Vol. 12 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291
Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/

## UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK
KULIT BATANG KAYU MANIS (Cinnamomum burmannii) TERHADAP KULTUR SEL T47D

## DETERMINATION OF CYTOTOXIC ACTIVITY FROM CINNAMON STEM BARK FOR T47D CELL CULTURE
Wiwin Herdwiani 1 , Endang Sri Rejeki 1 ,
Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi herdwiani@gmail.com HP 085230234003
_____________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Kayu manis adalah tanaman yang biasa digunakan sebagai penambah aroma pada masakan. Kayu  manis  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  dari  pengobatan  kanker.  Kandungan  dari  kulit  kayu manis diantaranya minyak atsiri, safrole, sinamaldehid, eugenol, tanin, flavonoid, saponin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol kulit kayu manis terhadap sel kanker payudara T47D.
Ekstrak etanol kulit kayu manis diperoleh melalui metode maserasi dengan pelarut etanol 96%. Kandungan sinamaldehid  dan flavonoid dalam ekstrak tersebut dideteksi dengan  kromatografi lapis tipis (KLT). Uji sitotoksik dilakukan menggunakan sel kanker payudara T47D dengan metode uji 3- [4,5-dimetilthiazol-2yl]-2,5-difeniltetrazolium  bromide  (MTT)  dan  dibaca  absorbansinya  pada  ELISA reader.  Parameter  yang  digunakan  adalah  IC50  dan  digunakan  doksorubisin  sebagai  kontrol positifnya.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit kayu manis memiliki efek sitotoksik terhadap  sel  kanker  payudara  T47D  dengan nilai  IC50  71,157  µg/ml.  Hal  tersebut  menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit kayu manis berpotensi untuk dikembangkan sebagai agen kemopreventif.
Kata  kunci: kayu  manis  (Cinnamomum  burmanni  Ness  ex.  Bl.),  doksorubisin,  sel  T47D,  sitotoksik, MTT .
_____________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Cinnamon is plant commonly used as an aroma enhancer in cooking. Cinnamon can be used as  an  alternative  cancer  treatment.  The  content  of  cinnamon  bark  essential oil  including,  safrole, cinnamaldehyde, eugenol, tannins, flavonoids, saponins. This study aimed to examine the cytotoxic activity of ethanol extract skin cinnamon to inhibit T47D breast cancer cell activity.
Ethanol  extract  skin cinnamon  was  obtained through maceration method  by 96%  ethanol. The content of flavonoids and cinnamaldehyde was detected by Thin Layer Chromatography (TLC). Cytotoxic  test  on  breast  cancer  cells  T47D  used  3-[4,5-dimetilthiazol-2yl]-2,5-difeniltetrazolium bromide (MTT) method and the absorbance was read at ELISA reader. Parameter single cytotoxic test is IC50.and its cytotoxic activity was compared with doxorubicin.
The result showed that ethanol extract skin cinnamon had cytotoxic effect on breast cancer T47D with IC50 71,157 µg/ml. The ethanol extract skin cinnamon has the potential to be developed as a cemoprefentive agency .
Keywords : cinnamon (Cinnamomum burmanni Ness ex. Bl.), doxorubicin, T47D cell lines, cytotoxic, MTT .
_______________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Kanker  adalah  penyakit  yang ditandai  dengan  pergeseran  mekanisme kontrol  yang  mengatur  kelangsungan hidup,  proliferasi  dan  diferensiasi  sel (Katzung  2010).  Nama carcinos atau carcinoma atau  kanker  pertama  kali diperkenalkan  oleh  Hipocrates,  seorang dokter  Yunani  pada  400  tahun  SM (Sukardja, 2000).
Kanker    menempati  peringkat kedua  setelah  kardiovasculer  dalam menimbulkan  kematian  di  Inggris  dan Amerika  Serikat  (Di  Piro et  al ,  1997).
Meskipun  belum  ada  data  yang  pasti  di Indonesia,  tetapi  dari  berbagai  laporan terdapat kenaikan jumlah kasus, data dari Depkes  didapati  angka  1,8  per  100.000 penduduk (Depkes, 2006).
