## UJI VIABILITAS BAKTERI ASAM LAKTAT DARI USUS ITIK PADA MEDIA PAKAN DEDAK PADI DAN KOMBINASI DEDAK PADI DENGAN MOLASES

## THE VIABILITY TEST OF LACTIC ACID BACTERIA FROM DUCK INTESTINES ON RICE BRAN AND COMBINATION OF RICE BRAN AND MOLASSES
Rudy Sutrisna 1 , C. N. Ekowati 2 ,  dan Vina Silviana Agustin 2
1 Jurusan Peternakan Fakultas Pertanian Universitas Lampung
2 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung Jl. Prof. Dr. Soemantri Brodjonegoro No. 1 Bandar Lampung 35145 e-mail: rudysutrisna65@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui viabilitas Bakteri Asam Laktat dari usus itik pada dedak padi dan kombinasi dedak padi dengan molases sebagai kandidat probiotik. Penelitian dilaksanakan dalam Percobaan Rancangan  Acak  Kelompok  yang  dilakukan  secara  faktorial  2  x  6.    Faktor  A  adalah  2  macam  media perlakuan  yaitu:  media  A  (dedak  padi)  dan  media  B  (dedak  padi  +  molasis).  Faktor  B  adalah  lama  waktu inkubasi  yaitu  0  jam  (kontrol),  2jam,  4jam,  6  jam,  8  jam,  dan  10  jam.  Masing-  masing  perlakuan  diulang sebanyak  2  kali.  Pengamatan  viabilitas  bakteri  dilakukan  dengan  metode  angka  lempeng  total  untuk menentukan jumlah sel bakteri yang hidup dilanjutkan dengan menghitung viabilitas BAL. Data jumlah koloni BAL yang diperoleh dianalisis secara deskriptif. Hasil  penelitian menunjukkan isolat BAL dari usus itik pada media  perlakuan  dedak  padi  dan  kombinasi  dedak  padi  dengan  molases  memiliki  viabilitas  tertinggi  pada waktu inkubasi ke- 10 jam dengan jumlah populasi sebesar Log 6,53 CFU/g pada dedak padi dan Log 6,87 CFU/g pada kombinasi dedak padi dan molases.
Kata kunci: Viabilitas, Bakteri Asam Laktat, Dedak Padi, Molases.

## ABSTRACT
This study aims to determine the viability of Lactic Acid Bacteria from duck intestines on rice bran and rice bran combination with molasses as probiotic candidate. The experiment was conducted in Randomized Block Design  Experiment  which  was  done  2  x  6  factorial.    Medium  A  (rice  bran)  and  medium  B  (rice  bran  + molasses)  were  used  as  treatment  media  (Factor  A).  Factor  B  was  length  of  incubation  time  :  0  hours (control),  2  hours,  4  hours,  6  hours,  8  hours,  and  10  hours.  Each  treatment  was  repeated  2  times. Observation  of  bacterial  viability  was  done  by  total  plate  number  method  to  determine  the  number  of  live bacterial  cells  followed  by  calculating  the  viability  of  LAB.  The  number  of  obtained  LAB  colonies  was analyzed descriptively. The results showed that LAB isolates from duck intestines on rice bran treatment and rice  bran  combination  combined  with  molasses  had  the  highest  viability  at  the  10  hours  storage  with  a population of Log 6,53 CFU/g in rice bran and 6,87 CFU/g.in combination of rice bran and molasses.
Keywords: Viability, Lactic Acid Bacteria, Rice Bran, Molasses.

## PENDAHULUAN
Bakteri  Asam  Laktat  (BAL)  merupakan  kelompok bakteri  yang  berpotensi  sebagai  probiotik,  karena memiliki  kemampuan  mengubah  gula  menjadi asam  organik  (laktat  dan  asetat).  Asam  laktat yang dihasilkan oleh BAL mengakibatkan
terjadinya  penurunan  pH  sehingga  menyebabkan terhambatnya  pertumbuhan  bakteri  pembusuk atau  patogen  (Rajagukguk,  2015).    Prangdimurti (2001),  mensyaratkan  mikroorganisme  menjadi probiotik harus memiliki viabilitas yang tinggi untuk melalui saluran pencernaan.
Viabilitas  merupakan  kemampuan  dari  makhluk hidup untuk dapat mempertahankan daya hidupnya  pada  lingkungan  (Kristiyanti,  2015). Beberapa  faktor  lingkungan  yang  mempengaruhi viabilitas mikroba antara lain temperatur lingkungan,  pH,  aerasi,  tekanan  osmotik,  serta faktor  lain  berupa  nutrisi  yang  terkandung  dalam medium pertumbuhan (Pelczar dan Chan, 2005).
