Penulis Pertamawati*, Sriningsih, Fahri Fahrudin, Julham Efendi Afiliasi Pusat Teknologi Farmasi dan Medika – Laboratorium Pengembangan Teknik Industri Agro & Biomedika, Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi

## Kata Kunci
 ekstrak secang
 volume urin
 tikus putih
Diterima 7 September 2015 Direvisi 10 Juni 2016 Disetujui 15 November 2017

## *Penulis Koresponding Pertamawati
Gedung 610-611 Tlp./ Fax :
021-7560707
Kawasan PUSPIPTEK, Serpong Banten pertamawatikartakusumah@g mail.com

## ABSTRAK
Secara empiris secang ( Caesalpinia sappan L.) dimanfaatkan  sebagai bahan untuk mengatasi penyakit, namun bagaimana pengaruhnya terhadap pengeluaran urin belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsumsi ekstrak secang terhadap  pengeluaran  urin.  Percobaan  dilakukan  terhadap  hewan  coba  tikus  putih jantan  galur Spraque  dawley dengan  sampel  uji  ekstrak  etanol  96%  kulit kayu secang. Hewan  coba  dibagi  dalam  7  kelompok,  masing-masing  terdiri  dari  6  ekor,  yaitu kelompok normal, kelompok positif (Furosemide 10mg/200g BB), kelompok  negatif (air 2ml/200g  BB),  kelompok  sampel  uji  dosis  I  (62,5  mg/kg  BB),  dosis  II  (125mg/kg  BB), dosis III (250mg/kg BB) dan dosis IV (500mg/kg BB), tigapuluh menit setelah pemberian sampel  uji,  hewan  coba  diberi  air  minum  4ml/200g  BB  dilakukan  melalui  sonde lambung, selanjutnya hewan coba dimasukkan ke dalam kandang metabolit selama 16 jam  (overnight).  Hewan  coba  dengan  dosis  II  menghasilkan  volume  urin  paling  besar (8.00 mL) yaitu hampir dua kali lipat dibandingkan urin yang dihasilkan oleh kelompok normal (4.50 mL) Volume urin berkurang jika konsumsi ekstrak secang bertambah pada dosis III dan IV. Disimpulkan bahwa hewan coba yang diberi ekstrak kulit secang dengan dosis 125 mg/kg BB (dosis II) rata-rata mampu mengeluarkan urin lebih banyak daripada hewan coba dalam kelompok lainnya.

