## AGROLAND: JURNAL ILMU-ILMU PERTANIAN
Vol. 30, No. 3 Desember (2023), 217 - 227 P-ISSN : 0854-641X & E-ISSN : 2407-7607 , Diterbitkan Universitas Tadulako
MEDIA ALTERNATIF PERBANYAKAN Trichoderma sp. DARI BERBAGAI JENIS LIMBAH SEBAGAI AGEN PENGENDALI HAYATI
Alternative Media Propagation of Trichoderma sp. from Various Types of Wastes as a Biological Agents
Muzayyanah Rahmiyah 1) , Novianti Ulia Maesaroh 1) , Putri Laeshita 1)
1) Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Tidar Email: mrahmiyah@untidar.ac.id
Diterima: 4 Juli 2023, Revisi : 25 Agustus 2023, Diterbitkan:  Desember 2023 https://doi.org/10.22487/agrolandnasional.v30i3.1756

## ABSTRACT
The  objective  of  this  study  is  to  evaluate  the  potential  of  cassava  skin  waste  as  a viable  medium  for  cultivating  Trichoderma  sp.  The  research  was  carried  out  at  the  Plant Pest and Disease Observation Laboratory (LPHP) in Temanggung, Central Java, located on Jalan Raya Kedu-Parakan, Kedu Sub District, Temanggung District, Central Java Province. The research design  involved a non-factorial Randomized Complete  Block Design (RAL) with  five  treatment  levels,  specifically  corn  media  (M1),  bran  media  (M2),  cassava  peel waste  media  (M3),  banana  peel  waste  media  (M4),  and  bagasse  waste  media  (M5). Qualitative  parameters  were  assessed  using  descriptive  analysis,  while  quantitative parameters  were  analysed  using  ANOVA  followed  by  the  LSD  α0.05  test.  The  findings revealed that the type of propagation media had a significant  effect on parameters such as the  incubation  period,  changes  in  media  weight  before  and  after  inoculation,  and  spore density.  However,  it  did  not  have  a  substantial  effect  on  spore  viability.  Macroscopic observations  indicated  color  changes  to  dark  green  in  M1,  M2,  M3,  and  M5,  appearing uniformly.  Microscopic  observations  across  all  media  types  displayed  the  microscopic morphological  structure  of  Trichoderma  sp.  Based  on  the  research  results,  the recommended  alternative  media  for  cultivating  Trichoderma  sp.  are  bagasse  waste  and cassava skin waste.
Keywords : Propagation Media, Trichoderma sp., and Waste.

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menguji potensi  dari beberapa limbah sebagai media alternatif  perbanyakan Trichoderma sp.  Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Pengamatan Hama dan Penyakit Tanaman (LPHP) Temanggung Jawa Tengah, Jalan Raya Kedu-Parakan,  Kecamatan  Kedu,  Kabupaten  Temanggung,  Provinsi  Jawa  Tengah.
Original Research
Open Access
Rancangan penelitian menggunakan RAL non faktorial terdiri dari 5 taraf perlakuan yakni media  jagung (M1), media dedak (M2), media  limbah kulit singkong (M3), media  limbah kulit pisang (M4) dan media limbah ampas tebu (M5). Pada parameter kualitatif dianalisis menggunakan  analisis  deskripsi  dan  parameter  kuantitatif  dianalisis  menggunakan ANOVA  dilanjutkan  dengan  uji  BNT 0,05 .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perbedaan jenis  media  perbanyakan Trichoderma sp.  berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  parameter masa  inkubasi  dan  selisih  berat  media,  berpengaruh  nyata  terhadap  parameter  kerapatan spora  dan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  parameter  viabilitas  spora.  Hasil  penelitian pada parameter kualitatif bagian pengamatan makroskopis menunjukkan M1, M2, M3, dan M5  mengalami  perubahan  warna  menjadi  hijau  tua  yang  tampak  merata  sedangkan  pada bagian  pengamatan  mikroskopis  pada  masing-masing  media  menunjukkan  stuktur morfologi  mikroskopis Trichoderma sp.  Berdasarkan  penelitian,  media  alternatif  yang direkomendasikan untuk perbanyakan Trichoderma sp. adalah menggunakan limbah ampas tebu dan limbah kulit singkong.
Kata Kunci :  Limbah, Media Perbanyakan, dan Trichoderma sp.

