Raisya, E. ∙ D.S. Sobarna ∙ A. Nuraini ∙ S. Mubarok ∙ E. Suminar ∙ M. Akutsu
Multiplikasi in vitro stroberi kultivar tochiotome dengan penambahan jenis dan konsentrasi sitokinin untuk perbanyakan bibit
Sari Perbanyakan  tanaman  stroberi  secara  konvensional  dilakukan  dengan  menggunakan  stolon,  tetapi kurang  efektif  serta  kualitas  bibit  yang  dihasilkan  kurang  baik  akibat  adanya  akumulasi  penyakit. Budidaya  stroberi  memerlukan  adanya  perbanyakan  bibit  secara  massal,  tetapi  tidak  mengubah kualitasnya. Multiplikasi in vitro menjadi solusi untuk penyediaan bibit berkualitas dalam jumlah besar. Upaya  untuk  mendapatkan  tunas in  vitro dalam  jumlah  banyak  yakni  perlu  adanya  penambahan  zat pengatur tumbuh golongan sitokinin seperti Benzylaminopurine (BAP) atau Thidiazuron (TDZ). Tujuan penelitian  ini  adalah  mengetahui  dan  menetapkan  jenis  serta  konsentrasi  sitokinin  dengan  hasil  terbaik dalam multiplikasi stroberi kultivar Tochiotome. Percobaan dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman,  Teknologi  Benih,  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Padjadjaran.  Penelitian  menggunakan Rancangan Acak Lengkap yang terdiri dari tujuh perlakuan yang diulang lima kali, yaitu: Kontrol (tanpa sitokinin);  BAP  (0,25  ppm;  0,50  ppm;  0,75  ppm),  dan  TDZ  (0,25  ppm;  0,50  ppm;  0,75  ppm).  Hasil  dari percobaan  menunjukkan  bahwa  penambahan  sitokinin  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  tunas dan  bobot  segar  planlet.  Media  perlakuan  kontrol  dapat  menghasilkan  jumlah  akar  lebih  banyak dibandingkan  dengan  media  ditambah  sitokinin.  Penambahan  BAP  0,50  ppm    berpengaruh  positif terhadap jumlah daun dan dapat menghasilkan runner secara in vitro . Pemberian BAP 0,50 ppm cenderung dapat meningkatkan dan mempercepat produksi bibit tanaman stroberi kultivar Tochiotome .
Kata kunci : Benzylaminopurine (BAP) ∙ Thidiazuron (TDZ) ∙ Stroberi ∙ Kultur jaringan
In vitro multiplication of strawberries ‘tochiotome’ with addition of types and concentrations of cytokinin for seed propagation
Abstract . Stolon is used for conventional propagation of strawberry, but it is less effective and the quality of the seeds is not good due to the accumulation of disease. In vitro multiplication becomes a solution for the  supply  of  quality  seeds  in  a  fast  time.  The  addition  of  growth  regulator  cytokinin,  such  as Benzylaminopurine (BAP) or Thidiazuron (TDZ) can produced the large number of shoot. The objective of this study was to obtain the best type and concentration of cytokinin in the multiplication of strawberry „Tochiotome‟. The study was conducted at the Plant Tissue Culture Laboratory, Seed Technology, Faculty of Agriculture, Universitas  Padjadjaran.  This  study  used a Completely  Randomized Design (CRD)  with seven treatments and five replications, that were: Control (without cytokinin); BAP (0.25 ppm; 0.50 ppm; 0.75 ppm), and TDZ (0.25 ppm; 0.50 ppm; 0.75 ppm). The results indicated that addition of cytokinin did not affected increasing number of shoots and fresh weight of plantlets. Control media can produce larger number of roots than those containing PGRs, this might be due to the endogenous auxin concentrations found in strawberry plants. Also, cytokinin inhibited root formations process. Plants treated with BAP 0.50 ppm increased for the number of leaves and produced runners in vitro. This study showed application of BAP with 0.50 ppm increased and accelerated the production of strawberry „Tochiotome‟seedlings.
