Pengaruh stunting terhadap kondisi fisiologis benih ikan sidat, Anguilla bicolor bicolor McClelland, 1844
[The effect of stunting to physiological condition of freshwater eel seed, Anguilla bicolor bicolor McClelland, 1844]
Latifa Fekri 1  , Ridwan Affandi 2 , Tatag Budiardi 3
1 Program Studi Sumber Daya Perairan, Sekolah Pascasarjana IPB 2 Departemen Manajemen Sumber Daya Perairan, FPIK IPB
3 Departemen Budi Daya Perairan, FPIK IPB Jln Rasamala, Kampus IPB Dramaga, Bogor Surel: latifa_fekri@yahoo.com
Diterima: 15 April 2014; Disetujui: 27 Januari 2015

## Abstrak
Sidat adalah ikan ekonomis penting yang memiliki permintaan pasar yang terus meningkat dari tahun ke tahun. Namun, ketersediaan stok ikan sidat tidak berkelanjutan karena budi daya ikan ini masih bergantung kepada benih hasil tangka- pan  dari  alam.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  pengaruh stunting (penahanan  pertumbuhan)  terhadap  kondisi fisiologis benih ikan sidat ukuran 1-2 g dengan panjang tubuh 8-12 cm. Penelitian dilakukan dari bulan September 2013 hingga Februari 2014 di Laboratorium Fisiologi Hewan Air, FPIK IPB. Penelitian menggunakan rancangan acak leng- kap dengan tiga perlakuan lama stunting (30, 60 dan 90 hari) dan masing-masing dengan tiga ulangan. Ikan dipelihara dalam akuarium ukuran 60 x 40 x 30 cm 3 dengan padat tebar 30 ekor per akuarium dan diberi pakan komersial berupa pellet ukuran 1,5 mm dengan kadar protein 46%. Jumlah pakan yang diberi setiap hari sebanyak 3,3 % dari total bio- massa ikan. Ikan diberi pakan dua kali sehari secara kontinu selama 30, 60 dan 90 hari pemeliharaan. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa stunting selama  satu  bulan  merupakan  perlakuan  yang  terbaik  yang  ditunjukkan  dengan  dengan laju pertumbuhan spesifik benih ikan mendekati nol (0,1%), nilai koefisien keragaman bobot  <20% (19,90%) dan kon- disi fisiologis mendekati normal  (tidak berbeda jauh dengan kontrol), serta kelangsungan hidup 96%. Perlakuan lama stunting dua dan tiga bulan menunjukkan bahwa laju pertumbuhan spesifik sebesar 0,2%, nilai koefisien keragaman bo- bot  >25% (27,96% dan 30,37%) dan kondisi fisiologisnya jauh di atas batas normal benih ikan sidat, serta kelangsung- an hidup sebesar 89%.
Kata penting: benih ikan sidat, kebutuhan pakan, pertumbuhan, stunting

## Abstract
Eel is an economically important fish species and the demand for this species is increasing every year. However, stock availability not sustainable because the eel culture totally depends on the wild catches of glass eel (elver). The aim of this study was to examine the effect of stunting to the physiological condition of eel seeds with 1-2 g body weight and 8-12  mm  body  length.  The  research  was  conducted  from  September  2013  to  February  2014  at  the  Aquatic  Animal Physiology  Laboratory, Faculty  of Fisheries and Marine Science, Bogor Agricultural University.  The experiment was arranged in a completely randomized design with three treatments of stunting (i.e. 30, 60, and 90 days) and three repli- cations. Eel seeds were reared in aquarium 60 x 40 x 30 cm 3 with a density of 30 fish in each aquarium and fed with commercial pellets of 1.5 mm in size with 46 % protein content. The diets were fed to the fish at a daily rate of 3.3% of the total biomass. Fish were fed twice a day continuously for 30, 60 and 90 days of rearing process. The weight, proxi- mate test and blood analysis of each specimen were checked at the beginning of the experiment and in every 30 days. The results showed that the stunting for one month was the best treatment. In this treatment, the lowest specific growth rate was approaching 0 % (0.1%), coefficient of variation in body weight was < 20 % (19.90%), physiological condi- tions was normal (not different with control) and survival rate was above 96 %. The treatment of stunting for two and three months showed that the specific growth rate was 0.2 %, coefficient of variation in body weight was > 25% (27.96 % and 30.37 %), physiological conditions was over than the limit for normal conditions, and survival rate was 89% for both treatments.
Keywords: eel seed, feed requirement, growth, stunting

## Pendahuluan
Stunting adalah proses penahanan pertum- buhan bobot atau panjang ikan. Stunting pertama
kali  dikembangkan  di  Filipina  oleh  Bombeo- Tuburan  (1988)  yang  melakukan stunting pada ikan  bandeng  untuk  dapat  menyediakan pasokan
 Penulis korespondensi Alamat surel: latifa_fekri@yahoo.com
benih sepanjang tahun. Pada saat itu, bandeng se- bagai penyedia sumber protein yang murah di ne- gara-negara  Asia  Tenggara,  namun  budi  daya dan  produksi  ikan  bandeng  tersebut  terkendala terutama  oleh  pasokan  benih  yang  tidak  kontinu dan  bersifat  musiman,  serta  kurang  tersedianya pakan praktis. Pada saat tersebut dilakukan upaya menahan  pertumbuhan  berat  benih  bandeng  se- hingga  tetap  berada  pada  kisaran  ukuran  benih walaupun  telah  dipelihara  dalam  waktu  yang  la- ma (2-4 bulan) sehingga ketika dibutuhkan benih dikemudian hari, benih hasil stunting dapat digu- nakan.  Penahanan  pertumbuhan  benih  ikan  ban- deng  biasa  dilakukan  karena  masa  pertumbuhan somatik  ikan  bandeng  cukup  panjang  (pertum- buhan  gonadik  baru  dimulai  setelah    bandeng berumur  4-5  tahun).  Benih  hasil stunting dapat tumbuh normal ketika dipelihara dengan pembe- rian  pakan  yang  normal. Stunting hanya  dapat dilakukan  pada  ikan  yang  memiliki  umur  hidup yang  panjang,  misalnya  bandeng,  sidat,  dan  gu- rame.
