Studi Literatur Mekanisme Molekuler Antibakteri dari Daun Telang ( Clitoria ternatea L.)
Literature Study of Molecular Antibacterial Mechanism of Butterfly Pea

## ( Clitoria ternatea L.) Leaves
Mario Henrik Refwalu, Ana Indrayati, Ika Purwidyaningrum Program Studi Pasca Sarjana Jurusan Sains Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi email: riorefwalu1210@gmail.com
(tanggal diterima: 23-02-2021 , tanggal disetujui: 03-04-2023)

## INTISARI
Bakteri  merupakan  salah  satu  patogen  yang  menyebabkan  terjadinya  penyakit  infeksi. Masalah yang saat ini berkembang dalam pengobatan penyakit infeksi adalah resistensi antimikroba. Resistensi antimikroba merupakan ketidakmampuan suatu antibiotik untuk menyembukan penyakit infeksi,  sehingga  dibutuhkan  senyawa  antimikroba  baru  yang  mampu  membunuh  patogen penginfeksi (bakteri, jamur, virus dan parasit multi seluler). Tanaman telang ( Clitoria ternatea L. ) telah diidentifikasi sebagai tanaman yang berpotensi sebagai antibakteri. Tujuan studi literatur ini untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dan  mengidentifikasi  mekanisme  molekuler  berdasarkan kandungan kimia dari daun telang yang belum dilakukan sebelumnya.
Penelitian  menggunkan  metode systematic  literature  review (SLR)  untuk  mengetahui aktivitas  dan  mekanisme  antibakteri  berdasarkan  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  dengan menggunakan PRISMA ( Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses ) sebagai protokol review . Strategi pencarian data menggunakan search engine: science direct, google scholar dan pubmed . Kata kunci pencarian menggunkan kombinasi kata-kata dalam rumusan masalah dan menggunakan Boolean “OR” dan “AND”.
Hasil pencarian literatur yang relevan memperoleh 22 artikel yang memenuhi kriteria yang terdiri dari artikel senyawa kimia, aktivitas dan mekanisme antibakteri. Hasil SLR menunjukan daun telang  berpotensi  sebagai  antibakteri  dan  memiliki  mekanisme  molekuler  yaitu,  menggangu permeabilitas  membran  sel,  menghambat  sintesis  asam  nukleat  dan  protein  dan  menghambat pembentukan biofilm. Senyawa kimia yang berpotensi sebagai agen  antibakteri yaitu kaempferol, kuersetin, siklotida, b-sitosterol alkaloid dan tanin.
Kata kunci : Clitoria ternatea ; antibakteri; mekanisme antibakteri; senyawa bioaktif

## ABSTRACT
The bacterium is one of the infectious pathogens that cause infectious diseases. A problem currently developing in the treatment of infectious diseases is antimicrobial resistance. Antimicrobial resistance  is  the  inability  of  an  antibiotic  to  cure  infectious  diseases  so  that  new  antimicrobial compounds  are  needed  that  can  kill  infectious  pathogens  (by  bacteria,  fungi,  viruses,  and  multi- cellular parasites). The butterfly pea plant ( Clitoria ternatea L .) has been identified  as  a potential antibacterial  plant.  This  literature  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  and  identify molecular  mechanisms  based  on  the  chemical  content  of  telang  leaves  that  have  not  been  done before.
This literature study uses the systematic literature review (SLR) method to determine the activity and antibacterial mechanisms based on the bioactive compounds contained by using PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyzes) as the review protocol. Data search  strategy  using  search  engines:  science  direct,  google  scholar,  and  Pubmed.  The  keyword search uses a combination of words in the problem statement and uses the Boolean "OR" and "AND".
The  finding  shows  that  the  relevant  literature  obtained  22  articles  that  met  the  criteria consisting  of  articles  on  chemical  compounds,  antibacterial  activities  and  mechanisms.  The  SLR results  showed  that  telang leaf has  potential  as  an  antibacterial  and  has  a  molecular mechanism,
namely,  interfering  with  the  permeability  of  cell  membranes,  inhibiting  nucleic  acid  and  protein synthesis and inhibiting the formation of biofilms. Chemical compounds that have the potential as antibacterial agents are kaempferol, quercetin, cyclotide, b-sitosterol alkaloids and tannins.
Keywords: Clitoria ternatea ; antibacterial; antibacterial mechanism; bioactive compounds

