ISSN: 1693-8615 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Uji Sitotoksik Fraksi n -Heksana, Etil Asetat, Etanol dari Ekstrak Etanolik Daun Ende ( Coccinia grandis (L.) Voigt) pada Sel HeLa The Cytotoxic Test of n -Hexane, Ethyl Acetate, and Ethanol Fraction from Ethanolic Extract of Ende (Coccinia Grandis (L.) Voigt.) Leaf on HeLa Cell

## NURAINI HARMASTUTI*, GUNAWAN PAMUDJI WIDODO, MARIA E.D.O. HUREK MAKING, MARIA
YANGSYE LENGGU, FEOLISTIN MIENCE POBAS
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518
* Korespondensi: nuraini_harmastuti@yahoo.co.id
(Diterima  12 Agustus 2011, disetujui 9 November 2011)
____________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Daun  ende  ( Coccinia  grandis (L.)  Voigt) adalah  salah  satu  tanaman  obat  yang  banyak digunakan  oleh  masyarakat  Nusa  Tenggara  Timur  (NTT). Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  efek  sitotoksik  fraksi n-heksana,  etil  asetat,  etanol  dari ekstrak  etanolik  daun  ende ( Coccinia grandis (L.) Voigt ) terhadap sel HeLa dengan menentukan nilai IC 50 . Serbuk daun ende diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96  %,  kemudian  difraksinasi dengan n-heksana,  etil asetat, dan etanol. Selanjutnya pengujian efek sitotoksik terhadap sel HeLa dengan  metode  MTT  ( Microculture  Tetrazolium  Salt). Respon  serapan  dikonversikan  ke  dalam rumus  viabilitas  sel.  Harga  IC 50 dihitung  dengan  persamaan  regresi  linear  hubungan  antara  log konsentrasi sampel uji dengan persen viabilitas sel HeLa. Hasil penelitian menunjukkan hasil efek sitotoksik  terhadap  sel HeLa  daun  ende  dengan  nilai IC 50 ekstrak  etanolik, fraksi n-heksana,  fraksi etil asetat, fraksi etanol berturut-turut 415,719 ppm; 307,142 ppm; 50303,71 ppm; dan 50722,424 ppm.
Kata kunci : Daun ende, sel HeLa, sitotoksik.
____________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Ende leaf (Coccinia grandis (L.) Voigt) is the one of plant that most popular in Nusa Tenggara Timur province. The study was aimed to know the cytotoxic effect of n-hexane, ethyl acetate, and ethanol fractions from ethanolic extract of ende leaf on hela cell and its IC 50 value. Dried ende was macerated  with  96  %  ethanol  solvent,  then  it  was  fractionated  by n-hexane, ethyl  acetate,  and ethanol  solvent.  Then it  was tested  the  cytotoxic by  MTT  ( Microculture  Tetrazolium Salt) method on HeLa cell The absorbance response was converted into abbreviation of cell viability. IC 50 value was calculated with linear regression equation between logarithm of concentration samples versus percentage  viability  of  HeLa  cell.  The  result  showed  that  the  cytotoxic  test  of ende  leaf  against HeLa  cell  presented  the  IC 50 value  of  ethanolic  extract  and n-hexane,  ethyl  acetate,  and  ethanol fractions were 415.719 ppm; 307.142 ppm; 50303.71 ppm; dan 50722.424 ppm, respectively.
Keywords : Coccinia grandis (L.) Voigt, cytotoxic, HeLa cell line. ____________________________________________________________________________________________
78 ~ Nuraini Harmastuti, Gunawan Pamudji Widodo, Maria E.D.O. Hurek Making,         J. Farmasi Indonesia Maria Yangsye Lenggu, Feolistin Mience Pobas

## PENDAHULUAN
Kanker  adalah  suatu  penyakit  di mana terjadi pertumbuhan sel-sel jaringan tubuh yang tidak normal, cepat, dan  tidak  terkendali  (Dalimartha  2007). Kanker  merupakan  penyebab  kematian kedua  di  dunia  setelah  penyakit  jantung dan  pembuluh  darah  (Tjay  2002). Menurut  Ketua  Perhimpunan  Dokter Spesialis  Onkologi  Radiasi  Indonesia, jenis  kanker  yang  terbesar  ialah  kanker leher  rahim  (serviks),  kanker  payudara, dan  kanker  nasofaring  (Anonim  2010). Di  Indonesia  diperkirakan  dalam  setiap harinya  terdapat  41  kasus  baru  kanker serviks  dan  sekitar  20  orang  setiap harinya meninggal dunia (Sukaca 2009).
