## ISSN: 0215-7950
*Alamat penulis korespondensi: Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Jalan Kamper, Kampus IPB Dramaga Bogor, Jawa Barat 16680. Tel: +62-251-8629364 . Surel: fitrianingrum@apps.ipb.ac.id .

## Volume 20, Nomor 1, Januari 2024
Halaman 26–33 DOI: 10.14692/jfi.20.1.24–31

## Perbanyakan Nematoda Daun
Aphelenchoides fragariae pada Biakan Cendawan
Mass Rearing of Foliar Nematode Aphlenchoides fragariae
on Fungal Culture
Fitrianingrum Kurniawati * , Supramana, Sri Hendrastuti Hidayat, Efi Toding Tondok, Heriyanto Syafutra Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor , Jalan Kamper Kampus IPB Dramaga Bogor, Jawa Barat 16680.
(diterima Agustus 2023, disetujui Januari 2024)

## ABSTRAK
Nematoda daun Aphelenchoides fragariae mempunyai inang yang luas dan dapat berperan sebagai parasit  tumbuhan  maupun  pemakan  cendawan.  Belum  ada  informasi  terkait  teknik  perbanyakan A. fragariae di Indonesia. Penelitian untuk memperoleh jumlah nematoda A. fragariae yang murni perlu dilakukan untuk mendukung penelitian di masa mendatang. Penelitian ini bertujuan untuk memperbanyak A. fragariae menggunakan  biakan  cendawan  pada  tiga  suhu  yang  berbeda  dan  menghitung  jumlah nematoda.  Biakan  cendawan  yang  digunakan  ialah, Alternaria porri, Botrytis cinerea , Fusarium oxysporum f. sp. cepae , Pythium sp., dan Rhizopus sp. Lima spesies cendawan tersebut diinkubasikan pada tiga suhu. Untuk memperoleh kondisi yang sesuai, biakan cendawan diinkubasi pada tiga suhu yang berbeda. Sebelum ditumbuhkan dalam biakan cendawan, nematoda dicelupkan ke dalam larutan streptomisin  sulfat  0.1%,  kemudian  dicuci  menggunakan  air  steril.  Selanjutnya,  20  nematoda  steril diinfestasikan  pada  biakan  cendawan  berumur  7  hari  dan  diinkubasi  pada  suhu  16,  28,  dan  37  ℃. Setelah  28  hari,  nematoda  dipanen  dan  dihitung  jumlahnya.  Di  antara  spesies  cendawan  yang  diuji sebagai media pemeliharaan, biakan terbaik untuk reproduksi A. fragariae ialah Alternaria porri pada suhu 28 ℃,  dengan jumlah nematoda akhir rata-rata hingga 407.8 per cawan petri Pada suhu 37 ℃ A. fragariae gagal bereproduksi di semua biakan cendawan yang diuji. Hal ini menunjukkan bahwa di antara ketiga suhu tersebut, yang paling mendukung pertumbuhan dan perkembangan nematoda ialah 16 dan 28 ℃, yang paling tidak mendukung adalah 37 ℃.
Kata kunci:  jumlah nematoda, suhu, reproduksi

## ABSTRACT
This research investigated the in vitro cultivation of the foliar nematode Aphelenchoides fragariae , which can feed on both plants and fungi. As there was no prior information available in Indonesia, this study aimed to establish an efficient method for mass rearing, thereby supporting future research. Five  fungal  cultures  i.e. Alternaria porri , Fusarium oxysporum , Botrytis cinerea , Pythium sp., and Rhizopus sp. grown in potato dextrose agar were evaluated as potential growing media at three different temperatures:  16,  28,  and  37  ℃.  Nematodes  were  surface-sterilized  with  streptomycin  sulfat  0.1%
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Kurniawati et al. before being introduced into the fungal cultures. Results showed that A. porri was the most favourable culture for A . fragariae reproduction, particularly at 28 ℃. Under these conditions, the average final population reached 407.8 nematodes per petri dish. Notably, A. fragariae failed to thrive at 37 ℃ in all tested fungal media. This suggests that the optimal temperature for its reproduction ranges between 16 and 28 ℃. This study provides valuable insights into the in vitro cultivation of A. fragariae , paving the way for further research utilizing this nematode species.
