## Perbandingan Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Fenolik Temulawak dan Temu Ireng
Penulis Waras Nurcholis 1,2* , Maria Bintang 1 Afiliasi
1 Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor
2 Pusat Studi Biofarmaka Tropika, LPPM-Institut Pertanian Bogor

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membandingkan  aktivitas  antioksidan  dan kandungan  fenolik  dari  rimpang  temulawak  dan  temu  ireng.  Aktivitas  antioksidan ditentukan  dengan  menggunakan  metode  DPPH  ( 1,  1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ). Kandungan  fenolik  total  ditentukan  dengan  menggunakan  metode Folin-Ciocalteu . Ekstrak  etanol  70%  dari  rimpang  temulawak  memiliki  aktivitas  antiosidan  (IC 50 ,  167.03 µg/  ml)  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  ekstrak  etanol  70%  rimpang  temu  ireng aeruginosa (IC 50 ,  406.52  µg/  ml).  Kandungan  fenolik  total  dari  ekstrak  etanol  70% rimpang temulawak (139.16 mg TAE/ g) lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak etanol 70% rimpang temu ireng (51.49 mg TAE/ g). Terdapat korelasi yang kuat antara aktivitas antioksidan dan kandungan fenolik total dari ekstrak temulawak dan temu ireng.

## PENDAHULUAN
Temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza RoxB)  dan  temu  ireng  ( Curcuma  aeruginosa RoxB.)  merupakan  tanaman  herba  tahunan  asli  Indonesia  dari  keluarga  Zingiberaceae dengan bagian utama yang dimanfaatkan untuk pengobatan adalah rimpang (Devaraj et al . 2010; Bos et al . 2007). Banyak penelitian telah melaporkan potensi farmakalogi dari tanaman  temulawak  dan  temu  ireng.  Beberapa  diantaranya  menunjukkan  bahwa temulawak berkhasiat sebagai antimikroba (Hwang et  al. 2000), antimetastatis (Choi et al. 2004),  antikanker  (Huang et  al. 1998),  antijamur (Rukayadi et  al. 2006),  antioksidan (Masuda et  al .  1992),  hipolipidemia  (Yasni et  al .  1993),  antihiperglikemia  (Kim et  al . 2014).  Untuk  temu  ireng  juga  telah  banyak  laporan  penelitian  terkait  khasiatnya, meliputi  sebagai  antiinflamasi  (Reanmongkol et  al .  2006),  antifungi  (Banerjee et  al. 1976),  inhibitor  virus  HIV-1  (Otake et  al .  1995),  dan  antikanker  (Jantan et  al .  2005). Namun pemanfaatan temulawak dalam industri obat tradisional di Indonesia masih lebih tinggi  dibandingkan  temu  ireng.  Sebagai  gambarannya  adalah  berdasarkan data  base dari Kementrian Pertanian (2012) menunjukkan luas panen temu ireng hanya mencapai 3.603.476 m 2 sedangkan temulawak hampir 6 kali lipat, yaitu 18.198.625 m 2 .  Tingginya luas  panen,  dapat  menjadi  gambaran  indikator  penggunaan  temulawak  sebagai  bahan

## Kata Kunci
 Antioksidan
 Fenolik
 Temulawak
 Temu Ireng
Diterima 7 September 2015 Direvisi 13 Desember 2016
Disetujui 20 Maret 2017 *Penulis korespondensi Waras Nurcholis
Departemen Biokimia, Institut Pertanian Bogor Email: wnurcholis@gmail.com
Nurcholis et al.
