Perubahan Kecepatan Pertumbuhan Larva Lalat Chrysomya sp . pada Bangkai Tikus yang Mengandung Berbagai Kadar Morfin
Bayu Primahatmaja*, Teguh W Sardjono**, Ngesti Lestari***

## ABSTRAK
Penentuan  waktu  minimum  sejak  kematian  dapat  dilakukan  dengan  mengidentifikasi  umur  larva  lalat pada jenazah. Pertumbuhan larva lalat dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor termasuk iklim, geografi, dan obat-obatan  yang  terkandung  di  tubuh  jenazah.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  efek  berbagai dosis  morfin  terhadap  pertumbuhan  larva Chrysomya sp . Sampel  penelitian  adalah  4  ekor  tikus  ( Rattus norvegicus )  yang  masing-masing  diinjeksi  dengan  5  mg,  10  mg,  dan  20  mg  morfin  secara  intraperitoneal serta 1 tikus sebagai kontrol. Dua jam kemudian keempat tikus dimatikan dengan cara membiusnya terlebih dulu  dengan  kloroform.  Dinding  perut  tikus  dibuka  pada  posisi  terlentang  dan  organ  dalamnya  dibuka kemudian  dimasukkan  ke  dalam  kandang  pertama  yang  berisi  120  ekor  lalat Chrysomya sp . agar  lalat meletakkan  telurnya  pada  bangkai  tikus  tersebut.  Setelah  12  jam  bangkai  tikus  dikeluarkan  dari  kandang pertama  dan  dimasukkan  ke  dalam  empat  kandang  lain  yang  terpisah.  Lima  larva  diambil  dari  masing- masing perlakuan dan diukur panjang, keliling, dan berat tubuhnya setiap 12 jam, yaitu pagi (p) dan sore (s) hingga menjadi pupa. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa panjang maksimum larva lalat pada bangkai tikus yang mengandung morfin 5 mg, 10 mg, 20 mg dan kontrol masing-masing dicapai pada H6p, H4s, H4s, dan H5p. Keliling maksimal dicapai pada H5p, H4s, H5p dan H5p, berat maksimal dicapai pada H5s, H4s, H4s  dan  H4s.  Sementara  larva  lalat  menjadi  pupa  pada  H6s,  H6p,  H5p  dan  H6p.  Pengaruh  paling  nyata didapat pada dosis 20 mg (ANOVA, p < 0,05), yang mempercepat proses larva menjadi pupa. Dari hasil ini dapat disimpulkan bahwa laju pertumbuhan larva lalat Chrysomya sp . menjadi lebih cepat pada morfin dosis tinggi, sebaliknya akan timbul perlambatan pada morfin dosis rendah.
Kata kunci : Larva Chrysomya sp ., Morfin, PMI ( post mortem inteval ).
Changes in Growth Rate of Blow Flies ( Chrysomya sp.) Larvae on Rats Carcasses Containing Morphine

## ABSTRACT
The minimum post mortem interval can be determined by information about age of larvae  on a corpse. However, it can be affected by climates, geographic, and drugs contained in the corpse. This study was to find out the effect of morphine on growth rate of blow flies ( Chrysomya sp) . Four rats ( Rattus norvegicus ) were injected with 5 mg, 10 mg, and 20 mg morphine intraperitoneally as a model and one rat as a control. Two hours later, all rats were simultaneously killed  using chloroform and the abdominal was dissected on the supine  position.  The  viscera  were  exposed  out,  then  they  were  put  into  a  cage  containing  120  blow  flies ( Chrysomya sp.) to let the flies laying their eggs on the rat carcasses equally.  After 12 hours, the caracasses were taken out and splitted into four separated cages. Then, five larvae were taken in the morning (p) and evening  (s)  from  each  cages  to  determine  the  length,  circumference,  weight  and  day  of  pupariation.  The maximum length of larvae on carcasses containing morphine 5 mg, 10 mg, 20 mg and control were achieved on D6p, D4s, D4s, and D5p, respectively. Maximum circumference were achieved on D5p, D4s,  D5p and D5p. Maximum weight of each group were reached on the D5s, D4s, D4s and D4s. The day of pupariation were  achieved  at  D6s,  D6p,  D5p  and  D6p.  The  effect  of  morphine  dosage  is  shown  at  20  mg  treatment (ANOVA,  p  <  0,05)  that  accelerate  pupariation.  It  can  be  concluded  that  high  dose  of  morphine  can accelerate growth rate of blow flies ( Chrysomya sp.) but slowing down at small dose of morphine.
Keywords: Chrysomya sp. larvae, PMI (post mortem inteval), Morphine.
