Available online at http://ejurnal.setiabudi.ac.id/ojs/index.php/biomedika P-ISSN : 1979 - 035X & E-ISSN : 2302 - 1306
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanolik Daun dan Daging Buah Berenuk (Crescentia cujete, Linn.) terhadap

## Candida albicans ATCC 1023
Anti-Fungal Activity Test Ethanolic Extracts Of Calabash’s Leaved And Fruit Meat (Crescentia cujete, Linn.) against Candida albicans ATCC 1023
Dewi Sulistyawati 1 , Kartinah Wiryosoendjojo 1 , Nony Puspawati 2
1 Program Studi D3 Analis Kesehatan
2 Program Studi D4 Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi Surakarta, Jl. Let. Jend. Sutoyo, Mojosongo, Surakarta, 57127, Jawa Tengah, Indonesia *Corresponding author: dewi.trop.08@gmail.com
Received: Agustus 25, 2019; Revise: November 8, 2019;  Accepted: December 27, 2019 DOI : https://doi.org/10.31001/biomedika.v12i2.616

## ABSTRAK
Candida albicans adalah penyebab kandidiasis oportunistik yang merupakan infeksi jamur dengan insiden tertinggi. Kandidiasis adalah suatu penyakit yang dapat menyerang rongga mulut, selaput lendir, dan daerah genitalia. Indonesia mempunyai banyak sekali tanaman yang bisa dimanfaatkan sebagai herbal  dari 6.000 spesies  tumbuhan  sebagai  kebutuhan  obat-obatan  dan  perlindungan.  Berenuk  ( Crescentia  cujete, Linn.) banyak terdapat di Indonesia tapi belum banyak diketahui khasiatnya dan belum banyak diteliti. Berenuk mengandung  alkaloid,  flavonoid,  fenol  dan  tanin  yang  bisa  merusak  dinding  sel Candida  albicans. Penelitian ini dilakukan menguji ada tidaknya aktivitas daun dan buah berenuk ( Crescentia cujete , Linn) untuk  menghambat  atau  membunuh Candida    albicans ATCC  1023  dan  mengetahui  konsentrasi  yang paling maksimal  sebagai antijamur.  Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental laboratoris.  Metode pengujian  yang  dipakai  adalah  metode  difusi  cakram.  Metode  ekstraksi  yang  dipakai  adalah  maserasi etanol.  Hasil  penelitian  menunjukkan  daun  dan  buah  berenuk  mempunyai  aktivitas  sebagai  antijamur terhadap Candida  albicans ATCC 1023. Konsentrasi ekstrak daun dan daging buah berenuk yang paling maksimal adalah 25% dengan diameter zona hambat masing-masing 15 ± 0,8 mm dan 9,33 ± 0,57 mm. Kata kunci : berenuk, Candida  albicans, antijamur

## ABSTRACT
Candida  albicans  is  the  cause  of  opportunistic  candidiasis  which  is  a  fungal  infection  with  the  highest incidence. Candidiasis is a disease that can attack the oral cavity, mucous membranes, and genital areas. Indonesia is a country that is rich in biodiversity and people have used more than 6,000 species of plants as  medicines  and  protection  needs.  One  of  the  herbs  that  can  be  used  as  an  alternative  treatment  for candidiasis is Calabash (Crescentia cujete, Linn.) Which has not been much studied. Throwing contains alkaloids,  flavonoids,  phenols  and  tannins  which  can  damage  the  cell  wall  of  Candida  albicans.  The purpose of this study was to determine the antifungal activity of leaves and fruit of Calabash (Crescentia cujete,  Linn)  against  Candida  albicans  ATCC  1023  and  determine  the  maximum  concentration  as  an antifungal. This research is an experimental laboratory research. The test method used is the disk diffusion method. The extraction method used is ethanol maceration. The results showed that the leaves and fruit of Calabash had an antifungal activity against Candida albicans ATCC 1023. The maximum concentration of the extracts of the Calabash was 25% with inhibition zone diameters of 15 ± 0.8 mm and 9.33 ± 0, 57 mm.
Keywords: Calabash, Candida albicans, antifungal
218 | Sulistyawati, D., et. al.

