## Patogenitas Kombinasi Jenis Cendawan Entomopatogen dan Kerapatan Konidia terhadap Mortalitas Larva Ulat Grayak

## ABSTRAK
ABSTRACT

## PENDAHULUAN

## BIOMEDIKA
ISSN : 1979 - 035X (printed edition) ISSN : 2302 - 1306 (electronic/Portal e-Journal)
Available online at www.biomedika.ac.id
Pathogenicity Combination of Entomopathogenic Fungi and Conidia Density on Mortality Larvae Armyworm
1* 2 2 3
Durroh Humairoh , M. Thamrin Hidayat , Isnawati , Yusmani Prayogo
1 Jurusan Biologi Fakultas Sains Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Kediri
2 Jurusan Biologi-FMIPA Universitas Negeri Surabaya
3 Balai Penelitian Tanaman Kacangkacangan dan Umbiumbian Malang * Corresponding author, Email: durrohhumairoh@gmail.com
Ulat  grayak  bersifat  polifag  atau  dapat  menyerang  berbagai  jenis  tanaman  pangan,  sayuran,  dan  buah-buahan. Kerugian-kerugian yang ditimbulkan oleh insektisida sintetik dapat mencemari lingkungan. Oleh sebab itu, penggunaan cendawan  entomopatogen  dapat  digunakan  sebagai  agen  hayati  untuk  pengendalian  hama.  Penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahui keefektifan jenis cendawan entomo patogen serta kerapatan konidia terhadap mortalitas larva ulat grayak.Metode penelitian yang digunakan adalah rancangan acak kelompok (RAK) dua faktor. Terdapat 12 perlakuan dengan 3 jenis cendawan meliputi Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana dan Lecanicillium lecanii menggunakan
6 7 8 9
4 macam kerapatan konidia yakni 10 , 10 , 10  dan 10 konidia/ml. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 3 kali. Data berupa persentase mortalitas larva pada 7 hari setelah aplikasi dianalisis menggunakan analisis varian dua arah.
8 Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi cendawan Metarhizium anisopliae dengan kerapatan konidia 10 efektif dalam mengendalikan mortalitas larva ulat grayak hingga 61,85%.
Kata kunci : M. anisopliae, B. Bassiana, L. Lecanii, kerapatan konidia, ulat grayak, mortalitas
Armyworms  are  polifag  or  can  attack  different  types  of  crops,  vegetables,  and  fruits.  Losses  caused  by  synthetic insecticides  can  pollute  the  environment.  Therefore,  the  use  of  entomopathogenic  fungi  can  be  used  as  a  biological agent  for  pest  control.  This  study  aims  to  determine  the  effectiveness  of  entomopathogenic  fungi  and  conidia  density on the mortality of larvae armyworm. The method used was a randomized block design (RAK) two factors. There are 12 treatment with 3 types of fungi include Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Lecanicillium lecanii using
6 7 8 9
4 kinds of conidia namely 10 , 10 , 10  and 10  conidia / ml. Each treatment was repeated 3 times. Data in the form of percentage mortality of larvae at 7 days after the application is analyzed using two-way analysis of variance. The results
8 showed that the combination of the fungus Metarhizium anisopliae with 10  conidia effective in controlling armyworm larvae mortality of up to 61.85%.
Key words : M.anisopliae, B.Bassiana, L.Lecanii, conidialdensity, armyworms, mortality
Sampai saat ini hama masih menjadi kendala bagi  petani.  Hampir  di  setiap  musim  terjadi ledakan hama pada pertanaman kedelai (Prayogo, 2006). Hasil  survei  terhadap  jenis-jenis  hama kedelai  yang  dilakukan  oleh  Tengkano et  al . (2005)  menunjukkan  bahwa  terdapat  beberapa jenis  hama  yang  dianggap  sangat  penting  kebe- radaannya  antara  lain Riptortus  linearis,  Nezara viridula, dan Piezodorus  hybneri. Sedangkan jenis  hama  yang  dianggap  penting  antara  lain Etiella  zinckenella,  Helicoverpa  armigera, Spodoptera litura, Bemisia tabaci, Aphis glycines, dan Ophiomyia phaseoli .