Bakteri  Asam  Laktat  dapat  bertahan  hidup  pada medium  yang  sesuai  atau  medium  yang  memiliki komposisi nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhannya.    Untuk  tetap  bertahan  hidup, BAL dalam pertumbuhannya  memerlukan sumber nitrogen yang berupa asam amino, sumber karbon atau  energi  berupa  karbohidrat,  sumber  vitamin berupa vitamin B dan sumber mineral berupa Mg, Mn,  dan  S.    Beberapa  bahan  pakan  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  sumber  karbohidrat  dan sumber  nitrogen  diantaranya  adalah  dedak  padi dan molases.
Dedak  padi  mengandung  energi  termetabolis sebesar  2500,76%  kcal/kg –  2840,23  kcal/kg, protein kasar  8%-14%, serat kasar 6%-30%, dan kadar  abu  5%-  16%  (Zuprizal,  2000).    Menurut Tangendjaja  (1986)  beberapa  elemen  penting yang  terkandung  didalam  dedak  padi  diantaranya Metionin  0,25%,  Lisin  0,45%,  Ca  0,20%,  dan  P 1,00%  .  Dedak  padi  juga  memiliki  kisaran  pH sekitar  6,54±0,03 (Suwarno, 2007).
Penelitian  Esivan  dkk  (2015)  menunjukan  bahwa Lactobacilus  casei yang  merupakan  salah  satu strain  probiotik  mampu  tumbuh  dengan  baik  di media dedak padi.  Viabilitas tertinggi Lactobacilus casei ditunjukan  pada  dedak  padi  konsentrasi  20 %  (w/v)  dengan  waktu  inkubasi  10  jam  yaitu sebesar  3,0  x  10 8 CFU/ml.  Selain  itu  dedak  padi juga mempengaruhi produksi biomassa sel bakteri
yaitu  sebesar  0,0076  g/ml..    Hasil  ini  sesuai dengan  temuan  Elok  dkk  (2012)  bahwa  Bakteri Asam  Laktat  (BAL)  mampu  menggunakan  nutrisi dedak padi secara efektif.
Selain dedak padi, molases juga dapat digunakan sebagai  medium  sumber  karbon  (Desniar,  2003). Molases  mengandung    48-56%  gula  dan  sedikit bahan  atau  unsur-unsur  mikro  (trace  element) yang  penting  bagi  kehidupan  organisme,  seperti cobalt,  boron,  iodium,  tembaga,  mangan,  dan seng.    Selain  itu,  molasis  juga  mengandung vitamin    (Saputra,  2008)  sehingga  dapat mendukung  viabilitas  BAL.  Hasil  penelitian Sutrisna  dkk  (2015)  menunjukan  penambahan molases  konsentrasi  1%  pada  medium  tumbuh BAL  menjadikan  daya  hidup  BAL  lebih  baik dibandingkan  media  kontrol  (MRS).    Isolat  BAL dari  usus  itik  B1,  B3  dan  B4  tetap  viabel  selama 72 jam inkubasi. Masing-masing isolat menghasilkan  1,73  generasi,  1,52  generasi  dan 2,82  generasi.    Oleh  karena  itu,  penambahan molases  konsentrasi  1  %  pada  dedak  padi dimungkinkan dapat meningkatkan viabilitas Bakteri Asam Laktat.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi  Fakultas  MIPA  Biologi  Universitas Lampung dari bulan Januari – Maret 2016.

## Alat dan Bahan
Bahan  yang  diperlukan  dalam  penelitian  ini meliputi  campuran  isolat  bakteri  asam  laktat  dari usus  itik  B4,  B7,  dan  B8  yang  diperoleh  dari koleksi  (Sutrisna,  2013),  media deMan  Rogosa and  Sharpe  Broth (MRS),  NaCl  steril,  Molases, dan  Dedak  padi.    Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu laminar  air  flow  cabinet,
autoclvef , oven, hot plate magnetic stirrer , neraca analitik,  pH  meter, ultrasonic  cleaner ,  inkubator, erlenmeyer,  beaker  glass,  mikropipet,  tabung reaksi,  pipet  tip,  cawan  petri,  kapas,  kain  kassa, keranjang,  tabung  reaksi,  kertas  label,  pipet volumetri  dan  pump,  bunsen,  gelas  ukur,  dan  rak tabung.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  disusun  dengan  percobaan  rancangan acak  kelompok  (RAK)  pola  perlakuan  faktorial 6x2.    Faktor  A  adalah  dua  macam  media perlakuan  bakteri  asam  laktat,  yaitu  media  A (dedak  padi),  dan  media  B  (dedak  padi  + molases).  Faktor B adalah lama waktu inkubasi 0 jam, 2  jam, 4  jam, dan 6  jam, 8  jam, dan 10 jam. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 3 kali.

