## 1 / Jurnal Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati
PENGARUH PEMBERIAN STRESS OSMOTIK TERHADAP KADAR TOTAL LIPID MIKROALGA Porphyridium sp. DAN Isochrysis sp. PADA SALINITAS YANG

## BERBEDA

## THE EFFECT OF GIVING OSMOTIC STRESS TOWARD THE LEVEL OF LIPID TOTAL OF
Porphyridium sp. AND Isochrysis sp. MICROALGAE AT DIFFERENT SALINITY
Lia Anggraini 1* , Endang Linirin Widiastuti 1 , Sri Murwani 1
1 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung Jl. Prof. Dr. Soemantri Brodjonegoro No.1 Bandar Lampung 35145
* e-mail : anggraini.la@gmail.com

## ABSTRAK
Mikroalga  merupakan  salah  satu  produsen  primer  yang  diduga  memiliki  kandungan  lipid  tinggi  untuk dimanfaatkan  sebagai  energi  alternatif.    Mikroalga  yang  memiliki  kandungan  lipid  cukup  tinggi diantaranya  adalah Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp.    Pemberian  stress  osmotik  diduga  dapat meningkatkan  kadar  total  lipid  mikroalga Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp.    Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui pengaruh  pemberian  stress  osmotik  berupa  perbedaan  salinitas  terhadap  kadar  total lipid  pada  mikroalga Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp.    Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  pada  bulan Januari - Februari 2016 di Laboratorium Biologi Molekuler Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Lampung.    Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap dengan  faktorial  yang  terdiri  dari  2  jenis  mikroalga  serta  4  taraf  salinitas  20  ppt,  25  ppt,  30  ppt,  dan  35 ppt, serta 3 kali ulangan.  Parameter yang diamati yaitu kepadatan populasi, laju pertumbuhan, dan kadar total lipid.  Data dianalisis dengan Analysis of Variance (ANOVA) dan diuj lanjut dengan Uji Tukey HSD pada taraf 5 %.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa kepadatan populasi tertinggi terjadi pada perlakuan Isochrysis sp. pada salinitas 35 ppt. Mikroalga yang menyumbang lipid tertinggi pada tiap selnya adalah Porphyridium sp.  pada  salinitas  20  ppt  sebesar  6x10 -6 g/sel  dan Isochrysis sp.  pada  salinitas  20  ppt sebesar 45x10 -7 g/sel.
Kata Kunci: Porphyridium, Isochrysis , salinitas, stress osmotik, kadar total lipid

## ABSTRACT
Microalgae  is  one  of  the  primary  producers  that  presumably  have  high  lipid  contents  used  as  an alternative  energy.  Microalgae  which  have  sufficient  high  lipid  contents  are Porphyridium sp.  and Isochrysis sp. It was expected that giving osmotic stress to microalgae Porphyridium sp. and Isochrysis sp.  may increase the level of lipid total themselves. This research purposed to determine giving osmotic stress in different salinity levels to the total lipid content of microalgae Porphyridium sp. and Isochrysis sp. This research was conducted on January until February 2016 in Biomolecular Laboratory, Department of Biology, Mathematics and Natural Sciences Faculty, University of Lampung. This experiment were using complete  randomized  design  with  factorial  within  two  species  of  microalgae  and  four  levels  of  salinity namely 20 ppt, 25 ppt, 30 ppt, and 35 ppt with three replicantions. Observed parameters are population density, growth rate, and the level of lipid total. Data were analyzed by using Analysis of Variant (Anova) and advanced test using Tukey - HSD Test with significance level at a = 5%. The result showed that the highest level of lipid total is Isochrysis sp. with treatment 35 ppt of salinity. Microalgae that contribute the highest level of lipid total each cell is Porphyridium sp. with treatment 20 ppt of salinity are 6x10 -6 g/cell and Isochrysis sp. with treatment 20 ppt of salinity 45x10 -7 g/cell.
Keywords: Porphyridium, Isochrysis ,salinity, osmotic stress, the level of lipid total

