## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology

## PENDAHULUAN
Alanine  Aminotransferase (ALT)  dahulu  lebih sering  disebut  dengan Glutamate  Piruvat  Transaminase (GPT)  adalah  enzim  yang  umumnya  digunakan  untuk mendiagnosis  kerusakan  hati  dan  mengevaluasi
kesehatan  secara  menyeluruh.  ALT  merupakan prediktor  kerusakan  hati  yang  paling  spesifik  karena tempat  produksi  utamnya  di  hati  (Kolahdoozan et  al. , 2020). Hepatosit pada dasarnya adalah satu-satunya sel dengan  konsentrasi  ALT  yang  tinggi.  Sedangkan  ginjal, jantung, dan otot rangka mengandung konsentrasi ALT

## GAMBARAN HASIL PEMERIKSAAN AKTIVITAS ENZIM ALANINE AMINOTRANSFERASE (ALT) PADA SERUM SETELAH DISIMPAN SELAMA 14 HARI
Overview of Alanine Aminotransferase (ALT) Enzyme Activity Assay Result in Serum After Storage for 14 Days
Putri Kurniasiwi 1*
Roosmarinto 2
Narendra Yoga Hendarta 3
*1 Poltekkes Kemenkes Semarang, Indonesia
2 Poltekkes Kemenkes Yogyakarta,
Indonesia
3 Poltekkes Kemenkes Yogyakarta,
Indonesia
*email: putrikurniasiwi@poltekkes- smg.ac.id

## Abstrak
Penyimpanan  serum  pada  suhu  4°C  selama  lebih  dari  3  hari  menyebabkan penurunan  aktivitas  enzim Alanine  Aminotransferase (ALT)  sebesar    10  %. Namun  terdapat beberapa laboratorium yang menyimpan sisa sampel serum selama satu minggu bahkan satu bulan paska pemeriksaan yang tentu saja tidak sesuai  dengan Good  Laboratory  Practice (GLP).  Penyimpanan  serum  tersebut digunakan  untuk  mengantisipasi  apabila  terdapat  kesalahan  pemeriksaan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran hasil pemeriksaan aktivitas enzim ALT pada serum yang langsung diperiksan dan  disimpan selama 14 hari. Jenis penelitian  ini  adalah  deskriptif kuantitatif  dengan menggunakan  Pretest- Posttest  Design.  Sampel  dalam  penelitian  ini  adalah  serum  darah  manusia dengan  jumlah  sampel  sebanyak  10  pasien.  Data  dianalisis  secara  deskriptif terhadap  semua  data  yang  diperoleh  secara keseluruhan  dan  disajikan  dalam bentuk  tabel.  Rata-rata  hasil  pemeriksaan  aktivitas  enzim  ALT  sebelum penyimpanan, penyimpanan hari ke 7 dan hari ke 14 adalah 50,7 U/L, 46,1 U/L, dan  40,5  U/L.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  adanya  penurunan  hasil pemeriksaan aktivitas enzim ALT sebanyak 9 % pada hari ke 7 dan 20 % pada hari ke 14. Oleh karena itu, disarankan petugas laboratorium harus sesegera mungkin memeriksa sampel. Apabila ada kebutuhan untuk mengulang analisis, memverifikasi hasil atau menambahkan pengujian laboratorium, sampel harus dibekukan untuk menjamin stabilitasnya.

## Kata Kunci:
Penyimpanan serum, Hari, Suhu,
Aktivitas Enzim ALT
Keywords : Serum Storage, Day, Temperature, ALT Enzyme Activity

## Abstract
Storage of serum at 4°C for more 3 days causes a 10% decrease in the enzyme Alanine Aminotransferase (ALT) activity. However, several laboratories store remaining serum samples for one week or even one month after examination, which is not under Good Laboratory Practice (GLP). The serum storage used to anticipate if there is an examination error. This study aims to describe the results  of  examining  ALT  enzyme  activity  in  serum  that  was  immediately checked  and  stored  for  14  days.  This  type  of  research  is  descriptive quantitative using the Pretest-Posttest Design. The sample in this study was human  blood  serum,  with  total  samples  of  10  patients.  Data  analyzed descriptively for all data obtained as a whole and presented in tabular form. The  average  yield  of  ALT  enzyme  activity  examination  before  storage  and storage on day 7 and day 14 were 50.7 U/L, 46.1 U/L, and 40.5 U/L. This study concluded that there was a decrease in the results of examining the activity of the ALT enzyme by 9% on the 7th day and 20% on the 14th day. Therefore, it suggested that laboratory staff check the sample as soon as possible. If there is a need to repeat the analysis, verify the results or add laboratory tests, samples should be frozen to ensure stability.
sedang. ALT dalam jumlah yang lebih sedikit dijumpai di pankreas, paru, limfa, dan eritrosit. Pemeriksaan enzim ini  adalah  salah  satu  pemeriksaan  laboratorium  yang paling sering diminta dan merupakan bagian integral dari diagnosis  dan  penatalaksanaan  pasien  dengan  penyakit hati (Valenti et al. , 2021).