## Tahapan Penelitian
1.  Peremajaan  bakteri  isolat  B4,  B7,  dan  B8  dari usus  itik  pada  tabung  reaksi  yang  berisi medium  MRS  Broth    kemudian  diinkubasi selama  48  jam  di  dalam  inkubator  pada  suhu
37 o C.
2.  Pembuatan starter  isolat yang telah diinkubasi dari  peremajaan  diambil  sebanyak  1  ml  ke dalam  9  ml  MRS  Broth  steril  kemudian
diinkubasi selama 48 jam dalam incubator .
3.  Pencampuran  dedak  padi  dengan  probiotik,
suspensi  BAL  diinokulasi  ke  dalam  tabung reaksi  yang  berisi  9  ml  aquades  steril  sampai diperoleh  kekeruhan  yang  sama  dengan Standar  Mac  Farland  0,5  dengan  kepadatan (1,5x10 8 CFU/ml).    Suspensi  bakteri    uji diinokulasikan secara merata dengan perbandingan  50  ml  suspensi  untuk  setiap  50 gram  media  pakan  perlakuan  (Irianingrum, 2009).    Campuran  antara  suspensi  bakteri dengan  media  pakan  lalu  dihomogenkan  dan
diinkubasi pada 0 jam (kontrol), 2 jam, 4 jam, 6 jam, 8 jam, dan 10 jam pada  suhu ruang.
4.  Perhitungan  sel  bakteri  dilakukan  secara  tidak langsung  dengan  metode pour  plate .    Masing- masing  sampel  perlakuan  diambil  sebanyak  1 gram,  lalu  diencerkan  dalam  larutan  garam fisiologis sebanyak 10 ml sebagai pengenceran  10 -1 dan  seterusnya  sampai pengenceran10 -6 .    Diambil  sebanyak  1  ml masing-masing  dari  3  pengenceran  tertinggi dituang  kedalam  cawan  petri  steril,  kemudian ditambahkan  medium  MRS  Agar  sebanyak  15 ml.  Cawan petri digoyangkan supaya suspensi dan  media  tercampur  merata  ( Pour  Plate Method ).    Setelah  media  memadat,  diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 37°C selama 48 ±  2  jam.    Setelah  diinkubasi  dihitung  jumlah koloni  dengan  menggunakan colony  counter .
Hasil  pehitungan  jumlah  koloni  kemudian dikonversikan ke dalam CFU/gram.
Jumlah  koloni  BAL  yang  tumbuh  kemudian dimasukan  kedalam  rumus  ALT  (Angka Lempeng Total) sebagai berikut:
N = Σ C (n1 x 1) + (𝑛2 𝑥 0,1) x d (Kristiyanti, 2015) Keterangan: N = Jumlah koloni / gram ΣC = Total koloni yang dapat dihitung n1 =  Jumlah  cawan  petri  pada  pengenceran pertama yang dihitung n2 =  Jumlah  cawan  petri  pada  pengenceran kedua yang dihitung
d = Pengenceran pertama yang dihitung

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Penelitian
1.  Pertumbuhan  Isolat  BAL  dari  Usus  Itik  pada Pakan Dedak Padi
Angka  lempeng  total  bakteri  asam  laktat  dalam media pakan dedak padi disajikan pada Gambar 1.    Fase  lag  pada  BAL  terjadi  selama  jam  ke-0 sampai  jam  ke-6  dengan  jumlah  populasi  BAL berkisar  Log 6,22 CFU/g.  Kemudian diikuti fase eksponensial  pertumbuhan  bakteri  berlangsung cepat pada jam ke-8 dan jam ke-10.
Pertumbuhan  populasi  BAL  tertinggi  terjadi selama waktu inkubasi 10 jam sebesar Log 6,53 CFU/g.
Gambar  1.    Grafik  log  jumlah  populasi  BAL  pada media pakan dedak padi
2.  Pertumbuhan  Isolat  BAL  dari  Usus  Itik  pada Pakan Kombinasi Dedak Padi Dengan Molases
Angka  lempeng  total  bakteri  asam  laktat  dalam media  pakan  kombinasi  dedak  padi  dengan molases  disajikan  pada  Gambar  2.    Fase  lag pada  BAL  terjadi  selama  jam  ke-0  sampai  jam ke-6  dengan  jumlah  populasi  BAL  berkisar   Log 6,20 –  6,21  CFU/g.    Kemudian  diikuti  fase eksponensial  pertumbuhan  bakteri  berlangsung cepat pada jam ke-8 dan jam ke-10.
