## KUALITAS SEMEN BEKU SAPI BALI POST THAWING DENGAN JARAK DAN WAKTU YANG BERBEDA DI DINAS PERTANIAN PROVINSI GORONTALO

## QUALITY OF FROZEN SEMEN OF BALI CATTLE AT THE DEPARTMENT OF AGRICULTURE OF  GORONTALO PROVINCE POST THAWING WITH DIFFERENT DISTANCES AND TIMES
Dia Laila Gafur 1 , Mohamad Ervandi 2* ,Terri Repi 1 ,  Ishak Korompot 1
1 Program Studi Peternakan, Fakultas Sains dan Ilmu Komputer, Universitas Muhammadiyah Gorontalo Jalan Prof. Dr. Mansoer Pateda, Pentadio Timur, Telaga Biru, Gorontalo 97181, Indonesia
Article history: Received: 11-03-2024 Revised: 30-07-2024 Accepted: 31-07-2024
Corresponding author: Mohamad Ervandi Program Studi Peternakan, Fakultas Sains dan Ilmu Komputer,
Universitas Muhammadiyah
Gorontalo Email: ervandi_husain@yahoo.co.id
ABSTRAK : Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kualitas semen beku sapi Bali post thawing dengan  jarak  dan  waktu  yang  berbeda  di  Dinas  Pertanian  Provinsi  Gorontalo. Peubah  yang  diamati  motilitas,  viabilitas  dan  abnormalitas  spermatozoa.  Penelitian  ini menggunakan  semen  beku  sapi  Bali  di  Dinas  Pertanian  Provinsi  Gorontalo  yang distribusinya  berasal  dari  BBIB  Singosari.  Penelitian  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap Faktorial. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA dua arah dengan bantuan software SPSS 21. Hasil rerata persentase motilitas spermatozoa tertinggi terdapat pada  jarak  10  cm  selama  15  detik,  rerata  persentase  viabilitas  spermatozoa  tertinggi terdapat  pada  jarak  15  cm selama  20  detik,  rerata  persentase  abnormalitas  spermatozoa tertinggi  terdapat  pada  jarak  20  cm  selama  20  detik post  thawing .  Jarak  dan  waktu pemindahan sraw dari permukaan nitrogen cair tidak mempengaruhi kualitas semen beku baik motilitas, viabilitas dan abnormalitas spermatozoa sapi Bali post thawing namun layak digunakan bagi kegiatan IB di lapangan.
Kata kunci: Semen beku, Jarak dan Waktu Pengangkatan straw , Post thawing , Sapi Bali
ABSTRACT: This  research  aims  to  determine  the  quality  of  frozen  semen  from  post- thawing Bali cattle at different distances and times at the Gorontalo Province Agricultural Service. The variables observed were Motility, viability and abnormalities of spermatozoa. This research used frozen semen from Bali cattle at the Gorontalo Province Agricultural Service,  the  distribution  of  which  came  from  BBIB  Singosari.  The  research  used  a completely randomized factorial design. The data obtained were analyzed using two-way ANOVA with the help of SPSS 21 software. The highest mean percentage of spermatozoa Motility  was  at  a  distance  of  10  cm  for  15  seconds,  the  highest  mean  percentage  of spermatozoa  viability  was  at  a  distance  of  15  cm  for  20  seconds,  the  highest  mean percentage of spermatozoa abnormalities was at distance of 20 cm for 20 seconds after thawing. The distance and time of sraw transfer from the liquid nitrogen surface does not affect  the  quality  of  frozen  semen,  including  Motility,  viability  and  spermatozoa abnormalities post thawing Bali cattle but is suitable for use for AI in the field.
Keywords:  Frozen  Semen,  Distance  and  Time  Of  Straw  Removal,  Post  thawing,  Bali Cattle,

## JURNAL SAINS DAN TEKNOLOGI INDUSTRI PETERNAKAN
Gafur D. L., Ervandi M., Repi T., dan  Korompot I./ Kualitas Semen Beku Sapi Bali Post Thawing Dengan Jarak
dan
Waktu yang Berbeda di Dinas Pertanian Provinsi Gorontalo.
