## KARAKTERISTIK DASAR POPULASI BAKTERI PENAMBAT NITROGEN NON-SIMBIOTIK PADA LAHAN GAMBUT BEKAS KEBAKARAN
( Basic characteristics the population of non-simbiotic nitrogen-fixing bacteria on burn
peatlands )

## Menik Desmina, Wiwik Ekyastuti, Hanna Artuti Ekamawanti
Fakultas Kehutanan Universitas Tanjungpura Pontianak. Jl. Daya Nasional Pontianak 78124
Email: menikdesmina99@gmail.com
Abstract
Nitrogen  is  an  macroessential  nutrient  for  plant  growth.  Insufficient  nitrogen  or  nitrogen elements, the plant will be upnormal. The availability of nitrogen can be obtained through one of the microbes in the soil, namely nitrogen fixing bacteria (NFB) that is capable of fixing free nitrogen,  including  symbiotic  and  non-symbiotic.  This  study  aimd  to  describe  the  density  of population  and  the  basic  characteristics  of  NFB  in  burnt  peatland  Kuala  Dua  village.  The method  was  in  soil  sampling  with  systematic  sampling.  Bacteria  isolation  using  yeast  extract mannitol  agar  (YEMA)  media  by  using  the  pour  plate  method.  The  density  of  bacterial population was calculated by count pour method. The result showed tha the higest population density in peat from at distance of 80 m from the edge of the trench with a depth of 0-20 cm as much (52.10 7 cfu/g soil), while a low population density was found at a distance of 20 m from the  edge  of  a  trench  with  a  depth  of  20-50  cm  by  much  (15,5.10 7 cfu/g  soil).  The  bacterial population  in  burnt  peatland  fall  was  categorited  the  high.  there  potential  can  developed  to support the restoration of peatland ecosystems originating from burnt peatlands.
Keywords: charakteristics, burnt peatlands, nitrogen fixing bacteria, restoration.

## PENDAHULUAN
Lahan  gambut  dikenal  sebagai lahan  yang  rapuh  atau  rentan  dengan perubahan karaktristik yang tidak menguntungkan, sehigga yang menyebabkan produktivitas lahan menurun bahkan menjadi tidak berprduktif    (Masganti  2013).  Pada dasarnya,  lahan  yang  tidak  produktif adalah  lahan  yang  telah  mengalami penurunan  fungsi  atau  terdegradasi akibat  adanya  konversi  atau  alih  guna lahan,  kondisi  lahan  kering  atau  tidak tergenang dan bekas penebangan
(Wahyunto et al. 2013). Degradasi pada lahan gambut bekas kebakaran menyebabkan perubahan pada karakteristik gambut meliputi komponen fisik, kimia dan
biologi.Salah  satu  lahan  gambut  bekas kebakaran  yang  ada  di  Kalimantan Barat  berada  di  desa  Kuala  Dua  bekas kebakaran  besar  pada  tahun  2014. Komponen  biologi  yang  berkurang akibat  degradasi  yaitu  berkurangnya bahkan  punah  habitat  ekosistem  satwa dan  vegetasi  pada  lahan  gambut.  Tidak hanya  satwa  dan  vegetasi  tetapi  mikrob yang  ada  di  dalam  tanah  contohnya bakteri dan fungi (Agustina et al. 2001). Mikrob yang ada didalam tanah dan bermanfaat bagi tanaman adalah bakteri dan fungi. Bakteri yang berperan dalam penambatan  nitrogen  salah  satunya
adalah bakteri penambat nitrogen (BPN). BPN  terbagi  menjadi  dua  golongan yaitu  BPN  simbiotik  yang  bersimbiosis dengan  tanaman  legum  dan  BPN  non- simbiotik  yang  hidup  bebas  pada rizosfer. Menurut Isti’anah 2014 mikrob yang terdapat di dalam tanah
memainkan peran penting dalam produktivitas  tanaman,  terutama  dalam penambatan  nitrogen  dan  menghasilkan zat  pemacu  tumbuh.    Peran  BPN  dapat dikembangkan dan dimanfaatkan sebagai  agens  hayati  untuk  membantu restorasi ekosistem lahan gambut terdegradasi.  Menurut  Nasahi  (2010), faktor  yang  mempengaruhi  aktifitas bakteri penambat nitrogen yaitu ketersediaan seyawa N seperti amonium dan nitrat.  Salah satu contoh BPN non- simbiotik  adalah  Azotobacter  yang paling  sering  ditemukan  pada  rizosfer. Bakteri  ini  berbeda  dengan  bakteri rizobium karena bakteri ini hidup bebas sehingga  tidak  memerlukan  tanaman inang yang spesifik. Upaya
pengembangan  potensi  BPN  dalam mendukung  restorasi  ekosistem  lahan gambut  terdegradasi  sebagai  sumber inokulasi  awal,  dibutuhkan  isolat  BPN berasal  dari  lahan  gambut  bekas kebakaran.  Kebutuhan  bakteri  akan unsur  N  dapat  dipenuhi  dari  sumber  N yang  terdapat  dalam  berbagai  senyawa organik  maupun  dari  udara.  Penelitian bertujuan untuk mendreskripsikan kepadatan  populasi  dan  karakteristik dasar  BPN  pada  lahan  gambut  bekas kebakaran  dengan  kedalaman  dan  jarak masing-masing dari tepi parit.
METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan Februari-April 2018. Lokasi pengambilan  sampel  tanah  di  desa Kuala  Dua  Kabupaten  Kubu  Raya. Isolasi  BPN  dilakukan  di  Laboratorim Silvikutur Fakultas Kehutanan Universitas Tanjungpura Pontianak.

