## EFEK  IMMUNOTOKSIK  LOGAM  BERAT  MERKURI  KLORIDA (HgCl2)  TERHADAP  PERUBAHAN  UKURAN  MELANO-MAKROFAG GINJAL IKAN MAS ( Cyprinus carpio )
Immunotoxic  Effect  of  Heavy  Metal  of  Mercury  Chloride  (HgCl2)  on  Size  of  Melano- Macrophage From Common Carp Kidney
Lailatul Mubarokah 1 , Wahju Tjahjaningsih 2 dan Laksmi Sulmartiwi 2 .
1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Departemen Kelautan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya *lailatul-m-11@fpk.unair.ac.id

## Abstrak
Salah satu logam berat yang bersifat racun adalah merkuri. Salah satu jenis senyawa merkuri anorganik adalah merkuri klorida (HgCl 2 ) yang dapat menyebabkan kerusakan pada hati, ginjal dan bersifat korosif pada usus. Paparan logam berat dalam perairan akan terakumulasi pada jaringan dalam organ ikan melalui aktivitas metabolisme dan proses bioabsorbtion . Organisme akuatik sangat baik digunakan sebagai indikator pencemaran logam  dalam  lingkungan  perairan. Ikan  mas  sering  direkomendasikan  untuk  indikator  adanya  polutan  di perairan dan digunakan sebagai model eksperimental, karena ketersediaan dan kemampuan adaptasi yang baik terhadap  kondisi  laboratorium. Merkuri  klorida  (HgCl 2 )  dapat  menyebabkan  efek  immunotoksik  yang  akan menimbulkan respon imun dan perubahan behaviour ikan.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  apakah  merkuri  klorida  dapat  menyebabkan  efek immunotoksik  yang  ditunjukkan  dengan  adanya  perubahan  ukuran  melano-makrofag  ginjal  ikan  mas.  Metode yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  menggunakan  empat perlakuan  merkuri  klorida  (0,  0,01,  0,05  dan  0,1  ppm)  dengan  jumlah  hewan  uji  yang  digunakan  adalah  lima ekor  setiap  perlakuan  dengan  ulangan  sebanyak  lima  kali.  Parameter  utama  adalah  perubahan  ukuran  melano- makrofag ginjal ikan mas. Parameter penunjang adalah perubahan behavior dan kualitas air.
Kesimpulan  yang  didapat  dari  hasil  penelitian  ini  adalah  bahwa  merkuri  klorida  dapat  menyebabkan efek  immunotoksik  yang  ditunjukkan  dengan  adanya  perubahan  ukuran  melano-makrofag  ginjal  ikan  mas ( Cyprinus  carpio ).  Perubahan  ukuran  melano-makrofag  ginjal  ikan  mas  yang  terpapar  merkuri  klorida  0,01 ppm,  0,05  ppm,  0,1  ppm  mengalami  peningkatan  dibanding  ikan  mas  yang  tidak  terpapar  merkuri  klorida  (0 ppm).
Kata kunci :  Immunotoksik, Merkuri Klorida (HgCl 2 ), Ukuran Melano-Makrofag, Ginjal, Cyprinus carpio

## Abstract
One  of  the  toxic  heavy  metals  is  mercury.  One  type  of  inorganic  mercury  compounds  is  mercury chloride (HgCl 2 ) which may cause damage to the liver, kidney and corrosive to the intestine. Heavy metals into surface  waters  will  accumulate  in  fish  tissue  in  the  organ  through  the  metabolic  activity  and  bioabsorbtion process.  Aquatic  organisms  is  properly  well  used  as  an  indicator  of  metal  pollution  in  aquatic  environment. Common  carp  often  recommended  for  indicators  of  pollutants  in  water  and  used  as  an  experimental  model, because of the availability and tremendous adaptability to the laboratory conditions of common carp. Mercury chloride (HgCl 2 ) can lead to immunotoxic effects which would cause an immune response and the changes of fish behavior.
The  purpose  of  this  research  was  to  determine  whether  mercuric  chloride  (HgCl 2 )  can  cause  the immunotoxic effect on size of melano-macrophage from common carp kidney. The method used in this research is completely randomized design (RAL)  with using four treatments of mercury chloride (0, 0.01, 0.05 and 0.1 ppm ) the number of test animals used were five fish each treatment is five replications. The main parameter is the size of  melano-macrophage in kidney common carp. Supporting  parameter is the behavior changes of the fish, water quality and concentration of mercury in the water and kidney.
To sum up, this research shows that the mercuric chloride (HgCl 2 ) can cause the immunotoxic effect on size of the melano-macrophage from common carp kidney. The size of melano-macrophage in kidney common carp  exposed  to  mercury  chloride  0.01  ppm,  0.05  ppm,  0.1  ppm  increased  compared  to  carp  which  is  not exposed to mercury chloride (0 ppm).
Key words: Immunotoxic, Mercuric chloride (HgCl 2 ), Size of melano-macrophage, Kidney, Common carp