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  dan  resistensi  antibiotik  merupakan  suatu  masalah  yang menjadi  ancaman  bagi  kesehatan  masyarakat.  Salah  satu  penyakit  infeksi  yang menjadi masalah kesehatan di Indonesia khusunya pada daerah papua dan maluku yaitu penyakit kusta. Angka prevalensi kusta di Indonesia pada tahun 2019 sebesar 0,74/10.000  penduduk  dan  angka  penemuan  kasus  baru  sebesar  6,51/100.000 penduduk  [1].  Salah  satu  bakteri  yang  mempunyai  resistensi  tinggi  terhadap berbagai  jenis  antibiotik  ( Multi  Drug  Resistance )  adalah Staphylococcus  aureus. Bakteri  ini  memiliki  kemampuan  adaptasi  yang  luar  biasa  sehingga  bisa  resisten pada  banyak  antibiotik.  Pandemik  dari antibiotic  resistant S.  aureus pertama  kali muncul 60 tahun yang lalu [2].
Penelitian mengenai aktivitas antibakteri telah banyak dilakukan terutama terhadap  berbagai  jenis  tanaman  yang  secara  empiris  mempunyai  aktivitas antibakteri  dan  secara  tradisional  juga  banyak  digunakan  sebagai  alternatif pengobatan. Salah satu tanaman yang bisa dijadikan sebagai obat tradisional adalah Clitoria ternatea L. (telang). Tanaman telang sejak dahulu telah digunakan sebagai obat  tradisional  oleh  masyarakat  India  dan  Madagaskar.  Tanaman C.  ternatea merupakan salah satu tanaman yang disebut sebagai Antimicrobial peptides, karena terdapat  senyawa  peptida  yaitu  siklotida . Nguyen et  al .  (2011)  melaporkan kandungan siklotida ditemukan diseluruh bagian tanaman C. ternatea yaitu bunga, daun, akar, biji dan batang[3].
Tanaman  telang  sendiri  terdapat  senyawa  bioaktif  seperti  flavonoid. Senyawa bioaktif pada daun telang dilaporkan mengandung β-sitosterol, flavonoid, lakton aparajitin dan clitorin, minyak esensial, colouring-matter dan mucilage [4]. Flavonoid  dan  β-sitosterol  merupakan  senyawa  antibakteri.  Flavonoid  berfungsi menghambat  sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi  membran  sel  dan menghambat  metabolisme  energi  [5].  Berdasarkan  uraian  diatas,  kebaruan penelitian ini bahwa penelitian-penelitian sebelumnya belum melakukan penelitian terkait  dengan  mekanisme  molekuler  antibakteri  dari  daun  telang  berdasarkan kandungan kimia. Tujuan studi literatur ini untuk  mengetahui aktivitas antibakteri dan  mengidentifikasi  mekanisme  molekuler  antibakteri  berdasarkan  kandungan kimia dari daun telang. Berdasarkan masalah yang ditimbulkan dari infeksi patogen, resistensi  antibiotik,  serta  pentingnya  pengembangan  obat  tradisional  sebagai alternatif  pengobatan,  maka  perlu  di  lakukan  pengkajian  studi.  Pengkajian  studi literatur  ini  dilakukan  menggunakan  review  data  secara  deskriptif/naratif  dari berbagai  studi  primer  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dan  kaitan  antara kandungan  senyawa  bioaktif  dari  daun  telang  dengan  mekanisme  molekuler antibakteri.
2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. DESAIN PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode  literatur  review.  Identifikasi  aktivitas antibakteri,  kandungan  senyawa  kimia  serta  mekanisme  antibakteri  terhadap bakteri  gram  positif  dan  negatif  menggunakn  metode  sistematik  literatur  review untuk  menganalisa  dan  mengevaluasi  data  penelitian  sebelumnya  dengan menggunakan PRISMA sebagai protokol penelitian. Topik studi literatur ini adalah daun telang ( Clitoria ternatea L. ) sebagai antibakteri serta kandungan kimia sebagai antibakteri.

## 2. 2. IDENTIFIKASI LITERATUR YANG RELEVAN
Pencarian data dilakukan dengan menggunakan search engine : sciencedirect, google  scholar  dan  pubmed .  Penentuan  strategi  pencarian  data  menggunkan kombinasi kata-kata dalam rumusan masalah dan menggunakan Boolean OR untuk memasukan sinonim alternatif, serta Boolean AND untuk menghubungkan istlah- istilah utama. Kata kunci untuk search engine dapat dilihat pada tabel.
Tabel 1. Kata kunci
Kode Kata kunci #1 Clitoria ternatea leaves or butterfly pea leaves #2 Antimicrobial or antibacterial or antibacterial agents or antibacterial activity #3 Bioactive compound or phytoconstituents (Kaempferol, astragalin, quercetin, cyclotide, b-sitosterol, alkaloid dan tannin). #4 Targets antibacterial agent or antibacterial mechanism of action #5 #1 and #2, #1 and #3, #3 and #4

## 2. 3. PEMILIHAN HASIL STUDI DATA PRIMER
Pemilihan hasil studi data primer dilakukan sesuai dengan kriteria inklusi dan  eksklusi  yang  berdasarkan  rumusan  masalah  yang  dapat  dilihat  pada  tabel. Hasil yang diperoleh dibuat dalam bentuk diagram alur menggunkan diagram alur PRISMA 2009.

## Tabel 2. Kriteria inklusi dan eksklusi
Kriteria
inklusi Jurnal yang diterbitkan pada tahun 2005-2020 Jurnal yang terindeks Scopus, web of science dan DOAJ Jurnal yang termasuk kategori Q1 – Q4 menurut SCIMAGOJR
Jurnal atau literatur ilmiah yang membahas tentang aktivitas antibakteri daun telang dan mekanisme antibakteri dari senyawa bioktif daun telang. Kriteria eksklusi Jurnal atau literatur ilmiah yang tergolong systematic review Jurnal atau literatur ilmiah yang sama atau duplikasi.
Jurnal  atau  karya  tulis  tentang  aktivitas  antibakteri  dari  kombinasi  daun  telang dengan  tanaman  lain  yang  tidak  menjelaskan  atau  mencantumkan  hasil  masing- masing

## 2. 4. EKSTRAKSI DATA
Ekstraksi  data  dilakukan  untuk  menggolongkan  artikel  dan  membuat gambaran besar mengenai isi artikel. Data primer yang telah didapat, diekstraksikan untuk  memasukan  kriteria  kunci  seperti  penulis,  subjek  uji,  bakteri  uji,  metode pengujian,  parameter  uji  dan  hasil,  untuk  aktivitas  antibakteri  sedangkan  data primer  mekanisme  molekuler  antibakteri  diekstraksikan  dengan  kriteria  kunci
seperti penulis, nama senyawa, target molekul, metode pengujian dan mekanisme molekuler.  Kriteria  kunci  dari  senyawa  daun  telang  yaitu  penulis  dan  nama senyawa. Data primer tersebur diekstraksi ke dalam tiga bentuk tabel.

## 2. 5. SINTESIS DATA
Literatur yang telah didapat dan telah dilakukan ekstrasi data menggunkan tabel  ekstraksi,  kemudian  disintesis  dengan  pendekatan  secara  deskriptif (naratif/non-kuantitatif) yaitu penggunaan kata-kata dan teks untuk merangkum dan menjelaskan tentang data dari hasil studi primer.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. IDENTIFIKASI LITERATUR DAN PEMILIHAN HASIL STUDI DATA

## Gambar 1. Diagram alur PRISMA
Hasil  identifikasi  diperoleh  22  artikel  ilmiah  yang  diantaranya  8  artikel ilmiah senyawa kimia, 5 artikel ilmiah aktivitas  antibakteri, dan 10 artikel ilmiah mekanisme molekuler antibakteri. Pada artikel aktivitas antibakteri dan senyawa kimia terdapat satu jurnal yang sama.