Sampai  saat  ini  obat  kanker  yang benar-benar  efektif  dan  aman  belum ditemukan.  Hal  ini  karena  rendahnya selektifitas  obat-obat  kanker  yang digunakan  maupun  karena  belum diketahuinya  dengan  jelas  proses karsinogenesis  itu  sendiri.  Apalagi  obat kanker  harus  diminum  dalam  jangka panjang.  Karenanya  penemuan  obat kanker  alami  yang  aman  dan  efektif mutlak  diperlukan  (Nurrochmad  & Kristina, 2004).
Kayu  manis  merupakan  salah  satu tanaman  obat  tradisional  yang  telah diteliti  kegunaannya  sejak  lama.  Kayu manis  bisa  digunakan  untuk  obat sariawan,  obat  batuk,  sesak  napas,  nyeri lambung, perut kembung, diare, rematik, menghangatkan  lambung  dan  sebagai anti  kanker.  Diduga  senyawa  aktif  yang bertanggungjawab  terhadap  aktifitas  anti kanker  dalam  kayu  manis  adalah
kandungan  zat  aktif  cinnamaldehyde (Kwon et al ,1997). Penelitian pendahuluan menunjukkan  bahwa  cinnamaldehyde mampu  menghambat  proliferasi,  invasi, dan pertumbuhan tumor. Cinnamaldehyde  yang  diisolasi  dari C
cassia juga  telah  terbukti  memiliki  efek sebagai antiangiogenesis. Sehingga dapat disimpulkan  bahwa  cinnamaldehyd  dan derivatnya  memiliki  aktivitas  antitumor (Kwon et  al ,  1998).  Akan  tetapi  belum banyak  pustaka/  data  aktivitas  sitotoksik terhadap  species  kayu  manis  yang tumbuh  di  Indonesia  ( Cinnamomum burmannii ).  Maka,  berdasar  penelitian yang sudah dilakukan dan data-data yang tersedia  maka  sangat  penting  kiranya untuk  mengetahui  bagaimana  aktivitas sitotoksik  spesies  kayu  manis  yang tumbuh  di  Indonesia  ( Cinnamomum burmannii )  terhadap  kultur  sel  kanker T47D,  sehingga  diperoleh  berbagai  data pendukung  aktivitas  tanaman  kayu manis, khususnya terhadap pengembangan  aktivitas  antikanker.
Adapun  tujuan  penelitian  ini  adalah untuk  mendapatkan    data  aktivitas sitotoksik  ekstrak  n-hexana  kulit  batang kayu  manis  ( Cinnamomum  burmanii ) terhadap  kultur  sel  T47D.  Untuk mendapatkan  nilai  IC  50  ekstrak  n- hexana  kulit  batang  kayu  manis ( Cinnamomum burmanii ) terhadap kultur sel kanker payudara T47D.

## METODE PENELITIAN
Pembuatan Ekstrak etanol Kayu Manis Tanaman  kayu  manis  yang  sudah dideterminasi  di  Lab  Morfologi  & Sistematika  Tumbuhan  USB,  diambil kulit  batang  kayunya.    Kulit  kayu
selanjutnya  dikeringkan  dan  diserbuk. Kemudian  dilakukan  ekstraksi  dengan metode  maserasi  menggunakan  pelarut etanol.  Serbuk  kayu  manis  sebanyak 1000g  ditimbang  dan  ditambahkan pelarut  750ml,  kemudian  ditutup  rapat, direndam  selama  5  hari.  Selama  proses maserasi  setiap  hari  dikocok  sesekali. Selanjutnya disaring dan  dipisahkan dari pelarutnya  dengan vaccum  evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kental  (Voigt, 1994).
Metode  Uji  aktivitas  sitotoksik  ekstrak kulit batang kayu manis.
