## ABSTRAK

## ABSTRACT
Beluntas dan Meniran merupakan tanaman obat tradisional yang mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, dan triterpenoid. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui adanya aktivitas antibakteri ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini maserasi dengan etanol 96%. Isolasi dan identifikasi bakteri Staphylococcus  aureus  dengan  media  VJA  (Vogel  Johnson Agar),  pengecatan  gram,  uji  katalase,  dan  uji  katalase. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus. Ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran pada perbandingan 1 : 0, 2 : 1, 1 : 1, 1 : 2, dan 0 : 1 dengan konsentrasi 50% terhadap bakteri Staphylococcusaureus dari rumah sakit adalah 10,67 mm, 13 mm, 17 mm, 17 mm, dan 20 mm. Ekstrak etanolik daunBeluntas dan Meniran pada perbandingan 1 : 0, 2 : 1, 1 : 1, 1 : 2, dan 0 : 1 terhadap bakteri Staphylococcusaureus kultur laboratorium adalah 11 mm, 13,67 mm, 14 mm, 16,67 mm, dan 18 mm. Ekstrak etanolikdaun Beluntas dan Meniran dengan perbandingan 0 : 1 merupakan ekstrak yang memiliki zona hambat paling luas terhadap bakteri Staphylococcus aureus dari rumah sakit dan kultur laboratorium.

## Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanolik Daun Beluntas
( Pluchaea indica Less.) dan Meniran ( Phyllanthus niruri L.)
terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Antibacterial Activity Combination ff Ethanolic Ekstract Beluntas Leaf (Pluchaea indica Less.) and Meniran (Phyllanthus niruri L.) Againts Staphylococcus aureus.
Bella Agil Agustin, Nony Puspawaty, Rizal Maarif Rukmana* Program Studi D-IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi Surakarta * Corresponding author : rizal.nerazuri@gmail.com
Beluntas and Meniran a traditional medicinal plants compounds containing an alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, and triterpenoid. The purpose of this study is to find the antibacterial activity extract etanolik leaves Beluntas and leaves Meniran of bacteria Staphylococcus aureus.
A  method  of  extraction  who  used  in  this  research  maceration  using  ethanol  96  %.  Isolation  and  identification bacteria  Staphylococcus  aureus  to  the  media  VJA  (Vogel  Johnson  Agar),  painting  grams,  test  catalase  and  test coagulase. Testing methods have antibacterial activity diffusion.
The research results show that etanolic extracts of Beluntas and Meniran leaves having antibacterial activity of Staphylococcus aureus. Extract etanolik leaves Beluntas and leaves Meniran from the comparison 1: 0, 2: 1, 1 : 1, 1: 2, and 0: 1 by concentration of the 50 % against bacteria Staphylococcusaureus from the hospital were 10,67 mm, 13 mm , 17 mm, 17 mm, and 20 mm. Etanolic extract of Beluntas and Meniran leaves from the comparison 1: 0, 2: 1, 1 : 1, 1: 2 , and 0: 1 against bacteria Staphylococcus aureus laboratory culture respectively is 11 mm , 13,67 mm, 14 mm, 16.67 mm, and 18 mm. Etanolic extract of Beluntas and Meniran leaves by comparison 0: 1 is extract having a zone obstruent the most extensive against bacteria Staphylococcus aureus from hospital and the culture laboratory.
Kata kunci: Antibakteri, Ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran, Staphylococcus aureus
Keywords: Antibacterial, Etanolic extract of Beluntas and Meniran leaves, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang mempu- nyai iklim tropis dan lembab. Salah satu penya- kit yang paling sering diderita oleh masyarakat di  Indonsia  adalah  penyakit  infeksi.  Penyakit infeksi  merupakan  penyakit  yang  disebabkan
oleh bakteri, virus, jamur, dan mikrobia lainnya (Muhaimin et al., 2003). Berdasarkan penelitian yang  dilakukan  oleh  Badan  Kesehatan  Dunia (WHO)  penyakit  infeksi  kulit  di  Indonesia mencapai 9,8%. Penyakit infeksi pada kulit di sebabkan  oleh  beberapa  macam  bakteri,  salah
Available online at http://ejurnal.setiabudi.ac.id/ojs/index.php/biomedika