Maraknya  kegiatan  budi  daya  terutama  di negara-negara  Asia  timur  (Jepang,  Taiwan,  dan Tiongkok) dan Eropa ( Italia dan Jerman) menga- kibatkan  eksploitasi  benih  di  alam  secara  besar- besaran, sehingga di negara-negara tersebut telah terjadi penurunan  stok. Sampai saat ini benih si- dat belum dapat dihasilkan dari kegiatan pembe- nihan.  Untuk  menjaga  kelestarian  sumber  daya sidat  maka  perlu  dilakukan  restoking.  Terdapat tiga  hal  yang  perlu  diperhatikan  dalam  keberha- silan  restoking yakni:  ukuran  yang  tepat  untuk ditebar,  waktu  penebaran,  dan  lokasi  penebaran. Glass eel (berat 0,12 – 0,18 g dengan panjang 6- 7  cm)  tidak  tepat  digunakan  untuk  restoking  ka- rena  kondisinya  masih  sangat  rentan  terhadap predator  dan  perubahan  lingkungan.  Ukuran  be- nih  sidat  yang  tepat  untuk  ditebar  adalah  benih yang  relatif  sudah  tahan  terhadap  fluktuasi  kon-
disi lingkungan dan  memiliki kemampuan tinggi untuk menghindar dari predator. Ukuran tersebut adalah  benih  yang  berbobot  1-2  g  dengan  pan- jang  10-12  cm.  Untuk  menjadi  benih  berukuran 1-2  g  dibutuhkan  waktu  2-3  bulan  masa  pemeli- haraan (Affandi 2005). Dengan demikian jika pe- nangkapan glass eel pada musim hujan dan dipe- lihara  selama  2-3  bulan  maka  benih  yang  beru- kuran  tersebut  bila  ditebar  langsung  di  lokasi yang  menjadi  sorotan  restoking  maka  kemung- kinan  waktunya  tidak  tepat  karena  mau  masuk atau sudah masuk musim kemarau.
Waktu  yang  tepat  untuk  penebaran  benih pada kegiatan restoking adalah musim hujan (sa- at  genangan  perairan  umum  daratan  tinggi)  se- hingga  ruang  gerak  luas  dan  ketersediaan  pakan alami terjamin. Untuk menunggu waktu penebar- an  yang  tepat,  benih  berukuran  1-2  g  perlu  di “ stunting ”  agar  pada  waktu  pemeliharaan  tidak banyak  menggunakan  tempat  dan  biaya.  Benih hasil stunting juga dapat digunakan untuk kegiat- an budi daya agar pembesaran benih dapat dipro- gramkan sepanjang tahun. Penelitian  ini bertuju- an  untuk  menganalisis  pengaruh  lama stunting terhadap kondisi fisiologis benih ikan sidat. Kon- disi  fisiologis  adalah  kondisi  ikan  yang  digam- barkan  oleh  parameter  pertumbuhan,  gambaran darah,  dan  komposisi  kimiawi  tubuh.  Parameter lain yang juga sering dipakai untuk menggambar- kan  kondisi  fisiologis  adalah  tingkat  konsumsi oksigen, gradien osmotik, dan aktivitas enzim.

## Bahan dan metode
Penelitian  dilaksanakan  dari  bulan  Sep- tember  2013  hingga  Februari  2014  di  Laborato- rium  Fisiologi  Hewan  Air,  Fakultas  Perikanan dan  Ilmu  Kelautan,  IPB.  Analisis  fisik-kimiawi air  dilaksanakan  di  Laboratorium  Lingkungan Akuakultur  FPIK  IPB.  Analisis  darah:  glukosa darah, hemoglobin, hematokrit, eritrosit dan leu-
kosit  dilaksanakan  di  Laboratorium  Fisiologi FKH IPB. Analisis proksimat: kadar air, protein, lemak,  karbohidrat  dan  abu  dilaksanakan  di  La- boratorium Sumberdaya Hayati dan Bioteknologi LPPM IPB.
Benih sidat yang digunakan pada peneliti- an  ini,  diperoleh  dari  hasil  tangkapan  alam  di Muara Sungai Cimandiri, Palabuhan Ratu, Suka- bumi. Ukuran benih glass eel yang diperoleh dari alam  berukuran  0,1-0,2  g  dan  dipelihara  selama 2-3  bulan  untuk  memperoleh  ukuran  1-2  g  se- hingga  dapat  digunakan  untuk  proses stunting . Pakan  yang  digunakan  adalah  pakan  kerapu (KRA).  Pakan  ikan  kerapu  berbentuk  pelet  yang memiliki kandungan protein tinggi dengan kadar protein 46%.

## Rancangan percobaan
Percobaan  menggunakan  rancangan  acak lengkap (RAL) dengan tiga perlakuan lama wak- tu stunting dan masing-masing perlakuan diulang tiga kali, yaitu:
 Perlakuan 1: Benih ikan sidat diberi pakan de- ngan  tingkat  pemberian  pakan maintenance
(3,3%  dari bobot  biomassa)  selama  satu  bulan masa pemeliharaan.
 Perlakuan 2: Benih ikan sidat diberi pakan de- ngan  tingkat  pemberian  pakan maintenance
(3,3%  dari  bobot  biomassa)  selama  dua  bulan masa pemeliharaan.
 Perlakuan 3: Benih ikan sidat diberi pakan de- ngan  tingkat  pemberian  pakan maintenance
(3,3%  dari  bobot  biomassa)  selama  tiga  bulan masa pemeliharaan.

## Prosedur percobaan
Akuarium  disiapkan  sebanyak  sembilan unit  lengkap  dengan  sistem  aerasi  dan  filterisasi internal.  Air  yang  digunakan  terlebih  dahulu  di- endapkan di dalam sebuah bak penampungan air
selama 2-3 hari dan diaerasi. Air dimasukkan  ke dalam akuarium ukuran 60x40x30 cm 3 sebanyak 2/3 volume air dari total volume akuarium/media pemeliharaan.  Benih  ikan  sidat  disiapkan  seba- nyak 270 ekor, dengan padat tebar 30 ekor/akua- rium.  Pakan  diberikan  dua  kali  sehari,  yakni  pu- kul  08.00  (¼  bagian  dan  pukul  16.00  ¾  bagian dari jumlah pakan harian). Jumlah pakan yang di- berikan per harinya sebesar 3,3 %. Pakan diberi- kan setiap hari secara kontinu tanpa jeda, kecuali pada  hari  pergantian  air  100  %.  Penyifonan  air dilakukan  setiap  pagi  hari  sebelum  pemberian pakan.  Penggantian  total  volume  air  dilakukan setiap  dua  minggu  sekali.  Untuk  menstabilkan suhu  di  dalam  aquarium  digunakan heater pada suhu optimum (29 0 C).

