Potensi Inhibisi Enzim α -Glukosidase Dari Ekstrak Kulit Buah Labu Air ( Lagenaria siceraria ) Sebagai Antidiabetes
The Potency Inhibition of α -Glucosidase Enzyme From Lagenaria siceraria Fruit Skin Extract as Antidiabetic
Harry Noviardi 1 *, Freddy Arifta Nassel 1 , Moh. Syarif 1 Program Studi S1 Farmasi, Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor, Jl. Kumbang No. 23, Bogor, Indonesia.
*Coresponding Author: harry.noviardi@gmail.com
(tanggal diterima: 04-01-2020 , tanggal disetujui: 24-04-2020)

## INTISARI
Kandungan  antioksidan  yang  terdapat  pada  kulit  buah  labu  air  dapat  berperan  dalam pengobatan  antidiabetes.  Senyawa  antioksidan  yang  terkandung  labu  air  ( Lagenaria  siceraria ) seperti flavonoid, fenol, dan tanin yang digunakan untuk menurunkan kadar glukosa dalam darah. Senyawa  aktif  golongan  flavonoid  yang  terdapat  pada  labu  air  adalah  apigenin  dan  flavon. Efektivitas  ekstrasi  senyawa  golongan  flavonoid  senyawa  dapat  meningkatkan  potensi  labu  air sebagai antidiabetes. Flavonoid yang bersifat polar dan dapat diekstraksi dengan pelarut polar.
Penelitian  bertujuan  menentukan  potensi  aktivitas  ekstrak  air  dan  etanol  dengan konsentrasi  70%,  dan  96%  kulit  labu  air  dalam  menghambat aktivitas  enzim  α -glukosidase. Simplisia kulit buah labu diekstraksi dengan air dan etanol menggunakan metode maserasi. Ekstrak kental diidentifikasi senyawa kimia dan diuji aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase. Pada uji fitokimia ekstrak kulit buah labu air positif mengandung senyawa flavonoid dan saponin.  Ekstrak  kulit  buah  labu  air  memiliki  nilai  inhibisi  terendah  terletak  pada  ekstrak  air sedangkan nilai tertinggi terletak pada ekstrak etanol 96%. Nilai IC 50 dari ekstrak air, etanol 70%, dan etanol 96% secara berturut-turut adalah 13530; 5500; 4870 μ g/mL. Nilai IC 50 terbaik terdapat pada glucobay® sebesar 1220 μ g/mL. Ekstrak air dan etanol dari kulit labu air berpotensi dalam menghambat enzim α -glukosidase.
Kata Kunci : antidiabetes; inhibisi; Lagenaria siceraria ; α - glukosidase.
ABSTRACT Antioxidant  content  in  the Lagenaria  siceraria peels  could  play  a  role  in  antidiabetic treatment. The antioxidant compounds contained Lagenaria Siceraria such as flavonoids, phenols, and tannins are used to lower glucose levels in the blood. The active compounds of the flavonoids in the Lagenaria  Siceraria are  apigenin  and  flavones.  The  effectiveness  of  the  extraction  of  a compound  group  of  flavonoids  compounds  could  increase  the  potency  of Lagenaria  Siceraria as antidiabetic. The flavonoids compounds are polar and could be extracted with polar solvents.
The research aimed to determine the potential activity of water and ethanol extracts with a concentration  of  70%,  and  96%  of Lagenaria  siceraria peels in  inhibiting  the  activity  of  the  α - glucosidase  enzyme.  The  extraction  method  was  maceration  method  with  aquadest  and  ethanol. The extracts were identified by its chemical compound and tested for the inhibitory activity of the α -glucosidase enzyme. Based  on    phytochemical  results, Lagenaria  siceraria peel  extracts  contained  flavonoids and saponins. Water extract Lagenaria siceraria had  the lowest inhibitory. The highest value was ethanol 96% extract. The IC 50 value of water and ethanol extracts with a concentration of 70%, and 96% Lagenaria siceraria peel  extract   was  13530;  5500;  4870 μ g/mL,  respectively.  The best  IC 50 value in glucobay® was 1220 μ g/mL. Therefore, water and ethanol Lagenaria siceraria peel extract had the potential to inhibit α -glucosidase.
