Daya Anthelmintika Ekstrak Etanol Daun Kemangi ( Ocimum americanum Linn.) Terhadap Mortalitas Cacing Haemonchus contortus Secara in Vitro
The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Basil Leaves (Ocimum americanum Linn.) Againt Haemonchus contortus Death in Vitro
1) Rari Noviana, 2) Chairul Anwar, 3) Agus Sunarso
3) Setiawan Koesdarto, 3) Sri Mumpuni S, 4) Iwan Sahrial H
1) Mahasiswa, 2) Departemen Anatomi Veteriner, 3) Departemen Parasitologi Veteriner, 4) Departemen Kedokteran Dasar,
Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga

## Abstract
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui daya anthelmintik dari ekstrak etanol daun kemangi ( Ocimum americanum Linn.) terhadap mortalitas cacing Haemonchus contortus secara in vitro . Sediaan ekstrak dibuat dengan konsentrasi (berat/volume) 2,5%, 5%, 7,5%, dan 10%.  Untuk  kontrol  positif  digunakan  PBS  dan  DMSO  sedangkan  untuk  kontrol  negatif digunakan  Albendazole  10  mg/ml.  Sebanyak  10  ekor  cacing Haemonchus  contortus betina direndam  dengan  berbagai  perlakuan  dalam  cawan  petri.  Masing-masing  perlakuan  diulang sebanyak 4 kali. Pengamatan dilakukan setiap 1 jam sekali selama 6 jam untuk melihat apakah cacing  masih  hidup  atau  sudah  mati.  Hasil  dari  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun  kemangi  memiliki  efek  anthelmintik  terhadap  cacing Haemonchus  contortus secara in vitro . Makin tinggi konsentrasi ekstrak, maka daya anthelmintiknya juga semakin tinggi. Pada ekstrak  konsentrasi  10%  memiliki  kemampuan  anthelmintik  yang  hampir  sama  dengan Albendazole.
Key words: Ocimum americanum , anthelmintik, Haemonchus contortus , in vitro


## Pendahuluan
Haemonchosis merupakan suatu penyakit yang disebabkan  oleh  cacing  nematoda  dari genus Haemonchus ,  salah  satu  spesiasnya  adalah Haemonchus  contortus .  Cacing  ini  menyerang ruminansia  terutama    pada  ruminansia  kecil (Subekti dkk, 2013).
Kerugian  yang  ditimbulkan  dari  infeksi nematoda  termasuk H.  contortus di-perkirakan dapat  mencapai  Rp.7.000.000.000  /tahun  serta diperkirakan terus meningkat bila tidak dilakukan  upaya  pengendalian  dengan  sungguh- sungguh (Rachmat dkk, 1998 dalam Ahmad dkk, 2006).  Menurut  hasil  penelitian  dari  Nugroho (2013) infeksi cacing nematoda saluran pencernaan  pada  ruminansia  kecil  didominasi oleh H.  contortus dengan  prevalensi  58,26%- 66,21%.  Dilihat  dari  angka  prevalensi  tersebut menunjukkan penyakit haemonchosis di Indonesia masih  tinggi. Infeksi cacing ini  sendiri
banyak  menimbulkan  kerugian  bagi  ternak karena  menyebabkan  penurunan  berat  badan, anemia  bahkan  kematian.  Cacing  dewasa  juga mengakibatkan penurunan digesti serta penurunan  absorbsi  protein,  kalsium  dan  fosfor dalam tubuh ternak (Subekti dkk, 2013).
Selama ini pengendalian yang sering dilakukan dengan  pemberian  anthelmintik  dari  golongan Benzimidazole,  salah  satu  contohnya  adalah Albendazole.  Meskipun  obat  tersebut  efektif tetapi masih terdapat efek samping (Adam, 2001). Pemberian  anthelmintik  kimia  juga  sering  tidak terbeli  oleh  masyarakat  karena  obat  dianggap mahal  sehingga  penyakit  cacing  dibiarkan  ada dan berkembang (Beriajaya, 1998).
Alternatif  pengganti  anthelmintik  kimia  yaitu dengan  anthelmintik  yang  berasal  dari  tanaman perlu  dipertimbangkan.  Hal  ini  bertujuan  untuk mengantisipasi  dampak  yang  ditimbulkan  oleh anthelmintik  kimia,  selain  itu  penggunaan  obat
Journal of Parasite Science. (J. Parasite Sci.)                                                        Vol. 1, No.2, September 2017
tradisional akan memungkinkan untuk penyediaan  obat  secara  murah    dan  mudah didapat  di  pedesaan.  Salah  satu  tanaman  yang berkhasiat  sebagai  anthelmintik  adalah  tanaman kemangi  terutama  bagian  daun.  Pada  daun kemangi memiliki
kandungan sebagai anthelmintik  yaitu  tannin  dan  saponin  (Sentana, 2010).
Penelitian ini ingin mengetahui khasiat daun kemangi sebagai anthelmintik terhadap cacing H. contortus secara in  vitro .  Sebagai  pembanding digunakan  Albendazole  karena  merupakan  obat yang sering dipakai dalam pengobatan haemonchosis (Ambarawati, 2011).
Materi dan Metode Penelitia n

## Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kemangi
Daun  kemangi  dibeli  dari  pasar  di  Surabaya. Dipilih  daun-daun  yang  masih  segar,  berwarna hijau  tetapi  belum  kering  dan  tidak  busuk. Kemudian  dalam  pembuatan  serbuk  kemangi daun  tersebut  dicuci  bersih  pada  air  mengalir, tujuannya  untuk  menghilangkan  kotoran  yang melekat  kemudian  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan  sampai  kering  agar  lebih mudah dihaluskan untuk dijadikan serbuk. Daun kemangi  yang  sudah  kering  kemudian  diblender hingga  menjadi  serbuk  lalu  diayak  hingga memperoleh  serbuk  halus,  kemudian  dilakukan maserasi  dengan  menggunakan  etanol  96% selama  kurang  lebih  tiga  hari  dan  pada  6  jam pertama  dilakukan  pengadukan.  Hasil  maserasi disaring  dengan  kapas  dan  kertas  saring, Selanjutnya,  residu  dimaserasi  kembali  hingga warna  coklat  bening.  Filtrat  yang  diperoleh disatukan  dan  dipekatkan  dengan  menggunakan rotary  evaporator  pada  suhu  40 0 C-50 0 C  sampai diperoleh ekstrak kental (Khoirani, 2013).
Persiapan Cacing H. contortus Penelitian ini menggunakan cacing H. contortus betina  dewasa  berukuran  10-30  mm. Cacing  diperoleh  dari  Abomasum  kambing  yang dipotong  di  Rumah  Potong  Hewan  Pegirian Surabaya. Selanjutnya abomasum dibuka menggunakan  scalpel,  kemudian  cacing H. contortus diambil  menggunakan  pinset  dan diletakkan  pada  beker  glass  berukuran  500  ml
yang  berisi  PBS.  Cacing  kemudian  dibawa  ke Laboratorium Helmintologi, Departemen Parasitologi Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga.

## Perlakuan
Penelitian  ini  meliputi  empat  perlakuan, dengan  satu  kontrol  negatif  (-)  dan  satu  kontrol positif (+) yaitu:
(K-):  10  ekor  cacing H.  contortus hanya  diberi larutan  PBS  dan  DMSO.  (K+):  10  ekor  cacing H. contortus diberi  larutan  Albendazole  10mg/ml  . (P1):  10  ekor  cacing H.  contortus diberi  ekstrak daun  kemangi  konsentrasi  2,5%.  (P2):  10  ekor cacing H. contortus diberi ekstrak daun kemangi konsentrasi 5%. (P3): 10 ekor cacing H. contortus diberi  ekstrak  daun  kemangi  konsentrasi  7,5%. (P4):  10  ekor  cacing H.  contortus diberi  ekstrak daun kemangi konsentrasi 10%.
Waktu  pengamatan  dilakukan  setiap  1  jam selama  6  jam.  Pembuatan  konsentrasi  daun kemangi  diberi  tambahan  DMSO  0,5%  sebagai emulsifier agar  ekstrak  dapat  larut  sempurna dalam PBS. Setiap cawan petri diisi larutan perla- kuan dengan volume 25 ml dan 10 ekor cacing H. contortus yang  masih  aktif  bergerak  kemudian semua cawan petri dimasukkan kedalam inkubator  dengan  suhu  37 0 C.  Setiap  perlakuan terdiri dari 4 kali pengulangan.

