Penulis Makmum  Syafi’i 1 ,  Eti  Rohaeti 1 ,  Wulan  Tri  Wahyuni 1,2 *,  Mohamad  Rafi 1,2 ,  Dewi  Anggraini
Septaningsih 2 Afiliasi 1 Departemen Kimia, Fakultas Matematikan dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor,
Indonesia
2 Pusat Studi Biofarmaka Tropika, Institut Pertanian Bogor, Indonesia

## Kata Kunci
 Curcuma mangga
 kromatografi lapis tipis
 sidik jari
Diterima 5 September 2018 Direvisi 2 November 2018 Disetujui 26 November 2018

## *Corresponding author Wulan Tri Wahyuni
Jalan Tanjung Kampus IPB, Dramaga, Babakan, Dramaga, Bogor, Jawa Barat 16680 wulantriws@gmail.com

## ABSTRAK
Profil  sidik  jari  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dapat  dimanfaatkan  untuk  kendali mutu  bahan  baku  maupun  produk  tumbuhan  obat.  Penelitian  ini  bertujuan mengembangkan  metode  analisis  sidik  jari  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga ) untuk  kendali  mutunya.  Rimpang  kering  temu  mangga  diekstraksi  menggunakan metanol  dan  dianalisis  sidik  jari  KLT.  Kloroform:etil  asetat  (8.5:1.5)  merupakan  fase gerak  optimum  yang  memisahkan  11  pita  dari  rimpang  temu  mangga  dengan keterpisahan  yang  baik  dan  memiliki  pita  khas  biru  tua  ( R f 0.36).  Demetoksikurkumin terdeteksi  pada  rimpang  temu  mangga  dengan  warna  jingga  kecoklatan  pada  UV  366 nm ( R f 0.48) setelah diderivatisasi dengan pereaksi asam sulfat 10%. Pengujian spesifitas terhadap rimpang lain dalam satu genus, rimpang temu mangga menunjukan pola yang berbeda.  Validasi  metode  analisis  sidik  jari  KLT  memenuhi  kriteria  keberterimaan, sehingga metode ini dapat digunakan untuk kendali mutu rimpang temu mangga.

## PENDAHULUAN
Temu  mangga  ( C.  mangga )  merupakan  salah  satu  spesies  dari  genus Curcuma yang banyak digunakan di Indonesia sebagai obat tradisioal (jamu). Rimpang merupakan bagian temu mangga yang paling banyak digunakan sebagai bahan baku obat tradisional karena  rimpang  temu  mangga  memiliki  khasiat  sebagai  obat  maag,  diare,  penghilang nyeri  saat  haid,  keputihan,  serta  mengobati  jerawat  dan  bisul  (Tedjo et  al. 2005). Rimpang  segar  temu  mangga  memiliki  ciri  khas  berwarna  kuning  muda  dan  memiliki bau  khas  seperti  bau  buah  mangga,  sehingga  mudah  dibedakan  dengan  rimpang  lain yang  berkerabat  dekat  dengannya.  Namun  demikian,  serbuk  kering  rimpang  temu mangga  akan  sulit  dibedakan  dari  serbuk  kering  rimpang  tumbuhan  yang  berkerabat dengannya  seperti  bangle,  kunyit,  dan  temulawak.  Harga  jual  serbuk  rimpang  temu mangga  juga  lebih  mahal  dibandingkan  rimpang-rimpang  tersebut,  sehingga  dapat memicu terjadinya subtitusi bahan baku obat herbal yang berbasis temu mangga. Oleh karena  itu  perlu  dilakukan  identifikasi  dan  kendali  mutu  agar  khasiat,  keamanan,  dan
Analisis Sidik Jari Kromatografi Lapis Tipis Rimpang Temu Mangga ( Curcuma mangga )
Syafi’i et al. mutu obat herbal tetap terjaga.
Identifikasi terhadap bahan baku memerlukan suatu metode analisis. Salah satu metode analisis yang sering digunakan  dalam  kendali  mutu  bahan  baku  ialah pendekatan  sidik  jari.  Pendekatan  sidikjari  akan memvisualisasi  secara  keseluruhan  metabolit  dalam sampel  (Lin et  al .  2006).  Teknik  kromatografi merupakan  alternatif  yang  dapat  digunakan  untuk menunjukkan  pola  sidik  jari  keseluruhan  dengan merepresentasikan keragaman komponen yang terdapat  pada  tanaman  obat  tanpa  memperhatikan jenisnya  (Liang et  al. 2004),  khususnya  kromatografi lapis  tipis  (KLT).  Analisis  sidik  jari  KLT  dapat  dilakukan secara  kualitatif,  yaitu  menganalisis  profil  hasil pemisahan  berdasarkan  jumlah,  posisi,  warna, intensitas  serta R f ( retardation  factor )  pita  yang dihasilkan.  Kromatografi  lapis  tipis  memiliki  kelebihan berupa  mudah  dalam  preparasi  sampel,  sederhana, biaya  operasional  relatif  murah  karena  semua komponen  sampel  dan  standar  diujikan  dalam  waktu yang  sama,  volume  pelarut  yang  digunakan  sedikit, selektif  dan  sensitif,  serta  kromatogramnya  dapat diamati secara visual (Kimura et al. 2008).
Analisis  sidik  jari  dengan  KLT  telah  dilakukan  untuk identifikasi  kunyit,  bangle,  dan  temulawak  (Rafi et  al . 2011);  pegagan  ( Centella  asiatica )(James  dan  Dubery 2011); Potentilla (Swieboda et  al .  2014);  dan phyllanthus  amarus  (Ketmongkhonsit et  al. 2015).  Di dalam  tulisan  ini  telah  dikembangkan  suatu  metode analisis  sidik  jari  rimpang  temu mangga  menggunakan kromatografi lapis tipis. Metode yang telah dikembangkan digunakan untuk mengidentifikasi temu mangga  dari  tiga  jenis  rimpang  tumbuhan  yang berkerabat dekat dengannya.