Keywords : antidiabetic; inhibition ; Lagenaria siceraria ; α -glucosidase.

## 1. PENDAHULUAN
Diabetes  Melitus  (DM)  merupakan  gangguan  metabolisme  yang  ditandai dengan  hiperglikemia  yang  berhubungan  dengan  abnormalitas  metabolisme karbohidrat,  lemak, dan  protein  yang disebabkan  oleh penurunan  sekresi  insulin atau penurunan sensitivitas insulin atau keduanya serta menyebabkan komplikasi kronis  [1].  Insulin  merupakan  hormon  yang  diproduksi  di  pankreas  yang menjadikan  glukosa  dari  makanan  dapat  masuk  ke  dalam  sel  untuk  diubah menjadi  energi  yang  dibutuhkan  oleh  tubuh.  Penderita  diabetes  tidak  dapat mengabsorbsi glukosa dengan cukup, sehingga glukosa menumpuk di dalam darah menyebabkan  hiperglikemia  [2].  Jika  insulin  tidak  tersedia  dalam  tubuh  maka glukosa  akan  tertimbun  dalam  darah  dan  segera  diekskresikan  ke  dalam  urin sehingga  produksi  kemih  akan  meningkat  dan  penderita  menjadi  lebih  sering untuk kemih.
Jumlah penderita diabetes melitus mengalami peningkatan setiap tahunnya. Pada  tahun  2011  jumlah  penderita  diabetes  telah  mencapai  366  juta  orang. Penderita diabetes dapat diobati dengan injeksi insulin atau dengan menggunakan obat  modern  seperti  antidiabetes  oral.  Pengobatan  dengan  menggunakan  injeksi insulin  biasanya  digunakan  untuk  DM  tipe  1,  sedangkan  untuk  DM  tipe  2 menggunakan  pengobatan  dengan  antidiabetes  oral,  salah  satu    obat  untuk  DM tipe 2, yaitu akarbosa.
Akarbosa (glucobay®) bekerja menghambat enzim α -glukosidase sehingga mencegah  penguraian  sukrosa  dan  karbohidrat  kompleks  dalam  usus  halus dengan  demikian  memperlambat  dan  menghambat  penyerapan  karbohidrat. Meskipun  tidak  menimbulkan  efek  samping  seperti  hipoglikemia,  namun mempunyai  keterbatasan,  yaitu  menimbulkan  efek  samping  tidak  enak  di  perut, seperti  flatulensi,  diare,  ikterus,  hepatitis,  perut  kembung  dan  nyeri.  Karena adanya  efek  samping  yang  sangat  tinggi  sehingga  tidak  sedikit  dari  masyarakat yang beralih pada obat herbal. Obat herbal  mempunyai efek samping yang rendah serta relatif lebih murah.
Bahan  alam  yang  dapat  menginhibisi  enzim α -glukosidase  salah  satunya adalah  kulit  buah  labu  air  ( Lagenaria  siceraria ).  Sebelumnya  kulit  labu  air  telah diujikam  secara in  vivo dan  berkhasiat  antihiperglikemia  [3].  Kandungan antioksidan dari kulit buah labu air termasuk dalam kategori kuat dengan nilai IC 50 sebesar 9,332 μ g/mL [4]. Kandungan antioksidan  yang terdapat pada kulit buah labu  air  dapat  berperan  dalam  mengurangi  stress  oksidatif  serta  menurunkan ekspresi  protein  TNF- α  yang  berperan  pada  resistensi  insulin.  Antioksidan tersebut  dapat  mengatur  kadar  glukosa  dalam  darah  serta  dapat  mencegah terjadinya komplikasi diabetes [5].
