Jurnal Farmasi Indonesia, November 2014, hal 114-122
Vol. 11 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Uji Aktivitas Praklinis Kapsul Ekstrak Campuran Bahan Alami Buah Mengkudu ( Morinda c itrifolia L.) dan Daun Pepaya
( Carica papaya L.) sebagai Hepatoprotektor pada Terapi  Tuberculosis (TBC)
Preclinic Activity Test of Capsule of Natural Ingredients Extract Combination of Noni Fruit ( Morinda citrifolia L.) and Papaya Leaf ( Carica papaya L.)  as Hepatoprotector Agent for Tuberculosis (TB) Treatment

## ILHAM KUNCAHYO*, SUPRIYADI
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi: ilhamninda@gmail.com
(Diterima 23 September 2014, disetujui 22 Oktober 2014)
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Penelitian  dilakukan  pada  tahun  pertama membuat  kapsul  campuran  bahan  alami    ekstrak buah  mengkudu  dan  daun  pepaya  untuk  mengatasi  kerusakan  hati  (hepatoprotektor)  pada  terapi tuberkulosis  (TBC).  Tahun  kedua  dilakukan  uji  praklinik  menggunakan  hewan  coba  tikus yang diberi  INH  dan  rifampisin  yang  sering  digunakan  pada  terapi  TBC  selama  28  hari.  Sebanyak  30 tikus  dikelompokkan  menjadi  enam:  kelompok  I  (kontrol  normal)  tanpa  diberi  perlakuan,  hanya diberi  makan  dan  minum; kelompok  II  (kontrol  negatif)  diberi  suspensi  INH-rifampisin  dengan dosis  INH  10  mg/200  g  BB  dan  rifampisin  10  mg/200  g  BB;  kelompok  III  (kontrol  positif)  diberi suspensi INH-rifampisin dan obat antihepatotoksik methicol®; kelompok IV diberi kapsul formula 1; kelompok V diberi formula 2; kelompok VI diberi formula 3. Parameter kerusakan hati adalah kadar bilirubin serum, ALT dan AST yang diukur pada hari ke-0 (sebelum perlakuan), ke-14, ke-21, ke-28. Histologi hati diamati secara microscopic photograph dengan pengecatan hematoksilin-eosin. Analisis statistik dilakukan dengan ANOVA satu jalan untuk persentase nekrosis hati dan ANOVA dua jalan untuk  kadar  ALT,  AST, dan  bilirubin serum,  dengan  taraf  kepercayaan 95%. Hasil  penelitian menunjukkan bahwa kapsul kombinasi ekstrak buah mengkudu dan daun pepaya formula 1 dengan bahan pengikat PVP 1% mampu menurunkan kerusakan hati yang lebih baik daripada kapsul formula 2 dan 3.
Kata kunci : buah mengkudu, daun pepaya, kapsul, INH-rifampisin, hepatoprotektor.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Research  has  been  conducted  in  year  1 st with  the  manufacture  capsule  of  noni  fruit  ( Morinda citrifolia L.) and papaya leaf (Carica papaya L.) as the active material to cope with damage to the liver (hepatoprotective)  for  the  treatment  of  tuberculosis  (TB).  Year  2 nd pre-clinical  tests  have  been conducted using rats as test animals given INH and rifampicin that are often used in the treatment of tuberculosis  for  28  days.  Test  animals  consisted  of  30  rats  were  grouped  into  six  groups.  Group  I (normal control) were without any treatment, rat were given only the usual food and drink. Group II (negative  control)  were  given INH-rifampicin suspension (INH dose  of  10  mg/200  g  BW  and rifampicin  dose  of  10  mg/200  g  BW.  Group  III  (positive  control) were given  INH-rifampicin suspension and  drug  antihepatotoxic methicol®. Group IV were given formula    capsule 1,  group V were given  formula  capsule  2,  and  group  VI  were  given  formula  capsule  3.  Parameters  of  liver damage  was  observed  by  measuring  the  levels  of  serum  bilirubin,  ALT  and  AST  values.  The parameters  were measured on  day  0  (before  treatment),  day  14,  day  21,  and  day  28. There  were observed  liver  histologically  by  histological  methods-microscopic  photograph  using  hematoxylin-
eosin staining. The data obtained were statistically evaluated using ANOVA one way for percentage of  liver  necrosis  and  two-way  ANOVA  for  ALT,  AST  and  serum  bilirubin,  with  a  95%  confidence level. The results showed that the formula capsule 1 of extract combination of papaya leaf and noni fruit  with  PVP  binder  1  %  was able  to  provide  reduced  liver  damage  on rats  induced  isoniazid- rifampicin which was better than formula capsule 2 and 3.