Penambahan  molases  konsentrasi  1  %  pada dedak padi mengakibatkan peningkatan pertumbuhan BAL dalam  waktu inkubasi 10 jam dengan  jumlah  populasi  BAL  sebesar  Log  6,87 CFU/g Gambar  2.    Grafik  log  jumlah  populasi  BAL  pada media  pakan  kombinasi  dedak  padi dengan molases.
3.   Viabilitas Isolat BAL Dari Usus Itik Pada Media Pakan
Berdasarkan  hasil  perhitungan  menunjukkan bahwa  isolat  BAL  dari  usus  itik  pada  kedua media  perlakuan  dapat  bertahan  hidup  hingga waktu inkubasi jam ke 10.  Isolat BAL dari usus itik mempunyai viabilitas tertinggi pada medium dedak  padi  +  molases  dibandingkan  dengan medium  dedak  padi  tanpa  molases.  Pada Gambar  3  perbedaan  signifikan  terlihat  pada waktu  inkubasi  jam    ke  10  yaitu  terjadi peningkatan  pertumbuhan  sebesar  log  6,87 CFU/g pada dedak padi + molases sedangkan pada  media  pakan  dedak  padi  saja  hanya sebesar log 6,53 CFU/g.
Gambar  3.  Grafik  log  jumlah  populasi  BAL  pada kedua media pakan perlakuan.
6.10 6.20 6.30 6.40 6.50 6.60 0 5 10 15 Log jum la h se l
b akt e ri h id u p cf u /g r waktu inkubasi 6.00 6.20 6.40 6.60 6.80 7.00 0 5 10 15 Lo g ju m la h s el b a kter i h id u p cf u /g r waktu inkubasi 6.00 6.20 6.40 6.60 6.80 7.00 0 5 10 15 Log ju m la h sel b a kter i h id u p c fu /g r waktu inkubasi

## Pembahasan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  BAL  tetap viabel hingga waktu inkubasi jam ke-10.  Populasi total bakteri  cenderung  meningkat  seiring  dengan pertambahan  lama  waktu  inkubasi.    Hasil  ini menunjukan  bahwa  dalam  media  pakan  dedak padi memiliki ketersediaan nutrisi yang baik untuk bakteri asam laktat sehingga jumlah koloni bakteri pada  semua  perlakuan  dapat  bertahan  hidup hingga  10  jam.    Pada  jam  ke-0  (awal  inkubasi) campuran  isolat  BAL  pada    media  pakan  dedak padi  memiliki  jumlah  populasi  sebesar  Log  6,22 CFU/g  dan  tetap  viabel  hingga  jam  ke-6  yaitu sebesar Log 6,22 CFU/g. Sedangkan pada  media pakan  dedak  padi  dengan  molases  pada  jam  ke- 0(awal inkubasi) hingga ke- 6 jam memiliki jumlah sel  sebanyak  log  6,20  CFU/g  hingga  log  6,21 CFU/g. Pada jam ke-0 hingga jam ke-6 ini bakteri asam  laktat  mengalami  fase  lag.    Dalam  fase  lag ini,  BAL  berada  dalam  tahap  penyesuaian terhadap  lingkungan  yang  baru.  Pada  fase adaptasi  mikroba  mengalami  suatu  masa  dimana selnya menjadi lebih besar tetapi jumlahnya tetap sama  atau  sedikit  sekali  terjadi  perkembangan populasi meskipun metabolisme sel terus berlangsung  (Fauziah  dkk,  2011).    Pada  fase  lag sel  juga  membutuhkan  waktu  untuk  memperbaiki diri  dari  kerusakan  yang  terjadi  akibat  pereseran suhu    dan  nutrisi  dari  medium  sebelumnya  serta kandungan  bahan  kimia  yang  beracun  bagi  sel tersebut  (Brock,  2012).  Untuk  tetap  bertahan hidup,  BAL  dalam  pertumbuhannya  memerlukan sumber  nitrogen  berupa  asam  amino,  sumber karbon  atau  energi  berupa  glukosa,  sumber vitamin  berupa  vitamin  B  dan  sumber  mineral berupa  Mg,  Mn,  dan  S.  