## PENDAHULUAN
Candida albcans merupakan jamur komensal  yang  secara  normal  hidup  di tubuh  manusia  (Bruno et  al .,  2015). Candida  albicans adalah  penyebab kandidiasis oportunistik yang merupakan infeksi  jamur  dengan  insiden  tertinggi (Sudoyo, 2009). Prevalensi pasien kandidiasis  di  RSUD  Dr.  Soetomo Surabaya  menunjukkan  jumlah  pasien wanita  lebih  banyak  dibandingkan  pria yaitu tahun 2013 sebanyak 54,3%, pa da tahun  2012  sebanyak  80%,  dan  tahun 2016  sebanyak  56,6%.  Jumlah  umur terbanyak  pada  tahun  2013-2016  yang terinfeksi  kandida  kulit  yaitu  umur  1-4 tahun,  infeksi  kandida  kuku  pada  tahun 2013  jumlahnya  di  atas  65  tahun sebanyak  50%,  tahun  2014  kelompok umur 25-44 tahun sebesar 40% dan tahun 2015  adalah  umur  45-65  tahun  sebesar 50% (Soetojo & Astari, 2016). Obat-obat kandidiasis yang biasa di gunakan saat ini adalah  nistatin,  amfoterisin  B  dan golongan  - azole seperti  flukonazole, itrakonazole,
klotrimazole dan ketokonazole. Beberapa
penelitian menyebutkan  bahwa Candida  albicans
resisten  terhadap  obat-obatan  tersebut (Poonam et al., 2013). Berenuk ( Crescentia cujete, Linn.) dapat digunakan  sebagai  pengobatan  alternatif untuk  kandidiasis  tapi  belum  banyak diteliti secara ilmiah. Berenuk ( Crescentia cujete, Linn.) adalah tumbuhan  berbentuk  pohon  dan  banyak tumbuh di Indonesia.
Berenuk mengandung  asam  tartrat,  asam  sitrat, tanin,  β-sitosterol,  estigmastrol,  α  dan  β
amirina, asam stearat, triakontanol, asam palmitat,  quersetin,  apigenin  (Kaneko et al., 1998; Ogbuagu 2008; Dawodu et al .,
2016). Daun berenuk memiliki kandungan  flavonoid,  fenol,  alkaloid, steroid,  naftokuinon,  glikosida  iridoid, dan  aukubin  (Oktaviani et  al .,  2018; Agarwal  &  Popli,  1992).  Flavonoid, alkaloid,  saponin,  tanin  dan fenol  dapat berfungsi  sebagai    antijamur,  sehingga daun  berenuk  ( Crescentia  cujete, Linn.) kemungkinan  besar  memiliki  potensi sebagai antijamur.
Obat-obat antijamur sintetik untuk mengatasi kandidiasis banyak yang beredar  di  pasaran  (Saifudin,  2011). Salah  satu  antijamur  sintetik  adalah ketokonazole. Obat sintetik bisa menimbulkan efek samping dan
resistensi  sehingga  perlu  dicari  obat alternative yang cukup efektif (Rintiswati et al ., 2004). Berenuk ( Crescentia cujete , Linn.)  adalah  tanaman  yang  tumbuh  di daerah  tropis  (Mahbub,  2011).  Berenuk ( Crescentia  cujete ,  Linn.)  merupakan salah  satu  tanaman  yang  bisa  digunakan sebagai  herbal  (Parvin et  al., 2015). Tumbuhan ini tersebar diberbagai daerah di  Indonesia  dan  umum  untuk  dijumpai. Oleh  karena  itu  ketersediaan  berenuk  di Indonesia  cukup  melimpah,  namun pemanfaatannya  masih  jarang  dijumpai (Bahroni & Istianah, 2018).
Penelitian-penelitian  sebelumnya mengatakan  bahwa  bagian  tanaman  ini yang  banyak  mengandung  zat  aktif sebagai antimikroba ialah daunnya. Daun berenuk  mengandung  alkaloid,  saponin, tanin,  dan  fenol  (Ardianti  &  Kusnadi, 2014). Alkaloid, flavonid, saponin, tanin,
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanolik Daun dan Daging Buah … Sulistyawati, D., et. al. | 219
dan  fenol  bekerja  dengan  cara  merusak dinding  dan  membrane  sel Candida albicans, sehingga terjadi kerusakan dan
kebocoran sel dan menyebabkan
keluarnya  organela  dalam  sel Candida albicans seperti  asam  nukleat,  protein, asam  amino  dan  nukleotida  (Ariningsih,
2009). Rojas et al. (2001) dalam Kusuma et  al. (2014)  menyatakan  bahwa  daun berenuk efektif menghambat
pertumbuhan  jamur Candida  albicans .
