Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1

## RESPON HEMATOLOGIS IKAN KERAPU TIKUS ( Cromileptes altivelis ) PADA SUHU MEDIA PEMELIHARAAN YANG BERBEDA
Hematological  response  of  humpback  grouper  fish  ( Cromileptes  altivelis )  in  different temperatures of media
Reny Lidhia Widi Samsisko 1* , Hari Suprapto 2 , and Setiawati Sigit 1
1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Departemen Manajemen Kesehatan Ikan dan Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya * reny-l-w-09@fpk.unair.ac.id

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh suhu media pemeliharaan yang berbeda terhadap respon hematologis ikan kerapu tikus ( Cromileptes altivelis ). Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental yang terdiri dari tiga perlakuan yaitu, Kontrol (ikan dipelihara pada suhu ruangan 30 o C), A (ikan  dipelihara  pada  suhu  32 o C) ,  dan  B  (ikan  dipelihara pada  suhu  34 o C)  dengan  masing-masing  perlakuan diulang  sebanyak  tiga  kali.  Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  ikan  kerapu  tikus  ( Cromileptes altivelis ) yang berukuran  10-15 cm sebanyak 72 ekor, air laut, pellet, EDTA, aquades, larutan Hayem’s, dan larutan Turk’s. Ikan kerapu tikus pada perlakuan A (32 o C) dan B (34 o C) mengalami stres dibandingkan dengan ikan Kontrol (30 o C) yang ditandai dengan tingginya kadar glukosa darah hingga akhir pemeliharaan yaitu sebesar 80,7 mg/dL pada perlakuan A (32 o C), 88 mg/dL pada perlakuan B (34 o C). Nilai tertinggi total eritrosit adalah 2,86x10 6 sel/mm 3 pada perlakuan A (32 o C) dan 2,92x10 6 sel/mm 3 pada perlakuan B (34 o C); total leukosit sebesar 10,86x10 4 sel/mm 3 pada  perlakuan  A  (32 o C)  dan  10,93x10 4 sel/mm 3 pada  perlakuan  B  (34 o C);  persentase hematokrit sebesar 41,7% pada perlakuan A (32 o C) dan 44% pada perlakuan B (34 o C).
Kata kunci: Cromileptes altivelis , glukosa darah, eritrosit, hematokrit, leukosit

## Abstract
This study aimed to determine the effect of different maintenance media temperature on haematological response of humpback grouper ( Cromileptes altivelis ). The method used in this study is an experimental method that consists of three treatments, namely Kontrol (fish kept at room temperature 30 o C), A (fish maintained at a temperature of 32 o C), and B (fish maintained at a temperature of 34 o C) with each treatment was repeated three times. Materials used in the study is the humpback grouper ( Cromileptes altivelis ) measuring 10-15 cm by 72 tails, sea water, pellets, EDTA, aquadest, Hayem's solution, and Turk's solution. Humpback grouper on treatment A (32 o C) and B (34 o C) to stress than the control fish (30 o C) which is characterized by high blood glucose levels by the end of maintenance in the amount of 80.7 mg/dL on treatment A (32 o C), 88 mg/dL on treatment B (34 o C). Highest value of total erythrocytes was 2.86 x10 6 cells/mm 3 in treatment A (32 o C) and 2,92 x10 6 cells/mm 3 in treatment B (34 o C), total leukocytes of 10.86 x10 4 cells/mm 3 in treatment A (32 o C) and 10.93 x10 4 cells/mm 3 in treatment B (34 o C); percentage hematocrit of 41.7% in treatment A (32 o C) and 44% in treatment B (34 o C).
Keywords: Cromileptes altivelis , blood glucose, erythocytes, hematocrit, leukocytes

