Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi, Wulandari et al.

## KARAKTERISTIK FISIKO-KIMIA BISKUIT DENGAN FORTIFIKASI TEPUNG BELUT
Wulandari*, Herpandi, Shanti Dwita Lestari, Rizky Maharani Putri Program Studi Teknologi Hasil Perikanan, Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian
Universitas Sriwijaya,  Jalan. Palembang-Prabumulih KM 32 Indralaya,
Kabupaten Ogan Ilir 3066, Sumatera Selatan, Indonesia Telepon/Faks.: 0711-580934
*Korespondensi: wulandari@fp.unsri.ac.id Diterima: 27 November 2018/ Disetujui: 19 Juli 2019
Cara sitasi : Wulandari, Herpandi, Lestari SD, Putri RM. 2019. Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi tepung belut. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 22(2): 246-254.

## Abstrak
Biskuit merupakan makanan ringan untuk penunda lapar. Penelitian ini bertujuan menentukan karakteristik fisiko-kimia biskuit fortifikasi tepung belut pada beberapa tingkat konsentrasi yang berbeda. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan faktor perlakuan fortifikasi tepung belut 10; 20; 30; 40 dan 50%. Parameter uji yang dilakukan terdiri atas warna ( lightness, derajat hue, chroma ), komposisi kimia, kadar kalsium dan fosfor. Perlakuan fortifikasi tepung belut 10-50% pada pembuatan biskuit berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar abu, protein, karbohidrat, kalsium, fosfor, dan warna ( lightness dan derajat hue ), tetapi tidak berpengaruh nyata (p>0,05) terhadap kadar air, lemak dan nilai chroma . Biskuit belut memiliki kadar protein, air, abu dan lemak yang lebih tinggi dari standar mutu. Perlakuan terbaik yaitu fortifikasi tepung belut 30% dengan komposisi kimia biskuit yang dihasilkan memiliki kadar air 5,58±0,40% (b/b), abu 2,56±0,19% (b/b), lemak 30,72±4,02% (b/b), protein 15,89±0,55% (b/b) dan karbohidrat 46,92±2,04% (b/b) serta kandungan kalsium dan fosfor masing-masing 0,40±0,00% dan 0,58±0,01%.

## Kata kunci : biskuit, fortifikasi, fosfor, kalsium

## Physicochemical Characteristics of Biscuits With the Fortification of Asian Swamp Eel Flour
Abstract
Biscuits are light food to resist starving. This study was aimed to determine the physicochemical characteristics of the biscuits fortified with Asian swamp eel flour at several different concentration levels. Research design of this study Completely Randomized Design (CRD) with fortification of Asian swamp eel flour were 10; 20; 30; 40 and 50%. Testing parameters were color (lightness, hue and chroma), chemical content, calcium and phosphorus content. Treatments of 10-50% Asian swamp eel flour fortification on biscuit had significant effect (p<0.05) on ash content, protein, carbohydrate, calcium, phosphorus, and color (lightness and hue), but did not have significant effect (p>0.05 ) on moisture content, fat and chroma value. Asian swamp eel biscuits have higher levels of protein, moisture, ash and lipid than indonesian national quality standards of biscuits. The best treatment was 30% Asian swamp eel flour fortification with the chemical composition: moisture content 5.58±0.40% (w/w), ash 2.56±0.19% (w/w), lipid 30.72±4.02% (w/w), protein 15.89±0.55% (w/w) and carbohydrates 46.92±2.04% (w/w) while calcium and phosphorus content 0.40±0.00% and 0.58±0.01%, respectively.
Keywords: biscuits, calcium, fortification, phosphorus

