Jurnal Teknologi Kesehatan Borneo, Vol. 4, No 2 (2023) 49-57 Available online at: http://jtk.poltekkes-pontianak.ac.id/index.php/JTKB/ p-ISSN: 2723-3790 e-ISSN 2723-3782
Doi: https://doi.org/10.30602/jtkb.v4i2.281

## Perbedaan  Hasil  Pemeriksaan  Kadar  Hemoglobin  Sampel Darah  Vena  Remaja  Segera  Diperiksa  dan  Ditunda  dengan Metode Sahli

## Riki Rinaldi*, Silvia Indra, Tasya Nadira Annisa
Program Studi Diploma III Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Kesehatan, Universitas Kader Bangsa, Palembang
* Correspondence: r.rinaldi86@gmail.com
Abstrak. Darah merupakan komponen penting bagi tubuh yang terdiri dari eritrosit, leukosit, trombosit yang dapat digunakan  sebagai  diagnosis  suatu  penyakit.  Salah  satu  pemeriksaan laboratorium yang menggunakan  darah  adalah  hemoglobin.  Sampel  darah  yang  akan  diperiksa  harus  dilakukan pengecekan  terlebih  dahulu,  karena  darah  yang  disimpan  terlalu  lama  dapat  menyebabkan  eritrosit pecah dan menyebabkan hemoglobin berada di plasma. Pemeriksaan hemoglobin ada dua cara yaitu manual dan otomatis. Cara manual bisa menggunakan metode sahli. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui hasil kadar hemoglobin pada sampel darah vena remaja yang segera diperiksa dan ditunda selama 60 menit, 120 menit pada suhu ruang dengan metode sahli. Penelitian ini menggunakan jenis penelitian  eksperimen  dengan  pendekatan  kuantitatif  dan  uji  statistic  O ne  Way  Anova dengan menggunakan sampel sebanyak 15 remaja. Setiap pemeriksaan dilakukan sebanyak enam kali ulangan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa adanya perbedaan pemeriksaan segera dan ditunda (60 menit, 120  menit)  dikarenakan  terjadiadanyapenurunankadar  hemoglobin  sebanyak  1gr/dL  setiap  60  menit dan pada hasi l one way anova menunjukkan hasil penilaian yang signifikan yaitu dengan p 0,00027. Nilai rata-rata hasilkadar hemoglobin menunjukkan pada segera 12,43 gr/dL, ditunda 60 menit 11,48 gr/dL, dan ditunda 120 menit 10,35 gr/dL. Nilai rata-rata kadar  hemoglobin remaja laki-laki pada segera (1 3,6 gr/dl), ditunda 60 menit (12,6gr/dL),dan ditunda 120 menit s (11,3 gr/dL). Nilai rata-rata kadar hemoglobin remaja perempuan pada pemeriksaan segera (11,8 gr/dL), ditunda 60 menit (10,9 gr/dL), ditunda 120 menit (9,8 gr/dL).
Kata kunci: Darah, Hemoglobin, Sahli
Abstract. Blood is an important component for the body consisting of erythrocyte, leukocyte, platelet that can be  used  as  a  diagnosis  of  a  disease.  One  laboratory  test  that  uses  blood  is  hemoglobin.  Blood  samples  to  be examined must be checked first, because blood stored for too long can cause erythrocytes to rupture and cause hemoglobin to be in plasma. There are two ways of manual and automatic hemoglobin examination, the manual way can usesahlimethod. The purpose of this study was to determine the results of hemoglobin levels in venous blood samples that were immediately examined and delayed 60 minutes, 120 minutes at room temperature with the expert method. This study used a type of quantitative research with a statistical test one wayanova using a sample  of  15  respondents.  The  results  of  this  study  showed  that  there  was  a  difference  in  examination immediately and postponed (60 minutes, 120 minutes) due to a decrease in hemoglobin levels by 1gr / dL every 60 minutes and the results of one wayanova showed significant assessment results with p 0.00027. The average value of hemoglobin level results showed immediately 12.43 gr/dL, delayed 60 minutes 11.48 gr/dL, and delayed 120 minutes 10.35 gr/dL.  The average value of hemoglobin levels in male adolescents was immediately (13.6 gr/dL), delayed 60 minutes (12.6 gr/dL), and delayed 120 minutes (11.3 gr/dL). The average value of hemoglobin levels in female adolescents on immediate examination (11.8 gr/dL), delayed 60 minutes (10.9 gr/dL), delayed 120 minutes (9.8 gr/dL).