Penelitian tentang aktivitas  ekstrak daun dan  buah  berenuk  sebagai  antijamur
Candida albicans belum pernah dilakukan. Peneliti ingin menguji aktivitas antijamur ekstrak daun berenuk
( Crescentia cujete, Linn.)  terhadap jamur Candida  albicans .  Tujuannya  adalah
untuk mengetahui terapi alternatif ekstrak daun berenuk antijamur dalam menghambat Candida albicans sehingga potensi  yang  dimiliki  daun  dan  daging buah  berenuk  ( Crescentia  cujete, Linn.) dapat diaplikasikan oleh khalayak umum.

## METODE PENELITIAN
Jenis penelitian ini adalah eksperimental  laboratorium.  Ekstraksi daun dan daging buah berenuk dilakukan dengan  maserasi,  metode  pengujian antijamur  menggunakan  metode  difusi cakram.
Alat dan Bahan Oven  Furnace NA  250/45,  mesin penggiling Disk Mill FFC 15 dan ayakan atau mesh  test  Seive  Analys no.  40, vacuum rotary evaporator R1005 5 L .
Prosedur Penelitian Sampel Penelitian
Bahan  sampel  penelitian  ini  adalah daun dan daging buah berenuk ( Cresentia
cujete, L ) dari Desa Rejosari Kecamatan Gondangrejo, Karanganyar.

## Cara Kerja Penelitian :
1. Determinasi tanaman Berenuk
Determinasi  tanaman  Berenuk dilaksanakan  di  Laboratorium Teknobiologi,  Universitas  Atma
Jaya Yogyakarta.
2. Penetapan kadar air
Kadar air serbuk daun dan daging buah  berenuk  dilakukan  dengan menggunakan Moisture  balance .
Kadar  air  untuk  penetapan  susut pengeringan  serbuk  tidak  boleh lebih dari 10%.
3. Pembuatan ekstrak etanolik daun dan daging buah berenuk
Pembuatan  ekstrak  daun  dan daging buah Berenuk yang dilakukan dengan metode maserasi    dengan  perbandingan 1:10.  Caranya  ditambahkan  satu bagian  serbuk  kering  simplisia daun dan buah Berenuk
dimasukkan  ke  dalam  maserator, kemudian ditambahkan 10 bagian pelarut,  selanjutnya  direndam  6 jam pertama dan sesekali diaduk, selanjutnya didiamkan selama 18 jam.  Maserat  dipisahkan  dengan cara  diendapkan,  sentrifugasi, dekantasi  atau  filtrasi.  Proses ekstraksi  diulangi  minimal  dua kali. Maserat dikumpulkan kemudian uapkan sehingga diperoleh ekstrak kental. Rendemen diperoleh dengan menghitung persentase bobot (b/b)  antara  rendemen  dengan bobot  serbuk  simplisia  (Depkes,
2000).
220 | Sulistyawati, D., et. al.
4. Uji bebas alkohol ekstrak etanolik daun dan daging buah berenuk Uji bebas alkohol ekstrak dilakukan dengan menambah ekstrak dengan asam asetat encer dan  asam  sulfat  pekat  dan dipanaskan.  Hasil  yang  tidak  ada bau ester (etil asetat) menandakan sudah  tidak  ada  etanol  (Depkes,
1979). 5. Uji Fenol Pengujian Fenol dilakukan dengan  cara  memasukkan  1  ml ekstrak  ke  dalam  tabung  reaksi,
kemudian  ditambahkan  beberapa tetes air panas dan pereaksi FeCl 3
1%.  Perubahan  warna  larutan menjadi  hijau,  biru,  atau  ungu menandakan adanya fenol. Pemeriksaan  diulangi  tiga  kali (Atmoko & Ma’ruf, 2009).
6. Uji flavonoid Ada tidaknya flavonoid dilakukan dengan  cara  memasukkan  2  ml ekstrak  ke  dalam  tabung  reaksi, kemudian  ditambahkan  beberapa mg  serbuk  Mg  dan  larutan  HCl pekat.  Adanya  perubahan  warna larutan menjadi merah tomat atau jingga menandakan adanya flavonoid.  Pemeriksaan  diulangi tiga kali (Gupta et al ., 2010).
7. Uji alkaloid
Ada  tidaknya  alkaloid  dilakukan dengan cara memasukkan ekstrak sebanyak  1  ml  ke  dalam  tabung reaksi  kemudian  ditambahkan dengan 1 ml HCl 2N dan dua tetes pereaksi  Dragendroff.  Adanya alkaloid ditandai dengan terbentuk  endapan  jingga  atau
cokelat  pada  tabung  reaksi. Pemeriksaan  diulangi  tiga  kali (Atmoko & Ma’ruf, 2009).
