## RESEARCH   ARTICLE
The Effect of Various Concentration BAP ( 6-Benzyl Amino Purine ) on Orchid Growth ( Macodes petola (Blume) Lindl.) In-Vitro
(Pengaruh Konsentrasi BAP (6- Benzyl Amino Purine ) Terhadap Pertumbuhan Tunas Anggrek ( Macodes petola (Blume) Lindl.) Secara In-Vitro)
Muchfa Eprilia Muchsin *) , Ateng Supriatna, Ayuni Adawiyah, Adisty Virakawugi Darniwa Jurusan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Sunan Gunung Djati, Jl. A.H. Nasution No. 105, Cibiru, Bandung, Jawa Barat, 40614

## ABSTRACT
Macodes petola (Blume) Lindl. has an attractive of leaves veins motif with letters pattern, so it has a high economic value. Tissue culture technique is reported as the best way of plant propagation in short time. BAP (6- Benzyl Amino Purine ) has a role in stimulating shoot growth with a certain concentration. The purpose of this study was to determine the effect of Various Concentration BAP (6- Benzyl Amino Purine ) on Orchid Growth ( M petola (Blume) Lindl.) in vitro. This study used a completely randomized design (CRD) with 4 concentration BAP levels (0; 0.5; 1; 1.5 ppm) with 3 replication. Based on the results of the study, it showed that up to 60 DAP (Day After Planting) the composition of the media with a concentration of 0 ppm BAP had a higher average value for the increase in the stem height, number of shoots and number of roots, namely 1.77±0.798 cm, 2.4 ± 1,528 shoot and 2.4 ± 2,082 root. In contrast to the concentration of 1.5 ppm at this concentration it has a low average value the parameters of stem height, number of shoots and number of roots.
M petola memiliki daya tarik pada motif urat daunnya yang seperti aksara sehingga memiliki nilai ekonomis yang tinggi. Teknik kultur jaringan dilaporkan sebagai cara terbaik perbanyakan tanaman dengan waktu yang lebih singkat. BAP (6- Benzyl Amino Purine ) memiliki peranan dalam merangsang pertumbuhan tunas dengan konsentrasi tertentu. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui pengaruh dalam  pemberian  BAP  (6- Benzyl  Amino  Purine )  terhadap  pertumbuhan  tanaman  anggrek M  petola secara  in  vitro.  Penelitian  ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 taraf konsentrasi BAP yaitu (0; 0.5; 1; 1.5 ppm) dengan 3 kali pengulangan. Berdasarkan hasil penelitian pada eksplan batang yang digunakan menunjukkan bahwa sampai dengan 60 HST (Hari Setelah Tanam) komposisi media dengan konsentrasi BAP 0  ppm memiliki  nilai rata-rata yang lebih tinggi terhadap pertambahan jumlah tinggi batang, jumlah  tunas dan jumlah akar, berturut  – turut adalah 1.77 ±  0.798 cm, 2.4 ± 1.528 dan 2.4 ± 2.082. Berbeda dengan konsentrasi BAP 1.5 ppm, pada konsentrasi tersebut memiliki nilai rata-rata yang rendah terhadap parameter tinggi batang, jumlah tunas dan jumlah akar.
Keywords: BAP (6- Benzyl Amino Purine ), concentration, Macodes petola, Orchid.

## PENDAHULUAN
Tanaman  anggrek  mempunyai  daya  tarik  yang terletak pada keindahan bunganya  yang dapat dilihat dengan  jelas  dari  bentuk,  susunan,  maupun  dari warnanya.  Namun  terdapat  beberapa  dari  jenis tanaman  anggrek  yang  mempunyai  daya  tarik  yang bukan  terletak  di  bunganya  namun  dibagian  lain. Anggrek M petola merupakan salah satu dari tanaman
anggrek  yang  memiliki  daya  tarik  bukan  pada bunganya  tetapi  pada  daunnya,  keindahan  daun anggrek M petola yaitu pada motif  urat daunnya yang bergurat-gurat selayaknya aksara atau tulisan [1].
