## UJI AKTIVITAS  SENYAWA ANTI JAMUR EKTRAK DAUN SIRIH
MERAH ( Piper crocatum ) TERHADAP JAMUR Candida albicans PENYEBAB PENYAKIT KEPUTIHAN
Rokhana 1* , R.A Nadia 2 1-2 Akademi Farmasi 17 Agustus 1945 Semarang Email: annakhana4@gmail.com

## ABSTRAK
Daun  sirih  merah (Piper  Crocatum) merupakan  salah  satu  herbal  medicine  yang  mengandung senyawa alkaloid, flavonoid,  dan minyak atsiri. Senyawa tersebut memiliki potensi sebagai antifungi yang  bisa  digunakan  untuk  mengatasi  kandidiasis  seperti  keputihan  yang  disebabkan  oleh Candida albicans .Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antijamur  ekstrak   etanol  daun  sirih merah  ( Piper  crocatum )  terhadap Candida  albicans .  Metode  penelitian  ini  bersifat  eksperimental laboratorium  dengan  metode post  test  control  group  design  only .  Uji  aktivitas  antifungi  ektrak  sirih merah  terhadap Candida  albicans menggunakan  pengujian  metode  difusi  cakram  yaitu  dengan mengoleskan  kultur  fungi   pada  permukaan  medium  Muller  Hinton  agar  menggunakan  lidi  kapas steril. Disk cakram yang telah diberi ektrak sirih merah dengan variasi konsentrasi 20% v/v, 40% v/v, 80%v/v, 100%v/v  sebagai  kontrol  negatif  adalah  air  garam  fisiolgis  dan  ketokonazol  sebagai  kontro positif. Media isolat diinkubasi pada suhu 25 0 C selama 3 hari kemudian diukur diameter zona jernih yang  terbentuk.  Data  penelitian  di  analisis  secara  statistik  menggunakan  uji  Mann  Whitney.  Hasil didapatkan  Ektrak  etanol  daun  sirih  merah  mempunyai  aktivitas  antifungi   terhadap Candidia albicans pada konsentrasi 20%, (12 mm), 40% (12,75 mm), 60% (13,38 mm), 80%  (14,5 mm) 100% (15,4mm).  Pada  konsentrasi  100%   mempunyai  daya  bunuh  antifungi  lebih  besar  dan  hampir  sama dengan  ketokonazol.  Hasil  analisis  statistik  menunjukkan  tidak  terdapat  perbedaan  diameter  zona jernih pada konsentrasi 80% dan 100%. Konsentrasi ekstrak etanol daun sirih merah ( Piper crocatum ) yang paling efektif  menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans pada konsentrasi 80%.
Kata Kunci : Antijamur, Candida albicans, daun sirih merah (Piper Crocatum)

## ABSTRACT
Red betel leaf (Piper Crocatum) is a herbal medicine that contains alkaloids, flavonoids and essential oils.  This  compound  has  potential  as  an  antifungal  which  can  be  used  to  treat  candidiasis  such  as vaginal  discharge  caused  by  Candida  albicans.  This  research  aims  to  determine  the  antifungal activity  of  ethanol  extract  of  red  betel  leaves  (Piper  crocatum)  against  Candida  albicans.  This research  method  is  laboratory  experimental  with  a  post  test  control  group design  only  method.  The antifungal  activity  of  red  betel  extract  against  Candida  albicans  was  tested  using  the  disc  diffusion method,  namely  by  applying  fungal  culture  to  the  surface  of  Muller  Hinton  agar  medium  using  a sterile  cotton  swab.  Discs  that had been given  red betel  extract  with  varying  concentrations  of  20% v/v, 40% v/v, 80% v/v, 100% v/v as a negative control were physiological salt water and ketoconazole as a positive control. The isolate media was incubated at 250C for 3 days and then the diameter of the clear  zone  formed  was  measured.  Research data  was analyzed  statistically  using  the  Mann Whitney test.  The  results  obtained  that  the  ethanol  extract  of  red  betel  leaves  had antifungal  activity  against Candidia albicans at concentrations of 20%, (12 mm), 40% (12.75 mm), 60% (13.38 mm), 80% (14.5 mm)  100  %  (15.4mm).  At  a  concentration  of  100%,  it  has  greater  antifungal  killing  power  and  is

