Penulis Ni Putu Ermi Hikmawanti 1,2 *, Hayati 1,2 , dan Yeni Andriyani 2
Afiliasi
1 Unit Bidang Ilmu Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. DR. HAMKA, Jalan Delima II/IV, Jakarta Timur, DKI Jakarta, 13460.
2 Fakultas  Farmasi  dan  Sains,  Universitas  Muhammadiyah  Prof.  DR.  HAMKA,  Jalan  Delima  II/IV, Jakarta Timur, DKI Jakarta, 13460 .
Kata Kunci  Flavonoid
 Katuk
 Ketinggian
 Sauropus androgynus (L.) Merr
Keywords  Altitude
 Flavonoids
 Katuk
 Sauropus androgynus (L.) Merr
Diterima 2 September 2020
Direvisi 30 Maret 2021
Disetujui 31 Mei 2021
*Penulis Koresponding Ni Putu Ermi Hikmawanti 1 email: ermy0907@uhamka.ac.id

## ABSTRAK
Sauropus androgynus (L.) Merr (Phyllanthaceae), yang dikenal juga sebagai katuk di Indonesia,  merupakan  tanaman  yang  tumbuh  di  iklim  tropis.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  kadar  flavonoid  total  ekstrak  hidro-etanolik  daun  katuk  dari  tiga daerah dengan ketinggian tempat tumbuh yang berbeda. Maserasi daun katuk kering dilakukan  menggunakan  hidro-etanolik  (campuran  etanol:H 2 O  (7:3,  v/v))  sebagai pelarut  pengekstraksi  pada  suhu  kamar.  Kadar  flavonoid  ekstrak  ditetapkan  dengan metode  kolorimetri  menggunakan  pereaksi  AlCl 3 .  Kuersetin  digunakan  sebagai pembanding.  Pengukuran  absorbansi  pada  panjang  gelombang  maksimal  434,50  nm dilakukan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Visibel.  Kadar  flavonoid  total  ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  yang  tumbuh  di  dataran  rendah  (Bogor),  dataran  sedang (Sleman)  dan  dataran  tinggi  (Bandung)  secara  berturut-turut  adalah  8,56  0,63 mgQE/g,  4,67  0,30  mgQE/g  dan  9,72  0,24  mgQE/g.  Dengan  demikian,  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak  hidro- etanolik daun katuk yang diperoleh dari ketinggian tempat tumbuh yang berbeda.

## ABSTRACT
Sauropus androgynus (L.) Merr (Phyllanthaceae), also known as katuk in Indonesia, is  a  plant  that  grows  in  tropical  climates.  The  study  aimed  to  determine  the  total flavonoid  levels  of  hydroethanolic  extract  of  katuk  leaves  from  three  regions  with different  altitudes.  Dried  katuk  leaves  were  macerated  using  hydroethanolic  (the mixture  of  ethanol:H 2 O  (7:3,  v/v))  as  solvent  extraction  at  room  temperature. Determination of flavonoid levels was carried out by the colorimetry method using AlCl 3 reagent. Quercetin was used as a reference. A UV-Visible spectrophotometer measured the absorbance at the maximum wavelength of 434.50 nm. The total flavonoids level of hydroethanolic  extract  of  katuk  leaves  from  a  different  region  with  low-altitude (Bogor),  medium-altitude  (Sleman),  and  high-altitude  (Bandung)  are  8.56±0.63 mgQE/g,  4.67±0.30  mgQE/g,  and  9.72±0.24  mgQE/g,  respectively.  Thus,  it  can  be concluded that there are differences in total flavonoid levels of hydroethanolic extract of katuk leaves from three regions with different altitudes.
Kadar Flavonoid Total pada Ekstrak Hidro-etanolik Daun Sauropus androgynus (L.) Merr dari Tiga Daerah dengan Ketinggian yang Berbeda
Total Flavonoid Content in Hydro-ethanolic Extract of Sauropus androgynus (L.) Merr Leaves from Three Regions with Different Altitude

