77 | How to cite this article (APA) : Lestari,A.I.,Nazip,K.,& Riyanto.(2022) . Pengaruh Ekstrak Kulit Jeruk  Kalamansi  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri Salmonella  Typhi dan  Sumbangannya  Pada Pembelajaran Biologi SMA. BIO-EDU: Jurnal Pendidikan Biologi, 7 (2), 77-86. doi: https://doi.org/ 10.32938/jbe.v7i2.2260

## BIO-EDU: JURNAL PENDIDIKAN BIOLOGI
Tahun 2022, VOL. 7, No.2, Halaman 77-86, e-ISSN: 2527-6999
https://doi.org/ 10.32938/jbe.v7i2.2260
Pengaruh  Ekstrak  Kulit  Jeruk  Kalamansi  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella Typhi dan Sumbangannya Pada Pembelajaran Biologi Sma
Astri Indah Lestari 1 , Khoiron Nazip 2 , Riyanto 3
1 Mahasiswa Pendidikan Biologi, Universitas Sriwijaya, Jl. Raya Palembang-Prabumulih KM 32 Indralaya, Ogan Ilir, Sumatera Selatan
2 Dosen Pendidikan Biologi, Universitas Sriwijaya, Jl. Raya Palembang-Prabumulih KM 32 Indralaya, Ogan Ilir, Sumatera Selatan
3 Dosen Pendidikan Biologi, Universitas Sriwijaya, Jl. Raya Palembang-Prabumulih KM 32 Indralaya, Ogan Ilir, Sumatera Selatan
Received 13 Agustus 2022 ABSTRACT Revised 25 Agustus 2022 Kalamansi orange ( Citrus microcarpa Bunge.) has the potential as a source of antimicrobials because the skin of the fruit contains flavonoid compounds, tannins, and alkaloids which have been shown to be able to inhibit the growth of gram-negative bacteria. This study aimed to obtain information on the effect of ethanolic extract of kalamansi orange peel ( C. microcarpa Bunge.) on the growth of Salmonella typhi bacteria and the minimum inhibitory concentration of ethanolic extract of kalamansi orange peel ( C. microcarpa Bunge.) on the growth of S. typhi bacteria. Experimental research with a completely randomized design, the results were analyzed using the One Way ANOVA test. Calamansi orange peel ethanol extract with concentrations of 0%, 5%, 7.5%, 10%,12.5%, l and 15% was tested for antibacterial activity against the growth of S. typhi bacteria using the disc diffusion method. The parameters observed were the diameter of the inhibition zone formed around the paper disc. The results of this study showed that ethanol extract of kalamansi orange peel ( C. microcarpa Bunge.) had a significant effect on the growth of S. typhi bacteria, with a 95% confidence level and minimum inhibitory concentration (MIC) of ethanolic extract of kalamansi orange peel ( C. l microcarpa l Bunge.) on bacterial growth. S. typhi was at a concentration of 10%, to be precise, MIC was at a concentration of 5% with  an average inhibition zone diameter of 5.27 mm. The results of this study were donated in the form of student worksheets and related their role in life in the biology subject
of SMA class X even semester.
Accepted 26 Agustus 2022 Published 31 Agustus 2022

## Corresponding Author
Astri Indah Lestari, astriindah.ai@gmail.com
Distributed under
CC BY-SA 4.0
Keywords : Citrus Microcarpa Bunge. ; Salmonella Typhi ; Inhibition Zone

## 1 PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara beriklim tropis dengan kekayaan hayati terbesar di Asia Tenggara yang memiliki 20.000 spesies tanaman, 13.576 diantaranya teridentifikasi berpotensi sebagai tanaman obat (Kumoro, 2015). Penggunaan tanaman sebagai obat dinilai memiliki efek samping yang relatif lebih rendah dibandingkan dengan obat sintetik (Sumayyah &  Salsabila,  2017). Salah satu tanaman obat yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai bahan antimikroba yaitu jeruk kalamansi ( Citrus microcarpa Bunge.). Tanaman ini banyak dibudidayakan di Indonesia namun pemanfaatannya masih sangat kurang, hanya sebatas bahan tambahan makanan dan minuman.
