Uji Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Etanol 70% Daun Dewandaru ( Eugenia Uniflora L.) Kombinasi dengan Metformin pada Tikus Jantan Wistar Diinduksi Na 2 EDTA
Blood Glucose Level Decrease Test of 70% Ethanol Extract Dewandaru ( Eugenia uniflora L.) Leaves Combine with Metformin in Wistar Male Rats Induced Na 2 EDTA

## GUSTI AYU RAI SAPUTRI, GUNAWAN PAMUDJI WIDODO*, DWI NINGSIH
Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi
Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518
*Email: gunawanpamudji@yahoo.com
(Diterima 28 Januari 2011, disetujui 15 Februari 2011)

## Abstrak
Diabetes mellitus merupakan penyakit yang banyak menjangkiti masyarakat. Daun dewandaru ( Eugenia uniflora L.) merupakan tanaman obat tradisional memiliki kandungan saponin, flavonoid, taninyang  salah  satu  manfaatnya  dapat  mengobati  diabetes  mellitus.  Penelitian  ini  bertujuan mengetahui dan mencari dosis kombinasi yang paling efektif dari kombinasi ekstrak etanol 70% daun  dewandaru  yang  dikombinasikan  dengan  metformin  terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah pada tikus jantan Wistar. Daun dewandaru dimaserasi dengan pelarut etanol 70 %, ekstrak kental yang diperoleh diujikan pada masing-masing kelompok hewan uji. Tiga puluh ekor tikus dibagi menjadi 6 kelompok. Kelompok I diberi ekstrak etanol 70% daun dewandaru 300 mg/200 gBB, kelompok II ( kontrol negatif ) yang diberi senyawa Na 2 EDTA 14 mg/200 gBB, kelompok III ( kontrol positif ) yang diberi metformin 4,5 mg/200 gBB, kelompok IV, V dan VI diberikan ekstrak dengan dosis berturut-turut 75 mg/ 200 gBB, 150 mg/200 gBB dan 300 mg/200 gBB yang dikombinasikan dengan metformin 4,5 mg/200 gBB. Perlakuan selama 12 hari, 3 hari dilakukan penginduksian  dengan  senyawa  Na 2 EDTA  kemudian  selama  9  hari  diberikan  perlakuan  sesuai dengan masing-masing kelompok. Penetapan kadar glukosa dilakukan pada hari ke-0, ke-3, ke-6, ke-9 dan ke-12. Kemudian data yang diperoleh dianalisa dengan ANOVA satu jalan dengan taraf kepercayaan  95%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  perbedaan  penurunan  kadar  glukosa darah yang cukup signifikan antar kelompok perlakuan ekstrak etanol 70% daun dewandaru dosis 75 mg, 150 mg dan 300 mg/200 gBB yang dikombinasikan dengan metformin. Ekstrak etanol 70% daun dewandaru dosis 75 mg/200 gBB yang dikombinasikan dengan metformin merupakan dosis efektif yang dapat menurunkan kadar glukosa darah dalam waktu tiga hari terapi.
Kata kunci: Daun dewandaru, metformin, kombinasi, Na 2 EDTA, antidiabetes
ISSN: 1693-8615 Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2011, hal 94-103

## Abstract
Diabetes mellitus is a disease that affects many people. Dewandaru ( Eugenia uniflora L .) leaves is a traditional medicinal plant contains saponins, flavonoids, tannins which one of the benefits to treat diabetes mellitus. Aimedof this study to identify and seek the most effective combination dose of 70% ethanol extract dewandaru leaves in combined with metformin to decrease blood glucose levels in Wistar male rats. Dewandaru leaves macerated with 70% ethanol solvent, condensed macerate obtained was tested in each group of test animals. Thirty rats were divided into 6 groups. Group I was given 70% ethanol extract of dewandaru leaves 300 mg/200 gBW, the second group (negative  control)  was  given  Na 2 EDTA  14  mg/200  gBW,  group  III  (positive  control)  was  given metformin 4.5 mg/200 gBW, group IV, V and VI was given the extract doses of 75 mg / 200 gBW, 150 mg/200 gBW and 300 mg/200 gBW combine with metformin 4.5 mg/200 gBW repectively. The treatment conduct for 12 days, 3 days induced with Na 2 EDTA, and then for 9 days given treatment according to each group. The glucose levels were determinated day 0, the 3rd, 6th, 9th and 12th. Then the data obtained were analyzed by one way ANOVA with a level of 95%. The result showed a decrease in blood glucose levels significantly between the treatment group 70% ethanol extract of dewandaru leaves dose of 75 mg, 150 mg and 300 mg/200 gBW in combine with metformin. 70% ethanol extract of dewandaru leaves dose of 75 mg/200 gBW in combine with metformin is effective dose that coulddecrease blood glucose levels with three days theraphy.
Keywords: Dewandaru leaves, metformin, combination, Na 2 EDTA, antidiabetic

