## MONITORING PENYAKIT WSSV PADA BUDIDAYA UDANG WINDU
(P enaeus monodon ) DI TAMBAK TRADISIONAL KOTA TARAKAN
WSSV Disease Monitoring of Cultivated Giant Tiger Shrimp (Penaeus monodon) in Tarakan Traditional Ponds
1 Rukisah; 1 Gloria Ika Satriani; 1 Rosmawati Rasyid
1 Jurusan Budidaya Perairan Universitas Borneo Tarakan, Kalimantan Utara Jalan Amal Lama No.1 Kota Tarakan 77123 email: kichafishery@gmail.com

## ABSTRAK
Penyakit  WSSV  ( white  spot  syndrome  virus )  pertama  kali  dilaporkan  menyebabkan  wabah mematikan  pada  udang  Penaeus  japonicas  di  Jepang  pada  tahun  1993  (Nakano et  al .,  1994) kemudian menyebar hampir ke seluruh wilayah Asia, termasuk Indonesia. Hingga saat ini, WSSV masih menjadi penyebab utama kegagalan panen pada tambak tradisional Kota Tarakan. Virus ini merupakan famili Nimaviridae dari genus Whispovirus yang menyerang udang pada semua stadia dan merupakan patogen mematikan bagi semua jenis udang penaeid. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui kondisi WSSV di kawasan tambak-tambak tradisional Tarakan (wilayah barat, timur, dan utara) sehingga dapat dilakukan tindakan penanggulangan terhadap penularan WSSV di Kota Tarakan.  Antisipasi  terhadap  penyebaran  WSSV  dilakukan  secara  vertikal  maupun  horizontal. Secara vertikal melalui genetik, sedangkan horizontal melalui rantai makanan, faktor transmisi, dan  reservoir  infeksi.  Penelitian  dilakukan  di  semester  awal  (Januari-Juni)  tahun  2016 menggunakan metode sampling populasi secara acak dan selektif. Sample udang windu ( Penaeus monodon )  dianalisis  kualitatif  secara  deskriptif  menggunakan  teknik  PCR  (polymerase  chain reactions) berdasarkan  OIE Protocol (Office  International Des Epizooties) di Stasiun Karantina Kelas II Tarakan, dan parameter penunjang berupa data kualitas air diukur secara in situ. Hasil penelitian bahwa seluruh sampel yang dianalisis pada 146 F1/R1 Primers First Step menunjukan pita  DNA  kurang  dari  1447  bp  hasilnya  negatif  WSSV,  namun  pada  tahap  kedua  146  F2/R2 Primers Nested terdapat satu sampel menghasilkan pita DNA 941 bp hasilnya positif WSSV. Data kualitas  air  masih  sesuai  persyaratan  baku  mutu  budidaya  windu  (SNI  7310-2009).  Pada  akhir penelitian,  tidak  ditemukan  satu  pun  tambak  tradisional  di  lokasi  penelitian  yang  mengalami kegagalan panen.
Kata kunci: WSSV, Penaeus monodon , PCR, Tambak Tradisional

## ABSTRACT
WSSV (white spot syndrome virus) was reported to cause desease outbreaks in farmed Penaeus japonicas  in  Japan  in  1993  (Nakano  et  al.,  1994)  and  it  subsequently  spread  to  other  Asian countries, including Indonesia.  WSSV is the most serious viral in traditional ponds of Tarakan City. The virus has been assigned to the new family Nimaviridae and genus Whispovirus (Vlak et al.,  2005),  attacked  all  stadia  of  shrimp  and  deadly  pathogen  of  all  penaeid.  The  aim  of  this
research  was  to  known  WSSV  infected  of  Tarakan  traditional  ponds  (Western,  Eastern,  and Northern) so that it can be against the transmission of WSSV in Tarakan City. Anticipation towards the spread WSSV is carried out vertically or horizontally. Vertically through the genetic, while horizontally through the food chain, transmission factors, and a reservoir of infection. Research conducted  at  January  until  June  2016  used  to  sampling  method  of  random  population  and selective.  Samples  were  analyzed  using  descriptive  techniques  in  qualitative  PCR  (polymerase chain reactions) based on Protocol OIE (Office International Des Epizooties) at Stasiun Karantina Kelas II Tarakan. The water quality parameters measured in situ. PCR detection of 146 F1/R1 Primers First Step showed all band DNA was less than 1447 bp resulted negative WSSV, but the second  of  146  F2/R2  Primers  Nested  showed  only  one  sample  of  band  DNA  941  bp  resulted positive WSSV. Water quality of all ponds was required to P.monodon cultivated (SNI 7310-2009). At the end of the study,  we not found any location of our cultivated traditional ponds reported WSSV outbreaks.