https://doi.org/10.55678/jstip.v4i2.1403

## PENDAHULUAN
Sapi  Bali  adalah  bangsa  sapi  asli  lokal Indonesia  dengan  keunggulan  ciri  genetik  yang tinggi  dibandingkan  dengan  sapi  lain  (Hoesni, 2015).  Sapi  Bali  memiliki  tingkat  produksi  dan reproduksi  yang    tinggi  dan  bervariasi  serta kemampuan  adaptasi  pada  berbagai  keadaan iklim  di  Indonesia  sehingga  dapat  berkembang dengan baik. Ervandi et al. , (2013) menyatakan bahwa  peningkatan  populasi  dan  mutu  genetik ternak  sapi  dilakukan  dengan  pemanfaatan bioteknologi reproduksi di antaranya adalah IB. Teknologi  IB  berperan  sangat  penting  terhadap efisiensi  reproduksi  dan  keberhasilan  dalam peningkatan produktivitas ternak (Ervandi, dkk., 2022).  Kualitas  semen  beku  dapat  menjadi penentu  keberhasilan  IB.  IB  merupakan  suatu program  teknologi  reproduksi  yang  diterapkan dalam  bidang  peternakan  dengan  tujuan  untuk meningkatkan kualitas genetik keturunan ternak dan meningkatkan populasi ternak secara merata serta  mencegah  penularan  penyakit  kelamin (Ervandi,  dkk.,  2020;  Ervandi,  dkk.,  2023). Rendahnya  kualitas  semen  beku  berakibat  pada kegagalan  IB  yang  ditandai  dengan  kawin berulang  (Affandy  dkk.,  2006;  Riady,  2006  ; Ervandi, et  al. ,  2019).  Kasus  kejadian  kawin berulang  pada  ternak  sapi  terjadi  hingga mencapai
5,5-3,3% (Gustafsoon
and Emmanuelson,  2002  ;  Yusuf et  al ,.  2010  ; Ervandi dan Susilawati, 2021). Oleh karena itu, untuk  mencegah  bertambahnya  kasus  kejadian kawin  berulang  ini  perlu  adanya  perhatian terhadap  penyebab  kegagalan  atau  keberhasilan IB salah satunya yaitu kualitas semen beku. Nilai Post  thawing  Motility (PTM)  kualitas  semen beku  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  yaitu teknik thawing ,  ketersediaan  nitrogen  cair, handling  semen  beku  dan  taknik  pemindahan straw (Selk, 2002; Afiati et al. , 2004).
Teknik  pemindahan straw terdapat  suatu proses yang dapat mempengaruhi kualitas semen beku  yaitu  proses  perhitungan  semen  yang diletakkan pada  rak  di  atas permukaan  nitrogen cair  dengan  tujuan  untuk  mencegah  kesalahan dan  jumlah  cacat  pada straw .  Proses  tersebut menyebabkan  terjadinya  peningkatan  suhu lingkungan setelah dicelupkan kedalam nitrogen cair  -196°C  (Ardiana et  al. ,  2018).  Penanganan yang  salah dapat menyebabkan  perubahan  suhu
sehingga semen beku mengalami cold shock atau cekaman dingin yang berakibat pada rendahnya nilai  motilitas,  viabilitas  dan  abnormalitas spermatozoa  atau  kerusakan  kualitas  semen (Susilawati, 2011).
Menurunnya motilitas spermatozoa post thawing disebabkan oleh meningkatnya suhu uap nitrogen cair  yang  dimana  hal  ini  berpengaruh  pada kemampuan metabolisme dan integritas membran sel spermatozoa (Ardiana et al. 2018). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  posisi  jarak  dan lama waktu perhitungan straw dapat menyebabkan  terjadinya  perubahan  suhu  yang sangat  berpengaruh  terhadap  kualitas  semen beku.  Penelitian  mengenai  teknik  pemindahan straw ini  belum  banyak  dilakukan  sehingga sampai saat ini belum ada informasi lebih lanjut tentang hasil proses perhitungan straw sapi Bali yang  dilakukan  pada  permukaan  nitrogen  cair yang terbaik sehingga perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui hal tersebut.

## BAHAN DAN METODE

## Materi Penelitian
Alat  penelitian  yang  digunakan  yaitu peralatan  freezing  (kontainer,  timer,  pinset panjang,  sarung  tangan  kulit,),  serta  dalam pemeriksaan  kualitas  menggunakan  gunting, kertas  label,  mikroskop,  object  glass,  pemanas, hand  counter,  cover  glass,  pippet  tipe, mikropipet,  wadah  semen  beku,  gelas  kimia, pena, buku, penggaris dan stopwatch HP. Bahan penelitian  yaitu  mini straw volume  0,25  ml semen sapi Bali, air, eosin negrosin dan nitrogen cair.
Metode Penelitian Penelitian ini menggunakan metode eksperimental  laboratorium  dengan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  pola  faktorial  dengan media  percobaan straw semen  beku  sapi  Bali yang distribusinya dari BBIB Singosari sebanyak 36 straw . RAL terdiri dari 2 faktor yaitu faktor A (jarak) dan faktor B (waktu) dengan 3 perlakuan dan  4  kali  ulangan  yang  menghasilkan  36 kombinasi perlakuan.
