## ISSN: 0215-7950
Alamat penulis korespondensi: Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680. Tel: 0251-8629364, Faks: 0251-8629362, Surel: smulyadisastra@gmail.com

## Volume 17, Nomor 6, November 2021
Halaman 243–250 DOI: 10.14692/jfi.17.6. 243–250
Potensi Isolat Bakteri Asal Gambut sebagai Agens Pengendali Nematoda Puru Akar Meloidogyne incognita
Potential of Bacterial Isolates from Peat Land as Controlling Agent for the Root Knot Nematodes Meloidogyne incognita
Elvina Efendi, Supramana * , Giyanto Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680

## ABSTRAK
Nematoda penyebab puru akar ( Meloidogyne spp.) merupakan parasit penting tanaman budi daya dan memiliki kisaran inang yang luas. Salah satu alternatif pengendalian fitonematoda yang potensial ialah pemanfaatan bakteri non-patogen. Penelitian ini bertujuan mengevaluasi potensi bakteri asal gambut sebagai agens pengendali biologi nematoda puru akar ( M. incognita ). Pengujian secara in vitro menggunakan filtrat 15 isolat bakteri terhadap M. incognita juvenil 2 (J2) dalam cawan petri. Sebanyak 4.5  mL  filtrat  bakteri  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  berdiameter  5  cm,  kemudian  ditambahkan 50 individu J2 M. incognita dan  diinkubasi  pada  suhu  27  ℃.  Pengamatan  mortalitas  nematoda dilakukan pada 6, 12, dan 24 jam setelah perlakuan. Percobaan disusun dalam rancangan acak lengkap dengan 3 ulangan. Peubah yang diamati ialah persentase mortalitas serta lamanya waktu paparan dalam mematikan nematoda. Karakterisasi fisiologis yang dilakukan terhadap isolat bakteri meliputi uji produksi HCN dan enzim kitinase. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 9 isolat bakteri yaitu: GA2 GAA1, GT1 GTA7, GT1 GTB3, GT1 GTB4, GT1 GTB6, GT1 GTB7, GT1 GTC2, GT1 GTC4, dan STDHC4 memiliki kemampuan nematisidal dengan mortalitas mencapai 83%–94%. Isolat bakteri GT1 GTB4 dan GT1 GTB7 memiliki homologi 99% dengan Serratia marcescens asal Cina, dan GT1 GTC2 memiliki homologi 99% dengan Streptomyces sp. AT67 asal Korea Selatan. Ketiga isolat tersebut mampu menghasilkan enzim kitinase dengan indeks lisis >1, namun semua isolat tidak ada yang menghasilkan senyawa HCN.

## Kata kunci: indeks lisis, kitinase, mortalitas nematoda

## ABSTRACT
The root-knot nematodes ( Meloidogyne spp.) is an important parasite of cultivated plants and have a wide host range. One of the potential alternative to controlling this pathogen is by utilizing non- pathogenic bacteria. This study aims to evaluate the potential of bacteria from peat as a biological control agent for the root-knot nematodes ( M. incognita ). In vitro testing was conducted by using filtrate of 15 bacterial isolates against M. incognita juvenile 2 (J2) in a 5 cm petri dish. Fivety juveniles (J2) of M. incognita were added to 4.5 mL of bacterial filtrate and incubated at 27 ℃. Nematode mortality was observed at 6, 12, and 24 hours after treatment. The experiment was arranged in a completely randomized design with three replications. The variables observed include the percentage of nematode mortality and the length of lethal exposure to nematodes. Physiological characterization test was carried out to the bacterial isolates including the production of HCN and chitinase enzymes. The results showed that nine bacterial isolates, that are GA2 GAA1, GT1 GTA7, GT1 GTB3, GT1 GTB4, GT1 GTB6, GT1
GTB7, GT1 GTC2, GT1 GTC4, and STDHC4 perform nematicidal activities with mortality level 83% to 94%. Three bacterial isolates, that are GT1 GTB4, GT1 GTB7, and GT1 GTC2 produce chitinase enzymes with lysis index above 1, but none of those isolates produce HCN. Bacterial isolates GT1 GTB4 and GT1 GTB7 had 99% homology with Serratia marcescens from China, and GT1 GTC2 had 99% homology with Streptomyces sp. AT67 from South Korea.
Key words: lysis index, chitinase, nematode mortality.

