## Sains Aku a kultur Tropis D e p a r t e m e n A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan - Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id
PENGARUH SALINITAS TERHADAP EFEKTIFITAS EKSTRAK DAUN API-API ( Avicennia marina ) DALAM MENGOBATI INFEKSI Vibrio harveyi PADA KEPITING BAKAU ( Scylla sp.)
The Influence of Salinity to the Effectiveness of Mangrove Leaf Extract (Avicennia marina) in Treating Vibrio harveyi Infections on Mud Crab (Scylla sp.)
Muhamad Falah, Sarjito*, Desrina Program Studi Budidaya Perairan, Jurusan Perikanan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto Tembalang-Semarang

## ABSTRAK
Kepiting  bakau  ( Scylla sp.)  salah  satu  komoditas  yang  memiliki  ekonomis  tinggi.  Salah  satu  faktor  yang menyebabkan  penurunan  produksi  kepiting  adalah  penyakit.  Penyakit  yang  sering  menyerang  kepiting  bakau adalah Vibriosis . Salah satu upaya  dalam pengobatan dapat menggunakan bahan alami yaitu ekstrak daun api-api ( A.  marina )  akan  dilakukan  pada  salinitas  yang  berbeda.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui pengaruh  salinitas  terhadap  efektifitas  perendaman  ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  dilihat  dari  kelulushidupan, salinitas  terbaik  didalam  perendaman  ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  kepiting  bakau  yang  diinfeksi  bakteri V. harveyi, dan  gejala  klinis  kepiting  bakau  ( Scylla sp.).  Kepiting  bakau  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini berjumlah 48 ekor dengan bobot 46-56 g. Penelitian ini  menggunakan  metode eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (4 perlakuan 3 kali ulangan). Kepiting seluruhnya disuntik bakteri V. harveyi dengan kepadatan 0,1 x  10 7 CFU/ml  pada  bagian  pangkal  kaki  renang.  Pasca  munculnya  gejala  klinis,  kepiting  bakau  direndam menggunakan  ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  dengan  perlakuan  A  (perendaman  dalam  salinitas  15  ppt),  B (perendaman dalam salinitas 20 ppt), C (perendaman dalam salinitas 25 ppt), dan D (perendaman dalam salinitas 30  ppt).  Kepiting  yang  digunakan  adalah  kepiting  bakau,  dengan  kepadatan  adalah  4  ekor/akuarium  selama  14 hari. Data yang dianalisis adalah gejala klinis, kelulushidupan, histopatologi hepatopankreas dan kualitas air. Data yang telah didapatkan kemudian dianalisis seluruhnya secara deskriptif.
Hasil penelitian menunjukkan salinitas tidak berpengaruh terhadap kelulushidupan kepiting bakau ( Scylla sp.) yang di infeksi V. harveyi yang direndam ekstrak daun api-api pada berbegai salinitas, namun diperoleh nilai tertinggi pada salinitas 30 ppt (58%) dan terendah pada salinitas 15 ppt (50%). Salinitas terbaik untuk pengobatan menggunakan ekstrak daun api-api ( A. marina ) pada kepiting bakau ( Scylla sp.) yang di infeksi bakteri V. harveyi adalah  30  ppt.  Gejala  klinis  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian  adalah  perubahan  morfologis  dan  perubahan tingkah  laku.  Hasil  pengamatan  histologi  hepatopankreas  ditemukan  adanya  kerusakan  jaringan  pada  seluruh perlakuan  yaitu  berupa  nekrosis,  vakuolisis,  dan  degradasi  lumen.  Kualitas  air  pada  media  pemeliharaan  berada dalam kisaran yang layak untuk kehidupan kepiting bakau.
Kata kunci : Scylla sp., Vibrio harveyi , Salinitas, Hepatopankreas, Keluluhidupan

## ABSTRACT
Mud  crab  (Scylla  sp.)  is  one  of  the  commodities  that  have  high  economic.  One  of  the  factors  that  cause decreased  production  of  crab  is  a  disease.  The  diseases  that  often  attacks  mud  crab  is  Vibriosis.  One  of  the attempts  in  treatment  can  be  use  natural  ingredients  which  is  the  mangrove  leaf  extract (A.  marina) that  will  be performed at different salinity. The purpose of this research is to find out the effect of salinity on the effectiveness of  the  submersion  of  mangrove  leaf  extract  ( A.  marina )  seen  on  the  survival  rate,  the  best  salinity  in  the submersion of mangrove leaf extract ( A. marina ) mud crab that is infected by bacteria V. harveyi , and clinical sign of mud crab ( Scylla sp.). Mud crab used in this research consists of 48 animals weighing 46-56 g. This research used  an  experimental  method  by  Complete  Random  Design  (4  treatments  3  repetitions).  The  crab  is  entirely injected to V. harveyi bacteria with a density of 0.1 x 107 CFU / ml at the base of the bathing leg. Post-emergence of clinical sign, mud crab is soaked with the mangrove leaf extract ( A. marina ) with treatment A (immersion in a salinity of 15 ppt), B (immersion in a salinity of 20 ppt), C (immersion in a salinity of 25 ppt), and D (immersion in a salinity of 30 ppt). The used crab is mud crab which the density is 4 fish / aquarium for 14 days.