## Analisis Data
Data  yang  telah  diperoleh  dari  penelitian dikumpulkan  dan  disajikan  dalam  bentuk  tabel, kemudian  dianalisis  menggunakan  uji  Kruskall Wallis  dilanjutkan  dengan  uji  Mann-Witney untuk  mengetahui  perbandingan  masing-masing perlakuan.  Setelah  mengetahui  perbandingan dari masing-masing perlakuan, kemudian dilakukan analisis probit untuk mengetahui  LC 50 ekstrak pada setiap jam pengamatan. Uji statistik mengunakan Statistical  Product  and  Service Solution (SPSS).

## Hasil
Hasil  pengamatan  kematian  kumulatif    cacing H.  contortus dapat  dilihat  pada  Tabel  1  dan Gambar 1.
Tabel 1. Persentase kematian kumulatif cacing H. contortus pada jam ke- 1, ke- 2, ke- 3, ke- 4, ke- 5 dan ke- 6
Perlakuan Waktu Pengamatan (Jam) Ke-1 Ke-2 Ke-3 Ke-4 Ke-5 Ke-6 PBS+DMSO 0 0 0 0 0 0 Albendazole 37,5 100 100 100 100 100 EDK 2,5% 0 0 10 32,5 47,5 67,5 EDK 5% 0 30 52,5 90 100 100 EDK 7,5% 10 47,5 100 100 100 100 EDK 10% 30 97,5 100 100 100 100
Keterangan EDK 2,5% : Ekstrak daun kemangi 2,5%, EDK 5% : Ekstrak daun kemangi 5%, EDK 7,5% : Ekstrak daun kemangi 7,5%, EDK 10% : Ekstrak daun kemangi 10%.
Gambar 1. Grafik persentase kematian cacing H. contortus
Data  persentase  tersebut  kemudian  dilakukan  analisis  statistik  dengan  menggunakan  uji  statistik Kruskall-Wallis    dan  didapatkan  hasil  yang    berbeda  nyata  (p<0,05),  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji Mann-Withney untuk membandingkan masing - masing perlakuan pada setiap jam. Hasil selengkapnya dapat dilihat pada tabel 2
Tabel  2. Rata-rata  dan  simpangan  baku  persen-tase  kematian  cacing H.  contortus akibat  pemberian berbagai perlakuan pada waktu pengamatan jam.
Perlakuan Rata-rata ± Simpangan Baku Jam Ke-1 Jam Ke-2 Jam Ke-3 Jam Ke-4 Jam Ke-5 Jam Ke-6 PBS+DMSO 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 EDK 2,5% 0,00 a ±  0,00 0,00 a ±  0,00 1,00 b ±  0,816 3,25 b ±  0,50 4,75 b ±  0,957 6,75 b ±  0,50 EDK 5% 0,00 a ±  0,00 3,00 b ±  0,816 5,25 c ±  0,50 9,00 c ±  0,816 10,00 c ±  0,00 10,00 c ±  0,00 EDK 7,5% 1,00 b ±  0,816 4,75 c ±  0,957 10,00 d ±  0,00 10,00 d ±  0,00 10,00 c ±  0,00 10,00 c ±  0,00 EDK 10% 3,00 c ±  0,16 9,75 d ±  0,50 10,00 d ±  0,00 10,00 d ±  0,00 10,00 c ±  0,00 10,00 c ±  0,00 Albendazole 3,75 c ±  0,957 10,00 d ±  0,00 10,00 d ±  0,00 10,00 d ±  0,00 10,00 c ±  0,00 10,00 c ±  0,00
a- c Superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05).
58                     The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Basil Leaves ( Ocimum americanum Linn .),,
Hasil  dari  analisis  probit  dapat  diketahui  LC 50 pada  jam  ke-1  sebesar  11,740%,  jam  ke-2  sebesar 6,535%, jam ke-3 sebesar 4,314%, jam ke-4 sebesar 2,985%,  jam  ke-5  sebesar  2,533%  dan  jam  ke-6 sebesar 2,241%.

