## PENGARUH SACCHAROMYCES CEREVISIAE TERHADAP KADAR ETANOL DARI KULIT NANAS SECARA FERMENTASI

## THE EFFECT OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE ON ETHANOL LEVELS FROM FERMENTATION OF PINEAPPLE PEEL
Rifdah 1) , Ummi Kalsum 2) , Intan Seprina Anugrah 3) 1,2,3) Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Muhammadiyah Palembang, Palembang, Indonesia Corresponding Author E-mail: rifdah147@gmail.com, ummikalsum1207@gmail.com dan intananugrah307gmail.com
Abstract: Indonesia as a country rich in  natural resources has ample  opportunity  for the development of  ethanol to replace  fewer  fossil  energy  sources.  Currently,  bioethanol  has  begun  to  be  produced  from  various  raw materials such as  bagasse,  cassava,  potatoes  and  so  on.  The  government  has  also  strengthened  the  development  of  bioethanol  with Presidential Regulation of the Republic of Indonesia Number 5 of 2006 concerning National Energy Policy to develop alternative  energy  sources  as  a  substitute  for  fuel.  Bioethanol  can  be  produced  through  a  fermentation  process  from plants  that  produce  carbohydrates  and  sugar.  One  of  the  raw  materials  that  can  be  used  for  the  manufacture  of bioethanol  is  pineapple  peel.  This  research  was  knowing  the  effect  of Saccharomyces  cerevisiae on  the  ethanol content.  In this  study, the stages of fermentation for 7 days and 14 days, distillation to obtain ethanol at temperature of 80oC for 60 minutes and hydrolisis with 75% sulfuric acid as much as 14 ml at 120 o C and heating time for 45 minutes.  Pineapple  peel  extract  was  divided  into  200  ml  Erlenmyer  flasks  each  given Saccharomyces cerevisiae as much  as  4  grams,  8  grams,  10  grams,  11  grams  and  12  grams.  From  the  research,  it  was  found  that  10  grams  of Saccharomyces  cerevisiae with  7  days  of  fermentation  had  the  highest  ethanol  content  of  the  other  variations,  which was 3.7778%.
Keywords: Pineapple Peel, Saccharomyces cerevisiae , Fermentation, Ethanol, Distilation.
Abstrak : Indonesia  sebagai  negara  yang  kaya  dengan  sumber  daya  alam  memiliki  kesempatan  yang  luas  untuk pengembangan etanol untuk menggantikan sumber  energi fosil  yang semakin sedikit.  Saat  ini sudah mulai diproduksi bioethanol dari berbagai  bahan baku  seperti ampas tebu,  singkong,  kentang  dan sebagainya. Pemerintah  juga  sudah memperkuat  pengembangan  bioethanol  ini  dengan  Peraturan  Presiden  Republik  Indonesia  Nomor    5  Tahun  2006 tentang    Kebijakan  Energi  Nasional  untuk    mengembangkan  sumber  energi  alternatif  sebagai  pengganti  BBM. Bioetanol  dapat    diproduksi  melalui  proses  fermentasi  dari  tanaman  penghasil  karbohidrat  dan  gula.  Salah  satu bahan  baku  yang  dapat  digunakan untuk  pembuatan bioetanol ini  adalah kulit  nanas.  Penelitian  ini  dilakukan untuk mengetahui  pengaruh  Saccharomyces  cerevisiae  terhadap  kadar  etanol.  Pada  penelitian  ini  menggunakan  tahapan fermentasi  selama  7  hari  dan  14 hari,  distilasi  untuk  mendapatkan  etanol  dengan  suhu  80 o C  selama  60  menit  serta hidrolisis  dengan  asam  sulfat  75%  sebanyak  14 ml suhu  120 ℃ dan  lama pemanasan  selama  45  menit.  Ekstrak  kulit nanas  dibagi  pada  labu  erlenmyer  masing-masing  200ml  diberi  Saccharomyces  cerevisiae  sebanyak  4  gram,  8 gram, 10 gram, 11gram dan 12gram. Dari penelitian didapatkan 10gram Saccharomyces cerevisiae lama fermentasi 7 hari  memiliki kadar etanol paling tinggi dari variasi yang lain, yaitu sebesar 3,7778%.
Kata kunci: Kulit Nanas, Saccharomyces cerevisiae, Fermentasi, Etanol, Distilasi.

## 1. PENDAHULUAN
Indonesia  sebagai  negara  yang  kaya dengan sumber daya alam memiliki kesempatan  yang  luas  untuk  pengembangan etanol untuk menggantikan sumber energi fosil yang  semakin  sedikit.  Saat  ini  sudah  mulai diproduksi  bioethanol  dari  berbagai  bahan baku  seperti  ampas  tebu,  singkong,  kentang dan  sebagainya.  Pemerintah  juga  sudah memperkuat  pengembangan  bioethanol  ini dengan Peraturan Presiden
Republik Indonesia  Nomor  5  Tahun  2006  tentang Kebijakan Energi Nasional
untuk mengembangkan  sumber  energy  alternatif sebagai  pengganti  BBM  (Warsa,  2013). Tingginya  ketergantungan  terhadap  bahan bakar  fosil  terutama  minyak  bumi  (sekitar 47%),  batubara  (27%)  dan  gas  alam  (20%) mengakibatkan  ketersediaan  bahan  bakar  fosil semakin menipis. Sumberdaya fosil merupakan sumber daya alam yang tidak dapat diperbaharui  dan  lamakelamaan  akan  habis apabila  di  eksplorasi  secara  terus  menerus. Sehingga  diperlukan  adanya  pengembangan
energy  terbarukan  seperti  produktivitas  etanol Poernomo, (2014). Menurut Andayana, (2014) masalah  yang  sering  dihadapi  pada  industri kimia adalah pemanfaatan bahan tidak berguna yang  murah  menjadi  bahan-bahan  yang  lebih berguna  dan  bernilai  tinggi.  Sumber  energi alternatif yang cukup potensial adalah bioetanol.  Bioetanol  merupakan  etanol  yang dihasilkan dari fermentasi glukosa (gula) yang dilanjutkan  dengan  proses  distilasi.  Proses distilasi  dapat  menghasilkan  etanol  dengan kadar  95%  volume,  untuk  digunakan  sebagai bahan  bakar (biofuel) perlu  lebih  dimurnikan lagi hingga mencapai 99%  yang lazim  disebut Fuel Grade Ethanol (FGE). Proses pemurnian dengan  prinsip  dehidrasi  umumnya  dilakukan dengan  metode Molecular  Sieve ,  untuk memisahkan air dari senyawa etanol (Musanif, 2012).
Bioetanol  dapat  diproduksi  melalui proses  fermentasi  dari  tanaman  penghasil karbohidrat  dan  gula.  Salah  satu  bahan  baku yang  dapat  digunakan  untuk  pembuatan bioetanol  ini  adalah  kulit  nanas.  Kulit  nanas mengandung 81,72%  air,  17,53% karbohidrat, 4,41%  protein,  13,65%  gula  pereduksi,  dan 20,87%  serat  kasar.  (Wijana, 1991).  Kulit nanas  mengandung  81,72  %  air, 20,87  % serat  kasar,  17,53  %  karbohidrat, 4,41  % protein  dan  13,65  %  gula  reduksi.  Mengingat kandungan  karbohidrat  dan  gula  yang  cukup tinggi tersebut, maka kulit nanas memungkinkan  untuk  dimanfaatkan  sebagai bahan baku bioetanol (Setyawati, 2012).

