Jurnal Perikanan dan Kelautan
Volume 8 Nomor 2. Desember 2018
Halaman:  104 – 113
Evaluasi Fermentasi Daun Kelor ( Moringa oleifera ) sebagai Bahan Baku Pakan Ikan Nila ( Oreochromis niloticus )
(Evaluation of Fermentation on Moringa Leaves (Moringa oleifera) as Raw Material on Tilapia (Oreochromis niloticus) Feed)
1*) Achmad Noerkhaerin Putra, 1) Citra Widia Ningsih, 1) Fitriana Sari Nurani,
1) Mustahal , 1) Forcep Rio Indaryanto
1) Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Jl. Raya Jakarta Km. 04, Pakupatan, Serang, Banten 42121
*) Korespondensi: putra.achmadnp@untirta.ac.id
Diterima : 29 November 2018 / Disetujui : 23 Februari 2019

## ABSTRAK
Daun kelor adalah sumber daya yang potensial digunakan sebagai bahan pakan ikan nila dengan  kandungan  protein  yang  tinggi  sebesar  25%.  Namun,  penggunaan  daun  kelor sebagai bahan baku pakan dibatasi oleh kandungan serat yang tinggi dan adanya zat anti nutrisi.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengevaluasi  fermentasi  daun  kelor  ( Moringa oleifera ) sebagai bahan baku pakan pada ikan nila ( Oreochromis niloticus ). Penelitian ini dilaksanakan  selama  8  bulan,  bertempat  di  Laboratorium  Budidaya  Perikanan,  Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa. Penelitian terdiri dari 4 perlakuan pakan dengan fermentasi yang berbeda yakni: pakan A: 70% pakan acuan + 30%  tepung  daun  kelor  (TDK),  pakan  B:  70%  pakan  acuan  +  30%  TDK  dengan fermentasi menggunakan Rhizopus oligosporus , pakan C: 70% pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi menggunakan Saccharomyces cereviceae , pakan D: 70% pakan acuan +  30%  TDK  dengan  fermentasi  menggunakan Aspergillus  niger .  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  fermentasi  daun  kelor  menggunakan A.  niger menghasikan pertumbuhan terbaik pada ikan nila dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Fermentasi dengan Aspergillus  niger dan Rhizopus  oligosporus pada  daun  kelor  menghasilkan  nilai kecernaan  nutrien terbaik  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain.  Fermentasi  dengan A.  niger , S.  cereviceae dan R.  oligosporus tidak  berpengaruh  pada  proses fisologis  ikan nila,  hal  ini  ditunjukkan  dengan  nilai  parameter  gambaran  darah  yang  berada  dalam kisaran  normal.  Daun  kelor  yang  terfermentasi A.  niger dapat  digunakan  sebagai  bahan baku pakan ikan nila.
Kata kunci : daun kelor, fermentasi, ikan nila, pakan

## ABSTRACT
Moringa  leaves  is  a  potential  ingredient  for  raw  material  of  tilapia  feed,  which  a  high protein  content  of  25%.  However,  moringa  leaves  has  a  high  fibre  and  antinutritional factors.  The  aims  of  this  study  was  to  evaluate  the  fermentation  of  Moringa  leaves (Moringa oleifera) as a raw material feed on tilapia (Oreochromis niloticus). This study was conducted for eight months at Laboratory of Aquaculture, Department of Fisheries, Faculty  of  Agriculture,  University  of  Sultan  Ageng  Tirtayasa.  The  study  consisted  of  4 treatments  of  feed  with  different  fermentations,  namely:  A:  reference  feed  70%  + Moringa leaves meal 30%, B: reference feed 70%+fermented Moringa leaves meal with
Rhizopus oligosporus 30%, C: reference feed 70%+fermented Moringa leaves meal with Saccharomyces  cereviceae  30%,  and  feed  D:  reference  feed  70%+fermented  Moringa leaves  meal  with  Aspergillus  niger  30%.  The  results  showed  that  feed  with  Moringa leaves  fermentation  using  A.  niger  resulted  in  the  best  growth  on  tilapia  compared  to other  treatments.  Fermentation  with  A.  niger  and  R.  oligosporus  on  Moringa  leaves produced  the  best  nutrient  digestibility  value  compared  to  other  treatments.  Moringa leaves  fermented  with  A.  niger,  S.  cerevisiae  and  R.  oligosporus  had  no  effect  on physiological  processes  on  tilapia,  as  shown  by  hematological  parameter  values  that were  within  the  normal range. Moringa leaves fermented  with  Aspergillus  niger  can  be used as a raw material for tilapia feed.
Keywords : Fermented, feed, moringa leaves tilapia.