The results show the salinity has no effect on the survival rate of mud crabs ( Scylla sp.) infected V. harveyi which is soaked with the mangrove leaf extract  at various salinities, but the highest values obtained at a salinity of 30 ppt (58.33%) and the lowest in salinity 15 ppt (50%). The best salinity for treatment using the   mangrove leaf extract ( A. marina ) on mud crab ( Scylla sp.) infected V. harveyi bacterial is 30 ppt. Clinical sign that is obtained from  the  research  is  morphological  changes  and  behavioral  changes.  The  observation  of  hepatopancreas
histological found tissue damage on all treatments in the form of necrosis, vakuolisis and lumen degradation.  The water quality on maintenance is media in a reasonable range for the life of mud crabs.
Keywords: Scylla sp., Vibrio harveyi , Salinity, Hepatopancreas, Survival Rate * Corresponding author (email: Sarjito_msdp@yahoo.com)

## PENDAHULUAN
Kepiting  bakau  ( Scylla sp.) merupakan  jenis  biota  yang  hidup  di  hutan  mangrove  (bakau)  dan  dapat juga dijumpai  di  perairan  pantai.  Kepiting    bakau  merupakan  salah  satu  komoditas  perikanan  dengan  nilai  ekonomis penting  (Meistika,  2011). Indonesia  menguasai  60%  permintaan  kepiting  bakau  ( Scylla sp.)  di  Amerika  Serikat (KKP,  2011).  Melalui  data  dari  KKP  melaporkan  bahwa  permintaan  ekspor  kepiting  pada  tahun  2008  adalah 20,713 ton dan meningkat menjadi 28,212 ton pada tahun 2012 (KKP, 2012).
Permintaan  yang terus  meningkat  terhadap kepiting bakau  yang  merupakan potensi dalam pengembangan budidaya  kepiting  (Herlinah et  al., 2010). Hal  ini  menyebabkan  masalah  kesehatan  kepiting  yang  akan dibudidayakan,  salah  satunya  serangan  penyakit.  Penyakit  menjadi  salah  satu  permasalahan  dalam  kegiatan budidaya  kepiting  bakau  (Hatmanti,  2003). Vibriosis dapat  menimbulkan  kematian,  mulai  stadia  larva  sampai dewasa (Kumaravel et al ., 2010). Menurut Lavilla-Pitogo dan Pena (2004) bahwa bakteri menyerang pada bagian karapas  kepiting  di  stadia juvenile dan    kepiting  dewasa.  Jithendrran et  al .  (2010)  menyatakan  bahwa Vibrio harveyi 10 2 –  10 3 CFU/ml  patogenik  pada  stadia  zoea  kepiting  bakau.  Oleh  karena  itu  perlu  adanya penanggulangan dalam mengatasinya adalah dengan bahan antibiotik.
Penanggulangan  penyakit  yang  menggunakan  bahan  antibiotik  dapat  menimbulkan  resistensi  patogen, mencemari  lingkungan  serta  membahayakan  konsumen  (Fadli,  2000;  Zulham  2004).  Daun  api-api  ( A.  marina ) merupakan  salah  satu  daun  mangrove  yang  memiliki  kemampuan  anti  bakteri    (Danata  dan  Yamindago,  2014). Daun api-api memiliki kandungan bahan yang berperan dalam menghambat pertumbuhan bakteri patogen karena memiliki senyawa bioaktif  yang terdapat  pada daun terbukti  mampu  menekan pertumbuhan bakteri. Penggunaan dosis  terbaik  pada  ekstrak  daun  api-api  menjadi  salah  satu  alasan  untuk  dilakukan  penelitian  mengenai pemanfaatan bahan alami seperti daun api-api ( A. marina ) dengan menggunakan konsentrasi ekstrak terbaik dalam menanggulangi V.  harveyi pada  kepiting  bakau  di  salinitas  yang  berbeda  (Purnobasuki,  2004).  Tujuan  dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh salinitas terhadap efektifitas perendaman ekstrak daun api-api ( A. marina ) dilihat dari kelulushidupan kepiting bakau ( Scylla sp.), mengetahui salinitas terbaik didalam perendaman ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  kepiting  bakau  ( Scylla sp.)  diinfeksi V.  harveyi dan  mengetahui  gejala  klinis kepiting bakau ( Scylla sp.) yang di infeksi bakteri V. harveyi .

## MATERI DAN METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Januari  2015-Maret  2016  di  Laboratorium  Budidaya  Perairan, Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Laboratorium Tropical  Marine  Biology ,  UPT  Laboratorium  Terpadu, Universitas Diponegoro, Laboratorium Patologi Anatomi RSUP Karyadi Semarang.
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  metode  eksperimental.  Penelitian  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  yang terdiri dari  4 perlakuan dengan  3 kali ulangan.  Kepiting  yang digunakan yaitu  kepiting  bakau  ( Scylla sp.)  yang  berukuran  46-56  gram  sebanyak  48  ekor,  dengan  setiap  perlakuan menggunakan 12 ekor kepiting. Kepiting bakau diperoleh dari Desa Tapak, Kecamatan Tugu, Semarang. Kepiting uji merupakan kepiting yang sehat dan tidak cacat. Bakteri V. harveyi yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari koleksi Sarjito et al., (2014). Daun api-api ( A. marina ) diperoleh dari Pantai Maron, Semarang, sebanyak 1 kg berat basah. Daun api-api kemudian dibersihkan, kemudian di ekstraksi menggunakan pelarut aquades.  Penetapan konsentrasi ekstrak daun api-api yang digunakan adalah 30.000 ppm dalam penelitian ini berdasarkan penelitian sebelumnya (Fitria, 2016). Wadah  pemeliharaan  yang  digunakan  adalah  akuarium  berukuran  40x30x40  cm  sebanyak  12  buah.  Akuarium disekat dengan menggunakan bambu menjadi 9 kotak dan 4 kotak yang diisi kepiting masing-masing 1 ekor.
