## PENGARUH PENGGUNAAN PENGENCER SITRAT-KUNING TELUR DENGAN LEVEL AIR KELAPA MUDA TERHADAP KUALITAS SPERMATOZOA DOMBA JANTAN
The effect of use of egg citrate-yellow threatener with young coconut water level on quality Spermatozoa of the sheep
Hendriawan Kapoteng Bili 1 , Agustinus A. Dethan 2 , Paulus K. Tahuk 3
1,2,3 Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Timor
* Coresponding Author : hendrikkapoteng24@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  penggunaan  level  pengencer  air  kelapa muda terhadap viabilitas, abnormalitas spermatozoa dan pH semen  domba jantan. Penelitian dilaksanakan selama 2 bulan, pada bulan Juni sampai Agustus 2021, dan dilakukan di tempat penampungan  semen  domba  di  Desa  Naiola,  Kecamatan  Bikomi  Selatan,  Kabupaten  Timor Tengah  Utara  sedangkan  evaluasi  spermatozoa  dilaksanakan  di  Laboratorium  Fakultas Pertanian,  Universitas  Timor.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkal  (RAL) dengan  empat  perlakuan  dan  lima  ulangan.  Perlakuan  R1  tanpa  air  kelapa  muda, perlakuan R2 10% air kelapa muda, perlakuan R3 15% air kelapa muda, perlakuan R4 20%  air kelapa muda. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan  berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap viabilitas spermatozoa. Rata-rata viabilitas spermatozoa masing-masing perlakuan adalah P1 sebesar  78,0±8,15,  P2  sebesar  75,2±7,79  ,  P3  sebesar  71,8±9,44  dan  P4  sebesar  66,8±4,54. Abnormalitas  spermatozoa  berbeda  tidak  nyata  (P>0,05).  Abnormalitas  spermatozoa perlakuan  P1  sebesar  8,4±1,14,  P2  sebesar  9,2±0,83,  P3  sebesar  9,4±1,34  dan  P4  sebesar 9,6±3,84. Derajat keasaman (pH) semen berbeda nyata (P<0,05) diantara perlakuan. Nilai pH masing-masing  perlakuan  adalah  P1  sebesar  6,79±0,16,  P2  sebesar  6,53±0,34,  P3  sebesar 6,47±0,33, dan P4 sebesar 6,35±0,20. Disimpulkan bahwa penambahan level air kelapa muda (20%) masih dapat mempertahankan viabilitas, normalitas spermatozoa dan pH semen domba jantan.
Kata Kunci: Viabilitas dan abnormalitas spermatozoa, pH semen, pengencer air kelapa muda-kuning telur domba jantan

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  effect  of  using  young  coconut  water  as  a  diluent  on viability, spermatozoa abnormalities and pH of ram semen. This research has been carried out for 2 months, from June to August 2021, and has been carried out in a sheep semen shelter in Naiola  Village,  South  Bikomi  District,  North  Central  Timor  Regency  and  evaluated  at  the Laboratory  of  the  Faculty  of  Agriculture,  Timor  University.  This  study  used  a  completely randomized  design  (CRD)  with  four  treatments  and  five  replications.  The  R1  treatment without  young  coconut  water,  R2  treatment  10%  young  coconut  water,  R3  treatment  15% young  coconut  water,  R4  treatment  20%  young  coconut  water.  The  results  showed  that  the effect of treatment was significantly different (P<0.05) on the viability of spermatozoa. The average spermatozoa viability of each treatment was P1 of 78,0±8,15, P2 of 75,2±7,79, P3 of 71,8±9,44  and  P4  of  66,8±4,54.  Spermatozoa  abnormalities  were  not  significantly  different (P>0.05).  Spermatozoa  abnormalities  of  treatment  P1  were  8,4±1,14,  P2  was  9,2±0,83,  P3 was  9,4±1,34  and  P4  was  9,6±3,84.  The  degree  of  acidity  (pH)  of  semen  was  significantly different  (P<0.05)  between  treatments.  The  pH  values  of  each  treatment  were  P1  of
6,79±0,16, P2 of 6,53±0,34, P3 of 6,47±0,33, and P4 of 6,35±0,20. So this study concluded that  the  addition  of  young  coconut  water  level  of  (20%)  can  still  maintain  the  viability, normality of spermatozoa and pH of ram semen.
Keywords: Viability and abnormalities of spermatozoa, semen pH, young coconut water-egg yolk diluent