## METODE Alat dan Bahan
Alat
Peralatan  yang  digunakan,  yaitu  KLT  aplikator semiotomatis  Camag  Linomat  5  (CAMAG,  Muttenz, Swiss),  bejana  kromatografi  twin  trough  (CAMAG, Muttenz,  Swiss),  CAMAG  Reprostar  3  (CAMAG, Muttenz,  Swiss),  aplikasi  winCATS  (CAMAG,  Muttenz, Swiss),  dan  ultrasonikator  Branson  1510  (Branson, Danbury, USA).

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  terdiri  atas  pelat  KLT silica  gel  60  F254  20×20  cm  (Merck,  Darmstadt, Jerman);  n-heksana  pa  (Merck,  Darmstadt,  Jerman), dietil eter pa (Merck, Darmstadt, Jerman), diklorometana  pa  (Merck,  Darmstadt,  Jerman), kloroform  pa  (Merck,  Darmstadt,  Jerman),  etil  asetat pa  (Merck,  Darmstadt,  Jerman),  etanol  pa  (Merck, Darmstadt,  Jerman),  aseton  pa  (Merck,  Darmstadt, Jerman),  metanol  pa  (Merck,  Darmstadt,  Jerman), asetonitril pa (Merck, Darmstadt, Jerman), asam sulfat (Merck, Darmstadt, Jerman).
Rimpang  temu  mangga  yang  digunakan  terdapat  5 sampel  yang  diambil  dari  beberapa  lokasi.  Selain  itu digunakan produk jamu, serbuk rimpang temu mangga, rimpang bangle, temulawak dan kunyit (Tabel 1).

## Ekstraksi Simplisia
Serbuk  sampel  ditimbang  sebanyak  1  g  dan ditambahkan  dengan  10  mL  metanol  dan  diekstraksi selama  30  menit  menggunakan  ultrasonikator  dengan frekuensi  42  kHz  pada  suhu  ruang.  Ekstrak  disaring  ke dalam botol yang bersih kemudian ditutup rapat.

## Tabel 1 Asal dan Kode Sampel
Asal Sampel Kode Sampel Rimpang temu mangga asal Desa Cihanjawar, Kecamatan Nagrak, Kabupaten Sukabumi, Jawa Barat M1 Rimpang temu mangga asal Pasar Anyar Bogor, Jawa Barat M2 Rimpang temu mangga asal Pasar Merdeka Bogor, Jawa Barat M3 Rimpang temu mangga asal Pasar Bogor Bogor, Jawa Barat M4 Rimpang temu mangga asal Pasar Senen, Jakarta Pusat M5 Produk jamu serbuk rimpang temu mangga asal Pasar Senen, Jakarta Pusat J Rimpang bangle asal kebun Biofarmaka IPB, Bogor, Jawa Barat B Rimpang temulawak asal kebun Biofarmaka IPB, Bogor, Jawa Barat L Rimpang kunyit asal kebun Biofarmaka IPB, Bogor, Jawa Barat K

