* Corresponding Author : halimahtus.sahdiah@um.ac.id
https://doi.org/10.56064/jps.v26i2.1015 Naskah diusulkan: 1 Juli 2024;  Naskah disetujui: 5 Agustus 2024 p-ISSN: 1410-7058 e-ISSN: 2597-7059 © 2024 JPS MIPA UNSRI

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index
Pengujian aktivitas antioksidan vitamin C menggunakan metode titrasi iodometri dan spectroscopy UVVIS – DPPH pada sampel minuman kemasan mengandung gula ( with sugar ) dan tanpa gula ( less sugar )
Halimahtus Sahdiah 1 * dan Surjani Wonorahardjo 1,2
1 Laboratorium Mineral dan Material Maju, FMIPA , Universitas Negeri Malang; 2 Departemen Kimia, Universitas Negeri Malang
Kata kunci: antioksidan,
DPPH ,
vitamin C, iodomtetri,
minuman kemasan, gula
ABSTRAK: Vitamin C atau asam askorbat C 6 H 8 O 6 adalah salah satu senyawa yang bersi- fat  antioksidan  yaitu  senyawa  yang  dapat  menghambat  oksidasi  dari  efek  berbahaya radikal bebas yang dapat menyebabkan penyakit-penyakit degeneratif. Semakin mening- katnya kesadaran masyarakat mengonsumsi vitamin C menyebabkan munculnya banyak produk minuman kemasan mengandung vitamin C dari yang kadar rendah hingga kadar tinggi.  Jenis varian minuman kemasan vitamin C kadar tinggi pun semakin beragam sa- lah  satunya  varian  mengandung  gula  ( with  sugar )    dan  varian  tanpa  gula  ( less  sugar ). Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menguji aktifitas antioksidan vitamin C pada mi- numan kemasan varian mengandung gula ( with sugar )  dan varian tanpa gula ( less sug- ar ).  Kadar  Vitamin  C  minuman  kemasan  varian  mengandung  gula  ( with  sugar ) menggunakan metode titrasi iodmetri adalah sebesar 987,36 mg mendekati kadar pada etiket kemasan yaitu 1000 mg sementara varian tanpa gula ( less sugar ) sebesar 609,84 mg  yaitu  mengalami  penurunan  40%  dari  kadar  pada  etiket  kemasan.  Dan  hasil  peng- ujian aktifitas antioksidan menggunakan metode spectroscopy UVVIS – DPPH menunjuk- kan  hasil  IC  50  varian  mengandung  gula  ( with  sugar )  sebesar  7  ppm  dan  varian  tanpa gula  ( less  sugar )  sebesar  21  ppm.  Sehingga  dapat  disimpulkan  keberadaan  gula  pada minuman  kemasan  memiliki  potensi  mencegah  vitamin  C  teroksidasi  sehingga  dapat mempertahankan kadar dan sifat antioksidannya.
Keywords: antioxidant,
DPPH,
vitamin C,
iodmetric titration, drinks,
sugar
ABSTRACT: Vitamin C or ascorbic acid C 6 H 8 O 6 is a compound that is an antioxidant, it can inhibit oxidation from the harmful effects of free radicals which can cause degenera- tive  diseases.  The  increasing  public  awareness  of  consuming  vitamin  C  has  led  to  the emergence of many products of vitamin C drinks. The types of vitamin C drinks are in- creasingly diverse, one of which is a variant with sugar and a variant less sugar. The aim of this study was to test the antioxidant activity of vitamin C in vitamin C drinks containing sugar and less sugar variants. The Vitamin C content of the  vitamin C drinks with sugar using the iodmetric titration method was 987.36 mg, close to the level on the packaging label 1000 mg, while the vitamin C drinks less sugar was 609.84 mg, which is a 40% de- crease from the packaging label. And the results of antioxidant activity testing using the UVVIS – DPPH spectroscopy method showed that the IC 50 for the vitamin C drinks with sugar was 7 ppm and the the vitamin C drinks less sugar was 21 ppm. So it can be con- cluded that the presence of sugar in vitamin C drinks has the potential to prevent vitamin C from being oxidized so that it can maintain its antioxidant levels and properties .

