ANTIFUNGAL EKSTRAK n -HEKSANA

## TUMBUHAN OBAT DI ACEH TERHADAP Candida albicans
Mustanir*,  Hendra Fahrizal, Nurhaida, dan Nurdin Saidi
Jurusan Kimia FMIPA Unsyiah, Darussalam, Banda Aceh, 23111. *email : mustanir_yahya@yahoo.com

## ABSTRAK
Telah dilakukan penapisan aktivitas antifungal ekstrak n -heksana dari bagian tanaman, sembilan jenis tumbuhan obat penyakit kulit di Aceh terhadap Candida albicans. Uji fitokimia menunjukkan bahwa hampir  semua  sampel  mengandung  alkaloid  dan  saponin  sebagai  indikasi  adanya  senyawa  aktif berkhasiat.  Hasil  uji  bioaktif  didapatkan  tiga  diantaranya  tumbuhan  sampel  yaitu  biduri (Calotropis gigantean  Willd ),  Cabai  rawit (Capsicum  frutescens L),  dan  Pegagan (Centella  asiatica (L.) Urban ) aktif menghambat pertumbuhan C. albicans . Sebagai kontrol positif digunakan nistatin. Zona hambat paling besar didapatkan dari ekstrak pegagan dengan konsentrasi 1, 5 dan 10% masing-masing 9, 10, dan  12  mm.  Hasil  kromatografi  gas-spektroskopi  massa  dari  ekstrak n -heksana  pegagan  didapatkan empat  senyawa  paling  dominan  yaitu  :  Bisikllo  [3.1.1]  Heptana,2,6,6-trimetil-,  [1.alpa,2.Beta,5.alpa] sebanyak  21,55%;  1,6,10-Dodekatriena,  7,11-dimetil-3-metilena  sebanyak  20,55%;  2,3-dimetil kuinolina  sebanyak  13,49%  dan  asam  1,2-benzenadikarboksilat,  mono  (2-etilheksil)  ester  sebanyak 9,92%.
Kata kunci : antifungal, Candida albicas, metabolit sekunder.

## ABSTRACT
Nine n -hexane extracts of plant materials selected on the basis of medicinal folklore for skin disease treatment  in  Aceh  were  studied  for  their  activity  in  inhibiting Candida  albicans .  Phytochemical analysis majority sampel revealed the presence of secondary metabolites alkaloids and saponins in the plants  thus  indicating  the  therapeutic  potentials  of  the  plant.    The  results  of  screening  indicated  that three of n -hexane extracts Calotropis gigantean Willd , Capsicum frutescens L, and Centella asiatica (L.) Urban were  contain  active  compounds  that  inhibit  mast-cell  degranulation  to C.  albicans . Nystatine  used  as  standard  reference. Centella  asiatica (L.) Urban gaves  the  largest  inhibition to C. Albicans among  the  samples,  the  concentration  of  1,  5  and  10%  inhibits  9,  10,  and  12  mm, respectively. The isolated compounds n -hexane extract from Centella asiatica were identified by using Gas  Chromatography  Mass  Spectroscopy.  The  result  showed  the  presence  of    bicyclo [3.1.1]Heptena,2,6,6-trimethyl,  [1.alpa,2.Beta,5.alpa]  amount  21.55%,  1,6,10-odecatriene,  7,11- dimethyl-3-methylene  amount  20.55%,  quinoline,  2,3-dimethyl  amount  13.49%,  and  acid  1,2- benzenedicarboxylate, mono (2-ethylhexyl) ester amount 9.92%.
Keywords : antifungal, Candida albicans , secondary metabolite compounds .

## PENDAHULUAN
Indonesia memiliki 30.000 jenis tumbuh- tumbuhan,  sekitar  7.500  jenis  diantaranya termasuk tanaman berkhasiat obat, lebih dari 1.800  jenis  tanaman  telah  diidentifikasi  dari beberapa  formasi  hutan,  namun  hingga  saat ini  jumlah  tanaman  obat  yang  dimanfaatkan oleh masyarakat baru sekitar 1.000, dan yang
digunakan  secara  rutin  dalam  industri  obat tradisional baru sekitar 300 jenis.