Medium  MRS  Broth merupakan  medium  selektif  yang  sebelumnya digunakan  untuk  pertumbuhan  BAL,  dimana medium ini mengandung nutrisi yang lengkap dan
sesuai  dengan  kebutuhan  pertumbuhan  BAL sehingga  BAL  dapat  tumbuh  dengan  baik  pada medium  tersebut  (Kristiyanti,  2015).    Menurut Dwidjoseputro  (2005)  menyatakan  bahwa  dedak padi  mengandung  unsur  C,  H,  O,  dan  N  yang berguna untuk menyusun protoplasma sel bakteri. Pada fase lag sel juga menghasilkan enzim untuk sintesis  metabolit  essensial  pelengkap  yang  tidak ada  dalam  pakan  dedak  padi    (Brock,  2012). Enzim- enzim tersebut membantu dalam perombakan karbohidrat,  lemak, protein,dan beberapa  zat  lainnya  yang  terkandung  dalam dedak  padi  sehingga  mudah  diserap  oleh  bakteri sebagai  sumber  energi  (Dwidjoseputro,  2005). Menurut Wibawa dkk (2015) Proses biofermentasi pada  dedak  padi  oleh  mikroba  mengakibatkan struktur  serat  dedak  padi  menjadi  rapuh  dan terbuka.    Mikroba  bekerja  secara  bertahap  dalam memecah  komponen  dinding  sel.    Enzim peroksidase  ekstraseluler  bekerja  secara  aktif pada aktivitas lignolisis, sehingga ikatan lignoselulosa  putus,  dan  fraksi  lignin  terurai menjadi CO2.
Biofermentasi dengan menggunakan  jasa  mikroba  dapat  meningkatkan kandungan kecernaan zat makanan pakan.
Setelah  itu  diikuti  fase  eksponesial  bakteri  pada jam  ke-8  dan  jam  ke-10.    Jumlah  koloni  tertinggi pada  media  dedak  padi  ditunjukkan  pada  waktu inkubasi 10 jam sebanyak Log 6,53 CFU/g (3,39 x 106  CFU/g),  sedangkan  pada  media  kombinasi dedak  padi  dengan  molases  memiliki  jumlah  sel sebanyak  Log  6,87  CFU/g.(7,41  x  106  CFU/g). Fase  ini  adalah  periode  pembiakan  bakteri  yang berlangsung cepat karena sel mengalami pembelahan  secara  aktif  (Volk  dan  Wheeler, 1993).    Konsentrasi  seluler  atau  biomassa meningkat  sehingga  massa  sel  menjadi  dua  kali lipat  dengan  laju  sama  dimana  sel  akan
mengalami  pembelahan  dengan  laju  konstan (Pelczar  dan  Chan,  2005).      Hasil  ini  sesuai dengan  temuan  Esivan  dkk  (2015)  bahwa viabilitas tertinggi BAL pada dedak padi konsentrasi  20%  (w/v)  ditunjukkan  pada  waktu inkubasi 10 jam yaitu sebanyak 3,0 x 108 CFU/ml. Perbedaan  jumlah  log  koloni  ini  disebabkan karena penggunaan konsentrasi dedak padi pada penelitian  yang  dilakukan  lebih  padat  sebesar 50%  (w/v)  menyesuaikan  kondisi  pemberian pakan pada itik yang tidak terlalu encer.
Hasil  penelitian  jumlah  koloni  BAL  pada  pakan dedak  padi  dan  kombinasi  dedak  padi  dengan molases pada waktu inkubasi 0 jam hingga 10 jam menunjukan kisaran koloni lebih dari 106 , hasil ini memenuhi kriteria BAL sebagai probiotik. Menurut Sumarsih  dkk  (2012)  menyebutkan  bahwa  jumlah sel  bakteri  asam  laktat  hidup  yang  dianjurkan berada dalam saluran pencernaan agar memperoleh  efek  positif  terhadap  kesehatan mengandung sel hidup lebih dari 106.