Keywords : noni fruit, papaya leaf, INH-rifampicin, hepatoprotector.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Tuberkulosis  adalah  suatu  penyakit yang  disebabkan  oleh Mycobacterium tuberculosis.  Penyakit  ini  biasanya mengenai  paru-paru,  tetapi  mungkin menyerang semua organ atau jaringan di tubuh.  WHO  memperkirakan  TBC menyebabkan  6%  dari  semua  kematian di  seluruh  dunia,  yang  menyebabkan menjadi  penyebab  tersering  kematian akibat infeksi tunggal (Robbins 2007).
Terapi  penyembuhan  tuberkulosis biasanya  dapat  menggunakan  obat-obat seperti isoniazid, pirazinamid, rifampisin, etambutol,  dan  streptomisin  (Katzung 2004).  Salah  satu  efek  samping  yang dapat  ditimbulkan  akibat  pemberian OAT  (obat  antituberkulosis)  ini  adalah gangguan  fungsi  hati, dari  yang  ringan sampai  yang  berat, berupa  nekrosis jaringan  hati  (Arsyad  1996).  Efek hepatotoksisitas akan muncul bila  kedua obat  yaitu  isoniazid  dan  rifampisin tersebut dikombinasi. Berbagai penelitian mengenai  efek  samping  penggunaan obat  tuberkulosis  terhadap  kerusakan hati  telah  dilakukan, di  antaranya penelitian  yang  dilakukan  Adhvaryu et al.(2007)  yang  menunjukkan  bahwa isoniazid dan rifampisin
yang diinduksikan pada babi dengan dosis 50 mg/kg  dan  rifampisin  100mg/kg  selama
21  hari  dapat  menyebabkan  terjadinya kerusakan hati.
Tanaman  yang  dapat  digunakan sebagai  obat  antihepatotoksik  adalah pepaya ( Carica papaya L.) dan mengkudu. Buah pepaya dapat
digunakan  sebagai  obat  kerusakan  hati (Hembing 2008). Buah mengkudu  untuk menyembuhkan  berbagai  penyakit, di antaranya  difteri  dan  lever  (Hariana 2008).  Perasan  buah  mengkudu  dapat menurunkan kadar enzim GOT (Glutamate  Oxaloacetat  Transaminase) dan GPT (Glutamate Pyruvate
Transaminase)  pada  tikus  putih  yang diberi diet tinggi lemak (Maslachah et al. 2008). Ekstrak  buah  mengkudu  mampu menurunkan    kadar    SGOT dan  SGPT pada  mencit        dengan        induksi karbon    tetraklorida (Hermawan 2009)
Kapsul  adalah  sediaan  padat  yang mengandung  satu  macam  bahan  obat atau  lebih  dan  atau  bahan  inert  lainnya yang  dimasukkan  ke  dalam  cangkang atau  wadah  kecil  yang  umumnya  dibuat dari  gelatin  yang  sesuai  (Ansel  1989). Pada penelitian ini dipilih bahan pengisi laktosa dan bahan pengikat polivinilpirolidon (PVP). Laktosa
merupakan  serbuk  atau  massa  halus, keras,  putih  atau  putih  krem,  tidak berbau  dan  rasa  sedikit  manis.  Stabil  di udara  tetapi  mudah  menyerap  bau (Anonim  1995).  Laktosa  merupakan
