Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2015, hal 15-22
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Penetapan Kadar Omega-3 Undur-Undur Laut ( Emerita emeritus ) dalam Bentuk Granul, Bubur, dan Mentah secara Kromatografi Gas Determination of Omega-3 in Mole Crab ( Emerita emeritus ) on Granule, Puree, and Raw by Chromatography Gas

## ANGELINA DESIO LISARNI, ENDANG SRI REJEKI*, SUHARTINAH
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi: edg_srirejeki@yahoo.com
(Diterima 22 Oktober 2014, disetujui 10 Desember 2014)
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Undur-undur  laut  adalah  sumber  daya  hayati  pesisir  yang  sebarannya  cukup  luas  dan mempunyai kandungan gizi yang cukup tinggi terutama asam lemak omega-3 yang baik untuk daya ingat.  Asam  lemak  omega-3  terdiri  atas  asam  linolenat,  EPA,  dan  DHA.  Undur-undur  laut  diolah menjadi  granul  dan  bubur  instan  bayi  dengan  berbagai  proses  pemasakan  serta  pengolahan. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan kadar kandungan omega-3 granul dan bubur yang telah  dimasak  dengan tepung  undur-undur laut  mentah tanpa  pemasakan. Undur-undur  laut  yang didapat,  dibersihkan  dan  dikeringkan  kemudian  diolah menjadi  tepung  undur-undur  laut mentah, granul  yang  dikeringkan  dengan  cara  sangrai,  granul  yang  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari, bubur  instan  bayi  dengan  penambahan  undur-undur  laut,  serta  bubur  instan  bayi  tanpa penambahan undur-undur laut (plasebo). Sampel diekstraksi menggunakan soxhlet dengan pelarut kloroform:metanol  (2:1).  Analisis  dilakukan  secara  kromatografi  gas  dengan  fase  gerak  gas Nitrogen. Kadar omega-3 dihitung dengan persamaan persen relatif dan dianalisis uji Shapiro Wilk test untuk uji normalitas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar omega (asam linolenat, EPA, dan  DHA)  total  ekstrak  undur-undur  laut  mentah  sebesar  44,416  g/100  g,  ekstrak  granul-sangrai sebesar 52,280 g/100 g, ekstrak granul-sinar matahari sebesar 29,489 g/100 g, ekstrak bubur undur- undur laut dan bubur plasebo tidak terdeteksi adanya omega-3.
Kata kunci : undur-undur laut, granul, bubur, omega 3.
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Mole crab is the coastal of biological resources are spreading quite extensive and has a high nutrient content, especially omega-3 fatty acids are good for memory. Omega-3 fatty acids consist of linolenic acid, EPA, and DHA. Mole crab is processed into a granule and instant baby puree with a variety of cooking and processing. This study aims to compare the levels of omega-3 content of granule and puree that has been cooked with mole crab raw without cooking. Mole crab that was acquired, cleaned and dried and then processed into mole crab raw, the roasted dried granule, the granule  sun  dried,  instant  puree  with  the  addition  of  a  mole  crab,  and  the  instant  puree  without addition  of  mole  crab  (placebo).  Samples  are  extracted  using  soxhlet  with  solvents chloroform:methanol  (2:1).  Analysis  using  gas  chromatography  with  Nitrogen  gas  as  phases  of motion.  The  content  of  omega-3  was  calculated  based  on  the  relative  percent  and  analyzed  by Shapiro wilk test for normality test. The result of the experiment showed that total content of omega (linolenic  acid,  EPA,  and DHA)  extract  of  mole  crab  raw was  44,416  g/100  g,  extract  of  granule- roasted was 52,280 g/100 g, extract of granule-sundried was 29,489 g/100 g, extract of mole crab puree and extract of puree as a placebo was not detected of omega-3.
Keywords : mole crab, granule, puree, omega 3.