## Jurnal Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati
Vol. 3 No. 1 Juni 2016: hal. 57 - 65 ISSN : 2338-4344

## PENDAHULUAN
Mikroalga merupakan mikroorganisme bersel  tunggal  yang  berbentuk  seperti benang.  Hidupnya  melayang-layang  di dalam  air  dan  keberadaannya  sangat dipengaruhi oleh gerakan air  (Davis, 1951). Alga  sangat  berperan  penting  sebagai produsen  primer.  Hal  ini  karena  mikroalga memiliki  kemampuan  untuk  berfotosintesis dengan cara mengubah sinar  matahari,  air, dan  karbondioksida  menjadi  energi  seperti layaknya tumbuhan tingkat tinggi (Kawaroe, 2010).  Pertumbuhan dari Porphyridium sp. sendiri bergantung pada ketersediaan nutrien,  suhu,  intensitas  cahaya,  pH, karbondioksida, dan salinitas (Sleigh, 1989).
Porphyridium sp.  merupakan  mikroalga yang  memiliki  kecepatan  pertumbuhan tinggi  dan  masa  panennya  cepat,  memiliki kandungan  asam  lemak  tinggi,  bersifat dapat  terbaharukan  dan  ramah  lingkungan sehingga  berpotensi  untuk  dikembangkan sebagai biodiesel (Kabinawa, 2005).  Selain Porphyridium sp.  terdapat  mikroalga  yang diduga mengandung lipid yang cukup tinggi, salah  satunya  yaitu Isochrysis sp.  (Christi, 2007).
Lipid  merupakan  sejumlah  senyawa  yang terdapat  di  alam.    Lipid  sukar  larut  atau tidak  dapat  larut  dalam  air,  namun  dapat larut dalam pelarut organik non polar seperti pentana,  benzen,  dietil  eter,  alkohol  dan kloroform.    Lipid  memiliki  fungsi  biologis sebagai  komponen  struktural  membran serta penyimpanan energi (Panggalo,
2012).
Pertumbuhan dan perkembangan mikroalga Porphyridium sp.    dan Isochrysis sp. dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor,  salah satunya  adalah  salinitas.    Salinitas  atau kadar garam dapat mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan mikroalga.    Salinitas  yang  tidak  sesuai, berpengaruh  langsung  terhadap  kelang- sungan  hidup  dan  tingkat  pertumbuhannya (Odum,  1993).    Kondisi  lingkungan  dan tempat tumbuh mikroalga yang tidak sesuai berpengaruh  terhadap  kandungan  lipid mikroalga  tersebut.    Saat  mikroalga  me- ngalami tekanan, akumulasi lipid cenderung mengalami  peningkatan  (Kawaroe et  al. , 2010).  Hal ini  merupakan bentuk adaptasi yang dilakukan organisme terhadap salinitas  yang  tidak  optimal  untuk  tumbuh sehingga  cenderung  tidak  mengeluarkan banyak  energi.    Perbedaan  salinitas  ini berpengaruh terhadap tekanan osmosis dan mekanisme  osmoregulasi  yang  bertujuan untuk  menyamakan  konsentrasi  garam internal  dengan  konsentrasi  garam  yang berada  di  lingkungan  luar    (Widianingsih, 2011). Pada kondisi tidak normal, mikroalga tetap  berfotosintesis  dengan  bantuan  CO 2 dan  mengakumulasi  hasilnya  dalam  bentuk karbohidrat  dan  lipid  (Schenk et.al ,  2008).
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui pengaruh pemberian stress osmotik terhadap kadar total lipid mikroalga Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp.  pada salinitas yang berbeda.

