Jurnal Farmasi Indonesia, November 2014, hal 168-174
Vol. 11 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Aktivitas Antihiperglikemik Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Yakon ( Smallanthus sonchifolius ) dan Metformin pada Mencit yang Diinduksi Aloksan
Antihyperglycemic Activity of Combination of Yakon Leaves ( Smallanthus sonchifolius ) Ethanolic Extract and Metformin in Mice Induced Alloxan

## LIDIA KURNIAWATI, DWI NINGSIH*, VIVIN NOPIYANTI
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi: dwiee_nink@yahoo.co.id
(Diterima 27 Agustus 2014, disetujui 22 Oktober 2014)
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Diabetes  melitus  adalah  gangguan  metabolisme  yang  ditandai  dengan  hiperglikemia  yang berhubungan  dengan  abnormalitas  metabolisme  karbohidrat,  lemak,  dan  protein  yang  disebabkan oleh  penurunan  sekresi  insulin  atau  penurunan  sensitivitas  insulin  atau  keduanya.  Daun  yakon ( Smallanthus  sonchifolius)  merupakan  tanaman  obat  tradisional  yang  salah  satu  manfaatnya  dapat mengobati  diabetes  melitus.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antihiperglikemik kombinasi  ekstrak daun yakon dan metformin pada mencit yang diinduksi aloksan. Hewan uji dibagi dalam  6  kelompok  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  5  ekor  mencit.  Kelompok  I  CMC  0,5  %, kelompok  II  metformin (65  mg/kg  BB),  kelompok III  ekstrak  etanol  daun  yakon (840  mg/kg  BB), kelompok IV kombinasi ekstrak etanol daun yakon (420 mg/kg BB) dan metformin (32,5 mg/kg BB), kelompok V kombinasi ekstrak etanol daun yakon (630 mg/kg BB) dan metformin (16,25 mg/kg BB). Perlakuan diberikan selama 14 hari, dengan pengukuran kadar gula darah pada hari ke-7 dan hari ke- 14, kemudian dilakukan uji statistik dengan analisis varian satu jalan dengan taraf kepercayaan 95% kemudian dilanjutkan uji Tukey. Hasil penelitian menunjukkan kombinasi ekstrak etanol daun yakon 630  mg/kg  BB dan  metformin  16,25  mg/  kg  BB  lebih  baik  dibanding  sediaan  tunggal  metformin maupun ekstrak etanol daun yakon.
Kata kunci : Ekstrak daun yakon ( Smallanthus sonchifolius), aloksan, metformin, antihiperglikemik.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  is  a  metabolic  disorder  characterized  by  hyperglycemia  and  related  with abnormality metabolism of carbohydrate, lipid, and protein cause a decrease of insulin secretion or insulin sensitivity decrease or both. Yakon leaves is traditional medicinal plants that one of benefits could  treat  diabetes  mellitus.  The  experiment  was  purpose  to  find  antihyperglycemic    activity  of combination of yakon leaves ethanolic extract and metformin in mice induced alloxan. Test animals were divided in 6 groups each group consist of 5 mice. Groups I was given CMC 0,5%, group II was given metformin (65 mg/kg BB), group III was given yakon leaves ethanolic extract (840 mg/kg BB), group  IV  was  given  combination  of yakon leaves ethanolic  extract  (420 mg/kg BB) and metformin (32,5 mg/ kg BB), group V was given combination of yakon leaves ethanolic extract (630 mg/kg BB) and  metformin  (16,25 mg/ kg BB). The treatment were given during  14  days, with measurement  of glucose levels at 7 days and 14 days, then it was statistically tested by one way analysis of variance at 95% confidence continued with Tukey test. The result showed that the combination of yakon leaves ethanolic  extract  (630  mg/kg  BB)  and  metformin  (16,25  mg/  kg  BB)  was better  than  metformin  or yakon leaves ethanolic extract.
Keywords : yakon  leaves  ( Smallanthus  sonchifolius)  ethanolic  extract,  aloxan,  metformin, antihyperglycemic.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  adalah  gangguan metabolisme  yang  ditandai  dengan hiperglikemia yang berhubungan dengan abnormalitas  metabolisme  karbohidrat, lemak, dan protein yang disebabkan oleh penurunan sekresi insulin atau penurunan  sensitivitas  insulin  atau keduanya  dan  menyebabkan  komplikasi kronis  mikrovaskular,  makrovaskular, dan neuropati (ISFI 2008).
