## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAN FRAKSI KARANG LUNAK Sinularia SP. DI TELUK MANADO
Lyone Katiandagho 1) , Defny Silvia Wewengkang 1) , Sri Sudewi 1)
1) Program Studi Farmasi Fakultas MIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Soft  Coral  Sinularia  sp.has  been  shown  to  have  antibacterial  activity.  This  research  aims  to determine the antibacterial activity of marine  organisms obtained from Manado bay. The method in this study is the diffusion method with positive control chloramphenicol and negative control of methanol in Escerichia  coli  and  Sthaphylococcus  aureus.  The  result  showed  that  extracts,  chloroform  fraction  and methanol-water fraction were obtained inhibiting category of Sthapylococcus aureus bacteria, but in the chloroform fraction and ethanol extract can inhibit Escerichia coli bacteria categorized as strong. With it can  be  conlueded  that  the  extract  and  fraction  of  soft  Sinularia  sp.  have  bioactive  compounds  with  a broth spectrum of antibacterial activity.
Keywords: Sinularia sp., Chloramphenicol, Escerichia coli, Sthaphylococcus aureus, and antibacterial.

## ABSTRAK
Karang  lunak Sinularia sp. telah  terbukti  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  pada  organisme  biota  laut  yang  diperoleh  dari  teluk  Manado. Metode dalam penelitian ini adalah metode difusi agar dengan kontrol positif kloramfenikol dan kontrol negatit metanol pada Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak,  fraksi  kloroform,  dan  fraksi  metanol-air  dapat  menghambat  bakteri Staphylococcus  aereus dikategorikan  sedang,  namun  pada  fraksi  kloroform  dan  ekstrak  etanol  dapat  menghambat  bakteri Escerichia coli dikategorikan kuat. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa ekstrak dan fraksi karang lunak Sinularia sp .memiliki senyawa bioaktif dengan spektrum yang luas terhadap aktivitas antibakteri.
Kata kunci: Sinularia sp , Kloramfenikol, Escherichia coli , Staphylococcus aureus , dan antibakteri

## PENDAHULUAN
Laut  menutupi  71%  dari  permukaan bumi, oleh sebab itu sangat banyak potensi yang bisa  diambil  dari  laut  seperti  sumber  makanan, zat  warna  kosmetik,  bahkan  obat-obatan. Dewasa  ini  pemanfaatan  organisme  laut  banyak digunakan  sebagai  sumber  obat  baru.  Hal  ini disebabkan  oleh  kemampuan  organisme  laut seperti  tumbuhan  dan  invertebrata  laut  dalam memproduksi  senyawa  kimia  yang  mempunyai keanekaragaman  hayati  yang  tinggi  dengan struktur kimia yang khas. Banyak senyawa aktif yang  diisolasi  dari  bahan  alam  bahari  yang memberikan  dengan  aktivitas  biologinya  (Ellis and Sharon, 2005).
Berbagai penelitian menunjukkan bahwa organisme  laut  memiliki  potensi  yang  sangat besar  dalam  menghasilkan  senyawa-senyawa aktif  yang  dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku obat-obatan.  Beberapa  organisme  laut  yang diketahui  dapat  menghasilkan  senyawa  aktif antara  lain  ialah  spons,  moluska,  bryozoa, tunikata, karang lunak dan lain-lain. Organisme- organisme  ini  diketahui  dapat  menghasilkan sejumlah  besar  produk  laut  yang  bersifat  alami, juga  mampu  menunjukkan  keragaman  senyawa kimia  yang  sangat  besar  (Thakur and Muller, 2004).
Karang lunak berperan sebagai salah satu hewan penyusun  ekosistem  terumbu  karang  serta pemasok  senyawa  pertumbuhan  terbesar  bagi terumbu  karang  yaitu  senyawa  karbonat,  hal  ini dibuktikan  dengan  penemuan  sejumlah  besar spikula berkapur di dalam jaringan tubuhnya dan ini  tidak  ditemukan  pada  hewan-hewan  lain yang  hidup  sekalipun  diterumbu  karang  yang sama. Berdasarkan laporan pada dekade terakhir ini  ditemukan  bahwa  tenyata  sebanyak  50% senyawa bioaktif yang terdapat pada invertebrata ini  bersifat  toksik.  Karang  lunak  pada  waktu diambil dari laut umumnya mempunyai bau atau aroma yang tajam (Radhika, 2006).
