Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
ANALISIS IN VITRO AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN SISIK NAGA ( Drymoglossum pilosellaoides ) TERHADAP BAKTERI Vibrio harveyi DAN
Vibrio parahaemolyticus
In  Vitro  Analysis  of  Dragon  Scale  Leaves  ( Drymoglossum  pilosellaoides )  Antibacterial Activity Against Vibrio harveyi and Vibrio parahaemolyticus Bacteria
Azis 1*
1 Program Studi Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Borneo Tarakan, Tarakan * azis.borneo@gmail.com
Abstrak
Penelitian ini menganalisis bioaktifitas ekstrak daun sisik naga ( Drymoglossum pilosellaoides ) terhadap pertumbuhan  bakteri Vibrio  harveyi dan Vibrio  parahaemolyticus .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui bioaktifitas dan efektifitas antibakteri ekstrak daun sisik naga terhadap pertumbuhan bakteri V. harveyi dan V. parahaemolyticus .  Pengujian  daya  hambat  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar  menggunakan  5  variasi konsentrasi  100%,  50%,  25%,  12,5%  dan  6,25%  b/v  pada  media  TSA  ( Tryptone  Soya  Agar )  dan  TCBS ( Thiosulfate  Citrate  Bile  Salts  Sucrose )  yang  diinkubasi  selama  2x24  jam.  Digunakan  pula  antibiotik  berupa chloramphenicol 10 -1 (= 30 µ g) sebagai kontrol positif, dan sebagai kontrol negatif digunakan akuades. Ekstrak daun sisik naga. mengandung flavonoid, saponin dan tanin yang bersifat antibakteri dan memiliki kemampuan mematikan  bakteri  uji, dengan efektifitas  diameter hambatan V.  harveyi 14,8  mm  pada  konsentrasi 100%  b/v, sedangkan bakteri V. parahaemolyticus 11,8 mm pada konsentrasi 50% b/v. Efektifitas daya hambat tertinggi pada konsentrasi 50% terhadap bakteri V. parahaemolitycus yaitu sebesar 45,5%, Sedangkan pada konsentrasi 100% memiliki efektifitas daya hambat sebesar 56,3% terhadap bakteri V. harveyi.
Kata kunci: Bioaktifitas, Ekstrak daun sisik naga, Zona hambat, Vibrio harveyi , Vibrio parahaemolyticus

## Abstract
The research focuses on the Antibacterial activity of dragon scale leaves ( Drymoglossum pilosellaoides ) towards the growth of Vibrio harveyi and Vibrio parahaemolyticus bacteria. This study aimed to determine the bioactivity and antibacterial properties of Drymoglossum pilosellaoides extract on the growth of Vibrio harveyi and Vibrio  parahaemolyticus .  Tests  conducted  by  the  inhibition  of  agar  diffusion  method  using  5  various concentration 100%, 50%, 25%, 12,5% and 6,25% w/v on TSA ( Tryptone Soya Agar ) and TCBS ( Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose ) incubated for 2x24 hours. Antibiotics are also used in the form of Chloramphenicol 3µ as  positive  control  and  aquades  as  a  negative  control.  The Drymoglossum  pilosellaoides extract  contains flavonoids, saponins and tannins which are antibacterial and the ability to kill bacteria test, the effectiveness of barriers V. harveyi diameter 14.8 mm at a concentration of 100% b / v, while the bacterium V. parahaemolyticus 11.8 mm at a concentration of 50% b / v. The effectiveness of the highest inhibition at a concentration of 50% against  bacteria V.  parahaemolitycus that  is  equal  to  45.5%,  whereas  at  a  concentration  of  100%  has  the effectiveness of inhibition of 56.3% against bacteria V. harveyi .
Keywords : Bioactivity , Dragon scales leaf extract, Barriers zone, Vibrio harveyi , Vibrio parahaemolyticus

## PENDAHULUAN
Bakteri merupakan organisme proka- riot  hidup  terdapat  hampir  di  seluruh ekosistem  dengan  berbagai  bentuk  kehi- dupan,  yaitu  bebas,  parasit  dan  patogen. Sifat  patogen  tersebut  menimbulkan kerugian, sebab bakteri dapat menyebabkan infeksi  dan  akhirnya  dapat  menimbulkan penyakit pada organisme lain termasuk ikan dan  udang.  Penyakit  pada  udang  dapat disebabkan  oleh  bakteri,  jamur,  virus  dan
parasit yang terdapat di perairan. Penyakit yang disebabkan oleh bakteri, selain dapat menyebabkan kematian massal juga meng- ganggu kualitas udang dengan menurunkan mutu  daging  udang  yang  terinfeksi sehingga tidak disukai oleh konsumen.