## PENDAHULUAN
Sauropus  androgynus (L.)  Merr.  atau  katuk (Phyllanthaceae)  merupakan  tanaman  perdu  yang tumbuh di daerah yang hangat dan lembap (Direktorat Obat  Asli  Indonesia,  2008).  Katuk  tersebar  di  daerah India, Cina Selatan, Malaysia, maupun Indonesia. Katuk telah  tumbuh  pada  ketinggian  yang  lebih  rendah, namun  juga  tetap  dapat  tumbuh  hingga  ketinggian 1300  mdpl  seperti  di  Malaysia  maupun  Indonesia. Katuk  merupakan  salah  satu  sayuran  popular  di  Asia tenggara.  Di  Indonesia,  daun  katuk  umum  digunakan untuk  meningkatkan  dan  melancarkan  produksi  air susu  ibu  (ASI).  Daun  katuk  juga  dilaporkan  digunakan untuk  meredakan  batuk,  tonikum,  penurun  panas, pewarna makanan (Petrus, 2013).
Studi fitokimia daun katuk menunjukan keberadaan senyawa  dari  golongan  alkaloid,  protein,  asam  amino, tanin,  flavonoid,  karbohidrat,  sterol  (Agrawal et  al. , 2014).  Daun  katuk  mengandung  senyawa  polifenol seperti fenolik, flavonoid, antosianin dan tanin (Petrus, 2013).  Polifenol  memberikan  efek  perlindungan  yang penting pada kondisi karsinogenik, gangguan kardiovaskular,  fungsi  memori  dan  kognitif  serta disfungsi neurologis seperti Alzheimer. Aksi antioksidan dari senyawaan fenolik disebabkan oleh kemampuannya dalam meredam radikal bebas (Petrus, 2013).  Flavonoid  merupakan  metabolit  sekunder  yang memiliki  struktur  inti  dua  cincin  benzena  yang dihubungkan  oleh  tiga  atom  karbon  (C)  dengan  ikatan oksigen  heterosiklik.  Kelarutan  flavonoid  umumnya dalam  pelarut  polar,  seperti  etanol  absolut  ataupun hidro-etanolik  (Hanani,  2015).  Isolat  flavonoid  telah ditemukan  pada  ekstrak  metanol  daun  katuk  berupa senyawa  aglikon  flavonol  dan  flavon  (Djamil &  Zaidan, 2017).  Petrus  (2013)  melaporkan  bahwa  daun  katuk kering mengandung kadar total flavonoid sebesar 1.040 mgRE/100 g. Kadar flavonoid total pada ekstrak etanol berair (50%) daun katuk dilaporkan sebesar 11,18 ±0,38 mgQE/g (Hikmawanti et al. , 2021).
Mutu  suatu  ekstrak  tumbuhan  dapat  dipengaruhi oleh  beberapa  faktor  seperti  lokasi  tumbuh, pemanenan,  penyimpanan,  dan  umur  serta  bagian tumbuhan  yang  digunakan.  Faktor-faktor  lingkungan pada  lokasi  tumbuh,  meliputi  nutrisi  tanah,  atmosfer, cuaca, suhu, kelembapan cahaya matahari, ketersediaan  air,  senyawa  organik  dan  senyawa anorganik berpengaruh terhadap beragamnya produksi kandungan  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  oleh suatu  tanaman  (Departemen  Kesehatan  RI,  2000; Mukherjee,  2019).  Misalnya,  unsur  lingkungan  yang mempengaruhi  kadar  nikotin  pada  daun  tembakau
adalah  ketinggian  tempat,  temperatur  udara,  dan kelembapan  relatif  (Nurnasari  &  Djumali,  2010). Sedangkan  menurut  (Dalimoenthe et  al. ,  2016), produktivitas  tanaman  teh  yang  ditanam  pada ketinggian  yang  berbeda  dipengaruhi  oleh  intensitas curah hujan tahunan.
Tanaman  katuk  budidaya  dapat  diperoleh  dari daerah  dengan  ketinggian  tempat  tumbuh  yang berbeda-beda.  Melalui  penelitian  ini  dapat  diketahui adanya  pengaruh  ketinggian  tempat  tumbuh  katuk terhadap  kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak hidroetanolik  dari  daun  katuk.  Kadar  flavonoid  pada ekstrak  ditentukan  secara  kolorimetri  dengan  alat spektrofotometer  UV-Vis.  Hasil  kadarnya  dinyatakan sebagai  mg  flavonoid  yang  setara  dengan  kuersetin sebagai pembanding dalam tiap g ekstrak.