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara mega diversity untuk tumbuhan obat di dunia. Wilayah hutan tropika Indonesia memiliki keanekaragaman hayati tertinggi ke-2 di dunia setelah Brasil. Dari 40.000 jenis flora yang ada di dunia sebanyak 30.000 jenis dijumpai di Indonesia dan 940 jenis di antaranya diketahui berkhasiat sebagai obat yang telah dipergunakan dalam pengobatan tradisional secara turun-temurun oleh berbagai etnis  di  Indonesia.  Jumlah  tumbuhan  obat  tersebut  meliputi  sekitar  90%  dari  jumlah tumbuhan obat yang terdapat di kawasan Asia (CI 1997; WWF 2012).
Konsumsi Ekstrak Secang (Caesalpinia sappan L. ) Terhadap Volume Urin Tikus Putih Jantan Galur Spraque Dawley
Penggunaan  obat  tradisional  (jamu)  di  Indonesia pada  hakekatnya  merupakan  bagian  kebudayaan bangsa  Indonesia.  Keuntungan  dari  penggunaan  jamu pada  prinsipnya  adalah  efek  samping  yang  relatif  kecil dibandingkan  obat  modern.  Meskipun  secara  empiris jamu  mampu  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit,  tetapi  khasiat  dan  kemampuannya  belum banyak  dibuktikan  secara  ilmiah  maupun  klinis.  Selain itu,  belum  banyak  diketahui  senyawa  kimia  apa  yang bertanggung  jawab  terhadap  khasiat  jamu  tersebut (Wijayakusuma 2002).
Salah  satu  tanaman  yang  banyak  digunakan  dalam pengobatan  tradisional  adalah  secang  ( Caesalpinia sappan L,).  Kayu  secang  memiliki  khasiat  sebagai pengelat  (astringensia).  Kandungan  utamanya  adalah brazilin,  yakni  zat  warna  merah-sappan,  asam  tanat, dan  asam  galat.  Simplisia  kayu  secang  berupa  irisan atau  keping-keping  kecil  kayu  ini  dikenal  sebagai Sappan  lignum dalam  sediaan  FMSo  ( Formularium Medicamentorum  Soloensis )  (Sutrisno  1974).  Brazilin dari  kayu  secang  teruji  secara  ilmiah  bersifat antioksidan, antibakteri, anti-inflamasi, anti- photoaging , hypoglycemic (menurunkan  kadar  lemak), vasorelaxant (merelaksasi pembuluh darah), hepatoprotective (melindungi  hati)  dan anti-acne (anti jerawat) (Nirmal et al . 2015). Ekstrak kayu secang juga ditengarai berkhasiat anti-tumor, anti-virus, immunostimulant dan  lain-lain  (Badami et  al .,  2004) Secara  tradisional,  potongan-potongan  kayu  secang biasa digunakan sebagai campuran bahan jamu di Jawa. Di  samping  itu,  kayu  secang  adalah  salah  satu  bahan pembuatan  minuman  penyegar  khas  Yogyakarta selatan  (wedang  secang  dan  wedang  uwuh)  (Syifa 2015).
Secang    juga  telah  lama  dikenal  sebagai  bahan ramuan  untuk  mengobati  berbagai  penyakit,  seperti sifilis,  batuk  darah,  dan  radang  penelitian  yang dilakukan  oleh  Sugiyanto et  al. (2013)  di  Fakultas Farmasi
Universitas Gadjah Mada, juga
mengungkapkan, secang memiliki kemampuan antioksidan,  antikanker,  memperlancar  peredaran darah,  dan  melegakan  pernapasan.  Penelitian  yang telah  dilakukan  oleh  Pertamawati et  al pada  tahun 2014  memperlihatkan  bahwa  secang  juga  mampu mengatasi  masalah  diuretikun  (Pertamawati et  al . 2014).
Diuretika adalah senyawa yang dapat menyebabkan ekskresi urin yang lebih banyak. Jika pada peningkatan ekskresi  garam-garam,  maka  diuretika  ini  dinamakan
saluretika  atau  natriuretika  (diuretika  dalam  arti sempit) (Mutschler 1991).
Tujuan  percobaan  ilmiah  yang  dilaksanakan  secara preklinis  ini  ialah  untuk  mengetahui  kemampuan  atau pengaruh  konsumsi  ekstrak  kulit  kayu  secang ( Caesalpinia sappan L.) dalam memperbaiki kemampuan  pengeluaran  urin  hewan  coba  tikus  putih jantan  galur Spraque  dawley ,  sampel  diberikan  secara oral  melalui  sonde  lambung  untuk  mendapatkan informasi dosis efektif dari sampel uji. Pengolahan data yang  diperoleh  dilakukan  secara  metoda  statistik Analisis Varian dan untuk menguji perbedaan nilai rata- rata  antar  2  perlakuan  digunakan  metode  Uji  Wilayah Berganda  Duncan.  Hasil  percobaan  diharapkan  dapat memberikan informasi dalam meningkatkan kesehatan dengan mengembangkan obat herbal terstandar (OHT) secara  tradisional  sehingga  dapat  dimanfaatkan berdasarkan landasan ilmiah. Penelitian ini dilaksanakan  pada  bulan  Maret  sampai  dengan  bulan Mei  tahun  2014  di  laboratorium  Pusat  Teknologi Farmasi dan Medika – LAPTIAB – TAB – BPPT.

## METODE

## Animals Bahan
Ekstrak  etanol kulit kayu secang; Tikus  putih jantan galur Spraque  Dawley ;  CMC  Na  5%,  (Natrium karboksilmetil selulosa); Furosemide (generik), akuades.

