## KULTUR BAKTERI PROBIOTIK DENGAN MEDIA PREBIOTIK BERBEDA SEBAGAI AGEN BIOKONTROL BUDIDAYA UDANG
Azis, Heppi Iromo, Abdul Jabarsyah, M. Amien
Fakultas perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Borneo Tarakan
Email : azishamzah@borneo.ac.id

## ABSTRAK
Probiotik  bermanfaat  dalam  mengatur  keseimbangan  mikroba  pada  proses metabolisme  terutama  di  saluran  pencernaan  serta  menghambat  perkembangan mikroba  patogen  di  usus  serta  membantu  proses  sekresi  enzim  pada  proses pencernaan  makanan  pada  udang.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mendapatkan formulasi  media  prebiotik  yang  terbaik  untuk  perkembangan  bakteri  probiotik. Penelitian  ini  menggunakan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4 perlakuan  dan  4  ulangan. Perlakuan A : Ekstrak Kecambah Kacang Hijau + Tepung Ikan + Molase + Air Kelapa + Gula Merah ; Perlakuan B : Ekstrak Kecambah Kacang Hijau  +  Tepung  Ikan  +  Molase  +  Gula  Merah  ;  Perlakuan  C  :  Ekstrak  Kecambah Kacang Hijau + Tepung Ikan + Molase + Air Kelapa ; Perlakuan D : Tepung Ikan + Molase  +  Air  Kelapa  +  Gula  Merah.  Perkembangan  bakteri  probiotik  diukur menggunakan alat spektofotometer dengan melihat nilai absorbansinya. Perlakuan A menunjukkan  pertumbuhan  yang  lebih  stabil  sampai  hari  ke  25,  dan  paling  efektif digunakan  dalam  kultur  bakteri probiotik.  Probiotik  hasil  kultur  dapat  diaplikasikan pada budidaya udang di tambak.
Kata kunci : Absorban, bakteri, kultur, probiotik.

## PENDAHULUAN
Salah  satu  cara  untuk  meningkatkan kelulushidupan udang windu adalah dengan penggunaan probiotik. Probiotik bermanfaat dalam  mengatur  keseimbangan  mikroba pada  proses  metabolisme  terutama  di saluran  pencernaan  serta  menghambat perkembangan  mikroba  patogen  di  usus serta  membantu  proses  sekresi  enzim (Xiong,  2018)  pada  proses  pencernaan makanan, menstimulasi imunitas udang dan sebagai  perbaikan  kualitas  air  (Salminen  et al.,  1999  ;  Mansyur  dan  Tangko,  2016). Indikator peningkatan daya cerna berbanding  lurus  dengan  semakin  tinggi
nutrisi  yang  terserap  oleh  tubuh  (Jusadi et  al ., 2004).  Kegagalan  yang  paling  mendasar  dari budidaya  udang,  umumnya  disebabkan  oleh serangan penyakit dan kualitas air  yang  buruk akibat  pencemaran  (Mustafa et  al. 2019). Timbulnya penyakit disebabkan oleh ketidakstabilan  mikroba  menguntungkan  dan meningkatnya mikroba patogen, yang meningkatkan ancaman penyakit akibat bakteri yang  bermacam-macam  seperti V.  harveyi,  V. alginolyticus,  V.  parahaemolyticus ,  dan  lain- lain,  yang  umum  dikenal  sebagai  penyakit vibriosis (Valente & Wan, 2021).
Penggunaan  probiotik  merupakan  solusi internal  untuk  meningkatkan  pertumbuhan  dan efisiensi  pakan  secara  optimal,  sehingga  dapat
mengurangi  biaya  produksi  dan  beban lingkungan  akibat  akumulasi  limbah  di perairan  (Iribarren  et  al.,  2012).  Efek penggunaan probiotik terhadap peningkatan kualitas air dalam budidaya udang sebenarnya  tidak  selalu  konsisten  selama pemeliharaan, melainkan berfluktuasi karena beberapa faktor yang mempengaruhi perubahan  kualitas  air  tambak  (Gunarto, 2008).  Akibatnya,  setiap  aplikasi  probiotik tidak  selalu  menghasilkan  peningkatan produksi  udang  yang  signifikan  (Devaraja et  al.,  2002).  Oleh  karena  itu,  pemberian probiotik  harus  dilakukan  secara  tepat  dan berkala.  Namun,  keberhasilan  aplikasi probiotik  secara  luas  sangat  bergantung pada  kondisi  lingkungan  dalam  tambak udang,  terutama  pada  formulasi  media prebiotik  yang  mendukung  pertumbuhan dan aktivitas bakteri probiotik.
