Aktivitas Antibakteri Ekstrak Dan Fraksi Daun Manggis ( Garcinia Mangostana) Terhadap Staphylococcus aureus
Antibacterial Activity of Mangosteen ( Garcinia Mangostana ) Leaf Extracts and Fractions Against Staphylococcus aureus
Taufik Turahman 1 * , Ghani Nurfiana Fadma Sari 1 Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi Surakarta Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 email: taufikturahman@gmail.com

## ABSTRAK
Penyakit  infeksi  masih  merupakan  salah  satu  masalah  kesehatan  masyarakat  yang penting  untuk  diperhatikan  khususnya  di  negara  berkembang.  Daun  Manggis  ( Garcinia mangostana L.) merupakan tanaman yang cukup dikenal yang bermanfaat sebagai antioksidan, antibakteri,  dan  antikanker.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  kimia  dan aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol, fraksi n-heksan, etil asetat dan air daun manggis ( Garcinia mangostana L.) terhadap Staphylococcus aureus secara difusi dan dilusi Daun manggis  diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan etanol  96% kemudian dilanjutkan  fraksinasi  menggunakan  metode  ekstraksi  cair-cair.  Selanjutnya  diuji  aktivitas antibakterinya dengan metode difusi cakram dengan konsentrasi 12.5%, 25% dan 50%. Kontrol positif yang digunakan adalah ciprofloksasin 5μg/disk dan kontrol negatif Tween 80 5%. Uji dilusi dilakukan  terhadap  ekstrak  yang  paling  aktif  dengan  melihat  KHM  dan  KBM  nya.  Identifikasi golongan senyawa dapat dilakukan dengan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis.
Hasil  pengujian  aktifitas  antibakteri  menunjukan  diameter  zona  hambat  terbesar  pada bakteri Staphylococcus aureus terdapat pada fraksi air daun manggis konsentrasi 50% dengan diameter zona hambat (10 mm). Hasil kadar hambat minimum KHM dan kadar bunuh minimum KBM pada konsentrasi 12.5%. Hasil uji KLT menunjukkan bahwa dalam ekstrak dan fraksi daun manggis mengandung senyawa flavonoid, saponin dan steroid.
Kata kunci : Antibakteri, Daun Manggis ( Garcinia mangostana) , Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Infectious diseases are still one of the important public health problems to be considered especially  in  developing  countries.  Mangosteen  leaf  (Garcinia  mangostana  L.)  is  a  well-known plant that is useful as an antioxidant, antibacterial and anticancer. This study aims to determine the chemical content and antibacterial activity of ethanol extract, n-hexane fraction, ethyl acetate and water of mangosteen leaves (Garcinia mangostana L.) on Staphylococcus aureus by diffusion and dilution
Mangosteen leaves were extracted by maceration using 96% ethanol then continued by fractionation using a liquid-liquid extraction method. Antibacterial activity was then tested using disc diffusion method with a concentration  of 12.5%,  25% and 50%.  Positive control used  was ciprofloxacin 5μg / disk and negative control of 5% Tween 80. Dilution test was carried out on the most active  extract by  looking  at the MIC  and  MBC. Identification of compound groups can be done using Thin Layer Chromatography method.
