Penulis Balqis 1 , Betty Lukiati 1 , Mohammad Amin 1 , Agus Muji Santoso 2 , Jeni 3 , Widodo 4
Afiliasi 1 Department of Biology, Faculty of Mathematics and Natural Science, State University of Malang, Semarang St. 5, Malang, East Jawa 65145, Indonesia.
2 Department of Biology Education, University of Nusantara PGRI Kediri, Ahmad Dahlan St. No.76, Kediri, East Java 64112, Indonesia
3 Department  of  Biology  Education,  Faculty  of  Teacher  Training  and  Education,  University  of Papua, Gunung Salju St. Manokwari, West Papua 98314, Indonesia
4 Department  of  Biology,  Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Sciences,  Brawijaya  University, Veteran St. Malang, East Jawa 65145, Indonesia
Kata Kunci  bawang putih lokal
 LCMS
 PASS Server
 potensi biologi
 saponin
Keywords  biological potential
 LCMS
 Local garlic
 PASS Server
 saponins

## Diterima 18 Februari 2021
Direvisi 13 Juli 2022
Disetujui 14 Juli 2022
*Penulis Koresponding Widodo email: widodo@ub.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  senyawa  dari  kelompok  saponin bawang  putih  lokal  yang  berasal  dari  provinsi  Papua  Barat  dan  memetakan  potensi hayatinya  dalam  bidang  kesehatan.  Identifikasi  senyawa  saponin  dari  bawang  putih lokal  menggunakan  kromatografi  cair-spektrometri  massa  (LCMS)  dan  divalidasi berdasarkan  kesamaannya  dengan  pangkalan  data  PubChem  NCBI.  Selanjutnya, potensi  hayati  senyawa  saponin  bawang  putih  lokal  dipetakan  menggunakan  PASS Server.  Hasil analisis LCMS menunjukan bahwa bawang putih lokal segar memiliki 96 macam senyawa dengan komposisi 2/3 kelompok non sulfur dengan gugus thiol (R-SH) dan  1/3  kelompok  organosulfur  dengan  gugus  fungsi  sulfida  (R-S-R).  Saponin  steroid merupakan  jenis  senyawa  dari  kelompok  non  sulfur  yang  banyak  ditemukan  dalam bawang  putih  lokal  Papua.  Sebanyak  15  senyawa  dari  kelompok  saponin  berhasil diidentifikasi  dengan  18  macam  potensi.  Tiga  potensi  yang  paling  dominan  adalah sebagai  antikanker,  antijamur,  dan  hipolipemik.  Dapat  disimpulkan  bahwa  bawang putih  lokal  Indonesia  berpotensi  besar  untuk  dikembangkan  dan  diaplikasikan  pada bidang kesehatan, terutama sebagai antikanker terkait dengan kandungan saponin di dalam umbinya.

## ABSTRACT
This study aimed to compare antioxidant, antibacterial and toxicity tests of various types  of  kesambi  tree  bark  extract  (Schleichera  oleosa  (Lour)  Oken).  The  research stages included extraction of kesambi stem skin from Mancak Serang sub-district with multilevel  maceration  techniques  using  3  solvents:  Methanol,  n-hexane,  and  ethyl acetate.  The  extract  was  then  tested  for  antioxidant  activity,  antibacterial,  and toxicity. The results of antioxidant  testing using the DPPH method, antibacterial with agar  diffusion  method,  and  toxicity  test  with  BSLT  method,  the  results  showed  that ethyl  acetate  extract  had  better  antioxidant  activity  (IC50  7,723  ppm.)  compared  to extract  of  methanol  (IC50  7,801  ppm),  and  n-hexane  extract  (IC50  8,568  ppm). Antibacterial activity showed the ability to inhibit the growth of Streptococcus aureus compared to Escherichia coli at a concentration of 10000 ppm, and the results of the toxicity test showed that ethyl acetate extract had better activity (LC50 305,17 ppm) than n-hexane extract (LC50 374, 96 ppm) and methanol extract (LC50 431,26 ppm).

