SELEKSI KETAHANAN BIBIT KAKAO  ( Theobroma cacao L.)

## TERHADAP  POLYETHYLENE GLYCOL
Mohammad Taufiq Hidayat Agribisnis Perikanan, Pertanian, Universitas Islam Madura Hidayat.ike.16@gmail.com

## ABSTRAK
Peningkatan produksi kakao dapat dilakukan dengan perbaikan tanaman yang adaptif terhadap lahan marginal antara lain lahan kering. Salah satu upaya dapat  dilakukan  adalah  dengan  melakukan  seleksi  beberapa  klon  kakao  yang memiliki  potensi  toleran  terhadap  cekaman  kekeringan.  Senyawa  polyethylene Glycol  (PEG)  merupakan  senyawa  yang  dapat  digunakan  untuk  mensimulasi kondisi  lahan  yang  kering.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh perlakuan  PEG  pada  berbagai  klon  kakao.  Penelitian  dilaksanakan  secara Rancangan Acak Kelompok (RAK) yang disusun secara faktorial, diulang 3 kali. Faktor pertama adalah bahan tanam/klon , Faktor kedua adalah kosentrasi PEG. Pengamatan dilakukan terhadap tinggi tanaman, diameter  batang, jumlah daun, luas  daun,  bobot  kering  tanaman,  bobot  basah  tanaman,  panjang  akar  utama, jumlah  cabang  akar  sekunder,  jumlah  stomata  dan  daya  hantar  listrik.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak terdapat interaksi antara bahan tanam/klon dengan  kosentrasi  PEG  terhadap  semua  parameter  pengamatan,  Jenis  bahan tanam/klon  kakao  ICS  60  merupakan  klon  yang memiliki  rata-rata  pertumbuhan bibit terbaik.
Kata Kunci : Perlakuan polyethylene Glycol (PEG), Kakao

## ABSTRACT
Increased cocoa production can be done with the improvement of plants adapted to marginal lands include dry land. One effort that can be done is to do a selection of some cocoa clones that have the potential tolerant of drought stress. Compound  polyethylene  Glycol  (PEG)  is  a  compound  that  can  be  used  to simulate  the  conditions  of  dry  land.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of PEG  treatment  on  the  various  clones  of  cocoa.  Research  carried  out  in  a Random  Design  Group  (RAK)  is  arranged  in  a  factorial,  repeated  3  times.  The first factor is the planting material / clone. The second factor is the concentration of    PEG,  which  consists  of  5  levels,  Observations  were  made  on  plant  height, stem  diameter,  number  of  leaves,  leaf  area,  plant  dry  weight,  wet  weight  of plants, the main root length, number of branches of secondary roots, the number of  stomata  and  electrical  conductivity.  The  results  showed  that  there  was  no interaction  between  planting  materials  /  clones  with  PEG  concentration  of  all observation  parameters,  types  of  planting  materials  /  cacao  clones  ICS  60  is  a clone that has an average growth of the best seeds.
Keyword : Treatment polyethylene Glycol (PEG), Cacao

## PENDAHULUAN
Kakao  ( Theobroma  cacao L.)  merupakan  salah  satu  komoditas perdagangan  dan  sumber  pendapatan  rakyat,  serta  penerimaan  negara  yang
cukup penting. Persaingan perdagangan komoditas ini cukup ketat. Peningkatan daya  saing  dapat  diraih  melalui  upaya  peningkatan  produktivitas  dan  kualitas hasil,  serta  efisiensi.  Pertumbuhan  produksi  kakao  dunia  sendiri  relatif  tinggi dengan  rata-rata  sebesar  5,8  %  pertahunnya,  sementara  konsumsi  tumbuh  4,8 %  dengan  kecenderungan  terus  meningkat.  Indonesia  merupakan  pemasok ketiga terbesar di dunia setelah Pantai Gading dan Ghana dengan market share 13,6  %  dari  total  produksi  dunia  atau  sebesar  550.800  ton.  Pertumbuhan produksi  kakao  Indonesia  adalah  sebesar  5,1  %  per  tahun  (Soehargo,  2009). Upaya  peningkatan  produksi  kakao  di  Indonesia  pada  pokoknya  dapat  dicapai dengan melakukan intensifikasi dan perluasan tanam. Kedua cara tersebut telah dikembangkan  oleh  perkebunan  besar  Negara  maupun  perkebunan  swasta. Usaha  peningkatan  kakao  ini  akan  lebih  cepat  tercapai  bilamana  sektor  kakao rakyat  dibina  dan  dikembangkan.  Menurut  John  Bako  Baon  (1988)  selama beberapa tahun terakhir, perluasan areal kakao semakin digalakkan di Indonesia. Usaha  ini  diharapkan  dapat  meningkatkan  pemasukan  devisa  Negara  di  luar sektor  minyak  dan  gas.Dalam  usaha  peningkatan  produksi  kakao  melalui perluasan  tanam  sering  dihadapkan  dengan  adanya  pengembangan  areal pertanaman  ke  kawasan  marginal.  Lahan  marginal  ini  pada  umumnya  memiliki kesuburan tanah yang rendah di samping kandungan air tanah yang sedikit yang berarti  kondisi  tanah  sering  mengalami  kekeringan.  Lahan  kering  di  Indonesia mencapai  luas  40,7  juta  ha  (Direktorat  Bina  Rehabilitasi  dan  Pengembangan Lahan,  2008).  Lahan  kering  memiliki  karakteristik  yang  kurang  menguntungkan seperti  terbatasnya  air,  rendahnya  produktivitas  lahan,  tingginya  variabilitas kesuburan  tanah,  terbatasnya  spesies  tanaman  yang  dapat  ditanam  (Hamzah, 2003).  Kekeringan  merupakan  salah  satu  kendala  utama  dalam  produksi tanaman  kakao  khususnya  dalam  upaya  perluasan  tanaman  kakao  ke  lahan marginal yang sering mengalami kekeringan.
