## IDENTIFIKASI SENYAWA FITOKIMIA DAN UJI TOKSISITAS DENGAN METODE BSLT EKSTRAK ETANOL BUNGA UBU-UBU
( Hibiscus rosa-sinensis L.) DARI MALUKU UTARA
Lievyana F. Tulangow 1) , Edwin De Queljoe 2) , Herny Simbala 2)
1) Program Studi Farmasi, FMIPA, UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Biologi, FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Ubu-ubu flower (Hibiscus rosa-sinensis L.) is a medical plant which have the potential as anti-diabetes, anticonvulsant, cardioprotector and anti-inflamatory. This research aims to identify phytochemical  content  and  to  determine  the  toxicity  value  of Ubu-ubu  flower  ethanol  extracts collected  from  Akehuda  and  Wayafli  Village,  North  Maluku  through  toxicity  test  assessed  using BSLT  method.  Extraction  was  done  by  ultrasonication  method  using  ethanol  95%  as  the  solvent. Phytochemical  screening  was  done  according  to  Harborne  method  including  identification  of flavonoids,  alkaloids  triterpenoids,  steroids  and  tannins.  BSLT  method  had  been  used  in  toxicity essay, shrimp larvae had been put in test solutions, each provided with different concentration. The observation was done every 60 minutes in 24 hours. The value of LC 50 were obtained based from the  calculation  of  shrimp  larvae  lethality  percentage  using  probit  analysis.  The  result  of phytochemical screening showed that Ubu-ubu flowers ethanol extracts from Akehuda and Wayafli both  containing  phytochemical  compounds  namely  flavonoids,  triterpenoids  and  tannin.  LC 50 values were 76,913 ppm for Ubu-ubu flowers extracts from Akehuda and 71,779 ppm for Ubu-ubu flowers ethanol extract from Wayafli.
Keywords: Ubu-ubu (Hibiscus rosa-sinensis L.), Phytochemical Screening, Toxicity Assay, Brine Shrimp.

## ABSTRAK
Bunga  Ubu-ubu  ( Hibiscus  rosa-sinensis L.)  merupakan  tanaman  berkhasiat  obat  yang dapat digunakan sebagai antidiabetes, antikonvulsan, kardioprotektor dan antiinflamasi. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  senyawa  fitokimia  dan  menentukan  nilai  toksisitas ekstrak etanol  bunga  Ubu-ubu  dari  Maluku  Utara  yang  diambil  dari  Desa  Akehuda  dan  Desa  Wayafli melalui  uji  toksisitas  menggunakan  metode  BSLT.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode Ultrasonikasi menggunakan  pelarut  etanol  95%.  Pengujian  senyawa  fitokimia  dilakukan  dengan metode  Harborne  yang  mencakup  identifikasi  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid,  steroid  dan  tanin. Uji  toksisitas  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  BSLT,  larva  udang  yang  masukkan  dalam empat larutan uji dengan masing-masing konsentrasi larutan yang berbeda. Pengamatan dilakukan setiap  60  menit  selama  24  jam.  Nilai  LC 50 didapatkan  berdasarkan  perhitungan  persen  kematian larva udang menggunakan analisis probit. Hasil identifikasi fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol bunga Ubu-ubu Wayafli dan Akehuda mengandung flavonoid, triterpenoid dan tanin. Nilai LC 50 yang diperoleh yaitu 76,913 ppm untuk ekstrak bunga Ubu-ubu dari Akehuda dan 71,779 ppm untuk ekstrak bunga Ubu-ubu dari Wayafli.
Kata kunci : Ubu-ubu ( Hibiscus rosa-sinensis L.), Identifikasi Fitokimia, Uji Toksisitas, Larva Udang.