Anggrek M  petola merupakan  salah  satu  dari tanaman anggrek yang keberadaanya mempunyai nilai ekonomis  yang  tinggi.  Tanaman  anggrek M  petola merupakan jenis anggrek terestrial yang keberadaanya sudah  mulai  langka.  Menurut  Silalahi  dan  Nisyawati
*)Corresponding author: Muchfa Eprilia Muchsin E-mail: mpriliaa@gmail.com
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
[2], permintaan pasar pada tanaman anggrek M petola ini  sangat  tinggi  namun  pasokan  yang  tersedia dipasaran  sangat  rendah.  Hal  ini  diduga  bahwa ketersediaan  dari  jenis  anggrek  ini  terutama  dialam sudah  mulai  langka  sehingga  ketersediaannya  pun sangat rendah.  Menurut Chase, dkk [3] pemanfaatan anggrek sebagai komoditas ekonomi ataupun sebagai bahan  obat  sering  mengakibatkan  eksploitasi  yang berlebih  sehingga  menyebabkan  keberadaannya  di alam  liarpun  menjadi  terancam  punah.  Menurut Peraturan 17 Republik Indonesia No 7 Tahun 1999 [4], M  petola merupakan  anggrek  yang  dilindungi  dan sudah langka keberadaannya. Oleh sebab itu, tanaman anggrek M petola dapat dilakukan upaya serius dalam membudidayakan  atau  mengembangkan  sehingga mencegah dari kepunuhan pada tanaman anggrek ini di alam [5].
Perbanyakan tanaman anggrek secara konvensional dapat dilakukan dengan cara generatif  ataupun dengan cara vegetatif. Kendala dari perbanyakan dengan cara konvensional  adalah  waktu  yang  dibutuhkan  sangat lama dalam menyediakan bibit sehingga diperlukannya metode  alternatif   yang  jauh  efektif   yaitu  dengan menggunakan  teknik  kultur  jaringan.  Dengan menggunakan  teknik  kultur  jaringan  dalam menyediakan  bibit  tanaman  dengan  jumlah  yang banyak dan seragam serta waktu yang dibutuhkan juga singkat [6].
Keberhasilan  dalam  teknik  perbanyakan in  vitro dapat  dipengaruhi  oleh  media  dasar,  ZPT  (Zat Pengatur  Tumbuh)  dan  kondisi  lingkungan  kultur. Kultur  jaringan in  vitro dapat  berhasil  apabila  dalam proses  perbanyakannya  di  pengaruhi  penggunaan ZPT, media dasar, pemilihan jenis eksplan, sterilisasi dan  juga  faktor  lingkungan  kultur  dengan  baik  [7] Menurut  Purita,  dkk  [8],  menyatakan  bahwa  dalam menggunakan  teknik  kultur  jaringan  tanaman, keberadaan Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) mempunyai pengaruh  yang  sangat  nyata.  Dalam  menginduksi penggandaan  tunas  untuk  memperbanyak  tunas umumnya dengan menggunakan ZPT jenis sitokinin. ZPT  jenis  sitokinin  yang umum  digunakan  di  kultur jaringan  yaitu  BAP  (6- Benzyl  Amino  Purine )  akan ditambahkan kedalam media tumbuh yaitu pada media Murashige and Skoog .
BAP  mempunyai  fungsi  yang  dapat  merangsang pertumbuhan  tunas,  berpengaruh  dalam  metabolism sel, dan juga berfungsi sebagai pendorong dari proses fisiologis  yang  nantinya  akan  bergantung  pada
konsentrasi  yang  diberikan.  Menurut  Ratnasari,  dkk [9], menyatakan bahwa semakin tingginya konsentrasi sitokinin yang diberikan maka akan memiliki dampak pada jumlah tunas yang akan terbentuk. Namun dalam pembentukan  pada  masing-masing  tunas  akan mengalami  penghambatan  sehingga  diperlukannya penentuan  dalam  jumlah  konsentrasi  yang  tepat. Menurut  Nur’Anisa,  dkk  [10],  konsentrasi  BAP  1,5 ppm  merupakan  perlakuan  yang  efektif   terhadap jumlah  tunas  pada  eksplan  anggrek  Hitam  ( Coelogyne pandurata Lindl.) Tujuan  dalam  penelitian  ini  yaitu  mengetahui pengaruh  konsentrasi  BAP  terhadap  pertumbuhan tunas  ( M  petola (Blume)  Lindl.)  secara in  vitro serta menentukan  BAP  dengan  konsentrasi  optimum terhadap  pertumbuhan  tanaman  Anggrek M  petola secara in vitro .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Kultur Jaringan  Tanaman  Jurusan  Biologi  Gedung Solahuddin  Sanusi  Universitas  Islam  Negeri  Sunan Gunang  Djati  Bandung,  Jawa  Barat.  Dilaksanakan pada bulan Januari - Agustus 2021.