Research Article

## UNPAD
Subcronic Toxicity Of Moringa Leaf Extract ( Moringa Oleivera L ) On Histopathology Heart Organ Of Rats
Yunda P. Listiani 1 , Novi Ayuwardani 2 , Susanti Erikania 1 1Program Studi S1 Farmasi, 2Program Studi D-III Farmasi, STIKes Bhakti Husada Mulia, Madiun, Jawa Timur, Indonesia
Submitted 9 September 2021; Revised 24 December 2021; Accepted 2 Febtuary 2022; Published 20 February 2023 *Corresponding author: yundalistiani07@gmail.com
Abstract Moringa leaf ( Moringa oleivera L ) is a plant that has benefits as a natural medicinal ingredient. Benefits of Moringa leaves as anti-inflammatory, antimicrobial, antioxidant, antihypertensive, anticholesterol and antidiabetic. Phytochemical test Moringa leaves contain flavonoids, alkaloids, saponins, tannins, phenols and steroids. Sub-chronic toxicity test was conducted to determine the negative impact of Moringa leaves on the body if consumed for a certain period of time. The test animals used were 20 male rats with 5 doses of treatment. Parameters observed were body weight (g), relative weight of liver (%), macroscopic changes and liver histopathology. The data were analyzed by One Way Anova and continued with the Post Hoc LSD test. The results of this study showed changes in body weight of rats, changes in the relative weight of the liver, macroscopic changes in the liver in the form of consistency and surface of the liver and histopathological changes in the liver in the form of necrosis with a total liver damage of 46% and the number of normal cells by 54%.
Keywords: Moringa Leaf, Subchronic Toxicity, Liver Histopathology.
Toksisitas Subkronis Ekstrak Daun Kelor ( Moringa Oleivera L ) terhadap Histopatologi Organ Hati Tikus
Abstrak Daun Kelor ( Moringa oleivera L ) merupakan tanaman yang memiliki manfaat sebagai bahan obat alami. Manfaat  daun  kelor  sebagai  antiinflamasi,  antimikrobial,  antioksidan,  antihipertensi,  antikolesterol dan antidiabetes. Uji fitokimia daun kelor mengandung flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, fenol dan steroid.  Uji  toksisitas  subkronis  dilakukan  untuk  mengetahui  dampak  negatif  daun  kelor  terhadap tubuh jika dikonsumsi dalam jangka waktu tertentu. Hewan uji yang digunakan adalah 20 ekor tikus jantan dengan 5 perlakuan dosis. Parameter yang diamati berat badan tikus (g), berat relatif organ hati (%), perubahan makroskopis dan histopatologi organ hati. Data dianalisis dengan One Way Anova dan dilanjutkan uji Post Hoc LSD. Hasil penelitian ini terdapat perubahan berat badan tikus, perubahan berat relatif organ hati, perubahan makroskopis organ hati berupa konsistensi dan permukaan organ hati, dan perubahan histopatologi organ hati berupa nekrosis dengan total kerusakan organ hati sebesar 46% dan jumlah sel normal sebesar 54%.
Kata Kunci: Daun Kelor, Toksisitas Subkronis, Histopatologi Hati.

## 1.  Pendahuluan
Kelor merupakan tanaman herbal yang memiliki  banyak  khasiat  bagi  kesehatan tubuh.  Kelor  sering  dijumpai  sebagai tanaman  pagar  dan  pembatas  tanah.  Namun banyak  kandungan  dalam  tanaman  kelor yang  bermanfaat  sebagai  obat  yang  dapat kita  jumpai  dalam  produk  obat  herbal  yang beredar  di  apotek-apotek  yang  mengandung bahan utama daun kelor. Daun kelor memiliki banyak manfaat bagi kesehatan yaitu sebagai antiinflamasi,  antimikrobial,  antioksidan, antihipertensi, antikolesterol dan antidiabetes1. Berdasarkan  pengujian  fitokimia  daun  kelor mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin,  tannin,  steroid  dan  triterpenoid2. Penelitian  dari  Novi  Ayuwardani  (2019) 3 menunjukkan bahwa ekstrak daun kelor dosis 700 mg/kgBB efektif menurunkan kadar gula darah. Namun penggunaan daun kelor dalam jangka  waktu  tertentu  dapat  berdampak negatif terhadap tubuh. Oleh karena itu, perlu dilakukan  pengujian  mengenai  keamanan dan  efek  daun  kelor  melalui  pemeriksaan toksisitas  subkronis.  Hati  merupakan  organ penting  dalam  metabolisme  yang  berfungsi melindungi  tubuh  terhadap  penumpukan  zat berbahaya serta sebagai tempat metabolisme obat dan bahan toksik lain4.