## PENDAHULUAN
Pakan yang mengandung nilai gizi yang baik akan membantu pertumbuhan yang optimal pada ikan. Kebutuhan protein bagi ikan dapat diperoleh dari bahan tumbuhan/nabati  maupun  hewan/hewani  (Chowdhury  2011).  Faktor  pakan menentukan  biaya  produksi  mencapai  60–70%  dalam  usaha  budidaya  ikan sehingga perlu pengelolaan yang efektif dan efisien. Salah satu bahan nabati yang dapat  digunakan  sebagai  sumber  protein  adalah  daun  kelor  ( Moringa  oleifera ). Hal  ini  karena  kandungan  zat  gizi  tepung  daun  kelor  yang  tinggi,  yaitu  sebesar 25% (Richter et al . 2003).
Daun  kelor  juga  memiliki  zat  anti-nutrisi  seperti  tannin,  saponin,  asam phitat  dan  total  phenol.  Zat  anti-nutrisi  merupakan  inhibitor  yang  dapat mengganggu  pertumbuhan  (Sitompul  2004).  Zat  anti-nutrisi  yang  terkandung  di dalam  daun  kelor  adalah  senyawa  yang  sangat  kompleks  sehingga  sulit  dicerna oleh ikan (Richter et al . 2003). Perlu adanya teknik khusus agar zat tersebut dapat dicerna dengan baik oleh ikan. Salah satu teknik yang digunakan untuk mengubah zat  anti-nutrisi  menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana  adalah  dengan  teknik fermentasi.  Proses  fermentasi  terhadap  bahan  pangan  menghasilkan  beberapa keuntungan  diantaranya  meningkatkan  mutu  bahan  pangan  tersebut  baik  dari aspek gizi maupun daya cernanya, selain itu juga meningkatkan daya simpannya (Buckle et  al .  2013).  Karakteristik  darah  dapat  digunakan  untuk  mengevaluasi respon  fisiologi  pada  ikan  (Rachmawati et  al .  2010).  Penerapan  teknik haemotologi  yang  meliputi  pengukuran  kadar  haemoglobin,  hematokrtit,  jumlah eritrosit  dan  leukosit  yang  menginformasikan  tentang  gambaran  darah,  penting dalam  menilai  kesehatan  ikan  dan  memantau  tentang  kondisi  stress  pada  ikan yang dipelihara (Blaxhall dan Daisley 1973).
Ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus )  merupakan  jenis  ikan  yang  mempunyai nilai  ekonomis  tinggi  sebagai  ikan  konsumsi  dan  merupakan  komoditas  penting dalam bisnis ikan air tawar di dunia (Afebrata et al. 2014). Peningkatan produksi ikan  nila  membutuhan  pakan  yang  semakin  meningkat.  Pengembangan  usaha budidaya  ikan  nila  saat  ini  masih  terdapat  beberapa  masalah  di  lapangan.  Salah satu  permasalahan  yang  dihadapi  dalam  kegiatan  budidaya  ikan  nila  yaitu  harga pakan yang tinggi. Penggunaan tepung dari daun kelor yang difermentasi sebagai bahan  baku  dalam  pembuatan  pakan  diharapkan  dapat  meningkatkan  kecernaan pakan pada ikan nila dan tidak berdampak pada proses fisiologis dari tubuh ikan.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengevaluasi  fermentasi  daun  kelor  ( Moringa oleifera ) sebagai bahan baku pakan pada ikan nila ( Oreochromis niloticus ).

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  dilaksanakan  selama  12  bulan,  bertempat  di  Laboratorium Budidaya  Perikanan,  Jurusan  Perikanan,  Fakultas  Pertanian  UNTIRTA.  Analisa dilakukan di Laboratorium Nutrisi Ikan Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB.

## Fermentasi Tepung Daun Kelor
Daun  kelor  yang  sudah  didapat  dipisahkan  dari  tangkainya  kemudian dikeringkan  dan  digiling  hingga  menjadi  tepung.  Fermentasi  tepung  daun  kelor menggunakan empat jenis perlakuan  yaitu kontrol, penggunaan kapang Rhizopus oligosporus , Saccharomyces  cereviceae ,  dan  kapang Aspergillus  niger .  Tepung daun  kelor  dikukus  selama  ±  15  menit  kemudian  ditiriskan,  kemudian  kapang ditebar pada tepung daun kelor dengan dosis 0,1 g/kg dan fermentasi berlangsung selama ± 2 pada suhu kamar.