## PENDAHULUAN
Salah  satu  jenis  ikan  laut  yang memiliki  nilai  ekonomis  penting  adalah ikan  kerapu  tikus  ( Cromileptes  altivelis ) (Suburhan  dkk.,  2005).  Ikan  kerapu  tikus merupakan  salah  satu  jenis  ikan  karang yang  dalam  dunia  internasional  dikenal dengan  nama humpback groupers atau coral  reef  fishes yang  sudah  dapat dibudidayakan di keramba jaring apung.
Selain  itu, ikan  kerapu  tikus  juga merupakan salah satu komoditas unggulan ekspor  hasil  perikanan  dengan  potensi pengembangan  yang  masih  cukup  besar. Besarnya  permintaan  dan  tingginya  harga jual  ikan  kerapu  menjadi  alasan  utama pengembangan  usaha  budidaya  kerapu (Azhar, 2011).
Salah  satu  permasalahan  yang dihadapi dalam budidaya ikan kerapu tikus
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
adalah angka kelulushidupan yang rendah. Rendahnya  nilai  kelulushidupan  disebab- kan  karena  ikan  kerapu  tikus  mudah mengalami  stres.  Perubahan  suhu  di  ling- kungan  media  pemeliharaan  dapat  mem- pengaruhi  kehidupan  ikan  bahkan  dapat menyebabkan stres. Suhu yang tinggi dapat menyebabkan dissolved  oxygen menurun dan  mengurangi  selera  makan  ikan (Kelabora, 2010).
Meskipun  ikan  dapat  beraklima- tisasi  pada  suhu  yang  relatif  tinggi,  tetapi pada  suatu  derajat  tertentu  kenaikan  suhu dapat  menyebabkan  kematian  ikan. Perubahan  drastis  suhu  sampai  mencapai 5 o C  dapat  menyebabkan  stres  pada  ikan atau  membunuhnya  (Cholik  dkk.,  1986). Kubilay  and  Ulukoy  (2002)  menyatakan bahwa stres adalah ketidak mampuan suatu organisme  mempertahankan  kondisi  ho- meostasis  akibat  terganggunya  individu tersebut  oleh  adanya  rangsangan  dari  luar yang dinamai dengan stressor.

## METODOLOGI Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah metode eksperimental yang  terdiri  dari  tiga  perlakuan  yaitu, Kontrol  (K),  A,  dan  B  dengan  masing- masing  perlakuan  diulang  sebanyak  tiga kali  kemudian  data  yang  diperoleh  disaji- kan  secara  deskriptif.  Ikan  kerapu  tikus pada  Kontrol  (K)  dipelihara  pada  suhu ruangan  (30 o C),  pada  perlakuan  A  ikan kerapu tikus dipelihara pada suhu 32 o C, dan pada  perlakuan  B  ikan  kerapu  tikus dipelihara  pada  suhu  34 o C.  Pemeliharaan ikan  kerapu  tikus  pada  penelitian  ini dilakukan selama 15 hari.

## Persiapan Akuarium dan Ikan Sampel
Akuarium yang akan dipergunakan dalam penelitian ini dicuci terlebih dahulu, setelah bersih kemudian akuarium berukur- an 45x45x45cm diisi dengan menggunakan air  laut  hingga ¾ bagian,  yaitu  68  L. Akuarium  diberi  aerasi  dan  diisi  ikan kerapu tikus. Ikan kerapu tikus yang akan digunakan  dalam  penelitian  ini  diseleksi
terlebih dahulu. Ukuran panjang ikan yang digunakan yaitu 10-15 cm.

## Pengambilan Darah
Pada  pengambilan  darah,  ikan diletakkan  dengan  kepala  disebelah  kiri, sebelumnya  spuit  sudah  dibilas  dengan EDTA 10% sebagai antikoagulan. Sampel darah diambil menggunakan teknik punctie cardiac yaitu pengambilan darah tepat pada bagian  jantung  ikan  menggunakan  spuit  1 ml. Darah yang telah diambil, dimasukkan ke  dalam  tabung eppendorf untuk  segera diamati gambaran darahnya.

## Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Pengukuran  glukosa  darah  pada ikan  kerapu  tikus  menggunakan  alat Glucossure Star . Untuk pengukuran meng- gunakan alat Glucosure Star, sampel darah ikan  yang  didapat  kemudian  diteteskan pada test strip glucose, kemudian test strip dimasukkan  pada glucose  meter sehingga terbaca  hasil  glukosa  darah  yang  terkan- dung.