## Alat
Timbangan  hewan,  kandang  tikus  beserta  tempat makan  dan  minum,  sonde  oral,  blender,  magnetic stirer,  evaporator,  kertas  saring,  tissue,  timbangan analitik, peralatan gelas.

## Pembuatan simplisia
Pembuatan  simplisia  kulit  kering  kayu  secang melalui  tahapan  sortasi  basah,  pencucian,  perajangan, pengeringan, sortasi kering, dan penepungan (penggilingan  dan  pengayakan).  Kulit  kayu  secang diperoleh  dari  Balai  Pengkajian  Teknologi  Pertanian (BPTP) Lembang.

## Ekstraksi
Simplisia serbuk kulit kayu secang kering (400 gram) diekstraksi  dengan  metode  maserasi,  menggunakan pelarut etanol 96% dengan perbandingan 1 : 10 selama 2x1jam,  sehingga  diperoleh  ekstraknya.  Ekstrak  yang diperoleh dievaporasi sampai diperoleh ekstrak kental.
Konsumsi Ekstrak Secang (Caesalpinia sappan L. ) Terhadap Volume Urin Tikus Putih Jantan Galur Spraque Dawley 123
Selanjutnya,  ektrak  kental  tersebut  disimpan  dalam lemari  pendingin  sampai  saat  digunakan  sebagai sampel  uji  (DepKes  RI  DitJen  POM  2000;  Harborne 1996).

## Penapisan Fitokimia
Penapisan  fitokimia  simplisia  dimaksudkan  untuk mengetahui  kandungan  golongan  senyawa  dalam simplisia.  Penapisan  fitokimia  dilakuan  berdasarkan teori  dan  metode  Fransworth  (1986)  dan  Harborne (1996).

## Persiapan hewan coba
Hewan  coba  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan galur Spraque dawley berusia 2–3 bulan dengan berat  badan  sekitar  150–200  gram,  diaklimatisasi selama  satu  minggu  agar  dapat  menyesuaikan  diri dengan  lingkungannya,  mengontrol  kesehatan  dan berat badan. Hewan uji dipilih  sebanyak 42 ekor tikus putih  jantan  secara  acak  untuk  dibagi  menjadi  7 kelompok, tiap kelompok terdiri dari 6 ekor. (Disetujui oleh  Komite  Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas Kedokteran  Rumah  Sakit  Cipto  Mangunkusumo  No. 163/H2.F1/ETIK/2014 tanggal 24 Maret 2014).

## Persiapan sampel uji
Ekstrak kental kulit kayu secang dijadikan sampel uji yang diberikan terhadap hewan coba tikus putih jantan sesuai dengan dosis yang telah ditentukan.

## Pembuatan sampel uji
a. Pembuatan suspensi sampel uji.
Sebanyak  2  gram  sampel  uj  dimasukkan  ke  dalam mortar  dan  ditambahkan  100  ml  CMC  Na  0,5%,  aduk rata  sampai  homogen.  Campuran  tersebut  diberikan kepada hewan coba dengan konsentrasi 2ml/200g BB b. Pembuatan suspensi Furosemide.
Satu  tablet  Furosemide  setara  dengan  40mg, dilarutkan  dengan  CMC  0,5%  sehingga  diperoleh perhitungan  10mg  untuk  berat  badan  hewan  coba 200g.