## Prosedur pengamatan
Pengamatan pada penelitian ini meliputi:
o Pengamatan  jumlah  ikan  yang  mati,  dilaku- kan setiap hari selama masa pemeliharaan se- suai dengan perlakuan.
o Penimbangan bobot tubuh seluruh benih ikan sidat  yang dipelihara dalam akuarium,  meng- gunakan  timbangan  digital  dengan  ketelitian 0,01 g.
o Pengukuran  gambaran  darah  menggunakan metode  GOD  –  PAP (Glucose  Oxidase  Phe- nol 4-Aminoantipirin (Sacks 1999)
o Pengukuran  komposisi  kimiawi  tubuh  benih ikan  sidat  menggunakan  metode Weende  Ex- periment Station (Murtidjo 2001)
Parameter  pengamatan  meliputi:  tingkat kelangsungan  hidup  (TKH),  laju  pertumbuhan spesifik  (LPS),  dan  koefisien  keragaman  bobot (KKB),  gambaran  darah  (glukosa  darah,  hemo- globin,  eritrosit,  leukosit,  dan  hematokrit)  dan komposisi  kimiawi  tubuh  (air,  protein,  lemak, karbohidrat dan abu).
Pengukuran karakter fisik-kimiawi air pa- da  penelitian  ini  meliputi  suhu,  oksigen  terlarut, pH  dilakukan  setiap  hari,  sedangkan  nitrit,  dan amonia  dilakukan  setiap  sebelum  penggantian total volume air (dua minggu sekali).
Tingkat kelangsungan hidup ikan dihitung dengan rumus Ricker (1979):
SR= tingkat kelangsungan hidup (%), No= jumlah ikan uji pada awal penelitian (ekor), Nt= jumlah ikan uji pada akhir penelitian (ekor).
Laju  pertumbuhan  spesifik  dengan  rumus Ricker (1979):
SGR=  laju  pertumbuhan  berat  sesifik  (%  per  hari),
=  bobot  rata-rata  pada  akhir  penelitian  (gram),
=  bobot  rata-rata  pada  awal  penelitian  (gram),  t 1 - t 0 = lama pemeliharaan (hari).
Koefisien  keragaman  bobot  dihitung  de- ngan rumus (Steel & Torrie 1981):
KK = (s/y) x 100
s=  simpangan baku, y= nilai rata-rata

## Prosedur kerja uji gambaran darah
1) Prosedur kerja pengambilan darah dan plasma darah: Terlebih dahulu tabung ependorf dibi- las  dengan  antikoagulan  agar  tidak  terjadi pembekuan darah dalam penyimpanan. Darah diambil  pada  bagian  belakang  sirip  anal  de- ngan memotong ujung ekor ikan. Darah yang menetes  dari  ujung  ekor  dimasukkan  ke  da- lam  ependorf,  lalu  disentrifus  sampai  homo- gen  dan  didiamkan  hingga  terbagi  menjadi dua lapisan cairan darah.
2) Pengukuran kadar glukosa darah: Reagen glu- kosa  sebanyak  1000  μl  tabung  reaksi  dima- sukkan  ke  dalam  mikrotube  2  ml  (2000  μl), lalu  ditambahkan  plasma  darah  yang  akan diuji  sebanyak  10  μl  dengan  menggunakan mikropipet,  kemudian  dibiarkan  selama  15
menit sambil diamati sampai terjadi perubah- an  warna  merah  muda  atau  jingga,  selanjut- nya dipindahkan kedalam cuvet kapasitas 1,5 ml  dan  dilakukan  pengukuran  dengan  spek- tropotometer  pada  panjang  gelombang  546 nm, yang secara otomatis dapat langsung ter- baca.  Sebagai  perhitungan  dibuatkan  larutan standar  dari  reagen  glukosa  1000  μl  ditam- bahkan 10 μl larutan standar. Guna memban- dingkan  larutan  warna  sampel  dan  larutan standar yang telah ditentukan, larutan standar dimasukkan  kedalam  spektrofotometer  untuk mengetahui  kadar  larutan  standar  pada  pan- jang gelombang yang sama. Setelah itu sudah dapat  dihitung  kadar  glukosa  darah,  dibaca de-ngan panjang gelombang 546 nm.
3) Pengukuran kadar hemoglobin: Darah dihisap menggunakan  pipet  Sahli  sampai  20  m 3 /0,2 ml.  Kemudian  pipet  dimasukkan  ke  dalam tabung Hb-meter yang telah diisi dengan HCl 0.1  N  sampai  mencapai  skala  10.  Diaduk  se- lama  3-5  menit  secara  perlahan  dan  ditam- bahkan  akuades  sedikit  demi  sedikit  sampai warna  larutan  sama  dengan  warna  larutan standar.  Kadar  hemoglobin  yang  diperoleh merupakan  skala  yang  ditunjukkan  oleh  Hb- meter.
4) Penghitungan  jumlah  eritrosit:  Darah  dihisap dengan  menggunakan  pipet  yang  berisi  bulir sampai skala 1, kemudian ditambahkan larut- an hayems sampai skala 101, serta diaduk se- lama  3-5  menit.  Setelah  itu,  darah  diteteskan pada  hemasitometer  (dua  tetesan  yang  perta- ma  dibuang)  dan  ditutup  dengan cover  glass untuk  diamati  dan  dihitung  jumlah  eritrosit- nya  di  bawah  mikroskop.  Cara  penghitungan adalah  lima  kotak  besar  pada  hemasitometer, jumlah eritrositnya dihitung menggunakan ru- mus:
SDM = Rataan sel terhitung x (1)/(volume kotak besar) x pengenceran
5) Penghitungan  jumlah  leukosit:  Darah  dihisap menggunakan  pipet  yang  berisi  bulir  sampai skala 0,5 kemudian ditambahkan larutan turks sampai skala 11, serta diaduk selama 3-5 me- nit. Setelah itu, darah diteteskan pada hemasi- tometer  (dua  tetesan  yang  pertama  dibuang) dan ditutup dengan cover glass untuk diamati dan  dihitung  jumlah  leukositnya  di   bawah mikroskop.  Cara  perhitungannya  adalah  ha- nya  25  kotak  kecil  yang  terdapat  pada  kotak besar  dihemasitometer,  jumlah  leukositnya dihitung menggunakan rumus :
SDP = Rataan sel terhitung x (1 )/(volume kotak kecil ) x pengenceran
6) Penentuan  nilai  hematokrit:  Salah  satu  ujung tabung  hematokrit  dicelupkan  kedalam  ta- bung  yang  berisi  darah  sehingga  darah  naik ke  tabung  hematokrit.  Setelah  itu,  ujung  ta- bung  ditutup  dengan  crystoseal  dengan  cara ujung tabung ditancapkan kedalam crystoseal sampai 1 mm, dan selanjutnya disentrifus de- ngan  kecepatan  3000  rpm  selama  5  menit. Bagian  yang  mengendap  dan  total  endapan dengan  cairan  diukur  dalam  100%  sebagai berikut:
Hematokrit = (bagian yang mengendap)/(bagian yang mengendap +cairan ) x 100 %

## Prosedur kerja uji komposisi kimiawi tubuh ikan
Pengukuran  komposisi  kimiawi  tubuh  to- tal benih ikan sidat dengan menggunakan seluruh tubuh ikan dari kepala hingga ekor yang dilumat- kan  dan  dianalisis  komposisi  kimiawi  tubuhnya yang meliputi: kadar air, protein, lemak, karbohi- drat dan abu.
