## EFEK GEL EKSTRAK HERBA PEGAGAN (Centella asiatica L. Urban) DENGAN GELLING AGENT

## HIDROKSIPROPIL METHYLCELLULOSE TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA BAKAR PADA KULIT PUNGGUNG KELINCI
Tanti Azizah Sujono 1 , Ullya Nur Wahyu Hidayah 2 , T.N. Saifullah Sulaiman 2
1 Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
2 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Email : tanti_azizah@ums.ac.id

## ABSTRACT
Pegagan  (Centella  asiatica  L.  Urban)  contain  saponin  asiaticoside,  which  is  a  structural  protein.  The compound plays a role in the wound healing process by the formation of collagen. This research was conducted to determine the effect of wound healing of burns on New Zealand male rabbits using gel extract of Pegagan (Centella asiatica L. Urban) herbs using hydroxypropyl methylcellulose (HPMC)  as gelling agent. This research was an experimental with the same subject design, using � ve male New Zealand rabbits to test the wound healing of burns, and the backs of each rabbit were divided into six treatment i.e : positive control (Bioplasenton), negative control  (no  treatment),  control  HPMC  base  (no  extract),  and  three  formula  with  herbal  extracts  of  Centella asiatica with a concentration of gelling agent HPMC 8%, 9%, and 10% respectively. Gel was applied to the back of rabbits with the use ± 0.3 grams once daily until the wound diameter equal to zero or until healed. The data was analyzed by one way anava  with a 95% con � dence level. The result showed that of the gelling agent HPMC concentration effect on the increased the viscosity, and decreased the spreadability and the burn wound healing time is a longer. Gel herb pegagan extract (Centella asiatica L. Urban) with a gelling agent HPMC concentration of 8% (17,60±1,14 days) most effectively heal burns compared to the concentration of 9% (19,40 ±1,14 days) and concentration 10% (20,40±1,14 days).
Keywords: Centella asiatica L. Urban, gel, hydroxypropyl methylcellulose, burns.

## PENDAHULUAN
Luka  bakar  merupakan  respon  kulit  dan jaringan  subkutan  terhadap  trauma  termal  atau suhu (Grace & Borley, 2007). Penyebab luka bakar bermacam-macam  diantaranya  api,  uap  panas, cairan  panas,  bahkan  bahan  kimia,  aliran  listrik. Pengobatan  menggunakan  tanaman  obat  sebagai penyembuh  luka  bakar  akhir-akhir  ini  banyak digunakan,  salah  satunya  adalah  menggunakan herba  pegagan  ( Centella  asiatica L.  Urban) (Wasito,  2011).  Penggunaan  tradisional  herba pegagan  sebagai  obat  luka  bakar  yaitu  dengan mencuci  bersih  herba  pegagan  segar,  digiling dan langsung ditempelkan pada bagian yang luka (Sudarsono et al., 2002).
Pegagan
mengandung asiaticoside (Sikarrepaisan et  al., 2008),  suatu  saponin
yang  memacu  pembentukan  kolagen,  yaitu protein  struktur  yang  berperan  dalam  proses penyembuhan  luka  (MacKay  &  Miller,  2003), selain  itu  juga  mengandung  senyawa  fenolik, � avonoid, minyak atsiri. Beberapa penelitian telah dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas  pegagan sebagai  antimikroba,  antifungi,  dan  antioksidan (Lee &  Vairappan , 2011),  serta  antikanker  (Kim et al., 2009). Penggunaan herba pegagan sebagai obat  penyembuh  luka  bakar  dapat  dipermudah dengan  memformulasikannya  dalam  sediaan  gel. Kandungan air yang tinggi  dalam basis gel dapat menyebabkan  terjadinya  hidrasi  pada stratum corneum sehingga  akan  memudahkan  penetrasi obat melalui kulit (Kibbe, 2004).
Penelitian  Rismana  (2010)  menunjukkan bahwa  gel  ekstrak  herba  pegagan  0,5  %  dengan
gelling agent kitosan 1,5% mampu menyembuhkan luka bakar setelah 22 hari. Penelitian Suratman et al., (1996)  menggunakan  ekstrak  herba  pegagan 3%  dan  5%  dengan gelling  agent karbopol  940 sebesar  2%  mampu  menyembuhkan  luka  bakar setelah 11 hari.
Salah satu basis gel derivat selulosa adalah hidroksipropil  metilselulose  (HPMC)  (Gibson, 2001). Hidroksipropil metilselulose adalah turunan selulosa  eter  semisintetik  yang  telah  digunakan secara luas sebagai polimer hidro � lik dalam sistem pemberian  obat  oral  dan  topikal  ( Rogers,  2009). Pemilihan basis HPMC dikarenakan penampakan gel  jernih  dan kompatibel dengan  bahan-bahan lain, kecuali bahan-bahan yang oksidatif (Gibson, 2001) serta dapat mengembang terbatas dalam air sehingga  merupakan  bahan  pembentuk  hidrogel yang baik (Suardi et al., 2008). Selain itu substitusi pada  metil  memberi  satu  ciri  unik  HPMC  yaitu kekuatan gel dan gel terbentuk pada suhu 60-90  C tergantung  substitusi  polimer  dan  konsentrasi pada  air  (Roger,  2009). Hasil  penelitian  Madan &  Singh  (2010)  menyebutkan  basis  HPMC memiliki kemampuan daya sebar yang lebih baik dari karbopol, metilselulosa, dan natrium alginat, sehingga mudah diaplikasikan ke kulit. Gel yang baik mempunyai waktu penyebaran yang singkat.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas, maka  perlu  dilakukan  penelitian  tentang efek penyembuhan  luka  bakar  pada  punggung  kelinci jantan  menggunakan  gel  ekstrak  herba  pegagan dengan  variasi  konsentrasi gelling  agent yang berbeda yaitu HPMC