## METODE

## 1. Persiapan Sampel
Daun  katuk  dipanen  saat  tanaman  berumur  3-6 bulan  pada  pagi  hari.  Daun  katuk  diperoleh  dari  tiga daerah dengan ketinggian yang berbeda-beda yaitu: (1) Sampel dataran rendah dari Kebun Unit Konservasi dan Budidaya  Biofarmaka,  Pusat  Studi  Biofarmaka  LPPM IPB,  Kampus  IPB  Darmaga,  Bogor  (ketinggian  =  142,60 m  dpl);  (2)  Sampel  dataran  sedang  dari  CV.  Merapi Herbal  Farma,  Hargobinagun  Pakem,  Kabupaten Sleman  (ketinggian  =  900  m  dpl),  dan  (3)  Sampel dataran  tinggi  dari  Kebun  Percobaan  Manoko,  Balai Penelitian  Tanaman  rempah  dan  Obat,  Kabupaten Bandung  (ketinggian  =  1200  m  dpl).  Klasifikasi ketinggian  tempat  tumbuh  tiap  tanaman  berbeda- beda. Tanaman katuk dapat tumbuh di dataran rendah sampai  tinggi  (Pusat  Penelitian  dan  Pengembangan Holtikultura,  2013).  Klasifikasi  ketinggian  tempat tumbuh  pada  penelitian  ini  mengikuti  pedoman ketinggian  tempat  tumbuh  penanaman  teh  di Indonesia  yaitu:  dataran  rendah  dengan  ketinggian <800  mdpl,  dataran  sedang  dengan  ketinggian  800- 1200 mdpl dan dataran tinggi dengan ketinggian >1200 mdpl (Dalimoenthe et al. , 2016).
Tanaman  katuk  dideterminasi  di  Laboratorium “Herbarium Bogoriense”, Bidang Botani Pusat Penelitian  Biologi,  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan Indonesia  (LIPI),  Bogor.  Daun  katuk  yang  diperoleh dipisahkan dari batangnya dan dibersihkan dengan cara dicuci  dengan  air  mengalir.  Daun  dikeringkan  di  udara terbuka  dan  terhindar  dari  sinar  matahari  langsung. Simplisia  dihaluskan  dan  serbuknya  diayak  dengan ayakan  mesh  nomor  40  kemudian  ditimbang  dan dicatat hasilnya.

## 2. Proses Ekstraksi Daun Katuk
Serbuk  simplisia  daun  katuk  (100,0  g)  diekstraksi dengan  cara  dingin  menggunakan  pelarut  hidro- etanolik  yaitu  campuran  etanol  (Merck,  Darmstadt, Germany)  dan  H 2 O  dengan  rasio  7:3  (v/v).  Proses perendaman bahan berlangsung selama 24 jam sambil sesekali  diaduk.  Filtrat  disaring  menggunakan  kertas saring. Residunya diremaserasi kembali dengan pelarut sama  yang  baru.  Remaserasi  diakhiri  sampai  dengan filtrat  terakhir  memberikan  hasil  negatif  terhadap keberadaan flavonoid dengan identifikasi menggunakan  uji  Shinoda.  Filtrat  yang  telah dikumpulkan  kemudian  dievaporasi  menggunakan vacuum  rotary  evaporator N-1200BS  Series  (EYELA, Shanghai,  Cina)  dan  dilanjutkan  menggunakan waterbath pada  suhu  60°C  hingga  diperoleh  ekstrak kental.  Ekstrak  kental  hidro-etanolik  selanjutnya dihitung  persentase  rendemennya  terhadap  simplisia yang diekstraksi.

## 3. Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak
Parameter karakteristik ekstrak hidro-etanolik daun katuk  yang  ditetapkan  meliputi:  organoleptis,  susut pengeringan,  kadar  air  dengan  metode  distilasi  dan kadar abu yang dilakukan sesuai dengan prosedur yang tertulis  dalam  Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  1 (Kementerian Kesehatan RI, 2008).