## Pengukuran Total Eritrosit
Darah  dihisap  dengan  pipet  yang berisi bulir pengaduk warna merah sampai skala  0,5.  Lalu  ditambahkan  larutan Hayem’s (berfungsi untuk mematikan sel- sel  darah  putih)  sampai  skala  101. Pengadukan  darah  di  dalam  pipet  dilaku- kan dengan mengayunkan tangan selama 3 –  5  menit  sehingga  darah  tercampur  rata. Setelah  itu  tetesan  pertama  larutan  darah dalam pipet dibuang, selanjutnya teteskan pada haemacytometer tipe Neubauer kemudian  ditutup  dengan cover  glass bagian  yang  berlekuk.  Rumus  untuk menghitung eritrosit adalah sebagai berikut (Nabib dan Pasaribu, 1989):
Σ Eritrosit = A N x 1 V x Fp
Keterangan :
A : Σ sel terhitung V : Volume kotak Haemocytometer N : Σ kotak Haemocytometer yang diamati Fp : Faktor Pengenceran
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1

## Pengukuran Total Leukosit
Sampel  darah  ikan  kerapu  tikus diambil  dengan  menggunakan  spuit  1  cc, sebanyak  ±  1ml.  Sampel  kemudian diencerkan  dengan  menggunakan  larutan Turk’s, campur darah secara perlahan agar tidak merusak sel darah. Mengambil darah dengan  menggunakan  pipet  dan  letakkan ujung  pipet  pada Neubauer. Lalu meletakkan coverglass diatas petak hitung Neubauer ,  kemudian  diamati  mengguna- kan  mikroskop  dengan  perbesaran  1000 kali.  Penghitungan  jumlah  leukosit  hanya pada  empat  bidang  besar,  dimulai  dari sudut  sebelah  kiri  atas,  lalu  kekanan, kemudian  turun  kebawah  dan  dari  kanan kemudian  kekiri  (Blaxhall  and  Daisley, 1973).
Jumlah sel darah putih mengguna- kan rumus sebagai berikut :
Σ Leukosit = Σ sel vol. kotak besar x Fp