Nutrisi  Dedak  padi  yang  mampu  dimanfaatkan oleh  BAL  untuk  mempertahankan  hidupnya adalah  komponen  karbohidrat,  protein,  serta lemak.    Kandungan  protein  pada  dedak  padi mempunyai  nilai  yang  cukup  baik  karena  banyak mengandung  asam  amino  esensial,  diantaranya theronine,  valine,  leucine,  isoleucine,  lysine, tryptophan, phenylalanine, methionine, dan histidine  (Hadipernata  dkk,  2012).    Asam  amino yang dihasikan dari perombakan protein digunakan sebagai sumber nitrogen untuk meningkatkan  viabilitas  BAL  tersebut  (Mardiani dkk,  2013).    Selain  itu  kandungan  karbohidrat dedak  padi  juga  cukup  tinggi  sekitar  40-49% (Rasyaf,  2004)  .    Serat  kasar  dalam    dedak  padi yang terdiri dari selulosa, hemiselulosa, lignin, dan
polisakarida  lain  (Hidayat  dkk,  2014)  dapat digunakan sebagai sumber karbon untuk pertumbuhan  bakteri  asam  laktat.    Karbohidrat yang  tersedia  dedak  padi  merupakan  sumber energi  untuk  menghasilkan  ATP  yang  dapat memfasilitasi  aktivitas  mikroorganisme  dalam melakukan  proses  fermentasi  (Irlbeck,  2000). Dwidjoseputro  (2005)  menyatakan  bahwa  dedak padi  mengandung  unsur  C,  H,  O,  dan  N  yang berguna untuk menyusun protoplasma sel bakteri. Elemen  penting  lainnya  yang  terkandung  dalam dedak  padi  diantaranya  Ca  0,20%,  dan  P  1,00% (Tangendjaja,  dkk.,1986).    Unsur  mineral  Ca dibutuhkan  sebagai  penyusun  sel  (Sumarsih, 2003)  sedangkan  sumber  phospor  pada  dedak padi  dibutuhkan  sebagai  komponen  ATP,  asam nukleat  dan  sejumlah  koenzim  seperti  NAD, NADPH,  dan  flavin.    Selain itu,  banyak  metabolit, lipid, komponen dinding sel, dan beberapa protein juga  bergugus  fosfat  (Jawetz  dkk,  2005). Pertumbuhan  cepat  BAL  diawali  dengan  proses masuknya  nutrisi  ke  dalam  sel,  selanjunya  nutrisi diubah  menjadi  energi  dan  pembentukan  organel sel.    Energi  yang  dihasilkan  digunakan  dalam proses replikasi kromosom sehingga mengakibatkan pembelahan sel serta peningkatan jumlah dan ukuran sel (Sutrisna dkk, 2015).
Penambahan  molases  dengan  konsentrasi  1% pada  pakan  dedak  padi  menunjukkan  hasil populasi  total  bakteri  asam  laktat  cenderung meningkat  seiring  dengan  pertambahan  lama waktu  inkubasi.    Pada  jam  ke-10  viabilitas  BAL pada  pakan  dedak  padi  dengan  molases  lebih tinggi  karena  molases  mengandung  gula  dalam bentuk  yang  lebih  sederhana  dibandingkan dengan  dedak  padi  sehingga  mudah  digunakan oleh  bakteri  sebagai  sumber  karbon  untuk memacu  proses  pertumbuhan  dan  metabolisme.
Penggunaan  molase  sebagai  sumber  karbon didasarkan pada harga molase yang relatif murah, memiliki  kandungan  karbon  yang  tinggi,  serta penggunaannnya  yang  cukup  mudah.    Molases mengandung  48 –  56%  gula  dalam  bentuk sukrosa  (30  -  40%),  glukosa  (4-9%),  fruktosa  (5- 12%),  gula  pereduksi  (1  -  5%)  (Yuniasari,  2009) serta  sedikit  bahan  atau  unsur-unsur  mikro  (trace element) yang penting bagi kehidupan organisme, seperti  cobalt,  boron,  iodium,  tembaga,  mangan, dan seng (Saputra, 2008).  Unsur – unsur mineral Mn,  Co,  Cu,  Bo,  dan  Zn  merupakan  unsur  hara mikro yang diperlukan oleh sel dalam jumlah yang sangat  sedikit  sebagai  penyusun  sel,  pengatur tekanan osmosis, kadar ion hidrogen, permeabilitas,  dan  potensial  oksidasi  reduksi suatu  medium  (Sumarsih,  2003).    Nutrisi  seperti glukosa, sukrosa dan nutrisi dengan molekul yang besar  lainnya,  masuk  ke  dalam  sel  melalui transport  aktif  dan  difusi  terfasilitasi.    Beberapa senyawa  organik  lain  pada  molases  yang mempengaruhi pertumbuhan BAL yaitu Biotin 2%, Cholin 8,8%, Asam folat 0,35%, Niacin 23%, K2O, CuO,  MgO  dan  NaO  (Sutrisna  dkk,  2015). Menurut  Moat  dkk  (2002)  biotin  yang  terkandung dalam  molases  digunakan  oleh  bakteri  dalam penyusun  enzim  karboksilase  dan  mutase. Unsur-unsur  lain  pada  molases  seperti    K+,  Na+, Mg+  digunakan  sebagai  sumber  ion  untuk menyeimbangkan  larutan  yang  berperan  dalam memfasilitasi molekul menyeberangi membran sel dan sebagai kofaktor enzim.
