Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2015, hal 70-78
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Herba Sambiloto ( Andrographis paniculata Nees) dan Biji Jinten Hitam ( Nigella sativa L.) terhadap Reaksi Anafilaksis Kutan Aktif pada Tikus Putih Wistar Jantan yang Diinduksi Ovalbumin
Active Cutaneous Anaphilaxis Reaction Activity of an Ethanol Extract of Bitter Herbs ( Andrographis paniculata Nees) and Black Seed ( Nigella sativa L.) in Ovalbumin Induced Male Wistar Albino Rats
YELI TRIMAYANTI 1 , GUNAWAN PAMUDJI W 1, *, YUL MARIYAH 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518
2 Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret Jln. Ir Sutami No 36-A Kentingan Surakarta 57126 Telp 0271-646994 * Korespondensi : smileend.yt@gmail.com
(Diterima 20 November 2014, disetujui 8 Januari 2015)
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Pengembangan  tanaman  obat  sebagai  antialergi  terus  berkembang  di antaranya  adalah sambiloto  ( Andrographis  paniculata Nees)  dan  biji  jinten  hitam  (Nigella  sativa L.).  Penelitian  ini bertujuan untuk mempelajari efek penghambatan reaksi anafilaksis ekstrak etanol herba sambiloto dan bij jinten hitam pada reaksi anafilaksis kutan aktif yang diinduksi ovalbumin pada tikus Wistar jantan.  Penelitian  menggunakan  metode  anafilaksis  kutan  aktif  dengan  5  kelompok  uji, yaitu kelompok  kontrol  negatif,  kelompok  kontrol  positif  dan  3  kelompok  perlakuan.  Subjek  uji disensitisasi dengan ovalbumin secara subkutan sebanyak 2 kali dengan selang waktu 7 hari. Tikus dicukur  punggungnya  dan  disuntik  evans  blue  secara  intravena  pada  ekor  tikus.  Diameter  area pigmentasi  diukur  setiap  jam,  hingga  jam  ke  8.  Data  yang  diperoleh  diuji  secara  statistik menggunakan ANOVA. Hasil  penelitian menunjukkan bahwa  ektrak  herba  sambiloto (120  mg/kg BB), biji jinten hitam (30 mg/kg BB) dan kombinasi keduanya (60 mg/kg BB : 15 mg/kg BB) dapat menghambat area pigmentasi pada kulit punggung tikus. Persen daya hambat secara berturut-turut adalah  12.39  %;  14.51  %;  22.36  %.  Namun,  efek  tersebut  masih  lebih  rendah  dibandingkan natrium kromolin, obat penstabil sel mast. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa kombinasi ekstrak  etanol  herba  sambiloto  dengan  ekstrak  etanol  biji  jinten  hitam  lebih  efektif  menghambat reaksi anafilaksis kutan aktif yang diinduksi ovalbumin pada tikus Wistar jantan.
Kata kunci : sambiloto, biji jinten hitam, anafilaksis kutan aktif, ovalbumin.
______________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Development  of  medical  plants  for  the  allergic  reaction  is  continuing  with  the  extrac  of  the bitter  ( Andrographis  paniculata Nees)  and  black  seed  (Nigella  sativa L.)  as  an  example.  This reseach’s purpose is studying inhibition of anaphylaxis reactions effect from ethanol extracts of the bitter herbs and black seed for active anaphylaxis reaction inducted by ovalbumin in male Wistar rats.  Research  used  active  anaphylaxis  reaction  method  with  5  test  groups,  i.e.  negative  control group,  positive  control  group  and  3  tread  group.  The  rats  were    subcutaneously  sensitized  by ovalbumin  two  act  time  with  an  interval  of  seven  days.  Back  rats  shavered  and  intravenaosly
injected with evans blue in rats tail. Diameter area of pigmentation measured every hour, up to 8 hours.  Obtained  data  then  tested  statistically  using  ANOVA.  Results  showed    that  the  extract  of bitter herbs (120 mg/kg BB), black seed (30 mg/kg BB) and combination of both (60 mg/kg BB : 15 mg/kg BB) could inhibit pigmentation in the back rats skin area. Percent inhibition respectively is 12.39  %;  14.51  %;  22.36  %.  Nevertheless,  the  inhibitory  effect  was  still  lower  compared  with cromolyn sodium as an mast cell stabilizer drug. It can be concluded that the combination of bitter herbs  ethanol  extracts  with  black  seed  ethanol  extracts  more  effectively  inhibit  active  cutaneous anaphylaxis reaction of ovalbumin induced in male Wistar rats.