## Pendahuluan
Diabetes  mellitus,  penyakit  gula  atau kencing  manis  adalah  suatu  gangguan  kronis yang  khususnya  menyangkut  metabolisme glukosa di dalam tubuh. Gangguan metabolisme  tersebut  disebabkan  kurangnya produksi hormon insulin. Insulin adalah salah satu  hormon  di  dalam  tubuh  manusia  yang dihasilkan atau diproduksi oleh sel beta pulau langerhans di dalam kelenjar pankreas (Utami 2006).
Diabetes mellitus memerlukan penanganan secara  multidisiplin  yang  mencakup  terapi diabetes  mellitus  yaitu  dengan  non  obat dan  obat.  Penyakit  ini  dilatarbelakangi  oleh
lingkungan dan usia, perokok, riwayat keluarga yang  terkena  diabetes  mellitus  (turunan), kegemukan  dan  kerusakan  kelenjar  pankreas (tidak  lagi  memproduksi  hormon  insulin  atau sedikit memproduksi hormon tersebut) (Mistra 2004).
Diabetes  mellitus  memiliki  dua  tipe  yaitu diabetes  mellitus  tipe  I  yang  tergantung  akan insulin  dan  diabetes  mellitus  tipe  II  yang tidak  tergantung  akan  insulin.  Pengobatan menggunakan  antidiabetes  oral  yang  dibagi menjadi  beberapa  golongan,  pada  penderita diabetes mellitus tipe I yaitu diberikan injeksi insulin untuk terapinya, sedangkan yang sering
digunakan untuk diabetes mellitus tipe II yaitu golongan biguanid (Mistra 2004).
Diabetes  mellitus  tipe  II  merupakan  tipe diabetes  yang  lebih  umum,  lebih  banyak penderitanya  dibandingkan  dengan  diabetes mellitus tipe I. Penderita diabetes mellitus tipe II mencapai 90-95% dari keseluruhan populasi penderita diabetes mellitus (Utami 2006).
Penggunaan  antidiabetes  oral  pada penderita  diabetes  mellitus  tipe  II  yaitu penggunaan golongan biguanid yang dikombinasikan dengan golongan sulfonilurea. Metformin  merupakan  salah  satu  jenis  ADO golongan biguanid bekerja dalam menurunkan kadar glukosa darah dengan cara meningkatkan sensitivitas reseptor insulin (Utami 2006).
Terapi  kombinasi  pada  kasus  diabetes mellitus  mulai  diberikan,  yaitu  pemberian kombinasi  antara  golongan  ADO  dengan insulin  dalam  bentuk  injeksi  atau  kombinasi antara  dua  golongan  ADO  yang  memiliki mekanisme kerja yang berbeda, pemberiannya dimulai dengan dosis rendah untuk kemudian dinaikkan  secara  bertahap  sesuai  dengan respon kadar glukosa darah.
Terapi  kombinasi  dengan  menggunakan senyawa  kimia  tetap  memberikan  efek  lain selain  efek  terapi  seperti  efek  samping. Pada  penderita  diabetes  mellitus  tipe  II  yang banyak  terjadi  pada  kebanyakan  penderita diabetes  sering  digunakan  kombinasi  ADO golongan  sulfonilurea  dengan  biguanid. Penggunaan  ADO  golongan  sulfonilurea seperti  glibenklamide  memiliki  efek  samping yang  sangat  besar  yaitu  terjadinya  suatu
keadaan  hipoglikemik.  Oleh  karena  efek samping yang ditimbulkan oleh glibenklamide tersebut  maka  dilakukan  penelitian  terhadap beberapa  tanaman  obat  yang  dapat  berfungsi sebagai antidiabetes yang tidak menimbulkan efek  hipoglikemik.  Keuntungan  inilah  yang diperlukan  oleh  masyarakat  khususnya  oleh penderita diabetes mellitus dalam menurunkan kadar glukosa darah, menggantikan salah satu kombinasi  ADO  dengan  tanaman  obat  yang memberikan efek terapi yang sama dengan efek samping yang minimal (Thomas 1992).
Daun  dewandaru  merupakan  salah satu  jenis  tanaman  yang  dipercayai  dapat memberikan  khasiat  sebagai  antidiabetes, bagian  tamanan  yang  dipakai  yaitu  bagian daun (Sidik 2009). Daun dewandaru ( Eugenia uniflora L.)  merupakan  salah  satu  jenis  dari familia Myrtaceae memiliki  kandungan  kimia antara lain: saponin, flavonoid, tanin (Hutapea et al. 1994). Daun dewandaru juga berkhasiat sebagai antioksidan,
hepatoprotektor,
antihipertensi  dan  bakteriosida  (Dalimartha 2003).
Penelitian ini
mengkombinasikan antara  ekstrak  daun  dewandaru  dengan ADO  golongan  biguanid  yaitu  metformin, dikarenakan  penderita  diabetes  lebih  sering direkomendasikan  menggunakan  kombinasi antara  ADO  golongan  sulfonilurea  yaitu glibenklamide  dengan  golongan  biguanid yaitu  metformin.  Penggunaan  kombinasi ekstrak daun dewandaru  dalam penelitian  ini bertujuan  untuk  membantu  metformin  dalam menurunkan kadar glukosa darah.

