Penulis Wulan Tri Wahyuni 1,2,* , Herdiyanto 1 , Mohamad Rafi 1,2
Afiliasi 1 Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor
2 Pusat Studi Biofarmaka Tropika, Lembaga Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat, Institut Pertanian Bogor

## Kata Kunci
 C. Xanthorrhiza
 Isolasi
 Kromatografi
 Xantorizol
Diterima 23 Februari 2017
Direvisi 5 April 2017
Disetujui 10 Juli 2017

## *Penulis korespondensi Wulan Tri Wahyuni
Departemen Kimia, FMIPA,
Institut Pertanian Bogor
Jl Tanjung Kampus IPB
Dramaga, Bogor 16880, Indonesia
Email : wulantriws@apps.ipb.ac.id

## ABSTRAK
Xantorizol  merupakan  senyawa  penciri  utama  temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza ). Penelitian ini bertujuan menentukan metode ekstraksi dan pemisahan optimum untuk isolasi  xantorizol  dari  rimpang  temulawak.  Maserasi  dan  sokletasi  digunakan  untuk mengekstraksi  xantorizol  dengan  pelarut  metanol,  dietil  eter,  dan n- heksana. Pemisahan  dilakukan  dengan  kromatografi  kolom  dan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) preparatif  dan  hasil  pemisahan  dikarakterisasi  berdasarkan  spektrum  inframerah  dan kromatografi  gas-spektrum  massa  (KG-SM),  sementara  persentase  kemurniannya ditentukan  dengan  kromatografi  cair  kinerja  tinggi.  Ekstrak n- heksana  dari  teknik maserasi  memiliki  kandungan  xantorizol  lebih  tinggi  dibanding  ekstrak  lainnya  yaitu sebesar  168  mg/g  sampel.  Fraksi  ke-4  hasil  pemisahan  kolom  terhadap  ekstrak n- heksana memberikan dua spot pada KLT dengan R f 0.54 dan 0.68, spot dengan Rf 0.54 diduga  merupakan  xantorizol  (dikonfirmasi  dengan  KG-SM).  Pemurnian  lebih  lanjut dengan KLT preparatif terhadap fraksi ke-4 menghasilkan xantorizol dengan rendemen sebesar 0.016 % berdasar bobot sampel dan tingkat kemurnian sebesar 87.40 %.