## 2. TEORI DASAR
Ada  banyak  metode  yang  digunakan dalam pembuatan  bioethanol  dari  kulit  nanas ini.  Namun  yang  paling  sering  digunakan, yaitu  dengan  metode  fermentasi  dengan menggunakan  ragi.  Dalam  proses  ini  juga terdapat beberapa faktor yang menjadi penentu besarnya  konsentrasi  etanol  yang  dihasilkan. Mulai  dari  metode,  jenis  ragi,  banyaknya penambahan  ragi  sampai  jangka  waktu melakukan fermentasi akan sangat mempengaruhi produk yang dihasilkan.
C 6 H 12 O 6 ragi 2C 2 H 5 OH + 2CO 2 Glukosa                        Etanol

## 2.1 Bioethanol
Bioetanol (bioethanol) merupakan etanol  (etil  alkohol)  yang  proses  produksinya menggunakan  bahan  baku  alami  dan  proses biologis,  berbeda  dengan  etanol  sintetik  yang diperoleh  dari  sintesis  kimiawi  senyawa hidrokarbon.  Etanol  yang  digunakan  sebagai bahan  bakar  kendaraan  memiliki  struktur kimia  yang  persis  sama  dengan  etanol  yang ditemukan  pada  minuman  keras.  Etanol  yang digunakan  untuk  bahan  bakar  disebut  dengan Fuel  Grade  Ethanol ( FGE )  dengan  tingkat kemurnian 99,5%.
Bahan  baku  yang  digunakan  untuk produksi bioetanol terbagi menjadi:
1. Gula (glucose) dengan rumus kimia C 6 H 12 O 6 ,  berbeda  dengan  pengertian  gula sehari-hari  yang  mengandung  sukrosa, laktosa  dan  fruktosa.  Gula  dapat  diperoleh dari tebu ( sugarcane ) melalui hasil sampingan produksinya berupa tetes ( molases ).  Sebagai  bahan  baku  bioetanol, glukosa  dapat  langsung  digunakan  dalam proses peragian.
2. Pati (strach) banyak  ditemukan  pada jagung,  singkong,  sagu  dan  beragam makanan pokok manusia yang mengandung karbohidrat.  Rumus  kimia  dari  pati  adalah (C 6 H 10 O 5 ) n dengan  jumlah  n  antara  40– 3.000.  Sebagai  bahan  baku  bioetanol,  pati membutuhkan  proses untuk memecah ikatan  kimianya menjadi  glukosa.  Proses yang  umum  dilakukan  adalah  dengan penambahan enzim amylase untuk menghidrolisis menjadi glukosa.
Penggunaan bahan pati sebagai bahan baku bioetanol  secara  umum  akan  bersaing dengan  cadangan  pangan  bagi  manusia, yang  pada  akhirnya  akan  meningkatkan harga bahan pangan.
3. Selulosa (cellulose) merupakan polisakarida dengan  rumus  kimia  (C 6 H 10 O 5 ) n ,  dengan jumlah  ribuan  hingga  lebih  dari  puluhan ribu,  yang  membentuk  dinding  tanaman dan  kayu.  Selulosa  merupakan  senyawa organik  yang  paling  banyak  jumlahnya  di muka bumi.  Sekitar 1/3 komposisi tanaman adalah  selulosa  yang  tidak  tercerna  oleh manusia.  Karena  tidak  bersaing  dengan
bahan  pangan,  maka  selulosa  diperkirakan akan mendominasi bahan baku bioetanol di masa  mendatang.  Sebagai  bahan  baku bioetanol, selulosa membutuhkan pengolahan  awal  yang  lebih  intensif dibandingkan  dengan  bahan  baku  lain. Konsumsi  bioethanol  dalam  negeri  rata- rata  setiap  tahunnya  100.000.000  liter. (Indra Purnomo,20-03-2020).
Produksi ethanol / bioethanol (alkohol) dengan bahan baku tanaman yang mengandung  pati  atau  karbohidrat,  dilakukan melalui  proses  konversi  karbohidrat  menjadi gula  (glukosa)  larut  air.  Konversi  bahan  baku tanaman yang mengandung pati atau karbohidrat  dan  tetes  menjadi  bioethanol. Glukosa  dapat  dibuat  dari  pati-patian,  proses pembuatannya  dapat  dibedakan  berdasarkan zat  pembantu  yang  dipergunakan,  yaitu hidrolisa  asam  dan  atau  hidrolisa  enzim. Berdasarkan  kedua  jenis  hidrolisa  tersebut. Saat  ini  hidrolisa  enzim  lebih  banyak dikembangkan,  sedangkan  hidrolisa  asam (misalnya  dengan  asam  sulfat)  kurang  dapat berkembang,  sehingga  proses  pembuatan glukosa  dari  bahan  berpati  sekarang  ini menggunakan hidrolisa enzim. Konversi bahan baku tanaman yang mengandung pati.
Proses fermentasi menghasilkan alkohol  dengan  kadar  maksimal  hanya  7-9% (15%  jika  menggunakan strain ragi  yang paling  tahan  alkohol).  Untuk  meningkatkan kadar  etanol  hingga  mencapai Fuel  Grade Ethanol  (FGE) 99,5%  dibutuhkan  proses penyulingan ( destilation ) dan dehidrasi ( dehydration ). Proses penyulingan akan menghasilkan  etanol  dengan  kadar  maksimum 95,6%  dan  tidak  bisa  ditingkatkan  lagi  karena sifat azeotrope larutan etanol-air.
Etanol  >  99,5%,  digunakan  untuk bahan  bakar.  Jika  dimurnikan  lebih  lanjut dapat  digunakan  untuk  keperluan  farmasi  dan pelarut  di  laboratorium  analisis.  Etanol  ini disebut  dengan  dengan Fuel  Grade  Ethanol (FGE) atau anhydrous ethanol (etanol anhidrat) atau etanol kering,  yakni etanol yang bebas  5  air  atau  hanya  mengandung  air minimal  (Prihandana,  2007).  Berikut  ini
merupakan tabel sifat-fisik dari etanol berdasarkan SNI 06-3565- 1994:
Tabel 2.1 Sifat Fisik Dari Etanol Berdasarkan SNI 06-3565-1994 Parameter Ethanol Rumus Kimia C 2 H 5 OH Berat Molekul (g/mol) 46 Densitas (g/ml) 0,7851 Titik Didih ( o C) 78,4 Titik Nyala ( o C) 13 Titik Beku ( o C) -112,4 Indeks Bias 1,3633 Panas Evaporasi (cal/g) 204 Viscositas pada 20 o C (poise) 0,0122
Sumber : SNI 06-3565-1994
Etanol  atau  alcohol  dimanfaatkan untuk  berbagai  keperluan,  antara  lain:  bahan baku  industry  atau  senyawa  kimia,  misalnya industry  minuman  beralkohol,  industri  asam asetat dan asetaldehid;  pelarut dalam industri, misalnya  industry  farmasi,  kosmetika  dan plastik;  bahan  desinfektan,  misalnya  peralatan kedokteran,  rumah  tangga  dan  peralatan  di rumah  sakit;  dan  bioetanol  sebagai  energi altarnatif untuk kendaraan bermotor.