Keywords: Andrographis  paniculata Nees,  Nigella  sativa L.,  active  cutaneous  anaphylaxis reaction, ovalbumin.
_________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Penyakit alergi merupakan kumpulan penyakit yang sering dijumpai di  masyarakat  (Tanjung  &  Yunihastuti 2006).  Alergi  terjadi  akibat  respon  imun yang  berlebihan  sehingga  menimbulkan kerusakan jaringan tubuh (Baratawijaja & Rengganis  2012).  Reaksi  kerusakan jaringan  yang  disebabkan  oleh  respon imun tersebut merupakan reaksi hipersensitivitas.  Istilah  alergi  termasuk hipersensitivitas tipe I karena melibatkan IgE.  Reaksi  alergi  akut  yang  mengenai beberapa  organ  tubuh  secara  simultan (biasanya sistem kardiovaskular, respirasi,  kulit  dan  gastrointestinal) disebut  sebagai  reaksi  anafilaksis.  Reaksi anafilaksis  terjadi  akibat  paparan  ulang alergen  yang  sama.  Reaksi  anafilaktik timbulnya  tiba-tiba,  tidak  terduga  dan potensial  mematikan  serta  memerlukan penanganan  yang  cepat  dan  tepat.  Oleh karena itu harus dimengerti dan diwaspadai (Syamsu 2001). Daerah yang umumnya terkena efek adalah: kulit (80– 90%),  paru-paru  dan  saluran  napas (70%),  saluran  cerna  (30–45%),  jantung dan  pembuluh  darah  (10–45%),  dan sistem  saraf  pusat  (10–15%)  (Simons 2009).
Paparan  alergen  yang  meningkat disaat  sistem imun  tidak  bekerja  optimal akan mengakibatkan tubuh rentan terhadap  penyakit.  Beberapa  hal  dapat mempengaruhi  daya  tahan  tubuh  seperti faktor lingkungan, makanan, gaya hidup, stres  dan  lain-lain.  Untuk  meningkatkan sistem  kekebalan  tubuh  maka  salah satunya  melalui  suplemen  obat  yang berfungsi sebagai imunomodulator.
Terapi  alergi  yang  banyak  digunakan adalah  obat-obat  anti  alergi  seperti antihistamin,  ketotifen  dan  natrium kromolin.  Pada  saat  sekarang  tingginya kesadaran  masyarakat  untuk  kembali  ke alam  menyebabkan  peng-gunaan  bahan herbal tradisional menjadi pilihan masyarakat  sebagai  profilaksis  dan pengobatan terhadap penyakit. Di antara tanaman  tradisional  yang  berpotensi sebagai imunomodulator sehingga mampu  menghambat  reaksi  anafilaksis adalah tanaman sambiloto ( Andrographis paniculata
Nees)  dan  jinten  hitam
( Nigella sativa L.) (Dewi 2013).
Penelitian  terdahulu  bahwa  ekstrak herba  sambiloto  mampu  menurunkan kadar histamin serum dan infiltrasi sel-sel radang  pada  saluran  pernafasan  mencit model  asma  alergi  (Rahardjo  &  Endang
2006).  Ekstrak  sambiloto  dapat  berperan sebagai imunomodulator  pada  dermatitis alergika  (Junarsa 2006). Sambiloto memiliki  efek  anti  alergi  baik  secara  in vitro  maupun in  vivo (Aldi  2006). Kandungan diterpen seperti
andrografolid dan neoandrografolid pada Andrographis  paniculata menunjukkan aktivitas  antialergi  dengan  aktivitas menstabilkan  degranulasi  sel  mast  yang diinduksi  albumin  telur  (Gupta et  al. 1998).
