Pengaruh Pemberian Vitamin E Pada Tikus (Rattus norvegicus) Bunting yang Dipapar Asap Rokok Subakut terhadap Berat Badan Bayi Lahir Aterm
A’yunin Nelawati*, Soemardini**, Bambang Prijadi***

## ABSTRAK
Vitamin E adalah antioksidan yang dapat melindungi tubuh dari radikal bebas. Asap rokok menghasilkan radikal  bebas  di  dalam  tubuh.  Paparan  asap  rokok  selama  kehamilan  dapat  mengakibatkan  hambatan pertumbuhan bayi dan berat badan lahir rendah (BBLR). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian vitamin E pada tikus ( Rattus norvegicus ) bunting yang dipapar asap rokok subakut terhadap berat badan bayi lahir aterm. Penelitian ini menggunakan 20 tikus bunting yang dibagi menjadi 5 kelompok; kontrol negatif (P0), kontrol positif (P1), kelompok dengan 3 dosis vitamin E (P2:100, P3:200, P4:400 mg/kgbb/hari). Vitamin E diberikan sejak hari pertama hingga hari ke-19. Asap rokok dipaparkan pada hari ke-6  hingga hari ke-19. Tikus dibedah  pada hari ke-20, bayi tikus ditimbang dan dihitung rata-rata berat badan lahirnya. Hasil penelitian menunjukkan adanya penurunan berat badan rata-rata (p = 0,044) pada P1 dibanding P0. Pada P2 terjadi peningkatan rata-rata berat badan lahir yang signifikan (p = 0,003), sedangkan peningkatan berat badan  lahir  pada  P3  dan  P4  tidak  signifikan  (masing-masing  p  =  0,085  dan  p  =  0,467).  Kesimpulan penelitian  ini  adalah  pemaparan  asap  rokok  subakut  dapat  menurunkan  berat  badan  lahir  rata-rata, pemberian vitamin E dosis 100 mg/kgBB/hari dapat meningkatkan berat badan lahir, dan pemberian vitamin E dosis 200 dan 400 mg/kgBB/hari meningkatkan berat badan lahir bayi aterm .
Kata kunci: Asap rokok, Berat badan lahir aterm, Tikus ( Rattus norvegicus ), Vitamin E.
Effect of Vitamin E Supplementation in Pregnant Rat ( Rattus norvegicus ) that Exposed with Subacute Cigarret Smoke to Aterm Birth Weight

## ABSTRACT
Vitamin E is an antioxidant that can protect the body from free radicals. Cigarette smoke is free radicals source. Exposure to cigarette smoke during pregnancy can cause miscarriage, intrauterine growth restriction, and  low  birth  weight.  The  aim  of  this  study  was  to  investigate  the  effect  of  vitamin  E  in  pregnant  rat  that exposed  with  subacute  to  cigarette  smoke  on  aterm  birth  weight.  Twenty  pregnant  rats  were  randomly divided into 5 groups, as follows:  negative control  group that  was neither exposed to cigarette smoke nor treated  by  vitamin  E  (P0),  positive  control  group  that  was  exposed  to  cigarette  smoke  without  vitamin  E supplementation (P1), three groups that were treated with 3 different doses of vitamin E (P2 = 100, P3 = 200, P4 = 400 mg/rat/day). Vitamin E is given on day 1 to day 19.  Cigarette smoke was exposed to rats on day 6 to day 19. On day 20 of gestation, the rats were dissected, fetal rats were pondered and the average birth weight was calculated. The result showed that P1 decreased significantly compared to P1 (p = 0,044). In P2 group  showed  significantly  increasing  the  average  of  birth  weight  (p  =  0,003),  while  increasing  the  birth weight  in  P3  and  P4  was  not  significant  (p  =  0,085  and  p  =  0,465,  respectively).  In  conclusion,  subacute cigarette smoke exposure reduce the average of fetal birth weight and vitamin E supplementation with dose of 100 mg/rat/day can increase the average fetal birth weight, but vitamin E supplementation with dose of 200 and 400 mg/rat/day can not increase the average of aterm fetal birth weight.
Keywords: Aterm birth weight, Cigarette smoke, Rat ( Rattus norvegicus ), Vitamin E
* Program Studi S1 Kebidanan, FKUB
**Laboratorium Faal, FKUB
*** Laboratorium Biokimia-Biomolekuler, FKUB

## PENDAHULUAN
Menurut WHO (2003), lebih dari 1 milyar orang di dunia menggunakan tembakau  dan menyebabkan  kematian  lebih  dari  5  juta orang  setiap  tahun. 1 Menurut  data  Susenas
(2001), jumlah perokok di Indonesia sebesar 31,8 %.  Jumlah ini meningkat menjadi 32 % pada  tahun  2003,  dan  meningkat  lagi menjadi   35  %  pada  tahun  2004. 2 Jumlah perokok  aktif  penduduk  umur  >5  tahun adalah  35,4  %  (65,3  %  laki-laki  dan  5,6  % wanita), berarti  2 diantara 3 laki-laki adalah perokok  aktif.  Lebih  bahaya  lagi  85,4  % perokok  aktif  merokok  dalam  rumah bersama  anggota  keluarga. 3 Satu  pertiga sampai setengah dari wanita hamil terpapar asap  rokok  sebagai  perokok  pasif  selama mereka di rumah, bekerja maupun di tempat umum. 4,5
Kehamilan  adalah  rangkaian  peristiwa yang  terjadi  bila  ovum  dibuahi  dan pembuahan  ovum  akhirnya  berkembang sampai  menjadi  fetus  yang  aterm.
