Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048 DOI: http://dx.doi.org/10.20473/bikfar.v8i1.31207
Cite this as: Sela Mustika Sari, Arista Wahyu Ningsih, Farida Anwari1, Iif Hanifa Nurrosyidah (2021),  Modifikasi Media Pertumbuhan Lactobacillus casei Strain Shirota dengan Susu Skim yang Diperkaya Air Kelapa Hijau dan Tepung Jagung, 8 (1), 14-19

## Modifikasi Media Pertumbuhan Lactobacillus casei Strain Shirota dengan Susu Skim yang Diperkaya Air Kelapa Hijau dan Tepung Jagung
Media Modification Lactobacillus casei Strain Shirota with Skim Milk Enriched Green Coconut Water and Corn Starch
Sela Mustika Sari 1 , Arista Wahyu Ningsih 1 , Farida Anwari1, Iif Hanifa Nurrosyidah* 1
1STIKES RS Anwar Medika Jalan Raya Bypass KM 33, Balongbendo, Kecamatan BalongBendo, Kabupaten Sidoarjo, Jawa Timur 61262, Indonesia
*Corresponding author E - mail: : iifhanifanurrosyidah@gmail.com
Article History
Received: 24 February 2021; Received in Revision: 23 March 2021; Accepted: 31 March 2021

## ABSTRACT
Bacteria need a medium that can play an important role in their growth. One example of a medium is the medium De Mann Rogosa and Sharpe (MRS) which is a specific medium for the growth of lactic acid bacteria. The use of MRS media on an industrial scale is ineffective due to its relatively high price. The purpose of this study was to find out the effect of skim milk media enriched with green coconut water and cornstarch on the growth of Lactobacillus casei bacteria. The type of research conducted is experimental research with post test only control group design where there are two groups, namely the control group and the experimental group. The experimental group consisted of 3 types of samples, namely skim milk and green coconut water, skim milk and cornstarch, as well as skim milk and green coconut water and cornstarch. The comparison of treatment levels for each sample was 1:2 and 1:3 and analyzed, including bacterial growth curves, growth speed and bacterial generation time. From each concentration, the results found that the addition of green coconut water  and cornstarch had a significant effect on the growth of Lactobacillus casei (P˂0.01) to the speed of growth and generation time. It was concluded that the higher the concentration added it can accelerate the growth of Lactobacillus casei.
Keywords : Green Coconut Water, Lactobacillus casei, Growth Media, Modifications, CornStarch

## ABSTRAK
Bakteri membutuhkan media yang dapat berperan penting dalam pertumbuhannya. Salah satu contoh media adalah media De Mann Rogosa and Sharpe (MRS) yang merupakan media spesifik untuk pertumbuhan bakteri asam laktat. Penggunaan media MRS pada skala industri tidaklah efektif dikarenakan harga yang relatif tinggi. Tujuan dari penelitian ini dalah untuk mengetahui pengaruh media susu skim yang diperkaya air kelapa hijau dan tepung jagung terhadap pertumbuhan bakteri Lactobacillus casei. Jenis penelitian yang dilakukan  adalah  penelitian  eksperimental  dengan  desain  penelitian  Post  Test  Only  Control  Group Designdimana  terdapat  dua  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  dan  kelompok  eksperimen.  Kelompok eksperimen terdiri dari 3 macam sampel yaitu susu skim dan air kelapa hijau, susu skim dan tepung jagung ,  serta  susu  skim dan  air  kelapa hijau dan tepung  jagung.  Dengan  perbandingan    level perlakuan  untuk masing  –  masing sampel yang  diberikan  adalah 1:2  dan  1:3  dan  dianalisis  meliputi  kurva  pertumbuhan bakteri, kecepatan pertumbuhan dan waktu generasi bakteri. Dari masing – masing konsentrasi didapatkan hasil bahwa penambahan air kelapa hijau dan tepung jagung berpengaruh signifikan terhadap pertumbuhan Lactobacillus  casei (P˂0,01) terhadap kecepatan pertumbuhan dan waktu generasi. Disimpulkan bahwa semakin tinggi konsentrasi yang ditambahkan maka dapat mempercepat pertumbuhan Lactobacillus casei.
Kata Kunci : Air Kelapa Hijau, Lactobacillus casei, Media Pertumbuhan, Modifikasi, Tepung Jagung

