## Isolasi Dan Karakterisasi Bakteri Tanah Rhizosfer Tanaman Di Kawasan Hutan Wisata Sibolangit Sumatera Utara
Sri Wahyuni (1),Nomi Noviani (2),Dian Habibie (3)Bambang Hermanto(4)
(1)(2)(3)(4)Fakultas Pertanian,Universitas Muslim Nusantara Al Washliyah
sriwahyuniumnaw.ac.id (1) nominoviani@umnaw.ac.id (2) dianhabibie@umnaw.ac.id
(3) bambanghermanto@umnaw.ac.id (4)

## ABSTRAK
Kawasan Hutan Wisata alam Sibolangit termasuk daerah yang mempunyai produktivitas  serasah yang tinggi. Keberadaan proses kegiatan dekomposisi sangat tergantung terhadap peran dari mikroorganisme tanah antara lain  bakteri,  peran  bakteri  sebagai  bagian  dari  agen  dekomposisi  sangat  penting    karena  berperan  dalam penyedia  unsur  hara  bagi  tanaman  sehingga  dapat  dimanfaatkan  oleh  tumbuhan. Salah  satu  habitat mikroorganisme yang menarik di hutan adalah rhizosfer. Keberadaan bakteri rhizosfer memiliki peluang  yang besar  terutama  dalam  penyediaan  hara  bagi  tanaman  maupun  sebagai  pengendali  patogen. Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengkarakterisasi keragaman  bakteri tanah   yang  berada  di sekitar rhizosfer akar. Sampel tanah diambil secara acak dan dilakukan  ulangan sebanyak tiga kali. Isolasi sampel tanah dilakukan dengan menggunakan  cara    sebar    untuk  mendapatkan  isolate  yang  diinginkan.  Pemurnian  isolat  dilakukan  dengan metode  streak  plate,  selanjutnya  diidentifikasi  dan  dikarakterisasi. Dari  hasil  diperoleh  10  spesies  koloni bakteri dengan isolat yang terpilih dengan berbagai bentuk morfologi, tepi koloni dan elevasi yang berbeda. Hasil uji pengecatan gram diperoleh di dominasi dengan bentuk coccus dan basil, uji pati, TSIA dan gelatin menunjukkan hasil positif ke 10 koloni, Uji Sitrat positif koloni T3, T4, T6, T7 , T8, T9 dan Katalase Positif (T1,T2 ,T3 ,T4 ,T5 dan T 10).
Kata Kunci :Bakteri Tanah,Rhizosfer, Isolasi

## ABSTRACT
The Sibolangit Nature Tourism Forest area includes areas that have high litter productivity. The existence of the decomposition activity process is very dependent on the role of soil microorganisms, including bacteria, the role of bacteria as part of the decomposition agent is very important because it plays a role in providing nutrients for plants so that they can  be utilized  by plants. One interesting habitat for microorganisms  in the forest  is  the  rhizosphere.  The  existence  of  rhizosphere  bacteria  has  great  opportunities,  especially  in providing  nutrients  for plants and as pathogen control.  This study aims to characterize the diversity of soil bacteria around the root rhizosphere. Soil samples were taken randomly and replicated three times. Isolation of soil samples was carried out using the spread method to obtain the desired isolate. Purification of isolates is  done  by  streak  plate  method,  then  identified  and  characterized.  From  the  results  obtained  10  species  of bacterial  colonies  with  selected  isolates  with  various  morphological  forms,  colony  edges  and  different elevations. Gram stain test results were obtained dominated by coccus and bacillus forms, starch, TSIA and gelatin tests showed positive results to 10 colonies, positive Citrate Test colonies T3, T4, T6, T7, T8, T9 and Positive Catalase (T1, T2, T3, T4, T5 and T10)
Keywords : Soil Bacteria, Rhizosphere, Isolation.