## BAHAN DAN METODE
Bahan Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Januari sampai Februari 2016 di Laboratorium  Biologi  Molekuler  Jurusan Biologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Lampung. Bahan-bahan    yang  digunakan  dalam penelitian yaitu air laut steril, air tawar steril, mikroalga  uji Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp. yang didapat dari Laboratorium  Pakan  Alami  Balai  Besar Perikanan  Budidaya  Laut  Lampung,  Pupuk
Conwy ,  Garam  Krosok,  Formalin,  Kaporit,
Alkohol  70  %,  NaOH,  Aquades,  Kloroform, dan Metanol untuk proses ekstraksi pengukuran kadar total lipid mikroalga.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak  lengkap  (RAL)  dengan  faktorial  yang terdiri  dari  2  jenis  mikroalga, Porphyridium sp. dan Isochrysis sp. masing masing  pada level salinitas 20 ppt, 25 ppt, 30 ppt, dan 35 ppt.
Kultur  kedua  mikrolaga  pada  salinitas  yang berbeda  tersebut  dilakukan  selama  8  hari dan  dihitung  kepadatannya  setiap  hari dengan menggunakan alat haemocytometer di bawah  mikroskop. Adapun rumus kepadatan  sel  menurut  Mudjiman  (2007) adalah sebagai berikut:
Ʃ Sel / ml = N x 10 4
Keterangan:
N  : Jumlah rata-rata sel
Setelah  didapatkan  nilai  kepadatannya kemudian dihitung laju pertumbuhan spesifik  menggunakan  rumus  modifikasi menurut Becker (1994) yaitu:
µ = LnNt−LnNo 𝑡 x 100 %

## Keterangan :
No  : Kepadatan awal populasi (Ind/L) Nt  : Kepadatan puncak populasi (Ind/L)
t : Waktu (hari)
µ : Laju Pertumbuhan Populasi (%/hari)

## Ekstraksi Lipid
Ekstraksi dilakukan dengan cara mensentrifugasi hasil kultur untuk memisahkan mikroalga dengan air pelarutnya. Setelah mengendap, air pelarutnya  dibuang  untuk  mendapatkan mikroalga  basah  berbentuk  natan.    Natan yang  telah  terpisah  tersebut  kemudian ditimbang sebanyak 3 g.  Tahap selanjutnya adalah  menguji  kandungan  lipid  dengan menggunakan metanol dan kloroform dengan perbandingan 1 : 1 (1 ml : 1 ml) lalu dihomogenkan selama kurang lebih 1 menit kemudian  didiamkan  di  dalam  kulkas selama 15 menit.  Setelah didiamkan, natan tersebut  diberi  akuades  1 ml  lalu  kemudian disentrifugasi hingga terpisah larutan lipidnya.  Lipid  tersebut  diambil  dan  ditaruh di  cawan  petri  steril  untuk  dikeringkan. Setelah  itu  tahap  selanjutnya  dilakukan evaporasi  atau  dikeringkan  menggunakan alat desikator kemudian dilakukan penimbangan.    Padatan  yang  telah  kering ini  sebagai  hasil  perhitungan  kadar  total lipid.  Lipid  yang  telah  diketahui  berat