Berdasarkan  uji  antagonis  hasilnya  diperoleh isolat BAL B4, B7, dan B8 dinyatakan tidak saling membunuh antar isolat.  Dijelaskan pada Gambar 1  dan  2  pertumbuhan  BAL  mengalami  fase adaptasi  pada  jam  ke-0  hingga  jam  ke-6  pada kedua  media  perlakuan.  Selama  fase  adaptasi ini
diduga  terjadi  indikasi  kompetisi  antar  bakteri untuk memperoleh nutrisi dalam media perlakuan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan diperoleh  kesimpulan  isolat  BAL  hasil  isolasi  dari usus  itik  koleksi  Sutrisna  (2013)  diinkubasi  pada media  perlakuan    dedak  padi  dan  kombinasi dedak  padi  dengan  molases  memiliki  viabilitas tertinggi  pada  waktu  inkubasi  jam  ke-10  dengan jumlah  populasi  sebesar  Log  6,53  CFU/g  pada dedak  padi  dan  Log  6,87  CFU/g  pada  kombinasi dedak padi dan molases.

## Daftar Pustaka
Brock.  2012. Biology  of  Microorganisms  Thirteenth Edition .  Pearson  Education,  Inc.  Publishing  As Benjamin Cummings. San Francisco.
Desniar.  2003.  Pemanfaatan  Tetes  Tebu  (Molases) dan  Urea  sebagai  Sumber  Karbon  dan  Nitrogen Dalam  Produksi  Algina  Oleh  Bakteri. Tesis . Progam  Pasca  Sarjana.  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Esivan S. M. M, Roslina R, N. Azrini N. A, N. Athirah Z,  Norasikin  O.  2015.    Effects  of  the  Initial  Rice Bran  Concentration  on  the  Production  of Lactobacillus  casei  as  Digestive  Bio-regulator. Jurnal Teknologi (Sciences & Engineering). 74(7): 25-28. Johor. Malaysia.
Elok  Z,  Nurcholis  M,  Wulan  S.  N,  Kusuma  A.  2012. Comparative  Study  on  Synbiotic  Effect  of Fermented  Rice  Bran  by  Probiotic  Lactic  Acid Bacteria Lactobacillus  casei and  Newly  Isolated Lactobacillus  plantarum B2  in  Winstar  rats. APCBEE  Procedia . 2:  170-177. Bangkok. Thailand.
Fauziah  N.  Prima.,  dan  R.  Safitri.  2011.  Pembuatan Starter  Inokulum  Jamur Aspergillus  oryzae , Rhizopus  oligosporus dan Trichoderma  viride untuk Bibit Fermentasi Kulit Pisang Kepok ( Musa balbisiana  Colla ).  (Dokumentasi  Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi FMIPA Unpad).
Hadipernata M, W. Supartono, M. A. F. Falah. 2012. Proses  Stabilisasi  Dedak  Padi  ( Oryza  sativa ) Menggunakan Radiasi Far Infra Red (fir) Sebagai Bahan  Baku  Minyak  Pangan. Journal  Aplikasi Teknlogi Pangan . 1(4).
irlbeckHidayat  N.  H,  Hifizah  A,  Kiramang  K,  Astati.
2014.  Rekayasa  Komposisi  Kimia  Dedak  Padi Dan  Aplikasinya  Sebagai  Ransum  Ayam  Buras. Prosiding Seminar Nasional & Workshop Optimallisasi Sumberdaya Lokal pada
Peternakan  Rakyat  Berbasis  Teknologi .  Fakultas Peternakan. Universitas Hasanudin.
Irianingrum  R.  2009.  Kandungan  Asam  Fitat  Dan Kualitas  Dedak  PadiYang  Disimpan  Dalam Keadaan  Anaerob. Skripsi .  Fakultas  Peternakan.
Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Irlbeck N. A. 2000. Basics of Alpaca Nutrition. Alpaca Owners and Breeder Association Annual.
Conference Proceedings . June 4. Louisville.
Jawetz,  Melnick,  dan  Adelberg’s.  2005. Mikrobiologi Kedokteran . Salemba
Medika. Jakarta.
Kristiyanti  M.  P.  2015.Viabilitas  Bakteri  Asam  Laktat (BAL)  Pada  Media  Tumbuh  yang  Dimodifikasi dengan Tepung Ikan . Skripsi. Universitas Lampung. Lampung.