## PENDAHULUAN
Penggunaan bahan kimia secara berlebihan dan  berkelanjutan  dalam  kegiatan  pemupukan maupun  pengendalian  hama  dan  penyakit tanaman  dapat  berdampak  buruk  terhadap lingkungan,  patogen  lebih  resisten  terhadap bahan  kimia,  meninggalkan  residu  pada hasil  panen  dan  lain-lain.  Oleh  karena  itu, diperlukan  adanya  alternatif  pengendalian lainnya  yang  lebih  ramah  lingkungan  dan efektif  yaitu  dengan  menerapkan  pengendalian hayati yang memanfaatkan agen hayati seperti mikroba antagonis. Mikroba antagonis yang dapat  digunakan  sebagai  pengendali  penyakit tanaman bahkan berperan juga dalam menstimulasi pertumbuhan  tanaman  yaitu Trichoderma sp. (Gusnawaty  dkk.,  2017).  Beberapa  penelitian menunjukkan  bahwa  aplikasi  cendawan antagonis Trichoderma sp.  dapat  menekan penyakit  yang  menyerang  tanaman  seperti penyakit  layu  fusarium  dan  antraknosa. Selain  dimanfaatkan  sebagai  agen  hayati, Trichoderma sp.  juga  dapat  berperan  sebagai dekomposer  dan  stimulator  pertumbuhan tanaman.  Sebelum  diintroduksikan  ke  tanah, sebaiknya  dilakukan  perbanyakan  massal pada media bahan organik yang dapat mendukung pertumbuhan  dan  perkembangan Trichoderma sp. supaya memiliki daya adaptasi yang lebih baik  pada  lingkungan  baru  (Jumadi  dkk., 2021).
Bahan  organik  yang  sering  digunakan untuk perbanyakan Trichoderma sp. ialah beras, jagung, dan dedak. Pertumbuhan dan perkembangan Trichoderma sp. tergantung kecukupan nutrisi pada media  pertumbuhannya. Trichoderma sp. membutuhkan  karbohidrat  sebagai  sumber energi dalam proses pertumbuhannya. Perbanyakan Trichoderma sp. pada media yang tepat dapat meningkatkan  kemampuan  antagonisnya (Iswari  dkk., 2021). Perbanyakan Trichoderma sp. secara massal diperlukan biaya yang relatif tinggi  jika  menggunakan  media  dengan bahan organik tersebut sehingga diperlukan bahan alternatif yang lebih ekonomis seperti limbah.  Limbah  kulit  singkong  di  Kota Magelang,  Jawa  Tengah  dapat  ditemukan secara  melimpah.  Hal  tersebut  dikarenakan Magelang merupakan kota dengan makanan khas  yang  berbahan  dasar  singkong  seperti getuk, slondok, grubi dan  lain-lain.  Adanya olahan  makanan  berbahan  dasar  singkong tersebut menyebabkan  banyak penumpukan limbah  kulit  singkong.  Beberapa  penelitian melaporkan  bahwa  limbah  kulit  singkong, ampas  tebu,  dan  kulit  pisang  memiliki kandungan  bahan  yang  dapat  mendukung pertumbuhan  dan  perkembangan  jamur. Berdasarkan  uraian  di  atas,  perlu  dilakukan penelitian  yang  bertujuan  untuk  menguji beberapa  limbah  yang potensial  sebagai  media perbanyakan agen hayati Trichoderma sp.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  secara in vitro pada bulan Januari 2023  – April 2023 di  Laboratorium  Pengamatan  Hama  dan Penyakit  Tanaman  (LPHP)  Temanggung Jawa  Tengah,  Jalan  Raya  Kedu-Parakan, Kecamatan  Kedu,  Kabupaten Temanggung, Provinsi Jawa Tengah. Alat yang digunakan dalam  penelitian  adalah  timbangan,  kompor, panci, hot  plate,  magnetic  stirrer,  autoclave , cawan  petri,  LAF,  erlenmeyer,  gelas  piala, gelas  ukur,  mikro  pipet,  lampu  bunsen, pinset, corbore,  scalpel, jarum  ose,  jarum needle , haemocytometer , plastik klip, kertas label,  dan  alat tulis.  Bahan  yang  digunakan adalah aquades, alkohol 70%, sampel tanah salin  bagian  rhizosfer  tanaman  jagung  di Dukuhseti,  Kabupaten  Pati,  Jawa  Tengah, isolat Trichoderma sp., media tumbuh PDA, jagung,  dedak,  limbah  kulit  singkong, limbah ampas tebu, dan limbah kulit pisang.
Penelitian  dilakukan  dengan  metode Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  satu  faktor dengan  5  perlakuan  yang  diulang  sebanyak  5 kali.  Perlakuan  tersebut  meliputi  M1 ( Trichoderma sp.  pada  media  jagung),  M2 ( Trichoderma sp.  pada  media  dedak),  M3 ( Trichoderma sp.  pada  media  limbah  kulit singkong),  M4  ( Trichoderma sp.  pada  media limbah  kulit  pisang),  dan  M5  ( Trichoderma sp.  pada  media  limbah  ampas  tebu).  Data hasil parameter pengamatan kualitatif dianalisis menggunakan  analisis  deskripsi  sedangkan parameter  pengamatan  kuantitatif  dianalisis menggunakan  sidik  ragam.  Apabila  hasil analisis  menunjukkan  terdapat  perlakuan yang berpengaruh nyata maka dilakukan uji lanjut  menggunakan  uji  BNT  (Beda  Nyata Terkecil) dengan taraf 5%.

