Induksi pematangan gonad secara hormonal pada ikan sidat, Anguilla bicolor bicolor McClelland 1844 dengan penggunaan Pregnant Mare Serum Gonadotropin , anti dopamin, dan recombinant Growth Hormone
[Hormonally induced gonadal maturation in eels, Anguilla bicolor bicolor McClelland 1984 with the use of Pregnant Mare Serum Gonadotropin, anti dopamin, and recombinant Growth Hormone]
Hadra Fi Ahlina 1  , Agus Oman Sudrajat 2 , Tatag Budiardi 2 , Ridwan Affandi 3
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor
2 Departemen Budi daya Perairan, FPIK-IPB
3 Departemen Sumberdaya Perairan, FPIK-IPB Jl. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Diterima: 28 Oktober 2014; Disetujui: 15 September 2015

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan mengevaluasi penggunaan hormon Pregnant Mare Serum Gonadotropin (PMSG), Anti Dopa- min (AD) dan Recombinant Growth Hormone (rGH) melalui teknik penyuntikan terhadap pematangan gonad ikan sidat (Anguilla  bicolor  bicolor ).  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  lima  perlakuan kombinasi hormon yaitu 10 IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD (P10A), 10 IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD + 10 µg rGH (P10B), 20 IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD (P20A), 20 IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD +  10 µg rGH (P20B), dan PK (kontrol). Pada setiap perlakuan,  sebanyak  20  ekor  ikan  digunakan  sebagai  ulangan  individu  dan  sampling  dilakukan  setiap  minggu  selama delapan minggu masa pemeliharaan. Parameter yang diamati meliputi nilai laju pertumbuhan spesifik (LPS), indeks he- patosomatik (IHS), indeks gonadosomatik (IGS) dan indeks mata (IM). Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan P20A menyebabkan perkembangan spermatogenesis dan meningkatkan nilai IGS tertinggi (2,291±0,278%) pada ming- gu  ke  empat  hingga  ke  enam  setelah  penyuntikan  dibandingkan  perlakuan  P20B  (2,134±0,265%),  P10B  (2,065± 0,201%), P10A (2,037±0,105%) dan PK (1,937±0,050%). Nilai IHS pada perlakuan P20A (1,188±0,091%) lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Nilai LPS tertinggi ditemukan pada perlakuan P20B (0,514±0,062 %) dan te- rendah pada perlakuan Kontrol (0,052±0,027%). Nilai IM juga meningkat pada perlakuan P20B (10,599±2,372) seiring dengan bertambahnya bobot tubuh dan terendah pada perlakuan PK (7,189±0,217). Kombinasi hormon PMSG, AD dan rGH dapat merangsang perkembangan testis ikan sidat ukuran 140-150 g serta memacu pertumbuhan 0,514 %.
Kata penting: Anguilla bicolor bicolor , anti dopamin, induksi pematangan, PMSG, rGH

## Abstract
The aim of this study was to evaluate the effect of Pregnant mare serum gonadotropin (PMSG), Anti-Dopamine (AD) and Recombinant growth hormone (RGH) through the injection technique on gonadal development of eel (Anguilla bi- color bicolor). The experimental was arranged in completely randomized design with five treatments of hormone com- bination, namely P10A combination hormone (10 IU PMSG + 0.1 mgL -1 AD), P10B (10 IU PMSG + 0.1 mgL -1 AD + 10 ug RGH), P20A (20 IU PMSG + 0.1 mgL -1 AD), P20B (20 IU PMSG + 0.1 mgL -1 AD + 10 ug RGH), and PK (ne- gative control). In each treatment, a total of 20 fish individuals used as replicates and the hormonal induction was con- ducted every week for eight weeks of the rearing period. Specific growth rate (SGR), hepatosomatic index (HSI), go- nadosomatic index (GSI) and an index of the eye (IM) were observed. The results showed that the P20A treatment in- creased spermatogenesis and the value of GSI (2.291±0.278%) at 4-6 weeks after injection. This result was higher than P20B (2.134±0.265%), P10B (2.065±0.201%), P10A (2.037±0.105%), and PK (1.937±0.050%). The value of HSI on the P20A treatment (1.188±0.091 %) was higher than other treatments. The highest value of SGR (0.514±0.062%) was found in the P20B, whereas the lowest value (0.052±0.027%) was found in the PK. Thus, the combination of PMSG, AD and RGH hormones can stimulate the development of testicular of eel with body weight 140 to150 g, and stimulate the growth of 0.514 % during the six-weeks rearing period.
Keywords: Anguilla bicolor bicolor , AD, maturation induction, PMSG, rGH

## Pendahuluan
Ikan  sidat (Anguilla  bicolor  bicolor) ada- lah ikan yang bernilai ekonomis tinggi dan ba-
nyak dikonsumsi di negara maju, seperti Jepang,
Hongkong, Jerman, dan Italia. Negara konsumen terbesar  ikan  sidat  adalah  Jepang.  Negara  terse- but mengkonsumsi rata-rata 120.000 ton ikan si-
_____________________________
 Penulis korespondensi Alamat surel: vee_hadra@yahoo.com
dat  per  tahun  (Kagawa et  al. 2006).  Indonesia merupakan  salah  satu  negara  yang  berpeluang besar untuk menjadi pemasok ikan sidat ke pasar internasional. Hal ini disebabkan oleh banyaknya ikan  sidat  yang  ditemukan  di  perairan  Indonesia baik ukuran konsumsi maupun ukuran benih.
Budi  daya  ikan  sidat  di  Indonesia  saat  ini masih  sangat  terbatas,  karena  masyarakat  belum menguasai teknologi budidayanya serta informa- si pasarnya pun belum memadai. Benih untuk ke- perluan  budi  daya  cukup  tersedia,  terutama  di muara-muara sungai di pantai selatan Jawa, pan- tai  barat  Sumatera,  dan  pantai  di  Sulawesi.  Pe- nangkapan benih ikan sidat dari alam secara terus menerus  dan  tanpa  adanya  pengendalian  dapat menyebabkan  kepunahan.  Dengan  demikian  un- tuk  menghindari  kelangkaan  benih  ikan  sidat pada  masa  yang  akan  datang,  perlu  dilakukan upaya  untuk  memproduksi  benih  secara  terkon- trol.