Kondisi  kekeringan  pada  tanaman kakao  dapat mengakibatkan tanaman mengalami cekaman air atau stess air. Cekaman air mempengaruhi semua fase pertumbuhan  tanaman,  baik  pertumbuhan  vegetatif  maupun  pertumbuhan generatif,  yang  pada  akhirnya  akan  mempengaruhi  hasil  tanaman.  Kekurangan air  pada  tanaman  terjadi  karena  ketersediaan  air  dalam  media  tidak  cukup  dan transpirasi  yang  berlebihan  atau  kombinasi  kedua  faktor  tersebut.Menurut Mariska (2004) agen reaksi yang biasa digunakan untuk mendapatkan tanaman tahan  kekeringan  adalah  PEG. Polyethylene  glycol (PEG)  adalah  salah  satu senyawa  yang  digunakan  dalam priming dimana  PEG  mempunyai  sifat mengontrol  imbibisi  dan  hidrasi  benih.  Jenis  priming  yang  sangat  umum  adalah osmo  priming di  mana  benih  direndam  dalam  larutan  dengan  tekanan  osmosis tinggi biasanya polyethylene glycol (PEG).
Kondisi  tanah  yang  kering  dapat  diuji  dengan  mengatur  waktu penyiraman  atau  juga  dapat  mengkondisikan  media  menjadi  kering  dengan menggunakan larutan PEG yang dapat mempengaruhi tekanan osmosis dimana keadaan  tersebut  dapat  menggambarkan  kondisi  kekeringan  di  lapang. Pengujian  dengan  menggunakan  PEG  dilakukan  dalam  hal  seleksi  terhadap beberapa  klon  kakao  yang  telah  ada.  Harapan  klon  tanaman  kakao  yang  lolos seleksi tersebut dapat digunakan sebagai klon tanaman kakao tahan kekeringan dan  memperoleh  tanaman  yang  mampu  beradaptasi  dengan  baik  pada  kondisi kekeringan yang pada akhirnya mampu ditanam, tumbuh dan berproduksi tinggi di lahan marginal dengan kondisi lahan kering.
Penelitian  ini  menggunakan  klon  kakao  ICS  60,  PBC  123,  dan  Sca  6. Ketiga  klon  ini  diperoleh  dari  pusat  penelitian  kopi  dan  kakao  (puslit  kopi  dan
kakao),  karekteristik  masing-masing  klon  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah sebagai berikut:
Klon kakao ICS 60 mempunyai habitus tanaman besar dengan daya hasil 1.500  kg/ha  dengan  berat  biji  kering  1.67  g/biji.  Warna  flushnya  merah kekuningan, bentuk daunnya panjang meruncing dengan ujung daun meruncing dan  pangkal  daun  tumpul.    Bentuk  buahnya  bulat  memanjang  dengan  pangkal buah  tumpul  dengan  leher  botol,  kulit  buahnya    kasar,  alur  buah  tegas,  ujung buah meruncing, warna buah hijau muda dan  warna buah masak kuning.
Klon  PBC  123  mempunyai  tipe  pertumbuhan  yaitu:  warna  tangkai daunnya  hijau  berbentuk  ellip,  pangkalnya  bulat  dengan  bentuk  daunnya  ujung meruncing, dan warna daun mudanya merah, bentuk buahnya obovate (panjang 18  cm,  lebar  8  cm),  pangkal  ada  leher  botol  dengan  ujung  runcing, permukaannya kasar, kedalaman alurnya dalam, kulit buahnya tebal, warna buah mudanya  merah  dan  warna  buah  masak  orange.  Bentuk  bijinya  bulat  lonjong dengan berat rata-rata 1 biji kering 1.32 g dan potensi hasilnya 2376 kg/ha/tahun. Ketahanannya: tahan terhadap hama helopeltis dan penyakit busuk buah.
Klon kakao Sca 6 mempunyai keragaan yaitu: vigorus daunnya berbentuk ellip,  pangkal  runcing  dengan  ujung  agak  meruncing,  warna  daun  muda  merah kekuningan, warna daun tua hijau. Bentuk buahnya elip (panjang 16 cm, lebar 6 cm),  pangkal  ada  leher  botol  dengan  ujung  runcing,  permukaan  kasar, kedalaman  alur  dalam, kulit  buahnya  tebal,  warna  buahnya  muda  merah  warna buahnya  masak  orange.  Bentuk  bijinya  bulat  lonjong  dengan  berat  1  biji  kering 1.16 g dan potensi hasilnya 2127 kg/ha/tahun. Ketahanannya  moderat terhadap helopeltis dan rentan terhadap penyakit busuk buah (Baon, 1988).
Faktor  iklim  dan  tanah  mempengaruhi  pertumbuhan  dan  produksi tanaman  kakao.  Iklim  sulit  untuk  di  ubah  atau  di  perbaiki,  oleh  sebab  itu  iklim sangat  di  perhatikan  dalam  penilaian  lahan  untuk  tanaman  kakao.  Curah  hujan merupakan  hal  yang  penting  bagi  pertanaman  kakao  terutama  distribusinya, karena  erat  kaitannya  dengan  pembentukan  tunas  muda  dan  produksi.  Curah hujan  tahunan  yang  ideal  bagi  tanaman  kakao  berkisar  antara  1100-3000  mm, sedangkan  curah  hujan  tahunan  yang  melebihi  4500  mm  tidak  cocok  bagi pengembangan  tanaman  kakao.  Di  samping  itu  yang  perlu  menjadi pertimbangan,  yaitu  curah  hujan  yang  berhubungan  dengan  kondisi  tanah (Hardjono et al , 1991).
Tanaman  kakao  menghendaki  kelembapan  udara  yang  konstan  dan relatif  tinggi  yaitu  di  atas  80%.  Pada  kelembapan  tersebut  keseimbangan metabolisme  tanaman  kakao  terjamin  dengan  baik.  Pada  kelembapan  tinggi tanaman  kakao  dapat  menyesuaikan  diri  terhadap  kekurangan  air  dalam  tanah selama musin kering (Subagio, 1991).
Tanah  yang  gembur  dan  beraerasi  baik  serta  mempunyai  kadar  lengas tanah  yang  cukup,  air  tidak  menggenang,  merupakan  kondisi  tanah  yang  baik untuk tempat tumbuh tanaman kakao. Kakao menghendaki tanah dengan tekstur geluh berpasir, karena tekstur yang demikian aerasinya cukup baik dan mampu menyimpan lengas tanah. Tanah dengan tekstur berat seperti lempung tidak baik untuk  pertumbuhan tanaman kakao (Syamsulbahri, 1996).
Kakao  merupakan  tanaman  yang  tidak  tahan  cekaman  air,  secara langsung  maupun  tidak  langsung,  karena  musim  kemarau  panjang  maupun tiupan  angin  kering  yang  terus  menerus.  Kemarau  yang  panjang  menyebabkan kelayuan  daun  serta  mengeringnya  ranting  dan  batang  kakao  sehingga produktivitas dapat merosot tajam. Akibat lainnya, daun dan batang kakao muda menjadi layu dan gugur, serta presentase biji pipih meningkat. Masalah cekaman air  dapat  diatasi  dengan  mengubah  lingkungan  agar  cekaman  air  dapat
diminimumkan atau dengan memperbaiki genotipe tanaman agar tahan terhadap cekaman air (Winaryo et al ., 1997).