1) Penentuan  kadar  air: Air  yang  terkandung  di dalam  tubuh  ikan  akan  menguap  seluruhnya apabila bahan tersebut dipanaskan selama be- berapa waktu pada suhu 105 0 C sampai 110 0 C
dengan tekanan udara bebas. Alat  yang digu- nakan adalah silica disk yang berfungsi seba- gai  tempat  sampel  yang  tidak  mudah  rusak karena  memiliki  titik  leleh  lebih  dari  1000 o C sehingga dapat digunakan dalam menentukan analisis  proksimat  dan  merusak  sampel  pada suhu yang tinggi, desikator yang berfungsi se- bagai penstabil suhu, dan silica gel berfungsi menyerap  air.  Alat  lain  yang  digunakan  ada- lah  oven  (105 0 C  sampai  110 0 C),  yang  ber- fungsi  untuk  menguapkan  seluruh  air  yang terdapat  dalam  sampel,  tang  penjepit  untuk mengeluarkan silica  disk dari  dalam  oven, dan timbangan analitik yang digunakan untuk menimbang sampel baik yang belum atau su- dah  dioven  ataupun  untuk  menimbang silica disk .  Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  maka kadar  air  dapat  dihitung  dengan  menjumlah bobot  gelas  timbang  dan  bobot  cuplikan  ke- mudian  dikurangi  bobot  gelas  timbang  dan cuplikan  setelah  dioven  105  sampai  110 o C, kemudian  dikali  100%  dan  dibagi  bobot  cu- plikan pakan. Sampel ikan ditimbang dan di- letakkan dalam cawan khusus dan dipanaskan dalam  oven  pada  temperatur  105 0 C.  Pema- nasan berjalan hingga sampel sudah tidak lagi turun  beratnya.  Setelah  pemanasan  tersebut sampel  ikan  disebut  “sampel  bahan  kering” dan pengurangannya dengan sampel ikan tadi disebut persen air atau kadar airnya.
2) Penentuan kadar protein kasar: Sampel diam- bil  sebanyak  2  gram  secara  acak.  Sampel  di- masukkan  dalam  gelas  percobaan  dan  ditam- bah  zat  katalis  (K 2 SO 4 )  30  cc,  lalu  dipanasi selama  2  jam  sampai  bewarna  hijau  muda. Sampel  didinginkan  dan  dipindah  ke  gelas volume  250  cc  dan  diberi  aquadest  50  ml, diambil  25  cc  dalam  gelas  penyulingan,  di- tambah dengan (NaOH) kadar 50% sebanyak 20  cc  dan  dicuci  dengan  aquadest.  Di  bawah
gelas  pembekuan  dipasang  gelas  segitiga yang  didalamnya  telah  diisi  dengan  0,1  N H 2 SO 4 sebanyak  20  cc  ditambah  dengan  in- dikator metil merah 2 tetes, lalu disuling sela- ma 10 menit sampai zat cair dalam gelas ber- tambah  2  kali  lipat,  selanjutnya  dititrasi  de- ngan  NaOH  0,1  N  dan  dihitung  zat  protein- nya.
3) Penentuan  kadar  lemak  kasar:  Kadar  lemak kasar  dapat  dihitung  dengan  menghitung  bo- bot  sampel  dan  kertas  saring  bebas  lemak setelah  oven  105°C  (sebelum  diekstraksi), kemudian  dikurangi  bobot  sampel  dan  kertas saring  bebas  lemak  setelah  oven  105°C  (se- telah diekstraksi) dan dikali 100% dan dibagi bobot sampel sebelum ditanur.
4) Penentuan  kadar  karbohidrat: Pengukuran karbohidrat  dilakukan  dengan  cara by  dif- ference , yaitu dihitung dengan rumus:
% Karbohidrat = 100% - (% air + % protein + % lemak + % abu
5) Penentuan kadar abu: Abu merupakan zat-zat mineral  sebagai  suatu  golongan  dalam  bahan makanan atau jaringan hewan, ditentukan de- ngan  membakar  zat-zat  organik  dan  kemudi- an  menimbang  sisanya.  Suatu  bahan  bila  di- bakar pada suhu 550 - 600 O C selama bebera- pa  waktu,  maka  semua  zat  organiknya  akan terbakar sempurna menghasilkan oksida yang menguap yaitu berupa CO 2 , H 2 O dan gas-gas lain; sedangkan yang tertinggal tidak mengu- ap  adalah  oksida  mineral  atau  yang  disebut abu.  Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  kadar abu dapat dihitung dengan menghitung bobot sampel  dan silica  disk setelah  ditanur  550  - 600 o C,  kemudian  dikurangi  bobot  silica  disk kosong sebelum ditanur dan dikali 100% dan dibagi bobot sampel sebelum ditanur.
Hasil perhitungan SR, SGR dan KK bobot dianalisis  dengan  analisis  ragam  (ANOVA)  de- ngan  tingkat  kepercayaan  95%.  Apabila  hasil
analisis memperlihatkan adanya perbedaan nyata, maka dilakukan uji lanjut Tukey pada taraf nyata 5%  (Steel  &  Torrie  1981)  untuk  menentukan tingkat  perbedaan  antar  perlakuan.  Glukosa  da- rah, gambaran darah, proksimat dan fisika-kimia air dianalisis secara deskriptif.