## 3.2. EKSTRAKSI DAN SINTESIS DATA
Artikel  ilmiah  yang  dinilai  layak  untuk  disintesis,  dilakukan  ekstraksi menggunakan tabel ekstraksi data terhadap masing-masing artikel. Ekstraksi data terbagi atas tiga bagian yaitu senyawa kimia, aktivitas antibakteri dan mekanisme molekuler antibakteri. Jenis data yang diekstraksi berdasarkan kebutuhan peneliti untuk  mensintesis  data.  Data  dari  artikel  seperti  nama  penulis,  tahun  dan  judul dibutuhkan  sebagai  identitas.  Data  yang  lain  seperti  subjek  uji,  parameter  dan sumber sampel dibutuhkan untuk mempermudah perbandingan metode serta hasil pengujian dari masing-masing artikel.
Identifikasi artikel penelitian melalui  tiga pencarian basis data Sciencedirect (n = 9.654), Pubmed /ncbi (n = 2.199), Google scholar (n = 63.187) Id ent if ic at io n Artikel penelitian yang telah disaring (n = 75.040)
Artikel teks lengkap dinilai untuk kelayakan (n = 118) Artikel teks lengkap yang dieksklusi karena tidak memenuhi kriteria inklusi (n = 92)
Artikel penelitian dengan desain kualitatif (n =   22) Sc ree n in g El ig ib ilit y In clu d ed Artikel penelitian yang di eksklusi: (n = 74.992) - Judul dan abstrak
- Tidak dapat diakses
- Tidak full teks
- Artikel yang duplikasi
- Systematic review
- Kombinasi dari daun telang yang tidak mencantumkan hasil masing-masing.

## Senyawa Kimia Daun Telang
Berdasarkan  hasil  review  pada  literatur/jurnal  ilmiah,  diperoleh  data senyawa kimia yang telah diteliti. Dari hasil review terdapat 28 senyawa  dengan berbagai aktivitas biologi dari 8 literatur/jurnal ilmiah. Senyawa dari daun telang secara umum mengandung senyawa turunan flavonoid, turunan siklotida. Senyawa kimia  dari  daun  telang  Sebagian  besar  merupakan  senyawa-senyawa  antibakteri dan  antioksidan.  Senyawa  kimia  seperti  Kaempferol,  Kuersetin,  β–sitosterol, Siklotida dan alkaloid merupakan senyawa dengan kandungan tertinggi pada daun telang, sehingga dapat digunakan sebagai acuan untuk mengidentifikasi mekanisme molekuler dari daun telang. Daftar senyawa kimia dari ekstrak daun telang dapat dilihat pada tabel 3.

## Tabel 3.  Senyawa kimia daun telang
Penulis Subjek uji Metode pengujian Parameter uji Nama senyawa Makasana (2017) [6] Ekstrak metanol 80% Analisis HPLC dengan detektor UV-VIS Waktu retensi, Panjang gelombang Kaempferol, Kuersetin Makasana (2016) [7] Ektrak kloroform, etil asetat, aseton, metanol dan etanol dari bagian daun telang Analisis HPTLC Penentuan kadar β – sitosterol, Taraxerol Maity (2012) [8] Ekstrak metanol, fraksi etil asetat dan fraksi n-butanol Analisis HPLC fase terbalik Kurva kalibrasi Taraxerol Sivaprabha (2008) [9] Ekstrak air Estimasi kadar Absorbansi Asam askorbat, Reduced glutathione, Karotenoid Nguyen (2011) [3] Ekstrak air Analisis MALDI- TOF-MS Profil ekspresi Clotilde T1, T2, Cliotide T4 (Cter P), Cter M (Cliotide T3), Cter Q (Cliotide T5) Gilding (2016) [10] Ekstrak air panas Analisis MALDI- TOF-MS Profil ekspresi Cliotide T1, T2, T12, T19 Cter A, F, N, Q Cter 8, 12, 35,17,30 Cliotide T4 (Cter P), Cliotide T3 (Cter M) Poth (2011) [11] Ekstraksi dengan 50% asetonitril dan 2% asam format dalam air. Analisis MALDI- TOF, LC-MS, Spektroskopi NMR Profil ekspresi Cter A, Cter M (Cliotide T3), Cter Q (Cliotide T5) Kamilla (2009) [12] Ekstrak metanol daun telang Uji fitokimia kualitatif Perubahan warna Tanin, alkaloid, kardiak glikosida, steroid