## Preparasi Pelat dan Kondisi Aplikasi Sampel
Pelat  KLT  silika  gel  60  F254  dipotong  dan dikembangkan  dalam  bejana  kromatografi  yang  telah dijenuhkan  dengan  metanol.  Pelat  dikeringkan menggunakan oven dengan suhu 105 °C sampai kering. Pelat  yang  telah  kering  digunakan  untuk  aplikasi sampel.
Penotolan  sampel  menggunakan  KLT  aplikator semiotomatis, yaitu  Camag  Linomat  5.  Kondisi  aplikasi sampel,  yaitu  gas  pembawa  menggunakan  gas nitrogen,  sampel  diaplikasikan  konstan  dengan  laju  70 nL/detik,  aplikasi  volume  sampel  sebesar  15  µL,  lebar pita 8 mm, dan jarak antar spot pita sebesar 4 mm.

## Pemilihan Fase Gerak
Ekstrak M diaplikasikan pada pelat. Pelat yang telah dilakukan  penotolan  ekstrak  dikembangkan  dalam bejana  yang  telah  dijenuhkan  dengan  pelarut  tunggal sebanyak  10  mL  selama  30  menit.  Pelarut  yang digunakan,  yaitu  n-heksana,  dietil  eter,  asetonitril, aseton,  diklorometana,  kloroform,  etil  asetat,  etanol, metanol,  dan  kombinasi  beberapa  pelarut.  Pelat dikembangkan hingga fase gerak mencapai tinggi 8 cm dari  posisi  aplikasi  ekstrak.  Setelah  pengembangan selesai,  pelat  dikeluarkan  dan  dikeringkan  pada  suhu ruang, kemudian diamati kromatogramnya.
Pembuatan Pereaksi Pewarna, Deteksi, dan Derivatisasi Komponen (Reich dan Schibili 2006)
Derivatisasi komponen dilakukan dengan cara pelat dicelupkan menggunakan pereaksi asam sulfat 10% dan dikeringkan  menggunakan  oven  pada  suhu  100  °C selama 10 menit. Pelat yang telah kering diamati pada sinar tampak dan UV 366 nm.