Pemeriksaan aktivitas enzim ALT menggunakan sampel serum darah. Hasil pemeriksaan enzim ALT yang akurat,  reliabel  dan  valid  sangat  membantu  diagnosa penyakit terkait. Oleh karena itu, perlakuan pada tahap pra  analitik,  analitik  dan  paska  analitik  sangat menentukan kualitas hasil pemeriksaan (Sukorini et al. , 2010).  Seperti  halnya  pemeriksaan  laboratorium  lain, pemeriksaan  aktivitas  enzim  ALT  dipengaruhi  oleh beberapa faktor seperti suhu dan waktu penyimpanan. Faktor-faktor  tersebut  harus  dipertimbangkan  apabila dilakukan  penundaan  pemeriksaan  atau  penyimpanan sampel.
Berdasar Good Laboratory Practice (GLP), apabila serum darah manusia disimpan selama lebih dari 3 hari pada  suhu  20-25°C  terjadi  penurunan  aktivitas  enzim ALT  sebesar  17%  dan  pada  suhu  4°C  sebesar  10% (Kemenkes, 2013). Namun, pada kenyataannya terdapat beberapa  laboratorium  yang  menyimpan  sisa  sampel serum  selama  satu  minggu  bahkan  satu  bulan  paska pemeriksaan yang tentu saja tidak sesuai dengan  GLP. Hal itu dilakukan untuk mengantisipasi adanya kesalahan pemeriksaan  dan  ingin  melakukan  pengulangan pemeriksaan.  Namun  apabila  yang  diperiksa  adalah kelompok  enzim    enzim  ALT,  kemungkinan  dapat terjadi penurunan aktivitas  yang dipengaruhi oleh suhu dan  lama  penyimpanan  sehingga  dapat  mempengaruhi ketepatan hasil pemeriksaan ulang.
Berdasarkan  permasalahan  yang  ada,  maka peneliti tertarik untuk melihat gambaran hasil aktivitas enzim ALT. Tujuan dari penelitian ini yaitu mengetahui gambaran  hasil  pemeriksaan  aktivitas  enzim  ALT pada serum yang langsung diperiksan dan  disimpan selama 14 hari. Diharapkan dari hasil penelitian ini dapat dijadikan sebagai  acuan  mengenai  seberapa  besar  persentase
penurunan  hasil  pemeriksaan  aktivitas  enzim  ALT  jika dilakukan  pemeriksaan  ulang  sehingga  selisih  hasil pemeriksaan  ulang  dan  pemeriksaan  awal  dapat diperhitungkan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian  deskriptif kuantitatif dengan  menggunakan Pretest-Posttest  Design. Aktivitas enzim ALT pada serum yang langsung diperiksa atau sebelum disimpan adalah sebagai pretest . Aktivitas enzim ALT pada serum yang disimpan selama 7 hari dan 14  hari  pada  suhu  4°C  merupakan posttest .  Sampel dalam penelitian ini adalah serum darah manusia dengan jumlah 10 sampel tiap perlakuan. Setelah mendapatkan sampel yang sesuai dengan kriteria inklusi dan ekslusi, sampel  dibagi  menjadi  dua  vial.  Kemudian  sampel disimpan pada suhu 4°C selama 7 hari dan 14 hari. Data yang  terkumpul  dalam  penelitian  ini  dianalisis menggunakan teknik analisis deskriptif terhadap semua data  yang  diperoleh  secara  keseluruhan  dan  disajikan dalam bentuk tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL
Data hasil pemeriksaan aktivitas enzim ALT pada 10 sampepl disajikan dalam Tabel 1. berikut : Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Aktivitas Enzim ALT
Putri Kurniasiwi, Roosmarinto, Narendra Yoga Hendarta. 2023. Overview of Alanine Aminotransferase (ALT) Enzyme Activity Assay Result in Serum After Storage for 14 Days
Kemudian  perhitungan  hasil  pemeriksaan  tersebut dapat dilihat pada Tabel 2. berikut:
Tabel 2. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Aktivitas Enzim ALT

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  Tabel  1.,  dapat  dilihat  hasil pemeriksaan  pada  10  sampel,  dimana  sampel  yang diambil adalah sampel dengan aktivitas enzim ALT tinggi. Nilai normal ALT pada wanita < 45 U/L dan pada pria < 34  U/L  (Proline,  2023).  Pada  masing-masing  sampel terdapat penurunan nilai aktivitas enzim ALT baik pada hari ke 7 maupun hari ke 14.
