Kombinasi Minyak Ikan Sardin dan Cucut, Musbah et al. Available online: journal.ipb.ac.id/index.php/jphpi
produk hasil samping pengalengan yang mengandung omega-3 cukup tinggi yaitu EPA 15,54% dan DHA 6,41% (Suseno et al. 2013 a ). Minyak ikan sardin sebagai bahan baku produk minyak ikan memiliki kekurangan yaitu kandungan DHA yang rendah jika bandingkan dengan kandungan DHA pada minyak ikan cucut. Minyak ikan cucut

## PENDAHULUAN
Asam lemak tidak jenuh merupakan komponen esensial bagi tubuh manusia, terutama asam lemak rantai panjang Eicosapentanoic acid/EPA dan dokosaheksanoic acid/DHA yang banyak ditemukan pada minyak ikan (Loef dan Walach 2013). Minyak ikan sardin adalah

## KOMBINASI MINYAK IKAN SARDIN DAN CUCUT KAYA OMEGA-3 DAN SQUALENE

## Combination of Sardine and  Shark Oil High Content of Omega-3 and Squalene
Muhamad Musbah*, Sugeng Heri Suseno, Uju Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Kampus IPB Dramaga, Jalan Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat Telepon (0251) 8622909-8622906, faks (0251) 8622915.
*Korespodensi: muhamad_musbah@yahoo.com
Diterima: 25 Januari 2017/ Disetujui: 18 April 2017
Cara sitasi: Musbah M, Suseno SH, Uju. Kombinasi minyak ikan sardin dan cucut kaya omega-3 dan squalene . Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 20(1): 45-52.

## Abstrak
Minyak ikan sardin memiliki kandungan EPA yang cukup tinggi jika dibandingkan dengan kandungan DHA. Kandungan tersebut berbanding terbalik pada minyak ikan cucut yaitu DHA dan squalene merupakan komponen yang tinggi namun rendah EPA. Kandungan EPA, DHA dan squalene dalam minyak ikan sangat bermanfaat dalam bidang farmasi. Penelitian ini bertujuan untuk memperkaya minyak ikan dengan omega-3 dan squalene serta meningkatkan kualitasnya. Kombinasi minyak ikan (sardin:cucut) 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 2:1, 3:1 dan 4:1 memberikan hasil yang berbeda sangat nyata terhadap kandungan bilangan peroksida, bilangan anisidin dan total oksidasi, tetapi tidak berbeda nyata untuk  uji asam lemak bebas. Parameter oksidasi terbaik dihasilkan dari rasio pencampuran (sardin:cucut)1:4 dengan nilai peroksida 5,44±0,06 mEq/kg, bilangan anisidin 8,3±0,72 mEq/kg dan total oksidasi 19,27±0,7mEq/kg.  Profil asam lemak kombinasi minyak sardin dan cucut memberikan variasi kandungan terhadap SFA, MUFA dan PUFA. Minyak sardin semakin banyak ditambahkan pada rasio kombinasi akan menghasilkan kandungan omega-3 yang semakin tinggi. Sampel 1:4 menunjukkan kandungan squalene 43,16%.
Kata kunci: asam dekosaheksaenoat, asam eikosapentaenoat, oksidasi
Abstract
Sardine oil contain high concentration of  EPA but low of  DHA while shark is reverse. Shark oil  high contain of DHA and squalene but low EPA. This research aim to fortify the quality of  fish oil withomega-3 and squalen and improve the quality of fish oil. The combination of fish oil (sardine:shark) 1: 1, 1: 2, 1: 3, 1: 4, 2: 1, 3: 1 and 4:1 showed significant results on peroxide, anisidine, and total oxidation value, however free fatty acids analysis did not show the influence to the content value.  The best oxidation parameters value werefound (sardine: shark) (1:4) with peroxide was 5.44±0.06 mEq/kg, anisidine was 8.3±0.72 mEq/kg and total oxidation was 19.27±0.7mEq/kg. Fatty acids profile between sardines and shark oil containedvarious SFA, MUFA and PUFA. Sardine oil which was added more to combination ratio will increase omega-3. Sample 1:4 had 43.16% squalene.
