Pengaruh Theaflavin Teh Hitam ( Camellia sinensis ) Gambung, Jawa Barat terhadap Ketebalan Dinding Aorta Tikus Wistar ( Rattus norvegicus ) yang Diberi Diet Atherogenik
Pratista Adi Krisna *, Retty Ratnawati **, Eviana Norahmawati ***

## ABSTRAK
Penyakit kardiovaskular yang disebabkan terutama oleh atherosklerosis, merupakan penyebab utama kecacatan  dan  kematian  dini  di  seluruh  dunia.  Salah  satu  strategi  terbaru  yang  dilakukan  sebagai pencegahan atherosklerosis adalah konsumsi antioksidan. Theaflavin dari teh hitam merupakan antioksidan yang  memiliki  kemampuan  antioksidan  yang  tinggi.  Penelitian  ini  bertujuan  membuktikan  pengaruh pemberian  theaflavin  teh  hitam  berbagai  dosis  terhadap  penurunan  ketebalan  dinding  aorta  tikus  ( Rattus norvegicus) wistar yang diberi diet atherogenik. Studi eksperimental ini menggunakan post test only control group design. Sampel dibagi ke dalam lima kelompok yang masing-masing terdiri dari 5 tikus, yaitu kelompok kontrol negatif (diet normal), kelompok kontrol positif (diet atherogenik), kelompok dosis 1 (diet atherogenik + theaflavin 5 mg/kgBB/hari), kelompok dosis 2 (diet atherogenik + theaflavin 10 mg/kgBB/hari), dan kelompok dosis  3  (diet  atherogenik  +  theaflavin  20  mg/kgBB/hari).  Variabel    yang  diukur  pada  penelitian  ini  adalah ketebalan  dinding  aorta.  Pada  uji one-way ANOVA  didapatkan  nilai  signifikansi  0,000.  Pada  uji post  hoc terdapat  perbedaan  yang  signifikan  pada  ketebalan  dinding  aorta  antara  kelompok  kontrol  positif  dengan kelompok  kontrol  negative    (p  =  0.000)  dan  kelompok  perlakuan  (p  =  0.000;  0.000;  0.000),  namun  tidak terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antar  kelompok  perlakuan.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah pemberian theaflavin dapat menurunkan ketebalan dinding aorta tikus yang diberi diet atherogenik secara signifikan.
Kata kunci: Atherosklerosis, Ketebalan dinding aorta, Theaflavin.
The Effect of Theaflavin Black Tea (Camellia sinensis) Gambung, West Java on Aortic Wall Thickness of Rats (Rattus norvegicus) Induced by Atherogenic Diet

## ABSTRACT
Cardiovascular disease which mostly caused by atherosclerosis plaque is the major cause of disability and death in the world. One of the newest strategy of preventing atherosclerosis is antioxidant consumption. Theaflavin is an antioxidant which has high antioxidant effect. This research is aimed to prove theaflavin’s effect on aortic wall thickness of rats ( Rattus norvegicus) Wistar given atherogenic diet. This experimental study was using post test only control group design. These samples were be divided into five groups which each group was consist of 5 rats,  Negative control group (normal diet), positive control group (atherogenic diet),  dose  1  group  (atherogenic  diet  +  theaflavin  5  mg/kgBW/day),  dose  2  group  (atherogenic  diet  + theaflavin  10  mg/kgBW/day),  and  dose  3  group  (atherogenic  diet  +  theaflavin  20  mg/kgBW/day).  The measured variable is aortic wall thickness. One-way ANOVA was used to analyze various doses that showed significance score 0,000. The post hoc test showed significant difference between positive control group with negative control group and dose groups, but there  was no significant difference among dose groups.  It is concluded that  theaflavin decreases aortic wall thickness of rats induced by atherogenic diet significantly.
Keywords: Aortic wall thickness, Atherosclerosis, Theaflavin.
