## EFEK DIET ATEROGENIK TERHADAP GAMBARAN HISTOPATOLOGIS HATI MENCIT
(Mus musculus)
The Effect of  Aterogenic Diet on Histopatology mice (Mus musculus) Hepar
Ervina Dewi1, Fadliyani 2, Ismiranda3
Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jabal Ghafur Email : vinaunigha@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian   ini    bertujuan   Mengetahui    efek    diet    aterogenik    terhadap    gambaran    histopatologis    hati mencit (Mus musculus) jantan. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium MIPA FKIP Universitas Jabal Ghafur   dan Laboratorium  Patologi Fakultas Kedokteran  Hewan (FKH) Universitas  Syiah Kuala pada bulan  Maret  sampai  dengan  Agustus  2017.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium yang terdiri atas 2 perlakuan dan 4 ulangan. Perlakuan terdiri atas  Pakan standar (Po) dan Pakan  aterogenik  (P1).  Pembuatan  sediaan  histologis  dengan  menggunakan  metode  parafin.    Parameter yang    diamati    adalah    infiltrasi    lemak,    degenerasi    lemak    dan    nekrosa    sel    hati  mencit.  Data  yang diperoleh dianalis dengan uji T. Hasil penelitian menunjukkan diet aterogenik mampu merusak organ hati mencit  perlakuan.  Kerusakan  yang  ditimbulkan  berupa  meningkatnya  rerata  jumlah  infiltrasi  lemak, degenerasi  lemak  dan  nekrosa  sel  hati  mencit.  Kesimpulan,  diet  aterogenik  mampu  meningkatkan infiltrasi lemak, degenerasi lemak dan nekrosa sel hati   mencit (Mus musculus). Kata Kunci : Diet Aterogenik, Degenerasi lemak, infiltrasi lemak, nekrosa, hepatosit.

## ABSTRACT
This research aimed to know the effct  of aterogenic diet on histopatology  mice hepar. The research was conducted  from  March  to  August  2017    at MIPA  laboratory  Jabal  Ghafur  University  and Patology Laboratory FKH Syiah Kuala University. A experimental laboratory design was used with 2  treatments  and  4  repetitions  of  each  treatment.  The  treatments  were  standar  weft    (P0)  and aterogenic  diet  weft  (P1).  Paraffin  method  was  apllied  of  microscopic  structure  observation.  The parameters observed  were lipid infiltration, lipid degeneration and necrosis of  mice hepatocyte.  A T test was  tested  to  the  data    alteration  of  histopatology  of    mice  hepatocyte.  The  result  showed  that  diet aterogenic      could  significant  to      increase  lipid  infiltration,  lipid  degeneration  and  necrosis  of  mice hepatocyte.  In conlusion,  the diet aterogenic  has ability to increase lipid infiltration,  lipid degeneration and necrosis of  mice hepatocyte.
Key word :  diet aterogenic, lipid infiltration, lipid degeneration and necrosis, hepatocyte.