## Hasil
Dari  hasil  pengukuran  dan  pengamatan selama penelitian didapatkan tingkat kelangsung- an  hidup, laju pertumbuhan  spesifik dan koefisi- en keragaman bobot sebagaimana disajikan pada Tabel  1.  Nilai  SR  pada  semua  perlakuan  di  atas 80%, nilai SGR terbaik (mendekati 0) yaitu pada stunting satu bulan dengan nilai SGR 0,1% (men- dekati  0%).  Nilai  KK  terbaik  berada  pada stun- ting satu bulan dengan nilai <25% (19,90%).
Gambaran  darah  benih  ikan  sidat    pasca - stunting satu,  dua  dan  tiga  bulan  disajikan  pada Tabel 2. Glukosa darah mengalami fluktuasi. Ni- lai  glukosa  darah  sebelum  diberikan  perlakuan sebesar  15,4  mg  dL -1 .  Pada  perlakuan stunting selama satu bulan nilai glukosa darah turun men- jadi 10,9 mg dL -1 , kemudian meningkat pada per- lakuan  dua  dan  tiga  bulan stunting menjadi  77,5 dan  73,5  mg  dL -1 .  Nilai  glukosa  pada stunting satu  bulan  masih  berada  pada  kisaran  normal. Gambaran  darah  (hemoglobin,  eritrosit,  leukosit, dan hematokrit) pada semua perlakuan (satu, dua, dan tiga bulan) berada pada kisaran normal.
Hasil  pengukuran  proksimat  tubuh  benih ikan sidat pasca -stunting satu, dua dan tiga bulan disajikan  pada  Tabel  3.  Hasil  uji  statistik  secara umum  memperlihatkan  angka  yang  tidak  jauh berbeda antarperlakuan sebelum dan setelah per- lakuan stunting satu,  dua  dan  tiga  bulan.  Kadar protein  tertinggi  setelah  kadar  air.  Kadar  lemak di atas nilai karbohidrat, dan kadar abu memiliki nilai terendah.
Hasil  pengukuran  parameter  fisik–kimia- wi  air  selama  pemeliharaan  benih  ikan  sidat  de- ngan  lama  pemeliharaan  waktu  berbeda  (satu, dua, dan tiga bulan) disajikan pada Tabel 4. Nilai rata–rata parameter fisik-kimiawi air media sela- ma pemeliharaan pada perlakuan stunting dengan
waktu yang berbeda berada pada kisaran optimal bagi kelangsungan hidup dan pertumbuhan benih ikan  sidat.  Pakan  yang  diberikan  dalam  takaran terbatas,  sehingga  tidak  banyak  menghasilkan limbah khususnya nitrit dan amonia.
Tabel 1. Nilai kelangsungan hidup, laju pertumbuhan spesifik dan koefisien keragaman bobot benih ikan sidat selama pemeliharaan Parameter Perlakuan 1 bulan 2  bulan 3 bulan SR(%) 96,00 a ± 0,08 87,00 a ± 0,09 89,00 a ± 0,05 SGR (%) 0,1 a ± 0,09 0,2 a ± 0,13 0,2 a ± 0,01 KK (%) 19,90 a ± 0,50 27,96 ab ± 7,40 30,37 b ± 3,40 a Angka-angka pada baris yang sama yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji selang berganda Tukey).
Tabel 2. Gambaran darah benih ikan sidat selama pemeliharaan
Parameter Sebelum perlakuan Perlakuan (bulan) Kisaran normal Sumber 1 2 3 Glukosa darah (mg dL -1 ) 15,4 10,9 77,5 73,5 <26,23 Kubilay & Ulukoy 2002 Hb (g 100 mL -1 ) 4,2 5,2 9,4 7,2 3,45-13,65 Hall et al . 1929 in Setiawati et al . 2007 Eritrosit (juta sel mm -3 ) 2,0 2,0 2,9 2,4 1,05-3,00 Angel & David 1964 in Setiawati et al . 2007 Leukosit (ribu mm -3 ) 32,8 22,8 20,8 19,6 20-150 Affandi & Tang 2002 Hematokrit (%) 6,0 9,5 28,8 19,5 5-60 Snieszko et al . 1960
Tabel 3. Hasil pengukuran proksimat (%) tubuh benih ikan sidat selama pemeliharaan
Kandungan kimiawi tubuh  Sebelum perlakuan Perlakuan (bulan) 1 2 3 Air 81,70±2,12 a 75,.98±1,34 b 75,40±0,63 b 79,83±1,08 ab Protein 71,43±0,07 a 50,27±0,38 a 64,40±0,46 b 63,09±092 a Lemak 15,30±0,80 a 12,75±0,69 a 15,52±0,33 a 12,39±0,48 a Karbohidrat 6,85±1,33 a 27,67±0,48 ab 10,18±1,13 ab 17,30±1,76 b Abu 6,43±0,06 a 9,32±0,34 b 9,90±0,32 b 8,11±0,27 a a Angka-angka pada baris yang sama yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji selang berganda Tukey).
Tabel 4. Kisaran rata-rata parameter fisik–kimiawi air selama pemeliharaan
Parameter Perlakuan Kisaran optimum Pustaka 1 bulan 2 bulan 3 bulan Suhu ( 0 C) 29,0-29,4 29,0-30,0 29,0-29,5 29-32 Hasbullah 1996 Oksigen terlarut (mg L -1 ) 7,3-7,7 7,2-7,4 7,2-7,4 5-6 Affandi & Suhenda 2003 pH 8,0-8,3 7,9-8,2 7,7-8,2 6-8 Ritonga 2014 Amoniak (mg L -1 ) 0,022-0,043 0,014-0,064 0,012-0,053 < 0,1 Yamagata & Niwa 1982 Nitrit (mg L -1 ) 0,024-0,084 0,022-0,084 0,040-0,095 < 0,5 Knosche 1994

## Pembahasan
Masing-masing  perlakuan  menghasilkan tingkat  kelangsungan  hidup  di  atas  80%.  Hal  ini membuktikan bahwa pakan yang diberikan beru- pa  pelet  dengan  jumlah  pakan  harian  sebesar 3,3%  dari  bobot  biomassa  dengan  kadar  protein 46%  mampu  memberikan  energi  yang  dapat  di- manfaatkan oleh ikan sidat untuk aktivitas tubuh sehingga  ikan  dapat  melangsungkan  kehidupan- nya. Nilai tingkat kelangsungan hidup yang sama juga  didapatkan  oleh  Arief et  al. (2011)  yang menggunakan  pakan  dengan  kandungan  protein 42%.  Pemeliharaan  benih  dengan stunting yang baik  berada  pada  pemeliharaan  dengan  lama stunting 1  bulan  dengan  pertumbuhan  paling mendekati 0 (nilai laju pertumbuhan berat 0,1%). Hal  ini  diakibatkan  oleh  perlakuan stunting de- ngan  pembatasan  pemberian  pakan  sehingga memperlambat pertumbuhan benih.