Keywords : Benzylaminopurine (BAP) ∙ Thidiazuron (TDZ) ∙ Strawberry ∙ Tissue culture
Diterima : 12 April 2020, Disetujui : 28 Desember 2020, Dipublikasikan : 31 Desember 2020 doi: https://doi.org/10.24198/kultivasi.v19i3.26932
Raisya, E. 1 ∙ D.S. Sobarna 1 ∙ A. Nuraini 1 ∙ S. Mubarok 1 ∙ E. Suminar 1 ∙  M. Akutsu 2 1 Departemen  Budidaya Tanaman  Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran
2 Kyushu University Japan Korespondensi: syariful.mubarok@unpad.ac.id

## ___________________________________________ Pendahuluan
Buah  stroberi  dapat  dikonsumsi  berupa  buah segar,  beku,  maupun  dibuat  menjadi  olahan (Hanif,  2015).  Stroberi  „Tochiotome‟  asal  Jepang memiliki  buah  berwarna  merah  cerah  dan mengkilap serta sangat cocok digunakan sebagai bahan  olahan  karena  memiliki  rasa  manis  dan masam  yang  seimbang.  Stroberi  termasuk kedalam  kelompok  pangan Desireable  Dietary Pattern (Pola  Pangan  Harapan/  PPH)  yang berfungsi  sebagai  sumber  vitamin  dan  mineral yang baik untuk kondisi gizi.
Masyarakat  mulai  sadar  akan  kesehatan menyebabkan  permintaan  buah  stroberi  dalam negeri pun mengalami peningkatan (Budiono et al ., 2016). Namun, kebutuhan buah dalam negeri masih dipasok oleh impor dari berbagai negara.
Data  Pemasukan  dan  Pengeluaran  Benih Hortikultura  tahun  2017  menunjukkan  bahwa nilai  impor  stroberi  pada  tahun  2016  sebanyak 307.000 bibit tanpa adanya ekspor ke luar negeri (Direktorat  Jenderal  Hortikultura,  2017).  Data Badan  Pusat  Statistik  dan  Direktorat  Jendral Hortikultura  tahun  2019  menunjukkan  bahwa produksi buah stroberi di Indonesia pada tahun 2013 sebanyak 90,352 ton mengalami penurunan tiap  tahunnya  dan  hanya  menghasilkan  8,528 ton  pada  tahun  2018.  Salah  satu  faktor  utama yang menjadi pembatas pada budidaya stroberi di  Indonesia  adalah  ketersediaan  benih berkualitas dan bebas penyakit.
Penyediaan  benih  stroberi  selama  ini dilakukan secara konvensional dengan menggunakan  stolon  (Bimantara et  al .,  2018). Stroberi  yang  diperbanyak  secara  konvensional dengan  menggunakan  stolon    terbukti  kurang efektif karena banyaknya infeksi pathogen yang berpengaruh  terhadap  kualitas tanaman  (Ara et al ., 2016).
Salah satu upaya untuk menyediakan bibit dalam jumlah besar yang  bebas  patogen adalah melalui  kultur  jaringan.  Kultur  jaringan  atau in vitro memiliki  banyak  keuntungan,  seperti perbanyakan  secara  massal,  keseragaman genetik,  bebas  virus,  produksi  tanaman sepanjang  tahun  yang  tidak  mengenal  musim, stok tanaman induk mikro yang terpelihara, dan dapat  memperbanyak  tanaman  yang  sulit dikembangbiakkan  dalam  jumlah  besar  (Taji et al .,  1997).  Keberhasilan  perbanyakan  tanaman dengan kultur jaringan adalah rasio antara tunas dan akar yang terbentuk. Rasio antara tunas dan
akar  yang  terbentuk  sangat  ditentukan  oleh komposisi  zat  pengatur  tumbuh  (Bimantara et al. , 2018). Triningsih et al . (2013) mengemukakan bahwa  untuk  meningkatkan  daya  regenerasi eksplan  diperlukan  penambahan  zat  pengatur tumbuh (ZPT) sitokinin pada media yang dapat merangsang pertumbuhan tunas dan pembelahan  sel,  seperti  Benzylaminopurin (BAP) dan Thidiazuron (TDZ).
Perbanyakan  tanaman  stroberi  yang dilakukan  oleh  Ashrafuzzaman et  al .  (2013) secara  in  vitro  menggunakan  media Murashige and  Skoog (MS)  ditambah  BAP  menunjukkan bahwa  penambahan  BAP  0,5  mg/L  dapat menginduksi tunas dengan jumlah paling tinggi (7  tunas)  dibanding  dengan  perlakuan  lainnya. Zat pengatur tumbuh TDZ yang diberikan pada media  inokulasi  eksplan  pisang  ambon  kuning sebanyak  0,5  mg/L  kemudian  ditingkatkan menjadi 1 mg/L memberikan peningkatan hasil rata-rata  jumlah  tunas  dari  2,13  menjadi  3,0 tunas per eksplan (Ikhsandi, 2017).
Penggunaan  ZPT  berupa  BAP  atau  TDZ yang  berperan  merangsang  pertumbuhan  tunas dan  pembelahan  sel  diharapkan  dapat berpengaruh  positif  dalam  upaya  multiplikasi stroberi.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan percobaan  untuk  mendapatkan  jenis  dan konsentrasi  sitokinin  yang  tepat  untuk multiplikasi stroberi kultivar Tochiotome.
