Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2015, hal 50-59
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Efek Perasan Kering Kulit Nanas ( Ananas comosus (L.) Merr) terhadap Waktu Perdarahan dan Pembekuan Darah pada Tikus Putih Jantan
Effect of Pineapple Peel Dried Juice ( Ananas comosus (L.) Merr) on Bleeding Time and Blood Clotting of Male White Rats
VERONICA BELLA LUPITA, OPSTARIA SAPTARINI * , LINA SUSANTI
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi opstaria.saptarini79@gmail.com
(Diterima 13 Desember 2014, disetujui 8 Januari 2015)
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Nanas memiliki kulit yang mengandung enzim bromelin yang bermanfaat sebagai antiagregasi platelet.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  perasan  kering  kulit  nanas  terhadap perpanjangan waktu perdarahan dan pembekuan darah, serta mengetahui dosis yang paling efektif dalam  memperpanjang  waktu  perdarahan  dan  pembekuan  darah.  Penelitian  ini  meliputi determinasi tanaman, pengeringan perasan kulit nanas, identifikasi kandungan kimia, dan uji waktu perdarahan dan pembekuan darah. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan. Kelompok dibagi atas kelompok perlakuan dengan variasi dosis perasan kering kulit nanas 28 mg/200 g BB, 56 mg/200 g BB, dan 112 mg/200 g BB, kelompok kontrol positif (asetosal 3,7 mg/200 g BB), dan kelompok  kontrol  negatif  (aquades).  Hasil  identifikasi  kandungan  kimia  menunjukkan  adanya senyawa  enzim  bromelin,  flavonoid,  dan  saponin.  Hasil  uji  antiagregasi  platelet  menujukkan bahwa  hasil  freeze  dry  kulit  nanas  yang  diberikan  secara  oral  mampu  memperpanjang  waktu perdarahan dan pembekuan darah pada tikus putih jantan. Perasan kering kulit nanas dengan dosis 112  mg/200  g  BB  memberikan efek  yang  paling efektif terhadap  perpanjangan waktu  perdarahan dan pembekuan darah dengan peningkatan waktu perdarahan 150,2 detik dan peningkatan waktu pembekuan 105 detik.
Kata kunci : kulit nanas, waktu perdarahan, waktu pembekuan darah.
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Pineapple  has  a  peel  that  contains  bromelain  enzyme  which  is  useful  as  platelet antiagregation.  This  study  was  aimed  to  determine  the  effect  of  pineapple  peel  dried  juice  on bleeding and clotting time extention, and to know the most effective dose in prolonging bleeding time and blood clotting. This study includes the determination of plants, drying of pineapple peel, the identification of the chemical contents, and test of bleeding and clotting time. This study used 5 treatment  groups.  The  group  was  divided  into  treatment  groups  with  pineapple  peel  dried  juice variation  dose  of  28  mg/200  g  BW,  56 mg/200  g  BW,  and  112  mg/200  g  BW,  positive  control group (acetosal 3.7 mg/200 g BW), and negative control group (distilled water). The identification results showed chemical constituents of bromelain enzyme compounds, flavonoids, and saponins. The  test  results  showed  that  platelets  antiagregation  freeze  drying  product  from  pineapple  peel dried juice which was administered orally could prolong the bleeding time and blood clotting on white male rats. Pineapple peel dried juice with a dose of 112 mg/200 g BW gave the best effect to the  extension  of  bleeding  and  clotting  time  with  an  average  increase  in  bleeding  time  of  150 seconds and an increase in clotting time of 105 seconds.
Keywords: acetosal, pineapple peel, bleeding time, clotting time.

## PENDAHULUAN
Stroke  didefinisikan  sebagai  suatu gangguan  fungsional  otak  yang  terjadi secara  mendadak  dengan  tanda  dan gejala  klinik  baik  fokal  maupun  global yang berlangsung lebih dari 24 jam atau dapat menimbulkan kematian,
disebabkan  oleh  gangguan  peredaran darah otak (WHO 1989).
Obat-obat antitrombotik seperti antikoagulan merupakan salah satu terapi untuk  mencegah  terjadinya  trombosis yang  dapat  menyumbat  aliran  darah menuju otak. Penggunaan obat
antiagregasi  platelet  seperti  asetosal  juga digunakan  untuk  mencegah  terjadinya agregasi  platelet  yang  dapat  membentuk sumbatan dalam pembuluh darah
sehingga  mengurangi  resiko  terjadinya stroke (Lullman et al. 2000).