Kultur bakteri V. harveyi dilakukan dengan cara  mengambil koloni  tunggal bakteri pada media agar TSA miring  kemudian  dipindahkan  ke  media Zobell cair  dan  diinkubasi  selama  2x24  jam  pada Shive  shaker ,  sampai media  berubah  warna  menjadi  keruh.  Kemudian  dilakukan  pemanenan  dan  pencucian  bakteri  dengan  PBS ( Phospat Buffer Saline ) untuk memisahkan antara supernatant dan pellet bakteri (Sarjito, 2010). Uji in  vivo dilakukan  dengan  menginjeksi  bakteri V.  harveyi dengan  kepadatan  bakteri  10 6 CFU/ml  pada ruas  kaki  pertama  kaki  renang  kepiting  bakau.  Pasca  munculnya  gejala  klinis,  kepiting  bakau  direndam menggunakan salinitas pada perlakuan A (15 ppt), perlakuan B (20 ppt), perlakuan C (25 ppt) dan perlakuan D (30 ppt)  pada  ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  ±  selama  60  menit.  Pengamatan  efektifitas  ekstrak  daun  api-api  ( A. marina )  terhadap  infeksi  bakteri V.  harveyi pada  kepiting,  setiap  hari  dilakukan  adalah  pengamatan  dan perhitungan  mortalitas  kepiting  hingga  hari  ke-14  pasca  perendaman.  Parameter  yang  diamati  yaitu kelulushidupan, gejala klinis, histologi hepatopankreas dan kualitas air.
Menurut Effendi (1997), tingkat kelangsungan hidup kepiting dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut:
Keterangan : SR = Tingkat kelangsungan hidup (%) Nt = Jumlah kepiting yang hidup pada akhir pengamatan (ekor)

## No = Jumlah kepiting pada awal pengamatan
Data  yang  diperoleh  selama  penelitian  meliputi  tingkat  kelulushidupan,  gejala  klinis,  histologi hepatopankreas dan kualitas air,  selanjutnya dianalisis secara deskriptif.

## HASIL
1. Kelulushidupan kepiting bakau ( Scylla sp.)
Hasil pengamatan kelulushidupan tertinggi didapatkan pada perlakuan D (58%), diikuti pelakuan A (50%), perlakuan C (25 ppt) adalah 42%, dan kelulushidupan terendah pada perlakuan B (33%). Berdasarkan pada Tabel 1.  juga  diperoleh,  bahwa  pada  perlakuan  A  (15  ppt)  cukup  efektif  dalam  pengobatan,  akan  tetapi  salinitas  yang paling efektif untuk pengobatan kepiting bakau ( Scylla sp.)  pada penelitian ini dengan perendaman ekstrak daun api-api ( A. marina ) adalah 30 ppt.
Tabel  1.  Pasca  Perendaman  Ekstrak  Daun  Api-Api  ( A.  marina )  pada  Kepiting  Bakau  ( Scylla sp.)  dilihat  dari Kelulushidupan (%)
Ulangan Perlakuan Jumlah A B C D 1. 100 75 75 100 350 2. 25 0 50 50 125 3. 25 25 0 25 75 Rerata±SD 50±43 33±38 42±38 58±38 550
2. Gejala klinis kepiting bakau ( Scylla sp.)
Hasil pengamatan gejala klinis selama 14 hari pemeliharaan didapatkan hasil yaitu perubahan tingkah laku dan perubahan morfologi. Gejala klinis berupa tingkah laku adalah penurunan nafsu makan, gerakan tidak agresif (pasif),  mengeluarkan  buih-buih,  perubahan  tingkah  laku  ditandai  dengan  kepiting  naik  ke  permukaan  (Gambar 1e). Perubahan gejala klinis secara morfologi ditandai melanosis (Gambar 1a), karapas menghitam (Gambar 1b), munculnya  warna  merah  pada  kaki  renang  (Gambar  1c),  dan  karat  ( rust  spot )  (Gambar  1d).  adanya  borok kehitaman pada capit atau abdomen, dan karapas menghitam. Perubahan gejala klinis dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Gejala Klinis Kepiting Bakau Pasca Infeksi Keterangan : (a) melanosis , (b) karapas menghitam, (c) kaki renang merah, d) karat ( Rust spot ), dan (e) kepiting naik ke permukaan
Adapun  gejala  klinis  yang  diamati  pasca  infeksi  dan  pasca  perendaman  didapatkan  yaitu  perubahan morfologi dan tingkah laku tersaji pada Tabel 2.