## 4. Penapisan Fitokimia
Pengujian  ini  dilakukan  untuk  mengidentifikasi secara  kualitatif  keberadaan  golongan  metabolit sekunder  menggunakan  pereaksi  pewarna  sederhana ataupun ciri fisik lainnya (Hanani, 2015). Secara singkat prosedurnya meliputi: (1) Identifikasi alkaloid dilakukan menggunakan  pereaksi  Dragendorff,  Mayer,  dan Bouchardat.  Masing-masing  warna  endapan  yang terbentuk  dicatat.  (2)  Identifikasi  flavonoid  dilakukan menggunakan  HCl  pekat  dan  ditambahkan  logam  Mg. Adanya  flavonoid  ditandai  dengan  terbentuknya larutan  berwarna  merah. (3)  Identifikasi  fenolik dilakukan menggunakan pereaksi FeCl 3 5%. Keberadaan fenolik ditandai dengan terbentuknya larutan berwarna biru  kehitaman.  (4) Identifikasi  tannin  dilakukan menggunakan  pereaksi  gelatin  10%.  Adanya  tanin ditandai  dengan  adanya  endapan  berwarna  putih.  (5) Identifikasi  saponin  dilakukan  dengan  mengocok  kuat larutan sampel yang telah dilarutkan dengan 10 ml air panas  selama  10  detik.  Adanya  saponin  ditandai dengan  buih  yang  terbentuk  setinggi  1  cm  sampai  10 cm selama tidak kurang dari 10 menit. Buih yang stabil setelah  penambahan  HCl  2N  menunjukan  keberadaan saponin pada larutan uji. (6) Identifikasi triterpenoid/steroid  dilakukan  menggunakan pereaksi
asam  asetat  anhidrat  dan  H 2 SO 4 pekat  ditambahkan pada  larutan  uji  ekstrak.  Adanya  triterpenoid ditunjukan  dengan  terbentuknya  larutan  berwarna merah atau ungu.

## 5. Penentuan Kadar Flavonoid Total
Larutan  induk  kuersetin  (Sigma-Aldrich,  St.  Louis, USA)  dibuat  dengan  konsentrasi  1000  ppm  dalam etanol 95% (p.a). Larutan kuersetin (6 ppm) digunakan untuk  menentukan  panjang  gelombang  maksimum (pada  kisaran  400-800  nm  dan  operating  time  (0-60 menit).  Larutan  kuersetin  dengan  variasi  konsentrasi, yaitu  4-8  ppm  digunakan  pada  penentuan  kurva  baku kuersetin. Ekstrak hidro-etanolik daun katuk (500 ppm) dalam  etanol  95%  (p.a)  digunakan  sebagai  larutan  uji pada  penentuan  kadar  flavonoid.  Pengujian  ini dilakukan dengan mencampurkan larutan uji dengan 3 mL etanol 96%, 0,2 mL AlCl 3 10%, 0,2 mL natrium asetat 1  M  dan  aquadest  sampai  volume  10  mL,  kemudian dikocok  dan  diinkubasi  selama  40  menit.  Larutan dibaca absorbansinya pada panjang gelombang 434,50 nm menggunakan spektrofotometer UV-Visible seri UV- 1601  (Shimadzu,  Kyoto,  Jepang).  Kadar  flavonoid  total dinyatakan dalam satuan mgQE/g ekstrak dan dihitung dengan  cara  mengalikan  konsentrasi  flavonoid  dalam larutan  uji  (ppm)  dengan  faktor  pengenceran  dan volume  larutan  uji  (mL)  dan  kemudian  dibagi  dengan bobot ekstrak (g) (Chang et al. , 2002)