Pada  penelitian  Rifqi  (2019)5,  kulit batang kelor menimbulkan efek pada hewan percobaan  berupa  peningkatan  berat  badan, pembesaran  indeks  organ  limpa  dosis  5000 mg/kgBB  dan  tidak  terdapat  kematian sehingga  termasuk  dalam  kategori  LD50 praktis  tidak  toksik.  Berdasarkan  penelitian tersebut daun kelor tidak menyebabkan toksik jika  dikonsumsi  selama  14  hari.  Namun jika  penggunaan  dalam  jangka  panjang dapat memberikan efek negative pada organ tubuh.  Berdasarkan  latar  belakang  diatas, perlu dilakukan adanya penelitian mengenai uji  toksisitas  subkronis  ekstak  daun  kelor terhadap histopatologi organ hati tikus putih dengan dosis 1600 mg/kgBB, 1800 mg/kgBB, 2000 mg/kgBB, dan 2200 mg/kgBB.

## 2.  Metode
2.1.  Alat
Alat  yang  digunakan  adalah rotary
evaporator ,  cawan  porselin, waterbath , tabung reaksi, penjepit tabung, bunsen, spirtus, Halogen Moisture Analyzer , Alumunium foil , krus silikat, kertas saring, timbangan analitik, corong,  inkubator,  objek glass, cover glass , dan mikroskop.
2.2.  Bahan Tikus  jantan 5 ,  sekam,  pakan  tikus, ekstrak  daun  kelor,  aquadest,  kertas  saring, alumunium  foil,  CMC  Na  1%  (YanXing, Cina),  HCL  2N  (MERCK,  Indonesia),  HCL pekat (MERCK, Indonesia), pereaksi Mayer (MERCK,  Indonesia),  pereaksi  Dragendorff (MERCK,  Indonesia),  pereaksi  FeCl3  1% (MERCK,  Indonesia),  CH3COOH  glasial (MERCK,  Indonesia),  H2SO4  (MERCK, Indonesia), serbuk magnesium, amil alcohol (MERCK, Indoneisia), kloroform (MERCK, Indonesia),  NaCl  0,9%  (WIDA,  Indonesia), formalin  10%,  alkohol  70%  (MERCK, Indonesia),  alkohol  80%  (MERCK, Indonesia),  alkohol  96%  (MERCK, Indonesia),  xylol  (MERCK,  Indonesia), paraffin  cair  (MERCK,  Indonesia),  pewarna Hematoxylin,  dan  pewarna  eosin  (MERCK, Indonesia.
2.3.  Prosedur 2.3.1. Uji Bebas Etanol Daun  kelor  yang  telah  dimaserasi  dan dipekatkan  dengan  rotary  evaporator  pada suhu 400C, diambil 0,5 g dimasukkan dalam cawan poselin, ditetesi H2SO4 dan asam asetat dipanaskan  di waterbath .  Hasil  negatif  jika tidak ada bau khas eter pada ekstrak6.
2.3.2. Pengujian Fitokimia
Identifikasi Alkaloid Pemeriksaan alkaloid dilakukan dengan cara  0,5  ml  filtrat  ditetesi  dengan  pereaksi, dalam penelitian ini pereaksi yang digunakana adalah  pereaksi  Mayer’s  (reaksi  positif  jika terdapat  endapan  putih  atau  kuning)  dan pereaksi  Dragendrof  (reaksi  positif  jika terdapat  endapan  jingga)  (Vidiyanti,  2018) [7].