Ulat  grayak  ( Spodoptera  litura) merupakan salah  satu  jenis  hama  penting  yang  menyerang tanaman  palawija  dan  sayuran  di  Indonesia. Hama  ini  sering  mengakibatkan  penurunan  pro- duktivitas  bahkan  kegagalan  panen  karena  hama tersebut  menyebabkan  daun  menjadi  robek  dan buah  berlubang.  Bila  tidak  segera  dikendalikan maka daun atau buah tanaman di areal pertanian akan  habis  (Trizelia et  al. ,  2011). Spodoptera litura bersifat polifag. Tanaman inangnya adalah cabai,  kubis,  padi,  jagung,  tomat,  tebu,  buncis, jeruk, tembakau, bawang merah, terung, kentang, kacang-kacangan  (kedelai,  kacang  tanah),  kang- kung, bayam, pisang, dan tanaman hias (Marwoto
Berdasarkan  uraian  di  atas, bertujuan untuk menguji keefektifan kombinasi jenis cendawan dan kerapatan konidia terhadap mortalitas larva ulat grayak.
penelitian  ini
& Suharsono 2008).
Petani  umumnya  menggunakan  insektisida kimia  yang  intensif  (dengan  frekuensi  dan  dosis tinggi). Hal ini mengakibatkan timbulnya dampak penggunaan  pestisida  seperti:  gejala  resistensi, resurjensi  hama,  terbunuhnya  musuh  alami,  me- ningkatnya  residu  pada  hasil,  mencemari  ling- kungan  dan  gangguan  kesehatan  bagi  pengguna (Direktorat  Perlindungan  Tanaman  Hortikultura, 2008). Pengurangan penggunaan pestisida di areal pertanian menuntut tersedianya cara pengendalian lain yang aman dan ramah lingkungan, di antara- nya  dengan  memanfaatkan  musuh  alami,  seperti cendawan  entomopatogen,  serangga  predator, dan parasitoid (Lembaga Pertanian Sehat, 2008). Cendawan  entomopatogen  merupakan  salah satu jenis mikroorganisme yang dapat digunakan sebagai  agen  hayati  untuk  pengendalian  hama (Prayogo,  2005).
Keberhasilan pengendalian hama  dengan  cendawan  entomopatogen  ditentu- kan oleh kerapatan konidia cendawan yang diapli- kasikan,  yaitu  kerapatan  konidia  dalam  setiap mililiter  air.  Jumlah  konidia  berkaitan  dengan banyaknya  biakan  cendawan  yang  dibutuhkan setiap hektar. Kerapatan konidia yang dibutuhkan untuk mengendalikan hama bergantung pada jenis dan  populasi  hama  yang  akan  dikendalikan (Wikardi, 1993).
Cendawan  entomopatogen  yang sangat  potensial  dalam  mengendalikan  beberapa spesies  serangga  antara  lain Beauveria  bassiana , Lecanicillium lecanii dan Metarhizium anisopliae (Prayogo et al ., 2005). Pengamatan  dilakukan  dengan  cara  meng- hitung  kematian  larva  ulat  grayak  yang  mati pada 7 Hari Setelah Aplikasi (HSA). Perhitungan data  persentase  mortalitas  larva  ulat  grayak dihitung dengan rumus:

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilakukan di kebun percobaan Balai Penelitian Tanaman Kacang-kacangan dan Umbi- umbian  (BALITKABI)  Malangpadabulan  Mei sampaiAgustus  2012.Larva  ulat  grayak  instar  3 diperoleh  dengan  melakukan  pemeliharaan hingga didapat larva pada stadia yang diinginkan di  Laboratorium  Entomologi  BALITKABI
Beauveria bassiana , dan cendawan Lecanicillium lecanii diperoleh  dari  isolat  yang  diperbanyak di  Laboratorium  Entomologi  Balitkabi  Malang menggunakan media padat jagung.