## Aktivitas Antibakteri Daun Telang
Tabel 4. Aktivitas antibakteri daun telang Penulis Subjek uji Metode pengujian Parameter uji Hasil Dhanaseka ran (2019) [13] Ekstak aseton, isopropil alkohol dan petroleum eter dari daun telang Metode Difusi Zona hambatan Ekstrak aseton Clitoria ternatea menunjukkan aktivitas antimikroba  tertinggi  terhadap P. mirabilis dalam kisaran 20–26 mM dengan kisaran konsentrasi 100 - 500 μg Rekha (2018) [14] Ekstrak etanol daun telang Metode difusi sumur dan metode dilusi Zona hambatan dan MIC Hasil  uji  dari  ekstrak  etanol menujukan aktivitas penghambatan dari ketiga bakteri.  Nilai MIC dari  ketiga bakteri: S. aureus (651.175μg), P. aeruginosa (637.692μg), Klebsiella spp (480.241μg) Ponnusam y et al., (2010) [15] Ekstrak petroleum eter, Etil asetat, Etanol, Aseton dan air suling ganda dari daun telang Metode Difusi Zona hambatan Ekstrak  etil  asetat C.  ternatea menunjukkan  zona  hambat maksimum terhadap A. formicans (18 mm), A. hydrophilia (19  mm), B.  subtilis
(19  mm)  dan P.  aeruginosa (21 mm) Ekstrak  etanol C.  ternatea menunjukkan  zona  hambat maksimum A.  formicans (18 mm) dan E. coli (14 mm) Ekstrak  aseton  menunjukkan zona  hambat  maksimum S. agalactiae (19  mm)  dan K. pneumonia (17 mm). Ekstrak  air  tidak  menuinjukan aktivitas antibakteri pada semua bakteri uji. Shahid (2009) [16] Ekstrak air dan etanol dari eksplan daun telang Metode difusi agar Zona hambatan Ekstrak  etanol  menunjukkan aktivitas antibakteri pada semua jenis  bakteri  Gram  positif  dan negatif  yang  di  uji,  Sedangkan Ekstrak air menunjukkan aktivitas  antibakteri  terhadap sejumlah  spesies  bakteri; S.
pyogenes , B.  subtilis dan B. cereus . Kamilla (2009) [12] Ekstrak metanol daun telang Metode difusi disk dan metode dilusi Zona hambatan dan MIC Ekstrak  metanol  daun  telang menunjukan aktivitas antibakteri  pada  semua  bakteri uji  dengan  nilai  penghambatan pada  kisaran  11-21  mms edangkan        nilai MIC ;  3,125 mg/ml
Berbagai  upaya  penelitian  yang  dilakukan  mengenai  aktivitas  antibakteri dari daun telang menunjukan hasil yang berbeda-beda. Perbedaan yang signifikan dari masing-masing artikel yaitu pelarut yang digunkan serta nilai konsentrasi dari ekstrak  daun  telang  sehingga  mempengaruhi  hasil  yang  diperoleh.  Lima  artikel penilitian  ini  menegaskan  bahwa  daun  telang  memiliki  aktivitas  antibakteri. Berdasarkan tabel 4 diketahui bahwa parameter uji untuk aktivitas antibakteri yaitu uji  zona  hambat  yang  terdapat  pada  5  artikel,  uji  konsentrasi  hambat  minimal terdapat pada 2 artikel, sedangkan untuk parameter uji keduanya hanya dalam 2 artikel.  Dari  2  artikel  tersebut,  semuanya  membahas  pengujian  secara in  vitro dengan  metode  difusi  dan  dilusi.  Subjek  uji  dari  5  artikel  ini  yaitu  ekstrak  daun telang dengan berbagai macam pelarut (polar, semi polar dan non polar).
Pengujian zona hambat pada artikel pertama dilakukan pada bakteri Proteus mirabilis yang didapat dari 63 pasien, hanya 27 sampel yang teridentifikasi positif bakteri P.  mirabilis .  Dari  ketiga  ekstrak  dengan  pelarut  aseton,  isopropil  dan petroleum  eter  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri P.  mirabilis .  kandungan ekstrak dari aseton lebih tinggi dari pelarut isopropil dan petroleum eter[13].
Rekha  [14],  menggunakan  metode  difusi  agar  dan  dilusi  untuk  menguji aktivitas antibakteri. Pengujian metode difusi agar menggunakan beberapa variasi konsentrasi  yaitu  1,25;  2,5;  5;  10  mg/ml.  Hasil  pengujian  dari  metode  difusi menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  telang  dapat  menghambat  bakteri  gram positif  ( S.  aureus )  dan  gram  negatif  ( P.    aeruginosa,  Klebsiella  spp )  dengan konsentrasi  tertinggi  pada  10  mg/ml.  Konsentrasi  hambat  minimum  adalah konsentrasi  terendah  dari  agen  antimikroba  yang  menghambat  pertumbuhan mikroba  patogen  setelah  inkubasi  semalaman.  MIIC  menghambat  pertumbuhan bakteri patogen pada konsentrasi terendah sekitar 480.241 μg hingga 651.175 μg. Penelitian lain menggunakan metode difusi dan dilusi, meneliti aktivitas antibakteri pada  beberapa  bagian  tanaman  telang  yaitu  daun,  batang,  bunga,  biji  dan  akar. Pengujian dilakukan secara in vitro terhadap 12 spesies bakteri dan menggunkan pelarut  metanol.  Hasil  pengujian  menunjukan  bahwa  daun  dan  akar  efektif menghambat  semua  organisme  yang  di  uji.  Ekstrak  daun  telang  menghambat  12 spesies  bakteri  dengan  kisaran  penghambatan  10-21  mm  pada  konsentrasi  100 mg/ml. Kisaran konsentrasi hambat minimal dari ekstrak daun telang pada semua bakteri uji yaitu 3,125-100 mg/ml[12].
