EKSTRAK BUAH MANGROVE ( Sonneratia alba ) PADA Artemia salina DALAM MENGHAMBAT INFEKSI Vibrio harveyi TERHADAP SINTASAN BENUR UDANG WINDU
( Penaeus monodon ) SECARA INVIVO
MANGROVE FRUIT ( Sonneratia alba ) EXTRACT TO Artemia salina INHIBITING THE INFECTION OF Vibrio harveyi IN SURVIVAL

## RATE Penaeus monodon BY INVIVO
Jimmy Cahyadi 1 ; Gloria Ika Satriani 1 ; Ery Gusman 1 ; Sabri 1 1 Program Studi Akuakultur Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Borneo Tarakan jim.borneo@gmail.com

## ABSTRAK
Penyakit  vibriosis Vibrio  harveyi sering  menjatuhkan  produksi  udang  windu  pada tambak tradisional pesisir Kalimantan Utara. Tujuan penelitian ini mengetahui senyawa aktif  ekstrak  buah Sonneratia  alba menghambat  infeksi Vibrio  harveyi diuji  tantang pada larva udang windu stadia post larva 12 melalui bioerichment pakan alami Artemia salina . Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dilakukan dengan Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  4  perlakuan  dan  3  kali  ulangan.  Hasil  penelitian  menunjukkan ekstrak buah mangrove mengandung Alkaloid, Fenol hidrokuinon, Flavonoid, Saponin, Steroid dan Tanin.  Bioenrichment Artemia salina berhasil meningkatkan kelangsungan hidup  larva  udang  windu  78,33%  pada  perlakuan  III  (20  ppm).    Hasil  pengukuran kualitas air menunjukkan kisaran pada batas normal bagi kehidupan benur udang windu ( Penaeus monodon ).
Kata Kunci : Udang Windu, Artemia salina , Vibrio harveyi, Ekstrak Sonneratia sp.

## ABSTRACT
Vibriosis  disease  Vibrio  harveyi  often  drops  Penaeus  monodon  production  on  the traditional coastal ponds of North Kalimantan. The purpose of this study was to find out the  active  compound  extract  of  Sonneratia  alba  fruit  inhibiting  the  infection  of  Vibrio harveyi, which was tested on the larvae of Penaeus monodon in post larvae 12 through the  bioerichment  of  natural  feed  Artemia  salina.  This  study  used  an  experimental method performed with a Completely Randomized Design (CRD) of 4 treatments and 3 replications.  The  results  showed  mangrove  fruit  extracts  containing  alkaloids,  phenol hydroquinone, flavonoids, saponins, steroids and tannins. Artemia salina bioenrichment succeeded in increasing the survival of  Penaeus monodon larvae 78.33% in treatment III  (20  ppm).  The  results  of  water  quality  measurements  indicate  the  range  at  the normal limit for the life of the Penaeus monodon larvae.
Keywords : Penaeus monodon, Artemia salina, Vibrio harveyi, Extract Sonneratia alba

## PENDAHULUAN
Upaya  pencapaian  hasil  produksi  pada usaha  budidaya  udang  windu  ( Penaeus monodon ) nampaknya masih menemukan berbagai permasalahan. Salah satu permasalahan adalah tingginya tingkat serangan penyakit baik yang  bersifat  infeksius.  Berbagai  jenis penyakit  pada  budidaya  udang  windu sebagaian besar diakibatkan oleh infeksi bakteri Vibrio  harveyi (Trianto et  al ., 2004).
Serangan  penyebab  vibriosis  tersebut sering terjadi pada stadia nauplius, stadia zoea ,  stadia mysis dan  kadang-kadang post  larva  saat  pemeliharaan  di  tambak sampai  sekitar  umur 1-1,5  bulan
(Saptiani et  al., 2012).  Bakteri Vibrio harveyi umumnya  bersifat  patogen oportunistik,  yaitu  organisme  yang dalam  keadaan  normal  ada  dalam lingkungan
pemeliharaan
dan berkembang dari sifat saprofitik menjadi patogenik,  apabila  kondisi  lingkungan dan  inang  memburuk  (Diggles et  al ., 2000).
Beberapa  penelitian  penggunaan  bahan herbal  atau  fitofarmaka  telah  dilakukan pada  biota  akuatik,  seperti  yang  telah dilakukan  Maryani et  al., (2002)  yaitu peneliti  menggunakan  ekstrak  kelopak dan buah mangrove
Sonneratia caseolaris sebagai antibakterial terhadap infeksi  bakteri Vibrio  harveyi pada udang windu ( Penaeus  monodon ).
Ekstrak  pasta  kental  etanol Sonneratia alba memiliki  kandungan  senyawa  aktif berupa alkaloid , flavonoid,  triterpenoid, karbohidrat,  karotenoid,  tannin, dan kumarin berdasarkan  penelitian  Satriani,
et al. (2017).  Analisa fitokimia terhadap sampel  ekstraksi  etanol  buah  pedada diketahui  bahwa  bahan  aktif  yang terkandung dalam pasta tersebut berpeluang sebagai kandidat anti bakteri. Beberapa  penelitian  melaporkan  bahwa
mangrove  memiliki  kemampuan  dalam menghambat    pertumbuhan  bakteri V. Harveyi. Naiborhu et al., (2002) menyatakan bahwa ekstrak daun,
kelopak,  buah  dan  biji Sonneratia caseolaris membunuh  dan  menghambat pertumbuhan bakteri V. harveyi .
Menurut  Satriani et  al, (2017)  hasil pengujian fitokimia ekstrak buah pedada
(Sonneratia alba) , hanya senyawa saponin  yang  tidak  terkandung  pada ekstrak  buah  pedada.    Umumnya senyawa saponin terkandung pada tanaman  yang  memiliki  cita  rasa  pahit seperti  daun  pepaya  dan  buah  pare sedangkan  buah  pedada  memiliki  cita rasa  asam  yang  hampir  serupa  dengan cita rasa asam jawa.
Selanjutnya  pada  pengujian  bakteri V.harveyii secara in  vitro di  media selektif  TCBSA  melalui  teknik  difusi kertas cakram (yang direndam konsentrasi  ekstrak  etanol  buah S.alba ) terhadap pertumbuhan bakteri V. harveyi
menunjukkan mampu menghasilkan daya  hambat  yang  ditandai  dengan terbentuknya  zona  bening  berdiameter sebesar 2,50 ± 0,31 cm pada konsentrasi 2%  (Satriani, et al., 2017).
Berdasarkan  permasalahan  dan  upaya yang  ada  maka  penelitian  pengaruh ekstrak  buah  mangrove  ( Sonneratia alba )  sebagai  imunostimulan  terhadap bakteri Vibrio harveyi yang diaplikasikan  secara in  vivo pada  benur udang windu dilakukan. Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi manfaat ekstrak  buah  mangrove Sonneratia  alba dalam  menekan  penyakit  vibriosis  pada benur  udang  windu  melalui  pemberian bioenrichment Artemia  salina .

## METODOLOGI
Penelitian  ini  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan Universitas Borneo Tarakan  pada  awal  Tahun  2018.    Alat
dan  bahan  yang  digunakan  meliputi  : Evaporator, Autoclave Inkubator,  Oven Akuarium, Perlengkapan aerasi, Buah S. alba, TCBS, A.  salina,  V.  harveyi, Etanol,  NaCl,  Asam  sulfat  2N,  Pereaksi wagner,  FeCl 3 5%,    HCl  2N,  Asam asetat.  Prosedur Penelitian meliputi
a. Ekstraksi  simplisia.    Buah S.  alba segar  dan  muda  sebanyak  35  kg, dengan  kriteria  buah  berwarna  hijau muda dengan ukuran 2-3 cm.  Proses maserasi dilakukan dengan merendam simplisia ke dalam larutan etanol 96% dengan  perbandingan  simplisia  dan etanol  adalah  1:4.    Selanjutnya dilakukan  penyaringan  antara  larutan dan  ampas  simplisia  menggunakan kertas  saring  sehingga  diperoleh filtrat menggunakan alat rotary evaporator pada  suhu  40°C  untuk memisahkan  bahan  aktif  dan  pelarut etanol 96% sehingga diperoleh ekstrak  berbentuk  pasta  encer.  Pasta encer  yang  terbentuk  selanjutnya diuapkan  dengan  oven  pada  suhu 40°C  secara  konstan  selama  3x8  jam sampai diperoleh pasta kental S. alba (Puspitasari dan Proyogo, 2016).
b. Fitokimia. Pengujian fitokimia secara kualitatif
dilakukan untuk menjelaskan kandungan positif antibakterial simplisia meliputi Alkaloid, Fenol hidroquinon, Flavonoid dan Saponin mengacu
(Harbone, 1987) sementara uji
Steroid dan Tanin mengacu  pada (Indarto, 2011).
c. Bioenrichment
Artemia.
Bioenrichment pakan  alami Artemia
salina mengacu pada metode (Cahyadi et  al, 2017).    Kista  artemia ditimbang  sebanyak  0.5  gram  lalu ditetaskan dalam 1 liter air bersalinitas 32 mg/L dan diaerasi kuat selama  24  jam  kemudian  dipanen. Perendaman ekstrak
dengan konsentrasi pada P1 (kontrol), P2 (25
ppm),  P3  (20  ppm),  P4  (15  ppm).
Hasil  pengujian  ekstrak Sonneratia alba pada Artemia salina menunjukkan  hasil  LC 50 sebesar konsentrasi 20 ppm.
d. Benur  Udang  Windu.    Benur  udang windu (lokal) diperoleh dari hatchery pembenihan  di  Kota  Tarakan.  Benur udang  windu  yang  akan  digunakan dalam  penelitian  terlebih  dahulu diaklimatisasi selama 1-3 hari, hal ini bertujuan agar benur dapat beradaptasi dengan lingkungan barunya.  Benur  yang  sehat  terlihat aktif  bergerak  melawan  arus  dan apabila  diberi  pakan  benur  aktif memakan pakan yang diberikan.
e. Inokulasi V.  harveyi. Isolat  murni bakteri V.  harveyi yang  didapatkan dari  BPBAP  Jepara,  diremajakan kembali  kedalam  media  selektif TCBSA.    Secara  kualitatif  dilakukan analisis  nilai  (OD) Optical  Density menggunakan spektrofotometer dengan  panjang  gelombang  600  nm hingga diperoleh nilai > 0,600 asumsi paling  padat.    Selanjunya  biakan tersebut  diambil  0,1  ml  dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berisi 0,9 ml  APW  (Pengenceran  10 -1 sampai 10 -7 ) (Hadioetomo, 1990).
f. Pengamatan  Benur  Udang  Windu. Menggunakan 24 media yang bervolume  5  liter  yang  berisi  air  laut 2 Liter setiap media sebanyak 20 ekor PL  10.  Pemberian  pakan A.  salina ± 20  ekor/benur  selama  12  hari  dan dilanjutkan  uji  tantang  penginfeksian Vibrio  harveyi selama  48  jam meliputi  pengamatan  gelaja  klinis udang  windu  dan  hitung  jumlah kelangsungan hidup gelondongan udang windu.
g. Identifikasi  Bakteri.    Identifikasi bakteri  dilakukan  untuk  mengetahui jenis  bakteri  yang  menyerang  benur
udang windu pada saat penelitian dan pasca penelitian, selain dengan melihat  bentuk  dan  warna  koloni bakteri, Uji biokimia dengan pewarnaan  dilakukan  berdasarkan prosedur  (Holt, et  al .,  1994 dalam Cahyadi dan Gusman, 2009).
h. Kualitas Air.  Pengukuran kualitas air dilakukan setiap hari untuk mengetahui suhu, pH, salinitas kemudian  untuk  parameter  amoniak dilakukan pengukuran kadar amoniak pada  hari  ke  0,  5,  12    mengacu kepada SNI, No.06-6989.30-2005.
i. Desain  Penelitian.  Penelitian  ini menggunkan  metode  ekperimental yang  dilakukan  dengan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  terdiri  dari  4
perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan  1  :  Pakan  Artemia  tanpa perendaman 0 ppm (Kontrol)
Perlakuan 2 : Pakan yang ditambahkan ekstrak pedada 25 ppm Perlakuan 3 : Pakan yang ditambahkan ekstrak pedada 20 ppm Perlakuan 4 : Pakan yang
ditambahkan ekstrak pedada 15 ppm
j. Survival  Rate (SR)  Benur  Udang. Menurut  Effendie  (2002),  Kelulusan hidup  benur  udang  windu  dihitung dengan  menggunakan  rumus  sebagai berikut:
Keterangan :
SR  =  Kelangsungan Hidup (%)
Nt    =    Jumlah  benur  pada  akhir penelitian
No    =    Jumlah  benur  pada  awal penelitian
k. Analisis  Data.    Data  yang  diperoleh dari  hasil  penelitian  ini  dianalisis
secara  deskriptif  dan  statistik.  Untuk analisis statistik menggunakan metode Analisis Sidik Ragam/ANOVA  untuk  mengetahui pengaruh perlakuan terhadap
kelangsungan  hidup  benur  udang Windu.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia  secara kualitatif menunjukkan bahwa bioenrichment  A.  salina yang  diberikan perlakuan  perendaman  ekstrak  buah S.
alba menunjukkan hasil positif mengandung senyawa alkaloid,
flavonoid,  saponin,  steroid serta fenol sedangkan tanin negatif  atau  tidak terdeteksinya warna pada saat pengujian.
Hasil perendaman bioenrichment
artemia  selama  24  jam  menunjukkan bahwa  ekstrak S.  alba (Cahyadi et  al,
2018)  dapat  diserap  oleh  artemia.
Menurut Djariah, (1995) artemia memiliki  sifat  atau  cara  makan non selective  filter  feeder atau  penyaring tidak  selektif  sehingga  artemia  akan memakan  apa  saja  yang  dapat  dimakan disekitarnya  termasuk  ekstrak S.  alba . Menurut  Wibisono  (1989),  bahwa  nilai yang  aman  ( safety  concentration )  bagi organisme  dari  daya  racun  toksisitas adalah 10% dari nilai LC 50 .
Hasil  negatif  yang  dihasilkan  pada  uji tanin diduga karena kandungan senyawa tanin  merupakan  senyawa  yang  dapat mengikat  protein  membentuk  ikatan kompleks protein tanin sehingga artemia yang  memiliki  kandungan  protein  yang tinggi  tidak  dapat  menyerap  ekstrak S. alba (Zamsari, et  al .,  2012).    Pada artemia non bioenrichment juga terdapat beberapa  senyawa  yang  positif  sama yang  terkandung  dalam  ekstrak  buah S.
alba akan  tetapi  pada  senyawa steroid dan tanin negatif.    Beberapa  seyawa yang memiliki kemampuan dalam
menghambat pertumbuhan bakteri seperti  pada  senyawa alkaloid memiliki mekanisme  penghambatan  dengan  cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian sel tersebut (Juliantina, 2008).
Mekanisme  senyawa fenol sebagai antibakteri  pada  konsentrasi  rendah adalah dengan merusak membran sitoplasma  dan  dapat  menyebabkan kebocoran  dari  inti  sel,  sedangkan  pada konsentrasi tinggi senyawa fenol berkongulasi  dengan  protein  seluler sehingga aktivitas tersebut sangat efektif ketika  bakteri  dalam  tahap  pembelahan dimana  lapisan fosfolipid di  sekeliling sel  sedang  dalam  kondisi  sangat  tipis sehingga  senyawa fenol dapat  dengan mudah  merusak  isi  sel  (Volk  and Wheller, 1984)
Menurut Sabir (2005), Seyawa flavonoid memiliki  mekanisme  kerja  sebagai  anti bakteri yaitu dapat merusak permebialitas  dinding  sel  mikroba  yakni kemampuan  untuk  berikatan  dengan proein fungsional sel dan DNA sehingga mampu menghambat pertumbuhan mikroba.
Senyawa steroid banyak terdapat di alam sebagai  fraksi lipid dari  tanaman  atau hewan.  Zat  ini  sangat  penting  sebagai pengatur aktivitas biologis dalam organisme  hidup. Steroid merupakan senyawa yang terdapat pada lapisan lilin daun  dan  buah  yang  berfungsi  sebagai pelindung  dari  serangga  dan  serangan mikroba (Harbone, 1987).
Benur  udang  windu  PL  ( Post  Larva -12) dipelihara selama sepuluh hari dan diberi pakan  alami  artemia  yang  sebelumnya telah  dilakukan  perlakuan  perendaman dengan  ekstrak S.  alba .  Pada  saat pemeliharaan  selama  sepuluh  hari  dan dilanjutkan uji tantang dua hari dilakukan  pengamatan  gejala  klinis secara  langsung  diperoleh  benur  udang windu  yang  hidup  tertinggi  pada konsentrasi  20  ppm  (78,33%)  ;  25  ppm (68,33%)  ;  15  ppm  (70%)  dan  0  ppm (58.33%).
Berdasarkan hasil pengamatan
menunjukkan bahwa pada hari ke-11 dan 12  pada  perlakuan  kontrol  setelah  uji tantang terjadi penurunan aktifitas gerak ditandai  dengan  berkurangnya  aktivitas gerak  dan  cenderung  berdiam  di  dasar, pola  renang  menjadi  miring  dengan posisi badan cenderung miring kekanan, dan  terjadi  penurunan  nafsu  makan terlihat  dari  banyaknya  artemia  yang tidak  termakan,  begitu  pula  dengan perlakuan  15  ppm  terjadi  penurunan aktifitas  gerak,  pola  renang  cenderung normal  namun  gerak  reflek  cenderung agresif  di  karenakan  adanya  pertahanan tubuh alami dalam tubuh udang dan juga pemberian bioenrichment Artemia salina sehingga  benur  dapat  bertahan  dari serangan bakteri V. harveyi .
Menurut  Gultom  (2003),  udang  yang terinfeksi secara akut akan menyebabkan penurunan  konsumsi  pakan  secara  cepat dan  ketahanan  tubuh  menjadi  semakin lemah, sehingga menyebabkan kematian.
Demikian  juga  menurut  Saptiani  dan Hartini  (2008)  dan  Saptiani et  al ., (2012),  mengemukakan  ciri-ciri  udang yang  terserang  adalah  udang  terlihat lemah  dan  cenderung  tidak  berenang dan  pada  bagian  tubuh  terlihat  bercak- bercak merah.
Survival  rate benur  udang  windu dihitung  rata-rata  kelulushidupannya pada  akhir  penelitian  setelah  diberikan bioenrichment selama  10  hari  dan  uji tantang  selama  2  hari.  Rata-rata  benur udang  windu  yang  hidup  dapat  dilihat pada gambar 1.
Kelangsungan hidup benur pada perlakuan kontrol mengalami penurunan paling tinggi bila
dibandingkan dengan perlakuan 20 ppm dikarenakan  daya  imunitas  tubuh  benur udang  windu  semakin  melemah  hingga menyebabkan  kematian  benur  selama penginfeksian  bakteri.  Hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Rukyani et  al .,
(1992) bahwa penyakit yang diakibatkan  bakteri V.  harveyi bersifat sangat  akut  dan  ganas  karena  dapat memusnakan  populasi  yang  terserang, hanya dalam waktu 1-3 hari sejak gejala awal tampak.
Tingkat  kelangsungan  hidup  yang tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  20 ppm yaitu 78,33%, hal ini menunjukkan bahwa aktivitas ekstrak dengan perlakuan 20 ppm mampu menghambat pertumbuhan  dan  infeksi  bakteri V. harveyi , sesuai dengan pendapat
Purushotham et  al .,  (2010),    bahwa senyawa flavonoid , alkaloid , tanin , napthaquinones dan antrakuinon yang terkandung pada buah pedada merupakan  senyawa  antibakteri  yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri.  kecuali pada perlakuan kontrol mengalami penurunan tertinggi menjadi 58,33  %.  Hasil  analisis  uji  ANOVA berdasarkan  persentase  kelangsungan hidup  benur  udang  windu  yang  diberi pakan bioenrichment S.  alba dengan konsentrasi  25  ppm,  20  ppm,  dan  15 ppm  secara  perendaman  memberikan pengaruh  yang  nyata  dengan  taraf signifikan  (α=0,05)  dengan  perolehan F(hitung) 8,08  ≥ Fcrit (tabel) 3,49.
Berdasarkan  hasil  uji  biokimia  dengan pewarnaan gram diketahui bahwa bakteri  yang  menyerang  benur  udang windu merupakan golongan dari bakteri Vibrio sp. Karena hasil uji menunjukkan gram  negatif  (-)  yang  ditandai  dengan terbentuknya  suspensi  yang  kental (seperti lendir) dan lengket, uji motility, catalase,  oxsidase,  glucose  bernilai positif  serta  uji  TCBS  positif  kuning dapat dilihat pada Gambar 2 diatas.
Kualitas  air  merupakan  suatu  variabel yang dapat mempengaruhi
kelangsungan  hidup  ikan.  Parameter kualitas  air  yang  diamati  adalah  suhu, salinitas, pH, dan amoniak. Pengukuran dilakukan  setiap  hari  kecuali  amoniak. Kisaran  pengukuran  parameter  kualitas air dapat dilihat pada Tabel 1.
Gambar 1. Grafik Kelangsungan Hidup (SR) Benur Udang Windu
Tabel 1. Kisaran Rerata Pengukuran Kualitas Air Parameter Satuan Kisaran Pengamatan Kisaran Optimal (Rakhmatun dan Mudjiman, 2003) Suhu °C 26,6 – 28 28-32 Salinitas Ppt 31 – 33 10-35 Ph - 7,44 -7,53 6,8-8,7 Amoniak mg/L 0,07 – 0,218 < 0,1
Kualitas  air  termasuk  salah  satu  faktor yang mempengaruhi timbulnya penyakit pada ikan, karena penyakit muncul dari interaksi  antara  inang,  patogen,  dan lingkungan,  kualtas  air  yang  berada diluar  kisaran  optimum  kebutuhan hidup  ikan  akan  menyebabkan  ikan mengalami  stress,  sehingga  akibatnya ikan  lebih  mudah  terserang  penyakit. Oleh  karena  itu  kondisi  kualitas  air selama  perlakuan  harus  diperhatikan agar tetap berada
pada  kisaran  normal.  Secara  umum kualitas  air  media  pemeliharaan  selama penelitian masih kisaran normal.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa pemberian  pakan bioenrichment pada Artemia salina menunjukkan hasil yang berbeda nyata pada kelangsungan hidup benur  udang  windu  yang  terinfeksi Vibrio  harveyi sebesar  78,33%  pada konsentrasi  20  ppm. Artemia  salina yang  diberi bioenrichment terbukti menyerap ekstrak buah Sonneratia alba dibuktikan  dengan  hasil  pengujian fitokimia secara kualitatif yang
menunjukkan  positif  senyawa alkaloid , flavonoid , saponin, steroid dan fenol .

## DAFTAR PUSTAKA
Cahyadi,  J.,  Satriani,  GI.,  Gusman,  E., 2017.    Uji  Toksisitas  Ekstrak Etanol Sonneratia  alba Metode
Brine  Shrimp  Lethality  Test
(BSLT)  Pada Artemia  salina .
Prosiding  Semnas  Saling  Didik IV  Universitas  Borneo  Tarakan Volume 2 Tahun 2017. ISSN:2548-9615.  Halaman  490- 493. https://drive.google.com/file/d/1 IpOXQ2Ci_agUBoWpPtAC4Qg hCCaTG8wm/view Cahyadi,  J.,  Satriani,  GI.,  Gusman,  E., Sabri, 2018.  Skrining Fitokimia Ekstrak Buah Mangrove (Sonneratia alba) Sebagai Bioenrichment Pakan Alami Artemia  salina. Jurnal  Borneo
Saintek  E-ISSN  2599-3313  &
ISSN  2615-434X  Vol  3  Nomor
2  Oktober  2018.  e-journal; http://ojs.borneo.ac.id/ojs/index. php/JBS/
Cahyadi,  J.,  dan  Gusman,  E.,  2009. Karakterisasi  Bakteri Vibrio sp pada benur Udang windu (Penaneus monodon) Di Hatchery  Kota  Tarakan. . Jurnal
Eksakta  Borneo  ISSN  2085- 2037 Vol II/No 2, 2009. Hal 11- 22.
Diggles,  B.  K.,  Moss,  G.  A., Carson, J. and  Anderson,  C.  D.  2000. Vibrio Species Associated With  Mortalities  In  Hatchery- reared Turbot ( Colistium nudipinnis ) and Brill ( C. guntheri )  In  New  Zealand.
Jurnal Aquaculture . Pp 183: 1- 12.
Djariah, A. S. 1995 . Pengaruh Pemberian  Kombinasi  Pakan Alami Daphnia Dengan Kuning  Telur  Ayam  Terhadap Pertumbuhan dan Sintasan Larva  Ikan  Koi  ( Cyprinus carpio ). Jurnal  Sains  Akuatik , Vol 14, No 1 : hal 9-16. ISSN: 1410 – 9425
Effendie,  M.  I.  2002.  “ Biologi Perikanan ”.  Yayasan  Pustaka Nusatama. Yogyakarta.
Gultom,  D.  M.  2003. Patogenisitas Bakteri  Vibrio  harveyi  Pada Larva  Udang  Windu  (Penaeus
monodon) .  Institut  Pertanian Bogor. Hadioetomo, 1990. “ Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek”. Penerbit Gramedia 161 halaman : Jakarta. Harborne,  J.  B.  1987.  Uji  Aktivitas Antibakteri  dan  Uji  Fitokimia Ekstrak Daun Mangrove Sonneratia alba . Jurnal Aquawarman .  Vol.  2  (1)  :  hlm 43-50. ISSN: 2460-9226.
Holt, J. G., Noel R. Krieg., Peter H. A.,
Sneath.,  James,  T.,  Stanley,  T. &  Williams.  1994. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology . Baltimore: Lippincott William and Wilkins.
Joni, I. M., Wibawa, B. M., Hidayat. D., Mulyasari,  E.  S.,  Suharyadi, Farchan, M. dan Daging, I. K., 2007. Rancang Bangun Sistem Pakar  Udang  Windu  Fase Benur . Jurnal  Sains  MIPA ,
Edisi Khusus Tahun 2007, Vol.
13.  No.3,  Hal  :  208-215  ISSN
1976-1673. Juliantina,  F.  R.  2008.  Manfaat  Sirih Merah ( Piper crocatum ) Sebagai  Agen  Anti  Bakterial Terhadap  Bakteri  Gram  Positif dan  Gram  Negatif . JKKI- Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia . Maryani,  D.  Dana,  dan  Sukenda.  2002. Peranan  Ekstrak  Kelopak  dan Buah  Mangrove Sonneratia caseolaris (L)  terhadap  Infeksi
Bakteri Vibrio  harveyi pada Udang Windu ( Penaeus monodon Fab). Jurnal Akuakultur  Indonesia .,  1  (2)  : 129-130. Mustika,  S.  N.  2014. Perancangan Pengukur Optical Density Bakteri Lactobacillus Plantarum  dan  Starter  Yogurt ( Lactobacillus  Plantarum dan streptococcus  thermophillus ). Jurnal Skripsi. Fakultas Teknik, Universitas Brawijaya. Malang. Naiborhu,  P.E.    (2002) .    Ekstraksi  Dan Manfaat Ekstrak Mangrove (Sonneratia Alba Dan Sonneratia Caseolaris) Sebagai Bahan Alami Antibakterial Pada Patogen Udang  Windu,  Vibrio  Harveyi . Tesis,  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian Bogor, Bogor. 63 hal.
Puspitasari, A. D., Proyogo, L. S. 2016. Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi dan Sokletasi Terhadap Kadar Fenolik  Total  Ekstrak  Daun Kersen (Muntingia  calabura).
Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta . ISSN 2528-5912. Rukyani,  A.  P.,  Taufik  dan  Taukhid. 1992. Penyakit Kunang - Kunang (Luminescecce vibrios)  di  hatchery  udang windu dan cara penanggulangan penyakit benur di hatchery udang. Jurnal Litbang Pert. 2: 1-17.
Satriani, G.I., Cahyadi, J., Juliana, E.N., 2017.    Eksatraksi  Etanol  Buah
Pedada (Sonneratia alba) Dalam Menghambat Pertumbuhan Vibrio  harveyi Secara In  Vitro. Semnaskan IV FPIK Universitas Nusa  Cendana  Kupang.    ISBN 978-602-6906-39-7) halaman 105.  http://fkp.nusacendana.net
Sabir,  A.  2005.  Aktivitas  Antibakteri
Flavonoid  propolis , Trigonas sp. Terhadap Bakteri Streptococcus mutans ( in
vitro ). Jurnal Kedokteran Gigi . Vol.38, No.3, Hal.135-141.
Saptiani,  G.,  Hartini.  2008.  Aktivitas
Antibakterial  Ekstrak  Daun Sonneratia alba Terhadap Vibrio  harveyii Pada  Benur Udang Windu (Penaeus monodon) . Jurnal Aquawarman .  Vol  2  (2)  :  35- 44. ISSN : 2460-9226.
Saptiani, G., Prayitno., dan Anggoro, S.
2012.  Aktivitas  Antibakterial Ekstrak  Daun Sonneratia  alba Terhadap Vibrio  harveyi Pada
Benur  Udang  Windu (Penaeus monodon) . Jurnal
Aquawarman .  Vol  2  (2)  :  35- 44. ISSN : 2460-9226.
SNI,  No.06-6989.30-2005. Panduan Prosedur  Pengujian  Kadar Amoniak Dengan Spektrofotometer Secara Fenat Pada  Air  dan  Air  Limbah .
Badan  Standarisasi  Nasional (BPN). Trianto, Agus, W. Edi, Suryono, S. dan Rahayu  S. 2004. Ekstrak Daun Mangrove Aegiceras corniculatum Sebagai Antibakteri Vibrio  harveyi  dan Vibrio parahaemolyticus . Jurnal Ilmu Kelautan . Universitas Diponegoro. Semarang, 9 (4): 186-189. Volk  dan  Wheeler.  1984.  “ Mikroba Dasar ”.  Jilid  I  Penerjemah:
Markhman. Edisi Kelima. Penerbit: Erlangga. Jakarta Wibisono,  M.,  S.  1989.  Toksisitas Deterjen  Terhadap  Benih  Ikan Kakap  Putih  ( Lates  calcarifer , Bloch). Jurnal Berkala Perikanan  Terubuk ,  Juli  2006, hlm.  75-81.  ISSN  0126-4265 Vol. 33 No.2
Zamsari,  M.,  Sunarso.,  Sutrisno.  2012.
Pemanfaatan Tanin Alami dalam  memproteksi  protein bungkil  kelapa  ditinjau  dari fermentabilitas  protein  secara
IN VITRO. Animal Agriculture Journal , Vol. 1. No. 1, 2012, p 405-416. Universitas Diponegoro.