Jeruk  Kalamansi  mengandung  beberapa  senyawa  bioaktif  yang  terdapat  pada  kulit buahnya,  antara  lain  minyak  atsiri,  flavonoid,  tanin,  dan  alkaloid  (metanol  dan  etil  asetat) (Noviyanty et al., 2019; Wulandari et al., 2013; Yulliasri et al., 2000). Senyawa-senyawa ini dapat  menghambat  pertumbuhan  beberapa  bakteri  gram  negatif  yang  telah  dibuktikan  oleh
peneliti, dintaranya yaitu (Kindangen et al., 2018) menguji aktivitas antimikroba minyak atsiri kulit  jeruk  kalamansi  ( C.  microcarpa Bunge.)  menunjukkan  penghambatan  pertumbuhan terhadap bakteri Escherichia coli . Flavonoid yang termasuk kelompok senyawa fenolik, telah diketahui  memiliki  kemampuan  menghambat  pertumbuhan  bakteri.  (Suteja  et  al.,  2016) melakukan  uji  aktivitas  antimikroba  senyawa  flavonoid  dari  ekstrak  daun  trembesi  ( Albizia saman (Jacq.) Merr.) menunjukkan penghambatan pertumbuhan terhadap bakteri E.coli. Tanin yang  juga  termasuk  kelompok  senyawa  fenolik,  telah  terbukti  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri.
Salmonella typhi merupakan bakteri gram negatif yang menyebabkan penyakit demam tifoid. Demam tifoid merupakan salah satu penyakit yang masih menjadi ancaman di Indonesia. Penyakit  ini  di  Indonesia  bersifat  endemis  dan  merupakan  masalah  kesehatan  masyarakat. Penyakit  demam  tifoid menunjukkan  kecenderungan  meningkat  dari  tahun  ke  tahun  dengan rata-rata  500/100.000  penduduk  dengan  angka  kematian  0,6―5%  (Kemenkes  RI,  2006). Penyakit infeksi bakteri umumnya dapat diobati dengan antibiotik. Antibiotik dan obat-obatan sejenis, yang kemudian disebut sebagai obat antimikroba (Salim & Soleha, 2017). Beberapa obat antibiotik yang biasa digunakan dalam pengobatan penyakit demam tifoid yaitu ciprofloxacin, pefloxacin, dan levofloxacin. Obat ini termasuk ke dalam antibiotik golongan fluoroquinolone (Gunawan et al., 2020). Obat antibiotik golongan ini memiliki efek samping yaitu; gangguan pencernaan, gangguan sistem saraf pusat (SSP), gangguan ginjal, gangguan penglihatan, gangguan kulit, gangguan hati, atropi dan tendinitis, gangguan kardiovaskular, gangguan hematologi, reaksi imunologi, gangguan metabolik, dan teratogenik (Raini, 2016). Oleh sebab itu, perlu dicari antimikroba alami yang memberi efek samping minimal yang bersumber dari tanaman.
Hasil dari penelitian ini dapat dimanfaatkan sebagai sumber pembelajaran materi kontekstual pada mata l pelajaran biologi SMA kelas X semester genap dengan Kompetensi Dasar (KD) 3.8 Mengelompokan tumbuhan ke dalam divisio berdasarkan ciri-ciri umum, serta mengaitkan peranannya dalam kehidupan. Pembelajaran kontekstual ( Contextual Teaching and Learning ) merupakan konsep belajar yang membantu guru mengaitkan antara materi yang diajarkannya dengan situasi dunia nyata peserta didik (Hasnawati,  2006). Tanaman l jeruk kalamansi yang telah dikenal dan terdapat di sekitar peserta didik diharapkan dapat menjadi contoh yang kontekstual untuk mendeskripsikan peranan tumbuhan bagi kehidupan. Sumbangan pembelajaran ini akan dikemas dalam bentuk lembar kerja peserta didik (LKPD) non-eksperimen tentang peranan jeruk kalamansi ( C. microcarpa Bunge.) sebagai antimikroba. Berdasarkan uraian di atas, maka telah dilakukan penelitian dengan judul “Pengaruh Ekstrak Kulit Jeruk Kalamansi ( Citrus microcarpa Bunge.) terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella typhi dan Sumbangannya pada Pembelajaran Biologi SMA ” .

## 2 METODE
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL), yaitu keragaman atau variasi hanya disebabkan oleh perlakuan yang diujicobakan dan perlakuan tersebut merupakan level-level dari satu faktor tertentu (Harsojuwono et al., 2011) yang terdiri dari enam perlakuan dan empat pengulangan. Metode uji aktivitas antibakteri yang digunakan adalah metode difusi cakram yang digunakan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dan konsentrasi hambat minumum (KHM) ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella typhi (Yusmaniar et al., 2017). Penelitian ini dilakukan secara dua tahap, yaitu uji pendahuluan dan uji lanjutan.