## Pendahuluan
Bakteri  membutuhkan  media  yang  dapat  berperan penting dalam pertumbuhannya. Bakteri asam  laktat biasanya ditumbuhkan pada media De Mann Rogosa
and  Sharpe (MRS).  Media  MRS  merupakan  media spesifik  untuk  pertumbuhan  bakteri  asam  laktat. Penggunaan media MRS pada skala industri tidaklah efektif  dikarenakan  harga  yang  relatif  tinggi.  Untuk menangani  masalah  ini  diperlukan  media  pengganti

## Research Article
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
yang  harganya  relatif  murah  namun  mengandung sejumlah  nutrisi  penting  yang  dapat  menunjang pertumbuhan bakteri asam laktat.
Lactobacillus merupakan  salah  satu  genus bakteri  probiotik  yang  sering  dimanfaatkan  (Shin et al., 2019).  Probiotik  adalah  bakteri  hidup  yang mempunyai pengaruh menguntungkan pada kesehatan  manusia  dengan  cara  memperbaiki keseimbangan  mikroflora  dalam  saluran  pencernaan (Widyaningsih,  2011).  Mekanisme  kerja  probiotik dalam saluran pencernaan yaitu  menghambat adhesi patogen  enterik  di  mukosa  usus,  menghasilkan antimikroba  yaitu  bakteriosin,  memperkuat  fungsi epitel  usus dan meregulasi  sistem imun (Shin et al., 2019).  Probiotik  akan  menekan  mikroorganisme patogen  keluar  dari  saluran  pencernaan  dan  akan terjadi  proses  translokasi  oleh  bakteri  probiotik sehingga keseimbangan mikroorganisme menguntungkan bisa tercapai (Shin et al., 2019). Bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah Lactobacillus  casei karena  merupakan kelompok bakteri asam laktat (BAL) yang telah teruji klinis mampu hidup di saluran pencernaan (Mulyani et  al., 2008).  Keunggulan  dari Lactobacillus  casei yaitu  dapat  memproduksi  asam  organik  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  dan  aktivitas  bakteri patogen  (Khotimah  dan  Kusnadi,  2014).  Produksi asam  organik  akan  menurunkan  pH  lingkungan. Lingkungan yang asam akan menghambat pertumbuhan  bakteri  patogen  sehingga  probiotik mampu  menjaga  keseimbangan  mikroorganisme dalam saluran pencernaan (Yana, 2020).
Kelapa merupakan salah satu tanaman yang umumnya  terdapat  di  daerah  tropis.  Buah  kelapa memiliki dua varietas utama yaitu varietas dalam (tall coconut) dan varietas genjah (dwarf coconut). Salah satu buah kelapa yang terkenal banyak mannfaat nya untuk  pengobatan  adalah  kelapa  hijau.  Kelapa  hijau ( Cocos  nucifera L.  Var.  Viridis)  termasuk  dalam varietas dalam (tall coconut). Secara alami air kelapa hijau  mempunyai  komposisi  gula  dan  mineral  yang lengkap,  sehingga  mempunyai  potensi  yang  besar untuk  dikembangkan  sebagai  medium  untuk  proses fermentasi  asam  laktat.  Pertumbuhan  dari  bakteri asam laktat akan menggunakan komponen karbohidrat  dalam  air  kelapa  hijau  sebagai  sumber karbon  dan  memanfaatkan  komponen  vitamin  dan mineralnya sebagai koenzim dan kofaktor (Widowati dan Malahayati, 2016).
Air kelapa kaya akan nutrisi seperti kalium, protein  0,07  –  0,55%.  Karbohidrat  dalam  air  kelapa hijau  mencapai  4,00  –  7,27  %  berupa  sukrosa (disakarida),  glukosa,  fruktosa  (monosakarida)  serta mengandung  vitamin  B  kompleks.  Glukosa  dan Fruktosa  dalam  air  kelapa  hijau  yang  merupakan monosakarida lebih mudah dimanfaatkan BAL untuk
pertumbuhannya  sebagai  prebiotik.  (Jannah et  al ., 2012).

