## KUALITAS BAKTERIOLOGIS MINUMAN THAI TEA PINGGIR JALAN: STUDI KASUS EMPAT KECAMATAN SEKITAR KAWASAN INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA DI PROVINSI LAMPUNG
Bacteriological Quality Of  Roadside Thai Tea Beverages : Case Study Of Four District Around the Sumatera Institute Of Technology Area in Lampung Province
Muhammad Asril 1 , Ika Agus Rini 1 , Revi Agustin 2 , Tarra Ivanka 2 , Azisa Nabila Putri 2
1 Institut Teknologi Sumatera/ Program Studi Biologi
2 Institut Teknologi Sumatera/ Mahasiswa Program Studi Biologi Email: m.asril@bi.itera.ac.id
Diterima: 9 Maret 2021; Direvisi: 18 Mei 2021; Disetujui: 29 Juni 2021

## ABSTRACT
Beverages that are widely sold on the roadside are very easily contaminated by various types of bacteria that are harmful to health. This study aims to detect the presence of bacteria in Thai tea drinks sold on the roadside  along  the  Sumatran  Institute  of  Technology  (ITERA)  area. The  research  design  was  cross- sectional using a descriptive approach which was carried out in October 2019. Detection of bacteria using specific medium Desoxycholate Lactose Sucrose (DCLS) and Cystine Lactose Electrolyte Deficient (CLED) from 25 samples located in 4 villages around the ITERA area. A total of 25 samples were tested, all Thai tea samples were contaminated with bacteria and did not qualify as a drink fit for consumption. Thai tea from  Tanjung  Happy  (TS)  District  has  the  highest  Enterobacteriaceae  contamination,  namely  55-65x10 4 cfu/ml, namely Klebsiella sp. (30x10 5 cfu/ml), E. coli (15x10 5 cfu/ml), Salmonella sp. (15x10 5 cfu/ml) and Proteus  sp.  (15x10 5 cfu/ml).  The  presence  of  these  bacteria  is  an  early  indication  of  the  potential  for disease  and  the  seller's  lack  of  personal  hygiene  which  includes  water  sources  and  raw  materials  for making Thai tea. Therefore, knowledge to sellers regarding overall cleanliness needs to be improved .
Keywords: Beverages, bacteria Contaminant, Lampung Province, Thai tea

## ABSTRAK
Berbagai  jenis  minuman  yang  banyak  dijual  dipinggir  jalan  sangat  mudah  terkontaminasi  oleh  berbagai jenis bakteri yang membahayakan kesehatan. Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi keberadaan bakteri dalam  minuman Thai  tea yang  dijual  dipinggir  jalan  sepanjang  kawasan  Institut  Teknologi  Sumatera (ITERA). Disain penelitian adalah potong lintang menggunakan pendekatan deskriptif yang dilakukan pada bulan  Oktober  2019. Deteksi  bakteri  menggunakan  medium  spesifik Desoxycholate  Lactose  Sucrose (DCLS)  dan Cystine  Lactose  Electrolyte  Deficient (CLED) dari  25  sampel  yang  berada  di  4  kelurahan  di sekitar  wilayah  ITERA.  Sebanyak  25  sampel  yang  diuji,  seluruh  sampel Thai  tea terkontaminasi  oleh bakteri  dan  tidak  memenuhi  syarat  sebagai  minuman  layak  konsumsi. Thai  tea yang  berasal  dari Kecamatan Tanjung Senang (TS) memiliki cemaran Enterobacteriaceae tertinggi yaitu 55-65x10 4 cfu/ml, yaitu Klebsiella sp. (30x10 5 cfu/ml), E. coli (15x10 5 cfu/ml), Salmonella sp. (15x10 5 cfu/ml) dan Proteus sp. (15x10 5 cfu/ml). Keberadaan bakteri ini merupakan indikasi awal adanya potensi munculnya penyakit dan  rendahnya  kebersihan  pribadi  penjual  yang  melingkupi,  sumber  air  dan  bahan  baku  pembuatan Thai tea. Pengetahuan penjual terkait kebersihan secara keseluruhan perlu ditingkatkan.
Kata kunci : Minuman , bakteri kontaminan, Provinsi Lampung, Thai tea

## PENDAHULUAN
Jenis  minuman    yang  dikonsumsi oleh  masyarakat  umum  terdapat  dalam berbagai    jenis,  salah  satunya  minuman dengan  berbahan  teh.  Saat  ini,  minuman  teh semakin beragam cara penyajiannya,
dimodifikasi menjadi berbagai macam minuman  yang  digemari  oleh  masyarakat salah  satunya  adalah Thai  tea .  Inovasi minuman  ini  bertujuan  untuk  meningkatkan nilai  jual  (Handayani,  Sundu  and  Dawia, 2017). Thai  tea merupakan  minuman  khas Thailand  berbahan  dasar  teh  hitam  yang
ditambahkan dengan gula, kental manis/krimer  dan  es,  yang  diseduh  dengan air  pada  suhu  88-100 0 C  selama  3-5  menit. Penyeduhan  pada  suhu  dan  waktu  tersebut diharapkan untuk menghindari adanya bakteri  dalam  air  yang  digunakan  selama pembuatan Thai tea (Mawarni et al. , 2019) .
