Sistematik Review Aktivitas Buah Pare ( Momordica charantia L.) Terhadap  Target Molekuler Antidiabetes
Systematic Review The Activity Bitter Melon ( Momordica Charantia L.)

## Against Molecular Targets  Antidiabetic
Mega Ayu Kusniawati, Rina Herowati, Gunaman Pamudji Widodo Program Studi S2 Farmasi, Universitas Setia Budi *Corresponding author: megaayukusniawati@gmail.com
(tanggal diterima: 17-09-2020, tanggal disetujui: 19-10-2021)

## INTISARI
Diabetes melitus (DM) adalah penyakit kronis terjadi ketika pankreas tidak menghasilkan cukup insulin atau tubuh tidak dapat menggunakan insulin yang dihasilkan secara efektif. Tujuan untuk  mengetahui  aktivitas  buah  pare  terhadap  target  molekuler  antidiabetes  secara  sistematik review. Metode  yang  digunakan  sistematik  review  dengan  membuat  PRISMA  ceklis  dan  diagram flow, menetapkan kriteria inklusi-eksklusi, search engine serta kata kunci untuk mendapatkan data yang  relevan.  Data  yang  diperoleh  berupa  hasil  penelitian  primer  yang  disajikan  dalam  tabel ekstraksi data, selanjutnya ditelaah secara komprehensif.
Hasil  menunjukkan  senyawa  charantin,  cucurbitacin,  dan  momordicoside  D  secara bersamaan mengaktivasi reseptor TGR5 dan GLP1 untuk menghambat DPP4, senyawa cucurbitane 25-O-methylkaraviagein  D  dikaitkan  dengan  keberadaan  –OH  memiliki  aktivitas  penghambatan terhadap  enzim  PTP1B,  senyawa  charantal,  3β,  7β,  25-trihydroxycucurbita-5,23(E)-dien-19-al, charantoside  XI,  dan  25ξ-  isopropenylchole-5,  6-ene-3-O-  D-glukopiranosida  diprediksi  memiliki afinitas  mengikat  sisi  aktif  protein  sehingga  menghambat  α-glukosidase,  dan  senyawa  charantin, vicine,  polypeptide-p,  5-,19-epoxy-3-,  25-dihydroxycucurbita-6,23  (E)  -diene  dan  3-  7-,  25- trihydroxycucurbita-5,23 (E)-dien-19-al. dapat meningkatkan jumlah GLUT4 pada permukaan sel
Kata kunci : Momordica charantia ; DPP4; PTP1B; α-glukosidase, GLUT4.

## ABSTRACT
Diabetes mellitus (DM) is a chronic disease that occurs either when the pancreas does not produce enough insulin, or when the body cannot effectively use the insulin it produces. The purpose activity of bitter melon fruit against molecular targets antidiabetic in literatre review.
The  method  of  systematic  evaluation  is  to  make  a  PRISMA  checklist  and  flow  chart, determine the inclusion and exclusion criteria, search engines and keywords to obtain relevant data. The data was o btained from the primary research results presented in the data extraction table, and then was analyzed comprehensively.
The charantin, cucurbitacin, dan momordicoside D  compound from bitter melon fruit has activating  the  TGR5  and  GLP1  receptor  simultaneously  inhibiting  DPP4.  The  cucurbitane  25-O- methylkaraviagein D the of bitter melon fruit has inhibitory activity against the PTP1B enzyme which is  associated  with  the  presence  of  –OH,  The  3β,7β,25-trihydroxycucurbita-5,23(E)-dien-19-al, charantal,  charantoside  XI,  dan  25ξ-  isopropenylchole-5,  6-ene-3-O-  D-glukopiranosida  α- glucosidase  predicted  to  have  inhibitory  activity  of  binding  to  the  active  side  of  the  protein.  The vicine,  polypeptide-p,  5-,19-epoxy-3-,  25-dihydroxycucurbita-6,23  (E)  -diene  dan  3-7-,25- trihydroxycucurbita-5,23 (E)-dien-19-al can increase the amount of GLUT4 on the cell surface.
Keyword : Momordica charantia; DPP4; PTP1B; α-glukosidase, GLUT4

## 1. PENDAHULUAN
Diabetes melitus (DM) adalah penyakit yang ditandai ketika pankreas tidak menghasilkan  insulin  yang  cukup,  atau  tubuh  tidak  dapat  menggunakan  insulin yang  dihasilkan  secara  efektif  atau  keduanya.  Indonesia  menempati peringkat  ke tujuh dunia untuk prevalensi penderita DM, dengan jumlah estimasi orang sebesar 10 juta. Mayoritas penderita dengan DM dipengaruhi oleh diabetes tipe 2. DM tipe 2 terjadi  hampir  seluruhnya  di  antara  orang  dewasa,  tetapi  sekarang  terjadi  pada anak-anak  juga  [1].  DM  tipe  2  merupakan  suatu  keadaan  hiperglikemi  yang dikarakterisasi  oleh  resistensi  insulin  atau  defisiensi  relatif  sekresi  insulin  atau bahkan keduanya [2]. Tatalaksana dari DM tipe 2 adalah terkontrolnya kadar gula darah,  sehingga  menurunkan  komplikasi.  Obat  antidiabetes  yang  ada  di  antara konsumen  memiliki  target  molekuler  yang  berbeda-beda,  umumnya  bekerja meningkatkan sekresi insulin dan sensitivitas reseptor insulin. Namun penggunaan jangka  panjang  sering  menimbulkan  masalah,  terutama  efek  samping,  yang  juga berdampak  menurunkan  kepatuhan  pasien.  Penelitian  terus  dilakukan  untuk mencari target molekuler baru dalam terapi DM.
