Penulis
Ratna Djamil 1* , Diah Kartika Pratami 1 , Lola Vidia Riyantika 1
Afiliasi 1 Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta, 12640
Kata Kunci
 antidiabetes  α-glukosidase
 daun keji beling
 in vitro
 Sericocalyx crispus (L.) Bremek
Keywords  antidiabetic  α- glucosidase
 in vitro
 keji beling leave
 Sericocalyx crispus (L.) Bremek
Diterima 17 Juli 2019 Direvisi 31 Oktober 2019 Disetujui 15 Desember 2019 *Penulis Koresponding
Ratna Djamil email: ratnadj_ffup@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Daun  keji  beling  ( Sericocalyx  crispus (L.)  Bremek)  [Sinonim Strobilanthes  crispa (L.)]  merupakan salah  satu  tanaman  yang  secara  empiris  digunakan  oleh  masyarakat  untuk  membantu  pengobatan. Menurut penelitian daun keji  beling diketahui mempunyai khasiat sebagai antidiabetes. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi golongan senyawa yang terkandung dalam ekstrak, mutu ekstrak dan aktivitas  penghambatan  enzim  α-Glukosidase  secara in  vitro .  Serbuk  simplisia  diekstraksi  dengan pelarut etanol 70% secara maserasi kinetik, kemudian dilakukan penapisan fitokimia, penetapan mutu ekstrak  dan  uji  aktivitas  penghambatan  enzim  α-Glukosidase.  Hasil  penapisan  menunjukkan  ekstrak mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin,  steroid  dan  triterpenoid.  Hasil  penetapan  mutu  ekstrak menunjukkan bentuk ekstrak kental berwarna hijau kehitaman; rasa pahit; kadar sari larut air 60,46%; kadar sari larut etanol 73,45%; kadar abu total 15,06%; kadar abu tidak larut asam  3,10%; kadar abu larut  air  11,29%;  kadar  air  7,68%; susut  pengeringan  9,25%; sisa  pelarut  0,38%; kadar  Pb  0,4941 bpj; kadar Cd 0,0222 bpj; Angka Lempeng Total (ALT) 4,52x10 2 koloni/g; Angka Kapang Kamir (AKK) terlalu sedikit untuk dihitung (TSUD); dan kadar flavonoid total 2,39%. Hasil uji aktivitas penghambatan enzim α-Glukosidase pada akarbose dan ekstrak kental keji beling  menunjukkan IC 50 masing-masing sebesar 50  bpj  dan  86,2  bpj.  Dapat  disimpulkan  ekstrak  kental  daun  keji  beling  memenuhi  persyaratan  mutu ekstrak  dan  memiliki  aktivitas  sebagai  penghambat  enzim  α-Glukosidase.  Keji  beling memiliki  potensi untuk dikembangkan lebih lanjut sebagai obat herbal antidiabetes.

## ABSTRACT
Keji beling leaves (Sericocalyx crispus (L.) Bremek) [Synonym  Strobilanthes crispa (L.)] is one of the plants  empirically  used  by  the  community  to  aid  the  treatment.  According  to  previous  research,  keji beling leaves is known to have efficacy as antidiabetic agent. This research aims to identify the class of compounds contained in extract, the quality of extracts and inhibition activity of α-Glucosidase enzyme. The keji beling leaves powder was extracted with 70% ethanol solvent by kinetic maceration, then was analyzed  its  phytochemical  screening,  determination  of  the  quality  of  the  extract  and  α-glucosidase inhibition  activity.  The  phytochemical  screening  results  have  shown  the  extract  contains  flavonoids, saponins, steroids and triterpenoids. The result of the quality of the extract has showed a thick extract form, dark green colored, bitter taste, water soluble extract content (60.46%), ethanol soluble extract content  (73.45%),  total  ash  content  (15.06%),  acid  insoluble  ash  content  (3.10%),  water  soluble  ash content (11.29%), moisture content (7.68%), loss on drying (9.25%), residual solvent (0.38%), Pb metal contamination  (0.4941  ppm),  Cd  metal  contamination  (0.0222  ppm),  total  plate  count  microbial contamination  (4.52x10 2 colony/g)  and  the  number  of  yeast  and  mold  was  Too  Numerous  To  Count (TNTC), and total flavonoid content (2.39%). The IC 50 of antidiabetic activity by α-glucosidase inhibition of acarbose and keji beling viscous extract was 50 ppm and 86.2 ppm, resvectively. It can be concluded that  the  thick  extract  of  keji  beling  leaves  meets  the  quality  requirements  of  the  extract  and  has  α- glucosidase inhibition activity. Our findings certainly suggest among others the use of keji beling leaves as a source of potentially useful antidiabetic agents.
Pemeriksaan Parameter Mutu dan Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-Glukosidase dari Ekstrak Etanol 70% Daun Keji Beling ( Sericocalyx Crispus (L.) Bremek)
Quality  Parameters  Test  and  α-Glukosidase  Enzyme  Inhibitory  Activity  of  70%  Ethanol  Extract  Keji Beling Leaves (Sericocalyx Crispus (L.) Bremek)
Djamil et al .

