Uji  Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara in vitro
Rahmad Setia Budi,
Staf Pengajar Agroteknologi Fakultas Pertanian UISU
Rsbudi69@yahoo.com

## ABSTRAK
Perbanyakan konvensional pisang secara umum melalui anakan (sucker) dan belahan bonggol (corm), namun bibit  yang  dihasilkan  dengan  cara  ini  menghasilkan  sedikit  anakan  dan  membutuhkan  waktu  relatif  lama, pertumbuhan tidak seragam sehingga penanaman skala besar akan sulit dilakukan. Perbanyakan melalui kultur jaringan  pada  pisang  barangan  telah  dilakukan,  hingga  diperoleh  bibit  bermutu  baik  (seragam  dan  bebas patogen)  dalam  jumlah  lebih  banyak  dan  cepat.  Keberhasilan  menginisiasi  pembentukan  kalus  dan  tunas merupakan  langkah  awal  untuk  menghasilkan  planlet  dengan  multiplikasi  yang  tinggi.  Penelitian  ini dilaksanakan di laboratorium kultur jaringan  UPT. Balai Benih Induk Gedung Johor Dinas Pertanian Provinsi Sumatera  Utara.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  pengaruh  beberapa  konsentrasi  ZPT:  (1).  NAA ( Naphthaleneacetic acid ) dan BAP ( Benzylamino purin ) terhadap pertumbuhan eksplan pisang barangan secara kultur in vitro . (2). BA ( Benzyl Adenin )  dan IBA ( Indole Butyric Acid ). Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pengaruh konsentrasi NAA dan BAP; BA dan IBA terhadap pertumbuhan dan perkembangan eksplan tampak terutama dimulai pada minggu ke-2 setelah  aplikasi  hingga  minggu ke-12. Konsentrasi  BAP dan kombinasi konsentrasi NAA dan BAP  serta  konsentrasi  BA  dn  IBA  dan  interaksinya  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  persentase  tumbuh, jumlah tunas, panjang tunas, dan bobot tunas.
Kata Kunci : : Eksplan, kultur in vitro, pisang barangan, zat pengatur tumbuh (NAA, BAP, BA, dan IBA)

## ABSTRACT
Conventional propagation of bananas in  general through saplings (sucker) and parts of the tuber (corm), but the seeds produced in this way produces little puppies and requires a relatively long time, growth is not uniform so that large-scale cultivation would be difficult to do. Propagation through the tissue culture banana has been done, to obtain good quality seed (uniform and free of pathogens) in the amount of more and faster. The success initiate the formation of callus and shoots a preliminary step to produce plantlets with a high multiplication. This study was conducted in tissue culture laboratory UPT. Balai Benih Induk Gedung Johor Dinas Pertanian Sumatera  Utara.  The  aim  of  research  to  determine  the  effect  of  several  concentrations  of  PGR:  (1).  NAA ( Naphthaleneacetic acid ) and BAP ( Benzylamino  purine ) on the growth of banana explants in vitro culture. (2). BA ( Benzyl adenine ) and IBA ( Indole Butyric Acid ). The study design used was completely randomized design  (CRD)  factorial.  The  results  showed  that  the  effect of  NAA  and  BAP;  BA  and  IBA  on  growth  and development  of  explants  looked  especially  starting  at  week  2  after  application  until  the  12th  week.  The concentration of BAP and NAA concentrations and combinations of BAP and IBA and BA concentration and interaction did not significantly affect the percentage grows, the number of shoots, shoot length and weight of shoots
Keywords : Explant, in vitro culture, barangan banana , plant growth regulator (NAA , BAP , BA and IBA).
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .

## I. PENDAHULUAN
1. Latar Belakang
Tanaman  pisang  ( Musa  paradisiaca L.)  termasuk  famili  Musaceae,    adalah  buah-buahan yang berasal dari Asia Tenggara, tersebar diseluruh dunia, termasuk komoditi hortikultura yang  penting  dan  sudah  ada  sejak  lama  menjadi  mata  dagangan  yang  memiliki  reputasi internasional.  Pisang  termasuk  keluarga  musaceae,  salah  satu  anggota  ordo  scitamineae (Suhardiman, 1997; dan Anonimus, 2013). Manfaat pisang antara lain: buahnya dikonsumsi, bonggolnya dapat diolah menjadi makanan, daunnya dijadikan pembungkus dan pelepahnya dapat dijadikan bahan serat (Supriyadi dan Satuhu, 2002). Pisang barangan ( Musa acuminate Colla ) berasal  dari  Sumatera  Utara  dan menyebar  diseluruh  Indonesia.  Selama  ini  pisang barangan belum begitu dikembangkan, meskipun sangat digemari masyarakat. Akar hingga daunnya  dapat  dimanfaakan  untuk  kepentingan  manusia.  Buah  pisang  dikonsumsi  dalam bentuk segar (tanpa pengolahan), karena rasanya enak, manis, dan beraroma. Jenis tanaman pisang dapat digolongkan menjadi tiga jika didasarkan pada saat buah pisang tersebut dapat dimakan yaitu golongan pisang yang dapat dimakan buahnya setelah masak seperti pisang ambon,  pisang  barangan,  pisang  raja  dan  lainnya.(Widya,  2008).    Pada  tahun  1942, Indonesia terkenal sebagai negara pengekspor  pisang, tetapi kini tidak terjadi lagi walaupun peluang  untuk  itu  besar.  Hal  ini  dikarenakan  kontinuitas  dan  kualitas  produksi  pisang  di Indonesia tidak memenuhi standar sesuai dengan persyaratan dunia (Agustin, 2005). Khusus untuk permintaan buah pisang barangan juga terus meningkat terutama di kota-kota besar Sumatera  Utara  dan  Jakarta,  sehingga  beberapa  petani  telah  membudidayakannya  secara komersial. Bercocok tanam pisang barangan sangat berbeda dengan tanaman pisang lainnya, karena pisang memerlukan pemeliharaan intensif guna mendapatkan produksi yang tinggi dan  kualitas  buah  yang  baik  (Balai  Pengkajian  Teknologi  Pertanian  Sumatera  Utara, 2008).Salah satu tanaman pisang yang mempunyai potensi yang tinggi dan berpeluang untuk dikembangkan  adalah  pisang  barangan  (Zebua,  2015).  Salah  satu  masalah  utama  yang dihadapi  masyarakat  Indonesia  dalam  budidaya  tanaman  pisang  dan  khususnya  pisang barangan    adalah  teknik  budidaya  perbanyakan  pisang.  Tanaman  pisang  biasanya diperbanyak dengan cara vegetatif dengan menggunakan tunas anakan (sucker) yang tumbuh dari bonggol (corm) induknya anakan, karena tanaman pisang tidak dapat menghasilkan biji yang  dapat  berkembang  menjadi  tanaman  baru,  hanya  menghasilkan  sekitar  2-6  anakan, membutuhkan  waktu  relatif  lama.  Teknik  pemindahan  anakan  pada  perbanyakan  pisang, menghasilkan tanaman tidak seragam, dapat membawa penyakit dan sulit didapatkan bahan tanaman  dalam  jumlah  yang  banyak  (Purnomo,  2004).  Setiap  indukan  pisang  dapat menghasilkan 5-10 anakan sehat dalam tiap tahun (Levoire, 2000). Penanaman skala besar akan sulit dilakukan karena membutuhkan bibit dalam jumlah besar dan pertumbuhan yang seragam (Cahyono,  1995). Sehubungan dengan itu kebutuhan bibit ungul berkualitas, dalam jumlah banyak, dan tersedia secara kontinu setiap tahunnya merupakan masalah. Disamping faktor  pertunasan  yang  rendah,  perakaran  sering  menjadi  masalah  utama  yang  sulit dipecahkan. Masalah ini diharapkan dapat diatasi melalui teknik kultur in vitro , yaitu dapat diperoleh tanaman baru yang lengkap dan mempunyai sifat seperti induknya, diperoleh bibit bermutu  baik  (seragam  dan  bebas  patogen),  menghasilkan  jumlah  anakan  dalam  jumlah besar dan dalam waktu singkat (Gunawan, 1990; 1998). Umumnya jaringan meristematis merupakan bagian yang penting dijadikan sebagai bahan tanam. Pada perbanyakan mikro tanaman pisang, bahan tanam dapat berasal dari meristem/mata tunas (Al-Amin, et al., 2009; Marlin, 2010; Bhosale, et al ., 2011).Menurut Gunawan (1998), dalam teknik kultur jaringan terdapat beberapa faktor penentu antara lain media tumbuh. Media tumbuh adalah komposisi unsur hara makro, unsur hara mikro, sumber besi, sumber karbon, vitamin, dan zat pengatur tumbuh  (ZPT).  Medium  dasar  MS  ( Murashige and Skoog ,  1962)  adalah  yang  paling  luas penggunaannya dibandingkan dengan media dasar lainnya. Pertumbuhan dan perkembangan
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
tanaman  dikendalikan  berbagai  faktor  dan  berbagai  reaksi  kimia.  Salah  satu  reaksi  kimia yang cukup memegang peranan penting adalah hormon dan ZPT (Dartius, 2002). Di dalam kultur  jaringan,  kehadiran  ZPT  sangat  nyata  pengaruhnya.  Bahkan  menurut  Zulkarnain (2009),  menyatakan  bahwa  sangat  sulit  menerapkan  tehnik  kultur  jaringan  pada  upaya perbanyakan  tanaman  tanpa  melibatkan ZPT.  Zat  pengatur  tumbuh  yang  biasa  digunakan dapat berasal dari golongan auksin maupun sitokinin. Golongan auksin adalah IBA,  IAA, NAA, dan 2,4-D. Sedangkan dari golongan sitokinin adalah Kinetin, Zeatin dan BA (Abidin, 1990). Auksin umumnya berfungsi terhadap pemanjangan sel, pembentukan kalus dan akar adventif  serta menghambat  pembentukan  tunas  aksilar,  auksin  yang  sering  dipakai  dalam kultur jaringan adalah IAA ( Indole Acetic Acid ), 2,4-D ( 2,4 DichlorophenoxyAcetic Acid ), IBA ( Indole Butyric Acid ) dan NAA ( Naphtalen Acetic Acid ) (Wattimena, 1987).Sitokinin adalah  ZPT  yang  ditemukan  pada  tanaman  oleh  Haberlandt,  fungsi  sitokinin  adalah pembelahan  sel,  pembesaran  sel,  menghambat  penuaan  bunga  dan  buah,  dan  deferensiasi akar dan tunas (Heddy, 1996).

## 2. Rumusan Masalah
Bibit  pisang  yang  berkualitas  dan  baik  masih  sangat  dibutuhkan  bagi  budidaya  tanaman pisang, salah satunya dapat dihasilkan melalui Teknik kultur in vitro . Masalah utama dalam kultur jaringan adalah cara memproduksi kalus dan tunas secara massal dari  eksplan yang digunakan,  dikarenakan  media  dasar  yang  digunakan  dalam  kultur  jaringan  belum  cukup untuk mensuplai semua kebutuhan pertumbuhan jaringan, maka untuk itu perlu ditambahkan ZPT yang berfungsi merangsang dan mendorong pertumbuhan eksplan

## 3. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk menguji beberapa ZPT NAA, BAP,  BA dan IBA  terhadap pertumbuhan eksplan pisang barangan pada media MS secara In vitro

## II. METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu
Penelitian  dilaksanakan  di  laboratorium  kultur  jaringan  UPT.  Balai  Benih  Induk  Gedung Johor Dinas Pertanian Pemerintah Provinsi Sumatera Utara, Medan