Menurut  Chakhravaty (1993),  kristal nigellone  merupakan  agen  penghambat histamin.  Cara  kerja  kristal  nigellon adalah  dengan  menghambat  protein kinase  C  yang  dikenal  sebagai  zat  yang memacu  pelepasan  histamin.  Kristal nigellone  juga  menurunkan  pelepasan kalsium  pada  sel,  yang  menghambat pelepasan  histamin  (Khomsan  2009).  El Gazzar et al. (2006) dalam penelitiannya menunjukkan  bawa  secara  in  vitro nigellon  menurunkan  kadar  Ca2+ intrasel.  Thymoquinone  yang  terdapat pada minyak atsiri dari jinten hitam dapat menurunkan jumlah sitokin hasil produksi  Th2  yaitu  IL-4,  IL-5,  dan  IL-13 serta  penurunan  IgE  serum  yang menyababkan  pencegahan  degranulasi sel  mast,  serta  menurunkan  TNF pada inflamasi  sehingga  pemberian  minyak biji  jintan  hitam  mampu  menurunkan tingkat  infiltrasi  sel-sel  radang  pada saluran  pernafasan  (Subiyanto  &  Diding 2008).
Pada penelitian ini pengujian aktivitas  antialergi  kombinasi  herba sambiloto dan biji jinten hitam dilakukan dengan  metode  anfilaksis  kutan  aktif yang diinduksi ovalbumin (OVA).
Diharapkan  dapat  memberikan  efek antialergi yang baik dan dapat mengatasi efek samping serta lebih aman digunakan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  serbuk  herba sambiloto ( Andrographis paniculata
Nees),  serbuk  biji  jinten  hitam  ( Nigella sativa L.), etanol 96%, natrium kromolin, ovalbumin  (OVA)  0,1%  dan  0,52%, Al(OH)3 1%, Na CMC 0,5%, evans blue 1,5%

## Alat
Alat  yang  digunakan  yaitu  botol coklat maserasi, tutup bejana, pengaduk, bejana hasil maserasi, penyerkai, evaporator,  timbangan,  alat-alat  gelas, spuit  injeksi,  kanula  oral  tikus,  jangka sorong.
Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Herba  Sambiloto  Dan  Biji  Jinten

## Hitam
Cara  memperoleh  ekstrak  etanol adalah  dengan  menimbang  masing- masing  serbuk  simplisia  herba  sambiloto dan  biji  jinten  hitam  dengan  berat  300 mg,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam botol kaca berwarna coklat dan ditambahkan larutan penyari yaitu etanol 96  %  sebanyak  3  liter  (perbandingan antara  serbuk  simplisia  kering  dan pelarut  adalah  1:10),  lalu  didiamkan selama  3-5  hari  dengan  melakukan pengadukan  setiap  hari  secara  berulang- ulang.  Hari  berikutnya  simplisia  yang dimaserasi  tadi  disaring  dan  kemudian
menggunakan rotary  vaccum  evaporator suhu  50 0 C  dan  kecepatan  30  rpm  untuk menguapkan etanol.

## Penetapan Dosis
Dosis  ekstrak  herba  sambiloto  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah 120  mg/kg  BB  tikus,  ekstrak  biji  jinten hitam  30  mg/kg  BB  tikus,  ekstrak kombinasi herba sambiloto 60 mg/kg BB tikus  :  biji  jinten  hitam  15  mg/kg  BB tikus,  dosis  dan  narium  kromolin  2 mg/kg BB tikus.

## Uji  Penghambatan  Anaflaksis  Kutan Aktif
Hewan  percobaan  yang  digunakan adalah  tikus  putih  jantan  galur  Wistar dengan  bobot  ±200  gram.  Setiap  tikus ditempatkan pada kandang bak individual. Masing-masing bak berisi satu ekor  tikus.  Setiap  kandang  diberi identitas  yang  jelas  sesuai  perlakuan yang  akan  diberikan.  Air  minum diberikan  secara ad  libitum,  sedangkan makanan  yang  diberikan  adalah  pakan tikus disertai sayuran.
Sebanyak  25  ekor  tikus  putih  jantan galur Wistar untuk percobaan, selanjutnya hewan tersebut dibagi menjadi  5  kelompok  perlakuan,  setiap kelompok  terdiri  dari  5  ekor  tikus,  yaitu semua  kelompok  perlakuan  disensitisasi ovalbumin  kemudian  diberi:  larutan natrium  CMC  (kontrol  negatif),    natrium kromolin  (kontrol  positif),  ekstrak  etanol 96%  herba  sambiloto dan  biji  jinten hitam  konsentrasi  120:0  mg/kg  BB (100%:0%),  0:30 mg/kg  BB (0%:100%), 60:15  mg/kg  BB  (50%:50%).  Untuk adaptasi  lingkungan  tikus  dikondisikan dengan  penyeragaman  makanan  dan
minum  selama  7  hari  agar  tidak  stres yang  mana  apabila  tikus  tersebut  stres akan  mempengaruhi  metabolisme  obat dan  agar  tikus  dapat  bertahan  hidup selama  masa  percobaan.  Selanjutnya tikus  diaklimatisasi  dan  dipuasakan selama 12 jam dan hanya diberi minum. Pada  hari  ke-8  kelompok  perlakuan diberi ekstrak uji dengan volume 5 ml/kg BB  tikus  untuk  meningkatkan  imunitas dan mencegah terjadinya syok anafilaktik serta  diberi  makan  dan  minum  seragam hingga  hari  ke  14  (Winter et  al.  2000;
Ikawati et al. 2007; Raisa 2011).
