Abstrak —Belimbing  wuluh  merupakan  tanaman  yang mengandung senyawa metabolit sekunder, seperti tanin, saponin, flavonoid  dan  terpenoid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  (Averrhoa bilimbi) terhadap mortalitas dan perkembangan larva Spodoptera  litura.  Metode  yang  digunakan  untuk  penelitian  ini adalah  metode  maserasi.  Parameter  yang  diamati  adalah mortalitas, kandungan antifeedant, serta perkembangan pembentukan  pupa.  Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  0%, 10%,  20%,  30%,  40%,  50%,  60%,  70%,  80%,  dan  90%.  Larva uji  yang  digunakan  sebanyak  20  ekor.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  konsentrasi  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  yang efektif  untuk  membunuh  larva  S.  litura  yaitu  antara  80-90% dimana hasil analisis probit nilai LC50 terdapat pada konsentrasi 84% (LC50 – 84,2%).
Kata  Kunci —  Belimbing  wuluh  (Averrhoa  bilimbi),  Ekstrak daun, LC50, Spodoptera litura.

## I. PENDAHULUAN
NDONESIA  merupakan  negara  yang  terkenal  dengan keanekaragaman  tanaman  terutama  hasil  pertanian  dan rempah-rempah.  Hal  ini  didukung  oleh  keadaan  geografis Indonesia  yang  beriklim  tropis  dengan  curah  hujan  sering terjadi  sepanjang  tahun.  Salah  satu  keanekaragaman  hayati yang terdapat di Indonesia adalah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi).  Belimbing  wuluh  tumbuh  hampir  di  seluruh  daerah, namun belum dibudidayakan secara khusus [1].
Daun  belimbing  wuluh  mengandung  tanin,  sulfur,  asam format  dan  peroksida  [2].  Menurut  rujukan  [3]  menyatakan bahwa  daun  belimbing  wuluh  (A.bilimbi)  mengandung senyawa metabolit sekunder diantaranya senyawa tanin, selain itu  daun  belimbing  wuluh  juga  mengandung  sulfur,  asam format.  Rujukan  [4]  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun belimbing  wuluh  mengandung  flavonoid,  saponin  dan  tanin. Selain  itu    menurut  rujukan  [5]  menjelaskan  bahwa  di  dalam daun  belimbing  wuluh  selain  tanin  juga  mengandung peroksidase, kalsium oksalat dan kalium sitrat.
Salah  satu  serangga  yang  dianggap  sebagai  hama  budidaya yang  cukup  mempengaruhi  budidaya  yakni  ulat  grayak (Spodoptera  litura).  Hama  ini  merupakan  salah  satu    jenis hama  terpenting  yang  menyerang  tanaman  palawija  dan sayuran  di  Indonesia.  Ulat  grayak  sering  mengakibatkan
penurunan  produktivitas  bahkan  kegagalan  panen  karena menyebabkan  daun  dan  buah  sayuran  menjadi  sobek, terpotong-potong  dan  berlubang.  Bila  tidak  segera  diatasi maka  daun  atau  buah  tanaman  di  areal  pertanian  akan  habis [6]. Serangan hama pengganggu tanaman yang tidak terkendali akan  menyebabkan  kerugian  yang  cukup  besar  bagi  para petani.  Hama  S.  litura  merupakan  hama  yang  bersifat  polifag atau  dengan  kata  lain  memiliki  banyak  inang  dari  berbagai jenis  tanaman  holtikultura,  tanaman  pangan,  tanaman  industri sehingga  agak  sulit  untuk  dikendalikan  [7].  Menurut  rujukan [8]  menginformasikan  bahwa  ditemukan  lebih    dari  210 spesies  tanaman  yang  termasuk  ke  dalam  inang  dari Spodoptera litura. Beberapa spesies dari tanaman pangan yang diserang  diantaranya  adalah  talas  toma,  kacang  tanah,  kapas, yute,  jagung,  kedelai,  padi,  teh,  tembakau,  sayuran  yang meliputi sawi, cabe, buncis, ubi kacang dan kentang [9].
Pengendalian  terhadap  ulat  grayak  (S.  litura)  pada  tingkat petani  pada  umumnya  masih  menggunakan  insektisida  atau pestisida  yang  berasal  dari  senyawa  kimia  sintesis  yang  dapat merusak  organisme  non  target,  resistensi  hama,  resurgensi hama  dan  menimbulkan  efek  residu  pada  tanaman  dan lingkungan. Untuk meminimalkan penggunaan pestisida kimia perlu alternatif pengendalian pengganti yang efektif dan aman terhadap lingkungan.
Biopestisida  merupakan  pestisida  yang  tersusun  atas  bahan alami  atau  berasal  dari  mahluk  hidup.  Biopestisida  dapat dibedakan  menjadi  dua  yakni  pestisida  hayati  dan  pestisida nabati. Pestisida hayati merupakan formulasi yang mengandung  mikroba  tertentu  baik  jamur,  bakteri  ataupun virus  yang  memiliki  sifat  antagonis  terhadap  mikroba  lainnya yang merugikan atau penyebab penyakit dari senyawa tertentu yang  dihasilkan  dan  bersifat  racun  baik  bagi  serangga  atau nematode.  Sedangkan  pestisida  nabati  adalah  hasil  ekstraksi dari  bagian  tertentu  dari  tanaman  baik    daun,  buah,  biji, batang,  atau  akar  yang  memiliki  senyawa  atau  metabolit sekunder yang bersifat racun bagi hama. Pestisida nabati pada umumnya  digunakan  untuk  pengendalian  hama  (bersifat insektisidal) [10]. Penggunaan  pestisida  nabati  yang

## Pengaruh Ekstrak Daun Belimbing Wuluh

## ( Averrhoa bilimbi ) Terhadap Mortalitas dan Perkembangan Larva Spodoptera litura
Bintang Wahyu Syah dan Kristanti Indah Purwani
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia e-mail : kristanti@bio.its.ac.id
I
Tabel 1.
