## Jurnal Agrotek Tropika
Journal homepage: https://jurnal.fp.unila.ac.id/index.php/JA
P-ISSN: 2337-4993 E-ISSN: 2620-3138
ANALISIS FITOKIMIA EKSTRAK BUAH PURNAJIWA (Kopsia sp.) DAN UJI DAYA HAMBATNYA TERHADAP JAMUR Fusarium oxysporum f.sp. cubense (E.F. Smith) PENYEBAB LAYU FUSARIUM PISANG
PHYTOCHEMICAL ANALYSIS OF PURNAJIWA (Kopsia sp.) FRUIT EXTRACT AND ITS INHIBITORY POWER TEST AGAINST Fusarium oxysporum f.sp. cubense (E. F. Smith) FUNGI AS THE CAUSES OF BANANA FUSARIUM WILT
Putu Eka Pasmidi Ariati 1* , I Ketut Widnyana 1 , I Made Sukerta 1 , Made Budiasa 2 , I Ketut Suada 3 , dan Pande Komang Suparyana 4 1 Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian dan Bisnis, Universitas Mahasaraswati Denpasar, Denpasar, Indonessia 2 Program Studi Agribisnis Fakultas Pertanian dan Bisnis, Universitas Mahasaraswati Denpasar, Indonesua 3 Prodi Magister Agroekoteknologi Fakultas Pertanian Universitas Udayana Denpasar, Bali, Indonessia 4 Program Studi Agribisnis, Fakultas Pertanian, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia * Corresponding Author. E-mail address: ekapasmidi@unmas.ac.id

## PERKEMBANGAN ARTIKEL:
Diterima: 21 Desember 2023 Direvisi: 16 Januari 2024 Disetujui: 4 Maret 2024

## KEYWORDS:
Alkaloids, extract, Fusarium, inhibition zone, phytochemicals, purnajiwa
KATA KUNCI: Alkaloid, ekstraksi, fitokimia, Fusarium, purnajiwa, zone hambat
© 2024 The Author(s). Published by Department of Agrotechnology, Faculty of Agriculture, University of Lampung.

## ABSTRACT
The purnajiwa plant (Kopsia sp.) is a plant species from the Apocynaceae family which has the potential as a natural antifungal. This study was aimed to determine the phytochemical content of the purnajiwa fruit extract and the antifungal activity of the ethanol extract of the purnajiwa fruit  against F.  oxysporum f.sp. cubense.  The  study  was  conducted  from  April  to  September. Phytochemical analysis was carried out by gas chromatography-mass spectrophotometry (GC-
MS).  This  study  was  a  single  factorial  experiment,  arranged  according  to  a  Completely Randomized Design (CRD) consisting of 17 treatments, and each repeated three times. The in vitro  treatments were purnajiwa fruit extract with concentrations of 0.1; 0.2; 0.3; 0.4; 0.5; 0.6;
0.7;  0.8;  0.9;  1;  2.5;  5;  10;  and  15;  and  20%;  positive  control  (0,5%  mancozeb),  and  negative control, namely 96% ethanol solution. The parameter observed was clear zone around the extract well.  The  results  showed  that  the  purnajiwa  fruit  extract  contained  various  fatty  acids  and alkaloids  and  had  antifungal  properties.  The  Miinimum  Inhibitory  Concentration  (MIC)  test results  showed  that  at  a  concentration  of  0.8%,  it  had  an  inhibitory  effect  on  the  F. oxysporum f.sp. cubense. At a concentration of 20%, gave inhibitory activity with a diameter of 14.53 mm. On the other hand, purnajiwa fruit extract at a concentration of 10% showed strong inhibitory  activity  and  was  not  significantly  different  from  concentrations  of  15%  and  20%. Therefore, there was a tendency to increase the concentration of purnajiwa fruit extract  causing an increased inhibitory ability against the fungus F. oxysporum f.sp. cubense.

## ABSTRAK
Tumbuhan purnajiwa ( Kopsia sp.) yakni spesies tumbuh-tumbuhan dari famili Apocinaceae yang  memiliki  potensi  sebagai  antijamur  alami.  Tujuan  penelitian  ini  yakni  menelaah kandungan fitokimia ekstrak buah purnajiwa serta menguji aktivitas antijamur ekstrak etanol buah purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense . Penelitian dilaksanakan pada bulan April hingga September. Analisis fitokimia dilaksanakan dengan kromatografi gas-spektrofotometri massa (GC-MS) Studi ini yakni percobaan faktorial tunggal, disusun menurut Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang mana terdapat 17 perlakuan yang diulang tiga kali. Perlakuan tersebut adalah ekstrak buah purnajiwa dengan konsentrasi   0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1; 2,5;  5;  10;  15;  dan  20%;  kontrol  positif  mankozeb  0,5%,  dan  kontrol  negatif  yaitu  larutan etanol  96%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  buah  purnajiwa  memiliki  kandungan berbagai asam lemak, alkaloid, dan bersifat antijamur. Pengujian daya hambat minimum (MIC) diperoleh pada konsentrasi 0,8%  yaitu telah mampu menghambat. jamur F. oxysporum f.sp. cubense. Pada konsentrasi 20% memberikan aktivitas penghambatan dengan diameter 14,53 mm dengan kategori sangat kuat . Ekstrak buah purnajiwa pada konsentrasi 10% memberikan aktivitas penghambatan yang tergolong kuat namun  tidak berbeda nyata dengan konsentrasi 15%  dan  20%.  Terdapat  kecendrungan  peningkatan  konsentrasi  ekstrak  buah  Purnajiwa menyebabkan meningkatnya penghambatan pada jamur “ F. oxysporum f.sp. cubense”.