## Cendekia Journal of Pharmacy
ITEKES Cendekia Utama Kudus P-ISSN 2559 – 2163           E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 8, No. 1, Januari 2024 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id
almost the same as ketoconazole. The results of statistical analysis show that there is no difference in the diameter of the clear zone at concentrations of 80% and 100%. The most effective concentration of red betel leaf (Piper crocatum) ethanol extract inhibited the growth of the Candida albicans fungus at a concentration of 80%.
Keywords: Antifungal, Candida albicans, red betel leaf (Piper Crocatum)

## LATAR BELAKANG
Kandidiasis  vulvovaginal merupakan  Suatu  infeksi  jamur  vagina  dan  jaringan  pada pembukaan  vagina  ( vulva )  yang  disebabkan  oleh  jamur Candida  albicans .  Infeksi  jamur tersebut dapat  ditandai  dengan  rasa  gatal,  sakit  dan  pembengkakan  atau  kemerahan  pada vagina.  Infeksi Candida  albicans dapat  diterapi  dengan  penggunaan  obat  atau  sediaan  yang funsinya sebagai antifungi. Namun penggunaan obat obatan antifungi yang terbuat dari bahan kimia  seperti  ketokonazol,  nistatin,  amfeterasin  sering  menimbulkan  efek  samping  dan hanganya mahal, sehingga diperlukan penggalian obat alternatif dari tanaman obat tradisional yang secara empiris sudah sering digunakan oleh masyarakat (Astuti, 2012).
Salah  satunya  tanaman  obat  tradisional  yang  sering  digunaka  sebagai  antiseptik alami  adalah  tanaman  sirih  merah  ( Piper  crocatum ).  Tanaman  ini  mengandung  alkaloid, flavonoid,  tanin,  dan  minyak  atsiri.  Minyak  atsiri  daun  sirih  mengandung  bethel  penol, sequisterpen  dan  carvicol  yang  bersifat  antibakteri  dan  antijamur.  Secara  empris  bekhasiat mengurangi sekresi pada liang vagina dan keputihan akut (Rahajeng, 2014). Ektrak daun sirih merah  mampu  membunuh  fungi Candida  albicans penyebab  keputihan akut  dan  gatal  gatal pada alat kelamin (Wina dkk,2015).

## METODE PENELITIAN Desain Penelitian
Jenis Penelitian ini adalah ekperimental laboratorium dengan menggunakan metode difusi cakram.

## Alat dan bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah autoclave, inkubator,  oven, neraca analitik,  rak  tabung  reaksi,  erlenmeyer,  gelas  ukur,  oven,  lampu  spiritus,  waterbath,  jarum ose,  timbangan  analitik,  pinset,  blender,    jangka  sorong, cotton  swab ,  cawan  porselen,  labu takar,  batang  pengaduk  dan  beaker  glass.    Bahan  yang  digunakan  antara  laian  media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA),  media  Heart  Infusion  Brain  (HIB),  Mac  Farland  0,5, ekstrak  etanol  daun  sirih  merah,  NaCl  0,85%,  aquadest  steril,  etanol  96%,  biakan  jamur Candida albicans , disk blank (oxoid), kontrol positif (ketokonazol) dan kontrol negatif (NaCl 0,85%).

## Prosedur Penelitian

## Pembutan ekstrak etanol daun sirih merah
Ektrak  sirih  merah  dibuat  dengan  cara maserasu  menggunakan  pelarut etanol  96%. Daun  sirih  segar  dicuci  dengan  air  mengalir  sampai  bersih,  dipotong  kecil  ditiriskan  dan dikeringkan  kemudian  sampel  di  blender  sampai  halus  direndam  selama  tiga  hari menggunakan  etanol  96%.  Setelah  disaring  filtrat  dipekatkan  menggunakan  waterbath  pada suhu  60 0 C  sampai  diperoleh  ektrak  kental.  Selanjutnya  diencerkan  sehingga  konsentrasi ekstrak menjadi 80%, 60%, 40%, 20%.

## Pembuatan Media Pertumbuhan
Media  pertumbuhan  yang  digunakan  adalah  SDA.  Pembuatan  media  dilakukan berdasarkan  takaran  pembuatan  pada  kemasan  media  yaitu  dengan  65  gram  serbuk  SDA dalam 1 liter air.

## Uji Efektivitas Ekstrak Daun Siri Merah
Biakan subkultur Candida albicans diambil dengan menggunakan ose steril kedalam larutan  NaCl  0,85%  sampai  mencapai  kekeruhan  yang  ekuialen  denan  standar  Mac  Farland 0,5.  Kemudian  0,5  ml  suspensi Candida  albicans dioleskan  merata  pada  permukaan  media SDA  pada  empat  cawan  petri.  Pada  masing  masing  cawan  petri  diletakkan  lima  disk  blank (oxoid)  sebagai  replika  dan  ditetesi  20  µL  ekstrak  sirih  merah  dengan  konsentrasi  yang berbeda 20%, 40%, 60%, 80%, 100%. Cawan petri yang sudah ditetesi ekstrak sirih merah, kontrol  positif  dan  kontrol  negatif  kemudian  diinkubasi  pada  25 0 C  selama  3  hari.  Diameter zona  jernih  yang  terbentuk  disekeliling  disk  cakaram  pada  setiap  kelompok  diukur menggunakan jangka sorong.

## Analisi Data
Data hasil penelitian ini di analisi menggunakan uji Mann Whitney .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Pengaruh  pemberian  ekstrak  daun  sirih  merah  ( Piper  crocatum )  terhadap pertumbuhan  jamur Candida  albicans dilihat  dengar  mengkur  diameter  zona  jernih  yang terbentuk dari ekstrak daun sirih merah. Diameter zona hambat disajikan dalam Tabel 1 dan Gambar 1.
Gambar 1. Diameter zona jernih  ekstrak sirih merah, kontrol (+) dan kotrol (-)
Tabel 1. Data Hasil Diameter Zona Bening yang Terbentuk Dari Masing-Masing Perlakuan
Konsentrasi Diameter Zona jernih (mm) Rerata (mm) Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 20% 13 12 12 11 12 40% 13,5 12 13 13 12,75 60% 14 13 13,5 13,5 13,38 80% 15,5 14 14 14 14,50 100% 15 15 16 15,5 15,38 Kontrol (+) 22,5 22,5 22,5 33,5 22,5 Kontro (-) 0 0 0 0 0
Variabel  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  adalah  daya  hambat  pertumbuhan Candida albicans pada media pertumbuhan yang diberi ekstrak daun sirih merah. Dari hasil  pengukuran rerata diameter  zona  jernih  ekstak  sirih  merah ( Piper  crocatum ). pada  konsentrasi  20%  (12  mm),  40% (12,75 mm), 60% (13,38 mm), 80% (14,5mm), 100% (15,38mm). Hal ini menunjukkan semakin besar konsentrasi  ekstrak  daun  sirih  semakin  tinggi  pula  senyawa  aktif  yang  terkandung  didalamnya sehingga mempengaruhi zona jernih yang terbentuk dari setiap konsentrasi ekstrak.
Data  hasil  penelitian  kemudian  dianalisis  menggunakan  uji  normalitas  dengan  Shaphiro  – Wilk Test menunjukkan nilai signifikan P > 0,05 untuk konsentrasi 20%, 60%, 80% dan 100%, serta P < 0,05 untuk konsentrasi 40%. Dari nilai signifikan tersebut dapat disimpulkan bahwa data tersebut terdistribusi  tidak  normal.  Pengujian dilanjutkan  dengan  melihat  homogenitas,  didapatkan  hasil  nilai sig  0,961  >  0,05  dan  dinyatakan  data  tersebut  homogen.  Pengujian  kemudian  dilanjutkan menggunakan Mann-Whitney diperoleh hasil konsentrasi ekstrak 20% dan 40% serta 80% dan 100% nilai sig (2- tailed ) 0,165 > 0,05 yang berarti bahwa tidak ada perbedaan. Pada konsntrasi antara 20%, 60%  dan  80%  nilai  sig  (2- tailed )  0,029  <  0,05  menunjukkan  adanyaperbedaan.  Hasil  uji  beda  bisa dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Mann-Whitney Konsentrasi 20% 40% 60% 80% 100% Kontrol+ 20% 40% 60% 80% 100 % - *0,165 0,024 0,026 0,027 * 0,165 - 0,029 0,032 0,035 0,024 0,029 - 0,040 0,043 0,026 0,032 0,040 - *0,621 0,027 0,035 0,043 *0,621 - 0,016 0,013 0,011 0,013 0,012 Kontrol + 0,016 0,013 0,011 0,013 0,012 -