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Sibolangit  memiliki  tempat  wisata  yang  sering  dikunjungi  berbagai  wisatawan  karena daerah  ini  termasuk  daerah  yang  dijadikan  sebagai  tempat  rekreasi,  pengenalan keberagaman kebudayaan, serta dapat digunakan dalam melakukan kegiatan pembelajaran. Salah  satu  tempat  daerah  Sibolangit  yang  menjadi  salah  satu  tujuan  utama  para  pelajar, peneliti,serta  para  pecinta  alam  adalah  Hutan  Taman  Wisata  atau  yang  sering  dikenal dengan  nama  TWA  .  Hutan  ini  adalah  salah  satu  tempat  wisata  yang    memiliki keberagaman  keindahan  alam  hal  tersebut  karena  disana  tumbuh  berbagai  macam tumbuhan  (nabati)  yang  unik  serta  bermanfaat,  keragaman  hewan,  maupun  keberagaman mikroorganisme. Hutan merupakan ekosistem kompleks yang menampung keanekaragaman hayati yang  luar biasa, termasuk mikroorganisme. Salah satu habitat mikroorganisme yang menarik di hutan adalah rhizosfer, yaitu zona tanah di sekitar akar tanaman. Rhizosfer kaya akan nutrisi dan senyawa organik yang berasal dari eksudat akar tanaman, sehingga menjadi tempat  ideal  bagi  berbagai  jenis  mikroorganisme,  termasuk  bakteri.  Pada  dasarnya keberadaan bakteri di sekitar Rhizosfer yang hidup di  perakaran  dapat memiliki interaksi yang menguntungkan, merugikan serta ada yang bersifat netral terhadap tanaman. Konsep menguntungkan  pada  tanaman  karena  dapat  berperan  dalam  menstabilkan  tanah  terhadap kondisi  tanah  yang  mengalami  perubahan  PH  akibat  ekosistem  tanah  yang  mengalami perubahan,  selain  itu  dapat  berperan  dalam  menyerap  air  serta  nutrisi  di  dalam  tanah sehingga  dapat  digunakan  oleh  tumbuhan  dalam  proses  perkembangan  dan pertumbuhannya,  yang  paling  penting  adalah  bakteri  di  sekitar  rhizospere  dapat  berperan dalam  mengikat  unsure  N2  dari  udara  sehingga  dapat  digunakan  oleh  tumbuhan  dalam bentuk yang sudah terikat melalui mekanisme nitrifikasi dan denitrifikasi. Dalam interaksi pengendalian  hayati,  antibiosis  serta  simbiosis  keragaman  bakteri  rhizospher  dapat  di dapatkan  karena  bakteri  memiliki  kelebihan  dalam  mengeluarkan  senyawa  penting  yang mempengaruhi  organisme  yang  ada  di  sekitrarnya.  Dalam  menyediakan  nutrisi  terhadap tanaman bakteri rhizospere dapat merubah sifat dari morfologi, proses fisiologi dari akar di dalam sistem tanaman tersebut dengan cara menyeimbangkan komposisi nutrient tersebut sehingga  lebih  mudah  di  transfer  keseluruh  permakaan  akar  sehingga  akar  tersebut  dapat langsung melakukan penyerapan, komposisi kimia tanah juga dapat dirubah,nutrient yang terdapat  di  sekitar  juga  dapat  langsung  di  gunakan  oleh  inang  melalui  interaksi  secara simbiotik. (Nye dan Tinker, 1977 dalam Irianto, 2002). Bakteri rhizosfer memainkan peran penting  dalam  kesehatan  dan  pertumbuhan  tanaman  hutan.  Mereka  terlibat  dalam  berbagai proses  ekologis,  seperti:  Siklus  nutrisi,  kegiatan  siklus  nutrisi,  Bakteri  rhizosfer  dapat membantu tanaman menyerap nutrisi penting seperti nitrogen, fosfor, dan kalium dari tanah. Mereka juga dapat menguraikan bahan organik dan membebaskan nutrisi yang terikat dalam tanah.  Bakteri  rhizosfer  tertentu  menghasilkan  hormon  tanaman  dan  komposisi  komponen kimia  pengatur  tumbuh  lainnya  sehingga    dapat  digunakan  dalam  meningkatkan pertumbuhan  akar  dan  tunas  tanaman  yang  baru.  Keanekaragaman  bakteri  rhizosfer  yang tinggi menghasilkan  banyak jenis bakteri rhizosfer dengan fungsi yang berbeda-beda.  Pada lapisan rhizosfir bakteri hidup secara berkelompok dan secara alami , bakteri yang dikenal adalah rizobacteria yang berperan dalam meningkatkan pertumbuhan tanaman atau istilah yang disebut adalah Bakteri PGPR (Kloepper et al., 1991; Glick, 1995). Menurut Kloepper (1993),  beberapa  penelitian  tentang    bakteri  ini    telah  pernah  diteliti  dan  telah diidentifikasi.  Dari  hasil  penelitian  dan  identifikasi  sebelumnya  menunjukkan  komposisi bakteri  yang  berada  di  sekitar  perakaran  rhizospere  diperoleh  dari  golongan    genus Pseudomonas dan  golongan  genus Seratia .  Glick  (1995)  dari  hasil  penelitian  keragaman yang  lain  ditemukan  dilaporkan  juga    golongan  jenis  bakteri  dari  genus Azotobacter, sebahagian Azospirillum, golongan Acetobacter, jenis Burkholderia dan jenis lain adalah
golongan Bacillus . Hal ini membutuhkan metode isolasi dan karakterisasi yang tepat untuk mengidentifikasi  bakteri  yang  memiliki  potensi  manfaat.  Kompleksitas  interaksi  antara bakteri  dan  tanaman:  Interaksi  antara  bakteri  rhizosfer  dan  tanaman  hutan  masih  belum sepenuhnya  dipahami.  Hal  ini  dibutuhkan  penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui bagaimana bakteri rhizosfer mempengaruhi pertumbuhan dan kesehatan tanaman. Penelitian tentang  isolasi  bakteri  rhizosfer  tanaman  hutan  masih  terus  berkembang.  Dengan mempelajari bakteri-bakteri ini, kita dapat membuka peluang baru untuk pengelolaan hutan yang lebih lestari dan ramah lingkungan”.