## HASIL & PEMBAHASAN

## 1. Hasil Ekstraksi Daun Katuk
Ekstraksi  merupakan  pemisahan  yang  ditujukan untuk  menarik  senyawa  aktif  dari  jaringan  tanaman menggunakan  pelarut  yang  selektif.  Keberhasilan proses  ekstraksi  bergantung  pada  pemilihan  pelarut. Pelarut  dengan  kriteria  seperti  memiliki  toksisitas rendah,  mudah  diuapkan,  bersifat  mengawetkan merupakan  parameter  yang  perlu  diperhatikan  untuk menghasilkan  ekstrak  dengan  mutu  yang  baik. Pemilihan pelarut juga berpengaruh terhadap perolehan  senyawa  yang  diekstraksi.  Pelarut  etanol memiliki  kemampuan  yang  tinggi  dalam  menarik senyawa  polifenol  dibandingkan  air.  Pelarut  etanol terutama hidro-etanolik (etanol-air) mudah berpenetrasi  pada  membran  sel  untuk  mengekstrak bahan  intraseluler  dari  material  tanaman.  Pelarut  ini dinilai  lebih  efisien  dalam  merusak  dinding  sel  dan menyebabkan  polifenol  (termasuk  flavonoid)  keluar dari  dalam  sel  (Tiwari et  al. ,  2011).  Hikmawanti et  al. (2021)    melaporkan  bahwa  kadar  flavonoid  total  pada ekstrak  daun  katuk  paling  baik  diperoleh  dari  pelarut etanol  50%  dibandingkan  dengan  etanol  70%  (8.87  ±
0.14  mgQE/g)  dan  etanol  96%  (5.68  ±  0.34  mgQE/g). Namun,  proses  evaporasi  pelarut  pada  ekstrak  etanol 50% memiliki tingkat kesulitan yang tinggi dibandingkan dengan pada etanol 70% dan etanol 96% karena  banyaknya  kandungan  air  pada  pelarut  yang akan  berpengaruh  terhadap  efisiensi  ekstraksi  terkait besarnya  energi  dan  waktu  yang  dibutuhkan  untuk memperoleh  ekstrak  tersebut.  Hasil  karakteristik ekstrak hidro-etanolik daun katuk terdapat pada Tabel 1.
Berdasarkan Tabel  1 ,  perolehan  rendemen  ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  yang  dihasilkan  dari  ketiga daerah  berada  direntang  25-36%.  Rendemen  ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  tertinggi  dihasilkan  dari Bandung  (daerah  dataran  tinggi).  Berdasarkan (Anonim,  2010),  dinyatakan  bahwa  rendemen  ekstrak katuk  menggunakan  pelarut  etanol  96%  tidak  kurang dari 9,2%. Rendemen menunjukan gambaran persentase  senyawa  yang  dapat  larut  dari  sejumlah bahan  simplisia  yang  diekstraksi  ke  dalam  pelarut  dan dengan  metode  ekstraksi  yang  digunakan.  Hasil rendemen  yang  tinggi  menggambarkan  banyaknya senyawa  kimia  yang  dapat  terlarut  dalam  pelarut pengekstraksinya.  Perbedaan  rendemen  ekstrak  hidro- etanolik  daun  katuk  dari  ketiga  daerah  menunjukan adanya  kaitan  antara  produksi  metabolit  sekunder tanaman  dengan  ketinggian  tempat  tumbuhnya sebagai  bagian  dari  faktor  lingkungan.  Daerah  dataran tinggi  kemungkinan  memiliki  kadar  material  organik, nutrisi  atom  nitrogen (N),  dan  air  pada tanahnya  yang lebih  tinggi  dari  daerah  dataran  tengah  dan  sedang (Yuliani et al. , 2019). Adanya interaksi antara tanaman dengan  perubahan  lingkungan  akan  menyebabkan produksi  metabolit  yang  bervariasi  untuk  tujuan pertahanan  diri  tanaman  itu  sendiri  (Mazid et  al. , 2011). Nilai kadar air ketiga ekstrak hidro-etanolik daun katuk  yang  dihasilkan  berkisar  antara  6,37-7,26%.  Hal ini menunjukan gambaran kandungan air dalam ekstrak yang diperoleh telah memenuhi persyaratan mutu yang baik,  yaitu  <10%.  Semakin  kecil  kadar  airnya  akan berdampak  pada  terjaganya  kualitas  ekstrak  dan menyebabkan  makin  lamanya  masa  simpan  ekstrak. Sementara  itu,  kandungan  abu  pada  ketiga  ekstrak hidro-etanolik daun katuk diperoleh pada rentang 1,44- 3,63%.  Kadar  abu  menggambarkan  banyaknya  mineral baik  yang  berasal  dari  dalam  tanaman  itu  sendiri maupun dari luar tanaman yang terdapat pada ekstrak (Departemen  Kesehatan  RI,  2000).  Sedangkan  susut pengeringan  memberikan  gambaran  batas  maksimal banyaknya  senyawa  yang  menguap  selama  proses
pemanasan  pada  suhu  105  C.  Hasil  pada Tabel  1 menunjukan  bahwa  nilai  susut  pengeringan  ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  dari  ketiga  daerah  berada pada  kisaran  8,5-8,9%.  Nilai  susut  pengeringan menggambarkan  hilangnya  air  dan  senyawa  volatil pada ekstrak selama proses pemanasan pada suhu 100- 105  C  (WHO,  1998)  yang  berkaitan  dengan  bobot konstan dari ekstrak kental yang diperoleh (digambarkan oleh nilai rendemen ekstrak).

## 2. Penapisan fitokimia
Hasil  skrining  fitokimia  pada Tabel  2 menunjukan bahwa  ketiga  ekstrak  memiliki  kandungan  kimia  yang sama  yaitu  mengandung  alkaloid,  fenolik,  flavonoid, tanin,  saponin  dan  triterpenoid.  Tiwari et  al. ,  (2011) menyatakan bahwa etanol sebagai pelarut pengekstraksi mampu menarik metabolit seperti tanin, poliasetat, flavonol, terpenoid, steroid dan alkaloid.