## PENDAHULUAN
Temulawak  merupakan  tanaman  asli  Indonesia  yang  termasuk  ke  dalam  famili Zingiberaceae.  Tanaman  ini  secara  empiris  dilaporkan  dapat  mengobati  berbagai penyakit  seperti  radang  dan  pembengkakan  saluran  cerna,  batu  empedu,  liver, dyspepsia,  antispasmodic  (EMA  2014).  Secara  saintifik  temulawak  dilaporkan  memiliki aktivitas  antibakteri,  antioksidan,  antitumor,  antiinflamasi,  antijamur,  dan hepatoprotektif (Masuda et al. 1992; Lin et al. 1996; Hwang et al. 2000; Hwang 2004; Park et  al. 2008). Bagian tanaman temulawak yang  digunakan ialah rimpang. Rimpang temulawak merupakan komoditas tanaman obat yang paling banyak digunakan sebagai bahan baku jamu di Indonesia. Rimpang temulawak, terutama dalam bentuk simplisia, juga  diekspor  ke  berbagai  negara  seperti  Singapura,  Jerman,  dan  Taiwan  (Syukur  dan Hernani 2002).
Metode Ekstraksi dan Pemisahan Optimum Untuk Isolasi Xantorizol dari Temulawak ( Curcuma xanthorrhiza )
Wahyuni et al.
Kualitas  rimpang  temulawak  sebagai  bahan  baku obat  tradisional  sangat  ditentukan  oleh  senyawa fitokimia  yang  dikandungnya.  Xantorizol  (Gambar  1) merupakan  senyawa  fitokimia  khas  dalam  temulawak, kadar  senyawa  ini  digunakan  sebagai  penentu kualitas rimpang  temulawak.  Xantorizol  merupakan  senyawa golongan  seskuiterpena  teroksidasi  yang  memiliki rumus molekul C 15 H 22 O dengan bobot molekul sebesar 218.3  g/mol.  Senyawa  dengan  nama  IUPAC  5-(1,5- dimetilheks-4-enil)-2-metilfenol  ini  mempunyai  ciri tidak  berwarna,  stabil  terhadap  panas,  sangat  pahit serta  larut  baik  dalam  dimetil  sulfoksida  (DMSO)  dan etanol 96% (Hwang et al . 2000). Xantorizol mempunyai kemampuan  sebagai  antibakteri  (Rukayadi  dan  Hwang 2007),  antijamur  (Rukayadi et  al. 2006),  antikanker (Cheah et al. 2009), antioksidan, dan antiinflamasi (Lim et  al. 2005),  serta  berpotensi  untuk  penanganan penyakit flu burung (Darusman et al. 2007).
Gambar 1 Struktur xantorizol
Xantorizol  dapat  diisolasi  dari  rimpang  temulawak dengan  beragam  metode.  Hwang et  al .  (2000) mengisolasi  xantorizol  dari  temulawak  dengan menggunakan  metanol  75%  sebagai  pengekstrak, dilanjutkan  dengan  kromatografi  kolom  serta  proses asetilasi  dan  deasetilasi.  Rendemen  yang  diperoleh sebesar  0.064%  dengan  kemurnian  99.90%.  Asriani (2010)  melakukan  modifikasi  terhadap  metode  Hwang dengan  mengganti  pelarut  ekstraksi  menggunakan etanol  96%  dan  tanpa  tahapan  kromatografi  kolom. Asriani melakukan pemurnian xantorizol menggunakan KLT  peparatif  dan  menghasilkan  rendemen  sebesar 0.140% serta kemurniannya 99.50%.
Kebutuhan  terhadap  xantorizol  sebagai  senyawa penanda  untuk  kontrol  kualitas  temulawak  tidak diiringi  dengan  ketersediaan  xantorizol  dalam  jumlah memadai  di  pasaran.  Perlu  dilakukan  pengoptimuman metode  isolasi  xantorizol  dari  temulawak  untuk mendapatkan  rendemen  yang  lebih  besar  dan
kemurnian  tinggi.  Dalam  penelitian  ini  dilakukan pengoptimuman  metode  ekstraksi  dan  pemisahan xantorizol  dari  rimpang  temulawak.  Teknik  ekstraksi maserasi digunakan karena merupakan teknik ekstraksi yang  sederhana,  sementara  sokletasi  dipilih  karena merupakan teknik ekstraksi sinambung yang diharapkan  dapat  meningkatkan  rendemen  ekstraksi xantorizol.  Tahap  pemurnian  yang  digunakan  meliputi kromatografi  kolom  dan  kromatografi  lapis  tipis preparatif  dengan  tujuan  meningkatkan  kemurnian xantorizol  yang  diperoleh.  Berbeda  dari  metode  yang telah  dikembangkan  oleh  Hwang et  al .  (2000)  dan Asriani  (2010),  pada  penelitian  ini  tidak  dilakukan proses  asetilasi  dan  deasetilasi  selama  pemurnian dengan tujuan untuk meminimalkan waktu isolasi.

## METODE

## Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu evaporator  putar  WB  2000  (Heidolph,  Jerman), spektrofotometer  UV-Vis  U-2000  (Hitachi,  Jepang), spektrofotometer  FTIR  Tensor  37  (Bruker,  Jerman), kromatografi  cair  kinerja  tinggi  (KCKT)  tipe  LC-20A (Shimadzu,  Jepang),  kromatografi  gas-spektrometri massa  (KG-SM)  tipe  GC  6890  MS  5973  (Agilent, Jerman),  dan  alat-alat  kaca  yang  umum  digunakan dalam laboratorium kimia.
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  simplisia rimpang  temulawak  (Unit  Konservasi  dan  Budidaya Biofarmaka,  Pusat  Studi  Biofarmaka  Tropika,  Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat  Institut Pertanian Bogor (LPPM IPB), Standar xantorizol (donasi Prof  JK  Hwang,  Yonsei  University,  Korea  Selatan), Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  analitik  silika  gel  60  F 254 (Merck,  Jerman),  dan  KLT  preparatif  silika  gel  60  F 254 (Merck,  Jerman),  metanol,  dietil  eter, n -heksana,  etil asetat, dan silika gel (Merck, Jerman).