_________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Undur-undur  laut  ( Emerita  sp.) mempunyai  kandungan  gizi  yang  cukup tinggi  dimana  merupakan  biota  laut dengan  kandungan  asam  lemak  sebesar 3,57% (dalam 100 mg) dan protein kasar 32,32%  (dalam  100 mg).  Undur-undur laut  juga  mengandung  asam  lemak omega  3  sebesar  12,49%  (dalam  100 mg) (Anonim 2007).
Hasil  penelitian  Mursyidin et  al. (2003) menunjukkan bahwa undur-undur laut mengandung lemak total yang cukup tinggi  pula,  yaitu  berkisar  17,22  – 21,56%; asam lemak omega 3 total (EPA dan  DHA)  yang  cukup  tinggi  pula,  yaitu berkisar  7,75  – 14,48%  dibandingkan dengan  beberapa  jenis  Crustacea  lain, seperti  udang,  lobster,  dan  beberapa jenis  kepiting;  sedangkan  kandungan EPA  (6,41  – 8,43%)  lebih  tinggi dibandingkan  kandungan  DHA  (1,34  – 6,57%).
Berdasarkan  penelitian  Puspitasari (2009), pemberian  ransum  undur-undur laut  dapat  meningkatkan  kandungan omega 3 dalam produksi telur itik. Kadar omega 3 dalam telur itik dengan ransum undur-undur laut 25% adalah (4,3633 ± 0,0707)  mg/g.  Kadar  omega  3  dalam telur  itik  dengan  ransum  undur-undur laut  50% adalah  (5,9604  ±  0,3254) mg/g.  Kadar  omega  3  dalam  telur  itik dengan  ransum  undur-undur  laut  75% adalah (6,7969 ± 0,3451) mg/g.
Asam  lemak  omega  3  digolongkan menjadi  asam  lemak α -linolenat,  asam eikosapentaenoat (EPA), asam dokosaheksaenoat (DHA) yang merupakan  asam  lemak  esensial  dan
sangat dibutuhkan tubuh untuk membantu  metabolisme.  Asam  lemak esensial  tidak  dapat  disintesis  dalam tubuh  sehingga  harus  dipasok  melalui makanan  dari  luar  tubuh.  Asam  lemak omega  3  berperan  dalam  pertumbuhan dan perkembangan otak, serta pembentukan  sel-sel  pembuluh  darah dan  jantung  pada  janin.  Omega  3  juga berperan  pada  orang  dewasa  yang berfungsi menyehatkan darah dan pembuluhnya serta membantu mekanisme  sirkulasi  darah  (Titiek  2007). Asam  lemak  omega-3  merupakan  asam lemak tidak jenuh yang kaya akan ikatan rangkap yakni mempunyai ikatan rangkap  3  dalam  struktur  molekulnya, yang  mempunyai  peranan  positif pada kesehatan  manusia  yaitu  antara  lain: dapat  menurunkan  kadar  kolesterol, membantu  perkembangan  syaraf  pada bayi,  menyembuhkan  dan  mencegah penyakit  kardiovaskuler  (Osman et  al. 2001  diacu  dalam  Supriyantini et  al.
2007).
Penelitian  ini  menggunakan  undur- undur  laut  ( Emerita  emeritus)  sebagai sumber  omega  3  yang  akan  diolah menjadi sediaan granul dan bubur instan. Granul  merupakan  hasil  dari  proses granulasi yang bertujuan untuk meningkatkan aliran serbuk dengan jalan membentuknya  menjadi  bulatan-bulatan atau  agregat-agregat  dalam  bentuk  yang beraturan. Proses granulasi dapat dilakukan  dengan  metode  granulasi kering  dan  granulasi  basah  (Ansel et  al.
1989). Bubur  instan    merupakan  bubur yang telah mengalami proses
pengolahan  lebih  lanjut  sehingga  dalam
penyajiannya  tidak  diperlukan  proses pemasakan.  Penyajian  bubur  instan dapat dilakukan
hanya dengan menambahkan  air  panas  ataupun  susu sesuai dengan selera (Hendy 2007).
Dalam    pengolahan  sediaan  granul dan  bubur  instan,  akan  melalui  proses pemanasan  dan  pengeringan.  Kerusakan lemak  di  dalam  bahan pangan  dapat terjadi selama pengolahan, proses pemanasan maupun penyimpanan. Kerusakan  lemak  menyebabkan  bahan pangan  berlemak  memiliki  bau  dan  rasa yang  tidak  enak,  sehingga  menurunkan mutu dan nilai gizinya. Kerusakan lemak dapat  disebabkan  oleh  proses  oksidasi terhadap asam lemak tidak jenuh. Proses ini  dapat  terjadi  dalam  suhu  kamar maupun selama pengolahan menggunakan suhu tinggi (Ketaren 1986; Khamidinal  2007).  Kadar  lemak  yang menurun pada
setiap metode
pengolahan  dapat  dipengaruhi  oleh waktu  dan  suhu  pemanasan.  Semakin lama  waktu  pemanasan  maka  semakin banyak  lemak  yang  mencair  dan  hilang bersama dengan air   (Tapotobun et al. 2008  diacu  dalam Hanifa 2014).
Oleh  karena  itu, perlu  dianalisis kadar  asam  lemak  omega  3  dalam berbagai  proses  pengolahan  seperti bentuk  granul  undur-undur  laut  dan bubur  instan  undur-undur  laut,  serta dianalisis  undur-undur  laut  mentahnya sebagai  kontrol  positifnya  kemudian dibandingkan kadar ketiga jenis sediaannya.  Analisa  omega  3 dalam undur-undur  laut  yang  merupakan  suatu asam  lemak  dapat  dilakukan  dengan kromatografi gas .