___________________________________________

## Bahan dan Metode
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan  Teknologi  Benih  Fakultas  Pertanian, Universitas  Padjadjaran.  Percobaan  dilakukan pada bulan Agustus sampai Desember 2019.
Sterilisasi eksplan . Eksplan yang digunakan  yaitu runner  tip stroberi  introduksi Jepang  kultivar  Tochiotome  yang  diambil  dari tanaman  induk  di  lapangan.  Eksplan  dibersih- kan  dengan  air  mengalir  lalu  direndam  dalam larutan  deterjen  selama  15  menit  kemudian dibilas  dengan  aquades  steril  sampai  tidak berbusa.  Selanjutnya  direndam  dalam  larutan fungisida  dan  bakterisida  selama  20  menit  lalu dibilas  sebanyak  dua  kali  kemudian  direndam dalam  larutan  clorox  1%  selama  20  menit, selanjutnya direndam dalam larutan clorox 0,5% selama  10  menit  .  Setelah  itu,  eksplan  dibilas dengan  aquades  steril  sampai  tidak  berbau, kemudian  direndam  dalam  larutan  HgCl  0,1% selama 5 menit lalu dikering anginkan.
Media
multiplikasi .
Media yang digunakan  adalah  media  dasar  MS  dengan penambahan sitokinin tunggal yang terdiri dari: A  (Kontrol/tanpa  sitokinin);  B  (BAP 0,25  ppm); C (0,50 ppm); D (0,75 ppm), E (TDZ 0,25 ppm); F (0,50 ppm); dan G (0,75 ppm).
Analisis data . Penelitian dirancang dengan Rancangan  Acak  Lengkap  yang  terdiri  dari tujuh  perlakuan  diulang  sebanyak  lima  kali. Analisis  data  menggunakan  analisis  varian untuk  menguji  perlakuan  dan  mengetahui perbedaan  diantara  perlakuan  dengan  taraf signifikan 5%. Apabila terdapat perbedaan nyata dilanjutkan  dengan  uji Duncan  Multiple  Range Test (DMRT) dengan bantuan software SPSS 22.0. Perameter  pengamatan  meliputi:  Jumlah  tunas, jumlah  akar,  jumlah  daun,  bobot  segar,  dan jumlah runner .
___________________________________________ Hasil dan Pembahasan
Jumlah Tunas . Hasil analisis statistik menunjukkan  bahwa  penambahan  sitokinin tidak berpengaruh nyata terhadap pembentukan tunas  (Tabel  1).  Hal  tersebut  diduga  bahwa media  dasar Murashige  and  Skoog (MS)  telah memiliki nutrisi yang cukup untuk pertumbuhan  eksplan.  Media  MS  dapat memenuhi  kebutuhan  eksplan  pada  kultur jaringan  karena  mengandung  makro  nutrien, mikronutrien,  dan  garam-garam  mineral  yang tersedia (Budiono et al ., 2016).

## Tabel 1. Rata-rata jumlah tunas 4 MST dan 8 MST
Perlakuan Jumlah Tunas 4 MST 8 MST A (Kontrol) 1,10 a 2,60 a B (BAP 0,25 ppm) 1,50 a 3,90 a C (BAP 0,50 ppm) 2,70 a 6,10 a D (BAP 0,75 ppm) 2,50 a 4,20 a E (TDZ 0,25 ppm) 1,40 a 1,70 a F (TDZ 0,50 ppm) 1,30 a 2,20 a G (TDZ 0,75 ppm) 1,10 a 2,10 a Keterangan:
Nilai  rata-rata  yang  diikuti dengan  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf nyata 5% menurut Uji Duncan
Media  MS  terdiri  dari  garam  mineral, sumber  karbon  (umumnya  sukrosa),  vitamin, dan  pengatur  tumbuh.  Selain  mengandung unsur-unsur tersebut, media MS juga
mengandung nutrisi anorganik dengan proporsi yang  tepat  untuk  memenuhi  nutrisi  serta kebutuhan  fisiologis  banyak  sel  dalam  kultur jaringan (Gamborg et al ., 1976).
Pada Tabel 1, terlihat adanya pertambahan jumlah  tunas  dari  4  MST  ke  8  MST  meskipun pengaruhnya  tidak  nyata,  namun  penambahan BAP  mengindikasikan  pertambahan  jumlah tunas  cenderung  lebih  banyak  dibandingkan dengan  penambahan  TDZ.  Hasil  percobaan Quiroz et  al. (2017)  menunjukkan  bahwa penggunaan  BAP  tunggal  efektif  dalam menghasilkan  jumlah  tunas  paling  tinggi  pada setiap  eksplan.  Zat  pengatur  tumbuh  BAP merupakan  sitokinin  yang  paling  sering digunakan  dalam  proliferasi  tunas  stroberi (Haddadi et al ., 2010).
