Aktivitas antioxidan ekstrak metanol bunga Gmelina elliptica dari Kalimantan Timur
Antioxidant activity of methanol extract of Gmelina elliptica from East Kalimantan
Usman 1,2 , Sukemi 1,3,4 *, Yessi Maulida Mardian 5 , Herliani 5 , Eadvin Rosrinda Awang Sari 6 , Enos Tangke Arung 2,7 1 Program Sarjana Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia
2 Program Magister Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia
3 Pusat Unggulan IPTEKS Perguruan Tinggi Bahan Alam dari Hutan Tropika Lembap (PUI-PT OKTAL), Universitas Mulawarman, Samarinda,75119,  Indonesia
4 SMA Negeri 2 Samarinda, Kalimantan Timur, 75117, Indonesia
5 Program Studi Sarjana Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan,Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia
6 Laboratorium Biologi, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia
7 Laboratorium Kimia Hasil Hutan dan Energi Terbarukan, Fakultas Kehutanan, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, 75123, Indonesia *sainusman@ymail.com

## Abstrak
Gmelina  elliptica digunakan  penduduk  di  desa  Talisayan,  Kalimantan  Timur,  untuk  mengobati otorrhea . Penelitian tentang aktifitas biologi dan antioksidan dari G. elliptica telah banyak dilakukan. Walaupun demikian penelitian aktivitas antioksidan bunga G. elliptica dari Kalimantan  Timur belum dilakukan.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menganalisa  aktivitas  antioksidan  ekstrak  kasar  metanol bunga G.  elliptica dari  desa  Talisayan.  Aktivitas  antioksidan  menggunakan  uji  penangkapan  radikal 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl  (DPPH).  Aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH  dari  ekstrak  mencapai 89,77%  pada  konsentrasi  0,0050  mg/ml.  Jadi  bunga G.  elliptica dari  Kalimantan  Timur  berpotensi sebagai sumber antioksidan.
Kata kunci: Antioksidan, Bunga, DPPH, Gmelina elliptica

## Abstract
Gmelina  elliptica was  used  by  villager  at  Talisayan  village,  East  Kalimantan,  to  treat otorrhea . Researches  on  biological  and  antioxidant  activities  of G.  elliptica have  been  done.  However, researches  on  antioxidant  activities  of G.  elliptica flower  from  East  Kalimantan  have  not  been conducted. This research was carried out to analyze antioxidant activity of crude methanol extract of G.  elliptica flower  from  Talisayan  Village.  Antioxidant  activity  was  measured  using  2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging assay. The DPPH radical scavenging activity of the extract reached  89.77%  at  the  concentration  of  0.0050  mg/ml.  Thus,  the  flower  of G.  elliptica from  East Kalimantan is potential as antioxidant sources.
Keywords: Antioxidant, DPPH, Flower, Gmelina elliptica
Diajukan: 5 Juni 2022 Direvisi: 18 November 2022 Diterima: 30 November 2022

## Pendahuluan
Indonesia  dikenal  sebagai  negara  terbesar  kedua keaneka  ragaman  hayatinya  didunia,  dengan  sekitar 40.000  tanaman  endemik  dan  6.000  tanaman  obat (Nurlaili,  dkk.,  2019).  Salah  satu  tanaman  yang
digunakan  sebagai  obat  tradisional  dan  dapat  dijumpai di Indonesia adalah Gmelina elliptica ( Gmelina asiatica L.), G.  elliptica merupakan  tanaman  pohon  kecil  atau semak  besar  yang  tergolong  dalam  famili  Lamiaceae (Kannan, dkk., 2012; Jeeva, dkk., 2019).
Tanaman  ini  dilaporkan  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  seperti  alkaloid,  fenol,  fitosterol, flavonoid, furan,saponin, steroid, tannin, dan triterpenoid  (Jeeva,  dkk.,  2019).  Di  desa  Talisayan, Kabupaten  Berau,  Kalimantan  Timur,  sebuah  keluarga memanfaatkan  buah G.  elliptica untuk  menyembuhkan penyakit  telinga  yang  mereka  kenal  dengan  “congek” atau “cullik”. Bagian aerial, daun, dan akar G. elliptica digunakan  untuk  mengobati  demam,  disuria,  kencing manis, kencing  nanah, ketombe,  luka, penyakit kuning, penyakit  hati,  rematik  dan  sifilis  (Jeeva,  dkk.,  2019). Beberapa  ekstrak  daun,  akar,  kayu,  kulit  kayu,  biji, buah,  dan  bagian  aerial G.  elliptica memiliki  aktivitas antikanker,  antihiperglikemik,  antihipoglikemik,  anti- mikroba,  antioksidan,  antiproliperatif,  anti-radang,  dan nematidis (Jeeva, dkk., 2019).
Suatu spesies tumbuhan dari lokasi yang berbeda menunjukkan  kandungan  metabolit  sekunder  dan aktivitas  biologis,  termasuk  aktifitas  antioksidan  yang berbeda  (Ghasemzadeh,  dkk.,  2015;  Nurlaili,  dkk., 2019; Kusuma, dkk., 2020). Penelitian tentang aktivitas biologis, terutama aktivitas antioksidan bunga G.  elliptica dari  desa  Talisayan  belum  pernah dilaporkan. Berdasarkan alasan tersebut, maka penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan  ekstrak  bunga G.  elliptica dari  desa Talisayan.