Kakao  membutuhkan  tanah  yang  mudah  di  tembus  akar  tunggangnya hingga  kedalaman  150  cm.  Tanaman  kakao  dengan  akar  tunggang  yang  kerdil dan  bengkok  akibat  adanya  lapisan  padas  atau  kerikil,  daya  hasilnya  akan rendah  dan  menurun  terus  (Baon,  1988).  Penentuan  nilai  daya  hantar  listrik (DHL)  merupakan  suatu  cara  pendekatan  untuk  mengetahui  taraf  kejenuhan garam di dalam tanah. Nilai DHL  4 μS menunjukkan kandungan garam di dalam larutan  tanah  cukup  tinggi  sehingga  membahayakan  kebanyakan  tanaman pertanian.  Hanya  tanaman-tanaman  yang  toleran  terhadap  kegaraman  tinggi dapat  tumbuh  pada  kondisi  tersebut.  Batas  ambang  kritis  untuk  kebanyakan tanaman  adalah  4  μS.  Makin  tinggi  DHL  makin  terbatas  jenis  tanaman  yang dapat tumbuh dengan baik. Peningkatan DHL akan di ikuti peningkatan potensial air. Potensial air menggambarkan tegangan air akibat adanya selisih yang tinggi antara  kapasitas  lapang  dan  titik  layu  permanent.  Pada  DHL  yang  tinggi  juga mengakibatkan  adanya  perbedaan  potensial  air  akibat    tekanan  osmotik (Syamsul, 2006).
Kekurangan  air  pada  tanaman  terjadi  karena  ketersediaan  air  dalam media  tidak cukup  dan  transpirasi  yang  berlebihan  atau kombinasi kedua faktor tersebut,  sebaliknya  didalam  tanah  air  yang  cukup  tersedia  tanaman tidak  akan mengalami  cekaman  (kekurangan  air).  Cekaman  air  terjadi  jika  kecepatan absorpsi  tidak  dapat  mengimbangi  kehilangan  air  melalui  proses  transpirasi (Islami  dan  Utomo,  1995).  Kehilangan  air  pada  tanaman  yang  disebabkan  oleh transpirasi  merupakan  suatu  akibat  yang  tidak  dapat  dielakkan  dari  keperluan membuka  dan  menutupnya  stomata  untuk  masuknya  CO 2 dan  kehilangan  air melalui transpirasi lebih besar melalui stomata daripada melalui kutikula. Indeks luas  daun  yang  merupakan  ukuran  perkembangan  tajuk,  sangat  peka  terhadap cekaman  air,  yang  mengakibatkan  penurunan  dalam  pembentukan  dan perluasan  daun,  peningkatan  penuaan  dan  perontokan  daun,  atau  keduanya. Perluasan  daun  lebih  peka  terhadap  cekaman  air  daripada  penutupan  stomata (Yoshida, 1981).
Peningkatan  penuaan  daun  akibat  cekaman  air  cenderung  terjadi  pada daun-daun  yang  lebih  bawah,  yang  paling  kurang  aktif  dalam  fotosintesa  dan dalam  penyediaan  asimilat,  sehingga  kecil  pengaruhnya  terhadap  hasil (Goldsworthy dan Fisher, 1992). Menurut Martin et al ., (1994) cekaman air yang terjadi  pada  paruh  kedua  dari  siklus  hidup  tanaman  ercis  mengakibatkan penurunan nilai LAI ( leaf area index ) setelah pembungaan. Penyebab rendahnya hasil  biji  ercis  bila  dibandingkan  dengan  hasil  pada  musim  tanam  sebelumnya disebabkan  curah  hujan  selama  paruh  pertama  siklus  hidupnya  lebih  besar. Kekurangan air dapat menghambat laju fotosintesa, karena turgiditas sel penjaga stomata akan menurun. Hal ini menyebabkan stomata menutup (Lakitan, 1995).
Penutupan  stomata  pada  kebanyakan  spesies  tanaman  akibat berkurangnya  air  pada  daun  sehingga  mengurangi  laju  penyerapan  CO 2 pada waktu  yang  sama  dan  pada  akhirnya  akan  mengurangi  laju  fotosintesa. Penutupan  stomata  merupakan  faktor  yang  sangat  penting  dalam  perlindungan mesophyta terhadap cekaman air yang berat (Fitter dan Hay, 1994).
Polyethylene  Glycol  (PEG)  merupakan  salah  satu  jenis  osmotikum dengan  rumus  kimia  HO-CH2-(CH2-O-CH2-)n-CH2-OH  (Anonim,  2008).  PEG biasa  digunakan  untuk  mensimulasi  kondisi  kekeringan,  karena  sifatnya  yang dapat  menghambat  penyerapan  air  oleh  sel  atau  jaringan  tanaman.  Selain  itu, PEG memiliki bobot melekul yang sangat besar (≥ 4000) sehingga tidak bersifat toksik  karena  tidak  dapat  diserap  oleh  jaringan  tanaman.  PEG  bersifat  stabil,
polimer  panjang,  non  ionik  dan  larut  dalam  air  dan  pelarut  organik  seperti metanol,  benzena,  karbon  tetraklorida,  kloroform,  dimetilformamida  (DMF), asetonitril,  dan  diklorometana  (Dami  dan  Hughes,  1997).  Senyawa  PEG  dapat menyebabkan  penurunan  potensial  air  yang  homogen.  Besarnya  penurunan  air sangat tergantung pada konsentrasi dan berat molekul PEG. Potensial air dalam media  yang  mengandung  PEG  dapat  digunakan  untuk  meniru  besarnya potensial air tanah (Michel and Kaufmann, 1973).