## PENDAHULUAN
Pencemaran  kerap  terjadi  sebagai pengaruh  dari  laju  pembangunan  terutama pengembangan  di  sektor  perindustrian dengan  residu  hasil  produksinya  berupa limbah  (Kurniawan,  2003).  Rochyatun dkk.  (2006)  menyatakan  bahwa  peningka- tan  jumlah  industri  diikuti  oleh  penamba- han  jumlah  limbah,  baik  berupa  limbah padat,  cair  maupun  gas.  Limbah  tersebut mengandung  bahan  kimia  yang  beracun dan berbahaya, salah satunya adalah logam berat.
Salah  satu  logam  berat  yang bersifat  racun  adalah  merkuri  (Darmono, 1995).  Merkuri  merupakan  salah  satu bahan  pencemar  perairan  yang  berbahaya bagi  lingkungan  dan  dapat  terakumulasi pada  organisme  perairan  (Nirmala  dkk., 2012). Organisme  akuatik  sangat  baik digunakan  sebagai  indikator  pencemaran logam dalam lingkungan perairan (Darmono,  1995). Ikan  mas  ( Cyprinus carpio )  sering  direkomendasikan  untuk indikator  adanya  polutan  di  perairan  dan digunakan  sebagai  model  eksperimental, karena  ketersediaan  dan  kemampuan adaptasi  yang  baik  terhadap  kondisi laboratorium dari ikan mas (Moreno et al ., 2014).
Logam berat yang memasuki perairan  akan  terakumulasi  pada  jaringan dalam  organ  ikan  melalui  aktivitas  meta- bolisme  dan  proses bioabsorbtion (Coban et  al .,  2013).  Al-Madani et  al .  (2009) menyatakan  bahwa  salah  satu  organ  yang dapat terakumulasi merkuri klorida (HgCl 2 )  adalah  ginjal,  berfungsi  dalam mengekskresikan  produk  limbah  dan memainkan  peran  penting  dalam  menjaga homeostasis  dengan  mengatur  cairan tubuh.
Merkuri klorida (HgCl 2 ) dapat me- nyebabkan  efek  immunotoksik  yang  akan menimbulkan  respon  imun  dan  perubahan behaviour ikan  (Hedayati et  al .,  2010). Hasil  penelitian  El-Boshy and Taha (2011),  menunjukkan  bahwa  merkuri  klo- rida  menyebabkan  gangguan  respon  imun seluler  maupun  humoral  pada  ikan  nila.
Respon  imun  selular  salah  satunya  dapat dilihat  dari  aktivitas  fagositosis.  Aktivitas fagositosis  diperankan  oleh  makrofag, makrofag  akan  membentuk  agregat  yang mengandung  pigmen  yang  biasanya  dise- but  dengan  melano-makrofag  (Bols et  al ., 2001).
Melano-makrofag  adalah  akumu- lasi  atau  agregat  dari  makrofag,  dapat ditemukan  di  limpa,  ginjal  bagian  anterior dan  hati  ikan.  Struktur  melano-makrofag ini mudah divisualisasikan secara histologi dengan kehadiran tiga pigmen yaitu hemo- siderin, melanin dan lipofuscin (Fournie et al .,  2001). Hasil  penelitian  dari  Reddy (2012), menyimpulkan  bahwa  adanya  pe- rubahan  ukuran  dan  munculnya  pigmen pada  melano-makrofag  di  hati  dan  ginjal menunjukkan  bahwa  melano-makrofag dapat  dianggap  sebagai  biomarker  yang disebabkan  oleh  toksisitas  logam  berat dalam perairan.