Persyaratan  bahan  dasar  pembuatan etanol di antaranya adalah:
1. mengandung  sukrosa (succrose) ,  umumnya dipakai molasse (tetes) dari gula tebu,
2. mengandung  pati (amylum) dan  juga dapat berasal  dari  padi  padian  atau  tumbuh tumbuhan, dan
3. dapat berasal dari gas hidrokarbon dan juga dari  bahan  yang  mengandung  selulosa ( cellulose )  serta bahan-bahan sisa dari hasil pertanian.
Reaksi  kimia  pembentukan  etanol  dari sukrosa  dengan  cara  fermentasi  sebagai berikut:
C 12 H 22 O 11 + H 2 O          C 6 H 12 O 6 + C 6 H 12 O 6 C 6 H 12 O          2C 2 H 5 OH + 2CO 2 Salah satu faktor yang dapat mempengaruhi  jumlah  etanol  adalah  proses fermentasi  mikroorganisme  dan  media  yang digunakan. Fermentasi adalah perubahan suatu bahan  ke  bahan  lain  dengan  pertolongan mikroorganisme.  Mikroorganisme  ini  berupa tumbuhan  yang  tidak  mempunyai chlorophyl, yaitu  bakteri yeast dan mold. Mikroorganisme
Volume 13 No. 02 Desember 2022
ini memakan bahan organic. Oleh  karena  itu, makanan  merupakan  faktor  yang  penting dalam proses fermentasi dan karena perubahan suatu zat tertentu (nutrisi), maka mikroorganisme dapat tumbuh dan berkembang  biak  dan  mengubah  bahan makanan  itu  menjadi  bahan  yang  lain. Fermentasi  juga  merupakan  suatu  reaksi oksidasi atau reaksi dalam sistem biologi yang menghasilkan energi dimana donor dan aseptor adalah  senyawa  organik.  Senyawa  organik yang  biasa  digunakan  adalah  zat  gula. Senyawa  tersebut  akan  diubah  oleh  reaksi reduksi dengan katalis enzim menjadi senyawa lain.
2.2 Kulit Nanas Buah nanas ( Ananas comosus L. Merr ) merupakan salah satu jenis buah  yang terdapat di  Indonesia,  mempunyai  penyebaran  yang merata.  Selain dikonsumsi sebagai buah segar, nanas  juga  banyak  digunakan  sebagai  bahan baku industri pertanian.
Dari  berbagai  macam  pengolahana nanas  seperti  selai,  manisan,  sirup,  dan  lain- lain,  maka  akan  didapatkan  kulit  yang  cukup banyak  sebagai  hasil  sampingan.  Secara ekonomi  kulit  nanas  masih  bermanfaat  untuk diolah menjadi pupuk. Berdasarkan kandungan nutriennya, ternyata kulit buah nanas mengandung karbohidrat dan gula yang cukup tinggi.  Menurut  Wijana,  dkk.  (1991)  kulit nanas  mengandung  81,72  %  air,  20,87  % serat  kasar,  17,53  %  karbohidrat,  4,41  % protein,  0,02  %  lemak,  0,48  %  abu,  1,66  % serat  basah,  dan  13,65  %  gula  reduksi.  Selain itu,  buah  nanas  juga  mengandung  asam chlorogen, yaitu  antioksidan  kemudian cytine yang  berguna  untuk  pembentukan  kulit  dan rambut,  lalu  zat  asam  amino  esensial  yang dibutuhkan  oleh  tubuh  untuk  mempercepat pertumbuhan  dan  memperbaiki  jaringan  otot. Kulit  nanas  mengandung  enzim  bromelin sebanyak  0,050-0,0754  %,  Murniati  (2010).
Bromelin  dikenal  secara  kimia  sejak tahun  1876  dan  mulai  diperkenalkan  sebagai bahan terapeutik saat ditemukan konsentrasinya  yang  tinggi  pada  bonggol nanas  tahun  1957.  Bromelin,  yang  didapatkan dari  ekstrak  mentah  tanaman  nanas  ( Ananas
comosus.  L ),  mengandung  beberapa  jenis proteinase,  Naritasari,  dkk.  (2010).  Enzim bromelin  merupakan  enzim  proteolitik  yang memiliki  kemampuan  untuk  mengkatalisis reaksi  hidrolisis  dari  protein.  Enzim  bromelin bisa  digunakan  sebagai  efek  antibakteri  yang menekan pertumbuhan bakteri secara bakteriosida maupun bakteriostatik. Cara kerja bromelin  sebagai  antiseptik,  yaitu  dengan menurunkan  tegangan  permukaan  bakteri dengan  menghidrolisis  protein  dari  saliva  dan glikoprotein  menjadi  mediator  bakteri  untuk melekat dipermukaan gigi, Rakhmanda, (2008).  Bromelin  juga  memiliki  efek  anti inflamasi telah lama digunakan di Central dan South
America untuk meningkatkan penyembuhan  luka,  mengobati  pembengkakan dan  mengurangi  peradangan  setelah  operasi, Khosropanah,  dkk.,  (2012).  Kegunaan  lain dari  enzim  bromelin  adalah  memperlancar pencernaan  protein,  menyembuhkan  artritis, sembelit,  infeksi  saluran  pernafasan,  angina, dan  trauma  (Wuryanti,  2006).  Bromelin  telah terbukti menunjukkan berbagai aktivitas fibrinolitik,  antiedematous,  antitrombotik,  dan kegiatan  anti-inflamasi  baik  in  vitro  dan  in vivo. Bromelin juga mempunyai sifat antiadhesi  yang  dapat  mencegah  bakteri mengikuti  reseptor  glikoprotein  spesifik  yang salah  satunya  ada  pada  mukosa  usus.  Oleh karena  itu,  bromelin  dimungkinkan  dapat mencegah  menempelnya  bakteri,  sehingga mengerahkan  aksi  anti  bakteri  (Nc.  Praveen, dkk.,  2014).  Saat  ini  banyak  industri  yang memanfaatkan limbah untuk pembuatan produk  baru  yang  bermanfaat  bagi  makhluk hidup  lainnya  seperti  kulit  buah  nanas  yang dapat  dimanfaatkan  sebagai  bahan  baku pembuatan bioetanol, dimana dengan memanfaatkan kulit buah nanas dapat mengurangi  pencemaran  terhadap  lingkungan (Harahap, 2014).