Radioterapi dan
kemoterapi
merupakan  metode  pengobatan  kanker yang  banyak  dilakukan  saat  ini,  namun pengobatan dengan cara tersebut memerlukan  biaya  yang  cukup  tinggi. Terapi kanker dengan tanaman merupakan  cara  yang  sangat  murah  bagi penduduk  Indonesia  yang  kaya  dengan tanaman obat (Aryanti 2005).
Salah  satu  tanaman  yang  banyak digunakan oleh masyarakat Nusa
Tenggara  Timur  (NTT)  adalah  tanaman ende  ( Coccinia  grandis (L.)  Voigt), tergolong  famili  Cucurbitaceae.  Menurut Yadav et al. (2010), aktivitas farmakologi Coccinia  grandis  (L.)  Voigt  antara  lain antiinflamasi, antibakteri, antioksidan, antimutagenik antiulcer,  antidiabetes,
antiprotozoal, analgesik, hepatoprotektif, ekspektoran. Umamaheswari and Chatterjee (2008) mengungkapkan adanya flavonoid,  saponin,  fenol,  tanin  dan terpenoid dalam ekstrak kasar hidrometanol  daun Coccinia  grandis (L.) Voigt. Yadav et  al. (2010)  menyebutkan ekstrak  air  daun  segar Coccinia  grandis (L.)  Voigt  mengandung  antrakuinon, alkaloid,  karbohidrat,  protein  dan  asam amino, tanin, saponin, flavonoid, fitosterol, triterpen.
Pengujian brine  shrimp  lethality  test yang  dilakukan  terhadap  ekstrak  etanol 96  %  dan  ekstrak n-heksana  daun  ende menunjukkan  bahwa  daun  tanaman  ini mampu  membunuh  100  %  bioindikator (Tenda  dkk  2007).  Aktivitas  yang  positif ini  dapat  digunakan  sebagai  skrining awal terhadap adanya aktivitas antikanker  dari  daun  ende. Suatu senyawa  yang  toksik  terhadap Artemia salina Leach dapat dilakukan uji lanjutan berupa uji sitotoksik (Meyer et al.1982).
Coccinia    grandis  menurunkan jumlah  sel  yang  hidup  secara  signifikan dan  meningkatkan  kematian  sel  yang menunjukkan  kemampuan  antikanker yang  dibandingkan  dengan  vinblastin (Nanasombat and    Teckchuen  2009; Bhattacharya et  al.  2011). Penelitian Bhattacharya et  al (2011)  membuktikan ekstrak etanol daun Coccinia grandis (L.) Voigt signifikan dalam aktivitas
antikanker in  vitro dan  in  vivo terhadap sel Ehrlich Ascites Carcinoma (EAC) pada mencit albino Swiss. Penelitian Churiyah (2005)  menyebutkan  fraksi  protein  CYF3 dari  buah  muda Coccinia  grandis (L.) Voigt  dapat  menghambat  proliferasi  sel HeLa dengan LC 50 32 μ g/ml. Menurut Nakanishi (1974), tumbuhan  dengan  famili  yang  sama kemungkinan mempunyai aktivitas dengan  struktur  senyawa  yang  mirip.
Uji Sitotoksik Fraksi n-Heksana, Etil Asetat, Etanol ~79
Tanaman  lain  dalam  satu  famili  dengan tanaman  ende  juga  telah  diteliti  aktivitas antikanker,  seperti  pare  ( Momordicae charantia L.) yang berpotensi menghambat  pertumbuhan  sel  HeLa dengan nilai IC 50 sebesar 51,56 μ g/ml.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui efek sitotoksik fraksi
n-heksana,  etil  asetat,  etanol  dari  ekstrak etanolik daun ende ( Coccinia grandis (L.) Voigt) pada sel HeLa dengan menentukan nilai IC 50.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah : serbuk daun ende ( Coccinia  grandis (L.)  Voigt),  etanol (teknis), n-heksana (teknis),  etil  asetat
(teknis),  HeLa cell  line (koleksi  Lab.