*    Program Studi Pendidikan Dokter, FKUB
**  Lab Parasitologi, FKUB
***Lab Ilmu Kedokteran Forensik, RSSA-FKUB

## PENDAHULUAN
Morfin  adalah  opioid  terpenting  dalam keluarga  opium  yang  ditemukan  pada  lebih dari  10  persen  opium. 1 Selain  khasiat analgetiknya yang kuat, morfin juga memiliki pengaruh di sistem saraf pusat lainnya yang berdasarkan  supresi,  sedatif,  hipnotis, euphoria, penekanan refleks pernafasan dan batuk. Efek morfin yang menstimulasi sistem saraf  pusat  antara  lain:  miosis,  eksitasi  dan konvulsi.  Pada  sebagian  pengguna  morfin jangka panjang, ditemukan gejala ketergantungan,  baik  fisik  maupun  psikis. Ketergantungan  psikis  terjadi  akibat kebutuhan  akan  efek  psikotropik,  berupa euphoria,  yang  menjadi  sangat  kuat. Ketergantungan  ini  membuat  proses penghentian obat sukar dilakukan dan dalam beberapa  kasus  membawa  penderita  pada kematian. 2 Kematian-kematian  yang  terjadi karena  morfin  merupakan  salah  satu kematian  yang  tidak  wajar  yang  wajib diselidiki. Hal ini berdasarkan UU Kesehatan No. 36/2009 pasal 119 tentang bedah mayat untuk  menegakkan  diagnosis  penyebab kematian.
Pada kasus-kasus seperti ini penentuan post mortem interval (PMI) menjadi penting. Post  mortem  interval (PMI)  adalah  waktu sejak  kematian  terjadi  pada  seorang manusia ataupun hewan sampai dilakukannya pemeriksaan. Untuk penyelidikan  mengenai  PMI  ini  diperlukan ilmu  forensik.  Dalam  dunia  forensik, berbagai  cara  dapat  dilakukan  untuk menentukan  saat  kematian  jenazah,  antara lain  dengan  menentukan  umur  larva  lalat yang  terdapat  pada  jenazah.  Salah  satu prosedur  tetap  dalam  pemeriksaan  jenazah adalah  dengan  mengirimedia  kulturan  larva serangga  yang  ditemukan  ke  laboratorium parasitologi  untuk  mengetahui  berapa  umur larva  sebagai  penunjang  dalam  perkiraan waktu kematian.
3
Perkembangan  larva  lalat  dipengaruhi oleh  makanan  baik  saat  stadium  larva maupun  saat  dewasa,  suhu  lingkungan, panas yang dihasilkan dari pergerakan larva, kontaminan  (racun)  dan  kelembaban. 4,5 Pengaruh  morfin  terhadap  larva  lalat berbeda-beda.    Pertumbuhan  larva  lalat Calliphora  vicina dan Lucilia  sericata diperlambat  oleh  morfin,  sedangkan pertumbuhan  larva Boettcherisca  peregrina menjadi  lebih  besar  secara  signifikan, 6 sebaliknya pertumbuhan larva lalat
Calliphora  stygia menunjukkan  tidak  ada pengaruh  bermakna  pada  panjang  dan keliling  larva  lalat  yang  diukur. 7 Penelitian yang dilakukan pada larva Musca domestica dan Sarcophaga  sp. menunjukan  bahwa larva  yang  diberi  makan  bangkai  tikus dengan  kandungan  morfin  dapat  tumbuh lebih cepat dibandingkan dengan control. 8
Belum  ada  penelitian  yang  membahas pengaruh dosis terhadap pertumbuhan larva lalat. Penelitian kali ini akan mempergunakan  larva  lalat Chrysomya sp . karena larva lalat ini adalah jenis lalat yang paling  banyak  ditemukan  pada  segala  jenis tempat  kematian  dan  lingkungan  hidupnya yang  bervariasi  seperti  pegunungan,  hutan, desa dan kota. Pada kasus-kasus forensik di Malang,  ternyata  penemuan  larva  serangga mengerucut  pada  empat  spesies  dari  ordo Diptera,  terutama  spesies  yang  dapat menimbulkan  myasis  yaitu Chrysomya, Lucillia,  Musca, dan Sarcophaga. Dengan adanya  penelitian  ini  diharapkan  dapat membantu  pemecahan  masalah  dalam bidang  kedokteran  forensik  terutama  dalam mengusut  kematian  akibat  penggunaan morfin.  Pada  penelitian  ini  akan  digunakan bangkai tikus Rattus novergicus strain Wistar sebagai  media  tumbuh  lalat Chrysomya sp. yang dianalogikan sebagai jenazah manusia yang mengalami kematian akibat over dosis morfin.

## BAHAN DAN METODE
Desain Penelitian Penelititan  ini  merupakan  penelitian eksperimental laboratorium, membandingkan perbedaan pengaruh berbagai  dosis  kandungan  morfin  pada media tumbuh berupa bangkai  tikus ( Rattus novergicus) strain  Wistar  terhadap  panjang, lebar,  berat,  dan  durasi  pertumbuhan  larva lalat Chrysomya sp .
Definisi Operasional 1. Lalat Chrysomya sp.  disebut  juga blow fly ,  dengan  ciri-ciri:  kepala  berbentuk oval,  antena  berbulu  pada  kedua  sisi, bagian  mulut  disebut probobscis tipe sponging .  Lalat  berwarna  hijau  metalik, vertexnya berwarna kuning atau orange, dengan  squama  berbulu  dan  pada bagian posterior thoraksnya tidak banyak bristle .  Lalat  untuk  penelitian  ini ditangkap  di  lingkungan  Universitas Brawijaya.
2. Media  tumbuh  yang  dipakai  adalah berupa bangkai tikus ( Rattus novergicus) strain Wistar yang mempunyai berat rata- rata 230 g.