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan sampel tanah gambut
Metode  yang  digunakan  dalam pengambilan  sampel  adalah  metode systematic sampling . Jarak pengambilan sampel  tanah  gambut  pada  masing- masing  jalur  dengan  jarak  20  m,  50  m, dan 80 m. Masing-masing jarak diambil dengan  kedalaman  0-20  cm,  dan  20-50 cm  pada  setiap  jalur.  Tanah  yang diambil setiap jarak sebanyak 300 g dan dimasukan kedalam kantong plastik dan beri  label  sesuai  jarak  dan  kedalaman masing-masing.
Tanah dengan
kedalaman  dan  jarak  yang  sama  pada ketiga  jalur  tersebut,  sampel  tanahnya kemudian  dikompositkan  menjadi  satu sampel sehingga diperoleh enam sampel tanah  dengan  berat  masing-masing  900 g. Bersamaan pada pengambilan sampel juga  melakukan  pengukuran  iklim lingkungan  seperti  parameter  suhu udara, kelembaban, dan curah hujan. Isolasi  Bakteri  Penambat  Nitrogen (BPN)
Media selektif isolasi BPN
menggunakan yeast  extract  mannitol agar (YEMA).  Sampel  bakteri  diisolasi dengan  metode  tuang  ( pour  plate method )  pada  seri  pengenceran  10 -1 sampai  10 -7 .  Sampel  tanah  ditimbang sebanyak  10  g  dari  masing-masing
sampel  kemudian  dimasukan  kedalam
Erlenmeyer dicampurkan dengan akuades  steril  hingga  100  ml,  lalu dihomogenisasi  menggunakan  vortex. Selanjutnya  diambil  1  ml  larutan  dari Erlenmeyer  tadi  dimasukan  ke  dalam microtube  berukuran  2  ml,  kemudian diambil 0,1 ml larutan tanah menggunakan  pipet  mikro  masukan kedalam  microtube  yang  berisi  0,9  ml akuades steril sehingga diperoleh tingkat  pengenceran  10 -1 .  Prosedur tersebut  diulang  terus  sampai  dengan seri  pengenceran  10 -7 .  Sampel  yang sudah diencerkan dengan metode pengenceran  diambil  masing-masing dengan  cara  mengambil  0,1  ml    dari pengenceran 10 -3 , 10 -5 , 10 -7
menggunakan  pipet  mikro  kemudian dimasukan  kedalam  cawan  Petri  secara aseptis  yang  telah  berisi  media  YEMA lalu  ratakan  dengan  memutar  media membentuk angka delapan agar homogen.  Bakteri  diinkubasi  selama  15 hari.  Selanjutnya  koloni  BPN  yang terpisah atau membentuk koloni tunggal tidak  dempet  dengan  bakteri  lain  di murnikan untuk menjadi isolat.
Diperoleh 22 isolat yang akan
dikarakterisasi  morfologi  dan  diuji fisiologis  menggunakan    indikator Congo  Red (CR)  dan Bromthimol  Blue (BB).