Salah  satu  penyakit  bakteri  pada udang  disebabkan  oleh  bakteri Vibrio harveyi dan Vibrio  parahaemolyticus .  Se- rangan dari kedua bakteri ini dapat menim-
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
bulkan  kerugian  cukup  besar  bagi pembudidaya udang di Indonesia.
Penanggulangan  penyakit  pada udang  biasanya  menggunakan  zat  kimia atau antibiotik. Penggunaan antibiotik dapat menimbulkan  resistensi  terhadap  bakteri, jamur,  virus,  dan  parasit.  Selain  itu  juga membutuhkan biaya yang cukup besar serta dapat mencemari lingkungan.
Evolusi strain bakteri yang berperan sebagai  agen  penyebar  penyakit  dan resistensi  antibiotik,  menjadi  perhatian besar  bagi  kesehatan  masyarakat  secara global  (Jawetz,  2007).  Resistensi  terhadap antibiotik  mempengaruhi  aktivitas  dan perkembangan bakteri, sehingga jumlahnya dapat meningkat di
perairan.
Penanggulangan  secara  alami  dengan memanfaatkan ekstrak tanaman merupakan salah satu alternatif.
Beberapa tanaman mengandung se- nyawa  yang  bersifat  antimikroba  yang dapat  dimanfaatkan  untuk  menghambat pertumbuhan  dan  membunuh  agen  penye- bab  penyakit,  salah  satunya  adalah  daun sisik  naga  ( Drymoglossum  pilosellaoides). Dibandingkan  dengan  antibiotik  sintesis, senyawa  bioaktif  yang  diturunkan  dari tanaman  bersifat  alami,  tidak  beracun, bebas residu dan ideal sebagai bahan pakan tambahan.
Daun  sisik  naga  banyak  dimanfaat- kan  terutama  sebagai  antibakteri  dan  anti- jamur (Somchit, 2011). Ekstrak daun sisik naga  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Propionibacterium acne dan bakteri Shigella  dysentriae Febriani  (2015).  Kan- dungan  yang  terdapat  di  dalam  daun  sisik naga  sebagai  antibakteri  adalah flavonoid, saponin dan tanin (Somchit, 2011).
Hal  tersebut  dapat  diketahui  dari adanya  zona  hambatan  yang  terbentuk (Tjokronegoro  dan  Utama,  2002).  Atas dasar tersebut, maka perlu dilakukan pene- litian  untuk  mengetahui  potensi  ekstrak daun  sisik  naga D.  pilosellaoides sebagai antibakteri  terhadap V.  harveyi dan V. parahaemolyticus penyebab  penyakit  pada udang .
Tujuan  penelitian  ini  untuk  menge- tahui daya antimikroba dan efektifitas daya hambat  ekstrak  daun  sisik  naga D. pilosellaoides terhadap  bakteri V.  harveyi dan V. parahaemolyticus secara in vitro.

## METODOLOGI Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Juli  –  September  2018  di  Laboratorium Nutrisi FPIK UBT.

## Materi Penelitian
Alat yang digunakan dalam preparasi sampel  antara  lain  blender,  nampan, timbangan  analitik  dan  spatula.  Ekstraksi: erlenmeyer,  gelas  ukur, beaker  glass , hot plate  with  stirrer dan    evaporator . Kultur bakteri:  jarum  ose,  cawan  petri,  bunsen, inkubator  dan laminair  flow .  Uji  aktivitas antibakteri:  mikropipet, pippet  tip ,  kertas cakram,  pinset,  bunsen  dan  jarum  ose. Pengamatan  zona  hambat  pertumbuhan bakteri:  jangka  sorong.    Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  daun sisik naga yang telah dihaluskan dan etanol 70%,  alkohol,  akuades  steril,  media  agar miring  TSA  ( Tryptone  Soya  Agar )  TCBS ( Thiosulfate  Citrate  Bile  Salts  Sucrose ), chloramphenicol 250 g, etanol 96%, isolat bakteri V. harveyi dan V. parahaemolyticus diperoleh  dari  Balai  Besar  Perikanan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara dan Stasiun Karantina Ikan Tarakan.

