## PENGARUH KONSENTRASI KITOSAN DAN LAMA PENYIMPANAN TERHADAP TOTAL PLATE COUNT (TPC) BAKTERI PADA IKAN KEMBUNG (Rastrelliger sp.) ASIN
The Effect Chitosan Concentration and Storage Time for Total Plate Count (TPC) on Salted Mackerel (Rastrelliger sp.)
Ardhana Yulisma, Cut Yulvizar, Edi Rudi
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Syiah Kuala e-mail: dhana_yulisma@yahoo.co.id

## Abstrak
Penelitian  ini  menggunakan  kitosan  sebagai  pengawet  ikan  kembung  (Rastrelliger sp.) asin selama  penyimpanan  suhu  kamar.  Tujuannya  adalah mengetahui  pengaruh  konsentrasi  kitosan  dan lama  penyimpanan  terhadap  angka  lempeng  total  pada  ikan  kembung  (Rastrelliger sp.)  asin. Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Mikrobiologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Syiah  Kuala  dari  bulan April sampai  bulan Agustus 2012. Metode yang  digunakan  adalah  eksperimental  laboratorium.  Data  dianalisis  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) faktorial (2 faktor). Faktor pertama adalah perlakuan  konsentrasi  kitosan (tiga taraf: 0%;  1%;  2%)  dan  faktor  kedua  adalah  lama penyimpanan  (empat  taraf:  0;  2;  4;  8  minggu).  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan  konsentrasi  kitosan  tidak  berpengaruh  nyata  (p>0,05) terhadap angka  lempeng total,  sedangkan  lama  penyimpanan  berpengaruh  nyata  (p<0,05)  terahadap angka lempeng total. Interaksi antara konsentrasi dan lama penyimpanan berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap angka lempeng total ikan kembung (Rastrelliger sp.) asin.
Kata kunci: Konsentrasi kitosan, Ikan Kembung (Rastrelliger sp.) Asin, Lama penyimpanan

## Abstract
This  research  studied  the  application  of  chitosan  on  salted mackerel (Rastrelliger sp.) preservation  during  storage  at  room  temperature.  The  research  is  aimed  to  study  the  effect  chitosan concentration and storage time for Total Plate Count (TPC). The study was conducted in Laboratory of Microbiology, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Syiah Kuala University from April to August  2012. The  research  method  was  laboratory  experimental.    The  data  was  analyzed  by Randomized Completely Design with two factorial. The first factor was chitosan concentration (three levels:  0%;  1%;  2%)  while  the  second  factor  was  storage  time  (four  levels:  0;  2;  4;  8  weeks).  The results of this study indicated that chitosan concentration was not significantly different for the Total Plate  Count  (p>0,05),  however  storage  time  was  significantly for  the Total  Plate  Count (p<0,05). Futhermore,  the  interaction  chitosan  concentration  and  storage  time  was  significantly  for  the  Total Plate Count (p<0,05).
Keywords: Chitosan concentration, Salted Mackerel (Rastrelliger sp.), Storage time