## 1. PENDAHULUAN
Kopsia sp . Blume di Bali disebut “Purnajiwa”, di Jawa disebut “Pronojiwo”, dan di Indonesia lazim  disebut  “Pranajiwa”.  Purnajiwa  yakni  tumbuhan  yang  sangat  dikenal  di  Bali.  Balian  Usada (penyembuh  tradisional  Bali)  mempercayai  bahwa  buah  Purnajiwa  bisa  dipergunakan  sebagai afrodisiak, sehingga banyak orang di sekitar hutan menjadikan tumbuhan purnajiwa sebagai sasaran eksplorasi sporadis. Purnajiwa juga berperan sebagai penangkal racun, ekspektoran, dan tonikum yang dipercaya menetralkan bisa ular serta TBC. Akar dan batang Purnajiwa terkandung “flavonoid, isoflavon, pterocarps, caumaronochromones dan flavonone”, serta pada biji dan daunnya terkandung “alkaloid  berupa  sitosin  (1,5%),  matrine  dan  matrine-n-oxide”  (Lemmens  dan  Bunyapraphatsara, 2003).  Berdasarkan  komponen  tersebut,  tumbuhan  purnajiwa  berpotensi  menjadi  sumber  agen antijamur dalam pengendalian penyakit di bidang pertanian.
Alkaloid  adalah  senyawa  organik  bernitrogen  yang  melimpah  pada  tumbuhan.  Alkaloid termasuk “metabolit sekunder” yang banyak ada pada tumbuh-tumbuhan purnajiwa. Senyawa ini bertindak sebagai agen antijamur. Mekanisme kerja agen antijamur alkaloid adalah menyisipkan diri pada dinding sel dan DNA, mencegah replikasi DNA jamur dan dengan demikian pertumbuhan jamur terganggu. Wulandari (2012) menjabarkan bahwasnya “senyawa alkaloid menghambat biosintesis asam nukleat jamur sehingga mencegah pertumbuhan jamur dan akhirnya mati sehingga potensial  dapat digunakan dalam pengendalian penyakit yang di sebabkan oleh jamur pada tanaman budidaya”.
Salah  satu  masalah  pertanian  di  Indonesia  adalah  infeksi  penyakit  “layu  Fusarium”  yang diakibatkan oleh “ Fusarium oxysporum” . Jamur F. oxysporum f.sp. cubense adalah jamur yang secara spesifik menyerang  tanaman pisang , secara kuantitatif mempengaruhi produktivitas. Sudah banyak usaha  dilakukan  guna  mengatasi  penyakit  layu  Fusarium,  diantaranya  dengan  fungisida  kimia sintetik  (mancozeb).  Penggunaan  fungisida  kimia  sintetik  dapat  menyebabkan  resistensi  terhadap jamur patogen, membuat tanaman lebih rentan terhadap penyakit, dan residu fungisida juga dapat mencemari lingkungan jika penggunaan fungisida tidak tepat. Selain itu, tindakan pengendalian secara kimia sering tertunda karena biasanya mengandalkan gejala layu, meskipun infeksi jamur tular tanah seringkali sulit dideteksi karena infeksi awal terjadi   di bawah permukaan tanah (Semangun, 2007).
Hasil  penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa  hasil  uji  GC-MS  ekstrak  etanol  buah purnajiwa  memiliki  senyawa  golongan  alkaloid  dan  senyawa  heteroaromatik  yang  mempunyai beberapa reaksi biologi seperti antimikroba (anti bakteri dan antijamur), antikanker, antioksidan, anti-inflamasi, antitrombotik, antiurease, dan antikonvulsan (Ariati, 2021).
Penggunaan  senyawa  bioaktif  dari  tanaman  purnajiwa  memiliki  keunggulan  dibandingkan pestisida  sintetis  yaitu  pada  bersifat biodegradable ,  residunya  tidak  sulit  hilang  maka  tak mengakibatkan  pencemaran  lingkungan,  aman  untuk  manusia  dan  ternak.  Selain  itu  bahan  yang dibutuhkan yaitu buah Purnajiwa mudah didapat di daerah Bali, dan pembuatannya mudah sehingga tidak  menyulitkan  petani.    Maka,  penggunaan  ekstrak  tumbuhan  yang  berasal  dari  bahan-bahan alam/tradiosional  diharapkan  dapat  memberikan  solusi  terhadap  permasalahan  pertanian  di Indonesia. Tujuan penelitian ini yakni menelaah kandungan fitokimia ekstrak buah purnajiwa serta menguji aktivitas antijamur ekstrak etanol buah purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense .

## 2. METODE PENELITIAN

## 2.1 Waktu, Alat, dan Bahan Penelitian
Studi  dilaksanakan  sejak  bulan  April  -  September  2022  yaitu  mulai  dari  persiapan  hingga  akhir penelitian. Analisis fitokimia mempergunakan “Gas Chromatography-Mass Spectrophotometry (GC- MS)”  dilaksanakn  di  Laboratorium  Forensik  Poltabes  Denpasar.  Uji  daya  hambat  ekstrak dilaksanakan di laboratorium Fakultas Pertanian Universitas Mahasaraswati Denpasar.
Bahan-bahan yang dipergunakan pada studi ini yakni buah tumbuhan purnajiwa yang berasal dari wilayah  Dauh  Puri  Kauh,  Kecamatan  Denpasar  Barat,  Kota  Denpasar.  Bahan  lain  yang  digunakan adalah jamur F. oxysporum f.sp. cubense (isolate lapangan tanaman pisang), n-heksana, etil asetat, etanol  96%,  akuades,  media  PDA,  kloramfenikol,  Tween  80  dan  mancozeb.  Alat  yang  digunakan adalah gelas beaker, mixer, pelubang gabus, erlenmeyer, gelas ukur, jarum ose, kamera, kertas label, autoklaf, kertas saring, laminar air flow cabinet, oven, cawan petri, penggaris, pinset, mikropipet, evaporator vakum, dan perangkat lain yang umum digunakan di laboratorium.