## Saponin pada Bawang Putih Lokal Indonesia dan Potensi Biologinya
Saponins in Indonesian Local Garlic and Its Biological Potential

## PENDAHULUAN
Bawang  putih  (A llium  sativum L.)  lokal  Indonesia telah  lama  dibudidayakan  oleh  masyarakat  secara turun temurun. Benih atau bibit yang digunakan untuk menanam  diperoleh  dari  anakan  hasil  penanaman sebelumnya,  secara  turun  temurun,  sehingga  varietas bawang putih lokal umumnya belum teridentifikasi dan terdaftar  di  Departemen  Pertanian.  Masyarakat membudidayakan  bawang  putih  dengan  sistem pengolahan lahan yang sederhana, tanpa irigasi khusus, tanpa  penambahan  pupuk  buatan  atau  penggunaan pestisida, dan pengolahan hasil panen yang sederhana. Masyarakat  asli  Distrik  Anggi  -  Pegunungan  Arfak, Papua  Barat  telah  menanam  bawang  putih  dengan sistem  penanaman  sederhana  dari  generasi  ke generasi.  Secara  umum,  ciri  bawang  putih  lokal  dari Pegunungan Arfak, Papua Barat, sama dengan bawang putih  umumnya,  tetapi  ukuran  umbi  kecil  dan  jumlah siung dalam umbi yang tidak sebanyak varietas bawang putih  yang  direkomendasikan  Departemen  Pertanian. Masyarakat  Papua  Barat  memanfaatkan  bawang  putih lokal,  sama  dengan  bawang  putih  lainnya,  yaitu  untuk bumbu masak dan juga obat.
Bawang  putih  lokal,  seperti  bawang  putih  pada umumnya,  mengandung  berbagai  kelompok  senyawa aktif.  Senyawa  organik  sulfur  merupakan  kelompok senyawa  yang  mengandung  belerang  dan  memberi aroma  menyengat  yang  khas  pada  bawang  putih. Kelompok  ini  sangat  banyak  dikaji  dalam  berbagai aktivitas  biologi  terutama  terkait  manfaatnya  dalam bidang  kesehatan.  Kelompok  organik  sulfur  pada bawang  terdiri  atas  gugus  fungsi  thiol  (R-SH)  yang merupakan  senyawa  non-volatile  dan  sulfida  (R-S-R) yang  mencakup  senyawa  volatile  pada  bawang  putih. Senyawa  utama  non-volatile  pada  bawang  berupa γ - glutamyl-S-allyl-L-cysteines, sedangkan senyawa utama volatile  pada  bawang  yaitu S-allyl-L-cysteine  sulfoxides (alliin).  Kelompok  senyawa  non  sulfur  pada  bawang putih yang juga memiliki peran penting dalam berbagai aktivitas  biologi  adalah  saponin.  Saponin  merupakan kelompok  senyawa  yang  terdapat  pada  hampir  semua tumbuhan.  Kelompok  senyawa  ini  tidak  mudah menguap, lebih stabil pada saat proses pemanasan dan penyimpanan  (Shang, et  al .  2019;  Bhatwalkar et  al . 2021).  Saponin  larut  dalam  air,  bersifat  surfaktan, dan menghasilkan buih jika dikocok (Rai et al ., 2021; Falade et al . 2021).
Karakter  struktur  saponin  adalah  adanya  aglikon triterpen atau steroid dan mengandung satu atau lebih rantai gula (Singh dan Prabir, 2018; Falade et al . 2021). Saponin  steroid  umumnya  terdapat  pada  tumbuhan
dari kelompok monokotil, sedangkan saponin triterpen umum  ditemukan  pada  tumbuhan  dari  kelompok dikotil (Sparg et al . 2004). Beberapa jenis saponin pada bawang  putih  telah  diidentifikasi,  di  antaranya  adalah protoerubosida  B,  protoisoerubosida  B,  erubosida  B, isoerubosida  B,  dan  sativosida  B  (Bhatwalkar et  al . 2021).  Hasil  penelitian  Balqis et  al .  (2019) memperlihatkan  bahwa  pada  bawang  lokal  yang direbus  terdapat  78  senyawa  aktif,  termasuk  di dalamnya  senyawa  organosulfur,  flavonoid,  dan saponin dari jenis erubosida B dan sativosida B.
Bioinformatika  merupakan  cabang  ilmu  dari  biologi yang  menerapkan  ilmu  komputasi,  matematika,  dan teknologi informasi dalam menyimpan, mengakses, dan mengolah  data  pada  bidang  biologi  molekuler (Abdurakhmonov,  2016).  Penggunaan  bioinformatika bertujuan  untuk  memperoleh  dan  mengatur  data seperti  yang  terdapat  di gene  bank dan protein  data bank ,  untuk  mengembangkan  alat  dan  sumber  daya dalam menganalisis data, dan dapat menginterpretasikan  hasil  penelitian  biologi  secara lebih  bermakna,  lebih  cepat,  dan  dapat  dilakukan dalam  skala  besar.  Penggunaan  bioinformatika  dalam mengolah  dan  menganalisis  data  tidak  dapat dipisahkan  dari  teknik  secara in  silico.  In  silico merupakan  istilah  untuk  percobaan  atau  uji  yang dilakukan  dengan  menggunakan  komputer  dalam prakteknya. In silico merupakan analogi dari penelitian in  vivo dan in  vitro yang  dapat  digunakan  untuk simulasi  dan  kalkulasi  dalam  merancang  obat  baru (Brogi et al . 2020).
