## Pemanfaatan Jamur Simbion Sponge dalam Bioisomerasi Asam Lemak pada Dedak untuk Menghasilkan Asam Lemak Cis
Agus Trianto 1,2* , Sri Sedjati 1 , Ocky Karna Radjasa 1,3 , Rachmat Afriyanto 1 , Sakti Imam Muchlisin 3 , Septhy Kusuma Radjasa 3 , Muhammad Syaifudien Bahry 2
1 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan IlmuKelautan, Universitas Diponegoro 2 Natural Product Laboratory, Laboratorium Terpadu, Universitas Diponegoro 3 Tropical Marine Biodiversity Laboratorium Terpadu, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Tembalang, Semarang 50275 Indonesia Email : agustrianto.undip@gmail.com

## Abstract

## Utilization of Sponges Symbiotic Fungus in the Bioisomeration  of Fatty Acids in Brans to Produce Cis Fatty Acid
Trans fatty acids are known to have a negative impact on human health such as triggering the  coronary  heart  and  blood  vessel  related  diseases.  However,  many  food  and  animal  feed contain trans  fatty  acids.    Bran,  which  is  widely  used  as  animal  feed  has  high  fatty  acid  content and  the  majority  are  trans  fatty  acids.  This  study  aims  to  determine  the  potential  of Trichoderma harzanum , a sponge symbiont fungus, in the process of fatty acid bioconversion in bran. Bran was fermented in saline and non-salin condition for 15 days in the room temperature. Both fermented and  not  bran  was  extracted  with  methanol,  and  the  extracts  were  concentrated  with  rotary evaporator. Fatty acid extracts were analyzed on the GC with hydrolysis and methylation as pre- treatments. The test results showed the fatty acid composition changed, and the was formation of new fatty acids. The bioisomeration process occurs in the Trans-9-Elaidic acid Methyl esther into Cis- 9-Oleic  Methyl  ester.  Cis-9-oleic  acid  is  known  as  oleic  acid  which  is  widely  found  in  olive  and sunflowers oil. The fungus has potential as biocatalys for production of cis fatty acid.
Keyword : sponge; symbiotic fungus; trans-cis isomeration; fatty acid

## Abstrak
Asam  lemak  trans  dikenal  mempunyai  dampak  negatif  terhadap  kesehatan  manusia seperti memicu terjadinya penyakit jantung koroner dan penyakit terkait pembuluh darah. Namun asam  lemak  trans  banyak  terkandung  dalam  berbagai  jenis  bahan  makanan  maupun  pakan ternak diantaranya adalah dedak.  Dedak banyak digunakan sebagai pakan ternak mempunyai kandungan  asam  lemak  yang  tinggi  dan  mayoritas  adalah  asam  lemak  trans.    Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  potensi  jamur  simbion  spons Trichoderma  harzanum dalam  proses biokonversi asam lemak pada dedak.  Fermentasi dedak dilakukan dalam kondisi salin dan unsalin selama  15  hari  pada  suhu  ruang.  Dedak  yang  difermentasi  maupun  tidak  kemudian  diekstrak dengan metanol kemudian dipekatkan dengan rotari eveporator.  Ekstrak asam lemak degan GC dengan  pre-treatment  meliputi  hidrolisis  dan  metilasi.  Hasil  uji  menunjukan  adanya  perubahan komposisi dan terbentuknya asam lemak baru. Proses bioisomerasi terjadi pada Trans-9-Elaidic acid Methyl  estermenjadi  Cis-9-Oleic  Methyl  ester.  Cis-9-oleic  acid  yang  dikenal  dengan  asam  oleat yang banyak terdapat dalam minyak zaitun dan bunga matahari. Jamur T. Harzianum mempunyai potensi sebagai biokatalis untuk memproduksi asam lemak cis.