## PENDAHULUAN
Masyarakat  di  seluruh  dunia,
terlebih khusus di negara-negara berkembang  seperti  Indonesia,  mulai menyadari  nilai  penting  tanaman  dalam mencegah  dan  mengobati  penyakit.  Hal ini  terjadi  karena  tanaman  obat  telah terbukti  khasiatnya  selama  berabad-abad silam,  selain  itu  tanaman  obat  umumnya memiliki efek samping yang relatif kecil, lebih  mudah  ditemukan  oleh  masyarakat yang tinggal di pedalaman serta berpotensi  menjadi  obat  baru  yang terjangkau  (Anonim,  1997).  Salah  satu tanaman  yang  bagian  bunganya  dapat digunakan sebagai obat tradisional adalah bunga Ubu-ubu ( Hibiscus rosa-sinensis ).
Bunga  Ubu-ubu,  yang  umum dikenal  dengan  nama  Kembang  sepatu, adalah  tumbuhan  yang  berasal  dari daerah  tropis  dan  subtropis  dan  banyak dipakai  sebagai  tanaman  hias  karena memiliki bunga yang besar dengan warna merah  cerah.  (Kumar  dan  Singh,  2012). Selain  sebagai  ornamen,  bunga  Ubu-ubu juga dapat dipakai sebagai obat tradisional,  umumnya  digunakan  sebagai obat  batuk,  bahan  kosmetik  dan  bahan tambahan  pada  makanan,  sebagai  bahan pewarna  dan  bahan  pengawet.  Kegunaan bunga  Ubu-ubu  ini  tidak  terlepas  dari senyawa  yang  ada  di  dalamnya,  yang disebut senyawa fitokimia.
Fitokimia  adalah  bahan-bahan kimia dalam tanaman. Fitokimia biasanya bersifat  spesifik  pada  setiap  jenis  atau kelompok jenis tanaman tertentu.
Fitokimia  terbagi  atas  metabolit  primer dan metabolit sekunder. (Suryanto, 2012). Metabolit primer digunakan tanaman  untuk  pertumbuhan  sementara metabolit  sekunder  berperan  penting dalam  menentukan  efek  fisiologis  suatu
tanaman  seperti  perlindungan  terhadap hewan  herbivore,  sifat  antioksidan  dan sebagainya. Jenis fitokimia dapat berbeda pada  tanaman  yang  sama  spesies  dengan tempat tumbuh yang berbeda dikarenakan iklim  dan  keadaan  lingkungan  tumbuh yang  berbeda.  Untuk  itu  perlu  dilakukan uji  fitokimia  pada  bunga  Ubu-ubu  yang ada  di  Provinsi  Maluku  Utara.  Efek fisiologis yang diberikan senyawa fitokimia membutuhkan konsentrasi  yang tepat,  untuk  itu,  perlu  diadakan  uji toksisitas.
Uji  toksisitas  perlu  dilakukan untuk  mengetahui  konsentrasi  minimum tanaman  hingga  bersifat  toksik.  Uji toksisitas dapat dilakukan dengan metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT).  Uji BSLT  merupakan  metode  yang  sudah sering digunakan misalnya pada penelitian uji toksisitas beberapa tanaman dari  Papua  (Lestari et.  al ,  2015)  dan  uji toksisitas  beberapa  jenis  teripang  suku Holothuriidae  dari  Kepulauan  Seribu (Albuntana et. al , 2011).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk mengidentifikasi senyawa fitokimia  yang  ada  dalam  ekstrak  etanol bunga  Ubu-ubu  dari  Maluku  Utara  serta nilai toksisitasnya.

## BAHAN DAN METODE

## Alat dan Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  bunga  Ubu-ubu berwarna  merah  yang  diambil  dari Maluku Utara. Bahan-bahan lainnya ialah larva  udang Artemia  salina ,  air,  etanol 95%,  natrium  klorida,    kloroform, amoniak, asam sulfat, asam klorida, asam asetat  anhidrat,  besi(III)  klorida,  serbuk
magnesium, eter, pereaksi Mayer, Dragendorf dan Wagner.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  ialah  gelas-gelas pyrex, neraca analitik,  pipet  tetes,  corong,  cawan  petri, kertas  saring,  bola  lampu  5  watt,  kaca pembesar, ultrasonic bath ULTRA
8060D-H, rotary  evaporator Steroglass Strike  300,  oven,  batang  pengaduk, tabung reaksi, rak tabung reaksi, aluminium foil dan sendok plastik.

