## JBIO: JURNAL BIOSAINS
(The Journal of Biosciences) http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
POTENSI  ANTIBAKTERI  EKSTRAK n- HEXANA, ETIL ASETAT, ETANOL DAUN SARANG BANUA ( Clerodendrum fragrans VENT WILLD) TERHADAP Salmonella enterica
Murniaty Simorangkir, Bajoka Nainggolan, Saronom Silaban Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Medan Email korespondensi: murniatysimorangkir@unimed.ac.id
Diterima:  Mei 2019; Direvisi: Juli 2019; Disetujui: Agustus 2019

## ABSTRAK
Senyawa bioaktif antibakteri dari metabolit sekunder tanaman dapat diekstraksi menggunakan jenis pelarut  yang  sesuai  dengan  polaritas  dan  kelarutan  metabolit  sehingga  menghasilkan  jenis  ekstrak  yang berbeda  kepolarannya.  Tanaman  sarang  banua  ditemukan  di  daerah  Simalungun,  diidentifikasi  sebagai Clerodendrum fragrans Vent Willd telah digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional antara lain obat diare.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  jenis  ekstrak  daun  tumbuhan  lokal  sarang  banua ( Clerodendrum  fragrans Vent  Willd)  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri  terhadap Salmonella  enterica . Sampel daun C. Fragrans diperoleh dari desa Raya Usang, Kecamatan Dolok Masagal, Kabupaten Simalungun, Sumatera  Utara.  Serbuk  daun C.  Fragrans dimaserasi  dengan  pelarut  bertingkat  kepolarannya  sehingga diperoleh  ekstrak  etanol  (polar),  etil  asetat  (semi-polar)  dan n- heksana  (non-polar).  Masing-masing  jenis ekstrak  diuji  dengan  variasi  konsentrasi  10%,  5%,  2,5%,  dan  1,25%.  Kloramfenikol  digunakan  sebagai kontrol  positif dan  DMSO sebagai  kontrol negative.  Metode uji antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  aktivitas  antibakteri  (diameter  zona  hambat)  terbesar terhadap Salmonella enterica secara berurutan adalah ekstrak etanol 5% (polar) sebesar 14,0 mm, ekstrak n - heksan 10% (non-polar) sebesar 11,6 mm, dan ekstrak etilasetat 10% (semi-polar) sebesar 10,5 mm. Ekstrak etanol  daun C.  fragrans Vent  Willd    memiliki  potensi  antibakteri  yang  sangat  baik  terhadap Salmonella enterica. Hasil  penelitian  ini  dapat  digunakan  sebagai  bahan  pertimbangan  pemilihan  jenis  ekstrak  pelarut dalam penyediaan daun C. fragrans sebagai bahan baku obat antibakteri alami.
Kata  Kunci  :  Aktivitas  antibakteri;    Sarang  banua  ( Clrodendrum  fragrans Vent  Willd); Salmonella enterica, polaritas ekstrak , tumbuhan obat Indonesia .