## METODOLOGI Waktu dan Tempat
Penelitian  dilaksanakan  di  Labora- torium Pendidikan Fakultas Perikanan dan Kelautan  Universitas  Airlangga  Surabaya. Pemeriksaan histopatologi melano- makrofag  ginjal  ikan  mas  dilaksanakan  di Laboratorium  Patologi  Veteriner  Fakultas Kedokteran Hewan  Universitas Airlangga. Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Maret 2015.

## Materi Penelitian
Peralatan Penelitian
Alat  yang  digunakan  untuk  pene- litian adalah akuarium dengan ukuran    50 cm  x  35  cm  x  30  cm  sebanyak  dua  puluh buah,  tandon  air,  aerator,  selang  aerasi, batu  aerasi,  seperangkat  alat  bedah  untuk mengambil  organ  dalam  ikan  uji,  sepe- rangkat  alat  untuk  pembuatan  preparat histologi  dan  mikroskop  untuk  mengukur perubahan  ukuran  melano-makrofag.  Alat yang  digunakan  untuk  mengukur  kualitas air selama perlakuan meliputi termometer, pH pen dan DO meter.
Bahan Penelitian Bahan  penelitian  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah merkuri klorida (HgCl 2 ),  ikan  mas  dengan  ukuran  panjang 18-20  cm  dan  berat  75-80  gram    (Suresh, 2009)  yang  didapatkan  dari  pasar  ikan Gunung  Sari,  pakan  pelet.  Bahan  untuk pembuatan  preparat  histopatologi  organ meliputi  akuades, buffer formalin,  parafin cair,  alkohol  70%,  80%,  90%,  96%, alkohol absolut  I, alkohol absolut  II, xylol I,  xylol  II  dan  zat  warna  hematoksilin- eosin (HE).

## Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  metode  Rancangan Acak Lengkap (RAL) karena media dalam perlakuan  seragam  (Kusriningrum,  2010), dengan  empat  perlakuan  merkuri  klorida (HgCl 2 )  0,  0,01,  0,05,  0,1  ppm  (El-Boshy and Taha,  2011).  Jumlah  ikan  uji  yang digunakan  adalah  lima  ekor  setiap  per- lakuan dengan ulangan sebanyak lima.

## Prosedur Kerja Persiapan Wadah dan Ikan Uji
Wadah yang akan digunakan dalam penelitian  ini  adalah  akuarium.  Langkah awal yang dilakukan adalah membersihkan akuarium. Akuarium  dicuci  dengan meng- gunakan  sabun  cair,  dilanjutkan  dengan pemberian desinfektan klorin dengan dosis 100  ppm  (Wahjuningrum  dkk.,  2010)  dan dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari. Akuarium  yang  digunakan  adalah  ukuran 50  cm  x  35  cm  x  30  cm  kemudian  diisi dengan air sebanyak 25 liter dan diberi ae- rasi.  Setiap  akuarium  diisi  lima  ekor  ikan uji  (Narantaka,  2012).  Penambahan  mer- kuri  klorida  (HgCl 2 )  dilakukan  setelah akuarium siap digunakan.
Pembuatan  Larutan  Stok  Merkuri Klorida (HgCl 2 )
Larutan  stok  merkuri  klorida  (Hg- Cl 2 ) berasal dari merkuri berbentuk bubuk dan  dibuat  dengan  konsentrasi  10  ppm. Penyediaan  stok  merkuri  klorida  (HgCl 2 ) dilakukan dengan cara pengenceran
sampai  mencapai  konsentrasi  yang  sesuai yang  akan  digunakan  untuk  penelitian, yakni 0,01, 0,05 dan 0,1 ppm.
Pemeliharaan  Ikan  Mas ( Cyprinus carpio )
Langkah  awal  yang  dilakukan  ada- lah  dengan  melakukan  aklimatisasi  ikan terlebih  dahulu  terhadap  lingkungan  baru. Ikan  dipelihara  selama  21  hari  dengan paparan  logam  berat  merkuri  klorida (HgCl 2 )  sesuai  dengan  konsentrasi  perla- kuan. Selama pemeliharaan, ikan uji diberi pakan  pelet  buatan  secara ad  libitum pada pukul 09.00 dan 16.00 WIB. Pergantian air dilakukan  setiap  tiga  hari  sekali  dengan cara  menambahkan  air  yang  mempunyai konsentrasi  merkuri  klorida  (HgCl 2 )  yang sama.