## Preparasi Sampel
Bunga  Ubu-ubu  yang  berwarna merah  diambil  langsung  dari  Desa Akehuda,  Kecamatan  Ternate  Utara  dan dari  Desa  Wayafli,  Kecamatan  Maba. Bunga  Ubu-ubu  dicuci  bersih  dengan  air mengalir  kemudian dipisahkan  dari tangkai bunga dan kaliks bunga. Selanjutnya  bunga  Ubu-ubu  dirajang hingga menjadi potongan-potongan kecil.

## Ekstraksi
Potongan bunga Ubu-ubu masing- masing  yang  diambil  dari  Desa  Akehuda dan  Desa  Wayafli  sebanyak  250  g ditimbang  dan  dimasukkan  dalam  beaker gelas, diektraksi dengan metode ultrasonikasi  dengan  merendam  sampel dalam  pelarut alkohol 95% sebanyak 1,5 L  selama  50  menit  sambil  diaduk sesekali.  Sampel  yang  telah  diekstraksi disaring  menggunakan  kertas  saring  dan corong.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan menggunakan rotary evaporator pada suhu  40˚C  hingga  diperoleh  ekstrak kental.
Uji Fitokimia
a. Alkaloid
Sebanyak  4  g  masing-masing  ekstrak sampel  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi kemudian ditambah kloroform
secukupnya.  Kemudian  ditambah  10  mL amoniak.  Lapisan  kloroform  dipisahkan dan  diasamkan  dengan  H 2 SO 4 2  M. Lapisan  H 2 SO 4 diambil,  dimasukkan dalam  3  tabung  reaksi  yang  berbeda kemudian  ditambahkan  masing-masing pereaksi Mayer, Dragendorf dan Wagner. Jika  terbentuk  endapan  putih  dengan pereaksi Mayer, dengan pereaksi Dragendorf  memberikan  endapan  jingga dan dengan pereaksi Wagner memberikan endapan  coklat,  maka  uji  dinyatakan positif terhadap alkaloid.
b. Triterpenoid dan Steroid
Sebanyak  2  g  masing-masing  ekstrak sampel  dimasukkan  dalam  erlenmeyer kemudian  ditambahkan  etanol  sebanyak 25  mL  lalu  dipanaskan  dan  disaring. Filtratnya diuapkan hingga volume filtrat tinggal  separuh  dan  ditambahkan  eter. Lapisan  eter  dipipet,  dipindahkan  ke tabung  reaksi  yang  lain  dan  diuji  dengan pereaksi  Lieberman-Buchard.  Adanya warna  merah  ungu  menunjukkan  positif terhadap  triterpenoid  dan  warna  hijau menunjukkan positif mengandung steroid.
c. Flavonoid
Sebanyak 200 mg masing-masing ekstrak sampel  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi, ditambahkan 5 mL etanol dan dipanaskan selama  5  menit  dalam  tabung  reaksi. Larutan ekstrak ini kemudian dipipet dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  lain. Selanjutnya  ditambahkan  beberapa  tetes HCl pekat.  Kemudian ditambahkan 0.2 g serbuk Mg. Adanya flavonoid ditunjukkan oleh timbulnya warna merah coklat.
d. Tanin
Sebanyak  20  mg  masing-masing  ekstrak sampel  dimasukkan  ke  dalam  tabung
reaksi,  ditambahkan  2  mL  air  lalu dipanaskan, kemudian ditambahkan FeCl3. Terbentuknya warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tannin.
