p-ISSN         : 2087-9423
e-ISSN         : 2620-309X

## UJI ANTIOKSIDAN DAN UJI BSLT PADA EKSTRAK KASAR Holothuria scabra DENGAN BERBAGAI PELARUT

## ANTIOXIDANT TEST AND BSLT TEST ON CRUDE EXTRACT Holothuria scabra WITH VARIOUS SOLVENTS
Ardi Ardiansyah*, Abdullah Rasyid dan Aji Nugroho Pusat Penelitian Oseanografi-LIPI, Jakarta, 14430, Indonesia
* E-mail: ardiardiansyah24@gmail.com

## ABSTRACT
Holothuria  scabra  is  one  of  high-value  sea  cucumber.  The  beneficial  aspect  of  sea  cucumbers  is determined  by  the  source  of  raw  materials.  The  extraction  process  is  a  process  that  happens  before sea  cucumbers  are  used.  In  this  process,  the  use  of  a  various  solvent  is  not  only  to  facilitate  the production process but also to maintain the active material. Also, the amount of yield obtained in the extraction  process  becomes  a  consideration  in  the  production  process.  One  of  the  benefits  that  are often  claimed  is  antioxidants.  This  study  aims  to  determine  the  yield  of  sea  cucumbers  after  the extraction  process  by  maceration  with  various  types  of  solvents then  antioxidant  testing  was  carried out with DPPH followed by BSLT test. It was commonly used and easy to do. Besides, BSLT test was carried  out  to  determine  the  initial  toxicity  and  potency  to  be  developed  as  antibacterial,  antifungal and  anticancer  candidates.  Results  showed  that  the  highest  yield  was  8.98%  produced  by  dry  sea cucumber samples extracted with ethanol PA 70% ethanol (code T5). In the results of the antioxidant tests,  the  best  IC50  comes  from  dried  sea  cucumber  extracted  using  ethyl  acetate  (code  T2  and  T3) with 1140 ± 0.00 ppm and1140 ± 10 ppm respectively. In the BSLT test results, the lowest LC50 was shown by extract using 100% methanol PA solvent (T4 code), with 108 ppm.
Keywords : antioxidant, BSLT, Holothuria scabra, yield

## ABSTRAK
Teripang Holothuria  scabra merupakan  salah  satu  jenis  teripang  bernilai  ekonomis  tinggi.  Manfaat yang  diperoleh  dari  teripang  sangat  ditentukan  oleh  bentuk  bahan  baku  yang  digunakan.  Proses  ini biasanya  merupakan  proses  lanjutan  sebelum  teripang  dimanfaatkan.  Pada  proses  ekstraksi penggunaan  berbagai  komposisi  pelarut,  selain  bertujuan  untuk  mempermudah  proses  produksi  juga dimaksudkan untuk mempertahankan material aktif. Selain itu, jumlah rendemen yang diperoleh pada proses  ekstraksi  menjadi  pertimbangan  selanjutnya  dalam  proses  produksi.  Salah  satu  manfaat  yang sering  diklaim  pada  produk  teripang  diantaranya  kandungan  antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  rendemen  teripang  setelah  dilakukan  proses  ekstrasi  dengan  metode  maserasi dengan  berbagai  jenis  pelarut  kemudian  dilakukan  uji  antioksidan  dengan  metode  DPPH  dilanjutkan dengan  uji  BSLT.  Metode  pengujian  antioksidan  DPPH  dipilih  karena  umum  digunakan  dan  mudah dilakukan.  Selain  itu,  uji  BSLT  dilakukan  untuk  mengetahui  toksisitas  awal  dan  potensi  untuk dikembangkan  sebagai  kandidat  antibakteri,  antijamur  maupun  antikanker.  Hasil  penelitian menunjukkan  rendemen  tertinggi  yaitu  8,98%  yang  diperoleh  dari  sampel  kering  hasil  ekstraksi dengan  pelarut  etanol  PA  70%  (kode  T5).  Pada  hasil  uji  antoksidan  yang  dilakukan,  besaran  IC50 sampel  terbaik  adalah  teripang  kering  yang  diekstraksi  menggunakan  etil  asetat  (kode  T2  and  T3) dengan nilai yang hampir sama yaitu 1140 ± 0,00 ppm and 1140 ± 10 ppm. Pada hasil uji BSLT, LC50 terendah  ditunjukkan  oleh  ekstrak  dengan  pelarut  metanol  PA  100%  (kode  T4),  dengan  nilai  sebesar 108 ppm.
