Hasil Penelitian                                Jurnal.Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No.1 Th. 2002

## AKTIVITAS STIMULASI KOMPONEN BIOAKTIF RIMPANG JAHE
( Zingiber officinale Roscoe) PADA SEL LIMFOSIT B MANUSIA SECARA IN VITRO
[Effects of  Bioactive Compounds of Ginger ( Zingiber officinale Roscoe) Root on B Cell Lymphocyte Function using In Vitro System]
Tejasari 1) ,  Fransiska R  Zakaria 2) ,  dan  Dondin Sajuthi 3)
1) Staf Pengajar Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Jember
2) Staf Pengajar Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fateta-IPB
3) Peneliti Pada Pusat Studi Satwa Primata IPB

## ABSTRACT
The  effect  of  two  fractions  of  oleoresin  compounds  from  ginger  root  on  lymphocyte  function  were  studied  by  observing  B  cell proliferations, which were  measured by the incorporation of 3H-thymidine during cell incubation. The doses of oleoresin compounds and its two fractions tested were 50,100, 150,  and 200  g per ml.  Lymphocyte  from human peripheral blood were isolated using ficoll density gradient technique, and cultured  in the presence of the compounds in RPMI-1640 medium for 4 days, with or without the addition of 3 mM paraquat as the oxidizing agent.
The results showed that the effects of oleoresin and its two fractions depended on its doses. Oleoresin and its two fractions increased B cell  proliferation  with    the  highest  activity  of  456  percent  at  low  dose  of  50  g  per  ml.  These  result  showed  a  positive  effect  of  oleoresin compound and its two fractions on B cell functions  at low doses. It indicated that bioactive compounds of ginger root at low  concentration have positive effects on humoral immune response and this supports the traditional belief that ginger increases body resistance to common cold.
Key words : bioactive compound, proliferation, humoral immune responds, stress oxidative, in vitro, and  lymphocyte

## PENDAHULUAN
Pangan,  selain  memberi  sumbangan  zat  gizi  yang telah  diketahui  sebagai  zat  yang  mutlak  diperlukan  tubuh, juga  memberikan  zat  lain,  atau  komponen  bioaktif,  yang memberikan  efek  fisiologis  positif  pada  tubuh  manusia. Komponen  bioaktif  pangan  yang  menimbulkan  efek fisiologis  atau  biasa  disebut  dengan  khasiat  pangan, terutama  banyak  terdapat  pada  pangan  kelompok  buah dan sayur, dan bumbu atau rempah.
Jahe ( Zingiber officinale Roscoe) merupakan salah satu  jenis  rempah  yang  sejak  dulu  dikonsumsi  oleh masyarakat Indonesia. Sejak akhir abad ke- 20, jahe selalu digunakan  dalam  formula  makanan  dan  minuman kesehatan, seperti STMJ (Susu Telur Madu Jahe), wedang jahe  dan  lainnya.  Hal  ini  didasari  oleh  khasiat  jahe  yang secara  tradisi  dan  empiris  dirasakan  oleh  masyarakat, terutama  sebagai  bahan  anti  masuk-angin,  walaupun secara  ilmiah  belum  dibuktikan  efeknya  pada  kesehatan manusia.  Menurut  Tang  dan  Eisenbrand  (1992)  khasiat jahe ditimbulkan oleh kandungan senyawa bioaktif jahe.
Senyawa  bioaktif  jahe,  seperti  oleoresin,  gingerol, dan  shogaol  sudah  banyak  diteliti  dari  aspek  aktivitasnya sebagai  antibakteri,  antitusif,  dan  antioksidan.  Senyawa gingerol,  dan  zingeron  memiliki  sifat  sporostatik  terhadap bakteri Bacillus  subtilis (Al-Khayat  dan  Blank,  1985). Senyawa  (6)-shogaol,  dan  (6)-gingerol  bersifat  antitusif
(Suekawa  et  al.,  1984).  Aktivitas  senyawa  gingerol, shogaol,  dan  zingeron  telah  diteliti  oleh  Kikuzaki  dan Nakatani (1993); Tejasari (2000) meneliti efek antioksidatif senyawa  oleoresn,  gingerol  dan  shogaol  terhadap  kadar peroksida,  khususnya  MDA  (malonaldehida),  dan  kadar radikal bebas sel limfosit yang dikultur secara in vitro.