Setelah  masa  adaptasi,  dilakukan pengujian aktivitas anafilaksis kutan aktif. Tikus  disensitisasi  terhitung  pada  hari  1. Sensitisasi  pertama  pada  punggung  tikus disuntikan  ovalbumin  0,1%  dalam suspensi  Al(OH)3  1%  secara  subkutan dengan  volume  pemberian  5  ml/kg  BB tikus.  Sensitisasi  kedua  dilakukan  pada hari  ke-14  atau  7  hari  setelah  sensitisasi pertama,  tikus  dicukur  punggungnya dengan ukuran ± setengah luas pungung tikus.  Kemudian  disuntikkan  evans  blue 1,5%  dengan  dosis  1,75  ml/kg  BB  tikus secara intra vena pada ekor tikus sebagai indikator  terjadinya  reaksi  anafilaksis kutan  aktif  ditunjukkan  dengan  bulatan berwarna  biru  sebagai  reaksi  positif. Setelah  15  menit  senyawa  uji  yaitu ekstrak  etanol  96%  herba  sambiloto  dan biji jinten hitam konsentrasi 120:0 mg/kg BB tikus (100%:0%), 0:30 mg/kg BB tikus (0%:100%),  60:15  mg/kg  BB  tikus (50%:50%),  sedangkan  tikus  kelompok kontrol negatif diberi natrium CMC 0,5% sebanyak 5 ml/kg BB tikus dan kelompok kontrol  positif  diberi  larutan  natrium kromolin  0,4  mg/ml  dengan  volume
pemberian  5  ml/kg  BB  tikus  secara subkutan.  Lima  belas  menit  setelah pemberian  larutan  uji,  disuntikkan  lagi
dengan ovalbumin 0,52% dalam suspensi  Al(OH)3  1%  secara  subkutan dengan  volume  pemberian  5  ml/kg  BB
tikus sebagai pembangkit reaksi anafilaksis  kutan  aktif  (Ikawati et  al.
2007; Ediati et al. 2014; Raissa 2011).
Perhitungan Persen Daya Anti-

## Anafilaksis Kutan Aktif
Diameter  area  pigmentasi  (area berwarna  biru)  diukur  setiap  jam  selama 8  jam,  dimulai  satu  jam  setelah pemberian  pembangkit  reaksi  anfilaksis kutan  aktif.  Pengukuran  diameter  dari  4 sisi  yang  berbeda  kemudian  hitung puratanya (Ikawati et al. 2007). Diameter area  pigmentasi  diubah  menjadi  luas area  pigmentasi,  lalu  dihitung  nilai AUC dari  jam  ke-0  sampai  jam  ke-8,  yaitu dengan metode trapezoid.
Persen  penghambatan  anafilaksis dihitung dengan menggunakan rumus: Penghambatan anafilaksis (%) =
Keterangan:
= rata-rata  kelompok kontrol negatif (cm 2 . jam) = masing-masing tikus
pada  kelompok  yang  diberi senyawa  uji  dengan  dosis sebesar n (cm 2 . jam) Analisis Data Data dianalisis dengan Kolmogorov-Smirnov dan Shapiro Wilk , dilanjutkan  uji Lavene ,  ANOVA  dan
LSD  dengan  taraf  kepercayaan  95% (Ikawati et al. 2007).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Efek alergi secara positif terlihat pada tikus.  Terlihatnya  warna  kebiruan  pada punggung  tikus  menunjukkan  bahwa evans blue berhasil keluar dari pembuluh darah.  Terlepasnya  histamin  akibat  reaksi alergi  yang  terbentuk  menyebabkan permeabilitas pembuluh darah meningkat sehingga pewarna evans blue dapat keluar dan  mewarnai  tubuh  tikus  yang  alergi (Winter et al. 2000; Natania 2010).