## BIOMEDIKA
satunya  adalah  bakteri Staphylococcus  aureus (Green, 2005).
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri flora  normal  pada  kulit,  hidung,  tenggorokan, dan  saluran  pencernaan  manusia. Staphylo- coccus aureus merupakan bakteri Grampositif, berbentuk bulat ( coccus ) dengan susunan berge- rombol seperti anggur. Bakteri ini dapat ditemu- kan di tanah, udara, air, susu, makanan dan di lingkungan sekitar (Jawetz et al., 2001). Infeksi yang  disebabkan  oleh Staphylococcusaureus ditandai dengan kerusakan jaringan yang diser- tai abses bernanah (Moeloek, 2005).
Menurut Green (2005) banyak tanaman obat yang  telah  digunakan  untuk  menyembuhkan infeksi-infeksi  yang  disebabkan  oleh  bakteri yang  sekarang  telah  resisten.  Berdasarkan WHO  ditemukan  banyak  tanaman  obat  yang memiliki khasiat antibakteri yang kuat, dan be- berapa tanaman obat tersebut memiliki kemam- puan  yang  lebih  kuat  dibandingkan  antibiotik. Beberapa contoh tanaman obat tersebut adalah tanaman Beluntas dan Meniran.
Tanaman Beluntas ( Pluchaea indica Less.) merupakan salah satu tanaman dari suku Astera- ceae  yang  mengandung  alkaloid,  flavonoid, tanin, asam klorogenik, natrium, kalium, mag- nesium, dan fosfor (Agoes, 2010). Daun Belun- tas  ( Pluchaea  indica Less.)  memiliki  sifat antibakteri dan khasiat daun Beluntas ini diduga diperoleh dari kandungan senyawa yang berada di dalamnya (Dalimartha, 1999).
Tanaman  Meniran  ( Phyllantus  nirui L.) merupakan  salah  satu  tanaman  dari  famili Euphorbiaceae yang tumbuh liar di tempat lem- bab dan berbatu, seperti semak-semak dan tanah diantara  rerumputan  (Djauhari  dan  Hermani, 2004). Meniran mengandung berbagai senyawa kimia antara lain alkaloid, lignin, triterpenoid, flavonoid  (quersetin,  quersitrin,  isoquersitrin, astragalin,  rutin,  kaemferol-4,  rhamnopy- noside),  asam  lemak  (asam  ricinoleat,  asam linoleate,  asam  linolenat),  vitamin  c,  kalium, damar,  tannin,  geranin,  saponin  (Permadi,
2006).  Berdasarkan  kandungan  dari  senyawa kimia yang ada pada Meniran tersebut, Meniran dapat digunakan sebagai antibakteri. Berdasar- kan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Candrasari  (2012)  ekstrak  etil  asetat  Meniran pada  konsentrasi  20%  dapat  menghambat bakteri Staphylococcus aureus.
Berdasarkan uraian di atas maka perlu dila- kukan  penelitian  tentang  aktivitas  antibakteri kombinasi  ekstrak  etanolik  Meniran  dan  Me- niran terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat  yang  digunakan  untuk  penelitian  ini adalah: nampan, kain, blender, ayakan 40 mesh, baker  glass ,  evaporator,  oven,  neraca  analitik, cawan  petri  steril,  kapas  lidi  steril,  pipet  ukur steril,  api  spiritus,  inkas,  tabung  reaksi  steril, jarum  ose,  mikroskop, inkubator,  autoklave , kompor,  botol  sampel  steril,  paper  disk, boorproof, mistar, alat pelindung diri lengkap.
Bahan-bahan  lain  yang  digunakan  seperti: Spiritus,  cat  Gram  (Kristal  violet,  iodium, alkohol-aseton,  dan  safranin),  minyak  imersi, aquades,  etanol,  larutan  H2O2  3%,  larutan plasma citrate, Ciprofloxacin.