## Perhitungan Kepadatan populasi BPN
Perhitungan koloni BPN selama 15 hari  dimulai  dari  hari  pertama  setelah melakukan  isolasi  BPN.  Diamati  mulai hari  ke-1  sampai  dengan  hari  ke-15 dihitung  jumlah  koloni  yang  tumbuh dan beri tanda pada koloni yang tumbuh akan memampakan seperti bercak lendir putih  pada  media.  Penandaan  koloni menggunakan  pulpen  OHP  dibagian bawah cawan Petri agar dapat membedakan antara koloni tumbuh baru dan  yang  sudah  terhitung.  Koloni  yang tumbuh  kemudian  dimurnikan  untuk dikarakteristikkan bagian morfologi untuk  mengetahui  apakah  termasuk
BPN  rizobia  atau  bukan.  Koloni  yang tumbuh  dihitung  menggunakan  metode perhitungan cawan ( total plate count /TPC)  dengan  satuan  cfu/g  tanah. Kepadatan koloni dihitung menggunakan rumus kepadatan bakteri: jumlah koloni x 1 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  pada  6  sampel  tanah gambut dari beberapa jarak dan kedalaman  masing-masing  ditemukan populasi  BPN  dengan  kepadatan  yang bervariasi.  Kepadatan  rerata  koloni BPN  yang  tumbuh  selama  15  hari dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Kepadatan populasi BPN setelah diinkubasi selama 15 hari. ( Population

## density of NFB after incubation for 15 days.)
Keterangan:  J20: Jarak 20 m dari tepi parit, J50: Jarak 50 m dari tepi parit, J80: Jarak 80 m dari tepi parit (meter) K: kedalaman (cm)
Gambar  1  menunjukan  jumlah populasi  BPN  yang  bervariasi  dengan jarak  dan  kedalaman  masing-masing dari tepi parit. Jumlah koloni BPN pada sampel  yang  diambil  terbilang  kategori tinggi,  kedalaman  0-20  cm  lebih  tinggi dari  pada  jumlah  koloni  BPN  pada kedalaman  20-50  cm.  Hal  ini  karena perakaran tanaman mempengaruhi kehidupan mikrob secara fisiologis yang berada dekat dengan perakaran tanaman lebih  aktif  dibandingkan  dengan  yang jauh  dari  perakaran  (Purwaningsih 2004).  Tanah  rizosfer  atau  tanah  yang dekat dengan perakaran tanaman adalah daerah yang banyak mengandung karbon  (C)  yang  digunakan  mikrob untuk  melakukan  pertumbuhan,  salah satunya  adalah  BPN  (Barea  2005).
Perbedaan  populasi  BPN  diperoleh  dari sampel  yang  kondisi  fisik  dan  kimia tanah  (  kandungan  unsur  hara  makro seperti  N,  P,  K,  P-potensial,  P-tersedia dan  kadar  C-organik)  yang  berbeda- beda.  Kedalaman  gambut  di  lokasi lahan  gambut  bekas  kebakaran  bekisar 4,6-5,6  m  dengan  tingkat  kematangan gambut  dari  fibrik  hingga  hemik (Ekamawanti et  al. 2017).  Kepadatan populasi tertinggi  ditemukan pada jarak 80  m  dengan  kandungan  unsur  haranya termasuk C-organik paling tinggi dibandingkan jarak 50 m dan 20 m dari tepi parit. Faktor lain dalam mempengaruhi kepadatan populasi BPN adalah  faktor  lingkungan  seperti  suhu, kelembaban  dan  curah  hujan.  Suhu udara rata-rata pada bulan Februari saat
244 260 520 155 170 249 0 100 200 300 400 500 600 J20 J50 J80 T o ta l Po p u la si B PN No n -s im b io tik cf u/g T a na h m ili ar Kedalaman gambut 0-20cm
Kedalaman gambut 20-50cm
pengambilan sampel tanah sekitar 30 0 C, dan  kelembapan  rata-rata  84%  dengan curah  hujan  rata-rata  13,4  mm/bulan. Banya  curah  hujan  201,7  mm  dengan banyak  hari  hujannya  17  hari  dalam sebulan.
Agustian (2012) menemukan populasi  BPN  pada  tanah  rizosfer Titonia  sekitar  19,7.10 3 cfu/g  tanah,
sedangkan pada lahan gambut pertanian yang  subur  mengandung  lebih  dari
1.10 4 cfu/g tanah (Tate 2000). Berdasarkan pernyataan tersebut kepadatan  populasi  BPN  pada  lokasi penelitian termasuk tinggi, yaitu sebesar 15,5.10 7 cfu/g  tanah  sampai  dengan 52.10 7 cfu/g tanah (Gambar 1). Karakteristik morfologi BPN Karakteristik morfologi untuk mengetahui  bakteri  secara  makroskopis dari  segi  bentuk,  warna,  permukaan, tepian  dan  elevasinya.  Dari  6  sampel tanah  gambut  berhasil  ditemukan  22 isolat BPN dengan karakteristik morfologi yang berbeda.
Isolat  yang  berbeda  pada  sampel  tanah memiliki  karakteristik  berbeda-beda karena  berasal  dari  koloni  BPN  yang yang berbeda. Hasil karakteristik morfologi  ditemukan  13  isolat  yang termasuk  rizobia  dan  9  isolat  yang nonrizobia.  Ternyata  bakteri  rizobia mendominasi  pada  lahan  gambut  bekas kebakaran  karena  pada  lahan  gambut tersebut  banyak  perakaran  tanaman pionir  dan  beberapa  vegetasi  seperti akasia yang memungkinkan ketersediaan substrat dan suplai makanan bagi bakteri. Karakteristik fisiologis BPN Karakteristik fisiologis
yang
dilakukan untuk mengkarakterisasi bakteri tersebut termasuk bakteri rizobia atau  bukan  dan  merupakan  rangkaian kegiatan identifikasi BPN. Karakteristik fisiologi  menggunakan indikator Congo Red  (CR)  untuk  melihat  apakah  bakteri menyerap  merah  kongo  atau  tidak  dan Bromthimol  Blue  (BB)  untuk  melihat
bakteri  bereaksi  asam  akan  berwarna kuning atau tidak.
Hasil  dari  karakteristik  fisiologis  BPN ditemukan  13  isolat  yang  termasuk dalam rizobia. Hasil menyatakan terdapat  banyak  bakteri  rizobia  dan nereaksi  masam,  namum  belum  jelas dari segi jenis BPN yang spesifik karena hanya  dasar  karakteristik  BPN.  Untuk itu perlu penelitian lanjut untuk mengidentifikasi  jenis  BPN  yang  lebih spesifik.