ANTIBACTERIAL POTENTIAL OF n -HEXANA, ETHYL ACETATE, ETHANOL  EXTRACTS OF SARANG BANUA LEAF ( Clerodendrum fragrans Vent Willd) AGAINST Salmonella enterica

## ABSTRACT
Antibacterial bioactive compounds from plant secondary metabolites can be extracted using a type of solvent that is suitable for the polarity and solubility of the metabolite to produce a different type of extract of polarity. Sarang banua plant found in the Simalungun area, identified as Clerodendrum fragrans Vent Willd has  been  used  by  the  community  as  traditional  medicine  including  diarrhea  medicine.  This  study  aims  to determine the type of plant leaf extract of local sarang banua  ( Clerodendrum fragrans Vent Willd) which has the  potential  as  an  antibacterial  against Salmonella  enterica .  Samples  of C.  Fragrans leaves  were  obtained from  the  village  of  Raya  Usang  village,  Dolok  Masagal  sub-district,  Simalungun  regency,  North  Sumatra,
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.13157
Indonesia. C.  fragrans leaf powder macerated with its  polarity level solvent to obtain ethanol (polar), ethyl acetate  (semi-polar)  and n -hexane  (non-polar)  extracts.  Each  type  of  extract  was  tested  with  variations  in concentrations of 10%, 5%, 2.5%, and 1.25%. Chloramphenicol was used as a positive control and DMSO as a negative  control.  The  antibacterial  test  method  was  carried  out  by  the  disc  diffusion  method.  The  results showed that the greatest antibacterial activity (inhibition zone diameter) of Salmonella enterica sequentially were    5%  ethanol  extract  (polar)  (14.0  mm),  10% n -hexane  extract  (non  polar)(11.6  mm),  and  10% ethylacetate  extract  (semi  polar)(10.5  mm).  Ethanol  extract  of C.  fragrans Vent  Willd  leaves  has  excellent antibacterial  potential  against Salmonella  enterica .  The  results  of  this  study  can  be  used  as  material  for consideration of the selection of solvent extracts in the supply of C. fragrans leaves as raw material for natural antibacterial drugs.
Keywords:  Antibacterial  activity; Clerodendrum  fragrans Vent  Willd; Salmonella  enterica;  Polarity Extracts; Indonesian medicinal plants.
Pendahuluan Bakteri  merupakan  agen  penyebab infeksi  yang  menyebabkan  terjadinya  proses invasi  dan  pembiakan  mikroorganisme  di dalam  jaringan  tubuh.  Jumlah  penderita  yang diakibatkan terinfeksi bakteri semakin meningkat, khusunya di negara yang berkembang  termasuk  Indonesia  (Darsana, 2012; Febrina dkk., 2017). Salmonella enterica adalah  bakteri  gram-negatif  yang  memiliki flagellata  dan  berbentuk  tongkat,  yang menyebabkan  demam  enteric  :  demam,  sakit perut,  dan  diare  atau  sembelit  (Haraga et  al., 2008),  yang  merupakan  salah  satu  penyakit bakteremia  yang  paling  umum  di  Asia  Selatan (Qamar et  al .,  2014).  Penyakit  ini  membawa tingkat kematian hingga 30% (Efaa et al., 2011; Qamar et  al ., 2014), dan hingga 90%  kematian akibat  demam  enterik  terjadi  di  Asia  sendiri (Crump et  al., 2004;  Qamar et  al .,  2014).  Bagi penderita  selain  menyebabkan  penderitaan fisisk,  infeksi  enterik  juga  menyebabkan penurunan kinerja dan produktifitas, yang pada akhirnya akan mengakibatkan kerugian materil yang  berlipat-lipat  yang  berhubungan  dengan upaya  pengobatannya  (Wahyono,  2007). Pengobatan  dengan  menggunakan    kombinasi berbagai  antibiotik  dan  bahan-bahan  kimia lainnya,  menjadi  kontroversi  karena  dapat menimbulkan  gangguan  pada  jaringan  tubuh, alergi,  toksik,  resistensi  dan  harga  yang  relatif mahal (Nelwan, 2010; Amin, 2014).
Kemampuan fitokimia tanaman sebagai antibakteri  dapat  digunakan  untuk  pengujian infeksi  bakteri.  Khasiat  antibakteri  ekstrak daun,  biji  dan  akar  tanaman  terhadap  strain
bakteri  yang  diuji,  merekomendasikan  ekstrak tanaman  tersebut  digunakan  secara  efektif untuk  penyembuhan  penyakit  infeksi  akibat bakteri tertentu.  Antibakteri berbasis tanaman ini  memiliki  potensi  sebagai  obat  sangat  besar karena  efek  sampingnya    lebih  sedikit.  Dalam beberapa  tahun  terakhir,  penelitian  ke  arah obat  tradisional,  mencari  petunjuk  untuk mengembangkan  obat-obata  baru  yang  lebih baik melawan infeksi bakteri.
