## Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo sebagai agen bioremediasi dari
pencemaran logam berat
Identification of bacteria in the mangroves Sawohan Village Sidoarjo as bioremediation agents from heavy metal pollution
Vella Rohmayani 1 *, Nurhidayatullah Romadhon 2 , Holly Ichda 3 , Anindita Riesti Retno Arimurti 4 , Mohammad Taufiq Shidqi 5 , Wiwi Wikanta 6

## Abstract
Background: Remediation of heavy metal pollutants using bacteria is currently being carried out due to high levels of heavy metal  pollution  (Cu  and  Hg)  in  ecosystems,  mainly  due  to  industrial  growth,  encouraging  remediation  research  using bacteria. The toxic effects of heavy metals on living things and the environment need to be addressed.
Objective: This study aims to identify and analyze the  potential of indigenous bacteria from mangrove sediments in Sawohan Sidoarjo Village in reducing Cu and Hg heavy metal levels in vitro.
Method: This  research  is  included  in  explorative  descriptive  research.  This  research  was  conducted  at  the UMSurabaya  microbiology  laboratory,  in  July – November  2023.  Isolation  is  carried  out  by  pour  plate  method  and purified using streak plate method on Nutrient Agar medium. Initial screening of bacteria using Nutrient Agar medium with  the  addition  of  Cu  and  Hg  metals  as  much  as  100,  250,  350  and  500  ppm.  Measurement  of  the  potential  of bacteria  in  reducing  Cu  and  Hg  metal  levels  was  carried  out  on  SSA  medium  (Salmonella  shigela  agar)  using  the Langmuir  method.  The  results  of  bacterial  isolation  from  mangrove  sediments  obtained  9  isolates  used  to  test  the degradation ability of heavy metals Cu and Hg.
Result: U Heavy metal degradation test showed that the 9 isolates were able to degrade Cu and Hg heavy metals. T1 isolates  of  Pseudomonas  aeruginosa  species,  with  Gram  negative  characteristics,  have  the  highest  reduction  ability with Cu reduction power of 82% and Hg metal of 72,61%.
Conclusion: H Pseudomonas aeruginosa bacteria from mangrove sediments has the ability as a bioremediation agent of heavy metals Cu and Hg from ecosystems.

## Keywords
Bacterial Isolation, Indigenous, Metal Degradation, Cu, Hg

## Abstrak
Latar  Belakang: Remediasi  polutan  logam  berat  menggunakan  bakteri  saat  ini    terus  dilakukan  karena  tingginya  tingkat pencemaran  logam  berat  (Cu  dan  Hg)  dalam  ekosistem,  terutama  akibat  pertumbuhan  industri,  mendorong  penelitian remediasi dengan menggunakan bakteri. Efek toksik logam berat bagi makhluk hidup dan lingkungan perlu diatasi. Tujuan: Penelitian  ini  mempunyai  tujuan  untuk  mengidentifikasi  dan  menganalisis  potensi  bakteri  indigenous  dari sedimen mangrove Desa Sawohan Sidoarjo dalam mengurangi kadar logam berat Cu dan Hg secara in-vitro.
1 Prodi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Surabaya E-mail: vella_rohmayani@um-surabaya.ac.id
2 Prodi Sarjana Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan, Universitas Muhammadiyah Surabaya. E-mail: nurhidayatullahr10@gmail.com
3 Prodi PGSD, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Muhammadiyah Surabaya. E-mail: holyichdawahyuni@um-surabaya.ac.id
4 Prodi DIII Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Surabaya. E-mail: aninditariesti@um-surabaya.ac.id
5 Prodi Agrobisnis Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Islam Madura.  Email : nurhidayatullahr10@gmail.com
6 Prodi Sarjana Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan, Universitas Muhammadiyah Surabaya. Email : wikanta@fkip.um-surabaya.ac.id
Penulis Koresponding:
Vella Rohmayani :  Prodi  Sarjana  Terapan  Teknologi  Laboratorium  Medis,  Fakultas  Ilmu  Kesehatan,  Universitas  Muhammadiyah  Surabaya.  Jl. Sutorejo No.59, Surabaya. E-mail: vella_rohmayani@um-surabaya.ac.id
SAGO: Gizi dan Kesehatan 2024, Vol. 5(3) 733-745
© The Author(s) 2024
DOI: http://dx.doi.org/10.30867/gikes.v5i3.1706 https://ejournal.poltekkesaceh.ac.id/index.php/ gikes Poltekkes Kemenkes Aceh
Mei – Agustus 2024
Metode: Penelitian  ini  termasuk  dalam  penelitian  deskriptif  exploratif.  Penelitian  ini  dilakukan  di  laboratorium mikrobiologi  UMSurabaya,  pada bulan  Juli – November  2023.  Isolasi  yang  dilakukan  dengan  metode pour plate dan dipurifikasi menggunakan cara  streak plate pada medium Nutrient Agar. Skrining awal bakteri menggunakan medium Nutrient  Agar  dengan  penambahan  logam  Cu  dan  Hg  sebanyak  100,  250,  350  dan  500  ppm.  Pengukuran  potensi bakteri  dalam  mengurangi  kadar  logam  Cu  dan  Hg  dilakukan  pada  medium  SSA  (Salmonella  shigela  agar) menggunakan metode Langmuir. Hasil isolasi bakteri dari sedimen mangrove diperoleh 9 isolat yang digunakan untuk pengujian kemampuan degradasi logam berat Cu dan Hg.
Hasil: Uji degradasi logam berat menunjukan bahwa ke-9 isolat mampu mendegradasi logam berat Cu dan Hg, namun isolat isolat dengan kemampuan reduksi tertinggi adalah isolat T1 dengan daya reduksi Cu sebesar 82% dan logam Hg sebesar  72,61%.  Berdasarkan Bergey’s, isolat  T1  termasuk  spesies Pseudomonas  aeruginosa ,  dengan  karakteristik Gram  negatif,  bentuk  basil,  non-motil,  katalase  positif,  oksidase  positif,  bersifat  motil,  manitol  positif,  Sitrat  positif, dan arginin positif.
Kesimpulan: Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  kelompok  bakteri Pseudomonas  aeruginosa tersebut  dapat  digunakan secara efisien untuk penghilangan logam berat Cu dan Hg dari ekosistem.