## 2. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang  yang diuraikan sebelumnya, rumusan masalah pada penelitian ini adalah :
1.Apakah  Tanaman  Wisata  Alam  memiliki  keanekaragaman  bakteri  pada  daerah Rhizosfere?
2. Bagaimana keragaman dan sifat bakteri terhadap uji karakterisasi dan uji biokimia?

## 3. Tujuan Penelitian
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah Untuk mengidentifikasi jenis bakteri yang berada di sekitar rhizosfer akar

## 4. Manfaat Penelitian
Isolat bakteri yang diperoleh dari Rhizosphere akan dapat dikembangkan selanjutnya dalam pembuatan dan penyediaan nutrisi (pupuk) pada tanaman dan sebagai pengendali patogen.

## II. METODE Isolasi Bakteri Tanah Perakaran Rhizospere
Cara  melakukan  isolasi  bakteri  tanah  di  sekitar  perakaran  Rhizosphere  adalah  dengan ditumbuhkan pada media di perkaya(Lambui dkk, 2015) dan spreadplate. Tanah Sebanyak 10  g  dengan  menggunakan  spatula  dilakukan  pengencerandi  dalam  tabung  reaksi  yang telah  terisi  90  ml  aquadest  yang  telah  disterilkan  dengan  autoklaf,dilanjutkan  dengan pemisahan melalui serangkaian pengenceran dengan mempersiapkan tabung reaksi.Masing-masing  pengenceran 10-8 -  10 -12 .  Dari  pengenceran  tersebut    ambil  0,1  ml untuk  ditumbuhkan  dan  disebar  dengan  menggunakan  hockey  stick  secara  merata  pada media tumbuh NA. NA dan selanjutnya akan diinkubasi dengan suhu 37°C selama selama 24-48 jam. Kelompok koloni yang  tunggal dan terpisah dari kelompok lainnya dilakukan pemurniandengan  cara  penggoresan  pada  media  NA.  Kemudian  dapat  diamati  dan dilakukan  identifikasi  diidentifikasi  berdasarkan  bentuk  karakteristik  berdasarkan  buku identifikasi.