## 3. Kadar Flavonoid Total
Analisis  kuantitatif  senyawa  flavonoid  total  ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  dilakukan  dengan  metode kolorimetri.  Panjang  gelombang  maksimal  kuersetin yang  diperoleh  adalah  434,50  nm  dengan  nilai absorbansi sebesar 0,4857. Berdasarkan hasil pengukuran,  panjang  gelombang  maksimum  tersebut masih  dalam  rentang  400-800  nm(Chang et  al. ,  2002). Flavonoid  merupakan  suatu  polifenol  yang  memiliki sistem  cincin  aromatis  terkonjugasi  sehingga  memiliki serapan  pada  panjang  gelombang  sinar  UV.  Kuersetin merupakan salah satu kelompok flavonol dengan gugus hidroksil yang tersubstitusi pada karbon nomor 5 dan 7 pada  cincin  aromatis  A  serta    karbon  nomor  3  pada  C heterosiklik,  dan  gugus  keto  yang  tersubstitusi  pada karbon  nomor  4  pada  cincin  C  heterosiklik.  Hidroksil pada  karbon  nomor  3  atau  5  serta  keto  pada  posisi karbon  nomor  4  inilah  yang  dengan  AlCl 3 akan membentuk  kompleks  yang  stabil  terhadap  asam ( Gambar  1 ).  Hasilnya  timbul  pergeseran  batokromik (panjang  gelombang  ke  arah  sinar  tampak/ visible ) akibat  dari  semua  kompleks  yang  terbentuk  (Hanani, 2015).  Pembentukan  kompleks  ini  ditandai  dengan terbentuknya larutan yang berwarna kuning cerah.
Kurva  baku  kuersetin  dibuat  dengan  memplotkan seri konsentrasi larutan kuersetin serapannya ( Gambar 2 .)  yang  kemudian  menghasilkan  persamaan  garis linear,  yaitu:  y  =  0,0334x  +  0,2578  dengan  nilai R 2 =0,9981.  Nilai  R 2 mendekati  angka  1  menunjukan bahwa  persamaan  garis  tersebut  linear.  Kadar flavonoid  kemudian  ditetapkan  berdasarkan  persaman garis tersebut. Perolehan kadar flavonoid total ekstrak
Tabel 1. Karakteristik Ekstrak Hidro-etanolik Daun Katuk dari Tiga Daerah yang Berbeda
Parameter Ekstrak Hidro-etanolik Daun katuk Bogor Sleman Bandung Bobot Ekstrak (g) 35,17±0,31 25,05±0,14 36,13±0,20 Rendemen (%) 35,17±0,31 25,05±0,14 36,13±0,20 Kadar Air (%) 6,37± 0,10 7,26± 0,08 6,70± 0,09 Kadar Abu (%) 1,44± 0,13 2,91± 0,11 3,63± 0,10 Susut Pengeringan (%) 8,59 ± 0,10 8,21 ± 0,03 8,93± 0,05
Keterangan: Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan. Data yang ditampilkan merupakan rata-rata ± SD.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Hidro-etanolik Daun Katuk dari Tiga Daerah yang Berbeda
Senyawa Ekstrak Hidro-etanolik Daun Katuk Bogor Sleman Bandung Alkaloid + + + Fenolik + + + Flavonoid + + + Tanin + + + Saponin + + + Triterpenoid + + +
Keterangan: (+) = mengandung senyawa yang diidentifikasi
Gambar 1. Reaksi kompleks kuersetin dengan aluminium klorida
Gambar 2. Kurva baku kuersetin
y = 0,0334x + 0,2578 R² = 0,9981 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0 2 4 6 8 10 A b so rb an si
Konsentrasi (ppm)
hidro-etanolik  daun  katuk  dari  masing-masing  daerah dengan  ketinggian  tempat  tumbuh  yang  berbeda berada  pada  kisaran  4,67-9,72  mgQE/g  ekstrak  ( Tabel 3. )  atau  sekitar  0,467-0,972%.  Menurut  Departemen Kesehatan  RI  (2010),  kadar  flavonoid  total  ekstrak etanol  daun  katuk  tidak  kurang  dari  0,5%.  Melalui penelitian  ini,  dapat  dinyatakan  bahwa  untuk menghasilkan  kadar  flavonoid  yang  tinggi  dari  daun katuk  maka  sebaiknya  tanaman  ini  ditanam  pada daerah dataran tinggi.
Ketinggian  tempat  tumbuh  dapat  memberikan pengaruh yang berbeda-beda terhadap kadar metabolit tiap  tanaman.  Beberapa  studi  telah  dilaporkan  terkait hal  ini.  Kadar  fenolik  dan  flavonoid  paling  tinggi  pada Elephantopus  scaber dan Ageratum  cony dari Asteraceae  dihasilkan  dari  daerah  dataran  sedang sebagai  tempat  tumbuh  (Yuliani et  al. ,  2019). Ketinggian tempat tumbuh juga berpengaruh terhadap produksi  senyawa  antioksidan  (fenolik  dan  flavonoid) dari akar Coleus forskohlii . Berdasarkan hasil penelitian Rana et al. , (2020) menunjukan bahwa daerah dataran tinggi  memberikan  lingkungan  yang  baik  untuk pertumbuhan  tanaman  ini  dengan  kadar  senyawa fenolik dan flavonoid yang tinggi sehingga berpengaruh pula  pada  aktivitas  antioksidannya.  Sebenarnya pengaruh  variasi  ketinggian  tempat  tumbuh  terhadap profil  metabolit  sekunder  dalam  tanaman  belum sepenuhnya  dipelajari  penyebabnya.  Hal  ini  karena variasi  dari  banyaknya  faktor  yang  berpengaruh  dari ketinggian  tempat  tumbuh  seperti  curah  hujan,  suhu rata-rata,  kecepatan  angin,  intensitas  radiasi  dan  jenis tanah  (Cechibnel-Filho,  2012)  termasuk  tekstur  tanah, nutrisi,  pH,  kandungan  atom  karbon  (C)  dan  nitrogen (N),  serta  mineral  lain  seperti  kalium  (K),  sulfur  (S), magnesium (Mg) dan besi (Fe). Kondisi tanah yang baik akan menghasilkan pertumbuhan yang optimal dengan kadar  metabolit  sekunder  yang  diharapkan  (Yuliani et al. , 2019).