8. Uji tanin
Ada  tidaknya  tanin  dilakukan dengan cara memasukkan ekstrak ke  dalam  2  tabung  reaksi sebanyak 1 ml, kemudian ditambahkan  2  ml  FeCl 3 2%. Adanya tanin ditunjukkan dengan terbentuknya  warna  biru  atau hijau  kehitaman.  Pemeriksaan dilakukan  sebanyak  tiga  kali (Gupta et al ., 2010).
9. Uji saponin
Ada  tidaknya  saponin  dilakukan dengan cara memasukkan ekstrak sebanyak 0,5 ml ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahakan 5 ml  aquadest  panas,  kemudian didinginkan  dan  dikocok  dengan kuat  selama  10  menit.  Adanya buih menunjukkan adanya saponin.  Pemeriksaan  dilakukan sebanyak  3  kali  (Gupta et  al .,
2010).
10. Identifikasi  jamur  uji  Candida albicans
Identifikasi Candida  albicans dilakukan  dengan  cara  biakan murni  ditanam  pada  media  SDA yang  baru  kemudian  diinkubasi pada  suhu  37 o C  selama  24-72 jam.  Koloni Candida  albicans ditentukan  dengan  terbentuknya koloni lunak berwarna krem yang memiliki bau seperti ragi (Jawetz et al ., 2007). Identifikasi biokimia dilakukan uji asam dan fermentasi pada  biakan  pada  pembenihan karbohidrat yaitu glukosa,
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanolik Daun dan Daging Buah … Sulistyawati, D., et. al. | 221
maltosa,  sukrosa,  dan  laktosa yang telah ditambahkan indikator fenol red 1%. Terbentuknya asam ditunjukkan  dengan  perubahan warna  merah  menjadi  kuning. Fermentasi  ditunjukkan  adanya pembentukan  gas,  pembentukan gas  diuji  dengan  menggunakan tabung  Durham  yang  diletakkan secara  terbalik  dalam  tabung reaksi.  Gas  yang  terbentuk  akan tampak  sebagai  ruang  kosong pada  tabung  Durham. Candida albicans dapat melakukan fermentasi  dan  akan  membentuk gas pada media yang mengandung glukosa dan maltosa, pada media yang  mengandung  sukrosa  dapat melakukan fermentasi tanpa menghasilkan gas dan pada media yang  mengandung  laktosa  tidak dapat melakukan fermentasi
(Jawetz et al ., 1986).
11. Pembuatan kultur Candida albicans Disiapkan satu tabung media SDA
miring steril kemudian di ambil 1 ose  biakan Candida  albicans kemudian  diinokulasikan  secara streak  plate .  Inkubasi  dalam inkubator selama 48-72 jam pada suhu 37 o C dan hasil inokulasi ini digunakan sebagai stok.
12. Standarisasi jamur menggunakan Mc. Farland Jamur  uji Candida  albicans diambil  2-3  ose  secara  aseptis
kemudian  dimasukkan  kedalam tabung  reaksi  yang  berisi  5  ml media NaCl fisiologis. Kekeruhan larutan disetarakan dengan standard  Mc.  Farland    1,5x108
cfu/ml.
13. Pengujian    antijamur  dengan metode difusi cakram
Cara  kerja  pengujian  antijamur dilakukan  dengan  cara  kapas  lidi steril dicelupkan kedalam suspensi jamur yang sudah distandarkan kekeruhannya
dengan  standard  Mc.  Farland kemudian di  inokulasikan merata pada  media  SDA  dan  diinkubasi selama  15  menit.  Selanjutnya diletakkan  kertas  cakram  yang sudah  ditetesi  dengan  ekstrak daun  dan  daging  buah  berenuk masing-masing  20  µl  dengan konsentrasi  masing-masing  25%, 20%,  15%,  10%  dan  5%  di  atas medium SDA yang sudah diinokulasi C. albicans . Perlakuan ini juga dilakukan kontrol positif , kontrol negatif dan kontrol DMSO  3%.  Inkubasi  dilakukan pada suhu 37 o C selama 48-72 jam. Perlakuan  dilakukan  sebanyak  3 kali.  Diamati  ada  tidaknya  zona bening disekeliling kertas cakram. Diukur  diameter  zona  bening yang  terbentuk  menggunakan penggaris.  Penentuan  kategori respon  zona  hambat  menurut Suryawirya (1978) pada Tabel 1.
222 | Sulistyawati, D., et. al.
Tabel 1. Penentuan kategori respon zona hambat Diameter zona hambat Respon Antijamur < 5 mm Lemah 5-10 mm Sedang 10-20 mm Kuat >20 mm Sangat kuat 14. Analisis Data Penentuan daya antijamur dengan  metode  difusi  agar ditunjukkan dengan adanya zona hambat  disekitar  paper  disk.