## Identifikasi Isolat
Untuk  melakukan  karakteristik  terhadap  isolate  yang  terpilih  dapat  dilakukan  dalam  Dua proses antara lain, yaitu uji secara proses mikrobiologis dan pengujian  biokimiawi.  Dalam Pengujian    secara  mikrobiologi  prosesnya  antara  lain  dengan  melakukan  identifikasi melalui  pengamatan  secara  langsung  morfologi  bakteri  melalui  makroskopis  serta menggunakan  mikroskop.  Identifikasi  dengan  mengidentifikasi  secara  langsung (makroskopis) dapat dilakukan dengan melakukan pengamatan secara cirri spesifik bentuk koloni bakteri dengan menggunakan colony counter, yang diamati seperti: bentuk ukuran, warna koloni, bentuk isolat, margin atau tepi, dan elevasi atau cekungan  bakteri tersebut (Lay,  1994).  Identifikasi  dengan  menggunakan  mikroskop  melalui  pengamatan karakteristik  bentuk  sel  yang  terwarnai  melalui  metode  pewarnaan  secara  bertingkat  atau Gram.
Wahyuni S, Noviani N, Habibie D, Hermanto B : Isolasi Dan Karakterisasi Bakteri Tanah Rhizosfer Tanaman Di Kawasan Hutan Wisata Sibolangit Sumatera Utara

## Pewarnaan Bertingkan atau Gram
Identifikasi pewarnaan bertingkat yaitu pewarnaan dengan menggunakan lebih dari satu zat warna seperti pewarnaan Gram bertujuan untuk menentukan karakteristik dan bentuk asal dari koloni bakteri. Proses pewarnaan gram diawali dengan pembuatan isolate murni yang diinkubasi  24-48  jam.  Selanjutnya  di  buat  preparat  olesan  di  objek  glass  dengan mengambil 1 koloni bakteri dan diencerkan dengan aquadest selanjutnya dilakukan proses fiksasi. Setelah itu preparat olesan digenangi dengan zat warna utama seperti Kristal violet dan  didiamkan   lebih  kurang  3  menit  dan  dilakukan  pencucian  dengan  air mengalir  yang steril dan dikeringanginkan. Selanjutnya diteteskan dengan larutan iodium/lugol dibiarkan 1detik  dan  dibilas  dengan  aseton  alcohol,  di  alirkan  dengan  aquadest  serta  di dikeringanginkan. Proses selanjutnya adalah diberi zat warna penutup yaitu safranin. Hasil pewarnaan dapat dilihat melalui mikroskop, hasil menunjukkan positif berwarna ungu dan hasil negative akan menunjukkan warna merah.

## Uji biokimiawi
Uji TSIA (Triple Sugar IronAgar) digunakan untuk mengidentifikasi kemampuan mikroba dalam  memfermentasi  glukosa,  sukrosa  atau  laktosa,  dengan  menggunakan  media  agar TSIA. Pengujian pada media TSIA diproses dengan melakukan pengambilan bakteri yang telah murni selanjutnya satu lup ose yang telah steril terlebih dahulu kemudian dilakukan penggoresan  pada  media TSIA  melalui  tusukan    ose  dari  bagian  tengah  sampai  sepertiga tabung  yang  mengandung  media.  Kemudian  ditarik  dan  digores  secara  berbentuk zig  zag pada permukaan media selanjutnya  diinkubasi selama 24-48 jam.
Uji  Simon  Citrate  (SCA) yang  dilakukan  untuk  menentukan    bakteri  mampu  dalam mengkonversi    komponen  media  ini  yang  mengandung  komposisi  senyawa  sitrat  yang berperan  sebagaikomponen  karbon  untuk  kebutuhan  energi.  Isolat  murni    koloni    yang terpilih  di  inokulasi  pada  media  miring  Sitrat  melalui  tusukan  pada  bagian  tengah  secara lurus  sampai  pada  1/3  bagian  dasar  media,  serta  bagian  miring  dilakukan  penggoresan melalui  zig  zag  sampai  pada  bagian  dasar.  Komposisi  Media  ini  dilakukan inkubasi/diperam pada suhu ruang  yaitu  sekitar 28 0 C selama 24-48  jam dan pengamatan dapat  dilihat  melaluin  perubahan  warna  yang  terbentuk.  Hasil  pengujian  yang menunjukkan positif  yaitu media dasar yaitu berwarna hijau menjadi biru.

