AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)

## JURNAL KESEHATAN
http://ejournal.poltekkesternate.ac.id/ojs
Surel/Email astutinur1989@gmail.com
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
1 2 3 Astuti Nur , Alfian Noor , Saifuddin Sirajuddin
1 Prodi Gizi Poltekkes Kemenkes Kupang
2 Bagian Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Hasanuddin, Makassar, 3 Bagian Gizi, Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Hasanuddin, Makassar
1
Info Artikel Abstrak Madu merupakan cairan
manis alami yang berasal sari bunga tanaman atau
Sejarah Artikel:
bagian lain dari tanaman dan ekskresi serangga (Gebremariam, 2014). Madu
Diterima 28 april 2019
memiliki kemampuan dalam melawan bakteri (Molan PC, 1992). Pada Disetujui 21 Mei 2019 penelitian ini, madu trigona Sulawesi Selatan diuji aktivitas antibakterinya Di Publikasi 30 Mei 2019 terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli menggunakan metode difusi agar. Hasil analisis  proksimat  menunjukkan komposisi madu trigona Keywords: terdiri dari karbohidrat (87,41%), kadar air (10,90%), kadar  serat (0,90%),
Madu Trigona, Uji
kadar  abu (0,57%), kadar protein  (0,15%) kadar lemak (0,06%). Rata-rata Aktivitas Antibakteri,
diameter hambatanmadu trigona terhadap bakteri Eschrichia coli konsentrasi Staphylococcus aureus,
10%, 20%, 40%, 60%, 80% v/v dan kontrol positif berturut-turut adalah 21.33, Escherichia coli, metode 24.67, 27.33, 29.33, 29.67, dan 28.67 sedangkan terhadap bakteri difusi agar.
Staphylococcus aureus konsentrasi 10%, 20%, 40%, 60%, 80% v/v dan kontrol positif berturut-turut adalah 13.67, 15.00, 16.67, 18.00, 19.00, dan 21.33. Madu trigona lebih efektif menghambat pertumbuhan bakteri Eschrichia coli daripada Staphylococcus aureus. Konsentrasi terbaik madu trigona dalam menghambat pertumbuhan bakteri adalah 60%-80% karena pada konsentrasi ini setara dengan control positif (kloramfenikol).

## Abstract
Honey  is  a  natural  sweet  liquid  derived  from  the  essence  of  plant  flowers  or  other parts  of  plants  and  insect  excretion  (Gebremariam,  2014).  Honey  has  the  ability  to fight bacteria (Molan PC, 1992). In this study, South Sulawesi’s trigona honey was tested  for  antibacterial  activity  against Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli using  agar  diffusion  method.  The  proximate  analysis  showed  that  the  composition oftrigona honey consisted of carbohydrates (87.41%), water content (10.90%), fiber content (0.90%), ash content (0.57%), protein content (0.15 %) fat content (0.06%). The average diameter of trigone honey’s inhibition against Eschrichia  coli bacteria concentrations   of   10%,   20%,   40%,   60%,   80%   v   /   v   and   positive   controls respectively   21.33,   24.67,   27.33,   29.33,   29.67,   and   28.67   while   those   of Staphylococcus aureus bacteria concentrated 10%, 20%, 40%, 60%, 80% v / v and positive  controls  respectively  were  13.67,  15.00,  16.67,  18.00,  19.00,  and  21.33. Trigona honey is more effective in inhibiting the growth of Eschrichia coli bacteria than  Staphylococcus  aureus.  The  best  concentration  of  trigona  honey  in  inhibiting bacterial growth is 60% -80% because at this concentration is equal to
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
positivecontrol (chloramphenicol).
© 2019 Poltekkes Kemenkes Ternate

Alamat korespondensi:
Poltekkes Kemenkes Ternate, Ternate- West Maluku Utara , Indonesia ISSN 2597-7520 Email: uppmpoltekkesternate@gmail.co.id

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia
Coli)