## 2.2 Rancangan Penelitian dan Analisis Data
Studi ini yakni studi eksperimental dan  disusun menurut RAL dan terdapat 17 perlakuan, dan tiap perlakuan dilakukan pengulangan tiga kali. Perlakuan dengan ekstrak buah purnajiwa terdiri dari konsentrasi : 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1; 2,5; 5; 10; 15; dan 20%; kontrol positif menggunakan    mancozeb  0,5%  dan  kontrol  negatif  yaitu  larutan  etanol  96%.    Data-data  yang didapatkan  dilakukan  analisis  secara  kuantitatif  dengan  mempergunakan  “ analysis  of  variance (ANOVA)”  pada  tingkat  kepercayaan  5%  sampai  1%  dan  selanjutnya  mempergunakan  “Duncan's Multiple Range Test (DMRT)” pada tingkat 5%.

## 2.3 Ekstraksi Buah Purnajiwa
Buah  purnajiwa  dikeringkan  sampai  beratnya  konstan  pada  suhu  40 o C  untuk  menghindari kerusakan  senyawa  bioaktifnya,  kemudian  diblender  untuk  mendapatkan  konsistensi  yang  halus (Putranti, 2013). Ekstraksi dilakukan mengacu pada metode El-Din dan El-Ahwany (2015) dengan modifikasi  yaitu  menggunakan  metode  maserasi.  Maserasi  dilakukan  3  x  24  jam  sampai  filtrat terlihat  jernih.  Maserasi  dilakukan  dengan  agitasi  sedang  (Senja et  al .,  2014.  Hasil  maserasi  yang diperoleh  selanjutnya  disaring  dengan  kertas  saring  untuk  mendapatkan  filtrat.  Filtrat  yang didapatkan kemudian dipekatkan mempergunakan rotary vacuum evaporator pada temperatur 35 o C sampai dengan didapatkannya ekstrak kasar yakni pasta (Putranti, 2013).

## 2.4 Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  dengan  GC-MS  menggunakan  mesin  Agilent  7890B  MSD  5977B pada  kolom  silika  wakosil  ODS/5C18-200  4,6  x  200  mm  dengan  gas  N 2 sebagai  pembawa.  Suhu injeksi  yang  dipergunakan  adalah  290°C  dalam  waktu  27  menit  dengan  laju  injeksi  1  ml/menit. Identifikasi senyawa dilakukan dengan membandingkan waktu retensi setiap puncak kromatogram dengan database.

## 2.5 Persiapan Larutan Uji
Larutan  yang  diuji  dalam  penelitian  ini  terdiri  dari  ekstrak  buah  purnajiwa,  larutan  kontrol positif  (mankozeb  0,5%),  dan  larutan  kontrol  negatif  (etanol  96%).  Konsentrasi    larutan  ekstrak dibuat  dengan  cara  mencampurkan  10  ml  etanol  96%  dengan  2  g  ekstrak  untuk  mendapatkan konsentrasi  ekstrak  20%  yang  kemudian  diencerkan  untuk  mendapatkan  konsentrasi  uji selanjutnya.  Pegenceran dilakukan sesuai rumus yang digunakan Afrilla (2011) :
V1 x C1 = V2 x C2
(1)
Keterangan:  V1  =  volume  awal  ekstrak  (ml),  C1  =  Konsentrasi  awal  ekstrak  (%),  V2  =  Volume ekstraks yang dibuat (ml), C2 = Konsentrasi ekstrak dibuat (%), larutan kontrol positif mancozeb dibuat dengan melarutkan 0,05 g serbuk mancozeb dalam  10 ml air suling sehingga didapat konsentrasi 0,5%.
Tabel 1. Penentuan daya hambat ekstrak menurut klasifikasi Davis Stout (Ardiansyah, 2005) Zona hambat Daya hambat ≤ 5 mm Lemah 6-10 mm Sedang 11-20 mm Kuat >20 mm Sangat kuat 2.6 Persiapan  Jamur F. oxysporum f.sp. cubense
Jamur F. oxysporum f.sp. cubense dilakukan isolasi dari pohon pisang terserang penyakit layu di kawasan Desa Pedungan, Kecamatan Denpasar Selatan, Kota Denpasar, Bali. Pangkal batang pisang yang bergejala penyakit dibersihkan dengan air mengalir lalu diambil potongan  kecil (0,5 x 0,5 cm 2 ) yang mengandung bagian bergejala dan terlihat tanpa gejala. Bagian tersebut didesinfeksi dengan kloroks  1%  selama  sekitar  3  menit  dan  dibilas  3  kali  dengan  air  bersih/steril.  Kemudian, diinokulasikan pada media PDA dan dilakukan inkubasi di temperatur kamar dalam waktu 1 minggu. Selanjutnya,  miselium F.  oxysporum f.sp. cubense bertumbuh  dan  dilakukan  isolasi  ulang  guna didapatkan kultur murni dan siap uji.