keringnya  kemudian  dilarutkan  kembali
menggunakan akuades untuk diukur dengan spektrofotometer menggunakan panjang  gelombang  680  nm  (Wayan et  al , 2012). Data  dianalisis  dengan one  way
Anova  dan  dilakukan  uji  lanjut  dengan  Uji Tukey HSD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
1.  Kepadatan Populasi Kultur mikroalga skala laboratorium dilakukan  selama  8  hari.    Kepadatan populasi  dihitung  setiap  hari  hingga  akhir pengkulturan.    Dari  perhitungan  kepadatan didapatkan data seperti yang disajikan pada tabel 1 sebagai berikut :
Tabel 1. Kepadatan populasi malga pada salinitas berbeda (Ind/ml)
Hari ke Jenis mikroalga / salinitas Porphyridium sp Isochrysis sp 20 ppt 25 ppt 30 ppt 35 ppt 20 ppt 25 ppt 30 ppt 35 ppt 1 1500 + 0 a 1500 + 0 a 1500 + 0 a 1500 + 0 a 2000 + 0 a 2000 + 0 a 2000 + 0 a 2000 + 0 a 2 953 + 89 c 1232 + 138 c 1570 + 18 b 1563 + 24 bc 2233+  14 a 2358 +142 a 2217 + 176 a 2408 + 188 a 3 708 + 81 c 935 + 74 c 1630 + 5 b 1608 +36 b 2467 +184 a 2525 + 75 a 2525+ 241 a 2667 + 142 a 4 533 + 104 d 700 + 156 cd 1385 + 152 bc 1653 + 28 b 1967 +593 b 1902 +258 b 2750 + 241 a 2887 + 137 a 5 370 + 133 b 467 + 178 b 1005 + 161 b 1530+ 289 b 1317+ 401 b 1325 + 25 b 2760 + 910 a 2853 + 568 a 6 193 + 65 b 328 + 136 b 775 + 152 b 1220 +220 ab 900 + 327 b 767 + 250 b 2170 + 930 a 2483 + 726 a 7 115 + 10 c 180 + 72 c 475 + 109 bc 945 + 157 abc 250 + 175 c 408 + 404 bc 1708 +969 ab 1903 + 871 a 8 50 + 0 b 75 + 25 b 175 + 25 ab 583 + 339 ab 67 + 29 b 125 + 109 b 1067 +682 ab 1200 + 736 a
Keterangan :
- Angka pada baris yang sama diikuti dengan huruf superscript yang sama tidak berbeda nyata padataraf α = 0,05
- Angka yang diarsir menunjukkan kepadatan tertinggi
Tabel  1  menunjukkan  kepadatan  puncak terjadi  pada  hari  yang  berbeda  pada masing-masing perlakuan.
Perlakuan
Porphyridium sp.  pada  salinitas  20  ppt  dan salinitas 25 ppt tidak mengalami peningkatan pada hari kedua.  Namun pada salinitas  30  ppt  memiliki  tingkat  kepadatan yang  berbeda  nyata  dibandingkan  pada salinitas  lebih  rendah  yaitu  salinitas  20  ppt dan salinitas 25 ppt, serta pada salinitas 30 ppt dan pada salinitas 35 ppt pada hari  ke- 4. Demikian pula untuk perlakuan Isochrysis sp., puncak kepadatan populasi pada media
kultur terjadi di hari ke 4 dan pada salinitas yang  tinggi  yaitu  pada  salinitas  35  ppt  dan salinitas 35 ppt.