## Prosedur Penelitian
1.  Pembuatan  Serbuk  Daun  Beluntas  dan Meniran.
Tiga kilogram daun Beluntas dan Meniran dicuci  bersih  supaya  bersih  dari  kotoran  debu kemudian  dikeringkan  dengan  menggunakan oven  hingga  kering.  Daun  yang  sudah  kering kemudian  dihaluskan  dan  kemudian  diayak dengan mesh 40.

## 2.  Penentuan Nilai Kadar Air Serbuk Daun Beluntas Dan Meniran
Penentuan  kadar  air  daun  Beluntas  dan Meniran masing-masing ditimbang 20 gram dan dimasukkan  dalama  labu  alas  bulat  kemudian ditambah xylen 150 ml. Dipasang alat Bidwell
Sterling dan  dipanaskan  dengan  api  kecil, pemanasan dihentikan apabila sudah tidak ada air  yang  menetes  lagi  pada  tabung skala receiver.

## 3.  Identifikasi Golongan Senyawa
a)  Saponin
Dua  ml  ekstrak  ditambah  10  ml  aquadest panas  dalam  tabung  reaksi,  dikocok  kuat-kuat selama 10 detik, kemudian ditambah beberapa tetes HCl 2N. hasil positif jika terbentuk busa stabil (Setyawati et al., 2014).
b)  Flavonoid
Dua ml ekstrak ditambah 2 ml etanol 95%, 0,05 gramserbuk seng dan 2 ml HCl 2N. larutan didiamkan  selama  1  menit  dan  kemudian ditambah  2  ml  HCl  pekat.  Hasil  positif  jika terbentuk  warna  merah  jingga  atau  kuning (Rumanggit et al., 2015).
4. Pembuatan  Ekstrak  Etanolik  Daun Beluntas dan Meniran metode maserasi
Beluntas dan Meniran dibuat perbandingan

## 5.  Isolasi Bakteri
Sampel digoreskan pada media VJA ( Vogel Johnson  Agar )  menggunakan  jarum  ose  lalu
0 dinkubakasi  pada  suhu  37 C  selama  24  jam. Hasil  isolasi  pada  media  VJA  ( VogelJohnson Agar ) menunjukkan hasil positifadanya bakteri Staphylococcus  aureus ditandai  dengan  koloni berwarna  hitam,  permukaan  cembung,  dan  di sekitar koloni terbentuk warna kuning.