## Pembahasan
Hasil  uji  analisis  statistik  menunjukkan  bahwa pada jam ke-1 ekstrak  daun kemangi konsentrasi 10%  sudah  menunjukkan  hasil  yang  tidak berbeda  nyata  dengan  Albendazole,  hal  ini berarti  ekstrak  etanol  daun  kemangi  konsentrasi 10%  memiliki  kemampuan  yang  hampir  sama dengan Albendazole.
Sedangkan  pada  konsentrasi  yang  lainnya untuk  mendapatkan  hasil  yang  tidak  berbeda nyata  dengan  Albendazole  membutuhkan  waktu yang  lebih  lama.  Pada  konsentrasi  7,5% membutuhkan  waktu  selama  3  jam,  konsentrasi 5%  selama  5  jam,  sedangkan  konsentrasi  2,5% selama  6  jam  belum  menunjukkan  kemampuan yang  sama  dengan  Albendazole.  Pada  kontrol negatif    perendaman  PBS+DMSO  belum  terjadi kematian  hingga  jam  ke-6.  Berdasarkan  grafik diatas  juga  dapat  diketahui  bahwa  ekstrak  daun kemangi memiliki Onset of action yang cepat dan Duration  of  action yang  lama  sehingga  ekstrak daun  kemangi  memiliki  efektifitas  yang  baik sebagai  anthelmintik.  Kemampuan  anthelmintik tersebut  diduga  karena  adanya  kandungan senyawa  tannin  dan  saponin.  Senyawa  saponin bekerja  dengan  meningkatkan  permeabilitas  dan formasi  pori  dinding  tubuh  cacing  yang menyebabkan vakuolisasi dan disintegrasi kutikula (Melzig et al . 2010 dalam Parvathy et al. 2012. Cara kerja senyawa tannin menurut Patel et al .  (2010)  dalam  Salhan et  al .  (2011)  mempunyai daya  anthelmintika  dengan  cara  mengganggu pembentukan energi dengan menghambat fosforilasi oksidatif yang menyebabkan kematian. Hasil  analisis  probit  menunjukkan  bahwa semakin  lama  waktu  perendaman  cacing H. contortus dalam  ekstrak  etanol  daun  kemangi maka LC 50 yang dibutuhkan semakin sedikit.

## Kesimpulan
Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa    ekstrak etanol    daun        kemangi  memiliki  daya anthelmintika  terhadap  cacing H.  contortus secara in vitro dengan konsentrasi optimum yang didapatkan yaitu 10%. Semakin lama perendaman
cacing H.  contortus dalam  ekstrak  etanol  daun kemangi  maka  LC 50 yang  dibutuhkan  semakin sedikit

## Daftar Pustaka
Adam,  H.R.  2001.    Veterinary  Pharmacology  and Therapeutics.  Eight  Edition.  Lowa  State Press.
Ahmad,  R.Z.,  Beriajaya.,  M.  Suatmojo  dan  E.
Purwaningsih.  2006.  Faktor-faktor  yang mempengaruhi Aplikasi Duddingtonia flagransi dalam Mereduksi Larva
Haemonchus  contortus di  Lapang  Rumput.
Seminar  Nasional  Teknologi  Pertanian  dan Veteriner. Bogor.
Ambarawati.,  M.F.  Palupi.,  U.  Patrianadan  E. Rusmiati.  2011.  Perbandingan  Pengujian
Kadar
Albendazol dengan Metode Spektofotometri  dan  Titrasi  Bebas  Air.  Balai Besar  Pengujian  Mutu  dan  Sertifikasi  Obat Hewan. Bogor.
Khoirani,  N.  2013.Karakterisasi  Simplisia  dan Standarisasi Ekstrak Etanol Herba Kemangi ( Ocimum  americanum L.)  (Skripsi).  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan.  UIN  Syarif Hidayatullah.
Nugroho, R. 2013. Jenis dan Prevalensi Nematoda Usus pada Kambing yang Dipelihara dengan Model Kandang yang Berbeda di Kecamatan Subang  Kabupaten  Banyumas  (Thesis).
Fakultas Biologi. Universitas Jenderal Sudirman.
Parvathy,  N.G.,  Padma,  R.,  Renjith,  V.,  Rahate, P.K  and  Saranya,  T.S.  2012.  Phytochemical Screening  and  Anthelmintic  Activityof Methanolic  Extract  of Imperata  Cylindrica . Int. J. Pharm. Sci. 4(1): 232-2
Salhan,  M.,  B.  Kumar.,  P.  Tiwari.,  P.  Sharma., H.K.  Sandhar  and  M.  Gautam.  2011. Ethanolik  Leaf  Extracts  of Clitoria  ternatea . Int. J. Drug Dev. & Res., Jan-March 2011. 3(1) : 68-69.
Sentana,  O.K.  2010.  Efek  Antihelmintik  Ekstrak Etanol Daun Kemangi ( Ocimum americanum L.)  Terhadap  Kematian Ascaris  suum Goeze sp Secara in vitro(Skripsi). Fakultas Kedokteran. Universitas Sebelas Maret.