d d d e a d d b d d c d d
Tabel 2. Perubahan Morfologi dan Tingkah Laku pada Kepiting Bakau
Gejala klinis pasca penyuntikan V. harveyi Hari ke- A (15 ppt) B (20 ppt) C (25 ppt) D (30 ppt) A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 D1 D2 D3 Pasca Infeksi V. harveyi I. d d e E d e e e e e a d
Pasca perendaman dengan salinitas berbeda yang telah dilarutkan ekstrak daun bakau ( A. marina ) 1. e d e D d e e d e e e d 2. e d e D e e e d e e e e 3. e d e D e e e d e d e e 4. d d e D e e e d d d e e 5. d d e D e e e d d d e e 6. d d e E e e e d d d e e 7. d d e E e e e d d d e e 8. d d e E e e e d d d e e 9. d d e E e e f c d e e e 10. d c e E - - f d d e e f 11. d d e F - - c d - e f f 12. d d f F - - - d - e f f 13. d d f F f - - d - e f f 14. d d f F f - - d - e f f Keterangan :
a = Kaki renang merah b = Warna karapas kehijauan c = Kepiting naik ke permukaan d = Karapas menghitam
e = Melanosis
f = Melanosis berkurang - = Mati
Pada  Tabel  2  menjelaskan  gejala  klinis  pasca  infeksi V.  harveyi dan  pasca  perendaman  dengan  salinitas berbeda yang telah dilarutkan ekstrak daun bakau ( A. marina ). Hasil pengamatan gejala klinis dapat dilihat pasca infeksi V.  harveyi berupa  melanosis,  karapas  menghitam,  dan  kaki  renang  merah.  Kemudian  gejala  klinis  pasca perendaman dengan salinitas yang berbeda pada hari ke-1 sampai ke-8 berupa melanosis dan karapas menghitam, walaupun gejala klinis masih terdeteksi  pada hari ke-9, akan tetapi ditunjukkan proses pemulihan/ recovey hal itu ditandai  dengan melanosis berkurang  dan  karapas  menghijau.  Pada  hari  ke-10  sampai  hari  ke-14  mulai menunjukkan kematian kepiting pada perlakuan B2, B3, C1 dan C3 dan perlakuan D3, A3, B1, D2 dan D3 Dapat dilihat pada Gambar 3.
a
Gambar 2. Gejala Klinis Kepiting Bakau Pasca Perendaman Keterangan: (a) Melanosis, (b) Luka Hitam,  (c) Black discoloration, dan (d) Karapas menghijau
3. Histologi hepatopankreas kepiting bakau ( Scylla sp.)
Hasil  pengamatan  histopatologi  hepatopankreas  dari  kepiting  bakau  menunjukkan  bahwa  terdapatnya kerusakan yang berbeda pada setiap perlakuan. Pengamatan histologi hepatopankreas dilihat dari gross anatomy . Gross  anatomy yaitu  pengamatan  bentuk  secara  utuh  pada  hepatopankreas  kepiting  tanpa  menggunakan mikroskop.  Pada  hepatopankreas  kepiting  yang  sehat  terlihat  berwarna  kuning  cerah  dan  bentuk  sempurna (Gambar  7a)  sedangkan  pada  hepatopankreas  pada  kepiting  bakau  yang  sakit  didapatkan  bentuk  tidak  sempurna dan  hepatopankreas  berwarna  hitam  (Gambar  7b).  Pada  perlakuan  A  (perendaman  15  ppt),  perlakuan  B (perendaman  20  ppt),  dan  perlakuan  C  (perendaman  25  ppt)    insang  berwarna  pekat  dan  hepatopankreas  tidak sempurna  seperti  pada  gambar  7b,  namun  pada  perlakuan  D  (perendaman  30  ppt)  insang  berwarna  cerah  dan hepatopankreas  berbentuk  sempurna. Hasil  yang  didapat  menunjukkan  bahwa  pada  perlakuan  D  (30  ppt)  mulai terjadi proses recovery dan bentuk hepatopankreas seperti keadaan normal (sehat).
Gambar 3. Pengamatan gross anatomy kepiting bakau Keterangan: (a) Hepatopankreas yang sehat dan (b) hepatopankreas yang sakit
c N
d c
N V V d a b a b
Gambar 4. Histopatologi Hepatopankreas Kepiting Bakau ( Scylla sp.) dengan perbesaran 100x Keterangan: (a) Hepatopankreas Sakit, (b) Hepatopankreas Sehat, (c) Salinitas 15 ppt, (d) Salinitas 20 ppt, (e) Salinitas 25 ppt, dan (f) Salinitas 30 ppt. N = nekrosis, V= vakuolisis
4. Kualitas air
Tabel 3. Rata-rata Hasil Pengukuran Kualitas Air Media Pemeliharaan Kepiting Bakau ( Scylla sp.) Variabel pengukuran Perlakuan Kisaran A B C D DO (mg/L) 5,15 5,77 5,28 5,75 3,7 – 8,9 a) Salinitas (ppt) 24,47 25,11 24,97 25,23 10 – 25 b) Suhu ( o C) 27,7 27,53 27,75 27,53 28,5 – 30 b) pH 7,48 7,64 7,76 7,65 7,5 – 8,5 b)
Keterangan : a) William (2003), dan b) FAO (2011)
Berdasarkan Tabel 3, parameter kualitas air yang meliputi oksigen terlarut, salinitasm pH dan suhu air yang telah  diukur  berada  dalam  kisaran  normal,  sehingga  kualitas  air  pada  pemeliharaan  kepiting  bakau  pada  kondisi optimal.