Penelitian  tentang  aplikasi  probiotik pada  udang  telah  banyak  dilakukan. Beberapa  di  antaranya  meliputi  penapisan bakteri probiotik dan pengaruhnya terhadap dinamika  populasi  bakteri  serta  kualitas  air dalam budidaya udang Vaname (Sukenda et al ., 2005), penggunaan probiotik, prebiotik, dan  sinbiotik  melalui  pakan  pada  Udang Vaname  (Widanarni et  al .,  2014),  serta pemberian probiotik komersial dalam pakan untuk  udang Vaname (Anwar et  al ., 2016). Harpeni et  al .  (2016)  menyatakan  bahwa kepadatan  bakteri  Bacillus  sp.  meningkat seiring  dengan  peningkatan  dosis  media teknis  ekstrak  tepung  ubi  jalar.  Kultur probiotik menggunakan media teknis ekstrak kecambah kacang hijau mempengaruhi pertumbuhan bakteri Bacillus sp. (Endah, 2014). Suminto (2008) menemukan  bahwa  perbedaan  konsentrasi molase  sangat  mempengaruhi  pertumbuhan bakteri probiotik Alkaligenes sp.
Dalam  konteks  ini,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengoptimalkan  formulasi media prebiotik yang terbaik guna mendukung aplikasi probiotik yang berkelanjutan dalam budidaya udang.
Penelitian  ini  menjadi  relevan  mengingat keberlanjutan produksi udang sangat dipengaruhi  oleh  kesehatan  dan  kinerja  udang di  dalam  tambak.  Dengan  memahami  dan mengoptimalkan  kondisi  lingkungan  di  dalam tambak melalui formulasi media prebiotik yang tepat, diharapkan dapat meningkatkan efektivitas  probiotik  dalam  meningkatkan pertumbuhan udang, mengurangi risiko penyakit,  dan  meningkatkan  kualitas  produk budidaya udang.

## BAHAN DAN METODE

## Rancangan Riset
Metode  penelitian  deskriptif  kuantitatif melalui pengembangan metode kultur probiotik dengan  media  prebiotik  berbeda  dan  aplikasi penggunaan  probiotik  skala  laboratorium. Sterilisasi  alat  dan  media  kultur  bakteri mengikuti  metode  (Dewi,  2014).  Objek  dari penelitian ini yaitu penggunaan media prebiotik  yang  berbeda  untuk  perkembangan populasi  mikroba  probiotik.  Bakteri  probiotik yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari genus Lactobacillus dan jamur fermentasi yaitu Actinomycetes .  Wadah  yang  digunakan  untuk kultur  ada  galon  air  mineral  kapasitas  25 l sebanyak  16  unit  yang  dilengkapi  dengan aerasi. Pertumbuhan sel diukur dengan menganalisis kerapatan optik ( Optical Density )  menggunakan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  550  nm,  dengan  nilai  OD sebesar  2,155  (Febriyansari,  2008).  Pada  uji kultur bakteri probiotik digunakan 4 perlakuan dan 4 ulangan yaitu:
Perlakuan A : Ekstrak Kecambah Kacang Hijau 0,5 kg + Tepung Ikan 0,2 kg + Molase 0,25 ltr + Air Kelapa 0,25 ltr + Gula Merah 0,2 kg
Perlakuan B : Ekstrak Kecambah Kacang Hijau
0,5 kg + Tepung Ikan 0,2 kg + Molase 0,25 ltr + Gula Merah
0,2 kg
Perlakuan C : Ekstrak Kecambah Kacang Hijau 0,5 kg + Tepung Ikan 0,2 kg +
Molase 0,25 ltr + Air Kelapa 0,25 ltr Perlakuan D : Tepung Ikan 0,2 kg + Molase 0,25 ltr + Air Kelapa 0,25 ltr + Gula Merah 0,2 kg Perlakuan E : Tanpa perlakuan (kontrol)
Semua  bahan  dicampur  dengan  air laut  steril  sebanyak  15  ltr  per  galon, sebelum  dimasukkan  ke  galon  bahan tersebut disaring agar ampas prebiotik tidak ikut kedalam media kultur.