Kata kunci : antioksidan, BSLT, Holothuria scabra , rendemen

## I. PENDAHULUAN
Teripang merupakan salah satu komoditi  ekspor  sub  sektor  perikanan  yang cukup  potensial.  Sebagai  salah  satu  produk perikanan invertebrata yang populer, teripang dari kelas Holothuroidea telah lama dikonsumsi  oleh  orang  Indonesia  (Pankey, 2012).  Penelitian  tentang  teripang  yang pernah dilakukan di Indonesia telah menginventarisasi  jenis-jenis  teripang  yang ada  di  beberapa  wilayah  perairan  Indonesia misalnya di perairan Situbondo, Karimunjawa  dan  Ambon  sudah  dilakukan oleh  Setyastuti  and  Purwati  (2015)  dan daerah  lain  di  Indonesia  juga  sudah  ditinjau keanekaragamannya oleh Setyastuti et al., (2019)  bahwa  jenis  teripang  yang  diteliti dan  dikoleksi  berjumlah  empat  puluh  enam spesies.
Banyak  dari  spesies  teripang  yang memiliki  nilai  ekonomis  tinggi  berasal  dari spesies Holothuria misalnya H.  nobilis (black teatfish), H. fuscogilva (white teatfish), dan H.  scabra  (sandfish) sebagian besar terdistribusi di perairan tropis di Pasifik Barat  dan Samudera Hindia  (Ravinesh et  al., 2014).  Sebagian  besar  teripang  dikeringkan terlebih dahulu sebelum dimanfaatkan. Teripang  kering  dijual  secara  komersial, terutama  di  pasar  Asia  dengan  bisnis  utama di  Cina,  diikuti  oleh  Korea,  Indonesia,  dan Jepang  (Shiell,  2004).  Menurut  laporan statistik global Food and Agriculture Organization of United Nations (FAO) tahun 2004,  Indonesia  pernah  tercatat  menjadi produsen Teripang terbesar di dunia berdasarkan laporan global negara pengimpor  utama,  yaitu  Hongkong  dan  Cina (Choo, 2008).
Sebagian besar spesies teripang kering  yang  dikomersialisasi  merupakan bagian  dari  famili  Aspidochirotids , genus Bohadschia, Holothuria, Actinopyga, Isostichopus,  Stichopus,  Parastichopus dan
Thelenota (Stichopodidae) dan famili Dendrochirotids , genus Cucumaria (Purcell et  al., 2012) . Meskipun  ada  banyak  spesies
teripang  yang dapat dibudidaya dan dipanen, tetapi hanya sekitar 20 spesies yang memiliki nilai ekonomis relatif tinggi, salah satunya H. scabra .  Secara  komersial,  teripang  kering dapat dikategorikan bernilai ekonomis rendah,  sedang  atau  tinggi  tergantung  pada beberapa  aspek  seperti  spesies,  penampilan, kelimpahan,  warna,  bau,  ketebalan  dinding tubuh, tren pasar dan kebutuhan (Wen et  al., 2010).
Pemanfaatan  teripang  di  Indonesia sebagai  bahan  pangan  dalam  bentuk  olahan dibanding produk perikanan lainnya tergolong  rendah  dan  kurang  populer,  hal tersebut  disebabkan  teripang  memiliki  nilai estetika yang rendah dilihat dari bentuk fisik teripang  yang terkesan  menjijikkan (Karnila, 2011).  Namun  demikian,  teripang  memiliki kandungan  nutrisi  yang  tinggi.  Menurut Martoyo et  al, (2006),  kandungan  nutrisi teripang  dalam  kondisi  kering  terdiri  dari protein  sebesar  82%,  lemak  1,7%,  kadar  air 8,9%, kadar abu 8,6% dan kadar karbohidrat 4,8%.   Selain  itu,  kandungan  terpenting  dari teripang adalah kolagen, mineral, mukopolisakarida, glycosa-minoglycans, omega-3,  6,  dan  9,  asam  amino,  glukosamin dan kondroitin (Esmat et al., 2012).
Teripang H.  scabra ,  mengandung sejumlah besar protein, khususnya kolagen,  dan  lipid  sangat  rendah.  Selain  itu, teripang  ini  memiliki  kadar  asam  amino esensial, asam  lemak esensial terutama  asam nervonic  dan  asam  arakidonat,  yang  juga mengandung Gamma  Aminobutyric  Acid (GABA), vitamin C, dan vitamin E (Sroyraya et  al., 2017). Holothuroidea kaya  akan kandungan bahan fungsional termasuk saponin,  kondroitin  sulfat,  kolagen,  asam amino,  dan  fenol.  Bahan  bioaktif  ini potensial  digunakan  tidak  hanya  di  industri makanan  tetapi  juga  industri  biomedis (Siahaan et  al., 2017;  Pengestuti  and  Arifin, 2017).  Dari  berbagai  material  aktif  yang terkandung  di  dalam  teripang,  kandungan yang  sering  diklaim  pada  produk  di  pasaran diantaranya kandungan antioksidan.
