,887-94,87%  dan  memenuhi  kriteria  (baik  =  >80%,  jelek  =  <30%) [26]. cis -Linalool  oksida  dan trans -linalool  oksida  selanjutnya  menunjukkan permeabilitas kulit yang baik dengan nilai log Kp -2,68 (<-2,5), sedangkan linalool, β-elemena,  α-humulena,  dan  nerolidol  memiliki  permeabilitas  kulit  yang  rendah dengan  nilai  log  Kp  >-2,5  [13].  Lebih  lanjut,  seluruh  senyawa  dapat  terdistribusi secara  merata  dengan  konsentrasi  yang  sama  dalam  plasma  darah  sebagaimana ditunjukkan oleh nilai VDss antara 0,084 hingga 0,601. Kriteria volume distribusi rendah apabila nilai VDss <-0,15 dan tinggi apabila >0,45 [13]. β-Elemena dan α- humulena memiliki volume distribusi yang tinggi dengan nilai log VDss 0,601 dan 0,505.  Tabel  3  menginformasikan  bahwa cis -linalool  oksida  dan trans -linalool oksida dapat terdistribusi dan menembus sawar darah otak dengan moderat yang ditandai  dengan  nilai  log  BB  sebesar  0,217.  Di  sisi  lain,  linalool,  β-elemena,  α- humulena, dan nerolidol memiliki nilai log BB >0,3 sehingga mampu terdistribusi dan menembus sawar darah otak dengan baik. Parameter ini cukup penting dalam mengurangi  efek  samping  dan  toksisitas  serta meningkatkan  efikasi  obat  dengan aktivitas  farmakologi  dalam  otak.  Parameter  logaritmik  konsentrasi  pada  otak terhadap plasma ini dievaluasi secara in vivo dan dinyatakan sebagai log BB yang menyatakan distribusi baik apabila bernilai >0,3 dan jelek apabila bernilai <-1 [13]. Evaluasi metabolisme senyawa terhadap sitokrom P450 dalam hati penting dilakukan karena enzim ini berperan dalam detoksifikasi melalui oksidasi senyawa organik  asing  termasuk  obat.  Enzim  ini  juga  diketahui  berperan  dalam  ekskresi senyawa  tersebut.  Evaluasi  metabolisme  terhadap  isoform  sitokrom  P2D6 (CYP2D6) mengindikasikan bahwa seluruh senyawa dapat dimetabolisme dan tidak mengalami kontra indikasi terhadap sitokrom P450 (Tabel 3).
Tabel 3. Sifat farmakokinetika (ADMET) senyawa daun M. Alba Parameter cis - Linalool oksida trans - Linalool oksida Linalool β- Elemena α- Humulena Nerolidol IA (human, %) 94,87 94,87 93,163 94,359 94,682 91,887 SP (log Kp) -2,68 -2,68 -1,737 -1,279 -1,739 -1,477 VDss (log L/kg) 0,084 0,084 0,152 0,601 0,505 0,37 BBB (logBB) 0,217 0,217 0,598 0,809 0,663 0,652 CYP2D6 substrat tidak tidak tidak tidak tidak tidak CYP2D6 inhibitor tidak tidak tidak tidak tidak tidak TC (log ml/min/kg) 1,297 1,297 0,446 0,251 1,282 1,739 OCT2 substrat tidak tidak tidak tidak tidak tidak Toksisitas Ames tidak tidak tidak tidak tidak tidak LD 50 (mg/kg) 1,917 1,917 1,704 1,535 1,766 1,58
IA = penyerapan intestinal, SP = permeabilitas kulit, VDss = volume distribusi steady state , BBB = sawar darah otak, CY = sitokrom, TC = total clearance , OCT2 = renal organic cation transporter 2 ; LD 50 = oral rat acute toxicity
Parameter  ekskresi  dievaluasi  dengan  melihat  total  clearance  yang  merupakan kombinasi ekskresi di hati dan empedu ( hepatic clearance ) serta ekskresi melalui ginjal ( renal clearance ). Nilai total celarance seluruh senyawa antara 0,251 hingga 1,739  dengan  nerolidol  lebih  cepat  diekskresikan  dan  β-elemena  paling  lambat diekskresikan dibandingkan senyawa yang lain. Selanjutnya, seluruh senyawa tidak berperan  sebagai  substrat  OCT2  yang  berperan  penting dalam ekskresi  obat  dan senyawa endogen. Hal tersebut juga mengindikasikan bahwa seluruh senyawa tidak menimbulkan interaksi samping apabila bertemu dengan inhibitor OCT2.