## Eksplorasi dari Sampel Tanah
Sampel  tanah  sebanyak  1  gram ditimbang  lalu  ditambahkan  dengan  ±9  ml aquadest  steril kemudian  dihomogenkan menggunakan vortex selama  3-5  menit/jam dan  dilakukan  pengenceran  bertingkat  hingga mencapai pengenceran 10 -6 . Selanjutnya sampel dari pengenceran diambil menggunakan mikro
pipet 0,1  mL  kemudian  dituangkan  ke dalam  media PDA  dan diinkubasi selama 7 hari pada suhu 25ºC. Media PDA yang telah ditumbuhi cendawan hasil eksplorasi kemudian diidentifikasi  dengan  mengambil  cendawan menggunakan  jarum needle dan  digoreskan ke  kaca  preparat  yang  telah  ditetesi methylene blue kemudian ditutup dengan cover glass lalu dilakukan pengamatan menggunakan mikroskop perbesaran 400 kali.
Inokulasi Pemurnian Trichoderma sp. Trichoderma sp.  hasil  eksplorasi diinokulasikan pada media PDA baru untuk memperoleh  isolat  murni  yang  dilakukan dengan memindahkan satu koloni cendawan menggunakan  bor  gabus  lalu  dipindahkan ke  media  PDA  baru  dan  diinkubasi  selama ± 1 minggu.
Pembuatan Media Pertumbuhan Trichoderma sp.
Pembuatan  media  jagung,  dedak, limbah  kulit  singkong,  limbah  ampas  tebu dan  limbah  kulit  pisang  dimana  untuk masing-masing  limbah  dicacah  hingga berukuran  kecil  ±  1  cm.  Untuk  media jagung  dan  media  limbah  direndam  selama 24  jam kemudian dicuci  lalu dikeringanginkan selanjutnya  dikukus  hingga  melunak  dan ditunggu  hingga  dingin  (Gusnawaty  dkk., 2017).  Untuk  media  limbah  kulit  singkong dan  limbah  kulit  pisang  selanjutnya  dioven untuk  mengurangi  kadar  air  agar  media tidak terlalu basah. Sedangkan untuk media dedak  dicampur  air  10%  dari  berat  dedak lalu  diaduk  hingga  merata  (Prasetyawati dan  Dania,  2017).  Setelah  itu,  masing- masing  bahan  dimasukkan  sebanyak  200 gram  ke  dalam  plastik  klip  yang  tahan  panas kemudian disterilkan dalam autoclave . Selanjutnya jamur Trichoderma sp. diinokulasi menggunakan cork borrer ±5 mm dari media PDA ke media jagung,  dedak,  limbah  kulit  singkong, limbah  ampas  tebu  dan  limbah  kulit  pisang ke dalam plastik klip.  Kemudian diinkubasi selama  7  –  14  hari  hingga  tumbuh  jamur berwarna hijau.
Pengamatan Makroskopis dan Mikroskopis Pengamatan makroskopis atau pengamatan visual  dilakukan  untuk  melihat  perubahan  warna koloni Trichoderma sp.  pada  masing-masing media  pertumbuhannya  yang  dihitung  pada 4 hsi, 7 hsi, dan 14 hsi. Pengamatan mikroskopis yang  diamati  adalah  struktur Trichoderma sp. secara  mikroskopis  menggunakan  mikroskop perbesaran 400×.

## Masa Inkubasi
Masa  inkubasi  merupakan  waktu yang  dibutuhkan Trichoderma sp.  dalam memperbanyak diri pada media yang  dihitung dari  hari  inokulasi Trichoderma sp.  hingga hari Trichoderma sp.  mulai  memperbanyak diri.