Antioksidan  adalah  zat  yang  dapat menghambat  radikal  bebas  di  dalam  tubuh. Radikal  bebas  memainkan  peran  penting dalam  tubuh  manusia,  seperti  keterlibatan dalam energi diantaranya menciptakan proses,  pertumbuhan  sel,  proses  pensinyalan dan  proses  imunisasi  (Lobo et  al .,  2010). Namun,  aktivitas  tinggi  radikal  bebas  dapat menyebabkan  berbagai  gangguan  sel  dan jaringan yang pada akhirnya dapat menyebabkan kematian sel, kelainan gen dan kanker  (Kulbacka et  al., 2012).  Senyawa yang  berfungsi  sebagai  antioksidan  yang terkandung dalam teripang diantaranya fenol, Vitamin  C,  vitamin  E,  dan  terpen  (Sroyraya et al., 2017; Nobsathian et al., 2017). Pada  penelitian  ini,  teripang H. scabra basah  dan  kering  diekstrak  dengan berbagai komposisi
pelarut
untuk menghasilkan  ekstrak  kasar.  Pelarut  yang digunakan  bersifat  polar  dan  semi  polar. Penggunaan  berbagai  komposisi  pelarut biasanya  dipilih  selain  untuk  mempermudah proses  produksi  juga  dimaksudkan  untuk mempertahankan  material  aktif  yang  dituju sebagai  senyawa  marker.  Hasil  ekstraksi tersebut  dilakukan  dengan  uji  antioksidan dengan  metode  DPPH  untuk  selanjutnya dilakukan  juga  uji  BSLT.  Uji  BSLT dilakukan  untuk  mengetahui  toksisitas  tahap awal  dan  potensi  untuk  dikembangkan sebagai kandidat antibakteri, antijamur maupun antikanker.

## II. METODE PENELITIAN
2.1.     Ekstraksi dengan Maserasi Teripang  segar  dikumpulkan  dari lokasi  sampling  di  daerah  Lampung  dan teripang  kering  yang  dibeli  dari  nelayan  di lokasi tersebut. Selanjutnya teripang tersebut dicacah untuk memperluas permukaanya dan kemudian  diekstraksi  menggunakan  pelarut masing-masing sebanyak 180g dengan metode  maserasi.  Pelarut  yang  digunakan adalah  pelarut  polar  (metanol,  etanol),  dan pelarut  semi  polar  (etil  asetat)  dengan konsentrasi tertentu. Proses maserasi
dilakukan  beberapa kali pengulangan sampai diperoleh  filtrat  yang  bening.  Setelah dilakukan  penyaringan  beberapa  kali,  filtrat yang  diperoleh  dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator pada  suhu  40 o C dan dikeringkan dengan gas nitrogen.
Metode  ekstraksi  berupa  maserasi dipilih  karena  pada  proses  tersebut  tidak terjadi pemanasan seperti metode lain, seperti sokletasi.  Sehingga  diharapkan  kandungan antioksidan  yang  terdapat  pada  larutan ekstrak  tidak  rusak,  meskipun  maserasi memiliki  kelemahan  yaitu  pelarut  yang digunakan akan lebih boros. Adapun penggunaan  metanol  tidak  diperuntukan dalam  proses  pengolahan  yang  mengarah kepada produk konsumsi oral seperti klasifikasi yang ditetapkan oleh FDA (2017).

## 2.2. Uji Antioksidan dengan Metode DPPH
Ekstrak  teripang dengan variasi konsentrasi  berbeda  yaitu  rentang  0.1 mg.mL –1 hingga  2  mg.mL –1 disiapkan  untuk dianalisa.  Sebanyak  160  μL  larutan  ekstrak ditambahkan  dengan  40  μL  larutan  1  mM DPPH  (Sigma,  D9132)  di  dalam  96  well plates.  Sampel  diinkubasi  selama  30  menit pada  suhu  ruang.  Absorbansi  diukur  pada panjang  gelombang  515  nm  menggunakan Tecan ® Microplate Reader. BHT (Butylated hydrotoluene)  (Sigma,  W218405-1KG-K) dan Quercetin (Sigma,
Q4951-10G)
digunakan  sebagai  baku  standar  dengan kondisi  yang  sama.  Konsentrasi  yang digunakan  yaitu  001  mg.mL –1 hingga  0,005 mg.mL –1 untuk  BHT  dan  0,00025  mg.mL –1 hingga  0,001  mg.mL –1 untuk  Quercetin. Pengukuran diulang 3 kali dan diambil rerata ±  standar  errornya,  kemudian  aktivitas penghambatan dihitung. Aktivitas penghambatan radikal bebas dihitung menggunakan rumus:
…………………………………………..…....(1)

## 2.3. Uji BSLT
Sebanyak  10  naupili Artemia  salina
Leach dipipet ke dalam masing-masing botol vial  yang telah berisi ekstrak dalam  berbagai konsentrasi dan kontrol, kemudian ditambahkan  air  laut  hingga  volume  5  mL. Selanjutnya  botol  vial  ditutup  dengan  tutup karet dan dibiarkan selama 24 jam. Kematian pada setiap konsentrasi dicatat dan dibandingkan  dengan  kontrol.  Pengukuran diulang  3  kali  dan  diambil  rerata,  lalu dihitung menggunakan rumus:
……………………………………….…(2)
Dari  masing-masing  nilai  kematian yang  didapat  selanjutnya  diubah  ke  dalam nilai  probit  ( probability  unit )  sebagai  nilai mortalitas.  Nilai  probit  didapatkan  dengan mencocokan  besaran  persentase  kematian dengan tabel probit. Begitu juga dengan nilai konsenterasi  uji  yang  digunakan  diubah  ke dalam Log10. Nilai probit digunakan sebagai sumbu  Y  dan  nilai  Log  sebagai  sumbu  X untuk membuat kurva standar dalam mencari nilai  IC50.  Setelah  didapatkan  hasil  nilai
IC50  selanjutnya  besaran  Log  diubah kembali ke dalam nilai konsenterasi.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil Ekstraksi Teripang
Sesuai  persyaratan  SNI,  teripang segar  dan  teripang  kering  yang  digunakan adalah  teripang  yang  tidak  terkontaminasi, tidak  ada  tanda  kerusakan  dan  pemalsuan, serta tidak ada risiko bagi kesehatan manusia (SNI,  2009).  Oleh  karena  itu,  teripang  segar yang  diperoleh  langsung  dikeluarkan  isi perutnya  kemudian  dimasukkan  ke  dalam kontainer dingin untuk mencegah dari proses pembusukan.  Sedangkan  teripang  kering yang  diambil  adalah  teripang  yang  dipilih secara  kasat  mata,  memiliki  kadar  air  yang paling  sedikit  serta  tidak  nampak  adanya jamur pada permukaan teripang tersebut.
Rendemen  ekstrak  yang  diperoleh dengan  pelarut  polar  dan  semi  polar ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Rendemen tertinggi  diperoleh  dari  sampel  teripang kering  dengan  pelarut  etanol  PA  70%  (kode T5)  dengan  rendemen  sebesar  8,98%. Sedangkan  untuk  sampel  basah,  rendemen paling  banyak  terdapat  pada  ekstrak  dengan pelarut  etanol  PA  100%  (kode  T9)  dengan rendemen sebesar 2,57 %.
Tabel 1. Rendeman hasil maserasi.
No. Jenis Kode Berat Pelarut Rendemen (%) 1. Teripang Kering T1 180 g MeOH – PA – 100% 4,46 2. Teripang Kering T2 180 g EtAc – PA – 100% 0,13 3. Teripang Kering T3 180 g EtAc – Teknis – 100% 0,14 4. Teripang Kering T4 180 g EtOH – PA – 100% 0,37 5. Teripang Kering T5 180 g EtOH – PA – 70% 8,98 6. Teripang Basah T6 180 g MeOH – PA – 100% 2,51 7. Teripang Basah T7 180 g EtAc – PA – 100% 0,001 8. Teripang Basah T8 180 g EtAc – Teknis – 100% 0,014 9. Teripang Basah T9 180 g EtOH – PA – 100% 2,57 10.  Teripang Basah T10 180 g EtOH – PA – 70% 1,065

## 3.2. Hasil Uji Antioksidan
Berdasarkan  hasil  uji  antoksidan, besaran  IC50  sampel  terbaik  adalah  teripang
kering  yang  diekstraksi  menggunakan  etil asetat (kode T2&T3), dengan nilai yang sama yaitu  1,14  ±  0,00  mg  mL-1,  1,14  ±  0,01  mg
mL-1. Adapun sampel T10 memiliki aktivitas  antioksidan  terendah  dengan  IC50 sebesar  18,54  ±  0,71  mg  mL-1.  Sedangkan sampel  T7  dan  T8  tidak  diujikan,  karena rendemen  yang  didapat  tidak  mencukupi massa  minimal  untuk  diujikan.  Hasil  uji ditunjukkan pada Tabel 2.
Teripang adalah salah satu organisme laut  yang  dapat  dieksplorasi  sebagai  sumber potensial antioksidan. Pada penelitian ini, uji antioksidan dilakukan dengan metode DPPH. DPPH  menghasilkan  larutan  violet  dalam metanol  dan  intensitas  warnanya  akan berkurang  ketika  bereaksi  dengan  senyawa antioksidan.  Perubahan  warna  digunakan untuk  mengevaluasi  aktivitas  antioksidan dari  ekstrak  (Biswas et  al .,  2010;  Garcia et al., 2012).
