## Sintesis senyawa 2,4-Dihidroksiasetofenon dan Uji Aktivitasnya
sebagai Antioksidan

## Synthesis of 2,4-Dihydroxyacetophenone Compound and its Antioxidant
Activity Assay
Laksmiari Sekar Nirwani, Hery Muhamad Ansory, Anita Nilawati Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Jalan Letjen Sutoyo, Surakarta

## ABSTRAK
Antioksidan  sangat  penting  dalam  menjaga  kesehatan  tubuh  manusia  karena  mampu meredam  radikal  bebas.  Asetofenon  dan  turunannya  dilaporkan  berpotensi  sebagai  antioksidan. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  senyawa  2,4- dihidroksiasetofenon hasil sintesis dari resorsinol.
Penelitian dilakukan dengan mensintesis senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon melalui reaksi asilasi  Friedel-Crafts  dari  resorsinol.  Senyawa  hasil  sintesis  dianalisis  menggunakan kromatografi  gas,  spektrometer massa, spektrofotometer  infra merah,  dan  analisis  antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH.
Hasil  sintesis  berupa  padatan  jingga  yang  memiliki  persentase yield sebesar 86,14  %. Hasil analisis menunjukkan bahwa senyawa tersebut adalah senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon. Senyawa hasil sintesis memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 36,72 ppm.

## Kata kunci : antioksidan; 2,4-dihidroksiasetofenon; DPPH

## ABSTRACT
Antioxidant is very important to keep human’s health because of its capability to reduce free radical.  Acetophenone  and  its  derivates  are  reported  as  potential  antioxidant.  The  aim  of  this research  was  to  find  antioxidant  activity  of  2,4-dihydroxyacetophenone  compound  synthesized from resorcinol.
The  research  was  performed  by  synthesizing  2,4-dihydroxyacetophenon  through  Friedel- Crafts  acylation  from  resorsinol.  The  structure  of  the  compound  was  elucidated  using  gas chromatography,  mass  spectrometer,  infrared  spectrophotometer,  and  antioxidant  test  was using DPPH method.
The results showed that product was succesfully synthesized. Yellowish-orange solid was obtained  from  synthesis  with  86,14%  of  yield  and  confirmed  as  2,4-dihydroxyacetophenone. The product showed weak antioxidant activity with 36,72 ppm of IC 50 .

## Keywords : antioxidant; 2,4-dihydroxyacetophenon; DPPH
PENDAHULUAN Penyakit degeneratif dam
penuaan dini merupakan implikasi akibat stress  oksidatif  yang  ditimbulkan  oleh terakumulasinya  radikal  bebas  dalam jaringan  tubuh.  Hal  ini  terjadi  karena adanya  nutrisi  buruk,  tingginya  stress fisik maupun psikologis, paparan
polutan, paparan berlebih dari antibiotika dan obat lainnya menyebabkan semakin
banyaknya  radikal  bebas  dalam  tubuh.
(Moelyono et al ., 2000).
Antioksidan merupakan suatu senyawa  yang  mampu  menghambat oksidasi  molekul  lain  (Rohman  &
Riyanto,  2005).  Tubuh  manusia  tidak mempunyai cadangan antioksidan
dalam  jumlah  berlebih,  sehingga  jika terjadi  paparan  radikal  berlebih  maka tubuh membutuhkan
antioksidan
eksogen (Sunarni, 2005).
Senyawa asetofenon dan turunannya  mampu  menghambat  reaksi oksidasi melalui mekanisme penangkapan radikal (radical scavenging) dengan cara menyumbangkan  satu  elektron  pada elektron  yang  tidak  berpasangan  dalam radikal  bebas  sehingga  banyaknya radikal bebas menjadi berkurang (Pokorny et al . 2001).

## METODE PENELITIAN
Bahan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah senyawa resorsinol dan  asam  asetat  glasial,  selain  itu reagen,  yaitu  ZnCl 2 (teknis),  DPPH, etanol  p.a.  ,  asam  klorida  (teknis)  , n - heksana  p.a.,  etil-asetat  p.a., kloroform
p.a., aqua destilata (Ramayana Laboratorium). Alat-alat  yang  digunakan  adalah peralatan gelas laboratorium, termometer,  satu  set  alat  pengaduk magnet  (magnetic  stirrer),  timbangan analitik. Untuk keperluan analisis digunakan  alat  Spektrofotometer  UV- Vis (Shimadzu 1800 UV-VIS).