## Selisih Berat Media
Selisih  berat  media  sebelum  dan setelah  inokulasi Trichoderma sp.  dihitung dengan  cara  berat  media  sebelum  inokulasi Trichoderma sp.  yaitu  200  gram  dikurangi berat media setelah ditumbuhi Trichoderma sp.
Kerapatan Spora Kerapatan  spora  dihitung  dengan menimbang 1 gram Trichoderma sp. pada setiap perlakuan  yang  berumur  14  hari  dicampur dengan  9  ml  aquadest  lalu  dihomogenkan menggunakan  vortex,  kemudian  dilakukan pengenceran  hingga  10 2 .  Suspensi  0,1  ml dituangkan  pada haemocytometer lalu ditutup dengan kaca obyek hingga mengalir ke bawah dan memenuhi bidang hitung kemudian diamati dengan mikroskop perbesaran 100 kali dan akan nampak spora dalam bidang kotak hitung.  Selanjutnya  dilakukan  perhitungan dengan rumus:
Sumber: Gusnawati dkk. (2017)
Keterangan:
K =   jumlah spora/ml
t =   jumlah  spora  dalam  semua  kotak hitung d = faktor pengenceran n = jumlah semua kotak hitung 0,25  = faktor koreksi 10 6 = konstanta kerapatan spora

## Viabilitas Spora
Perhitungan  viabilitas  spora  dilakukan dengan  mengambil  suspensi Trichoderma sp. yang  digunakan  untuk  kerapatan  spora  lalu diteteskan  menggunakan syringe di  atas media  PDA  dengan  2  titik  yang  berbeda masing-masing  1  tetes.  Kemudian  diinkubasi selama 16 jam. Setelah itu, diamati menggunakan mikroskop  dengan  perbesaran  400  kali  dan dihitung spora yang berkecambah dan tidak berkecambah.  Rumus  untuk  menghitung viabilitas spora yaitu:
Sumber: Yogaswara dkk. (2020)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Eksplorasi dari Sampel Tanah
Sampel  tanah  terdiri  dari  lokasi tersebut  terdiri  dari  sampel  tanah  A,  B,  C, dan  D.  Sampel  tanah  A  dan  D  terdapat cendawan Penicillium sp.  sedangkan  sampel tanah  B  dan  C  terdapat  cendawan Penicillium sp.  dan Trichoderma sp.  Cendawan  yang digunakan  dalam  penelitian  hanya  berupa Trichoderma sp..  Koloni Trichoderma sp. memiliki  ciri  morfologis  berupa  warna koloni  putih  yang  berangsur  berubah  menjadi kehijauan.  Sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Gusnawaty  dkk.,  (2014), Trichoderma sp.  memiliki  perkembangan warna  koloni  yang  diawali  warna  putih, berubah  menjadi  putih  kehijauan,  hijau muda,  hingga  berubah  menjadi  hijau  tua (Gambar  1a).  Cendawan Trichoderma sp. secara  mikroskopis  memiliki  hifa  bersepta yang  berwarna  kehijauan,  tangkai  fialid pendek,  konidia  berbentuk  bulat  terdapat pada  ujung  fialid,  konidium  bergerombol pada  permukaan  sel  konidiofornya  dan berawarna hijau muda (Gambar 1b).
Gambar 1.  A) Morfologi makroskopis Trichoderma sp.  pada media PDA dan B) Morfologi mikroskopis Trichoderma sp