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui  berbagai jenis  saponin  yang  terkandung  dalam  bawang  putih lokal  asal  Papua  Brat  dan  potensi  aktivitas  biologinya dalam bidang kesehatan melalui analisis in silico .

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  bawang  putih  lokal segar  yang  berasal  dari  provinsi  Papua  Barat.  Langkah kerja dalam penelitian ini merujuk pada penelitian yang dilakukan  Balqis et  al .  (2019)  meliputi  persiapan bawang putih lokal Indonesia, identifikasi senyawa aktif dalam  umbi  bawang  putih  lokal,  dan  analisis bioinformatika.

## Pembuatan Bubuk Bawang Putih Lokal
Penelitian  ini  menggunakan  umbi  bawang  putih lokal yang ditanam di Distrik Anggi, Pegunungan Arfak, Papua  Barat.  Umbi  bawang  putih  dikupas  dan  dicuci dengan  akuades  steril.  Sebanyak  100  g  bawang  putih dihaluskan  dengan  50  ml  air,  sehingga  diperoleh  jus
bawang  putih.  Selanjutnya,  jus  bawang  putih dikeringkan  dengan  metode freeze  drying dan diperoleh bubuk bawang putih.
Identifikasi Senyawa Aktif dalam Umbi Bawang Putih Senyawa  aktif  pada  bawang  putih  lokal  diperoleh melalui metode Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LCMS)  (Shimadzu-8040,  Jepang)  dengan kromatografi  pemisah  menggunakan  kolom  C18  (Shim Pack  FC-ODS)  mengacu  pada  penelitian  Balqis et  al . (2019).  Pengujian  LCMS  menggunakan  pelarut  yang terdiri  atas  campuran  pelarut  A  H 2 O:MeOH  (4:1) dengan  0.1%  asam  metanoat  dan  pelarut  B  acetonitil dengan  1%  asam  metanoat.  Kedua  jenis  pelarut dicampurkan  dengan  rasio  95:5  dengan  gradien  elusi 0/100  pada  0  menit,  15/85  pada  5  menit,  21/79  pada 20  menit,  dan  90/100  pada  24  menit.  Analisis  MS dilakukan  dengan  sumber  ionisasi  elektrospray  (SIE) dalam mode ion positif. Data MS/MS dihasilkan dengan energi  tumbukan  perangkap  menyebar  dari  5.0  V. Pengaturan  parameter  sumber  SIE  termasuk  tegangan kapiler  pada  3,0  kV,  suhu  sumber  pada  100  °C,  suhu desolvasi  pada  350  °C,  pengambilan  sampel  kerucut pada 23 V dan aliran gas desolvasi 6 L/jam.

## Analisis Bioinformatika
Data LCMS bawang putih lokal dianalisis lebih lanjut dengan  mengacu  pada  penelitian  Balqis et  al .  (2019), sehingga  diketahui  potensi  biologi  senyawa-senyawa
dari  kelompok  saponin  yang  terdapat  dalam  umbi bawang putih lokal.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  LCMS  senyawa  aktif  bawang  putih  lokal  segar dari  Distrik  Anggi,  Pegunungan  Arfak,  Papua  Barat diperoleh  96  macam  senyawa  aktif  yang  tergolong dalam  senyawa  organosulfur  dan  senyawa  non  sulfur. Kelompok senyawa non sulfur ditemukan lebih banyak daripada  senyawa  organosulfur,  yaitu  sekitar  dua  per tiga  dari  96  senyawa  aktif.  Senyawa  non  sulfur  terdiri atas  beberapa  kelompok  senyawa,  seperti  saponin, fenolik,  terpenoid,  flavonoid,  hormon  tumbuhan, vitamin, dan beberapa kelompok senyawa lainnya.