BAP  dapat  memicu  pembelahan  sel, proliferasi  sel,  dan  morfogenesis  tunas  (Smith, 2013).  BAP  dapat  memacu  terjadinya  proses fotosintesis karena berperan dalam peningkatan produksi  klorofil  dan  merupakan  golongan sitokinin  aktif  yang  mendorong  proliferasi tunas.  Berdasarkan  hasil  tersebut,  dapat diasumsikan bahwa penggunaan BAP berpotensi  baik  dalam  multiplikasi  stroberi. Meskipun  hasil  analisis  statistik  jumlah  tunas tidak  berbeda  nyata,  tetapi  hasil  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  bentuk  planlet  yang dihasilkan  pada  perlakuan  media  TDZ cenderung  berbeda  dengan  perlakuan  BAP  dan kontrol.  Hal  ini  didukung  dengan  tampilan planlet pada 8 MST (Gambar 1).
Planlet  pada  perlakuan  kontrol  memiliki tunas  yang  tumbuh  tegak,  berwarna  hijau,  dan menghasilkan  daun  trifoliet.  Bentuk  planlet pada  perlakuan  BAP  serupa  dengan  kontrol, tetapi  jumlah  tunasnya  yang  lebih  banyak  serta dapat  menghasilkan  runner  (Gambar  1). Sementara itu,  penambahan TDZ menghasilkan planlet  dengan  tunas  berukuran  pendek, melengkung  atau  keriting,  dan  rapat,  sehingga sulit  dihitung  dan  dibedakan  antar  tunas,  serta berwarna  pucat.  Konsentrasi  TDZ  yang  tinggi (lebih  dari  1  ppm)  memiliki  efek  negatif terhadap  perpanjangan  tunas,  menghasilkan tunas  yang  kompak/  rapat,  dan  ukuran  tunas kecil  (Ghasemi et  al. ,  2015).  Prasiwi  dan Wardiyati (2018) menyebutkan bahwa pemberian  TDZ  dengan  konsentrasi  terlalu tinggi dapat menghambat pertumbuhan eksplan karena  penggunaan  TDZ  pada  konsentrasi tinggi  berperan  sebagai  herbisida  (Thomas, 2013). Pernyataan yang sama dikemukakan oleh
Gambar 1. Perbedaan bentuk planlet pada umur 8 MST
Huetteman dan Preece (1993)
yang menyebutkan  bahwa  TDZ  efektif  pada konsentrasi  rendah  yaitu  kurang  1  µM  tetapi penggunaan  TDZ  dapat  menghambat  elongasi tunas.
Penggunaan  TDZ  dalam  konsentrasi rendah (0-0,50 ppm) dapat memacu pertumbuhan  tunas  aksilar,  sedangkan  pada konsentrasi  tinggi  yaitu  lebih  dari  0,50  ppm dalam  jangka  waktu  yang  lama  dapat menyebabkan  kerusakan  pada  jaringan  eksplan sehingga  menurunkan  kemampuan  regenerasi tunas  (Murthy et  al .,  1998).  Meningkatnya konsentrasi  sitokinin  dapat  menyebabkan penurunan  dalam  mikropropagasi  tunas  dan terhambatnya  elongasi  tunas  (Budiono et  al. , 2016).  Sesuai  dengan  pendapat  Debnath  (2006) yang menyebutkan bahwa peningkatan konsentrasi TDZ dapat menghambat perpanjangan tunas pada tanaman stroberi.
Jumlah  Akar .  Tabel  2  menunjukkan sitokinin berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan  akar.  Jumlah  akar  paling  banyak terdapat  pada  perlakuan  A  (tanpa  penambahan sitokinin)  yaitu  sebanyak  1,20  saat  4  MST  dan 2,70  saat  8  MST.  Sementara  itu,  eksplan  yang ditanam  pada  media  dengan  penambahan sitokinin  hanya  menghasilkan  akar  dalam jumlah sedikit bahkan tidak memproduksi akar.
Pada  perlakuan  A  (kontrol),  akar  dapat tumbuh meskipun media tidak diberi tambahan ZPT  golongan  auksin.  Hal  tersebut  sesuai dengan  hasil  percobaan  yang  dilakukan  oleh Debnath  (2006,  2008),  Murthy et  al. (1998), Haddadi et al . (2010, 2013), Ghasemi et al. (2015), Quiroz et al . (2017), serta Prasiwi dan Wardiyati (2018)  yang  menunjukkan  bahwa  akar  dapat tumbuh  dengan  baik  pada  media  tanpa penambahan  sitokinin.  Akar  yang  tumbuh diduga  karena  eksplan  mengandung  auksin endogen  yang  cukup  tinggi  (Murti et  al .,  2012; Haddadi et al ., 2013).