## Keterangan * Tidak ada perbedaan

## Pembahasan
Dan  sirih  yang  masih  segar  mempunyai  kandungan  fenil  propane  (senyawa  fenolik)  yang sangat berpengaruh sebagai anti fungi (Nurul, 2010). Senyawa tersebut dapat menyebabkan denaturasi protein  yaitu  kerusakan  struktur  tersier  penyusun  dinding  sel  jamur  sehingga  dapat  menyebabkan kelemahan fungsi protein dinding sel. Selain itu senyawa kavikol merupakan turunan dari fenol yang mempunyai daya antibakteri lima kali lipat dari fenol biasa (Ditha, 2013). Senyawa fenol juga mampu memtuskan  ikatan  silang  peptidoglikon  dalam  usaha  menerobos  dinding  sel  jamur  (Achmad,  2009).
0 5 10 15 20 25 20 40 60 80 100 K + K - 12 12,75 13,38 14,5 15,38 22,5 0 D ia m e te r Zo n a Je rn ih ( m m ) Konsentrasi Ektrak Daun Sirih Merah (%) Diameter Zona Jernih Ekstrak Sirih Merah Terhadap

## Candida albicans
Gambar 2.  Grafik Diameter  Zona Jernih  Ekstrak Sirih Merah
Protein  merupakan  senyawa  yang  berperan  dalam  seluruh  kegiatan  mekanisme  fisiologi  dari  jamur Candida  albicans ,  terdenaturasinya  dinding  sel  protein  jamur  tersebut  akan  menyebbkan  kerapuhan pada  dinding  sel  sehingga  akan  mudah  terlewati  senyawa  aktif  lainya  yang  bersifat  antifungi  (Eni, 2008 ).  Semakin  banyak  senyawa  fenol  yang  terkandung  didalam  daun  sirih  maka  akan semakin  banyak  diding  sel  akan  dirusak  sehingga  menyebabkan  pertumbuhan  jamur  akan terhambat dan mati.
Aktivitas  flavanoid  kemungkinan  disebabkan  oleh  kemampuannya  menghambat pembentukan peseudohifa selama proses perkembangan jamur (Eni, 2008), hal ini akan menyebabkan terbentuknya  kompleks  dengan  protein  ekstraseluler    terlarut  dengan  dinding  sel  sehingga menyebabkan terjadinya denaturasi proteinmenyebabkan kerapuhan dinding sel. Flavonoid diketahui telah  disintesis  oleh  tanaman  dalam  responsnya  terhadap  infeksi  mikroba  sehingga  tidak mengherankan kalau efektif secara in vitro terhadap sejumlah mikroorganisme.
Tanin  yang  terkandung  dalam  daun  sirih  bersifat  sebagai  zat  antifungi  dengan  cara menghambat kerja enzim-enzim termasuk enzim katalase (Nurul, 2010). Dengan terhambatnya kerja enzim  maka  kegiatan  metabolisme  dan  fisiologi  sel  akan  terganggu  sehingga  proses  reproduksi  pun akan  terhambat.  Apabila  yang  dihambat  enzim  pembentuk  ergosterol  maka  sel  fungi  tidak  dapat mensintesis ergosterol yang mengakibatkan pembentukan membran plasma sel tidak terbentuk dengan sempurna dan fungsinya pun akan tergangu (Nurul, 2010).
Hasil  penelitian  ini  memberikan  informasi  bahwa  penggunaan  ekstrak  daun  sirih  merah ( Piper  crocatum )  bisa  menghambat  pertumbuhan  jamur Candida  albicans yang  merupakan penyebabp  penyakit  keputihan  (kandidiasis)  sehingga  ekstrak  sirih  merah  ( Piper  crocatum )  bisa digumakan untuk menekan penyebaran infeksi yang disebabkan oleh Candida albicans.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  hasil  zona  jernih  ekstrak  sirih  merah  ( Piper crocatum ) dengan konsentrasi 80% paling efektif menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  dan  Ido  Suryana.  (2009).  Pengujian  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Sirih  ( Piper  betle L.) terhadap Rhizoctonia sp. secara In Vitro. Vol. 20, No. 1, h. 92-98. Cahyaningrum, B. D. (2018). Uji Aktivitas Antijamur Kombinasi Ekstrak Etanol 70% Daun Kersen (Muntingia  calabura  L.) Dan  Daun  Sukun (Artocarpus  communis  Forst.) Terhadap Candida albicans. Program Studi S1 Farmasi STIKes Karya Putra Bangsa Tulungagung