Berdasarkan  hasil  identifikasi  melalui  LCMS, didapatkan  15  senyawa  saponin  dalam  bawang  putih lokal  Papua  yang  didominasi  oleh  kelompok  senyawa non sulfur yaitu 2.4%  dari keseluruhan total senyaawa aktif  dalam  bawang  putih  lokal  Papua.  Senyawa kelompok  saponin  pada  bawang  putih  lokal  yang berhasil  diidentifikasi  terbagi  dalam  dua  kelompok, yaitu saponin steroid dan saponin triterpenoid. Saponin steroid  cukup  mendominasi  keberadaannya  dalam umbi bawang putih lokal daripada saponin triterpenoid, yaitu  sebanyak  11  jenis  atau  sekitar  73%  dari keseluruhan  saponin.  Kehadiran  saponin  triterpenoid lebih  memperkaya  jenis  saponin  yang  dikandung bawang putih lokal ( Tabel 1 ).
Berdasarkan  hasil  verifikasi  senyawa  kelompok
Tabel 1. Macam dan Pengelompokan Saponin pada Bawang Putih Lokal
Kelompok Saponin Nama Retention Time (RT) Saponin Steroid Laxogenin 20.035 Gitogenin 21.404 Eruboside B1 87.001 Diosgenin 17,046 Tigogenin 17,447 Agigenin 22.751 Isoeruboside 87.034 Sativoside R2 90.121 Protoeruboside B1 97.435 Sativoside R1 108.536 Sativoside B1 117.094 Saponin Triterpenoid Squalene 13.367 β Amyrin 19.319 Lupeol 19.614 24-MethyleneCycloartanol 22.154
saponin  yang  teridentifikasi  dengan  LCMS  dan dibandingkan  dengan  kesamaan  struktur  dalam database senyawa  kimia  PubChem  NCBI,  ditemukan satu  senyawa  yaitu  Protoeruboside  B1  yang  tidak terdapat  dalam database PubChem  NCBI. Database senyawa  saponin  pada  bawang  putih  lokal  dapat digunakan untuk mengetahui macam aktivitas, molekul target,  efektivitas  interaksi  antara  senyawa  dengan target,  juga  mekanisme  kerja  senyawa  dalam  sel. Analisis  secara in  silico merupakan  analisis  yang memanfaatkan  teknologi  komputasi  dan database untuk  memprediksi  dan  kebermanfaatan  dari  suatu penelitian. Penelitian pendahuluan dengan menggunakan  pendekatan in  silico dapat  secara signifikan  mengurangi  waktu,  tenaga,  dan  biaya  untuk mengidentifikasi  dan  mengevaluasi  senyawa  aktif berpotensi  obat.  Analisis  senyawa  saponin  secara in silico tidak digunakan untuk menggantikan penelitian in vivo atau in  vitro ,  tetapi  membantu  penelitian  lebih terarah  dan  menyediakan  data  yang  tidak  mungkin diperoleh  secara  eksperimen  (Chattopadhyay et  al ., 2019;  Rifai  2017).  Tujuan  penelitian  secara in  silico dalam drug  design adalah  dengan  melakukan  simulasi dan  kalkulasi  secara  komputasi  sehingga  dapat mengefisienkan penelitian eksperimen di laboratorium.
Saponin dilaporkan memiliki banyak aktivitas biologi seperti antimikroba, antijamur, sitotoksik, antikolesterol, antikanker, antivirus, dan juga antiradang, sehingga saat ini saponin banyak dikaji dan
digunakan secara luas di bidang pangan, kosmetik, dan farmasi (Yunus et al ., 2021; Li et al ., 2018; Falade et al . 2021).  Saponin  steroid  yang  terdapat  pada  bawang putih  diketahui  dapat  menurunkan  kadar  kolesterol dalam  darah,  sehingga  digolongkan  sebagai  senyawa dengan  aktivitas  hipokolesterolemik  (Budianto et  al . 2018).  Sobolewska et  al .  (2016)  melaporkan  bahwa agigenin  dan  erubosida  yang  diisolasi  dari  bawang putih  memperlihatkan  aktivitas  antijamur  pada beberapa jenis Candida , termasuk C. albicans secara in vitro .