## 6.  Identifikasi Bakteri
a)  Pengececatan Gram: (1) Dibuat olesan tipis suspensi  dari  koloni  murni  bakteri  pada  objek glass  yang  bersih,  dikering-anginkan.  Setelah kering difiksasi dengan cara melewatkan bagian bawah objek glass di atas api bunsen (2) Olesan bakteri  digenangi  dengan  cat  Gram A  (Kristal Violet)  selama  1  menit  (3)  Dibilas  dengan  air mengalir  beberapa  detik  kemudian  dikering- anginkan (4) Olesan bakteri digenangi dengan cat Gram B (iodium) sebanyak 3 tetes didiam- kan selama 1 menit (5) Dibilas dengan air meng- alir beberapa detik kemudian dikering-anginkan (6) Ditambahkan cat Gram C (alkohol-aseton) untuk  melunturkan  sampai  lapisan  berwarna pucat kurang lebih selama 30 menit  (7) Dibilas dengan  air  mengalir  beberapa  detik  kemudian dikering-anginkan  (8)  Diteteskan  cat  Gram  D (Safranin) dan dibiarkan selama 2 menit, kemu- dian dicuci dengan air mengalir lalu di kering- anginkan  (9)  Bagian  bawah  objek  glass  dike- ringkan dengan tissue, kemudian diamati di ba- wah mikroskop dengan perbesaran 100x10 kali menggunakan minyak emersi. Hasil positif jika sel  berwana  ungu  berbentuk  bulat  dengan
c)  Tanin
Dua  ml  ekstrak  ditambah  2  ml  air  dan kemudian ditambah beberapa tetes FeCl3 1%. Hasil  positif  jika  terbentuk  larutan  berwarna biru kehitaman (Sastrawan et al., 2013). d)  Triterpenoid
Uji  triterpenoid  menggunakan  metode Lieberman-Burchard (LB). Dua mg ekstrak ke- ring  dilarutkan  di  anhidrat  asetat,  dipanaskan sampai mendidih, didinginkan dan kemudian 1 ml H2SO4 pekat ditambahkan di tabung reaksi, jika terbentuk warna atau ungu maka terdapat kandungan triterpenoid (Balafif et al., 2013). e)  Alkaloid
Empat  ml  ekstrak  ditambah  0,5  ml  HCl, kemudian dibagi menjadi dua tabung. Tabung 1 ditambah  reagen  dragendrof  dan  tabung  2 ditambah  2-3  tetes  reagen  mayer.  Positif  jika tabung 1 terdapat endapan jingga dan tabung 2 terdapat  endapan  kekuningan  (Ningsih etal.,
1 : 0, 2 : 1, 1 : 1, 1 : 2, dan 0 : 1. Serbuk daun Beluntas  dan  Meniran  tersebut  dimasukkan dalam  botol  maserasi,  ditambahkan  dengan pelarut etanol 96% dengan perbandingan 1:10 (100  gram  serbuk  +  1  liter  pelarut).  Maserasi dilakukan  kurang  lebih  dua  hari  dan  sesekali digojok. Setelah dua hari hasil maserasi disaring dengan kertas saring sehingga didapat filtrat
Tabel 1. Hasil Penentuan Kadar Air Serbuk Daun Beluntas dan Meniran
Tanaman Kadar Air (%) Beluntas 9,9 Meniran 7,5 Tabel 2. Hasil Identifikasi Golongan Senyawa Kandungan Beluntas Meniran Alkaloid + + Flavonoid + + Tanin + + Saponin + + Triterpenoid - -
Gambar 1. (a) Koloni Staphylococcus aureus dari RS pada media VJA (b)  Koloni Staphylococcus aureus kultur laboratorium pada media VJA
(a)                                    (b)
(a)                                    (b) Gambar 2. (a) Uji katalase Staphylococcusaureus dari RS (b)  Uji katalase Staphylococcusaureus kultur laboratorium

## susunan bergerombol seperti anggur.

## 8.  Uji Sensitivitas
(1) Media  Mueller  Hinton  Agar  steril dituang ke dalam cawan petri dengan ketebalan ±0,5  cm  dibiarkan  memadat  pada  suhu  kamar (2)  Kapas  lidi  steril  dicelupkan  pada  suspensi bakteri  uji  lalu  diinokulasikan  secara  merata pada media Mueller Hinton Agar (MHA) yang telah memadat. Ditunggu beberapa menit sam- pai kering, (3) Disk yang telah direndam selama 24 jam pada ekstrak di letakkan di atas media Mueller  Hinton  Agar  (MHA),  kontrol  positif antibiotik  Ciprofloxacin  dan  kontrol  negatif Dimetilsulfoksida (DMSO 2%) (4) Diinkubasi
0 pada  suhu  37 C  selama  24  jam  dan  perlaku- antersebut  dilakukan  3  kali  pengulangan  4) setelah  Perubahan  warna  yang  terjadi  pada media  disebabkan  oleh  asam  yang  dihasilkan pada metabolisme bakteri atau akibat kemam- puan  Staphylococcus  aureus  untuk  memfer- mentasi  manitol  itu  diukur  zona  jernih  yang terbentuk disekitar paper disk.
b)  Uji Katalase
Koloni yang tumbuh berwarna hitam pada media  VJA  diuji  katalase  dengan  H2O2  3% yang  diteteskan  pada  object  glass  kemudian diambil  1  ose  koloni.  Hasil  positif  ditandai dengan terbentukknya gelembung c)  Uji Koagulase
Koloni yang di tanam pada media BHI diuji koagulase  dengan  ditambahkan  1  ml  larutan plasma  citrat  ditambah  1  ml  suspensi  bakteri
0 kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 C  selama 18-24  jam.  Hasil  positif  jika  terbentuk gumpalan.