Selain  bersifat  antioksidatif,  ekstrak  jahe  telah dibuktikan  oleh  Zakaria  et  al.,  (1996),  Nurahman  et  al., (1998),  Prangdimurti  et  al.,(1999),  dan    Zakaria  et  al., (1999)  dapat  meningkatkan    ketahanan  tubuh  tikus,  dan manusia pada sistem in vivo dan in vitro . Pengaruh ekstrak jahe  tersebut  bergantung  pada  kondisi  kultur  dan  dosis ekstrak jahe.
Tujuan penelitian ini adalah untuk meneliti pengaruh jenis,  dan  konsentrasi  senyawa  bioaktif  jahe  terhadap fungsi  sel  limfosit  pada  sistem in  vitro .  Hasil  penelitian  ini diharapkan  memberikan  informasi  ilmiah  khasiat  jahe, khususnya  efek  senyawa  bioaktif  jahe  terhadap  fungsi  sel imun dan ketahanan tubuh manusia.

## METODOLOGI
Penelitian  dilakukan    dalam  2  tahap  percobaan laboratorium,  yaitu:  1)  fraksinasi  komponen  bioaktif  jahe (gingerol  dan  shogaol)  dan  2)  uji in  vitro efek  senyawa oleoresin dan fraksi 1 (gingerol) dan fraksi 2 (shogaol) jahe
terhadap fungsi limfosit B.  Penelitian tahap  1 dilakukan di laboratorium  Kimia  Pangan  PAU  Pangan  dan  Gizi-IPB, sedangkan  tahap  ke  2  dilakukan  di  laboratorium  Biokimia TPG-IPB, laboratorium Virologi  Pusat Studi  Satwa Primata IPB (PSSP-IPB), dan laboratorium Imunologi U.S. NAMRU- 2 ( Naval American Medical Research Unit-2 ), Jakarta.

## Fraksinasi komponen oleoresin rimpang jahe
(Wikandari, 1994)
Senyawa oleoresin diekstrak dari tepung jahe kering beku    (60  mesh)  dalam  pelarut  etanol  dengan  metode soxhlet.  Fraksi  1  atau  gingerol  dan  fraksi  2  atau  shogaol diperoleh  dengan  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) dengan  menggunakan  plat  GF-254  (E-merck)  dan  eluen heksana  dan  dietileter  rasio  3:7  (V:V).  Senyawa  fraksi  1 dan  2  diekstrak  dari  silika  dengan  pelarut  aseton, disentrifugasi  pada  2800  x  g  selama  15  menit,  berulang- ulang dan disaring lalu diuapkan. Masing-masing senyawa oleoresin,  gingerol  dan  shogaol  dilarutkan  dalam  media RPMI  –  1640  dan  dengan  pengenceran  bertingkat  dibuat larutan  dengan  4  tingkat  konsentrasi  250,  500,  1000  dan 2000  g/ml.  Larutan  disterilkan  dengan  penyaringan membran 0,22  m (Millipore).

## Persiapan medium dan larutan paraquat
Medium yang digunakan untuk kultur adalah media basal  dan  media  semi  lengkap.  Media  basal  digunakan untuk pencucian dan dibuat dari bubuk RPMI-1640 (Sigma, R-7755) sebanyak 10,42 gram dilarutkan dengan akuades steril hingga 1 liter, lalu ditambah 2 gram NaHCO 3 . Medium semi  lengkap  merupakan  media  basal  yang  ditambah  1% L-glutamin  (Sigma  G  2150)  2  mM  dan  1%  antibiotik gentamisin (Sigma G1522).