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  undur-undur  laut, amilum, tepung beras merah, susu skim, gula  halus,  minyak  nabati,  aquades, kloroform, metanol, hexan, KOH metanol 2N.

## Alat
Alat yang digunakan untuk
penelitian  ini  adalah:  alat-alat  gelas, timbangan  analitik,  oven,  mortir  dan stamper,  ayakan  mesh  40,  ayakan  mesh 16,  ayakan  mesh  18,  alat  ekstraksi soxhlet beserta kondensor, tabung reaksi berpulir,  penangas  air  ( waterbath), vorteks mixer, sentrifugator, kromatografi gas  Shimadzu  GC-9  AM,  Detektor Ionisasi Nyala (FID), Pemroses data class C-R6A,  kolom  kapiler  CBP:10,  panjang kolom  50  m,  gas  N2  sebagai  gas pembawa (fase gerak).

## Determinasi Hewan
Determinasi    ini dibuktikan  di Laboratorium  Farmasi  Biologi  UGM, Yogyakarta.

## Preparasi sampel
Sampel undur-undur laut segar yang terpilih  dalam  kondisi  baik  dibersihkan dari pasir yang menempel, dicuci dengan air bersih mengalir untuk menghilangkan kotoran dan cemaran.

## Pembuatan  sampel  tepung  undur- undur laut mentah
Undur-undur  laut  yang  didapat dicuci  sampai  bersih,  kemudian  direbus
pada air mendidih setelah itu dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari selama 3 hari sampai kering. Pembuatan serbuk  undur-undur  laut  mentah adalah dengan  dihaluskan  menggunakan  mortir dan lumpang porselen.
Setelah didapatkan  serbuk  lalu  diayak  dengan ayakan  mesh  nomor  40.  Tepung  undur- undur  laut  diberi  wadah  tertutup  agar tidak teroksidasi.

## Pembuatan  sampel  tepung  undur- undur laut mentah
Undur-undur  laut  yang  didapat dicuci  sampai  bersih,  kemudian  direbus pada air mendidih setelah itu dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari selama 3 hari sampai kering. Pembuatan serbuk undur-undur laut

## Pembuatan sampel bentuk granul
Pembuatan  granul  undur-undur  laut adalah  dengan  cara  granulasi  basah. Undur  undur  laut  dikeringkan  dengan cara  yang  berbeda,  yaitu  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  dan  disangrai. Undur-undur laut yang bersih dan kering dihaluskan  menjadi  serbuk  dan  diayak dengan  ayakan  nomor  mesh  40.  Serbuk undur-undur  laut  ditambah  amilum dengan  jumlah  konsentrasi  yang  sama pada  kedua formula,  kemudian  diaduk sampai homogen. Mucilago amili kemudian ditambahkan sampai terbentuk massa  yang  siap  digranulasi.  Massa granul  diayak  dengan  ayakan  no.  16, kemudian  hasilnya  dikeringkan  dalam oven  dengan  suhu  kurang  dari  50 0 C. Setelah  kering,  granul  diayak  kembali dengan ayakan no. 18.