baku  industri  obat  tradisional  di  Indonesia  lebih  tinggi dibandingkan  temu  ireng.  Dengan  demikian  perlu dilakukan  upaya  untuk  memberikan  informasi  kepada masyarakat  akan  potensi  temu  ireng  sebagai  bahan baku  industri  obat  tradisional  Indonesia.  Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa temulawak dan kunyit  mengandung  senyawa  fenolik  salah  satunya kurmuninoid yang yang berkhasiat sebagai antioksidan (Bos et al . 2007; Lechtenberg et al . 2004). Berdasarkan hal tersebut, penelitian bertujuan untuk membandingkan  potensi  aktivitas  antioksidan  dan kandungan  fenolik  dari  rimpang  temulawak  dan  temu ireng  untuk  mendapatkan  gambaran  potensi  khasiat dari kedua rimpang tanaman tersebut

## METODE
Rimpang  temulawak  dan  temu  ireng  diperoleh dari  Unit  Konservasi  dan  Budidaya  Biofarmaka,  Pusat Studi  Biofarmaka  Tropika  LPPM-IPB  diekstraksi  untuk mendapatkan  ekstrak  yang  digunakan  dalam  analisis antioksidan  dan  fenolik  total.  Masing-masing  rimpang segar  dibersihkan  dengan  menggunakan  air,  dipotong tipis  dan  dikeringkan  dengan  menggunakan  matahari selama  kurang  lebih  5  hari  sampai  kadar  air  <  10%. Rimpang yang telah kering digerus untuk menghasilkan serbuk  temu  ireng  dengan  ukuran  100  mesh.  Serbuk temu  ireng  untuk  masing-masing  bagian  rimpang diekstraksi dengan metode maserasi dengan menggunakan  pelarut  etanol  70%  pada  perbandingan 1:10  selama  48  jam  sesuai  penelitian  yang  kami kembangkan  (Nurcholis et  al .  2012).  Setiap  1x24  jam filtrat diambil dengan cara disaring, kemudian ekstraksi dilanjutkan  1x24  jam  sesuai  tahapan  sebelumnya. Filtrat  yang  dikumpulkan  selanjutnya  dikeringkan dengan rotary  evaporator (BUCHI,  R-250,  Switzerland) untuk mendapatkan ekstrak kental pada suhu ± 50°C.
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  temulawak  dan temu  ireng  dianalisis  dengan  menggunakan  radikal bebas  DPPH  ( 1,  1-diphenyl-2-picrylhydrazyl )  sesuai Akowuah et al . (2005) yang dimodifikasi. Dua mL DPPH 0.1 mM dalam metanol ditambahkan pada 200  L dari ekstrak  temulawak  dan  temu  ireng  (masing-masing pada konsentrasi: 5, 10, 50, 100, 250, dan 500  g/ mL) dan 0.8 mL metanol.
Campuran dikocok agar tercampur homogen dan disimpan dalam tempat gelap selama 1 jam. Campuran 2  mL  DPPH  dan  1  mL  metanol  digunakan  sebagai kontrol.  Absorbansi  diukur  pada  517  nm  dengan
menggunakan microplate  reader spektrofotometer (Epoch  BioTek,  USA).  Persen  penghambatan  DPPH ditentukan  dengan  rumus  =  [Abs  kontrol-Abs  sampel/ Abs  kontrol]  x  100.  Hubungan  antara  konsentrasi  dan persen  penghambatan  DPPH  digunakan  untuk menentukan nilai IC 50 dari ekstrak temulawak dan temu ireng.
Kandungan  fenolik  total  ditentukan  secara spektrofotometri  sesuai  Stoilova et  al .  (2007)  dengan metode  Folin-Ciocalteu  yang  dimodifikasi.  Sebanyak  2 mL ekstrak dicampur dengan 5 mL air destilasi dan 0.5 mL  reagen  fenol  Folin-Ciocalteu  50%  dalam  tabung reaksi  dan  disimpan  selama  5  menit.  Selanjutnya, ditambah  dengan  1  mL  larutan  sodium  karbonat  5%. Inkubasi  dilakukan  diruang  gelap  selama  1  jam  dan absorban dibaca dengan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  725  nm.  Larutan  asam tanat  dengan  konsentrasi  yang  digunakan  10-100  g/ mL  digunakan  untuk  membentuk  kurva  standar. Kandungan  fenolik  total  ditentukan  berdasarkan ekivalen mg asam tanat (TAE) per 1 g ekstrak.
