Uji Aktivitas Analgetika Fraksi-Fraksi Ekstrak Etanol Daun Gandarusa ( Justicia gendarussa Burm. f) dengan Metode Tail Flick
Analgetic Activity Assay of Etanolic Extract Fractions of Gandarusa ( Justicia gendarussa Burm. f) Leaves using Tail Flick Method
Rosa Juwita Hesturini 1) , Rina Herowati 2) dan Gunawan Pamudji Widodo 2) 1) Fakultas Farmasi,Institut Ilmu Kesehatan Kediri, Jawa Timur.
2) Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Surakarta, Jawa Tengah.

## ABSTRAK
Gandarusa  ( Justicia  gendarussa Burm.  f)  adalah  tanaman  potensial  sebagai  analgetik dengan  kandungan  senyawa  steroid,  terpenoid  dan  alkaloid.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui  aktivitas  analgetik  ekstrak  etanol  dan  fraksi-fraksi  gandarusa  dengan  metode tail flick pada hewan uji tikus putih.
Ekstrak  etanol  difraksinasi  dengan  pelarut  n-heksana,  etil  asetat  dan  air.  Uji  analgetik dilakukan  dengan  metode tail  flick yaitu  dengan  pemberian  panas  terukur  pada  ekor  dan dilakukan  pengukuran  waktu  penarikan  ekor  hewan  uji.  Dosis  ekstrak  dan  fraksi  daun gandarusa berturut-turut yaitu 250 mg/kgbb, 500 mg/kgbb, fraksi n-heksana 314 mg/kgbb, fraksi 41,05 mg/kgbb dan fraksi air 144,8 mg/kgbb, kelompok kontrol negatif CMC 0.5% dan asetosal 360  mg/kgbb.  Hasil  penelitian  menunjukkan  aktivitas  analgetik  optimal  pada  fraksi n -heksana dengan  persentase  antinociceptif  sebesar  94,58%  dan  sebanding  dengan  kelompok  kontrol positif asetosal.
Kata kunci : Gandarusa, analgetik, anti-inflamasi, karagenan, tail flick

## ABSTRACT
Gandarusa  ( Justicia  gendarussa Burm.  f)  is  a  potential  plant  as  analgetic  activities. The aim of the present research was to investigate the analgetic activity with tail flick method on rat models of ethanol extract and the fractions of gandarusa leaf.
Partitioned  fractinations  isolated  from  ethanolic  extract  of  gandarusaleaves  with  n- heksana, etil asetat and water. Dosage extracts and fractions gandarusa leaf, respectively, are 250 mg/kg bw, 500 mg/kg bw, n-hexane fraction of 314 mg/kg bw, the fraction of 41,05 mg/kg bw and water fractions 144,8 mg/kg bw, the negative control group CMC and aspirin 360 mg/kg bw.  The  results  showed  the n -heksana  fraction  has  optimal  analgesic  activity  with antinociceptive percentage 94,58% comparable to aspirin.
The preliminary phytochemical analisys showed the presence of active phytochemical such  as  flavonoids,  alkaloids,  saponins,  steroids  dan  tannins  and  these  compound  might  be responsible for analgetic mechanism. The possibility analgetic mechanism of the gandarussa its stimulate  lipomodulin  protein  biosynthesis  which  inhibit  the  action  of  phospolipase  enzimatic that affecting the enzyme activity arachidonic acid but there is also has gastroprotective activity with increased mucus production and prevents the release of histamine.
Keywords : Gandarusa, analgetic, anti-inflammatory, carragenan, tail flick

