Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n -Heksan, Kloroform dan Air dari Ekstrak Etanolik Daun Zodia ( Evodia sauveolens, Scheff . ) terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

## ABSTRAK
ABSTRACT
PENDAHULUAN

## BIOMEDIKA
Volume 8, No. 2, September 2015
Antibacterial Activity Test of Zodia Leaf ( Evodia sauveolens, Scheff) n -Hexane, Chloroform and Water Fraction Against Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 1 2 3
Ismi Rahmawati , Ratno Agung Samsumaharto , dan Edi Zunaidi Iryanto W
1,3 2 Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi Jl. Letjen Sutoyo, Mojosongo, Surakarta 57127
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi
Daun zodia (Evodia sauveolens, Scheff) adalah tanaman yang secara empiris berkhasiat sebagai obat luka, sakit gigi demam  dan  nyeri  perut.  Kandungan  kimia  daun  zodia  adalah  minyak  atsiri,  flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  tanin. Penelitian  ini  dilakukan  untuk  untuk  mengetahui  aktivitas  fraksi  n-heksan,  kloroform,  air  dan  ekstrak  etanolik  daun zodia  (Evodia  sauveolens,  Scheff)  sebagai  antibakteri  terhadap  Pseudomonas  aeruginosa  ATCC  27853.  Metode  yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode maserasi dengan pelarut etanol 96% dilanjutkan dengan pelarut n-heksan, kloroform  dan  air.  Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  dilusi.  Konsentrasi  ekstrak  etanolik  dan  fraksi yang  digunakan  50,0%;  25%;  12,5%;  6,2%;  3,1%;  1,5%;  0,7%;  0,3%;  0,1%;  0,09%.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa ekstrak etanolik dan fraksi air memiliki konsentrasi bunuh minimum sebesar 50% terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa  ATCC  27853.  Fraksi  air  dari  ekstrak  etanolik  dari  daun  zodia  memiliki  aktivitas  antibakteri  paling  aktif dibandingkan dengan fraksi n-heksan dan fraksi kloroform. Hal ini dapat disebabkan karena pada fraksi air dari ekstrak etanolik daun zodia mengandung senyawa saponin dan tanin yang dapat berguna sebagai antibakteri.
Kata kunci: daun zodia (Evodia sauveolens, Scheff), Pseudomonas aeruginosa ATCC   27853, saponin, tanin, antibakteri.
Zodia leaf (Evodia sauveolens, Scheff) is a plant that is empirically efficacious as cure wounds, toothaches, drug fever and abdominal pain. Zodia leaf chemical constituents are essential oils, flavonoids, alkaloids, saponins and tannins. This study was conducted to determine the activity for n-hexane fraction, chloroform fraction, water fraction and ethanolic extracts of leaves zodia  (Evodia  sauveolens,  Scheff)  as  antibacterial  against  Pseudomonas  aeruginosa  ATCC  27853.  The  method  used  in  this research is the method of maceration with 96 % ethanol solvent followed by solvent n-hexane, chloroform and water. Antibacteri al activity test performed by the dilution method. Concentration of ethanolic extracts and fractions are used 50.0 % ; 25 % ; 12.5 % ; 6.2 % ; 3.1 % ; 1.5 % ; 0.7 % ; 0.3 % ; 0.1 % ; 0.09 %. The results showed that the ethanolic extract and water fraction has committed a minimum concentration of 50% against the bacterium Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. The fraction of water from ethanolic extracts of leaves zodia has the most active antibacterial activity compared with a fraction of n- hexane and chloroform fractions. This can be caused because the water fraction of the ethanolic extract of the leaves zodia contains saponins and tannins that can be useful as an antibacterial.
Key words: leaves zodia (Evodia sauveolens, Scheff.), Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, saponin, tannins,  antibacterial.
