Karakteristik dan Stabilitas Fisik Krim Amniotic Membrane Stem Cell Metabolite Product dengan Penambahan SPACE Peptide
Nisa Qurrota A’yun 1 , Tristiana Erawati 1 *, Cita Rosita Sigit Prakoeswo 2,3 , Widji Soeratri 1 1 Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
2 Departemen Kesehatan Kulit dan Kelamin, Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
3 Departemen Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin, RSUD Dr. Soetomo, Surabaya, Indonesia
*Corresponding author: era_ffua@yahoo.co.id
Submitted: 17 Januari 2020 Accepted: 28 Januari 2020 Published: 25 Juni 2020

## Abstract
Background : The use of growth factors in cosmetics is a promising effort in overcoming aging, and becomes a challenge  for  its  use.  Physical  characteristics  and  stability  are  important  parameters  in  the  cosmetic preparations  which  contain  growth  factors  because  they  can  directly  influence  the  effectiveness  of  antiaging efficacy. Objective : To evaluate the effect of the addition of SPACE peptide at different weight ratio to Amniotic Membrane  Stem  Cell  Metabolite  Product  (AMSC-MP)  (F1  =  1:0;  F2  =  1:1;    F3  =  1:2;  F4  =  1:3)  on  the characteristics  and  physical  stability  of  the  antiaging  cream. Methods :  The  antiaging  cream  were  firstly determined  for  organoleptic,  pH,  and  spredibility.  Physical  stability  was  evaluates  for  the  antiaging  cream during  the  preparation  for  21  days  of  storage. Results :  Cream  preparations  which  contains  AMSC-MP  with SPACE peptide has characteristics; pH range of 5.8 - 6.5 statistical test results showed a significant difference, the  spread  of  the  preparation  between  5.6  -  7.2  cm  test  results  with  the  Kruskal  Wallis  method  showed  no significant differences, a slight fishy odor, milky white color and soft texture. The results of the stability test on the pH value and the spreadability showed that the cream formula with the addition of various concentrations of SPACE  pepide  was  stable  for  21  days  storage. Conclusion :  The  increased  concentration  of  SPACE  peptide increases  the  preparation  pH  but  does  not  affect  the  spread,  odor,  color  and  texture  of  the  preparation.  All AMSC-MP cream preparation formulas with SPACE peptide were stable for 21 days of storage.
Keywords : AMSC-MP, cream, physical characteristic, physical stability, SPACE peptide

## Abstrak
Pendahuluan :  Penggunaan growth  factor dalam  kosmetika  adalah  upaya  yang  menjanjikan  dalam  mengatasi masalah penuaan,  namun  juga  menjadi  sebuah tantangan tersendiri untuk pengaplikasiannya.  Karakteristik dan stabilitas  fisik  merupakan  parameter  yang  penting  dalam  formulasi  sediaan,  utamanya  pada  sediaan  kosmetika yang mengandung growth factor karena dapat berpengaruh langsung terhadap efektifitas kandungan zat aktifnya. Tujuan : Mengevaluasi pengaruh perbandingan Amniotic Membran Stem Cell Metabolite Product (AMSC-MP) dan SPACE  peptide (F1  =  1:0;  F2  =  1:1;  F3  =  1:2;  F4  =  1:3)  terhadap  karakteristik  dan  stabilitas  fisik  krim antiaging  AMSC-MP  yang  mengandung growth  factor . Metode :  Uji  karakteristik  sediaan  dievaluasi  dengan parameter  organoleptis,  pH  dan  daya  sebar.  Uji  stabilitas  fisik  dilakukan  dengan  mengevaluasi  karakteristik sediaan selama 21 hari penyimpanan. Hasil : Sediaan krim yang mengandung AMSC-MP dengan SPACE peptide memiliki  karakteristik;  rentang  pH  5,8  -  6,5  hasil  uji  statistik  dengan  metoda  ANOVA  satu  arah  menunjukan perbedaan  bermakna,  daya  sebar  sediaan  antara  5,6  -  7,2  cm  hasil  uji  dengan  metoda  Kruskal  Wallis menunjukkan tidak ada perbedaan yang bermakna, bau sedikit amis, warna putih susu dan tekstur lembut. Hasil uji stabilitas terhadap nilai pH dan daya sebar menunjukkan bahwa formula krim dengan penambahan berbagai konsentrasi SPACE  peptide stabil  selama  penyimpanan  21  hari. Kesimpulan :  Peningkatan  konsentrasi SPACE
peptide meningkatkan  pH  sediaaan  namun  tidak  mempengaruhi  daya  sebar,  bau,  warna  dan  tektur  sediaan. Semua formula sediaan krim AMSC-MP dengan SPACE peptide stabil selama 21 hari penyimpanan.
Kata kunci : AMSC-MP, karakteristik fisik, krim, SPACE peptide , stabilitas fisik