## PENDAHULUAN
Biskuit merupakan makanan ringan yang dikonsumsi sebagai penunda lapar dan mudah didapatkan, serta merupakan jenis makanan ringan yang memiliki umur simpan yang lama (Caleja et al. 2017; Klunklin dan Savage 2018). Biskuit pada umumnya terbuat dari tepung, mentega dan gula sehingga menjadikan makanan ini kurang serat dan protein (Park et al. 2015). Perkembangan gaya hidup masyarakat yang mulai menyadari pola hidup sehat mengakibatkan permintaan terhadap makanan bernutrisi tinggi semakin meningkat. Kondisi tersebut menciptakan peluang untuk membuat produk biskuit yang kaya protein sehingga dapat menjadi makanan fungsional Makanan fungsional adalah sesuatu bahan makanan yang memberikan efek menyehatkan dan mengurangi resiko  timbulnya  penyakit  pada  tubuh (Siró et al. 2008;  Lordan et al . 2011).
Pengembangan produk biskuit berprotein tinggi tentu harus mempertimbangan aspek bahan baku yang digunakan. Biota perairan yang memiliki kandungan protein tinggi salah satunya adalah belut.
Belut ( Monopterus albus ) merupakan salah satu jenis ikan konsumsi air tawar Indonesia yang mengandung protein, lemak, vitamin dan mineral yang lebih tinggi dibanding jenis ikan lainnya. Seo et al . (2013) melaporkan bahwa kandungan protein belut yaitu 16,60±0,66%-17,70±0,47% (b/b), lemak 10,85±0,55-19,44±0,72% (b/b), abu 1,03±0,06-1,26±0,04% (b/b). Fortifikasi tepung belut sebagai bahan tambahan dalam pembuatan biskuit merupakan salah satu alternatif yang cukup menjanjikan. Kandungan gizi yang cukup tinggi pada belut dapat digunakan sebagai alternatif bahan fortifikasi untuk meningkatkan nilai nutrisi biskuit. Fortifikasi tepung belut pada pembuatan biskuit diharapkan menghasilkan produk akhir yang memiliki cita rasa sama seperti biskuit pada umumnya, tetapi memiliki kelebihan kandungan protein tinggi. Diversifikasi produk dari tepung ikan pernah dilakukan sebelumnya dengan fortifikasi tepung ikan nila pada roti (Adeleke dan Odedeji 2010), fortifikasi tepung tulang ikan bandeng pada
kue kering (Darmawangsyah et al . 2016), fortifikasi tepung tulang ikan nila pada cookies (Syadeto et al . 2017), dan penambahan tepung belut pada tempe (Andini et al. 2015).
Penelitian mengenai fortifikasi tepung belut pada produk biskuit belum dilaporkan, sehingga diperlukan penelitian karakteristik fisiko-kimia biskuit tepung belut.  Penelitian ini bertujuan menentukan karakteristik fisikokimia biskuit terbaik dengan fortifikasi tepung belut ( Monopterus albus ) pada beberapa tingkat konsentrasi yang berbeda.

## BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Bahan  utama yang digunakan pada penelitian ini adalah belut, tepung terigu (Kunci Biru, Bogasari), telur, butter (Orchid), gula (Gulaku) , baking powder (Koepoe), vanili (Koepoe), air lemon, natrium bikarbonat (Koepoe) dan bahan analisis lainnya. Peralatan yang digunakan terdiri dari timbangan digital (Pioneer TM Balances, USA), oven (Thermocenter Salvis TC-40 S, California, US), hotplate stirrer ( B-One, AHS-12A, Cina), dan Chromameter (Minolta CR-310, Tokyo, Japan).

## Pembuatan Tepung Belut
Metode pembuatan tepung belut mengacu pada modifikasi Litaay dan Santoso (2013). Belut disiangi dan dicuci bersih, kemudian ditiriskan untuk menghilangkan air yang tersisa pada proses pencucian. Belut ditimbang sebanyak 1 kg kemudian direndam ke dalam larutan natrium bikarbonat konsentrasi 0,8% dengan rasio 1:1 (b/v) selama 6 jam, kemudian dikukus selama 10 menit. Tahap selanjutnya dilakukan pengepresan, kemudian dikeringkan menggunakan oven pada suhu 60 o C selama 12 jam, setelah kering dilakukan penggilingan dan diayak menggunakan ayakan 100 mesh.