Parasitologi,  UGM),  RPMI  1640  powder
(GIBCO),  aqua  bidestilata,  NaHCO 3
(sodium  bicarbonate),  10  %  Foetal Bovine Serum (FBS), Hepes (C 9 H 18 N 2 O 4 S), Phosphat  Buffered  Saline (PBS), 0,5 % Fungison (Amphotericin B),
2  %  antibiotik  penisilin-streptomisin
(GIBCO),  100  % Dimetylsulfoxide
(DMSO)  pa  (Sigma),  reagen stopper larutan  10  % Sodium  Dodecyl  Sulphate (SDS) dalam HCl 0,1 N.
Alat Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  : disc  mill model
FFD, kertas saring,
timbangan (Shimadzu), corong pisah, oven, evaporator  (Heidolph),  Sterling-Bidwell, dan  alat-alat  gelas,  tangki  nitrogen  cair, waterbath, sentrifuge Sigma 3k12 (Sorvall Legend  RT), autoclave (HiclaveTM),
incubator CO 2 (Heraeus), Laminar  Air Flow  Clean  Bench  (Gelmansciences),
ELISA reader (SLT 240 ATC), hemocytometer (Neubauer), tabung
konikal  steril  (Nunclone),  ampul, tissue culture  flask (Nunclone),  microplate 96 sumuran  (Nunclone),  filter  polietilen sulfon  steril  0,22 μ m,  neraca  elektrik (Sartorius),  mikropipet  2-20 μ l,  50-250 μ l,  200-1000 μ l  (Pipetman),  mikroskop inverted (Axiovert-25),  magnetic  stirrer, pengocok  Vortex  Maxi  Mix  II  (Sartorius) dan kamera digital.
Pembuatan  Ekstrak  dan  Fraksi  Daun Ende Ekstraksi daun ende dilakukan dengan  teknik  maserasi sebanyak  300 gram  serbuk  dengan  pelarut  500  ml etanol  96  %  selama  lima  hari.  Maserat yang  diperoleh  lalu  dipekatkan  dengan evaporator pada suhu 50 0 C.
Ekstrak etanolik pekat yang diperoleh difraksinasi  dengan  pelarut n-heksana, etil  asetat,  dan  etanol menggunakan corong  pisah.  Fraksi  yang  detil  asetat yang  diperoleh  kemudian  dipekatkan dengan evaporator pada suhu 50 0 C.

## Uji Sitotoksik MTT
Sel  HeLa  disuspensikan  dengan kepadatan 1 x 104 sel/sumuran sebanyak 100 μ l  kemudian  sel  dimasukkan  pada microplate  96  sumuran,  diinkubasikan dalam  inkubator  CO2  5%  pada  suhu 37 0 C  selama  semalaman.  Sumuran- sumuran yang berisi suspensi sel tersebut ditambahkan  100 μ l  larutan  uji  yaitu masing-masing ekstrak etanolik dan fraksi etil  asetat  daun  Ende  yang  dilarutkan dalam pelarut DMSO, sehingga diperoleh  kadar  akhir  sampel  dengan
80 ~ Nuraini Harmastuti, Gunawan Pamudji Widodo, Maria E.D.O. Hurek Making,         J. Farmasi Indonesia Maria Yangsye Lenggu, Feolistin Mience Pobas
% viabilitas sel =              X 100% ......(1) A p -A km A ks -A km variasi  konsentrasi  100;  50;  25;  12,5; 6,25;  3,12;  1,6 μ g/ml  tiap  sumuran.