2.3 Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae adalah genus  dalam  kerajaan  jamur  yang  mencakup banyak  jenis  ragi. Saccharomyces berasal  dari bahasa  Latin  yang  berarti  gula  jamur.  Banyak anggota dari genus ini dianggap sangat penting
dalam  produksi  makanan.  Salah  satu  contoh adalah Saccharomyces cerevisiae , yang digunakan  dalam  pembuatan  anggur,  roti,  dan bir.  Anggota  lain  dari  genus  ini  termasuk Saccharomyces  bayanus ,  digunakan  dalam pembuatan anggur, dan Saccharomyces boulardi , digunakan dalam obat-obatan. Koloni  dari Saccharomyces tumbuh  pesat  dan jatuh tempo dalam 3 hari. Mereka rata, mulus, basah, glistening atau  kuyu,  dan cream untuk cream tannish dalam warna. Ketidakmampuan untuk  memanfaatkan  nitrat  dan  kemampuan untuk  berbagai  memfermentasi  karbohidrat adalah karakteristik khas dari Saccharomyces . Fase pertumbuhan Saccharomyces cerevisiae : a. Fase adaptasi (lag phase) Pada  fase  ini  sebagian  besar S.  cerevisiae terlebih dahulu menyesuaikan diri (adaptasi)  dengan  lingkungan  barunya  dan belum mengadakan.
b. Perbanyakan sel
Pada  fase  ini  mikroba  merombak  substrat menjadi  nutrisi  untuk  pertumbuhannya. Jika  ditemukan  senyawa  kompleks  yang tidak dikenalinya, mikroba akan memproduksi  enzim  untuk  merombak senyawa  tersebut  (Casselman,  2005). S. cerevisiae termasuk  ragi  yang  mudah beradaptasi,  ditunjukan  dengan  singkatnya waktu  yang  dibutuhkan  untuk  beradaptasi, yaitu  selama  1  jam 40 menit.
c. Fase   percepatan (acceleration   phase)
Pada  fase  ini  mulai  terjadi  peningkatan jumlah  sel  dalam  waktu  singkat (rapid growth) . Waktu percepatan yang
dibutuhkan selama 20 menit.
d. Fase eksponensial/pertumbuhan (log phase)
Pada  fase  ini S.  Cerevisiae telah  dapat menyesuaikan  diri  dengan  lingkungannya. Pembelahan sel telah dapat menyesuaikan  diri  dengan  lingkungannya. Pembelahan sel terjadi sangat  cepat  secara eksponensial. Dalam    kondisi   kultur    yang optimum, sel mengalami reaksi
metabolisme yang maksimum. Fase eksponensial ini berlangsung selama 2 jam. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kultur  telah berada  dalam  kondisi  aktif  dan  proses
aktivasi yang dilakukan sebelumnya berjalan dengan baik.
e. Fase   penurunan (deceleration   phase) Pada  fase  ini  laju  pertumbuhan  mengalami perlambatan.  Fase  ini  berlangsung  selama 20 menit.
f. Fase penetapan/konstan (stasioner phase) Selama  fase  ini  kecepatan  pertumbuhan adalah  nol.  Meskipun  demikian,  tidak berarti terjadi pertumbuhan sel.

## 2.4 Fermentasi
Fermentasi  adalah  proses  produksi energi  dalam  sel,  dalam  keadaan  anaerobik (tanpa  oksigen).  Secara  umum,  fermentasi adalah  salah  satu  bentuk  respirasi  anaerobik, akan  tetapi,  terdapat  definisi  yang  lebih  jelas yang mendefinisikan fermentasi sebagai respirasi  dalam  lingkungan  anaerobik  dengan tanpa  akseptor  elektron  eksternal.  Gula adalah  bahan  yang  umum  dalam  fermentasi. Beberapa  contoh  hasil  fermentasi  adalah etanol,  asam  laktat,  dan  hidrogen.  Perubahan yang  terjadi  selama  proses  fermentasi  adalah glukosa  menjadi  bioetanol  oleh  sel  ragi  tape dan  ragi  roti. Mikroba  yang umumnya terlibat dalam  fermentasi  pangan  adalah  bakteri, khamir  dan  kapang.  Prinsip  dasar  fermentasi adalah mengaktifkan aktivitas mikroba tertentu  agar  dapat  merubah  sifat  bahan sehingga  dihasilkan  produk  fermentasi  yang bermanfaat. Beberapa faktor yang mempengaruhi fermentasi antara lain microorganisme, substrat (medium), pH (keasaman),  suhu,  oksigen,  dan  aktivitas  air (Afrianti, 2013)
Jenis-jenis fermentasi:
1. Fermantasi alkohol
Etanol  merupakan  salah  satu  produk  hasil fermentasi  dari  bahan  yang  mengandung gula  sederhana,  pati,  atau  bahan  berserat lainnya.  Bioproses  etanol  dapat  diawali dengan  pemecahan  gula  atau  pati  menjadi bentuk sederhana yang berlangsung dengan  hidrolisis  atau  reaksi  enzimatis (Azizah,  dkk.,  2012).  Etanol  memiliki rumus  kimia  C 2 H 5 OH  dan  dikenal  juga sebagai  alkohol.  Etanol  dipakai  sejak ratusan  tahun  lalu  untuk  meragikan  gula
menjadi  arak  sebagai  minuman  keras. Etanol  juga  dapat  dimanfaatkan  dalam bidang  pengobatan,  pangan,  pembuatan kosmetik,  dan  bahan  bakar  (Sebayang, 2006).  Produksi  etanol  awalnya  dilakukan dalam produksi minuman beralkohol, seperti  anggur (wine) .  Produksi  alkohol dalam wine sendiri  telah  dilakukan  sejak 6000  tahun  sebelum  masehi  (Hawusiwa dkk., 2015). Produksi etanol saat ini banyak dikembangkan untuk bahan bakar pengganti bahan  bakar  fosil,  karena  lebih  mudah terbakar  dan  sisa  pembakarannya  lebih bersih (Singh dan Sharma, 2015).
2. Fermentasi laktat
a.  Fermentasi alkohol Fermentasi alkohol merupakan suatu reaksi  pengubahan  glukosa  menjadi etanol (etil alkohol) dan karbon dioksida. Organisme yang berperan, yaitu Saccharomyces  cerevisiae ragi    untuk pembuatan  tape, ragi  roti  atau  minuman keras.
b.  Fermentasi asam Laktat  adalah  respirasi  yang  terjadi pada  sel  hewan  atau  manusia,  ketika keutuhan  oksigen tidak   tercukupi   akibat bekerja  terlalu berat di dalam sel otot asa laktat  dapat  menyebabkan  gejala  kram dan  kelelahan.  Laktat  yang  terakumulasi sebagai produk limbah dapat
menyebabkan otot letih dan nyeri, namun secara  perlahan  diangkat  oleh  darah  ke hati  untuk  diubah  kembali  menjadi piruvat.  Glukosa  dipecah  menjadi  dua molekul  asam  piruvat  melalui  glikolisis, membentuk 2 ATP dan 2 NADH.
c.  Fermentasi asam Cuka merupakan suatu contoh fermentasi  yang  berlangsung  dalam keadaan  aerob.  Fermentasi  ini  dilakukan oleh  bakteri  asam  cuka (acetobacter aceti) dengan  substrat  etanol.  Energi yang  dihasilkan  5  kali  lebih  besar  dari energi  yang  dihasilkan  oleh  fermentasi alkohol secara anaerob (Wikipedia).
Keberhasilan  fermentasi  ditentukan oleh beberapa faktor, yaitu:
1. Keasaman (pH),
Kondisi keasaman  yang  baik  untuk  bakteri adalah  4,5–5,5  supaya  fermentasi  berjalan dengan baik.
2. Mikroba
Fermentasi  biasanya  dilakukan  dengan kultur murni yang dihasilkan di laboratorium.  Kultur  ini  dapat  disimpan dalam keadaan kering atau dibekukan.