## PENDAHULUAN
Bahaya biologi (mikroba) pada
pangan perlu mendapat perhatian karena jenis bahaya ini yang sering menjadi agen penyebab kasus keracunan pangan.
Escherichia coli merupakan bakteri patogen yang sering menyebabkan keracunan pangan dan juga menjadi salah satu mikroba indikator sanitasi. Sedangkan Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang biasa menghuni hidung, mulut, tenggorokan, maupun kulit.
Keberadaan Escherichia coli pada pangan
dapat menunjukkan praktek sanitasi lingkungan  yang  buruk  sedangkan  adanya Staphylococcus aureus mengidentifikasi praktek  higiene  yang  kurang  (Wijaya,  R, 2009).
Berdasarkan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan MakananRepublik Indonesia (BPOM RI) Nomor HK.00.06.1.52.4011 tentang penetapan batas maksimum cemaran mikroba dalam makanan, dan minuman dimana bakteri minuman yang menggunakan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus sebagai indikator mikroba pencemar (BPOM, 2009) . Madu  adalah  produk  alami  yang berasal  dari  serangga  dan  terbentuk  dari nektar bunga yang bermanfaat bagi kesehatan termasuk  antioksidan  (Ahmed  S  &  Othman NH,  2013),  anti-inflamasi  (Khalil  I  dkk, 2012). Madu  merupakan  salah  satu  obat tradisional  yang  digunakan  oleh  masyarakat dan dikenal sejak 10.000 tahun yang lalu serta mempunyai  kemampuan  sebagai  antimikroba (Rio, 2012). Madu dapat menghambat pertumbuhan bakteri patogen seperti Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .
Hal ini terlihat dari zona penghambatan yang dihasilkan oleh madu yang diberikan pada media yang telah ditanam bakteri-bakteri tersebut (Dewi M.A dkk, 2017).
Salah  satu  madu  lokal  sulawesi selatan adalah madu trigona yang berasal dari lebah trigona  spp .  Terdapat  tiga  jenis  lebah trigona di Sulawesi Selatan  yang setiap
dibandingkan  lebah  penghasil  madu    jenis Apis dan  lebih  sulit  dipanen  dari  sarangnya. Madu yang dihasilkan Trigona spp mempunyai  aroma  khusus,  campuran  rasa manis  dan  asam  seperti  lemon  (Fatoni  A, 2008).
Penelitian  ini  ingin  melihat  aktivitas antibakteri  madu  trigona  terhadap  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Hasanuddin untuk analisis proksimat dan Laboratorium Mikrobiologi Fakultas MIPA Universitas Hasanuddin untuk uji antimikroba . Sampel adalah madu trigona yang diambil dari Kabupaten Maros Sulawesi Selatan. Tahap pertama adalah analisis proksimat meliputi identifikasi kandungan protein, lemak, kadar abu, kadar karbohidrat, kadar serat kasar, kadar air serta pH. Tahap kedua adalah uji aktivitas antibakteri madu trigona terhadap bakteri penyebab infeksi saluran pernapasan yang diwakili oleh Staphylococcus aureus yang merupakan bakteri gram positif dan bakteri penyebab infeksi saluran pencernaan yang diwakili oleh Escherichia coli yang merupakan bakteri gram negative menggunakan  metode  difusi  agar  dengan  3 (tiga)  kali  ulangan  masing-masing  dengan konsentrasi madu 10%, 20%, 40%, 60%, 80% v/v dan control positif kloramfenikol.

## HASIL

## Analisis proksimat
Komposisi  madu  trigona  terdiri  dari karbohidrat  (87,41%)  kadar  air  (10,90%), kadar serat (0,90%), kadar abu (0,57%), kadar protein (0,15%) dan kadar lemak (0,06%) serta pH (4.0) (table 1) .

## Tabel 1. Rata-Rata Hasil Analisis Proksimat Madu Trigona
Komposisi Kadar Protein Lemak Serat KH Kadar pH koloninya  terdiri  atas  300  –  80.000  ribu  ekor (Siregar  H.C.H  dkk,  2011).  Jumlah  madu yang dihasilkan jenis Trigona lebih sedikit
Sampel  Air  Kasar Kasar Kasar (%) (%)   (%)(%) (%) Abu (%)
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
35 29.67 29.33 30 28.67 27.33 24.67 25 21.33 21.33 20 18 19 16.67 15 13.67 15 0 10% 20% 40% 60%
80% Kontrol (+) Madu    10,90 0,17 0,06    0,90   87,41  0,57 4,0 Kontrol + 26 17 21 21.33