## Pakan Uji
Komposisi pakan uji yang digunakan mengacu pada Takeuchi (1988), yaitu 70% pakan komersial sebagai pakan acuan diformulasikan dengan 30% bahan uji. Pakan acuan dihaluskan terlebih dahulu kemudian dicampurkan dengan bahan uji yang sudah difermentasi dengan menggunakan R. oligosporus , S . cereviceae , dan A. niger .  Cromium  oxidase  (Cr 2 O 3 )  sebanyak  0,5%  digunakan  sebagai  indikator kecernaan  sedangkan  untuk binder digunakan  tepung  tapioka  sebanyak  3%. Penelitian  ini  terdiri  dari  4  perlakuan  komposisi  pakan  dengan  3  kali  ulangan. Komposisi pakan uji dalam penelitian ini tersaji pada Tabel 1.
Tabel 1. Komposisi pakan uji pada pemeliharaan ikan nila
Ingredients Perlakuan (%) Pakan A Pakan B Pakan C Pakan D Pakan Komersial 67,55 67,55 67,55 67,55 Tepung Daun Kelor (A) 28, 95 - - - Tepung Daun Kelor (B) - 28, 95 - - Tepung Daun Kelor (C) - - 28, 95 - Tepung Daun Kelor (D) - - - 28, 95 Tepung Tapioka 3 3 3 3 Cr 2 O 3 0,5 0,5 0,5 0,5 Total 100 100 100 100 Protein 25,36±0,01 25,29±0,01  24,21±0,01  29,21±0,01 Lemak 6,07±0,01 6,15±0,01 6,14±0,01 6,12±0,01 Serat kasar 7,93±0,02 6,10±0,01 6,14±0,01 6,11±0,01 BETN 40,15±0,00 43,09±0,01  43,25±0,03  38,98±0,01 Keterangan: A: 70% Pakan acuan + 30% tepung daun kelor (TDK) B: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi R. oligosporus
C: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi S. cereviceae
D: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi A. niger

## Pemeliharaan ikan dan pengumpulan data
Ikan  nila  yang  digunakan  adalah  ikan  nila  monosek  jantan  dengan  bobot rata-rata  3,53  ±  0,05  g  dan  kepadatan  15  ekor/akuarium.  Akuarium  yang digunakan berukuran 50 x 40 x 30 cm, sebanyak 12 buah dan disusun secara acak. Ikan uji terlebih dahulu diaklimatisasi terhadap lingkungan selama 7 hari. Setelah masa  aklimatisasi  selesai,  ikan  uji  dipuasakan  selama  24  jam  dengan  tujuan menghilangkan  sisa  pakan  dalam  tubuh.  Pemeliharaan  ikan  dilakukan  selama  30 hari dengan menggunakan sistem resirkulasi. Pemberian pakan dilakukan tiga kali dalam  sehari  secara at  satiation atau  sekenyangnya  dan  pengumpulan  feces dilakukan  pada  hari  ke-5  setelah  pemeliharaan.  Untuk  menjaga  kualitas  air, akuarium  disifon  dan  dilakukan  pergantian  air  sebanyak  30%  dari  total  volume akuarium. Feses  yang telah terkumpul kemudian dikeringkan menggunakan oven bersuhu  110  °C  selama  empat  sampai  enam  jam.  Selanjutnya  dilakukan  analisis kandungan  Cr 2 O 3 dan  energi  pada  feses  yang  sudah  dikeringkan  untuk  dihitung daya  cernanya  berdasarkan  prosedur  Takeuchi  (1988).  Pengukuran  kadar  Cr2O3 dalam feses menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang 350 nm.

## Parameter penelitian
Parameter  kecernaan  dan  pertumbuhan  yang  diamati  terdiri  dari  jumlah konsumsi  pakan,  laju  pertumbuhan  spesifik  dan  efisiensi  pakan  mengacu  pada Huisman  (1987).  Parameter  selanjutnya  adalah  kecernaan  bahan  uji,  kecernaan nutrien (protein, lemak dan energi) dan kecernaan total mengacu pada Watanabe (1988).  Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  SPSS  16.0  dan  dilakukan analisis  ragam  dengan  tingkat  kepercayaan  95%.  Pengamatan  gambaran  darah dilakukan  sebanyak  3  kali,  yakni  H0,  H15  dan  H30.  Parameter  gambaran  darah meliputi  kadar  haemoglobin  (Hb),  mengacu  pada  metode Sahli (Archana  dan Arun  2015),  sedangkan  kadar  hemtokrit,  jumlah  sel  darah  merah  (eritrosit)  dan jumlah  sel  darah  putih  (leukosit)  mengacu  pada  metode  yang  dikemukakan  oleh Blaxhall  dan  Daisley  (1973).  Data  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis  secara deskriptif .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Penelitian
Nilai  pertumbuhan  dan  kecernaan  pakan  yang  difermentasi  dengan perlakuan  yang  berbeda  pada  pemeliharaan  ikan  nila  tersaji  pada  Tabel  2.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  fermentasi  daun  kelor  dengan  menggunakan A. niger dan R. oligosporus menghasilkan  nilai  kecernaan  nutrien  terbaik dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Sedangkan pertumbuhan terbaik terdapat pada perlakuan dengan fermentasi A . niger .