Uji Toksisitas
a. Pembuatan Pelarut
Pelarut  yang  digunakan  dalam  uji  BSLT adalah  air  laut  sintetik.  Pertama-tama, kristal  NaCl  sebanyak  20  g  ditimbang menggunakan  neraca  analitik.  NaCl kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu ukur  dan  ditambahkan  air  bersih  hingga tanda  tera  kemudian  diaduk  dengan batang  pengaduk  hingga  NaCl  terlarut sempurna.
b. Penyiapan Larva A. salina Leach
Telur A. salina Leach ditimbang sebanyak  1  g  dan  dimasukkan  ke  dalam beaker  gelas  bersama  100  mL  air  laut sintetik.  Selama  24  jam,  telur-telur A. salina Leach  dibiarkan  dibawah  cahaya lampu  5  watt.  Setelah  24  jam,  telur-telur yang  telah  menetas  menjadi  nauplii dipindahkan ke cawan petri  lainnya  yang telah diisi dengan 100 mL air laut sintetik menggunakan  sendok  plastik.  24  jam kemudian,  nauplii  dapat  digunakan. Larutan  uji  kedua  ekstrak  dibuat  dengan konsentrasi 1000 ppm, 100 ppm, 10 ppm dan  1  ppm  dengan  menggunakan  air  laut sintetik sebagai pelarut.
c. Pengujian Terhadap Larva
Sebanyak  10  ekor  larva  A.  salina dimasukkan  kedalam  cawan  petri  berisi 10 mL larutan uji konsentrasi  1000 ppm.
Hal  yang  sama  dilakukan  untuk  larutan uji 100 ppm, 10 ppm dan 1 ppm. Masing- masing  larutan  uji  dibagi  dalam  dua kelompok dan dibuat kontrol positif yaitu larva  A.  salina  yang  dimasukkan  ke dalam  10  mL  air  laut  sintetik  dengan perlakuan yang sama. Pengamatan dilakukan  setiap  60  menit  hingga  24  jam dengan  menghitung  jumlah  larva  yang mati  dari total  larva  yang dimasukkan ke dalam cawan petri. Perhitungan dilakukan dengan memakai  bantuan kaca pembesar.
d. Analisis Data Aktivitas sitotoksik
dianalisis berdasarkan  probit  LC50.  Pengolahan data persen mortalitas kumulatif dihitung menggunakan analisis probit LC50 dengan selang kepercayaan 95%. Analisis probit  LC50  menggunakan  Microsoft Excel 2013.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Randemen Ekstrak
Randemen  ekstrak  adalah  presentasi jumlah ekstrak yang didapat dari sejumlah  sampel.  Randemen  ekstrak  dan warna dari masing-masing sampel ekstrak etanol  bunga  Ubu-ubu  dapat  dilihat dalam Tabel 1.
Dalam Tabel 1, masing-masing sebesar  3,833  %  untuk  sampel  dari Akehuda  dengan  ekstrak  sebanyak  2,3 gram  dari  sampel  seberat  60  gram  dan 3,25% untuk sampel dari Wayafli dengan sampel  seberat  200  gram  dan  berat ekstrak 6,5 gram.
Tabel 1 . Randemen Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu
Jenis Sampel Randemen (%) Warna Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu Akehuda 3,833 Merah Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu Wayafli 3,25 Merah

## Identifikasi Senyawa Fitokimia
Identifikasi  senyawa  fitokimia dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan fitokimia yang ada dalam bunga Ubu-ubu dari  Maluku  Utara.  Senyawa  fitokimia yang  diidentifikasi  adalah  flavonoid, alkaloid,  terpenoid,  steroid  dan  tanin. Hasil  identifikasi  senyawa  fitokimia dalam  sampel  dapat  dilihat  dalam  Tabel 2.
Flavonoid  bersifat  polar  sehingga dapat  ditemukan  pada  ekstrak  etanol
bunga  Ubu-ubu.  Pada  bunga,  flavonoid dapat  menjadi  ko-pigmen  dari  antosianin untuk  memberikan  warna  yang  cerah pada  kelopak  bunga.  Terdeteksinya flavonoid  diakibatkan  oleh  kepekaan flavonoid  terhadap  perlakuan  dengan senyawa  yang bersifat basa. Penambahan basa,  dalam  percobaan  ini  serbuk Magnesium, menyebabkan terjadinya perubahan  warna  yang  spontan  melalui reaksi reduksi yang terjadi pada flavonoid (Harborne, 1984).