6 Proses kehamilan sangat dipengaruhi oleh lingkungan. Agar kehamilan sehat maka ibu hamil  harus  berada  di  lingkungan  dengan gaya  hidup  yang  sehat  pula.  Larangan merokok di tempat umum yang belum tegas menyebabkan  banyak  ibu  hamil  terpapar asap rokok, padahal asap rokok mengandung  sekitar  4000  bahan  kimia toksik  seperti  nikotin,  karbon  monoksida
(CO),  asam  sianida  (HCN),  NH4,  acrolein, acetilen,  benzaldehyde,  urethane,  benzene, methanol, coumarin, etikatehol-4, ortokresol, perilen dan radikal. 7
Radikal  bebas  adalah  molekul  oksigen yang dalam interaksinya dengan molekul lain kehilangan  sebuah  elektron  di  lingkaran terluar  orbitnya  sehingga  jumlah  eletronnya ganjil  . Radikal  bebas  sangat  reaktif  dan dapat  menyebabkan  kerusakan  serta merugikan  jaringan  tubuh.  Radikal  hidroksil
(OH•)  menyebabkan  kerusakan  oksidatif terhadap  protein,  DNA,  lemak  membran
yang  mengandung  lebih  dari  satu  ikatan rangkap  pada  rantai  hidrokarbon (poly unsaturated) dan komponen sel lain. 8 Peningkatan jumlah radikal bebas dalam tubuh  akibat  paparan  asap  rokok  akan menyebabkan penurunan sistem pertahanan endogen terhadap radikal bebas. Kondisi ini disebut  stres  oksidatif.  Stres  oksidatif  dapat menyebabkan  kematian  sel  (apoptosis  atau nekrosis)  dan  terlepasnya  sel  endotel  dari dinding  pembuluh  darah. 9 Tubuh  juga terkena  radikal  bebas  dari  paparan lingkungan seperti asap rokok. 10
Pembakaran  rokok  merupakan  salah  satu penghasil  radikal  bebas,  oleh  karena  itu asap  rokok  mengandung  zat-zat  yang berbahaya  bagi  lingkungan  termasuk  ibu hamil  sebagai  perokok  pasif.  Paparan  asap rokok bagi ibu hamil dapat berdampak buruk bagi  kehamilannya  karena  meningkatkan resiko  berat  bayi  lahir  rendah  (BBLR), penurunan  fungsi  paru-paru  bayi, sudden infant  death  syndrome (SIDS) ,  dan penurunan kadar asam folat di dalam serum maternal. 11,12
Tubuh  secara  alami    memiliki    sistem proteksi  terhadap  radikal  bebas  yaitu superoksida dismutase (SOD), katalase, dan glutation  peroksidase,  namun  pemaparan asap  rokok  menyebabkan  meningkatnya jumlah  radikal  bebas  dalam  tubuh  sehingga sistem pertahanan tidak mampu mengimbangi  efek  toksik  radikal  bebas.
Salah satu upaya yang bisa dilakukan untuk mencegah  kerusakan  pada  tubuh  akibat radikal  bebas  ialah  dengan  pemberian antioksidan.  Antioksidan  melindungi  sel  dari kerusakan  akibat  radikal bebas. 10 Vitamin  E adalah  senyawa  yang  larut  dalam  lemak dengan aktifitas antioksidan yang berbeda. 13 Elektron  tidak  berpasangan  dari  radikal bebas  sangat  energik  dan  bereaksi  cepat dengan  oksigen  untuk  membentuk reactive oxygen  species (ROS).  Vitamin  E merupakan  antioksidan  yang  larut  dalam
lemak  yang  dapat  menghambat  produksi ROS ketika lemak mengalami oksidasi. 10
Berat  badan  lahir  rendah  dapat disebabkan  karena  kekurangan  nutrisi  dan juga  oksigenasi  pada  bayi  sebagai  akibat dari kerusakan pada jaringan plasenta yang disebabkan  oleh  serangan  radikal  bebas. Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa vitamin E dapat melindungi dan mempertahankan  fungsi  sel  dari  serangan radikal  bebas. 14 Pemberian  vitamin  E dengan  dosis  120  IU  terbukti  mampu menurunkan  kadar  MDA  darah  tikus  yang diberi  pakan  tinggi  lemak. 15 Penggunaan dengan  dosis  80  IU  juga  telah  dibuktikan mampu  menurunkan  secara  nyata  jumlah neuron  yang  mengalami  nekrosa  pada kondisi hiperglikemia. 16 Sebagai antioksidan, vitamin  E  berfungsi  sebagai donor  hidrogen yang  mampu  mengubah  radikal  peroksil (hasil  peroksidasi  lipid)  menjadi  radikal tokoferol yang kurang reaktif, sehingga tidak mampu merusak rantai asam lemak dan sel menjadi terhindar dari kerusakan. 17
Sejauh ini, belum diketahui apakah ada pengaruh  pemberian  vitamin  E  terhadap berat  badan  bayi  tikus  lahir  aterm  yang terpapar  radikal  bebas  asap  rokok  subakut. Pada  penelitian  ini  ingin  diteliti  tentang pengaruh  pemberian  vitamin  E  pada  tikus ( Rattus  norvegicus )  bunting  yang  dipapar asap  rokok  subakut    terhadap  berat  badan bayi lahir aterm.