## Pembuatan Biskuit Belut
Pembuatan biskuit fortifikasi tepung belut mengacu pada Pratama et al . (2014) yang telah dimodifikasi. Bahan-bahan disiapkan berdasarkan formulasi yang telah ditentukan. Gula dan butter dikocok dengan mixer kecepatan rendah selama ± 2 menit
Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi, Wulandari et al.
hingga tercampur. Telur dimasukkan ke dalam adonan perlahan sambil tetap diaduk hingga campuran merata. Baking powder dan vanili dimasukkan ke dalam adonan, diaduk dengan mixer kecepatan sedang sampai tercampur selama ±2 menit, tambahkan tepung bel ut sebanyak 10-50 g dan tepung terigu sebanyak 50-90 g sesuai dengan perlakuan. Aduk perlahan hingga terbentuk adonan biskuit. Adonan digiling menggunakan rolling pin sehingga menghasilkan bentuk yang memipih. Adonan yang telah terbentuk dicetak dan diletakkan pada loyang dan ditusuk pada bagian atas adonan biskuit agar penyebaran panas merata. Adonan biskuit dipanggang dalam oven pada suhu 160 o C selama ±20 menit kemudian dikeluarkan dari oven. Formulasi biskuit dengan fortifikasi tepung belut dapat dilihat pada Table 1 .
Karakterisasi Biskuit Belut Karakterisasi biskuit belut yang dilakukan terdiri atas analisis fisik dan kimia. Analisis  fisik  yang  dilakukan  yaitu  warna ( Nurul et al. 2009) , analisis kimia terdiri dari kadar air, abu,  lemak dan  protein mengacu pada AOAC (2005), kadar karbohidrat by different (BeMiller 2003), kadar kalsium dan fosfor (Apriyantono et al . 1989).
Analisis kadar kalsium
Kadar kalsium dianalisis menggunakan Atomic Absorption Spectrofotometer (AAS). Prinsip penetapan kalsium dengan metode AAS yaitu sampel didestruksi secara basah kemudian diukur pada panjang gelombang 420 nm. Sampel yang telah diabukan
dilarutkan dalam asam klorida. Mineral yang diatomisasi akan menyerap energi yang diemisikan oleh lampu katoda. Jumlah energi yang terserap sebanding dengan jumlah kalsium pada sampel. Larutan sampel dan blanko diukur absorpsi emisi dengan AAS panjang gelombang 420 nm dan dibandingkan dengan standar Ca yang telah diketahui konsentrasinya. Rumus perhitungan kadar Ca adalah sebagai berikut:

## Keterangan :
FP  =   Faktor Pengenceran

## Analisis kadar fosfor
Kadar fosfor pada sampel ditentukan dengan metode kolorimetri yang mengacu pada Apriyantono et al. (1989). Prinsip kerja metode ini yaitu larutan ortofosfat dilarutkan dengan pereaksi ammonium molibdovanadat sehingga membentuk senyawa molibdovanadat asam fosfat yang berwarna kuning. Larutan didiamkan selama 10 menit dan diukur menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang 400 nm. Nilai absorbansi dibandingkan dengan standar fosfor yang telah diketahui konsentrasinya. Rumus perhitungan kadar fosfor  adalah sebagai berikut:
Table 1 Formulation of biscuit with Asian swamp eel flour in 100 g of wheat flour
Compositions A 1 A 2 A 3 A 4 A 5 Wheat flour (g) 90 80 70 60 50 Asian swamp eel flour (g) 10 20 30 40 50 Sugar (g) 37 37 37 37 37 Butter (g) 46 46 46 46 46 Egg (g) 31 31 31 31 31 Baking powder (g) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 Vanilla (g) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 Lemon juice (g) 13 13 13 13 13 FP x (konsentrasi sampel-konsentrasi blangko)
1000 x berat sampel (mg) Kadar Ca (% bb) = x 100
Fosfor total sebagai P 2 O 5 (% b/b) = x 100 x C x P W 100 100-KA
Keterangan: C = mg P 2 O 5 dari pembacaan kurva standar P = faktor pengenceran W = berat contoh mg KA = kadar air %