Faktor A (jarak) Faktor B (waktu) J1 : 10 cm W1 : 15 detik J2 : 15 cm W2 : 20 detik J3 : 20 cm W3 : 25 detik Variabel Penelitian
Motilitas Individu  Spermatozoa
Motilitas  spermatozoa  diamati  dengan meneteskan semen pada object glass, kemudian ditutup  dengan  cover  glass,  selanjutnya  diamati di  bawah  mikroskop  pada  perbesaran  10  X  40 (Kusumawati,  dkk.,  2018  ;  Istiqomah,  dkk., 2023). Menghitung motilitas spermatozoa berdasarkan  rumus  (Hafez  and  Hafez,  2008  ; Susilawati, 2011). Penentuan persentase motilitas spermatozoa menggunakan rumus dari Feradis (2010) : Motilitas spermatozoa (%) = (TSm-TStm)/TS x 100% Ket:
TSm = Total Sperma motil
TStm = Total Sperma tidak motil TS     = Total Spermatozoa Viabilitas Spermatozoa Pemeriksaan viabilitas
spermatozoa dilakukan  dengan  cara  memberikan  satu  tetes semen  beku  dan  zat  pewarna  Eosin-negrosin sebanyak  2%  pada  object-glass  yang  telah dipanaskan,  diulas  lalu  dikeringkan  kemudian diperiksa  menggunakan  mikroskop  dengan perbesaran 400 kali untuk mengetahui nilai rerata persentasenya.  Zat  pewarna  tidak  akan  mampu menembus  sel  spermatozoa  yang  hidup  dan mampu  menembus  sel  spermatozoa  yang  mati (Ardiana, et  al ,.  2018).  Berwarna  merah keunguan  pada  spermatozoa  yang  mati  dan berwarna  putih  transparan  apabila  spermatozoa hidup  (Susilowati, et  al ,.  2010).  Perhitungan viabilitas spermatozoa dengan cara: Spermatozoa  hidup  (%)  =  (jumlah  spermatozoa hidup)/(jumlah total spermatozoa) X 100% Abnormalitas Spermatozoa
Pemeriksaan  abnormalitas  spermatozoa dilakukan dengan cara: Panaskan terlebih dahulu object  glass.  Meneteskan  semen  pada object glass ,  kemudian  campurkan  larutan Eosin- negrosin sebanyak  2%.  Diulas  kemudian dikeringkan  selanjutnya  diamati  menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400 kali. Lakukan perhitungan  untuk  mengetahahui  nilai  rerata persentasenya. Menurut
Ridwan (2002), perhitungan  persentase  abnormalitas  ditentukan dengan cara: Spermatozoa abnormal (%) = (jumlah spermatozoa abnormal)/(jumlah total spermatozoayang diamati) X 100% Analisa Data Analisis statistik dilakukan dengan Analysis  Of  Variance  (ANOVA)  dua  arah
dengan  interaksi  dengan  signifikansi  0,05. Apabila  menunjukkan  perbedaan,  dilanjutkan dengan  pengujian  Beda  Nyata  Terkecil  dengan bantuan software SPSS  21  (Sudarwati  dkk., 2019)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Motilitas Spermatozoa
Motilitas  spermatozoa  merupakan  faktor utama  untuk  menentukan  kualitas  semen  beku. Banyaknya spermatozoa yang bergerak aktif atau motil  progresif  menjadi  ciri  utama  dalam menentukan kualitas sperma (Triadi et al. , 2022). Hasil  pemeriksaan  motilitas  semen  beku  sapi Bali post  thawing pada  lama  waktu  dan  jarak yang  berbeda  dalam  proses  perhitungan straw dalam penelitian inidisajikan pada Tabel 1.
Pada  Tabel  2  dapat  dilihat  nilai  motilitas spermatozoa  paling  tinggi  terdapat  pada perlakuan  J1W1  (10  cm  selama  15  detik)  yaitu 41,75%  di  mana  kisaran  persentase  ini  sesuai dengan  SNI  4689.1:2008  bahwa  motilitas spermatozoa post  thawing atau  proses  setelah pencairan kembali semen yang dibekukan harus memiliki  rerata  persentase  40%  agar  dapat dikatakan layak digunakan untuk IB, sedangkan nilai persentase motilitas terendah terdapat pada perlakuan  J2W3  yaitu  31,25%.  Hasil  analisis ragam  ANOVA  menunjukkan  bahwa  jarak  dan waktu  perhitungan straw tidak  berpengaruh nyata  (P>0,05)  terhadap  motilitas  spermatozoa sapi Bali post thawing .
Meskipun  tidak  berpengaruh  nyata  terjadi penurunan  nilai  persentase  motilitas  dari  setiap perlakuan, seperti pada perlakuan J2W3, J2W1, J3W1,  J1W3,  J3W3,  J2W2  dan  J1W2  yaitu dibawah 40% yang menandakan tidak memenuhi syarat layak untuk IB. Penyebab dari rendahnya nilai  motilitas  spermatozoa  ini  diduga  karena kualitas straw yang  berbeda  dari  setiap perlakuan,  dalam  penelitiannya  Manehat et  al. , (2021)  menyatakan  bahwa  proses  pengolahan serta  penyimpanan  semen  beku  dapat  menjadi salah satu penyebab menurunnya motilitas semen beku.  Selain  itu  tingginya  jarak  pengangkatan straw dari  permukaan  nitrogen  cair  juga berdampak  pada  nilai  motilitas  spermatozoa. Hasil  penelitian  ini  didukung  oleh  pendapat Ardiana et  al. (2018)  yang  menyatakan  bahwa jarak  tinggi pengangkatan straw daripermukaan nitrogen cair menyebabkan rendahnya nilai
Gafur D. L., Ervandi M., Repi T., dan  Korompot I./ Kualitas Semen Beku Sapi Bali Post Thawing Dengan Jarak
dan
Waktu yang Berbeda di Dinas Pertanian Provinsi Gorontalo.