## 1 PENDAHULUAN
ewasa  ini  tingkat  kepedulian  terhadap  kese- hatan  semakin  meningkat,  salah  satunya mengenai  efek  radikal  bebas  terhadap  kesehatan. Radikal bebas merupakan suatu senyawa asing yang masuk ke dalam tubuh dan merusak sistem imunitas
tubuh  [1].  Radikal  bebas  tersebut  dapat  timbul  aki- bat  berbagai  proses  kimia  yang  kompleks  dalam tubuh,  polutan  lingkungan,  radiasi  zat-zat  kimia,  ra- cun,  makanan  cepat  saji,dan  makanan  yang  digo- reng  pada  suhu  tinggi  [2]. Jika  jumlahnya  berlebih, radikal  bebas  akan  memicu  efek  patologis  [3]. Radikal bebas juga menyebabkan stress oksidatif se-
D
hingga  juga  dapat  mempercepat  proses  penuaan pada  tubuh  manusia  [4].  Oleh  sebab  itu  pemben- tukan  radikal  bebas  harus  dihalangi  atau  dihambat dengan  yang  kita  kenal  yaitu  antioksidan.  Antioksi- dan  merupakan  komponen  penting  yang  berperan dalam aktivitas alami suatu makhluk hidup, senyawa ini  memiliki  struktur  molekul  yang  dapat  mem- berikan  elektronnya  kepada  molekul  radikal  bebas tanpa  terganggu  sama  sekali  fungsinya  dan  dapat memutus reaksi berantai dari radikal bebas [5]. An- tioksidan  dapat  berupa  molekul  yang  kompleks  se- perti  superoksida  dismutase,  katalase  dan  perok- siredoksin, maupun berupa senyawa sederhana yai- tu glutation, vitamin (vitamin A, C, E dan β -karoten) dan senyawa lain (seperti flavonoid, albumin, biliru- bin,  seruplasmin  dan  lain-lain)  [1].  Vitamin  C  bisa meningkatkan  daya  tahan  tubuh  terhadap  penyakit dan  sebagai  antioksidan  yang  menetralkan  radikal bebas didalam darah maupun cairan [6].  Vitamin C selain dapat berfungsi sebagai antioksidan dan dapat mengurangi resiko kanker payudara, kolon, rektum, dan  paru-paru  [7].  Vitamin  C  adalah  vitamin  yang paling  tidak  stabil  dari  semua  vitamin  dan  mudah rusak,  eksposur  oksigen,  pemanasan  yang  terlalu lama  dengan  adanya  oksigen,  dan  eksposur  ter- hadap  cahaya  semuanya  merusak  kandungan  vita- min  C  makanan.  Di  beberapa  negara,  dosis  yang biasa  dianjurkan  berkisar  dari  60-90  mg  vitamin  C per  hari  [8].  Pemenuhan  kebutuhan  vitamin  C  ini sangat tergantung kondisi tubuh setiap orang , kare- na jika tidak diperlukan maka vitamin C akan dibu- ang oleh tubuh melalui urin. Semakin meningkatnya kesadaran  masyarakat  mengonsumsi  vitamin  C  me- nyebabkan  munculnya  banyak  produk  minuman kemasan  mengandung  vitamin  C  dari  yang  kadar rendah hingga kadar tinggi.   Jenis  varian minuman kemasan  vitamin  C  kadar  tinggi  pun  semakin  be- ragam salah satunya varian mengandung gula ( with sugar )  dan varian tanpa gula ( less sugar ). Bebera- pa  penelitian  menunjukkan  perbedaan  aktivitas  an- tioksidan  ekstrak  tanaman  yang  mengandung  vita- min  C  dengan  variasi  pemberian  gula  [9]  [10]  [11]. Namun  pada  bahan  ekstraksi  tentu  saja  banyak faktor  yang  mempengaruhi  hasil  pengujian,  untuk memastikan  bahwa  gula  dapat  berperan  dalam  ak- tivitas  antioksidan  suatu  bahan  maka  tujuan  dari penelitian  ini  adalah  untuk  menguji  aktifitas  anti- oksidan  vitamin  C  pada  minuman  kemasan  varian mengandung  gula  ( with  sugar )    dan  varian  tanpa gula ( less sugar ). Pengujian aktifitas antioksidan ini dapat  dilakukan  dengan  cara  mengukur  kadar  vita- min  C  menggunakan  metode  titrasi  iodometri, metode  ini  juga  paling  banyak  digunakan,  karena murah, sederhana, dan tidak memerlukan peralatan laboratorium yang canggih . Titrasi iodometri meru-
pakan  jenis  reaksi  redoks  yang  mengukur  jumlah iodin yang tersisa dari hasil reaksi  redoks antara  vi- tamin C dengan reaktan [12]. Selain dengan penen- tuan  kadar,  aktifitas  antioksidan  juga  dapat  diten- tukan  dengan  pengujian  terhadap  DPPH,  yaitu  2,2 Difenil-1-Pikrilhidrazil  sebuah  senyawa  yang  dapat bersifat  radikal  bebas.  DPPH  merupakan  radikal bebas  yang  stabil  pada  suhu  kamar  dan  sering digunakan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan beberapa  senyawa  atau  bahan  alam  [13].  DPPH memberikan serapan kuat pada panjang gelombang 517  nm  dengan  warna  violet  yang  gelap  [14]. Senyawa  antioksidan  akan  bereaksi  dengan  radikal DPPH  melalui  mekanisme  donasi  atom  hidrogen dan  menyebabkan  peluruhan  warna  DPPH  dari ungu menjadi kuning yang diukur pada panjang ge- lombang 517 nm. Parameter dari metode DPPH ini adalah nilai inhibition concentration 50% (IC50) atau konsentrasi  yang  dapat  meredam  aktivitas  radikal bebas  sebesar  50%  [15].  Metode  ini  sering  dipilih sebagai  metode  pengujian  aktivitas  antioksidan  ka- rena  sederhana,  mudah,  cepat,  peka  dan  memer- lukan sedikit sampel [16].