## PENDAHULUAN
Ikan  kembung  merupakan  ikan  yang hidup  di  tepian  pantai  dan  pada  musim  tertentu hidup  bergerombol  di  permukaan  laut,  sehingga penangkapannya  secara  besar-besaran  mudah dilakukan.  Ikan  ini  banyak  dikonsumsi  oleh masyarakat  karena  kandungan  gizi  yang  cukup tinggi,  harganya  relatif  murah  dan  mudah diperoleh  di  pasaran  (Ratnawati et  al.,  2008). Umumnya  ikan  dijual  di  pasar  dalam  keadaan segar,  namun  saat  hasil  tangkapan  melimpah
para  nelayan  melakukan  pengawetan  agar  tidak membusuk.
Salah  satu  cara  pengawetan secara tradisional adalah membuat ikan asin. Penggunaan  garam  sebagai  bahan  pengawet berfungsi  untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri dan kegiatan enzim penyebab pembusukan  ikan.  Menurut Afrianto  dan Liviawaty  (1989)  ikan  kembung  hasil  olahan akan  mudah  mengalami  kerusakan  secara mikrobiologis, kimiawi dan fisik.
Saat  ini  banyak  zat  kimia  berbahaya digunakan  sebagai  bahan  pengawet  pada  produk hasil  perikanan.  Di  Indonesia,  nelayan  sering menambahkan bahan pengawet berbahaya seperti formalin agar ikan asin olahan tidak cepat busuk. Melihat  kenyataan  saat  ini  bahwa  pengawetan ikan  asin  menggunakan  formalin  dianggap terlalu  berbahaya,  maka  diperlukan  pengawet alternatif  pengganti  yang  aman  dikonsumsi  dan tidak  berbahaya  bagi  kesehatan  konsumen (Rachmawati, 2006).
Kitosan  merupakan  salah  satu  pengawet alternatif  pengganti  formalin.  Kitosan  terbuat  dari kulit  udang,  rajungan  dan  sebagainya.  Kitosan memiliki  sifat  antimikrobial  dan  aman  bagi manusia  sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai bahan  pengawet  makanan.  Di  negara-negara  maju seperti  Jepang  dan  Amerika  Serikat,  kitosan  dan turunannya  telah  diproduksi  secara  komersil (dari limbah industri pangan seperti kulit udang dan lain- lain). Aplikasi  kitosan banyak  ditemui  pada berbagai  bidang  industri  modern  seperti  bidang farmasi,  biokimia,  bioteknologi,  industri  pangan dan lain-lain (Kaban, 2009).
Menurut  Suseno  (2006)  penggunaan kitosan  dengan  konsentrasi  1,5%  pada  ikan  cucut asin  kering  dapat  memperpanjang  masa  simpan sampai  3  bulan.  Menurut  Sedjati  dan  Agustini (2007) konsentrasi  kitosan  0,5%  berpengaruh terhadap  total  bakteri  ikan  teri  (Stolephorus heterolobus)  asin.  Perlakuan  perendaman  dalam larutan  kitosan diharapkan dapat  menurunkan total jumlah bakteri dan memperpanjang lama penyimpanan ikan. Berdasarkan hal tersebut, maka diperlukan  penelitian  penggunaan  kitosan  sebagai bahan  pengawet  alami  pada  ikan  kembung (Rastrelliger sp.) asin.

## METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dimulai  dari  bulan  April sampai  dengan  Agustus  2012.  Penelitian  ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Syiah Kuala.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah pisau steril, ember  plastik, timbangan  biasa,  cawan  petri steril,  tabung  reaksi,  gelas  kimia,  gelas  ukur, erlenmeyer,  pipet  volume, batu penggiling, keranjang,  baskom, timbangan  analitik,  pinset, autoklaf, inkubator, hot  plate, colony  counter, magnetic stirrer, bunsen dan kamera.
Bahan  yang  digunakan  adalah  ikan kembung  (Rastrelliger sp.)  36  ekor,  garam  dan air, asam asetat (CH 3 COOH) 2%, kitosan, media Plate  Count  Agar (PCA),  alkohol,  akuades,  tali
plastik, plastik  kaca,  plastik  2  dan  5  kg, tissue gulung, kapas, alumunium foil, plastik polyethylene dan isolatip.

## Metode Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode eksperimental laboratorium  dengan  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  pola  Faktorial. Sebagai  perlakuan  adalah  konsentrasi  kitosan dan lama penyimpanan.

## Prosedur Penelitian Persiapan
Sebanyak 36 ekor ikan  kembung dicuci dengan  air  bersih  agar semua  kotoran  yang menempel  dapat  dihilangkan.  Kemudian  ikan kembung  dibelah  dan  dikeluarkan  isi  perut beserta  insangnya.  Pembelahan  ini  dilakukan dengan  membelah  ikan  menjadi  dua  sisi  tanpa terputus.  Air  yang  digunakan  untuk  mencuci adalah  air  yang  bersih  dan  mengalir  agar  semua kotoran yang masih melengket di permukaan luar ikan,  bagian  dalam  perut  ikan  dan  sisa-sisa pembuluh  darah  dapat  dibersihkan. Ikan  yang telah  bersih  diletakkan  dalam  keranjang  dengan posisi  bagian  dalam  menghadap  ke  bawah  agar air tidak mengendap dalam tubuh ikan.

## Penggaraman
Proses  penggaraman  dimulai  dengan persiapan larutan garam 10%. Pembuatan larutan garam 10% dibuat dengan cara melarutkan 100 g garam dalam air hingga mencapai volume 1 liter. Ikan  dan  larutan  garam  dicampur rata  pada ember pengaraman sampai semua ikan terendam dalam  larutan  garam,  ditutup  dan  diberi pemberat,  selanjutnya  ikan  kembung  dibiarkan selama  8  jam  terendam  dalam  larutan  garam. Ikan  kembung  yang  sudah  terendam  larutan garam  kemudian  dicuci  dan  dijemur selama  2 hari sampai menjadi ikan asin setengah kering.