## Pelaksanaan Percobaan
Pada  percobaan  ini  digunakan  rancangan  acak kelompok,  hewan  coba  yang  digunakan  berjumlah  42 ekor  yang  dibagi  secara  acak  menjadi  tujuh  kelompok perlakuan  dan  tiap  kelompok  terdiri  dari  enam  ekor, yang  dibedakan  berdasarkan  pemberian  bahan (sampel) uji (Tabel 1).
Setiap  hewan  coba  dalam  setiap  kelompok mendapat perlakuan sebagai berikut :
- Diberi air minum 4ml/200g BB secara oral
- Dimasukan  ke  dalam  kandang  metabolit  selama  16 jam (overnight).
- Diberi  perlakuan  setelah  masa  puasa  sesuai  dosis masing-masing  secara  oral  sekali  sehari.  Hewan coba dalam kelompok normal diberi larutan CMC-Na 0,5%  sebanyak  1ml/200g  BB  per  oral,  hewan  coba dalam kelompok negatif diberi larutan CMC-Na 0,5% sebanyak  1ml/200g  BB  dan  air  4ml/200g  BB  secara per  oral,  dan  hewan  coba  dalam  kelompok  positif diberi  Furosemide  10mg/200g  BB  dan  air 4ml/200g BB secara per oral.
- Urin yang keluar ditampung, diukur volumenya dan diperhatikan warna urine secara manual.

## Pengolahan data volume urine
Urine  yang  diperoleh  ditabulasi  dan  dianalisis. Analisis data dimaksudkan untuk melihat ada tidaknya perbedaan  urine  setiap  hewan  coba  dalam  masing- masing  kelompok  pada  satu  kali  pengambilan. Pengolahan  data  menggunakan  metode  statistika Analisis Varian dan untuk menguji perbedaan nilai rata- rata  antar  2  perlakuan  digunakan  metode  uji  Wilayah Berganda Duncan.
Tabel 1. Pembagian Kelompok Perlakuan Kelompok Perlakuan Jumlah Tikus Normal Diberi larutan CMC-Na 0,5% sebanyak 1 ml/200g BB 6 Negatif Diberi larutan CMC-Na 0,5% sebanyak 1 ml/200g BB dan air 4ml/200g BB 6 Positif Diberi Furosemide 10mg/200g BB dan air 4ml/200g BB 6 Dosis I Diberi sampel uji 62,5mg/kg BB dan air 4ml/200g BB 6 Dosis II Diberi sampel uji 125 mg/kg BB dan air 4ml/200g BB 6 Dosis III Diberi sampel uji 250 mg/kg BB dan air 4ml/200g BB 6 Dosis IV Diberi sampel uji 500 mg/kg BB dan air 4ml/200g BB 6
124 Pertamawati et al.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Hasil  ekstraksi  sebanyak  400  gram  simplisia  kulit kayu  secang  bubuk  yang  dilakukan  dengan  cara maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  dengan perbandingan  1  :  10  selama  1  jam  sebanyak  2  kali, memberikan  hasil  berupa  ekstrak  yang  dikentalkan dengan alat evaporator sehingga menghasilkan ekstrak kental dengan berat 6.97 g.

## Penapisan fitokimia
Berdasarkan  hasil  pemeriksaan  penapisan  fitokimia ekstrak kental kulit kayu secang, terlihat bahwa ekstrak kental  kulit kayu  secang mengandung  kadar  terpenoid tinggi (+++), kadar fenol tinggi (+++),kadar triterpenoid cukup  (++),  kadar  flavonoid  cukup  (++),  kadar  alkaloid cukup  (++)  dan  kadar  saponin  sedikit  (+),  namun  tidak mengandung  steroid  dan  tannin  (-)  seperti  tertulis dalam  Tabel  2.  Menurut  Widowati  (2011),  hasil  uji fitokimia  ekstrak  secang  mengandung  senyawa terpenoid dan fenol tetapi tidak mengandung senyawa steroid  dan  tannin.  Ekstrak  kayu  secang  mengandung kadar  total  fenol  ekivalen  EGC  849.11  μg/mg  dan ekivalen  ECG  825.11  μg/mg.  Selain  itu,  ekstrak  kayu secang memiliki aktivitas antioksidan tinggi yaitu 80.46- 89.13%.