*   Program Studi Pendidikan Dokter FKUB
**   Labotarorium Fisiologi FKUB
***   Laboratorium Patologi Anatomi FKUB

## PENDAHULUAN
Atherosklerosis  merupakan  penyakit yang  menjadi  permasalahan  terbesar  yang dihadapi  baik  bagi  negara  maju  maupun negara berkembang. Atherosklerosis merupakan  kelainan  yang  mendasari penyakit  kardiovaskuler  (jantung  dan pembuluh darah). Menurut data WHO tahun
2004,  penyakit    kardiovaskuler  merupakan peringkat  pertama  (29,34  %)  penyebab kematian  di  dunia. 1 Data  Survei  Kesehatan Rumah  Tangga  (SKRT)  2001  menunjukkan penyakit  kardiovaskuler  (jantung  dan pembuluh darah) menempati urutan pertama (26,4  %)  sebagai  penyakit  penyebab kematian di Indonesia. 2
Patogenesis atherosklerosis dimulai dari disfungsi  endotel  yang  disebabkan  salah satunya  karena  hiperlipidemia  dan  kadar reactive oxygen species (ROS) yang tinggi. 3 Disfungsi endotel menyebabkan pengeluaran  molekul  adhesi  dan  faktor kemotaktik  serta  peningkatan  permeabilitas endotel  sehingga  LDL (low  density lipoprotein) akan  masuk ke dalam jaringan. 4
LDL  dalam  jaringan  akan  berubah  menjadi LDL  yang  teroksidasi  (Ox-LDL)  melalui proses  lipid  peroxidase.  LDL  yang teroksidasi  (Ox-LDL)  sebagian  besar  akan ditelan  oleh  makrofag  melalui scavenger receptor (SR), dan berkembang menjadi sel foam. 5 Sel  foam  dan  kolesterol  membentuk lipid core . Disfungsi endotel dan aktivasi sel foam  menyebabkan  migrasi  dan  proliferasi otot polos dalam tunika intima. Sel otot polos ini kemudian memproduksi matrik ekstraseluler  berupa  kolagen,  elastin  dan proteoglikan  yang  kemudian  membentuk fibrous cap di atas inti lemak yang kemudian akan  menimbulkan  bentuk  atherosklerosis yang  disebut fibrous  plaque .  Kumpulan  dari sel  otot  polos,  makrofag,  sel  foam,  serat kolagen, elastin, proteoglikan ini menyebabkan  terjadinya  penebalan  dinding pembuluh darah. 6
Radikal  bebas  memegang  peranan penting  dalam  setiap  tahap  patogenesis atherosclerosis. 7 Maka strategi terbaru yang dilakukan sebagai pencegahan atherosklerosis adalah penggunaan antioksidan. Antioksidan bekerja mendonorkan  ion  hidrogen  kepada  radikal bebas  dan  sebagai scavenger radikal bebas. 8
Salah  satu  antioksidan  yang  potensial yaitu  theaflavin,  senyawa  polifenol  yang terkandung  dalam  teh  hitam.  Efek antioksidan  pada  theaflavin  lebih  kuat dibandingkan  dengan  vitamin  C,  vitamin  E, PG,  dan  catechin  teh  hijau  karena  memiliki gugus  hidroksi  (OH)  lebih  banyak  yang berfungsi  sebagai  antiradikal  bebas  atau antioksidan, serta tetapan laju penangkapan radikal  superoksida  lebih  tinggi. 9 Selain  itu, theaflavin  dapat  meningkatkan  antioksidan alami  yang  terdapat  dalam  tubuh. 10 Untuk mengetahui peran theaflavin yang berpotensi  atheroprotektif,  maka  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  khususnya tentang peran theaflavin dalam menghambat penebalan dinding aorta sebagai pendekatan prevensi atherosklerosis.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  menggunakan  desain eksperimen murni (true eksperimental) yang dikerjakan  di  laboratorium  secara in  vivo dengan menggunakan rancangan percobaan post test only control group design .
Sampel  penelitian  adalah  25  ekor  tikus Wistar ( Rattus norvegicus ) betina berumur 6- 8  minggu  yang  diperoleh  dari  Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang. Pengelompokan dan perlakuan dilakukan secara acak (randomized) , dengan membagi  hewan  coba  menjadi  5  kelompok yang terdiri dari 5 tikus untuk masing-masing kelompok, yaitu: kelompok kontrol negatif (K) yaitu hewan coba dengan diet normal tanpa diberikan  ekstrak  theaflavin;  kelompok
kontrol positif (P) yaitu hewan coba dengan diet  atherogenik  tanpa  diberikan  ekstrak theaflavin;  kelompok  perlakuan  I  (D1)  yaitu hewan  coba  dengan  diet  atherogenik  + ekstrak  theaflavin  dosis  5  mg/kgBB/hari; kelompok  perlakuan  II  (D2)  yaitu  hewan coba  dengan  diet  atherogenik  +  ekstrak theaflavin  dosis  10  mg/kgBB/hari;  kelompok perlakuan III (D3) yaitu hewan coba dengan diet  atherogenik  +  ekstrak  theaflavin  dosis 20 mg/kgBB/hari.