Dalam  kegiatan  pembenihan  secara  ter- kontrol, ketersediaan induk  merupakan prasyarat utama. Pada usaha produksi benih  ikan sidat pe- nyediaan  induk  masih  merupakan  kendala,  kare- na adanya perbedaan ukuran dewasa antara indi- vidu  jantan  dan  betina.  Disamping  itu  kegiatan pembesaran ikan  sidat terbatas pada target  ukur- an  konsumsi  saja,  belum  ada  upaya  lebih  lanjut untuk  menghasilkan  calon  induk  guna  kegiatan restocking atau  penambahan  stok  ikan  di  alam dan produksi benih ikan sidat.
Ketersediaan  benih  dengan  kualitas  yang baik dan kontinuitas jumlah merupakan hal yang harus  diusahakan  untuk  menopang  pengem- bangan  usaha  budi  daya  ikan  sidat  tersebut.  In- formasi dasar yang penting untuk diketahui anta- ra  lain  adalah  aspek  reproduksi  (status  seksual, struktur ovarium, kematangan gonad, dan fekun- ditas)  yang berguna  untuk  kegiatan pembenihan. Berbagai teknologi telah dilakukan untuk menun-
jang penyediaan induk ikan yang berkualitas agar siap  bereproduksi,  baik  dengan  manipulasi  ling- kungan, nutrisi maupun teknik seleksi. Demikian pula teknik manipulasi hormonal ke dalam tubuh ikan  baik  secara  oral,  injeksi  maupun  implantasi untuk  merangsang  pematangan  gonad  telah  dila- kukan.
Reproduksi  pada  ikan  diatur  oleh  sistem endokrin reproduksi yang terdiri atas otak (hipo- talamus), kelenjar pituitari, dan gonad. Perlakuan hormon  merupakan  salah  satu  solusi  pada  pem- benihan ikan yang sulit matang gonad pada ling- kungan budi daya seperti halnya ikan sidat. Pada kondisi  ini  gonad  dan  proses  vitellogenesis  ikan sidat  sulit  untuk  berkembang  (Ijiri et  al. 1998). Di  Perancis,  Polandia,  Denmark,  dan  Jepang  uji coba pematangan gonad ikan sidat melalui injek- si hormon dan hipofisasi telah berhasil mencapai kematangan  (Bleniarz  &  Epler  1977,  Herianti 2005).
Pregnant  Mare  Serum  Gonadotropin (PMSG) adalah hormon  yang terdapat dalam se- rum famili Equidae (kuda, kuldi, dan zebra) yang sedang bunting dan  memiliki  cara kerja merang- sang  pertumbuhan  sel-sel  interstitial  dan  pem- bentukan  sel-sel  lutea.  Moore  &  Ward  (1980) yang  menyebutkan  bahwa  PMSG  memiliki  pe- ngaruh  seperti Folicle  Stimulating  Hormone ( FSH)  dan Luteinizing  Hormone  ( LH),  namun aktivitas  FSH  lebih  besar  dibandingkan  LH. PMSG  telah  digunakan  pada  ikan  lele  dengan kombinasi hormon PMSG dan Human Chorionic Gonadotropin (HCG)  terhadap  ovulasinya  (Ba- suki 1990).
Antidopamin  (AD)  merupakan  suatu  zat kimiawi  yang  biasa  digunakan  untuk  menyuntik ikan  sebelum  ditemukannya  ovaprim.  Chen  & Fernald  (2008)  menyatakan  bahwa  antidopamin adalah  bahan  kimiawi  yang  dapat  menghentikan kerja  dopamin.  Dopamin  merupakan  neurotrans-
mitter  yang  berperan  dalam  menghambat  pema- tangan  gonad  dengan  menstimulasi  sekresi  hor- mon penghambat pematangan gonad.
Kombinasi  hormon  PMSG  dan  AD  diha- rapkan  mampu  memberikan  hasil  yang  optimal pada  pematangan  gonad  ikan  sidat.  Sehubungan dengan  hal  tersebut,  maka  dibutuhkan  hormon lain  untuk  memacu  pertumbuhan  ikan  agar  ikan dapat terdiferensiasi dan tumbuh cepat tanpa ada- nya efek samping. Salah satu hormon yang dapat memacu  pertumbuhan  ikan  adalah Recombinant Growth  Hormon (rGH).  Hormon  ini  merupakan komponen yang penting dalam mengatur banyak aspek  fisiologis  seperti  pertumbuhan,  metabolis- me,  osmoregulasi,  fungsi  kekebalan  tubuh,  dan reproduksi.
Berbagai penelitian telah dilakukan namun belum  memberikan  hasil  yang  optimal  baik  me- lalui rangsangan internal maupun eksternal. Ber- dasarkan  pertimbangan  tersebut  perlu  dikem- bangkan  teknologi  sebagai  jalan  pintas  untuk menghasilkan  ikan  sidat  yang  matang  gonad. Teknologi  yang  berkembang  saat ini  baik  mani- pulasi  lingkungan,  nutrisi  maupun  teknik  seleksi memberikan peluang yang amat besar untuk me- realisasikan tujuan tersebut.
Penelitian ini bertujuan untuk mengevalu- asi efek pemberian hormon PMSG, AD dan rGH melalui teknik penyuntikan terhadap pematangan gonad ikan sidat ( Anguilla bicolor bicolor ).

## Bahan dan metode
Penelitian dilaksanakan selama lima bulan (Januari-Mei  2014)  di  Laboratorium  Fisiologi Hewan Air Departemen Manajemen Sumberdaya Perairan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan Institut Pertanian Bogor. Hewan uji pada peneli- tian ini adalah ikan sidat (Anguilla bicolor bico-
lor )  berukuran  140-150  gram  per  ekor  sebanyak
120  ekor  yang  telah  dibudidayakan  sebelumnya
oleh pembudidaya di daerah Gadog, Jawa Barat. Setelah  diaklimatisasi  ke  media  air  laut,  ikan  di pindahkan  ke  wadah  pemeliharaan  berupa  bak berdinding  keramik  berukuran  1,7x1,7x1  m 3 yang  telah  disekat  dan  dipasang  hapa  ukuran 0,85x0,85x1  m 3 untuk  diberi  perlakuan  induksi hormon.