https://doi.org/10.55678/jstip.v4i2.1403
Tabel 1. Rata-Rata Persentase Motilitas Spermatozoa Perlakuan Ulangan Rata-rata ± SEM I II III IV J1W1 40,00% 40,00% 45,00% 42,00% 41,75%  2,36 J1W2 45,00% 40,00% 45,00% 24,00% 38,50%  9,95 J1W3 40,00% 30,00% 40,00% 32,00% 35,50%  5,26 J2W1 25,00% 35,00% 38,00% 39,00% 34,25%  6,40 J2W2 35,00% 40,00% 30,00% 43,00% 37,00%  5,72 J2W3 30,00% 32,00% 40,00% 35,00% 31,25%  8,54 J3W1 47,00% 25,00% 40,00% 25,00% 34,25%  11,06 J3W2 22,00% 45,00% 47,00% 47,00% 40,25%  12,20 J3W3 38,00% 30,00% 38,00% 38,00% 36,00%  4,00
motilitas spermatozoa.
Selain  beberapa  faktor  di  atas,  suhu  dan lama thawing juga  berpengaruh  pada  motilitas spermatozoa pada sapi Bali di lokasi penelitian, hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Adnyani et  al.
(2015) yaitu thawing yang terlalu cepat ataupun lama  berpengaruh  pada  gerak  progresif  sel spermatozoa yang dapat menyebabkan turunnya kualitas semen beku dan keberhasilan inseminasi buatan sehingga diperlukan adanya pemeriksaan semen  beku post  thawing .  Penelitian  ini menggunakan  metode thawing yang  sesuai dengan  Standar  Nasional  Indonesia  yaitu di thawing dengan  suhu  37 0 C  waktu  30  detik. Pemeriksaan  semen  beku  dilakuakan  setelah proses  pencairan  kembali  pada  suhu  37 0 C  dan 38 0 C  selama  15-30  detik  (SNI  4689.1  2008) kemungkinan  besar  faktor  ini  juga  yang menyebabkan  motilitas  spermatozoa  dalam penelitian ini memiliki nilai persentase yang baik dan memenuhi syarat layak digunakan untuk IB di  lapangan.  Proses  metabolisme  pada  proses thawing dengan  suhu  37 0 C  selama  30  detik menjadikan  spermatozoa  tidak  kekurangan subtrat  energi  sehingga  motilitas  spermatozoa lebih tinggi (Adnyani et al. 2018) Zelpina et  al. (2012)  dalam  penelitiannya menyatakan bahwa metode thawing dengan suhu 37 0 C  dan  39 0 C  tidak  mempengaruhi  motilitas spermatozoa dengan menghasilkan rerata persentase  49-52%,  pada  suhu  tersebut  sel spermatozoa masih bergerak aktif karena sesuai dengan  suhu  fisiologis  ternak  dimana  sumber energi kimawi dari reaksi enzimatik menjadikan energi  gerak  berjalan  dengan  baik  pada  sel
spermatozoa.  Terdapat  beberapa  faktor  yang mempengaruhi  kualitas  semen  beku  terutama motilitas  spermatozoa  diantaranya  metode thawing , penambahan nitrogen cair, jarak straw , suhu dan kelembapan (Makrifat, 2019).

## Viabilitas Spermatozoa
Hasil pemeriksaan vialitas semen beku sapi Bali post  thawing pada  lama  waktu  dan  jarak yang  berbeda  dalam  proses  perhitungan straw dalam penelitian ini disajikan pada Tabel 2.