## Pengamatan Makroskopis
Pengamatan  makroskopis  hari  ke-4 menunjukkan  pertumbuhan  miselium  yang berjumlah  sedikit  dan  berwarna  putih  hijau muda  pada  media  M1,  M2,  M3,  dan  M5 sedangkan  pada  M4  miselium  tipis  yang berwarna  putih  transparan.    Pada  hari  ke-7 dan  ke-14  setelah  inokulasi,  menunjukkan perkembangan  pertumbuhan Trichoderma sp.  dimana  pada  M1,  M2,  M3,  dan  M5 miselium  semakin  menyebar  ke  seluruh permukaan media dan tebal sehingga media berubah  menjadi kehijauan sedangkan pada M4  miselium  tetap  berwarna  putih  dan menyebar  ke  seluruh  permukaan  media (Tabel 1). Tabel 1.  Perubahan warna koloni Trichoderma sp. pada masing-masing media perbanyakan Perlakuan 4 HSI 7 HSI 14 HSI
M1 (media jagung) M2 (media dedak) M3 (media limbah kulit singkong) M4 (media limbah kulit pisang)
M5 (media limbah ampas tebu) B B A A
Berdasarkan  Tabel  1,  menunjukkan bahwa  masing-masing  media  dapat  digunakan sebagai  media  pertumbuhan Trichoderma sp. Day  dkk.  (2022),  mengemukakan  bahwa penyebaran pertumbuhan cendawan Trichoderma sp.  dipengaruhi  oleh  nutrisi  yang  diserap dimana  semakin  banyak  nutrisi  yang  diserap oleh cendawan maka penyebaran pertumbuhan cendawan juga semakin banyak. Balitbangtan (2018),  menyatakan  bahwa  perbanyakan Trichoderma sp.  pada  media  alternatif perbanyakan  dikatakan  berhasil  jika  media tersebut  berubah  warna  menjadi  hijau  yang merata. Pertumbuhan Trichoderma sp. bergantung pada  ketersediaan  nutrisi  terutama  karbohidrat yang  digunakan  sebagai  sumber  makanan dan  energi.  Selain  karbohidrat,  kandungan selulosa  yang  terdapat  dalam  media  juga sangat  mendukung  pertumbuhan  miselium. Berdasarkan  pernyataan  tersebut,  diduga pada  media  jagung  (M1),  dedak  (M2),
limbah  kulit  singkong  (M3),  dan  ampas tebu  (M5)  mengandung  nutrisi  terutama karbohidrat  dan  selulosa  yang  dibutuhkan untuk  pertumbuhan  dan  perkembangan Trichoderma sp.  Perubahan  warna  yang terjadi  pada  media  juga  disebabkan  oleh aktivitas pengomposan yang dilakukan oleh Trichoderma sp.  pada  media  pertumbuhan yang  menyebabkan  hancurnya  partikel  media sehingga  terjadi  perubahan  warna  menjadi hijau.  Pada  media  kulit  pisang  (M4)  warna media  tetap  putih  dan  miselium  tipis.  Hal tersebut  diduga  disebabkan  oleh  struktur dari kulit pisang yang cepat membusuk dan memiliki  kadar  air  yang  tinggi  yaitu mencapai  82,12  %  (Criswantara,    2021). Kadar air yang terlalu rendah maupun yang terlalu tinggi dapat mengganggu  pertumbuhan jamur bahkan miselium jamur dapat  membusuk dan mati.

## Pengamatan Mikroskopis
Gambar  2.  Morfologi Trichoderma sp.  secara  mikroskopis  pada  media  perbanyakan:  (1) Media  jagung  (M1),  (2)  Media  dedak  (M2),  (3)  Media  limbah  kulit  singkong (M3),  (4)  Media  limbah  kulit  pisang  (M4),  dan  (5)  Media  limbah  ampas  tebu (M5), dengan bagian:  (a) Fialid,  (b) Konidia, (c) Konidiofor,  dan (d) Cabang Konidiofor
a d a b c a b c 1 1 1 2 2 3 3 3 3 3 3 a b c 4 4 5 5 a c b b c d
Gambar  2  menunjukkan  morfologi mikroskopis Trichoderma sp.  pada  masing- masing  media  perbanyakan. Trichoderma sp.  memiliki  hifa  bersepta  yang  berwarna hijau,  tangkai  fialid  gemuk  dan  pendek,  pada setiap  cabang  konidiofor  fialid  tersusun  pada kelompok  yang  berbeda dimana  per kelompok terdapat 2-4 fialid, konidia  berbentuk globuse atau  bulat  yang  berwarna  kehijauan  yang terletak  pada  ujung  fialid  dan  percabangan konidiofor  dapat  vertikal  secara  teratur ataupun tidak teratur.

## Masa Inkubasi
Pengaruh  berbagai  macam  media perbanyakan Trichoderma sp.  terhadap  masa inkubasi Trichoderma sp.  pada  uji  lanjut BNT 0,05 disajikan pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil  uji  lanjut  BNT 0,05 pada parameter masa inkubasi (HSI)
Media perlakuan Rerata masa inkubasi (HSI) M5 (ampas tebu) 4,2 a M4 (kulit pisang) 3,4 b M1 (jagung) 2,6 c M2 (dedak) 2,6 c M3 (kulit singkong) 2,4 c BNT 0,05 = 0,699
Keterangan:   Angka  diikuti  huruf  yang  sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji lanjut BNT 0,05
Data  pengamatan  menunjukkan  bahwa masa  inkubasi  dari Trichoderma sp.  tergolong cepat. Hal tersebut menunjukkan bahwa masing- masing  jenis  media  perbanyakan  mampu memacu pertumbuhan  miselium Trichoderma sp.  Media  jagung  (M1),  dedak  (M2),  kulit singkong (M3), ampas tebu (M5), dan kulit pisang  (M4)  diduga  memiliki  kandungan karbohidrat. Karbohidat bagi cendawan berperan sebagai sumber energi dan membentuk struktur sel sehingga memacu cendawan tersebut untuk memperbanyak  diri.  Kandungan  karbohidrat dan  selulosa  yang  dimiliki  oleh  masing- masing media perbanyakan diduga memiliki potensi  yang  baik  untuk  menumbuhkan Trichoderma sp.  Handiyanto  dkk.  (2013),
mengemukakan  bahwa  pertumbuhan  miselium jamur  akan  meningkat  dengan  cepat  jika media untuk pertumbuhannya  menyediakan nutrisi yang tepat.  Tersedianya substrat dan kandungan  nutrisi  pada  suatu  media merupakan  faktor  penting  dalam  fase  lag dari  jamur.  Hal  tersebut  dikarenakan  pada fase  lag  jamur,  jamur  akan  beradaptasi dengan  lingkungan  tempat  tumbuhnya  dan mulai  mengekskresikan  atau  membentuk enzim-enzim yan digunakan untuk menguraikan substrat dalam media yang digunakan.