## Pencelupan Ikan  Kembung  Asin  Setengah Kering dalam Larutan Kitosan
Kitosan dalam bentuk padatan diblender sampai  halus.  Kemudian  kitosan  yang  sudah halus  disaring  sampai  menjadi  bubuk  kitosan. Kitosan  dengan  konsentrasi  1%  dibuat  dengan cara  melarutkan  kitosan  sebanyak  1  g  dalam larutan  asam  asetat  2%.  Kitosan  dengan konsentrasi  2%  dibuat  dengan  cara  melarutkan kitosan  sebanyak  2  g  dalam  larutan  asam  asetat 2%. Ikan kembung yang sudah dijemur selama 2 hari  atau  baru  setengah  kering,  kemudian dicelupkan dalam larutan kitosan selama 1 menit. Setelah  pencelupan  dalam  larutan  kitosan,  ikan ditiriskan.
Penjemuran Setelah Proses Pencelupan Kitosan
Ikan  kembung  setengah  kering  yang sudah  dicelupkan  larutan kitosan  dan  telah ditiriskan  lalu  dijemur  kembali  hingga  kering selama 8 jam.

## Pengemasan
Ikan  kembung  asin  kering  dikemas menggunakan plastik polyethylene dan diisolatip. Penyimpanan dilakukan pada suhu kamar.

## Uji Angka Lempeng Total (Total Plate Count)
Sebanyak  25  g  sampel  ikan  asin  kering ditimbang  dan  dihaluskan  menggunakan  batu penggiling.  Ikan  kembung  asin  yang  telah  halus dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  yang  berisi 225  ml  larutan akuades steril.  Menggunakan pipet  volume  steril  dipindahkan  1  ml  suspensi dari pengenceran 10 -1 dan dimasukkan  ke dalam tabung  reaksi  berisi 9  ml  akuades  steril untuk mendapatkan  pengenceran  10 -2 .  Selanjutnya diulangi dengan cara yang sama untuk mendapatkan  pengenceran  10 -3 ,  10 -4 ,  10 -5 ,  10 -6 dan  10 -7 .  Setelah  itu  diambil  sebanyak  1  ml sampel dari pengenceran 10 -6 dan 10 -7 , kemudian dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  steril  serta dilakukan  duplo.  Cawan  petri  yang  sudah  berisi larutan  sampel  ditambahkan  12 – 15  ml  media PCA  (Plate  Count  Agar)  dan  diinkubasi  pada suhu 37ºC selama 48 jam.

## Parameter Penelitian
Adapun  parameter  dari  penelitian  ini  adalah sebagai berikut :
1. Konsentrasi kitosan (0%, 1% dan 2%) 2. Lama penyimpanan (0, 2, 4 dan 8 minggu)