Pengobatan dengan menggunakan obat kimia sering  menimbulkan  efek  samping  dari  obat tersebut  dan  menimbulkan  minat  masyarakat untuk  kembali  memanfaatkan  tumbuh-tumbuhan obat  yang  telah  lama  digunakan  oleh  para pendahulunya semakin besar. Hal ini juga memicu para peneliti untuk melakukan penelitian terhadap suatu  tanaman  tertentu  yang  berkhasiat  sebagai obat.
Satu diantara tanaman yang dapat digunakan sebagai tanaman obat ialah tanaman zodia. Zodia ( Evodia  sauveolens, Scheff . )  adalah  tanaman endemik  Papua  yang  penggunaannya  masih secara tradisional dan oleh masyarakat setempat digunakan sebagai pengusir nyamuk, penghilang bau  badan,  obat  luka  dan  sakit  gigi.  Penelitian yang  dilakukan  oleh  Anggreyni  (2009)  bahwa hasil  skrining  fitokimia  serbuk  simplisia  daun zodia  ( Euodia  hortensis J.R.  &  G.Forst)
menunjukkan  adanya  senyawa  alkaloida, flavonoida,  tanin  dan  glikosida.  Berdasarkan Depkes (2003) daun Evodia sauveolens , Scheff. mengandung  saponin,  alkaloid,  berberine,  dan furoquinoline.
Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan penelitian  tentang  aktivitas  daun  zodia  sebagai antibakteri  terhadap Pseudomonas  aeruginosa ATCC  27853,  sehingga  dapat  digunakan  sebagai pengobatan  infeksi.  Tujuan  dari  penelitian  adalah untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak etanolik,  fraksi n -heksan,  kloroform,  dan  air  dari daun  zodia  ( Evodia  sauveolens, Scheff . )  terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.
Maryuni  (2008)  melaporkan  bahwa  minyak atsiri  dari  daun  zodia  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif Staphylococcus aureus,  Staphylococcus  epidermidis dan  bakteri Gram  negatif Salmonella  enteritidis dan Escherichia  coli .  Aktivitas  terbesar  dihasilkan dari  interaksi  minyak  atsiri  dengan  bakteri Staphylococcus  aureus .  Konsentrasi  Hambat Minimum  (KHM)  minyak  atsiri  daun  zodia bernilai  1%  terhadap Staphylococcus  aureus , 0,8%  terhadap Staphylococcus  epidermidis , 1,25%  terhadap Salmonella  enteritidis dan  1,2% terhadap Escherichia coli .
Pengujian aktivitas antibakteri pada penelitian ini ialah menggunakan metode dilusi. Metode ini menggunakan  antimikroba  dengan  kadar  yang menurun secara bertahap, baik dengan media cair atau padat. Media diinokulasikan terhadap bakteri uji  dan  diinkubasi.  Tahap  akhir  dilarutkan antimikroba dengan kadar yang menghambat dan mematikan (Jawetz et al., 2012).
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  alat  timbang  analisa  yang  mempunyai ketelitian baca minimum 0,1 mg dan daya muat maksimum  100  gram,  inkas,  ose  platina,  piring petri,  erlenmeyer,  tabung  reaksi,  gelas  ukur, pipet  tetes,  volume  pipet  (15  mL;  10  mL;  0,5 mL), ayakan no 40, inkubator, kain flanel, kapas, corong  kaca,  autoclave,  labu  destilasi,  kertas

## METODE PENELITIAN
Alat
Bahan  sampel  yang  digunakan  adalah  daun zodia ( Evodia sauveolens, Scheff.) yang diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat di Bogor, Jawa Barat. Bakteri uji yang digunakan adalah Pseudomonas  aeruginosa ATCC  27853 yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi, Fakultas  Farmasi,  Universitas  Setia  Budi, Surakarta.  Medium  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah Brain Heart Infusion (BHI), Pseudomonas  Selektif  Agar (PSA),  KIA,  LIA, SIM,  Citrat,  etanol  96%, n -heksan,    kloroform, aquadest  steril,  larutan  standart  Mc  Farlan  0,5, DMSO  1%,  HCL  2N,  CH3COOH,  H2SO4, spritus,  amil  alkohol,  pereaksi  Meyer  dan Dragendorf, serbuk Mg dan FeCl3.
saring, botol coklat, oven binder, lampu spirtus, vortex, evaporator dan alat Moisture Balance .

