Jurnal Biosains Pascasarjana Vol. 19 (2017) pp ©(2017) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
Potensi Ekstrak Etanol Bawang Dayak ( Eleutherine americana Merr.) sebagai Protektor Diameter Tubulus Seminiferus Mencit ( Mus musculus ) Balb/C yang di Induksi Timbal Asetat
Paramita Ratna Gayatri 1 , Sri Agus Sudjarwo 2 , Reny I’tishom 3
1 Magister Ilmu Kesehatan Reproduksi FK Universitas Airlangga Surabaya 2 Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya
3 Departemen Biologi Medik FK Universitas Airlangga Surabaya Email : paramitaratna11@gmail.com 1 , ags158@yahoo.com 2 , ritishom@fk.unair.ac.id 3

## Abstrak
Timbal  merupakan  salah  satu  bahan  pencemar  udara      yang  berpengaruh  pada kesehatan  organ  reproduksi  pria.  Polusi  udara  oleh  logam  berat  ini  menyebabkan terbentuknya Reactive Oxygen Species dan penurunan simpanan antioksidan tubuh. Penelitian    ini    bertujuan    mengetahui    potensi    ekstrak    etanol    bawang    dayak    untuk mempertahankan diameter tubulus seminiferus pada mencit yang diinduksi timbal asetat.
Jenis  penelitian  ini  adalah  eksperimental  murni  laboratorik  (true  experimental) dengan rancangan penelitian Posttest Only Control Group Design. Subyek penelitian adalah 30    mencit    (Mus    musculus)    jantan    strain    Balb/C    yang    diinduksi    timbal    asetat 0,75mg/KgBB/hari dan dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok kontrol negatif (K0),  kelompok  kontrol  positif  (K1),  dan  kelompok  perlakuan  dengan  pemberian  ekstrak bawang 30mg/KgBB/hari (K2), 60mg/KgBB/hari (K3), 120mg/KgBB/hari (K4). Pada hari ke 39, hewan coba dikorbankan untuk diukur diameter tubulus seminiferusnya.
Hasil  penelitian  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  bermakna  diameter  tubulus seminiferus   kelompok   kontrol   dan   perlakuan.  Kesimpulan   penelitian   ini   ekstrak   etanol bawang  dayak  tidak  mempengaruhi  diameter  tubulus  seminiferus  mencit  yang  di  induksi timbal asetat
Kata kunci : ekstrak etanol bawang dayak, diameter tubulus seminiferus , timbal asetat
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri

## 1.    PENDAHULUAN
Indonesia    merupakan    salah    satu    negara berkembang  yang  memiliki  tingkat  percepatan pertumbuhan  transportasi  yang  tinggi,  dampak negatifnya  yaitu  menyebabkan  tingginya  tingkat pencemaran  udara  (Widowati  dkk.,  2008).  Hasil penelitian  Lembaga  Penerbangan  dan  Antariksa Nasional  (LAPAN)  mengenai  pencemaran  udara di  perkotaan,  emisi  transportasi  terbukti  sebagai penyumbang  pencemaran  udara  tertinggi  di Indonesia,  yakni  sekitar  85%  (Gusnita,  2012). Pencemaran  udara  mengandung  berbagai  logam berat,  salah  satunya  timbal  yang  bersumber  dari pembakaran bahan bakar kendaraan bermotor dan emisi  industri  (Mardiani,  2008).  Pencemaran timbal  oleh  asap  kendaraan  bermotor,  30-40% yang  terabsorbsi  akan  masuk  ke  dalam  aliran darah lalu 95% timbal dalam darah tersebut di ikat oleh  eritrosit.  (Palar,  2008).  Ambang  batas  kadar timbal  dalam  darah  menurut  WHO  adalah  400 µg/dl (I’tishom dkk, 2011).
Timbal  adalah  bahan  yang  dapat  meracuni lingkungan dan mempunyai dampak pada seluruh sistem di dalam tubuh. Paparan timbal merupakan toksin lingkungan persisten yang dapat menyebabkan  gangguan  neurologi,  hematologi, gastrointestinal, reproduksi, sirkulasi, dan imunologi  (Patrick,  2006).  Timbunan  timbal  di dalam  sel  darah  merah  dan  di  jaringan  lunak  di duga  paling  bertanggungjawab  terhadap  efek toksiknya  bagi  tubuh  (Patocka  dan  Cerny,  2003). Penelitian yang dilakukan pada pria yang terpapar emisi    gas    buang    kendaraan    bermotor membuktikan  bahwa  paparan  emisi  gas  buang kendaraan bermotor menurunkan motilitas spermatozoa (Lubis, 2009). Penelitian pada hewan coba didapatkan bukti bahwa paparan timbal dapat menekan aksis hypothalamus-hipofisa-testis, sehingga    mengakibatkan    histologi    testis, morfologi spermatozoa dan hubungan berbagai sel didalam   testis   terganggu   (Sharma   dan   Garu, 2011).
Timbal sebagai radikal bebas dapat menyebabkan kerusakan melalui dua mekanisme, yaitu    1)    pembentukan    ROS,    antara    lain hiperoksida,  oksigen anglet  dan hidrogen peroksida;   dan     2)   penurunan   simpanan   anti oksidan tubuh. Pada setiap sistem biologis dimana terjadi  produksi  radikal  bebas  berlebih,  simpanan anti oksidan akan menurun (Patrick, 2006).
Dampak negatif radikal bebas pada kesehatan reproduksi  dapat  dicegah  dengan  pemberian antioksidan.  Sumber  antioksidan  alami  lebih banyak  dipilih  karena  harga  terjangkau  dan memiliki sedikit efek samping (Flora et al ., 2012). Bawang  dayak merupakan  tanaman yang berpotensi  sebagai  sumber  antioksidan  alami (Ernawati  dan  Nurliani,  2012).  Kandungan fitokimia  yang  dimiliki  tanaman  bawang  dayak antara  lain  alkaloid,  glikosida,  flavonoid,  fenolik, steroid,  tanin  (Galingging,  2007)  serta  kuinon (Nawawi et al., 2007). Tanaman khas Kalimantan Tengah    ini    mengandung    senyawa    fenolat golongan naftokuinon (Alves et al ., 2003; Hara et al.,  1997;  Han et  al .,  2008;  Nielsen  &  Wege, 2006).  Naftokuinon  memiliki  bioaktivitas  sebagai antioksidan   dan   anti   kanker   (Firdaus,   2006). Aktivitas   antioksidan   yang   kuat   pada   ekstrak etanol bawang dayak dibuktikan dengan nilai IC 50 sebesar  25,33µg/ml  (Kuntorini  dan  Astuti, 2010). Kandungan senyawa fenolik dalam bawang dayak diduga  dapat  membentuk  ikatan  senyawa  radikal antioksidan  lebih  stabil  dan  tidak  berbahaya  bagi sel tubuh (Prior dan Schaich, 2005). Umbi bawang dayak  dipercaya  mengandung  berbagai  senyawa aktif  yang ampuh  menggempur  berbagai  macam penyakit. Sebut saja senyawa golongan naftokuinon    yang  terkandung  dalam  umbi tanaman  ini.  Oleh  karena  itu  wajar  bila  umbi tanaman  ini  terkenal  sebagai  obat  untuk  berbagai macam  penyakit.  Senyawa  naftokuinon  biasanya digunakan   antara   lain  sebagai  antimikroba  dan antioksidan (Kuntorini, 2013).
Tujuan   penelitian   ini   untuk   membuktikan ekstrak  etanol  bawang  dayak  ( Eleutherine americana Merr.) mampu  mempertahankan kadar hormon  testosteron,  diameter  dan  tebal  epitel tubulus  seminiferus  mencit  ( Mus  musculus ) Balb/C yang di induksi timbal asetat.

## 2.     METODE

## Alat Penelitian
Kandang  mencit,  timbangan, disposible syringe ,  sonde,  set  alat  bedah  steril, object  glass , mikroskop cahaya

## Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan adalah mencit jantan ( Mus musculus )  Balb/C  Bahan  pemeliharaan  mencit  : pelet  untuk  makanan  hewan  coba.  Bahan  untuk
Jurnal Biosains Pascasarjana Vol. 19 (2017) pp ©(2017) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
perlakukan  :  ekstrak  bawang  dayak  ( Eleutherine americana Merr.),  timbal  asetat,  aquadest,  Na- CMC  0,5%.  Bahan  pembedahan  :  alkohol  70%, buffer  formalin.  Bahan  fiksasi  jaringan  :  alkohol 70%,  80%,  96%,  parafin  cair.  Bahan  pewarnaan histologis : hemaktosilin, eosin