Pengamatan Mortalitas Larva pada Perlakuan 24 Jam
Konsentrasi (%) Jumlah larva (ekor) Rata-rata
Jumlah larva mati Mortalitas (%) 0 20 0 0 a 10 20 0 0 a 20 20 0 0 a 30 20 1 5 ab 40 20 1 5 ab 50 20 3 15 b 60 20 7 35 bc 70 20 7 35 bc 80 20 8 40 c 90 20 10 50 d
Keterangan : huruf yang sama pada kolom menunjukkan tidak beda nyata berdasarkan uji Tukey dengan tingkat kepercayaan (95%)
Tabel 2. Perkembangan Larva menjadi Pupa setelah Pemaparan
Lama perkembangan instar (hari) Konsentrasi Ekstrak Instar 3 Instar 4 Instar 5 Pre pupa Pupa 0% 3-4 5-6 8-9 10-11 0 10% 3-4 5-6 8-9 10-11 0 20% 3-4 5-6 8-9 10-11 0 30% 3-4 5-6 8-9 10-11 11-12 40% 3-4 5-6 8-9 10-11 11-12 50% 3-4 5-6 8-9 10-11 0 60% 3-4 5-6 7-8 9-10 11-12 70% 3-4 5-6 7-8 9-10 11-12 80% 3-4 5-6 7-8 9-10 11-12 90% 3-4 5-6 7-8 9-10 0
berasal  dari  tumbuhan  merupakan  salah  satu  pestisida  yang dapat  digunakan  untuk  mengendalikan  serangan  hama  dan penyakit    tanaman.  Pestisida  ini  berbahan  aktif  tunggal  atau majemuk  dapat  berfungsi  sebagai  penolak,  anti  fertilitas (pemandul),  pembunuh  dan  bentuk  lainnya.  Di  alam  ini terdapat  lebih  dari 1.000 spesies tumbuhan yang mengandung insektisida,  lebih  dari  380  spp  mengandung  zat  pencegah makan  (antifeedant),  lebih  dari  270  spp  mengandung  zat penolak  (repellent),  lebih  dari  35  spp  mengandung  akarisida dan  lebih  dari  30  spp  mengandung  zat  penghambat pertumbuhan  [11].  Didalam  penelitian  ini  akan  dikaji  lebih lanjut  tentang  pengaruh  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  (A. bilimbi)  sebagai  pestisida  nabati  terhadap  mortalitas  larva  S. litura dengan menggunakan daun sawi (Brassica rapa) sebagai media pakan.
a b c d
Gambar  1.Perbandingan  larva  kontrol  dengan  yang  mati  setelah pemaparan (Dokumentasi pribadi)
Keterangan  gambar  :  (a)  larva  kontrol,  (b)  larva  mati  pada konsentrasi  60%,  (c)  larva  mati  pada  konsentrasi  70%,  (d)  dinding tubuh larva rusak atau mengkerut
a c b
Gambar  2.  Perbandingan  pupa  kontrol  dengan  yang  mati  setelah pemaparan (Dokumentasi pribadi)
Keterangan gambar : (a) pupa kontrol, (b) pupa terpapar ekstrak 70%, (c) pupa terpapar ekstrak 80%

## I. METODE PENELITIAN

## A. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Januari  sampai  dengan April  2016  di  laboratorium  Botani  jurusan  Biologi  Institut Teknologi  Sepuluh  Nopember  Surabaya,  proses  ekstraksi dilakukan  di  laboratorium  Unit  Layanan  Pengujian  Fakultas Farmasi kampus B Universitas Airlangga (UA) Surabaya.

## B. Ekstraksi Daun Belimbing Wuluh
Ekstrak  daun  belimbing  wuluh  (A.  bilimbi)  dibuat  dengan menggunakan  metode  maserasi  atau  perendaman  dengan beberapa  modifikasi.  Langkah  awal  yang  dilakukan  dimulai dengan mengambil daun belimbing wuluh (A. bilimbi) di area kampus  ITS,  kemudian  dibersihkan  dengan  aquades  dan dikering-anginkan  tanpa  terpapar  oleh  sinar  matahari  secara langsung.  Setelah  kering,  daun  dipotong  kecil-kecil  dan dihaluskan  menggunakan  mesin  penghalus  (blender).  Dari hasil  penghalusan  kemudian  dikeringkan  dalam  suhu  ruang,
setelah kering kemudian di timbang beratnya. Kemudian hasil pemblenderan  di  maserasi  dalam  etanol  96%  dengan perbandingan 1:5 (10 gram serbuk dengan 50 ml etanol) [12]. Perendaman atau proses maserasi di lakukan pada suhu kamar hingga  72  jam.  Proses  perendaman  bertujuan  untuk meluruhkan  seluruh  kandungan  senyawa  bioaktif  yang terkandung  di  dalam  daun  tersebut  agar  dapat  tertarik  keluar. Proses  maserasi  menggunakan  konsep  senyawa  polar menarik senyawa polar dan sebaliknya, serta senyawa organik menarik senyawa  organik  dan  sebaliknya  [13].  Setelah  72  jam,  hasil maserasi di saring dengan menggunakan corong buchener yang di  alasi  dengan  kertas  saring,  kemudian  hasil  ekstraksi  diuap dengan  menggunakan  Rotary  evaporator  sampai  dihasilkan ekstrak  murni  daun  belimbing  wuluh  tersebut  disimpan  di lemari pendingin sampai digunakan untuk proses pengujian.