## PENDAHULUAN
Indonesia memiliki lahan gambut terluas di Asia dan menempati urutan keempat dunia (Sorensen 1993). Ekosistem gambut merupakan ekosistem yang berperan penting dalam aspek ekologi maupun ekonomi, sifatnya unik dibandingkan tipe lahan lain. Lahan gambut memiliki kandungan bahan organik tinggi, derajat keasaman rendah, dan kandungan oksigen terlarut rendah yang menyebabkan laju dekomposisi bahan organik pada lahan gambut menjadi lambat. Namun demikian, lahan gambut merupakan habitat dari berbagai jenis mikrob yang berperan penting dalam ekosistem, salah satunya ialah bakteri (Mace et al . 2012; Pankratov et al . 2011). Bakteri merupakan kelompok mikro- organisme yang paling beragam dalam aspek fisiologi  terutama  terkait  keragamannya pada berbagai tipe habitat. Akhir-akhir ini, konsep konservasi pada lahan gambut kurang memperhatikan peran bakteri. Padahal, bakteri pada lahan gambut mampu memanfaatkan bahan organik dalam aliran energi dan siklus unsur hara. Sifat dan karakter fisiologi khusus yang dimiliki bakteri yang mampu hidup pada kondisi lahan gambut dapat dimanfaatkan kemampuannya dalam bidang pertanian salah satunya sebagai agens pengendali hayati penyakit tanaman. Munif et al . (2015) melaporkan beberapa mekanisme seperti produksi enzim protease dan enzim kitinase dimiliki  oleh  bakteri  endofit  yang  dapat dimanfaatkan untuk mendegradasi dinding sel telur dan dinding tubuh juvenil nematoda. Berdasarkan sifat dan karakteristik yang dimiliki bakteri asal gambut dapat menjadi alternatif lain sebagai agens pengendali hayati penyakit tanaman. Dengan demikian, dilakukan
penelitian untuk mengevaluasi potensi bakteri gambut dalam pengendalian nematoda M. incognita yang diharapkan dapat menjadi komponen dalam pengendalian nematoda parasit tanaman secara komprehensif.

## BAHAN DAN METODE
Karakterisasi Isolat Bakteri Sebanyak 40 isolat asal gambut merupakan koleksi Laboratorium Bakteriologi Tumbuhan, Fakultas Pertanian, IPB. Isolat-isolat tersebut berasal dari beberapa tipe ekologi gambut yaitu: ekologi gambut yang masih asli, lahan gambut yang pernah terbakar, lahan gambut terbakar yang telah ditanami kembali, lahan sawah pada bekas lahan gambut, dan lahan sawah pasang surut di Kabupaten Banyuasin, Sumatera Selatan dengan kedalaman pengambilan sampel tanah 0–50 cm. Isolat dikumpulkan dengan pengenceran berseri (konvensional).

## Nematoda Uji
Nematoda uji diambil dari tanaman tomat yang terinfeksi nematoda, yaitu tanaman tomat yang menunjukkan gejala kerdil dan menguning. Akat tanaman tomat yang menunjukkan puru diamati dan didokumentasikan. Perbanyakan puru akar dilakukan di Rumah Kaca Cikabayan IPB Bogor.
Perbanyakan Masal M. incognita . Paket telur M. incognita dikumpulkan dari akar tanaman tomat yang bergejala puru. Paket telur berwarna kuning kecoklatan diinfestasikan ke dalam 5 pot plastik (polibag) berisi tanaman mentimun yang sudah ditanam sebelumnya. Metode infestasi yang dilakukan ialah 1) paket telur secara langsung diletakkan di masing- masing polibag; 2) paket telur ditetaskan terlebih dahulu di cawan petri selama tiga
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Efendi et al. hari dua malam kemudian disiram ke dalam polibag; 3) paket telur dipecahkan  dengan cara ditekan menggunakan cover glass di kaca objek kemudian disiram ke dalam polibag. Setelah didapatkan gejala puru pada akar tanaman mentimun, nematoda penyebab puru diidentifikasi berdasarkan karakter morfologi yaitu dengan mengamati pola perineal. Nematoda puru akar yang selanjutnya digunakan ialah M. incognita . Perbanyakan masal M. incognita kemudian dilakukan pada tanaman tomat varietas Palupi di rumah kaca.
Evaluasi Pengujian in vitro terhadap Mortalitas M. incognita Isolat bakteri ditumbuhkan pada medium tryptic soy agar (TSA) selama 48 jam pada suhu ruang. Sebanyak satu loop biakan dipindahkan ke dalam 50 mL medium tryptic soy broth (TSB) kemudian diinkubasikan pada suhu ruang lalu digoyang selama 48 jam dengan kecepatan 150 rpm. Filtrat bakteri diperoleh dengan  cara  mensentrifugasi  biakan  filtrat kultur bakteri dengan kecepatan 6500 rpm selama 20 menit, kemudian disaring meng- gunakan syringe milipore berdiameter 0.22 µm. M. incognita juvenil 2 (J2) dihitung sampai dengan mendapatkan jumlah individu 50 individu per 0.5 mL untuk dilakukan pengujian in vitro . Sebanyak 4.5 mL filtrat bakteri 100% dimasukkan ke dalam cawan petri, kemudian ditambahkan 50 individu M. incognita J2. Pengamatan dilakukan terhadap mortalitas nematoda pada 6, 12, 24, dan 12 jam setelah pembilasan menggunakan akuades steril atau 36 jam setelah pemaparan.
Evaluasi Mekanisme Antagonisme in vitro 15 Isolat Bakteri Asal Gambut terhadap M. incognita Uji Produksi HCN . Isolat bakteri uji digoreskan pada medium TSA + glisin 4.4 g L -1 . Pada bagian tutup cawan petri diletakkan kertas saring steril berukuran 1 cm × 1 cm yang telah direndam dalam larutan cyanide detection solution (CDS) hingga berwarna kuning. Inkubasi dilakukan selama 7 hari. Metode pengujian produksi HCN ini mengacu pada Wei et al . (1991).
Uji Aktivitas Kitinolitik . Isolat bakteri yang berumur 24 jam digoreskan pada medium koloidal kitin (medium TSA 100% steril yang diperkaya koloidal kitin 0.4%). Inkubasi dilakukan pada suhu ruang selama 24–72 jam. Metode ini mengacu pada Hariprasad et al .  (2011)  yang  dimodifikasi.  Kemampuan mendegradasi kitin dapat diukur dari waktu yang dibutuhkan lebih cepat serta dapat diukur dari indeks lisis. Pengukuran indeks lisis berdasarkan Muharni dan Widjajanti (2011).
(A–B) B Indeks lisis = , dengan

## A, diameter zona bening; dan B, koloni bakteri.
Identifikasi  Bakteri  Asal  Gambut  secara Molekuler Sebanyak tiga isolat bakteri terseleksi ditumbuhkan pada medium TSB selama 24 jam dan disentrifugasi menggunakan Mikro 200R, Hettich Zentrifugen, Jerman, pada kecepatan 10.000 rpm selama 5 menit untuk memperoleh pelet guna ekstraksi DNA. DNA genom bakteri diekstraksi mengikuti protokol isolasi DNA Geneaid Presto TM Mini gDNA Bacteria Kit, PT. Genetika Science Indonesia. Jumlah DNA yang digunakan untuk PCR yaitu 1 µL. Hasil ekstraksi diukur kualitas dan kuantitas DNA genom menggunakan spektrofotometer Spectronic 200D, Thermo-Spectronic, Jepang. Amplifikasi gen 16S rRNA dari genom bakteri dilakukan menggunakan primer forward 27 F dan primer reverse 1429 R (Lane 1991). Komposisi PCR per reaksi meliputi: 1 µL primer 27 F dan primer 1492 R; 9.5 µL ddH2O steril dan 12.5 µL Taq DNA polymerase. Sebanyak 1 µL DNA templat dimasukkan sehingga diperoleh campuran dengan volume 25 µL. Amplifikasi  DNA  menggunakan  prosedur umum PCR dengan mesin PCR GeneAmp ® PCR System 9700, Singapur. Elektroforesis dilakukan pada mesin elektroforasi Mupid- exU Advance, TAKARA Jepang dengan tegangan 50 volt selama 50 menit. Penanda ukuran DNA ( marker ) menggunakan 1 kb ladder. Visualisasi hasil PCR dilakukan pada Transilluminator UV ULTRA.LUM, Quantum Scientific, Australia.