## BAHAN DAN METODE
Desain Penelitian Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah randomized  post  test  only  control grup design dengan subjek dibagi menjadi 5 kelompok  secara  random.  Tiap  kelompok terdiri dari 4 tikus bunting. Kelompok kontrol negatif  (P0)  adalah  tikus  bunting  tanpa paparan  asap  rokok  dan  tanpa  pemberian vitamin  E.    Kelompok  kontrol  positif  (P1) adalah  tikus  bunting  yang  dipapar  asap rokok tanpa pemberian vitamin E. Kelompok
P2, P3, dan P4 adalah kelompok perlakuan yang  dipapar  asap  rokok  dan  diberikan vitamin  E  dengan  dosis  berturut-turut  100 mg/kgBB/hari,  200  mg/kgBB/hari  dan  400 mg/kgBB/hari    per  oral  dengan  sonde. Pemberian  vitamin  E  pada  hari  ke-1 kebuntingan,  sedangkan  pemaparan  asap rokok dilakukan secara subakut dimulai hari ke-6  kebuntingan.  Perlakuan  dihentikan pada  hari  ke-20  kebuntingan  sekaligus pembedahan  tikus  untuk  pengambilan  bayi tikus. Kemudian diobservasi dan dibandingkan  efek  pemberian  vitamin  E terhadap  berat  badan  rata-rata  pada kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan. Tikus  yang  dipilih  adalah  tikus  ( Rattus norvegicus) betina  berusia  minimal  8 minggu, telah siap kawin dan belum pernah melahirkan.

## Pembuntingan Tikus
Pembuntingan dilakukan dengan mencampurkan  hewan  jantan  dan  betina dengan  perbandingan  1:4  atau  1:1  pada pukul  16.00  WIB  dan  dipisahkan  lagi  besok paginya  pukul  05.00  WIB.  Jika  keesokan harinya ditemukan vaginal plaque , maka hari tersebut  dihitung  sebagai  hari  pertama kebuntingan.

## Pengenceran Vitamin E
Dosis  vitamin  E  untuk  tikus  dengan kondisi stres oksidatif adalah 200 mg/kg/hari, sehingga dosis perlakuan dibuat menjadi tiga yaitu  100  mg/kgBB/hari,  200  mg/kgBB/hari dan  400  mg/kgBB/hari.  Penghitungan kebutuhan  vitamin  E  berdasarkan  berat badan tikus adalah sebagai berikut : Dosis 1:
Kebutuhan vitamin E = 100 mg/kg/hari Berat badan tikus = 0.25 kg Kebutuhan vit E tikus = 100 x 0,25 = 25 mg/hari = 22.73 IU ≈  23 IU
Ket : 1 IU = 1,1 mg d-alpha-tokoferol
Vitamin E untuk 4 ekor tikus selama 10 hari adalah  23  IU  x  4  x  10  =  920  IU,  jumlah  ini setara  dengan  9,2  kapsul  dan  dibulatkan menjadi  10  kapsul  natur  E.  Untuk mempermudah  proses  sonde,  vitamin  E diencerkan  menggunakan  minyak  wijen sampai  volume  1  ml.  Oleh  karena  itu  10 kapsul vitamin E diencerkan dengan minyak wijen sampai volume akhir yang didapatkan adalah  40  ml.  Dosis  2  (200  mg/kg/hari) dibuat  dengan  mengencerkan  20  kapsul natur E dengan minyak wijen sampai volume 40  ml.  Dosis  3  (400  mg/kg/hari)  dibuat dengan  mengencerkan  40  kapsul  natur  E dengan minyak wijen sampai volume 40 ml. Dalam  penelitian  ini,  berat  badan  tikus dianggap  sama  yakni  0,25  kg  sehingga satuan yang digunakan adalah kg/tikus/hari.

## Pemaparan Asap Rokok
Pemaparan  asap  rokok  menggunakan alat smoking  pump (standar  pemaparan asap  rokok  di  laboratorium  Farmakologi, FKUB).  Tikus  ditimbang  berat  badannya dengan  neraca  analitik sebelum  dipapar asap  rokok,  tempat  pemaparan  dibersihkan dari  kotoran  dan  sisa  asap,  nikotin  yang melekat  pada smoking  pump dibersihkan terlebih  dahulu,  power  dan self  voltage diperiksa, rokok dipasang pada pipa sampai batas merah, tiga ekor dimasukkan ke dalam kotak  dan  segera  ditutup,  karena  pada smoking pump hanya tersedia tiga ruangan, setiap  pemaparan  asap  rokok  dilakukan dengan  menjalankan  pompa  selama  7,5 menit  untuk  1  batang  rokok,  kemudian  alat dimatikan, tutup dibuka dan selanjutnya tikus segera  dipindahkan  ke  kandang  semula, setiap  pemaparan  berikutnya  kotak  selalu dibersihkan  dahulu  dari  sisa  asap  rokok perlakuan  sebelumnya,  pompa  tetap dijalankan  tanpa  rokok  untuk  mengeluarkan
sisa asap, tahap-tahap di atas diulangi untuk kelompok tikus berikutnya.

## HASIL
Berat Badan Lahir Rata-Rata
Pada  Tabel  1.  ditampilkan  berat  badan bayi tikus dari lima kelompok perlakuan.