Nguyen et  al. ,  (2011)  menggunakan  air  mendidih  karena  rebusan  air mendidih  merupakan  metode  yang  relevan  dalam  pengobatan  tradisional. Pemantauan ekstrak air daun telang pada suhu 100 o C selama 30 menit menunjukan profil cliotide yang hampir identik sebelum dan sesudah perlakuan. Jadi  siklotida dapat  bertahan  dari  perlakuan  panas  selama  proses  persiapan  rebusan  dan mungkin  menjadi  salah  satu  prinsip  aktif  yang  dikaitkan  dengan  nilai  obat  daun telang. Hasil uji cliotide T1 dan cliotide T4 menunjukan aktivitas antibakteri yang kuat terhadap 3 bakteri yang merupakan bakteri Gram negatif ( E. coli, K. pneumonia, P.  aeruginosa) dengan  nilai  MIC  dalam  kisaran  micromolar  rendah,  tetapi  tidak efektif  melawan  strain  bakteri  Gram  positif  ( S.  aureus  dan  E.  faecalis )[3].  Pada penelitian  lainnya,  mengungkapkan  bahwa  ekstrak  air  dari  daun  telang  tidak menghambat pertumbuhan bakteri Gram negatif yang diuji, sedangkan untuk Gram
positif  ekstrak  air  menghambat  3  strain  bakteri  dari  semua  bakteri  Gram  positif yang diuji ( S. pyogenes, B. subtilis dan B. cereus) . Hal ini menujukan perbedaan hasil dari pelarut yang sama, sedangkan untuk ekstrak etanol menghambat pertumbuhan semua bakteri Gram positif maupun negatif pada konsentrasi 10 mg/ml[16].
Ponnusamy  [15]  menyatakan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  air  daun telang  tidak  menunjukan  penghambatan  yang  signifikan  dibandingkan  dengan ekstrak lainnya. Ekstrak petroleum eter, Etil asetat, Aseton dan Etanol menunjukan zona hambat terhadap patogen ikan yang diisolasi dengan diameter yang bervariasi pada konsentrasi 100 mg/ml sehingga dapat digunakan sebagai antibiotik spektrum luas  karena  aktif  melawan  gram  positif  dan  negatif.  Hasil  penelitian  ini mengungkapkan bahwa daun telang dapat digunakan dalam pengobatan bisul, luka, karena bakteri P. aeruginosa telah terlibat sebagai agen penyebab penyakit ini.
Mekanisme Molekuler Antibakteri dari Senyawa Bioaktif Daun Telang Pada artikel ilmiah terkait mekanisme molekuler antibakteri, menggunakan beberapa metode pengujian, secara umum metode yang digunakan yaitu metode in vitro dan in silico .
Tabel 5. Mekanisme antibakteri mengganggu permeabilitas membran Penulis Nama senyawa Target molekul Metode pengujian Hasil He (2014) [17] Kaempferol Membran sel Analisis spektroskopi Raman dan analisis kalorimetri pemindaian diferensial Mekanisme  antimikroba  dari flavonoid  bioaktif  berinteraksi dengan daerah hidrofobik fosfolipid  pada  membran  sel sehingga dapat membunuh bakteri E. coli. Nguyen (2016) [18] Siklotida Membran sel Atomic force microscopy scanning Kemampuan siklotida untuk mengganggu  membran  bakteri dengan  kinetika  pembunuhan yang  berbeda  pada  bakteri  Gram negatif. Efimova (2020) [19] Alkaloid saluran ion berpagar tegangan dan mekanosen sitif dalam membran sel. Pengukuran Batas Membran dan Potensi Dipol, Kalorimetri Pemindaian Diferensial Rekonstitusi Saluran Ion Menjadi Lapisan Ganda Lipid Planar Alkaloid  yang  beragam  secara struktural mengubah karakteristik  fisik  lapisan  ganda lipid (potensi batas membran dan kemasan  lipid)  dan  sifat  saluran ion, maka terjadi kerusakan pada bakteri S. aureus .
Xu (2017) [20] Punicalagin (tanin terhidrolisis) Membran sel Potassium efflux dan Mikroskop elektron Punicalagin  dapat  meningkatkan permeabilitas  membran  atau mempengaruhi  sistem  gradien proton  membran  dari  bakteri S.
aureus .
Mekanisme  antibakteri  pada  studi  ini  secara  umum  membahas  beberapa mekanisme yaitu mengganggu permeabilitas membran, menghambat sintesis asam nukleat  dan  protein,  menghambat  pembentukan  biofilm  dan  menghambat  enzim
metabolik. Senyawa bioaktif dari daun telang yang diidentifikasi memiliki aktivitas antibakteri yaitu flavonoid (kaempferol, kuersetin), siklotida, b-sitosterol, alkaloid dan tanin.
Salah  satu  mekanisme  antibakteri  yaitu  mengganggu  permeabilitas membran sel. Empat artikel pada tabel di atas dapat menunujukan bahwa senyawa bioaktif yang terdapat pada daun telang dapat membunuh bakteri Gram positif dan Gram  negatif  pada  target  molekul  yang  sama  yaitu  dengan  mengganggu permeabilitas  membran  sel.  Setiap  artikel  menggunakan  berbagai  metode pengujian untuk memastikan hasil yang didapat. Berdasarkan artikel diatas maka dapat diidentifikasi senyawa dari daun telang berpotensi sebagai agen antibakteri dengan target molekul pada membran sel.