## Perunutan DNA dilakukan dengan
mengirimkan fragmen DNA hasil amplifikasi ke FirstBase ® , Malaysia. Hasil perunutan dianalisis menggunakan program basic local alignment search tool (BLAST) dengan program optimasi untuk mendapatkan urutan basa DNA yang terdapat dalam situs National Center for Biotechnology Information (NCBI).
Analisis Data Pengaruh perlakuan uji in vitro , dianalisis ragam dan perlakuan yang berpengaruh nyata diuji  lanjut  dengan  uji  Tukey  pada  α=0.05 menggunakan piranti SPSS.

## HASIL
Karakter Morfologi Isolat Bakteri Sebanyak sebanyak 15 isolat diremajakan lagi pada medium TSA. Karakterisasi morfologi isolat  bakteri meliputi ukuran, bentuk, elevasi, tepian, dan warna  koloni dapat dilihat pada  Tabel 1. Bentuk koloni berbeda-beda, tepian koloni lebih banyak yang memiliki ciri filamentous dan elevasi banyak yang  memiliki  ciri  flat.  Isolat-isolat  tersebut selanjutnya diremajakan lagi pada medium TSA. Uji sifat gram menggunakan KOH 3% menunjukkan 11 isolat bakteri Gram positif dan 4 isolat Gram negatif.
Identitas Nematoda Puru Akar Tanaman yang berhasil diinfestasi oleh paket telur Meloidogyne spp. menunjukkan gejala puru pada akar setelah 3 bulan inkubasi.  Hasil  identifikasi  secara  morfologi menunjukkan bahwa nematoda yang di- perbanyak merupakan M. incognita . Ciri khas pola perineal M. incognita ialah adanya ciri lengkung dorsal yang tinggi dan menyempit (Gambar 1c). Keseluruhan polibag yang diinfestasi oleh Meloidogyne spp. semuanya menunjukkan spesies M. incognita .
Aktivitas Nematisidal dari Filtrat Bakteri Isolat bakteri asal gambut dapat menekan populasi M. incognita J2 sebesar 69.10%–94.14%. Sembilan isolat bakteri (GA2  GAA1, GT1 GTA7, GT1 GTB3, GT1 GTB4, GT1 GTB6, GT1 GTB7, GT1 GTC2, GT1  GTC4, dan STDHC4) memberikan pengaruh penekanan yang nyata lebih besar daripada perlakuan kontrol. Hasil uji in vitro menunjukkan 9 isolat bakteri memiliki kemampuan nematisidal dengan mortalitas J2 mencapai 83%–94% (Tabel 2).
Nematoda yang mati pada uji in vitro me- nunjukkan adanya kerusakan yang disebabkan adanya aktivitas kitinolitik oleh enzim kitinase yang dihasilkan bakteri (Gambar 2).
Tabel 1 Karakter morfologi 15 isolat bakteri asal gambut pada medium natrium agar Kode isolat Ukuran Bentuk Elevasi Tepian Warna Gram GT1 GTA7 Besar Circular Flat Filamentous Putih + GT1 GTB3 Kecil Punctiform Convex Smooth Transparan - GT1 GTB4 Kecil Punctiform Convex Smooth Transparan - GT1 GTB5 Besar Irregular Flat Filamentous Putih + GT1 GTB6 Besar Circular Flat Filamentous Putih - GT1 GTB7 Kecil Circular Convex Smooth Transparan - GT1 GTC1 Besar Circular Flat Filamentous Putih + GT1 GTC2 Kecil Punctiform Convex Filamentous Kuning + GT1 GTC4 Besar Irregular Flat Filamentous Putih + GT1 GTC9 Besar Circular Convex Smooth Putih + GT2 GTB9 Besar Irregular Flat Filamentous Putih + GT3 GTC6 Besar Circular Flat Filamentous Putih + GA2 GAA1 Besar Irregular Flat Filamentous Putih + GA3 GAB7 Besar Irregular Flat Filamentous Putih + STDHC 4 Kecil Irregular Convex Smooth Kuning +
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Pengujian produksi enzim kitinase menunjukkan 11 isolat menghasilkan enzim kitinase, yang ditandai dengan terbentuknya zona bening pada medium kitin (Gambar 3). Isolat bakteri GT1 GTB4, GT1 GTB7, dan GT1 GTC2 memiliki indeks kitin tinggi (>1) yaitu 1.09–1.80 (Tabel 3).