Banyaknya  jenis  tumbuhan  yang  belum dipelajari  dan  tidak  memungkinkan  diteliti secara  terstruktur,  maka  pada  penelitian  ini diambil secara acak sembilan jenis tumbuhan yang sering digunakan sebagai obat tradisional  oleh  masyarakat  seperti Cassia
florida  Vahl (johar)  yang  sering  digunakan untuk  mengobati  penyakit  demam  malaria, obat  luka  dan  penambah  nafsu  makan. Leucaena  leucocephala (Lam.) de  Wit (petai cina)  yang  diketahui  dapat  mengobati diabetes  melitus,  luka,  kulit  mengelupas  dan cacingan. Calotropis gigantean Willd (biduri) berkhasiat untuk peluruh keringat (diaforetik),  obat  bila  digigit  kutu  babi, perangsang  muntah  (emetik),  memacu  kerja enzim  pencernaan  (alteratif)  dan  peluruh kencing  (diuretik). Lawsonia  inermis L (pacar kuku) bermanfaat untuk mengutuhkan kembali  kuku  yang  terbelah  atau  sobek  dan digunakan setelah bersalin. Apium graveolens L (seledri) dapat digunakan untuk mengobati hipertensi,  sakit  mata  dan reumatik. Centella  asiatica (L.) Urban (pegagan)  digunakan  untuk  obat  kulit,  obat luka,  gangguan  syaraf  dan  memperbaiki peredaran  darah. Capsicum  frutescens L (cabai  rawit)  berkhasiat  untuk  jantung  dan aliran  darah,  antirematik,  menghancurkan bekuan  darah  (antikoagulan),  meningkatkan nafsu  makan,  perangsang  kulit  (kalau digosokkan  ke  kulit  akan  menimbulkan  rasa panas). Datura  metel (kecubung)  dapat mengobati  penyakit  asma  dan  reumatik. Physalis angulata (ceplukan) dapat mengobati  penyakit  asam  urat,  anti  radang, penghilang  rasa  sakit  (analgesik),  campak dan membersihkan darah dari zat toksik. 1)
Tumbuhan yang diuraikan di atas banyak sekali  dijumpai  dan  digunakan  masyarakat
dalam kehidupan sehari-hari. Namun penelitian  ilmiah  terhadap  kandungan  dan aktifitas  dari  senyawa  yang  terkandung dalam  tumbuhan  tersebut  relatif  belum banyak dilakukan. Dalam  penelitian ini akan menggunakan pelarut nonpolar n -heksana.

## METODE

## Bahan dan Alat
Sampel yang digunakan pada penelitian  ini  diperolah  dari  Aceh,  yang terdiri dari ; (1). biduri (Calotropis gigantean Willd )  terdiri  dari  daun,    dan  bunga.  (2). Cabai  rawit (  Capsicum  frutescens L)  terdiri dari buah, dan daun. (3). Ceplukan (Physalis angulata )  terdiri  dari  campuran  daun  dan batang.  (4).  Johar  ( Cassia  florida  Vahl ) terdiri  dari  daun  dan  batang.  (5).  Kecubung (Datura metel ) terdiri dari daun, batang,  dan bunga. (6). Petai cina ( Leucaena leucocephala (Lam.) de  Wit )  terdiri  dari daun, dan batang. (7). Pacar kuku (Lawsonia inermis L) terdiri dari daun,  dan  batang. (8). Pegagan (Centella  asiatica (L.) Urban ), campuran  daun  dan  batang.  (9).  Seledri (Apium  graveolens L)  campuran  daun  dan batang.