Pemanfaatan  obat  tradisional  salah  satunya  buah  pare.  Buah  pare merupakan jenis buah yang bermanfaat karena memiliki nilai ekonomi yang tinggi sebagai tanaman pangan dan bahan obat tradisional. Kandungan kimia buah pare yang  berkhasiat  dalam  pengobatan  adalah  saponin,  flavonoid,  polifenol,  alkaloid, triterpenoid,  momordisin,  glikosida  cucurbitacin,  charantin,  asam  butirat,  asam palmitat,  asam  linoleat,  dan  asam  stearat  [3].  Menurut  hasil  penelitian  [4]    pare maserasi dengan etanol 70%, granulometri hingga 710 μm dan rasio plant: solvent 1.5:  10.  Dalam  kondisi  ini,  larutan  ekstraktif  terpilih  mengandung  0,666g%  total flavonoid dinyatakan sebagai kuersetin. Menurut penelitian [5]  pare mengandung senyawa n-tetradekana, metil dodekanoat, metilheksadekanoat, etil heksadekanoat, etiloktadekanoat, metil-9-oktadekenoat, mono(2-etilheksil)-1,2 benzena dikarboksilat,  ,  metil  oktadekanoat,  metil-9cis-11trans-13trans  oktadekatrienoat, metil-9,12oktadekadienoat dan mono (2-etilheksil)-1,2 benzena dikarboksilat.
Beberapa  penelitian  molekuler  sebagai  pencarian  agent  antidiabetes  baru yang  poten  dan  memiliki  profil  farmakologis  yang  baik,  menurut  penelitian  [3] ekstrak  etanol  buah  pare  2%  pada  dosis  100  mg/kg  bb  sebanding  dengan glibenklamid dapat menurunkan glukosa darah. Menurut [6] pemberian fraksi 1 n- heksana buah pare, mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus. Pada ekstrak buah pare yang mempunyai sifat kelarutan non polar berpotensi menurunkan kadar glukosa darah. Menurut penelitian  [5] fraksi n-heksana ekstrak etanol buah pare aktif menurunkan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan ( Rattus novergicus ) pada hari ke-7. Menurut penelitian [7]  menyimpulkan bahwa ekstrak protein dari dua varietas pare memiliki aktivitas penghambatan α amylase dan  α-glukosidase secara in vitro persentase penghambatan 60-66% , IC50 sebesar 0,26-0,29 mg/ml dan  secara in  vivo kedua  ekstrak  protein  secara  signifikan  mengurangi  glukosa darah  puncak  dan  area  di  bawah  kurva  pada  tikus  diabetes  yang  diinduksi Streptozotocin, yang secara oral dibandingkan dengan pati dan sukrosa.
DPP-4 (dipeptidly  peptidase-4) merupakan  enzim  yang  menghidrolisis Glukagon-Like  Peptide-1 (GLP1),  suatu  hormon  inkretin  yang  diekskresikan  di saluran cerna GLP1 berperan dalam metabolisme tubuh, meliputi sekresi insulin, peningkatan massa sel β-pankreas, sekresi glucagon, dan mengurangi pengosongan lambung  [8].  PTP1B  ( protein  tyrosine  phosphatase 1B)  merupakan  target  terapi penting yang berhubungan dengan DM tipe 2 karena kemampuannya memodulasi jalur  sinyaling  insulin  dan  leptin  [9]. α-glucosidase merupakan  anggota  enzim hidrolase  glikosida  yang  memutuskan  ikatan  glikosidik  dari  substrat  sehingga mampu memecah glikogen dan menyebabkan peningkatan penyerapan karbohidrat [10] . Glukokinase adalah enzim yang terdapat di hati dan pancreas, berfungsi untuk memfosforilasi glukosa. Apabila kekurangan enzim ini dapat menyebabkan DM tipe 2 pada usia dini [11] . GLUT 4 adalah suatu transporter glukosa yang ada pada otot dan  jaringan  adipose, dimana  tugas  GLUT 4  ini  untuk  melakukan  uptake  glukosa yang diperantarai oleh insulin. . PI 3-kinase merupakan protein yang penting dalam translokasi GLUT 4 ke membrane sel pada sel otot dan adipose dan menginduksi enzim-enzim  yang  bekerja  pada  downstream  [12].  Tujuan  penelitian  untuk mengetahui  bagaimana  aktivitas  buah  pare  dalam  menghambat  enzim  DPP4, PTP1B, α-glukosidase, meningkatkan kadar GLUT secara sistematik review.