## PENDAHULUAN
Penuaan  adalah  sebuah  proses  biologi  kompleks yang  merupakan  konsekuensi  dari  pengaruh  faktor intrinsik  dan  dapat  dipercepat  oleh  faktor  ekstrinsik. Paparan  sinar  UV  merupakan  faktor  ekstrinsik  utama penyebab terjadinya penuaan (Shin dkk . , 2019). Gejala klinis  yang  terjadi  pada  penuaan  adalah  timbulnya kerutan-kerutan  ( wrinkle ),  perubahan  warna  kulit, perubahan tekstur serta berkurangnya elastisitas. Terapi yang  bisa  digunakan  untuk  mengatasi  permasalahan tersebut  salah  satunya  adalah  penggunaan  kosmetika antiaging  yang,  mengandung  metabolit  stem  cell  (Lee dkk . , 2014).
Amniotic  Membran Stem  Cell  Metabolit  Product (AMSC-MP)  adalah  produk  metabolit  dari  stem  cell yang  diambil  dari  membran  amnion  (Prakoeswo  dkk . , 2018).  Produk  metabolit  mempunyai  keuntungan mengandung  komposisi growth  factor yang  sama dengan stem cell -nya, serta lebih  mudah dibuat karena tidak  memerlukan  bahan  pembawa  tertentu  untuk mempertahankan stem  cell tetap  hidup  (Seo  dkk . , 2013).  Atas  dasar  potensi  AMSC-MP  tersebut  pada penelitian  ini  memformulasikan  AMSC-MP  menjadi kosmetika antiaging dalam bentuk sediaan krim.
Untuk  memformulasikan  AMSC-MP  menjadi bentuk  sediaan  krim  mempunyai  permasalahan  karena ukuran  molekul  rata-rata growth  factor lebih  dari 20  kDa,  sementara  ukuran  molekul  yang  dapat terpenetrasi  ke  dalam  kulit  maksimal  adalah  500  Da (Bos  &  Meinardi,  2000).  Sehingga  perlu  penambahan enhancer yang  dapat  memfasilitasi  AMSC-MP melewati  stratum  korneum  agar  dapat  menghasilkan efek  yang  diharapkan.  Penelitian  terbaru  menemukan sebuah  alternatif  untuk  membantu  penetrasi  suatu makromolekul  ke  dalam  stratum  corneum  secara  non invasif tanpa menimbulkan efek iritasi pada kulit yaitu dengan menggunakan skin penetrating peptide enhancer (SPPs)  salah  satu  contohnya  adalah SPACE peptide .  Pada  penelitian in  vitro dan in  vivo membuktikan bahwa ketika SPACE peptide dikonjugasikan  secara  langsung  dengan  siRNA  yang mempunyai  ukuran molekul > 300 kDa, meningkatkan absorbsi  ke  dalam  kulit  dengan  cara  berinteraksi dengan  struktur  sekunder  protein  kulit  (Hsu  &
Mitragotri, 2011). Sementara mekanisme kerja SPACE peptide yang  diteliti  oleh  Kumar  dkk.  (2015)  terbukti dalam bentuk  tunggal mempunyai  kemampuan meningkatkan  afinitas  terhadap  keratin  dan  korneosit melalui  jalur  transeluler  sehingga  memfasilitasi makromolekul  menembus  stratum  korneum  ke  dalam epidermis  dan  dermis. SPACE  peptide diketahui memiliki  toksisitas  yang  paling  redah  dibandingkan dengan  peptide  yang  lain  (Kumar  dkk . ,  2015). Berdasarkan  beberapa  penelitian  tersebut,  menjadi dasar  pemilihan SPACE  peptide sebagai enhancer untuk mefasilitasi AMSC-MP masuk ke dalam stratum korneum.  Penelitian  ini  untuk  mengevaluasi  pengaruh penambahan  konsentrasi SPACE  peptide terhadap karakteristik dan stabilitas fisik krim antiaging AMSC- MP.  Perbandingan  konsentrasi  AMSC-MP: SPACE peptide pada Formula 1(F1), Formula 2 (F2), Formula 3  (F3)  dan  Formula  4  (F4)  berturut  turut  adalah  1:0; 1:1; 1:2; 1:3.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan-bahan  yang digunakan dalam penelitian  ini memiliki  derajat  farmasetis  kecuali  dinyatakan  lain; AMSC-MP  (dikultur  di  Bank  Jaringan  dan  Pusat Biomaterial  RSUD  Dr.  Soetomo), SPACE  Peptide (diimpor  dari  Medchem  Express),  asam  strearat,  setil alkohol,  liquid  paraffin,  gliserin,  propilenglikol, fenoxyethanol, aquadest,  dan air bebas CO 2 .