Peralatan yang digunakan pada penelitian  ini  meliputi: autoklaf , rotary evaporator ,  peralatan  gelas, test  plate, penangas  air,  lampu  UV,  dan  kromatografi gas-spektroskopi  massa  (KG-SM).  Bahan yang  digunakan  meliputi  media Sabouroud Dextrose Agar (SDA) , nistatin, FeCl 3 , etanol, metanol,  HgCl 2 ,  H 2 O,  KI,  bismuth  nitrat,
asam  asetat  glasial,  asam  asetat  anhidrida, iodium,  kloroform,  amonium  hidroksida, asam sulfat, asam klorida, serbuk Mg, NaOH dan n- heksana.
Uji  fitokimia  dan  penapisan  aktivitas antifungal ekstrak n -heksana dari sembilan  jenis  tumbuhan  obat  penyakit kulit di Aceh terhadap Candida albicans Pengujian  alkoid  terhadap  kulit  batang P.  alba dan  ekstrak  etil  asetat  dilakukan menggunakan  pereaksi  Meyer,  Dragendorff, dan  Wagner.  Uji  steroid  menggunakan pereaksi Liebermann-Burchard, bila dihasilkan warna biru atau hijau menunjukkan adanya steroid dan terbentuknya  warna  merah  mengindikasikan adanya triterpenoid. Adanya busa yang stabil selama 30 menit setelah pengocokan menunjukkan adanya saponin. Adanya kandungan flavonoid ditandai dengan muncul  warna  merah  atau  ungu  setelah ditambahkan logam magnesium dan HCl. 2,3)
Pengujian  dilakukan  dengan  metode difusi  agar  menggunakan  cakram.  Media yang  digunakan  adalah  Sabouroud  Dextrose Agar  (SDA).  Cakram  direndam  dalam larutan  uji  yang  telah  disiapkan  dengan konsentrasi  1,  5  dan  10%.  Setiap  set
percobaan  diletakkan  cakram  berisi  larutan uji,  kontrol  positif  (nistatin  50  μg)  dan kontrol  negatif  (pelarut)  pada  daerah  yang berbeda  dalam media  tumbuh  jamur, kemudian diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24  jam.  Diamati  pertumbuhan  jamur  untuk setiap area. Bila zona hambat belum tampak, dibiarkan  selama  24  jam  lagi.  Luas  zona hambat diukur dengan mengunakan penggaris dalam satuan milimeter.
Analisis  kandungan  senyawa  dalam ekstrak n -heksana  pegagan  menggunakan alat  GC-MS  jenis  pengionan  EI  ( elektron impact )  sebesar  70  eV,  jenis  detektor  TCD (Thermal  Conductivity  Detector)  dengan suhu  280 o C.  Jenis  kolom  yang  digunakan yaitu  DB-5  (bersifat  polar)  pada  suhu  70 o C yang  dinaikkan  5 o C/menit  sampai  300 o C. Gas  pembawa  helium  dan  jumlah  sampel yang  diinjeksi  sebesar  0,1  µL  dengan  suhu injector  270 o C.  Struktur  senyawa  ditentukan berdasarkan perbandingan dengan data base.