## 2. METODE PENELITIAN
Metode  yang  digunakan  sistematikk  review.  Sistematik  review  yaitu membuat PRISMA checklist dan diagram flow , menetapkan kriteria inklusi-eksklusi, search engine serta kata kunci pencarian artikel penelitian. Hal tersebut bertujuan untuk  memberikan  tuntunan  dalam  melakukan review dan  memberikan  batas pencarian  terhadap  artikel  penelitian  yang  relevan.  Data  yang  diperoleh  berupa hasil  penelitian  primer,  tersaji  dalam  tabel  ekstraksi  data  yang  memuat  judul, subjek,  parameter,  metode  dan  hasil  penelitian,  kemudian  data  dianalisis  secara komprehensif.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis sistematis dan tinjauan literatur penelitian yang berkaitan dengan buah pare yang digunakan untuk aktivitas antidiabetes target molekuler  diseluruh dunia antara tahun 2005-2020. Strategi yang digunakan untuk pencarian literatur penelitian berbasis web. Studi mekanisme atau pengujian secara in vitro, in vivo, in silico dikumpulkan  dengan  dua  pendekatan  pencarian  yang  berbeda,  termasuk: Membahas  pengujian  aktivitas  dan  mekanisme  kerja  antidiabetes  dari  buah pare membahas aktivitas antidiabetes dari buah pare terkait mekanisme kerjanya pada enzim  α-glukosidase  atau  α-amilase,  DPP4,  PTP1B,  GLUT.  Artikel  jurnal  yang diterbitkan menggunakan basis data ilmiah internasional termasuk PubMed, Web of Science, Google Scholar. Pencarian literatur menggunakan istilah kunci berikut: momordica  charantia  or  momordica  alpha  glucosidase/dipeptidyl  peptidase-4 (DPP4)/protein  tirosin  pospatase-1B  (PTP1B),  momordica  charantia  GLUT transport in vitro. Informasi yang relevan dikumpulkan dalam tabel 2.
Tabel 2. Tabel ekstraksi data aktivitas buah pare terhadap target molekuler antidiabetes
Subjek Tahun publikasi Parameter yang diuji Metode uji Hasil Sitasi Ekstrak buah pare Momordica charantia 2009 resistensi insulin dan protein kerangka otot GLUT4 pada tikus yang diberi fruktosa In vivo Hasil dari ekstrak buah pare menghasilkan perubahan ekspresi PPAR dan GLUT4 pada tikus yang diberi diet tinggi fruktosa [12] Ekstrak buah pare 2009 Potensial penyerapan glucose dan up- regulate Glut-4, PPAR_ dan PI3K In vitro, in silico Ekstrak klorofom buah pare konsentrasi 6 g/ml menunjukkan efek penaikan yang signifikan, masing- masing, sebesar 3,6-, 2,8- dan 3,8 pada target Glut-4, PPAR dan PI3K dalam transportasi glukosa. [20] Buah Momordica charantia 2010 Penghambatan glikosida tipe triterpene terhadap Enzim α glucosidase In silico Senyawa Momordicoside M dan  momordicoside A memiliki aktivitas penghambatan yang moderat terhadap α-glucosidase [18] Buah pare Momordica charantia 2011 Dimerisasi piceatannol oleh buah pare pirokside penghambatanEn zim α-glucosidase In vitro Dimer piceatannol menunjukkan aktivitas penghambatan α-glukosidase pada ikatan rangkap trans, cincin tetrahydrofuran, dan dihydroxyls dan M. charantia peroxidase memiliki aktivitas biotransformasi enzimatik stilbena [19] Buah pare Momordica charantia 2014 Senyawa baru dari produk hidrolisis Penghambatan PTP1B In vitro Senyawa 5a, 19S-epoxy- 19,23- dimethoxycucurbita- 6,24-dien-3b-ol (1), 5a, 19R- epoxy-19,23- dimethoxycucurbita-6,24- dien-3b-ol(2), 5b,19S-epoxy- 19,23-dimethoxycucurbita- 6,24-dien-3b-ol (4), (19R,23E)-5ß,19-epoxy-19- methoxy-cucurbita-6,23,25- trien-3ß-o-l (7), (19R,23E)- 5ß,19-epoxy-cucurbita- 6,23,25-trien-3ß,19-diol (9) memiliki penghambatan PTP1B [15] Dua varian buah pare 2016 Penghambatan α- glucosidase in vitro dan in vivo Buah pare menghamnat secara in vitro (66 hingga 69%) dan IC50 (0,26 hingga 0,29 mg/ml). ekstrak buah pare signifikan mengurangi glukosa darah tikus diabetes yang diinduksi Streptozotocin, yang secara oral ditantang dengan pati dan sukrosa. [7]
Subjek Tahun publikasi Parameter yang diuji Metode uji Hasil Sitasi Buah pare golongan triterpenoid 2017 penghambatan enzim α- glukosidase, PTP1B dan α- aamylase In silico Senyawa yang terdapat dalam buah pare ada 21 senyawa antaranya diperoleh dua glikosida triterpen tipe cucurbitane (1 2) memiliki aktivitas penghambatan enzim α-glukosidase, PTP1B, IC50 masing-masing 10,19, 28,55, dan 20,20 lM [14] Ekstrak buah pare golongan triterpenoid 2018 Aktivitas penghambatanEn zim alpha glukosidase in vitro Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kaya terpenoid memiliki IC50 tinggi 1,60 mg/mL aktivitas terhadap α- glukosidase [16] Senyawa tuunan buah pare 2018 Studi mekanisme penghambatan DPP4 In silico dan in vivo mekanisme buah pare yaitu aktivasi reseptor TGR5 dan GLP-1 dengan penghambatan bersamaan DPP4 bertanggung jawab atas sifat antidiabetesnya adalah karantin, cucurbitacin dan momordicoside D dan semua kelas saponin. [13] Senyawa tipe cucurbitae pada buah pare 2019 Penghambatan alfa-glukosidase in vitro, in silico Ekstrak etil asetat buah pare yang diperoleh golongan senyawa triterpen tipe cucurbitane 3β, 7β, 25- trihydroxycucurbita-5,23 (E) - dien-19-al, charantal, charantoside XI, dan 25ξ- isopropenylchole-5, 6-ene-3- O-D-glucopyranoside penghambatan signifikan α-glukosidase sebanding dengan acarbose. [17]