## Rancangan Penelitian
Sebelum  uji  aktivitas  antibakteri, terlebih dahulu dilakukan perhitungan total bakteri  melalui  total plate  count  method terhadap  mikroba  yang  akan  digunakan. Selanjutnya, uji aktivitas antibakteri tepung daun  sisik  naga  terhadap  bakteri  pathogen V. harveyi dan V. parahaemolyticus dengan menggunakan metode difusi agar sumuran ( well diffusion agar ) . Larutan tepung daun sisik naga yang diujicobakan terdiri dari 5 konsentrasi  larutan,  2  kontrol  (positif  dan negative)  :  100%,  50%,  25%,  12,5%  dan 6,25%.  Sebagai  kontrol  positif  digunakan antibiotik chloramphenicol 10 -1 (= 30 µ g),
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
dan  sebagai  kontrol  negatif  digunakan akuades.
Pengamatan dilakukan dengan meng- ukur  diameter  zona  bening  di  sekitar sumuran  pada  masing-masing  variasi konsentrasi ekstrak daun sisik naga, kontrol positif  dan  kontrol  negatif  dengan menggunakan  jangka  sorong  terhadap pertumbuhan  bakteri V.  harveyi dan V. parahaemolyticus, zona  hambat  yang terbentuk  sebagai  parameter  utama  diukur dari  zona  hambat  vertikal  dan  horizontal kemudian  dirata–ratakan  (Paliling et  al., 2016).
Parameter  penunjang  untuk  efek- tivitas daya hambat berbagai ekstrak bahan tumbuhan  dari  antibiotik  dihitung  berda- sarkan  persamaan  (Arora  dan  Bhardwaj, 1997).  Uji  aktivitas  antibakteri  secara in vitro dianalisis  secara  deskriptif.  Pengu- kuran dilakukan pada masa inkubasi selama 24 jam dan dilanjutkan hingga 48 jam. Data yang  diperoleh  dari  hasil  pengukuran ditabulasi  dan  dianalisis  dengan  cara membandingkan  diameter  zona  hambatan untuk semua konsentrasi.

## Analisis Data
Parameter  penunjang  untuk  efekti- vitas daya hambat  ekstrak daun sisik naga
dari antibiotik dihitung berdasarkan persa- maan (Arora dan Bhardwaj, 1997), yaitu:
E = # D Da & x 100%
Keterangan:
E   : Efektivitas daya hambat (%)
D  : Diameter zona hambat ekstrak bahan tumbuhan (mm) Da : Diameter zona hambat antibiotik (mm)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  meliputi  penghitungan jumlah  mikroba  yang   digunakan   melalui metode hitungan cawan ( total plate count ) dan uji aktivitas antibakteri yang dilakukan dengan  metode  difusi  agar  sumuran.  Uji tersebut  dilakukan  untuk  mengukur diameter  zona  bening  yang  merupakan petunjuk  adanya  penghambatan  partum- buhan  bakteri  oleh  suatu  senyawa antibakteri.
Total  koloni  2  jenis  bakteri  yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 1. Dari hasil TPC maka jumlah bakteri  yang  dapat  digunakan  dalam  uji aktivitas  antibakteri  adalah  10 6 CFU/ml. Syarat  jumlah  bakteri  untuk  uji  kepekaan sensivisitas yakni 10 5 -10 8 CFU/ml (Lavilla et al ., 1990).
Tabel 1.   Hasil perhitungan total koloni bakteri.
Isolat Pengenceran Total (CFU/ml) 10 2 10 3 10 4 V. harveyi TBUD  Spread  157  1,57 x 10 6 V. parahaemolyticus TBUD  TBUD  203  2,03 x 10 6
Keterangan: TBUD = terlalu banyak untuk dihitung; spread = menyebar

## Uji Aktivitas Antibakteri
Hasil  uji  difusi  agar  sumuran  (Tabel 2)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  sisik naga  dengan  konsentrasi  100%  sampai 6,25%  (b/v)  dapat  menghambat  bakteri V. harveyi pada  zona  hambat  19,37  -  20,64 mm    dan V.  parahaemolyticus pada  zona hambat  18,59  -  19,97  mm  pada  24  jam inkubasi. Sedangkan pada inkubasi 48 jam V. harveyi pada zona hambat 21,32 - 24,64 mm  dan V.  parahaemolyticus pada  zona hambat  18,94  –  22,93  mm.  Sementara  itu
Amoxicillin dapat menghambat bakteri pada zona hambat 25,09 mm.