## PENDAHULUAN
Domba Ekor Tipis (DET)
merupakan  domba  asli  Indonesia  dan dikenal  sebagai  domba  lokal  atau  domba kampung  karena  ukuran  tubuhnya  yang kecil,  warnanya  bermacam-macam,  bulu tidak  tebal,  ekor  kecil  dan  panjangnya sedang  (Purbowati,  2009).  Keunggulan domba ekor tipis yaitu mampu beradaptasi pada  kondisi  iklim  tropis  serta  memiliki sifat  seasonal  polyestrus  sehingga  dapat kawin  sepanjang  tahun  (Marniati,  1989). Keunggulan  domba  ekor  tipis  tersebut tentunya  perlu  untuk  dijadikan  sebagai salah  satu  aspek  untuk  dikembangkan. Pengembangan  domba  ekor  tipis  dapat dilakukan dari segi peningkatan reproduksinya.
Kualitas  sperma  untuk  Inseminasi Buatan  (IB)  sangat  ditentukan  oleh  jenis bahan  pengencernya.  Daya  fertilisasi optimum  spermatozoa  harus  diawetkan untuk beberapa lama setelah penampungan untuk  mempertahankan  motilitas  dan viabilitasnya  agar  penggunaan  pejantan yang  bebas  penyakit  dan  bermutu  genetik tinggi  secara  maksimal  dapat  tercapai dalam program IB. Sperma perlu dicampur dengan  larutan  pengencer  yang  menjamin kebutuhan  fisik  dan  kimiawinya  serta disimpan  pada  suhu  dan  kondisi  tertentu yang mempertahankan kehidupan spermatozoa selama waktu yang diinginkan  untuk  kemudian  dipakai  sesuai kebutuhan. Disamping pengaruh pengencer, penyimpanan semen cair memerlukan  temperatur  lemari  pendingin (3-5 °C )  agar  spermatozoa  dapat  bertahan cukup  lama.  Kerusakan  spermatozoa  yang terjadi  saat  preservasi  pada  suhu  rendah merupakan  kendala  utama  dalam  upaya mempertahankan  kualitas  semen.  Untuk
mengatasi  hal  tersebut,  maka  harus menggunakan bahan-bahan pengencer semen. Salah satu syarat pemilihan bahan- bahan pengencer semen adalah murah dan mudah di peroleh (Toelihere,1981). Proses pengenceran memiliki tujuan untuk memperbanyak volume semen; melindungi spermatozoa dari cold shock, menyediakan zat  makanan  sebagai  sumber  energi  bagi spermatozoa,  menyediakan  buffer  untuk mempertahankan pH, tekanan osmotic, dan keseimbangan elektrolit, mencegah kemungkinan terjadinya pertumbuhan kuman (Partodihardjo, 1992).
Berdasarkan  pada  kriteria  tersebut air  kelapa  memenuhi  syarat  digunakan sebagai  bahan  pengencer  semen,  karena kelapa  muda  sangat  mudah  diperoleh dengan  harga  yang  murah  dibandingkan dengan  bahan-bahan  kimia.  Air  kelapa mengandung  karbohidrat  yang  dapat menjadi  sumber  energi  bagi  kehidupan spermatozoa  (Smith et  al. ,  1997 disitasi Ketaren  dan  Djatmiko,  1981).  Kebutuhan beberapa  karbohidrat  sederhana  sebagai sumber  energi  dalam  pengencer  dapat dipenuhi dengan penggunaan madu (Brosdiana, 2000), ekstrak melon (Yulnawati, 2002), dan air kelapa (Anggraeny et  al., 2004)  .  Apabila dibandingkan  antara  ketiganya,  air  kelapa lebih  murah  dan  lebih  mudah  didapat dengan  kandungan  nutrisi  yang  lengkap dan  bersifat buffer .  Air  kelapa  juga mengandung unsur karbon berupa karbohidrat  sederhana,  seperti:  glukosa, sukrosa,  dan  fruktosa  (Kuberski et  al., 1979). Selain  air  kelapa,  kuning  telur  juga merupakan  salah  satu  pengencer  semen yang  sudah  lazim  digunakan,  karena
kuning  telur  mengandung  lesitin  dan lipoprotein  untuk  melindungi  spermatozoa dari  cekaman  dingin  (Toelihere,  1993), sehingga  diperlukan  dalam  semen  cair yang disimpan pada suhu 5 °C . Telur lebih mudah  didapat  dan  lebih  tahan  lama penyimpanannya  dibandingkan  dengan  air susu sehingga sampai saat ini kuning telur
ayam ras masih populer digunakan sebagai salah  satu  bahan  pengencer  semen.
Berdasarkan  hal  yang  telah  dijelaskan tersebut  maka  perlu  dilakukan  penelitian dengan untuk melihat pengaruh penggunaan  pengencer  sitrat-kuning  telur dengan  level  air  kelapa  muda  terhadap kualitas spermatozoa domba jantan.

## MATERI DAN METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan selama  2  bulan,  pada  bulan  Juni  sampai Agustus  2021,  dan  telah  dilaksanakan  di tempat  penampungan  semen  domba  di Desa  Naiola,  Kecamatan  Bikomi  Selatan, Kabupaten  Timor  Tengah  Utara    dan dievaluasi di Laboratorium Fakultas Pertanian, Universitas Timor. Ternak  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah ternak  Domba  jantan    yang  berumur  3 tahun dan satu ekor domba betina berumur 4 tahun sebagai pemancing. Alat-alat yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah vagina  buatan,gelas  ukur,  termometer, gelas  objek,  mikroskop,  cool  box,  cover gelas,  gelas  objek,  tabung  reaksi,  rak tabung,  kertas indikator pH, handcounter, dulang,  pipet,  hemacytometer,  tisu,  alat tulis  dan  kamera.  Bahan-bahan  yang digunakan  adalah  semen  domba,  air kelapa,  kuning  telur,  asam  sitrat, penisilin , streptomisin, larutan eosin, larutan hayem, alkohol dan air.
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalahmetode  eksperimen laboratorium dengan menggunakan rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  4 perlakuan dan 5 ulangan.
P1  :Sitrat - kuning  telur  tanpa  air  kelapa muda P2  :  Sitrat - kuning  telur  + air  kelapa  muda (10%)
P3  :  Sitrat - kuning  telur  + air  kelapa  muda (15%) P4  : Sitrar - kuning telur + air kelapa muda (20%)
Variabel yang diamati
Variabel yang diamati dalam penelitian ini adalah:
 Viabilitas spermatozoa (%)
 Abnormalitas spermatozoa serta (%)
 pH semen domba jantan.

## Tahap persiapanAir kelapa
Pembuatan  bahan  pengencer  air kelapa dilakukan sebagai beriku:
- ambil kelapa mudah dicuci bersih dari kotoran  dan  keringkan  dengan  tisue kemudian dibilas dengan alkohol 70% menggunakan kapas agar steril
- keluarkan air kelapa dengan menggunakan parang steril
- Tuangakan  air  kelapa  ke  wadah  dan air  kelapa  dipanasakan  dengan  suhu 45 °C agar  bakteri  dalam  air  kelapa mati
- kemudian  dinginkan  air  kelapa  dan siap digunakan