## Pengambilan/Pemilihan Sampel
Sampel pada masing-masing
perlakuan diambil sebanyak 15 ml kemudian  diamati  kepadatan  mikroba probiotik  menggunakan  sepektofotometer.
Pengukuran
perkembangan mikroba probiotik  dilakukan  selama  25  hari  yaitu pada  hari  1  –  6  dilakukan  setiap  24  jam, pengamatan  selanjutnya  pada  hari  ke-10, 15,  20  dan  hari  ke-25.  Data  hasil pengukuran  ditampilkan  secara  deskriptif dalam bentuk grafik, serta diuji menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  selang  kepercayaan  95%, jika  berbeda  nyata  dilanjutkan  dengan  uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Keamanan  pangan  telah  menjadi perhatian dunia diberbagai negara. Aplikasi probiotik dianggap sebagai alternatif berkelanjutan yang lebih ramah lingkungan dibandingkan  dengan  antibiotic.  Namun penggunaan  bakteri  probiotik  harus  benar- benar selektif dan hati-hati agar tidak terjadi patogenitas pada kultivan yang dibudidayakan.  Kandidat  bakteri  probiotik biasanya  diambil  dari  lingkungan  budidaya ikan atau bakteri pada usus ikan atau udang yang  tidak  bersifat  pathogen  serta  dengan syarat  bakteri  tersebut  tidak  memiliki potensi  toksigenik,  seperti  ; Lactobacillus
sp., Saccharomyces cerevisiae , dan lain-lain.

## Pertumbuhan Bakteri
Pertumbuhan  bakteri  adalah  proses peningkatan  ukuran,  substansi,  atau  massa  zat suatu  organisme.  Umumnya,  pertumbuhan bakteri  bergantung  pada  ketersediaan  nutrisi serta  kondisi  lingkungan  yang  mendukung (Torpee et  al .,  2021).  Jika  makanan  dan lingkungan  sesuai, mikroorganisme  akan tumbuh  dalam  waktu  yang  relatif  singkat  dan optimal. Berdasarkan hasil pengamatan pertumbuhan bakteri probiotik pada Gambar 1 menunjukkan bahwa terdapat perbedaan pertumbuhan  bakteri  probiotik  pada  setiap perlakuan.
2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0,00 H0 H1 H2 H3 H4 H5 H6 H10 H15 H20 H25
Waktu pengamatan (hari) Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D Kontrol
Gambar  1 .  Pertumbuhan  bakteri  menggunakan  analisa  kerapatan  optic  (OD)  selama  25  hari pengamatan.
Dalam  percobaan  ini,  pada  hari  ke-1 hingga  hari  ke-3  terjadi  puncak  populasi bakteri  di  dalam  kultur.  Jumlah  bakteri probiotik  meningkat  secara  signifikan selama  periode  ini,  menunjukkan  adanya pertumbuhan  yang  kuat  dan  aktif.  Hal  ini dapat  disebabkan  oleh  ketersediaan  nutrisi yang  mencukupi  dari  kombinasi  bahan prebiotik  yang  digunakan.  Namun,  pada hari ke-3 terjadi penurunan populasi bakteri dalam  jumlah  yang  kecil.  Penurunan  ini mungkin  terjadi  karena  beberapa  faktor, seperti  pertempuran  kompetitif  antara bakteri probiotik dan bakteri patogen dalam kultur, perubahan kondisi lingkungan seperti pH atau suhu,  atau adanya fluktuasi alami dalam pertumbuhan bakteri.
