Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi n -heksana, Etil Asetat, dan Air dari Daun Turi ( Sesbania grandiflor a Pers) terhadap Bakteri Shigella dysenteriae ATCC 9361

## ABSTRAK
ABSTRACT

## PENDAHULUAN

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition)
ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Available online at www.biomedika.ac.id
Antibacterial Activity Ethanolic Extract, Fractions Test Ofn-Hexane, Ethyl Acetate and Water from Turi Leaves ( Sesbania grandiflora Pers) Against Shigella dysenteriae ATCC 9361 1 2 3
Benedikta Coo Mogi , Reslely Harjanti , Ratno Agung Samsumaharto
1,2 Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi
3 Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi
Volume 9, No. 2, September 2016
Daun turi (Sesbania grandiflora Pers) merupakan tanaman suku Fabaceae yang dapat ditanam di perkarangan sebagai pagar hidup atau tanaman obat. Kandungan kimia daun turi adalah flavonoid, alkaloid, saponin, dan tanin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas ekstrak etanol, fraksi n-heksana, etil asetat dan air dari daun turi (Sesbania grandiflora Pers) sebagai antibakteri terhadap  Shigella dysenteriae ATCC 9361.Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etil asetat dan fraksi air terhadap Shigella dysenteriae ATCC 9361 menggu- nakan metode dilusi dan difusi. Konsentrasi fraksi yang digunakan untuk metode dilusi adalah 50%; 25%; 12,5%; 6,25%; 3,12%; 1,56%; 0,78%; 0,39%; 0,19%; 0,09%. Konsentrasi fraksi yang digunakan untuk metode difusi adalah 6,25%; 4,68% dan 3,12%. Fraksi paling aktif diuji kandungan kimia secara Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Konsen- trasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol,  fraksi  n-heksana,  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  air terhadap Shigella dysenteriae ATCC 9361 berturut-turut adalah 0,78%, 12,5%, 6,25% dan 50%. Diameter zona ham- bat  fraksi  teraktif  etil  asetat  terhadap  Shigella  dysenteriae ATCC  9361  adalah  18,17  mm  pada  konsentrasi  6,25%. Hasil identifikasi KLT menunjukkan fraksi etil asetat mengandung senyawa flavonoid dan alkaloid.
Sesbania grandiflora Pers is a kind of plant from Fabaceae family which can be planted in the yard as a living fence or medicine plant. Compounds contained in turi leaves is flavonoids, alkaloids, saponins, and tannins. This re- search  was  conducted  to  determine  the  ethanolic  extract,  fraction  activity  n-hexane,  ethyl  acetate  and  water  of  turi leaves  (Sesbania  grandiflora  Pers)  as  antibacterial  against  Shigella  dysenteriae  ATCC  9361.Antibacterial  activity ethanolic  extract,fractions  test  of  n-hexane,  ethyl  acetate  and  water  against  Shigella  dysenteriae  ATCC  9361  using dilution  and  diffusion  methods.  Concentration  of  the  fraction  used  for  the  dilution  method  was  50%;  25%;  12,5%; 6,25%;  3,12%;  1,56%;  0,78%;  0,39%;  0,19%;  0,09%.  Concentration  of  the  fraction  used  for  the  diffusion  method was 6,25%; 4,68% and 3,12%. The most active fractions were tested qualitatively with Thin-Layer Chromatography (TLC). Minimum Bactericidal Concentration (MBC) antibacterial activity ethanolic extract,fractions test of n-hexane, ethyl  acetate  and  water  against  shigella  dysenteriae  ATCC  9361  respectively  is  0,78%,  12,5%,  6,25%  and  50%. Diameter of inhibition zone ethyl acetate fraction against Shigella dysenteriae ATCC 9361 is 18,17 mm at concentra- tion 6,25%. The most active fractions of the chemical contenf of ethyl acetate were tested qualitatively with Thin-Layer Chromatography (TLC). Identification results with KLT showed positive fraction of ethyl acetate containing flavonoids and alkaloids.
Kata kunci: daun turi, antibakteri, metode dilusi, metode difusi, Shigella dysenteriae
