Vol. 12 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291
Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/

## AKTIVITAS ANTIJAMUR KRIM EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper betle L. var Rubrum ) PADA KELINCI BETINA YANG DIINFEKSI
Candida albicans ATCC
® 10231
ANTIFUNGAL ACTIVITY OF Piper betle L. var RubrumLEAVESETHANOL EXTRACT CREAM ON FEMALE RABBITINFECTED  Candida albicansATCC® 10231
Dwi Ningsih 1 , Aneng Ardiya Sukmawanti 1 , Gunawan Pamudji Widodo 1
1 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi
_____________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Tanaman sirih merah ( Piper betle L. var Rubrum) merupakan salah satu tanaman yang secara turun temurun digunakan sebagai antijamur. Flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, dan minyak atsiri yang terkandung di dalamnya diduga mempunyai aktivitas antijamur. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  aktivitas  antijamur  krim  ekstrak etanol 96%  daun  sirih  merah  terhadap Candida albicans ATCC ® 10231 pada kelinci betina. Uji efek  antijamur Candida  albicans ATCC ® 10231 dilakukan  dengan  menginfeksi  vagina kelinci New  Zealand  White dengan  jamur Candida  albicans ATCC ® 10231.Empat  puluh  delapan jam setelah infeksi, vagina diolesi krim ekstrak etanol 96% daun sirih merah konsentrasi 2,5%, 5%, 10%, dan ketokonazol 2% sebagai kontrol positif. Gejala klinis yang timbul pada vagina kelinci selama  penyembuhan diamati dan jumlah  koloni  jamur  dari  vagina  kelinci dihitung. Data  yang diperoleh  dianalisa  dengan  metode  analisis  varian  satu  jalan  dengan  taraf  kepercayaan  95%  dan dilanjutkan dengan uji SNK.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa krim ekstrak etanol 96% daun sirih merah konsentrasi 2,5%,  5%,  dan  10% mempunyai efek antijamur.  Krim  dengan  konsentrasi  10%  paling  efektif sebagai antijamur.
Kata kunci : antijamur, Piper betle L. var Rubrum, Candida albicans, ekstrak etanol 96%
_____________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Piper betle L. var Rubrumbe one of herbal that have historically been used as an antifungal. Flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tannin,  and  essential  oils that consisting  in it was  expectedhave antifungal  activity.  Thestudy aimto determine  theantifungal activity of Piper  betle l.  var Rubrumleaves ethanol extract creamon female rabbit infected Candida albicans ATCC ® 10231. The antifungal experiment of Piper  betle L. var Rubrumdone  by  infecting  vagina  New Zealand  White  rabbits  with Candida  albicans ATCC ® 10231. Forty-eight  hours  after  infection, vaginal smeared with 96% ethanol extract of Piper betel leaf concentration of 2.5%, 5%, 10%, and ketoconazole  2%  as  a  positive  control.  Clinical  symptoms  that  arise  in  the  rabbit  vagina  during healing  were  observed and  the  number  of  fungal  colonies  of  rabbit  vagina  calculated.The  data obtained were analyzed with Anova methods with significant level of 95%, followed by SNK test.
The results showed that 96% ethanol extract cream Piper betel leaf concentration of 2.5%, 5%, and 10% have antifungal effect. Cream with a 10% concentration was the most effective as an antifungal.
Keyword : antifungal, Piper betle L. var Rubrum, Candida albicans , ethanol extract
_____________________________________________________________________________________________________________________________
Aktivitas Antijamur Krim Ekstrak  Etanol Daun Sirih Merah ~ 138

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  jamur  kulit cukup banyak ditemukan di Indonesia yang  merupakan  negara beriklim tropis. Salah  satu penyebab  infeksi jamur adalah Candida  sp. , disebut kandidiasis,  dapat bersifat  akut maupun subakut. Penyakit kandidiasis banyak  dihubungkan  dengan  aneka faktor,  seperti  keadaan  kulit  yang lembab,pemakaian obat-obat antibiotika,  steroid  dan  sitostatika, perubahan  fisiologis  tubuh  pada kehamilan, penyakit-penyakit menahun  dan  kelemahan  umum, gangguan endokrin, dan obesitas serta keadaan malnutrisi (Harahap, 2000).