Tanaman  kedelai  yang  digunakan  ialah varietas  willis  ditanam  pada  polibag  berisi  tanah 5 kg dan pengaplikasian dilakukan pada 28 Hari Setelah  Tanam  (HST).  Biakan  cendawan  yang digunakan berumur 21 hari dikocok menggunakan shaker ± 15 menit, kemudian disaring dan ditam- bahkan  tween  80  sebanyak  2  ml/l,  kemudian kerapatan  konidia  dihitung  menggunakan Haemocytometer hingga  diperoleh  kerapatan 9
9 10 .  Larutan  induk  dengan  kerapatan  10 dibuat
9 sebanyak 20 ml, diambil 2 ml dari 10 kemudian ditambahkan  akuades  hingga  20  ml.  Demikian seterusnya  hingga  diperoleh  kerapatan  konidia
6 10 .  Pengujian  suspensi  diberikan  5  ml  pada  se- tiap  rumpun  sesuai  dengan  rumus  penentuan penyemprotan  pada  hama  daun  menurut Tengkano (2012).
Keterangan:
P = Persentase mortalitas larva uji pada masing- masing konsentrasi
X = Jumlah larva uji yang mati Y = Jumlah larva uji P = x 100% X Y
Data  mortalitas  yang  disebabkan  oleh  ulat grayak diperoleh setelah melakukan pengamatan pada 7 HSA dengan 3 kali pengulangan ditampil- kan di  Tabel 1.

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan  hasil  uji  normalitas  menunjukkan bahwa  data  berdistribusi  normal  kemudian  dilaku- kan  uji  parametrik  Anava  dua  arah  menunjukkan hasil  bahwa  jenis  cendawan  dapat  memengaruhi mortalitas larva dengan nilai signifikasi 0,022   0,05,
Malang. Cendawan Metarhizium anisopliae ,
2    DURROH HUMAIROH ET AL.
Tabel 1. Mortalitas larva ulat grayakinstar 3 pada 7 HSA dengan kombinasi jenis cendawan dan kerapatan konidia
Kerapatan konidia Jenis Cendawan Intensitas serangan (%)
10 6 10 7 10 8 10 9 M. anisopliae 31,11± 0,82 b p 37,78±4,57 b p 61,85±3,15 b q 47,78± 5,74 b q B.bassiana 30,74± 3,80 ab p 34,07±4,38 ab p 44,81±2,14 ab q 54,81± 3,83 ab q L. lecanii 27,41± 1,91 a p 30,74±3,80 a p 38,15±3,15 a q 41,11± 3,58 a q
Angka yang diikuti huruf yang berbeda diartikan memiliki perbedaan yang nyata antara perlakuan yang satu dengan perlakuan yang lain pada taraf uji 0,05 menurut uji Duncan's.
0,00 0,05  dapat  diartikan  bahwa  kerapatan konidia  menyebabkan  adanya  pengaruh  pada mortalitas  ulat  grayak . Pada  kombinasi  jenis cendawan  dan  kerapatan  konidia  menunjukkan nilai signifikasi 0,244 > 0,05 yang berarti bahwa antara  jenis  cendawan  dan  kerapatan  konidia tidak  ada  interaksi.  Langkah  selanjutnya  ialah pengujian  lanjutan  Duncan's  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  nyata  antara  jenis cendawan  dan  begitu  pula  kerapatan  konidia menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan.