Sebagai  kontrol  pelarut  digunakan  sel dengan  penambahan  persen  terbesar DMSO  yang  dilihat  dari  konsentrasi DMSO  dalam  seri  konsentrasi  sampel yang paling pekat. Sebagai kontrol media digunakan  hanya  larutan  uji  dan  media penumbuh.  Kemudian  sel  tersebut diinkubasikan  pada  inkubator  CO 2 5% pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam.  Akhir inkubasi
medium masing-masing
sumuran  dibuang  dengan  cara  plate dibalikkan  1800  di atas  tempat  buangan kemudian plate ditekan untuk meniriskan sisa  cairan.  Dicuci  dengan  PBS  sampai tidak  berwarna.  Kemudian  ditambahkan 15 μ l MTT 0,3 % dalam PBS. Microplate diinkubasikan  kembali  selama  4  jam pada inkubator CO 2 5% pada suhu 37 0 C. Sel  hidup  akan  bereaksi  dengan  MTT membentuk  formazan  berwarna  ungu dan untuk menghentikan reaksi antara sel dengan  MTT  serta  melarutkan  formazan maka  ditambahkan  50 μ l  SDS  10  % dalam  0,1  N  HCl.  Plate  kemudian dibungkus dengan kertas alumunium foil, diinkubasikan  selama  semalaman  pada suhu  kamar,  dan  serapan  dibaca  dengan menggunakan ELISA reader pada panjang gelombang 595 nm.

## Analisis Hasil
Dari  hasil  uji  sitotoksisitas  yang berupa  respon  serapan  dikonversikan  ke dalam  persen  (%)  viabilitas  sel  dengan rumus sebagai berikut :
A p = Absorbansi perlakuan A km = Absorbansi kontrol media A ks = Absorbansi kontrol sel
Kemudian dilakukan perhitungan IC 50 berdasarkan  persamaan  regresi  linear yang  diperoleh  dari  grafik  hubungan antara  persen  (%)  viabilitas  sel  HeLa dengan log konsentrasi sampel uji.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyarian  dilakukan  dengan  metode maserasi untuk mengeliminasi kerusakan senyawa  akibat  pemanasan.  Penyarian dengan pelarut  etanol  96% untuk menarik  semua  jenis  senyawa  metabolit sekunder  dalam  daun  ende.  Ekstrak  cair etanol  diuapkan dengan  alat vaccum rotaevaporator sehingga diperoleh
ekstrak  etanolik  pekat.  Hasil rendemen ekstrak daun ende sebesar 15,09 %.
Ekstrak  etanolik  pekat  difraksinasi dengan pelarut tiga pelarut yang berbeda polaritasnya.  Pelarut  yang  digunakan adalah n-heksana sebagai pelarut nonpolar,  etil  asetat  sebagai  pelarut semipolar,  dan  air  sebagai  pelarut  polar. Fraksinasi ini bertujuan untuk memisahkan  senyawa-senyawa  dalam daun  ende.  Gambar  1  menunjukkan bahwa  daun  ende  paling  banyak mengandung  senyawa polar  dan  paling sedikit adalah senyawa semipolar.
Uji Sitotoksik Fraksi n-Heksana, Etil Asetat, Etanol ~81
Gambar 1. Rendemen fraksi dari ekstrak etanolik daun ende.
Gambar 2.  Nilai IC 50 aktivitas sitotoksik ekstrak etanolik, fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi etanol daun ende terhadap sel HeLa.
Uji  sitotoksik  dilakukan  secara in vitro dengan  metode  MTT. Prinsip
metode ini adalah senyawa 3,(4,5-dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil
tetrazolium bromida  diabsorpsi  oleh  sel  hidup  dan cincin  tetrazoliumnya  dipecah  melalui reaksi  reduksi  oleh  sistem  reduktase suksinat tetrazolium yang terdapat dalam
rantai respirasi mitokondria sel, sehingga dihasilkan  formazan berupa  zat  warna ungu  yang  tidak  larut  dalam  air  tetapi dapat  larut  SDS  10  %  (Doyle and
Griffiths 2000). Formazan terlarut
kemudian  diukur  dengan  ELISA reader pada  panjang  gelombang  595  nm. Formazan  yang  terbentuk  proporsional
82 ~ Nuraini Harmastuti, Gunawan Pamudji Widodo, Maria E.D.O. Hurek Making,         J. Farmasi Indonesia Maria Yangsye Lenggu, Feolistin Mience Pobas
dengan jumlah sel yang hidup (Mosmann 1983).
Berdasarkan  hasil  uji  sitotoksik terhadap  kultur  sel  HeLa  (Gambar  2), ekstrak daun ende  ( Coccinia grandis (L.) Voigt)  memiliki  IC 50 415,719  ppm, artinya  tidak  berpotensi  sebagai  agen sitotoksik karena  Menurut  Ueda et  al.