3. Suhu fermentasi sangat menentukan macam mikroba  yang  dominan  selama  fermentasi. Tiap-tiap  mikroorganisme  memiliki  suhu pertumbuhan yang maksimal, suhu pertumbuhan  minimal,  dan  suhu  optimal yaitu  suhu  yang  memberikan  terbaik  dan perbanyakan diri tercepat.
4. Oksigen  atau  udara  selama  fermentasi harus diatur sebaik mungkin untuk memperbanyak atau menghambat
pertumbuhan  mikroba  tertentu.  Setiap mikroba membutuhkan oksigen yang berbeda jumlahnya untuk pertumbuhan atau membentuk sel-sel baru dan untuk fermentasi. Misalnya ragi roti
(Saccharomycess  cereviseae) akan  tumbuh lebih  baik  dalam  keadaan  aerobik,  tetapi keduanya  akan  melakukan  fermentasi terhadap  gula  jauh  lebih  cepat  dengan keadaan anaerobik.
5. Waktu Laju perbanyakan bakteri bervariasi menurut spesies dan kondisi
pertumbuhannya.  Pada  kondisi  optimal, bakteri  akan  membelah  sekali  setiap  20 menit.  Untuk  beberapa  bakteri  memilih waktu  generasi,  yaitu  selang  waktu  antara pembelahan,  dapat  dicapai  selama  20 menit.  Jika  waktu  generasinya  20  menit pada  kondisi  yang  cocok  sebuah  sel  dapat menghasilkan  beberapa  juta  sel  selama  7 jam (indotetis.com, 2017).
Gula-gula  di  dalam  kulit  nanas  akan dikonversi  menjadi  bioethanol  dengan bantuan Saccharomyces cerevisiae . Saccharomyces cerevisiae dapat mengkonversi  gula  menjadi  etanol  karena adanya  enzim  invertase  dan  zymase.
Dengan adanya enzim-enzim ini Saccharomces
cerevisiae memiliki
kemampuan  yang  baik  gula  dari  kelompok
monosakarida  maupun  dari  kelompok disakarida.  Jika  gula  yang  tersedia  dalam substrat  merupakan  gula  disakarida,  maka enzim invertase akan bekerja menghidrolisis disakarida menjadi monosakarida.  Setelah  itu,  enzim  zymase akan  mengubah  monosakarida  tersebut menjadi  alkohol  dan  CO 2 .    (Azizah  N,  Al- Baari, S. Mulyani, 2015).
2.5 Distilasi
Distilasi ataupun disebut dengan penyulingan ialah sebuah metode yang dipakai memisahkan  bahan  kimia  menurut  perbedaan kecepatan ataupun kemudahan menguap maupun  volatilitas  bahan. Pada proses penyulingan  ini,  zat  bercampur  akan didihkan agar  menguap  dan  uap  itu  berikutnya  akan dididihkan  lagi  ke  bentuk  cairan.  Sedangkan zat  yang  mempunyai  titik  didih  lebih  sedikit juga akan menguap terlebih dahulu.
Distilasi  merupakan  cara  pemisahan antara zat cair terhadap campurannya  menurut perbedaan  titik  didih ataupun kemampuan zat guna  menguap.  Destilasi  atau  penyulingan adalah  suatu  metode  pemisahan  bahan  kimia berdasarkan perbedaan kecepatan atau kemudahan  menguap (volatilitas) bahan  atau didefinisikan  juga  teknik  pemisahan  kimia yang berdasarkan perbedaan titik didih. Dalam penyulingan, campuran zat dididihkan sehingga  menguap,  dan  uap  ini  kemudian didinginkan  kembali  ke  dalam  bentuk  cairan. Zat  yang  memiliki  titik  didih  lebih  rendah akan  menguap  lebih  dulu.  Metode  ini merupakan  termasuk  unit  operasi  kimia  jenis perpindahan  massa.  Penerapan  proses  ini didasarkan  pada  teori  bahwa  pada  suatu larutan, masing-masing komponen akan menguap  pada  titik  didihnya.  Model  ideal distilasi  didasarkan  pada  Hukum  Raoult  dan Hukum  Dalton.  Distilasi  adalah  suatu  teknik yang  digunakan  untuk  memisahkan  dan memurnikan cairan.
Distilasi  terdiri  dari  pemanasan  cairan sampai  pada  titik  didihnya,  penghantaran  uap pada alat pendingin dimana terjadi kondensasi dan  mengambil  zat  yang  telah  terkondensasi. Distilasi  juga  merupakan  suatu  perubahan
cairan menjadi uap dan uap  tersebut didinginkan  kembali  menjadi  cairan.  Unit operasi  destilasi  merupakan  metode  yang digunakan  untuk  memisahkan  komponen- komponennya  yang  terdapat  dalam  salah  satu larutan  atau  campuran  dan  bergantung  pada distribusi komponen-komponen tersebut antara fasa  uap  dan  fasa  air.  Syarat  utama  dalam operasi pemisahan komponen-komponen dengan  cara  destilasi  adalah  komposisi  uap harus  berbeda  dengan  komposisi  cairan dengan  terjadi  keseimbangan  larutan-larutan, dengan  komponen-komponennya  cukup  dapat menguap.  Bila  zat  non  volatil  dilarutkan  ke dalam  suatu  zat  cair  tersebut  akan  turun. Hukum  Raoult  menyatakan  bahwa  tekanan masing-masing komponen berbanding langsung  dengan  fraksi  molnya.  Apabila  yang didinginkan  adalah  bagian  campuran  yang tidak  teruapkan  dan  bukan  destilatnya,  maka proses tersebut biasanya dinamakan pengentalan  dengan  evaporasi  (Pamularsih, 2013).
Destilasi  ini  dikatakan  normal  karena tekanan  campuran  yang  telah  dipisahkan, tekanannya  sama  dengan  tekanan  udara  luar yang  besarnya  adalah  satu  atm.  Destilasi normal digunakan untuk memisahkan campuran volatil dari bahan yang tidak volatil. Itu  dibuat  dari  cairan  yang  mendidih  dan  uap yang disimpan di dalam sebuah penerima hasil destilasi  yang  telah  siap  dilanjutkan  dalam kotak  pemisah.  Pengaruh  dari  penambahan kolom fraksinasi akan mempersingkat beberapa pekerjaan pemisah dari distilasi biasa hanya  menjadi  satu  pekerjaan.  Proses  distilasi berlangsung  dimana  uap  cairan  akan  menjadi cairan  di  dalam  kondensor  pendingin.  Cairan yang  menjadi  uap  merupakan  senyawa  murni yang  terpisah  dari  campurannya  dan  dari  zat pengkotamin  atau  penyetor. Jika  semua  cairan sudah  terpisah,  maka  terdapat  residu  yang bersifat padatan.
Hasil  distilasi  disebut  distilat.  Distilasi tergantung  pada  temperatur  zatnya,  beberapa molekul  zat  cair  memiliki  energi  yang  cukup untuk diubah dan membuat suatu tekanan uap. Kecendrungan untuk penguapan menjadi lebih besar karena energi kinetik yang ditambah dari
kenaikan  temperatur.  Ketika  suatu  cairan dipanaskan  sampai  tekanan  uapnya  sama dengan  atmosfer  lingkungan  cairan  yang mendidih,  maka  hal  ini  disebut  titik  didih. Besarnya  perbedaan  titik  didih  beberapa senyawa  berbanding  lurus  dengan  tingkat kemudahan  pemisahannya.  Semakin  besar perbedaan  titik  didih  akan  semakin  mudah pula pemisahan senyawa tersebut.