## 2.7 Penentuan Minimum Inhibitory Concentration (MIC) ekstrak Buah Purnajiwa
Nilai  MIC  ditentukan  dengan  mempergunakan  metode  sumur  difusi  (Berghe  dan  Vlientinck, 1991; Rios et al ., 1988). Sebanyak 2 g ekstrak dicampur dengan 10 ml akuades untuk mendapatkan ekstrak konsentrasi 20%, setelah itu ekstrak dicampur kembali dengan air steril hingga konsentrasi yang diinginkan. Sebanyak 1 ml suspensi spora jamur yang mengandung 10 6 spora dicampur didalam cawan petri dengan 20 ml PDA hangat dalam keadaan cair, digoyangkan secara horizontal hingga tercampur rata. Setelah PDA memadat, dibuat lubang sumur difusi menggunakan pelubang gabus, yang  kemudian  diisi  dengan  20  μl  masing-masing  konsentrasi  ekstrak.  Pengamatan  dilaksanakan saat jamur kontrol tumbuh rata dicawan Petri dan terbentuk zona bening selama perlakuan ekstrak (Wibawa et al ., 2018).
Uji  ini  dilaksanakan  dengan  ditentukannya  daya  hambat  ekstrak  dengan  melakukan pengamatan daerah transparan di sekitar sumur ekstraksi. Kultur dilakukan inkubasi dalam waktu 3 x 24 jam dan diukur diameter daerah transparan yang dibentuk. Kategori daya hambat dilakukan dengan mengacu kepada klasifikasi dari Davis Stout (Ardiansyah, 2005), seperti disajikan pada Tabel 1.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Uji Fitokimia Buah Purnajiwa
Analisis senyawa pada ekstrak buah pohon purnajiwa di wilayah Denpasar dilakukan dengan metode GC. Hasil GC analitik menghasilkan 14 puncak kromatografi yang terjabarkan pada Gambar 1. Dari perbandingan antara data hasil studi dengan database dan literature review, dapat diketahui bahwa  kandungan  senyawa  dari  masing-masing  komponen  dalam  ekstrak  buah  tumbuhan purnajiwa ditunjukkan pada Tabel 2.
Sampel ekstrak etanol buah pohon purnajiwa menunjukkan beberapa hasil yaitu mengandung asam  lemak  berupa  asam  palmitat,  asam  etiloleat,  asam  pentadekanoat,  asam  miristat  dan  asam dlinoleat. Ada juga senyawa asam lemak yang mengandung asam cis-9-hexadecanoic, asam oleat dan asam eicosanoic. Komponen utama (senyawa utama) ekstrak etanol buah purnajiwa adalah asam oleat. Asam oleat merupakan senyawa dengan aktivitas antiinflamasi, yang dapat mengurangi risiko penyakit kardiovaskular dan mencegah pertumbuhan sel kanker (Pravst, 2014). Ekstrak etanol hasil
GC-MS  buah  purnajiwa  juga  mengandung  senyawa  alkaloid  aspidospermidine  dan  cossinine. Aspidospermidine merupakan alkaloid yang dapat digunakan untuk mengatasi inflamasi, dermatitis, dan  penyakit  Parkinson  (Ceravolo et  al .,  2018).  Ekstrak  etanol  buah  pohon  purnajiwa  juga mengandung alkaloid matrine dan caryophyllene. Selain itu, ada senyawa tiopen. Senyawa tiopen merupakan  salah  satu  senyawa  utama  dalam  ekstrak  etanol  buah  beri  purnajiwa.  Senyawa heterosiklik  tersebut  diyakini  memiliki  beberapa  aktivitas  biologis,  seperti  antibiotik  (antibakteri dan antijamur), antikanker, antioksidan, antiinflamasi, antitrombotik, antiurologis, dan antikejang (Shah  dan  Verma,  2018).  Adanya  kandungan  antibiotik  yang  ditemukan  pada  penelitian  ini memungkinkan  ekstrak  buah  purnajiwa  dapat  digunakan  sebagai  inhibitor  untuk  menghambat serangan jamur Fusarium yang menyerang tanaman pisang F. oxysporum f.sp. cubense .
Gambar 1. Grafik kromatogram ektrak buah tumbuhan purnajiwa
Tabel 2. Hasil analisis fitokimia buah tumbuhan purnajiwa
PK Nama Senyawa RT AUC Qual Rumus molekul Deskripsi Senyawa 1 Heptadecane 6.8.178 0.90 95 C 17 H 36
Heptadecane adalah alkana rantai lurus yang  merupakan  komponen  minyak esensial  pada  tanaman  seperti Opuntia littoralis dan Annona squamosa (PubChem, 2022). 2 Asam tetradekanoat 7.8.493 0.92 95 C 14 H 28 O 2 Asam tetradekanoat atau asam miristat merupakan  asam  lemak  jenuh  rantai panjang  yang  ditemukan  pada  minyak sawit,  minyak  kelapa,  dan  mentega (PubChem, 2022). 3 Octadecane 9.8.723 1.64 95 C 18 H 38 Octadecane  merupakan  alkana  rantai lurus  yang  berperan  sebagai  metabolit bakteri dan tanaman (PubChem, 2022) 4 Asam pentadekanoat 9.029 0.37 96 C
15 H 30 O 2 Asam pentadekanoat adalah asam lemak jenuh  rantai  lurus  yang  mengandung lima  belas  atom  karbon.  Senyawa  ini
memiliki  peran  sebagai  metabolit tanaman, komponen makanan,
metabolit  Daphnia  magna,  metabolit serum  darah  manusia  dan  metabolit alga.    Senyawa  ini  adalah  asam  lemak rantai  panjang  dan  asam  lemak  jenuh rantai lurus (PubChem, 2022).