Keywords: eicosapentaenoic acid (EPA), decosahexaenoic acid (DHA),  oxidation
( Centrophorus squamosus ) mengandung DHA  25,05%  dan  rendah  EPA  5,14% (Garcia et al. 2000). Minyak ikan cucut juga mengandung squalene 83%, vitamin A  dan  D  yang  sangat  baik  bagi  kesehatan (Wetherbe 2000). Squalene memiliki fungsi yang sangat penting bagi tubuh manusia, yaitu untuk penguat stamina tubuh, menyembuhkan penyakit liver, kencing manis dan mencegah penyakit degeneratif (Kelly 1999). EPA dan DHA memiliki peranan penting yaitu untuk perkembangan otak, retina mata, peningkatan kekebalan, pencegahan penyakit degenaratif, membantu dalam pengembangan kejiwaan, pertumbuhan anak-anak usia dini, terutama bagi anak-anak penderita autism spectrum disorders (Schuchardt  2010; Baken et al. 2014). Manfaat minyak ikan yang besar terhadap kesehatan manusia mendorong pengembangan inovasi produk minyak ikan dalam bentuk pangan fungsional atau pharmaceutical terus meningkat. Penelitian pengembangan kualitas minyak ikan yang telah dilakukan yaitu: karakteristik dan kestabilan kombinasi minyak ikan sardin dengan habbatussauda Suseno et al. (2013 b ), peningkatan kualitas minyak ikan dengan metode Degumming menggunakan asam sitrat dan garam hingga memenuhi standar pangan (Suseno et al. 2016), kombinasi minyak ikan patin dan minyak sawit merah yang diaplikasikan ke bubur instan dan cookies (Dewita et al. 2015), kombinasi minyak ikan jambal dan kerapu untuk memenuhi standar rasio omega-3 dan  omega-6  yang  baik  menurut  WHO (Ilza dan Siregar 2015).
Kombinasi minyak ikan sardin dan cucut sejauh ini belum pernah dilakukan. Penelitian ini diharapkan dapat menghasilkan minyak ikan yang mengandung asam lemak kaya omega-3 dan squalene serta rendah oksidasi yang dapat diaplikasikan dalam bidang pangan dan farmasi. Penelitian ini bertujuan untuk memperkaya minyak ikan dengan omega-3 dan squalene serta meningkatkan kualitas kombinasi minyak sardin dan cucut.

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Penelitian ini menggunakan bahan yang meliputi minyak sardin hasil samping industri penepungan dan minyak cucut hasil produk industri Rumah Tangga Pelabuhan Ratu. Bahan-bahan kimia yang digunakan meliputi KOH (Merck), CH 3 COOH (Merck), kloroform (Merck), Na 2 SO 3 (Merck), trimethylpentane (Merck), larutan p-Anisidin (Sigma Aldrich), magnesol XL dan asam sitrat. Alat yang digunakan yaitu burret (Iwaki Pyrex), spektrofotometer UV-VIS (Agilent 8453), timbangan digital (Quattro) dan mikropipet (Axygen), perangkat kromatografi gas (SHIMADZU GC2010), GC-MS (Agilent 7890A).

## Metode Penelitian
Proses pemurnian dilakukan terhadap minyak sardin dan cucut dengan tahapan Degumming (penghilangan gum), neutralization (netralisasi/penyabunan), dan bleaching (pemucatan) kemudian dikombinasikan. Degumming dilakukan dengan cara memanaskan 100 g minyak ikan pada suhu 50°C dan kecepatan stirer 800 rpm, setelah mencapai suhu tersebut ditambahkan 2 mL akuades, dipanaskan selama 10 menit, kemudian ditambahkan asam sitrat 0,4% (b/v). Netralisasi dengan cara menambahkan NaOH 18°Be pada suhu 50°C, kecepatan stirer 800 rpm selama 20 menit, dan pemisahan endapan dilakukan dengan sentrifugasi pada 108 g selama 10  menit. Fraksi supernatan (minyak) dipanaskan hingga suhu 50°C pada kecepatan stirer 800 rpm kemudian ditambah Magnesol XL 5% selama 20 menit (proses bleaching ). Magnesol XL dan minyak ikan dipisahkan dengan sentrifugasi pada 108 g selama 10 menit. Minyak ikan hasil pemurnian dikombinasi dengan perbandingan sardin:cucut yaitu 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 2:1, 3:1, dan 4:1 kemudian dianalisis parameter oksidasi primer dan sekundernya. Minyak hasil kombinasi (1:4) memiliki parameter oksidasi terbaik sehingga dilanjutkan dengan analisis kandungan
Kombinasi Minyak Ikan Sardin dan Cucut, Musbah et al.