## PENDAHULUAN
Salah  satu  tanaman  yang  telah  lama  digunakan masyarakat  dalam  rangka  pengobatan  tradisional karena  mengandung  metabolit  sekunder  berkhasiat sebagai  obat  adalah  tanaman  keji  beling  ( Sericocalyx crispus (L.)  Bremek)  [Sinonim Strobilanthes  crispa (L.)] (Adibi et al. 2017). Penelitian sebelumnya menunjukkan  daun  keji  beling  memiliki  efek hipoglikemik  pada  tikus  sehingga  dapat  berkhasiat sebagai  antidiabetes  (Samal  2013).  Pemberian  dosis ekstrak  etanol  daun  keji  beling  menunjukkan penurunan kadar glukosa darah secara signifikan. Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  keji  beling  pada  dosis  200  mg/kg  berat badan  (BB)  menunjukkan  kadar  glukosa  darah  sebesar 56,77%  dibandingkan  dengan  dosis  100  mg/kgBB (49,41%)  dan  metformin  pada  dosis  120  mg/kgBB (53,84%).  Ekstrak  n-heksana,  diklorometana  dan metanol daun keji beling asal Provinsi Riau mempunyai efek sitotoksik dengan LC 50 33,49 µg/ml, 244,34 µg/ml, 143,88  µg/ml  (Rahmah et  al .  2011).  Daun  keji  beling memiliki  kandungan  senyawa  saponin,  flavonoid, sterol, terpen, lemak dan mineral (Artanti et al . 2017). Daun keji beling secara empiris telah banyak digunakan sebagai obat diabetes mellitus (Kusnul et al. 2015).
Diabetes  mellitus  merupakan  penyakit  metabolik yang  disebabkan  karena  adanya  kelainan  sekresi  atau kerja  insulin,  merupakan  penyakit  degeneratif  yang menduduki  peringkat  4  di  Indonesia,  ditandai  dengan adanya  hiperglikemi.  Salah  satu  metode  pengobatan diabetes mellitus adalah dengan penghambatan enzim α-glukosidase  dengan  menggunakan  akarbose  yang dapat  menghambat  penyerapan  glukosa  di  usus sehingga dapat mengurangi kebutuhan insulin (Tanty & Herlina 2017).
Dalam  rangka  pengembangan  daun  keji  beling sebagai  tanaman  obat  berkhasiat  antidiabetes  maka perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut,  dengan melakukan standardisasi simplisia daun keji beling dan menguji  aktivitasnya  dalam  penghambatan  enzim  α- glukosidase.

## METODE Bahan
Daun segar tanaman keji beling  ( Sericocalyx crispus L. Bremek)  diperoleh  dari  Balai  Penelitian  Tanaman Rempah  dan  Obat  (BALITTRO),  Cimanggu-Bogor. Pelarut  dan  larutan  pereaksi  etanol 70%,  asam  klorida encer P, ammonia 30% dan 25%, kloroform P, pereaksi Dragendorff,  pereaksi  Mayer,  serbuk  magnesium  P, asam  klorida  25%,  amil  alkohol  P,  larutan  besi  (III)
klorida 1%, pereaksi Stiasny, natrium  asetat P, eter P, asam  asetat  glacial  P,  asam  sulfat  pekat,  natrium hidroksida 1 N, petroleum eter, etanol 96%, dan dimetil sulfoksida P, larutan dapar pospat pH 7,0, pereaksi Karl Fischer,  asetonitril  P,  asam  klorida  2  N,  magnesium sulfat  25%,  asam  sufat  2  N,  dapar  asetat  pH  3,5, tioasetamida  LP,  kalium  pospat  monobasa,  dimetil sulfonat. Potato  Dextrose  Agar (PDA), Nutrient  Agar (NA), heksametiltetramin (HMT), AlCl 3 diperoleh dari Q- Lab  Fakultas  Farmasi  Universitas  Pancasila.  Enzim  α- glukosidase,  substrat  p-nitrofenil-α-D-glukopiroksida, bovine  serum  albumin,  dan  akarbose  dibeli  dari  PT Sigma-Aldrich (Sigma-Aldrich, Missouri, USA).

## Alat
Tabung reaksi, pipet tetes, botol gelap, mikro pipet, pipet  volum,  batang  pengaduk,  gelas  ukur,  labu tentukur,  vial,  erlenmeyer,  beaker,  labu  sumbat,  pipa kapiler, Magnetic  Stirrers  Hot  Plate CMAX  HS (IKA, Selangor, Malaysia), rotavapor, cawan penguap, cawan petri,  ayakan  no.4  dan  no.18,  deksikator,  oven, penjepit besi, penjepit kayu, kertas saring, kertas saring bebas  abu,  lumpang  dan  alu,  penangas  air,  timbangan analitik  Sartorius  BL  210  S  (Sartorius  Lab  Instruments GmbH  &  Co.,    Goettingen,  Germany),  spatula,  mesin penghalus  blender,  lemari  pendingin,  tanur,  krus, kompor  listrik,  BioTek  ELx800 Absorbance  Microplate Readers (Thermo  Fischer  Scientific,  Massachusetts, United  States),  kromatografi  gas  Shimadzu  17A (Shimadzu, Kyoto Prefecture, Japan).