Hormon  yang  digunakan  adalah  10  IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD (P10A), 10 IU PMSG +
0,1  mgL -1 AD  +  10  µg  rGH  (P10B),  20  IU
PMSG + 0,1 mgL -1 AD (P20A), 20 IU PMSG +
0,1  mgL -1 AD  +  10  µg  rGH  (P20B)  dan  0,9  %
NaCl  (PK)  sebagai  kontrol.  Kombinasi  hormon tersebut di atas diinjeksikan ke tubuh pada bagi- an punggung ikan  sidat  sesuai dengan perlakuan masing-masing  dengan  menggunakan syringe ukuran 1 ml.

## Prosedur pemeliharaan
1. Proses aklimatisasi
Sebelum diberi perlakuan hormon, dilaku- kan penyesuaian terhadap media bersalinitas. Air media  yang  semula  berisi  50  cm  air  tawar  diku- rangi  sebanyak  10  cm  dan  ditambah  10  cm  air bersalinitas 30 ppt. Setelah dicek salinitasnya, di- diamkan selama 24 jam. Hari berikutnya, dilaku- kan  hal  yang  sama,  begitu  seterusnya  hingga mencapai salinitas 30 ppt.
2. Tahapan percobaan
a. Penebaran
Semua  ikan  ditimbang  bobot  dan  diukur panjang  tubuhnya.  Kemudian  dibagi-bagi  ke  da- lam  lima  bak  perlakuan  masing-masing  24  ekor. Bak  dilengkapi  dengan  aerasi  untuk  memenuhi konsumsi  oksigen  terlarut  dan  ditutup  dengan plastik  hitam  agar  ikan  tidak  melompat  keluar wadah pemeliharaan.
b. Manajemen air dan manajemen pakan
Air  laut  diendapkan  di  bak  tandon  sebe- lum  digunakan.  Untuk  kondisi  media  yang  lebih baik,  bak  dilengkapi  dengan  filter  dan  penggan- tian  air  dilakukan  dua  hari  sekali  pada  pagi  hari sebelum pemberian pakan.
Pada waktu penggantian air, dilakukan pe- nyiponan kotoran yang ada di dasar bak agar ku- alitas air media tetap terjaga. Pakan yang diguna- kan adalah pakan ikan berupa pelet  dengan  kan- dungan  protein  sebanyak  45%.  Jumlah  pakan yang  diberikan  adalah  3%  biomassa  dengan  fre- kuensi  pemberian  tiga  kali  sehari  yakni  pagi (20%), siang (30%), dan malam (50%).
c. Pembiusan, pengukuran panjang, penimbangan bobot, dan penyuntikan
Pembiusan  dilakukan  dengan  mengguna- kan obat bius stabilizer dengan dosis 1 ml per 0,5
L  air  selama  tiga  menit,  kemudian  dilakukan pengukuran  panjang  dan  penimbangan  bobot  tu- buh  ikan.  Pengukuran  panjang  menggunakan mistar  dengan  ketelitian  1  mm,  sedangkan  pe- nimbangan  bobot  menggunakan  timbangan  digi- tal dengan ketelitian 0,01 g. Penyuntikan dilaku- kan  secara  intramuskular  dengan  hormon  yang telah ditentukan.
Hormon  yang  disuntikkan  adalah  hormon perlakuan  sesuai  dengan  dosis.  Ikan  yang  telah disuntik  dimasukkan  pada  wadah  dengan  aerasi yang  kuat  selama  6  sampai  10  menit.  Ikan  yang telah  sadar  dimasukkan  ke  dalam  hapa.  Ikan  di- suntik  sebanyak  satu  kali  seminggu  selama  dua bulan.
d. Pengambilan sampel gonad dan hati serta
pembuatan preparat histologis
Pengambilan sampel gonad dan hati untuk keperluan  penghitungan  indeks  hepatosomatik (IHS)  dan  indeks  gonadosomatik  (IGS)  dilaku- kan lima kali selama penelitian berlangsung yak-
ni  minggu  ke-0  (M0),  minggu  ke-2  (M2),  ming- gu ke-4 (M4) dan minggu ke-6 (M6). Ikan diam- bil tiga ekor setiap perlakuan untuk dibedah. Se- telah  dilakukan  penimbangan,  sampel  gonad  di- gunakan  untuk  pembuatan  preparat  histologis. Pembuatan  preparat  histologis  mengacu  pada metode yang digunakan oleh Gunarso (1989) de- ngan pewarnaan hematoksilin-eosin.

## Parameter uji
Parameter penelitian yang diamati adalah laju pertumbuhan spesifik, indeks hepatosomatik, indeks gonadosomatik, dan indeks mata.
Laju  pertumbuhan  spesifik  ikan  dihi- tung dengan rumus:
LPS = Ln Wt ̅̅̅̅−Ln Wo ̅̅̅̅̅ t x 100
Keterangan: LPS= laju pertumbuhan spesifik (%), W ̅ t = bobot rata-rata ikan pada akhir penelitian (gram), W ̅ o = bobot  rata-rata  ikan  pada  awal  penelitian  (gram),  t= periode penelitian (hari)
Indeks  hepatosomatik  adalah  persentase antara  bobot  hepatik  dengan  bobot  tubuh  total. Pengukuran  dilakukan  pada  awal  penelitian  se- belum diberi perlakuan hormon (M0) dan setelah diberi perlakuan hormon (M2, M4, M6 dan M8).
IHS = [ W h / W i ] x 100
Keterangan:  IHS=    indeks  hepatosomatik  (%),  W h = bobot hati  (g), W i =  bobot tubuh ikan (g)
Indeks  gonadosomatik  atau  status  gonad merupakan  sebuah  nilai  perbandingan  antara  be- rat  gonad  dengan  keseluruhan  bobot  tubuh  ikan. Pengamatan ini dilakukan pada awal sebelum di- beri  perlakuan  hormon  (M0)  dan  setelah  diberi perlakuan hormon (M2, M4, M6 dan M8).