Tabel 2. Rata-rata jumlah akar 4 MST dan 8 MST
Perlakuan JumlahAkar 4 MST 8 MST A (Kontrol) 1,20 b 2,70 b B (BAP 0,25 ppm) 0,00 a 0,90 a C (BAP 0,50 ppm) 0,10 a 0,90 a D (BAP 0,75 ppm) 0,20 a 0,10 a E (TDZ 0,25 ppm) 0,00 a 0,00 a F (TDZ 0,50 ppm) 0,00 a 0,00 a G (TDZ 0,75 ppm) 0,00 a 0,00 a
Keterangan:  Nilai  rata-rata  yang  diikuti  dengan huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf nyata 5% menurut Uji Duncan
Perlakuan  penambahan  sitokinin  BAP menghasilkan  jumlah  akar  yang  sedikit  dan pendek.  Budiono et  al .  (2016)  menyebutkan bahwa  konsentrasi  BA  yang  tinggi  (1-10  mg/L) dapat  menginduksi  tunas  adventif,  tetapi menghambat  pertumbuhan  akar.  Akar  tidak tumbuh pada media dengan penambahan TDZ. Hal  tersebut  diduga  karena  TDZ  merupakan sitokinin kuat sehingga menekan produksi akar lebih  besar.  Konsentrasi  sitokinin  yang  tinggi cenderung  menghambat  atau  memperlambat proses pembentukan akar (Kwapta et al., 1999).
Jumlah  Daun .  Jumlah  daun  pada  4  MST tidak  dipengaruhi  secara  nyata  oleh  pemberian BAP  maupun  TDZ,  tetapi  pada  8  MST pemberian  BAP  berpengaruh  nyata  terhadap pembentukan  daun  (Tabel  3).  Penambahan  0,50 ppm  BAP  menghasilkan  jumlah  daun  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  yang  diberi  TDZ. Hasil  uji  statistik  menunjukkan  terdapat perbedaan  jumlah  daun  pada  saat  8  MST. Perlakuan  C  (BAP  0,5  ppm)  menghasilkan jumlah daun lebih banyak, namun tidak berbeda dengan  perlakuan  A  (kontrol),  B  (BAP  0,25 ppm),  dan  D  (BAP  0,75  ppm).  Rata-rata  jumlah daun dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Rata-rata jumlah daun 4 MST dan 8 MST
Perlakuan JumlahDaun 4 MST 8 MST A (Kontrol) 0,70 a 2,30 ab B (BAP 0,25 ppm) 0,80 a 3,10 ab C (BAP 0,50 ppm) 1,70 a 5,10 b D (BAP 0,75 ppm) 1,50 a 3,30 ab E (TDZ 0,25 ppm) 0,60 a 0,80 a F (TDZ 0,50 ppm) 0,70 a 0,90 a G (TDZ 0,75 ppm) 0,40 a 0,70 a
Keterangan: Nilai  rata-rata  yang  diikuti dengan  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  pada  taraf  5% menurut Uji Duncan
Berdasarkan Tabel 3 terlihat bahwa jumlah daun  paling  tinggi  terdapat  pada  perlakuan  C (BAP  0,50  ppm)  sebanyak  5,10.  Hal  tersebut sesuai  dengan  hasil  percobaan  yang  dilakukan oleh  Danial et  al .  (2016)  yang  menunjukkan bahwa  jumlah  daun  stroberi  terdapat  pada perlakuan media ditambah BAP 0,50 ppm.
Jumlah  daun  terendah  terdapat  pada perlakuan  G  (TDZ  0,75  ppm)  yakni  sebanyak 0,40  saat  4  MST  dan  0,70  saat  8  MST.  Hal tersebut diduga karena aplikasi konsentrasi TDZ yang  terlalu  tinggi  sehingga  menghambat pertumbuhan  eksplan  stroberi  secara  normal. Keadaan  tersebut  sesuai  dengan  pendapat (Prasiwi dan Wardiyati, 2018) bahwa pemberian TDZ  pada  konsentrasi  terlalu  tinggi  dapat menghambat pertumbuhan eksplan dan menyebabkan metabolisme terganggu.