Squalene . Analisis data hasil penelitian pada profil asam lemak dan kandungan Squalene dilakukan secara deskriptif, dan analisis parameter oksidasi menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan tiga kali ulangan. Prosedur analisis yang dilakukan meliputi analisis asam lemak bebas (FFA) berdasarkan AOCS (1998) Ca-5a-40. Analisis bilangan peroksida (PV) dengan metode AOCS (1995)  Cd-8b-90.  Penentuan  nilai  anisidin (p-AV) menggunakan metode Watson (1994). Penentuan nilai total oksidasi (TOTOX) menggunakan metode Perrin (1996). Penentuan profil asam lemak dengan metode AOAC (2005) No. Metode 969.33.
Analisis kandungan squalene
Analisis kandungan Squalene pada minyak kombinasi sardin dan cucut dilakukan dengan GC-MS (Agilent 7890A/5975C MDS) menggunakan kolom Agilent 19091J-413HP-5 5% Diphenyl dan 95% Methyl Poli Siloxan, 60 m x 250 µm x 0,25 µm. Suhu yang digunakan pada 100°C selama 5 menit, kemudian meningkat 15°C/menit sampai suhu 280°C dan selama 22 menit. Injeksi split menggunakan rasio split 5:1 dengan volume injeksi 1 µL. Spektrum massa yang diperoleh lalu dibandingkan dengan Library Willey9
N11.L .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar asam lemak bebas (ALB)
Asam lemak bebas merupakan asam lemak yang terbentuk karena proses hidrolisis dan oksidasi (Suseno et al. 2014). Kadar asam lemak bebas minyak sardin dan cucut  masing- masing 0,52%  dan 0,53% (Tabel 1). Asam lemak bebas minyak sardin dan cucut setelah dikombinasi (1:1,1:2, 1:3, 1:4, 2:1,
3:1,dan 4:1) menunjukkan nilai yang berbeda tidak nyata ( p >0,05). Hasil inidisebabkan oleh nilai ALB awal pada minyak sardin dan cucut yang sudah sangat rendah. Nilai ALB hasil kombinasi untuk semua perlakuan memenuhi standar International  Fish  Oil  Standard (IFOS 2014) yaitu 1,50%. Gunawan et al. (2003) menjelaskan bahwa enzim lipase pada minyak dapat menghidrolisis trigliserida sehingga menghasilkan asam lemak bebas dan gliserol. Reaksi pembentukan asam
lemak bebas dipercepat dengan adanya panas, air, asam dan katalis enzim. Asam lemak bebas yang terbentuk akan meningkat jika proses tersebut semakin lama berlangsung (Hernandez dan Kamal-Eldin 2013).

## Bilangan peroksida (PV)
Kombinasi minyak ikan sardin dan cucut (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 2:1, 3:1 dan 4:1) memberikan pengaruh berbeda sangat nyata ( p <0,05) terhadap nilai peroksida. Kombinasi minyak ikan (sardin:cucut) yang didominasi minyak cucut (1:4) menghasilkan nilai peroksida terendah  yaitu 5,4±0,06mEq/ kg, sebaliknya dengan penambahan minyak cucut sedikit atau penambahan minyak ikan sardin yang lebih besar (4:1) menghasilkan nilai peroksida yang semakin tinggi yaitu 11,6 mEq/kg. Nilai peroksida yang menurun dengan penambahan minyak cucut yang semakin besar diduga karena minyak cucut mengandung vitamin A dan Squalene yang dapat berfungsi sebagai antioksidan alami. Kohno et al. (1995) menjelaskan bahwa Squalene stabil terhadap serangan radikal peroksida. Nilai peroksida yang tinggi dengan penambahan minyak sardin yang semakin banyak diduga karena minyak sardin sebelum dikombinasi mengalami kontak langsung dengan udara dan penggunaan suhu tinggi pada saat ekstraksi sehingga ikatan rangkap terputus dan ikatan rangkap mengikat oksigen mengakibatkan meningkatnya peroksida. Aidos et al. (2003) menjelaskan bahwa nilai peroksida sangat dipengaruhi oleh suhu ekstraksi minyak, semakin tinggi suhu yang digunakan makan semakin tinggi nilai peroksida minyak tersebut.