Besarnya  diameter  zona  hambat yang terbentuk dianalisis dengan uji Shapiro–Wilk untuk mengetahui  distribusinya.  Jika data berdistribusi normal selanjutnya  dilakukan  analisis dengan analisa of varian
(ANOVA)  satu  arah  atau  one way anova.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Identifikasi kandungan senyawa bertujuan untuk mengetahui  senyawa  aktif  yang terkandung  di  dalam  ekstrak  daun berenuk  dan  daging  buah.  Hasil pemeriksaan  kandungan  senyawa kimia dapat dilihat pada Tabel 2.
B. Identifikasi Jamur Candida albicans Hasil identifikasi jamur Candida albicans ATCC 10231 pada media  Sabouraud  Dextrosa Agar
(SDA) dan  diinkubasi  pada  suhu
37 o C selama 24-72 jam, ditunjukkan dengan  terbentuknya  koloni  lunak berwarna  krem  dan  berbau  ragi (Gambar 1).
Tabel 2 . Pemeriksaan kandungan senyawa kimia ekstrak daun dan daging buah berenuk Daun Pereaksi Hasil Ket. Acuan Flavonoid Ekstrak + serbuk Mg+ HCl pekat Warna merah tomat/jingga + Hasil positif merah/jingga (Gupta et al., 2010) Alkaloid Ekstrak+HCl  2 N + reagen Dragendroff Endapan jingga/coklat + Hasil positif endapan jingga-coklat (Atmoko &Makruf, 2009) Saponin Ekstrak + aquadest panas, kocok kuat- kuat Busa stabil + Hasil positif busa stabil (Gupta et al., 2010) Tanin Ekstrak + FeCl 3 2% Warna hijau kehitaman + Hasil positif warna biru, hijau kehitaman (Gupta et al., 2010) Fenol Ekstrak + FeCl 3 1% Warna hijau tua + Hasil positif warna hijau, biru, atau ungu (Atmoko & Makruf, 2009)
Gambar 1. Candida albicans ATCC 10231 pada media SDA pada suhu 37 o C selama 24-72 jam
Identifikasi  biokimia  dilakukan dengan  uji  gula-gula  meliputi  glukosa, laktosa,  maltosa  dan  sukrosa.  Masing- masing media di dalam tabung ditambahkan    satu    tetes fenol  red 1% sebagai  indikator  dan  dimasukkan tabung  Durham  secara  terbalik.  Koloni Candida albicans ATCC 10231 diambil dengan  ose  lalu  diinokulasi  kedalam tabung  yang  masing-masing  berisi
glukosa,  laktosa,  maltosa  dan  sukrosa, kemudian  diinkubasi  selam  24-72  jam pada suhu 37 o C. Phenol red 1% adalah indikator  pH  yaitu  untuk  mengetahui adanya  perubahan  pH.  Warna  merah akan  terbentuk    pada  suasana  asam dengan  pH  di  bawah  4,4  dan  warna kuning  pada  suasana  basa  dengan    pH 6,2 (Gambar 2).
Gambar 2. Hasil pengujian biokimia
Identifikasi biokimia Candida albicans ATCC  10231 ditunjukkan
dengan  adanya  perubahan  warna  merah menjadi  kuning  pada  reaksi  fermentasi.
Candida  albicans bisa  memfermentasi glukosa,  sukrosa,  dan  maltosa  sehingga menghasilkan asam. Adanya asam ditandai  dengan  perubahan  warna  dari
224 | Sulistyawati, D., et. al.
merah  menjadi  kuning  dengan  bantuan indikator fenol red 1%. Candida albicans ATCC 10231 menghasilkan asam dan gas hal  ini  dibuktikan  dari  hasil  tabung Durham  pada  glukosa,  maltosa  dan sukrosa yang menimbulkan rongga uda ra pada  tabung  Durham  sedangkan  tidak menghasilkan gas dan asam pada pada uji laktosa  yang  dibuktikan  dengan    larutan laktosa yang masih  berwarna merah dan tabung  durham  tidak  terdapat  rongga udara.

## C. Uji Antijamur Metode Difusi Cakram
Hasil pengujian antijamur ekstrak daun  dan  daging  berenuk  terhadap Candida albicans ATCC 10231
menunjukkan  adanya  daya  hambat. Adanya  daya  hambat  dibuktikan  dengan adanya daerah jernih disekitar disk yang tidak  ditumbuhi  jamur.  Pada  ekstrak daging buah berenuk, zona hambat hanya terbentuk pad konsentrasi 25%, sedangkan  pada  ekstrak  daun  berenuk zona  hambat  terbentuk  pada  semua konsentrasi.  Hasil  zona  hambat  yang terbentuk pada penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 3 dan 4.