Sterilisasi  alat .  Alat-alat  gelas  yang akan  digunakan  harus  dalam  keadaan steril,  dapat  dicuci dengan  deterjen atau antiseptik, lalu  dibilas  dengan  air  bersih mengalir  dan  direndam  dalam  aquadest selama  1  jam  kemudian  dikeringkan dalam  oven  selama  24  jam.  Setelah kering, alat-alat tersebut diberi tanda dan dimasukkan ke dalam autoklaf selama 20 menit pada suhu 121 o C. Pengaktifan  sel. Sel  yang  inaktif diambil  dari  tangki  nitrogen  cair  dan segera  dicairkan  pada  suhu  37 o C kemudian  vial  disemprot  dengan  etanol 70%.  Di  dalam  LAF,  sel  WiDr dimasukkan dalam tabung sentrifuge lalu disentrifugasi  dengan  kecepatan  1500 rpm  selama  15  menit.  Supernatan dibuang,  endapan  yang  terbentuk ditambah  media  penumbuh  RPMI  1640 dengan  FBS  10%.  Selanjutnya  sel ditumbuhkan  dalam  beberapa tissue
culture flask kecil  (2-3 buah) dan diamati
di bawah mikroskop untuk memperkirakan  jumlah  sel.  Sel  hidup kelihatan bulat-bulat, jernih, dan
bersinar.  Flask  dimasukkan  dalam inkubator  beraliran CO 2 5%    pada  suhu 37 o C  dengan  tutup  flask  dikendorkan. Setelah  24  jam,  mediu  diganti  dan  sel ditumbuhkan  lagi  hingga  konfluen  serta jumlahnya cukup untuk penelitian.
Panen  dan  perhitungan  sel. Kultur sel  WiDr  yang  telah  konfluen  dipanen dengan  tripsin.  Sel  dipindah ke  dalam tabung conical steril dan ditambah media RPMI  1640  hingga  volume  10  ml  dan disentrifugasi  dengan  kecepatan  1500 rpm  selama  5  menit.  Supernatan dibuang,  ditambahkan  3  ml  media  dan diresuspensikan.  Diambil  10  µl  dan dipipetkan  ke haemocytometer lalu sel dihitung di bawah mikroskop inverted .
A B D C
Gambar 2. Skema bilik hitung dalam haemocytometer Haemocytometer terdiri dari  empat  bilik hitung.  Tiap  bilik  hitung  terdiri  dari  16 kotak.  Sel  yang  gelap  (mati),  sel  yang berada  di  batas  luar sebelah  atas,  dan sebelah kanan tidak ikut dihitung. Sel di batas kiri dan batas bawah ikut dihitung. Lalu  dihitung  sel-sel  per  ml  dengan rumus :
Jumlah sel terhitung/ml =
x 10 4
Setelah  itu jumlah  suspensi  sel yang  harus  diambil  dan  jumlah  media yang  harus  ditambahkan  dihitung  untuk memperoleh  konsentrasi  sel  sebesar  2  x 10 4 sel/100µl.  Sel  didistribusikan  ke dalam microplate sumuran  96  dengan konsentrasi  2  x  10 4 sel/sumuran  dalam 100  µl  kemudian  diinkubasi  selama  24 jam untuk beradaptasi dan menempel di sumuran  sampai  sel  siap  untuk  diberi perlakuan minyak atsiri kulit batang kayu manis.
Uji  sitotoksik. Sebanyak  100 μ L larutan uji disuspensikan dengan 100 μ L sel  dalam  medium  RPMI  1640 (kepadatan  2  x  10 4 sel/sumuran)  dan dimasukkan  kedalam microplate 96. Kemudian  sel  diinkubasi  selama  24  jam dalam  inkubator  CO 2 5  %.  Sampel masuk  dalam plate dengan  variasi  kadar 37,5 ; 75 ; 150 ; 300 μ g/mL. Selanjutnya plate diinkubasi  dalam  inkubator  CO 2 5 %  selama  24  jam.  Sel  yang  hidup  akan bereaksi dengan MTT membentuk warna ungu  (formazan).  Lalu  dibuang  media sel, ditambahkan 110 μ L reagen MTT ke setiap  sumuran,  termasuk  kontrol  media (tanpa sel). Setelah diinkubasi berjalan 4 jam,  ditambahkan  100 μ L  SDS  ( Sodium Dodecyl Sulfate ) 10 % untuk
menghentikan  reaksi  antara  sel  hidup.
Pada  akhir  inkubasi  serapan  dibaca dengan  ELISA reader pada  panjang gelombang 595 nm.