## Determinasi Tanaman
Temulawak  yang  digunakan  diidentifikasi  di Balai Penelitian  dan  Pengembangan  Botani  (Herbarium Bogoriense),  Pusat  Penelitian  dan  Pengembangan Biologi-Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI) Cibinong,  Bogor,  Jawa  Barat.  Voucher  spesimen temulawak  yang  digunakan  dalam  penelitian  disimpan dengan  nomor  seri  spesimen  BMK0042071014  asal Unit  Konservasi  dan  Budidaya  Biofarmaka-Pusat  Studi Biofarmaka Tropika LPPM IPB.

## Metode Ekstraksi Dan Pemisahan Optimum Untuk Isolasi Xantorizol
Dari Temulawak (Curcuma xanthorrhiza)
Ekstraksi simplisia rimpang temulawak
Sebanyak 300 gram serbuk simplisia kering rimpang temulawak diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan  metanol,  dietil  eter,  dan n -heksana (1:5 b/v).  Maserasi  dilakukan  selama  3  x  24  jam  untuk masing-masing  pelarut  dengan  penggantian  pelarut setiap  24  jam.  Maserat  dari  proses  ekstraksi  dengan masing-masing  pelarut  kemudian  diuapkan  dengan penguap putar. Ekstrak pekat yang diperoleh kemudian dianalisis  kandungan  xantorizolnya  menggunakan KCKT.  Selain  dengan  metode  maserasi,  ekstraksi  juga dilakukan  dengan  metode  sokletasi.  Proses  sokletasi dilakukan  selama  6  jam,  sementara  pelarut  ekstraksi dan nisbah bahan:pelarut yang digunakan sama dengan pada  ekstraksi  maserasi.  Ekstrak  yang  diperoleh dipekatkan  dan  kadar  xantorizol  dalam  ekstrak  pekat ditentukan dengan KCKT.

## Penentuan kadar xantorizol dengan metode KCKT
Kadar  xantorizol  ditentukan  menggunakan  KCKT dengan  kondisi  KCKT  yang  digunakan  ialah  sebagai berikut: kolom C18, detektor UV-Vis, volume injeksi 10 µL, elusi isokratik (eluen H 3 PO 4 dan metanol) serta suhu kolom 40 o C (Darusman et al. 2007).
Pemisahan xantorizol pada ekstrak rimpang temulawak dengan kromatografi kolom dan lapis tipis preparatif
Ekstrak temulawak dengan kadar xantorizol tertinggi selanjutnya  dipisahkan  dengan  kromatografi  kolom dilanjutkan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  preparatif. Pemisahan  dengan  kromatografi  kolom  dilakukan dengan  fase  diam  berupa  silika  gel  dan  fase  gerak berupa  campuran n- heksana:etil  asetat  (ditentukan berdasarkan  penentuan  eluen  terbaik  dengan  KLT analitik, tidak dilaporkan dalam tulisan ini). Fraksi-fraksi yang  diperoleh  dari  pemisahan  kromatografi  kolom dievaluasi  pada  KLT  analitik,  spot  yang  terbentuk dibandingkan  dengan  spot  standar  xantorizol.  Fraksi terpilih difraksinasi lebih lanjut  dengan KLT preparatif. Spot  dengan  R f yang  sama  dengan  standar  xantorizol dikeruk,  dilarutkan  dalam n -heksana,  selanjutnya dipekatkan.