Cendawan L.  lecanii memproduksi  beberapa macam   toksin,   yaitu dipicolonic   acid, hydroxycarboxylic  acid,  bassionalide,  beauvericin dan cyclodepsipeptide yang berfungsi mengganggu sistem  saraf  (Prayogo,  2012).  Toksin-toksin  ter- sebut  sangat  virulen  terhadap  beberapa  jenis serangga  hama  (Prayogo  dan  Suharsono,  2005). Cendawan L. lecanii mampu mengendalikan imago Riptortus  linearis hingga  angka  mortalitas  men- capai 81%.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  bahwa persentase  mortalitas  menggunakan  cendawan M.  anisopliae menunjukkan  angka  yang  lebih tinggi  daripada  menggunakan  cendawan  jenis lain.  Beberapa  keberhasilan  dalam  parameter tersebut  disebabkan  oleh  beberapa  faktor  pato- genitas  yang  dimiliki  oleh  cendawan  entomopa- togen,  antara  lain  toksin  yang  dikandung  oleh cendawan,  kecepatan  perkecambahan  konidia, daya  kecambah  konidia,  pertumbuhan,  sporulasi dan  ukuran  konidia  (Trizelia,  2005).  Diduga toksin  yang  dimiliki  oleh M.  anisopliae lebih efektif daripada toksin yang dikandung cendawan yang lain.
Toksin  merupakan  salah  satu  hal  yang  paling berperan  dalam  peningkatan  mortalitas  larva. Setiap  cendawan  entomopatogen  memiliki  pato- genitas  yang  berbedabeda  karena  toksin  yang dikandungnya  pun  berbeda.  Widiyanti et  al . (2004) menyatakan bahwa cendawan M. anisopliae memiliki  aktivitas  larvasidal  karena  menghasil- kan cyclopeptida , destruxin dan desmethyldestrusin . Destruxin telah  dipertimbangkan  sebagai  bahan
retikulum  endoplasma  dan  membran  nukleus), yang dapat menyebabkan paralisis sel dan kelainan fungsi lambung tengah, tubulus maphigi, hemocyt dan  jaringan  otot.  Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Herlinda et  al. (2008)  bahwa cendawan M.  anisopliae sangat  efektif  dalam mengendalikan  hama  wereng  coklat  hingga  90%
6 dengan kerapatan konidia 10 .
Cendawan B. bassiana menghasilkan beberapa macam  toksin,  yaitu bassianin,  beauvericin, bassionalid, beauveriolide, bassiacridin, oosporein dan  tenellin (Quesada-Moraga  dan  Vey,  2004). Menurut Soetopo dan Indrayani (2007) beauvericin merupakan racun yang dapat menyebabkan gang- guan pada fungsi hemolimfa dan nukleus serangga, sehingga  mengakibatkan  pembengkakan  yang disertai pengerasan pada serangga yang terinfeksi. Menurut  Saleh et  al. (2000)  menunjukkan  bahwa cendawan B.  bassiana dengan  kerapatan  konidia 8 10   mampu  mengendalikan  mortalitas  ulat  grayak instar 3 pada skala rumah kaca sebesar 70%. Hal ini  ditunjang  dari  keefektifan  toksin  yang  dikan- dung B. bassiana tersebut.
Hasil  dokumentasi  penelitian  ulat  grayak  yang terkolonisasi setelah diaplikasi menggunakan 3 jenis cendawan entomopatogen ditampilkan di Gambar 1.
sedangkan untuk kerapatan konidia menunjukkan hasil  yang  signifikan  dengan  nilai  signifikasi insektisida generasi baru. Efek destruxin berpe- ngaruh  pada  organella  sel  target  (mitokondria,
Gambar 1. a) kolonisasi oleh M. anisopliae (perbesaran 20×) , b) kolonisasi oleh B. bassiana (perbesaran 20×) , c) kolonisasi oleh L. lecanii (perbesaran 20×)
Menurut  Posada  dan  Vega  (2005)  isolat cendawan  entomopatogen  yang  mampu  meng- hasilkan konidia lebih banyak akan cepat pemen- carannya  sehingga  akan  lebih  menguntungkan karena  isolat  akan  mampu  menginfeksi  dalam kurun  waktu  yang  lebih  singkat.  Berdasarkan perhitungan  menggunakan Haemocytometer pada  penelitian  yang  kami  lakukan,  cendawan M.  anisopliae memiliki  jumlah  konidia  yang lebih banyak dibandingkan jenis cendawan yang lain  sehingga  menyebabkan  pemencaran  yang lebih  cepat.  Konidia  cendawan  entomopatogen menjadi  salah  satu  bagian  yang  sangat  penting karena  konidia  merupakan  salah  satu  organ  in- fektif ( propagule ) cendawan yang menyebabkan infeksi  pada  integumen  serangga  yang  diakhiri dengan kematian (Prayogo, 2006).
