## EKSTRAKSI DAN KARAKTERISASI EKSTRAK  ZAT WARNA RUMPUT LAUT
(Eucheuma cottonii)
[Extraction and Characterization of Seaweed Pigment Extract ( Eucheuma cottonii) ]
Henny H. Veronika 1* , Mappiratu 1 ,  Ni Ketut Sumarni 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
Diterima 27 November 2016 , Disetujui 4 Januari 2017

## ABSTRACT
This study  was done for the  following purposes: to found solution pH as an extract to result from an extract  color  substance  with  high  concentration  to  found  time  of  extraction  which  result  extract  with high  concentration.  Determination  of  the  best  eluent  which  can  be  used  in  the  separation  of pigmented compound from the extract, by using Thin Layer Chromatography (TLC) and determination of  spectrum  for  each  functional  molecule.  This  study  was  done  by  a  maceration-extraction  method, determination of pH using phosphate buffer pH 5-6 and time of extraction during 1-4 hour, separation based  on  TLC  and  analysis  FTIR  spectrums.  The  result  showed  that  ethanol  extract  of  Eucheuma cottonii  was  contained  the  ficoeritrine  compound.  This  extract  has  appeared  brown  yellow  in  acid solution  and  base  solution  with  high  absorbance  at  pH  9  and  time  extraction  at  1  hour.  Maximum absorbance  from  the  extract  was  330  nm  and  the  best  eluent in  separation  of  this  chemical  by  TLC preparation,  it  was  mixture  of  Chloroform-Acetic  Acid-Ethanol  in  composition  of  30  :  15  :  2  (v/v/v), which  indicating  there  were  at  least  four  compounds  within  the  extract,  two  of  these  were  coloring brown  yellow  and  other  two  were  colorless  and  it  was  free  hydroxyl  function  and  bind  in  hydrogen bound, also C=O function.
Key words: Extraction, Eucheuma cottonii, buffer phospat, TLC .

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  Ekstraksi  dan  Karakterisasi  Ekstrak  Zat  Warna  Rumput  Laut Eucheuma  coottonii .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk    mengetahui:  pH  larutan  buffer  sebagai pengekstrak  yang  menghasilkan  ekstrak  zat  warna  dengan  absorbansi  tinggi,  mendapatkan  waktu ekstraksi  yang  menghasilkan  ekstrak  dengan  absorbansi  tinggi,  mendapatkan  jenis  eluen  yang  baik digunakan  dalam  pemisahkan  zat  warna  ekstrak Eucheuma  cottonii menggunakan  metode Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  serta  spektrum  serapan  dan  gugus  fungsi.  Pencapaian  tujuan dilakukan  melalui  ekstraksi Eucheuma  cottonii secara  maserasi,  dilanjutkan  dengan  penentuan  pH menggunakan buffer fosfat pH 5 – 9 dan waktu ekstraksi selama 1 – 4 jam serta melakukan analisis dengan  KLT  dan  FTIR.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  ekstrak  zat  warna Eucheuma  cottonii mengandung  kelompok  senyawa  fikoeritrin.  Ekstrak Eucheuma  cottonii dalam  larutan  asam  hingga basa berwarna kuning kecoklatan dengan nilai absorbansi tertinggi pada pH 9 dan waktu ekstraksi 1 jam. Serapan maksimum ekstrak Eucheuma cottonii adalah 330 nm dan eluen  yang baik digunakan dalam  pemisahan  komponen  menggunakan  KLT  preparatif  adalah  eluen  campuran  kloroform/asam asetat/etanol    30  :  15  :  2  (v/v/v)  yang  memberikan  indikasi  ada  empat  jenis  senyawa  dalam  ekstrak dan memiliki gugus fungsi yakni gugus hidroksi bebas dan terikat ikatan hidrogen serta gugus C=O.
Kata kunci : Ekstraksi, Eucheuma cottonii, buffer fosfat, KLT .