## Bahan dan Metode Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Air kelapa Hijau, Lactobacillus casei, Tepung Jagung (Maizenaku),  Susu  Skim,  Garam  Fisiologis  (Otsu NS)  MRS Agar (Merck)  ,  MRS Broth (Merck), Etanol 70% (One Med), Indikator Fenolftalein, NaOh 0,1N, aquadestilata (PT. Brataco Chemika).
Alat alat  yang  diperlukan  antara  lain  Cawan  petri  ,  pipet ukur 10 mL (Pyrex), micropipet   (Eppendorf) dan tip, sterile tube Eppendorf, autoclave (Huxley), autoshaker  (Gerhardt),  vortex  (Thermo),  UV-Vis (Thermo)  spectrophotometer,  incubator  (Memmert), jarum  Öse, Bunsen, Hot Plate.

## Peremajaan Bakteri Lactobacillus casei
Peremajaan  bakteri  dilakukan  dengan  mengambil  1 ose dari Yakult kemudian digoreskan dengan metode streak 16 pada cawan petri yang berisi medium MRS Agar yang telah di buat sebelumnya. Cawan petri di inkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 – 48 jam sampai bakteri  tumbuh.  Bakteri  yang  tumbuh  kemudian  di ambil 1 ose dan di goreskan pada medium MRS Agar miring dalam tabung reaksi lalu di tutup dengan kapas dan di inkubasi  selama 24  –  48 jam. Setelah bakteri tumbuh, di simpan dalam lemari pendingin.

## Pembuatan Starter Bakteri Lactobacillus casei
Kultur Lactobacillus  casei dari  agar  miring  di inokulasikan  dalam  10  ml  MRS Broth steril, kemudian di inkubasi pada shaker dengan kecepatan 100  rpm  selama  24  jam  sampai  terlihat  pertmbuhan bakteri. Kultur cair siap di gunakan.

## Pembuatan Media Pertumbuhan

## a. Media Fermentasi Susu Skim Yang Diperkaya Air Kelapa Hijau
Susu  skim  dan  air  kelapa  hijau  di  campur  dengan konsentrasi  1:2  dan  1:3  kemudian  di  homogenkan dengan menggunakan vortex selama 5 menit sampai media homogen. Media fermentasi susu skim dan air kelapa hijau siap di gunakan.

## b. Media Fermentasi Susu Skim Yang Diperkaya Tepung Jagung
Pembuatan  media  fermentasi  susu  skim  yang di  substitusi  dengan  tepung  jagung  yaitu  dengan mencampukan susu skim dengan tepung jagung yang di larutkan dalam aquades dengan perbandingan yang di  gunakan  adalah  1:2  dan  1:3.  Setelah  itu  di homogenkan pada hot plate dengan suhu 85 0 C selama 10  menit  dengan  pengadukan.  Dinginkan  dalam ruangan  aseptis  sampai  mencapai  suhu  ruang. kemudian  di  vortex  selama  5  menit  untuk  membuat
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
media homogen. Media fermentasi susu skim yang di substitusi tepung jagung diap di gunakan .

## c. Media Fermentasi Susu Skim Yang Diperkaya Air Kelapa Hijau Dan Tepung Jagung
Susu  skim  di  tambahkan  dengan  air  kelapa hijau  dan  tepung  jagung  yang  di  larutkan  dalam aquades dengan perbandingan 1:1:1, 1:2:2, dan 1:3:3 dalam  beaker  glass.  Kemudian  di  homogenkan dengan  hot  plate  pada  suhu  85 0 C  selama  10  menit dengan  pengadukan.  Vortex  media  yang  terdapat pada  tabung  reaksi  sampai  homogen  kurang  lebih  5 menit.  Dinginkan  dalam  ruangan  aseptis  sampai mencapai suhu ruang.