Penyebab terbanyak kandidiasis adalah spesies Candida albicans yang dapat  diisolasi  dari  kulit,  mulut, mukosa,  vagina  atau  feses  orang normal. Candida  albicans dapat menginfeksi kulit, kuku, vagina, paru- paru,  dan  rongga  mulut.  Penyakit  ini dapat ditemukan di seluruh dunia dan dapat  menyerang  semua  umur,  baik laki-laki maupun perempuan (Kuswidji, 1983).  Kandidiasis  vagina atau vaginitis oleh Candida merupakan  kelainan  pada  vulva dengan  gambaran  klinis  antara  lain adanya hiperemi pada introitus vagina dan  dinding  vagina,  pada  stadium lanjut  labia  minora  membengkak, adanya  sekret  vagina  encer dan menjadi kental, sekret vaginaberwarna  kuning  hingga  hijau, keluhan utama rasa gatal pada malam hari (Soeprihatin, 1982).
Sirih  merah merupakan  salah satu  jenis  tanaman  yang  secara empiris berkhasiat mengurangi sekresi
pada  liang  vagina  atau  keputihan akut.  Kandungan  kimia  daun  sirih merah  adalah  flavonoid,  alkaloid, saponin, tanin, dan minyak atsiri(Sudewo, 2005). Sediaan topikalmerupakan sediaan yang sering digunakan untuk pengobatan kandidiasis. Bentuk sediaan  krim  lebih  disukai  karena lebih mudah menyebar rata pada kulit dan  lebih  mudah  dibersihkan dengan air.
Pada  penelitian ini  akan  dikaji tentang efek  antijamur  sediaan  krim ekstrak  daun  sirih  merah terhadap Candida albicans . Hasil dari penelitian  ini  diharapkan  dapat memberikan  data  ilmiah  tentang antijamur  sediaan  krim  daun  sirih merah terutama untuk infeksi Candida albicans,
sebagai pendekatan terhadap  pemakaian  obat  tradisional agar  dapat  dikembangkan menjadi fitofarmaka.

## METODE PENELITIAN
A. Bahan dan Alat
1. Bahan
Daun  sirih  merah diambil  dari daerah  Kampung  Baru,  Surakarta, Jawa Tengah,penyari etanol 96%,bahan  basis  krim  yang terdiri dari asam  stearat,  cera  alba,  vaselin album,  TEA,  propilenglikol  diperoleh dari  Brataco, Surakarta,jamur  uji Candida  albicans dan  medium  SGA ( Sabaroud  Glukose  Agar ) diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas  Farmasi  Universitas  Setia Budi. Hewan  uji  kelinci  betina  putih (New  Zealand  White)  berumur  ±  4
bulan,  bobot  badan  1,5-2,0  kg diambil  dari  UPT  kelinci  Balai Kambang, Surakarta, Dinas Peternakan Propinsi Jawa Tengah. 2. Alat Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah Coloni  Counter , cawan  petri,  jarum  Ose,kapas lidi steril,  tabung,  pinset,  lampu  spiritus dan  rak  tabung, beaker glass,  kasa steril, mortir, stamper, pot dan oven.
B. Jalannya Penelitian Pembuatan  ekstrak  maserasi  serbuk daun sirih merah
Serbuk  daun  sirih  merah ditimbang  sebanyak  200  gram, dimasukan  ke  dalam  botol  coklat, kemudian ditambahkan pelarut etanol 96 % sampai semua serbuk terendam. Selama 5 hari botol dikocok sebanyak 3 kali sehari dengan lama pengocokan 30 menit (Anief 1987). Identifikasi  kandungan  kimia  ekstrak etanol daun sirih merah Identifikasi  kandungan  kimia dalam  ekstrak  dilakukan  terhadap golongan senyawa flavonoid, alkaloid,  saponin,  tanin,  dan  minyak atsiri menggunakan pereaksi warna.
Pembuatan krim
Ekstrak  etanol  96% daun  sirih merah diformulasi dalam sediaan krim menggunakan basis  vanishing  krim dengan  3  variasi  konsentrasi sebesar 2,5%, 5%, dan 10%.
Pengujian Mutu Fisik krim Uji stabilitas krim.