IGS  = Bt Bg x  100
Keterangan:  IGS=  indeks  gonadosomatik  (%),  B g = bobot gonad (g), B t =  bobot tubuh (g)
Indeks  ukuran  mata  diukur  berdasarkan rumus (Pankhurst 1982) :
IM = [{(A+B) / 4}² x π / L ] x100
Keterangan: IM= indeks mata, A= diameter mata seca- ra  horizontal  (cm),  B=  diameter  mata  secara  vertikal (cm), L= panjang tubuh total (cm)

## Analisis data
Data  yang  diperoleh  dari  pengamatan  ke- mudian  dihitung  untuk  mendapatkan  hasil  para- meter uji laju pertumbuhan spesifik, indeks hepa- tosomatik,  indeks  gonadosomatik  dan  indeks ukuran  mata.  Data  tersebut  dianalisis  secara  sta- tistik  menggunakan  analisis  ragam  (ANOVA). Jika terdapat perbedaan yang nyata (P<0,05) ma- ka dilanjutkan dengan  uji Tuckey dengan selang kepercayaan  95%.  Pengolahan  pengujian  data menggunakan  bantuan  program  Microsoft  Excel 2007  dan  MINITAB  16  for  windows.  Hasil  pe- ngamatan struktur anatomi dan histologi dianali- sis secara deskriptif.

## Hasil
Data hasil pengukuran parameter laju per- tumbuhan spesifik, indeks hepatosomatik, indeks gonadosomatik,  dan  indeks  ukuran  mata  selama penelitian  disajikan  pada  Tabel  1.  Nilai  parame- ter  yang  diamati  disajikan  pada  Gambar  1,  2,  3, dan 4.
Pada  Tabel  1  dapat  dilihat  bahwa  nilai LPS  tertinggi  ditunjukkan  oleh  perlakuan  P20B, diikuti  P10B,  P20A  dan  P10A,  serta  nilai  teren- dah  PK  secara  berurutan.  Nilai  tersebut  menun- jukkan  adanya  perbedaan  yang  nyata  antar  per- lakuan. P20B berbeda nyata dengan P10B, P10B berbeda  nyata  dengan  P20A  dan  P10A,  P20A dan  P10A  berbeda  nyata  dengan  PK,  sedangkan P20A tidak berbeda nyata dengan P10A.
Nilai  IHS  juga  menunjukkan  perlakuan tertinggi  ditunjukkan  pada  perlakuan  P20A,  ke-
mudian diikuti oleh P20B, P10A dan P10B, serta terendah  ditunjukkan  oleh  PK.  P20A  berbeda nyata  dengan  P20B,  P10A,  P10B  dan  PK.  Na- mun P20B, P10A dan P10B tidak saling berbeda nyata.
Nilai  IGS  menunjukkan  P20A  berbeda nyata terhadap P20B, P10B, P10A dan PK. Nilai IGS  tertinggi  ditunjukkan  oleh  perlakuan  P20A dan terendah ditunjukkan oleh PK.
Perlakuan  terbaik  pada  parameter  indeks ukuran  mata  adalah  P20B.  Kombinasi  hormon pada  P20B  memberikan  respon  yang  positif  ter- hadap LPS dan IM.
Nilai  rata-rata  LPS  terbaik  adalah  P20  B dengan simpangan baku (0,062). Pada Gambar 1 terlihat  bahwa  P20B  dan  P10B  mengalami  pe- ningkatan  yang  signifikan  dibanding  P10A, P20A dan PK.
Pada Gambar 2 dapat dilihat bahwa hepa- tosomatik ikan sidat P20A dan P20B mengalami peningkatan  pada  minggu  ke  4,  namun  pada minggu ke 6  mengalami penurunan. Dapat dika- takan  bahwa  hormon  ini  berpengaruh  pada  nilai IHS  ikan  sidat  dalam  waktu  yang  singkat  yakni kurang dari 5 minggu pemeliharaan.
Pada  Gambar  3  diketahui  nilai  gonadoso- matik ikan sidat pada setiap perlakuan meningkat pada  minggu  ke  6.  Dapat  dikatakan  bahwa  in- duksi  hormon  PMSG,  AD  dan  rGH  memenga- ruhi nilai IGS ikan sidat pada minggu ke 6.
Dari Gambar 4, indeks ukuran mata pada P20B mengalami peningkatan setiap minggu se- iring dengan bertambahnya bobot tubuh ikan. Se- makin meningkat bobot dan panjang ikan, maka semakin besar pertambahan nilai indeks ukuran matanya.
Tabel 1. Nilai rata-rata dan simpangan baku laju pertumbuhan spesifik (LPS), indeks hepatosomatik (IHS),
indeks gonadosomatik (IGS) dan indeks ukuran mata (IM) pada masing-masing perlakuan Perlakuan LPS (%) (rata-rata + sb) IHS (%) (rata-rata + sb) IGS (%) (rata-rata + sb) IM (mm) (rata-rata + sb) P10A P10B P20A P20B PK 0,183 c ± 0,055 0,289 b ± 0,054 0,223 c ± 0,015 0,514 a ± 0,062 0,052 d ± 0,027
1,071 b ± 0,064 1,064 b ± 0,040 1,188 a ± 0,091 1,112 b ± 0,074 0,905 c ± 0,029 2,037 cb ± 0,105 2,065 bc ± 0,201 2,291 a ± 0,278 2,134 ba ± 0,265 1,937 c ± 0,050 7,655 cb ± 0,268 8,328 bc ± 0,896 8,458 b ± 0,294 10,599 a ± 2,372 7,189 d ± 0,217
Huruf tika atas yang sama pada kolom yang sama “tidak berbeda nyata” (P ≤ 0,05). sb = simpangan baku
Gambar 1. Laju pertumbuhan spesifik ikan sidat pada setiap perlakuan selama pemeliharaan
Gambar 2. Nilai hepatosomatik ikan sidat pada setiap perlakuan selama pemeliharaan
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 M0 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 Sp e si fi c Gr o wt h R ate ( % ) P10 A P10 B P20 A P20 B PK 0.97 1.13 1.00 1.15 0.95 1.04 1.05 1.22 1.16 0.90 1.10 1.07 1.33 1.18 0.88 1.13 1.02 1.12 1.04 0.92 1.11 1.05 1.12 1.02 0.88 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 P10 A P10 B P20 A P20 B PK He p at os oma ti k In d e ks (%) M0 M2 M4
M6 M8
Gambar 3. Nilai gonadosomatik ikan sidat pada setiap perlakuan selama pemeliharaan
Gambar 4. Histogram indeks ukuran mata pada setiap perlakuan selama pemeliharaan

## Struktur anatomi dan histologis gonad ikan sidat
Struktur  anatomi  dan  struktur  histologis gonad ikan sidat dapat dilihat pada Gambar 5 dan 6.  Gambar  5  menunjukkan  adanya  perbedaan struktur  anatomi  antara  M0  dengan  M6.  Pada minggu  pertama  yakni  minggu  ke-0  dan  minggu ke-2,  gonad  belum  terlihat  dengan  jelas,  hanya berupa  benang  tipis  yang  diselimuti  oleh  lemak. Pada minggu ke-4, gonad  mulai terlihat baik na- mun masih berukuran kecil, namun pada minggu ke-6  dan  ke-8,  gonad  sudah  bisa  dilihat  dengan jelas pada sisi kiri dan kanan yang  melekat pada dinding  ventral  bagian  atas.  Gonad  terlihat  ber-
warna  putih  kemerahan  yang  ditunjukkan  oleh tanda panah bewarna hitam.