Berdasarkan  hasil  nilai  rata-rata  pada  tabel  2 didapatkan  rata-rata  hasil  pemeriksaan  aktivitas  enzim ALT sebelum penyimpanan, penyimpanan hari ke 7 dan hari ke 14 adalah 50,7 U/L, 46,1 U/L, dan 40,5 U/L. Hasil tersebut  menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas enzim  ALT  sebelum  dilakukan  penyimpanan  sampai pada  penyimpanan  hari  ke-14  pada  suhu  4°C.  Hal  ini dapat  disebabkan  karena  perubahan  struktur  enzim yang  mengalami  kerusakan  akibat  perubahan  suhu sehingga  kecepatan  katalitiknya  pun  akan  menurun (Sinaga, 2012).
Pengaturan  suhu  alat  penyimpanan  juga  dapat mempengaruhi  kualitas  dari  serum  dalam  proses penyimpanan (Hartini et al. , 2016). Sampel dipindahkan dari  tempat  semula  setiap  kali  akan  diperiksa  dalam kondisi penyimpanan berbeda dan tidak sesuai dengan standar  kualitas.  Semua  ini  menyebabkan  sampel mengalami  proses  perubahan  atau  degradasi  yang bersifat  kumulatif  dari  waktu  ke  waktu  dan menyebabkan perbahan hasil pemeriksaan sampel awal (Flores et al. , 2020). Oleh karena itu, harus diperhatikan suhu  serum  saat  akan  diperiksa  maupun  suhu  tempat
penyimpanan  serum  agar  tidak  terjadi  perubahan aktivitas  enzim  yang  mempengaruhi  hasil  pemeriksaan aktivitas enzim ALT.
Dalam Good  Laboratory  Practice (Kemenkes, 2013) menyatakan bahwa apabila serum disimpan pada suhu  4°C  selama  lebih  dari  3  hari  akan  mengalami penurunan  aktivitas  sebesar  10%.  Akan  tetapi  pada penelitian  ini  hanya  mengalami  penurunan  aktivitas sebesar  9  %  setelah  penyimpanan  hari  ke  7.  Hal  itu sesuai  dengan  penelitian  Divya et  al., (2014)  yang menunjukkan bahwa enzim ALT cukup stabil sampai 8 hari pada suhu 4°C dan penelitian Yan et al., (2012) yang menunjukkan  bahwa  enzim  ALT  stabil  selama  7  hari pada  suhu  4°C  (Divya et  al. ,  2014)(Yan et  al. ,  2012).
Sedangkan apabila dilihat selisih rata-rata aktivitas enzim sebelum  disimpan  dengan  penyimpanan  hari  ke  14 menunjukkan  selisih  cukup  besar  yaitu  20  %.  Hal  ini sesuai  dengan  penelitian  Donnelly, et  al., (2010) menunjukkan  bahwa  kestabilan  enzim  ALT  pada  suhu 4°C  selama  48  jam,  14  hari,  dan  4  bulan  mengalami beberapa penurunan dari waktu ke waktu (Donnelly, J.
G. et al. , 2010).
Apabila  dilihat  dari  sisi  patologis  apakah penyimpanan  serum  dapat  mempengaruhi  diagnosis klinis,  hal  itu  dapat  dilihat  dari  presentase  penurunan yang  didapatkan  pada  pemeriksaan  ulang.  Dalam penelitian ini presentase penurunan pada pemeriksaan hari ke 7 adalah 9 % sedangkan pada hari ke 14 adalah 20 %. Sedangkan nilai normal aktivitas enzim ALT ALT pada wanita < 45 U/L dan pada pria < 34 U/L (Proline, 2023). Oleh karena itu, selisih hasil pemeriksaan ulang dan  pemeriksaan  awal  dapat  diperhitungkan  dengan melihat presentase penurunan dan dibandingkan dengan nilai  normal  yang  ada  untuk  melihat  apakah penyimpanan  serum  berpengaruh  terhadap  diagnosis klinis atau tidak.