## 2 BAHAN DAN METODE
Sampel  yang  digunakan  merupakan  sampel  minu- man  kemasan  yang  mengandung  vitamin  C  kadar tinggi dan dijual bebas di toko dan swalayan dengan varian  mengandung  gula  ( with  sugar )  dan  varian tanpa gula ( less sugar ). Bahan kimia yang digunakan berderajat  PA  (Pro  Analysis)  dan  teknis  meliputi Na 2 S 2 O 3 ,  KIO 3 ,  KI,  H 2 SO 4 ,  Amilum,  Asam  askorbat, DPPH (2,2 Difenil-1-Pikrilhidrazil), Etanol dari merck dan  Aquades  dari  Onemed.  Peralatan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain,  tim- bangan  analitik,  mikropipet,  peralatan  gelas  yaitu labu erlenmeyer, gelas arloji, pipet ukur, labu ukur, beaker glass, botol reagen serta klem dan statif.

## Penentuan kadar  vitamin C dengan metode Titrasi Iodometri
Titrasi iodometri merupakan jenis reaksi redoks yang mengukur jumlah iodin yang tersisa dari hasil reaksi redoks  antara  vitamin  C  dengan  reaktan  Indikator yang  digunakan  yaitu  amilum  yang  ditambahkan saat  sudah  mendekati  titik  akhir  titrasi.  Indikator yang  amilum  yang  ditambahkan  saat  sudah  men- dekati titik akhir titrasi tersebut dilakukan agar ami- lum  tidak  membungkus  iodin  sehingga  penentuan titik  akhir  dapat  ditentukan  secara  tepat  [17]. Metode  ini  juga  paling  banyak  digunakan,  karena murah, sederhana, dan tidak memerlukan peralatan laboratorium  yang  canggih.  Larutan  standar  yang digunakan dalam metode ini adalah Natrium tiosul-
fat  Na 2 S 2 O 3 ,  larutan  standar  ini  tidak  boleh  distan- darisasi dengan penimbangan secara langsung tetapi harus distandarisasi dengan larutan baku primer ter- lebih  dahulu  [18].  Larutan  natrium  thiosulfat  tidak stabil  untuk  waktu  yang  lama  sehingga  proses  ini harus  dilakukan  cepat  [12].  Metode  iodometrik menggunakan  dua  jenis  indikator,  yaitu  kanji/ami- lum  dan  Iodin  yang  dapat  bertindak  sebagai  indi- kator  bagi  dirinya  sendiri.  Iodin  juga  memberikan warna ungu atau violet yang intensitas untuk zat-zat pelarut  seperti  karbon  tetra  korida  dan  kloroform. Namun  demikan  larutan  dari  kanji  lebih  umum  di- pergunakan, karena warna biru gelap dari kompleks iodin – kanji/amilum bertindak sebagai suatu tes yang amat sensitif untuk iodin.  Dalam perhitungan kadar vitamin  C  dimana,  suatu  larutan  vitamin  C  (asam askorbat)  sebagai  reduktor  dioksidasi  oleh  Iodium, sesudah  vitamin  C  dalam  sampel  habis  teroksidasi, kelebihan  Iodium  akan  segera  terdeteksi  oleh kelebihan  amilum  yang  dalam  suasana  basa berwarna biru muda [12].