## Determinasi Tanaman
Sampel  daun  keji  beling  ( Sericocalyx  crispus (L.) Bremek)  diidentifikasi  di  Pusat  Penelitian  Biologi- Herbarium Bogoriense, LIPI, Cibinong, Bogor.

## Skrining Fitokimia
Identifikasi  golongan  senyawa  kimia  dari  daun  keji beling  dilakukan  sesuai  metode  Farnsworth  (1966), meliputi  pemeriksaan  kandungan  senyawa  kimia seperti  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tannin,  minyak atsiri, steroid/terpenoid, kuinon, dan kumarin.

## Penetapan Mutu Simplisia
Standard mutu simplisia daun keji beling ditetapkan dengan  penetapan  Bahan  Organik  Asing  (BOA)  dan pengukuran  derajat  halus  serbuk  sesuai  yang  tertera pada Materia Medika Indonesia (1995) dan Farmakope Herbal Indonesia (2008).
Pemeriksaan Parameter Mutu dan Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-Glukosidase dari Ekstrak Etanol 70% Daun Keji Beling ( Sericocalyx Crispus (L.) Bremek) 3

## Pembuatan Ekstrak Etanol 70% Daun Keji Beling
Sejumlah 500 gram serbuk simplisia daun keji beling dimaserasi  secara  maserasi  kinetik  dengan  5  L  etanol 70% selama 3 hari. Ekstraksi daun keji beling dilakukan re-maserasi  sebanyak  10  kali.  Maserat  yang  diperoleh dikumpulkan  lalu  dipekatkan  dengan  rotavapor  pada suhu  40°C  dan  rotasi 60  rpm  hingga  diperoleh  ekstrak kental , kemudian  dimasukkan  ke  dalam  lemari pendingin agar kualitas ekstrak tetap terjaga.

## Penetapan Parameter Mutu Spesifik Ekstrak
Metode  yang  dilakukan  sesuai  yang  ditetapkan Departemen Kesehatan RI (2000) mengenai parameter standar ekstrak tumbuhan obat. Pemeriksaan organoleptik  dilakukan  dengan  pengamatan  terhadap konsistensi,  warna,  bau  dan  rasa  dari  ekstrak  kental daun  keji  beling.  Kemudian  dilakukan  penetapan senyawa terlarut dalam air. Kadar sari yang larut dalam air  dihitung  dalam  persen  senyawa  yang  larut  dalam air,  dihitung  terhadap  ekstrak  awal.  Untuk  penetapan kada  sari  larut  dalam  etanol  dihitung  dalam  persen senyawa  yang  larut  dalam  etanol,  dihitung  terhadap berat ekstrak awal.

## Pemeriksaan Parameter Non-Spesifik
Parameter  yang  diukur  meliputi  penetapan  susut pengeringan,  kadar  air,  kadar  abu  total,  abu  tak  larut asam,  abu  tak  larut  air,  dan  sisa  pelarut  ekstrak. Metode  pemeriksaan  mengacu  pada  metode  yang tertera  pada  Departemen  Kesehatan  RI  (2000) mengenai  parameter  standar  ekstrak  tumbuhan  obat. Susut  pengeringan  ditetapkan  berdasarkan  prinsip gravimetri.    Penetapan  kadar  air  dilakukan  dengan metode  Karl  Fischer.    Penetapan  kadar  abu  total dengan  menggunakan  2  gram  ekstrak  yang  dipijarkan pada  suhu  450 0 C.  Sedangkan  kadar  abu  tidak  larut asam  dilakukan  dengan  menghitung  kadar  abu  yang tidak  larut  dalam  25  mL  asam  klorida  encer  P  yang dididihkan selama 5 menit. Untuk kadar abu tidak larut air berdasarkan kadar abu yang tidak larut dalam 25 mL air  mendidih  selama  5  menit.  Sisa  pelarut  ekstrak ditetapkan  menggunakan  kromatografi  gas  Shimadzu 17A  (Shimadzu,  Kyoto  Prefecture,  Japan).  Kondisi operasional  menggunakan  kolom  kaca  30  cm  x  0,32 mm  berisi  fase  diam  dialirkan  TR-WAX  dengan  ukuran partikel  100-200  mesh,  nitrogen  P  sebagai  gas pembawa,  laju  alir  gas  pembawa  20  mL/menit,  suhu injektor 200 0 C dan suhu detektor 160 0 C.

## Uji Cemaran Logam Berat
Kandungan  logam  berat  di  dalam  ekstrak  dianalisis menggunakan spektrofotometri serapan atom Shimadzu AA-6300 (Shimadzu, Kyoto Prefecture, Japan) mengacu  pada  metode  yang  dilakukan  oleh  Sugiastuti et  al. (2006).  Penetapan  logam  berat  yang  diperiksa meliputi kadar timbal dan kadmium.