2.3.3. Identifikasi Flavonoid
Ekstrak 1 g dilarutkan pada 10 ml air
panas lalu disaring. Kemudian ditambahakan 0,1 g serbuk Mg, 1 ml NaCl dan 2 ml amil alkohol  lalu  dikocok.  Hasil  positif  terdapat perubahan warna merah8.
2.3.4. Identifikasi Saponin
Dilakukan  dengan  cara  0,5  g  ekstrak dimasukkan kedalam tabung reaksi ditambahkan  10  ml  air  panas  lalu  dikocok. Hasil  positif  jika  terdapat  busa  dan  tidak hilang dengan penambahan asam klorida 2N9.
2.3.5. Identifikasi Tanin
Pemeriksaan dilakukan dengan melarutkan  1  g  ekstrak  pada  air  panas  10 ml  lalu  disaring.  Diambil  2  ml  filtrat  lalu ditambahakan 1-2 tetes FeCl 1%. Hasil positif jika berubah warna hijau kehitaman atau biru tua9.
2.3.6. Identifikasi Steroid Identifikasi  dilakukan  dengan  cara ekstrak 0,5 g ditetesi CH3COOH glasial dan H2SO4  lalu  dikocok.  Hasil  positif  apabila warna berubah biru atau hijau 10 .
2.3.7. Pengujian Kadar Air dan Kadar Abu
Kadar Air: Ekstrak  1g  diletakkan di alumunium foil ,  dimasukkan  kedalam alat Halogen Moisture Analyzer ,  dikatakan memenuhi  syarat  apabila  jumlah  kadar  air tidak lebih dari 10%8.
Kadar Abu: Ekstrak  2  g  diletakkan dalam  krus  silikat.  Pijarkan  sampai  arang habis, didingankan lalu timbang. Tambahkan air  panas  apabila  abu  tidak  dapat  hilang kemudian  saring.  Pijarkan  sisa  kertas dan  kertas  saring  dalam  krus  yang  sama. Masukkan filtrat ke dalam krus lalu uapkan. Kemudian  pijarkan  kembali  hingga  bobot tetap dan hitung kadar abu 11 .
2.3.8. Uji Toksisitas Subkronis Tikus  jantan  umur  8-10  minggu  berat berkisar 250-300 g diaklimatisasi 1 minggu, dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan masing-masing  4  tikus  lalu  dipuasakan sebelum  pemberiaan  sediaan  uji.  Pada  hari ke-29 dilakukan pembedahan, diamati secara makroskopis  dan  mikroskopis  organ  hati
tikus.
2.3.9. Pembuatan Preparat Organ Hati Menurut  Sari  (2010) 12 dan  Amaliyah (2015) 13 ,  pembuatan  preparat  dilakukan dengan  cara:  fiksasi,  setelah  organ  dicuci dengan  larutan  NaCl  0,9%  lalu  difiksasi dengan larutan formalin 10% minimal 1x24 jam. Dehidrasi, organ direndam dalam larutan etanol bertingkat 70%-100% masing-masing selama 1 jam. Penjernihan, dilakukan dengan merendam dalam larutan xylol I dan II selama 1 jam. Penanaman, organ dimasukkan dalam blok  parafin  dan  dibiarkan  mengeras  dalam inkubator  suhu  580-600C.  Pemotongan,  hati dipotong  5  micron,  hasil  potongan  diambil dengan  objek  glass.  Pewarnaan,  dengan hematoxilin  eosin  kurang  lebih  30  detik selanjutnya  dicuci  dengan  air  mengalir. Mounting , preparat ditetesi entelan kemudian ditutup dengan cover glass .