## Metode Penelitian

## Bahan
Bahan sampel yang digunakan pada penelitian ini  adalah  daun  dewandaru  yang  diperoleh  dari Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Tanaman  Obat  dan  Obat  Tradisional (B2P2TO2T)  Karanganyar,  Jawa  Tengah. Bahan kimia yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  etanol  70%  sebagai  larutan penyari.  Untuk  uji  farmakologi  digunakan Na 2 EDTA,metformin, larutan CMC Na 0,5%, larutan infus, reagen KIT glukosa, larutan TCA ( Trichloroacetic  Acid )  dan  akuades.  Bahan kimia  yang  digunakan  dalam  identifikasi kandungan senyawa simplisia adalah HCl 2N, metanol, serbuk Mg, HCl pekat, FeCl 3.

## Alat
Alat untuk membuat simplisia seperti pisau untuk merajang, mesin penggiling dan ayakan no.  40.  Alat  penyari  yang  digunakan  adalah seperangkat alat maserasi, evaporator. Alat yang digunakan untuk memisahkan serum terdiri dari tabung serologis dan centrifuge tipe T121 yang terdapat di Laboratorium Klinik Universitas Setia Budi, yellow tip, blue tip dan spektrofotometer Stardust  untuk  mengukur  kadar  glukosa  darah tikus. Alat untuk pengambilan darah tikus dan untuk memasukkan larutan aloksan monohidrat sebagai penginduksi kadar glukosa darah tikus digunakan  spuit  injeksi  insulin  1,0  ml  merck Terumo. Timbangan listrik AEG 120 ( Shimadzu ) dan alat - alat gelas.

## Pengumpulan Bahan dan Pembuatan Serbuk Daun Dewandaru
Daun  dewandaru  yang  digunakan  berasal dari Unit Pengeringan dan Penyediaan Bahan, Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Tanaman  Obat  dan  Obat  Tradisional (B2P2TO2T)  Karanganyar,  Jawa  Tengah pada  bulan  Januari  2010.  Daun  dewandaru dikeringkan  dengan  penjemuran  di  bawah sinar  matahari.  Daun  dewandaru  yang  telah dikeringkan  diblender  kemudian  diayak dengan ayakan no 100.

## Identifikasi Kualitatif Kandungan Kimia Daun Dewandaru
Identifikasi  kandungan  senyawa  kimia daun dewandaru meliputi identifikasi terhadap senyawa golongan saponin, flavonoid, tanin.