Pada  uji  antioksidan  yang  dilakukan, tercatat bahwa aktivitas penghambatan DPPH semakin meningkat dengan peningkatan  konsentrasi  baik  untuk  standar maupun  ekstrak H.  Scabra, dalam  hal  ini standar  yang  digunakan  adalah  BHT  dan Quercetin.  Berdasarkan  nilai  IC50,  aktivitas antioksidan  dapat  digolongkan  menjadi  5
(lima)  golongan  dari  sangat  kuat  (IC50  <50 ppm), kuat (50 ppm<IC50>100 ppm), sedang (100  ppm<IC50>150  ppm),  lemah  (150 ppm<IC50>  200  ppm),  dan  sangat  lemah (IC50>200  ppm)  (Molyneux,  2004).  Hasil penelitian menunjukkan bahwa hanya standar (BHT  dan  Quercetin)  yang  termasuk  dalam kategori  antioksidan  sangat  kuat.  Adapun ekstrak yang diujikan masih tergolong sangat lemah,  sama  seperti  hasil  pada  penelitian sebelumnya (Ardiansyah, A, 2016; Nobsathian et al., 2017) dengan standar yang digunakan  berupa  asam  askorbat,  teripang jenis H.  scabra menunjukkan  aktivitas antioksidan  yang  lebih  rendah  daripada standar.    Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh pengujian aktivitas antioksidan masih dilakukan  terhadap  ekstrak  kasar.  Jika dilakukan  proses  pemisahan  lebih  lanjut hingga didapatkan senyawa murni maka akan memiliki  nilai  aktivitas  antioksidan  yang lebih  kuat  dibanding  ekstrak  kasar  seperti yang  dilakukan  oleh  Nobsathian et  al., 2017 dimana  aktivitas  antioksidan  dan  senyawa murni  memiliki  aktivitas  lebih  tinggi  dari ekstrak kasar bahkan standar.
Tabel 2. Hasil uji antioksidan dengan Metode DPPH.
No Jenis Kode Konsentrasi (mg/ml) % Inhibisi Persamaan Regresi IC50 (ppm) 1 Teripang Kering T1 2 1 0,5 0,2 0,1 16,44 ± 1,05 8,70 ± 0,37 4,88 ± 0,36 2,92 ± 0,35 1,42 ± 0,40 y=7.726x+1.0001 6340±380 2 Teripang Kering T2 2 1 0,5 0,2 0,1 76,21 ±0,34 51,80 ±0,09 30,56 ±0,26 15,13 ±0,44 8,94 ± 0,51 y=35.081x+9.8652 1140±0.00 3 Teripang Kering T3 2 1 0,5 0,2 0,1 75,30 ± 0,54 52,69 ± 0,28 31,80 ± 0,32 15,73 ± 0,33 9,05 ± 0,18 y=34,398x+10,772 1140±10
No Jenis Kode Konsentrasi (mg/ml) % Inhibisi Persamaan Regresi IC50 (ppm) 4 Teripang Kering T4 2 1 0,5 0,2 0,1 36,43 ± 0,12 21,21 ± 0,13 11,50 ± 0,31 6,09 ± 0,21 3,22 ± 0,75 y=17,302x+2.5406 2740±30 5 Teripang Kering T5 2 1 0,5 0,2 0,1 15,55 ± 0,45 8,73 ± 1,27 6,00 ± 0,66 4,09 ± 0,15 3,77 ± 0,68 y=6,2363x+2.8913 7550±110 6 Teripang Basah T6 2 1 0,5 0,2 0,1 6,98 ± 0,19 4,35 ± 0,37 2,59 ± 0,47 2,36 ± 0,21 0,87 ± 1,29 y=2.9558x+1,18842 16520±19 30 7 Teripang Basah T9 2 1 0,5 0,2 0,1 10,11 ± 0,46 6,19 ± 0,79 5,87 ± 0,46 3,90 ± 0,41 4,11 ± 0,22 y=3.1485x+3.6417 14720±13 00 8 Teripang Basah T10 2 1 0,5 0,2 0,1 6,53 ± 0,30 4,16 ± 0,09 2,63 ± 0,26 1,64 ± 0,20 1,76 ± 0,32 y=2,6245x+1,3486 18540±71 0 9 BHT 0,05 0,02 0,01 0,005 0,001 70,33 ± 0,54 41,04 ± 0,84 26,36 ± 0,66 15,56 ± 0,13 5,07 ± 0,84 y=1267x+9,8805 30±0,00 10 Quercetin 0,01 0,005 0,001 0,0005 0,00025 74,26 ± 0,98 39,54 ± 0,41 8,80 ± 0,78 5,23 ± 1,70 2,84 ± 0,07 y=7331,5x+1,5713 10±0,00
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh, teripang kering memiliki kandungan antioksidan  yang  lebih  tinggi  daripada teripang segar. Teripang kering jenis tertentu, terutama  yang  memiliki  organ  internal, memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  lebih tinggi daripada teripang segar. Sifat antioksidan  dari  ekstrak  alami  umumnya berasal  dari  adanya  beberapa  bioproduk termasuk senyawa fenolik, kolagen, polifenol
di bagian tubuh  yang kandungannya  berbeda antara  teripang  segar  dan  olahan  (Zhong et al., 2007). Sumber fenolik teripang dimungkinkan berasal dari  makanan teripang yang berupa fitoplankton dan partikel rumput laut yang kaya akan senyawa fenolik.