Nilai bobot rata-rata akhir tertinggi secara signifikan (P<0,05) terdapat pada perlakuan D dan C, yaitu sebesar 16,36 g dan 14,6 g, secara berurutan. Nilai SGR yang diperoleh berbanding lurus dengan nilai bobot akhir, masing-masing sebesar 3,47 pada perlakuan D dan 3,31 %/hari pada perlakukan C. Nilai kecernaan bahan kering terbaik terdapat pada perlakuan D, yaitu sebesar 60,95%; sedangkan  yang
terkecil  terdapat  pada  perlakuan  C,  sebesar  48,41%.  Nilai  kecernaan  protein  dan nilai kecernaan lemak tertinggi terdapat pada perlakuan D masing-masing sebesar 85,07% dan 83,18%. Sejalan dengan nilai kecernaan protein dan kecernaan lemak, nilai kecernaan energi tertinggi terdapat pada perlakuan D, yaitu sebesar 74,31%; kemudian diikuti oleh perlakuan B sebesar 70,84%; perlakuan C sebesar 65,30% dan  nilai  terendah  terdapat  pada  perlakuan  A  yaitu  sebesar  64,16%.  Nilai  FCR tertinggi terbaik terdapat pada perlakuan D yaitu sebesar 1,55%, kemudian diikuti oleh  perlakuan  C,  sebesar  1,58%,  perlakuan  B  sebesar  1,78%  dan  terakhir  pada perlakuan  A  sebesar  2,38%.  Selama  pemeliharaan  tidak  terjadi  kematian  pada ikan  nila  sehingga  semua  perlakuan  memiliki  nilai  SR  yang  sama,  yaitu  sebesar 100%.
Tabel  2. Bobot  rata-rata  awal  (B),  Bobot  rata-rata  akhir  (BA),  Specific  Growth Rate (SGR), Kecernaan Bahan Kering (KBK), Kecernaan Protein (KP), Kecernaan  Lemak  (KL),  Kecernaan  Energi  (KE),  Feed  Conversion Ratio (FCR) dan Survival Rate (SR) pada pemeliharaan ikan nila Parameter Pakan Uji A B C D B (g) 5,35±0,04 5,35±0,04 5,35±0,07 5,33±0,07 BA (g) 11,51±0,81 a 13,47±1,26 b 14,60±1,22 bc 16,36±0,64 c SGR (%/hari)  2,53±0,20 a 2,82±0,09 a 3,31±0,24 b 3,47±0,38 b KBK (%) 49,31±6,18 a 57,05±1,12 b 48,41±1,55 a 60,95±2,51 b KP (%) 80,72±1,97 ab 83,18±2,24 bc 78,31±2,37 a 85,07±0,74 c KL (%) 63,56±3,32 a 69,24±4,09 ab 71,16±4,40 b 73,21±1,21 b KE (%) 64,16±4,27 a 70,84±1,16 b 65,30±2,76 a 74,31±1,06 b FCR (%) 2,38±0,14 b 1,78±0,41 a 1,58±0,17 a 1,55±0,08 a SR (%) 100±0,00 100±0,00 100±0,00 100±0,00
Keterangan:  Huruf superscript yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P<0,05%).