## Analisis Data
Data yang diperoleh pada analisis proksimat, kadar kalsium, kadar fosfor dan warna diolah menggunakan SPSS dengan analisis Rancangan Acak Lengkap (RAL) (Mattjik dan Sumertajaya 2013). Uji lanjut yang digunakan adalah uji beda nyata jujur (BNJ) pada taraf kepercayaan 95% apabila data berpengaruh nyata.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik Fisiko-Kimia Biskuit Belut
Perlakuan fortifikasi tepung belut 10- 50% pada pembuatan biskuit berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar abu, protein, karbohidrat, kalsium, fosfor, dan warna ( lightness dan derajat hue ), tetapi tidak berpengaruh nyata (p>0,05) terhadap kadar air, lemak dan nilai chroma ( Table 2 ). Syarat mutu biskuit yang baik harus memenuhi SNI 01-2973-2011 yaitu kadar air maksimum 5% (b/b), kadar protein minimum 5% (b/b), dan SNI 01-2973-1992 yaitu kadar lemak bebas
maksimum 1% (bb), karbohidrat minimum 70% (b/b), dan kadar abu maksimum 1,5% (b/b).
Karakterististik Fisik (Warna) Lightness
Nilai koreksi warna lightness berkisar 0 untuk warna yang paling gelap (hitam) dan 100 untuk warna yang paling terang (putih). Nilai lightness biskuit dengan fortifikasi tepung belut semakin menurun seiring dengan semakin banyak jumlah tepung belut yang ditambahkan. Perlakuan penambahan tepung belut 10% menghasilkan biskuit dengan nilai lightness 63,45±0,21 lebih tinggi dibandingkan dengan penambahan tepung belut 50% yaitu 53,75±0,92.  Perlakuan fortifikasi tepung belut 10-50% berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap nilai lightness biskuit belut.
Perlakuan 10 dan 20% berbeda dengan 30-50%, hal ini menunjukkan bahwa fortifikasi tepung belut dengan konsentrasi tinggi menyebabkan warna biskuit semakin gelap (hitam).  Hal ini sejalan dengan hasil penelitian Mervina et al . (2012) menyatakan bahwa hasil pengukuran derajat kecerahan warna tepung ikan lebih rendah dibandingkan dengan tepung terigu, sehingga semakin banyak penambahan tepung ikan maka biskuit akan semakin gelap. Nurul et al . (2009) menyatakan bahwa daging ikan mengandung beberapa
Table 2 Phsycochemical characteristics of biscuit with the fortification of Asian swamp eel flour
Phsycochemical characteristics Persentage of fortification Asian swamp eel flour 10% 20% 30% 40% 50% SNI 2973 Lightness 63.45±0.21 a 59.95±0.78 b 57.50±0.57 c 54.8±1.13 c 53.75±0.92 c Hue 22.15±0.78 a 19.00±0.42 b 17.65±0.49 c 16.2±0.85 d 14.9±0.99 d Chroma 8.70±1.27 a 9.35±0.92 a 7.70±1.13 a 8.00±0.71 a 8.40±0.99 a Moisture (%) 5.45±0.13 a 5.74±0.49 a 5.58±0.40 a 6.31±0.28 a 6.69±1.59 a Max 5% * Ash (%) 1.59±0.04 a 1.72±0.06 a 2.56±0.19 a 2.64±0.24 a 3.08±0.24 b Max 1.5% ** Lipid (%) 33.47±2.29 a 31.09±1.74 a 30.72±4.02 a 30.31±1.61 a 27.29±0.81 a Min 9% ** Protein (%) 8.71±0.27 a 10.94±0.51 b 15.89±0.55 c 17.68±0.60 d 18.12±0.19 d Min 5% *
Carbohydrate (%) 53.53±3.85 a 50.76±3.15 b 46.92±2.04 c 41.19±1.92 d 41.82±3.15 e Min 70% **
Phosphorus (%) 0.156±0.00 a 0.24±0.00 b 0.40±0.00 c 0.49±0.00 d 0.61±0.00 e Calcium (%) 0.16±0.00 a 0.30±0.01 b 0.58±0.01 c 0.67±0.01 d 0. 2±0.00 e
Information: The different letter in the same column assigns significantly different . *SNI  2973-2011, **SNI 2793-1992
Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi, Wulandari et al.
pigmen yang berkontribusi terhadap produk akhir yang dihasilkan. Beberapa senyawa nitrogen antara lain mioglobin, hemoglobin, dan hemosianin berkontribusi terhadap warna daging ikan dan kerang (Haard et al .  1994). Mohamed et al . (2014) menyatakan bahwa nilai lightness biskuit dengan penambahan konsentrat protein ikan 1% yaitu 58,82±0,08, sedangkan nilai lightness perlakuan penambahan konsentrat protein ikan 3% menurun yaitu 56,59±0,02. Penelitian yang dilakukan Nurul et al . (2009) menunjukkan bahwa peningkatan jumlah tepung ikan atau penurunan jumlah tapioka yang ditambahkan menyebabkan warna kerupuk ikan menjadi lebih gelap.