Data disajikan dalam bentuk  rataan ±  stdev dari tiga  pengulangan.  Analisis  korelasi  antara  aktivitas antioksidan  dan  kandungan  total  fenolik  dilakukan dengan  menggunakan  korelasi  Pearson  dengan program SPSS 17.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambar  1  menunjukkan  hasil  analisis  aktivitas antioksidan,  kandungan  fenolik  total  dan  korelasi antara  aktivitas  antioksidan  dan  kandungan  fenolik total  dari  ekstrak  etanol  70%  temulawak  dan  temu ireng. Ekstrak temulawak memiliki aktivitas antioksidan dalam menangkap radikal bebas DPPH dan kandungan fenolik  total  lebih  baik  dibandingkan  dengan  temu ireng.  Hal  tersebut  ditunjukkan  dengan  nilai  IC 50 yaitu 406.52  µg/  mL  untuk  ekstrak  temu  ireng  dan  167.03 µg/  mL  untuk  ekstrak  temulawak  (Gambar  1.A).    Hal yang  sama  juga  ditunjukkan  untuk  kandungan  fenolik total, yaitu ekstrak temulawak lebih tinggi dibandingkan  dengan  ekstrak  temu  ireng.  Besarnya kandungan  fenolik  total  secara  berurutan  adalah 139.16 dan 51.49 mg TAE/ g untuk ekstrak temulawak dan  temu  ireng  (Gambar  1.B).  Besarnya  kandungan fenolik  total  mempengaruhi  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  temulawak  dan  temu  ireng.  Hal  tersebut ditunjukkan  oleh  korelasi  Pearson  yang  menghasilkan nilai 0.888 dan signifikan pada α = 0.05 (Gambar 1.C).
Berdasarkan  data  (Gambar  1)  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  70%  temulawak  memiliki aktivitas antioksidan dan kandungan total fenolik lebih tinggi  dibandingkan  dengan  ekstrak  temu  ireng.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  senyawa  fenolik bertanggung  jawab  terhadap  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  temulawak  dan  temu  ireng.  Data  semakin diperkuat  dengan  ditunjukkan  berdasarkan  analisis korelasi  Person  yang  berhubungan  sangat  kuat  dan signifikan  pada  α  =  0.05.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa semakin tinggi fenolik total maka semakin tinggi juga  aktivitas  antioksidan.  Dengan  demikian  sesuai dengan  penelitian  yang  dilaporkan  oleh  Wong et  al . (2006),  Shan et  al .  (2005)  dan  Cai et  al .  (2004)  bahwa kandungan  senyawa  fenolik  pada  tanaman  obat  akan berpengaruh  secara  signifikan  terhadap  aktivitas antioksidan.  Kurkuminoid  merupakan  salah  satu metabolit  golongan  fenolik  yang  diketahui  banyak ditemukan  pada  spesies Curcuma termasuk  pada tanaman  temu  ireng  (Bos et  al .  2007)  dan  temulawak (Lechtenberg et al . 2004). Besarnya kandungan fenolik di  temulawak  dibandingkan  temu  ireng  dimungkinkan karena  adanya  kontribusi  dari  senyawa  kurkuminoid tersebut.  Berdasarkan  Bos et  al .  (2007)  pada  rimpang
temu  ireng  hanya  memiliki  senyawa  kurkumin  dan demetoksikurkumin, sedangkan sesuai hasil Lechtenberg et  al .  (2004)  menunjukkan  bahwa  pada rimpang  temulawak  memiliki  kelompok  kurkuminoid yang  lengkap  meliputi  kurkumin,  demetoksikurkumin, dan  bisdemetoksikurkumin.  Selain  itu,  juga  terdapat senyawa  fenolik diarylheptanoids dari  tanaman rimpang  temulawak  (Suksamrarn et  al .  1994).  Dengan demikian untuk aspek senyawa fenolik yang berkhasiat dalam  menangani  kesehatan  maka  bahan  baku temulawak  lebih  baik  untuk  digunakan  dalam  industri obat  tradisional  dibandingkan  dengan  rimpang  temu ireng.  Potensi  temu  ireng  yang  khas  dalam menanggulangi  dan  meningkatkan  kesehatan  perlu mendapatkan  perhatian  untuk  dieksplorasi  lebih  luas sebagai upaya meningkatkan sumber daya bahan baku farmasi  nasional  yang  tidak  hanya  terbatas  pada kelompok tanaman tertentu misalnya temulawak.