## Pengujian Pati
Degradasi    pati  di  uji  dengan  menggunakan  media  agar  yang  mengandung  pati  atau amilum.  Proses  hidrolisis  ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  bakteri  yang  dapat memecah  pati  hasil  akhirnya  menjadi  dekstrin.  Pengujian  ini  di  awali  dengan  pembuatan kultur murni, setelah 24 jam ditetesi dengan iodium.

## Hidrolisis Gelatin
Proses Hidrolisis gelatin di uji menggunakan komposisi media yang mengandung nutrient gelatin,  dengan  menginokulasi  isolate  kedalam  media  dan  diperam  selama  24  jam  pada suhu 37 0 C, Setelah inkubasi di pindahkan   pada incubator pada suhu 4 0 C selama 30 menit. Hidrolisis gelatin akan menunjukkan media masih tetap  cair walaupun disimpan pada suhu 4 0 C.

## III. HASIL PENELITIAN Isolasi Bakteri Daerah Rhizosphere
Isolasi  bakteri  daerah  rhizosphere  di  sekitar  perakaran  tanaman  hutan  di  daerah  taman wisata alam sibolangit Sumatera Utara diambil secara random di bagian perakaran tanaman hutan.  Bagian  tanah  yang  di  ambil  dikelompokkan  pada  bagian  luar  perakaran,  dekat dengan  perakaran  serta  tanah  yang  terdapat  di  bagian  akar.Tanah  yang  diambil  sebanyak 10 gram dan dilakukan melalui metode pengenceran, hasil yang  diperoleh koloni dengan karakteristik yang berbeda. Melalui tahapan isolasi, karakterisasi dan uji Biokimia. Setelah
Wahyuni S, Noviani N, Habibie D, Hermanto B : Isolasi Dan Karakterisasi Bakteri Tanah Rhizosfer Tanaman Di Kawasan Hutan Wisata Sibolangit Sumatera Utara
melalui  tahapan  pemurnian  diperoleh  10  isolat  terpilih.  Proses  isolasi  termasuk  bagian penting  dalam  kegiatan  perlakuan  dengan  menggunakan  media  NA  (Nutrient  Agar), penggunaan  media  NA  bertujuan  memberi  serta  mensuplai  ketersediaan  nutrisi  bagi pertumbuhan mikroorganisme.

## Morfologi Koloni Bakteri Isolat terpilih
Dari hasil yang diperoleh serta pengamatan yang dilakukan menunjukkan morfologi koloni pada  isolate  bakteri  memiliki  karakteristik  morfologi  yang  berbeda.  Pengamatan  karakter dari bakteri dapat dilihat melalui pengamatan bentuk,tepi, elevasi dan warna. Dari isolate 10  isolat  yang  terpilih  dari  bentuk  menunjukkan  T1,T2,T5,T6  dan  T8  memiliki  bentuk Iregular.  T3  Rhizoid,  T4  dan  T9  Circular  serta  T7  Filamentous.  Bagian  tepi  koloni memiliki  bentuk  Undulate  (T1,T2,T5,T6  dan  T8),  Lobate  (T3),  Entire  (T4,T9),    dan Filamentous  (T7,T10).  Untuk  warna  yang  teramati  dari  koloni  yaitu  di  dominasi  dengan warna krem dan putih ke kuningan.