## Bahan

## Jalannya penelitian

## Pembuatan ekstrak etanolik dan fraksinasi daun zodia
Pembuatan  ekstrak  etanolik  daun  zodia dilakukan secara maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96%. Sebanyak 4.000 gram serbuk daun  zodia  direndam  dalam  pelarut  etanol  96% selama 5 hari dengan sesekali digojog. Hasil dari maserasi  ini  kemudian  di  lanjutkan  dengan menggunakan evaporator sehingga  didapatkan ekstrak etanolik daun zodia.
Fraksinasi dilakukan dengan cara menimbang 10 gram ekstrak daun zodia kemudian dilarutkan dengan pelarut air 75 mL, difraksi 3 kali dengan pelarut n -heksan  masing-masing  75  mL.  Proses fraksinasi dilakukan dengan corong pisah, fraksi n -heksan  terletak  di  atas  dan  fase  air  terletak  di bawah. Fraksi n -heksan yang didapat dipekatkan menggunakan  evaporator  pada  suhu  dibawah 0 40 C.  Residu  yang  didapat  dari  fraksi n -heksan dilanjutkan  fraksinasi  3  kali  dengan  pelarut kloroform  75  mL.  Hasil  yang  didapat  adalah fraksi  kloroform  yang  terletak  diatas  dan  fraksi air di bagian bawah. Fraksi kloroform dipekatkan menggunakan  evaporator  pada  suhu  dibawah
0 40 C  dan  air  dipekatkan  dengan  menggunakan
terakhir merupakan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM).  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM) ditentukan  dengan  menggoreskan  larutan  dari sejumlah tabung yang hasilnya jernih pada medium
0 selektif  kemudian  diinkubasi  37 C  selama  24  jam dan  diamati  ada  tidaknya  pertumbuhan  bakteri maka  merupakan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM).  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) ditentukan dari goresan terakhir yang masih terdapat pertumbuhan bakteri, sedangkan Konsentrasi Bunuh Minimum  (KBM)  ditentukan  dari  goresan  bakteri yang  sudah  tidak  terdapat  pertumbuhan  bakteri (Bonang dan Koeswardono, 1982).
waterbath.

## Pembuatan suspensi bakteri uji
Pembuatan suspensi dengan mengambil biakan murni  kurang  lebih  2  ose  bakteri Pseudomonas aeruginosa .  Dibuat  suspensi  dalam  tabung  yang berisi  media Brain  Heart  Infusion (BHI)  dan kekeruhannya  disesuaikan  dengan  kekeruhan standard Mc  Farland 0,5  yang  dianggap  setara 8 dengan  10   CFU/mL  bakteri Pseudomonas aeruginosa .  Tahap  selanjutnya  diinkubasi  pada 0 suhu  37 C  selama  24-48  jam,  diambil  0,01  mL dimasukkan  dalam  10  mL  medium  BHI  dengan perbandingan  1  :  1000  untuk  pengujian  dilusi. Hal  ini  dilakukan  untuk  mengendalikan  jumlah bakteri yang akan digunakan.

## Uji aktivitas antibakteri
Hasil  maserasi,  fraksi n -heksan,  kloroform, dan  air  dari  daun  zodia  yang  didapatkan  diuji secara  mikrobiologi  dengan  bakteri Pseudomonas aeruginosa. Metode  yang  digunakan  adalah metode  dilusi.  Metode  dilusi  digunakan  untuk mengetahui  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM).