Tabel 3. Zona hambat ekstrak daun berenuk terhadap Candida albicans ATCC 10231
Zona Hambat (mm) Rata-rata (mm) ± SD Konsentrasi Sediaan Uji Replikasi I II III 25% Ekstrak daun berenuk 15 14 16 15 ± 0.8 20% Ekstrak daun berenuk 13 12 15 13.3 ± 1.2 15% Ekstrak daun berenuk 12 11 13 12 ± 0.8 10% Ekstrak daun berenuk 9 10 12 10.3 ± 1.2 5% Ekstrak daun berenuk 7 8 10 8.3 ± 1.2 2% Ketokonazole 32 30 31 31 ± 0.8 3% DMSO 0 0 0 0 - Akuades 0 0 0 0
Tabel 4. Zona hambat ekstrak daging buah berenuk terhadap Candida albicans ATCC 10231
Zona Hambat (mm) Rata-rata (mm) ± SD Konsentrasi Sediaan Uji Replikasi I II III 25% Ekstrak buah berenuk 9 10 10 9.3 ± 0.57 20% Ekstrak buah berenuk 0 0 0 0 15% Ekstrak buah berenuk 0 0 0 0 10% Ekstrak buah berenuk 0 0 0 0 5% Ekstrak buah berenuk 0 0 0 0 2% Ketokonazole 32 33 33 32.7 ± 0.57 3% DMSO 0 0 0 0 - Akuades 0 0 0 0
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanolik Daun dan Daging Buah … Sulistyawati, D., et. al. | 225
Ekstrak  daun  berenuk  dengan konsentrasi 25% memiliki daya hambatan yang  efektif  dibandingkan  konsentrasi
20%,  15%,  10%  dan  5%    terhadap
Candida  albicans ATCC  10231,  hal terbukti. Berdasarkan kategori Suryawirya (1978), ekstrak daun berenuk pada  konsentrasi  25%  mempunyai  daya hambat terhadap jamur yang kuat karena berada  pada  range  10  mm-20  mm. Perbedaan  diameter  hambat  dikarenakan senyawa yang terdapat di dalam  masing- masing konsentrasi memiliki kemampuan aktivitas  antijamur  yang  berbeda-beda tergantung  tingkat  senyawa  kimia  dari ekstrak daun berenuk. diameter hambatan pada  konsentrasi  25%,  20%,  15%,  10% dan 5% berturut-turut adalah 15 mm, 13,3 mm,  12  mm,  10,3  mm,  8,3  mm sedangkan    ketokonazole  selaku  kontrol positif  memiliki  rata-rata  31  mm, ketokonazole  dipilih  sebagai  kontrol positif  disebabkan  obat  ini  merupakan antibiotik  golongan –azole yang  paling efektif menghambat pertumbuhan Candida  albicans (Brunton et  al ,  2010). Penelitian Hamdanah (2012) menyatakan bahwa  ketokonazole  lebih  efektif  dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans dibandingkan  obat  antijamur yang lain.
Ekstrak  daging  buah  berenuk terhadap Candida albicans ATCC 10231 menunjukkan daya hambat pada konsentrasi  25%  dengan  rata-rata  9,33 mm.  Daya  hambat  tersebut  dibuktikan dengan  adanya  zona  jernih  di  sekeliling kertas  cakram.  Berdasarkan  kategori Suryawirya  (1978),  konsentrasi  25% ekstrak  daging  buah  berenuk  termasuk antijamur dengan kategori sedang karena berada  pada  range  5  mm-10  mm.
Konsentrasi  20%,  15%,  10%  dan  5% tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan Candida  albicans .  Kadar  kandungan senyawa  kimia  dalam  ekstrak  daging buah  berenuk  pada  konsentrasi  tersebut kemungkinan  terlalu  rendah.  Senyawa aktif  dalam  kandungan  kimia  daging buah  berenuk  yaitu  tanin,  saponin,  dan flavonoid.