## C. Persiapan Larva S. litura
Larva  S.  litura  diperoleh  dari  Balitas  Malang  dan dimasukkan  ke  dalam  toples,  lalu  toples  di  tutup  dengan  kain tipis  kemudian  diikat  dengan  menggunakan  karet.  Larva tersebut  dipelihara  hingga  berubah  menjadi  larva  instar  III, makanan  yang  diberikan  untuk  pemeliharaan  larva  ini  adalah daun  sawi  (Brasica  rapa)  segar  yang  diganti  setiap  hari  serta kotorannya  dibersihkan  dengan  kuas  sampai  memasuki  instar III  yang  siap  untuk  digunakan  sebagai  larva  uji  [14].  Dalam rujukan [15] menyebutkan bahwa instar III-IV merupakan fase yang  paling  banyak  menyerang  dimana  larva  ini  dapat memakan  seluruh  daun  hingga  ketulang-tulang  daun  sehingga sangat  mengganggu  pertumbuhan  tanaman  yang  diserang. Dengan adanya hal tersebut maka digunakan larva instar III.

## D. Metode Pengujian
Pengujian  (uji  pendahuluan  ataupun  uji  lanjutan)  dilakukan dengan metode pencelupan daun  (leaf dipping methods) [16]. Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  dalam  uji  pendahuluan adalah  10%  -  90%  dan  kontrol  dengan  tiga  kali pengulangan. Larva  S.litura  yang  telah  mencapai  instar  III  disiapkan  dan diletakkan  dalam  botol  uji  [15].  Daun  sawi  ditimbangkan beratnya  3  gram.  Setelah  itu,  daun  sawi  direndam  dalam masing-masing  konsentrasi  ekstrak  selama  ±  10  detik  dan dikering-anginkan  pada  suhu  ruang.  Selanjutnya  daun  sawi dimasukkan  ke  dalam  botol  uji  sebagai  pakan    ulat  S.litura. Setiap  perlakuan  digunakan  sebanyak  20  ekor  larva  S.litura dengan  pengulangan  tiga  kali  untuk  tiap  konsentrasi  dan  1 kontrol. Setiap 24 jam daun sawi diganti dengan yang baru dan dibersihkan  kotoran  dalam  toples  setiap  hari  dengan menggunakan  kuas.  Pengamatan  dilakukan  pada  waktu  yang sama setiap harinya hingga mencapai masa pupa.

## E. Parameter Pengamatan
Parameter  yang  diamati  adalah  mortalitas  (LC50), antifeedant (nafsu makan), dan perkembangan (instar 3 sampai menjadi  pupa)  dari  S.litura.  Pengamatan  untuk  parameter mortalitas  dilakukan  dengan  menghitung  jumlah  larva  yang mati  1  hari  setelah  aplikasi  pemberian  ekstrak.  Parameter perkembangan  yaitu  pengamatan  larva  ulat  grayak  instar  III
yang  masih  hidup  sampai  menjadi  pupa.  Pengamatan perkembangan diamati untuk mengetahui dampak lanjutan dari perlakuan yang digunakan. Perkembangan larva menjadi pupa kurang  lebih  membutuhkan  waktu  20  hari  [17].  Jika  dalam kurun waktu tersebut larva tidak membentuk pupa maka dapat dikatakan ekstrak daun belimbing wuluh tersebut berhasil dan jika  tidak  maka  ekstrak  tersebut  kurang  efektif.  Sedangkan pengamatan  antifeedant  memiliki  tujuan  untuk  melihat kandungan  senyawa  antifeedant  dari  daun  belimbing  wuluh terhadap  larva  S.  litura  yang  dilakukan  dengan  metode  residu pada daun.

## II. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh  (Averrhoa bilimbi) terhadap Mortalitas Larva S. litura
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  toksisitas dari  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  (A.  bilimbi)  terhadap mortalitas  larva  S.  litura  yang  berlangsung  selama  24  jam. Perlakuan  dilakukan  dengan  berbagai  macam  konsentrasi mulai dari 10-90% serta kontrol yang dilakukan dengan 3 kali pengulangan.  Kemudian  dilakukan  analisis  probit  untuk mencari nilai LC50 dan uji Anova One Way untuk mengetahui pengaruh  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  terhadap  mortalitas larva S. litura. Berikut hasil pengamatan mortalitas larva pada perlakuan 24 jam (Tabel 1.):
Berdasarkan Tabel 1. hasil pengamatan mortalitas setelah 24 jam  pemaparan  dengan  ekstrak  daun  belimbing  wuluh, didapatkan persentase kematian  larva S. litura sebesar  0-50% dengan  jumlah  rata-rata  kematian  pada  masing-masing perlakuan adalah 0, 0, 1, 1, 3, 7, 7, 8 dan 10 ekor. Sedangkan pada  perlakuan  kontrol  terjadi  kematian    0%  sehingga  tidak perlu  dilakukan  koreksi  Abbot.  Menurut  teori,  apabila  terjadi kematian pada kontrol dengan persen mortalitas antara 5-20% maka persen mortalitas harus dilakukan koreksi Abbot [18].