Senyawa  dari  daun  telang  yang  berpotensi  mengganggu  permeabilitas membran  sel  bakteri  yaitu  kaempferol,  siklotida,  alkaloid  dan  tanin.  He  [17] menggunakan metode analisis TEM dan Raman spektroskopi untuk menganalisis mekanisme  molekuler  pada  membran  sel  yang  merupakan  target  aktivitas antibakteri. Hasil analisis TEM mengkonfirmasi bahwa efek antimikroba yang lebih kuat menyebabkan tingkat kerusakan membran pada bakteri E. coli . Fenomena yang paling  jelas  adalah  plasmolisis  yang  melibatkan  aliran  keluar  konstituen intraseluler, yang menunjukkan perubahan dalam fluiditas dan integritas membran sel. Kaempferol menurunkan fluiditas model liposom pada konsentrasi yang lebih rendah (20%). Interaksi flavonoid dengan gugus kepala liposom yang melemahkan getaran  ikatan  C-H  dan  getaran  ikatan  C-C  dari  rantai  alkil  sehingga  molekul kaempferol menembus daerah hidrofobik dari lapisan ganda lipid.
Penelitian  sifat  antimikroba  sikoltida  yang  berkaitan  dengan kemampuannya  untuk  menggangu  membran  menunjukan  bahwa  turunan  dari siklotida yaitu cliotide memberikan  efek  aktif  terhadap  bakteri  Gram  negatif, sementara Gram positif tidak memberikan efek. Perbedaan ini dikarenakan struktur yang berbeda dari kedua bakteri. Bakteri Gram negatif terdiri dari membran luar yang  kaya  akan  LPS  (lapisan  lipopolisakarida)  yang  sangat  anionik  dan  lapisan peptidoglikan tipis, sedangkan bakteri Gram positif tidak memiliki membran luar tetapi memiliki dinding sel peptidoglikan yang tebal yang dapat mencegah cliotide berpindah  ke  dalam  sel  dan  berinteraksi  dengan  membran  sitoplasma . Potensi aktivitas antibakteri berkolerasi dengan muatan bersih yaitu cliotide kationik yang bermutan  tinggi  serta  urutan  dan  struktur  tersiernya,  dimana cliotide kationik menampilkan  kinetika  pembunuhan  yang  berbeda  yaitu  melisiskan  membran dengan cepat ( cliotide T150) dan kinetika yang lebih lambat dan bertahap ( cliotide T20)[18].
Terkait  dengan  senyawa  bioaktif  lainya,  senyawa  alkaloid  berserta turunannya yang beragam struktur mengubah karakteristik fisik lapisan ganda lipid (potensi batas membran dan kemasan lipid) dan pembentukan kembali sifat saluran ion  yang  dibentuk  oleh  agen  antimikroba.  Hal  ini  memberikan  bukti  jelas  untuk regulasi fungsi saluran ion yang dimediasi oleh alkaloid dengan mengganggu inang lipid. [19].  Punicalagin  (tanin  terhidrolisis  meningkatan  pelepasan  ion  K  +,  yang menunjukkan  kerusakan  membran  pada  bakteri S.  aureus .  Punicalagin  dapat
meningkatkan permeabilitas membran atau mempengaruhi sistem gradien proton membran[20].
Tabel 6. Mekanisme antibakteri menghambat sintesis asam nukleat dan protein Penulis Nama senyawa Target molekul Metode pengujian Mekanisme antibakteri Huang (2015) [21] Kaempferol PriA helicase Uji kolorimetri sensitif Vanadate dan quenching Fluoresensi Flavonol  kaempferol  memberikan efek penghambatan terhadap aktivitas PriA dari S. aureus . Chen & Huang (2011) [22] Kaempferol dan Kuersetin DnaB Helicase Quenching Fluoresensi Kaempferol  dan  kuersetin  dapat menghambat pengikatan dNTP ( deoksiribonukleosidiatrifosfat ) ke DnaB helicase dari K. pneumoniae. Gonzalez (2019) [23] Kaempferol Respon regulator HsrA(HP1043 gene) Uji pergeseran mobilitas elektroforetik, metode Mikrodilusi, dan Molekuler docking Kaempferol  diidentifikasi  sebagai pengikat HsrA pada bakteri Helicobacter  pylori ,  karena  secara signifikan  meningkatkan  stabilitas termal.
Kaempferol  secara  umum  dapat  menghambat  sintesis  asam  nukleat  dan protein dengan target molekul yang berbeda-beda. Pada artikel di atas Huang [21] mengungkapkan flavonoid kaempferol memberikan efek penghambatan terhadap Staphylococcus  aureus  PriA  (SaPriA).  PriA  merupakan  protein  inisiator  esensial yang diperlukan untuk memulai kembali replikasi DNA pada bakteri Gram negatif. Hasil studi menjelaskan flavonoid kaempferol menurunkan konsentrasi fosfat dari hidrolisis  ATP  oleh  SaPriA  hingga  37%.  Hasil  fluoresensi  quenching  SaPriA menunjukan kaempferol menurunkan intensitas fluoresensi protein, maka terjadi pembentukan ikatan kompleks antara kaempferol dengan SaPriA, dengan demikian kaempferol  dapat  mengikat  SaPriA  dan  kemudian  menghambat  aktivasi  ATPase- nya.  Penelitian  Chen  &  Huang  [22]  menggunakan  Fluoresensi  Quenching  untuk menganalisis  flavonol  (kaempferol)  dalam  penghambatan  interaksi  pengikatan dNTP dari replikatif primer DnaB helicase dari K. pneumoniae (KpDnaB). Studi ini menunjukan  bahwa  10  µM  flavonol  (kaempferol)  dapat  menghambat  pengikatan dNTP  ke  KpDnaB.  Kekuatan  penghambatannya  tidak  berkorelasi  dengan  dengan jumlah subtituen hidroksil pada cincin aromatik dari flavonol.
