## Penentuan Kadar Vitamin C dan Aktivitas Antioksidan Buah
Carica ( Vasconcellea cundinamarcensis ) Wonosobo
Determination of Vitamin C Contain And Antioxidant Activity From Carica Fruit ( Vasconcellea cundinamarcensis ) Wonosobo
Hery Muhamad Ansory 1 ; Rinda Binugraheni; 2 ; Argo Khoirul Anas 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Jalan Letjen Sutoyo, Surakarta
2 Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi, Jalan Letjen Sutoyo, Surakarta
3 Fakultas MIPA, Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta
________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Informasi mengenai kandungan  vitamin  C  dalam buah carica ( Vasconcellea cundinamarcensis) sangatlah penting karena dapat meningkatkan daya jual buah tersebut. Selain itu, potensi buah carica sebagai antioksidan belum banyak diteliti oleh kalangan peneliti. Kedua hal tersebut merupakan suatu kajian  yang menarik, sehingga peneliti melakukan kajian ini  yang  bertujuan untuk menganalisis kadar  vitamin  C  dan aktivitas antioksidan dari buah Carica yang tumbuh di daerah Wonosobo.
Penelitian ini dimulai dengan melakukan preparasi pada buah Carica sehingga didapatkan larutan buah Carica.  Selanjutnya  dilakukan analisis kandungan asam organik total,  asam askorbat, dan aktivitas antioksidan. Analisis kandungan asam organik dilakukan menggunakan metode titrasi alkalimetri, analisis kandungan asam askorbat dilakukan dengan spektrofotometri UV-Vis, dan analisis aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH.
Hasil  yang  diperoleh,  konsentrasi asam organik  total  dalam sampel buah Carica adalah setara  dengan 0,4  N.  Kandungan asam askorbat dalam sampel buah Carica adalah sebesar 1560 ppm dan Nilai IC 50 dari buah Carica didapatkan dari larutan sampel dengan pengenceran 118x atau setara dengan buah Carica dengan berat 17 gram.
Kata Kunci :Carica, asam organik, asam askorbat, antioksidan
________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
The content of vitamin C information in carica fruit is very important because it can improve the  marketability  of  this fruit. The potential of Carica  fruit  as  antioxidants agent hasn’t  been studied  by  the  researchers. It’s  made  Carica  fruit  are interesting to  be  studied,  so  the researchers conducted this study to determine the vitamin C contain and the antioxidant activity of Carica fruit that grows in Wonosobo.
This  study was  started by the  preparation  of  the Carica fruit to  obatined  Carica  fruit solution. So  that  the  total  content  of  organic  acids,  ascorbic  acid,  and  antioxidant  activity  of Carica fruit solution could be analyzed. The organic acid content analysis of Carica fruit solution was performed by alkalimetric method. The ascorbic acid content analyses were performed by UV-Vis Spectrophotometry,  and  analysis  of  antioxidant activity  were  performed  with DPPH method.
The organic  acids total concentration  of Carica fruit  solution was equal  to 0,4  N.  The ascorbic acid concentration of Carica fruit solution was 1560 ppm and The C50 value of Carica fruit obtained from sample solution by 118x dilution or equivalent to 17 gram of Carica fruit.
Keywords: Carica, organic acids, ascorbic acid, antioxidant
________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Belakangan ini, masyarakat
modern  memiliki  kecenderungan  tinggi untuk  mengkonsumsi  makanan  yang praktis  dan  cepat  atau  biasa  dikenal sebagai  makanan  cepat  saji. Jenis makanan  ini  sangat  digemari  karena kepraktisannya mengingat tingkat kesibukan  masyarakat  yang  selalu meningkat dari tahun ke tahun,
sehingga dengan mengkonsumsi makanan  cepat  saji  masyarakat  dapat lebih  menghemat  waktu.  Hal  ini  dapat berakibat buruk karena makanan cepat saji  mengandung  lemak  tidak  jenuh yang sangat berpotensi memicu
terbentuknya  radikal  bebas  dalam tubuh. Radikal  bebas  merupakan  suatu senyawa atau molekul yang mengandung  satu  atau  lebih  elektron tidak berpasangan pada orbital luarnya. Adanya elektron yang tidak berpasangan  menyebabkan  senyawa tersebut sangat reaktif mencari
pasangan,  dengan  cara  menyerang dan  mengikat  elektron  molekul  yang berada  di  sekitarnya.  Adanya  radikal bebas
dalam tubuh dapat mengakibatkan kerusakan oksidatif dalam tubuh sehingga memicu munculnya penyakit degeneratif seperti hipertensi,  diabetes,  kegemukan,  dan jantung (Rohmatussolihat, 2009).
Kerusakan
oksidatif yang diakibatkan  oleh  unsur  radikal  bebas dapat  diatasi  dengan  adanya  suatu antioksidan  yang  berasal dari  dalam atau  luar  tubuh.  Dalam  hal  ini, antioksidan berfungsi untuk menetralkan  aktivitas  radikal  bebas dalam  tubuh  (Wardani,  2012).  Ditinjau
dari  sumbernya,  antioksidan  terdiri  dari antioksidan  buatan  dan  alami.  Namun, antioksidan  alami  lebih  diminati karena lebih aman bagi tubuh ketika dikonsumsi.  Antioksidan  alami  banyak terdapat pada buah-buahan dan sayur- sayuran. Salah satu buah-buahan yang diyakini mengandung antioksidan
adalah Carica. Carica atau pepaya gunung (Vasconcellea cundinamarcensis) merupakan salah satu tumbuhan spesifik yang dapat dijumpai di
Wonosobo, Jawa Tengah. Selain nikmat  dan  segar  untuk  dikonsumsi, buah  ini  diyakini  memiliki  kandungan vitamin  C  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  alami.  Namun,  informasi mengenai  kandungan  vitamin C  dalam buah  carica  sangat  sulit  dijumpai. Padahal  informasi  ilmiah  mengenai kandungan  vitamin  C  dalam  buah Carica  sangat  penting  karena  dapat meningkatkan  daya  jual  buah  tersebut. Tingkat  ketertarikan  dan  kepercayaan masyarakat pada buah ini akan meningkat  jika  terdapat  informasi  yang telah  teruji  secara  ilmiah,  bahkan  buah ini  nantinya  berpotensi  untuk  diolah lebih  lanjut  menjadi minuman kemasan seperti buah Jeruk atau buah lain yang mengandung  vitamin  C  tinggi.  Selain itu,  potensi  buah  carica  sebagai antioksidan  belum  banyak  diteliti  oleh kalangan  peneliti.  Kedua  hal  tersebut merupakan  suatu  kajian  yang  menarik, sehingga  peneliti  melakukan  kajian  ini yang bertujuan untuk menganlisis kadar vitamin C dan aktivitas antioksidan dari buah  Carica  yang  tumbuh  di daerah Wonosobo.