A: 70% Pakan acuan + 30% tepung daun kelor (TDK)
B: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi R. oligosporus C: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi S. cereviceae
D: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi A. niger
Nilai  gambaran  darah  pada  penelitian  ini  tersaji  pada  Gambar  1.  Kadar haemoglobin ikan nila tertinggi terdapat pada perlakuan D ( A. niger ) sebesar 5,12 ±  1,19  g%  pada  pengamatan  hari  ke-15  dan  sebesar  5,95  ±  0,92  g%  pada pengamatan  hari  ke-30  dan  terendah  terdapat  pada  perlakuan  B  ( R.  oligosporus ) yakni sebesar 5,07 ± 0,51 g% pada pengamatan hari ke-15 dan sebesar 5,20 ± 1,65 g%  pada  pengamatan  hari  ke-30.  Kadar  hematokrit  ikan  nila  tertinggi  terdapat pada perlakuan  D ( A. niger ) sebesar  15,32±5,04  % pada pengamatan hari ke-15, demikian  juga  pada  pengamatan  hari  ke-30  sebesar  27,06±13,26  %.  Jumlah eritrosit  pada  hari  ke-15  dan  hari  ke-30  perlakuan  D  ( A.  niger )  menunjukkan jumlah yang paling tinggi yakni sebesar 1,39×10 6 ±0,73 sel/mm 3 pada pengamatan hari  ke-15  dan  sebesar  1,64×10 6 ±0,14  sel/mm 3 pada  pengamatan  hari  ke-30. Jumlah  sel  darah  merah  terendah  terdapat  pada  perlakuan  B  ( R.  oligosporus ) sebesar  1,06×10 6 ±0,13  sel/mm 3 pada  pengamatan  hari  ke-15  dan  sebesar
1,08×10 6 ±0,12 sel/mm 3 pada pengamatan hari ke-30. jumlah sel darah putih ikan nila  selama  penelitian  mengalami  fluktuasi  naik  turun  akan  tetapi  masih  dalam kisaran  normal.  Pada  pengamatan  hari  ke-15  jumlah  sel  darah  putih  mengalami penurunan  yakni  berkisar  1,03×10 5 ±0,35  sel/mm 3 sampai  dengan  1,48×10 5 ±0,37 sel/mm 3 .  Kemudian  perlahan  kembali  naik  pada  pengamatan  hari  ke-30.  Jumlah sel  darah  putih  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  D  ( A.  niger )  sebesar  2,25×10 5 sel/mm 3 pada  pengamatan  hari  ke-0,  sebesar  1,48×10 5 ±0,37  sel/mm 3 pada pengamatan hari ke-15 dan sebesar 1,50×10 5 ±0,16 sel/mm 3 pada pengamatan hari ke-30.
Gambar 1. Kadar haemoglobin (i), kadar hematokrit (ii), jumlah eritrosit (iii) dan jumlah leukosit (iv) pada pemeliharaan ikan nila selama 30 hari. (AA: Ambang batas atas, AB: Ambang batas bawah,  A: 70% Pakan acuan + 30% TDK, B: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi R. oligosporus , C: 70% Pakan acuan + 30% TDK dengan fermentasi S. cereviceae ,  D:  70%  Pakan  acuan  +  30%  TDK  dengan  fermentasi A. niger ).

## Pembahasan
Nilai bobot rata-rata akhir dan SGR tertinggi terdapat pada perlakuan D. Hal ini  diduga  terkait  dengan  nilai  kadar  protein  tertinggi  yang  terdapat  pada perlakuan  D,  yaitu  sebesar  29%.  Protein  dibutuhkan  untuk  memperbaiki  atau mempertahankan  jaringan,  pertumbuhan  dan  membentuk  berbagai  persenyawaan biologis  aktif  tertentu.    Protein  dapat  juga  berfungsi  sebagai  sumber  energi (Harver  &  Hardy  2002).  Tingginya  kandungan  protein  pada  pakan  D  akan meningkatkan pasokan energi pada ikan sehingga pertumbuhan ikan meningkat.
Selain itu, pakan D memiliki nilai serat kasar terkecil  yaitu sebesar 6,12%. Rendahnya nilai serat kasar pada pakan akan memudahkan ikan dalam mencerna makanannya, sehingga lebih banyak pakan yang dapat dicerna oleh ikan sehingga pertumbuhan  ikan  meningkat.  Nilai  serat  kasar  juga  dapat  digunakan  sebagai
parameter  kandungan  zat  anti  nutrisi  dalam  bahan  uji.  Nilai  serat  kasar  yang rendah pada perlakuan D, diduga disebabkan oleh fermentasi  yang dilakuan oleh A. niger terhadap  daun  kelor.  Penurunan  zat  anti-nutrisi  dapat  dilakukan  dengan teknik  seperti  perendaman,  pengeringan,  perlakuan  panas,  ekstraksi  pelarut  dan perlakuan enzim pada jenis pakan nabati (Afuang et al. 2003).
Pertumbuhan ikan sangat tergantung pada pasokan energi dalam pakan dan pembelanjaan  energi.  Pasokan  energi  yang  berfluktuasi,  kondisi  fisik  ikan  dan kondisi  perairan  sangat  berpengaruh  terhadap  besarnya  energi  yang  dikonsumsi oleh ikan sehingga menyebabkan adanya peningkatan dan penurunan energi tubuh (NRC  1993).  Menurut  Halver  &  Hardy  (2002),  energi  yang  terkandung  dalam pakan  yang  berasal  dari  non-protein  dapat  mempengaruhi  jumlah  protein  yang digunakan  untuk  pertumbuhan.  Jika  pakan  kekurangan  energi  yang  berasal  dari non  protein  dapat  mempengaruhi  jumlah  protein  yang  digunakan  untuk pertumbuhan.  Jika  pakan  kekurangan  energi  maka  sebagian  besar  protein  yang seharusnya  digunakan  untuk  pertumbuhan  akan  dimanfaatkan  sebagai  sumber energi.