Nilai  rerata  persentase  sel  spermatozoa hidup  yang  layak  digunakan  untuk  IB  adalah 50%  (Manehat et  al. ,  2021). Hasil  pemeriksaan persentase  hidup  spermatozoa  sapi  Bali post thawing dengan  jarak  dan  lama  waktu perhitungan straw dalam penelitian ini disajikan pada  Tabel  2,  diketahui  nilai  persentase  hidup spermatozoa  yang  paling  tinggi  terdapat  pada perlakuan  J2W2  (jarak  15  cm  selama  20  detik) yaitu  70.81%,  dan  terendah  terdapat  pada perlakuan J3W2 yaitu 48%. Pada waktu 20 detik dengan  jarak  15  cm  ini  spermatozoa  masih beradaptasi  dengan  baik  dengan  suhu  setelah diangkat  dari  nitrogen  cair  artinya  tidak  terjadi kenaikan  suhu  secara  drastis  dari  suhu  nitrogen cair  -196 0 C  sehingga  tidak  terjadi cold  shock ataupun osmotic stress pada spermatozoa dimana hal  ini  dapat  menyebabkan  kematian  pada spermatozoa.  Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan penelitian Fatimah et al. (2018) yang menghasilkan rerata persentase hidup diatas 50% pada lama waktu perhitungan straw 15-30 detik. Prastika et  al. (2018)  menyatakan  bahwa  tidak terjadinya  osmotic  stress  secara  ekstrem menjadikan membran plasma sel spermatozoa

## Tabel 2. Rata-Rata Persentase Viabilitas Spermatozoa
Perlakuan Ulangan Rata-rata ± SEM I II III IV J1W1 72,19% 41,17% 48,00% 98,30% 63,92%  24,24 J1W2 74,62% 50,90% 42,81% 61,00% 57,33%  13,72 J1W3 69,80% 21,23% 64,45% 17,60% 43,27%  27,67 J2W1 50,00% 72,72% 61,90% 78,94% 65,89%  12,72 J2W2 83,88% 52,90% 65,36% 81,08% 70,81%  14,45 J2W3 85,64% 44,50% 62,66% 66,03% 64,71%  16,86 J3W1 60,24% 76,08% 47,84% 27,77% 52,98%  20,40 J3W2 6,86% 57,93% 71,54% 56,66% 48,00%  28,31 J3W3 40,69% 56,66% 50,50% 56,31% 51,04%  7,46
masih  utuh  dimana  membran  plasma  ini memiliki fungsi melindungi organel spermatozoa dan  transprot  elektrolit  untuk  metabolisme spermatozoa yang apabila aktivitas metabolisme spermatozoa  ini  tinggi  maka  berakibat  pada kematian  spermatozoa.  Hasil  analisis  ragam ANOVA  menunjukkan  bahwa  jarak  dan  waktu perhitungan straw tidak  berpengaruh  nyata (P>0,05)  terhadap  motilitas  spermatozoa  sapi Bali post thawing . Nilai persentase spermatozoa dalam penelitian  ini  yaitu  lebih  dari  50%  meskipun tidak  berpengaruh  nyata  terjadi  penurunan  nilai persentase viabilitas spermatozoa hingga 48,00% pada  perlakuan  J3W2  (20  cm  selama  20  detik), hal  ini  diduga  karena  terjadi  perubahan  suhu secara ekstrem sehingga mempengaruhi persentase hidup spermatozoa selama penelitian. Aini et  al. (2014)  mengemukakan  bahwa perubahan suhu yang darstis menjadikan proses metabolisme tetap berjalan sehingga daya gerak spermatozoa  menurun  yang  berakibat  pada kematian  sel  spermatozoa.  Kenaikan  suhu menyebabkan  kerusakan  spermatozoa post thawing karena  rusaknya  lipoprotein  yang  ada pada  spermatozoa  (Fatimah, et  al. ,  2018). Metode thawing yang digunakan dalam penelitian ini yaitu dengan suhu 37 0 C selama 30 detik,  dimana  hal  ini  juga  dapat  menjadi  salah satu faktor dari tingginya nilai persentase hidup spermatozoa.  Ningrum, et  al. (2014)  dalam penelitiannya  mengungkapkan  bahwa  suhu  dan durasi thawing memberikan  pengaruh  yang sangat nyata terhadap persentase hidup spermatozoa.  Selain  itu,  hasil  penelitian  yang baik  ini  dapat  juga  disebabkan  oleh  faktor
genetik  sapi  Bali  bahwa  sel  spermatozoa  sapi Bali  memiliki  kemampuan  adaptasi  yang  baik terhadap suhu dan thawing . Viabilitas spermatozoa  dalam  penelitian  ini  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil pengamatan viabilitas spermatozoa Keterangan: A. Spermatozoa hidup (tidak terwarnai) B. Spermatozoa mati (terwarnai)

## Abnormalitas Spermatozoa
Hasil  pemeriksaan  Abnormlitas  semen beku sapi Bali post thawing pada lama waktu dan jarak  yang  berbeda  dalam  proses  perhitungan straw dalam penelitian inidisajikan pada Tabel 3. Abnormalitas spermatozoa ditandai dengan tidak lengkapnya bagian struktur tubuh spermatozoa seperti tanpa kaki atau tanpa kepala. Spermatozoa  yang  memiliki  nilai  persentase abnormal >20% tidak layak digunakan untuk IB (Manehat et  al. ,  2021).  Hasil  pengamatan abnormalitas  spermatozoa  secara  mikroskopis ditunjukkan pada Tabel 3, diketahui bahwa hasil penelitian nilai persentase abnormalitas spermatozoa paling baik terdapat pada perlakuan J3W2 (jarak 20 cm dengan waktu 20 detik) yaitu 6,60% dan yang terendah terdapat pada
Gafur D. L., Ervandi M., Repi T., dan  Korompot I./ Kualitas Semen Beku Sapi Bali Post Thawing Dengan Jarak
dan
Waktu yang Berbeda di Dinas Pertanian Provinsi Gorontalo.