Ditha Tri Armianty Harman. (2013). Efektivitas Anti Bakteri Ekstrak Daun Sirih (Piper betle Linn)  terhadap  Bakteri Enterococcus  faecalis (Penelitian  In  Vitro),  Skripsi,
(Makassar: Universitas Hasanuddin, 2013), h. 46.
Dian  Saraswati.  (2011).  Pengaruh  Kosentrasi  Ekstrak  Daun  Sirih  terhadap  Daya  Hambat
Escherichia coli . Jurnal Health & Sport , Vol. 3, No. 2, Agustus, h. 285-362
Eni Kusumaningtyas, R.R. Widiati, D. Gholib. (2008). “Uji Daya Hambat Ekstrak dan Krim Ekstrak  Daun  Sirih  ( Piper  betle )  terhadap Candida  albicans dan Trichophyton mentagrophytes . Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner, h. 805-811 Gunawan  Adi,  dkk  (2015).  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun  Sirih  ( Piper  Sp .)  Terhadap Pertumbuhan Jamur Candida Albicans . Prosiding Nasional Biotik.
Maretniatin,  C.  D.  (2019).  Uji  Potensi  Antifungi  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  Merah (Piper crocatum) Terhadap Candida  albicans Secara  In  Vitro (Vol.  3).  Jurnal  Al  Azhar Indonesia Seri Sains dan Teknologi.
Masfufatun. (2017). Efektivitas Kombinasi Ekstrak Daun Sirih Merah (PiperCrocatum) Dan Ekstrak  Biji  Alpukat (Persea  americana) Dalam  Menghambat  Pertumbuhan Candida albicans (Vol. 2 No. 2). Jurnal Kimia Riset.
Naufal,  M.  F.  (2019).  Uji  Aktivitas  Antifungi  Ekstrak  Etanol  70%  Daun  Zaitun (Olea europaea  L.) Terhadap Candida  albicans,  Aspergillus  niger  dan  Trichophyton rubrum. Fakultas Ilmu Kesehatan Program Studi Farmasi Jakarta.
Nurul Rahmah, dan Aditya Rahman. (2010). “Uji Fungistatik Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L.) terhadap Candida albicans”. Jurnal Bioscientae , Vol. 7, No. 2, Juli 2010, h. 17- 24.
Parfati,  N.  (2018).  Kajian  Pustaka  Aspek  Botani,  Kandungan  Kimia,  dan  Aktivitas Farmakologi  Pada  Sirih  Merah  ( Piper  crocatum )  (Vol.  1).  Jurnal  Media Pharmaceutical Indonesia.
Purnamasari,  A. I.  (2021).  Uji  Aktivitas Antifungi  Ekstrak  Metanol  Daun  dan  Umbi  Keladi Tikus (Typhonium flagelliforme) Terhadap Pertumbuhan Candida albicans. Program Studi Biologi Fakultas Sains Dan Teknologi Universitas Islam Negeri Sunan Ampel Surabaya.
Putri,  A.  U.  (2013).  Uji  Potensi  Antifungi  Ekstrak  Berbagai  Jenis  Lamun  Terhadap  Fungi
Candida albicans. Jurnal ITEKIMIA, 2(1):84-94.
Simbolon, C. (2020). Studi Literatur Perbandingan Efek Antifungi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah (Piper  crocatum) dan  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  Hijau (Piper  betle.L) Terhadap  Pertumbuhan Jamur Candida  albicans. Politeknik  Kesehatan  Kemenkes Medan Jurusan Farmasi.
Siti  Ngaisah.  (2010). “Identifikasi  dan  Uji  Aktivitas  Anti  Bakteri  Minyak  Atsiri  Daun  Sirih Merah  (Piper  Crocatum  Ruiz  &  Pav).  Asal  Magelang”,  Skripsi,  (Surakarta: Universitas Sebelas Maret, 2010), h. 49.
Zuraidah.  (2021).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau (Piper  betle  L.), Daun  Sirih Merah (Piper  crocatum), dan  Daun  Sirih  Hutan (Piper  aduncum  L.) Terhadap Pertumbuhan Candida albicans (Vol. 2). Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan.