Penulis Saat Egra 1 , Mardhiana 1 , Randy Patriawan 1 , Kartina 1 , Sudirman Sirait 1 , Harlinda Kuspradini 2
Afiliasi 1 Fakultas Pertanian, Universitas Borneo Tarakan, Indonesia
2 Fakultas Kehutanan, Universitas Mulawarman, Indonesia

## Kata kunci
 Antimikroba
 P. caudatum
 R. solanacearum
 S. palustris
 S. sobrinus
 Tumbuhan paku .

## Keyword
 Antimicrobial
 Pterdophyta
 P. caudatum
 R. solanacearum
 S. palustris
 S. sobrinus.
Diterima 1 Maret 2019
Direvisi 15 Maret 2019 Disetujui 30 Maret 2019
* Corresponding author Saat Egra email: saat.egra.shaumi@gmail.com

## ABSTRAK
Tanaman paku merupakan tanaman yang tumbuh subur dan liar di wilayah tropis, kehadirannya dalam dunia  pertanian  sebagai  gulma,  namun  di  sisi  lain  juga  bermanfaat  sebagai  tanaman  obat  (hortikultur). Kehadiran  tanaman  paku  sebagai  obat  diharapkan  menjadi  alternative  bahan  baru  dalam  pengobatan. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Perlindungan Tanaman, Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas  Borneo  Tarakan.  Sampel  yang  digunakan  yaitu  ekstrak  daun S.  Palustris dan P.  Caudatum dengan konsentrasi 2%, 1% dan 0,5%. kontrol positif pada penelitian ini yaitu chloramphenicol dan kontrol negatif  etanol  40%.  Variabel  yang  diamati  adalah  perhitungan  faktor  kelembaban,  persentase  rendemen dan  persentase  diameter  daerah  hambatan  (DDH).  Hasil  penelitian  menunjukkan  rendemen  ekstrak P. Caudatum 2,5% sedangkan S. Palustris 1.6%. Selain itu hasil DDH menampilkan bahwa ekstrak etanol daun S. palustris dan P. caudatum pada konsentrasi 0.5%, 1% dan 2% tidak mampu menghambat pertumbuhan R.  Solanacearum ,  tetapi  mampu  menghambat S.  sobrinus dengan  diameter  tertinggi  yaitu  13.7  mm  pada konsentrasi  2%.  Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan  menggunakan  pelarut  bertingkat  pada proses  ekstraksi  untuk  mengetahui  golongan  polaritas  senyawa  yang  berpengaruh  terhadapa  aktifitas penghambatan bakteri.

## ABSTRACT
Pteridophyta  is  plants  that  flourish  wildly  in  the  tropics.  The  pteridophyte  are  better  known  as weeds, otherwise agriculture knows it as a medicinal plants (horticulture). In the future, the expected to be an  alternative  new  ingredient  in  medicine  is  pterdophyta.  The  research  was  conducted  at  the  Plant Protection  Laboratory,  Department  of  Agrotechnology,  Faculty  of  Agriculture,  Borneo  Tarakan  University. The  samples  used  were S.  Palustris and P.  Caudatum leave  extracts  with  concentrations  of  2%,  1%  and 0.5%.  Positive  controls  in  this  study  were  chloramphenicol  and  negative  control  of  40%  ethanol.  The variables observed were the calculation of the moisture factor, the percentage of yield and the percentage of minimum inhibitory concentration (MIC). The results showed the yield of P. Caudatum extract 2.5% while S. Palustris 1.6%. In addition, the activity of MIC showed that the ethanol extract of the leaves of S. palustris and P.  caudatum at  concentrations  of  0.5%,  1%  and  2%  were  not  available  to  inhibit  the  growth  of R. Solanacearum , but were able to inhibit S. sobrinus with the highest diameter of 13.7 mm at concentration of 2%. Further research using multilevel solvents in the extraction process is needed to find out the polarity of compounds that affect bacterial inhibitory activity.
Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku ( Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum ) Terhadap Bakteri ( Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus )
(Antimicrobial Activity of Pteridophyte (Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum) Against Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus)
Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku ( Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum ) Terhadap Bakteri ( Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus )

## PENDAHULUAN
Kalimantan  merupakan  pulau  terbesar  di  Indonesia yang  beriklim  tropis  dengan  sumber  kekayaan  hayati yang  sangat  melimpah.  Keanekaragaman  hayati tersebut berpotensi untuk dijadikan sebagai tumbuhan obat,  insektisida  alami,  produksi  makanan  dan  minyak serta  produksi  barang-barang  kerajinan  tangan.  Salah satu  tumbuhan yang  tumbuh  subur  di  daerah  Tarakan adalah tumbuhan paku, karena tumbuhan paku mudah tumbuh  subur  di  daerah  dengan  lingkungan  yang lembab dan beriklim tropis (Arini dan Kinho 2012). Hal ini  memungkinkan  tumbuhan  paku  tumbuh  liar sehingga  keberadaanya  dianggap  sebagai  gulma  bagi pertanian  seperti  tumbuhan  paku P.  caudatum .  Disisi lain,  sebagian  tanaman  paku  merupakan  tanaman hortikultura  yang  bermanfaat  sebagai  sayuran, tanaman  hias,  kerajinan  tangan  dan  obat  tradisional. Padahal  fungsi  utama  tanaman  hortikultura  yang dikenal  adalah  sebagai  penyediaan  pangan,  ekonomi, kesehatan, dan sosial budaya (Zulkarnain 2010).
Kalimantan  merupakan  pulau  terbesar  di  Indonesia yang  beriklim  tropis  dengan  sumber  kekayaan  hayati yang  sangat  melimpah.  Keanekaragaman  hayati tersebut berpotensi untuk dijadikan sebagai tumbuhan obat,  insektisida  alami,  produksi  makanan  dan  minyak serta  produksi  barang-barang  kerajinan  tangan.  Salah satu  tumbuhan yang  tumbuh  subur  di  daerah  Tarakan adalah tumbuhan paku, karena tumbuhan paku mudah tumbuh  subur  di  daerah  dengan  lingkungan  yang lembab dan beriklim tropis (Arini dan Kinho 2012). Hal ini  memungkinkan  tumbuhan  paku  tumbuh  liar sehingga  keberadaanya  dianggap  sebagai  gulma  bagi pertanian  seperti  tumbuhan  paku P.  caudatum .  Disisi lain,  sebagian  tanaman  paku  merupakan  tanaman hortikultura  yang  bermanfaat  sebagai  sayuran, tanaman  hias,  kerajinan  tangan  dan  obat  tradisional. Padahal  fungsi  utama  tanaman  hortikultura  yang dikenal  adalah  sebagai  penyediaan  pangan,  ekonomi, kesehatan, dan sosial budaya (Zulkarnain 2010).
Tumbuhan paku yang memiliki aktivitas antioksidan dan  antibakteri  karena  adanya  senyawa  metabolit sekunder  yang  ada  pada  tumbuhan  tersebut,  yaitu alkaloid,  flavonoid,  saponin  dan  steroid  (Khoiri  2009). Ibrahim et  al. (2011)  melaporkan  bahwa  senyawa triterpenoid,  flavonoid,  steroid  dan Shikimic  acids terdapat  pada  tumbuhan  paku Adiantum  capillus . Sedangkan  pada  tumbuhan  kelakai  ( Stenochlaena palustris )  juga  mengandung  alkaloid,  steroid,  dan flavonoid  yang  dapat  dijadikan  sebagai  antibakteri
(Anggraeni,  Erwin  2006).  Kemampuan  sebagai antibakteri  ditunjukkan  oleh  ekstrak  metanol  paku sayur ( Diplazium esculentum ) dengan konsentrasi 100% membentuk diameter daerah hambat pada pertumbuhan  bakteri Staphyloccus  aureus sebesar 13,33 mm dan Escherichea coli sebesar 9.20 mm secara in  vitro (Husna et  al .  2015).  Selain  itu,  ekstrak  etanol daun  ( Stenochlaena  palustris )  memiliki  aktivitas antibakteri terhadap Salmonella thypi dan Staphylococcus  aureus dengan  diameter  daerah hambat secara berturut-turut 15.20 mm dan 18.53 mm pada konsentrasi 12.5% (Rostinawati et al . 2015).
Tumbuhan  paku Stenochlaena  palustris dan Pteridium  caudatum diduga  memiliki  potensi  yang sama  sebagai  antibacterial  agent.  Bakteri  yang digunakan dalam penelitian ini adalah bakteri Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus . R. solanacearum merupakan  penyebab  penyakit  layu bakteri  yang  menginfeksi  berbagai  jenis  tanaman terutama  famili  Solanaceae,  seperti  penyakit  layu bakteri pada tanaman cabai, tanaman tomat, kentang, dan  tembakau.  Infeksi  bakteri  tersebut  dapat mengakibatkan  kegagalan panen  pada  tanaman  tomat sampai 100% (Adeputri et al . 2016), cara mengendalikan  penyakit  tanaman  tersebut  petani sangat tergantung dengan pestisida kimia. Penggunaan pestisida  kimia  secara  berlebihan  akan  menyebabkan dampak negatif pada lingkungan, oleh karena itu untuk mengurangi  efek  negatif  dari  senyawa  pestisida  kimia perlu  dikembangkan  penggunaan  pestisida  nabati. Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada tumbuhan selain dimanfaatkan sebagai obat tradisional juga dapat dimanfaatkan sebagai bahan aktif pestisida nabati (Saifuddin 2014).
Pestisida  nabati  merupakan  pestisida  yang  aman terhadap  lingkungan  dan  menghasilkan  produk pertanian  yang  sehat  karena  senyawa  kimia  yang  ada pada  pestisida  nabati  berasal  dari  tumbuhan.  Sebuah penelitian  menunjukkan  adanya  potensi  pestisida nabati  pada  tumbuhan  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta L.)  pada  konsentrasi  100%  yang  mampu  menghambat pertumbuhan R.  solanacearum , E.  coli dan S.  aureus dengan  diameter  daerah  hambat  berturut-turut sebesar  18.26  mm,  17.06  mm  dan  21.8  mm  secara in vitro (Anggelika et al. 2014).
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada tumbuhan  paku  selain  diduga  memiliki  potensi  untuk dijadikan  sebagai  pestisida  nabati  juga  berkhasiat sebagai obat untuk kesehatan gigi dan mulut manusia.
Egra et al.
Oleh  karena  itu,  tumbuhan  paku S.  palustris dan P. caudatum diduga memiliki potensi untuk menghambat S. sobrinus yang merupakan salah satu mikroorganisme yang  banyak  ditemukan  di  rongga  mulut  dan merupakan bakteri penyebab awal proses karies gigi. S. sobrinus merupakan  bakteri  penyebab  karies  gigi karena  mampu  menghasilkan  asam  (asidogenik)  dan asam  laktat,  selain  itu  bakteri  ini  juga  mampu  hidup pada  lingkungan  asam  dan  anaerobik  serta  memiliki kemampuan untuk melekat pada permukaan gigi.
Kegunaan  dan  khasiat  yang  diperoleh  dari  berbagai jenis  tumbuhan  paku  sangat  banyak  terutama  di manfaatkan  oleh  masyarakat  sebagai  obat  tradisional untuk  menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit, karena  tumbuhan  ini  mudah  didapatkan  oleh masyarakat  dan  tidak  memiliki  efek  samping  yang membahayakan  kesehatan.  Namun  sejauh  ini  masih sedikit  penelitian  yang  mengungkapkan  aktivitas antibakteri  dari  ekstrak  daun  paku S.  palustris dan P. caudatum ,  sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  untuk mengetahui  potensi  dari  ekstrak  daun S.  palustris dan P. caudatum yang dapat menghambat pertumbuhan R. solanacearum dan S. sobrinus.

## METODE

## Alat dan Bahan
Bahan  baku  diambil  di  lahan  Hutan  Pendidikan Universitas Borneo Tarakan. Bahan lain yang digunakan adalah  aquades,  etanol,  mikroba  S.  sobrinus  dan  R. solanacearum,  nutrient  agar  (Difco),  chloramphenicol, glukosa  (Merck).  Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  spektrofotometer  model  Shimadzu UV Vis 1200 (Shimadzu co, Jepang), evaporator (Eyela, Tokyo), shaker, oven, autoclave model All Americans.

## Persiapan Sampel
Sampel tanaman paku (S. palustris dan P. caudatum) dikumpulkan  yang  terdiri  dari  seluruh  bagian  daun. Selanjutnya  sampel  dipotong-potong  agar  terbagi menjadi  bagian  yang  lebih  kecil  0.5  cm  agar  mudah dalam  proses  pengeringan.  Pengeringan  sampel dilakukan  di  oven  pada  suhu  39 O C  selama  3  x  24  jam. Sampel yang telah kering kemudian dihaluskan dengan blender untuk menghasilkan serbuk kasar. Perendaman dilakukan dengan etanol.

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Bahan  utama  yang  digunakan  untuk  pembuatan media  pertumbuhan  bakteri  adalah  nutrient  agar
(DIFCO).  Media  pertumbuhan  bakteri  dibuat  dengan cara mencampur 20 g nutrient agar, glukosa 10 g, dan aquades  1000  ml  dan  dididihkan  sampai  melarut sempurna,  dimasukkan  ke  dalam  botol  untuk disterilisasi dengan autoclave  pada suhu 121 o C selama 15  menit.  Pengujian  antimikroba  dilakukan  dengan menggunakan metode difusi agar sumuran (Kuspradini dkk, 2012). Dalam pengujian ini sebanyak 20 ml media NA  dituangkan  ke  dalam  Petridish  yang  sudah disterilkan  selama  15 menit  dengan  temperatur  121 o C dalam  autoclave.  Setelah  itu  pada  keadaan  aseptik (dalam  laminar  flow)  biarkan  media  mengeras, kemudian  dilabur  dengan  suspensi  bakteri  dengan densitas  setera  dengan  10 6 cells/ml  (standar  0.5 McFarland)  sebanyak  100  µl  kemudian  diratakan dengan  menggunakan  kaca  perata  dan  biarkan mengering  selama  ±  60  menit.  Selanjutnya  ekstrak sampel diuji dalam beberapa konsentrasi (0.5%, 1% dan 2%)  untuk  mengetahui  efektivitas  peningkatan konsentrasi  pada  aktivitas  penghambatan  terhadap mikroba  uji  minimum.  Kontrol  positif  yang  digunakan adalah  Chloramphenicol  dengan  dosis  10  µg  dan kontrol negatif yang digunakan adalah aseton. Aktifitas antimikrobial  ditandai  dengan  adanya  zona  hambat disekitar  sumuran  yang  mengandung  ekstrak,  dengan angka lebih besar dari 8 mm dan dilakukan sebanyak 3 kali ulangan (Kuspradini 2012).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Pada  penelitian  ini  telah  dilakukan  pengamatan mengenai  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun tumbuhan paku (Pteridophyta) terhadap R. solanacearum dan S.  sobrinus secara in  vitro . Parameter  yang  diamati  yaitu  faktor kelembaban  (FK), persentase rendemen, dan persentase penghambatan. Perhitungan  faktor  kelembaban  (FK)  dilakukan  setelah memperoleh  nilai  berat  kering  tanur  dari  sampel  yang digunakan. Perhitungan ini bertujuan untuk mengetahui  besarnya  kandungan  air  di  dalam  bahan. Sampel  daun  segar S.  palustris dan P.  caudatum yang masing-masing  berat  awal  1  g,  diperoleh  factor kelembaban  daun S.  palustris yaitu  0.37  dan P. caudatum yaitu 0.37.

## Persentase Rendemen
Proses  ekstraksi  daun S.  palustris dan P.  caudatum dilakukan  menggunakan  metode  maserasi.  Hasil
Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku ( Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum ) Terhadap Bakteri ( Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus )
perhitungan  persentase  rendemen  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil rendemen ekstrak Sampel Bobot awal (g) Bobot ekstrak (g) Rendemen (%) S. palustris 32.97 0.51 1.6 P. caudatum 56.49 1.41 2.5
Hasil rendemen menunjukkan bahwa jumlah ekstrak etanol P.  caudatum lebih  besar  (2.5%)  dibandingkan dengan daun S. palustris (1.6%). Hal ini diduga semakin tinggi  nilai  rendemen  yang  dihasilkan  menandakan jumlah ekstrak yang  dihasilkan semakin banyak. Selain itu juga dipengaruhi oleh jenis pelarut yang digunakan, semakin  polar  pelarut  yang  digunakan  maka  akan semakin banyak senyawa yang akan terekstrak.

## Persentase Penghambatan
Pengamatan aktifitas antimikroba dilakukan dengan cara  mengukur  diameter  daerah  hambat  di  sekitar sumuran yang mengandung ekstrak dengan menggunakan mistar. Perhitungan persentase penghambatan  ditentukan  berdasarkan  daya  hambat relatif  terhadap  kontrol  positif.  Hasil  perhitungan persentase penghambatan dapat dilihat pada Tabel 2.
Persentase  penghambatan  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun S.  palustris dan P.  caudatum tidak memiliki  daya  hambat  terhadap R.  solanacearum . Tetapi  kontrol  positif  pada R.  solanacearum menghambat 100% (rata-rata DDH 45 mm). Sedangkan pada S.  sobrinus menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun S. palustris dan P.  caudatum memiliki  aktivitas antibakteri.  Ekstrak  daun S.  palustris mampu menghambat S.  sobrinus pada  konsentrasi  0.5%,  1% dan  2%  dengan  nilai  persentase  hambat  secara berturut-turut 18.8%, 20.9% dan 26.5% dengan kontrol positif  100%  (rata-rata  DDH  39.2  mm).  Sedangkan ekstrak P. caudatum pada konsentrasi 0.5%, 1% dan 2% dengan  nilai  persentase  hambat  secara  berturut-turut 22.9%,  29.7%  dan  37.7%  dengan  kontrol  positif  100% (rata-rata DDH 36.3 mm).

## Pembahasan Perhitungan Faktor Kelembaban
Faktor  kelembaban  daun S.  palustris dan P. caudatum menunjukkan  nilai  yang  sama  yaitu  0.37. Faktor  kelembaban  dalam  suatu  bahan  sangat diperlukan  dalam  suatu  ekstrak  tanaman  karena penetapan  aktivitas  air  memberikan  batasan  minimal besarnya  kandungan  air  dalam  bahan.  Menurut Isnawati, Arifin (2006) kadar air yang disyaratkan untuk proses ekstraksi tidak boleh melebihi 10% karena dapat memicu  pertumbuhan  mikroorganisme.  Menurut Susiani et  al .  (2017)  simplisia  yang  ditumbuhi  kapang dan  jamur  akan  berpengaruh  pada  zat  aktif  yang terkandung  di  dalamnya.  Oleh  karena  itu  proses pengeringan  dilakukan  sampai  daun  dengan  kadar  air rendah  yang  diindikasi  mudah  diremukkan.    Menurut Cahyono  (2011)  bahan  yang  mudah  meremah  atau mudah  patah  setelah  pengeringan  memiliki  kadar  air rendah.
Daun  dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan  di udara  terbuka  pada  suhu  kamar  yang  terlindung  dari sinar  cahaya  matahari.  Hal  ini  dilakukan  untuk menghindari  kerusakan  kandungan  senyawa  yang  ada dalam  suatu  simplisia  yang  mempunyai  aktivitas antioksidan  dan  antibakteri.  Hasil  penelitian  Luliana et al .  (2016)  pengeringan  simplisia  daun  ( Melastoma malabathricum L.) dengan cara pengeringan angin pada suhu kamar memiliki antioksidan tertinggi yaitu 54.60% dibandingkan  dengan  cara  pengeringan  oven  pada suhu  40°C  (52.76%),  pengeringan  sinar  matahari langsung  (38.06%),  pengeringan  sinar  matahari  tidak langsung  (49.19%)  dan  sampel  segar  (35.79%).  Hal  ini dikarenakan  senyawa  antioksidan  dan  flavonoid bersifat sensitif terhadap cahaya dan panas.

## Persentase Rendemen
Perhitungan  persentase  rendemen  bertujuan  untuk mengetahui  berapa  jumlah  simplisia  yang  diperlukan untuk  ekstraksi  agar  diperoleh  sejumlah  ekstrak  yang diinginkan.  Berdasarkan  hasil  perhitungan  yang memiliki  nilai  persentase  rendemen  yang  tertinggi terdapat  pada  ekstrak  etanol  daun P.  caudatum yaitu Tabel 2. Hasil perhitungan persentase penghambatan
Nama Tumbuhan Bagian Persentase Penghambatan (%) Bakteri R. solanacearum Bakteri S. sobrinus 2% 1% 0,5% 2% 1% 0,5% S. palustris Daun 0% 0% 0% 26.5 20.9 18.8 P. caudatum Daun 0% 0% 0% 37.7 29.7 22.9
2,5%  sedangkan  daun S.  palustris yaitu  1,6%.  Hal  ini diduga  karena  bobot  simplisia  yang  digunakan  pada daun P.  caudatum lebih  besar  (56.49  g)  sedangkan daun S. palustris (32.97 g). Menurut Irsyad (2013) hasil rendemen  dapat  dijadikan  acuan  untuk  mengetahui jumlah  simplisia  yang  dibutuhkan  untuk  pembuatan sejumlah tertentu ekstrak kental. Selain itu, penentuan rendemen  juga  berfungsi  untuk  mengetahui  kadar metabolit  sekunder  yang  terekstrak  oleh  pelarut  yang digunakan (Ukieyanna 2012).
Menurut Febrina et al . (2015) metode ekstraksi yang digunakan  merupakan  salah  satu  faktor  yang  akan mempengaruhi  rendemen  suatu  ekstrak.  Ekstraksi menggunakan  pelarut  terdiri  dari  cara  dingin,  meliputi maserasi,  perkolasi  dan  cara  panas  meliputi  refluks, soxhletasi, infus, dekoh, dan digesti. Sampel S. palustris dan P. caudatum diekstraksi dengan metode maserasi. Maserasi  dilakukan  dengan  merendam  simplisia menggunakan  pelarut  dengan  pengadukan  pada  suhu ruang. Metode maserasi dipilih sebagai proses ekstraksi karena  metode  ini  merupakan  metode  ekstraksi  cara dingin, sehingga dapat mencegah terurainya metabolit yang tidak tahan dengan pemanasan.
Ekstraksi  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut tunggal yaitu etanol. Menurut Dia et al . (2015) pelarut etanol memiliki polaritas yang tinggi yaitu 4,3 sehingga dapat  mengekstrak  senyawa  yang  bersifat  polar, diantaranya  senyawa  fenolik,  steroid,  terpenoid, alkaloid  dan  glikosida.  Selain  itu,  etanol  dapat bercampur  dengan  air  pada  segala  perbandingan, absorbsinya baik, netral, dan tidak beracun (Anggraeni, Erwin 2015).

## Persentase Penghambatan
Metode  yang  digunakan  pada  pengujian  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun S.  palustris dan P. caudatum adalah metode difusi agar (sumuran), seperti yang  telah  dilakukan  (Kuspradini  2012).  Aktivitas penghambatan  ekstrak S.  palustris dan P.  caudatum dilihat  dengan  terbentuknya  zona  hambat  (zona bening)  disekitar  sumuran  setelah  diinkubasi  selama 18-24  jam  pada  suhu  37°C.  Perhitungan  persentase penghambatan  yang  digunakan  sebagai  kontrol  positif yaitu Chloramphenicol ,  karena  berspektrum  luas  yang efektif  untuk  menghambat  bakteri  Gram  positif  dan Gram  negatif.  Menurut  Olson  (2004)  mekanisme  dari Chloramphenicol yaitu  menghambat  sintesis  protein, mencegah  ujung  aminoasil  t-RNA  bergabung  dengan peptidil  transferase.  Sedangkan  kontrol  negatif  yang digunakan  yaitu  etanol  40%  untuk  mengetahui  ada tidaknya  pengaruh  pelarut  terhadap  pertumbuhan R. solanacearum dan S.  sobrinus .  Sehingga  dapat diketahui bahwa yang mempunyai aktivitas antibakteri adalah  zat  uji  bukan  pelarut.  Hasil  uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  daun S.  palustris dan P.  caudatum terhadap R. solanacearum diamati setelah inkubasi 18- 24 jam dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1.  menunjukkan  bahwa  ekstrak S.  palustris dan P. caudatum tidak dapat menghambat pertumbuhan R.  solanacearum .  Hal  ini  diduga  karena senyawa  aktif  pada  ekstrak  daun S.  palustris dan P. caudatum sebagai  antibakteri  jumlahnya  sedikit. Heriyati et  al .  (2016)  melaporkan  semakin  tinggi senyawa  metabolit  sekunder  maka  kemampuan penghambatan  meningkat  terhadap  pertumbuhan
Gambar  1. DDH  ekstrak S.  palustris dan P.  caudatum pada  konsentrasi  2%,  1%  dan  0.5%  terhadap  bakteri R. solanacearum
Tabel 2. Hasil perhitungan persentase penghambatan
Nama Tumbuhan Bagian Persentase Penghambatan (%) Bakteri R. solanacearum Bakteri S. sobrinus 2% 1% 0,5% 2% 1% 0,5% S. palustris Daun 0% 0% 0% 26.5 20.9 18.8
Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku ( Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum ) Terhadap Bakteri ( Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus )
33
bakteri.  Anggelika et  al .  (2014)  menunjukkan  ekstrak tumbuhan  petikan  ( Euphorbia  hirta L.)  dengan konsentrasi  100%  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri R.  solanacearum sebesar  18.26  mm.  Menurut Firmansyah  (2015)  senyawa  bioaktif  dikatakan mempunyai  aktivitas  yang  tinggi  terhadap  mikroba apabila  mempunyai  nilai  konsentrasi  penghambatan mikroba  yang  terendah,  tetapi  mempunyai  diameter penghambatan  yang  besar.  Berdasarkan  hasil  uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun S.  palustris dan P. caudatum terhadap S.  sobrinus dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Gambar  2  menunjukkan  hasil  positif  dengan terbentuknya  zona  hambat  disekitar  sumuran  pada S. sobrinus yang  berisi  ekstrak S.  palustris dan P. caudatum .  Hal  ini  disebabkan  oleh  keberadaan metabolit  sekunder  sehingga  memberikan  pengaruh terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji.  Kandungan metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  tumbuhan paku secara umum adalah alkaloid, flavonoid, saponin, dan  steroid  (Khoiri  2009).  Menurut  Shirotake  (2014) mekanisme zat antimikroba bekerja secara ekstraseluler  dan  intraseluler.  Ekstrakseluler  dengan cara  menghambat  sintesis  dinding  sel,  menurunkan permeabilitas  membran  sel  dan  menurunkan  fungsi asam  nukleat.  Intraseluler  dengan  cara  menghambat sintesis  protein  dan  sintesis  asam  folat.  Aktivitas antibakteri  terdiri  dari  2  jenis  yaitu  aktivitas bakteriostatik yang bersifat menghambat pertumbuhan bakteri dengan menginfeksi komponen yang dibutuhkan untuk berkembang biak, seperti mensintesis  protein,  mengganggu  sintesis  DNA  dan menurunkan  permeabilitas  membran  sel.  Sedangkan aktivitas  bakterisidal  yaitu  menghambat  pembentukan
dinding sel dan bersifat toksik pada sel bakteri (Pratiwi 2017).
Menurut  Nurjanah et  al. (2018)  uji  aktivitas antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  dan metode  pengenceran.  Metode  difusi  yaitu  mengukur diameter  zona  bening  oleh  suatu  senyawa  dalam ekstrak.  Metode  difusi  dilakukan  dengan  metode  agar sumuran.  Sedangkan  metode  pengenceran  yaitu senyawa  antibakteri  diencerkan  dari  berbagai  macam konsentrasi  kemudian  masing-masing  konsentrasi ditambahkan  suspensi  bakteri  uji  dalam  dalam  media cair.  Setelah  itu  diinkubasi  selama  18-24  jam.  Oleh karena  itu,  hasil  uji  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) menunjukkan bahwa konsentrasi 11% menghambat pertumbuhan bakteri S. mutans dan pada konsentrasi 16% menghambat pertumbuhan bakteri S. sanguinis .  Kemudian  konsentrasi  yang  menghambat bakteri  tersebut  dikultur  ulang  pada  media  cair  tanpa penambahan  bakteri  uji  dan  senyawa  antibakteri.  Hal ini  dilakukan  untuk  mengetahui  Konsentrasi  Bunuh Minimum  (KBM).  Hasil  uji  KBM  menunjukkan  bahwa daun  kembang  bulan  ( Tithonia  diversifolia )  pada bakteri S. mutans bersifat bakterisidal pada konsentrasi 11% karena media cair terlihat jernih setelah inkubasi, sedangkan S.  sanguinis bersifat  bakteriostatik  karena pada  konsentrasi  16%  masih  terdapat  pertumbuhan bakteri pada cawan petridish.
Rikomah et  al. (2017)  aktivitas  bakteriostatik ditunjukkan dengan adanya bintik putih di daerah zona bening yang diduga sebagai koloni bakteri. Oleh karena itu, dalam penelitian ini ekstrak etanol daun tumbuhan S.  palustris dan P.  caudatum bersifat  bakterisidal karena  tidak  ada  bintik  putih  di  daerah  zona  bening. Daun tumbuhan S. palustris dan P. caudatum memiliki
a. S. palustris b. P. caudatum
Gambar 2. DDH  ekstrak S.  palustris dan P.  caudatum pada  konsentrasi  0.5%,  1%  dan  2%  terhadap  bakteri S. sobrinus.
Egra et al. aktivitras antibakteri karena adanya senyawa flavonoid yang  membentuk  senyawa  kompleks  dengan  protein ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga  dapat  merusak membran  sel  bakteri  dan  diikuti  dengan  keluarnya senyawa  intraseluler  (Heriyati et  al. 2016).  Saponin yang  terkandung  dapat  menurunkan  tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas  atau  kebocoran  sel  dan  mengakibatkan senyawa  intraseluler  akan  keluar  (Nuria et  al. 2009). Kusumawati  (2015)  melaporkan  saponin  bekerja sebagai  antimikroba  dengan  menganggu  stabilitas membran  sel  bakteri  sehingga  menyebabkan  sel bakterilisis.  Hal  ini  menyebabkan  sitoplasma  bocor sehingga  senyawa  intraseluler  keluar  dari  sel  yang mengakibatkan kematian sel.
Husna et  al. (2015)  senyawa  alkaloid  memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri  dengan  menganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  utuh kemudian  menyebabkan  kematian  sel.  Lamothe et  al . (2009)  melaporkan  mekanisme  kerja  alkaloid  yaitu melalui  penghambatan  sintesis  dinding  sel  yang  akan menyebabkan  lisis  pada  sel  sehingga  sel  akan  mati. Mekanisme  steroid  sebagai  antibakteri  berhubungan dengan  membran  lipid  dan  sensitivitas  terhadap komponen  steroid  yang  menyebabkan  kebocoran (Madduluri et al. 2013).
Berdasarkan dengan nilai persentase penghambatan pada konsentrasi 2% menunjukkan ekstrak etanol daun S.  palustris (26.5%)  dan P.  caudatum (37.7%)  lebih besar  dibandingkan  dengan  konsentrasi  0.5%  dan  1%. Hal  ini  menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi  akan semakin besar diameter daerah hambat pada sumuran. Menurut  Ajizah  (2004)  peningkatan  konsentrasi  suatu ekstrak  akan  meningkatkan  kadar  senyawa  metabolit sekunder  dalam  penghambatan  pertumbuhan  bakteri. Selain itu, besar kecilnya diameter daerah hambat yang terbentuk  dapat  pula  dipengaruhi  oleh  mutu  ekstrak daun.  Faktor  yang  mempengaruhi  mutu  ekstrak  daun yaitu  faktor  biologi  dan  faktor  kimia.  Faktor  biologi meliputi  spesies  tanaman,  lokasi  tanaman  asal,  waktu pemanenan,  penyimpanan  bahan  baku,  umur  serta bagian  tanaman  yang  digunakan.  Sedangkan  faktor kimia  terdiri  dari  faktor  internal  seperti  senyawa  aktif dalam  bahan,  komposisi  kualitatif  senyawa  aktif,  dan kadar  total  rata-rata  senyawa  aktif.  Faktor  eksternal seperti metode ekstraksi, jenis pelarut yang digunakan, kandungan  logam  berat,  ukuran  kekerasan  dan kekeringan bahan (Maradona 2013).
Berdasarkan  hasil  analisis  diameter  daerah  hambat R.  solanacearum menunjukkan  pengaruh  yang  tidak nyata  terhadap  semua  perlakuan  rerata  diameter daerah  hambat.  Sedangkan  pada S.  sobrinus menunjukkan  pengaruh  yang  sangat  nyata  terhadap semua  perlakuan  rerata  diameter  daerah  hambat.  Hal ini diduga karena bakteri Gram negatif dan Gram positif mempunyai  dinding  sel  yang  berbeda  susunan kimianya.  Perbedaan  lapisan  dinding  sel  bakteri  Gram positif dan Gram negatif.
R.  solanacearum merupakan  bakteri  Gram  negatif yang memiliki struktur dinding sel yang lebih kompleks sehingga senyawa terkandung pada ekstrak tidak dapat merusak dinding sel pada R. solanacearum . Kandou dan Pandiangana  (2018)  bakteri  Gram  negatif  mempunyai lapisan  dinding  sel  yaitu  lipoprotein,  lipopolisakarida, dan  peptidoglikan.  Husna et  al. (2015)  menyatakan bakteri  Gram  negatif  memiliki  sistem  seleksi  terhadap zat-zat  asing  yaitu  pada  lapisan  lipopolisakarida  dan lapisan  selaput  luar  yang  terletak  diluar  lapisan peptidoglikan  pada  bakteri  Gram  negatif  berfungsi mencegah  kebocoran  dari  protein  periplasma  dan melindungi sel.
Wahyuni et  al. (2016)  porin  yang  terkandung  pada membran  terluar  bakteri  Gram  negatif  menyebabkan molekul-molekul  komponen  ekstrak  sulit  masuk  ke dalam sel bakteri. Hal ini disebabkan karena perbedaan sifat  antara  porin  dan  ekstrak.  Porin  bersifat  hidrofilik sedangkan ekstrak bersifat hidrofobik. Akibatnya dalam kondisi  demikian  bakteri  dapat  bertahan  hidup, memperbanyak  diri  dan  mampu  menekan  produksi metabolit  sitotoksik  sel  fagosit  yang  menyebabkan terjadinya deaktivasi makrofag melawan infeksi bakteri tersebut.  Sedangkan S.  sobrinus merupakan  bakteri Gram  positif  yang  memiliki  struktur  dinding  sel  yang lebih sederhana, sehingga senyawa yang terdapat pada ekstrak  lebih  mudah  merusak  dinding  sel  bakteri. Husna et  al .  (2015)  melaporkan  dinding  sel  bakteri Gram  positif  hanya  tersusun  dari  satu  lapisan  yaitu lapisan peptidoglikan yang relatif tebal.