Dari hasil pengamatan mikroskopis gonad dari  M0,  M2  hingga  M6,  pada  P10A,  P10B, P20A, dan P20B, terlihat jelas adanya perbedaan bentuk  jaringan  histologis  pada  masing-masing perlakuan. P10A dan P10B minggu ke-6 menun- jukkan  perkembangan  sperma  fase  spermatoge- nik.  P20A  menunjukkan  adanya  perkembangan sperma fase spermatosit tahap awal dan perlaku- an  P20B  menunjukkan  perkembangan  fase  sper- matosit tahap akhir. Pada PK, tidak ada perkem- bangan baik sperma maupun oosit.
1.97
1.72 2.05 1.83 1.89 2.07 2.12 2.06 2.13 1.96 2.11 2.15 2.22 2.34 1.93 2.15 2.25 2.71 2.45 1.90 1.89 2.08 2.41 1.92 2.01 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 P10 A P10 B P20 A P20 B PK G on ad os oma ti k In d ek s (%) M0 M2 M4 M6 M8
0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 M0 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 In d e ks u ku ran m ata (c m ) P10A P10B P20A
P20B PK
Gambar 5. Struktur anatomi ikan sidat. Keterangan:  a. Ikan sidat sebelum diberi perlakuan pada minggu  ke-0  (bobot  146  gram);  b.  Ikan  sidat  setelah  diberi  perlakuan  kombinasi hormon pada minggu ke-6 (bobot 187 gram); 1. Hati; 2. Permukaan perut bagian luar; 3. Dinding perut bagian dalam; 4. lemak; 5. gonad jantan; 6. usus; 7. lambung. (      0,6 mm)
MO P10A M2 P10A M6
Gambar 6. Struktur histologis gonad ikan sidat setiap perlakuan selama induksi hormon pada minggu ke-0 (M0), minggu ke-2 (M2) dan minggu ke-6 (M6). Keterangan: AC, adiposit cell; SgA, sperma- togonia type A; SgB, spermatogonia type B; L, lumen; Sc, spermatosit. Pewarnaan Hematok- silin-Eosin (           20 µm).

## Pembahasan
Hormon  PMSG  adalah  salah  satu chori- onic  gonadotropin mamalia  yang  sering  diguna- kan  pada  budi  daya  ikan  untuk  merangsang  vi- tellogenesis  maupun  spermatogenesis  (Goetz 1983).  Hormon  PMSG  memiliki  pengaruh  FSH
lebih  kuat  dibanding  LH  sehingga  memberikan pengaruh  kepada  pemasakan  folikel.  Hormon PMSG  merangsang  terjadinya  lonjakan  kadar GnRH  yang  selanjutnya  akan  memengaruhi  pi- tuitari  untuk  memproduksi  gonadotropin.  Anti- dopamin  adalah  salah  satu  zat  kimiawi  yang  da-

## P10B M2
P20A M2 0A M2 P10A M2 P10A M2 P20B M2 PK M2 MM2 P20B M2 P20B M2 P20B M6 PK M6 MM2 P20B M2 P20B M2 P20A M6 0A M2 P10A M2 P10A M2 P10B M6
pat  menghentikan  kerja  dopamin,  sedangkan  do- pamin itu  sendiri  merupakan  penghambat aktivi- tas  pelepasan  hormon  GnRH  dari  hipotalamus. Dopamin  menghambat  pematangan  gonad  de- ngan  menstimulasi  sekresi  hormon  penghambat pematangan gonad (GIH) (Fingerman 1997). De- ngan  adanya  antidopamin,  diharapkan  neuro- transmitter yang menghambat pematangan gonad dapat  dihambat  sehingga  proses  pematangan  go- nad dapat lebih cepat tercapai.
Berdasarkan  penelitian  dapat  diketahui bahwa  bobot  spesifik  ikan  pada  masing-masing perlakuan  mengalami  peningkatan  hingga  akhir pemeliharaan.  Hal  tersebut  terlihat  pada  grafik peningkatan  bobot  spesifik  ikan  sidat  yang  me- nunjukkan hasil positif. Funkenstein et al . (2005) menyatakan bahwa pada ikan baronang (Siganus guttatus) pemberian  rGH  selama  empat  minggu dapat  meningkatkan  bobot  tubuh  sebesar  20% dibandingkan  kontrol.  Li et  al .  (2003)  menge- mukakan  bahwa  pemberian  rGH  ikan  mas  se- besar 0,1 μg/g bobot tubuh pada  benih ikan  nila dapat  meningkatkan  bobot  tubuh  sebesar  53,1% dibandingkan dengan kontrol.