## Identifikasi Fraksi KLTP Terpilih (Isolat Xantorizol) Spektrum FTIR
Sebanyak  ±2  mg  isolat  xantorizol  hasil  fraksionasi dicampurkan dengan KBr. Campuran tersebut dibentuk pellet  dengan  bantuan hand  press Shimadzu  pada
tekanan 8 kN selama 15 menit. Pelet sampel dianalisis dengan FTIR pada daerah 4000-400 cm -1 dengan jumlah payar 32/menit dan resolusi 4 cm -1 .
Analisis isolat xantorizol dengan KG-S M Isolat yang didapat dari hasil fraksionasi menggunakan  KLT  preparatif  kemudian  dianalisis menggunakan  KG-SM  dengan  kondisi  sebagai  berikut: kolom  HP-5  MS,  dimensi  60  m  ×  250  µm.  Suhu terprogram dari 70 °C sampai 290 °C (selama 40 menit) dengan  kenaikan  suhu  sebesar  15  °C/menit.  Suhu injektor  290  °C.  Suhu  detektor  250  °C.  Mode  injeksi split  (50:1)  dan  tekanan  inlet  sebesar  18.03  psi.  Gas pembawa  berupa  helium dengan  laju  alir  1  mL/menit. Spektrometer  massa  yang  digunakan  dengan  energi ionisasi 70 eV, mode ionisasi tumbukan elektron. Area deteksinya  ialah  40-800  m/z.  Setiap  puncak  yang muncul  dalam  kromatogram  ion  total  diidentifikasi dengan  menganalisis  hasil  spektrum  massa  yang terdapat pada pustaka spektrometer massa.

## Evaluasi kemurnian isolat xantorizol
Kemurnian isolat xantorizol ditentukan berdasarkan rasio  area  puncak  xantorizol  terhadap  area  seluruh puncak  yang  terdeteksi  pada  kromatogram  KCKT. Analisis  KCKT  dilakukan  dengan  metode  yang  sama seperti pada penentuan kadar xantorizol.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak  Rimpang  Temulawak  dan  Kadar  Xantorizol dalam Ekstrak
Rendemen ekstraksi rimpang temulawak ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Pelarut n -heksana  secara konsisten  memberikan  rendemen  ekstraksi  tertinggi baik  pada  ekstraksi  dengan  metode  maserasi  maupun sokletasi.  Di  antara  ketiga  pelarut  yang  digunakan, n - heksana merupakan pelarut dengan polaritas terendah (indeks polaritas, P = 0.1) dibandingkan dietil eter (P = 2.8)  dan  metanol  (P  =  5.1).  Pelarut n -heksana terkategori  sebagai  pelarut  nonpolar.  Hasil  ini mengindikasikan  bahwa  senyawa  metabolit  sekunder yang  terdapat  pada  rimpang  temulawak  mayoritas larut  dalam  pelarut  yang  bersifat  nonpolar.  Rimpang temulawak  banyak  mengandung  minyak  atsiri  yang terdiri atas senyawa golongan seskuiterpena yang larut dalam  pelarut  non-polar  seperti n -heksana  (Zwaving dan Bos 1992; Jarikasem et al. 2005).
Sementara itu, rendemen ekstraksi metode sokletasi dengan  tiga  pelarut  yang  digunakan  selalu  lebih  tinggi
dibandingkan  rendemen  metode  maserasi.  Ekstraksi dengan metode sokletasi dilakukan dengan menggunakan  bantuan  pemanasan  sehingga  interaksi pelarut  dengan  bahan  terjadi  lebih  optimal. Penggunaan  panas  pada  metode  ekstraksi  sokletasi menyebabkan  energi  kinetik  pelarut  meningkat sehingga  berinteraksi  lebih  intensif  dengan  bahan.  Hal ini  menyebabkan  komponen  yang  terdapat  dalam sampel  lebih  efektif  terekstrak  ke  dalam  pelarut.  Di samping  itu,  pada  teknik  sokletasi  ekstraksi  selalu dilakukan  oleh  pelarut  yang  segar,  sementara  pada maserasi pelarut telah jenuh dengan ekstrak.
Kandungan  xantorizol  dalam  ekstrak n -heksana jauh  lebih  tinggi  dibandingkan  dalam  ekstrak  metanol dan  dietil  eter.  Salea et  al. (2014)  membandingkan efektivitas  ekstraksi  xantorizol  dengan  pelarut n - heksana  dan  fluida  superkritis  CO 2 dan  memperoleh informasi  bahwa  rendemen  ekstraksi  dengan  fluida superkritis  CO 2 memberikan  rendemen  lebih  tinggi. Namun  demikian,  ekstraksi  dengan n -heksana  dapat menjadi alternatif metode ekstraksi xantorizol.
Analisis  kadar  xantorizol  dalam  ekstrak  rimpang temulawak  dilakukan  dengan  KCKT  fase  terbalik menggunakan  C18  sebagai  fase  diam  dan  campuran H 3 PO 4 dengan  metanol  sebagai  fase  gerak.  Puncak senyawa  xantorizol  standar  maupun  xantorizol  dalam ekstrak rimpang temulawak muncul pada waktu retensi sekitar  16  menit  (data  tidak  ditunjukkan).  Penentuan xantorizol dengan standardisasi satu titik menunjukkan bahwa ekstrak heksana mengandung xantorizol dengan kadar hampir tiga kali lebih tinggi dibandingkan ekstrak metanol dan dietil eter (Tabel 1). Jenis pelarut teramati memengaruhi  rendemen  xantorizol  yang  terekstrak dari rimpang temulawak, sementara pengaruh metode ekstraksi  terhadap  kadar  xantorizol  yang  terekstrak tidak  signifikan.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan kadar  xantorizol  pada  ekstrak  hasil  ekstraksi  maserasi dengan  pelarut n -heksana  sedikit  lebih  tinggi  dari ekstrak hasil sokletasi.

