EFEK EKSTRAK DAUN KENCANA UNGU ( Ruellia tuberosa ) TERHADAP KADAR

## MALONDIALDEHIDA (MDA) USUS TIKUS YANG DIINDUKSI INDOMETASIN
Elly Mayangsari*  , Umi Kalsum*, R. Galih Agung Pragiwaksana**

## Abstrak
Indometasin adalah salah satu NSAID yang dapat menimbulkan ulkus. Ulserasi akan terjadi di salu- ran  cerna,  terutama  di  lambung,  dan  usus  halus.  Dosis  30  mg/kgBB  indometasin  dapat  menghasilkan senyawa  radikal  bebas  akibat  ulserasi  dan  kerusakan  atau  disfungsi  mitokondria  pada  sel  enterosit  dan villus. Senyawa radikal bebas ini jika berikatan dengan lemak tak jenuh akan menghasilkan senyawa baru yaitu malondialdehida (MDA). Kadar senyawa radikal bebas tersebut dapat diukur melalui indikator kadar malondialdehida.  Salah  satu  alternatif  terapi  stres  oksidatif  adalah  dari  tanaman  tradisional  yaitu  daun kencana ungu ( Ruellia tuberosa ) yang diduga mempunyai aktivitas antioksidan sehingga kerusakan yang terjadi akibat senyawa radikal bebas dapat dihambat. Ektraksi daun kencana ungu menggunakan metode maserasi. Sebanyak  30  ekor  tikus  dibagi  menjadi  5  kelompok:  kelompok  I  kontrol  negatif  (K(-))  tanpa induksi  indometasin  dan  ekstrak Ruellia  tuberosa ;  kelompok  II  kontrol  positif  (K(+))  indometasin  30  mg/ kgBB p.o; kelompok III dosis 1 (D1) indometasin 30 mg/kgBB p.o + ekstrak Ruellia tuberosa 100mg/kgBB p.o; kelompok IV dosis 2 (D2) indometasin 30 mg/kgBB p.o + ekstrak Ruellia tuberosa 150mg/kgBB p.o; kelompok V dosis 3 (D3) indometasin 30 mg/kgBB p.o + ekstrak Ruellia tuberosa 200mg/kgBB p.o. Hasil penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  induksi  ketiga  dosis  ekstrak  daun  kencana  ungu dapat  menurunkan kadar MDA usus secara signifikan (p < 0,05). Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak daun kencana ungu dapat menurunkan kadar MDA usus tikus yang diinduksi indometasin.
Kata kunci:  ekstrak daun kencana ungu, Ruellia tuberosa , indometasin, malondialdehida.
EFFECT OF MINNIE ROOT ( Ruellia tuberosa ) LEAF EXTRACT ON MALONDYALDEHIDE (MDA) INTESTINAL LEVELS OF INDOMETACIN-INDUCED RAT

## Abstract
Indomethacin is one NSAID that can cause ulcers. Ulceration will occur in the digestive tract, espe- cially in the stomach and small intestine. 30 mg/kgBW doses of indomethacin can produce free radical com- pounds due to ulceration and damage or mitochondrial dysfunction in enterocyte and villus cells. These free radical compounds when bound to unsaturated fats will produce new compounds, namely malondialdehyde (MDA).  So that  the levels  of  free  radical  compounds  can  be  measured  by  malondialdehyde  levels.  One alternative oxidative stress therapy is using traditional plants namely minnie root leaf ( Ruellia tuberosa ) that have antioxidant activity so the damage caused by free radical compounds can be inhibited. Minnie root leaf extraction uses the maceration method. There were 30 rats divided into 5 groups, group I was negative control  (K  (-))  without  indomethacin  and Ruellia  tuberosa extract,  group  II  was  positive  control  (K  (+)) indomethacin 30 mg/kgBW p.o, group III dosage 1 (D1) indomethacin 30 mg/kgBW p.o + Ruellia tuberosa extract 100mg/kgBW p.o, group IV dosage 2 (D2) indomethacin 30 mg/kgBW p.o + Ruellia tuberosa extract
150mg/kgBW p.o, group V dosage 3 (D3) indomethacin 30 mg/kgBW p.o + Ruellia tuberosa extract 200mg/ kgBW p.o. The results of this study indicate that the induction of three doses of minnie root leaf extract can significantly reduce MDA intestinal levels (p < 0.05). The conclusion is minnie root leaf extract can reduce the MDA intestinal levels of indometacin-induced rats.
Keywords: minnie root leaf extract, Ruellia tuberosa , indometachin, malondialdehyde.
*Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya **Program Studi Sarjana (S1) Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya
Mayangsari E, et al. Efek Ekstrak Daun Kencana Ungu ( Ruellia tuberosa ) terhadap…….