Kulit  buah  labu  air  mengandung  protein  (17,5%),  selulosa  (18,2%),  dan lignin  (8,0%).  Selain  itu  terdapat  kandung  vitamin  C,  β -karoten  pada  labu  air. Senyawa  aktif  yang  telah  terisolasi  dari  golongan  flavonoid  antara  lain  4-C- glikosilflavon,  7-0-glukosil-6-C-glukosida  apigenin,  6-C-glukosida  apigenin,  6-C- glukosida  luteolin,  dan 7,4’ -O-diglukosil6-C-glukosida  apigenin  [6].  Golongan senyawa  flavonoid  tersebut  dapat  berpontesi  sebagai  antioksidan  [7].  Flavonoid
bersifat  polar  sehingga  dapat  terekstraksi  pada  pelarut  polar  [8].  Efektivitas ekstrasi  dari  suatu  senyawa  sangat  dipengaruhi  oleh  kelarutan  senyawa  dalam pelarut  yang  digunakan  dalam  proses  ekstraksi  [9].  Berdasarkan  hal  tersebut, penelitian  ini  melakukan  ekstraksi  dengan  menggunakan  pelarut  polar  dengan variasi kepolaran, yaitu air dan etanol (70%, dan 96%). Variasi tingkat kepolaran pada saat melakukan ekstraksi berakibat pada banyaknya senyawa metabolit yang dapat  terekstraksi.  Selain  itu,  efektivitas,  dan  jumlah  senyawa  aktif  yang  dapat terekstraksi juga terpengaruh, dimana senyawa aktif yang terekstraksi diharapkan dapat  berpotensi  menghambat  kerja enzim  α -glukosidase.  Obat  yang  digunakan sebagai  pembanding  aktivitas  inhibisi  enzim  α -glukosidase  pada  penelitian  ini adalah glucobay®.  Penelitian bertujuan menentukan aktivitas inhibisi ekstrak air dan etanol kulit labu air terhadap enzim α -glukosidase.

## 2. METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah, neraca analitik, pisau, alat- alat  gelas,  neraca  digital  (AND  300),  botol  coklat,  kertas  saring,  corong  (Iwaki), labu ukur (Iwaki), rotary evaporator (IKA), perangkat instrumen microplatereader (Epoch Microplate Spectrophotometer), dan micropipet (Thermo Scientific). Bahan  pada  penelitian  ini  adalah  kulit  buah  labu  air Lagenaria  siceraria berumur 2-4 minggu, yang telah dideterminasi oleh Herbarium Bogoriense, Pusat Penelitian  Biologi,  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI),  aquadest,  etil asetat,  enzim α -glukosidase,  bufer  fosfat  pH  7, p -nitrofenil α -D-glukopiranosa (pNPG),  standar  glucobay®  (akarbosa),  dimetilsulfoksida  (DMSO)  dan  larutan Na 2 CO 3 .
Ekstraksi Kulit Buah Labu Air.
Buah  labu  air  dicuci,  kemudian  dikupas  kulitnya.  Kulit  buah  dipotong potong  dengan  ketebalan  3  mm  kemudian  diangin-anginkan  dan  tidak  di  bawah sinar  matahari  langsung  selama  10  hari.  Simplisia  yang  sudah  kering  diblender sampai  halus  kemudian  diayak  menggunakan  mesh  no  40.  Serbuk  simplisia dimasukan ke dalam 4 botol coklat masing-masing sebanyak 200g kemudian pada botol  1  ditambahkan  air,  botol  2  ditambahkan  etanol  70%  dan  botol  3 ditambahkan etanol 96% hingga seluruh serbuk simplisia terendam. Botol coklat ditutup dan disimpan ditempat terlindung dari cahaya dan dibiarkan selama 1 x 24 jam.  Hasil  maserasi  disaring,  filtrat  yang  diperoleh  ditampung  dan  residu direndam kembali dengan masing-masing pelarutnya. Maserasi diulangi hingga 3 kali  perendaman.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan  pelarutnya  dengan rotary evaporator . Ekstrak yang didapat kemudian dilakukan penetapkan kadar air serta penapisan fitokimia.
