## PENURUNAN LAJU PENUAAN REPRODUKSI MENCIT JANTAN (Mus muculus.Linn) DENGAN PEMBERIAN EKSTRAK JAHE (Zingiber officinale) DALAM PAKAN

## DECREASE IN AGING REPRODUCTION RATE OF MALE MICE (Mus muculus Linn.) WITH GINGER
EXTRACT (Zingiber officinale)  IN FEED
1 Sutyarso, 2 Sumayyah Annida, 3 Mohammad Kanedi, 4 Hendri Busman, 5 Nuning Nurcahyani
1,3,4,5 Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung 2 Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Lampung Jln. Sumantri Brojonegoro No 1 Bandar Lampung E-mail korespondensi: sutyarso@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Rimpang  jahe  mengandung  antioksidan  dan  bersifat  kemoprotektif,  oleh  karena  itu  kami  menduga  dapat menurunkan laju penuaan pada sistem reproduksi. Tujuan penelitian ini, untuk mengetahui pengaruh ekstrak jahe  ( Zingiber  officinale )  terhadap    penuaan  reproduksi  mencit  jantan  ( Mus  musculus ).  Penelitian  ini, menggunakan  36  ekor  mencit  jantan  ( Mus  musculus )  berumur  12-14  bulan,  dibagi  tiga  kelompok  masing- masing 12 ekor. Kelompok 1  sebagai kontrol, kelompok 2 dan 3 diberikan 50 mg dan 100 mg ekstrak jahe/kg pelet.  Pelet  diberikan  selama  70  hari  secara ad  libitum .  Selanjutnya,  diamati  jumlah  sel-sel  spermatogenik, serta  jumlah  dan  kualitas  spermatozoa.  Hasil  penelitian  menunjukan,  bahwa  pemberian  ekstrak  jahe berpengaruh  terhadap  sel-sel  spermatogenik  dan  spermatozoa  (P<0,01)  mencit.  Hasil  penghitungan spermatosit  preleptoten,  pakhiten,  dan  sel  spermatid  lebih  tinggi,  demikian  juga  pada  jumlah  spermatozoa, persentase  viabilitas  dan  motilitas,  serta  morfologi  normal  spermatozoa  lebih  banyak  pada  kelompok  yang diberi ekstrak jahe dibanding kontrol (P<0,01).  Disimpulkan bahwa ekstrak rimpang jahe yang diberikan pada mencit yang sedang memasuki masa penuaan dapat menghambat laju penurunan fungsi repruduksi.
Kata Kunci : ekstrak jahe, fungsi reproduksi, mencit jantan, anti-penuaan, antioksidan.

## ABSTRACT
The ginger rhizome contains antioxidants and is chemoprotective, therefore we suspect it can decrease the aging  rate  in  the  reproductive  system.  The  purpose  of  this  study,  to  determine  the  effect  of  ginger  extract (Zingiber officinale) against reproductive aging of male mice (Mus musculus). This study, using 36 male mice (Mus musculus) aged 12-14 months, divided into three groups each 12 tails. Group 1 as controls, groups 2 and 3 were given 50 mg and 100 mg ginger extract / kg of pellets. The pellet is given for 70 days ad libitum. Next, observed the number of spermatogenic cells, as well as the number and quality of spermatozoa. The results showed  that  ginger  extract  had  an  effect  on  spermatogenic  and  spermatozoa  (P  <0,01)  cells  of  mice.  The results of preleptotene spermatocyte, pakhiten and spermatid spermatocyte counts were higher, as were the number of spermatozoa, the percentage of viability and motility,  and the normal morphology of spermatozoa were more in the group given ginger extract than control (P <0.01). It was concluded that ginger rhizome extract given to mice entering the aging period could inhibit the rate of decline in reproductive function.
Keywords : ginger extract, reproductive function, male mice, anti-aging, antioxidants