## Kata Kunci
Isolasi Bakteri, Indigenous, Degradasi logam, Cu, Hg

## Pendahuluan
ndonesia  merupakan  negara  dengan  sumber daya alam yang berlimpah baik dari lingkungan terrestrial  hingga  maritim.  Kekayaan  sumber daya  alam  ini  memicu  perkembangan  berbagai sektor  industri  yang  berusaha  mengeksplorasi secara  luas  serta  mengolah  bahan-bahan  alam tersebut  menjadi  sebuah  produk  bernilai  tinggi  di pasaran  lokal  maupun  global  (Herdiansyah,  2018). Pengolahan  bahan  mentah  tersebut  juga  memicu perkembangan  dari  sektor  teknologi  yang  mampu mengurangi  waktu  pengolahan  dan  meningkatkan kualitas  produk  akhir  (Miharja  &  Sidharta,  2018). Adanya  sinergitas  antara  perkembangan  teknologi dan  kemajuan  sektor industri  ini  memang  mampu meningkatkan  ekonomi  nasional,  akan  tetapi  juga berdampak  negatif  pada  kestabilan  lingkungan hidup,  dimana  terjadinya  eksploitasi  secara  luas terhadap  sumber  daya  alam  serta  menghasilkan berbagai senyawa sampingan dari proses pengolahan yang bersifat toksik terhadap lingkungan  dan  makhluk  hidup.      Senyawa sampingan       tersebut        berupa        limbah        yang dihasilkan  baik  dalam  bentuk  padat,  cair  dan  gas (Ali  et  al.,  2019).  Salah  satu  limbah  toksik  adalah logam berat (Ali et al., 2019).
Salah  satu  yang  menyebabkan  logam  berat menjadi  sumber    pencemar  berbahaya  yaitu sifatnya yang tidak dipecah  ( non-degradable ) oleh mahluk  hidup  di  lingkungan  dan  terakumulasi  ke lingkungan,  kemudian  logam  berat  tersebut mengendap di dasar perairan sehingga terbentuknya  senyawa  komplek  dengan    bahan
organik  dan  anorganik  secara  adsorbsi  dan kombinasi war (Erlambang et al., 2019).
Hal  ini  terjadi  secara  terus  menerus  dalam waktu  yang  lama  dan  akan  merusak  kestabilan rantai  makanan,  dimana  konsumen  puncak  yang mengkonsumsi  mangsa  (produsen  atau  konsumen tingkat  bawah)  yang  tubuhnya  telah  terakumulasi senyawa  logam  berat  sebelumnya,  akan  bersifat destruktif  bagi  tubuh  konsumen  akhir  (Lestari  et al., 2021). Hal  ini  dikarenakan  jumlah  logam  berat tersebut  telah  banyak  dan  mampu  merusak berbagai  sel  vital  makhluk  hidup  melalui  aliran darah  (Lestari  et  al.,  2021).  Salah  satu  senyawa logam berat yang sangat  tinggi yaitu tembaga (Cu) dan air raksa (Hg) (Ishak et al., 2023).
Logam  Cu  termasuk  jenis  logam  berat  yang bersifat esensial bagi makhluk hidup, namun akibat perkembangan  industri  yang  pesat  menjadikan logam  tersebut  berlimpah  dan  meningkatkan toksisitasnya  terhadap  lingkungan  dan  makhluk hidup.  Begitupun  dengan  logam  Hg  dan  Pb  yang termasuk  ke  dalam  golongan  logam  yang  paling berbahaya  bagi  makhluk  hidup  karena  mudah diserap  dan  mampu  menghambat  kinerja  enzim serta  merusak  sel  (Suryono  et  al.,  2020).  Logam- logam  tersebut  banyak  ditemukan  di  lingkungan perairan  dan  lahan  basah  seperti  lahan  mangrove (Suryono et al., 2020). Berbagai metode remediasi lahan telah dipergunakan untuk mengurangi kadar logam berat dari lingkungan seperti remediasi fisik (memasukkan  cemaran  ke  dalam  wadah  tang kemudian  diberikan  perlakuan),  remediasi  kimia (dengan  melakukan  ektraksi  kimia  dan  solidfikasi) dan  remediasi  biologi  (biofilter,  bioventing,
I
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....
fitoremediasi, bioremediasi).  Namun metode  yang aman  dan  efektif  dalam  proses  revitalisasi  lahan tercemar  adalah  dengan  menggunakan  bakteri indigenous  yang  mampu  mengarbsorpsi  dan mengurai  logam,  dan  jenis  bakteri  ini  paling berlimpah ditemukan di daerah sedimen mangrove.  Sedimen  mangrove  pada  dasarnya terdiri  dari  partikel  halus  dengan  kandungan organik tinggi  dan pH rendah, sehingga membuatnya  sangat  efektif  dalam  menyerap logam  berat  yang  berpotensi  beracun  dengan menguraikan senyawa sulfida dalam sedimen yang biasanya bersifat anaerob (Kartikorini et al., 2021).
Sedimen  mangrove  bersifat  anaerobik;  kaya akan sulfida, ion, dan bahan organik; dan bertindak sebagai  penyerap  logam  berat  di  lingkungan perairan  sehingga  akan  banyak  ditemukan  logam berat  di  sekitar  perakaran  mangrove.  Dalam mekanisme penyerapan nutrisi, mangrove berasosiasi  dengan  berbagai  bakteri  laut  untuk mengurai senyawa kompleks yang akan dipergunakan  oleh  tanaman.  Namun  karena  akar mangrove  bersifat  akumulator  terhadap  logam berat,  sehingga  bakteri  laut  mengembangkan mekanisme  resistensi  untuk  beradaptasi  dengan lingkungan  yang  terkontaminasi  oleh  logam  berat beracun. Untuk aktivitas metabolismenya, bakteri juga membutuhkan  beberapa  logam  berat,  yang  diterima dari  lingkungan  laut  melalui  saluran  protein pengangkut  logam  berat  yang  bersifat  spesifik (Suryono  et  al.,  2020).  Interaksi  mikroba      dengan logam   berat   berperan   penting   dalam mengurangi toksisitas  dan  juga  membantu  biota  sekitarnya, terutama tanaman (Erlambang et al., 2019).
Adapun  beberapa  bakteri  yang  dapat mengikat  dan  mereduksi  logam  berat  adalah Thiobacillus  ferrooxidans,  Bacillus  cereus,  Oogloea sp.,  Citrobacter sp, Microccocus,  Corynebacterium, Phenylobacterium,  Enhydrobacter,  Flavobacterium , yang  masing-masing  mampu  mengurangi  logam berat  Cu,  Pb,  Cd  maupun  Hg  (Lestari  et  al.,  2021). Oleh  karena  itu,  proses screening terhadap  bakteri potensial  untuk  mengurangi  cemaran  logam  berat pada  lahan  mangrove  perlu  dieksplorasi  lebih  jauh untuk  memperoleh  jenis  bakteri  yang  memiliki potensi  maksimal  dalam  mereduksi  kadar  logam berat di lingkungan. Salah satu lokasi lahan mangrove yang berpotensi terletak di desa Sawohan Kecamatan Buduran  Sidoarjo.  Penelitian  ini  mempunyai  tujuan untuk  mengidentifikasi  dan  menganalisis  potensi bakteri  indigenous  dari  sedimen  mangrove  Desa
Sawohan  Sidoarjo  dalam  mengurangi  kadar  logam berat Cu dan Hg secara in-vitro.

## Metode
Penelitian  ini  termasuk  dalam  penelitian  deskriptif exploratif yakni penelitian yang bertujuan menyatukan  beragam  informasi    mengenai  status gejala  yang  ada  saat  penelitian  dilakuan  tidak  ada (Fauzizah et al., 2022). Penelitian di harapkan mampu membentuk  gambara  fenomena  secara  sistematis, akurat  dan  faktual  terhadap  sifat – sifat  ,ifat-sifat serta hubungan antar fenomena yang diteliti berupa adanya  bakteri  indigenous  yag  resisten  terhadap logam berat di periaran mangrove sebenarnya sudah dicemari  oleh  logam  berat  yang  berasal  dari  limbah domestik.  Pengumpulan  data  dilakukan  melalui observasi, dan pengambilan sampel sedimen serta air pada  zona  sekitar  akar  mangrove.  Selain  itu, penelitian ini juga termasuk penelitian eksperimental,  dimana  sampel  yang  diperoleh  dari kawasan  mangrove  desa  Sawohan  Sidoarjo  akan diujikan pada berbagai logam berat dengan berbagai variasi  konsentrasi.  Penelitian  ini  dilakukan  di laboratorium  mikrobiologi  UMSurabaya,  pada  bulan Juli – November 2023.

## Prosedur Penelitian Pengambilan sampel
Daerah  pengambilan  sampel  terletak  di  3  titik  yaitu titik  dekat  lokasi  tambak,  titik  dekat  dengan  aliran pembuangan limbah domestik dan titik tengah hutan mangrove.  Pemilihan  titik  sampling  berdasarkan kondisi lokasi yang diperkirakan memiliki kandungan mikroba  potensial  sebagai  bioremediator  logam berat. Purposive  sampling digunakan  dalam pengambilan sampel yang diperkirakan mengandung logam  berat  tembaga  (Cu)  dan  raksa  (Hg).  Sedimen diambil dengan menggunakan botol kaca gelap steril yang  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  kolom  air hingga  mencapai  sistem  perakaran  tanaman mangrove.  Selanjutnya  botol  ditarik  setelah mencapai  volume  ¼  dari  volume  botol.  Kemudian botol  steril  ditutup  pada  posisi  masih  di  dalam sedimen.
Sampel  sedimen  yang  diambil  menggunakan grab  sampler  seberat  250  gram  per  titik pengambilan, diambil dari permukaan dasar perairan dengan  ketebalan  kurang  dari  20  cm  menggunakan alat  Ekman  grab.  Sampel  tersebut  dikumpulkan dalam  plastik  klip  dan  kemudian  disimpan  dalam
botol  polyetylen  sebelum  dibungkus  dalam kantong  plastik  dan  ditempatkan  dalam  Cool  box untuk  pengiriman  ke  laboratorium.  Analisis dilakukan di Laboratorium Fakultas Ilmu Kesehatan UM Surabaya untuk menilai kandungan Hg dan Cu dalam  sampel  sedimen  tersebut.  Sampel  sedimen kemudian  dianalisa  di  laboratorium  Fakultas  Ilmu Kesehatan  UM  Surabaya  untuk  mengetahui kandungan  Hg  dan  Cu.  Pengambilan  data  biota (moluska) dan sedimen dimaksudkan sebagai data dasar  dalam  mengumpulkan  dan  menganalisis kondisi  eksisting  kualitas  perairan  serta  sebagai indikator pencemaran lingkungan di lokasi kajian.

## Isolasi sampel
Mikroba yang mengakumulasi logam berat diisolasi dengan langkah-langkah berikut: endapan sedimen yang diambil dari tiga titik berbeda, masing-masing 10  gram,  disuspensikan  dalam  larutan  glukosa 0,5%  sebanyak  90  ml.  Suspensi  endapan  sedimen kemudian diinkubasi di shaker incubator selama  2 jam  dengan  kecepatan  1500  rpm,  lalu  diencerkan hingga  106  kali.  Hasil  pengenceran  dikocok menggunakan  vortex,  dan  100  µl  suspensi diinokulasikan  ke  dalam  cawan  Petri  yang  berisi medium  Nutrient  Agar  (NA).  Setelah  itu,  cawan Petri diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 37°C selama 2 hari (Ndidiamaka Ezejiofor et al., 2022).