Pada sisi yang lain, prediksi potensi aktivitas biologi senyawa-senyawa  dari  kelompok  saponin  dilakukan dengan PASS Server yang mensyaratkan berat molekul senyawa  tidak  lebih  dari  1250  g/mol.  Dua  senyawa saponin,  yaitu  Sativosida  B1  dan  Sativosida  R1  tidak dapat  diprediksi  lebih  lanjut  dengan  PASS  Server, karena  memiliki  berat  molekul  1423,5  g/mol  dan 1377,5  g/mol.  Dengan  demikian,  pemetaan  potensi aktivitas  biologi  senyawa-senyawa  dari  kelompok saponin  pada  bawang  putih  lokal  dilakukan  pada  12 senyawa  saponin.  Hasil  prediksi  aktivitas  biologi saponin  menggunakan  PASS  Server  memperlihatkan bahwa senyawa kelompok saponin pada bawang putih lokal  Indonesia  terlibat  dalam  18  macam  aktivitas biologi. Satu senyawa saponin dapat memiliki beberapa aktivitas biologi ( Gambar 1 .).
Berdasarkan Gambar 1 , aktivitas biologi yang paling dominan  dari  saponin  pada  bawang  putih  lokal  ini
Gambar 1. Aktivitas  biologi  dari  senyawa  kelompok  saponin.  Angka  pada  grafik  menunjukkan  jumlah  macam senyawa yang terlibat dalam suatu aktivitas biologi
adalah  sebagai  antikanker,  termasuk  di  dalamnya sebagai  anticarcinogenic,  antineoplastic,  apoptosis antagonis,  dengan  rata-rata  nilai  Pa  sebesar  0,840. probability  to  be  active  (Pa) memiliki  rentang  nilai  0-1 dengan  semakin  tinggi  nilai  Pa  maka  semakin  tinggi nilai  kebenaran  terhadap  prediksi  potensi  suatu senyawa.  Senyawa-senyawa  yang  menyusun  fungsi biologi  dari  bawang  putih  lokal  Papua  dapat  dilihat  di Tabel  2 .  Seluruh  senyawa  saponin,  yaitu  12  senyawa, terlibat  sebagai  antikanker,  terutama  terkait  aktivitas antineoplastic.  Beberapa  aktivitas  biologi  lainnya  dari saponin pada bawang putih lokal Indonesia antara lain hipolipemik,  kolesterol  antagonis,  antijamur,  dan antiinflamasi  ( Gambar  1 ).  Skor  Pa  ≥  0,7  dalam  PASS menunjukkan potensi suatu senyawa bahan alam dapat dikembangkan  menjadi  obat  dalam  lingkup  industri (Poroikov et al . 2020).

## SIMPULAN
Saponin  yang  terkandung  dalam  bawang  putih  asal Papua  Barat  merupakan  senyawa  non  sulfur  yang paling banyak ditemukan daripada senyawa non sulfur lainnya.  Keragaman  jenis  kelompok  saponin  pada bawang  putih  asal  Papua  Barat  menunjukkan  adanya
senyawa  dari  kelompok  saponin  triterpenoid  dan saponin  steroid..  Berdasarkan  analisis  PASS,  saponin pada  bawang  putih  lokal  Indonesia  cukup  berpotensi dalam  beberapa  aktivitas  biologi,  terutama  sebagai anticancer.

## DAFTAR PUSTAKA
Balqis,  Widodo,  Lukiati  B,  Amin  M.  2019.  Active Compounds  with  antioxidant  potential  in  boiled local  Papua-Indonesian  garlic. AIP  Conference Proceedings , 2019(1): 0200121 – 4.
Bhatwalkar, S.B., Rajesh M., Suresh B.N.K., Jamila K.A., Patrick  G.,  and  Rajaneesh  A.  2021.  Antibacterial properties  of  organosulfur  compounds  of  garlic ( Allium sativum ). Front Microbiol 12: 1-20.
Budianto,  Yanuarius  A.P.,  N.S.  Widyastiti,  dan  Ariosta. 2018.  Perbandingan  pengaruh  pemberian  ekstrak bawang  putih  ( Allium  sativum L.),  kitosan,  dan yoghurt sinbiotik pisang tanduk terhadap profil lipid tikus Sprague  Dawley hiperkolesterolemia. JKD Vol. 7(2): 586-598.