Tabel 1. Rata-rata berat badan bayi tikus
Berdasarkan Tabel 1. dapat diketahui bahwa pada  kelompok  perlakuan  kontrol  negatif (P0) rata-rata berat badan bayi tikus sebesar 3,2  gram.  Pada  tikus  kelompok  perlakuan kontrol  positif  (P1),  rata-rata  berat  badan bayi  tikus  menurun  hingga  mencapai  1,95 gram  dan  merupakan  kelompok  dengan berat  badan  bayi  tikus  paling  kecil.  Pada kelompok P2 (vitamin E 100 mg/kgBB/hari), rata-rata  berat  badan  bayi  tikus  meningkat hingga  4  gram  dan  merupakan  kelompok dengan rata-rata berat badan terbesar. Pada kelompok P3 (vitamin E 200 mg/kgBB/hari), rata-rata  berat  badan  bayi  tikus  sebesar  3 gram.  Pada  kelompok  P4  (vitamin  E  400 mg/kgBB/hari),  rata-rata  berat  badan  tikus sebesar  2,37  gram.  Berdasarkan  hasil penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa pemberian  dosis  vitamin  E  yang  dapat meningkatkan secara optimal rata-rata berat badan  bayi  tikus  lahir  aterm  yang  dipapar asap  rokok  subakut  adalah  pada  kelompok P2 yaitu sebesar 100 mg/kgBB/hari.
Pada  Gambar  1.  ditampilkan  rata-rata berat badan bayi tikus pada masing-masing kelompok.
Gambar  1.  Rata-rata  berat  badan  bayi  tikus  pada  masing-masing  kelompok.  Keterangan:  (PO)
kontrol negatif, (P1) kontrol positif, (P2) pemberian vitamin E 100 mg/kgBB/hari, (P3) pemberian vitamin E 200 mg/kgBB/hari, (P4) pemberian vitamin E 400 mg/kgBB/hari.
Berdasarkan  gambar  di  atas  dapat  dilihat bahwa  pemberian  vitamin  E  akan  mampu meningkatkan  berat  badan  bayi  tikus  lahir aterm.  Peningkatan  tertinggi  terdapat  pada kelompok P2 (vitamin E 100 mg/kgBB/hari). Untuk  mengetahui  apakah  rata-rata  jumlah sel  endotel  pada  tikus  tersebut  berbeda signifikan  antar  perlakuan  maka  dilakukan analisis oneway ANOVA  (α  =  0,05), diperoleh  nilai  p  =  0,024  (p  <  0,05)  yang menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  rata-rata  berat  badan    antar kelompok  perlakuan.  Untuk  mengetahui perlakuan  yang  berbeda  secara  bermakna dilakukan analisa post hoc HSD Tukey 5 %.
Tabel 2. Hasil analisis uji post hoc Tukey
Berdasarkan  hasil  uji  Tukey  terhadap  berat badan rata-rata bayi tikus dapat disimpulkan bahwa  P1  mengalami  penurunan  berat badan  rata-rata  bayi  tikus  dengan  nilai  p  = 0,044 (p < 0,05) yang menunjukkan bahwa
penurunan  berat  badan  rata-rata  bayi  tikus tersebut bermakna dibanding dengan P0. P2 mengalami  peningkatan  berat  badan  rata- rata bayi tikus nilai p = 0,003 (p < 0,05) yang menunjukkan  bahwa  peningkatan  berat badan rata-rata bayi tikus tersebut bermakna dibanding P1. P3 dengan nilai p = 0,085 dan P4 p = 0,467  (p > 0,05) yang menunjukkan bahwa  peningkatan  berat  badan  rata-rata bayi tikus tidak bermakna dibanding dengan P1.

## Rata-Rata Jumlah Bayi
Pada  penelitian  ini  juga  dilakukan analisis  pengaruh  pemberian  Vitamin  E terhadap  jumlah  bayi  tikus  yang  dipapar asap  rokok  subakut.  Rata-rata  jumlah  bayi seperti pada Tabel 3 berikut.