Nilai  kecernaan  pakan  atau  disebut  juga  koefisien  pencernaan  dapat menggambarkan  kemampuan  ikan  untuk  mencerna  pakan,  juga  dapat menggambarkan  kualitas  pakan  yang  dikonsumsi  ikan.  Secara  umum  nilai kecernaan  nutrien  (bahan  kering,  protein,  lemak  dan  energi)  terbaik  yang diperoleh pada penelitian ini terdapat pada perlakuan D, yaitu fermentasi dengan menggunakan Aspergillus niger .  Nilai kecernaan bahan kering tertinggi diperoleh pada  perlakuan  D  tepung  daun  kelor  dengan  fermentasi  kapang Aspergillus niger dan  nilai  kecernaan  bahan  kering  terendah  diperolah  pada  perlakuan  C tepung daun kelor dengan fermentasi kapang Saccharomyces cerevisiae . Diduga bahwa Aspergillus  niger memfermentasi  lebih  baik  dalam  menyederhanakan  zat anti-nutrisi yang terkandung di dalam daun kelor. Hal tersebut dibuktikan dengan nilai  proksimat  pakan  yang  menunjukkan  bahwa  pakan  D  memiliki  nilai  protein dan  lemak  tertinggi  dengan  nilai  serat  kasar  dan  nilai  BETN  terendah  (Tabel  1). Penurunan  zat  anti-nutrisi  dapat  dilakukan  dengan  teknik  seperti  perendaman, pengeringan,  perlakuan  panas,  ekstraksi  pelarut  dan  perlakuan  enzim  pada  jenis pakan nabati (Afuang et al. 2003). Nilai kecernaan bahan kering menggambarkan banyaknya nutrien dalam pakan yang dapat dicerna ikan (Putra 2015).
Nilai  kecernaan  protein  merupakan  hal  yang  sangat  penting  untuk mengetahui  efesiensi  pakan  yang  diberikan  pada  ikan  (Handajani  2011).  Nilai kecernaan  protein  yang  diperoleh  pada  penelitian  berkisar  antara  78,31% (perlakuan  C)  sampai  dengan  nilai  kecernaan  protein  terbesar  pada  perlakuan  D sebesar  85,07%.  Nilai  tersebut  sesuai  dengan  NRC  (1993)  yang  menyatakan bahwa  kisaran  nilai  kecernaan  protein  ikan  secara  umum  yaitu  sebesar  75-95%. Lemak  merupakan  sumber  energi  yang  penting  dan  asam  lemak  esensial  (EFA) yang  dibutuhkan  untuk  pertumbuhan  dan  pengembangan  (NRC  1993).  Hasil penelitian menunjukkan nilai kecernaan lemak tertinggi diperoleh pada perlakuan D  (tepung  daun  kelor  dengan  fermentasi  kapang Aspergillus  niger )  yaitu sebesar  73,21%  dan  nilai  kecernaan  lemak  terendah  diperoleh  pada  perlakuan  A (tepung daun kelor tanpa fermentasi atau kontrol) yaitu sebesar 63,56%. Energi bukan  merupakan  nutrisi,  energi  dilepaskan  selama  oksidasi  metabolisme karbohidrat,  lemak  dan  asam  amino  (NRC  1993).  Nilai  kecernaan  energi  sejalan
dengan nilai kecernaan protein dan kecernaan lemak yaitu hasil terbaik diperoleh pada perlakuan D (tepung daun kelor dengan fermentasi Aspergillus niger ). Semakin rendah nilai konversi pakan maka pakan tersebut memiliki kualitas yang  baik.  Rasio  konversi  pakan  merupakan  salah  satu  parameter  efisiensi pemberian  pakan  (Huisman  1987).  Hasil  FCR  terbaik  diperlihatkan  pada perlakuan  D  yang  dibuktikan  dengan  nilai  konversi  pakan  yaitu  sebesar  1,55%. Sebaliknya nilai kecernaan pakan yang rendah memiliki nilai konversi pakan yang besar,  yang ditunjukkan oleh perlakuan  A  yaitu sebesar 2,38. Perbedaan nilai ini memperlihatkan bahwa kandungan protein pakan mampu meningkatkan konversi pakan (Harver & Hardy 2002). Hal tersebut juga dipengaruhi oleh adanya tingkat konversi  pakan  dengan  bertambahnya  berat  badan  ikan  sehingga  semakin  tinggi berat badan ikan maka semakin tinggi pula konversi pakan yang dimanfaatkan.