Keywords: fungus culture, population, reproductive, temperature

## PENDAHULUAN
Nematoda merupakan mikrofauna yang penting dalam proses dekomposisi dan daur ulang  nutrisi  dalam  tanah.  Bergantung  pada stratanya,  nematoda  memiliki  berbagai makanan  pilihan.  Nematoda  dapat  hidup sebagai  pemakan  tumbuhan  (herbivora), pemakan  segala  (omnivora),  predator (penelan  dan  penusuk),  pemakan  bakteri (bakterivora),  pemakan  substrat,  pemakan eukariota uniseluler, dan pemakan cendawan (fungivora) (Yeates et al . 1993). Pengetahuan tentang  kebiasaan  makan  nematoda  sangat penting  untuk  diketahui  karena  dapat membantu dalam memahami biologi dan peran nematoda dalam proses ekosistem. Nematoda pemakan cendawan hidup pada banyak spesies cendawan yang berbeda, termasuk cendawan saprob, patogen, dan mikoriza (Freckman dan Caswell 1985; Giannakis dan Sanders 1989). Nematoda dari genus Aphelenchoides dapat  memakan  cendawan.  Pembiakan massal nematoda Aphelenchoides, khususnya Aphelenchoides fragariae, pada  biakan cendawan dapat menjadi metode yang efisien untuk  mendapatkan  jumlah  nematoda  yang tinggi dan murni. Pembiakan massal nematoda A. besseyi pada  biakan  cendawan  telah dilakukan  secara in vitro . A. besseyi dapat makan  dan  bereproduksi  pada Alternaria tenuis (Todd dan Atkins 1958), Fusarium solani (Huang et al .  1973), Aureobasidium pullulans (Huang et al . 1979), dan Alternaria alternata (Rajan et al. 1989). Rao (1985) mempelajari jumlah nematoda pucuk  putih  pada  biakan  monosenik  dan menemukan bahwa medium agar-agar tepung
gandum merupakan medium yang sesuai untuk memperbanyak nematoda pada biakan cendawan Fusarium moniliforme , Alternaria padwickii, Helminthosporium oryzae, dan Curvularia sp., tetapi tidak untuk Pyricularia oryzae . Biakan spesies cendawan dan suhu inkubasi berpengaruh  pada  fase  kehidupan  nematoda. Nematoda  juvenil  berkembang  biak  dengan baik  pada  biakan  cendawan A. padwickii dengan  suhu  inkubasi  20  ℃,  sedangkan nematoda  dewasa  pada  suhu  inkubasi  25  ℃ (Imamah 2019).  Cendawan A. padwickii dan F. semitectum merupakan  cendawan  yang dapat  mendukung  perkembangan  nematoda pada suhu inkubasi 20–25 ℃.
Penelitian  pembiakan  nematoda A. besseyi —nematoda  pucuk  putih  padi— telah  dilakukan  pada  biakan  cendawan A. padwickii , F. semitectum, dan B. cinerea (Imamah et al .  2020).  Pembiakan  nematoda Aphelenchoides, khususnya A. fragariae, pada biakan cendawan dapat menjadi metode yang  efisien  untuk  mendukung  berbagai aspek  penelitian  (bioekologi,  pengendalian, resistensi, dan lainnya).
Sambiloto  ( Andrographis paniculata ) merupakan  salah  satu  inang A. fragariae yang  mempunyai  gejala  khas  hawar  pada daun.  Jumlah  nematoda A. fragariae dalam daun  sambiloto  sangat  banyak  dan  mudah diekstraksi  sehingga A. fragariae yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  hasil ekstraksi  dari  tanaman  sambiloto.  Penelitian ini  bertujuan  memperbanyak  nematoda A. fragariae dari daun sambiloto pada lima biakan  cendawan  pada  tiga  suhu  inkubasi yang berbeda.