Sebaliknya  apabila  perbedaan  titik didih  kecil,  maka  akan  semakin  sulit  pula pemisahan  senyawa  tersebut.  Proses  destilasi bisa dikerjakan dalam satu langkah menggunakan  sebuah  kolom fractionating antara botol destilasi dan alat kondensor. Salah satu  tipe  dari  kolom  adalah  pipa  vertilkal panjang  yang  sederhana  dengan  gelas  embun atau  material  lembam  lainnya.  Sebuah  tipe fractionating setelah  mendestilasi  sebuah cairan  bias  dilanjutkan.  Kondensasi  dan penguapan  diulangi  beberapa  kali  sebelum  air bereaksi  dikondensor  atau  alat  pendingin, akibatnya  komponen  terpisah  dalam  jumlah yang  besar  dari  larutannya.  Proses  ini  disebut distilasi  fraksinasi.  Untuk  menggambarkan perbedaan ciri  khas  di antara sebuah  zat  dan sebuah  larutan  dilakukan  dengan  menguji  dua cairan  homogen  sehingga  berubah  sifatnya menjadi  gas  oleh  pemanasan  dan  kemudian didinginkan.  Proses  inilah  yang  disebut destilasi  (Ardhian,      2015).  Prinsip  kerja destilasi  ialah:  bila  suatu  zat  pada  larutan  tak sama-sama menguap,  berarti  uap  larutan akan mempunyai    komponen    yang    beda dengan larutan  yang  aslinya.  Jika  salah  satu  dari  zat menguap,  berarti  pemisahannya  akan  terjadi secara  sempurna.  Tapi  jika  kedua  zat  itu menguap,  proses  pemisahannya  hanya  terjadi secara  sebagian  tapi  destilat  ataupun  produk akan  memiliki  kaya  dapat  dari  komponen dibandingkan larutan aslinya.
Berikutnya adalah tujuan distilasi ialah untuk  memurnikan  bentuk  cair  di  titik didihnya serta memisahkan cairan terhadap zat padatnya.  Uap  tersebut  akan  dikeluarkan terhadap  campurannya  sebagai  uap  bebas. Konsentrat  yang  jatuh  juga  sebagai  destilat serta bagian cair yang tak menguap merupakan residu. Bila yang diinginkan dibagian
campuran  yang  tak  teruapkan,  berarti  proses tersebut  disebut  menjadi  pengentalan  dengan evaporasi  (Ruangguru.co.id.,  2018).  Destilasi yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah destilasi sederhana. Destilasi jenis ini biasanya melalui cara menaikan suhu, sehingga tekanan uapnya  ada  diluar  cairan  ataupun  tekanan atmosfer  ataupun  titik  didih  normal.  Pada destilasi sederhana ini, dasar dari pemisahannya  adalah  perbedaan  dari  titik didihnya  yang  jauh  maupun  salah  satu komponennya  bersifat  volatin.  Jika  campuran tersebut  dipanaskan  /  dididihkan,  maka komponen  yang  memiliki  titik  yang  lebih rendah akan menguap lebih dahulu.

## 3. METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Metode Penelitian
Lokasi dan waktu penelitian dilaksanakan  di  Laboratorium  Kimia  Analisa Teknik  Kimia  Universitas  Muhammadiyah Palembang pada bulan Juni-Agustus.

## 3.2 Alat dan Bahan
a. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah kulit  nanas, Saccharomyces  cerevisiae yang berasal  dari  toko  bahan  kimia,  H 2 SO 4 75% yang berasal dari toko kimia, dan aquadest . b. Alat
Alat-alat  yang  digunakan  timbangan digital, kaca arloji, spatula, kertas saring, pipet ukur,  tabung  ukur,  labu  erlenmeyer, blender , beaker glass , perlengkapan fermentasi, termometer dan perlengkapan distilasi.

## 3.3 Prosedur Penelitian
Tahapan  langkah-langkah  penelitian sebagai berikut:
1. Preparasi bahan
Kulit  nanas  yang  didapat  dari  pedagang nanas di pasar 4  Ulu Darat, sebanyak 3 kg. Kemudian  dipotong-potong  menjadi  kecil lalu dijemur selama 3 hari. Lalu kulit nanas kering  seberat  1  kg  dihaluskan  dengan 1.000  ml aquadest menggunakan blender hingga  membentuk slurry (bubur). Slurry (bubur)  dari  hasil  kulit  nanas  disaring  dan diambil filtratnya.
2. Hidrolisis Larutan  kulit  nanas  ditambahkan  dengan H 2 SO 4 10,4 ml dalam setiap 200 ml ekstrak air  kulit  nanas.  Setelah  itu,  dihidrolisis dengan  menggunakan  suhu  120ºC  selama 45  menit.  Dinginkan  kembali  hingga mencapai  suhu  ruang  sekitar  30ºC - 40ºC. 3. Fermentasi
Fermentasi  dilakukan  di  dalam  lima  labu erlenmeyer  dengan  volume  masing-masing 200  ml  ekstrak  kulit  nanas.  Ditambahkan Saccharomyces  cerevisiae ke  dalam  labu erlenmeyer  dengan  masing-masing  berat sebanyak 4 gram, 8 gram, 10 gram, 11 gram dan  12  gram.  Kemudian  difermentasi selama 7 hari dan 14 hari
4. Distilasi Menyiapkan rangkaian alat distilasi. Kemudian memasukkan hasil proses fermentasi  ke  labu  alas  bulat.  Dipanaskan pada  suhu  80ºC  selama  60  menit.  Akan terjadi  pemisahan  antara  air  dan  etanol dikarenakan perbedaan titik didih.

## 3.4 Analisis Produk Biopelet
Analisa  dilakukan  di  Laboratorium Kimia  Analisa  Politeknik  Negeri  Sriwijaya Palembang dengan menggunakan alat refraktomeri.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Peneltian ini dilakukan dengan maksud dan  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh banyaknya Sachharomyces cerevisiae terhadap kadar  persentase  etanol.  Bahan  baku  yang digunakan  sebagai  umpan,  yaitu  kulit  nanas secara fermentasi selama 7 hari dan 14 hari.
Tabel  4 . 1 Data  Hasil  Analisis  Etanol Dengan Menggunakan Refraktomeri No.
Massa Saccharomyces cerevisiae (g) Lama Fermentasi (hari)
%Etanol 1 4
7 3,1667 8 3,3889 10 3,7778 11 3,3889 12
3,3889
2
4
14 2,5000 8 2,5000 10 3,1667 11 3,1667 12 3,1667
Gambar 4.1 Hasil Analisa Kadar Etanol Dari
Kulit Nanas
Dari  hasil  penelitian  di  atas  dapat disimpulkan  bahwa  nilai  persentase  etanol tertinggi  terdapat  pada  massa Saccharomyces cerevisiae seberat  10  gram  dengan  lama fermentasi  selama  7  hari  sebesar  3,7778%. Sedangkan  nilai  persentase  etanol  terendah sebesar 2,5000% terdapat pada massa Saccharomyces  cerevisiae seberat  4  gram  dan 8  gram  dengan  lama  fermentasi  selama  14 hari .