## Rancangan Penelitian atau Model
Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak  Lengkap (RAL)  Faktorial, yaitu: (1) Uji NAA dan BAP  dengan 2 faktor,  yaitu konsentrasi NAA (A) dengan 4 taraf yaitu: A0 (kontrol), A1 (0.5 mg/l), A2 (1.0 mg/l) dan  A3 (1.5 mg/l), dan faktor konsentrasi BAP (B) dengan 4 taraf, yaitu: B0 (kontrol), B1 (1.5 mg/l), B2 (3.0 mg/l) dan B3 (4.5 mg/l). Media yang digunakan adalah media MS penuh; (2) Uji BA dan IBA  dengan 2 faktor, yaitu konsentrasi BA (A) dengan 4 taraf yaitu: B0 (kontrol), B1 (1.5 mg/l), B2 (3.0 mg/l) dan  B3 (4.5 mg/l), dan faktor konsentrasi  IBA (I) dengan 4 taraf, yaitu: I0 (kontrol), I1 (0.5 mg/l), I2 (1.0 mg/l) dan I3 (1.5 mg/l). Media yang digunakan adalah media MS penuh.

## Bahan dan Peralatan
Penelitian ini menggunakan eksplan anakan  pisang barangan yang sehat dengan  bonggol berwarna  putih  bersih  berukuran  tinggi  30  –  40  cm  yang  diperoleh  dari  Desa  Siguci, Kecamatan: STM.  Hilir, Kabupaten Deli Serdang Provinsi Sumatera Utara.Bahan lainnya yaitu bahan pembuat media lengkap, antara lain:hara makro, hara mikro vitamin, gula, air
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
suling,  bahan  pemadat  agar  untuk  pembuatan  media  MS,  dan  ZPT.  Zat  pengatur  tumbuh yang  biasa  digunakan  dapat  berasal  dari  golongan  auksin  maupun  sitokinin,  yaitu:  NAA, BAP,  BA, dan IAA.

## Peralatan
Laminar  air  flow  cabinet  (LAFC),  autoclave,  petridish,  erlenmeyer,  becker  glass,  pinset, scapel,  bunsen,  wadah  botol  kultur,  dan  peralatan  laboratorium  lainnya,  serta  alat-alat pengamatan.

## Tahapan Penelitian Persiapan Eksplan
Eksplan berupa bonggol pisang  yang berumur 2-3 bulan dibersihkan dengan air  mengalir dan  diambil  titik  tumbuh  direndam  dalam  larutan  fungisida  (benlate)  selama  2-3  jam, kemudian bilas dengan air bersih sebanyak 3 kali. Titik tumbuh direndam ke dalam larutan clorox  20%  dan  dibiarkan  selama  1  jam,lalu  bilas  dengan  air  steril  sebanyak  3  kali. Pindahkan ke botol lain yang berisi clorox 10% selama 30 menit dan dibiarkan,  kemudian dikeluarkan lalu bilas dengan air steril sebanyak 3 kali.

## Penanaman Eksplan
Penanaman eksplan dilakukan dalam LAFC. Dari tunas diambil titik tumbuhnya (meristem) dipotong dengan ukuran 1,5 cm 3 dan dimasukkan ke dalam petridish yang berisi akohol dan betadine.  Kemudian  eksplan  ditanam  ke  dalam  media  yang  telah  disiapkan.  Media  yang digunakan adalah media dasar Murashige dan Skoog (1962) yang terdiri dari komponen hara makro,  hara  mikro, myoinositol dan  asam  amino.  Masing-masing  komponen  media  di larutkan dan diencerkan sesuai dengan kepekatan hara yang dibutuhkan dan ditambahkan dengan ZPT sesuai perlakuan.