## Derajat Hue
Nilai derajat hue adalah karakteristik warna berdasarkan cahaya yang dipantulkan oleh objek yang merupakan nilai keseluruhan yang didominasi pada suatu produk atau warna produk. Nilai derajat hue biskuit dengan fortifikasi tepung belut berkisar antara 14,9±0,99-22,15±0,78. Berdasarkan kisaran nilai derajat hue 342 o –18 o adalah red purple ( RP ) dan 18 o –54 o adalah red ( R ), maka warna biskuit yang dihasilkan dalam penelitian ini adalah merah. Perlakuan penambahan tepung belut 10-50% berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap nilai hue biskuit. Tren derajat hue menunjukkan bahwa semakin meningkat jumlah fortifikasi tepung belut menyebabkan derajat hue menurun. Hal ini diduga karena semakin banyak fortifikasi tepung belut yang digunakan maka biskuit yang dihasilkan akan lebih merah dan  gelap.
Chroma Chroma adalah tingkatan warna berdasarkan ketajaman, berfungsi untuk mendefinisikan warna suatu produk cenderung murni, cerah atau kusam. Fortifikasi tepung belut pada pembuatan biskuit tidak berpengaruh nyata (p>0,05) terhadap nilai chroma yang dihasilkan.
Biskuit yang dihasilkan dari fortifikasi tepung belut memiliki warna kusam dengan nilai  berkisar antara 7,70±1,13-9,35±0,92. Hal ini diduga karena tepung belut yang digunakan adalah bagian daging, kulit dan
kepala belut, yang memiliki pigmen coklat sehingga fortifikasi belut menghasilkan warna yang tidak cerah atau kusam dan cenderung menjadi lebih gelap. Selain itu, warna cokelat kusam juga disebabkan oleh reaksi maillard selama proses pengovenan . Hal  ini  sejalan  dengan  hasil  penelitian Chambo et al . (2017) bahwa penambahan tepung ikan nila 5-15% pada biskuit menyebabkan nilai chroma meningkat. Abraha et al. (2018) menyatakan bahwa peningkatan warna kuning kecokelatan pada biskuit dengan fortifikasi konsentrat protein ikan karena reaksi maillard antara gula dan asam amino bebas.

## Karakteristik Kimia Kadar air
Fortifikasi tepung belut pada pembuatan biskuit tidak berpengaruh nyata (p>0,05) terhadap kadar air biskuit. Kadar air biskuit dengan fortifikasi tepung belut berkisar antara 5,45±0,134-6,69±1,59% (b/b). Nilai kadar air maksimal tepung terigu 14,50% SNI 01-3751-2009 (BSN 2009) . Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian Klunklin dan Savage (2018) bahwa penambahan tepung kerang hijau 10-20% pada biskuit meningkatkan kadar air secara berurutan yaitu  5,79±0,2%-6,50±0,1% (b/b). Kadar air biskuit dengan fortifikasi konsentrat protein ikan  1%-3%  yaitu  3,68±0,05-4,00±0,01% (Mohamed et al . 2014). Nilai kadar air biskuit dengan fortifikasi tepung belut belum memenuhi standar mutu yang ditetapkan SNI 01-2973-2011 yaitu maksimum 5% (b/b).

## Kadar abu
Kadar abu biskuit dengan fortifikasi tepung belut berkisar antara 1,59±0,04- 3,08±0,24% (b/b). Nilai kadar abu meningkat seiring dengan banyaknya jumlah tepung belut yang ditambahkan. Kadar abu pada tepung belut berkisar antara 10-20% (b/b) (Moeljanto 1992). Fortifikasi tepung belut 50% berbeda nyata (p<0,05) dengan perlakuan fortifikasi tepung belut 10-40%.
Kadar abu biskuit dengan fortifikasi tepung belut yang dihasilkan belum memenuhi standar mutu kadar abu biskuit SNI 01-2973-1992
yaitu maksimum
1,5% (b/b). Tren peningkatan nilai kadar abu pada penelitian ini sejalan dengan nilai kadar abu  fortifikasi konsentrat protein ikan sebanyak
1; 2 dan 3% pada biskuit secara berurutan yaitu 1,80±0,03%, 1,84±0,01% dan 1,88±0,02%
(b/b) (Mohamed et al . 2014), biskuit dengan fortifikasi tepung kerang hijau 10; 15 dan 20% nilai kadar abu secara berurutan yaitu 2,85±0,01%, 3,15±0,00% dan 3,31±0,01% (b/b) (Klunklin dan Savage 2018).

## Kadar lemak
Fortifikasi tepung belut pada pembuatan biskuit tidak berpengaruh nyata (p>0,05) terhadap kadar lemak. Nilai kadar lemak biskuit dengan penambahan tepung belut yaitu 27,29±0,81%-33,47±2,29% (b/b).
Kadar  lemak  tepung  belut  yaitu  10,25% (Sastrodihardjo et   al .  2012). Larutan  natrium bikarbonat 0,8% yang direndam  dengan tepung ikan cakalang selama 2 jam menyebabkan nilai kadar lemak menurun (1,05%) dibandingkan dengan perendaman ikan dengan air (1,83%) (Litaay dan Santoso 2013). Nilai kadar lemak biskuit dengan fortifikasi tepung tulang ikan jangilus ( Istiophorus sp.) mengalami penurunan penambahan tepung tulang ikan 0% nilai kadar lemak 13,30% sedangkan penambahan tepung  tulang  20%  nilai  kadar  lemak  7,70% (Pratama et al . 2014). Hal ini diduga penggunaan natrium bikarbonat pada saat perendaman belut sebelum penepungan mampu mengurangi kadar lemak.  Natrium bikarbonat (NaHCO 3 ) bersifat alkali. Cho et al . (2005) menyatakan bahwa penggunaan senyawa asam dan alkali mampu membuka matrik pada jaringan, hal tersebut memungkinkan lemak dan senyawa lainnya terlepas ke larutan perendam.