Perlakuan  diberikan  setiap  hari  secara bersamaan  selama  65  hari.  Pada  akhir penelitian  yaitu  hari  ke-66,  semua  tikus dibunuh  dengan  kloroform  dan  diambil jaringan  aortanya  dengan  pembedahan untuk  selanjutnya  dilakukan  pembuatan sediaan  histopatologi  dengan  pewarnaan hematoksilin-eosin.  Kemudian  dilakukan pengukuran  ketebalan  dinding  aorta  dan dihitung reratanya.
Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini adalah  ekstrak  theaflavin  yang  didapat  dari teh hitam (Camellia sinensis) Gambung yang diektraksi  di  Laboratorium  Kimia  organik FMIPA,  Institut  Teknologi  Bandung  dan Pusat  Penelitian  Kina  dan  Teh  Gambung, Bandung. 11 Dosis  theaflavin  yang  diberikan adalah  5  mg/kgBB/hari,  10  mg/kgBB/hari, dan  20  mg/kgBB/hari  yang  diencerkan dengan  5  ml  aquades. 12 Variabel  terikat penelitian  adalah  ketebalan  dinding  aorta tikus  Wistar  dalam  tiap  kelompok  perlakuan yang dilihat pada 5 lapang pandang dengan mikroskop cahaya pembesaran 400 kali dan diukur dengan menggunakan sofware Image Pro Plus (IPP) 6.1. Tebal dinding aorta dapat diukur  dengan    menarik  garis  tegak  lurus garis terdalam tunika intima dan garis terluar tunika  adventisia.  Pengukuran  dilakukan  di ujung awal, ujung akhir dan tengah aorta.
Komposisi  diet  normal  dan  diet atherogenik  dibuat  berdasarkan  penelitian yang dilakukan Mutiyani. 13
Lokasi  pemeliharaan  hewan  coba adalah  Laboratorium  Farmakologi  Fakultas
Kedokteran  Universitas  Brawijaya  Malang. Pembuatan  sediaan  histopatoogi  jaringan aorta  dilakukan  di  Laboratorium  Patologi Anatomi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Brawijaya  Malang.  Pengukuran  ketebalan dinding  aorta  tikus  wistar  dilakukan  di laboratorium  Patologi  Anatomi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Brawijaya  Malang. Penelitian  dilakukan  dalam  jangka  waktu  3 bulan, dari bulan Maret-Mei 2011.
Data  penelitian  adalah  ketebalan dinding aorta tikus Wistar, dan analisis data yang  digunakan  adalah one-way ANOVA,
dilanjutkan  dengan  analisis post  hoc  least significant difference (LSD) , untuk
mengetahui  kelompok  mana  yang  berbeda secara  signifikan  dari  hasil  tes  ANOVA. Teknik  pengolahan  dan  analisis  data dilakukan  dengan  menggunakan  program software  statistical  product  and  service solution 17  PS  (SPSS  17  PS),  dengan tingkat  signifikansi  atau  nilai  probabilitas 0,05 ( p = 0.05) dan taraf kepercayaan 95 % (α = 0.05).

## HASIL
Preparat  aorta  tikus  difoto  dengan menggunakan  mikroskop  cahaya  dengan perbesaran  400  kali.  Kemudian  gambar penampang  aorta  yang  didapatkan  diukur dengan  menggunakan  sofware  Image  Pro Plus  (IPP)  6.1.  Tebal  dinding  dapat  diukur dengan  menarik  garis  tegak  lurus  garis terdalam  tunika  intima  dan  garis  terluar tunika adventisia. Akan didapatkan ketebalan  rata-rata  dari  dinding  aorta. Pengukuran  dilakukan  di  ujung  awal,  ujung akhir  dan  tengah  aorta.  Dalam  satu  kali pengukuran  dilihat  lima  kali  lapangan pandang.
Pengukuran terhadap  masing-masing kelompok  perlakuan  ditampilkan  pada Gambar1.