## Fraksi Xantorizol Hasil Pemisahan Kromatografi Kolom dan Lapis Tipis Preparatif
Eluen  untuk  pemisahan  ekstrak  temulawak  dengan kromatografi kolom diperoleh melalui pengoptimuman fase gerak dengan KLT analitik. Fase gerak terpilih ialah n -heksana:etil  asetat  dengan  perbandingan  10:1. Berdasarkan  hasil  pemisahan  menggunakan  KLT,  spot dengan  Rf  0.55  diduga  merupakan  xantorizol,  spot menunjukkan  warna  keunguan  setelah  diberi  pereaksi penampak  noda  vanillin  (Gambar  2).  Spot  dugaan xantorizol  ini  kemudian  dipisahkan  dari  sampel menggunakan kromatografi kolom.
Gambar 2 Kromatogram  KLT  ekstrak n -heksana metode maserasi dengan eluen n -heksana- etil  asetat  (10:1)  setelah  diberi  pereaksi penampak noda vanillin
Sebanyak  5.0079  gram  sampel n -heksana  hasil maserasi  difraksionasi  dengan  kromatografi  kolom menggunakan  elusi  isokratik.  Sampel  dielusi  dengan 500  mL n -heksana  sebagai  awal  kemudian  dielusi menggunakan  eluen  terbaik  hingga  spot  dugaan xantorizol  selesai  dielusi.  Pengelompokkan  fraksi  hasil kromatografi  kolom  dilakukan  dengan  bantuan  lampu UV 254 nm dan penyemprotan dengan pereaksi vanilin. Diperoleh 6 fraksi hasil kromatografi kolom, fraksi ke-4 (rendemen  17.85  %)  merupakan  fraksi  yang  diduga mengandung xantorizol. Fraksi ke-4 ini menghasilkan 2
Tabel 1 Rendemen ekstrak temulawak dan kadar xantorizol dalam ekstrak temulawak
Pelarut Rendemen (%) Kadar xantorizol (mg/g) Maserasi Sokletasi Maserasi Sokletasi Metanol 5.45 12.73 61.57 61.96 Dietil eter 4.98 6.65 78.30 78.48 n-heksana 12.47 17.19 168.12 163.35

## Metode Ekstraksi Dan Pemisahan Optimum Untuk Isolasi Xantorizol
Dari Temulawak (Curcuma xanthorrhiza)
spot pada pemisahan dengan KanLT analitik, yaitu pada R f 0.54 (diduga sebagai spot xantorizol) dan Rf 0.68.
Fraksi  ke-4  kemudian  difraksionasi  lebih  lanjut dengan  KLT  preparatif  untuk  mendapatkan  senyawa tunggal  berupa  xantorizol  dari  2  spot  yang  terdeteksi pada  pengujian  sebelumnya.  Pemisahan  0.5008  gram fraksi  ke-4  menghasilkan  spot  dengan  R f 0.54  (diduga sebagai  isolat  xantorizol)  dengan  rendemen  sebesar 4.78 %.