Keywords: Blood, Hemoglobin, Sahli
1. Latar Belakang
Darah adalah komponen yang sangat penting bagi manusia yang terdiri dari 2 komponen yaitu plasma darah dan butir-butir darah. Butir-butir darah terdiri dari sel Eritrosit, Leukosit dan trombosit. Pemeriksaan kadar hemoglobin adalah salah satu pemeriksaan laboratorium yang menggunakan sampel darah. Hemoglobin mengandung protein yang kaya akan zat besi dengan  membentuk  oksihemoglobin  karena  memiliki  afinitas  terhadap  oksigen  di  sel eritrosit. Defisiensi zat besi (Fe) dapat menimbulkan anemia ringan dan berat. Gejala anemia ringan  adalah  lesu,  lemah,  letih,  dan  menurunkan  daya  tahan  tubuh.  Anemia  berat  dapat menyebabkan gejala yang lebih parah dari pada anemia biasa, seperti sesak napas, lemas atau kelelahan, jantung berdebar kencang, dan pusing(Budiarti et al., 2020). Menurut (Kementrian Kesehatan,  2021)  berdasarkan  riset  kesehatan  desa  yang  dilakukan  pada  tahun  2018  ada sebesar  32%  remaja  yang  mengalami  anemia.  Artinya  ada  3  sampai  4  dari  10  remaja  di Indonesia mengalami anemia.
Pemeriksaan  kadar  hemoglobin  secara  manual  ada  beberapa  metode  yaitu  metode Tallquist, metode CuSO4, metode Sahli. Metode Tallquist dan metode CuSO4 adalah metode pemeriksaan kadar hemoglobin sangat sederhana dan murah, akan tetapi tidak terlalu akurat. Metode  Tallquist  sangat  dipengaruhi  oleh  intensitas  pencahayaan.  Metode  CuSO4  sangat dipengaruhi oleh konsentrasi dari larutan tembaga sulfat (Sari et al., 2021).
Pemeriksaan  kadar  hemoglobin  menggunakan  metode  sahli  sangat  akurat  dari  pada menggunakan 2 metode lainnya, akan tetapi lebih membutuhkan waktu dan keterampilan. Metode sahli ini mengukur jumlah hemoglobin dalam darah dengan cara menghitung jumlah asam  yang  diperlukan  untuk  mengoksidasi  hemoglobin  menjadi  hematin.  Saat  asam ditambahkan ke dalam sampel darah, hemoglobin akan bereaksi dengan asam tersebut dan menghasilkan  oksidasi  yang  dapat  dilihat  melalui  perubahan  warna.  Perubahan  warna  ini dapat diukur dengan warna standar pada tabung sahli (Kusumawati et al., 2018). Menurut (Ardina  &  Putri,  2019),perbedaan  waktu  pemeriksaan  dan  penyimpanan  darah  dengan metode sahli sangat mempengaruhi hasil kadar Hb.
Pemeriksaan hemoglobin bisa menggunakan darah kapiler dan darah vena. Penggunaan darah  vena  memakai  antikoagulan  yang  akan  dimasukkan  ke  dalam  tabung.  Hemoglobin sangat baik ditentukan menggunakan darah vena yang diantikoagulasi menggunakan Etylene Diamine  Tetra  Acetate  (EDTA).  EDTA  yang  digunakan  dalam  bentuk  garam  natrium  atau kalium. Banyaknya antikoagulan EDTA yang digunakan adalah 1 mg/mL darah (Wahdaniah & Tumpuk, 2018). Darah EDTA yang tidak digunakan dengan segera atau ditunda lebih dari 2  jam  di  suhu  kamar  maka  akan  terjadi  pembengkakkan  pada  eritrosit  (Muslim,  2015). Pengaruh penyimpanan yang terlalu lama dapat menyebabkan eritrosit mengalami pecahnya membran  dan  menyebabkan  hemolisis,  sehingga  hemoglobin  akan  keluar  dan  berada  di plasma. Namun karena keterbatasan jumlah tenaga medis, volume pekerjaan yang tinggi, atau masalah non-teknis yang terjadi pada saat pemeriksaan menyebabkan terjadinya penundaan pemeriksaan sampel darah dengan antikoagulan EDTA (Ethylene Diamine Tetraacetik Acid) di laboratorium (Lestari, 2019).