Sediaan krim ekstrak etanol96% daun  sirih  merah  diuji  stabilitasnya dengan  memperhatikan  warna,  bau
dan konsistensi  selama 4  minggu penyimpanan.
Uji homogenitas krim.
Sediaan krim ekstrak etanol96% daun sirih merah diuji homogenitasnya dengan mengoleskan krim pada kaca obyek, diamati secara mikroskopis perubahan ukuran diameter globul minyak.
Uji tipe krim.
Penentuan  jenis  krim dengan beberapa  uji yaitu  metode  warna, metode  pengenceran,  percobaan pencucian, percobaan cincin.
Metode warna.
Diambil  beberapa  tetes  larutan bahan  pewarna  dalam  air  (metilen biru) dicampurkan ke dalam sampel, jika  seluruh  krim  berwarna  seragam, maka  terdapat  suatu  krim  dari  jenis M/A.  Uji  tipe  A/M  dengan bahan pewarna larut  lipid yaitu  dengan larutan Sudan III dalam minyak.
Metode pengenceran.
Sedikit  air  diberikan  ke  dalam sebuah  botol  krim  dan  setelah pengocokan atau pengadukan diperoleh kembali suatu krim
homogen, maka terdapat jenis M/A.
Percobaan pencucian.
Hanya  krim  M/A  dapat dengan mudah  dicuci  air  dari  tangan  atau barang. Penghilangan suatu krim A/M dengan air sulit dilakukan.
Percobaan cincin.
Satu  tetes  krim  yang  diuji diberikan  pada  kertas  saring,  maka krim  M/A  setelah  waktu  singkat menunjukkan  sebuah cincin  air disekeliling tetesan.
Aktivitas Antijamur Krim Ekstrak  Etanol Daun Sirih Merah ~ 140 Identifikasi Candida  albicans ATCC 10231 Identifikasi Candida  albicans ATCC  10231  dari  biakan  murni ditanam  pada  media  SGA  yang diinkubasi pada suhu 37°C selama 48 jam  akan  terbentuk  koloni  lunak berwarna krem, yang mempunyai bau seperti ragi. Biakan muda membentuk tabung  bening  bila  diinokulasikan dalam serum selama 3 jam pada 37°C (Jawetz at al ., 2007).
Uji efek antikandidiasis Suspensi Candidaalbicans diinfeksikan  dengan  cara  dioleskan pada  vagina  kelinci.  Pengamatan munculnya  infeksi  pada  vagina dilakukan setelah  24  jam  dengan mengamati  munculnya  gejala-gejala klinis hiperemi seperti vagina memerah,  membengkak,  keluarnya sekret  dari  vagina  serta  dipertegas dengan  menggoreskan  sekret  dari vagina  kelinci  pada  media  SGA  lalu diinkubasi  kemudian  diamati  koloni jamur yang tumbuh.
Pemberian perlakuan dilakukan setelah 48 jam dengan cara dioleskan 2 kali sehari pada vagina kelinci yang telah  terinfeksi  terbagi  dalam  5 kelompok  yaitu  :Kelompok I-III krim ekstrak etanol96%  daun  sirih  merah (konsentrasi  2,5  %, 5  %, 10  %),
Kelompok IV (kontrol pembanding Ketokonazol  2  %),Kelompok V (kontrol negatif). Pengamatan hasil uji efek antikandidiasis Pengamatan makroskopis Pengamatan makroskopis dilakukan  dengan  cara  mengamati
gejala-gejala klinis yang muncul pada vagina  kelinci  yang  terinfeksi  jamur Candida  albicans seperti  adanya vagina  memerah,  bengkak,  luka-luka kecil  dan  cairan  atau  sekret  kental pada vagina kelinci selama pemberian pengobatan  dengan  krim  ekstrak etanol96% daun sirih merah.
Pengamatan secara mikroskopis .
Perhitungan jumlah koloni.
Pengamatan  secara  mikroskopis dilakukan  dengan  cara  menghitung jumlah pertumbuhan jamur menggunakan Coloni  Counter agar mengetahui jumlah koloni jamur pada vagina  kelinci  setelah  pengobatan dengan  pemberian  krim  ekstrak etanol96%  daun  sirih  merah,  dengan krim  Ketokonazol  2  %  dan  tanpa perlakuan.