## Pengujian aktifitas antioksidan dengan metode Spectroscopy UVVIS dan DPPH (1,1 Difenil-2-picryhidrazil)
Metode  DPPH  merupakan  metode  in  vitro  yang memberikan informasi reaktivitas senyawa yang diuji dengan  suatu  radikal  stabil.  Metode  DPPH  ini  ber- dasarkan  prinsip  electron  transferbased  (ET- based ) assay,  yaitu  reaksi  reduksi  molekul  DPPH  (sebagai oksidan)  oleh  molekul  dalam  larutan  standar  atau sampel (sebagai antioksidan) [19]. Perubahan warna menunjukkan  bahwa  DPPH  telah  tereduksi  oleh proses donasi hydrogen atau electron dari senyawa antioksidan  sehingga  warnanya  berubah  dari  violet ke  kuning  dan  DPPH  memberikan  serapan  pada panjang gelombang 517 nm [20]. Adanya reaksi ter- sebut  membuat  terjadinya  perbedaan  nilai  absorb- ansi  panjang  gelombang  sebelum  dan  sesudah reaksi  berjalan.  Kuantifikasi  perubahan  nilai  diper- oleh  dari  hasil  pembacaan  angka  absorbansi  pada alat  spektrofotometer  yang  digunakan  dan  perhi- tungannya  [5].  Pada  dasarnya  absorbansi  yang diukur  adalah  absorbansi  larutan  DPPH  yang  tidak bereaksi  dengan  senyawa  antioksidan.  Semakin  be- sar  konsentrasi  larutan  bahan  uji  maka  absorbansi yang  dihasilkan  semakin  kecil  karena  yang  terukur adalah  sisa  DPPH  yang  tidak  bereaksi  dengan  anti- oksidan.  Semakin  kecil  absorbansi  yang  dihasilkan maka  semakin  besar  aktivitas  penangkapan  radikal DPPH [14]. Untuk mengetahui seberapa besar aktifi- tas  antioksidan  suatu  bahan  maka  dapat  dilakukan perhitungan  IC50  ( Inhibition  Concentration 50%) . IC50 didefinisikan sebagai konsentrasi senyawa anti-
oksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH [13].
x100% kontrol Absorbansi sampel Absorbansi kontrol Absorbansi n %Perendama − =
Cara  memperoleh  nilai  IC50  dihitung  berdasarkan presentase  inhibisi  atau  persen  perendaman  ter- hadap radikal DPPH dari masing-masing konsentrasi larutan  sampel berdasarkan rumus diatas  [16].  Dari nilai  %  Inhibisi  pada  berbagai  konsentrasi,  selanjut- nya dimasukkan ke dalam persamaan regresidengan konsentrasi  sampel  sebagai  sumbu  x  dan  %  inhibisi sebagai  sumbu  y.  Nilai  IC50  didapat  dari  perhi- tungan pada saat % inhibisi sebesar 50% dari persa- maan  y  =  a  +  bx  [21]. Nilai  IC50  berbanding terbalik  dengan  kemampuan  senyawa  untuk  me- nangkap  radikal  bebas.  Rendahnya  nilai  IC50  me- nunjukkan  tingginya  aktivitas  penangkapan  radikal bebas. Semakin besar harga IC50 maka aktivitas an- tioksidan  melalui  penangkapan  radikal  bebas  se- makin kecil. Suatu dikatakan memiliki aktivitas anti- oksidan kelompok sangat kuat jika nilai IC50 kurang dari  50  ppm,  kelompok  kuat  IC50  antara  50-100 ppm, kelompok sedang jika nilai IC50 101-150 ppm, kelompok lemah jika nilai IC50  antara 150-200 ppm dan  kelompok  tidak  aktif  jika  nilai  IC50  lebih  besar dari 500 ppm [14].

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Penentuan Kadar Vitamin C Minuman kema- san mengandung gula ( with sugar ) dan tanpa gula ( less sugar )
Penentuan  kadar  vitamin  C  dilakukan  dengan menentukan  kadar  asam  askorbat  atau  C 6 H 8 O 6 da- lam  sampel  menggunakan  titrasi  Iodometri  dengan pertama  menentukan  standarisasi  larutan  Na 2 S 2 O 3 [18].  Standarisasi  Natrium  tiosulfat  KIO 3 ,  KI,  H 2 SO 4 dapat  menggunakan  larutan  baku  primer  KIO 3 dengan  menyiapkan  larutan  Natrium  Tiosulfat  250 ml, larutan KIO 3 0,1 N 100 ml, larutan KI 1%, larutan H 2 SO 4 2N  dan  larutan  amilum  1%.  Pada  proses standarisasinya dilakukan dengan cara 10 ml larutan KIO 3 0,1  N  dimasukkan  ke  dalam  labu  Erlenmeyer 250 ml dan ditambahkan larutan asam sulfat  H 2 SO 4 2  ml  kemudian  dititrasi  dengan  larutan  Na 2 S 2 O 3 sampai  kuning  jerami,  selanjutnya  ditambahkan  in- dikator amilum dan dilanjutkan titrasi hingga warna biru hilang [17]. Proses titrasi dilakukan secara duplo sehingga  menghasilkan  data  volume  Na 2 S 2 O 3 pada Tabel 1.