Setelah  periode  penurunan  tersebut, pertumbuhan  bakteri  probiotik  kembali stabil  mulai  dari  hari  ke-4  hingga  hari  ke- 24.  Jumlah  bakteri  tetap  konstan  dan  tidak mengalami fluktuasi yang signifikan selama periode  ini.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kondisi  kultur  dan  kombinasi  bahan
prebiotik memberikan lingkungan yang optimal bagi  pertumbuhan  dan  kelangsungan  hidup bakteri  probiotik.  Hasil  ini  mengindikasikan bahwa  kombinasi  bahan  prebiotik  yang digunakan  dalam  percobaan  ini  memberikan dukungan  yang  konsisten  bagi  pertumbuhan bakteri  probiotik  setelah  periode  penurunan awal.  Pertumbuhan  yang  stabil  dari  hari  ke-4 hingga  hari  ke-24  menunjukkan  bahwa kombinasi  bahan  prebiotik  memberikan  nutrisi yang  cukup  dan  lingkungan  yang  sesuai  untuk pertumbuhan bakteri probiotik secara berkelanjutan.
Molases,  dengan  kandungan  glukosa, fruktosa, dan sukrosa, memberikan nutrisi yang diperlukan  bagi  bakteri  probiotik  untuk berkembang  biak.  Tepung  kecambah,  dengan serat,  protein,  dan  karbohidrat  kompleksnya, membantu memperbaiki kondisi saluran pencernaan
bakteri probiotik dan meningkatkan  penyerapan  nutrisi.  Seiring berjalannya  waktu,  tepung  ikan  memberikan kontribusi  penting  dalam  memberikan  sumber protein  yang  kaya  akan  asam  amino  esensial.
Perhit u n gan b ak teri (O D )
Protein  yang  ada  dalam  tepung  ikan membantu  memenuhi  kebutuhan  nutrisi bakteri probiotik, memastikan pertumbuhan mereka  yang  optimal  dan  pemeliharaan  sel yang baik.
Selama  masa  kultur,  air  kelapa menjadi  sumber  elektrolit  alami  yang membantu  menjaga  keseimbangan  cairan dan  elektrolit  dalam  lingkungan  kultur. Dengan kandungan mineral seperti natrium, kalium, magnesium, dan kalsium, air kelapa (Carvalho et al. 2006), mendukung kelangsungan  hidup  bakteri  probiotik  dan memastikan  kondisi  yang  optimal  untuk pertumbuhan  mereka  (Praia,  et  al.  2021). Kombinasi  bahan  prebiotik  ini  bekerja secara  sinergis  untuk  memberikan  kondisi yang menguntungkan bagi bakteri probiotik sejak  awal  kultur  hingga  hari  ke  -  24. Pertumbuhan  yang  stabil  dari  hari  ke  4 sampai  hari  ke-24,  menunjukkan  adanya keseimbangan yang baik antara nutrisi yang disediakan  oleh  bahan  prebiotik  dan kebutuhan bakteri probiotik untuk berkembang biak.
Pemberian  ekstrak  kecambah  kacang hijau,  tepung  ikan,  molase,  air  kelapa,  dan gula  merah  bertujuan  untuk  menyediakan nutrisi yang tepat bagi pertumbuhan bakteri sehingga  kultur  dapat  berjalan  optimal. Kecambah  kacang  hijau  mengandung nutrisi  yang  sangat  bermanfaat  bagi pertumbuhan  bakteri,  seperti  protein,  besi, amilum,  belerang,  minyak  lemak,  kalsium, magnesium,  niasin,  mangan,  dan  vitamin (B1, A,  dan E). Nutrisi ini menjadi  sumber karbon dan nitrogen yang digunakan bakteri sebagai sumber energi dan bahan pembentuk asam laktat, sedangkan nitrogen digunakan untuk pembentukan biomassa sel (Nisa et al ., 2001). Kecambah kacang hijau mengandung  gula  dalam  bentuk  sukrosa, fruktosa,  dan  glukosa,  yang  digunakan sebagai  sumber  karbon  untuk  bakteri. Menurut  Yeni  (2016),  glukosa  berfungsi sebagai  sumber  karbon  yang  baik  bagi pertumbuhan bakteri Bacillus sp. Gula yang
dikonsumsi  dalam  media  digunakan  oleh bakteri  untuk  pertumbuhan  dan  pemeliharaan sel,  serta  pembentukan  asam-asam  organik. Protein  dalam kacang hijau mengandung  asam amino  esensial  seperti  triptofan  (1,35%), treonin  (4,50%),  fenilalanin  (7,07%),  metionin (0,84%),  lisin  (7,94%),  leusin  (12,90%), isoleusin (6,95%), dan valin (6,25%). Kandungan  nutrisi  kecambah  kacang  hijau yang  lengkap  mampu  memberikan  kondisi terbaik  untuk  pertumbuhan  bakteri  probiotik (Endah, 2014). Media kultur bakteri yang kaya nutrisi mendukung pertumbuhan dan perkembangan  bakteri,  dengan  mengandung sumber  karbon,  nitrogen,  belerang,  fosfat, logam mikro, vitamin, penyubur, NaCl, dan air (Hidayat et al ., 2008).
