Uji Aktivitas Antijamur Fraksi n -Heksana, Kloroform dan Air dari Ekstrak Etanolik Daun Zodia (Evodia sauveolens, Scheff ) terhadap Candida albicans ATCC 10231

## ABSTRAK
ABSTRACT PENDAHULUAN

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition) ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Available online at www.biomedika.ac.id
Volume 9, No. 1, Maret 2016
Antifungal Activity Test fraction of n -Hexane, Chloroform and Water from ethanolic leaf extract Zodia ( Evodia sauveolens , Scheff) against Candida albicans ATCC 10 231 1
2 3
Ismi Rahmawati , Ratno Agung Samsumaharto , dan Patricius Prima Dimas Putranto ,
1,3 Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi Surakarta
2 Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta Jl. Let.jen Sutoyo, Mojosongo, Surakarta 57127
Daun zodia (Evodia sauveolens, Scheff) adalah tanaman yang secara empiris berkhasiat sebagai antimikroba. Kandungan kimia daun zodia adalah minyak atsiri, flavonoid, alkaloid, saponin dan zodia. Penelitian ini dilakukan untuk  untukmengetahuiaktivitasfraksin-heksan,kloroform,  air  dari  ekstraketanolikdaun  zodia  (Evodia  sauveolens, Scheff)  sebagai  antijamur  terhadap  Candida  albicans  ATCC  10231.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  dilanjutkan  dengan  pelarut  n-heksan,  kloroform  dan  air.  Uji aktivitas antijamur dilakukan dengan metode dilusi. Konsentrasi ekstrak etanolik dan fraksi yang digunakan 50%; 25%; 12,5%; 6,2%; 3,1%; 1,5%; 0,7%; 0,3%; 0,1%; 0,09%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanolik dan fraksi air memiliki konsentrasi bunuh minimum sebesar 25% terhadapCandida albicans ATCC 10231. Fraksi air dari ekstrak etanolik dari daun zodia memiliki aktivitas antijamur paling aktif dibandingkan dengan fraksi n-heksan dan fraksi kloroform.
Kata kunci : daun zodia, Candida albicans, antijamur.
Leaves  zodia  (Evodia  sauveolens,  Scheff)  is  a  plant  that  is  empirically  efficacious  as  antimicrobials.  Zodia  leaf chemical  constituents  are  essential  oils,  flavonoids,  alkaloids,  saponins  and  tannins.  This  study  was  conducted  to determine the activity of the fraction to n-hexane, chloroform, water from ethanolic extracts of leaves zodia (Evodia sauveolens,  Scheff)  as  antifungals  against  Candida  albicans  ATCC  10  231.The  method  used  in  this  research  is the method of maceration with 96% ethanol solvent followed by solvent n-hexane, chloroform and water. Antifungal activity  test  performed  by  dilution  method.  Concentration  of  ethanolic  extracts  and  fractions  are  used  50%;  25%; 12.5%; 6.2%; 3.1%; 1.5%; 0.7%; 0.3%; 0.1%; 0.09%.The results showed that the ethanolic extract and water fraction has committed a minimum concentration of 25% against Candida albicans ATCC 10231. The fraction of water from ethanolic  extracts  of  leaves  zodia  has  the  most  active  antifungal  activity  compared  to  the  fraction  of  n-hexane  and chloroform fractions.
Key words: leaves zodia, Candida albicans, antifungal.
Saat ini obat tradisional semakin popular dan lebih  diminati  oleh  masyarakat  Indonesia,  dika- renakan  obat  tradisional  selain  harganya  murah juga  memiliki  efek  samping  yang  relatif  ringan apabila dibandingkan dengan obat kimia sehingga hal  ini  diperkuat  dengan  ketersediaan  sumber bahan  obat  alam  yang  banyak  ditemukan  di Indonesia,  sehingga  mempunyai  potensi  yang cukup besar untuk dikembangkan secara optimal sehingga  obat  tradisional  juga  menjadi  pilihan pengganti  atau  pengobatan  alternatif  untuk
penyembuhan penyakit di dalam masyarakat Indonesia(Setiawan 2008).
Jamur Candida albicans ATCC 10231dianggap sebagai  spesies  patogen  dan  menjadi  penyebab utama kandidiasis . Candida albicans ATCC 10231 merupakan  jamur  opportunistik  penyebab  saria- wan,  lesi  pada  kulit,  vulvavaginistis,  kandiduria, gastrointestinal kandidiasis yang dapat menyebab- kan  gastric  ulcer  atau  bahkan  dapat  menjadi komplikasi kanker (Kurniawan 2009).
Tanaman yang berpotensi dikembangkan adalah  zodia  ( Evodia  sauveolens, Scheff.)