## PEMBAHASAN
1. Kelulushidupan kepiting bakau ( Scylla sp.)
Berdasarkan  hasil  pengamatan  selama  penelitian  didapatkan  kelulushidupan  tertinggi  pada  perlakuan  D (58%),  diikuti  dengan  perlakuan  A  (50%),  perlakuan  C  (42%)  dan  kelulushidupan  terendah  pada  perlakuan  B (33%).  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  efektifitas  ekstrak  daun  api-api  ( A.  marina )  berpengaruh  pada kelulushidupan  kepiting  bakau.  Hasil  pada  kelulushidupan  pada  kepiting  uji  diduga  disebabkan  oleh  adanya  zat aktif  yang  terkandung  dalam  daun  api-api.  Zat  aktif  pada  daun  api-api  yang  terkandung  adalah  salah  satunya antibakteri.  Kandungan  antibakteri  yang  ada  pada  daun  api-api  diduga  mempengaruhi  tingkat  kelulushidupan kepiting uji. Dosis ekstrak yang digunakan didalam perendaman yaitu 30.000 ppm. Menurut Wibowo et al. (2009) ekstrak daun api-api A. marina banyak ditemukan senyawa-senyawa aktif meliputi flavonoid, alkaloid, terpenoid, tanin,  dan  saponin  daripada  kulit,  batang,  getah,  akar  dan  buah.  Penggunaan  daun  api-api  diharapkan  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Menurut  Jawetz et  al. (2001)  pertumbuhan  bakteri  yang  terhambat  atau kematian bakteri akibat adanya penghambatan terhadap sintesis protein oleh senyawa-senyawa bioaktif. Menurut Oktavianus (2013), mekanisme penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri dapat berupa kerusakan dinding sel yang mengakibatkan lisis atau penghambatan sistesis dinding sel, pengubahan permeabilitas membran sitoplasma sehingga keluarnya bahan makanan, denaturasi protein sel dan perusakan sistem metabolisme didalam sel.
Tingginya kelulushidupan pada perlakuan A dan D dengan nilai prosentase 50% dan 58%  diduga karena zat aktif yang ada didalam daun api-api yang terserap lebih banyak sehingga dapat menghambat infeksi V. harveyi . Menurut Mariyono  dan  Sundana  (2002),  mekanisme  kerja  bahan  aktif  dilakukan  dengan  mendenaturasi  protein dan merusak membran sel bakteri dengan cara melarutkan lemak pada dinding sel, senyawa ini mampu melakukan migrasi  dari  fase  cair  ke  fase  lemak.  Terjadinya  kerusakan  pada  membran  sel  mengakibatkan  terhambatnya aktifitas  enzim-enzim  spesifik  yang  diperlukan  sehingga  menyebabkan  kematian  pada  bakteri.  Sedangkan  pada perlakuan B dan C kelulushidupannya rendah dengan nilai presentase 33% dan 42% diduga penyerapan zat aktif yang masuk ke dalam tubuh kepiting uji tidak optimal, hal ini diduga pada penyerapan ekstrak daun api-api yang dalam media perendaman dipengaruhi oleh salinitas.
Salinitas  merupakan  salah  satu  faktor  lingkungan  yang  berpengaruh  pada  kehidupan  organisme  akuatik termasuk kepiting bakau. Salinitas yang digunakan selama pemeliharan pada kepiting bakau ( Scylla sp.) adalah 25 ppt, hal ini diperkuat oleh (Agus, 2008) salinitas yang sesuai untuk pemeliharaan kepiting adalah 15–25 ppt. Nilai kelulushidupan  pada  perlakuan  A  (perendaman  15  ppt)  dan  perlakuan  D  (perendaman  30  ppt)  dengan  50%  dan
N V V N e f
58%  presentasenya  lebih  tinggi  dari  perlakuan  B  (perendaman  20  ppt)  dan  perlakuan  C  (perendaman  25  ppt) dengan  33%  dan  42%  berkaitan  dengan  osmoregulasi,  osmoregulasi  berkaitan  dengan  penggunaan  energi  dan tekanan  osmotik.  Menurut  Kursistiyanto et  al .  (2012)  dalam  peristiwa  osmoregulasi  diperlukan  adanya penggunaan energi yang seharusnya untuk pertumbuhan. Energi yang dipergunakan untuk kegiatan osmoregulasi dipergunakan untuk respon terhadap perubahan tekanan osmotik pada media, apabila tingkat kerja osmotik rendah maka  hanya  diperlukan  sedikit  energi  untuk  kegiatan  osmoregulasi.  Pada  kondisi  hiposmotik  dan  hiperosmotik dimana  tingkat  kerja  osmotiknya  semakin  besar,  maka  dari  itu  pembelanjaan  energi  yang  dipergunakan  untuk proses osmoregulasi juga semakin besar dan ini akan menyebabkan porsi energi yang ada untuk pertumbuhan jauh lebih kecil, Hastuti et al. (2015) mengatakan bahwa 25 ppt merupakan salinitas yang paling mendekati isoosmotik kepiting, karena nilai gradien osmotik yang kecil, sehingga dengan diberikannya perendaman 15 ppt (perlakuan A) merupakan kondisi hiperosmotik dan pada perendaman 30 ppt (perlakuan D)  merupakan  kondisi hipoosmotik.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  kelulushidupan  didapatkan  salinitas  terbaik  dengan  nilai  presentase  58% yaitu  pada  perlakuan  D  (perendaman  30  ppt).  Peranan  salinitas  dalam  penelitian  ini  untuk  mengetahui  kondisi yang optimal dan mengetahui tekanan osmotik yang sesuai pada kepiting bakau dalam perendaman ekstrak daun api-api, sehingga didapatkan  hasil bahwa  kepiting bakau berada pada kondisi isoosmotik, namun  mampu toleran terhadap  kondisi  hiperosmotik  dan  hipoosmotik.  Pengaruh  ekstrak  daun  api-api  diharapkan  mampu  terserap  ke dalam tubuh kepiting dengan adanya proses osmoregulasi.