## Identitas Fraksi Xantorizol Berdasarkan Spektrum FTIR
Hasil
fraksionasi dikarakterisasi dengan spektroskopi  FTIR.  Terdapat  serapan  kuat  yang  khas pada  bilangan  gelombang  sekitar  3400  cm -1 yang menyatakan  keberadaan  gugus  regang  –OH  pada sampel  (Gambar  3).  Selain  itu,  terdapat  pula  serapan pada bilangan gelombang 3000 cm -1 dan 1400 cm -1 yang menyatakan gugus regang aromatik dan regang alkana yang terikat pada aromatik (gugus –CH 3 ). Serapan pada daerah  1600  cm -1 menyatakan  adanya  ikatan  alkena (regang C=C) pada rantai karbon dan daerah 1100-1300 cm -1 menyatakan atom C terikat pada atom O (Pavia et al. 2008). Berdasarkan gugus fungsi yang teridentifikasi, dapat disimpulkan bahwa sampel merupakan golongan seskuiterpenol  yang  memiliki  gugus  benzena  terikat  - OH yang sesuai dengan struktur xantorizol.
Identitas Fraksi Xantorizol Berdasarkan KG-SM Tahap karakterisasi selanjutnya dilakukan menggunakan teknik KG-SM. Kromatogram KG-SM dari isolat  xantorizol  menunjukkan  satu  puncak  mayor dengan waktu retensi 14.96 menit (Gambar 4a) dengan persentase  area  sebesar  93.14%.  Bobot  molekul  dari puncak tersebut (berdasarkan m/z yang diperoleh dari spektrum  massanya)  ialah  sebesar  218.2  g/mol (Gambar 4b). Berdasarkan kecocokan dengan pangkalan  data  diperoleh  persen  kemiripan  struktur isolat  xantorizol  dengan  standar  xantorizol  sebesar 96%.  Selain  itu  terdeteksi  puncak  dengan  m/z  136 g/mol  dengan  intensitas  tertinggi.  Spektrum  massa  ini memiliki pola fragmentasi yang identik jika dibandingkan  dengan  spektrum  xantorizol  yang terdapat  pada National  Institute  Standards  and Technology (NIST)  (2011)  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa senyawa hasil isolasi adalah xantorizol.
Fragmen-fragmen  yang  terbentuk  mencirikan senyawa dengan m/z 218 g/mol terbelah pada posisi β dari  cincin  benzena  membentuk  senyawa  dengan  m/z 136  g/mol.  Senyawa  tersebut  juga  mengalami pembelahan  di  gugus  alkena  membentuk  ion  molekul karbokation  dengan  m/z  175  g/mol.  Spektum  massa juga menunjukkan terdapat serapan kuat pada m/z 91 g/mol  dan  53  g/mol.  Fragmen-fragmen  ini  diduga terbentuk  dari  senyawa  dengan  m/z  136  g/mol  yang
Gambar 3 Spektra FTIR isolat xantorizol hasil pemisahan dengan kromatografi kolom dan KLT preparatif
kelimpahannya besar. Senyawa  dengan m/z 91 diduga mengalami  pemutusan  gugus  alkana  dan  –OH, sedangkan  untuk  senyawa  dengan  m/z  53  g/mol terbentuk  dari  ion  tropilium  sikloheptena  dengan  m/z 105 g/mol. Prosesnya disebut proses pembentukan ion tropilium  dengan  pembuangan  gugus  etena.  Ion  ini terbentuk  dari  resonansi  hasil  pembelahan  senyawa dengan m/z 136 g/mol melalui pemutusan gugus –CH 3 dan –OH (Pavia et al . 2008). Dugaan pola pembelahan selengkapnya ditunjukkan pada Gambar 5.