Keywords: WSSV, Penaeus monodon, PCR, Traditional Pond

## PENDAHULUAN
Tambak  tradisional  dicirikan  dengan  sistem pengelolaan tambak yang sederhana, di mana sumber  air  mengandalkan  pasang  surut, pengelolaan  yang  tanpa  pakan,  dan  tanpa aerasi. Bentuk dan luasan tambak tradisional di  Kota  Tarakan  bervariasi  namun  tambak tradisional  di  Kota  Tarakan  memiliki kesamaan  yakni  padat  penebaran  rendah kurang lebih 2 ekor udang per-meter persegi (WWF,  2011).  Udang  windu  merupakan salah  satu  komoditas  unggulan  perikanan  di Kota Tarakan yang banyak dibudidayakan di tambak tradisional dan menjadi sumber mata pencarian  utama  pembudidaya  tambak tradisional Kalimantan Utara.
Saat ini di Kota Tarakan, kegiatan budidaya udang windu secara tradisional praktis tidak bisa berkembang bahkan mengalami degradasi  yang  cukup  signifikan  dari  tahun ke  tahun,  dimana  pada  tahun  2008  luas tambak  sebesar  788  ha  tambak  produktif menjadi hanya 494 ha pada tahun 2012, atau terjadi  pengurangan  sebesar  37%  dalam kurun  waktu  4  tahun  (BPS,  2015).  Ada banyak  faktor  yang  menyebabkan  degradasi tersebut  diantaranya  adalah  menurunnya
daya  dukung  lahan  dan  timbulnya  berbagai macam  penyakit  udang  yang  masih  susah untuk ditanggulangi.
Mewabahnya berbagai penyakit udang windu pada  tambak  tradisional  menjadi  masalah utama kegagalan panen. Jenis penyakit yang menyerang  udang  dapat  dikelompokkan menjadi  penyakit  viral,  bakterial,  kelompok fouling  desease  dan  malnutrisi.  Jenis penyakit  yang  paling  ganas  adalah  penyakit viral  yang  menginfeksi  udang  windu diantaranya white  spot  syndrome  virus (WSSV)  yang  mengakibatkan  kematian dalam  jumlah  besar  dan  menyebar  secara cepat.