## Uji Cemaran Mikroba
Analisis  cemaran  mikroba  pada  ekstrak  dilakukan sesuai metode  yang  dilakukan  Tambunan et  al. (2016) dengan  sedikit  modifikasi.  Untuk  menentukan  Angka Lempeng  Total  (ALT)  sejumlah  1,0  g  ekstrak ditambahkan  dapar  fosfat  (pH  7,2)  hingga  10  mL. Kemudian  dilakukan  pengenceran  hingga  10 -6 .  Dari setiap pengenceran dipipet 1 mL ke dalam cawan petri steril  dan  dibuat  triplo.  Ke  dalam  tiap  cawan  petri dituangkan  15-20  mL  media  perbenihan  NA  (45±1 0 C). ALT  dinyatakan  berdasarkan  jumlah  koloni  yang tumbuh  pada  inkubasi  cawan  petri  dengan  posisi terbalik selama 24 jam suhu 35-37 0 C. Untuk penentuan Angka  Kapang  Khamir  (AKK)  dilakukan  prosedur  yang sama  dengan  pengerjaan  ALT  dengan  menggunakan media perbenihan Potato Dextrose Agar (PDA).

## Penetapan Kadar Flavonoid Total
Ekstrak kental etanol 70 % yang diperoleh dianalisis kadar  flavonoid  total  dengan  menggunakan  metode spektrofotometri  ultraviolet-cahaya  tampak  dengan prinsip  kolorimetri  sesuai  metode  yang  tertera  pada Suplemen  II  Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  1 (Depkes  RI  2011).  Larutan  uji  sebanyak  200  mg ditambahkan  berturut-turut  1  mL  larutan  larutan heksametilentetramin 0,5% b/v; 20 mL aseton P dan 2 mL  larutan  asam  klorida  P,  direfluks  selama  30  menit. Selanjutnya  disaring  menggunakan  kapas,  filtrat dimasukkan  kedalam  labu  takar  100  mL.  Direfluks kembali residu dengan 20 mL aseton P selam 30 menit, kemudian saring dan campur filtrat kedalam labu takar 100 mL dan ditambahkan aseton P sampai tanda. Pipet 20,0 mL ke dalam corong pisah, ditambahkan 20 mL air dan diekstraksi 3 kali, tiap kali menggunakan 15 mL etil asetat  P.  Kemudian  dimasukkan  fase  etil  asetat kedalam labu takar 50-mL dan ditambahkan etil asetat P sampai tanda. Pipet 10,0 mL larutan uji kedalam labu tentukur  25-mL,  ditambahkan  larutan  asam  asetat glasial  5%  v/v  dalam  metanol  P  sampai  tanda.
Djamil et al .
Pipet 10,0 mL larutan uji ke dalam labu tentukur 25-mL, ditambahkan  1,0  mL  larutan  asam  klorida  dan  larutan asam  asetat  glasial  5%  v/v  dalam  metanol  P  sampai tanda.  Pengukuran  dilakukan  setelah  inkubasi  selama 30  menit  setelah  penambahan  larutan  alumunium klorida  menggunakan  spektofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  425,5  nm.  Kadar  flavonoid  total dihitung seperti tertera pada monografi dengan rumus 1:
% F = X 1,25 X (1)
Keterangan :
% F  =  Kadar  flavonoid  total  dihitung  sebagai flavonoid pembanding
C p =  Konsentrasi larutan pembanding
A u =  Serapan  larutan  uji  dengan  aluminium klorida
A bu =  Serapan  larutan  uji  tanpa  aluminium klorida
A p =  Serapan  larutan  pembanding  dengan aluminium klorida
A bo =  Serapan larutan pembanding tanpa aluminium klorida 1,25  =  Faktor konstanta

## Uji Penghambatan Enzim α-Glukosidase
Pengukuran  aktivitas  α-glukosidase  secara in  vitro sesuai metode yang dikembangkan oleh Loranza (2012) dan  Ramdanis et  al. (2012)  dengan  sedikit  modifikasi. Nilai  penghambatan  diukur  absorbansinya  dengan 96 well  Microplate  Reader EL  x  800  (Thermo  Fischer Scientific, Massachusetts, United States) pada λ 405 nm sesuai dengan prosedur pada Tabel 1.
Cara  Penetapan  persentase  aktivitas  penghambatan (%)  dihitung  dengan  menggunakan  persamaan  2 sebagai berikut :
Penghambat % inhibisi = (2) Keterangan : C =  Absorbansi  aktivitas  enzim  tanpa  adanya inhibitor S =  Absorbansi aktivitas enzim dengan penambahan  sampel yang diuji (S 1 -S 0 ) S 1 =  Absorbansi  p-nitrofenol  sebagai  akibat aktivitas  dengan  penambahan  enzim terlebih dahulu
S 0 =  A  bsorbansi  p-nitrofenol  sebagai  akibat aktivitas  dengan  penambahan  natrium karbonat terlebih dahulu
Nilai  IC 50 dihitung  dengan  menggunakan  persamaan regresi linier, konsentrasi sampel sebagai sumbu x dan % penghambatan sebagai sumbu y dari persamaan y = a  +  bx  dapat  dihitung  nilai  IC 50 dengan  menggunakan persamaan 3 berikut:
IC 50 = (3)

## HASIL & PEMBAHASAN Determinasi Tanaman
Hasil  determinasi  dari  Herbarium  Bogoriense  Bidang Botani, Pusat  Penelitian Biologi-LIPI Kebun Raya Bogor menunjukkan  bahwa  tanaman  yang  digunakan  dalam penelitian adalah benar Sericocalyx crispus (L.) Bremek dari suku Acanthaceae.