## HASIL PENELITIAN Hasil identifikasi sampel kulit kayu manis
Bahan  utama  dari  penelitian  ini adalah    kulit  batang  kayu  manis  yang diperoleh  di  Ambarawa,  Kabupaten Semarang,  Jawa  Tengah.    Identifikasi sampel  kulit  kayu  manis  dilakukan  di unit  Laboratorium  Farmakognosi,  Bagian Biologi Farmasi, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta. Berdasarkan hasil identifikasi tersebut  dinyatakan  bahwa  sampel  yang diteliti adalah benar-benar tanaman kayu manis Cinnamomum burmanni Nees ex. Bl.
Hasil  penetapan  susut  pengeringan serbuk kulit kayu manis
Tujuan  dari  penetapan  susut pengeringan  adalah  untuk  mengetahui hasil  dari  serbuk  kulit  kayu  manis  yang didapatkan apakah memenuhi
persyaratan  atau  tidak,    dengan  standar yang  telah  ditetapkan  menggunakan  alat Moisture  Balance .  Hasil  penetapan kandungan  lembab  serbuk  kulit  kayu manis dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Hasil penetapan susut pengeringan dalam serbuk kulit kayu manis Berat awal (g) Berat akhir (g) Susut pengeringan (%) 2 1,85 7,5 2 1,85 7,5 2 1,86 7,0 Rata-rata 7,3
Persentase  rata-rata  penetapan susut  pengeringan  serbuk  kulit  kayu manis  yaitu  7,3%.  Nilai  tersebut menunjukkan bahwa tanaman kulit kayu manis memenuhi syarat, dimana menurut  Depkes  (1985)  proses  reaksi enzimatis di dalam sel dan pertumbuhan mikroba  terjadi  pada  tumbuhan  dengan susut pengeringan lebih dari 10%.
Pembuatan  ekstrak  etanol  kulit  kayu manis
Proses  ekstraksi  serbuk  kulit  kayu manis  menggunakan  metode  maserasi karena  pengerjaannya  relatif  sederhana dan  untuk  menghindari  kerusakan senyawa  aktif  yang  tidak  tahan  terhadap pemanasan  dan  biasanya  digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung  bahan  aktif  yang  mudah larut dalam pelarut dan tidak mengandung zat yang mudah mengembang  dalam  cairan  penyari
(Voigt,  1994).  Pelarut  yang  digunakan adalah etanol  96%,  karena  etanol merupakan  pelarut  universal,  sehingga dapat  menarik  sebagian  besar  senyawa yang  ada  pada  kulit  kayu  manis. Penggunaan  etanol  (96%  b/v)  sering dapat  menghasilkan  suatu  bahan  aktif yang  optimal,  dimana  bahan  pengotor hanya  dalam  skala  kecil  turut  dalam penyarian (Voigt 1994). Wadah maserasi yang  digunakan  berkaca  gelap  untuk menghindari dari sinar matahari
langsung.  Proses  maserasi  dilakukan dalam keadaan tertutup agar etanol tidak menguap  pada  suhu  kamar.  Proses penguapan  dilakukan dengan vaccum rotary evaporator , keuntungannya adalah dapat  mencegah  terurai  atau  rusaknya senyawa  aktif  yang  tidak  stabil  terhadap suhu tinggi. Dari serbuk kulit kayu manis sebanyak  250  g  menghasilkan  ekstrak kental sebanyak 73,975 g. Ekstrak etanol kulit kayu manis menghasilkan rendemen 29,59%.
Uji  kadar  air  ekstrak  etanol  kulit  kayu manis
Tujuan  dari  penetapan  kadar  air ekstrak  etanol  kulit  kayu  manis  adalah untuk  mengetahui  kadar  air  ekstrak etanol kulit kayu manis, yang diharapkan dapat  memenuhi  persyaratan.  Hasil penetapan  kadar  air  ekstrak  etanol  kulit kayu manis dapat dilihat pada Tabel 1.