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan Alat :   pembuat  luka  (penginduksi  panas/ lempeng  logam  dengan  diameter  2 cm  yang  dihubungkan  pada  sebuah solder),  termometer, stopwatch , jangka  sorong,  alat-alat  gelas (Pyrex), Viscotester  RION (VT- 04E  RION), rotary  evaporator (Reidolph).
Bahan
:  Simplisia  herba  pegagan  (CV. Merapi  Farma  Herbal),  HPMC  SH 60 (Bratachem), metilparaben (Bate Chemical  Co.Ltd.),  propilparaben (Bate Chemical Co.Ltd.),
propilenglikol (Bratachem), bioplasenton, etanol 96%. Hewan uji :  kelinci  jantan New  Zealand  White sehat dengan umur 2,5-3 bulan

## Jalannya Penelitian

## 1.  Pembuatan Ekstrak Herba Pegagan
Simplisia  herba  pegagan  500  mg dimaserasi  menggunakan  10  liter  etanol 96%  selama  3  hari  sambil  sesekali  diaduk, selanjutnya � ltrat  diuapkan  di  atas waterbath sampai diperoleh ekstrak kental.
2.  Pembuatan  Gel  Ekstrak  Herba  Pegagan dengan Gelling Agent HPMC
Tabel 1. Formula pembuatan gel ekstrak herba Pegagan Komposisi F 1 F2 F3 F4 Ekstrak (g)* - 3 3 3 HPMC (g)** 8 8 9 10 Metilparaben (g) 0,18 0,18 0,18 0,18 Propilenglikol (g) 15 15 15 15 Propilparaben (g) 0,15 0,15 0,15 0,15 Aquadest ad (mL) 100 100 100 100 *   Konsentrasi  ekstrak  pegagan  yang  digunakan didapatkan dari penelitian Suratman et al., (1996)
**  Variasi  konsentrasi  HPMC  yang  digunakan didapatkan setelah melakukan uji pendahuluan
Gel  diformulasikan  sesuai  komposisi pada  tabel  1,  ditimbang  masing-masing bahan.  HPMC  didispersikan  ke  dalam  30  ml air pada suhu (80-90°C) hingga mengembang dan  diaduk  sampai  terbentuk  liat  (gel). Pengadukan harus dalam keadaan dingin yaitu di  dalam  baskom  yang  telah  diberi  es  batu. Metilparaben  dan  propilparaben  dicampur dalam  propilenglikol  15  ml  lalu  ekstrak dimasukkan  hingga  tercampur.  Campuran tersebut  dimasukkan  dalam  campuran  HPMC liat  dan  diaduk  sampai  homogen.  Ditambah air  dingin  hingga  didapat  100,0  gram  gel, kemudian  dikemas  dalam  tube  yang  tertutup rapat.
3.  Uji Sifat Fisik Gel
Uji sifat � sik gel antara lain pemeriksaan organoleptis, pH, viskositas, waktu lekat, daya sebar, dan homogenitas.

