Penulis Herlina N 1* , Dwi Indriati 1 , Mulyati 1 , Yulianita 1 , Elsa Fitria 2
Afiliasi
1 FMIPA, Universitas Pakuan, Jawa Barat, 16144, Indonesia
2 FMIPA, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan, 30128, Indonesia
Kata Kunci  Fraksi Etil Asetat Ampas Tahu  resisten insulin
 diabetes mellitus

## Keywords
 Ethyl Acetate Tofu Faction
 insulin resistance
 diabetes
Diterima 13 September 2019 Direvisi 14 April 2020 Disetujui 20 April 2020 *Penulis Koresponding
Herlina N email: nina.herlina@unpak.ac.id

## ABSTRAK
Ampas  tahu  telah  menunjukkan  efek  antidiabetes  pada  model  hewan  yang  diinduksi aloksan. Penelitian ini bertujuan untuk menguji efek antidiabetes fraksi etil asetat ampas tahu (FEAAT)  pada  model  hewan  resisten  insulin.  Ampas  tahu  diekstraksi  dengan  metode  refluks menggunakan etanol dan HCl, kemudian difraksinasi menggunakan etil asetat. Mencit dibagi menjadi  lima  kelompok,  yaitu  kelompok  normal,  induksi,  obat  pembanding  (Metformin), FEAAT1 (200 mg/kg bb) dan FEAAT2 (400 mg/kg bb). Mencit diinduksi resisten insulin dengan pemberian diet tinggi lemak dan glukosa selama 14 hari. kemudian diberikan bahan uji selama 14 hari. Pengujian efektivitas antidiabetes dilakukan dengan modifikasi Tes Toleransi Glukosa Oral  (TTGO).  Nilai Area  Under  Curve ( AUC )  diukur  sebagai  gambaran  efek  penurunan  kadar glukosa darah. Data AUC yang diperoleh dianalisis secara statistik menggunakan uji Analisi of varians (ANOVA)  dengan  tingkat  kepercayaan  95%.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  nilai AUC kelompok  FEAAT1  tidak memberikan  perbedaan yang  nyata  (p > 0,05)  dibandingkan  dengan kontrol  negatif,  sedangkan  kelompok  FEAAT2  dan  Metformin  memberikan  perbedaan  yang nyata  (p <  0,05).  Jika  dibandingkan  dengan  kelompok  normal,  kelompok  FEAAT2  dan Metformin  tidak  memiliki  pengaruh  yang  berbeda  nyata  (p  >  0,05)  sementara  nilai  AUC FEAAT1 berbeda nyata (p < 0,05). Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa FEAAT2 efektif sebagai antidiabetes pada model hewan resisten insulin.

## ABSTRACT
Tofu residue has shown an antidiabetic effect in alloxan induced diabetic. The aim of this study was to evaluate antidiabetic effect of the ethyl acetate fraction of tofu residue at insulin resistant animal model. Tofu residue was extracted using reflux with the solvent ethanol and HCl, then fractionated using ethyl acetate. Mice were divided into five groups, namely normal, induction, comparative drugs (Metformin), FEAAT1 (200 mg kg b.w.) and FEAAT2 (400 mg/kg b.w.). Mice were induced insulin resistance by giving a diet high in fat and glucose during 14 days,  then  mice  treated  with  the  test  material  during  14  days.  Antidiabetic  effect  was measured by oral glucose tolerance test modification. Area Under Curve (AUC) represents the rise and subsequent lowering of blood glucose levels. The AUC data obtained were statistically analyzed using the Analysis of Variance (ANOVA) test with confidence level of 95%. The results showed  that  the  AUC  value  of  the  FEAAT1  group  have  not  statistically  significant  (p  >  0.05) between  the  induction  group,  while  the  FEAAT2  and  Metformin  groups  have  a  significantly difference  (p  <0.05).  When  compared  with  the  normal  group,  the  FEAAT2  and  Metformin groups  have  not  a  significantly  different  effect  (p  >  0.05)  while  the  AUC  FEAAT1  value  was significantly different (p <0.05). It can be concluded that administration of FEAAT2 for 2 weeks provides effectiveness as an antidiabetic in animal models.