Nanas merupakan buah yang banyak digemari masyarakat luas, termasuk  Indonesia.  Kulit,  daun,  dan batangnya dapat digunakan sebagai obat.
Nanas  berkhasiat  mengurangi  keluarnya asam lambung yang berlebihan,
membantu  mencernakan  makanan  di lambung,  antiradang,  peluruh  kencing (diuretik),  membersihkan  jaringan  kulit yang mati, mengganggu pertumbuhan sel kanker, menghambat penggumpalan trombosit  (agregasi  platelet),  mempunyai aktifitas fibrinolitik, mengurangi rasa sakit pada  sendi,  dan  memiliki  sifat  anti penuaan.  Kandungan  serat  nanas  dapat mempermudah  buang  air  besar  pada penderita sembelit atau konstipasi (Dalimartha 2000).
Penelitian  sebelumnya  menyatakan bahwa  ekstrak  buah  nanas  mampu
memperlama  waktu  perdarahan  dan koagulasi  terhadap  mencit  putih  jantan,
sehingga dapat dijadikan sebagai antiagregasi platelet (Rakasiwi 2013).
Buah  nanas  memiliki  bagian  kulit yang  seringkali  dibuang  sebagai  limbah. Kulit  nanas  sama  seperti  buahnya, mengandung  enzim  bromelin.  Kulit nanas  juga  mengandung  vitamin  C, saponin, dan flavonoid (Erukainure et al. 2011).
Tanaman  nanas  mengandung  enzim bromelin yang memiliki aktivitas sebagai antikoagulan  dan  antiplatelet.  Enzim bromelin  merupakan  enzim  protease sulfhidril  yang  terdiri  dari  tripsin, kimotripsin  dan  beberapa  susunan  lain untuk mencerna protein menjadi polipeptida  dan  asam  amino  (Olivia 2006).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  efek  perasan  kering  kulit nanas  terhadap  perpanjangan  waktu perdarahan  dan  pembekuan  darah  pada tikus putih jantan, serta mengetahui dosis perasan  kering  kulit  nanas  yang  paling efektif  dalam  memperpanjang  waktu perdarahan dan pembekuan darah.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  kulit  nanas  madu varietas  Queen.  Kulit  nanas  diperoleh dari  Desa  Beluk,  Kecamatan  Belik, Kabupaten Pemalang, Jawa Tengah, pada bulan  Maret  2014  yang  diambil  secara acak sebanyak 60 buah. Bahan lain yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah
asetosal  sebagai  kontrol  positif,  aquades sebagai kontrol negatif.
Bahan  kimia  untuk  identifikasi kandungan  senyawa  kimia  adalah  asam nitrat  pekat,  air,  HCl  2N,  dan  amoniak 10.
Alat Alat yang digunakan untuk
pengeringan  kulit  nanas  yaitu  tabung reaksi, tube  sentrifuge DKC  1008T, blender,  kain  mori, beaker  glass,  freeze dryer,  dan  kulkas.  Peralatan  untuk  uji farmakologi  yaitu  kikir  ampul,  gunting bedah,  kertas  saring,  sonde, stopwatch, dan pipa kapiler.
Determinasi dan Identifikasi Tanaman Determinasi tanaman nanas
dilakukan  di  Laboratorium  Balai  Besar Penelitian  dan  Pengembangan  Tanaman Obat  dan  Obat  Tradisional  (B2P2TO2T) Tawangmangu,  Kabupaten  Karanganyar, Jawa Tengah.

## Pembuatan  Perasan  Kering  Kulit Nanas
Buah  nanas  dikupas  dan  diambil kulitnya.  Kulit  nanas  dicuci  bersih, dipotong kecil-kecil, kemudian di blender bertahap. Kulit nanas yang sudah diblender  kemudian  disaring  dengan kain mori untuk diambil sarinya (Winarti 2011).  Disimpan  selama  24 jam  dalam pendingin  pada  suhu  10°  C  agar  enzim mengendap.  Dimasukkan  ke  dalam sentrifuge  kemudian  disentrifuse  pada kecepatan  5000  rpm  selama  30  menit. Endapan  yang  diperoleh  dibekukan dalam freezer pada  suhu  -20°  C. Dikeringkan  dengan  alat  pengeringan
beku pada suhu -60° C dan tekanan 2,18 Torr,  lalu  diperoleh  perasan  kering  kulit nanas (Ishak 2012).