Kata kunci : Sponge; jamur simbion; tran-cis isomerasi; asam lemak

## PENDAHULUAN
Keanekaragaman hayati laut Indonesia memiliki  potensi  yang  sangat  besar  untuk menghasilkan  metabolit  sekunder  yang dapat dimanfaatkan sebagai sumber bahan bioaktif.  Spons  merupakan  merupakan  biota filter  feeder  yang  mengandung  mikroba  laut hingga 40 % dari volumenya (Murniasih et al ., 2016).  Jamur  simbion  merupakan  salah  satu sumber  metabolit  sekunder  yang  sangat produktif  (Amira et  al. ,  2009).    Pada  dekade terakhir  banyak  penelitian  yang  melaporkan bahwa  jamur  yang  bersimbiosis  dengan beberapa  invertebrata  laut  seperti  spons diketahui  dapat  digunakan  sebagai  sumber baru  dari  senyawa  bioaktif  yang  dapat digunakan  sebagai  anti  tumor,  anti  bakteri, antivirus,  anti  jamur,  anti  kanker  dan  anti inflamasi  (Swathi,  2013).  Jamur  yang  berasal dari  laut  banyak  menghasilkan  senyawa seperti  poliketida,  turunan  alkaloid,  terpen, peptide dan senyawa lain serta mengahsilkan  enzim  seperti  amilase  (Swathi, 2013)
Asam  lemak  trans  merupakan  asam lemak  tak  jenuh  yang  memiiliki  satu  ikatan rangkap  atau  lebih  (Mazidi  et  al.  2018) Penelitian  menunjukkan  bahwa  keberadaan asam  lemak  trans  dapat  menimbulkan dampak  negatif  pada  kesehatan  seperti memicu  terjadinya  penyakit  jantung  koroner dan  penyakit  lainnya.  Beberapa  penelitian menunjukkan  pengaruh  asam  lemak  trans lebih  buruk  jika  dibandingkan  efek  negative asam  lemak  jenuh  dan  kolesterol  (Wikanta, 2012).
Jumlah  asam  lemak  trans  dapat meningkat  akibat  proses  hidrogenasi  dan pemanasan  pada  suhu  tinggi.  Proses hidrogenasi  ditemukan  oleh  Norman  pada tahun  1903.  Proses  ini  terdiri  dari  pemanasan dengan  adanya  higrogen  elementer  yang dibantu  oleh  katalisator  logam  biasanya mengunakan  nikel.  Hasil  higrogen  parsial ialah a) terjadinya penjenuhan dari ikatan tak jenuh  asam  lemak,  b)  isomerisasi  ikatan rengkap  bentuk  cis  (alami)  menjadi  isomer trans,  dan  c)  perubahan  posisi  ikatan rangkap (Silalahi et al ., 2002).
Dedak  padi  merupakan  limbah  hasil penggilingan  padi  menjadi  beras.  Dedak
banyak dimanfaatkan sebagai pakan ternak. Komponen  utama  dedak  adalah  minyak, protein,
karbohidrat dan mineral (Hadipernata et al ., 2012). Dedak mengandung minyak yang cukup tinggi yaitu 15–25%  dan  tersusun  atas  asam  lemak palmitat,  oleat  dan  linoleat  berturut-turut berkisar  antara:  12-18%;  40-50%  dan  30–35% (Wang et  al., 2017).  Minyak  dedak digolongkan  sebagai  asam  lemak  tak  jenuh yang memliki nilai nutrisi yang tinggi, sehingga dalam pemanfaatannya tidak hanya sebagai  bahan  minyak  goreng  saja  namun dapat diproses lebih lanjut menjadi berbagai macam  produk  turuanannya.  Namun,  asam lemak  yang  terkandung  dalam  dedak merupakan  asam  lemak  trans  yang  dapat memberikan  pengaruh  negatif  seperti  yang telah disebutkan jika dikonsumsi (Hadipernata, 2012).
Penelitian  tentang  pemanfaatan  jamur simbion  sponge  dalam  bioisomerasi  asam lemak  pada  dedak  ini  dilakukan  dengan harapan dapat diketahui gambaran mengenai  proses  bioisomerisasi  asam  lemak trans  yang  berbahaya  bagi  kesehatan  jika dikonsumsi  menjadi  asam  lemak  cis  yang lebih  mudah  bereaksi  dan  minim  efek samping bagi kesehatan.