Keywords: turi leaves,antibacterial, dilution methods, diffusion method, Shigelladysenteriae
Penyakit disentri basiler atau yang biasa dise- but  dengan Shigellosis merupakan  suatu  penya- kit  diare  yang  disebabkan  oleh  bakteri  genus Shigella. Disentri basiler diindikasi dengan nyeri hebat  pada  perut,  diare  secara  terus-  menerus,
volume feses sedikit yang disertai lendir dan darah (Dzen et al. , 2003).
Infeksi Shigella hampir selalu terbatas di sa- luran  cerna  dan  sangat  mudah  menular.  Sanitasi dan  kebersihan  personal  yang  buruk,  tidak  terse- dianya air, malnutrisi, serta peningkatan kepadatan
Daun turi ( Sesbania grandiflora Pers.) meru- pakan  tanaman  obat  yang  cukup  dikenal  oleh masyarakat  di  Indonesia.  Daun  turi  dimanfaat- kan  sebagai  obat  berbagai  penyakit.  Sebagai antibakteri, beberapa senyawa fitokimia dilapor- kan  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri penyebab penyakit (Rahayu et al. , 2006). Daun turi  mengandung  flavonoid,  alkaloid,  saponin, dan tanin yang terbukti memiliki efek antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Candida sp (Padmalochana  &  Rajan  2014).  Ekstrak  daun turi ( Sesbania grandiflora Pers.) mempunyai ak- tivitas  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli , Bacillus  subtilus , Staphylo- coccus aureus , Pseudomonas aeruginosa teruta-
penduduk adalah faktor-faktor yang menjadi pe- nyebab  tersebarnya  penyakit  disentri  (Sukandar et al ., 2008). Shigella dapat menular melalui ma- kanan, jari-jari tangan, feses, dan lalat dari orang yang  terinfeksi  ke  orang  normal.  Kebanyakan penyakit  ini  terjadi  pada  anak  umur  1-10  tahun dan  menjadi  suatu  masalah  kesehatan  yang  sa- ngat  penting  untuk  diperhatikan,  karena  pada penyakit  ini  penderita  dapat  mengalami  diare yang hebat hingga 20-30 kali sehari yang dapat mengakibatkan  penderita  kehilangan  cairan  tu- buh  dan  bila  tidak  segera  diatasi  dehidrasi  ter- sebut  akan  dapat  mengakibatkan  terjadinya  ke- matian (Jawetz et al. ,2012).
Menurut laporan World Health Organization (2005),  bakteri  genus  Shigella  resisten  terhadap multi  antibiotik  sebagai  akibat  pemakaian  anti- biotik  yang  tidak  tepat.  Oleh  karena  sudah  ba- nyak  ditemukannya  bakteri Shigella  dysenteriae yang  resisten  terhadap  banyak  antibiotik,  maka dalam penelitian ini digunakan obat dari tanaman tradisional  untuk  diuji  aktivitas  bakterinya. Seiring  dengan  perkembangan  zaman  perhatian masyarakat  telah  kembali  ke  bahan  alami  yang dikenal  dengan  istilah  “ Back  to  Nature “  ini  di- anggap  sebagai  hal  yang  sangat  bermanfaat  ka- rena sejak dahulu masyarakat telah percaya bah wa  bahan  alam  mampu  mengobati  segala  jenis penyakit dan relatif aman bagi tubuh.
ma  terhadap Escherichia  coli dan Pseudomonas aeruginosa (Vipin et al. , 2011). Berdasarkan hal tersebut  maka  perlu  dilakukan  penelitian  lanjut- an  mengenai  aktivitas  atibakteri  daun  turi  terha- dap S higella dysenteriae dengan pemisahan kom- ponen  senyawa  berdasarkan  polaritasnya  secara fraksinasi sehingga diketahui fraksi teraktif yang mempunyai daya bunuh dan diameter zona ham- bat terhadap Shigella dysenteriae .
Alat  yang  digunakan  antara  lain  :  oven, blender  untuk  membuat  serbuk,  alat  maserasi berupa  botol  mulut  lebar  warna  coklat,  gelas ukur,  pembakar  spirtus,  kaki  tiga,  kertas  saring, selang,  corong  penyaring, rotary  evaporator , timbangan analitik, erlenmeyer,batang pengaduk, tabung  reaksi,  cawan  petri,  inkas,  jarum  ose, pinset,  vial,  spuit,  labu  alas  bulat,  rak  tabung, boor  prop,  mikroskop, moisture  balance ,  pipet ukur, corong pisah, autoklaf, inkubator.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Alat