Salah  satu  gangguan  metabolisme  planlet akibat konsentrasi TDZ yang terlalu tinggi dapat dilihat  dari  daun  yang  muncul  (Gambar  1). Meskipun  menghasilkan  daun  trifoliet,  tetapi daun  berbentuk  runcing  dan  berwarna  pucat. Ghasemi et  al .  (2015)  melaporkan  planlet  dalam media  TDZ  memiliki  daun  yang  tipis  dan berwarna  lebih  pucat.  Berbeda  dengan  daun pada perlakuan kontrol dan BAP yang memiliki daun  lebar,  pinggiran  daun  bergerigi,  dan berwarna hijau.
Bobot Segar Planlet Stroberi . Bobot basah planlet  membuktikan  bahwa  eksplan  menyerap nutrisi  yang  terdapat  pada  media.  Nutrisi  yang diserap  oleh  tanaman  digunakan  untuk  proses pertumbuhan  tanaman  seperti  terbentuknya tunas,  daun,  dan  akar.  Sulasiah et  al .  (2015) menyebutkan  bahwa  hasil  bobot  segar bergantung  pada  kecepatan  pembelahan  sel, perbanyakan sel, dan pembesaran tunas.
Tabel 4. Bobot segar planlet stroberi pada umur 8
MST Perlakuan Bobot segar (g) A (Kontrol) 0,44 a B (BAP 0,25 ppm) 0,33 a C (BAP 0,50 ppm) 0,55 a D (BAP 0,75 ppm) 0,28 a E (TDZ 0,25 ppm) 0,29 a F (TDZ 0,50 ppm) 0,50 a G (TDZ 0,75 ppm) 0,28 a Keterangan:
Nilai  rata-rata  yang  diikuti dengan  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  pada  taraf  5% menurut Uji Duncan
Meskipun  pemberian  0,50  ppm  BAP  ada indikasi bobot segar planlet tertinggi yakni sebesar 0,55 g, tetapi hasil uji statistik menunjukkan bahwa tidak  berbeda  nyata  pada  parameter  bobot  segar setiap  perlakuan  (Tabel  4).  Hal  tersebut  didasari oleh peranan sitokinin dalam memacu pembelahan  sel  (Gaspar et  al .,  1996).  Hasil percobaan yang dilakukan oleh Amer et al . (2013) menunjukkan  bahwa  stroberi  kultivar  Sweet Charlie  yang  ditanam  pada  media  MS  yang ditambah  0,50  ppm  Benzyl  Adenin  (BA)  dapat menghasilkan bobot segar dan bobot kering yang tertinggi dibandingkan dengan perlakuan lain.
Bobot  segar  pada  perlakuan  F  (TDZ  0,50 ppm) memiliki nilai yang cukup besar yaitu 0,50 g,  tetapi  apabila  dilihat  dari  jumlah  tunas, jumlah  daun,  dan  jumlah  akar  yang  dihasilkan pada  perlakuan  ini  jauh  lebih  sedikit  diban- dingkan  dengan  perlakuan  penambahan  BAP. Hal tersebut diduga karena terjadinya gangguan metabolisme  pada  planlet  akibat  pemberian TDZ konsentrasi tinggi. Sesuai dengan pendapat Murthy et  al .  (1998)  yang  menyebutkan  bahwa TDZ  dapat  berpengaruh  terhadap  tingkat akumulasi  mineral  atau  metabolit  lain  yang relatif  tinggi  dalam  jaringan,  dan  hal  tersebut merupakan  respon  tanaman  atau  planlet terhadap  stress.  Salah  satu  pengaruh  TDZ tersebut  menghasilkan  tunas  yang  lebih  tebal (Gambar 1) walapun jumlahnya sedikit.
Jumlah runner in vitro . Runner atau stolon dapat  menghasilkan  anakan  yang  digunakan sebagai bibit untuk tanaman stroberi. Berdasarkan  hasil  pengamatan,  ditemukan eksplan  yang  menghasilkan  runner  pada perlakuan  media  dengan  penambahan  BAP. Gambar  2  menunjukkan runner yang  terbentuk pada perlakuan media ditambah BAP.
Gambar 2. Runner yang terbentuk pada perlakuan

## BAP
Sampai  saat  ini  belum  ada  yang melaporkan  bagaimana runner stroberi  dapat terbentuk  secara in  vitro .  Terbentuknya runner tersebut  diduga  karena  fungsi  dari  sitokinin yang  dapat  memacu  pertumbuhan  tunas  maka dapat  berpotensi  juga  dalam  pembentukan runner secara in vitro .