## PENDAHULUAN
Perkembangan  ilmu  pengetahuan  dan teknologi dewasa ini telah mampu  merubah pola hidup  masyarakat  Indonesia,  termasuk  Nanggroe Aceh  Darussalam.  Umumnya,  masyarakat  sibuk dengan  berbagai  aktivitasnya,  sepert  kesibukan dalam bekerja atau lainnya. Hal ini memungkinkan  masyarakat      memiliki      waktu yang    sedikit  untuk    menerapkan    gaya    hidup sehat    mulai  dari      pola      makan      yang      tidak seimbang  sampai  kurangnya  olah  raga.  Milias (2006)  menjelaskan  bahwa  pola  makan  yang tidak seimbang meliputi konsumsi makanan yang tinggi lemak dan karbohidrat, konsumsi makanan rendah serat serta kebiasaan merokok dan minum
alkohol.  Selain  itu  juga  disebabkan    oleh    stress emosional    dan  kelainan  genetik  (Hardiningsih dan Hidayat,
2006 ; Murray et al., 2009). Penerapan gaya hidup tidak sehat menyebabkan munculnya berbagai macam penyakit. Salah satu penyakit yang timbul adalah hiperkolesterolemia.
Hiperkolessterolemia merupakan salah satu  gangguan  metabolisme  yang  ditandai dengan    adanya    kelainan metabolisme  lipid  dan ditandai  dengan  meningkatnya  kadar  kolesterol atau trigliserida  dalam  serum  darah  (Guyton  dan Hall,    1997    ;    Sudoyo    et    al.,    2006).
Hiperkolesterolemia      mengindikasikan adanya      akumulasi      radikal      bebas      dalam tubuh.  Radikal  bebas  ini dapat  berasal  dari  lipid eksogen    (Murray    et  al.,  2009).    Sofia  (2005) menyatakan  bahwa  radikal  bebas  adalah  spesi kimia  yang  memiliki  pasangan  elekton      bebas di     kulit     terluar     sehingga  reaktif  dan  mampu breaksi  dengan  protein,  lipid,  karbohidrat atau DNA.
Hati merupakan salah satu organ pencernaan  yang  memetabolisme  seluruh  bahan makanan  yang  masuk  ke  tubuh,  termasuk    obat. Hati    menjadi    organ    yang  sering    mengalami kerusakan  yang disebabkan oleh berbagai faktor. Salah  satu  diantaranya    adalah    radikal    bebas atau senyawa   toksik.   Toksik   yang  masuk   ke dalam  tubuh  diangkut  ke  porta  hati  oleh vena porta.      Hati      memiliki      enzim      yang  mampu memetabolisme senyawa toksik tersebut (Murray et  al.,  2009).      Cara  kerja  hati  dalam  hal metabolisme seperti ini dapat mengakibatkan hati mudah rusak. Kerusakan hati dapat pula meliputi kerusakan  struktur  maupun  gangguan  fungsi (Guyton dan Hall,
1997).
Peningkatan  radikal  bebas  menstimulasi proses peroksidasi  lipid dan mengakibatkan stres oksidatif.    Peningkatan  radikal  bebas  juga menurunkan  aktivitas  enzim        lipoprotein lipase    (LPL)    yang menyebabkan  terjadinya akumulasi  trigliserida  (TG)  dalam  sel  hati  dan menimbulkan  infiltrasi  lemak,  degenerasi  lemak, bahkan  menyebabkan  sel hati  mengalami kematian (nekrosa) sehingga memperparah kondisi tubuh. Hasil penelitian Ismiranda  (2016) telah  membuktikan  bahwa  pemberian  pakan aterogenik mampu
meningkatkan kadar kolesterol  total  serum  darah  mencit  perlakuan. Selanjutnya pakan aterogenik juga mempengaruhi struktur mikroskopis  organ  hati. Hati    mencit  perlakuan  mengalami  infiltrasi lemak  dan  degenerasi  lemak.  Namun  demikian, pengamatan  secara  terperinci  tentang  efek diet aterogenik  terhadap  gambaran  histopatologi  hati belum  pernah dilakukan,  mengingat  perlemakan hati  dapat  mengakibatkan  terganggunya  fungsi hati bahkan menyebabkan nekrosa sel hati.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  maka perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efek diet  aterogenik  secara  terperinci  terhadap gambaran  histopatologi  hati  mencit  (Mus musculus) yang berupa infiltrasi lemak, degenerasi lemak dan nekrosa.  Dengan demikian diharapkan,  hasil  penelitian  ini  dapat  menambah
wawasan  masyarakat  akan  bahaya  yang  dapat ditimbulkan        akibat        tingginya konsumsibahan    pangan    diet    lemak    terhadap organ hati.

## METODE PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  duatempat yaitu  :proses  pemeliharaan  dan  pemberian perlakuan  pada  mencit  perlakuan  dilakukan  di Laboratorium  MIPA  FKIP  Universitas  Jabal Ghafur dan pembuatan preparat organ hati mencit perlakuan dilaksanakan di Laboratorium Patologi Fakultas    Kedokteran    Hewan    (FKH)  Unsyiah. Penelitian  ini      berlangsung      pada  bulan  Maret sampai dengan Agustus 2017.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  yang  digunakan  adalah,  timbangan digital  analitik,  oven,  kandang  mencit,  dan  botol minum mencit.
Bahan  yang  digunakan  adalah  mencit  (Mus musculus) jantan  umur  2  bulan dengan  bobot  20 gr,      akuades,  etanol  96  %,  NaCl  fisiologis, pakan   standar,   Kuning   telur, Lemak kambing dan Alkohol 70 %, Larutan Bouin.

## Jenis Penelitian dan Rencana Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium yang terdiri dari 2 perlakuan dan masing-masing perlakuan terdiri dari  4  ekor  mencit.  Perlakuan  terdiriatas  P0  : kontrol negatif (hanya diberikan pakan standar + Aquades)  dan  P1  :  kontrol  positif  (pemberian pakan aterogenik + Aquades).