Kurva  Gambar  1 menunjukkan bahwa  kontrol  positif  (Na  kromolin) berada  paling  rendah  dimana  berarti mampu  menghambat  reaksi  anfilaksis kutan  aktif  paling  baik  atau  dapat mengatasi alergi.
Kontrol  negatif  (Na  CMC  0,5%) menunjukkan  kurva  yang  sangat  tinggi. Hal  ini  menunjukkan  sensitisasi  oleh ovalbumin (OVA) berhasil sebagai antigen,  sedangkan  kelompok  perlakuan berada  di  bawah  kurva  kontrol  negatif dimana  hal  ini  menunjukkan  bahwa kelompok  perlakuan  dengan  ekstrak etanol  herba  sambiloto  (120  mg/kg  BB tikus),  biji  jinten  hitam  (30  mg/kg  BB tikus)  dan  herba  sambiloto  60  mg/kg  BB tikus : biji jinten hitam 15 mg/kg BB tikus dapat  menghambat  reaksi  anafilaksis kutan aktif dengan baik, namun kombinasi  antara  kedua  ekstrak  etanol lebih  baik  dalam  menghambat  reaksi anafilaksis  kutan  dari  pada  ekstrak tunggal. Kandungan  andrographolide dan neoandrographolide  yang  terdapat  pada ekstrak sambiloto serta kandungan thymoquinone dan nigellone yang
terdapat  pada  ekstrak  biji  jinten  hitam mampu  menunjukkan  efeknya  dalam penghambatan  reaksi  anafilaksis  yang terjadi  pada  tikus.  Mengkombinasikan dua  atau  lebih  simplisia  tanaman  bisa memberikan  efek  farmakologi  yang sinergis atau aditif yang dapat mengurangi atau bahkan menghilangkan efek samping pada  simplisia  tunggal  (Kaufman et  al.
1999; Tyler 1999; Donald 2000). Selanjutnya untuk melihat kemampuan penghambatan reaksi
anafilaksis  kutan  aktif  maka  dihitung
persentase daya anti-anafilaksis kutan aktif seperti  ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Efek yang  baik  ditunjukkan  dengan  semakin kecilnya  nilai  AUC  maka  kemampuan menghambat luas area pigmentasi semakin  baik,  sehingga  nilai  persen  daya anti-anafilaksis  kutan  aktif  akan  semakin besar  atau  dapat  mengatasi  dengan  baik alergi yang disebabkan induksi
ovalbumin.
Gambar  1.  Kurva  luas  area  pigmentasi  (cm 2 )  vs  waktu  (jam)  pada  punggung  tikus  dengan  atau tanpa perlakuan ekstrak dan Na kromolin.
Tabel 1.  Data  AUC0-8 area  pigmentasi  pada  tikus  dan  persentase  daya anti-anafilaksis aktif tiap perlakuan.
Data AUC 0-8 yang ditampilkan nilai rata-rata ± SD (n=5) * Berbeda signifikan dengan kontrol negatif dan positif (p<0,05) Kelompok Uji AUC 0-8 rata-rata (cm 2 .jam) Daya anti-anafilaksis kutan aktif (%) Na CMC 0,5 % Kontrol (-) 105.7877 ± 2.88 Natrium kromolin 2 mg/kg BB Kontrol (+) 43.9431 ± 3.23 58.46 ± 3.06 Ekstrak etanol herba sambiloto 120 mg/kg BB 92.6785 ± 4.91* 12.39 ± 4.64* Ekstrak  etanol biji jinten hitam 30 mg/kg BB 90.4395 ± 4.84* 14.51 ± 4.57* Ekstrak  etanol herba sambiloto 60 mg/kg BB : biji jinten hitam 15 mg/kg BB 82.1351 ± 3.09* 22.36 ± 2.92* 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Luas area pigmentasi (cm2) waktu (jam) Na CMC 0,5 % Kontrol (-) Natrium kromolin 2 mg/kg BB Kontrol (+)
Ekstrak etanol herba sambiloto 120 mg/kg BB
Ekstrak etanol biji jinten hitam 30 mg/kg BB
Ekstrak etanol herba sambiloto 60 mg/kg BB : biji jinten hitam 15 mg/kg BB