## PEMBAHASAN
Sampel dari sembilan tumbuhan berkhasiat  yang  tumbuh  di  Aceh  dilakukan uji  fitokimia  untuk  mengetahui  kandungan metabolit  sekundernya,  hasil  uji  fitokimia tumbuhan tersebut ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1 . Hasil uji fitokimia beberapa tumbuhan obat di Aceh No Sampel Uji Alkaloid T St Fe Fl Sa K M W D 1 Biduri Bunga + + + + - + + - - 2 Daun + + + + - - + + - 3 Cabe Rawit Buah + + + + - - - + - 4 Daun + + + - - - - + - 5 Ceplukan - - - - - - - + - 6 Johar Batang + + + + - - - + - 7 Daun - - - - - - - + - 8 Kecubung Batang - - - - - - - + - 9 Bunga + + + - - - - - - 10 Daun - - - + + - - - - 11  Pacar Kuku Batang + + + - - - - + - 12 Daun - - - - - + - - - 13 Petai cina Batang - - - - - - + - + 14 Daun - - - - - - - - + 15  Pegagan + + + + + - - + - 16  Seledri + + + - - - - + +
Keterangan: M=Meyer; W=Wagner; D=Dragendrof; T=Terpenoid; St=Steroid; Fe=Fenol; Fl=Flavonoid; Sa=Saponin; K=Kumarin
Tabel 1 di atas menunjukkan bahwa dari golongan  metabolit  sekunder  yang  paling dominan  adalah  alkaloid  dan  saponin, sementara  golongan  metabolit  sekunder  lain yang  tidak  dominan  diantaranya  terpenoid, steroid, fenol, flavonoid, dan kumarin. Secara umum tumbuhan yang mengandung senyawa alkaloid,  secara  fisik  dapat  diidentifikasi dengan  ciri-ciri  jelas,  misalnya  bergetah  dan terasa pahit jika dicicipi.
Uji  bioaktif  dilakukan  pada  konsentrasi larutan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  1,  5,  dan  10%  (b/v).  Pemilihan konsentrasi ini bertujuan mengetahui konsentrasi  terkecil  yang  aktif  dari  semua larutan  uji  terhadap  jamur C.  albicans .
Konsentrasi jamur C. albicans setara dengan 0,5  Mc.  Farlan  dengan  membandingkan suspensi C.  albicans dengan  larutan  Mc. Farlan  0,5.  Metoda  yang  digunakan  adalah metoda  Kirby-Bauer  mengunakan  cakram dengan  media Sabouroud  Dextrose  Agar (SDA). Aktivitas antijamur ditentukan berdasarkan  pembentukan  zona  bening  yang terbentuk  pada media.  Zona bening, Gambar 1  menunjukkan  bahwa  ekstrak  tumbuhan mampu  menghambat  pertumbuhan  jamur C. albicans .  Diameter  daya  hambat  dihitung dari  jarak  satu  ujung  ke  ujung  zona  bening yang  lain.  Hasil  uji  aktivitas  ekstrak n- heksana  beberapa  tumbuhan  dapat  dilihat pada Tabel 2 .
Gambar 1.  Zona Hambat uji aktivitas antifungal ekstrak n -heksana dari pegagan terhadap jamur C. albicans.
Berdasarkan  Tabel  2,  dari  16  sampel atau  sembilan  tumbuhan  yang  diuji  hanya  6 sampel  yang  aktif  dan  pegagan  mempunyai keaktifan  paling  besar  dengan  daya  hambat sebesar  9,  10  dan  12  mm  masing-masing pada  konsentrasi  1,  5,    dan  10%.  Aktivitas lainnya  ditunjukkan  oleh  buah  cabe  rawit dengan zona hambatnya sebesar 6 mm untuk konsentrasi 1% dan  9 mm  untuk konsentrasi 5 dan 10%.
Tabel 2 .  Zona Hambat ekstrak tumbuhan terhadap C. albicans (mm)
No Sampel C. albican Kontrol Positif (mm) 1% 5% 10% (mm) 1 Biduri Bunga 6 7 7 30 2 Daun - - - 25 3 Cabe Rawit Buah 6 9 9 25 4 Daun 6 6 8 27 5 Ceplukan - - - 25 6 Johar Batang - - - 27 7 Daun - - - 24 8 Kecubung Batang - - - 23 9 Bung a - - - 27 10 Daun - - - 25 11  Pacar Kuku Batang - - 6 27 12 Daun - - - 28 13 Petai cina Batang - - 7 30 14 Daun - - - 24 15  Pegagan 9 10 12 26 16  Seledri - - - 30
Daun  cabe  rawit  dan  bunga  biduri  juga menunjukkan  zona  hambat  pada  setiap konsentrasi  uji,  rata-rata  6,7  mm.  Selain keempat  sampel  ini,  hanya  batang  petai  cina dan  batang  pacar  kuku  yang  menunjukkan aktivitas terhadap C. albicans pada konsentrasi  10%.  Sementara  10  sampel  lain yang  diuji  tidak  menunjukkan  zona  hambat, sehingga  ekstrak n -heksana  dari  tumbuhan tersebut  kemungkinan  tidak  mengandung senyawa aktif terhadap C. albicans.