Uji Inhibisi α -Glukosidase Secara in vitro Uji in vitro ekstrak air dan etanol kulit labu air terhadap aktivitas enzim α - glukosidase  dilakukan  dengan  cara  menyiapkan  larutan  enzim  terlebih  dahulu,
yakni  dibuat  dengan  melarutkan  1  mg  α -glukosidase  dalam  larutan  bufer  fosfat (pH 7) 0.1 M yang mengandung 200 mg serum bovin albumin. Sebelum digunakan sebanyak 1 mL larutan enzim tersebut diencerkan 25 kali dengan bufer fosfat (pH 7).  Sampel  yang  akan  diuji  dilarutkan  dalam  pelarut  dimetil  sulfoksida  (DMSO) dengan  konsentrasi  1%;  1.2%;  1.4%;  1.6%;  1.8%;  dan  2%  (b/v).  Campuran pereaksi  terdiri  atas  25  (µL)  p- nitrofenil  α -D-glukopiranosida  (p-NPG)  0.5  mM sebagai  substrat  (yang  telah  dilarutkan  dalam  bufer  fosfat  (pH  7)  0.1  M,  50  µL larutan  bufer  fosfat  (pH  7)  0.1  M,  dan  10  µL  larutan  sampel  dalam  dimetil sulfoksida  (DMSO)  konsentrasi  1,  1.2,  1.4,  1.6,  1.8  dan  2%  (b/v).  Setelah  itu ditambahkan 25 µL larutan enzim α -glukosidase, kemudian campuran diinkubasi pada  suhu  37 o C  selama  30  menit.  Reaksi  enzim  dihentikan  dengan  penambahan 100  µL  natrium  karbonat  (Na 2 CO 3 )  0.2  M.  Absorbans  dari  p-nitrofenol  yang merupakan  hasil  hidrolisis  enzimatis  dari  substrat  p-NPG  diukur  dengan microplate  reader pada  panjang  gelombang  maksimum  (λ)  410  nm [10].  Selain sampel uji, juga disiapkan campuran ekstrak tanpa direaksikan dengan enzim (So) yang digunakan sebagai koreksi terhadap absorban ekstrak. Untuk kontrol negatif (C) merupakan campuran tanpa ekstrak/sampel uji. Kontrol positif dibuat dengan melarutkan akarbosa (Glucobay®) dalam bufer fosfat (pH 7) dan HCl 2 N dengan konsentrasi  larutan  standar yang  digunakan  sama  dengan  konsentrasi  1%  (b/v). Larutan  ini  kemudian  disentrifus,  supernatan  dimasukkan  ke  dalam  campuran pereaksi  seperti  pada  sampel  uji  (10  µL).  Hasil  reaksi  tersebut  diukur  dengan spektrofotometer ultraviolet pada panjang gelombang 410 nm. Data kontrol positif ini  digunakan  sebagai  pembanding  dengan  sampel  yang  diuji.  Setiap  pengujian diulang sebanyak 2 kali. Masing-masing sampel uji dihitung persen inhibisinya.

## Analisis Data
Data aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase yang diperoleh dalam penelitian ini,  akan  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  ANOVA  yaitu  RAL  (Rancangan Acak Lengkap) satu faktor dengan tiga kali ulangan pada tingkat kepercayaan 95% dan taraf α 0,05. Hipotesis yang diajukan adalah :
1. Ho  =  Ekstrak  air,  etanol  70%,  dan  96  %  kulit  labu  air  tidak  mampu menginhibisi enzim α -glukosidase.
2. H1 = Ekstrak air, etanol 70%, dan 96 % kulit labu air mampu menginhibisi enzim α -glukosidase.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik Simplisia Ekstrak Labu Air.
Kulit  buah  labu  air  ( Lagenaria  siceraria )  yang  digunakan  diambil  di  Desa Mekar  Jaya  Kecamatan  Ciomas  Kabupaten  Bogor.  Tanaman  kulit  buah  labu  air yang digunakan dalam penelitian ini adalah Lagenaria siceraria berasal dari suku Cucurbitaceae .  Simplisia  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  berupa  serbuk berwarna  hijau  kecoklatan  dan  beraroma  khas.  Setelah  tahap  pengeringan, simplisia  dihaluskan  menggunakan blender sampai  berbentuk  serbuk,  kemudian diayak  menggunakan  ayakan  dengan  ukuran  40  mesh.  Penghalusan  simplisia
bertujuan  untuk  memperluas  permukaan  sampel  sehingga  memudahkan  pelarut masuk ke dalam sel melewati membran sehingga lebih banyak senyawa yang dapat ditarik  oleh  pelarut  saat  proses  ekstraksi.  Hasil  penetapan  kadar  air  yang diperoleh pada penelitian ini adalah 8,16%. Serbuk kulit buah labu air diekstraksi dengan  metode  remaserasi  menggunakan  pelarut  air  dan  etanol.  Rendemen ekstrak  air  memiliki  nilai  tertinggi  dibandingkan  dengan  ekstrak  yang  lain.  Nilai rendemen  ekstraksi  dari  pelarut  air,  etanol  70%  dan  96%  secara  berturut-turut adalah 17,78; 15,74; 14,87 %.