bahan  pengisi  yang  paling  banyak digunakan  karena  tidak  bereaksi  dengan hampir  semua  bahan  obat,  granulnya cepat kering tapi daya hancurnya rendah, dan  mempunyai  sifat  alir  yang  bagus. PVP cocok untuk meningkatkan kelarutan  dalam  air  dari  bahan  obat. Dalam  ketergantungannya  dari  tingkat polimerisasi  sediaan  PVP berair  pada konsentrasi  10-15% (Voigt  1995).  Sifat fisik  kapsul  yang  dihasilkan  tergantung pada  granul  hasil  proses  granulasinya. Sifat fisik granul salah satunya dipengaruhi  oleh  proporsi  eksipien  yang digunakan,  dalam  hal  campuran  laktosa dan PVP.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun pepaya,  buah  mengkudu,  talk,  Mg stearat,  PVP, laktosa,  aerosil,  explotab, etanol,  INH, rifampisin,  CMC  1%, metichol®,  reagen  bilirubin,  ALT dan AST, histopatologi sel, tikus putih.
Alat
Alat yang digunakan adalah
timbangan  listrik  (tipe  metter  teledo), kandang  tikus,  timbangan  tikus,dan
jarum oral, pipa kapiler, mikrosentrifuge, tabung reaksi, dan spektrofotometer.

## Pembuatan Ekstrak
Serbuk  kering  daun  pepaya    dan buah mengkudu masing-masing dimaserasi  dengan  etanol  70%  selama 5  hari.  Ekstrak  kental  hasil  maserasi dievaporator  dan  dilakukan  standarisasi dengan  evaluasi  organoleptis,  kadar  air, kandungan kimia ekstrak.

## Pembuatan Kapsul
Kapsul  ekstrak  campuran  daun pepaya  dan  buah  mengkudu    dibuat dengan  bobot  700  mg  dengan  formula pada Tabel 1.
Pembuatan  kapsul  dimulai  dengan mencampur  ekstrak  kental  dengan laktosa,  aerosil  dan  explotab  kemudian diaduk hingga homogen. PVP dikembangkan dengan aquadest,
tambahkan  sampai  terbentuk  massa granul  diayak  dengan  ayakan  no.  16, dioven  (50ºC).  Setelah  kering,  granul diayak  kembali  dengan  ayakan  no.  18, ditambahkan talk dan magnesium stearat kemudian dikemas dalam kapsul.
Tabel 1. Formula kapsul ekstrak campuran buah mengkudu dan daun pepaya
Komposisi Berat bahan ( mg) Formula I Formula II Formula III Ekstrak daun pepaya (g) 560 560 560 Ekstrak buah mengkudu (g) 93,3 93,3 93,3 Aerosil (g) 88 88 88 Polivinilpirolidon (%) 1% 3% 5% Mg stearat:talk (1:9) (g) 10 10 10 Explotab (g) 30 30 30 Laktosa hingga (g) 1000 1000 1000

## Uji Hepatoprotektor pada Tikus
Sebelum  dilakukan  uji  pada  tikus, dilakukan adaptasi terhadap lingkungan minimal  satu  minggu.  Suhu  dan kelembaban  relatif dari  kandang  harus diperhatikan  karena  hal  tersebut  dapat mempengaruhi  uji  penelitian.  Sebelum perlakuan,  semua  tikus  ditimbang untuk  pengaturan  dosis.  Hewan  uji dikelompokkan menjadi enam kelompok, masing-masing terdiri dari 5 ekor tikus jantan. Satu hari sebelumnya tikus dipuasakan.