PEG  juga  dikenal  sebagai  poli  (oxyethylene)  atau  poli  (etilena  oksida) (PEO), adalah polieter sintetis tersedia dalam berbagai berat molekul. Pada berat molekul  rendah  (<1,000)  PEG  berupa  cairan  kental  dan  tidak  berwarna, sedangkan pada berat molekul tinggi PEG (>1.000) berbentuk lilin, padatan putih dengan  titik  leleh  berbanding  lurus  dengan  berat  molekul  yaitu  sekitar  67 0 C. PEG telah banyak digunakan dalam berbagai  eksperimen untuk mensimulasikan cekaman  kekeringan.  Beberapa  penelitian  telah  banyak  dilakukan  dengan menggunakan  PEG  dalam  media  kultur  somaklonal.  Peningkatan  konsentrasi PEG dalam media akan menyebabkan terhambatnya proses osmosis dalam sel sehingga  menghambat  masuknya  air  ke  dalam  sel  (Lawyer,  1970).  Beberapa jenis  tanaman  dilaporkan  mengalami  peningkatan  toleransi  terhadap  cekaman kekeringan  dengan  PEG,  diantaranya  tanaman  kedelai,  bunga  matahari,  tomat, wortel, padi, kacang tanah, dan nilam. Pada kedelai, hampir semua kalus dengan struktur embrio somatik yang tidak diperlakukan dengan PEG (0%) dapat hidup. Biakan yang diseleksi dengan  larutan PEG konsentrasi 25% dan 50% ada yang hidup dan ada yang mati, sedangkan biakan yang diperlakukan PEG konsentrasi yang  lebih  tinggi  (75%)  semuanya  mengalami  kematian  (Husni et.  al .,  2003). Pada  tanaman  nilam  dilaporkan  bahwa  konsentrasi  PEG  20%  dapat menyebabkan kematian kalus 66,9 – 85,0% (Sutjahyo et. al ., 2007).
Penelitian ini mencoba melakukan pengamatan terhadap  klon-klon kakao terhadap  tahan  kekeringan  atau  dikenal  tahan  pada  lahan  marginal  dengan perlakuan  PEG,    sehingga  peneliti  dapat  Menyeleksi  ketahanan  beberapa  klon kakao  terhadap  kekeringan,  dan  Mengetahui  pengaruh  konsentrasi  PEG terhadap pertumbuhan bibit kakao.

## METODE PENELITIAN
Tempat  dan  Waktu  Penelitian  dilakukan  di  Lahan  (  rumah  naungan  ) letaknya  di    Kebonsari  Kecamatan  Sumbersari  Jember, Bahan  dan  Alat : Tiga (3) klon kakao yaitu: ICS 60, Scafina 6 dan PBC 123, Polyethylene Glycol (PEG), Tanah  latosol  yang  diambil  dari  Daerah  Rembangan,  Kecamatan  Patrang, Jember.  Bahan  lainnya  adalah  polibag  volume  3  liter,  isolasi  kertas,  cutex  dan bahan pendukung lainnya. Timbangan analitis, Rollmeter, Alat siram, Mikrometer, Gelas  ukur,  Oven,  Leaf  area  meter,  Spektrofotometer,  Porometer,  dan  alat pendukung  lainnya.  Metode  Analisa  dengan  Rancangan  Penelitian,  Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Kelompok (RAK) yang disusun secara faktorial,  jumlah  ulangan  3  kali  dengan  ulangan  sebagai  kelompok  (setiap ulangan  menggunakan  5  tanaman)  A.Faktor  bahan  tanam/klon  (K),  sebanyak  3 level:- K1 : ICS 60
- K2 : SCAFINA 6  - K3 : PBC 123. B. Faktor tingkat PEG (C) sebanyak 5 level, yaitu:  - C0 : 0 g/L, - C1: 25 g/L,- C2: 50 g/L,- C3 : 75 g/L,- C4: 100 g/L.
Pelaksanaan  penelitian  terdiri  dari    1).  Persediaan  media  tanam:  Tanah yang digunakan penelitian ini berasal dari daerah Rembangan, ditempatkan pada tempat  terbuka  di  bawah  naungan  sampai  tercapai  kondisi  kering  angin. Sebelum tanah dimasukkan ke dalam polybag, tanah dihaluskan terlebih dahulu
kemudian  di  ayak  dengan  saringan  2  mm,  setelah  itu  ditimbang  sebanyak  2  kg untuk  dimasukkan  ke  dalam  polybag  sebagai  media  tumbuh.2).Perlakuan pertama  Penentuan  perlakuan  cekaman  kekeringan  didasarkan  pada penimbangan tanah awal, setelah itu tanah dijenuhkan dengan air dan didiamkan selama  2  x  24  jam  sampai  tidak  ada  air  yang  menetes  dari  lubang  polibag, kemudian dilakukan penimbangan kedua. Selisih berat antara penimbangan awal dan  penimbangan  kedua  dijadikan  sebagai  dasar  penentuan  jumlah  air  yang dibutuhkan  untuk  mencapai  kondisi  kapasitas  lapang.  Pada  penelitian  ini perlakuan cekaman air diperoleh dari penimbangan media tanah awal 2400 gram tanpa penyiraman (Y), setelah penyiraman berat media 2900 gram (X) sehingga perlakuan  penyiraman  dilakukan  dengan  cara  X –  Y  yaitu  2900  –  2400  =  500 g/l.Perlakuan  cekaman  kekeringan  ditentukan  dengan  mengkalikan  persentase tingkat  cekaman  dengan  jumlah  air  yang  dibutuhkan.  Perlakuan  cekaman kekeringan  dilakukan  pada  bibit  berumur  ±  2  minggu  dan  diulangi  secara  rutin sesuai perlakuan setiap dua minggu sekali dengan cara yang sama.
Persiapan bahan tanaman Benih dari 3 klon hibrida F1 hasil persilangan terbuka  diperoleh  di  kebun  Pusat  Penelitian  Kopi  dan  Kakao.  Penanaman Sebelum  ditanam  benih  dikecambahkan  terlebih  dahulu  selama  ±  1-2  minggu dan  langsung  ditanam  pada  tanah  yang  sudah  disiapkan  di  dalam  polybag sebanyak  2  kg.    Penyiraman  Penyiraman  pertama  dilakukan  pada  2  minggu setelah  tanam  (MST).  Penyiraman  berikutnya  dilakukan  pada  6  dan  10  MST. Volume  air  dan  konsentrasi  PEG  diberikan  sesuai  dengan  perlakuan. Pengamatan  pengamatan  dilakukan  pada  2,  4,  6,  8,  10,  dan  11  MST. Pengamatan  dilakukan  terhadap  tinggi  tanaman,  diameter  batang,  dan  jumlah daun dilakukan 2 minggu sekali setelah perlakuan, sedangkan variabel yang lain luas daun, berat basah tajuk dan akar, berat kering tajuk dan akar, panjang akar utama, jumlah cabang akar, nisbah tajuk akar, prosentase kematian dan jumlah stomata diamati pada 11 MST.