## Pemurnian isolat
Tahap  pemurnian  melibatkan  langkah-langkah berikut:  koloni  bakteri  yang  telah  tumbuh diremajakan pada medium agar Nutrient Agar (NA) dengan metode streak plate, dilakukan dalam dua percobaan terpisah, dan diinkubasi kembali selama 1-2 hari dalam kondisi awal. Setelah pertumbuhan koloni  yang  mencapai  diameter  2-4  mm,  bakteri tersebut  diinokulasikan  pada  medium  NA  yang telah  diperkaya  dengan  logam  berat,  seperti tembaga,  raksa,  dan  timbal,  dengan  variasi konsentrasi  (100,  250,  350,  dan  500  ppm)  di permukaannya. Biakan kemudian diinkubasi kembali  dalam  kondisi  yang  sama,  dalam  ruang gelap, selama 2 hari (Juharna et al., 2022). Sebagai kontrol,  media  yang  tidak  mengandung  logam berat  digunakan  untuk  memastikan  bahwa pertumbuhan  koloni  tidak  disebabkan  oleh ketidakmampuan mikroba dalam bertahan terhadap logam berat atau jika koloni tidak muncul sama  sekali.  Ini  dilakukan  untuk  mengoreksi  hasil yang  mungkin  tidak  teramati  akibat  ketahanan mikroba  terhadap  logam  berat  atau  kesulitan
dalam  pengambilan  sampel  koloni  (Juharna  et  al., 2022).
Pembuatan larutan induk CuSO 4 Pembuatan  larutan  induk  CuSO4  1000  ppm dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 2,512 g    kristal  CuSO4,  kemudian  memasukkannya  ke dalam  labu  ukur  yang  berisi  1  L  aquades  dan dihomogenkan (Agustiningrum et al., 2023).
Pembuatan larutan induk HgCl 2 Larutan  awal  raksa  sebanyak  1000  ppm  (mg/L) dipersiapkan  dengan  melarutkan  1353  mg  HgCl2 p.a  ke  dalam  100  mL  aquades.  Proses melarutkannya  dilakukan  dengan  pengadukan hingga  mencapai  keadaan  homogen.  Setelah homogen,  larutan  tersebut  dituangkan  ke  dalam labu  takar  berukuran  1000  mL,  kemudian diencerkan  dengan  penambahan  aquades  hingga mencapai  batas  tandanya.  Larutan  awal  ini nantinya akan diencerkan sesuai dengan konsentrasi  yang  dibutuhkan  untuk  membuat larutan standar (Fitriani et al., 2022).
Pembuatan larutan induk PbNO 3 Pembuatan  larutan  induk  PbNO 3 1000  ppm dilakukan  dengan  cara  1,59897  gram  Pb  (NO3) 2 dilarutkan  dalam  1000  ml  larutan  aquades  dan menjadi  larutan  baku  Pb  1000  mg/L  (Ndidiamaka Ezejiofor et al., 2022).

## Pemeriksaan makroskopis
Evaluasi makroskopis koloni melibatkan pengamatan  visual  terhadap  beberapa  aspek, termasuk bentuknya (apakah punctiform, irregular, filamentous, atau rhizoid), elevasinya (apakah flat, raised, atau convex), karakteristik optiknya (seperti warna,  opak,  translusen,  atau  transparan),  dan sifat  permukaannya  (apakah  halus  atau  kasar) (Wang et al., 2020).

## Pewarnaan Gram
Pewarnaan Gram dimulai dengan menetesi larutan kristal violet sebanyak 2-3 tetes pada preparat ulas dan  membiarkannya  selama  1  menit,  diikuti dengan  pencucian  menggunakan  air  mengalir. Gram’s  Iodine  Mordant  (Emerck)  kemudian diteteskan  sebanyak  2-3  tetes  di  atas  permukaan preparat  dan  dibiarkan  selama  1  menit  sebelum dicuci  kembali  dengan  air  mengalir.  Selanjutnya, etil alkohol 95% diteteskan perlahan-lahan sampai kristal  violet  tercuci,  diikuti  dengan  pencucian
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....
ulang  menggunakan  air  mengalir.  Preparat kemudian ditetesi Safranin selama 45 detik, dicuci dengan  air  mengalir,  dikeringkan,  dan  diamati menggunakan mikroskop (Viesser et al., 2020).
Pewarnaan  endospora  dilakukan  dengan meletakkan  preparat  ulas  pada  rak  pewarna  dan menutupnya  penuh  dengan  kertas  saring.  Zat warna  hijau  malakit  kemudian  diteteskan  secara merata  ke  permukaan kertas  saring menggunakan pipet Pasteur, lalu dipanaskan selama 5 menit dan didinginkan. Setelah  preparat dingin, kertas saring dibuang,  dan  preparat  dibilas  dengan  air  mengalir sebelum dikeringkan. Selanjutnya, preparat diwarnai  dengan  safranin  selama  1  menit,  dicuci dengan  air  mengalir,  dan  dikeringkan.  Preparat diamati  di  bawah  mikroskop  dengan  pembesaran 1000x menggunakan minyak imersi yang diteteskan  di  luar  atas  kaca  penutup.  Pengukuran ukuran  bakteri  dilakukan  menggunakan  lensa  foto pada  mikroskop  yang  terhubung  dengan  aplikasi khusus untuk memotret dan mengukur sel bakteri (Kalaimurugan et al., 2020).

## Uji katalase
Uji  katalase  digunakan  sebagai  metode  untuk menilai aktivitas katalase pada bakteri yang sedang diuji.  Sebagian  besar  bakteri  menghasilkan  enzim katalase  yang  memiliki  kemampuan  untuk memecah  H2O2  menjadi  H2O  dan  O2.  Katalase diyakini  berperan  penting  dalam  pertumbuhan aerobik  karena  H2O2  yang  dihasilkan  dapat menjadi  racun  bagi  sel  mikroba.  Prosedur  uji  ini melibatkan  langkah-langkah  seperti  ini:  suspensi bakteri dimasukkan ke dalam tabung reaksi sekitar 5 mL, kemudian suspensi tersebut ditetesi dengan 5  tetes  H2O2  0,5%.  Jika  terbentuk  gelembung udara,  hal  ini  menunjukkan  hasil  positif  dari  uji katalase (Budiyanto et al., 2021).

## Uji oksidase
Uji  oksidase  bertujuan  untuk  membantu  dalam identifikasi  keberadaan  enzim  oksidase  pada bakteri.  Proses  ini  dilakukan  dengan  menyiapkan preparat  ulas  pada  objek  kaca  yang  kemudian ditutup  dengan  kertas  saring  atau  tisu,  lalu diteteskan  larutan  reagen  oksidase.  Hasil  positif ditandai  dengan  perubahan  warna  menjadi  ungu, sementara hasil negatif akan tetap tidak berwarna. Selain  itu,  pertumbuhan  koloni  bakteri  diamati dalam  cawan  petri  untuk  mengetahui  pH  mana yang lebih mendukung pertumbuhannya (Budiyanto et al., 2021).

## Uji motilitas
Uji motilitas bakteri bertujuan untuk mengevaluasi kemampuan  gerak  atau  motilitasnya.  Bakteri yang bersifat  motil  akan  menunjukkan  pertumbuhan yang  menyebar  di  sekitar  tempat  tusukan  ose, sementara bakteri non-motil tidak akan menunjukkan  perluasan  di  sekitar  tusukan  ose. Prosedur  uji  ini  melibatkan  pengambilan  suspensi bakteri  sekitar  1  ml  yang  kemudian  ditempatkan pada gelas objek cekung dan ditutup dengan gelas penutup.  Selanjutnya,  gelas  objek  diamati  di bawah mikroskop untuk memeriksa pergerakan sel bakterinya (Budiyanto et al., 2021).

## Uji derajat keasaman (pH)
Bakteri  uji  ditanam  dalam  Nutrient  Broth  (NB) sebanyak 1 ml dalam tabung Eppendorf dan diinkubasi selama  24  jam.  Setelah  24  jam,  bakteri  yang  telah mencapai  usia  tersebut  kemudian  ditambahkan  HCl yang telah diencerkan sebanyak 10 µl ke setiap tabung Eppendorf untuk mencapai pH 3, lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama tiga jam. Setiap jam, sebanyak 200 µl inokulum disebar di atas media Nutrient Agar (NA) dan diinkubasi pada suhu 37°C. Pengamatan dilakukan selama lima hari. Sebagai kontrol untuk uji ketahanan terhadap  pH  rendah,  isolat  bakteri  yang  telah ditumbuhkan  dalam  NB  selama  24  jam  namun  tidak diberi  perlakuan  HCl,  kemudian  ditumbuhkan  pada media NA (Sari et al., 2022).