## Pembuatan bubur instan
Pembuatan  bubur  instan  dibedakan menjadi  2  formula  yaitu  dengan penambahan undur-undur laut dan tanpa penambahan undur-undur laut (plasebo). Pada  pembuatan  formula  bubur  undur- undur  laut,  pertama-tama  undur-undur laut  yang  bersih  dan  kering  dihaluskan menjadi serbuk. Serbuk undur-undur laut diproses  dengan  bahan  tambahan  yaitu tepung  beras,  susu  skim,  gula  halus, minyak  nabati,  dan  aquades.  Semua bahan  dicampur  sampai  homogen  lalu dipanaskan    sambil    diaduk  sesekali. Setelah larutan mulai mengental, kemudian    dikeringkan  di    oven  selama kurang  lebih  24  jam  pada  suhu  50oC. Setelah kering, sampel kemudian diayak. Pada  formula  bubur  plasebo,  serbuk undur-undur  laut  tidak  ditambahkan. Semua bahan tambahan dicampur dengan cara yang sama seperti pembuatan  bubur  undur-undur  laut  dan kemudian  dikeringkan  di  oven  dengan suhu  50 0 C  dalam  waktu  24  jam.  Setelah kering kemudian  diayak  dengan  ayakan mesh no. 40.

## Ekstraksi  asam  lemak  undur-undur laut
Ekstraksi  asam  lemak  dilakukan dengan metode ekstraksi kering soxhletasi  dan  menggunakan  pelarut kloroform  dan  metanol  (2:1)  (v/v).  70 gram  sampel  diekstraksi  dengan  200  ml pelarut  sampai  filtrat  minyak  yang dihasilkan menjadi jernih.
Analisa kandungan asam lemak omega-3 Sampel  minyak  ekstrak  sampel granul,  bubur  dan  undur-undur  laut mentah diambil 0,2 gram dimasukkan ke dalam
tabung reaksi berpulir.
Ditambahkan  6  ml  5%  heksan  dalam etanol,  kemudian  ditambahkan  150  µl KOH  metanol  2N.  Campuran  tersebut divortek selama 1 menit untuk mengekstraksi metil  ester  asam  lemak.
Setelah  disentrifugasi,  lapisan  atas  siap untuk dianalisis menggunakan kromatografi gas dengan volume
penyuntikkan 0,2 µl.

## Uji kualitatif
Sebanyak      0,2 μ l    larutan    sampel disuntikkan  ke  dalam  ruang  suntik kromatografi  gas  sesuai  dengan  kondisi terpilih.  Waktu  retensi  yang  dihasilkan dicatat  lalu  dibandingkan  dengan  waktu retensi standar (baku).

## Uji kuantitatif
Sebanyak  0,2 μ l  larutan  sampel masing-masing  disuntikkan  ke  dalam ruang  suntik  kromatografi  gas  dengan kondisi terpilih.
Kemudian hasil kromatogram  yang  diperoleh  dihitung presentasi relatifnya
dengan membandingkan  luas  area  pada  masing- masing  sampel.  Analisa  kadar  asam lemak  omega  3  pada  sampel  dilakukan dengan  menggunakan  persamaan  kadar persen  relatif  yang  ditetapkan  dari Universitas Gadjah Mada.
Rumus  untuk  menghitung  kadar omega  3  adalah  dengan  menggunakan persamaan  kadar  persen  relatif  sebagai berikut :