Senyawa fenolik telah terbukti berkorelasi  dengan  aktivitas  antioksidan  dari banyak  ekstrak.  Fenolik  di  dalam  spesies teripang  bertindak  untuk  mem-pertahankan
sifat  redoks.  Pada  tahun  2007,  Mamelona et al. melaporkan kandungan fenolik yang lebih tinggi  pada  ekstrak  air  daripada  yang terkandung  dalam  ekstrak  etil  asetat.  Selain itu,  Bordbar et  al. ,  2011  juga  menduga senyawa  yang  memiliki  aktivitas  sebagai antioksidan  di  teripang  mayoritas  adalah senyawa  hidrofilik.  Namun,  hasil  percobaan menunjukkan ekstrak dengan kepolaran lebih rendah  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang lebih  tinggi.  Hal  ini  dimungkinkan  dalam ekstrak tersebut kandungan zat yang memiliki  sifat  anti-oksidan  tertinggi  dapat berasal  dari  senyawa  lain  selain  fenol.  Akan tetapi,  jenis  zat  antioksidan  apa  saja  yang terdapat  dalam  ekstrak  tidak  diujikan  lebih lanjut.

## 3.2. Hasil Uji BSLT
Uji BSLT dengan  menggunakan telur udang ( Artemia salina Leach) selain digunakan  untuk  mempelajari  toksisitas sampel  secara  umum  juga  dapat  digunakan untuk  mengetahui  potensi  senyawa  sebagai antikanker, antibakteri, dan antijamur (Mayer et  al., 1982).  Hasil  uji  BSLT  dibuat berdasarkan hubungan antara Log C (konsentrasi)  dengan  nilai  probit  yang mewakili  persen  mortalitas  hewan  uji. Analisis  probit  merupakan  analisis  dengan tingkat  kepercayaan  95%,  nilai  probit didapatkan dari tabel probit.
Pada  percobaan  ini,  nilai  LC50  yang diperoleh  menunjukkan  angka  bervariasi seperti  yang  terlihat  pada  Tabel  3.  Nilai LC50  merupakan  konsentrasi  dimana  zat menyebabkan kematian 50% diperoleh dengan  memakai  persamaan  linier.  Nilai LC50  terendah  ditunjukkan  oleh  ekstrak dengan  pelarut  etanol  PA  100%  (kode  T4) dengan  108  ppm.  Suatu  ekstrak  dikatakan aktif  bila  nilai  LC50  <  1000  ppm (Fajarningsih et  al., 2006)  dan  tergolong sangat  aktif  terhadap  larva  udang Artemia salina Leach jika menunjukkan nilai LC50 ≤ 30  ppm.  National  Cancer  Institute  (NCI) Amerika yang menyatakan standar efektifitas komponen bioaktif untuk melawan sel kanker
adalah  ≤  30μg/mL  (Albuntana et  al., 2011). Namun,  pada  percobaan  ini  tidak  ditemukan nilai  LC50  ≤  30  ppm.  Dari  hasil  yang diperoleh menunjukkan bahwa semua ekstrak kasar  kecuali  ekstrak  dengan  pelarut  etil asetat  yang  memiliki  LC50<1000  ppm.  Hal ini  mengindikasikan  kecenderungan  bahwa semakin  polar  pelarut  yang  digunakan, aktivitas LC 50 semakin rendah.
Tabel 3. Hasil Uji BSLT ekstrak teripang berbagai jenis pelarut. No. Jenis Kode NilI LC50 (ppm) 1 Teripang Kering T1 384,00 2 Teripang Kering T2 38589,09 3 Teripang Kering T3 2413,11 4 Teripang Kering T4 233,23 5 Teripang Kering T5 438,74 6 Teripang Basah T6 108,00 7 Teripang Basah T7 - 8 Teripang Basah T8 - 9 Teripang Basah T9 289,21 10 Teripang Basah T10 278,28

## IV. KESIMPULAN
Rendemen ekstrak tertinggi dihasilkan oleh sampel kering yang diekstraksi  dengan  pelarut  etanol  PA  70% (kode  T5)  dengan  hasil  rendemen  sebesar 8,98%  sedangkan  untuk  sampel  basah rendemen  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak dengan  pelarut  etanol  PA  100%  (kode  T9) dengan hasil rendemen sebesar 2,57 %. Pada hasil uji antioksidan yang dilakukan, besaran IC50  sampel  terbaik  adalah  teripang  kering
yang  diekstraksi  menggunakan  etil  asetat (kode  T2&T3)  dengan  nilai  yang  hampir sama yaitu 1140 ± 0,00 ppm, 1140 ± 10 ppm. Namun, keduanya masih termasuk antioksidan  kategori  golongan  sangat  lemah. Pada  hasil  uji  BSLT,  LC50  terendah ditunjukkan  oleh  ekstrak  dengan  pelarut metanol  PA  100%  (kode  T4),  dengan  nilai sebesar 108 ppm. Pada penelitian ini teripang kering  memiliki value yang  lebih  tinggi daripada teripang basah, hal tersebut ditunjukkan  dari  hasil  rendemen  ekstrak, hasil uji antioksidan dan hasil uji BSLT yang didapatkan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih yang  sebesar-besarnya  kepada  Kementerian Riset,  Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi Republik  Indonesia  yang  telah  mendanai kegiatan penelitian ini sampai selesai melalui program Insinas.