## 7.   Pembuatan Suspensi Bakteri
Biakan  bakteri Staphylococcus  aureus di- inokulasikan pada media BHI. Kekeruhan dise- tarakan  dengan  Standart  Mc.  Farland  1,5x103 cfu/ml (1,5 ml Barium Klorida dalam 8,5 Asam Sulfat).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1.  Hasil Penentuan Kadar Air Serbuk Daun Beluntas dan Meniran (Tabel 1)
Kadar  air  pada  serbuk  Beluntas  9,9%  dan Meniran 7,5% sehingga kedua serbuk tersebut sudah  memenuhi  standar  untuk  pembuatan ekstrak yaitu kurang dari 10% (Emilan, 2011).

## 2.   Hasil  Identifikasi  Golongan  Senyawa (Tabel 2)

## 3.   Hasil Isolasi Bakteri
Hasil  isolasi  dan  identifikasi  bakteri Staphylococcus aureus secara makroskopis pa- da  media  VJA  ( Vogel  Johnson  Agar )  didapat koloni berbentuk bulat, warna koloni hitam, tepi koloni halus, permukaan koloni cembung, dan daerah sekitar koloni berwarna kuning (Todar, 2014).

## 4.    Hasil Identifikasi Bakteri
a)    Hasil Uji Katalase
Hasil  menunjukkan  bahwa  terbentuk  ada- nya  gelembung.  Uji  katalase  bertujuan  untuk membedakan Streptococcus sp . (katalase nega- tif) dengan Staphylococcus sp. yang menghasil- kan  enzim  katalase  (katalase  positif)  (Todar, 2005).
b)    Hasil Pengecatan Gram (Gambar 3)
Pengecatan    Gram    dilakukan    bertujuan untuk  membedakan  bakteri  Gram  positif  dan bakteri  Gram  negatif.  Hasil  pengecatan  Gram Staphy-lococcus aureus berwarna ungu,bentuk bulat,  susunan  bergerombol,  dan  merupakan bakteri Gram positif.
Staphylococcus  aureus merupakanbakteri
Gram  positif  sehingga  pada  pengecatan  Gram akan berwarna ungu karena bakteri Gram positif mampu  mempertahankan  Gram  A  (Kristal Violet), bakteri Gram positif akan mengikat zat tersebut. Pemberian cat Gram B (iodium) akan meningkatkan  afinitas  pengikatan  zat  warna sedangkan pemeberian cat Gram C (alkohol – aseton)  akan  melunturkan  cat,  hal  ini  karena bakteri  Gram  positif  memiliki  lapisan  pepti- doglikan yang tebal. Pada saat penambahan cat Gram D (safranin) tidak menyebabkan peruba- han  warna  pada  bakteri  Gram  positif  (Supar- tono, 2006).
c)    Hasil Uji Koagulase (Gambar 4)
Hasil  menunjukkan  adanya  enzim  koagu- lase. Uji koagulase bertujuan untuk mengetahui kemampuan  bakteri  menghasilkan  enzim koagulase. Reaksi koagulase positif sangat pen- ting untuk membedakan Staphylococcus aureus dengan  spesies Staphylococcus yang  lain (Cowan, 1999).