## BAHAN DAN METODE
Nematoda Aphelenchoides fragariae dan Biakan Cendawan Uji Nematoda ( Aphelenchoides fragariae ) dan cendawan uji merupakan koleksi Laboratorium Mikologi  Tumbuhan  dan  Nematologi Tumbuhan,  Departemen  Proteksi  Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Aphelenchoides fragariae yang digunakan berasal  dari  tanaman  sambiloto  bergejala hawar daun . Daun sambiloto dipotong-potong, direndam dalam akuades steril, lalu diinkubasi dalam lemari es pada suhu 4 ℃ selama 24 jam. Nematoda A. fragariae disaring menggunakan saringan  500  mesh,  lalu  direndam  dalam streptomisin sulfat 0.1% selama 10 menit dan  dibilas  sebanyak  tiga  kali  menggunakan akuades steril.
Lima  spesies  cendawan  uji  digunakan sebagai  medium  perbanyakan  nematoda A. fragariae. Kelima  cendawan  uji  merupakan cendawan  patogen  dari  tanaman  sakit: Alternaria porri dari bawang merah bergejala bercak  ungu, Botrytis cinerea dari gejala busuk buah stroberi, Fusarium oxysporum f. sp. cepae dari  bawang  merah  dengan  gejala moler, Pythium sp.  dari  buah  mentimun bergejala busuk basah, dan Rhizopus sp. dari buah  nangka  bergejala  busuk  lunak.  Tidak ada alasan khusus dalam pemilihan cendawan yang  digunakan  sebagai  medium  pembiakan nematoda A. fragariae . Biakan  cendawan  uji  ditumbuhkan  pada medium agar-agar dekstrosa kentang (ADK) (1 L akuades, 20 g dekstrosa, 20 g agar- agar,  200  g  kentang)  dan  diinkubasi  koloni memenuhi  permukaan  cawan  petri  penuh. Inkubasi  cendawan  tersebut  memerlukan waktu  yang  berbeda-beda,  untuk  biakan cendawan A. porri, B. cinerea, F. oxysporum fsp. cepae waktu  inkubasi  yang  diperlukan adalah  7  hari,  sedangkan Pythium sp. dan Rhizopus sp. selama 3 hari. Selanjutnya biakan cendawan disimpan pada suhu 28 ℃ sampai digunakan untuk pengujian.
Perbanyakan Nematoda pada Biakan Cendawan Uji Sebanyak  20  nematoda  diinfestasikan masing-masing  ke  dalam  cawan  yang  berisi koloni  biakan  cendawan  uji.    Setiap  biakan disimpan dalam plastik hitam dan diinkubasi dalam keadaan gelap pada tiga suhu (16, 28, dan 37 ℃) selama 28 hari.
Medium  biakan  cendawan  uji  dalam cawan dipotong-potong.  Ekstraksi nematoda dilakukan  dengan  metode  corong  Baermann yang dimodifikasi (peralatannya menggunakan wadah es  krim  yang  dilubangi  dan  diberi saringan dari kain kassa dan gelas plastik yang diisi air pada bagian bawahnya). Jumlah nematoda  dihitung  dari  contoh  pengenceran suspensi nematoda mengikuti Coyne (2007):
N = × n, dengan v V
V,  volume  suspensi  dalam  botol;  v,  volume suspensi dalam cawan syracuse ; dan n, jumlah rata-rata  yang  dihitung  di  mikroskop.  Total jumlah  nematoda  juvenil  dan  dewasa  adalah kepadatan jumlah nematoda akhir.
Penelitian disusun  dalam  rancangan  acak lengkap dengan dua faktor. Faktor pertama ialah  biakan  cendawan  uji  yang  terdiri  atas lima taraf ( A. porri, B. cinerea, F. oxysporum f. sp. cepae , Pythium sp. , dan Rhizopus sp.) dan  faktor  kedua  ialah  suhu  inkubasi  yang terdiri atas tiga taraf (16, 28, dan 37 ℃). Dasar pemilihan  suhu  16  ℃  ialah  mewakili  suhu rendah AC, 28 ℃ mewakili suhu ruang, dan 37  ℃  mewakili  suhu  di  atas  suhu  optimum pertumbuhan  nematoda A. fragariae. Kombinasi  perlakuan  yang  diujikan  ialah 15 kombinasi perlakuan dan diulang sebanyak 5 kali. Data dianalisis menggunakan analysis of variance (ANOVA) faktorial dalam rancangan acak lengkap menggunakan program R versi 4.2.1. Hasil pengujian yang menunjukkan beda nyata  dilanjutkan  dengan  uji  perbandingan berganda menggunakan uji Tukey pada taraf 5%.  Data  jumlah  nematoda  ditransformasi menggunakan persamaan: y’ = ln (y+1) dengan nilai y ialah jumlah nematoda.