## Pembuatan Ekstrak Bawang Dayak
a)     Bawang   dayak   sebanyak   10   kg   dikupas kulitnya, dikeringkan kemudian dihaluskan.
b)  Serbuk  bawang  dayak  kemudian  ditimbang sejumlah  500  gram,  dimasukkan  ke  dalam alat   maserasi,   ditambahkan   etanol   97% sambil diaduk hingga cairan etanol terendam 1 cm di atas permukaan sampel.
c) Ekstraksi    selama   3x24   jam,   pergantian pelarut dilakukan sekali sehari.
d)     Pelarut    diuapkan    menggunakan    vacuum rotary  evaporator  pada  suhu  40  c  sampai tidak menguap lagi.
e) Filtrat  diuapkan  kembali  di  atas  waterbath dan ditimbang berat ekstrak yang dihasilkan (Ernawati & Anni, 2012).

## Hewan coba dan Perlakuan
Subyek  penelitian  adalah  30  mencit  ( Mus Musculus )  jantan  strain  Balb/C  dengan  kriteria berumur  6-8  minggu,  berat  badan  25-35  gram, kondisi  fisik  sehat  yang  ditandai  dengan  gerakan lincah  dan  nafsu  makan  baik.  Mencit  dibagi menjadi  5  kelompok,  yaitu  2  kontrol  dan  3 perlakuan yang masing – masing berjumlah 5 ekor mencit.  Perlakuan  yang  diberikan  pada  hewan coba adalah:
a) Kelompok  kontrol  negatif  (K0)  diberi  Na- CMC 0,5% selama 38 hari
b)  Kelompok  kontrol  positif  (K1)  diberi  Na- CMC   0,5%   selama   3   hari   kemudian   di induksi timbal asetat dosis 0,075g/KgBB/hari selama 35 hari
c) Kelompok  perlakuan  1  (K2)  diberi  ekstrak bawang  dayak  30mg/KgBB  selama  3  hari kemudian   diinduksi   timbal   asetat   dosis 0,075g/KgBB/hari,    satu   jam    setelahnya diberi  ekstrak  bawang  dayak  30mg/KgBB selama 35 hari
d)  Kelompok  perlakuan  2  (K3)  diberi  ekstrak bawang  dayak  60mg/KgBB  selama  3  hari kemudian   diinduksi   timbal   asetat   dosis 0,075g/KgBB/hari,    satu    jam    setelahnya
diberi  ekstrak  bawang  dayak  60mg/KgBB selama 35 hari
e) Kelompok  perlakuan  3  (K4)  diberi  ekstrak bawang  dayak  120mg/KgBB  selama  3  hari kemudian   diinduksi   timbal   asetat   dosis 0,075g/KgBB/hari,    satu    jam    setelahnya diberi  ekstrak  bawang  dayak  120mg/KgBB selama 35 hari.
Pemberian   ekstrak  bawang   dayak   dan   timbal asetat   pada   hewan   coba   dilakukan   per   oral menggunakan  sonde.  Pada  hari  ke  39  semua subyek  penelitian  dikorbankan.  Hewan  coba diterminasi    dengan    pembiusan    menggunakan kloroform kemudian dilakukan pembedahan untuk diambil  testis.  Penelitian  ini  telah  mendapatkan sertifikat kelaikan etik dari Komite Etik Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya.

## Pengukuran Diameter Tubulus Seminiferus
Diameter  tubulus seminiferus diukur dengan membuat preparat dari potongan testis. Pembuatan preparat  menggunakan  metode  parafin,  diwarnai dengan  hemaktosilin  dan  eosin.  Kemudian  dilihat di bawah  mikroskop  cahaya.  Pengukuran dilakukan  dengan  mengukur  diameter  tubulus seminiferus   terpanjang   dan   terpendek   dalam satuan   mikron   kemudian   di   rerata   (Agustina, 2015).

## Analisis Statistik
Data  hasil  penelitian  disajikan  dalam bentuk mean  dan  standart  deviasi  juga  histogram. Penilaian    distribusi    data    menggunakan    uji Kolmogorov-Smirnov .    Distribusi    data    normal apabila  nilai  p  ≥  0,05.  Data  yang  berdistribusi normal  kemudian  dianalisis  dengan  uji one  way ANOVA.  Untuk  mengetahui  kelompok  mana yang  berbeda  secara  bermakna,  maka  dilakukan analisis Post-Hoc .