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui aktivitas antijamur fraksi n -heksana, kloroform,  dan  air  dari  ekstrak  etanolik  daun zodia  ( Evodia  sauveolens ,  Scheff.)  terhadap Candida  albicans ATCC  10231,  mengetahui Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  atau Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) dari fraksi n -heksan,  kloroform  dan  air  ekstrak  etanolik daun zodia ( Evodia sauveolens , Scheff.) sebagai antijamur Candida  albicans ATCC  10231  serta aktivitas  tertinggi  terhadap  jamur Candida albicans ATCC  10231  dari  ketiga  fraksi  dapat diketahui.
tanaman  zodia  memiliki  kandungan  kimia  pada bagian  daun  zodia  ( Evodia  sauveolens, Scheff . ) mengandung  alkaloid,  saponin,  berberine  dan furoquinoline  (Depkes  RI  2003).  Komponen minyak  atsiri  dianalisis  dengan  metode  GC-MS. Spektra  GC-MS  menampakkan  26  puncak  yang menunjukkan  adanya  26  komponen  penyusun minyak  atsiri.  Total  persentase  komponen penyusun adalah 100% dengan komponen utama adalah  evodone  dengan  kadar  72,32%,  diikuti dengan  menthofuran  sebesar  7,52%,  limonene 4,73%,  curcumene  4,28%  dan  fonenol  1,66%, sedangkan  sisanya  merupakan  komponen- komponen  berkadar  rendah  (Maryuni  2008). Penelitian yang dilakukan oleh Rosmalina (2013) kandungan  tanin  pada  zodia  didapat  2,08%  dari semua  jenis  suku  Rutaceace.  Hasil  analisis fitokimia  yang  dilakukan  oleh Anggreyni  (2009) bahwa  serbuk  simplisia  daun  zodia  ( Evodia hortensis J.R.  &  G.Forst)  menunjukkan  adanya senyawa alkaloida, flavonoida, tanin dan glikosida. Penyarian senyawa tanaman zodia dilakukan dengan  menggunakan  metode  maserasi  karena metode  ini  merupakan  metode  ekstraksi  yang mudah  dilakukan  dan  sederhana.  Metode maserasi  merupakan  cara  penyarian  yang sederhana.  Maserasi  dilakukan  dengan  cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan  penyari  akan  menembus  dinding  seldan masuk  ke  dalam  rongga  sel  yang  mengandung zat  aktif,  zat  aktif  akan  larut  dan  karena  adanya perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  zat  aktif  di dalam  sel  dengan  yang  diluar  sel,maka  larutan yang  terpekat  didesak  keluar.  Peristiwa  tersebut berulang sehingga terjadi keseimbangan konsen- trasi  antara  larutan  diluar  sel  dengan  larutan  di dalam  sel.  Maserasi  digunakan  untuk  penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut  dalam  cairan  penyari,  tidak  mengandung zat  yang  mudah  mengembang  dalam  cairan penyari,  tidak  mengandung  benzoin,  sitrat  dan lain-lain.
Penelitian ini  menggunakancairan penyari etanol karena  lebih  selektif,   kapang maupun kuman sulit untuk tumbuh pada etanol dengan konsentrasi  20% keatas, tidakberacun, netral,
absorbsinya  baik,  dapat  bercampur  dengan  air pada  segala  perbandingan,dan  panas  yang diperlukan untuk pemekatanlebih rendah. Etanol 96 % digunakan dalam penelitian karena sering menghasilkan suatu  bahan aktif yang optimal, di mana  bahan  pengotornya  hanya  dalam  skala kecil  turut  dalam  cairan  pengekstrak. Fraksinasi  adalah  suatu  cara  memisahkan golongan  utama,kandungan  yang  satu  dari golongan yang lain berdasarkan polaritas. Jumlah dan  jenis  senyawa  yang  telah  dipisahkan  akan menjadi  fraksi  yang  berbeda.  Senyawa  yang bersifat nonpolar akan masuk ke pelarut nonpolar sedangkan  yang  bersifat  polar  akan  masuk  ke pelarut  polar.  Keuntungan  fraksinasi  adalah diperolehnya  isolat  atau  senyawa  yang  lebih spesifik terhadap polaritas pelarut yang digunakan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan utama yamg digunakan dalam penelitian adalah  serbuk  daun  zodia,  sedangkan  jamur  yang digunakan adalah Candida albicans ATCC 10231. Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi  media  SGA  ( Sabouraud  Glucose Agar ),  SGC  ( Sabougraud  Glucose  Cair ),  Bahan kimia  yang  digunakan  adalah  pelarut  etanol  96%, n -heksana,  kloroform,  aquadest,  HCl  2N,  Mayer, Dragendrof,  pereaksi  besi  (III)  klorida  5%,  amil alkohol.

## Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah
timbangan  analitik,  tabung  reaksi,  cawan  petri, jarum  ose,  kapas  lidi  steril,  kotak  septis  inkas, pembakar spiritus, miskroskop, objek glass, dek glass,  pipet  ukur,  gelas  ukur,  batang  pengaduk ayakan nomor 40, waterbath, autoklaf, inkubator, erlenmeyer, Moisture Balance dan corong pisah.

## Jalannya Penelitian
Tahap pertama dalam penelitian  ini adalah menetapkan  kebenaran  daun  zodia  dengan mencocokan ciri fisiologis yang ada pada daun zodia dengan  acuan buku, serta dibuktikan  di Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI), Bogor, Jawa Barat.

## Penyiapan Bahan
Penetapan  susut  pengeringan  daun  zodia menggunakan Moisture  Balance .  Suhu  yang digunakan  adalah  95  °C  dan  waktu  pengeringan secara manual yaitu 15 menit, kemudian dimasukan dalam  neraca  timbang  dengan  posisi  0,00  dan memasukkan  sampel  daun  zodia  2  gram.  Penan- daan  hasil  analisa  telah  selesai  yaitu  sampai diperoleh  bobot  konstan  yang  dilakukan  penim- bangan  sebanyak  3  kali.  Susut  pengeringan memenuhi  syarat  dimana  suatu  serbuk  simplisia tidak boleh lebih dari 10%.
Daun  zodia  diperoleh  dari  Lembaga  Ilmu Pengetahuan  Indonesia,  Bogor,  Jawa  Barat  dalam Pembuatan  serbuk  daun  zodia  adalah  dengan cara  dicuci  bersihkan  dengan  air  mengalir  agar bebas  kotoran  dan  debu,  lalu  daun  dikeringkan
0 dengan  oven  pada  suhu  40 C,  pengeringan  bertu- juan  untuk  mengurangi  bekerja  nya  enzim  dan perubahan  kimia  yang  dapat  menurunkan  mutu serta  memudahkan  dalam  proses  penyerbukan. setelah  kering  segera  diserbuk  dengan  mesin penyerbuk  atau  blender  kemudian  diayak  dengan ayakan  nomor  40  sampai  serbuk  terayak  habis sehingga  didapatkan  serbuk  daun  zodia  yang mempunyai derajat kehalusan yang relatif homogen.