Metode dilusi menggunakan 1 deretan tabung yang  terdiri  dari  12  tabung  dengan  konsentrasi 50% ,25%, 12,5%, 6,5%, 3,125%, 1,56%, 0,78%, 0,39%,  0,19%,  0,095%,  kontrol  (+)  dan  kontrol negatif  (-).  Dimasukkan  0,5  ml  media  BHI  dari tabung  3  sampai  11,  secara  aseptik  ke  dalam tabung  1  ditambahkan  1,0  mL  larutan  stock ekstrak yang akan diperiksa, kemudian dari tabung 2  dan  3  dimasukkan  0,5  mL  larutan  stock, kemudian  dari  tabung  3  dipipet  0,5  mL  dan
Hasil prosentase rendemen ekstrak maserasi daun zodia dapat dilihat pada Tabel 1.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Prosentase bobot ekstrak maserasi daun zodia
Serbuk (g) Ekstrak kental (g)
Rendemen (%) 4.000 790 19,75
Identifikasi  kandungan  kimia  dimaksudkan untuk menetapkan kandungan kimia yang terdapat pada  daun  zodia.  Hasil  identifikasi  kandungan kimia serbuk dan ekstrak daun zodia dapat dilihat pada Tabel 2 .
Prosentase rendemen ekstrak maserasi daun zodia yang diperoleh sebanyak 19,75%.
Tabel 2 . Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia serbuk dan ekstrak daun zodia secara kualitatif
Senyawa Interpretasi hasil Serbuk Ekstrak Saponin + + Alkaloid + + Tanin + + Flavonoid + + Minyak atsiri + + Keterangan : + : memiliki
- : tidak memiliki
dimasukkan ke dalam tabung 4 begitu seterusnya sampai tabung 11 kemudian dibuang, tambahkan 0,5  mL  biakan  yang  akan  diperiksa  yang  telah diencerkan  1:1000  dari  biakan  yang  telah dieramkan  dari  tabung  2  sampai  tabung  11 semalam. Tabung terakhir berlaku sebagai kontrol positif.  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) ditentukan  dengan  mengamati  adanya  kekeruhan pada seri pengenceran sejumlah tabung yang telah
0 diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam, dimana tabung dengan larutan jernih setelah tabung keruh
Fraksinasi dilakukan setelah diperoleh ekstrak kental dari daun zodia ( Evodia sauveolens , Scheff.) dengan  pelarut n -heksan,  kloroform  dan  air. erbandingan ekstrak dan pelarut yaitu 10 : 75.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Anggreyni (2009)  serbuk  simplisia  daun  zodia  mengandung senyawa alkaloida, flavonoida, tanin dan glikosida. Kandungan  senyawa  lain  dalam  daun  zodia  yaitu saponin,  alkaloid  jenis  berberine  dan  furoquinoline (Depkes,  2003),  serta  minyak  atsiri  (evodone, menthofuran,  dan  sebagainya)  (Maryuni,  2008). Skrining fitokimia yang dilakukan  dalam penelitian ini menunjukkan hasil positif pada senyawa saponin, alkaloid, tanin, flavonoid dan minyak atsiri.
Tabel 3. Rendemen fraksi n -heksan, kloroform dan air daun zodia
Fraksi Bobot ekstrak etanolik Bobot fraksi Rendemen (%) n -heksan 30 gram 0,151 gram 0,503 Kloroform 30 gram 0,321 gram 1,07 Air 30 gram 6,778 gram 22,59
Uji  aktivitas  dilusi  ekstrak  etanol  maupun fraksi n- heksan,  kloroform  dan  air  dapat  dilihat pada  Tabel  4.  Pada  tabel  tersebut  menunjukan Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  terhadap bakteri Pseudomonas  aeruginosa ATCC  27853 terbaik  adalah  ekstrak  etanolik  dan  fraksi  air
b yaitu  pada  konsentrasi  50% / ,  sedangkan  fraksi v n-heksan  dan  fraksi  kloroform  tidak  memiliki aktivitas dalam menghambat maupun membunuh bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.