## Uji resistensi logam berat
Pengujian resistensi terhadap logam berat dilakukan setelah  karakterisasi  bakteri.  Bakteri  tersebut  diuji terkait kemampuannya mengakumulasi dan mengurangi  konsentrasi  logam  tembaga,  raksa,  dan timbal.  Proses  ini  dimulai  dengan  menginokulasikan isolat  bakteri  ke  dalam  medium  cair  Nutrient  Broth (NB) yang diperkaya dengan tembaga sulfat (CuSO4), raksa(II)  klorida  (HgCl2),  dan  Pb(NO3)2  dengan konsentrasi  100,  250,  350,  dan  500  ppm  dalam Erlenmeyer.  Setiap  perlakuan  diulang  tiga  kali. Inkubasi dilakukan dalam inkubator shaker selama 72 jam  dengan  kecepatan  220  rpm  untuk  mengamati ketahanan bakteri terhadap logam berat. Setelah itu, nilai Optical Density (OD) dari masing-masing bakteri pada  setiap  perlakuan  diukur  dengan  panjang gelombang 600 nm menggunakan spektrofotometer. Nilai  OD  yang  lebih  tinggi  menunjukkan  kepadatan bakteri  yang  lebih  tinggi,  menandakan  ketahanan bakteri  terhadap  konsentrasi  tembaga  dan  raksa yang lebih tinggi (Imron et al., 2021).
Bakteri  yang  menunjukkan  ketahanan terhadap  logam  berat  kemudian  diukur  nilai Optical  Density  (OD)  dengan  panjang  gelombang 600  nm  untuk  setiap  perlakuan,  guna  menilai kepadatan  bakteri  menggunakan  spektrofotometer. Setelah  mengidentifikasi  isolat  yang  memiliki ketahanan  berdasarkan  kepadatan,  dilanjutkan dengan  uji  penurunan  konsentrasi  Cu  dan  Hg (Jalilvand et al., 2020).

## Uji penurunan kadar logam berat oleh bakteri
Pengujian  penurunan  kadar  logam  berat  dilakukan setelah  didapatkan  bakteri  tahan  Cu  dan  Hg. Pengujian  ini  dilakukan  dengan  cara  bakteri diinokulasikan ke dalam medium cair Nutrient Broth (Nb)  yang  telah  diperkaya  dengan  masing-masing logam  berat  dengan  konsentrasi  resistensi  tertinggi, yaitu  500  ppm.  Ulangan  pada  perlakuan  ini  adalah tiga kali. Kemudian diinkubasikan ke dalam incubator shaker selama  24  jam  pada  suhu  37 0 C  dengan kecepatan  220  rpm,  sentrifugasi  dengan  kecepatan 10.000  rpm  selama  5  menit,  selanjutnya  diiukur kadar Cu dan Hg dengan SSA.

## Pengukuran kadar Cu dan Hg menggunakan SSA
Pengukuran  kadar  logam  Cu  dan  Hg  dilakukan dengan cara diambil 5 ml sampel lalu dimasukkan ke dalam gelas beaker ukuran 100 mL lalu ditambahkan dengan  10  ml  HNO3  dan  3  ml  HClO4.  Dipanaskan HClO4  diatas hot  plate dengan  suhu  100 0 C  hingga volumenya berkurang setengahnya dari volume awal, untuk  menguapkan  sebanyak  mungkin  zat  organic yang ada. Jika masih keruh, maka ditambahkan HNO3 dan  zat  pengoksidasi  lain  selain  sesuai  dengan komposisi, kemudian disaring ke dalam labu ukur 50 ml dan diencerkan dengan menggunakan HNO3 1 M hingga  tanda  batas  dan  diukur  kadar  Cu  dan  Hg
dengan SSA (Ismail & Moustafa, 2016).
Pengukuran kadar Cu dan Hg menggunakan SSA Perhitungan konsentrasi logam Cu dan Hg terserap atau menggunakan metode Langmuir (Kladsomboon  et  al.,  2020),  dengan  persamaan sebagai berikut :

## Cs = Ca – Cb
Perhitungan % Penurunan Kadar Logam Penentuan persentase  logam  berat  Cu  dan  Hg  sesuai  dengan persamaan :
Keterangan : D = Daya Penurunan Kadar logam Cu dan Hg Cs = Cu dan Hg yang kadarnya berkurang (ppm) C(a) = Konsentrasi awal Cu dan Hg (ppm) C(b) = Konsentrasi akhir Cu dan Hg (ppm)

## Analisis Data
Data  mengenai  jenis  bakteri  lokal  dianalisis menggunakan  Bergey’s  Manual  of  Determinative of Microorganisms, edisi ke-9. Data yang diperoleh bersifat  deskriptif,  mengandung  angka-angka kuantitatif  berupa  rata-rata  persentase.  Analisis deskriptif  kuantitatif  dilakukan  dengan  cara menggambarkan dan menjelaskan data yang telah terkumpul,  kemudian  diinterpretasikan  melalui tabel dan grafik (Poosinuntakul et al., 2020).

## Hasil
Berdasarkan  hasil  penelitian,  didapatkan  hasil reduksi logam berat Cu dan Hg oleh isolate bakteri tertera pada tabel 1 sebagai berikut:
Tabel 1. Hasil Reduksi Logam Berat Hg dan Cu oleh Isolat Bakteri Selama berdasarkan Hari 0, 3 dan 5 Isolat Logam Hg (ppm) Logam Cu (ppm) Hari Ke-0 Hari Ke-3 Hari Ke-5 Hari Ke-0 Hari Ke-3 Hari Ke-5 D1 250,000 206,792 103,005 250,000 190,500 54,250 D2 250,000 190,017 97,203 250,000 187,006 81,050 D3 250,000 172,368 115,900 250,000 178,240 52,730 D4 250,000 238,261 94,350 250,000 215,500 55,320 D5 250,000 221,384 84,210 250,000 192,250 57,402 T1 250,000 178,272 68,482 250,000 148,272 45,005 T2 250,000 192,220 71,375 250,000 127,387 52,200 B1 250,000 130,135 62,213 250,000 142,156 62,302 B2 250,000 216,237 78,784 250,000 224,007 67,004
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....
Tabel 2. Persentase reduksi logam berat Isolat Kadar awal (ppm) Kadar akhir (ppm) Daya Reduksi (%) Kadar awal (ppm) Kadar akhir (ppm) Daya Reduksi (%) D1 250,000 103,005 58,80 250,000 54,250 78,30 D2 250,000 97,203 61,12 250,000 81,050 67,58 D3 250,000 115,900 53,64 250,000 52,730 78,91 D4 250,000 94,350 62,26 250,000 55,320 77,87 D5 250,000 84,210 66,32 250,000 57,402 77,04 T1 250,000 68,482 72,61 250,000 45,005 82,00 T2 250,000 71,375 71,45 250,000 52,200 79,12 B1 250,000 62,213 75.11 250,000 62,302 75,08 B2 250,000 78,784 68,49 250,000 67,004 73,20