Sifat-sifat Agronomi Yang Diamati hasil penelitian meliputi 2 tahapan : 1. Pengamatan yang dilakukan setiap satu bulan sekali, dimulai pada saat tanaman berumur  2  minggu  setelah  tanam.  Tinggi  Tanaman  (cm)  yaitu  Tinggi  tanaman diukur,  mulai  dari  leher  akar  dalam  polibag  sampai  pucuk  batang.  Diameter batang (mm) yaitu Diameter batang diukur dengan mikrometer pada ketinggian 5 cm  dari  leher  akar  tanaman  dalam  polybag.  Dan  Jumlah  Daun  (helai)  yaitu Menghitung  banyaknya  daun  pada  setiap  tanaman.2.  Pengamatan  dilakukan pada  akhir  penelitian,  pada  saat  tanaman  berumur  5  bulan;  Luas  Daun  (cm 2 ) Diukur dengan menggunakan alat leaf area meter (LAM), Bobot Kering Tanaman (g)  Tajuk  dan  akar  tanaman  dikeringkan  dalam  oven  sampai  kering  pada  suhu 60 o C  selama  48  jam  ,  Bobot  Basah  Tanaman  (g)    Tajuk  dan  akar  tanaman langsung  ditimbang  sebelum  dikeringkan,  Panjang  Akar  Utama  (cm);  Diukur dengan  menggunakan  alat  penggaris,  Jumlah  Cabang  Akar  (akar  sekunder  ); Dihitung  cabang  akar  yang  terletak  di  akar  utama,  Jumlah  Stomata  (mm 2 ); Jumlah stomata dihitung dengan cara mengambil epidermis daun yang memakai cutex dan diamati dibawah mikroskop, Daya hantar listrik dapat digunakan untuk mengestimasi  kandungan  garam  bermuatan  listrik  di  dalam  tanah.  Prosedur praktis untuk memperoleh nilai DHL dalam media tanah dapat dilakukan sebagai berikut:  Sampel  5  gram  tanah  dicampur  dengan  25  ml  air  aquades  dan dimasukkan pada botol plastik kecil (tempat botol spirtus) lalu dikocok selama 1 menit  dan  di    diamkan  selama  +  30  menit,  selanjutnya  dicelupkan  sebuah elektroda yang telah dikalibrasi ke dalam larutan tanah dan dibaca nilainya.

## HASIL Dan PEMBAHASAN
Perlakuan  Bahan  Tanam/Klon  Kakao,  Hasil  uji  jarak  berganda  Duncan pada perlakuan jenis klon kakao terhadap semua parameter berpengaruh nyata disajikan pada tabel di bawah ini.
Tabel 1. Rata-rata  tinggi  tanaman  perlakuan  jenis  klon  kakao  pada  berbagai umur tanam Perlakuan Rata-rata tinggi tanaman (cm) 2 minggu 4 minggu 6 minggu 8 minggu K1 19,32  a 19,84 a  19,84 a  19,93 a K2 16,34  b 16,51 b  17,19 b  17,49 b K3 19,81  a 19,98 a  19,89 a  19,96 a
Keterangan :  rata-rata yang diikuti huruf yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5%
Berdasarkan hasil uji Duncan (Tabel 1) di atas tampak bahwa jenis klon kakao  berpengaruh  terhadap  tinggi  tanaman.  Perlakuan  jenis  klon  kakao  PBC 123  (K3)  berbeda  tidak  nyata  dengan  klon  kakao  ICS  60  (K1),  tetapi  kedua perlakuan  berbeda  nyata  dengan  klon  kakao  Scafina  6  (K2)  terhadap  tinggi tanaman.Perlakuan  bahan  tanam/klon  terhadap  tinggi  tanaman,  pada  bahan tanam/klon  jenis  ICS  60  dan  PBC  123  diperoleh  rata-rata  tinggi  tanaman  yang hampir sama, yaitu 19,93 cm (ICS 60) dan 19,96 cm (PBC 123), sedangkan pada klon Scafina 6 diperoleh rata-rata yang lebih rendah (17,49 cm). Klon ICS 60 dan PBC 123 lebih tahan terhadap kekeringan jika dibandingkan dengan klon Scafina 6, karena perbedaan genetik klon kakao.
Pada  penelitian  Taufik  (2007),  diameter  batang  dan  tinggi  bibit merupakan  cerminan  pertumbuhan  cepat  pada  bibit  kakao,  semakin  besar diameter batang dan tinggi bibit mencerminkan pertumbuhan bibit semakin baik. Fase pertumbuhan vegetatif merupakan bagian dari fase pertumbuhan tanaman yang  dapat  menentukan  keberhasilan  fase  pertumbuhan  generatif.  Tanaman kakao sebagai tanaman tahunan ( perennial crop ) memiliki perilaku pertumbuhan indeterminate , yaitu tanaman yang dapat mengalami pertumbuhan vegetatif dan generarif  secara  bersamaan.  Namun  demikian,  sebelum  memasuki  fase pematangan  ( maturity ),  tanaman  terlebih  dahulu  akan  melewati  fase  vegetatif, sehingga pertumbuhan vegetatif merupakan cerminan pertumbuhan generatif.
Menurut Nasaruddin (2002), tanaman kakao muda dalam pertumbuhannya memerlukan intensitas cahaya rendah, tanaman yang berumur 3-4  bulan  membutuhkan  sekitar  35%-40%  intensitas  cahaya  matahari  dan berangsur-angsur  meningkat  sejalan  dengan  peningkatan  unur  tanaman.  Makin tua  umur  tanaman  makin  tinggi  tingkat  kebutuhan  cahaya  matahari  dan sebaliknya  makin  muda tanaman kebutuhan  intensitas  cahaya  semakin  rendah. Naungan  plastik  putih  memperlihatkan  aktivitas  fisiologi  khususnya  fotosintesis yang  lebih  tinggi  (21,76    m  m-2s-1)  dibanding  perlakuan  lainnya.  Tingginya aktivitas  fotosintesis  pada  jenis    naungan  plastik  putih  mempengaruhi  tingginya pertumbuhan tanaman.