## Pembuatan Ekstrak Etanolik dan Fraksinasi
Serbuk daun zodia ditimbang kemudian dimasuk- kan    ke  dalam    bejana  lalu  ditambahkan  etanol 96%  dengan  perbandingan  1:7,5.  Campuran
tersebut didiamkan  selama 5 hari dengan sesekali digojog,  setelah  itu  dipisahkan  antara  filtrat dengan  ampas  dengan  menggunakan  corong Buchner.  Filtrat  yang  diperoleh  kemudian  dipe-
0 katkan  dengan evaporator pada  suhu  40 C sehingga menjadi ekstrak etanol daun zodia. Fraksinasi dilakukan dengan cara menimbang 10 gram ekstrak daun zodia kemudian dilarutkan dengan pelarut air 75 mL, difraksi 3 kali dengan pelarut n -heksan  masing-masing  75  ml.  Proses fraksinasi  dilakukan  dengan  corong  pisah,  fraksi n -heksan  terletak  diatas  dan  fase  air  terletak dibawah. Fraksi n -heksan yang didapat dipekatkan menggunakan  evaporator  pada  suhu  dibawah
0 40 C.  Residu  yang  didapat  dari  fraksi n -heksan dilanjutkan  fraksinasi  3  kali  dengan  pelarut kloroform 75 ml. Hasil yang didapat adalah fraksi kloroform  yang  terletak  diatas  dan  fraksi  air  di bagian  bawah.  Fraksi  kloroform  dipekatkan menggunakan  evaporator  pada  suhu  dibawah
0 40  C  dan  air  dipekatkan  dengan  menggunakan waterbath.

## Pembuatan Suspensi Jamur Uji
Candida  albicans ATCC  10231  diambil  dari biakan  murni Candida  albicans ATCC  10231 sebanyak  beberapa  ose,  kemudian  digoreskan pada  media Sabouroud  Glukosa  Agar (SGA) miring pada suatu tabung yang kemudian diinku-
0 basi  selama  2-5  hari  pada  suhu  37 C.  Hasil inkubasi  digunakan  sebagai  stok  jamur  uji Candida  albicans ATCC  10231.  Beberapa  Ose biakan Candida  albicans ATCC  10231  dimasuk- kan  ke  dalam  tabung  reaksi,  dicampur  hingga homogen  dan  didapatkan  kekeruhan  yang  sama dengan  standart  Mc  Farland  0,5  suspensi  yang didapat diencerkan dengan perbandingan 1: 1000.

## Pengujian Aktivitas Antijamur Ekstrak dan Fraksi Daun Zodia
Larutan stok secara aseptis tersebut dibuat deret konsentrasi di bawahnya, di mana masing-masing konsentrasi dibuat sampai volume 1 ml ditambah- kan  0,5ml  suspensi  jamur  pada  masing-masing tabung.  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) ditentukan  dengan  mengamati  adanya  kekeruhan
pada seri pengenceran sejumlah tabung yang telah
0 diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam, dimana tabung dengan larutan jernih setelah tabung keruh terakhir merupakan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM).  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM) ditentukan  dengan  mennggoreskan  larutan  dari sejumlah tabung yang hasilnya jernih pada medium
0 selektif  kemudian  diinkubasi  37 C  selama  24  jam dan  diamati  ada  tidaknya  pertumbuhan  jamur maka  merupakan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM).  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) ditentukan  dari  goresan  terakhir  yang  masih terdapat  pertumbuhan  jamur,  sedangkan  Konsen- trasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  ditentukan  dari goresan  jamur  yang  sudah  tidak  terdapat  pertum- buhan jamur.
Serbuk daun zodia dimaserasi dengan etanol 96  %  kemudian  disaring  dan  dipekatkan. Rendemen ekstrak etanol yang diperoleh dihitung terhadap  bobot  serbuk  sebesar  19,75.  Ekstrak lalu di fraksinasi dengan tujuan untuk  memisah- kan  golongan  senyawa  berdasarkan  polaritasnya menggunakan  pelarut    air  sebagai  pelarut  polar, etil  asetat  sebagai  pelarut  semi  polar,  dan