-  Media  1  adalah  bangkai  tikus  strain Wistar tanpa  kandungan  morfin,
dibunuh  dengan  dibius  dengan kloroform.
-  Media  2  adalah  bangkai  tikus  strain Wistar dengan kandungan morfin 5 mg yang  diinjeksi  secara  intraperitoneal, dibunuh  dengan  dibius  dengan menggunakan kloroform.
-  Media  3  adalah  bangkai  tikus  strain Wistar dengan  kandungan  morfin  10 mg yang diinjeksi secara intraperitoneal,  dibunuh  dengan  dibius menggunakan kloroform. -  Media  4  adalah  bangkai  tikus  strain Wistar dengan  kandungan  morfin  20 mg yang diinjeksi secara intraperitoneal,  dibunuh  dengan  dibius menggunakan kloroform. 3. Larva lalat
-  Diukur  panjang  dan  kelilingnya  dengan menggunakan penggaris dalam keadaan mati.
-  Ditimbang  beratnya  dengan  mengguna- kan  timbangan  analitik  dalam  keadaan mati.
-  Larva  lalat  berwarna  putih,  bentuk  lebih mirip kerucut daripada sosis. Tubuh larva ini  terdiri  dari  12  segmen  dan  antara segmen  dibatasi  dengan  duri-duri  kecil melingkar.  Pada  ujung  posterior  dari larva  tersebut  terdapat  cekungan  yang dalam  dengan  satu  pasang  spirakel posterior  yang  berbentuk  khas  untuk setiap  spesies.  Mulutnya  terletak  pada ujung  anterior  dan  terdapat  kait  untuk menempel pada daging mayat. Kait juga digunakan  untuk  berpindah  tempat, bergerak  degan  memanjangkan  dan memendekkan  segmen  tubuh  karena tidak memiliki kaki.

## Alur Kerja Penelitian
Persiapan Lalat Chrysomya sp.  ditangkap  di lingkungan  Universitas  Brawijaya  sebanyak 120 ekor, kemudian dimasukkan ke dalam 1 buah  kandang  yang  telah  disediakan. Selama  aklimatisasi,  lalat  diberi  nutrisi larutan  glukosa.  Lalu,  empat  ekor  tikus dengan  berat  rata-rata  200-250  mg ditempatkan  pada  kandang  yang  sama  dan diberi makan yang sama selama 3 hari untuk menyamakan  media  bangkai  tikus  yang akan digunakan nanti. Selanjutnya,
menyiapkan  kloroform  sebagai  alat  untuk membius dan mematikan tikus.
Persiapan Tikus
Keempat  tikus  diberi  tanda  dengan spidol marker pada  bagian  tubuhnya  untuk membedakannya.  Masing-masing  tikus diinjeksi sesuai dengan dosis perlakuannya. Setelah  proses  injeksi  selesai,  ditunggu selama  1  jam  dan  dianggap  selama  itu
morfin  sudah  terdistribusi  sempurna  ke seluruh  tubuh.  Setelah  itu,  semua  tikus dibunuh  dengan  menggunakan  kloroform. Kemudian  semua  bangkai  tikus  tersebut dibuat irisan pada garis tengah tubuh bagian ventral  sepanjang  leher  sampai  dekat  anus sampai tampak organ dalam tubuh tikus dan dimasukkan  dalam  kandang  yang  sudah berisi lalat tadi. Kandang tersebut diletakkan dalam  ruangan  dimana  suhunya  berkisar antara 23 o C – 26 o C. Setelah 24 jam, tikus dikeluarkan  dari  kandang  yang  berisi  lalat dan  dimasukan  ke  kandang  masing-masing
untuk  mencegah  lalat  yang  baru  untuk masuk.
Perlakuan Pada penelitian ini, berat rata-rata tikus adalah  230  mg.  Pemeriksaan  dilakukan setiap  pagi  hari  sekitar  pukul  05.00  -  07.00 dan sore hari pada pukul 17.00 - 19.00 WIB. Diambil  5  larva  dengan  ukuran  terbesar, diukur  panjangnya  dan  kelilingnya,  berat larva  ditimbang,  dan  dicatat  waktu pengambilannya.  Larva  yang  tersisa dibiarkan  hidup  hingga  stadium  pupa  dan menjadi lalat dewasa.