Cara  kerja  untuk  menghitung angka  koloni  jamur Candida  albicans adalah  menyiapkan  4  buah  tabung yang  telah  diisi  dengan  9  ml  NaCl fisiologis, untuk membuat
pengenceran  sampel  dari  10 -1 -10 -4 , pada tabung yang pertama ditambahkan  sampel  jamur Candida albicans yang  diambil  dari  vagina kelinci  menggunakan kapas lidi  steril yang akan diperiksa sehingga didapatkan  pengenceran  10 -1 ,  dari tabung  yang  pertama  diambil  1  ml dimasukkan  pada  tabung  yang  kedua sampai mendapatkan pengenceran 10 - 2 ,  demikian  seterusnya  sampai mendapatkan  pengenceran  10 -4 ,  dari masing-masing  tabung  pengenceran diambil  1  ml  dan  dimasukkan  pada tiap- tiap  cawan  petri  steril  secara aseptis.  Kemudian  pada  tiap-tiap cawan  petri  ditambah  media  SGA
yang  sudah  dicairkan  (suhu  45– 50°C), digoyang-goyang agar suspensi tersebar  merata,  lalu  dibiarkan memadat.  Setelah  memadat masing- masing  cawan  petri  diinkubasi  secara terbalik  pada  suhu  kamar  selama  24 jam,  kemudian  menghitung  jumlah koloni  menggunakan  alat Coloni Counter .
Sterilitas  larutan  pengencer  dan media  diketahui  dengan  melakukan uji  blanko,  yaitu  ke  dalam  petri dituangkan  1  ml  larutan  pengencer ditambahkan  media  SGA  ±20  ml, dibiarkan memadat kemudian diinkubasi selama 24 jam lalu diamati (Fardiaz, 1989). Pengamatan kesembuhan Pengamatan kesembuhan infeksi  jamur Candida  albicans dilakukan  dengan  menentukan  lama waktu penyembuhan kandidiasis pada vagina  kelinci  menggunakan  krim ekstrak  etanol96%  daun  sirih  merah dan  menghitung  jumlah  penurunan jamur Candida  albicans
setelah pemberian  krim  ekstrak  etanol96% daun sirih merah.
Pengamatan pertumbuhan jamur pada kelinci yang telah sembuh
Pengamatan  mikroskopis  ini dilakukan  untuk  menyatakan  bahwa kelinci benar-benar telah sembuh dari kandidiasis.  Pengamatan  dilakukan dengan  cara  sekret  vagina  kelinci yang  telah  sembuh  diambil  dengan
lidi  kapas  steril  kemudian  digoreskan pada medium  SGA  lalu  diinkubasi selama  24  jam,  apabila  setelah diinkubasi  pada  medium  SGA  tidak ditumbuhi jamur, berarti krim ekstrak etanoldaun sirih merah efektif.
HASIL PENELITIAN DAN

## PEMBAHASAN
Hasil  pembuatan  ekstrak  daun  sirih merah
Hasil  prosentase  bobot  kering terhadap  bobot  basah  daun  sirih merah  dari  bobot  basah  sebanyak 1000  gram  didapatkan  bobot  kering 131,202 dengan rendemen  sebesar 13,12%,  dengan  rata-rata  kadar  air serbuk sebesar 8,90%.
Identifikasi  kandungan  kimia  ekstrak etanol 96% Berdasarkan hasil  identifikasi kimia,  terbukti  bahwa  ekstrak etanol 96%  daun  sirih  merah mengandung flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tanin dan minyak atsiri.
Hasil  pengujian  krim  ekstrak etanol daun sirih merah Hasil uji stabilitas krim ekstrak etanol daun sirih merah.