## Pendahuluan
Obat-obatan NSAIDs ( Nonstreoidal Anti- inflammatory  Drugs )  selain  menguntungkan ternyata juga memiliki efek samping yang pa- da  beberapa  orang  dapat  muncul  mulai  dari intensitas  ringan  hingga  berat.  Contoh  efek samping  dari  penggunaan  obat  NSAID diantaranya  adalah  diare,  tukak  lambung, nyeri  perut,  sakit  kepala,  konstipasi,  dan bahkan  perdarahan. 1 Indometasin  adalah salah  satu  NSAID  yang  digunakan  untuk membuat  model  ulkus  karena  memiliki  efek antiinflamasi  melalui  penghambatan  siklo- oksigenase. Indometasin juga membuat keru- sakan  sel  enterosit  serta  villus  pada  hewan coba  sehingga  kondisi  tersebut  akan  mem- buat senyawa radikal bebas meningkat. 2 Pada dosis  30  mg/kgBB,  indometasin  dapat menghasilkan radikal bebas akibat kerusakan pada  sel  enterosit  dan  villus,  serta  pening- katan aktivitas dari xantin oksidase. 3,4
Senyawa  radikal  bebas  dalam  tubuh akan  bereaksi  dengan poly  unsaturated  fatty acid (PUFA) yang mengakibatkan proses per- oksidasi  lipid,  sehingga  terjadi  peningkatan produksi    malondialdehida  (MDA). 5 Usus  ha- lus  merupakan  bagian  sistem  pencernaan yang  berfungsi  untuk    mencerna  dan  me- nyerap zat makanan seperti asam amino, lipid dan  monosakarida.  Usus  merupakan  bagian tengah  dari  tiga  bagian  usus  halus  yang menempati bagian ventral rongga perut. Usus merupakan  bagian  usus  yang  banyak mengabsorbsi  mikronutrien. 6 Penyerapan absorbsi  lemak  melalui  metabolisme  pada usus  secara  otomatis  akan  mengakibatkan penyerapan  mikronutrien  dalam  tubuh.  Lipid merupakan  target  dari  pembentukan  radikal bebas  dan  menimbulkan  proses  oksidatif disertai peroksidasi lipid. 7
Indonesia banyak memiliki tanaman obat tradisional  yang  dapat  dijadikan  alternatif obat. Tumbuhan kencana ungu (Ruellia tube- rosa L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat  dijadikan  obat.  Kencana  ungu  dikenal
memiliki  berbagai  khasiat  diantaranya  untuk kencing  batu,  antihiperlipidemia,  antioksidan dan  antidiabetes. 8 Antioksidan  adalah  suatu senyawa  yang  dapat  menangkap  senyawa reactive oxygen species (ROS). 9 Kandungan  antioksidan  pada  kencana ungu  diharapkan  dapat  menurunkan  kadar MDA. Oleh karena itu, penting untuk menge- tahui  pengaruh  ekstrak Ruellia  tuberosa  L. terhadap kadar MDA usus tikus yang diinduksi indometasin.