## Metode Penelitian

## Pengambailan Sampel dan Bahan Kimia
Bunga G.  elliptica dikumpulkan  dari  desa Talisayan,  Kabupaten  Berau,  Provinsi  Kalimantan Timur, Indonesia. Sampel diidentifikasi di Laboratorium Anatomi dan Sistematika, Fakultas MIPA Universitas  Mulawarman  oleh  Dr.  Syafrizal,  MP.  dan Spesimen  voucher  (XIX.Ver.G  /  1)  disimpan  di Laboratorium  Biologi  Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu Pendidikan Universitas Mulawarman.
Bunga  dibersihkan  dari  debu  menggunakan  air mengalir  dan  dikeringkan  di  bawah  naungan  selama satu  pekan.  Bunga  kering  dimaserasi  dengan  metanol dalam  wadah  kaca  dengan  teknik batch .  Campuran dibiarkan selama 24 jam kemudian disaring menggunakan  kertas  saring.  Larutan  ekstrak  metanol dipekatkan  menggunakan  evaporator  pada  suhu  40ºC kemudian  disimpan  dalam  desikator.  Semua  bahan kimia  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  dibeli  dari Sigma-Aldrich.

## Tes Skrining Fitokimia
Uji  skrining  fitokimia  menggunakan  metode/uji perubahan  warna  menggunakan  perekasi  tertentu untuk mendeteksi  kandungan  metabolit  sekunder  dalam sampel (Tiwari, dkk., 2011; Madappa & Bopaiah, 2012; Ugochukwu, dkk., 2013; Khanam, dkk., 2015; Sukemi, 2016).

## Penentuan Kandungan Total Senyawa Fenolik
Metode Folin-Ciocalteau digunakan untuk penentuan  kandungan  total  senyawa  fenolik  dalam sampel  (Dhona,  dkk.,  2020).  Sebanyak  2  ml  pereaksi Folin-Ciocalteau  0,2  N  ditambahkan  ke  dalam  0,4  ml larutan  sampel  (dalam  metanol).  Campuran  dihomogen menggunakan  vortex,  kemudian  ditambahkan  1,6  ml natrium  karbonat  7,5%.  Campuran  dihomogenkan menggunakan  vortex  dan  dibiarkan  pada  suhu  kamar selama  2  jam.  Dengan  menggunakan  spektrofotometer UV-Vis,  absorbansi  campuran  diukur  pada  panjang gelombang  760  nm.  Dilakukan  pengujian  yang  sama terhadap asam galat dengan berbagai variasi konsentrasi sebagai  standar. Total senyawa  fenolik sampel dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier  standar  asam galat.

## Penentuan Kandungan Total Senyawa Flavonoid
Penentuan total senyawa flavonoid dalam sampel diuji  menggunakan  metode  warna  dengan  aluminium klorida  (Dhona,  dkk.,  2020).  Dipipet  1  ml  sampel (dalam metanol) ke dalam tabung reaksi dan sebanyak 2 ml  aluminium  klorida  2%  ditambahkan  ke  dalamnya. Campuran  dihomogenkan  menggunakan  vortex  dan didiamkan pada suhu kamar selama satu jam. Kemudian absorbansi  campuran  diukur  pada  panjang  gelombang 420  nm  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Dilakukan  hal  yang  sama  terhadap  kuersetin  dengan berbagai  variasi  konsentrasi  sebagai  standar.  Total senyawa  flavonoid  sampel  dihitung  menggunakan persamaan regresi linier dari standar kuersetin.