## Efek Antidiabetes Fraksi Etil Asetat Ampas Tahu Pada Model Hewan Resisten Insulin
Antidiabetic of Ethyl Acetate Tofu Residue in Insulin Resistant Animal Models
Herlina et al .

## PENDAHULUAN
Diabetes Mellitus
merupakan gangguan metabolisme kronis dengan multi etiologi yang ditandai dengan  hiperglisemia  disertai  dengan  gangguan metabolisme  karbohidrat,  lipid  dan  protein  sebagai akibat  insufisiensi  fungsi  insulin  (Dipiro et  al. 2008). Hiperglisemia  pada  penderita  DM  tipe  2  lebih  sering disebabkan  karena  terjadinya  resistensi  insulin  pada jaringan  perifer,  sehingga  kebanyakan  glukosa  gagal dibawa  masuk  ke  dalam  sel  (hévenod,  2008). Kegemukan atau obesitas merupakan salah satu faktor resiko  DM.  DM  mengancam  kehidupan  manusia melalui  komplikasi  diabetes  yang  serius  termasuk retinopati, nefropati dan neuropati otonom (Zimmet et al. 2014  dan  Lorber  2014).  Saat  ini  obat  anti-diabetes sintetis  banyak  digunakan  dalam  pengobatan  diabetes tipe 2, tetapi efek samping membatasi penerapan obat- obatan (Derosa & Maffioli 2010). Terapi nutrisi menjadi salah  satu  pendekatan  yang  baik  untuk  membantu pasien diabetes mengontrol kadar glukosa darah (KGD) yang optimal dan mengurangi risiko kerusakan jaringan jangka panjang (ADA 2012).
Indonesia memiliki potensi ampas tahu cukup tinggi, karena  produksi  kedelai  mencapai  779.074  ribu  ton pada tahun 2012 (BPS 2012), hal ini berpengaruh pada produksi tahu yang menggunakan bahan baku kedelai. Ampas  tahu  dianggap  sebagai  limbah  yang  tidak bernilai  ekonomis  sehingga  biasanya  dibuang  tanpa diolah  lebih  lanjut  untuk  dijadikan  produk  bernilai ekonomis. Studi nutrisi yang dilakukan pada hewan dan studi  intervensi  dengan  manusia  menunjukkan  bahwa konsumsi protein kedelai dengan isoflavon meningkatkan  kontrol  glukosa  dan  mengurangi resistensi  insulin  (Kwon et  al., 2009).  Menurut  Balai Penelitian  dan  Pengembangan  industri  tahu  di Indonesia sebagian besar masih melakukan pengolahan secara  sederhana  sehingga  kandungan  bermanfaat yang  terdapat  di  ampas  tahu  masih  cukup  banyak (Arbaiyah  2003).  Sulistiani  (2004)  melaporkan  bahwa tepung  ampas  tahu  mengandung  protein  (11,04%), lemak  (19,69%),  karbohidrat  (51,50%),  serat  pangan tidak larut (42,75%) dan serat pangan larut (8,75%).
Jannatun  (2009)  melaporkan  bahwa  ampas  tahu mengandung  isoflavon  genistein  dan  daidzein  sebesar 65.93  mg/100g  dan  63.68  mg/100g.  Kandungan  ini diduga  memiliki  peranan  penting  dalam  reglukosasi glukosa darah. Bhattamisra et al (2013) dan Babu et al (2013)  serta  Cheong et  al (2014)  mengkonfirmasi bahwa  isoflavon  dari  kedelai  dapat  membantu memperbaiki kondisi hiperglikemia. Akan tetapi belum ada yang mengkonfirmasi efek fraksi etil asetat ampas
tahu  sebagai  antidiabetes  pada  model  hewan  resisten insulin.  Oleh  karena  itu  dalam  penelitian  ini  dilakukan pengujian  efek  hipoglikemik  pada  ampas  fraksi  etil asetat ampas tahu pada mencit yang diinduksi resisten insulin  dengan  pemberian  emulsi  lemak  dan  glukosa. Dari  hasil  penelitian  ini  diharapkan  nilai  guna  ampas tahu  semakin  meningkat  dan  komoditas  ampas  tahu semakin berkembang sehingga meningkatkan pendapatan produsen tahu.

## METODE Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah glukometer (Easy touch, Miaoli  County,Taiwan), strip  test glukosa  (Easy  touch, Miaoli  County,Taiwan),  sonde  oral,  timbangan.  Bahan yang  digunakan  ampas  tahu  (Pabrik  Tahu  Sumedang Bumi Armasta, Bogor, Indonesia), vacuum dryer , etanol 70%, HCl 4N, etil asetat, kloroform, NH4OH, H2SO4 2M, serbuk  magnesium,  alkohol,  akuades,  FeCl3  1%, metanol,  pakan  (512  Bravo),  Metformin,  lemak  sapi, kolesterol,  propiltiourasil,  natrium  glutamat,  sukrosa, fruktosa, tween 80, propilen glikol. Mencit jantan galur deutch  democratic  Yokohama  (DDY)  yang  berumur sekitar  11 minggu  dengan kisaran  bobot  badan  25  g  – 30 g sebanyak 30 ekor.

## Ekstraksi dan Fraksinasi Ampas Tahu
Ampas  tahu  segar  dikeringkan  menggunakan vacuum  dryer hingga  diperoleh  ampas  tahu  kering. Setelah itu dilakukan ekstraksi dengan metode refluks. Sampel  ampas  tahu  sebanyak  1  kg  direfluks menggunakan  campuran  HCl  4N  dan  etanol  dengan perbandingam  1:8  selama  2  jam  pada  suhu  70°C. Campuran  disaring  dengan  menggunakan  pompa vakum  dan  kertas  saring  Whatman  nomor  41.  Filtrat yang  diperoleh  kemudian  dipekatkan  menggunakan rotavapor.  Ekstrak  ampas tahu  difraksinasi  dengan  etil asetat  (1:1)  menggunakan  corong  pisah.  Fraksi  etil asetat  yang  diperoleh  kemudian  disaring,  dan dipekatkan dengan rotavapor.

## Uji Mutu dan Uji Fitokimia
Proses  pengujian  mutu  ampas  tahu  kering  meliputi kadar air, kadar abu dan uji fitokimia. Pengujian kadar air  mengacu  pada  Materia  Medika  (Depkes  1995), kadar  abu  mengacu  pada  Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat  (Depkes  2000)  dan  untuk  uji fitokimia mengacu pada Harborne (1987).

## Persiapan Hewan
Mencit  diaktimasi  dengan  kondisi  laboratorium selama 7  hari.  Mencit  diletakkan  dalam  kandang  pada temperatur  25  ±2°C  dengan  pencahayaan  selama  12 jam  dan  tanpa  pencahayaan  selama  12  jam.  Semua percobaan  telah  disetujui  (Persetujuan  Protokol No.2015006)  oleh  Komite  Etik  Penggunaan  Hewan Percobaan  FMIPA  Universitas  Pakuan  dengan  SK No.16/KEPHP-UNPAK/3-2019. Mencit diberikan makanan  dan  minuman ad  libitum selama  1  minggu sebelum induksi model hewan dilaksanakan.

## Pembentukan Model Hewan Resisten Insulin
Induksi  diabetes  mellitus  dengan  model  resisten insulin  dilakukan  dengan  pemberian  emulsi  tinggi lemak  dan  glukosa  mengacu  pada  penelitian  Ai et  al. (2005).  Emulsi  ini  mengandung  lemak  sapi  (20%), kolesterol (5%), propiltiourasil (1%), natrium glutamate (1%),  sukrosa  (5%),  fruktosa  (5%),  tween  80  (20%), propilen  glikol  (30%)  dan  akuades  (13%).  Setelah  2 minggu  pemberian  induktor,  kadar  glukosa  darah diukur  menggunakan  glukometer  (Easy  touch,  Miaoli County,Taiwan)  dengan  menggunakan  modifikasi  tes toleransi glukosa oral.
Pengujian  Efek  Antidiabetes  Fraksi  Etil  Asetat  Ampas Tahu (FEAAT)
Mencit  secara  acak  dibagi  menjadi  lima  kelompok yaitu kelompok normal (diberikan larutan karboksimetilselulosa  natrium  (Na  CMC)  1%  dengan volume  pemberian  1ml/20  g),  kelompok  induksi (diinduksi  dan  diberikan  larutan  karboksimetilselulosa natrium  (Na  CMC)  1%  dengan  volume  pemberian 1ml/20 g), obat pembanding (Metformin 65 mg/kgbb), FEAAT1 (200 mg/kg bb) dan FEAAT2 (400mg/kgbb).

## Pengukuran Glukosa Darah
Glukosa  darah  diukur  setiap  minggu  pada  mencit selama  perlakuan.  Sampel  darah  dikumpulkan  dari vena  ekor  mencit,  dan  diukur  menggunakan glukometer  Easy  touch  sesuai  dengan  instruksi  pabrik. Hasilnya dinyatakan sebagai plasma mg
/dL.Pemeriksaan glukosa darah menggunakan modifikasi  tes  toleransi  glukosa.  Mencit  diberikan sediaan  uji.  Tiga  puluh  menit  kemudian,  seluruh
kelompok diberikan larutan glukosa secara oral dengan dosis  2  g/kgbb.  Selanjutnya,  setiap  30  menit  setelah pemberian  glukosa,  darah  dari  tiap  hewan  disampling untuk ditentukan KGD hingga menit ke-150. Untuk itu, akan didapatkan parameter KGD hewan pada menit ke- 0, 60, 90, 120 dan 150.  Dilakukan pula analisa dengan melihat perbandingan luas daerah di bawah kurva.Area di bawah kurva (AUC) dihitung untuk mewakili toleransi glukosa.  Nilai  disajikan  sebagai  persentase  kadar glukosa plasma awal dengan cara rumus:
Luas Area di bawah kurva ; (KGDt 1 +KGDt 2 )/2 x (t 2 -t 1 )
Keterangan : KGD t1: kadar  glukosa  darah  periode  pertama pengukuran (mg/dl)
KGD t2 :  kadar  glukosa  darah  periode  kedua pengukuran (mg/dl)
t1  =  Periode  pertama  pengukuran  kadar  glukosa darah (menit)
t2 = periode kedua pengukuran kadar glukosa darah (menit)

## Analisis Data
Hasil  penelitian  dinyatakan  sebagai  rata-rata±SD. Data  dianalisis  dengan  analisis  varians  satu  arah (ANOVA).  SPSS  versi  25.0  (SPSS  Inc.,  Chicago,  IL,  USA) digunakan  untuk  melakukan  semua  analisis  statistik. Nilai  P  kurang  dari  0,05  (P  <0,05)  dianggap  sebagai indikasi signifikansi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar  Air,  Kadar  Abu  dan  Kandungan  Fitokimia Ekstrak Ampas Tahu
Ampas  tahu  kering  mengandung  kadar  air  10,45% dan  kadar  Abu  sebesar  10,95%.  Setelah  diekstraksi dengan  etanol  70%  dan  HCl  kadar  air  ampas  tahu 35,37%  dan  kadar  abu  12,79%  sebagaimana ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Ekstrak  ampas  tahu mengandung  flavonoid  dan  tanin  sebagaimana ditunjukkan pada Tabel 2.
Pembentukan  model  hewan  resisten  insulin dilakukan dengan pemberian emulsi tingggi lemak dan glukosa  selama  dua  minggu.  Hasil  induksi  ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1 menunjukkan bahwa kadar glukosa darah (KGD)  kelompok  normal  berbeda  signifikan  (P<0,001) dibandingkan  kelompok  normal.  Hal  ini  menunjukkan bahwa induksi model hewan resisten insulin dinyatakan berhasil. Model mencit resisten insulin yang digunakan dalam  penelitian  ini  meniru  resistensi  insulin  dan hiperglikemia pada pasien DMT2 (Srinivasan et al. 2005 dan  Reed et  al. 2000).  Makanan  tinggi  lemak  dan glukosa  ini  mengandung  lemak  sapi,  kolesterol, propiltiourasil  (PTU),  sukrosa,  dan  fruktosa  yang diberikan  secara  oral  untuk  memastikan  hewan
mendapatkan  asupan  lemak  dan  glukosa  yang  sama untuk  mencapai  kondisit  resisten  insulin . Makanan  ini didesain  sama  seperti  kondisi  yang  sesuai  dengan keadaan nyata dimana manusia lebih tertarik memakan makanan  siap  saji  yang  mengandung  tinggi  lemak  dan glukosa. Lemak jenuh dan kolesterol dapat meningkatkan  kadar  lipid  dengan  cepat  untuk pembentukan  resistensi  insulin,  fruktosa  memberikan suplai karbon bagi gliserol untuk membentuk trigiserida serta  mendorong  terjadinya  lipogenesis  sehingga meningkatkan  penyimpanan  lemak.  PTU  bekerja
Gambar 1.  Hasil induksi Emulsi Tinggi lemak dan Glukosa selama 14 hari perlakuan
Tabel 1. Kadar Air dan Kadar Abu Ampas Tahu
Uji Karakteristik Sampel Hasil Rata-rata Standar Kadar Air Serbuk kering 10,38 % 10,95 % ≤ 10% 11,53 % Ekstrak etanol 34,58 % 35,37 % 36,17 % Kadar Abu Serbuk kering 1,95 % 10,95 % ≤16 1,93 % Ekstrak etanol 13,52 % 12,79 % 12,07 % Tabel 2. Hasil uji Fitokimia Ampas Tahu (Harborne, 1987)
Senyawa Pereaksi Serbuk Ampas Tahu Ekstrak Etanol Ampas Tahu Alkaloid Bouchardat Dragendorf Meyer + - - - - - Flavonoid HCl. Mg + - Tanin FeCl3 3%, gelatin + + Saponin Akuades - - Keterangan (+) ; Positif,,  (-) ; negatif
n o rma l in d u ks i 0 50 100 150 200 ## Kelompok Perlakuan Ka d a r Gl u k o s a d a r a h ( m g /d l)
meningkatkan kadar kolesterol dengan cara menghambat  sintesis  hormon  tiroid.  Induksi  dengan makanan tinggi lemak dan glukosa dapat menyebabkan pembesaran sel adiposit (Ai dkk, 2005).
Pengujian  tes  toleransi  glukosa  oral  (TTGO)  diawali dengan  pengukuran  KGD  (T 0 )  dan  kemudian  diberikan sediaan uji. Pemberian glukosa (2 g/kgbb) dilakukan 30 menit  setelah  pemberian  sediaan  uji.  Selanjutnya dilakukan  pengukuran  glukosa  darah  setiap  30  menit dan  dilakukan  hingga  2  jam.  Pemberian  sediaan  uji dilakukan  30  menit  sebelum  pemberian  glukosa dimaksudkan  untuk  mengoptimalisasi  penyerapan sediaan uji. Pengukuran glukosa hanya dilakukan dalam rentang  waktu  2,5  jam  karena  KGD  dapat  kembali normal  dalam  waktu  2-2,5  jam  setelah  pemberian glukosa.  AUC  digunakan  sebagai  gambaran  efek hipoglikemik dari fraksi etil asetat ampas tahu (FEAAT). Semakin  kecil  nilai  AUC  maka  efek  hipoglikemik semakin besar. Data AUC dapat dilihat pada Gambar 2.
Hasil pengujian efek yang ditunjukkan pada Gambar 2 menyatakan bahwa Nilai AUC pada FEAAT1 lebih kecil dibandingkan  induksi.  Akan  tetapi  secara  statistik nilainya  tidak  signifikan.  (P value >0,05).  Sedangkan AUC  FEAAT2  dan  Metformin  memiliki  pengaruh  yang berbeda  nyata  terhadap  kelompok  induksi  (P Value <0,05). Hal ini membuktikan bahwa pemberian FEAAT1 selama dua minggu belum menunjukkan efektivitasnya dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah,  berbeda halnya  dengan  FEAAT2  dan  Metformin  yang  sudah menunjukkan efektivitasnya menurunkan kadar
glukosa darah pada model hewan resisten insulin. Jika dibandingkan  dengan  kelompok  normal,  nilai  AUC kelompok  FEAAT2  dan  Metformin  tidak  mengalami perbedaan  yang  nyata  (P value >0,05),  sehingga dikatakan  bahwa  pemberian  FEAAT2  dan  metformin selama dua minggu memberikan efek penurunan kadar glukosa  darah  yang  sebanding  dengan  kelompok normal.
Jannatun  (2009)  melaporkan  bahwa  ampas  tahu masih  memiliki  kandungan  isoflavon  genistein  dan daidzein sebesar 65.93 mg/100 g dan 63.68 mg/100 g. Kandungan ini diduga memiliki peranan dalam regulasi glukosa  darah.  Dalam  penelitian  Mezel  (2003) dilaporkan  bahwa  Isoflavon  dalam  kedelai  dapat mengaktifkan  reseptor  nuklir  termasuk  reseptor teraktivasi  peroksisom-proliferator  (PPAR)  α,  PPAR  γ, protein  pengikat  elemen  yang  diatur  sterol,  dan reseptor  pengikat  hati  untuk  mengatur  metabolisme lemak  dan  glukosa.  Isoflavon  juga  telah  terbukti memperbaiki  kondisi  hiperglikemia,  meningkatkan glukosa  toleransi,  dan  meningkatkan  konsentrasi insulin  yang  tersirkulasi  (Babu et  al.  2013 ), menstimulasi fosforilasi protein kinase teraktivasi-AMP dan  asetil-KoA  karboksilase  untuk  meningkatkan penyerapan  glukosa  dan  oksidasi  asam  lemak (Cederroth et  al.  2008 ).  Menurut  Kwon et  al. (2010) isoflavon  diduga  memiliki  efek  sebagai  antidiabetes melalui  perantara  reseptor  estrogen.  Reseptor estrogen α muncul sebagai molekul kunci yang terlibat dalam metabolisme glukosa dan lipid. Isoflavon adalah
No rmal Ind uks i FE AAT 1 FE AAT 2 ME TF O RM IN 0 10000 20000 30000 40000 # # * * Kelompok Perlakuan A re a Un d e r Cu rv e ( A UC) m g /d lx 1 2 0 m e n it
Gambar 2. Nilai rata-rata Area Under Curve ( AUC ) kadar glukosa darah tiap perlakuan terhadap waktu.
(*)P <0,05 vs Induksi;, (#) P <0,05 vs Kontrol Normal
Herlina et al . fitoestrogen  yang  secara  alami  terjadi  dengan  protein kedelai  secara  struktural  dan  fungsional  mirip  dengan estradiol (Kwon et al., 2010).