## Validasi metode
Kondisi  dengan  fase  gerak  terpilih  selanjutnya dilakukan  validasi  metode.  Parameter  validasi  metode yang  dilakukan  meliputi:  Pertama  presisi  dilakukan dengan  3  kali  pengulangan  dan  3  hari  yang  berbeda (presisi  antara).  Kedua  ketegaran  (robustness) dilakukan dengan pengembangan pelat pada perbedaan  tipe  bejana  (twin  trough  dan  flat  bottom) dan  jarak  pengembangan  (7  cm  dan  8  cm).  Ketiga spesifitas dilakukan dengan perbandingan analisis sidik jari rimpang temu mangga dari beberapa lokasi (M1-5) dibandingkan  dengan  produk  jamu  serbuk  rimpang temu  mangga  (J),  rimpang  bangle  (B),  temulawak    (L) dan kunyit (K).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Fase Gerak Terbaik
Pemilihan  fase  gerak  terbaik  dilakukan  dengan mengembangkan  pelat  kromatografi  lapis  tipis  yang telah  diaplikasikan  ekstrak  temu  mangga  dengan  9 pelarut  tunggal  yang  memiliki  tingkat  kepolaran berbeda.  Pola  sidik  jari  kromatografi  lapis  tipis  yang dihasilkan dari pengembangan 9 pelarut tunggal dipilih tiga pelarut  yang menghasilkan pita terbanyak  dengan keterpisahan  yang  baik.  Pelarut  yang  dipilih  adalah kloroform,  diklorometana,  dan  etil  asetat.  Ketiga pelarut tunggal tersebut dikombinasikan menjadi 2 fase gerak  campuran,  yaitu  kloroform:diklorometana,  dan kloroform:etil  asetat.  Kombinasi  ini  dilakukan  dengan beberapa  perbandingan.  jumlah  pita  yang  dihasilkan pada deteksi UV 254 nm, UV 366 nm, dan total jumlah pita  keseluruhan  pada  berbagai  komposisi  fase  gerak ditampilkan pada Gambar 1.
Gambar 1 Komposisi  campuran  fase  gerak  dan  total  jumlah  pita  kloroform:diklorometana  dengan perbandingan  (A)  9:1,  (B)  7:3,  (C)  5:5,  (D)  2:8,  dan  kloroform:etil  asetat  dengan  perbandingan  (E) 9:1, (F) 7:3, (G) 5:5, (H) 1:9, (I) 8.5:1.5.
0 5 10 15 A B C D
E F
G H I Jumlah Pita UV 254 nm UV 366 nm Total Jumlah Pita
Komposisi  pelarut  yang  berbeda  memberikan jumlah  pita  yang  berbeda.  Hal  ini  disebabkan perbedaan tingkat kepolaran pelarut untuk memisahkan senyawa yang terkandung dalam rimpang temu  mangga.  Jumlah  pita  terbanyak  pada  ekstrak temu  mangga  diperoleh  pada  komposisi  fase  gerak campuran kloroform dan etil asetat (9:1) yaitu 10 pita. Intensitas  warna  yang  rendah  pada  beberapa  pita diduga  senyawa  memiliki  konsentrasi  yang  rendah. Selanjutnya,  komposisi  kloroform:etil  asetat  (9:1) dihitung  nilai  resolusi  masing-masing  pitanya  untuk menentukan keterpisahan pitanya.
Keterpisahan  antar  pita  juga  merupakan  faktor penting  dalam  kromatografi  lapis  tipis.  Keterpisahan antar  pita  dikatakan  baik  jika  memiliki  nilai  resolusi yang  baik  (>1.5).  Nilai  resolusi  eluen  campuran kloroform:etil  asetat  (9:1)  tidak  memenuhi  syarat keterpisahan  yang  baik  (Tabel  2),  sehingga  dilakukan modifikasi  kembali  komposisi  fase  gerak  campuran antara  kloroform  dengan  etil  asetat.  Komposisi  fase gerak  campuran  kloroform:etil  asetat  (8.5:1.5)  dipilih. Komposisi  fase  gerak  campuran  kloroform:etil  asetat (8.5:1.5)  dipilih  sebagai  fase  gerak  terbaik  yang memiliki  7  pita  pada  deteksi  UV  254  nm,  9  pita  pada deteksi  UV  366  nm,  dan  11  pita  pada  deteksi  UV  366 nm setelah derivatisasi (Gambar 2). Fase gerak terbaik yang  diperoleh  digunakan  untuk  analisis  selanjutnya yaitu validasi metode.

## A B           C
Gambar 2 Pola sidik jari KLT serbuk M1 komposisi fase gerak kloroform:etil asetat (8.5:1.5). Deteksi yang digunakan (A) UV 254 nm, (B)  UV 366 nm, dan (C) UV 366 nm setelah derivatisasi.

## Presisi
Uji  presisi  dilakukan  pada  tiga  pelat  yang  berbeda pada  hari  yang  sama.  Jumlah,  posisi,  intensitas,  dan warna  pada  pita  merupakan  parameter  yang menentukan  analisis  presisi  pada  kromatografi  lapis tipis.  Pengamatan  presisi  antara  dilakukan  pada  dua hari  berikutnya.  Berdasarkan  hasil  analisis  yang dilakukan,  tidak  ada  perbedaan  yang  signifikan  dari jumlah,  letak,  warna,  dan  intensitas  pita  dari  hasil
Tabel 2 Nilai resolusi pita fase gerak kloroform:etil asetat (9:1 dan 8.5:1.5) pada deteksi 366 nm
Komposisi Perbandingan Fase Gerak Pita Jarak pita Lebar pita R F Resolusi Kloroform : etil asetat (8.5 : 1.5) 1 0.90 0.10 0.11 9.00 2 1.30 0.10 0.16 2.67 3 1.70 0.20 0.21 1.60 4 2.25 0.30 0.28 1.60 5 3.10 0.40 0.39 2.43 6 4.00 0.30 0.50 3.60 7 5.20 0.20 0.65 6.00 8 7.50 0.20 0.94 15.30 9 7.70 0.10 0.96 2.00 Kloroform : etil asetat (9 : 1) 1 0.70 0.10 0.09 7.00 2 1.00 0.10 0.13 3.00 3 1.25 0.10 0.16 1.67 4 1.60 0.20 0.20 1.00 5 2.50 0.50 0.31 2.57 6 4.00 0.20 0.50 7.50 7 7.30 0.20 0.91 16.50 8 7.60 0.20 0.95 3.00
Gambar 3 Pola  sidik  jari  KLT  temu  mangga,  bangle,  kunyit,  dan  temulawak  pada  uji  ketegaran  jarak pengembangan dengan deteksi UV 366 nm setelah derivatisasi.
Gambar 4 Spesifitas pola sidik jari KLT serbuk rimpang temu mangga dari 5 tempat berbeda, yaitu M1, M2, M3, M4,  M5;  produk  serbuk  jamu  rimpang  temu  mangga  (J);  standar  kurkuminoid,  (a)  kurkumin,  (b) demetoksikurkumin, (c) bisdemetoksikurkumin.
Z Y X Pelat 1 Pelat 2 Pelat 3 Hari 1 Hari 2 Hari 3 Z Y X
pengembangan yang telah dilakukan (Gambar 3). Pada pola  sidik  jari,  tiga  buah  pita  dipilih  untuk  diamati perubahan migrasi yang mewakili bagian paling bawah (X, R f 0.10), tengah (Y, R f 0.36), dan atas (Z, R f 0.95). Pita X,  Y,  dan  Z  dihitung  pada  masing-masing  pelat  (uji presisi) dan hari (uji presisi antara). Selisih nilai R f setiap pita  yang  didapat  berkisar  0-0.02  untuk  uji  presisi  dan berkisar  0.01-0.04  untuk  uji  presisi  antara.  Hal  ini menunjukkan bahwa hasil uji presisi dan presisi antara dapat diterima, karena syarat selisih nilai R f tidak lebih dari  0.02  untuk  uji  presisi  dan  tidak  lebih  dari  0.05 untuk uji presisi antara (Reich dan Schibli 2006).