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  pH  meter  (merk SCHOTT CG 842), alat uji daya sebar (Lab.Farmasetika  Universitas  Airlangga), stirrer , cawan  porselen,  alat-alat  gelas, waterbath dan  pot krim.

## Metode

## Pembuatan formula krim
Komponen  penyusun  formula  krim  dapat  dilihat pada Tabel 1. Semua bahan ditimbang terlebih dahulu. Fase  Minyak  (asam  stearat,  setil  alkohol, paraffin liquid ), dipanaskan di atas waterbath hingga temperatur  70 o C  (campuran  pertama).  Fase  air (gliserin, propilenglikol, fenoxietanol) dicampur menjadi  satu  di  dalam  gelas  beker  dan  dipanaskan
sampai  suhu  kurang  lebih  75 o C  (campuran  kedua). Campuran  kedua  (fase  air)  sedikit  demi  sedikit dimasukkan ke dalam campuran pertama (fase minyak) kemudiaan  dihomogenkan  dengan stirrer dengan kecepatan  250  rpm  selama  20  menit.  Selanjutnya campuran  diturunkan,  diaduk  sampai  terbentuk  masa
krim  yang  baik. Setelah kurang  lebih 30  menit sampai suhu dibawah 40 o C, dimasukkan campuran AMSC-MP dengan SPACE  Peptide pada  perbanding  masing- masing  kelompok  F1(1:0),  F2(1:1),  F3(1:2)  dan F4(1:3), kemudian diaduk hingga homogen.
Tabel 1. Formula sediaan krim freeze dried AMSC-MP dengan variasi konsentrasi SPACE peptide Fungsi Bahan Jumlah dalam % F1 F2 F3 F4 Bahan aktif AMSC-MP 0,008 0,008 0,008 0,008 Enhancher SPACE peptide 0 0,008 0,016 0,024 Fase minyak Asam stearat 10 10 10 10 Setil alkohol 6 6 6 6 Liquid paraffin 6,6 6,6 6,6 6,6 Fase air Glyserin 5 5 5 5 Propilen glycol 30 30 30 30 Phenoxyethanol 0,1 0,1 0,1 0,1 Pelarut Aquadest Ad 100
Penentuan karakteristik dan stabilitas fisik sediaan krim antiaging AMSC-MP
Uji  karakteristik  sediaan  krim antiaging AMSC- MP  meliputi  pengamatan  organoleptis,  pemeriksaan pH  dan  pengujian  daya  sebar  yang  dilakukan  setelah pembuatan sediaan. Sedangkan pada uji  stabilitas fisik dilakukan  terhadap  sediaan  selama  penyimpanan  21 hari  meliputi pengujian  pH dan daya sebar pada suhu ruang  30  ±  0,5 o C  dan  RH  70  ±  2%.  Kondisi penyimpanan terhindar dari sinar matahari.