Identifikasi  Molekuler  Bakteri  Asal Gambut secara Molekuler Isolat GT1 GTB4, GT1 GTB7, dan GT1 GTC2 merupakan isolat penghasil kitin yang baik  sehingga  dipilih  untuk  diidentifikasi secara molekuler. Sekuen parsial gen 16S rRNA ketiga isolat dibandingkan dengan
Tabel 2  Mortalitas Meloidogyne incognita juvenil 2 pada perlakuan bakteri asal gambut secara in vitro Jenis isolat Mortalitas (%) Kontrol air 17.02 a Kontrol medium 54.12 b GT1 GTC9 69.10 bc GT2 GTB9 70.63 bc GA3 GAB7 72.72 bc GT1 GTB5 78.15 bc GT1 GTC1 80.22 bc GT3 GTC6 81.45 bc GT1 GTC4 83.11 c GT1 GTC2 83.57 c GT1 GTB3 85.96 c STDHC4 87.04 c GT1 GTA7 87.08 c GT1 GTB6 91.13 c GA2 GAA1 92.45 c GT1 GTB4 93.61 c GT1 GTB7 94.14 c Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan pada uji Tukey α = 0.05.
Gambar 2  Pengaruh enzim kitinase pada tubuh nematoda. a, Tubuh terdegradasi dan rusak; dan b,Tubuh nematoda tanpa kerusakan.
a
b
Tubuh nematoda mengalami degradasi baik pada dinding tubuh serta pada organ dalam tubuh nematoda. Nematoda yang tidak mengalami kerusakan masih terlihat adanya gerigi pada lapisan luar tubuh serta esofagus terlihat dengan jelas.
Karakter Fisiologi Isolat Bakeri Berdasarkan pengujian, keseluruhan isolat bakteri tidak meproduksi senyawa HCN. Hal ini ditandai dengan tidak adanya perubahan warna pada kertas saring (Gambar 3).
Gambar 1  Nematoda puru akar pada tanaman mentimun. a, Puru pada akar; b, Nematoda betina; dan c, Pola perineal Meloidogyne incognita pada perbesaran mikroskop 20 × 10.
a b c
sekuen yang ada pada database Genbank. Amplifikasi sekuen 16S rRNA ( small subunit ribosome ) pada sampel DNA hasil ekstraksi menunjukkan adanya pita DNA berukuran ± 1500 pb (Gambar 4).
Hasil perunutan DNA menunjukkan bahwa isolat GT1 GTB4 dan GT1 GTB7 memiliki homologi sebesar 99% dengan Serratia marcescens asal Cina, dan GT1 GTC2 homologi 99% dengan Streptomyces sp. Isolat asal Korea Selatan (Tabel 4).
Tabel 3 Rata-rata indeks lisis kitinase 9 isolat bakteri terbaik pada medium kitin secara in vitro Kode isolat Indeks lisis (hari ke-) 1 2 3 4 5 GT1 GTB4 0.57 1.67 1.56 1.44 1.80 GT1 GTB7 0.67 0.96 1.40 1.19 1.73 GT1 GTC2 0.00 0.00 0.00 0.00 1.09 GT1 GTB3 0.83 0.72 1.33 1.14 0.90 GT1 GTB6 0.44 0.68 0.64 0.70 0.82 GT1 GTA7 0.00 0.28 0.34 0.29 0.32 GA2 GAA1 0.00 0.00 0.07 0.16 0.20 STDHC4 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 GT1 GTC4 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
Gambar 3  Karakter fisiologi isolat bakteri asal tanaman gambut. a, Bakteri tidak menghasilkan senyawa HCN; dan b, Produksi enzim kitinase oleh isolat bakteri (terbentuk zona bening).
a b GT1 GTB4 GT1 GTA7 GT1 GTB3 STDHC4
Tabel 4  Homologi nukleotida gen 16S rRNA isolat GT1 GTB4, GT1 GTB7, dan GT1 GTC2 dengan bakteri lain pada GenBank NCBI
Isolat bakteri gambut Identitas bakteri Kode aksesi Homologi (%) Query cover (%) GT1 GTB4 Serratia marcescens MN519524.1 99 100 Pseudomonas fluorescens FJ652595.1 99 99 GT1 GTB7 Serratia marcescens MN519524.1 99 99 Serratia marcescens HQ242736.1 99 99 GT1 GTC2 Streptomyces sp. AT67 KU141342.1 99 99 Streptomyces sp. MK757964.1 99 99
Gambar  4    Amplifikasi  DNA  isolat  bakteri asal gambut menggunakan sekuen 16S rRNA terdeteksi pada ± 1500 pb.

