Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048 DOI: http://dx.doi.org/10.20473/bikfar.v8i1.31209
Cite this as: Nuril Fikriyah, Isnaeni, Asri Darmawat (2021 Cite this as: Sela Mustika Sari1, Arista Wahyu Ningsih1, Farida Anwari1, Iif Hanifa Nurrosyidah*1 (2021),  Karakterisasi Yogurt Kacang Hijau Dan Kacang Merah yang  Diperkaya Madu Dan Aktivitasnya Terhadap Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus, 8 (1), 20 -26, 8 (1), 28 -33
This is an open access article under the CC BY-SA license ( http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ )

## Aktivitas Anti Oksidan dan Daya Hambat Ekstrak Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) Terhadap Methicillin Resistant Stasphilococcus Aureus (MRSA)
Antioxidant and inhibitory activity of Roselle Extract ( Hibiscus sabdariffa L.) against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
Nuril Fikriyah 1 , Isnaeni1*, Asri Darmawat 1
1Departemen Ilmu Kefarmasian, Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, Gedung Nanizar Zaman Joenoes, Kampus C Unair Jl. Mulyorejo, Surabaya 60115, Indonesia
*Corresponding author E - mail: isnaeni@ff.unair.ac.id
Article History
Received: 12 juli 2020; Received in Revision: 23 Agustush 2020; Accepted: 1 Oktobr 2020

## ABSTRACT
Background: Hibiscus sabdariffa known as roselle, which belongs to the family Malvaceae, grows in sub-tropical and tropical region including Indonesia. Several studies have reported the benefits of roselle for health. Roselle extract has been shown to have antibacterial effect as a support for antibacterial therapy, especially for case of antibiotic resistance, and antioxidant effect which can neutralize free radicals. Purpose: The aim of this study was obtaining  the  minimum  inhibitory  concentration  (MIC)  and  inhibition  concentration  (IC50)  of  roselle  extract. Methods: Antibacterial effect of roselle extract against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) was tested  in  nutrient  agar  media  using  diffusion  method.  Antioxidant  activity  of  roselle  extract  was  performed  by DPPH.  The  violet  color  of  DPPH  solutions  that  was  reduced  by  roselle  extract  were  measured  using  visible spectrophotometer at the wavelength of 516 nm. Result: The result of this study obtained the (MIC) and IC50 of roselle extract were 2,5% and 1251±202,32 ppm, respectively. Conclusion: It can be concluded that roselle extract have antibacterial effect against MRSA and antioxidant effect.
Keywords  :  roselle  extract  ,  antibacterial,  good  health  and  well-being,  antioxidant,  Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus

## ABSTRAK
Latar Belakang: Hibiscus sabdariffa atau lebih dikenal dengan sebutan rosela, termasuk famili Malvaceae, banyak ditemukan di daerah sub-tropis hingga tropis termasuk Indonesia. Beberapa penelitian telah melaporkan manfaat yang dimiliki rosela untuk kesehatan. Ekstrak rosela terbukti memiliki efek antibakteri yang dimanfaatkan sebagai terapi pendukung untuk terapi antibakteri khususnya pada kasus resistensi dan efek antioksidan yang bermanfaat untuk menetralisir radikal bebas. Tujuan: Penelitian ini bertujuan menentukan nilai konsentrasi hambat minimal (KHM) dan IC50 ekstrak bunga rosela. Metode: Uji efek antibakteri ekstrak bunga rosela terhadap Methicillin- Resistant  Staphylococcus  aureus  (MRSA)  dilakukan  dalam  media  nutrient  agar  menggunakan  metode  difusi- sumuran. Uji efek antioksidan ekstrak bunga rosela dilakukan menggunakan metode uji DPPH. Warna violet DPPH yang  tereduksi  oleh  ekstrak  diukur  menggunakan  Spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  516  nm. Hasil: Nilai KHM dan IC50 ekstrak adalah 2,5% dan 1251±202,32 ppm. Kesimpulan: berdasarkan hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa ekstrak bunga rosela memiliki efek antibakteri terhadap MRSA dan efek antioksidan.
Kata  kunci:  ekstrak  bunga  rosela,  antibakteri,  kesehatan  dan  kesejahteraan,  antioksidan,  Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA)