Haemoglobin  dalam  darah  merupakan  alat  transportasi  oksigen  dan karbondioksida  yang  terdapat  di  dalam  eritrosit.  Pada  hari  ke-30,  nilai haemoglobin  yang  diperoleh  berkisar  dari  5,20  ±  1,65  g%  g%  (perlakuan  B) sampai dengan 5,95 ± 0,92 g%. Nilai haemoglobin yang diperoleh pada penelitian berada  dalam  kisaran  normal,  hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Salasia et  al . (2001) kadar haemoglobin normal pada ikan nila berkisar 5,05-8,33 g%. Snieszko et al . (1960) menyebutkan bahwa kondisi ikan secara umum cukup sehat atau baik jika nilai hematokrit pada ikan berkisar 5–60 %. Nilai hematokrit yang diperoleh pada penelitian ini cenderung bervariasi pada setiap perlakuan, tetapi masih dalam kisaran normal nilai hematokrit yang disampaikan Snieszko et al . (1960). Kisaran kadar hematokrit pada pengamatan hari ke-0 rata-rata sebesar 20,67 %, kemudian mengalami penurunan sedikit pada saat pengamatan hari ke-15 kisaran hematokrit antara  11,54±4,85  %  sampai  dengan  15,32±5,04  %  dan  mengalami  peningkatan kembali pada pengamatan hari ke-30 berkisar antara 14,50±1,75 % sampai dengan 27,06±13,26 %.
Eritrosit  merupakan  jumlah  sel  terbanyak  pada  segala  jenis  ikan  yang mempunyai  fungsi  sebagai  pembawa  oksigen  dan  berbagai  materi.  Nilai  eritrosit yang diperoleh pada penelitian ini berada dalam kisaran normal. Hal ini didukung oleh pernyataan  Sjafei et al . (1989), bahwa eritrosit normal  pada ikan berjumlah rata-rata  20.000–3.000.000  sel/mm 3 .  Kadar  haemoglobin  dalam  darah berhubungan  erat  dengan  jumlah  sel  darah  merah  (Royan et  al .  2014).  Nilai eritrosit  yang  diperoleh  berkisar  antara  1,08×10 6 ±0,12  sel/mm 3 sampai  dengan 1,64×10 6 ±0,14  sel/mm 3 .  Jumlah  leukosit  yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini memiliki kisaran antara 1,03×10 5 ±0,35 sel/mm 3 sampai dengan 2,25×10 5 sel/mm 3 . Kisaran  normal  jumlah  sel  darah  putih  pada  ikan  normal  berkisar  antara  20.000 hingga 150.000 sel/mm3 (Rahadjo et al . 2011), sehingga dapat dinyatakan bahwa jumlah  sel  darah  putih  yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  berada  pada  kisaran normal.  Utami et  al .  (2013) mengemukakan  bahwa  peningkatan  sel  leukosit merupakan  refleksi  keberhasilan  sistem  imunitas  ikan  dalam  mengembangkan respon imunitas seluler (non spesifik) sebagai pemicu untuk respon kekebalan.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Fermentasi  daun  kelor  menggunakan Aspergillus  niger menghasikan pertumbuhan  terbaik  pada  ikan  nila  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya. Fermentasi Aspergillus  niger dan Rhizopus  oligosporus pada  daun  kelor
menghasilkan  nilai  kecernaan  nutrien  terbaik  dibandingkan  dengan  perlakuan yang lain. Fermentasi Aspergillus niger , Saccharomyces cereviceae dan Rhizopus oligosporus tidak berpengaruh pada proses fisologis ikan nila, hal ini ditunjukkan dengan nilai parameter gambaran darah yang berada dalam kisaran normal. Perlu dilakukan  penelitian  lanjutan  terkait  dengan  komposisi  daun  kelor  terfermentasi Aspergillus niger terbaik dalam formulasi pakan ikan nila.

## DAFTAR PUSTAKA
Afebrata RD, Limin S & Suparmono. 2014. Substitusi Tepung Onggok Singkong Sebagai  Bahan  Baku  Pakan  Pada  Budidaya  Nila  ( Oreochromis  niloticus ). e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan (II):2302-3600 hlm.