## Analisis Data
Data berupa konsentrasi kitosan, lama penyimpanan  serta  interaksi  antara keduanya diolah  dengan  Analisis  Varian  (ANAVA) menggunakan SPSS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian Angka  Lempeng  Total (Total  Plate Count)
Hasil  analisis  data  pada  Uji  ANAVA menunjukkan  bahwa  perlakuan  konsentrasi kitosan  tidak  berpengaruh  nyata  (p>0,05) terhadap  angka  lempeng  total,  sedangkan  lama penyimpanan berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap  angka  lempeng  total  ikan  kembung (Rastrelliger sp.) asin. Interaksi antara konsentrasi  kitosan  dan  lama  penyimpanan  juga berpengaruh  nyata  (p<0,05)  terhadap  perubahan angka lempeng total.
Tabel 1 Total nilai rata-rata angka lempeng total (Log
CFU/g)  menurut  perlakuan  konsentrasi kitosan No. Perlakuan X ± Sd 1. 2. 3. A0 A1 A2 11,99 a ± 3,01 11,20 a ± 3,94 10,03 a ± 5,90
Keterangan: Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang sama menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  pada  taraf  5%. A= Konsentrasi kitosan (0=0%, 1=1% dan 2=2%).
Tabel 1 menunjukkan perlakuan konsentrasi kitosan  (0%,  1%  dan  2%)    tidak  berbeda  nyata (p>0,05) terhadap angka lempeng total ikan kembung (Rastrelliger sp.)  asin.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  penggunaan  konsentrasi  kitosan  1%  dan  2% tidak menghasilkan angka lempeng total yang berbeda dibandingkan  perlakuan  kontrol  (0%),  namun demikian  semakin  tinggi konsentrasi  kitosan cenderung semakin rendah angka lempeng total.
Tidak  adanya  perbedaan  nyata  antara konsentrasi kitosan 1% dan 2% dengan kontrol (0%) diduga karena konsentrasi kitosan 2% belum optimal untuk  mengawetkan  ikan  kembung  asin.  Sehingga diperlukan  konsentrasi  yang  lebih  tinggi  untuk pengawetan  ikan  asin  ini.  Namun  demikian  pada perlakuan  konsentrasi  kitosan  0%  jumlah  angka lempeng  total  terhitung  masih  tinggi,  karena penggaraman dan pengeringan belum dapat menurunkan jumlah bakteri. Pada perlakuan konsentrasi  kitosan  1%  dan  2%  terjadi  penurunan jumlah bakteri, dikarenakan proses penggaraman dan pengeringan serta kitosan sebagai edible coating.
Menurut Sedjati dan Agustini (2007) kitosan dengan  konsentrasi  0,5%  sudah  bisa  menurunkan jumlah  bakteri.  Murtini  dan  Kusmarwati  (2006) melaporkan  konsentrasi  kitosan  0,50%  dan  0,75% mampu menurunkan jumlah bakteri pada cumi-cumi. Suptijah et al. (2008) menyatakan konsentrasi kitosan 1,5%  dapat  menurunkan  jumlah  bakteri  pada fillet ikan  patin.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  kitosan mempunyai  kemampuan  sebagai  antibakteri  dalam menghambat  pertumbuhan  mikroba.  Lapisan  tipis (edible  coating)  kitosan  yang  menutupi  seluruh permukaan ikan akan menghambat masuknya oksigen dan  air  melalui  permukaan  tubuh  ikan.  Sehingga mengakibatkan mikroba menjadi sulit untuk berkembang.  Kitosan  memiliki  gugus  amina  bebas (NH 2 ) yang pada saat dilarutkan dalam suasana asam
(asam  encer)  akan  terprotonasi  menjadi  gugu  amino kationik (NH 3 + ) (Sandford, 1989). Menurut Kong et.al