## MetodePenelitian
Bahan uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  buah  carica,  dari daerah Wonosobo Jawa Tengah,
Bahan  kimia  yang  digunakan  antara lain  larutan  DPPH  dan  etanol  p.a. natrium hidroksida, asam oksalat, indikator  metilen  biru,  asam  askorbat, silika gel GF 254, butanol, asam asetat.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  peralatan  gelas laboratorium,  Blender,  Termometer, satu  set  alat  pengaduk  magnet  (hot plate  stirrer)  dan  pengaduk  magnet ( magnetic  stirrer ),  timbangan  analitik. Untuk keperluan analisis digunakan alat Spektrofotometer UV-Vis (Genesys 10S UV-VIS).

## Preparasi sampel
Buah  carica  segar  dicuci  hingga bersih,  kemudian  dipotong  kecil-kecil dan  dipanaskan  dalam  oven  60°C selama  24  jam.  Buah  carica  kering kemudian dihaluskan dengan menggunakan blender sampai menyerupai  bubur.  Kemudian,  bubur buah  Carica  dilarutkan  dalam aqua destillata menggunakan
magnetic
stirrer dengan suhu 60°C selama 1 jam.
Larutan disaring dan siap untuk dilakukan pengujian.

## Penentuan Kadar Asam Total
Penentuan  konsentrasi asam  total dalam  larutan  sampel  asam  dilakukan dengan  cara  5,0 mL  larutan  sampel buah  carica  ditambah  2  tetes  indikator fenolftalein  kemudian  dititrasi  dengan larutan standar NaOH 0,5 N yang telah di  standarisasi  dengan  larutan  standar
H 2 C 2 O 4 0,1  N.  Titrasi  dilakukan  hingga terbentuk  warna  merah  muda  pada larutan  dan  titrasi  diulang  sebanyak  3 kali.