## PENDAHULUAN
Kini orang mulai menyadari bahwa proses menua sesungguhnya  harus  dianggap  sebagai  penyakit dan bukanlah sesuatu yang tidak dapat dielakkan. Ini  merupakan  penyakit  degeneratif  dan  berjalan progresif dengan merusak setiap sel, jaringan dan organ  tubuh  manusia,  yang  selanjutnya  berakhir fatal.    Sebagai  antisipasi,  dunia  kedokteran  mulai menerima konsep aging dapat dicegah dan diobati (Sutyarso,  2017).  Dengan  demikian  berbagai upaya pencegahan dan pengobatan bisa dilakukan untuk  mengatasi  gangguan  defisiensi  nutrisi, suplemen,  hormon,  imunitas,  anti-oksidan,  gaya hidup,  seksualitas,  obesitas  sampai  terapi stem- cells dan terapi gen telah diteliti untuk menghentikan, menghambat bahkan Aging
Reversal atau membalikan proses menua (Mitchell et  al.,  2015).  Namun,  faktor-faktor  yang  dapat melindungi  atau  menghambat  proses  penuaan reproduksi  pada  pria  sebagian  besar  tidak diketahui.
Secara umum, penuaan adalah proses perubahan secara  reguler  yang  meliputi  genetik,  biokimia, morfologi, dan fisiologis. Perubahan menyimpang, melanggar  dan  menyederhanakan  struktur  dan fungsi sistem kehidupan, sehingga terjadi peningkatan gangguan dan kematian.  Singkatnya, penuaan  harus  dipahami  sebagai  perubahan komplek  yang  berkaitan  dengan  usia  organisme, yang  menyebabkan  peningkatan  probabilitas kematiannya,  demikian  juga  spermatogensis selama  penuaan  (Zahidov  et  al.,2010;  Mitchell  et al., 2015).
Spermatogenesis yang normal, diatur dengan tepat untuk menjaga keseimbangan antara proliferasi sel terus-menerus  dan  secara  bersamaan  kematian sel  terprogram.  Bentuk  kematian  sel  germinal
terprogram  telah  dipelajari  secara  detail  dan dikenal  sebagai  apoptosis  (Wang  et  al.,  1999; George et al., 2012).  Proses kematian sel tersebut, diatur  dan  dikendalikan  dengan  karakteristik morfologi dan biokimia yang berbeda. Peningkatan kematian sel germinal terjadi akibat berbagai jalan, yaitu  cedera  testis,  termasuk  paparan  racun, perubahan  dukungan  hormonal,  paparan  panas, radiasi,  atau  pengobatan  dengan  senyawa kemoterapi  (Zahidov  et  al,  2010;  Sinha  et  al., 1997).    Kematian  sel  germinal  baik  spontan  dan cedera terkait, apoptosis tampaknya menjadi jalur utama kematian sel, tidak terkecuali penuaan pada spermatogenesis (Billig et al., 1995; Furuchi et al., 1996; Hasegawa et al., 1997).
Telah  banyak  pembuktian  bahwa  faktor  makanan dapat  digunakan  sendiri  atau  kombinasinya dengan  agen  kemoterapi  tradisional,  ternyata dapat bermanfaat baik  untuk pencegahan maupun untuk mengobati berbagai penyakit. Jahe ( Zingiber officinale )  adalah  contoh  tanaman  obat  yang mendapatkan popularitas di kalangan masyarakat modern,  dan  rimpang  bawah  tanah  ini  berguna dalam bidang medik. Banyak studi dilakukan pada jahe  dan  konstituen  yang  menyengat  dan  segar dari rimpang kering (Mascolo et al, 1989).
Ekstrak  jahe  baru-baru  ini  telah  terbukti  memiliki berbagai  aktivitas  biologis,  termasuk  antikanker, antioksidan,  antiinflamasi  dan  sifat  antimikroba (Morakinyo et al., 2011).  Jahe ditemukan memiliki efek  hypocholesterolemik  dan  menyebabkan penurunan  berat  badan,  glukosa  dalam  darah, kolesterol  total  serum  dan  serum  alkali  fosfatase pada  tikus  jantan  dewasa. Kajian  terbaru, menyimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak  jahe pada tikus yang diinduksi fungisida-metiram dapat memperbaiki kerusakan histologis dan mengurangi
apoptosis. Hal ini mungkin  karena sifat antioksidan dari ekstrak jahe (Mascolo et al, 1989; Bhandari et al.,  2005;  Kamtchouing  et  al.,  2002;  Khaki  et  al., 2014).
Proses  penuaan  akan  terjadi  secara  alamiah  dan akan dialami oleh semua organisme hidup.  Pada mamalia jantan  termasuk manusia, sistem reproduksi juga akan mengalami penurunan fungsi sebanding  dengan  bertambahnya  umur.  Jahe merupakan  salah  satu  tanaman  yang  bersifat antioksidan, efek kemoprotektif, dan kami menduga  dapat  menghambat  laju  penuaan  pada sistem  reproduksi.  Dengan  demikan,  tujuan penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak jahe  ( Zingiber  officinale )  terhadap  hambatan penuaan reproduksi mencit jantan ( Mus musculus ).

## Bahan dan Metode Ekstraksi jahe
Dalam  penelitian  ini,  menggunakan  ekstrak rimpang jahe ( Zingiber officnale Roscoe). Rimpang jahe  diperoleh  dari  petani  di  Gisting  Kabupaten Tanggamus,    Provinsi  Lampung.  Rimpang  jahe dipotong-potong    tipis    kemudian  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  antara  pukul  10:00  -  12:00 setiap  harinya.  Kemudian  digiling  dan  dimaserasi dalam air hangat selama 48 jam pada suhu kamar, setelah  itu  disaring,  dan  maserat  yang  diperoleh diuapkan  sampai  didapatkan  serbuk  kering  (Sakr and Badawy, 2011). Serbuk kering ekstrak  jahe ini, selanjutnya siap digunakan.

## Dosis dan cara perlakuan Dosis ekstrak jahe
Hewan  uji  mencit  dan  pakan  berbentuk  pelet diperoleh  dari  Balai  Penelitian  Penyakit  Viteriner Lampung,    Bandar  Lampung.  Dengan  asumsi setiap  mencit  membutuhkan  makanan  sebanyak
10%  dari  berat  tubuhnya,  per  hari,  maka  mencit dengan  berat  rata-rata  30  g  akan  membutuhkan makanan  sebanyak  3  g.  Dalam  rangka  menjaga agar  pakan  selalu  tersedia  ( ad  libitum ),  maka jumlah pelet disiapkan untuk setiap ekor mencit itu dibulatkan  ke  4  g  sehari.  Untuk  memenuhi  dosis harian, maka untuk setiap 1 kg pelet ditambahkan ekstrak  jahe    sebanyak  50  mg  dan  100  mg. Kemudian,  campuran  itu  dicetak  kembali  dan dikeringkan  menjadi  pelet  baru.  Pelet  baru tersebut,  kemudian  disajikan ad  libitum dengan dosis  sesuai  rencana  penelitian  (Rosyidah  et  al, 2014; Sutyarso et al., 2016).