Kelompok  I  (kontrol  normal)    yaitu tanpa  ada  perlakuan  pada  tikus,  hanya diberi  makan  dan  minum  biasa. Kelompok  II (kontrol  negatif)  yang diberi  suspensi  INH-rifampisin,  dengan dosis    INH    10  mg/200  g  BB  tikus  dan rifampisin  10  mg/200  g  BB  tikus. Kelompok  III  (kontrol  positif)  yaitu kelompok  yang  diberi  suspensi  INH- rifampisin  serta  obat  antihepatotoksik methicol®.  Kelompok  IV  kelompok diberi  formula  kapsul  1,  Kelompok  V diberi  formula  kapsul  2.  Kelompok  VI diberi  formula  kapsul  3.  Sebelum perlakuan  setiap    tikus  diambil darahnya  untuk  diukur  kadar  bilirubin serum, nilai ALT dan AST ini dilakukan pada hari ke 0 (sebelum perlakuan).
Parameter  kerusakan  hati  diamati dengan  cara  mengukur  kadar  serum bilirubin, nilai ALT dan AST.
Pengamatan  juga  dilakukan  secara histologi  dengan  metode histological- microscopic  photograph menggunakan pengecatan  hematoxylin-eosin.  Setiap kelompok diberi perlakuan yang sama
sesuai
dengan pembagian kelompoknya  setiap  hari  selama  28 hari,  kemudian  pada  hari  ke-14,  hari ke-21, dan hari ke-28 diambil darahnya untuk  diukur  kadar  bilirubin  serum, kadar ALT dan AST

## Metode Analisa
Data  yang  diperoleh  dievaluasi secara  statistik  menggunakan  anova satu  jalan  untuk  persentase  nekrosis hati  dan  anova  dua  jalan  untuk  ALT, AST  dan  bilirubin  serum,  dengan  taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengujian  Kapsul  terhadap  Hepar Tikus
Tabel  2 menunjukkan  bahwa persentase  nekrosis  tertinggi  dimiliki oleh  kelompok  K2  (kontrol  negatif) yang  hanya  diberi  isoniazid  dan rifampisin,  sedangkan  kelompok  yang memiliki  persentase  nekrosis  yang paling  rendah  adalah  kelompok  K1 (kontrol  normal).  Kelompok  perlakuan yang  diberi  kapsul  ekstrak  kombinasi buah  mengkudu  dan  daun  pepaya memiliki  persentase  nekrosis  sel  hati yang   lebih  kecil  dibandingkan  dengan kelompok K2 (kontrol negatif). Kelompok P1 (kapsul PVP 1%) memberikan  hasil  prosentase  nekrosis lebih kecil dibandingkan dengan kelompok  P2  (kapsul  PVP  3%)  dan kelompok  P3  (kapsul  PVP  5%). Kelompok  K3 (kontrol  positif) ternyata memiliki  persentase  nekrosis  yang lebih tinggi dari kelompok P1.
Penelitian ini  menunjukkan  bahwa ternyata kapsul kombinasi ekstrak buah mengkudu  dan  daun  pepaya  dengan formula  bahan  pengikat  PVP  1%  lebih baik dibandingkan dengan kapsul buah mengkudu  dan  daun  pepaya  dengan konsentrasi  PVP  3%  dan  5%. Kapsul dengan konsentrasi PVP 1%
menunjukkan  prosentase  hasil  yang lebih  baik  dari  Methicol®  dalam melindungi  organ  hati  dan  mencegah terjadinya  nekrosis  sel.  Peningkatan jumlah  konsentrasi  bahan  pengikat
dalam kapsul ini diperkirakan mempunyai pengaruh terhadap kemampuan  pelepasan  zat  aktif  yang terdapat  di  dalam  kapsul,  sehingga konsentrasi  zat  terdapat  di  dalam serum berkurang dan ini juga berpengaruh pada aktivitasnya sebagai hepatoprotektor. Semakin tinggi konsentrasi bahan pengikat, penurunan kemampuan hepatoprotektor dengan parameter nekrosis hati juga semakin menurun.