Serangan  WSSV  dapat  mengakibatkan kematian  massal  hingga  mencapai  100% dalam waktu singkat yaitu hanya 3 (tiga) hari sejak  gejala  pertama,  tampak  udang  yang terserang  biasanya  berenang  ke  tepi  tambak saat pagi/siang hari, udang terlihat lemah, dan akhirnya  ditemukan  mati  serta  disusul berikutnya terjadi kematian massal (Lightner, 1996). Berbagai upaya telah dilakukan untuk menanggulangi  penyakit  udang,  baik  secara teknis (langsung) maupun non-teknis (berkala). Secara teknis meliputi penggunaan
benih  bebas  virus  (SPF: Spesifik  Pathogen Free )  dan  manajemen  kualitas  air  yang menerapkan  prinsip biosecurity .  Sedangkan secara non-teknis dengan melakukan monitoring rutin yakni pemantauan terhadap perkembangan  suatu  jenis  penyakit  di  suatu wilayah. Dengan adanya kegiatan monitoring rutin  maka  pengumpulan  informasi  secara sistematik mengenai kasus penyakit memungkinkan dilakukannya tindakan antisipasi  terhadap  penyebaran/penularan WSSV pada skala yang lebih luas ( outbreak ) yang dapat mengakibatkan kerugian semakin besar.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui kondisi aktual penyakit WSSV di kawasan  tambak-tambak  tradisional  Kota Tarakan  (wilayah  barat,  timur,  dan  utara). Sehingga, tindakan penanggulangan terhadap penularan penyakit WSSV pada udang windu yang  dibudidayakan  di  tambak  tradisional Kota  Tarakan  dapat  dilaksanakan  dengan optimal.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  di  semester  awal (Januari-Juni)  tahun  2016  menggunakan metode  sampling  populasi  secara  acak  dan selektif.  Sampel  penelitian  diperoleh  dari udang windu yang dibudidayakan di tambak tradisional Kota Tarakan pada 12 (dua belas) lokasi berbeda mewakili wilayah Utara, Barat dan  Timur.  Lokasi  tambak  tradisional meliputi tambak B, D, I, K, dan L di wilayah Tarakan  Utara,  tambak  A,  C,  dan  H  di wilayah Tarakan Timur, serta tambak E, F, G, dan  J  di  wilayah  Tarakan  Barat.  Usia  dan ukuran  udang  windu  ( Penaeus  monodon ) yang diuji pada penelitin ini bervariasi untuk setiap  tambak.  Sampel  udang  diperoleh dalam  kondisi  hidup  pada  saat  tertangkap menggunakan  anco.  Kemudian,  sampel tersebut  dibawa  ke  laboratorium  pengujian virus  di  Stasiun  Karantina  Kelas  II  Kota Tarakan  untuk  diamati  secara  klinis  dan dianalisis kualitatif secara deskriptif menggunakan teknik PCR ( polymerase chain
reactions ) berdasarkan protokol OIE ( Office International Des Epizooties ) sebagai parameter utama penelitian. Tahapan uji PCR meliputi  ekstraksi  DNA  genom  udang sampling menggunakan prosedur DNeasy Kit Qiagen,  amplifikasi  DNA  genom  dengan thermocycler  menggunakan  primer  146 F1/R1  dan  146F2/R2,  elektroforesis  hasil PCR  pada  media  agarose  1%  dan  tahapan terakhir visualisasi band DNA hasil elektroforesis  menggunakan  mesin  UV- transiluminator disertai dokumentasi. Adapun  primer  (first  dan  nested)  yang digunakan sebagai berikut:
146 F1 :
5’ACTACTAACTTCAGCCTATCTCTAG- 3’.
146 R1 : 5’TAATGCGGGTGTAATGTTCTTACGA -3’.
146 F2 : 5’GTAACTGCCCCTTCCATCTCCA-3’.
146 R2 : 5’TACGGCAGCTGCTGCACCTTGT-3’.
Parameter penunjang berupa data kualitas air pada  tambak  tradisional  yakni  parameter fisika  (suhu,  DO,  salinitas  dan  pH)  yang diukur secara in situ.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyakit WSSV (white spot syndrome virus) pertama kali dilaporkan menyebabkan wabah pada udang Penaeus japonicas di Jepang pada tahun  1993  (Inouye et  al .,  1994;  Nakano et al .,  1994)  kemudian  menyebar  hampir  ke seluruh  wilayah  Asia,  termasuk  Indonesia sejak  2002  mengakibatkan  kematian  massal di Jawa Timur (Supriyadi, et al ., 2006), terus meluas penyebarannya, dan mulai menjangkit  pertama  kali  di  Tarakan  pada tahun  2004.  Hingga  saat  ini,  WSSV  masih
menjadi  penyebab  utama  kegagalan  panen pada tambak tradisional Kota Tarakan. Virus ini merupakan famili Nimaviridae dari genus Whispovirus  (Vlak et  al .,  2005)  yang menyerang  udang  pada  semua  stadia,  baik benur maupun udang dewasa dan merupakan patogen  yang  mematikan  bagi  semua  jenis udang penaeid.
WSSV  merupakan  virus  DNA  untai  ganda yang berbentuk batang yang menginfeksi inti sel  inang  dengan  membentuk  kristal  virus ( occlusion  body )  (Lightner,  1996).  Koloni virion  berupa  matriks  protein  perekat membentuk kristal seperti bola di dalam inti sel  hepatopankreas  udang  terinfeksi.  Kristal virus yang semakin membesar dalam inti sel ( hypertrophied )  selanjutnya  akan  merusak jaringan udang dan mengakibatkan kematian.
Muncul  dan  mewabahnya  penyakit  viral sangat  terkait  dengan  kondisi  lingkungan, pencemaran,  dan  perubahan  kualitas  air sehingga  menyebabkan  udang  mengalami stres  yang  memicu  virus  pada  stadia  laten menjadi  ganas  dan  mematikan.  Penyebaran penyakit WSSV dapat terjadi secara vertikal maupun horizontal. Secara vertikal ditularkan  secara  generatif  yakni  melalui tetua/induk yang terinfeksi kepada keturunannya,  sedangkan  secara  horizontal dapat melalui rantai makanan sehingga virion yang  ada  di  lingkungan  masuk  ke  tubuh
udang,  selain  itu  dapat  juga  terjadi  karena adanya faktor transmisi dan reservoir infeksi.
Tindakan pengendalian penyakit terdiri dari 3 (tiga) tahapan yakni pencegahan, penyembuhan/pengobatan,  dan  pemusnahan (eradikasi). Dalam mengendalikan penyakit, pencegahan merupakan tindakan yang paling efektif  dibandingkan  pengobatan  karena tidak  semua  penyakit  ikan/udang  sudah ditemukan cara pengobatannya seperti halnya penyakit WSSV yang sampai saat ini belum ditemukan obat yang efektif menyembuhkan udang/ikan yang terinfeksi virus. Keuntungan pencegahan, selain tidak menimbulkan efek samping, tindakan ini juga tidak  memerlukan  biaya yang  besar. Pencegahan  sebaiknya  dilakukan  sebelum kegiatan  pemeliharaan  dimulai,  atau  pada saat  tanda-tanda  serangan  penyakit  mulai terlihat untuk mencegah meluasnya penyakit.
Monitoring  secara  rutin  sangat  penting dilakukan  untuk  mengetahui  perkembangan penyakit WSSV di kawasan tambak-tambak tradisional  (wilayah  barat,  timur,  dan  utara) sehingga dapat mengambil tindakan pengendalian  terhadap  penularan  penyakit WSSV  (outbreak)  di  Kota  Tarakan.  Berikut ini  (Gambar.  1)  hasil  pengujian  PCR  untuk sampel  udang  windu  yang  didapatkan  saat monitoring  pada  semester  awal  2016  di tambak tradisional Kota Tarakan.
Gambar 1. Hasil Elektroforesis Hasil PCR sampel Udang Windu (A) 146 F1/R1 Primers First Step dan (B) 146 F2/R2 Primers Nested
Berdasarkan  protokol  OIE  diketahui  bahwa di  tahap  first  PCR  ukuran  band  spesifik WSSV untuk amplicon pada posisi 1447 bp (base pairs) yang tepat menunjukkan 20.000 copies template plasmid DNA virus WSSV. Sedangkan  pada  tahap  kedua  nested  PCR, ukuran band spesifik WSSV untuk amplicon pada  posisi  941  bp  tepat  menunjukkan  20 copies template plasmid DNA virus WSSV. Secara umum, sensitivitas nested PCR lebih tinggi dibandingkan first PCR.
Hasil  pengujian  PCR,  pada  Gambar  1.A menunjukkan  bahwa  semua  sampel  yang diuji tidak menghasilkan band 1447 bp yakni hasilnya  semua  sampel  negatif  WSSV. Sedangkan,  pada  Gambar  1.B  menunjukkan bahwa  hanya  1  (satu)  sampel  L  (lokasi tambak  tradisional  di  wilayah  Utara  Kota Tarakan)  yang  menghasilkan  band  ukuran 941 bp hasilnya positif WSSV. Maka, seperti penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ayub, et  al (2007)  menemukan  adanya  infeksi  WSSV pada post larvae (PL) yang nampaknya sehat sehat  secara  klinis  ternyata  negatif  saat pengujian PCR tahap pertama, namun positif WSSV pada saat pengujian PCR tahap kedua, yang  pengujiannya  juga  menggunakan pasangan  primer  yang  sama  seperti  pada penelitian ini (146 F1/R1 dan 146 F2/R2).
Dua pasang primer yang telah dirancang oleh Lo et  al (1996)  tersebut,  telah  memiliki ukuran  positif  1447  bp  dan  941  bp  bagi amplicon  untuk  WSSV,  dan  hasil  uji  yang positif  dalam  first  PCR  dan  nested  PCR menggunakan  146  F1/R1  dan  146  F2/R2 menyatakan  bahwa  sampel  tersebut  sangat terinfeksi  oleh  WSSV.  Jika  dibandingkan, sensitivitas antara dua pasang primer 941 bp dan  1447  bp  bahwa  hasil  941  bp  jauh  lebih sensitif  dan  memperkuat  hasil  uji  pada ukuran 1447 bp, dimana hal ini sesuai dengan Hossain et  al .  (2004)  bahwa  primer  yang berisi  ukuran  amplicon  lebih  kecil  hasilnya lebih  sensitif  daripada  primer  yang  berisi ukuran amplicon yang lebih besar.
Melalui  analisis  sensitivitas,  optimalisasi teknik  PCR  untuk  pengujian  WSSV  akan memberikan  hasil  yang  jauh  lebih  akurat dalam  menentukan  tingkat  infeksi  sehingga dapat mengurangi resiko dalam membudidayakan udang. Pada penelitian ini, uji PCR yang telah dilakukan menggunakan template  DNA  udang  sehingga  tidak diketahui  nilai  kuantitas  DNA  virus  WSSV tetapi  hasil  pengujian  dinyatakan  negatif WSSV untuk semua sampel yang diuji, hanya 1  (satu)  sampel  terbukti  terinfeksi  WSSV ringan  pada  941  bp,  yakni  sampel  yang diperoleh  di  lokasi  tambak  wilayah  utara. Kepekaan  nested  PCR  yang  tinggi  sangat berguna  dalam  mengkonfirmasi  tahap  awal infeksi WSSV ketika konsentrasi virus masih rendah  atau  sebelum  terjadinya  manifestasi infeksi,  sehingga  upaya  pengendalian  yang sesuai  untuk  mengantisipasi  terjadinya outbreaks dapat dilakukan.
Seiring  dengan  aktivitas  manusia,  maka timbulnya kasus penyakit di lokasi pertambakan semakin marak dijumpai karena terkait  dengan:  (1)  peningkatan  kepadatan kultivan, (2) penggunaan pakan buatan yang menyisakan  penumpukan  bahan  organik  di lingkungan  perairan,  (3)  pola  monokultur, serta  secara  umum  (4)  menurunnya  daya dukung  lingkungan  karena  pencemaran  air, tanah, dan udara oleh berbagai aktivitas fisik lainnya. Tambak tradisonal di wilayah Kota Tarakan  sangat  dekat  lokasinya  dengan pemukiman sehingga tidak jarang berdampingan dengan rumah tangga, pabrik, dan  akses  jalan  sehingga  rentan  terhadap pencemaran.  Oleh  karena  itu,  penerapan manajemen  biosecurity  di  wilayah  tambak harus diperhatikan agar tidak menjadi pemicu penyebaran WSSV.
Pada  tambak  tradisional  di  wilayah  Utara Kota  Tarakan,  yang  berlokasi  dekat  dengan pabrik prosesing udang  dan pasar tradisonal sebaiknya sangat memperhatikan pemasukan air  yang  harus  benar-benar  dijaga  dengan
baik, terutama saat terindikasi adanya infeksi ringan  WSSV  pada  udang  budidaya  maka pergantian  air  tidak  perlu  dilakukan  sampai udang  siap  dipanen,  dan  intens  melakukan kontrol  di  petakan  tambak  setiap  hari,  serta apabila ditemukan populasi udang yang mati akibat  WSSV,  tindakan  pertama  yang  dapat dilakukan ialah segera melakukan pemanenan  dini,  serta  menetralisir  tambak agar  tidak  menularkan  WSSV  pada  tambak lain disekitarnya.
Berdasarkan  hasil  pengukuran  kualitas  air yang  dilakukan  secara  in  situ  di  lokasi penelitian  bahwa  nilai  suhu,  DO,  salinitas, dan  pH  (Tabel  1)  perairan  di  tambak tradisonal Kota Tarakan masih sesuai dengan nilai  standar  kualitas  air  budidaya  udang windu sederhana yang disyaratkan oleh SNI 7310-2009 sehingga masih layak dan sesuai untuk mendukung kegiatan budidaya.
Tabel 1. Hasil Pengukuran secara in situ.
Nilai Standar Kualitas Air Budidaya
Udang Windu Sederhana (SNI 7310- 2009) No  Parameter Pengukuran Acuan 1 Suhu 28-30 o C 28- 32 o C 2 DO 5-8 >3 3 Salinitas 30-34 ppt 5-40 4 pH 7,5-8,5 7,5-8,5
Nilai  hasil  pengukuran  kualitas  air  di  atas, menandakan bahwa udang mampu hidup dan tumbuh  dengan  baik  di  tambak  tradisional Kota Tarakan.
Hasil  monitoring  ditemukan  hanya  satu sampel  positif  WSSV  pada  941  bp menandakan adanya infeksi ringan walaupun secara fisik udang tersebut belum menunjukkan  tanda-tanda  fisik  terserang WSSV.  Udang  yang  terinfeksi  ringan  pada lokasi  tambak  wilayah  utara  tersebut  masih mampu bertahan dan tumbuh, namun apabila
kualitas air memburuk dan udang mengalami stres maka akan menimbulkan outbreaks.
Kondisi sakit pada organisme budidaya ialah suatu  keadaan  abnormal  yang  ditandai dengan  penurunan  kemampuan  ikan/udang dalam mempertahankan fungsi-fungsi fisiologi normal. Secara umum faktor-faktor yang  terkait  dengan  timbulnya  penyakit merupakan interaksi dari 3 faktor yaitu inang, patogen,  dan  lingkungan  atau  stressor eksternal,  yaitu  perubahan  lingkungan  yang tidak menguntungkan, tingkat higienik  yang buruk, dan stres (Irianto, 2005). Hingga akhir penelitian,  tidak  ditemukan  satu  pun  lokasi tambak  tradisional  Kota  Tarakan  tempat dilakukan sampling dalam penelitian ini yang mengalami kegagalan panen.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  disimpulkan bahwa pada first PCR untuk seluruh sampel udang yang diuji dinyatakan negatif terinfeksi  WSSV.  Tetapi,  pada  nested  PCR hanya ditemukan 1 (satu) sampel udang pada lokasi  tambak  L  (wilayah  utara  Kota Tarakan)  yang  menghasilkan  band  DNA berukuran  941  bp  (base  pair)  yang  artinya udang tersebut terinfeksi WSSV ringan. Data kualitas air masih sesuai dengan persyaratan baku mutu budidaya windu (SNI 7310-2009). Pada  akhir  penelitian,  tidak  ditemukan  satu pun  tambak  tradisional  di  lokasi  penelitian yang mengalami kegagalan panen.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada Laboratorium  Pengujian  Virus  Stasiun Karantina  Ikan  Kelas  II  Kota  Tarakan  yang telah menyediakan fasilitas Uji PCR.

## DAFTAR PUSTAKA
Ayub,  F.,  Sarker,  Y.,  Alam,  S.,  2007. Prevalence of white spot syndrome
virus  infection  detected  by  one-step  and
nested  PCR  in  selected  tiger  shrimp (Penaeus monodon) hatcheries. Aquaculture 2008, 16:405-415.
Badan Pusat Statistik. 2015. Tarakan Dalam Angka 2015. Kota Tarakan.
Badan Standarisasi Nasional. 2009. Produksi udang  windu  (Penaeus  monodon)  di tambak  dengan  teknologi  sederhana. SNI 7310-2009. Jakarta.
Hossain MS, Chakraborty A, Joseph B, Otta SK,  Karunasagar  I,  Karunasagar  I (2001)  Detection  of  new  hosts  for white spot syndrome virus of shrimp using nested polymerase chain reaction. Aquaculture 198:1–11.
Inouye, K., Miwa,S., Oseko, N., Nakano, H., Kimura, T., Momoyama, K.,Hiraoka, M.,  1994.  Mass  mortalities  of cultured  Kuruma  shrimp,  Penaeus japonicas, in Japan in 1993: electron microscopic evidence of the causative virus. Fish Pathol 29, 149-158.
Irianto  A,  2005.  Faktor-Faktor  Lingkungan Abiotik  air  tawar.  Jurnal  Manusia Dan Lingkungan, Vol. XI, No.2.
Lightner, D. V 1996. A Handbook of Shrimp Pathology and Diagnostic Procedures for  Diseases  of  Cultured  penaeid Shrimp.  The  World  Aquaculture Society.  Baton  Rouge,  Louisiana, 70803 USA.
Lo CF, Leu JH, Ho CH, Chen CH, Peng SE, Chen YT, Chou CM, Yeh PY, Huang CJ,  Chou  HY,  Wang  CH,  Kou  GH (1996b)  Detection  of  baculovirirus associated with white spot syndrome (WSBV)  in  penaeid  shrimps  using polymerase chain reaction. Dis Aquat Org 25:133–141.
Nakano,  H.,  Kaube,  H.,  Umezawa,  S., Momoyama, K., Hiraoka, M., Inouye, K., Oseko, N. 1994. Mass mortalities of cultured Kuruma shrimp, Penaeus japonicas, in Japan in 1993: epizootiological survey and infections trails. Fish Pathol. 29, 135-
139.
OIE.  2003.  Manual  of  diagnostic  tests  for aquatic  animals,  4th  edn.  Office International  des  Epizootics,  Paris, France, 358 pp.
Supriyadi,H., Priono,B., Taukhid., Koesharyani.,  Sumiati,T.,  Novita,H.
2006. Kebijakan dalam pengendalian penyakit  ikan  dan  udang.  Analisis Kebijakan  Pembangunan  Perikanan Budi  Daya.  Jakarta:  Pusat  Riset Perikanan Budidaya.
Vlak JM., Bonami JR., Flegel TW., Kou GH., Lightner  DV.,  Lo  CF.,  Loh  PC., Walker PJ. 2005. Nimaviridae: a new virus family infecting aquatic.
WWF.  2011.  Better  Management  Practices: Budidaya Udang Windu Tanpa Pakan dan Tanpa Aerasi. Indonesia.