Uji pendahuluan dilakukan untuk mendapatkan nilai konsentrasi ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi ( Citrus microcarpa Bunge.) yang aktif dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Salmonella typhi yang digunakan sebagai patokan dalam pengujian lanjutan. Pada uji pendahuluan menggunakan lima perlakuan dengan lima pengulangan. Perlakuan yang digunakan yaitu ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi dengan konsentrasi 0%, 0,5%, 1%, 5%, dan 10%. Setelah diinkubasi selama 1 × 24 jam, dilakukan pengukuran diameter zona hambat berupa daerah jernih di sekeliling kertas cakram dalam satuan milimeter (mm), selanjutnya dilakukan uji Analysis Of Variance (ANOVA). Hasil uji pendahuluan yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel berikut ini:
Tabel l 1.Data Hasil Uji Pendahuluan
Data l hasil l uji l pendahuluan, l di l uji l statistik l ANOVA l dan l disimpulkan l bahwa l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( Citrus l microcarpa l Bunge.) l berpengaruh l signifikan l terhadap l pertumbuhan l bakteri l Salmonella l typhi l pada l konsentrasi l 10%, l pada l kosentrasi l ini l terbentuk l zona l hambat l dengan l rata-rata l diameter l zona l hambat l sebesar l 4,61 l mm. l Data l ini l kemudian l dijadikan l dasar l bagi l peneliti l untuk l menentukan l rentang l konsentrasi l ekstrak l minimal l yang l digunakan l pada l uji l lanjut, l oleh l karena l rentang l konsentrasi l 10% l masih l terlalu l besar l maka l perlakuan l diturunkan l pada l konsentrasi l 5% l dan l 7,5%, l sehingga l konsentrasi l perlakuan l yang l digunakan l adalah l 0%, l 5%, l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15%. l Ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l sebagai l bahan l uji l dengan l enam l perlakuan l dan l empat l l pengulangan l pada l setiap l perlakuan. l Pada l penelitian l ini l ciprofloxacin l digunakan l sebagai l antimikroba l pembanding l kontrol l positif, l sedangkan l perlakuan l dengan l konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 0%(aquadest) l sebagai l kontrol l negatif. l Rancangan l perlakuan l dan l pengulangan l pada l penelitian l ini l dapat l dilihat l pada l Tabel 2.
Tabel l 2. l l Rancangan L Perlakuan L dan L Ulangan
Keterangan l : P 0 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 0% l dalam l pelarut P 1 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 5% l % l dalam l pelarut P 2 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 7,5% l dalam l pelarut P 3 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 10% l dalam l pelarut P 4 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 12,5% l dalam l pelarut P 5 l : l Konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 15% l dalam l pelarut
Perlakuan Konsentrasi l (%)
Diameter l zona l hambat l (mm) Jumlah Rata- rata 1 2 3 4 5 P0 0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 P1 0,5 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 P2 1 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 P3 5 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 P4 10 4,66 4,46 4,60 4,46 4,86 23.04 4,61 Perlakuan Ulangan 1 2 3 4 P 0 P 0 l 1 P 0 l 2 P 0 l 3 P 0 l 4
P 1
P 1 l 1 P 1 l 2 P 1 l 3 P 1 l 4
P 2
P 2 l 1 P 2 l 2 P 2 l 3 P 2 l 4 P 3
P 3 l 1 P 3 l 2 P 3 l 3 P 3 l 4
P 4 P 4 l 1 P 4 l 2 P 4 l 3 P 4 l 4
P 5
P 5 l 1 P 5 l 2 P 5 l 3 P 5 l 4
Data l yang l diperoleh l akan l dianalisis l secara l statistik l menggunakan l metode l One l Way l Analysis l of l Variance l (ANOVA) l dengan l program l Statistical l Product l Services l Solution l (SPSS) l versi l 20 l pada l taraf l signifikansi l 5% l (α=0,05) l dengan l tingkat l kepercayaan l 95%. l Uji l ANOVA l bertujuan l untuk l mengetahui l signifikan l atau l tidak l signifikan l pengaruh l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( Citrus l microcarpa l Bunge.) l terhadap l pertumbuhan l bakteri l Salmonella l typhi l dalam l setiap l perlakuan.
Tabel l 3. l Analisis l Sidik l Ragam l F l (One l Way l ANOVA)
Sumber l Keragaman l (SK) Derajat l Bebas l (DB) Jumlah l Kuadrat (JK)
Kuadrat l Tengah
l (KT) F hitung F l tabel (α=5%) Perlakuan l (P)  t-1 JKP KTP=JKP/t-1 KTP/KTG
Galat l ( l l l Galat l (G) t(r-1) JKG KTG=JKP/t(r-1) Total l (T) t.r– l 1 JKT
(Harsojuwono et al., 2011) Keterangan: r = ulangan, t = perlakuan
Untuk memutuskan signifikan atau tidaknya ekstrak kulit jeruk kalamansi terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella typhi jika :
1) Nilai sig. < 0,05 maka H 1 l diterima pada taraf uji 0,05 artinya berbeda nyata ( significant difference ).