## 2.  Laju Pertumbuhan
Hasil pengukuran rata-rata laju pertumbuhan  dari  mikroalga Porphyridium sp. dan Isochrysis sp. yang diberi perlakuan salinitas  yang  berbeda  disajikan  pada Gambar 1.
Gambar 1. Rata-rata laju pertumbuhan mikroalga  (%).  Por  = Porphyridium sp. dan  Iso = Isochrysis sp.
Gambar  1  menunjukkan  rata-rata  laju pertumbuhan spesifik. Terdapat dua perlakuan yang laju pertumbuhannya sangat  rendah  atau  di  bawah  0%,  yaitu pada  perlakuan Porphyridium sp.  pada salinitas 20 ppt dan perlakuan Porphyridium sp.  pada  salinitas  25  ppt.    Hal  ini menunjukkan  bahwa  pada  kedua  salinitas tersebut  laju  kematiannya  lebih  tinggi  dari laju  pertumbuhannya.  Kemudian  pada mikroalga Isochrysis sp.  rata-rata  laju pertumbuhan tertinggi pada salinitas 25 ppt yaitu sebesar 0,12 %.

## 3.  Kandungan Lipid
Hasil  perhitungan  kandungan  lipid  pada mikroalga Porphyridium sp.  dan Isochrysis sp.  yang  diberi  perlakuan  salinitas  berbeda disajikan pada Gambar 2.
Gambar 2. Berat kering lipid mikroalga (g). Por = Porphyridium sp.  dan    Iso  = Isochrysis sp.
Berat  kering  lipid  tertinggi  adalah  terjadi pada perlakuan Isochrysis sp. pada salinitas
35  ppt,  dan  berat  kering  lipid  yang  paling rendah    terjadi  pada  dua  perlakuan  yaitu pada  perlakuan Porphyridium sp.  pada salinitas  25  ppt  dan  pada  perlakuan
Isochrysis sp. salinitas 20 ppt.
Untuk memverifikasi kandungan lipid, maka sample  lipid  dari  masing-masing  kelompok mikroalga  diuji  kandungan  lipidnya  dengan menggunakan  spektrofotometri.  Kandungan lipid  dengan  uji  spektrofotometri  disajikan pada gambar 3 sebagai berikut :
Gambar 3. Sampel lipid menggunakan spektrofotometri (Abs)
Seperti halnya  pengukuran kandungan  lipid dengan  gravimetri  (berat  kering),  nilai tertinggi pengukuran kandungan lipid menggunakan  spektrofotometri  yaitu  pada perlakuan Isochrysis sp.  pada  salinitas  35 ppt  yaitu  sebesar  0,328.    Sedangkan  nilai terendah pengukuran menggunakan spektrofotometri  adalah  pada  perlakuan Porphyridium sp.  pada  salinitas  20  ppt  dan Porphyridium sp. pada salinitas 25 ppt yaitu sebesar 0,003.
Jumlah  lipid  yang  telah  diketahui  dihitung kembali  untuk  mengetahui  perkiraan  kan- dungan  lipid  yang  dihasilkan  oleh  satu  sel. Perkiraan kandungan lipid per sel mikroalga Porphyridium sp.  yang  dikultur  pada salinitas  berbeda  disajikan  pada  Tabel  2.
Tabel 2. Perkiraan kandungan lipid per sel mikroalga Porphyridium sp. dan Isochrysis sp. Perlakuan Por 20 Por 25 Por 30 Por 35 Kepadatan 50x10 4 sel/ml 75x10 4 sel/ml 175x10 4 sel/ml 583x10 4 sel/ml Berat Kering Lipid 0,0029 g = 2,9 mg 0,0017 g = 1,7 mg 0,0064 g = 6,4 mg 0,007 g = 7 mg Kepadatan terambil 483 sel/ml 425 sel/ml 3.733 sel/ml 13.603sel/ml Lipid yang dihasilkan 1 sel 0,006 mg/sel =6x10 -6 g/sel 0,004 mg/sel = 4x10 -6 g/sel 0,0017 mg/sel = 17x10 -7 g/sel 0,00051 mg/sel = 51x10 -8 g/sel Perlakuan Iso 20 Iso 25 Iso 30 Iso 35 Kepadatan 66 x 10 4 sel/ml 125 x 10 4 sel/ml 1066 x 10 4 sel/ml 1200 x 10 4 sel/ml Berat Kering Lipid 0,0017 g = 1,7 mg 0,0029 g = 2,9 mg 0,0154 g = 15,4 mg 0,0187 g = 18,7 mg Kepadatan terambil 374 sel/ml 1.208 sel/ml 54.741 sel/ml 74.800  sel/ml Lipid yang dihasilkan 1 sel 0,0045 mg/sel = 45x10 -7 g/sel 0,0024 mg/sel = 24x10 -7 g/sel 0,00028 mg/sel = 28x10 -8 g/sel 0,00025 mg/sel = 25x10 -8 g/sel
Pada  tabel  2  perkiraan  lipid  tertinggi  yang dihasilkan tiap satu sel yaitu pada perlakuan Porphyridium sp.  pada  salinitas  20  ppt sebesar  0,006  mg/sel.    Demikian  pula perkiraan kandungan lipid per sel mikroalga Isochrysis sp.  tertinggi  terdapat  kultur salinitas 20 ppt.