## Identifikasi  Kimia  Perasan  Kering Kulit Nanas
Pemeriksaan  organoleptis dilakukan meliputi bentuk, bau, warna, dan rasa.
Identifikasi protein (enzim bromelin) dilakukan dengan menambahkan  larutan asam  nitrat  pekat  dengan  hati-hati  ke dalam  larutan  enzim.  Setelah  dicampur terjadi  endapan  putih  yang  dapat berubah menjadi kuning apabila dipanaskan.  Reaksi  yang  terjadi  ialah nitrasi  pada  inti  benzena  yang  terdapat pada  molekul  protein  enzim  (Sudarmaji 1984).
Identifikasi flavonoid dilakukan dengan  menambahkan  5  ml  aquades pada  2  mg  perasan  kering,  dipanaskan selama  1  menit,  disaring  dan  diambil filtratnya.  Filtrat  diteteskan  di  atas kertas saring  lalu  diuapi uap  amonia. Positif mengandung  flavonoid  jika  terbentuk warna kuning pada kertas saring (Depkes 1987).
Identifikasi saponin
dilakukan dengan  mengekstraksi  0,5  g  perasan kering ke dalam tabung reaksi dengan 10 ml  air  panas.  Lalu  didinginkan  dan dikocok  kuat-kuat  selama  10  detik. Saponin  positif  bila  terbentuk  buih  yang mantap setinggi 1-10 cm pada penambahan asam klorida 2 N buih tidak hilang (Depkes 1977).

## Perhitungan  Dosis  Perasan  Kering Kulit Nanas
Penelitian  sebelumnya  menyatakan bahwa  ekstrak  buah  nanas  mampu memperlama  waktu  perdarahan  dan
koagulasi  pada  mencit  putih  jantan, sehingga dapat dijadikan sebagai antiagregasi  platelet dengan  dosis  50 mg/kg BB, 100 mg/kg BB, 200 mg/kg BB, 300 mg/kg BB, dan 400 mg/kg BB. Dosis yang  paling  efektif  dalam  penelitian tersebut  adalah  400  mg/kg  BB.  Maka, dipilih  dosis  tersebut  dan  divariasikan kembali (Rakasiwi 2013).
Dosis  yang  tersedia  adalah  dosis
untuk mencit sehingga harus
dikonversikan  terlebih  dahulu  menjadi dosis  tikus.  Faktor  konversi  dari  mencit dengan berat badan 20 g ke tikus dengan berat  badan  200  g  adalah  7,0  (Laurence & Bacharach 1964). Dosis perasan kering kulit nanas dibuat tiga variasi dosis yaitu 28 mg/200  g  BB,  56  mg/200  g  BB,  dan 112 mg/200 g BB.

## Pengujian In vivo
Hewan  uji  yaitu  25  ekor  tikus  putih jantan  ditimbang  dan  diberi  tanda pengenal.  Sebelum  percobaan  dimulai, tikus  diberi  pra  perlakuan  dengan diaklimatisasi selama 1 minggu.
Tikus  dibagi  menjadi  5  kelompok, masing-masing  kelompok  terdiri  dari  5 ekor:  kelompok  I diberikan  perasan kering kulit nanas dosis 28 mg/200 g BB; kelompok  II diberikan  perasan  kering kulit  nanas  dosis  56  mg/200  g  BB; kelompok III diberikan  perasan  kering kulit  nanas  dosis  112  mg/200  g  BB; kelompok IV diberikan asetosal dosis 3,7 mg/200  g  BB  (kontrol  positif);  kelompok V diberikan aquades (kontrol negatif).
Masing-masing  hewan  uji  sebelum diberi  perlakuan  dilakukan  pengukuran waktu perdarahan dan pembekuan darah tikus  terlebih  dahulu  pada  waktu  ke-0
(T0). Tikus  diistirahatkan  satu  hari dengan dipuasakan  makan  selama  16 jam  namun  tetap  diberi  minum. Perlakuan  diberi  setiap  pagi  selama  7 hari  secara oral  untuk  masing-masing kelompok.  Pada  hari  ketujuh  dicatat waktu  perdarahan  dan  pembekuannya (Th).