Persentase  rata-rata  penetapan kadar air ekstrak etanol kulit kayu manis yaitu 4,99 %. Nilai tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit kayu  manis  memenuhi  syarat,  dimana menurut  Depkes  (1985)  proses  reaksi enzimatis di dalam sel dan pertumbuhan mikroba  terjadi  pada  tumbuhan  dengan kadar air lebih dari 10%. Selain itu, jika kadar  airnya  terlalu  tinggi  dapat mengganggu  perhitungan  konsentrasi ekstrak  etanol  kulit  kayu  manis  pada  uji sitotoksik. Tabel 1. Hasil penetapan susut pengeringan dalam serbuk kulit kayu manis Berat awal (g) Berat akhir (g) Susut pengeringan (%) 2 1,85 7,5 2 1,85 7,5 2 1,86 7,0 Rata-rata 7,3

## Hasil identifikasi kandungan senyawa
kimia ekstrak etanol kulit kayu manis secara kualitatif
Identifikasi  senyawa ekstrak  etanol kulit kayu manis yang dilakukan dengan melihat  adanya  perubahan  warna, terbentuknya  buih,  terjadi pengendapan yang  bertujuan  untuk  mengetahui golongan  senyawa  yang  terkandung  di dalam  ekstrak.  Golongan  senyawa  yang diidentifikasi  adalah  alkaloid,  saponin, flavonoid, tanin dan terpen. Hasil dari uji pereaksi  warna  dapat  dilihat  pada  tabel 2.
Tabel 2. Hasil identifikasi senyawa kimia dengan uji pereaksi warna Golongan senyawa Hasil Alkaloid + Saponin + Flavonoid + Tanin + Triterpen +

## Hasil identifikasi KLT
Pemeriksaan  kandungan  kimia ekstrak  etanol  kulit  kayu  manis diarahkan  pada  golongan  senyawa sinamaldehid,  sesuai  dengan  golongan senyawa  yang  terdapat  dalam  jumlah melimpah pada kayu manis (Wijayanti et al .,  2010)  dan  flavonoid  yang  diketahui memiliki  aktivitas  antioksidan  dan antiproliferatif (Kuo YC et al., 2005).
Pemeriksaan  kandungan  kimia senyawa  sinamaldehid  dilakukan  secara kualitatif  menggunakan  fase  gerak toluene-etil asetat (93 : 7) dan fase diam silika gel GF 254 , pereaksi penampak yang dipakai  adalah  vanillin-asam  sulfat  serta sinamaldehid  murni  yang  digunakan sebagai pembandingnya. a) b)
c)
Gambar 6. Profil KLT sinamaldehid (S) dan ekstrak etanol kulit kayu manis (E) dengan fase diam  Silicagel  60  F 254 ,  fase  gerak  toluen - etil  asetat  (93:7)  dan  disemprot dengan  vanilin  asam  sulfat  serta  dideteksi  sinar  UV  a)  254  nm,  b)  365,  c) visibel.
E
S S E E S
Identifikasi  menunjukkan  hasil yang positif terhadap adanya kandungan sinamaldehid  karena  setelah  diberi pereaksi penampak menimbulkan bercak warna biru dan diperoleh nilai Rf sebesar 0,71.
Pemeriksaan  kandungan  kimia senyawa  flavonoid  menggunakan  fase gerak  Butanol-Asam  Asetat-Air  (3:1:1) dan  fase  diam  silika gel  GF 254 ,  pereaksi penampak yang dipakai adalah Aluminium  chlorida  serta  falvonoid golongan  rutin  digunakan  sebagai pembandingnya.
Hasil Uji Sitotoksik dengan MTT assay.
Uji  MTT  merupakan  uji  yang sensitif, kuantitatif dan terpercaya. Reaksi MTT  merupakan  reaksi  reduksi  selular yang didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium  MTT  berwarna  kuning menjadi  kristal  formazan  berwarna  biru keunguan  (Basmal et  al., 2009).  Metode perubahan  warna  tersebut  digunakan mendeteksi  adanya  proliferasi  sel.  Sel
yang  mengalami  proliferasi,  mitokondria akan  menyerap  MTT  sehingga  sel-sel tersebut  akan  berwarna  ungu  akibat terbentuknya kristal tetrazolium (formazan) (Depamede et al. 2009)
Reaksi  MTT  merupakan  reaksi  reduksi selular yang didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium MTT berwarna kuning menjadi  kristal  formazan  berwarna  biru keunguan  (Basmal et  al. 2009).  Metode perubahan  warna  tersebut  digunakan mendeteksi  adanya  proliferasi  sel.  Sel yang  mengalami  proliferasi,  mitokondria akan  menyerap  MTT  sehingga  sel-sel tersebut  akan  berwarna  ungu  akibat terbentuknya kristal tetrazolium (formazan) (Depamede et al. 2009).