Banyak  penelitian  yang  telah  dilakukan  dalam  penundaan  pemeriksaan  kadar hemoglobin yaitu(Obeidi et al., 2012),evaluasi pengaruh suhu dan waktu inkubasi pada tes hitung  darah  lengkap  (CBC).  (Muslim, 2015b)), dalam  penelitiannya  menunjukan  hasil ada pengaruh bermakna penundaan waktu 1 jam, 2 jam dan 3 jam darah K2EDTA dan Na2EDTA terhadap  kadar  hemoglobin  metode  Cyanmethemoglobin.  Selanjutnya  berdasarkan  hasil penelitian  (Rahayu,  2018)  menunjukan  terjadinya  penurunan  hasil  kadar  hemoglobin  pada seluruh  sampel  darah yang  ditunda  selama 2  jam  dan  dibiarkan  pada  suhu  kamar dengan menggunakan  metode  Cyanmethemoglobin.  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  penelitian  ini
bertujuan melihat perbedaan hasil kadar hemoglobin pada sampel darah vena  remaja yang segera  diperiksa  dan  ditunda  dengan  waktu  60  menit,120  menit  pada  suhu  ruang  dengan menggunakan metode berbeda yaitu metode sahli.

## 2. Metode

## 2.1 Desain Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode eksperimen dengan pendekatan kuantitatif yang  dilaksanakan  di  laboratorium  hematologi  Teknologi  Laboratorium  Medis, Universitas  Kader  Bangsa.  Teknik  pengambilan  sampel  pada  penelitian  ini  adalah dengan  melakukan  pengambilan  sampel  dari  mahasiswa  yang  memiliki  kriteria kelayakan  inklusi  yaitu  mahasiswa  DIII  Teknologi  Laboratorium  Medis  tingkat  tiga. Mahasiswa  bersedia  menjadi  responden  penelitian.  Mahasiswa  yang  dalam  kategori sehat jasmani, sehat rohani.
2.2 Populasi dan sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  seluruh  mahasiswa  D3  teknologi laboratorium  medis,  Universitas  Kader  Bangsa  Palembang.  Sampel  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalahsampel  darah  vena  EDTA  pada  Mahasiswa  DIII  Teknologi Laboratorium  Medis  tingkat  tiga  pada  tahun  2023  sebanyak  15  mahasiswa  dengan masing-masing darah yang diambil pada setiap mahasiswa sebanyak 3 ml.
2.3 Pemeriksaan Hb dengan Metode Sahli
Larutan HCl  0,1 N dimasukkan kedalam tabung Sahli sampai tanda batas 2. Hisap darah  EDTA  menggunakan  pipet  Sahli hingga  tanda  batas  20  μL (untuk  yang  segera diperiksa)  dan  hisap  darah  EDTA  (yang  telah  disimpan  pada  suhu  ruang  selama  60 menit, 120 menit). Masukkan darah EDTA dari pipet ke dalam dasar tabung Sahli yang telah terisi HCl 0,1 N dan homogenkan larutan dengan cara hisap dan lepaskan larutan HCl menggunakan pipet Sahli 2-3 kali untuk membilas sisa darah dalam pipet. Inkubasi selama  3-5  menit  dan  tambahkan  aquades  tetes  demi  tetes  lalu  homogenkan  dengan batang pengaduk (perhatikan jangan sampai ada gelembung udara). Bandingkan warna yang  terbentuk  dengan  warna  pada  standar.  Jika  warna  masih  pekat  (lebih  gelap  dari standar), tambahkan lagi aquades dan homogenkan kembali sampai warna sama dengan warna standar. Setelah itu, baca skala tabung Sahli pada miniskus bawah larutan, catat hasil kadar hemoglobin dalam satuan g/dL.
2.4 Analisis Data
Analisis data yang digunakan dalam penelitian ini adalah analisis data kuantitatif metode  statistik.  Data  dianalisa  menggunakan  uji  statistic  One  Way  Annova  yang bertujuan  ntuk  mengetahui  ada/tidaknya  pengaruh  yang  signifikan  dari  perbedaan waktu  pemeriksaan  terhadap  hasil  kadar  hemoglobin.  Dalam  penelitian  ini  data  yang diambil  adalah  dengan  mengukur  jumlah  kadar  hemoglobin  yang  dihitung  dengan menggunakan  metode  sahli  dan  kemudian  akan  dibandingkan  dengan  penundaan pemeriksaan  hemoglobin  selama  60  menit,  120  menit  sehingga  akan  didapatkan  data yang  akurat.  Data  ditampilkan  dalam  bentuk  tablel.  Etika  penelitian  menggunakan Informed consent. Pengambilan sampel darah vena EDTA pada Mahasiswa DIII Teknologi Laboratorium  Medis  ini  sudah  mendapat  persetujuan  dan  mengisi  surat  pernyataan kesanggupan menjadi subjek penelitian.