2.3.10. Prosedur Pengumpulan Data Sebelum  pemberian  larutan  uji  pada tikus,  dilakukan  penimbangan  berat  badan tikus pada semua kelompok selama 28 hari. Pada  hari  ke-29  dilakukan  pembedahan tikus  dan  ditimbang  berat  organ  hati  untuk mengetahui  ada  tidaknya  perbedaan  berat relatif  organ  yang  bermakna.  Kemudian dilakukan  pengamatan  secara  makroskopis meliputi  warna,  permukaan  dan  konsistensi. Hati yang normal berwarna merah kecoklatan, permukaan  licin  dan  konsistensi  kenyal 14 . Kemudian  pengamatan  organ  hati  dibawah mikroskop  perbesaran  400x.  Pembacaan  sel terhadap perubahan sel normal dan nekrosis 15 . 2.3.11. Analisis Data Data  kuantitatif  pada  penelitian  ini adalah  data  berat  badan  tikus,  berat  relatif organ tikus dan data kerusakan organ hati tikus. Data  yang  diperoleh  selanjutnya  dianalisis uji  normalitas  menggunakan Shapiro-Wilk test  karena  sampel  yang  digunakan  kurang dari  50  sampel.  Uji  normalitas  dilakukan untuk  mengetahui  apakah  data  terdistribusi merata  dan  setelah  data  normal  dilanjut  tes homgenitas, apabila data homogen maka dapat dilakukan tes One way Anova . Tes One way
Anova digunakan  untuk  mengetahui  adanya perbedaan  signifikan  data  antara  kelompok perlakuan  dengan  kontrol  kontrol 5 .  Untuk mengetahui perbedaan secara signifikan antar kelompok  perlakuan  dilanjutkan  dengan  uji Post Hoc LSD.
3.  Hasil
3.1.  Determinasi Daun Kelor Daun  kelor  dideterminasi  di  UPT Laboratorium Herbal Materia Medica (MMI) Batu  Malang,  Jawa  Timur.  Determinasi menunjukan  hasil  yang  benar  bahwa  yang menjadi  sampel  penelitian  ini  adalah  daun kelor  yang  berasal  dari  spesies Moringa oleivera L dan famili Moringaceae .
3.2.  Rendemen,  Kadar Air  dan  Kadar Abu Ekstrak Daun Kelor
Rendemen yang dihasilkan dari ekstrak daun  kelor  sebesar  14,25%.  Kadar  air  yang dihasilkan  sebesar  10,58%  dan  kadar  abu 0,93%  dari  berat  sampel  2  g  dan  berat  abu 1,86 g.
3.3.  Hasil Pengamatan Berat Badan Tikus
Rata-rata  berat  badan  tikus  (Tabel  1) pada  semua  kelompok  perlakuan  selama  28 hari  mengalami  peningkatan.  Data  tersebut dianalisis dengan One Way Anova menujukkan bahwa  terdapat  perbedaan  siginifikan  berat badan tikus pada semua kelompok selama 28 hari (sig.<0.05).
3.4.  Hasil Pengamatan Berat Relatif Organ Hati Tikus Rata-rata  berat  relatif  organ  hati (Tabel  2)  pada  semua  kelompok  perlakuan mengalami  peningkatan.  Berat  relatif  organ diuji  dengan One Way Anova menujukkan bahwa  ada  perbedaan  siginifikan  pada perubahan berat relatif organ hati tikus pada semua kelompok selama 28 hari (sig.<0.05).

## 3.5.  Hasil Pengamatan Makroskopis Organ
Hati Tikus. Pengamatan  makroskopis  organ  hati tikus  (gambar  1)  terdapat  dua  kriteria  hati abnormal yaitu permukaan hati kasar terdapat bintik  putih  dan  konsistensi  kurang  kenyal. Perubahan ini terjadi pada kelompok 5 dengan pemberian dosis 2200 mg/kgBB.

## 3.6.  Hasil Pengamatan Histopatologi Organ
Hati Tikus Pengamatan  histopatologi  organ  hati (Gambar 2) menunjukkan adanya kerusakan hati  pada  semua  kelompok  perlakuan  yaitu nekrosis  (Tabel  3)  yang  ditandai  dengan adanya  piknosis,  karioreksis  dan  kariolisis. Selain itu juga diamati jumlah sel normal yang ada (Tabel 4). Kedua data tersebut dianalisis dengan One Way Anova menunjukkan bahwa terdapat  perbedaan  signifikan  kerusakan organ hati dan jumlah sel normal.