## Uji organoleptis
Pengujian  organoleptis  meliputi  homogenitas, tekstur, warna, dan bau dari krim AMSC-MP.

## Pengukuran pH sediaan
Pengukuran  karakteristik  pH  sediaan  dilakukan dengan  cara  mengencerkan  sampel  dengan  air  bebas CO 2 menggunakan  perbandingan  1:9.  Sampel  yang telah  diencerkan  diuukur  pHnya  menggunakan  pH meter digital merk SCHOTT CG 842.

## Uji daya sebar sediaan
Pengujian  daya  sebar  dilakukan  dengan  cara menimbang  0,5  gram  sampel  kemudian  diletakkan diantara 2 plat kaca yang salah satunya berskala. Krim dibiarkan  menyebar  selama  1  menit,  kemudian  diukur diameternya.  Selanjutnya  dilakukan  penambahan beban  yang  semakin  meningkat  dengan  kelipatan 5  gram.  Setiap  1  menit  setelah  penambahan  beban, dicatat  diameternya,  sampai  didapatkan  diameter  yang konstan sehingga cukup untuk  mengevaluasi pengaruh beban terhadap daya sebarnya (Metasari, 2006).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil pemeriksaan organoleptis
AMSC-MP  dalam  bentuk freeze  dried adalah serbuk berwarna putih tulang dengan bau sedikit amis. Sedangkan SPACE peptide berbentuk serbuk berwarna putih  dan  tidak  berbau.  Dari  uji  organoleptis    krim, masing-masing  formula  memberikan  hasil  yang  relatif sama  yaitu  warna  putih  susu,  bau  khas  sedikit  amis, konsistensi semi solid dan bertekstur lembut.

## Hasil pemeriksaan karakteristik pH
Hasil  pemeriksaan  pH  sediaan  dapat  dilihat  pada Tabel  2  dan  Gambar  1.  Nilai  pH  rata-rata  semua formula masuk ke dalam rentang pH normal kulit yaitu 4,5  -  6,8  (Lambers  dkk.,  2006).  Peningkatan konsentrasi SPACE peptide diikuti dengan peningkatan nilai  pH  sediaan.  Selanjutnya  dilakukan  uji  normalitas terhadap data pH masing-masing formula. Berdasarkan uji normalitas diketahui bahwa data bersifat parametrik, sehingga dilanjutkan menggunakan uji One Way ANOVA.  Hasil  uji One  Way ANOVA menunjukkan  terdapat  perbedaan  bermakna  pada  nilai pH  antar  formula  (p  <  0,05).  Untuk  mengetahui kelompok  mana  yang  berbeda  bermakna dilakukan uji Post  Hoc  Tuke .  Dari  hasil  pengujian Post  Hoc  Tukey , diketahui  bahwa  formula  yang  berbeda  bermakna adalah  F4  dengan  semua  formula  lain.  Sedangkan  F3 tidak  berbeda  bermakna  dengan  F2  namun  berbeda bermakna  dengan  F1,  sementara  F1  tidak  berbeda bermakna  dengan  F2.  Sehingga  disimpulkan  bahwa penambahan konsentrasi SPACE peptide meningkatkan pH sediaan.
Tabel 2 . Hasil pemeriksaan karakteristik nilai pH formula 1 (F1), formula 2 (F2), formula 3 (F3) dan formula 4 (F4) Formula Replikasi pH Rata-rata ± SD I II III F1 5,47 5,58 5,70 5,58 ± 0,115 F2 5,66 5,82 5,86 5,78 ± 0.106 F3 5,86 5,96 6,15 5,99 ± 0.138 F4 6,77 6,70 6,69 6,72 ± 0,435
Gambar 1 . Grafik profil karakteristik nilai pH formula 1 (F1), formula 2 (F2), formula 3 (F3) dan formula 4 (F4)
SPACE  peptide mempengaruhi  nilai  pH  sediaan karena  berdasarkan  hasil  pengujian  mempunyai  nilai pH  7,2,  akibatnya  semakin  besar  konsentrasinya menyebabkan terjadinya peningkatan nilai pH  sediaan. Akan  tetapi  semua  sediaan  masih  memenuhi  rentang pH  normal  kulit  (4,5  -  6,8)  (Lambers  dkk . ,  2006) sehingga meminimalkan risiko iritasi pada penggunaan topikal.