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah daun turi ( Sesbania grandiflora Pers.) se- gar yang diambil dari Desa Tugu Rejo, Kecama- tan  Musuk,  Kabupaten  Boyolali.  Bakteri  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Shigella dysenteriae ATCC  9361  yang  dibiakkan.  Me- dium  yang  digunakan  adalah Brain  Heart  Infu- sion (BHI), Mueller  Hinton  Agar (MHA), Sulfi- daIndolMotility (SIM), Kligler  Iron Agar (KIA), Lysine  Iron  Agar (LIA), Citrat , Salmonella Shigella Agar (SSA). Bahan kimia yang diguna- kan dalam penelitian ini adalah pelarut n -heksana, etil  asetat, Mc  Farland 0,5,  etanol    70%,  aqua- destilata,  NaCl  fisiologis,  erlich  A,  erlich  B, DMSO 5%.

## Alat

## Jalannya penelitian

## Identifikasi tumbuhan
Pembuatan  ekstrak  dengan  cara  maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 70%. Serbuk daun turi sebanyak 1500 gram gram dimasukkan ke  dalam  botol,  dengan  ditambahkan  pelarut sebanyak  11250  ml.  Ekstraksi  dilakukan  selama 5  hari  dengan  sesekali  digojog  berulang-ulang. Maserat  yang  didapatkan  selama  5  hari  diperas dengan kain flanel dan disaring. Residu kemudi- an ditambahkan etanol 3750 ml dibiarkan selama 2 hari. Ekstrak yang diperoleh diuapkan pelarut- nya dengan menggunakan rotary evaporator pa- da  suhu  50°C  hingga  diperoleh  ekstrak  kental (Depkes, 1986).
flora Pers.)  yang  dilakukan  di  bagian  Laborato- rium  Sistematika  Tumbuhan,  Fakultas  Farmasi Universitas  Setia  Budi,  Surakarta.  Identifikasi ini bertujuan untuk mencocokan ciri makroskopis dan mikroskopis, selain itu juga berfungsi untuk mencocokan  ciri  morfologi  yang  ada  pada  daun turi ( Sesbania grandiflora Pers.).
Pengeringan bahan dan pembuatan serbuk daun turi
Daun turi ( Sesbania grandiflora Pers.) dicuci dengan  air,ditiriskan  lalu  dikeringkan  dengan oven  pada  suhu  50°C.  Daun  kering  diblender dan diayak dengan menggunakan ayakan no. 40 sampai  didapatkan  serbuk  daun  turi  ( Sesbania grandiflora Pers.) yang diinginkan.

## Penetapan kadar lembab
Penetapan kadar kelembaban serbuk daun turi dilakukan  dengan  menggunakan  alat moisture balance .  Serbuk  ditimbang  2  gram,  dimasukkan ke  dalam  alat moisture  balance .  Kemudian moisture  balance ditutup  dan  ditunggu  sampai ada  bunyi  pada  alat  sebagai  tanda. Angka  yang muncul  dalam  satuan  persen  pada  alat moisture balance dicatat sebagai kadar kelembaban.

## Pembuatan ekstrak daun turi secara maserasi
untuk menetapkan kebenaran kandungan kimia yang terkandung dalam serbuk daun turi. Iden- tifikasi  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  saponin, dan tanin dibuktikan di Laboratorium Fitokimia Fakultas  Farmasi  Universitas  Setia  Budi  Sura- karta.
Identifikasi  flavonoid. Ekstrak  sebanyak ± 0,5 g dicampurkan dengan aquadestilata. Sete- lah itu, didihkan selama 5 menit kemudian disa- ring. Filtrat ditambahkan 0,5 mg bubuk Mg dan ditambahkan 1 ml HCl pekat dan amil alkohol. Dicampur  dan  dikocok  kuat-kuat  kemudian  di- biarkan memisah. Reaksi positif ditandai dengan warna merah atau kuning atau jingga pada lapis- an amil akohol (Alamsyah et al. , 2014).
Identifikasi tanin. Ekstrak sebanyak ± 0,5 g ditambahkan  aquadestilata  sampai  terendam dan  dipanaskan  selama  3  sampai  5  menit.  Ke- mudian  ditambahkan  2  tetes  larutan  NaCl  10% lalu  direaksikan  dengan  menambahkan  FeCl3. Perubahan  warna  hijau  kehitaman  menunjukan adanya  kandungan  tanin  (Ramyashree et  al. , 2012).
Identifikasi  alkaloid. Ekstrak  sebanyak ± 0,5 g dilarutkan dengan aquadestilata. Setelah itu ditambahkan 1 ml HCl 2 N. Dibuat dalam 2 tabung.  Tabung  1  ditambahkan  reagen  Mayer terbentuk endapan menggumpal warna putih ke- kuningan.  Tabung  2  ditambahkan  reagen  Dra- gendroff  terbentuk  endapan  berwarna  merah sampai jingga (Alamsyah et al. , 2014).
Identifikasi  saponin. Ekstrak  sebanyak ±  0,5  g  ditambahkan  aquadestilata,  kemudian dipanaskan  selama  2  sampai  3  menit.  Setelah dipanaskan tunggu sampai dingin lalu kocok de- ngan kuat. Adanya busa yang stabil dan setelah ditambahkan  1  tetes  HCl  2N  busa  tidak  hilang menandakan adanya kandungan saponin (Ram- yashree et al. , 2012).