## 3. Hasil
Penelitian  ini  menggunakan  eksperimen dengan  perlakuan  60  menit,  120  menit  yang dilakukan  dengan  6  kali  pengulangan  pemeriksaan.  Penelitian  yang  digunakan  untuk pemeriksaan  segera,  dikerjakan  dengan  cara  sampel  darah  vena  dimasukkan  ke  dalam tabung  vacuntainer  dengan  antikoagulan  (EDTA),  kemudian  dihomogenkan  dan  segera diperiksa  kadar  Hemoglobinnya  menggunakan  haemometer  sahli.  Sampel  yang  diberi perlakuan 60  menit,  120 menit  dihitung setelah  dimasukkan ke  dalam  tabung.  Perbedaan hasil pemeriksaan kadar hemoglobin yang segera diperiksa dan ditunda selama 60 menit,120 menit dapat dilihat pada table 1.
Tabel  1.  Hasil  Pemeriksaan  Kadar  Hemoglobin  Yang  Segera  Diperiksa  Dan  Ditunda Selama 60 Menit, 120 Menit
No. Jenis Kelamin Kadar Hemoglobin DitundaPada Suhu Ruang Segera 60 Menit 120 Menit 1. L 14,0 13,4 12,0 2 L 13,8 12,0 12,0 3 L 13,4 12,4 11,0 4 P 11,4 10,0 9,0 5 P 10,6 9,8 9,0 6 P 11,0 10,0 9,8 7 P 12,0 11,4 10,0 8 P 13,0 12,6 11,0 9 P 12,0 11,0 10,4 10 P 11,4 10,0 9,4 11 P 13,0 12,0 11,0 12 L 13,8 12,6 11,0 13 L 13,0 12,8 10,6 14 P 12,0 11,4 10,0 15 P 12,0 10,8 9,0
Tabel  1  diatas  menunjukan  bahwa  hasil  pemeriksaan  kadar  hemoglobin  yang didapatkan  pada  pemeriksaan  segera  dengan  ditunda  selama  (60  menit,  120  menit)  yaitu didapatkan hasil kadar hemoglobin yang menurun. Penurunan yang terjadi disetiap waktu satu jam penundaan yaitu rata-rata mengalami penurunan 1 gr/dL.
Tabel  2.  Rata-rata  hasil  perbedaan  Kadar  Hemoglobin  Pada  Laki-laki  dan  Perempuan

## Yang Segera Diperiksa Dan Ditunda (60 Menit, 120 Menit)
Jenis Kelamin Perbedaan Nilai Terendah Hb (g/dL) Nilai Tertinggi Hb (g/dL) Rata- Rata Kadar Hb (g/dL) Kadar Hemoglobin Hb Normal (g/dL) Laki-laki Segera 13,0 14,0 13,6 13 – 18 g/dL Ditunda 60 Menit 12 13,4 12,6 Ditunda 120 Menit 10,6 12 11,3 Perempuan Segera 10,6 13,0 11,8 ` 12 – 15 g/dL Ditunda 60 Menit 9,8 12,6 10,9 Ditunda 120 Menit 9 10,4 9,8
Tabel  2  memperlihatkan  bahwa  terdapat  perbedaan  nilai  hasil  rata-rata  kadar hemoglobin pada mahasiswa laki-laki dan perempuan, baik itu untuk perlakuan yang segera diperiksa maupun yang ditunda. Kadar hemoglobin mahasiswa laki-laki didapatkan nilai
rata-rata kadar hemoglobin pada pemeriksaan segera yaitu 13,6 gr/dL, pada pemeriksaan ditunda 60 menit yaitu 12,6 gr/dL, pada pemeriksaan ditunda 120 menit yaitu 11,3 gr/dL. Pada mahasiswi perempuan didapatkan nilai rata-rata pada pemeriksaan segera diperiksa yaitu  11,8  gr/dL,  pada  pemeriksaan  ditunda  60  menit  yaitu  10,9  gr/dL,  dan  ditunda  120 menit yaitu 9,8 gr/dL.
Hasil pemeriksaan tersebut harus dilanjutkan dengan analisis dengan mengunakan uji statistic  One  Way  Annova.  Uji  statistic  ini  untuk  mengetahui  pengaruh  perbedaan  waktu segera  dan  ditunda  pemeriksaan  terhadap  kadar  hemoglobin  dengan  metode  Sahli  yang dapat dilihat pada tabel 3.

## Tabel 3. Perbedaan waktu segera dan ditunda pemeriksaan terhadap kadar hemoglobin dengan metode Sahli
Hasil  uji  statistik  menggunakan  One  Way  ANNOVA  diperoleh  nilai  sig.  0,00  (<0,05) maka H0 ditolak dan Ha diterima. Hasil ini menunjukkan adanya pengaruh yang signifikan/ perbedaan yang bermakna antara waktu segera diperiksa dengan ditunda 60 dan 120 menit terhadap kadar hemoglobin dengan metode Sahli. Kemudian dilanjutkan dengan uji Tukey HSD  pada kadar  hemoglobin  segera  dan  kadar  hemoglobin  penundaan  60 dan 120  menit didapatkan  nilai  probabilitas  (sig  2  failed)  p  =  0,00  dengan  alpha  0.05  maka  dapat disimpulkan bahwa (α = 0.05) p < 0,05 probabilitas (sig.) artinya terdapat perbedaan hasil pemeriksaan segera dengan penundaan pemeriksaan.

## 4. Pembahasan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dengan jumlah 15 responden untuk melihat  perbedaan  hasil  pemeriksaan  kadar  hemoglobin  pada  saat  segera  diperiksa  dan penundaan pada suhu ruang yaitu rata-rata terjadi penurunan 1 g/dL disetiap waktu satu jam  penundaan.  Pada  suhu  ruang  terdapat  penurunan  kadar  hemoglobin  dikarenakan kondisi  lingkungan  tidak  stabil  menyebabkan  peningkatan  suhu  sehingga  pecahnya membran  eritrosit  maka  dapat  menyebabkan  terjadinya  penurunan  kadar  hemoglobin. Menurut Karlina et al., (2023), penurunan kadar hemoglobin karena penundaan pemeriksaan disebabkan  karena  adanya  zat  yang  dibutuhkan  oleh  darah  seperti  dekstrosa  yang digunakan  sebagai  sumber  energi  dalam  menjaga  kelangsungan  hidupnya  dan  akan mengalami penurunan selama penyimpanan dan menyebabkan eritrosit menjadi lisis.
Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Sriwati  et  al., 2018)yang menyatakan kadar hemoglobin yang diperiksa segera (0 jam) ada pada kisaran 12,07 g/dl – 14,4 g/dL, sedangkan pada sampel yang ditunda selama 3 jam pada suhu kamar ada pada kisaran 10,98 g/dL – 13,34 g/dL. Penundaan tersebut menyebabkan selisih sebesar 1,09  g/dl.  Menurut(Afriansyah  et  al.,  2021)  dan  (Mulyana,  2020)bahwa  penurunan  kadar hemoglobin akan semakin besar, jika waktu penundaannya semakin lama. Volume Eritrosit Rata-rata  (VER) akan meningkat  dan konsentrasi  Hemoglobin  Eritrosit  Rata-  rata  (KHER) akan menurun, jika dalam pemeriksaan darah EDTA dilakukan penundaan lebih dari dua jam.  Penundaan  waktu  ini  dapat  menyebabkan  eritrosit  mengalami  haemolisis,  sehingga terjadi pengurangan jumlah eritrosit(Darmadi &Permatasari, 2018).
Menurut  Muslim  (2015),  penurunan  kadar  hemoglobin  pada  waktu  penundaan
Sumber Varian Jumlah Kuadrat df Rerata F Sig. Antar groups 32,535 2 16,268 13,684 ,000027 Dalam groups 49,931 42 1,189 Total 82,466 44
pemeriksaan  disebabkan  karena  terjadinya  kelainan  morfologi  eritrosit  yaitu  berbentuk krenasi/echinocyte. Krenasi adalah bentuk eritrosit yang mengkerut dan terjadi juga karena semakin lama terpapar dengan EDTA akibat dibiarkan pada suhu ruang dalam waktu yang lama.  Perubahan  bentuk  eritrosit  ini  disebabkan  oleh  pengaruh  faktor  intrinsic  dan ekstrinsik.  Berkurangnya  adenosin  triphospat  (ATP)  merupakan  factor  intrinsic. Peningkatan  pH  antikoagulan  (EDTA) merupakan  factor  ekstrinsik,  selain  itu  EDTA akan menyebabkan  penurunan  tegangan  permukaan  membran  eritrosit  sehingga  membran eritrosit menjadi lemah dan tidak stabil.