## LATAR BELAKANG
Rumput  laut  ( seaweed )  secara bahasa  ilmiah  dikenal  nama  alga,  salah satunya Eucheuma  cottonii.  Eucheuma cottonii termasuk  dalam  kelompok  alga merah ( Rhodopyceae ) dan banyak dimanfaatkan untuk pembuatan karaginan (Djaeni et  al .,  2012).  Rumput  laut  merah (Rhodophyta)  termasuk  jenis  rumput  laut berpotensi  ekonomi  tinggi,  mengandung vitamin,  mineral,  serat,  natrium,  kalium, dan  senyawa  bioaktif  yang  berupa  hasil metabolit  sekunder,  dan  nutrisi  yang paling  penting  adalah  pigmen  (De  Fretes H. et  al .,    2012;  Yunizal,  2004).  Banyak penelitian  mengemukakan  komposisi  dan kandungan  pigmen  dari  rumput  laut sehingga diperoleh informasi untuk mengembangkan dan mengeksplorasi beberapa produk rumput laut.
Produk perwarna atau pigmen alami pada  bahan  makanan  kembali  banyak diminati dikalangan masyarakat mengingat bahaya dari penggunaan pewarna  sintesis.  Pewarna  alami  yang tersedia  saat  ini  hanya  dimanfaatkan secara  tradisional  dan  pada  umumnya berbahan  dasar  tanaman  tingkat  tinggi, seperti  kunyit,  daun  pandan,  dan  daun suji.  Akan  tetapi,  pewarna  alami  masih kalah  bersaing  dengan  pewarna  sintesis yang  dijual  di  pasaran.  Fenomena  ini mendorong kalangan ilmiah untuk mengembangkan lebih luas akan manfaat pigmen Eucheuma  cottoni sebagai  bahan pewarna alami yang aman dan sehat.
Rumput  laut  merah  mengandung pigmen  klorofil  dan  juga  fikoeritrin  dan fikosianin  sebagai  pigmen  asesoris  atau pelengkap  dalam  proses  fotosintesis,  dan juga  mengandung  polisakarida  berupa karagenan  dan  agar,  serta  mengandung pigmen  yang  banyak  dimanfaatkan  pada bidang  farmasi  (Mc    Hugh et  al .,    2003).
Pigmen berperan untuk membantu menangkap cahaya yang digunakan klorofil dalam proses fotosintesis.
Pigmen  utama  pada  orgnasime autotrof,  yaitu  klorofil  dan  juga  memiliki dua pigmen asesoris, yaitu karatenoid dan fikobiliprotein atau fikobilin. Fikobilin terbagi menjadi empat jenis, yaitu fikourobilin,  fikoeritrosianin,  fikosianobilin, dan  fikoeritrobilin,  sedangkan  karatenoid terbagi  menjadi  dua,  yaitu  karoten  dan xantofil (Nobel, 2009).
Pengelompokan  pigmen  dapat  pula ditinjau  dari  sifat  kepolaran,  seperti pigmen  polar  (hidrofilik)  dan  non-polar (lipofilik).  Pigmen  non-polar  diantaranya adalah  karotenoid  dan  klorofil,  dapat terekstrak  pada  beberapa  pelarut  organik dengan  tingkat  kepolaran  tertentu  (indeks kepolaran  d”  5,2).  Sementara  itu,  fikobilin merupakan  pigmen  polar  dan  berasosiasi dengan  protein.  Buffer  ataupun  air  dapat digunakan  untuk  mengekstrak  pigmen fikobilin  tersebut  (Masojidek et  al .,  2004).
Komponen  utama  pigmen  polar  (fikobilin) Cyanobacteria terdiri  dari  tiga  senyawa, yaitu fikosianin, allofikosianin, dan fikoeritrin.
Fikoeritrin  dapat  digunakan  sebagai
pewarna alami untuk menggantikan pewarna sintesis yang bersifat karsinogen. Fikoeritrin mempunyai potensi pasar  yang  luas  karena  permintaan pigmen yang tinggi terhadap jenis pigmen merah yang aman bagi kesehatan (Borowitzka dan Borowitzka, 1988).
Mekanisme  ekstraksi  rumput  laut tentunya terjadi perpindahan massa, yaitu dari  fase  padat  ke  cair.  Pada  penentuan kecepatan  ekstraksi, terlebih dahulu perlu diketahui  kesetimbangan  dan  koefisien transfer  massa  antar  fase.  Mekanisme ekstraksi padat-cair, yaitu terjadi difusi zat aktif  dari  dalam  padatan  ke  bagian permukaan  dari  padatan,  kemudian  zat aktif  yang  berada  di  permukaan  padatan akan berpindah ke dalam cairan (Treybal, 1981).