Menurut  Badan  Kesehatan  Dunia (WHO) jumlah penderita diabetes melitus  di  Indonesia  jumlahnya  sangat luar  biasa.  Pada  tahun  2000  jumlah penderita  8.400.000  jiwa,  pada  tahun 2003  jumlah  penderita  13.797.470  jiwa dan  diperkirakan  tahun  2030  jumlah penderita  bisa  mencapai  21.300.000 jiwa.  Data  jumlah  penderita  diabetes  di Indonesia  pada  tahun  2005  sekitar  24 juta  orang.  Jumlah  ini  diperkirakan  akan terus  meningkat  pada  tahun  yang  akan datang (Soegondo 2005).
Salah  satu  terapi  diabetes  melitus adalah  metformin. Metformin  memiliki mekanisme  kerja  yaitu  menstimulasi glikolisis  langsung  pada  jaringan  perifer dengan peningkatan pengeluaran glukosa dari  darah,  mengurangi  glukoneogenesis hati,  memperlambat  absorpsi  glukosa dari  saluran  pencernaan,  pengurangan kadar glukagon plasma, dan
meningkatkan  pengikatan  insulin    pada reseptor  insulin  (Katzung  1997),    namun adanya  efek  samping    pada  penggunaan obat  antidiabetik  oral  yang  masih  sering muncul,  mengingat  penderita  diabetes melitus harus mengkonsumsi obat dalam jangka waktu yang lama, maka
dikombinasikan antara obat kimia dengan  obat  herbal.  Kelebihan  dari  obat herbal  di antaranya  bersifat  alami sehingga dimaksudkan untuk
merekonstruksi  organ  tubuh  yang  rusak, mengurangi  efek  samping  dan  harganya murah (Erna 2011).
Tanaman  obat  yang  digunakan sebagai  kombinasi  dalam  penelitian  ini adalah daun yakon ( Smallanthus sonchifolius).  Tumbuhan  yang  berasal dari  Pegunungan  Andes,  Peru  ini dipercaya  dapat  mengatasi  penyakit diabetes. Yakon terbukti dapat
menurunkan kadar gula darah dan dapat meningkatkan  sensitivitas  insulin  pada tikus  yang  menderita  diabetes  (Aybar 2001).
Menurut  penelitian  Noor (2012), setelah 20 hari pemberian ekstrak etanol daun  yakon  terbukti  memiliki  khasiat menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada tikus jantan galur wistar. Pada penelitian ini  akan  dikaji  efek  kombinasi  ekstrak etanol  daun  yakon  dan  metformin terhadap penurunan kadar glukosa darah pada mencit yang diinduksi aloksan. Dari penelitian ini diharapkan efek kombinasi dapat  memberikan  efek  yang  lebih menurunkan  kadar  glukosa  darah  bila dibandingkan  dengan  metformin  dan ekstrak daun yakon, serta dapat mengurangi  efek  samping  penggunaan obat.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam
penelitian  ini  adalah  daun  yakon  yang diperoleh  dari  Colomadu,  Karanganyar,
metformin,  etanol,  aloksan  monohidrat, CMC,  larutan  NaCl  fisiologis.  Binatang percobaan  dalam  penelitian  ini  adalah mencit putih balb/c jenis kelamin jantan, umur 2-3 bulan dengan berat badan rata- rata 20 g.

## Alat
Alat    yang  digunakan  adalah  oven, seperangkat  alat  soxhletasi,  glukometer, timbangan,  jarum  suntik  1  ml,  neraca analitik,  dan  alat-alat  gelas,  jarum  suntik bentuk bola/ kanula.

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun Yakon
Daun  yang  tidak  berpenyakit  dan berumur  5-6  bulan.  Selanjutnya  daun dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu 55ºC,  dihaluskan  dengan  blender  dan diayak  dengan  ayakan  nomor    40. Selanjutnya  diukur  kelembaban  air dengan metode moisture balance diperoleh kadar 6,83±0,28 % yang telah memenuhi  syarat  kadar  air  yaitu  kurang dari 10%.