The  results  of  antibacterial  activity  testing  showed  that  the  diameter  of  the  largest inhibitory zone in Staphylococcus aureus bacteria was found in the water fraction of mangosteen leaves at 50% concentration with inhibition zone diameter (10 mm). The results of the minimum MIC inhibitory level and the minimum suicide rate of MBC at a concentration of 12.5%. The TLC test results showed that in the extracts and fractions of mangosteen leaves contained flavonoids, saponins and steroids
Key word : Antibacterial, Mangosteen Leaf (Garcinia mangostana), Staphylococcus aureus
PENDAHULUAN Penyakit infeksi merupakan salah  satu  masalah  kesehatan  yang semakin meningkat. Infeksi dapat disebabkan  oleh  virus,  jamur,  parasite dan  bakteri. Staphylococcus  aureus adalah  bakteri  yang  berbentuk  bulat, sering berkelompok yang tidak
beraturan dan merupakan bakteri gram positf (Volk, dkk, 1990). Staphylococcus
aureus sering  menimbulkan  penyakit pada  manusia.  Infeksi  oleh  bakteri  ini menyebabkan timbulnya penyakit dengan tanda-tanda khas yaitu peradangan, nekrosis, dan pembentukan abses. Pengobatan  penyakit  infeksi  bisa menggunaan  antibiotik,  akan  tetapi penggunaan antibiotik yang tidak sesuai aturan menjadi penyebab utama terjadinya  resistensi.  Oleh  karena  itu dengan berkembangnya resistensi
tersebut harus diimbangi dengan penemuan sumber antibakteri baru yang dapat  membunuh  bakteri  maupun menghambat
pertembuhannya.
Penemuan  sumber  antibakteri  tersebut dapat berasal dari alam maupun sintetik (Kamila, 2014)
Manggis merupakan tanaman yang seluruh  bagian  tanamannya  dapat dimanfaatkan,  mulai  dari  daging  buah, kulit  buah,  daun,  batang  dan  akar.
Manggis mempunyai kandungan senyawa turunan xanton yang
mempunyai  aktivitas  biologi  sebagai antibakteri,  antimikroba,  anti  inflamasi, antioksidan,  dan  dapat  menghambat pertumbuhan  sel  kanker  usus  (Putra, 2010).
Menurut  (Poeloengan  dkk,  2010) Ekstrak  kulit  buah  manggis  memiliki aktivitas  antibakteri  sebesar  10  mm
terhadap Stapylococcus  aureus pada konsentrasi  25%  dan  mempunyai  nilai KBM  sebesar  2%.  Penelitian  lain  juga menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat dari  ekstrak  kulit  buah  manggis  pada konsentrasi  5%  mempunyai  aktifitas antibakteri  sebesar  17  mm  terhadap Escherichia  coli dan  mempunyai  nilai KHM sebesar 5%.
Berdasarkan  uraian  diatas,  peneliti tertarik untuk meneliti golongan senyawa kimia dari daun manggis yang aktif sebagai antibakteri, sehingga perlu dilakukan pemisahan untuk memperoleh fraksi aktif dengan
kandungan senyawa lebih sederhana.
Fraksi  aktif  diperoleh  dari  hasil fraksinasi  menggunakan  pelarut n- heksan,  etil-asetat  dan  air.  Masing- masing fraksi dan ekstrak nantinya akan diuji  antibakteri  secara  difusi  dan  dilusi terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923