## Pembahasan
Hasil  penelitian  ditinjau  dari  segi  jumlah  koloni yang  terlihat,  koloni  bakteri  yang  diperoleh  dari lahan  basah  desa  Sawohan  Kecamatan  Buduran yang  berlokasi  di  daerah  Sidoarjo  Jawa  Timur memiliki  jumlah  koloni  bakteri  yang  tergolong banyak. Berdasarkan hasil penelitian, jumlah koloni bakteri yang diperoleh dari lokasi lahan basah desa Sawohan sebanyak 9 isolat, yang terbagi menjadi 5 isolat  yang  diperoleh  dari  sampel  tanah  pada  titik dekat lokasi tambak (D), 2 isolat dari sampel tanah pada titik dekat dengan aliran pembuangan limbah domestik  (B)  dan  2  isolat  dari  sampel  tanah  pada titik tengah hutan mangrove (T). Perbedaan jumlah isolat  yang  diperoleh  dari  masing-masing  lokasi dapat  disebabkan  oleh  faktor  lingkungan  daerah pengambilan  sampel  tanah.  Menurut  Irfan  (2014), faktor lingkungan yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri dalam tanah yang berdampak  secara  langsung  pada  jumlah  isolat yang diperoleh yaitu kandungan unsur hara tanah, kelembaban  tanah,  temperatur  tanah  dan  aerasi tanah (Sari et al., 2020).
Secara  topografi  lahan  basah  wilayah  Desa Sawohan berada pada ketinggian empat meter dari permukaan laut dengan curah hujan sebesar 2000 mm/th dan suhu udara rata-rata 30oC dan terletak di  lokasi  persawahan,  hal  ini  dapat  berpengaruh secara tidak langsung terhadap kelembaban tanah, temperatur  tanah  serta  kandungan  unsur  hara tanah  baik  komponen  organik  maupun  anorganik (Sampurno  et  al.,  2017).  Ketinggian  suatu  daerah dari  permukaan  laut  berdampak  signifikan terhadap  penurunan  temperatur  tanah  dan peningkatan  kelembaban  tanah,  dimana  setiap kenaikkan 100 kaki dari permukaan laut maka akan terjadi  penurunan  temperatur  tanah  sebesar
0.71ºF ekuivalen terhadap peningkatan kelembaban  tanah  dan  aerasi  tanah.  Temperatur tanah  baik  dari  bagian  permukaan  hingga  bagian rhizosfer sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroba tanah, khususnya mempengaruhi  laju  pembetukan  enzim  dan kecepatan  inaktivasi  enzim  dalam  sel  bakteri (Primadina et al., 2019). Semakin tinggi temperatur eksternal sel mikroba, akan berdampak terdenaturasinya  protein  menjadi  monomer  asam amino  dan  secara  struktural  maupun  fungsional enzim  tersebut  akan  rusak,  yang  kemudian mengakibatkan aktivitas sel terhambat  (Kartikorini et  al.,  2021).  Begitupun  sebaliknya,  semakin rendah  temperatur  eksternal  sel  mikroba,  maka laju  pembentukan  enzim  akan  berjalan  lambat yang  berakibat  sel  mikroba  kekurangan  energi untuk  bermetabolisme  dan  bertahan  hidup (Sugiharti & Gayatri, 2021).
Sama halnya dengan temperatur, kelembaban  tanah  dan  aerasi  tanah  juga mempengaruhi laju pertumbuhan mikroba bergantung  pada  jenis  mikroba,  yakni  mikroba aerobik  atau  anaerobik,  dimana  semakin  tinggi tingkat  kelembaban  tanah  maka  kandungan oksigen akan semakin sedikit sehingga berdampak fatal  bagi  kehidupan  mikroba  aerobik  (Ali  et  al., 2019).  Begitu  pula  dengan  aerasi  tanah,  proses aerasi  tanah  akan  meningkatkan  kadar  oksigen dalam  tanah  sehingga  menguntungkan  bagi kehidupan mikroba aerobik (Suryono et al., 2020). Berlimpahnya unsur hara tanah berdampak positif bagi  pertumbuhan  mikroba  tanah,  karena tersedianya  bahan  baku  penting  dalam  proses metabolisme sel (Mangungsong et al., 2020).
Selain  dari  segi  topografi,  pemilihan  lokasi pengambilan  sampel berupa ekosistem  mangrove, juga mempengaruhi diversitas dari spesies bakteri.
Hal  ini  dikarenakan  ekosistem  mangrove  memiliki rentang  salinitas  12-15  psu,  yang  berada  di  atas ambang batas pertumbuhan optimum dari bakteri yaitu  dibawah  7  psu,  sehingga  mayoritas  bakteri yang  bisa  tumbuh  adalah  bakteri  halofilik  (Hendri et  al.,  2021).  Salinitas  tanah  atau  air  yang  tinggi dapat  mempengaruhi  mikroba  melalui  dua mekanisme  utama:  mekanisme  osmotik  dan mekanisme  ion  spesifik  (Ganing  et  al.,  2023). Garam  terlarut  dapat  meningkatkan  potensial osmotik  (lebih  negatif)  dari  air  tanah,  sehingga mampu  menarik  air  keluar  dari  sel  mikroba ataupun  akar  tanaman  dan  dapat  membunuh mikroba  dan  akar  melalui  plasmolisis.  Potensi osmotik yang rendah juga dapat mempersulit akar dan  mikroba  untuk  mengeluarkan  air  dari  tanah. Tanaman  dan  mikroba  dapat  beradaptasi  dengan potensi  osmotik  rendah  dengan  mengakumulasi osmolit,  namun  sintesis  osmolit  membutuhkan energi  dalam  jumlah  besar  dan  ini  mengakibatkan penurunan  pertumbuhan  dan  aktivitas  sel  (Lestari et  al.,  2021).  Salah  satu  kelompok  bakteri  yang mampu tumbuh pada habitat dengan tingkat salinitas yang tinggi adalah kelompok bakteri halofilik.
Seluruh bakteri halofilik memiliki sitoplasma yang bersifat isoosmotik dengan media sekitarnya, memilki  membran  biologis  yang  permeabel terhadap air dengan memiliki sistem transpor aktif untuk  menyeimbangkan  total  air  yang  keluar  dari sel serta memiliki sel-sel yang mampu mempertahankan  turgor  dengan  tekanan  osmotik intraselulernya lebih tinggi daripada lingkungannya (Foeh & Gaina, 2017). Bakteri halofilik menggunakan
dua strategi untuk menyeimbangkan  sitoplasma  mereka  secara osmotik  dengan  media  tumbuhnya,  yaitu  :  (1) Melibatkan  akumulasi  konsentrasi  molar  KCl, dimana  strategi  ini  memerlukan  adaptasi  sistem enzimatik  intraseluler  dari  bakteri,  karena  protein harus mempertahankan konformasi dan aktivitasnya  yang  tepat  pada  konsentrasi  garam yang  mendekati  jenuh, sehingga proteom organisme  tersebut  bersifat  sangat  asam,  dan sebagian  besar  protein  mengalami  denaturasi ketika  tersuspensi  dalam  media  dengan  kadar garam  rendah;  dan  (2)  Mengeluarkan  garam  dari sitoplasma dan mensintesis dan/atau mengakumulasi  zat  terlarut  organik  'kompatibel' yang tidak bersifat mengganggu aktivitas enzimatik (Kartikorini et al., 2021).
Hasil isolasi sampel tanah juga menunjukkan morfologi  koloni  yang  berbeda  pada  masing-
masing  titik  sampling.  Hasil  morfologi  morfologi koloni  bakteri  dari  ketiga  lokasi  cenderung menunjukkan  bentuk  yang  sama  yakni circular (bulat) terdiri dari 4 isolat (D1, D2, D5 dan B2) dan Irregular (tidak beraturan) terdiri dari 5 isolat (D3, D4,  T1,T2  dan  B1)  dan  elevasi  koloni  yang  sama yakni Flat (rata)  terdiri  dari  2  isolat  (D2  dan  D4) dan raised (sedikit  menonjol)  terdiri  dari  7  isolat (D1,D3,D5,  T1,T2,  B1  dan  B2)  dengan  perbedaan signifikan  terlihat  pada  pola  warna,  tekstur permukaan  koloni  dan  tepi  koloni.  perbedaan morfologi  koloni  dapat  menjadi  tolok  ukur  dalam mengidentifikasi  jenis  bakteri,  karena  masing- masing  spesies  bakteri  dapat  membentuk  koloni spesifik dalam media tertentu.
Menurut  penelitian  Lacasta et  al dalam (Erlambang  et  al.,  2019)  dan  Golding et  al dalam (Lestari et al., 2021), perbedaan struktur morfologi koloni  bakteri  disebabkan  oleh  2  faktor  utama yaitu  kepadatan  medium  nutrien  tumbuh  bakteri dan  tingkat  kekerasan  medium  tumbuh,  yang dimana kedua faktor tersebut merupakan hasil dari konsentrasi agar yang ditambahkan dalam medium sebagai  pemadat.  Semakin  tinggi  konsentrasi  agar yang  diberikan  maka  lebar  percabangan  arah tumbuh bakteri akan lebih tipis, hal ini dikarenakan sehingga  bakteri  tidak  dapat  bergerak  secara leluasa  akibat medium  tumbuh yang  terlalu  keras. Umumnya  tipe  koloni  yang  tumbuh  pada  jenis medium tersebut, akan tumbuh pada satu titik dan membentuk  pola  tumbuh  radial  atau circular (bulat) dengan warna koloni yang transparan atau buram  (Hendri    et  al.,  2021).  Selain  konsentrasi agar, konsentrasi nutrien dalam medium juga turut andil  dalam  membentuk  pola  koloni,  dimana semakin  tinggi  konsentrasi  nutrien  dalam  medium maka  pergerakan  dan  penyebaran  bakteri  akan semakin  cepat  sehingga  pada  umumnya  medium jenis  ini  memiliki  koloni  yang circular (bulat) ataupun Irregular (tidak  beraturan)  dengan struktur yang kompak dan warna koloni jelas (tidak transparan) (Foeh & Gaina, 2017).
Identifikasi  mikroskopis  dari  isolat  yang berhasil diisolasi menunjukkan bahwa keseluruhan isolatnya  adalah  Gram  negatif,  dengan  7  isolat menunjukkan hasil uji katalase positif dan 2 isolat menunjukkan  hasil  katalase  negatif.  Bakteri Gram  negatif  tergolong  sebagai  jenis  bakteri yang  memiliki  membran  sel  yang  tipis  sehingga selama proses pewarnaan Gram, pewarna dasar kristal  violet  dapat  dihapus  oleh  alkohol,  dan sel  bakteri  kemudian  diwarnai  oleh  pewarna
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....