Kaempferol  dan  kuersetin    yang  merupakan  turunan  flavonoid  yang diidentifikasi  menghambat  aktivitas  pengikatan  DNA in  vitro dari  HsrA  (HP1043 gene )  yang  efektif  pada  infeksi  bakteri Helicobacter  pylori .  Senyawa  flavonoid (kaempferol  dan  kuersetin)  disebut  sebagai  pengikat  regulator H.  pylori HsrA karena  dapat  meningkatkan  stabilitas  termal  secara  signifikan  berdasarkan pengujian High-throughput  screening (HTS) . Kuersetin  menunujukan  aktivitas bakterisidal yang rendah jika dibandingkan dengan kaempferol yang menunjukan aktivitas bakterisidal yang kuat. Perbedaan aktivitas bakterisidal antara kaempferol
dan kuersetin terhadap bakteri H. pylori dipengaruhi oleh gugus hidroksil. Menurut prediksi in  silico ini,  penghambatan  aktivitas  HsrA  oleh  flavonoid  bisa  jadi merupakan hasil dari penyumbatan langsung dari residu asam amino yang terlibat dalam  interaksi  protein-DNA  dan  /  atau  perubahan  konformasi  dalam  domain efektor yang mengganggu kestabilan pengikat regulator ke promotor target[23].
Tabel 7. Mekanisme antibakteri menghambat pembentukan biofilm Penulis Nama senyawa Target molekul Metode pengujian Mekanisme antibakteri Ming (2017) [24] Kaempfer ol SortaseA (SrtA) dan ekspresi gen Uji transfer energi resonansi fluoresensi (FRET) dan analisis reaksi berantai polimerase transkripsi balik waktu nyata kuantitatif (qRT- PCR) Kaempferol mengurangi adhesi bakteri  menjadi  fibrinogen  dengan mempengaruhi fase pelekatan pembentukan biofilm Oh (2006) [25] Betasitost erol-3-O- glukopira nosida Adhesi sel Uji penghambatan sortase dan uji pengikatan fibronektin (BSG), turunan dari BS, menghambat adhesi sel bakteri ke fibronektin yang menunjukkan  bahwa  modifikasi  BS diperlukan  untuk  mengerahkan  efek antibakterinya.
Studi  Ming  [24]  menunujukan  kaempferol  memiliki  efek  penghambatan terhadap  pembentukan  biofilm  dari S.  aureus. Hasil  penelitian  ini  menjelaskan kaempferol tidak mempengaruhi penghamatan pertumbuhan bakteri S. aureus akan tetapi  menghambat  pembentukan  biofilm  hingga  80%  pada  64  µg/ml.  Studi  ini menjelaskan  kaempferol  mengurangi  adhesi  bakteri  menjadi  fibrinogen  dengan mempengaruhi fase pelekatan pembentukan biofilm yang merupakan langka awal dalam pembentukan biofilm. Hasilnya lainya kaempferol mengurangi adhesi bakteri dengan  memblokir  aktivasi sortase  A dan  menurunkan  ekspresi  gen  yang  terkait dengan adhesi. Gen clfA dan clfB yang menyandi Clumping factor A (ClfA) dan ClfB tertekan sebesar 45 dan 88%. S. aureus memiliki dua protein pengikat fibronectin yaitu  FnBPA  dan  FnBPB,  yang  masing-masing  dikodekan  oleh  fnbA  dan  fnbB. Kaempferol menurunkan fnbA dan fnbB dengan tingkat penghambatan adalah 56% dan 72%. Penelitian lainnya menjelaskan modifikasi senyawa turunan β-sitosterol yaitu  Betasitosterol-3-O-glukopiranose  menghambat  adhesi  sel  bakteri  ke fibronektin[25].
Tabel 8. Mekanisme antibakteri menghambat enzim metabolik secara in silico Penulis Nama senyawa Target molekul Metode pengujian Paramete r uji Mekanisme antibakteri Potshangb am (2020) [26] Kaempferol dihydropte roate synthase (DHPS) Studi dinamika molekuler dan Docking Skor docking, energi ikatan bebas Kaempferol memiliki potensi untuk menghambat mutan DHPS yang resisten terhadap sulfonamida.
Studi  Potshangbam  [26]  menggunakan  metode in  silico untuk mengidentifikasi  target  terapeutik  kaempferol.  Studi  memfokuskan  efektivitas kaempferol sebagai alternatif pengobatan pada bakteri Mycobacterium leprae yang
resisten  terhadap  antibiotik  golongan  sulfonamida.  Hasil  docking  menunjukan kaempferol efektif menghambat enzim sintase dihidropteroat (DHPS), kaempferol memiliki mode pengikatan dan konformasi yang serupa dengan interaksi penstabil yang serupa. Kaempferol memiliki tiga ikatan hidrogen tulang punggung dan rantai samping asam amino pada kantong pABA. Studi dinamika molekuler, volume poket dan analisis jaringan residu menunjukan bahwa penyebab resistensi obat terhadap bakteri M.  leprae adalah  terjadi  peningkatan  ukuran  volume  kantong  pABA. Perbandingan interaksi yang dihitung serta energi bebas pengikatan menunjukkan bahwa  kaempferol  dapat  mengikat  lebih  baik  daripada  dapson,  karena  ikatan hidrogen  yang  lebih  stabil  dan  interaksi  hidrofobik  yang  diamati  pada  kompleks kaempferol DHPS, maka  kaempferol memiliki potensi untuk mengatasi resistensi obat akibat mutasi.