## Pembuatan Kurva Standar Bakteri
Starter bakteri Lactobacillus casei yang telah dibuat diamati  Absorbannya  pada  spektrofotometer  UV  – Vis  pada  panjang  gelombang  625nm.  Kemudian dilakukan pengenceran dengan cara mengambil 1mL larutan starter dengan pengenceran 1;1, 1;2, 1;4, 1;8, 1;16, 1;32 dengan larutan pengencer garam fisiologis (Rosmania,  2020)  Masing  –  masing  pengenceran diukur  nilai  Absorbannya  dengan  spektrofotometer UV  –  Vis  dan  dihitung  jumlah  jumlah  sel  bakteri Kemudian  dibuat  kurva  standar  yaitu  hubungan antara  Absorban  pada  sumbu  y  dengan  jumlah  sel bakteri  pada  sumbu  x.  Pada  grafik  akan  didapatkan persamaan regresi linier yang akan digunakan untuk menghitung  jumlah  sel  bakteri  pada  kurva pertumbuhan bakteri.
Rumus persamaan regresi linier
Keterangan :
y = Absorban ( Optical Density ) a dan b = Konstanta dari garis linier x = Jumlah sel bakteri

## Pembuatan Kurva Pertumbuhan Bakteri
Starter Bakteri yang didapat diinokulasikan pada  media  pertumbuhan  susu  skim  yang  diperkaya air  kelapa  hijau,  susu  skim  yang  diperkaya  tepung jagung, susu skim yang diperkaya air kelapa hiaju dan tepung  jagung  serta  pada  media  MRS Broth cair untuk  kontrol  positif.  Kultur  bakteri  di  encerkan dengan mengambil 1 ml dari media yang telah dibuat dan  dimasukkan  dalam  9ml  garam  fisiologis  (NaCl 90%) untuk pengenceran 10 -1 , dilakukan pengulangan hingga didapat pengenceran 10 -8 . Kultur bakteri  dalam  media  yang  telah  diencerkan  diukur nialai  Absorbannya  dengan  Spektrofotometer  Uv  – Vis  pada  panjang  gelombang  625  nm.  Setiap  8  jam diukur  nilai  Absorbannya  selama  48  jam.  Nilai Absorban yang didapat digunakan untuk menghitung jumlah sel bakteri pada persamaan regresi linier yang telah didapatkan sebelumnya.

## Analisis Data
Analisis  Data  dilakukan  untuk  mengetahui pengaruh suatu variabel bebas ( independen ) terhadap satu variabel terikat ( dependen ) adalah menggunakan program statistik dan dilakukan uji dengan One Way Analysys  of  Variance (ANOVA)  dengan  syarat  data yang  didapat  harus  berdistribusi  normal  dan homogen.  Uji  homogenitas  dengan  hasil  data homogen pada Nilai Signifikansi (P) > 0,05. Analisis data  dilanjutkan  menggunakan  uji Analysys  of Variance (ANOVA) dengan Nilai Signifikansi (P) > 0,05 maka H 0 diterima dan H 1 di tolak. Apabila Nilai Signifikansi (P) < 0,05 maka H 0 ditolak maka terdapat pengaruh  yang  signifikan  terhadap  variabel  yang diuji.