## Perlakuan hewan uji
Sebanyak  36  ekor  mencit  jantan  ( Mus  musculus Linn.)  berumur  12-14  bulan,  dikelompokkan menjadi  tiga  kelompok  masing-masing  terdiri  dari 12 ekor mencit. Kelompok 1 (K1) sebagai kontrol, diberikan pelet tanpa ekstrak jahe; kelompok 2 (K2) diberikan  pelet  yang  mengandung  50  mg  ekstrak jahe  setiap  1  kg  pelet;  dan  kelompok  3  (K3), mengandung  100    mg  ekstrak  jahe  setiap  1  kg pelet.  Pakan  dalam  bentuk  pelet  ini  diberikan selama  dua  siklus  spermatogenesis.  Oleh  karena satu  siklus  spermatogenesis  mencit  memerlukan waktu sekitar 35 hari (Morakinyo et al., 2008), maka penelitian ini dilaksanakan selama 70 hari. Adapun dasar  digunakan  mencit  pada  umur  ini,  karena pada  umur  12  bulan,  mencit  dan  tikus  mulai mengalami  penuaan  reproduksi  (Wang  et  al., 1999). Selanjutnya,    setiap  mencit  dipiara  dalam kandang secara individual dan menerima 10 g pelet yang  mengandung  ekstrak  jahe  dan  air  minum secara ad libitum setiap hari selama 70 hari.

## Prosedur pembedahan
Berat  badan  kontrol  dan  mencit  percobaan ditimbang  pada  awal  penelitian  dan  pada  hari
dikurbankan.  Dua puluh empat jam setelah ekstrak dosis terakhir diberikan, tikus dikorbankan dengan cara  dibius  dengan  eter.  Rongga  peritoneum dibuka  melalui  sayatan  melintang  pada  perut bagian  bawah.  Testis  dan  epididimis  diambil, dibersihkan  dari  jaringan  pengganggu  seperti lemak dan jaringan ikat, dan ditimbang (Khaki et al., 2014).

## Parameter spermatozoa
Potong bagian kauda epididimis kemudian dimasukan  dalam  cawan  petri  yang berisi  1,5    ml larutan  Hank’s.  Selanjutnya,  keluarkan  isinya dengan cara menekan dan mendorong menggunakan pinset sampai seluruh isinya keluar, selanjutnya  digunakan  untuk  analisis  semen. Suspensi  semen  yang  diperoleh  digunakan  untuk menghitung jumlah sperma, viabilitas, motilitas dan morfologi.

## Konsentrasi dan kualitas sperma
Diambil 10 µL dengan mikro pipet suspensi semen ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  90  µL larutan Hank’s, aduk perlahan-lahan supaya merata. Dari campuran ini kemudian diambil 10 µL, teteskan ke dalam bilik hitung Neubauer haemocytometer, hasil hitung  sperma  dinyatakan  dalam  juta  permililiter (x10 6 /mL).  Motilitas  sperma  juga  dinilai  langsung dengan  menghitung  baik  spermatozoa  motil  dan imotil per satuan luas dan dinyatakan dalam persen motilitas (WHO, 2010).
Viabilitas sperma diperiksa dengan cara pengecetan supravital, yaitu 10µL suspensi semen ditambahkan  10  µL larutan  eosin-Y  0,5%    di  atas gelas  objek  dan  ditutup  dengan  gelas  penutup. Pengamatan dilakukan dengan mikroskop cahaya pada  perbesaran  40x,  diamati  terhadap  sperma hidup  tidak  berwarna  sedangkan  sperma  mati
berwarna  merah,  hasilnya  dinyatakan  dalam persen.  Untuk  mengetahui  morphologi  sperma, 10µL suspensi semen teteskan di atas gelas objek kemudian  dibuat  sediaan  hapus.  Selanjutnya difiksasi  dengan  metanol  dan  diwarnai  dengan Giemsa. Pemeriksaan morphologi sperma meliputi bentuk  normal,  kelainan  bentuk  primer  dan sekunder,  hasilnya  dinyatakan  dalam  persen sperma abnormal.

## Histologi tubulus seminiferus
Setelah  testis  diambil  dan  ditimbang,  langsung dimasukan ke dalam fiksatif Bouin’s selama 24 jam. Kemudian  dilakukan  dehidrasi  dengan  serial alkohol  dari  konsentrasi  rendah  ke  konsentrasi tinggi.  Setelah  dehidrasi  selesai,  kemudian dimasukan  ke  dalam  toluen  hingga  jernih, dilakukan  parafinasi  dan  diblok.    Setelah  diblok dengan  parafin,    kemudian  dibuat  sayatan histopatology  dengan  mikrotom,  tebal  sayatan  6 µm  dan  diwarnai  dengan  hematoxylin  dan  eosin (H&E).  Parameter histologi testis dipelajari dengan Mikroskop Olympus (Olympus-BX53) dan Olympus Streaming-Aplikasi  Software  Versi  1.7 (Art.Code: 5-648-111-11-4),  antara  lain  meliputi  diameter tubulus seminiferus, spermatogonium yang merupakan  jumlah  spermatogonia  tipe  A  dan  tipe B,  spermatosit  preleptoten,  spermatosit  pakhiten, dan sel spermatid. Pengamatan sel-sel spermatogenik  dan  diameter  tubulus  seminiferus adalah  hasil hitung rata-rata  dari  10  tubulus (Lotfi et al., 2013).