Gambar 1. Preparat jaringan aorta yang dicat dengan pewarnaan  hematoksilin-eosin (400x) pada setiap kelompok. Keterangan: A . Jaringan aorta tikus kelompok kontrol negatif (K) yang diberi diet normal. Rata-rata ketebalan aorta pada kelompok K adalah 482.66 ± 59.32 µm. B .  Jaringan aorta tikus kelompok kontrol  positif  (P)  yang  diberi  diet  atherogenik  saja.  Rata-rata  ketebalan  aorta  pada  kelompok    P  adalah 662.90 ± 51.59 µm. C . Jaringan aorta tikus (D1) yang diberi diet atherogenik + theaflavin 5 mg/kgBB/hari. Rata-rata ketebalan aorta pada kelompok D1  adalah 506.40 ± 31.51 µm. D . Jaringan aorta tikus (D2) yang diberi diet atherogenik  + theaflavin 10 mg/kgBB/hari. Rata-rata ketebalan aorta pada kelompok  D2 adalah 532.90 ± 40.74 µm. E .  Jaringan aorta tikus (D3) yang diberi diet atherogenik + theaflavin 20 mg/kgBB/hari. Rata-rata ketebalan aorta pada kelompok D3 adalah 486.6 ± 54.93.
Rerata  hasil  pengukuran  ketebalan dinding aorta dari setiap kelompok perlakuan ditampilkan  pada  Tabel  1.  Diagram  rerata ketebalan  dinding  aorta  masing-masing kelompok sampel ditampilkan pada Gambar 2. Tabel 1.  Rerata hasil pengukuran ketebalan dinding aorta Kelompok Perlakuan Rerata (µm) Standar Deviasi K  Kontrol negatif 482,66 59,32 P  Kontrol positif (diet atherogenik) 662,90 51,59 D1  Diet atherogenik + theaflavin 5 mg/kgBB/hari 506,40 31,51 D2  Diet atherogenik + theaflavin 10 mg/kgBB/hari 532,90 40,74 D3  Diet atherogenik + theaflavin 20 mg/kgBB/hari 486,6 54,93
A B
C D E
Gambar 2. Rerata ketebalan dinding aorta tikus pada masing-masing perlakuan
Dari Gambar 2 terlihat rerata ketebalan dinding  aorta  terendah  terdapat  pada kelompok kontrol  negatif  (K) yaitu  482,66 ± 59,32  µm.  Sementara  rerata  ketebalan dinding  aorta  tertinggi  terdapat  pada kelompok  kontrol  positif  (P)  yaitu  662,90  ± 51,59  µm.  Pada  kelompok  perlakuan  yang diberi  diet  atherogenik  dan  theaflavin berbagai dosis selama 65 hari (D1, D2, dan D3)  terlihat  adanya  penurunan  ketebalan dinding  aorta  bila  dibandingkan  dengan kelompok kontrol positif (P).
Dari hasil uji one-way ANOVA (α = 0,05) didapatkan  nilai  p  =  0,000    (p  <  0,05). Jadi dapat disimpulkan bahwa terdapat
perbedaan  nilai  rerata  ( mean )  ketebalan dinding  aorta  yang  bermakna  pada setidaknya dua kelompok. Analisis dilanjutkan  dengan post  hoc  test yang bertujuan untuk mengetahui pada kelompok mana  terdapat  perbedaan  bermakna  dari hasil  uji  ANOVA,  dengan  menggunakan  uji least  significant  difference (LSD),  yang hasilnya ditampilkan dalam Tabel 2.
Tabel 2 Hasil uji LSD terhadap ketebalan dinding aorta tikus
Nilai p K P D1 D2 D3 K - 0.000 0.450 0.118 0.903 P 0.000 - 0.000 0.000 0.000 D1 0.450 0.000 - 0.400 0.525 D2 0.118 0.000 0.400 - 0.147 D3 0.903 0.000 0.525 0.147 - Keterangan:
Nilai p < 0,05: terdapat perbedaan yang bermakna antara dua kelompok yang dibandingkan
Nilai p > 0,05: tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara dua kelompok yang dibandingkan

## PEMBAHASAN
Hasil  perhitungan  ketebalan  dinding aorta  tikus  Wistar  kelompok  kontrol  negatif adalah  K  =  482.66  ±  59.32  µm.  Analisis statistik  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan yang bermakna (p < 0,05) antara kelompok  kontrol  negatif  dengan  kelompok kontrol  positif.  Hal  ini  disebabkan  karena tikus  pada  kelompok  kontrol  negatif diberikan diet normal, dengan kata lain tidak diberikan diet atherogenik yang tinggi lemak, sehingga  proses  atherosklerosis  tidak terjadi.