Pada  ekstrak  dengan  konsentrasi  0-40%  mortalitas  larva  S. litura tidak terjadi beda nyata dengan kontrol, sedangkan pada ekstrak  dengan  konsentrasi  50-90%  mortalitas  larva  S.  litura berbeda  nyata  dengan  kontrol,  yang  berarti  pada  konsentrasi 50%  telah  dapat  mempengaruhi  mortalitas  larva  S.  litura. Konsentrasi  50-70%  menyebabkan  mortalitas  larva  S.  litura lebih  rendah  dibandingkan  konsentrasi  80%,  sedangkan konsentrasi  80%  menyebabkan  mortalitas  larva  S.  litura  lebih rendah  dibandingkan  konsentrasi  90%.  Pada  konsentrasi  50% telah dapat membunuh larva S. litura, namun pada konsentrasi diantara  80-90%  baru  dapat  menyebabkan  kematian  larva  S. litura  sebanyak  50%  dari  total  populasi.  Hal  ini  dikarenakan jumlah  toksik  yang  terkandung  dalam  ekstrak daun belimbing wuluh  terbilang  relatif  sedikit,  sehingga  mortalitas  larva  S. litura  baru  mengalami  kematian  jika  diberi  konsentrasi  diatas 50%.
Pada  penelitian  ini  yang  terjadi  adalah  larva  mengalami kematian  setelah  24  jam  pemaparan  ekstrak  daun  belimbing wuluh  yang  mempunyai  ciri-ciri  tubuh  larva  mengeras, berwarna  cokelat  sampai  kehitaman  (Gambar  1b),  tubuh
memanjang dan lentur (Gambar 1c), serta dinding tubuh larva rusak  atau  mengkerut  (Gambar  1d).    Menurut  rujukan  [19] mengatakan  larva-larva  yang  mati  pada  tubuhnya  terjadi perubahan warna dimana pada bagian dorsal berwarna kuning, pucat  dan  bagian  ventral  berwarna  cokelat  muda  dan  lama- kelamaan  di  seluruh  tubuh  terjadi  pengerasan,  berubah  warna menjadi cokelat kehitaman.
Kematian  larva  ini  diduga  disebabkan  oleh  metabolit sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  belimbing wuluh  yang  bersifat  toksik.  Mortalitas  larva  S.  litura  terjadi karena  metabolit  sekunder  yang  terkandung  didalam  ekstrak daun  belimnbing  wuluh  yang  telah  di  uji.  Berdasarkan  hasil screening  fitokimia  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  memiliki kandungan  metabolit  sekunder  antara  lain  yaitu  4,11%  tanin, 3,61%  saponin,  1,76%  flavonoid  dan  2,01%  terpenoid. Senyawa  zat  toksik  yang  terkadung  dalam  daun  belimbing wuluh  masuk  dapat  masuk  melalui  dinding  tubuh  larva  dan melalui mulut karena larva biasanya mengambil makanan dari tempat  hidupnya  [20].  Menurut  rujukan  [21]  mengatakan bahwa  dinding  tubuh  serangga  merupakan  bagian  tubuh  yang dapat menyerap zat toksik dalam jumlah besar.
Mekanisme  kerja  pestisida  nabati  dari  ekstrak  daun belimbing  wuluh  dalam  membunuh  larva  yaitu  zat  toksik masuk  melalui  kontak  dengan  kulit.  Kemudian  diaplikasikan langsung  menembus  integumen  serangga  (kutikula),  trakea atau  kelenjar  sensoris  dan  organ  lain  yang  berhubungan dengan kutikula. Bahan kimia yang terkandung dalam pestisida nabati  melarutkan  lemak  atau  lapisan  lilin  pada  kutikula sehingga  menyebabkan  bahan  aktif  yang  terkandung  dalam pestisda nabati tersebut dapat menembus tubuh serangga [22]. Racun  kontak  dapat  dilihat  di  Gambar  1d  yang  menunjukkan dinding  tubuh  larva  rusak  atau  mengkerut.  Menurut  rujukan [23]  menyatakan  bahwa  dinding  tubuh  merupakan  bagian tubuh  serangga  yang  dapat  menyerap  senyawa  bioaktif  yang terkandung dalam bioinsektisida dalam jumlah besar. Dinding tubuh (integumen) serangga terdiri dari satu lapis sel epidermis yang  dapat  menghasilkan  lapiran  luar  yang  keras.  Sebagian besar  lapisan  luar  ini  terdiri  dari  kutikula  dan  beberapa  zat kimia  lainnya.  Lapisan  terluar  dinding  tubuh  serangga  adalah lapisan lipid polifenol. Kemudian lapisan epikutila merupakan lapisan  gelap,  keras,  kering  dan  kaku  namun  larut  dalam  air. Setelah  itu  terdapat  lapisan  epidermis  dan  lapisan  membran dasar  yang  bersifat  semipermeabel  dan  dapat  memilih  jenis senyawa yang dapat melewatinya.