Penggunaan  rGH  dapat  dilakukan  melalui beberapa metode, yaitu melalui oral, perendaman, dan  penyuntikan.  Metode  perendaman  dan  oral merupakan  metode  yang  relatif  lebih  mudah  un- tuk diaplikasikan dalam budi daya. Alimuddin et al .  (2010)  telah  berhasil  membuat  protein  hor- mon  pertumbuhan  rekombinan  (rGH)  ikan  gura- me ( Osphronemus gouramy ), ikan mas ( Cyprinus carpio ), dan ikan kerapu ( Chromileptes altivelis ).
Acosta et  al .  (2007)  melaporkan  perendaman hormon  pertumbuhan  dapat  meningkatkan  bobot ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus )  sebesar  171%.
Kamil  (2000)  menjelaskan  bahwa  pertumbuhan ikan  akan  maksimal  apabila  kebutuhan  nutrien dan  kebutuhan  energinya  terpenuhi  dengan  baik. Peningkatan  bobot  spesifik  ini  juga  diduga  di-
pengaruhi oleh penambahan rGH pada kombinasi hormon  P10B  dan  P20B.  Hal  ini  terlihat  pada Gambar  1  bahwa  perlakuan  yang  ditambahkan hormon  pertumbuhan  mengalami  peningkatan yang  signifikan.  Analisis  statistik  dengan  uji Duncan  juga  menunjukkan  perbedaan  nyata. Hormon  pertumbuhan  ( growth  hormone, GH) merupakan  polipeptida  yang  dilepaskan  oleh  so- matotrof  kelenjar  pituitari  yang  berperan  utama dalam  pengaturan  pertumbuhan  somatik  dan pengaturan  dalam  sistem  metabolisme  (Matty 1985).  Selain  itu  hormon  pertumbuhan  juga  me- mengaruhi  osmoregulasi  dan  reproduksi  (Saka- moto et al. 1993).
Nilai IHS merupakan nilai kuantitatif yang dapat  menggambarkan  pertambahan  bobot  hati seiring  dengan  pematangan  gonad  dan  pening- katan  IGS.  Nilai  IHS  akan  semakin  meningkat seiring  pematangan  gonad  dan  nilainya  akan  le- bih rendah daripada nilai IGS pada saat telah ma- tang gonad. Dari hasil penelitian, ditemukan bah- wa  nilai  IHS  meningkat  pada  minggu  ke  4.  Hal ini  disebabkan  oleh  hormon  yang  disuntikkan memberikan  pengaruh  positif  dari  M0  sampai M4 yang dibuktikan adanya peningkatan IHS da- ri  minggu  ke  minggu.  Perlakuan  hormon  terbaik adalah  P20A  yakni  pemberian  20  IU  PMSG  + 0,1  mg  L -1 AD    dengan  nilai  rata-rata  IHS  ter- tinggi  1,188  ±  0,091 pada  minggu  ke-4.  Tabel 1 menunjukkan  bahwa  nilai  IGS  yang  dihasilkan berkisar  antara  1,937  sampai  2,291  dengan  ki- saran bobot 150 sampai 200 gram. Penelitian se- rupa  telah  dilakukan  Rovara  (2007)  yang  men- dapatkan  nilai  IGS ikan sidat berkisar 1,07 sam- pai  3,375  dengan  bobot  rata-rata  lebih  dari  600 gram.
Gambaran  anatomi  gonad  dengan  IGS memberikan  hubungan  yang  berbanding  lurus, semakin ukuran gonad ikan sidat besar dan lebar maka  nilai  IGS  semakin  tinggi.  Gonad  akan  se-
makin  bertambah  bobotnya  diimbangi  dengan bertambah  besar  ukurannya.  Grafik  IGS  hingga minggu  ke-8  pemeliharaan  memberikan  pola yang  fluktuatif  namun  cenderung  meningkat  di- bandingkan  sebelum  dilakukan  penyuntikan  un- tuk  semua  perlakuan  hormonal  (Gambar  3).  Hal serupa ditemukan pada penelitian Tomkiewicz et al. (2011)  yang  menyebutkan  bahwa  nilai  IGS ikan sidat jantan yang diinduksi HCG selama 18 minggu adalah berfluktuatif. Hal tersebut diduga karena  kemampuan  masing-masing  sidat  dalam merespons  hormon  berbeda  sehingga  berpenga- ruh terhadap pematangan  gonad. Dari data terse- but terlihat keadaan yang relatif normal, di mana dalam  batas-batas  tertentu  umumnya  nilai  IGS yang mencerminkan kematangan gonad sidat de- ngan  aplikasi  hormon  PMSG  akan  mengalami peningkatan  dibandingkan  dengan  kontrol  atau penyuntikan larutan fisiologis yang berisi ion-ion yang  tidak  berpengaruh  kepada  pematangan  go- nad  ikan.  Hal  ini  sesuai  dengan  Moore  &  Ward (1980)  yang  menyebutkan  bahwa  PMSG  memi- liki  pengaruh  seperti  FSH  dan  LH,  namun  akti- vitas  FSH  lebih  besar  dibandingkan  LH.  FSH tersebut  merupakan  hormon  gonadotropin  yang merangsang  gonad  baik  testis  maupun  ovari  un- tuk  memproduksi  testosteron  yang  kemudian merangsang  sel  gamet  untuk  membelah  secara mitosis  dan  meningkatkan  massa  sel  gamet  da- lam  gonad  (Sukumasavin  2007).  Peningkatan IGS  mengindikasikan  terjadinya  perkembangan sel  sperma  pada  jantan.  Aktivitas  ini  menyebab- kan  nilai  IHS  dan  IGS  ikan  meningkat  dan  me- tabolisme  sebagian  besar  tertuju  pada  proses  pe- matangan gonad (Cerda et al. 1996).
Beullens et al . (1997) menguraikan bentuk dan  posisi  umum  gonad  sidat  jantan  dan  betina. Gonad sidat tidak mempunyai ukuran yang sama, sebelah  kanan  lebih  memanjang  kedepan  (1  cm pada  sidat berukuran  30  cm)  dan  yang  kiri  lebih
kearah posterior (2 cm dibelakang anus sidat ber- ukuran  30  cm).  Dari  gambar  5b,  dapat  dilihat bahwa  gonad    ikan  penelitian  sebelah  kiri  lebih panjang  daripada  sebelah  kanan.  Hal  ini  sesuai dengan pernyataan Tesch (1977) yaitu gonad kiri 2–3%  lebih  panjang.  Matsui  (1993)  menambah- kan selain lebih panjang, gonad sidat sebelah kiri lebih  berat  dan  mengandung  lebih  banyak  sel telur dibandingkan gonad kanan.