## Research Article
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048

## Pendahuluan
Indonesia  adalah  negara  yang  dikenal  dengan kekayaan  floranya  yang  sangat  beragam. Keanekaragaman  ini  tidak  hanya  dimanfaatkan untuk  kebutuhan  pangan  namun  juga  sebagai obat  tradisional.  Menurut  pernyataan  WHO, sebanyak 65% penduduk di negara maju dan 80 %  penduduk  di  negara  berkembang  telah menggunakan  obat  herbal.  Hal  inilah  yang menjadikan  penelitian  terkait  tanaman  obat, perkembangan obat tradisional baru serta isolasi senyawa  aktif  dalam  tanaman  obat  terus berkembang.  Di  Indonesia  terdapat  lebih  dari puluhan  ribu  jenis  tanaman  dengan  berbagai spesies  yang  tersebar  di  berbagai  daerah  dan 7000  diantaranya  merupakan  tanaman  yang memiliki khasiat obat (Jumiarni and Komalasari, 2017).  Salah  satu  dari  berbagai  tanaman berkhasiat  obat  tersebut  adalah  Hibiscus sabdariffa  atau  Rosela,  yang  merupakan  salah satu  tanaman  dari  keluarga  kapas-kapasan  atau Malvaceae  (Masnadi,  2019).  Tanaman  Rosela dapat  ditemukan  di  berbagai  daerah  tropis  atau sub-tropis seperti Indonesia, Malaysia, India, dan lain-lain (Dhar et al., 2015). Habitat asli tanaman ini  berasal  dari  Nigeria,  tetapi  tumbuh berkembang  di  seluruh  dunia,  terutama  daerah tropis.  Sejak  2013,  terdapat  empat  varietas unggul  rosela  yang  telah  disetujui  oleh  Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat (BALITTAS)  antara  lain  Roselindo  1  (Rosela Merah),  Roselindo  2  (Jamaika/  Rosela  Ungu Cumi), Roselindo 3 (Rosela Hijau), Roselindo 4 (Rosela  Ungu  biasa)  (Murianingrum,  2013). Perbedaan warna pada tiap varietas dipengaruhi oleh  kandungan  senyawa  antosianin.  Merah gelap  atau  ungu  memiliki  kadar  antosianin tertinggi  diikuti  oleh  warna  merah,  sedangkan warna  hijau  memiliki  kadar  antosianin  yang sangat rendah (Hussein et al., 2010). Roselindo 2 dinilai  sebagai  varietas  rosela  yang  memiliki kadar antosianin tertinggi dibandingkan varietas lain (Budi et al., 2018).
Seluruh bagian tanaman rosela mulai dari daun, buah,  biji,  batang,  akar,  dan  utamanya  kelopak bunga telah diketahui  memiliki banyak manfaat (Nurnasari  and  Khuluq,  2018).  Salah  satu  yang paling  dikenal  adalah  aktivitas  antibakteri. Rosela telah terbukti memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  beberapa  bakteri  uji,  salah satunya  adalah  Methicillin-Resistant  Staphylo- coccus aureus (MRSA). MRSA adalah kelompok S.  aureus  yang  resisten  terhadap  antibiotik methicillin  dan  antibiotik  golongan  β-laktam (Darna, Turnip and Rahmawati, 2018). Kejadian infeksi MRSA terus meningkat. Prevalensi kasus infeksi  MRSA  di  Indonesia  mencapai  23,5%