## Sintesis 2,4-dihidroksiasetofenon
Asam asetat glasial sebanyak 0,1 mol  dimasukkan  dalam  labu  leher  tiga dan  ditambah  katalis  ZnCl 2 0,05  mol.
Campuran  direfluks  selama  45  menit.
Resorsinol sebanyak 0,04 mol ditambahkan perlahan ke dalam campuran  dan  direfluks.  Selanjutnya
direkristalisasi  dengan  memanaskan padatan dalam campuran HCl : metanol
:  air  kemudian  disaring.  Hasil  diuji kemurniannya dengan kromatografi lapis tipis dan kromatografi gas selanjutnya dielusidasi dengan spektrometer massa dan spektrofotometri infra merah. Penentuan Panjang Gelombang

## Maksimum DPPH
Sebanyak  2,0  ml  larutan  DPPH ditambah  2,0  ml  metanol,  dikocok homogen dan diamati serapannya pada rentang  λ  400-600  nm  dengan menggunakan blanko metanol.
Sebelum  dilakukan  penentuan  panjang gelombnag maksimum tersebut terlebih dahulu  ditetapkan operating  time untuk mengetahui kestabilan larutan DPPH.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Penentuan  aktivitas  antioksidan dengan  memipet  sebanyak  2  mL larutan  uji  dan  ditambahkan  ke  dalam vial  dan  dihomogenkan.  Campuran diinkubasi  selama operating  time yang telah diperoleh dan dibaca absorbansinya pada panjang gelombang maksimum. Aktivitas antioksidan  sampel  ditentukan  oleh besarnya serapan radikal DPPH melalui  perhitungan  persentase  inhibisi serapan  DPPH  dengan  menggunakan rumus:
% inhibisi = | Absorbansi kontrol−Absorbansi sampel Absorbansi kontrol 𝑥 100%|
PEMBAHASAN 2,4-dihidroksiasetofenon  di  sintetis
melalui  reaksi  asilasi  Friedel-Crafts.
Asam asetat berperan sebagai senyawa pengasilasi  dan  ZnCl 2 sebagai  katalis asam Lewis.
Gambar 1. Reaksi sintesis senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon
Hasil  sintesis  berupa  padatan berwarna  jingga  dengan  persentase yield 86,14  %,  memiliki  titik  lebur  143 o C. Senyawa ini larut dalam etanol dan praktis tidak larut dalam air. Senyawa  hasil  sintesis  dikatakan berhasil secara KLT karena
memberikan  satu  bercak  tunggal  pada sinar UV 254 nm dengan harga Rf 0,84.
(2)
(3)
Gambar 2. Padatan senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon.
Gambar 3. Profil KLT 2,4-dihidroksiasetofenon. Keterangan : A. Asam asetat glasial, B. Resorsinol, C. Senyawa target
Analisis  senyawa  hasil  sintesis dengan  kromatografi  gas  menunjukkan bahwa  senyawa  hasil  sintesis  memiliki puncak  tunggal  dengan  kemurnian mencapai 100% pada waktu retensi (t R ) 11,503  menit  (Gambar  4).Kemurnian senyawa hasil sintesis diperkuat dengan data spektra massa (MS)  yang menunjukkan  ion  molekular  (M + )  yang sesuai  dengan  berat  molekul  senyawa
2,4-dihidroksiasetofenon yaitu 152 g/mol (Gambar 5. Serapan pada bilangan gelombang  3302  cm -1 menunjukkan gugus –OH  alkohol  dengan  vibrasi rentang.  Serapan  pada  3034  cm -1 menunjukkan  vibrasi  ulur  =C –H  (Csp 2 ) akibat  adanya  gugus  tak  jenuh.  Gugus tak  jenuh  ini  diperkuat  oleh  serapan vibrasi  ulur  pada  1631  cm -1 yang
A B C
disebabkan oleh gugus C = C. Serapan kuat  pada  1631  cm -1 dengan overtone - nya  pada  3302  timbul  dari  gugus karbonil,  C=O.  Pergeseran  ke  daerah bilangan  gelombang  yang  lebih  rendah menunjukkan  bahwa  gugus  karbonil
dari senyawa hasil sintesis terkonjugasi dengan  cincin  aromatis  dan  ikatan rangkap –C=C  cenderung  memiliki karakter ikatan tunggal sehingga
mudah  mengalami stretching dari  pada ikatan  rangkap  dua  (Gambar  6).