## Tabel 1. Prosedur Uji penghambatan α-glukosidase
Reagen Volume (µl) A 1 A 0 EKB 1 EKB 0 B K Sampel 50 50 50 50 - - DMSO - - - - 50 50 Dapar fosfat pH 7.0 450 450 450 450 450 450 p-nitrofenil-α-D-glukopiranosida 10 mM 250 250 250 250 250 250 inkubasi selama 5 menit pada suhu 37°C Larutan α-glukosidase 0.025 U/mL 250 - 250 - - 250 Dapar fosfat pH 7.0 - 250 - 250 250 - inkubasi selama 20 menit pada suhu 37°C Natrium karbonat 0,2 M 1000 1000 1000 1000 1000 1000 Ukur absorbansinya dengan Microplate Reader 96 well EL x 800 pada λ 405 nm
Keterangan:  A 1 =  akarbose;  A 0 =  kontrol  akarbose;  EKB 1 =  Sampel  ekstrak  daun  keji  beling;  EKB 0 =  Kontrol  ekstrak daun keji beling; K = Kontrol; S= Sampel
Pemeriksaan Parameter Mutu dan Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-Glukosidase dari Ekstrak Etanol 70% Daun Keji Beling ( Sericocalyx Crispus (L.) Bremek)

## Pemeriksaan Parameter Non-Spesifik
Hasil penetapan BOA dari simplisia daun keji beling diperoleh  sebesar  1,86  %.  Penetapan  BOA  bertujuan untuk  menentukan  pemenuhan  standard  simplisia tanaman  dari  bahan  yang  tidak  termasuk  dalam pemerian simplisia seperti ranting ( petiolus ) dan batang ( caulis ),  karena  yang  digunakan  adalah  daun  ( folium ). Nilai  BOA  memenuhi  persyaratan  mutu  sesuai monografi  yang  telah  ditetapkan  menurut  Materia Medika Indonesia yaitu tidak lebih dari 2%.
Hasil  yang  didapat  dari  pengukuran  derajat  halus serbuk  simplisia  diperoleh  100%  melewati  pengayak no.4  dan  17.53%  melewati  pengayak  no.18.  Hal tersebut  memenuhi  standard  MMI  yaitu  100%  serbuk dapat melewati pengayak no.4 dan tidak lebih dari 40% dapat  melewati  pengayak  no.18.  Ukuran  derajat  halus simplisia  akan  mempengaruhi  proses  maserasi  dalam hal  penyarian  yang  didapat  sempurna  dan  metabolit yang  terekstraksi  semakin  banyak.  Apabila  ukuran serbuk  simplisia  terlalu  besar  maka  luas  permukaan kontak  antara  serbuk  dan  pelarut  akan  semakin  kecil, sehingga  penyarian  yang  didapat  kurang  sempurna. Sedangkan,  apabila  ukuran  serbuk  simplisia  terlalu halus  akan  mempersulit  proses  penyarian  karena serbuk tersebut akan menutupi pori pada kertas saring sehingga terjadi penyumbatan pada proses penyaringan.

## Skrining Fitokimia
Hasil skrining fitokimia serbuk dan ekstrak daun keji Hasil  skrining  fitokimia  serbuk  dan  ekstrak  daun  keji beling.ditunjukkan  pada  Tabel  2.  Penapisan  fitokimia bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  pada  serbuk  simplisia  dan  ekstrak etanol  70%  daun  keji  beling  ( Sericocalyx  crispus (L.) Bremek).  Dari  hasil  penapisan  fitokimia  diketahui bahwa  pada  serbuk  simplisia  dan  ekstrak  etanol  70% Hasil  menunjukkan  daun  keji  beling  mengandung
senyawa  flavonoid,  saponin,  steroid  dan  triterpenoid sesuai  literatur  (Dharma et  al .  2016).  Adanya kandungan  flavonoid  dan  steroid  yang  dapat memberikan aktivitas antidiabetes.
Pembuatan ekstrak etanol 70%
Presentase Drug  Extract  Ratio (DER- native ) diperoleh  sebesar 8,74  dan  rendemen  ekstrak  sebesar 11,45%.  Ekstraksi  daun  keji  beling  dilakukan  sebanyak 10 kali (dilakukan re-maserasi) karena semakin banyak remaserasi maka simplisia akan semakin jenuh dengan pelarutnya  sehingga  senyawa  yang  tertarik  akan  lebih banyak. Filtrat yang didapat pada ekstraksi ini sebanyak 17 L. Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi kinetik  karena  proses  pengerjaannya  yang  sederhana dan  supaya  senyawa  aktif  yang  terkandung  di  dalam simplisia  tidak  mudah  rusak  oleh  pemanasan  dan dilakukan  pada  suhu  kamar.  Hasil  rendemen  yang diperoleh  lebih  tinggi  dari  penelitan  yang  dilakukan Dharma et al. (2016) sebesar 4,008%.