## DAFTAR PUSTAKA
Albuntana.  A.,  Yasman,  dan  W.  Wardhana. 2011.  Uji  toksisitas  ekstrak  empat jenis teripang suku Holothuriidae dari Kepulauan Penjaliran Timur, Kepulauan Seribu, Jakarta menggunakan  brine  shrimp  lethality test  (BSLT). J.  Ilmu  dan  Teknologi
Kelautan Tropis , 3(1): 65-72. https://doi.org/10.29244/jitkt.v3i1.783
5
Ardiansyah,  A.  2016.    Ekstraksi  dan formulasi  suspensi  oral  teripang
Holothuria  scabra sebagai  sumber antioksidan. Oseanologi dan Limnologi  di  Indonesia ,  1(1):  29–37.
https://doi.org/10.14203/oldi.2016.v1i
1.42
Biswas,  M.,  P.K.  Haldar,  and  A.K.  Ghosh. 2010.  Antioxidant  and  free-radical- scavenging effects of fruits of Dregea volubilis . J.  of  Natural  Science, Biology  and  Medicine ,  1(1):  29-34.
https://doi.org/10.4103/0976- 9668.71670
Bordbar,  S.,  F.  Anwar,  and  N.  Saari.  2011. High-value components and bioactives  from  sea  cucumbers  for functional foods-a  review. Mar. Drugs , 9(10): 1761–1805. https://doi.org/10.3390/md9101761 Choo. P.S. 2008. Population status, fisheries, and  trade  of  sea  cucumbers  in  Asia. In:  V.  Toral-Granda.,  A.  Lovatelli, and  M.  Vasconcellos  (ed.).  Sea cucumbers:  A  global  review  of fisheries  and  trade.  FAO  Fisheries and  Aquaculture  Technical  Paper.
Rome. 81–118 pp.
Esmat,  A.Y.,  M.M.  Said,  A.A.  Soliman, K.S.H.  El-Masry,  and  E.A.  Badiea. 2012. The bioactive compound, antioxidant
potential and
hepatoprotective activity of sea cucumber  ( Holothuria  atra )  against thioacetamide  intoxication  in  rats.
Nutrion , 29(1): 258-267.
https://doi.org/10.1016/j.nut.2012.06. 004 Fajarningsih,  N.D.,  H.I.  Januar,  M.  Nursid, dan  T.  Wikanta.  2006.  Potensi antitumor ekstrak spons Crella papilata asal  Taman  Nasional  Laut Kepulauan Seribu. J. Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan , 1(1): 35-41. http://dx.doi.org/10.15578/jpbkp.v1i1.
229
FDA.  2017.  Q3C-Tables  and  list  guidance for  industry.  U.S.  Department  of Health and Human Services Food and Drug Administration; Center for Drug Evaluation  and  Research  (CDER). Center  for  Biologics  Evaluation  and Research (CBER). https://www.fda.gov/regulatory- information/search-fda-guidance- documents/q3c-tables-and-list-rev-3. Garcia, E.J., T.L.C. Oldoni, S.M. de Alencar, A. Reis, A.D. Loguercio, and R.H.M. Grande. 2012. Antioxidant activity by
DPPH  assay  of  potential  solutions  to be  applied  on  bleached  teeth. Braz Dent J. , 23(1): 22-27. https://doi.org/10.1590/s0103- 64402012000100004 Karnila,  R.  2011.  Pemanfaatan  komponen bioaktif teripang dalam bidang kesehatan.  Perpustakaan  Univ.  Riau, FAPERIKA UR.
Kulbacka,  J.,  J.  Saczko,  A.  Chwialkowska,
A.  Choromańska,  and  N.  Skołucka.
2012.  Apoptosis,  free  radicals  and antioxidant  defense  in  antitumor therapy. In : El-Missiry. (ed.). Antioxidant enzyme.
http://doi.org/10.5772/50357
Lobo,  V.,  A.  Patil,  A.  Phatak,  and  N.
Chandra. 2010. Free radicals, antioxidants  and  functional  foods: Impact on human health. Pharmacognosy  Reviews,  4(8):  118-
126. http://doi.org/10.4103/0973- 7847.70902
Mamelona,  J.,  É.  Pelletier,  K.  Girard- Lalancette,  J.  Legault,  S.  Karboune,
and S. Kermasha. 2007.
Quantification  of  phenolic  contents and  antioxidant  capacity  of  Atlantic sea  cucumber, Cucumaria  frondosa.
Food  Chemistry ,  104(3):  1040-1047. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.20 07.01.016
Martoyo,  J.,  N.  Aji,  dan  T.  Winanto.  2006. Budidaya teripang. Penebar Swadaya. Jakarta. 69 pp.
Molyneux,  P.  2004.  The  use  of  stable  free radical diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH)  for  estimating  antioxidant. Songklanakarin  J.  of  Science  and Technology , 26(2): 211-219. http://www.thaiscience.info/journals/ Article/SONG/10462423.pdf Nobsathian,  S.,  P.  Tuchinda,  P.  Sobhon,  Y. Tinikul,  J.  Poljaroen,  R.  Tinikul,  M. Sroyraya,  T.  Poomton,  and  S. Chaichotranunt. 2017. An antioxidant activity  of  the  whole  body  of
Holothuria  scabra. Chemical  and Biological
Technologies in Agriculture , 4(4): 1-5. https://doi.org/10.1186/s40538-017-
0087-7
Pangestuti,  R., T.  Murniasih,  M.Y.  Putra,  A. Rasyid, J.T. Wibowo, A. Ardiansyah, and  F.  Untari.  2016.  Free  radical scavenging  activity  of  selected  sea cucumber  species  from  Mataram- Lombok,  Indonesia. J.  Teknologi , 78(4-2): 179–185.
https://doi.org/10.11113/jt.v78.8202
Pangestuti,  R.  and  Z.  Arifin.    2018.
Medicinal  and  health  benefit  effects of  functional  sea  cucumbers. J.  of
Traditional and Complementary Medicine , 8(3): 341-351. https://doi.org/10.1016/j.jtcme.2017.0 6.007
Purcell,  S.W.,  Y.  Samyn,  and  C.  Conand. 2012.  Commercially  important  sea cucumbers of the world. FAO Species Catalogue  for  Fishery  Purposes. Rome. 150 pp.
Ravinesh,  R.,  F.  Kim,  V.C.  Roveena,  N.S. Milika, and C.S. Paul. 2014.
Harvesting  and  processing  of tropical sea cucumbers in Fiji. As. J. Food Ag- Ind ., 7(01): 035-046.
Setyastuti,  A.  and  P.  Purwati.  2015.  Species list  of  Indonesian  trepang. SPC Beche-de-mer  Information  Bulletin , 35: 19-25.
Setyastuti,  A.,  I.  Wirawati,  S.  Permadi,  dan
B. Vimono. 2019. Teripang Indonesia,  jenis,  sebaran,  dan  status nilai  ekonomi.  PT.  Media  Sains Nasional, Bogor. 75 pp.
Siahaan,  E.A.,  R.  Pangestuti,  H.  Munandar, and  S.K.  Kim.  2017.  Cosmeceuticals properties of sea cucumbers: prospects  and  trends. Cosmetics , 5(3): 1-12.
https://doi.org/10.3390/cosmetics403 0026
Standar  Nasional  Indonesia  (SNI).  2009. Standar  Nasional  Indonesia  2732.2-
2009.  Teripang  kering-Bagian  2: Persyaratan  Bahan  Baku.  Jakarta:
Dewan Standarisasi Nasional.
Sroyraya,  M.,  P.J.  Hanna,  T.  Siangeham,  B. Tinikul, P. Jatiujan, T. Poomtong, and P. Sobhon. 2017. Nutritional components  of  the  sea  cucumber Holothuria  scabra .  Functional  Food in Health and Disease, 7(3): 168-181. https://ffhdj.com/index.php/ffhd/articl e/download/303/588 Wen,  J.,  C.  Hu,  and  S.  Fan.  2010.  Chemical composition and nutritional quality of sea  cucumbers. J.  Science  of  Food
and  Agriculture ,  90(14):  2469–2474. https://doi.org/10.1002/jsfa.4108 Zhong, Y., M.A. Khan, and F. Shahidi. 2007. Compositional characteristics and antioxidant  properties  of  fresh  and processed  sea  cucumber  ( Cucumaria frondosa ). J. Agriculture Food Chem , 55(4): 1188-1192. http://dx.doi.org/10.1021/jf063085h
Received   : 20 December 2018 Reviewed  : 05 September 2019 Accepted  : 25 December 2019