Berdasarkan standar NCCLS (The National  Committe  of  Clinical  Laboratory Standard), suatu senyawa disebutkan sensitif bila mampu menghasilkan zona hambat lebih dari  18  mm,  bersifat  intermediet  bila  zona hambatnya  13-17  mm  dan  bersifat  resisten bila  zona  hambatnya  kurang  dari  12  mm. Jadi,  dari  semua  sampel  yang  diekstraksi zona hambat yang paling kuat hanya bersifat resisten terhadap C. Albicans. 4)
Penggunaan  nistatin  sebagai  kontrol positif karena sifatnya yang dapat menghambat  pertumbuhan  jamur  dan  ragi, tetapi  tidak  aktif  terhadap  bakteri  dan protozoa.  Nistatin  hanya  akan  diikat  oleh jamur atau ragi yang sensitif. 5) . Melihat data daya hambat kontrol positif dan negatif yang digunakan,  memberikan  indikasi  bahwa metoda yang diaplikasi cukup akurat.

## Hasil Analisa KG-SM
Ekstrak  kasar  sampel  dikarakterisasi
dengan menggunakan KG-SM untuk mengetahui komponen senyawa yang terkandung  di  dalam  sampel  tersebut.  Hasil KG-SM  ditunjukkan  pada  Tabel  3.  Terdapat 15  senyawa  di  dalam  pegagan  yang  mirip dengan  data  base,  tetapi  hanya  4  senyawa yang mempunyai kelimpahan dominan ditampilkan  dalam  Tabel  3.  Diduga  dari keempat senyawa tersebut yang menyumbang  keaktifan  terhadap C.  albicans adalah  senyawa  2,3-dimetil  kuinolin,  karena berdasarkan struktur, senyawa ini merupakan turunan alkaloid, sementara pada uji fitokimia,  pegagan  positif  mengandung alkaloid.  Selain  itu  senyawa  asam  1,2- benzenadikarboksilat,  mono  (2-etilheksil) ester diduga juga berpotensi menyumbangkan keaktifan antifungal.
Didapatkan  sebanyak  15  senyawa  dari daun  cabe  rawit  mirip  dengan  data  base, tetapi  hanya  4  senyawa  paling  dominan  saja yang  dituliskan  dalam  Tabel  3.  Dalam  cabe rawit diketahui terkandung kapcaisin, dihidrocapsaisin, vitamin A dan C, zat warna kapsantin,  karoten,  dan  berbagai  mineral seperti fosfor, zat besi, kalium, dan niasin. Di dalam  biji  buah  cabe  rawit  terdapat  soanin, solamidin, solamargin, sterioid dan antibiotik (kapsisidin). 6)
Senyawa asam 1,2-benzanadikarboksilat, mono  (2-etilheksil)  ester    mempunyai
komposisi  sebanyak  15,29%  dengan  kualitas kemiripan 87%. Senyawa ini juga terdapat di dalam  daun  cabe  rawit,  sehingga  diduga senyawa  ini  adalah  penyumbang  keaktifan ekstrak buah cabe rawit terhadap bioindikator pada  penelitian  ini.  Tiga  senyawa  lain  yang juga  dominan  didalam  buah  cabe  rawit adalah asam heksanoat, heksil ester (10,14%),  tridekana  (7,97%),  dan  dodekana (8,35%). Dari 38 senyawa yang mirip dengan data  base  pada  bunga  biduri  terdapat  4 senyawa  dominan,  namun  senyawa  12- oleanen-il-asetat,(3-alfa)- paling banyak terkandung  didalam  ekstrak  bunga  biduri (14,76%)  dengan  99%  kualitas  kemiripan. Berdasarkan strukturnya, senyawa ini memungkinkan menyumbang keaktifan terhadap  jamur C.  albicans karena  senyawa ini merupakan turunan dari  flavonoid.