## Berat Badan
Berat badan adalah hasil pengaturan kontrol neural dan  hormonal  yang  secara  substansial  mengatur
keseimbangan  antara  pemasukan  dan  pengeluaran energi. Sistem regulatori yang kompleks ini dibutuhkan karena  sedikit  ketidakseimbangan  antara  pemasukan dan penggunaan energi akan memberi efek yang cukup signifikan pada berat badan (Fauci et al . 2008).
Pada awal perlakuan, pemberian sampel uji ekstrak kayu  secang  berat  badan  hewan  coba  cenderung rendah,  dan  semakin  lama  pemberian  ekstrak  secang semakin  meningkatkan  berat  badan  hewan  coba. Ketika  jumlah  energi  yang  masuk  ke  dalam  tubuh (dalam  bentuk  makanan)  melebihi  jumlah  energi  yang digunakan,  berat  badan  akan  meningkat,  dan kebanyakan  dari  energi  yang  berlebih  akan  disimpan dalam  bentuk  lemak.  Oleh  karena  itu,  adipositas  yang berlebihan (obesitas) disebabkan oleh konsumsi energi yang berlebihan dibandingkan dengan penggunaannya. Lokasi  penyimpanan  lemak  yang  utama  adalah  pada jaringan  subkutan  dan  pada  rongga  intraperitoneal, walaupun hati dan jaringan lainnya didalam tubuh juga terkadang  menyimpan  lemak  dalam  jumlah  yang signifikan  (Guyton  dan  Hall  2006).  Kenaikan  berat badan  ini  tampak  pada  semua  kelompok  hewan  coba dalam percobaan, seperti terlihat dalam Gambar 1.

## Volume Urin
Perlakuan pemberian sampel uji mampu meningkatkan  kemampuan  pengeluaran  urin  tiap hewan  coba  dalam  kelompoknya.  Volume  urin  hewan coba  dengan  perlakuan  pemberian  sampel  uji  dosis  2 lebih banyak daripada volume  urin hewan coba dalam
Gambar 1 Bobot badan hewan coba sesuai perlakuan
Tabel 2. Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Kayu Secang
Hasil Penapisan Fitokimia Terpenoid Fenol Triterpenoid Flavonoid Alkaloid  Saponin Steroid Tannin +++ +++ ++ ++ ++ + - -
Keterangan : +++ : kadar tinggi, ++   : kadar cukup, + : kadar sedikit, - : tidak mengandung
Konsumsi Ekstrak Secang (Caesalpinia sappan L. ) Terhadap Volume Urin Tikus Putih Jantan Galur Spraque Dawley 125
kelompok  positif,  yaitu  sebanyak  8.00  ml,  seperti tertulis dalam Tabel 3.
Hasil  percobaan  yang  diperoleh  memperlihatkan bahwa  ekstrak  kulit kayu  secang mampu memperbaiki kemampuan pengeluaran urin hewan coba.
Tabel 3. Rataan  volume  urin  hewan  coba  dalam perlakuan
Kelompok & perlakuan Rataan volume Urin (ml) Normal 4.50 (cd) Positif (Furosemide 10mg/200g BB) 5.00 (bc) Negatif (aquades 2ml/200g BB) 4.25 (d) Dosis I (62,5ml/kg BB) 4.50 (cd) Dosis II (125ml/kg BB) 8.00 (a) Dosis III (250ml/kg BB) 5.75 (b) Dosis IV (500ml/kg BB) 5.50 (b)
Keterangan : Angka-angka yang diikuti oleh huruf sama pada waktu  pengamatan  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda nyata pada taraf 5% uji DMRT