## 3.     HASIL
Hasil pengukuran histologis diameter tubulus seminiferus  dapat  dilihat  pada  gambar  1  sampai dengan 5.
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
Gambar 1.1 Diameter tubulus seminiferus mencit ( Mus musculus ) Balb/C kelompok kontrol negatif (K0) yang diberi Na-CMC 0,5% selama 38 hari
Gambar   1.2. Diameter   tubulus   seminiferus mencit ( Mus musculus ) Balb/C kelompok kontrol positif (K1) yang diberi Na-CMC 0,5% selama 3 hari   kemudian   di   induksi   timbal   asetat   dosis 0,075g/KgBB/hari selama 35 hari
Gambar   1.3. Diameter   tubulus   seminiferus mencit  ( Mus  musculus )  Balb/C  kelompok perlakuan  1  (K2)  yang  diberi  ekstrak        bawang dayak  30mg/KgBB  selama  3  hari  kemudian diinduksi  timbal  asetat  dosis  0,075g/KgBB/hari,
satu jam setelahnya diberi ekstrak bawang dayak 30mg/KgBB selama 35 hari
Gambar   1.4. Diameter   tubulus   seminiferus mencit  ( Mus  musculus )  Balb/C  kelompok perlakuan  2  (K3)  yang  diberi  ekstrak        bawang dayak  60mg/KgBB  selama  3  hari  kemudian diinduksi  timbal  asetat  dosis  0,075g/KgBB/hari, satu jam setelahnya diberi ekstrak bawang dayak 60mg/KgBB selama 35 hari
Gambar   1.5. Diameter   tubulus   seminiferus mencit  ( Mus  musculus )  Balb/C  kelompok perlakuan  2  (K3)  yang  diberi  ekstrak        bawang dayak  120mg/KgBB  selama  3  hari  kemudian diinduksi  timbal  asetat  dosis  0,075g/KgBB/hari, satu jam setelahnya diberi ekstrak bawang dayak 120mg/KgBB selama 35 hari.
Data  hasil  pengukuran  diameter  tubulus seminiferus  mencit  disajikan  dalam  bentuk  mean dan  standart  deviasi  sesuai  dengan  tabel  1. Penilaian  distribusi  data  menggunakan  uji Kolmogorov-Smirnov .  Distribusi  data  normal apabila  nilai  p  ≥  0,05.  Berdasarkan  hasil perhitungan    menunjukkan    bahwa    variabel diameter    tubulus    seminiferus    mempunyai distribusi data normal dengan nilai p = 0,999
Data  variabel  diameter  tubulus  seminiferus berdistribusi  normal  kemudian  dianalisis  dengan
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
uji one    way ANOVA    dengan    hasil    tidak didapatkan perbedaan bermakna (p > 0,05) antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan. Tabel  2. Efek  protektor  ekstrak  etanol  bawang dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  terhadap diameter    tubulus    seminiferus    mencit    ( Mus musculus ) Balb/C yang di induksi timbal asetat
Kadar        Hormon