## HASIL

## Hasil Pengukuran Panjang Tubuh Larva
Tabel 1. Rerata panjang tubuh larva lalat Chrysomya sp. pada setiap kelompok perlakuan
Panjang (mm) + 1 SD Hari Ke- Kontrol Morfin 5 mg ( p ) Morfin 10 mg ( p ) Morfin 20 mg ( p ) 1p *) *) *) *) 1s *) *) 1,83 + 0,76 *) 2p 3,16 + 0,32 3,16 + 0,32 (1,00) 4,2 + 0,45 (0,015) 4,00 + 0,71 (0,57) 2s 4,00 2,00 (0,00) 4,6 + 0,55 (0,00) 4,2 + 0,45 (0,00) 3p 5,7 + 0,27 3+ 0,35 (0,00) 5,8 + 0,84 (0,990) 8,7 + 0,45 (0,00) 3s 9,6  + 0,34 4,3 + 0,45 (0,00) 9 + 0,71 (0,697) 9 + 0,71 (0,697) 4p 14,7 + 0,45 5,2 + 0,84 (0,00) 14,2 + 1,79 (0,874) 16,6 + 0,55 (0,05) 4s 14,8 + 2,59 5,6 + 0,82 (0,00) 17,4 + 0,89 (0,052)**) 18,2 + 0,45 (0,009)**) 5p 17,2+ 0,27**) 12,7 + 1,56 (0,00) 10,4 + 0,54 (0,014) 10,25 + 1,5 (0,00) ***) 5s 14 + 1,00 12,8 + 1,09 13,8 + 1.09 - 6p 8,2 + 0,84***) 13,3 + 0,71**) 9,1 + 0,55***) - 6s - 8 + 0,94***) - -
Keterangan:  p  =  pagi;  s  =  sore; p =  Perbedaan;    *)  belum  ditemukan  larva;  **)  panjang  maksimum  untuk masing-masing dosis; ***) sudah menjadi pupa
Gambar 1. Rerata panjang tubuh larva pada setiap kelompok perlakuan
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 1p 1s 2p 2s 3p 3s 4p 4s 5p 5s 6p 6s Kontrol Morfin 5 mg Morfin 10 mg Morfin 20 mg
Dari Gambar 1 dan Tabel 1, didapatkan data  bahwa  pertumbuhan larva  pada  media kontrol mampu mencapai panjang maksimal rata-rata 17,2 mm pada hari ke-5 pagi. Saat memasuki  masa  pupa  pada  hari  ke-6  sore, memiliki  panjang  rata-rata  8,2  mm. Kemudian  menjadi  rata-rata  sepanjang  8,2 mm  saat  memasuki  masa  pupa  pada  hari ke-6  sore.  Pada  perlakuan  2  (morfin  5  mg) didapatkan    maksimal  rata-rata  panjang tubuh larva sebesar 13,3 mm pada hari ke-6 pagi.  Ukuran  rata-rata  yang  tercatat  pada masa  pupa  adalah  sepanjang  8  mm  pada hari ke-6 sore. Pada perlakuan 3 (morfin 10 mg) didapatkan  maksimal rata-rata panjang tubuh larva sebesar 17,4 mm pada hari ke-4 pagi.  Ukuran  rata-rata  yang  tercatat  pada masa pupa adalah sepanjang 9,1 mm pada hari ke-6 pagi. Pada perlakuan 4 (morfin 20 mg), didapatkan rata-rata panjang
maksimum 18,2 mm pada hari ke-4 sore dan menjadi  pupa  pada  hari  ke-5  pagi  dengan panjang rata-rata 10,25 mm.
Analisis one way ANOVA menunjukkan adanya  perbedaan  yang  bermakna  (p  < 0,05) pada data panjang tubuh yang tercatat dari  masing-masing    kelompok.  Perbedaan yang bermakna (p < 0,05) mulai terlihat pada hari ke-2 sore. Pada uji multiple comparisons dengan  Tukey  HSD  didapatkan  perbedaan yang signifikan antara perlakuan 2 (morfin 5 mg)  terhadap  perlakuan  1  (kontrol)  hanya pada 2s, 3p, 3s, 4p, 4s, dan 5p. Perlakuan 3 (morfin 10 mg) terhadap pelakuan 1 (kontrol) menunjukan  perbedaan  hanya  pada  2p,  2s dan  5p.  Perbedaan  panjang  perlakuan  4 (morfin 20 mg) dengan perlakuan 1 (kontrol) tercatat pada hari 2s, 3p, 4s dan 5p.

## Hasil Pengukuran Keliling Tubuh Larva
Tabel 2 Rerata keliling tubuh larva lalat Chrysomya sp . pada setiap kelompok perlakuan Hari ke- Keliling (mm) + 1 SD Kontrol Morfin 5 mg ( p ) Morfin 10 mg ( p ) Morfin 20 mg ( p ) 1p *) *) *) *) 1s *) *) 0,52 + 0,18 *) 2p 2,89 + 0,34 2,89 + 0,34 (1,00) 3,77 + 0,86 (1,00) 3,14 (1,00) 2s 3,45 + 0,70 2,83 + 0,70 (0,556) 3,77 + 0,86 (0,908) 3,45 + 0,70 (1,00) 3p 3,27 + 0,28 3,45 + 0,70 (0,996) 5,34 + 2,63 (0,118) 6,28 (0,015) 3s 7,85 3,14 (0,00) 8,16 + 0,70 (0,509) 6,28 (0,00) 4p 8,16 + 0,70 3,14 (0,00) 9,11 + 1,31 (0,305) 10,68 + 0,70 (0,00) 4s 10,68 + 1,72 3,77 + 0,86 (0,00) 11,93 + 1,4 (0,482) **) 10,68 + 1,31 (1,00) 5p 12,25 + 1,72**) 9,73 + 1,31 (0,168) **) 6,91 + 1,40 (0,002) 13,34 + 2,72 (0,801) **)***) 5s 11,62 + 0,86 9,11 + 0,70 6,28 6p 8,79 + 1,40 ***) 8,83 + 0,89 3,14 + 0 ***) 6s 8,79 + 1,79 ***)
Keterangan  :  p  =  pagi;  s  =  sore; p =  perbedaan;  *)  belum  ditemukan  larva;  **)  keliling  maksimum  untuk masing-masing dosis; ***) sudah menjadi pupa