Gambar 1. Kelompok 1 hati normal; kelompok 5 hati abnormal (terdapat bintik putih)
Tabel 1. Pengamatan Berat Badan Tikus
Kelompok BB Tikus (g) Rata-rata ± SD K1 144,62 ± 9,60 K2 160,15 ± 15,07 K3 172,92 ± 11,86 K4 148,31 ± 16,34 K5 165,79 ± 14,52 Kelompok Organ Hati (%) Rata-rata ± SD Sig. K1 5,88 ± 0,17 .004 K2 6,06 ± 0,64 K3 5,15 ± 0,68 K4 6,48 ± 0,34 K5 6,72 ± 0,39 Tabel 2. Pengamatan Berat Relatif Organ Hati Tikus

## 4.  Pembahasan
Hasil  ekstrak  kental  dari  1000  g serbuk  daun  kelor  sebanyak  142,5  g  dan nilai  rendemen  sebesar  14,25%.  Rendemen tersebut  telah  memenuhi  persyaratan Farmakope  Herbal  Indonesia,  yaitu  tidak kurang  dari  7,2%8.  Hasil  uji  bebas  etanol ekstrak  daun  kelor  tidak  tercium  bau  eter, menandakan  ekstrak  tidak  mengandung etanol.  Identifikasi  senyawa  ekstrak  daun kelor mengandung senyawa flavonoid, tanin, steroid,  alkaloid,  dan  fenol.  Hasil  tersebut sesuai dengan penelitian dari Purwoko et al. (2020)8. Penelitian lain yang dilakukan oleh Kasolo et al. (2010)2 menyatakan bahwa hasil
fitokimia  pada  daun  kelor  antara  lain  tanin, steroid  dan  triterpenoid,  flavonoid,  saponin, antrakuinon,  alkaloid,  dan  gula  pereduksi. Menurut  Rani  et  al.  (2018) 16 ,  daun  kelor memiliki  kandungan  flavonoid,  glukosida, dan glukosinolat yang tinggi.
Sesuai  penelitian  Purwoko  et  al. (2020)8,  kadar  air  ekstrak  tidak  lebih  dari 10%.  Hasil  uji  kadar  air  ekstrak  daun  kelor sebesar  10,58%,  hasil  tersebut  melebihi batas  standart.  Hal  tersebut  disebabkan karena  pengaruh  suhu  dan  kelembapan  di lingkungan  kerja.  Sesuai  pendapat  Hidayati et  al.  (2011) 17 menyatakan  bahwa  adanya absorpsi  air  kedalam  ekstrak  saat  proses
Gambar 2. Histopatologi Organ Hati Tikus
Kelompok Jumlah Sel Kerusakan Organ Hati Rata-rata ± SD Sig. Piknosis Karioreksis Kariolisis K1 12 12,5 8
32,50 ± 2,64
.000 K2 20 22,5 12,75 55,25 ± 2,63 K3 22,75 14,25 6,25 43,25 ± 1,70 K4 20,75 22,25 8,75 51,75 ± 2,50 K5 24,25 15,25 7,75 47,25 ± 2,21
Tabel 3. Hasil Pengamatan Kerusakan Organ Hati Tikus
Tabel 4. Hasil Pengamatan Jumah Sel Normal Organ Hati Tikus
Kelompok Organ Hati (%) Rata-rata ± SD
Sig. K1 67,50 ± 2,64 .000 K2 44,75 ± 2,63 K3 56,75 ± 1,70 K4 48,25 ± 2,50 K5 52,75 ± 2,21
penyimpanan akibat lingkungan yang lembab dan  pengeringan  yang  kurang  optimal.  Uji kadar  abu  yang  dihasilkan  sebesar  0,93% dari hasil berat sampel 2 g dan berat abu 1,86 gram. Kadar abu tersebut menurut Purwoko et  al.  (2020)8,  telah  memenuhi  persyaratan yaitu kurang dari 9%. Penelitian lain menurut Chatepa dan Emmanuel (2018) 18 , dihasilkan kadar abu tepung daun kelor berkisar 0,13% hingga 0,17%.