## Analisa statistik
Data  hasil  pengamatan,  selanjutnya  dianalisa dengan bantuan software program SPSS Versi 21. Untuk mengetahui pengaruh ekstrak jahe (variabel bebas)  dilakukan  analisis  varian  satu  arah  ( one way-  ANOVA ),  sedangkan  untuk  mengetahui
perbedaan antar variabel dilakukan uji lanjut (post- hoc test  LSD, Least Significant Different). Hasil uji dinyatakan ada perbedaan jika P-value kurang dari 5% (P<0,05%).

## Hasil
Pemberian  ekstrak  jahe  pada  mencit  mempunyai pengaruh  baik  terhadap  berat  badan,  nampak bahwa  beratnya  bertambah,  meskipun  tidak berbeda  nyata  (P>0,05)  antar  kelompok,  juga terhadap  berat  testis  dan  epidimis  (Tabel  1). Selanjutnya,  pemberian  ekstrak  jahe  50  mg/kg pelet (K2) dan 100 mg/kg pelet (K3) menyebabkan jumlah  dan  kualitas  spermatozoa  lebih  baik dibandingkan dengan kontrol (K1). Analisis varian dari  data  tersebut  (Tabel  2)  menjukan  bahwa pemberian  ekstrak  jahe  berbeda  sangat  nyata (P<0,01)  dibandingkan  dengan  kontrol.  Demikian juga  terhadap  kualitas  spermatozoa  (motilitas, viabilitas, dan morfologi abnormal) berbeda sangat nyata (P<0,01). Hasil uji lanjut LSD terlihat bahwa pemberian  ekstrak  jahe  baik  K2  maupun  K3 berbeda  sangat  nyata  (P<0,01)  dibandingkan dengan  kontrol  (K1)  tetapi  tidak  berbeda  nyata (P>0,05)  antara  K2  dengan  K3.  Pola  yang  sama juga terjadi pada viabilitas, motilitas, dan morfologi abnormal spermatozoa (Tabel 2).
Meskipun berat testis dan epididimis tidak berbeda antar  kelompok  (P>0,05),  akan  tetapi  pemberian ekstrak  jahe  ini  berpengaruh  nyata  (P<0,01) terhadap diameter tubulus seminiferus.
Selanjutnya,  hasil  penghitungan  populasi  sel-sel spermatogenik  disajikan  pada  Tabel  3.  Hasil  uji ANOVA data tersebut memberikan petunjuk bahwa ekstrak  jahe  yang  diberikan  pada  mencit berpengaruh  sangat  nyata  (P<0,01)  terhadap spermatosit preleptoten, spermatosit pakhiten, dan sel-sel  spermatid.  Sebaliknya  tidak  berpengaruh
terhadap sel-sel spermatogonia ( P>0,05). Dengan uji  perbedaan  rata-rata  ( post-hoc  LSD-test )  untuk mengetahui  pengaruh  antar  kelompok,  kembali diperlihatkan  pola  yang  sama  yaitu  pemberian ekstrak jahe 50 mg/kg pelet tidak berbeda dengan 100 mg/kg pelet, meskipun berbeda sangat nyata (P<0,01) dibandingkan dengan kontrol (Tabel 3).
Tabel  1.  Parameter  berat  badan,  testis,  dan epididimis  mencit setelah diberi ekstrak jahe ( Zingiber officinale ) yang dicampurkan dalam pelet Variabel K 1 (kontrol) K2 (50 mg ekstrak jahe/1kg pelet) K 3 (100 mg ekstrak jahe/1kg pelet) One- way ANOVA (p- value) Berat badan awal (g) 27,25±2,18 a 28,33±1,92 a 27,83±1,85 a 0,420
Berat badan akhir (g) 29,67±2,98 a 35,83±3,59 b 36,33±3,09 b 0,023
Berat
testis (mg) 85,33±11,4 3 a 82,50±7,47 a 89,27±9,68 a 0,070 Berat epididimis (mg) 19,31±3,47 a 19,52±3,81 a 18,90±3,30 a 0,168
Keterangan: Hasil uji lanjut LSD, angka yang diikuti oleh  huruf  sama  pada  satu  variabel yang  sama  tidak  berbeda  nyata (P>0,05),  dan  sebaliknya  berbeda nyata (P<0,05)
Tabel 2. Parameter jumlah dan kualitas spermatozoa  mencit  umur  setelah diberi ekstrak jahe ( Zingiber officinale ) yang dicampurkan dalam pellet Variabel K 1 (kontrol ) K 2 (50 mg ekstrak jahe/1k g pelet) K 3 (100 mg ekstrak jahe/1k g pelet) One-way ANOVA (p-value) Jumlah spermatozoa (x 10 6 /ml) 6,33±1, 82 a 10,088 ±2,40 b 11,57± 1,53 c 0,000 Viabilitas spermatozoa (%) 45,98± 6,33 a 59,88± 7,06 b 61,39± 7,71 b 0,001 Motilitas spermatozoa (%) 54,05± 7,43 a 61,11± 6,84 b 65,86± 8,57 b 0,000 Morfologi spermatozoa abnormal (%) 17,31± 3,57 a 11,27± 2,01 b 10,75± 3,28 b 0,000
Keterangan: Hasil uji lanjut LSD, angka yang diikuti oleh  huruf  sama  pada  satu  variabel yang  sama  tidak  berbeda  nyata (P>0,05),  dan  sebaliknya  berbeda nyata (P<0,05)
Tabel  3.  Parameter  histologi  tubulus  seminiferus testis  mencit  setelah  diberi  ekstrak  jahe ( Zingiber  officinale )  yang  dicampurkan dalam pelet Variabel K 1 (kontrol ) K 2 (50 mg ekstrak jahe/1k g pelet) K 3 (100 mg ekstrak jahe/1k g pelet)
One-way ANOVA (p-value) Diameter tubulus semini- ferus (μm) 179,23 ±8,52 a 195,08 ±11,09 b 197,16 ±11,65 b 0,002 Jumlah spermatogonia 3,91±0, 11 a 4,27±0, 31 a
3,27±0, 09 a 0,177 Jumlah spermatosit pre-leptoten 7,49±1, 95 a 12,28± 4,05 b 14,51± 3,66 b 0,000 Jumlah spermatosit pakhiten 15,58± 2,09 a 21,64± 2,25 b 19,02± 3,81 b 0,000 Jumlah spermatid 27,78± 3,92 a 59,69± 12,97 b
56,82± 9,10 b 0,000
Keterangan: Hasil uji lanjut LSD, angka yang diikuti oleh  huruf  sama  pada  satu  variabel yang  sama  tidak  berbeda  nyata (P>0,05),  dan  sebaliknya  berbeda nyata (P<0,05)