## Peubah yang diamati
Pengamatan  meliputi  persen  eksplan  yang  tumbuh/  hidup,  jumlah  tunas,  tinggi  eksplan, bobot  eksplan.  Pengamatan  dilakukan  pada  umur  2,  4,  6,  8,  dan  12  minggu  setelah dikulturkan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  menunjukkan  persentase  hidup  jaringan  eksplan  yang  tinggi.  Beberapa teknik  sterilisasi  dilakukan  untuk  mendapatkan  inokulasi  yang  steril  untuk  dikulturkan kembali  sesuai  dengan  perlakuan.  Penggunaan  fungisida  dan  bakterisida  yang  sistemik ditujukan untuk menghilangkan kontaminasi dalam jaringan eksplan.Hasil pengamatan dan analisis data dapat dilihat pada uaraian berikut:
1. Persentase Eksplan Hidup (%) Pada Perlakuan ZPT (NAA, BAP, BA, IBA)
Dari  hasil  penelitian  terlihat  bahwa  persentase  hidup  eksplan  tinggi  (100%),  walaupun memerlukan  waktu  yang  relatif  lebih  lama  dalam  membentuk  kalus  dan  tunas.  Respon tumbuh  ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  eksplan,  kemudian  diikuti  dengan pembengkakan  dan  pemanjangan  jaringan.  Pada  beberapa  bagian  eksplan  menunjukkan gejala pencoklatan (browning) dan gejala ini terjadi pada tahap awal kultur, tetapi gejala ini berubah  baik  warna  putih  kecokelatan  menjadi  coklat  kehijauan  maupun  bentuknya  pada umur  4  mst.Terjadinya  perubahan  warna  eksplan  tidak  berarti  matinya  jaringan,  karena
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
jaringan  masih  menunjukkan  pertambahan  ukuran.  Perubahan  warna  disebabkan  oleh keluarnya  senyawa  yang  berasal  dari  jaringan  terluka.  Pertumbuhannya  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor,  antara  lain  media  tumbuh  dan  ukuran  eksplan  yang  digunakan.  Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi ZPT BA dan IBA serta interaksi keduanya berpengaruh tidak nyata terhadap jumlah eksplan yang tumbuh pada umur 2 mst. Perlakuan  dosis  ZPT  BA  dan  ZPT  IBA  serta  interaksi  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap persentase tumbuh pisang barangan. Hasil penelitian dapat dilihat bahwa jumlah persentase hidup  eksplan  pisang  barangan  sangatlah  tinggi  (100%),  hal  ini  disebabkan  media  kultur sudah cukup untuk mendukung pertumbuhan eksplan sehingga ZPT BA dan ZPT IBA serta interaksinya tidak menunjukkan pengaruh terhadap pertumbuhannya. Eksplan  yang hidup berkembang membentuk tunas, sedikit perakaran, pembesaran bonggol dan sebagian kecil statis. Respon awal dari jaringan adalah membesarnya eksplan yang dikulturkan, pada awal penanaman  eksplan  berwarna  putih  kehitaman.  Terjadi  perubahan  warna  eksplan  tidak berarti  matinya jaringan, karena jaringan masih menunjukkan pertambahan ukuran, diduga perubahan  warna  tersebut  disebabkan  oleh  keluarnya  senyawa-senyawa  dari  jaringan eksplan yang terluka selanjutnya berubah warna yang disebut dengan browning/pencoklatan. Browning  ini  disebabkan  oleh  senyawa  fenol  yang  timbul  akibat  stress  mekanik  dari pelukaan  pada  waktu  proses  isolasi  eksplan  dari  tanaman  induk.  Senyawa  fenol  tersebut bersifat toksik, menghambat pertumbuhan atau bahkan dapat mematikan jaringan eksplan (Edhi,  20013).  Pencoklatan/browning  ini  dapat  diatasi  dengan  melakukan  subkultur  pada waktu terjadinya browning. Penambahan arang aktif ke dalam media kultur seringkali dapat menghindari pembentukan inhibitor fenolat. Arang aktif menghilangkan pewarnaan dengan menyerap dan mengoksidasi fenol dan menginaktifkan peroksidase (Tisserat, 1979). Semua eksplan  menunjukkan  adanya  pertumbuhan,  pertumbuhan  ini  dipengaruhi  oleh  beberapa faktor,  antara  lain  karena  media  tumbuhan  yang  digunakan,  dimana  pada  medium  yang digunakan  tersedia  nutrisi  yang  cukup  untuk  pertumbuhan  eksplan.  Pertumbuhan  eksplan juga dipengaruhi oleh potongan jaringan eksplan yang digunakan serta ukuran eksplan, pada penelitian ini jaringan yang digunakan adalah jaringan meristem. Jaringan meristem adalah jaringan  muda,  dimana  jaringan  ini  terdiri  dari  sel-sel  yang  selalu  membelah  dan  ukuran eksplan berukuran kecil lebih kurang 1 cm.