## METODE PENELITIAN Alat
Peralatan  yang  digunakan  adalah bejana  maserasi,  corong  pisah,  cawan porselen,  moisture  balance,  corong pisah,  evaporator,  ayakan  nomor  40, peralatan gelas ( Pyrex ), neraca analitik, lampu UV, kertas saring, lempeng KLT, tabung  reaksi,  cawan  petri,  jarum  ose, kapas  lidi  steril,  kotak  aseptis  inkas, gelas  ukur,  batang    pengaduk,  kertas cakram.

## Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan adalah  daun  manggis  yang  ditanam  di daerah Wonogiri, Jawa Tengah. Bahan kimia  yang  digunakan  meliputi n - heksana, etil-asetat, etanol 96%, aquadest, pereaksi dragendorff,
pereaksi Lieberman Burchard, pereaksi anisaldehid, pereaksi sitro borat, Media Nutrient Agar (NA), Brain Heart Infuction (BHI),  dan  muller  Hinton  Agar  (MHA), bakteri Staphylococcus  aureus ATCC
25923.
Pembuatan  Ekstrak  Etanolik  Daun manggis Ekstrak  etanolik  dibuat  dengan cara,  1000  g  serbuk  daun  manggis dimasukkan dalam botol gelap kemudian ditambah dengan etanol 96% sebanyak  7500  ml.  Maserasi  dilakukan selama  lima  hari  dengan  penggojogan. Setelah  itu  dipisahkan  antara  filtrat dengan ampas. Ekstrak yang diperoleh dipekatkan
dengan
` vacuum rotaevaporator suhu  40°C),  selanjutnya disebut ekstrak etanolik daun manggis Pembuatan Fraksi n -Heksana, Fraksi Etil Asetat, dan Fraksi Air
Ekstrak  etanolik  sebanyak  10  g
kemudian disuspensi dengan air sebanyak 75 ml lalu dipartisi dengan n-
heksana 75 ml dan di replikasi sebanyak tiga  kali  menggunakan  corong  pisah.
Lapisan n- heksana
selanjutnya
dikumpulkan  dan  dipekatkan  dengan vaccum rotaevaporator , filtrat n- heksana yang kering ini selanjutnya disebut fraksi n- heksana.  Lapisan  air  sisa  partisi dengan n- heksan kemudian dipartisi lagi dengan 75 ml etil asetat dan di replikasi sebanyak  tiga  kali.  Lapisan  etil  asetat dipisahkan  dan  dipekatkan  dengan vaccum  rotaevaporator dan  diperoleh fraksi etil asetat. Lapisan air diuapkan di atas waterbath sampai  kental,  yang kemudian disebut fraksi air. Fraksi yang didapat masing-masing ditimbang untuk mendapat  persen  rendemen  terhadap bobot awal.
Identifikasi  Kandungan  Flavonoid secara  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT) Identifikasi golongan senyawa dapat  dilakukan  dengan  menggunakan KLT.  Identifikasi  golongan  senyawa dilakukan  terhadap  ekstrak  dan  fraksi yang diperoleh dengan melihat hasil dari penampak bercak yang bereaksi dengan  reagen  di  antaranya:  flavonoid (uap Ammonia dan pereaksi Sitroborat), alkaloid  (pereaksi  Dragendroff),  steroid (pereaksi  Liberman  bourchard),  tanin (Pereaksi  FeCl 3 ),  saponin  (Pereaksi Anisaldehid).
Uji  kualitatif  ini  dilakukan  untuk membuktikan kebenaran bahan/zat aktif yang  terkandung  pada  daun  manggis yang berperan dalam aktivitas antibakteri.
Pengujian Aktivitas Antibakteri

## secara difusi cakram
Media  MHA  ( Muller  Hinton  Agar ) yang  sudah  disterilkan  dituang  secara aseptis  sebanyak  50  ml  pada  cawan petri  15  cm  yang  sudah  disterilkan hingga  merata,  kemudian  dibiarkan hingga  membeku.  Setelah  media  MHA membeku,  celupkan  1  ose  kapas kedalam  suspensi  bakteri,  kemudian inokulasikan  bakteri  yang  telah  diambil dengan ose tersebut pada media MHA . Paper  disc kosong Steril  (diameter  6 mm) direndam dalam ekstrak, fraksi n –
heksana,  etil  asetat  dan  air  yang masing –masing dilarutkan dalam Tween  80  5%,  kemudian paper  disc yang  telah  direndam  larutan  ekstrak, ditunggu selama 5 menit sampai ekstrak tersebut menyerap pada paper disc dan diletakkan  diatas  permukaan  lempeng agar  yang  telah  diinokulasikan  bakteri. Kontrol  negatif  digunakan  Tween  80
5%,  Kontrol  positif  digunakan  antibiotik Ciprofloxacin 5µg. Selanjutnya diinkubasi pada temperatur 37 o C selama 24 jam.
Zona hambat yang terbentuk diukur dengan  menggunakan  jangka  sorong. Pengujian  dilakukan  sebanyak  dua kali (duplo)
Tahap  uji  antibakteri  yang  kedua adalah  metode  dilusi  menggunakan beberapa  pengenceran  yang  bertujuan untuk menentukan kadar hambat
minimum  KHM  dan  kadar  bunuh minimum (KBM) terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi
Ekstrak  kental  etanolik  yang didapatkan  dari  1000  g  serbuk  adalah 296,430 g sehingga memiliki rendemen sebesar  29,640%.    Ekstraksi  dilakukan dengan etanol karena etanol merupakan pelarut universal sehingga dapat mengekstraksi hampir semua kandungan  kimia  dalam  simplisia.
Ekstrak  kental  etanolik  sebanyak  10g kemudian  dilakukan  fraksinasi  dengan n -heksana, etil asetat, dan air
dimaksudkan untuk memisahkan senyawa berdasarkan polaritasnya, dimana fase n -heksana akan melarutkan kandungan senyawa tanaman  yang  bersifat  nonpolar,  fase etil  asetat  melarutkan  senyawa  yang bersifat semipolar, dan fase air melarutkan  kandungan  senyawa  kimia tanaman  yang  bersifat  polar.  Hasil partisi dapat dilihat pada Tabel 1 setelah dilakukan 3 kali replikasi.