## METODE PENELITIAN Bahan dan Peralatan
Bahan-bahan yang digunakan adalah  rumput  laut Eucheuma  cottonii, buffer  fosfat  pH  5,  6,  7,  8,    dan  9,  n- heksan,  etanol,  asam  asetat,  kloroform, plat  KLT  silika  gel  G  60  F  254,  kertas saring, indikator universal, dan akuadest.
Peralatan    yang  digunakan  adalah labu  ukur  250  mL,  gelas  kimia  250  mL, gelas  ukur  100  mL  dan  200  mL, erlenmeyer  100  mL,  batang  pengaduk, pipet tetes, shaker, neraca analitik, corong kaca,  corong Buchner , rotary  vakum evaporator,  chamber, spektrofotometer
UV-VIS, sendok zat, micro pipet , penggaris dan pensil.

## Rancangan Penelitian
Penelitian
ini dirancang menggunakan  rancangan  acak  lengkap (RAL),  dengan  dua  variabel  bebas. Perlakuan yang diterapkan adalah pengaruh  pH  buffer  sebagai  larutan pengekstrak yang terdiri atas lima tingkatan pH yang dilakukan secara duplo, sehingga jumlah unit percobaan 2 x 5 = 10 unit. Perlakuan selanjutnya adalah pengaruh waktu ekstraksi yang terdiri atas lima  tingkatan  waktu  yang  dilakukan secara  duplo,  sehingga  jumlah  unit percobaan 2 x 5 = 10 unit.

## Prosedur Penelitian

## Persiapan Rumput Laut
Rumput  laut  yang  baru  dipanen, dikeringanginkan selama 3-4 jam kemudian dipotong-potong dengan ukuran 2-3  cm.  Rumput  laut  kering  kemudian diblender  hingga  diperoleh  rumput  laut dalam bentuk serbuk. Selanjutnya dimasukkan ke dalam kantong plastik dan disimpan untuk diekstrak zat warnanya.

## Ekstraksi  Zat  Warna  dengan  Larutan Buffer pada Berbagai pH
Larutan  buffer  phosfat  dibuat  untuk menghasilkan larutan buffer pH 5, 6, 7, 8, dan  pH  9.  Sejumlah  tertentu  serbuk rumput laut dimasukkan ke dalam erlenmeyer 250 mL, kemudian ditambahkan  larutan  buffer  dengan  pH yang  sesuai  dengan  perbandingan  1  :  10 atas  dasar  berat  per  volume  (satu  bagian
serbuk  rumput  laut,  10  bagian  larutan buffer).  Campuran  selanjutnya  dikocok dengan kecepatan 200 rpm selama 3 jam. Campuran  disaring  dengan  penyaring vakum,  filtrat  yang  dihasilkan  diukur volumya  dan  ditempatkan  dalam  labu ukur.  Filtrat  yang  dihasilkan  diukur serapannya dengan spektrofotometer UV- Vis pada rentang panjang gelombang 300 hingga  800  nm.  Panjang  gelombang optimum  digunakan  untuk  mengukur serapan  perlakuan  lainnya  (blanko  yang digunakan  adalah  larutan  buffer  dengan pH sesuai dengan pH pengekstrak).