(2010)  gugus  amino  kationik  (NH 3 + )  yang  dimiliki kitosan  mampu  berkorelasi  erat  dengan  karakteristik permukaan  sel  mikroba  yang  bermuatan  negatif, sehingga  mengakibatkan  depolarisasi  membran seluler mikroba sebagai akibat terganggunya integritas dinding  sel  dari  hubungan  kedua  molekul  yang menyebabkan kematian bagi mikroba.
Tabel 2 Total  nilai  rata-rata  angka  lempeng  total
(Log  CFU/g)  menurut  perlakuan  lama penyimpanan No. Perlakuan X ± Sd 1.
2. 3. 4. B0 B2 B4 B8 10,70 b ± 4,54
13,07 bc ±1,28 14,62 c ± 2,40 5,91 a ± 2,80
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang berbeda menunjukkan berbeda nyata pada taraf 5%. B= Lama penyimpanan (0=0 minggu, 2=2minggu, 4=4minggu dan 8=8 minggu).
Tabel 2 menunjukkan  perlakuan lama  penyimpanan  (0,  2,  4  dan  8  minggu) berbeda  nyata  (p<0,05)  terhadap  angka lempeng  total  ikan  kembung  (Rastrelliger sp.)  asin.  Adanya  pengaruh  perlakuan  lama penyimpanan  terhadap  angka  lempeng  total menyebabkan  harus  dilakukan  uji  lanjutan (Uji Tukey).
Berdasarkan Uji Tukey, angka lempeng  total  pada  lama  penyimpanan  8 minggu  berbeda  nyata  (p<0,05)  dengan lama  penyimpanan  0,  2  dan  4  minggu. Namun  lama  penyimpanan  0  dan  2  minggu memiliki  angka  lempeng  total  yang  tidak berbeda  nyata.  Lama  penyimpanan  2  dan  4 minggu juga tidak berbeda nyata. Menurunnya nilai angka lempeng total pada minggu  ke-8  diduga  karena  pada  minggu ke-8  pertumbuhan  bakteri  memasuki  fase kematian.  Sedangkan  pada  minggu  ke-0 sampai minggu ke-4 merupakan fase pertumbuhan bakteri, sehingga terjadi peningkatan  nilai  angka  lempeng  total. Bakteri  yang  masih  dapat  bertahan  hidup akan tumbuh selama nutrisi yang dibutuhkan tersedia.
Menurut    Sedjati  dan  Agustini (2007)  pada  lama  penyimpanan  8  minggu masih  terjadi  fase  pertumbuhan  bakteri. Kadir (2004)  melaporkan  pada  minggu ke-2 bakteri pada ikan tongkol asap menunjukkan kecendrungan semakin bertambah  jumlahnya.  Mahatmanti et  al.
(2008)  menyatakan  pada  lama  penyimpanan 14  jam  jumlah  total  bakteri  pada  ikan  nila semakin meningkat.
Berdasarkan analisis data menggunakan  Uji  ANAVA  menunjukkan adanya  pengaruh  nyata  pada  perlakuan interaksi  konsentrasi  kitosan  dan  lama penyimpanan  terhadap  angka  lempeng  total ikan kembung asin. Sehingga perlu dilakukan  uji  lanjut  Duncan.  Berdasarkan uji  lanjut  Duncan  untuk  interaksi  perlakuan konsentrasi  kitosan  dan  lama  penyimpanan tidak  memperlihatkan  perbedaan  nyata  satu dengan yang lain (Tabel 6).
Tabel 6  Rata-rata  nilai  angka  lempeng  total  (Log CFU/g) dari interaksi perlakuan konsentrasi kitosan dan lama penyimpanan
A B Nilai angka lempeng total (Log CFU/g) interaksi A*B A 0 B 0 A 0 B 2 A 0 B 4 A 0 B 8 A 1 B 0 A 1 B 2 A 1 B 4 A 1 B 8 A 2 B 0 A 2 B 2 A 2 B 4 A 2 B 8 14,24 ef 12,05 def 13,01 def 8,66 bcd 10,51 cde
13,03 def 15,43 f 5,86 ab
7,34 abc 14,13 ef 15,44 f
3,21 a
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf 5%. A= Konsentrasi kitosan (0=0%, 1=1% dan  2=2%). B=  Lama  penyimpanan  (0=0minggu,  2=2minggu, 4=4minggu dan 8=8 minggu).