## Spesifitas
Spesifisitas  metode  pengujian  rimpang  temu mangga  diukur  dengan  membandingkan  sidik  jari rimpang temu mangga dengan tanaman obat lain yang
memiliki  kesamaan  secara  fisik  dan  juga  berkerabat dekat  dengannya.  Sampel  serbuk  rimpang  bangle  (B), kunyit  (K),  dan  temulawak  (L)  dipilih  sebagai pembanding  karena  berkerabat  dekat  dengan  serbuk rimpang  temu  mangga.  Serbuk  B,  K,  dan  L  tersebut cukup  sulit  dibedakan  dengan  serbuk  rimpang  temu mangga  dan mungkin dapat dijadikan sebagai pemalsu dari serbuk rimpang temu mangga.
Hasil  analisis  KLT  yang  dilakukan  terhadap  serbuk temu  mangga  dari  beberapa  lokasi,  B,  L,  dan  K menunjukkan kromatogram yang cukup berbeda nyata (Gambar  4).  Pola  sidik  jari  dari  keempat  tanaman berbeda dari jumlah pita, dan warna pita yang dimiliki. Rimpang M, B, L, dan K masing-masing memiliki 11, 13, 12,  dan  10  pita.  Rimpang  temu  mangga  (M)  memiliki satu  pita  berwarna  biru  tua  yang  dapat  dijadikan sebagai  ciri  khas  dan  pembeda  dengan  rimpang  lain
(a) (b)
Gambar 5 Pola  sidik  jari  KLT  M1,  B,  L,  dan  K  pada  uji  ketegaran  tipe  bejana  (a)  dan  jarak  pengembangan  (b) dengan deteksi UV 366 nm setelah derivatisasi. Twin trough Flat bottom *Z *Y *X M B
K L M B K L *Z *Y *X 8 cm 7 cm *Z *Y *X *X *Y *Z M B L K M B L K
dengan nilai R f sebesar 0.36.
Salah  satu  kandungan  kimia  yang  dimiliki  rimpang temu mangga, yaitu demetoksikurkumin. Pola sidik jari dari  5  sampel  rimpang  temu  mangga  yang  diperoleh dari  berbeda-beda  tempat  terlihat  mengandung senyawa demetoksikurkumin ( R f 0.48) yang menghasilkan  warna  jingga  kecoklatan  dengan intensitas  warna  yang  rendah  (Gambar4).  Sementara itu,  rimpang  bangle  dan  temulawak  mengandung senyawa kurkumin dan demetoksikurkumin; sedangkan rimpang kunyit mengandung kurkumin, demetoksikurkumin,  dan  bisdemetoksikurkumin.  Pola sidik jari yang dihasilkan antara M1, M2, M3, M4, M5, dan  J  tidak  terlihat  berbeda  dari  jumlah  pita  yang dihasilkan.  Namun,  intensitas  warna  beberapa  pita terlihat  berbeda.  Hal  ini  diduga  konsentrasi  suatu senyawa  yang  dimiliki  rimpang  temu  mangga  berbeda dari tempat yang berbeda.