Sinularia sp. Merupakan salah satu jenis karang lunak yang belakangan ini banyak dikaji kandungan  bioaktifnya.  Mengingat  potensi  dari karang  lunak  terutama Sinularia  sp. Yang mempunyai  kandungan  bioaktif  yang  besar, maka  peneliti  tertarik  untuk  meneliti  karang lunak Sinularia  sp. Yang  terdapat  di  Teluk Manado untuk melihat aktivitas antibakterinya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode Eksperimental Laboratorium yaitu dengan menguji  aktivitas  dari  fraksi  teripang  laut (Sinularia sp.) terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

## Preparasi Sampel
Pada  penelitian  ini  sampel  teripang  laut dikoleksi  dari  perairan  pantai  Malalayang  kota Manado,  dengan  menggunakan  alat  bantu (masker, fins, dan shorkel).
1. Pengambilan  sampel  di  ambil  di
Teluk Manado 2. Ekstraksi bahan aktif sampelmenggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 96%. 3. Fraksinasi sampel menggunakan larutan  metanol,  n-heksan,  dan kloroform.

## Pembuatan Media dan Pengujian Antibakteri
1. Sterilisasi alat
2. Kultur bakteri
3. Pembuatan  larutan  kontrol  negatif dan positif
4. Pembuatan larutan uji
5. Pengujian aktivitas antibakteri, metode  yang  dalam  penelitian  ini yaitu  metode  difusi  agar  (disc diffusion Kirby and Bauer).
6. Pengamatan  dapat  dilakukan  setelah 1x24 jam masa inkubasi dan diameter zona  hambat  diukur  dalam  satuan millimeter (mm) menggunakan mistar  berskala  dengan  cara  diukur diameter total zona bening cakram.
HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Sampel Pada  penilitian  ini  ekstraksi  karang lunak Sinularia sp. ialah maserasi. Tabel 1. Hasil Ekstraksi dan Rendemen Ekstrak Sinularia sp. Sampel Segar Filtrat (Warna)   Ekstrak  Kasar Rendemen Ekstrak Kasar (g) (g) (%) (Warna) 120,8 Cokelat Pekat 6,28 5,2 Cokelatkehitaman
Keterangan : Ekstraksi menggunakan pelarut etanol 96 %
Berdasarkan tabel di atas, hasil ekstraksi menggunakan  pelarut  etanol  96  %  didapati filtrat  berwarna  cokelat  pekat  dengan  berat 120,8  g,  filtrat  tersebut  kemudian  disaring kembali  untuk  memisahkan  garam  dari ekstrak dengan tujuan, agar dalam pengujian antibakteri garam tidak mengganggu penghambatan  bakteri.Filtrat  selanjutnya diuapkan  menggunakan rotary  evaporator untuk  memisahkan  pelarut  dan  ekstrak sehingga  didapati  ekstrak  kasar  etanol
berwarna  cokelat  kehitaman  dengan  berat 6,28 g dan rendemen berkisar 5,2 %. Hal ini disebabkan  oleh  karena  ukuran  sampel mempengaruhi suatu rendemen.
Ekstrak etanol yang diperoleh selanjutnya disimpan didalam lemari pendingin  untuk  menjaga  agar  tidak  terjadi kerusakan kandungan bioaktifnya dan selanjutnya  diuji  aktivitas  antibakteri  utuk mengetahui bahwa ekstrak tersebut memiliki daya hambat terhadap bakteri uji.

## Fraksinasi Sampel
Pada  penelitian  ini,  fraksinasi  dilakukan dengan  metode  FCC  (Fraksinasi  Cair-Cair)
dengan  pelarut  n-heksan,  kloroform  dan metanol  secara  berkesinambungan  dengan sifat kepolaran pelarut yang berbeda-beda. Tabel 2. Hasil Fraksinasi dan Rendemen Fraksi Sampel Berat Fraksi  (g) Rendemen (%) Warna FH 0,22 22 Hijau FK 0,37 37 Coklat Kehitaman FMA 0,24 24 Cokelat Keterangan : FH  = Fraksi Heksan FK  = Fraksi Kloroform FMA = Fraksi Metanol-Air Berdasarkan tabel diatas, partisi menggunakan  pelarut  n-heksan,  didapati fraksi  n-heksan  berwana  hijau  dengan  berat 0,22  g  dan  rendemen  berkisar  22%,  untuk pelarut  kloroform  didapati  fraksi  berwarna cokelat  kehitaman  dengan  berat  0,37  g  dan rendemen  berkisar  37%  dan  metanol
didapati fraksi berwarna coklat dengan berat 0,24 g, serta rendemen berkisar 24%. Ketiga rendemen  menunjukkan  perbedaan  yang nyata seperti rendemen yang dihasilkan oleh fraksi  kloroform  lebih  besar  dibanding dengan  rendemen  metanol-air  dan  n-heksan hal  ini  disebabkan  oleh  karena  adanya
perbedaan kelarutan komponen dalam sampel.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstraketanol, fraksi MeOH-air, fraksi n-heksan dan fraksi kloroform  Karang  Lunak Sinularia  sp . dilakuan  terhadap  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus dengan  metode difusi agar. Metode difusi agar (difusi Kirby -  Bauer  yang  telah  dimodifikasi)  menjadi pilihan untuk tujuan klinis yang mempertimbangkan  kesederhanaan  teknik,
ketelitian,  metode  serbaguna  bagi  semua bakteri  patogen  yang  tumbuh  cepat  dan sering  digunakan  dalam  uji  kepekaan antibiotik  dalam  program  pengendalian mutu (Mpila, 2012).