## Fraksinasi
Ekstrak kental ditimbang dilarutkan dengan etanol  dan  aquadestilata  kemudian  dipisahkan di corong pisah dengan ditambahkan n -heksana,
Kromatografi  lapis  tipis  dilakukan  untuk menguji  fraksi  aktif  dalam  ekstrak  etanol  daun turi.  Ekstrak  atau  fraksi  aktif  dilarutkan  dalam pelarut yang sesuai, kemudian ditotolkan di atas lempeng  kromatografi,  setelah  totolan  kering, lempeng  KLT  dimasukkan  dalam  bejana  yang sudah  jenuh  oleh  fase  gerak  yang  sesuai.  Pe- ngembangan  dilakukan  sampai  jarak  tertentu, kemudian dilakukan deteksi di bawah sinar UV 254 nm dan 366 nm serta pereaksi tertentu. Ber- cak yang terdeteksi ditentukan harga Rf dan pe- nampakan warnanya.
dipartisi sebanyak tiga kali. Hasil fraksinasi yang diperoleh  dipekatkan  dengan rotary  evaporator dan  disebut  sebagai  fraksi n -heksana.  Residu dari  fraksinasi n -heksana  dipisahkan  di  corong pisah  dengan  ditambahkan  etil  asetat,  dipartisi sebanyak  tiga  kali.  Hasil  fraksinasi  yang  diper- oleh  dipekatkan  dengan  menggunakan rotary evaporator kemudian ditimbang dan disebut se- bagai  fraksi  etil  asetat.  Residu  dari  fraksi  etil asetat  dipekatkan  menggunakan  waterbath  suhu ± 50°C lalu ditimbang dan disebut sebagai fraksi air.

## Pembuatan suspensi bakteri uji
Bakteri Shigella dysenteriae ATCC 9361 da- lam  biakan  murni  diambil  masing-masing  satu ose dan kemudian dimasukkan tabung yang telah diisi  10  ml  media  BHI  ( Brain  Heart  Infusion ) kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Suspensi  yang  didapat  diencerkan  dengan perbandingan  1:1000  dengan  menggunakan  la- rutan garam fisiologis dan dibandingkan dengan konsentrasi Mc  Farland 0,5  (Bonang  &  Koes- wardono, 1982).

## Pengujian aktivitas antibakteri daun turi

## Pengujian antibakteri secara dilusi
Metode dilusi menggunakan 12 tabung steril. Konsentrasi larutan stok yang dibuat adalah 50%, kemudian diencerkan dengan pelarut DMSO 5%. Secara  aseptis  dari  larutan  stok  tersebut  dibuat deret  konsentrasi  di  bawahnya  yaitu  kontrol  (-); 50%;  25%;  12,5%;  6,25%;  3,12%;  1,56%; 0,78%;  0,39%;  0,19%;  0,09%  dan  kontrol  (+). Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) ditentukan dengan  cara  tabung  media  yang  jernih  diinoku- lasi  secara  goresan  pada  media  selektif  untuk masing-masing  bakteri  uji.  Bakteri  yang  sudah
Pengujian  antibakteri  secara  difusi. Metode  difusi  digunakan  untuk  menentukan diameter zona hambat terhadap bakteri uji meng- gunakan  cawan  petri  steril  yang  telah  diisi  de- ngan media MHA sebanyak 50 ml. Secara asep- tis  pada  cawan  petri  digoresi  suspensi  bakteri menggunakan lidi steril, kemudian dibuat sumur- an  menggunakan  boor  prop  sebanyak  5  lubang sumuran. Kemudian sumuran diisi fraksi teraktif etil  asetat  yang  telah  dibuat  seri  pengenceran berdasarkan  konsentrasi  pada  dilusi  yang  dapat membunuh  bakteri  Shigella  dysenteriae  ATCC 9361.  Kontrol  positif  adalah  kotrimoksazol  dan kontrol  negatif  adalah  DMSO  5%,  masing-ma- sing dengan volume 50μl. Masa inkubasi selama 24  jam  pada  suhu  37°C  dan  diamati  hasilnya, setelah  itu  diukur  diameter  zona  hambat  sekitar sumuran yang dinyatakan dalam satuan mm (Bo- nang & Koeswardono 1982).