2) Nilai sig. > 0,05 maka H 0 l diterima pada taraf uji 0,05 artinya tidak berbeda nyata (non significant l difference ).
Untuk menentukan tingkat ketelitian dilakukan pengujian koefisien keragaman (KK), menggunakan rumus berikut ini :
Keterangan l : l l l l
KK l l l = l Koefisien l keragaman KTG l = l Kuadrat l tengah l galat y l = l Rata-rata l seluruh l percobaan

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Zona l hambat l yaitu l zona l jernih l yang l tampak l di l sekeliling l kertas l cakram l pada l media l agar l padat l biakan l bakteri l (Hanizar  &  Sari,  2018). l Zona l ini l terbentuk l akibat l terhambatnya l pertumbuhan l mikroba l oleh l bahan l antimikroba l yang l berdifusi l ke l dalam l medium l (Yusmaniar et al.,  2017).  Pada l konsentrasi l perlakuan l 0% l (kontrol l negatif) l tidak l terlihat l zona l hambat, l sedangkan l pada l konsentrasi l 5%, l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15% l terlihat l adanya l zona l hambat l berupa l daerah l jernih l di l sekeliling l kertas l cakram. l Pada l penelitian l ini l parameter l yang l diamati l berupa l diameter l zona l hambat l dengan l enam l perlakuan l dan l empat l pengulangan.
Koefisien keragaman (KK) = √𝐾𝑇𝐺 𝑦 x 100% ................. (1)
Tabel l 4. l Diameter l Zona Hambat Ekstrak l Etanol l Kulit l Jeruk l Kalamansi l Terhadap
l Pertumbuhan l Bakteri l Salmonella l typhi Pada l Tabel l 4 l menunjukkan l data l hasil l penelitian l berupa l diameter l zona l hambat l yang l terbentuk l pada l setiap l perlakuan l yang l diberi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Perlakuan dengan l konsentrasi l 0% l sebagai l kontrol l negatif l tidak l menghasilkan l zona l hambat. l Perlakuan l yang l menghasilkan l rata-rata l diameter l zona l hambat l terkecil l yaitu l pada l konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 5% l sebesar l 5,27 l mm, l sedangkan l rata-rata l diameter l zona l hambat l terbesar l terdapat l pada l konsentrasi l 15% l sebesar l 7 l mm. l Rata-rata l diameter l zona l hambat l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l dapat l dilihat l melalui l diagram l (Gambar l 1) l berikut l ini:
Gambar l 1 l Rata-rata l Diameter l Zona l Hambat l Ekstrak l Etanol l Kulit l Jeruk Kalamansi
l Terhadap l Pertumbuhan Bakteri l Salmonella l typhi
Pada l Gambar l 1 l menunjukkan l bahwa l dengan l meningkatnya l konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi, l maka l zona l hambat l yang l terbentuk l juga l semakin l besar. l Hal l ini l didukung l oleh l pernyataan l (Pelczar  &  Chan,  2008) l bahwa l semakin l tinggi l konsentrasi l suatu l zat l antimikroba, l maka l semakin l tinggi l daya l antimikrobanya. Selanjutnya, l untuk l mengetahui l signifikan l atau l tidak l signifikan l pengaruh l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l maka l dilakukan l uji l analisis l sidik l ragam l F l ( One l Way l ANOVA) l dengan l tingkat l kepercayaan l 95%. l Hasil l analisis l sidik l ragam l dapat l dilihat l pada l Tabel l 5 l berikut l ini: 0 5,27 5,36 5,97 6,87 7 0 2 4 6 8 0 5 7,5 10 12,5 15 Diam ete r z on a h am b at (m m ) Konsentrasi (%) Perlakuan  Konsentrasi l (%) Diameter l zona l hambat l (mm)
Jumlah Rata-rata 1 2 3 4 P0 0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 P1 5 6,10 5,90 4,04 5,04 21,08 5,27 P2 7,5 6,08 5,28 4,44 5,64 21,44 5,36 P3 10 6,88 5,06 5,40 6,56 23,90 5,97 P4 12,5 6,30 6,04 7,94 7,20 27,48 6,87 P5 15 6,56 7,04 7,80 6,62 28,02 7,00 Jumlah 31,92  29,32  29,62  31,06  121,92 30,47
Tabel l 5 l Hasil l Analisis l Sidik l Ragam l ANOVA l Pengaruh Ekstrak Etanol l Kulit l Jeruk l Kalamansi l Terhadap Pertumbuhan Bakteri l Salmonella l typhi
Sumber l Keragaman
l (SK) Jumlah
l Kuadrat l (JK) Derajat
l Bebas l (DB) Kuadrat l Tengah l (KT) F hitung Sig. Perlakuan 134,527 5 26.905 50,044 ,000 Galat 9,677 18 ,538 Total 144,204 23