Seluruh senyawa selanjutnya tidak bersifat mutagenik dan tidak bertindak sebagai karsinogen berdasarkan uji toksisitas Ames yang dilakukan dengan bakteri. Uji  toksisitas  akut  per  oral  pada  rodensia  (LD 50 )  yang  menyatakan  konsentrasi senyawa  yang  menyebabkan  kematian  50%  hewan  coba  juga  digunakan  untuk mengevaluasi  toksisitas  seluruh  senyawa.  LD 50 seluruh  senyawa  bernilai  antara 1,535 hingga 1,917 mg/kg dan termasuk dalam kelompok cukup aman berdasarkan Badan Perlindungan Lingkungan Amerika Serikat [27].
Studi molecular docking , analisis interaksi dan mode ikatan, dan analisis sifat fisikokimia dan ADMET terhadap senyawa dalam daun M. alba menyatakan bahwa nerolidol, α-humulena, dan β-elemena merupakan senyawa aktif yang berpotensi sebagai  agen  antihiperpigmentasi.  Seluruh  senyawa  dalam  daun M.  alba tidak melanggar  aturan  Lipinski  dan  Veber  serta  menujukkan  profil  penyerapan, distribusi, metabolisme, ekskresi, dan toksisitas yang baik.

## 4. KESIMPULAN
Studi in silico melalui molecular docking terhadap senyawa aktif dalam daun M. alba terhadap protein target 1BUG telah dilakukan. Nerolidol, α-humulena, dan β-elemena memiliki skor penambatan yang lebih baik dari kontrol asam kojat dan hidrokuinon dengan interaksi melalui ikatan hidrogen, interaksi Van der Walls, dan interaksi  alkil/π-alkil  dan  π-π stacking .  Analisis  fisikokimia  dan  ADMET
menyatakan  bahwa  seluruh  senyawa  memenuhi  kriteria  sebagai  kandidat  obat dengan profil ADMET yang baik.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Direktorat Jenderal Pembelajaran dan  Kemahasiswaan,  Kementerian  Riset,  Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi Republik Indonesia melalui skema Program Kreativitas Mahasiswa 2021.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
[1]. Swantara, I. M. D., Bawa, I. G. A. G., Suparta, D. N., Agustina, K. K., Temaja, I. R. M. 2020. Identification Michelia alba barks extract using gas chromatography- mass spectrometry (GC-MS) and its antifungal properties to inhibit microbial growth. Biodiversitas . 21: 1541-1550.
[2]. Wang, H. -M., Chen, C. -Y., Chen, C. -Y., Ho, M. -L., Chou, Y. -T., Chang, H. -C., Lee, C. -H., Wang, C. -Z., Chu, I-M. 2010. (-)-N-Formylanonaine from Michelia Alba as a humantyrosinase inhbitor and antioxidant. Bioorg. Med. Chem . 18: 5241- 5247.
[3]. Chiang, H. -M., Chen, H. -C., Lin, T. -J., Shih, I-C., Wen, K. -C. 2012. Michelia Alba extract attenuates UVB-induced expression of matrix metalloproteinased via MAP  kinase  pathway  in  human  dermal  fibroblast. Food  Chem.  Toxicol .  50: 4260-4269.
[4]. Sari,  W.  Y.,  Yuliastuti,  D.,  Ulfa,  M.  2022.  Kandungan  fitokimia  dan  aktivitas antioksidan  krim  fraksi  etanol  kulit  buah  jeruk  manis  ( Citrus  sinensis (L.) Osbeck). J. Farmasi Indonesia. 19: 69-79.
[5]. Ansory,  H.  M.,  Fitriani,  I.  N.  2021.  Efek  reaksi  isomerisasi  pada  miristisin terhadap potensinya sebagai tabir surya secara in-vitro. J. Farmasi Indonesia. 18: 48-54.
[6]. Chávez-Béjar,  M.  I.,  Balderas-Hernandez,  V.  E.,  Gutiérrez-Alejandre,  A., Martinez, A., Bolívar, F., Gosset, G. 2013. Metabolic engineering of Escherichia coli to optimize melanin synthesis from glucose. Microb. Cell Factories . 12: 108.
[7]. Suryani,  N.,  Indriatmoko,  D.  D.,  Mahmudah,  A.,  Efendi,  D.  2022.  Penetapan kadar asam galat dan kuersetin serta aktivitas inhibisi enzim tyrosinase freeze dry jus buah jamblang ( Syzygium cumini (L.) Skeels. J. Farmasi Indonesia. 19: 124-132.
[8]. Jugreet, B. L., Ibrahime, S. K., Zengin, G., Abdallah, H. H., Mahomoodally, M. F. 2021.  GC/MS  Profiling,  in  vitro  and  in  silico pharmacological  screening and principal  component  analysis  of  essential  oils  from  three  exotic  and  two endemic plants from Mauritius. Chem. Biodivers . 18: e2000921.
[9]. Owolabi, J. O., Fabiyi, O. S., Adelakin, L.A., Ekwerike, M. C. 2020. Effects of skin lightening cream agents – hydroquinone and kojic Acid, on the skin of adult female experimental rats. Clin. Cosmet. Investig. Dermatol . 13: 283–289.