## Kromatografi lapis tipis
digoreskan  pada  media  selektif  Salmonella Shigella Agar (SSA) diinkubasi pada suhu kamar 37ᴼC selama 24-48 jam. Diamati ada atau tidak- nya koloni yang tumbuh pada permukaan media lempeng.

## Pembahasan
Hasil pengujian aktivitas antibakteri menun- jukkan  bahwa  ekstrak  etanol,  fraksi n -heksana, etil asetat, dan air memiliki aktivitas antibakteri terhadap  bakteri Shigella  dysenteriae ATCC 9361 yang ditunjukkan dengan adanya tidaknya

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Hasil Penelitian
Hasil penelitian dapat dilihat di Tabel 1, 2, dan 3.
Uji dilusi fraksi n -heksana, etil asetat, dan air menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat  adalah fraksi  yang  teraktif  dapat  membunuh Shigella dysenteriae ATCC  9361  dengan  konsentrasi
Hasil penelitian ini membuktikan bahwa ek- strak etanol lebih baik dalam membunuh Shigella dysenteriae ATCC  9361  jika  dibandingkan  de- ngan fraksi n -heksana, etil asetat dan air. Hal ini kemungkinan  disebabkan  karena  kandungan  se-
sinergis  sehingga  menghasilkan  aktivitas  anti- bakteri yang lebih kuat. Hasil penelitian ini juga menunjukan  bahwa  fraksi  etil  asetat  lebih  baik dalam  membunuh Shigella  dysenteriae ATCC 9361 dibandingkan dengan fraksi n -heksana dan fraksi  air,  mungkin  dikarenakan  dalam  fraksi etil  asetat  senyawa  yang  tersari  di  dalamnya adalah  flavonoid  dan  alkaloid  yang  memiliki aktivitas antibakteri.
koloni yang tumbuh pada media SSA. Konsen- trasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  ekstrak  etanol, fraksi n -heksana, fraksi etil asetat dan fraksi air berturut-turut adalah 0,78%, 12,5%, 6,25% dan 50%.
nyawa  antibakteri  yang  terkandung  dalam  ek- strak etanol lebih banyak dan semua kandungan senyawa  dalam  ekstrak  etanol  bekerja  secara
Tabel 2. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan fraksi daun turi terhadap Shigella dysenteriae ATCC 9361
No. Konsentrasi (% b/v) Ekstrak etanol Fraksi n -heksana Fraksi etil asetat Fraksi air I II III I II III I II III I II III 1 Kontrol (-) - - - - - - - - - - - - 2 50 - - - - - - - - - - - - 3 25 - - - - - - - - - + + + 4 12,5 - - - - - - - - - + + + 5 6,25 - - - + + + - - - + + + 6 3,12 - - - + + + + + + + + + 7 1,56 - - - + + + + + + + + + 8 0,78 - - - + + + + + + + + + 9 0,39 + + + + + + + + + + + + 10 0,19 + + + + + + + + + + + + 11 0,09 + + + + + + + + + + + + 12 Kontrol (+) + + + + + + + + + + + +
Keterangan : (-)  : Tidak ada pertumbuhan bakteri (+)  : Ada pertumbuhan bakteri Kontrol (-) : Larutan stok (ekstrak/fraksi) Kontrol (+) : Suspensi bakteri Tabung no. 2-11: Larutan uji dan suspensi bakteri
Tabel 3.  Hasil perhitungan diameter hambat pada uji antibakteri fraksi teraktif etil asetat daun turi terhadap Shigella dysenteriae ATCC 9361 secara difusi
Fraksi Konsentrasi Diameter hambat (mm) Rata-rata(mm) I II III Etil Asetat 6,25% 17 19 18,5 18,17 4,68% 9 10 9 9,33 3,12% 0 0 0 0 Kontrol (+) 35,5 37 37 36,5 Kontrol (-) 0 0 0 0
Keterangan: Kontrol (+)  : Kotrimoksazol Kontrol (-)   : DMSO 5%
Tabel 1.  Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak daun turi SenyawaKeterangan
Flavonoid + Alkaloid +
Saponin +
Tanin
+
KBM  6,25%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri fraksi  etil  asetat  sebagai  fraksi  teraktif  dilanjut- kan  dengan  metode  difusi  untuk  mengetahui rata-rata diameter zona hambat pada konsentrasi 6,25%;  4,68%  dan  3,12%  yang  dinyatakan  da- lam satuan mm. Rata-rata diameter zona hambat dari fraksi etil asetat adalah 18,17 mm pada kon- sentrasi  6,25%  dan  9,33  mm  pada  konsentrasi 4,68%,  serta  tidak  ada  daya  hambat  pada  kon- sentrasi  3,12%.  Hal  ini  berarti  diamater  zona hambat  yang  paling  besar  dari  fraksi  etil  asetat adalah 18,17 mm pada konsentrasi 6,25%.
World  Health  Organization  (WHO).  2005. Guidelines  For The Control Of Shigellosis, Including Epidemics Due To Shigella dysenteriae type 1 . WHO Document Production Services, Geneva, Switzerland. hlm 12 - 15.

