## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK DAUN PEPAYA DAN DAUN CENGKEH SECARA IN VITRO
Novi Elisa 1 , Yustisia Dian Advistasari 2 , Ahmad Fuad Masduqi 3 1,2,3 Stifar Yayasan Pharmasi Semarang Email : novieliza737@gmail.com

## Abstrak
Indonesia  kaya  akan  tanaman  herbal  yang  belum  banyak  dibudayakan  sebagai  pengobatan, masyarakat  memanfaatkan  tanaman  sebagai  pewarna  makanan,  olahan  minuman  dan  makanan lainnya.  Perkembangan  zaman  masyarakat  lebih  memilih  untuk  menggunakan  makanan  siap  saji sehingga kurang dalam memahami khasiat dan kandungan pada makanan tersebut. Radikal bebas memiliki  efek  yang  relatif  dan  tidak  stabil  Antioksidan  merupakan  zat  yang  dapat mempertahankan dan melindungi tubuh dengan baik oleh penyebab senyawa radikal bebas. Tujuan dalam  penelitian  ini  adalah  menguji  total  flavonoid  dan  uji  antioksidan  dari  bahan  alam  ekstrak daun  pepaya  dan  daun  cengkeh.  Metode  penelitian  mengguanakan  determinasi  tanaman  dengan pemilihan  sempel  yang  segar,  uji  total  flavonoid  yaitu  Kandungan  flavonoid  total  ditentukan dengan  spektrofotometri  UV-VIS  dengan  panjang  gelombang  500  ppm.  Sedangkan  pada  uji antioksidan mengguanakan metode DPPH yang dihasilkan dengan nilai IC 50. Hasil penelitian ini uji total  flavonoid  antara  ekstrak  dari  daun  pepaya  dan  ekstrak  daun  cengkeh  yang  dapat  memiliki kandungan  total  flavonoid  tebaik  adalah  ekstrak  daun  cengkeh  dengan  total  (61.017±0.061),  uji antioksidan yang kuat adalah ekstrak daun cengkeh dengan nilai IC 50 31.19 % . .
Kata kunci: daun pepaya, daun cengkeh, total flavonoid, antioksida

## ANTIOXIDANT ACTIVITY OF HEMP LEAF EXTRACT AND CENGKEH LEAVES IN VITRO

## Abstract
Indonesia  is  rich  in  herbal  plants  which  have  not  been  widely  cultivated  as  medicine,  people  use plants  as  food  coloring,  processed  drinks  and  other  foods.  In  the  current  era,  people  prefer  to  use ready-to-eat  food,  so  they  do  not  understand  the  properties  and  ingredients  of  these  foods.  Free radicals have relatively unstable effects. Antioxidants are substances that can defend and protect the body  properly  by  causing  free  radical  compounds.  The  purpose  of  this  study  was  to  test  the  total flavonoids and antioxidant tests from natural ingredients  extracts of papaya leaves and clove leaves. The  research  method  used  plant  determination  by  selecting  fresh  samples,  the  total  flavonoid  test, namely the total flavonoid content was determined by UV-VIS spectrophotometry with a wavelength of 500 ppm. Meanwhile, the antioxidant test using the DPPH method resulted in an IC50 value. The results  of  this  study  tested  the  total  flavonoids  between  papaya  leaf  extract  and  clove  leaf  extract which could have the best total flavonoid content was clove leaf extract with a total (61.017 ± 0.061), papaya leaf with a total (54.982 ± 1.073) and in the strong antioxidant test was clove leaf extract with an IC50 value of 31.19 %.. papaya leaf IC50 403.15 %
Keywords: papaya leaf, clove leaf, total flavonoids, antioxidants