Larutan paraquat 10 mM dibuat dengan melarutkan 0,02572 gr paraquat diklorida (Sigma, M-2254) (BM=257,2) dalam  10  ml  media  basal.  Semua  larutan  media  dan parakuat disterilkan dengan  penyaringan melalui membran steril  berpori-pori 0,22  m.
Isolasi  dan  kultur  limfosit  (Rose  et  al.,  1994; Freshney, 1994)
Limfosit    diisolasi  dari  sampel  darah  tepi  laki-laki dewasa  sehat  dengan  cara  sentrifugasi  dan  pemisahan melalui  perbedaan  densitas ficoll  hypaque (1,77  +  0,001 g/ml)  (Sigma  1077  –1).  Pemisahan  komponen  seluler dilakukan  dengan  sentrifugasi    514  x  g  selama  10  menit, diperoleh  lapisan buffy  coat ,  yang  sebagian  besar  berisi limfosit. Pemisahan limfosit dilakukan dengan  melewatkan lapisan  tersebut  diatas  larutan ficoll-hypaque secara perlahan,  lalu  disentrifugasi  pada  1430  x  g  selama  30 menit.  Lapisan    atas  yang  berisi  limfosit,  monosit  dan platelet dicuci 2 kali dengan media basal dan disentrifugasi
pada 288 x g selama 10 menit. Limfosit (dalam presipitat) terpisah  dari  platelet,  monosit,  plasma  dan ficoll (dalam supernatan).  Sel  limfosit  tersebut  dihitung  dengan pewarnaan  biru  trifan  pada  hemasitometer  (Neubauer). Suspensi  limfosit  yang  memiliki  viabilitas  di  atas  95%, dengan  konsentrasi  2x10 6 sel/ml  disiapkan  dengan penambahan media basal.
Analisis  respons  proliferasi  limfosit  (Rose  et  al., 1994; Zakaria et .al., 2000)
Metode  uji  aktivitas  proliferasi  limfosit  didasarkan pada  inkorporasi tritiated  thymidine atau  [ 3 H]-timidin  pada saat  sintesis  DNA  limfosit.  Sinar  dari  [ 3 H]-timidin  yang terinkorporasi  dihitung  oleh  -counter dan  diperoleh    nilai count per minute (cpm). Sejumlah  100  l  suspensi  limfosit  (2x  10 6 sel/ml) yang  telah  disiapkan  dimasukkan  ke  dalam  sumur-sumur lempeng  mikro.  Lalu  ditambahkan  berturut-turut  ke  setiap sumur masing-masing sejumlah  20  l senyawa oleoresin, gingerol atau shogaol dengan konsentrasi 500, 1000, 1500 dan 2000  g/ml  untuk ketiganya, dan masing-masing 80  l mitogen  lipopolisakarida  (LPS)  12,5  g/ml.  Konsentrasi akhir setiap sumur lempeng mikro masing-masing senyawa adalah  50,  100,  150  dan  200  g/ml,  dan  untuk  mitogen adalah  5  g/ml.  Mitogen  LPS  digunakan  untuk  stimulasi proliferasi  sel  limfosit  B.  Pada  sumur  lempeng  mikro sebagai kontrol hanya ditambahkan media RPMI 1640 saja.
Untuk kondisi stres oksidatif, ke dalam setiap sumur ditambahkan 100  l suspensi limfosit (2x 10 6 sel/ml), 20  l senyawa  oleoresin,  gingerol  atau  shogaol  yang  telah disiapkan  dengan  konsentrasi  500,  1000,  1500  dan  2000  g/ml untuk ketiganya, 60  l mitogen LPS 16,67  g/ml dan 20  l  larutan  paraquat  30  mM.  Konsentrasi  akhir  paraquat pada setiap sumur lempeng mikro (200  l) menjadi 3mM. Untuk  kontrol  stres  oksidatif  hanya  ditambahkan  medium RPMI 1640 dan paraquat.