## KESIMPULAN
Pertama, ekstrak etanol, fraksi n-heksana, etil asetat  dan  fraksi  air  dari  daun  turi  ( Sesbania grandiflora Pers.)  mempunyai  aktivitas  antibak- teri  terhadap  bakteri Shigella  dysenteriae ATCC 9361.  Kedua,  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM)  ekstrak  etanol,  fraksi  n-heksana,  etil asetat dan air dari daun turi ( Sesbania grandiflora (L.)  Pers.)  terhadap Shigella  dysenteriae ATCC 9361  adalah  0,78%;  12,5%;  6,25%  dan  50%. Ketiga, fraksi etil asetat dari ekstrak etanol daun turi  merupakan  fraksi  yang  paling  aktif  sebagai antibakteri  terhadap Shigella  dysenteriae ATCC 9361.  Keempat,  diameter  zona  hambat  fraksi teraktif  etil  asetat  terhadap Shigella  dysenteriae ATCC  9361  adalah  18,17  mm  pada  konsentrasi 6,25%.

## DAFTAR PUSTAKA
Alamsyah HK, Widowati I, Sabdono A. 2014. Aktivitas antibak- teri  ekstrak  rumput  laut Sargassum  cinereum (J.G. Agardh) dari perairan pulau panjang jepara terhadap bakteri Escheri- chia coli dan Staphylococcus epidermidis . Journal Of Marine Research 3:69-78. Bonang G dan Koeswardono.1982. Mikrobiologi Untuk Labo- ratorium  dan  Klinik .  Jakarta:  PT  Gramedia.  hlm  77-78, 176-191.
[Departemen  Kesehatan  RI].  1986. Sediaan  Galenik .  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. hlm 6-7, 10-12. Dzen SJ, Roekistiningsih, Santoso S, dan Winarsih S. 2003. Bak- teriologi  Medik  Edisi  I .  Malang:  Bayumedia  Publishing. hlm 187.
Jawetz  E,  Melnick  JL, Adelberg  EA.  2012. Mikrobiologi  Kedok- teran Edisi 25 . Jakarta: Buku Kedokteran EGC. hlm 230-231. Padmalochana  K  dan  Rajan  DMS.  2014. Antimicrobial  activity of aqueous, ethanol and acetone extracts of Sesbania grandi- flora leaves and its phytochemical characterization. Interna- tional Journal of Pharma Sciences and Research (IJPSR) 5: 957-962.
Rahayu  M,  Sunarti  S,  Sulistiarini  D,  Prawiroatmodjo  S.  2006. Pemanfaatan tumbuhan obat secara tradisional oleh masya- rakat lokal di pulau Wawonii, Sulawesi Tenggara. Biodiver- sitas 7:245-250.
Ramyashree M, Krishna Ram H, Shivabasavaiah. 2012. Ethno- medicinal value of opuntia elatior fruits and its effects in mice. University of Mysore. Karnataka. India. Journal of Pharmacy Research 8: 4554-4558.
Sukandar EY, Andrajati  R, Sigit JI, Adnyana IK., Setiadi AP, Kusnandar. 2008. ISOFarmakoterapi . Buku 1 . PT. ISFI Penerbitan: Jakarta. hlm 682.
Vipin  K,  Arun  GK,  Rajesh  G.  2011.  Antimicrobial  activity  of Sesbania grandiflora (L.) Pers. International research jour- nal of pharmacy 2:85-87.