Dipeptidyl-peptidase  4  (DPP4)  adalah  glikoprotein  110  kDa,  yang diekspresikan  pada  permukaan  berbagai  sel.  Eksopeptidase  ini  secara  selektif membelah  dipeptida  N-terminal  dari  berbagai  substrat,  termasuk  sitokin,  faktor pertumbuhan, neuropeptida, dan hormon incretin. Ekspresi DPP4 secara substansi tidak  diatur  dalam  berbagai  keadaan  penyakit  salah  satunya  diabetes  militus. Karena  hormon  incretin,  glukagon-like  peptide-1  dan  glukosa-dependent insulinotropic  polypeptide  (GIP),  adalah  pengatur  utama  sekresi  insulin  pasca- prandial. Penghambatan DPP4 termasuk kelompok obat gliptin sebagai terapi tipe 2.  Menurut  penelitian  [22]  ekstrak metanol  (0,5  mg/ml)  buah pare  menghambat aktivitas DPP4  (53,25±0,04%) fenolik. Ekstrak buah pare mengandung beberapa inhibitor  DPP4  baru  dengan  potensi  antiperoksidatif  dan  dapat  dikembangkan sebagai molekul terapeutik untuk diabetes mellitus tipe 2. Situs aktif DPP4 terletak di urutan Gly–Trp–Ser–Tyr–Gly dan merupakan bagian dari triad katalitik (Ser 630, Asp  708,  His  740)  dalam  katalitik  DPP4.  Hormon  GLP-1  dan  GIP  terletak  diusus
masing-masing  dikeluarkan  setelah  asupan  makanan  dari  sel-sel  L  dan  K  dari mukosa  usus.  Hormon  tersebut  berkontribusi  sekitar  60%  dari  sekresi  insulin postprandial  dan  bertanggung  jawab  atas  efek  incretin.  Sementara  DPP4  pada pasien DM secara cepat menonaktifkan GLP-1 dan GIP. Penghambatan DPP4 untuk memperpanjang  dan  meningkatkan  aktivitas  GLP-1  dan  GIP  endogen,  yang berfungsi sebagai stimulator prandial penting yang berperan pada sekresi insulin dan  regulator  glukosa  darah.  Pada  penelitian  ini  mengungkapkan  bahwa konsentrasi  ekstrak  metanol  buah  pare  mampu  menghambatan  DPP4.  Menurut penelitian  [13]  Salah  satu  senyawa  yang  terkandung  dalam  buah  pare  yaitu cocorbitacin  memiliki  afinitas  tertinggi  dalam  mengikat  reseptor  GLP-1  dan termasuk dalam golongan senyawa saponin.
Cucurbitan dalam golongan senyawa saponin menunjukkan afinitas tertinggi penghambatan DPP4 yaitu sebesar (-8,4 kkal/mol) bila dibandingkan dengan obat standar omarigliptin sebesar (-9,3 kkal/mol). Senyawa momordicosides D golongan senyawa  saponin  memiliki  afinitas  paling  tinggi  mengikat  TGR5  sebesar  (-9,3 kkal/mol)  bila  dibandingkan  dengan  asam  kolat  sebagai  agonis  sebesar  (-7,2 kkal/mol). Selama stimulasi DPP4 interaksi senyawa kimia buah pare distabilkan dengan ikatan hidrogen dan hidrofobik. Situs aktif DPP4 terdapat dua residu yaitu Tyr-752  dan  Lys-554  yang  terlibat  dalam  pembentukan  ikatan  hidrogen  dengan charantin. Interaksi hidrofobik juga berkontribusi pada interaksi charantind engan residu asam amino (Asp 545, Trp 627, Trp 629, Glu 206, Tyr 547, 740, Arg 125, Tyr 666, Phe 357, Ser 630, Glu 205, Tyr 662, Tyr631, Asn 710) dalam situs aktif DPP-4. Glu1169, Glu1170, Ser1172, Lys1250, Arg1257 adalah residu penting untuk ikatan hidrogen  dengan  GLP-1  dan  delapan  residu  bertanggung  jawab  untuk  interaksi hidrofobik (Phe1254, Tyr 1173, Met 1136, Asn1200, His1201, Trp1247, Phe1246, Tyr1242).  Interaksi  ikatan  hidrogen  momorcosides  D  dengan  TGR5  yang ditingkatkan oleh residu Arg830, Thr848 di situs aktif sebaliknya, dua belas residu bertanggung jawab atas interaksi hidrofobik dengan Momorcosides D (Val 827, Asp 860, Met 715, Arg 849, Pro 828, Ala 716, Pro 824, Glu 823, Ile 843, Leu 796, Asp 795, Phe  794).  Hasil  studi in  silico menunjukkan  bahwa  charantin,  cucurbitacin  dan momordicosides D mungkin merupakan senyawa antidiabetik utama di buah pare dan mekanisme kerja senyawa ini adalah melalui aktivasi reseptor TGR5 dan GLP-1 dengan  penghambatan  bersamaan  DPP4.  Senyawa  bioaktif  yang  mungkin bertanggung jawab atas antidiabetik adalah saponin (charantin, cucurbitacin, dan momordicoside D).
Peran PTP1B dalam pensinyalan insulin pada DM tipe 2 menunjukkan bahwa PTP1B  adalah  regulasi  metabolik  dan  target  farmakologis  untuk  diabetes  tipe  2. PTP1B  dapat  mengkatalisis  insulin  receptor  (IR)  dan  insulin  receptor  substrates (IRS) dephosphorylation, mengkoordinasikan keseimbangan antara fosforilasi dan defosforilasi  residu  tirosin,  yang  mengakibatkan  downregulasi  transduksi  sinyal insulin. Selain itu, PTP1B dapat mendeosforilasi JAK2 dan STAT3 yang diaktifkan, dan mencegah transduksi sinyal leptin. Ekspresi PTP1B yang tinggi mempengaruhi aktivitas  PTKs  yang  mengakibatkan  insulin  gagal  bergabung  dengan  IR, menyebabkan resistensi insulin dan resistensi leptin, serta menyebabkan diabetes
tipe 2 dan obesitas. Penghambat PTP1B dan terapi diabetes tipe 2 PTP1B adalah PTP intraseluler, terlibat dalam regulasi negatif insulin serta pensinyalan leptin. PTP1B telah muncul sebagai target terapeutik yang divalidasi untuk pengobatan diabetes tipe  2  dan  kelainan  metabolik.  PTP1B  telah  dihambat  secara  eksperimental menggunakan berbagai mekanisme dan senyawa kimia. Inhibitor PTP1B berpotensi meningkatkan  resistensi  insulin  dan  menormalkan  glukosa  plasma  dan  kadar insulin  tanpa  menyebabkan  hipoglikemia.  Metabolit  sekunder  mengandung keragaman struktural dan jenis sifat obat dan banyak obat secara langsing dan tidak langsung berasal dari produk alami. Produk alami dianggap sebagai sumber penting untuk  obat  baru  penghambatan  PTP1B.  Berbagai  macam  prodk  alami  telah dilaporkan dengan aktivitas penghambatan PTP1B seperti penelitian [14]  senyawa golongan  triterpenoid  cucurbitane  25-O-methylkaraviagein  D  memiliki  aktivitas penghambatan terkuat terhadap PTP1B.
Menurut  penelitian  [15]  telah  mengisolasi  dan  memurnikan  konstituen bioaktif  melalui  hidrolisis  asam  dari  buah  pare    dan  mengevaluasi  efek  dari konstituen  buah  pare  terhadap  aktivitas  PTP1B.  Terdapat  empat  senyawa  baru yaitu 5a, 19S-epoxy-19,23- dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b-ol (1), 5a, 19R-epoxy- 19,23-dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b-ol(2),
5b,19Repoxy-19,23- dimethoxycucur- bita-6,24-dien-3b-ol (3) dan
5b,19S-epoxy-19,23- dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b-ol (4), dari delapan senyawa yang diketahui dan telah diisolasi dari produk terhidrolisis asam dari buah pare. Dari hasil pengujian aktivitas, hanya senyawa 5a, 19S-epoxy-19,23- dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b- ol(1),  5a,19R-epoxy-19,23-dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b-ol(2),  5b,19S-epoxy- 19,23-dimethoxycucurbita-6,24-dien-3b-ol (4), (19R,23E)-5ß,19-epoxy-19- methoxy-cucurbita-6,23,25-trien-3ß-o-l(7)  dan  (19R,23E)-5ß,19-epoxy-cucurbita- 6,23,25-trien-3ß,19-diol  (9)  yang  menunjukkan  penghambatan  signifikan  pada PTP1B,  dengan  tingkat  penghambatan  sebesar  77%,  62%,  62%,  60%  dan  68%. Efisiensi penghambatan  terhadap  PTP1B  dari  senyawa-senyawa  ini  bahkan  lebih kuat daripada Na 3 VO 4 , sebagai kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini. Selain itu, senyawa 5b,19Repoxy-19,23-dimethoxycucur- bita-6,24-dien-3b-ol (3), (19R,23E)-5b,19-epox y-19,25-dimethoxycucurbita-6,23-dien-3b-ol (6) dan 5b,19- epoxy-cucurbita-6,23(E)-dien-3b,25-diol  (10)  menunjukkan  tingkat  aktivitas penghambatan yang relatif moderat terhadap PTP1B, menghasilkan masing-masing 40%,  37%  dan  52%  penghambatan.  Analisis  Spatial  Autoregresive  (SAR) menunjukkan  bahwa  senyawa  dengan  kelompok  substituen  -OH  dalam  rantai samping  yaitu  senyawa  (19R,23E)-5b,19-epoxy-19-methoxy-cucurbita-6,23-dien- 3b,25-diol  (5)  dan  3b,7b,25-trihydroxy-cucurbita-5(23E)-diene-19-al  (11)  tidak memiliki efisiensi penghambatan yang signifikan pada PTP1B. Sementara senyawa (1, 2, 4, 7 dan 9) tanpa kelompok substitusi -OH dalam rantai samping menunjukkan penghambatan yang lebih baik terhadap aktivitas PTP1B. Hasil penelitian ini juga menunjukkan  bahwa  aktivitas  penghambatan  PTP1B  dari  triterpenoid  tipe cucurbitanet  dikaitkan  dengan  keberadaan  kelompok  -OH  pada  rantai  samping serta  jumlah  kelompok  -OH.  PTP1B  merupakan  fosfatase  yang  bersifat  sangat hidrofilik  sehingga  penghambatan  PTP1B  sebagian  besar  molekulnya  bersifat
sangat  hidrofilik  namun  ada  beberapa  senyawa  signifikan  menghambat  PTP1B sifatnya lipofilik. Sehingga pengaruh subtitusi -OH terhadap aktivitas PTP1B masih belum terlalu jelas dan perlu dilakukan penelitian selanjutnya.