Tabel 2. Persentase nekrosis sel hati
Kode Perlakuan Total Inti Total Inti piknotik Rata-rata Persentase (%±SD) K1 Tanpa perlakuan INH-rifampisin (kontrol normal) 1012 184 18,69 ±5,97 K2 INH-rifampisin (kontrol negatif) 966 413 40,95 ±8,76 K3 INH-rifampisin dan Methicol® (kontrol positif) 1015 200 19,89±5,25 P1 INH-rifampisin dan kapsul* PVP 1% 1014 190 18,75±4,84 P2 INH-rifampisin dan kapsul* PVP 3% 992 203 20,60±2,34 P3 INH-rifampisin dan kapsul* PVP 5% 1009 269 26,66 ±2,07
Keterangan :
* kapsul mengandung bahan aktif kombinasi buah mengkudu dan daun pepaya
Kadar Rata-rata Bilirubin Serum Berdasarkan hasil statistik dengan uji ANOVA Tukey dan Bonferroni,
diperoleh  hasil  bahwa  kadar  bilirubin serum  pada  hari  ke-0  dan  hari  ke-14 tidak mempunyai perbedaan yang nyata. Kadar  bilirubin  serum  antara  hari  ke-21 dan  hari  ke-28  juga  tidak  mempunyai perbedaan yang nyata.
Berdasarkan  Gambar  1,  formula kapsul  kombinasi  buah  mengkudu  dan daun  pepaya  yang  paling  efektif  dalam menurunkan  kadar  bilirubin  serum adalah  formula  kapsul  dengan  bahan pengikat  PVP  1%, hal  ini  disebabkan oleh zat  aktif  yang  lebih  mudah  lepas atau melarut dalam tubuh sehingga lebih cepat menghasilkan efek.
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 Hari ke-0 Hari ke-14 Hari ke-21 Hari ke-28 0,32 0,12 0,12 0,14 0,28 0,44 1,04 1,12 0,26 0,22 0,2 0,1 0,18 0,2 0,18 0,26 0,22 0,32 0,28 0,24 0,34 0,22 0,52 0,34 Kadar bilirubin serum K1 K2 K3 P1 P2 P3
Keterangan :
K1 : tanpa perlakuan (kontrol normal) K2 : perlakuan INH-rifampisin (kontrol negatif)
K3 : perlakuan INH-rifampisin dan Methicol® (kontrol positif) P1 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 1% P2 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 3% P3 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 5% Gambar 1.  Kadar  bilirubin  serum  perlakuan  kapsul  buah  mengkudu-daun  pepaya  dengan  variasi  bahan pengikat PVP

## Kadar Enzim ALT dan AST
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa formula FI kapsul kombinasi buah mengkudu  dan  daun  pepaya  dengan bahan  pengikat  PVP  1%  mampu menurunkan  kadar  enzim  ALT  dan  AST yang  paling  baik  dibandingkan  formula dengan bahan pengikat PVP 3% dan 5%.