5 Asam cis-9- heksadekanoat 9.459 0.50 99 C 16 H 30 O 2 Asam  cis-9-heksadekanoat  atau  asam palmitelaidik  merupakan  asam  lemak yang  ditemukan  pada Tripneustes ventricosus dan Myrmekioderma  rea (PubChem, 2022). 6 Asam palmitat 9.559 5.19 99 C 16 H 32 O 2 Asam palmitat adalah asam lemak rantai panjang jenuh dengan tulang punggung 16-karbon.  Asam  palmitat  ditemukan secara  alami  dalam  minyak  sawit  dan minyak inti sawit, serta dalam mentega, keju, susu dan daging (PubChem, 2022). 7 Asam heptadekanoat 10.076 0.43 99 C 17 H 34 O 2 Merupakan  asam  lemak  rantai  panjang dan  asam  lemak  jenuh  rantai  lurus (PubChem, 2022). 8 Asam 11- oktadekanoat, metil ester 10.342 0.46 99 C 19 H 38 O 2 Asam 11- oktadekanoat , metil ester atau metil  stearat  merupakan  asam  lemak metil  ester  yang  ditemukan  pada Cinnamomum  kotoense dan Hedysarum polybotrys (PubChem, 2022). 9 Asam oleat 10.539 9.38 99 C 18 H 34 O 2 Asam  oleat  berperan  sebagai  inhibitor carboxylesterase,  metabolit  tanaman, sebagai  pelarut,  dan  antioksidan (PubChem, 2022). 10 Etil oleat 10.775 7.59 99 C 20 H 38 O 2 Etil oleat merupakan asam lemak rantai panjang  etil  ester  yang  diturunkan  dari asam  oleat,  senyawa  ini  berperan sebagai metabolit tanaman dan akarisida (PubChem, 2022). 11 Etil stearat 10.939 1.90 96 C 20 H 40 O 2 Etil  stearat  adalah  asam  lemak  rantai panjang etil ester (PubChem, 2022) 12 Aspidospermidin 11.644 0.29 91 C 25 H 34 N 2 O 5 S Alkaloid  yang  diisolasi  dari  tanaman genus  Apidosperma  (Deutsch  et  al., 1994) 13 Asam eicosanoic 12.221 0.36 98 C 20 H 40 O 2 Asam  eicosanoic  atau  asam  arasidik adalah asam lemak jenuh rantai panjang yang  ditemukan  sebagai  komponen minor  pada  minyak  kacang  (PubChem, 2022) 14 Quebrachamin 13.339 0.75 99 C 19 H 26 N 2 Alkaloid  yang  banyak  ditemukan pada Aspidosperma quebracho- blanco , Hunteria  umbellata (PubChem, 2022) 15 Tabersonin 13. 835 2.67 93 C 21 H 24 N 2 O
2
Merupakan  alkaloid  indol-monoterpen yang banyak ditemukan pada Voacanga schweinfurthii , Tabernaemontana citrifolia (PubChem, 2022) 16 Kopsinin 13.920 2.87 90 C 21 H 26 N 2 O 2 Kopsinine  adalah  alkaloid  indol  yang ditemukan di Kopsia pauciflora, Hunteria zeylanica ,  dan  organisme  lain  dengan data yang tersedia (PubChem, 2022)
3.2 Uji MIC Ekstrak Buah Purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense
Hasil uji MIC ekstrak purnajiwa pada F. oxysporum f.sp. cubense menjabarkannya bahwasanya ekstrak dengan konsentrasi 0,7% belum dapat menggangu tumbuhnya F. oxysporum f.sp. cubense ditandai dengan tak adanya zona yang jelas di sekitar sumur difusi (Gambar 2i). Hal ini berarti pada konsentrasi  tersebut  tidak  cukup  tinggi  untuk  dapat  menghambat  tumbuhnya F.  oxysporum f.sp. cubense .  Ekstrak purnajiwa di konsentrasi 0,8% atau 8 mg/ml sudah dapat menghambat tumbuhnya F. oxysporum f.sp. cubense terbukti dengan adanya daerah bening yang terbentuk di sekitar sumur difusi pada hari ke-3 setelah inokulasi (Gambar 2k).
Hasil  uji  MIC  juga  menunjukkan  bahwa  diameter  kontrol  positif  (+)  mempunyai  area transparan  yang  terbesar  dibanding  perlakuan  lainnya  (Gambar  2a).  Hal  ini  disebabkan  karena mancozeb (sebagai kontrol positif) adalah fungisida yang berperan dalam menekan penyakit yang diakibatkan  oleh  cendawan F.  oxysporum f.sp. cubense .      Mancozeb  bekerja  dengan  menghambat aktivitas enzim jamur yang mengandung unsur logam yang bertanggung jawab untuk pembentukan ATP (Frac, 2011). Perlakuan etanol 96% sebagai kontrol negatif tidak menunjukkan penghambatan terhadap Fusarium (Gambar 2b). Etanol 96% yakni zat larut yang bisa melarutkan senyawa dalam ekstrak namun tidak aktif secara biologis. Hal ini memastikan bahwa etanol 96% tidak menghambat pertumbuhan jamur.
Gambar 2.  Hasil uji MIC ekstrak purnajiwa terhadap jamur F. oxysporum f.sp. cubense . a) kontrol positif (Mankozeb 0,5%); b) kontrol negatif (Etanol 96%); c) konsentrasi ekstrak 0,1%; d) ekstrak 0,2%; e) ekstrak 0,3%; f) ekstrak 0,4%; g) ekstrak 0,5%; h) ekstrak 0,6%; i) ekstrak 0,7%; j) ekstrak 0,8%; k) ekstrak 0,9%; dan l) ekstrak 1%
Menurut  Sen et  al .,  (2012),  penentuan  nilai  MIC  penting  untuk  uji  ekstrak  dikarenakan  memberi informasi potensi aktivitas antibakteri ekstrak. Konsentrasi ekstrak buah purnajiwa terkecil yang menunjukkan daya hambat adalah konsentrasi 0,8%, sehingga pengujian selanjutnya menggunakan konsentrasi ekstrak 0,8%.