## Hasil pemeriksaan karakteristik daya sebar
Dari hasil pemeriksaan daya sebar pengaruh beban terhadap  daya  sebar  masing-masing  Formula  pada beban konstan 25 gram dapat dilihat pada Tabel 3 dan Gambar 2, dihasilkan daya sebar F1 < F2 < F3 < F4.
Tabel 3. Hasil pengukuran daya sebar formula 1 (F1), formula 2 (F2), formula 3 (F3), dan formula 4 (F4) Formula Beban (gram) Diameter daya sebar (cm) Diameter rata-rata (cm) I II III F1 - 5,40 5,50 5,40 5,43 ± 0,06 5 5,50 5,70 5,60 5,60 ± 0,10 10 5,60 5,80 5,80 5,73 ± 0,11 15 5,80 5,90 5,90 5,87 ± 0,06 20 5,80 5,90 5,90 5,87 ± 0,06 25 5,80 5,90 5,90 5,87 ± 0,06 F2 - 5,40 5,60 5,50 5,50 ± 0,10 5 5,50 5,70 5,70 5,60 ± 0,11 10 5,60 5,80 5,80 5,73 ± 0,11 15 5,70 5,90 5,90 5,83 ± 0,11 20 5,90 5,90 5,90 5,83 ± 0,11 25 5,90 5,90 5,90 5,83 ± 0,11 F3 - 6,00 6,00 6,10 6,03 ± 0,06 5 6,10 6,10 6,20 6,13 ± 0,06 10 6,20 6,20 6,20 6,20 ± 0,00 15 6,30 6,40 6,40 6,37 ± 0,06 20 6,30 6,40 6,40 6,37 ± 0,06 25 6,30 6,40 6,40 6,37 ± 0,06 F4 - 6,30 6,30 6,30 6,30 ± 0,00 5 6,40 6,50 6,50 6,47 ± 0,06 10 6,50 6,60 6,70 6,60 ± 0,10 15 6,70 6,70 6,80 6,73 ± 0,06 20 6,70 6,70 6,80 6,73 ± 0,06 25 6,70 6,70 6,80 6,73 ± 0,06
4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5 F1 F2 F3 F4 Ni la i pH Formula
Gambar 2 . Grafik profil karakteristik daya sebar dengan pengaruh penambahan beban pada formula 1 (F1), formula 2 (F2), formula 3 (F3), dan formula 4 (F4)
Selanjutnya dilakukan uji normalitas data, menunjukkan  data  tidak  terdistribusi  normal,  sehingga dilanjutkan  dengan  uji  statistika  Kruskal  Wallis. Berdasarkan uji statistik Kruskal Wallis diperoleh nilai p  >  0,05  artinya  tidak  ada  perbedaan  bermakna  daya sebar pada data yang berpasangan.
Berdasarkan data yang diperoleh tersebut menunjukkan  penambahan SPACE  peptide tidak memberikan  peningkatan  signifikan  terhadap  profil daya  sebar.  Daya  sebar  menjadi  salah  satu  faktor penting  dalam  parameter  acceptabilitas  sediaan kosmetik.