Hasil  uji  daya  hambat  kelima  kon- sentrasi  ekstrak  daun  sisik  naga  memper- lihatkan  bahwa  semakin  tinggi  konsen- trasinya  maka  semakin  besar  pula  zona bening  yang  terbentuk  di  sekitar  sumuran. Selain  itu,  kontrol  (+)  juga  mampu menghambat  pertumbahan  bakteri  dengan adanya  zona  hambat  yang  terbentuk  di sekitar media, sedangkan untuk kontrol (-) tidak membentuk zona hambat pada media.
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
Adapun  hasil  pengukuran  zona  hambat pada masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  terhadap  bakteri V.  harveyi dan V.
parahaemolyticus dengan masa inkubasi 24 jam dan 48 jam. Waktu (jam) Isolat bakteri Rata-rata diameter zona hambat (mm) 6,25%  12,5%  25%  50%  100%  K + K - 24 V. harveyi 4,6 6,1 10,3  12,6  12,6  25,1  0 V. parahaemolyticus 5,2 6,8 9,9  10,6  10,5  25,4  0 48 V. harveyi 4,9 7,2 10,3  14,3  14,8  26,3  0 V. parahaemolyticus 5,3 8,2 10,1  11,8  11,1  25,9  0
Umumnya,  diameter  zona  hambat cenderung  meningkat  sebanding  dengan meningkatnya  konsentrasi  ekstrak.  Akan tetapi,  dalam  uji  ini  terjadi  tidak  seperti pada  umumnya  serta  zona  hambat  yang dihasilkan  tidak  stabil  pada  beberapa konsentrasi. Konsentrasi ekstrak daun sisik naga  pada  konsentrasi  50%  dan  100% memberikan  respon  rata-rata  zona  hambat terhadap  bakteri V.  harveyi sebesar  12,6 mm  pada  pengamatan  24  jam  dan mengalami  peningkatan  zona  hambat sebesar  2,3  mm  dan  2,4  mm  pada  penga- matan 48 jam.
Zona  hambat  terhadap  bakteri V. parahaemolitycus pada  konsentrasi  50% dan 100% memberikan respon zona hambat sebesar  10,6  dan  10,5  atau  mengalami penurunan  nilai  zona  hambat  rata-rata sebesar  0,1  mm  pada  pengamatan  24  jam. Sedangkan  pada  pengamatan  48  jam memiliki  nilai  rata-rata  zona  hambat sebesar  11,8  mm  dan  11,1  mm  atau mengalami  penurunan  nilai  zona  hambat sebesar  0,7  mm  dari  konsentrasi  50%  ke konsentrasi 100%.
Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa peningkatan konsentrasi ekstrak daun sisik naga  tidak  berbanding  lurus  dengan peningkatan zona hambat terhadap perkembangan  bakteri V.  harveyi dan V. parahaemolitycus. Menurut  Stout  dan Davis  (1971),  diameter  zona  hambat  yang dibentuk  tidak  selalu  naik  sebanding dengan naiknya konsentrasi ekstrak, hal ini disebabkan  karena  adanya  perbedaan kecepatan  difusi  senyawa  antibakteri  pada
media  agar  serta  jenis  dan  konsentrasi senyawa  antibakteri  yang  berbeda  juga memberikan  diameter  zona  hambat  yang berbeda  pada waktu tertentu.
Selain  itu,  perbedaan  diameter  zona hambat  pada  masing-masing  perlakuan dipengaruhi oleh beberapa faktor. Faktor - faktor  tersebut  antara  lain  adalah  konsen- trasi  senyawa  antibakteri,  jumlah  bakteri, jenis bakteri, dan suhu (Pelczar dan Chan , 1986).
Hasil  pengamatan zona  hambat yang dihasilkan  dari  masing-masing  perlakuan memiliki  diameter  yang  berbeda  serta bentuk  yang  tidak  beraturan.  Oleh  karena itu,  pengamatan  dilakukan  dengan  cara mengukur  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  secara  vertikal  dan  horizontal, dari zona  yang terbentuk di sekitar lubang sumuran.    Hasil  pengujian  menunjukkan bahwa kategori zona hambat yang terbentuk oleh  ekstrak  daun  sisik  naga  terhadap pertumbuhan  bakteri V.  harveyi dan V. parahaemolitycus pada  konsentrasi  50% dan 100% termasuk dalam kategori kuat.