## ± 1500 pb
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Efendi et al.

## PEMBAHASAN
Nematoda puru akar M. incognita berhasil  diidentifikasi  secara  morfologi. Keseluruhan polibag yang diinfestasi, semuanya menunjukkan spesies M. incognita . Keberadaan dan keseragaman jenis spesies Meloidogyne spp. di suatu tempat dipengaruhi oleh kondisi tanah dan iklim. M. incoginta berkembang optimum pada suhu 15–25 ℃
(Utami et al . 2017).
Sebanyak 9 isolat bakteri asal gambut berpotensi sebagai agens pengendali M. incognita pada pengujian in vitro , yaitu tersebut antara lain GA2 GAA1, GT1 GTA7, GT1 GTB3, GT1 GTB4, GT1 GTB6, GT1 GTB7, GT1 GTC2, GT1 GTC4, dan STDHC 4. Isolat bakteri yang mampu mematikan nematoda dengan persentase tinggi merupakan nematoda penghasil enzim kitinase. Hal ini ditunjukkan dengan kemampuan isolat tersebut dalam melisis medium kitin yang diukur dengan indeks lisis. Bakteri penghasil enzim kitinase dan  β-1,3-glucanase  yang  bersifat  antagonis terhadap Meloidogyne spp. ialah Streptomyces cacaoi GY525 (Yoon et al . 2012). Selain itu, enzim ini dapat mendegradasi lapisan tengah telur nematoda seperti Meloidogyne javanica , Rotylenchulus reniformis , Tylenchulus semipenetrans , dan Pratylenchus minyus
(Tian et al. 2007). Dalam penelitian ini tidak ditemukan adanya bakteri penghasil Hydrogen cyanide (HCN). HCN merupakan senyawa volatil hasil metabolit sekunder dari bakteri. Mena dan Pimentel (2002) menyatakan bahwa bakteri Corynebacterium paurometabolum dapat mengganggu penetasan telur serta bersifat nematisidal. Selain itu, senyawa HCN dapat mengendalikan beberapa patogen di antaranya Pythium ultimum pada bit gula (Wiyono 2004). Hasil analisis sekuen gen 16SrRNA menunjukkan bahwa isolat terpilih (GT1 GTB4 dan GT1 GTB7) memiliki homologi 99% dengan Serratia marcescens asal Cina, dan GT1 GTC2 memiliki homologi 99% dengan Streptomyces sp. AT67 asal Korea Selatan. Rahul et al . 2014 menyatakan bahwa ekstrak
pigmen dari Serratia marcescens memiliki sifat antagonis terhadap juvenil Radopholus similis dan M. javanica pada konsentrasi rendah. Selain Serratia marcescens , Streptomyces sp. merupakan mikrob dari golongan aktinomiset yang mampu menjadi agens biokontrol bagi nematoda. Streptomyces rubrogriseus HDZ-9- 47 yang dikombinasikan dengan biofumigasi tanah berhasil mengurangi jumlah puru akibat M. incognita hingga 41% (Jin et al . 2019). Sembilan isolat bakteri asal tanah gambut, yaitu GA2 GAA1, GT1 GTA7, GT1 GTB3, GT1 GTB4, GT1 GTB6, GT1 GTB7, GT1 GTC2, GT1 GTC4, dan STDHC4 memiliki kemampuan nematisidal in vitro dengan mortalitas mencapai 83–94%. Isolat bakteri GT1 GTB4 dan GT1 GTB7 memiliki kemampuan menghasilkan enzim kitinase dengan indeks lisis lebih besar dari 1. Isolat GT1 GTB4 dan GT1 GTB7 memiliki homologi 99% dengan Serratia marcescens asal Cina, dan GT1 GTC2 memiliki homologi 99% dengan Streptomyces sp. AT67 asal Korea Selatan. Seluruh isolat bakteri asal gambut yang diuji tidak menghasilkan senyawa HCN.