[10]. Zhao, N., Su, X., Wang, Y., Chen, J., Zhuang, W. 2020. Traditional chinese herbal medicine for whitening. Nat. Prod. Commun . 15: 1-12.
[11]. Kiss, R., Sandor, M., Szalal, F. A. 2012. http://Mcule.com: A public web service for drug discovery. J. Cheminformatics . 4: P17.
[12]. Daina, A., Michielin, O., Zoete, V. 2016. SwissADME: A free web tool to evaluate pharmacokinetics, drug-likeness and medicinal chemistry friendliness of small molecules. Sci. Rep . 7: 42717.
[13]. Pires,  D.  E.  V.,  Blundell,  T.  L..  Ascher,  D.  B.  2015.  pkCSM:  Predicting  small- molecule  pharmacokinetic  and  toxicity  properties  using  graph-based signatures. J. Med. Chem . 58: 4066–4072.
[14]. Ueyama,  Y.,  Hashimoto,  S.,  Nii,  H.,  Furukawa,  K.  1992.  The  chemical composition of the flower oil and the leaf oil of Michelia alba D.C. J. Essent. Oil Res . 4: 15-23.
[15]. Morris, G. M., Huey, R., Lindstrom, W., Sanner, M. F., Belew, R. K., Goodsell, D. S., Olson, A. J. 2009, AutoDock4 and AutoDockTools4: Automated docking with selective receptor flexibility. J. Comput. Chem . 30: 2785–2791.
[16]. Rudarapal, M., Chetia, D. 2020. Virtual screening, molecular docking and QSAR studies  in  drug  discovery  and  development  programme. J.  Drug  Deliv.  Ther . 10:225-233.
[17]. Maia, E. H. B., Assis, L. C., de Oliveira, T. A., da Silva, A. M., Taranto, A. G. 2020. Structure-based  virtual  screening:  From  classical  to  artificial  intelligence. Front. Chem . 8: 343.
[18]. Listyani,  T.  A.,  Herowati,  R.,  Djalil,  A.  D.  2019.  Analisis docking molekuler senyawa derivate phtalimide sebagai inhibitor non-nukleosida HIV-1 reverse trancsription . J. Farmasi Indonesia. 15: 123-134.
[19]. Pratama,  M.  R.  F.,  Pratomo,  G.  S.  2017.  Pharmacophore  optimization  of berberine as HER2 inhibitor. J. Farmasi Indonesia. 14: 109-117.
[20]. Elfiky, A. A., Mahdy, S. M., Elshemey, W. M. 2017. Quantitative structure-activity relationship and molecular docking revealed a potency of anti-hepatitis C virus drugs against human corona viruses. J. Med. Virol . 89: 1040-1047.
[21]. da Silva, A. P., Silva, N. F., Andrade, E. H. A., Gratieri, T., Setzer, W. N., Maia, J. G. S.,  da  Silva,  J.  K.  R.  2017.  Tyrosinase  inhibitory  activity,  molecular  docking studies  and  antioxidant  potential  of  chemotypes  of  Lippia  origanoides (Verbenaceae) essential oils. Plos ONE . 12: e0175598.
[22]. Gao, D., Kim, J. H., Kim, C. T., Jeong, W. S., Kim, H. M., Sim, J., Kang, J. S. 2021. Evaluation  of  anti-melanogenesis  activity  of  enriched  Pueraria  lobata  stem extracts and characterization of its phytochemical components using HPLC– PDA–ESI–MS/MS. Int. J. Mol. Sci. 22: 8105.
[23]. Lipinski, C. A. 2000, Drug-like properties and the causes of poor solubility and poor permeability. J. Pharmacol. Toxicol. Methods . 44: 235–249.
[24]. Lipinski, C. A., Lombardo, F., Dominy, B. W., Feeney, P. J. 1997. Experimental and computational approaches to estimate solubility and permeability in drug discovery and development settings. Adv. Drug Deliv. Rev . 23 (SUPPL.): 3–25.
[25]. Veber, D. F., Johnson, S. R., Cheng, H.-Y., Smith, B. R., Ward, K. W., Kopple, K. D. 2002,  Molecular  properties  that  influence  the  oral  bioavailability  of  drug candidates. J. Med. Chem . 45: 2615–2623.
[26]. Chander, S., Tang, C. R., Al-Maqtari, H. M., Jamalis, J., Penta, A., Ben Hadda, T., Sirat, H. M., Zheng, Y-T., Sankaranarayanan, M. 2017. Synthesis and study of
anti-HIV-1  RT  activity  of  5-benzoyl-4-methyl-1,3,4,5-tetrahydro-2H-1,5- benzodiazepin-2-one derivatives. Bioorg. Chem . 72: 74-79.
[27]. Label Review Manual - Chapter 7: Precautionary Statements, EPA Washington DC, 2018. OPP Label Review Manual - Chapter 7 (epa.gov). diakses tanggal 06 Maret 2022.