Tabel  5  menunjukkan  bahwa  krim ekstrak  etanol  96%  daun  sirih  merah dengan konsentrasi  2,5%,  5%,  10% setelah  penyimpanan  selama  4 minggu  dan  dilakukan  pengamatan setiap minggu tidak terjadi perubahan warna dan bau, yang berarti tidak ada perubahan fisik selama penyimpanan. Tabel 2.  Hasil pembuatan ekstrak etanol 96% daun sirih merah No. Bobot serbuk (g) Bobot ekstrak (g) Rendemen (% b/b) 1. 50,00 6,096 12,192 2. 50,00 6,080 12,160 Rata-rata 12, 171
Aktivitas Antijamur Krim Ekstrak  Etanol Daun Sirih Merah ~ 142
Tabel 5. Hasil uji stabilitas krim ekstrak etanol daun sirih merah Konsentrasi Pengamatan krim (minggu) 0 1 2 3 4 2,5% Bau K K K K K Warna HM HM HM HM HM Konsistens i T T T T T 5% Bau K K K K K Warna H H H H H Konsistens i T T T T T 10% Bau K K K K K Warna HT HT HT HT HT Konsistens i T T T T T Keterangan : K : Khas H : Hijau HM : Hijau Muda HT : Hijau Tua T : Tetap Hasil uji homogenitas krim Hasil uji homogenitas menunjukkan  bahwa  krim  ekstrak etanol 96%  daun  sirih  merah menunjukkan  ukuran  globul  minyak yang stabil.

## Hasil uji tipe krim
Tabel 7 menunjukkan bahwa krim ekstrak  etanol  daun  sirih  merah mempunyai tipe M/A.
Tabel 7. Hasil uji tipe krim ekstrak etanol daun sirih merah
Metode Test Hasil Uji Krim ekstrak etanol daun sirih merah dengan basis M/A Pustaka (Voigt, 1994) 1. Warna + metilen biru Berwarna biru homogen Berwarna biru homogen + larutan  sudan III Berwarna merah tidak homogen Berwarna merah tidak homogen 2. Pengenceran + sedikit air (aduk) Diperoleh krim yang homogen Diperoleh krim yang homogen 3. Pencucian Krim dioleskan ditangan lalu dicuci dengan air Mudah dicuci dengan air Mudah dicuci dengan air 4. Percobaan cincin Satu tetes krim ditempatkan pada kertas saring terbentuk cincin air disekeliling tetesan terbentuk cincin  air disekeliling tetesan
Hasil identifikasi Candida albicans Candida  albicans dari  biakan murni ditanam pada medium sabouraund  diinkubasi  pada  suhu kamar  selama  24  jam,  terbentuk koloni-koloni  lunak  berwarna  krem yang  mempunyai  bau  seperti  ragi. Koloni  diletakkan  dalam  serum selama 3 jam pada suhu 37˚C, biakan membentuk  tabung-tabung  benih ( Germ Tube ). Hasil pengamatan gejala klinis yang  muncul  pada  vagina  kelinci selama  penyembuhan  dapat  dilihat pada tabel 8.
Efek  penyembuhan  dapat dilihat  dari  cepat  sembuhnya  infeksi karena  jamur Candida  albicans yang dapat  diamati  dengan  berkurangnya gejala  klinis  hiperemi  seperti  vagina memerah, vagina membengkak, nanah  atau  sekret  pada  vagina,  dan kesembuhan  total  dari  kandidiasis vaginal  pada  kelinci  betina  dalam ukuran  hari  dan  perhitungan  jumlah koloni  jamur dengan  dibandingkan pada  kontrol  positif  dan  kontrol negatif.