## Bahan dan Metode
Penelitian  yang  dilakukan  adalah penelitian  eksperimental  dengan post  test control  group  design untuk  membandingkan kadar  senyawa  radikal  bebas  tikus  yang diinduksi oleh indometasin dan diberi berbagai dosis  ekstrak  daun Ruellia  tuberosa  L. Surat kelaikan  etik  penelitian  ini  dikeluarkan  oleh Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas Kedokteran  Universitas  Brawijaya  dengan nomor  surat  No.157/EC/KEPK -S1- PD/05/2019.
Hewan  penelitian  adalah  tikus  putih jantan  ( Rattus  norvegicus )  galur  Wistar dengan  berat  badan  ±150 – 200  gram  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya.
Pada  penelitian  ini  terdapat  5  kelompok (tiap kelompok terdiri dari 6 ekor tikus), yaitu: kelompok I kontrol negatif (K(-)) tanpa induksi indometasin; kelompok II kontrol positif (K(+)) indometasin  30  mg/kg;  kelompok  III  dosis  1 (D1) indometasin 30 mg/kgBB + ekstrak daun kencana  ungu  100mg/kgBB;  kelompok  IV dosis  2  (D2)  indometasin  30  mg/kgBB  + ekstrak  daun  kencana  ungu  150mg/kgBB; kelompok V dosis 3 (D3) indometasin 30 mg/ kgBB  +  ekstrak  daun  kencana  ungu  200mg/ kgBB.    Pemberian  indometasin  dan  ekstrak daun  ungu  dilakukan  secara  oral  (p.o.) menggunakan  sonde.  Ekstrak  daun  kencana ungu diberikan sesuai dengan dosis sebanyak 3 kali selama sehari.
Majalah Kesehatan                                                                                           Volume 7, Nomor 2, Juni 2020
Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium
Farmakologi,  Fakultas  Kedokteran, Universitas  Brawijaya  Malang  pada  bulan Januari 2019 – September 2019.

## Ekstraksi Daun Kencana Ungu
Proses  ektraksi  daun  kencana  ungu menggunakan  metode  maserasi.  Daun kencana  ungu  kering  dihaluskan,  kemudian dicampur dengan pelarut etanol 96% dengan perbandingan  1:10.  Campuran  tersebut dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer  tertutup, kemudian  dikocok  berulang-ulang  dan  di- diamkan  selama  3  hari.  Kemudian  hasil  ma- serasi  disaring  dan  dilakukan  penyulingan untuk  menguapkan  pelarut  dengan menggunakan rotary evaporator .
Perlakuan pada Tikus dan Pengukuran Kadar Malondialdehida (MDA)
Tikus  dieuthanasia  dengan  cara dislokasi  cervical,  dibedah  dan  diambil  juga usus tikus sekitar 100 gram untuk diukur ka- dar  malondialdehida  (MDA).  Prosedur  pe-
ngukuran MDA adalah menggunakan uji TBA dengan  metode  kolorimetri.  Dasar  pemerik- saan  adalah  reaksi  spektrofotometer  seder- hana,  di  mana  satu  molekul  MDA  akan  ter- pecah menjadi 2 molekul 2-asam thiobarbitu- rat.  Reaksi  ini  berjalan  pada  pH  2-3.  TBA akan memberikan warna pink -kromogen yang dapat diperiksa secara spektrofotometer.

## Analisis Data
Data  dianalisis  menggunakan  metode oneway  ANOVA antar  kelompok.  Uji  statistik dinyatakan  signifikan  jika  nilai  p  <  0,05. Analisis data menggunakan program SPSS.