## Pembuatan Preparat Histologi
Preparat histologi dibuat dari organ ginjal  bagian  anterior  ikan  mas.  Pengam- bilan organ ginjal ikan mas diawali dengan membedah  ikan  mas  setelah  21  hari  masa pemeliharaan.  Preparat  histopatologi  di- buat  dengan  menggunakan  parafin  dan pewarnaan  hematoksilin-eosin  (Suresh, 2009).
Parameter Pengamatan
dan

## Pengambilan Data
Parameter  utama  dalam  penelitian ini  adalah ukuran  melano-makrofag  pada organ  ginjal  ikan  uji  yang  diamati  pada akhir  penelitian.  Parameter  pendukung dalam  penelitian  ini  adalah perubahan behaviour ikan  uji  selama  penelitian  ber- langsung, serta parameter kualitas air meli- puti  suhu,  pH  dan  oksigen  terlarut  (DO) dilakukan  pada  awal  dan  akhir  penelitian. Pengukuran  kualitas  air  dilakukan  pada pagi hari.
Pengamatan melano-makrofag yang  terlihat  pada  preparat  histopatologi menggunakan  mikroskop  dengan  perbe- saran  400x.  Mikroskop  yang  digunakan untuk  mengukur  ukuran  melano-makrofag adalah  mikroskop  yang  sudah  terhubung dengan  komputer  dan  dapat  digunakan
untuk menentukan ukuran bar dari gambar yang terambil.

## Analisis Data
Data  perubahan  ukuran  melano- makrofag  yang  diperoleh  disusun  dalam bentuk  tabel  kemudian  dianalisis  meng- gunakan  Analisis  Varian  (ANAVA)  de- ngan  menggunakan  SPSS  versi  17.  Hasil yang  didapat  akan  dilanjutkan  dengan  uji jarak berganda Duncan ( Duncan`s multiple range  test )  untuk  mengetahui  perbedaan antar perlakuan (Kusriningrum, 2012).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ukuran  Melano-makrofag  Ginjal  Ikan Mas ( Cyprinus carpio )
Data rata-rata ukuran melano-makrofag pada ginjal ikan mas ( Cyprinus carpio ) yang sudah terpapar merkuri klorida (HgCl 2 ) dengan konsentrasi berbeda disajikan pada Tabel 1.
Hasil  Analisis  Varian  (ANAVA)
dengan  selang  kepercayaan  95%  menun- jukkan  bahwa  konsentrasi  merkuri  klorida (HgCl 2 ) berpengaruh nyata (p<0,05) terha-
dap  perubahan  ukuran  melano-makrofag ginjal ikan mas ( Cyprinus carpio ).
Tabel 1. Rata-rata ukuran melano makrofag  pada  ginjal  ikan  mas ( Cyprinus carpio ) Perlakuan Ukuran (µm) A (0 ppm) 8,89 d ±0,81 B (0,01 ppm) 12,22 c ±0,29 C (0,05 ppm) 31,97 a ±2,19 D (0,1 ppm) 18,56 b ±1,03
Keterangan:  Superskrip  yang  berbeda  dalam  satu kolom menunjukkan ada perbedaan yang nyata pada taraf signifikansi (α = <0,05)
Hasil  uji  lanjut  menggunakan  uji  Jarak Berganda  Duncan  5%  dilakukan  untuk mengetahui  perbedaan  antar  perlakuan. Ukuran melano-makrofag tertinggi dipero- leh pada perlakuan 0,05 ppm yang berbeda nyata  (p<0,05)  dengan  perlakuan  0  ppm, 0,01 ppm dan 0,1 ppm.
Gambar 1. Gambaran histopatologi ginjal ikan mas (perbesaran 400x). A: konsentrasi HgCl 2 0 ppm, B: konsentrasi HgCl 2 0,01 ppm, C: konsentrasi HgCl 2 0,05 ppm dan D: konsentrasi HgCl 2 0,1 ppm. Melano-makrofag (1), tubulus (2), glomerulus (3).
Perubahan  Tingkah  Laku  ( Behaviour ) Ikan Mas
Perubahan  tingkah  laku  ikan  mas ( Cyprinus  carpio ) diamati  setelah  21  hari pemeliharaan  dengan  paparan  konsentrasi merkuri  klorida  (HgCl 2 )  yang  berbeda.
Pada  perlakuan  A  (0  ppm),  ikan  tidak mengalami  perubahan  tingkah  laku  dan ikan  berenang  normal.  Pada  perlakuan  B (0,01 ppm), ikan cenderung berenang lebih cepat  dan  adanya  akumulasi  lendir.  Pada perlakuan  C  (0,05  ppm),  ikan  cenderung
hiperaktif,  banyak  akumulasi  lendir  dan ikan  mencoba  meloncat  keluar  dari  akua- rium.  Pada  perlakuan  D  (0,1  ppm),  ikan cenderung  hiperaktif,  akumulasi  lendir sangat  banyak,  hilang  keseimbangan  dan ikan  mencoba  meloncat  keluar  dari akuarium.