(2002)  nilai  IC 50 di bawah  100 μ g/ml merupakan  agen  antikanker  poten, sedangkan  nilai  IC 50 di  atas  100 μ g/ml merupakan  agen  kemopreventif  yang poten. Fraksi n-heksana  daun  ende memiliki  nilai  IC 50 yang  lebih  kecil  dari ekstrak  daun  ende,  artinya  fraksi n- heksana daun ende lebih poten daripada ekstrak  daun  ende,  namun  nilainya  juga lebih  dari  100  ppm,  sehingga  tidak berpotensi sebagai agen sitotoksik. Fraksi etil  asetat  dan  air  sangat  tidak  poten terhadap kultur sel HeLa.
Kurang potennya daun ende sebagai agen sitotoksik tidak menutup kemungkinan untuk mengarahkan tumbuhan  ini  dikembangkan  sebagai agen  kemopreventif.  Pendekatan  terapi kanker menggunakan agen kemopreventif lebih menjanjikan daripada  obat  antikanker  konvensional.
Agen kemopreventif sendiri dapat didefinisikan  sebagai  senyawa yang dapat  menghambat  dan  menekan  proses karsinogenesis  pada  manusia  sehingga pertumbuhan  kanker  dapat  dicegah (Kakizoe and Tadao 2003).

## KESIMPULAN
Hasil  uji  efek  sitotoksik  daun  ende terhadap  sel  HeLa  dengan  nilai  IC 50 ekstrak  etanolik,  fraksi n-heksana,  fraksi etil asetat, dan fraksi etanol berturut-turut
415,719  ppm;  307,142  ppm; 50303,71 ppm; dan 50722,424 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
[Anonim].  14  Oktober  2010.  Pelayanan Radio Terapi masih Minim. Kompas: 18.
Aryanti.  2005.  Isolasi  senyawa  antikanker dari  akar berambut  artemicia  cina  dan aktivitas  inhibisinya terhadap  sel  kanker mulut rahim. Majalah Farmasi Indonesia. 16(4): 192 – 196.
Bhattacharya  B,  Pal  P,  Lalee  A,  Samanta  A. 2011.  In  vivo  and  in  vitro  anticancer activity  of Coccinia  grandis (L.)  Voigt.
Journal  of  Pharmacy  Research.4(3):567- 569.
Churiyah.  2005.  Protein  bioaktif  dari  bagian tanaman dan akar transgenik cucurbitaceae serta aktivitas antiproliferasi  galur  sel  kanker in  vitro. [Disertasi]. Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. http://iirc.ipb.ac.id/jspui/bitstream/1234 56789/41195/1cover-2005Gku.pdf  [22 Des 2010].
Dalimartha  S.  2007. Ramuan  Tradisional untuk  Pengobatan  Kanker.  Jakarta: Penebar swadaya
Doyle  A  dan  Griffiths  B.  2000. Cell  and Tissue  Culture  for  Medical  Research. England: Wiley.
Kakizoe and Tadao. 2003. Chemoprevention of  cancer  focusing  on  clinical  trials. J.
Clin. Oncol. 33(9): 421-442.
Mosmann T. 1983. Rapid  colorimetric  assay for  cellular  growth  and    survival:
application to proliferation and cytotoxicity  assays. J.  Immunol.  Meth. 65: 55-63.
Meyer BN, Ferrigni NR, Putnam JE, Jacobsen LB,  Nichols  DE,  McLaughlin  JL.  1982. Brine  shrimp:  a  convenient  general bioassay  for  active  plant  constituents. Planta Med. 45(5):31-4.
Uji Sitotoksik Fraksi n-Heksana, Etil Asetat, Etanol ~83
Nakanishi  K.  1974. Natural  Products
Chemistry (1). Tokyo: Kodansha
Scientific.
Nanasombat  S.  and  Teckchuen  N.  2009.
Antimicrobial,
antioxidant, and anticancer    activities    of    Thai    local vegetables. Journal  of  Medicinal  Plants Research. 3950: 443-449.
Sukaca  B.  2009. Cara  Cerdas  Menghadapi Kanker Serviks (Leher Rahim). Yogyakarta: Genius Publisher.