Pengukuran waktu pendarahan dilakukan  dengan  cara  melukai  ekor tikus  dengan  mengguntingnya  sepanjang 2  mm  dari  ujung  ekor. Stopwatch dijalankan  pada  saat  darah  pertama keluar.  Darah  yang  keluar  tiap  30  detik diserap  dengan  kertas  saring  tanpa menyentuh  luka.  Diamati  hingga  darah yang  keluar  berhenti.  Darah  berhenti ditandai dengan  berhentinya  kertas saring dalam menyerap darah, kemudian waktunya dicatat . Pengukuran waktu pembekuan darah  digunakan  pipa  kapiler  yang terlebih  dahulu  digoreskan  dengan  kikir ampul agar mudah dipatahkan.
Kemudian  pipa  kapiler  ditusukkan  pada vena  mata  dan  saat  darah  mulai  keluar segera jalankan stopwatch. Pada 30 detik pertama  pipa  kapiler  dipatahkan  pada goresan, pematahan
berikutnya dilakukan  setiap  45  detik. Stopwatch dihentikan  pada  saat  pipa  kapiler dipatahkan telah terbentuk benang fibrin dan waktunya dicatat.

## Analisis Hasil
Data  kuantitatif  pada  penelitian  ini adalah  penambahan  daya  tahan  dari waktu  lelah  sebelum  perlakuan  dengan waktu  lelah  setelah  perlakuan  pada kelompok  percobaan. Seluruh  data waktu  penghentian  perdarahan  dan
pembekuan  yang  diperoleh  dianalisis secara  statistik  dengan  One  Way  Anova. Tahap selanjutnya dilanjutkan dengan uji
Student-Newman-Keuls (SNK) untuk melihat  perlakuan  yang  paling  baik  di antara masing-masing kelompok.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi dan Identifikasi Tanaman Determinasi tanaman dilakukan untuk mengetahui kebenaran sampel yang digunakan dalam penelitian terkait dengan  ciri-ciri  morfologi  bahan  terkait dengan kepustakaan. Kunci determinasinya sebagai berikut : 1a________________________12. Ananas 1____________ Ananas comosus (L.) Merr.

## Identifikasi  Kimia  Perasan  Kering Kulit Nanas
Tujuan  identifikasi  kandungan  kimia adalah  untuk  mengetahui  zat-zat  yang terkandung dalam sediaan perasan kering kulit  nanas.  Perasan  kering  kulit  nanas mengandung  enzim  bromelin,  flavonoid,
dan saponin. Hasil uji kualitatif kandungan  kimia  perasan  kering  kulit nanas dapat dilihat pada Tabel 1.

## Hasil  Uji  Waktu  Perdarahan  dan Pembekuan Darah
Hasil  uji  waktu  perdarahan  dan pembekuan  darah  dibuat  rata-rata  untuk melihat  adanya  hubungan  antara  waktu pengamatan  dengan  waktu  perdarahan dan  pembekuan  darah.  Data  hasil pengamatan  waktu  perdarahan  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2 menunjukkan  bahwa  data hasil  pengamatan  waktu  perdarahan sesudah  perlakuan  lebih  lama  dari  pada waktu  perdarahan  sebelum  perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa perlakuan dengan  perasan  kering  kulit  nanas  28 mg/200  g  BB,  56  mg/200  g  BB,  112 mg/200 g BB, dan perlakuan asetosal 3,7 mg/200  g  BB  sebagai  kontrol  positif dapat memperpanjang waktu perdarahan.
Tabel 1. Hasil uji kualitatif kandungan kimia perasan kering kulit nanas
Kandungan kimia Hasil Pustaka Ket Protein (Enzim Bromelin) Endapan kuning Endapan kuning (Sudarmaji 1984) + Flavonoid Warna kuning pada kertas saring Warna kuning pada kertas saring (Depkes 1987) + Saponin Buih Buih (Depkes 1977) +
Tabel 2. Data hasil pengamatan waktu perdarahan
Kelompok Waktu Perdarahan (detik) Selisih (detik) T0 Th Kelompok  I 109,6 ±   8,14 169,2 ± 17,20 59,6 ± 21,09 b 90,4 ± 42,17 b,c 150,2 ± 19,01 d
112,0 ± 33,53 c 5,6 ±   4,28 a Kelompok II 123,6 ±   8,02 214,0 ± 42,91 Kelompok III 134,8 ± 21,64 285,0 ±   9,51 Kelompok IV 138,8 ± 20,28 250,8 ± 35,56 Kelompok V 136,6 ± 13,36 142,2 ± 14,18 Keterangan : Kelompok I = Perasan kering kulit nanas dosis 28 mg/200 g BB Kelompok II = Perasan kering kulit nanas dosis 56 mg/200 g BB Kelompok III = Perasan kering kulit nanas dosis 112 mg/200 g BB Kelompok IV = Asetosal dosis 3,7 mg/200 g BB (kontrol positif) Kelompok V = Aquades (kontrol negatif)
Gambar 1. Histogram selisih peningkatan waktu perdarahan.
Gambar  1 menunjukkan  histogram selisih  peningkatan  waktu  perdarahan sebelum dan sesudah perlakuan. Histogram  menunjukkan  kelompok  I dengan  dosis  perasan  kering  kulit  nanas 28 mg/200 g BB memiliki waktu rata-rata 59,6 detik. Kelompok II dosis 56 mg/200 g BB memiliki waktu rata-rata 90,4 detik.
Kelompok III dosis 112 mg/200 g BB memiliki  waktu  rata-rata  150,2  detik. Kelompok  IV  sebagai  kontrol  positif
memiliki  waktu  rata-rata  112  detik. Kelompok  V sebagai  kontrol  negatif memiliki waktu rata-rata 5,6 detik. Maka, dosis  yang  memiliki  efek  paling  baik sebagai  peningkat  waktu  perdarahan adalah  kelompok  III,  karena  memiliki selisih  waktu  rata-rata  perdarahan  paling besar, yaitu 150,2 detik.
Tabel 3. Data hasil pengamatan waktu pembekuan darah.
Kelompok Waktu Pembekuan (detik) Selisih (detik) T0 Th Kelompok I 53,8 ± 11,71 12,4 ± 14,93 48,6 ± 15,98 b 66,0 ± 31,28 b 105,0 ± 14,30 c
74,2 ± 26,96 b 18,2 ± 13,88 a Kelompok II 58,4 ±   9,21 124,4 ± 38,79 Kelompok III 53,0 ±   9,93 158,0 ± 18,32 Kelompok IV 61,2 ±   7,56 135,4 ± 24,38 Kelompok V 54,0 ± 15,86 72,2 ± 20,77 Keterangan : Kelompok I = Perasan kering kulit nanas dosis 28 mg/200 g BB Kelompok II = Perasan kering kulit nanas dosis 56 mg/200 g BB Kelompok III = Perasan kering kulit nanas dosis 112 mg/200 g BB Kelompok IV = Asetosal dosis 3,7 mg/200 g BB (kontrol positif) Kelompok V = Aquades (kontrol negatif)
Gambar 2. Histogram selisih peningkatan waktu pembekuan darah.
Tabel  3 menunjukkan  bahwa  data hasil  pengamatan  waktu  pembekuan sesudah  perlakuan  lebih  lama  dari  pada waktu  perdarahan  sebelum  perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa perlakuan dengan  perasan  kering  kulit  nanas  28 mg/200  g  BB,  56  mg/200  g  BB,  112 mg/200 g BB, dan perlakuan asetosal 3,7 mg/200  g  BB  sebagai  kontrol  positif dapat memperpanjang waktu perdarahan.  Adanya  efek  ditunjukkan oleh  waktu  perdarahan  dan  pembekuan darah  yang  semakin  panjang  setelah pemberian perlakuan pada hewan uji.
Gambar  2 menunjukkan  histogram selisih  peningkatan  waktu  pembekuan
darah  sebelum  dan  sesudah  perlakuan. Kelompok I memiliki waktu rata-rata 48,6 detik.  Kelompok  II  memiliki  waktu  rata- rata  66  detik.  Kelompok  III  memiliki waktu  rata-rata  105  detik.  Kelompok  IV sebagai  kontrol  positif memiliki  waktu rata-rata 74,2 detik. Kelompok V sebagai kontrol  negatif  memiliki  waktu  rata-rata 18,2  detik.  Maka,  dosis  yang  memiliki efek paling baik sebagai peningkat waktu pembekuan  adalah  kelompok  III,  karena memiliki selisih waktu rata-rata pembekuan darah paling besar, yaitu 105
detik.