Hasil  penelitian  ini  menyatakan  bahwa  pemeriksaan  dengan  metode  sahli  yang menggunakan  sampel  darah  vena  EDTA  untuk  pemeriksaan  kadar  Hemoglobin  harus segera  dilakukan.  Jika  dilakukan  penundaan  pemeriksaan,  harus  memperhatikan  lama waktu penyimpanan agar eritrosit tidak mengalami haemolisis. Saputra & Aristoteles, (2022), menyatakan  dalam  penelitiannya  bahwa  Perbedaan  kadar  hemoglobin  juga  dapat dipengaruhi  oleh  lamanya  penyimpanan  darah.  Semakin  lama  darah  disimpan  maka  sel darah  merah  akan  mengalami  kerusakan.  Kemudian  dari  faktor  sumber  daya  manusia sendiri  yang  dapat  mempengaruhi  kadar  hemoglobin,  yaitu  tindakan  dan  ketelitian  dari petugas pada saat melakukan pemeriksaan
Hasil  penelitian  ini  juga  sejalan  dengan  penelitian  dari  (Nazariah,  2022)  yang menyatakan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  untuk  perbedaan  kadar hemoglobin  yang  segera  dan  ditunda.  Penelitian  dariKurnia  (2019)  yang  memakai antikoagulan  K3EDTA  menyatakan  bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna  kadar hemoglobin darah K3EDTA antara langsung periksa dengan penundaan 2,5 jam pada suhu kamar. Kadar hemoglobin pada sampel segera diperiksa (0 jam) ada pada rentang 8,88 g/dl – 17,48 g/dl, sedangkan pada sampel yang ditunda 2,5 jam ada pada rentang 8,52 g/dl – 16,83 g/dl.
Nilai  rata-rata  kadar  hemoglobin  pada  mahasiswa  laki-laki  lebih  tinggi dibandingkan  perempuan,  baik  pada  waktu  segera  diperiksa  maupun  penundaan  waktu pemeriksaan.  Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan  teori  dari  (Syuhada  et  al.,  (2022)  bahwa kadar  hemoglobin  pada  laki-laki  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  perempuan,  hal  ini dipengaruhi  oleh  fungsi  fisiologis  dan  metabolisme  pada  kaki-laki  lebih  aktif  dari  pada perempuan. Kadar hemoglobin perempuan lebih mudah menurun dikarenakan perempuan mengalami  siklus  bulanan  atau  menstruasi.  Menurut  Tsegaye  et  al.,  (1999),  kadar hemoglobin  yang  rendah  pada  perempuan  dibandingkan  laki-laki  adalah  karena  adanya faktor hormon androgen dalam proses eritropoiesis dan kehilangan darah saat menstruasi. Hal ini juga sejalan dari penjelasan Hidayat & Sunarti (2015) yaitu remaja merupakan periode pertumbuhan  anak-anak  menuju  proses  kematangan  manusia  dewasa.  Pada  periode  ini terjadi  perubahan  fisik  (mempengaruhi  status  kesehatan  dan  nutrisinya),  biologis,  dan psikologis. Remaja putri merupakan salah satu kelompok rawan untuk menderita anemia. Zat  besi  lebih  banyak  dibutuhkan  oleh  remaja  putri  karena  remaja  putri  mengalami  haid (menstruasi) setiap bulan, di mana kehilangan zat besi ± 1.3 mg per hari, sehingga kebutuhan zat besi lebih banyak dari pada remaja pria. Selain itu juga remaja putri biasanya ingin tampil langsing,  sehingga membatasi  asupan makanan  yang  mengandung zat  besi.  Penelitian  ini sejalan  dengan  Esa  et  al.,  (2006)  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  untuk  nilai eritrosit, hemoglobin, hematokrit. Laki-laki memiliki nilai lebih tinggi dibandingkan dengan perempuan.
