OPTIMASI KOMBINASI EKSTRAK BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia L) DAN DAUN MAHKOTA DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) PADA FORMULA SABUN TRANSPARAN DENGAN METODE FACTORIAL DESIGN
Intan Martha Cahyani 1) , Bekti Nugraheni 1) , Suwarmi 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi "Yayasan Pharmasi" Semarang

## INTISARI
Ekstrak  buah  mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa  masing-masing  mengandung  senyawa yang  dapat  berkhasiat  sebagai  antibakteri Staphylococcus  Aureus (bakteri  penyebab  jerawat), namun  pada  konsentrasi  yang  tinggi.  Kombinasi  keduanya  diharapkan  dapat  meningkatkan efisiensi  dan  efektivitas penggunaan  jika diformulasikan  dalam  bentuk  sediaan  sabun  transparan. Pemilihan  bentuk  sediaan  sabun  transparan  didasarkan  pada  alasan acceptabilitas .  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penggunaan masing-masing maupun interaksi ekstrak buah mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa  pada  diameter  zona  bening  uji  aktivitas  antibakteri  dengan metode sumuran serta metode dilusi dengan parameter jumlah koloni, selanjutnya dapat ditetapkan perbandingan  penggunaan  kedua  ekstrak  yang  mamiliki  aktivitas  antibakteri  yang  optimal.  Hasil pengujian menyatakan baik penggunaan masing-masing dan kombinasi dapat meningkatkan zona bening  sesuai  pada  persamaan  Y  = 0,811  +  0,011 A  + 0,007  B  +  1,56. 10 -5 AB,  pada parameter jumlah koloni juga memberikan hasil yang sama Y = 42,781  – 0,316 A – 0,228 B + 0,006 A B. Kombinasi  optimal  didapatkan  konsentrasi  30%  ekstrak  buah  mengkudu  dan  40%  ekstrak  daun mahkota  dewa.  Uji  aktivitas  antibakteri  sabun  transparan  kombinasi  ekstrak  buah  mengkudu  dan daun mahkota dewa dengan kombinasi optimal menghasilkan diameter zona bening sebesar 2,509 cm.
Kata  kunci  :  ekstrak  buah  mengkudu,  ekstrak  daun  mahkota  dewa,  Optimasi,  sabun transparan.

## ABSTRACT
Extracts of mengkudu fruit and mahkota dewa leaf each contain compounds that can be efficacious  antibacterial  Staphylococcus  Aureus  (acne-causing  bacteria),  but  at  high concentrations. The combination of both is expected to improve the efficiency and effectiveness of the use if the dosage form is formulated in a transparent soap. Selection of dosage forms based on a transparent soap acceptabilitas reasons. This study aims to determine the effect of the use of each and  interactions  extract  of  mengkudu  fruit  and  mahkota  dewa  leaf  in  diameter  clear  zone antibacterial activity test by the method of pitting and dilution method with a parameter number of colony  can  then  be  determined  comparison of  the  two  extracts  were  having  antibacterial  activity optimum.  The  test  results  stated  good  use  of  each  and  combinations  can  enhance  the  clear  zone according to the equation Y = 0.811 + 0.011 + 0.007 B + A 1.56. 10-5 AB, the parameters of the number  of  colonies  also  give  the  same  result  Y  =  42.781  to  0.316  A  -  0.228  0.006  A  B  +  B. Optimal  combination  obtained  extract  concentration  of  30%  mengkudu  fruit  extract  and  40% mahkota  dewa  leaf  extract.  Test  the  antibacterial  activity  of  a  combination  of  transparent  soap mengkudu fruit and mahkota dewa leaf extracts with an optimal combination produces a clear zone diameter of 2.509 cm.
Keywords : extracts of mengkudu fruit, extract of mahkota dewa, Optimization, transparent soap.
PENDAHULUAN Flavonoid  merupakan  salah  satu senyawa  metabolit  sekunder  yang  memiliki aktivitas antibakteri. Selain flavonoid,
beberapa  penelitian  menyatakan  alkaloid  dan saponin yang terkandung dalam tanaman juga
banyak  digunakan  sebagai  antibakteri.  Buah mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa  secara empiris  digunakan  sebagai  antibakteri  yang dibuktikan  dengan  adanya  flavonoid,  alkaloid dan saponin didalamnya. Buah mahkota dewa merupakan salah satu tanaman berkhasiat obat yang  digunakan  untuk  mengobati  penyakit kulit  (Winarto,  2003).  Pada  penelitian  yang dilakukan oleh Saptarini et al. , (2012), ekstrak etanol  buah  mahkota  dewa  pada  konsentrasi 3,125%  dengan  metode  ekstraksi  maserasi diketahui  memiliki  daya  antibakteri  sehingga mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus epidermidis .
