## AKTIVITAS ANTIHIPERGLIKEMIK EKSTRAK ETANOL DAUN CINCAU HITAM PADA MENCIT PUTIH JANTAN YANG DIINDUKSI ALOKSAN
Dadan Rohdiana 1 , Dyhta Andri Deswati 2 , Jamliati 2 , Noni Rosanti 2 , Nadhilah Nur Fajrina 2 , Sri Maryam 2 , Windy Widowaty 1
1 Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Al-Ghifari, Bandung
2 Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Al-Ghifari, Bandung
Email : rohdiana@unfari.ac.id

## Abstrak
Telah dilakukan penelitian aktivitas antihiperglikemik EEDCH atau ekstrak etanol daun cincau hitam ( Mesona palustris B.L ) pada mencit putih jantan yang diabetes. Penelitian ini dibagi menjadi empat tahap yaitu ekstraksi daun cincau hitam menggunakan pelarut etanol 96%, skrining fitokimia, analisis total flavonoid dan pengujian aktivitas antihiperglikemik. Mencit  putih jantan dibuat diabetes dengan diinduksi aloksan. Mencit dibagi menjadi lima kelompok yang terdiri dari kontrol negatif (Aquadest), kontrol positif (Glibenklamid 13 mg/Kg BB), dosis 1 (200 mg EEDCH/kg BB), dosis 2 (400 mg EEDCH/kg BB), dosis 3 (600 mg EEDCH/kg BB). Hasil skrining fitokimia memperlihatkan bahwa EEDCH positif mengandung flavonoid, alkaloid, tanin, dan saponin. Hasil analisis pada EECDH menunjukkan bahwa total flavonoid sampel yang diuji adalah sebesar 4,9 mg QE/g. Hasil pengujian aktivitas antihiperglimek menunjukkan bahwa mencit putih jantan diabetes didapati mengalami penurunan kadar gula darah pada hari ke 14 dan 21 masing-masing sebesar 26,33% dan 43,89%; 27,46% dan 44,32%; 39,89% dan 57,37% pasca pemberian yang EEDCH pada dosis 1, 2 dan 3.
Keywords : black grass jelly, phytochemical screening, alloxan, antihyperglycemic,

## Pendahuluan
Diabetes      melitus  (DM)  merupakan  penyakit yang  disebabkan  oleh  gangguan  kronis  yang  terjadi ketika  hormon  insulin    hipoglikemik    tidak  dilepaskan dalam  jumlah  yang  memadai  atau  ketika  aktivitasnya tidak efektif karena resistensi metabolisme (Hajleh et al., 2022).  Berdasarkan  tipenya,  DM  dapat  dikelompokkan menjadi DM tipe 1 (DM 1) dan DM tipe 2 (DM 2). DM 1  umumnya  mulai  diderita  pada  masa  pubertas  dan merupakan  kondisi  autoimun  di  mana  sel-sel  β  dari pankreas akan berkurang dan menyebabkan produksi insulin menjadi tidak mencukupi (Ortega et al., 2022). Sementara itu pada DM 2, pankreas dapat memproduksi insulin dalam jumlah yang memadai, tetapi sel-sel dari berbagai organ (lemak, hati dan otot)  tidak merespons hormon  ini  dengan  baik   ( Méril-Mamert et al., 2022). DM  juga  merupakan  penyakit  disregulasi  metabolik yang  mengakibatkan  penumpukan  kadar  gula  yang menyimpang dalam aliran darah (Khalid et al., 2022).
Dalam perjalanannya,  pemanfaatan insulin dan obat kimia telah menjadi metode utama dalam perawatan penderita  DM.  Namun  demikian,  metode  ini  dinilai sering  memberatkan  pasien  mengingat  biayanya  yang tidak murah ( Boccardi, and Shubrook, 2022) . Disamping itu,  perawatan  dengan  obat  kimia  berpotensi menyebabkan efek samping (Masood et al., 2021).
Untuk  mengatasi  permasalah  tersebut  perlu dikembangkan  pemanfaatan  bahan  alam  yang  bersifat antioksidan untuk mengatasi hiperglikemik dan DM (Ojo
et  al.,  2022).  Daun  cincau  hitam  berpotensi dikembangkan sebagai antihiperglikemik karena bersifat antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji aktivitas  EEDCH  pada  mencit  putih  jantan  yang  telah diinduksi aloksan.