## Pembahasan
1.  Kepadatan Populasi Kepadatan  populasi Porphyridium sp.  pada salinitas  20  ppt  dan  25  ppt  lebih  cepat mengalami death phase atau fase kematian dibanding Porphyridium sp.  pada  salinitas yang  lebih  tinggi  yaitu  30  ppt  dan  35  ppt. Pada  perlakuan Porphyridium sp.  dengan salinitas  30  ppt,    puncak  kepadatan  terjadi pada  hari  ketiga,  demikian  juga  pada perlakuan Porphyridium sp. dengan salinitas  35  ppt,    puncak  kepadatan  terjadi pada  hari  keempat.    Sama  halnya  dengan perlakuan pada mikroalga Porphyridium sp., pada  perlakuan Isochrysis sp.  puncak kepadatan  juga  terjadi  pada  hari  yang berbeda  pada  masing-masing  perlakuan.
Setelah  fase  puncak,  semua  perlakuan menunjukkan  penurunan  populasi  hingga masuk ke dalam fase kematian.
Pertumbuhan mikroalga  sendiri  dipengaruhi oleh  beberapa  faktor  diantaranya  nutrien, intensitas  cahaya,  CO 2 ,  pH,  temperatur, serta  salinitas  yang  dibutuhkan  dalam proses  fotosintesis  (Fogg,  1965).    Pada awal  pengkulturan,  nutrien  dari  pupuk  yang diberikan  masih  tinggi  dan  dimanfaatkan dengan  baik  sehingga  terjadi  peningkatan populasi.  Sebaliknya, setelah fase puncak, jumlah  populasi  mikroalga  terus  meningkat namun  jumlah  nutrien  tidak  mencukupi kebutuhan mikroalga sehingga terjadi persaingan  antara  mikroalga  satu  dengan yang lainnya dan mengakibatkan penurunan populasi (Round, 1973).
Selain  itu, perbedaan puncak kepadatan  ini disebabkan  oleh  stress  osmotik  berupa salinitas  yang  diberikan  pada  perlakuan. Salinitas yang tidak sesuai dengan salinitas hidup  mikroalga  yang  diberikan  pada
perlakuan ini mempengaruhi tekanan osmosis  antara  sel  dan  medium  kultur. Media kultur yang bersifat bersifat hipertonis dan  hipotonis  terhadap  sel  mikroalga  ini mengganggu  keseimbangan  osmotik  sel. Terganggunya  keseimbangan  osmotik  sel ini  membuat  sel  melakukan  adaptasi dengan  cara  penyeimbangan  osmotik  pada lingkungan  dalam  sel  dan  lingkungan  luar sel  (Erdmann  dan  Hagemann,  2001). Keadaan  ini  membuat  sel  melakukan respon  dengan  cara  menarik  ion.    Namun pada  saat  yang  bersamaan,  penarikan osmotik  air  dari  vakuola  terus  berlangsung. Hal  ini  mengakibatkan  penyusutan  sel  dari dinding  sel  (Hart et  al ,  1991).    Toleransi terhadap perlakuan salinitas yang dilakukan oleh mikroalga  ini  membuat  nutrien  yang  di dapat  dari  pupuk  conwy  kurang  terserap dengan baik (Hastuti dan Djunaidah, 1991).
Pada  mikroalga Porphyridium sp . hanya pada  salinitas  30  ppt  dan  35  ppt  saja  yang menunjukkan kepadatan yang tinggi karena sesuai dengan salinitas normal untuk kultur mikroalga  yaitu  ±  32  -  36  ppt  (Effendi, 2003). Berbeda dengan mikroalga Isochrysis sp.  yang  pertumbuhannya cukup tinggi pada semua salinitas.  Hal  ini karena mikroalga Isochrysis sp.  memiliki  toleransi yang  tinggi  pada  salinitas (euryhaline) . Isochrysis sp.  sendiri  dapat  hidup  pada kisaran  salinitas  10 –  30  ppt  (Sudjiharno, 2002).

## 2.  Laju Pertumbuhan
Laju  pertumbuhan  merupakan  tolak  ukur untuk  mengetahui  kecepatan  pertumbuhan
mikroalga  yang  dihitung  persatuan  waktu kultur  (Myers,  1995).    Laju  pertumbuhan pada  mikroalga Isochrysis sp.  cenderung lebih  tinggi  dibandingkan dengan mikroalga Porphyridium sp.    Hal  ini  dimungkinkan karena  ukuran  sel Isochrysis sp.  lebih  kecil dibandingkan ukuran sel mikroalga Porphyridium sp.  sehingga  dapat  lebih mudah melakukan perbanyakan sel. Menurut  Bouterfas et  al, (2006),  sel  yang memiliki  ukuran  lebih  kecil  memiliki  masa tumbuh  yang  lebih  cepat  dibandingkan dengan  sel  yang  berukuran  besar.  Selain ukuran  sel,  stress  osmotik  yang  diberikan pada perlakuan mempengaruhi laju pertumbuhan  mikroalga.  Dalam  memper- tahankan  kelangsungan  hidupnya  dari keadaan  yang  ekstrim  tersebut,  mikroalga cenderung  tidak  melakukan  perbanyakan sel (Schenk et al , 2008).