## Hasil identifikasi kandungan
senyawa kimia ekstrak etanol daun manggis menggunakan metode KLT Ekstrak  etanol  herba  manggis  yang diperoleh  melalui  metode  maserasi, kemudian dianalisis kandungan kimianya menggunakan metode kromatografi lapis tipis (KLT). Senyawa yang  akan  diidentifikasi  yaitu  alkaloid, flavonoid,  steroid,  tannin  dan  saponin. Fase  diam  yang  digunakan  yaitu  Silika Gel  GF  254  dan  menggunakan  fase gerak  yang  berbeda-beda  berdasakan polaritas  senyawa,  Hasil  identifikasi kandungan  senyawa  tersebut  dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 1. Hasil fraksinasi ekstrak etanolik daun manggis
Nama pelarut Berat (g) Rendemen (%) n -heksan 8,997 26,67 etil asetat 19,287 32,14 Air 23,425 39,04

## Tabel 2. Hasil identifikasi senyawa setiap fraksi dari ekstrak daun manggis
Uji Alkaloid  Flavonoid  Steroid  Saponin  Tanin Ekstrak - + + + - n -heksana - + + + - Etil asetat - + + + - Air - + - + -
Dari  hasil  identifikasi  kandungan senyawa  ini  dapat  disimpulkan  bahwa daun  manggis  mengandung  senyawa flavonoid, steroid dan saponin baik pada ekstrak  maupun  pada  masing-masing fraksinya.