## Prosedur Penelitian
Penyiapan Hewan Coba
Penelitian  ini  menggunakan  mencit  (Mus musculus)  jantan  berumur  2  bulan  dengan  rata- rata  berat  badan  20  g.  Mencit  ini  diaklimatisasi selama  tujuh  hari  di  kandang  percobaan. Kandang  mencit  terbuat  dari  bak  plastik  dengan ukuran  27  cm  x  19,5  cm  x  9  cm.    Bagian    atas kandang    ditutup    kawat  jaring      dan      bagian bawah      dialasi      sekam  dengan  ketebalan  3  cm. Mencit  diberi  pakan  dan  minuman  secara  ad libitum.
Pembuatan Pakan Aterogenik Pembuatan    pakan    aterogenik  mengacu pada Hernawati (2012).
Bahan Kadar% TepungJagung 60 TepungIkan 8
BungkilKedelai 20 KuningTelur 3 MinyakKelapa 6 Premiks 1 Garam 1 CaCO 3 1 Total 100

## Pemberian Pakan Aterogenik
Pakan aterogenik diberikan pada kelompok P1  (kontrol  positif).  Pakan  aterogenik  diberikan selama  30  hari  secara  ad  libitum  (Hernawati, 2012).

## Pengambilan Organ dan Pembuatan Sediaan Histologis
Setelah    hewan    diterminasi      dengan  cara pembiusan  menggunakan  kloroform,  dilakukan bedah  bangkai,  organ  hati  segera  diambil  dan selanjutnya  dibuat  sediaan  histologis  dengan metode  parafin.  Spesimen  hati  dimasukkan  ke dalam  larutan  fiksatif  bouin,  kemudian  dehidrasi dengan  menggunakan  alkohol  seri  70  %  sampai dengan  alkohol  absolut,  kliring  dalam  xilol, infiltrasi dan embedding dalam blok parafin 56 - 58 oC. Sediaan yang telah diembeddingdisayat  dengan  ketebalan  5  mikron menggunakan    mikrotom    putar.    Setiap ulangan dibuat 4 sayatan dengan interval 10 sayatan  dan diletakkan  di atas  kaca  benda yang telah diberi larutan  perekat.  Untuk  mengamati    gambaran histologis    hati,  maka  sediaan  hati  diwarnai dengan  metode  pewarnaan      Hematoxylin  Eosin (HE)  yang  mengacu  pada  Gridley  (1960). Pengamatan  histologis    hati    mengunakan mikroskop cahaya pada pembesaran 10 x 40. Parameter Yang Diamati
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah  degenerasi  lemak,  infiltrasi  lemak  dan nekrosa  sel  hati  mencit  (Mus  musculus)  akibat pemberian pakan aterogenik.

## Analisis Data
Data    hasil    penelitian    berupa    rerata degenerasi    lemak,  infiltrasi  lemak  dan  nekrosa sel    hati    mencit    (Mus    musculus)  akibat pemberian    pakan    aterogenik  dianalisis  dengan analisis dengan   statistik uji-T .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran Histopatologi Organ Hati
Hasil penelitian terhadap gambaran histopatologi  organ  hati  mencit  perlakuan  dapat dilihat pada
Gambar 1 di bawah ini.
A

## B
Gambar 1.  Gambaran Histopatologis hati mencit perlakuan
Keterangan  :  a.Vena  sentralis,  b.  Hepatosit,  c. Sinusoid,  d.  Nukleus,  e.  Infiltrasi  lemak,  f. Degenerasi lemak P0                    : Pakan Standar P1                    : Pakan Aterogenik
Gambar 1A    memperlihatkan  gambaran histologis  hati  memperlihatkan  unsur  utama  hati yaitu  hepatosit  yang  berbentuk          polyhedral dan        heksagonaldengan   inti   (nukleus)   bulat. Diantara  hepatosit  terdapat  sinusoid;  merupakan pembuluh      darah      kapiler      yang      membawa darah      menuju      ke      vena      sentralis. Padagambar  juga  memperlihatkan  vena  sentralis dengan  sangat  jelas.  Sel  hati  tersusun  regular dengan perbandingan sitoplasma dan inti sel yang normal  dan  mengelilingi  vena  sentralis  dengan sinusoid yang beraturan rapi.
Berbeda    dengan    Gambar    1A,  Gambar 1B    memperlihatkan  bahwa  pemberian  pakan aterogenik  selama  30  hari  berturut-turut  (P1) mampu merusak histologist hati mencit. Kerusakan  tersebut  ditandai  dengan  adanya perlemakan  di  hati.  Perlemakan    ini  terdiri    dari infiltrasi    lemak  (vakuola-vakuola  lemak  diluar sel  hepatosit)  yang  membentuk  ruang-ruang kosong  akibat  penimbunan  lemak  di  luar  sel hepatosit,  dan  degenerasi  lemak  (pembentukan vakuola- vakuola  lemak  yang  memenuhi  bagian sitoplasma    hepatosit).    Pada    degenerasi  lemak, pembentukan  vakuola  lemak  memenuhi    bagian sitoplasma    sel    hati  sehingga  mendesak  inti  sel hepatosit  ke  tepi.  Sinusoid  yang  tampak  tidak beraturan  akibat  sitoplasma  sel  hepatosit  yang membesar.
Jurnal Sains Riset | Volume  VIII Nomor I 27
BungkilKedelai 20 KuningTelur 3 MinyakKelapa 6 Premiks 1 Garam 1 CaCO 3 1 Total 100