## KESIMPULAN
Perlakuan  konsentrasi  kitosan  tidak berpengaruh  nyata  (p>0,05)  terhadap  angka lempeng  total,  sedangkan lama  penyimpanan berpengaruh  nyata  (p<0,05)  terahadap  angka lempeng  total.  Interaksi  antara  konsentrasi  dan lama  penyimpanan  berpengaruh  nyata  (p<0,05) terhadap  angka  lempeng  total  ikan  kembung (Rastrelliger sp.) asin.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrianto, E., dan Liviawaty, E. 1989.
Pengawetan  dan  Pengolahan  Ikan. Kanisius, Yogyakarta.
Bahar,  B.  2006. Memilih  dan  Menangani Produk Perikanan.
Gramedia,
Jakarta.
Buletin  CP.  2006. Kitosan  Bahan  Pengawet Makanan  yang  Aman. We  serve  “A Tradition  Quality  Product ” .  Februari 2006: 6-7.
Burhanudin,  S.,  Martosuwejo,  M.A.,  dan
Hutomo, M. 1984. Sumber Daya Ikan
Kembung. Lembaga
Oseanologi
Nasional LIPI, Jakarta.
Ide,  P.  2007. Seri  Diet  Korektif.  Elex  Media
Komputindo, Jakarta.
Kaban,  J.  2009.  Modifikasi  Kimia  dari Kitosan  dan  Aplikasi  Produk  yang Dihasilkan.
Pidato Pengukuhan
Jabatan  Guru  Besar  Tetap  dalam Bidang Kimia Organik Sintesis pada
Fakultas Matematika
dan Ilmu
Pengetahuan  Alam. Sumatera Utara, Halaman: 2-12.
Kadir,  L.  2004.  Pengaruh  Suhu  dan  Lama Penyimpanan terhadap Jumlah Kandungan Bakteri  dan  Kualitas Fisik  Ikan  Tongkol  Asap  (Euthynnus afinis). Jurnal Bioteknologi Perikanan 6(2): 79-84. Kong, M., Chen, X. G., Xing, K., and Park, H. 2010. Antimicrobial Properties of Chitosan and Mode of Action: A State of The Art Review. International Journal of Food Microbiologi 144(1):
51-63.
Mahatmanti,  W.F.,  Sugiyo,  W.,  dan  Sunarto,
W. 2008. Sintesis Kitosan dan Pemanfaatannya Sebagai Anti Mikrobia  Ikan  Segar.  FMIPA  UNES, Semarang. Meriatna. 2008. Penggunaan Membran Kitosan  Untuk  Menurunkan  Kadar Logam Krom (Cr) dan Nikel (Ni) dalam Limbah Cair Industri Pelapisan Logam. Tesis.  USU, Medan. Murtini,  T.J.,  dan  Kusmawarti,  A.  2006. Pengaruh Perendaman Cumi-Cumi Segar  dalam  Larutan  Kitosan  terhadap Daya  Awetnya  Selama  Penyimpanan pada  Suhu  Kamar. Jurnal  Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 1(2): 160-161.
Prasetyaningrum, A., Rokhati, N. dan
Purwantisari, S. 2007. Optimasi Derajat
Deasetilasi  pada  Proses  Pembuatan Kitosan  dan  Pengaruhnya  Sebagai Pengawet  Pangan. Jurnal Riset  dan Iptek 1: 39-46. Putra, S. 2008. Inventarisasi Ikan Pelagis di TPI Lampulo  Kota  Banda  Aceh. Skripsi. Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh.
Rachmawati, E. 2006. Makan Sehat Hidup Sehat.
Gramedia, Jakarta.
Raharjo, S., dan Sanusi, H.S. 1982. Oseanografi
Perikanan. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat  Pendidikan Menengah Kejuruan. Ratnawati,  E.,  Sunarko.,  dan  Hartaman,  S. 2008. Penentuan  Kandungan  Logam dalam Ikan Kembung dengan
Metode  Analisis  Aktivitas  Neutron.
Buletin Pengelolaan Reaktor Nuklir, April 2008: 24-29. Saanin,  H.  1994. Taksonomi  dan  Kunci Identifikasi Ikan. Bina Cipta,
Bandung.
Sunamto,  I.T.  2009. Mikrobiologi  Esensial.
Ardy Agency, Jakarta.
Sanford,  S.A.,  Brine,  C.J.,  and  Zikakis,  J.P. 1989. Advances in Chitin and Chitosan. Elvesier Science Publisher, London and New York.
Sedjati,  S.  and  Agustini,  W.T.    2007.  The
Effect  of  Chitosan  Concentration  and
Storage  Time  on  The  Quality  of Salted-Dried Anchovy (Stolephorus heterolobus). Journal of Coasial Development 10(2): 63-71. Sherrington, K.B dan Gaman P.M. 1981. Ilmu Pangan, Pengantar Ilmu Pangan, Nutrisi, dan Mikrobiologi. Terjemahan dari The Science of Food, An Introduction  to  Food
Science,  Nutrition,  and  Microbiology, oleh Gardjito M, UGM, Yogyakarta.
Supardi,  I.  dan  Sukamto.  1999. Mikrobiologi
Pangan dalam Pengolahan dan Keamanan Pangan. Alumni, Bandung.
Suptijah,  P.,  Gushagia,  Y.  dan  Sukarsa,  R.D.
2008. Kajian  Efek  Daya  Hambat Kitosan  terhadap  Kemunduran  Mutu Fillet Ikan Patin (Pangasius hypopthalmus) pada
Penyimpanan Suhu  Ruang. Buletin  Teknologi  Hasil
Perikanan, Januari 2008: 98-99. Suseno,  S.H.  2006. Kitosan  Pengawet  Alami Alternatif Pengganti Formalin. Teknologi  untuk  Peningkatan  Daya Saing  Wilayah  Menuju  Kehidupan yang Lebih  Baik.  Jepara (1):  11 –
15.
Zen, M.,  Simbolon, D.,  Gaol,  J.L.,  dan Hartojo,  W.  2005. Pengkajian  Zona Potensial Penangkapan Ikan Kembung (Rastrelliger spp.) di Kabupaten Asahan. Sumatera Utara 1: 304.