## SIMPULAN
Berdasarkan  pada  penelitian  ini,  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  kayu  secang  ( Caesalpinia  sappan L.) mampu  memperbaiki  kemampuan  pengeluaran  urin hewan  coba  tikus  putih  jantan  galur Spraque  dawley ., sedangkan  perlakuan  pemberian  sampel  uji  dosis  II (125 mg/200 g BB) mampu meningkatkan pengeluaran urin hewan coba dengan volume terbanyak (8 ml), dan pengujian secara ilmiah yang dilakukan secara preklinis terhadap hewan coba tikus putih jantan galur Spraque Dawley menguatkan  pengetahuan  masyarakat  yang secara  empiris  telah  memanfaatkan  herbal  secang sebagai peluruh urin.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada Kementerian  Riset  dan  Teknologi  RI.  yang  telah memberikan  bantuan  dana  penelitian  SINas  2014  dan Pimpinan  Pusat  TFM–TAB  -  BPPT  yang  memfasilitasi pelaksanaan dan penyelesaian penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Badami  S,  Moorkoth  S,  Suresh  B.  2004.  Caesalpinia sappan  a  medical  and  dye  yielding  plant. Natural Product Radiance . 3(2):75-82
[CI]  Conservation  International.  1997.  Megadiversity.
New York (USA).
DepKes  RI  DitJen  POM.  2000.  Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat.  Jakarta  (ID): Direktorat  Jenderal  Umum  Pengawasan  Obat  dan Makanan.
Fauci AS, Kasper DL, Longo D, Braunwald E, Hauser SL, Loscalzo J. 2008. Obesity. In : Harisson’s Manual Of Medicine  17th  Edition.  USA  :  The  McGraw-Hill Companies.
Fransworth  NR.  1986.  Biological  and  Phytochemical Screening  of  Plants, Journal  of  Pharmaceutical Science . 55(3):225-276.
Harborne JB. 1996. Metode Fitokimia . Ed. ke-2. Kosasih Padmawinata,  penerjemah.  Terjemahan  dari: Phytochemical  Methods. Bandung  (ID):  Institut Teknologi Bandung.
Guyton  AC,  Hall  JE.  2006. Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran . Edisi 11. Irawati, Ramadani D, Indriyani F,  penerjemah.  Jakarta  (ID):  Penerbit  Buku Kedokteran EGC.
Komite  Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas  Kedokteran
Rumah Sakit Cipto Mangunkusumo No. 163/H2.F1/ETIK/2014. Mutschler  E.  1991. Dinamika  obat  Farmakologi  dan Toksikologi .  Bandung  (ID):  Institut  Teknologi Bandung.
Nirmal, NP, Rajput MS, Prasad RGSV, Ahmad M. 2015. Brazilin from Caesalpinia sappan heartwood and its pharmacological  activities:  A  review. Asian  Pacific Journal of Tropical Medicine. 8(6):421–430. Pertamawati, Nuralih, Fahrudin F. 2014. Ekstrak Secang Sebagai  Bahan  Diuretikum  (Percobaan  Terhadap Tikus  Putih  Jantan  Galur  Spraque  Dawley). Al- Kauniyah Jurnal Biologi. 7(2):89-93.
Sugiyanto  RN,  Putri  SR,    Damanik  FS,  Sasmita  GMA, 2013.  Aplikasi  kayu  secang  ( Caesalpinia  sappan L.) dalam  upaya  prevensi  kerusakan  DNA  akibat paparan zat potensial karsinogenik melalui MNPCE assay. Yogyakarta (ID): Universitas Gajah Mada Sutrisno  B.  1974.  Ihtisar  Farmakognosi,  Ed.  IV:  122.
Jakarta (ID): Pharmascience Pacific.
Syifa  TH.  2015.  Resep  Wedang  Uwuh  Khas  Yogyakarta yang Menyehatkan.[Diunduh 9 Juni 2016]. Tersedia pada: http://www.butania.com/2015/11/resep- wedang-uwuh.html    Resep  wedang  uwuh  khas Yogyakarta yang menyehatkan.
Widowati  W.  2011.  Uji  Fitokimia  dan  Potensi
Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Secang ( Caesalpinia  sappan L.). Jurnal  Kedokteran
Maranatha. 11(1):23-31.
126
Pertamawati et al.
Wijayakusuma  H.  2002    Tumbuhan  Berkhasiat  Obat Indonesia.  Rempah,  Rimpang  dan  Umbi . Jakarta
(ID): Prestasi Instan Indonesia. [WWF]  World  Wide  Fund  for  Nature.  2012.  Living Planet Report 2012. Netherlands (NL).