## Kadar protein
Perlakuan fortifikasi tepung belut 10; 20; 30; 40 dan 50% berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar protein biskuit yang dihasilkan. Nilai kadar protein berkisar antara 8,71±0,27%-
18,12±0,19% (b/b). Peningkatan kadar protein pada biskuit diduga karena tingginya kandungan protein pada belut. Wijayanti dan
Setiyorini (2018) menyatakan bahwa nilai kadar protein pada belut yaitu 17,92±3,98%
(b/b), 71,81±1,14%  (b/k) (Arizal et al . 2018).
Fortifikasi konsentrat protein ikan sebesar 1-3% berpengaruh nyata terhadap protein biskuit yaitu 10,22±0,08-12,00±0,05% (b/b) (Mohamed et al . 2014). Daging ikan nila sebanyak  5-15% yang ditambahkan pada pembuatan roti dapat meningkatkan kadar protein yaitu 12,24 ±0,04 -14,30±0,19% (b/b) ( Chambo et al . 2017) . Fortifikasi konsentrat protein ikan 5% dapat meningkatkan kadar protein pada biskuit yaitu 12,50±0,94 (Ibrahim 2009). Protein pada biskuit dari penelitian ini memenuhi standar mutu biskuit yang ditetapkan SNI 01-2973-2011 dengan nilai minimum 5%.

## Kadar karbohidrat
Persentase penambahan tepung belut 10- 50% pada pembuatan biskuit berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar karbohidrat. Kadar karbohidrat biskuit semakin menurun dengan bertambahnya jumlah tepung belut yang ditambahkan. Perlakuan penambahan tepung belut 10% nilai kadar karbohidratnya yaitu 53,53±3,85% (b/b), sedangkan nilai karbohidrat pada perlakuan penambahan tepung belut 50% adalah 41,82±3,15% (b/b).
Biskuit yang dihasilkan dari penelitian ini memiliki nilai karbohidrat yang lebih rendah dibandingkan dengan syarat standar mutu biskuit yang ditetapkan SNI 01-2973-1992 yaitu minimum 70%. Mohamed et al . (2014) melaporkan bahwa semakin tinggi jumlah konsentrat protein ikan yang ditambahkan dalam pembuatan biskuit maka nilai karbohidrat semakin menurun.

## Kadar kalsium dan fosfor
Kadar kalsium biskuit dengan fortifikasi tepung belut yaitu 0,16±0,00%-0,72±0,00% (b/b). Perlakuan penambahan tepung belut 10-50% berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar kalsium biskuit yang dihasilkan. Kadar kalsium semakin meningkat seiring dengan banyaknya jumlah tepung belut yang ditambahkan. Peningkatan kadar kalsium diduga karena tepung belut yang digunakan secara keseluruhan yaitu mulai dari kepala, daging dan tulang sehingga kandungan mineralnya cukup tinggi. Kandungan kalsium pada belut sawah yaitu 5.0468,50±2.907,59 mg/kg ( Arizal et al. 2018) . Kandungan kalsium
Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi, Wulandari et al.
belut lebih tinggi dibandingkan dengan ikan nila ( 1.600,2±1,3 mg/kg) dan ikan lele (2.300,9±4,3 mg/kg) (Emurotu et al . 2014). Peningkatan kadar kalsium juga terjadi pada produk biskuit dengan fortifikasi tepung tulang ikan lele, fortifikasi tepung lele 10; 20 dan 30% menyebabkan peningkatan kadar kalsium secara berurutan yaitu 6,72; 7,59 dan 10,15% (Mahmudah 2013). Biskuit yang ditambahkan tepung belut memiliki kadar kalsium yang lebih tinggi (Putri 2015). Fortifikasi tepung belut 10-50% berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar fosfor biskuit. Kadar fosfor biskuit dengan fortifikasi tepung belut berkisar antara 0,156±0,00%-0,61±0,00% (b/b). Perlakuan penambahan tepung belut yang semakin banyak menyebabkan nilai kadar fosfor juga meningkat. Kadar fosfor pada  belut  sawah  yaitu  32.975,50±1.463,5 (Arizal et al . 2018). Kadar fosfor belut 30% lebih tinggi dibandingkan dengan ikan air tawar lainnya yaitu ikan nila (5.516-9.476 mg/ kg), ikan lele (7.398-9.988 mg/kg), ikan rohu (3.828-6.794 mg/kg) (Sen et al . 2011) dan ikan rainbow trouth yang hanya 3.378,78 mg/kg (Gokoglu et al . 2004).