## KESIMPULAN
Pada  gambut  bekas  kebakaran berada  di  Desa  Kuala  Dua,  ditemukan populasi yang bervariasi pada jarak dan kedalaman yang berbeda terdapat kecendrungan  dari  tepi  parit  semakin jauh  semakin  besar.  Populasi  BPN bervariasi  ditemukan  dari  sampel  tanah pada  jarak  80  m  dari  tepi  parit, kemudian  diikuti  pada  jarak  50  m  dari tepi  parit  dan  yang  paling  sedikit ditemukan  pada  jarak  20  m  dari  tepi parit  pada  kedalaman  yang  sama  yaitu 0-20  cm.  Karakteristik  morfologi  BPN ditemukan  isolat  berbeda-beda  yang termasuk  rizobia  dan  9  isolat  yang nonrizobia berdasarkan hsil karakterisasi morfologi dan uji fisiologis BPN.

## SARAN
Populasi  BPN  pada  lahan  gambut bekas  kebakaran  dengan  jarak  dan kedalaman  masing-masing berbeda- beda,  namum  diperlukan  penelitiaan lanjut  yang  spesifik  untuk  mengetahui jenis  BPN  yang  terdapat  pada  lahan gambut bekas kebakaran.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada SEAMEO BIOTROP  melalui  Dr.  Hanna  Artuti Ekamawanti  (sebagai  ketua  peneliti) telah membantu dana penelitian ini dari DIPA  Biotrop  2017  yang  berjudul “Pengembangan  Sistem  Paludikultur untuk  Lahan  Gambut  dan  Teknik Propagasi Tumbuhan Indigenos”.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustian,  Syaifei  R,  Maira  L.  2012.
Keragaman  Bakteri  Penambat  N
Pada  Tanah  Rhizosfir  Titonia Pada Tanah Masam Ultisol. Jurnal Solum. 9(2) : 98-105.
Barea  JM.  Pozo  M.J.  2005.  Microbial Cooperation  In  The  Rhizozphere. Jurnal  of  exp.  Botany. 56(2):
1761-1778.
Ekamawanti HA, Tata MHL, Astiani D, Ektastuti W. 2017. Pengembangan Sistem Paludikultur Untuk Restorasi Lahan Gambut Terdegradasi: Karakterisasi Lahan Gambut  Dan  Teknik  Propagasi Jenis Tumbuhan Indigenus. Laporan  DIPA  Biotrop  2017 . Pontianak. Masganti, Wahyunto, Dariah A, Nurhayati, Yusuf R. 2013. Karakteristik dan potensi pemanfaatan lahan gambut terdegradasi  di  Provinsi  Riau.
Jurnal  sumber  daya  lahan. 8(1): 59-66.
Purwaningsih  S. 2004.  Isolasi,  Populasi dan  Karakterisasi  Bakteri  pada tanah dari Taman Nasional Bogani.  Sulawesi  Utara. Biologi 3(1): 22-34.