2. Gejala klinis kepiting bakau ( Scylla sp.)
Gejala klinis yang didapatkan selama penelitian pasca infeksi adalah perubahan morfologi kepiting ditandai dengan  munculnya melanosis ,  karapas  menghitam,  kaki  renang  merah,  dan  terdapatnya  karat  pada  karapas. Sedangkan  gejala  klinis  kepiting  bakau  pasca  perendaman  ditandai melanosis pada    bagian  karapas,  munculnya luka hitam pada capit kepiting,  adanya karapas menghitam, karat ( Rust spot ) pada kaki kepiting mulai berkurang dan  karapas  mulai  menghijau.  Hal  ini  ditemukan  pada  penelitian  Lavilla-Pitogo  dan  Pena,  (2004);  Sarjito et  al ., (2014); Joseph dan Ravichandran (2012); Dinakaran et. al., (2013),  bahwa efek yang diterima oleh kepiting bakau ( Scylla sp.) akibat serangan bakteri vibrio adalah melanosis pada karapas, perubahan warna  hitam pada karapas, kebanyakan anggota tubuh lepas/rusak saat terinfeksi bakteri, respon pasif, gerakan lemah serta naik kepermukaan air,  mulut  (insang)  bergerak  cepat  hingga  menghasilkan  buih-buih,  “bintik  karat”  ( Shell  lesion )  seperti  berwarna oranye muncul pada dorsal karapas. Penyakit yang ada dikarapas memiliki ciri adanya luka, merupakan penyakit yang biasa ditemukan pada karapas dan kepiting akan mengalami penurunan aktifitas. Hal ini juga dibenarkan oleh Chen et al., (2011) mengatakan bahwa kepiting yang sakit akan menurunnya agresifitas. Pada setiap perlakuan A (15 ppt), B (20 ppt), C (25 ppt), dan D (30 ppt) didapatkan hasil berupa karapas menghitam, melanosis, munculnya rust spot dan kepiting naik kepermukaan. Pemeliharaan kepiting bakau setiap perlakuan berjumlah 12 ekor selama masa pemeliharaan. Hal ini diduga bahwa tingkat patogenitas dari bakteri V. harveyi tinggi sehingga kepiting tidak dapat mentoleransinya.

## 3. Histologi hepatopankreas
Histologi pada kepiting bakau menunjukkan adanya perubahan pada organ  hepatopankreas dalam keadaan rusak.  Bahwa  hasil  pengamatan  hepatopankreas  diduga  mengalami  nekrosis  dan  vakuolisis  di  semua  perlakuan. Adanya  perubahan  inti  sel  dan  tubulus  pada  hepatopankreas  menyebabkan  bentuk  yang  tidak  normal  antar jaringan.  Menurut  Li  (2008) mengatakan  hepatopankreas  kepiting  sehat  memiliki  tubulus  hepatopancreatik  yang sehat dan jaringan ikat yang kenyal antara tubulus. Hal ini perkuat oleh Sari et al., (2007) bahwa hepatopankreas pada  dasarnya  terdiri  atas  tubulus  bercabang  dan  berbagai  jenis  lapisan  epitel  tubulus,  dengan  adanya  paparan bahan kimia bisa mengakibatkan perubahan struktur pada tubulus sel epitel yang menyebabkan adanya perubahan histologis.  Perubahan  histologis  memberikan  informasi  adanya  tingkat  stres,  kerentanan  dan  adaptif  kemampuan organisme menghadapi stres, hal ini menunjukkan adanya reaksi terhadap perubahan lingkungan.
Pada  perlakuan  A  (15  ppt),  B  (20  ppt),  C  (25  ppt),  dan  D  (30  ppt)    kerusakan  hepatopankreas  diduga disebabkan  oleh V.  harveyi telah  menginfeksi  jaringan  hepatopankreas  kepiting  bakau.  Pada  jaringan hepatopankreas terlihat inti sel berbentuk bulat sempurna, tubulus pada hepatopankreas berbentuk bintang serta sel epitel  terlihat  menempel  pada  lumen.    Menurut  Sari et  al., (2012)  dalam  penelitiannya  didapat  hasil  pada perubahan histologi yang terlihat pada organ kepiting bakau ( Scylla sp.) adalah membran hepatopankreas tampak kusut dan vakuola lebih terbentuk, lalu epitel tampak tidak beraturan dan bentuk bintang pada lumen sudah tidak terlihat  jelas  dan  vakuola  semakin  jelas. Hal  ini  dijelaskan  oleh  Bhavan  dan  Geraldine  (2000)  bahwa hepatopankreas  tidak  hanya  merupakan  organ  pencernaan  yang  memiliki  kemapuan  penyerapan,  penyimpanan, dan  sekresi  akan  tetapi  biotranformasi  dan  detoksifikasi  alami  pada  kelas  krustacea.  Perendaman  salinitas didapatkan  hasil  bahwa  pada  salinitas  30  ppt  diduga  mampu  memberikan  efek  penyembuhan  ( Recovery )  pada hepatopankreas namun masih tergolong lambat untuk kembali ke dalam keadaan normal serta pengaruh terhadap aktifitas patogen dari bakteri V. harveyi yang merusak jaringan hepatopankreas kepiting bakau. 4. Kualitas air
Nilai dari parameter kualitas air seperti DO, salinitas, suhu, dan pH menunjukkan bahwa kualitas air selama penelitian berada pada kisaran yang layak. DO dan salinitas selama pemeliharaan berkisar antara 5,15 – 5,75 mg/l dan 24,47 – 25,23 ppt. Menurut Septiningsih dan Jompa (2012) bahwa kisaran salinitas 19,4  – 20,6 masih layak untuk  daya  hidup  kepiting  bakau  dikarenakan  kisaran  toleransi  salinitas  antara  <  15  ppt  -  >  30  ppt.  Sedangkan pada  kisaran  DO  pada  media  pemeliharaan  pada  kisaran  3,8  – 6,6  mg/l  cukup  optimum.  Hasil  pengukuran  pada
semua perlakuan selama pemeliharaan menunjukkan nilai suhu berkisar antara suhu 27,53 – 27,7 o C dan pH 7,48 – 7,65.  Menurut  Agus  (2008),  berdasarkan  hasil  yang  didapat  pada  parameter  suhu  berkisar  antara  26  –  30 o C termasuk  layak  untuk  kehidupan  dan  pertumbuhan  kepiting  bakau.  Sementara  menurut  Herlinah et  al., (2015) kisaran pH dalam pemeliharaan kepiting bakau berkisar 7,5  – 8,0 nilai termasuk dalam  kondisi layak dan sesuai sebagai pemeliharaan.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan yang dapat diambil dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Salinitas  membantu  sistem  kerja  ekstrak  daun  api-api  ( Avicennia  marina )  dalam  mengeluarkan  zat  aktif, sehingga perendaman ekstrak daun api-api berpengaruh terhadap kelulushidupan kepiting bakau ( Scylla sp.), dengan nilai kelulushidupan tertinggi adalah pada perlakuan D (58%) dan terendah pada perlakuan B (33%).