Hasil  pengamatan  berat  badan menunjukkan  bahwa  adanya  peningkatan berat  badan  tikus  pada  semua  kelompok. Peningkatan  berat  badan  diduga  karena lamanya pengamatan selama 28 hari dan tikus mengalami pertumbuhan. Hal tersebut sesuai penelitian  Wulandari  (2017) 15 ,  menyatakan bahwa  pemberian  serbuk  daun  kelor  pada tikus  mengakibatkan  adanya  kenaikan berat  badan  pada  semua  kelompok  tikus. Kandungan  nutrisi  pada  serbuk  daun  kelor berperan  dalam  kenaikan  berat  badan.  Data tersebut  diuji One Way Anova menujukkan bahwa  terdapat  perbedaan  siginifikan  pada perubahan  berat  badan  tikus  pada  semua kelompok selama 28 hari (sig.<0.05).
Peningkatan  berat  hati  merupakan kriteria paling peka untuk uji toksisitas. Berat relatif organ diuji One Way Anova menujukkan hasil terdapat perbedaan siginifikan pada berat relatif organ hati tikus pada semua kelompok selama  28  hari  (sig.<0.05).  Rata-rata  berat relatif organ hati tikus pada semua kelompok perlakuan  mengalami  peningkatan  dengan rentang  yang  berbeda.  Hasil  pengamatan makroskopis  terdapat  dua  kriteria  hati abnormal  yaitu  permukaan  kasar  terdapat bintik  putih  dan  konsistensi  kurang  kenyal. Perubahan ini terjadi pada kelompok 5 dengan pemberian dosis 2200 mg/kgBB. Hal tersebut sesuai  pendapat  Liwandouw  (2017) 19 ,  hati yang abnormal mengalami perubahan warna dan  memiliki  permukaan  berbintik-bintik serta terdapat kista.
Pengamatan mikroskopik preparat organ hati  menunjukkan  bahwa  adanya  kerusakan hati  pada  semua  kelompok  perlakuan yaitu  nekrosis  sel,  yang  ditandai  dengan piknosis  (inti  sel  mengkerut),  karioreksis (inti  sel  hancur  bersegmen-segmen)  dan
kariolisis  (inti  sel  lisis).  Pada  kelompok  1 (kelompok  kontrol)  mengalami  kerusakan organ  hati,  kemungkinan  disebabkan  karena penggunaan CMC Na dalam jangka panjang dapat  memberikan  kerusakan  pada  organ. Menurut  Widiantoko  (2013) 20 ,  emulsifier seperti CMC Na dalam jangka panjang dapat berdampak  negatif  seperti  penyakit  kanker dan kerusakan ginjal. Dari pendapat tersebut, selain  kerusakan  organ  ginjal,  kemungkinan dapat terjadi kerusakan organ hati maka perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai keamanan  penggunaan  CMC  Na  dalam jangka  panjang.  Pada  kelompok  2  dosis terkecil  terlihat  kerusakan  organ  hati  yang lebih  besar  dibandingkan  dengan  kelompok lain.  Hal  tersebut  kemungkinan  disebabkan oleh  rentang  data  pada  kelompok  2  lebih besar  dibandingkan  dengan  kelompok  lain. Selain itu disebabkan karena saat penyondean volume  ekstrak  daun  kelor  yang  masuk pada  pencernaan  hewan  uji  lebih  banyak dibandingkan dengan kelompok lain. Faktor yang  mempengaruhi  kerusakan  organ  hati adalah  dosis  pemberian,  durasi  pakai,  onset kerja, dan terlalu sering terpapar, serta induk sel yang rentan. Selain itu juga dilihat jumlah sel  normal  pada  histopatologi  organ  hati tikus 21 . Hasil analisis statistik kerusakan organ hati dan jumlah sel normal diuji dengan One Way Anova menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  signifikan  kerusakan  organ  hati tikus  dan  jumlah  sel  normal  pada  semua kelompok  selama  28  hari  (sig.<0.05).  Pada uji Post Hoc LSD  terhadap  kerusakan  dan jumlah  sel  normal  menunjukkan  perbedaan signifikan  antara  kelompok  kontrol  dengan semua  kelompok  perlakuan.  Hal  tersebut membuktikan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol 96% daun kelor pada hewan uji selama 28  hari  mengalami  kerusakan  pada  organ hati berupa nekrosis dan akan mempengaruhi jumlah sel normal pada hewan uji.