## 4.     PEMBAHASAN
Hasil     penelitian     menunjukkan     bahwa paparan  timbal  asetat  mampu  menurunkan diameter  tubulus  seminiferus  seperti  yang  terlihat di  histogram  pada  gambar  2  yang  menunjukkan diameter  tubulus  seminiferus  mencit  pada kelompok  kontrol  positif  (K1)  lebih  rendah daripada kelompok kontrol negatif (K0).
Hasil ini sesuai dengan penelitian Corpas et Kelompok Testosteron (ng/dl) Rerata ± SD al .,    (2001)    yang    melaporkan    pengurangan ketebalan epitel dan diameter tubulus seminiferus
Kontrol negatif                    5,5ª±1,37 Kontrol positif                     2,99 b ± 1,18
Ekstrak   Bawang   Dayak 30mg/KgBB/hari 5,28ª ± 2,3 Ekstrak   Bawang   Dayak 60mg/KgBB/hari 5,3ª ± 0,71
yang    merupakan    akibat    dari    timbal    dalam mereduksi jumlah spermatogonia dan spermatosit. Peneliti  lain  menemukan  bahwa  paparan  timbal pada  mencit  juga  menyebabkan  kerusakan  dan pengurangan  jumlah  tubulus  seminiferus  dan  sel germinal (Garu et al . 2011).
Penurunan   diameter   tubulus   seminiferus
Ekstrak   Bawang   Dayak ab 120mg/KgBB/hari 4,2 ± 1,92 dalam   penelitian   ini   disebabkan   timbal   yang masuk   ke   dalam   tubuh   melalui   inhalasi   dan pencernaan, selanjutnya akan berikatan dengan sel
Huruf superscript yang  berbeda,menunjukkan perbedaan bermakna pada p<0,05
Histogram efek ekstrak etanol bawang dayak ( Eleutherine  americana Merr)  terhadap  diameter tubulus   seminiferus   mencit   (Mus   musculus) Balb/C yang di induksi timbal asetat dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar  2. Efek  protektor  ekstrak  etanol bawang  dayak  ( Eleutherine  americana Merr.) terhadap  diameter  tubulus  seminiferus  mencit ( Mus musculus ) Balb/C yang di induksi timbal asetat.  K0  :  kelompok      kontrol  negatif;  K1  : kelompok  kontrol  positif;  K2  :  kelompok pemberian        ekstrak        bawang        dayak 30mg/KgBB/hari;  K3  :  kelompok  pemberian ekstrak bawang dayak 60mg/KgBB/hari; K4 : kelompok  pemberian  ekstrak  bawang  dayak 120mg/KgBB/hari
darah  merah.  Akumulasi  timbal  dalam  sel  darah merah  menyebabkan  inhibisi  δ-ALAD  ( delta - aminolevulinic acid dehidratse ). Inhibisi δ-ALAD menyebabkan     peningkatan     ALA     (delta     - aminolevulinic      acid ).      Peningkatan      ALA menyebabkan  terbentuknya  ROS  ( Reactive Oxygen  Species ).  Pada  setiap  keadaan  dimana terjadi  produksi  ROS  berlebih,  maka  simpanan anti  oksidan  tubuh  akan  menurun.  Apabila  rasio antara  paparan  radikal  bebas  atau  oksidan  lebih besar  daripada  antiradikal  bebas  atau  antioksidan, maka akan terjadi stress oksidatif. Terjadinya stres oksidatif menyebabkan gangguan pada hipotalamus yaitu penurunan GnRH ( Gonadotropin  Releasing  Hormone ),  penekanan sekresi  GnRH  yang  dihasilkan  hipotalamus  oleh timbal  (Sokol et  al .,  2002).  Penekanan  sekresi GnRH  ini  menyebabkan  penurunan  sekresi  FSH dan  LH.  LH  berperan  untuk  menstimulasi  sel Leydig  untuk  menghasilkan  hormon  testosteron, FSH  berfungsi  dalam  menstimulasi  sel  Sertoli menghasilkan Androgen  Binding  Protein (ABP) untuk  mengikat  hormon  testosteron  dalam memacu perkembangan spermatogonium. Penurunan testosteron dan FSH  akan menganggu sel  germinal  untuk  berproliferasi,  berdiferensiasi dan  metabolisme  sel.  Dampaknya  mempengaruhi struktur  testis,  diantaranya  diameter  tubulus seminiferus dan sel – sel spermatogenik (Apriliani dkk, 2013).
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
Timbal  yang  masuk  ke  dalam  tubuh  akan terakumulasi  di  testis,  epididimis,  vas  derefen, vesikel  seminalis  dan semen (Chowdhury, 2009). Hal  ini  akan  mengakibatkan  testis  menjadi  atrofi karena  kehilangan  sel  spermatogenik,  merusak bentuk  dan  menurunkan  diameter  tubulus seminiferus (Adibmoradi et al ., 2015; Lamondo et al .,    2014).    Penurunan    diameter    tubulus seminiferus akibat penurunan jumlah sel spermatogonia,  jumlah  sel  Sertoli,  jumlah  sel germinal (Garu et al ., 2011).
Namun  hasil  statistik  pada  tabel  2 menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna pada kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan  juga Hal  ini  dimungkinkan  karena  terbatasnya  waktu paparan  timbal  pada  mencit.  Penelitian  Sokol et al .,  (2002)  menyebutkan  bahwa  terganggunya sinyal  di  dalam  dan  diantara  hipotalamus  dan kelenjar  hipofise  tikus  oleh  paparan  timbal bergantung pada kadar dan durasi pajanan timbal. Verstraeten et    al .,    (2008)    juga    menyebutkan bahwa  toksisitas  timbal  tergantung  dari  besarnya dosis  dan  lamanya  paparan.  Dengan  demikian pemberian  timbal  asetat  selama  35  hari  masih memberikan  efek  kerusakan  tahap  awal,  karena kadar    akumulasinya    belum    sepenuhnya mencukupi untuk merusak sel Leydig. Jika timbal