## Pemberian Pakan Aterogenik
Pakan aterogenik diberikan pada kelompok P1  (kontrol  positif).  Pakan  aterogenik  diberikan selama  30  hari  secara  ad  libitum  (Hernawati, 2012).

## Pengambilan Organ dan Pembuatan Sediaan Histologis
Setelah    hewan    diterminasi      dengan  cara pembiusan  menggunakan  kloroform,  dilakukan bedah  bangkai,  organ  hati  segera  diambil  dan selanjutnya  dibuat  sediaan  histologis  dengan metode  parafin.  Spesimen  hati  dimasukkan  ke dalam  larutan  fiksatif  bouin,  kemudian  dehidrasi dengan  menggunakan  alkohol  seri  70  %  sampai dengan  alkohol  absolut,  kliring  dalam  xilol, infiltrasi dan embedding dalam blok parafin 56 - 58 oC. Sediaan yang telah diembeddingdisayat  dengan  ketebalan  5  mikron menggunakan    mikrotom    putar.    Setiap ulangan dibuat 4 sayatan dengan interval 10 sayatan  dan diletakkan  di atas  kaca  benda yang telah diberi larutan  perekat.  Untuk  mengamati    gambaran histologis    hati,  maka  sediaan  hati  diwarnai dengan  metode  pewarnaan      Hematoxylin  Eosin (HE)  yang  mengacu  pada  Gridley  (1960). Pengamatan  histologis    hati    mengunakan mikroskop cahaya pada pembesaran 10 x 40. Parameter Yang Diamati
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah  degenerasi  lemak,  infiltrasi  lemak  dan nekrosa  sel  hati  mencit  (Mus  musculus)  akibat pemberian pakan aterogenik.

## Analisis Data
Data    hasil    penelitian    berupa    rerata degenerasi    lemak,  infiltrasi  lemak  dan  nekrosa sel    hati    mencit    (Mus    musculus)  akibat pemberian    pakan    aterogenik  dianalisis  dengan analisis dengan   statistik uji-T .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran Histopatologi Organ Hati
Hasil penelitian terhadap gambaran histopatologi  organ  hati  mencit  perlakuan  dapat dilihat pada
Gambar 1 di bawah ini.
A

## B
Gambar 1.  Gambaran Histopatologis hati mencit perlakuan
Keterangan  :  a.Vena  sentralis,  b.  Hepatosit,  c. Sinusoid,  d.  Nukleus,  e.  Infiltrasi  lemak,  f. Degenerasi lemak P0                    : Pakan Standar P1                    : Pakan Aterogenik
Gambar 1A    memperlihatkan  gambaran histologis  hati  memperlihatkan  unsur  utama  hati yaitu  hepatosit  yang  berbentuk          polyhedral dan        heksagonaldengan   inti   (nukleus)   bulat. Diantara  hepatosit  terdapat  sinusoid;  merupakan pembuluh      darah      kapiler      yang      membawa darah      menuju      ke      vena      sentralis. Padagambar  juga  memperlihatkan  vena  sentralis dengan  sangat  jelas.  Sel  hati  tersusun  regular dengan perbandingan sitoplasma dan inti sel yang normal  dan  mengelilingi  vena  sentralis  dengan sinusoid yang beraturan rapi.
Berbeda    dengan    Gambar    1A,  Gambar 1B    memperlihatkan  bahwa  pemberian  pakan aterogenik  selama  30  hari  berturut-turut  (P1) mampu merusak histologist hati mencit. Kerusakan  tersebut  ditandai  dengan  adanya perlemakan  di  hati.  Perlemakan    ini  terdiri    dari infiltrasi    lemak  (vakuola-vakuola  lemak  diluar sel  hepatosit)  yang  membentuk  ruang-ruang kosong  akibat  penimbunan  lemak  di  luar  sel hepatosit,  dan  degenerasi  lemak  (pembentukan vakuola- vakuola  lemak  yang  memenuhi  bagian sitoplasma    hepatosit).    Pada    degenerasi  lemak, pembentukan  vakuola  lemak  memenuhi    bagian sitoplasma    sel    hati  sehingga  mendesak  inti  sel hepatosit  ke  tepi.  Sinusoid  yang  tampak  tidak beraturan  akibat  sitoplasma  sel  hepatosit  yang membesar.
Jurnal Sains Riset | Volume  VIII Nomor I 27
BungkilKedelai 20 KuningTelur 3 MinyakKelapa 6 Premiks 1 Garam 1 CaCO 3 1 Total 100