pembanding  seperti  safranin  yang  berwarna merah atau pink (Lestari et al., 2017). Menurut Aryal dalam  (Sugiharti  &  Gayatri,  2021),  bakteri  Gram negatif  ditandai  dengan  karakteristik  dinding  sel  tipis yang  memiliki  ketebalan  sekitar  8  -  12  nm,  memiliki tiga lapisan membran yang terdiri dari membran luar, membran peptidoglikan, dan membran plasma, serta memiliki  membran  periplasma  yang  khas  dan kandungan  lipid  dan  lipoprotein  yang  tinggi.  Katalase positif  yang  ditunjukkan  oleh  isolat  menunjukkan bahwa bakteri tersebut memiliki enzim katalase yang mampu mengubah hydrogen peroksida (H2O2), yang merupakan  produk  sampingan  dari  metabolisme aerobik  dan  bersifat  letal,  menjadi  molekul  oksigen dan air.
Hasil  penelitian  juga  berhasil  menunjukkan bahwa 3 isolat bersifat motil dan 6 isolat bersifat non- motil,  yang  berarti  isolat  bakteri  memiliki  flagella sebagai alat lokomosi dan juga 1 isolat menunjukkan hasil  uji  Hidrogen  sulfida  (H2S)  positif  dan  8  isolat negatif  serta  5  isolat  menunjukkan  hasil  uji  oksidase positif dan 4 isolat oksidase negatif. Menurut Arora et al dalam  (Ali  et  al.,  2019),  Hydrogen  sulfide  bersifat racun  bagi  sel  bakteri  sehingga  hanya  beberapa bakteri  yang  mampu  memproduksi  hydrogen  sulfide dalam  rantai  metabolismenya.  Sedangkan  menurut Aryal,  S  dalam  (Lestari  et  al.,  2021),  uji  oksidase digunakan untuk mendeteksi adanya sistem sitokrom oksidase  yang  akan  mengkatalisis  transpor  elektron antara  donor  elektron  pada  bakteri  dan  zat  warna redoks-tetrametil-p-fenilen-diamin,  dimana  semua bakteri  yang  oksidase-positif  bersifat  aerobik  dan dapat  menggunakan  oksigen  sebagai  akseptor elektron terminal dalam respirasi.
Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  ke-9  isolat bakteri mampu mereduksi ketiga jenis logam dengan variasi  daya  reduksi  yang  berbeda-beda.  Hasil  uji screening kemampuan isolat dalam mereduksi logam Hg  selama  3  hari  percobaan  menunjukkan penurunan yang signifikan, dimana terdapat 3  isolat yang menunjukkan persentase daya reduksi tertinggi yaitu  di  atas  70%.    Adapun  jenis  isolat  yang menunjukkan  persentase  tinggi        dalam  mereduksi logam Hg adalah isolat B1, T1 dan T2.
Menurut  Celo et  al dalam  (Kartikorini  et  al., 2021),  polusi  merkuri  di  lingkungan  akuatik  selain dari aktivitas manusia yang melakukan pembuangan merkuri  di  perairan,  juga  dapat  disebabkan  karena mekanisme  metilasi  merkuri  oleh  mikroorganisme tertentu terutama bakteri pereduksi sulfat dan  besi. Sulfur,  karbon  organik,  dan  komposisi      sedimen lainnya      dapat      mempengaruhi  produksi  MeHg
dengan  mengubah  jumlah  Hg  anorganik  yang tersedia  secara  hayati  dan  dengan  merangsang aktivitas mikroba yang mengalami metilasi (Ganing et al.,  2023).  Berdasarkan  sebuah  penelitian  yang  di tunjukkan  dalam  ScienceDaily  dalam  (Erlambang  et al.,  2019),  bakteri  dapat  mereduksi  merkuri  (Hg) karena  mampu  memproduksi  sebuah  enzim  yang dikenal  sebagai  MerB,  dimana  enzim  tersebut mampu  memberi  bakteri  kemampuan  untuk mengubah  metilmerkuri  menjadi  bentuk  merkuri yang  kurang  beracun  yang  menimbulkan  risiko lingkungan  yang  jauh  lebih  sedikit,  suatu  sifat  yang memungkinkan mereka bertahan hidup di lingkungan yang kaya merkuri.
Menurut  Tiquia-Arashiro  dalam  (Suryono  et al., 2020), terdapat 5 mekanisme bakteri untuk dapat mereduksi  Pb,  diantaranya  :  (1)  mengikat  ion logam Pb  pada  permukaan  dinding  sel  .Dinding  sel  bakteri Gram-positif  dan  Gram-negatif  secara  alami membawa  muatan  negatif,  yang  mengikat  kation logam  dan  mengatur  pergerakan  logam  melintasi membran.  Gugus  karboksil  pada  dinding  sel  bakteri Gram-positif adalah tempat pengikatan utama kation logam,  sedangkan  gugus  fosfat  berkontribusi signifikan  terhadap  pengikatan  logam  pada  spesies Gram- negative (Gadd, 2009); (2) Penyerapan logam dengan  mengeluarkan  zat  polimer  ekstraseluler (EPS).  Polimer  ekstraseluler  adalah  campuran kompleks  dari  polimer  polianionik  dengan  berat molekul  tinggi,  seperti  protein,  asam  humat, polisakarida, dan asam nukleat yang mengikat logam kationik dengan tingkat spesifisitas dan afinitas yang berbeda, sehingga kation logam Pb dapat diikat dan ditransformasi menjadi zat non-toksik; (3) Bioakumulasi timbal oleh metallothionein.
Metallothionein adalah protein dengan berat molekul  rendah  yang  kaya  sistein  dan  berperan dalam  memfasilitasi  penyerapan  atau  bioakumulasi logam  beracun  di  dalam  sel,  dimana  mekanisme resistensi  ini  sering  kali  ditularkan  melalui  plasmid, yang  memfasilitasi  penyebarannya  dari  satu  sel  ke sel  lainnya  (Das et  al .  2016).  Bakteri  mensintesis metallothionein sebagai respons terhadap peningkatan  paparan  logam;  (4)  Pengendapan timbal.  Pengendapan  adalah  mekanisme  lain  yang digunakan oleh beberapa bakteri untuk menurunkan  konsentrasi  logam  bebas  menjadi kompleks  yang  tidak  larut  dan  oleh  karena  itu mengurangi  bioavailabilitas  dan  toksisitasnya. Proses  pengendapan  terjadi  di  luar  (ekstraseluler) atau  di  dalam  (intraseluler)  sel;  (5)  Pengikatan timbal oleh siderophores. Siderophores adalah kelas
utama  agen  kelator  yang  disekresikan  oleh mikroorganisme  di  berbagai  habitat.  Senyawa  ini berfungsi  terutama  sebagai  mediator  transportasi besi  ke  sel.  Meskipun  pendamping  logam  ini khusus  untuk  besi,  mereka  juga  mengikat  secara efektif dengan logam lain di luar sel seperti halnya logam timbal (Arimurti et al., 2022).
Hasil  uji screening kemampuan  isolat  dalam mereduksi  logam  Cu  selama  3  hari  percobaan menunjukkan  penurunan  yang  sangat  signifikan, dimana  terdapat  1  isolat  yang  menunjukkan persentase daya reduksi tertinggi yaitu di atas 80% yaitu  isolat  T1  mampu  mereduksi  logam  Cu  dari konsenstrasi 250 ppm menjadi 45,005 ppm dengan daya  reduksi  sebesar  82%.  Ke-delapan  isolat lainnya juga menunjukkan persentase daya reduksi yang  sangat  tinggi  yaitu  rata-rata  di  atas  70%, diantaranya  diantaranya  isolat  T2  dengan  daya reduksi 79,12%, isolat D3 sebesar 78,91%, isolat D1 sebesar  78,30%,  isolat  D4  sebesar  77,87%,  isolat D5  sebesar  77,04%,  isolat  B1  sebesar  75,08%, isolat  B2  sebesar  73,20%  serta  isolat  D2  sebesar 67,58%.  Menurut  Romadhon  et  al.,  (2023), mekanisme reduksi tembaga oleh bakteri meliputi: (1)  ekspor  tembaga  transmembran,  terjadi  dari sitoplasma  ke  dalam  ruang  periplasma  atau  ke dalam  lingkungan  ekstraseluler;  (2)  penyerapan tembaga  oleh  metallothionein;  dan  (3)  oksidasi Cu(i) oleh oksidase multi-tembaga untuk menghasilkan ion Cu(ii) yang kurang beracun.
Berdasarkan hasil uji karakteristik menunjukan  bahwa  isolat  T1  tergolong  spesies Pseudomonas  aeruginosa .  Bakteri  ini  pada dasarnya  memiliki  enzim  katalase  yang  mampu menguraikan  senyawa hidrogen  peroksida (H2O2) menjadi  air  (H2O)  dan  gas  oksigen  (O2).  Senyawa hidrogen peroksida (H2O2) ini bersifat antimikroba sehingga mayoritas dapat membunuh bakteri yang tidak  memiliki  enzim  katalase.  Bakteri  ini  juga memiliki enzim sitokrom oksidase yang merupakan enzim  kompleks  yang  berperan  dalam  fosforilasi oksidatif. Selain itu, bakteri ini mampu memfermentasikan  manitol,  sitrat  dan  arginine sebagai  salah  satu  sumber  karbonnya.Isolat  T2 diestimasi  termasuk  dalam  spesies Klebsiella pneumonia . Spesies ini memiliki kemampuan untuk memfermentasikan  berbagai  jenis  gula  dan  asam amino  seperti  glukosa,  manitol,  xilosa,  urease,  vp, sitrat,  inositolf,  sorbitol,  rhamnosa,  sukrosa, laktosa,  arabinosa,  adonitol,  raffinosa  dan  salisin, yang dimana hasil fermentasi tersebut dipergunakan  oleh bakteri sebagai sumber karbon
dan  nitrogen.  Sama  halnya  dengan  isolat  T2, isolat B1 memiliki kemampuan dalam memfermentasikan  berbagai  jenis  karbohidrat dan  asam  amino  seperti  ornitin  ,  glukosa  , manitol , xilosa , vp , sitrat , sorbitol , rhamnosa , sukrosa  ,  laktosa  ,  arabinosa  ,  raffinosa  ,  salisin dan  arginin,  yang  dimana  hasil  fermentasi tersebut  juga  digunakan  sebagai  cadangan energi dalam bentuk karbon dan nitrogen. Isolat B2  ini  termasuk  dalam  spesies Enterobacter sp. Pembeda  isolat  T2  dan  B1  adalah,  dimana  isolat B1  positif  mampu  memfermentasikan  Ornitin sedangkan isolat T2 tidak mampu memfermentasikannya,  isolat  B1  tidak  mampu memfermentasikan Urease, Inositol dan Adonitol,  tetapi  sebaliknya  isolat  T2  mampu memfermentasikan  senyawa-senyawa  tersebut. Oleh  karena  itu  kedua  isolat  ini  tergolong  dua spesies yang berbeda (Lestari et al., 2021).
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  dapat menunjukkan  bahwa  ke-sembilan  isolat  memiliki kemampuan  dalam  mereduksi  ketiga  jenis  logam, dimana  isolat  terbaik  ditunjukkan  oleh  isolat  T1 yang  diestimasi  berdasarkan Bergey’s berasal  dari kelompok Pseudomonas  aeruginosa .  Mekanisme reduksi  logam  dari  ke-  sembilan  isolat  mungkin terdapat  perbedaan,  tetapi  pada  dasarnya terdapat  lima  mekanisme  utama  resistensi  logam berat  pada  barier  ekstraselular  bakteri  yaitu transpor  aktif  ion  logam  (efflux),  sekuestrasi ekstrasel,  ekuestrasi  intrasel,  reduksi  ion  logam (Erlambang et al., 2019).