## Uji Biokimia Isolat Terpilih
Pada  pengecatan  gram,  secara  mikroskopis  kelompok  bakteri  gram  positif  (T1,T2,T3,T4 dan T6) sedangkan gram negative termasuk dalam kelompok (T7,T8,T9 dan T 10) dengan di  dominasi  dengan  bentuk  coccus  dan  basil  .  Menurut  Pelczar  dan  Chan  (1986), pengecatan  gram memiliki mekanisme dengan dasar kepada struktur serta  komposisi dari bagian terluar sel bakteri. Karakteristik Bakteri gram negative mempunyai struktur dengan komposisi bagian dinding sel yang  tipis serta komposisi kandungan komponen lemak yang banyak yaitu sekitar 11-22%, selain itu bakteri gram positif mengandung komposisi bagian teerluar  sel yang tebal serta komposisi lemak yang rendah yaitu sebesar 1-4%. Komponen komposisi  bagian  dari  sel  terdiri  dari  lemak  dan  gula  atau  sering  disebut  dengan  istilah peptidoglikan  pada  bagian  luar  lebih  tipis  sehingga  lebih  mudah  dihidrolisis  oleh  zat dibandingkan dengan komponen lipid dan gula yang tinggi yang disebut gram posistif.
A B
Gambar  1  A.Gram  Positif  (Zat  warna  utama  masih  terikat)  B.  Gram  Negatif  (zat  warna utama tidak terikat)

## Hidrolisis Pati
Pengujian  pati  dilakukan  dengan  menggunakan  medium  agar  pati  dengan  melihat kemampuan  bakteri  tersebut  mampu  menghidrolisis  pati.  Hasil  hidrolisis  pati  positif ditandai dengan pemecahan gugus molekul pati menjadi dekstrin di tandai dengan koloni bakteri  yang  tumbuh  pada  medium  yang  mengandung  pati  terdapat  daerah  bening  di sekelilingnya  setelah  diteteskan  dengan  larutan  iodium/lugol  yang  dibiarkan  beberapa menit  Hal  ini  dapat  mengidentifikasi  Kemampuan  bakteri    dapat  mengeksresikan  enzim amylase  sehingga  pati  dapat  terhidrolisis.  Hasil  yang  diperoleh  dari  data  menunjukkan bahwa ke 10 spesies mampu menghidrolisis pati.
Gambar 2 . Hasil Hidrolisis Pati

## Hidrolisis Gelatin
Pengujian  gelatin  dengan  menggunakan  nutrient  gelatin  adalah  untuk  mengkarakterisasi bakteri  tersebut  mampu  mampu  memecah  gelatin,  hal  ini  karena  bakteri  mampu mensekresikan  ke  luar  sel  eksoenzim  proteolitik  atau  yang  disering  sebut  dengan gelatinase.  Enzim  gelatinase  dapat  menandakan  aktivitas  serta  kemampuan  bakteri  dapat mampu  dalam  mencerna  protein  dan  dapat  mencairkan  gelatin.  Dari  hasil  yang  diperoleh 10 spesies juga memiliki kemampuan dalam menghidrolisis gelatin.

## Uji SC (Simmon’s Citrate )
Penggunaan Simmon’s Citrate dalam menguji dan mengidentifikasi koloni bakteri tersebut mampu  mengkonversi    senyawa  carbon  antara  dalam  siklus  krebs  menjadi  rantai oksaloasetat.  Identifikasi  uji  ini  menentukan  perubahan  warna  yang  menunjukkan  positif yaitu  dengan  perubahan  warna  dari  media  hijau  menjadi  biru  dan  terkadang  terdapat endapan hitam. Dari data yang diperoleh T3,T4,T6,T7,T8,T9 memiliki kemampuan dalam mengkonversi  sitrat.  Sedangkan  hasil  negative  yaitu  bakteri  T3,T2,T5  dan  T10  tidak mampu mengkonversi sitrat sehingga media yang terlihat tetap berwarna hijau.

## Uji Katalase
Pengujian  pada  koloni  bakteri  yang  memiliki  enzim  peroxidase  dapat  di  Uji  dengan disekresikannya    katalase  digunakan  dalam  melakukan  identifikasi  bakteri  yang  dapat menghidrolisis  H2O2  atau  Hidrogen  Peroksida  karena  memiliki  kemampuan mensekresikan  enzim  katalase.  Hasil  positif  ditandai  dengan  terbentuknya  gelembung udara yang dapat teridentifikasi dari bakteri (T1,T2,T3,T4,T5 dan T 10), namun T6,T7,T8 dan  T9    menunjukkan    negatif  yang  tidak  terbentuk  gelembung  gas  setelah  proses penetesan hydrogen peroksida.
Gambar 3. Hasil Uji Katalase