Kultur  diinkubasi  selama  96  jam,  18  jam  sebelum inkubasi  berakhir  dilakukan  penambahan  sebanyak  50  l [ 3 H]-timidin  25  Ci/mL.  Setelah  inkubasi  berakhir,  limfosit dipanen dengan alat pemanen sel yang dilengkapi dengan membran  1  m.  Membran  tersebut  dikeringanginkan  lalu dibungkus  dengan aluminium  foil untuk  dilakukan pembacaan dengan  -counter .
Analisis Data Analisis  ragam  (ANOVA)  pada  model    percobaan dilakukan  untuk  menilai  pengaruh  konsentrasi  dan  kondisi kultur  limfosit  serta  pengaruh  interaksinya,  untuk  masing- masing  senyawa  oleoresin,  gingerol  dan  shogaol.  Model regresi  digunakan  untuk  menyimpulkan  sifat  hubungan antar respon dengan konsentrasi komponen oleoresin jahe dan kondisi kultur limfosit. Analisis ragam regresi dilakukan
dengan menggunakan program statistik Statistical Analysis System  (SAS)  for Windows  release 6.12  (SAS  Institute, 1985).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol Jahe
Analisis  kualitatif  KLT  menunjukkan  ada  5  fraksi dengan  spot  yang  cukup  tajam  dengan  nilai  Rf  fraksi  1  = 0,24,  fraksi  2  =  0,42,  fraksi  3  =  0,54,  fraksi  4=  0,60  dan fraksi 5 = 0,68. Fraksi 1 dan fraksi 2 yang masing-masing merupakan  senyawa  gingerol  dan  shogaol  (Chen  et  al., 1986;  Wikandari,  1994)  memiliki  kemampuan  antioksidan yang  tinggi  (Kikuzaki  dan  Nakatani,  1993).  Kadar  gingerol atau  1(4-hidroksi-3-metoksifenil)-hidroksialkan-3-one  dan shogaol  atau  1(4-hidroksi-3-metoksifenil)-4-dekena-3-one yang diperoleh adalah 0,52 dan 0,24 persen  berat kering. Konsentrasi senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol yang diuji, ditentukan berdasarkan jumlah  konsumsi satu gelas wedang jahe dari 25 gram jahe segar, yaitu 50  g per ml, dan  dicobakan    juga  dengan  tingkat  konsentrasi  100,  150 dan 200  g per ml.
Pengaruh  senyawa  oleoresin,  gingerol,  dan shogaol  terhadap  respons  proliferasi  limfosit  B manusia
Proliferasi  adalah  proses  perbanyakan  sel  melalui pembelahan  sel  atau  mitosis  sebagai  respons  terhadap antigen atau mitogen. Pada proses tersebut dihasilkan sel- sel efektor aktif yang berperan pada respons spesifik atau non  spesifik  untuk  eliminasi  mikroorganisme  patogen  dan zat  asing  lainnya.  Proliferasi  merupakan  fungsi  dasar biologis limfosit (Rose et al., 1994) dan respons proliferasi secara in  vitro dapat  menggambarkan  fungsi  limfosit. Penambahan  LPS  dalam  media  kultur  limfosit  berfungsi sebagai mitogen yang terutama menstimulsi proliferasi sel limfosit B. (Zakaria et al., 1996).
Pengaruh konsentrasi  senyawa oleoresin, gingerol dan  shogaol  terhadap  proliferasi  sel  limfosit  B  sangat tergantung pada kondisi  kultur limfosit. Pada kondisi tanpa stres  oksidatif,  senyawa  oleoresin,  gingerol  dan  shogaol secara  nyata  meningkatkan  proliferasi  sel  limfosit  B masing-masing dengan peningkatan tertinggi berturut-turut sebesar  456  dan  390  persen,  terjadi  pada  konsentrasi rendah (50  g/ml).