Etanol  merupakan  salah  satu  produk hasil fermentasi  dari  bahan  yang  mengandung gula  sederhana,  pati,  atau  bahan  berserat lainnya. Bioproses etanol dapat diawali dengan pemecahan  gula  atau  pati  menjadi  bentuk sederhana  yang  berlangsung  dengan  hidrolisis atau  reaksi  enzimatis  (Azizah,  dkk., 2012). Karbohidrat  terbagi  menjadi  tiga,  yaitu: monosakarida (glukosa dan fruktosa), disakarida  (sukrosa,  maltose  dan  laktosa)  dan polisakarida  (amilum,  glikogen  dan  selulosa). Menurut  Harahap  (2014),  kandungan  gula reduksi  pada  filtrat  kulit  nanas  sebesar 11,40%.  Mengingat  kandungan  gula  yang cukup  tinggi  tersebut,  maka  kulit  nanas memungkinkan  untuk  dimanfaatkan  sebagai bahan  baku  pembuatan  bioethanol  melalui proses  fermentasi.  Etanol  memiliki  rumus kimia  C 2 H 5 OH  dan  dikenal  juga  sebagai alkohol.  Etanol  dipakai  sejak  ratusan  tahun lalu  untuk  meragikan  gula  menjadi  arak sebagai minuman keras.
Fermentasi  adalah  proses  produksi energi  dalam  sel,  dalam  keadaan  anaerobik (tanpa  oksigen).  Secara  umum,  fermentasi adalah  salah  satu  bentuk  respirasi  anaerobik, akan  tetapi,  terdapat  definisi  yang  lebih  jelas yang mendefinisikan fermentasi sebagai respirasi  dalam  lingkungan  anaerobik  dengan tanpa akseptor elektron eksternal.
Gula  adalah  bahan  yang  umum  dalam fermentasi.  Beberapa  contoh  hasil  fermentasi adalah  etanol,  asam  laktat,  dan  hidrogen. Perubahan yang terjadi selama proses fermentasi  adalah  glukosa  menjadi  bioetanol oleh sel ragi tape dan ragi roti.
C 6 H 12 O 6 ragi 2C 2 H 5 OH + 2CO 2 Glukosa                        Etanol Mikroba  yang umumnya terlibat dalam fermentasi  pangan  adalah  bakteri,  khamir  dan kapang.  Prinsip  dasar  fermentasi  adalah mengaktifkan  aktivitas  mikroba  tertentu  agar dapat merubah sifat bahan sehingga dihasilkan produk fermentasi yang bermanfaat. Beberapa factor yang mempengaruhi fermentasi antara lain mikroorganisme, substrat  (medium),  pH  (keasaman),  suhu, oksigen,  dan  aktivitas  air.  Gula-gula  di  dalam kulit nanas akan dikonversi menjadi  bioetanol dengan  bantuan Saccharomyces  cerevisiae. Saccharomyces cerevisiae dapat mengkonversi gula  menjadi  etanol  karena  adanya  enzim invertase  dan  zymase.  Dengan  adanya  enzim- enzim  ini Saccharomces  cerevisiae memiliki kemampuan  yang  baik  gula  dari  kelompok monosakarida maupun dari kelompok disakarida.  Jika  gula  yang  tersedia  dalam substrat  merupakan  gula  disakarida,  maka enzim  invertase  akan  bekerja  menghidrolisis disakarida menjadi monosakarida. Setelah   itu, enzim  zymase  akan  mengubah  monosakarida tersebut menjadi alkohol dan CO 2 .
Dari  hasil  penelitian  di  atas  dapat disimpulkan  bahwa  nilai  persentase  etanol tertinggi  terdapat  pada  massa Saccharomyces cerevisiae seberat  10  gram  dengan  lama fermentasi  selama  7  hari  sebesar  3,7778%. Sedangkan  nilai  persentase  etanol  terendah sebesar 2,5000% terdapat pada massa Saccharomyces  cerevisiae seberat  4  gram  dan
8  gram  dengan  lama  fermentasi  selama  14 hari.
Pada  variable  4  gram  dan  8  gram dengan lama fermentasi 14 hari gula pada kulit nanas  memiliki  kadar  etanol  yang  rendah disebabkan  karena  substrat  yang  dikonversi menjadi  produk  oleh  mikroorganisme  telah habis.  Terlalu  lama  dilakukan  fermentasi sehingga  etanol  yang  dihasilkan  berubah menjadi asam-asam organik seperti asam cuka.
Untuk 10 gram Saccharomyces cerevisiae 7 hari  dan  14  hari Saccharomyces cerevisiae gula  terkonversi  maksimal  menjadi etanol  pada  masing-masing  lama  fermentasi. 11  gram  dan  12  gram Saccharomyces cerevisiae lama fermentasi 7 hari lebih optimal mengkonversi  gula  menjadi  etanol  daripada 11  gram  dan  12  gram Saccharomyces cerevisiae dengan  lama  fermentasi  14  hari karena fementasi yang dilakukan tidak   terlalu lama.  Sedangkan  4  gram  dan  8  gram Saccharomyces dengan lama fermentasi 7 hari memiliki  perbedaan  kadar  etanol  yang  tidak signifikan  karena  waktu  yang  dibutuhkan untuk  berkembang berlangsung  sama.  Terjadi perbedaan  kadar  etanol  dikarenakan  memiliki jumlah Saccharomyces cerevisiae yang berbeda  sehingga  jumlah  mikroorganisme yang  mengkonversi  gula  juga  lebih  banyak. Diketahui  waktu  optimal  fermentasi,  yaitu  3 hari. Pada waktu tersebut aktivitas Saccharomyces  cerevisiae bekerja  secara optimal serta kegiatan enzimatis tidak terhambat.  Fase  ini  dikenal  dengan  fase eksponensial  dimana  sel  akan  tumbuh  dan membelah  diri  hingga  mencapai  jumlah maksimum  (Chairul,  2013).  Hanya  penurunan kadar  etanol  yang  didapatkan  disebabkan karena  etanol yang  dihasilkan  berubah menjadi  asam-asam  organik  seperti  asam cuka.

## 5. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan
Dari hasil penelitian pengaruh Saccharomyces  cerevisiae terhadap  kadar etanol  dari  kulit  nanas  secara  fermentasi  yang telah  dilakukan  dan  dari  pembahasan  yang
Volume 13 No. 02 Desember 2022
telah  diuraikan  pada  hasil  penelitian,  maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Pada  data  analisa  etanol  hasilnya  bisa dilihat  bahwa  penambahan Saccharomyces cerevisiae memiliki pengaruh untuk meningkatkan  kadar  persentase  etanol sebesar  3,7778%  pada  massa  seberat  10 gram dengan lama fermentasi 7 hari.
2. Untuk  hasil  persentase  etanol  terendah terdapat pada massa Saccharomyces cerevisiae dengan berat sebesar 4 gram dan 8 gram dengan lama fermentasi 14 hari.