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun S.  palustris dan  daun P. caudatum memiliki  kemampuan  untuk  menghambat bakteri S.  sobrinus pada  kosentrasi  2%  dengan diameter 13.7 mm, namun tidak mampu menghambat pertumbuhan R. solanacearum.
Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku ( Stenochlaena palustris dan Pteridium caudatum ) Terhadap Bakteri ( Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus ) 35 UCAPAN TERIMA KASIH Penghargaan setinggi-tingginya kepada
Laboratorium  Kimia  Hasil  Hutan,  Fakultas  Kehutanan, Universitas  Mulawarman  yang  telah  menyumbangkan bakteri  demi  menunjangnya  penelitian  ini.  Ucapan terima  kasih  juga  kepada  seluruh  tim  Natural  Product Chemistry (Ana, Rofin, Hartini, Ningrum, Wanda)

## DAFTAR PUSTAKA
Adeputri  E,  Rustikawati,  Suryati  D,  Herison  C.  2016. Penapisan  tiga  puluh  tujuh  genotif  tomat  dan seleksi primer RAPD untuk toleransi terhadap layu bakteri  ( Ralstonia  solanacearum ). Akta  agrosia. 19(1): 28-42.
Ajizah  A.  2004.  Sensitivitas Salmonella  fhypimurium terhadap  ekstrak  daun Psidium  guajava L. Bioscientiae. 1(1): 31-38.
Anggelika,  Suprihadi,  Pujiyanto.  2014.  Uji  aktifitas antibakteri  ekstrak  tumbuhan  Euphorbia  thirta  L. terhadap Ralstonia solanacearum, Escherichia coli, dan Staphylococcus aureus secara in vitro. Biologi. 3(2): 49-58.
Anggraeni D, Erwin. 2006. Uji fitokimia dan uji ekstrak daun  kelakai  ( Stenochlaena  palustris ).  Di  dalam: Prosiding Seminar Tugas Akhir Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  2015. Universitas Mulawarman, Samarinda, Juni 2015. Arini  DID,  Kinho  J.  2012.  Keragaman  jenis  tumbuhan paku  (Pteridophyta)  di  Cagar  Alam  Gunung Ambang Sulawesi Utara. Balai Penelitian
Kehutanan Manado. 2(1): 17-39.
Cahyono  B,  Huda  MDK,  Limantara  L.  2011.  Pengaruh proses pengeringan rimpang temulawak ( Curcuma xanhorriza Roxb)  terhadap  kandungan  dan komposisi kurkuminoid. Reaktor. 13(3): 165-171. Dia  SPS,  Nurjanah,  Jacoeb  AM.  2015.  Komposisi  kimia dan  aktivitas  antioksidan  akar,  kulit  batang  dan daun lindur. Pengolahan Hasil Perikanan
Indonesia. 18(2): 205-219.
Febrina  L,  Rusli  R,  Mutlihah  F.  2015.  Optimalisasi ekstrak  antioksidan  uji  metabolit  sekunder tumbuhan  libo  ( Ficus  variegate Blume). Tropical pharmacy and chemistry. 3(2):74-81.
Firmansyah  SB.  2015.  Aktivitas  Antioksidan  dan Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Rumput  Laut ( Surgassum duplicatum J. Agardh) serta
Potensinya  sebagai  Alternatif  Pengawet  Alami pada  Telur  Asin.  [Skripsi].  Semarang  (ID): Universitas Islam Negeri Walisongo,
Heriyati,  Khotimah  S,  Wardoyo  ERP.  2016.  Aktivitas antibakteri  fraksi  diklorometan  dan  N-Heksana paku  sisik  ( Drymoglossum  piloselloides L.  presl.) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Salmonella typhi . Protobiont. 5(3): 82-88. Husna  FA,  Sulasmi  ES,  Witjoro  A.  2015.  Uji  Aktifitas
Antibakteri Ekstrak Metanol Ental Muda ( Diplazium  esculentum Retz.)  Swartz  terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan
Escherichia  coli secara In  Vitro .  [Skripsi].  Malang (ID): Universitas Negeri Malang.
Ibrahim ZZ, Ahmed AS, Gouda YG. 2011. Phytochemical and biological studies of Adiantum capillus-veneris L. Saudi pharmaceutical. 19: 65-74.
Irsyad  M.  2013.  Standarisasi  Ekstrak  Etanol  Tanaman Ketumpangan  Air  ( Peperomia  pellucida L.  Kunth).
[Skripsi].  Jakarta  (ID):  UIN  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
Jawetz, Ernest, Melnick EAA. 1995. Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan. Bonang, Jakarta.
Kandou FEF, Pandiangana D. 2018. Aktivitas antibakteri ekstrak metanol tumbuhan paku diantara Capillus veneris dan Asplenium  nidus terhadap  bakteri Gram  negatif Escherichia  coli . Matematika  Dan
Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam
Ratulangi. 7(1): 25-28.
Khoiri  M.  2009.  Aktivitas  Anti  Tumor  Ekstrak  Etanol pada  Sel  Tumor  Kelenjar  Mamari  Mencit  ( Mus musculus )  C3H.  [Tesis].  Bogor  (ID):  Institut Pertanian Bogor.