## DAFTAR PUSTAKA

## Agustina SNM. 2015. Efek Pemberian Ekstrak
Teh Hijau (Camellia Sinensi) terhadap  Analisis  Semen,  Diameter Tubulus  Seminiferus  dan  Kadar Malondialdehyde (MDA) Testis Mencit  Balb/C  Setelah  Dipapar Monosodium Glutamate (MSG). Tesis . Surabaya : Universitas Airlangga. Tidak Dipublikasikan. Alves TMA, Helmut K, dan Carlos LZ. 2003. Eleutherinone   A   Novel   Fungitoxic
Naphtoquinone from Eleutherine Bulbosa (Iridiceae). Memórias  do Instituto Oswaldo Cruz Vol. 98, No.
5 : 709–712. Apriliani  M,  Nurcahyani  N  dan  Busman  H. 2013.  Efek  Pemaparan  Kebisingan Terhadap Jumlah Sel – Sel Spermatogenik  dan  Diameter  Tubulus
Seminiferus    Mencit    ( Mus    musculus L.).    Seminar    Nasional    Sains    &
diberikan  pada  durasi  waktu  yang  lebih  lama, maka akumulasi timbal asetat semakin banyak dan kemungkinan    pengaruhnya    terhadap    testis semakin nyata.

## 5.     KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Ekstrak   etanol   bawang   dayak      ( Eleutherine americana Merr.)  terbukti  tidak  mempengaruhi diameter        tubulus  seminiferus  mencit  ( Mus musculus ) Balb/C yang dipapar timbal asetat