## Kualitas Air
Pengukuran  kualitas  air  bertujuan untuk  memantau  kondisi  kualitas  air  bagi ikan  mas  ( Cyprinus  carpio )  selama  peme- liharaan.  Rata-rata  nilai  pengukuran  kua- litas  air  selama  penelitian  21  hari  yaitu berkisar  antara:  suhu  25,8  -  29,04 o C,  pH 7,1 – 7,8 dan DO 3,95 - 4,14 mg/l.

## Pembahasan
Logam  berat  merkuri  merupakan salah  satu  bahan  pencemar  perairan  yang sangat  berbahaya  jika  terakumulasi  dalam tubuh  (Diliyana,  2008).  Akumulasi  mer- kuri  klorida  (HgCl 2 )  pada  ikan  diawali dengan proses pengambilan ( uptake ) mela- lui  insang  (Lasut,  2009)  dan  akan  didis- tribusikan  melalui  sistem  peredaran  darah dari insang ke seluruh organ sasaran dalam tubuh (Suseso, 2011).
Merkuri  klorida  (HgCl 2 )  merupa- kan salah satu jenis senyawa merkuri anor- ganik (Supriharyono,  2002)  dan  sangat larut  dalam  air  (Gianti,  2013). Merkuri klorida  (HgCl 2 )  bukan  termasuk  senyawa merkuri  yang  paling  beracun,  tetapi  mer- kuri  klorida  (HgCl 2 )  dapat  menyebabkan efek immunotoksik (Hedayati et al ., 2010). Logam  berat  merkuri  klorida  (HgCl 2 ) dapat menyebabkan gangguan respon imun secara  selular  maupun  humoral  (El-Boshy and Taha,  2011).  Respon  imun  secara selular  yang  dijadikan  indikator  adalah adanya perubahan ukuran melano- makrofag di hati dan ginjal terutama ginjal bagian anterior (Reddy, 2012).
Melano-makrofag merupakan agre- gasi  dari  makrofag  (Wolke et  al .,  1985).
Makrofag  berfungsi  sebagai  sel  fagosit utama  yang  berperan  dalam  proses fagositosis (Thomas et al ., 2013). Melano- makrofag memainkan peran penting dalam
respon  ikan  terhadap  bahan  asing,  ter- masuk agen infeksius (Agius and Roberts, 2003).
Hasil  pengamatan  perubahan  uku- ran  melano-makrofag  pada  ginjal  yang tertinggi  diperoleh  pada  perlakuan  0,05 ppm  yang  berbeda  nyata  (p<0,05)  dengan perlakuan  0  ppm,  0,01  ppm  dan  0,1  ppm. Merkuri  klorida  (HgCl 2 )  yang  masuk  ke dalam  tubuh  akan  mengalir  dalam  aliran darah  dan  akan  menyebabkan  kerusakan sel dan jaringan (Destiany, 2007). Sel atau jaringan  yang  mengalami  kerusakan  terse- but akan dicerna oleh sel fagosit dan akan terkonsentrasi  dalam  makrofag  (Wolke et al .,  1985).  Mekanisme  ini  yang  akan  me- rangsang  pembentukan  dan  peningkatan ukuran  melano-makrofag  (Agius and Roberts, 2003).