Kuspradini H, Susanto D, Ritmaleni, Mitsunaga T. 2012. Phytochemical  and  comparative  study  of  anti microbial  activity  of Lepisanthes  amoena leaves extract. Biology, Agriculture And Healthcare. 2(11): 80-86.
Kusumawati  E,  Supriningrum  R,  Rzadi  R.  2015.  Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun kecombrang  ( Etlingera  elatior Jack)  R.  M.  SM terhadap Salmonella typhi . Manuntung. 1(1): 1-7. Lamothe  RG,  Mitchell  G,  Gattuso  M,  Diarra  MS,
Malouin F, Bourab K. 2009. Plant
antimicrobialagents and their effects on plant and human  pathogens. Molecular  sciences. 10:  3400- 3419.
Luliana S, Purwanti Nu, Manihuruk KN. 2016. Pengaruh cara  pengeringan  simplisia  daun  senggani ( Melastoma  malabathricum L.)  terhadap  aktivitas antioksidan  menggunakan  metode  DPPH  (2,2-
Egra et al. difenil-l-pikrilhidrazi). Pharmaceutical sciences and research. 3(3): 120-129.
Madduluri  S,  Rao  KB,  Sitaram  B.  2013.  In  vitro evaluastion  of  antibacterial  activity  of  five indegenous  plants  extract  agains  five  bacterial phatogens of human. Pharmacy and pharmaceutical sciences. 5(4): 679-684.
Maradona  D.  2013.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Daun  Durian  ( Durio  zibehinus L.),  Daun Lengkeng  ( Dimocarpus  Longan Lour.)  dan  Daun Rambutan  ( Niphelium  lappaceum L.)  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  25925  dan Escherichia coli ATCC 25922. [Skripsi]. Jakarta (ID): Universitas  Islam  Negeri  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
Nuria  MC,  Faizatun  A,  Sumantri.  2009.  Uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar ( Jatropha curcas L.) terhadap bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  25923, Escherichia coli ATCC 25922 dan Salmonella typhi ATCC 1408. Mediagro. 5(2): 26-37.
Nurjanah  S,  Isbiyantoro,  Fadhillah  H.  2018.  Ekstrak daun kembang bulan ( Tithonia diversifolia ) sebagai antibakteri  terhadap Streptococcus  mutans dan Stretococcus sanguinis . Farmasi lampung. 7(1): 33- 40.
Olson J. 2004. Belajar Mudah Farmakologi. Jakarta (ID):
Buku Kedokteran.
Pratiwi  RH.  2017.  Mekanisme  pertahanan  bakteri patogen  terhadap  antibiotik. Pro-life 4(3):  418- 429.
Rikomah  SE,  Yanti  YS,  Juarsah  W.  2017.  Uji  daya hambat  ekstrak  etanol  daun  puding  hitam ( Graptophylm  pictum )  pada  pertumbuhan  bakteri Pseudomonas  aeruginosa . Sains  dan  Teknologi Farmasi. 19(1): 22-26.
Rostinawati  T,  Suryana  S,  Fajrin  M,  Nugrahani.  2015. Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  kelakai ( Stenochlaena palustris ) terhadap Salmonella typhi dan Staphylococcus  aureus dengan  metode  difusi agar CLSI M02-A11. Farmasi Universitas Halu Oleo. 3(1): 1-5.
Saifuddin.  2014.  Senyawa  Alam  Metabolit  Sekunder. Yogyakarta (ID): Deepublish.
Shirotake  S.  2014.  A  new  cyanoacrylate  colloidal polymer  with  nove  antibacterial  mechanism  and its  application  to  infection  control. Nanomedine Biotherapeautic Discovery. 4(1): 1-7.
Susiani  EF,  Guntarti  A,  Kintoko.  2017.  Pengaruh  suhu pengeringan  terhadap  kadar  flavonoid  total ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  ( Orthosiphon aristatus BL. Miq.). Pharmascientech. 1(2): 1-8. Ukieyanna E. 2012. Aktivitas Antioksidan Kadar Fenolik dan Flavonoid Total Tumbuhan Suruhan
( Peperomia  pellucida L.  Kunth).  [Skripsi].  Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.
Wahyuni,  Armadany  FI,  Widasri  M.  2016.  Uji  aktivitas antibakteri  secara in  vitro ekstrak  etanol  daun pakis  sayur  ( Diplazium  esculentum Swartz)  pada mencit  jantan  galur  balb/c  yang  diinfeksi Salmonella  typhi ATCC  14028.  Farmasi  Fakultas Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam  Negeri  Alauddin Makassar. 4(2): 43-49.
Widiyanto  J,  Wulandari  A,  Lukitasari  M.  2017. Identifikasi  keragaman  paku  di  kawasan  wisata Mojosemi  Forest  Park.  Di  dalam:  Prosiding Seminar  Nasional SIMBIOSIS  II. Madiun,  30 September 2017. Zulkarnain. 2010. Dasar- Dasar Hortikultura.
Jakarta(ID):Bumi Aksara.