Hasil  penelitian  memperlihatkan  bahwa nilai koefisien keragaman bobot tubuh benih ikan sidat  yang linear dengan lama stunting, semakin lama  masa stunting maka  nilai  koefisien  kera- gaman bobot tubuh benih ikan sidat semakin be- sar.  Hal  ini  diduga  terjadi  karena  adanya  persa- ingan  dalam  mendapatkan  pakan  oleh  benih  si- dat. Benih ikan sidat  yang  memiliki bobot tubuh yang  relatif  lebih  besar  cenderung  lebih  mampu dalam mendapatkan pakan lebih banyak sehingga benih  ukuran  ini  akan  tumbuh  lebih  cepat,  se- dangkan  benih  ikan  sidat  yang  memiliki  bobot yang  lebih  kecil  cenderung  lebih  lambat  dalam memanfaatkan makanan yang diberikan sehingga pertumbuhannya  pun lebih lambat. Nilai koefisi- en keragaman bobot yang baik adalah pada perla- kuan stunting satu  bulan  dengan  nilai  koefisien keragaman  <20%  (19,90%).  Hal  ini  diakibatkan karena  pada  awal  pemeliharaan  ukuran  benih yang  ditebar  seragam  sehingga  pada  proses  per- saingan  dalam  memperoleh  makanannya  masih
sangat kecil, sedangkan pada pemeliharaan 2 dan 3 bulan terlihat ukuran tubuh ikan sidat yang mu- lai beragam.
Berdasarkan  data  pada  Tabel  4,  tampak bahwa kadar glukosa darah pada akhir pemeliha- raan  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  glukosa darah  pada  awal  pemeliharaan.  Perlakuan stun- ting satu  bulan,  menunjukkan  penurunan  kadar glukosa  darah,  sedangkan  pada  perlakuan  dua dan  tiga  bulan stunting menunjukkan  peningkat- an nilai glukosa darah. Hal ini menunjukkan bah- wa stunting selama  satu  bulan  merupakan  lama stunting yang paling baik, hal ini dikarenakan la- ma stunting yang  diberikan  tidak  menyebabkan stres. Berbeda dengan perlakuan dua dan tiga bu- lan,  nilai  glukosa  darah  mengalami  peningkatan yang  cukup  tinggi,  ini  mengindikasikan  bahwa ikan mengalami stres. Evans & Claiborne (2006) menyatakan  bahwa  salah  satu  indikator  yang  se- ring terlihat dari efek metabolik akibat stres ada- lah meningkatnya kadar glukosa di dalam plasma darah.  Syawal  &  Ikhwan  (2011)  juga  menyata- kan  bahwa  respons  fisiologis  ikan  jambal  siam terlihat  mengalami  stres  yang  ditandai  dengan tingginya kadar glukosa dalam plasma darahnya.
Walaupun  ada  indikasi  stres  yang  dialami benih ikan sidat pada perlakuan dua dan tiga bu- lan,  namun  benih  masih  mampu  mempertahan- kan kelangsungan hidupnya dengan baik (SR>80%).  Hal  ini  juga  diperlihatkan  oleh  ada- nya adaptasi benih, yaitu adanya peningkatan ka- dar glukosa darah pada  masa stunting dua bulan, namun  pada  masa stunting tiga  bulan  mulai memperlihatkan  penurunan.  Apabila  level  stres sangat  tinggi,  dan  terjadi  peningkatan  glukosa darah  yang  cepat  dan  nilainya  bertahan  pada level  tinggi  maka  biasanya  akan  diikuti  dengan kematian (Brown 1993).
Hemoglobin adalah protein dalam eritrosit yang tersusun atas protein globin yang tidak ber-
warna dan pigmen heme dalam eritrosit. Siakpere (1985)  menyatakan  bahwa  secara  fisiologis,  he- moglobin  menentukan  tingkat  ketahanan  tubuh ikan  dikarenakan  hubungannya  yang  sangat  erat dengan daya ikat oksigen oleh darah. Kemampu- an  darah  untuk  mengangkut  oksigen  bergantung pada  Hb  dalam  darah  (Lagler et  al .  1977).  Well et al . (2005) menyatakan bahwa 1 g 100 mL -1 he- moglobin dapat mengikat kira-kira 1,34 ml oksi- gen. Hasil analisis hemoglobin ikan sidat selama pemeliharaan  menunjukkan  bahwa  hemoglobin mengalami peningkatan dan tertinggi pada perla- kuan stunting selama  dua  bulan,  namun  pening- katan  hemoglobin  pascaperlakuan stunting satu, dua dan tiga bulan masih berada pada batas nor- mal  (5,2;  9,4;  dan  7,2  g  100  mL -1 ).  Hall et  al .
(1929) in Setiawati et  al .  (2007)  menyatakan bahwa  hemoglobin  benih  ikan  berkisar  3,45- 13,65  g  100  mL -1 .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa perlakuan  pembatasan  persentase  pakan  pada waktu satu, dua dan tiga bulan tidak berpengaruh nyata  terhadap  kadar  hemoglobin  dalam  darah ikan.
Pemeriksaan total eritrosit bertujuan untuk mengetahui  status  kesehatan  ikan.  Rendahnya jumlah eritrosit menandakan ikan menderita ane- mia dan kerusakan organ ginjal, sedangkan ting- ginya  jumlah  eritrosit  menandakan  ikan  dalam keadaan stres (Wedemeyer & Yasutake 1977 dan Nabib & Pasaribu 1989). Eritrosit terbentuk di ja- ringan  hematopoetik  ginjal  dan  pada  ikan  meru- pakan  sel  yang  terbanyak.  Hasil  pengukuran  ka- dar eritrosit pada ketiga perlakuan, menunjukkan bahwa  jumlah  eritrosit  pasca- stunting cenderung meningkat namun peningkatan nilai eritrosit pas- ca- stunting masih  berada  pada  batas  normal  eri- trosit  ikan  (2,0;  2,9;  dan  2,4 juta  sel  mm -3 ).  Me- nurut  Lagler et  al .  (1977),  nilai  normal  eritrosit pada ikan adalah 1,05-3,00 juta sel mm -3 .