Penghambatan α-glukosidase menurut penelitian [7]  buah pare secara in vitro  dan in  vivo dengan  menggunakan  ekstrak  protein.  Metode  yang  digunakan untuk  pengujian in vitro menggunakan  enzim  alfa  glukosidase  dan  dilanjutkan dengan  uji in  vivo induksi  streptozotocin  dan  acarbose  sebagai  kontrol  positif. Ekstrak  protein  buah  pare  menunjukkan  aktivitas  maksimum  penghambatan terhadap α-glukosidase pada konsentrasi 10%. IC 50 dari MCC, MCM dan acarbose berturut-turut  adalah  0,298  ±  0,034,  0,292  ±  0,022,  dan  0,28  ±  0,019  mg/ml. Penghambatan kompetitif, yang setara dengan Acarbose seperti yang ditunjukkan oleh persentase penghambatan in vitro sebesar 66 hingga 69% dan nilai IC50 0,26 hingga  0,29  mg/ml.  Pada  penelitian  [16]  ekstrak  buah  pare  dengan  kandungan triterpen memiliki IC 50 sebesar 1,45 mg/mL. Menurut penelitian  [17] senyawa yang berhasil  diisolasi  dari  ekstrak  etil  asetat  adalah  golongan  senyawa  triterpen  tipe cucurbitane  yang  bertanggung  jawab  sebagai  senyawa  antidiabetes.  Senyawa- senyawa  tersebut  antara  lain  3β,  7β,  25-trihydroxycucurbita-5,23(E)-dien-19-al, charantal,  charantoside  XI,  dan  25ξ-  isopropenylchole-5,  6-ene-3-O-  D- glukopiranosida Senyawa-senyawa ini telah dikarakterisasi dengan HR-ESIMS, 1D, dan 2D NMR. Semua senyawa menunjukkan penghambatan signifikan terhadap α- amilase  dan  α-glukosidase  yang  sebanding  dengan  acarbose.  Studi  docking molekuler  menunjukkan  bahwa  senyawa  yang  dimurnikan  mampu  mengikat  ke situs  aktif  protein.  Dimerisasi  piceatannol  dari  Momordica  charantia  peroxidase (MCP) sebagai aktivitas penghambatan alfa glukosidase. Selain Stilbenes, terutama oligomer, memiliki potensi besar untuk menjadi agen antihiperglikemik. Penelitian [18] momordicoside M  dan  momordicoside A memiliki aktivitas moderat untuk penghambatan alfa glukosidase. Penelitian [19] delapan dimer stilbene, termasuk lima dimer baru, untuk pertamakalinya biotransformasi piceatannol menggunakan Momordica  charantia  peroxidase  (MCP).  Struktur  mereka  didirikan  berdasarkan bukti  spektroskopi.  Dimer  piceatannol  ini  menunjukkan  potensi  aktivitas penghambatan  alfa  glukosidase  dan  trans  ikatan  rangkap,  cincin  tetrahydrofuran dan  dihydroxyls  fenolik  yang  berdekatan.  Biotransformasi  enzimatik  stilbena  M. charantia  peroksidase  (MCP)  untuk  menghasilkan  stilbena  oligomer  sebagai pengembangan antihiperglikemik.
Peningkatan translokasi/ekspresi GLUT Menurut penelitian [20] glucose transporter 4 (GLUT4) adalah transporter glukosa utama yang diatur oleh insulin diekspresikan  dalam  otot  rangka  dan  jaringan  adiposa.  Insulin  merangsang pengambilan glukosa dalam sel-sel terutama menginduksi translokasi GLUT4 dari tempat penyimpanan intraseluler ke membran plasma. Resistensi insulin diketahui dengan  berkurangnya  pengambilan  glukosa  dan  pemanfaatan  oleh  jaringan  dan dikaitkan  dengan  berkurangnya  ekspresi  gen  GLUT4.  Gangguan  ekspresi  GLUT4, translokasi  GLUT4  atau  pensinyalan  insulin  dapat  mempengaruhi  penyerapan glukosa  yang  dirangsang  oleh  insulin,  akan  menghasilkan  resistensi  insulin  dan hiperglikemia.  Buah  pare  mengandung  bahan  kimia  meliputi  glikosida,  saponin,
alkaloid,  triterpen,  protein,  dan  steroid.  Bahan  kimia  hipoglikemik  pare  adalah campuran  dari  steroid  saponin  yang  dikenal  sebagai  charantin  dan  alkaloid. Beberapa kandungan kimia yang sudah terisolasi seperti charantins, a polipeptida- p, momordin Ic, asam oleanolic 3-HAI-monodesmoside dan asam oleanolic 3-HAI- glucuronide dari pare telah menunjukkan aktivitas hipoglikemik. Ekstraksi protein dan imunoblot untuk penentuan GLUT4 dilakukan pada otot rangka beku dari tikus menggunakan metode Klip yang dimodifikasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak  buah  pare  secara  efektif  mengendalikan  hiperglikemia  dan hiperinsulinemia pada hewan uji yang resisten insulin yang diinduksi fruktosa kerja dari  kandungan  kimia  dalam  pare  mirip  dengan  sensitizer  insulin  konvensional, yang bertindak sebagai agonis PPAR gama. Buah pare menunjukkan dua mekanisme yang  menghasilkan  peningkatan  kepekaan  reseptor  insulin,  dan  peningkatan penyerapan glukosa ke dalam otot yang mengakibatkan penurunan kadar glukosa. Peningkatan dalam kontrol glikemik dari buah pare berkaitan dengan peningkatan ekspresi mRNA GLUT4 dalam otot rangka melalui PPAR jalur tengah yang membuat peningkatan  efisiensi  penyerapan  glukosa  dan  menekan  peningkatan  glukosa plasma.  