## Bahan dan Metode Penelitian
Daun cincau hitam, etanol 96%, pereaksi/reagen Mayer,  Dragendorff, Bouchard , Steansy,  HCl,  CHCl 3 , dan  FeCl 3 telah  digunakan  dalam  penelitian  ini. Pada penelitian ini digunakan mencit jantan putih yang berusia 6-8 minggu dengan berat badan 20-30g.
Daun cincau hitam yang sudah dikeringkan dan diperkecil  ukuran  partikelnya  kemudian  dieksraksi menggunakan  etanol  96%  ( Vaičiulienė,  et  al.,  2022) . Ekstraktan  disaring  untuk  selanjutnya  dikentalkan menggunakan rotary vapor (Khanal et al., 2022) sampai dihasilkan  ekstrak  EEDCH.  EEDCH  selanjutnya diskrining  kandungan  fitokimianya  berupa  alkaloid, flavonoid, tannin dan saponin (Tiwari et al., 2020) dan dianalisis total flavonoidnya (Sassi et al., 2022).
Mencit  putih  jantan  yang  sudah  diinduksi aloksan  dibagi  menjadi  lima  kelompok  dan  diberikan asupan  berupa  aquadest  (kontrol),  glibenklamind  13 mg/Kg  BB  (kontrol  positif),  EEDCH    200  mg/Kg  BB (dosis 1), 400 mg/Kg BB (dosis 2) dan 600 mg/Kg BB (dosis 3). Mencit diukur kandungan gula darahnya pada hari ke 7:7-14 dan 21:7-21 (Sakul et al., 2021).

## Hasil dan Pembahasan

## Skrining Fitokimia
Hasil  skrining  fitokimia  terhadap  EEDCH memperlihatkan  bahwa  sampel  yang  diuji  positif mengandung  flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan  saponin. Hasil analisis skrining fitokimia diperlihatkan pada tabel 1 berikut ini.
Tabel 1. Hasil Analisis Skrining Fitokimia
No Fitokimia Hasil 1 2 3 4 Flavonoid Alkaloid Tanin Saponin +++ + ++ +
Hasil  penelitian  ini  senada  dengan  Oktavia  et al.,  (2020)  yang  menyatakan  bahwa  daun  cincau  hijau mengandung  alkaloid,  flavonoid,  tanin  dan  saponin. Penelitian terkait cincau hitam tidak sebanyak penelitian terkait  cincau  hijau.  Pada  pembahasan  penelitian  ini pustaka daun cincau hijau dijadikan sebagai pembanding.

## Total Flavonoid
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  kandungan flavonoid  total  pada  EEDCH  adalah  sebesar  4,9  mg QE/g. Angka ini lebih tinggi dibandingkan dengan hasil analisis pada ekstrak etanol daun cincau hijau yang total flavonoidnya  1,23  mg  QE/g  (Zahra  et  al.,  2017).  Total flavonoid  jenis  cincau  ini  lebih  tinggi  dibandingkan dengan tanaman Garut ( Maranta arundinacea ) yang nilai total flavonoidnya di angka 0,38 mg QE/g (Lamkeng et al., 2022) tetapi lebih rendah daripada Matoa ( Pometia pinnata ) yang total flavonoidnya diangka 13,15mg QE/g (Syahputra et al., 2021).