Nilai  AUC  kelompok  perlakuan dengan  ekstrak  etanol  herba  sambiloto, biji jinten hitam dan keduanya berada di bawah  kontrol  negatif  (Na  CMC  0,5%) hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  herba  sambiloto,  biji  jinten  hitam dan  keduanya  mampu  memberikan  efek penghambatan terhadap reaksi anafilaksis kutan aktif atau dapat digunakan sebagai antialergi.  Na  kromolin  sebagai  kontrol positif  memiliki  nilai  AUC  yang  paling kecil menunjukkan penghambatan reaksi anafilaksis kutan paling efektif.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  kemampuan  daya  anti-anafilaksis kutan  aktif  dari  ekstrak  etanol  herba sambiloto  120  mg/kg  BB  tikus  adalah 12,39 %, ekstrak etanol biji jinten hitam 30  mg/kg  BB  tikus  adalah  14,51  %  dan ekstrak  ekstrak  sambiloto  60  mg/kg  BB tikus : biji jinten hitam 15 mg/kg BB tikus adalah  22,36  %.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  sambiloto  dan  biji jinten  hitam  mampu  menghambat  reaksi anafilaksis  kutan  aktif,  namun  kombinasi dari  keduanya  dengan  dosis  ekstrak etanol  herba  sambiloto  60  mg/kg  BB tikus : ekstrak biji jinten hitam 15 mg/kg BB tikus  jauh  lebih  baik.  Namun kemampuan penghambatan reaksi anafilaksis  ekstrak  etanol  percobaan  ini belum sebanding dengan natrium kromolin (kontrol positif) yang
merupakan  obat  antialergi  (antihistamin) sintetis.  Terbukti  dengan  nilai  AUC paling rendah dan nilai persen daya anti- anafilaksis  kutan  aktif  paling  tinggi.  Hal ini  sesuai  dengan  aktivitas  natrium kromolin sebagai penghambat degranulasi  sel  mast  dalam  melepaskan
histamin  dengan  cara  menghambat influks kalsium (Nugroho 2009).
Kemampuan natrium kromolin sebagai  obat  antialergi  (antihistamin) sintetis memang belum sebanding dengan  ekstrak  herba  sambiloto  dan  biji jinten  hitam  maupun  kombinasinya. Namun,  dari  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  dilihat  bahwa  herba sambiloto  dan  biji  jinten  hitam  memiliki kemampuan  dalam  menghambat  reaksi alergi  yang  dapat  dilihat  dari  daya hambat  terhadap  reaksi  anafilaksis  kutan aktif,  dan  hasil  dari  kombinasi  kedua bahan  ini  menunjukkan  hasil  yang  lebih baik  dari  pada  penggunaan  tunggal. Karena herba sambiloto dengan kandungan andrographolide dan
neoandrographolide  serta  biji  jinten hitam  dengan  kandungan  nigellone  dan thymoquinone  jika  dikombinasi  akan bekerja  sama  dalam  memberikan  efek penghambatan degranulasi sel mast.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan dapat diperoleh kesimpulan bahwa: Ekstrak  etanol  herba  sambiloto
( Andrographis  paniculata Nees),  biji jinten  hitam  ( Nigella  sativa L.)  dan kombinasi  keduanya  memberikan  efek anti  alergi  terhadap  reaksi  anafilaksis kutan  aktif  pada  tikus  putih  yang diinduksi ovalbumin (OVA).
Ekstrak  etanol  yang  paling  efektif adalah  kombinasi  herba  sambiloto ( Andrographis  paniculata Nees)  dan  biji jinten  hitam  ( Nigella  sativa L.)  dengan dosis 60 mg/kg BB : 15 mg/kg BB tikus.

## DAFTAR PUSTAKA
Aldi  Y.  2006.  Uji  efek  antialergi  dari tumbuhan Andrograpihis paniculata Nees. dan Blumea  balsamifera (L)  DC  [Thesis].
Bandung: Institut Teknologi Bandung. Baratawijaja KG, Rengganis I. 2012.
Imunologi Dasar. Edisi ke X. Jakarta: Balai
Penerbit  Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia.
Chakhravarty  N.  1993.  Inhibition  of  histamin release  from  mast  cell  by Nigellon. Intl  J
Pharm 70:237-242.
Junarsa  NC.  2006.  Efek  herba  sambiloto
(Andrographidis herba) sebagai imunodulator pada mencit dengan dermatitis  alergika  [Karya  Tulis  Ilmiah]. Bandung: Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha.