## Kemurnian Xantorizol Hasil Isolasi
Kemurnian isolat xantorizol ditentukan menggunakan  KCKT.  Isolat  yang  diperoleh  dari  hasil fraksionasi dengan KLT preparatif diukur kembali kadar xantorizolnya.  Rendemen  akhir  diperoleh  sebesar 0.016%.  Persentase  kemurniannya  jika  dibanding dengan  standar  xantorizol  berdasarkan  persen  area didapat  hasil  sebesar  87.40%.  Rendemen  dan
kemurnian  xantorizol  yang  diperoleh  masih  lebih rendah dibandingkan dengan hasil yang diperoleh oleh Hwang et al . (2000) maupun Asriani (2010) akan tetapi proses  isolasi  yang  diperlukan  lebih  singkat  tanpa  dan sederhana, yaitu tanpa tahap asetilasi dan deasetilasi.

## KESIMPULAN
Ekstraksi xantorizol dari rimpang temulawak dengan pelarut n -heksana  menggunakan  metode  maserasi memberikan  rendemen  lebih  besar  dibandingkan pelarut  metanol  dan  dietil  eter.  Teknik  ekstraksi sokletasi  dengan  pelarut  metanol  dan  dietil  eter memberikan  rendemen  xantorizol  yang  sama  besar dengan  teknik  maserasi,  kecuali  saat  digunakan n - heksana sebagai pelarut ekstraksi. Pemisahan xantorizol  dari  ekstrak n -heksana  menggunakan kromatografi  kolom  dan  KLT  preparatif  dengan  fase diam  silika  gel  dan  fase  gerak n -heksana:etil  asetat (10:1) menghasilkan isolat xantorizol dengan rendemen
Gambar 4 Kromatogram KG-SM senyawa isolat yang diduga xantorizol (a), spektra massa senyawa isolat yang diduga xantorizol (b), spektra massa standar xantorizol mengacu pada National Institute of Standard and Technology (NIST) (c).
6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0 1 6 .0 0 1 8 .0 0 2 0 .0 0 2 2 .0 0 2 4 .0 0 2 6 .0 0 2 8 .0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 e + 0 7 1 .5 e + 0 7 2 e + 0 7 2 .5 e + 0 7 3 e + 0 7 3 .5 e + 0 7 4 e + 0 7 4 .5 e + 0 7 T im e --> A b u n d a n c e T IC : S A M P E L .D \ d a ta .m s 7 .7 2 2 1 3 .3 7 4 1 4 .0 5 3 1 4 .5 3 1 1 4 .9 6 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 0 1000000 2000000 3000000 4000000 5000000 6000000 7000000 8000000 m/ z--> Abundance Scan 1178 (14.958 min): SAMPEL.D\ data.ms 136.1 218.2 91.1 175.1 53.1 256.1 340.9 393.3 479.0 544.3 298.8 (a) (b) (c)
sebesar  0.016  %  berdasarkan  bobot  simplisia  dan kemurnian  sebesar  87.40%.  Metode  ekstraksi  dan pemurnian tanpa tahapan asetilasi dan deasetilasi yang dikembangkan lebih sederhana, namun rendemen dan kemurnian  yang  diperoleh  masih  lebih  rendah dibandingkan  metode  yang  telah  dikembangkan sebelumnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Asriani  D.  2010.  Isolasi  xantorizol  dari  temulawak terpilih  berdasarkan  nomor  harapan.  Tesis. Bogor  (ID):  Fakultas  matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Cheah YH, Nordin FJ,  Sarip R,  Tee TT,  Azimahtol HLP, Sirat HM, Rashid BAA,Abdullah NR,Ismail Z. 2009. Combined xanthorrhizol-curcumin exhibits synergistic  growth  inhibitory  activity via