Morfologi sel pada ekstrak etanol kulit kayu manis konsentrasi 7,8125 ppm tidak  jauh  berbeda  jika  dibandingkan dengan  kontrol  sel.  Sel  berbentuk lonjong,  bergerombol  dan  tidak  terlihat adanya sel yang lisis. a) b) c)
Gambar 7. Profil KLT flavonoid  rutin (R) dan ekstrak etanol kulit kayu manis (E) dengan fase  diam  Silicagel  60  F 254 ,  fase  gerak  butanol - asam  asetat - air  (3:1:1)  dan disemprot dengan aluminium chlorida serta dideteksi sinar UV a) 254 nm, b) 365, c) visibel.
E E E R R R
Kontrol sel
Ekstrak konsentrasi 500 ppm Ekstrak konsentrasi 62,5ppm Ekstrak konsentrasi 7,8125 ppm Doksorubisin konsentrasi 100 ppm Doksorubisin konsentrasi 12,5 ppm Doksorubisin konsentrasi 1,5625 ppm Gambar. Hasil uji sitotoksik ekstrak kayu manis terhadap sel T47D. Hal tersebut mengindikasikan bahwa ekstrak etanol kulit kayu manis pada dosis 7,8125 ppm belum mampu menghambat atau menurunkan sifat proliferatif sel T47D.
Bentuk morfologi ekstrak etanol kulit  kayu  manis  dosis  62,5  ppm  pada Gambar 9 menunjukkan adanya sel yang mengalami  lisis  dan  pengkerutan.  Sel kanker  yang  masih  hidup  tidak  terlalu
padat  jika  dibandingkan  dengan  kontrol sel.  Pembentukan  kristal  formazan semakin  menurun  seiring  dengan banyaknya  sel  yang  mati.  Sedangkan pada  perlakuan  dengan  ekstrak  etanol kulit kayu manis  dosis 500 ppm, hampir semua  sel  mengalami  lisis  dan  kristal formazan  yang  terbentuk  hanya  sedikit. Hal tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol  kulit  kayu  manis  pada  dosis  62,5
a b
Keterangan:
a . Sel hidup = bentuk lonjong dan besar
b. Sel mati = bentuk bulat, mengkerut dan kecil
ppm  sampai  dengan  500  ppm  mampu menghambat  atau  menurunkan  sifat proliferatif sel T47D. Efek penghambatan proliferatif semakin besar seiring dengan adanya peningkatan dosis yang diujikan. Berikut  tabel  3  merupakan  hasil persamaan  garis  regresi  linear  dari masing-masing replikasi absorbansi ekstrak  etanol  kulit  batang  kayu  manis dan doksorubisin: Grafik regresi linier ekstrak etanol kulit kayu manis tiap replikasi dandoksorubicin tiap replikasi Berdasarkan  gambar  11  terlihat hubungan  antara  nilai  log  konsentrasi dengan  %  viabilitas  dari  hasil  uji  MTT ekstrak etanol kulit kayu manis terhadap sel  T47D  yang  linear.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi
pemberian  ekstrak  maka %  viabilitas  sel (% hidup sel) semakin kecil.
Nilai IC 50 merefleksikan konsentrasi  senyawa yang  menyebabkan penghambatan  pertumbuhan  sel  hingga 50%.  Doksorubisin  digunakan  sebagai kontrol  pembanding  karena  luasnya penggunaan  obat  ini  dalam  pengobatan beberapa jenis kanker di Indonesia.
Berdasarkan  tabel  4  ekstrak etanol  kulit  kayu  manis  memiliki toksisitas terhadap sel T47D, hal tersebut terlihat  dari  nilai  rata-rata  IC 50 yang diperoleh  yaitu  sebesar  71,158  µg/ml. Persentase  penghambatan  sel  yang dihasilkan  antara  log  konsentrasi  versus %  viabilitas  memiliki  korelasi  positif yang  tinggi  (R  =  0,992;  0,993;  0,989; 0,994).