## Penentuan Aktivitas Antioksidan
Aktivitas antioksidan sampel diuji menggunakan uji  penangkapan  radikal  DPPH  (Dhona,  dkk.,  2020). Sebanyak  2  ml  dari  setiap  konsentrasi  larutan  sampel (dalam  metanol)  dicampur  dengan  2  ml  larutan  radikal DPPH  0,1  mM  (dalam  metanol).  Campuran  diaduk menggunakan  vortex  selama  beberapa  detik  dan didiamkan  selama  30  menit  dalam  kondisi  gelap. Absorbansi campuran diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm.  Vitamin  C  digunakan  sebagai  pembanding. Aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH  dihitung  sebagai persentase aktivitas penangkapan (AP) sebagai berikut:
AP (%) = [1-((A1-A2)/A0)] x 100
dimana  A0  adalah  absorbansi  larutan  DPPH (tanpa  sampel  /  vitamin  C),  A1  adalah  absorbansi campuran antara  larutan DPPH dan sampel /  vitamin C dan  A2  adalah  absorbansi  sampel  /  vitamin  C  (tanpa larutan radikal DPPH).

## Hasil dan Pembahasan
Ekstrak kasar metanol bunga G. eliptica berupa padatan berwarna coklat. Metabolit sekunder dari ekstrak adalah alkaloid, fenolik, flavonoid dan terpenoid. Total fenolik dan total flavonoid ekstrak adalah 41,46±3,24 mg/g
Gambar 1.   Aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH oleh ekstrak metanol bunga G. elliptica (MG) dan Vitamin C (AA)
ekstrak  dan  14,82±1,41  mg/g  ekstrak.  Aktivitas penangkapan  radikal  DPPH  ekstrak  kasar  metanol bunga G. elliptica ditunjukkan pada Gambar 1.
Aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH  ekstrak metanol  bunga  G.  eliptica  meningkat  dengan  semakin meningkatnya konsentrasi dan  mencapai optimum  pada konsentrasi 0,005  mg/ml dengan  aktivitas penangkapan sebesar  89,77%.  Dibandingkan  dengan  vitamin  C, ekstrak  menunjukkan  aktivitas  yang  rendah.  Namun pada konsentrasi 0,010  mg/ml tidak terdapat perbedaan nyata dalam aktivitas penangkapan ekstrak dan  vitamin C.
Aktivitas  penangkapan  ekstrak  berhubungan dengan senyawa fenoliknya (Dudonné, 2009). Senyawa fenol  dalam  bentuk  flavonoid  dapat  bertindak  sebagai antioksidan  dan  memiliki  kemampuan  untuk  mengkap radikal  DPPH  dengan  mendonasikan  hidrogennya  (Al- Amiery,  2019;  Amić,  dkk.,  2003;  Nur,  dkk.,  2019). Penelitian ini mengindikasikan bahwa aktivitas penangkapan  radikal  DPPH  dari  ekstrak  disebabkan oleh kandungan senyawa fenolik dan flavonoidnya.

## Simpulan
Telah  dilakukan  penelitian  aktivitas  antioksidan ekstrak  metanol  bunga G.  elliptica dan  aktivitas penangkapan radikal DPPH-nya tinggi dengan persentase  aktivitas  penangkapan  sebesar  89,77%  pada konsentrasi 0,0050 mg/ml. Bunga G. elliptica dari desa Talisayan  memiliki  potensi  sebagai  agen  penangkap radikal  bebas.  Penelitian  lebih  lanjut  masih  diperlukan untuk  mengetahui  kandungan  kimia  yang  berperan dalam ekstrak dan aktifitas biologis lainnya.