Hasil data selisih peningkatan waktu perdarahan  dan  pembekuan  darah dikuatkan  dengan  uji  statistik  yang dianalisa  dengan  statistik  SPSS  18.  Hasil uji  SNK  untuk  waktu  perdarahan menunjukkan  kelompok  kontrol  negatif berbeda signifikan dengan semua kelompok  perlakuan.  Kelompok  kontrol positif berbeda signifikan dengan kelompok  I  (perasan  kering  kulit  nanas 28  mg/200  g  BB)  dan  III  (perasan  kering kulit  nanas  112  mg/200  g  BB),  tetapi tidak berbeda signifikan dengan kelompok  II  (perasan  kering  kulit  nanas 56 mg/200 g BB). Kelompok III ada beda signifikan  dengan  semua  kelompok perlakuan,  dan  memiliki  peningkatan waktu paling besar yaitu 150,2 detik.
Hasil uji SNK untuk waktu pembekuan  menunjukkan  kelompok kontrol negatif berbeda signifikan dengan semua  kelompok  perlakuan.  Kelompok kontrol positif  berbeda signifikan dengan kelompok  III  (perasan  kering  kulit  nanas 112  mg/200  g  BB),  tetapi  tidak  berbeda signifikan  dengan  kelompok  I  (perasan kering  kulit  nanas  28  mg/200  g  BB)  dan kelompok  II  (perasan  kering  kulit  nanas 56 mg/200 g BB). Kelompok III ada beda signifikan  dengan  semua  kelompok perlakuan,  dan  memiliki  peningkatan waktu paling besar yaitu 105,00 detik.
Kelompok  I  perasan  kering  kulit nanas  dengan  dosis  28  mg/200  g  BB, kelompok  II  perasan  kering  kulit  nanas dengan  dosis  56  mg/200  g  BB,  dan kelompok  III  perasan  kering  kulit nanas dengan dosis 112 mg/200 g BB memiliki perbedaan yang signifikan dengan
kontrol negatif, sehingga dapat disimpulkan  perasan  kering  kulit  nanas memberikan  efek  peningkatan  waktu perdarahan  dan  pembekuan  darah. Kelompok  yang  paling  efektif  dalam meningkatkan  waktu  perdarahan  dan pembekuan  darah  adalah  kelompok  III dengan  dosis  perasan  kering  kulit  nanas 112  mg/200  g  BB,  dilihat  dari  selisih peningkatan  waktunya  paling  besar.  Hal ini  diasumsikan  berkaitan    dengan kandungan enzim bromelin dan kandungan lainnya, seperti flavonoid dan saponin yang terdapat pada kulit nanas.
Kulit  nanas  pada  kelompok  III mempunyai efek yang paling baik karena mengandung enzim  bromelin  paling tinggi,  sehingga  perasan  kering  kulit nanas  dosis  112  mg/200  g  BB  aktivitas peningkatannya  lebih  besar  dibanding kelompok dosis yang lain.
Enzim  bromelin  merupakan  enzim proteolitik  yang  paling  penting  dalam kulit  nanas.  Enzim  bromelin  bekerja dengan cara memecah fibrinogen, fibrin, dan faktor lain yang dapat menyebabkan darah  membeku  (Olivia  2006).  Enzim bromelin juga dapat mencegah penggumpalan darah dengan
menghambat  faktor  X.  Jika  faktor  X dihambat,  maka  sintesis  protombin menjadi  trombin  juga  dicegah,  sehingga pembentukan  fibrin  terhambat  dan pembekuan  darah  menjadi  lebih  lama. Selain  itu,  bromelin  juga  menstimulasi perkembangan  plasmin,  dimana  fungsi plasmin adalah memecah fibrin sehingga menghambat  pembekuan  darah  (Kelly 1996).
Kelompok kontrol positif menggunakan  asetosal  dengan  dosis  3,7 mg/200 g BB. Asetosal secara nonselektif bekerja  kuat  menghambat  enzim COX  1 jika dikonsumsi dengan dosis yang tepat.