## Pengukuran Kadar Hematokrit
Sampel  darah  ikan  kerapu  tikus diambil  dengan  menggunakan  spuit  1  cc sebanyak ± 1ml. Pengambilan darah melalui vena  caudalis.  Sampel  darah  kemudian dimasukkan  ke  dalam  tabung  mikrohema- tokrit  hingga  mencapai ¾ bagian,  lalu disumbat pada bagian ujung dengan meng- gunakan kretoseal. Sampel darah tersebut di
centrifuge dengan  kecepatan  6.000  rpm selama  5  menit.  Pengukuran  kadar  hema- tokrit  dilakukan  dengan  menggunakan microhematocrit  reader (Anderson  and Siwicki, 1993) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil dari penelitian ini adalah data pengukuran  kadar  glukosa  darah,  total eritrosit,  persentase  hematokrit,  dan  total leukosit.  Hasil  tersebut  digunakan  untuk mengetahui  pengaruh  suhu  media  pemeli- haraan  yang  berbeda  terhadap  respon hematologis ikan kerapu tikus ( Cromileptes altivelis ). Parameter kualitas air berupa data rata-rata  DO,  pH,  dan  salinitas  selama penelitian berlangsung ditampilkan sebagai data pendukung.
Hasil  pengukuran  kadar  glukosa darah  ikan  kerapu  tikus  yang  dipelihara pada  suhu  yang  berbeda  mengalami  pe- ningkatan. Kadar glukosa darah ikan yang dipelihara pada suhu 32 o C dan 34 o C lebih tinggi  dibandingkan  ikan  yang  dipelihara pada  suhu  ruangan  (kontrol). Peningkatan kadar  glukosa  darah  ikan  uji  pada perlakuan  A  (32 o C)  hingga  hari  ke-15 mencapai 80,7 mg/dL begitu juga dengan ikan  uji  pada  perlakuan  B  (34 o C)  yang kadar  glukosa  darahnya  mencapai  88 mg/dL.
Gambar 1. Diagram hasil pengukuran kadar rata-rata glukosa darah ikan kerapu tikus pada hari ke-0, 5, 10, dan 15
40 41 33,3 33,3 43,6 56 66,7 80,7 43,7 60,3 72 88 0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 mg /d L Hari ke- Kontrol (K) A (32°C) B (34°C) Nilai Rata-rata Kadar Glukosa Darah
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
Hasil  pengukuran  eritrosit  ikan kerapu  tikus  perlakuan  A  (32 o C)  dan  B (34 o C)  mengalami  peningkatan  pada  hari ke-5  hingga  ke-10  kemudian  mengalami penurunan  kembali  pada  hari  ke-15.  Nilai eritrosit  tertinggi  diperoleh  dari  perlakuan
B  (34 o C)  sebesar  2,92x10 6 sel/mm 3 .  Nilai rata-rata  eritrosit  dari  perlakuan  A  (32 o C) dan B (34 o C) pada pengamatan hari ke-15 mendekati  nilai  eritrosit  ikan  sebelum diberikan perlakuan.
Gambar 2.  Diagram hasil pengukuran nilai rata-rata total eritrosit ikan kerapu tikus pada hari ke-0, 5, 10, dan 15
Pada  hasil  pengukuran  hematokrit  ikan kerapu tikus pada hari ke-0, 5, 10, dan 15 terlihat  bahwa  terjadi  peningkatan  kadar hematokrit ikan perlakuan A (32 o C) dan B (34 o C) pada pengamatan hari ke-5 dan ke- 10. Pada hari ke-15 kadar hematokrit ikan
kerapu  tikus  perlakuan  A  (32 o C)  dan  B (34 o C)  mengalami  penurunan  mendekati kadar  hematokrit  pada  hari  ke-0.  Kadar hematokrit  tertinggi  terlihat  pada  ikan  uji perlakuan B (34 o C) yaitu sebesar 44%.
Gambar 3.  Diagram hasil pengukuran nilai rata-rata hematokrit ikan kerapu tikus pada hari ke-0, 5, 10, dan 15
Hasil  pengukuran  leukosit  ikan kerapu tikus pada perlakuan A (32 o C) dan B (34 o C) selama pemeliharaan mengalami peningkatan dibandingkan dengan Kontrol
(K).  Jumlah  total  leukosit  tertinggi  diper- oleh  dari  ikan  perlakuan  B  (34 o C)  pada pengamatan  hari  ke-15  yaitu  sebesar 10,93x10 4 sel/mm 3 .
2, 33 2, 37 2, 3 2, 43 2, 42 2, 62 2, 86 2, 28 2, 3 5 2, 8 2, 92 2, 52 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 0 5 10 15 x1 06 sel /m m 3 Hari ke- Kontrol (K) A (32°C) Nilai Rata-rata Eritrosit 31 39, 3 37, 3 37, 3 30, 7 36, 7 41, 7 27, 3 30, 7 40, 7 44 32, 3 0 10 20 30 40 50 0 5 10 15 Dal am % Hari ke- Kontrol A (32°C) B (34°C) Nilai Rata-rata Hematokrit
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
Gambar 4.  Diagram hasil pengukuran nilai rata-rata leukosit ikan kerapu tikus pada hari ke-0, 5, 10, dan 15