Jurnal Fitopatologi Indonesia

## HASIL
Biakan Cendawan Pada  tabel  1  disajikan  tentang  biakan cendawan  yang  digunakan  untuk  media perbanyakan  nematoda A. fragariae dan struktur  mikroskopisnya.  Koloni  cendawan A. porri pada medium ADK tampak atas berwarna  putih  terang  hingga  abu-abu  gelap dan tampak belakang berwarna hitam, struktur mikroskopisnya terdiri atas konidia yang memiliki sekat melintang dan membujur serta konidiofor berwarna gelap. Koloni cendawan F. oxysporum f. sp . cepae tampak atas berwarna putih  dengan  membentuk  miselium  aerial (udara) yang panjang dan padat menyerupai benang-benang halus seperti kapas dan tampak belakang berwarna ungu muda, terlihat seperti berair  dan  struktur  mikroskopisnya  terlihat adanya makrokonidia dan mikrokonidia.
Koloni  cendawan Pythium sp. tampak atas berwarna putih seperti kapas dan tampak bawah  berwarna  putih,  tidak  beraturan, dan  berair,  struktur  mikroskopis  terdiri atas  miselium  berwarna  hialin  dan  terdapat sporangium  berbentuk globose . Koloni cendawan B. cinerea tampak  atas  berwarna putih berbentuk  melingkar  konsentris,
memiliki miselium udara dengan tekstur lembut  ( fluffy ),  dan  tampak  atas  berwarna putih dan berair, struktur mikroskopis terdiri atas  konidia  berbentuk  oval  (bulat  telur) seperti  bunga.  Koloni  cendawan Rhizopus sp.  tampak  atas  berwarna  keabu-abuan, tampak bawah berwarna cokelat keabu-abuan, struktur mikroskopisnya berupa sporangiofor berwarna kecokelatan dan sporangia berwarna hitam keabu-abuan, berbentuk bulat.
Morfologi Aphelenchoides fragariae Hasil Perbanyakan Massal Nematoda A. fragariae hasil perbanyakan jantan  memiliki  tubuh  ramping,  panjang, dan  ekor  melengkung  (Gambar  1a).  Betina memiliki tubuh ramping dengan posisi istirahat lurus (Gambar 1b), stilet ramping, berbentuk seperti jarum, median bulb berukuran  besar, dan berbentuk bulat hingga oval (Gambar 1c).
Ekor  memanjang  berbentuk conoid dan terdapat 1 mukro diujung ekor (Gambar 1d). Spikula  pada  nematoda  jantan  berbentuk seperti  duri  mawar,  tidak  terdapat  bursa  dan gubernaculum (Gambar  1e).  Vulva  pada nematoda  betina  berada  di  sekitar  setengah dari lebar tubuh (Gambar 1f). Kantung post- uterus memanjang  lebih  dari  setengah  jarak vulva-anus (Gambar 1g).