## Pembahasan
Penelitian ini menggunakan mencit jantan umur 12- 14  bulan,  yaitu  umur  dimana  mencit  memasuki masa penurunan atau kemunduran fungsi reproduksi,  dan  pada  tikus.    Ini  sebagai  model penelitian mencari bahan alam sebagai suplemen, yang berguna mempertahankan kesehatan reproduksi dan hambatan laju penurunan spermatogenesis karena penuaan (Schmidt et al., 2009.;Systin  et  al.,  2001).    Salah  satu  teori penuaan adalah meningkatnya radikal bebas yang sebanding dengan bertambahnya umur, dan ROS ( reactive  oxygen  species )  merupakan  penanda ( biomarkers ) terbentuknya radikal bebas (Desai et al., 2010).
Penuaan  juga  terkait  dengan  penurunan  kualitas parameter semen atau air mani (Jung et al.,2002). menunjukkan penurunan signifikan dalam kualitas parameter  semen  dari  pria  yang  lebih  tua  (>  50 tahun; n = 66) dibandingkan dengan laki-laki yang lebih  muda  (21-25  tahun;  n  =  134).  Mereka menunjukkan bahwa motilitas progresif spermatozoa  menurun  27%  pada  pria  yang  lebih tua.  Disamping  itu,  Telah  dibuktikan  bahwa persentase sperma abnormal pada mencit umur 12 dan 18 bulan lebih tinggi dari mencit umur 2 dan 6 bulan.  Penelitian  kami  menyajikan  hasil  bahwa pemberian ekstrak jahe pada mencit yang  sedang dalam  proses  menua,  maka  jumlah  dan  kualitas sperma  yang  meliputi  viabilitas,  motilitas,  dan morfologi; menjadi lebih baik dibandingkan dengan yang tidak diberi ekstrak.
Spermatogenesis  merupakan  proses  proliferasi dan  diferensiasi  sel-sel  spermatogenik  menjadi spermatozoa  yang  matang,  sehingga  memiliki kemampuan  membuahi  sel  telur  dalam  proses fertilisasi. Disamping itu, Tahapan yang tidak kalah penting  adalah  spermatozoa  akan  mengalami pematangan  fisiologis  di  dalam  epididimis.  Salah satu  teori  penuaan,  terjadi  karena  peningkatan radikal bebas (ROS) pada semua jenis sel (Systin et  al.,  2001).  Stres  oksidatif  dapat  tidak menguntungkan karena mengakibatkan perubahan fisiologis  pada  organ  reproduksi,  termasuk epididimis  dan  kelenjar  aksesori.  Kerusakan  lokal untuk  epididimis  dapat  mempengaruhi  proses pematangan  sperma  normal.  Mengurangi  volume semen  disebabkan  oleh  kelenjar  aksesori  yang rusak adalah manifestasi lain dari stress oksidatif. Oleh  karena  itu,  stres  oksidatif  ditambah  dengan penuaan  berkorelasi  dengan  penurunan  kualitas semen  (Mehraban  et  al.,2014;  Vermeulen  and Kaufman, 1995).
Testis  dan  epididimis  merupakan  bagian      sistem organ reproduksi yang sel-selnya memiliki aktivitas tinggi,  dan  ini  cenderung  mehasilkan  ROS  yang berlebih. Akibatnya, akan mengganggu proses baik spermatositogenesis  maupun  spermiogenesis  di testis,  dan  pematangan  sperma  pada  epididimis (Fabricant  and  Parkening,  1982;  Franks  and Payne, 1970). Sementara itu, ada hubungan antara penuaan  dengan  meningkatnya  apoptosis  pada spermatositogenesis.  Apoptosis  seluler  adalah salah  satu  proses  menyolok  yang  diamati  dalam perkembangan testis dan spermatogenesis normal. Terbukti pemberian suplemen ekstrak jahe pada mencit jantan dewasa meningkatkan kualitas parameter reproduksi dan spermatogenesis (Morakino et al 2011; Khaki et al., 2014).
Hal  itu  penting  karena  spermatogenesis  mamalia merupakan proses yang kompleks yang memerlukan homeostasis yang tepat dari jenis sel yang  berbeda.  Sel  Sertoli  berperan  mengatur proliferasi  dan  diferensiasi  sel  germinal,  yang berarti  terlibat  dalam  pengendalian  apoptosis  sel germinal, mungkin ekstrak jahe berfungsi memaksimalkan  mekanisme  pengendalian  poros hipotamaus-hipofisis-testis (Vermeulen and Kaufman,  1995;  Paul  et  al.,  2009).  Faktor  lain selain  penuaan,  apoptosis  juga  terjadi  karena faktor  endokrin,  eksokrin,  racun,  obat-obatan, metabolit  dan  peptida  yang  memicu  aktivasi  gen spesifik (Kuhnert and Nieschlag, 2004).  Pada sel- sel  germinal  baik  faktor  fisik  misal  radiasi gelombang elektromagentik dan panas lokal pada testis, maupun faktor induksi bahan kimia misal zat toksik dan antiandrogen (Mares and Najam, 2012; Kerr et al., 1972).