## KESIMPULAN
Temulawak memiliki kandungan fenolik total dan aktivitas  antioksidan  yang  lebih  baik  dibandingkan dengan  temu  ireng  dengan  nilai  secara  berurutan adalah 139.16 dan 51.49 mg TAE/ g  untuk fenolik total,
Gambar 1. Aktivitas  antioksidan  (A);  kandungan  fenolik  (B);  dan  korelasi  antara  aktivitas  antioksidan  dan kandungan  fenolik  (C)  dari  ekstrak  etanol  70%  temulawak  dan  temu  ireng.  Keterangan  *  = signifikan pada α = 0.05.
Nurcholis et al.
dan  167.03  dan  406.52  µg/  mL  untuk  IC 50 aktivitas antioksidan. Eksplorasi temu ireng perlu dilakukan lebih luas  dalam  menangani  suatu  kesehatan  dalam  upaya meningkatkan peluang pemanfaatan pada industri obat tradisional Indonesia.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini didukung dari pendanaan Penelitian  Unggulan  Perguruan  Tinggi  BOPTN  IPB: 082/SP2H/PL/DIT.LITABMAS/II/2015.

## DAFTAR PUSTAKA
Akowuah  GA,  Ismail  Z,  Norhayati  I,  Sadikun  A.  2005.
The  effects  of  different  extraction  solvents  of varying  polarities  of  polyphenols  of Orthosiphon stamineus and  evaluation  of  the  free  radical- scavenging activity. Food Chem. 93(2): 311-317. Banerjee A, Nigam SS. 1976. Antifungal activities of the essential  oil  of Curcuma  caesia Roxb. Indian Journal of Medical Research. 64(9): 1318-1321. Bos  R,  Windono  T,  Woerdenbag  HJ,  Boersma  YL, Koulman  A,  Kayser  O.  2007.  HPLC-photodiode array  detection  analysis  of  curcuminoids  in Curcuma species  indigenous  to  Indonesia. Phytochemical Analysis. 18: 118-122.
Cai Y, Luo Q, Sun M, Corke H. 2004. Antioxidant activity and  phenolic  compounds  of  112  Chinese medicinal plants  associated with anticancer. Life Sciences. 74: 2157–2184.
Choi  M,  Kim  S,  Chung  W,  Hwang  J,  Park  K.  2004. Xanthorrhizol,  a  natural  sesquiterpenoid  from Curcuma  xanthorrhiza has  an  anti-metastatic potential in experimental mouse lung metastasis model. Biochemical  and  Biophysical  Research Communications. 326: 210-217.
Devaraj  S,  Esfahani  AS,  Ismail  S,  Ramanathan  S,  Yam MF.  2010.  Evaluation  of  the  antinociceptive activity  and  acute  oral  toxicity  of  standardized ethanolic  extract  of  the  rhizome  of Curcuma xanthorrhiza Roxb. Molecules. 15(4): 2925-2934. Huang  MT,  Lou  Y,  Xie  J,  Ma  W,  Lu  Y,  Yen  P,  Zhu  B,
Newmark  H,  Ho  C.  1998.  Effect  of  dietary curcumin and dibenzoylmethane on formation of 7,  12-dimethylbenz  [a]  anthracene-induced mammary tumors and lymphomas/leukemia’s in Sencar mice. Carcinogenesis. 19(9): 1697-1700.