Tabel 3. Rata-rata jumlah bayi bayi tikus yang dipapar asap rokok subakut
Berdasarkan data di atas, maka dilakukan uji kruskal-wallis untuk mengetahui apakah ada perbedaan  yang  signifikan  rata-rata  jumlah bayi pada kelompok perlakuan dan uji Mann-
Whitney  untuk  mengetahui  pengaruh  antar perlakuan.  Hasil  analisis  Kruskall  Wallis, diperoleh  nilai  p  =  0,229  (p  <  0,05)  yang menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan  bermakna  pada  rata-rata  jumlah bayi antar kelompok perlakuan. Berdasarkan uji  korelasi  antara  jumlah  bayi  tikus  dengan berat  badan  rata-rata  bayi  lahir  aterm didapatkan p = 0,645 (p < 0,05) yang berarti bahwa tidak ada korelasi antara jumlah bayi yang dilahirkan dengan berat badan rata-rata bayi tikus lahir aterm.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  berat badan  rata-rata  bayi  tikus  dari  kelompok kontrol  negatif  (P0)  sebesar  3,2  gram, kelompok  kontrol  positif  (P1)  sebesar  1,  95 gram,  P2  (vitamin  E  100  mg/kgBB/hari) sebesar  4  gram,  P3  (vitamin  E  200 mg/kgbb/hari)  sebesar  3  gram,  dan  P4 (vitamin  E  400  mg/kgbb/hari)  sebesar  2,37 gram. Berat badan rata-rata bayi tikus aterm kelompok  kontrol  negatif  pada  penelitian  ini adalah sebesar 3,2 gram yang berarti kurang dari  berat  badan  bayi  tikus  aterm  berdasar referensi yaitu 5-6 gram. 18
Ada  banyak  faktor  yang  mempengaruhi berat  lahir  bayi  tikus.  Bobot  lahir  tikus dipengaruhi  oleh  pertumbuhan  fetus sebelum  lahir  atau  pertumbuhan  selama kebuntingan. Variasi bobot lahir dipengaruhi oleh  beberapa  faktor,  yaitu  genotif  (36  %), lingkungan fetal (30 %), lingkungan induk (18 %),  kesamaan  induk  (7  %),  nutrisi  induk  (6
%), dan umur induk (1 %). 19
Pemberian  vitamin  E  pada  tikus  yang terpapar  asap  rokok  subakut  diketahui berpengaruh  terhadap  jumlah  bayi  yang dilahirkan. Namun tidak ditemukan perbedaan  yang  signifikann  pada  jumlah bayi antara kelompok perlakuan berdasarkan  hasil  uji  Kruskall  Wallis  (p  = 0,229;  p  <  0,05).  Pada  penelitian  ini  tidak ditemukan  korelasi  antara  jumlah  bayi dengan berat badan rata-rata bayi tikus lahir
aterm  (p  =  0,645;  p  <  0,05).  Hasil  ini  tidak sejalan  dengan  penelitian  terdahulu  yang menyatakan  bahwa  semakin  banyak  jumlah anak  menyebabkan  semakin  rendah  berat badan  lahir  rata-ratanya. 19 Pada  Penelitian ini  jumlah  bayi  tidak  memiliki  pengaruh terhadap  berat  badan  lahir  rata-rata disebabkan  karena  banyak  faktor  yang mempengaruhi  variasi  berat  badan  lahir.
Pemberian vitamin E diketahui mempengaruhi  berat  badan  lahir  rata-rata sehingga  tidak  terlihat  korelasi  yang  nyata antara jumlah bayi tikus dengan berat badan rata-rata bayi tikus  lahir aterm.
Masa  aterm  pada  kehamilan  dapat bervariasi  antara  satu  induk  dengan  induk lainnya  dengan  rentang  waktu  20-24  hari. Tikus  jarang  menunjukkan  kebuntingan semu.  Seperti  pada  mencit,  kita  dapat diketahui kebuntingan tikus setelah ditemukan sumbat vagina  atau dengan cara melakukan  usapan  vagina  untuk  melihat adanya  spermatozoa. 20 Pada  penelitian  ini hari pertama kebuntingan ditentukan dengan cara melihat sumbat vagina. Pada hari ke-20 bayi  tikus  dilahirkan  dengan  cara pembedahan.  Hal  tersebut  kemungkinan menyebabkan  berat  badan  lahir  bayinya kurang  dari  5  gram,  karena  bayi  tidak dilahirkan  secara  spontan  oleh  induk. Meskipun  hari  ke-20  sudah  masuk  dalam rentang  masa  kebuntingan  aterm,  namun kelahiran  aterm  antara  satu  induk  dengan induk lainnya bisa bervariasi.
Faktor  nutrisi  juga  berpengaruh  dalam perkembangan  bayi.  Kebutuhan  pakan  bagi seekor  tikus  setiap  harinya  kurang  lebih sebanyak  10  %  dari  bobot  tubuhnya  jika pakan  tersebut  berupa  pakan  kering  dan dapat  ditingkatkan  sampai  15  %  dari  bobot tubuhnya jika pakan yang dikonsumsi berupa pakan  basah. 20 Pada  penelitian  ini  pakan yang  diberikan  berdasarkan  standar  pakan hewan  coba  laboratorium  sebesar  50 garm/tikus/hari  jadi  pemberian  pakan  ini sebenarnya sudah sesuai dengan kebutuhan
tikus pada masa reproduksi dan sudah lebih dari  10  %  berat  badan  tikus  yaitu  sekitar 200-250  gram.  Akan  tetapi  pakan  diberikan secara bersamaan untuk 4 tikus dalam satu kandang.  Hal  ini  menyebabkan  tidak terjaminnya secara pasti bahwa setiap tikus mendapatkan pakan sebesar 50 gram/tikus/hari.  Kualitas  pakan  merupakan faktor penting yang mempengaruhi kemampuan tikus  mencapai potensi  genetik untuk  tumbuh.  Kebutuhan  protein  tikus adalah  12  %  (lengkap  berisi  20  asam amino),  lemak  5  %  dan  serat  kasar  ±5  %, makanan  tikus  juga  harus  mengandung vitamin  A,  vitamin  D,  asam  linoleat,  tiamin, riboflavin,  pantotenat,  vitamin  B12,  biotin, piridoksin  dan  kolin,  serta  mineral-mineral tertentu. 20 Dalam  penelitian  ini  pakan  tikus yang  digunakan  memiliki  kandungan  air  12 %, protein kasar 12-14 %, lemak kasar 4 %, serat kasar 6 %, abu 7,5 %, kalsium  1,2 % dan  fosfor  0,8  %.    Kurangnya  beberapa komponen  vitamin  dalam  pakan  juga pemberian  pakan  secara  bersamaan  dalam satu  kandang  mungkin  mempengaruhi pertumbuhan  bayi  pada  masa  kebuntingan sehingga  memyebabkan  berat  badan  lahir bayi  juga  kurang  dari  5  gram.  Selain  itu faktor  genotip  (36  %),  lingkungan  fetal  (30 %),  dan  kesamaan  induk  (7  %)  adalah faktor-faktor  yang  tidak  bisa  dikontrol  pada penlitian  ini.  Sementara  faktor  lingkungan induk, seperti kandang dan suhu lingkungan adalah  faktor  yang  telah  dikontrol  pada penelitian  ini  agar  tidak  mempengaruhi variasi berat badan lahir bayi tikus.