## Aktivitas Antihiperglikemik
Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  EEDCH mempunyai  aktivitas  antihiperglikemik.  Mencit  putih jantan  diabetes  mengalami  penurunan  kandungan  gula darah pada pengujian hari ke 14 dan 21 pasca pemberian EEDCH  pada  dosis  1,  2  dan  3  masing-masing  sebesar 26,33% dan 43,89%; 27,46% dan 44,32%; 39,89% dan 57,37%. Hasil pengukuran penurunan diperlihatkan pada tabel 2 berikut ini.
Tabel 2. Penurunan Kadar Gula Darah (%) Kelompok H14 H21 Kontrol Positif Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 40,66 26,33 27,46 39,89 56,02 43,89 44,32 57,37
Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil penelitian Zahra et al., (2017).  Kelompok  mencit yang diberi ekstrak daun cincau mengalami penurunan kadar gula  darah.  Penurunan  kadar  gula  darah  mencit  diduga karena  adanya  kandungan  senyawa  fitokimia  yang terkandung dalam EEDCH.
Flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan  saponin  telah menunjukkan sifatnya sebagai antidiabetes ( Praparatana et al., 2022). Mekanisme kerja antidiabetes dari fitokimia
yang  ditemukan  pada  tumbuhan  dapat  dikategorikan menjadi  enam  kelompok  berdasarkan  mekanisme farmakologinya  yaitu  modulator  metabolisme  glukosa, efektor  hipolipidemik,  efektor  pankreas,  efektor antioksidan,  modulator  komplikasi  terkait  diabetes  dan modulator insulin-mimetic dan insulin-sensitizer ( Méril- Mamert et al ., 2022).
Senyawa  fitokimia berupa flavonoid, alkaloid, tanin  dan  saponin  mampu  memodulasi  jalur metabolisme  di  mana  glukosa  dapat  bertindak  sebagai substrat  maupun  sebagai    produk  (Un  et  al.,  2022). Senyawa fitokimia tersebut mempengaruhi glukoneogenesis,  glikogenolisis,  jalur  pentosa  fosfat dan glikogenesis.  Senyawa fitokimia ini juga bekerja dengan  mengganggu  penyerapan  glukosa  dan menghambat  aktivitas  α-glukosidase  dan  α-amilase ( Andargie et al., 2022).
Mekanisme  berikutnya  senyawa  fitokimia diduga  mampu  menurunkan  kadar  trigliserida  dan kandungan  kolesterol,  yang  akan  berdampak  pada hiperlipidemia,  yang  merupakan  salah  satu  fitur patofisiologis  DM  (Lin  et  al.,  2022).  Mekanisme lainnya  adalah  bahwa  senyawa  bioaktif  seperti flavonoid  dan  alkaloid  dapat  melindungi  terhadap kerusakan  sel  β,  meningkatkan  proliferasi  dan merangsang sekresi insulin (Eguchi et al., 2022).
Flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan  saponin mempunyai  kemampuan  dalam  melindungi  diri  dari stres  oksidatif  yang  berhubungan  dengan  komplikasi DM  ( Vassalle  and  Gaggini,  2022). Sementara  itu, alkaloid dapat merangsang penyerapan  glukosa  seluler dan mengurangi resistensi insulin.
Tanin  juga  mempunyai  efek  antidiabetes dengan  mekanisme  kerja  meningkatkan  propagasi pemulihan sel, dan mengurangi penyerapan karbohidrat dengan  menghambat  aktivitas a -amilase  dan a - glukosidase (Kifle et al., 2022).
Sementara  itu,  saponin  menampilkan  aktivitas antidiabetes  mereka  melalui  kemungkinan  mekanisme memperbaiki  resistensi  insulin,  merangsang  sekresi insulin,  dan  melindungi  sel  pankreas  (Miyachi  et  al., 2022).

## Kesimpulan
EEDCH mengandung flavonoid, alkaloid, tanin dan saponin yang mempunyai aktivitas antihiperglikemik pada mencit jantan putih diabetes.