## 5.   Hasil Uji Sensitivitas
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dengan menggunakan metode difusi. Paper disk diren- dam pada ekstrak dengan perbandingan 1:0, 2:1, 1:1, 1:2, dan 0:1 menggunakan konsentrai 50% dan untuk kontrol negatif direndam pada DMSO 2% selama 24 jam kemudian diletakkan di atas media MuellerHinton Agar yang telah diinoku- lasikan Staphylococcus aureus . Kontrol positif yang  digunakan  pada  bakteri Staphylococcu- saureus dari Rumah Sakit dan dari kultur Labo- ratorium adalah Ciprofloxacin. Perlakuan terse- but dilakukan 3 kali pengulangan.
(a)                                                                                  (b) Gambar 3. (a) Mikroskopis Staphylococcus aureus dari RS (b) Mikroskopis Staphylococcus aureus kultur laboratorium
Gambar 4. (a) Uji koagulase Staphylococcus aureus dari RS (b) Uji koagulase Staphylococcus aureus kultur laboratorium
(a)                                          (b) Gambar 5. (a) Uji aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus dari RS (b) Uji aktivitas antibakteri Staphylococcus kultur Laboratorium
Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanolik Daun Beluntas dan Meniran terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Sampel Rumah Sakit.
(a)                 (b) Diameter Zona Rata-Rata Jenis Hambat
Diameter Zona Keterangan R1 R2 R3 Hambat Kontrol (+) Ciprofloxacin 35 40 41 38,67 Sangat Kuat Konsentrasi 1 : 0 12 10 10 10,67 Kuat Ekstrak 2 : 1 13 11 15
13,00
Kuat Etanolik Daun 1 : 1 16 20 15 17,00 Kuat Beluntas 1 : 2 16 17 18
17,00
Kuat dan 0 : 1 17 22 21 20,00 Sangat Kuat Meniran Kontrol (-) DMSO 2% 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat
Tabel 4. Hasil Uji Ekstrak Etanolik Daun Beluntas dan Meniran terhadap Staphylococcus aureus Kultur Laboratorium
Diameter Zona Rata-Rata
Hambat
Jenis Diameter Zona Keterangan Hambat R1 R2 R3 Kontrol (+) Ciprofloxacin 32 32 32 32,00 Sangat Kuat Konsentrasi 1 : 0 8 12 13 11,00 Kuat Ekstrak 2 : 1 12 14 15 13,67
Kuat Etanolik Daun 1 : 1 12 15 15
14,00
Kuat Beluntas 1 : 2 19 16 15 16,67 Kuat
dan Meniran 0 : 1 17 23 14
18,00
Kuat Kontrol (-) DMSO 2% 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat
Pada Gambar 6 dan 7 Grafik rerata diameter zona hambat menunjukkan bahwa diameter zo- na hambat ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran pada perbandingan 0 : 1 yaitu ekstrak Meniran  mempunyai  diameter  zona  hambat yang  paling  luas  diantara  perbandingan  yang lain yaitu 1 : 0, 2 : 1, 1 : 1, dan 1 : 2 terhadap bak- teri Staphylococcus aureus sampel Rumah Sakit dan Staphylococcus aureus kultur laboratorium. Pada Gambar 8 ekstrak etanolik daun Beluntas
dan Meniran mempunyai daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus sampel dari ru- mah sakit dan Staphylococcusaureus dari kultur laboratorium  tetapi  masihlebih  luas  diameter zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol posi- tif Ciprofloxacin. Hal ini dikarenakan ekstrarak etanolik daun Beluntas dan Meniran merupakan campuran senyawa yang kompleks, sedangkan Ciprofloxacin merupakan senyawa murni.
Gambar 6. Grafik rerata diameter zona hambat ekstrak etanolik daun Beluntas dan Meniran terhadap Staphylococcus aureus dari RS
Gambar 7. Grafik rerata diameter zona hambat ekstrak etanolik daun Beluntas dan daun Meniran terhadap bakteri Staphylococcus aureus kultur Laboratorium
Gambar 8. Grafik perbandingan rerata diameter zona hambat Staphylococcus aureus kultur laboratorium dan dari rumah sakit terhadap ekstrak .
Keterangan Gambar 6, 7, dan 8 : -Kontrol -   : DMSO 2% -1 : 0 : 1 bagian serbuk daun beluntas : 0 bagian serbuk meniran
-2 : 1 : 2 bagian serbuk beluntas : 1 bagian serbuk meniran -1 : 1 : 1 bagian serbuk beluntas : 1 bagian serbuk meniran -1 : 2 : 1 bagian serbuk beluntas : 2 bagian serbuk meniran -0 : 1 : 0 bagian serbuk beluntas : 1 bagian serbuk meniran
-Kontrol +  : Ciprofloxacin
Agoes, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Jakarta. Balafif, Ragaya,  A.,  Andayani,  Yayuk.,  dan  Gunaman,  E.R. 2013. Analisis Senyawa Triterpenoid dari Hasil Fraksinasi Ekstrak Air Buah Bucis ( Phaseolus vulgaris Linn). Chem. Prog . 6 (2): 56-61. Cowan, M., M. 1999. Plant Product as  Antimicrobial  agents. Clinical Microbiolog Review, 12 (4) : 564-582. Dalimartha,S. 1999. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 1. Jakarta: Pustaka Bunda. . Djauhari,E.,  &  Hermani.  2004. Gulma  Berkhasiat  Obat. Jakarta: Penebar Swadaya.