## Pemeriksaan saponin
Identifikasi  senyawa  golongan  saponin dilakukan  dengan  cara,  sedikit  ekstrak  etanol 70%  daun  dewandaru  dimasukkan  dalam tabung  reaksi  ditambah  air  (1:1),  kemudian ditambah  HCl  2N,  kocok  kuat-kuat.  Reaksi positif  jika  terbentuk  buih  yang  tidak  hilang dengan penambahan HCl 2N (Depkes 1993).

## Pemeriksaan flavonoid
Identifikasi  senyawa  golongan  saponin dilakukan  dengan  cara,  sedikit  ekstrak  etanol 70%  daun  dewandaru  dimasukkan  dalam tabung reaksi ditambah 1-2 ml metanol panas, kemudian  ditambah  serbuk  Mg  setelah  itu teteskan HCl pekat 4-5 tetes. Reaksi positif jika
terbentuk larutan berwarna merah pada lapisan amyl alkohol (Depkes 1993).

## Pemeriksaan tanin
Identifikasi  senyawa  golongan  tanin dilakukan  dengan  cara,  Ekstrak  etanol  70% daun dewandaru ditambahkan dengan 5 tetes larutan FeCl 3 5%. Reaksi positif jika terbentuk larutan berwarna hijau violet (Depkes 1993).

## Pembuatan Ekstrak Etanol 70% Daun Dewandaru
Serbuk  daun  dewandaru  yang  sudah ditimbang sebanyak 600 gram direndam dalam 4500  ml  etanol  70%  pada  botol  gelas  yang ditutup selama 5 hari dimana selama maserasi dilakukan  pengocokan  beberapa  kali.  Ekstrak maserasi  yang  diperoleh  dipekatkan  dengan evaporator hingga didapatkan ekstrak kental.

## Pengujian Antidiabetes Ekstrak Etanol 70% Daun Dewandaru
Hewan  uji  diadaptasikan  terlebih  dahulu dengan  kondisi  laboratorium  selama  3  hari. Kemudian hewan uji diinduksi Na 2 EDTA dengan dosis  14  mg/200  gBB  secara  intraperitoneal melalui  ekor  kemudian  dipelihara  selama  3 hari  agar  menjadi  hiperglikemik.  Setiap  tikus yang  digunakan  terlebih  dahulu  ditimbang dan diambil cuplikan darah melalui vena mata untuk mengukur kadar glukosa normal.
Sebanyak  30  tikus  yang  dibagi  menjadi  6 kelompok  masing-masing  terdiri  dari  5  ekor dengan pembagian kelompok sebagai berikut: kelompok  1  yaitu  kelompok  yang  diberi
perlakuan  dengan  pemberian  ekstrak  tunggal dengan  dosis  300  mg/200  gBB,  kelompok  2 yaitu  kontrol  negatif  yang  hanya  diinduksi dengan  senyawa  Na 2 EDTA  dosis  14  mg/200 gBB,  kelompok  3  yaitu  kontrol  positif  yang diberikan senyawa metformin dengan dosis 4,5 mg/200 gBB, kelompok 4 yaitu kelompok yang diberi  dosis  kombinasi  antara  ekstrak  daun dewandaru 75 mg/ 200 gBB dengan metformin 4,5 mg/ 200 gBB, kelompok 5 yaitu kelompok yang  diberi  dosis  kombinasi  antara  ekstrak daun  dewandaru  150  mg/  200  gBB  dengan metformin  4,5  mg/200  gBB  dan  kelompok  6 yaitu  kelompok  yang  diberi  dosis  kombinasi antara  ekstrak  daun  dewandaru  300  mg/200 gBB dengan metformin 4,5 mg/200 gBB.
Pemberian  perlakuan  dilakukan  selama 12  hari.  Pemeriksaan  kadar  glukosa  darah tikus  pada  tiap  kelompok  dilakukan  melalui vena mata pada hari ke-0, hari ke-3, hari ke-6, hari ke-9 dan hari ke-12. Kadar glukosa darah tikus  diambil  setelah  dipuasakan  semalaman atau  selama  12  jam  (Tjokroprawiro  1999). Pengukuran  kadar  glukosa  darah  sebelum dan  setelah  diinduksi  Na 2 EDTA  dilakukan untuk mengetahui kadar glukosa sebelum dan sesudah tikus mengalami hiperglikemik.