Gambar 2. Rerata panjang tubuh larva pada setiap kelompok perlakuan
Dari  Gambar  2  dan  Tabel  2,  dapat diketahui  bahwa  pertumbuhan  larva  pada media  kontrol  mampu  mencapai  keliling maksimal rata-rata 12,25  mm pada hari ke-5 pagi  (5p).  Saat  memasuki masa  pupa  pada hari  ke-6  pagi  (6p),  memiliki  keliling    8,79 mm.  Pada  perlakuan  2  (morfin  5  mg) didapatkan  hasil  bahwa  keliling  maksimal rata-rata  yang  dapat  dicapai  larva  adalah 9,73 mm pada hari ke-5 pagi (5p). Kemudian menjadi  rata-rata  8,79  mm  saat  memasuki masa  pupa  pada  hari  ke-6  sore  (6s).  Pada perlakuan  3  (morfin  10  mg)  didapatkan capaian  maksimal  rata-rata  keliling  tubuh larva sebesar 11,93 mm pada hari ke-4 sore (4s)  dengan  ukuran  rata-rata  keliling  yang tercatat pada pupa 3,14 mm pada hari ke-6 pagi (6p). Pada perlakuan 4 (morfin 20 mg),
didapatkan rata-rata keliling maksimum 18,2 mm  pada  hari  ke-4  pagi  (4p)    dan  menjadi pupa  pada  hari  ke-5  pagi  (5p)  dengan keliling rata-rata 10,25 mm.
Analisis one way ANOVA menunjukkan adanya  perbedaan  yang  bermakna  (p  < 0,05) pada data keliling tubuh yang tercatat dari  masing-masing    kelompok.  Pada  uji multiple  comparisons dengan  Tukey  HSD didapatkan  hasil  dengan  perbedaan  antara perlakuan  2  (morfn  5  mg)  terhadap perlakuan 1 (kontrol) hanya pada 3s, 4p dan 4s.  Pelakuan  3  (morfin  10  mg)  terhadap pelakuan 1 (kontrol) menunjukan perbedaan hanya  pada  5p.  Perbedaan  perlakuan  4 (morfin 20 mg) dengan perlakuan 1 (kontrol) hanya tercatat pada hari 3p, 4p dan 4s.

## Hasil Pengukuran Berat Tubuh Larva
Tabel 3. Rerata pengukuran berat tubuh pada setiap kelompok perlakuan Hari Ke- Berat (mm) + 1 SD Kontrol Morfin 5 mg ( p ) Morfin 10 mg ( p ) Morfin 20 mg ( p ) 1p 1s 0,0011 2p 1,04 +0,207 1,04 +  0,207 (1,00) 1,28 + 0,37 (0,787) 2,48 + 0,661 (0,00) 2s 1,94 + 0,754 0,34 + 0,152 (0,05) 3,9 + 0,778 (0,001) 1,44 + 0,539 (0,607) 3p 4,66 + 0,829 1,02 + 0,444 (0,016) 9,02 + 0,286 (0,004) 13,06 + 3,214 (0,00) 3s 25,46 + 2,092367 2,56 + 0,391152 (0,00) 30,76 + 3,305753 (0,191) 22,3 + 5,885855 (0,600) 4p 33,58 + 27,589 3,22 + 0,676 (0,989) 55,42 + 9,77 (0,102) 50,22 + 9,914 (0,998) 4s 70,88 + 19,209 **) 4,2 + 1,219 (0,345) 77,7 + 65,038 (0,00) **) 65,12 + 3,964 (0,00) **) 5p 61,14 + 14,57 59,68 + 13,226 (0,00) 77,44 + 5,313 (0,00) 20,425 + 5,043 (0,06) ***) 5s 29,48 + 17,56 61,62 + 295,859 **) 69,64 + 4,754 6p 36,84 + 5,018 ***) 56,7 + 7,29 59,88 + 5,204 ***) 6s 51,88 + 10,48 ***)
Keterangan: p = pagi; s = sore; p = perbedaan; *) belum ditemukan larva; **) berat maksimum untuk masing- masing dosis; ***) sudah menjadi pupa
0 2 4 6 8 10 12 14 16 1p 1s 2p 2s 3p 3s 4p 4s 5p 5s 6p 6s Kontrol Morfin 1/2 Morfin 1
Morfin 2
5mg 5mg 10mg 20mg

## Gambar 3. Rerata berat tubuh pada setiap kelompok perlakuan
Dari Gambar 3 dan Tabel 3, didapatkan hasil bahwa pertumbuhan larva pada media kontrol  mampu  mencapai  berat  maksimal rata-rata 70,88 mg pada hari ke-4 sore (4s). Lalu,  saat  memasuki  masa  pupa  pada  hari ke-6  pagi  (6p),  memiliki  berat  36,84  mg. Pada perlakuan 2 (morfin 5 mg) didapatkan hasil  bahwa  rata-rata  berat  maksimal  yang dapat  dicapai  larva  adalah    61,62  mg  pada hari ke-5 sore (5s). Kemudian pada hari ke-6 sore  (6s),  rata-rata  berat  menjadi  51,88  mg saat memasuki masa pupa. Pada perlakuan 3 (morfin 10 mg) didapatkan  maksimal rata- rata berat tubuh larva sebesar 77,7 mg pada hari  ke-4  sore  (4s).  Sementara  rata-rata berat yang tercatat pada masa pupa adalah 59,88  mg  pada  hari  ke-6  pagi  (6p).  Pada perlakuan 4 (morfin 20 mg), didapatkan rata- rata berat maksimum  65,12 g pada hari ke-4 sore (4s). Kemudian menjadi pupa pada hari ke-5  pagi  (5p)  dengan  berat  rata-rata 20,425 g.