Tabel 8. Hasil  pengamatan  gejala  klinis  dan  perkembangan  infeksi Candida albicans pada vagina kelinci Sampel Replikasi Pengamatan gejala klinis infeksi Candida albicans setelah pengobatan pada hari ke : 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Konsentrasi 2,5% 1 a abc abc abc d de def def def s s 2 a abc abc abc d de de def def s s 3 a abc abc d de de def def def s s Konsentrasi 5% 1 a abc abc de def def def s s s s 2 a abc abc de def def def s s s s 3 a abc abc de def def s s s s s Konsentrasi 10% 1 a abc d de def s s s s s s 2 a abc d de def def s s s s s 3 a abc d def def s s s s s s Kontrol Positif 1 a abc d de def def s s s s s 2 a abc d def def s s s s s s 3 a abc d de def s s s s s s Kontrol Negatif 1 a abc abc abc d d de de def def def 2 a abc abc abc d d de de def def s 3 a abc abc abc d d de de def def s Keterangan a : Vagina merah dan membengkak d : Berkurangnya hiperemi b : Bercak-bercak putih pada vagina e  : Luka pada vagina mengering c : Sekret vagina encer sampai kental f : Berkurangnya sekret pada vagina s  : Sembuh
Aktivitas Antijamur Krim Ekstrak  Etanol Daun Sirih Merah ~ 144
Pengujian antikandidiasis krim ekstrak etanol 96% daun sirih merah Hasilpengamatan secara makroskopis
Gambar.3 . a. Luka dan adanya nanah pada vagina kelinci setelah infeksi, b. Sekret kental dan berwarna kuning pada vagina kelinci, c dan d. Vagina kelinci setelah diberikan perlakuan
Hasil pengamatan secara mikroskopis Hasil pengamatan perhitungan jumlah koloni jamur Candida albicans Hasil analisa  statistik  terhadap data  koloni  pada  perlakuan  hari  ke-4 menunjukkan bahwa terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  perlakuan  dengan  kontrol negatif,  hal  ini  membuktikan  bahwa krim  ekstrak  etanol  daun  sirih  merah mempunyai  daya  sembuh  terhadap kandidiasis. Tidak terdapat perbedaan yang  signifikan pada  jumlah  koloni candida  sp antara  ketokonazol  2% dengan krim ekstrak etanol 96% daun sirih  merah  dengan  konsentrasi  10% pada  perlakuan  hari  ke  4,  6  dan  8. Hari  ke-10 perlakuan menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada jumlah  koloni antara ketokonazol  2%  dengan krim  ekstrak
etanol 96% daun sirih merah dengan konsentrasi 2.5%, 5%, dan 10% . Hasil pengamatan goresan dari vagina kelinci yang telah sembuh
Pengamatan secara mikroskopi dilakukan  lagi  pada  vagina  kelinci yang  sudah  sembuh.  Sekret  dari vagina  kelinci  yang  telah  dinyatakan sembuh  atau  tidak  menunjukkan  lagi gejala-gejala klinis pada vagina kelinci diambil  menggunakan    kapas lidi steril  lalu  digoreskan  pada  medium SGA  kemudian  diinkubasi  selama  24 jam.  Hasil  inokulasi  dari  vagina kelinci  yang  sudah  sembuh pada medium SGA memberikan hasil tidak adanya  jamur Candida  albicans yang tumbuh pada medium SGA.
Gambar 15 berikut menunjukkan  perbedaan  pengamatan hasil inokulasi goresan dari sekret
a b c d
Tabel 9.Data pengamatan perhitungan jumlah koloni C andida albicans Sampel Jumlah rata-rata koloni Candida albicans (10 - 4 koloni/ml) setelah perlakuan pada hari ke- 2 4 6 8 10 Krim Ketokonazol 2% 333 173 29 3 0 Kontrol (-) 340 240 124 32 15 Krim Ekst. Etanol sirih merah Konsentrasi 2,5% 339 201 68 25 2 Krim Ekst. Etanol sirih merah Konsentrasi 5% 334 177 61 11 0 Krim Ekst. Etanol sirih merah Konsentrasi 10% 332 173 30 3 0
Gambar 1. Grafik jumlah koloni C. albican
vagina kelinci. Gambar B menunjukkan  adanya  pertumbuhan jamur Candida albicans pada medium SGA  yang  merupakan  hasil  inokulasi dari  sekret  vagina  kelinci  yang  masih terinfeksi oleh jamur Candida albicans ,  sedangkan  pada  gambar  A pada medium menunjukkan tidak ada lagi  koloni  jamur Candida  albicans yang  tumbuh  hasil  ini  menunjukkan bahwa  vagina  kelinci  telah  sembuh dari infeksi.
Analisis Waktu Sembuh. Pengamatan yang telah dilakukan  secara  makroskopis  dan mikroskopis  didapatkan  bahwa  lama pengobatan  dengan  krim  ekstrak etanol 96%  daun  sirih  merah konsentrasi  10%  menyembuhkan kandidiasis  dalam  7  hari,  konsentrasi 5%  menyembuhkan  dalam  9  hari, konsentrasi  2,5%
menyembuhkan dalam 11hari, kontrol positif negatif sembuh  dalam  12  hari, ketokonazol 2% dalam 7 hari, sama dengan waktu pengobatan menggunakan konsentrasi 10%.