## Uji Penetapan  Parameter Mutu Spesifik
Pemerian organoleptik ekstrak etanol 70% daun keji beling  berupa  ekstrak  kental,  berwarna  hijau kehitaman,  rasa  pahit.  Kadar  sari  larut  air  dan  larut etanol yang didapat memenuhi persyaratan yang telah tertera di monografi MMI (Tabel 3).
Metabolit  sekunder  yang  mungkin  tersari  dalam pelarut  air  adalah  saponin  dan  flavonoid  karena bersifat  polar.  Sedangkan  metabolit  sekunder  yang tersari  dalam  pelarut  etanol  diduga  adalah  saponin, flavonoid,  steroid  dan  triterpenoid,  karena  etanol merupakan  pelarut  yang  bersifat  universal  sehingga dapat  menarik  senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar, semipolar,  maupun  nonpolar  sehingga  presentase senyawa  yang  terlarut  dalam  etanol  lebih  banyak dibandingkan  dengan  presentase  senyawa  yang terlarut dalam air.

## Tabel 2. Hasil identifikasi golongan senyawa kimia
Metabolit Sekunder Serbuk Ekstrak Etanol 70% Flavonoid + + Saponin + + Tanin - - Steroid/ triterpenoid +/+ +/+ Minyak atsiri - - Kumarin - - Alkaloid - -

## Uji Penetapan Parameter Mutu Non Spesifik
Pada penelitian ini diperoleh kadar air 7,68%; susut pengeringan 9,25%; kadar abu total 15,06%; kadar abu tidak larut asam 3,10%; kadar abu larut air 11,29%; dan sisa pelarut 0,38%. Susut pengeringan dilakukan untuk mengetahui  senyawa  yang  menguap  dalam  ekstrak setelah  dilakukan  proses  pengeringan  didalam  oven pada  suhu  105 0 C  dengan  menggunakan  metode gravimetri.  Nilai  penetapan  susut  pengeringan  dan kadar  air  memenuhu  standar  penetapan mutu ekstrak dari BPOM RI yaitu sebesar 10%. Kadar air yang sesuai standar  menjamin  kestabilan  ekstrak  dalam  jangka waktu panjang, terhindar dari kemungkinan tumbuhnya  mikroba. Kadar  Abu  Total  dilakukan  untuk menunjukkan jumlah abu fisiologis dan abu nonfisiologis  setelah  dilakukan  proses  pemijaran selama  1  jam  pada  suhu  450 0 C  dengan  metode grafimetri.  Nilai  kadar  abu  total  dan  kadar  abu  tidak larut  asam  memenuhi  persyaratan  MMI  yaitu  masing- masing nilainya tidak lebih dari 16% dan 4%. Kadar abu tidak larut asam menunjukkan adanya silika dan logam- logam berat yang tidak larut dalam asam seperti Pb, Hg dan  Cd.  Pada  penetapan  sisa  pelarut  menunjukkan jumlah  sisa  kandungan  pelarut  yang  digunakan  pada saat  proses  maserasi.  Sisa  pelarut  pada  penelitian memenuhi  persyaratan  BPOM  yang  terdapat  pada monografi tidak lebih dari 1%.

## Jumlah Cemaran Logam
Pada  penetapan  cemaran  logam  berat  didapat kadar logam Pb yaitu 0,49 bpj dan kadar logam Cd yaitu 0,02  bpj.  Nilai  ini  memenuhi  persyaratan  yang ditetapkan  BPOM  tidak  lebih  dari  10  bpj.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  memenuhi  persyaratan
keamanan  bahan  dari  cemaran  logam  berat,  sehingga dapat  digunakan  sebagai  bahan  sediaan  karena  aman bagi tubuh.

## Jumlah Cemaran Mikroba.
Pada penetapan cemaran mikroba didapat hasil ALT sebesar  4,5161x10 2 koloni/g  dan  AKK  ≤  1x10 3 .  Hasil tersebut  memenuhi  persyaratan  yang  terdapat  pada monografi BPOM dimana ALT dan AKK tidak boleh lebih dari 1 x 10 4 . Ekstrak dinyatakan aman digunakan untuk bahan sediaan dan dapat disimpan dalam waktu jangka panjang.

## Penetapan Kadar Flavonoid Total
Kadar  Flavonoid  Total  yang  diperoleh  sebesar 2,39%.  Dilakukan  penetapan  kadar  flavonoid  total karena  senyawa yang  diutamakan  pada  pengujian  dan antidiabetes  adalah  senyawa  flavonoid . Nilai  ini  lebih kecil  dibandingkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan Roring (2017) sebesar 5,449 8%.

## Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-glukosidase.
Pada  uji  aktivitas  penghambatan  enzim  α- glukosidase  dilakukan  uji  pendahuluan  seperti  yang dapat  dilihat  pada  Tabel  4  dengan  tujuan  untuk mencari kondisi yang optimum untuk uji aktivitas.
Hasil uji aktivitas penghambatan oleh akarbose yang merupakan  senyawa  aktif  penghambat  enzim  α- Glukosidase  memberikan  nilai  IC 50 sebesar  50,0  bpj. Sedangkan,  aktivitas  penghambatan  oleh  ekstrak etanol  70%  daun  keji  beling  nilai  IC 50 yaitu  86,2  bpj. Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  mengakibatkan  aktivitas penghambatan  menjadi  semakin  besar.  Nilai  IC 50 ekstrak  keji  beling  lebih  rendah  dari  akarbose  karena
Tabel 3. Hasil Presentase kadar senyawa terlarut dalam pelarut tertentu
Jenis Penetapan Hasil (%) Persyaratan (MMI) Kadar Sari Larut Air 60.46 Tidak kurang dari 16% Kadar Sari Larut Etanol 73.45 Tidak kurang dari 4% Keterangan: MMI: Materia Medika Indonesia Tabel 4. Hasil uji pendahuluan aktivitas penghambatan enzim α-Glukosidase
Uji Pendahuluan Hasil Aktivitas Enzim (U/mg) Konsentrasi Enzim 0.025 U/mL 10.2990 pH 7.0 4.7844 Waktu Inkubasi 20 menit 4.4173 Konsentrasi Substrat 10 mM 8.3645
Keterangan: U/mL : unit per mili liter; U/mg : unit per mili gram; mM : mili molar
Pemeriksaan Parameter Mutu dan Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-Glukosidase dari Ekstrak Etanol 70% Daun Keji Beling ( Sericocalyx Crispus (L.) Bremek)
senyawa  aktif  belum  difraksinasi,  kemungkinan  terjadi efek  sinergis  inhibisi  dari  kandungan  senyawa  aktif lainnya  (Elya et  al. 2011).  Variasi  konsentrasi  larutan akarbose dan ekstrak daun keji beling 25, 75, 125, 175 dan 225 ppm untuk membuat persamaan regresi untuk menghitung IC 50 ditunjukan pada Gambar 1.
Hasil  penelitian  menunjukkan  kandungan  kimia pada  ekstrak  etanol  70%  daun  keji  beling  seperti flavonoid,  saponin,  steroid  dan  triterpenoid  bekerja sinergis  untuk  menghambat  aktivitas  enzim  α- Glukosidase. Pada umumnya uji aktivitas penghambatan enzim α–glukosidase akan menurunkan peningkatan kadar glukosa pada penderita hiperglikemia.  Akarbose  dan  ekstrak  etanol  70%  daun keji  beling  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah serta  dapat  meningkatkan  sensitivitas  insulin  dan  juga dapat  menghambat  kerja  enzim  α–glukosidase. Akarbose memiliki mekanisme kerja untuk
menghambat  reaksi  enzimatik  oligosakarida  menjadi glukosa sehingga dapat mengatur penurunan penyerapan  glukosa  dari  makanan.  Akarbose  akan melekat  pada  tempat  pengikatan  antara  enzim  α  – glukosidase  dengan  oligosakarida,  ikatan  tersebut bersifat  reversible  dan  inhibisinya  bersifat  kompetitif (Sheehan 2003).
Pada penelitian yang dilakukan Sy & Novianty (2019) infusa  daun  keji  beling  memiliki  nilai  inhibisi  α– glukosidase  sebesar  49.69±1.7  %  (pada  konsentrasi ekstrak  equivalen  dengan  50%  sampel  segar)  karena mengandung senyawa aktif steroid yang diduga sebagai agen  diabetes.  Penelitian  inhibisi  α–glukosidase  yang dilakukan  pada  45  jenis  tanaman  asli  Indonesia menunjukkan  ekstrak  daun Garcinia  rigida Miq. memiliki  nilai  IC 50 paling  kecil  yaitu  2.33  μg/mL  (Elya 2012).