Menurut  Stout  dan  Davis  (1971) diameter zona hambat yang terbentuk pada uji in  vitro sebesar  10  –  20  mm  termasuk dalam  kategori  kuat.  Sedangkan  hasil pengujian zona hambat pada kontrol negatif tidak  menghasilkan  zona  hambat,  dikare- nakan  larutan  yang  digunakan  adalah aquades  yang  tidak  memiliki  senyawa antibakteri.  Sedangkan  diameter  zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif chloramphenicol menunjukkan  perbedaan dengan nilai rata - rata 24,60 ± 1,90 mm, hal
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
ini  dikarenakan chloramphenicol meru- pakan bahan kimia antibiotik bakteriostatik.
Zona hambat di sekitar kertas cakram menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri. Zona  hambat  yang  terbentuk,  diduga adanya  kandungan  senyawa  bioaktif sebagai  antibakteri  dari  ekstrak  daun  sisik naga yang mampu
menghambat pertumbuhan  bakteri V.  harveyi. Sejalan dengan pendapat Azis (2016) zona hambat di sekitar kertas cakram merupakan daerah
difusi ekstrak yang mempengaruhi pertum- buhan bakteri.
Efektivitas daya hambat ekstrak daun sisik  naga  diperoleh  dengan  memban- dingkan nilai zona hambat bahan tumbuhan dengan  nilai  zona  hambat  dari  kontrol positif  yaitu  larutan  antibiotik chloram- phenicol .  Efektivitas  daya  hambat  ekstrak daun sisik naga terhadap bakteri V. harveyi dapat dlihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Efektivitas  daya  hambat    ekstrak  daun  sisik  naga  selama  48  jam  terhadap pertumbuhan bakteri V. harveyi dan V. parahaemolitycus . Perlakuan (%) Efektivitas Ekstrak (%) V. harveyi V. parahaemolitycus 100 50 25 12,5 6,25 56,3 54,3 39 27,3 18,6 42,8 45,5 38,9 31,7 20,5
Berdasarkan  tabel  3,  persentase efektivitas daya hambat ekstrak daun sisik naga  menunjukkan  persentase  efektivitas daya  hambat  tertinggi  terhadap  pertum- buhan bakteri V. harveyi yaitu 56,3% pada konsentrasi  100%  sedangkan  pada  bakteri V.  parahaemolitycus memiliki  efektifitas daya hambat terbesar pada konsentrasi 50% sebesar 45,5%.
Hal ini diduga karena adanya perbe- daan  senyawa  antibakteri  pada  masing- masing ekstrak dalam menghambat pertumbuhan  bakteri V.  harveyi dan V. parahaemolitycus. Pada  penelitian  Azis (2016)  mengenai  efektivitas  daya  hambat ekstrak  bawang  tiwai  terhadap  pertum- buhan  bakteri Aeromonas  hydrophila ¸ bahwa  ekstrak  bawang  tiwai dengan konsentrasi  30%  menunjukkan  efektivitas antibakteri  tertinggi  terhadap  bakteri A. hydrophila sebesar 72,5%, sedangkan pada konsentrasi  40%  dan  50%  terlihat  bahwa efektivitas  antibakterial  dari  ekstrak  ba- wang tiwai semakin menurun yaitu masing- masing sebesar 54% dan 47%.
Efektifitas daya hambat ekstrak daun sisik  naga  terhadap  bakteri V.  harveyi dan V.  parahaemolitycus disebabkan  oleh
kandungan  senyawa  bioaktif  pada  ekstrak daun sisik naga yang dapat merusak sistem sintesa protein, kerusakan dinding sel yang menyebabkan  lisis  sehingga  terjadi  keru- sakan dinding sel yang dapat mengganggu mekanisme sintesis dinding sel bakteri. Menurut Jawetz (2007), pertumbuhan bakteri  yang  terhambat  atau  kematian bakteri  akibat  adanya  penghambatan terhadap  sintesis  protein  oleh  senyawa  - senyawa  bioaktif.  Ketahanan  bakteri  gram negatif dan gram positif terhadap senyawa antibakteri  berbeda-beda.  Perbedaan  kepe- kaan bakteri gram negatif dan gram positif berkaitan  dengan  struktur  dalam  dinding sel,  seperti  jumlah  peptidoglikan  (adanya reseptor,  pori-pori  dan  lipid),  sifat  ikatan silang  dan  aktivitas  enzim  autolik. Komponen tersebut merupakan faktor yang menentukan  penetrasi,  pengikatan  dan aktivitas senyawa antimikroba.