Jahe mengandung zat yang memiliki kemampuan sebagai  antioksidan,  yang  dapat  melindungi pengaruh buruk radikal bebas.  Bahan yang paling aktif dan mendasar adalah  gingerol dan shogaol, yang  telah  menunjukkan  efek  perlindungan  pada diabetes  karena  fungsi  hati,  ginjal,  mata,  dan komplikasi sistem saraf. Selanjutnya, studi dengan hewan model menunjukkan bahwa jahe umumnya berguna  sebagai  antioksidan  (Mares  and  Najam, 2012;  Aleissa,  2014),  efek  androgenik  dan  efek hipoglikemik.  Bahan aktif dari akar jahe dan daun seperti  zingerone,  gingerdiol,  zingibrene,  gingerol dan  shogaols  diproduksi  dan  memiliki  aktivitas antioksidan (Mascolo et al., 1989; Kamtchouing et al.,2002;  Bhandari  et  al.,  2005).  Mencit  yang diinduksi  fungisida-metiram  dan  bersama-sama dengan  itu  diberikan  jahe,  terbukti  dapat mengurangi apoptosis sel-sel germinal testis (Sakrr and Badawy, 2011). Hasil penelitian ini, kami telah membuktikan pemberian ekstrak jahe dalam pakan pelet  selama    dua  siklus  spermatogenesis, memperlihatkan bahwa jumlah sel-sel spermatosit dan  spermatid  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan kontrol.  Hal  ini  diduga  ekrtrak  jahe  berfungsi sebagai  antioksidan  (Sekiwa  et  al.,2000;  Khaki  et al  2014),  yang  dapat  melindungi  pengaruh  buruk ROS akibat penuaan.
Pengobatan  dengan  jahe  terhadap  pria  infertil menyebabkan peningkatan yang signifikan hormon LH ( Luteinizing Hormone ), FSH ( Folicle Stimulating Hormone ),  dan  testosteron  dalam  serum  (Zancan et  al.,2002).  Suplementasi  jahe  secara  oral  pada pasien  diabetes,  mengurangi  inflammasi  dan meminimkan  dampak  lain  atau  komplikasi  kronik dari  penyakit  ini,  seperti  menurunnya  fungsi reproduksi(Sutyarso  et  al.,2016;  Mahluji  et  al., 2013).  Informasi  lain,  bahwa  eksrak  jahe  yang diberikan  pada  tikus,  dapat  meningkatkan  kadar
hormon testosteron dan FSH, sebaliknya menurunkan  estradiol  dan  prolaktin  (Mares  and Najam, 2012; Ekaluo et al., 2011).  Bukti lain bahwa induksi  antibiotik-gentamicin  pada  tikus  dapat menyebabkan  apopotosis  sel-sel  spermatogenik dan  kerusakan  histologi  testis,  pemberian  ekstrak jahe  dapat  memperbaiki  kerusakan  tersebut (Zahedi  and  Khaki,  2014).  Selain  sebagai antioksidan,  jahe  juga  mempunyai  efek  protektif terhadap    kerusakan  jaringan  testis  selama spermatogenesis  akibat  meningkatnya  tekanan oksidatif,  tetapi  juga  bersifat  androgenik  dan meningkatkan produksi hormon testosteron (Hozayen et al., 2014; Hafez, 2010). Bahkan patut diduga  ekstrak  jahe  dapat  meingkatkan  fungsi poros  hipotalamus-hipofisis-testis,  terbukti  dapat meningkatkan  kadar  FSH,  LH,  dan  testosteron (Khaki et al., 2014; Morakinyo et al., 2010).
Antioksidan  alami  dapat  melindungi  molekul  dari kerusakan sel yang disebabkan oleh oksidasi dan dapat meningkatkan kualitas sperma dan meningkatkan efisiensi reproduksi pria (Hafez DA., 2010; George et al., 2012).  Jahe juga ditemukan memiliki  efek  perlindungan  terhadap  kerusakan DNA  yang  disebabkan  oleh  induktor  H 2 O 2 dan meningkatkan  kualitas  parameter  sperma  pada tikus  (Maheshwari  et  al.,  2011;  Kerr  et  al.,  1972; Morakinyo et al., 2010). Penelitian lain merekomendasikan  bahwa  asupan  akar  jahe sebagai minuman mungkin bermanfaat bagi pasien diabetes  yang  mengalami  disfungsi  seksual,  dan ekstrak  jahe  juga  memiliki  aktivitas  antidiabetes dan  meningkatkan  fertilitas  pada  tikus  jantan diabetes (Zahedi and Khaki 2014). Hasil penelitian sebelumnya,  menunjukkan  bahwa  ekstrak  jahe memiliki  pengaruh  profertilitas  pada  tikus  jantan yang berfungsi sebagai antioksidan kuat, antitoksisitas,  dan  meningkatkan  steroidogenesis
testis (Yang et al., 2006; Rasyidah et al., 2014).  Di samping  itu  ekstrak  jahe  juga  emiliki  efek kemopreventif  terhadap  efek  toksik  fungisida- aspartame  pada testis tikus (Ekaluo et al., 2011). Ekstrak  jahe  juga  bekerja  meningkatkan  aktivitas enzim  oksidase  SOD ( superoxide  dismutase )  dan katalase,  ini  sebagai  indikasi  bahwa  ekstrak  jahe berperan  sebagai  antioksidan  (Khaki  et  al.,  2009; Rasyidah et al., 2014; Sutyarso et al., 2016).
Penelitian  kami  ini,  telah    berhasil  membuktikan bahwa  pemberian  ekstrak  jahe  yang  dicampur dalam pakan pelet selama dua siklus spermatogenesis  pada  mencit  yang  sedang memasuki masa penuaan, dapat menghambat laju penurunan  fungsi  testis.  Antara  lain  jumlah spermatosit  preleptoten,  pakhiten,  dan  spermatid lebih tinggi dibandingkan yang tidak diberi ekstrak jahe  (kontrol).  Selanjutnya,  jumlah  sepermatozoa, viabilitas, motilitas, dan morfologi normal spermatozoa  lebih  baik  dibandingkan  kontrol.  Hal ini  diduga  karena  ekstrak  jahe  berfungsi  sebagai antioksidan,  bersifat  androgenik  dan  protektif terhadap kerusakan testis mencit akibat penuaan.