Hwang J, Shim J, Pyun Y. 2000. Antibacterial activity of xanthorrhizol from Curcuma xanthorrhiza against oral pathogens. Fitoterapia 71(3): 321-323. Jantan I, Rafi IAA, Jalil J. 2005. Plateletactivating factor (PAF)  receptor-binding  antagonist  activity  of Malaysian medicinal plants. Phytomedicine 12(1- 2): 88-92.
Kim  MB,  Kim  C,  Song  Y,  Hwang  JK.  2014. Antihyperglycemic and anti-inflammatory effects of  standardized Curcuma  xanthorrhiza Roxb. extract  and  active  compound  xanthorrhizol  in high-fat  diet-induced  obese  mice. Evidence- Based Complementary and Alternative Medicine . Article ID 205915: 1-10.
Lechtenberg  M,  Quandt  B,  Nahrstedt  A.  2004. Quantitative  determination  of  curcuminoids  in Curcuma rhizomes  and  rapid  differentiation  of Curcuma domestica Val. and Curcuma xanthorrhiza Roxb,  by  capillary  electrophoresis. Phytochemical Analysis. 15(3): 152-158. Masuda  T,  Isoke  J,  Jitoe  A,  Nakatani  N.  1992. Antioxidative  curcuminoids  from  rhizomes  of Curcuma  xanthorrhiza . Phytochemistry. 31(10):
3645-3647.
Nurcholis  W,  Priosoeryanto  BP,  Purwakusumah  ED, Katayama  T,  Suzuki  T.  2012.  Antioxidant, cytotoxic activities and total phenolic content of four  Indonesian  medicinal  plants. Valensi. 2  (4): 501-510.
Otake  T,  Mori  H,  Morimoto  M,  Ueba  N,  Sutardjo  S, Kusumoto  IT,  Hattori  M,  Namba  T.  1995. Screening  of  Indonesian  plant  extracts  for antihuman  immunodeficiency  virus-type  1  (HIV- 1) activity. Phytotherapy Research. 9(1): 6-10. Reanmongkol  W,  Subhadhirasakul  S,  Khaisombat  N, Fuengnawakit  P,  Jantasila  N,  Khamjun  A.  2006. Investigation the antinociceptive, antipyretic and anti-inflammatory activities of Curcuma aeruginosa Roxb.  extracts  in  experimental animals. Songklanakarin J Sci Technol. 28(5): 999- 1008.
Rukayadi  Y,  Yong  D,  Hwang  JK.  2006.  In  vitro anticandidal  activity  of  xanthorrhizol  isolated from Curcuma  xanthorrhiza RoxB. Journal  of Antimicrobial Chemotherapy. 57(6): 1231-1234. Shan  B,  Cai  YZ,  Sun  M,  Corke  H.  2005.  Antioxidant capacity of 26 spice extracts and characterization of  their  phenolic  constituents. Journal  of
Agricultural  and  Food  Chemistry. 53(20):  7749–
7759. Suksamrarn  A,  Eiamong  S,  Piyachaturawat  P, Charoenpiboonsin J. 1994. Phenolic diarylheptanoids  from Curcuma  xanthorrhiza . Phytochemistry . 36(6): 1505-1508.
Stoilova I, Krastanov A, Stoyanova A, Denev P, Gargova S.  2007.  Antioxidant  activity  of  a  ginger  extract ( Zingiber officinale ). Food Chemistry. 102(3): 764- 770.
Wong  C,  Li  H,  Cheng  K,  Chen  F.  2006.  A  systematic survey  of  antioxidant  activity  of  30  Chinese medicinal  plants  using  the  ferric  reducing antioxidant  power  assay. Food  Chemistry. 97(4): 705-711.
Yasni  S,  Imaizumi  KT,  Nakamura  M,  Aimoto  J,  Sugano M.  1993.  Effects  of Curcuma  xanthorrhiza Roxb. and curcuminoids on the level of serum and liver lipids,  serum  apolipoprotein  A-I  and  lipogenic enzymes  in  rats. Food  and  Chemical  Toxicology. 31(3): 213-218.