Mekanisme penghambatan anti- bakteri terhadap pertumbuhan bakteri dapat berupa  kerusakan  dinding  sel  yang mengakibatkan  lisis  atau  penghambatan sintesis  dinding  sel,  pengubahan  permea- bilitas  membrane  sitoplasma  sehingga menyebabkan  keluarnya  bahan  makanan
Journal of Aquaculture and Fish Health Vol. 8 No.2 (2019)
melalui  dinding  sel,  denaturasi  protein  sel dan perusakan sistem metabolisme di dalam sel dengan cara penghambatan kerja enzim intraseluler (Pelczar dan Chan , 2008).

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Setelah  dilakukan  penelitian  maka diperoleh  beberapa  kesimpulan,  yaitu  bio- aktifitas ekstrak daun sisik naga ( Drymoglossum  pilosellaoides )  bersifat bakteriosida yang ditunjukkan oleh pening- katan  zona  bening  diameter  zona  bening setelah 24 dan 48 jam inkubasi.
Selain  itu  efektifitas  ekstrak  daun sisik naga diperoleh pada konsentrasi 50% terhadap  bakteri V.  parahaemolitycus . Sedangkan  untuk  bakteri V.  harveyi pada konsentrasi 100%.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan mengenai senyawa bioaktif yang lebih spe- sifik pada daun sisik naga ( Drymoglossum pilosellaoides ).  sehingga  masing-masing kandungan  senyawa  bioaktif  dalam  daun sisik naga dapat diketahui manfaatnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Arora,  D.S.  dan  Bhardwaj,  1997. Antibacterial  Activity  of  Some Medicinal Plants, Geo. Bios ., 24, 127- 131.
Azis,  2016.  Efektivitas  Daya  Hambat Ekstrak  Bawang  Tiwai  ( Eleutherine americana )  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Aeromonas
hydrophila
Secara In Vitro . J. Harpodon 10(3). Febriani,  W.D.,  2015.  Perbedaan  Daya Hambat  Ekstrak  Daun  Sisik  Naga ( Drymoglossum  piloselloides Linn.) Terhadap  Bakteri  Propionibacterium acne  Dengan  Shigella  dysentriae. Universitas Jember, Jember. Jawetz,  2007.  Mikrobiologi  Kedokteran Jawetz,  Melnick,  &  Adelberg. Translation  of  Jawetz,  Melnick,  and Adelberg’s.  Medical  Microbiology, 23th  Ed.  Alih  bahasa  oleh  Hartanto, H., et al . Jakarta: EGC, Ed.23.
Lavilla,  P.,  Baticados,  M.C.L.,  Cruz, L.E.R., Pena,  L.D.  and  Sunaz,  N.A., 1990. Studies on the chemical control of luminous bacteria V. harveyi and V splendidus isolated  from  diseased
Penaeus monodon larvae and rearing water . Dis. Aquat . Org. 9: 133-139. Paliling,  A.,  Jimmy  Posangi,  P.S.  dan Anindita,  2016.  Uji  Daya  Hambat Ekstrak  Bunga  Cengkeh  ( Syzgyum aromaticum ) Terhadap Bakteri Porphyromonas  gingivalis . Jurnal
eG , 4(2):230-233.
Pelczar.,  M.J.  dan  Chan,  E.C.S.,  2008.
Dasar-Dasar
Mikroorganisme.
Jakarta. Universitas Indonesia Press.
Pelczar,  M.J.  dan  Chan,  E.C.S.,  1986.
Dasar  -  Dasar  Mikrobiologi  Jilid  I . Diterjemahkan  oleh  Ratna  Siri
Hadioetomo,  Teja  Imas,  S.  Sutami,
Sri  Lestari.  Jakarta:  Universitas Indonesia, 116 – 117.
Somchit,  N.M.,  2011. In  vitro antifungal and antibacterial activity of Drymoglossum piloselloides L. Presl.
Against several fungi responsible for
Athlete’s foot and common pathogenic  bacteria. African  Journal of  Microbiology  Research Vol.  5  no
21. Stout,  R.T.  dan  Davis,  W.W.,  1971.  Disc Plate  Method  of  Microbiological Antibiotic Assay. Applied microbiology , p. 666-670 vol. 22, no.
4 The Lily Research Laboratories, Eli Lilly  and  Co.,  Indianapolis,  Indiana 46206.
Tjokronegoro,  A.  dan  Utama,  A.,  2002. Pengobatan  Mutakhir  Dermatologi pada Anak Remaja. Jakarta: FK UJ.