3.3 Zona Hambat Ekstrak Purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense .
Dihasilkan uji zona hambat ekstrak purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense . Terlihat pada Gambar 3c. Hasil pengujian zona hambat ekstrak purnajiwa terhadap F. oxysporum f.sp. cubense . Menjabarkan bahwasanya konsentrasi ekstrak 0,8% dapat menggangu tumbuhnya F. oxysporum f.sp. cubense .,  senyawa  aktif  yang  ada  pada  ekstrak  purnajiwa  dapat  menghambat  pertumbuhan  dan perkembangan F. oxysporum f.sp. cubense . Ekstrak Purnajiwa mengandung alkaloid tingkat tinggi. Alkaloid mengandung senyawa penolak serangga dan antijamur (Ariati, 2021). Wulandari (2012) menjabarkan  bahwasanya  “alkaloid  bekerja  dengan  cara  menghambat  biosintesis  asam  nukleat jamur, sehingga jamur tidak dapat tumbuh dan akhirnya mati”.
Pengamatan  selanjutnya  menunjukkan  bahwa F.  oxysporum f.sp. cubense 3  hari  kemudian dapat tumbuh kembali setelah terhambat pada konsentrasi ekstrak 0,8%. Dari hasil tersebut, dapat disarankan  bahwa  penggunaan  ekstrak  buah  purnajiwa  pada  di  lapangan  dimanfaatkan  sebagai upaya  pencegahan  terhadap  infeksi F.  oxysporum f.sp. cubense .  Apabila  dimanfaatkan  untuk pengendalian  setelah  tanaman  terserang  maka  konsentrasinya  perlu  ditingkatkan,  dan  hal  ini membutuhkan  penelitian  lebih  lanjut.    Menurut  Marsh  (1977),  mekanisme  antijamur  (fungisida) memiliki  dua  bentuk  yaitu  a)  fungisidal,  yaitu  senyawa  yang  mampu  membunuh  jamur,  dan  b) fungisstatik,  hanya  menghambat  sementara  pertumbuhan  jamur,  bukan  membunuhnya  sehingga jamur  dapat  tumbuh  kembali.  Hasil  perhitungan  zona  hambat  ekstrak  purnajiwa  terhadap F. oxysporum f.sp. cubense dapat dilihat pada Tabel 3.
Berdasarkan  diameter  zona  hambatnya,  potensi  antijamur  dapat  diklasifikasikan  menjadi empat kelompok yaitu lemah (zona hambat 5 mm atau kurang), sedang (zona hambat   5-10 mm), kuat (zone hambat 10-20 mm) dan sangat kuat (zona hambat di atas 20 mm). Terbentuknya zona hambat  di  sekitar  sumur  difusi  menunjukkan  adanya  daya  hambat  terhadap F.  oxysporum f.sp. cubense akibat senyawa bioaktif yang terkandung dalam ekstrak tumbuhan purnajiwa. Zona hambat ekstrak purnajiwa pada konsentrasi 0,8% adalah dengan rata-rata 8,85 mm. Zona hambat bertambah seiring  dengan  bertambahnya  konsentrasi  ekstrak  tumbuhan  purnajiwa.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat Sitepu et al . (2012), bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak yang diuji dalam medium, semakin  banyak  ekstrak  yang  berdifusi  ke  dalam  sel  jamur  sehingga  diameter  zona  hambat semakin besar.
Gambar  3.  Zona  hambat  ekstrak  purnajiwa  terhadap  jamur F.  oxysporum  f.sp.  cubense .  a)  kontrol positif (Mankozeb 0,2%); b) kontrol negatif (etanol 96%); c) konsentrasi ekstak 0,8%
Tabel 3. Zona hambat ekstrak purnajiwa terhadap jamur F. oxysporum f.sp. cubense (mm) Perlakuan Ulangan Rata-rata Kategori I II III Etanol 96% (Kontrol negatif) 0 0 0 0 - Ekstrak 0,7% 0 0 0 0 - Ekstrak 0,8% 9,41 8,53 8,01 8,65 a Sedang Ekstrak 0,9% 9,22 9,47 8,94 9,21 ab Sedang Ekstrak 1,0% 12,57 9,25 8,62 10,15 ac Kuat Ekstrak 2,5% 10,03 10,83 10,63 10,50 ad Kuat Ekstrak 5,0% 13,31 9,82 10,29 11,14 ae Kuat Ekstrak 10% 13,83 10,79 13,17 12,60 cf Kuat Ekstrak 15% 14,17 13,34 15,61 14,37 ef Kuat Ekstrak 20% 15,46 16,21 11,93 14,53 f Kuat Mancozeb 0,5% (Kontrol positif) 21,34 17,85 22,67 20,65 g Sangat Kuat
Keterangan:  Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata menurut Uji DMRT 5%.
Perbedaan  konsentrasi  mempengaruhi  ukuran  diameter  zona  hambat.  Semakin  tinggi  nilai konsentrasi maka semakin tinggi pula nilai zona hambatnya. Faktor lain yang mempengaruhi ukuran diameter zona hambat adalah ketebalan media agar pertumbuhan, kemurnian media kultur jamur, suhu inkubasi, dan laju penyerapan panas di setiap cawan petri tergantung pada ketebalan pelat agar. Derajat inhibisi dapat dipengaruhi oleh kepekaan organisme, media biakan, kondisi inkubasi, dan laju difusi agar (Ernawati, 2007). Beberapa faktor dapat mempengaruhi kualitas ekstrak antara lain lokasi tumbuh tanaman purnajiwa yang berbeda, bagian tanaman yang diekstrak, dan pelarut yang digunakan untuk ekstraksi.