5.  Kesimpulan Hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan terdapat  efek  subkronis  ekstrak  daun  kelor pada  histopatologi  organ  hati  tikus.  Tikus mengalami peningkatan berat badan dan berat
relatif organ. Pada pengamatan makroskopis organ  hati,  terdapat  kerusakan  organ  yaitu permukaan hati kasar (terdapat bintik putih) dan  konsistensi  kurang  kenyal.  Pengamatan histopatologi menunjukkan adanya kerusakan hati  berupa  nekrosis  yang  ditandai  dengan adanya  piknosis,  karioreksis  dan  kariolisis dengan total kerusakan 46% dan jumlah sel normal 54%.

## Daftar Pustaka
1.  Farooq  F,  Rai  M,  Tiwari  A  dkk.  2012.
Medicinal properties of Moringa oleifera: An  overview  of  promising  healer [diunduh 1 Agustus 2021]. Tersedia dari: http://www.academicjournals.org/JMPR.
2.  Kasolo  J  N,Gabriel  S.  Bimenya,  Lonzy Ojok, et al. Phytochemicals and uses of Moringa oleifera leaves in Ugandan rural communities. Journal of Medicinal Plants Research Vol. 4(9), pp. 753-757. [diunduh 10 Desember 2021]. Tersedia dari: https:// academicjournals.org/journal/JMPR/ article-full-text-pdf/5F654D120796
3.  Novi  Ayuwardani,  Yetti  H.  Efektivitas Kombinasi Ekstrak Daun Kelor (Moringa oleifera  L)  Dan  Ekstrak  Biji  Pepaya (Carica  Papaya  L.)  dalam  Menurunkan Kadar  Gula  dari  Tikus  Diabetes (disertasi). Madiun: Departemen Farmasi Stikes Bhakti Husada Mulia: 2019.
4.  Insani A, dan Samsuri I. 2015. Gambaran Histopatologi  Hati  Tikus  Putih  yang Diberikan Deksametason dan Vitamin E. Indonesia Medicus Veterinus, 4(3), 228- 237.
5.  Rifqy  Firmansyah.  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak  Etanol  Kulit  Batang  Kelor (Moringa  Oleifera  L)  Terhadap  Mencit (Mus  Musculus)  Galur  Ddy  (skripsi). Bandung:  Universitas  Jenderal  Achmad Yani: 2019.
6.  Kurniawati  E.  Daya  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Tunas  Bambu  Apus Terhadap  Bakteri  Escherichia  coli  dan Staphylococcus  aureus  Secara  In  Vitro. Jurnal  Wiyata:  Penelitian  Sains  dan Kesehatan,  2(2),  193-199.  Surabaya: Universitas Airlangga: 2015.
7.  Vidiyanti  I.  L.  Pengaruh  Pemberian
Ekstrak  Etanol  90%  Daun  Kelor (Moringa  oleifera  L)  Terhadap  Kadar Testosteron  dan  Spermatozoa  Serta Gambaran  Motilitas  dan  Diameter Tubulus  Seminiferus  Secara  In  Vivo (tesis). Jakarta: UIN Syarif Hidayatullah: 2018.
8.  Purwoko  M.  Y,  Syamsudin  S,  & Simanjuntak  P.  Standardisasi  Parameter Spesifik dan Nonspesifik Ekstrak Etanol Daun  Kelor  (Moringa  oleifera  L)  Asal Kabupaten Blora. Sainstech Farma. 2020. 13(2), 124-129.