pada  tahun  2006  (Sulistiyaningsih,  2010). Ekstrak  air  rosela  telah  terbukti  memiliki aktivitas antibakteri yang efektif terhadap MRSA dengan nilai konsentrasi hambat minimal (KHM) sebesar 2,5% (Ramadiansyah, 2016).
Beberapa  golongan  senyawa  yang  berperan dalam  aktivitas  biologi  ekstrak  bunga  rosela adalah  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan  tanin (Pacôme  et  al.,  2014).  Senyawa  alkaloid  yang mengandung  gugus-gugus  basa  dapat  bereaksi dengan asam-asam  amino penyusun dinding sel bakteri  serta  DNA  bakteri  sehingga  dapat merubah struktur dan susunan asam amino serta DNA  tersebut  yang  akan  mengakibatkan perubahan  keseimbangan  genetik  (Darsana, Besung  and  Mahatmi,  2012).  Kandungan flavonoid  memiliki  aktivitas  antibakteri  dengan mekanisme  yang  dibagi  menjadi  3  yaitu menghambat sintesis asam nukleat, menghambat fungsi membran sel, dan menghambat metabolisme energi. Saponin dapat menurunkan tegangan  permukaan  dinding  sel  bakteri  dan merusak permeabilitas membran serta menyebabkan kebocoran protein dan enzim dari dalam sel (Madduluri, Rao and B.Sitaram, 2013). Sedangkan tanin mampu menghambat proliferasi sel  bakteri  dengan  menghambat  enzim  yang digunakan  untuk  metabolisme  oleh  sel  bakteri. Tanin juga mengganggu polipeptida dinding sel sehingga  pembentukan  dinding  sel  bakteri menjadi kurang sempurna.
Selain berfungsi sebagai antibakteri, rosela juga memiliki  beberapa  aktivitas  biologi  lainnya, salah  satunya  adalah  antioksidan.  Antioksidan adalah suatu senyawa baik sintetik maupun alami yang  dapat  mencegah  atau  menunda  beberapa jenis kerusakan sel melalui mekanisme pencegahan  terjadinya  oksidasi  (Sayuti  and Yenrina, 2015). Antioksidan membantu mengatasi  atau  mencegah  terjadinya  stress oksidatif akibat adanya radikal bebas berlebih di dalam  tubuh.  Adanya  zat  antioksidan  dalam rosela dapat menetralisir radikal bebas. Senyawa yang sering dikaitkan dengan aktivitas antioksidan rosela adalah antosianin dan vitamin C.  Sumber  vitamin  C  dapat  ditemui  pada  buah dan sayur serta beberapa tanaman lain termasuk rosela. Dalam 100 g kelopak bunga rosela segar terdapat 6,7 mg asam askorbat (Mahadevan and Kamboj,  2009).  Salah  satu  penelitian  yang dilakukan oleh Simanjuntak (2019)
menunjukkan  bahwa  ekstrak  air  kelopak  rosela memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 terhadap  radikal  bebas  DPPH  sebesar  476  ppm (Simanjuntak, 2019).
Penelitian  ini  bertujuan  menentukan  nilai konsentrasi  hambat  minimal  (KHM)  ekstrak bunga  rosela,  menggunakan  bakteri  uji  MRSA
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
dan  Uji  efek  antioksidan  ekstrak  bunga  rosela menggunakan metode uji DPPH.