Keterbatasan dalam penelitian ini adalah bahwa metode Sahli bersifat subjektif karena sangat  tergantung  pada  cara  membandingkan  warna  secara  visual,  membutuhkan
pemipetan yang akurat. Faktor kesalahan lainnya dapat terjadi pada saat perlakuan seperti kurangnya  waktu  dalam  menginkubasi,  intensitas  cahaya,  kemampuan  peneliti  dalam membedakan warna akibat kelelahan mata. Menurut Srivastava et al., (2014) bahwa metode sahli  kelemahan  jika  standard  warna  yang  sudah  tidak  baik  (luntur/buram)  atau  standar warna yang sudah lama tidak dikalibrasi sehingga menyebabkan alat standar warna kotor yang menyebabkan intensitas warna standar berubah,, sensitivitas dan akurasi yang buruk, dan  bukan  merupakan  standard  internasional    Menurut  (Barduagni  et  al.,  2003)  bahwa metode  Sahli  maupun  Tallquist  merupakan  metode  yang  sensitif  namun  memiliki spesifisitas (39,0%) yang sangat rendah, sehingga memberikan hasil positif palsu yang besar. (Hidayatussalihin  et  al.,  2018)  komponen  pipet  sahli  yang  sederhana  memiliki  faktor kesalahan  sistematis  yang  lebih  banyak.  Kesalahan  sistematis  merupakan  kesalahan  yang dapat diketahui secara pasti atau ditimbulkan oleh adanya faktor tetap yang mengakibatkan hasil pengujian yang cenderung lebih rendah atau lebih tinggi dari yang seharusnya. Faktor yang juga mempengaruhi kesalahan sistematis yaitu ketrampilan tenaga laboratorium dalam penggunaan alat

## 5. Kesimpulan
Hasil  Pemeriksaan  kadar  hemoglobin  metode  sahli  waktu  segera  dengan  penundaan pemeriksaan 60 dan 120 menit memiliki perbedaan signifikan. Tampak terjadi penurunan kadar hemoglobin  terjadi  seiring  dengan  penambahan  waktu  penundaan  pemeriksaan  yaitu  setiap waktu 60 menit penundaan pemeriksaan mengalami penurunan 1 gr/dL.  Dimana nilai tertinggi dari  rerata  kadar  hemoglobin  pada  pemeriksaan  segera  yaitu  13,6  gr/dL  (Laki-laki)    dan  nilai terendah pada pemeriksaan dengan waktu penundaan 120 menit yaitu 9,8 g/dL (perempuan). Berdasarkan  hasil  penelitian,  peneliti  merekomendasikan  untuk  peneliti  selanjutnya  yaitu sebaiknya melakukan pemeriksaan kadar Hemoglobin dengan metode otomatis yang sesuai good standar.

## Daftar Pustaka
Afriansyah, F., Bastian, Sari, I., & Juraijin, D. (2021). Pengaruh Lamanya Penyimpanan Dan
Suhu Terhadap Jumlah Eritrosit. Journal Of Indonesian Medical Laboratory And Science , 2 (2), 108–114.
Ardina, R., & Putri, Y. (2019). Pengaruh Variasi Waktu Inkubasi Terhadap Kadar Hemoglobin Menggunakan Metode Sahli. Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology , 2 (1).
Barduagni, P., Ahmed, A. S., Curtale, F., Raafat, M., & Soliman, L. (2003). Performance of Sahli  and  colour  scale  methods  in  diagnosing  anaemia  among  school  children  in  low prevalence areas. Tropical Medicine and International Health , 8 (7), 615–618.
Budiarti, A., Anik, S., & Wirani, N. P. G. (2020). Studi Fenomenologi Penyebab Anemia Pada Remaja Di Surabaya. Jurnal Kesehatan Mesencephalon , 6 (2), 137–141.
Darmadi, & Permatasari, D. (2018). Perbedaan Jumlah Leukosit Darah Edta Diperiksa Segera Dan Ditunda 2 Jam (Vol. 6, Issue 2).
Esa,  T.,  Aprianti,  S.,  Arif,  M.,  &  Hardjono.  (2006).  Nilai  Rujukan  Hematologi  Pada  Orang Dewasa  Sehat  Berdasarkan  Sysmex  XT-1800I. Clinical  Pathology  and  Medical  Laboratory ,
12 (3), 127–130.
Hidayat,  N.,  &  Sunarti.  (2015).  Validitas  Pemeriksaan  Kadar  Hemoglobin  Menggunakan Metode Hb Meter Pada Remaja Putri Di  Man Wonosari . KESMAS , 9 (1), 11–18.
Hidayatussalihin, Nurhayati, E., & Suwandi, E. (2018).  Perbedaan Presisi Pemipetan Sampel Menggunakan  Pipet  Sahli   Dan  Mikropipet  Pada  Pemeriksaan  Hemoglobin  Metode Cyanmethemoglobin. Urnal Laboratorium Khatulistiwa , 2 (1), 21–25.
Karlina,  E.,  Sari,  I.,  &  Bastian.  (2023).  Perbedaan  Kadar  Hemoglobin  Segera  Diperiksa  dan Penundaan  2,5  Jam  Pada  Suhu  Ruang. Journal  Health  Applied  Science  and  Technolgy , 1 (1), 21–25.
Kementrian  Kesehatan.  (2021).  Remaja  Sehat  Komponen  Utama  Pembangunan  SDM Indonesia. Kemenkes RI .