## 2. Jumlah Tunas (buah) Pada Perlakuan ZPT (NAA, BAP, BA, IBA)
Hasil analisis menunjukkan bahwa aplikasi ZPT NAA dan BAP serta interaksi kedua faktor perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  tunas  pada  umur  12  mst.  Pemberian NAA  menunjukkan pengaruh yang tidak nyata terhadap jumlah tunas eksplan pisang, tetapi terdapat  perbedaan  jumlah  tunas  eksplan  pada  setiap  perlakuan.  Jumlah  tunas  yang terbanyak terdapat pada perlakuan A3 (1.5 mg/l)  yaitu 1.75 buah dan yang terendah pada perlakuan A0 (kontrol) yaitu 1.17 buah. Auksin adalah salah satu hormon yang tidak terlepas dari proses pertumbuhan dan perkembangan ( growth and development) suatu tanaman, di dalam media berperan untuk merangsang pertumbuhan kalus, merangsang pembesaran sel serta pertumbuhan akar dan mengatur morfogenesis.  (Abidin, 1990). Menurut Karjadi dan Buchory (2007) auksin sintetis, seperti NAA biasaya lebih efektif dibandingkan IAA, karena NAA tidak dirusak oleh IAA oksidase atau enzim lain, sehingga bisa bertahan lebih lama. Perlakuan pemberian BAP menunjukkan perbedaan yang tidak nyata terhadap jumlah tunas eksplan, tetapi terdapat perbedaan jumlah tunas eksplan pada setiap perlakuan. Jumlah tunas yang terbanyak diperoleh pada perlakuan B1 (1.5 mg/l) yaitu 1.81 buah dan terendah pada perlakuan B0 (kontrol) yaitu 1.17 buah. Pemberian BAP menunjukkan pertambahan jumlah tunas, semakin tinggi konsentrasi yang diberikan maka jumlah tunas akan terus meningkat, tetapi pertumbuhan jumlah tunas belum maksimal. Hal ini disebabkan karena BAP belum berperan  dalam  pembelahan  sel  dan  morfogenesis  (pertumbuhan  akar  dan  tunas)
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
dikarenakan  faktor  keseimbangan  ZPT  dan  waktu  yang  mungkin  terlalu  singkat.  BAP merupakan  sitokinin  buatan  yang  mempunyai  sifat  yang  sama  dengan  sitokinin  alamiah. Sitokinin memiliki fungsi untuk mengatur pertumbuhan melalui pembelahan sel, membantu mengawasi  perkecambahan  biji,  mengatur  transport  auksin  dan  dalam  kultur  jaringan sitokinin berperan dalam pertumbuhan serta morfogenesis (Anonimus, 2013). Menurut Budi (1999),  medium  kultur  yang  hanya  mengandung  NAA  saja  berpengaruh  tidak  signifikan terhadap  persentase  eksplan  dalam  pembentukan  tunas  majemuk,  dan  pemberian  BAP dengan konsentrasi tinggi ternyata menghambat pembentukan tunas. Berbeda halnya dengan penambahan  NAA  yang  seimbang  dapat  memberikan  pengaruh  yang  lebih  baik  pada pembentukan tunas tanaman. Hal ini didukung oleh George dan Sherrington (1984), apabila ketersedian  sitokinin  di  dalam  media  kultur  sangat  terbatas  maka  pembelahan  sel  pada jaringan akan terhambat. Akan tetapi, apabila jaringan tersebut disubkulturkan pada medium dengan kandungan sitokinin yang memadai maka pembelahan sel akan berlangsung secara singkron  sedangkan  pada  konsentrasi  yang  tinggi  dapat  menghambat  pertumbuhan, meracuni bahkan mematikan tanaman. Perimbangan konsentrasi dan interaksi antara ZPT yang diberikan dalam media dan yang diproduksi oleh sel secara endogen akan menentukan perkembangan  suatu  kultur.  Interaksi  sitokinin  dan  auksin  sangat  dibutuhkan  untuk pertumbuhan  eksplan.  Pierik  (1987)  dalam  Zulkarnain  (2009),  menyatakan  bahwa  pada umumnya auksin meningkatkan pemanjangan sel, pembelahan sel, dan pembentukan akar adventif.  Auksin  berpengaruh  pula  untuk  menghambat  pembentukan  tunas  adventif  dan tunas  aksilar.  Konsentrasi  auksin  yang  rendah  akan  meningkatkan  pembentukan  akar adventif,  sedangkan  auksin  konsentrasi  tinggi  akan  merangsang  pembentukan  kalus  dan menekan morfogenesis. Eksplan yang tidak membentuk kalus mengalami perubahan warna dari hijau menjadi coklat kemudian mati, hal ini dapat disebabkan karena timbulnya senyawa fenolik yang keluar dari eksplan tersebut. Peristiwa pencoklatan ini merupakan suatu proses perubahan  adaptif  bagian  tanaman  akibat  adanya  pengaruh  seperti  respon  dari  bekas perlukaan pada eksplan. Terjadinya pencoklatan pada jaringan adalah karena aksi oksidasi plofenol yang disintesis akibat dari oksidasi jaringan ketika terluka. (Robbiani, 2010).
Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa konsentrasi BA dan IBA serta interaksi keduanya  berpengaruh  tidak  nyata  terhadap  jumlah  tunas  yang  tumbuh.  Pada  perlakuan pemberian  IBA  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  tunas  pisang  barangan. Berdasarkan data di atas pemberian IBA meskipun tidak berbeda nyata namun jumlah tunas akibat  pemberian  IBA  umumnya  di  atas  kontrol  (meningkat).  Hal  ini  menunjukkan meskipun media telah memenuhi kebutuhan tanaman untuk pertumbuhan namun masih ada respon  meningkatnya  jumlah  tunas,  semakin  tinggi  pemberian  ZPT  IBA  ternyata  jumlah tunas  menurun  sehingga  sama  dengan  kontrol.  Jumlah  tunas  terbanyak  diperoleh  pada perlakuan I 1 (0,5 mg/l) dan I 2 (1,0 mg/l)  yaitu 2,67 tunas dan  yang terendah jumlah tunas pada perlakuan I o (kontrol) yaitu 2,33 tunas dan I 3 (1,5 mg/l) yaitu 2,33 tunas.  Pemberian ZPT BA tidak menunjukkan pertambahan jumlah tunas. Tetapi terdapat perbedaan jumlah tunas pada setiap perlakuan. Jumlah tunas terbanyak diperoleh pada perlakuan B 1 (1.5 mg/l) yaitu 3,00 tunas dan yang terendah pada perlakuan B 2 (3,0 mg/l) dan B 3 (4,5 mg/l) yaitu 2,00 tunas.  Perlakuan  dosis  ZPT  BA  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap jumlah  tunas. Menurut George dan Sherrington (1984), apabila ketersedian sitokinin di dalam media kultur sangat terbatas maka pembelahan sel pada jaringan akan terhambat. Akan tetapi, apabila jaringan tersebut  disubkulturkan  pada  medium  dengan  kandungan  sitokinin  yang  memadai  maka pembelahan sel akan berlangsung secara singkron sedangkan pada konsentrasi yang tinggi dapat  menghambat  pertumbuhan,  meracuni  bahkan  mematikan  tanaman.    Zat  pengatur tumbuh  BA  banyak  digunakan  untuk  memacu  penggandaan  tunas  karena  mempunyai aktivitas  yang  kuat  dibanding   kinetin.  BA   mempunyai  struktur  dasar  yang  sama  dengan
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
kinetin   tetapi  lebih  efektif  karena  BA  mempunyai  gugus  benzi.  Umumnya  tanaman memiliki respon yang lebih baik terhadap BA dibandingkan terhadap kinetin sehingga BA lebih efektif untuk produksi tunas. IBA adalah salah satu hormon yang mempunyai manfaat lain  seperti  menambah  daya  kecambah,  merangsang  perkembangan  buah,  mencegah kerontokan,  pendorong  kegiatan  kambium  dan  lain  lain.  Suatu  tumbuhan  yang  diberikan hormon  IBA  akan  mengalami  pembentukan  akar  lebih  cepat.  IBA  mempunyai  sifat  yang lebih baik dan efektif dari pada IAA dan NAA. Dengan demikian IBA paling sesuai untuk merangsang aktivitas perakaran karena kadar kimianya lebih stabil (Anonimus, 2013).