Perlakuan  A  menunjukkan  pertumbuhan yang  lebih  stabil  sampai  hari  ke  25,  pada perlakuan B didapatkan nilai OD pada hari ke-25 yakni 1,89 lebih kecil dari perlakuan C yaitu 2,01 dan  perlakuan  D  sebesar  2,0.  Namun  pada perlakuan  E  (kontrol)  nilai  OD  paling  rendah yakni  0,01.  Hal  ini  membuktikan  bahwa pemberian  nutrisi  tambahan  pada  kultur  bakteri sangat penting untuk pertumbuhan dan perkembangan  bakteri.  Menurut  Endah  (2014), bahwa perlu adanya penambahan sumber karbon lain seperti asam amino esensial yang terkandung dalam  kecambah  kacang  hijau  yang  membantu pertumbuhan  sehingga  kebutuhan  sumber  energi untuk bakteri tercukupi. Sumber karbon berfungsi  sebagai  sumber  energi,  sementara nitrogen  digunakan  untuk  membentuk  biomassa sel. Pada fase pertumbuhan, bakteri memanfaatkan  protein  sebagai  sumber  nitrogen untuk  sintesis  protein  dan  asam  amino  (Nisa et al., 2001).  Pertumbuhan  bakteri  probiotik memerlukan  komposisi  nutrisi  tertentu  yang penting  untuk  perkembangan  mereka,  sehingga perlu  memahami  karakteristik  bakteri  tersebut. Penting  untuk  memastikan  ketersediaan  nutrisi yang  mendukung  kehidupan  bakteri  probiotik selama proses kultur.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan bahwa jenis media yang digunakan  memiliki  pengaruh  signifikan terhadap  pertumbuhan  bakteri  probiotik. Perlakuan  A  menunjukkan  pertumbuhan  yang lebih  stabil hingga hari ke-25 dan merupakan media  kultur  yang  paling  efektif  untuk digunakan dalam kultur bakteri probiotik.

## DAFTAR PUSTAKA
Carvalho  JM,  Maia  GA,  de  Sousa  PHM,
GAM (2006) Água-de-coco: Propriedades  nutricionais,  funcionais e  processamento.  Semina:  Ciências
Agrárias 27: 437-452
Devaraja,  T.N.,  Yusoff,  F.M.,  Shariff,  M.,
2002. Changes in bacterial populations  and shrimp  production in ponds treated with commercial microbial  product.  Aquaculture  206, 245– 256.
Dewi  E.R.S.  2014.  Pertumbuhan  Kultur Probiotik  Hasil  Isolat  Bakteri  Non Patogen Dalam Berbagai Jenis Media. Bioma, Vol. 3, No. 1 .
Endah  R.S.D.  2014.  Pertumbuhan  Kultur Probiotik  Hasil  Isolat  Bakteri  Non Patogen Dalam Berbagai Jenis Media. Universitas PGRI, Semarang.
Febriyansari,    A.N.    2008.    Penerapan Model Gompertz Pada pertumbuhan Bakteri L. acidophilus  dan  B.  Longum  Di Media Adonan Es Krim (Ice Cream Mix  atau ICM) Jenis Standar.  Skripsi  tidak  diterbitkan. Malang:  Universitas Brawijaya.
Gunarto.  2008.  Pengaruh  penggunaan probiotik  pada  kualitas  air  budidaya
udang  vaname(Litopenaeus  vannamei) pola  semi  intensif  di  tambak.  Makalah disajikan  pada  acara  seminar  Nasional Perikanan  yang  diselenggarakan  oleh Masyarakat Akuakultur Indonesia,
Lampung 8–10 Juli 2008, hlm. 4-7.