9.  Marcus L, Syamsudin, Partomuan. 2020. Standardisasi  Parameter  Spesifik  dan Nonspesifik  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor (Moringa oleifera) Asal Kabupaten Blora. Sainstech Farma Vol 13 No.2
10. Manongko, P. S., Sangi, M. S., & Momuat, L. I. Uji Senyawa Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan  Tanaman  Patah  Tulang (Euphorbia tirucalli L) (skripsi). Manado: Universitas Sam Ratulangi: 2020. 11. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  2000.  ParameterStandar UmumEkstrak Tumbuhan  Obat.  Jakarta: Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Hal 3-38.
12. Sari, W, P. Uji Toksisitas Akut Campuran Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  (Piper  Betle Linn.)  Dan  Ekstrak  Kering  Gambir (Uncaria Gambir Roxb.) Terhadap Mencit Putih Jantan (skripsi). Jakarta: Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah: 2010.
13. Amaliyah, F. R. Uji toksisitas subkronik ekstrak  air  daun  katuk  (Sauropus androgynous  L)  terhadap  berat  jantung dan  histologi  jantung  pada  tikus  putih (Rattus  norvegicus)  betina  (skripsi). Jakarta:  Universitas  Islam  Negeri Maulana Malik Ibrahim: 2015.
14. Hasan, A. E. Z., Effend, E. M., Setiyono, A dkk. 2014. Kondisi Hati Tikus Betina Akibat    Induksi  7,12-Dimethyl  Benz Anthrasen (Dmba) Dan Penyembuhannya Dengan  Propolis  Dan  Nanopropolis Indonesia.  Fitofarmaka:  Jurnal  Ilmiah Farmasi, 4(1), 1-9.
15. Wulandari,  M.  A.  Uji  Toksisitas Subkronis  Serbuk,  Ekstrak  Air,  dan
Ekstrak  Pekat  Suplemen  Kalsium  Daun Kelor  (Moringa  oleifera  Lam.)  Pada Fungsi  Hepar  dan  Ginjal  Tikus  Wistar (Rattus  norvegicus)  (disertasi).  Malang:
Universitas Brawijaya: 2017.
16. Rani  N  Z  A,  Khairana  H,  dan  Endang K.  Moringa  Genus:  A  Review  of Phytochemistry  and  Pharmacology. [diunduh  10  Desember  2021].  Tersedia dari https://www.frontiersin.org/ articles/10.3389/fphar.2018.00108/
full#h1
17. Hidayati D N, Sumiarsih C, Mahmudah U.  Standarisasi  Non  Spesifik  Ekstrak Etanol  Daun  dan  Kulit  Batang  Berenuk (Crescentia  cujete  Linn)  (skripsi). Semarang:  Universitas  Wahid  Hasyim:
2011.
18. Chatepa  L  E  C  dan  Emmanuel  C  M. Proximate,  physical  and  chemical composition  of  leaves  and  seeds  of Moringa (Moringa oleifera) from Central Malawi: A potential for increasing animal food supply in the 21st century. [diunduh 10 Desember 2021]. Tersedia dari: https:// academicjournals.org/journal/AJAR/ article-full-text-pdf/273ECD759566
19. Liwandouw,  J.  R,  Henry  S,  Widhi  B. Pengaruh  Ekstrak  Etanol  Buah  Pinang Yaki  (Areca  Vestiaria)  Terhadap Gambaran  Makroskopis  Organ  Hati Pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar (Rattus  Norvegicus)  (skripsi).  Manado: Universitas Sam Ratulangi: 2017. 20. Widyantoko. Karakteristik Sifat Na-CMC,
Gum Arab  dan  Xanthan  Gum  [diunduh 8  Agustus  2021].  Tersedia  dari:  https:// lordbrokrn.wordpress.com/2013/06/05/ karakteristik-sifat-na-cmc-dan-gum-arab/
21. Agustya  H  M.  Toksisitas  Subkronik Ekstrak Etanol Daun Pugun Tanoh (Picria Fel-Terrae  Lour.)  Terhadap  Hati  Dan Limpa Dari Tikus Putih (skripsi). Medan: Universitas Sumatera Utara: 2018.