Fungsi dari sitokinin yaitu berperan dalam merangsang  sintesis  protein  dan  berperan  juga dalam  kontrol  siklus  sel  (George et  al. ,  2008). Sitokinin  dapat  menginduksi  perkembangan tunas  aksilar  dan  adventif  serta  meningkatkan pembelahan sel. Zat pengatur tumbuh BAP ber- peran  pada  tahap  multiplikasi  karena  sitokinin memicu  produksi  tunas  lateral  dengan  men- dorong pembentukan jaringan xylem pada tunas yang  akan  memudahkan  transformasi  air  dan nutrisi  yang  mengarah  ke  pertumbuhan  tunas lateral. Selain itu, peran penting sitokinin dalam meningkatkan sintesis RNA, protein, dan enzim di  dalam  sel  yang  juga  dapat  meningkatkan pertumbuhan tunas (Danial et al ., 2016)
___________________________________________

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka  dapat disimpulkan bahwa:
1. Jenis dan konsentrasi sitokinin berpengaruh terhadap  jumlah  daun,  dan  akar  pada multiplikasi  tanaman  Stoberi  ( Fragaria ananassa ) Tochiotome secara in vitro
2. Penambahan  BAP  0,50  ppm  berpengaruh baik terhadap jumlah daun dan
pembentukan runner  in  vitro .  Media perlakuan  kontrol  dapat  menghasilkan jumlah  akar  lebih  banyak  dibandingkan dengan media ditambah sitokinin.
Penggunaan  TDZ  dengan  konsentrasi terlalu tinggi memberikan hasil kurang baik terhadap  pertumbuhan  tunas,  daun,  dan akar pada eksplan.

## ____________________________________ Daftar Pustaka
Amer,  M.S.H.,  H.M.E.  Arisha,  A.  Bardisi,  and D.A.S.  Nawar.  2013.  In  vitro  study  on strawberry  shoot  multiplication  and rooting  by  using  synthetic  plant  growth regulators  in  camparasion  with  moringa leaf  extract.  Zagazig  J.  Agric.  Res.  40(6): 1071–1082.
Ara,  T.,  M.R.  Karim,  and  Aziz.  2016. Micropropagation  and  field  evaluation  of seven  strawberry  genotypes  suitable  for agro-climatic  condition  of  Bangladesh. African J. Agric. Res. 8(13): 1194–1199. doi: 10.5897/ajar12.2255.
Ashrafuzzaman,  M.,  S.M.  Faisal,  D.  Yadav,  D. Khanam, and F. Raihan.
2013.
Micropropagation  of  strawberry  (Fragaria ananassa) through runner culture.
Bangladesh J. Agric. Res. 38(3): 467–472. Bimantara,  D.S.,  D.  Maghfoer,  N.  Barunawati, and  A.  Syahrian.  2018.  Multiplikasi  kultur meristem stroberi kultivar earlibrite dengan pengambahan  konsentrasi  hormon  BAP dan kinetin. J. Prod. Tanam. 6(3): 432–437.
Budiono,  R.,  T.  Setiawati,  G.G.  Pitaloka,  L. Anggreini,  M.  Nurzaman,  et  al.  2016. Mikropropagasi  stroberi  (Fragaria  x ananassa Var. earlibrite) dengan penambahan BA (Benzyl adenine) dan IBA (Indole  butyric  acid)  pada  media  MS (murashige and skoog). Pros. Semin. Nas. II Tahun 2016: 1126–1138.
Danial,  G.H.,  D.A.  Ibrahim,  and  M.S.  Omer. 2016.  Response  of  running  shoot  tips  of strawberry (Fragaria x ananasa) for in vitro propagation  in  Kurdistan  Region  of  Iraq. Int. J. Environ. Agric. Biotechnol. 1(2): 164– 169. doi: 10.22161/ijeab/1.2.11.
Debnath, S.C. 2006. Zeatin overcomes thidiazuron-induced  inhibition  of  shoot elongation  and  promotes  rooting  in strawberry  culture  in  vitro.  J.  Hortic.  Sci.
Biotechnol. 81(3): 349–354. doi: 10.1080/14620316.2006.11512072. Debnath,  S.C.  2008.  Developing  a  scale-up system  for  the  in  vitro  multiplication  of thidiazuron-induced  strawberry  shoots using  a  bioreactor.  Can.  J.  Plant  Sci.  88(4): 737–746. doi: 10.4141/CJPS07147.
Direktorat Jenderal Hortikultura. 2017.
Pemasukan dan pengeluaran benih hortikultura. diakses 29 Sept. 2019.
Gamborg, O.L., T. Murashige, T.A. Thorpe, and I.K. Vasil. 1976. Plant tissue culture media. Soc. Vitr. Biol. 12(7): 473–478.
Gaspar,  T.,  C.  Keveks,  C.  Penel,  H.  Greppin, D.M. Reid, et al. 1996. Plant hormones and plant  growth  regulators  in  plant  tissue culture.  Vitr.  Cell.  Dev.  Biol.  -  Plant  32(4): 272–289. doi: 10.1007/BF02822700.