## Bahan dan Metode

## Bahan
Ekstrak  etanol-air  (kering)  bunga  rosela, didapatkan  dari  salah  satu  industri  farmasi. Vankomisin,  metanol  p.  a.  (Merck), nutrient agar (Oxoid), NaCl p.a. (Merck), DPPH p. a., air suling,  MRSA 113749  diperoleh  dalam  bentuk isolate  stock dari Institute  of  Tropical  Disease

## Universitas Airlangga.
Cara kerja

## Pemeriksaan kualitatif ekstrak bunga rosela
Pemeriksaan  kualitatif  ekstrak  bunga  rosela meliputi uji organoleptis secara visual mengenai bentuk,  warna,  bau;  dan  pemeriksaan  nilai  pH menggunakan pH-meter.

## Pengamatan  efek  antibakteri  ekstrak  bunga rosela
Penetapan KHM ekstrak bunga rosela dilakukan menggunakan metode difusi-sumuran
menggunakan media nutrient agar .

## Pembuatan media nutrient agar
Ditimbang  serbuk  agar  nutrient  sebanyak  28  g dan  dilarutkan  dalam  1  L  air  suling  sambil dipanaskan  hingga  serbuk  agar  nutrient melarut sempurna.  Media  kemudian  diisikan  ke  dalam beberapa tabung reaksi dengan sebagian volume ± 15 ml untuk base layer , sebagian volume ± 10 ml  untuk seed  layer, dan  agar  miring  untuk peremajaan  bakteri.  Media  disterilkan  dengan otoklaf  pada  suhu  121 ℃ selama  15  menit (Bridson, 2006).

## Pembuatan inokulum MRSA
MRSA diambil dari isolate stock dan dibiakkan dalam media NA selama 24 jam pada suhu 37 ℃ . Hasil  biakan  dibuat  suspensi  dengan  larutan NaCl  0,9%  steril.  Transmitan  suspensi  diukur menggunakan  spektro-fotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  580  nm  menggunakan blanko larutan NaCl 0,9% (dilakukan pengenceran  bila  diperlukan)  hingga  diperoleh transmitan sebesar 25%.

## Pembuatan  dan  pengenceran  larutan  uji antibakteri
Ditimbang ekstrak bunga rosela sebanyak 1 gram dan dilarutkan dalam air suling hingga mencapai volume  10  ml  (konsentrasi  larutan  10%).  Lalu larutan  ekstrak  10%  dipipet  5  ml  dan ditambahkan air suling hingga mencapai volume 10 ml (konsentrasi 5%). Lalu larutan ekstrak 5% dipipet  5 ml dan ditambahkan air suling hingga
mencapai volume 10 ml (konsentrasi 2,5%). Lalu larutan  ekstrak  2,5%  dipipet  5  ml  dan ditambahkan air suling hingga mencapai volume 10 ml (konsentrasi 1,25%). Lalu larutan ekstrak 1,25%  dipipet  5  ml  dan  ditambahkan  air  suling hingga  mencapai  volume  10  ml  (konsentrasi 0,625%).

## Penetapan KHM ekstrak bunga rosela
Media NA sebanyak ± 15 ml (45 – 50 ℃ ) dituang ke  dalam  cawan  petri  ( ∅ 20  cm)  secara  aseptik lalu  diamkan  hingga  memadat  ( base  layer ). Kemudian  diambil  8 𝜇 l  inokulum  MRSA dan dimasukkan  dalam ± 10  ml  media  agar  nutrien (45  –  50 ℃ ),  di  vorteks,  lalu  dituang  ke  dalam base  layer dan  diamkan  hingga  memadat  ( seed layer ). Media yang terbentuk dilubangi menggunakan  pencetak  lubang  steril  sebanyak 18 lubang (3 untuk kontrol positif dan 15 untuk sampel). Kontrol  positif yang digunakan adalah vankomisin. Sampel dan kontrol positif kemudian dimasukkan ke dalam masing-masing lubang  lalu  diinkubasi  pada  suhu  37 ℃ selama ± 24  jam.  Dilakukan  pengamatan  terhadap diameter zona hambat yang terbentuk menggunakan jangka sorong. Konsentrasi terkecil yang masih dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  uji  ditetapkan  sebagai KHM (Isnaeni, Hendradi and Zettira, 2020).

## Pengamatan  efek  antioksidan  ekstrak  bunga rosela
Pengamatan terhadap efek antioksidan dilakukan menggunakan  metode  peredaman  radikal  bebas DPPH  dan  dilakukan  pengukuran  absorbansi menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada 𝜆 = 516 nm (Simanjuntak, 2019).