## Daftar Pustaka
Al-Amiery,  A.A.,  Kadhum,  A.H.,  Obayes,  H.  R.,  & Mohamad.  A.B.  (2013).  Synthesis  and  antioxidant
activities of novel 5-chlorocurcumin, complemented by semiempirical calculations. Bioinorganic Chemistry  and  Applications,  2013, 1-7 . doi: 10.1155/2013/354982
Amić, D., Davidović-Amić, D., Bešlo, D., & Trinajstić, N.  (2003).  Structure-radical  scavenging  activity relationships of flavonoids. Croatica Chemica Acta, 76 (1), 55-61. https://hrcak.srce.hr/103057
Dhona, T.R., Lumowa, S.V.T., Arung, E.T., & Sukemi.
(2020).  Secondary  metabolites  and  DPPH-radicals scavenging  activity  of  crude  methanol  extract  of Gmelina  elliptica leaves  from  Berau  District, Indonesia. Proceeding 4th ICTROPS 2020. Samarinda: Universitas Mulawarman, 64-66.
Dudonné,  S.,  Vitrac,  X.,  Coutière,  P.,  Woillez,  M.,  &
Mérillon, J. (2009). Comparative study of antioxidant  properties  and  total  phenolic  content  of 30  plant  extracts  of  industrial  interest  using  DPPH, ABTS,  FRAP,  SOD,  and  ORAC assays. Journal Agricultural  and  Food  Chemistry,  57 (5),  1768– 1774. doi: 10.1021/jf803011r
Ghasemzadeh,  A.,  Jaafar,  H.Z.E.,  Rahmat,  A.,  & Ashkani, S. (2015). Secondary metabolites constituents and antioxidant, anticancer and antibacterial  activities  of  Etlingera  elatior  (Jack) R.M.Sm  grown  in  different  locations  of  Malaysia. BMC Complementary  and  Alternative  Medicine,
15 (1), 335. doi: 10.1186/s12906-015-0838-6
Jeeva,  S.,  Florence,  A.  R.,  &  Sujin  R.M.  (2019). Therapeutic  biology  of  Gmelina  asiatica  Linn.  In V.R. Mohan, V.R., A. Doss, & P.S. Tresina.  (Eds.), Ethnomedicinal  plants  with  therapeutic  properties (pp.  113-123).  Waretown,  USA:  Apple  Academic Press.
Kannan,  R.,  Prasant,  K.,  &  Babu,  V.U.  (2012). Botanical  pharmacognosy  of  stem  of Gmelina asiatica Linn. Acient Science of Life, 31 (4), 190-193. doi: 10.4103/0257-7941.107347
Khanam,  Z.,  Wen,  C.S.,  &  Bhat,  I.U.H.  (2015). Phytochemical  screening  and  antimicrobial  activity of  root  and  stem  extracts  of  wild Eurycoma longifolia Jack  (tongkat  ali). Journal  of  King  Saud
University - Science, 27 (1), 23-30. doi: 10.1016/j.jksus.2014.04.006
Kusuma,  I.W.,  Rahmini,  Arung,  E.T.,  Pramono,  A.Y., Erwin,  & Supomo. (2020). Biological activities and phytochemicals  of Hyptis  capitata grown  in  East Kalimantan,  Indonesia. Journal  of  Applied  Biology
& Biotechnology, 8 (2), 58-64. doi: 10.7324/JABB.2020.80210
Madappa,  M.B.  &  Bopaiah,  A.K.  (2012).  Preliminary phytochemical  analysis  of  leaf  of Garcinia  gummi- gutta from Western Ghats. Journal of Pharmacy and Biological  Science,  4 (1),  17-27.  doi:  10.9790/3008- 0411727
Nur, S., Sami, F.J., Wilda, R., Awaluddin, A., & Afsari,
M.I.A.  (2019).  Correlation  between  total  phenolic and  flavonoid  contents  of  jati  putih  ( Gmelina arborea  Roxb. )  leaves  extract  and  fraction  toward antioxidant activity. Galenika Journal of Pharmacy, 5 (1), 33-42.
doi: 10.22487/j24428744.2019.v5.i1.12034
Nurlaili,  Eliani,  N.B.N.,  Lestari,  F.,  &  Sukemi.  (2019). DPPH  radical  scavenging  activity  of  methanol extract  of  Indonesian Etlingera  elatior  flower  and leave.  Journal  of  Physics:  Conference  Series, 1277 ,1-3.  doi: 10.1088/1742-6596/1277/1/012021
Sukemi.  (2016). Study  on  the  potential  of  natural products as antioxidant and natural fiber for cotton fibers. Bangkok, Thailand: King Mongkut's
University of Technology Thonburi.
Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G., & Kaur, H. (2011).  Phytochemical  screening  and  extraction:  A review. Internationale  Pharmaceutica  Sciencia,
1 (1), 98-106.
Ugochukwu,  S.C.,  Uche,  A.,  &  Ifeanyi,  O.  (2013) Preliminary  phytochemical  screening  of  different solvent  extracts of  stem  bark  and  roots of Dennetia tripetala G.  Baker. Asian  Journal  of  Plant  Science and Research, 3 (3), 10-13.