## Selisih Berat Media Sebelum dan Setelah Inokulasi (gram)
Pengaruh  berbagai  macam  media perbanyakan Trichoderma sp. terhadap  selisih berat  media  sebelum  dan  setelah  inokulasi pada uji lanjut BNT 0,05 disajikan pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji lanjut  BNT 0,05 pada parameter selisih berat media sebelum dan setelah inokulasi (gram) Media perlakuan Rerata masa inkubasi (HSI) M2 (dedak) 3,56  a M3 (kulit singkong) 3,02 ab M1 (jagung) 2,84  b M5 (ampas tebu) 2,68  b M4 (kulit pisang) 1,46  c BNT 0,05 = 0,687
Keterangan:    Angka  diikuti  huruf  yang  sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji lanjut BNT 0,05
Menurut Hilakore (2008) dalam Gusnawaty dkk.  (2017)  menyatakan  bahwa  adanya  selisih berat  media  setelah  inokulasi  menandakan bahwa  cendawan  tersebut  memanfaatkan bahan  media pertumbuhannya. Berdasarkan rerata  pengamatan,  diduga  bahwa  kemampuan Trichoderma sp. dalam merombak dedak dan kulit  singkong  lebih  cepat  dibandingkan pada media lainnya. Penurunan berat media juga  diduga  disebabkan  oleh  menurunnya kadar  air  akibat  aktifitas  dekomposer  oleh cendawan terhadap media perbanyakan sebagai sumber  makanannya.  Semakin  besar  selisih
berat  media  sebelum  dan  setelah  inokulasi menandakan  bahwa  aktifitas Trichoderma sp. sebagai dekomposer semakin tinggi dan menandakan bahwa media tersebut mengandung nutrisi yang dibutuhkan oleh Trichoderma sp.
Kerapatan Spora (spora/mg)
Pengaruh  berbagai  macam  media perbanyakan Trichoderma sp.  kerapatan spora Trichoderma sp.  pada  uji  lanjut BNT 0,05 disajikan pada tabel 4.
Tabel 4.  Hasil uji lanjut BNT 0,05 pada parameter kerapatan spora (spora/mg) Media perlakuan Rerata masa inkubasi (HSI) M5 (ampas tebu) 5,8×10 8 a M3 (kulit singkong) 5,2×10 8 ab M2 (dedak) 4,9×10 8 ab M1 (jagung) 3,4×10 8 bc M4 (kulit pisang) 2,5×10 8 c BNT 0,05 = 1,9251
Keterangan:    Angka  diikuti  huruf  yang  sama pada  kolom  yang  sama  tidak berbeda  nyata  pada  uji  lanjut BNT 0,05
Berdasarkan  Pusat  Penelitian  dan Pengembangan  Perkebunan  (2014),  standar kerapatan  spora  untuk Trichoderma sp. sebagai  agen  pengendali  hayati  yakni nilainya harus lebih besar atau sama dengan 1×10 6 spora/ml. Berdasarkan data pengamatan, kerapatan spora Trichoderma sp.  yang tumbuh pada  masing-masing  media  dalam  penelitian ini  telah  memenuhi  persyaratan  mutu  tersebut. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  media  perlakuan diduga  mengandung  nutrisi  yang  sesuai untuk proses sporulasi sehingga proses  sporulasi berjalan optimum. Tinggi rendahnya kerapatan spora  pada  setiap  media  dipengaruhi  oleh kandungan  nutrisi terutama karbohidrat dan selulosa  pada  media  yang  digunakan  sebagai sumber  makanan  dan  energi.  Gula  hasil metabolisme karbohidrat pada jamur dimanfaatkan untuk pembentukan konidia. Selain itu, Trichoderma sp.  mampu  menghasilkan  metabolit  sekunder seperti enzim selulase yang dapat mendegradasi media  yang  mengandung  selulosa  sehingga dapat  memacu  penyerapan  nutrisi  oleh jamur  untuk  pertumbuhannya.    Kandungan karbohidrat  dan  selulosa  pada  masing- masing media disajikan pada tabel 5.
Tabel 5. Kandungan karbohidrat dan selulosa pada masing-masing media perlakuan
Sumber Media Karbohidrat Selulosa Thamrin dan Martina (2022) Jagung 66,99% 23% Thamrin dan Martina (2022) Dedak 34,18 – 34,75% 25% Wahyudi dkk. (2021) Santoso dkk. (2012) Kulit Singkong 69,7% 57% Nail dkk. (2020) Kulit Pisang 59% 14% Chatri dkk. (2018) Ampas Tebu - 50%