Afuang W, Siddhuraju P & Becker K. 2003. Comparative Nutritional Evaluation of  Raw,  Methanol  Extracted  Residues  and  Methanol  Extracts  of  Moringa (Moringa oleifera Lam.) Leaves on Growth Performance and Feed Utilization in Nile Tilapia (Oreochromis niloticus L.). Aquaculture Research (34): 1147- 1159 pp.
Archana  G  and  Arun  K.  2015.  Haematological  Studies  of  Some  Edible  Fresh Water Fishes of NRC Region. World Journal Pharmacy and Pharmaceutical Sciences (4): pp 1467-1479.
Blaxhall  PC  dan  Daisley  KW.  1973.  Routine  Haematological  Methods  for  Use with Fish Blood. J. Fish Biol . 5:771-781.
Buckle  KA,  Edwards  RA,  Fleet  GH  &  Wooton  M.  2013. Ilmu  pangan .  Jakarta: Universitas Indonesia. 365 hlm.
Chowdhury  DK.  2011. Optimal  feeding  rate  for  nile  tilapia (Oreochromis niloticus) .  [TESIS].  Norwegian:  Department  of  Animal  and  Aquacultural Sciences Master Thesis. University of Life Sciences.
Handajani  H.  2011.  Optimalisasi  substitusi  tepung Azolla terfermentasi  pada pakan  ikan  untuk  meningkatkan  produktivitas  ikan  nila  gift. Jurnal  Teknik Industri (12):177-181 hlm. Harver & Hardy. 2002. Fish Nutrition : Bionergetics. Academic Prees: California USA.
Huisman  EA.  1987.  Principles  of  Fish  Production.  Department  of  Fish  Culture and Fisheries, Waganingen Agriculture University, Waganingan, Netherland. 170p.
National  Research  Council.  1993.  Nutrient  Requirement  of  Fish.  National Academic Press. Washington D. C. 273pp.
Putra  AN,  Widanarni,  Utomo  NBP.  2015.  Growth  performance  of  tilapia ( Oreochromis  niloticus )  fed  with  probiotic,  prebiotic  and  synbiotic  in  diet. Pakistan Journal of Nutrition 14: 263‒268.
Rachmawati  FN,  Untung  S,  dan  Yulia  S.  2010.  Respon  Fisiologi  Ikan  Nila, Oreochromis  niloticus ,  yang  Distimulasi  dengan  Daur  Pemuasaan  dan Pemberian Pakan Kembali. Nasional Biologi . 1(7): 492-499.
Rahardjo  MF,  Sjafei  DS,  Affandi  R,  dan  Sulistiono.  2011. Iktiology .  Bandung: Lubuk Agung Bandung. 395 hlm.
Royan F, Sri R dan Condro AH. 2014. Pengaruh Salinitas yang Berbeda terhadap Profil  Darah  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ). Journal  of  Aquaculture Management and Technology 3(2): 109-117.
Richter  N,  Siddhuraju  P  &  Becker.  2003.  Evaluation  of  Nutritional  Quality  of Moringa ( Moringa oleifera Lam .) Leaves as an Alternative Protein Source for Nile Tilapia ( Oreochromis niloticus L .). Department of Aquaculture Systems and Animal Nutrition. (217): 399-611.
Sjafei  DS,  Rahardjo  MF,  Affandi  R,  dan  Sulistiono.  1989. Iktiologi .  Fakultas Perikanan Institut Pertanian Bogor. Bogor. 329 hlm.
Sitompul  S.  2014.  Analisis  Asam  Amino  dalam  Tepung  Ikan  dan  Bungkil Kedelai. Buletin Teknik Pertanian (9):33-37 hlm.
Snieszko SF, Camper JE, Iloward FJ, dan Pettjohn LL. 1960. Micohematocrit as a Tool  in  Fishery  Research  and  Management .  Bureau  of  Sport  Fisheries  and Wildlife. Washington, D. C. 15 hlm.
Takeuchi, 1988. Laboratory Work-Chemical Evalualuation of Dietary Nutriens. In Watanabe  (Ed)  Fish  Nutrition  and  Mariculture.  Kanagawa  International Fisheries  Training.  Japan.  Japan  International  Coopration  Agency  (JICA). 179–233 (JICA). 233 hlm.
Utami DT, Slamet BP, Sri H, dan Ayi S. 2013. Gambaran Parameter Hematologis pada  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus )  yang  Diberi  Vaksin  DNA Streptococcus  iniae dengan  Dosis  yang  Berbeda. Journal  of  Aquaculture Management and Technology. 2(4): 7-20.
Watanabe  T.  1988.  Fish  nutrition  and  mariculture.  JICA  Textbook.  The  general aquaculture  courses.  Department  of  aquatic  biosciences.  Tokyo  University of Fisheries. 233 pp.