## Hasil dan Pembahasan

## Peremajaan Bakteri
Penelitian  ini  menggunakan  bakteri Lactobacillus casei strain Shirota dari botol kemasan Yakult. Dalam satu botol Yakult mengandung bakteri Lactobacillus casei Strain  Shirota  sebanyak  6,5  milyar  atau  6,5  x 10 9 CFU/ml  (Anonim,  2021).    Menurut  Najgebauer (2011)  Berdasarkan  suhu  pertumbuhannya,  kondisi optimum  pertumbuhan  bakteri Lactobacillus  casei nya  yaitu  pada  pH  6,8  dan  suhu  30  –  37 0 C.  Bakteri mulai  tumbuh pada jam ke 24 dengan penyimpanan pada suhu 35 0 C pada inkubator yang merupakan suhu optimum pertumbuhan Lactobacillus casei . Pertumbuhan bakteri Lactobacillus casei pada proses peremajaan dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1 Pertumbuhan Lactobacillus casei pada Agar Miring
Kurva Standar Pertumbuhan Bakteri Lactobacillus casei
Hasil pengamatan nilai Optical Density (Absorbansi) dari  pengenceran  starter  bakteri Lactobacillus  casei dengan  pelarut  garam  fisiologis  0,9%.  Pengenceran dilakukan dengan ketentuan konsentrasi 1:1 , 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 dapat dilihat pada tabel 1.
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
Tabel 1. Nilai Absorbansi Lactobacillus casei
Gambar 2 Kurva Standar Pertumbuhan

## Lactobacillus casei

## Kurva Pertumbuhan
Untuk  mendapatkan  kurva  pertumbuhan bakeri  diperlukan  kurva  standar  pertumbuhan, dimana kurva terbentuk dari nilai absorbansi dan nilai biomassa  (µg)  dari  bakteri Lactobacillus  casei . Pengamatan  dilakukan  dengan  mengamati  nilai absorbansi  pada  Spektrofotometri  UV  -  Vis  dimana metode  ini  dipilih  karena  memiliki  kelebihan  yaitu hasil  yang  didapatkan  bersifat  kuantitatif  sehingga hasilnya  dapat  dikatakan  akurat  (Raymond et  al, 2016).
Dari data yang dihasilkan dapat dibuat kurva standar  pertumbuhan  bakteri  dengan  persamaan regresi  yang  dihasilkan  adalah  y  =  0,012x  -  0,102 dengan  R 2 =  1.  Dari  persamaan  yang  didapat,  bisa dibuat kurva standar yang dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar  3  Kurva  Pertumbuhan  Lactobacillus casei pada Konsentrasi 1:2
Metode  turbiditas  (kekeruhan)  adalah  metode yang  dipilih  data  yang  diamati  berupa  nilai Optical Density (OD)  dengan  interval  sampling  yang  sama pada tiap 8 jam selama 48 jam. Terdapat tiga gambar kurva  pertumbuhan.  Pengelompokan  data  kurva pertumbuhan berdasarkan konsentrasi pada masing – masing  media  uji.  Kurva  pertumbuhan  bakteri  bisa digunakan  ntuk  mengetahui fase  hidup  bakteri  yang meliputi  fase  adaptasi  (lag),  fase  pertumbuhan eksponensial (log), fase stationer dan fase kematian. Kurva  pertumbuhan  menyajikan  hubungan  antara jumlah sel (biomassa) dan waktu (jam). Didapatkan 2 kurva  pertumbuhan  yaitu  pada  konsentrasi1:2  dan 1:3.
Gambar  4  Kurva  Pertumbuhan  Lactobacillus casei pada Konsentrasi 1:3
Dari  penelitian,  didapatkan  data  untuk konsentrasi  media  susu  skim  dan  air  kelapa  pada konsentrasi  1:3  menunjukkan  nilai  OD  ( optical density ) yang paling tinggi pada jam ke 16 yaitu 0,029 dengan  biomassa  yang  didapatkan  sebesar  10,91 mg/mL  daripada  konsentrasi  1:2  dengan  nilai  OD ( optical  density )  0,015  dan  biomassa  sebesar  9,75 mg/mL  yang  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi kadar  air  kelapa  hijau  dalam  media  maka  semakin tinggi  nilai  nilai  OD  ( optical  density )  yang  didapat. Pada  konsentrasi  1:3  bakteri  memiliki  fase eskponensial yang cukup tinggi karena supply nutrisi yang  didapat  dari  media  yang  digunakan  dan  juga kandungan  karbohidrat  yang  berupa  fruktosa  yang termasuk  golongan monosakarida yang lebih mudah dimanfaatkan bakteri asam laktat untuk pertumbuhannya sebagai prebiotik.