Perangsangan  hormon  berpengaruh  terha- dap pematangan gonad ikan sidat, dapat dibukti- kan  melalui  preparat  histologis  gonadnya.  Ikan dengan  penyuntikan  kombinasi  hormon  menun- jukkan adanya sel gamet pada preparat histologis baik sampling M2 maupun M6, sedangkan perla- kuan  kontrol  tidak  menunjukkan  adanya  tanda- tanda sel gamet (Gambar 5). Berdasarkan klasifi- kasi  perkembangan  sel  gamet  menurut  Takashi- ma & Hibiya (1995) dan Blazer (2002), perkem- bangan  sel  gamet  pada  perlakuan  P10A  dan P10B pada sampling M2 sudah ada perkembang- an namun belum bisa dikategorikan fase sperma- togenik.
Hasil  pengamatan  preparat  histologi,  ja- ringan  gonad telah  mencapai  tahap perkembang- an  fase  spermatosit  pada  perlakuan  P20A  yakni induksi  hormonal  dengan  menggunakan  20  IU PMSG + 0,1 mgL -1 AD. Perkembangan testis pa- da minggu ke-2 P10A dan P10B masih pada fase pembentukan  jaringan.  P20A  dan  P20B  masih pada fase spermatogonia tipe A yang ditandai de- ngan  inti  sel  yang  besar  dalam  kapsul  bewarna merah  yang  terdiri  atas  jaringan  otot  halus  dan pembuluh darah  serta penyebarannya belum  me- rata.  Perkembangan  testis  pada  minggu  ke-6 P10A berada pada fase perkembangan spermato- gonia  tipe  B  yang  ditandai  dengan  inti  sel  mulai mengecil  namun  masih  banyak  terdapat  jaringan otot halus dan pembuluh darah, P10B berada pa- da fase perkembangan spermatogonia tipe A, se-
dangkan  P20A  termasuk  pada  fase  perkembang- an spermatosit yang ditandai dengan inti menge- cil dengan sedikit sitoplasma dan sebagian masih terbungkus kapsul. P20B masih berada pada fase perkembangan spermatogonia tipe A. Pada perla- kuan kontrol (PK), baik pada M2 maupun M6, ti- dak terlihat adanya pematangan gonad. Berdasar- kan pengamatan dan kesesuaian struktur menurut Tesch (1977), gonad sidat pada semua perlakuan cenderung  termasuk  gonad  sidat  jantan.  Berda- sarkan  klasifikasi  gonad  sidat  menurut  Beullens et al . (1997), gonad pada perlakuan P10A, P10B, P20A, dan P20B, termasuk fase pembentukan tu- buli testis.
Selain  gonad,  diukur  pula  panjang  hori- zontal dan vertikal bola mata untuk mendapatkan indeks  ukuran  mata. Pada saat ikan  sidat  menyi- apkan  diri  untuk  memijah  dan  beruaya  dari  per- airan  tawar  menuju  laut  dalam  yang  jaraknya 3000-5000 km, terjadi perubahan pada tubuh an- tara lain diameter mata membesar, diikuti dengan perubahan  komposisi  sel  pada  retina,  perubahan warna tubuh menjadi silver, sisik membesar, der- mis menebal, densitas sel mukus meningkat teru- tama pada betina, bentuk kepala lebih pipih, ada- nya  peningkatan  panjang  dan  diameter  kapiler pada gelembung renang, usus mengalami pening- katan  bobot  namun  jumlah  lipatannya  menurun, serat  otot  tonnus  meningkat,  penumpukan  gliko- gen  dalam  hati  dan  lain-lain.  Mekanisme  peru- bahan tubuh tersebut banyak melibatkan hormon- hormon  dalam  tubuh,  karena  perubahan  ling- kungan akan memengaruhi hipotalamus, yang se- terusnya memengaruhi hipofisis dan organ-organ target  di  bawahnya.  Membesarnya  mata  ketika akan  memijah  dapat  mencapai  empat  kali  lipat dari ukuran sebelumnya (Pankhurst 1982).
Pada  penelitian  ini,  indeks  mata  yang  di- peroleh  antara  0,6  sampai  1,4  (Gambar  3).  Me- nurut Beullens et al . (1997), indeks ukuran mata
untuk yellow  eel atau  belum  matang  adalah  7,2.
Di atas nilai 7,2 maka ikan sidat sudah masuk ke tahap silver  eel (matang  gonad).  Karena  dalam penelitian ini indeks ukuran mata yang diperoleh adalah 0,6 sampai 1,4 maka ikan penelitian ukur- an  150  gram  masih  termasuk  ke  dalam  fase yellow eel tahap awal perkembangan.

## Simpulan
Ikan  sidat  yang  diinduksi  20  IU  PMSG  + 10 mgL -1 AD (P20A) lebih cepat mengalami pe- matangan  gonad,  sedangkan  ikan  sidat  yang  di- induksi  dengan  kombinasi  hormon recombinant Growth  Hormone (rGH)  pada  P10B  dan  P20B, terbukti  mengalami  perkembangan  bobot  tubuh lebih cepat.
Induksi  pematangan  gonad  sidat  bobot 140-150  gram  dapat  dilakukan  dengan  penyun- tikan  PMSG  +  AD  dosis  20  IU  +  10  mgL -1 kg -1 bobot tubuh sebanyak enam kali penyuntikan se- cara  berkala  selama  enam  minggu.  Penyuntikan dan  sampling  sebaiknya  dilakukan  dua  minggu sekali untuk menghindari terjadinya stres ikan.

## Daftar pustaka
Acosta  JR,  Morales  R,  Morales  M,  Alonso  M, Estrada  MP.  2007. Pichia  pastoris Expressing  recombinant  tilapia  growth hormone accelerates the growth of tilapia. Biotechnology Letter , 29 (11): 1671-1676.