Senyawa  fenol  mempunyai  sifat  racun  dehidrasi.  Racun tersebut  merupakan  racun  kontak  yang  dapat  mengakibatkan kematian  karena  kehilangan  cairan  terus-menerus. Larva yang terkena  racun  ini  akan  mati  karena  kekurangan  cairan.  Racun kontak  adalah  pestisida  nabati  yang  masuk  ke  dalam  tubuh larva melalui kulit, celah atau lubang alami pada tubuh. Larva akan  mati  apabila  bersinggungan  langsung  (kontak)  dengan pestisida  nabati  tersebut.  Kebanyakan  racun  kontak  juga berperan sebagai racun lambung [24].
Selain itu, pestisda nabati ekstrak daun belimbing wuluh ini masuk  ke  dalam  tubuh  larva  melalui  mulut  melalui  makanan
yang  dimakan.  Larva  mati  dikarenakan  racun  yang  masuk melalui  makanan  kemudian  dalam  sel  tubuh  larva  akan menghambat  metabolisme  sel  yaitu  menghambat  transport elektron dalam mitokondria sehingga pembentukan energi dari makanan sebagai sumber energi dalam sel tidak terjadi dan sel tidak  dapat  beraktifitas,  hal  ini  yang  menyebabkan  larva  mati [17].  Racun  perut  dapat  dilihat  di  Gambar  1b  yang menunjukkan  tubuh  larva  mengeras,  berwarna  cokelat  sampai kehitaman,  dan  Gambar  1c  tubuh  memanjang  dan  lentur. Senyawa  metabolit  sekunder  seperti  saponin  dan  alkaloid merupakan  Stomach  poisoning  atau  racun  perut  bagi  larva. Mekanisme  dari  saponin  yaitu  dapat  menurunkan  tegangan permukaan  selaput  mukosa  traktus  digestivus  larva  sehingga dinding traktus digestivus menjadi korosif. Saponin juga dapat membentuk  senyawa  kompleks  dalam  membran  plasma  dan mengganggu  sifat  permeabilitas  membran  [23].  Saponin  juga dapat menurunkan aktivitas enzim pencernaan dan penyerapan makanan.  Saponin  juga  menyebabkan  iritasi  lambung  apabila dimakan [25].

## B. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh  (Averrhoa bilimbi) terhadap Perkembangan Larva S. litura
Pada Tabel 2. menunjukkan perkembangan larva menjadi pupa  setelah  pemaparan  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  untuk mengetahui  pengaruhnya  terhadap  perkembangan  larva  S. litura  dari  instar  3,  instar  4,  instar  5,  fase  prepupa  dan  fase pupa.  Pada  penelitian  ini  perkembangan  pupa  berlangsung selama  11-12  hari,  menurut  rujukan  [26]  masa  stadia  larva berlangsung selama 15-30 hari.
Dalam penelitian ini terjadi kegagalan pembentukan pupa pada konsentrasi 10%, 20%, 50%, 90% dan juga pada kontrol. Hal  ini  diduga  disebabkan  oleh  faktor  lingkungan.  Dugaan faktor  yang  mempengaruhi  kegagalan  pembentukan  pupa antara  lain  suhu,  kelembapan,  serta  tempat  hidup  larva  uji  di laboratorium  botani  kurang  memenuhi  standart  tertentu  agar larva  dapat  hidup  dan  tumbuh  dengan  baik.  Menurut  rujukan [27]  periode  pupa  biasanya  dihabiskan  di  tanah  dan berlangsung  selama  11-13  hari  pada suhu 25o C, kelembapan yang sedikit rendah dan frekuensi hujan yang rendah. Dimana dalam  penelitian  ini  kemungkinan  wadah  botol  uji  yang digunakan  terlalu  kecil  untuk  memelihara  larva  kontrol sehingga menjadi lebih cepat lembab dan kotor.
Pada  Tabel  2.  dapat  diketahui  bahwa  ekstrak  daun belimbing  wuluh  tidak  memberikan  pengaruh  terhadap perkembangan  instar.  Hal  ini  terlihat  dari  rata-rata  lama perkembangan  instar  sampai  pupa  berlangsung  selama  11-12 hari, dimana konsentrasi 0-50% dan 60-90% sebenarnya tidak ada beda nyata yang dibuktikan pada uji mortalitas  (Tabel 1.). Menurut  rujukan  [28]  menyatakan  bahwa  saponin  dapat mengikat  sterol  bebas  dalam  pencernaan  makanan,  dimana sterol  berperan  sebagai  precursor  hormon  ekdison,  sehingga dengan  menurunnya  jumlah  sterol  bebas  akan  mengganggu proses  pergantian  kulit  (moulting)  pada  serangga.  Hormon ekdison  berfungsi  untuk  membentuk  organ  tubuh,  organ pernapasan dan organ pencernaan. Hormon ekdison tidak akan terbentuk  apabila  pada  saat  proses  pertumbuhan  larva  sudah
terjadi  pertumbuhan  yang  tidak  normal,  sehingga  pada  tubuh larva  tidak  terjadi  keseimbangan  sistem  hormonal  dan  terjadi kegagalan  proses  pembentukan  organ-organ  yang  akhirnya pupa menjadi mati [29].