Pada  pembuatan  ekstrak, serbuk
daun yakon diambil 125 gram,
dimasukkan  ke  dalam  sebuah  kantung yang  terbuat  dari  kertas  saring  dibuat bentuk  silinder  dan  ujung-ujungnya diikat dengan tali. Selanjutnya dimasukkan  ke  dalam  alat  Soxhlet  dan ditambah  dengan  etanol  kurang  lebih 250  ml  dilakukan  sebanyak  1,5  kali sirkulasi. Proses isolasi dilakukan sampai filtrat  yang  tersirkulasi  jernih.  Kemudian dilakukan pemekatan menggunakan Soxhlet.  Ekstraksi  dilakukan  sebanyak  4 kali dan  diperoleh  rendemen  sebesar 26,82 %.
Identifikasi Kandungan Senyawa

## Kimia Ekstrak Daun Yakon
Flavonoid diidentifikasi  dengan  cara dua  miligram  ekstrak  ditambah  5  ml aquadest  dipanaskan  selama  1  menit, disaring  dan  diambil  filtratnya.  Filtrat ditambah  0,1  gram  serbuk  Mg,  2  ml larutan  alkohol  :  asam  klorida  (1:1)  dan pelarut  amil  alkohol.  Campuran  ini dikocok  kuat-kuat,  kemudian  dibiarkan memisah.  Reaksi  positif  ditunjukkan dengan  warna  merah  atau  kuning  atau jingga pada amil alkohol (Robinson 1995).
Identifikasi  saponin dengan  cara sepuluh  mililiter  air  panas  dalam  tabung reaksi didinginkan kemudian ditambahkan 0,5  gram  ekstrak  dan  dikocok  kuat-kuat selama  10  detik.  Uji  positif  ditunjukkan dengan  terbentuknya  buih  yang  stabil selama tidak kurang dari 10 menit setinggi 1  – 10  cm.  Pada  penambahan  HCl  2N buih tidak hilang (Harborne 1987).
Tanin diidentifikasi  dengan  cara ekstrak  ditambah  10  ml  air  panas kemudian dididihkan selama 15 menit dan saring.  Filtrat  yang  diperoleh  disebut larutan  B.  Sebanyak  5  ml  larutan  B ditambah  pereaksi  besi  (III)  klorida  1%. Reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya  warna  violet  (Robinson 1995).
Alkaloid diidentifikasi  dengan  cara satu  gram  ekstrak  daun  yakon  ditambah dengan sedikit larutan HCl 2N, dipanaskan kemudian  ditambahkan  larutan  Mayer terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning dan dengan Dragendrof terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam,  maka  ada  kemungkinan  terdapat alkaloid (Robinson 1995).
Prosedur Uji Aktivitas Antihiperglikemik Mencit  yang  telah  ditimbang  dan dikelompokkan dipuasakan terlebih dahulu selama 16 jam. Pada hari pertama dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa darah  awal  (T0)  sebelum  mencit  diberi perlakuan.  Lalu  mencit  diinduksi  larutan aloksan monohidrat 210 mg/kg BB secara intra  peritoneal.  Setelah  3  hari  induksi, diukur kadar glukosanya (T3).
Selanjutnya  masing-masing  kelompok diberi  perlakuan  secara  oral  selama  14 hari. Kelompok I CMC 0,5 %, kelompok II metformin, kelompok III ekstrak etanol daun  yakon,  kelompok  IV  kombinasi
ekstrak  etanol  daun  yakon  (420  mg/kg BB)  dan  metformin  (32,5  mg/kg  BB), kelompok  V  kombinasi  ekstrak  etanol daun  yakon  (630  mg/kg  BB)  dan metformin (16,25 mg/kg BB). Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan pada hari ke 7 dan 14 setelah pemberian larutan uji.
Sampel  darah  diambil  dari  ekor mencit  dengan  cara  menusuk  ekor dengan jarum, kemudian darah diteteskan  pada  strip  glukometer  dan dimasukkan  dalam  glukometer  untuk dibaca kadar
glukosanya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Rata-rata kadar glukosa darah
Gambar 1.  Grafik rata-rata kadar glukosa darah (mg/dL) pada waktu sebelum induksi aloksan (T0), hari ketiga setelah  induksi  aloksan  (T1),    hari  ketujuh  setelah  perlakuan  larutan  uji  (T7),  dan  hari  ke-14 setelah perlakuan larutan uji (T14).