Alkaloid memiliki aktivitas sebagai  antijamur  yang  baik  terhadap
Candida  albcans (Lutfiyani et  al., 2012), disebabkan  mekanisme  kerja  alkaloid yang  menyebabkan  sel  jamur  lisis  dan menghambat  respirasi  sel,  menghambat pembentukan  asam  nukleat  sehingga jamur  tidak  dapat  berkembang  dan akhirnya mati. Senyawa flavonoid, fenol, saponin  dan  tanin  diduga  memiliki aktivitas dalam mengganggu permeabilitas membran sel jamur (Freiesleben  &  Jager,  2014).  Senyawa flavonoid  dapat  menurunkan  tegangan permukaan  sel  jamur  dan  mengganggu membran    mikroba  sehingga  secara perlahan  akan  menghambat Candida albicans dalam  membentuk  sistem pertahanannya (Waluyo, 2007). Mekanisme  kerja  saponin  yaitu  dengan menurunkan  tegangan  membran  sterol dari  dinding Candida  albicans sehingga permeabilitas  membrane  sel  meningkat yang  mengakibatkan  cairan  intraseluler keluar  sel  akhirnya  dapat  menghambat dan membunuh jamur Candida albicans (Hardiningtyas, 2009). Tanin merupakan metabolit  sekunder  yang  memiliki  daya antijamur  dengan  cara  menginaktivasi enzim dan fungsi dari materi genetik sel jamur sehingga sel tidak dapat terbentuk (Pelczar  &  Chan,  1988),  sedangkan mekanisme  kerja  dari  fenol  dalam
226 | Sulistyawati, D., et. al.
membunuh  jamur  yaitu  dengan  merusak protein  dimana  ikatan  hidrogen  yang terbentuk  antara  fenol  dan  protein mengakibatkan struktur protein sel jamur menjadi  rusak  sehingga  mempengaruhi permeabilitas  dinding  sel  dan  membran sitoplasma (Pelczar & Chan, 1998).
Candida  albicans mempunyai membran  sel  yang  tersusun  atas  protein dan  lipid,  sehingga  memungkinkan terjadinya ikatan kompleks antara antimikroba dengan ergosterol dalam sel Candida albicans sehingga komponen sel keluar  seperti  asam  nukleat  dan  protein. Kenyataan-kenyataan tersebut yang dapat menyebabkan  ekstrak  daun  berenuk menjadi  antijamur  dengan  konsentrasi paling  efektif  yaitu  konsentrsi  25% karena kemungkinan kandungan senyawa kimia  antijamur  terdapat  paling  besar pada  konsentrasi  25%.  Kontrol  negatif yang  digunakan  adalah  aquadest  steril, seperti  yang  diketahui  bahwa  akuades tidak mengandung senyawa kimia sehingga tidak membentuk zona hambat. DMSO 3% sebagai emulgator merupakan pelarut yang digunakan dalam pembuatan seri  konsentrasi  ekstrak  daun  berenuk. Pelarut DMSO digunakan dalam penelitian  ini  karena  DMSO  dapat melarutkan  senyawa  polar  dan  nonpolar (Octaviani et  al. ,  2019).  Hasil  dari pegujian  DMSO  3%  tidak  membentuk zona  hambat  sehingga  tidak  memiliki aktivitas  sebagai antijamur  dengan demikian  daya  hambat  yang  terbentuk benar-benar  merupakan  aktivitas  dari masing-masing  konsentrasi  ekstrak  daun dan  daging  buah  berenuk.  Ekstrak  daun berenuk  lebih  efektif  dibandingkan dengan ekstrak daging buah berenuk.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  dan  buah
berenuk ( Crescentia cujete, Linn.) mempunyai  aktivitas  sebagai  antijamur terhadap Candida albicans ATCC 10231. Konsentrasi yang paling optimum adalah 25% baik pada daun maupun daging buah dengan zona hambat masing-masing 15 ± 0,8  mm  (kategori  antijamur  kuat)  dan 9,33  ±  0,57 mm  (kategori  antijamur sedang).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Bersama  naskah  ini  penulis mengucapkan  terima  kasih  yang  tak terhingga kepada Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi,
Surakarta  dan  LPPM  USB  yang  telah memberikan  kesempatan  kepada  penulis untuk melakukan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agarwal, K. Popli, S. P. 1992. The Constituents of Crescentia  cujete  Leaves. Fitoterapia 63(5):476. Ardianti,  A.,  Kusnadi,  J.  2014.  Ekstraksi Antibakteri dari Daun Berenuk
( Crescentia  cujete Linn.)  Menggunakan
Metode  Ultrasonik. Jurnal  Pangan  dan Agroindustri , Vol.2 (2) p.28-53. Ariningsih, R. I. 2009. Isolasi Streptomyces dari Rizosfer  Familia  Poaceae  Yang  Berpotensi Menghasilkan Antijamur Terhadap Candida albicans. Surakarta. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Atmoko,  T  dan  Ma’ruf,  A.  2009.  Uji  Toksisitas dan  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Tumbuhan Sumber  Pakan  Orangutan  Terhadap  Larva Artemia  salina L. Jurnal  Penelitian  dan Konservasi Alam , 6(1): 37-45 Bahroni  dan  Istianah.  2018 .  Pemanfaatan  Buah Berenuk (Crescentia cujete Linn.) Sebagai
Bahan Baku Pembuatan Bioetanol . Jakarta.  Universitas  Islam  Negeri  Syarif Hidayatullah Jakarta.