Hasil  ini  didukung  oleh  penelitian  Prayogo et al. (2005) pada skala laboratorium menunjuk- kan  bahwa  mortalitas  ulat  grayak  menggunakan M. anisopliae dengan beberapa kerapatan konidia
4 5 6 7 8
10 , 10 , 10 , 10  dan 10  konidia/ml, menunjuk-
7 kan  hasil  bahwa  dengan  kerapatan  konidia  10 konidia/ml  lebih  optimal  daripada  kerapatan konidia yang lain karena dapat menekan populasi larva ulat grayak hingga 83,33%. Prayogo (2004) juga  menyatakan  bahwa  konsentrasi  cendawan entomopatogen  harus  ditentukan  secara  tepat untuk  mendapatkan  hasil  pengendalian  yang
Bukan hanya jenis cendawan, tetapi kerapatan konidia  juga  berpengaruh  terhadap  mortalitas larva. Destiyanti et al . (2007) menyatakan bahwa semakin  tinggi  kerapatan  konidia,  maka  mortali- tasnya akan semakin meningkat karena memung- kinkan kontak konidia dengan tubuh larva dalam jumlah yang lebih banyak. Keadaan ini memberi peluang  yang  lebih  baik  bagi  konidia  untuk  me- nempel,  berhasil  berkecambah  dan  berpenetrasi ke dalam tubuh larva.
optimal  dan  frekuensi  aplikasi  perlu  diketahui dengan tepat agar populasi hama di bawah nilai ambang kendali.

## KESIMPULAN
Kami  mengucapkan  banyak  terimakasih kepada Kepala BALITKABI yang telah memberi kesempatan kami melaksanakan penelitian sampai selesai,  beserta  segenap  staf  yang  bertugas  kami ucapkan terima kasih banyak atas bimbingannya.
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan  pembaha- san  menunjukkan  bahwa  kombinasi  cendawan Metarhizium anisopliae dengan kerapatan konidia 8 10 efektif  dalam  mengendalikan  mortalitas  larva ulat grayak pada daun kedelai dengan kemampuan mengendalikan hingga 61,85%.

## UCAPAN TERIMA KASIH

## DAFTAR PUSTAKA
Destiyanti, Y. S. Hadi, S. Yusuf, dan T. Santoso. 2007. Keefektifan Beberapa Spesies Cendawan Entomopatogen untuk Mengen- dalikan  Rayap  Tanah Coptotermes  gestroi WASMANN (Isoptera: Rhinotermidae) dengan Metode Kontak dan Umpan.
Jurnal Ilmu & Teknologi Kayu Tropis 5(2): 68-77. Direktorat Perlindungan Tanaman Hortikultura. 2008. Pengenalan dan Pengendalian Hama Tanaman.
Herlinda,  S.,  S.I.  Mulyati,  dan  Suwandi.  2008.  Jamur  Entomopa- togen Berformulasi Cair sebagai Bioinsektisida untuk Pengen- dali Wereng Coklat. Agritrop 27(3): 119-126.
Lembaga Pertanian Sehat Develop Useful Innovation for Farmers. 2008. Virus Patogen Serangga: BioInsektisida Ramah Ling- kungan.
Marwoto dan Suharsono. 2008. Strategi dan Komponen Teknologi Pengendalian Ulat Grayak ( Spodoptera litura fabricius) pada tanaman kedelai. Jurnal Litbang Pertanian 27(4):131-136. Posada, F. J., dan F. E. Vega. 2005. A New Method to Evaluate the Biocontrol Potential of Single Spore Isolates of Fungal Entomopathogens. Journal Insect Science 5: 37. Prayogo, Y. 2004. Keefektifan Lima Jenis Cendawan Entomopa- togen  Terhadap  Hama  Pengisap  Polong  Kedelai Riptortus linearis L. (Hemiptera: Alydidae) dan Dampaknya Terhadap Predator Oxyopes  javanus Thorell  (Araneida:  Oxyopidae). Tesis . Program Pasca Sarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor. Prayogo, Y., W. Tengkano, dan Marwoto. 2005. Prospek Cenda- wan Entomopatogen Metarhizium anisopliae untuk Mengen- dalikan Ulat Grayak Spodoptera litura pada Kedelai. Jurnal Litbang Pertanian 24(1): 19-26.