Kurva  respons  proliferatif  sel  limfosit  B  terhadap senyawa  oleoresin,  gingerol  dan  shogaol  bersifat  kubik (Gambar  1.),  dengan  persamaan  regresi  pada  Tabel  1. Artinya  setelah  nilai  optimal,  terjadi  penurunan  respons poliferatif  sel  B,  namun  masih  diatas  nilai  kontrol.  Pada kondisi  tanpa  stres  oksidatif  pengaruh  senyawa  oleoresin,
gingerol  dan  shogaol  bersifat  positif  sampai  taraf konsentrasi 200  g/ml.
Peningkatan  respons  proliferasi  sel    limfosit  B menunjukkan pertambahan jumlah sel limfosit B yang ada sehingga
memperkuat
pertahanan terhadap mikroorganisme  yang  setiap  saat  dapat  saja  masuk  ke dalam  tubuh,  dan  ini  berarti  efek  positif  terhadap kemampuan  mensintesis  antibodi.  Peningkatan  respons proliferatif sel limfosit B tersebut menunjukkan kemampuan memacu respons humoral senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol rimpang jahe secara in vitro .
Peningkatan  respons  proliferasi  tersebut    mungkin dijelaskan  oleh  dua  sebab  yaitu  1)  karena  sifat  fenol  dari tanaman  yang  mudah  terikat  pada  protein,  dan  2)  karena sifat  antioksidatif  fenol  sehingga  dapat  melindungi  limfosit dari  molekul  oksigen  reaktif.  Senyawa  fenol  tumbuhan memiliki  kemampuan untuk membentuk kompleks dengan protein melalui ikatan hidrogen (Suradikusumah, 1989). Hal ini  memungkinkan  pengikatan  senyawa  fenol  jahe  pada protein  reseptor  membran  limfosit  sehingga  mengaktivasi sistem    enzim  membran  yang  berperan  dalam  proliferasi. Gambar 2. menjelaskan kemungkinan mekanisme aktivasi sel limfosit B oleh senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol rimpang jahe.
Pada kultur limfosit, pengikatan komponen oleoresin jahe  pada  protein  reseptor  permukaan  sel    limfosit  B berakibat  pada  aktivasi  protein  G  yang  kemudian mengaktivasi  enzim  fofolipase  C.  Fosolipase  memecah fosfatidil inositol bifosfat (PIP 2 ) menjadi diasilgliserol (DAG) dan  inositol  trifosfat  (IP 3 ),  dua  molekul  yang  berperan dalam penandaan membran sel (Roitt, 1991)
Inositol  trifosfat  berdifusi  dari  membran  plasma  ke sitosol  dan  berikatan  dengan  protein  reseptor  pada permukaan sitoplasmik Calcium-sequestering Compartment . Pengikatan tersebut menyebabkan terbukanya  pintu  saluran  Ca 2+ dan  berakibat  pada peningkatan  konsentrasi  Ca 2+ sitosol.  Diasigliserol  dan peningkatan ion Ca 2+ mengaktivasi enzim protein kinase C. Protein  kinase  C  teraktivasi  memfosforilasi  atau memindahkan  gugus  fosfat  ke  residu  serin  atau  treonin spesifik  pada  protein  membran    sehingga  mengaktivasi pertukaran  Na + -H + dan  berakibat  pada  peningkatan  pH. Peningkatan  pH  tersebut  memberi  tanda    pada  sel  untuk melakukan proliferasi (Alberts et al., 1994). Pengikatan ion Ca 2+ pada kalmodulin menyebabkan perubahan konformasi protein  dan  mengaktivasi  enzim  protein  kinase  C  yang berperan  dalam  produksi  interleukin-2  (IL-2)  yang mengaktivasi sel limfosit B untuk berpoliferasi (Roitt, 1991).
Tabel 1. Persamaan regresi respons proliferatif sel B terhadap komponen oleoresin jahe pada dua kondisi kultur limfosit
Kondisi Kultur Komponen Oleoresin F-nyata R2 Persamaan Regresi Tanpa 1. Oleoresin 0,000 0,79 Y = 7,791 + 0,0246X-0,0009X 2 stres 2.  Gingerol 0,000 0,68 Y = 7,825 + 0,0218X-0,0001X 2 oksidatif 3. Shogaol 0,000 0,90 Y = 7,606 + 0,05884X-0,0073X 2 + (2,28x10-6)X 3 Stres 1. Oleoresin tn oksidatif 2.  Gingerol 0,000 0,89 Y = 8,0576-0,00023 X 2
3. Shogaol tn
tn = tidak nyata
Gambar 1. Kurva respons proliferatif sel limfosit B terhadap senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol pada dua kondisi kultur
----------  = kondisi stres oksidatif
_______  = kondisi tanpa  stes oksidatif
Gambar 2. Teori kemungkinan proses biokimia sel  limfosit B oleh komponen oleoresin jahe (dimodifikasi dari Roiit, 1991; Alberts et al., 1994)
Kemungkinan pengikatan komponen oleoresin jahe pada protein reseptor permukaan sel limfosit B masih perlu dibuktikan  antara  lain  dengan  penggunaan  antibodi  anti reseptor protein permukaan sel limfosit B. Jika anti reseptor protein  tersebut  berikatan  dengan  protein  reseptor  maka senyawa  fenol  tidak  dapat  berikatan  sehingga  proliferasi akan berkurang. Pengukuran aktivitas protein kinase C juga dapat dilakukan untuk menguji apakah senyawa fenol jahe tersebut mengaktivasi sistem enzim ini.
Kemampuan  antioksidatif  senyawa  fenol  jahe  yaitu gingerol  dan diarylheptanoid yang  tinggi  pada  konsentrasi rendah,  0,2  mM  (Nakatani  dan  Kikuzaki,  1993) memungkinkan senyawa tersebut untuk melindungi limfosit dari  radikal  bebas  endogen  sehingga  limfosit  tetap  dapat melakukan fungsi proliferatifnya.
Pada  kondisi  stres  oksidatif,  paraquat  yang ditambahkan  pada  kultur  limfosit,  melalui  reaksi  redoks dapat  membentuk  molekul  radikal  bebas  kation  bipiridil (PQ + ) atau anion superoksida (O 2 *). Radikal bebas tersebut dapat  merusak  lipid  dan  enzim  membran  sehingga mengganggu  penandaan  transmembran  dan  berakibat pada  gangguan  proliferasi  limfosit.  Pada  kondisi  tersebut senyawa  gingerol  secara  nyata  masih  meningkatkan respons proliferasi sel limfosit B. Respons bersifat kuadratik (Gambar  1),  dengan  persamaan  regresi  pada  Tabel  1 menunjukkan  bahwa  respons  proliferatif  tertinggi  sebesar 90  persen,  terjadi  pada  konsentrasi  rendah  (50  g/ml), setelah itu menurun dengan nilai lebih kecil dari kontrol.
Penurunan  respons  proliferasi  sel  limfosit    B tersebut  kemungkinan  ada  hubungannya  dengan  sifat antioksidatif  senyawa  gingerol  yang  semakin  menurun dengan  meningkatnya  konsentrasi  gingerol.  Pada konsentrasi  tinggi,  senyawa  fenol  jahe  tersebut  bersifat sebagai  prooksidan  (Cillard  et  al.,  1980;  Gordon,  1990) sehingga    mampu  mengoksidasi  fosfolipid  dan  protein membran  sel  serta  inaktivasi  membran  sel  (Davidson, 1983) yang berakibat gangguan proliferasi sel. Sebaliknya senyawa  oleoresin  dan  shogaol  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  respon  proliferasi  sel  limfosit  B.  Hal  ini kemungkinan  ada  hubungannya  dengan  kemampuan antioksidatif  shogaol    dan  komponen  fraksi  lainnya  yang lebih  rendah  dari  gingerol  sehingga  gingerol  lebih  dapat melindungi  komponen  membran  sel  limfosit  B  dari  efek toksik radikal bebas yang berasal dari paraquat.