## KESIMPULAN
Ekstrak  rimpang  jahe  ( Zingiber  officinale )  yang diberikan  pada  mencit  yang  sedang  memasuki masa penuaan dapat menurunkan laju penurunan fungsi testis.

## DAFTAR PUSTAKA
Aleissa MS. 2014. Effet of ginger supplements on some  reproductive  parameters  and spermatogenesis of mice. Indian J Fund Appl Life Sci;4:271-77
Bhandari    U,  Kanojia  R,  Pillai  KK.  2005.  Effect  of ethanolic extract of Zingiber officinale on dyslipidaemia in diabetic rats. J Ethnopharm;97:227-30
Billig H, Furuta I, Rivier C, Tapanainen J, Parvinen
M,  Hsueh  AJ.  1995.  Apoptosis  in  testis
germ  cells:  developmental  changes  in gonadotropin
dependence and localization  to  selective  tubule  stages. Endocrinology;136:5-12
Desai N, Sabanegh Jr E, Kim T, Agarwal A. 2010.
Free Radical Theory of Aging: Implications in Male Infertility. Urology;75: 14-19
Ekaluo,  U.B.,  Ikpeme,  E.V.    And  Edu,  N.E.  2011. Biological  response  of  male  rats  to aqueous  extract  of  ginger  ( Zingiber officinale Roscoe.).  Int  J  Recent  Sci Res;2:240-42.
Fabricant  JD,    Parkening  TA.  1982.  Sperm morphology  and  cytogenetic  studies  in ageing C57BL/6 mice. J Reprod Fertil;66:485-89
Franks LM, Payne J. 1970. The influence of age on reproductive  capacity  in  C57BL  mice.  J Reprod Fertil;21:563-65.
Furuchi  T,  Masuko  K,  Nishimune  Y,  Obinata  M,
Matsui  Y.  1996.  Inhibition  of  testicular germ cell apoptosis and differentiation in mice misexpressing Bcl-2 in spermatogonia.  Development;122:1703- 09
George  SK,  Jiao  Y,  Bishop  CE,  Lu  B.  2012. Oxidative  stress  is  involved  in  age- dependent  spermatogenic  damage  of Immp2l  mutant  mice.  Free  Rad  Bio Med;52:2223-2232
Hafez DA. 2010. Effect of extracts of ginger goots and  cinnamon  bark  on  fertility  of  male diabetic rats. J Am Sci;6:940-47
Hozayen  WG,  Soliman  HA,  Abou-Seif  HS.  2014.
Study  of  the  chemopreventive  effects  of Zingiber officinale
roots against
aspartame  induced  testicular  toxicity  in rat model. J Phys Pharm Adv;4:360-67
Jung A, Schuppe HC, Schill WB. 2002. Comparison of  semen  quality  in  older  and  younger men  attending  an  andrology  clinic. Andrologia;34:116-22.
Kamtchouing  P,  Mbongue-Fandio  GY,  Dimo  T, Jatsa HB. 2002. Evaluation of androgenic
activity  of Zingiber  officinale extracts  in male rats. Asian J Androl;4:299-301
Kerr JFR, Wyllie AH, Currie AR. 1972. Apoptosis: A  Basic  biological  phenomenon  with wide-ranging implications in tissue kinetics. British J Cancer; 26:239-57.
Khaki  A,  Fathiazad  F,  Nouri  M,    Khaki  A,  Chelar CO,  Marefat  N,  Hamadeh  M.  2009.  The Effects  of  Ginger  on  Spermatogenesis and  Sperm  parameters  of  Rat.  Iranian  J Reprod Med;7:7-12.
Khaki  A,  Khaki  AA,  Hajhosseini  L,  Golzar  FS, Ainehchi  N. 2014.  The  anti-oxidant effects  of  ginger  and  cinnamon  on spermatogenesis dys-function of diabettes rats. AfricanTradit Comp Altern Med;11:1-8.
Kuhnert B, Nieschlag E. Reproductive functions of the  ageing  male.  2004.  Hum  Reprod Update;10:327-39.
Lotfi N, Khazaei E, Shariatzadeh SMA, Mehranjani MS,  Ghanbari  A.  2013.  The  effect  of Cannabis  sativa hydroalcoholic  extract on sperm parameters and testis histology in rats. Int J Morphol;31:82-6
Maheshwari  A,  Misro  MM,  Aggarwal  A,  Sharma RK. Nadan D.  2011. N-Acetyl-L-cysteine counteracts oxidative stress and prevents H 2 O 2 induced  germ  cell  apoptosis through  down-regulation  of  caspase-9 and  JNK/c-jun.  Moll  Reprod  Dev;78:69- 79.
Mahluji S, Ostadrahimi A, Mobasseri M, Attari VE, Payahoo  L.  2013.  Anti-Inflammatory Effects  of Zingiber  Officinale in  Type  2 Diabetic Patients. Adv Pharm Bull;3:273- 76