Peningkatan  protein  GLUT4  dalam  membran  plasma  otot  rangka bertanggung jawab atas dampak yang menguntungkan pada sensitivitas reseptor insulin. Level mRNA GLUT4 ternyata tidak berkorelasi terhadap kandungan protein. Buah  pare  juga  meningkatkan  jumlah  GLUT4  pada  permukaan  sel,  sehingga meningkatkan  penyerapan  glukosa  dalam  jaringan  perifer,  terutama  otot  rangka sehingga diduga pare merupakan kandidat untuk perlindungan terhadap diabetes tipe 2. Penelitian [21] pengujian dengan model in vitro menggunakan kultur sel L6 dengan  ekstrak  air  dan  kloroform,  ekstrak  buah  pare  pada  dosis  6  g/ml  optimal memiliki  aktivitas  terhadap  peningkatan  Glut-4,  memperkuat  transpor  glukosa berperan efektif dari fitokimia umum yang ada dalam dua ekstrak[20].

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  kajian  sistematik  review  buah  pare  senyawa  charantin, cucurbitacin, dan momordicoside D secara bersamaan mengaktivasi reseptor TGR5 dan GLP1 untuk menghambat DPP4, senyawa cucurbitane 25-O-methylkaraviagein D dikaitkan  dengan  keberadaan  –OH  memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap enzim  PTP1B,  senyawa  3β,  7β,  25-trihydroxycucurbita-5,23(E)-dien-19-al, charantal,  charantoside  XI,  dan  25ξ-  isopropenylchole-5,  6-ene-3-O-  D- glukopiranosida  diprediksi  memiliki  afinitas  mengikat  sisi  aktif  protein  sehingga menghambat α-glukosidase, dan senyawa yang dapat meningkatkan jumlah GLUT4 pada  permukaan  sel  yaitu  charantin,  vicine,  polypeptidep,  5-,19-epoxy-3-,25- dihydroxycucurbita-6,23(E)-diene  dan  3-7-,25  trihydroxycucurbita-5,23  (E)-dien- 19-al.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
[1]. WHO. 2018. “World Health Organisation.” Global Report on Diabetes : 88.
[2]. Schwinghammer,  Terry  L.  2015.  Pharmacotherapy  Handbook Chapter  10. Hypertension .
[3]. Yuda I.K.A, Anthara M.S., Dharmayudha A.A.G.O. 2013. “Identifikasi Golongan Senyawa  Kimia  Estrak  Etanol  Buah  Pare  (Momordica  Charantia)  Dan Pengaruhnya Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus Putih Jantan (Rattus  Novergicus)  Yang  Diinduksi  Aloksan.” Buletin  Veteriner  Udayana 5(2): 87–95.
[4]. Nobre,  Cristiane  P.,  Fernanda  N.  Raffin,  and  Túlio  F.  Moura.  2005. “Standardization of Extracts from Momordica Charantia L. (Cucurbitaceae) by Total Flavonoids Content Determination.” Acta Farmaceutica Bonaerense 24(4): 562–66.
[5]. Kartini,  Ketut,  I  Swantara,  and  I  Suartha.  2015.  “Isolasi  Dan  Identifikasi Senyawa  Aktif  Ekstrak  Etanol  Buah  Pare  (Momordica  Charantia  L.)  Yang Dapat  Menurunkan  Kadar  Glukosa  Darah.” CAKRA  KIMIA  (Indonesian  E- Journal of Applied Chemistry) 3(2): 32–38.
[6]. Suartha, I Nyoman, I Made Dira Swantara, and Wiwik Susanah Rita. 2016. “Ekstrak  Etanol  Dan  Fraksi  Heksan  Buah  Pare  (Momordica  Charantia) Sebagai  Penurun  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Diabetes.” Jurnal  Veteriner 17(1): 30–36.
[7]. Poovitha,  Sundar,  and  Madasamy  Parani.  2016.  “In  Vitro  and  in  Vivo  α- Amylase and α-Glucosidase Inhibiting Activities of the Protein Extracts from Two  Varieties  of  Bitter  Gourd  (Momordica  Charantia  L.).” BMC Complementary and Alternative Medicine
16(Suppl 1): 1–8. http://dx.doi.org/10.1186/s12906-016-1085-1.
[8]. Ekayanti,  Meiliza,  Rani  Sauriasari,  and  Berna  Elya.  2018.  “Dipeptidyl Peptidase IV Inhibitory Activity of Fraction from White Tea Ethanolic Extract (Camellia Sinensis (L.) Kuntze) Ex Vivo.” Pharmacognosy Journal 10(1): 190– 93.