## Tahap persiapan Kuning telur
Pembuatan  bahan  pengencer  kuning telur dilakukan sebagai berikut :
- Telur  ayam  dicuci  sampai  bersih  dari kotoran.  Keringkan  dengan  tissue bilas dengan kapas yang telah dibasahi alkohol 70%.
- Pecahkan  telur  tersebut  dengan  jalan memotong  kulitnya  menjadi  dua bagian.  Tahan  kuning  telurnya  pada salah  satu  potongan  sedangkan  putih telurnya (albumen) ditampung ditempat lain atau dibuang.
- Kuning  telur  dipindahkan  ke  atas kertas isap steril
- Kuning telur diguling-gulingkan
sehingga selaput vitelinnya bersih dari albumin
- Pindahkan  kuning  telurke  kertas  isap yang lain yang steril
- Pecahkan  selaput  vitelinnya  dan bagian  kuning  telurdialirkan  pada gelas yang kecil (20 ml)
- Kuning telur siap digunakan.
Pembuatan  pengencer semen  dari sitrat kuning telur-air kelapa
Tahapan  pembuatan  semen  cair  dari bahan  dasar  air  kelapa  muda-kuning  telur adalah sebagai berikut:
- 100 ml Air kelapa muda + 2 ml sitrat (masing-masing  pengencer  air  kelapa muda dicampur hingga homogen)
- Penambahan  air  kelapa,  10%,  15%, 20%  pada  masing-masing  pengencer kuning telur (dicampur hingga homogen)
- Penambahan  kuning  telur  20  ml  pada masing-masing  pengencer  air  kelapa (dicampur hingga homogen)
- Penambahan antibiotik (0,5 ml penisilin  +  0,5ml  streptomisin/  ml), dicampur  hingga  terbentuk  kombinasi pengencer air kelapa - kuning telur.
- Setelah  air  kelapa  dan  kuning  telur sudah tercampur rata, langka selanjutnya  diukur  sesuai  perlakuan yang sudah disiapkan.
- Setelah masing-masing perlakuan sudah  siap,  pengencer  air  kelapa muda-kuning  telur  siap  dievaluasi menggunakan mikroskop.

## Penampungan semen
Sebelum  ditampung  semen  ternak jantan  perlu  dimandikan  terlebih  dahulu agar  ternak  jantan  menjadi  lebih  segar. Penampungan  semen  dilakukan  dengan cara  ternak  betina  pemancing  dimasukkan ke dalam kandang jepit. Kurang lebih satu jam sebelum ditampung semennya pejantan  didekatkan  ke  betina  pemancing untuk  mempertinggi  libido  ternak  jantan, sehingga  kualitas  dan  kuantitas  semen yang  dihasilkan  lebih  maksimal.  Jika pejantan  pertama  kali  naik,  jangan langsung  ditampung  semennnya,  tetapi penis  dibelokkan  sehingga  penis  tidak masuk  ke  vagina  betina  pemancing  dan akhirnya  pejantan  akan  turun  dengan sendirinya.  Setelah  menaiki  untuk  ketiga atau  keempat  kalinya  maka  penampungan
semen dilakukan dengan cara mengarahkan  vagina  buatan  ke  penis pejantan  hingga  penis  pejantan  masuk  ke dalam  vagina  buatan  dan  mengeluarkan semen  ke  dalam  vagina  buatan  tersebut. Setelah ditampung maka langkah selanjutnya  adalah  mengevaluasi  semen segar  tersebut  untuk  mengetahui  kualitas dari semen. Pemeriksaan makroskopis
dan mikroskopis
Evaluasi semen segar sangat penting dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kualitas  semen  dan  kelayakan  semen secara keseluruhan baik secara makroskopis maupun mikroskopis sebelum melakukan pengenceran. Evaluasi secara makroskopis meliputi:Volume semen  yang  tertampung  dapat  dievaluasi secara  langsung  pada  tabung  penampung yang berskala.

## Volume
Volume semen dianggap normal jika volume semen hasil penampungan berkisar antara 0,6-1,5 ml.

## Warna
Warna  semen  dievaluasi  dengan melihat  secara  langsung  sesaat  setelah penampungan  semen  dilakukan.  Warna semen  dianggap  normal  jika  warnanya krem atau putih kekuningan.
Bau
Bau  semen  dievaluasi  dengan  cara mencium bau semen pada tabung penampung  setelah  penampungan.  Bau semen  dianggap  normal  apabila  semen yang ditampung memiliki bau kas ternakitu sendiri.
pH Nilai pH semen dievaluasi menggunakan  kertas  indikator  pH.  Nilai pH  dianggap  normal  jika  pH  semen  yang dihasilkan memiliki kisaran antara 6,0-7,8. yaitu menunjukkan warna hijau danjika pH asam  maka  kerta  indikator  akan  berwarna kuning  atau  merah  sedangkan  jika  pHnya basa  maka  kertas  pH  akan  berwarna  biru atau ungu.

## Kekentalan
Konsistensi  atau  tingkat  kekentalan dievaluasi  dengan  cara  menggoyangkan tabung yang berisi semen secara perlahan- lahan sehingga terlihat gerakan permukaan semen  didalam  tabung.  Semakin  tinggi tingkat kekentalannya maka kualitas semen tersebut juga semakin tinggi.