## Hasil
Hasil  penelitian  (Gambar  1)  menunjuk- kan bahwa ekstrak daun kencana ungu dapat menurunkan  kadar  MDA  usus  tikus  Wistar yang  diinduksi  indometasin  secara  signifikan ( oneway ANOVA, p = 0,000). Hal ini menan- dakan  bahwa  ada  perbedaan  kadar  MDA usus  yang  bermakna  tiap  kelompok  perla- kuan.
Gambar 1. Perbandingan rata – rata kadar MDA usus tiap kelompok perlakuan.
Keterangan:  K- (tanpa perlakuan); K+ (tikus diinduksi indometasin); P1 (tikus diinduksi indometasin + Ru- ellia  tuberosa 100  mg/kgBB);  P2  (tikus  diinduksi  indometasin  + Ruellia  tuberosa 150  mg/ kgBB); P3 tikus diinduksi indometasin + Ruellia tuberosa 200 mg/kgBB). Notasi a: p < 0,05 dibandingkan  K-, notasi b: p < 0,05 dibandingkan K+.
a b b b b
Mayangsari E, et al. Efek Ekstrak Daun Kencana Ungu ( Ruellia tuberosa ) terhadap…….
Setelah  diinduksi  indometasin,  kadar  MDA usus kelompok kontrol positif (K+) menunjuk- kan  adanya  peningkatan  secara  signifikan dibandingkan  kontrol  negatif  (K-).  Pemberian ekstrak  daun  kencana  ungu  dengan  dosis 100  mg/kgBB  (P1),  150  mg/kgBB  (P2),  dan 200  mg/kgBB  (P3),  menunjukkan  penurunan secara  signifikan  terhadap  kadar  MDA  usus (p  <  0,05)  dibandingkan  dengan  kelompok yang diinduksi indometasin saja (kontrol posi- tif (K+)). Kadar MDA usus terendah diketahui pada  kelompok  pemberian  ekstrak  daun kencana ungu 200 mg/kgBB dan kadar MDA usus  tertinggi  pada  kelompok  tanpa  pem- berian ekstrak daun kencana ungu.

## Pembahasan
Mekanisme  pembentukan  malondial- dehida (MDA) di dalam tubuh melalui proses peroksidasi  lipid  pada  membran  sel  yaitu reaksi radikal bebas dengan poly unsaturated fatty  acid (PUFA).  Radikal  bebas  yang jumlahnya  tinggi  akan  berinteraksi  dengan PUFA,  mengakibatkan  proses  peroksidasi lipid  sehingga  terjadi  peningkatan  pemben- tukan  MDA. 5 Mekanisme  terjadinya  proses peroksidasi lipid diawali dengan penghilangan atom hidrogen (H) dari molekul lipid tak jenuh rantai  panjang  oleh  gugus  radikal  hidroksil (OH), sehingga lipid bersifat radikal. Pemben- tukan  radikal  lipid  tersebut  bereaksi  dengan atom  oksigen  (O2)  membentuk  radikal  pero- ksil (OO) dan menghasilkan MDA. 10
Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia,  daun kencana  ungu  memiliki  kandungan  flavo- noid. 11 Kandungan  flavonoid  tersebut  ber- fungsi sebagai zat antioksidan yang berperan dalam  menetralisir  radikal  bebas  dan  meng- hambat reaksi peroksidasi lipid. 12 Antioksidan sendiri  merupakan  senyawa  yang  mampu menghambat  reaksi  oksidasi  atau  zat  yang mampu  menetralkan  radikal  bebas. 13 Senya- wa flavonoid merupakan senyawa yang paling efektif  sebagai  penangkap  senyawa  reaktif,
seperti superoksida, radikal peroksil dan per- oksinitrit  dengan  cara  mentransfer  atom  H+, sehingga  dapat  menjaga  sel-sel  dari  kerusa- kan yang diakibatkan oleh radikal bebas. 14 Hasil  penelitian  menunjukkan  kadar MDA  usus  kelompok  tikus  yang  diinduksi  in- dometasin  saja  (K+)  berbeda  signifikan  ter- hadap tikus kelompok normal (K-) (p < 0,05). Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Sholihah  (2013)  tentang penggunaan  madu  hutan  sumbawa  yang memiliki aktivitas antioksidan karena berbagai macam  kandungan  flavonoid  yang  mampu menangkap  radikal  bebas  pada  tikus  model tinggi  kadar  radikal  bebas  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol. 15 Hasil  penelitian menunjukkan  penurunan  kadar  MDA  pada kelompok perlakuan 1  (100mg/kgBB), perla- kuan  2  (150mg/kgBB),  dan  perlakuan  3 (200mg/kgBB  )  dibandingkan  dengan  tikus kontrol positif (terinduksi indometasin) secara signifikan  (p  =  0,000)  dikarenakan  efek  dari daun  kencana  ungu  yang  mengandung  se- nyawa flavonoid.

## Kesimpulan
Dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun kencana  ungu (Ruellia  tuberosa L. ) menurunkan  kadar malondialdehyde (MDA) usus tikus jantan galur Wistar yang diinduksi indometasin.

## Daftar Pustaka
1.  Mardhiyah R, Fauzi A, & Syam AF. Diag- nosis dan Tata Laksana Enteropati akibat Obat  Anti  Inflamasi  Non  Steroid (OAINS). Jurnal  Penyakit  Dalam  Indone- sia . 2015; 2 (3):190-197.
2.  Martono  S.  Efek  antiinflamasi  nonsteroid terhadap  aktivitas  glutation  S-transferase hati  tikus  Sprague-dewley. Berkala  Ilmu
Kedokteran , 2005. 37 (2005).
3.  Basivireddy  J,  Vasudevan  A,  Jacob  M, Balasubramanian  KA.  Indomethacin- Induced  Mitochondrial  Dysfunction  and Oxidative  Stress  in  Villus  Enterocytes. Biochem Pharmacol . 2002; 64:339-49.
4.  Nalini S, Mathan MM, & Balasubramanian KA.  Oxygen  Free  Radical  Induced  Da- mage  during  Intestinal  Ischemia/ Reperfusion in Normal and Xanthine Oxi- dase Deficient Rats. Molecular and Cellu- lar Biochemistry . 1993; 124 (1):59-66.
5. Sholichah NA, Aulanni’am, dan Mahdi  C. Efek Terapi Ekstrak Air Daun Kedondong ( Lannea  coromandelica )  terhadap  Kadar Malondialdehid  (MDA)  dan  Aktivitas  Pro- tease  pada  Ileum  Tikus  Putih  ( Rattus novergicus )  Inflammatory  Bowel  Disease
(IBD) Akibat Paparan Indometasin. Veteri- narian Medika . 2012; 5(3):187-194.
6.  Guyton  and  Hall. Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran. Edisi  ke-11.  Jakarta:  pe- nerbit EGC. 2008.
7.  Suryohudoyo P. Oksidan, Antioksidan dan Radikal  bebas.  Dalam: Ilmu  Kedokteran
Molekuler . Kapita  Selekta .  Jakarta:  Sa- gung Seto. 2000. Hlm. 31-46.
8.  Shahwar D, Saif U, Mobasher A, Ullah S, Naeem A, Muhammad AK. Hypoglycemic Activity  of Ruellia  tuberosa linn (Acanthaceae)  in  Normal  and  Alloxan- Induced Diabetic Rabbits. Iranian Journal of Pharmaceutical Sciences . 2011. P. 107- 115.
9.  Winarsi H. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas .  Yogyakarta:  Penerbit  Kanisius.
2007.
10. Agnes  RY,  Aulanni’am,  dan  Sasangka  P. Kadar  Melondialdehid  (MDA)  dan  Gam- baran  Histologi  pada  Ginjal  Tikus  Putih ( Rattus  norvegicus )  Pasca  Induksi  Cylo- sporine-A.1. Kimia Student Journal . 2013;
(2):222-228.
11.  Faramayuda F, Farhan, Ruslan K. Telaah Fitokimia  Herba  Kencana  Ungu (Ruellia tuberosa L.) . 2015.
12.  Fenglin H, Ruili L, Bao H, & Liang M. Free Radical  Scavenging  Activity  of  Extracts Prepared from Fresh Leaves of Selected Chinese  Medicinal  Plants. Fitoterapia. 2004; 75:14 – 23.
13.  Tahir I, Wijaya K, & Widianingsih D. Tera- pan Analisis Hansch Untuk Aktivitas Anti- oksidan  Senyawa  Turunan  Flavon/ Flavonol.  Dalan: Makalah  Seminar Khemometri .2003. Vol. 25.
14.  Middleton et al. The Effect of Plant Flavo- noids on Mamalian Cells  :  Implication  for Information,  Heart  Disease,  and  Cancer. Pharmacol Rev . 2000; 52:673-751.
15.  Sholihah J.  Aktivitas Antibakteri dan Anti- oksidan Tiga  Jenis  Madu  Hutan  Indo- nesia.   [Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor. 2013.