Mardiani  A,  Juni  S,  Triana  S.  2013.  Total  Bakteri Asam  Laktat,  Kadar  Air  dan  Protein  Keju  Peram Susu  Kambing  Yang  Mengandung  Probiotik Lactobacillus  casei Dan Bifidobacterium  longum . Jurnal Ilmiah Peternakan 1 (1) : 244-245. Fakultas Peternakan.  Universitas  Jendral  Soedirman. Purwokerto.
Moat  G.  A,  W.  J.  Foster,  P.  M.  Spector.  2002 .
Microbial  Physiology.  fourth    edition .  Wiley-Liss. United States of Amerika.
Pelczar  M.  J.  dan  E.  C.  S.  Chan.  2005. diterjemahkan  oleh  Ratna  H.,S. Dasar-Dasar Mikrobiologi .  Cetakan  1  Jilid  2.  Penerbit Universitas Indonesia (UI- Press). Jakarta.
Prangdimurti    E.  2001.  Probiotik  dan  Efek Perlindungannya Terhadap Kanker Kolon. Makalah  Filsafah  Sains .  Progam  Pasca  Sarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Rajagukguk  N.  2015.  Penggunaan  Bakteri  Asam Laktat (BAL) Terhadap Karkas Dari Ayam Broiler Yang  Diinfeksi  Bakteri E.coli. Skripsi .  Fakulas Pertanian. Universitas Sumatra Utara. Medan.
Rasyaf, M. 2004. Seputar makanan Ayam Kampung , Cetakan ke-8. Yogyakarta. Penerbit Kanisius.
Saputra    W.  H.  2008.  Pengaruh  Penambahan Molase  Terhadap  Kelangsungan  Hidup  Dan Pertumbuhan  Larva  Udang  Windu Penaeus monodon Fab Yang Diberi Bakteri Probiotik Vibrio SKT-B. Skripsi .  Departemen  Budidaya  Perairan,
Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Sumarsih, S. 2003. Diktat kuliah Mikrobiologi Dasar. Fakultas Pertanian. UPN Veteran. Jakarta.
Sumarsih  S,  Sulistiyanto  B,  Sutrisno  C.I.,  Rahayu E.S.  2012.  Peran  Probiotik  Bakteri  Asam  Laktat Terhadap  Produktivitas  Unggas. Jurnal  Litbang Provinsi Jawa Tengah , Vol. 10 (1).
Sutrisna  R.  2013.  Karakterisasi  Isolat  Bakteri  Asam Laktat Dari Usus Itik ( Anas domestica ) Terhadap Escherichia  coli Dan Salmonella  pullorum . Seminar Nasional Sains & Teknologi V . Lembaga Penelitian Universitas Lampung. Bandar Lampung
Sutrisna  R,  Ekowati  C.  N,  Damayanti  R.  2015.  Uji Daya  Hidup  Bakteri  Asam  Laktat  dari  Usus  Itik Pada  Media  Tumbuh  dengan  Penambahan Variasi  Konsentrasi  Molases. Jurnal  Penelitian Pertanian  Terapan .  16  (1):  40-44.  Universitas Lampung. Lampung.
Soewarno A. R. 2007. Subtitusi Dedak Padi Dengan Limbah Restoran Terhadap Sifat Fisik Dan Kimia Ransum Ayam Broiler. Skripsi . Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Tangendjaja  B.,  R.  Matondang,  J.  Diment.  1986.
Perbandingan  Itik  Dan  Ayam  Petelur  Pada Penggunaan  Dedak  Dalam  Ransum  Selama Phase Pertumbuhan. Jurnal Ilmu dan Peternakan 2: 137-139.
Volk  A.  Wesley  dan  Wheeler  F.  Margaret.  1993. Mikrobiologi Dasar Ed Kelima . Erlangga. Jakarta.
Wibawa  A.  A.  P,  Wirawan  I.  W,  Partama  I.  B.  G. 2015.  Peningkatan  Nilai  Nutrisi  Dedak  Padi Sebagai Pakan Itik Melalui Biofermentasi Dengan Khamir. Majalah  Ilmiah  Peternakan .  18  (1). Universitas Udayana. Denpasar.
Yuniasari  D.  2009.  Denitrifikasi  Serta  Molase Dengan  C/N  Rasio  Berbeda  Terhadap  Profil Kualitas Air, Kelangsungan Hidup, Dan Pertumbuhan Udang Vaname Litopenaeus vannamei.  Skripsi. Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Zuprizal.  2000. Komposisi  Kimia  Dedak  Padi Sebagai  Bahan  Pakan  Lokal  Dalam  Ransum Ternak . Buletin Peternakan Edisi Tambahan. 282 – 286.