## Penentuan Waktu Ekstraksi
Penentuan  waktu  ekstraksi  dilakukan menggunakan pH larutan buffer terseleksi (hasil  perlakuan  sebelumnya).  Sejumlah tertentu  serbuk  rumput  laut  dimasukkan ke dalam erlenmeyer, kemudian ditambahkan larutan buffer terseleksi yang sesuai  dengan  perbandingan  1  :  10. Campuran  dikocok  di  atas  mesin  kocok dengan  waktu  sesuai  perlakuan  (1  jam,  2 jam,  3  jam,  dan  4  jam).  Campuran disaring  menggunakan  corong Buchner , filtrat  yang  dihasilkan  diukur  volumenya dan  ditepatkan  volumenya  dalam  labu ukur. Filtrat selanjutnya diukur serapannya pada panjang gelombang optimum.

## Pemisahan dengan KLT
Filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan dengan rotary vacum evaporator .
Kemudian filtrat pekat ditotolkan pada plat KLT, selanjutnya dielusi dengan campuran etanol heksan dengan berbagai
perbandingan. Noda yang timbul diperkuat dengan uap iodium dan ditentukan nilai Rf pada  setiap  noda.  Pada  pemisahan  KLT preparatif  lainnya,  filtrat  yang  telah ditotolkan  pada  plat  silika  gel    dielusi, kemudian diamati noda yang timbul. Noda yang  muncul  selanjutnya  dikerik,  dan diukur  spektrum    serapan  dan  panjang gelombangnya.

## Pengukuran Spektrum FTIR
Identifikasi  gugus  fungsional  zat warna  rumput  laut Eucheuma  cottonii dilakukan  dengan  pengujian  spektroskopi inframerah (Fourier  Transform  Infrared) yang  dikerjakan  di  Laboratorium  Kimia Organik,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tadulako.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Nilai  Serapan  Ekstrak  Zat  Warna Eucheuma  cotonii  pada  Berbagai  pH

## Larutan Pengekstrak
Rumput  laut  yang  mengandung senyawa  polar  dapat  diekstraksi  dengan menggunakan  pelarut  air  maupun  buffer (Masojidek et  al ,  2004).  Ekstrak  rumput laut yang diekstraksi menggunakan pelarut  buffer  fosfat  dengan  berbagai variasi  pH  menghasilkan  warna  ekstrak kuning kecoklatan.
Berdasarkan hasil pengukuran absorbansi  ekstrak Eucheuma  cottonii dengan menggunakan pelarut buffer fosfat pada  panjang  gelombang  antara  300-800 nm  (Gambar  1),  diperoleh  serapan maksimum  panjang  gelombang    ekstrak zat  warna Eucheuma  cottonii ada  pada
panjang gelombang 330 nm yang menandakan senyawa berwarna.
Gambar 1  Spektrum Serapan