Tabel 2. Rata-rata  diameter  batang  tanaman  perlakuan  jenis  klon  kakao  pada berbagai umur tanam Perlakuan Rata-rata diameter batang tanaman (cm) 2 minggu 4 minggu 6 minggu 8 minggu K1 0,26  a 0,35 a a  0,34 a a  0,35 a a K2 0,22  b 0,30 b b  0,32 b b  0,30 b b K3 0,25  a 0,33 a a 0,33 ab 0,34 a a
Keterangan :  rata-rata yang diikuti huruf yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5%
Berdasarkan Tabel 2 di atas, menunjukkan bahwa pada pengamatan 2, 4 dan  8  minggu  jenis klon  kakao  PBC  123  (K3)  berbeda  tidak  nyata  dengan  klon kakao ICS 60 (K1), tetapi kedua perlakuan tersebut berbeda nyata dengan klon kakao  Scafina  6  (K2).  Sedangkan  pada  pengamatan  6  minggu  PBC  123  (K3) berbeda  tidak  nyata  dengan  klon  kakao  ICS  60  (K1),  tetapi  berbeda  nyata dengan klon  kakao  Scafina  6  (K2).  Dan  antara  ICS  60  (K1)  dan  Scafina  6  (K2) tidak berbeda nyata diameter batang.
Bahan  tanam  ICS  60  menghasilkan  rata-rata  diameter  batang  tertinggi pada  semua  pengamatan  yaitu  sebesar  0,35  cm  pada  pengamatan  4  dan  8 minggu,  kemudian  diikuti  berturut-turut  PBC  123  (0,34  cm)  dan  Scafina  6  (0,30 cm).  Penelitian  Abdul  Salam  (2003)  menunjukkan  bahwa  bahan  tanam  kakao ICS  60  dan  PBC  123  menghasilkan  rata-rata  diameter  batang  yang  berbeda tidak  nyata.  Sama  halnya  dengan  tinggi  tanaman,  adanya  perbedaan  genetik pada  masing-masing  bahan  tanam  akan  berpengaruh  terhadap  proses metabolime  dan  pembesaran  sel  pada  batang,  sehingga  pertumbuhan  batang masing-masing bahan tanam menunjukkan perbedaan.
Diameter batang dan tinggi bibit merupakan cerminan pertumbuhan cepat pada bibit kakao, semakin besar diameter batang dan tinggi bibit mencerminkan pertumbuhan bibit semakin baik. Fase pertumbuhan vegetatif merupakan bagian dari  fase  pertumbuhan  tanaman  yang  dapat  menentukan  keberhasilan  fase pertumbuhan  generatif.  Tanaman  kakao  sebagai  tanaman  tahunan  ( perennial crop )  memiliki  perilaku  pertumbuhan indeterminate ,  yaitu  tanaman  yang  dapat mengalami  pertumbuhan  vegetatif  dan  generarif  secara  bersamaan.  Namun demikian,  sebelum  memasuki  fase  pematangan  ( maturity ),  tanaman  terlebih dahulu akan melewati fase vegetatif, sehingga pertumbuhan vegetatif merupakan cerminan pertumbuhan generatif (Taufik, 2007).
Tabel 3. Rata-rata  jumlah  daun  perlakuan  jenis  klon  kakao  pada  berbagai  umur tanam Perlakuan Rata-rata jumlah daun (helai) 2 minggu 4 minggu 6 minggu 8 minggu K1 6,60  a 6,37  a 6,81  a 6,68  a K2 5,64  c 5,52  c 5,73  b 5,99  b K3 6,11  b 6,00  b 6,03  b 6,40  ab Keterangan :  rata-rata yang diikuti huruf yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5%
Berdasarkan  Tabel  3  di  atas,  menunjukkan  bahwa  pada  pengamatan  2 dan 4 minggu antara perlakuan jenis klon kakao PBC 123 (K3), ICS 60 (K1) dan Scafina  6  (K2)  berbeda  nyata  terhadap  jumlah  daun.  Pada  pengamatan  6 minggu  PBC  123  (K3)  berbeda  nyata  dengan  klon  kakao  ICS  60  (K1)  dan Scafina  6  (K2).  Sedangkan  antara  klon  kakao  ICS  60  (K1)  dan  Scafina  6  (K2)
berbeda  tidak  nyata.  Sedangkan  pada  pengamatan  8  minggu  PBC  123  (K3) berbeda  tidak  nyata  dengan  klon  kakao  ICS  60  (K1),  tetapi  berbeda  nyata dengan klon  kakao  Scafina  6  (K2).  Dan  antara  ICS  60  (K1)  dan  Scafina  6  (K2) tidak berbeda nyata jumlah daun.
Pada  pengamatan  2  dan  4  antara  perlakuan  jenis  klon  kakao  PBC  123 (K3), ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2) berbeda nyata terhadap jumlah daun. Pada pengamatan 6 minggu PBC 123 (K3) berbeda nyata dengan klon kakao ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2). Sedangkan antara klon kakao ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2) berbeda tidak nyata. Pengamatan 8 minggu, bahan tanam PBC 123 (K3) berbeda  tidak  nyata  dengan  klon  kakao  ICS  60  (K1),  tetapi  berbeda  nyata dengan klon kakao Scafina 6 (K2). Bahan tanam ICS 60 menghasilkan rata-rata jumlah  daun  tertinggi  pada  semua  pengamatan  yaitu  sebesar  6,68  helai  pada pengamatan 8 minggu. Terlihat bahwa bahan tanam ICS 60 menghasilkan rata- rata  jumlah  daun  tertinggi  pada  semua  pengamatan  yaitu  sebesar  6,68  helai pada pengamatan 8 minggu, kemudian diikuti berturut-turut PBC 123 (6,40 helai) dan Scafina 6 (5,99 helai).
Berdasarkan  penelitian  Abdul  Salam  (2003),  perlakuan  bahan  tanam menghasilkan rata-rata jumlah daun yang sama antara bahan tanam ICS 60 dan PBC  123  dengan  rata-rata  sebesar  17,92  helai.  Sedangkan  pada  penelitian  ini bahan  tanam  ICS  60  menghasilkan  rata-rata  jumlah  daun  tertinggi,  yaitu  6,68 helai,  tetapi  antara  bahan  tanam  ICS  60  dan  PBC  123  berbeda  tidak  nyata terhadap jumlah daun.
Menurut  Subagiyo  (1991),  Jumlah  daun  pada  tanaman  mengindikasikan adanya  peningkatan  pertumbuhan  pada  tanaman.  Tanaman  yang  tahan terhadap cekaman air salah satunya ditunjukkan dengan tinggi tanaman, jumlah daun,  jumlah  cabang  yang  tetap  tinggi.  Adanya  penurunan  dari  komponen pertumbuhan  tersebut  dapat  menjadi  tolak  ukur  ketahanan  tanaman  terhadap kekeringan.