## Hasil uji aktivitas antibakteri
Tahap uji antibakteri yang pertama adalah proses screening dengan metode  difusi  cakram  yang  bertujuan untuk  menentukan  ekstrak  dan  fraksi yang  mempunyai  aktivitas  antibakteri tertinggi. Aktivitas antibakteri ditentukan melalui besarnya diameter zona hambat yang  terbentuk  disekitar  kertas  cakram dengan  menggunakan  tiga  kelompok perlakuan pada setiap ekstrak dan fraksi dengan  masing-masing  konsentrasi
12,5%,  25%  dan  50%  serta  dua kelompok  kontrol  positif  menggunakan ciprofloxacin 5µg/disk dan kontrol negatif  menggunakan  tween  80  5% steril. Penggunaan ciprofloxacin sebagai kontrol positif didasarkan pada sifatnya  yang  memiliki  spektrum  luas,
dan  sensitif  terhadap Staphylococcus aureus. Hasil  uji  aktivitas  antibakteri tersebut dapat dilihat pada tabel 3.
Pada  uji  difusi  lempeng  agar  zona hambat  yang  terbentuk  berukuran kurang dari ≤ 5 mm, maka respon zona hambat dikategorikan lemah. Jika zona hambat yang terbentuk 6-10 mm, maka respon  zona  hambat  masuk  kedalam kategori sedang, sedangkan 11-20 mm kuat, dan ≥ 20 mm sangat kuat
Tabel  3.  Rata –  rata  diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan  ekstrak,  fraksi n -
heksana, etil asetat dan air pada bakteri Staphylococcus aureus
Bakteri Rata-Rata Diameter Zona Hambat (mm) Konsentrasi  Ekstrak  F n- heksana  F-etil asetat   Fraksi air  K + K - S aureus 12,5 % - 3 - 7.5 25 - 25 % 7.5 5 8.6 8 50 % 8 5.5 9 10 Keterangan:
- Pengukuran diameter zona hambat termasuk diameter kertas cakram (6 mm)
- Tanda (-) menunjukkan tidak terbentuknya zona hambat
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak dan  fraksi  daun  Manggis  ( Garcinia mangostana) terhadap Staphylococcus dengan variasi konsentrasi 12,5%, 25% dan 50% dengan tiga kali pengulangan setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C memiliki respon penghambatan  yang  lemah  sampai sedang  (<11  mm)  sedangkan  kontrol positif  ciprofloxacin  5  µg  menunjukkan adanya aktivitas antibakteri yang ditandai  dengan  adanya  zona  hambat yang terbentuk di sekitar kertas cakram dengan diameter zona hambat rata-rata 25 mm pada Staphylococcus aureus kontrol  negatif  pada  penelitian  ini menggunakan  tween  80  (5%)  steril menunjukkan  tidak  adanya  aktivitas antibakteri  yang  ditandai  dengan  tidak terbentuknya  zona  hambat  di  sekitar kertas cakram. Pemilihan tween 80 steril
sebagai  kontrol  negatif  dikarenakan pada  saat  pembuatan  seri  konsentrasi ekstrak  dan  fraksi  tidak  semua  dapat melarut  atau  tercampur  pada  pelarut polar sehingga dengan penambahan tween  80  sebagai  surfaktan  dalam larutan  akan  menyebabkan  turunnya tegangan  permukaan  larutan  sehingga meningkatkan  proses  kelarutan  pada saat pembuatan seri konsentrasi.
Hasil  pengujian  secara  difusi menunjukan  diameter  zona  hambat terbesar  pada  bakteri Staphylococcus aureus terdapat  pada  fraksi  air  daun manggis  konsentrasi  50%  dengan diameter  zona hambat (10 mm), Hasil uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  dan fraksi daun Manggis ( Garcinia mangostana) terhadap Staphylococcus  aureus dapat  dilihat pada gambar 1.
Gambar  1. Hasil  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Manggis  Pada Staphylococcus Aureus Konsentrasi 50% (A), Ekstrak 25% (B), Ekstrak 12,5% (C), Fraksi  N-Heksan  Konsentrasi  50%  (D),  N-Heksan  25%  (E),  N-Heksan  12,5%  (F), Kontrol Positif Ciprofloxacin (G & O), Kontrol Negatif Tween 80 (H & P), Fraksi Etil Asetat  Konsentrasi  50%  (I),  Etil  Asetat  25%  (J),  Etil  Asetat  12,5%  (K),  Fraksi  Air Konsentrasi 50% (L), Air 25% (M), Air 12,5% (N)

## Tabel  4.  Kadar  hambat  minimum  fraksi  air  daun  manggis  pada  bakteri Staphylococcus aureus
Mikroba K - KHM Fraksi air daun manggis % K + 50%  25%  12,5%  6,25%  3,12%  1,56%  0,78% S Aureus 1 - - - - + + + + + S Aureus 2 - - - - + + + + +
Keterangan:
Tanda (-): Jermih/ menghambat Tanda (+) Keruh/tidak menghambat
Tabel  5.  Kadar  bunuh  minimum  fraksi  air  Daun  manggis  pada  bakteri