Pengaruh  Paparan  Asap  Rokok  Subakut terhadap  Berat  Badan  Rata-Rata  Bayi Tikus
Berdasarkan analisis statistik dengan uji post  hoc  HSD  Tukey  5  %  terdapat perbedaan  yang  signifikan  p  =  0,044  (p  < 0,05)  antara  kelompok  P0  (kontrol  negatif) dengan  berat  rata-rata  sebesar  3,2  gram dibandingkan  dengan  P1  (kontrol  positif)
dengan  berat  rata-rata  sebesar  1,95  gram. Penurunan  berat  badan  disebabkan  karena paparan  asap  rokok  akan  meningkatkan jumlah  radikal  bebas.  Tubuh  sebenarnya memiliki  antioksidan  endogen  untuk melawan  radikal  bebas  tapi  apabila  kadar radikal  bebas  terus  meningkat    maka antioksidan endogen tidak mampu mengimbangi peningkatan tersebut, sehingga terjadi stres oksidatif. Pada kondisi stres oksidatif akan terjadi peroksidasi lemak yang pada akhirnya akan merusak sel, selain itu  hasil  samping  berupa  MDA  juga  bersifat sitotoksik  bagi  sel  endotel.  Paparan  asap rokok  juga  mengakibatkan  sel  endotel mengalami disjunction dengan  jaringan dibawahnya  sehingga  akan  terlepas  ke dalam sirkulasi. 21
Beberapa  hasil  penelitian  menunjukkan ada  percepatan  degradasi  NO  akibat peningkatan ROS  sehingga terjadi disfungsi endotel (ketidakseimbangan produksi vasokontriktor  dan  vasodilator)  karena bioavailabilitas  NO  menurun.  Radikal superoksida  maupun  Ox-LDL  cholesterol bertanggungjawab atas peningkatan degradasi  NO,  bahkan  radikal  superoksida dapat  secara  langsung  menginaktifkan  NO melalui  proses  reaksi  cepat    membentuk peroksinitrit  yang  merupakan  komponen yang sangat kuat dan memiliki daya hancur lebih  kuat  daripada  superoksida. 21 Kondisi disfungsi  endotel  yang  terjadi  secara  terus menerus  dapat  menimbulkan  apoptosis, yang  kemudian  menyebabkan  denudasi endotel  dan  mempengaruhi  jumlah  sel endotel  plasenta  yang  intak. 22 Terjadinya kerusakan  sel  endotel  pada  plasenta  dapat menyebabkan  insufisiensi  plasenta  yaitu terjadi hambatan terhadap distribusi oksigen dan nutrisi sehingga bayi tidak mendapatkan oksignasi  dan  nutrisi  yang  adekuat. Penelitian sebelumnya menunjukkan adanya kerusakan  plasenta  yang  ditunjukkan dengan  penurunan  jumlah  sel  endotel plasenta  yang  signifikan  antara  plasenta
tikus kelompok kontrol dengan plasenta tikus yang dipapar asap rokok subakut. 21
Pengaruh  Pemberian  Vitamin  E  terhadap Berat  Badan  Rata-Rata  Bayi  Tikus  yang dipapar Asap Rokok Subakut Penelitian  ini  menggunakan  tiga  dosis vitamin  E  berbeda yakni  100,  200,  dan  400 mg/kgBB/hari.  Berdasarkan  hasil  penelitian sebelumnya,  pemberian  vitamin  E  dengan dosis  100  mg/kgbb/hari  selama  satu  bulan terbukti mampu menurunkan jumlah leukosit dan  neutrofil  pada  tikus  yang  dipapar  asap rokok. 23 Pemberian  vitamin  E  dengan  dosis 120 IU juga mampu menurunkan kadar MDA darah  tikus  yang  diberi  pakan  tinggi  lemak sehingga  mampu  mencegah  terjadinya kerusakan sel. 15 Seperti  yang  telah  dijelaskan  dalam pembahasan  sebelumnya  bahwa  adanya kekurangan dalam penelitian ini menyebabkan berat badan lahir kurang dari
5  gram.  Pada  penelitian  ini  berat  badan kelompok  kontrol  negatif  (P0)  sebesar  3,  2 gram.  Namun  secara  statistik  berdasarkan uji Tukey 5 % pada P1 (kontrol positif)  dan P2  (diberi  vitamin  E  100  mg/kgBB/hari) didapatkan  peningkatan  berat  badan  yang sangat  signifikan  dengan  p  =  0,003  (p  < 0,05).  Vitamin  E  dapat  melindungi  sel endotel  plasenta  dari  kerusakan  karena kemampuannya  dalam  memutus  rantai reaksi  radikal  bebas  dengan  cara  bereaksi dengan  radikal  peroksil,  sehingga  dapat mengurangi  resiko  terjadinya  insufisiensi plasenta yang dapat menyebabkan penurunan  berat  badan  bayi. 24,25 Hasil penelitian lain menyatakan dengan pemberian vitamin E dosis 100 mg/kgbb/hari dapat  mengurangi  kerusakan  sel  testis akibat  paparan  asap  rokok,akan  tetapi dengan lama paparan 2 bulan. 26