## Kecepatan Pertumbuhan dan Waktu Generasi Kecepatan Pertumbuhan
Hasil  data  kecepatan  pertumbuhan  didapatkan  dari perhitungan  matematis  kecepatan  pertumbuhan spesifik  bakteri  pada  fase  log  (fase  pertumbuhan). Rumus yang digunakan adalah
µ = ln X2 − ln X1 ∆t Dengan : µ    = kecepatan pertumbuhan spesifik (µg/jam) X1 = total mikroba jam ke–1 (mg/jam)
y = 0,0126x - 0,1022 R² = 1 0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0 5 10 15 ab so rb an si biomassa (mg)
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
X2 = total mikroba jam ke–2 (mg/jam) Δt  = selisih waktu (t2 – t1) (jam)
Data hasil menunjukkan semakin banyak konsentrasi air kelapa hijau dan tepung jagung yang digunakan, maka  semakin  tinggi  nilai  kecepatan  pertumbuhan. Hal  ini  didukung  oleh  uji  Anova One  Way dimana nilai  signifikansi  0,00  atau  ˂  0,05  yang  berarti terdapat  perbedaan yang signifikan. Perbedaan yang siginifkan  bisa  disebabkan  oleh  komposisi  bahan tambahan  sebagai  media  pertumbuhan  dimana  pada air  kelapa  hijau  lebih  tinggi  dibandingkan  tepung jagung maupun kombinasi air kelapa hijau dan tepung jagung,  dikarenakan  karbohidrat  yang  dimiliki  air kelapa hijau  berupa  monosakarida yang lebih mudah diuraikan oleh Lactobacillus casei.

## Waktu Generasi
Waktu  generasi  ( doubling  time )  adalah  waktu  yang dibutuhkan oleh populasi mikroba untuk meningkatkan dalam jumlah kelipatan dua (Madigan et  al., 1997;  Nurrosyidah  ,  2018).  Waktu  generasi yang  singkat  selalu  di  capai  ketika  bakteri  memiliki kecepatan pertumbuhan tinggi, yang berarti semakin cepat  bakteri  itu  tumbuh,  semakin  singkat  waktu generasi  yang  dihasilkan.  Waktu  generasi  dihitung’ dari waktu pertumbuhan spesifik bakteri pada fase log (fase pertumbuhan).
Tabel 2 Kecepatan Pertumbuhan Bakteri
Lactobacillus casei
Keterangan : FI     = susu skim diperkaya air kelapa hijau FII    = susu skim diperkaya tepung jagung FIII = susu skim diperkaya air kelapa hijau dan tepung jagung
Media pertumbuhan air kelapa hijau pada konsentrasi 1:3  memiliki  waktu  generasi  yang  singkat  yang berarti  pada  medium  ini  bakteri Lactobacillus  casei lebih  cepat  tumbuh  daripada  media  pertumbuhan yang lain.
Tabel  3  Waktu  Generasi  Bakteri  Lactobacillus casei
Keterangan : FI     = susu skim diperkaya air kelapa hijau FII    = susu skim diperkaya tepung jagung FIII  =  susu  skim  diperkaya  air  kelapa  hijau  dan tepung jagung

## Kesimpulan
Pengkayaan media pertumbuhan mampu meingkatkan  pertumbuhan Lactobacillus  casei. Semakin  tinggi  konsentrasi  air  kelapa  hijau  dan tepung  jagung  yang  diberikan,  semakin  tinggi kecepatan pertumbuhan.