## MATERI DAN METODE
Media  penanaman  jamur  Tricoderma harzianum  adalah  200  g  bekatul,  2  g  yeast, 5g pepton, 200ml air laut Autoclave 121 o C 15 menit.  Inokulasi  jamur  Tricoderma  harzianum dilakukan di dalam bok plastik steril.

## Panen
Proses  panen  dilakukan  di  hari  ke  15. Ekstraksi  dilakukan  dengan  merendam  jamur yang  tumbuh  pada  media  dedak  dengan menggunakan  pelarut  methanol.  Dilakukan penggantian pelarut setiap 1x24 jam  selama 2  kali.  Filtrat  maserasi  kemudian  dipekatkan dengan vacuum  rotary  evaporator untuk mendapatkan crude extract .

## Analisis Asam lemak jenuh dan tidak jenuh Hidrolisis
Ekstrak diambil dan ditambahkan 3 ml HCl  pekat  kemudian  dipanaskan  pada waterbath  suhu  80ºC.  Sampel  dipanaskan sampai  mendidih  selama  2  jam  kemudian
didinginkan. Ekstrak ditambahkan 5 ml diethyl ether  dan  petroleum  ether  (1:1).  Vortex kemudian  diamkan  sampai  mengendap kemudian  diambil  lapisan  atas  yang merupakan  minyak.  Sampel  kemudian diuapkan dalam waterbath dengan bantuan gas N 2 .

## Metilasi
Sampel
diambil
0,5 mL dan ditambahkan  1,5  mL  larutan  Natrium metanolik.  Sampel  kemudian  dipanaskan lama  5-10  menit  sambil digojok dan
didinginkan. Larutan ditambahkan 2 mL Boron trifluoride metanoat,  dianaskan  pada  suhu  60 o C selama  5-10  menit  dan  didinginkan.  Sampel diekstrak  dengan  1  mL  Heptan  dan  1  mL NaCl  jenuh.    Lapisan  atas  diambil  dan dimasukkan  ke  dalam  tube  untuk  kemudian
diinjeksikan  ke  GC  sebanyak  1µL  pada  GC Shimadzu 2010.

## Kondisi GC
Unit  GC  yang  digunakan  adalah  GC Shimadzu  2010.  Detektor    :  FID,  suhu  :  260˚C, Metode  :  Methylester  37  New  3032017 Kal,gcm, Kolom : HP-88 , Length: 100 m.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil analisa dengan GC menunjukan pada ekstrak dedak non fermentasi terdapat 15  asam  lemak  dengan    panjang  rantai karbon    4  hingga  24.    Asam  butirat merupakan  asam  lemak  dengan  rantai karbon  terpendek  yaitu  4,  sedangkan  asam lemak    lignoserat  merupakan  asam  lemak dengan  rantai  terpanjang  yang  terdapat dalam dedak.   Beberapa asam lemak jenuh
O O Elaidic Methyl ester O O Oleic Methyl ester O - O Heneicosanoate (++) O - O Cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoate (--) O O - Nervonate (++) C 19 H 36 O 2 Exact Mass: 296,3 C 19 H 36 O 2 Exact Mass: 296,3 C 21 H 41 O 2 - Exact Mass: 325,3 C 22 H 31 O 2 -
Exact Mass: 327,2
C 24 H 45 O 2 - Exact Mass: 365,3 O O Cis-11,14-Eicosadienoic acid methyl ester O O Cis-13-16-Docosadienoic acid methyl ester C 23 H 42 O 2 Exact Mass: 350,3 C 21 H 38 O 2 Exact Mass: 322,3
Gambar 1. Struktur  kimia  asam-asam  lemak  yang  berubah  secara  drastis  atau  asam  lemak  baru yang terbentuk/hilang.