Pedagang  minuman Thai  tea banyak ditemukan di pinggiran jalan sekitar Kampus Intitut  Teknologi  Sumatera  (ITERA).  Empat Kelurahan  disekitar  ITERA  yaitu  Korpri (Kecamatan  Sukarame),  Way  Hui  (Kec.  Jati Agung),  Way  Kandis  (Kec.Tanjung  Senang) dan  Way  Halim  (Kec.  Way  Halim).    Empat Kelurahan  tersebut  merupakan  daerah  yang banyak  ditemukan  penjual Thai  tea karena didominasi  oleh  mahasiswa  dan  anak-anak sekolah.  Akibatnya,  perlu  adanya  perhatian khusus  terhadap  kebersihan  dan  keamanan produk Thai  tea dari  cemaran  mikroba.  Hal ini  dikarenakan  minuman Thai tea ini  dibuat dengan  menggunakan  bahan  air  dan  es  yang merupakan  salah  satu  sumber  kontaminasi bakteri coliform (Ariefiansyah,  Suharti  and Anas,  2015).  Pengolahan  bahan  baku  yang tidak  bersih  seperti  menggunakan  air  yang telah  dididihkan  lalu  disimpan  kedalam wadah  teko  yang  dijajakan  di  pinggir  jalan beresiko tercemar bakteri kontaminan.
Pada  umumnya,  bakteri  kontaminan seperti Enterobacteriaceae
dapat menyebabkan penyakit diare dan abses hepar pyogenik yang  terus  meningkat  selama beberapa  dekade  terakhir  (Guzman-Otazo et al. , 2019). Berdasarkan data Dinas Kesehatan
Kota Bandar Lampung, kejadian diare hingga bulan  Juli  2013  mencapai  8.375  kasus (Dinkes Lampung, 2014). Prevalensi kejadian  diare  pada  tahun  2018  meningkat mencapai  5%  dari  total  populasi  dewasa  dan 10%  kejadian  pada  balita  (Kemenkes  RI, 2019). Kontaminasi bakteri ini dapat diperoleh  dari  air  minum  yang  digunakan untuk  pembuatan Thai  tea salah  satunya  air isi  ulang.  Kualitas  air  minum  isi  ulang  di Bandar Lampung dan Lampung Selatan tidak memenuhi syarat berdasarkan Permenkes R.I. No. 492/menkes/Per/IV/2010 tentang keberadaan  bakteri  dalam  air  minum  (Huda, 2010; Permenkes RI, 2010).
Beberapa penelitian terdahulu melaporkan adanya kontaminasi bakteri pada produk  minuman  yang  dijual  di  sekitar
instansi  pendidikan  diantaranya,  kontaminasi bakteri Escherichia  coli,  Salmonella  sp., Shigella sp., Klebsiella sp., Enterobacter sp., dan Proteus sp.  Jenis  bakteri  tersebut ditemukan pada minuman jajanan SD di Kec.
Sukabumi Kota Bandar
Lampung.
Kontaminasi  bakteri E.  coli ditemukan  pada minuman  di  Kantin  UIN  Raden  Fatah (Ningsih et  al. ,  2018),  pada  jenis  minuman teh  yang  dijual  di  pinggir  jalan  di  Kota Samarinda  (Handayani,  Sundu  and  Dawia, 2017) dan pada es dawet di Kota Banda Aceh (Husna  and  Andriani,  2018),  selain  itu  jenis bakteri Salmonella sp.  ditemukan  pada minuman  cincau  di  Bekasi  (Djajaningrat et al. , 2016). Pada jenis minuman Thai Tea (teh susu) ditemukan  jenis  bakteri Alcaligens faecalis,  Enterobacter spp .,  Pseudomonas spp. dan Klebsiella pneumoniae pada sampel di  Sepanjang  Jalan  Jatinangor,  Bandung (Hao,  Mulyana  and  Alisjahbana,  2019). Namun  hingga  saat  ini,  belum  ada  laporan terkait bakteri yang terdapat dalam minuman Thai tea yang  dijual  di  pinggir  jalan  di  Kota Bandar Lampung.
Untuk  menentukan  suatu  minuman terbebas dari berbagai jenis bakteri kontaminan,  maka  perlu  dilakukan  uji distribusi  cemaran  bakterinya.  Selama  ini untuk  mendeteksi  bakteri  dapat  dilakukan dengan menggunakan metode Most Probable Number (MPN)  tetapi  hanya  dikhususkan pada  bakteri  koliform.  Pada  penelitian  ini akan  dilakukan  deteksi  bakteri  kontaminan dengan  menggunakan  media  spesifik  yaitu Desoxycholate Lactose Sucrose (DCLS) yang mampu mendeteksi keberadaan bakteri golongan Enterobacteriaceae dan Cystine Lactose  Electrolyte  Deficient (CLED)  yang mampu  mendeteksi  beragam  jenis  bakteri seperti Escherichia coli, Klebsiella pneumonia,  Salmonella sp. Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus
aureus,
Enterococcus sp,  dan Proteus sp.,  sehingga jumlah  dan  jenis  mikroba  yang  ditemukan lebih  beragam.    Berdasarkan  uraian  diatas, penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendeteksi berbagai  bakteri  kontaminan  yang  terdapat pada minuman Thai tea yang dijual dipinggir jalan  di  berbagai  kelurahan  di  sekitar kawasan Institut Teknologi Sumatera.

## BAHAN DAN CARA

## Desain dan Lokasi Penelitian
Disain  penelitian  ini  adalah  potong lintang,  dengan  jenis  penelitian  deskriptif yang bertujuan untuk menggambarkan kondisi  cemaran  bakteri  kontaminan  pada minuman Thai tea yang dijual dipinggir jalan di  sekitar  kawasan  Institut  Teknologi Sumatera.      Kegiatan  pengambilan  sampel dilakukan  pada  bulan  Oktober  -  Desember 2019,  Objek  penelitian  yang  akan  digunakan adalah  sampel  minuman  es Thai  tea yang dijual  di  sekitar  area  kampus  Institut Teknologi Sumatera, yaitu di empat kelurahan terdiri dari Korpri (Kec.