Mekanisme  kerja  Vtamin  E  dalam menghambat  pembentukan  radikal  bebas dapat  dijelaskan  dengan  reaksi  radikal    α-
Tocopherol  (α-Toc*)  dalam bulk  lipids yang menghasilkan produk non radikal. 27,28
α-Toc* +L(R)OO-  non-radical products
Akan  tetapi  dalam  penelitian  ini  pada pemberian vitamin E dosis 200 mg/kgBB/hari (P3)  dan  dosis  400mg/kgBB/hari  (P4)  berat badan  bayi  tikus  justru  menurun.  Hal  ini mungkin  disebabkan  karena  pemberian dosis  yang  terlalu  tinggi  yaitu  200 mg/kgbb/hari  dan  400  mg/kgBB/hari. Walaupun secara umum vitamin E berfungsi sebagai  antioksidan  namun  dalam  kondisi tertentu  vitamin  E  juga  dapat  menjadi  pro- oksidan. 27 Vitamin  E  di  dalam  konsentrasi rendah  cairan  aqua  ROO­,  α-tocopherol  (α- TocH)  dapat  menjadi  pro-oxidan  kuat  untuk LDL.  Radikal  bebas  α-tocopherol  (α-Toc*) dapat  terbentuk  melalui  mekanisme  reaksi antara  α-TocH dengan  LOO-  atau  ROO-, sebagaimana reaksi berikut:
α-TocH +L(R)OO-  α-Toch* + L(R)OOH
dan  juga  reaksi  radikal  bebas  α  tocopherol (α-Toc*) dengan PUFA  mengandung lemak (L-H). 27 α-Toch* + L-H  α-TocH +L -
Berdasarkan pembahasan di atas maka vitamin  E  dapat  memiliki  efek  sebagai antioksidan  maupun  peroksidan.  Hasil  ini sejalan  dengan  penelitian  Richard  B, et  al., (2001) dan Vincent (1992) yang menyatakan bahwa  α-tocopherol  dapat  menghambat pembentukan  radikal  bebas  dengan bertindak  sebagai  pemulung  LOO-  maupun menginisiasi  terbentuknya  radikal  bebas ROO-. 27,28

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  mengenai pengaruh  pemberian  vitamin  E  pada  tikus (Rattus  norvegicus) bunting  yang  terpapar asap  rokok  subakut  terhadap  berat  badan
bayi  lahir  aterm,  maka  dapat  disimpulkan bahwa:
1. Berat  badan  rata-rata  bayi  tikus  pada kelompok  kontrol  negatif  (P0)  adalah sebesar 3,2 gram.
2. Pemaparan  asap  rokok  subakut  pada tikus selama masa kebuntingan (19 hari) dapat  menyebabkan  penurunan  berat badan  lahir  tikus  dengan  nilai  berat badan  rata-rata  bayi  tikus  pada kelompok  kontrol  positif  (P1)  adalah sebesar 1,95 gram.
3. Berat  badan  rata-rata  bayi  tikus  yang terpapar asap rokok subakut dan diberi vitamin E  100mg/kgBB/hari (P2) adalah 4  gram  dan,  pada  kelompok  P3  (dosis 200  mg/kgBB/hari)  adalah  3  gram,  dan (dosis  400  mg/kgBB/hari)  adalah  2,37 gram.
4. Pemberian vitamin E dengan dosis 100 mg/kgBB/hari  pada  tikus  bunting  yang dipapar  asap  rokok  subakut  dapat meningkatkan  berat  badan  lahir  tikus secara signifikan.  Sementara dosis  200 dan  400  mg/kgBB/hari  belum  dapat meningkatkan  berat  badan  lahir  tikus secara signifikan.

## DAFTAR PUSTAKA
1. (WHO)  World  Health  Organization.  The World  Health  Report  2003-Shaping  the Future:  Neglected  Global  Epidemics. Geneva:  World  Health  Organization. 2003; p 83-102.
2. (WHO)  World  Health  Organization. Prevention  and  Care  of  Illness, Neonates  and  Infats:  12  Key  Family Practices. (Online). 2005. http://www.who.int/childadolescenthealth /Prevention/12_key.htm.  Diakses  16 April 2013. 3. (DEPKES  RI)  Departemen  Kesehatan Republik  Indonesia. Rokok Membunuh Lima Juta Orang Setiap Tahun. (Online).
2011.http://www.depkes.go.id/index.php/ berita/press-release/458-rokok
membunuh-lima-juta-orang-setiap- tahun.html). Diakses 5 Maret 2012.
4. Rudatsikira  EM,  Knutsen  SF,  Job  JS, Singh PN, Yel D, Montgomery SB et al . Exposure  to  Environmental  Tobacco Smoke in the Nonsmoking Population of Cambodia. Am  J  Prev  Med. 2008;
34(1):69–73. 5. Jordan TR, Price JH, Dake JA, Shah S. Adolescent Exposure to and Perceptions  of  Environmental  Tobacco Smoke. J Sch Health. 2005;  75(5):178–
86.
6. Guyton  AC  and  Hall  JE. Textbook  of
Medical  Physiology .  11 th Edition.
Philadelphia: Elsevier Saunders. 2010.