Mares WAAK and Najam WS. 2012. The effect of ginger on semen parameters and serum FSH, LH & testosterone of infertile men. Tikrit Medical J;18:322-29.
Mascolo  N,  Jain  R,  Tain  S,  Capasso  F.  1989. Ethnopharmacologic investigation of ginger  ( Zingiber  officinale ).  J  Ethno Pharmacol;27:129 –40.
Meistrich  ML. Effects  of  chemotherapy  and radiotherapy on spermatogenesis. 1993.
Eur Urol;23:136-41
Mitchell SJ., Longo DL., Scheibye-Knudsen M, and de Cabo R. 2015. Animal Models of Aging Research: Implications for Human Aging and  Age-Related  Diseases. Ann  Rev Anim BioSci;3:283 –303
Morakinyo  AO,  Adeniyi  OS,  Arikawe  AP . 2008.
Effects of Zingiber officinale on reproductive  functions  in  the  male  rat. African J Biomed Res;11:329-34
Morakinyo  AO,  Achema  PU,  Adegoke  OA.  2010. Effect  of Zingiber  officinale (Ginger)  on sodium arsenit-induced reproductive toxicity  in  male  rats.  African  J  Biomed Res;13:39-45
Morakinyo AO, Oludare GO, Aderinto OT, Tasdup
A.  2011.  Antioxidant  and  fre  radical scavenging  activities  of  aqueous  and ethanol extracts of Zingiber officinale . Bio Med;3:25-30.
Paul  C,  Teng  S,  Saunders  PTK.  2009.  A  single mild-transient scrotal heat stress causes hypoxia  and  oxidative  stress  in  mouse testes which induces germ cell death. Biol Reprod;80: 913-19.
Rasyidah  TI,  Suhana  S,  Nur  HA,  Kaswandi  MA, Noah RM. 2014. Evaluation of antioxidant activity  of Zingiber  officinale (ginger)  on formalin-induced testicular toxicity in rats.
J Med Bioeng;3:149-53
Sakr  SA  and  Badawy  GM.  2011.  Effect  of  ginger ( Zingiber  officinale R.)  on  metiram- inhibited  spermatogenesis  and  induced apoptosis  in  albino  mice.  J  App  Pharm Sci;1:131-36.
Schmidt JA, Oatley JM, Brinster RL. 2009. Female Mice Delay Reproductive Aging in Males.
Biol Reprod;80:1009-14.
Sinha  HAP,  Rajavashisth  TB,  SinhaHI,  Lue  Y, Bonavera  JJ,  Leung  A,  Wang  C, Swerdloff  RS. 1997.  Significance  of apoptosis  in  the  temporal  and  stage- specific loss of germ cells in the adult rat after  gonadotropin  deprivation.  Biol Reprod;57:1193-201
Systin  P, Chen  H,  Zirkin  BR,  Robaire  B.  2001. Gene  expression  in  Brown  Norway  rat Leydig  cells:  Effect  of  age  and  age- related
germ
cell loss. Endocrin;142:5277-85
Sutyarso, Muhartono, Susianti, Busman H, Kanedi M.  2016.  Testicular  Function  of  Rats
Treated with Water Extract of Red Ginger ( Zingiber officinale var.rubrum)
Combined with Zinc. Journal of Food and Nutrition Research; 4( 3):157-162
Sutyarso, Busman H, Kanedi M, Muhartono. 2016. Rhizome  Extract  of  White  Ginger ( Zingiber  officinale Roxb)  Maintains Testicular  Function  of  Aging  Mice. International  Journal  of  Nutrition  and
Food Sciences;5(3):175-178
Sutyarso.  2017.  Penuaan  dan  Fungsi  Seksual.
Orasi  Ilmiah  Pengukuhan  Guru  Besar. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung. World Health Organization. 2010. WHO laboratory
manual for the examination and processing  of  human  semen.  5 th Ed., Geneva,  Switzerland;  World  Health Organization:21-65
Yang HS, Han DK, Kim JR, Sim JC. 2006. Effet of alpha-tocopherol  on  cadmium  induced- toxicity  in  rat  testis  and  carcinogenesis. Korean Med J;21:445-51
Zahedi  A,  Khaki  A.    2014.  Recovery  effect  of Zingiber  officinale on  testis  tissue  after treatment with gentamicin in rats. J Med Plant Res;8:288-91.
Zancan  KC,  Marques  MO,  Petenate  AJ,  Meireles MA.  2002.  Extraction  of  ginger  ( Zingiber officinale. Roscoe)  oleoresin  with  CO2 and  co-solvents:  A  study  of  the antioxidant  action  of  the  extracts.  J Supercri Fluids;24:57-67.