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dan  hasil pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak etanol,Fraksi  MeOH-air,  fraksi  heksan  dan fraksi  kloroform  Karang  lunak Sinularia  sp . terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli dapat dilihat padagambar 5 dan Tabel 3 dan 4.
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi etanol, fraksi MeOH-air, fraksi kloroform dan fraksi n-heksan  Karang Lunak Sinularia sp. terhadap bakteri Escherichia coli.
Gambar1. Diameter zona hambat terhadap E.Coli   Gambar 2. Diameter zona hambat terhadap  S. aureus
Berdasarkan  hasil  penelitian  uji  aktivitas antibakteri pada Tabel 3, didapati bahwa ekstrak dan fraksi uji mampu menghambat pertumbuhan bakteri  gram  negatif  yaitu  bakteri Escherichia coli .  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  adanya  daya hambat (zona bening) yang terbentuk pada fraksi
metanol  ekstrak  12,67  mm,  dan  pada  fraksi kloroform  sebesar  10,5  mm.  Hal  tersebut menyatakan  bahwa  fraksi  metanol  ekstrak  dan fraksi kloroform mampu menghambat pertumbuhan bakteri dengan kategori kuat. Pada fraksi  metanol-air  daya  hambat  yang  terbentuk
Ulangan Fraksi metanol ekstrak Fraksi metanol air Fraksi kloroform Fraksi n-heksan Kontrol positif (+) Kontrol negatif (-) 1 10 8 12 1 26 0 2 15 9 9,5 0 27 0 3 13 7 10 1,5 25 0 Rata-rata 12,67 8 10,5 0,83 26 0
yaitu sebesar 8 mm dengan kategori sedang, dan pada  fraksi  n-heksan  dengan  kategori  lemah
yaitu sebesar 0,83 mm.
Tabel  4.  Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  fraksi  metanol  ekstrak,  fraksi  MeOH-air,  fraksi kloroform dan fraksi n-heksan Karang Lunak Sinularia sp. terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Ulangan Fraksi metanol ekstrak Fraksi metanol air Fraksi kloroform Fraksi n-heksan Kontrol positif (+) Kontrol negatif (-) 1 12 10 12 7,5 22 0 2 13 7 9 6 23 0 3 12 8 10 7 23 0 Rata-rata 12,33 8,33 10,33 6,83 22,67 0 Pada  hasil  penelitian  uji  aktivitas antibakteri pada Tabel 4 diatas,
menunjukkan bahwa, ekstrak dan fraksi uji mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri gram  positif  yaitu  bakteri Staphylococus aureus . Hal ini ditunjukkan  dengan adanya daya  hambat  yang  terbentuk  pada  fraksi Etanol  ekstrak  sebesar  12,33  mm  serta fraksi  kloroform  yaitu  sebesar  10,33  mm dikategorikan kuat, sedangkan untuk fraksi metanol-air  menunjukan  daya  hambat dengan kategori sedang yaitu 8,33 mm dan pada fraksi n-heksan sebesar 6,83 mm.