## Trigona
Daya hambat madu trigona lebih besar pada  bakteri Eschrichia  coli dibandingkan Uji Aktivitas Antimikroba dengan Staphylococcus aureus dimana pada Setelah dilakukan uji  aktivitas konsentrasi 60% dan 80% daya hambat madu
antimikroba  madu  trigona  dengan  tiga  kali trigona teradapt bakteri Eschrichia  coli ulangan   pada   bakteri Eschrichia   coli, melebihi  kontrok positif  (kloramfenikol) diperoleh  hasil  rata-rata  diameter  hambatan sedangkan  pada bakteri Staphylococcus dengan  konsentrasi  10%,  20%,  40%,  60%, aureus sampai pada konsentrasi  80%  tidak 80% v/v d an control positif (Alqurashy, 2013) melampaui  control    positif    (kloramfenikol) berturut-turut   adalah  21.33, 24.67,  27.33, (gambar 1).
29.33, 29.67, dan 28.67 (table 2).
Tabel 2. Hasil Pengukuran Diameter Hambatan  Madu  Trigona  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschrichia coli.
Eschrichia coli Rata-rata Konsentrasi (Bakteri Gram Negatif) diameter Madu Ulangan Ulangan Ulangan  hambatan Trigona I II III (mm) 10 10% 20 22 22 21.33 5 20% 24 25 25 24.67 40% 27 27 28 27.33 60% 29 29 30 29.33 Eschrichia coli Staphylococcus aureus 80% 29 30 30 29.67  Gambar 1. Rata-rata diameter hambatan madu trigona Kontrol + 27 30 29 28.67
terhadap pertumbuhanbakteri Eschrichia coli dan Staphylococcus aureus
Setelah  melakukan  uji  antimikroba madu  trigona  dengan  tiga  kali  ulangan  pada bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi  10%,  20%,  40%,  60%,  80%  v/v dan control positif berturut-turut adalah 13.67, 15.00, 16.67, 18.00, 19.00, dan 21.33 (table 3).

## Tabel 3. Hasil Pengukuran Diameter Hambatan Madu Trigona Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Staphylococcus Aureus .

## PEMBAHASAN Analisis proksimat
Hasil  uji  proksimat  untuk  kadar  air didapatkan  10,90  pada  madu  trigona.  Jika dibandingkan dengan Standar Nasional Indonesia yaitu maksimal 22% ataupun madu lain  seperti  madu  Blossom  (17,2%),  madu honeydraw  (16,3%),  madu  Indonesia  (Sono (19,51),  Randu  (22,90),  Kaliandra  (17,40)) maka  kadar  air  madu  trigona  tergolong rendah.  Aktifitas  air  merupakan    faktor penting  dalam  pengendalian  mikroba  (Molan PC, 1992).
Dalam  hasil  yang  telah  didapatkan, kadar  protein  madu  trigona  adalah  0,15%. Nilai  ini  lebih  rendah  dibandingkan  madu madu  lain  seperti  madu  Blossom  (0,3%), madu  honeydraw  (0,6%).  Jumlah  protein dalam  madu  termasuk  sedikit,  paling  tinggi sebesar 0,5% yang terdiri atas enzim dan
Konsentrasi Staphylococcus aureus Rata-rata (Bakteri Gram Positif) diameter Madu Ulangan Ulangan Ulangan  hambatan Trigona I II III (mm) 10% 17 10 14 13.67 20% 20 11 14 15.00 40% 22 13 15 16.67 60% 25 13 16 18.00 80% 25 15 17 19.00
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
asam amino namun protein sangat diperlukan di  dalam  tubuh  (Suarez,  2010).  Hasil  uji proksimat  untuk  kadar  lemak  madu  trigona adalah  0,06%.  Kandungan  lemak  pada  madu tergolong yang paling rendah jika
dibandingkan  dengan  zat  gizi  makro  lainnya (Arifin Z, 2017).
Kadar  abu  madu  trigona  adalah 0,57%. Berdasarkan Standar Nasional
Indonesia  kadar  maksimal  untuk  abu  madu adalah  0,5%  yang  berarti  bahwa  untuk  madu trigona  tidak melampaui  batas  maksimal  SNI
0 1-3545-1994 .
Hasil analisis proksimat untuk kandungan  karbohidrat  madu  trigona  sebanyak 87,41%.  Unsur  karbohidrat  merupakan  unsur terbanyak dalam madu (Arifin Z,  2017; Suarez, 2010). Beberapa jenis madu juga menunjukkan komposisi karbohidrat    yang merupakan komposisi terbanyak dalam madu seperti madu blossom (79,9%), madu honeydraw (80,5%).
Monosakarida (fruktosa dan    glukosa) mencapai  85-90%  dari  karbohidrat  yang terdapat  dalam  madu,  sedangkan  disakarida, oligosakarida dan polisakarida hanya sebagian kecil (Sihombing D.T.H, 2005)
Hasil  pengukuran  pH  madu  trigona adalah  4,0  termasuk  ke  dalam  pH  asam dimana  keasaman  madu  yang  tinggi  dengan ph 3,2-4,5 menyebabkan terhambatnya proses metabolisme  sel  bakteri  dimana  zat-zat  yang dibutuhkan bakteri untuk bertahan hidup tidak tersedia  sehingga  memudahkan  terjadinya lisis (Bognodov S, 2011))