Fissy, S.O.N. 2013. Uji Aktivitas Efektivitas Sediaan Gel Anti Jerawat  Ekstrak  Etanol  Rimpang  Jahe  Merah  terhadap Propioni bacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis [Skripsi]. Pontianak: Universitas Tanjung Pura. Green, James.,  Rianto,  S.  2005. Pengobatan  Alami Mengatasi Bakteri. Jakarta: Prestasi Pustaka.
Jawetz,    E.,    Melnick,    J.  L.,    and   Adelburg    E.  A.  2001. Mikrobiologi  Kedokteran. Surabaya:  Salemba  Medika. Bagian  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Airlangga.
Karlina, C., Ibrahim, M., dan Trimulyono, C. 2013. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Herba Krokot (Portulaca oleracea L.) Terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Lentera Bio Berkala Ilmiah Biologi. 2252-3979. 2 (1): 83- 92.
Muhaimin, M., Liang, O.B., Ratnaningsih, E., Purwantini, E., dan  Retnoningrum  D.S.  2003.  Optimasi  proses Overproduksi,  Pemurnian  dan  Karakterisasi  protein  Mga Sebagai  Molekul  Target  Untuk  Pencegahan  Infeksi  Oleh Streptococcuspyogenes . Jurnal  Matematikan  dan  Sains . Vol. 8, No 3. Hal. 117-123.
Moeloek,    F.A.    2005. Herbal    and    Traditional  Medicine, National    Perpectives    and  Policies      in      Indonesia . Kumpulan  Kongres Nasionalke-2,  Obat  Tradisional Indonesia, Bandung.
Ciprofloxacin  merupakan  antibiotik  spek- trum luas yang dapat digunakan untuk bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif. Kontrol negative  yang  digunakan  adalah  DMSO  2% tujuannya  adalah  sebagai  pembanding  bahwa pelarut yang digunakan sebagai pengencer tidak mempengaruhi  hasil  uji  antibakteri  ekstrak. Senyawa metabolit yang dimiliki oleh Meniran antara  lain  saponin,  tannin,  triterpenoid, alkaloid,  dan  flavonoid  (Permadi,  2006)  dan senyawa  metabolit  yang  dimiliki  Beluntas adalah alkaloid, flavonoid, tannin, minyak atsiri (Agoes, 2010).
Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai  anti- bakteri  yaitu  flavonoid  bersifat  lipofilik  akan merusak  membran  mikroba  dan  senyawa flavonoid dapat tengganggu aktivitas transpep- tidase  peptidoglikan  sehingga  pembentukan dinding  sel  terganggu  sehingga  menyebabkan lisis  (Fissy,  2013).  Menurut  Rukmana  dan Mulyowati (2015) golongan senyawa flavonoid dapat  menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri Salmonella thypi dan Streptococcus pyogenes . Senyawa saponin merupakan zat yang apabila berinteraksi  dengan  dinding  bakteri  maka dinding tersebut akan pecah atau lisis (Pratiwi, 2008).  Saponin  akan  mengganggu  tegangan permukaan  dinding  sel,  maka  saat  tegangan permukaan terganggu zat antibakteri akan dapat dengan  mudah  masuk  ke  dalam  sel  dan  akan mengganggu metabolisme hingga akhirnya ter- jadilah kematian bakteri (Karlina et al., 2013). Mekanisme  tannin  sebagai  antibakteri  adalah menghambat  enzim  reverse  transkriptase  dan DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk (Nuria et al., 2009). Tanin dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara mengganggu transport protein, menginaktifkan adhesin sel dan menginaktifkan enzim di dalam sel bakteri (Cowan, 1994).
Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibak- teri yaitu dengan cara mengganggu komponen penyusun pepdoglikan pada sel bakteri, sehing- ga lapisan dinding tidak terbentuk secara uttuh
sehingga  menyebabkan  kematian  sel  tersebut (Mahatmi et al., 2005).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahas- an dapat disimpulkan:
1.  Ekstrak  etanolik  daun  Beluntas  ( Pluchaea indica Less.) dan Meniran ( Phyllantus nirui L.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bak- teri Staphylococcus aureus kultur laboratorium dan Staphylococcus aureus dari Rumah Sakit.
2.  Kombinasi  ekstrak  etanolik  ( Pluchaea indica Less.) dan Meniran ( Phyllanthus niruri L.) tidak memiliki efek sinergis terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