Tabel 3. Hasil persamaan garis dan perhitungan rerata IC 50 ekstrak etanol kulit batang kayu manis dan doksorubisin Perlakuan Replikasi Persamaan Nilai r IC 50 (µg/ml) Rerata ± SD Kayu manis 1 y = -50,09x + 143,2 0,992 72,552 2 y = -51,75x + 145,2 0,993 69,122 3 y = -53,77x + 150,4 0,989 73,657 4 y = -51,61x + 145,0 0,994 69,299 71,158 ± 2,294 Doksorubisi n 1 y = -28,15x + 69,09 0,985 4,766 2 y = -27,07x + 68,94 0,995 5,008 3 y = -30,35x + 76,36 0,989 7,388 4 y = -32,13x + 72,75 0,993 5,106 5,567 ± 1,222
Gambar  2.  Perbandingan  regresi  linear  ekstrak  etanol  kulit kayu  manis  tiap replikasi dan doksorubisin tiap replikasi  (log dosis vs % viabilitas).
Nilai  IC 50 menunjukkan  nilai konsentrasi yang menghasilkan hambatan  proliferasi  sel  sebesar  50% dan  menunjukkan  potensi  ketoksikan suatu  senyawa  terhadap  sel.  Semakin besar harga  IC 50 menunjukkan senyawa tersebut  semakin  tidak  toksik.  Batas  IC 50 suatu  ekstrak  untuk dapat  dinyatakan berpotensi  sebagai  suatu  antikanker adalah  100  µg/ml  (Freshney,  2000). Berdasarkan  hal  tersebut  maka  ekstrak etanol kulit kayu manis dengan nilai IC 50 sebesar  71,158  µg/ml  tergolong  ekstrak yang bersifat toksik terhadap sel T47D.
Kayu  manis  ( Cinnamomum burmanni ,Nees    Bl)  merupakan  salah satu tanaman obat tradisional yang telah diteliti  kegunaannya  sejak  lama.  Kayu manis  bisa  digunakan  untuk  obat sariawan,  obat  batuk,  sesak  napas,  nyeri lambung, perut kembung, diare, rematik, menghangatkan  lambung  dan  sebagai
anti  kanker.  Diduga  senyawa  aktif  yang bertanggungjawab  terhadap  aktifitas  anti kanker  dalam  kayu  manis  adalah kandungan  zat  aktif  cinnamaldehyde (Kwon et al ,1997). Penelitian pendahuluan menunjukkan  bahwa  cinnamaldehyde mampu  menghambat  proliferasi,  invasi, dan pertumbuhan tumor. Cinnamaldehyde  yang  diisolasi  dari C cassia juga  telah  terbukti  memiliki  efek sebagai antiangiogenesis. Sehingga dapat disimpulkan  bahwa  cinnamaldehyd  dan derivatnya  memiliki  aktivitas  antitumor (Kwon et  al ,  1998). Minyak  kayu  manis memiliki  khasiat  cytotoksic  yang  sangat kuat  yaitu  LC50  sebesar  0,03  mg/ml (Sharifar et al , 2009).
Cinamaldehyde, satu dari aldehyd aromatis dan diduga merupakan senyawa  aktif  yang  bertanggungjawab terhadap  warna  dan  bau  minyak kayu
manis.  Sebagian  besar  aldehyd  alifatis dan aromatis dan derivatnya menunjukkan khasiat cytotoksik terhadap sel lines tumor (Piantadosi et a l, 1964).
Beberapa dari aldehyd ini dan derivatnya juga  digunakan  secara  klinik  sebagai obat-obat antitumor (Goldin et al ., 1966). Efek antikanker beberapa  zat aktif  yang  diisolasi  dari Cinnamomum cassia terhadap  sel  tumor  pada  manusia seperti A549, SK-OV-3, SK-MEL-2, XF498 dan  HCT -15  telah  dilakukan. Sel  HCT- 15  dan  sel  SK-MEL-2  sangat  peka terhadap  derivat  cinnamaldehyde  yang ditunjukkan  nilai  ED50  0,63-8,1  ug/ml (Kwon,  1997).  Cinnamaldehyde  yang diisolasi  dari Cinnamomum    cassia juga telah  terbukti  memiliki  efek  sebagai antiangiogenesis (menghambat petumbuhan pembuluh darah baru) yang mampu  menghambat  pertumbuhan  sel- sel tumor (Kwon, 1998). KESIMPULAN Kesimpulan yang diperoleh dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
Ekstrak etanol kulit kayu manis memiliki efek  sitotoksik  terhadap  sel  kanker payudara T47D dengan nilai IC 50 sebesar 71,158 µg/ml.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi
Atas Hibah Penelitian Dosen Pemula
DAFTAR PUSTAKA
Basmal  J,  Amini  S,  Sugiyono,  Murniyati. 2009. Seminar Nasional Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan. Jakarta: hlm 208. Depamede  S.N  &  Rosyidi  A.  2009. Penghambat  proliferasi  mencit
Balb/C oleh ekstrak testis sapi bali:
Peran  TGF- β . Media  Peternakan 32(2):95-103.