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan dari hasil penelitian ini adalah  :
1. Dari  hasil  isolasi  tanah  perakaran  tanaman  di  daerah  taman  wisata  alam  Sibolangit setelah dikarakterisasi diperoleh 10 koloni bakteri dengan isolat yang terpilih dengan berbagai bentuk morfologi, tepi koloni dan elevasi yang berbeda.
2. Pengujian    gram,  secara  mikroskopis  kelompok  bakteri  gram  positif  (T1,T2,T3,T4
dan  T6)  sedangkan  gram  negative  termasuk  dalam  kelompok  (T7,T8,T9  dan  T  10) dengan di dominasi dengan bentuk coccus dan bacil (batang).
3. Uji  Hidrolisis  Pati  diperoleh  dari  data  menunjukkan  bahwa  ke  10  spesies  dapat menghidrolisis pati ujinya positif
4. Uji  Gelatin  diperoleh  10  spesies  juga  memiliki  kemampuan  dalam  menghidrolisis gelatin
5. Uji Karbohidrat menunjukkan Sembilan bakteri yaitu T1,T2,T3,T4,T5,T7,T8,T9 dan T  10  menunjukkan  mampu  memfermentasi  media  karbohidrat  hanya  sebahagian perubahan warna hal ini menunjukkan bakteri tersebut hanya mampu menghidrolisis sebahagian komposisi tiga jenis glukosa yang terdapat pada media. Pada bakteri T6 mampu memfermentasi karbohidrat sehingga hasil positif yang diperoleh perubahan media secara keseluruhan dari merah menjadi kuning
6. Uji  Sitrat    T3,T4,T6,T7,T8,T9  memiliki  kemampuan  dalam  mengkonversi  sitrat. Sedangkan  hasil  negative  yaitu  bakteri  T3,T2,T5  dan  T10  tidak  mampu mengkonversi sitrat sehingga media yang terlihat tetap berwarna hijau
7. Identifikasi pada pengujian Uji Katalase Hasil positif ditandai dengan terbentuknya gelembung udara yang dapat teridentifikasi dari bakteri (T1,T2,T3,T4,T5  dan  T  10),  namun  T6,T7,T8  dan  T9  tidak  menunjukkan  hasil positif  yang  ditandai  dengan  tidak  terbentuknya  gelembung  gas  setelah  diteteskan regen hydrogen peroksida

## DAFTAR PUSTAKA
Dwijoseputro, D., 2005, Dasar-Dasar Mikrobiologi , Djambatan, Jakarta.
Gyanesh,  K.  P.,  Kumar,  B.,  Parekh,  L.  J.,  &  Poole,  D.  B.  (2016).  Role  of  soil microorganisms in improving nutrient use efficiency and crop productivity. In Abiotic stress and crop productivity (pp. 1-42). Springer, Cham.
Hiltner,  L.  (1904).  Über  die  Einwirkung  des  Waldbodens  auf  die  Vegetation.  In Forstwissenschaftliche Centralblatt (Vol. 25, No. 7, pp. 293-301). Paul Parey.
Kloepper, J. W., 1993, Plant Growth Promoting Rizobakteria as Biological Control Agent . In  Meeting,  F.  B.  Jr.  (Ed), Soil  Mikrobial  Ecology,Application  in  Agricultural  and Environental Management , Marcel Dekker, New York, pp. 255-274. Kloepper, J. W., Mahaffee, J. A., Mcinroy, and Bacman, P. A., 1991, Comparative Analysis of Isolation Methode for Recovering Root- Colonizing Bacteria from Roots , In Keel, C., Koller, B., and Defagos, G.(Eds.), pp.252-255.
Marschner,  P., &  Dell'Aquila,  M.  (2004). The  rhizosphere:  dynamics  and  function.  In Soil biology (Vol. 3, pp. 229-344). Elsevier.
Wagg, C., & Sagaram, U. (2016). Microbes and soil fertility. In Soil health and fertility (pp. 243-276). CABI.
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 15 Juni 2024 25 Juni 18 Juli 2024 Ya