## Kesimpulan
Isolat bakteri yang mampu mereduksi logam berat Cu  dan  Hg  dari  sedimen  mangrove  Desa  Sawohan Kecamatan  Buduran  Sidoarjo.  Isolat  dengan kemampuan  reduksi  tertinggi  adalah  isolat  T1 dengan  daya  reduksi  Cu  sebesar  82%,  dan  logam Hg sebesar 72,61%. Hasil identifikasi secara manual menggunakan buku Bergey’s, teridentifikasi bahwa isolat bakteri dengan kemampuan reduksi tertinggi diestimasi  berasal  dari  kelompok  Pseudomonas aeruginosa.
Saran,  Isolate bakteri yang  dapat  mereduksi logam  berat  Cu  dan  Hg  perlu  diuji  lebih  lanjut  di laboratorium  untuk  mengetahui  kemampuan isolate dalam mereduksi logam berat jenis lainnya dan  nantinya  akan  bermanfaat  untuk  mengurangi pencemaran logam di lingkungan mangrove.
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....

## Deklarasi Konflik Kepentingan
Pada  penelitian  ini  tidak  ada  konflik  kepentingan kepada  siapapun  baik  secara  personal  maupun secara institusi.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada  Majelis Pendidikan  Tinggi  dan  Pengembangan  Pimpinan Pusat  Muhammadiyah  yang  telah  mendanai penelitian  ini  dan  membimbing  peneliti  dalam menyelesaikan  penelitian  dan  publikasi  ini. Penelitian  ini  mendapat  hibah  Penelitian  Dasar dengan nomor kontrak: 1687.327/PD/I.3/D/2022.