Sukarame),  Way  Hui  (Kecamatan  Jati Agung),  Way  Kandis  (Kecamatan  Tanjung Senang)  dan  Way  Halim  (Kecamatan  Way Halim).  Lokasi  ini merupakan  kawasan  yang memiliki keterkaitan dengan Institusi Pendidikan  yaitu  SD,  SMP,  SMA,  UIN Raden Intan Lampung dan Institut Teknologi Sumatera.  Empat  kelurahan  ini  merupakan kelurahan yang berada di titik utama aktivitas masyarakat/mahasiswa  Institut  Teknologi Sumatera  (ITERA)  dan  secara  administratif terpisah  kedalam  empat  Kecamatan.  Hal  ini dikarenakan posisi ITERA berada di perbatasan  Kota  Bandar  Lampung  dan Lampung  Selatan.  Peta  lokasi  pengambilan sampel disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1.  Peta lokasi pengambilan sampel Thai tea
Teknik sampling dalam penelitian ini adalah Accidental  Sample yaitu  pengambilan sampel  dengan  cara  mengambil  sampel  yang ada  pada  saat  dilakukan  penelitian  sesuai dengan keberadaan sampel yaitu berdasarkan keberadaan  penjual  minuman Thai  tea di sepanjang jalur lokasi pengambilan sampel di 4  (empat)  kelurahan  dengan  jumlah  25 sampel dan dua kali pengulangan.

## Pengambilan Sampel di Lapangan
Sampel  minuman Thai  tea diambil dengan cara membeli dari 25 Pedagang yang khusus  berjualan  minuman Thai  tea di sepanjang  jalan  Kawasan  ITERA  dengan kondisi tempat berjualan dalam  kios. Selama proses  pembelian  juga  diamati  perilaku penjual  yaitu  mencuci  tangan  sebelum melakukan  proses  pembuatan Thai  tea . Pengamatan  ini  menjadi  pertimbangan  akhir dalam  proses  analisis  kemungkinan  potensi penyebaran bakteri pada sampel. Sampel lalu dikemas dengan rapi dan dibawa
menggunakan box untuk  menjaga  agar sampel  dalam  keadaan  baik.  Sampel  yang telah  dikoleksi  dibawa  ke  Laboratorium Biologi  untuk  dianalisis  jumlah  dan  jenis bakteri  yang  terkandung  dalam  minuman tersebut.  Lama  waktu  pengambilan  sampel dengan  proses  analisis  dilakukan  langsung tanpa  adanya  proses  penyimpanan  atau inkubasi  sampel.  Hal  ini  dilakukan  agar mencegah  pembelahan  sel  bakteri  menjadi lebih banyak.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam
penelitian  ini  yaitu  alat-alat  gelas,  pipet mikro,  micro tip , hotplate , oven , incubator , laminar,  autoklaf.  Bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  antara  lain  sampel minuman thai tea sebanyak 10 ml per sampel. Media selektif diferensial yaitu Desoxycholate  Lactose  Sucrose (DCLS) Agar yang terdiri dari (7.0 g protease pepton , 3.0 g beef extract , 10 g Sodium Citrate , 5.0 g Saccharose,  5.0  g  Lactose,  5.0  g  Sodium thiosulfate,  2.5  g  Sodium  deoxycholate,  0.03 g  Neutral  red,  12.0  g  Agar  pada  pH  7.2  +/- 0.2)  dan  Media Cystine-Lactose-Electrolyte- Deficient (CLED) Agar yang terdiri dari (4.0
Pancreatic Digest of Gelatin, 4.0 g Pancreatic Digest  of  Casein,  3.0  g  Beef  Extract,  10.0  g Lactose,  0.128  g  L-Cystine  ,  0.02  g Bromthymol Blue dan 15 g Agar pada pH 7.3 +/- 0.2) dan akuades.

## Analisis Sampel di Laboratorium
1. Penyiapan Media
Media DCLS Agar ditimbang sebanyak  50  g  lalu  dilarutkan  dengan  1000 ml  akuades.  Media  dipanaskan  diatas stirer hotplate hingga  mendidih  dan  terlarut
sempurna.  Media  DCLS  Agar  tidak  perlu  di autoklaf  sehingga  setelah  dipanaskan  lalu didinginkan  hingga  suhu  45-50 0 C.  Media tersebut lalu dituangkan kedalam cawan petri steril.  Sedangkan  medium  CLED  Agar diperlukan  36.2  g  dalam  1000  ml  akuades. Media  dipanaskan  hingga  terlarut  sempurna lalu  disterilkan  dengan  autoklaf  pada  suhu 121 0 C  selama  15  menit.  Setelah  proses sterilisasi dan didinginkan hingga suhu 45-50 0 C lalu dituangkan kedalam cawan petri steril dan siap untuk digunakan.

## 2. Isolasi Bakteri
Seluruh  sampel  dengan  dua  kali pengulangan  dilakukan  pengenceran  serial (10 -1 -10 -7 )  menggunakan  akuades  steril. Selanjutnya  sampel  yang  telah  diencerkan diuji  dengan  menggunakan  metode  cawan sebar  pada  medium  CLED  dan  DCLS  Agar yang  telah  dituangkan  dalam  cawan  petri. Penyebaran  menggunakan  batang  penyebar dilakukan  secara  aseptis.  Cawan  petri  yang telah  berisi  sampel  diinkubasi  pada  suhu  35 0 C  selama  18-24  jam.  Koloni  bakteri  yang tumbuh dihitung menggunakan colony counter dengan  satuan  cfu/ml.  Media  tanpa inokulasi sampel digunakan sebagai kontrol.