## Kualitas Air
Tabel 1. Data rata-rata kualitas air selama penelitian Perlakuan Suhu ( o C) Salinitas (ppt) DO (ppm) pH K (kontrol) 1 30 34 7,26 8,13 K (kontrol) 2 30 34 6,3 8,14 K (kontrol) 3 30 34 6,26 8,14 A1 32 34 6 8,15 A2 32 34 6,2 8,16 A3 32 34 5,9 8,14 B1 34 34 4,9 8,17 B2 34 34 4,87 8,16 B3 34 34 4,85 8,16
Data  pengukuran  kualitas  air  pada perlakuan  Kontrol  (30 o C)  menunjukkan kisaran pH yaitu 8,13 – 8,14, untuk oksigen terlarut yaitu 6,26 -7,26 mg/l, dan salinitas 34 ppt. Hasil pengukuran kualitas air pada perlakuan Kontrol (K) menunjukkan bahwa kondisi  kualitas  air  pada  akuarium  dalam kondisi normal, artinya kondisi kualitas air tersebut  sesuai  dan  berada  pada  kisaran normal  bagi  kelangsungan  hidup  ikan kerapu tikus. Kualitas air pada perlakuan A (32 o C) menunjukkan kisaran pH 8,14-8,16, oksigen terlarut 5,9-6,2 mg/dl, dan salinitas 34  ppt.  Kualitas  air  pada  perlakuan  B (34 o C) menunjukkan kisaran pH 8,12 -8,16, oksigen terlarut 4,85-4,9 mg/l, dan salinitas sebesar 34 ppt.
Suhu  merupakan  salah  satu  faktor lingkungan yang dapat menimbulkan stres pada  ikan.  Perubahan  suhu  yang  cukup besar  dan  mendadak  dapat  menimbulkan stres  pada  ikan.  Stres  adalah  ketidak mampuan  suatu  organisme  mempertahan-
kan  kondisi  homeostasis  akibat  tergang- gunya  individu  tersebut  oleh  adanya rangsangan dari luar yang dinamai dengan stressor (Kubilay and Ulukoy, 2002). Hematologi  sering  juga  digunakan untuk  mendeteksi  perubahan  fisiologis yang disebabkan oleh stres lingkungan dan juga berhubungan dengan status kesehatan ikan, parameter yang biasa menjadi indeks dalam  menentukan  status  kesehatan  ikan adalah  total  sel  darah  merah,  sel  darah putih,  hemoglobin,  hematokrit,  sedangkan untuk  melihat  tingkat  stres  biasanya  juga diukur  kadar  kortisol  dan  glukosa  darah (Al-Attar 2005).
Ikan kerapu memiliki kadar glukosa normal  yang  berkisar  antara  28,8-34,2 mg/dL  (Porchas et  al .,  2009).  Salah  satu indikasi  ikan  stres  adalah  meningkatnya kadar  glukosa  dalam  plasma.  Adanya respons stres,
akan merangsang hipothalamus untuk melepaskan corticotro- phin  releasing  factor (CRF),  dan  CRF  ini
7,4 6 7 6,96 7,26 8,87 9,73 9,67
7,3 8,7 10,87 10,93 0 2 4 6 8 10 12 0 5 10 15 x 10 4 sel /m m 3 Hari ke- Kontrol (K) A (32°C) B (34°C) Nilai Rata-rata Leukosit
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
akan merangsang kelenjar hipofisa anterior untuk  melepaskan  hormon adrenocorti- cotropin  hormone (ACTH).  Kemudian ACTH  akan  merangsang  sel-sel  interrenal (medulla  adrenal)  untuk  menghasilkan kortisol  dan  hormon  katekolamin,  seperti epinefrin  (Wedemeyer,  1996).  Hormon- hormon  ini  berperan  dalam  proses  gluko- neogenesis yang akan mendeposisi cadangan  glikogen  di  hati  dan  otot  untuk meningkatkan kadar glukosa darah (Hastuti, 2004).
Untuk mengukur tingkat stres pada ikan  dapat  dilakukan  dengan  melakukan pengamatan terhadap gambaran darah yaitu dengan  mengamati  kadar  haemoglobin, jumlah sel darah merah, sel darah putih. Hal ini didasarkan kenyataan bahwa stres yang memicu  sekresi  kortisol  akan  mempe- ngaruhi  gambaran  darah  Gbore et  al. (2006).  Peningkatan  sel  darah  merah merupakan  usaha  homeostasis  tubuh  ikan dalam upaya untuk memperbanyak hemoglobin  guna  mengikat  oksigen.  Ikan yang  hidup  di  air  rendah  oksigen  akan mengalami  hematopoiesis  sehingga  eritro- sitnya meningkat sebagai upaya penyesuai- an penambahan oksigen (Setiawati, 2007).
Tingginya  jumlah  eritrosit  dalam darah  ikan  diduga  karena  ikan  dalam keadaan  stres  (Mones,  2008).  Menurut Affandi  dan  Tang  (2002),  stres  bisa disebabkan  oleh  kondisi  lingkungan  yang buruk  dan  tidak  nyaman  lagi  bagi  kehi- dupan  ikan,  salah  satunya  adalah  kondisi oksigen perairan yang kurang. Menurunnya jumlah eritrosit ikan kerapu tikus pada hari ke-15 diduga karena ikan mulai berdaptasi dengan suhu media pemeliharaan.
Perubahan nilai parameter hemato- logis berkaitan dengan peningkatan penye- bab  stres  ( stressor )  (Gabriel et  al .,  2007).
Nilai  hematokrit  adalah  suatu  istilah  yang digunakan  untuk  menyatakan  persentase (berdasarkan  volume)  dari  darah  yang terdiri atas sel-sel darah merah. Terjadinya peningkatan  kadar  hematokrit  ikan  kerapu tikus  perlakuan  A  (32 o C)  dan  B  (34 o C) diduga karena ikan uji mengalami stres dan beradaptasi dengan perlakuan yang diberi-
kan  seperti  suhu.  Pada  keadaan  hipoksia akan  menyebabkan  sel  membengkak sehingga  meningkatkan  nilai  hematokrit (Mones, 2008).
Penghitungan total leukosit penting dilakukan  untuk  mengetahui  status  kese- hatan ikan. Kortisol juga berhubungan erat dengan  sistem  imun,  kortisol  berfungsi menekan sistem imun sehingga menyebab- kan menurunnya jumlah total leukosit. Pada stres ringan yang masih dapat diatasi oleh tubuh ikan, akan terjadi peningkatan jumlah total  leukosit,  dimana  proses  tersebut merupakan  upaya  untuk  mengatasi  stres yang ditimbulkan oleh stressor (Harper and Wolf, 2009 ).
Tingginya jumlah leukosit disebab- kan  oleh  tingkat  stres  pada  ikan  akibat memburuknya  kualitas  air  (Paulo et  al., 2009).  Terjadinya  peningkatan  jumlah leukosit  atau  disebut  dengan leukositosis merupakan  reaksi  “ephinephrine”  dimana neutrofil dan limfosit dimobilisasi ke dalam sirkulasi  umum  sehingga  menaikkan jumlah total leukosit (Aliambar, 1999).