O O -
Butyrate O O - Tetradecanoate O O - Palmitate O O - Octadecanoate O O Linolelaidic Acid Methyl Ester O O - Arachidate O O Methyl cis-11-eicosenoate O O - Docosanoate O O - Lignocerate O - O Cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoate O O - Palmitoleat O O - Linoleate C 18 H 31 O 2 -
Exact Mass: 279,2 C 24 H 47 O 2 - Exact Mass: 367,4 C 18 H 35 O 2 - Exact Mass: 283,3 C 22 H 43 O 2 - Exact Mass: 339,3 C 16 H 29 O 2 - Exact Mass: 253,2 C 21 H 40 O 2 Exact Mass: 324,3 C 16 H 31 O 2 - Exact Mass: 255,2 C 20 H 39 O 2 - Exact Mass: 311,3 C 14 H 27 O 2 - Exact Mass: 227,2 C 4 H 7 O 2 -
Exact Mass: 87,0 C 19 H 34 O 2 Exact Mass: 294,3 C 20 H 29 O 2 - Exact Mass: 301,2
Gambar 2. Struktur  kimia  asam-asam  lemak  yang  konsentrasinya  sedikit  berubah  atau tetap.
yang  ditemukan  dalam  dedak  tanpa fermentasi  meliputi  asam  butirat,    asam miristat,  asam  palmitat,    asam  stearat,  asam arakhidat,  asam  Docosanoate,  dan  asam lignoserat.  Sedangkan asam lemak tak jenuh meliputi Trans-9-Elaidic acid Methyl ester, Cis- 9-Oleic  Methyl  ester,  Linolelaidic  Acid  Methyl Ester, M Linoleate,  Methyl cis-11-eicosenoate, M  Cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoate,  dan Cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoate.
Jamur  laut  merupakan  sumber  enzim lipase  yang  berperan  penting  dalam pemecahan lemak menjadi asam lemak dan
gliserol  (Knapp et  al. 2013).  Jamur  telah digunakan  dalam  biokonversi  asam  lemak volatil menjadi “microbial asam lemak” yang potensial  sebagai  bahan  untuk  pembuatan biodisel  (Jia  Liu  et  al.  2017).    Pada  proses bioknoversi  tersebut  asam  lemak  pendek akan diubah menjadi asam lemak yang lebih panjang  rantainya.  Melalui  bioengineering panjang  rantai  lemak  dapat  diatur  sesuai dengan  standar  mutu  suatu  produk  (Marella et al . 2018).
Komposisi  asam  lemak  mengalami perubahan  pada  dedak  yang  difermentasi
baik  dalam  kondisi  salin  mapun  non-salin. Asam  butirat,  asam  arakhidat  dan  asam lignoserat  mengalami  penurunan  konsentrasi dedak  yang  difermentasi  pada  semua kondisi.    Asam  miristat,    asam  palmitoleat, asam  linoleat,    Methyl  cis-11-eicosenoate mengalami penurunan pada kondisi unsaline tetapi naik pada kondisi salin.   Asam stearat, Linolelaidic  Acid  Methyl  Ester  dan  asam arakhidat  mengalami  kenaikan  pada  kondisi unsalin  tetapi  mengalami  kelaikan  pada kondisi
Salin.
Cis-5,8,11,14,17- Eikosapentaenoat  dan  palmitat  mengalami kenaikan  pada  semua  kondisi  fermentasi  ( Tabel 1).
Proses  fermentasi  juga  menghasilkan beberapa  asam  lemak  baru  yaitu:  asam
Nervonate, eneicosanoate, Cis-11,14- Eicosadienoic  acid  methyl  ester,  Cis-13-16- Docosadienoic  acid  methyl  ester.    Isomerasi asam elaidat menjadi asam oleat merupakan  fenomena  yang  sangat  menarik (Gambar 3).  Asam elaidat merapakan asam lemak  tak  jenuh  dalam  format  trans  yang dikenal tidak baik untuk kesehatan. Sedangkan  asam  oleat  merupakan  asam lemak  dalam  bentuk  trans  yang  baik  bagi kesehatan manusia.