[9]. Saifudin,  Azis,  Shigetoshi  Kadota,  and  Yasuhiro  Tezuka.  2012.  “Protein Tyrosine Phosphatase 1B Inhibitory Activity of Indonesian Herbal Medicines and  Constituents  of  Cinnamomum  Burmannii  and  Zingiber  Aromaticum.” Journal of Natural Medicines 67(2): 264–70.
[10]. Kerru,  Nagaraju,  Ashona  Singh-Pillay,  Paul  Awolade,  and  Parvesh  Singh. 2018. “Current Anti-Diabetic Agents and Their Molecular Targets: A Review.” European Journal of Medicinal Chemistry 152(May): 436–88.
[11]. Efanov, Alexander M. et al. 2005. “A Novel Glucokinase Activator Modulates Pancreatic  Islet  and  Hepatocyte  Function.”  Endocrinology  146(9):  3696– 3701.
[12]. Gisela  Wilcox.  2005.  “Insulin  and  Insulin  Resistance  Gisela.” Insulin  and Insulin Resistance Gisela 22(2): 61–63.
[13]. Olalekan,  Olalekan,  O.,  Opeyemi,  E.,  Orimoloye,  M.,  Sam,  O.,  Olalekan,  A.,  & Gbadura,  I.  (2018).  Pathophysiology  Potential  use  of  bitter  melon  ( Momordica charantia ) derived compounds as antidiabetics : In silico and in vivo studies. Pathophysiology ,
25 (4), 327–333.
https://doi.org/10.1016/j.pathophys.2018.05.003
[14]. Yue,  Yue,  J.,  Xu,  J.,  Cao,  J.,  Zhang,  X.,  &  Zhao,  Y.  (2017).  Cucurbitane
triterpenoids  from  Momordica  charantia  L.  and  their  inhibitory  activity against  α-glucosidase,  α-amylase  and  protein  tyrosine  phosphatase  1B (PTP1B). Journal of Functional Foods , 37 , 624–631.
https://doi.org/10.1016/j.jff.2017.07.041
[15]. Zeng,  He,  Y.,  Yang,  D.,  Cao,  J.,  Xia,  X.,  Zhang,  S.,  &  Bi,  X.  (2014).  “European Journal  of  Medicinal  Chemistry  New  Compounds  from  Acid  Hydrolyzed Products  of  the  Fruits  of  Momordica  Charantia  L  .  and  Their  Inhibitory Activity  against  Protein  Tyrosine  Phosphatas  1B.” European  Journal  of Medicinal Chemistry 81: 176–80. http://dx.doi.org/10.1016/j.ejmech.2014.01.066 [16]. Sallau A. B., Yakubu R. N., Aliyu S. M., Salihu A., Boniface B. Y. 2018. “In Vitro Efect  of  Terpenoids-Rich  Extract  of  Momordica  Charantia  on  Alpha Glucosidase Activity.” 25(3): 148–53. DOI: http://dx.doi.org/10.17533/udea.vitae.v25n3a05 [17]. Shivanagoudra, R., Perera, W. H., Perez, J. L., Athrey, G., Sun, Y., Jayaprakasha, G.  K.,  &  Patil,  B.  S.  2019.  “Bioorganic  Chemistry  Antidiabetic  ,  Anti-
Inflammatory  Activities  and  in  Silico  Modeling  Approaches.” Bioorganic Chemistry 87(January): 31–42. https://doi.org/10.1016/j.bioorg.2019.02.040. [18]. Hiem, N. X. N., Iem, P. V. K., Inh, C. V. M., An, K. B., Uong, X. C., Goc, T. M. N., Im, Y.  H.  K.2010.  “α-Glucosidase  Inhibition  Properties  of  Cucurbitane-Type Triterpene Glycosides from the Fruits of Momordica Charantia.” 58(5): 720- 24. https://doi.org/10.1192/bjp.111.479.1009-a.
[19]. Wan, X., Wang, X., Yang, M., Wang, J., & Kong, L. 2011. “Bioorganic & Medicinal Chemistry Dimerization of Piceatannol by Momordica Charantia Peroxidase and  α-Glucosidase  Inhibitory  Activity  of  the  Biotransformation  Products.”
Bioorganic & Medicinal Chemistry 19(17): 5085–92. http://dx.doi.org/10.1016/j.bmc.2011.07.032.
[20]. Kumar, Ramadhar, S Balaji, T S Uma, and P K Sehgal. 2009. “Fruit Extracts of Momordica  Charantia  Potentiate  Glucose  Uptake  and  Up-Regulate  Glut-4, PPAR and PI3K.” 126: 533–37. https://doi.org/10.1016/j.jep.2009.08.048 [21]. Shih,  Chun-ching,  Cheng-hsiu  Lin,  Wei-li  Lin,  and  Jin-bin  Wu.  2009. “Momordica Charantia Extract on Insulin Resistance and the Skeletal Muscle GLUT4 Protein in Fructose-Fed Rats.” 123: 82–90.
https://doi.org/10.1016/j.jep.2009.02.039
[22]. Singh, A. K., Jatwa, R., & Joshi, J. A. Y. A. 2014. Cytoprottective and Dipepetidyl Peptidase  IV  (DPP-IV/CD26)  Inhibitory  Roles  of  Ocimun  Sanctum  and Momordica Charantia Extract. 7(2827).