## Pemberian Pakan Aterogenik
Pakan aterogenik diberikan pada kelompok P1  (kontrol  positif).  Pakan  aterogenik  diberikan selama  30  hari  secara  ad  libitum  (Hernawati, 2012).

## Pengambilan Organ dan Pembuatan Sediaan Histologis
Setelah    hewan    diterminasi      dengan  cara pembiusan  menggunakan  kloroform,  dilakukan bedah  bangkai,  organ  hati  segera  diambil  dan selanjutnya  dibuat  sediaan  histologis  dengan metode  parafin.  Spesimen  hati  dimasukkan  ke dalam  larutan  fiksatif  bouin,  kemudian  dehidrasi dengan  menggunakan  alkohol  seri  70  %  sampai dengan  alkohol  absolut,  kliring  dalam  xilol, infiltrasi dan embedding dalam blok parafin 56 - 58 oC. Sediaan yang telah diembeddingdisayat  dengan  ketebalan  5  mikron menggunakan    mikrotom    putar.    Setiap ulangan dibuat 4 sayatan dengan interval 10 sayatan  dan diletakkan  di atas  kaca  benda yang telah diberi larutan  perekat.  Untuk  mengamati    gambaran histologis    hati,  maka  sediaan  hati  diwarnai dengan  metode  pewarnaan      Hematoxylin  Eosin (HE)  yang  mengacu  pada  Gridley  (1960). Pengamatan  histologis    hati    mengunakan mikroskop cahaya pada pembesaran 10 x 40. Parameter Yang Diamati
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah  degenerasi  lemak,  infiltrasi  lemak  dan nekrosa  sel  hati  mencit  (Mus  musculus)  akibat pemberian pakan aterogenik.

## Analisis Data
Data    hasil    penelitian    berupa    rerata degenerasi    lemak,  infiltrasi  lemak  dan  nekrosa sel    hati    mencit    (Mus    musculus)  akibat pemberian    pakan    aterogenik  dianalisis  dengan analisis dengan   statistik uji-T .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran Histopatologi Organ Hati
Hasil penelitian terhadap gambaran histopatologi  organ  hati  mencit  perlakuan  dapat dilihat pada
Gambar 1 di bawah ini.
A