## Penilaian Gerakan Massa
Menurut  Feradis  (2010)  bahwa sperma dalam suatu kelompok mempunyai kecenderungan  untuk  bergerak  bersama- sama  ke  satu  arah  yang  menyerupai gelombang  yang  tebal  dan  tipis,  bergerak cepat dan lamban tergantung dari spermatozoa  hidup  di  dalamnya.  Gerakan massa  spermatozoa  dapat  dilihat  jelas  di bawah  mikroskop  dengan  pembesaran (10x10) dan cahaya yang kurang.
Berdasarkan penilaian gerakan massa,  kualitas  semen  dapat  ditentukan (grade 1-4) sebagai berikut:
1) 4,  Sangat  baik  (+++),  bila  terlihat gelombang-gelombang  besar,  banyak, gelap,  tebal,  dan  aktif  bagaikan gumpalan awan hitam saat akan turun hujan  yang  bergerak  cepat  berpindah- pindah tempat.
2) 3,  Baik  (++),  bila  telihat  gelombang- gelombang  kecil,  tipis,  jarang,  kurang jelas dan bergerak lamban.
3) 2,  Cukup  (+),  jika  tidak  terlihat gelombang  melainkan  hanya  gerakan- gerakan individual aktif progresif.
4) 1,  Buruk  (N, necrospermia atau  0), bila  hanya  sedikit  atau  tidak  ada gerakan-gerakan induvindual.
Penilaian Gerakan Individu Penilaian gerakan individu dilakukan di bawah pandangan mikroskop pembesaran  (40x10)  pada  selapis  tipis semen  di  atas  gelas  objek  yang  ditutupi glas penutup akan terlihat gerakan-gerakan indvindual  spermatozoa.  Pada  umumnya yang  terbaik  adalah  pergerakan  progresif. Riady (2006) menyatakan bahwa penilaian dinyatakan dalam persentase sel spermatozoa  yang  gerak  maju  (motil progresif) terhadap keseluruhan jumlah sel spermatozoa serta gerak individu sperma.
Gerakan  individu  ditentukan  dengan  nilai 0 sampai 5 sebagai berikut:
0:spermatozoa immotile atau tidak bergerak;
1:gerakan berputar di tempat;
2:gerakan  berayun  atau  melingkar,  kurang dari 50% bergerak  progresif dan tidak ada gelombang;
3:50%  sampai  80%  spermatozoa  bergerak progresif dan menghasilkan gerakan massa;
4:pergerakan  progresif  yang  gesit  dan segera  membentuk  gelombang  dengan 90% sperma motil;
5:gerakan yang sangat progresif, gelombang yang sangat cepat, menunjukan 100% motil aktif.
Motilitas spermatozoa di bawah 40%
menunjukan nilai semen yang kurang baik karena  kebanyakan  persentase  yang  fertil itu  50-80%  spermatozoa  yang  motil  aktif progresif  (Feradis,  2010).  atau  gerakan aktif  maju  kedepan.  Gerakan  maju  dan mundur  merupakan  tanda cold  shock atau media  yang  tidak  isotonik  dengan  semen. Gerakan  berayun  atau  berputardi  tempat biasanya tarjadi pada semen yang tua, jika semen tidak bergerak maka dianggap mati (Feradis, 2010).
Konsentrasi spermatozoa Konsentrasi spermatozoa adalah banyaknya  spermatozoa  yang  terdapat dalam satu ml semen. Kosentrasi spermatozoa  dapat  diamati  menggunakan Hemacytometer dengan  cara  menghisap semen  sebanyak  0,5  ml  menggunakan pipet hemacytometer, kemudian
tambahkan  larutan  hayem  hingga  101  ml yang berfungsi untuk mematikan spermatozoa. Lalu homogenkan spermatozoa  dan  larutan  hayem  dengan cara  digoyang  perlahan.  Setelah  itu teteskan  ke  kamar  hitung  hemacytometer dan  dihitung  pada  lima  titik  menurut  arah diagonal menggunakan mikroskop pembesaran 400 kali.
Untuk  membuat  campuran  tersebut homogen  maka  dikocok  secara  perlahan selama  2  sampai  3  menit.  Setetes ditempatkan dibawah gelas penutup
Neubauer  dan  beberapa  tetes  dibuang. Konsentrasi  spermatozoa  dapat  dihitung pada  lima  bilik  menurut  arah  diagonal menggunakan mikroskop dengan pembesaran  40x10  (Dethan et  al .,  2010). Persamaan  untuk  menghitung  konsentrasi spermatozoa dengan rumus sebagai berikut:
Konsentrasi spermatozoa = X x  400 x 200 = Xx 10.000/mm 3 = X x 10 juta sel/ml 80      0.1 Dimana:  X      =  Jumlah  spermatozoa pengamatan dalam 5 kotak besar 400  =  Total  kotak  kecil  dalam kamar hitung 80   = Jumlah kotak kecil dalam 5 kotak besar 200 = Pengenceran 200 kali 0.1  = Volume kotak hitung (mm 3

## )

## Viabilitas spermatozoa
Viabilitas
spermatozoa adalah kemampuan  hidup spermatozoa setiap  kali mengalami        ejakulasi  (Rurangwa et  al .,
2004). Persentase normal Viabilitas spermatozoa adalah >58%. Dikatakan hidup  bila spermatozoa tidak  menyerap warna, sebaliknya dikatakan mati bila spermatozoa menyerap
warna (Wibisono,  2010).  Jumlah  spermatozoa yang hidup dihitung persentasenya dengan menggunakan  rumus  menurut  Feradis (2010):

## Abnormalitas spermatozoa
Abnormalitas merupakan salah satu
indikator
dalam menentukan kualitas spermatozoa,  karena  struktur  sel yang abnormal dapat menyebabkan
gangguan dan hambatan pada saat fertilisasi, lebih jauh menyebabkan rendahnya  angka  implantasi  maupun kebuntingan. Persentasi abnormalitas
dilakukan  dengan  menggunakan  warana yang dilakukan untuk pemeriksaan persentase abnormalitasi spermatozoa dibawah  mikroskop  dengan  pemberaran 400  kali.  Perhitungannya  adalah  dengan membandingkan  antara  spermatozoa  yang abnormal dengan spermatozoa yang normal  pada  luas  pandang  yang  sama. Adapun  cara    perhitungan    abnormalitas spermatozoa    adalah    jumlah    dari spermatozoa    yang    abnormal    dibagi dengan    200    spermatozoa    yang    terlihat dikali    seratus    persen.    Menurut    Ridwan (2002) Persentase Abnormalitas
spermatozoa  di  peroleh  dengan  rumus sebagai berikut:

## pH semen
pH  semen  dapat  diketahui  dengen meneteskan  semen  pada  kertas  indikator pH,  setelah  itu  diamkan  beberapa  saat kemudian amati dengan pewarnaan indikator  pH  dengan  membandingkan pewarnaan pH. Jika pH normal maka keras pH  berwarna  hijau,  jika  pH  tidak  normal maka  kertas  indikator  berwarna  kuning, merah dan ungu.
Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalis  dengan sidik  ragam  atau Analysis  of  Variance (ANOVA)  bila  perlakuan  berbeda  nyata (0,05)  akan  dilanjutkan  dengan  uji  jarak berganda dengan uji Duncan. Maka rumus matematikanya adalah sebagai berikut: Yij = µ+τi+εij
Keterangan :
Yij = Nilai pengamatan dari perlakuan  ke- i dan ulangan ke-j µ =  Nilai rata-rata umum τi = Pengaruh perlakuaan ke–i εij  = Galat percobaan

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Evaluasi makroskopis dan mikroskopis semen Domba
Hasil  evaluasi  semen  Domba  secara makroskopis  dan  mikroskopis.  Hasil
evaluasi semen Domba secara makroskopis dan mikroskopis menunjukkan  bahwa  semen  domba  layak untuk diencerkan.
Tabel 1.Evaluasi semen domba secara makroskopis dan mikroskopis dari spermatozoa domba yang diencerkan dengan sitrat - kuning telur dan air kelapa muda Karakteristik semen Jumlah Volume (ml) 0,9 Warna krem Bau Khas Domba Konsistensi/kekentalan Kental pH 6,8 Motilitas massa +++ Motilitas individu (%) 80 Konsentrasi spermatozoa (x 10 6 sel/ml) 2320 Viabilitas (%) 94 Abnormalitas (%) 6 Pengaruh perlakuan terhadap viabilitas spermatozoa Domba (%) Viabilitas spematozoa
adalah persentase hidup spermatozoa atau kemampuan  hidup  spermatozoa  untuk bertahan hidup saat di encerkan dengan air
kelapa  muda-kuning  telur.  Spermatozoa yang  hidup  kepalanya  berwana  bening sedangkan spermatozoa yang mati menyerap  warna  yang  diberikan.  Rataan viabilitas  spermatozoa  domba  jantan  pada penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Rataan viabilitas spermatozoa domba jantan (%) yang diencerkan dengan sitrat - kuning telur dan air kelapa muda Perlakuan Ulangan P1 (0%) P2 (10%) P3 (15%) P4 (20%) 1 89 84 82 73 2 84 81 80 70 3 75 76 72 64 4 70 70 65 62 5 72 65 60 65 Total 390 376 359 334 Rata rata 78,0±8,15 a 75,2±7,79 ab 71,8±9,44 ab 66,8±4,54 b
Keterangan : (a,b) superscript berbeda pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan berbeda nyata (P<0,05)
Hasil penelitian menunjukkan bahwa rata-rata  viabilitas  spermatozoa  pada masing-masing perlakuan adalah perlakuan  P1  sebesar  78,0±8,15,  P2 sebesar  75,2±7,79  ,  P3  sebesar  71,8±9,44 dan  P4  sebesar  66,8±4,54.  Persentase hidup  spermatozoa  yang  dihasilkan  dari perlakuan  penambahan  air  kelapa  muda 20%  berbeda  nyata  (P<0,05)  lebih  rendah
dibandingkan  dengan  penambahan  tanpa air  kelapa  muda,  dan  selanjutnya  pada penambahan  air  kelapa  muda  15%  tidak berbeda  nyata  dengan  penambahan  air kelapa  muda  10%.  Hal  ini  dikarenakan proporsi  sumber  energi  dan  karbohidrat yang  terkandung  dalam  setiap  level penambahan  air  kelapa  muda  adalah berbeda.
Hal  ini  diduga  disebabkan  oleh  dua faktor,  faktor  pertama  adalah  menurunnya kualitas  pengencer  (semakin  asam)  akibat pengaruh  penimbunan  asam  laktat  hasil proses  metabolisme  dan  faktor  kedua adalah  terbentuknya  radikal  bebas.  Proses metabolisme secara normal akan menghasilkan  radikal  bebas  (Werdhany, 1999).  Reaksi  radikal  bebas  dikenal dengan  terbentuknya  peroksidasi  lipid yang menyebabkan terganggunya integritas  membran  plasma  spermatozoa. Kerusakan membran plasma akan berlanjut pada  bagian  internal  sel  sehingga  dapat menurunkan  kualitas  spermatozoa  yaitu terhadap motilitas dan daya hidup spermatozoa.
Membran  plasma  yang  rusak  dapat menghambat  aktivitas  metabolisme  untuk motilitas dan pada akhirnya akan mempercepat kematian spermatozoa. Semakin  tinggi  penambahan  pengencer sitrat-kuning telur dengan air kelapa muda semakin  tinggi  pula  penurunan  viabilitas spermatozoa,  hal  ini  disebabkan  oleh semakin  pekat  atau  kentalnya  pengencer sehingga berakibat pada sulitnya spermatozoa bergerak. Jika larutan pengencer semakin pekat, maka pergerakan  spermatozoa  akan  menjadi sangat  lambat  dan  untuk  dapat  bergerak membutuhkan energi yang semakin banyak.  Semakin  tinggi  penambahan pengencer air kelapa maka derajat keasaman  juga  akan  meningkat  sehingga menyebabkan  spermatozoa  mati.  Hal tersebut  sesuai  yang  dijelaskan  Toelihere (1993) menyatakan bahwa derajat keasaman  sangat  mempengaruhi  daya hidup spermatozoa. Kondisi asam ini dapat menyebakan  kerusakan  bahan  pengencer dan zat-zat pelindung (lesitin dan lipoprotein).
Dari perlakuan P1-P4 dalam penelitian ini menunjukkan bahwa viabilitas spermatozoa masih layak digunakan  untuk  keperluan  IB karena memiliki  nilai  lebih  dari  50% sesuai pendapat  Toelihere  (1993)  bahwa,  semen yang  layak  digunakan  untuk  IB  harus
memiliki  persentase  spermatozoa  hidup  di atas  50%.  Hal  ini  disebabkan  oleh komposisi  kuning  telur  dan  air  kelapa muda lebih lengkap kandungan nutriennya seperti  asam  amino,  karbohidrat,  vitamin dan mineral yang dapat berfungsi mempertahankan daya hidup spermatozoa, terutama  lipoprotein,  lesitin  dan  fruktosa yang  terkandung  di  dalam  kuning  telur yang berfungsi sebagai pelindung spermatozoa  dari  kerusakan  selubung  sel spermatozoa akibat cold shock.
Herdis et  al .  (2005)  menyatakan bahwa  persentase  daya  hidup  (viabilitas) sperma segar domba Garut berkisar antara 84,3  sampai  88,9%.  Mesang-Nalley et  al . (2007) menyatakan bahwa nilai persentase viabilitas  spermatozoa  ini  biasanya  sedikit lebih  tinggi  dari  persentase  motilitas.  Hal ini  disebabkan  karena  spermatozoa  yang tidak  motil  progresif,  tetapi  sebenarnya masih hidup sehingga tidak akan menyerap warna  dari  larutan  eosin  yang  digunakan. Hasil  penelitian  menunjukkan  viabilitas sperma  segar  domba  Garut  berada  pada kisaran  normal  Persentase  hidup  ditandai oleh kepala berwarna putih (tidak menyerap zat warna) sedangkan yang mati kepalanya  berwarna  merah  atau  merah muda karena menyerap zat pewarna (Rizal dan  Herdis,  2008).  Viabilitas  semen  segar domba sebesar 84,5±2,74% (Herdis, 2005).  Menurut  penelitian  Akhdiat  (2012) bahwa  persentase  hidup  spermatozoa domba sebesar 87,96%. Pengaruh perlakuan terhadap abnormalitas permatozoa domba (%)
Abnormalitas  merupakan  salah  satu indikator  dalam  menentukan  kualitas spermatozoa,  karena  struktur  sel  yang abnormal  dapat  menyebabkan  gangguan dan  hambatan  pada  saat  fertilisasi,  lebih jauh menyebabkan rendahnya angka implantasi maupun kebuntingan. Spermatozoa  yang  abnormal  kepalanya putus,  ekor  putus  dan  ekor  melengkung. Rataan  abnormalitas  spermatozoa  domba jantan  pada  penelitian  ini  dapat  dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Rataan abnormalitas spermatozoa domba jantan (%)  yang diencerkan dengan sitrat - kuning telur dan air kelapa muda
Perlakuan Ulangan P1 (0%) P2 (10%) P3 (15%) P4 (20%) 1 8 10 10 8 2 10 9 8 9 3 8 10 11 11 4 9 9 8 1 5 7 8 10 9 Total 42 46 47 48 Rata-rata 8,4±1,14 9,2±0,83 9,4±1,34 9,6±3,84 Keterangan:tidak nyata (P<0,05) Hasil penelitian menunjukkan bahwa rata-rata  abnormalitas  spermatozoa  pada masing-masing perlakuan adalah perlakuan P1 sebesar 8,4±1,14, P2 sebesar 9,2±0,83,  P3  sebesar  9,4±1,34  dan  P4 sebesar 9,6±3,84. Berdasarkan hasil analisis  statistik  menunjukkan  bahwa perlakuan berpengaruh tidak nyata terhadap abnormalitas spermatozoa (P>0,05). Hal ini diduga karena penggunaan  air  kelapa  muda  baik  pada level  10%  maupun  level  20%  tidak mempengaruhi pada abnormalitas spermatozoa,  disebabkan  oleh  lipoprotein dan lesitin yang terkadung di dalam kuning telur yang  mampu  mempertahankan  dan melindungi  integritas  selubung membran plasma  spermatozoa  dari kejutan  dingin. Hal  ini  sesuai  pendapat Susilawati  (2011) yang  menyatakan bahwa  lipoprotein  dan lesitin mampu mempertahankan dan melindungi integritas  selubung  membran plasma spermatozoa sehingga dapat menekan kerusakan membran plasma pada spermatozoa.
Hasil  penelitian  masih  dikategorikan masih normal sesuai dengan hasil penelitian  Garner  dan  Hafez  (2000) menyatakan  bahwa  kisaran  abnormalitas spermatozoa  domba  antara  5-  20  %. Abnormalitas spermatozoa  terjadi diduga karena  adanya  tekanan  yang  keras  pada saat  penarikan  preparat,  pemanasan  dan
mungkin  terjadi  karena  terkontaminasi dengan  urine,  air  atau  kuman.  Sesuai pernyataan Rizal dan Herdis (2006) bahwa abnormalitas lebih banyak berupa terpisahnya  ekor  dengan  kepala  akibat terputus  saat  pembuatan  preparat  sebelum dilakukan pengamatan . Pencampuran dengan pengencer atau pembuatan preparat yang  kasar  akan  meningkatkan  kerusakan pada  kepala  spermatozoa  (Ihsan,  2009). Toelihere  (1993)  menyatakan  bahwa abnormalitass  spermatozoa  dapat  terjadi karena  tekanan  yang  keras,  pemanasan yang  berlebihan,  pendinginan  yang  cepat dan  kontaminasi  dengan  air,  urine  atau kuman dan bahan antiseptik. Avida (2009) menyatakan bahwa perubahan suhu selama prosesing  semen  dapat  menyebabkan perubahan  permeabilitas  membran  sel dinding  spermatozoa,  keadaan  tersebut dapat menyebabkan meningkatnya abnormalitas  spermatozoa.  Solihati et  al . (2008) yang menyatakan bahwa abnormalitas spermatozoa disebabkan oleh kejutan  suhu  dingin  yang  menyebabkan ketidakseimbangan tekanan osmotik sebagai  akibat  dari  proses  metabolik  yang terus berlangsung. Diperkuat oleh Alawiyah  dan Hartono  (2006)  bahwa, semen  dapat  diencerkan  dan  dapat digunakan untuk IB apabila nilai abnormalitasnya dibawah 20%.
Pengaruh  perlakuan  terhada  pH  semen domba (%)
Pengukuran  pH  semen  bertujuan untuk  memastikan  cairan  semen  hasil penampungan  memiliki  karakteristik  yang normal.  Pengukuran  pH  semen  dilakukan dengan  menggunakan  kertas  lakmus  atau pH meter.
Derajat  keasaman  (pH)  merupakan faktor  penentu  kehidupan  spermamtozoa. Lingkungan  semen  yang  terlalu  asam ataupun basa dapat menyebabkan kematian spermatozoa.  Rataan  pH  semen  domba jantan  pada  penelitian  ini  dapat  dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Rataan pH semen domba jantan (%) yang diencerkan dengan sitrat - kuning telur dan air kelapa muda Perlakuan Ulangan P1 (0%) P2 (10%) P3 (15%) P4 (20%) 1 6,80 6,75 6,50 6,35 2 7 6,40 6 6,40 3 6,75 6,65 6,75 6 4 6,85 6 6,80 6,45 5 6,55 6,85 6,30 6,54 Total 33,95 32,65 32,35 31,74 Rata rata 6,79±0,16 a 6,56,53±0,34 ab 6,47±0,33 ab 6,35±0,20 b
Keterangan : (a,b) superscript berbeda pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan berbeda nyata (P<0,05)
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa  rerata  derajat  keasaman  (pH) sperma  adalah  perlakuan  P1  sebesar 6,79±0,16,  P2  sebesar  6,53±0,34,  P3 sebesar 6,47±0,33, dan P4 sebesar 6,35±0,20.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa bahan pengencer sitrat-kuning telur dengen air kelapa muda mampu mempertahankan  pH  semen  tetap  berada pada  kisaran  normal.  Dethan et  al .  (2010) menyatakan bahwa pH semen yang normal sebesar  6,2-7,  pH  sangat  mempengaruhi daya  hidup  sperma  serta  pH  memiliki korelasi dengan konsentrasi, bila konsentrasi tinggi maka pH yang dihasilkan  akan  sedikit  asam.  Sperma segar  domba  hasil  pengamatan  memiliki pH  yang  sedikit  di  bawah  kisaran  normal.
Solihati et  al .  (2008)  menyatakan  bahwa variasi  pH  diduga  disebabkan  oleh konsentrasi  asam  laktat  yang  merupakan produk akhir metabolisme. Derajat keasaman  atau  pH  sangat  mempengaruhi hidup dan mati spermatozoa. Menurut Elya et  al .  (2010),  normal  atau  tidaknya  pH semen  ditentukan  oleh  keseimbangan kation dan anion dalam kelenjar asesoris.
Rataan  pH  pada  kisaran  perlakuan ini  sesuai  dengan  kisaran  pH  normal semen  menurut  Garner  dan  Hafez  (1987) sebesar 6,4-7,8.  Menurut Toelihere (1993) spermatozoa  sangat  aktif  dan  tahan  lama hidup  pada  pH  sekitar  7,0.  Variasi  pH disebabkan  oleh  variasi  produksi  plasma semen  oleh  kelenjar  kelamin  aksesoris. Kelenjar  kelamin  aksesoris  bertanggung jawab terhadap kapasitas penyangga semen.  Sistem  penyangga  semen  berperan melindungi  spermatozoa  dari  perubahan pH  secara  tiba-tiba  yang  dapat  merusak daya  hidup  sel  spermatozoa  (Evans  dan Maxwell, 1987). Menurut Toelihere (1993) pH  domba  berada  pada  kisaran    6,2  –7,0. Sumarsono (1998) juga berpendapat bahwa,  spermatozoa  sangat  peka  terhadap perubahan pH medium dari keadaan netral, terutama  terhadap  pH  rendah.  Toelihere (1993)  manyatakan  bahwa  pH  semen sangat  dipengaruhi  oleh  metabolisme fruktosa plasma seminalis dan menghasilkan  asam  laktat  dalam  jumlah tinggi.  Trianan  (2006)  menambahkan bahwa,  semakin  banyaknya  asam  laktat akan  menjadi  racun  bagi  kehidupan
spermatozoa,  akumulasi  asam  laktat  akan menyebabkan  perubahan  pH  sehingga
daya tahan spermatozoa berkurang

## KESIMPULAN
Sesuai hasil penelitian dapat disimpulkan  bahwa  penambahan  level  air kelapa muda (20%) masih dapat
mempertahankan  viabilitas,  normalitas spermatozoa dan pH semen domba jantan.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhdiat, T. 2012. Proporsi spermatozoa Y hasil  pemisahan  dengan  fraksi albumen telur dan lama penyimpanan semen domba lokal. Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu
Peternakan. 15 (2): 59 – 69.
Alawiyah,  D.  dan  M.  Hartono.  2006. Pengaruh Penambahan Vitamin E dalam  Bahan  Pengencer Sitrat Kuning  Telur  Terhadap  Kualitas Semen  Beku  Kambing  Boer .
Jurnal  Trop.  Anim.  Agric ,  31(1): 8-14
Anggraeny,  Y.  N.,  L.  Affandhy,  dan  A.
Rasyid. 2004. Efektivitas substitusi pengencer tris-sitrat dan kolesterol menggunakan air kelapa  dan  kuning  telur  terhadap kualitas  semen  beku  sapi  potong. Seminar Nasional Teknologi
Peternakan  dan  Veteriner  2004.
Grati, Pasuruan..
Avida,  N.  A.  2009.  Pengaruh  Tingkat Konsentrasi  Kuning  Telur  pada Pengencer  Tris  Aminomethane Terhadap  Kualitas  Spermatozoa Kambing  PE  Setelah  Proses Pembekuan  .  Skripsi.  Universitas Brawijaya. Malang
Brosdiana.  2000.    Pengaruh  pengenceran madu  kombinasi  dengan  kuning telur terhadap kualitas spermatozoa    kambing  Peranakan Etawa  (PE).  Skripsi.  [Pertanian, Universitas Sumatra Utara,. Medan.
Dethan,  A.  A.,  Kustono  dan  H.  Hartadi. 2010.  Kualitas  dan  kuantitas sperma  kambing  Bligon  jantan
yang  diberi  pakan  rumput  gajah dengan suplementasi tepung darah. Buletin Peternakan. 34 (3): 145-153.
Elya,  B.,  Amin,  J.,  Emiyanah,  2010,
Toksisitas  Akut  Daun  Justicia gandarussa  Burm,  Makara  Sains, 14 (2) : 129-134.
Evans,  G  and  W.M.C.  Maxwell.  1987.
Salamon’s Artificial Insemination of Sheep and Goats. Butterworths Pty Limited, Collingwood, Victoria.
Feradis.  2010.  Bioteknologi  Reproduksi
Pada  Ternak.  Penerbit  Alfa  Beta,
Bandung.
Garner,  D.  L.,  and  E.S.E  Hafez.  2000.
Spermatozoa and Seminal
Plasma.  In : Hafez,  B.,  and  E.  S. E.  Hafez  (Eds).  Reproduction  In
Farm Animals. 7th Ed. Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia.
Herdis,  2005.  Optimalisasi  inseminasi buatan  melalui  aplikasi  teknologi laserpunktur  pada  domba  Garut ( ovis  aries ). Disertasi .  Bogor. InstitutePertanian Bogor.
Ihsan,
N.M. 2009. Bioteknologi
Reproduksi  Ternak.  Universitas
Brawijaya. Malang. Ketaren,  S.,  dan  B.  Djatmiko.  1981.  Daya Guna  Kelapa.  Bogor:  Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor.
Kuberski,  T.,  A.  Roberts,  B.  Linehan,  R. N. Bryden and M. Teburae. 1979. Coconut  water  as  a  rehydration fluid. N Z Med J. 90: 98-100.
Marniati.  1989.  Beberapa  sifat  fisik  dan komposisi  kimia  daging  domba lokal  pada  lingkungan  nutritif yang  berbeda.  Karya  Ilmiah. Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor, Bogor Mesang-Nalley,  W.  M.,  R.  Handarini,  dan B. Purwantara. 2007. Viabilitas  spermatozoa  rusa Timor  (Cervus  timorensis)  di dalam pengencer tris kuning telur dengan sumber karbohidrat berbeda yang disimpan pada suhu ruang.  Jurnal  Ilmu  Ternak  dan Veteriner 12: 311-317.
Partodihardjo,  S.  1992.  Ilmu  Reproduksi Hewan.  Cetakan  ke-3  Penerbit Mutiara Sumber Widia, Jakarta.
Purbowati,  2009.  Usaha  Penggemukan
Domba Bogor. Penebar. Swadaya.
Qomariyah,  S.  Mihardja  dan  R.  Idi.  2001.
Pengaruh  kombinasi  telur  dengan air  kelapa  terhadap  daya  tahan dan  abnormalitas  spermatozoa domba Priangan pada penyimpanan 50C. Prosiding Seminar Nasional Teknologi
Peterna  -  kan  dan  Veteriner. Puslitbang  Bioteknologi  LIPI,
Bogor. pp. 172-177.
Riady  M.  2006.  Implementasi  Program
Menuju Swasembada Daging 2010.  Strategi  dan  Kendala. Prosiding Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.  Puslitbangnak.  Bogor 5 ‐ 6 September, 2006.
Ridwan, 2002. Fertil life dan Periode Fertil Spermatozoa        Ayam    Buras Pasca  Inseminasi    Buatan.   Tesis.
Bandung.    Program  Pascasarjana Universitas Padja djaran Bandung. Rizal,  M.  dan  Herdis.  2005.  Daya  Hidup Spermatozoa  Epididimis  Domba Garut yang Dikriopreservasi Menggunakan Modifikasi Pengencerr Tris. Jurnal Hayati. Rizal, M., Herdis, A. Boediono, A. S. Aku, dan  Yulnawati.  2006.  Peranan
beberapa jenis gula dalam meningkatkan kualitas semen beku  domba  Garut.  JITV.  11: 123-130.
Rurangwa  E,  Kime  DE,  Ollevier  F,  Nash JP.  2004.  The  measurement  of sperm motility and factors affecting sperm quality in cultured fish. Aquaculture 234: 1–
28.
Solihati  N,  Ruhijat  I,  Rasad  SD,  Rizal  M,
Fitriati M. 2008. Kualitas spermatozoa  cauda  epididimis sapi  peranakan  ongol  (PO)  dalam pengencer  susu,  Tris,  dan  sitrat kuning telur pada penyimpanan 4- 5ºC. Anim Prod 10: 22-29. Sumarsono, T. 1998. PeningkatanKualitas
Spermatozoa KerbauLumpur dengan Penambahan Asam Akorbat  dalam  PengencerSemen Beku . Tesis . Program Pascasarjana, Institut PertanianBogor, Bogor. Susilawati,  T.  2011.  Spermatozoatology. Universitas Brawijaya Press. Malang
Toelihere,  M.  R.  1981.  Inseminasi  Buatan
Pada  Ternak.  Penerbit  Angkasa, Bandung. Toelihere, M. R.1993. Fisiologi
Reproduksi Pada Ternak. Penerbit
Angkasa, Bandung.
Toelihere,  M.  R.1993.  Inseminasi  Buatan
pada Ternak. Angkasa. Bandung
Toelihere,  M.  R.1993 . Inseminasi  Buatan Pada  Ternak. Cetakan  ketiga. Angkasa. Bandung. Triana, I.N. 2006. Pengaruh WaktuInseminasi Terhadap Motilitas dan Viabilitas Spermatozoa Pascainseminasi Pada Kambing. Berk. Penel.
Hayati . 11: 147-150.
Werdhany, W. I. 1999. Efektifitas penambahan  alfa  tokoferol  di dalam  pengencer  tris  dan  susu skim  terhadap  kualitas  semen beku  kambing  Peranakan  Etawa.
Tesis. Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Wibisono, H, 2010, Panduan Laboratorium
Andrologi (buku pertama ), Refika Aditama, Bandung Yulnawati.  2002.  Pemanfaatan  sari  buah melon  dan  sari  buah  wortel sebagai pengencer alternatif semen domba Garut. Skripsi FKH IPB Bogor.