Pengukuran  ketebalan  dinding  aorta pada  kelompok  kontrol  positif  memiliki ketebalan dinding aorta tertinggi yaitu 662,90 ±  51,59  µm.  Analisis  statistik  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  yang  bermakna antara  kelompok  kontrol  positif    (p  <  0,05) dengan  kelompok  kontrol  negatif  dan dengan  kelompok  perlakuan.  Hal  ini  terjadi karena  pemberian  diet  tinggi  lemak  (diet atherogenik).  Diet  atherogenik  terdiri  atas penambahan  kolesterol  dan  minyak  babi yang  bertujuan  untuk  meningkatkan  serum kolesterol dalam darah dan asam kolat yang berfungsi untuk menjaga kestabilan kolesterol  dalam  darah  pada  asupan makanan  sehingga  diet  atherogenik  ini menginduksi terjadinya hiperlipidemia. 13 Hiperlipidemia menyebabkan peningkatan  ROS  dan  menyebabkan terjadinya  disfungsi  endotel.  Disfungsi endotel akan menyebabkan infiltrasi LDL ke dalam subendotel aorta. Hiperlipidemia juga berhubungan dengan  LDL yang tinggi. Jika LDL  terlalu  tinggi  maka  reseptor  LDL  pada hepatosit dan membran sel jaringan lainnya tidak  cukup  untuk  berikatan  dengan  jumlah kolesterol  LDL  yang  ada.  Sehinggga  LDL tetap  bebas  beredar  dalam  darah. 1 4 LDL yang  menembus  endotel  dan  mengalami proses  oksidasi  berubah  menjadi  LDL teroksidasi  (Ox-LDL).  Melalui scavenger reseptor makrofag  memfagosit  Ox-LDL  dan
berubah  menjadi  sel  busa (sel  foam). 1 5 Sel foam  dan  kolesterol  membentuk lipid  core. Dalam  proses  atherosklerosis  sel  foam mengeluarkan beberapa mediator  inflamasi, growth  factor serta  upregulasi  dari  SR, sekresi MMPs .ekspresi tissue factor , sekresi ROS,  inhibisi  ekspresi  ABCA1,  sekresi proinflamatory cytokine , peningkatan kematian  sel,  sekresi  molekul  adhesi, sekresi chemokine ,  inhibisi  NO,  sekresi growth factor , dan penurunan hidrolisis CE. 1 5 Proses inflamasi yang terjadi di dalam intima akan  menghasilkan  beberapa growth  factor yang  mempengaruhi  proliferasi  dari  sel  otot polos,  antara  lain  PDGF/ platelet-derived growth  factor (dilepaskan  oleh  makrofag yang  menempel  pada  sel  endotel  yang rusak,  makrofag,  sel  endotel,  dan  sel  otot polos), fibroblast  growth  factor ,  dan  TGF-α / transforming growth factor α . Sel otot polos di  dalam  media  akan  bermigrasi  ke  intima, berproliferasi,  dan  menghasilkan  matriks ekstraselular  berupa  serat  kolagen,  elastin, dan  proteoglikan  yang  akan  membentuk fibrous cap di atas inti lemak yang kemudian akan  menimbulkan  bentuk  atherosklerosis yang  disebut fibrous  plaque .  Kumpulan  dari sel  otot  polos,  makrofag,  sel  foam,  serat kolagen, elastin, proteoglikan ini menyebabkan  terjadinya  penebalan  dinding pembuluh darah. 6
Pemberian  theaflavin  pada  kelompok dengan  dosis  5,  10,  dan  20  mg/kgBB/hari pada  tikus  Wistar  bersamaan  dengan pemberian  diet  atherogenik  selama  65  hari mengurangi  ketebalan  dinding  aoprta berkurang  secara  bermakna  (p  <  0,05), dibandingkan  dengan  ketebalan  dinding aorta kelompok  kontrol  positif  (P)  yang diberikan  diet  atherogenik  saja.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian  theaflavin dapat  menurunkan  ketebalan  dinding  aorta tikus secara bermakna.