Analisis one way ANOVA menunjukkan adanya  perbedaan  yang  bermakna  (p  <
0,05)  pada  berat  tubuh  dari  masing-masing kelompok.  Perbedaan  yang  bermakna  (p  < 0,05) mulai terlihat pada hari ke-3 pagi (3p).
Pada uji multiple comparisons dengan Tukey HSD didapatkan perbedaan antara perlakuan  2  (morfn  5  mg)  terhadap perlakuan  1  (kontrol)  pada  3p,  3s  dan  5p. Pelakuan  3  (morfin  10  mg)  terhadap pelakuan 1 (kontrol) menunjukan perbedaan
hanya  pada  2s,  3p,  4s  dan  5p.  Perbedaan berat  pada  perlakuan  4  (morfin  20  mg) dengan perlakuan 1 (kontrol) hanya tercatat pada hari 2p, 3p, 4s dan 5p.

## PEMBAHASAN
Pertumbuhan  larva  lalat  dipengaruhi banyak faktor di antaranya makanan, musim, suhu lingkungan, panas yang dihasilkan dari pergerakan larva, letak geografis,
kontaminan  (racun),  dan  kelembaban. 6 Pertumbuhan  larva  lalat  dapat  dipantau lewat  beberapa  variabel,  di  antaranya ukuran  panjang  tubuh,  keliling  tubuh,  berat tubuh, dan perubahan morfologi yang terjadi pada posterior spiracle .
Pada  penelitian  ini,  telah  dilakukan pengamatan  dan  pengukuran  panjang, keliling  dan  berat  tubuh  larva  lalat Chrysomya sp . Pada Gambar 1 dapat dilihat bahwa  larva  kontrol  membutuhkan  waktu  6 hari  untuk  tumbuh  sampai  menjadi  pupa. Lamanya  waktu  ini  sesuai  dengan  waktu yang  dibutuhkan  larva Chrysomya sp . menjadi pupa yang diketahui sampai saat ini, yaitu  5-7  hari. 6 Oleh  karena  itu,  waktu pertumbuhan  larva  kontrol  dapat  diambil sebagai waktu kontrol yang dibutuhkan larva Chrysomya sp . untuk  tumbuh  sampai menjadi  lalat  dewasa.  Waktu  kontrol  inilah yang  akan  dibandingkan  dengan  waktu pertumbuhan perlakuan lain.
5 mg 10 mg 20 mg
Pada  Gambar  1,  kelompok  kontrol mencapai  panjang  maksimal  dengan  rata- rata 17,2 mm yang didapatkan pada hari ke- 5 pagi. Pada kelompok perlakuan 2 (morfin 5 mg),  didapatkan  panjang  maksimal  dengan rata-rata 13,3 mm pada hari ke-6 pagi. Pada kelompok  perlakuan  3  (morfin  10  mg), panjang maksimal dengan rata-rata 17,4 mm pada  hari  ke-4  pagi.  Pada  kelompok perlakuan  4  (morfin  20  mg),  rata-rata panjang  maksimal  adalah  18,2  mm didapatkan  pada  hari  ke-4  sore.  Dari  sini dapat  kita  lihat  bahwa  perlakuan  4  memiliki panjang  maksimal  yang  paling  besar dibandingkan dengan perlakuan lainnya.
Ada  beberapa  hal  yang  patut diperhatikan  pada  Gambar  1.  Hal  yang pertama  adalah  penyusutan  ukuran  larva perlakuan  2  (morfin  5  mg),  pada  hari  ke-2 sore.  Hal  ini  mungkin  disebabkan  oleh karena  tidak  validnya  pengukuran  karena larva  lalat  yang  diambil  bukan  yang  paling besar.  Selain  ada  kemungkinan  larva  lalat yang  paling  besar  telah  masuk  lebih  dalam ke  tubuh  tikus  sehingga  tidak  dapat ditemukan  lagi.  Hal  kedua  adalah  panjang maksimal  larva  pada  (morfin  5  mg) perlakuan  2  yang  lebih  kecil  dibandingkan perlakuan  1  (kontrol).  Sebaliknya,  panjang maksimal  dua  perlakuan  lainnya  melebihi perlakuan  1  (kontrol).  Hal  ini  mungkin karena:  pertama,  dosis  morfin  5  mg  pada perlakuan  ke-2  mengakibatkan  efek penghambatan, sebaliknya pada perlakuan 3 (morfin 10 mg) dan 4 (morfin 20 mg) menim- bulkan  efek  peningkatan.  Kedua,  nilai panjang  yang  didapatkan  tidak  sepenuhnya valid.  Hal  ini  disebabkan  oleh  proses pengukuran yang menggunakan larva hidup.