## Daftar Pustaka
Andargie Y, Sisay W, Molla M, Tessema G. Evaluation of Antidiabetic and Antihyperlipidemic Activity of 80%  Methanolic  Extract  of  the  Root  of  Solanum incanum Linnaeus (Solanaceae) in Mice. Evidence- Based  Complementary  and  Alternative  Medicine. 2022 Jun 21;2022.
Boccardi,  A.  and  Shubrook,  J.H.,  2022.  Cutaneous Reactions  to  Antidiabetic  Agents:  A  Narrative Review. Diabetology , 3 (1), pp.97-107.
Eguchi, N., Toribio, A.J., Alexander, M., Xu, I., Whaley, D.L.,  Hernandez,  L.F.,  Dafoe,  D.  and  Ichii,  H., 2022.  Dysregulation  of  β-Cell  Proliferation  in Diabetes:  Possibilities  of  Combination  Therapy  in the Development of a Comprehensive Treatment. Biomedicines , 10 (2), p.472.
Hajleh,  M.N.A.,  Khleifat,  K.M.,  Alqaraleh,  M.,  Al- Hraishat, E., Al-limoun, M.O., Qaralleh, H. and Al- Dujaili, E.A., 2022. Antioxidant and Antihyperglycemic  Effects  of  Ephedra  foeminea
Aqueous  Extract  in  Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Nutrients , 14 (11), p.2338.
Khanal, L.N., Sharma, K.R., Pokharel, Y.R. and Kalauni, S.K.,  2022.  Phytochemical  Analysis  and  In  Vitro Antioxidant and Antibacterial Activity of Different Solvent  Extracts  of  Beilschmiedia  roxburghiana
Nees Stem Barks. The Scientific World Journal , 2022 .
Lin, A., Xia, H., Zhang, A., Liu, X. and Chen, H., 2022. Vitreomacular  Interface  Disorders  in  Proliferative Diabetic  Retinopathy:  An  Optical  Coherence Tomography Study. Journal of Clinical Medicine , 11 (12), p.3266.
Khalid, M., Petroianu, G. and Adem, A., 2022. Advanced Glycation  End  Products  and  Diabetes  Mellitus:
Mechanisms and Perspectives. Biomolecules , 12 (4), p.542.
Kifle, Z.D., Abdelwuhab, M., Melak, A.D., Meseret, T. and Adugna, M., 2022. Pharmacological evaluation of  medicinal  plants  with  antidiabetic  activities  in Ethiopia: A review. Metabolism Open , p.100174.
Lamkeng,  S.,  Santibenchakul,  S.  and  Sooksawat,  N.,
2022. Potential of Maranta arundinacea residues for recycling: Analysis of total phenolic, flavonoid, and tannin contents. Biodiversitas Journal of Biological Diversity , 23 (3).
Masood, S., Bashir, S., El Shazly, M., Imran, M., Khalil, P.,  Ifthikar,  F.,  Jaffar,  H.M.  and  Khursheed,  T., 2021.  Investigation  of  the  anti-hyperglycemic  and antioxidant  effects  of  wheat  bread  supplemented with onion peel extract and onion powder in diabetic rats. Journal of Diabetes & Metabolic
Disorders , 20 (1), pp.485-495.
Méril-Mamert,  V.,  Ponce-Mora,  A.,  Sylvestre,  M., Lawrence, G., Bejarano, E. and Cebrián-Torrejón, G., 2022. Antidiabetic Potential of Plants from the Caribbean Basin. Plants , 11 (10), p.1360.
Miyachi,  Y.,  Miyazawa,  T.  and  Ogawa,  Y.,  2022.
HNF1A  Mutations  and  Beta  Cell  Dysfunction  in Diabetes. International  journal  of  molecular sciences , 23 (6), p.3222.
Ojo, O.A., Amanze, J.C., Oni, A.I., Grant, S., Iyobhebhe, M.,  Elebiyo,  T.C.,  Rotimi,  D.,  Asogwa,  N.T., Oyinloye, B.E., Ajiboye, B.O. and Ojo, A.B., 2022. Antidiabetic  activity  of  avocado  seeds  (Persea americana  Mill.)  in  diabetic  rats  via  activation  of
PI3K/AKT signaling