Paparan NaCl menyebabkan
perubahan
komposisi biokimia jamur, terutama meningkatkan produksi
polisakarida.  Kapasitas P . chrysosporium untuk  memperoleh  toleransi  yang  meningkat terhadap  stres  garam  dari  waktu  ke  waktu,

## Tabel 1. Hasil  perubahan asam lemak trans menjadi asam lemak cis
No. Asam lemak Non fermented Fermented-unsaline Fermented-saline Rata-rata konsentrasi (% Relatif) Rata-rata konsentrasi (% Relatif) Keterangan Rata-rata konsentrasi (% Relatif) Keterangan 1 M Butyrate 4,48 3,69 Turun 2,90 Turun 2 M Tetradecanoate 0,51 0,44 Turun 0,61 Naik 3 M Palmitate 15,49 17,28 Naik 16,32 Naik 4 M Palmitoleate 0,19 0,17 Turun 0,24 Naik 5 M Octadecanoate 1,28 1,41 Naik 0,62 Turun 6 Trans-9-Elaidic acid Methyl ester 36,82 0,70 Turun drastis 0,17 Turun drastis 7 Cis-9-Oleic Methyl ester 0,76 39,18 Naik drastis 34,71 Naik drastis 8 Linolelaidic Acid Methyl Ester 0,51 1,11 Naik 0,47 Turun 9 M Linoleate 37,55 33,48 Turun 40,66 Naik 10 M Arachidate 0,27 0,36 Naik - Tidak ada 11 Methyl cis-11- eicosenoate 1,45 1,23 Turun 1,51 Naik 12 M Docosanoate 0,11 0,12 Naik 0,11 Sama 13 M Lignocerate 0,17 0,16 Turun - Tidak ada 14 M Cis-5,8,11,14,17- Eicosapentaenoate 0,21 0,42 Naik 0,76 Naik 15 Cis-4,7,10,13,16,19- Docosahexaenoate 0,19 - Tidak ada - Tidak ada 16 M Nervonate - 0,14 Baru 0,36 Baru 17 M Heneicosanoate - 0,12 Baru 0,22 Baru 18 Cis-11,14- Eicosadienoic acid methyl ester - - - 0,21 Baru 19 Cis-13-16- Docosadienoic acid methyl ester - - - 0,14 Baru
O O Elaidic Methyl ester O O Oleic Methyl ester C 19 H 36 O 2 Exact Mass: 296,3 C 19 H 36 O 2 Exact Mass: 296,3 Isomerasi 9 9
Gambar 3. Struktur  kimia  asam-asam  lemak  yang  berubah  secara  drastis  atau  asam  lemak  baru yang terbentuk/hilang.
dapat dikaitkan dengan kapasitas yang lebih tinggi  untuk  produksi  dan  /  atau  retensi  zat terlarut (Jeon et al., 2017 ). Menariknya, jamur ini,  setelah  terpapar  ke  tingkat  salinitas rendah, meningkat basalnya (di bawah kondisi  kontrol)  dari  beberapa  metabolit (misalnya  senyawa  dengan  karboksil,  lipid, protein, polisakarida), seperti yang dikonfirmasi oleh peningkatan daerah puncak  eksternal  yang  diperoleh  oleh spektrum infra-merah (penambahan 53, 10, 9 dan  43%  untuk  karboksil,  lipid,  protein  dan polisakarida, masing-masing).
Perbedaan  intensitas  puncak  diamati antara  konsentrasi  kontrol  dan  NaCl  untuk NPENaCl,  perbedaan  tersebut  tidak  diamati untuk  PE-NaCl.  Hasil  ini  dapat  menunjukkan kapasitasnya untuk menyesuaikan diri dengan  stres  osmotik  setelah  pemaparan yang berkepanjangan. Sebenarnya, kemampuan  jamur  untuk  menyesuaikan  diri dengan  stres  kimia  sudah  dikenal  dan  telah banyak  digunakan  untuk  meningkatkan beberapa karakteristik dari organisme ini.
Salinitas  dapat  mempengaruhi  laju pertumbuhan  dan  komposisi  hifa  jamur, sehingga bahan bioaktifnya juga kemungkinan  terpengaruh  (Venâncio  et  al. 2017).    Pada  penelitian  lain,  salinitas  rendah dapat  meningkatkan  produktivitas  dari  suatu fermentortor  dibandingkan  tanpa  adanya NaCl, tetapi pada salinitas tinggi menghambat  proses  produksi  senyawa target  (Wen  et  al.  2018).  Namun  demikian, salititas  optimum  berbeda  antara  satu microorganisme dengan organisme yang lain tergantung  sifat  alamiah  dari  mikroba  yang digunakan dalam proses fermentasi.