Tenda,  dkk.  2007.  Identifikasi  pendahuluan senyawa  bioaktif  ekstrak  n-heksana  dan ekstrak  etanol  tanaman  daun  ende ( Cocinia  grandis (L.)  Voigt)  asal  Nusa
Tenggara  Timur.  [Risbinakes].  Kupang: Jurusan  Farmasi,  Politeknik  Kesehatan Kupang.
Tjay  HT.  2002. Obat-Obat  Penting,  Khasiat Penggunaan  dan  Efek-Efek  Sampingnya. Ed.  V.  Cetakan  II.  Jakarta:  PT.  Elex
Media Komputindo.
Ueda  JY1,  Tezuka  Y,  Banskota  AH,  Le  Tran
Q, Tran QK, Harimaya Y, Saiki I, Kadota
S.  2002.  Antiproliferative  activity  of
Vietnamese  medicinal  plants. Biol Pharm Bull. 25(6):753-60.
Umamaheswari  M,  Chatterjee  TK.  2008.  In vitro  antioxidant  activities  of  the fractions  of Coccinia  grandis L.  leaf
extract. Afr  J  Tradit  Complement AlternMed 5(1):61–73. http://journals.sfu.ca/africanem/index.ph p/ajtcam/article/viewArticle/326 [27
Nov 2010].
Yadav  GS,  Mishra  AK,  Tiwara  A.  2010.
Medical  properties  of  ivy  gourd
( Cephalandra indica): A Review.
IJPRD.2(9):92-98.  http://ijprd.com/204- NOV-10-14.pdf [23 Jan 2011].

## Petunjuk Penulisan Jurnal Farmasi Indonesia (Journal of Indonesian Pharmaceutical)
Jurnal  Farmasi  Indonesia  menerima  naskah  tentang hasil  penelitian  laboratorium, lapangan,  studi  kasus,  telaah  pustaka  yang  erat  kaitannya  dengan  bidang  kefarmasian, kesehatan dan lingkungan hidup. Naskah dikirimkan ke bagian tata usaha Fakultas Farmasi Jurnal  Farmasi  Indonesia  d/a  Fakultas  Farmasi  Univesitas  Setia  Budi  Jl.  Let.Jend  Sutoyo Mojosongo,  Surakarta  57127  telp:  (0271)  852518,  fax:  (0271)  85327  atau  email info@farmasiindonesia.setiabudi.ac.id.
Naskah  yang  dimuat  merupakan  hasil  seleksi  dan  disetujui  oleh  Dewan  Redaksi  dan belum pernah dimuat di jurnal lain. Bagi penulis yang artikelnya dimuat harus membayar fee penerbitan sebesar Rp. 75.000,00.
Cara Penulisan : Abstrak ditulis dengan jarak 1 spasi dan huruf Times New Roman font 12, naskah  ditulis  dengan  jarak  1,5  spasi dalam  1  kolom.  Jumlah  naskah  keseluruhan maksimal 15 halaman dengan format atas dan kiri berjarak 4 cm kanan dan bawah 3 cm kertas HVS A4. Softcopy naskah dalam file word.
Naskah ditulis dalam bahasa Indonesia atau bahasa Inggris dengan urutan : Judul (Title)
Judul harus singkat dan jelas
Nama Penulis (Author) Penulis pertama 1,* , Penulis kedua, dst (nama lengkap tanpa gelar)
1 Institusi
* Alamat korespondensi : kontak penulis berisi institusi, alamat (tidak harus), nomor telepon (tidak harus), kota, negara, email.
Abstrak (Abstract)
Abstrak  ditulis  dalam  bahasa  Indonesia  dan  bahasa  Inggris  (maksimal  200  kata), memuat uraian singkat tujuan, metode penelitian, hasil, dan kesimpulan.
Kata Kunci (Key word)
Kata kunci terdiri dari 1-5 kata yang dipisahkan dengan koma (,)
Pendahuluan (Introduction)
Pendahuluan memuat latar belakang, perumusan masalah dan tujuan penelitian.
Metode Penelitian (Materials and Methods)
Metode  penelitian  memuat  bahan  dan  alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  dan jalannya penelitian.
Hasil dan Pembahasan (Results and Discussion), Hasil dan Pembahasan digabung.