Senyawa  bioaktif  seperti  alkaloid  menyebabkan  perubahan warna pada tubuh pupa menjadi lebih transparan (Gambar 2b) [30],  sedangkan  saponin  dan  tanin  dapat  menghambat pertumbuhan  termasuk  gagalnya  pembentukan  pupa  (Gambar 2c).  Sesuai  dengan  rujukan  [31]  bahwa  rendahnya  pupa  yang dihasilkan  disebabkan  pakan  yang  dikonsumsi  oleh  larva makin  sedikit,  sehingga  proses  perubahan  dari  prepupa  ke pupa tidak berjalan sempurna bahkan gagal membentuk pupa. Rujukan  [32]  menjelaskan  bahwa  ada  empat  gangguan terhadap  larva  untuk  membentuk  pupa  (kepompong)  setelah memakan  senyawa  beracun  yaitu,  1)  larva  instar  akhir  mati sebelum atau pada proses berkepompong, 2) larva berkembang menjadi  kepompong  yang  tidak  normal,  3)  larva  berkembang menjadi kepompong yang berbentuk normal, tetapi mati dalam fase  kepompong  (sebelum  imago  muncul),  4)  larva berkembang  menjadi  kepompong  yang  berbentuk  normal, tetapi  imago  yang  muncul  tidak  normal.  Untuk  mencegah banyaknya  senyawa  racun  yang  masuk  ke  dalam  tubuh serangga,  maka  serangga  melakukan  kompensasi  dengan  cara menurunkan laju konsumsi sehingga mengakibatkan timbulnya gangguan pada berbagai aktivitas serangga seperti pertumbuhan dan perkembangan.
Ciri-ciri  kematian  larva  S.  litura  yang  gagal  dalam pembentukan  pupa  berbeda  dengan  ciri-ciri  kematian  larva  S. litura pada perlakuan yang diberi ekstrak. Larva yang mati dan gagal dalam pembentukan pupa, ciri-cirinya tubuh masih utuh tetapi tidak membentuk pupa, sedangkan pada perlakuan yang diberi  ekstrak  larva  mati  dengan  ciri-ciri  tubuh  abnormal. Rujukan  [33]  mengatakan  bahwa  serangga  akan  terhambat pertumbuhan  dan  perkembangannya  atau  mati  apabila  faktor lingkungan tempat hidupnya tidak mendukung baik dari faktor fisis atau dari faktor makanan. Sedangkan jika ada larva yang masih  mampu  bertahan  hidup  sampai  pada  periode  waktu tertentu dan bahkan ada larva yang dapat hidup sampai stadia pupa  tetapi  tidak  lama  kemudian    mati.  Hal  ini  terjadi  karena semakin  tinggi  kadar  racun  yang  ada  di  dalam  tubuh  suatu organisme,  semakin  sulit  suatu  organisme  menghambat  atau menetralisir  racun  yang  ada  di  dalam  tubuhnya.  Menurut rujukan [34] menjelaskan bahwa di saat memasuki stadia pupa, banyak  sekali cadangan glikogen dan protein yang diperlukan untuk  pembentukan  kokon,  dengan  demikian  aktivitas biokimia lebih banyak diarahkan untuk pembentukan senyawa- senyawa  tersebut,  sehingga  aktivitas  metabolisme  untuk menghambat  atau  menetralisir  racun  yang  ada  di  dalam tubuhnya menjadi menurun dan akibatnya pupa yang terbentuk akhirnya mati (tidak dapat hidup sampai ke stadia imago).
Dalam  penelitian  ini  ekstrak  daun  belimbing  wuluh menunjukkan dan memperkuat bahwa diduga kandungan jenis racun adalah racun perut dan sedikit racun kontak bagi larva S. litura, dikarenakan pada penelitian ini ekstrak daun belimbing wuluh  hanya  dapat  membunuh  sebagian  larva  S.  litura  dalam
waktu  24  jam,  sedangkan  sebagian  lagi  membutuhkan  waktu yang lama. Racun perut adalah senyawa bioaktif yang terdapat dalam  bioinsektisida  yang  masuk  melalui  mulut  dan  saluran makanan. Racun perut biasanya memerlukan waktu yang lebih lama  untuk  memperlihatkan  pengaruhnya  jika  dibandingkan dengan  racun  kontak  dan  racun  pernapasan.  Dalam  kasus  ini, ekstrak  daun  belimbing  wuluh  kurang  tepat  jika  dikatakan sebagai  racun  kontak  bagi  larva  S.  litura,  karena  larva  yang mati  dalam  waktu  24  jam  hanya  sebagian  saja,  sedangkan sebagian  lagi  membutuhkan  waktu  yang  cukup  lama.  Pada umumnya racun kontak hanya memerlukan sedikit waktu untuk membunuh  atau  mematikan  larva.  Pada  penelitian  ini,  ekstrak daun  belimbing  wuluh  membutuhkan  waktu  kurang  lebih  7 hari  untuk  membunuh  80-90%  dari  jumlah  populasi  larva. Diduga  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  terakumulasi  didalam tubuh  larva  dan  mulai  bereaksi  setelah  kurang  lebih  7  hari, karena  pada  hari  ke-7  tersebut  larva  mulai  banyak  yang  mati. Dari  hasil  penelitian  ini  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  daun belimbing  wuluh  merupakan  racun  kronis  karena  senyawa yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  belimbing  wuluh menimbulkan  efek  kematian  sebagian  besar  larva  S.  litura dalam jangka waktu yang lama.