## Daftar Rujukan
Agustiningrum, E., Hardarani, N., & Susanti, H. (2023).
Teknik  sterilisasi  eksplan  daun  lahung  (durio dulcis)  pada  media  ms  secara  in  vitro. AGROSCRIPT:  Journal  of  Applied  Agricultural Sciences , 5 (2), 65 – 80. https://doi.org/10.36423/agroscript.v5i2.1248 Ali,  H.,  Khan,  E.,  &  Ilahi,  I.  (2019).  Environmental chemistry  and  ecotoxicology  of  hazardous heavy  metals:  Environmental  persistence, toxicity,  and  bioaccumulation. Journal  of Chemistry , 2019 (2), 1 – 14. https://doi.org/10.1155/2019/6730305
Arimurti,  A.  R.  R.,  Rohmayani,  V.,  Romadhon,  N., Rahmani, T. P. D., Watson, L. J., Wahyuni, K. S.,  &  Ulumiya,  N.  (2022).  The  potency  of bacteria  isolated  from  the  hydroponic rockwool  of  field  mustard  (Brassica  rapa  L.) for  nitrogen  fixation  and  indole  acetic  acid (IAA)  production. Biogenesis:  Jurnal  Ilmiah Biologi , 10 (1). https://doi.org/10.24252/bio.v10i1.28451 Budiyanto,  R.,  Satriawan,  N.  E.,  &  Suryani,  A.
(2021).  Identifikasi  dan  uji  resistensi staphylococcus  aureus  terhadap  antibiotik (chloramphenicol  dan  cefotaxime  sodium) dari  pus  infeksi  piogenik  di  puskesmas proppo. Jurnal Kimia Riset , 6 (2), 154 – 162.
Erlambang,  B.  P.  D.,  Oktarianti,  R.,  &  Wathon,  S.
(2019).  Mikroorganisme  potensial  sebagai agen  hayati  pendegradasi  limbah  sampah plastik. BioTrends : Majalah Populer Bioteknologi , 18 – 26.
Fauzizah,  U.,  Utami,  B.,  &  Masykuri,  M.  (2022). Adsorbsi  ion  cd2+  dengan  kombinasi adsroben  cangkang  telur-tongkol  jagung teraktivasi  menggunakan  metode  batch. Seminar  Nasional  Kimia  Dan  Pendidikan Kimia XIII , 13 (1), 80 – 93.
Fitriani,  N.,  Ni’matuzahroh,  O’Marga,  T.  T.  N., Mohamed,  R.  M.  S.  R.,  Wahyudianto,  F.  E., Imron, M. F., Isnadina, D. R. M., & Soedjono, E.  S.  (2022).  Optimization  of  slow  sand filtration  for  the  raw  municipal  wastewater treatment  by  using  the  blood  cockle (anadara  granosa)  shell  as  an  alternative filter  media  through  the  response  surface methodology. Journal of Ecological Engineering , 23 (6), 100 – 111.
https://doi.org/10.12911/22998993/147833
Foeh,  N.  D.  F.  K.,  &  Gaina,  C.  D.  (2017).  Sari  buah lontar  sebagai  pengencer  alami  dalam mempertahankan kualitas spermatozoa babi. Jurnal Kajian Veteriner , 5 (1), 52 – 58. Ganing, M., Syafaatullah, A. Q., Asdiana, A., Yusuf, I.  S.,  Junianti,  F.,  &  Suleman,  I.  (2023). Pemanfaatan arang aktif dari tongkol jagung sebagai adsorben ion Pb 2+. In JTKM (Vol. 2,
Issue 2).
Hendri,  S.,  Handika,  R.,  Kenedi,  A.  K.,  &  Ramadhani, D.  (2021).  Pengembangan  modul  digital pembelajaran  matematika  berbasis  science, technology,  enginiring,  mathematic  untuk calon guru sekolah dasar. Jurnal Basicedu , 5 (4),
2395 – 2403.
https://doi.org/10.31004/basicedu.v5i4.1172
Hendri, S., Hendika, R., Kenedi, A. K., & Ramadhani, D.  (2021).  Pengembangan  modul  digital pembelajaran  matematika  berbasis  science, technology,  engineering,  mathematic  untuk calon  guru  sekolah  dasar. Jurnal  Basicedu ,
5 (4), 2395 – 2403.
Herdiansyah,  H.  (2018).  Pengelolaan  konflik sumber daya alam terbarukan di perbatasan dalam  pendekatan  ekologi  politik. Jurnal Hubungan  Internasional , 7 (2),  143 – 151. https://doi.org/10.18196/hi.72134
Imron,  M.  F.,  Kurniawan,  S.  B.,  &  Abdullah,  S.  R.  S. (2021).  Resistance  of  bacteria  isolated  from leachate  to  heavy  metals  and  the  removal  of Hg by Pseudomonas aeruginosa strain FZ-2 at different  salinity  levels  in  a  batch  biosorption system. Sustainable  Environment  Research , 31 (1). https://doi.org/10.1186/s42834-021- 00088-6
Irfan,  M.  (2014).  Isolasi  dan  enumerasi  bakteri tanah  gambut  di  perkebunan  kelapa  sawit PT.  Tambang  Hijau  Kecamatan  Tambang Kabupaten  Kampar. Jurnal  Agroteknologi , 5 (1), 1 – 7.
Ishak,  N.  I.,  Mahmudah,  M.,  Kasman,  K.,  Ishak,  E., Effendy,  I.  J.,  &  Fekri,  L.  (2023).  Analysis  of heavy  metal  content  in  martapura  river water,  South  Kalimantan  Province  in  2022. Journal  of  Fishery  Science  and  Innovation , 7 (1), 35 – 41. https://doi.org/10.33772/jsipi.v7i1.210 Ismail,  I.,  &  Moustafa,  T.  (2016).  Biosorption  of heavy  metals. Heavy  Metals:  Sources, Toxicity and Remediation Techniques , October , 131 – 174.
Jalilvand, N., Akhgar, A., Alikhani, H. A., Rahmani, H. A., & Rejali, F. (2020). Removal of heavy metals zinc,  lead,  and  cadmium  by  biomineralization of  urease-producing  bacteria  isolated  from iranian  mine  calcareous  soils. Journal  of  Soil Science  and  Plant  Nutrition , 20 (1),  206 – 219. https://doi.org/10.1007/s42729-019-00121-z Juharna, F. M., Widowati, I., & Endrawati, H. (2022).
Kandungan  logam  berat  timbal  (pb)  dan kromium (cr) pada kerang hijau (perna viridis) di  Perairan  Morosari,  Sayung,  Kabupaten Demak. Buletin  Oseanografi  Marina , 11 (2),
139 – 148. https://doi.org/10.14710/buloma.v11i2.41617 Kalaimurugan, D., Balamuralikrishnan, B., Durairaj, K., Vasudhevan, P., Shivakumar, M.  S., Kaul, T.,  Chang,  S.  W.,  Ravindran,  B.,  & Venkatesan,  S.  (2020).  Isolation  and characterization  of  heavy-metal-resistant bacteria and their applications in environmental bioremediation. International Journal  of  Environmental  Science  and
Technology , 17 (3), 1455 – 1462.
https://doi.org/10.1007/s13762-019-02563-5
Kartikorini,  N.,  Kunsah,  B.,  &  ...  (2021).  Efektivitas lama  perendaman  serbuk  kulit  jeruk  manis (citrus sinensis) terhadap bilangan peroksida pada minyak jelantah. The Journal of … , 2 (4),
216 – 224.
Kladsomboon,  S.,  Jaiyen,  C.,  Choprathumma,  C., Tusai,  T.,  &  Apilux,  A.  (2020).  Heavy  metals contamination  in  soil,  surface  water,  crops, and  resident  blood  in  Uthai  District,  Phra Nakhon Si Ayutthaya, Thailand.
Environmental  Geochemistry  and  Health ,
42 (2), 545 – 561.
https://doi.org/10.1007/s10653-019-00388-2
Lestari, S., Sudarmadji, S., Tandjung, S. D., & Santosa, S. J. (2017). Biosorpsi krom total dalam limbah cair  batik  dengan  biosorben  yang  dikemas dalam  kantung  teh  celup. Biosfera , 33 (2),  71. https://doi.org/10.20884/1.mib.2016.33.2.428
Lestari,  W.  Y.,  Nuroini,  F.,  &  Mukaromah,  A.  H.
(2021).  Gambaran  kadar  asam  urat  pada petani  di  Desa  Penaruban  Kecamatan Kaligondang Kabupaten Purbalingga.
Prosiding  Seminar  Nasional  Unimus , 4 (1),
1556 – 1563.
Mangungsong,  A.,  Soemarsono,  S.,  &  Zudri,  F. (2020).  Pemanfaatan  mikroba  tanah  dalam pembuatan pupuk organik serta peranannya terhadap  tanah  aluvial  dan  pertumbuhan bibit  tanaman  kakao. Jurnal  Agronomi Indonesia (Indonesian Journal of Agronomy) ,
47 (3), 318 – 325.
https://doi.org/10.24831/jai.v47i3.24721
Miharja,  D.  S.,  &  Sidharta,  I.  (2018).  Pengaruh pengelolaan  kelancaran  proses  produksi terhadap  kualitas  produk  migas  yang dimoderasi  peran  laboratorium. Jurnal Kontingen , 6 (1), 29 – 34.
Ndidiamaka Ezejiofor, A., Orish, C. N., & Akaranta,
O.  (2022).  Original  article  multi-organ inducedtoxicity  of  metal  mixture  (cdcl  2  , hgcl  2  ,  pb(no3),  and  the  ameliorative potentials  of  plantain  musa  paradisiaca  (f. musaceae)  stem  juice  on  male  wistar  rats. Int  J  Physiol  Pathophysiol  Pharmacol , 14 (4),
211 – 224. www.ijppp.org Poosinuntakul,  N.,  Parnklang,  T.,  Sitiwed,  T.,  Chaiyo, S., Kladsomboon, S., Chailapakul, O., & Apilux, A. (2020). Colorimetric assay for determination of  Cu  (II)  ions  using  L-cysteine  functionalized silver  nanoplates. Microchemical  Journal ,
158 (1), 1 – 8.
https://doi.org/10.1016/j.microc.2020.105101 Primadina,  N.,  Basori,  A.,  &  Perdanakusuma,  D.  S.
(2019).  Proses  penyembuhan  luka  ditinjau dari aspek mekanisme seluler dan molekuler. Qanun Medika , 3 (1), 31 – 43.
Rahman,  F.  A.,  Listari,  N.,  &  Jannah,  S.  W.  (2022).
Bioakumulasi  logam  berat  (pb)  pada  vegetasi mangrove famili rhizophoraceae di Teluk Lembar Kabupaten  Lombok  Barat. Bioscientist :  Jurnal
Ilmiah Biologi , 10 (2), 1273 – 1284. https://doi.org/10.33394/bioscientist.v10i2.5956
Identifikasi bakteri di mangrove Desa Sawohan Sidoarjo....
Romadhon, N., Ni’matuzahroh, N., Purnobasuki, H., Rohmayani, V., Arimurti, A. R. R., Riandi, M. I.,  &  Juniawan,  M.  F.  (2023). Fitoremediasi mangrove  dalam  penurunan  kadar  logam pb,  hg  dan  cu (r.  setiawan,  ed.;  setia).  UM Surabaya.
Sampurno, E. A., Yusrudin, Y., & Noor, M. T. (2017).
Pengaruh  jenis  umpan  terhadap  hasil tangkapan  kepiting  bakau  (scylla  sp)  pada alat  tangkap  bubu  di  Desa  Sawohan Kecamatan  Buduran  Kebupaten  Sidoarjo. Jurnal TECHNO-FISH , 1 (2), 65 – 77.
Sari,  D.  P.,  Amir,  H.,  &  Elvia,  R.  (2020).  Isolasi bakteri  dari  tanah  tempat  pembangan  akhir (tpa)  air  sebakul  sebagai  agen  biodegradasi limbah  plastik  polyethylene. ALOTROP :
Jurnal  Pendidikan  Dan  Ilmu  Kimia , 4 (2),  98 – 106.
Sari,  R.,  Bintari,  Y.  R.,  &  Damayanti,  D.  S.  (2022). Pengaruh variasi konsentrasi sukrosa terhadap derajat keasaman dan total bakteri asam  laktat  kombucha  daun  sirsak  (Annona muricata  L.). Jurnal  Kedokteran  Komunitas , 10 (1), 1 – 7.
Sugiharti,  N.,  &  Gayatri,  Y.  (2021).  Profil kemampuan  berpikir  kritis  siswa  sma muhammadiyah kota surabaya pada pembelajaran biologi. Jurnal Pedago Biologi , 9 (1), 34 – 40.
Suryono,  S.,  Taufiq-SPJ,  N.,  Pratikto,  I.,  &  Ario,  R.
(2020). Sebaran mangrove di Desa Bumiharjo Kecamatan  Keling  Kabupaten  Jepara. Buletin Oseanografi Marina , 9 (2), 117 – 124. https://doi.org/10.14710/buloma.v9i2.29067
Viesser,  J.  A.,  Sugai-Guerios,  M.  H.,  Malucelli,  L.  C.,
Pincerati,  M.  R.,  Karp,  S.  G.,  &  Maranho,  L.  T. (2020). Petroleum-tolerant rhizospheric bacteria:  isolation,  characterization  and bioremediation  potential. Scientific  Reports , 10 (1),  1 – 11.  https://doi.org/10.1038/s41598- 020-59029-9
Wang, Y., Luo, Y., Zeng, G., Wu, X., Wu, B., Li, X., & Xu, H.  (2020).  Characteristics  and  in  situ remediation effects of heavy metal immobilizing  bacteria  on  cadmium  and  nickel co-contaminated  soil. Ecotoxicology  and Environmental Safety , 192 .
https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2020.110294