Tabel 1. Data volume Na 2 S 2 O 3 pada proses standarisasi menggunakan KIO 3
Ulangan Volume Na 2 S 2 O 3 (ml)  Rata-rata (ml) Ulangan 1 10,1 10,1 Ulangan 2 10,1
Dengan  menggunakan  rumus  matematika  dari persamaan ekivalen maka  dapat ditentukan norma- lisasi  Na 2 S 2 O 3 yang  akan  digunakan  untuk  menen- tukan kadar vitamin C pada sampel [18].
𝑁 1 ∙ 𝑉 1 = 𝑁 2 ∙ 𝑉 2 Penentuan kadar vitamin C dengan larutan Na 2 S 2 O 3 yang telah dinormalisasikan dilakukan dengan cara, mengambil  20  ml  pada  masing-masing  sampel  mi- numan  kemasan  vitamin  C  mengandung  gula  ( with sugar ) dan yang tanpa gula ( less sugar ) kedalam la- bu  erlenmeyer.  Kemudian  pada  masing-masing  dit- ambahkan  larutan  KIO 3 0,1  N  10  ml,    5ml  larutan H 2 SO 4 dan larutan KI 1% 10 ml. Langkah selanjutnya yaitu  penambahan  amilum  5  tetes  di  tengah- tengah titrasi.  Setelah di tambah amilum, campuran dikocok  dan  dilanjutkan  titrasi  hingga  warna biru tepat hilang  [17].  Pada  proses  titrasi  tersebut didapatkan persamaan reaksi sebagai berikut;
− − − − − − − + = = = = + → + + → → + + → + + + + + → + + 2e SO 2Na I2 2e SO 2Na O H C O S 2I O 2S I Total Reaksi (x1) O S 2e O 2S Reduktor (x1) 2I 2e I Oksidator O S Na 2NaI O S 2Na I 4e SO K O H C 4H I SO H 2KI O H C 3 2 3 2 6 8 6 2 6 4 3 2 2 2 6 4 2 3 2 2 6 4 2 3 2 2 2 4 2 6 8 6 2 4 2 6 8 6
maka  didapatkan  berat  ekivalen  C 6 H 8 O 6 sama dengan setengah berat molekul C 6 H 8 O 6 , berat ekiva- len  I2  sama  dengan  setengah  berat  molekul  I2  dan berat  ekivalen  Na 2 S 2 O 3 sama  dengan  berat  mole- kulnya [18]. Sehingga dari persamaan tersebut dapat dihitung  normalitas  C 6 H 8 O 6 dan  dapat  ditentukan kadar  asam  askorbat  atau  vitamin  C  dari  sampel. Data perhitungan kadar asam askorbat atau vitamin C  yang  diperoleh  untuk  masing-masing  sampel  ter- tuang dalam Tabel 2.
Tabel 2. Data kadar vitamin C pada sampel minuman vitamin C kemasan
Jenis minuman Perhitungan kadar (mg) Rerata (mg) Kadar dlm etiket kema- san (mg) Ulangan 1  Ulangan 2 Mengandung gula 987,36 987,36 987,36 1000 Tanpa Gula 638,88 580,8 609,84 1000
Dari  data  yang  didapatkan  kandungan  asam askorbat atau vitamin C pada sampel minuman yang
mengandung gula ( with sugar ) didapatkan data yang stabil  antara  ulangan  1  dan  2  dengan  nilai  987,36 mg  yang  mendekati  kadar  dalam  etiket  kemasan produk yaitu 1000 mg. Sementara pada data minu- man tanpa kandungan gula antara ulangan 1 dan 2 mengalami  penurunan  dari  638,88  mg  menjadi 580,8  mg dan kadar tersebut jauh berbeda dengan kadar  dalam  etiket  kemasan  produk  yaitu  meng- alami penurunan 40%. Nilai kadar pada sampel mi- numan kemasan menggandung gula tidak sama per- sis  dengan  kadar  dalam  etiket  kemasan  dapat  dise- babkan  oleh  beberapa  faktor  antara  lain,  asam askorbat  atau  vitamin  C  saat  berbentuk  larutan  sa- ngat  mudah  teroksidasi  sehingga  dapat  dengan  ce- pat  berubah  saat  kemasan  dibuka  dari  segel  [22]. Faktor lainnya juga kesalahan penentuan akhir titra- si,  yaitu  kesalahan  yang  terjadi  apabila  titik  akhir titrasi  tidak  tepat  sama  dengan  titik  ekuivalensi  (≤ 0,1%)  hal  ini  bisa  terjadi  karena  perbedaan  warna- nya sangat tipis sehingga tidak bisa dibedakan kasat mata  [17].  