## Viabilitas Spora (%)
Berbagai macam media perbanyakan Trichoderma  sp .  pada  uji  ANOVA  tidak berpengaruh  nyata terhadap viabilitas spora Trichoderma sp  sehingga  tidak  dilakukan uji  lanjut  BNT 0,05 .  Rerata  viabilitas  spora pada  masing-masing  perlakuan  disajikan pada gambar 3.
Nilai dari viabilitas spora menunjukkan aktivitas  perkecambahan  oleh Trichoderma sp.  Menurut  Ramli  (2004)  dalam  Andari
dkk.  (2020),  menyatakan  bahwa  viabilitas spora  tergolong  baik  jika  nilainya  <80  – 100%,  sedang  <70-85%,  dan  kurang  >55- 70%. Mengacu pada rentang  nilai  viabilitas spora tersebut, viabilitas spora Trichoderma sp.  pada  media  kulit  singkong  (M3)  dan ampas tebu (M5) tergolong sedang, sedangkan pada media jagung (M1), dedak (M2), dan kulit pisang  (M4)  tergolong  kurang.  Hal  tersebut menandakan  bahwa  media  kulit  singkong (M3)  dan  ampas  tebu  (M5)  dapat  memacu
perkecambahan  spora Trichoderma sp.. Robinson (1978) dalam  Andari dkk. (2020) menyatakan  bahwa  spora  akan  berkecambah pada  media  yang  mengandung  nutrisi  yang sesuai  untuk  pertumbuhannya.  Kulit  singkong dan ampas tebu merupakan media yang diduga yang mengandung karbohidrat dan selulosa. Berdasarkan  pada  tabel  5,  selulosa  yang
terkandung  dalam  kulit  singkong  yaitu ±57%  dan  ampas  tebu  yaitu  50%.  Bilgrami dan Verma (1978), unsur utama yang dibutuhkan Trichoderma sp.  untuk  meningkatkan  jumlah dan  viabilitas  spora  adalah  karbon  dan nitrogen  yang  berperan  sebagai  sumber energi.
Gambar 3.  Histogram  rata-rata  viabilitas  spora Trichoderma sp.  pada  masing-masing media perlakuan

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  limbah ampas  tebu  (M5)  dan  kulit  singkong  (M3) berpotensi  sebagai  media  alternatif  untuk perbanyakan Trichoderma sp.  Hal  tersebut ditunjukkan oleh pertumbuhan Trichoderma sp.  yang  baik  pada  parameter  pengamatan visual,  masa  inkubasi,  kerapatan  spora,  dan viabilitas spora.

## Saran
Limbah ampas tebu dan kulit singkong dapat dikembangkan untuk media perbanyakan Trichoderma sp.  dengan  dilakukan  uji  kadar air  terlebih  dahulu  agar  sesuai  dengan pertumbuhan Trichoderma sp.  Selain  itu  juga diperlukan  penelitian  lanjutan  mengenai keefektifan Trichoderma sp.  yang  diperbanyak dengan  limbah  ampas  tebu  dan  limbah  kulit
singkong  pada  skala  laboratorium,  skala rumah  kaca,  atau  pada  spesifik  patogen tanaman.