## III. KESIMPULAN/RINGKASAN

## A. Kesimpulan
Ekstrak  daun  belimbing  wuluh  berpengaruh  terhadap mortalitas  larva  S.  litura,  dimana  dengan  konsentrasi  50% sudah dapat membunuh larva S. litura. Ekstrak daun belimbing wuluh  tidak  berpengaruh  terhadap  perkembangan  larva  S. litura,  ditunjukkan  dengan  rata-rata  lama  stadia  larva  pada semua  konsentrasi  berkisar  11-12  hari.  Konsentrasi  ekstrak daun  belimbing  wuluh  yang  efektif  untuk  membunuh  larva  S. litura  yaitu  antara  80-90%  dimana  hasil  analisis  probit  nilai LC50 terdapat pada konsentrasi 84% (LC50 – 84,2%).

## B. Saran
Pada  penelitian  ini  tidak  dilakukan  pengujian  senyawa  - senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  belimbing wuluh  (A.  bilimbi)  karena  itu  perlu  dilakukan  pengujian senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  belimbing wuluh (A. bilimbi) sehingga didapatkan senyawa yang spesifik yang  terkandung  dalam  ekstrak.  Selain  itu  perlu  dilakukan pengujian  secara  in  vivo  sehingga  dapat diketahui keefektifan ekstrak daun belimbing wuluh (A. bilimbi) untuk mengendalikan S. litura pada skala lapangan.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Abdul. 2008. Air Belimbing Wuluh Sebagai Alternatif. http://id.shvoong.com (21 Mei 2015).
[2] Wijayakusuma, H.M.H dan Dalimarta. 2006. Ramuan Tradisional untuk Pengobatan Darah Tinggi. Jakarta: Swadaya.
[3] Arland.  2006.  IPTEK  OBAT:  Belimbing  Wuluh.  www.mencinta  i- islam@ yahoogroups. com/ belimbimng wuluh. (19 Mei 2015).
[4] Faharani,  G.B.  2009.  Uji  Aktifitas  Antibakteri Daun Belimbing Wuluh Terhadap  Bakteri  Streptococcus  Aureus  dan  Achercia  Coli  secara Bioautografi. FMIPA UI Jakarta.
[5] Dalimarta,  S.  2008.  36  Resep  Tumbuhan  Obat  Untuk  Menurunkan Kolesterol. Jakarta: Penebar Swadaya.
[6] Samsudin,  2008.  Virus  Patogen  Serangga  :  Bio  –  Insektisida  Ramah Lingkungan, http://www.pertaniansehat.or.id (20 Mei 2015).
[7] Arifin,  M.  2012.  Bioinsektisida  S/NPV  untuk  Mengendalikan  Ulat Grayak  Mendukung  Swasembada  Kedelai.  Pengembangan  Inovasi Pertanian. Balai Besar dan Pengembangan Teknologi Pertanian Bogor.
[8] Noma,  T.,  Colunga-Gracia,  M.,  Brewer,  M.,  Landis,  J.,  and  Gooch,  A. 2010.Oriental  Leafworm  Spodoptera  litura.  Michigan  State  University infasive species factsheets. Michigan State University IPM program and M. Philip of Michigan Departement of Agriculture.
[9] EPPO.  1990.  Data  Sheet  on  Quarantine  Pest  Spodoptera  littoral  and Spodoptera  litura.  CABI  and  EPPO  for  the  EU  under  Contract 90/399003.
[10] Djunaedy,  A.  2009.  Biopestisida  sebagai  Pengendali  Organisme Pengganggu  Tanaman  (OPT)  yang  Ramah  Lingkungan.  Embryo  6: 0216-0188.
[11] Susetyo,  T.  2008.  Teknologi  Pengendalian  Organisme  Pengganggu Tumbuhan  (OPT)  Ramah  Lingkungan,  Direktorat  Perlindungan Tanaman Pangan Jakarta, 83 halaman.
[12] Zuhrotun,  A.,  Suganda,  A.  G.,  dan  Nawawi,  A.,  2010,  phytochemical Study  OF  Ketapang  Bark  (Terminalia  catappa  L.),  International
Conference on Medicinal Plants,
Bandung (online), http//:pustaka.unpad.ac.id/wpcontent/uploads/201108/adez_terminalia_ full-paper_finale- 1.pdf., (20 Mei 2015).
[13] Lehninger.  1982.  Dasar-Dasar  Biokimia.  Jilid  1.  Jakarta  :  Penerbit Erlangga.
[14] Tennyson, S., Samraj, D., Jeyasundar, D., Chalieu., and Larvacidal, K., 2013. Efficacy Of Plant Oils Against The Dengue Vector Aedes aegypti (Diptera : Culicidae). Middle East J Sci Res 2013;13(1):64-68.
[15] Arifin, M., dan Sunihardi. 1997. Biopestisida SlNPVuntuk mengendalikan  ulat  grayak  Spodoptera  litura.  Warta  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian 9(5 dan 6): 3-5.