Jumlah Nematoda Aphelenchoides fragariae pada Berbagai Suhu dan Biakan Cendawan Jumlah  nematoda A. fragariae hasil perbanyakan  pada  kultur  cendawan  dengan berbagai  suhu  menunjukkan  hasil  yang bervariasi  (Tabel  2).  Dari  hasil  analisis menggunakan  ANOVA  faktorial  diperoleh hasil  yang  berpengaruh  nyata,  yaitu  faktor suhu  dan  interaksi  antara  suhu  dengan cendawan.  Faktor  suhu  mempengaruhi jumlah nematoda. Pada kisaran suhu optimal nematoda akan berkembang dan bereproduksi sesuai kapasitas genetiknya. Pada suhu 37 ℃ rata-rata nematoda pada kultur cendawan tidak mampu tumbuh dan bereproduksi. Suhu lain perlu  diteliti  kembali  agar  didapatkan  suhu yang  benar-benar  sesuai  untuk  pertumbuhan dan perkembangan nematoda A. fragariae . Hasil uji ANOVA faktorial menunjukkan bahwa  P  value  suhu  6.4250E-14,  cendawan 0.403661851  dan  interaksi  6.22359E-05. Derajat bebas (DB) suhu 2, cendawan 4, dan interaksi 8. Fhitung suhu 52.576923, cendawan 1.0213675, dan interaksi 5.1762821. Dari hasil ini  diketahui  bahwa  terdapat  interaksi  antara faktor suhu dan biakan cendawan. Berdasarkan analisis lanjut menggunakan uji tukey dapat disimpulkan  bahwa  faktor  interaksi  suhu  dan biakan  cendawan  ini  memengaruhi  jumlah nematoda.    Interaksi  yang  signifikan  berarti pengaruh  suhu  bergantung  pada  biakan  yang digunakan.  Jika  digunakan  biakan A. porri dan B. cinerea maka  di  antara  ketiga  suhu yang paling baik adalah 28 ℃. Jika digunakan biakan F. oxysporum f.sp. cepae , Pythium sp., dan Rhizopus sp. maka suhu yang paling baik ialah 16 ℃. Pada penelitian ini diketahui bahwa
Tabel 1 Biakan cendawan yang digunakan untuk memperbanyak nematoda Aphelenchoides  fragariae
Table 1 Fungal cultures used to reproduce the nematode, Aphelenchoides fragariae Cendawan (Fungi) Makroskopis (Macroscopic) Mikroskopis (Microscopic) Tampak atas
(Observe side)
Tampak bawah (Reverse side)
Alternaria porri Konidia dengan sekat membujur dan melintang. (Conidia with longitudinal and transverse septates).
Fusarium oxysporum f.
sp. cepae a b a, makrokonidia; dan b, mikrokonidia.
(a, macroconidia; and b, microconidia).
Pythium sp
miselium dan sporangium.
(mycelium and sporangium).
Botrytis cinerea konidia seperti bunga (Flower-like conidia)
Rhizopus sp.
sporangium dan sporangiofor (sporangium and sporangiophore)
Keterangan: Biakan dan struktur mikroskopis cendawan diamati dengan mikroskop compound pada perbesaran 10 × 40.
(Note:  Fungal  cultures  and  its  microscopic  structures  were  observed  using  a  compound  microscope  at  a  magnification of 10 × 40)
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Tabel 2 Populasi nematoda Aphelenchoides fragariae pada biakan cendawan dan suhu yang berbeda-beda Table 2  Population of Aphelenchoides fragariae nematode in different fungal cultures and temperatures
Biakan c endawan
(Fungal culture) Suhu (Temperature) (℃) (mean ± se) 16 28 37 Alternaria porri 6.8 ± 8.34 cd 407.8 ± 524.29 a 0.0 ± 0.0 e Botrytis cinerea 25.2 ± 23.46 ab 56.4 ± 8.34 ab 0.2 ± 0.55 e Fusarium oxysporum f. sp. cepae 27.2 ± 32.31 abc 11.2 ± 16.10 bcd 0.0 ± 0.0 b Pythium sp. 62.6 ± 80.42 a 5.4 ± 4.44 cd 0.0 ± 0.0 b Rhizopus sp. 55.8 ± 46.49 a 3.0 ± 3.62 d 0.2 ± 0.55 e
Keterangan: se: standard error. Data telah ditransformasi dengan persamaan (y’ = ln n(y+1)) dengan nilai y adalah jumlah nematoda. Angka pada kolom dan baris yang sama dan diikuti huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata berdasarkan uji Tukey pada  α 5%.
(Note: se: standard error. Data have been transformed with the equation (y’ = ln n(y+1)) with y is the number of nematodes. Values in the same column and row followed by  different letter are significantly different based on Tukey’s test at α 5%.).
Gambar 1  Morfologi nematoda Aphelenchoides fragariae hasil perbanyakan pada biakan cendawan diamati dengan mikroskop compound perbesaran 10 × 20. a, Nematoda jantan; b, Nematoda betina; c,  Metakorpus; d, Mucro; e, Spikula pada nematoda jantan yang berbentuk seperti duri mawar; f, Vulva pada nematoda betina; g, Postvulval uterine sac (PUS) yang panjangnya lebih dari setengah jarak vulva ke anus.