## Uji  Kuantitatif  asam  askorbat  dalam sampel asam dari buah carica
Preparasi  larutan  standar  asam askorbat  dengan  melarutkan  25,0 mg asam  askorbat  dalam  labu  takar  250 mL  sehingga  memiliki  konsentrasi  100 ppm.  Kemudian dibuat  larutan  standar dengan  konsentrasi  26  ppm,  28  ppm, 30 ppm, 32 ppm, 34 ppm.
Ditentukan panjang gelombang maksimum  dari  larutan  standar  asam askorbat  dengan  spektrofotometer  UV- Vis  pada  berbagai  konsentrasi. Dibuat kurva absorbansi pada panjang gelombang  maksimum  pada  larutan standar. Sampel diencerkan hingga absorbansi yang terbaca oleh spektrofotometer UV-Vis tercapai konsentrasi  yang  masuk  dalam  range kurva standar yang sudah ada. Tentukan konsentrasi asam askorbat.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Larutan sampel diencerkan dengan pelarut metanol hingga diperoleh konsentrasi larutan uji dengan pengenceran  30x,  40x,  50x,  60x,  dan 70x.  Dari  deret  konsentrasi  tersebut dilakukan pengujian aktivitas
antioksidan  secara  kuantitatif.  Diawali dengan  skrining  λ  maksimal  dan operating time .
Penentuan  aktivitas  antioksidan dilakukan  dengan  cara  4,0  mL  DPPH 0,1  mM  dimasukkan  dalam  tabung reaksi,  ditambahkan  dengan  1,0 mL larutan. Selanjutnya campuran
dihomogenkan  dan  didiamkan  sesuai operating  time  masing-masing  larutan uji. Dilakukan pula pembacaan absorbansi larutan kontrol, yaitu larutan DPPH 0,1 mM. Analisis data Absorbansi dari sampel yang diperoleh dibandingkan dengan absorbansi  DPPH  sehingga  diperoleh % aktivitas antioksidannya. Perhitungan persentase  aktivitas  antioksidan  dapat menggunakan rumus : Data  hasil  penentuan  aktivitas antioksidan  dengan  metode  DPPH dihitung nilai IC 50 dengan
menggunakan persamaan regresi linier.

## PEMBAHASAN

## Penentuan kadar asam organik total
Penentuan kadar asam total dilakukan dengan metode titrasi
alkalimetri.  Pada  titrasi  ini  digunakan larutan  standar  sekunder  NaOH  0,5  N yang telah distandarisasi dengan larutan  standar  primer  H 2 C 2 O 4 0,1  N. Reaksi  yang  terjadi  antara  asam oksalat  dengan  NaOH  untuk  proses standarisasi adalah:
H 2 C 2 O 4 + 2NaOH  Na 2 C 2 O 4 + 2H 2 O
Setelah  distandarisasi  diperoleh kadar  NaOH  adalah  0,05  N.  Larutan baku  NaOH  tersebut  digunakan  untuk menentukan kadar asam organik dalam sampel.  Sehingga  didapatkan  kadar asam  organik  dalam  sampel  sebesar 0,04 N.

## Penentuan Kadar AsamAskorbat
Penentuan  kadar  asam  askorbat
secara kuantitatif dilakukan menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada  panjang gelombang  265  nm. Larutan standar yang digunakan adalah asam  askorbat  dengan  konsentrasi  26 ppm, 28 ppm, 30 ppm, 32 ppm, 34 ppm dan  didapatkan  kurva  standar  sebagai berikut:
Gambar 6. Kurva Standar Asam Askorbat
0,5 0,55 0,6 0,65 0,7 24 26 28 30 32 34 36 Absorbansi
Konsentrasi (ppm)
Kurva standar tersebut dapat digunakan  untuk  menentukan  kadar asam  askorbat  dalam  sampel.  Sampel yang  telah  diencerkan  60x  diukur absorbansinya pada panjang gelombang  265  nm  dan  didapatkan absorbansi  sebesar 0,529.  Sehingga dapat ditetapkan berdasarkan perhitungan bahwa kadar asam
askorbat  di  dalam  sampel  buah  Carica adalah sebesar 1560 ppm.