Nilai anisidin (p-AV) Nilai anisidin adalah parameter oksidasi minyak yang mengukur oksidasi sekunder dari hasil degradasi lemak atau minyak yang diinisiasi oleh hidroperoksida sehingga menghasilkan produk karbonil yang bersifat non-volatile (Aidos et al. 2002). Nilai anisidin sangat erat kaitannya dengan bilangan peroksida pada minyak sardin dan cucut awal sebelum dikombinasi. Bilangan peroksida yang tinggi pada minyak ikan akan terdekomposisi menghasilkan berbagai senyawa terutama
golongan aldehid, jumlah akumulasi aldehid dinyatakan sebagai bilangan anisidin (Ketaren 2012). Tabel 1 menunjukkan nilai anisidin kombinasi minyak ikan sardin dan cucut (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 2:1, 3:1 dan 4:1) memberikan nilai yang berbeda sangat nyata ( p <0,05). Nilai anisidin terendah diperoleh dengan penambahan minyak ikan cucut terbanyak yaitu pada rasio 1:4 (sardin:cucut) 8,3±0,72 mEq/kg, sedangkan nilai tertinggi ditemukan pada panambahan minyak ikan sardin yang semakin banyak yaitu pada rasio 4:1 (sardin:cucut) 31,3±1,06 mEq/kg. Nilai anisidin kombinasi minyak (sardin:cucut) yang memenuhi standar IFOS ≤ 20.00 yaitu 2:1 (19,2±0,07 mEq/kg), 1:1 (14,1±0,60 mEq/ kg), 1:2 (12,1±1,66 mEq/kg), 1:3 (11,4±0,06 mEq/kg) dan 1:4 (8,3±0,72 mEq/kg).
Bilangan total oksidasi (TOTOX) Total oksidasi adalah penggabungan dua kali nilai bilangan peroksida dan satu bilangan anisidin. Tabel 1 menunjukkan nilai  total oksidasi kombinasi minyak ikan sardin dan cucut (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 2:1, 3:1 dan 4:1) memberikan nilai yang berbeda sangat nyata ( p <0,05). Penambahan minyak cucut yang semakin banyak (1:2, 1:3 dan 1:4) menghasilkan total oksidasi yang semakin rendah, sedangkan dengan penambahan minyak sardin semakin banyak (2:1, 3:1
dan 4:1) menghasilkan total oksidasi yang semakin tinggi. Total oksidasi kombinasi minyak (sardin:cucut) yang terbaik dan memenuhi standar IFOS (2014) ≤26,00 mEq/kg ditemukan pada rasio 1:4 yaitu 19,2±0,07 mEq/kg. Kombinasi minyak ikan (sardin:cucut) yang tidak memenuhi standar total oksidasi IFOS (2014) diduga karena nilai bilangan peroksida dan anisidin yang tinggi sebelum dikombinasi sehingga memberikan pengaruh terhadap tingginya nilai total oksidasi. Bimbo (1998) total oksidasi minyak 10-60 mEq/kg masih layak untuk dikonsumsi.

## Profil asam lemak
Profil asam lemak hasil analisis GC dari kombinasi minyak (sardin:cucut) menunjukkan bahwa dengan penambahan minyak sardin lebih besar (4:1) menghasilkan nilai Saturated Fatty Acid (SFA) yang lebih tinggi dari semua perlakuan kombinasi yaitu 26,11% serta  PUFA mengalami peningkatan yaitu 19,95%. Penambahan minyak cucut semakin banyak pada rasio kombinasi (1:4) menghasilkan nilai Mono UnSaturated Fatty Acid (MUFA) yang lebih tinggi yaitu 37,87%. Total jumlah asam lemak omega-3 minyak sardin  20,45%, cucut  6,13%, kombinasi (1:1) 14,03%; (1:2) 9,27%; (1:3) 8,83%; (1:4) 8,55%; (2:1) 9,29%; (3:1) 16,18% dan (4:1) 16,58%. Minyak sardin yang ditambahkan pada minyak ikan cucut semakin tinggi maka Tabel 1 Nilai asam lemak bebas (ALB), peroksida (PV), Anisidin (p-AV) dan Total Oksidasi (TOTOX) kombinasi minyak ikan sardin dan cucut Sampel FFA PV AnV TOTOX Sardin 0,52±0,08 a 12,0±0,48 g 32,9±0,45 f 56,9±0,75 i Cucut 0,53±0,01 a 4,5±0,21 a 7,3±0,89 a 16,3±0,84 a (sardin:cucut/1:1) 0,53±0,05 a 9,8±0,71 e 14,1±0,60 c 33,8±1,43 e (sardin:cucut/1:2) 0,50±0,07 a 8,8±0,64 d 12,1±1,66 b 29,6±0,58 d (sardin:cucut/1:3) 0,52±0,08 a 6,2±0,06 c 11,4±0,06 b 23,8±0,16 c (sardin:cucut/1:4) 0,53±0,05 a 5,4±0,06 b 8,3±0,72 a 19,2±0,70 b (sardin:cucut/2:1) 0,53±0,09 a 10,3±0,28 e 19,2±0,07 d 39,8 ±0,48 f (sardin:cucut/3:1) 0,52±0,01 a 11,0±0,22 f 30,5±0,80 e 52,6±0,43 g (sardin:cucut/4:1) 0,52±0,01 a 11,6±0,07 fg 31,3±1,06 e 54,5±1,21 h IFOS ≤1,50 ≤ 5,0 ≤ 20,0 ≤ 26,0
Keterangan: Huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata ( p <0,05) dan huruf  yang  berbeda menunjukan perbedaan yang nyata ( p >0,05)
Kombinasi Minyak Ikan Sardin dan Cucut, Musbah et al.