Analisis  data  GC  MS  menunjukan bahwa  salah  satu  senyawa  mayor  dalam
dedak  yaitu    asam  elaidat  (trans-9  C18:1) mengalami  trans-cis  isomerasi.      Asam  lemak trans merupakan asam lemak yang berbahaya  bagi  kesehatan  manusia  karena dapat  menyebabkan  penyakit  jantung. Proses  isomerasi  cis/trans  pada  asam  lemak biasanya terjadi dalam proses penggoregngan  (Cheng et  al. 2018). Kemampuan  jamur T.  harzianum dalam proses  isomerasi  trans-cis  pada  asam  lemak elaidat  menjadi  asam  lemak  oleat  sangat bermanfaat  dalam  meningkatkan  mutu bahan  pangan  atau  bahan  pakan  ternak. Asam  lemak  oleat  merupakan  asam  lemak yang  baik  bagi  kesehatan  karena  dapat menurunkan  tekanan  darah  dan  plasma kolesterol  (Lee et al. 2019).    Asam  oleat juga bermanfaat  sebagai  bahan  pembuat  “drug carier”  untuk  obat  kanker  (ElMasry  et  al. 2018).    Fermentasi  telah  digunakan  dalam berbagai bidang misalnya untuk memproduksi  pigmen,  industri  makanan memproduksi  asam  lemak,  dan  pengolahan limbah (Liu et al. , 2019, Xuan et al. , 2018).

## KESIMPULAN
Komposisi  asam  lemak  mengalami perubahan  pada  dedak  yang  difermentasi baik  dalam  kondisi  salin  mapun  non-salin. Proses fermentasi juga menghasilkan beberapa  asam  lemak  baru  yaitu:  asam Nervonate, eneicosanoate, Cis-11,14- Eicosadienoic  acid  methyl  ester,  Cis-13-16- Docosadienoic  acid  methyl  ester.    Isomerasi asam elaidat menjadi asam oleat merupakan fenomena yang sangat menarik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari hibah  RPI    yang  dibiayai  dengan  sumber
dana  Selain  APBN  DPA  SUKPA  LPPM Universitas Diponegoro Tahun Anggaran 2017.

## DAFTAR PUSTAKA
Amira  M.G.E.,  Ahmed  A.L.  &  Tatsufumi  O. 2009. Modulation
of carcinogen metabolizing  enzymes  by  chromanone A;  a  new  chromone  derivative  from algicolous marine fungus Penicillium sp. Environ. Toxicol. Pharmacol. 28:317-322 Cheng,  N,  Zhang  J.,  Yin  J.,  &  Li  S.  2018. Computational and
Experimental
Research  on  Mechanism  of  Cis/Trans Isomerization of Oleic Acid. Heliyon 4(9). ElMasry, S.R., Hathout R.M., Abdel-Halim M., & Mansour  S..  2018.  In  Vitro  Transdermal Delivery  of  Sesamol  Using  Oleic  Acid Chemically-Modified
Gelatin
Nanoparticles  as  a  Potential  Breast Cancer  Medication. J.  Drug  Delivery Sci. Technol. 48: 30–39.
Hadipernata,  M.,  Supartono  W.,  &  Falah M.A.F.  2012.  Proses  Stabilisasi  Dedak Padi  ( Oryza  sativa L.)  Menggunakan Radiasi  Far  Infra  Red  (Fir)  Sebagai Bahan  Baku  Minyak  Pangan. J.  Aplikasi Teknol. Pangan. 1(4):103–107.
Jeon,  E.Y.,  Song,  J.  W.,  Cha,  H.  J.,  Lee,  S.M., Lee,  J.,  &  Park,  J.B.  2018.  Intracellular transformation  rates  of  fatty  acids  are influenced  by  expression  of  the  fatty acid transporter FadL in Escherichia coli cell  membrane. J.  Biotechnol .  281:161– 167.
Knapp,  I.S.S.,  Williams  G.J,  Carballo  J.L.  Cruz- Barraza  J.A.,  Garner  J.P.A,  &  Bell  J.J, 2013.  Restriction  of  sponges  to  an  atoll lagoon  as  a  result  of  reduced environmental  quality.  Mar.  Poll.  Bull. 66(1–2):209–220.  doi:  10.1016/j.marpol bul.2012.08.017.