## Uji Aktivitas Antimikroba
Berdasarkan hasil uji aktivitas antibakteri  madu  trigona  terhadap  bakteri Eschrichia  coli dan Staphylococcus  aureus terlihat  bahwa  madu  trigona  menghambat pertumbuhan bakteri Eschrichia coli tertinggi pada  konsentrasi  60%  dan  80%  karena  dapat melampaui diameter hambatan control positif. Sedangkan  madu  trigona  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus memperlihatkan  dari semua konsentrasi tidak ada yang melampaui
diameter hambatan control positif (21.33mm).
Madu trigona tergolong  efektif sebagai antimikroba untuk bakteri Eschrichia coli mulai konsentrasi 10% Jika dikonversi ke satuan gram, 10% madu trigona sama dengan 13 gram (1 sdm) dan  pada  bakteri Staphylococcus aureus mulai  konsentrasi 20% Jika dikonversi ke satuan gram, 20% madu trigona sama dengan 26 gram (2 sdm). Hal karena suatu antibiotik dapat dinilai tidak efektif untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri apabila diameter hambatannya ≤9 mm dan efektif apabila diameter hambatannya ≥14mm (Harahap, 2013).Salah satu hal yang menyebabkan perbedaan daya hambat madu trigona pada kedua bakteri tersebut adalah dinding sel bakteri Staphylococcus aureus yang tergolong bakteri gram positif, tersusun oleh lapisan peptidoglikan yang sangat tebal (40- 50%), protein (10%) dan lipid (2%). Sedangkan dinding sel bakteri Escherichia Coli yang tergolong bakteri gram negative tersusun oleh lapisan peptidoglikan yang lebih tipis daripada lapisan peptidoglikan bakteri gram positif yakni (5-20%), protein (60%),  dan  lipid (20%). Peptidoglikan merupakan structural yang kaku dan kuat dari dinding sel bakteri yang member bentuk dan perlindungan kepada
keutuhan sel (Cappucino
J.G  &  Natalie  S,  2001;Jawetz  E  dkk,  1995)
Madu telah terbukti memiliki penyembuhan luka dan sifat antimikroba, tapi ini tergantung pada jenisnya, lokasi geografis, dan bunga dari mana produk akhir berasal. Ilmuwan telah menguji aktivitas antimikroba dari madu Chili yang dibuat oleh Apis mellifera (lebah madu) yang berasal dari pohon Ulmo ( Eucryphia cordifolia ) dan madu Manuka yang berasal dari pohon Manuka ( Leptospermum scoparium ) yang saat ini dijual sebagai agen terapeutik seluruh dunia. Penelitian para ilmuwan tersebut dilakukan secara in vitro terhadap strain bakteri yang dipilih, yaitu Staphylococcus aureus,
Escherichia
Coli, dan Pseudomonas aeruginosa . Penelitian tersebut menghasilkan suatu perbedaan dari sifat kedua madu sebagai antibakteri, yakni menunjukkan
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
bahwa  madu  Ulmo  memiliki  efek  antibakteri yang  unggul  dibandingkan  madu  Manuka. Penelitian  yang  dilakukan  pada  konsentrasi yang  lebih  rendah,  Madu  Ulmo  selalu menghasilkan efek antibakteri yang lebih baik daripada  madu  Manuka  (Orla  Sherlock, 2010).
Efektivitas Madu trigona Sulawesi
selatan  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri juga dipengaruhi oleh tingkat keasamannya  (pH  4)  yang  tergolong  asam sehingga  berkontribusi  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Kemudian  Beberapa senyawa  fitokimia  juga  berperan  pada aktivitas antibakteri madu.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Komposisi madu trigona terdiri dari karbohidrat (87,41%) kadar air (10,90), kadar serat (0,90), kadar abu (0,57), kadar protein (0,15) kadar lemak (0,06) dan pH (4.0) .
Dalam menghambat pertumbuhan bakteri, madu trigona lebih efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Eschrichia coli daripada Staphylococcus aureus. Konsentrasi terbaik madu trigona dalam menghambat
pertumbuhan bakteri adalah 60%-80% karena pada konsentrasi ini setara dengan control positif (kloramfenikol).
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  senyawa  bioaktif  madu  trigona dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri dengan  menggunakan  beberapa  jenis  bakteri uji  serta  membandingkannya  dengan  madu lain  khususnya  yang  terdapat  di  Sulawesi Selatan.

## DAFTAR PUSTAKA
Gebremariam,  T., