Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2014, hal 75-80
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Aktivitas Antijamur Fraksi n -Heksana, Etil Asetat, dan Air dari Ekstrak Metanolik Daun Bunga Pukul Empat ( Mirabilis jalapa L.) terhadap Pityrosporum ovale ATCC ® 3179
Antifungal Activity of n -Hexane, Ethyl Acetate, and Water Fractions from Methanolic Leaves Extract of Mirabilis jalapa L. Against Pityrosporum ovale ATCC ® 3179

## AGNES CHRISTINA BUDIWATI, GUNAWAN PAMUDJI W*, ISWANDI
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi: gunawanpamudji@yahoo.com
(Diterima 28 Oktober 2013, disetujui 18 Januari 2014)
______________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Daun bunga pukul empat ( Mirabilis jalapa L.) dapat menghambat pertumbuhan Staphylococus aureus dan  jamur  Aspergilus  sp.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  aktivitas antijamur  fraksi n-heksana,  etil  asetat,  dan  air  dari  ekstrak  metanolik  daun  bunga  pukul  empat terhadap  jamur Pityrosporum  ovale dan  untuk  mengetahui  fraksi  yang  paling  efektif  dalam menghambat pertumbuhan Pityrosporum ovale. Pengujian aktivitas antijamur menggunakan metode difusi, dimana larutan  uji  daun bunga  pukul  empat  seri  pengenceran  10%;  5%;  3%  dimasukkan dalam  sumuran media SGA yang telah dioleskan suspensi jamur uji. Analisa hasil menggunakan metode statistik dua arah. Hasil  penelitian  diperoleh  bahwa  fraksi n-heksana,  etil  asetat, dan  air  dari  ekstrak metanolik daun  bunga  pukul empat mempunyai  aktivitas  antijamur terhadap Phytyrosporum ovale. Fraksi etil asetat pada konsentrasi 10% memiliki aktivitas antijamur paling besar yaitu 25 mm.
Kata kunci : Antijamur, ekstrak metanolik, Pityrosporum ovale, Mirabilis jalapa L.
______________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Leaves of Mirabilis jalapa L. can inhibit the growth of Staphylococcus aureus and Aspergillus sp. The study aimed to determine the antifungal activity of n-hexane, ethyl acetate, and water fractions from the methanolic extract of leaves of Mirabilis jalapa L. against Pityrosporum ovale fungi and to determine  the  most  effective  fraction  in  inhibiting  the  growth  of Pityrosporum  ovale.  Antifungal activity assays using the diffusion method, in which the test solution of Mirabilis jalapa L. leaves made serial consentrations of 10%, 5%, 3% entered in wells that have been applied to SGA media fungal suspension test. The results was analyzed using two ways statistical analysis. The result showed that of n-hexane, ethyl acetate, and water fractions from methanolic extracts Mirabilis jalapa L. leaves have antifungal activity against Phytyrosporum ovale. Ethyl acetate fraction at a concentration of 10% had the highest antifungal activity was 25 mm.
Keywords : antifungal, methanolic extract, Pityrosporum ovale, Mirabilis jalapa L.
______________________________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Iklim  tropis  dengan  kelembaban udara  yang  tinggi  di  Indonesia  sangat mendukung terjadinya pertumbuhan jamur. Jamur  merupakan  salah  satu penyebab infeksi pada penyakit terutama di negara tropis. Salah satu tanaman obat yang digunakan  di masyarakat Indonesia adalah bunga  pukul  empat  ( Mirabilis jalapa). Jamur  yang  sering  menyebabkan penyakit  di  Indonesia  salah  satunya adalah Pityrosporum ovale.
Antibiotik merupakan golongan senyawa  kimia,  baik  alami  maupun sintetik, yang dapat menghambat pertumbuhan dan reproduksi dari berbagai  bakteri  dan  jamur. Berdasarkan toksisitasnya,  antibiotik  dibagi menjadi dua  kelompok,  yaitu  antibiotik dengan aktivitas fungistatik dan aktivitas fungisida.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  aktivitas  antijamur  fraksi n-heksana, etil asetat, dan air dari ekstrak metanolik  daun  bunga  pukul  empat terhadap Phytyrosporum  ovale dan mengetahui  fraksi  yang  paling  efektif dalam
menghambat pertumbuhan
Pityrosporum ovale.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode difusi.  Daun  bunga  pukul  empat  yang telah dikeringkan dan diserbuk,
dimaserasi  selama  5  hari  menggunakan metanol.  Ekstrak  metanolik  dipisahkan dengan  fraksinasi  cair-cair  menggunakan pelarut n-heksana,  etil  asetat,  dan  air.
Ekstrak  metanolik,  fraksi n-heksana,  etil
asetat, dan air dibuat konsentrasi sebesar 10  %,  5%,  dan  3%  kemudian  diuji antijamur  terhadap Pityrosporum  ovale ATCC®  3179  dengan  metode  difusi. Daerah  bening  di  sekitar  sumuran merupakan diameter hambat yang menunjukkan  aktivitas  antijamur.  Semua data  dianalisa  menggunakan  analisa varian dua arah.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pembuatan  ekstrak  metanolik daun bunga pukul empat secara maserasi adalah 45,75 g  dari 500 g serbuk kering dengan persen rendemen 9,15(% b/b).
Hasil  identifikasi  kandungan  kimia ekstrak  metanolik  daun  bunga  pukul empat  telah  memberikan  hasil  sesuai pustaka, yaitu mengandung tanin, flavonoid, polifenol, dan alkaloid, saponin. Tabel 1. Rendemen  fraksi  dari  ekstrak  metanolik daun bunga pukul empat Fraksi Rendemen (%) n-heksana 10,43 Etil asetat 14,53 Air 8,18
Ekstrak metanolik daun bunga pukul empat  ditimbang  40  gram  untuk difraksinasi.  Hasil  fraksinasi  tiap  pelarut berbeda-beda  seperti  ditunjukkan  pada Tabel 1. Rendemen tiap pelarut berbeda- beda  karena  kemampuan  pelarut  dalam menyari senyawa yang terkandung dalam ekstrak  metanolik  daun  bunga  pukul empat  juga  berbeda.  Senyawa  nonpolar akan  tersari  dalam  pelarut n-heksana,
senyawa  semi  polar  akan  tersari  dalam pelarut  etil  asetat,  sedangkan senyawa polar akan tersari dalam pelarut air

## Hasil identifikasi jamur uji
Hasil identifikasi Pityrosporum ovale ATCC®  3179  dari  biakan  murni  yang diinokulasi  pada  media  Sabouraud Glukosa  Agar,  diinkubasi  pada  suhu
kamar  selama  1-2  hari  terbentuk  koloni yeast  berwarna  kuning. Hasil  identifikasi secara  mikroskopis  membentuk  tabung- tabung  benih.  Blastospora  merupakan tunas atau kuncup yang tumbuh pada sel khamir.
Tabel 1. Rata-rata diameter daya hambat fraksi daun bunga pukul empat terhadap Pityrosporum ovale Bahan Konsentrasi (%) Diameter Daya Hambat (mm) Fraksi n-heksana 3 0 5 16,71 ± 1,86 10 23,01 ± 1,86 Fraksi etil asetat 3 0 5 16,33 ± 1,25 10 25,00 ± 1,85 Fraksi air 3 0 5 13,85 ± 2,58 10 20,10 ± 3,75 Flukonazole 0,2 47,49 ± 6,17 (kontrol positif) DMSO 1 0 (kontrol negatif)
Gambar 1. Rata-rata diameter daya hambat fraksi n-heksana, etil asetat, dan air daun bunga pukul empat pada konsentrasi 3%, 5%, dan 10% terhadap Pityrosporum ovale.

## Hasil Uji Anti Jamur
Uji  antijamur  pada  penelitian  ini menggunakan  metode  difusi.  Metode  ini menggunakan difusi sumuran dan diinkubasi  selama  48  jam  dengan  suhu 37°C.  Masing-masing  fraksi  daun  bunga pukul  empat  dibuat  dengan  konsentrasi 3%, 5%, 10%. Kontrol positif
menggunakan  flukonazole  0,2  %  (b/v). Kontrol  negatif  menggunakan  DMSO sebagai  pembanding  untuk  mengetahui adanya  pengaruh  pembawa  terhadap meningkatnya  lebar  zona  hambat  jamur Pityrosporum ovale ATCC® 3179.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  ekstrak  metanolik  daun  bunga pukul  empat  mampu  menghambat pertumbuhan  jamur Pityrosporum  ovale ATCC®  3179.  Kontrol  negatif  dalam penelitian ini digunakan sebagai pembanding  untuk  mengetahui  adanya pengaruh pembawa terhadap
meningkatnya  luas  zona  hambat  jamur Pityrosporum ovale ATCC® 3179.
Penelitian  daun  tanaman  bunga pukul empat didapatkan bahwa fraksi etil asetat dengan konsentrasi 10 % menunjukkan  diameter  zona  hambat paling besar dalam menghambat pertumbuhan Phytyrosporum ovale ATCC® 3179. Hasil uji analisa statistik
menunjukkan  bahwa  pada  konsentrasi yang  sama  pada  fraksi n-heksana,  etil asetat,  dan  air  daun  bunga  pukul  empat tidak  terdapat  perbedaan  nilai  rata-rata daya  hambat    (P>0,05).  Pada  tiap  fraksi daun  bunga  pukul  empat,  terjadi peningkatan nyata seiring dengan kenaikan  konsentrasi  yang  berbanding lurus  dengan  bertambahnya  diameter
zona  hambat  terhadap Pityrosporum ovale ATCC® 3179.
Aktivitas  antijamur  dari  ekstrak metanolik  daun  tanaman  bunga  pukul empat disebabkan karena adanya kandungan  senyawa  saponin,  alkaloid, flavonoid,  polifenol  dan  tanin  yang dibuktikan dengan uji identifikasi. Senyawa  saponin,      alkaloid,  flavonoid, polifenol  dan  tanin  mempunyai  aktivitas antijamur (Gholib 2009).
Saponin mempunyai aktivitas antijamur dengan  cara  melisiskan  sel sehingga dapat bersifat fungisida.
Saponin  dapat  menurunkan  tegangan permukaan membran sel jamur, sehingga permeabilitasnya terganggu yang mengakibatkan  kebutuhan  sel  tidak tercukupi  dengan  baik.  Pertumbuhan  sel terhambat,  kemudian  sel  akan  mati (Jawetz et al. 1986).
Alkaloid merupakan pelindung tumbuhan  dari  gangguan  serangga  dan hewan  termasuk  jamur  karena  dapat berperan  sebagai  zat  racun  (Mursyidi 1990).  Mekanisme  alkaloid  sebagai antijamur  kemungkinan  ialah  dengan mengganggu komponen penyusun peptidoglikan  pada  sel  jamur,  sehingga lapisan  dinding  sel  yang  terbentuk  tidak utuh  serta  menyebabkan  kematian  sel tersebut (Robinson 1995).
Polifenol  merupakan  senyawa  yang dapat mendenaturasi protein dan membran sel sehingga terjadi peningkatan permeabilitas jamur. Denaturasi  protein  ialah  membentuk kompleks  dengan  protein  pada  dinding sel. Denaturasi protein dapat mengganggu aktivitas dari sel serta dapat
menyebabkan  kematian  pada  jamur (Robinson 1995).
Flavonoid merupakan senyawa fenol,  senyawa  fenol  bersifat  koagulator protein (Dwidjoseputro 1994). Flavonoid dapat  membentuk  senyawa  kompleks terhadap protein ekstraseluler yang dapat mengganggu  integritas  membran  sel jamur (Cowan 1999).
Tanin  mempunyai  efek  antijamur antara  lain  dengan  inaktivasi  enzim, bereaksi  dengan  membran  sel,  serta dekstruksi  atau  inaktivasi  fungsi  materi genetik.  Tanin  diduga  mempunyai  efek yang  sama  dengan  senyawa  fenolik, beraktivitas antijamur dengan mempresipitasi  protein  (Masduki  1996). Mekanisme  antijamur  tanin  diperkirakan karena  tanin  dapat  merusak  membran sel.  Senyawa  astringen  (tanin)  dapat menginduksi pembentukan
ikatan senyawa  kompleks  terhadap  enzim  atau substrat  jamur.  Ikatan  kompleks  tanin dengan  ion  logam  dapat  memicu  daya toksisitas  tanin  (Akiyama et  al.  2001).
Tanin diduga dapat mengerutkan dinding sel atau membran sel, sehingga permeabilitas  sel  terganggu,  aktivitas  sel tidak maksimal, pertumbuhan sel terganggu  serta  dapat  menyebabkan kematian sel (Ajizah 2004).
Fraksi n-heksana pada  konsentrasi 10% diameter hambatnya lebih kecil dari fraksi etil asetat 10 %. Pada konsentrasi 5 %  memiliki  daya  hambat  paling  besar dibanding  fraksi  air  dan  etil  asetat  pada konsentrasi yang sama, hal ini disebabkan  karena  adanya  senyawa- senyawa  non  antibiotik  atau  antijamur yang  tersari  diduga  lebih  banyak sehingga justru terjadi penurunan
aktivitas. Fraksi n-heksana dapat menyari
senyawa-senyawa  minyak  lemak  dan asam  lemak  tinggi, steroid,  triterpernoid, serta karetenoid.
Fraksi  etil  asetat  memiliki  diameter daya  hambat  yang  berbanding  lurus dengan  konsentrasi  yaitu  semakin  tinggi konsentrasi semakin besar daya hambatnya.  Etil  asetat  dapat  menyari senyawa  fenolik  (flavonoid)  alkaloid.
Fraksi  air  mempunyai  aktivitas  antijamur yang paling rendah di antara  fraksi yang lain  karena  sebagai  yang  terakhir senyawa-senyawa yang tersari sedikit.
Kontrol positif
(flukonazole) mempunyai  aktivitas  antijamur  paling besar  dibanding  fraksi  dari  ekstrak metanolik  daun  tanaman  bunga  pukul empat.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  daya hambat yang lebih luas pada konsentrasi yang  lebih  kecil.  Pengobatan  penyakit jamur  masih    lebih  efektif  menggunakan obat  antijamur,  dengan  dosis  kecil memiliki aktivitas poten.

## KESIMPULAN
Fraksi n-heksana,  fraksi  etil  asetat dan fraksi air dari ekstrak metanolik daun bunga pukul  empat  memiliki aktivitas antijamur  terhadap Pityrosporum ovale ATCC®  3179.  Fraksi  etil  asetat  pada konsentrasi  10%  memiliki  aktivitas antijamur  paling  besar dengan  rata-rata diameter hambat 25 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah  A.  2004. Sensitivitas Salmonella typhimurium terhadap  ekstrak daun Psidium  guajava  L. Bioscientiae. 1(1): 31-8.
Akiyama  H,  Fujii  K,  Yamasaki  O,  Oono T, Iwatsuki T. 2001. Antibacterial action of several tannins against Staphylococcus
aureus. J. Antimicrob. Chemother. 48: 487-491.
Cowan  MM. 1999.  Plant  Products  as
Antimicrobial  Agents. Clin.  Microbiol.
Rev. 12(4): 564–582.
Gholib D.  2009.  Uji  daya  hambat  daun senggani  ( Melastoma  malabathricum  L.) terhadap Trichophyton mentagrophytees dan Candida  albicans.  Jurnal  Biologi. Bogor: Balai Besar Penelitian Vereriner.
Jawetz  E,  Melnic  JL,  Adellerg  EA.  1986. Mikrobiologi  untuk  Profesi Kesehatan. Tonang, penerjemah; Bonang G, editor. Jakarta: ECG Penerbit Buku Kedokteran. Terjemahan  dari: Review  of  Medical Microbiology.
Masduki I. 1996. Efek antibakteri ekstrak biji pinang  ( Areca  catechu) terhadap  S. aureus dan  E.  coli. Cermin  Dunia Kedokteran 109: 21- 4.
Robinson  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tingkat  Tinggi.  Edisi  6 Padwaminta, penerjemah; Bandung: ITB Bandung.  Terjemahan: The Organic Constituens of Higher Plants.
Rusdiana E, Sylvia MMAR, Soenarto H. 2004.
Aktivitas seduhan buah asam ( Tamarindus  indica Linn)  terhadap keberadaan Candida  albicans pada
permukaan  lempeng  akrilik ortodonsi. JBP.  Surabaya: Universitas  Airlangga.