## Daftar Pustaka
Anonim. 2021. “Tentang Yakult”. www.yakult.co.id . diakses pada 9 Agustus 2021, 22:38. Jannah, A.M ., Nurwantoro dan Y.B Pramono. 2012.
Kombinasi  Susu  dengan  Air  Kelapa  pada Proses  Pembuatan  Drink  Yogurt  Terhadap Kadar  Bahan  Kering,  Kekentalan  dan  pH.
Jurnal  Aplikasi  Teknologi  Pangan.  1(3):  69  – 71. Khotimah, K dan K. Joni. 2014. Aktivitas Antibakteri Minuman Probiotik Sarikurma (Phoenix dactilyfera  L)  Menggunakan  Lactobacillus plantarum  dan  Lactobacillus  casei. Jurnal Pangan dan Afroindustri. 2 (3): 110 – 120. Madigan, M., Matrinko, J.M., Parker, J. 1997. Brock Biology  of  Microorganism. 8 th Edition.  New Jersey : Prentice Hall International Inc.
Mulyani,  S.,  A,  M.  Legowo,  dan  A.A.  Maharani.
2008. Viabilitas Bakteri Asam Laktat, Keasaman  dan  waktu  pelelehan  Es  Krim Probiotik Menggunakan starter. Jurnal Indonesia  Tropikal  Animal  Agrikultur  33 (2)  : 120-125.
Najgebauer  Lejko,  DE.,  Sade,  M.,  Grega,  T., Walczycka,  M.,  2011. The  Impact  of  Tea Supllementation  on  Microflora,  pH  and Antioxidant Capacity Of Yogurt. Intern Dairy. J. 21:568–574.
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 14 - 19 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
Nurrosyidah,  Iif  Hanifa.  2018.  Uji  Prebiotik  Inulin Umbi  Dahlia  ( Dahlia  pinnata Cav.)  Berbunga Merah  Darah  Pada Lactobacillus  acidophillus dan Streptococcus  termophillus .  Jurnal  Ilmiah Kesehatan Rustida. 4(2) : 526-532. Rosmania,  Fitri  Yanti.  2020. Perhitungan  Jumlah
Bakteri di Laboratorium Mikrobiologi menggunakan Pengembangan Metode
Spektrofotometri. Jurnal Penelitian Sains. 22(2)
: 76 – 86.
Shin,  D.,  S.  Y.  Chang.,  P.  Bogere.,  K.  Won.,  J.  Y. Choi.,  Y.J.  Choi.,  H.  K.  Lee.,  J.  Hur.,  B.  Y. Park.,  Y.  Kim  dan  J.  H,  Heo.  2019. Beneficial roles  of  probiotics  on  the  Modulation  of  Got Microbiota  and  Immune  Response  in  Pigs. PLoSONE. 14(8):1-23.
Widodo.  2016. Bakteri  Asam  Laktat  Strain  Lokal . Yogyakarta : UGM Press. Widowati, T.W. dan N. Malahayati. 2016. Pengaruh Penambahan  Garam  Terhadap  Karakteristik Kimia dan Mikrobiologi Asinan Sawi (Brassica juncea) selama Fermentasi dengan Medium Air Kelapa .  Prosiding  Seminar  Nasional  Lahan Suboptimal. 2(1) : 569-577.
Widyaningsih.  E.,  N.  2011. Peran  Probiotik  Untuk Kesehatan . Jurnal Kesehatan. 4(1).
Yana,  Hasna  Prima  .  2020. Pertumbuhan  Probiotik Lactobacillus  casei  Pada  Media  Kulit  Buah Pisang  Kepok ( Musa  balbasiana ).  Skripsi. Jember : Universitas Jember.
Yang, H. J., Park, S., Pak, V., Chung, K. R., Kwon, D. Y., 2011. Fermented soybean products and their bioactive compounds. In:  H. El-Shemy. Soybean  and  Health,  Egypt:  InTech,  pp.  22- 53.
Yoon, Seon-Joo, Yu, M., Sim, G., Kwon, S., Hwang, J.,  Shin,  J.,  Yeo,  I.,  and  Pyun,  Y.,  2002.
Screening and characterization of microorganism with fibrinolytic activity from fermented  foods.  J.  Microbiol  Biotechnol, 12(4), pp. 649-656.