## Pendahuluan
Indonesia  kaya  akan  tanaman  herbal  yang belum
banyak dibudayakan sebagai pengobatan, masyarakat memanfaatkan tanaman  sebagai  pewarna  makanan,  olahan minuman dan makanan lainnya. Perkembangan zaman  masyarakat  lebih  memilih  untuk menggunakan  makanan  siap  saji  sehingga kurang dalam memahami khasiat dan kandungan  pada  makanan  tersebut.  Minyak goreng  yang  digunakan  sebagai  bahan  untuk mengolah makanan siap saji, sehingga makanan  yang  telah  dikonsumsi  mengandung lemak  yang  cukup  tinggi.  Tingginya  lemak didalam  makanan  hingga  dapat  dikonsumsi sehari-hari  akan  menyebabkan  radikal  bebas yang  cukup  tinggi  di  dalam  tubuh  seseorang. Radikal  bebas  memiliki  efek  yang  relatif  dan tidak stabil. 1 Radikal  bebas  berbahaya  bagi  tubuh seseorang jika tidak segera dilakukan pencegahan,  radikal  bebas  dapat  merusak komponen-komponen  dalam  sel  yaitu  senyawa yang  mudah  teroksidasi  seperti  DNA,  protein, lipid  dan  didalam  tubuh  dapat  merusak  asam lemak  tak  jenuh  pada  membran  sel  di  dalam tubuh. 2
Antioksidan  merupakan  zat  yang  dapat mempertahankan dan melindungi tubuh dengan baik  oleh  penyebab  senyawa  radikal  bebas. Radikal  bebeas  adalah  senyawa  yang  memiliki electron  bebas  yang  bekerja  dengan  mencari pasangan  elektron  bebas  dan  relatif  pada senyawa  yang  mudah  teroksidasi.  Antioksidan terbagi menjadi dua yaitu  antioksidan sintentik dan  antioksidan  alami.  Antioksidan  sintetik semakin berkurang dikarenakan semakin berkurang  karena  dapat  menimbulkan  efek yang  kurang  baik  pada  keseharan  seperti gangguan  pada  hati  dan  dapar  menimbulkan karsionogenik  sehingga  dapat  diganti  dengan antioksidan  alami.  Antioksidan  alami  adalah senyawa yang terdapat dari bahan alam. 1 Senyawa  antioksidan  dari  tanaman  adalah fenol  dan  turunannya. 3 Salah  satu  tanaman yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  pengobatan, bahan  makanan  dan  bahan  minuman  adalah daun  pepaya  dan  daun  cengkeh.  Daun  pepaya di  pulau  jawa  dikenal  dengan  kates  dan dimanfaatkan untuk pengobatan malaria, malnurisi,  hipertensi  dan  pengobatan  lainnya. daun  pepaya  memiliki  kandungan  triterpenoid dan mikronutrien. 4 Daun pepaya juga memiliki
kandungan flavonoid, saponin, alkaloid, glikosida, fenol. 5
Daun  cengkeh  merupakan  tanaman  yang dikenal  dengan  bahan  baku  pembuatan  rokok, makanan,  minuman  dan  obat-obatan.  Cengkeh memiliki  komponen  eugenol  dalam  jumlah yang  cukup  besar  yang  memiliki  sifat  sebgai stimulant, anastesi local, karminatif, antiemetic,  antiseptik  lokal  dan  antispasmodik. Selain  itu  ekstrak  dari  daun  cengkeh  memiliki kandungan  senyawa  saponin,  tannin,  alkaloid, glikosida dan flavonoid.
Tanaman  cengkeh  di  Sulawesi  utara bagian  daun  digunakan  sebagai  limbah. Sedangkan  daun  dari tanaman cengkeh mengandung  minyak  atsiri  dan  komponen senyawa fenolik yang belum banyak dimanfaatkan  oleh  masyarakat.  Komponen fenolik  merupakan  bagian  dari  antioksidan alami yang dapat dimanfaarkan sebagai sumber kesehatan kesehatan bagi manusia. 6 Berdasarkan  informasi  diatas  tentang antioksidan  alami  perludilakukan  penelitian untuk menentukan aktivitas antioksidan, penentuan  total  fenol  sehingga  perlu  uji antioksidan dan uji total flavonoid dari ekstrak daun pepaya dan ekstrak daun cengkeh. 6
Salah  satu  metode  untuk  menentukan aktivitas  antioksidan  degan  menggunakan
DPPH ( 1,1-diphenyl-2picrylhidrazil ). Digunakan  untuk  menguji  kemampuan  sebagai penangkap  radikal  bebas  dalam  suatu  bahan atau  ekstrak.  Metode  ini  memiliki  keunggulan dengan cara bekerja cepat dan relatif sederhana. Sedangkan  metode  yang  digunakan  uji  total flavonoid adalah dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## Alat dan Bahan
Beberapa  bahan  yang  digunakan  pada Penelitian  adalah  ekstrak  daun  pepaya  dan daun  cengkeh,  etanol,  methanol,  heksna, aquades,  natrium  karbonat,  etanol  96%  p.a, HCL 0,5 N, pereaksi Mayer, preaksi Dragendorf,  pereaksi    Bourchart,  HCL  pekat, serbuk  Mg,  FeCl 3 2,2-  Difenil-1-  Pikrihidrazil (DPPH). 7 rotary  evaporator,  desikator,  labu ukur,  botol  maserasi,  pipet  tetes,  pipet  ukur, tabung reaksi, spektrofotometer UV-Vis.
Metode 1. Penetapan  kadar  flavonoid  total  dan panjang gelombang maksimum
Kandungan  flavonoid  total  ditentukan dengan  spektrofotometri,  tentukan  sejumlah sampel  yang  akan  di  uji  dengan  cara dimasukkan  ke  dalam  labu  takar  10  mL, ditambah  4  mL  aquades  dan  0,3  mL  larutan NaOH  10%  kemudian  biarkan  selama  5  menit. Kemudian  larutan  ditambah  dengan  4  mL NaOH  10%  dan  aquades  sampai  10.0  mL. larutan  dibiarkan  hingga  15  menit. Pembacaan absorbansi  dengan  panjang  gelombang  510  nm terhadap  blangko.  Larutan  kuersetin  digunakan untuk  membuat  kurva  kalibrasi  standar. Kandungan  flavonoid  total  digunakan  untuk gram ekivalen. 8