Perlakuan dengan konsentrasi mer- kuri  klorida  (HgCl 2 )  yang  paling  tinggi yaitu  0,1  ppm  terlihat  adanya  penurunan ukuran  melano-makrofag.  Pemberian  kon- sentrasi  yang  melebihi  konsentrasi  efektif dapat  bersifat  sangat  toksik,  sehingga  me- nyebabkan  terjadinya  pengurangan  eks- presi  respon  imun  karena  mekanisme imunosupresi  dari  sistem  imun  tersebut. Hal  tersebut  dikarenakan  suatu  zat  yang toksik  dapat  menghambat  aktivitas  fagosi- tosis  makrofag  pada  batas  konsentrasi tertentu (Middleton et al ., 2000).
Adanya  paparan  logam  berat  mer- kuri akan menyebabkan perubahan tingkah laku.  Perubahan  tingkah  laku  ikan  yang terlihat  akibat  adanya  respon  terhadap toksisitas  merkuri  klorida  (HgCl 2 )  antara lain  ikan  menjadi  hiperaktif  dengan berusaha untuk melompat keluar dikarena- kan  adanya  iritasi  kulit,  gangguan  respi- rasi,  kehilangan  keseimbangan,  akumulasi lendir  yang  berlebihan  dan  berakhir  de- ngan  kematian  (Guedenon et  al .,  2012).
Perubahan  tingkah  laku  ikan  mas  ( Cypri- nus  carpio )  pada  perlakuan  dengan konsentrasi  merkuri  0,1  ppm  sangat terlihat yaitu ikan hiperaktif, ikan mencoba keluar  dari  akuarium  pemeliharaan,  bere- nang tidak teratur dan tingginya akumulasi lendir  pada  ikan  mas  ( Cyprinus  carpio ).
Perubahan  tingkah  laku  ikan  mas  selama perlakuan  disebabkan  karena  merkuri  da- pat  mengganggu  indera  perasa  ikan  dan reseptor  indera  penglihatan  mata  ikan (Nirmala dkk., 2012).
Parameter  kualitas  air  diukur  pada awal  dan  akhir  penelitian.  Kisaran  nilai suhu selama penelitian adalah 25,8 - 29,04 o C, pH 7,1 – 7,8 dan oksigen terlarut (DO) 3,95  -  4,14  mg/l.  Nilai  tersebut  masih berada  pada  kisaran  optimum  bagi  kehi- dupan ikan mas  yaitu suhu 23  -  30 o C, pH 6,5 – 9 (FAO, 2006) dan oksigen terlarut 3- 5 mg/l (Rudiyanti dan Ekasari, 2009).

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Kesimpulan  yang  diperoleh  dari penelitian ini adalah bahwa merkuri klorida (HgCl 2 ) dapat menyebabkan efek immuno- toksik  yang  ditunjukkan  dengan  adanya perubahan  ukuran  melano-makrofag  ginjal ikan  mas  ( Cyprinus  carpio ).  Melano- makrofag  ginjal  ikan  mas  yang  terpapar merkuri  klorida  0,01  ppm,  0,05  ppm  dan 0,1  ppm  mengalami  peningkatan  ukuran dibanding  ikan  mas  yang  tidak  terpapar merkuri klorida (0 ppm).

## Saran
Saran  pada  penelitian  ini  adalah diperlukan  adanya  penelitian  lanjutan  ten- tang  peranan  melano-makrofag  pada  orga- nisme yang hidup di perairan bebas sebagai indikator  kesehatan  organisme  di  perairan umum.