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanolik Daun dan Daging Buah … Sulistyawati, D., et. al. | 227
Bruno,  M  ,Mignogna,  G,  Angiolella,  L.  2015. Resistance in Candida albicans: Exploring The  Cell  Wall  Barrier  by  Proteomics.
Chemo Open Acces 4 , pp: 165. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  1979. Farmakope  Indonesia .
Edisi Ketiga.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.
1979. Farmakope Indonesia . Edisi Ketiga. Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.
2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Jakarta.
Gupta,  C.  Garg,  A.  P.  Gupta,  S.  2010.
Antimicrobial  and  Phytochemical  Studies of Fresh Ripe Pulp and Dried Unripe Pulp of Mangifera indica (AMCHUR). Middle- East  Journal  of  Scientific  Research, 5(2):75-80.
Irianto,  K.  2014. Bakteriologi,  Mikologi,  dan Virologi.  Panduan  Medis  dan  Klinis .
Bandung: Penerbit Alfabeta. Jawetz, E. J. Melnick,  J.  L    &  Adelberg,  E.  A.  2005. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Jawetz,  E.  J.  Melnick,  J.  L    &  Adelberg,  E.  A.
2005. Mikrobiologi  Kedokteran .  Jakarta: EGC.
Kaneko, T., Ohtani, K., Kasai, R., Yamasaki, K.,
Minh  Duc,  N.  1998.  n-Alkylglycosides and  p-Hydroxybenzoyloxy  Glucose  from Fruits of Crescentia cujete . Phytochemistry 47(2):259-263. DOI: 10.1016/S0031-9422(97)00409-3. Kusuma, M. A. Sulistyo, N. A. Susanti & Sabikis. 2014. Aktivitas Pengehntian Pendarahan  Luar  Ekstrak  Etanol  Daun Berenuk  (Crescentia  cuejet,  Linn.) Secara  In-Vivo. Pharm  Sci  Res.  Vol.  1, No.2.
Mahbub,  K.  R.,  Hoq,  M.  M.,  Ahmed,  M.  M., & Sarker,  A.  2011. In  Vitro Antibacterial
Activity of Crescentia cujete and Moringa oleifera. Bangladesh Research Publication Journal Vol. 5(4), 337-43. Parvin, M. S., Das, N., Akhter, M. A., Nahar, L., Islam, M. E. 2015. Evaluation of In Vitro Anti-Inflammatory  and  Antibacterial
Potential of Crescentia cujete Leaves and
Stem Bark . BMC Research Notes 8:412- 418. DOI: 10.1186/s l 3104-015-1384-5. Poonam S, Hardeep S., Patrick, R.C., Kang, M.H. 2013. Defining The Metabolic Pathways of  13-Cis  Retinoic  Acid. Dalam: Proccedingsof the 104th Acctual Meeting of he American Association for Cancer Research. Rifai,  M.  1994. A  Discourse  on  Biodiversity Utilisation in Indonesia . Dalam Tropical Biodiversity.  YABSHI,  Jakarta:  348  - 351.
Rintiswati, N., Winarsih, N.E., & Malueka, R.G.
2004 . Potensi Antikandida Ekstrak Madu secara in Vitro dan in Vivo . Berkala Ilmu
Kedokteran . 36(4): 187-94. Saifudin,  A.  2011. Standardisasi  Bahan  Obat Alam. Yogyakarta: Graha Imu. Pp. 1-11. Siregar,  R.S.  2005. Atlas  Berwarna  Saripati Penyakit  Kulit:  Kandidiasis.Edisi  2. Jakarta: EGC. pp. 31-5.
Soetojo,  S.D.R  and  Astari,  L.  2016.  Profile  of New  Patient  with  Candida  Infection  in Skin  and  Nail . Jurnal  Berkala  Ilmu Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin .  Vol.28. No.1. Sudoyo,  A.  W.  2009. Buku  Ajar  Ilmu  Penyakit Dalam,  jilid  II,  edisi  V .Jakarta:  Interna Publishing.