Tabel 1. Kandungan Fitokimia Ekstrak Kulit Buah Labu Air
No Uji Ekstrak Air Etanol 70% Etanol 96% 1. Alkaloid Dragendorf - - - Mayer - - - Wagner - - - 2. Flavonoid + + + 3. Saponin + + + 4. Tanin - - -
Pada penapisan fitokimia ini, hasil yang didapat dari ekstrak air, dan etanol (70%,  96%)  mengandung  flavonoid  dan  saponin  (Tabel  1).  Buah  labu  air ( Lagenaria  siceraria )  mengandung  senyawa  antioksidan  seperti  flavonoid,  fenol, dan tanin yang digunakan untuk menurunkan kadar glukosa dalam darah. Selain itu, kulit buah labu air ( Lagenaria siceraria ) mengandung fenolik [11,12]. Senyawa flavanoid  berupa turunan apigenin  yang terkandung dalam buah labu air antara lain  7-0-glukosil-6-C-glukosida  apigenin,  6-C- glukosida  apigenin,  dan  7,4’ -O- diglukosil-6C-glukosida apigenin [6].
Senyawa apigenin (4’,5,7 -trihidroksiflavon) merupakan senyawa flavonoid yang banyak terkandung pada buah dan sayuran [13]. Apigenin bersifat polar dan berpotensi  sebagai  antioksidan  [14].  Toksisitas  apigenin  lebih  rendah dibandingkan dengan flavonoid yang lain [15].
Inhibisi Enzim α -Glukosidase Ekstrak Kulit Buah Labu Air.
Penentuan inhibisi enzim α -glukosidase dilakukan terhadap ekstrak air dan etanol  (70%,  96%)  kulit  buah  labu  air  secara in  vitro .  Masing-masing  ekstrak dibuat sebanyak 6 deret konsentrasi untuk penentuan persen daya inhibisi ekstrak terhadap enzim  α -glukosidase. Daya  inhibisi  enzim  α -glukosidase  ditentukan berdasarkan  absorbansi p -nitrofenol  yang  dihasilkan  dari  hidrolisis  substrat  ( p - nitrofenil  α– D-glukosida)  menjadi p -nitrofenol  dan  D- glikosidase  oleh  enzim  α - glukosidase [16]. Dengan adanya ekstrak kulit buah labu air yang berperan sebagai inhibitor enzim α -glukosidase maka p -nitrofenol yang dihasilkan akan berkurang yang ditandai dengan berkurangnya intesitas warna kuning [17]. Reaksi hidrolisis p - nitrofenil α– D- glukosida oleh enzim α -glukosidase dapat dilihat pada Gambar 1.

## Peningkatan konsentrasi ekstrak dan standar akarbosa menunjukkan daya inhibisi
enzim α -glukosidase semakin meningkat.
Gambar 1. Reaksi hidrolisis p - nitrofenil α– D- glukosida oleh enzim α -glukosidase [17].
Alfa-glukosidase  merupak  enzim  yang  dapat  mengkatalisis  pemutusan ikatan  glikosida  pada  karbohidrat  kompleks.  Enzim α -glukosidase  bekerja  dalam memecah  pati,  dekstrin  dan  maltose  menjadi  monosakarida.  Pemutusan  ikatan glikosida  ini  sangat  berperan  pada  beberapa  reaksi  biokimia  yang  ada  di  dalam tubuh. Enzim glukosidase bekerja secara spesifik dalam memutus ikatan glikosida berdasarkan  pada  posisi,  jumlah  dan  konfigurasi  hidroksil  di  dalam  gula.  Pada penderita  diabetes  penghambatan  kerja  enzim  α -glukosidase  dapat  mengatur kadar  glukosa  dalam  darah  sehingga  dapat  mencegah  terjadi  hiperglikemi  pada tubuh [18].