## B
Gambar 1.  Gambaran Histopatologis hati mencit perlakuan
Keterangan  :  a.Vena  sentralis,  b.  Hepatosit,  c. Sinusoid,  d.  Nukleus,  e.  Infiltrasi  lemak,  f. Degenerasi lemak P0                    : Pakan Standar P1                    : Pakan Aterogenik
Gambar 1A    memperlihatkan  gambaran histologis  hati  memperlihatkan  unsur  utama  hati yaitu  hepatosit  yang  berbentuk          polyhedral dan        heksagonaldengan   inti   (nukleus)   bulat. Diantara  hepatosit  terdapat  sinusoid;  merupakan pembuluh      darah      kapiler      yang      membawa darah      menuju      ke      vena      sentralis. Padagambar  juga  memperlihatkan  vena  sentralis dengan  sangat  jelas.  Sel  hati  tersusun  regular dengan perbandingan sitoplasma dan inti sel yang normal  dan  mengelilingi  vena  sentralis  dengan sinusoid yang beraturan rapi.
Berbeda    dengan    Gambar    1A,  Gambar 1B    memperlihatkan  bahwa  pemberian  pakan aterogenik  selama  30  hari  berturut-turut  (P1) mampu merusak histologist hati mencit. Kerusakan  tersebut  ditandai  dengan  adanya perlemakan  di  hati.  Perlemakan    ini  terdiri    dari infiltrasi    lemak  (vakuola-vakuola  lemak  diluar sel  hepatosit)  yang  membentuk  ruang-ruang kosong  akibat  penimbunan  lemak  di  luar  sel hepatosit,  dan  degenerasi  lemak  (pembentukan vakuola- vakuola  lemak  yang  memenuhi  bagian sitoplasma    hepatosit).    Pada    degenerasi  lemak, pembentukan  vakuola  lemak  memenuhi    bagian sitoplasma    sel    hati  sehingga  mendesak  inti  sel hepatosit  ke  tepi.  Sinusoid  yang  tampak  tidak beraturan  akibat  sitoplasma  sel  hepatosit  yang membesar.
Hasil  penelitian  Sutejo  dan Dewi  (2012), juga    memperlihatkan    bahwa  gambaran histopatologi hati yang telah diberikan pakan diet tinggi  lemak  memperlihatkan    adanya    fokus- fokus  degenerasi      lemak      yang      ditandai dengan  adanya  mikrovesikular  (vakuola  lemak) dan  peningkatan    jumlah    granule    (round    gl assappearance) pada sitoplasma, hilangnya sitoplasma  (clear  cell),      sel  membengkak (balloned cell), beberapa sel mengalami kerusakan  membrane,  susunan  sel  hati  tidak teratur      serta      ukuran      inti      bervariasi      dan struktur  kromatin  jelas,  dan  inti  sel  terdesak  ke tepi.
Hasil penelitian
Azman (2012)
membuktikan    bahwa  pemberian  pakan  diet tinggi  lemak  menyebabkan    hati  mengalami steatosis    yang    ditandai    dengan  bertumpuknya vakuola lemak dalam sitoplasma.
Pada  gambar  juga  ditemukan  adanya  sel hati    yang  mengalami    nekrosa.    Nekrosa merupakan  suatu  bentuk  kematian  sel  yang meninggalkan  respon  inflamasi  pada  organ. Nekrosa ditandai dengan inti sel yang mengalami piknotis  (pemadatan)  dan  sel  hati  yang  sudah tidak  lagi  memiliki  inti sel.  Kondisi      juga sejalan      dengan      penelitian  Sutejo  dan  Dewi (2012)  yaitu  pemberian  pakan  tinggi  lemak mampu menyebabkan nekrosa pada sel hati yang ditandai  dengan  adanya  fragmen  sel,  sel  tanpa pulasan  inti,  atau  tidak  tampaknya  sel  disertai reaksi radang;  kromatin  menggumpal  menjadi untaian  kasar;  inti  menjadi  massa  yang mengkerut,  memadat,  dan  menjadi  sangat basofilik  (biru tua),  yang disebut  piknosis; inti piknotik  pecah  menjadi  banyak  partikelbasofilik kecil-kecil          (karioreksis)          atau  mengalami lisis (kariolisis).
Analisis  Data  Infiltrasi  Lemak,  Degenerasi Lemak dan Nekrosa
Hasilpenelitianterhadapreratajumlahinfilt rasilemak,degenerasidannekrosaselhati mencitperlakuansetelahdiinduksipakanaterogen ikselama30haridapatdilihatpadaTabel1. Tabel1.
RerataInfiltrasiLemak,degenerasilemakdannekr osa
Tabel            1            menunjukkan            bahwa pemberian  pakan  aterogenik  selama  30  hari berturut-turut      mampu    meningkatkan rerata infiltrasi        lemak,        degenerasi        lemak        dan nekrosa      sel      hati      mencit      perlakuan      yang berbeda    nyata    dengan    mencit    yang    hanya diberikan  pakan  standar  (P<0,05).              Hasil penelitian        ini      sejalan      dengan        penelitian Murwani  et  al  .  (2006)  dan  Ismiranda  (2016) membuktikan          bahwa          pemberian          pakan aterogenik            mampu      meningkatkan      kadar kolesterol    total    serum    darah    mencit    secara bermakna      dibandingkan      dengan      kelompok pakan        standar.        Ismiranda (2016)        juga menjelaskan          bahwa          pemberian          pakan aterogenik          mempengaruhi          struktur mikroskopis hati mencit.