Berdasarkan l hasil l uji l analisis l sidik l ragam l F l ANOVA l pada l Tabel l 5, l menunjukkan l bahwa l nilai l sig. l <0,05 l maka l H0 1 l ditolak l dan l H1 1 l diterima l pada l taraf l uji l 0,05 l yang l artinya l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( C. l microcarpa l Bunge.) l berpengaruh l signifikan l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi. L
Selanjutnya, l dilakukan l uji l beda l jarak l nyata l duncan l (BJND) l untuk l mencari l perbedaan l antar l perlakuan. l Uji l ini l dilakukan l sesuai l dengan l koefisien l keragaman l (KK) l yang l diperoleh. l Nilai l KK l lebih l dari l 10% l (Lampiran l 12), l maka l uji l lanjut l yang l digunakan l yaitu l uji l BJND l dengan l taraf l uji l 5%. l Hasil l Uji l BJND l dapat l dilihat l pada l Tabel l 6 l berikut l ini l :
Tabel l 6 l Hasil l Uji l BJND l Rata-rata l Diameter l Zona l Hambat l Ekstrak l Etanol l Kulit l Jeruk
l Kalamansi l Terhadap l Pertumbuhan l Bakteri l Salmonella l typhi
Perlakuan Konsentrasi l (%) Rata-rata BJND l 5% P0 0 0 A P1 5 5,27 B P2 7,5 5,36 B P3 10 5,97 BC P4 12,5 6,87 C P5 15 7 C
Berdasarkan l hasil l uji l BJND l (Tabel l 6), l pada l taraf l signifikansi l 5% l menunjukkan l bahwa l pengaruh l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l dengan l konsentrasi l perlakuan l 0% l berbeda l nyata l dengan l konsentrasi l 5%, l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15% l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi. l Konsentrasi l perlakuan l 5% l berbeda l tidak l nyata l dengan l konsentrasi l 7,5% l dan l 10%, l akan l tetapi l berbeda l nyata l dengan l konsentrasi l 0%, l 12,5%, l dan l 15% l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Konsentrasi l perlakuan l 7,5% l berbeda l tidak l nyata l dengan l konsentrasi l 5% l dan l 10%, l akan l tetapi l berbeda l nyata l dengan l konsentrasi l 0%, l 12,5%, l dan l 15% l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Konsentrasi l perlakuan l 10% l berbeda l tidak l nyata l dengan l konsentrasi l 5%, l 7,5%, l 12,5%, l dan l 15%, l akan l tetapi l berbeda l nyata l dengan l konsentrasi l 0% l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Konsentrasi l 12,5% l berbeda l tidak l nyata l dengan l konsentrasi l 10% l dan l 15%, l akan l tetapi l berbeda l nyata l dengan l konsentrasi l 0%, l 5%, l dan l 7,5% l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . Selanjutnya l dilakukan l perbandingan l pengaruh l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l dan l ciprofloxacin l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Data l perbandingan l dapat l dilihat l pada l Tabel l 7 l berikut l ini l :
Tabel 7 l Perbandingan l Pengaruh l Ekstrak Etanol l Kulit l Jeruk l Kalamansi l dan
l Ciprofloxacin l Terhadap l Pertumbuhan l Bakteri l Salmonella l typhi
Perlakuan Ciprofloxacin (0,015%) 0% 5% 7,5% 10% 12,5% 15%
Rata-rata l diameter l zona l hambat l (mm)
0,00  5,27 5,365 l l 5,97 6,87 7 23,78
Tabel l 7 l menunjukkan l bahwa l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l dengan l konsentrasi l perlakuan l 0%, l 5% l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15% l menghasilkan l rata-rata l diameter l zona l hambat l yang l lebih l kecil l dibandingkan l dengan l rata-rata l diameter l zona l hambat l yang l dihasilkan l antibiotik l ciprofloxacin l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi. Penelitian l ini l menggunakan l kulit l jeruk l kalamansi l sebagai l bahan l uji l aktivitas l antibakteri l terhadap l Salmonella l typhi . l Kulit l jeruk l kalamansi l diekstraksi l menggunakan l metode l maserasi l dengan l menggunakan l pelarut l etanol l teknis l 70%, l sehingga l jenis l senyawa l yang l di l ekstrak l merupakan l senyawa l yang l bersifat l polar l (larut l air) l dan l semipolar l (sebagian l larut l air) l seperti l flavonoid, l tanin, l dan l alkaloid. l Pelarut l etanol l 70% l dapat l melarutkan l senyawa l fitokimia l lebih l maksimal l karena l masih l mengandung l air l sebanyak l 30%, l sehingga l sebagian l senyawa l tersebut l ada l yang l dapat l tertarik l dalam l etanol l dan l ada l pula l yang l tertarik l dalam l air l (Mubarak et al., 2018; Riwanti  