Eksplorasi  lebih  lanjut  antimikroba berbasis tanaman ini  sangat diperlukan saat ini sebagai  bahan  baku  obat  alami.  Lebih  dari ratusan  tanaman  digunakan  sebagai  obat tradisional  untuk  pengobatan  infeksi  bakteri dan  penyakit  lainnya  (Martin  &  Ernst.,  2003; Arokiyaraj et  al., 2012) . Kemampuan  fitokimia dari  tanaman  mampu  sebagai  antibakteri  yang dapat  digunakan  untuk  pengujian  infeksi bakteri.  Beberapa  penelitian  telah  dilakukan untuk  mencari  antibakteri  alami  dari  berbagai tanaman  obat.  Hasil  penelitian  Abakar et  al, (2017) ekstrak getah menunjukkan lebih efektif daripada  ekstrak  daun  terhadap  semua  uji mikroorganisme  dengan  menggunakan  teknik difusi.    Simorangkir,  dkk  (2013)  melaporkan ekstrak daun ranti hitam ( Solanum blumei Nees ex  Blume)  mempunyai  aktivitas    antibakteri terhadap Salmonella typhimurium. Flavonoid dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri,  mikrosom dan  lisosom  (Yunikawati, 2013;Febrina,dkk., 2017). Salah satu tumbuhan di  Indonesia  yang  berpeluang  sebagai antibakteri  adalah  sarang  banua,  yang  banyak
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.13157
ISSN 2460-6804 (online)
terdapat  di  daerah  Simalungun  maupun Tapanuli  Utara,  Sumatera  Utara.  Hasil determinasi  tumbuhan,  sarang  banua  adalah jenis Clerodendrum  fragrans Vent  Willd, termasuk  suku/famili  Verbenaceae.  Tumbuhan ini digunakan oleh masyarakat sebagai tanaman obat tradisional untuk sakit perut, demam, obat darah  tinggi,  obat  gula  dan  lain  sebagainya. Simorangkir, et al., (2018)  melaporkan bahwa ekstrak n -heksana  daun  sarang  banua ( C.fragrans Vent  Willd)  mengandung  metabolit sekunder  alkaloid,  steroid  dan  favonoid, sedangkan  pada  ekstrak  etil  acetat  terdapat alkaloid,  steroid,  saponin  dan  tannin  dan ekstrak etanol mengandung alkaloid, triterpenoid,  flavonoid,  saponin,  tannin  dan kuinon.  Venkatanarasimman, et  al (2012) melaporkan  bahwa  tanaman  lain  yang  satu famili dengan sarang banua yaitu Clerodendrum philippinum Schauer  mempunyai  aktivitas sebagai  antibakteri  karena  mengandung metabolit sekunder yang relatif tinggi.
Metabolit  sekunder  tanaman  dapat diperoleh  melalui  ekstraksi  menggunakan pelarut  berdasarkan  kelarutan  dan  polaritas senyawa  metabolit  sekunder  tanaman.  Pelarut n- heksan,  etilasetat  dan  etanol  mempunyai polaritas    yang  berbeda  yang  disebut  dengan non-polar,  semi  polar  dan  polar  dengan  nilai konstanta  dielektrik  masing-masing  (20°C) sebesar  1,90;  6,02  and  22,40  (Smallwood, 1996).  Pemilihan  pelarut  untuk  proses maserasi  berdasarkan  prinsip  kelarutan  “like dissolve  like”,  yang  berarti  senyawa  polar hanya  larut  pada  pelarut  polar,  sebaliknya untuk  senyawa  semi-polar  dan  non  polar. Pemilihan  pelarut  pada  proses  ekstraksi merupakan  salah  satu  faktor  penting  yang mempengaruhi  komposisi  kimia  dan  aktivitas biologis  ekstrak  tanaman  (Zang,  2015; Widyawati,  et  al.,  2014).  Pengujian  aktivitas antibakteri  dari  ekstrak  daun C.  fragrans yang menggunakan  jenis  pelarut  yang  berbeda kepolarannya  perlu  dilakukan.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  jenis  fraksi ekstrak  daun  tanaman  local C.  fragrans yang mempunyai  aktivitas  antibakteri  tertinggi dalam rangka mengembangkan potensi tumbuhan lokal C. fragrans sebagai bahan obat
infeksi  bakteri  alamiah.    Hasil  penelitian  ini dapat  digunakan  sebagai  bahan  pertimbangan pemilihan  jenis  ekstrak  pelarut  dalam penyediaan  daun C.  fragrans sebagai  bahan baku obat antibakteri alami.