Tumbuhan  biduri  mengandung  banyak metabolit sekunder diantaranya adalah saponin,  flavonoid,  fenol,  gigantin,  tanin, kalotoksin  uskarin,  kalaktin,  dan  kalotropin. Senyawa-senyawa    inilah  diduga  aktif terhadap jamur C. Albicans. 6)
Terdapat  4  senyawa  utama  yang  mirip dengan  data  base  yang  terdapat  pada  batang petai  cina.  Dari  keempat  senyawa  ini kemungkinan  senyawa  butil  hidroksitoluena dan 4-dehidriksi- N -(4,5-metilenadioksi-2- nitrobenzelidena)tiramina  menyumbangkan keaktifan  bila  dilihat  dari  strukturnya,  yaitu toluen dan senyawa alkaloid.
Tabel 3 .  Hasil analisis KG-SM ekstrak n -heksana Beberapa Tumbuhan Obat di Aceh
Dari semua senyawa  yang mirip dengan data  base  terdapat  7  senyawa  yang  dominan pada  ekstrak  daun  petai  cina.  Salah  satu senyawa tersebut yaitu Asam 1,2- benzenadikarboksilat,  mono  (2-etilheksil) ester  yang  juga  terdapat  dalam  pegagan, buah  dan  cabe  rawit  ,  tetapi  persen kandungan  senyawa  ini  sangat  sedikit  di dalam daun petai cina (5,20 %). Senyawa ini
diduga  memberikan  aktivitas  tehadap C. albicans .
Antijamur bekerja dengan beberapa cara diantaranya  menyerang  biosintesis  sterol, dinding  sel,  dan  menghambat  biosintesis RNA. Sterol yang terdapat pada jamur adalah ergosterol,  ketika  biosintesis  ergosterol terhambat,  maka  permeabilitas  membran akan  terganggu  dan  jamur  akan  mati.
Jenis Tumbuhan Waktu retensi (menit) Nama senyawa Kandungan senyawa (%) Kualitas kemiripan (%) Pegagan 7,624 Bisiklo 2,6,6-trimetil [1.alpa,2.Beta,5.alpa] Heptana 21,55 55 5,175 7,11-dimetil-3-metilena1,6,10-Dodekatriena 20,55 94 8,689 2,3-dimetil kuinolin 13,49 43 12,774 Asam 1, 2 Benzenadikarboksilat, mono (2-etilheksil) ester 9,92 91 Daun Cabe Rawit 12,746 Asam 1, 2 Benzenadikarboksilat, mono (2-etilheksil) ester 28,27 91 7,361 1-Oktadekena 10,03 98 9,404 1-Dokosena 9,10 96 8,328 Siklokosana 7,26 96 Buah Cabe Rawit 12,740 Asam 1,2-Benzenadikarboksilat, mono (2-etilheksil) ester 15,29 87 4,329 Asam Heksanoat, heksil ester 10,14 43 4,248 Tridekana 7,97 96 3,791 Dodekana 8,35 60 Bunga Biduri 19,57 Nonakosana 8,75 99 22,73 Nonakosana 8,22 98 31,02 12-oleanen-il-asetat,(3-alfa)- 14,76 99 32,31 Asam Urs-12-en-24-oat-1-okso-metilester 13,88 96 Batang Petai Cina 5,64 Butilat hidroksitoluena 22,98 98 8,18 Asam n -heksadekanoat 9,47 93 27,09 Gamma-sitosterol 23,19 99 29,05 4-Dehidroksi- N -(4,5-metilenadioksi-2- nitrobenzilidena)tiramina 23,40 47 Daun Petai Cina 5,63 Butil Hidroksitoluena 19.4 98 8,98 Vitol 23,49 91 12,74 Asam 1,2-benzenedicarboksilat, mono (2-etilheksil) ester 5,20 74 18,07 2,6,10,14,18,22-Tetracosahesaene, 2,6,10,15,19,23- heksameti-, (all-E)- 15,07 99 23,27 Vitamin E 8,62 95 27,05 Siklotrisiloksana 7,95 46 29,00 1-Metil-3-fenilindol 10,92 46