Gambar 4. Kromatogram GC senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon.
Gambar 5. Spektra massa senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon.
Gambar 6. Spektra IR 2,4-dihidroksiasetofenon.
Sebelum  dilakukan  uji  aktivitas penangkap radikal, dilakukan penetapan panjang gelombang maksimal  dari  DPPH  yaitu  516  nm. Panjang  gelombang  maksimal  inilah yang  selanjutnya  digunakan  untuk pembacaan serapan. Panjang gelombang yang menunjukkan senyawa  mempunyai  serapan  yang paling besar. Panjang  gelombang maksimal digunaka karena pada panjang gelombang maksimal kesalahan  relatif  pembacaan  paling kecil.Waktu  reaksi  yang  digunakan adalah  pada  menit  ke  25  dengan alasan  bahwa  pengamatan  serapan pada menit tersebut sudah cukup untuk memberikan kesempatan terjadi reaksi. Hasil  uji  aktivitas  penangkap  radikal dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 7. Grafik hubungan antara konsentrasi 2,4-dihidroksiasetofenon dengan
aktivitas antioksidan Berdasarkan grafik hubungan antara  konsentrasi  senyawa  dengan aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH, didapatkan persamaan regresi linier Y= 9,0560  +  1,1151X,  dengan  nilai  r  = 9,056 dapat diketahui nilai IC 50 senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon sebesar 36,72 ppm. Konsentrasi larutan uji(ppm) Absorbansi % Inhibisi (%) Nilai IC50 (ppm) 10 0,768 20,3320 0,847 20 0,684 29,0456 9,814 30 0,532 44,8133 18,782 40 0,429 55,4979 27,750 50 0,358 62,8631 36,718
Tabel 1. Grafik hubungan antara konsentrasi 2,4-dihidroksiasetofenon dengan aktivitas
antioksidan Proses penangkapan radikal
DPPH  pertama  kali  terjadi  pada  gugus hidroksil  pada  cincin  benzena.  Dimana gugus  hidroksil  tersebut  kemungkinan besar akan mengalami reaksi homolitik,
sehingga atom hidrogen akan terabstraksi  karena  adanya  radikal DPPH.  Pada  2,4-dihidroksiasetofenon,
gugus hidroksi merupakan gugus pendorong elektron yang sangat
0 5 10 15 20 25 30 35 40 10 20 30 40 50 Konsentrasi (ppm) Nilai IC 50
berpengaruh dalam proses penyebaran elektron atau konjugasi ke dalam cincin benzena walaupun memiliki efek induksi  negatif  tetapi  efek  resonansi lebih  kuat.  Elektronnya  beresonansi sampai  ke  luar  cincin  benzena,  yaitu sampai  gugus  karbonil.  Senyawa  2,4- dihidroksiasetofenon hanya mempunyai satu  gugus  karbonil  pada  gugus siklopentanon  sehingga  hanya  elektron dari  satu  sisi  gugus  hidroksil  yang mengalami reaksi homolitik yang bisa di bawa  ke  gugus  karbonil  sehingga  2,4- dihidroksiasetofenon mempunyai
aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH yang kecil.

## KESIMPULAN
Senyawa 2,4-dihidroksiasetofenon berhasil disintesis dan senyawa tersebut  mempunyai  aktivitas  sebagai antioksidan  dengan  nilai  IC50  sebesar 36,72 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Moelyono M.W, Ahmad M, Ully F, 2000,
Aktivitas Antioksidan Invitro Ekstrak Metanol Kulit Kayu
angkasa, Prosiding  Sem.NasXVII
: 555 –558
Pokorny,  J.,  Yanishlieva,  N.,  and Gordon,  M.,  2001, Antioxidant  in Food:  Practical  Aplications ,  CRC
press, New York Sunarni, T., 2005, Aktivitas Antioksidan Penangkap Radikal Bebas Beberapa  kecambah  Dari  Biji Tanaman  Familia  Papilionaceae,
Jurnal  Farmasi  Indonesia ,  2(2),
53-61.
Rohman  A,  Riyanto  S.  2005.  Daya antioksidan  ekstrak  etanol  daun
kemuning ( Murraya paniculata (L) Jack)  secara In  Vitro . Jurnal
Farmasi  Indonesia ,  16(3):136 – 140.