Sementara  nilai  kadar  vitamin  C  dalam sampel  minuman  kemasan  tanpa  gula ( less  sugar ) jauh berbeda dengan nilai kadar pada etiket kema- san dan  mengalami penurunan 40% dapat disebab- kan oleh faktor utama yaitu gula memiliki sifat dapat mengikat air dan vitamin C larut dalam air sehingga gula dapat mengikat vitamin C dan menetralisir ke- hilangan  vitamin  C  akibat  oksidasi  [9],  gula  juga dapat  melindungi  asam  askorbat  dari  degradasi  pa- da suhu rendah  (≤40˚C) [10], selain itu, penamba- han gula juga mampu menurunkan banyaknya oksi- gen  terlarut  yang  ada  di  dalam  sampel.  Hal  ini disebabkan  karena  tekanan  osmotik  yang  me- nyebabkan  minuman  menjadi  lebih  pekat  [11].  Se- hingga  pada  sampel  minuman  kemasan  tanpa  gula ( less sugar ) kandungan vitamin C nya akan lebih tid- ak  stabil  dan  sangat  mudah  teroksidasi.  Presisi  hasil pengujian titrasi pada sampel minuman kemasan ini juga dituangkan pada Gambar 1 dan 2 melalui peng- ulangan 15 kali ulangan sebagai sumbu x.
Gambar 1. Control chart kadar vitamin C sampel vitamin C minuman kemasan mengandung gula ( with sugar ) Konsentrasi Vit C Nilai Tengah UCL LCL 800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000 1020 1040 1060 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 K ons e nt rasi V it am in C (m g)
Dari data 15 kali ulangan  penentuan kadar vita- min  C  sampel  mengandung  gula  ( with  sugar ) didapatkan  rata-rata  kadar  vitamin  C  937,024  mg dengan  UCL  1048,527  mg  ,  LCL  825,521  mg,  dan standart deviasi sebesar 37,167 mg.
Gambar 2. Control Chart kadar vitamin C Sampel Vitamin C Minuman Kemasan tanpa gula
Sementara data 15 kali ulangan penentuan kadar vitamin C sampel tanpa gula ( less sugar ) didapatkan rata – rata kadar vitamin C 607,904 mg dengan UCL 780,476 mg , LCL 435,331 mg , dan standart deviasi sebesar  57,524  mg.  Dari  perbandingan  presisi  hasil pengujian  kedua  sampel  dapat  dinyatakan  bahwa pengujian  titrasi  pada  sampel  minuman  kemasan mengandung gula ( with sugar ) jauh lebih stabil dari- pada  sampel  minuman  kemasan  tanpa  gula  ( less sugar )  karena  memiliki  standar  deviasi  yang  jauh lebih kecil.
Pengujian aktifitas antioksidan Minuman kemasan mengandung gula ( with sugar ) dan tanpa gula ( less sugar )
Pengujian  aktifitas  antioksidan  sampel  dilakukan menggunakan  metode  DPPH  (1,1  Difenil-2- picryhidrazil)  dengan  spectroscopy  UVVIS,  dengan menyiapkan sampel dalam variasi konsentrasi  1000, 500,  250,  100,  dan  50  ppm.  Kemudian  menyipkan larutan  DPPH  dengan  menimbang  0,005  gram dilarutkan  dalam  100  ml  methanol  dan  vortex,  dan menyiapkan  larutan  asam  askorbat  sebagai  kontrol yaitu 0,5 mg asam askorbat dilarutkan dalam 100 ml methanol  dan  vortex.  Selanjutnya  masing-masing konsentrasi  sampel  diambil  2  ml  diletakkan  pada tabung  reaksi  dan  ditambahkan  larutan  DPPH sebanyak  2  ml  kemudian  diinkubasi  pada  suhu ruang  pada  keadaan  gelap  selama  30  menit. Pengukuran  sampel  dilakukan  menggunakan  spec-
troscopy UVVIS pada panjang gelombang 517  [16]. Hasil    perhitungan  %  inhibisi  dari  hasil  absorbansi meng-gunakan  spectroscopy  UVVIS  dapat  dilihat dari Tabel 3 dan Tabel 4.