## Analisa Data
Analisis      data      dengan  Statistical Product  and  Service  Solutions  (SPSS) vertion  17.0  menggunakan    Saphiro Wilk test untuk uji normalitas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Kualitatif
Injeksi  sampel  lemak  yang  telah dimetilasi  ke  dalam  kromatografi  gas akan menimbulkan puncak-puncak asam lemak. Asam lemak linolenat (C18:3, ω 3),
asam lemak eikosapentanoat EPA (C20:5, ω 3), dan asam lemak dokosaheksanoat  DHA  (C22:6, ω 3)  yang termasuk asam lemak omega 3 terdeteksi pada  waktu  yang  berbeda  antara  ketiga asam  lemak  standar.  Perbedaan  waktu retensi pada ketiga asam lemak mungkin disebabkan  karena  rantai  yang  berbeda pada ketiga asam lemak tersebut dimana DHA  mempunyai  rantai  lebih  panjang daripada  EPA  dan  asam  linolenat. Berdasarkan  hasil  uji  waktu  retensi  dari standar  asam  linolenat  (C18:3, ω 3),  EPA dan DHA, dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Waktu retensi sampel dan standar omega 3
Jenis omega 3 Waktu Retensi (menit) Standar A B C D E Asam Linolenat 12.635 12.738 12.620 12.583 - - EPA 18.423 18.420 18.358 19.018 - - DHA 28.805 29.743 29.790 29.675 - - Keterangan: A = Ekstrak undur-undur mentah (100% undur-undur laut) B = Ekstrak formula granul-sangrai (75% undur-undur laut)
C = Ekstrak formula granul-sinar matahari (75% undur-undur laut) D = Ekstrak formula bubur undur-undur laut (10% undur-undur laut) E =  Ekstrak formula bubur-plasebo
Tabel 2. Kadar persen relatif asam lemak omega 3
Jenis omega 3 Kadar Persen Relatif (%) A B C D E Asam Linolenat 42.500 49.273 29.361 - - EPA 1.893 2.964 0.093 - - DHA 0.023 0.043 0.035 - - Keterangan: A = Ekstrak undur-undur mentah (100% undur-undur laut) B = Ekstrak formula granul-sangrai (75% undur-undur laut)
C = Ekstrak formula granul-sinar matahari (75% undur-undur laut) D = Ekstrak formula bubur undur-undur laut (10% undur-undur laut) E = Ekstrak formula bubur plasebo
Formula bubur instan tidak mengandung  asam  lemak  omega  3,
namun  mengandung  asam  lemak  lain yang juga memiliki keuntungan.
Kandungan  asam  lemak  minyak  yang berpotensi  sebagai  biodiesel  setidaknya memiliki  kandungan  asam  laurat,  asam miristat, asam miristoleat, asam palmitat, asam  stearat,  asam  oleat,  asam  linoleat, dan  asam  linolenat  (Rachmaniah et  al. 2010).

## Uji Kuantitatif
Analisa    kuantitatif    menghasilkan kadar omega 3  pada tiap  sampel. Hasil uji  kuantitatif  terhadap  sampel    undur- undur    laut    pada  berbagai  bentuk sediaan  memberikan  hasil  yang  berbeda
pada  tiap  perlakuannya,  yaitu  sampel granul-sangrai  memiliki  kadar  persen relatif  rata-rata  omega-3  paling  besar daripada  kadar  persen  relatif  undur- undur mentah dan granul-sinar matahari. Hasil  kadar  persen  relatif  dapat  dilihat pada Tabel 2.
Berdasarkan hasil perhitungan kadar omega 3 pada sampel dengan persamaan kadar persen relatif, kadar total omega 3 pada  ekstrak  undur-undur  laut  mentah sebesar  44,416  g/100  g,  pada  ekstrak granul-sangrai  sebesar  52,280  g/100  g, sedangkan  pada  ekstrak  granul-sinar matahari sebesar 29,489 g/100 g. Sampel bubur  undur-undur  laut  dan  bubur plasebo  tidak  dapat  dihitung  kadar persen   relatifnya   dikarenakan     kedua
sampel ini tidak  memiliki  waktu  retensi asam lemak omega-3.
Kadar  omega-3  pada  granul-sangrai merupakan  kadar  terbesar  dibandingkan bentuk  undur-undur  mentah  dan  granul- sinar  matahari.  Bila  dilihat  dari  proses pemasakan,  pemanasan  yang  berulang dalam  proses  sangrai  serta  bahan tambahan  yang  ada  dalam  granulasi,  hal ini  bertolak  belakang  atau  tidak  relevan dengan pustaka yang ada.
Menurut  Greenwood &  Munro
(1975) (diacu  dalam  Nurfida dan
Puspitawati 2009),  secara  umum  pati mengandung  15  – 30%  amilosa,  70  – 85%  amilopektin  dan  5  – 10%  material antara  seperti  protein  dan  lemak.  Pati biji-bijian  mengandung  bahan  antara yang  lebih  besar  dibandingkan  pati batang  dan  pati  umbi.  Pada  penelitian ini,  dalam  pembuatan  formula  granul menggunakan amilum dari pati singkong (amilum  manihot).  Menurut  Tapotobun et  al.  2008  (diacu  dalam  Hanifa  2014) menyatakan semakin lama waktu pemanasan maka semakin banyak lemak yang  mencair  dan  hilang  bersama dengan air.