et  al.,  2020;  Supriningrum  et  al.,  2019). l Metode l uji l yang l digunakan l adalah l difusi l cakram l (Kirby-Bauer), l prinsipnya l adalah l terdifusinya l senyawa l antimikroba l pada l kertas l cakram l yang l telah l di l rendam l dengan l larutan l uji l ke l dalam l media l yang l telah l diinokulasi l dengan l bakteri l uji l (Yusmaniar et al., 2017). l Parameter l yang l diamati l pada l penelitian l ini l adalah l diameter l zona l hambat l berupa l daerah l jernih l di l sekeliling l kertas l cakram l dalam l satuan l milimeter l (mm). l Penelitian l ini l menggunakan l enam l perlakuan l dan l empat l pengulangan, l perlakuan l yang l digunakan l yaitu l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l dengan l konsentrasi l 0%, l 5%, l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15%. l Pembanding l yang l digunakan l pada l penelitian l ini l adalah l konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 0% l (aquadest) l sebagai l kontrol l negatif l dan l ciprofloxacin l dengan l kosnsentrasi l 0,015% l sebagai l kontrol l positif. L Berdasarkan l hasil l pengukuran l diameter l zona l hambat l diperoleh l rata-rata l diameter l zona l hambat l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi. l Rata-rata l diameter l zona l hambat l paling l besar l berada l pada l konsentrasi l uji l yang l paling l tinggi l yaitu l 15% l (7 l mm). l Hal l ini l disebabkan l karena l pada l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 15% l memiliki l kandungan l senyawa l antimikroba l yang l terlarut l lebih l banyak l dibandingkan l dengan l konsentrasi l di l bawahnya l (0%, l 5%, l l 7,5%, l 10%, l dan l 12,5%). l Hal l ini l didukung l oleh l pernyataan l (Pelczar & Chan,  2008) l bahwa l semakin l tinggi l konsentrasi l suatu l zat l antimikroba, l maka l semakin l tinggi l daya l antimikrobanya. L Terhambatnya l pertumbuhan l mikroba l uji l ( S. l typhi ) l pada l penelitian l ini l diduga l berasal l dari l senyawa l metabolit l sekunder l yang l terlarut l dalam l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi. l Senyawa l yang l diduga l berperan l aktif l dalam l menghambat l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l yaitu l flavonoid, l tanin, l dan l alkaloid l (metanol l dan l etil l asetat) l (Noviyanty et  al.,  2019;  Wulandari et al.,  2013; Yulliasri et al., 2000). L Berdasarkan l hasil l uji l BJND l menunjukkan l bahwa l perlakuan l yang l lebih l efektif l dalam l menghambat l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l berada l pada l konsentrasi l 5%. l Hal l ini l dikarenakan l konsentrasi l 5% l merupakan l konsentrasi l terendah l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l yang l dapat l menghambat l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi . l Hal l ini l didukung l oleh l pernyataan l (Zeniusa et al., 2019) l apabila l perlakuan l dengan l konsentrasi l lebih l rendah l tetapi l mempunyai l pengaruh l yang
l sama l dengan l perlakuan l dengan l konsentrasi l yang l lebih l tinggi l dalam l meningkatkan l diameter l zona l hambat, l maka l perlakuan l yang l lebih l rendah l tersebut l lebih l baik l daripada l perlakuan l konsentrasi l yang l lebih l tinggi l di l atasnya. l Menurut l (Yusmaniar et al., 2017) l konsentrasi l ekstrak l pada l kadar l terendah l yang l dapat l menghambat l pertumbuhan l bakteri l dengan l adanya l daerah l jernih l di l sekeliling l kertas l cakram l ditetapkan l sebagai l konsentrasi l hambat l minimum l (KHM). l Oleh l karena l itu, l maka l dapat l ditentukan l bahwa l konsentrasi l hambat l minimum l esktrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( C. l microcarpa l Bunge.) l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l berada l pada l konsentrasi l 5% l yang l berarti l H1 2 l diterima l yaitu l konsentrasi l hambat l minimum l (KHM) l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( C. l microcarpa l Bunge.) l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l berada l pada l konsentrasi l ≤10%.