Tabel 2 . Kandungan Senyawa Fitokimia Bunga Ubu-ubu
Sampel Flavonoid Alkaloid Tritepenoid/Steroid Tanin Bunga Ubu-ubu  Wayafli +++ - Tritepenoid +++ +++ Bunga Ubu-ubu Akehuda +++ - Tritepenoid +++ +++
Uji  alkaloid  dilakukan  awalnya  dengan penambahan kloroform dalam ekstrak. Hal ini  dilakukan  agar  garam  alkaloid  larut dalam  kloroform.  Penambahan  amoniak sebagai  basa  lemah  akan  membebaskan alkaloid dari garamnya. Penambahan asam mempermudah alkaloid untuk diendapkan, reagen  pada  uji  alkaloid  kemudian  akan memberikan  reaksi  yang  menghasilkan endapan  kompleks  alkaloid.  (Marliana  & Suyono,  2005).  Alkaloid  larut  dalam alkohol  95%  (Harborne,  1984)    sehingga tidak  terdeteksinya  alkaloid pada ekstrak bunga  Ubu-ubu  tidak  diperngaruhi  oleh pelarut.
Pada pengujian triterpenoid dan steroid, pemanasan dilakukan agar triterpenoid/steroid  larut  dalam  pelarut dengan  pengaruh  suhu  yang  tinggi. Tritepenoid  dan  steroid  dapat  larut  dalam senyawa  polar  seperti etanol  95%, meskipun kelarutan triterpenoid dan steroid  lebih  baik  dalam  metanol  yang telah  dipanaskan  (Harborne,  1984).  Asam asetat anhidrida dan asam sulfat ditambahkan pada pengujian triterpenoid/steroid  untuk  menghasilkan reaksi  hidrolisis  untuk  membebaskan aglikon  jika  terdapat  glikosida  dalam ekstrak,  karena  triterpenoid  dan  steroid umumnya  muncul  dalam  tanaman  dalam bentuk glikosida.
Tanin merupakan bagian dari flavonoid  yang  bersifat  polar,  sehingga dapat  larut  dalam  etanol  95%  meski, seperti triterpenoid dan steroid, tanin lebih mudah  larut  dan  terdeteksi  dalam  pelarut metanol  (Harborne,  1984).  Penggunaan FeCl3 dalam pengujian tannin dimaksudkan  agar  gugus  hidroksi  dalam tannin dapat bereaksi dengan Fe3+ hingga terbentuk warna hijau kehitaman (Sangi et. al., 2012).

## Pengujian  Toksisitas  dengan  Metode BSLT ( Brine Shrimp Lethality Test)
Pengujian  tingkat  toksisitas  dilakukan dengan  metode  BSLT  (Brine  Shrimp Lethality  Test)  menggunakan  larva  udang Artemia salina. Larva udang ini digunakan karena  A.  salina  adalah  hewan  dengan ketahanan  tinggi.  Ekstrak  etanol  dari bunga  Ubu-ubu  diuji  tingkat  toksisitasnya dalam  mematikan  larva  udang  yang  telah diberi perlakuan dengan konsentrasi 1, 10, 100  dan  1000  ppm.    Rentang  konsentrasi ini  digunakan  karena  sampel  yang  diuji merupakan ekstrak yang dinyatakan toksik bila  nilai  LC50  kurang  dari  1000  ppm. Dalam  pengujian,  larva  udang  diletakkan dibawah cahaya lampu 5 watt, karena larva udang    dapat  bertahan  hidup  pada  suhu optimum  28°C.  Hasil  pengujian  dapat dilihat pada Tabel 3 dan Tabel 4.