(Figure 1  Morphology of Aphelenchoides fragariae nematodes propagated on fungal culture. Observation  was  conducted  using  compound  microscope  with  a  10  ×  20  magnification.  a,  Male nematodes; b, Female nematodes; c, Metacorpus; d, Mucro; e, Spicules on male nematodes having shaped like rose thorns; f, Vulva on female nematodes; g, Postvulval uterine sac (PUS) which length is more than half the distance from vulva to anus.)
a b c d e f g PUS Anus Vulva
suhu 16 dan 28 ℃ adalah suhu optimum bagi pertumbuhan  dan  perkembangan A. fragariae . Sedangkan  pada  suhu  37  ℃  rata-rata nematoda A. fragariae tidak mampu tumbuh dan bereproduksi.

## PEMBAHASAN
Faktor  interaksi  antara  suhu  dan  biakan cendawan  dapat  memengaruhi  jumlah nematoda.  Interaksi  antara  suhu  dan  biakan cendawan dikatakan signifikan jika pengaruh suhu bergantung pada biakan yang digunakan. Terdapat  perbedaan  jumlah  nematoda  antara biakan cendawan yang sama pada suhu yang berbeda.  Makhluk  hidup  mempunyai  suhu optimum untuk tumbuh dan berkembang.
Selain  jenis  cendawan  dan  suhu,  faktor yang  memengaruhi  jumlah  nematoda  ialah medium  perbanyakan  cendawan  (subtrat). Pada percobaan ini hanya digunakan medium ADK saja sehingga pada penelitian selanjutnya perlu dilakukan pembiakan massal nematoda pada  biakan  cendawan  dengan  berbagai medium tumbuh.  Hasil penelitan yang telah dilakukan  terkait  hal  ini  ialah  perbanyakan nematoda A. besseyi pada  kombinasi  biakan cendawan dan jenis medium yang digunakan. Pada medium oat meal agar (OMA) dan ADK  yang  telah  diinfestasi  dengan  biakan cendawan A. alternata dan F. verticillioides menunjukkan  jumlah  nematoda A. beseeyi yang paling tinggi (Jamali et al. 2008).
Biakan  cendawan  yang  dipilih  sebaiknya merupakan  cendawan  yang  menginfeksi tanaman inang dari nematoda A. fragariae. Pada  penelitian  ini  cendawan  yang  dipilih ialah A. porri, F. oxysporum fsp . cepae , yang berasal dari tanaman bawang merah yang juga merupakan tanaman inang A. fragariae serta Botrytis cinerea pada  tanaman  stroberi.  Jika cendawan dan nematoda berasal dari tanaman yang  sama  maka  secara  ekologi  keduanya menghuni habitat yang sama sehingga faktor lingkungan  terutama  kisaran  suhu  optimum bagi  cendawan  dan  nematoda  kemungkinan relatif sama. Selain itu akan ada kemudahan dalam  mendapatkan  biakan  cendawannya (lebih  efisien  waktu),  biaya  lebih  murah
karena berasal dari tanaman inang yang sama, serta perawatannya lebih mudah. Dalam percobaan ini kisaran suhu 16 dan 28  ℃  merupakan  suhu  yang paling sesuai untuk perkembangan dan peningkatan jumlah A. fragariae karena menurut penelitian Jagdale dan Grewal (2006) nematoda A. fragariae mampu menyelesaikan siklus hidupnya pada suhu 14–40 ℃. Menurut Anindita et al . (2021) nematoda A. fragariae tumbuh  baik  pada suhu tanah 28–32 ℃ di Brebes dan Nganjuk. Suhu  optimum  untuk  nematoda  fungivora telah dilaporkan oleh beberapa peneliti. Pada perbanyakan  nematoda A. besseyi, populasi final A. besseyi tertinggi, yaitu sebanyak 9115.3 nematoda  dengan  suhu  inkubasi  25  ℃  pada cendawan A. padwickii dan sebanyak 6334.8 pada cendawan F. semitectum (Imamah 2019). Populasi nematoda A. besseyi, A. saprophilus dan Aphelenchus avenae tumbuh dengan baik pada  suhu  15–25  ℃ pada  biakan  cendawan Alternaria tenuis (Shesteperov dan Migunova 2022). Implikasi  dari  penelitian  ini  adalah data ini bisa dijadikan acuan dalam pemilihan spesies  cendawan  dan  suhu  inkubasi  yang sesuai untuk perbanyakan nematoda fungivora yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Anindita DC, Supramana, Giyanto. 2021.  Detection  and  identification  of Aphelenchoides fragariae nematodes on shallot bulbs in Bogor, West Java, Brebes, Central Java, and Nganjuk, East Java. Di dalam: IOP Conference Series: Earth and Environmental  Science. 807(2):022102. DOI:  https://doi.org/10.1088/1755- 1315/807/2/022102. Coyne D. 2007. Practical Plant Nematology: A Field and Laboratory Guide : IITA. Freckman DW, Caswell EP. 1985. The ecology of  nematodes  in  agroecosystems. Annual review  of  Phytopathology.  23:275–296. DOI: https://doi.org/10.1146/annurev. py.23.090185.001423.