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Ikan kerapu tikus pada perlakuan A (32 o C)  dan  B  (34 o C)  mengalami  stres dibandingkan dengan ikan Kontrol (30 o C). Hal  tersebut  ditandai  dengan  tingginya kadar  glukosa  darah  hingga  akhir  peme- liharaan  yaitu  sebesar  80,7  mg/dL  pada perlakuan  A  (32 o C),  88  mg/dL  pada perlakuan B (34 o C).
Parameter hematologis seperti total eritrosit, total leukosit, dan hematokrit yang mengalami  peningkatan  juga  menandakan bahwa  ikan  kerapu  tikus  yang  dipelihara pada suhu 32 o C dan 34 o C mengalami stres dibandingkan  ikan  Kontrol  (30 o C).  Nilai tertinggi  total  eritrosit  adalah  2,86x10 6 sel/mm 3 pada  perlakuan  A  (32 o C)  dan 2,92x10 6 sel/mm 3 pada perlakuan B (34 o C); total  leukosit  sebesar  10,86x10 4 sel/mm 3 pada  perlakuan  A  (32 o C)  dan  10,93x10 4 sel/mm 3 pada perlakuan B (34 o C); persen- tase  hematokrit  sebesar  41,7%  pada
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
perlakuan  A  (32 o C)  dan  44%  pada  perla- kuan B (34 o C).