Hasil disajikan secara singkat, dapat didukung dengan tabel, grafik serta gambar/foto. Tabel harus utuh, jelas terbaca. Judul tabel di bagian atas dengan nomor urut angka arab.  Gambar  dapat  dibuat  terpisah  dengan  naskah  besarnya  antara  ¼  -1  halaman, judul  di  bawah  dengan  nomor  urut  angka  arab,  siap  dicetak  dan  bila  direproduksi tetap  jelas  terbaca  dengan  segala  ketentuan.  Foto  dapat  diterima,  asal  jelas  hitam putih, glossy dan bila berwarna diproduksi tidak berwarna.
Pembahasan  mencakup  tinjauan  terhadap  hasil  penelitian  dan  dirujuk  oleh  literatur terkait.
Kesimpulan (Conclusion)
Kesimpulan menjawab tujuan penelitian dan disampaikan dalam bahasa yang ringkas.
Ucapan Terima Kasih (Acknowledgement)
Jika ada
Daftar Pustaka (References) Pustaka  dalam  naskah  ditulis  pengarang  dan  tahun  misal  (Ansel  1989),  (Cefalu  & Padridge  1985),  (Harnden et  al.  2002).  Daftar  pustaka  disusun  secara  alfabetis. Contoh :
Adsavakulchai S.  Baimai  V,  Prachyabrued  W,  Gore  PJ,  Lertlum  S.  1998.  Morphometric study  using  wing  image  analysis  for  identification  of  Bactrocera  dorsalis  complex. J. Biol. 3(5). http://epress.com/w3jbio/vol3/Adsavakulchai/index.html [17 Mar 1999].
Ardiansyah.  2006.  Isolasi  karakterisasi  molekular  dan  profil  protein  mikroorganisme hipertermofilik dari sumber air panas kawah Dieng, kawah Domas Tangkuban Perahu dan  Baturaden  [Thesis].  Yogyakarta:  Pascasarjana  Fakultas  Farmasi,  Universitas Gadjah Mada.
Cefalu  WT  &  Padridge  WM.  1985.  Restrictive  transport  of  a  lipid-soluble  peptide (Cyclosporin) through the blood-brain barrier. J.Neurochem. 45(1):1954-1956.
[Depkes RI] Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1979. Farmakope Indonesia. Jilid III. Jakarta: Depkes RI.
Kuret JA, Murad F. 1990. Adenohypophyseal hormones and related substances. Di dalam: Gilman AG, Rall TW, Nies AS, editor. The Pharmacological Basis of Therapeutics. Ed ke-8. New York: Pergamon. 1334-1460.
Meyer  B,  Hermans  K.  1985.  Formaldehyde  release  from  pressed  wood  products.  Di dalam:  Turoski  V,  editor. Formaldehyde:  Analytical  Chemistry  and  Toxicology. Proceedings  of  the  Symposium  at  the  187th;  St  Louis,  8-13  Apr  1984.  Washington: American Chemical Society. 101-116.
Pelczar  MjJR,  Chan  ECS.  1986. Dasar-Dasar  Mikrobiologi.  Volume  1.  Hadioetomo  RS,
Imas  T,  Angka  SL,  penerjemah;  Roodyn  DB,  editor.  Jakarta:  UI  Press.  Terjemahan dari: Elements of Microbiology. 120-200.

## FORMULIR BERLANGGANAN JURNAL FARMASI INDONESIA
Yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama
:  …………………………………………
Alamat rumah  :  …………………………………………
Alamat kantor  :  ………………………………………… No. Telp./HP :  ………………………………………… E-mail :  …………………………………………
Ingin  berlangganan  Jurnal  Farmasi  Indonesia  selama  …....  tahun.  Bersama  ini  kami kirimkan  iuran langganan  sebanyak Rp .....................................................……………
(Terbilang ...............................................................................................................) melalui rekening tanggal …………………………………….. Harap jurnal tersebut dikirim ke alamat kantor/rumah*)
(………………………………………)
Tanda tangan dan nama terang
*) Catatan: coret yang tidak perlu
Jumlah iuran:
- Tiap Nomor sebesar Rp. 30.000,- ditambah 20 % biaya pengiriman
- Langganan satu tahun Rp. 50.000,- ditambah 20 % biaya pengiriman
Setelah formulir diisi harap dikirim kembali kepada Jurnal Farmasi Indonesia Rekening Bank. BNI Cab. Surakarta a.n. Fransiska Leviana. No.: 0222249148