## Ekstrak

## Eucheuma cottonii
Pada  panjang  gelombang  330  nm dilakukan  pengukuran  pada  berbagai variasi  pH  dari  asam,  netral  hingga  basa yakni  pH  5,  6,  7,  8,  dan  pH  9  sebagai sampel.  Dari  hasil  pengukuran  diperoleh nilai  absorbansi  seperti  ditunjukkan  pada Gambar 2.
Gambar 2  Kurva  Hasil  Pengukuran  Absorban pada Berbagai pH Larutan
Pengekstrak
Dari Gambar  2, terlihat bahwa pada panjang gelombang 330 nm menunjukkan absorbansi  maksimum  pada  pH  9  yakni 0,6403  dan  absorbansi  terendah  pH  5
yakni  0,4958.  Hal  ini  berarti  pigmen rumput  laut Eucheuma  cottonii memiliki kelarutan  yang  baik  pada  larutan  buffer pada  pH  9.  Masojidek et  al .,  (2004) melaporkan  bahwa  fikobilin  (fikoeritrin) dapat  diperoleh  dengan  teknik  ekstraksi menggunakan pelarut air maupun penyangga  (buffer)  karena  sifatnya  yang polar. Sebagaiaamana prinsip “ like dissolve  like ”,  yaitu  pelarut  polar  akan melarutkan komponen senyawa polar dan begitupun sebaliknya.
Nilai  absorbansi  ekstrak  zat  warna rumput laut Eucheuma cottonii yang tinggi menandakan konsentrasi yang tinggi pula. Hal  ini  sesuai  dengan  Hukum  Lamber Beer  yakni  absorbansi  berbanding  lurus dengan  konsentrasi.  Artinya  konsentrasi makin  tinggi  maka  absorbansi  yang dihasilkan makin tinggi, begitupun sebaliknya  konsentrasi  makin  rendah absorbansi yang dihasilkan makin rendah.
Dari  hasil  perhitungan  uji  statistik ANOVA  menunjukkan  bahwa  pengukuran absorban  pada  berbagai  variasi  pH memberikan hasil bahwa perlakuan pH 5, 6,  7,  8  dan  pH  9  berbeda  nyata  hal  ini ditunjukkan  dengan  nilai  F  hitung  yakni 205,08  lebih  besar  dari  F  tabel  ( α=0,05)
yakni  5,19  dan  ( α=0,01)  11,39.  Dengan demikian, perlakuan variasi pH memberikan pengaruh yang nyata terhadap  absorbansi  ekstrak  zat  warna rumput laut Eucheuma cottonii .
Absorbansi  ekstrak  rumput  laut yang  diatur  dari  pH  5,  6,  7,  8  dan  9 tampak  memberikan  pengaruh  signifikan
0.4958 0.5316  0.5605 0.5862 0.6403 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 5 6 7 8 9 A b sor b an si pH
terhadap  pigmen  rumput  laut.  Menurut penelitian  Kaswar et  al  ( 2011)  pigmen Eucheuma  cottonii dapat  stabil  pada  pH 3,5  sampai  9,5.    Hal  ini  menguatkan asumsi  bahwa  zat  warna  rumput  laut Eucheuma  cottonii stabil  pada  suasana basa. Menurut Suryaningrum (1988) ekstrak  dilakukan  dalam  suasana  basa pada pH 8-9.  Dengan dasar itu, maka pH 9  dinyatakan  sebagai  pH  ekstraksi terseleksi.
Nilai Serapan Ekstrak Eucheuma cottonii pada Berbagai Waktu Ekstraksi
Pengukuran  lama  ekstraksi  dari ekstrak  rumput  laut Eucheuma  cottonii dengan  menggunakan  pH  buffer  fosfat terseleksi  yakni  pH  9  diperoleh  hasil seperti  ditunjukkan  pada  Gambar  3. Dengan demikian dari pegukuran berbagai  variasi  waktu  menunjukkan bahwa nilai absorbansi maksimum terdapat  pada  lama  ekstrasi  1  jam  yaitu 0,6878.  Pada  Gambar  3,  memperlihatkan absorbansi  ekstrak Eucheuma  cottonii mengalami  penurunan  sejalan  dengan peningkatan  waktu ekstraksi.
Gambar 3 Grafik Penentuan pH Ekstraksi
Dari  hasil  perhitungan  uji  statistik ANOVA  menunjukkan  bahwa  perlakuan penentuan waktu ekstraksi yakni 1 jam, 2 jam,  3  jam  dan  4  jam  memberikan  hasil tidak  berbeda  nyata  yang  ditunjukkan dengan nilai F hitung yakni 1,221482 lebih kecil  dari  F  table  ( α=0,05) yakni 6,59 dan ( α=0,05)  yakni  16,69.  Hal  ini  berarti pengukuran perlakuan variasi waktu ekstraksi  tidak  memberikan  pengaruh yang  nyata  terhadap  absorbansi  ekstrak zat warna rumput laut Eucheuma cottonii .
Lama  ekstraksi  yang  singkat  yakni selama  1  jam  ternyata  memberikan  hasil nyata  nilai tertinggi. Hal ini  dimungkinkan karena ekstraksi selama 1 jam memberikan  waktu  yang  tidak  banyak pada larutan untuk terkena sinar dari luar. Karena  semakin  sedikit  terkena  cahaya, semakin baik kondisi pigmen pada rumput laut Euchema cottoni sehingga kandungan pigmen fikoeritrin pada Eucheuma semakin baik. Kuantitas penyinaran matahari terhadap pertumbuhan  rumput  laut Eucheuma cotto nii juga mempengaruhi kualitas pigmennya.  Semakin  banyak  terkena sinar, maka memacu pigmen klorofil yang mendominasi.
Hal  ini  memacu  pembentukan  zat warna  yang  lebih  banyak  pada  pigmen klorofil.  Fenomena  ini  biasanya  dikenal dengan  proses  adaptasi  kromatik,  yaitu proporsi pigmen dan kualitas pencahayaan  terjadi  penyesuaian  (Aslan, 1998).  Sajilata  &  Singhal  (2006)  dan Gross  (1991)  yang  menjelaskan  bahwa
0.688 0.682 0.676 0.649 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 1 2 3 4 A b sor b an si Waktu (Jam)
perubahan warna pada pigmen menunjukkan  terjadinya  degradasi  akibat terpapar  oleh  cahaya  dalam  waktu  yang cukup lama dengan intensitas tinggi.

## Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis
Guna  memprediksi  jumlah  senyawa yang  mungkin  ada  dalam  ekstrak  rumput laut, maka dilakukan analisis Kromatografi Lapis  Tipis  menggunakan  eluen  tunggal (etanol),  eluen  campuran  antara  heksana dan  etanol  dengan  konsentrasi  heksana yang bervariasi (5%, 10%, 15 %, 20% dan 25%  ),  campuran  antara  kloroform,  asam asetat  dan  air  (30  :  15  :  1  atas  dasar v/v/v),  campuran  kloroform,  asam  asetat dan  etanol  (30  :  15  :  2  v/v/v)  serta campuran  antara  asam  asetat,  air  dan asam klorida  (30 : 10 : 3 v/v/v).
Hasil  yang  diperoleh  (nilai  Rf) disajikan  pada  Tabel  1.  Pada  tabel tersebut  teramati  noda  terbanyak  (empat
noda)    terdapat  pada  penggunaan  eluen campuran kloroform, asam asetat dan air, dan  begitu  juga  pada  penggunaan  eluen campuran  kloroform,  asam  asetat,  dan etanol.  Dari  hasil  tersebut  maka  pelarut etanol memberikan indikasi dapat digunakan  sebagai  eluen  untuk  plat  KLT silika gel.
Pada  penggunaan  eluen  campuran heksan  dan  etanol,  noda  tidak  terpisah dengan  baik,  karena  terdapat  noda  yang memanjang.    Pada  penggunaan  eluen campuran  kloroform/asam  asetat/air  dan kloroform/asam  asetat/etanol,  noda  relatif terpisah  lebih  baik  dibandingkan  dengan eluen  heksan/etanol  dan  etanol  sendiri. Timbulnya empat noda pada penggunaan eluen campuran kloroform/asam asetat/etanol memberikan indikasi ekstrak rumput  laut Eucheuma  cottonii paling sedikit  mengandung  4  jenis  senyawa berwarna.
Tabel 1  Hasil  Pengukuran  Nilai  Rf  Ekstrak  Rumput  Laut Eucheuma  cottonii pada  Berbagai  Jenis Eluen
Jenis Eluen Nilai Rf Noda 1 2 3 4 Etanol 0,5 0,68 0,87 - 5 % Heksana dalam etanol 0,31 0,93 - - 10 % Heksana dalam etanol 0,26 0,92 - - 15 % Heksana dalam etanol 0,31 0,91 - - 20 % Heksana dalam etanol 0,25 - - - 25 % Heksana dalam etanol 0,27 0,9 - - Kloroform/asam asetat/air = 30 :15 : 1 v/v/v 0,28 0,56 0,75 0,9 Kloroform/asam asetat/etanol = 30 : 15 : 2 v/v/v 0,3 0,57 0,76 0,92
Spektrum Serapan FTIR Ekstrak Rumput  Laut  Eucheuma  cottonii  dan

## Hasil Pemisahan dengan KLT
Untuk mendapatkan keterangan tentang  noda  mana  yang  senyawanya berwarna  dan  tidak  berwarna,  dilakukan analisis Kromatografi Lapis
Tipis Preparatif. Hasil yang diperoleh sebelumnya  pada  jenis  eluen  terbaik etanol  memberikan  keterangan  noda dengan  nilai  Rf    0,76  dan  0,92  berwarna coklat  muda  kekuningan,  sama  dengan warna ekstrak encer Eucheuma cottonii .