Pada  penelitian  menggunakan  kontrol  positif  akarbosa  ( Glucobay ®). Penggunaan  akarbosa mengikuti  penelitian  yang  dilakukan  Yuniarto et al (2018) [19]. Akarbosa (C 25 H 43 NO 18 ) merupakan metabolit sekunder yang dihasilkan dari fermentasi  mikroba Actinoplanes  utahenis .  Akarbosa  dapat  menghambat  kerja enzim  α -glukosidase  secara  kompetitif.  Akarbosa  dapat  digunakan  sebagai  obat oral dalam terapi pada penderita diabetes melitus tipe 2[20]. Penghambatan enzim α -glukosidase  oleh  akarbosa  akan  dapat  menunda  absorbsi  dan  digesti  glukosa. Hal ini akan menyebabkan kenaikan gula pada post-prandial dapat dicegah [19].
Gambar 2. Nilai IC 50 pada perlakuan ekstrak kulit buah labu air.
Nilai IC 50 yang terbaik dari ektrak air dan etanol kulit labu air terdapat pada ekstrak  etanol  96%  sebesar  4870 μ g/mL.  Konsentrasi  etanol  dibuat  dalam deret konsentrasi.  Nilai  IC 50 dari  ekstrak  air,  dan  etanol  70%  secara  berturut-turut adalah  13530;  5500 μ g/mL  (Gambar  2).  Kontrol  positif  akarbosa  ( glucobay ®) mempunyai nilai IC 50 tertinggi pada hasil penelitian sebesar 1220 μ g/mL. Nilai IC 50 ini  diperoleh  dari  persamaan  regresi  linear hubungan  antara  persen  inhibisi dan konsentrasi ekstrak dalam bentuk satuan μ g/mL . Nilai konsentrasi IC 50 dari setiap ekstrak  masuk  dalam  daerah  deret  konsentrasi.  Nilai  tertinggi  deret  konsentrasi dari  masing-masing  ekstrak  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  20000 μ g/mL.   Berdasarkan pada hasil analisis statistik uji One Way ANOVA dan Post Hoc Test  Duncan didapatkan  simpulan  bahwa  terdapat  perbedaan  inhibisi  enzim α - glukosidase dari maserasi ekstrak air dan etanol  70%, 96% kulit buah kulit labu air.

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  maka  dapat  disimpulkan ekstrak air dan etanol kulit buah labu air memiliki potensi inhibisi terhadap enzim α -glukosidase.  Nilai  IC 50 dari  ekstrak  air,  etanol  70%,  dan  etanol  96%  secara berturut-turut adalah 13530; 5500; 4870 μ g/mL. Nilai IC 50 terbaik terdapat pada glucobay® sebesar 1220 μ g/mL.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
[1].  [Depkes RI]  Departemen  Kesehatan  RI. 2005, Rencana Strategi Departemen Kesehatan, Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
[2].  [IDF]. 2013. IDF Diabetes Atlas. Sixth edition, Brussels : International Diabetes Federation.
[3].  Gorasiya,  HJ,  Paranjape,  A,  Murti,  K,  2011.  Pharmacognostic  and Pharmacological Profile Of Lagenaria siceraria (Molina), Phamacology online. 3: 317-324.
[4].  Masrifah,  Rahman,  N,  Abram,  PH.  2017.  Uji  Aktivitas  Antioksi  dan  Ekstrak Daun dan Kulit Labu Air (Lagenaria siceraria (Molina) Standl.), J. Akad. Kim . 6(2):98-106.
[5].  Widowati, W. 2008. Potensi Antioksidan sebagai Antidiabetes. JKM . 7(2):1-10.
[6].   Prajapati,  RP,  Kalariya,  M,  Parmar,  SK.,  Sheth,  NR.  2010.  Phytochemical  and pharmacological  review  of  Lagenaria  sicereria. Journal  of  Ayurveda  and integrative medicine , 1 (4): 266 – 272.