[16] Balfas,  R.,  dan  Willis,  M.  Pengaruh  Ekstrak  Tanaman  Obat  terhadap Mortalitas  dan Kelangsungan Hidup Spodoptera litura, Bul Litrro, Vol. 20, No. 2 (2009), 148-156.
[17] Sa’diyah,  N.  A.,  Purwani,  K.I.,  dan  Wijayanti,  L.  2013.  Pengaruh Ekstrak  Daun  Bintaro  (Cerbera  odollam)  terhadap  Perkembangan  Ulat Grayak  (Spodoptera  litura  F.).  Jurnal  Sains  dan  Seni  POMITS  Vol.  2, No.2, (2013) 2337-3520.
[18] Hasnah.,  Husni.,  dan  Purnama,  N.  N.  2013.  Keefektifan  Ekstrak  Daun Pare  (Momordica  charantia)  dalam  Mengendalikan  Crocidokomia pavonana F. pada Tanaman Sawi. Jurnal Floratek. Vol.8. Hal. 52-63.
[19] Makal,  H.V.G.,  dan  Deflly  A.S.  Turang.  2011.  Pemanfaatan  Ekstrak Kasar  Batang  Serai  untuk  Pengendalian  Larva  Crosidolomia  binotalis Zell. Pada Tanaman Kubis. Universitas Sam Latulangi, Manado.
[20] Yunita,  E.A.,  Suprapti  ,  N.H.,  dan  Hidayat,  J.S.  2009.  Ekstrak  Daun Teklan  (Eupatorium  riparium)  terhadap  Mortalitas  dan  Perkembangan Larva Aedes aegypti. Jurnal Bioma Vol 11 no 1 : 11-17.
[21] Sastrodihardjo. 1984. Pengantar Entomologi Terapan. Institut Teknologi Bandung, Bandung.
[22] Pradani. F., Ipa, M., Marina R., dan Yuliasih, Y. 2011. Status Resistensi Aedes  aegypti  dengan  Metode  Susceptibility  di  Kota  Cimahi  Terhadap Cypermethrin. Aspirator Vol. 3 No. 1 Tahun 2011 18-24.
[23] Darmanto,  Y.  2007.  Pengaruh  Ekstrak  Polar  Bebek  (Kalanchoe daigremontiana  Terhadap  Larva  Plutella  xylostella  Linnaeus.  Skripsi.
Program Studi Biologi. ITS. Surabaya.
[24] Panghiyangani,  R.,  Rahmiati.,  dan  Noor,  A.F.  2009.  Potensi  Ekstrak Daun  Dewa  (Gynura  pseudochina  Ldc)  sebagai  Larvasida  Nyamuk Aedes  aegypti  Vektor  Penyakit  Demam  Berdarah  Dengue.  Jurnal
Kedokteran Indonesia Vol.1.
[25] Utami,  S. 2010. Aktifitas Insektisida Bintaro (Cerbera odollam Gaertn) Terhadap Hama Eurema sp. pada Skala Laboratorium. Jurnal Penelitian Hutan Tanaman 7:211-220.
[26] Rahayu,  S.,Puspadi,K.,danMardian,  I.2009.PaketTeknologi  Produksi Benih Kedelai. NTB. BPPP Agro Inovasi.
[27] Carasi, R.C.1, Telan,  I.F., and Pera, B.V. 2014. Bioecology of Common Cutworm (S. litura) of Mulberry. International Journal of Scientific and Research Publications, Volume 4. ISSN 2250-3153.
[28] Nugraha, A., Setyaningrum, E., Wintoko, R., dan Kurniawan, B. 2011. The  Influence  of  Fruit  Extracts  Phaleria  macrocarpa  Against  Aedes
aegypti  Larvae  Development  of  Instar  III.  Jurnal  Universitas  Lampung ISSN 2337 -3776.
[29] Shinta,  A.,  Wigiati,  Y.,  dan  Sukowati,  S.,  2012.  Efektifitas  Larvasida Altosid  1,3G  Terhadap  Aedes  aegypti  di  Laboratorium.  Bul.  Penelit. Kesehat. Vol. 39, No.3, 2011:110-118.
[30] Cania, E. 2013. Uji Efektivitas Larvasida Ekstrak Daun Legundi (Vitex Trifolia)  Terhadap  Larva  Aedes  Aegypti.  Medical  Journal  of  Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013.
[31] Lestari,  M.  S.,  Martono,  E.,  dan  Trisyono,  Y.  A..  2005.  Bioaktifitas Ekstrak  Daun  Zodia  Euodia  Suaveolens  terhadap  Hama  Crocidolomia binotalis. Journal Agrosains 18(4):435-446.
[32] Prijono,  D.  1999.  Prospek  dan  Strategi  Pemanfaatan  Insektisida  Alami dan  PHT.  Halaman:  1-7.  Bahan  Pelatihan  pengembangan  dan Pemanfaatan Insektisida Alami. Pusat Kajian Pengendalian Hama-Hama Terpadu. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
[33] Sunjaya, P. I. 1970. Dasar-dasar Serangga Bagian Ilmu Hama Tanaman Pertanian. Bogor : IPB.
[34] Wigglesworth,  V.B.  1974.  Insect  Physiology.  Chapman  and  Hall. London.