Harpeni,  E.,  A.  Setyawan,  L.  Santoso  and  Z. Arifin.  2016.  Efektivitas  ekstrak  tepung ubi  jalar  sebagai  media  teknis  bakteri probiotik.  Proceeding  Seminar  Nasional MIPA  2016: 127- 130. Jatinangor, 27-28
Oktober 2016.
Hidayat N, Masdiana C. Padaga. Sri Suhartini.
2008.  Mikrobiologi  Industri.  Penerbit Andi Yogyakarta.
Iribarren, D., P. Dagá. And M. T. Moreira., G. Feijoo.  2012.  Potential  environmental effects  of probiotics used in  aquaculture.
Aquacult Int 20:779-789.
Jusadi,  D.,  E.  Gandora,  I.  Mokoginta.
2004. Pengaruh penambahan probiotik basillus  sp  pada  pakan komersil  terhadap  konversi  pakan  dan pertumbuhan  ikan  patih (pengasius hypopthalmus).  Jurnal  akultur  Indonesia, 3(1): 15-118.
Mustafa., M.F, Bunga., M, Achmad., M.  2019. Use  of  probiotics  to  fight  bacterial populations  of  Vibrio  sp.  on  vaname shrimp cultivation (Litopenaeus
vannamei).  Journal  Fishery  and  Marine Science. Vol. 2 (2). 69-76.
Nisa, Fithri Choirun., Hani R.H., Tri Wastono., B. Baskoro., Moestijanto. 2001. Produksi Nata  dari  Limbah  Cair  Tahu  (Whey):
Kajian Penambahan Sukrosa dan Ekstrak Kecambah.  Jurnal  Teknologi  Pertanian. Vol. II, No. 2 : 74-78.
Praia,  A.B,  Júnior,  G.C.A.C,  Guimarães,
A.G.D.S,  Rodrigues,  F.L,  Ferreira,
N.R.  2021.  Coconut  Water-Based Probiotic  Drink  Proposal:  Evaluation of  Microbiological  Stability  and
Lactic  Acid  Estimation.  J  Food  Sci Nutr. Vol. 6 : 062 : 1 – 7.
Sukenda;  A.J.  Sihombing;  F.  Novianti; Widanarni.  2005.  Penapisan  Bakteri Probiotik  dan  Peranannya  terhadap
Infeksi  Buatan Vibrio  harveyi pada Udang Vanname (Litopenaeus vannamei). Jurnal Akuakultur Indonesia. 4(2): 181-187
Suminto, 2008. Pertumbuhan Bakteri Probiotik Alkaligenus Sp Dan
Flavobacterium  Sp  Yang  Diisolasi dari  Usus  Udang  Pada  Media  Kultur Molase  Dan  Kaolin.  Universitas
Diponegoro, Semarang.
Torpee  S,  Kantachote  D,  Rattanachuay  P, Chiayvareesajja  S,  Tantirungkij  M. 2021.  Dietary  supplementation  with probiotic  Rhodobacter  sphaeroides SS15 extract to control acute
hepatopancreatic necrosis disease (AHPND)-causing Vibrio parahaemolyticus  in  cultivated  white shrimp. Journal Invertebrate Pathology 186: 107585.
Valente C.D.S., Wan A.H. 2021. Vibrio and
major commercially
important vibriosis
diseases in decapod
crustaceans.  Journal  of  Invertebrate
Pathology 181: 107527.
Widanarni,  Noermala,  J.I,  Sukenda.  2014. Prebiotic,  probiotic,  and  synbiotic  to control Vibrio harveyi and IMNV co- infection  in Litopenaeus  vannamei .
Jurnal  Akuakultur  Indonesia  13  (1),
11–20.
Xiong  J.  2018.  Progress  in  the  gut  microbiota in exploring shrimp disease pathogenesis and incidence. Applied Microbiology and Biotechnology 102: 7343–7350.
Yeni.,  A.  Meryandini,  A,  Sunarti  T.C.  2016. Penggunaan  Substrat  Whey  Tahu  untuk Produksi  Biomassa  oleh Pediococcus Pentosaceus E.1222.  Jurnal  Teknologi Industri Pertanian. 26 (3): 284-293.