## Gambar 4  Spektrum Serapan Ekstrak Rumput Laut
Setelah  dilakukan  uji  Kromatografi Lapis  Tipis  selanjutnya  hasil  kerikkan pada  plat  silika  gel  diambil  dan  dilakukan pengukuran spektrum serapan pada daerah  panjang  gelombang  300-800  nm. Dari  hasil  kerikkan  diperoleh  4  noda  Rf tetapi  hanya  dua  nilai  Rf  (Rf  1  dan  Rf  3) yang menujukkan berwarna pada pengujian menggunakan campuran pelarut dan hasil kerikkan. Untuk Rf 2 dan 3 diperoleh warna ekstrak yang pucat dan hasil  pengujian  nilai  absorbansinya  juga kurang baik. Setelah dilakukan pengukuran  spektrofotomeri  uv  vis  hasil
kerikkan, hasil panjang gelombang maksimum  yang  tampak  hanya  ada  pada panjang gelombang 330 nm. Hal ini berarti ekstrak  zat  warna  rumput  laut Eucheuma cottonii hanya  mengandung  satu  jenis senyawa berwarna.
Untuk  memprediksi  jenis  senyawa yang  ada,  dilakukan  analisis  spektrum serapan ultra lembayung dan tampak (UV- Vis)  dan  spektrum  FTIR.    Hasil  analisis spektrum serapan UV-Vis ekstrak
Eucheuma cottonii tersebut
memperlihatkan  serapan  optimum  berada pada panjang gelombang 330 nm, berada pada daerah sinat tampak yang mencirikan senyawa berwarna.
Selanjutnya  dilakukan  pengambilan spektrum FTIR (Gambar  5), menunjukkan adanya puncak absorpsi atau pita absorpsi  di  daerah  bilangan  gelombang lebih  kecil  dari  1400  cm -1 yang  disebut daerah  sidik  jari  ( fingerprint  region )  dan didaerah panjang gelombang gugus fungsi (daerah panjang gelombang antara 1400  dan  4000  cm -1 ).  Pita  adsorpsi  yang muncul terdiri atas pita yang kuat, medium dan  pita  adsorpsi  yang  lemah  serta beberapa  pita  bahu.  Pita  kuat  ditemukan pada bilangan gelombang 3392 dan 1645 cm -1 ;  pita  sedang  ditemukan  pada bilangan gelombang 1532 cm -1 , 1547 cm -1 dan  1563  cm -1 ;  pita  lemah  terdapat  pada bilangan gelombang 884,11 cm -1 , dan pita bahu  pada  bilangan  gelombang  1799,
2324 dan 2367 cm -1 .
Gambar 5  Spektrum FTIR  Ekstrak Zat Warna
Rumput Laut Eucheuma cottonii
Serapan lebar pada bilangan gelombang    3392  cm -1 merupakan  pita serapan  khas  ikatan  hydrogen  (-OH) (Nuryanti,  2013)    yang  berarti  terdapat gugus  hidroksil  yang  dapat  melakukan ikatan  hidrogen.  Puncak  vibrasi  pada panjang gelombang 3250 –  3500 menunjukkan  adanya  gugus  OH  (Daniel, 2011).  Selain  itu  adanya  serapan  yang kuat  pada  bilangan gelombang  1645  cm -1
dapat  ditafsirkan  sebagai  pita  serapan C=O  yang  menandakan  adanya  senyawa amida.  Amida  yang  termasuk  asam karboksilat  mudah  larut  dalam  air  karena adanya  gugus  C=O  dan  N-H  yang memungkinkan terbentuknya ikatan hidrogen.  Dari  struktur  kimia  fikoeritrin, diketahui bahwa senyawa tersebut memiliki gugus fungsi OH, C=O, dan NH.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan sebagai berikut :
1. Nilai  absorban  tertinggi  ekstrak  zat warna rumput laut Eucheuma cottonii
pada pH 9 yaitu 0,6403.
2. Nilai  absorban  tertinggi  ekstrak  zat warna rumput laut Eucheuma cottonii pada waktu 1 jam yaitu 0,6878.
3.  Eluen  terbaik  dalam  memisahkan ekstrak zat warna  rumput laut Eucheuma  cottonii dengan  metode Kromatografi Lapis Tipis adalah eluen campuran kloroform/asam asetat/etanol  30  :  15  :  2  atas  dasar volume/volume/volume (v/v/v)
4. Gugus  fungsi  senyawa  yang  ada dalam  ekstrak Eucheuma  cottonii yaitu  gugus  hidroksil  bebas  dan terikat  dengan  ikatan  hidrogen  (O-H) dan  terdapat  gugus  C=O  senyawa amida.