Media  DCLS  merupakan  media selektif  diferensial  kelompok Enterobacter . Koloni  bakteri  pada  medium  DCLS  adalah berwarna  merah  yang  digolongkan  kedalam golongan Enterobacteriaceae. sedangkan media  CLED  merupakan  media  selektif diferensial  untuk  bakteri  kontaminan  yang berhubungan  dengan urinaria  tract yang sering  ditemukan  sebagai  kontaminan  pada air.  Koloni  pada  medium  CLED  agar  akan berbeda  berdasarkan  jenis  bakterinya  seperti Tabel 1 berikut ini:

## Tabel 1. Morfologi koloni bakteri pada medium CLED Agar (Bevis, 1968)
Jenis bakteri Morfologi pertumbuhan Escherichia coli Koloni berwarna kuning pekat dan medium berwarna kuning Klebsiella Koloni  kuning  kuning  hingga  putih kebiruan,  berlendir  dan  medium berwarna kekuningan Proteus Koloni berwarna biru translucen, media berubah warna menjadi biru kehijauan hingga biru sedang Pseudomonas aeruginosa Koloni  hijau  dengan  permukaan  kusut  dan  khas  dan  pinggirannya kasar Enterococcus Koloni  berwarna  kuning  berdiameter  0.5  mm  dan  media  berwarna kuning Salmonella Koloni rata dan berwarna biru Staphylococcus aureus Koloni kuning tua, warnanya seragam, media berubah kuning

## HASIL
Sampel Thai  tea yang  berhasil dianalisis , digunakan dari 4 (empat) kelurahan  yang  tersebar  di  empat  kecamatan di  Provinsi  Lampung.    Kelurahan  Way Kandis  dan  Korpri  (Kecamatan  Sukarame) merupakan  lokasi  yang  paling  banyak menjual  minuman thai  tea . Sebanyak  40% sampel  berasal  dari  lokasi  Way  Kandis (Tabel 2).
Dari  total  25  sampel Thai  tea yang berasal  dari  empat  kelurahan,  terdapat  21 sampel Thai  tea yang  mengandung  bakteri golongan Enterobacteriaceae dengan kisaran jumlah  bakteri  5x10 2 cfu/ml  hingga  65x10 4 cfu/ml  pada  medium  DCLS  agar.  Bakteri Enterobacteriaceae ditemukan paling banyak pada sampel TS-01 dan TS-05 dengan jumlah total  masing-masing sebesar  65x10 4 cfu/ml dan  55x10 4 cfu/ml.  Terdapat  empat  sampel
Thai  tea yang  tidak  terdeteksi  keberadaan bakteri target yaitu SK-07, JA-02, TS-07 dan TS-09  (Gambar  2).  Selanjutnya,  sampel  juga dideteksi dengan menggunakan media lainnya  yaitu  CLED  agar  untuk  mendeteksi bakteri yang lebih beragam.
Tabel  2.  Jumlah  sampel  menurut  lokasi pengambilan sampel Kelurahan Kecamatan Ʃ Sampel Korpri Sukarame (SK) 8 Way Halim Way Halim (WH) 4 Way Hui Jati Agung (JA) 3 Way Kandis Tanjung Senang (TS) 10 Total 25
Gambar 2. Jumlah bakteri kelompok Enterobacteriaceae pada minuman Thai tea yang dideteksi pada medium DCLS agar
Berdasarkan  jumlah  sampel  yang digunakan
dalam deteksi bakteri menggunakan medium CLED agar menunjukkan  bahwa  kontaminasi E.  coli merupakan jenis
bakteri yang mengkontaminasi  sampel  tertinggi  sebesar 68% (17 sampel) dan genus Enterococcus sp. merupakan  genus  yang  paling  sedikit ditemukan  pada  minuman thai  tea yaitu  3 sampel  (12%)  (Tabel  3).  Dari  total  jumlah koloni  dari  setiap  sampel thai tea,  bakteri E. coli paling  banyak  ditemukan  pada  sampel
TS-03  (30%)  dan  TS-05  (30%). Klebsiella sp.  merupakan  genus  bakteri  kedua  yang keberadaannya  mendominasi  total  sampel yaitu  sebanyak  15 sampel  atau  60%. Sampel yang  terdeteksi  mengandung Klebsiella sp. adalah TS-03 (21%), TS-04 (21%) dan TS-06 (21%).  Bakteri P.  aeruginosa ditemukan pada  10  sampel  yang  dianalisis  dengan persentase  sebesar  40%.  Keberadaan  bakteri ini  tertinggi  pada  sampel  SK-06  (22%),  TS- 09 (27%) dan TS-07 (20%).
Tabel  3.  Persentase  jumlah  sampel  yang  terdeteksi  bakteri  pada medium CLED agar Jenis Bakteri Jumlah Sampel Terdeteksi % Escherichia coli 17 68 P. aeruginosa 10 40 S. aureus 7 28 Klebsiella sp. 15 60 Enterococcus sp. 3 12 Salmonella sp. 4 16 Proteus sp. 7 28
Dari  total  sampel,  bakteri S.  aureus terdeteksi  pada  7  sampel  (28%)  dan  jumlah koloni tertinggi diperoleh pada sampel TS-02 (77%).  Sama  halnya  dengan S.  aureus , Proteus sp. juga memiliki persentase keberadaan  yang  sama  pada  sampel Thai  tea yaitu  sebesar  28%.  Sampel  yang  terdeteksi terkontaminasi oleh Proteus sp. adalah TS-05
(54%)  dan  TS-06  (27%).  Selanjutnya,  genus
yang  hanya  ditemukan  pada  4  sampel minuman Thai  tea yaitu Salmonella sp. Bakteri  ini  paling  banyak  ditemukan  pada sampel  JA-02  dan  TS-06  masing-masing sebesar  48%. Enterococcus sp.  merupakan bakteri  dengan  persentase  terendah  paling banyak ditemukan pada sampel SK-02 (51%) dan SK-08 (44%) (Gambar 3).
Gambar 3. Persentase dominansi jenis bakteri pada setiap sampel Thai tea yang ditumbuhkan di medium CLED agar
Persentase  tersebut  menunjukkan bahwa  dalam  satu  sampel Thai  tea terdapat lebih  dari  satu  jenis  bakteri  kontaminan. Sampel  TS-02,  TS-06,  TS-07  dan  TS-08 yang  berasal  dari  Kecamatan  Tanjung Senang  merupakan  minuman thai  tea yang terkontaminasi  oleh  4  jenis  bakteri,  namun TS-06  menunjukkan  jumlah  tertinggi  dari setiap  jenis  bakterinya  yaitu Klebsiella sp. (30x10 5 cfu/ml), E.  coli (15x10 5 cfu/ml), Salmonella sp.  (15x10 5 cfu/ml)  dan Proteus sp. (15x10 5 cfu/ml) (Gambar 4). Total jumlah bakteri  yang  sama  juga  ditemukan  pada sampel  TS-05,  dengan  jenis  bakteri  yang berbeda  yaitu E.  coli (30x10 5 cfu/ml), Klebsiella sp.  (15x10 5 cfu/ml)  dan Proteus sp.  (30x10 5 cfu/ml).  Kedua  sampel thai  tea tersebut mengandung  total  jumlah  bakteri yang sama yaitu sebesar 75x10 5 cfu/ml tetapi dengan  distribusi  jumlah  masing-masing jenis  bakteri  berbeda.  Selain  itu,  terdapat juga,  sampel Thai  tea yang  hanya  ditumbuhi oleh  1  jenis  bakteri  yaitu  WH-02  ( Klebsiella sp.  ≈  34x10 4 cfu/ml),  TS-01  ( Proteus sp.  ≈
30x10 4 cfu/ml)  dan  TS-04  ( Klebsiella sp.  ≈ 30 x 10 5 cfu/ml) (Gambar 4).
Total populasi dan keberadaan bakteri  pada  medium  DCLS  agar  dan  CLED agar memiliki perbedaan. Namun, berdasarkan  hasil  deteksi  pada  kedua medium ini menunjukkan bahwa sampel Thai tea dari  25  lokasi  pengambilan  tidak memenuhi  syarat  baku  minuman  yang  dapat dikonsumsi  oleh  masyarakat.  Syarat  baku minuman ini mengacu pada tiga standar baku di Indonesia yaitu Peraturan Menteri Kesehatan  No.  492/Menkes/Per/IV/2010  dan SNI  7388:2009  yang  mensyaratkan  tidak boleh  ditemukan  bakteri  pada  air  minum. Selain  itu,  mengacu  pada  Peraturan  BPOM Nomor 13 tahun 2019 yang memperbolehkan keberadaan E.  coli pada  pangan  olahan  teh seduhan sebanyak 1.8 Angka Paling Mungkin  (APM)/100  ml  (SNI,  2009; Permenkes RI, 2010; BPOM, 2019). Berdasarkan  hasil  pengujian,  seluruh  sampel thai  tea yang  diuji  menunjukkan  kategori tidak memenuhi syarat (≥1.8 APM/100 ml).

## Gambar 4. Jumlah bakteri pada setiap sampel Thai Tea di medium CLED Agar

## PEMBAHASAN
Keberadaan bakteri
Enterobacteriaceae seperti E. coli , Klebsiella sp, Salmonella sp., Proteus sp.,  dan  bakteri non Enterobacteriaceae Enterococcus sp., bahkan P.  aeruginosa dan S.  aureus dalam minuman Thai tea yang dijual dipinggir jalan diduga  disebabkan  oleh  bahan  baku  yang digunakan  berupa  air  minum  dan  es  yang terkontaminasi  bakteri.  Air  minum  yang digunakan  untuk  pembuatan  Thai  tea menggunakan  air  isi  ulang  (komunikasi pribadi,  2019)  yang  rentan  terkontaminasi bakteri coliform (Ariefiansyah,  Suharti  and Anas,  2015).  Air  minum  yang  sehat  dan aman  untuk  dikonsumsi  harus  memenuhi persyaratan  yang  meliputi  syarat  fisik,  kimia dan  bakteriologis  (Natalia,  Bintari  and Mustikaningtyas, 2014).
Selain  itu,  es  batu  memiliki  peran terhadap  cemaran  bakteri  dalam  minuman. Berbagai  laporan  terkait  cemaran  bakteri dalam  es  batu  telah  banyak  dilaporkan diantaranya  cemaran  bakteri  es  batu  pada penjual  minuman  di  Jakarta  Selatan  yang melebihi  ambang  batas  yang  ditetapkan BPOM No.16 Tahun 2016 (Cahya, Amir and Manalu,  2019)  dan  di  Pasar  Kota  Gede Yogyakarta  (Warniningsih  and  Warsiyah., 2018).  Adanya  bakteri  pada  es  batu  tersebut dikarenakan  penggunaan  air  mentah  (tanpa dimasak)  sebagai  bahan  dasar  pembuatan  es batu.  Selain  itu,  kebersihan  wadah  yang
digunakan  dalam  pembuatan  es  batu  juga tidak  terlalu  diperhatikan.  Bakteri  yang terkandung  dalam  air  tersebut  tidak  mati selama  proses  pembekuan  sehingga  ketika kondisi es tersebut mencair, maka memungkinkan bakteri tersebut aktif kembali (Nur  and  Asri  Winarsih,  2018).  Es  batu  juga mampu mengkontaminasi permukaan minuman  botol/kaleng  yang  disimpan  dalam wadah yang diisi es batu (Asril and Amallia, 2018).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa cross contamination dapat diperoleh dengan berbagai cara.
Bakteri  koliform  fecal,  salah  satunya E.  coli  merupakan  salah  satu  indikator  mutu dan keamanan air minum (Navab- Daneshmand et  al. ,  2018).  Adanya  koliform tersebut didalam air/sumber air menunjukkan adanya  indikasi  tercemarnya  air  minum tersebut oleh salah satu kelompok
Enterobacteriaceae . Tercemarnya sumber air minum  oleh  bakteri  ini  dapat  meningkatkan penyakit diare (Harwood et al. , 2014; Stauber et al. , 2016; Ercumen et al. , 2017). Bakteri E. coli dapat  ditransmisikan  dari  feses  manusia dan hewan yang terinfeksi kepada inang yang baru  melalui  reservoir  lingkungan  seperti tangan, air dan tanah (Navab-Daneshmand et al. , 2018; Fuhrmeister et al. , 2020).
Pada  hasil  ini  menunjukkan  bahwa jumlah Klebsiella sp. dalam sampel berada di urutan  kedua  setelah E.  coli .  Bakteri  ini banyak  ditemukan  dalam  makanan,  tetapi
bersifat non patogen didalam sistem pencernaan.  Bakteri  ini  dapat  dengan  mudah ditemukan  sistem  pernapasan  dan  feses manusia  (Hao,  Mulyana  and  Alisjahbana, 2019).  Meskipun  demikian, Klebsiella spp. tidak  terlalu  berperan  dalam  menimbulkan penyakit yang bersumber dari air (Had et al. , 2012).
Selain Klebsiella
sp., Enterobacteriaceae lain juga banyak ditemukan dalam sampel. Beberapa jenis dari kelompok  ini  banyak  ditemukan  di  kulit  dan saluran  pencernaan.  Namun  bakteri  ini mudah  mati  akibat  adanya  asam  lambung (Zhu et  al. ,  2006),  sehingga  resiko  yang ditimbulkan tidak terlalu tinggi.
Keberadaan bakteri
yang menimbulkan  resiko  tinggi  adalah  adanya Salmonella sp. dalam sampel. Hasil menunjukkan  bahwa  terdapat  4  sampel  yang mengandung Salmonella sp.  yaitu  WH-04,
JA-02,  TS-06  dan  TS-07.  Sampel  TS-06  dan JA-02  memiliki  jumlah Salmonella sp.  yang sangat  tinggi.  Salah  satu  jenis  bakteri  dari genus  ini  yaitu S.  paratyphi bersifat  patogen dan  mampu  bertahan  dengan  berbagai perubahan  pH  dalam  lambung  (Álvarez- Ordóñez et al. , 2011).
Keberadaan  bakteri  patogen  enterik ini  berkorelasi  dengan  buruknya  kebersihan diri  (penjual)  dan  kebersihan  lingkungan (Hao,  Mulyana  and  Alisjahbana,  2019; Mawarni et  al. ,  2019).  Faktor  ini  dapat disebabkan  oleh  perilaku  penjual  melalui cross  contamination  antara  tangan  dan perlengkapan/alat  untuk  membuat  thai  tea. Hal  ini  terlihat  dari  seluruh  lokasi  penjual thai  tea  yang  dijadikan  sebagai  sampel  tidak melakukan aktivitas mencuci tangan sebelum melakukan pembuatan dan penyajian minuman  thai  tea.  Adanya  pengetahuan masyarakat  terhadap  peran  dari  transmisi bakteri enterik ini melalui tangan, permukaan benda dan tanah sehingga lebih efektif dalam pencegahan  penyebarannya  (Julian,  2016), salah  satunya  dengan  melakukan  kegiatan mencuci  tangan  sebelum  memulai  aktivitas khususnya  dalam  pembuatan  minuman  Thai tea ini.
Berdasarkan  lokasi  sampel,  sampel yang  memiliki  kontaminasi  tertinggi  berada dilokasi  Kecamatan  Tanjung  Senang  (TS). Lokasi  ini  merupakan  area  komersil  dan merupakan jalan terusan yang
menghubungkan  Bandar  Lampung  dengan jalan by  pass antar  provinsi.  Hal  ini menyebabkan  tingginya  arus  lalu  lintas  dan aktivitas  manusia.  Adi,  Meghana  and  Veena, (2016)  melaporkan  adanya  korelasi  antara lokasi  komersil  dan  lalu  lintas  yang  padat terhadap  tingginya  tingkat  cemaran  bakteri seperti E. coli, Salmonella, Shigella, Campylobacter dan S. aureus pada minuman jus  yang  dijual  dipinggir  jalan.  Kondisi  ini juga  diperburuk  dengan  perilaku  penjual yang  kurang  higienis  untuk  meminimalisasi jumlah  bakteri  dari  lingkungan  agar  tidak mengkontaminasi minuman yang dijual.
Selain  faktor  yang  mempengaruhi keberadaan  bakteri  dalam  sampel  minuman Thai  tea,  hasil  menunjukkan  perbedaan antara  jumlah  bakteri  pada  medium  DCLS dan  CLED.  Perbedaan  tersebut  disebabkan oleh  jenis  bakteri  target  dari  setiap  media. DCLS  agar  merupakan  media  yang  telah dimodifikasinya formulanya dari Desoxycholate  Citrate  Agar  (Leifson,  1935). Media  agar  DCLS  digunakan  untuk  isolasi patogen  enterik  dan  non  patogen  seperti spesies Proteus,  Serratia,  Enterobacter dan Klebsiella .  Media  ini  bersifat  selektif  karena mengandung  natrium  sitrat  dan  natrium deoksikolat  yang  menghambat  pertumbuhan bakteri  Gram  positif  dan  digunakan  untuk isolasi Shigella dan Salmonella .  Media  ini cenderung menghambat pertumbuhan E. coli . Namun, deteksi awal
untuk Enterobacteriaceae perlu  dilakukan  karena memiliki  cakupan  yang  luas  dan  sebagai indikasi awal terhadap keberadaan organisme indikator.  Beberapa  negara  menggunakan deteksi  bakteri Enterobacteriaceae untuk menggambarkan  seberapa  parah  tingkat kontaminasi.  Namun,  bakteri  ini  tidak berbahaya bagi manusia. Sedangkan medium CLED  biasanya  digunakan  untuk  deteksi bakteri  yang  berada  di  saluran  ekskresi ( urinary tract ). Medium ini sangat mendukung  untuk  pertumbuhan  bakteri patogen  asal  urine  dengan  terlihat  jelas perbedaan  antar  koloni  dan  diagnostiknya. Hal  tersebut  berguna  untuk  aplikasi  lainnya yaitu  dalam  mendeteksi  keberadaan  bakteri- bakteri patogen dalam minuman.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Sampel  minuman  Thai  tea  terdeteksi berbagai
jenis bakteri kontaminan diantaranya E.  coli,  Klebsiella sp., P. aeruginosa , S. aureus , Proteus sp. Salmonella sp.  dan Enterococcus sp. Sampel minuman  yang  memiliki tingkat  kontaminasi tertinggi  berada  di  wilayah  Tanjung  Senang (TS-05 dan TS-06). Kedua sampel terkontaminasi  oleh  3  jenis  bakteri  yaitu Klebsiella sp., E. coli , dan Proteus sp. Selain itu,  sampel  dari  lokasi  Tanjung Senang  yaitu TS-06  juga  tercemar  oleh  bakteri  patogen Salmonella sp. sebanyak 15x10 5 cfu/ml.

## Saran
Sebaiknya dilakukan analisis penyebab  tingginya  kontaminan  pada  lokasi Tanjung
Senang. Untuk
penelitian selanjutnya  perlu  dilakukan  agar  dapat diketahui  penyebab  tingginya  kontaminan, sehingga  dapat  dilakukan  tindakan  preventif agar cemaran bakteri pada minuman Thai tea tersebut dapat diminimalisir.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih diberikan kepada  Lea  Kristi  yang  telah  membantu dalam  penyajian  peta  lokasi  pengambilan sampel  serta  Ade  Silvinia  yang  ikut membantu dalam persiapan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adi,  V.  K.,  Meghana,  C.  and  Veena,  D.  (2016) ‘Bacteriological Quality Assessment of Street Vended  Panipuri  and  Fruit  Juices:  A  Case Study  of  Davangere  City’,  Research  &
Reviews:  Journal  of  Food  Science  and
Technology, 5(2), pp. 18–25.
Álvarez-Ordóñez,  A.  et  al.  (2011)  ‘Salmonella  spp. survival strategies within the host gastrointestinal tract’, Microbiology.
Microbiology (Reading), pp. 3268–3281. doi: 10.1099/mic.0.050351-0.
Ariefiansyah,  M.  N.,  Suharti,  N.  and  Anas,  E.  (2015)
‘Identifikasi  Bakteri  Coliform  yang  Terdapat pada Minuman Es Teh di Rumah Makan Tepi Laut  Purus  Padang  Barat’,  Jurnal  Kesehatan Andalas, 4(3), pp. 777–780. doi: 10.25077/jka.v4i3.363.
Asril,  M.  and  Amallia,  R.  A.  H.  T.  (2018)  ‘Pengaruh Pencucian  Permukaan  Kaleng  Minuman
terhadap  Keberadaan  Bakteri  Koliform- Fecal’, Jurnal Kesehatan Lingkungan Indonesia, 17(1), p. 26. doi:
10.14710/jkli.17.1.26-31.
Bevis,  T.  D. (1968)  ‘A Modified  Electrolyte  Deficient Culture  Medium’,  The  Journal  of  Medical Laboratory  Technology,  25(1),  pp.  38–41.
Available at:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4867139/ (Accessed: 24 June 2021).
BPOM  (2019)  Peraturan  Badan  Pengawas  Obat  Dan Makanan  Nomor  13  Tahun  2019  Tentang Batas  Maksimal  Cemaran  Mikroba  Dalam Pangan  Olahan,  Badan  Pengawas  Obat  Dan Makanan.
Cahya,  T.,  Amir,  M.  and  Manalu,  R.  T.  (2019)  ‘Uji Cemaran  Mikroba  Es  Batu  Pada  Penjual Minuman  di  Lingkungan  Pasar  Kecamatan Jagakarsa  ,  Jakarta  Selatan’,  Jurnal  Ilmu Kefarmasian, 12(2), pp. 78–84.
Dinkes  Lampung  (2014)  Profil  Kesehatan  Provinsi Lampung Tahun 2013.
Djajaningrat,  H.  et  al.  (2016)  ‘Tingkat  Cemaran Salmonella  Pada  Minuman  Es  Cappucino Cincau  Yang  Dijual  Di  Wilayah  Pondok Gede-Bekasi’,  Jurnal  Kesehatan,  6(2),  pp. 160–166. doi: 10.26630/JK.V6I2.100.
Ercumen,  A.  et  al. (2017) ‘Animal  Feces  Contribute  to Domestic  Fecal  Contamination:  Evidence from  E.  coli  Measured  in  Water,  Hands, Food,  Flies,  and  Soil  in  Bangladesh’, Environmental  Science  and  Technology, 51(15), pp. 8725–8734. doi: 10.1021/acs.est.7b01710. Fuhrmeister,  E.  R.  et  al.  (2020)  ‘Shared  Bacterial
Communities  Between  Soil,  Stored  Drinking Water,  and  Hands  in  Rural  Bangladeshi Households’,  Water  Research  X,  9(100056), pp. 1–10. doi: 10.1016/j.wroa.2020.100056. Guzman-Otazo,  J.  et  al.  (2019)  ‘Diarrheal  Bacterial Pathogens  and  Multi-resistant  Enterobacteria in the Choqueyapu River in La Paz, Bolivia’, PLoS  ONE,  14(1),  p.  e0210735.  doi: 10.1371/journal.pone.0210735.
Had,  S.  et  al.  (2012)  ‘Distribution  of  Nosocomial Infections  Caused  by  Klebsiella  pneumoniae ESBL  strain’,  Journal  of  Environmental  and Occupational  Science,  1(3),  p.  141.  doi: 10.5455/jeos.20121205084327.
Handayani,  F.,  Sundu,  R.  and  Dawia,  D.  (2017) ‘Identifikasi  Bakteri  Escherichia  coli  pada Minuman  Teh  Kemasan  Industri  Rumah Tangga di Kelurahan Sungai Dama dan Selili Menggunakan Metode Most Probable NUmber  (MPN)’,  Jurnal  Ilmiah  Manuntung, 3(1), p. 59. doi: 10.51352/jim.v3i1.91.
Hao,  T.  S.,  Mulyana,  Y.  and  Alisjahbana,  B.  (2019) ‘Identification of Enteric Bacterial Pathogens in  Beverages  Sold  By  Hawkers  around Jatinangor,  Bandung’,  Althea  Medical Journal, 6(1), pp. 13–17. doi: 10.15850/amj.v6n1.1536.
Harwood, V. J. et al. (2014) ‘Microbial source tracking markers  for  detection  of  fecal  contamination in environmental waters: Relationships between  pathogens  and  human  health outcomes’,  FEMS  Microbiology  Reviews.
FEMS  Microbiol  Rev,  pp.  1–40.  doi: 10.1111/1574-6976.12031.
Huda, M. (2010) ‘Kualitas Mikrobiologi Air Minum Isi Ulang di Wilayah Kota Bandar Lampung’, in Seminar Nasional Sains & Teknologi- III, pp. 629–641.
Husna,  H.  and  Andriani,  D.  (2018)  ‘Identifikasi Escherichia  coli  pada  Es  Dawet  di  Kota Banda  Aceh’,  Serambi  Saintia,  6(1),  pp.  7– 15.
Julian,  T.  R.  (2016)  ‘Environmental  Transmission  of Diarrheal  Pathogens  in  Low  and  Middle Income  Countries’,  Environmental  Science: Processes  and  Impacts,  18(8),  pp.  944–955. doi: 10.1039/c6em00222f.
Kemenkes  RI  (2019)  Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar Tahun 2018, Kementrian Kesehatan RI. Leifson,  E.  (1935)  ‘New  Culture  Media  Based  on Sodium  Desoxycholate  for  the  Isolation  of Intestinal Pathogens and for the Enumeration of  Colon  Bacilli  in  Milk  and  Water’,  The Journal of Pathology and Bacteriology, 40(3), pp. 581–599. doi: 10.1002/path.1700400315.
Mawarni,  N. et al. (2019) ‘Hubungan  Higiene Sanitasi dengan  Kualitas  Mikrobiologis  Minuman  Es Thai  Tea  di  Kecamatan  Tembalang’,  Jurnal Kesehatan  Masyarakat,  7(1),  pp.  186–191.
Available at: https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jkm/ar ticle/view/22868 (Accessed: 24 June 2021).
Natalia,  L.  A.,  Bintari,  S.  H.  and  Mustikaningtyas,  D.
(2014)  ‘Kajian  Kualitas  Bakteriologis  Air Minum  Isi  Ulang  di  Kabupaten  Blora’,  Life Science Journal of Biology, 3(1), pp. 32–34.
Navab-Daneshmand,  T.  et  al.  (2018)  ‘Escherichia  coli Contamination Across Multiple Environmental  Compartments  (Soil,  Hands, Drinking  Water, and  Handwashing Water)  in Urban Harare: Correlations and Risk
Factors’,  American  Journal  of  Tropical Medicine  and  Hygiene,  98(3),  pp.  803–813. doi: 10.4269/ajtmh.17-0521.
Ningsih,  S.  L.  et  al.  (2018)  ‘Deteksi  Bakteri  Coliform Pada  Makanan  dan  Minuman  Food  Court UIN  Raden  Fatah’,  in  Seminar  Nasional Sainst  dan  Teknologi  Terapan,  pp.  97–106. Available at: http://semnas.radenfatah.ac.id. Nur,  J.  and  Asri  Winarsih,  D.  (2018)  ‘Identifikasi Bakteri  Escherichia  coli  Pada  Es  Batu  Di Wilayah  Bojong  Raya,  Cengkareng  Jakarta’, Jurnal Wiyata: Penelitian Sains dan Kesehatan,  4(2),  pp.  151–156.  Available  at: https://ojs.iik.ac.id/index.php/wiyata/article/v iew/187 (Accessed: 24 June 2021). Permenkes  RI  (2010)  Peraturan  Menteri  Kesehatan Republik Indonesia Nomor 492/Menkes/Per/IV/2010 Tentang
Persyaratan  Kualitas  Air  Minum,  Peraturan Mentri Kesehatan Republik Indonesia.
SNI (2009) Batas Maksimum Cemaran Mikroba dalam Pangan, Bandar Standardisasi Nasional.
Stauber, C. E. et al. (2016) ‘Associations Between Self-
Reported  Gastrointestinal  Illness  and  Water System  Characteristics  in  Community  Water Supplies  in  Rural  Alabama:  A  Cross- Sectional  Study’,  PLoS  ONE,  11(1).  doi: 10.1371/journal.pone.0148102.
Warniningsih  and  Warsiyah.  (2018)  ‘Analisis  Kualitas Bakteriologis  Es  Batu  di  Lingkungan  Pasar Kota  Gede  Yogyakarta’,  Jurnal  Rekayasa Lingkungan, 18(1), pp. 1–12.
Zhu, H. et al. (2006) ‘Bacterial Killing in Gastric Juice - Effect of pH and Pepsin on Escherichia coli and  Helicobacter  pylori’,  Journal  of  Medical Microbiology,  55(9),  pp.  1265–1270.  doi: 10.1099/jmm.0.46611-0.