## Tabel 2 Profil asam lemak kombinasi minyak ikan sardin dan cucut
Asam Lemak/Fatty Acid %(w/w) Sardin Cucut Rasio Kombinasi Minyak (Sardin:Cucut)/w/w (1:1) (1:2) (1:3) (1:4) (2:1) (3:1) (4:1) Asam laurat C12:0 0,14 0,02 0,05 0,03 0,02 0,03 0,03 0,05 0,06 Asam miristat C14:0 13,37 0,82 5,86 2,58 2,33 1,94 2,76 7,76 7,63 Asam pentadekanoat C15:0 0,14 0,18 0,32 0,23 0,21 0,24 0,22 0,37 0,37 Asam palmitat C16:0 22,54 12,04 14,0 13,07 13,22 13,89 12,84 13,32 14,19 Asam heptadekanoat C17:0 ttd 0,33 0,40 0,34 0,33 0,38 0,34 0,40 0,43 Asam stearat C18:0 1,50 4,07 3,08 3,55 3,78 4,14 3,56 2,59 2,84 Asam arakidat C20:0 0,13 0,26 0,25 0,25 0,25 0,30 0,25 0,24 0,27 Asam heneikosanoat C21:0 0,02 0,03 0,08 0,02 0,03 0,03 0,05 0,07 0,07 Asam behenat C22:0 0,04 0,13 0,14 0,13 0,13 0,14 0,12 0,14 0,15 Asam Tricoanoic C23:0 0,03 0,02 0,02 0,03 0,02 0,03 0,02 0,02 0,02 Asam lignoserat C24:0 0,03 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,06 0,06 0,08 Total SFA 37,94 17,96 24,26 20,29 20,38 21,19 20,25 25,02 26,11 Asam miristoleat C14:1 0,04 0,06 0,04 0,05 0,05 0,06 0,04 0,03 0,03 Asam cis-10-Pentadecanoad C15:1 0,02 ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd Asam palmitoleat C16:1 3,07 7,30 7,72 7,07 7,26 7,54 7,23 7,52 7,95 Asam cis-10-Heptadecanoad C17:1 ttd 0,59 0,28 0,44 0,45 0,57 0,44 ttd 0,2 Asam elaidat C18:1n-9t ttd 0,17 0,08 0,09 0,10 0,13 0,09 ttd 0,06 Asam oleat C18:1n-9c 8,41 27,90 15,46 22,99 24,29 27,42 23,02 11,16 9,06 Asam cis-11-eicosenoat C20:1 0,68 1,44 0,92 1,20 1,29 1,47 1,18 0,65 0,76 Asam erukat C22:1n-9 0,02 0,26 0,16 Ttd 0,22 0,27 0,21 0,10 0,13 Asam nervonat C24:1 0,02 0,39 0,32 0,34 0,35 0,41 0,33 0,29 0,31 Total MUFA 12,26 38,11 24,98 32,18 34,01 37,87 32,54 19,75 18,5 Asam linoleat C18:2n-6c 5,77 0,62 0,78 0,65 0,63 0,70 0,65 0,81 0,87 Asam ϒ -linolenat C18:3n-6 0,51 0,04 0,15 0,08 0,08 0,08 0,09 0,18 0,18 Asam Linolenic C18:3n-3 0,43 ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd Asam cis-11,14-eicosedienoat C20:2 0,04 0,28 0,18 0,23 0,23 0,29 0,22 0,13 0,15 Asam cis-8,11,14-eicose- trienoat C20:3n-6 0,36 0,13 0,18 0,14 0,14 0,16 0,15 0,19 0,20 Asam cis-11,14,17-eicose- trienoat C20:3n-3 0,43 ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd ttd Asam arachidonat C20:4n-6 0,42 1,83 1,91 1,82 1,83 2,07 1,82 1,78 1,94 Asam cis-5,8,11,14,17-eicosa- pentaenoat C20:5n-3 12,20 1,49 7,07 3,60 3,23 2,82 3,69 8,94 8,99 Asam cis-13,16-docosadienoat C22:2 0,04 0,04 0,02 0,03 0,03 0,03 0,02 ttd 0,03 Asam cis-4,7,10,13,16,19-docosahek- saenoat C22:6n-3 7,39 4,64 6,96 5,67 5,60 5,73 5,60 7,24 7,59 Total PUFA 27,59 9,07 17,25 12,22 11,77 11,88 12,24 19,27 19,95 Total Asam  Lemak  Terdeteksi 77,79 65,14 66,49 64,69 66,16 70,94 65,03 64,04 64,56 Asam  Lemak Tidak Terdeteksi 22,21 34,86 33,51 35,31 33,84 29,06 34,97 35,96 35,44 Keterangan: ttd = tidak terdefinisi
kandungan omega-3 akan semakin tinggi. Profil asam lemak kombinasi minyak ikan sardin dan cucut disajikan pada Tabel 2.