7. Aditama  TY. Tuberkulosis,  Rokok  dan Perempuan . Jakarta: FKUI. 2006.
8. Marks  DB,  Marks  AD,  Smith  CM. Biokimia  Kedokteran  Dasar .  Cetakan  I. Jakarta: EGC. 2000; Hal 321-330.
9. Aoshiba  K,  Tamaoki  J,  Nagai  A.  Acute Cigarette  Smoke  Exposure  Induces Apoptosis of Alveolar Macrophages. Am
J  Physiol  Lung  Cell  Mol  Physiol .  2001;
281:L1392–1401.
10. Office  Dietary  of  Supplement.  (Online).
2011.http://ods.od.nih.gov/factsheets/vit amine/. Diakses 7 Maret 2012.
11. Goel P, A Radotra, I Singh, A Aggarwal, D  Dua.  Effects  of  Passive  Smoking  on Outcome  in  Pregnancy. Journal  of Postgraduate  Meicine. 2004;  50(1):12- 16 .
12. Kristin  HH,  Emily  RE,  Robert  MG,  and M.  Michele  P.  The  Effect  of  Cigarette Smoke  Exposure  on  Developing  Folate Binding  Protein-2  Null  Mice. Reprod Toxicol. 2008; 26(3-4):203–209.
13. Shils ME, Shike M, Ross AC, Caballero B, Cousins R (Editors). Modern Nutrition in  Health  and  Disease .  10 th Edition. Baltimore: Lippincott Williams & Wilkins.
2006;396-411.
14. Wahyuningsih. Pengaruh Vitamin C dan E  terhadap  Jumlah  Eritrosit  dan  Kadar
Hemaglobin  Darah  Tikus  Putih.  Solo:
Universitas Negeri Solo. 2009. 15. Yuliani. Pengaruh Pemberian Vitamin E terhadap  Kadar  Malonaldehid  Plasma pada  Tikus  yang  Diberi  Pakan  Lemak Tinggi. Jurnal  Sains  Veteriner. 2002;
20(1) .
16. Wibowo BA. Kajian Histomorfologi Otak Tikus  Putih  pada  Kondisi  Hiprglikemia dan  Pemberian  Vitamin  E.  Skripsi. Bogor: Institut Pertanian Bogor. 2007.
17. Winarsih  H. Antioksidan  Alami  dan Radikal  Bebas .  Cetakan  7.  Jakarta:
Kanisius. 2007; Hal 100. 18. Oktavianis. Efek Pemberian Asap Rokok terhadap Kehamilan Tikus Putih ( Rattus norvegicus ). Tesis. Padang: Universitas
Andalas. 2011.
19. Hafez ESE. Reproduction and Breeding
Techniques  for  Laboratory  Animals . Philadelphia: Lea & Febiger. 1970. 20. Smith Bj, Mangkoewidjojo S. Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan  Hewan  Cobaan di  Daerah Tropis .  Jakarta:  Universitas    Indonesia Press. 1988 .
21. Samsuria. Efek Asap Rokok pada Tikus ( Rattus  norvegicus )  Bunting  terhadap Tampilan  Fisiologis  Induk  dan  Anaknya Setelah Dilahirkan. Tesis. Bogor: Institut Pertanian Bogor. 2009; Hal 18-20.
22. Santoso  D,  Firani  NK,  Kusuma,  AF. Pengaruh  Pemberian  Vitamin  E terhadap  Peningkatan  Jumlah  Sel Endotel  Plasenta  Pars  Maternalis Tikus
(Rattus norvegicus) yang Terpapar Asap Rokok  Subakut.  Skripsi.  Malang: Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. 2013. 23. Squadrito  F,  Altavilla  D,  Squadrito  G, Saitta  A,  Cucunotta  D,  Minutoli  L, Deodato B, Ferlito M, Campo GM, Bova A, Caputi AP. Genistein Supplementation and Estrogen Relacement Therapy Improve Endothelial  Dysfunction  Induced  by Ovariectomy  in  Rats .  Cardiovascular
Research . 2000; 45:454-462.
24. Yuniharilmy D. Efek Vitamin E terhadap Jumlah  Total  Leukosit  dan  Neutrofil Tikus  Wistar  yang  Leukositosis  Setelah Diberi  Paparan  Asap  Rokok.  Skripsi. Semarang:  Universitas  Diponegoro. 2011.
25. Murray  KR,  Granner  KD,  Rodwell  WV. Biokimia  Harper. Edisi  ke-27.  Jakarta:
ECG. 2009. 26. Handayaningsih W. Pengaruh Antioksidan  Vitamin  E  terhadap  Jumlah Kerusakan  Sel  Testis  Tikus  Putih
( Rattus  norvegicus ) yang  Dipapar  Asap Rokok.  (Online).  2006.  (http://student- research.umm.ac.id/index.php/dept_of_ biology/ article/ view /4183).
27. Richard  BW,  Barbara  SV,  Rachel  AA, Jene ES, Michael JT. Pro-Oxidant Effect of  Vitamin  E  in  Cigarette  Smokers Consuming  a  High  Polyunsaturated  Fat Diet. Arterioscler Throb Vasc Biol. 2001; 21:1029-1033.
28. Vincent  WB,  Keith  UI,  and  Roland  S. Vitamin  E  in  Human  Low-Density Lipoprotein  when  and  How  This Antioxidant  Becomes  A  Pro-Oxidant. Biochem J . 1992; 288:341-34.