## Pembuatan larutan DPPH
Ditimbang DPPH sebanyak 5 mg lalu dilarutkan dalam metanol hingga volume mencapai 25,0 ml (konsentrasi  larutan  induk  DPPH  200  ppm). Kemudian dipipet 5 ml dan ditambahkan metanol hingga  volume  mencapai  25,0  ml  (konsentrasi larutan DPPH 40 ppm).

## Pembuatan  dan  pengenceran  larutan  uji antioksidan
Ditimbang ekstrak bunga rosela sebanyak 1 gram dan dilarutkan dalam air suling hingga mencapai volume 100 ml (konsentrasi larutan 10000 ppm). Lalu larutan dipipet 0,5 ml; 1,0 ml; 1,5 ml; 2 ml; dan  2,5  ml  kemudian  ditambahkan  air  suling hingga  volume  mencapai  25  ml  sehingga didapatkan pengenceran terhadap larutan tersebut  dengan  seri  konsentrasi  200,  400,  600, 800, dan 1000 ppm.
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
Uji DPPH dan penentuan nilai IC 50 Pengamatan  efek  antioksidan  diawali  dengan pengujian larutan DPPH sebagai kontrol negatif. Dipipet  4  ml  larutan  DPPH,  disimpan  selama ± 30  menit  pada  ruangan  gelap  lalu  diamati absorbansinya.  Selanjutnya  adalah  uji  efek antioksidan ekstrak bunga rosela dalam berbagai konsentrasi. Dipipet 0,5 ml larutan ekstrak bunga rosela  (200,  400,  600,  800,  1000  ppm), ditambahkan 3,5 ml larutan DPPH lalu dikocok. Campuran  larutan  disimpan  selama  30  menit pada  ruangan  gelap  lalu  diamati  absorbansinya. Hasil  pengamatan  dinyatakan  dalam  persentase inhibisi menggunakan rumus:
%𝑖𝑛𝑖ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 = 𝐴𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴𝑏𝑠 𝑢𝑗𝑖
𝐴𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙
× 100%
Keterangan: Abs = absorbansi
Setelah perhitungan %inhibisi, dilakukan penentuan  persamaan  regresi  linier  dengan  x adalah  konsentrasi  dan  y  adalah  %inhibisi.
Setelah didapatkan persamaan regresi, dimasukkan  nilai  y  =  50  yang  menunjukkan kondisi  inhibisi  terhadap  50%  DPPH.  Nilai  x yang  didapatkan  adalah  konsentrasi  larutan ekstrak bunga rosela yang dapat meredamt 50% dari total DPPH (IC 50 ).