Hasil  analisis  statistik    tersebut  diatas  membawa pada kesimpulan bahwa pada kondisi tanpa stress oksidatif senyawa  oleoresin,  gingerol  dan  shogaol  memberi  efek positif  terhadap  fungsi  proliferatif    sel  limfosit  B  terutama pada konsentrasi rendah. Sedangkan pada  kondisi stress oksidatif hanya senyawa gingerol yang memberi efek positif terhadap  fungsi  proliferatif  sel  limfosit  B,  dan  hanya  pada konsentrasi  rendah.  Hal  ini  menunjukkan  kemampuan imunogenik senyawa oleoresin, gingerol dan shogaol.

## KESIMPULAN
Pada  kondisi  tanpa  stres  oksidatif,  senyawa oleoresin,  gingreol,  dan  shogaol  jahe  meningkatkan proliferasi  sel  limfosit  B  secara  optimal  pada  konsentrasi rendah  (50  g/ml),  dengan  peningkatan  terbesar  456 persen.  Sedangkan  pada  kondisi  stres  oksidatif,  hanya senyawa  gingerol  pada  konsentrasi  rendah  (50  g/ml), yang meningkatkan proliferasi sel limfosit B, yaitu sebesar 90 persen.  Mekanisme induksi pada level reseptor seluler masih perlu diteliti lebih lanjut. Penelitian ini  menunjukkan kemampuan  senyawa  bioaktif    jahe  dalam  memperbaiki sistem imun atau kekebalan tubuh, terutama pada kondisi normal  tanpa  stres  oksidatif,  meskipun  demikian  potensi melindungi  sistem  imun  dalam  keadaan  stres  oksidatif cukup  nyata.  Hasil  penelitian  ini  mendukung  kepercayaan tradisional bahwa jahe bermanfaat bagi kesehatan dengan cara menaikkan daya tahan tubuh.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  disampaikan  pada  DIKTI  (Proyek URGE) yang telah mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alberts,  B.,  D.  Bray,  J.Lewis,  M.  Raff,  K.  Roberts  and J.D.  Watson.  1994. Molecular  Biology  of  the  Cell Garland Pub. Co New York .
Al-Khayat,  M.A.  and  G.  Blank.  1985. Phenolic  spice components sporostatics to B. substilis . J. Food Sci. 50: 972-974.
Chen, C., C.K. May and C.T. Ho. 1986. High performance liquid  chromatographic  determination  of  pungent gingerol  compound  of  ginger  ( Zingiber  officinale Roscoe ) J. of Food Sci. 51 (12) 1364-1365.
Cillard,  J.,  P.  Cillard  and  M.  Cormier.  1980. Effect  of experimental  factors  on  the  prooxidant  behavior  of tocopherol. J. Am. Oil Chem. Soc., 57:255-261
Davidson,  P.M.  1983. Phenolic  compounds.  In  :  Branen A.L.  and  P.M.  Davidson  (eds).  Antimicrobials  in Foods. Marcel Dekker, Inc., New  York .
Freshney,  R.I.  1994. Animal  cell  culture:  a  practical approach. IRL Press. Oxford, Washingtion D.C.
Gordon, M.H. 1990. The mechanism of antioxidant action in vitro. In : Hudson, B.J. F. (ed). Food Antioxidants. Elsevier Applied Science. London.
Kikuzaki, H. and N. Nakatani. 1993. Antioxidant effect of some  ginger  constituents.  J.  Food  Sci.  58:1407- 1410.
Nurahman,  F.R. Zakaria,  Sanjaya dan Sajuthi D. 1999 . Pengaruh konsumsi jahe terhadap perlindungan sel limfosit  dari  stress  oxidatif  pada  mahasiswa  di Pondok  Pesantren  Ulil  Albaab,  Kedung  Badak, Bogor.  Prosiding  Seminar  Nasional  Teknologi Pangan, PATPI& MENPANGHOR
Prangtimurti, E., F.R. Zakaria, S. Fardiaz dan D. Sajuthi.
1999 Efek  perlindungan  ekstrak  jahe  terhadap respon  imun  mencit  yang  diberi  perlakuan  stres oxidatif oleh pestisida paraquat. Prosiding. Seminar. Makanan Tradisional UGM, Yogyakarta
Roiit, I.M. 1991. Essential Immunology. Blackwell Scientific Publication, London .
Rose,  N.R.,  E.C.  de  Macario,  J.L.  Fahey,  H.  Friedman and  G.M.  Penn.  1994. Manual  of  Clinical Laboratory  Immunology.  American  Society  for Microbiology, Wanshington, D.C .
SAS  Institute.  1985 .  SAS  User’s  Guide:  Statistic.  SAS Institute, Cary, New York.
Suekawa,  M.A.,  K.  Ishige,  K.  Yuasa,  M.  Sudo,  M. Aburada  dan  E.  Hosoya.  1984 .  Pharmacological studies  on  ginger  I.  Pharmacological  actions  of pungent constituents, (6)-ginger and (6)-shogaol. J. Pharmacobiodyn 7 : 836-848.
Suradikusumah,  E.  1989 .  Kimia  Tumbuhan.  Depdikbud. Dirjen DIKTI, PAU.
Tang,  W.  and  G.  Einsenbrand.  1992 .  Chinese  Drugs  of Plant  Origin:  chemistry,  pharmacology  and  use  in traditional  and  modern  medicine.  Spring-Verlag, New York. Pp. 1011-1015.
Tejasari  dan  F.R.  Zakaria  2000 Sifat  fungsional  jahe: fraksi  1  dan  2  senyawa  bioaktif  oleoresin  rimpang jahe  ( Zingiber  officinale Roscoe)  menurunkan produk peroxidasi lipid membran sel limfosit secara in  vitro.  Prosiding  Seminar  Nasional  Industri Pangan,Vol II. PATPI, Bogor
Wikandari,  P.  1994. Pengembangan  Metode  Ekstraksi Dalam  Analisa  Gingerol  dari  Jahe  Segar  dan Beberapa Produk Jahe Olahan. Tesis Pascasarjana IPB. Bogor.
Zakaria,  F.R.,  L.  Darsana,  H.  Wijaya.  1996. Immunity enhancement  and  cell  protection  activity  of  ginger bud  and  fresh  on  mouse  spleen  lymphocyte. Symposium Non Nutritive Health Factors for Future Food.  Korean  Society  of  Foods  Science  and Technology (KoSFoST), September 28-30, 1996.
Zakaria, F.R., J. Wiguna dan A. Hartoyo. 1999. Konsumsi minuman  jahe  ( Zingiber  officinale Roscoe) meningkatkan aktivitas sel Natural Killer Mahasiswa pesantren  Ulil  Albab  di  Bogor.  Jur.  Teknol.  dan Industri Pangan X (2): 40-45.
Zakaria  ,  F.R.,  Bus  Irwan,  S.M.  Pramudya,  Sanjaya. 2000 .  Intervensi  sayur  dan  buah  pembawa  vitamin C dan E meningkatkan sistem imun populasi buruh di Bogor. Bul Teknol dan Industri Pangan XI, 2, 21- 17