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia ekstrak etanolik daun zodia
Senyawa Hasil
Keterangan Saponin + Alkaloid + Tanin + Flavonoid + Minyak atsiri +
Berdasarkan  hasil  analisis  kualitatif  pada Tabel 1 kandungan kimia serbuk daun zodia dapat disimpulkan  bahwa  serbuk  tersebut  mengandung alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin  dan  minyak atsiri dari hasil penelitian zodia hal ini didukung oleh Anggreyni (2009)
Tabel 2. Rendemen fraksi daun zodia
rendemen (%) Ekstrak etanolik 19,75 n - heksana                                              9,06
Kloroform                                              7,42 Air                                                        30,34
Hasil fraksi air yang didapatkan lebih banyak dibandingkan  fraksi  yang  lain  (Tabel  2)  karena mungkin  sebagian  besar  senyawa  dalam  daun zodia  bersifat  polar.  Rendemen  setiap  pelarut berbeda karena kemampuan dari masing-masing pelarut dalam menyari senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanolik daun zodia berbeda.
Tabel 3. Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia fraksi n- heksan, kloroform dan air dari ekstrak etanolik daun zodia
Senyawa Interpretasi hasil fraksi n -heksan kloroform Air Saponin - - + Alkaloid + - - Tanin - - + Flavonoid + + - Minyak atsiri - + -
Keterangan :+  :  memiliki  senyawa - : tidak memiliki senyawa
n -heksan sebagai pelarut nonpolar.
Pengujian aktivitas antijamur Candida  albicans ATCC  10231  dilakukan  dengan  metode  dilusi untuk  mengetahui  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM), dengan  membuat  konsentrasi  50%;  25%;  12,5%; 6,5%;  3,125%;  1,56%;  0,78%;  0,39%;  0,19%; 0,09%; kontrol (+) dan kontrol negatif (-).
Hasil Pengujian Aktivitas Antijamur secara Dilusi
Aktivitas antijamur dapat diketahui dari kekeruhan pada  tabung  percobaan  lalu  kemudian  di  goreskan pada  media  agar.  Hasil  menunjukan  Konsentrasi
40   ISMI ET AL.
Fraksi air daun zodia terbukti memiliki daya hambat  minimum  terhadap  aktivitas  antijamur. Hal  ini  mungkin  disebabkan  interaksi  antara senyawa  yang  terkandung  dalam  fraksi  air memiliki  aktivitas  terhadap Candida  albicans ATCC10231 adalah saponin dan tanin.
Hambat  Minimum  (KHM)  sulit  diamati  karena warna  sampel  yang  digunakan  keruh,  sehingga dilanjutkan dengan penggoresan pada media agar. Penelitian ini menggunakan metode dilusi atau seri  pengenceran.  Metode  ini  bermanfaat  untuk mengetahui dosis minimal dari obat yang bersifat fungistatik  dan  fungisid.  Konsentrasi  minimal fungistatik  dapat  diketahui  dari  tabung  jernih pada  konsentrasi  penggenceran  tinggi,  jika  digo- reskan pada media SGA akan tumbuh koloni.
Tabel 4. Perbandingan hasil inokulasi sediaan nistatin dengan uji aktivitas ekstrak, fraksi n- heksan, fraksi kloroform dan fraksi air terhadap Jamur Candida albicansATCC 10231
Hasil inokulum di media SGA Konsentrasi
% b / v Ekstrak etanolik Fraksi n - heksan Fraksi kloroform Fraksi air Konsentrasi
% b / v Nistatin I II III I II III I II III I II III I II III Kontrol (-)
50% 25% 12,5%
6,2% 3,1% 1,5%
0,7% 0,3%
0,1% 0,09% Kontrol (+)
- - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + - - - + + + + + + + + + - - - + + + + + + + + + - - - + + + + + + + + +
Kontrol (-)
0,2% 0,1% 0,05% 0,025% 0,0125% 0,00625% 0,00312% 0,000156% 0,000781% 0,000390% Kontrol (+) - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + - - + + + + + + + + + + Keterangan : (-): Tidak ada pertumbuhan jamur (+): Ada pertumbuhan jamur
akibatkan  kebutuhan  sel  tidak  tercukupi  dengan baik.  Pertumbuhan  sel  terhambat  kemudian  sel akan mati. Senyawa tanin adalah senyawa yang dapat mengikat dan mengendapkan atau menyu- sutkan  protein.  Tanin  dapat  berikatan  dengan dinding  sel  mikroorganisme  dan  dapat  meng- hambat  pertumbuhan  mikroorganisme  atau aktivitas enzim (Watson dan preedy 2010).
Berdasarkan  Tabel  4  di  atas  terlihat  bahwa fraksi air mempunyai aktivitas antijamur terhadap Candida  albicans ATCC  10231  dengan  Konsen- trasi Bunuh Minimum (KBM) terbaik adalah 25%. Fraksi  air  yang  paling  optimal  dalam  membunuh Candida  albicans ATCC10231,  hal  ini  terkait dengan  golongan  senyawa  yang    terdapat  dalam fraksi air. Air dapat melarutkan senyawa saponin. Saponin  adalah  senyawa  aktif  permukaan  yang kuat  yang  bekerja  sebagai  antimikroba,  (Watson dan   preedy 2010). Saponin mempunyai aktivitas antijamur  dengan  cara  melisiskan  sel  sehingga dapat  bersifat  fungsida.  Saponin  dapat  menurun- kan    tegangan    permukaan  membran  sel  jamur, sehingga  permeabilitasnya  terganggu  yang  meng-
Hasil  Tabel  4  menyatakan  bahwa  nistatin mempunyai aktivitas antijamur terhadap Candida albicans ATCC  10231  dengan  Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) yaitu 0,2% ini sebagai pembanding  pada  fraksi  air  yang  mempunyai Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  0,25%. Dengan demikian penggunaan antibiotik nistatin masih  lebih  efektif  digunakan  di  masyarakat dibanding  hasil  ekstrak  maupun  fraksi  daun zodia terhadap jamur.
Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) fraksi air dari ekstrak etanolik daun zodia ( Evodiasauveolens , b Scheff.)  adalah  25%  / sebagai  antijamur  terhadap v Candida  albicans ATCC  10231,  sedangkan  fraksi n -heksan dan kloroform dari ekstrak etanolik daun zodia  ( Evodiasauveolens ,  Scheff.)  tidak  memiliki Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM).  Fraksi yang  teraktif  terhadap Candida  albicans ATCC