## DAFTAR PUSTAKA
Andari,  N.  N.  A.,  Yunus,  M.,  dan  Asrul. 2020. Pengaruh  Masa  Inkubasi Biakan  Trihcoderma  sp.  Terhadap Kerapatan  Spora  dan  Viabilitasnya . Mitra Sain . 8(1): 95-103.
Balitbang  Pertanian.  2018. Info  Teknologi: Teknik Sederhana Memproduksi
Trichoderma sp. Kementrian Pertanian. http://bali.litbang.pertanian.go.id/ind /index.php/info_teknologi.  Diakses 28 April 2023 .
Chatri,  M.,  Handayani,  D.,  dan  Septiani,  J.
2018. Influence of Media (Mixture of Rice and Sugar Cane) on Trichoderma
harzianum Growth and it Resistance to Fusarium  oxysporum  by  In  Vitro . Bioscience. 2(1):  55-60.
Criswantara,  D.  2021. Pengaruh  Kulit Pisang  Kepok  pada  Media  Tanam Pertumbuhan  Jamur  Tiram  (Pleurotus Astreatus) Terhadap Pemberian Ampas  Tebu  dan  Pupuk  Organik  Cair (POC). Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa Pertanian (JIMTANI). 1(4): 1-12.
Day,  T.  M.  W.,  Beja,  H.  D.,  dan  Jeksen,  J. 2022. Teknik  Perbanyakan  Massal
Jamur Trichoderma sp. pada Beberapa Media Tumbuh Sebagai Agens Pengendali Hayati. Jurnal  LOCUS  Penelitian  dan Pengabdian. 1(2): 81-89.
Gusnawaty, H. S., Taufik, M., Bande, L. O.
S., dan Asis, A. 2017. Uji Efektivitas Beberapa Media untuk Perbanyakan
Agens  Hayati  Trichoderma  sp. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika. 17(1): 70-76.
Handiyanto, S., Hastuti, U. S., dan Prabaningtyas,
S.  2013. Pengaruh  Medium  Air Cucian  Beras  terhadap  Kecepatan Pertumbuhan  Miselium  Biakan  Murni Jamur  Tiram  Putih. Seminar  Nasional X  Pendidikan  Biologi  FKIP  UNS.  16 Oktober  2013.  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Universitas Negeri Malang: 1-6.
Hilakore,  M.  A.  2008. Peningkatan  Kualitas
Nutritif  Putak  Melalui  Fermentasi Campuran  Trichoderma  reesei  dan
Aspergillus niger sebagai Pakan Ruminansia . Tesis. Sekolah Pascasarjana Institut Prtanian Bogor. Jawa Barat.
Iswari,  P.,  Prasetyo,  J.,  Nurdin,  M.,  dan Dirmawati,  S.  R.  2021. Pengaruh Trichoderma  Spp.  dalam  Beberapa Jenis  Bahan  Organik  Terhadap Penyakit  Bulai  (Peronosclerospora
spp.). Jurnal Agrotek Tropika. 9 (1): 25-34.
Jumadi,  O.,  Juanda,  M.,  Caronge,  M.  W., dan  Syafruddin.  2021. Trichoderma dan Pemanfaatan . Biopress. Makassar.
Nail,  Y.  A.,  Ernawati,  dan  Suryani.  2020. Pemanfaatan  Kulit  Pisang  Kepok (Musa  paradisiaca  Linn.)  dan  Kulit Ubi  Kayu  (Manihot  utilisma  Pohl.) Sebagai Media Alternatif Pertumbuhan Jamur  Rhizopus  sp. Jurnal  Biosains dan Edukasi. 2(1): 24-28.
Prasetyawati, C. A dan Sri, R. D. 2017. Tahapan
Perbanyakan Jamur Trichoderma Harzianum  dengan  Media  Dedak  dan
Aplikasinya  pada  Tanaman  Murbei (Morus  sp.). Info  Teknis  EBONI. 14(1): 1-9.
Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan.
2014. Pengendalian  Penyakit  Jamur Akar  Putih  (JAP)  pada  Pembibitan Karet dengan Trichoderma sp.
Ramli,  N.  2004. Petunjuk  Teknis  pada Berbagai  Kegiatan  Laboratorium,
Laboratorium Lapangan. Balai Pengembangan  Proteksi  Tanaman Perkebunan Sumatera Utara. Medan.
Robinson,  P.  M.  1978. Practical  Fungal Physiologi .  John  Willey  and  Sons Chichester.
Thamrin, A., dan Martina, A. 2022. Pertumbuhan Agen Antagonis Trichoderma sp. PNE4 pada  Berbagai  Media  Pembawa. Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Riau.
Wahyudi, V. A., Wachid, M., dan Erykawati, L. 2021. Komposisi Nutrisi Media Alternatif dari  Kulit  Singkong,  Kulit  Pisang,  dan Whey Tahu serta Pola Pertumbuhan Bakteri  Lactobacillus  bulgaricus.
Jurnal  Sains  dan  Teknologi  Pangan. 6(2): 3856 – 3865.
Yogaswara,  Y.,  Suharjo,  R.,  Ratih,  S.,  dan Ginting, C. 2020. Kemampuan Isolat
Jamur  Trichoderma  spp.  Sebagai
Antagonis  Ganoderma  boninense dan  Plant  Growth  Promoting  Fungi (PGPF) .  Jurnal  Agrotek  Tropika. 8(2): 235-246.