## Analisa Hasil
Analisis  statistik  yang  digunakan  dalam pengolahan data yaitu analisa varian satu jalan dengan program computer SPSS. Jika berbeda bermakna  atau  signifikan  dilanjutkan  dengan menggunakan uji Post Hoc Test.

## Hasil dan Pembahasan

## Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak

## Etanol 70 % Daun Dewandaru
Identifikasi  dilakukan  terhadap  ekstrak etanol  untuk  menguji  keberadaan  senyawa golongan  saponin,  flavonoid,  tanin  yang  ada dalam  ekstrak  etanol  daun  dewandaru.  Hasil yang diperoleh terlihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan
kimia ekstrak etanolik 70% daun dewandaru
No Kandungan kimia Identifikasi Pengamatan Pustaka (Depkes 1993) 1 Saponin Ekstrak-air (1:1) + HCl 2N, kocok kuat-kuat Terbentuk buih yang mantap, + HCl buih tidak hilang Terdapat buih yang mantap setinggi 1-10 cm, + HCl buih tidak hilang 2 Flavonoid Ekstrak + 1-2 ml metanol panas + serbuk Mg + 4-5 tetes HCl pekat Larutan berwarna merah pada lapisan amyl alkohol Larutan berwarna merah/jingga pada lapisan amyl alkohol 3 Tanin Ekstrak+5 tetes FeCl 3 5% Larutan terbentuk warna hijau violet Larutan berwarna hijau violet