## KESIMPULAN
Fortifikasi tepung belut 10-50% pada pembuatan biskuit  berpengaruh nyata terhadap kadar abu, protein, karbohidrat, kalsium, fosfor, dan warna tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap kadar air, lemak dan nilai chroma. Komposisi kimia biskuit dengan fortifikasi tepung belut terbaik yaitu pada perlakuan penambahan tepung belut sebanyak 30%.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC] Association of Official Analytical Chemyst. 2005. Official Method of Analysis of The Association of Official Analytical of  Chemist. Arlington, Virginia (USA) : Published by The Association of Official Analytical Chemist. Inc. Adeleke RO, Odedeji JO. 2010. Acceptability studies on bread fortified with tilapia fish flour. Pakistan Journal of Nutrition . 9(6): 531-534. Abraha B, Mahmud A, Admassu H, Yang F,
Tsighe N, Girmatsion M, Xia W, Magoha P, Yu P, Jiang Q, Xu Y. 2018. Production and quality evaluation of biscuit incorporated with fish fillet protein concentrate. Journal of Nutrition and Food Science . 8(6): 1-13. Andini S, Virginia G, Hartini S. 2015. Peningkatan kadar protein, lemak, dan asam lemak tak jenuh pada tempe akibat penambahan tepung belut ( Monopterus albus Zuieuw) dan uji sensoris tempe belut. Jurnal Teknologi Pangan dan Hasil Pertanian . 12(1): 32-43. Apriyantono AD, Fardiaz, Puspitasari NL, Sedamawati, Budiyanto S. 1989. Analisis Bahan Pangan. PAU Pangan dan Gizi. Bogor (ID): IPB Press.
Arizal M, Khairi NSHM, Ha HC, Nguang SI, Ikhwaudin M, Poh SC, Komilus CF. 2018. Proximate and mineral compositions of rice field eel ( Monopterus albus ). International Journal of Engineering and Technology . 7(4): 72-77. BeMiller JN. 2003. Carbohydrate Analysis. New York (USA): Taylor & Francis Group, LLC.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 1992. Mutu dan cara uji biskuit-SNI 01-2973- 1992. Jakarta (ID): Badan Standardisasi Nasional.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2009. Tepung terigu sebagai bahan pangan- SNI 3751-2009 . Jakarta (ID): Badan Standardisasi Nasional.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2011.
Biskuit - SNI 01-2973-2011 . Jakarta (ID): Badan Standardisasi Nasional.
Caleja C, Barros L, Antonio AL, Oliveira MBPP, Ferreira ICFR. 2017. A comparative study between natural and synthetic antioxidants: evaluation of their performance after incorporation into biscuits. Food Chemistry. 216: 342-346. Cho SM, Gu YS, Kim SB. 2005. Extracting optimization and physical properties of yellowfin tuna ( Thunnus albacares ) skin gelatin compared to mammalian gelatins. Food Hydrocolloids. 19(2): 221-229. Chambo APS, Souza MLR, Oliveira ERN, Mickha JMG, Marques DR, Maistrovicz FC, Visentrainer JV, Goes ESR. 2017. Roll enriched with Nile tilapia meal:
sensory, nutritional, technological and microbiological characteristics. Food
Science and Technology . 49(1): 317-323.
Darmawangsyah, Jamaludin P, Kadirman. 2016. Fortifikasi tepung tulang ikan bandeng ( Chanos chanos ) dalam p embuatan kue kering. Jurnal Pendidikan Teknologi Pertanian . 2(2) : 149-156. Emurotu JE, Yahaya A, Adegbe AA. 2014.
Determination of some mineral elements in fresh and smoked  fish of tilapia ( Oreochromis noliticus ) and catfish ( Clarius gariepinus ) from Ibaji, Kogi State,
Nigeria. Scientia Africana . 13(2): 30-35. Gokoglu N, Yerlikaya P, Cengiz E. 2004. Effects of cooking methods on the proximate composition and mineral contents of rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss ). Food Chemistry . 84(1): 19–22. Haard NF, Simpson BK, Pan BS. 1994.