## Staphylococcus aureus
Mikroba K - KBM Fraksi air daun manggis % K + 50%  25%  12,5%  6,25%  3,12%  1,56%  0,78% S Aureus 1 - - - - + + + + + S Aureus 2 - - - - + + + + +
Keterangan: Tanda (-): Jermih/ menghambat Tanda (+) Keruh/tidak menghambat
Dari hasil penelitian diatas dapat dilihat bahwa fraksi air daun manggis memiliki kadar  hambat  minimum  pada  bakteri Staphylococcus  aureus yang  dilakukan dengan  2  kali  replikasi  menunjukan kadar hambat minimum masing-masing pada konsenrasi 12,5% terbukti dengan tidak  terbentuknya  warna  keruh  (tidak adanya endapan) pada tabung reaksi.
Pada  pengujian  KBM  dilakukan dengan  menanam  kembali  sediaan  uji yang telah diketahui KHM-nya kedalam Nutrient agar tanpa senyawa uji selama 24  jam  kemudian  diamati  ada  atau tidaknya pertumbuhan bakteri. Dari hasil penelitian dapat dilihat bahwa konsentrasi  bunuh  minimum  fraksi  air daun manggis terhadap bakteri Staphylococcus  aureus yang  dilakukan dengan  2  kali  replikasi  menunjukan kadar  bunuh  minimum  (KBM)  pada
konsenrasi 12,5% terbukti dengan tidak tumbuhnya bakteri dari hasil KHM yang di  inokulasikan  pada  media  Nutrient agar  setelah  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 37°C.

## KESIMPULAN
Ekstrak  dan  fraksi  daun  manggis memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus dengan diameter  zona  hambat  <  10  mm sedangkan  diameter  zona  hambat kontrol positif Ciprofloxacin 25 mm. hasil uji  kadar  hambat  minimun  KHM  dan kadar  bunuh  minimum  KBM  pada konsentrasi  12.5%.  Ekstrak  dan  fraksi daun  manggis  memiliki  kandungan senyawa flavonoid, steroid dan saponin.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Tim Peneliti menyampaikan banyak terima  kasih  kepada  LPPM  Universitas Setia  Budi  Surakarta  yang  telah mendanai penelitian ini sehingga penelitian ini bisa berjalan dengan baik dan  bermanfaat  bagi  perkembangan ilmu pengetahuan.

## DAFTAR PUSTAKA
Gopalakrishnan  G,  N.  Banumathi  B,
Suresh G. 1997. Evaluation of the antifungal activity of natural xanthones from Garcinia mangostana  and  their  synthetic derivates. J. Nat Prod . 50 (5): 519-
524.
Jawetz, E., Melnick, J.L., Adelberg. E.A.
1986. Mikrobiologi  Untuk  Profesi Kesehatan. Edisi XVI. Penerjemah: Bonang, G. Jakarta: Penerbit  Buku  Kedokteran  hlm
239-244.
Muhammad  Zakiya  Kamila.  2014.  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Dan Fraksi Daun Sintok ( Cinnamomum Sintoc Blume.) Terhadap Staphylococcus Aureus Dan Pseudomonas  Aeruginosa Serta Analisa Komponen Senyawa Fraksi  Aktif  Dengan  Kromatografi Gas - Spektrometri Massa. [Skripsi].  Uin  Syarif  Hidyatullah Jakarta Palakawong,  C.,  Sophanodora,  P., Pisuchpen,  S.,  dan  Phongpaichit. 2010. Antioxidant and Antimicrobial  Activities  of  Crude Extracts from Mangosteen (Garcinia  mangostana  L.)  Parts and Some Essential Oils. International Food Research
Journal . 17: 583-9 Poeloengan,  M.,  Praptiwi,  Praptiwi.  Uji Aktivitas Ekstrak Kulit Buah Manggis  (Garcinia  Mangostana Linn). Media Litbang Kesehatan,2010,  Vol.  20  (2):  65- 69 Putra I Nengah. 2010. Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah Manggis  (Garcinia  Mangostana L.)  Serta  Kandungan  Senyawa
Aktifnya.  J.Teknol.  dan  Industri Pangan, Vol. XXI No. 1 Th. 2010
Saputro  Eko.  2014.  Uji Aktivitas Antibakteri  Fraksi  Etil  Asetat. [Skripsi]. UIN. Jakarta
Volk  and  Wheller.  (1984).  Mikrobiologi Dasar, diterjemahkan oleh Soenarto Adisoemarto, hal. 137 –
138, Erlangga, Jakarta.
Yunitasari,  L.  S.  P.,  2011,  Gempur  41
Penyakit  Dengan  Buah  Manggis: Khasiat dan Cara Pengolahannya untuk Kesehatan, 1st ed., Yogyakarta, Penerbit Pustaka Baru Press, p. 11-2.