Tabel 4. Rata-rata  luas  daun,  berat  basah  akar,  panjang  akar  utama,  jumlah cabang akar dan jumlah stomata perlakuan jenis klon kakao
Perlakuan Rata-rata Luas daun Jumlah stomata Berat basah akar Panjang akar utama Jumlah cabang akar K1 46,84  a 44,01  b 3,16  a 12,42  b 19,45 a K2 30,59  c 50,62  ab 2,05  b 12,12  b 16,21 b K3 38,32  b 56,90  a 2,87  a 14,09  a 19,49 a
Keterangan :  rata-rata yang diikuti huruf yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5%
Berdasarkan  Tabel  4  di  atas,  menunjukkan  bahwa  pada  parameter  luas daun antara perlakuan jenis klon kakao PBC 123 (K3), ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2)  berbeda  nyata.  Parameter  panjang  akar  utama  menunjukkan  bahwa  klon PBC 123 (K3) berbeda nyata dengan klon kakao ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2). Sedangkan  antara  klon  kakao  ICS  60  (K1)  dan  Scafina  6  (K2)  berbeda  tidak nyata.
Menurut  Soedarsono  (1997),  peningkatan  luas  daun  pada  tanaman terkecam  dapat  mengindikasikan  tanaman  toleran  terhadap  kekeringan  yang berarti  tanaman  dapat  tumbuh  normal  dengan  mengadakan  adaptasi  secara morfologi.  Penelitian  Abdul  Salam  (2003)  perlakuan  bahan  tanam  kakao menghasilkan  luas  daun  dengan  rata-rata  14,26  dm²  (ICS  60)  dan  12,86  dm² (PBC  123),  tetapi  kedua  bahan  tanam  tersebut  berbeda  tidak  nyata  terhadap
luas daun. Sedangkan pada penelitian ini antara ICS 60 dan PBC 123 berbeda nyata  terhadap  luas  daun  dengan  rata-rata  sebesar  46,84  cm²  (ICS  60)  dan 38,32 cm² (PBC 123). Pada kedua penelitian ini bahan tanam ICS 60 sama-sama memberikan hasil luas daun dengan rata-rata yang lebih tinggi.
Parameter  berat  basah  akar  dan  jumlah  cabang  akar  menunjukkan bahwa  klon  PBC  123  (K3)  dan  ICS  60  (K1)  berbeda  tidak  nyata,  tetapi  kedua perlakuan tersebut berbeda nyata dengan klon Scafina 6 (K2). Sedangkan pada parameter jumlah stomata perlakuan PBC 123 (K3) berbeda tidak nyata dengan klon kakao ICS 60 (K1), tetapi berbeda nyata dengan klon kakao Scafina 6 (K2). Dan antara ICS 60 (K1) dan Scafina 6 (K2) tidak berbeda nyata.
Berdasarkan penjelasan di atas dapat dikemukakan bahwa bahan tanam PBC 123 lebih tidak tahan terhadap kekeringan jika dibandingkan dengan bahan tanam  Scafina  6  dan  ICS  60.  Menurut  Soedarsono  (1997),  tanaman  yang mentoleransi  kekeringan  mencakup  penundaan  dehidrasi  atau  mentoleransi dehidrasi. Penundaan dehidrasi mencakup peningkatan sensitivitas stomata dan perbedaan  jalur  fotosintesis,  sedangkan  toleransi  dehidrasi  mencakup penyesuaian osmotik.
Terbatasnya  jumlah  daun  menyebabkan  karbon  hasil  fotosintesis  tidak dapat  dialokasikan  untuk  simbion  di  akar.  Fotosintat  lebih  diutamakan  untuk menjamin agar tanaman mampu bertahan hidup. Seiring dengan bertambahnya waktu,  jumlah  daun  semakin  bertambah  banyak  sehingga  sebagian  fotosintat ditranslokasikan ke tajuk dan akar (Husni et . al ., 2003). Keadaan kurang air juga dapat  berpengaruh  terhadap  keseimbangan  hormonal  di  dalam  tanaman. Terdapat  dua  macam  hormon  yang  bertanggung  jawab  terhadap  ritme pertumbuhan  vegetatif  tanaman  kakao,  yaitu  hormon  asam  absisat  (ABA)  yang peranannya  menghambat  pertumbuhan  tunas-tunas  baru  dan  hormon  sitokinin yang  berperan  sebaliknya,  yaitu  memacu  pembentukan  tunas  dan  daun  baru. Nisbah  kedua  hormon  itulah  yang  menentukan  tanaman  kakao  dalam  keadaan istirahat (dorman) atau sebaliknya aktif membentuk tunas dan daun baru (Alvim et . al ., 1974 dalam Soedarsono, 1997).
Indeks  luas  daun  dan  umur  daun  juga  dipengaruhi  oleh  terjadinya cekaman  air.  Dalam  keadaan  kekurangan  air,  maka  indeks  luas  daun  mengecil dan  cepat  menua,  kering,  serta  gugur.  Sale  (1970)  juga  melaporkan  bahwa cekaman  air  memaksa  tanaman  kakao  membentuk  lebih  banyak  ranting,  tetapi memiliki  kualitas  yang  rendah  :  antara  lain  ranting  memendek  dan  mengecil diameternya, ruas memendek dan daunnya mengecil.
Perlakuan  konsentrasi  PEG  berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  berat basah  akar,  berat  basah  tajuk,  panjang  akar  utama  dan  jumlah  stomata,  serta berpengaruh  nyata  terhadap  berat  kering  akar,  berat  kering  tajuk,  daya  hantar listrik dan jumlah cabang akar.