0 50 100 150 200 250 300 350 400 2 4 6 8 10 Hari Ju m la h k o lo n i kontrol positif kontrol negatif konsentrasi 2,5% konsentrasi 5% konsentrasi 10%
Aktivitas Antijamur Krim Ekstrak  Etanol Daun Sirih Merah ~ 146

## Gambar 2. Hasil inokulasi  goresan  dari sekret vagina
Keterangan a : Hasil inokulasi goresan dari sekret vagina yang telahsembuh. b: Hasil inokulasi goresan dari sekret yang terinfeksi oleh Candida albicans .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian dapat disimpulkan:
Pertama,  krim  ekstrak etanol 96%  daun  sirih  merah memiliki aktivitas antijamur pada vagina kelinci betina yang diinfeksi Candida albicans . Kedua, krim ekstrak etanol 96% daun  sirih  merah  dengan  konsentrasi 10% efektif menyembuhkan punggung  kelinci  yang  diinfeksi
Candida albicans.

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel.  H.C..  1989. Pengantar  Bentuk Sediaan Farmasi , Diterjemahkan oleh  Ibrahim.  F..  Edisi  IV.  UI Press.  Jakarta.  hal  605.  607 - 608. [Departemen Kesehatan]. 1979.
Farmakope  Indonesia. Edisi  III . Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta. [Departemen Kesehatan]. 1989. Materia  Medika  Indonesia .  Jilid V. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta. [Departemen Kesehatan]. 1995. Farmakope  Indonesia. Edisi  IV. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.  Jakarta.  hal 6. Budimulya. U.. Sunoto dan Tjokronegoro. A.. 1983 . Penyakit Jamur Klinis , Epidemologi.  Diagnosis  dan Terapi.  Fakultas  Kedokteran
Universitas  Indonesia.  Jakarta. hal 9-12. 41. 42.
Fardiaz.  S..  1992. Mikrobiologi Pangan  ., Jakarta.PT.  Gramedia
Pustaka Utama. hal 150-158. Jawetz.  E..  Melnick.  J.L..  and Adelberg.  E.A..  2007. Medical Microbiology . 23 th Ed. diterjemahkan oleh Retna Neary Elferia.  Jakarta.  hal  635 – 658, 665 – 667.
Arsh.  R.  W..  1997 .  Systemic Fungisides .  Second  Edition. Lomgman.  London.  hal  131- 133.
Pradhan  D,  Suri  KA,  Pradhan  DK, Biswasroy  P.,  2013,  Golden Heart of the Nature: Piper betle L, Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry ; 1(6). Puspitasari, D., Apriasari, M.L., 2012,
Antifungal  test  of  Piper  betle linn leaf    35%on Candida
a b
albican, Jurnal PDGI 61 (2) Hal.
53-56
Sirait.  M..  2007. Penuntun  Fitokimia dalam  Farmasi .  ITB  Press. Bandung. hal 56 – 65, 72. Siregar..  1995. Penyakit  Jamur  Kulit.
FK UNSRI. EGC. Jakarta. hal 28- 29.
Sudarmadji. S.. Haryono. B.. Suhardi..
1997. Bahan  Makanan  dan
Pertanian .  Edisi  IV.  Liberty.
Yogyakarta. hal 99.
Sudewo.  B..  2005. Basmi  Penyakit dengan  Sirih  Merah .  Argo Media  Pustaka.  Jakarta.  hal  35, 40 – 45, 94. Trakranrungsiea N, Chatchawanchonteerab A, Khunkittic W., 2008, Ethnoveterinary study for antidermatophytic  activity  of Piper betle , Alpinia galanga and
Allium  ascalonicum  extracts in vitro . Research  in  Veterinary
Science ; 84(1):80-84.
Tripathi  S,  Verma  NK,  Singh  DP,
Chaudhary  SK.,  2011, Piper betle : Phytochemistry Traditional Use & Pharmacological  Activity – A Review. IJPRD ; 4(4):216-223.
Voigt.  R..  1994. Pelajaran  Teknologi Farmasi .  Diterjemahkan  oleh Soendarim  Noerono.  Edisi  V. Gadjah  Mada  University  Press. Yogyakarta. hal 561 – 563, 565 – 566.