Pembanding l yang l digunakan l pada l penelitian l ini l adalah l konsentrasi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l 0% l (aquadest) l sebagai l kontrol l negatif l dan l ciprofloxacin l dengan l kosnsentrasi l 0,015% l sebagai l kontrol l positif. l Perlakuan l kontrol l negatif l tidak l menghasilkan l zona l hambat l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l sehingga l terbukti l bahwa l zona l hambat l yang l terbentuk l pada l perlakuan l yang l diberi l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l bukan  berasal l dari l pelarut l ekstrak, l melainkan l memang l berasal l dari l senyawa l aktif l yang l terkandung l dalam l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi. l Pada l tabel l terlihat l bahwa l rata-rata l diameter l zona l hambat l ciprofloxacin l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l lebih l besar l dibandingkan l dengan l l perlakuan l yang l di l beri l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi, l artinya l daya l hambat l ciprofloxacin l lebih l besar l dibandingkan l dengan l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi. l Hal l ini l dibuktikan l dengan l zona l hambat l yang l dihasilkan l ciprofloxacin l pada l konsentrasi l yang l lebih l rendah l (0,015%) l menghasilkan l zona l hambat l yang l lebih l besar l yaitu l 23,78 l mm, l dibandingkan l dengan l zona l hambat l yang l dihasilkan l ekstrak l kulit l jeruk l kalamansi l dengan l perlakuan l konsentrasi l paling l tinggi l (15%) l yaitu l 7 l mm. l Kekuatan l daya l hambat l antibakteri l dari l perlakuan l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l pada l konsentrasi l 5%, l 7,5%, l 10%, l 12,5%, l dan l 15% l termasuk l kategori l sedang l (Zona l hambat l 5—10 l mm) l dalam l menghambat l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi , l sedangkan l pada l kontrol l positif l yang l menggunakan l ciprofloxacin l dengan l konsentrasi l 0,015% l termasuk l kategori l sangat l kuat l (Zona l hambat l >20 l mm) l l dalam l menghambat l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l (Davis & Stout, 1971).

## 4 KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1 Kesimpulan
Berdasarkan l hasil l penelitian l yang l telah l dilakukan, l dapat l disimpulkan l esktrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( Citrus l microcarpa l Bunge.) l berpengaruh l signifikan l terhadap l pertumbuhan l bakteri l Salmonella l typhi, l dengan l taraf l kepercayaan l 95% . l Konsentrasi l hambat l minimum l (KHM) l ekstrak l etanol l kulit l jeruk l kalamansi l ( C. l microcarpa l Bunge.) l terhadap l pertumbuhan l bakteri l S. l typhi l berada l pada l konsentrasi l ≤10%, l tepatnya l KHM l berada l pada l konsentrasi l 5% l dengan l rata-rata l diameter l zona l hambat l 5,27 l mm. l Sumbangan l hasil l penelitian l berupa l lembar l kerja l peserta l didik l (LKPD) l non-eksperimen l tentang l peranan l tanaman l jeruk l kalamansi l ( C. l microcarpa l Bunge.) l sebagai l antimikroba l dapat l digunakan l sebagai l bahan l ajar l pada l pembelajaran l biologi l SMA l kelas l X l khususnya l pada l Kompetensi l Dasar l (KD) l 3.8 l Mengelompokan l tumbuhan l ke l dalam l divisio l berdasarkan l ciri-ciri l umum, l serta l mengaitkan l peranannya l dalam l kehidupan.

## 4.2 Saran
Pada penelitian ini konsentrasi ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi yang diujikan hanya sampai  konsentrasi  15%  dengan  rentang  konsentrasi  yang  cukup  besar,  oleh  karena  itu disarankan untuk melakukan penelitian pengaruh ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi terhadap pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi dengan  rentang  konsentrasi  yang  lebih  kecil  dan
diujikan sampai dengan konsentrasi 100%. Zona hambat pada kosentrasi ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi 5% yang digunakan pada uji pendahuluan dan uji lanjut menunjukkan hasil yang tidak konsisten, hal ini diduga karena pada metode difusi cakram memiliki kelemahan, salah satunya yaitu zona hambat yang terbentuk tergantung oleh jumlah zat antimikroba yang terdifusi ke dalam medium, oleh karena itu disarankan untuk melakukan penelitian pengaruh ekstrak etanol kulit jeruk kalamansi terhadap pertumbuhan bakteri S. typhi dengan metode uji yang validitasnya lebih baik.

## DAFTAR RUJUKAN
Davis, W. W., & Stout, T. R. (1971). Disc plate method of microbiological antibiotic assay. Applied Microbiology , 22 (4), 659–665.
Gunawan, D. O., Indriani, L., & Dewi, M. (2020). Evaluasi pemberian antibiotik pada pasien demam tifoid di instalasi rawat inap rumah sakit Azra Kota Bogor. Fitofarmaka Jurnal Ilmiah Farmasi , 10 (1), 54–64.