Pada Gambar 2, dapat kita lihat bahwa perlakuan  kontrol  mencapai  keliling  maksi- malnya  pada  hari  ke-5  pagi  dengan  keliling 12,25 mm. Pada perlakuan 2 (morfin 5 mg), mencapai  keliling  maksimal  9,73  mm  pada hari  ke-5  pagi  (5p).  Sementara  pada perlakuan 3 (morfin 10mg) mencapai keliling
maksimalnya  pada  hari  ke-4  sore  (4s) sebesar  11,93  mm.  Pada  perlakuan  4 (morfin  20  mg)  mencapai  keliling  maksimal 18,2  pada  hari  ke-4  pagi.  Kesimpulannya, perlakuan 4 (morfin 20 mg) memiliki keliling maksimal  yang  paling  besar  dibandingkan dengan perlakuan lainnya.
Pada  Gambar  2,  dapat  dilihat  ukuran larva  perlakuan  2  yang  menurun  pada  hari ke-2  sore  (2s)  yaitu  2,89  mm  menjadi  2,83 mm.  Alasan  hal  tersebut  terjadi  masih mengacu  pada  pembahasan  sebelumnya yaitu  larva  yang  diambil  bukan  yang  paling besar.    Penyebab  yang  lain  adalah  tidak serempaknya  waktu  pencapaian  ukuran keliling  dan  panjang  terbesar.  Kecuali perlakuan  1  (kontrol)  dan  3  (morfin  10  mg) yang mencapai panjang dan keliling terbesar pada hari ke-5 pagi (5p) dan ke-4 sore (4s), sedangkan perlakuan 2 (morfin 5 mg) dan 4 (morfin 20 mg) tidak mecapainya pada waktu yang  sama.  Hal  ini  dapat  terjadi  karena pertumbuhan  bukanlah  sebuah  peningkatan ukuran  melalui    satu  atau  dua  dimensi melainkan tiga dimensi. Pengukuran panjang atau keliling saja hanya mencatat satu atau dua dimensi dari pertumbuhan. Oleh karena itu,  dalam  penelitian  ini  disertakan pengukuran  berat  yang  mencakup  ketiga dimensi.
Perbandingan  berat  tubuh  pupa  dapat kita lihat pada Gambar 3. Meski pengukuran berat dilakukan pada saat larva masih hidup, nilai  berat  ini  tidak  terlalu  dipengaruhi  oleh pergerakan-pergerakan  larva  ketika  ditim- bang.  Pada  perlakuan  1  (kontrol)  rata-rata berat  tubuh  maksimal  70,88  mg  pada  hari ke-4  sore  (4s).  Pada  perlakuan  2  (morfin  5 mg)  didapatkan  data  bahwa  rata-rata  berat maksimal  larva  adalah  61,62  mg  pada  hari ke-5 sore (5s). Pada perlakuan 3 (morfin 10 mg)  didapatkan  rata-rata  berat  maksimal sebesar  77,7  mg  pada  hari  ke-4  sore  (4s). Pada perlakuan 4 (morfin 20 mg), didapakan rata-rata berat maksimal 65,12 mg pada hari ke-4 sore (4s). Dari sini dapat dilihat bahwa
perlakuan  3  memiliki  berat  maksimal  yang paling besar dibandingkan dengan perlakuan lainnya.
Pada Gambar 3 dapat diketahui bahwa larva yang diambil dari perlakuan 2 (morfin 5 mg)  pada  hari  ke-2  sore  (2s)  bukan  larva dengan  berat  paling  besar.  Berat  yang menurun  menutup  kemungkinan  bahwa pengukuran panjang tidak valid dan semakin memperbesar  kemungkinan  bahwa  larva yang diambil bukan yang paling besar. Pada Gambar  3,  berat  maksimal  perlakuan  2 (morfin  5  mg)  bukan  yang  terkecil  sebagai- mana pada Gambar 1. Berat maksimal pada perlakuan  3  (morfin  10  mg)  adalah  yang terbesar,  kemudian  perlakuan  1  (kontrol), perlakuan  4  (morfin  20  mg)  dan  terakhir perlakuan  2  (morfin  5  mg).  Dari  uraian  di atas, dapat diketahui bahwa berat perlakuan 1  (kontrol)  yang  menempati  posisi  kedua terbesar.  Hal  ini  mungkin  disebabkan sebagian  larva  terbesar  pada  perlakuan  4 (morfin 20 mg) sudah mulai memasuki tahap pupa.  Pada  perlakuan  4  (morfin  20  mg) adalah  yang  paling  cepat  mencapai  tahap pupa,  yakni  pada  hari  ke  5  pagi  (5p),  atau setengah  hari  setelah  panjang  dan  berat maksimal. Proses membentuk pupa mungkin mempengaruhi penurunan berat perlakuan 4 (morfin  20  mg).  Sehingga  diharapkan  pada penelitian  berikutnya,  waktu  pengamatan lebih  diperpendek  lagi  yaitu  selang  waktu kurang dari 12 jam.