Hasil  analisis  statistik  menunjukkan  bahwa  terdapat  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak purnajiwa dengan aktivitas penghambatan pertumbuhan F. oxysporum f.sp. cubense , dimana F hitung >  F  table,  hal  ini  menunjukkan  adanya  perbedaan  aktivitas  penghambatan  pada  masing-masing konsentrasi  ekstrak.  Pada  hasil  uji  DMRT  5%,  aktivitas  penghambatan  menunjukkan  bahwa konsentrasi  ekstrak  purnajiwa  0,8%  tidak  berbeda  nyata  dengan  ekstrak  0,9%;  1,0%;  2,5%;  dan 5,0%  tetapi  berbeda  nyata  dengan  konsentrasi  ekstrak  10%;  15%;  dan  20%.  Uji  DMRT  5%  juga menunjukkan  bahwa  kontrol  positif  larutan  fungisida  mancozeb  menunjukkan  aktivitas penghambatan  yang  berbeda  nyata  pada  semua  konsentrasi  ekstrak  tumbuhan  purnajiwa  dan kontrol negatif. Konsentrasi ekstrak yang menghasilkan zona hambat terbesar adalah konsentrasi ekstrak  20%  dengan  diameter  zona  hambat  14,53  mm.  Namun  jika  diamati  secara  statistik, konsentrasi tersebut tidak berbeda nyata dengan konsentrasi 10% maupun ekstrak 15%. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa konsentrasi ekstrak purnajiwa yang paling efektif dan efisien terhadap F.  oxysporum f.sp. cubense adalah  konsentrasi  ekstrak  10%  karena  memiliki  aktivitas penghambatan yang setara atau tidak berbeda nyata dengan ekstrak 15% dan 20%.

## 4. KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  didapatkan  dari  penelitian  ini  adalah    ekstrak  buah  tumbuhan  purnajiwa mengandung  senyawa  antijamur  seperti  aspidospermidine  dan  tiopen.  Nilai  MIC  dari  ekstrak purnajiwa  adalah  0,8%  terhadap F.  oxysporum f.sp. cubense .  Eekstrak  buah  purnajiwa  pada konsentrasi  10%  memberi  aktivitas  penghambatan  yang  tergolong  kuat  dan  setara  dengan konsentrasi  15%  dan  20%.    Untuk  pemanfaatan  ekstrak  buah  purnajiwa  dalam  pengendalian F. oxysporum f.sp. cubense di lapangan perlu pengujian lebih lanjut.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimaksih  kepada  Rektor,  Dekan  dan  Ketua  LPPM  Universitas Mahasaraswati  Denpasar  atas  semua  fasilitas  yang  di  berikan  sehingga  penelitian  ini  dapat diselesaikan.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  M.  Wahid.  2020. Pengaruh  Beberapa  Jenis  Fungisida  Kimia  dan  Pupuk  Cair  Terhadap Penyakit  (Mycosphaerella  musicola Mulder )  pada  Tanaman  Pisang  Mas  (Musa  acuminata) . Skripsi.  Malang:  Program  Studi  Agroteknologi.  Fakultas  Pertanian  Peternakan.  Universitas Muhammadiyah Malang.
Afrilla  P,  M.  Suci.  2011. Efektifitas  Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau  terhadap  Pertumbuhan  Streptococcus mutans (In Vitro) . Skripsi. Medan: Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Sumatera Utara.
Ahmad,  M.  M.  2006.  Anti  Inflammatory  Activities  of Nigella  sativa Linn (Kalongi,  black  seed) . http://lailanurhayati.multiply.com/journal (diakses tanggal 21 Agustus 2022).
Ardiansyah.  2005. Daun  Beluntas  sebagai  Antibakteri  dan  Antioksidan.  Berita  IPTEK. http://www.beritaiptek.com/cetak-berita.php?kat=berita&id=60.  (diakses  tanggal  21 Agustus 2022).
Arsana, I. N. 2019. Keragaman Tanaman Obat dalam Lontar “Taru Pramana” dan Pemanfaatannya untuk Pengobatan Tradisional Bali . Jurnal Kajian Bali 9(1):241-262. Berghe, D. A. Vanden, dan A. J. Vlientinck. 1991. Screening Methods for Antibacterial and Antiviral Agent From Higher Plant In Dey, P.M. and J.B. Harborne (Eds.): Methods in plant biochemistry Vol. 7. London: Academic Press.
Ariati, P.E..P. I.G.P. Wirawan, I.N. Wijaya, I.K. Suada, M. Sritamin. 2021. Application of  DNA Barcoding for authentication of Balinese traditionsl medicinal plant Purnajiwa ( Kopsia arborea Blume. and Euchresta horsfieldii ) (Lesch)  Benn. Bali Medical Jornal (Bali MedJ) 11(3):1681-1685. El-Din,  S.  M.  Mohy,  dan  A.  M.  D.  El-Ahwany.  2015.  Bioactivity  and  Phytochemical  Constituents  of Marine  Red  Seaweeds  (Jania  rubens,  Corallina  mediterranea  and  Pterocladia  capillacea). Journal of Taibah University of Science, 10: 471-481. Ernawati.  2007. Penapsiran  dan  Fraksinasi  Senyawa  Antibakteri  dari  Rumput  Laut  Bulu  Ayam . [Skripsi].  Institut  Pertanian  Bogor,  Bogor,  88hlm.  FRAC.  2011.  FRAC  Code  List:  Fungicides Sorted by MoA. http ://www.frac.info/frac/ index.htm (diakses tanggal 25 Agustus 2022).
Halwiyah, Nurul, R. S. Ferniah, B. Raharjo, dan S. Purwantisari. 2019. Uji Antagonisme Jamur Patogen Fusarium  solani  Penyebab  Penyakit  Layu  pada  Tanaman  Cabai  dengan  Menggunakan Beauveria bassiana Secara In Vitro. Jurnal Akademika Biologi , 8(2), 8-17
Herbert, R.B., 1996, Biosintesis Metabolit Sekunder , Alih Bahasa Bambang Srigandono, Hal. 103-123, Penerbit IKIP Semarang Press, Semarang.
Hermawan, A., Hana, W., dan Wiwiek, T. 2007. Pengaruh Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan Metode Difusi Disk . Universitas Erlangga.
Ikhtimami, Aila. 2012. Pengaruh Periode Subkultur terhadap Kadar Sponin Akar Rambut Tanaman Gingseng Jawa (Talinum paniculatum Gaertn.) . Skripsi. Surabaya: Fakultas Sains dan Teknologi. Universitas Airlangga.
Jumjumidang,  Y.  Andinata,  dan  E.  Sulyanti.  2009.  Pengaruh  Populasi  Awal  Nematoda  Radopholus similis dalam Memicu Serangan Fusarium oxysporum f. sp cubense Ras 4 pada Pisang Ambon Hijau. Agrivita . 31(1): 48-56
Lemmens,  R.H.M.J.,  N.  Bunyapraphatsara.  2003. Plant  Resourc-es  of  South-East  Asia No.  12  (3). Medicinal and Poisonous Plants 3. PROSEA Foundation, Bogor Lim K.H., T.S. Kam. 2008. Methyl chanofruticosinate alkaloids from Kopsia arborea , Phytochemistry, 69:558-561.
Kusmayati  dan  N.  W.  R.  Agustini.  2007. Uji  aktivitas  senyawa  antibakteri  dari  mikroalga (PorphyridiumCruentum) .http://biodiversitas.mipa.uns.ac.id/D/D0801/D080110.pdf. Diakses tanggal 20 Agustus 2022
Marsh, S. 1977. The Selective Capsaicin Antagonist Capsazepine abolishes The Antinociceptive Action of Eugenol dan Guaiacol. Jurnal Dental Research . (76): 848-851.
Pelczar,  Michae  J.  Jr.,  dan  E.  C.  S.  Chan.  1988. Dasar-dasar  Mikrobiologi  2 .  Penerjemah:  Ratna  Siri Hadioetomo. Jakarta: Universitas Indonesia Press. Terjemahan dari: Element of Microbiology. Ploetz, R.C. 1994. Panama Disease: Return of The First Banana Menace. Internationa Journal of Pest Manage 40: 326-336.
Pratiwi, Sylvia T. 2008. Mikrobiologi Farmasi . Jakarta: Erlangga. Putranti, R. Ika. 2013. Skrining Fitokimia dan Antivitas Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Sargassum duplicatum  dan  Turbinaria  ornate  dari  Jepara .  Magister  Thesis.  Semarang:  Universitas Diponegoro.
Rios,  Jose-Luis,  M  .C.  Recio,  dan  A.  Villar.  1988.  Screening  methods  for  natural  products  with antimicrobial activity: A review of the literature. Journal of Ethnopharmacology (23): 127-149. Robinson,  T.  1995. Kandungan  Organik  Tumbuhan  Tinggi .  Penerjemah:  Koensoemardiyah. Semarang: IKIP Semarang Press.
Semangun, Haryono. 1996. Pengantar Ilmu Penyakit Tumbuhan . Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Semangun,  Haryono.  2007. Penyakit-Penyakit  Tanaman  Hortikultura  di  Indonesia .  Edisi  Ke-2. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Sen, A. Dev and A. Batra. 2012. Evaluation of Antimicrobial Activity of Different Solvent Extracts of Medicinal Plant: Melia azedarach L. International Journal of Current Pharmaceutical Research 4(2): 67-73.
Siregar H., I.N. Peneng. 2004. Konservasi Pranajiwa Euchresta horsfieldii (Lesch.) Benn. Fabaceae dan Upaya Perban-yakannya di Kebun Raya Bali . In: Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia ke XXV. Pokjanas TOI dan Depkes RI, Solo.
Sitepu,  I.  Selvyana  Br.,  I  K.  Suada,  dan  I  G.  K.  Susrama.  2012.  Uji  Aktivitas  Antimikroba  Beberapa Ekstrak  Bumbu  Dapur  terhadap  Pertumbuhan  Jamur  Curvularia  lunata  (Wakk.)  Boed.  dan Aspergillus flavus LINK. E-Jurnal Agroekoteknologi Tropika. 1 (2): 107-114.
Suciatmih. 2015. Diversitas jamur endofit pada tumbuhan mangrove di Pantai Sampiran dan Pulau Bunaken, Sulawesi Utara. PROS SEM NAS MASY BIODIV INDON (1)2: 177-183. Syahid, Siti Fatimah, dan Laba Udarno. 2002. “Pemanfaatan Tanaman Obat Sidagori (Sida rhombifolia Linn.) Sebagai Obat Anti Nyeri”. Prosiding Simposium Nasional II Tumbuhan Obat dan Aromatik APINMAP , Bogor
Wibawa, I G. K. Satria, D. N. Suprapta, dan K. Khalimi. 2018. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Biji Keben ( Barringtonia  asiatica L.  Kurz)  terhadap Curvularia  verruculosa Penyebab  Penyakit  Bercak Culvularia pada Tanaman Padi ( Oryza sativa L.). E-Jurnal Agroekoteknologi Tropika (7)3: 414-427. Wulandari,  A.  R.  2012. Uji  Daya  Efektivitas  Antifungi  Ekstrak  Biji  Tanjung  (Mimusops  elengi  Linn.) terhadap Pertumbuhan Candida albicans secara In Vitro dengan Metode Difusi . Skripsi. Jakarta: Program studi sarjana kedokteran. Fakultas kedokteran. Universitas Pembangunan Nasional Veteran Jakarta.