Kelompok T0 T1 T7 T14 Kontrol negatif 97,60±  6,42 205,40±15,74 208,60±15,33 207,80±12,39 Metformin (65 mg/kg BB) 98,60±  8,44 201,80±12,51 148,60±17,89 119,20±  3,27 Ekstrak daun yakon (840 mg/kgBB) 98,40±12,50 202,60±  7,40 148,40±  6,54 120,20±  5,63 Ekstrak daun yakon:metformin (420 mg/kg BB:32,5 mg/kgBB) 95,60±  5,41 211,80±  9,62 143,60±  4,50 115,60±  5,59 Ekstrak daun yakon:metformin (630 mg/kg BB:16,25 mg/kgBB) 92,60±  9,07 204,40±11,21 142,80±  5,35 114,80±  8,55
T0              T1               T7               T14 M :  Metformin Y   : ekstrak daun yakon
Hasil  uji  identifikasi  kandungan senyawa dalam ekstrak daun yakon yaitu ekstrak  etanol  daun  yakon  mengandung flavonoid,  alkaloid,  tanin,  dan  saponin. Senyawa-senyawa  tersebut  berpotensi berkhasiat sebagai antihiperglikemik.
Berdasarkan Tabel 1 dan Gambar 1, pada hari ke-3 setelah pemberian aloksan terjadi  peningkatan  kadar  glukosa  darah pada  masing-masing  kelompok.  Pada hari  ke-7  dan  ke-14  setelah  perlakuan terjadi  penurunan  kadar  glukosa  darah pada  kelompok  metformin,  kelompok ekstrak  daun  yakon,  dan  kelompok kombinasi  ekstrak  daun yakon dan metformin.
Gambar  1  menunjukkan  bahwa kombinasi ekstrak etanol daun yakon dan metformin  memiliki  daya  penurunan kadar  glukosa  darah  yang  lebih  baik dibandingkan  sediaan  tunggal  ekstrak etanol  daun  yakon  dan  metformin.  Hal ini  dikarenakan  adanya  gabungan  dari dua  zat  aktif  dengan  mekanisme  yang berbeda  dalam  menurunkan  kadar glukosa  darah.  Mekanisme  aksi  dari metformin  yaitu  menstimulasi  glikolisis langsung  pada  jaringan  perifer  dengan peningkatan  pengeluaran  glukosa  dari darah, mengurangi glukoneogenesis hati, memperlambat  absorpsi  glukosa  dari saluran  pencernaan,  pengurangan  kadar glukagon  plasma,  dan  meningkatkan pengikatan  insulin  pada  reseptor  insulin (Katzung  1997),  sedangkan  mekanisme aksi dari daun yakon adalah mengurangi stress  oksidatif yang  disebabkan  oleh pemberian  aloksan  dan  mencegah kerusakan  yang  lebih  parah  pada  sel β pankreas (Tiwari & Rao 2002).
Pada  Tabel  2  dan  Gambar  2  dapat diketahui kelompok perlakuan kombinasi ekstrak etanol daun yakon dan metformin dalam berbagai perbandingan (420  mg/kg  BB:  32,5  mg/  kg  BB,  630 mg/kg BB:16,25 mg/ kg BB)
menghasilkan  persen  penurunan  yang tidak  berbeda  jauh,  hal  ini  dikarenakan pada  perbandingan  kombinasi  ekstrak etanol  daun  yakon  (630  mg/kg  BB)  dan metformin (16,25 mg/ kg BB)
mengandung  dosis  ekstrak  etanol  yang jauh  lebih  besar  dibandingkan  dalam kombinasi  ekstrak  etanol  daun  yakon (420 mg/kg BB) dan metformin (32,5 mg/ kg  BB)  sehingga  aktivitas  antioksidan yang  dihasilkan  ekstrak  etanol  daun yakon lebih kuat dan mampu
memperbaiki  sel β pankreas  dari kerusakan yang disebabkan stress oksidatif,  sehingga  efek  hiperglikemik yang  diakibatkan  oleh  aloksan  dapat berkurang  dan  menghasilkan  persen penurunan  kadar  glukosa  darah  yang sama  dengan  kombinasi  ekstrak  etanol daun  yakon  (420  mg/kg  BB)  dan metformin  (32,5  mg/  kg  BB).  Dosis  obat yang  diberikan  dalam  kombinasi  ekstrak etanol  daun  yakon  (630  mg/kg  BB)  dan metformin  (16,25  mg/  kg  BB)  lebih rendah  namun  dapat  menghasilkan  efek penurunan  kadar  glukosa  yang  sama dengan  kombinasi  ekstrak  etanol  daun yakon  (420  mg/kg  BB)  dan  metformin (32,5  mg/  kg  BB)  sehingga  dapat dikatakan  bahwa  kombinasi  ekstrak etanol  daun  yakon  (630  mg/kg  BB)  dan metformin  (16,25  mg/  kg  BB)  lebih  baik karena  akan  dapat  mengurangi  efek samping  metformin  dengan  penggunaan dosis lebih rendah dalam kombinasi.