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  studi  yang  dilakukan  mekanisme  molekuler  antibakteri dari  dari  telang,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa:  Pertama,  ekstrak  daun  telang dengan  berbagai  jenis  pelarut  dapat  memberikan  penghambatan  pertumbuhan terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif. Kedua, kandungan kimia dari daun telang yaitu senyawa turunan flavonoid (kaempferol, kuersetin), senyawa turunan peptida  (siklotida),  senyawa  steroid  (b-sitosterol,  taraxerol), Ð -Lactone, Essential oil , mucilage , ascorbic acid, reduced glutathione, carotenoid, senyawa alkaloid dan tanin. Ketiga, mekanisme molekuler antibakteri berdasarkan kandungan kimia dari daun telang berpotensi mengganggu permeabilitas membran, menghambat sintesis asam nukleat dan protein serta menghambat pembentukan biofilm.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
[1] Kemenkes RI, Profil Kesehatan Indonesia. Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, 2019.
[2] D. C. Oliveira, A. Tomasz, and H. De Lencastre, “Secrets of success of a human pathogen:  Molecular  evolution  of  pandemic  clones  of  meticillin-resistant Staphylococcus aureus,” Lancet Infect. Dis., vol. 2, no. 3, pp. 180–189, 2002, doi: 10.1016/S1473-3099(02)00227-X.
[3] G.  K.  T.  Nguyen  et  al.,  “Discovery  and  characterization  of  novel  cyclotides originated  from  chimeric  precursors  consisting  of  albumin-1  chain  a  and cyclotide domains in the Fabaceae family,” J. Biol. Chem., vol. 286, no. 27, pp. 24275–24287, 2011, doi: 10.1074/jbc.M111.229922.
[4] B. Gollen, J. Mehla, and P. Gupta, “Clitoria ternatea Linn: A Herb with Potential Pharmacological  Activities:  Future  Prospects  as  Therapeutic  Herbal Medicine,” J. Pharmacol. Reports, vol. 3, no. 1, pp. 1–8, 2018.
[5] R. Hendra, S. Ahmad, A. Sukari, M. Y. Shukor, and E. Oskoueian, “Flavonoid analyses and antimicrobial activity of various parts of Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl fruit,” Int. J. Mol. Sci., vol. 12, no. 6, pp. 3422–3431, 2011, doi: 10.3390/ijms12063422.
[6] J.  Makasana,  B.  Z.  Dholakiya,  N.  A.  Gajbhiye,  and  S.  Raju,  “Extractive determination of bioactive flavonoids from butterfly pea (Clitoria ternatea
Linn.),”  Res.  Chem.  Intermed.,  vol.  43,  no.  2,  pp.  783–799,  2017,  doi: 10.1007/s11164-016-2664-y.
[7] A.  Kumar  et  al.,  “Extraction,  Phytochemical  Screening,  Separation  and Characterisation of Bioactive Compounds From Leaves  Extracts of Clitoria Ternatea Linn. (Aparajita),” Int. J. Res. Ayurveda Pharm., vol. 3, no. 5, pp. 70– 77, 2016, doi: 10.7897/2277-4343.075198.
[8] N.  Maity,  N.  Nema,  B.  Sarkar,  and  P.  Mukherjee,  “Standardized  Clitoria ternatea  leaf  extract  as  hyaluronidase,  elastase  and  matrix- metalloproteinase-1  inhibitor,”  Indian  J.  Pharmacol.,  2012,  doi: 10.4103/0253-7613.100381.
[9] J.  Sivaprabha,  J.  Supriya,  S.  Sumathi,  P.  R.  Padma,  R.  Nirmaladevi,  and  P. Radha, “A study on the levels of nonenzymic antioxidants in the leaves and flowers of Clitoria ternatea.,” Anc. Sci. Life, vol. 27, no. 4, pp. 28–32, 2008.
[10]  E. K. Gilding et al., “Gene coevolution and regulation lock cyclic plant defence peptides to their targets,” New Phytol., 2016, doi: 10.1111/nph.13789.
[11]  A. G. Poth et al., “Discovery of cyclotides in the Fabaceae plant family provides new  insights  into  the  cyclization,  evolution,  and  distribution  of  circular proteins,”  ACS  Chem.  Biol.,  vol.  6,  no.  4,  pp.  345–355,  2011,  doi: 10.1021/cb100388j.
[12]  L. Kamilla, S. M. Mansor, S. Ramanathan, and S. Sasidharan, “Antimicrobial activity of Clitoria ternatea (L.) extracts,” Pharmacologyonline, 2009.
[13]  S.  Dhanasekaran,  A.  Rajesh,  T.  Mathimani,  S.  Melvin  Samuel,  R. Shanmuganathan, and K. Brindhadevi, “Efficacy of crude extracts of Clitoria ternatea for antibacterial activity against gram negative bacterium (Proteus mirabilis),”  Biocatal.  Agric.  Biotechnol.,  vol.  21,  no.  September,  p.  101328, 2019, doi: 10.1016/j.bcab.2019.101328.
[14]  S. R. Rekha, M. Kulandhaivel, and K. V. Hridhya, “Antibacterial efficacy and minimum  inhibitory  concentrations  of  medicinal  plants  against  wound pathogens,” Biomed. Pharmacol. J., 2018, doi: 10.13005/bpj/1368.
[15]  S. Ponnusamy, W. E. Gnanaraj, J. M. Antonisamy, V. Selvakumar, and J. Nelson, “The  effect  of  leaves  extracts  of  Clitoria  ternatea  Linn  against  the  fish pathogens,”  Asian  Pac.  J.  Trop.  Med.,  2010,  doi:  10.1016/S1995- 7645(10)60173-3.
[16]  M. Shahid, A. Shahzad, and M. Anis, “Antibacterial potential of the extracts derived from leaves and in vitro raised calli of medicinal plants Pterocarpus marsupium  Roxb.,  Clitoria  ternatea  L.,  and  Sanseveiria  cylindrica  Bojer  ex Hook,”  Orient.  Pharm.  Exp.  Med.,  vol.  9,  no.  2,  pp.  174–181,  2009,  doi: 10.3742/opem.2009.9.2.174.
[17]  M.  He,  T.  Wu,  S.  Pan,  and  X.  Xu,  “Antimicrobial  mechanism  of  flavonoids against Escherichia coli ATCC 25922 by model membrane study,” Appl. Surf. Sci., vol. 305, pp. 515–521, 2014, doi: 10.1016/j.apsusc.2014.03.125.
[18]  K. N. T. Nguyen, G. K. T. Nguyen, P. Q. T. Nguyen, K. H. Ang, P. C. Dedon, and J. P.  Tam,  “Immunostimulating  and  Gram-negative-specific  antibacterial cyclotides from the butterfly pea (Clitoria ternatea),” FEBS J., vol. 283, no. 11, pp. 2067–2090, 2016, doi: 10.1111/febs.13720.
[19]  S. S. Efimova, A. A. Zakharova, and O. S. Ostroumova, “Alkaloids Modulate the Functioning  of  Ion  Channels  Produced  by  Antimicrobial  Agents  via  an Influence on the Lipid Host,” Front. Cell Dev. Biol., vol. 8, no. June, pp. 1–16, 2020, doi: 10.3389/fcell.2020.00537.
[20]  Y.  Xu  et  al.,  “Antimicrobial  Activity  of  Punicalagin  Against  Staphylococcus aureus and Its Effect on Biofilm Formation,” Foodborne Pathog. Dis., vol. 14, no. 5, pp. 282–287, 2017, doi: 10.1089/fpd.2016.2226.
[21]  Y. H. Huang, C. C. Huang, C. C. Chen, K. J. Yang, and C. Y. Huang, “Inhibition of Staphylococcus aureus PriA Helicase by Flavonol Kaempferol,” Protein J., vol. 34, no. 3, pp. 169–172, 2015, doi: 10.1007/s10930-015-9609-y.
[22]  C. C. Chen and C. Y. Huang, “Inhibition of klebsiella pneumoniae dnab helicase by  the  flavonol  galangin,”  Protein  J.,  vol.  30,  no.  1,  pp.  59–65,  2011,  doi: 10.1007/s10930-010-9302-0.
[23]  A.  González  et  al.,  “Identifying  potential  novel  drugs  against  Helicobacter pylori by targeting the essential response regulator HsrA,” Sci. Rep., vol. 9, no. 1, pp. 1–13, 2019, doi: 10.1038/s41598-019-47746-9.
[24]  D. Ming et al., “Kaempferol inhibits the primary attachment phase of biofilm formation in Staphylococcus aureus,” Front. Microbiol., vol. 8, no. NOV, pp. 1– 11, 2017, doi: 10.3389/fmicb.2017.02263.
[25]  K.  B.  Oh,  M.  N.  Oh,  J.  G.  Kim,  D.  S.  Shin,  and  J.  Shin,  “Inhibition  of  sortase- mediated  Staphylococcus  aureus  adhesion  to  fibronectin  via  fibronectin- binding protein by sortase inhibitors,” Appl. Microbiol. Biotechnol., vol. 70, no. 1, pp. 102–106, 2006, doi: 10.1007/s00253-005-0040-8.
[26]  A. M. Potshangbam, R. S. Rathore,  and  P. Nongdam, “Discovery of sulfone- resistant  dihydropteroate  synthase  (DHPS)  as  a  target  enzyme  for kaempferol, a natural flavanoid,” Heliyon, vol. 6, no. 2, p. e03378, 2020, doi: 10.1016/j.heliyon.2020.e03378.