## Hasil evaluasi stabilitas pH
Hasil  uji  stabilitas  dengan  parameter  pH  dapat dilihat  pada  Tabel  4  dan  Gambar  3.  Hasil  analisis
statistik masing-masing Formula menggunakan metode Paired T-test menunjukkan bahwa semua formula tidak menunjukkan  perbedaan  nilai  pH  bermakna  selama proses  penyimpanan  21  hari.  Sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  Formula 1, Formula 2, Formula 3, dan Formula 4 stabil secara fisika pada nilai pH.  Nilai pH  merupakan  salah  satu  faktor  yang  penting diperhatikan  terutama  pada  sampel  yang  mengandung growth  factor ,  selain  harus  dijaga  tetap  sesuai  dengan pH  normal  kulit  agar  tidak  menimbulkan  kekeringan dan iritasi, pH juga dapat mempengaruhi stabilitas dari growth  factor. Growth  factor yang  merupakan  salah satu  protein  ini  dapat  terdenaturasi  dengan  perubahan pH yang ekstrim (Kett dkk., 2004).
Tabel 4 . Hasil pengukuran pH formula 1(F1), formula 2(F2), formula 3(F3), dan formula 4(F4) selama penyimpanan
pada hari ke-0, ke-7, ke-14 dan ke-21 Formula Replikasi Hari ke-0 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 1 5,48 54,3 5,43 5,44 2 5,59 5,44 5,44 5,43 3 5,70 5,73 5,73 5,74 Rata-rata ± SD 5,59 ± 0,115 5,53 ± 0,171 5,532 ± 0,173 5,527 ± 0,172 F2 1 5,66 5,68 5,88 5,79 2 5,82 5,82 5,85 5,88 3 5,86 5,79 5,87 5,86 Rata-rata ± SD 5,78 ± 0,106 5.76 ± 0,075 5.87 ± 0,014 5,84 ± 0,051 F3 1 5,87 5,90 6,13 6,14 2 5,97 5,97 5,99 6,33 3 6,15 5,98 6,20 6,22 Rata-rata ± SD 5,99 ± 0,138 5,95 ± 0,014 6,11 ± 0,109 6,23 ± 0,095 F4 1 6,77 6,86 6,89 7,07 2 6,70 6,76 6,76 7,50 3 6,69 6,92 6,86 6,94 Rata-rata ± SD 6,71 ± 0,043 6,84 ± 0,081 6,836 ± 0,069 7,17 ± 0,293
5,00 5,50 6,00 6,50 7,00 0 5 10 15 20 25 30 d ia m e te r p e n ye b ar an Beban (gram) F1 F2 F3 F3
Gambar 3 . Grafik profil pengamatan stabilitas pH selama waktu penyimpanan 21 hari

## Hasil evaluasi stabilitas daya sebar
Hasil pengujian  stabilitas daya sebar krim diamati setiap minggu selama selama 21 hari dapat dilihat pada Tabel  5  dan  Gambar  4.  Semua  krim  mengalami peningkatan daya sebar selama penyimpanan. Berdasarkan  grafik  pada  Gambar  4  antara  lama penyimpanan dan luas daya sebar dapat diamati bahwa F1  memiliki  slope  paling  kecil  dan  F4  memiliki  slope
yang  paling  besar,  artinya  F1  memberikan  kestabilan daya  sebar  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  F4. Sedangkan  berdasarkan  metode  statistik  Paired  T-test menunjukkan nilai p > 0,05 berarti tidak ada perbedaan bermakna  pada  nilai  daya  sebar  selama  penyimpanan 21  hari.  Sehingga  disimpulkan  bahwa  semua  formula stabil secara fisika pada nilai daya sebar.
Tabel 5. Hasil uji stabilitas daya sebar formula 1 (F1), formula 2(F2), formula 3(F3) dan formula 4 (F4) selama
penyimpanan 21 hari Formula Rata-rata diameter daya sebar (cm) ± SD Hari ke-0 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 5,90 ± 0,00 6,00 ± 0,10 6,13 ± 0,06 6,20 ± 0,00 F2 5.87 ± 0,06 6,00 ± 0,10 6,20 ± 0,00 6,23 ± 0,06 F3 6,37 ± 0,06 6,50 ± 0,00 6,83 ± 0,06 6,90 ± 0,00 F4 6,73 ± 0,06 7,03 ± 0,15 7,17 ± 0,12 7,30 ± 0,00
Gambar 4 . Grafik Pengukuran stabilitas daya sebar pada penyimpanan selama 21 Hari Persamaan regresi linier:
F1:  y  =  0,1033x  +  5,80;  R  =  0,9928;  F2:  y  =  0,13x  +  5,75;  R  =  0,9705;  F3:  y  =  0,1933x  + 6,1667; R = 0,9693; F4 : y = 0,1833x + 6,6; R = 0,9761
4 5 6 7 8 0 7 14 21 pH Waktu pengamatan (hari) F1 F2 F3 F4
5 5,5 6 6,5 7 7,5 0 7 14 21 d ia m e te r d ay a seba r (cm ) lama penyimpanan (hari) F1 F2 F3 F4 Lama penyimpanan (hari) D ia m et er da ya se ba r (cm )