Pada  Gambar  1,  2,  3,  dapat  dilihat bahwa perlakuan 1 (kontrol) mencapai tahap pupa  pada hari  ke-6  pagi  (6p).  Perlakuan 2 (morfin  5  mg)  mencapai  tahap  pupa  pada hari  ke-6  sore  (6s).  Perlakuan  3  (morfin  10 mg)  mencapai  tahap  pupa  pada  hari  ke-6 pagi  (6p).  Sementara  pada    perlakuan  4 (morfin 20 mg)  mencapai bentuk pupa pada hari  ke-5  pagi  (5p).  Jika  waktu  munculnya larva disamakan, maka perlakuan 1 (kontrol) membutuhkan 4,5 hari, perlakuan 2 (morfin 5 mg)  memerlukan  waktu  5  hari,  perlakuan  3 (morfin  10  mg)    memerlukan  5  hari
sedangkan  perlakuan  4  (morfin  20  mg) membutuhkan  waktu  3,5  hari.  Dari  hasil tersebut dapat dilihat bahwa larva perlakuan 4  (morfin  20  mg)  yang  paling  cepat perkembangannya.  Ada  dua  hal  yang  patut diperhatikan.  Pertama,  perlakuan  4  yang mencapai  tahap  pupa  lebih  cepat  daripada perlakuan lain menyebabkan waktu
pengukuran hari ke 4 sore (4s) menjadi tidak seragam,  sehingga  tidak  bisa  menentukan ukuran terbesar pada perlakuan 4 (morfin 20 mg).  Kedua,  ada  korelasi  antara  dosis dengan perubahan menjadi pupa.
Pertumbuhan larva Boettcherisca peregnina (Diptera,  Sarcophagidae)  yang diberi  makan  dengan  jaringan  yang mengandung  morfin  dengan  dosis  yang berbeda-beda akan menunjukkan pertumbuhan  yang  lebih  cepat  dari  larva control. 6 Pertumbuhan larva Musca domestica dan Sarcophaga sp . yang  diberi makan  bangkai  tikus  dengan  kandungan morfin  akan  menunjukkan  pertumbuhan yang  lebih  cepat  dibandingkan  dengan kontrol. 8 Pertumbuhan  larva  lalat Calliphora stygia menunjukkan  tidak  ada  pengaruh bermakna  pada  panjang  dan  keliling  larva lalat yang diukur. 7
Dari  pembahasan  di  atas,  dapat disimpulkan  bahwa  dalam  penelitian  kali  ini tidak  ditemukan  linearisasi,  baik  dalam  satu kelompok maupun antar kelompok.

## KESIMPULAN
Pengaruh morfin terhadap pertumbuhan larva Chrysomya  sp. pada  media  tumbuh tikus  ( Rattus  novergicus) strain  Wistar  tidak menunjukkan  linearisasi  karena  didapatkan efek  percepatan  pertumbuhan  pada  dosis tinggi  dan  perlambatan  pertumbuhan  terjadi pada dosis rendah.

## SARAN
 Perlu  dikaji  ulang  jumlah  sampel  agar mendapatkan linearisasi.
 Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  mendapatkan  dosis  morfin  yang dapat  mempercepat  perkembangan larva Chrysomya sp . menjadi fase pupa.
 Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk mencari metode yang tepat dalam pengukuran larva sehingga menghasilkan data yang lebih akurat.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Dehghan  M.  The  Effect  of  Morphine Administration  on  Structure  and Ultrastructure  of  Uterus  in  Pregnant
Mice. Iranian  Journal  of  Reproductive Medicine. 2011; 8(3):111-118. .
2.   Shin  SW,  Eisenach  JC.  Intrathecal Morphine  Reduces  the  Visceromotor Response  to  Acute  Uterine  Cervical Distension in An Estrogen -Independent Manner. J  Anesthesiology. 2003;  98: 1467-1471.
3.   Anderson GS. Forensic Entomology: the Use  of  Insects  in  Death  Investigations. Dalam:  Fairgreave  S  (Editor). Case Studies  in  Forensic  Anthropology , Toronto: Charles C.T.  1999; 303–326.
4.  Cowan  FA.  A  Study  of  Fertility  in  the Blowfly.  Phormia  Regina  Meigen, (Online).http://kb.osu.edu/dspace/bitstre am/_389.pdf . 2003.
5.   Hall  M,  Brandt. Forensic  Entomology . Issue 2. 2006; 49-53.
6.   Goff  ML.  Estimation  of  the  Postmortem Interval  Using  Arthropoda  Development and  Successional  Patterns . Forensic Science Review . 1993; 5:81-94.
7.   George  KA,  Melanie  SA,  Lauren  MG, Xavier AC, Tes T. Effect of Morphine on the  Growth  Rate  of Calliphora  stygia
(Fabricius)  (Diptera:  Calliphoridae)  and Possible  Implications  for  Forensic Entomology. Forensic Science International 193. 2009; 21–25. 8.   Sardjono  TW  dkk.  Morphine  Can Precipitate  the  Growth  Rate  of  Fly Larva. Malaysian Society of Parasitology  and  Tropical  Medicine: 45th  Annual  Scientific  Seminar,  Impact of Animal Host on Disease Transmission and  Public  Health .  Kuala  Lumpur Malaysia. 2009.