## DAFTAR PUSTAKA
Aslan  LM.  1998. Seri  Budidaya  Rumput Laut . Yogyakarta: Kanisius.
Borowitzka  MA.,  Borowitzka  LJ.  1988.
Dunaliella,  Dalam  :  Borowitzka  MA dan  Borowitzka  LJ,  (Eds), Microalga Biotechnology , Cambridge: Cambridge  University  Press,  152 hlm. Daniel. 2011. Sintesis Surfaktan Digliserida dan Monogliserida
melalui  Reaksi  Gliserolisis  Metil Kaprat. Jurnal  kimia  Mulawarman. 8 (2): 105-111.
De  Fretes  H.,  AB  Susanto,  B.  Prasetyo, Heriyanto, Tatas H. P., L. Limantara.
2012.  Estimasi  Produk  Degradasi Ekstrak  Kasar  Pigmen  Alga  Merah Kappaphycus  alvarezii  (Doty)  Doty Varian  Merah,  Coklat,  dan  Hijau:
Telaah Perbedaan Spektrum Serapan. Jurnal  Ilmu  Kelautan. 17(1):  31-38.
Djaeni M., S.B. Sasongko, A.A.
Prasetyaningrum,  X.  Jin,  A.J.  van
Boxtel,  2012.  Carrageenan  drying with dehumidified air: drying characteristics  and  product  quality.
International Journal of Food Engineering. 8(3).
Gross  J.  1991. Pigment  in  Vegetables,
chloropylls  and  carotenoids .  New
York:  Publ.  By  Van  Nostrand
Reinholds.
Kawsar S., Yuki F., Ryo M., Hidetaro Y., & Yasuhiro  O.  2011.  Protein  R- phycoerythrin  from  marine  red  alga Amphiroa anceps: extraction,
purification    and  characterization. PHYTOLOGIA BALCANIC A.
17(3):347-354.
Masojidek J. M., Koblizek dan G., Torzillo, 2004.  Photosynthesis  in  Microalgae in:  A  Richmond  (Ed), Handbookof
Microalgal Culture:  Biotechnology and  Applied  Phycology,  Blakwell Science Ltd., Iowa,  p. 20-39.
Mc  Hugh  DJ.  2003. A  Guide  to  Seaweed Industry Food and Agric . Rome: Org
of the UN.
Nobel,  P.S.  2009. Physicochemical  and
Enviromental Plant Physiology . Canada: Academic Press, 582p.
Sajilata  &  Singhal.  2006.  Isolation  and Stabilitation  of  Natural  Pigments  for Food
Application. Stewart
Postharvest Review , 5-11.
Suryaningrum  D.,  Murdinah.,  Arifin  M. 2000.  Penggunaan  kappa-karaginan sebagai bahan penstabil pada pembuatan  fish  meat  loaf  dari  ikan tongkol  (Euthyinnus  pelamys.  L ). Jurnal Penelitian
Perikanan
Indonesia. 8(6).
Treybal,  R.E.,  1981. Mass  Transfer Operation,  3thed .,  Singapore:  Mc Graw  Hill  International  Editions,  pp. 34-37, 88.
Yunizal,  2004. Teknologi  Pengolahan Alginat.  Pusat  Riset  Pengolahan Produk  Sosial,  Ekonomi,  Kelautan dan Perikanan . BRKB : 66 htm.