Analisis squalene kombinasi minyak ikan terbaik Penggunaan minyak ikan kombinasi 1:4 berdasarkan hasil analisis total oksidasi masih memenuhi standar yang ditetapkan oleh IFOS. Squalene merupakan senyawa target dari uji
GC-MS yang terdeteksi pada waktu retensi 22,04 menit. Beberapa senyawa lain terdeteksi yaitu pentadecane , tetracosane , hexadecanoic acid dan oleic acid . Senyawa hasil kombinasi minyak sardin dan cucut 1:4 disajikan pada Tabel 3. Pentadecane (C 15 H 32 ) merupakan asam lemak jenuh dengan berat molekul 212,25, terdeteksi dengan waktu retensi 7,12 menit dengan jumlah kelimpahan 13,769%. Asam lemak pentadecane juga ditemukan pada lemak susu sapi dengan jumlah 1,2%, asam lemak ini juga terbentuk melalui proses  hidrogenasi  pada  lemak  kambing
(Smedman et al. 1999). Tetracosane (C 24 H 50 , Lignoceric acid ) merupakan asam lemak jenuh rantai panjang dengan berat molekul 422,48 terdeteksi pada waktu retensi 8,43 menit dengan jumlah kelimpahan 19,785%. Ligneceric acid merupakan hasil samping dari produksi lignin pada tanaman, asam lemak ini juga ditemukan pada lemak kacang tanah dengan jumlah kelimpahan 1,15-1,95%.
Hexadecanoic acid atau Asam palmitat (C 16 H 32 ) adalah asam lemak jenuh dengan berat molekul 284,27 terdeteksi pada waktu retensi 10,40 menit. Asam palmitat umumnya banyak ditemukan pada minyak dari famili Palmaceae seperti kelapa 92%, dan kelapa
sawit 50%. Hasil uji GC-MS pada sampel penelitian mengandung jumlah kelimpahan 7,433%. Asam palmitat suhu ruang berwujud padat berwarna putih dengan titik leburnya 63,1°C. Asam palmitat memiliki aktivitas  antioksidan  dan  antimikroba (Graikou et al. 2011). Asam oleat (C 18 H 32 ) merupakan senyawa dengan berat molekul 310,28 terdeteksi pada waktu retensi 11,81 menit. Asam oleat atau biasa dikenal dengan nama omega-9 yang merupakan jenis asam lemak MUFA. Hasil uji pada GC-MS sampel penelitian mengandung jumlah  kelimpahan  omega-9  15,852%. Suseno et al. (2010) menjelaskan bahwa Omega-9 memiliki manfaat yang sangat besar bagi kesehatan yaitu membantu menurunkan kolesterol jahat, menurunkan trigliserida dalam darah, meningkatkan kolesterol HDL ( high density lipoprotein ). Juniaty dan Balittri (2012) menyatakan bahwa omega-6 dalam bentuk tunggal memiliki sifat negatif karena berkaitan dengan peningkatan produksi eikosanoid (stimulant pertumbuhan tumor pada binatang percobaan), namun dengan adanya omega-9 dalam proporsi yang sesuai memiliki potensi memblokir produksi senyawa eikosanoid tersebut, sehingga peran omega-9 dapat mencegah stimulasi negatif omega-6.