2. Pada  perendaman  ekstrak  daun  api-api  dengan  salinitas  30  ppt,  merupakan  salinitas  terbaik  yang  dalam penelitian ini untuk pengobatan kepiting bakau ( Scylla sp.) yang diinfeksi V. harveyi.
3. Gejala  klinis  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian  adalah  perubahan  morfologis  yaitu melanosis ,  karapas menghitam, kaki renang merah, adanya luka/borok pada bagian abdomen karapas, rust spot , dan perubahan tingkah laku antara lain kepiting naik kepermukaan air serta munculnya buih pada kepiting.
Saran yang dapat diberikan dari penelitian yang dilakukan adalah sebaiknya dilakukan penelitian mengenai perendaman pada salinitas dengan rentang 10 ppt dari setiap perlakuan dari penelitian ini serta penggunaan ekstrak daun bakau ( A. marina ) dengan pelarut yang berbeda.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan banyak terimakasih kepada Dr. Ir. Sarjito, M.App.Sc. dan Dr. Ir. Desrina, M.Sc. yang telah membantu dalam penyusunan penulisan ini, serta keluarga dan Tim Crab Diseases yang telah membantu kelancaran selama penelitian dan memberikan dukungan.

## DAFTAR PUSTAKA
Agus,  M.  2008.  Analisis Carrying  Capacity Tambak  Pada  Sentra  Budidaya  Kepiting  Bakau  ( Scylla sp.)  di Kabupaten  Pemalang,  Jawa  Tengah.  [TESIS]  Program  Studi  Magister  Manajemen  Sumberdaya  Pantai, Universitas Diponegoro.
Bhavan P.S. and Geraldine P. 2000. Histopathology of the hepatopancreas and gills of the prawn Macrobrachium malcolmsonii exposure to endosulfan. Aquatic Toxicology . 50 (4) : 331-339.
Danata, R.H. dan A. Yamindago. 2014. Analisis Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Mangrove Avicennia marina dari  Kabupaten  Trenggalek  dan  Kabupaten  Pasuruan  terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus  aureus dan Vibrio alginolyticus . Jurnal Kelautan. 7 (1) : 12-19. ISSN: 1907-9931.
Dinakaran,  GK.,  P.  Soundarapandian.,  and  D.  Varadharajan.  2013. Tail  Rot  Disease  in  Macrobrachium  idella idella (Hilgendroft,  1898).  Faculty  of  Marine  Sciences.  Centre  of  Advanced  Study  in  Marine  Biology. Annamalal University. India. Journal Drug Merab Toxicol 4(4) : 1-3.
Effendi, I. 1997. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusatama. Yogyakarta.  163 hlm. Fadli, N. 2000. Evaluasi Perlakuan Pemberian Immunostimulan terhadap Larva Udang Windu ( Penaeus monodon Fabr.)  di  Hatchery.  [Skripsi].  Jurusan  Budidaya  Perairan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan.  IPB. Bogor, 47 hlm.
Gunarto.  1992.  Budidaya  Kepiting  Bakau  (Scylla  serrata  Forskal)  di  Tambak.  Balai  Penelitian  Budidaya  Pantai.
Maros.
Hatmanti,  A.  2003.  Penyakit  Bakterial  pada  Budidaya  Krustasea  serta  Cara  Penanganannya. J.  Oseana ,  V. XXVIII, Nomor 3, 2003 : 1-10.
Herlinah,  A.    Sulaeman  dan  A.  Tenriulo.  2010.  Pembesaran  Kepiting  Bakau  ( Scylla  serrata )  di  Tambak  dengan Pemberian Pakan Berbeda. Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur 169-174.
_______. Tenriulo, E. Septiningsih dan H. S. Suwoyo. 2015. Respon Molting dan Sintasan Kepiting Bakau ( Scylla olivacea ) yang Diinjeksi dengan Ekstrak Daun Murbei ( Morus spp.). Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis Vol 7(1): 247-258.
Jithendran, Poornima M., C.P. Balasubramanian and Kulasekarapandian S. 2010. Diseases of Mud Crabs ( Scylla sp.): an overview. Indian J. Fish ., 57(3) : 55-63. Joseph,  F.R.  S.  and  S.  Ravichandran.  2012. Shell  Diseases  of  Brachyuran  Crabs .  Centre  of  Advanced  Study  in Marine Biology. Annamalal University, India. Journal of Biological Sciences 12(3) : 117-127.