Giannakis N, Sanders FE. 1989. Interactions between mycophagous nematodes,  mycorrhizal  and  other  soil
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Kurniawati et al.
fungi.  Agriculture,  Ecosystems  and Environment. 29:163–167.  DOI:  https:// doi.org/10.1016/0167-8809(90)90270-N. Huang CS, Huang SP, Lin LH. 1973. The effect of temperature on development and generation periods of Aphelenchoides besseyi . Nematologica.  18:432–438.  DOI:  https:// doi.org/10.1163/187529272X00025. Huang C, Huang S, Chiang Y. 1979. Mode of reproduction  and  sex  ratio  of  rice  white- tip nematode, Aphelenchoides besseyi . Nematologica.  25:255–260.  DOI:  https:// doi.org/10.1163/187529279X00271. Imamah  AN.  2019.  Pembiakan  massal  dan ketahanan varietas padi terhadap nematoda A phelenchoides besseyi Christie  [tesis]. Bogor (ID): Insitut Pertanian Bogor. Imamah AN, Supramana, Damayanti TA. 2020. In  vitro  cultivation  of Aphelenchoides besseyi Christie on fungal cultures. Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia. 24(1): 43–47.  DOI:  https://doi.org/10.22146/ jpti.42227.
Jagdale  GB,  Grewal  PS.  2006.  Infection behavior  and  overwintering  survival of foliar nematodes, Aphelenchoides fragariae , on hosta. Journal of  Nematology . 38(1):130–136.
Jamali S,  Pourjam E,  Alizadeh A, Alinia F. 2008.  Reproduction  of  the  white
tip nematode  ( Aphelenchoides besseyi Christie,  1942)  in d ifferent  monoxenic cultures. Journal of Agricultural  Science and Technology . 10:165–171. Rajan AL, Mathur VK, Lal A. 1989. Improved culturing  technique  for Aphelenchoides besseyi by inducing anhydrobiosis. Indian Journal of Nematology. 19:10–13. Rao  J.  1985.  Population  build-up  of  white tip nematode ( Aphelenchoides bessey i Christie,  1942)  in  different  monoxenic cultures. Oryzae. 22:45–49.
Shesteperov  AA,  Migunova  DV.  2022. Growth and reproduction of Aphelenchus avenae, Aphelenchoides saprophilus, and Aphelenchoides besseyi in mono- and mixed  cultures  cultivated  on  the  fungus Alternaria tenuis . Russian Journal of Nematology. 30(2):121–130. Todd  E,  Atkins  J.  1958.  White  tip  disease of  rice.  I.  Symptoms,  laboratory  culture of  nematodes,  and  pathogenicity  tests. Phytopathology . 48(11) : 632–637.
Yeates  WG,  Bongers  T,  De  Goede  MGR, Freckman  WD,  Georgieva  SS.  1993. Feeding habits in soils nematode families and  genera-an  outline  for  soil  ecologists. Journal of Nematology. 25(3):315–331.