Dari  hasil  pengamatan  yang  dilakukan didapati  bahwa  ekstrak  etanol  mampu menghambat  bakteri  Gram  positif  dan bakteri Gram negatif lebih besar dibanding dengan  fraksi  metanol-air  dan  fraksi  n- heksan.  Hal  ini  terjadi  oleh  karena  ekstrak etanol  yang  diujikan  masih  berupa  ekstrak kasar  dan  senyawa  bioaktif  yang  bersifat antibakteri sehingga ekstrak tersebut mampu menghambat bakteri lebih baik dari pada  fraksi  lainnya.  Fraksi  kloroform  juga menunjukkan  perbedaan  yang  sangat nyata yaitu  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri Eschericia coli dan Staphylococcus
aureus lebih  besar  dibandingkan  dengan fraksi metanol-air dan fraksi n-heksan. Hal
tersebut  mungkin  terjadi  karena  pelarut kloroform mampu menarik senyawa bioaktif lebih banyak dibandingkan pelarut yang  lain  sehingga  ekstrak  yang  dipartisi oleh pelarut kloroform mengandung senyawa  bioaktif  lebih  besar,  dan  oleh sebab  itu  bakteri  uji  lebih  peka  terhadap fraksi  kloroform  dibandingkan  dengan fraksi lainnya.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  dan  Fraksi  Karang  Lunak Sinularia  sp., maka  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak  etanol,  fraksi  kloroform  dan  fraksi metanol-air dapat menghambat bakteri Staphylococcus  aureus dikategorikan  sedang, namun  pada  fraksi  kloroform  dan  ekstrak  kasar dapa  menghambat  bakteri Escerichia  coli dikategorikan  kuat.  Hasil  penelitian  ini  juga disimpulkan  bahwa  ekstrak  dan  fraksi  Karang Lunak Sinularia  sp. memiliki  senyawa  bioaktif dengan  spektrum  yang  luas  artinya  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram negatif dan Gram positif.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmadi,  S.  1992. Teknik  Kimia  Organik . Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB, Bogor.
Althunibat,  O.Y.,  R.  bin  Hashim.  M.  Daud,  M. A.  Ikeda  &  B.  I.  Zali.  2009  In  vitro antioxidant and proliferative activities of three  Malaysian  sea  cucumber  species.
European Journal of Scientific Research. 37 : 376—387.
Arnold,  O.  W.  &  R.A  Birtles.  1989.  Soft sediment marine invertebrates of southeast  asia  and  Australia:  a  guide  to identification.  Australian  Institutes  of Marine Science. Australia.
Bonham,  K.  &  E.E.  Held.1963.  Ecological observations  on  the  sea  cucumber
Holothuria atra and Holothuria
leucospilota at Rongelap Atoll, Marshall Islands. Pasific Science 17 : 305--314.
Bordbar,  S.,  F.  Anwar  &  N.Saari.  2011.  High- value  components  and  bioactives  from sea  cucumbers  for  functional  foods  –  a review. Marine drugs 9 : 1761—1805.
Brooks,  G.  F.  J.  S.  Butel,  And    L.  N.  Ornston.
1995. A.
Review of Medical
Microbiology. Journal  of Microbiology.
4 : 197--202.
Buchanan,  R.  E.  And  Gibson,  E.  E.  1974. Bergey’s  Manual  of  Determinative  of
Bacteriology. Baltimore, USA.
Careaga, V. P., C. Bueno, C. Muniain, L. Alche
& M.S. Maier. Antiproliferative,
cytotoxic  and  hemolytic  activities  of  a triterpene glycoside from Psolus patagonicus and  its  desulfated  analog.
Chemoterapy. 55 : 60—68.
Christami,  G.  2014. Aktivitas  Antioksidan  & Tabir  Surya  Ekstrak  Fenolik    Dari Cortex  Umbi Kayu (Manihot Esculenta)
Dari Kota Melonguane. [Skripsi] Program Studi Farmasi Fakultas Matematika  Dan  Ilmu  Pengetahuan Alam,  Universitas  Sam  Ratulangi,
Manado.
Cowan, M. 1999. Plant Product as Antimicrobial
Agent. Clinical  Microbiology  Reviews. 12 : 564--582.
Darsono,  P.  1998.  Pengenalan  secara  umum tentang teripang (holothurians). Oseana . 23 : 1--8.
Darsono,  P.,  A.  Aznam,  dan  Djamali.  1998.
Kepadatan  stok  teripang  pada  beberapa lokasi di Indonesia. J. Torani, 14 : 264-- 272.
Darsono,  P.  2003.  Sumber  daya  teripang  dan pengelolaannya. Oseana. 28 : 1--9.
Darsono,  P.  2007.  Teripang  (Holothuridae): kekayaan  alam  dalam  keanekaragaman biota laut. J. Oseana, 2 : 1--10.
Davis, W.W. And Stoud, T. R. 1971. Disc Plate Methods  Of  Microbiological.  Antibiotic Assay. Journal  Of  Microbiology .  22  : 659--665.
Depkes  RI,  1986, Sediaan  Galenik, 2  &  10, Departemen Kesehatan RI, Jakarta.