## Saran
Perlu adanya penelitian lebih lanjut mengenai  pengaruh  dari  suhu  terhadap faktor lain dari ikan kerapu.

## DAFTAR PUSTAKA
Affandi, R. dan U.M. Tang. 2002. Fisiologi Hewan Air. Riau: Uni press. Al-Attar,  A.  M.  2005.  Changes  in Haematological  Parameters  of  The Fish Oreochromis niloticus Treated With  Sublethal  Concentration  of
Cadmium.  Pakistan  Journal  of Biological  Sciences  8(3)  :  421  – 424. Aliambar, S.H. 1999. Pengaruh Pengendalian Hewan terhadap Temperatur,  Nadi  dan  Respirasi Nilai Hematologi dan Kimia Darah
Rusa ( Curvus termorensi, Blainville 1822). Institut Pertanian Bogor. Anderson, D. P. dan A. K. Siwicki. 1993. Injection or Immersion Delivery of Selected Immunostimulant to Trout Demonstrate  Enhancement  of  Non Specific  Defence  Mechannism  and Protective  Immunity. In :  Sharriff, M.  J.,  R.  Arthur,  R. P.  Subasinghe (Eds.). Discasc in Asian Aquaculture II. Fish Health Section
Asian Society. pp. 413-426.
Blaxhall and K. W. Deasley. 1973. Dasley : Routine  Haematological  Methods for Use With Fish Blood. Journal of Fish Biology. pp. 577-581. Gabriel UU, Amakiriand EU, Ezeri GNO. 2007.  Haematology  and  gill pathology  of Clarias  gariepinus exposed  to  refined  petroleum  oil, kerosene under laboratory conditions. Journal  of  Animal  and Veterinary Advances 6(3): 461–465. Gbore,  F.  A.,  Oginni.  O,  Adewole  A.  M, Aladetan J. O. 2006. The Effect Of Transportation and Handling Stress on  Haematology  and  Plasma Biochemistry  in  Fingerlings  of
Clarias gariepinus and Tilapia zilii. Word Journal  of  Agriculture Sciences 2(2): 208-212. Harper,  C.  and  J.  C.  Wolf.  2009. Morphologic  Effects  of  The  Stress Response in Fish. Hastuti,  S.  2004.  Respon  Fisiologis  Ikan Gurami  (Osphronemus  gouramy, Lac.) yang Diberi Pakan Mengandung Kromium-Ragi Terhadap Penurunan Suhu Lingkungan.  Disertasi.  Sekolah Pascasarjana.  Institut  Pertanian
Bogor. Bogor. hal. 6-36.
Kubilay.  A  and  G.  Ulukoy.  2002.  The Effects of Acute Stress on Rainbow Trout   ( Oncorhynchus mykiss ). Turkish  Journal  of  Zooloogy , 26: 249-254.
Mones, R. A. 2008. Gambaran Darah Pada Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio Linn)
Strain Majalaya Yang Berasal Dari
Daerah  Ciampea  Bogor.  Skripsi.
Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. 35 hal. Nabib,  R.  dan  F.  H.  Pasaribu.  1989. Patologi dan Penyakit Ikan. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan.  Direktorat  Jenderal
Pendidikan  Tinggi.  Pusat  Antar Universitas  Bioteknologi.  Institut Pertanian  Bogor.  UPT  Produksi MediaInformasi LSI-IPB. Bogor. Paulo,  C. F. C., Pedro H. S. K., Elaine A., Correia  S.,  and  Bernardo  B.  2009. Transport of Jundia Rhamdia quelen Juveniles  at  Different  Loading Densities: Water Quality and Blood Parameters. Journal . Neotropical Ichthyology , 7(2) : 283-288. Porchas, M. M., L. R. M. Cordova and R. R Enriquez.  2009.  Cortisol  and glucosa: Reliable Indicators of Fish Stress.  Pan-American  Journal  of Aquatic Sciences , 4(2):158–178. Setiawati,  M.,  T.  I.  Winarno,  M.  A. Suprayudi,  I.  Mokoginta,  W. Manalu.  2007.  Mineral  Besi Sebagai  Peningkat  Vitalitas  Ikan
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 3 No.1
Kerapu Bebek ( Cromileptes altivelis )  Saat  Kondisi  Stres Hipoksia.  Jurnal  Ilmu  Pertanian Indonesia, 12 (1) : 8-14. Wedemeyer, G. A. 1996. Physiology of fish in intensive culture system .
Chapman  and  Hall.  115  Fifth Avenue New York.