Tabel 2. Rata-rata persentase efek penurunan kadar glukosa darah
Gambar  2.  Grafik efek penurunan kadar glukosa darah (mg/dl) pada hari ke-7 dan ke-14 setelah perlakuan ekstrak daun yakon (Y) dan metformin (M).

## KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  yakon memiliki aktivitas antihiperglikemik.
Kombinasi  ekstrak  etanol  daun  yakon (630  mg/kg  BB)  dan  metformin  (16,25 mg/ kg BB) memiliki aktivitas yang lebih baik dibanding sediaan tunggal metformin  dan ekstrak  etanol  daun yakon.

## DAFTAR PUSTAKA
Aybar  MJ,  Riera  AS,  Grau  A,  Sanches SS. 2001.  Hypoglicemic  effect  of  the  water extract  of Smallanthus  sonchifolius
(yacon) leaves  in  normal  and  diabetic rats. J. Ethnopharmacol. 74: 125-132. Erna.  2011.  Kajian  kombinasi  ekstrak  n- heksana jamur lingzhi-glibenklamid dan ekstrak n-Heksana jamur lingzhi- metformin  terhadap  penurunan  kadar glukosa  darah  pada  tikus  putih  jantan galur  wistar  dengan  induksi  aloksan [Skripsi].  Surakarta:  Fakultas  Farmasi Universitas Setia Budi.
Harborne  JB.  1987. Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan.  Kosasih  P,  Iwang  S, Penerjemah; Bandung: ITB Press Terjemahan dari: Phytochemical Methods. Kelompok Penurunan kadar glukosa darah  (%) Hari ke-7 Hari ke-14 Kontrol negatif -1,55 -1,16 Metformin (65 mg/kg BB) 26,36 40,93 Ekstrak daun yakon (840 mg/kgBB) 26,75 40,67 Ekstrak daun yakon:metformin (420 mg/kg BB:32,5 mg/kgBB) 32,20 45,42 Ekstrak daun yakon:metformin (630 mg/kg BB:16,25 mg/kgBB) 30,13 43,83
[ISFI]  Ikatan  Sarjana  Farmasi  Indonesia. 2008. Iso  Farmakoterapi. Jakarta  :
Penerbit  PT. ISFI Penerbitan. Hlm 26.
Katzung  BG.  1997. Farmakologi  Dasar  dan Klinik.  Jakarta:  EGC.  Terjemahan  dari: Basic  and  Clinical  Pharmacology. hlm 663-679.
Robinson  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tingkat  Tinggi.  Edisi  6. Padwaminata,  penerjemah;  Bandung: ITB  Bandung.  Terjemahan dari: The Organic Constituents of Higher Plants.
Soegondo S. 2005. Diagnosis Dan Klasifikasi Diabetes Mellitus Terkini, dalam Penatalaksanaan Diabetes Mellitus Terpadu.  Jakarta:  Fakultas  Kedokteran Universitas Indonesia. 17-26.
Tiwari  AK,  Rao JM.  Diabetes  mellitus  and multiple  therapeutic  approaches  of phytochemicals:  present  status  and future  prospect. Current  Science 83(1): 30-38.