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  tentang  efek terapi  ekstrak  etanol  bawang  dayak  ( Eleutherine americana Merr.)  dengan  waktu  minimal  1,5 siklus untuk menghilangkan efek spermatogenesis pada siklus sebelumnya.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih tak terhingga dan penghargaan yang setinggi  - tingginya penulis ucapkan kepada  Prof. Sri Agus Sudjarwo, drh., Ph.D selaku pembimbing I, Dr. Reny I’tishom, M.Si selaku pembimbing II atas semua saran ilmiahnya dan semua pihak yang membantu dalam menyelesaikan artikel ilmiah ini.
Teknologi   V,   Lampung   :   Lembaga Penelitian                            Universitas Lampung.Widowati  W,  Sastiono  A, Jusuf  R.  2008. Efek  Toksik  Logam Pencegahan dan Penanggulangan
Pencemaran .Yogyakarta : ANDI.
Chowdhury  AR.  2009.  Recent  Advances  in
Heavy  Metals  Induced  Effect  on
Male Reproductive Function-A
Retrospective. Al  Ameen  Journal
Medicine  Science .  Vol  2,  No.  2  :
37-42.
Corpas I, Castillo M, Marquina D, dan Benito
MJ.  2001.  Lead  Intoxication  in
Gestational  and  Lactation  Periods Alters  the  Development  of  Male
Reproductive Organs. Ecotoxicology  and  Environmental Safety . 53 : 259-266.
Ernawati,      Nurliani      A.      2012.      Efek
Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Bulbus Bawang Dayak ( Eleutherine Americana  Merr )  terhadap  Struktur
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
Mikroanatomi  Tubulus  Seminiferus Testis  Tikus  yang  Dipapar  Asap Rokok. Sains  dan  Terapan  Kimia . Vol.6, No.2 : 93-100. Flora G, Gupta D, Tiwari A. 2012. Toxicity of Lead:  A    Review    With    Recent Updates. Interdiscip  Toxicol .  Vol.  5, No. 2: 47-58.
Galingging     RY.     2009.     Bawang     Dayak ( Eleutherine Palmifolia ) Sebagai Tanaman  Obat  Multifungsi. Warta Penelitian  dan  Pengembangan .  Vol.
15, No. 3 : 2-4.
Garu U, Sharma R & Barber I. 2011. Effect of Lead  Toxicity  on  Developing  Testis of Mice. IJPSR . Vol. 2, No. 9 : 2403- 2407.
Gusnita  D.  2012.  Pencemaran  Logam  Berat Timbal   (Pb)   di   Udara   dan   Upaya Penghapusan     Bensin     Bertimbal.
Berita   Dirgantara .   Vol.13,   No.3   :
95-101.
Han  AR,  Min  HY,  Nam  JW,  Lee  NY, Wiryawan  A,  Suprapto  W,  Lee  SK,
Leenand     KR,     Seo     EK.     2008. Identiﬁcation of A New Naphthalene and Its Derivatives from The Bulb of Eleutherine Americana with Inhibitory Activity on Lipopolysaccharide-Induced Nitric Oxide  Production. Chemical  and
Pharmaceutical    Bulletin. Vol.    56,
No. 9 : 1314–1316.
Hara  H,  Maruyama  N,  Yamshita  S,  Hayashi Y,  Lee  KH,  Bastow  KF,  Chairul, Marumoto  R,  and  Imakura  Y.  1997. Elecanacin,  A  Novel  Naphtoquinone from  The  Bulg  Of  Eleutherine Americana. Chemical and
Pharmaceutical    Bulletin .    Vol.    45,
No. 10 : 1714–1716.
Kuntorini  EM,  Astuti  MD.  2009. Penentuan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Bulbus  Bawang  Dayak ( Eleutherine Americana  Merr ).  Banjarmasin  : FMIPA Universitas Lambung Mangkurat. Lamando D, Soegianto A, Abadi A, Keman S.
2014.  Atioxidant  Effect  of  Sarang
Semut   ( Myrmecodia   pendens )   on The   Apoptosis   of   Spermatogenic
Cells  of  Rats  Exposed  to  Plumbum. Research  Journal  Of  Pharmautical, Biological  And  Chemical  Sciences . Vol 5, No. 4 : 282-294.
Lubis  HS,  Sono  OP,  Lunardhi  H,  I’tishom  R. 2009.          Perubahan          Motilitas Spermatozoa    pada    Pria    Terpapar Emisi Gas Buang Kendaraan Bermotor. Majalah Andrologi Indonesia No. 23 Desember. Mardiani   HT.   2008.   Pengaruh   Pemberian Timbal      (Pb)      terhadap      Kadar Malondialdehid (MDA) Plasma Mencit. Tesis .  Medan  :  Universitas Sumatera Utara.
Nawawi A, Winasih R, Anggi A. 2007. Isolasi dan   Identifikasi   Senyawa   Kuinon dari      Simplisia      Umbi      Bawang Sabrang ( Eleutherine palmifolia merr ).   Bandung   :   Sekolah   Tinggi
Farmasi Bandung
Nielsen  LB  &  Wege  D.  2006.  The
Enantioselective Synthesis of Elecanacin Through An Intramolecular  Naphtoquinonevenyl
Ether  Photochemical  Cycloaddition. Organic  and              Biomolecular Chemistry . 4: 868–876. Palar  H.  2008. Pencemaran  dan  Toksikologi Logam Berat . Jakarta: Rineka Cipta.
Patocka  J  &  Cerny  K,  2003.  Inorganic  Lead Toxicology,   Review   Article. Acta Medica . Vol. 46, No. 2 : 65-73.
Patrick  L.  2006.  The  Role  of  Free  Radical Damage      and      The      Use      Of Antioxidants  in  The  Pathology  and Treatment      of      Lead      Toxicity. Alternative  Medicine    Review .  Vol. 11, No. 2 : 114-127.
Prior  RL  &  Schaich  K.  2005.  Standardized Methods  for  The  Determination  of Antioxidant  Capacity  and  Phenolics in  Foods  and  Dietary. Journal  Agric Food Chemistry . Vol. 9 No. 2.
Sharma  R  &  Garu  U.  2011.  Effects  of  Lead Toxicity   on   Developing   Testes   in Swiss  Mice. Universal  Journal  of
Environmental Research and Technology .  Vol.  1,  Issue  4:  390-
398.
Sokol RZ, Wang S, Wan YJ, Stanczyk FZ,
JBP VoI. 19, No. 3, Desember 2017 – Paramita Ratna Gayatri
Gentzschein  E,  Chapin  RE.  2002. Long-term,  low-dose  lead  exposure alters  the  gonadotropin  –  releasing hormone  system  in  the  male  rat. Environ  Health  Perspect .  110  :  871  - 874 Verstraeten   SV,   Aimo   L,   Oteiza  PI.  2008.
Aluminium  and  Lead  :  Molecular Mechanism of Brain Toxicity. Archive Toxicology . Vol. 82.