Lee,  D-H,  Kulkarni  K.P.,  Kim  B.O,  Seok  Y.M., Song J.T., & Lee J.D. 2019. Comparative Assessment of Quality Characteristics of Chungkookjang  Made  from  Soybean
Seeds Differing in Oleic Acid
Concentration.
J.  Functional  Foods . 52:529–36
Liu, J., Gao T., Luo Y., Chai X., Wu J., Zhao W., Jiao  P.,  Luo  F.,  &  Lin  Q..  2019. Enhancement  of  Monascus  Pigment Productivity via a Simultaneous Fermentation  Process  and  Separation
System Using Immobilized-Cell Fermentation. Biore.  Technol .  272:552- 560.
L Liu,  J.,  Yuan  M.,  Liu  JN..,  &  Huang  X.F.  2017. Bioconversion  of  Mixed  Volatile  Fatty Acids into Microbial Lipids by Cryptococcus  Curvatus  ATCC  20509. Bioresource Technology 241:645–51. Marella,  E.R.,  Holkenbirnk  C.,  Siewers  V.,  & Borodina  I.,  2018.  Engineering  microbial fatty  acid  metabolism  for  biofuels  and biochemical. Current Opinion in Biotechnol. 50:39–46. DOI :
10.1016/j.copbio.2017.10.002.
Mazidi,  M.,  Katsiki,  N.,  Mikhailidis,  D.  P.,  & Banach, M. 2018. Link between plasma trans-fatty  acid  and  fatty  liver  is moderated  by  adiposity. Int.  J.
Cardiology. 272:316–322.
Murniasih, T., Wibowo J.T., Putra M.Y., Untari F. &  Maryani  M..  2016.  Pengaruh  nutrisi dan  suhu  terhadap  selektivitas  potensi antibakteri dari bakteri yang berasosiasi dengan  spons.  Jurnal  Kelautan  Tropis Vol. 21(1):65–70
Swathi, J. 2013. Marine fungal metabolites as a  rich  source  of  bioactive  compounds. African J. Biochem. Res. 7(10):184–196. Venâncio,  C.,  Pereira  R.,  Freitas  A.C.,  Rocha- Santos T.A.P., da Costa J.P., Duarte A.C. & Lopes I. 2017. Salinity induced effects on  the  growth  rates  and  mycelia composition  of  basidiomycete  and zygomycete fungi. Environ. Poll. 231:1633–1641.  doi:  10.1016/j.envpol.20 17.09.075.
Wang,  X.,  Wang,  X.  &  Wang,  T.  2017.  An effective method for reducing free fatty acid  content  of  high-acid  rice  bran  oil by enzymatic amidation. J. Indust. Eng. Chem .  48:119–124.  doi:  10.1016/j.jiec. 2016.12.028.
Wen,  Q.,  Ji  Y.,  Hao  Y.,  Huang  L.,  Chen  Z.,  & Sposob  M.  2018.  Effect  of  Sodium Chloride on Polyhydroxyalkanoate Production from Food Waste
Fermentation  Leachate  under  Different Organic  Loading  Rate. Biores.  Technol. 267:133–40.
Wikanta,  D.K.  &  Tembalang,  P.  2012. Pengembangan  Proses  Thermokimia Untuk  Peningkatan  Konversi  Asam Lemak  Melalui  Interfacial  Activation Lipase  Buah  Segar  Kelapa  Sawit
Dengan  Tuning  Up. Media  Komunikasi Rekayasa  Proses  dan  Teknologi  Tepat Guna 8(1):13–18.
Xuan,  N.H.,  Ferng  S.,  Ting,  C.H,  Lu,  Y.C,  Yeh, Y.F, Lai, Y.R, Chou, R.Y.H, Hwang, J.Y, &
Hsu,  C.K.  2018.  Food  Science  and
Technology  Effect  of  Initial  5  Days Fermentation  under  Low  Salt  Condition on  the  Quality  of  Soy  Sauce. LWT . 92(300): 234–41.