Myers  (2003)  menjelaskan,  pakan  tinggi kolesterol dari pakan yang diberikan menyebabkan  peningkatan  aktivitas  lipogenesis, dan  asam  lemak  bebas  yang  terbentuk  juga semakin banyak. Selanjutnya terjadilah mobilisasi asam lemak bebas dari jaringan lemak menuju  hati  dan  berikatan  dengan  gliserol membentuk trigliserida. Dengan demikian, semakin  tinggi  konsumsi  lemak  maka  semakin tinggi pula sintesa trigliserida di hati dan semakin tinggi kadar trigliserida dalam darah menyebabkan  degenerasi  lemak  dan  infiltrasi lemak di hati.
Sumber lain menyebutkan bahwa tingginya asupan asam lemak dalam pakan aterogenik  akan meningkatkan absorbsi  asam  lemak  di  usus sehingga  asam  lemak  di  darah  juga  tinggi. Adanya  transpor  asam  lemak  berlebihan  yang diangkut  dari  luar  kedalam  hati  mengakibatkan terjadinya  penumpukan  asam  lemak  dalam  sel hati.  Asam  lemak  jenuh  yang  disimpan  di  hati dalam jumlah besar dapat menimbulkan perlemakan hati.
Asam  lemak  tak  jenuh  dalam  jumlah banyak  pada  membran  mikrosomal  sel  hati  juga meningkatkan  kepekaan  membran  terhadap aktivitas    radikal    bebas    yang  bersifat autokatalitik. Aktivitas radikal bebas ini menghasilkan lipid peroksida yang menyebabkan kerusakan  retikulum  endoplasma  kasar  sehingga polisom akan terlepas (Wu and Cederbaum, 2003 dan  Ong&  Goh,  2002).  Sintesis  protein terganggu, lemak  yang ada dalam hati tidak bisa berikatan  dengan  protein  membentuk  lipoprotein untuk diangkut keluar hati.
Ditemukannya  sel  hati  yang  mengalami nekrosa  dalam  penelitian  ini  diduga  disebabkan
oleh  pakan  aterogenik  yang  bertindak  sebagai radikal  bebas.  Sofia  (2005)  menyatakan  bahwa radikal  bebas  adalah  spesi  kimia  yang  memiliki pasangan  elekton      bebas      di      kulit      terluar sehingga  reaktif  dan  mampu  breaksi  dengan protein, lipid, karbohidrat atau DNA. Peningkatan  jumlah  radikal  bebas  dalam  tubuh mengakibatkan    kemampuan    pertahanan  tubuh melalui  sistem  antioksidan  berkurang  mampu memicu    stress    oksidatif    yangberujung pada berbagai penyakit. . Keadaan ini dipengaruhi oleh spesies  oksigen  reaktif  (ROS).  ROS  merupakan molekul  oksidan  relatif  tinggi,  bersifat  sangat tidak  stabil  sehingga      cepat      bereaksi      dengan molekul  lain.      ROS      terjadi      baik      secara endogen  maupun  eksogen,  melalui  aktifitas metabolik reguler,    aktifitas gaya hidup dan diet (Trilling dan Jaber, 1996).
Peningkatan  radikal  bebas  menstimulasi proses    peroksidasi    lipid  dan  mengakibatkan stres  oksidatif.    Peningkatan  radikal  bebas  juga menurunkan  aktivitas  enzim  lipoprotein  lipase (LPL) yang menyebabkan  terjadinya  akumulasi trigliserida  (TG)  dalam  sel  hati.    Akumulasi lemak  dalam  hati  berlangsung  terus  menerus sehingga  terjadi  degenerasi  lemak  dan  infiltrasi lemak.      Selain      hati,      degenerasi  lemak  dan infiltrasi  lemak  juga  dapat  terjadi  pada      lapisan pembuluh      darah      (Mulyani,1997).  Selain  itu, akumulasi  lemak  juga  mengakibatkan      steatosis (Azman      et      al.,2012)  dan  nekrosa  (Sutejo  dan Dewi,  2012)  yang  memperparah  kondisi  tubuh dengan  malfungsi  hati  (Guyton  dan  Hall,  1997  ; Scanlon dan Sander, 2006).
Mekanisme  terjadinya  kerusakan  sel  hati pada dasarnya sama dengan mekanisme kerusakan sel hati akibat diet pakan tinggi lemak, yaitu  disebabkan  oleh  adanya  radikalbebas. Diduga,  sumber  radikal  bebas  yang  dapat menyebabkan nekrosa sel hati pada penelitian ini disebabkan  oleh  radikal  bebas  yang  berasal  dari pakan  aterogenik  yang  jika  bergabung  dengan radikal  bebas  hasil  metabolisme    tubuh jumlahnya  jauh  lebih besar sehingga kerusakan sel  hati  yang  ditimbulkan    lebih  berat.  Muray  et al.  (2009)  serta  Sutejo  dan  Dewi  (2012) menjelaskan bahwa pada dasarnya tubuh memiliki  kemampuan  membentuk  senyawa radikal  bebas  (radikal  bebas  yang  berasal  dari metabolisme  tubuh  normal).  Selanjutnya  jika bergabung  dengan  radikal  bebas  yang berasal dari  pakan  aterogenik  mampu  memperparah kerusakan pada sel hati.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  pakan  diet aterogenik  selama  30  hari  berturut-turut  mampu meningkatkan  infiltrasi  lemak,  degenerasi  lemak dan  nekrosa  secara  bermakna  dibandingkan pakan standar.