## 3. Tinggi Eksplan (cm) Pada Perlakuan ZPT (NAA, BAP, BA, IBA)
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  perlakuan  NAA  berpangaruh  nyata  terhadap  tinggi eksplan pisang, tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap perlakuan BAP dan interaksi kedua faktor tersebut. hal ini dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.  Rataan tinggi eksplan pisang barangan (cm) dengan perlakuan NAA dan BAP pada umur 12 Mst.
Perlakuan BAP B0                      B1 B2 B3                   Rataan NAA A0 2.04 1.93 2.33 2.11 2.10  C A1 2.04 2.43 2.51 2.13 2.28  C A2 2.37 4.31 3.00 5.84 3.88  A A3 2.73 2.73 4.67 2.97 3.28  B Rataan 2.29 2,85 3.13 3.26
Keterangan : Angka yang diikuti huruf yang tidak sama menunjukkan  berbeda nyata pada taraf 1% berdasarkan uji DMRT.
Tabel 1 dapat dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA menunjukkan perbedaan yang nyata terhadap tinggi eksplan pisang. Eksplan tertinggi terdapat pada perlakuan A2 (1 mg/l) yaitu 3.88 cm, yang berbeda nyata terhadap pengaruh perlakuanA3 (1.5 mg/l) yaitu 3.28 cm dan pengaruh  perlakuan  A1  (0.5  mg/l)  2.28  cm.  Hubungan  tinggi  eksplan  pisang  terhadap pemberian NAA dapat dilihat pada Gambar 1 di bawah ini. Hal ini dikarenakan pengaruh NAA memberikan efek sinergis terhadap pertumbuhan eksplan pisang untuk pemanjangan sel  membentuk  tunas.  Auksin  berfungsi  mendorong  perpanjangan  sel  dengan  cara mempengaruhi  dinding  sel  melalui  dua  tahap,  yaitu  fase  pembelahan  sehingga  sel  akan mengalami kerenggangan dan penebalan. Pertumbuhan pada meristem ujung menghasilkan sel-sel baru sehingga mengakibatkan bertambahnya tinggi atau panjang tunas. Sedangkan sitokinin  dapat  mendorong  pembelahan  sel  dalam  bagian  ujung  dari  tunas.  Perlakuan pemberian konsentrasi BAP berpengaruh tidak nyata terhadap tinggi eksplan pisang, tetapi terdapat  perbedaan  tinggi  pada  setiap  perlakuan.  Eksplan  yang  tertinggi  terdapat    pada perlakuan B3 (4.5 mg/l) yaitu 3.26 cm dan yang terendah pada perlakuan B0 (kontrol) yaitu 2.29 cm. Hal ini terjadi karena kandungan BAP lebih rendah, sehingga pertumbuhan tinggi tunas  menjadi  terhambat.  Interaksi  antara  kedua  perlakuan  konsentrasi  NAA  dan  BAP menunjukkan pengaruh tidak nyata terhadap tinggi eksplan (Gambar 2 a, 2 b, dan 2 c).
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
Gambar 1. Hubungan tinggi eksplan pisang barangan umur 12 mst terhadap pemberian NAA
Umumnya auksin meningkatkan pemanjangan sel, pembelahan sel, dan pembentukan akar adventif,  dalam  medium  kultur  auksin  dibutuhkan  untuk  meningkatkan  embryogenesis somatik  pada  kultur  suspensi  sel.  Konsentrasi  auksin  yang  tinggi  akan  merangsang pembentukan kalus dan menekan morfogenesis (George and Sherrington, 1984).
Gambar 2a. Eksplan  pisang pada perlakuan NAA dan BAP;   2b. BA dan  IBA pada 12 MST;   dan 2c. Planlet pisang barangan siap dipindah ke lapangan
4 . Bobot Eksplan (g) Pada Pemberian ZPT (NAA, BAP, BA, dan IBA)
Hasil analisis menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi NAA,  BAP,  BA, dan IBA  serta interaksi  kedua  faktor  perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  bobot  eksplan  pisang barangan pada umur 12 mst. Pada pemberian NAA  menunjukkan pengaruh yang tidak nyata terhadap bobot eksplan pisang barangan, tetapi terdapat perbedaan bobot eksplan pada setiap perlakuan. Bobot eksplan terberat terdapat pada perlakuan A3 (1.5 mg/l) yaitu  4.38 g dan
0.50 2.12 3.74 5.36 6.98 0 0.5 1.0 1.5 T in ggi E k sp lan ( cm ) NAA (mg/l) 2c 2b 2a
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