## Hasil Pengujian Antidiabetes Ekstrak
Etanol 70% Daun Dewandaru
Tabel 2. Kadar glukosa rata-rata tiap kelompok sebelum dan sesudah perlakuan Perlakuan Hari ke- (mg/dl) 0 3 6 9 12 E 300 mg/200 gBB 104.4 135.8 114.8 73.4 70 Na2EDTA 14 mg/200 gBB 101.6 134.8 143.2 147.6 164 M 4,5 mg/200 gBB 94.4 132 118.8 75.2 72 E (75 mg/200 gBB) + M (4,5 mg/200 gBB) 102.8 129.6 117.6 73 68.4 E (150 mg/200 gBB) + M (4,5 mg/200 gBB) 104 127.6 118.4 70.4 59.6 E (300 mg/200 gBB) + M (4,5 mg/200 gBB) 104.8 124.4 112.8 63.6 55.4 E= ekstrak daun dewandaru M= Metformin
Gambar 1. Kurva hubungan waktu (jam) terhadap kadar glukosa darah (mg/dl) sebelum dan setelah dilakukan perlakuan.
Pada  kurva  di  atas  dapat  dilihat  bahwa pada hari ke-0 kadar glukosa hewan uji yaitu tikus  jantan  Wistar  dalam  keadaan  normal (50  mg/dl-  100  mg/dl)  dikarenakan  belum ada  perlakuan  yang  diberikan  pada  setiap kelompok.  Sedangkan  pada  hari  ke-3  dapat terlihat  peningkatan  kadar  glukosa  darah hewan uji dikarenakan telah diinduksi dengan menggunakan  senyawa  Na 2 EDTA.  Pada  hari ke-6, 9 dan 12 terjadi penurunan kadar glukosa setelah  diberikan  perlakuan  dengan  ekstrak etanol 70% daun dewandaru yang kombinasi dengan metformin.
Pada kurva hubungan waktu (hari) dengan kadar  glukosa  tiap  kelompok  (mg/dl)  yang terdapat pada gambar 1, dapat dilihat pengaruh pemberian  ekstrak  yang  dikombinasikan dengan  metformin  pada  kelompok  perlakuan selama 12 hari. Pada hari ke-0 kadar glukosa
darah hewan uji dalam keadaan normal setelah itu dilakukan penginduksian dengan senyawa Na 2 EDTA pada semua hewan uji selama 3 hari. Setelah itu dilakukan pengukuran kadar glukosa kembali  pada  setiap  kelompok  dan  terlihat pada kurva adanya peningkatan kadar glukosa, peningkatan  ini  dikarenakan  pemberian senyawa  Na 2 EDTA  dengan  dosis  yang  tinggi (40-100 mg/kg BB) dapat melisiskan membran sel  terutama  pada  daerah  pankreas  sehingga terjadi degenerasi sel mengakibatan timbulnya penurunan fungsi pankreas yaitu salah satunya dalam mengekskresikan insulin(Depkes 1993). Kadar insulin setelah pemberian Na 2 EDTA pada setiap  kelompok  terjadi  penurunan  sehingga glukosa  dalam  darah  tidak  dapat  diubah menjadi ATP dan kadarnya akan tinggi dalam darah.Pemberian senyawa Na 2 EDTA selama 3 hari  dapat  menimbulkan  hiperglikemik  yang permanen.
Pada  hari  ke-3  setelah  pengukuran  kadar glukosa  pada  setiap  kelompok  dilakukan
perlakuan,  perlakuan  pada  tiap  kelompok dapat dilihat keterangannya padatabel 7. Pada kelompok  I  diberikan  dosis  tunggal  ekstrak, kelompokII kontrol negatif diberikan senyawa Na 2 EDTA,  kelompok  III  kontrol  positif diberikan  perlakuan  metformin  saja,  pada kelompok  IV,  V  dan  VI  diberikan  kombinasi antara ekstrak dengan metformin dengan dosis ekstrak yang bervariasi yaitu ½ dosis ekstrak, 1 x dosis ekstrak dan 2 x dosis ekstrak. Pemberian perlakuan dilakukan dari hari ke-3 sampai hari ke-12  yaitu  selama  9  hari,  pengukuran  kadar glukosa  darah  dilakukan  selama  3  hari  sekali dan  sebelum  dilakukan  pengukuran  darah dipuasakan selama 12 jam terlebih dahulu.
Prinsip  dari  penelitian  yang  dilakukan yaitu melihat berapa dosis efektif ekstrak daun dewandaru dalam menurunkan kadar glukosa darah hewan uji yang dikombinasikan dengan metformin  dan  pada  hari  keberapakah  dosis tersebut  dapat  memberikan  penurunan  kadar glukosa hewan uji. Penelitian ini mengharapkan kerja dari ekstrak dapat memperbaiki keadaan hiperglikemik yaitu menurunkan kadar glukosa darah.
Dilihat  dari  kurva  pada  gambar  1 penurunan  kadar  glukosa  terjadi  dari  awal pemberian  ekstrak  yang  dikombinasikan dengan metformin, pemberian ekstrak tunggal maupun pemberian metformin tunggal sebagai kontrol positif, sedangkan pada kontrol negatif terlihat kadar glukosa meningkat tiap harinya. Penurunan  kadar  glukosa  darah  terjadi  pada kelompok  I,  III,  IV,  V  dan  VI,  pada  kurva  ini dapat  di  analisa  dosis  efektif  dari  kombinasi ekstrak  dengan  metformin  dan  pada  hari
keberapakah  ekstrak  yang  dikombinasikan dengan metformin sudah dapat menimbulkan efeknya.
Pada  hari  ke-0  dan  hari  ke-3  dengan menggunakan  metode ANOVA satu  jalan menunjukkan  tidak  ada  beda  pada  setiap kelompok perlakuan, hal ini dikarenakan pada hari  ke-0  merupakan  hasil  pengukuran  kadar glukosa normal (50 mg/dl -100 mg/dl) sedangkan yang  hari  ke-3  merupakan  hasil  pengukuran kadar  glukosa  setelah  diinduksi  tetapi  belum dilakukan perlakuan.Pada hari ke-6 yaitu pada kontrol negatif (Na 2 EDTA 14 mg/200 gBB) ada beda  dengan  semua  perlakuan,  sedangkan kontrol  positif  (metformin  4,5  mg/200  gBB) tidak ada beda dengan ekstrak tunggal dan dosis kombinasi  ekstrak  daun  dewandaru  dengan metformin yaitu 75 mg/200 gBB, 150 mg/200 gBB dan 300 mg/200 gBB. Hal ini berarti dari hasil ANOVA di  atas  menunjukkan  bahwa ekstrak tunggal, dosis kombinasi ekstrak daun dewandaru  dengan  metformin  yaitu  75,  150 dan 300 mg/200 gBB memiliki efek yang sama dengan  metformin  dalam  menurunkan  kadar glukosa  pada  3  hari  pemberian  perlakuan, diukur kadar glukosa pada hari ke-6.Pada hari ke-9 yang diuji dengan menggunakan Dunnet T3  diperoleh  hasil  bahwa  kontrol  negatif (Na 2 EDTA  14  mg/200  gBB)  memiliki  beda makna  dengan  semua  perlakuan  sedangkan pada  kontrol  positif  tidak  ada  beda  makna dengan  ekstrak  tunggal,  dosis  kombinasi ekstrak  dengan  metformin  pada  dosis  75  mg dengan  150  mg.  Hal  ini  dapat  disimpulkan bahwa  pada  hari  ke-9  dosis  ekstrak  tunggal, dosis kombinasi dengan metformin pada dosis
75 mg dan 150 mg memiliki efek penurunan yang  sama  dengan  metformin.  Pada  hari ke-12  hasil  uji ANOVA menunjukkan  hasil yang  signifikan  yang  kemudian  dilanjutkan dengan uji menggunakan Dunnet T3, hasilnya menunjukkan  bahwa  kontrol  positif  tidak ada  beda  dengan  ekstrak  tunggal  dan  dosis kombinasi  ekstrak  daun  dewandaru  dengan metformin  pada  dosis  75  mg/200  gBB.  Hal ini  berarti  dosis  tersebut  masih  memberikan efek  penurunan  glukosa  sampai  pada  hari ke-12  yang  efeknya  sama  dengan  metformin sedangkan pada dosis kombinasi ekstrak daun dewandaru  dengan  metformin  150  mg  dan 300  mg  memiliki  efek  yang  berbeda  dengan metformin  (kontrol  positif)  yang  diduga memiliki  efek  lebih  dari  metformin  dalam menurunkan  kadar  glukosa  darah  yang  telah disajikan pada gambar 1.
Dalam  penelitian  ini  ekstrak  daun dewandaru memberikan efek penurunan kadar glukosa  darah,  dari  hasil  pengamatan  dapat dilihat  bahwa  ekstrak  daun  dewandaru  juga membantu  metformin  dalam  menurunkan kadar  glukosa  darah  hewan  uji.  Kerja  dari ekstak daun dewandaru dan senyawa yang aktif bekerja dalam penurunan kadar glukosa darah ini  belum  diketahui,  jadi  perlu  dilakukannya penelitian lebih lanjut.