George, E.F., M.A. Hail, and G.-J. De Klerk. 2008. Plant  Propagation  by  Tissue  Culture  3rd Edition. 3rd ed. Springer.
Ghasemi,  Y.,  S.  Beaicknejad,  F.  Sohrevardi,  M. Sharifani,  E.  Amiri,  et  al.  2015.  Adven- titious shoot and root regeneration  of wild strawberry  (F.  viridis  Duch.)  by  means  of tissue  culture  medium  optimization.  Biol. Forum- An Int. J. 7(2): 436–441.
Haddadi, F., M.A. Aziz, H. Kamaladini, and S.A. Ravanfar.  2013.  Thidiazuron-  and  zeatin- induced high-frequency shoot regeneration from  leafand  shoot-tip  explants  of strawberry. Horttechnology 23(3): 276–281. Haddadi,  F.,  M.A.  Aziz,  G.  Saleh,  A.A.  Rashid, and  H.  Kamaladini.  2010.  Micropropa- gation  of  strawberry  cv.  camarosa:  Prolific shoot regeneration from  in vitro shoot tips using  thidiazuron  with  n6-benzylamino- purine. HortScience 45(3): 453–456.
Hanif, Z. 2015. Peningkatan kualitas buah segar stroberi  melalui  penanganan  panen  dan pascapanen.  diakses  pada  20  Januari  2020. http://balitjestro.litbang.pertanian.go.id. Huetteman,  C.A.,  and  J.E.  Preece.  1993. Thidiazuron :  a  potent  cytokinin  for woody  plant  tissue  culture.  Plant  Cell. Tissue Organ Cult.: 105–106.
Ikhsandi, A. 2017. Pembentukan scalp dan tunas pada kultur in vitro tanaman pisang ambon kuning  sebagai  respons  terhadap  berbagai
konsentrasi thidiazuron.
Kwapta, M.B., F. Kalengamaliro, J. Bakuwa, and S.  Manyela.  1999.  In-vitro  rooting  and axillary  shoots  proliferation  of  Faidherbia albia  (Del.)  A.  Chev.  under  varying  levels of plant growth regulator. African Crop Sci. J. 7(4): 303–311.
Murthy,  B.N.S.,  S.J.  Murch,  and  P.K.  Saxena. 1998. Thidiazuron: A potent regulator of in vitro plant  morphogenesis.  Vitr.  Cell.  Dev. Biol.  -  Plant  34(4):  267–275.  doi: 10.1007/BF02822732.
Murti,  R.H.,  S.C.  Debnath,  and  Y.R.  Yeoung. 2012.  Effect  of  high  concentration  of thidiazuron  (TDZ)  combined  with  1H- indole-3-butanoic  acid  (IBA)  on  Albion strawberry ( Fragaria × ananassa ) cultivar plantlets  induction.  African  J.  Biotechnol. 11(81): 14696-14702–14702. doi:
10.5897/AJB12.1047.
Prasiwi,  I.D.,  and  T.  Wardiyati.  2018.  Pengaruh pemberian  thidiazuron  (TDZ)  terhadap pertumbuhan  tunas  nanas  (Ananassa comosus (L.) Merr.) cv. “Smooth Cayyene” asal  mahkota  buah.  J.  Produksi  Tanam. 6(1): 9–15.
Quiroz,  K.A.,  M.  Berríos,  B.  Carrasco,  J.B. Retamales,  P.D.S.  Caligari,  et  al.  2017. Meristem culture and subsequent micropropagation  of  Chilean  strawberry (Fragaria  chiloensis  (L.)  Duch.).  Biol.  Res. 50(1): 20. doi: 10.1186/s40659-017-0125-8.
Smith,  R.H.  2013.  Plant  Tissue  Culture : Techniques  and  Experiment.  3rd  editio. Elsevier, Texas.
Sulasiah, A., C. Tumilisar, and T. Lestaria. 2015. Pengaruh  pemberian  jenis  dan  konsentrasi auksin  terhadap  induksi  perakaran  pada tunas Dendribium sp secara in vitro. Bioma 11(1): 56–66. doi: 10.21009/bioma11(2).5.
Taji, A.M., W.A. Dodd, and R.R. Williams. 1997. Plant Tissue Culture Practice. 3rd ed.
Thomas,  J.W.  2013. Synthesis and  Evaluation  of Novel  Chemical  Compounds  for  Weed Management.
Triningsih,  L.A.M.  Siregar,  and  L.A.P.  Putri. 2013. Pertumbuhan eksplan Puar Tenangau (Elettariopsis  sp.)  secara  in  vitro.  J.  Online Agroekoteknologi 1(2): 276–285.