Variasi  berkurangnya  stabilitas  mencerminkan hasil pemeriksaan laboratorium yang nantinya digunakan untuk mengambil keputusan klinis atau terapeutik untuk pasien.  Saat  ini  antara  60-80  %  keputusan  medis
didasarkan  pada  hasil  pemeriksaan  laboratorium sehingga perlakuan sampel yang tidak sesuai dengan GLP atau berkaitan dengan stabilitas analit merupakan studi yang penting dan perlu dikembangkan lagi.
Penelitian  Prasad,  P et.al (2019)  menyimpulkan bahwa aktivitas ALT pada pooled sera stabil selama 6 bulan  pada  penyimpanan  -200°C  (Prasad et  al. ,  2019).
Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  sampel  yang  tidak segera  diperiksa  sebaiknya  disimpan  dalam  keadaan beku.  Alangkah  baiknya  sampel  yang  telah  didapatkan, harus  segera  diperiksa.  Namun  penggunaan  kembali sampel primer dapat diperlukan dalam keadaan berikut yaitu: karena keterlambatan dalam proses analitis, untuk mengkonfirmasi atau memeriksa ulang hasil yang  telah diperoleh sebelumnya dan untuk menambah pengujian laboratorium.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  dapat disimpulkan  adanya  penurunan  hasil  pemeriksaan aktivitas enzim ALT sebanyak 9 % pada hari ke 7 dan 20 % pada hari ke 14. Oleh karena itu, disarankan petugas laboratorium  harus  sesegera  mungkin  memeriksa sampel.  Apabila  ada  kebutuhan  untuk  mengulang analisis,  memverifikasi  hasil  atau  menambahkan pengujian laboratorium, sampel harus dibekukan untuk menjamin stabilitasnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Divya, P.D. et al. (2014) ‘Effect of time and temperature on  the  storage  stability  of  hepatobiliary  enzyme activities  in  cattle  serum’, Indian  Journal  of  Animal Research ,  48(2),  pp.  129 – 133.  Available  at: https://doi.org/10.5958/j.0976-0555.48.2.028.
Donnelly,  J.  G. et  al. (2010)  ‘Stability  of  Twenty -Five Analytes i n Human Serum at 22d’C, 4d’C, and - 20d’C’, Journal  Pediatric  Pathology  &  Laboratory  Medicine. [Preprint].
Flores,  C.F.Y. et  al. (2020)  ‘Sample  management: Stability  of  plasma  and  serum  on  different  storage conditions’, Electronic  Journal  of  the  International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine , 31(1), pp. 46 – 55.
Hartini,  S. et  al. (2016)  ‘Uji  Kualitas  Serum  S impanan Terhadap  Kadar’, Jurnal  Ilmiah  Manuntung ,  Volume
2(Nomor 1), pp. 65 – 69. Available at: https://www.jurnal.akfarsam.ac.id/index.php/jim/article/
download/49/47/.
Kemenkes (2013) Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia  Nomor  43  Tahun  2013  Tentang  Cara Penyelenggaraan  Laboratorium  Klinik  yang  Baik .  Jakarta, Indonesia.
Kolahdoozan,  S. et  al. (2020)  ‘Upper  normal  limits  of serum alanine aminotransferase in healthy population: A  systematic  review’, Middle  East  Journal  of  Digestive Diseases ,  12(3),  pp.  194 – 205.  Available  at: https://doi.org/10.34172/mejdd.2020.182.
Prasad, P. et al. (2019) ‘Effect of Storage on the Stability of  Enzyme  Activities  in  Pooled  Serum’, International Journal of Research & Review , 6(7), pp. 121 – 126.
Proline (2023) ALAT (GPT) FS* (IFCC.Mod) . Cikarang. Sinaga, E. (2012) Biokimia Dasar . Jakarta Barat: PT. ISFI Penerbitan.
Sukorini,  U. et  al. (2010) Pemantapan  Mutu  Internal Laboratorium Klinik . Yogyakarta: Kanal Medika dan Alfa Media Citra.
Valenti, L. et al. (2021) ‘Def inition of Healthy Ranges for Alanine  Aminotransferase  Levels:  A  2021  Update’, Hepatology  Communications ,  5(11),  pp.  1824 – 1832. Available at: https://doi.org/10.1002/hep4.1794.
Yan,  L. et  al. (2012)  ‘Stability  of  Serum  Alanine Aminotransferase Activity in Vary Storge Conditions’, China Practical Medicine [Preprint].