Wikardi,  E.A.  1993.  Teknik  Perbanyakan Beauveria  bassiana dan aplikasinya. Prosiding Simposium Patologi Serangga I . Yogyakarta, 12-13 Oktober 1993. Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Prayogo,Y. 2006. Upaya Mempertahankan Keefektifan Cendawan Entomopatogen  Untuk  Mengendalikan  Hama  Tanaman Pangan. Jurnal Litbang Pertanian 25(2): 47-54 Prayogo,Y. 2012. Bio-Lec: Biopestisida untuk Pengendalian Hama dan Penyakit Utama Kedelai. Disampaikan pada
Seminar Internal Balitkabi , 7 Mei 2012.
Prayogo,Y.,  dan  Suharsono.  2005.  Optimalisasi  Pengendalian Hama Pengisap Polong Kedelai (Riptortus linearis) Dengan Cendawan  Entomopatogen  Verticillium  lecanii. Jurnal Litbang Pertanian 24(4): 123-130.
Quesada-Moraga, E., A.Vey. 2004. Bassiacridin, a Protein Toxic for  Locusts  Secreted  by  The  Entomopathogenic  Fungus Beauveria bassiana . Mycology Research 108: 441–452. Saleh, M. S., R. Thalib, dan Suprapti. 2000. Pengaruh Pemberian Beauveria bassiana Vuill Terhadap Kematian dan Perkem- bangan Larva Spodoptera litura Fabricius di Rumah Kaca. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika 1(1): 7-10. Soetopo, D., dan I.G.A.A. Indrayani. 2007. Status Teknologi dan Prospek Beauveria bassiana Untuk Pengendalian Serangga Hama  Tanaman  Perkebunan  yang  Ramah  Lingkungan.
Jurnal  Balai  Penelitian  Tanaman  Tembakau  dan  Serat 6(1): 29-46.
Tengkano, W. 2012. Wawancara Rumus Volume Penyemprotan Cendawan Per rumpun. Pada tanggal 01 Juni 2012.
Tengkano, W., S. Hardaningsih, Sumartini, Y. Prayogo, Bedjo, dan  Purwantoro . 2005.  Status  Hama  Kedelai  dan  Musuh Alaminya  di  Lahan  Kering  Masam  Propinsi  Lampung.
Lokakarya  dan  Seminar  Nasional  Peningkatan  Produksi Kacang-kacangan dan Umbi-umbian Mendukung Keman- dirian Pangan . Malang, 26-27 Juli 2005.
Trizelia,  M.  Syahrawati,  dan  A.  Mardiah.  2011.  Patogenitas Beberapa  Isolat  Cendawan  Entomopatogen Metarhizium spp. Terhadap Telur Spodoptera litura Fabricius (Lepidop- tera: Noctuidae). Jurnal Entomologi Indonesia 8(1):45-54. Trizelia.  2005.  Cendawan  Entomopatogen Beauveria  bassiana (Bals.)  Vuill.  (Deuteromycotina:  Hyphomycetes):  Keraga- man  Genetik,  Karakterisasi  Fisiologi,  dan Virulensinya  ter- hadap Crocidolomia pavonana (F.) (Lepidoptera: Pyralidae). Disertasi. Program  Pasca  Sarjana  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Widiyanti, N., dan S. Muyadihardja. 2004. Uji Toksisitas Jamur Metarhizium  anisopliae  terhadap  Larva  Nyamuk  Aedes Aegypti. Media Litbang Kesehatan 16(3): 25-30.