## Hasil dan Pembahasan
Dari  hasil  pemeriksaan  kualitatif  ekstrak  bunga rosela  didapatkan  bentuk  serbuk  dengan  warna coklat kemerahan dan tidak berbau (Tabel I) serta nilai  pH  rata-rata  ekstrak  sebesar  2,43 ± 0,02 (Tabel  II).  Hasil  ini  mendekati  pustaka  yang merupakan penelitian sebelumnya, yakni 2,537 ± 0,004  (Isnaeni,  Hendradi  and  Zettira, 2020).  Nilai  pH  yang  rendah  ini  menunjukkan ekstrak  air  rosela  memiliki  tingkat  keasaman yang  cukup  tinggi  karena  diketahui  terdapat banyak  kandungan  asam  organik  di  dalamnya.
Kandungan asam-asam organik ini juga memiliki peran  terhadap  aktivitas  antibakteri  rosela  (Da- Costa-Rocha et al. , 2014).
Pada  uji  antibakteri  ekstrak  bunga  rosela terhadap  MRSA  dan  vankomisin,  ditemukan adanya  zona  hambat  pada  konsentrasi  ekstrak 10%; 5%; 2,5% (Tablet III). Nilai KHM ekstrak rosela  adalah  2,5%  yang  berarti  penggunaan ekstrak  rosela  pada  konsentrasi  tersebut  sudah dapat menghambat pertumbuhan bakteri MRSA. Nilai  KHM  yang  sama  juga  ditemukan  pada penelitian tahun 2016 oleh Errory (Ramadiansyah, 2016).
Klasifikasi  keefektifan  aktivitas  antibakteri berdasarkan  zona  hambat  yang  terbentuk dikemukakan  oleh  Davis  dan  Stout  (1971) dimana klasifikasi respon hambatan pertumbuhan bakteri berdasarkan diameter zona bening dibagi menjadi 4 kelompok yaitu respon lemah  (diameter  5  mm),  sedang  (diameter  5-10 mm),  kuat  (10-20  mm),  dan  sangat  kuat (diameter  20  mm).  sehingga  berdasarkan klasifikasi tersebut respon hambatan pertumbuhan  bakteri  MRSA  pada  nilai  KHM 2,5% tergolong kuat. Pengamatan efek antioksidan dilakukan menggunakan metode uji DPPH. Efek antioksidan ekstrak ditunjukkan oleh persentase inhibisi ekstrak terhadap DPPH (Tabel IV).
Sebelum  mendapatkan  data  persen  inhibisi, absorbansi sampel diukur pada panjang gelombang  maksimal  (516  nm)  terlebih  dahulu untuk mengetahui jumlah DPPH yang masih ada atau tidak teredam. Perolehan absorbansi sampel kemudian  dikonversi  ke  nilai  %inhibisi  lalu dilakukan perhitungan IC 50 . Nilai IC 50 dalam uji DPPH  menunjukkan  konsentrasi  saat  sampel berhasil  meredam  50%  DPPH  dan  merupakan
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