Theaflavin  adalah  sejenis  antioksidan yang terkandung dalam teh hitam. Pada teh hitam,  selama  proses  fermentasi  atau
oksimatis  (oksidasi  enzimatis),  sebagian besar  katekin  yang  merupakan  polifenol yang banyak terdapat pada teh hijau diubah menjadi theaflavin dan thearubigin oleh enzim polifenol oksidase yang terdapat pada daun teh itu sendiri dan oksigen. 1 6
Efek  antioksidan  theaflavin  yang  tinggi disebabkan kandungan gugus hidroksi (OH) yang  banyak  pada  theaflavin. 1 7 Gugus hidroksi  ini  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan  menangkap  radikal  bebas  dan mencegah  terjadinya  oksidasi  lipid  atau memotong  reaksi  berantai  oksidasi  lipid. Selain  itu,  theaflavin  dapat  meningkatkan antioksidan alami yang terdapat dalam tubuh seperti  glutathione-S  transferase  (GST), glutanthione  peroksidase  (GPX),  dismutase superoksida (SOD) dan katalase (CAT) yang mampu  membantu  menurunkan  oksidasi lipid. 8 Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  diet  atherogenik  selama  65  hari mampu  meningkatkan  ketebalan  dinding aorta  tikus  Wistar  secara  bermakna  dan pemberian  theaflavin  dalam  berbagai  dosis mampu mengurangi ketebalan dinding aorta tikus  Wistar  secara  signifikan.  Maka,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  theaflavin  dari teh  hitam  ( Camellia  sinensis ) Gambung,
Jawa  Barat  memiliki  pengaruh  dalam mengurangi  ketebalan  dinding  aorta  tikus Wistar  yang  diberikan  diet  atherogenik secara signifikan.
Kekurangan  dari  penelitian  ini  adalah kurangnya  variasi  dosis,  sehingga  tidak ditemukan  perbedaan  pengaruh  yang signifikan  (p  >  0,05)  antar  dosis  theaflavin dalam mengurangi ketebalan dinding aorta , tidak  dapat  ditentukan  perbandingan  efek antar  dosis  dan  dosis  optimum  untuk theaflavin sebagai antioksidan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian mengenai efek  theaflavin  pada  ekstrak  teh  hitam
( Camellia  sinensis )  Gambung,  Jawa  Barat terhadap  ketebalan  dinding  aorta  tikus Wistar (Rattus  norvegicus) yang  diberi  diet atherogenik,  maka  dapat  disimpulkan bahwa:
1. Pemberian  diet  atherogenik  dapat meningkatkan ketebalan dinding aorta. 2. Pemberian theaflavin mampu menghambat  penebalan  dinding  aorta tikus Wistar yang diberi diet atherogenik secara signifikan.
3. Dosis theafavin yang dapat menghambat penebalan  dinding  aorta  paling  besar pada  penelitian  ini  adalah  dosis  20 mg/kgBB/hari

## SARAN
Beberapa  hal  yang  perlu  dilakukan  sebagai tindak lanjut penelitian ini:
1. Perlu  dilakukan  penelitian  yang  sama dengan variasi dosis yang lebih besar.
2. Perlu dilakukan pengecatan Venhoeff & van  Gieson  pada  dinding  pembuluh darah  untuk  memastikan  jaringan  yang akan diperiksa adalah aorta.
3. Perlu  dilakukan  penelitian  yang  sama mengenai luas lumen pembuluh darah.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Boudi  FB.  Atherosclerosis.  (Online). 2010.  Diakses  18  Agustus  2010. http://emedicine.medscape.com/cardiol ogy#atherosclerosis.
2. Priyana  A.  Anggur  Merah  Baik  untuk Jantung.  Di  dalam  Suhanda  I  (Editor),
Rahasia  Sehat  dengan  Makanan Berkhasiat .  Jakarta:  Penerbit  Buku
Kompas. 2009. Hlm 31-36. 3. Steinberg  D  and  Witztum  JL.  Is  the Oxidative  Modification  Hypothesis
Relevant  to  Human  Atherosclerosis?: Do the Antioxidants Trials Conducted to
Date  Refute  Hypothesis?. Circulation . 2002. 105:2107-2111.