## KESIMPULAN
Ketiga fraksi daun zodia yaitu fraksi n- heksan, kloroform dan air yang memiliki aktivitas terhadap Candida albicans ATCC 10231 ialah fraksi air.
10231 adalah fraksi air yang memiliki Konsentrasi b Bunuh  Minimum  (KBM)  sebesar  25% / sampai v konsentrasi  100%  yang  tidak  sebanding  dengan nistatin  yang  mempunyai  Konsentrasi  Bunuh b Minimum (KBM) sebesar 0,2% / v
Anggreyni,  M.    Z.  2009. Pembuatan  dan  Uji  Aktivitas  Anti nyamuk Bakar dari Ekstrak daun Tumbuhan Zodia (Euodia hortensis  J.R.  &  G.Forst) .  Skripsi.  Medan  :  Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

## DAFTAR PUSTAKA
Watson R. R. & Preedy V. R. 2010. Bioactive Food and Extracts Cancer Treatment and Prevention, CRC Press, ISBN 978- 1-4398-1619-6. Hlm 432
Kurniawan,  J.A.  2009. Uji Aktivitas Antijamur  Ekstrak  Rimpang Binahong ( Anredera  cordifolia  (Tenora)  Steen ) Terhadap Jamur Candida albicansserta Skrining Fitokimianya . Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Maryuni, A. E.. 2008. Isolasi dan Identifikasi Antibakteri Minyak Atsiri Daun Zodia (Evodia sp.) . Bogor : Institut Pertanian Bogor.
Rosmalina S dan Nasution 2013. Studi Kandungan Tannin pada Daun Famili Rutaceace. Jurnal. Medan :Universitas Negeri Medan.
Setiawan D. 2008. Ensiklopedia Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Penerbit Dinamika Media. Halaman 23-25.
42   ISMI ET AL.