## SIMPULAN
Fraksi  etil  asetat  ampas  tahu  memiliki  efek menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada  model  hewan resisten  insulin.  Efektivitas  ini  baru  terlihat  pada pemberian fraksi etil asetat dosis 400 mg/kg bb selama 2 minggu.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terima kasih sebanyak- banyaknya  kepada  KEMENRISTEK  DIKTI  dan  LPPM Universitas  Pakuan  yang  telah  memberikan  telah memberikan  fasilitas  Hibah  Penelitian  Dosen  Muda yang diberikan kepada penulis.

## DAFTAR PUSTAKA
Ai,  J.,  Wang,  N.,  Yang,  M.,  Du,  Z.M.,  Zhang,  Y.C.,  dan Yang,  B.F.  2005.  Develompment  of  Wistar  Rat Model of Insulin Resistance. World J Gastroenteral.
11(24), 3675-3679.
American  Diabetes  Association  (ADA).  2012.  Standard of medical  care  in Diabetes. Diabetes  care. Volume 35, supplement 1.
Arbaiyah,  Ita.  2003.  Kandungan  Protein  dan  Kalsium serta  Daya  Terima  Susu  Kedelai  yang  dibuat  dari Ampas Tahu dengan Penambahan Bahan Pengental [Skripsi]. Medan (ID). Universitas Sumatera Utara. Babu  PV,  Liu  D,  Gilbert  ER.  2013.  Recent  advances  in understanding  the  anti-diabetic  actions  of  dietary flavonoids. J Nutr Biochem.; 24(11):1777-89.
BPS.  2012.  Produksi  Jagung,  Padi  dan  Kedelai  Badan Pusat  Statistik  (BPS),  2012.  Produksi  Padi,  Jagung, dan Kedelai. (Angka Tetap 2011 Dan Angka Ramalan I  2012).  Badan  Pusat  Statistik.  No.  43/07/Th.  XV,  2 Juli 2012 diakses pada 24 Agustus 2018
Cederroth CR, Vinciguerra M, Gjinovci A, Kühne F, Klein M,  Cederroth  M,  Caille  D,  Suter  M,  Neumann  D, James  RW,  Doerge  DR,  Wallimann  T,  Meda  P,  Foti M,  Rohner-Jeanrenaud  F,  Vassalli  JD.  2008.  Dietary phytoestrogens  activate  AMP-activated  protein kinase  with  improvement  in  lipid  and  glucose metabolism. Diabetes.; 57(5):1176-85.
Depkes  RI.  1995. Materia  Medika  Indonesia ,  Jilid  VI. Jakarta  (ID).  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia.
Depkes  RI.  2000. Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan  Obat .  Jakarta:  Direktorat  Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.
Derosa G, Maffioli P. 2010. Effects of thiazolidinediones and  sulfonylureas  in  patients  with  diabetes. Diabetes Technol Ther .  12:491–501.
DiPiro,  J.T.,  Talbert,  R.  L.,  Yee,  G.C.,  Matzke,  G.  R., Wells,  B.G.,  &  Posey, L.M.  2008. Pharmacotherapy: A  Pathophysiologic  Approach  (7th  Edition). USA:
McGraw-Hill
Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia  Penuntun  Cara Modern Menganalisa Tumbuhan . Bandung (ID): ITB. Jannatun,R.  2009.  Kadar  Genistein  Dan  Daidzein  Pada Kedelai,  Ampas  Tahu,  Dan  Oncom  Merah  (Skripsi). Bogor (ID): Insitut Pertanian Bogor.
Kwon,  D.  Y.,  Daily,  J.  W.,  Kim,  H.  J.,  &  Park,  S.  2010. Antidiabetic effects of fermented soybean products on  type  2  diabetes. Nutrition  Research,=. 30(1),  1– 13.  doi:10.1016/j.nutres.2009.11.004  url  to  share this paper:sci-hub.se/10.1016/j.nutres.2009.11.004 Lorber  D.  2014.  Importance  of  cardiovascular  disease risk  management  in  patients  with  type  2  diabetes mellitus. Diabetes  Metab  Syndr  Obes .    7:169–83. doi: 10.2147/DMSO.S61438
Reed  MJ,  Meszaros  K,  Entes  LJ,  Claypool  MD,  Pinkett JG, Gadbois TM, et al . 2000 A new rat model of type 2  diabetes:  the  fat-fed,  streptozotocin-treated  rat.
Metabolism 49:1390–4. doi:
10.1053/meta.2000.17721
Srinivasan K, Viswanad B, Asrat L, Kaul CL, Ramarao P. 2005. Combination of high-fat diet-fed and low-dose streptozotocin-treated  rat:  a  model  for  type  2 diabetes and pharmacological screening. Pharmacol Res. 523:313–20. doi: 10.1016/j.phrs.2005.05.004. Sulistiani.  2004.  Pemanfaatan  Ampas  Tahu  dalam Pembuatan Pangan Tinggi Serat dan Protein sebagai Alternatif  Bahan  Baku  Pangan  Fungsional  [Skripsi]. Bogor (ID). Fateta IPB.
Zimmet  PZ,  Magliano  DJ,  Herman  WH,  Shaw  JE.  2014. Diabetes: a 21st century challenge. Lancet Diabetes Endo .  2:56–64. doi: 10.1016/S2213-8587(13)70112- 8