## KESIMPULAN
Penambahan  variasi  konsentrasi SPACE  peptide terhadap  masing-masing  formula  krim  antiaging AMSC-MP  tidak  memberikan  perbedeaan  secara organoleptis.  Pada  pemeriksaan  pH, SPACE  peptide meningkatkan  pH  sediaan,  namun  tidak  berpengaruh terhadap  daya  sebar.  Sementara  pada  pengujian stabilitas  fisik  menunjukkan  bahwa  semua  Formula stabil  selama penyimpanan 21  hari  meliputi parameter stabilitas pH dan daya sebar.

## DAFTAR PUSTAKA
Bos, J. D.  &  Meinardi,  M. M. H.  M. (2000). The 500
Dalton Rule for the Skin Penetration of Chemical Compounds and Drugs.
Experimental
Dermatology; 9; 165–169.
Hsu,  T.  &  Mitragotri,  S.  (2011).  Delivery  of  siRNA and  Other  Macromolecules  Into  Skin  and  Cells Using  a  Peptide  Enhancer. Proceedings  of  the National  Academy  of  Sciences  of  the  United States of America; 108; 15816–15821.
Kett,  V.,  McMahon,  D.  &  Ward,  K.  (2004).  Freeze- Drying  of  Protein  Pharmaceuticals  -  the Application  of  Thermal  Analysis. Cryo-Letters;
25; 389–404.
Kumar,  S.,  Zakrewsky,  M.,  Chen,  M.,  Menegatti,  S., Muraski,  J.  A.  &  Mitragotri,  S.  (2015).  Peptides as  Skin  Penetration  Enhancers:  Mechanisms  of Action. Journal of Controlled Release; 199; 168–
178.
Lambers,  H.,  Piessens,  S.,  Bloem,  A.,  Pronk,  H.  & Finkel,  P. (2006). Natural Skin Surface pH  is on Average  Below  5,  Which  is  Beneficial  for  Its Resident Flora. International Journal of Cosmetic Science; 28; 359–370.
Lee, H. J., Kang, S., Lee, E. G. &  Sung, J. H. (2014). Efficacy of Microneedling Plus Human Stem Cell Conditioned  Medium  for  Skin  Rejuvenation:  A Randomized,  Controlled,  Blinded  Split-face Study. Annals of Dermatology; 26; 584–591. Prakoeswo,  C.  R.  S.,  Pratiwi,  F.  D.,  Herwanto,  N., Citrashanty,  I.,  Indramaya,  D.  M.,  Murtiastutik, D.,  Sukanto,  H.  &  Rantam,  F.  A.  (2018).  The Effects  of  Amniotic  Membrane  Stem  Cell- Conditioned  Medium  on  Photoaging. Journal  of Dermatological Treatment; 30; 478-482. Seo,  K.  Y.,  Lee,  S.  E.,  Hyu,  K.  D.  &  Yoon,  M.  S. (2013).  Skin  Rejuvenation  by  Microneedle Fractional  Radiofrequency  and  a  Human  Stem Cell  Conditioned  Medium  in  Asian  Skin:  A Randomized  Controlled  Investigator  Blinded Split-face  Study. Journal  of  Cosmetic  and  Laser Therapy; 15; 25–33.
Shin, J. W., Kwon, S. H., Choi, J. Y., Na, J. I., Huh, C. H.,  Choi,  H.  R.,  Park,  K.  C.  (2019).  Molecular Mechanisms  of  Dermal  Aging  and  Antiaging Approaches. International  Journal  of  Molecular Sciences; 20; 2126.