## DAFTAR PUSTAKA
Agius, C and R. J Roberts. 2003. Melano- macrophage  Centres  and  Their Role  in  Fish  Pathology.  Journal  of Fish Diseases, 26: 499-509.
Al-Madani, W. A., N. J. Siddiqi and A. S.
Alhomida. 2009. Renal Toxicity of Mercuric  Chloride  at  Different Time  Intervals  in  Rats.  Bio- chemistry  Insights.  Libertas  Aca- demica. Saudi Arabia, 2: 37-45.
Bols,  N.  C.,  J.  L.  Brubacher.,  R.  C. Ganassin  and  L.  E.  J.  Lee.  2001.
Ecotoxicology  and  Innate  Immu- nity  in  Fish.  Development  and
Comparative Immunology, 25:
853-873.
Coban,  M.  Z.,  M.  Eroglu.,  O.  Canpolat., M.  Calta  and  D.  Sen.  2013.  Effect of Chromium on Scale Morphology in Scaly Carp ( Cyprinus carpio L.). The  Journal  of  Animal  &  Plant Sciences, 23 (5): 1455-1459.
Darmono.  1995.  Logam  Dalam  Sistem Biologi  Makhluk  Hidup.  Univer- sitas  Indonesia  Press.  Jakarta.  hal. 23-24.
Destiany,  M.  2007.  Pengaruh  Pemberian Merkuri Klorida Terhadap Struktur Mikroanatomi  Hati  Ikan  Mas. Skripsi.  Universitas  Negeri  Sema- rang. Semarang. 63 hal.
Diliyana,  Y.  F.  2008.  Studi  Kandungan Merkuri  (Hg)  Pada  Ikan  Bandeng ( Chanos  chanos )  Di  Tambak  Seki- tar  Perairan  Rejoso  Kabupaten Pasuruan. Skripsi. Universitas
Islam  Negeri  Malang.  Malang.  77
hal. El-Boshy, M. E and R. Taha. 2011. Effects of  Mercuric  Chloride  on  the Immunological, Hematological, Biochemical Parameters and Diseases Resistance of Nile Tilapia Challenged with
Aeromonas hydrophila .  Nature  and  Science Journal, 9 (12): 7-15.
FAO.  2006.  Cultured  Aquatic  Species Information  Programme  of Cypri- nus  carpio .  Fisheries  and  Aqua- culture Department. hal. 2.
Fournie,  J.  W.,  J.  K.  Summers.,  L.  A. Courtney  and  V.  D.  Engle.  2001. Utility  of  Splenic  Macropage Aggregates  as  an  Indicator  of  Fish Exposure  to  Degraded  Environ- ments.  Journal  of  Aquatic  Animal Health, 13: 105-116.
Gianti. 2013. Analisis Kandungan Merkuri dan  Hidrokuinon  dalam  Kosmetik Krim  Racikan  Dokter.  Skripsi. Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Ke- sehatan.  Universitas  Islam  Negeri
Syarif  Hidayatullah.  Jakarta.  80
hal.
Guedenon, P., A.P Edorh., A.S.Y.
Hounkpatin.,  C.G.  Alimba.,  A. Ogunkanmi.,  E.G.  Nwokejiegbe., and M. Boko. 2012. Acute Toxicity of  Mercury  (HgCl2)  to  African Catfish Clarias gariepinus .
Research  Journal  of  Chemical
Sciences, 2(3): 41-45.
Hedayati,  A.,  A.  Safahieh.,  A.  Savari  and J.  G.  Marammazi.  2010.  Detection of  Range  Finding  Test  of  Mercury Chloride  in  Yellowfin  Sea  Bream ( Acanthopagrus latus ). Iranica Journal  of  Energy  and  Environ- ment, 1 (3): 228-233.
Kurniawan,  Y.  B.  2003.  Analisis  Kan- dungan Unsur Merkuri (Hg) Dalam Tanah Pertanian Menggunakan Metode Analisis Pengaktifan Neutron  (APN).  Skripsi.  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan
Alam.  Universitas  Sebelas  Maret. Surakarta. 73 hal.