## DAFTAR PUSTAKA
Azman,  F.  K.,  Zulkhairi,  A.,  Azrina,  A., Norhaizan,    M.  E.,  Rasadah,    M.  A., Zamree, M. S dan Khairul, K. A. K.
2012.  Antiobesity  Effect  Of  Tamarindus  Indica L.  Pulp  Aqueous  Extract    In    High-Fat Diet    InducedObese  Rats.  The  Japanes Society  ofPharmacognosy            and Springer.66:333-342.
Gridley, W. F., 1960. Manual of Special Staining Technic.  2nd   Ed.  London: Mc. Graw – Hill Book Company Inc.
Guyton,  A.  C  dan  Hall,  J.  E.  1997.  Fisiologi Kedokteran,  Edisi  5.  Terjemahan  dan Text    Book    of    Medical    Physiology, oleh I. Setiawan, L. M. A. K. A. Tengadi, A. Santoso. EGC: Jakarta.
Hardinigsih        R,        Nurhidayat        N. 2006.Pengaruh pemberian pakan hiperkolesterolemia terhadap bobot
badan  tikus  putih  wistar  yang  diberi bakteri asam laktat. Bogor: FMIPA UNS Surakarta.
Hernawati.  2012.  Peran  Berbagai  Sumber  Serat Pangan    Pada  Perbaikan    Profil  Lipid
Darah Mencit Hiperkolesterolemia. Ringkasan Desertasi. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Ismiranda. 2016 Analisis Potensi Antihiperkolesterol  Ekstrak  Etanol  Buah Asam    Jawa    (Tamarindus  indica  L) terhadap  Mencit(Mus  musculus)  yang Diinduksi Hiperkolesterol. Tesis. Program Pascasarjana  Universitas  Syiah
Kuala, Banda Aceh.
Milias GA, Panagiotakos DB, Pitsavos C, Xenaki
D,    Panagopoulos    G,  Stefanadis    C. 2006.    Prevalence    of  Self-Reported Hypercholesterolemia and Its Relation of Dietary  Habits,  in  Greek  Adult;  a National  Nutrition  &Healthy      Survey. Lipids   In   healthDisease 5 (5).
Mulyani, G.T.  1997. Efek Diet Lemak Jenuh dan Lemak Tak Jenuh terhadap Pembentukan
Lipid  Peroksida  dalam  Darah      Tikus Percobaan. Yogyakarta: Fakultas Kedokteran  Hewan  Universitas  Gajah
Mada.
Muray,  R.  K,  D.  K.  Granner,  P.  A.  Mayes.V. W.Rodwell,  2009.  Biokimia  Harper, edisi  27.  Terjemahan  dari  Harper’s Biochemistry  oleh  A.  Hartono.  Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Murwani.  S.,  Ali  M  dan  Muliartha  K.  2006.Diet
Aterogenik  pada  Tikus  Putih  (Rattus novergicus  strain  Wistar)  sebagai  Model Hewan Aterosklerosis. Jurnal Kedokteran Brawijaya, Vol. XXII, No. 1. Myers, 2003. Interrelationship Betweenarbohydrate and Lipid Metabolism Biological Chemistry. California State University, Long Beach.
Ong, A. S. H.   & Goh, S. H. 2002. Palm oil: A healthful and cost-effective dietary
component. Food and Nutrition Bull etin, vol. 23.
Scanlon.    V.C.dan    T.    Sanders.,    2006. BukuAjar Anatomi dan Fisiologi. Edisi3.
Terjemahan dari  Essentials  of  Anatomy and  Physiology.  3th  edition.    Oleh    F.X Awal    Prasetyo.  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta.
Sudoyo,  A.  W.,  Setiyohadi,  B.,  Alwi,  A., Simadibrata,  K.  M.,  Setiadi,  S.  2006. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid III Edisi  IV.  Departemen  Ilmu  Penyakit Dalam  Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia: Jakarta.
Sutejo, IR dan Dewi R,. 2012. Kerusakan sel hati dan  peningkatkan      Kolesterol  Serum Mencit      Akibat  Pemberian  Minyak Goreng  Bekas  Pakai.  Jurnal  IKESMA Volume 8 Nomor 1.
Trilling JS, Jaber R.1996. Selections from current literature:  the  role  of  free  radicals  and antioxidants  in  disease.  Fam  Pract  : 13(3):322-6.
Wu,      D.,      Cederbaum,  A.I.      2003.  Alcohol,
Oxidative  Stress,  and  Free  Radical
Damage. http:/www.pubs.niaaa.nih.
gov/arh27-4/277-284.htm.  Diakses  pada tanggal 18 Agustus 2015.