yang terendah pada A0 (kontrol) yaitu 2.54 g.  Hal ini dikarenakan konsentrasi NAA belum mencukupi  sehingga  kurang  meningkatkan  pembelahan  sel  untuk  dalam  proses pembengkakan eksplan walaupun terjadi bertambahnya ukuran bobot eksplan pada setiap penambahan konsetrasi NAA. Selain itu ukuran eksplan yang digunakan dalam penelitian ini  relatif  lebih  kecil,  sehingga  perkembangan  sel  menjadi  lebih  lambat.  Perlakuan pemberian BAP menunjukkan perbedaan  yang tidak nyata terhadap bobot eksplan pisang barangan,  tetapi  terdapat  perbedaan  pada  setiap  perlakuan.  Bobot  eksplan  terberat  pada perlakuan B2 (3 mg/l) yaitu 4.17 g dan terendah pada perlakuan B3 (4.5 mg/l) yaitu 2.69 g.
Hal ini dikarenakan konsentrasi BAP belum mencukupi untuk proses pembelahan sel dan pemanjangan sel. Demikian juga dengan interaksinya, kombinasi antara NAA dan BAP tidak berpengaruh  nyata  terhadap  bobot  eksplan  pisang  barangan.  Pierik  (1987)  menyatakan bahwa  pada  umumnya  auksin  meningkatkan  pemanjangan  sel,  pembelahan  sel,  dan pembentukan  akar  adventif.  Auksin  berpengaruh  pula  untuk  menghambat  pembentukan tunas  adventif  dan  tunas  aksilar.  Konsentrasi  auksin  yang  rendah  akan  meningkatkan pembentukan  akar  adventif,  sedangkan  auksin  konsentrasi  tinggi  akan  merangsang pembentukan kalus dan menekan morfogenesis.Pada perlakuan BA tidak berpengaruh nyata terhadap bobot eksplan pisang barangan. Berdasarkan data diketahui bahwa pemberian BA tidak  menunjukkan  pertambahan  bobot  eksplan  karena  pemberian  ZPT  BA  rata-rata menunjukkan angka di bawah kontrol. Tetapi terdapat perbedaan bobot eksplan pada setiap perlakuan. Bobot eksplan terberat pada perlakuan B 1 (1,5 mg/l)  yaitu 6,08 g dan terendah pada perlakuan B 3 (4,5 mg/l) yaitu 5,38 g. Dari data tersebut terlihat bahwa pemberian BA 1,5 mg/l terjadi pertambahan bobot eksplan namun selanjutnya semakin tinggi konsentarsi BA  bobot  eksplan  semakin  turun  malah  dibawah  kontrol.  Pada  perlakuan  IBA  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  bobot  eksplan  pisang  barangan.  Berdasarkan  data  bahwa pemberian IBA meskipun tidak berbeda nyata namun bobot eksplan diakibatkan pemberian IBA  umumnya  di  atas  kontrol  (meningkat).  Hal  ini  menunjukkan  meskipun  media  telah memenuhi kebutuhan tanaman untuk pertumbuhan namun masih ada respon meningkatnya bobot  eksplan,  tetapi  semakin  tinggi  pemberian  IBA  ternyata  bobot  eksplan  menurun sehingga mendekati kontrol. Dari penanaman eksplan pertamakali, bobot eksplan rata rata adalah 0,90 g. Eksplan berkembang menjadi kalus sehingga semakin bertambah besar, ini menandakan  proses  pembentukan  kalus  berlangsung  terhadap  eksplan.  Namun  terdapat perbedaan  bobot  eksplan  pada  setiap  perlakuan,  bobot  eksplan  terberat  diperoleh  pada perlakuan I 2 (1,0 mg/l)  yaitu 5,92 g dan terendah pada perlakuan I 0 (kontrol) yaitu 5,73 g pada umur 12 mst. Pada umumnya interaksi antara BA dan IBA menunjukkan penurunan bobot eksplan hanya kombinasi B 3 I 2 saja  yang terjadi peningkatan bobot eksplan. Hal ini disebabkan  kurang  sinergisnya  antara  ZPT  BA  dan    IBA.  Pertumbuhan  eksplan  juga dipengaruhi  oleh  potongan  jaringan  eksplan  yang  digunakan  serta  ukuran  eksplan  yang digunakan    dimana  eksplan  yang  berukuran  besar  beresiko  terkontaminasi  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  ukuran  yang  lebih  kecil,  tetapi  kemampuan  hidupnya  lebih besar/tumbuh  lebih  cepat.  Sebaliknya  eksplan  yang  berukuran  kecil  kemungkinan terkontaminasinya lebih rendah namun pertumbuhannya lebih lambat.