## SIMPULAN
Hasil penapisan fitokimia serbuk dan ekstrak etanol 70%  daun  keji  beling  mengandung  flavonoid,  saponin, steroid  dan  triterpenoid.  Ekstrak  daun  keji  beling memiliki  konsistensi  kental,  warna  hijau  kehitaman, berbau khas aromatik dan rasa pahit. Penetapan mutu spesifik  dan  non-spesifik  simplisia  dan  ekstrak  keji beling  memenuhi  standard  mutu  yang  ditetapkan monograf.  Kadar  senyawa  terlarut  dalam  etanol 73,45%; kadar senyawa yang terlarut dalam air 60,46%; susut  pengeringan  9,25%;  kadar  air  7,68%;  kadar  abu 11,29%; kadar abu tidak larut asam 3,10%; sisa pelarut 0,38%;  cemaran  logam  berat  Pb  0,49  bpj  dan  Cd  0,02 bpj;  ALT  4,52x koloni/g  dan  AKK  ≤1x10 3 koloni/g;
kadar  flavonoid  total  2,39%.  Hasil  uji  aktivitas penghambatan  enzim  α-glukosidase  terhadap  ekstrak etanol  70%  daun  keji  beling  secara in-vitro menunjukkan  nilai  IC 50 86,2  bpj  dan  akarbose  sebagai kontrol  positif  dengan  nilai  IC 50 50bpj.  Keji  beling memiliki  potensi  untuk  dikembangkan  sebagai  obat herbal  antidiabetes.  Diperlukan  penelitian  lebih  lanjut untuk studi in vivo maupun fraksinasi dari ekstrak daun keji  beling  untuk  hasil  penghambatan  enzim  α- glukosidase yang lebih baik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada  Q- Laboratorium  dan  Laboratorium  penelitian  dosen Fakultas  Farmasi  Universitas  Pancasila  yang  telah menyediakan sarana dan prasarana guna terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adibi, Sukaina, Hendry Nordan, Septri Nurjaya Ningsih, Moga  Kurnia,  and  Salastri  Rohiat.  2017.  Aktivitas antioksidan dan antibakteri ekstrak daun Strobilanthes  crispus Bl  (  Keji  Beling)  terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Alotrop. 1(2): 148–54.
Artanti,  Dita,  Siti  Fatimah,.  2017.  Efektivitas  perasan daun  keji  beling  ( Sericocalyx  crispus Linn  )  dalam menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus . The  Journal  of  Muhammadiyah  Medical  Laboratory Technologist , 1 (1): 78-83.
Departemen  Kesehatan.  Republik  Indonesia.  1995. Materia  Medika  Indonesia  Jilid  VI.  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2000. Parameter standar ekstrak tumbuhan obat. Jakarta:
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan
Makanan.
Departemen  Kesehatan.  Republik  Indonesia.  2008. Farmakope  herbal  Indonesia  Edisi  I.  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Dharma,  S.,  Aia,  M.,  &  Syukri,  E.  F.  2016.  Pengaruh ekstrak etanol daun keji beling ( Strobilanthes crispa (l)  blume)  terhadap  kelarutan  kalsium  dan  oksalat sebagai komponen batu ginjal pada urin tikus putih jantan. Scientia: Jurnal Farmasi dan Kesehatan . 4(1): 34-37.
Elya,  B.,  Basah,  K.,  Mun'im,  A.,  Yuliastuti,  W.,  Bangun, A.,  &  Septiana,  E.  K.  2011.  Screening  of - glucosidase  inhibitory  activity  from  some  plants  of Apocynaceae,  Clusiaceae,  Euphorbiaceae,  and
Djamil et al .
Rubiaceae. BioMed  Research  International .  2012:1- 6.
Farnsworth,  N.  R.  1966.  Biological  and  phytochemical screening  of  plants. Journal  of  pharmaceutical sciences . 55(3): 225-276.
Kusnul  N,  Jaka  Fadraersada,  Laode  Rijai. 2015.  Potensi ekstrak  daun  keji  beling  ( Strobilanthes  crispus ) sebagai  penurun  kadar  glukosa  darah:  uji  in  vivo pada  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ),  In Proceeding of  Mulawarman  Pharmaceuticals  Conferences .  2: 43-49.
Loranza  B.  2012.  Uji  penghambatan  enzim  alfa- glukosidase dan identifikasi  golongan  senyawa kimia  dan  fraksi  daun  buni (Antidesma  bunius  L.) . Skripsi, FMIPA UI.
Rahmah  Nst,  M.,  Hardianti,  S.,  &  Susanti,  E.  2011. Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Heksana, Diklorometana Dan Metanol Daun Keji Beling ( Sericocalyx crispus . L) terhadap Artemia Salina Leach. e-Publikasi Fakultas Farmasi, Des:71-74.
Ramdanis, R., Soemiati, A., & Munim, A. 2012. Isolation and  α-Glucosidase  Inhibitory  activity  of  endophytic fungi  from  mahogany  ( Swietenia  macrophylla King) seeds. International  Journal  of  Medicinal  and Aromatic Plants . 2(3): 447-452.
Roring,  N.  2017.  Standardisasi  parameter  spesifik  dan uji  aktivitas  antikanker  terhadap  sel  kanker
payudara  T47D  dari  ekstrak  etanol  daun  keji  beling ( Strobilanthes crispa (L.) Blume). Pharmacon , 6 (3). Samal,  Pradeep  Kumar.  2013.  Antidiabetic  and antioxidant  activity  of  strobilanthes  asperrimus  in rats. Journal  of  Global  Trends  in  Pharmaceutical Sciences . 4(2): 1067-1072.
Sheehan,  M.  T.  2003.  Current  therapeutic  options  in type  2  diabetes  mellitus:  a  practical  approach. Clinical Medicine & Research . 1(3): 189-200.
Sugiastuti,  S.,  Sediarso,  S.,  &  Kharisma,  W.  L.  2006.
Analisis  Cemaran  Logam  Berat  dalam  Buah  Ananas comosus  (L.)  Merr.  Kaleng  secara  Spektrofotometri Serapan Atom. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia . 4 (2):92-95.
Sy, Silvera. D., Nst, M. R., & Novianty, R. 2019. Analisis uji infusa buah petai cina, daun keji beling dan daun tempuyung  sebagai  inhibitor  enzim  α-amilase  dan α-glukosidase. Jurnal Riset Kimia . 12(2): 44-50. Tambunan,  R.M.,  Rahmat,  D.,  &  Silalahi,  J.S.  2016. Formulasi  tablet  nanopartikel  ekstrak  terstandar daun  pulai  ( Alstonia  scholaris (L).  R.  BR)  sebagai antidiabetes. Journal  of  Tropical  Pharmacy  and Chemistry . 3 (4): 291-298.
Tanty H, Herlina Tati. 2017. Antidiabetic activity test for leaves  extract  of Cassia  siamea. Lamk. MATTER: International  Journal  of  Science  and  Technology . 3(3): 339-348.