## Aktivitas Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode spektrofotometri.
Pengukuran absorbansi  larutan  uji  ini  dilakukan pada  panjang  gelombang  absorbansi maksimum dan waktu reaksi yang telah ditentukan  sebelumnya  yaitu  528  nm pada  menit  ke  15.  Hasil  Absorbansi untuk larutan Blanko (larutan DPPH 0,1 mM)  adalah  0,844.  Hasil  absorbansi dari standar asam askorbat dan sampel
yang  ditambahkan  kedalam  larutan DPPH dengan perbandingan 4 DPPH :
1 sampel, dapat dilihat pada Tabel 1. Hasil pengukuran Absorbansi sampel  dan  standar,  dapat  dibuat perhitungan  dan  diperoleh  %  aktivitas antioksidan  buah  carica  dan  asam askorbat dengan persamaan.
Hasil perhitungan % aktivitas antioksidan dari standar asam askorbat dan  sampel  Buah  Carica  dapat  dilihat pada Tabel 2.
Nilai  C 50 adalah  konsentrasi  yang efektif untuk menghambat atau meredam  50%  jumlah  radikal  bebas (JJoyeux,  1995).  Adapun  nilai  EC 50 antioksidan  asam  askorbat  dari  data  di atas adalah sebesar 4 ppm, sedangkan nilai  EC 50 antioksidan  sampel  daging buah Carica adalah dengan pengenceran  118x  atau  setara  dengan konsumsi buah carica seberat 17 gram.

## Tabel.  1.  Hasil  pengukuran  Absorbansi  DPPH  yang sudah  ditambahkan  asam askorbat dan buah Carica
Kosentrasi Asam Askorbat (ppm) Absorbansi Massa Sampel (g) Absorbansi 1 0,756 4,32 0,136 2 0,694 5,76 0,165 3 0,512 7,20 0,194 4 0,422 8,64 0,218 5 0,355 10,08 0,265
Tabel. 2. Hasil Perhitungan % aktivitas antioksidan dari asam askorbat dan buah
Carica Kosentrasi Asam Askorbat (ppm) % Aktivitas Antioksidan Massa Sampel (g) % Aktivitas Antioksidan 1 10,43 4,32 83.89 2 17.77 5,76 80,45 3 39.34 7,20 77.01 4 50,00 8,64 74.17 5 57.94 10,08 68.60

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  penelitian  yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan: 1. Konsentrasi Asam Total dalam Buah
Carica adalah setara dengan 0,04 N
2. Kadar  Vitamin C  dalam  Buah  carica adalah sebesar 1560 ppm
3. Nilai IC 50 dari  sampel  buah  carica bisa didapatkan dengan mengkonsumsi  Buah  carica  seberat 17 gram. DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2015. ManisanCaricaWonosobo. http://www.manisancarica.com/. Diaksespadatanggal 30 Juli 2015 pukul 09.00 Dean, J.A., 1999, Lange’s Handbook of Chemistry, EdisiKesembilan, Mc.Graw Hill, Inc., London Hariyatimi.  2004.  Kemampuan  Vitamin E sebagaiAntioksidanterhadapRa dikal BebaspadaLanjutUsia. Jurnal MIPA.  UniversitasMuhamadiah Surakarta Vol. 14: 52-60, Joyeux M, Lobstein A, Anton R, Mortier F, 1995. Comparative Antiliproperoxidant,  Antimicrotic And  Scavengging  Properties  Of
Terpenes  And  Biflavones  From Ginkgo  And  Some  Flavonoid, PlantaMedica, 61 126-129. Rohmatussolihat.  2009.  Antioksidan,
PenyelamatSel-
SelTubuhManusia. BioTrends Vol.4 No.1 Sari Irna R.M.
2012.UjiAktivitasAntioksidanEks
trakJamurPleurotusostreatusde nganMetode DPPH danIdentifikasiGolonganSenyaw a Kimia dariFraksiTeraktif.
Jakarta: FMIPA UI. Wardani.2012. ValidasiMetodeAnalisisdanPene ntuan Kadar Vitamin C padaMinumanBuahKemasande nganSpektrofotometri UV- Visible.Skripsi: FMIPA Universitas Indonesia Wijaya  A,  1996.  RadikalBebasdan Parameter  Status  Antioksidan, Forum Diagnosticum, Prodia Diagnostic Educational Services, No. 1: 1–12. Yu, Liangli, Scott H., Jonathan P., Mary H., John W. & Ming Qian. 2002. Free Radicals  Scavenging  Properties of Wheat Extracts. J.Agric Food Chem. Colorado.12 Februari 2002.