Kusriningrum,  R.  S.  2010.  Rancangan Percobaan.  Airlangga  University Press. Surabaya. hal. 99. Lasut,  M.  T.  2009.  Proses  Bioakumulasi dan Biotransfer Merkuri  (Hg) Pada Organisme  Perairan  Di  Dalam Wadah  Terkontrol.  Jurnal  Mate- matika dan Sains, 4 (3): 89-95. Middleton,  E.,  Kandaswami,  C  and  Theo- harides, T. C. 2000. The Effects of Plant  Flavonoids  on  Mammalian Cells:  Implications  for  Inflamma- tion,  Hearts  Disease,  and  Cancer. Pharmacological Review: The
American  Society  for  Pharmaco- logy  and  Experimental  Therapeu- tics, 52 (4): 673-751.
Moreno, D. H., I. C. Resino., J. M. Flores., M.  J.  G.  Gomez.,  C.  M.  Naila.,  F. Soler  and  M.  P.  Lopez.  2014. Different  Enzymatic  Activities  in Carp  ( Cyprinus  carpio L.)  as Potential  Biomarkers  of  Exposure to  The  Pesticide  Methomyl.  Arh Hig Rada Toksikol, 65: 311-318.
Narantaka,  A.  2012.  Pembenihan  Ikan Mas.  Javalitera.  Yogyakarta.  hal. 38.
Nirmala,  K.,  Y.  P.  Hastuti  dan  V.  Yuniar. 2012.  Toksisitas  Merkuri  (Hg)  dan Tingkat  Kelangsungan  Hidup,  Per- tumbuhan,  Gambaran  Darah  dan Kerusakan  Organ  Pada  Ikan  Nila
Oreochromis niloticus . Jurnal
Akuakultur  Indonesia,  11  (1):  38- 48.
Reddy,  S.  J.  2012.  Cadmium  Effect  on Histo-Biomarkers and Melano- Macrophage  Centers    in  Liver  and Kidney  of Cyprinus  carpio .  World Journal  of  Fish  and  Marine Sciences, 4 (2): 179-184.
Rochyatun,  E.,  M.  T.  Kaisupy  dan  A.
Rozak.  2006.  Distribusi  Logam Berat  Dalam  Air  dan  Sedimen  Di Perairan  Muara  Sungai  Cisadane. Makara Sains, 10 (1): 35-40.
Rudiyanti,  S  dan  A.  D.  Ekasari.  2009.
Pertumbuhan  dan Survival  Rate Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio  Linn ) Pada  Berbagai  Konsentrasi  Pesti- sida  Regent  0,3  G.  Jurnal  Saintek Perikanan, 5 (1): 39-47.
Supriharyono. 2002. Pelestarian dan Pengelolaan Sumber Daya Alam Di Wilayah  Pesisir  Tropis.  PT  Gra- media Pustaka Utama. Jakarta. hal. 156.
Suresh,  N.  2009.  Effect  of  Cadmium Chloride on Liver, Spleen and Kid- ney  Melanomacrophage  Centres  in Tilapia  mossambica .  Journal  of Environmental  Biology,  30  (4): 505-508.
Suseno,  H.  2011.  Bioakumulasi  Merkuri dan  Metil  Merkuri  Oleh Oreo- chromis  mossambicus Mengguna- kan  Aplikasi  Perunut  Radioaktif: Pengaruh  Konsentrasi,  Salinitas, Partikulat,  Ukuran  Ikan  dan  Kon- tribusi  Jalur  Pakan.  Disertasi.  Uni- versitas Indonesia. Depok. 147 hal. Thomas,  A.  W.,  A.  Chawla  and  J.  W. Pollard. 2013. Macrophage Biology In  Development,  Homeostasis  and
Disease.  Review  Nature  Journal. Macmillan  Publishers  Limited.  pp 445-455. Wahjuningrum,  D.,  E.  H.  Solikhah.,  T. Budiardi  dan  M.  Setiawati.  2010. Pengendalian  Infeksi Aeromonas hydrophila Pada  Ikan  Lele  Dumbo
( Clarias sp.)  Dengan  Campuran Meniran  ( Phyllanthus  niruri )  dan Bawang  Putih  ( Allium  sativum ) Dalam  Pakan.  Jurnal  Akuakultur Indonesia, 9 (2): 93-103. Wolke,  R.  E.,  R.  A.  Murchelano.,  C.  D. Dickstein  and  C.  J.  George.  1985. Preliminary  Evaluation  of  the  Use of  Macrophage  Aggregates  (MA) as  Fish  Health  Monitors.  Bull Environmental  Contamination  and Toxicology, 35: 222-227.