Menurut Paulo et al. (2009), leukosit akan meningkat jumlahnya seiring dengan meningkat- nya  infeksi  yang  disebabkan  oleh  virus,  bakteri, fungi  maupun  akibat  memburuknya  kualitas  air. Leukosit  memiliki  jumlah  yang  lebih  sedikit  di- bandingkan  dengan  eritrosit.  Leukosit  tidak  ber- warna,  jumlahnya  setiap  mm 3 berkisar  20.000- 150.000  butir  (Affandi  &  Tang  2002).  Faktor- faktor yang memengaruhi jumlah leukosit adalah kondisi  dan  kesehatan  tubuh  ikan  (Noercholis et al .  2013).  Hasil  pengukuran  leukosit  pasca- stunting satu,  dua  dan  tiga  bulan  masih  berada pada  pada  kisaran  normal  jumlah  leukosit  ikan (19,6-22,8  ribu  mm -3 ).  Jumlah  leukosit  setelah perlakuan  mengalami  penurunan  dari  jumlah leukosit sebelum perlakuan.  Menurunnya jumlah leukosit  dapat  mengakibatkan  tubuh  tidak  terlin- dungi  terhadap  infeksi  kuman  penyakit.  Hal  ini dikarenakan  fungsi  leukosit  adalah  membunuh kuman  penyakit  dalam  tubuh  dan  membentuk antibodi tubuh.
Meningkatnya  kadar  hematokrit  dan  eri- trosit  menunjukkan  bahwa  ikan  dalam  keadaan stres (Klontz in Johnny et al . 2003). Hasil peng- ukuran  kadar  hematokrit  dari  ketiga  perlakuan, terlihat  bahwa  nilai  hematokrit  pasca- stunting cenderung  meningkat  namun  peningkatan  nilai hematokrit  pasca- stunting masih  berada  pada batas  normal  hematokrit  ikan  (9,5;  28,8;  dan 19,5%).  Menurut  Snieszko et  al .  (1960),  nilai normal  hematokrit  pada  benih  ikan  adalah  5- 60%.
Pakan yang digunakan adalah pelet kering berukuran  1,5  mm  yang  bersifat  tenggelam  de- ngan  kandungan  protein  yang  tinggi  sebesar 46%.  Pakan  yang  diberikan  berdasarkan  kebu- tuhan  protein  sidat  adalah  40-50%  dari  asupan pakan  yang diberikan (Rovara 2007). Pemberian pakan  dengan  kandungan  protein  yang  tinggi memberikan  pertumbuhan  yang  baik  bagi  ke-
langsungan hidup benih ikan sidat bila diberikan dengan  takaran  optimal  yang  dibutuhkan  bagi kelangsungan  hidup  benih  sidat,  namun  dengan adanya  perlakuan stunting dengan  pemberian pakan maintenance mengakibatkan pertumbuhan yang lambat (mendekati nol).
Hasil  analisis  proksimat  tubuh  benih  ikan sidat  pasca- stunting memperlihatkan  adanya  pe- nurunan  kadar  protein  dan  lemak.  Hal  ini  dise- babkan  adanya  pemanfaatan  protein  dan  lemak tubuh  untuk  menutupi  kebutuhan  energi  akibat adanya pembatasan pakan yang diberikan selama pemeliharaan.  Sebaliknya,  kadar  abu  dan  karbo- hidrat tubuh pasca- stunting mengalami kenaikan, hal  ini  akibat  adanya  penurunan  komponen  pro- tein dan lemak pada saat kandungan kadar air tu- buh  benih  ikan  sidat  pasca- stunting relatif  tetap selama pemeliharaan.
Kualitas air yang baik dalam media peme- liharaan  merupakan  faktor  yang  sangat  mendu- kung kelangsungan hidup dan  pertumbuhan ikan sidat. Selama penelitian  suhu  media antara 29,0- 30,0 0 C,  pH  7,7-8,3  dan  oksigen  terlarut  7,2-7,7 mg  L -1 .  Kondisi  ini  sangat  optimum  untuk  budi daya ikan. Nilai amonia semakin meningkat seja- lan  dengan  lamanya  perlakuan stunting ,  namun masih  berada  pada  batas  yang  dapat  ditolerir. Adanya  kecenderungan  meningkatnya  kadar amonia  dalam  media  pemeliharaan  dengan  masa stunting yang lebih lama menunjukkan bahwa se- makin lama masa stunting, kekurangan energi se- makin  besar  sehingga  ikan  memanfaatkan  pro- tein tubuh yang lebih besar untuk sumber energi- nya.  Pada  Tabel  3  terlihat  bahwa  kadar  protein tubuh  semakin  lama  semakin  berkurang  dengan lamanya  masa stunting .  Semakin  berkurang  ka- dar protein tubuh berarti semakin banyak protein tubuh  yang  dikatabolisir  untuk  menghasilkan energi, dan berakibat kadar amonia media cende- rung meningkat (Tabel 4). Hal ini mengacu pada
Effendie  (2007)  bahwa  kebutuhan  akan  protein dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  seperti  ukuran ikan, suhu air, tingkat pemberian pakan, keterse- diaan dan kualitas pakan, energi yang dikandung dalam pakan dan  kualitas proteinnya.  Secara  ke- seluruhan  data  fisik-kimiawi  air  pada  media  pe- meliharan  dengan  perlakuan stunting ini  masih berada  pada  nilai  kisaran  optimal  bagi  kelang- sungan hidup dan pertumbuhan benih ikan sidat, hal ini sesuai referensi fisik-kimiawi air optimum bagi benih ikan sidat (Tabel 4).

## Simpulan
Masa stunting lebih  dari  satu  bulan  telah menurunkan kondisi fisiologis (kadar glukosa da- rah, kadar hemoglobin, dan lain-lain), namun de- mikian  benih  ikan  sidat  dapat  di stunting hingga tiga  bulan  dengan  tingkat  kelangsungan  hidup yang masih tinggi (87%).

## Daftar pustaka
Affandi  R,  Suhenda  N.  2003.  Teknik  budi  daya ikan  sidat (Anguilla  bicolor).  Prosiding Sumberdaya  Perikanan  Sidat  Tropik . UPT  Baruna  Jaya.  BPPT-DKP.  Jakarta. pp 47-54.
Affandi  R,  Tang  UM.  2002. Fisiologi  Hewan Air. Riau: Unri Press. Pekanbaru. 213 p.