Dewi N.  2013. Khasiat  &  Cara  Olah
Sambiloto  untuk  Menumpas  Berbagai Penyakit. Yogyakarta: Pustaka Baru Press. Donald  PB.  2000.  Medicinal  Plants  and Phytomedicines. Linking Plant Biochemistry  and  Physiology  to  Human Health. Plant Physiology 124: 507-514.
Ediati S, Nugroho AE, Sagala YV. 2014. Active cutaneous  anaphylaxis-inhibitory  activity of  the n-hexane  extract  of  Morinda citrifolia L.  Fruits  in  hepatitis  B Vaccine- induced wistar rats. Trad. Med. J. 9(1): 36- 42.
El  Gazzar  MA,  El  Mezayed  R,  Marecki  JC, Nicolls MR, Canastar A, Drekin SC. 2006.
Anti-inflammatory effect of thymoquinone in  a  mouse  model  of  allergic  lung inflammation. Int Immunopharmacol 6:1135–1142. Gupta  PP,  JS  Tandon  and  GK  Patnaik, 1998. Antiallergic activity of andrographolides isolated from Andrographis  paniculata (Burm.  F)  wall. Pharm. Biol 36: 72-74.
Ikawati  Z,  Supardjan  AM,  Listya  SA.  2007. Pengaruh  senyawa  heksagamavunon-1 (HGV-1)  terhadap  inflamasi  akut  akibat reaksi  anfilaksis  kutaneus  aktif  pada  tikus
wistar  jantan  terinduksi  ovalbumin.  Di dalam: Kemajuan Terkini Riset. Yogyakarta:  Lembaga  Penelitain  dan Pengabdian kepada Masyarakat, Universitas Gadjah Mada. Hal. 36-45. Kaufman PB, Cseke LJ, Warber S , Duke JA, Brielmann HL. 1999. Natural Products from Plants. CRC Press, Boca Raton, FL.
Khomsan  A.  2009. Rahasia  Sehat  dengan Makanan  Berkhasiat.  Jakarta:  Kompas Media Nusantara. Hal. 259.
Natania  BL.  2010.  Pemberian  ovalbumin sebagai  penyebab  alergi  pada  marmot [Skripsi].  Bogor:  Departemen  Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Institut  Pertanian Bogor. Nugroho  AE.  2009.  Natrium  kromolin,  obat penghambat  degranulasi  sel  mast,  lebih efektif  terhadap  sel  mast  jaringan  ikat dibanding  sel  mast  mukosa. Jurnal Farmasi Indonesia 6:6-11.
Rahardjo  SS,  Endang  LP.  2006.  Pengaruh ekstrak sambiloto terhadap kadar histamin serum  dan  gambaran  histologis  saluran pernafasan  mencit  balb/c  model  asma alergi. [Penelitian Dosen Muda]. http://sirine.uns.ac.id/penelitian.php?act= detail&idp=13 [12 November 2013]. Raisa  N.  2011.  Uji  aktivitas  imunostimulan kombinasi ekstrak etanol meniran ( Phyllantus  niruri L.)  dan  jinten  hitam ( Nigella  sativa L.)  pada  tikus  putih  jantan [Skripsi]. Depok: Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Program  Studi Farmasi, Universitas Indonesia.
Simons  FE.  2009.  Anaphylaxis  recent advances  in  assessment  and  treatment. J. Allergy  Clin. Immunol 124(4):625-636.
Subiyanto  AA,  Diding.  2008.  Pengaruh minyak  jinten  hitam  ( Nigella  sativa L.) terhadap  derajat  inflamasi  saluran  nafas. Majalah  Kedokteran  Indonesia.  6:200- 204.
Syamsu.  2001. Anafilaksis. Dalam: Buku Ajar Ilmu  Penyakit  Dalam.  Jakarta:  Balai Penerbit FKUI. Hal 43, 44.
Tanjung  A,  Yunihastuti  E.  2006. Prosedur Diagnostic  Penyakit  Alergi. Dalam:  Buku
Ajar  Ilmu  Penyakit  Dalam.  Jakarta:  Balai Penerbit FKUI.
Tyler  VE.  1999.  Phytomedicines:  back  to  the future. J Nat Prod 62:1589–1592.
Winter  WE,  Hardt  NS,  Fuhrman  S.  2000. Immunoglobulin E: Importance in parasitic  infections  and  hypersensitivity response. J.  Archieve  of  Pathology  and
Laboratory  Medicine 124:1382-1385.