Tabel 4. Perbandingan hasil inokulasi sediaan siprofloksasin dengan uji aktivitas ekstrak, fraksi n- heksan, fraksi kloroform dan fraksi air terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Hasil inokulum di media PSA Konsentrasi % b / v Ekstrak etanolik Fraksi n - heksan Fraksi kloroform Fraksi air Konsentrasi % b / v Siprofloksasin
I II III I II III I II III I II III I II III Kontrol (-) 50% 25% 12,5% 6,2% 3,1% 1,5% 0,7% 0,3% 0,1% 0,09% Kontrol (+) - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + +
Kontrol (-) 0,1% 0,05% 0,025% 0,0125% 0,00625% 0,00312% 0,00156% 0,00078% 0,00039% 0,000195% Kontrol (+) - - - + + + + + + + + + - - - + + + + + + + + + - - - + + + + + + + + + Keterangan : (+) ada pertumbuhan koloni bakteri pada media selektif ( - ) tidak ada pertumbuhan koloni bakteri pada media selektif Kontrol ( - ) = ekstrak Kontrol (+)  = suspensi bakteri
Hasil fraksi air yang didapatkan lebih banyak dibandingkan  fraksi  yang  lain  karena  mungkin sebagian besar senyawa dalam daun zodia bersifat polar.  Rendemen  setiap  pelarut  berbeda  karena kemampuan  dari  masing-masing  pelarut  dalam menyari senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanolik  daun  zodia  berbeda.  Hasil  rendemen yang  diperoleh  jauh  dari  yang  diharapkan  yaitu 100%  atau  mendekati  100%.  Hal  tersebut kemungkinan  disebabkan  ekstrak  banyak  yang menempel  pada  wadah  dan  corong  pisah,  serta
kurangnya kekentalan ekstrak untuk proses fraksinasi.
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanolik, fraksi n- heksan,  kloroform,  dan  air  dari  daun zodia terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dalam penelitian ini menggunakan metode  dilusi  untuk  mendapatkan  Konsentrasi Hambat  Minimum  (KHM)  dan  Konsentrasi Bunuh  Minimum  (KBM).  Pengujian  aktivitas dari  ekstrak  etanolik  dan  fraksi  daun  zodia terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dengan konsentrasi larutan masing-masing 50%, 25%,  12,5%,  6,5%,  3,125%,  1,56%,  0,78%, 0,39%, 0,19%, dan 0,09%.
12    ISMI RAHMAWATI, RATNO AGUNG SAMSUMAHARTO, DAN EDI ZUNAIDI IRYANTO W Biomedika
Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia fraksi n- heksan,  kloroform  dan  air  dari  ekstrak etanolik daun zodia ( Evodia sauveolens , Scheff.) dapat dilihat pada Tabel 5.
Hasil  penelitian  dengan  metode  dilusi menunjukkan  bahwa  fraksi  air  dan  ekstrak etanolik  memiliki  nilai  Konsentrasi  Bunuh b Minimum  (KBM)  adalah  50% / .  Hal  ini  dapat v disebabkan  karena  pada  ekstrak  etanolik  daun zodia  masih  memiliki  kandungan  kimia  minyak atsiri,  saponin,  alkaloid,  flavonoid,  dan  tanin. Saponin   memiliki   kemampuan   dalam menghambat  fungsi  membran  sel  sehingga merusak   permeabilitas   membran   yang mengakibatkan  dinding  sel  rusak  atau  hancur (Ayuningtyas,  2008).  Menurut  Juliantina  dkk. (2008)  mekanisme  alkaloid  sebagai  antibakteri adalah  dengan  cara  mengganggu  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel tersebut.  Flavonoid  merusak  lipid  pada  membran plasma  mikroorganisme  sehingga  menyebabkan isi  sel  keluar  (Pratiwi,  2008).  