Alimuddin, Lesmana I, Sudrajat AO, Carman O, Faizal I. 2010. Production and bioactivity potential  of  three  recombinant  growth hormones  of  farmed  fish. Indonesian Aquaculture Journal , 5 (11): 11-16.
Basuki  F.  1990.  Pengaruh  kombinasi  hormon PMSG dan  hCG terhadap ovulasi Clarias gariepinus (Burcell). Tesis .  Sekolah  Pas- casarjana, Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Bleniarz  K,  Epler  P.  1977.  Investigation  on inducing  sexual  maturity  in  the  male  eel Anguilla  anguilla L. Journal  of  Fish Biology , 10(6): 555-559.
Beullens  K,  Eding  EH,  Gilson  P,  Oliver  F, Komen  J,  Richter  CJJ.  1997.  Sex  dif- ferentiation,  change  in  length,  weight  and
eye  size  before  and  after  metamorphosis of  European  eel  ( Anguilla  anguilla L) maintained  in  captivity. Aquaculture 153 (1-2): 151-162.
Blazer  VS.  2002.  Histopathological  assessment of gonadal tissue in wild fishes. Fish Phy- siology and Biochemistry , 26(1): 85-101.
Cerda J, Calman BG, LaFleur Jr GJ, Limesand S. 1996. Pattern of vitellogenesis and follicle maturational competence during the ovari- an  follicular  cycle  of Fundulus  heterocli- tus . General and Comparative Endocrino- logy , 103(1): 24-35.
Chen  C,  Fernald  D.  2008.  GnRH  and  GnRH receptors:  distribution,  function  and  evo- lution. Journal  of  Fish  Biology ,  73(5): 1099–1120.
Fingerman M. 1997. Roles of neurotransmitter in regulating  reproductive  hormone  release and gonadal  maturation in decapods crus- tacean. Invertebrate  Reproduction  Deve- lopment. 31 (1-3): 47-54.
Funkenstein  B,  Dyman  A,  Lapidot  Z,  de  Jesus- Ayson  EG,  Gertler  A,  Ayson  FG.  2005. Expression  and  purification  of  a  biolo- gically  active  recombinant  rabbitfish ( Siganus  guttatus )  growth  hormone. Aquaculture , 250(1-2): 504-515.
Gunarso W. 1989. Mikroteknik . Pusat Antar Uni- versitas Ilmu Hayat. Institut Pertanian Bo- gor, Bogor. 87 hlm.
Herianti  I.  2005.  Rekayasa  lingkungan  untuk memacu  perkembangan  ovarium  ikan sidat (Anguilla  bicolor ). Oseanologi  dan Limnologi di Indonesia , 37: 25-41.
Goetz  FW.  1983.  Hormonal  control  of  oocyte final  maturation  and  ovulation  on  fishes.
In Hoar  WS,  Randall  DJ,  Donaldson  EM (Editors): Fish  Physiology , Volume  9B (Reproduction  Part  B.  Behaviour  and Fertility  Control). Academic  Press  Inc, London. pp 117-170.
Ijiri S, Kabaya T, Takeda N, Tachiki H, Adachi S, Yamauchi  K.  1998.  Pretreatment  repro- ductive  stage  and  oocyte  development induced  by  salmon  pituitary  hormogenate in  the  japanese  eel Anguilla  japonica. Fisheries Science , 64 (4) : 531-537.
Kagawa  H,  Tanaka  H,  Ohta  H,  Unuma  T, Nomura  K.  2006.  The  first  success  of glass  eel  production  in  the  world:  basic biology  on  fish  reproduction  advances new  applied  technology  in  aquaculture. Fish  Physiology  and  Biochemistry ,  31(2): 193-199.
Kamil MT. 2000. Pengaruh kadar asam lemak n- 6 yang berbeda pada kadar asam lemak n-
3 tetap pada pakan terhadap pertumbuhan ikan sidat Anguilla bicolor . Tesis . Institut Pertanian Bogor. 55 hlm.
Lie Y, Bai J, Jian Q, Ye X, Lao H, Li X, Luo J, Liang  X.  2003.  Expression  of  common carp  growth  hormone  in  the  yeast Pichia pastoris and  growth  stimulation  of juvenile  tilapia  ( Oreochromis  niloticus ).
Aquaculture, 216(1-4): 329-341.
Matsui  I.  1993. Theory  and  Practice  of  Eel Culture . A.A. Balkema. Rotterdam. 133 p. Matty  AJ.  1985. Fish  Endocrinology .  Croom Helm. London and Sydney. 267 p.
Moore Jr, Ward DN. 1980. Pregnant mare serum gonadotropin: rapid chromatographic procedures  for  the  purification  of  intact hormon and isolation subunits. Journal of Biological Chemistry , 255(14): 6923-6929.
Pankhurst NW. 1982. Relation of visual changes to  the  onset  of  sexual  maturation  in  the european  eel, Anguilla  anguilla (L). Journal of Fish Biology 21(2): 127-140.
Rovara O. 2007. Karakteristik reproduksi, upaya maskulinisasi dan pematangan gonad ikan sidat betina (Anguilla bicolor bicolor) me- lalui penyuntikan ekstrak hipofisis. Diser- tasi .  Sekolah  Pascasarjana  IPB,  Bogor.
123 hlm.
Sakamoto  T,  McCormick  SD,  Hirano  T.  1993.
Osmoregulatory  actions  of  growth  hor- mone and its mode of action in salmonids: a review. Fish Physiology and Biochemis- try , 11 (1): 155-164.
Sukumasavin  N.  2007.  Fish  Reproduction.
Advances Freshwater Aquaculture . Fisheries Information Technology  Center. Departemen  of  Fisheries.  Bangkok.  pp.
137-156
Takashima  F,  Hibiya  T.  1995. An  Atlas  of  Fish Histology: Normal and Pathological Fea- tures 2 nd Edition. Kodansha. Tokyo. 195 p.
Tesch FW. 1977. The eel; Biology  and Manage- ment of Anguillid Eels . Chapman and Hall.
London. 434 p.
Tomkiewizc  J,  Tanja  MN,  Pedrsen  JS . 2011.
Assessment  of  testis  development  using induced  spermatogenesis  in  the  European eel Anguilla anguilla. Marine and Coastal Fisheries. 3(1): 106-118.