apoptosis induction in human breast cancer cells. Cancer Cell International . 9:1 MDA-MB-231. Darusman  LK,  Priosoeryanto  BP,  Hasanah M,  Rahardjo M, Purwakusumah ED . 2007. Potensi Temulawak Terstandar  untuk  Menanggulangi  Flu  Burung . [Internet] [diunduh 2014 Jan 18]. Tersedia pada: http//repository.ipb.ac.id/bitstream/handle/123 456789/.../2007lkd_latif.doc?..2.
[EMA]  European  Medicines  Agency.  2014.  Assessment report  on Curcuma  xanthorrhiza Roxb.  ( C. xanthorrhiza D. Dietrich), rhizome.
EMA/HMPC/604598/2012.
Hwang JK, Shim JS, Pyun YR. 2000. Antibacterial activity of  xanthorrhizol  from Curcuma  xanthorrhiza against oral pathogens. Fitoterapia . 71:321–323. doi: 10.1016/S0367-326X(99)00170-7 Hwang JK. 2004. Xanthorrhizol: a potential antibacterial agent  from Curcuma  xanthorrhiza against
Gambar 5 Dugaan pola fragmentasi xantorizol
Wahyuni et al.
Streptococcus  mutans . Planta  Medica .  66:196-
197.
Jarikasem  S,  Thubthimthed  K,  Chawananoraseth, Suntorntanasat  T.  2005.  Essential  oil  from  three Curcuma  species  collected  in  Thailand. Acta Horticulturae . 677:37-41.
Lim et  al. 2005.  Antioxidant  and  antiinflammatory activities of xanthorrizol in hippocampal neurons and  primary  cultured  microglia. Journal  of Neuroscience Research 82 (6):831-8.
Lin  SC,  Teng  CW,  Lin  CC,  Lin  YH,  Supriyatna  S.  1996. Protective  and  therapeutic  effect  of  the Indonesian medicinal herb Curcuma xanthorrhiza on  β-D-galactosamine-induced  liver  damage. Phytotherapy Research . 10:131–135.
Masuda  T,  Isobe  J,  Jitoe  A,  Nakatani  N.  1992. Antioxidative  curcuminoids  from  rhizomes  of Curcuma xanthorrhiza . Phytochemistry . 31:3645– 3647.
[NIST]  National  Institute  Standard  Technology.  2011. Material  Measurement  Laboratory:  Phenol,  5- (1,5 dimethyl-4-hexenyl)-2-methyl-,(R)- .
[Internet] [diunduh 2014 Okt 12]. Tersedia pada: http//webbook.nist.gov/cgi/cbook.cg i?ID=C30199269&Mask=200.
Park JH, Park KK, Kim MJ, Hwang JK, Lee SK, Chung WY. 2008.  Cancer  chemoprotective  effects  of
Curcuma xanthorrhiza . Phytotherapy
Research. 22:695–698.
Pavia  DL,  Gary  ML,  George  SK,  James  RV.  2008 . Introduction  to  Spectroscopy  4 th Edition . Washington:  Brooks/Cole  CENGAGE  Learning. Halaman 27-83.
Rukayadi  Y,  Yong  D,  Hwang  JK.  2006.  In  vitro anticandidal activity of xanthorrizol isolated from Curcuma  xanthorrhiza Roxb.    Antimicrobial Chemotheraphy. Journal of Antimicrobial Chemotherapy . 57:1231-1234.
Rukayadi  Y,  Hwang  JK.  2007.  In  vitro  antimycotic activity  of  xanthorrhizol  isolated  from Curcuma xanthorrhiza Roxb. against opportunistic filamentous  fungi. Phytotherapy  Research . (5):434-438.
Salea R, Widjojokusumo E, Veriansyah B, Tjandrawinata R.  2014.  Optimizing  oil  and  xanthorrhizol extraction  from Curcuma  xanthorrhiza Roxb. rhizome  by  supercritical  carbon  dioxide. Journal of  Food  Science  and  Technology .  51(9):2197– 2203.
Syukur  C,  Hernani.  2002. Budi  Daya  tanaman  Obat Komersial . Jakarta (ID): Penebar Swadaya. Zwaving JH, Bos R. 1992. Analysis of the essential oils of five  curcuma  species. Flavour  and  Fragrance Journal. 7(1):19-22.