[7]. Zuraida,  Sulistiyani,  Sajuthi,  D,  Suparto,  IH.  2017.  Fenol,  Flavonoid,  Dan Aktivitas  Antioksidan  Pada  Ekstrak  Kulit  Batang  Pulai  ( Alstonia  scholaris R.Br ), Jurnal Penelitian Hasil Hutan . 35(3): 211-219.
[8].   Gazali  M,  Nufus  H,  Nurjanah,  Zuriat.  2019.  Eksplorasi  senyawa  bioaktif ekstrak daun nipah ( Nypa fruticans Wurmb ) asal pesisir Aceh Barat sebagai antioksidan, Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 22(1): 155-163.
[9].  Verdian, M, Widarta, IWR, Permana, IGM. 2018. Pengaruh Jenis Pelarut Pada Ekstraksi  Menggunakan  Gelombang  Ultrasonik  Terhadap  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Lemon ( Citrus limon (Linn.) Burm F .), Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan . 7(4):213-222.
[10].  Anggriawan, MB, Roswiem, AP, Nurcholis, W. 2015. Potensi Ekstrak Air dan Etanol Kulit Batang Kayu Manis Padang (Cinnamomum Burmanii) Terhadap Aktivitas Enzim A-Glukosidase, Jurnal Kedokteran Yarsi . 23(2): 91-102.
[11].  Joshi,  P,  Kulkami,  M,  dan  Joag,  S,  2013.    Higher  antioxidant  activity  in decoction than raw fruit parts of Lagenaria siceraria (Mol.), Free Radicals and Antioxidants . 3(1): 52-54.
[12]. Kumar,  A,  Partap,  S,  Sharma,  NK,  Jha,  KK.  2012.  Phytochemical, Ethnobotanical and Pharmacological Profile of Lagenaria siceraria , Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. 3(1): 24-31.
[13]. Anwar,  R.  2018.  Apigenin  Daun  Rasamala  ( Altingia  excelsa  nornha )  Sebagai Antibakteri Entrerococcus faecalis, Inssiva Dental Journal . 7(2):37-42.
[14]. Teles,  YCF,  Souza,  MSR,  Souza,  MDFVD.  2018.  Sulphated  Flavonoids: Biosynthesis, Structures, and Biological Activities, Molecules . 23(2):480-491.
[15]. Wang,  M,  Firrman,  J,  Liu,  L,  Yam,  K.  2019.  A  review  on  Flavonoid:  Dietary Intake,  ADME,  Antimicrobial  Effects,  and  Interactions  with  Human  Gut Microbiota, BioMed Research International . 7010467:1-18
[16]. Sugiwati,  S,  Setiasih,  S,  Afifah,  E,  2009.  Antihyperglycemic  Activity  Of  the Mahkota  Dewa  [Phaleria  macrocarpa  (scheff.)  boerl.]  Leaf  Extracts  As  an Alpha-Glucosidase Inhibitor, Makara, Kesehatan . 13(2) : 74-78.
[17]. Ain, Q, Ashiq, U, Jamal, RA, Saleem, M, Tahir, MM. 2017. Alpha-glucosidase and carbonic anhydrase inhibition studies of Pd(II)-hydrazide complexes, Arabian Journal of Chemistry . 10(4):488-499.
[18]. Febrinda,  AE,  Astawan,  M,  Wresdiyati,  T,  Yulian,  ND.  2013.  Kapasistas Antioksidan  dan  Inhibitor  Alfa  Glukosidase  Ekstrak  Umbi  Bawang  Dayak, J. Teknol. Dan Industri Pangan . 24(2):161-167.
[19]. Yuniarto, A, Selifiana, N. 2018. Aktivitas Inhibisi Enzim Alfa-glukosidase dari Ekstrak Rimpang Bangle (Zingiber cassumunar Roxb.) secara In vitro, Media Pharmaceutica Indonesiana . 2(1):22-25.
[20]. Hadiarti, D. 2017. Inhibi si α -Glukosidase Ekstrak Etanol Buas-buas (Premna Serratifolia Linn) secara In Vitro, Trad. Med. J . 22(2):80-83.