Hanizar,  E.,  &  Sari,  D.  N.  R.  (2018).  Aktivitas antibakteri  Pleurotus  ostreatus  varietas  grey oyster  pada  Staphylococcus  aureus  dan  Pseudomonas  aeruginosa. E-Jurnal  Pustaka Kesehatan , 6 (3), 387–392.
Harsojuwono, B. A., Arnata, I. W., & Puspawati, G. A. K. D. (2011). Rancangan Percobaan . Lintas Kata Publishing.
Hasnawati.  (2006).  Pendekatan  contextual  teaching  learning  hubungannya  dengan  evaluasi pembelajaran. Jurnal Ekonomi Dan Pendidikan , 3 (1), 53–62.
Kemenkes RI. (2006). Pedoman Pengendalian Demam Tifoid . Kemenkes RI.
Kindangen, G. D., Lolo, W. A., & Yamlean, P. V. Y. (2018). Uji aktivitas anti bakteri minyak atsiri  kulit  buah  jeruk  kalamansi  (Citrus  microcarpa  Bunge.)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Jurnal Ilmiah Farmasi , 7 (4), 62–68.
Kumoro, A. C. (2015). Teknologi ekstraksi senyawa bahan aktif dari tanaman obat . Plantaxia.
Mubarak,  F.,  Sartini,  S.,  &  Purnawanti,  D.  (2018).  Effect  of  ethanol  concentration  on antibacterial  activity  of  bligo  fruit  extract  (Benincasa  hispida  Thunb.)  to  Salmonella typhi. IJPST , 5 (3), 76–81.
Noviyanty, Y., Hepiyansori, & Ningsih, Y. P. (2019). Identifikasi senyawa tanin dari ekstrak etanol kulit buah jeruk kalamansi (Citrus x microcarpa Bunge). Jurnal Ilmiah Farmacy , 6 (1), 44–52.
Pelczar,  M.  J.,  &  Chan,  Jr.  E.  C.  S.  (2008). Dasar-dasar  mikrobiologi  jilid  2 .  Universitas Indonesia Pressc (UI-Press).
Raini,  M.  (2016).  Antibiotik  golongan  fluorokuinolon:  Manfaat  dan  kerugian. Media Litbangkes , 26 (3), 163–174.
Riwanti, P., Izazih, F., & Amaliyah. (2020). Pengaruh perbedaan konsentrasi etanol pada kadar flavonoid  total  ekstrak  etanol  50,70,  dan  96%  Sargassum  polycystum  dari  Madura. Journal of Pharmaceutical-Care Anwar Medika , 2 (2), 35–48.
Salim, H. H. U., & Soleha, T. U. (2017). Pengaruh aktivitas antimikroba ekstrak bawang putih (Allium  sativum)  terhadap  bakteri  gram  positif  (Staphylococcus  aureus)  dan  gram negatif (Escherichia coli) secara in vitro. Medula , 7 (5), 66–70.
Sumayyah, S., & Salsabila, N. (2017). Obat tradisional: Antara khasiat dan efek sampingnya. Majalah Farmasetika , 2 (5), 1–4.
Supriningrum,  R.,  Fatimah,  N.,  &  Purwanti,  Y.  E.  (2019).  Karakteristik  spesifik  dan  non spesifik  ekstrak  etanol  daun  putat  (Planchonia  valida). Al  Ulum  Jurnal  Sains  Dan Teknologi , 5 (1), 6–12.
Suteja, I. K. P., Rita, W. S., & Gunawan, I. W. G. (2016). Identifikasi dan uji aktivitas senyawa flavonoid dari ekstrak daun trembesi (Albizia saman (Jacq.) Merr) sebagai antibakteri Escherichia coli. Jurnal Kimia , 10 (1), 141–148.
Wulandari, M., Idiawati, N., & Gusrizal. (2013). Aktivitas antioksidan ekstrak N-heksana, etil asetat dan metanol kulit buah jeruk sambal (Citrus microcarpa Bunge.). Jkk , 2 (2), 90– 94.
Yulliasri,  J.,  Praptiwi,  &  Agusta,  A.  (2000).  Komponen  kimia  dan  efek  antibakteri  minyak atsiri kulit buah dan daun jeruk kasturi (Citrus microcarpa Bunge.). Majalah Farmasi Indonesia , 11 (1), 77–85.
Yusmaniar, Wardiyah, & Nida, K. (2017). Mikrobiologi dan parasitologi . Kemenkes RI.
Zeniusa, P., Ramadhian, M. R., Nasution, S. H., & Karima, N. (2019). Uji daya hambat ekstrak etanol teh hijau terhadap Escherichia coli Secara in vitro. Majority , 8 (2), 136–143.