pathway. Scientific reports , 12 (1), pp.1-17.
Oktavia,  S.N.,  Wahyuningsih,  E.  and  Andasari,  S.D., 2020. Skrining Fitokimia Dari Infusa Dan Ekstrak Etanol  70%  Daun  Cincau  Hijau  (Cyclea  barbata Miers). CERATA Jurnal Ilmu Farmasi , 11 (1), pp.1- 6.
Ortega,  R.,  Valdés,  M.,  Alarcón-Aguilar,  F.J.,  Fortis- Barrera,  Á.,  Barbosa,  E.,  Velazquez,  C.  and Calzada,  F.,  2022.  Antihyperglycemic  Effects  of Salvia  polystachya  Cav.  and  Its  Terpenoids:  α- Glucosidase  and  SGLT1  Inhibitors. Plants , 11 (5), p.575.
Passarelli, M. and Machado, U.F., 2021. AGEs-Induced and  Endoplasmic  Reticulum  Stress/Inflammation- Mediated  Regulation  of  GLUT4  Expression  and Atherogenesis  in  Diabetes  Mellitus. Cells , 11 (1), p.104.
Praparatana,  R.,  Maliyam,  P.,  Barrows,  L.R.  and Puttarak,  P.,  2022.  Flavonoids  and  Phenols,  the Potential Anti-Diabetic Compounds from Bauhinia strychnifolia Craib. Stem. Molecules , 27 (8), p.2393.
Şakul,  A.A.,  Kurtul,  E.,  Özbek,  H.,  Kirmizi,  N.I., Bahtiyar,  B.C.,  Saltan,  H.  and  ACIKARA,  Ö.B., 2021.  Evaluation  of  Antidiabetic  Activities  of Scorzonera  Species  on  Alloxan  Induced  Diabetic Mice. Clinical and Experimental Health
Sciences , 11 (1), pp.74-80.
Sassi, A., Normah, H., Khattak, M.M.A.K. and Hanapi, M.J.,  2022.  Analysis  of  phenolic  profile,  total phenolic  content  and  antioxidant  activity  in Anacardium occidentale
leaves. Food Research , 6 (1), pp.20-26.
Syahputra, Rony Abdi, Sukirman Lie, Steven Theo, and Sony  Eka  Nugraha.  "Antioxidant,  Total  Phenol, Total  Flavonoid,  and  LC-MS/MS  Analysis  of Pometia  Pinnata  Ethanol  Extract."  In 2021  IEEE International Conference on Health,
Instrumentation  &  Measurement,  and  Natural Sciences (InHeNce) , pp. 1-5. IEEE, 2021. Tiwari, S., Nepal, S., Sigdel, S., Bhattarai, S., Rokaya, R.K.,  Pandey,  J.,  Khadka,  R.B.,  Aryal,  P.  and Bhandari,  R.,  2020.  Phytochemical  Screening, Antibacterial-Guided
Fractionation, and
Thin-Layer Chromatographic Pattern of the Extract Obtained from Diploknemabutyracea. Pharmacognosy
Research , 12 (4).
Un, S., Quan, N.V., Anh, L.H., Lam, V.Q., Takami, A., Khanh,  T.D.  and  Xuan,  T.D.,  2022.  Effects  of  In Vitro Digestion on Anti-α-Amylase and Cytotoxic Potentials  of  Sargassum  spp. Molecules , 27 (7), p.2307.
Vaičiulienė, G., Bakutis, B., Jovaišienė, J., Falkauskas, R.,  Gerulis,  G.,  Bartkienė,  E.,  Klupšaitė,  D., Klementavičiūtė,  J.  and  Baliukonienė,  V.,  2022. Effects  of  Ethanol  Extracts  of  Origanum  vulgare
and  Thymus  vulgaris  on  the  Mycotoxin Concentrations and the Hygienic Quality of Maize (Zea mays L.) Silage. Toxins , 14 (5), p.298. Vassalle, C. and Gaggini, M., 2022. Type 2 Diabetes and
Oxidative Stress and Inflammation: Pathophysiological  Mechanisms  and  Possible
Therapeutic Options. Antioxidants , 11 (5), p.953.
Zahra,  F.,  Budhiarta,  A.A.  and  Pangkahila,  W.,  2017.
Pemberian  ekstrak  daun  cincau  (Mesona  palustris BL) oral meningkatkan jumlah sel β pankreas dan menurunkan  gula  darah  puasa  pada  tikus  putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar diabetes. e- Biomedik , 5 (1).