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dapat  disimpulkan  bahwa  ada pengaruh perbedaan kadar flavonoid total dari ekstrak hidro-etanolik  daun  katuk  yang  tumbuh  di  daerah dengan  ketinggian  tempat  tumbuh  yang  berbeda.
Untuk  tujuan  pengembangan  daun  katuk  sebagai sumber  obat  bahan  alam,  katuk  baik  dikultivasi  pada daerah  dataran  tinggi.  Meskipun  demikian,  penelitian mendalam  perlu  dilakukan  terhadap  faktor  lingkungan lain  yang  dapat  berpengaruh  terhadap  produksi metabolit  sekunder  terutama  flavonoid  dari  daun katuk.

## DAFTAR PUSTAKA
Agrawal,  S.  K.,  Karthikeyan,  V.,  Parthiban,  P.,  & Nandhini, R. (2014). Multivitamin plant : pharmacognostical standardization and
phytochemical  profile  of  its  leaves. Journal  of Pharmacy Research , 8 (7), 920 – 925. Anonim. (2010). Suplemen Farmakope Herbal
Indonesia .  Direktorat  Jenderal  POM,  Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Cechibnel-Filho,  V.  (2012). Plant  Bioactives  and  Drug Discovery: Principle, Practice, adn Perspectives . Chang, C. C. C.-C. ., Yang, M.-H. . M. H., Wen, H.-M. . H. M.,  &  Chern,  J.  C.  J.-C.  (2002).  Estimation  of  total flavonoid content in propolis by two complementary  colometric  methods. Journal  of Food and Drug Analysis , 10 (3), 178 – 182.
Dalimoenthe,  S.  L.,  Wulansari,  R.,  &  Rezamela,  E.
(2016). Dampak Perubahan Iklim terhadap
Produktivitas  Pucuk  Teh  pada  Berbagai  Ketinggian Tempat. Jurnal Littri , 22 (3), 135 – 141. Departemen  Kesehatan  RI.  (2000). Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan .  Departemen  Kesehatan RI.
Direktorat  Obat  Asli  Indonesia.  (2008). Taksonomi: Koleksi  Tanaman  Obat  Kebun  Tanaman  Obat Citeureup .  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik Indonesia (BPOM RI).
Djamil,  R.,  &  Zaidan,  S.  (2017).  Isolasi  Senyawa Flavonoid  dari  Ekstrak  Metanol  Daun  Katuk (Sauropus  androgynus  (L.)  Merr),  Euphorbiaceae. Jurnal  Ilmu  Kefarmasian  Indonesia , 14 (1),  57 – 61. http://jifi.farmasi.univpancasila.ac.id/index.php/jifi/ article/view/50 Hanani,  E.  (2015). Analisis  Fitokimia .  Buku  Kedokteran EGC.
Tabel 3. Perolehan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Hidro-etanolik dari Tiga Daerah yang Berbeda
Daerah Asal Ekstrak Kadar Flavonoid Total (mgQE/g ekstrak) ± SD Bogor (dataran rendah) 8,56 ± 0,63 Sleman (dataran sedang) 4,67 ± 0,30 Bandung (dataran tinggi) 9,72 ± 0,24
Keterangan: Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan. Data yang ditampilkan merupakan rata-rata ± SD.