3. Banyaknya
Saccharomyces cerevisiae memberikan  pengaruh  terhadap  kadar etanol
karena semakin banyak Saccharomyces  cerevisiae ,  maka  akan semakin banyak jamur yang bereaksi.
4. Waktu  fermentasi  berpengaruh  terhadap meningkatnya  kadar  etanol  karena  semakin lama  waktu  fermentasi  kadar  etanol semakin  meningkat,  namun  bila  fermentasi terlalu  lama  nutrisi  dalam  substrat  akan habis  dan Saccharomyces  cerevisiae tidak lagi memfermentasi
alkohol.
Saccharomyces  cerevisiae termasuk  ragi yang mudah beradaptasi, ditunjukan dengan singkatnya  waktu  yang  dibutuhkan  untuk beradaptasi, yaitu selama 1 jam 40 menit.
5. Fase  penurunan (deceleration  phase), pada fase  ini  laju  pertumbuhan  mengalami perlambatan.  Fase  ini  berlangsung  selama 20 menit.

## 5.2 SARAN
Perlunya  ketelitian  dan  kecermatan lebih  tinggi  lagi  dalam  proses  distilasi  selama menjaga  suhu  saat  melakukan  distilasi,  untuk lama  waktu  distilasi  disarankan  bisa  lebih lama  dari  60  menit  dan  bisa  menggunakan H 2 SO 4 dengan  kadar  yang  lebih  tinggi  dari yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti  saat melakukan hidrolisis .

## DAFTAR PUSTAKA
Adrian,  A.,  Sulaeman,  R.,  &  Oktorini,  Y. 2015. Karakteristik  Wood  Pellet  dari  Limbah Kayu        Karet        (Heveabrazilliensis Muell. Arg)  sebagai  Alternatif  Sumber  Energi Terbarukan . Jurnal
Online Mahasiswa
Fakultas Pertanian, 2 (2), 1-6.
Anita, S.H., dkk..  2011). Pemanfaatan Lignin Hasil  Isolasi  dari  Lindi  Hitam Proses Biopulping  Bambu  Betung  (Dendrocalamus asper)  sebagai  Media  Selektif  Jamur  Pelapuk Putih . Jurnal Penelitian, 29(4), 312–321.
Alcazar,  A.,  J.M.  Jurado,  F.  Pablos,  A.G. Gonzalez,    and    M.    J.    Martin.    2006.  HFLC
Determination Of 2-L'uraldehydeAnd 5~Hydroxymelhyl-2-Furaldehyde  In  Alcoholic Beverages .  Microchemical  Journal.  82(1):  22- 28.
Alley,  E.R.  2007. Water  Quality  Control Handbook .  New  York,  N.Y.:  McGraw Hill.
Bailey,  P.S.  1982. Ozonation  In  Organic Chemistry .  New  York,  N.Y.:  Academic  press. Inc.
Barrer,  FRS,  R.M..  1978. Zeolites  and  Clay
Minerals As Sorbents And Molecules . Academic Press, New York.
Boonfung,  C  and  Rattanaphanee,  P..  2010. Pressure  Swing  Adsorption  With  Cassava Adsorbent  for  Dehydration  of  Ethanol  Vapor . World Academy of Science,  Engineering  and Technology, 71.
Campo,  E.,  J.  Cacho,  and  V.  Ferreira.  2007.
Solid Phase Extraction, Multidimensional Gas Chromatography Mass Spectrometry
Determination Of Four Novel Aroma Powerful Ethyl Esters: Assessment Of Their Occurrence and  Importance  In  Wine  and  Other  Alcoholic Beverages .  Journal  of  Chromatography  A. 1140: 180-188
Desroir,  Norman.  1988. Unit  Processing Organic  Synthesis,  Ed  5 .  McGraw-Hill Book Company. New York.
Groggins,  P.H..  1992. Unit    Process    In Organic Synthesis . McGrawHill Book Company, New York.
Heraldy,  E.;  Hisyam,  S.  W.. Characterization and  Activation  Of  Natural  Zeolite  From
Volume 13 No. 02 Desember 2022
Ponorogo .  Indonesian  Journal  Of  Chemistry, 2003, Vol. 3, 91-97.
Igbokwe, P.K., Okolomike, R.O., and Nwokolo,  S.O..  2008. Zeolite  For  Drying  Og Ethanol-Water  System  From  A  Nigerian  Clay Resource .  Journal  of  the  University  of Chemical  Technology  and  Metallurgy,  43,  1, 109-112.
Levine,  I.N.. Physical  Chemistry. Mb  Ed, McGraw Hill, New York, 2002; p. 570.
Lee S, Speight J.G., Loyalka S.K.. 2007 Hand Book  Of  Alternative  Fuel  Technologies .  USA: CRC  Taylor  and  Francis  Group.
Ma'ruf,  A.,  dan  Mulyadi,  A.H..  2010. Pembuatan  Zeolit  Pelet  Sebagai  Adsorben Pada  Pembuatan Bioetanol Tradisional , Laporan  Penelitian,  Program  Studi  Teknik Kimia, UMP, Purwokerto.
Mccabe,  L.W.;  Smith,  C.J.;  Harriot,  P..  2004. Unit    Operation    of    Chemical  Engineering, 7th   Ed. ,   McGraw-Hill, New York.
McMillan, J.D.. 1997. Bioethanol Production: Status  and  Prospects .  Renewable  Energy,  10, 295.
N.  Azizah,  A.N.  Al-Baari.,  S.  Mulyani., Pengaruh  Lama  Fermentasi  Terhadap  Kadar Alkohol,  pH,  dan  Produksi  Gas  Pada  Proses Fermentasi  Bioetanol  Dari  Whey  dengan Substitusi  Kulit  Nanas .  Vol.  1  No.  2,  2012 Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan.
Niven,  R.K..  2005. Ethanol    In    Gasoline: Environmental  Impacts  and  Sustainability Review  Article.  Renewable  and  Sustainable Energy Reviews, 9, 535.
Osamu,  K.,    Carl  H.W..  1989. Biomass Handbook .  Gordon        Breach        Science Publisher.
Perry, R.H.. 1984. Perry Chemical
Engineering  Hands  Book .  Mc  Grow  Hill, Singapore.
Plham,  C.B.,  Mansigan,  V.E.,  and  Luis,  V.S., Development  Of  Low  Energy  Process  Of Water  Adsorption  From  Ethyl  Alcohol. Philippines:
National Institutes of Biotechnology  and  Applied  Microbiology, U.P. at Los Banos, College, Laguna.
Poedjiadi,  A.  1994. Dasar-dasar  Biokimia . Jakarta: Universitas Indonesia.
Prescott. S.G. and C.G., Said.  1959. Industrial Microbiology,Ed.3 .  New  York:  McGraw-Hill Book Company.
Raklimatullah,  D.K.A.,  Wiradini,  G.,  dan Ariyanto,  N.P..  2007. Pembuatan  Adsorben Dari  Zeolit  Alam  Dengan  Karakteristik Adsorption  Properties  Untuk  Kemurnian Bioetanol .  Bandung:  Program  Studi  Teknik Fisika,  FTI,  ITB.
Rini,  D.K.  2010. Optimasi  Aktivasi  Zeolit Alam  untuk  Dehumifikasi  Udara .  Skripsi  SI,
Semarang: Universitas Diponegoro.