https://doi.org/10.55678/jstip.v4i2.1403

## Tabel 3. Rata-Rata Persentase Abnormalitas Spermatozoa
Perlakuan Ulangan Rata-rata ± SEM I II III IV J1W1 4, 88% 4,35% 3,63% 16,98% 7,46%  6,37 J1W2 17,16% 13,63% 8,50% 8,00% 11,82%  4,37 J1W3 19,84% 8,56% 12,04% 7,42% 11,97%  5,61 J2W1 8,00% 11,11% 14,28% 9,86% 10,81%  2,64 J2W2 12,32% 8,13% 9,80% 9,00% 9,81%  1,81 J2W3 10,25% 8,79% 5,00% 23,58% 11,91%  8,09 J3W1 7,83% 14,49% 9,56% 8,88% 10,19%  2,95 J3W2 2,52% 8,62% 9,61% 5,66% 6,60%  3,20 J3W3 11,62% 9,00% 4,37% 13,15% 9,54%  3,85 perlakuan J1W3 (jarak 10 cm dengan waktu 25 detik) yaitu 11,97%. Nilai persentase abnormalitas  spermatozoa  baik  primer  maupun sekunder harus memiliki nilai <20% untuk dapat dikatakan layak digunakan untuk IB (Susilawati, 2011).
Hasil  analisis  ragam  ANOVA  dua  arah menunjukkan bahwa jarak dan waktu perhitungan straw tidak  berpengaruh  nyata (P>0,05)  terhadap  abnormalitas  spermatozoa sapi  Bali post  thawing dan  masih  layak digunakan untuk IB. Hal ini diduga karena proses thawing yang tepat, dalam penelitian ini metode thawing yang  digunakan  adalah  pada  suhu  air 37 0 C  selama  30  detik  (SNI  4689:1,  2008). Adnyani et  al ,  (2018)  dalam  penelitiannya mengungkapkan  bahwa  proses thawing pada suhu dan lama waktu tersebut tidak menyebabkan  tekanan  yang  ekstrem  bagi  sel spermatozoa sehingga nilai abnormalitas spermatozoa  masih  baik.  Keadaan  abnormalitas spermatozoa  yang  sering  dijumpai  dalam
penelitian  ini,  yaitu  ditandai  dengan  ekor  putus atau tergulung, ekor bengkok ataupun yang tanpa kepala.  Keadaan  abnormalitas  dalam  penelitian ini dapat dilihat pada Gambar 1.2.
Spermatozoa  yang  terkontaminasi  air selama  proses  penelitian,  keadaan  panas  dan dingin  yang  tidak  sesuai  serta  proses  dalam preparat ulas selama penelitian dapat menyebabkan spermatozoa mengalami abnormal (Abdillah, et  al ,.  2015).  Meskipun  tidak berpengaruh  nyata,  nilai  rerata  persentase abnormal  yang  sangat  drastis  mencapai  angka tinggi  hingga  >20%,  Abdillah, et  al ,.  (2015) dalam  penelitiannya  mengungkapkan osmotic stress  maupun cold  shock pada  spermatozoa berkibat pada abnormalitas spermatozoa. Abnormalitas spermatozoa disebabkan oleh cold shock dimana  keadaan  ini  menyebabkan terjadinya tekanan osmotik karena proses
Gambar 1. 2 Hasil pengamatan Abnormalitas spermatozoa Keterangan: A. Spermatozoa membran utuh, ekor bengkok bergelombang
B. Spermatozoa tanpa kepala
C. Spermatozoa ekor bengkok 1 B A C
Jurnal Sains dan Teknologi Industri Peternakan 2024, 4 (1): 8-16  https://jurnal.umsrappang.ac.id/jstip e-ISSN (2775-7889)
metabolik  masih  terus  berlangsung (Manehat et al. ,  2021).  Struktur  sel  yang  abnormal dapatmenyebabkan  gangguan  dan  hambatan pada  saat  fertilisasi  yang  parahnya  dapat menyebabkan  gagal  bunting,  oleh  karena  itu pemeriksaana  abnormalitas  menjadi  salah  satu hal penting yang mendukung penentuan kualitas semen beku (Yulnawati, et al ,. 2009).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  nilai  rerata  persentase motilitas  spermatozoa  tertinggi  terdapat  pada perlakuan  jarak  10  cm  selama  15  detik  yaitu 41,75%,  nilai  rerata  persentase  viabilitas spermatozoa  tertinggi  didapat  dari  perlakuan jarak  15  cm  selama  20  detik  yaitu  70,81%  dan nilai rerata persentase abnormalitas spermatozoa terbaik  didapat  pada  perlakuan  jarak  20  cm selama 20 detik. Secara statistik hasil penelitian ini tidak berpengaruh nyata, akan tetapi hasil ini dapat  dijadikan  rekomendasi  bagi  kegiatan pelaksanaan IB di lapangan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada staf  Laboratorium  Universitas  Muhammadiyah Gorontalo dan staf pegawai Laboratorium Dinas Pertanian  Provinsi  Gorontalo,  yang  banyak memberikan bantuan tekniks maupun membantu dalam pengambilan data.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdillah,  L.  Solihati,  &  N.  Rasad,  S.  D.  2015.
Pengaruh  Metode  gliserolisasi  Terhadap Kualitas  Semen  Domba Post  thawing . Students e-Journal 4 (3) : 1-10 Adnyani, N. L. A., Sumardani, N. L. G., & Sarini N. P. 2018. Pengaruh Lama Thawing pada Uji  Kualitas  Semen  Beku  Sapi  Bali Produksi  UPT  BIBD  Baturiti  Sebelum Didistribusikan. Journal of Tropcal Animal Science 6 (3): 629-635.
Affhandy,  L.,  Pamungkas,  D.,  Wijono,  B.,
Prihandini,  P.  W.,  Situmorang,  P,  & Pratiwi, W. C. 2006. Peningkatan
Produktivitas Sapi Potong Melalui Efisiensi Reproduksi. Laporan Akhir. Loka Penelitian Sapi Potong. Afianti, F., Kaain, E.M., Gunawan, M., Said, S,
&  Tappa,  B.  2004.  Kualitas  Dan Kemampuan Hidup Sperma Beku Sapi PO
Setelah Thawing .  J.  Protein,  11(2)  :  205- 212.
Aini.  K.,  Sri,  S.,  &  Madi,  H.,  2014.  Pengaruh Jarak Straw Dengan  Nitrogen  Cair  Pada Proses  Pree  Freezing  Terhadap  Kualitas
Semen  Beku  Sapi  Limousin.  Jurnal Peternakan Terpadu, 2 (3): 62-68. http://dx.doi.org/10.23960/jipt.v2i3.p%25p
Ardiana,  L.,  Hardijanto,  R.  Damayanti,  T.
Sardjito,  I.  Mustofa,  B.  Utomo  2018. Pengaruh  Lama  Waktu  Perhitungan Straw Dan Posisi Jarak Straw Diatas Permukaaan Nitrogen  Cair  Terhadap  Motilitas  Dan Viabilitas  Semen  Beku  Sapi  Madura Post thawing .  Ovozoa:  Journal  of  animal repordukction, 7(2), 114-118. https://doi.org/10.20473/ovz.v7i2.2018.11 4-119
Ervandi, M, M. N. Ihsan, S. Wahjuningsih, & T. Susilawati.  2020.  Pregnancy  Rate  and Reproductive  Disorders  Examination  of Inseminated  Brahman  Cross  by  Rectal
Palpation  and  Ultrasonography.  American Journal of Animal and Veterinary Sciences, 15 (1): 73-80. https://doi.org/10.3844/ajavsp.2020.73.80 Ervandi, M.  S. Mokoolang, W.  Ardiansyah & Suci Ananda. 2023. Efektivitas Kombinasi
Ekstak  Buah  Merah  (Pandanus  conoideus Lamk)  dan  Air  Kelapa  Hijau  Terhadap
Kualitas Semen Sapi Bali  Selama Simpan
Dingin. Jurnal Ilmu dan Industri Peternakan. 9 (2) : 161-176.
https://doi.org/10.24252/jiip.v9v2. 40465
Ervandi,  M.  &  T.  Susilawati.  2021.  Kegagalan Reproduksi  Sapi  Brahman  Cross.    UB Press. Malang
Ervandi,  M.  M.  N.  Ihsan,  S.  Wahjuningsih, A.P.A.  Yekti  &  T.  Susilawati.  2019. Reprodutive  Performance  Of  Brahman Cross  Cows  On Difference Time Intervals Of Artificial Insemination. Asian Journal of Microbiol. Biotech. Env. Sc. 21 (4) : 915- 919
Ervandi,  M.  T.  Susilawati,  &  S.  Wahjuningsih. 2013.  Pengaruh  Pengencer  Yang  Berbeda Terhadap Kualitas Spermatozoa Sapi Hasil Sexing  Dengan  Gradien  Albumin  (Putih Telur).  Jurnal  Ilmu  Ternak  dan  Veteriner,
Gafur D. L., Ervandi M., Repi T., dan  Korompot I./ Kualitas Semen Beku Sapi Bali Post Thawing Dengan Jarak
dan
Waktu yang Berbeda di Dinas Pertanian Provinsi Gorontalo.
https://doi.org/10.55678/jstip.v4i2.1403
18 (3) : 177-184. DOI: 10.14334/jitv.v18i3.319 Ervandi,  M.,    W.  Ardiansyah,  T.  Repi,  S. Mokoolang, I. Korompot, & R. Pomolango. 2022. Edukasi Masyarakat Peternak Dalam Pemanfaatan Teknologi IB Untuk
Mendukung  Produksi  Bibit  Sapi  Bali. HUIDU  :  Jurnal  Pengabdian  Masyarakat Geoscience.1 (2) :73-79
Fatimah,  S.  N.,  Wurlina,  &  Retno,  S.  W. 2018.