## 2. Penentuan Operating Time
Larutan  kuersetin  100  ppm  diambil sebanyak 1 mL ditambahkan dengan AlCl 3 10% dan  8  mL  asam  asetet  5%.  larutan  tersebut diukur  absorbansi  dengan  panjang  gelombang yang  telah  diperoleh  interval  waktu  2  jam sehingga sampai data absorbansi yang dihasilkan setabil. 9

## 3. Uji  Antioksidan  ekstrak  daun  pepaya dan daun cengkeh
Analisis  uji  antioksidan  dengan  metode DPPH  didapat  nilai  IC50  yang  terbaik. Berdasarkan penelitian. Suatu senyawa dikatakan  sebagai  antioksidan  sangat  kuat dengan nilai IC50 kurang dengan nilai 50, kuat dengan  nilai  50-100,  sedang  dengan  nilai  100- 150,  dan  lemah  150-  200.  Semakin  kecil  nilai IC50  maka  semakin  tinggi  nilai  aktivitas antioksidan.  Antioksidan  merupakan  zat  yang dapat  mempertahankan  dan  melindungi  tubuh dengan  baik  oleh  penyebab  senyawa  radikal bebas.

## Hasil dan Pembahasan
Tabel  1.  Hasil  Uji  Total  Flavonoid  Daun
Pepaya Sempel Total Flavonoid (%) Ekstrak Daun Pepaya 54.982±1.073 Ekstrak Daun Cengkeh 61.017±0.061
Flavonois total adalah sejumlah kandungan total  senyawa  metabolit  sekunder  yang  berasal dari  suatu  tanaman  dengan  metode  kuantitatif menggunakan spektrofotometer  UV-Vis. Uji flavonoid  total  dilakukan  dengan  cara  uji alkalin,  uji  pb,  uji  asetat  dan  uji  ammonia mengguanakn  kertas  saring.  Penentuan  persen perolehan  kembali  sebagai  salah  satu  validasi metode  Flavonoid  adalah  kelompok  senyawa fenolik.
Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan  panjang  gelombang  500  ppm. Penelitian  sebelumnya  kandungan  dari  ekstrak daun  pepaya  dan  ekstrak  daun  cengkeh  adalah flavonoid dan kuat sebagai uji total flavonoid. 10
Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan adalah  dengan  membandingkan  kedua  ekstrak yang  berpotensi  kuat  terhadapt  uji  total flavonoid  adalah  ekstrak  cengkeh  dengan  nilai sebesar  (61.017±0.061).  Hal  ini  membuktikan kedua  ekstrak  tersebut  memiliki  kandungan flavonoid.
Tabel  2.  Hasil  Uji  Antioksidan  Ekstra  Daun Pepaya
Tabel  3.  Hasil  Uji  Antioksidan  Ekstra  Daun Cengkeh
Uji  antioksidan  dengan  menggunakan metode DPPH (2,2 – diphenyl-1-
picrylhydrazill) menggunakan microplate
reader  96  well  (berthold  technologie)  pada panjang  gelombang  520  nm.  Hasil  penelitian yang  diperoleh  adalah  nilai  IC50  dengan perbandingan uji antioksidan dari ekstrak daun pepaya dan daun cengkeh.
Pemilihan  uji  antioksidan  dengan metode  DPPH  dikarenakan  sederhana, mudah,  cepat  dan  membutuhkan  sempel yang  sedikit.  Uji  antioksidan  dari  ekstrak dengan konsentrasi yang berbeda-beda yang ada  pada  tabel  2  dan  3.  Semakin  besar konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  besar perendaman yang di tandai dengan perubahan  warna  ungu  menjadi  warna kuning. 10
Uji antioksidan  dengan  menghambat radikal  bebas  adalah  dilihat  dari  nilai  IC 50 . Suatu  senyawa  dapat  dikatakan  sebagai antioksidan  sangat  kuat  jika  nilai  IC 50 kurang dari  50  ppm,  jika  kuat  maka  memiliki  nilai  5- 100 ppm, jika sedang maka memiliki nilai 100- 150  ppm,  dan  jika  lemah  memiliki  nilai  150- 200  ppm. Nilai  IC 50 pada  uji  ekstrak  dari  daun pepaya  IC 50 403.15    dengan  nilai  dan  ekstrak daun  cengkeh  IC 50 31.19 yang  berpotensi  kuat antioksidan adalah ekstrak daun cengkeh.