Affandi  R.  2005.  Strategi  pemanfaatan  sumber daya  ikan  sidat, Anguilla spp.  di  Indone- sia. Jurnal  lktiologi  Indonesia. 5(2):  77- 81.
Arief M, Kukuh DP, Cahyoko Y. 2011. Effect of artificial  feed,  natural  feed  and  combina- tion  between  them  to  growth  rate,  food convertion ratio and survival rate of indo- nesian  shortfin  eel  ( Anguilla  bicolor ). Jurnal  Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan , 3(1): 61-65.
Bombeo-Tuburan  I.  1988.  The  effect  of  stunting on  growth,  survival  and  production  of milkfish  ( Chanos  chanos Forsskal). Aqu- culture 75(1): 97-104.
Brown  JA.  1993.  Endocrine  responses  to  envi- ronmental  pollutions. In Rankin  JF  & Jemsen  FB  (Eds .).  Fish  Ecophysiology . Chapman & Hall, London. pp: 276-292
Effendie MI. 2007. Biologi Perikanan . Yayasan Pustaka Nusatama. Yogyakarta.
Evans  DH,  Claiborne  JB.  2006. The  Physiology of Fishes. Third Edition. Taylor and Fran- cis, CRC Press, 601 pp
Hasbullah. 1996. Pengaruh tingkat salinitas (0, 3, 6 dan 9‰) dan suhu (23, 26, 29 dan 32 0 C) terhadap kelangsungan hidup dan pertum- buhan  benih  ikan  sidat  ( Anguilla  bicolor McClelland) pada masa pemeliharaan 0-2 minggu  setelah  penangkapan  dari  alam. Skripsi . Institut Pertanian Bogor.
Johnny  F,  Zafran,  Rosa  D,  Mahardika  K.  2003.
Hermatologis  beberapa  spesies  ikan  laut budi  daya. Jurnal  Penelitian  Perikanan Indonesia , 9(4): 34-38
Knosche  R.  1994.  An  effective  biofilter  type  for eel  culture  in  resirculation  system. Aqua- culture Engineering , 13(1): 71-82
Kubilay A, Ulukoy G. 2002. The effects of acute stress  on  rainbow  trout  ( Oncorhynchus mykiss ). Turkish Journal  of   Zoology . 26(2): 249–254.
Lagler  KF,  Bardach  JE,  Miller  RR,  Passino DRM. 1977. Ichthyology . John Wiley and Sonc Inc. New York, 506 p.
Murtidjo  BA.  2001. Pedoman  Meramu  Pakan Ikan . Kanisius. Yogyakarta. 128 hlm.
Nabib  R,  Pasaribu  FH.  1989. Patologi  dan  Pe- nyakit  Ikan .  Departemen  Pendidikan  dan Kebudayaan. Direktorat Jendral Pendidik- an  Tinggi.  Pusat  Antar  Universitas  Bio- teknologi, Institut Pertanian Bogor.
Noercholis  A,  Aziz  M,  Muslim,  Maftuch.  2013. Ekstraksi  fitur  roundness  untuk  menghi- tung jumlah leukosit dalam citra sel darah ikan. Jurnal  Universitas  Brawijaya 7(1): 35-40.
Paulo  CFC,  Pedro  HSK,  Elaine  A,  Correia  S, Bernardo  B.  2009.  Transport  of  jundia ( Rhamdia  quelen) juveniles  at  different loading densities: Water quality and blood parameters. Neotropical Ichthyology , 7(2): 283-288.
Ricker  WE.  1979.  Growth  rates  and  models. In :
Hoar WS, Randall DJ, Brett JR (Editors).
Fish Physiology vol. 8. Bioenergetics and
Growth. Academic  Press.  New  York.  pp. 677-743.
Ritonga  T.  2014.  Respon  benih  ikan  sidat ( Anguilla  bicolor  bicolor )  terhadap  dera-
jat  keasaman  (pH). Skripsi .  Departemen Manajemen  Sumber  Daya  Perairan,  Fa- kultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  IPB.
Bogor.
Rovara O. 2007.  Karakteristik reproduksi, upaya maskulinisasi dan pematangan gonad ikan sidat  betina (Anguilla  bicolor  bicolor) melalui  penyuntikan  ekstrak  hepofisis Disertasi . IPB. Bogor.
Sacks  DB.  1999. Carbohydrates. In :  Burtis  CA, Ashwood  ER,  Bruns  DE  (editors). Tietz textbook  of  clinical  chemistry  and  mole- cular  diagnostics. 4th  ed.  Elsevier  Saun- ders. St Louis. pp. 837–901.
Setiawati  M,  Mokoginta  I,  Suprayudi  MA,  Ma- nalu W. 2007. Pengaruh penambahan mi- neral  Fe  pada  pakan  ikan  terhadap  status kesehatan ikan kerapu bebek. Jurnal Per- ikanan dan Kelautan , 12(1): 55-63.
Siakpere  OK.  1985.  Haematological  characteris- tics  of Clarias  isheriensis Sydenham. Journal of Fish Biology , 27(3): 259-263. Sniezko SF. 1960. Microhematocrite as a Tool in Fishery  Research  and  Management. US. Wildlife  Service ,  Special  Scientific.  Re- port-Fisheries 341:15.
Steel  GD,  Torrie  JH.  1981. Prinsip-prinsip  dan prosedur statistika . Terjemahan Bambang Sumantri.  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama. Jakarta. 747 p.
Syawal  H,  Ikhwan  YS.  2011.  Respon  fisiologis ikan jambal siam ( Pangasius hypopthala- mus ) pada suhu pemeliharaan yang berbe- da. Berkala  Perikanan  Terubuk. 39(1): 51-57.
Wedemeyer  GA,  Yasutake  WT.  1977.  Clinical methods  for  assessment  of  the  effect  of environmental stress on fish health. Tech- nical  Paper  of  the  U.S.  Fish  and  Wildlife Service.  Vol.  89.  U.S.  Department  of  the Interior  Fish  and  Wildlife  Service,
Washington, D.C., USA. 18 pp.
Well  RMG,  Baldwin  J,  Seymour  RS,  Christian K,  Britain  T.  2005.  Blood  cell  function and haematology in two tropical freshwa- ter  fishes  from  Australia. Comparative Biochemistry and Physiology , 141(1): 87- 93.
Yamagata  Y,  Niwa  M.  1982.  Acute  and  chronic toxicity  of  amonia  to  eel ( Anguilla  japo- nica ). Bulletin  of  the  Japanese  Society  of Scientific Fisheries , 48(2): 171-176.