0 20 40 60 80 100 120 140 160 Hari ke-0 Hari ke-14 Hari ke-21 Hari ke-28 33,5 99,82 90,38 115,54 33,62 95,34 136,84 133,24 38,36 115,52 101,22 94,38 32,88 114,46 98,76 126,7 99,3 103,64 103,38 87,62 111,84 153,28 108,88 139,58 Kadar Enzim ALT K1 K2 K3 P1
P2
P3
Keterangan :
K1 : tanpa perlakuan (kontrol normal) K2 : perlakuan INH-rifampisin (kontrol negatif)
K3 : perlakuan INH-rifampisin dan Methicol® (kontrol positif) P1 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 1% P2 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 3% P3 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 5% Gambar 2.  Kadar bilirubin  serum  perlakuan  kapsul  buah  mengkudu-daun  pepaya  dengan  variasi  bahan pengikat PVP
Keterangan : K1 : tanpa perlakuan (kontrol normal) K2 : perlakuan INH-rifampisin (kontrol negatif) K3 : perlakuan INH-rifampisin dan Methicol® (kontrol positif) P1 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 1% P2 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 3% P3 : perlakuan  INH-rifampisin dan kapsul buah mengkudu-daun pepaya dengan pengikat PVP 5% Gambar 3.  Kadar  bilirubin  serum  perlakuan  kapsul  buah  mengkudu-daun  pepaya  dengan  variasi  bahan pengikat PVP

## KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  diperoleh  dari penelitian  ini  bahwa  kombinasi  ekstrak buah  mengkudu dan  daun  pepaya formula  1  dengan  bahan  pengikat  PVP 1%    memberikan  penurunan  kadar  ALT, AST,  bilirubin,  dan  persen  nekrosis  dari hati  tikus  putih  yang  diinduksi  isoniazid dan rifampisin yang lebih baik dibandingkan  formula  2  (PVP  3%)  dan formula 3 (PVP 5%).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kami sampaikan kepada  Koordinasi  Perguruan  Tinggi Swasta Wilayah VI, Kementerian Pendidikan  Nasional,  atas  pendanaan yang  diberikan  kepada  penelitian  kami sesuai dengan surat perjanjian Pelaksanaan  Hibah  Penelitian  No  : 204534/A.A3/KU/2013, tanggal 11
Desember 2013.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhvaryu  MR, Reddy N,  Parabia  MH.  2007. Effects of four Indian medicinal herbs on Isoniazid-, Rifampicin- and Pyrazinamide-induced  hepatic  injury and immunosuppression in guinea pigs.
World    J  Gastroenterol.  13(23):  3199- 3205.
Ansel  HC.  1989. Pengantar  Bentuk  Sediaan Farmasi.  Edisi  IV.  Farida  Ibrahim,
Penerjemah; Jakarta: Universitas Indonesia  Press.  217-218. Terjemahan dari: Introduction  to  Pharmaceutical Dosage Forms.
Arsyad  Z.  1996.  Evaluasi  faal  hati  pada penderita tuberkulosis paru yang mendapat  terapi  obat  anti  tuberkulosis. Cermin Dunia Kedokteran 110: 15-18.
Anonim.  1995. Farmakope  Indonesia.  Edisi IV.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Hariana  HA.  2008. Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya. Seri  2.  Jakarta:  Penerbit Penebar Swadaya.
Hembing  W.        2008. Ramuan  Lengkap Herbal    Taklukkan    Penyakit. Jakarta: Pustaka  Bunda.
Hermawan  SD.  2009.  Efek  ekstrak  buah mengkudu ( Morinda citrifolia L) terhadap  kadar  enzim  SGOT  dan  SGPT pada  mencit  dengan  induksi  karbon tetraklorida  [Skripsi].  Surakarta:  Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
Katzung  BG.  2004. Farmakologi  Dasar  dan
Klinik. Buku  3  Edisi  8.  Bagian
Farmakologi    Fakultas    Kedokteran Universitas    Airlangga,  Penerjemah; Jakarta:  Salemba  Medika.    Terjemahan dari: Basic and Clinical Pharmacology.
Maslachah  L,  Wibowo  WA,  Bijanti  R.  2008. The  effect  SGOT  and  SGPT  level  of white  rat  ( Rattus  norvegicus)  that  was given  juice  of  noni  ( Morinda  citrifolia) and  high  fatty  diet. Media  Veterinaria
Medika. 1 (1) Pub 2008-2 : 59-62.
Voigt  R.  1995. Buku  Pelajaran  Teknologi Farmasi.  Edisi  V.  Soendani  Noerono,
penerjemah.  Yogyakarta:  Gajah  Mada
University  Press.  Terjemahan  dari:
Lehrbuch der Pharmazeutischen Tecnologie. 155-566.