## IV. KESIMPULAN
Dari percobaan ini dapat diambil beberapa kesimpulan sebagai berikut:
1. Pemberian  ZPT  NAA  hanya  berpengaruh  nyata  terhadap  tinggi  eksplan  pisang barangan.  Sedangkan  pemberian  NAA  dan  BAP  serta  interaksinya  menunjukkan pengaruk tidak nyata pada parameter lainnya seperti persentase hidup, jumlah tunas dan bobot eksplan. Jumlah tunas yang terbanyak diperoleh pada perlakuan B1 (1.5 mg/l) yaitu 1.81 buah
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
2. Perlakuan konsentrasi ZPT BA dan IBA serta interaksi keduanya berpengaruh tidak nyata terhadap jumlah tunas yang tumbuh. Jumlah tunas terbanyak dihasilkan pada pemberian ZPT BA diperoleh pada perlakuan B 1 (1.5 mg/l) yaitu 3,00 tunas, jumlah tunas terbanyak antara kombinasi ZPT BA dan IBA pada perlakuan kombinasi B 3 I 3 (4,5  mg/l+1,5  mg/l)  yaitu  2,67  tunas . Bobot  eksplan  terberat  diperoleh  pada pemberian  ZPT  BA  diperoleh  pada  perlakuan  B 1 (1,5  mg/l)  yaitu  6,08  g,  bobot eksplan terberat antara kombinasi ZPT BA dan IBA pada perlakuan kombinasi B 3 I 2 (4,5 mg/l+1,0 mg/l) yaitu 5,94 g .
3. Untuk  keberhasilan  suatu  kultur  perlu  perhatian  khusus  dalam  penentuan  jenis, jumlah, keseimbangan ZPT, dan komposisi kimia medium, serta ukuran eksplan dan alokasi  waktu  yang  dibutuhkan  dalam  melihat  respon  pertumbuhan  dan perkembangan suatu kultur.dikembangkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abidin,  Z.  1990. Dasar-Dasar  Pengetahuan  Tentang  Zat  Pengatur  Tumbuh. Angkasa, Bandung.
Agustin, Widya. 2005. Pemuliaan Tanaman Pisang dengan Kultur Anther . Dikutip dari  : http// www. Pemuliaan Tanaman Pisang.com. diakses bulan Januari 2016.
Al-Amin, M.D., M.R. Karim, M.R. Amin, S. Rahman, and A.N.M. Mamun. 2009. In vitro micropropagation of banana (Musa spp.) . Bangladesh J. Agril. R. 34(4): 645-659. Ambarwati,  A.D.   1987. Induksi  Kalus  dan  Differensiasi  pada  Kultur  Jaringan Gnetum gnemon L. Fakultas Biologi.  Universitas Gadjah Mada.  Yogyakarta. Anonimus, 2013. Jenis-Jenis dan Fungsi Hormon .http://www.limaratus.com.diakses pada tanggal 26 januari 2014. Medan .
Balai Pengkajian Teknologi Pertanian Sumatera Utara, 2008. Teknologi Penanaman Pisang Barangan  Sistem  Dua  Jalur  (Double  Row). Balai  Pengkajian  Teknologi  Pertanian Sumatera Utara. Medan.
Bhosale,  U.P.,  S.V.  Dubhashi,  N.S.  Mali,  and  H.P.  Rathod.  2011. In  vitro shoot multiplication in different species of banana. Asian J. of Plant Science and Research. 1(3):23-27.
Budi, R.S., Liew Teik Kooi, Christoper K.H. Teo.  1999. Produksi Tunas Majemuk Secara In  Vitro  Pohon  Sentang  (Azadirachta  excelsa Linn).  Jurnal  penelitian  Pertanian ; Volume 18, No 2, Desember 1999.
Cahyono,  B. 1995. Pisang, Budidaya dan Analisis UsahaTani . Kanisius.Yogjakarta. Dartius. 2002. Fisiologi Tumbuhan . Fakulatas Pertanian UISU, Medan.
Edhi, S.  2013. Cara Mudah Memahami dan Menguasai Kultur Jaringan Skala Rumah Tangga. IPB Press. Bogor. George, E.F.  and P.D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture: Handbook and Directory of Commercial Laboratories. Great Britain by Eastern Press, Reading, Berks.
Gomez, A. K And A.A. Gomez. 1996. Prosedur Statistik Untuk Penelitian Pertanian . UI- Press, Jakarta.
Gunawan,  L.W.  1998. Regenerasi  pucuk  dan  embrio  somatic  dalam  kultur  aseptik  Jati (Tectona grandis L.F.). Hayati, 5 (2): 44-49. Heddy, S. 1996. Hormon Tumbuhan . Jakarta. PT Grafindo Persada.
Herwin,
Aditya. 2013. Budidaya Tanaman Pisang . Dikutip Dari:
(wordpress.com/2014/01/27bab-pendahuluan-latar-belakang-piasang).
Setia Budi R : Uji Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Eksplan Pisang Barangan ( Musa paradisiaca L.) Pada Media MS Secara In Vitro .
Karjadi,  AK,  dan  A.  Buchory.  2007. Pengaruh  NAA  dan  BAP  Terhadap  Pertumbuhan Jaringan Meristem Bawang Putih Pada Media B5. Balai Penelitian Tanaman Sayuran. Lembang, Bandung.
Marlin,  2010. Regenerasi  In  Vitro  Planlet  Pisang  Ambon  Curup  Bebas  Penyakit  Layu Fusarium. Prosiding  pada  Seminar  Nasional  dan  Rapat  Tahunan  Dekan  Bidang Pertanian BKS Barat.
Murashige, T. Dan F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid growth and bio assay with tobacco tissue cultures . Physiologia Plantarum 15. Pierik, R.L.M. 1987. In Vitro Culture of Higher Plants . The Netherlands: Kluwer Academic Publishers, Dordrecht.
Purwanto, D.  1991. Pengaruh ukuran bahan tanam terhadap keberhasilan perbanyakan beberapa  varietas  pisang  (Musa  paradisiaca L.)  dengan  Metode  Kultur Jaringan. Skripsi. Fakultas Pertanian UNIBRAW. Malang. Purnomo, U. 2004. Pengaruh BAP dan Ekstrak Pisang Raja Terhadap pertumbuhan Pisang barangan Merah Secara In vitro. Skripsi. FP.UMSU, Medan. Radian.   1992. Penggunaan  Air  Kelapa  Dalam  Media  Kultur  Jaringan  Pisang  (Musa paradisiaca L). Program Pasca Sarjana.  UGM.  Program KDK UNBRAW. Robbiani, D., 2010. Pengaruh Kombinasi Naphthalene Acetic Acid (NAA) dan Kinetin pada Kultur  in  vitro  Eksplan  Daun  Tembakau  (Nicotiana  tabacum L.  var.  Prancak  95). Institut Teknologi Sepuluh Nopember Surabaya.
Setiyoko,  B.   1995. Kultur  Meristem  Tanaman  Pisang  (Musa  paradisiaca L.)  Kultivar Ambon  untuk  Memperoleh  Tanaman  yang  Bebas  Cucumber  Mosaic  Virus. Skripsi. Fakultas Biologi UGM.  Yogyakarta.
Sitohang, Nurdin. 2004. Kultur Meristem Pisang Barangan Pada Media MS. Skripsi . Unika Thomas, Medan.
Sriyanti, D.P. dan A.Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan . Yayasan Kansius.Yogyakarta.
Supriyadi, L. dan S. Satuhu. 2002. Pisang. Penebar Swadaya Jakarta.
Tisserat, B., 1979. Propagation of Date Palm (Phoenix dactylifera L.) in vitro . J. Exp. Bot. 30:1275- 1283.
Wattimena, G.A, 1987. Multipikasi Tanaman Hortikultura secara Kultur Jaringan. Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Wetter, L.R. dan F. Constabel.  1991. Metode Kultur Jaringan Tanaman .  ITB.  Bandung. Widya,
Y.    2008. Pedoman  Bertanam  Buah  Pisang . Tim Nima Karya Tani. Bandung
Zebua,  D.,  2015. Induksi  Tunas  Pisang  Barangan  (Musa  Acuminata L.) Asal  Nias  Utara Melalui  Kultur  Jaringan  dengan  Pemberian  2,4-D  dan  Kinetin. Tesis.  Program Pascasarjana.  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam.  Universitas Sumatera Utara.
Zullkarnain.  2009. Solusi  Perbanyakan  Tanaman  Budidaya,  Kultur  Jaringan  Tanaman . Bumi Aksara. Jakarta.