Penggunaan  dalam  bentuk  ekstrak cenderung  pada  konsentrasi  tinggi  karena masih  terdapat  kandungan  senyawa  lain  yang tidak  berfungsi  sebagai  antibakteri  sehingga senyawa  aktif  pada  proporsi  yang  lebih rendah. Hal tersebut yang menjadi alasan pada penelitian  ini  digunakan  kombinasi  ekstrak buah  mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa. Selain  itu  tidak  semua  senyawa  aktif  yang memiliki  aktivitas  antibakteri  terdapat  dalam satu tanaman sehingga penggunaan kombinasi diharapkan mampu meningkatkan efektivitasnya. Optimasi merupakan cara yang tepat untuk menentukan perbandingan penggunaan kombinasi sehingga menghasilkan aktivitas antibakteri yang optimal.
Sabun  mandi  merupakan  bahan pembersih  tubuh  dibuat  dengan  reaksi  antara senyawa  natrium  dengan  asam  lemak  dari minyak  nabati  atau  lemak  hewani  (Badan
Standardisasi Nasional, 1994). Pada penelitian ini dibuat sabun transparan karena penampilannya  lebih  menarik  dibandingkan dengan jenis sabun yang lain serta menghasilkan busa yang  lebih  lembut di  kulit karena mengandung bahan-bahan yang berfungsi sebagai pelembab. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  efektivitas  antibakteri  ekstrak buah  mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa, pengaruh penggunaan masing-masing maupun kombinasi  pada  karakteristik  fisik  dan aktivitas  antibakteri  sabun  transparan  serta perbandingan optimal ekstrak buah mengkudu dan daun mahkota dewa.

## METODOLOGI PENELITIAN BAHAN
Bahan  pembuatan  ekstrak  :  buah mengkudu,  daun  mahktota  dewa  dan  etanol 70%.  Bahan  uji  KLT  flavonoid  dan  tanin butanol : asam asetat : air (4:1:5) dan uji KLT saponin  kloroform  :  methanol  :  air  (64  :  50  : 10).  Bahan  pembuatan  sediaan  meliputi Minyak  kelapa  (merk  Barco),  Asam  stearat, Gliserin, Gula pasir, TEA, NaCl, Asam sitrat, Etanol  96%,  NaOH  dan  aquadest.  Bahan untuk pengujian sediaan meliputi larutan NaCl fisiologis,  media  Nutrient  Agar  (NA)  dan Nutrient  Broth  (NB)  serta  biakan  murni bakteri Staphylococcus aureus .

## ALAT
Alat  yang  digunakan  untuk  uji pendahuluan dan kualitatif ekstrak secara KLT :  chamber,  pipa  kapiler  dan  plat  tetes.  Alat pembuatan  ekstrak  dan  sediaan  meliputi  alat- alat gelas, neraca digital, waterbath, hot plate magnetic  stirrer ,  cawan  porselen,  mortir  dan stamper,  termometer,  wadah  dan  cetakan sabun  dari  plastik.  Alat  untuk  pengujian karakteristik  fisik  dan  kimia  pada  sediaan seperti  pH  meter,  LAF,  lampu  UV  254  nm, inkubator,  pipet  ukur,  cawan  petri  dan  jarum ose.

## JALANNYA PENELITIAN
Tahap awal penelitian adalah pembuatan  ekstrak  buah  mengkudu  dan  daun mahkota  dewa  dengan  metode  remaserasi menggunakan  pelarut  etanol  70%  selama  5 hari.  Ekstrak  yang  diperoleh  dilakukan skrining fitokimia untuk mengetahui kandungan  senyawa  aktif  kemudian  diuji aktivitas  menggunakan  media  NA  sehingga dapat  diketahui  Konsentrasi  Hambat  Minimal (KHM)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus . Dilakukan optimasi kombinasi ekstrak buah  mengkudu  dan  daun  mahkota  dewa dengan  metode factorial  design .  Rancangan optimasi  berdasarkan softwaredesign  expert dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  I. Rancangan  Optimasi  KonsentrasiEkstrak  Buah  Mengkudu  dan  Ekstrak  Daun  Mahkota Dewa Menggunakan Design Expert Dengan Metode Factorial Design Ekstrak Rancangan I II III IV Daun Mahkota Dewa (%) 30 50 30 50 Buah Mengkudu (%) 10 10 50 50 Parameter  optimasi  yang  dilakukan  adalah hasil uji aktivitas antibakteri dengan
menggunakan  dua  metode  yang  pertama metode  difusi  sumuran  agar  dengan  hasil diameter  zona  bening    dan  metode  kedua adalah  dilusi.  Hasil  uji  dengan  metode  dilusi ditunjukkan  dengan  jumlah  koloni  yang
tumbuh  pada  media  uji,  semakin  banyak koloni  yang  tumbuh  menggambar  semakin rendah  aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak. Perbandingan  konsentrasi  optimal  ekstrak buah mengkudu dan daun mahkota dewa yang diperoleh  dari  hasil  optimasi  dibuat  sediaan sabun transparan.
Formula Sabun Transparan Ekstrak Buah Mengkudu dan Ekstrak Daun Mahkota Dewa Ekstrak buah mengkudu 10-50% Ekstrak daun mahkota dewa 30-50% Asam stearat 12,5 g Minyak kelapa ( Coconut Oil ) 10% Larutan NaOH 20% 12,5 ml Etanol 96% 25 ml Gula Pasir 15 g Gliserin 15 g TEA 10 ml Asam sitrat 100 mg NaCl 100 mg Pembuatan  Sabun  Transparan  Ekstrak Buah  Mengkudu  dan  Ekstrak  Daun Mahkota Dewa
Minyak  kelapa  dipanaskan    di  atas hot plate  magnetic  stirrer pada  suhu  60 o C-70 o C.Asam  stearat  dilelehkan  diatas  waterbath pada  suhu  60 o C-70 o C,  dimasukkan  dalam minyak  kelapa  panas  dan  diaduk  homogen pada suhu 60ºC-70ºC (hasil fraksi lemak).
Fraksi  alkali  (larutan  NaOH  20%)
dimasukkan  sedikit  demi  sedikit  ke  dalam fraksi lemak hingga terbentuk reaksi saponifikasi  (penyabunan),  lalu  dimasukkan etanol  96%.  Aduk  homogen  pada  suhu  70º- 80ºC  sampai  semua  bahan  tercampur  dengan sempurna.Bahan  tambahan  seperti  gliserin, gula  pasir,  TEA,  asam  sitrat  dan  NaCl, ditimbang  dan  dimasukkan  ke  dalam  hasil saponifikasi,  diaduk  secara  kontinyu  hingga didapat  capuran  homogen  dan  transparan kemudian  suhu  pemanasan  diturunkan  dan didinginkan sampai suhu mencapai 40 o C.
Ekstrak  kental  buah    mengkudu  dan daun  mahkota  dewa  ditimbang  perbandingan sesuai  hasil  optimasi,  dimasukkan  sedikit demi  sedikit  ke  dalam  basis  sabun  transparan dan diaduk perlahan hingga homogen.
Tahap  berikutnya  adalah  pencetakan. Sabun  transparan  ekstrak  buah  mahkota dewa yang  terbentuk  dilakukan  pencetakan  ke dalam cetakan plastik bersih.didiamkan selama 24 jam agar sabun mengeras kemudian dikeluarkan dari cetakan (Hambali et al ., 2005 ).
Lakukan uji antibakteri terhadap sabun transparan  yang  dihasilkan  dengan  prosedur yang  sama  seperti  yang  dilakukan  pada  uji antibakteri  ekstrak  buah  mengkudu  dan ekstrak daun mahkota dewa.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  pendahuluan  ekstrak  buah mengkudu  mengandung  flavonoid,  alkaloid dan  saponin  sedangkan  ekstrak  daun  mahkota dewa  memberikan  hasil  positif  terhadap  uji
flavonoid,  tanin,  alkaloid  dan  saponin.  Hasil tersebut  juga  dibuktikan  dengan  skrining fitokimia  dengan  menggunakan  Kromatografi
Lapis Tipis (KLT) yang memberikan
informasi  kandungan  senyawa  aktif  yang berpotensi sebagai agen antibakteri.
Optimasi dengan design expert menggunakan metode factorial design
penggunaan  ekstrak  buah  mengkudu  dengan level  minimal  10%  dan  level  maksimal  50% serta ekstrak daun mahkota dewa dengan level minimal  30%  dan  level  maksimal  50%
merupakan  tahap  selanjutnya  yang  dilakukan
untuk  dapat  mengetahui  bagaimana  pengaruh masing-masing  ekstrak  terhadap  aktivitas antibakteri dan mengetahui konsentrasi optimal  kombinasi  ekstrak  buah  mengkudu dan ekstrak daun mahkota dewa.
Parameter  optimasi  yang  dilakukan adalah    hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dengan menggunakan  dua  metode  yang  pertama metode difusi sumuran agar dan metode kedua adalah  dilusi.  Hasil  uji  dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel  II. Hasil  Uji  aktivitas  antibakteri  kombinasi  ekstrak  buah  mengkudu  dan  daun  mahkota dewa KOMBINASI EKSTRAK Rerata Metode Difusi (Diameter zona bening (cm)) Metode Dilusi (Jumlah koloni) 30 % + 10 % 1,192 31.5 50 % + 10 % 1,360 25.5 30 % + 50 % 1,511 24.25 50 % + 50 % 1,740 19.5 Perhitungan  optimasi  menggunakan software design  expert dengan  metode factorial design . Hasil optimasi pada diameter zona bening dijelaskan pada persamaan 1.
Y  =  0,811  +  0,011  A  +  0,007  B  +  1,56. 10 -5 AB ................. (1).
Persamaan (1) menunjukkan bahwa penggunaan kombinasi kedua ekstrak memiliki pengaruh lebih rendah dibandingkan dengan  pengaruh  masing-masing  ekstrak,
terlihat  dengan  koefisien  AB  lebih  rendah dibandingkan dengan koefisien A dan koefisien  B.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan karena  adanya  interaksi  kandungan  senyawa dari  kedua  ekstrak  yang  antagonis  sehingga tidak  berpotensi  sebagai  antibakteri  pada penggunaan kombinasi. Pengaruh paling besar terhadap  daya  hambat  adalah  ekstrak  daun mahkota dewa, disebabkan karena pada positif mengandung  alkaloid,  flavonoid,  saponin, tanin, antrakinon dan terpenoid bebas sedangkan  ekstrak  buah  mengkudu  hanya mengandung alkaloid, flavonoid dan terpenoid bebas  sehingga  memiliki  potensi  antibakteri yang  lebih  rendah  dibandingkan  ekstrak  daun mahkota dewa.
Hasil optimasi  jumlah  koloni dari uji aktivitas  dengan  metode  dilusi  dapat  dilihat pada persamaan (2).
Y = 42,781 – 0,316 A – 0,228 B + 0,006 A B .............. (2)
Berdasarkan  persamaan  (2)  didapatkan  hasil bahwa  pengaruh  ekstrak  daun  mahkota  dewa menurunkan  jumlah  koloni  lebih  besar  dari pada ekstrak buah mengkudu dan kombinasinya. Kombinasi ekstrak buah mengkudu  dan  ekstrak  daun  mahkota  dewa memiliki harga koefisien + 0,006 berarti dapat meningkatkan  jumlah  koloni  namun  sangat kecil  sehingga  tidak  signifikan  dan  dapat disimpulkan  bahwa  penggunaan  kombinasi ekstrak  berpotensi  terhadap  penghambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus Aureus . Hasil  optimasi  diperoleh  kombinasi ekstrak buah mengkudu 30% dan ekstrak daun mahkota  dewa  40  %,  kemudian  kombinasi optimal  dibuat  sediaan  sabun  transparan menggunakan  formula  yang  telah  diverifikasi dapat  menghasilkan  sabun  transparan  yang memenuhi syarat. Hasil uji aktivitas antibakteri  sabun  transparan  ekstrak  buah mengkudu  30%  dan  ekstrak  daun  mahkota
dewa 40  % didapatkan zona  bening 2,509 cm dengan kontrol positif 2,838 cm

## KESIMPULAN
1. Berdasarkan perhitungan
optimasi
menggunakan software  design  expert dengan metode factorial
design
didapatkan proporsi optimal ekstrak buah mengkudu  30%  dan  ekstrak  daun mahkota dewa 40%.
2. Hasil  uji  antibakteri  sediaan  sabun ekstrak  buah  mengkudu  dan  daun mahkota dewa berpotensi sebagai antibakteri Staphylococcus Aureus
dibuktikan dengan terbentuknya diameter zona  bening  2,509  mendekati  diameter zona bening kontrol positif 2,838.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kami  ucapkan  kepada Dinas  Pendidikan  Jawa  Tengah  yang  telah menjadi  fasilitator  (pemberi  dana  penelitian) sehingga  penelitian  dosen  muda  dengan  judul “Optimasi Kombinasi Ekstrak Buah Mengkudu (Morinda  citrifolia L)  dan  Daun
mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Pada  Formula  Sabun  Transparan dengan  Metode Factorial  Design ”  dapat berjalan dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Standardisasi  Nasional,  1994,  SNI  06- 3532-1994,
Standar  Mutu  Sabun Mandi, Dewan Standardisasi
Nasional, Jakarta.
Hambali,  E.,  Suryani,  A.,    dan  Rivai,  M.,
2005, Membuat  Sabun  Transparan Untuk  Gift  dan  Kecantikan, Penebar Swadaya, Jakarta.
Saptarini,  O.,  Perawati.,  dan  Hartanto,  Y.,
2012,  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl)terhadap Staphylococcus epidermidis Penyebab Jerawat.
Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi, Surakarta.
Winarto,  W.P.,  2003, Mahkota  Dewa: Budidaya  dan  Pemanfaatan  untuk Obat, Penebar Swadaya, Jakarta.