## DAFTAR PUSTAKA
Nuria, M.C., A. Faizatun., dan Sumantri. 2009. Uji  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun Jarak Pagar (Jatropa cuircas L . ) terhadap  Bakteri Staphylococcusaureus ATCC  25923, Escherichia coli ATCC 25922 dan Salmonella typhy ATCC 1408. Jurnal Ilmu–ilmuPertanian. 5: 26-37.
Paithankar, V.V., Raut, K.S., Charde, R.M., and Vyas, J.V. 2011. Phyllanthus niruri : Amagig Herb. Research in Pharmacy 1(4) : 1-9. Permadi, Adi. 2006. Tanaman Obat Pelancar Air Seni. Jakarta: Penebar Swadaya.
Pratiwi,  Sylvia.  T.  2008. Mikrobiologi  Farmasi. Jakarta:
Erlangga.
Rosyidah,  S.  A.,  Nurmuhaiminina.,  Komari,  N.,  dan  M.  D.
Astuti.  2010.  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi  Saponin  dari Kulit Batang Tumbuhan Kasturi. ALCHEMY. 1 (2): 65-69. Rukmana, RM dan Mulyowati, T. 2015. Aktivitas Antibakteri dari  Ekstrak  Etanolik  Daun  Kumis  Kucing  (Orthosiphon stamineus) Terhadap Bakteri Streptococcus pyogenes dan Salmonella thypi. Jurnal Biomedika . 8 (2): 15-18.
Rumanggit, Hanna M, Max RJ Runtuwene, dan Sri   Sudewi. 2015.   Uji   Fitokimia   dan Uji aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Etanol Spons Lamello  dysideaherbacea.  Jurnal
Ilmiah Farmasi .
Sari, F.P., dan S.M. Sari. 2011. Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba dari  Tanaman  Yodium (Jatropha  multifidi Linn)  sebagai Bahan Baku Alternatif Antibiotik Alami. Fakultas   Teknik Universitas Diponegoro Semarang.
Sastrawan,  Idza  N,  Meiske  Sangi,  dan  Vanda kamu.  2013.
Skrining  Fitokimia  dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji  Adas (Foeniculum vulgare) Menggunakan    Metode DPPH. JurnalSains 13(2): 110-115.
Setyawati,  Widiastuti  Agustina  Eko,  Sri  Retno  Dwi  Ariani,
Ashadi,  BaktiMulyani,  dan  Cici  Putri  Rahmawati.  2014. Skrining  Fitokimia  dan  Identifikasi  Komponen  Utama Ekstrak  Metanol  Kulit  Durian (Durio  zibethinus  Murr) . Varietas  Petruk. Seminar  NasionalKimia  dan  Pendidikan Kimia VI: 271- 280. Widodo,   W.   2005. Tanaman   Beracun   Dalam Kehidupan
Ternak. Malang: UMM Press.