Chattopadhyay,  A.,  C.L.  Iwema,  Barbara  A.E.,  Adrian V.L.,  and  Arthur  S.L.  2019.  Molecular  biology information  service:  an  innovative  medical  library-
Tabel 2. Berbagai senyawa yang terdapat dalam bawang putih lokal Papua dan fungsi biologisnya
Fungsi Biologis Senyawa Antineoplastic squalene,  diosgenin,  tigogenin,  β -amyrin,  lupeol,  laxogenin,  gitogenin,  24  Methylene cycloartenol, agigenin, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (12 senyawa). Hypolipemic
diosgenin,  tigogenin,  β -amyrin,  laxogenin,  gitogenin,  24  Methylene  cycloartenol,  agigenin, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (10 senyawa). Anti-inflammatory
diosgenin,  tigogenin,  β -amyrin,  lupeol,  gitogenin,  agigenin,  eruboside  B1,  sativoside  R2, isoeruboside (9 senyawa). Cholesterol antagonist diosgenin, laxogenin, tigogenin, gitogenin, 24 Methylene cycloartenol, agigenin, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (9 senyawa). Antifungal diosgenin, tigogenin, laxogenin, gitogenin, 24 Methylene cycloartenol, agigenin, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (9 senyawa). Nootropic diosgenin,  tigogenin,  β -amyrin,  laxogenin,  lupeol,  gitogenin,  agigenin,  sativoside  R2  (8 senyawa) Antieczematic squalene, lupeol, gitogenin, 24 Methylene cycloartenol, agigenin, eruboside B1, sativoside R2 (7 senyawa). Antiprozoal diosgenin, lupeol, gitogenin, tigogenin, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (7 senyawa). Hepatoprotectant β -amyrin,  lupeol,  24  Methylene  cycloartenol,  eruboside  B1,  sativoside  R2,  isoeruboside  (6 senyawa). Immunosuppressant diosgenin, lupeol, laxogenin, gitogenin, agigenin, eruboside B1, (6 senyawa). Analeptic squalene, diosgenin, lupeol, eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (6 senyawa). Antipruritic β -amyrin, gitogenin, agigenin (3 senyawa). Vascular dementia eruboside B1, sativoside R2, isoeruboside (3 senyawa). Antiviral squalene, β -amyrin, 24 Methylene cycloartenol (3 senyawa). Antinociceptive β -amyrin, lupeol (2 senyawa). Antisecretotic β -amyrin (1 senyawa). Thrombolytic squalene (1 senyawa).
based  bioinformatics  support  service  for  medical researchers. Brief in Bioinfo 21(3): 876-884.
Falade  VA,  Adelusi  TI,  Adedotun  IO,  Hammed  MA, Lawal TA, Agboluaje SA. 2021. In Silico investigation of  saponins  and  tannins  as  potential  inhibitors  of SARS-CoV-2  main  Protease  (Mpro). In  Silico Pharmacology . 9(9): 1-15.
Li,  Zimming,  W.  Le,  dan  Z.  Cui.  2018.  A  novel therapeutic anticancer property of raw garlic extract via  injection  but  not  ingestion. Cell  Death  Disc 4(108): 1-10.
Poroikov,  V.V.,  D.A.  Filimonov.,  T.A.  Gloriozova,  A.A. Lagunin, D.S. Druzhilovskiy, A.V. Rudik., et  al. 2020. Computer-aided  prediction  of  biological  spectra  for organic compounds: the possibilities and limitations. Russ Chem Bul 68 (12): 2143-2154.
Rai, S., E. Acharya-Siwakoti, A. Kafle, H.P. Devkota, and A.  Bhattarai.  2021.  Plant-derived  saponin:  a  review of  their  surfactant  properties  and  applications.  Sci 3(4), 44.
Rifai EA, Hayun H, Yanuar A. 2017. In Silico screening of antimalarial  from  Indonesian  medicinal  plants database  to  plasmepsin  target. Asian  Journal  of Pharmaceutical  and  Clinical  Research. 10(5):  130- 133.
Shang, Ao, Shi-Yu C., Xiao-Yu X., Ren-You G., Guo-Yi T., Harold  C.,  Vuyo  M.,  and  Hua-Bin  L.  2019.  Bioactive compounds and biological functions of garlic ( Allium sativum L.). Foods 8 (246): 1-31.
Singh,  Deepika  dan  Prabir  K.  Chaudhuri.  2018. Structural characteristics, bioavailability, and cardioprotective potentials of saponins. Integr Med Res 7(1): 33-43.
Sobolewska  D,  Michalska  K,  Podolak  I,  Grabowska  K. 2016.  Steroidal  saponins  from  the  genus  Allium. Phytochemistry Reviews . 15: 1 – 35.
Yunus,  F.T.,  A.  Suwondo,  dan  Martini.  2021. Phytochemical compound of garlic ( Allium  sativum ) as an antibacterial to Staphylococcus aureus growth. IOP Conf. Ser.: Mater. Sci. Eng 1053 012041.