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi planlet tanaman Anggrek Macodes, MS ( Murashige and Skoog ), gula putih, agar, BAP, alumunium foil, alkohol 70%, plastik anti panas, karet gelang dan plastik wrap. Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi autoklaf,  gelas  ukur,  kompor,  breaker  glass,  panci, gunting,  cawan  petri,  botol  jam,  Laminar  Air  Flow (LAF), Bunsen, scalpel, pinset, timbangan analitik, lux meter dan thermo hygro.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan  faktor  tunggal  tanpa  kombinasi  yaitu konsentrasi BAP dengan  4 taraf  konsentrasi dengan media dasar MS, yaitu: B0: 0 ppm; B1: 0.5 ppm; B2: 1 ppm;  dan  B3:  1.5  ppm.  Masing-masing  perlakuan diulang sebanyak 3 kali ulangan sehingga diperoleh 12 unit percobaan. Masing-masing botol kultur di tanami 2 eksplan. Eksplan yang digunakan merupakan planlet M petola . Prosedur  penelitian  meliputi  sterilisasi  alat, pembuatan  media,  sterilisasi  media,  inokulasi  dan pemeliharaan.  Pada  tahap  sterilisasi  alat,  botol  jam dicuci dengan air keran mengalir hingga bersih dan di autoklaf  selama 20 menit dengan suhu 121 ˚C. Pada
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
tahap  pembuatan  media,  penggunaan  bahan pembuatan  media  yaitu  MS,  gula  putih,  dan  agar dipanaskan  hingga  homogen  dan  ditambah  dengan BAP. Tahap sterilisasi media, pada tahap ini botol jam yang sudah terisi sebanyak 25 mL larutan media dasar di  autoklaf   selama  15  menit  dengan  suhu  121  ˚C. Tahap  inokulasi,  pada  tahap  ini  planlet  anggrek macodes  dipotong  pada  bagian  batangnya  dengan ukuran  1.5  cm  lalu  potongan  eksplan  anggrek macodes ditanam pada yang telah disterilisasi. Tahap pemeliharaan, eksplan anggrek macodes yang telah di inokulasi  disimpan  dalam  ruang  inkubasi  yang sebelumnya  telah  dibersihkan  dengan  alkohol  70% sebagai salah satu bentuk dari pemeliharaan.
Parameter  pengamatan  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  yaitu  presentase  kelulushidupan,  tinggi batang,  jumlah  tunas,  jumlah  akar  dan  faktor lingkungan yang diamati setiap 2 hari sekali. Data yang diperoleh  diuji  secara  statistik  dan  deskriptif.  Pada pengamatan faktor lingkungan dan presentase kelulus hidupan  disajikan  secara  deskriptif   sedangkan  pada pengamatan  tinggi  batang,  jumlah  tunas  dan  jumlah akar  dilakukan  secara  statistik  dengan  uji  Kruskal- Wallis dan jika hasil berbeda nyata maka dilakukan uji lanjutan Mann Whitney U Test dengan menggunakan aplikasi  statistic  SPSS  ( Statistical  Product  and  Service Solutions ) 26.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Presentase Kelulus Hidupan
Keberhasilan  pada  teknik  kultur  jaringan bergantung pada banyak faktor. Faktor tersebut antara lain yaitu berupa eksplan, media dan juga lingkungan fisik  kultur  [1].  Apabila  salah  satu  dari  faktor  tidak terpenuhi  akan  menyebabkan  kegagalan  pada pertumbuhan eksplan dan hasilnya akan tidak sesuai dengan  apa  yang  diharapkan.  Selain  itu  juga, keberhasilan  dalam  menggunakan  teknik  kultur jaringan juga dapat dipengaruhi oleh faktor eksogen dan endogen. Pada faktor eksogen meliputi media zat pengatur tumbuh dan faktor lingkungan seperti suhu, kelembaban  dan  intensitas  cahaya  sedangkan  pada faktor endogen meliputi eksplan yang digunakan [11] Dari  hasil  pengamatan,  didapatkan  hasil  bahwa pada  eksplan  60  HST  tidak  terdapat  eksplan  yang mengalami  kontaminasi,  sehingga  dapat  dilihat  pada Gambar  1  menunjukkan bahwa  pada  semua  eksplan yang ditanam pada media kultur dapat bertahan hidup
hingga  diakhir  penelitian.  Eksplan  dapat  bertahan hidup hingga akhir penelitian dapat disebabkan tidak adanya  kontaminasi  berupa  jamur  atau  bakteri  pada eksplan yang dikultur. Hal ini sesuai dengan pendapat Sagala dkk [12] bahwa kontaminasi yang terjadi pada kultur  jaringan  dapat  di  identifikasi  setelah  media tanam  didiamkan  selama  4  hari.  Dan  pertumbuhan kontaminan  akan  terus  berlanjut  hingga  berminggu minggu kemudian.
Gambar 1. Kelulus Hidupan Eksplan M petola Setelah 60 HST. Kontaminasi disebabkan oleh adanya pertumbuhan jamur atau bakteri pada media dan juga pada  eksplan.  Pada  kontaminasi  jamur  dapat  di identifikasi  dengan  munculnya  koloni-koloni  yang berwarna putih sampai berwarna abu-abu. Sedangkan pada  kontaminasi  bakteri  dapat  ditandai  dengan adanya  koloni-koloni  pada  bakteri  yang  berwarna kuning  dan  kecoklatan  sehingga  dapat  membuat eksplan  akan  menjadi  basah  atau  berlendir.  Tingkat eksplan  yang  dapat  bertahan  hidup  dalam  penelitian ini  juga  dipengaruhi  oleh  faktor  kandungan  nutrisi pada  media  yang  tersedia  dalam  jumlah  yang  cukup. Media Murashige and Skoog (MS) ini mengandung unsur hara makro dan mikro sehingga dapat meningkatkan presentase eksplan hidup pada teknik kultur jaringan [13].
Tinggi Batang Berdasarkan uji statistik menggunakan uji Kruskal- Wallis  menunjukan  bahwa  nilai  Asymp.Sig  0.185  > 0.05 sehingga dapat diketahui bahwa data dari tinggi batang  memiliki  hasil  yang  tidak  berbeda  signifikan. Berdasarkan  nilai  rata-rata  tinggi  batang  (Gambar  2) yang  menunjukan  bahwa  tanpa  penggunaan  ZPT
0 20 40 60 80 100 120 B0 B1 B2 B3 Ke lu lu s H id u p an E kspla n (% ) Konsentrasi BAP I II III
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
dapat menaikan nilai rata-rata terhadap pertumbuhan tinggi batang eksplan.
Gambar  2.  Rerata  Tinggi  Batang  Eksplan M  petola Setelah 60 HST.
Pada  Gambar  2  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  B0  (BAP  0  ppm)  merupakan  konsentrasi yang berpengaruh tinggi terhadap pertumbuhan tinggi batang yaitu sebesar 1.77±0.798 cm sampai dengan 60 HST.  Sedangkan  konsentrasi  1.5  ppm  merupakan konsentrasi yang paling rendah terhadap pertumbuhan tinggi  batang,  yaitu  sebesar  0.64±0.058  cm.  Hal  ini diduga  bahwa  konsentrasi  ZPT  eksogen  yang ditambah pada eksplan M petola terlalu tinggi sehingga menghambat pertumbuhan eksplan. Menurut Hartati dkk  [14],  tinggi  pada  tanaman  merupakan  ukuran pertumbuhan  yang  paling  mudah  untuk  dilihat. Adanya pertambahan tinggi eksplan dapat disebabkan oleh  dua  proses  yaitu  pembelahan  dan  juga pemanjangan  sel.  Perbadaan  rata-rata  pada  tinggi batang  eksplan  konsentrasi  0  ppm  yang  lebih  tinggi dibandingkan dengan perlakuan lain dapat disebabkan penggunaan konsentrasi BAP pada perlakuan selain 0 ppm terlalu tinggi sehingga menghambat pertumbuhan  eksplan.  Menurut  Anggit  [15], konsentrasi  ZPT  yang  diberikan  terlalu  tinggi  atau tidak  tepat  akan  menyebabkan  terhambatnya pertumbuhan eksplan dikarenakan hormon sitokinin yang diberikan menjadi eksesif. Konsentrasi sitokinin yang  tepat  sangat  dibutuhkan  untuk  menunjang pertumbuhan  eksplan  apabila  konsentrasi  yang diberikan terlalu tinggi dapat menyebabkan kematian pada  eksplan  dikarenakan  dengan  pemberikan sitokinin yang tinggi menjadi toksik bagi eksplan yang dikultur [16].
Pertambahan  tinggi  pada  eksplan  dapat dipengaruhi oleh adanya penambahan ZPT khususnya
pemberian  ZPT  berupa  sitokinin  (BAP).  ZPT merupakan  senyawa  organik  bukan  nutrisi  dimana pemberian dalam konsentrasi yang rendah akan dapat mendorong  pertumbuhan  eksplan,  namun  apabila diberikan dengan konsentrasi yang tinggi maka akan menghambat  pertumbuhan  dan  perkembangan tanaman  [17].  Penggunaan  media  MS  ( Murashige  and Skoog )  juga  memiliki  pengaruh  dalam  pertumbuhan. Menurut Tanjung [18], menyatakan bahwa media MS memiliki kandungan zat organik dan anorganik serta vitamin yang dapat memicu jaringan akan tumbuh dan membentuk  individu  baru.  Pada  media  MS  terdapat kandungan  vitamin  Thiamin  atau  Vitamin  B1  yang dapat meningkatkan aktivitas hormon sehingga dapat mempercepat  pembelahan  sel  yang  terjadi  pada eksplan [19].
Jumlah Tunas Berdasarkan uji statistik menggunakan uji Kruskal- Wallis  menunjukan  bahwa  nilai  Asymp.Sig  0.139  > 0.05 sehingga dapat diketahui bahwa data dari jumlah tunas  memiliki  hasil  yang  tidak  berbeda  signifikan. Berdasarkan nilai rata-rata dari jumlah tunas (Gambar 3)  menunjukkan  bahwa,  pada  konsentrasi  0  ppm merupakan  konsentrasi  yang  pertumbuhan  tunasnya paling banyak.
Gambar  3.  Rerata  Jumlah  Tunas  Eksplan M  petola Setelah 60 HST.
Pada  Gambar  3.  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  B0  (BAP  0  ppm)  merupakan  konsentrasi dengan  rata-rata  yang  paling  tinggi  terhadap  jumlah tunas  yang  tumbuh,  yaitu  sebesar  2.4±1.528  sampai dengan 60 HST. Sedangkan pada konsentrasi 1.5 ppm merupakan  konsentrasi  yang  memiliki  nilai  rata-rata yang  rendah  terhadap  jumlah  tunas,  yaitu  sebesar  0 buah.  Pertumbuhan  tunas  pada  eksplan  dapat dipengaruhi  oleh  hormon  sitokinin.  Kemampuan
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
eksplan dalam meningkatkan multiplikasi tunas dapat dipengaruhi oleh jenis sitokinin dan juga konsentrasi yang digunakan [9].
ZPT  merupakan  senyawa  organik  bukan  nutrisi dimana  pemberian  dalam  konsentrasi  rendah  akan mendorong  pertumbuhan  tanaman,  namun  jika konsentrasi  tinggi  maka  akan  menghambat pertumbuhan  tanaman.  Jumlah  pertumbuhan  tunas yang berbeda-beda dapat disebabkan oleh kemampuan eksplan dalam menyerap unsur hara yang terdapat  didalam  media  MS  dan  juga  zat  pengatur tumbuh yang diberikan [9]. Menurut Ratnasari dkk [9], semakin tinggi pemberian konsentrasi sitokinin yang diberikan  maka  akan  berdampak  pada  jumlah  tunas yang  akan  terbentuk.  Menurut  Suhenteka  dan  Sobir [20],  tanaman  yang  digunakan  berbeda  dapat merespon  hormon  yang  diberikan  dalam  berbagai konsentrasi secara berbeda pula.

## Jumlah Akar
Berdasarkan uji statistik menggunakan uji Kruskal- Wallis  menunjukan  bahwa  nilai  Asymp.Sig  0.139  > 0.05 sehingga dapat diketahui bahwa data dari jumlah akar  memiliki  hasil  yang  tidak  berbeda  signifikan. Berdasarkan nilai rata-rata dari jumlah akar (Gambar 4)  menunjukkan  bahwa,  pada  konsentrasi  0  ppm merupakan  konsentrasi  yang  memiliki  nilai  rata-rata yang paling tinggi pada pertumbuhan akar.
Gambar  4.  Rerata  Jumlah  Akar  Eksplan M  petola Setelah 60 HST.
Pada  Gambar  4.  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  B0  (BAP  0  ppm)  merupakan  konsentrasi dengan nilai rata-ratanya lebih tinggi terhadap jumlah akar yang tumbuh, yakni 2.4 ± 2.082 sampai dengan 60 HST. Sedangkan konsentrasi 0.5 ppm, 1 ppm, dan
1.5 ppm merupakan konsentrasi dengan nilai rata-rata yang rendah terhadap pertumbuhan akar. Hal ini dapat terjadi ketika hormon sitokinin yang digunakan sangat tinggi  sehingga  pertumbuhan  akar  pada  eksplan terhambat. Menurut Su dkk [20], media tanam tanpa penambahan hormon sitokinin lebih baik dibandingkan dengan media tanam yang ditambahkan hormon  sitokinin  untuk  pembentukan  akar,  hal  ini disebabkan  hormon  sitokinin  dapat  menghambat biosintesis auksin endogen dalam pembentukan akar pada  eksplan.  Menurut  Sudiyanti  dan  Rusbana  [21], dalam pembentukan akar dibutuhkannya konsentrasi auksin yang tepat untuk dapat memacu pertumbuhan akar.
Penambahan  zat  pengatur  tumbuh  BAP  pada media  kultur  jaringan in  vitro lebih  mengarah  pada pembentukan  tunas  namun  cenderung  dalam menghambat pembentukan akar. Menuru Yatim [22], kemunculan  akar  sering  terjadi  setelah  eksplan  atau jaringan yang dikulturkan telah membentuk tunas dan dari  tunas-tunas  yang  telah  terbentuk  akan merangsang  pembentukan  akar.  Dengan  pemberian konsentrasi  sitokinin  eksogen  yang  tinggi  dan terdapatnya sitokinin endogen maka akan menghambat dalam pertumbuhan dan pembentukan akar [23].
Faktor Lingkungan Pada  pengamatan  60  HST  (Hari  Setelah  Tanam) dilakukan  pengukuran  terhadap  faktor  lingkungan yang  terdiri  dari  pengukuran  suhu,  kelembaban  dan intensitas cahaya yang dilakukan di ruang inkubasi.
Tabel 1. Faktor Lingkungan Suhu Kelembaban Intensitas Cahaya 22.3ºC 58% 800 Lux
Berdasarkan  data  yang  telah  diperoleh,  suhu ruangan  inkubasi  adalah  sekitar  22.3ºC.  Suhu  dapat berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  dan  juga perkembangan  tanaman  maupun  mikroorganisme. Suhu  merupakan  salah  satu  faktor  yang  memiliki pengaruh  terhadap  keberhasilan  kultur  jaringan. Tanaman secara umum tumbuh di lingkungan dengan suhu yang tidak sama setiap harinya, seperti pada siang hari  dengan  malam  hari  pada  tanaman  dapat mengalami perbedaan suhu yang sangat besar. Kondisi tersebut  juga  bisa  dilakukan  di  laboratorium  kultur jaringan  namun  pada  dasarnya  laboratorium  kultur
2,4 0 0 0 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 B0 B1 B2 B3 Re rata J u m lah Akar Konsentrasi BAP
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
jaringan  mempunyai  suhu  ruang  yang  konstan  baik pada  siang  maupun  malam  hari  [24].  Kisaran  suhu yang  tepat  akan  membantu  pertumbuhan  eksplan. Menurut  Adawiyah  [25],  kisaran  suhu  yang  paling banyak digunakan yaitu 20-27 ºC.
Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  kelembaban ruang  inkubasi  yaitu  berkisar  58%.    kelembaban merupakan  salah  satu  faktor  penting  yang  dapat mempengaruhi  dalam  pertumbuhan  dan  juga perkembangan  tanaman  kultur.  Menurut  Chen  [26], tingginya  kelembaban  akan  memiliki  kecenderungan yang  mengakibatkan  ketidaksempurnaan  dalam perkembangan  fisiologi  serta  morofologi  pada eksplan,  diantaranya  bentuk  daun  abnormal,  tunas hyperhydric  dan  juga  stomata  tidak  berfungsi.  Suhu dan  juga  intensitas  cahaya,  kelembaban  juga merupakan  faktor  yang  tidak  kalah  penting. Kelembaban  di  dalam  ruang  inkubasi  umumnya berkisar  70%.  Kelembaban  di  dalam  ruang  inkubasi lebih  rendah  dari  50%  akan  menyebabkan  media tanam menjadi kering sedangkan apabila kelembaban lebih tinggi maka akan menyebabkan kontaminasi oleh mikroorganisme [27].
Cahaya merupakan salah satu faktor yang penting dalam  pertumbuhan  juga  perkembangan  tanaman dikarenakan  selain  memiliki  peran  dalam  proses fotosintesis  juga  berperan  sebagai  pemicu  respon morfogenesis khususnya pada tahap awal pertumbuhan  tanaman.  Berdasarkan  data  yang diperoleh, intesitas cahaya di ruang inkubasi berkisar 800  lux.  Menurut  Basri  [7],  intensitas  cahaya  yang digunakan  dalam  ruang  kultur  umumnya  jauh  lebih rendah  dari  pada  intensitas  cahaya  yang  diperlukan oleh  tanaman  dalam  keadaan  normal,  Intensitas cahaya dalam ruang kultur untuk pertumbuhan tunas pada  umumnya  membutuhkan  sekitar  600-1000  lux. Menurut  Adawiyah  [25],  peranan  dari  penggunaan cahaya  tidak  terlalu  dibutuhkan  pada  fotosintesis in vitro dibandingkan  dengan  penggunaan  cahaya  pada fotosintesis in vivo , karena laju dari fotosintesis in vitro relatif   sangat  rendah  disebabkan  eksplan  lebih bergantung  pada  suplai  sukrosa  dari  luar  atau  dari media. Pengaruh cahaya dalam teknik kultur jaringan terletak pada fotomorfogenesisnya. Menurut Adawiyah [25] cahaya berperan penting dalam kultur jaringan  karena  memiliki  pengaruh  terhadap fotomorfogenesis bukan terhadap fotosintesis.

## KESIMPULAN
Tidak  adanya  perlakuan  yang  berpengaruh terhadap konsentrasi BAP yang diberikan serta tidak ditemukan konsentrasi yang optimum. Berdasarkan uji statistik menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata terhadap semua parameter, namun rerata tertinggi dari parameter tinggi batang, jumlah tunas dan jumlah akar yaitu pada konsentrasi 0 ppm, yakni 1.77±0.798 cm, 2.4 ± 1.528 dan 2.4 ± 2.082.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  G. Gunawan, “Pengaruh Zat Pengatur Tumbuh Tunas (BAP, IBA, GA3, Myoinositol dan Mineral) dan Umur Kultur  terhadap  Pertumbuhan  Tanaman  Macodes petola Secara in vitro,” Bandung: UIN Sunan Gunung Djati, 2016.
[2]  M,  Silalahi  and  Nisyawati,  "Pemanfaatan  Anggrek Sebagai  Bahan  Obat  Tradisional  pada  Etnis  Batak Sumatera Utara," Berita Biologi ., vol. 14 no. 2, pp. 187- 193, 2015.
[3]  M. W, Chase, K. M, Cameron, R. L, Barret, and J. V, Freudestein,  "DNA  Data  and  Orchidaceae Systematics:  A  New  Phylogenetic  Classification,"
Orchid Conservation ., pp. 69-89, 2003.
[4]  Peraturan  Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomer  7 Tahun  1999.  "Pengawetan  Jenis  Tumbuhan  dan Satwa", Jakarta, 1999.
[5]  L.  Damayanti,  “Konsentrasi  Colchicine  terhadap Morfologi Macodes  petola ,”  Bogor:  Institut  Pertanian Bogor, 2015.
[6]  T. Setiawati, M. Nurzaman, E. S. Rosmiati, and G. G. Pitaloka,  “Pertumbuhan  Tunas  Anggrek Dendrobium sp.  Menggunakan  Kombinasi Benzyl  Amino  Purin (BAP)  dengan  Ekstrak  Bahan  Organik  pada  Media Vacin  and  Went  (VW),” J. Pro-Life ,  vol.  3,  no.  3,  pp. 143–152, 2016.
[7]  A.  H.  H.  Basri,  “Tanaman  Bebas  Virus,” Agro  Biog. , vol. 10, no. 6, pp. 64–73, 2016.
[8]  S. Y. Purita, N. Rahmi, and N. Basuki, “Pengaruh Zat pengatur Tumbuh Jenis BAP terhadap Pertumbuhan Planlet Sub Kultur Jaringan Tanaman Nanas ( Ananas comosus L. Merr),” J. Produksi Tanam. , vol. 5, no. 7, pp. 1207–1212, 2017.
[9]  B. D. Ratnasari., E. Suminar, A. Nuraini, and A. Ismail, “Pengujian  efektivitas  berbagai  jenis  dan  konsentrasi sitokinin  terhadap  multiplikasi  tunas  mikro  pisang ( Musa paradisiaca L.) secara In Vitro,” Kultivasi , vol. 15, no. 2, pp. 74–80, 2016.
[10] Nur'Anisa, R. S, Wulandari and Asnawati  “Pengaruh Terhadap Multiplikasi Tunas Anggrek Hitam ( Coelogyne
Muchsin et al, The Effect of Various Concentration BAP …
pandurate Lindl.) Secara Kultur Jaringan,” Jurnal Hutan Lestari , vol. 4, no. 4, pp. 591–595, 2016.
[11] Y.  A.  Nugroho,  Y.  Sugito,  L.  Agustina,  and  S. Soemarno,  “Kajian  Penambahan  Dosis  Beberapa Pupuk Hijau dan Pengaruhnya
Terhadap
Pertumbuhan  Tanaman  Selada  ( Lactuca  sativa L.),” J. Exp. Life Sci. , vol. 3, no. 2, pp. 45–53, 2013.
[12] D.  Sagala,  H.  W.  Tubur,  U.  F.  Jannah,  C.  Sinath, “Pengaruh  BAP  Terhadap  Pembentukan  dan Pembesaran  Umbi  Mikro  Kentang  Kultivar Granola,“ Jurnal  Agroqua .,  vol.  10,  no.  1,  pp.  5–12, 2012.
[13] D. Yanti and M. N. Isda, “Induksi Tunas dari Eksplan Nodus  Jeruk  Kasturi  ( Citrus  microcarpa Bunge  .) dengan  Penambahan  6- Benzyl  Amino  Purine (  BAP  ) Secara  in  vitro,” Biospesies ,  vol.  14,  no.  1,  pp.  53–58, 2021.
[14] S. Hartati, A. Budiyono, and O. Cahyono, “Pengaruh NAA  dan  BAP  Terhadap  Pertumbuhan  Subkultur Anggrek  Hasil  Persilangan Dendrobium  biggibum X Dendrobium liniale ,” Caraka Tani J. Sustain. Agric. , vol. 31, no. 1, p. 33, 2016.
[15] W.  S.  S,  Anggit,  “Pengaruh  Konsentrasi  BAP  dan Macam  Media  Terhadap  Pertumbuhan  Awal ( Anthurium  hookeri ),”  Surakarta:  Universitas  Sebelas Maret, 2008.
[16] S,  Fatmawati,  T.  Zairin  and  Djufri,  “Pengaruh Penambahan Bahan Organik Terhadap Pertumbuhan Akar  Kultur  Jaringan  Tanaman  Kentang  ( Solanum tuberosum L.),” Jurnal Edubio Tropika , vol. 3, no. 2, pp.
51–97, 2015.
[17] S.  E.  Nurhanis,  R.  S.  Wulandari,  and  R.  Suryantini, “Korelasi  Konsentrasi  IAA  dan  BAP  Terhadap Pertumbuhan  Kultur  Jaringan  Sengon  ( Paraserianthes falcataria ),” J. Hutan Lestari , vol. 7, no. 2, pp. 857–867,
2019.
[18] M.  F.  Tanjung,  “Pengaruh  Konsentrasi Benzyl  Amino Purin ( BAP ) dan Indole Acetic Acid ( IAA ) pada Media MS  Terhadap  Pertumbuhan  Planlet  Krisan ( Chrysanthemum sp.) Secara in Vitro,” Sumatera Utara: Universitas Muhammadiyah, 2020.
[19] R, Amalia, “Pengaruh Jenis dan Konsentrasi Vitamin Terhadap  Pertumbuhan  dan  Perkembangan  Biji Dendrobium laxiflorum J.J Smith Secara In Vitro.,” Jurnal
Sains dan Seni Pomits , vol. 1, no. 1, pp. 1–5, 2013.
[20] Suhenteka  and  F.  Sobir,  “Peranan  Zat  Pengatur Tumbuh dalam Perbanyakan Tanaman melalui Kultur Jaringan,” Jurnal Agro Biogen , vol. 7, no. 1, pp. 63–68,
2010.
[21] Y.  Su,  Y.  Liu,  and  X.  Zhang,  “Auxin-cytokinin Interaction  Regulates  Meristem  Development,” Moleculler Plant. , vol. 4, no. 4, pp. 616–625, 2011.
[21] S.  Sudiyanti  and  T.  B.  Rusbana,  “Inisiasi  Tunas Kokoleceran  ( Vatica  bantamensis )  pada  Berbagai  Jenis Media  Tanam  dan  Konsentrasi  BAP  ( Benzyl  Amino Purine ) Secara In Vitro,” J. Agro. , vol. IV, no. 1, pp. 1– 14, 2017.
[23] H.  Yatim,  “Multiplikasi  Pisang  Raja  Bulu  ( Musa paradisiaca L.  AAB  GROUP)  pada  Beberapa Konsentrasi Benzyl  Aminopurine (BAP)  Secara  In Vitro,” J.  Agroteknologi. ,  vol. 4,  no.  3,  pp.  1989–1995, 2016.
[24] I. Rahmi, I. Suliansyah, and T. Bustamam, “Pengaruh pemberian  beberapa  konsentrasi  BAP  dan  NAA terhadap multiplikasi tunas pucuk jeruk kanci ( Citrus sp.) secara in vitro,” Jerami. , vol. 3, no. 3, pp. 210–219, 2010.
[25] A.  Adawiyah,  “Pengaruh  Giberelin  (GA3)  dan  Air Kelapa  Terhadap  Organogenesis  Kultur  Jaringan Krisan  ( Chrysanthemum  morifolium Ram.)  Varietas Mustika Kaniya,” Bandung: UIN Sunan Gunung Djati, 2011.
[24] J,  Chen,  R.  J,  Henry  and  D.  B,  McConnell, “Development  of   New  Foliage  Plant  Cultivars.,” Florida Agricultural Experiment Sta. Journa., pp. 117–121, 2002.