konsentrasi  efektif  aktivitas  antioksidan  suatu sampel  (Tristantini et  al. ,  2016).  Semakin  kecil nilai IC 50 maka semakin tinggi efek antioksidan yang dimiliki oleh sampel. Nilai IC 50 didapatkan dengan  cara  menentukan  persamaan  regresi (konsentrasi  vs  %inhibisi)  lalu  mencari  nilai  x dengan  memasukkan  nilai  y=50.  Pada  hasil  uji antioksidan  replikasi  1  didapatkan  persamaan regresi y= 0,043x – 11,269 (r= 0,9377) sehingga didapatkan  nilai  IC 50 sebesar  1425  ppm.  Pada replikasi  2  didapatkan  persamaan  regresi  y= 0,067x  –  18,964  (r=  0,8524)  dan  menghasilkan nilai  IC 50 sebesar  1029  ppm.  Sedangkan  pada replikasi  3  didapatkan  persamaan  regresi  y= 0,046x – 9,753 (r= 0,9371) dan nilai IC 50 sebesar 1299 ppm. Berdasarkan nilai IC 50 ketiga replikasi didapatkan  IC 50 rata-rata  yakni  1251 ± 202,32 ppm.  Pada  konsentrasi  1251  ppm  terdapat ekstrak  sebanyak  1251  mcg  tiap  ml,  sehingga pada  3,5  ml  sampel  yang  ditambahkan  terdapat sebanyak  4478,5  mcg.  Nilai  IC 50 yang didapatkan dalam penelitian ini berbeda dengan penelitian  yang  pernah  dilakukan  oleh  (Liuqing et  al. ,  2012),  yaitu  ekstrak  air  rosela  memiliki nilai  IC 50 sebesar  486,52  ppm.  Penelitian  lain oleh Simanjuntak (2019) mendapatkan nilai IC 50 ekstrak air kelopak rosela sebesar 476 ppm. Pada penelitian  ini  didapatkan  hasil  uji  antioksidan yang  cukup  variatif  dan  kurang  rendah  dalam linearitas  berdasarkan  nilai  korelasi  (r)  yang didapatkan pada persamaan regresi tiap replikasi. Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh  faktor-faktor tertentu.  Beberapa  diantaranya  adalah  bentuk sampel  uji  yang  merupakan  serbuk  sehingga didalamnya  terkandung  bahan  eksipien  yang dapat  memengaruhi  hasil  uji.  Selain  itu penggunaan  pelarut  air  dan  metanol  dalam prosedur  dapat  menyebabkan  reaksi  tertentu yang  tidak  teramati  secara  visual  namun memengaruhi  hasil  analisis.  Faktor  lain  yang dapat memengaruhi hasil uji adalah pelaksanaan prosedur penelitian yang dapat berupa kesalahan pelaksanaan  prosedur  kerja  atau  prosedur  kerja yang  dilakukan  memiliki  tingkat  ketidaktelitian yang cukup tinggi sehingga sangat memengaruhi hasil penelitian kuantitatif seperti penentuan nilai IC 50 dan  KHM.  Solusi  agar  hal  ini  dapat terhindari  adalah  dengan  melakukan  prosedur preparasi  sampel  yang  dapat  meminimalkan kontaminan  yang  terlibat  seperti  dengan melakukan sentrifugasi  dan penyaringan. Selain itu  perlu  memerhatikan  ketelitian  alat  yang digunakan  dan  memastikan  untuk  menyusun prosedur  kerja  yang  dapat  meminimalkan kesalahan hasil uji seperti mengganti pemipetan 2  kali  dengan  pemipetan  sekali  menggunakan alat dengan ketidaktelitian yang lebih rendah.