Pengaruh  Jarak  Dan  Lama  Waktu  Proses Perhitungan Straw Sebelum  Distribusi Terhadap  Kualitas  Semen  Beku  Sapi
Simental Post thawing . Ovozoa: Journal of reproduction, 7(2) : 126-129.
https://doi.org/10.20473/ovz.v7i2.2018.12 6-130 Feradis.  2010.  Bioteknologi  Reproduksi  pada
Ternak.Bandung. Alfabeta
Hoesni,  F.  2015.  Pengaruh  Keberhasilan
Inseminasi  Buatan  (IB)  Antara  Sapi  Bali Dara  Dengan  Sapi  Bali  Yang  Pernah Beranak Di Kecamatan Pemayung
Kabupaten  Batanghari.  Jurnal  Ilmiah Universitas  Batanghari  Jambi,  15  (4)  :  20. http://dx.doi.org/10.33087/jiu.bjv15i4.119
Istiqomah,  H.N.    M.  Ervandi,  I.  Korompot,  T.
Repi,  &    I.  S.  Buhang.  2023.  Kualitas Semen  Beku  Sapi  Bali  (Bos  sondaicus) Pada Lama Thawing yang Berbeda di Dinas Pertanian  Provinsi  Gorontalo.  Jurnal  Ilmu dan  Industri  Peternakan.  9  (1)  :  20-30. https://doi.org/10.24252/jiip.v9v1.35393 Manehat, X. F., Dethan, A. A., & Tahuk, P. K. 2021.  Motilitas,  Viabilitas,  Abnormalitas Spermatozoa  dan  pH  Semen  Sapi  Bali Dalam  Pengencer  Sari  Air  Tebu-Kuning Telur Yang Disimpan Dalam Waktu Yang Berbeda.  Journal  of  Tropical  Animal Science  and  Technology,  3(2)  :  81-87. https://doi.org/10.323928/jtast.v3i2.1032
Ningrum,  S.  P.,  Hartono,  M.,  &  Santosa  P.  E. 2014. Pengaruh Suhu dan Lama Thawing di Dataran  Tinggi  Terhadap  Kualitas  Semen Beku  Sapi  Brahman.  Jurnal  Ilmiah Peternakan Terpadu 2 (3). https://dx.doi.org/10.23960/jipt.v2i3.p%25 p
Prastika, Z., Susilowati, S., Agustono, B., Safitri,
E.,  Fikri,  F.  &  Prastiya,  R.  A.  2018.
Motilitas  dan  Viabilitas  Spermatozoa  Sapi Rambon  di  Desa  Kemiren  Banyuwangi. Jurnal Medik Veteriner 1 (2) : 38-40. Ridwan,  2002.  Fertil  Life  Dan  Periode
Fertilspermatozoa  Ayam  Buras  Pasca Inseminasi Buatan. Tesis. Bandung. Program Pascasarjana Universitas Padjadjaran Bandung. SNI. 2017. Semen Beku – bagian 1: Sapi. BSN.
4689-1:2008.
Sudarwati,  H.,  Natsir,  M.H.  &  Nurgiatiningsih, V.M.  A.    2019.  Statistika  dan  Rancangan Percobaan Penerapan Dalam Bidang
Peternakan.  Universitas  Brawijaya  (UB Prees). Malang.
Susilawati,  T.  2011.  Spermatology.  UB  Press. Malang.
Susilawati,  T.  2011.  Tingkat  Keberhasilan
Inseminasi  Buatan  Dengan  Kualitas  dan Deposisi  Semen  yang  Berbeda  Pada  Sapi Peranakan Ongole. Jurnal Ternak Tropika, 12(2) : 15-24.
Susilowati, S., Hardijanto, T. W., Suprayogi, T.,
Sardjito,  &  Hernawati,  T.  2010.  Penuntun Praktikum  Inseminasi  Buatan.  Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga: Surabaya.
Triadi,  Ervandi,  M.  Fahrullah,  Repi,  T.,  & Indrianti,  M.  A.  2022.    Kualitas  Semen Ayam  KUB    Menggunakan  Pengencer Ringer  Dextros  Dan  Ringer  Laktat  Pada
Suhu 5 0 C. Jurnal Peternakan Sriwijaya, 11 (1) : 45-48. https://doi.org/10.36706/JPS.11.1.2022.16 641
Yulnawati. Herdis, H. Maheswari, Boediono, & M. Rizal, A. 2009. Potensi Reproduksi dan Upaya Pengembangbiakkan Kerbau Belang Tana  Toraja.  Prosiding  Seminar  dan Lokakarya Nasional Kerbau. Brebes, 11-13 November. 152-158 Yusuf , M.  T. Nakao, R.B. Kumari Ranasinghe, G.  Gautam,  S.  T.  Long,  C.  Yoshida,  K. Koike,  &  A.  Hayashi  2010.  Reproduktive Performance  Of  Repeat  Breeders  In  Dairy Herds. Theriogenology, 73: 1220- 1229.https://doi.org/10.1016/j.theriogenolo gy.2010.01.016
Zelpina,  A.  Rosadi,  B.  &  Sumarsono,  T.  2012.
Kualitas  Spermatozoa Post  thawing Dari
Semen  Beku  Sapi  Perah.  Jurnal  Ilmu-Imu Peternakan, 15 (2) : 96-98.
https://doi.org/10.22437/jiiip.v15.1796