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  kesimpulan  penelitian ini  pada  uji  total  flavonoid  antara  ekstrak  dari daun  pepaya  dan  ekstrak  daun  cengkeh  yang dapat  memiliki  kandungan  total  flavonoid tebaik  adalah  ekstrak  daun  cengkeh  dengan total  (61.017±0.061)  dan  pada  uji  antioksidan yang  kuat  adalah  ekstrak  daun  cengkeh  dengan nilai IC 50 31.19.

## Daftar Pustaka
1.   Sepriyani  h.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol daun pepaya (carica papaya l) dengan metode 2, 2 – diphenyl  -  1  – picrylhydrazil  (dpph). J  penelit farm indones . 2020;9(1):8-11. Doi:10.51887/jpfi.v9i1.789 2.   Kristiana  mulia,  hasan  akhmad  endang  zainal, suryani.  Current  biochemistry.  Total  phenolic, anticancer and antioxidant activity of ethanol extract of  piper  retrofractum  vahl  from  pamekasan  and karang  asem. Curr  biochem .  2016;3(5):80-90. Http://biokimia.ipb.ac.id
3.    No  title.  2019;2(1).  Irawan  h,  syera  s,  ekawati  n, tisnadjaja  d.  Pengaruh  proses  maserasi  dengan
NO Kons (ppm) Abs % Aktivitas Antioksidan IC50 (ppm) 1 2 3 4 5 6 DPPH 10.02 20.04 30.06 40.08 50.10 0.908 0.582 0.515 0.451 0.396 0.358 - 35.90 43.28 50.33 56.39 60.57 31.19 NO Konsi (ppm) Abs % Aktivitas Antioksidan IC50 (ppm) 1 2 3 4 5 6 DPPH 102 204 306 408 510 0.908 0.570 0.550 0.496 0.475 0.411 - 38.44 40.56 46.44 48.70 55.62 403.15
variasi konsentrasi pelarut etanol terhadap kandungan  senyawa  ekstrak  daun  pepaya  (carica papaya l.) Dan daun ubi jalar ungu (ipomoea batatas l. Lam).
J ilm manuntung .
2020;6(2):252.doi:10.51352/jim.v6i2.372
5.   Chel-guerrero  ld,  cuevas-glory  lf,  sauri-duch  e, sierra-palacios  e,  de  león-sánchez  fd,  mendoza- espinoza  ja.  Tropical  fruit  peels  as  sources  of bioactive  compounds:  a  review. Pakistan  j  bot . 2022;54(3):1169-1179. Doi:10.30848/pjb2022-3(7)
6.   Rorong  ja.  Uji  aktivitas  antioksidan  dari  daun cengkeh  (  eugenia  carryophyllus  )  dengan  metode dpph. 2008;1(2).
7.   Marinova  g,  batchvarov  v.  Evaluation  of  the methode  for  determination  of  the  free  radical scavenging  activity  by  dpph. Bulg  j  agric  sci .
2011;17(1):11-24.
8.   Nur  s,  sami  fj,  awaluddin  a,  afsari  mia.  Korelasi antara kadar total flavonoid dan fenolik dari ekstrak dan  fraksi  daun  jati  putih  (gmelina  arborea  roxb.) Terhadap  aktivitas  antioksidan. J  farm  galen (galenika j
pharmacy) . 2019;5(1):33-42. Doi:10.22487/j24428744.2019.v5.i1.12034
9.   Salamah n, widyasari e. Aktivitas antioksidan ekstrak metanol  daun  kelengkeng  (euphoria  longan  (l) steud.)  Dengan  metode  penangkapan  radikal  2,2’- difenil-1-pikrilhidrazil. Pharmaciana .  2015;5(1):25-
34. Doi:10.12928/pharmaciana.v5i1.2283
10.  Kesehatan ri, hp es, elisa n, primananda az, advistasari yd,  foundation  sp.  Doi:  10.30644/rik.v12i1.708. 2023;12(1):153-157. doi:10.30644/rik.v12i1.708