## Kesimpulan
Ekstrak  etanol  70  %  daun  dewandaru ( Eugenia  uniflora L.)  pada  dosis  75  mg/200 gBB  yang  dikombinasikan  dengan  metformin 4,5 mg/200 gBB merupakan dosis efektif dalam menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan Wistar.
Ekstrak etanol 70 % daun dewandaru pada dosis  75  mg/200  gBByang  dikombinasikan dengan  metformin  4,5  mg/200  gBB  dapat memberikan efeknya sejak 3 hari terapi.

## Daftar Pustaka
Dalimartha  S.  2003. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia .  Jilid  III.  Jakarta:  Trubus Agriwidya.
DepKes  RI.  1993. Pedoman  Pengujian  dan Pengembangan  Fitokimia:  Penapisan Farmakologi,  Pengujian  Fitokimia  dan Pengujian  Klinik. Jakarta:  Yayasan Perkembangan Obat Bahan Alam.
Hutapea  RJ.  1994. Inventaris  Tanaman  Obat Indone sia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Balai  penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan.
Mistra.  2004. Tiga  Jurus  Melawan  Diabetes Mellitus . Jakarta: Pustaka Pembangunan
Swadaya Nusantara. Sidik  E.  2009.  Uji  penurunan  kadar  glukosa darah  tablet  effervescent  kombinasi ekstrak daundewandaru (Eugenia uniflora  L.)  dan  herba  sambiloto (Andographis  panicula  NESS.)  pada tikus  yang  dibebani  glukosa  [Skripsi]. Surakarta: Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah.
Thomas ANS. 1992. Tanaman Obat Tradisional 2 . Yogyakarta: Penerbit Kanisius.
Tjokroprawiro  A.  1999 .  Diabetes  Mellitus: Klasifikasi,  Diagnosis  dan  Terapi.
Edisi. III Cetakan ke-2. Jakarta: Penerbit Gramedia Pustaka Utama.
Utami  P.  2006. Tanaman  Obat  Untuk Mengatasi  Diabetes  Mellitus. Jakarta:
Agromedia Pustaka.