Bahan dan Metode Penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi , Jurusan Kimia, FMIPA UNIMED.

## Bahan dan Alat
Sampel  daun  sarang  banua  diambil  dari  desa Raya  Usang,  Kecamatan  Dolok  Masagal, Kabupaten  Simalungun,  Sumatera  Utara.  Hasil determinasi  oleh  “Herbarium  Bogoriense” bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi – Bogor, sarang  banua  adalah Clerodendrum  fragrans Vent Willd,termasuk dalam family Verbenaceae. Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  Mueller  Hinton  Agar  (MHA)  (Oxoid, UK), akuades steril, bakteri Salmonella enterica ATCC  14028  (Laboratorium  Biologi  FMIPA UNIMED),  kapas,  kertas  whatman,  aluminium foil,  blank  disc  (Oxoid,  UK),  chloramphenicol disc  (Oxoid,  UK),  DEMSO ( dimethyl  sulfoxide) (Merck) dan beberapa solvent berderajat teknis untuk keperluan maserasi seperti n -heksan, etil asetat dan etanol 96%.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  cawan  petri  (Iwaky), vacum  rotary evaporator (Heidolph),  alat  -  alat  gelas  (Pyrex) untuk  ekstraksi,  cotton  buds,  mikropipet, jangka  sorong,  spreader, Vortex  (SBS),  laminar flow  (B-ONE  V  915  S),  inkubator  (Memmert) dan autoclave (TOMY ES-315).
Preparasi dan Ekstraksi Daun C. fragrans Sebanyak 4,0 kg daun sarang banua ( C. fragrans ) segar  dipisahkan  dari  tangkainya, dicuci  bersih,  ditiriskan,  dikeringkan  dalam ruangan kemudian digiling secara mekanik dan disaring  dengan  saringan  100  mesh,  sehingga diperoleh  serbuk  simplisia  daun  sebanyak 500,90  gr.  Sebanyak  500,0  gr  serbuk  simplisia daun C.  fragrans dimaserasi  dengan  pelarut yang bertingkat kepolarannya sehingga diperoleh  ekstrak n- heksana  (non  polar), ektraks  etil  asetat  (semipolar)  dan  ekstrak etanol(polar)(Simorangkir et al, 2018; Harborne, 1998) .
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.13157
ISSN 2460-6804 (online)
Uji Antibakteri U ji  antibakteri  menggunakan  metode difusi cakram yang mengacu pada metode Davis dan  Stout  (1971)  yang  dimodifikasi.  Daerah yang  terlihat  tidak  ditumbuhi  oleh  bakteri (zona bening) disebut daerah hambatan. Lebar daerah  hambatan  ini  tergantung  pada  daya serap  bahan  antibakteri  kedalam  agar  dan kepekaan  bakteri  terhadap  bahan  antibakteri tersebut (Misnadiarly dan Djajaningrat, 2014).
Pembuatan Media Selektif  Agar.
Media  pertumbuhan  bakteri  dibuat dengan melarutkan media selektif agar Mueller Hinton Agar (MHA) 19,0 gram ke dalam 500 mL akuades. Larutan tersebut dimasukkan kedalam autoclave  pada  tekanan  1,5  atm,  suhu  121 o C selama  15  menit,  dengan  tujuan  untuk melarutkan  media  dan  mensterilkan  media. Setelah  itu  larutan  tersebut  dimasukkan  ke dalam  cawan  petri  hingga  merata,  kemudian media  dibiarkan  hingga  mengering  dan memadat pada laminar flow.

## Peremajaan Bakteri
Bakteri Salmonella  enterica ATCC 14028  dibiakkan  pada  cawan  petri  yang  telah disterilkan, kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C. Kultur bakteri tersebut diambil sebanyak  satu  ose  dan  diinokulasi  ke  tabung reaksi  yang  berisi  15  mL  NaCl  fisiologis  0,9  % lalu  divortex  hingga  kekeruhannya  mencapai standar McFarland 0,5.
Uji  Difusi Cakram Masing-masing  ekstrak n -heksan  (non polar),  ekstrak  etil  asetat  (semi  polar),  dan ekstrak  etanol  (polar)  daun  sarang  banua dilarutkan  dalam  pelarut  DEMSO  untuk memperoleh konsentrasi 1,25 %, 2,5 %, 5 %, 10 %.  Sebagai  kontrol  positif  (Kp)  digunakan kloramfenikol  disk  30 𝜇𝑔 dan  kontrol  negatif pelarut DEMSO.
Bakteri Salmonella  enterica yang  telah diremajakan  dioleskan  ke  dalam  media  yang telah  padat  secara  merata  dengan  spreader.
Kemudian blank disk (cakram) dan kloramfenikol  disk  ditempelkan  pada  media. Pada  blank  disk    ditetesi  dengan  ekstrak  n-
heksan,  ekstrak  etil  asetat,  ekstrak  etanol dengan  konsentrasi  masing-masing  ekstrak 1,25 %; 2,5 %; 5 %, dan 10 % sebanyak 20 μL. Setelah  itu  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama 24 jam.
Tujuan  dari  perlakuan  tersebut  adalah untuk mengetahui daya hambat antibakteri dari fraksi  ekstrak  dengan  pelarut  yang  berbeda kepolaran  dan  konsentrasinya.  Daya  hambat antibakteri  ditunjukkan  oleh  diameter  zona bening  disekitar  cakram.  (Bintang,  1993; Simorangkir dkk., 2013; Davis dan Stout ,1971).

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  uji  antibakteri  dari  ekstrak n- heksana  (non  polar),  ekstrak  etil  asetat  (semi polar)  dan  ekstrak  etanol  (polar)  daun C. fragrans terhadap  bakteri Salmonella  enterica dengan  menggunakan  metode  difusi  cakram menunjukkan  daya  hambat  yang  berbeda (Gambar  1).  Daya  hambat  ekstrak C.  fragrans terhadap  bakteri Salmonella  enteric  dapat diukur  dari  besar  diameter  zona  bening  yang terbentuk  di  sekitar  cakram  (Gambar  1  dan Tabel 1).
Diameter  zona  bening  yang  terbentuk dimulai dari yang paling besar secara berurutan adalah  pemberian  ekstrak  etanol  10%  (polar) sebesar  14,4  mm,  ekstrak  etanol  5%  (polar) sebesar  14,0 mm, ekstrak n -heksan 10% (non- polar)  sebesar  11,6  mm, dan  ekstrak  etilasetat 10% (semi-polar) sebesar 10,5 mm.
Hal  ini    menunjukkan  bahwa  daya hambat ekstrak etanol (polar) daun C. fragrans lebih  besar  daripada    ekstrak n -heksan  (non polar)  dan  ekstrak  etilsetat  (semi  polar) terhadap Salmonella  enterica .  Ekstrak  etanol daun C.  fragrans Vent  Willd    memiliki  potensi antibakteri  yang  sangat  baik  terhadap Salmonella enterica. Hasil penelitian Simorangkir, dkk  (2018) menunjukkan bahwa pada  ekstrak  etanol C,  fragrans terdapat metabolit sekunder alkaloid, flavonoid, triterpenoid,  tannin  dan  saponin.  Hasil penelitian  yang  relevan  menunjukkan  bahwa flavonoid  (Cushnie  dan  Lamb,  2005),  senyawa alkaloid  (Ali et al,  2014),  senyawa  lain  seperti saponin  (Monte et  al .,  2014),  dan  senyawa terpenoid  (Rosyidah et  al .,  2010)  memiliki
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.13157
potensi  antibakteri  terutama  terhadap  bakteri patogen umum.
Gambar  1 .Hasil  Uji  Antibakteri  Ekstrak n - heksana  (a,b),  Ekstrak  Etil  Asetat (c,d)  dan  Ekstrak Etanol (e,f)  Daun C.  fragrans Terhadap Salmonella enteric.
Ekstrak  etanol  (polar)  daun C.  fragrans memiliki  potensi  antibakteri  yang  lebih  kuat terhadap Salmonella  enterica dibandingkan dengan  ekstrak n -heksan    (non  polar)  dan ekstrak  etilasetat  (semi  polar).    Ekstrak  etanol yang  bersifat  polar  lebih  banyak  mengandung senyawa  polar,  sedangkan  pada  ekstrak n - heksan banyak mengandung senyawa nonpolar dan  ekstrak  etilsasetat  banyak  mengandung senyawa  semipolar.  Senyawa  dalam  ekstrak polar  dapat  mudah  berpenetrasi  pada  dinding sel  bakteri  Gram  negatif  karena  adanya  gugus hidrofilik (Moat et al .,2002).
Dinding  sel  bakteri  Gram  negatif mengandung gugus protein yang disebut porin yang  membentuk  pori–pori  hidrofilik  pada lapisan  membran  luar  sel  sehingga  senyawa polar  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol  dapat lebih  mudah  menembus  dinding  sel  bakteri Salmonella enterica ( Geo et al ., 2005).
Salmonella  enterica termasuk  bakteri Gram  negatif. Senyawa  senyawa  polar  yang terdapat  pada  ekstrak  etanol C.  fragrans yang bersifat hidrofilik akan dapat menembus gugus protein transmembran  (porin) membrane luar dinding  sel  bakteri Salmonella  enterica yang bersifat hidrofilik, yang menyebabkan rusaknya porin membran sel bakteri.
Tabel  1. Diameter  Zona  Bening/Hambat Ekstrak  Daun C. fragrans  T erhadap Bakteri Salmonella enterica. No  Ekstrak Daun C.fragrans Konse ntrasi (%) Diameter Zona Hambat (mm) d 1 (mm) d 2 (mm ) D (mm) 1.  Ekstrak n - heksan Kp 23,2 22,3 23,2 Kn 0 0 0 1,25% 9,4 9,7 9,7 2,5% 9,8 9,3 9,8 5% 10,3 7,8 10,3 10% 11,4 11,6 11,6 2.  Ekstrak etilasetat Kp 24,0 23,2 24,0 Kn 0 0 0 1,25% 8,6 9,0 9,0 2,5% 9,8 10,8 10,8 5% 7,8 8,4 8,4 10% 10,1 10,5 10,5 3.  Ekstrak etanol Kp 22,7 25,4 25,4 Kn 0 0 0 1,25% 10,2 10,3 10,3 2,5% 9,2 11,3 11,3 5% 14,0 10,7 14,0 10% 14,4 13,9 14,4 Keterangan : d 1 :  diameter  1;  d 2: diameter  2;  D:  diameter  terluas; Kp: kontrol positif  ; Kn: kontrol negatif
Senyawa  terpenoid  yang  terdapat  pada ekstrak  etanol  bereaksi  dengan  porin  (protein transmembran) pada membran luar dinding sel bakteri  dan  membentuk  ikatan  polimer  yang
(a) (b) (c) (d) (e) (f)
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.13157
ISSN 2460-6804 (online)
kuat  sehingga  mengakibatkan  rusaknya  porin. Rusaknya  porin  yang  merupakan  pintu  keluar masuknya senyawa yang dibutuhkan sel bakteri akan  mengurangi  permeabilitas  dinding  sel bakteri  yang  mengakibatkan  sel  bakteri  akan kekurangan  nutrisi,  sehingga  pertumbuhan bakteri terhambat atau mati (Cowan, 1999 ).
Kesimpulan Ekstrak  etanol  (polar)  5,0  %  daun C. fragrans memiliki  potensi  antibakteri  yang paling  besar  (zona  hambat  14,0  mm) dibandingkan  ekstrak n -heksan  10%  (non- polar)  sebesar  11,6  mm  dan  ekstrak  etilasetat 10%  (semi-polar)  sebesar  10,5  mm  terhadap Salmonella enterica.
Hasil  penelitian  ini  dapat  digunakan sebagai bahan pertimbangan pemilihan pelarut pada proses ekstraksi daun C. fragrans sebagai bahan baku pembuatan obat antibakteri alami.

## Ucapan Terimakasih
Ucapan  terimakasih  ditujukan  kepada Direktorat  Riset  dan  Pengabdian  Masyarakat, Direktorat  Jenderal  Penguatan  Riset  dan Pengembangan,  Kementerian  Riset  Teknologi dan  Pendidikan  Tinggi,  sesuai  Kontrak Penelitian No. 027/UN33.8/LL/2018.

## Daftar putaka
Abakar,  H.,  Bakhiet,  S.,  and  Abadi,  R.  (2017). Antimicrobial  activity  and  minimum inhibitory concentration of Aloe  vera sap and  leaves  using  different  extracts. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry , 6(3):298-303. Ali,  M.A.,  Lafta,  A.H.,  and  Jabar,  S.K.  (2014). Antibacterial activity of alkaloidal compound  isolated  from  leaves  of Catharanthus  roseaus (L.)  against  multi- drug  resistant  strains. Research  in Pharmaceutical  Biotechnology. 5 (2):  13- 21.
Amin,  L.Z.  (2014).  Pemilihan  Antibiotik  yang Rasional. Medicinus , 27(3): 40-45. Arokiyaraj, S.,  Sripriya, N.,  Bhagya,  R.,  Radhika, B.,  Prameela,  L.,  and  Udayaprakash,  N.K.
(2012). Phytochemical screening, antibacterial  and  free  radical  scavenging
effects  of  Artemisia  nilagirica,  Mimosa pudica and Clerodendrum siphonanthus - An in-vitro study. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine , S601-S604. Bintang,  M.  (1993). Studi  antimikroba  dari Streptococcus  lactis  BCC2259.  Disertasi. Institut Teknologi Bandung, Bandung.
Crump,  J.A.,  Luby,  S.P.  and  Mintz,  E.D.  (2004). The  global  burden  of  typhoid  fever. Bull World Health Organ 5: 346-353.
Cushnie, T.P., & Lamb, A.J. (2005). Antimicrobial activity  of  flavonoids. International Journal  of  Antimicrobial  Agents, 26:  343– 356.
Darsana,  I.G.O.,  Besung,  I.N.K.  and  Hapsari,  M. (2012). Potensi daun binahong ( Anredera cordifolia (Tenore)  steenis)  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli secara  in  vitro. Jurnal Indonesia Medicus Veterinus, 1:337-351. Davis,  W.W.  and  Stout,  T.T.  (1971).  Disc  Plate Method  of  Microbiological  Antibiotic Assay. Microbiology, 22:659-665. Effa,  E.E.,  Lassi,  Z.S.,  Critchley,  J.A.,  Garner,  P., Sinclair,  D.,  Olliaro,  P.L  and  Bhutta,  Z.A. (2011).  Fluoroquinolones  for  treating typhoid  and  paratyphoid  fever  (enteric fever). Cochrane  Database  Syst    Rev 10 : CD004530.
Febrina, L., Riris, I.D. dan Silaban, S. (2017). Uji aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dan  antioksidan  dari  ekstrak  air tumbuhan  binara  ( Artemisia  vulgaris  L. ). Jurnal Pendidikan Kimia. 9(2):311-317. Haraga,  A,  Ohlson,  M.B.  and  Miller,  S.I.  (2008).
Salmonellae interplay with host cells. Nat Rev Microbiol , 6(1):53-66.
Harborne,  J.B.  (1998). Phytochemical  methods: a  guide  to  modern  techniques  of  plant analysis. 3rd  edition .  Chapman  &  Hall. London, UK, 302. Martin,  K.W.  and  Ernst,  E.  (2003).  Herbal medicines  for  treatment  of  bacterial infections:  a  review  of  controlled  clinical trials. J Antimicr Chemother , 51:241-246. Misnadiarly dan Djajaningrat. (2014). Mikrobiologi untuk Klinik  dan Laboratorium. Jakarta: Rineka
Cipta.
Moat, A.G., Foster, J.W. and Spector, M.P. (2002). Microbial  Physiology  Fourth  Edition .  New York: Wiley-Liss.
Monte,  J.,  Abreu,  A.C.,  Borges,  A.,  Simoes,  L.C. and  Siomes,  M.  (2014).  Antimicrobial Activity  of  Selected  Phytochemicals against Escherichia coli and Staphylococcus aureus and Their Biofilms.
Pathogens . 3: 473 – 498. Nelwan,  R.H.  (2010). Pemakaian  Antimikroba Secara Rasional Di Klinik . Jakarta : Interna Publishing. Cetakan kedua:2896-2900.
Qamar, F. N., Azmatullah, A., Kazi, A. M., Khan, E. and  Zaidi,  A.  K.  M.  (2014).  A  three-year review  of  antimicrobial  resistance  of Salmonella  enterica  serovars  Typhi  and Paratyphi  A  in  Pakistan. The  Journal  of Infection  in  Developing  Countries ,  8:  981- 986.
Rosyidah, K., Nurmuhaimina., Komari. dan M.D.
Astuti.  (2010).    Aktivitas  Antibakteri
Fraksi  Saponin  dari  Kulit  Batang
Tumbuhan  Kasturi. Mangifera casturi Bioscientiae , 7 (2) : 25-31.
Simorangkir, M., Sitepu, M. dan Simanjuntak, P. (2013).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun  Sarang  banua  ( Solanum  Blumei Nees  Ex  Blume)  Terhadap Salmonella typhimuriu. Prosiding SNYuBe, 382-389. Simorangkir,  M.,  Saragih,  S.H.,  Nainggolan,  B. and  Silaban,    S.  (2018).  Secondary Metabolites Phytochemical  Analysis of n - Hexane,  Ethyl  Acetate  And  Ethanol Extracts of  Sarang Banua ( Clerodendrum Fragrans Vent  Willd)  Leaves.  In  Book  of Program  of  The  2 nd International Conference  on  Innovation  in  Education,
Science and Culture (ICIESC), Medan City Indonesia, pp.6.
Smallwood,  M.  (1996).  Handbook  of  Organic Solvent  Properties,  John  Wiley  &  Sons Inc., New York, P.7, 65, 227.
Venkatanarasimman,  B.,  Rajeswari,  T.  and Padmapriya,  B.  (2012).  Antibacterial Potential  of  Crude  Leaf  Extract  of Clerodendrum philippinum Schauer .
International Journal of Pharmaceutical & Biological Archives, 3(2):307- 310 Wahyono,    H.    (2007). Peran    Mikrobiologi Klinik    Pada    Penanganan    Penyakit    In- feksi. Makalah  Pidato  Pengukuhan  Guru Besar  Dalam  Ilmu  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro. Widyawati, P.S., Budianta, T.D.W., Kusuma,  F.A. and  Wijaya,  E.L.  (2014).  Difference  of solvent polarity to phytochemical content and antioxidant activity of Pluchea indicia Less leaves extracts . International Journal of  Pharmacognosy  and  Phytochemical Research , 6 (4): 850-855.
Zang,  Q..  (2015).  Effects Of  Extraction  Solvents On  Phytochemicals  And  Antioxidant Activities  Of  Walnut  ( Juglans  Regia L.) Green Husk Extracts. European Journal of Food Science and Technology , 3 (5):15-21.