## DAFTAR PUSTAKA
Hariprasad P, Divakara S, Niranjana S. 2011. Isolation and characterization of chitinolitic bacteria for the management of Fusarium wilt in tomato. Crop Prot. 30(12):1606–1612. DOI: https://doi. org/10.1016/j.cropro.2011.02.032.
Jin N, Lu X, Wang X, Liu Q, Peng D, Jian H.
2019. The effect of combined application of Streptomyces rubrogriseus HDZ-9-47 with soil biofumigation on soil microbial and  nematode  communities.  Scientific Reports. 9(1):1–12. DOI: https://doi. org/10.1038/s41598-019-52941-9.
Lane DJ. 1991. 16S/23S rRNA sequencing. Di dalam: Stackebrandt E, Goodfellow M, editor. Nucleic Acid Techniques in Bacterial Systematic. New York (US):
Wiley. hlm 115–175. Mace GMK, Norris AH, Fitter. 2012. Biodiversity and ecosystem services: A
multilayered relationship. Trends Ecol
Evol. 27(1):19–26. DOI: https://doi. org/10.1016/j.tree.2011.08.006. Mena J, Pimentel E. 2002. Mechanism of action of Corynebacterium paurometabolum strain C-924 on nematodes. Nematol. 4:287 (abstract).
Muharni, Widjajanti H. 2011. Skrining bakteri kitinolitik antagonis terhadap pertumbuhan jamur akar putih ( Rigidoporus lignosus ) dari rizosfir tanaman karet. J Penelit Pen Sains. 14(1):51–56.
Munif A, Wibowo AR, Herliyana EN. 2015.
Bakteri  endofit  dari  tanaman  kehutanan sebagai pemacu pertumbuhan tanaman tomat dan agen pengendali Meloidogyne sp. J Fitopatol Indones. 11(6):179–186.
DOI: https://doi.org/10.14692/jfi.11.6.179. Pankratov TA, Ivanova AO, Desysh SN, Liesack W. 2011. Bacterial populations and environmental factors controlling cellulose degradation in an acidic sphagnum peat Environ  Microbiol. 13(7):1800–1814. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1462- 2920.2011.02491.x.
Rahul S. Chandrashekhar P, Hemant B, Chandrakant N, Laxmikant S, Satish P. 2014. Nematicidal activity of microbial pigment from Serratia marcescens . Natural Product Research. 28(17):1399– 1404. DOI: https://doi.org/10.1080/14786 419.2014.904310.
Sorensen KW. 1993. Indonesian peat swamp forests and their role as a carbon
sink. Chemosphere. 27(6):1065–1082. DOI: https://doi.org/10.1016/0045- 6535(93)90068-G.
Tian B, Yang J, Zhang K. 2007. Bacteria used in the biological control of plant- parasitic nematodes: Populations, mechanism of action, and future prospects. FEMS Microbiol Ecol. 61(2):197–213. DOI:  https://doi.org/10.1111/j.1574- 6941.2007.00349.x.
Utami BC, Supramana, Giyanto. 2017. Deteksi dan  identifikasi  spesies Meloidogyne penyebab umbi berbintil pada kentang asal Sulawesi Utara. J Fitopatol Indones. 13(3):98–104. DOI: https://doi. org/10.14692/jfi.13.3.98.
Wei G, Kloepper JW, Tuzun S. 1991. Induction of systemic resistance of cucumber to Colletotrichum orbiculare by select strains of plant growth-promoting rhizobacteia. Phytopathology. 81(11):1508–1512. DOI: https://doi.org/10.1094/Phyto-81-1508. Wiyono S. 2004. Optimation of biocontrol of  damping  off  of  sugar  beet  caused by Pythium ultimum Trow by using Pseudomonas  fluorescens B5 [disertasi]. Gottingen (DE): University of Gottingen.
Yoon GY, Lee YS, Lee SY, Park RD, Hyun HN,  Nam  Y,  Kim  KY.  2012.  Effects  on Meloidogyne incognita of chitinase, glucanase and a secondary metabolite from Streptomyces cacaoi GY525. Nematology. 14(2):175–184. DOI: https:// doi.org/10.1163/138855411X584124.