Ajizah  (2004) dalam Juliantina et al . (2008) menyatakan bahwa mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri dengan mengkerutkan  dinding  sel  atau  membran  sel sehingga  mengganggu  permeabilitas  dinding  sel bakteri  itu  sendiri.  Tanin  dapat  berikatan  dengan dinding  sel  bakteri  dan  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Minyak  atsiri  dapat menyebabkan terjadinya lisis pada bakteri dengan mengikat  protein,  lipid  dan  atau  korbohidrat yang terdapat pada membran sel (Harborne, 1998). Fraksi  air  memiliki  senyawa  saponin  dan tanin. Senyawa tanin memiliki  aktivitas antibakteri yang  berhubungan  dengan  kemampuannya  untuk menginaktifkan  adhesin  sel  mikroba  juga menginaktifkan  enzim,  dan  menggangu  transport protein  pada  pada  lapisan  dalam  sel  (Cowan, 1994).  Menurut  Sari  dan  Sari  (2011),  tanin  juga mempunyai  target  pada  polipeptida  dinding  sel sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna.  Hal  ini    menyebabkan  sel  bakteri menjadi  lisis  karena  tekanan  osmotik  maupun fisik sehingga sel bakteri   akan mati. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri adalah menghambat enzim    reverse  transkriptase  dan  DNA topoisomerase  sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat terbentuk  (Nuria et  al., 2009).  Mekanisme  kerja
saponin  sebagai  antibaktei  adalah  menurunkan tegangan  permukaan  sehingga  mengakibatkan naiknya  permeabilitas  atau  kebocoran  sel  dan mengakibatkan  senyawa  intraseluler  akan  keluar (Robinson, 1995). Menurut Cavalieri et al. (2005), senyawa  ini  berdifusi  melalui  membran  luar  dan dinding  sel  yang  rentan,  lalu  mengikat  membran sitoplasma  dan  mengganggu  dan  mengurangi kestabilan  itu.  Hal  ini  menyebabkan  sitoplasma bocor  keluar  dari  sel  yang  mengakibatkan kematian sel. Agen antimikroba yang mengganggu membran sitoplasma bersifat bakterisida.
Penelitian ini menggunakan metode dilusi atau uji  seri  pengenceran.  Metode  ini  bermanfaat untuk  mengetahui  dosis  minimal  dari  obat  yang bersifat  bakteriostatik  dan  bakterisid.  Konsentrasi Bunuh  Minimum  (KBM)  dapat  diketahui  dari konsentrasi  tertinggi  yang  menunjukkan  tidak adanya  pertumbuhan  koloni  bakteri  pada  media Pseudomonas Selektif Agar ( PSA ).
Penelitian  ini  menggunakan  siprofloksasin sebagai pembanding pengujian aktivitas antibakteri karena  merupakan  antibiotik  dengan  spektrum luas  dan  bekerja  dalam  menghambat  kerja  DNA gyrase pada bakteri. Hasil inokulasi siprofloksasin terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  dari siprofloksasin  ialah  sebesar  0,05%.  Konsentrasi Bunuh  Minimum  (KBM)  dari  siprofloksasin mempunyai  daya  bunuh  yang  lebih  besar dibandingkan  dengan  ekstrak  etanolik  maupun fraksi  air  yang  memiliki  Konsentrasi  Bunuh Minimum  (KBM)  sebesar  50%,  sehingga penggunaan  antibiotik  siprofloksasin  masih  lebih efektif  digunakan  dalam  penanganan  infeksi yang  disebabkan  oleh  bakteri Pseudomonas aeruginosa .