Tabel 3 . Persentase Jumlah Kematian Larva Udang pada Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu dari Akehuda
Ubu-ubu Akehuda Kontrol 1 ppm 10 ppm 100 ppm 1000 ppm Ulangan I 0 0 0 3 10 Ulangan II 0 0 1 4 10 Rata-Rata 0 0 0,5 3,5 10 % Kematian 0 0 15 35 100
Tabel 4 . Persentase Jumlah Kematian Larva Udang pada Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu dari Wayafli
Ubu-ubu Wayafli Kontrol 1 ppm 10 ppm 100 ppm 1000 ppm Ulangan I 0 0 1 3 10 Ulangan II 0 0 1 4 10 Rata-Rata 0 0 1 3,5 10 % Kematian 0 0 10 35 100
Berdasarkan Tabel 3 dan Tabel 4, didapati bahwa  konsentrasi  ekstrak  berbanding lurus  dengan  kematian  larva  udang. Dengan  kata  lain,  kematian  larva  udang dipengaruhi  oleh  peningkatan  konsentrasi dalam sampel. Suatu ekstrak daun bersifat toksik  apabila  mempunyai  nilai  LC50  < 1000  ppm.  LC50  adalah  konsentrasi  yang dapat  mematikan  50%  larva  udang  laut
(Meyer  et.  al.,  1982).  Berdasarkan  data hasil  pengujian  yang  kemudian  diolah menggunakan  analisis  probit    LC 50 , didapatkan  nilai  LC 50 dari  esktrak  etanol bunga  Ubu-ubu  yaitu  76,913  ppm  untuk ekstrak  etanol  bunga  Ubu-ubu  dari Akehuda  dan  71,779  ppm  untuk  ekstrak etanol  bunga  Ubu-ubu  dari  Wayafli.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol bunga Ubu-ubu bersifat toksik .
Tabel 5 . Hasil Analisis Probit LC 50
Jenis Sampel Nilai LC 50 (ppm) Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu Akehuda 76,913 Ekstrak Etanol Bunga Ubu-ubu Wayafli 71,779

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol bunga Ubu-ubu dari Maluku Utara,  baik  dari  Akehuda  dan  Wayafli mengandung  senyawa  flavonoid,  tannin dan triterpenoid dan bersifat toksik dengan nilai  LC 50 76,913  ppm  untuk  ekstrak  dari Akehuda  dan  71,779  ppm  untuk  ekstrak dari Wayafli.

## DAFTAR PUSTAKA
Albuntana  A,  Yasman  dan  Wardhana  W. 2011.  Uji  Toksisitas  Ekstrak  Empat Jenis  Teripang  Suku  Holothuriidae Dari Pulau Penjaliran Timur Kepulauan Seribu, Jakarta Menggunakan Brine Shrimp Lethality  Test (BSLT). Jurnal  Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis . 3(1) :65-72.
Anonim. 1997. Medicinal Plants in China; A  Selection  of  150  Commonly  Used
Species .  World  Health  Organization.
Manila.
Harborne,  J.  B.  1984. Phytochemical Methods:A Guide to Modern
Techniques  of  Plant  Analysis  2 nd .
Chapman and Hall. USA.
Kumar, A. dan Singh, A. 2012. Review on
Hibiscus  rosa-sinensis.  International Journal of Research in Phamaceutical and Biomedical Sciences . 3 : 534-538.
Lestari  M.S,  Himawan  T,  Abadi  A.L  dan Retnowati  L.  2015.  Toxicity  and Phytochemistry  Test  of  Methanol Extract of Several Plants From Papua Using Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT). Journal  of  Chemical  and Pharmaceutical  Research .  7(4)  :
866-872.
Marliana,  S.  D.,  V,  Suryanti  dan  Suyono. 2005. dalam Uji
Fitokimia, Toksisitas  dan  Antioksidan  Dari Daun  Yantan  (Blumea  chinensis DC). [skripsi]  FMIPA  Universitas
Sam Ratulangi. Manado.
Meyer, B. N., N. R. Ferrigni, J. E. Putnam, L.  B. Jacobsen, D. E. Nichols  dan J. L. McLaughlin. 1982. Brine Shrimp: A  Convenient  General  Bioassay  for Active Plant Constituents. Journal of Medical Plant Research . 45: 31-34.
Sangi,  M.,  Momuat,  L.  dan  Kumaunang,
M.  2012. dalam  Uji  Fitokimia,
Toksisitas  dan  Antioksidan  Dari Daun  Yantan  (Blumea  chinensis DC). [skripsi]  FMIPA  Universitas Sam Ratulangi. Manado.
Suryanto  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan . Penerbit  Putra  Media  Nusantara.
Surabaya.