COX 1 bekerja memproduksi tromboksan-A2,  dimana  tromboksan-A2
adalah  penginduksi  kuat  terjadinya agregasi  platelet.  Penghambatan  COX  1 menyebabkan sintesis tromboksan menurun,  sehingga  menyebabkan  waktu perdarahan  menjadi  semakin  panjang. Penggunaan  asetosal  yang  tidak  tepat akan  menyebabkan  perubahan  efek dimana  asetosal bukan  lagi  hanya menghambat  COX  1,  tetapi  juga  akan menghambat  enzim  siklooksigenase  2 (COX  2)  yang  berhubungan  dengan respon inflamasi (Anderson 2001).
Kelompok  kontrol  negatif  tidak terjadi  peningkatan  yang  signifikan  pada waktu  perdarahan  dan  pembekuan darah, karena aquades
tidak mengandung  kandungan  senyawa  aktif yang  dapat  bekerja  dalam  meningkatkan waktu  perdarahan  dan  pembekuan darah,  sehingga  tidak  memberikan  efek peningkatan  yang  berarti  pada  tikus putih jantan.
Hasil pada penelitian ini menunjukkan bahwa kerja asetosal dosis
3,7  mg/200  g  BB  sebanding  dengan perasan  kering  kulit  nanas  dosis  56 mg/200  g  BB,  namun  berbeda  signifikan dengan  perasan  kering  kulit  nanas  dosis 112 mg/200 g BB.

## KESIMPULAN
Pertama,  perasan  kering  kulit  nanas yang  diberikan  secara  oral  dapat memperpanjang  waktu  perdarahan  dan pembekuan  darah  terhadap  tikus  putih jantan.
Kedua,  perasan  kering  kulit  nanas dosis 112 mg/200 g BB mempunyai efek paling  efektif  dalam  memperpanjang waktu perdarahan dan pembekuan darah dengan  rata-rata  peningkatan  waktu perdarahan 150,2  detik dan peningkatan waktu pembekuan darah 105,0 detik.

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson  PO,  Knoben  JE,  Troutman  WG. 2001. Handbook  of  Clinical  Drug Data. 11th Ed. New York: Mc Graw Hill. 19-20.
Dalimartha  S.  2000. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia. Jilid  II.  Bogor:  Trubus
Agriwidya. 45-48. [Depkes].  1977. Materia  Medika  Indonesia. Jilid I. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 144. [Depkes].  1987. Analisis  Obat  Tradisional. Jilid I. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik  Indonesia.  43- 53. Erukainure  O,  Ajiboye  JA,  Adejobi  RO, Okafor  OY,  Sunday  A.  2011. Protective effect of pineapple ( Ananas  comosus)  peel  extract  on alcohol- induced  oxidative  stress  in brain  tissues  of  male  albino  rats. A sian Pac J of Trop Dis. 1(1): 5-9.
Ishak MC. 2012. Pengaruh proses pengeringan dan imobilisasi terhadap  aktivitas  dan  kestabilan enzim  bromelain  dari  buah  nenas ( Ananas comosus (L). Merr) [Skripsi]. Makassar: Fakultas Pertanian Universitas Hasanuddin. Kelly GS. 1996. Bromelin: a literature review and  discussion  of  its  therapeutic applications. Alt  Med  Rev. 1(4): 243-257. Laurence DR, Bacharach AL. 1964. Evaluation of Drug Activities Farmacometris. New York: Academic Press. 71.
Lullman  H,  Ziegler  A,  Mohr  K,  Bieger  D.
2000. Color  Atlas  of  Pharmacology,
2nd  Ed.  New  York:  Thieme.
Stuttgart, p. 142-150. Olivia  V.  2006. Khasiat  Buah-buahan. Jakarta: Bina Usaha. 24-26.
Rakasiwi  M.  2013.  Efek  antiagregasi  platelet ekstrak  etanol  buah  nanas  ( Ananas comosus Merr)  pada  mencit  putih jantan  [Skripsi].  Medan:  Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara.
Sudarmaji.  1984. Prosedur  Analisa  Bahan Makanan  dan  Pertanian. Edisi  ke-4. Yogyakarta: Liberty. 41-43.
Winarti.  2011.  Penggunaan  ekstrak  buah nanas  masak  dan  muda  ( Ananas comosus (L).  Merr)  terhadap  waktu penggumpalan darah. [Skripsi]. Semarang: Universitas Muhammadyah Semarang. [WHO].  World  Health  Organization.  1989. Recommendations on Stroke Preventation, Diagnosis, and Therapy  Stroke. New  York:  World Health  Organization.  20:  1407-
1431.