4. Tesfamariam  B  and  DeFelice  AF.
Endothelial  Injury  in  the  Initiation  and Progression  of  Vascular  Disorders. Vascul Pharmacol . 2007. 46(4):229-37. 5. Mughni A. Pengaruh Puasa Ramadhan Terhadap Faktor-Faktor Risiko Atherosklerosis. Semarang: Universitas Diponegoro.  Tesis  tidak  diterbitkan. 2007. 6. Ontoseno  T.  Pencegahan  Primordial Penyakit  Jantung  Koroner.  (Online). 1999.  Diakses  18  September  2010. www.pediatrik.com/buletin/0622411360
6-2g3xih.pdf. 7. Grassi  D,  Giovambattista  D  dan Claudio  F.  Flavonoids:  Antioxidants Against  Atherosclerosis. Nutrients.
2010. 2 (8):889-902.
8. Astuti  S.  The  Effects  of  Isoflavone- riched  Soybean  Flour,  Zinc  (Zn)  and Vitamin E on Profile of Cu, Zn-SOD in the Seminiferous Tubules of Male Rats Testes.    Jurnal  Penelitian  Jurusan Teknologi Industri Pertanian, Universitas  Lampung. 2009. 122-126. 9. Wang  C  and  Li  Y.  Research  Progress on  Property  and  Application  of Theaflavin. African Journal of Biotechnology . 2006. 5(3): 213-218. 10. Prosenjit S and Sukta D. Regulation of Hazardous  Exposure  by  Protective Exposure:  Modulation  of  Phase  II
Detoxification and Lipid Peroxidation by Camellia  Sinensis and Swertia  chirata . Teratogenesis,  Carcinogenesis,  and Mutagenesis Supplement. 2003. 1:313- 322. 11. Polisenawati  A  dan  Ciptati.  Ringkasan dan  Pengajuan  Metode  Analisis: Proses Ekstraksi dan Isolasi Theaflavin dari  Sampel  Teh  Hitam  Gambung. Laporan  tidak  diterbitkan.  Bandung:
Laboratorium  Penelitian  Kimia  Organik ITB. 2010.
12. Cai F, Cai RL, Ji LW, Jian GC, Chao L, Qing  M, et  al .  Theaflavin  Ameliorates Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury in Rats  Through  Its  Anti-Inflammatory Effect  and  Modulation  of  STAT-1. Mediators Inflamm . 2006. (5):1-9. 13. Mutiyani  M.  Pengaruh  Pemberian  Diet Tinggi Karbohidrat Dibandingkan dengan  Diet  Tinggi  Lemak  terhadap Kadar  Glukosa  Darah  dan  Kepadatan Sel β Pankreas pada Rattus norvegicus strain  Wistar.  Tugas  Akhir  tidak diterbitkan. Malang: Fakultas Kedokteran  Program  Studi  Ilmu  Gizi Universitas Brawijaya. 2005. 14. Wibowo  JW.  Pengaruh  Pemberian Vitamin  E  dan  Vitamin  E  Terhadap Profil  Lipid  dan  Ketebalan  Dinding Aorta Abdominalis Tikus yang Mendapat  Diet  Tinggi  Kolesterol. Thesis.  Semarang:  Program  Pasca Sarjana Universitas Diponegoro. 2003. 15. Su  Jun.  Natural  Antibodies  Against Phosphorylcholine as Potential Protective  Factors  in  Atherosclerosis, Cardiovascular  Disease  and  Systemic Lupus Erythematous. Thesis. Stockholm: Karonlinka Institutet. 2009. 16. Rohdiana  D.  Teh  Hitam  Dan  Anti Oksidan.  Pusat  Penelitian  The  dan Kina  Gambung . (Online).  2008. Diakses 21 Oktober 2010. http://www.ritc.or.id/files/rohdiana_Teh_ Hitam_dan_Antioksidan.pdf. 17. Leborgne  L,  Rajbabu  P,  Christian  D,
David  H,  Rufus  S,  Fermin  O,  Tio  RW. 2005.  Effect  of  Antioxidants  on Atherosclerotic  Plaque  Formation  in Balloon-Denuded and Irradiated Hypercholesterolemic  Rabbits. Journal of Cardiovascular Pharmacology. 46(4):540-547.