## KESIMPULAN
Kadar  omega  3  yang  ditetapkan secara  kromatografi  gas  dalam  bentuk granul-sangrai  undur-undur  laut  adalah 52,280 g/100 g dan kadar omega 3 pada bentuk  granul  yang  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  adalah  29,489 g/100  g.  Bentuk  bubur  instan  undur- undur  laut  dan  plasebo  tidak  terdeteksi omega  3.  Kadar  omega  3  bentuk tepung undur-undur  laut  mentah  adalah  44,416 g/100 g.

## DAFTAR PUSTAKA
[Anonim].  2007.  Natura Omega. Natura 2:1-
5.
Ansel  HC.  1989. Pengantar  Bentuk  Sediaan Farmasi.  Farida  Ibrahim,  Penerjemah; Jakarta:  Universitas  Indonesia  Press. 217-218. Terjemahan dari: Introduction to pharmaceutical dosage forms.
Greenwood    CT    and    Munro DN.    1975, Carbohydrates,    di    dalam    R.J. Priestley,    ed. Effects  of  Heat  on Foodstufs. London:  Applied  Science Publ. Ltd.
Hanifa  YN.  2014.  Pengaruh  metode pengolahan  terhadap  kandungan  gizi undur-undur  laut  ( Emerita  emeritus) [Skripsi].  Bogor:  Fakultas  Perikanan dan  Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian Bogor.
Hendy.  2007.  Formulasi  bubur  instan berbasis  singkong  ( Manihot  esculenta
Crantz) sebagai pangan pokok alternatif  [Skripsi].  Bogor:  Fakultas Teknologi  Pertanian,  Institut  Pertanian Bogor.
Khamidinal,  Hadipranoto  N,  Mudasir.  2007.
Pengaruh antioksidan terhadap kerusakan  asam  lemak  omega-3  pada proses  pengolahan  ikan  tongkol.
Kaunia 3(2):119-138.
Ketaren S. 1986. Minyak dan Lemak Pangan, Jakarta:  Universitas Indonesia Press.
Mursyidin  DH,  Muhammad  S,  Perkasa  DP, Sekendriana,  Prabowo .  2003.  Kajian kandungan  asam  lemak  omega  3 undur-undur  laut  ( Emerita  sp.)  di pantai  selatan  Yogyakarta. Bull  PM UGM 10:8-10.
Nurfida A, Puspitawati IN. 2009. Pembuatan maltodekstrin  dengan  proses  hidrolisa parsial  pati  singkong  menggunakan enzim α -amilase.  [Laporan  Penelitian] Semarang: Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro.
Osman  H,  Suriah  AR and  Law EC.  2001. Fatty acid composition and cholesterol contens  of selected  marine  fish  in
Malaysian waters. Food Chemistry. 73: 55 – 60.
Puspitasari  AA.  2009.  Pengaruh  asupan makanan  undur-undur  laut  terhadap kandungan  omega  3  pada  telur  itik [Skripsi].  Surakarta:  Fakultas  Farmasi, Universitas Setia Budi.
Rachmaniah  O,  Reni  DS,  Lailatul  M.  2010. Pemilihan  metode  ekstraksi  minyak alga dari Chlorella sp. dan prediksinya sebagai  biodiesel. Seminar  Teknik Kimia  Soehadi  Reksowardojo  2010 Surabaya:  Fakultas  Teknik  Kimia. Institut Teknologi Sepuluh November.
Supriyantini  E,  Widowati  I,  Ambariyanto. 2007.  Kandungan  asam  lemak  omega 3 pada kerang totok Polymesoda erosa yang  diberi  pakan Tetraselmis  chuii dan Skeletonema  costatum.  Ilmu
Kelautan 12 (2): 97 – 104.
Tapotobun  AM,  Nanlohy  E,  Louhenapessy J.    2008.    Efek    waktu    pemanasan terhadap  mutu  presto  beberapa  jenis ikan. Ichthyos. 7(2):65-70.
Titiek.  2007.  Telur  Asin  Omega  3  Tinggi. WPPP 29 (4):14-15.