Tabel 3. Hasil perhitungan % Inhibisi  sampel minuman vitamin C kemasan mengandung gula ( with sugar ) Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi U1 U2 U3 50 0,61  0,61  0,61 81,123 100 0,37  0,37  0,37 88,956 250 0,3 0,3 0,3 91,306 500 0,21  0,21  0,21 94,327 1000 0,13  0,13  0,13 97,012 Tabel 4. Hasil perhitungan % Inhibisi  sampel minuman vitamin C kemasan tanpa gula ( less sugar ) Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi U1 U2 U3 50 0,68  0,68  0,68 78,550 100 0,52  0,52  0,52 83,921 250 0,39  0,39  0,39 88,173 500 0,22  0,22  0,22 93,991 1000 0,16  0,16  0,16 96,005
Selanjutnya  dari  hasil    pengujian  antioksidan dapat  ditentukan  persamaan  regresi  linier  untuk sampel  minuman  kemasan  mengandung  gula menghasilkan  persamaan  y  =  9,118x  +  33,303 dengan    regresi  R 2 =  0,989  dan  sampel  minuman kemasan  tanpa  gula  menghasilkan  persamaan  y  = 11,51x + 16,319 dengan regresi R 2 = 0,961.
Data kedua sampel menunjukkan nilai % inhibisi diatas  50%  sehingga  bisa  dilanjutkan  untuk  perhi- tungan  IC50.  Nilai  IC50  didapatkan  dengan  mema- sukkan nilai X dengan angka 50 sehingga diperoleh sampel  minuman  kemasan  mengandung  gula  ( with sugar )  didapatkan  sebesar  7  ppm  sementara  IC50 sampel  minuman  kemasan  tanpa  gula  ( less  sugar ) didapatkan  hasil  21  ppm.  Data  hasil  kedua  sampel menunjukkan  bahwa  keduanya  termasuk  dalam memiliki aktivitas antioksidan kelompok  sangat kuat yaitu  IC50  kurang  dari  50  ppm.  Sampel  minuman kemasan  mengandung  gula  ( with  sugar )  memiliki nilai IC50 lebih kecil dari sampel minuman kemasan tanpa gula ( less sugar ). Sehingga bisa dikatakan mi- numan  yang  mengandung  gula  memiliki  aktivitas antioksidan lebih kuat.

## 4 KESIMPULAN
Hasil perhitungan kadar vitamin C sampel minuman kemasan  mengandung  gula  ( with  sugar )  dengan metode  titrasi  iodometri  memiki  kadar  987,36  mg mendekati  kadar  yang  tertulis  dalam  etiket  sampel, sementara  sampel  minuman  kemasan  tanpa  gula ( less  sugar )  memiliki  kadar  609,84  mg  yaitu
Konsentrasi Vit C Nilai Tengah UCL LCL 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740 760 780 800 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 K ons e nt rasi V it am in C (m g)
mengalami  penurunan  40%  dari  kadar  yang  tertulis dalam  etiket  sampel.  Dan  data  hasil  perhitungan aktifitas  antioksidan  DPPH  sampel  minuman  kema- san  mengandung  gula  ( with  sugar )  memiliki  IC50 sebesar  7  ppm    dan  minuman  kemasan  tanpa  gula ( less  sugar )  memiliki  IC50  sebesar  21  ppm.  Keber- adaan gula pada minuman kemasan memiliki poten- si  mencegah  vitamin  C  teroksidasi  sehingga  dapat mempertahankan kadar dan sifat antioksidannya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  penulis  sampaikan  kepada Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  kepada Masyarakat (LPPM) Universitas Negeri Malang yang telah mendanai kegiatan penelitian ini , dengan da- na internal UM tahun anggaran 2024 dengan nomor kontrak 4.4.595/UN32.14.1/LT/2024

## REFERENSI ______________________________
[1] A. P. Hasanuddin, “Analisis Kadar Antioksidan Pada Ekstrak Daun Binahong Hijau (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis),” Bioma J. Biol. Makassar , vol. 8, no. 2, pp. 66 – 74, 2023.
[2] N. A. Berlianti, C. S. Widodo, and U. P. Juswono, “Studi tentang pengaruh limbah pencemar terhadap kandungan radikal bebas pada organ insang ikan nila (Oreochromis niloticus),” J. Nat. B , vol. 2, no. 4, pp.
355 – 359, 2014.
[3] N. K. Y. Sari and I. M. W. A. Putra, “Uji Aktivitas Anti- oksidan Ekstrak Daun Akasia (Acacia Auriculiformis),” J. Media Sains , vol. 2, no. 1, 2018.
[4] M. L. Zalukhu, A. R. Phyma, and R. T. Pinzon, “Proses Menua, Stres Oksidatif, dan Peran Anti Oksidan,” Cer- min Dunia Kedokt. , vol. 43, no. 10, pp. 733 – 736, 2016.