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian uji aktivitas antibakteri ekstrak etanolik, fraksi n- heksan,
Tabel 5.Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia fraksi n- heksan, kloroform dan air dari ekstrak etanolik daun zodia
Senyawa Interpretasi hasil fraksi n -heksan kloroform Air Saponin - - + Alkaloid + - - Tanin - - + Flavonoid + + - Minyak atsiri - - - Keterangan :+ : memiliki senyawa - : tidak memiliki senyawa
kloroform  dan  air  dari  daun  zodia  ( Evodia sauveolens , Scheff.) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC  27853  dapat  disimpulkan bahwa : Pertama, dari ekstrak etanolik dan ketiga fraksi daun zodia yaitu fraksi n- heksan, kloroform dan  air  yang  memiliki  aktivitas  terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ialah fraksi air  dan  ekstrak  etanolik  daun  zodia  ( Evodia sauveolens ,  Scheff.).  Kedua,  Konsentrasi  Bunuh Minimum  (KBM)  dari  fraksi  air  dan  ekstrak etanolik  dari  daun  zodia  ( Evodia  sauveolens , b Scheff.)  adalah  50%  / .  Ketiga,  fraksi  air  dan v ekstrak  etanolik  daun  zodia  ( Evodia  sauveolens , Scheff.)  memiliki  aktivitas  tertinggi  terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.
Anggreyni, Mery Zuana. 2009. Pembuatan dan Uji Aktivitas Antinyamuk Bakar dari Ekstrak daun Tumbuhan Zodia (Euodia  hortensis  J.R.  &  G.Forst) .  Skripsi.  Medan: Fakultas  Farmasi  Universitas  Sumatera  Utara.

## DAFTAR PUSTAKA
Jawetz, E., Melnick.,J.L., Adelberg, E.A., 2012, Mikrobiologi Untuk Profesi Kesehatan, Diterjemahkan Oleh Boning G., Edisi XXV, ECG., Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta
Ayuningtyas  A.  K.,  2008. Efektivitas  Campuran  Meniran Phyllanthus  niruri  dan  Bawang  Putih  Allium  sativum untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias gariepenus. Skripsi. Prodi Teknologi  dan  Manajemen  Akuakultur  Institut  Pertanian Bogor. Bogor.
Cavalieri,  S.J.,  I.D.  Rankin.,  R.J.  Harbeck.,  R.S.  Sautter.,  Y.S. McCarter., S.E. Sharp., J.H. Ortez., dan C.A. Spiegel. 2005.
Manual  of  Antimicrobial  Susceptibility  Testing. American Society for Microbiology, USA
Cowan, M.M. 1999. Plant Products as Antimicrobial Agents.
Clinical Microbiology Reviews . 12 : 564 – 582.
[Departemen Kesehatan R.I]. 2003. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid VI. Jakarta : Depkes R.I. hlmn 76-77. Harborne J.B. 1998. Metode Fitokimia. Ed ke-1. Diterjemahkan Ibrahim F. Bandung : ITB Bandung Press.
Juliantina F., Dewa A. C. M., Bunga N., Titis N., Endrawati T. B., 2008. Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum) Sebagai Agen Anti  Bakterial  Terhadap  Bakteri  Gram  Positif  dan  Gram Negatif. Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia. Mayasari, E. 2006. Pseudomonas aeruginosa; Karakteristik, Infeksi  dan  Penanganan.  http://library.usu.ac.id . [24 Desember 2014].
Maryuni, Agnes Eri. 2008. Isolasi dan Identifikasi  Antibakteri Minyak Atsiri  Daun  Zodia  (Evodia  sp.) . Bogor  : Institut Pertanian Bogor Nuria, M.C., A. Faizatun., dan Sumantri. 2009. Uji  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Jarak  Pagar  (  Jatropha  cuircas  L) terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Salmonella typhi ATCC 408. Jurnal  Ilmu  –  ilmu  Pertanian .  5:  26  –37. Pratiwi, sylvia T. 2008. Mikrobiologi Farmasi . Erlangga Robinson T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi . Bandung : ITB.
Sari, F.P., dan S. M. Sari. 2011. Ekstraksi Zat Aktif  Antimikroba dari  Tanaman  Yodium  ( Jatropha  multifida Linn)  sebagai Bahan  Baku Alternatif   Antibiotik Alami.  Fakultas Teknik Universitas Diponegoro, Semarang.
Siswandono dan Soekardjo B. 2008. Kimia Medisinal . Airlangga University   Press. Hlm: 128.