Karim, M. Y. 2007. The Effect of Osmotic at Various Medium Salinity on Vitality of Female Mud Crab ( Scylla olivacea ). Jurnal Protein. 14 (1) : 65-72. Kementerian Kelautan dan Perikanan. 2011. Info Komoditas Utama 2011. Jakarta.
______________________________. 2012. Kelautan dan Perikanan dalam Angka 2012. Jakarta.
Kumaravel,  K.,  S.  Ravichandran,  and  S.  Sritama-Bose.  2010. In  vitro antimicrobial  activity  of  shrimps haemolymph on clinical pathogens. African J. Microbiol. Research. 4(23):2592-2596.
Lavilla,  Celia  R.P.  and  Pena,  Leobert  D.  de  la.  2004.  Diseases  in  Farmed  Mud  Crabs Scylla sp.:  Diagnosis, Prevention,  and  Control.  Aquacultur  Departement  Southeast  Asian  Fisheries  Development  Center. Government of Japan Trust Fund.
Li, Y.Y, X.A. Xia, Q.Y. Wu, W. H. Liu and Y.S. Lin. 2008. Infection with Hematodinium sp. in Mud Crabs Scylla serrata Cultured in Low Salinity Water in Southern China. Meistika,  R.  2011.  Analisis  Faktor-Faktor  yang  Memengaruhi  Permintaan  Ekspor  Kepiting  Indonesia.  [Skripsi] Fakultas Ekonomi dan Manajemen, IPB, Bogor.
Prabhu, V.V. & Guruvayoorappan, C. 2012. Phytochemical screening of ethanolic extract of mangrove Avicennia marina Forssk.)Vierh. Der Pharmacia Sinica , Vol.3(1): 64-67.
Poornima,  M,  R.  Singaravel,  J.  J.  S.  Rajan,  S.  Sivakumar,  S.Ramakrishnan,  S.V.  Alavandi,  and  N.  Kalaimani.
2012. Vibrio  harveyi Infection  in  Mud  Crabs  ( Scylla  tranquebarica )  Infected  with  White  Spot  Syndrome Virus. International J. of Research in Biological Sciences 2012; 2 (1): 1-5. Purnobasuki, H. 2004. Potensi Mangrove Sebagai Tanaman Obat. Jurnal Biota., 9 (2):125 hlm. Rangka,  N.A  dan  Sulaeman.  2010.  Pemacuan  Pergantian  Kulit  Kepiting  Bakau  ( Scylla  serrata )  Melalui Manipulasi  Lingkungan  untuk  Menghasilkan  Kepiting  Lunak.  Prosiding  Forum  Inovasi  Teknologi Akuakultur. 179-185.
Retnowati,  Y.,  N.  Bianglangi,  N.  W.  Posangi.  2011.  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus pada  Media yang Diekspos dengan Infus Daun Sambiloto ( Andrographis paniculata ). Saintek 6(2). Sari,  A.  H.  W,  Y.  Risjani,  dan  A.  P.  W.  Marhendra.  2007.  Histologi  Organ  Hepatopankreas  Kepiting  Bakau ( Scylla serata ) pada Konsentrasi Sublethal Fenol sebagai Peringatan Dini ( Early warning ) Toksisitas Fenol di Estuaria. ISSN 2087-2852. J. Exp. Life Sci. 2 (1): 36-41.
Sarjito.  2010.  Aplikasi  Biomolukuler  untuk  Deteksi  Agensia  Penyebab  Vibriosis  pada  Ikan  Kerapu  dan  Potensi Bakteri Sponge Anti Vibriosis. [Disertasi]. Program Pasca Sarjana, Universitas Diponegoro, Semarang, 20- 30 hlm.
______,  S.B.  Prayitno  dan  F.B.  Feriandika.  2014.  Identifikasi  Agensia  Penyebab  Vibriosis  Pada  Penggemukkan Kepiting  Bakau  ( Scylla  serrata )  di  Pemalang.  Journal  Of  Aquaculture  Management  and  Technology 3(2):126-134.
Septiningsih,  E.  dan  H.  Jompa.  2012.  Studi  Aspek  Fisika,  Kimia,  dan  Biologi  Kualitas  Air  Media  Pemeliharaan Krablet Kepiting Bakau ( Scylla olivacea ) Melalui Percobaan dengan Penambahan Serasah Daun Mangrove ( Rhizophora mucronata ). Prosiding Seminar Nasional Limnologi VI. 720-738 hlm.
Trianto, A., E. Wibowo, Suryono, dan R. S. Sapta. 2004. Ekstrak Daun Mangrove Aegiceras corniculatum sebagai Antibakteri Vibrio  harveyi dan Vibrio  parahaemolyticus .  Ilmu  Kelautan,  Universitas  Diponegoro.  9(4)  : 186-189 ISSN 0853-7291.
Wibowo  C,  Kusmana  C,  Suryani  A,  Hartati  Y,  Oktadiyani  P.  2009.  Pemanfaatan  pohon  mangrove  api-api (Avicennia spp.) sebagai bahan pangan dan obat. Di dalam: Prosiding Seminar Hasil-Hasil Penelitian IPB 2009 Buku 1: bidang pangan dan energi. Bogor: LPPM-IPB.
Zulham,  R.  2004.  Potensi  Ekstrak  Mangrove  Sonneratia  caseolaris  dan  Aviceniia  marina  untuk  Pengendalian Bakteri  Vibrio  harveyi  pada  Larva  Udang  Windu  (Panaeus  monodon  Fabr.)  [Skripsi].  Jurusan  Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor, 100 hlm.