[5] A. S. W. Bawole, D. S. Wewengkang, and I. Antasio- nasti, “Aktivitas antioksidan ekstrak teripang (H. Atra) dengan metode DPPH (1, 1-diphenyl-2- picrylhydrazyl),” Pharmacon , vol. 10, no. 2, pp. 863 – 867, 2021.
[6] M. IRFANI, “PENETAPAN KADAR VITAMIN C PADA

## SEDIAAN TABLET MULTIVITAMIN DENGAN
METODE TITRASI IODIMETRI,” UMN AL -
WASHLIYAH 69 FAR 2019, 2019.
[7] E. T. Damayanti and P. Kurniawati, “Perbandingan metode penentuan vitamin C pada minuman kemasan menggunakan metode spektrofotometer UV-Vis dan iodimetri,” in dalam Seminar Nasoinal Kimia dan Pem- belajarannya, Malang , 2017.
[8] R. Leo and A. S. Daulay, “Penentuan Kadar Vitamin C Pada Minuman Bervitamin Yang Disimpan Pada Berbagai Waktu Dengan Metode Spektrofotometri UV,” J. Health Med. Sci. , pp. 105 – 115, 2022.
[9] J. Rosmianto, E. Y. Sani, A. S. Putri, and S. Haryati, “BERBAGAI KONSENTRASI GULA TERHADAP

## KARAKTERISTIK DAN ORGANOLEPTIK FRUIT
LEATHER LIKE KROKOT (Portulaca olereacea)”.
[10] L. F. Octaviani and A. Rahayuni, “Pengaruh berbagai konsentrasi gula terhadap aktivitas antioksidan dan tingkat penerimaan sari buah buni (Antidesma bunius),” Diponegoro University, 2014.
[11] P. D. Yanti, V. A. Devianti, and R. K. Wardani,
“Pengaruh lama waktu konsumsi dan penambahan gu- la terhadap kadar vitamin c pada jus buah jeruk manis (Citrus sp.) Dengan metode spektrofotometri ultravio- let,” Akad. Farm. Suarabaya , 2019.
[12] C. R. Silva, J. A. Simoni, C. H. Collins, and P. L. Volpe, “Ascorbic acid as a standard for iodometric titrations. An analytical experiment for general chemistry,” J. Chem. Educ. , vol. 76, no. 10, p. 1421, 1999.
[13] G. N. Handayany, I. Umar, and I. Ismail, “Formulasi dan uji efektivitas antioksidan krim ekstrak etanol daun botto’ - botto’(Chromolaena odorata L.) dengan metode dpph,” J. Kesehat. , vol. 11, no. 2, pp. 86 – 90, 2018.
[14] N. Febrianti, M. I. Rohmana, I. Yunianto, and R. D. Putri, “Perbandingan Aktivitas Antioksidan Buah Pepa- ya (Carica papaya L.) dan Buah Jambu Biji Merah (Psidium guajava L.),” Res. Rep. , no. 2, 2016.
[15] A. Widyasanti, D. Rohdiana, and N. Ekatama, “Aktivi- tas Antioksidan Ekstrak Teh Putih dengan Metode DPPH,” EDUFORTECH , vol. 1, no. 1, 2016.
[16] S. B. Kedare and R. P. Singh, “Genesis and develop- ment of DPPH method of antioxidant assay,” J. Food Sci. Technol. , vol. 48, pp. 412 – 422, 2011.
[17] R. T. Padmaningrum, “Titrasi Iodometri,” J. Pendidik. Kim. Unversitas Negeri Yogyak. , 2008.
[18] B. Meyiwa, “Iodometric and iodimetric titration meth- ods,” J. Wet. Health , vol. 1, no. 1, pp. 5 – 8, 2020.
[19] C. Mahendra, A. Margaret, and E. Loanda, “Per- bandingan aktivitas antioksidan berbagai minuman ekstrak buah- buahan dalam kemasan,” Tarumanagara Med. J. , vol. 3, no. 1, pp. 29 – 41, 2021.
[20] E. R. Yuslianti, Pengantar radikal bebas dan antioksidan . Deepublish, 2018.
[21] D. Susiloningrum and D. E. M. Sari, “Uji Aktivitas Anti- oksidan dan Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Temu Mangga (Curcuma mangga Valeton & Zijp) dengan Variasi Konsentrasi Pelarut,” Cendekia J. Pharm. , vol. 5, no. 2, pp. 117 – 127, 2021.
[22] F. Husni, A. S. Daulay, and H. M. N. Ridwanto, “Penetapan Kadar Vitamin C Pada Minuman Sachet Ekonomis Dengan Berbagai Merkmenggunakan Metode Spektrofotometri UV,” J. Health Med. Sci. , pp.
19 – 26, 2023.  ____________________________________