Kurnia,  W.  (2019).  Perbedaan  Darah  K 3  Edta  Yang  Segera  Diperiksa  dan  Ditunda  2,5  Jam Pada Suhu Kamar Terhadap Kadar Hemoglobin Di Puskesmas Suranenggala. Jurnal An Nasher , 1 (1), 1–9.
Kusumawati, E., Lusiana, N., Mustika, I., HIdayati, S., & Andyarini, E. N. (2018). Perbedaan Hasil  Pemeriksaan  Kadar  Hemoglobin  (Hb)  Remaja  Menggunakan  Metode  Sahli  dan Digital (Easy Touch GCHb). Journal of Health Science and Prevention , 2 (2), 95–98.
Lestari,  A.  I.  (2019).  Perbedaan  Jumlah  Trombosit  Pada  Penyimpanan  Sampel  Darah  Suhu Ruang Dan Kulkas Selama 24 Jam. Journal of Vocational Health Studies , 3 (1), 59–62.
Mulyana,  S.  (2020). Gambaran  Pemeriksaan  Kadar  Hemoglobin  (Hb)  Yang  Diperiksa Langsung Dan Ditunda Dengan Metode Flowcytometry: Literatur Review .
Muslim,  A.  (2015a). Pengaruh  Waktu  Simpan  Darah  K2EDTA  dan  Na2EDTA  Pada  Suhu Kamar Terhadap Kadar Hemoglobin (Vol. 4, Issue 2).
Muslim,  A.  (2015b).  Pengaruh  Waktu  Simpan  Darah  K2EDTA  dan  Na2EDTA  Pada  Suhu Kamar Terhadap Kadar Hemoglobin. Jurnal Analis Kesehatan , 4 (2).
Nazariah.  (2022). Perbandingan  Hasil  Kadar  Hemoglobin  Metode  Sahli  Segera  Periksa, Ditunda 60 Menit, 120 Menit Pada Suhu Kamar . Universitas ’Aisyiyah.
Obeidi, N., Safavi, E., & Emami, H. (2012). Evaluation of the effect of temperature and time of incubation on complete blood count (CBC) tests. African Journal of Biotechnology , 11 (7), 1–9.
Rahayu,  C.  (2018). Gambaran  Kadar  Hemoglobin  Pada  Mahasiswa/I  Tingkat  Iii  Jurusan Analis Kesehatan Medan Sebelum dan Sesudah Disimpan Selama 2 Jam Pada Suhu Kamar . Poltekes Kemenkes RI Medan.
Saputra,  O.  D.,  &  Aristoteles.  (2022).  Perbedaan  Pemeriksaan  Darah  Segera  dan  Ditunda
Selama  6  Jam  Pada  Suhu  4-8 O C  Terhadap  Kadar  Hemoglobin  Dengan Hematology Analyzer. Jurnal ‘Aisyiyah Medika , 7 (2), 49–56.
Sari, M. P., Komara, N. K., & Shari, A. (2021). Petunjuk Praktikum Hematologi Dasar. Yayasan Penerbit Muhammad Zaini .
Srivastava, T., Negandhi, H., & Neogi, S. B. (2014). Methods for Hemoglobin Estimation: A Review of “What Works.” Journal of Hematology & Transfusion , 2 (3), 1–7.
Sriwati, C., Ariyadi, T., & Santosa, B. (2018). Perbedaan Kadar Hemoglobin Pada Sampel Yang Segera Diperiksa Dan Ditunda 3 Jam. Thesis (Diploma III) .
Syuhada,  Triwahyuni,  T.,  Nabigha,  Z.  A.,  &  Putri,  T.  B.  (2022).  Perbandingan  Kadar Hemoglobin  Pada  Sampel  Darah  3  Ml,  2  Ml,  &  1  Ml  Dengan  Antikoagulan  K  2  Edta
Setelah  Ditunda  4  Jam  Di  Rsud  Dr.  H.  Abdul  Moeloek  Bandar  Lampung. MAHESA: Malahayati Health Student Journal , 2 (3), 564–575.
Tsegaye, A., Miessele, T., Tilahun, T., Hailu, E., Sahlu, T., Doorly, R., Fontanet, A. L., & Rinke, T. F. (1999). Immunohematological Reference Ranges for Adult Ethiopians. Clinical And Diagnostic Laboratory Immunology , 6 (1), 410–414.
Wahdaniah, & Tumpuk, S. (2018). Perbedaan Penggunaan Antikoagulan K2edta Dan K3edta Terhadap  Hasil  Pemeriksaan  Indeks  Eritrosit. Jurnal  Laboratorium  Khatulistiwa , 2 (2), 114–118.