## Ketegaran
Parameter yang dilakukan pada uji ketegaran, yaitu ketegaran tipe bejana dan ketegaran jarak pengembangan. Ketegaran tipe bejana dilakukan untuk membandingkan  hasil  pengembangan  pelat  pada bejana twin trough dan flat bottom . Pola sidik jari yang dihasilkan menunjukkan pengembangan dengan bejana twin trough maupun flat  bottom menghasilkan jumlah pita yang sama (Gambar  5a). Selisih nilai R f dari 3 pita X,  Y,  dan  Z  tidak  lebih  dari  0.05  sehingga  parameter ketegaran tipe bejana memenuhi kriteria
keberterimaannya.  Uji  ketegaran  jarak  pengembangan dilakukan  dengan  membandingkan  pola  sidik  jari  KLT temu  mangga  pada  jarak  pengembangan  8  cm  dan  7 cm.  Pita  pada  jarak  pengembangan  8  cm  dan  7  cm menghasilkan jumlah yang sama (Gambar 5b). Pita X, Y, dan Z memiliki selisih nilai R f maksimum tidak lebih dari 0.05 sehingga parameter ketegaran jarak pengembangan memenuhi kriteria keberterimaannya.

## SIMPULAN
Metode  analisis  sidik  jari  kromatografi  lapis  tipis rimpang  temu  mangga  telah  berhasil  dikembangkan. Fase gerak terpilih adalah kloroform:etil asetat (8.5:1.5) yang mampu memisahkan 11 pita pada serbuk rimpang temu  mangga  dengan  deteksi  menggunakan  UV  366 nm  setelah  diderivatisasi menggunakan  pereaksi  asam sulfat 10%. Oleh karena itu metode ini dapat digunakan untuk kendali mutu rimpang temu mangga.

## DAFTAR PUSTAKA
James  JT,  Dubery  IA.  2011.  Identification  and Quantification  of  Triterpenoid  Centelloids  in Centella  asiatica  (L.)  Urban  by  Densitometric  TLC. Journal of Planar Chromatography. 24(1):82-87. Ketmongkhonsit  P,  Chaichantipyuth  C,  Palanuvej  C, Thitikornpong W, Sukrong S. 2015. A validated TLC- image  analysis  method  for  detecting  and quantifying  bioactive  phyllanthin  in Phyllanthus amarus and commercial herbal drugs.
Analisis Sidik Jari Kromatografi Lapis Tipis Rimpang Temu Mangga (Curcuma mangga)
Songklanakarin  Journal  Science  Technology.  320  37 (3): 319-326
Kimura  M,  Fujimura  M,  Yoshida  M,  Takeshi  T,  Naoko TA.  2008.  An  easy  method  to  identify  8-keto-15- hydroxytrichothecenes by
thin layer chromatographic. Mycotoxins . 58 : 115-117.
Liang YZ, Xie P, Chan K. 2004. Quality control of herbal medicines. Journal  of  Chromatography  B. 812:  53- 70.
Lin  CY,  Viant,  MR,  and  Tjeerdema  RS.  2006. Metabolomics:  methodologies  and  application  in the  environmental  sciences. Journal  of  Pesticides Science . 31 (3): 245-251.
Rafi M, Rohaeti E, Miftahuddin A, Darussman LK. 2011. Differentiation of Curcuma xanthorriza and Zingiber
cassumunar by thin layer chromatography fingerprint analysis. Indonesian Journal of Chemistry . 11(1): 71-74 Reich  E,  Shibli  A.  2006. High  Performance  Thin  Layer Chromatography  for  The  Analysis  of  Medicinal Plants . New York (US): Thieme Medical Publishers, Swieboda  R,  Jozwiak  A,  Jozwiak  G,  Hajnus  MW.  2014.
Thin  layer  chromatography  and  chemometric studies  of  selected Potentilla species. American Journal of Analytical Chemistry . 5:1109-1120. Tedjo  A,  Sajuthi  D,  Darusman  LK.  2005.  Aktivitas kemoprevensi  ekstrak  temu  mangga. Jurnal Kesehatan. 9(2): 57-62.