## 3.  Kandungan Lipid
Kandungan lipid dihitung berdasarkan berat kering dan nilai absorbansi dengan spektrofotometri.    Kandungan  lipid  tertinggi pada jenis mikroalga Porphyridium sp. pada perlakuan dengan salinitas 35 ppt, sementara  kandungan  lipid  tertinggi  pada jenis mikroalga Isochrysis sp. pada perlakuan dengan salinitas 35 ppt. Perlakuan yang memiliki kepadatan rendah, hasil perhitungan berat kering dan spektrofotometri  menunjukkan  lipid  yang rendah  pula.    Hal  ini  menunjukkan  bahwa kandungan lipid meningkat seiring
meningkatnya kepadatan dan laju pertumbuhan  sesuai  dengan  penelitian yang dilakukan oleh Safitri (2013).
Pada perhitungan perkiraan kandungan lipid per  sel,  perlakuan  yang  menyumbang  lipid tertinggi  tiap  sel  nya  pada  kedua mikroalga adalah  pada  salinitas  20.    Salinitas  20  ppt merupakan  salinitas  di  bawah  salinitas hidup  mikroalga Porphyridium sp.    Pada salinitas  ini  mikroalga  mengalami  cekaman yang ekstrim sehingga menghasilkan kepadatan  yang  rendah.  Namun  menyum- bang  kandungan  lipid  yang  cukup  tinggi dalam pengukuran per individunya.  Diduga mikroalga dalam cekaman osmotik tersebut mempertahankan  diri  dengan  menghasikan lipid  pada  pertumbuhan  secara  alami tubuhnya.  Pada  proses  ini  pula,  pertum- buhan  cenderung  melambat  agar  tidak mengeluarkan banyak energi saat beradaptasi  (Widianingsih,  2011).    Secara alami,  dalam  kondisi  tidak  normal  atau dalam keadaan stress osmotik yang terjadi, dapat  mengganggu  keseimbangan  osmotik antara  lingkungan  luar  dan  lingkungan dalam sel (Erdmann dan Hagemann, 2001). Untuk menghindari keluarnya air maka perlu dibentuk dinding sel yang memiliki kemampuan mempertahankan keluarnya air dari  sel.    Dalam  keadaan  ekstrim  ini,  laju pertumbuhan semakin rendah namun kandungan  lipid  yang  diperoleh  semakin tinggi (Duan et al , 2012).

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah kepadatan  populasi  tertinggi  terjadi  pada perlakuan Isochrysis sp.  pada  salinitas  35 ppt.  Mikroalga  yang  menyumbang  lipid tertinggi pada tiap selnya adalah
Porphyridium sp.  pada  salinitas  20  ppt  dan Isochrysis sp.  pada  salinitas  20  ppt.  Stress osmotic  mempengaruhi  kandungan  lipid mikroalga.