## PENDAHULUAN
Nyeri  adalah  ciri  terjadinya inflamasi,  yang  merupakan  sensasi
rasa  sakit  kurang  lebih  terlokalisir akibat  rangsangan  pada  ujung  saraf khusus. Nyeri berfungsi sebagai
mekanisme pelindung karena membuat kita menarik diri atau menjauhi sumbernya  (Anonim,  1996).  Nyeri dapat  disebabkan  oleh  rangsangan atau  trauma  mekanik,  fisika,  kimia maupun trauma lain yang yang mengakibatkan rangsangan pada reseptor  nyeri.  NSAIDs  ( Non-Steroid Anti-Inflammation Drugs ) sebagai analgetik mempunyai kemampuan untuk  menghambat  siklooksigenase (COX) dan inhibisi sintesis
prostaglandin  (Neal,  2006).  Namun inhibisi sintesis prostaglandin yang juga berfungsi  sebagai  proteksi  mukosa lambung,  menstimulasi  mukus  dan sekresi  bikarbonat  dan  menyebabkan vasodilatasi  menjadi  terganggu.  Pada penggunaan  salisilat,  efek  yang  paling sering  terjadi  adalah  distres  epigastrik, disertai  mual,  muntah  dan  perdarahan (Harvey,  2014;  Tjay  &  Raharja,  2007; Neal, 2006).
Salah  satu  tanaman  Indonesia yang  secara  empiris  digunakan  untuk terapi analgetik adalah tanaman gandarusa. Batang dan daun gandarusa diketahui
mengandung fenol,  flavonoid,  tanin,  alkaloid,  steroid (Chandrashekar,  2013),  glikosida  dan saponin  (Chinna,  2010).  Tanaman  ini diketahui  mengandung  stigmasterol, lupeol dan 16-hidroksilupeol yang diisolasi  dari  fraksi  pretroleum  eter  dari keseluruhan tanaman
gandarusa
(Uddin, 2011), triterpenoid, justicin, dan gendarusin A senyawa mayor flavonoid dan  gendarusin  B  senyawa  minor flavonoid (Prajogo, 2007). Hasil penelitian  pada  ekstrak  etanol  daun gandarusa menunjukkan adanya aktivitas sebagai anti-nociceptif dengan peningkatan waktu latensi
menggunakan  metode hot  plate dan sebagai  anti-inflamasi  dengan  adanya penurunan  terhadap  volume  udema (Shikha, 2010)
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk  mengetahui  aktivitas  analgetik dengan  metode tailflick dan  dosis paling efektif pada ekstrak etanol, fraksi n- heksana,  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi air daun gandarusa.

## METODE PENELITIAN Bahan
Daun gandarusa ( Justicia gendarussa Burm. f), asetosal ( Phapros Factory ),  etanol  96%,  n - heksana,  etil asetat,  aquades,plat  silika  GF254,
anisaldehid asam sulfat, asam sitroborat, FeCl 3 , Dragendorf, Lieberman-Burchard, asam formiat. Alat Seperangkat  alat  maserasi  dan fraksinasi, evaporator , waterbath , moisture  balance ,  alat  suntik  peroral ( Becton Dickinson ), radiant heat
automatic  tail  flick  analgesiometer LE7106  versi  V29/10/2014X , camera digital (Cannon).
Hewan uji Tikus albino galur Wistar berumur 3-4 bulan, jenis kelamin jantan dengan  berat180-210  gram.  Sebelum dilakukan  percobaan,  hewan  terlebih dahulu  diadaptasikan  selama  satu minggu  dengan  pakan  pellet  dalam kandang  di  laboratorium  farmakologi dan  toksikologi  Universitas  Setia  Budi Surakarta, Jawa Tengah.

## Uji aktivitas analgetik
Tikus  dikelompokkan  menjadi  7 kelompok  :  K1  (kontrol  negatif),  K2 (kontrol  positif),  K3  (ekstrak  250
mg/kgbb),  K4  (ekstrak  500  mg/kgbb), K5 (fraksi n-heksana 314 mg/kgbb), K6 (fraksi  etil  asetat  41,05  mg/kgbb),  K7 (fraksi  air  144,85  mg/kgbb),  beri perlakuan  dosis,  kemudian  setelah  15 menit  ekor  tikus  (1-2  cm  dari  ujung) diletakkan  di  bawah phototransistor , disinari  dengan  inframerah  fokus  40. Waktu yang dicatat adalah respon tikus menarik atau mengibaskan ekor
sebagai waktu latensi. Respon nociceptif  diukur  setiap  interval  15 menit  selama  60  menit  (Kakoti,  2013)
dan dihitung dengan
rumus (Nurrochmad, 2004) : %Antinociceptif = (T latensi – T 0 latensi)/ (waktu cut off – T 0 latensi) X 100

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil uji analgetik (uji tail flick ) Hasil pengamatan rata-rata
persentase antinociceptif dilakukan
hingga menit ke-60 dan dijelaskan pada gambar  kurva  1.  Pada  kurva  dapat dilihat rata-rata % antinociceptif kelompok asetosal yaitu 93,69%, sedangkan ekstrak etanol daun gandarusa  250  mg/kg  bb  sebesar 37,36%.  Diduga  hal  ini  terjadi  karena dosis yang digunakan merupakan dosis yang rendah. Rata-rata % antinociceptif kelompok  fraksi  n-heksana  sebesar 94,58%  dan  memiliki  aktivitas  yang hampir  sama  kuat  dengan  kelompok asetosal. Hal ini dapat dipengaruhi oleh besarnya  rendemen  fraksi  n-heksana sebesar  60,71%.  Kandungan  senyawa yang  dapat  larut  dalam  pelarut  n- heksana  yaitu  terpenoid,  triterpenoid, steroid  dan  fenil  propanol  (Tiwari, 2011).
Hasil  identifikasi  pada  fraksi  n-heksana daun  gandarusa  mengandung  steroid dan  terpenoid  yang  dapat  merangsang biosintesis  protein  lipomodulin  yang dapat menghambat  kerja enzimatik fosfolipase, yaitu enzim yang bertanggung  jawab  terhadap  pelepasan asam  arakhidonat  dan  memblok  jalur siklooksigenase dan lipooksigenase sehingga metabolitnya yaitu prostaglandin, leukotrien, prostasiklin dan tromboksan juga tidak dapat terbentuk. Sama halnya dengan flavonoid yang juga mempengaruhi pengaturan  aktivitas  metabolisme  enzim asam arakhidonat (Chinna, 2010), sedangkan  adanya  kandungan  saponin yang  dapat  dikelompokkan  berdasarkan aglikonnya yaitu saponin triterpenoid dan saponin  steroid  juga  memiliki  aktivitas analgetik,  anti-inflamasi  dan  sitotoksik (Gotama, 1999). Tannin memiliki aktivitas  analgetik  dengan  menghambat cyclooksigenase-1  (Pan,  2010).  Maka banyaknya  rendemen  fraksi  n-heksana dan  berbagai  kandungan  senyawa  yang dimiliki  memungkinkan  semakin  banyak pula kandungan senyawa yang terabsorbsi sehingga penghambatan fosfolipase dalam pembentukan prostaglandin  maupun  leukotrien  juga tidak  terbentuk  dan  aktivitas  analgetik yang dihasilkan semakin besar, sedangkan pada kelompok ekstrak etanol  250  mg/kg  bb  sebesar  37,36% dan  pada  kelompok  ekstrak  500  mg/kg bb sebesar 50,75%.
Gambar 1. Kurva data rata-rata persentase antinociceptif
Pada fraksi etil asetat rata-rata % antinociceptif sebesar 82,73%.
Kandungan  senyawa  yang  dapat  larut dalam  pelarut  etil  asetat  yaitu  flavonoid aglikon  (Tiwari,  2011).  Hasil  identifikasi pada  fraksi  etil  asetat  daun  gandarusa mengandung flavonoid, alkaloid, saponin,  tanin  dan  steroid.  Adanya kandungan  senyawa  flavonoid  yang mudah  larut  pada  pelarut  etil  asetat diduga  berperan  penting  dalam  aktivitas penghambatan  nyeri  pada  fraksi  etil asetat ini dimana  flavonoid dapat menghambat  jalur  5-lipooksigenase  dan jalur COX-2 yang memproduksi mediator nyeri,  hal  ini  sesuai  dengan  penelitian Paval  (2009)  bahwa  pada  tanaman gandarusa mengandung sitosterol, alkaloid,  flavonoid  vitekin  dan  apigenin yang memiliki aktivitas sebagai analgetik dan anti-inflamasi.
Pada fraksi air dengan %
antinociceptif  sebesar  60,04%  memiliki kandungan senyawa saponin yang dapat memberikan  aktivitas  analgetik  karena saponin dikelompokkan berdasarkan aglikonnya yaitu saponin triterpenoid dan
saponin  steroid  juga  memiliki  aktivitas analgetik,  anti-inflamasi  dan  sitotoksik (Gotama, 1999).
Hasil pengamatan yang dilakukan dengan metode tail flick ini menunjukkan bahwa  adanya  perbedaan  onset  pada masing-masing kelompok perlakuan serta  tidak  semua  pemberian  perlakuan menghasilkan  rata-rata  puncak  waktu respon  yang  sama,  hal  ini  dipengaruhi faktor  metabolisme  obat  atau  ekstrak yang  diberikan  kepada  hewan  uji. Ekstrak  dan  fraksi  yang  menggunakan pelarut  non-polar  seperti  n-heksana menarik senyawa non-polar yang mudah larut  lemak  atau  lipofilik  dan  akan  lebih mudah  menembus  membran  sel  pada fase  absorbsi  dibanding  senyawa  polar sehingga senyawa non-polar akan memberikan onset yang lebih cepat.

## KESIMPULAN
Fraksi n -heksana memiliki aktivitas  analgetik  %  antinociceptif sebesar 94,58%, aktivitas ini sebanding dengan kontrol positif asetosal.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 15 menit 30 menit 45 menit 60 menit Per sen tase an tino ci ce p tif ( % ) Waktu (Menit) CMC Na. Asetosal Ekstrak etanol 250 mg/kg bb Ekstrak etanol 500 mg/kg bb
Fraksi n-heksana Fraksi etil asetat Fraksi air

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  berterima  kasih  kepada laboratorium  Farmakologi  Toksikologi Fakultas  Farmasi  Universitas  Setia Budi Surakarta.

## DAFTAR PUSTAKA
Chandrashekar K. R., Bhagya N. 2013.
In  Vitro Production  Of  Bioactive Compounds From Stem and Leaf Explants  Of Justicia  gendarussa Burm.  F. Asian  Journal  Of Pharmaceutical And Clinical Research .  Vol  6,  Issue  1.  100- 105. Chinna Manickam, Devi P. R., Fazaludeen M. F. 2010. Evaluation  of  Anti-Inflammatory Activity  of Justicia  gendarussa Burm.f.  Leaf  Extract  in  Adjuvan
Induced  Arthritis  Rats. Int  J  Med
Res . 163-169. Gusdinar  T.,  Herowati  R.,  Kartasasita R.E., Adnyana I. K. 2009. Sintesis Kuersetin Terklorinasi dan Aktivitas  Perlindungan  Terhadap Tukak Lambung. Majalah Farmasi
indonesia . 20(4). 163-169.
Junquiera  L.  C.,  Carneiro  J.  2007.
Basic  Histology  Text  and  Atlas .
Ed  ke-11.  Department  of  Celland
Developmental Biology Institute of
Biomedical Sciences University of
SÃ£o Paulo. Brazil. 1-42.
Kakoti  B.  B.,  Pradhan  P.,  Borah  S.,
Mahato  K.,  Kumar  M.  2013.
Analgesic  and  Anti-Inflammatory
Activities  of  the  Methanolic  Stem Bark Extract of Nyctanthes arbor- tristis Linn.  Hindawi  Publishing Corporation. BioMed  Research
International .  Vol  2013,  Article  ID
826295. 1-6. Kumar  J.,  Nino,  Lourthuraj  A.  2012. In vitro Regeneration and Phytochemical Analysis of Justicia gendarussa . Indian Journal  Innovation  Dev .,  Vol.  1, No. 2. 106-110. Nurrochmad  A.,  Masahiko  O.,  Narita M., Suzuki T. 2004. The Advantages  of  Fentanyl  For  The Treatment  of  Pain:  Studies  of Pharmacological Profiles and Fentanyl  Related  Side  Effects. Majalah Farmasi Indonesia . 15(4). 185-193. Paval  J., et  al .  2009.    Anti-arthritic Potential  of  the  Plant Justicia gendarussa Burm F. Clinical Science ; 64(4). 357-60.
Prajogo B. E., Guliet  D., Queiroz E. F.,
Wolfender  John-Luc.,  Cholies  N., Hostettmann K. 2009. Isolation of male anti-fertility Compound In N- Butanol Fraction Of Justicia Gendarussa Burm. f. Leave. Folia
Medica  Indonesiana .  Vol.  45.  No.
1 January- March: 28-31.
Uddin  Rakib  Md.  R.,  Sinha  S., et  al . 2011.  Chemical  and  Biological Investigations of Justicia gendarussa (Burm.  f) .    Dhaka
Univ. J. Pharm. Sci . 10(1); 53-57.