## Kesimpulan
Ekstrak  bunga  rosela  memiliki  efek  antibakteri terhadap MRSA dengan nilai KHM sebesar 2,5% serta efek antioksidan dengan nilai IC 50 terhadap radikal bebas DPPH sebesar 1251 ± 202,32 ppm.

## Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian,  disarankan  agar pada penelitian efek antibakteri terhadap MRSA dilakukan uji rasio potensi antara ekstrak bunga rosela  dengan  vankomisin,  serta  pada  uji antioksidan  ekstrak  bunga  rosela  menggunakan metode  uji  DPPH  dilakukan  optimasi  prosedur kerja  agar  dapat  menghasilkan  hasil  yang optimal.

## Daftar Pustaka
Budi,  U.  S. et  al. (2018) Varietas  Unggul
Tanaman Rosela , BALITTAS -
Kementrian Pertanian .
Bridson,  E.  Y.  (2006)  ‘The  Oxoid  Manual  9th Edition’.
Da-Costa-Rocha,  I. et  al. (2014)  ‘Hibiscus sabdariffa  L.  -  A  phytochemical  and pharmacological review’,
Food
Chemistry ,  165,  pp.  424–443.  doi:
10.1016/j.foodchem.2014.05.002. Darna,  Turnip,  M.  and  Rahmawati  (2018) ‘Identifikasi Bakteri Anggota Enterobacteriaceae pada Makanan
Tradisional Sotong Pangkong’, Jlabmed ,
2(2), pp. 6–12.
Darsana, I. G. O., Besung, I. N. K. and Mahatmi, H.  (2012)  ‘Potensi  Daun  Binahong (Anredera  Cordifolia  (Tenore)  Steenis) Dalam Menghambat
Pertumbuhan
Bakteri Escherichia Coli Secara in Vitro’,
Indonesia  Medicus  Veterinus, 1(3),  pp.
337–351.
Dhar, P. et al. (2015)  ‘Chemistry  , phytotechnology  ,  pharmacology  and nutraceutical  functions  of  kenaf  ( Hibiscus  cannabinus  L  .)  and  roselle  ( Hibiscus  sabdariffa  L  .)  seed  oil :  An overview’, Industrial Crops & Products , 77, pp. 323–332. doi: 10.1016/j.indcrop.2015.08.064. Hussein,  R.  M. et  al. (2010)  ‘Biochemical  and molecular characterization of  three colored types of roselle Biochemical and molecular characterization of  three colored  types  of  roselle  (  Hibiscus sabdariffa  L  .)’, Journal  of  American Science , 6(11), pp. 726–733.
Isnaeni,  Hendradi,  E.  and  Zettira,  N.  Z.  (2020) ‘Inhibitory  Effect  of  Roselle  Aqueous Extracts- HPMC 6000 Gel on the Growth
Berkala Ilmiah Kimia Farmasi, Vol.8 No.1 Juni 2021 Hal 28 - 33 P-ISSN: 2302-8270 E-ISSN: 2808-1048
of Staphylococcus Aureus ATCC 25923’, Turk  J  Pharm  Sci ,  17(2),  pp.  190–196. doi: 10.4274/tjps.galenos.2019.88709. Jumiarni,  W.  O.  and  Komalasari,  O.  (2017)
‘Eksplorasi  Jenis  Dan  Pemanfaatan Tumbuhan
Obat  Pada  Masyarakat  Suku  Muna  Di Permukiman  Kota  Wuna’, Traditional Medicine Journal , 22(1), pp. 45–56.
Liuqing, Y. et  al. (2012) ‘Antioxidant  Capacity of  Extract  from  Calyx  Fruits  of  Roselle (Hibiscus  sabdariffa  L.)’, African Journal  of  Biotechnology ,  11(17),  pp. 4063–4068.
Madduluri, S., Rao, K. B. and B.Sitaram (2013)
‘In  Vitro  Evaluation  of  Antibacterial Activity of Five Indigenous Plants Extract Against  Five  Bacterial  Pathogens  of Human’, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical
Sciences , 5(4), pp. 679–684. Mahadevan, N. and Kamboj, P. (2009) ‘Hibiscus sabdariffa Linn . – An overview’, Natural Product Radiance , 8(1), pp. 77–83.
Masnadi  (2019)  ‘Keanekaragaman  Family
Malvaceae  Di  Hutan  Taman  Eden  100 Sebagai  Bahan  Perangkat  Pembelajaran Biologi Masnadi : Keanekaragaman Family Malvaceae di Hutan Taman Eden 100  sebagai  Bahan  Perangkat  1  .  Latar Belakang Hutan di kawasan Danau Toba merupakan  potensi’, Biology  Education Science & Technology (BEST) Journal , 2(2), pp. 32–41.
Murianingrum,  M.  (2013) Pelepasan  Varietas Baru Rosela Minuman (Hibiscus sabdariffa  var.  sabdariffa) .  Available  at:
http://www.balittas.litbang.pertanian.go.i d.
Nurnasari, E. and Khuluq, A. D. (2018) ‘Potensi Diversifikasi  Rosela  Herbal  (Hibiscus sabdariffa L.) untuk Pangan dan Kesehatan’, Buletin Tanaman Tembakau,  Serat  &  Minyak  Industri , 9(2), p. 82. doi: 10.21082/btsm.v9n2.2017.82-92.
Pacôme, O. A. et al. (2014) ‘Phytochemical and Antioxidant Activity of Roselle (Hibiscus Sabdariffa  L.)  Petal  Extracts’, Research Journal  of  Pharmaceutical  ,  Biological and  Chemical  Sciences ,  5(1453),  pp.
1453–1465.
Ramadiansyah,  E.  (2016)  ‘Efektivitas  Ekstrak Bunga  Rosella  (Hibiscus  sabdariffa  L.) terhadap  Bakteri  Methicillin-resistant Staphylococcus aureus’.
Sayuti,  K.  and  Yenrina,  R.  (2015)  Antioksidan Alami  dan  Sintetik.  Padang:  Andalas University Press.
Simanjuntak,  H.  D.  (2019)  ‘Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol  dan  Ekstrak Air Kelopak Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil)’.
Sulistiyaningsih  (2010) Uji Kepekaan Beberapa Sediaan  Antiseptik  terhadap  Bakteri
Staphylococcus
aureus dan Staphylococcus aureus Resisten Metisilin ( MRSA ) . UNIVERSITAS PADJADJARAN. Tristantini, D. et al. (2016) ‘Pengujian Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode DPPH  pada  Daun  Tanjung  (  Mimusops elengi L )’, pp. 1–7.