Senyawa  yang  paling  banyak  digunakan dalam menghambat sterol adalah amfoterisin B dan imidazol. Dinding sel jamur mengandung  senyawa β- glukan,  senyawa  ini merupakan  target  utama  dalam  toksisitas selektif.  Inhibisi  biosintesis  glucan  ini menyebabkan  dinding    sel  tidak  terbentuk secara sempurna, sehingga sel jamur menjadi lisis. Senyawa yang bersifat sebagai antifungal  yang  menghambat  dinding  sel adalah echinocandins, yang menghambat biosisntesis β- glukan. Kelompok dari ekhinocandin, kapofungin (Candidas) sekarang tersedia secara komersial.
Antifungal  ini  diharapkan  memberi  nilai spesial  untuk  kombinasi  sistem  infeksi Aspergillus pada  manusia.  Senyawa  ini  juga efektif  menyerang  jamur-jamur  penting seperti Candida  spp. dan Pneumocytis jiroveci ,  yang  menyebabkan  pneumia  pada penderita AIDS. 7)

## KESIMPULAN
Hasil  uji  aktivitas  antifungal  dari ekstrak  beberapa  tumbuhan  obat  di  Aceh terdapat enam sampel  yang aktif terhadap C.
albicans dengan  memberikan  zona  hambat, namun  hanya  pegagan  yang  memiliki  zona hambat  yang  paling  besar  yaitu  9  mm,  10 mm  dan  12  mm  masing-masing  pada konsentrasi 1, 5 dan 10%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  Kasih  kepada    Departemen Pendidikan  dan  Kebudayaan  Nasional  atas pendanaan melalui Program Penelitian
Pengembangan  Bidang  Ilmu  No.  Kontrak 06/K-HP/PBI-Unsyiah/2007.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Harini,  M.,  Sangat,  E,  A.,  M,.  Zuhud,  E, K.,  Damayanti, 2000 , Kamus  Penyakit dan Tumbuhan Obat Indonesia
Etnofitomedika , Yayasan Obor Indonesia,
Jakarta.
2. Milles, D.H, 1994 , A Guide to Biologically  Active  Plant  Constituent , Department  of  Chemistry,  University  of Florida, USA.
3. Harbone,  J.B., 1988 , Metode  Fitokimia Penentuan  Cara  Modern  Menganalisa Tumbuhan (Terjemahan  Kosasih,  P.),
Edisi kedua, ITB, Bandung.
4. National Committee for Clinical Laboratory  Standard, 1990 ,  Method  for dilution  antimicrobial  susceptibility  test for  bacteria  that  grow  aerobically .  USA National Communittee for Clinical Laboratory Standard, USA.
5. Rostinawati, T., 2007 , Uji Aktivitas Hasil Penyarian  Biji  Mahkota  Dewa  ( phaleria macrocarpa [Scheff]  Terhadap  Beberapa Mikroba Penyebab Anfusi Kulit, Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran.
6. Zahara,  R., 2009 . Mengukur  Tingkat Kepedasan  Cabe ,  Pikiran  Rakyat,  22 Januari.
7. Tortora,  J.,  Funke,  R.B.  and  Case,  C.L., 2004 , Microbiology  an  Introduction,
Benjamin Cummings,