## Saran
Saran  dalam  penelitian  ini  adalah  perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan pemberian  stress  osmotik  berupa  salinitas yang  berbeda  terhadap  mikroalga  sejenis maupun  dengan  jenis  lainnya.    Selain  itu perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  tentang uji  lipid  secara  kuantitatif  dengan  metode yang lebih baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Becker, E.W. 1994. Microalgae Biotechnology  and  Microbiology .  New York Cambridge.
Bouterfas, R., M. Belkoura, A. Dauta. 2006. The effects of irradiance and photoperiod  on  the  growth  rate  of three  freshwater  green  algae  isolated from  a  eutrophic  lake. Limnetica , 25(3): 647 –656.
Chisti, Y. 2007.  Biodiesel From Microalgae. BiotechnologyAdvances, Vol.25.
Davis,  C.C.  1951. The  Marine  Freshwater Plankton .  Michigan  State  University Press. USA.
Duan,  X.,  Ren.,  Guang.,  Yue.,  L.Liu.,  Zhu., W.Xue.  2012.  Salt-induced  Osmotic Stress  For  Lipid  Overproduction  in Batch  Culture  of Chlorella  vulgaris. AfricanJ.  Biotechnol., Vol.11  (27)  :
7072-7078.
Effendi,  H.  2003. Telaah  Kualitas  Air  Bagi
Pengelolaan
Sumberdaya dan
Lingkungan  Perairan .  UGM  Press. Yogyakarta.
Erdmann,  N  and  M.  Hagemann.  2001.  Salt Acclimation of Algae and Cyanobacteria: A Comparison. In: L.C Rai and J.P Gaur. Algal Adaptation to Environmental  Stres.  Physiological, Biochemical and Molecular Mechanism.  Springer-Verlag  Berlin Heidelberg. German.pp. 324-350. Fogg,  G.E.  1965. Algal  Cultures  and Phytoplankton Ecology . The University of Wisconsin Press. Medison. Hart,  B.T.,  Bailey.,  P.Edwards.,  K.Hortle., K.James.,  and  A.Mc  Mahon.  1991.  A Review  of  the  Salt  Sensitivity  of  the Australian Freshwater Biota. Hydrobiologia 210:105-144.
Hastuti,  W  dan  Djunaidah.  1991.  Heavy metal  activate  Synthesis  Of  Peptides In Chlamydomonas Reinhardtii , Plant,
Physiol , 98: 127 –136.
Kabinawa  and  Miyamoto.  1994. Cultivation of  Algae  Cells  Chlorella  pyrenoidesa.
Annual Report of IC Biotech.
International  Center  of  Cooperative  in Biotechnology, Engineering Faculty of
Osaka. Osaka – Japan.
Kawaroe,  M.  2010.  The  Prospect  of  Marine
Microalgae  as  Biofuel  (Oilgae)  for
Future  Alternative  of  Energy  Source.
Pusat Penelitian Surfaktan dan
Bioenergi  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor. Kawaroe,  M.,  T.Partono.,  A.Sunnudin., S.W.Sari., D.Agustine. 2010. Mikroalga : Potensi dan Pemanfaatannya  untuk  Produksi  Bio Bahan  Bakar.    untuk  Biofuel .  Institut Pertanian Bogor Press. Bogor. Mudjiman, A.2007.MakananIkan
PT. PenebarSwadaya, Jakarta.
Myers,  J.  1995. Growth  Characteristic  Of Algae  In  Relation  To  TheProblem  Of
Mass  Culture .  Carnigie  Institution  Of WashingtonPublication, DC.
Odum. 1993. Fundamental of Ecology . W.B. Souders Company. Toronto. 577 pp.
Panggalo,  E.S.  2012.  Identifikasi  Pengaruh
Variabel Kultur Pertumbuhan Terhadap Total Lipid Mikroalga Menggunakan  Metode  Permukaan Respon [skripsi] Universitas Indonesia. Jakarta. Round,  F.E.  1973.  The  Biology  Of  Algae. Edward Arnold. 278 pp. London
Safitri,  M.E.,  R.  Diantari.,  Suparmono.,  dan M.  Muhaemin.  2013.  Kandungan Lemak  Total Nannochloropsis sp. Pada  Fotoperiode  Yang  Berbeda  e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi
Budidaya  Perairan  Volume  I  No  2 ISSN: 2302-3600
Schenk,  P.  M.,  Griffiths.,  and  Harisson .
2008.  Second  Generation  Biofuel  : High Efficiency Microalgae for Biodesel Production. Bioenergy.
Sleigh,  M.A.  1989.  Adaptations  of  ciliary systems  for  the  propulsion  of    water and  mucus.  Comp.  Biochem.  Physiol. 94A:359-364.
Sudjiharno.  2002.  Budidaya  Fitoplankton dan
Zooplankton.
Departemen Kelautan  dan  Perikanan  Direktorat Jenderal  Perikanan  Budidaya,  Balai
Budidaya Laut Lampung.
Wayan, N.S.A., M.Afriastini., Maulida, Yoana.  2012. Potensi  Asam  Lemak Dari  Mikroalga  Nannochloropsis  sp. Sebagai  Antioksidan  Dan  Antibakteri.
Seminar  Nasional  XI  Pendidikan Biologi FKIP UNS 3-204.
Widianingsih.,  R.Hartati.,  E.H.Endrawati., M.Hilal. 2011. Kajian Kadar Total Lipid dan  Kepadatan Nitzschia sp.  yang Dikultur  dengan  Salinitas  Berbeda. Undip E-Journal 4030-8655-1.