Squalene (C 30 H 50 ) adalah senyawa dengan berat molekul 410,39 terdeteksi pada waktu retensi 22,04 menit. Squalene merupakan senyawa hidrokarbon rantai panjang tidak jenuh, terdapat pada minyak hati ikan cucut, terutama keluarga Squalidae, minyak ikan cod, minyak zaitun, minyak kelapa, minyak gandum, minyak bayam dan minyak dedak padi (Nunez 2007). Hasil uji GC-MS menunjukkan bahwa kelimpahan Tabel 3 Senyawa hasil perbandingan puncak-puncak spektrum massa kombinasi minyak sardin dan cucut (1:4) Nama senyawa Rumus molekul Berat molekul Waktu Retensi Kelimpahan (%) Indeks kemiri- pan (%) Pentadecane C 15 H 32 212,25 7,12 13,769 97 Tetracosane C 24 H 50 422,48 8,43 19,785 92 Hexadecanoic acid C 16 H 32 284,27 10,40 7,433 98 Oleic acid C 18 H 32 310,28 11,81 15,852 96 Squalene C 30 H 50 410,39 22,04 43,169 99
Kombinasi Minyak Ikan Sardin dan Cucut, Musbah et al.
Squalene tertinggi dari kelima senyawa yang terdeteksi yaitu 43,169%. Undjung (2005) menyatakan  bahwa  minyak  ikan  cucut
( Centrophorus atromarginatus ) yang ditangkap di perairan pantai pagatan Propinsi Kalimantan Tengah mengandung Squalene mencapai 83%. Catchpole et al.
(1997) menyatakan bahwa kandungan Squalene pada  hati  ikan  cucut  mencapai  50%. Kamimura et al. (1992) menyatakan Squalene dapat mengurangi toksisitas obat yang dikonsumsi.
KESIMPULAN
Kombinasi minyak ikan terbaik ditemukan pada rasio 1:4 (sardin:cucut) berdasarkan parameter  total oksidasi yang memenuhi standar IFOS dengan kandungan omega-3 yaitu 8,55% dan Squalene yaitu 43,16%.
Minyak sardin jika banyak ditambahkan pada rasio kombinasi menghasilkan kandungan omega-3 yang semakin tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Aidos I, Jacobsen C, Jensen B, Luten JB, van der Padt A, Boom RM. 2002. Volatile oxidation products formed in crude herring oil under accelerated oxidation conditions. Journal Lipid Sci Tech. 4:148- 161.
Aidos I, Schelvus-Smit R, Veldnan MB, Luten
J, Padt AVD, Boom RM. 2003. Chemical and sensory evaluation of crude oil extracted from Herring by-products from different processing operations. Journal Agric Food Chem. 51(7):1897-1903. [AOAC] Association of Official Analytical Chemist. 2005. Official Method of Analysis of The Association of Official Analytical of Chemist 18th edition edition. Arlington. Virginia: AOAC Pr. [AOCS] American Oil Chemists Society. 1995. Official Methods and Recommended Practices of the American Oil Chemists Society, 5th edition: AOCS Pr. [AOCS] American Oil Chemists Society. 1998. Official Methods and Recommended Practices of the American Oil Chemists Society, 5th edition: AOCS Pr. Baken, Dilli, Fettah, Kabatas. 2014. The influence of fish-oil lipid emulsions on
retinopathy of prematurity in very low birth weight infants: A randomized controlled tria. Journal Early Human
Development. 90:27-31.
Bimbo AP. 1998. Guidelines for characterizing food-grade fish oil (9 th -ed) 473-483. Hertfordshire: Inform.
Catchpole O, Kamp P, Grey. 1997. Extraction of squalene from shark liver oil in a packed column using supercritical carbon dioxide. Journal Chemistry. 36(10):4318- 4324
Dewita, Syahrul, Desmelati, Lukman S.
2015. Inovasi bubur instan dan cookies berbasis konsentrat protein ikan patin yang difortifikasi minyak sawit merah dan minyak patin terenkapsulasi. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 18(3):315-320 Gunawan, Triatmo MMA, Rahayu A. 2003. Analisis pangan: penentuan angka peroksida dan asam lemak bebas pada minyak kedelai dengan variasi menggoreng. Jurnal Kimia Analitik. 6(3):1-6. Graikou K, Suzanne K, Nektarios A, George S, Niki C, Efstathios G, Ionna C. 2011. Chemical analysis of greek pollen-antioxidant, antimicrobial and proteasome activation properties. Journal
Chemistry. 33(5):1-9. Gracia N, Aguilar P, Cordova, Suarez, Balanos. 2000. Lipid composition of liver oil of shark species from the caribbean and gulf of california Waters. Journal Of Food Composotions And Analysis. 13:791-798.