Hikmawanti,  N.  P.  E.,  Fatmawati,  S.,  &  Asri,  A.  W. (2021). The Effect of Ethanol Concentrations as The Extraction  Solvent  on  Antioxidant  Activity  of  Katuk (Sauropus  androgynus  (L.)  Merr.)  Leaves  Extracts. IOP  Conference  Series:  Earth  and  Environmental Science , 755 (1), 012060.
https://doi.org/10.1088/1755-1315/755/1/012060 Kementerian  Kesehatan  RI.  (2008). Farmakope  Herbal Indonesia (FHI) (Ed. 1). Kementerian Kesehatan RI. Mazid, M., Khan, T. A., & Mohammad, F. (2011). Role of Secondary  Metabolites  in  Defense  Mechanisms  of Plants. Biology and Medicine , 3 (2), 232 – 249.
Mukherjee, P. K. (2019). Quality control and evaluation of  herbal  drugs:  Evaluating  natural  products  and traditional  medicine.  In Quality  Control  and Evaluation  of  Herbal  Drugs:  Evaluating  Natural Products
and Traditional Medicine . https://doi.org/10.1016/C2016-0-04232-8
Nurnasari,  E.,  &  Djumali.  (2010).  Pengaruh  Kondisi Ketinggian  Tempat  Terhadap  Produksi  dan  Mutu Tembakau Temanggung. Buletin Tanaman
Tembakau,  Serat  &  Minyak  Industri , 2 (2),  45 – 59. https://doi.org/10.21082/bultas.v2n2.2010.45-59 Petrus, A. J. A. (2013). Sauropus androgynus (L.) merrill- a  potentially  nutritive  functional  leafy-vegetable. Asian  Journal  of  Chemistry , 25 (17),  9425 – 9433.
https://doi.org/10.14233/ajchem.2013.15405
Pusat  Penelitian  dan  Pengembangan  Holtikultura.
(2013). Budidaya Tanaman Katuk . https://hortikultura.litbang.pertanian.go.id/berita- 338-budidaya-tanaman-katuk.html Rana  Singh,  P.,  Saklani,  P.,  &  Chandel,  C.  (2020). Influence of Altitude on Secondary Metabolites and Antioxidant  Activity  of  Coleus  forskohlii  Root Extracts. Research  Journal  of  Medicinal  Plants ,
14 (2), 43 – 52. https://doi.org/10.3923/rjmp.2020.43.52 Tiwari,  Prashant;  Kumar,  Bimlesh;  Kaur,  Mandeep; Kaur,  Gurpreet;  Kaur,  H.  (2011).  Phytochemical screening  and  Extraction:  A  Review. Internationale
Pharmaceutica Sciencia , 1 (1), 98 – 106. https://doi.org/10.1002/hep.29375
WHO.  (1998).  Quality  control  methods  for  medicinal plant  materials  World  Health  Organization  Geneva. Who . https://doi.org/10.1016/j.pbi.2015.01.003 Yuliani,  Rachmadiarti,  F.,  Dewi,  S.  K.,  Asri,  M.  T.,  & Soegianto,  A.  (2019).  Total  phenolic  and  flavonoid contents  of  elephantopus  scaber  and  ageratum conyzoides  (Asteraceae)  leaves  extracts  from various altitude  habitats. Ecology, Environment  and Conservation , 25 , S106 – S113.