Depkes  RI.  1985.  Cara  pembuatan simplisia.  Jakarta:  Departemen Kesehatan Republik  Indonesia. Hlm 1-15.
Depkes.  2006.  Deteksi dini  kanker  usus besar.  Departemen  Kesehatan
Republik Indonesia.
Di Piro, Joseph T., Robert LT., Gary CY., Gary  RM.,  Barbara  GW.,  L. Michael P. 2008. Pharmacotherapy A  Pathophysiologic  Approach . Edisi  ke-7.  New  York  :  McGraw- Hill, Medical Publishing Division Goldin,  A.,  Serpick,  A.  A.,  Mantel,  N.,
Experimentalscreening  procedures and  clinical  predictability  value Cancer  Chemoth.  Rep ., 50,  190- 231 (I 966). Katzung,  B.G.  2002. Farmakologi  Dasar dan  Klinik .  Buku  2.  Bagian
Farmakologi  Fakultas  Kedokteran Universitas Airlangga, penerjemah. Jakarta : Salemba Medika. Terjemahan dari : Basic & Clinical
Pharmacology . hlm 449-462. Kuo YC et al . 2005. Inhibitory effects of acylated  kaempferol  glycosides from  the  leaves  of  Cinnamomum kotoense  on  the  proliferation  of human peripheral blood mononuclear  cells. Planta  Med 71:412-415.
Kwon BM, Lee SH, Cho YK, Bok SH, So SH,  Youn  MR.,  and  Chang  SI. 1997.  Synthesis  and  biological activity  of  cinnamaldehyde  as angiogenesis  inhibitors. Bioorg. Med.Chem. Lett. 7:2473-2476.
Kwon  BM.,  Lee  SH,  Choi  SU,  Park  SH, Lee  CO,  Cho  YK,  Sung  ND,  and Bok  SH.  1998.  Synthesis  and  in vitro cytotoxicity of cinnamaldehyde  to  human  solid tumor  cells. Arch.  Pharm.  Res.
21:147-152.
Nurrochmad,  A.,  Kristina  S.A.  2004. Effect  of Curcuma  zedoaria  Rosc . ethanolic extract on the lung tumor growth  on  post  initiation  phase  in female mice induced by benzo(a)pyrene. Indonesian Journal of Pharmacy , 15 (1): 7 - 12. Piantadosi,  C.,  Skulason,  V.  G.,  Irvin,  J. L.,  Powell,  J.  M.  and  Hall,  L., Potential antitumor agents. Schiffbases and hydrazone derivatives of
pyrimidine-4- carboxaldehydes .  Journal.  MecL. Chem., 7, 337-348 (I 964). Sharififar  F, Moshafi  MH, Dehghan- Nudehe  G, Ameri  A, Alishahi  F, Pourhemati  A.,  2009, Bioassay screening  of  the  essential  oil  and various  extracts  from  4  spices medicinal  plants . Pak  Journal Pharm Science.;22(3):317-322
Sukardja, I Dewa Gede. 2000. Onkologi Klinik Edisi 2 . Surabaya : Airlangga University Press. Voigt R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi
Farmasi .  Edisi  ke-5.  Terjemahkan dari: S.N. Soewandhi. Penerjemah. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Wijayanti WA, Yulfi Z, Perry B. 2010. Minyak atsiri dari kulit batang
Cinnamomum burmanii (kayu manis) dari famili lauraceae sebagai insektisida alami, antibakteri, dan antioksidan. Surabaya : Laboratorium Kimia Organik F-MIPA Kimia ITS.