## 4.  Uji Stabilitas Gel
Gel  ekstrak  herba  pegagan  diuji stabilitasnya  pada  suhu  kamar  dengan mengamati  warna,  bau,  konsistensi,  pH,  dan viskositas setiap hari ke-0, ke-7, ke-14, ke-21, ke-28, ke-35, ke-42.

## 5.  Pembuatan Luka Bakar
Gambar 1. Model lokasi pembuatan luka bakar di bagian kulit punggung kelinci Keterangan 1 Tidak diberi perlakuan A Kelinci ke-1 2 Kontrol positif (Bioplacenton  ) B Kelinci ke-2 3 F1 (HPMC 8%) C Kelinci ke-3 4 F2 (HPMC 8%+ekstrak) D Kelinci ke-4 5 F3 (HPMC 9%+ekstrak) E Kelinci ke-5 6 F4 (HPMC 10%+ekstrak) Pembuatan luka bakar dilakukan dengan  alat  penginduksi  panas  suhu  80  C, selama  5  detik.  Sebelum  diinduksi  bulu  pada bagian  punggung  dicukur  terlebih  dahulu  dan dianestesi menggunakan etil klorida dengan cara disemprotkan  pada  kulit  yang  akan  dibuat  luka bakar.  Alat  penginduksi  panas  berupa  lempeng logam  dengan  diameter  2  cm  yang  dihubungkan dengan  sebuah  elemen  panas  yang  mempunyai daya 40 Watt dan tegangan 220 Volt. Jarak masing- masing luka bakar 5 cm (Suratman et al. , 1996).
6.  Pengujian Lama Penyembuhan Luka Bakar Gel Herba Pegagan Digunakan  5  hewan  uji  kelinci  jantan yang  punggungnya  telah  dibuat  luka  bakar, kemudian diolesi ±0,3 gram gel sekali sehari, lalu ditutup dengan kain kasa steril dan plester.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari penelitian berupa diameter  luka  bakar  (cm)  yang  diukur  dengan jangka  sorong  (Einbill)  (Gambar  2).  Diameter luka  bakar  yang  diperoleh  dihitung  dengan menggunakan rumus:
1 2 3 4 ....................................
4 dx dx dx dx dx    
dx: diameter pada hari ke x
Gambar 2. Cara mengukur diameter luka bakar (Suratman et al , 1996).
Lalu dihitung persentase penyembuhan luka bakar dengan rumus sebagai berikut: (Suratman et al , 1996)
2 2 2 1 x100% .............................(2) 1 d dx px d  
Px  =   persentase  penyembuhan  luka  bakar  pada  hari ke-x d 1 =   diatemer luka bakar hari pertama dx  =   diameter luka bakar hari ke-x
Data lama penyembuhan luka bakar (hari) diuji  statistik  dengan  uji  Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui normalitas distribusi data, dan Levene test untuk mengetahui homogenitas varian. Karena  data  terdistribusi  normal  dan  homogen maka  dilakukan  uji  statistik  analisis  varian satu  jalan,    dilanjutkan  dengan  uji  LSD  ( Least Signi � cant  different )  dengan  taraf  kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN A. Uji Pendahuluan Konsentrasi Basis HPMC SH 60
Uji  pendahuluan  dilakukan  untuk mencari konsentrasi HPMC SH 60 yang dapat diformulasikan  dalam  sediaan  gel  ekstrak herba  pegagan  dengan  konsistensi  yang  tidak encer.
Tabel  2. Hasil  uji  pendahuluan  konsentrasi  Basis HPMC SH 60 Konsentrasi HPMC SH 60 (%) Sebelum ditambah ekstrak Setelah ditambah ekstrak 1 Encer Encer 2 Encer Encer 3 Encer Encer 4 Encer Encer 5 Encer Encer 6 Encer Encer 7 Agak kental Encer 8 Kental Kental 9 Kental Kental 10 Kental Kental
Hasil konsentrasi HPMC SH 60 1% hingga 7%  sebelum  dan  setelah  penambahan  ekstrak didapatkan gel yang masih encer, sehingga tidak digunakan  dalam  penelitian  (Tabel  2),  hal  ini dikarenakan jika konsistensi gel yang encer akan sulit diaplikasikan dalam punggung kelinci, karena akan  mudah  mengalir  sehingga  pengobatannya kurang  optimal.  Konsentrasi  8%,  9%,  dan  10% menghasilkan gel dengan konsistensi yang kental sebelum  dan  setelah  penambahan  ekstrak.  Pada HPMC  SH  60  memiliki  rentang  konsentrasi 7-12%  agar  dapat  terbentuk  gel  (Rogers,  2009), dalam  penelitian  ini  konsentrasi  yang  digunakan adalah 8%, 9%, dan 10%, sehingga sudah sesuai dengan  standar  rentang  konsentrasi  basis  HPMC SH 60.

## A. Sifat Fisik Gel
1.  Hasil  Uji  Organoleptis,  pH,  dan Homogenitas
Pembuatan  ekstrak  herba  pegagan dilakukan  dengan  cara  maserasi.  Pelarut yang  digunakan  dalam  ekstraksi  yaitu etanol  96%,  yang  dapat  menarik  senyawa kimia asiaticoside yang  terkandung  dalam pegagan.  Pemilihan  etanol  96%  (bersifat polar)  karena  zat  aktif  yang  hendak  disari yaitu asiaticoside yang merupakan saponin yang  bersifat  polar  sehingga  lebih  mudah ditarik oleh penyari yang bersifat polar ( like dissolve like ). Hasil maserasi dan remaserasi 500 gram herba pegagan diperoleh ekstrak kental  berwarna  coklat  kehijauan  sebesar 50,62  gram  dan  rendemen  yang  diperoleh 10,12%,  sehingga  sudah  sesuai  dengan standar bahwa hasil rendemen tidak kurang dari 7,2%. (DepKes, 2008).
Tabel 3. Hasil uji organoleptis, homogenitas dan pH gel ekstrak herba pegagan Uji Sifat Fisik Formula F1 F2 F3 F4 Konsistensi Kental Kental Kental Kental Warna Putih Kekuningan Hijau Kehitaman Hijau Kehitaman Hijau kehitaman Bau Khas Basis Khas Pegagan Khas Pegagan Khas Pegagan Homogenitas Homogen Homogen Homogen Homogen pH 5 5 5 5 Keterangan :
F1: Kontrol basis (HPMC 8%) F2: Gel HPMC 8% + ekstrak F3: Gel  HPMC 9% + ekstrak F4: Gel  HPMC 10% + ekstrak
Pada uji organoleptis gel diamati secara visual dengan mengamati konsistensi, warna, dan  bau  sediaan.  Gel  tanpa  penambahan ekstrak  (kontrol  basis)  berwarna  putih kekuningan dengan bau khas basis HPMC sedangkan dengan penambahan ekstrak gel berwarna  hijau  pekat  serta  menunjukkan adanya  bau  khas  pegagan  dengan  warna gel  yang  tidak  berubah  dengan  adanya perbedaan  konsentrasi  HPMC,  konsistensi kental dan sulit dituang. Viskositas ekstrak yang tinggi 4000 dPa-s dikarenakan bentuk ekstrak  yang  liat  dan  sedikit  kandungan air di dalam ekstrak menyebabkan ekstrak menjadi kental.
Salah  satu  syarat  sediaan  gel  adalah homogen.  Syarat  homogenitas  tidak  boleh mengandung bahan kasar yang bisa diraba (Syamsuni,  2006).  Homogenitas  sedian gel  dapat  dilihat  secara  visual  dengan hasil  pengujian  semua  formula  dihasilkan warna merata serta tidak ditemukan adanya partikel di dalam gel. Hasil uji homogenitas menunjukkan tidak adanya pengaruh variasi konsentrasi  HPMC  terhadap  homogenitas gel.
Pengukuran  pH  sangat  penting  dalam pembuatan  sediaan  topikal  karena  pH yang  terlalu  asam  atau  basa  akan  mudah mengiritasi  kulit  dan  menyebabkan kulit  menjadi  kering.  Pada  sediaan  gel ektrak  herba  pegagan  dengan  adanya variasi  konsentrasi gelling  agent tidak mempengaruhi  perubahan  pH.  Semua formula  memiliki  pH  yang  sama  yaitu 5,  yang  berarti  masih  dalam  range  pH normal kulit sehingga bila digunakan akan meningkatkan  kenyamanan  pada  kulit dengan  luka  bakar. Ini  dikarenakan  sifat dari  HPMC  yang  netral,  tahan  terhadap pengaruh  asam  dan  basa  sehingga  dapat menjaga kestabilitas pH gel (Roger, 2009).

## 2.  Hasil Uji Viskositas
Gambar 3. Diagram Viskositas Gel
Keterangan : F1: Kontrol basis (HPMC 8% F2: Gel HPMC 8% + ekstrak F3: Gel  HPMC 9% + ekstrak F4: Gel  HPMC 10% + ekstrak
Peningkatan viskositas sediaan
gel  ekstrak  herba  pegagan  dipengaruhi oleh  kenaikan  konsentrasi gelling  agent HPMC  (Gambar  3).  Pada  formula  dengan penambahan  ekstrak  viskositas  menjadi meningkat  dibanding  dengan  formula kontrol basis (tanpa ekstrak). Ini dikarenakan viskositas  dari  ekstrak  (4000  d-Pas)  yang sifatnya  mengentalkan,  semakin  besar konsentrasi  HPMC  yang  digunakan  maka sediaan  akan  semakin  kental.  Viskositas menyatakan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir,  semakin  tinggi  viskositas  maka semakin  besar  pula  tahanannya  (Martin et al .,  2008).  Hal  ini  disebabkan  viskositas sediaan  gel  tergantung  pada  struktur  dan berat  molekul  bahan  pembentuk  gel  atau basis gel yang digunakan. HPMC merupakan polimer  turunan  selulosa  (Gibson,  2001). Menurut Erawati et al , 2005 pada dispersi polimer turunan selulosa, molekul polimer masuk  ke  dalam  rongga  yang  dibentuk oleh  molekul  air  menyebabkan  terjadinya ikatan  hidrogen  antara  gugus  hidroksil (-OH)  dari  polimer  dengan  molekul  air. Ikatan  hidrogen  ini  yang  berperan  dalam hidrasi  pada  proses swelling dari  suatu polimer, sehingga peningkatan konsentrasi HPMC  menyebabkan  gugus  hidroksil yang  berikatan  semakin  banyak  sehingga viskositas sediaan semakin meningkat.
3.  Hasil Uji Waktu Melekat
Gambar 4. Diagram Hasil Daya Melekat Gel
Keterangan : F1: Kontrol basis (HPMC 8%) F2: Gel HPMC 8% + ekstrak F3: Gel  HPMC 9% + ekstrak F4: Gel  HPMC 10% + ekstrak
Penambahan  ekstrak  pada  formula dapat  meningkatkan  waktu  lekat  gel dibandingkan dengan formula kontrol basis (tanpa  ekstrak).  Ini  disebabkan viskositas dari  ekstrak  herba  pegagan  yang  kental (4000  d-Pas)  akan  berpengaruh  pada viskositas  gel  yang  semakin  kental  pula, sehingga  waktu  lekat  yang  dibutuhkan semakin  lama.  Hasil  daya  melekat  pada setiap  formula  menunjukkan  adanya peningkatan  waktu  melekat  gel  dengan adanya  penambahan  konsentrasi  HPMC (Gambar  4).  Hal  ini  disebabkan  HPMC dapat  mengembang  dan  membentuk koloid  dengan  penambahan  air  panas (Roger,  2009).  Koloid  terbentuk  karena zat  terdispersinya  mengabsorbsi  medium pendispersinya sehingga menjadi kental dan bersifat  lengket,  maka  dapat  disimpulkan dengan  meningkatnya  konsentrasi  HPMC koloid  yang  terbentuk  semakin  banyak sehingga  akan  meningkatkan  kekentalan gel  yang  mengakibatkan  meningkatnya daya lekat gel.

## 4.  Hasil Luas Penyebaran

## Gambar 5. Diagram Luas Penyebaran Gel
Keterangan : F1: Kontrol basis (HPMC 8%) F2: Gel HPMC 8% + ekstrak F3: Gel  HPMC 9% + ekstrak F4: Gel  HPMC 10% + ekstrak
Hasil  luas  penyebaran  gel  dengan pemberian  beban  yang  sama  pada masing-masing  formula  menunjukkan semakin  tinggi  konsentrasi  HPMC  maka
luas  penyebarannya  semakin  menurun (Gambar  5).  Hal  ini  disebabkan  seiring dengan  peningkatan  basis  kadar  air  yang terkandung dalam formula menjadi sedikit yang menyebabkan daya menyebar menjadi turun.  Daya  sebar  bukan  merupakan  data absolut  karena  tidak  ada  literatur  yang menyatakan angka pastinya. Jadi data hasil daya menyebar merupakan data yang relatif (Suardi et al., 2008)
5.  Uji Stabilitas Gel
Salah  satu  ciri-ciri  sedian  semipadat yang  baik  adalah  stabil,  baik  selama penyimpanan  dan  pemakaiannya  karena dipengaruhi  oleh  kelembaban  dan  suhu. Hasil pemeriksaan stabilitas secara organoleptis  selama  penyimpanan  42 hari  menunjukkan  bahwa  tidak  terjadinya perubahan  homogenitas,  warna,  bau, viskositas, dan pH, ini menunjukkan bahwa
interaksi  antara  bahan  aktif  dan  bahan pembawa  dalam  pembentukan  sediaan  gel tidak  mengakibatkan  perubahan  apapun. Hal  ini  menunjukkan  bahan-bahan  dalam formula  gel  tidak  mengalami  penguraian selama penyimpanan, ini dikarenakan sifat HPMC  yang  netral,  tahan  terhadap  asam dan basa, punya pH stabil antara 3-11, tahan terhadap serangan mikroba dan tahan panas (Suardi et  al., 2008).  Selain  itu  adanya metilparaben  dan  propilparaben  sebagai pengawet  sangat  diperlukan  karena  gel mempunyai  kadar  air  yang  tinggi.  Kadar air  yang  tinggi  ini  merupakan  medium yang  baik  bagi  pertumbuhan  jasad  renik, sehingga adanya pengawet juga membantu dalam  menjaga  kestabilan  sediaan  gel. Sediaan  gel  yang  baik  mempunyai kestabilan  dalam  jangka  waktu  yang  lama dan tidak dipengaruhi oleh lingkungan luar.

## Tabel 4. Hasil uji stabilitas gel ekstrak herba Pegagan berbagai konsentrasi
Karakteristik Formula Penyimpanan hari ke- 0 7 14 21 28 35 42 pH F1 5 - - - - - - F2 5 - - - - - - F3 5 - - - - - - F4 5 - - - - - - Viskositas (dPa-s) F1 300 - - - - - - F2 450 - - - - - - F3 700 - - - - - - F4 900 - - - - - - Bau F1 Khas basis - - - - - - F2 Bau pegagan - - - - - - F3 Bau pegagan - - - - - - F4 Bau pegagan - - - - - - Warna F1 Putih kekuningan - - - - - - F2 Hijau kehitaman - - - - - - F3 Hijau kehitaman - - - - - - F4 Hijau kehitaman - - - - - - Konsistensi F1 Kental - - - - - - F2 Kental - - - - - - F3 Kental - - - - - - F4 Kental - - - - - - Keterangan : F1: Kontrol basis (HPMC 8%)
F2: Gel ektrak + HPMC 8% F3: Gel ektrak +  HPMC 9% F4: Gel ektrak + HPMC 10% -: menunjukkan tidak adanya perubahan

## 6.  Hasil  Pengujian  Efek  Penyembuhan Luka Bakar
Pada  penelitian  ini  kontrol  positif yang  digunakan  adalah  Bioplacenton®. Kontrol  negatif  dimaksudkan  untuk mengetahui  kecepatan  penyembuhan  luka bakar  tanpa  dilakukan  pemberian  obat (tidak diberi perlakuan). Kandungan dalam pegagan  yang  berperan  penting  dalam proses  penyembuhan  luka  bakar  adalah asiaticoside (Sikarrepaisan et  al., 2008) yang  merupakan  saponin  yang  memacu pembentukan kolagen, yaitu protein struktur yang  berperan  dalam  proses  penyembuhan luka  (MacKay  &  Miller,  2003),  mampu menurunkan � brosis  pada  luka  sehingga mencegah  pembentukan  bekas  luka  baru.
Hasil  uji  penyembuhan  luka  bakar  pada keenam  sediaan  menunjukkan  adanya perbedaan waktu dalam penyembuhan luka, sedangkan  pada  ketiga  sediaan  dengan variasi  konsentrasi  HPMC  menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  HPMC maka semakin lama waktu yang dibutuhkan untuk  kesembuhan  luka  bakarnya.  Hal  ini disebabkan  semakin  tinggi  konsentrasi HPMC  maka  semakin  tinggi  pula viskositasnya,  sehingga  semakin  lama kecepatan  absorbsi  obat  yang  masuk  ke dalam kulit. Rata-rata waktu penyembuhan luka  bakar  yang  paling  cepat:  kontrol positif > formula 2 > formula 3 > formula 4 > formula 1 > kontrol negatif.
Tabel 5.  Waktu penyembuhan luka bakar setelah pemberian ekstrak pegagan dengan gelling agent HPMC Perlakuan Lama penyembuhan (hari) kelinci ke : Mean ±SD 1 2 3 4 5 Kontrol positif (bioplacenton) 15 14 16 13 13 14,20±1,30* Kontrol  negatif (tanpa perlakuan) 23 24 24 24 22 23,40±0,89 Kontrol basis HPMC 23 20 23 21 22 21,80±1,30 Pegagan+HPMC 8% 17 16 19 18 18 17,60±1,14* Pegagan+HPMC 9% 19 21 19 18 20 19,40±1,14* Pegagan+HPMC 10% 20 20 21 19 22 20,40±1,14*
Keterangan : *   : berbeda bermakna dengan kontrol negatif  (p<0,05)
Tabel 6. Pengujian dan deteksi hasil uji skrining � tokimia ekstrak etanol herba pegagan Senyawa Cara pengujian Deteksi hasil Hasil Flavonoid Ekstrak yang sudah dipekatkan diletakkan di cawan porselen, ditambahkan asam oksalat dan asam borat secukupnya lalu diuapkan sampai kering. Setelah itu ditambah 2 ml dietileter Positif apabila terjadi � uoresensi kuning  di UV 366 + Saponin Ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditambah dengan air lalu dikocok kuat Positif jika terbentuk buih + Alkaloid Ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditambah 5 tetes CCl 4 dan pereaksi Meyer Positif jika terbentuk endapan putih _ Tanin Ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditetesi larutan FeCl 3 Positif jika warna larutan berubah menjadi biru tua + Terpenoid Ekstrak ditambah 1 ml asam asetat glasial dan  1 ml H 2 SO 4 Positif jika warna larutan berubah menjadi merah +
Pada tabel  5  kontrol negatif memberi kesembuhan  hampir  setara  dengan  kontrol basis,  ini  dikarenakan  jaringan  sel  yang rusak dapat beregenerasi dengan sendirinya, sehingga  penyembuhan  secara  spontan tanpa pemberian obat dapat terjadi. Kontrol negatif  dengan  formula  penambahan ekstrak memperlihatkan
perbedaan
lama  penyembuhan  luka  bakarnya.  Ini disebabkan  adanya  zat  aktif asiaticoside
yang  terkandung  di  ekstrak  yang  memicu proses penyembuhan luka semakin cepat.
Kecepatan  penyembuhan  luka  bakar dapat  dipengaruhi  oleh  kedalaman  luka yang  telah  dibuat.  Semakin  dalam  luka bakar  yang  dibuat  maka  membutuhkan waktu lama untuk sembuh. Pada penelitian ini  gel  ekstrak  herba  pegagan  dengan basis HPMC 8% merupakan formula yang paling  efektif  dalam  memberikan  efek
dibanding dengan sediaan gel ekstrak herba pegagan basis HPMC 9% dan 10%. Dapat disimpulkan  bahwa  dengan  peningkatan konsentrasi  HPMC  viskositasnya  semakin besar  yang  akan  mempengaruhi  lama penyembuhan luka bakar, menurunkan luas penyebaran, meningkatkan waktu melekat, tanpa  mempengaruhi  perubahan  pH  pada sediaan gel ekstrak herba pegagan.
Berdasarkan  uji  tabung  dalam  ekstrak etanol herba pegagan mengandung
� avonoid,  terpenoid,  saponin  dan  tanin. Menurut    Sikarrepaisan et  al ,  (2008), kandungan asiacoside yang  merupakan suatu saponin dapat memacu pembentukan kolagen yang akan mempercepat penyembuhan luka.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
1.  Variasi  konsentrasi gelling  agent HPMC mempengaruhi  sifat � sik  gel  ekstrak  herba pegagan  ( Centella  asiatica L.  Urban)  yaitu kenaikan  konsentrasi gelling  agent HPMC menyebabkan  peningkatan  viskositas,  daya lekat dan menurunkan daya sebar.
2.  Semakin  rendah  konsentrasi gelling  agent HPMC maka semakin cepat penyembuhan luka bakar pada kulit punggung kelinci jantan New Zealand, yaitu  konsentrasi  8%    (16,4±0,55) hari,  konsentrasi  9%  (18±0,71)  hari  dan konsentrasi 10% (19,8±0,84) hari.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  dalam pembuatan  gel  ekstrak  herba  pegagan  dengan gelling  agent HPMC  yang  dioptimasi  terlebih dahulu.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kami  ucapkan  kepada Fakultas  Farmasi  Universitas  Muhammadiyah Surakarta  yang  telah  mendanai  penelitian  ini melalui  Penelitian  Kolaboratif  antara  Dosen  dan Mahasiswa

## DAFTAR PUSTAKA
DepKes  RI,  2008, Farmakope  Herbal  Indonesia ,
113-115,  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, Jakarta.
Erwati,  Tristiana,  Rosita,  N.  ,  Hendroprasetyo,  W.  & Dien  R.  J.,  2005,  Pengaruh  Jenis  Basis
Gel  Dan  Penambahan  NaCl  (0.5%  -b/b) Terhadap  Intensitas  Echo  Gelombang Ultrasonik Sediaan Gel Untuk Pemeriksaan USG ( Acoustic Coupling Agent ), Airlangga Journal of Pharmacy, 5 (2).
Gibson, M., 2001, Pharmaceutical Preformulation and Formulation ,  546-550,  CRC  Press,  United States of America.
Grace, A. P. & Borley, N. R., 2007, Ilmu Bedah Edisi
III , 87, Penerbit Erlangga, Jakarta. Kibbe,  A.H.,  2004, Handbook  of  Pharmaceutical
Exipients ,  Third  Edition,  18-19,  462-469, 629-631, Pharmaceutical Press. London.
Kim,  W.J.,  Kim,  J.,  Veriansyah,  B.,  Kim,  J.D.,  Lee,
S.G.,  &  Winata,  R.R.T.,  2009,  Extraction of  Bioactive  Components  from Centella asiatica Using  Subcritical  Water, The Journal of Supercritical Fluid , 48, 211-216 Lee,  T.K.,  &  Vairappan,  C.S.,  2011,  Antioxidant, Antibacterial  and  Cytotoxic  Activities of  Essential  Oils  and  Ethanol  Extracts  of Selected  South  East  Asian  Herbs, J  Med Plant Res , 5 (21), 5284-5290
MacKay D. & Miller A. L., 2003, Nutritional Support for  Wound  Healing, Alternative  Medicine Review, 8, 369-370.
Madan,  J.  &  Singh,  R.,  2010,  Formulation  and Evaluation of Aloe vera Gels, Int J Ph Sci , 2 (2) : 551-555
Martin,  A.,  Swarbrick,  J.  &  Cammarata,  A.,  2008,
Farmasi  Fisik ,  Edisi  Ketiga,  Penerbit  UI Press, Jakarta.
Rismana, E., 2010, Pengembangan Formulasi Sediaan Wound  Healing  Menggunakan  Bahan  Aktif Kitosan dan Ekstrak Pegagan , BPPT, Jakarta Rogers, T.L., 2009, Hypromellose, Rowe, R. C., Paul J. S., & Marian E. Q., Sixth Edition , 326-329, Handbook  of  Pharmaceutical  Excipient,
Pharmaceutical Press, USA.
Sikarrepaisan, P., Suksamrarn, A., & Supaphol, P., 2008, Electrospun  Gelatin  Fiber  Mats Containing A  Herbal  Centella  asiatica  Extract  and Release  Characteristic  of  Asiaticoside, Nanotechnology , 2.
Suardi, M., Armenia & Maryawati, A., 2008, Formulasi dan  Uji  Klinik  Gel  Anti  Jerawat    Benzoil Peroksida-HPMC, Karya  Ilmiah ,  Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Sumatra Barat.
Sudarsono,  Gunawan,  D.,  Wahyuono,  S.,  Donatus,
I.A., & Purnomo, 2002, Tumbuhan Obat II , 42-45,  Pusat  Studi  Obat Tradisional  UGM, Yogyakarta
Suratman, Sumiwi, S.A., & Gozali, D., 1996, Pengaruh Ekstrak Antanan dalam Bentuk Salep, Krim dan  Jelly  terhadap  Penyembuhan  Luka Bakar, Cermin Dunia Kedokteran , 108 : 31-
36
Syamsuni, H., 2006, Farmasetika Dasar dan Hitungan Farmasi , 104, EGC, Jakarta Teti & Fina, 2011, Formulasi Gel Pengupas Kulit Mati yang Mengandung Sari Buah Nanas ( Ananas comosus L.) antara 17 sampai 78%, Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, 104-109.
Wasito,  H.,  2011, Obat  Tradisional  Kekayaan  Alam ,
78-80, Graha Ilmu, Yogyakarta.