Sarcoplasmic proteins and other nitrogenous compounds. In Sikorski ZE, Pan BS, Shahidi F. (Eds.). Seafood Proteins. New York (US): Chapman and Hall. Ibrahim SM. 2009. Evaluation of production and quality of salt-biscuits supplemented with fish protein concentrate. World Journal of Dairy and Food Sciences .
4(1): 28-31.
Klunklin W, Savage G. 2018.  Physicochemical properties and sensory evaluation of wheat-purple rice biscuits enriched with green-lippe mussel powder ( Perna canaliculus ) and spices. Journal of Food
Quality . 41(1): 1-9. Litaay C, Santoso J. 2013. Pengaruh perbedaan metode perendaman dan lama perendaman terhadap karakteristik fisiko-kimia tepung ikan cakalang ( Katsuwonus pelamis ). Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis. 5(1): 85-92. Lordan S, Paul Ross R, Stanton C. 2011. Marine bioactives as functional food ingredients: potential to reduce the incidence of chronic diseases. Marine Drugs . 9(6):
1056-1100.
Mahmudah S. 2013. Pengaruh substitusi tepung tulang ikan lele ( Clarias batrachus ) terhadap kadar kalsium, kekerasan, dan daya terima biskuit. [Skripsi]. Surakarta
(ID): Universitas Muhammadiyah surakarta.
Mattjik AA, Sumertajaya IM. 2013. Perancangan Percobaan dengan Aplikasi
SAS an Minitab . Bogor (ID): IPB Press. Mervina, Kusharto CM, Marliyati SA. 2012. Formulasi biskuit dengan sibsitusi tepung ikan lele dumbo ( Clarias gariephinus ) dan isolat protein kedelai ( Glycine max ) sebagai makanan potensial untuk balita kurang gizi. Jurnal Teknologi dan Hasil
Pangan . 23(1): 9-16. Moeljanto R. 1992. Pengolahan Hasil Samping
Ikan . Jakarta (ID): Penebar Swadaya. Mohamed GF, Sulieman AM, Soliman ING, Bassiuny SS. 2014. Fortification of biscuits with fish protein concentrate. World Journal of Dairy and Food Sciences. 9(2): 242-249. Nurul H, Boni I, Noryati I. 2009. The effect of different ratios of Dory fish to tapioca flour on the linear expansion, oil absorption, colour and hardness of fish crackers. International Food Research
Journal. 16: 159-165. Park J, Choi I, Kim Y. 2015. Cookies formulated from fresh okara using starch, soy flour and hydroxypropyl methylcellulose have high quality and nutritional value. LWT- Food Science and Technology . 63(1): 660–
666.
Pratama RI. 2014. Karakteristik biskuit dengan penambahan tepung tulang ikan jangilus.
Jurnal Akuatik. 5(1): 30-39. Putri TA. 2015. Karakteristik fisiko-kimia dan sensori biskuit dengan penambahan tepung ikan motan. [Skripsi]. Indralaya
(ID): Universitas Sriwijaya.
Sastrodihardjo S, Dewi L, Hasan GE. 2012.
Penambahan tepung belut ( Monopterus albus Zuieuw) terhadap kualitas tempe kedelai lokal ditinjau dari kadar protein, kadar air, kadar lemak, dang angka ketidakjenuhan. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains VII UKSW . Sen I, Shandil A, Shrivastava V. 2011. Study for determination of heavy  metals in fish species of the river Yamuna (Delhi) by inductively coupled plasma-optical emission spectroscopy
Karakteristik fisiko-kimia biskuit dengan fortifikasi, Wulandari et al.
(ICP-OES). Advances in Applied Science Research . 2(2): 161–166. Seo JS, Choi JH, Seo JH, Ahn TH, Chong WS, Kim SH, Cho SH, Ahn JC. 2013. Comparison of major nutrients in eels Anguilla japonica cultured with different formula feeds or at different farms. Fisheries and  Aquatic  Science.
16(2): 85-92.
Siró I, Kápolna E, Kápolna B, Lugasi A. 2008.
Functional food. Product development,
marketing and consumer acceptance-a review. Appetite . 51: 456–467.
Syadeto HS, Sumardianto, Purnamayati L. 2017. Fortifikasi tepung tulang ikan nila ( Oreochromis niloticus ) sebagai sumber kalsium dan fosfor serta mutu cookies. Jurnal Ilmiah Teknosains. 3(1): 17-21 Wijayanti I, Setiyorini ESS. 2018. Nutritional content of wild and cultured eel ( Anguilla bicolor ) from southern coast of Central Java . Ilmu Kelautan . 23(1): 37-44.