Tabel 5. Rata-rata  berat  basah  tajuk,  berat  basah  akar,  berat  kering  tajuk  dan berat kering akar perlakuan konsentrasi PEG Perlakuan Berat basah Berat kering Tajuk Akar Tajuk Akar C0 9,90  Bc 2,44  b 3,91  b 1,12  ab C1 7,43  c 2,30  b 4,58  ab 1,04  b C2 9,28  Bc 2,32  b 4,85  ab 0,97  b C3 12,49  Ab 2,83  ab 5,06  ab 1,14  ab C4 12,97  a 3,56  a 5,73  a 1,47  a Keterangan :  rata-rata yang diikuti huruf yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5% a
b
Berdasarkan  Tabel  5  di  atas,  pada  parameter  berat  basah  tajuk menunjukkan  perlakuan  PEG  konsentrasi  100  g/L  (C4)  berbeda  tidak  nyata dengan  konsentrasi  75  g/L  (C3),  tetapi  berbeda  nyata  dengan  ketiga  perlakuan lainnya.  Perlakuan  PEG  konsentrasi  75  g/L  (C3)  berbeda  tidak  nyata  dengan konsentrasi 0 g/L (C0) dan 50 g/L (C2), tetapi berbeda nyata dengan konsentrasi 25  g/L  (C1).  Sedangkan  antara  perlakuan  PEG  konsentrasi  0  g/L  (C0),  50  g/L (C2) dan 25 g/L (C1) berbeda tidak nyata.
Berat basah menurun antara kontrol sampai konsentrasi PEG 25 g/L dan selanjutnya  meningkat  sampai  pada  perlakuan  PEG  konsentrasi  100  g/L. Perlakuan  PEG  konsentrasi  100  g/L  menghasilkan  rata-rata  berat  basah  tajuk tertinggi  jika  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya,  dengan  rata-rata  sebesar 12,97  g,  karena  pada  faktor    penyiraman  yang  dilakukan  1  bulan  sekali, konsentrasi PEG tinggi (100 g/L) memiliki kemampuan dalam mengikat air lebih banyak jika dibandingkan dengan konsentrasi PEG yang rendah (25 – 75%) dan pada saat tanah mengering, kandungan air yang di ikat oleh PEG akan menetes sedikit  demi  sedikit  sampai  tanah  tersedia  cukup  air  sehingga  tanaman  akan tumbuh  normal  dengan  konsentrasi  PEG  tinggi.  Secara  teori  konsentrasi  PEG yang  tinggi  akan  menyebabkan  kekeringan  atau  kematian,  sehingga  secara penelitian ini pada parameter berat basah, berat kering, panjang akar utama dan jumlah  cabang  akar  ini  konsentrasi  PEG  tinggi  tanaman  dapat  meningkat perkembangan atau pertumbuhannya.
Parameter  berat  basah  akar  menunjukkan  perlakuan  PEG  konsentrasi 100 g/L (C4) berbeda tidak nyata dengan konsentrasi 75 g/L (C3), tetapi berbeda nyata dengan perlakuan konsentrasi PEG lainnya.  Sedangkan antara perlakuan PEG konsentrasi  75 g/L  (C3),  0 g/L  (C0),  50 g/L  (C2)  dan  25 g/L (C1)  berbeda tidak  nyata  terhadap  berat  basah  akar  dan  perlakuan  PEG  konsentrasi  100  g/L menghasilkan  rata-rata  berat  basah  akar  tertinggi  jika  dibandingkan  dengan perlakuan lainnya, dengan rata-rata sebesar 3,56 g. Berat basah akar untuk PEG dengan  konsentrasi  yang  tinggi  mempunyai  nilai  rata-rata  berat  basah  yang tinggi jika dibandingkan dengan perlakuan lainnya.

## PENUTUP
Berdasarkan  hasil  analisis  dan  pembahasan,  maka  dapat  diambil kesimpulan  bahwa  Klon  ICS  60  dan  PBC  123  lebih  tahan  terhadap  kekeringan dibandingkan  dengan  klon  Scafina  6  dan  Konsentrasi  PEG  berpengaruh  nyata pada  pertumbuhan  bibit  kakao,  semakin  meningkat  konsentrasi  PEG pertumbuhan bibit kakao semakin baik .

## DAFTAR PUSTAKA
Baon,  J.  B.  1988. Lahan-Lahan  Yang  Cocok  Untuk  Tanaman  Kakao  dan  Kopi .
Warta Pusat Penelitian Kopi dan Kakao. Jember. 7: 17-20.
__________. 1998. Konservasi Lengas Tanah Melalui Pemberian Bahan Organik an  Mulsa .  Warta  Pusat  Penelitian  Kopi  dan  Kakao.  Pebruari.  Jember. 14(1) : 61-68.
Fitter, A.H. dan R.K.M. Hay. 1994. Fisiologi Lingkungan Tanaman. Diterjemahkn oleh Sri Andani dan E.D.Purbayanti. Gadjah Mada University Press. 421 Hal.
Hardjono, A., T. Warsito dan H. Widiastuti. 1991. Respon Bibit Kakao Mulia dan Lindak Pada Tanah Masam Terhadap Pengapuran. Menara Perkebunan. 59 (1): 7-11.
Lakitan,  Benyamin.  1995.  Dasar-dasar  Fisiologi  Tumbuhan.  PT.  Raja  Grafindo Persada. Jakarta. Hal. 155 – 168.
Mariska  I.  2006.  Perbaikan  sifat  genotipe  melalui  fusi  Protoplas  pada  tanaman lada, Nilam, dan terung. Jurnal Litbang Pertanian, 25(2), 2006. Bogor.
Michel,  B.E  and  M.R.  Kaufmann.  1973. The  osmotic  potential  of  polyethylene glycol 6000. Plant Physiol. 57:914-916. Nasaruddin (2006). Some process physiological activity of juvenil cocoa Crop in field at various of shading. Jurnal Agrisistem.(2):1 Soedarsono.  1997. Respon  Fisiologi  Tanaman  Kakao  Terhadap  Cekaman  Air. Warta Pusat Penelitian Kopi dan Kakao. Juni. Jember. 13 (2) : 96-109. Sutjahjo  S.  H.,  A.  Kadir,  I.  Mariska.  2007. Efektifitas  Polietilena  Glikol  Sebagai Bahan  Penyeleksi  Kalus  Nilam  Yang  Diiradiasi  Sinar  Gamma  Untuk Toleransi  Terhadap  Cekaman  Kekeringan. Jurnal  Ilmu-Ilmu  Pertanian Indonesia. 9(1): 48-57.
Syamsul  A.  Siradz.  2006. Degradasi  lahan  persawahan  akibat  Produksi biomassa Jurnal Ilmu Tanah dan Lingkungan 6(1) : 47-51.
Syamsulbahri.  1996.  Bercocok  tanam  Tanaman  Perkebunan  Tahunan.  Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Taufik M. 2007.  Characterization of High Yielding Cacao Seedlings. Jurnal Akta Agrosia Edisi Khusus. (1) : 67 - 70, 2007.
Yoshida,  S.  1981.  Fundamentals  of  rice  crop  science.  TRRT,  Manila, Philippines.