Hernandez E, Kamal-Eldin A. 2013. Processing and Nutrition of Fats and Oils.
Amerika Serikat: John Wiley & Sons, Ltd.
[IFOS] International Fish Oils Standard. 2014. Fish Oil Purity Standards. Ilza M, Siregar YI. 2015. Sosialisasi penambahan minyak perut ikan jambal siam an minyak ikan kerapu  pada bubur bayi untuk memenuhi standar omega 3 dan omega 6. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 18(3): 262-275.
Juniaty T, Balittri. 2012. Kenari ( Canarium indicium ) sebagai sumber omega-3, omega-6 dan omega-9. Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri.
[Internet];[diunduh 2016 Sep 23].http:// www.perkebunan.litbang.pertanian. do.id. Kamimura H, Koga N, Oguri K, Yoshimura H 1992. Enhanced elimination of theophylline, phenobarbital and strychnine from the bodies of rats and mice by squalene treatment. Journal Pharmacobiody. 15:215-221. Ketaren S. 2012. Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta (ID): UI Press.
Kelly G. 1999. Squlene and its potential clinical uses. Alternative Medicine Review. 4(1):29-36. Kohno Y, Egawa Y, Itoh S. 1995. Kinetic Study of quenching reaction of singlet oxygen and scavenging reaction of free radical by squalene in n-butanol. Journal Biochim Biophys Acta. 1256:52-56. Loef M, Walach H. 2013. The omega-6/ omega-3 ratio and dementia or cognitive decline: A Systematic review on human studies and biological evidence. Journal of Nutrition in Gerontology and Geriatrics. 32(1):1-23. Nunez GC. 2007. Quality and Stability of Cuban Shark Liver Oil: Comparasion with Icelandic Cod Liver Oil. UNU. Fisheries Training Programme. Perrin JL. 1996. Determination of alteration. In: Karleskind A, Wolff JP. (Eds.) Oils and Fats, Manual vol. 2. Paris (Fr):Lavoisier Pr. Schuchardt JP, Huss M, Stauss-Grabo M, Hahn A. 2010. Significance of long- chain polyunsaturated fatty acids (PUFA) for the development and behaviour of children. Jounal Nutrition. 169(2): 149- 164.
Suseno SH, Nurjanah, Jacoeb AM, Saraswati.
2013a.  Purification of Sardinlla sp., Oil: centrifugation and bentonite adsorbent.
Journal of Food Science and Technology . 6(1):60-67.
Suseno SH, Nurjanah, Faradiba. 2013 b . Profil asam lemak dan kestabilan produk formulasi minyak dan habbatussauda.
Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 16(2):142-149. Suseno SH, Tajul, Nadia, Hamida, Asti, Ali. 2010. Proximate, fatty acid and mineral composition of selected deep sea fish species from Southern Java Ocean and Western Sumatra Ocean Indonesia. International Food Research Journal . 17:905-914. Suseno SH, Jacoeb AM, Bija, Fitriana N, Ruspatti NP. 2016. The effect of citric acid and sodium chloride (NaCl) to quality ofsardine oil ( Sardinella sp.). Journal Biotechnol . 13(3):181-186. Suseno SH, Syari C, Zakiyah ER, Jakoeb AM, Izaki AP, Saraswati, Hayati. 2014. Low temperature extraction and quality  of  oil  from  spotted  Sardinella ( Amblygaster sirm ) and Goldstrip
Sardinella ( Sardinella gibbosa ). Journal of Fish and Marine Sciences. 6 (5):435-440. Smedman AE, Gustafsson IB, Berglund LG, Vessby BO (1999). Pentadecanoic acid in serum as a marker for intake of milk fat: relations between intake of milk fat and metabolic risk factors. Journal Clinical Nutrition. 69(1):9-22. Undjung D. 2005. Contious production of pure squalene by using column chromatography. Journal Chemistry. 5(3):251-254. Watson CA. 1994. Official and standardized methods of analysis (Third Ed.). Cambridge: The Royal Society of Chemistry. Wetherbe B, Nichols P. 2000. Lipid composition of the liver oil of deep-sea sharks from the Chatham Rise, New Zealand. Journal Comparative Biochemistry and Physiology .
125:511-521.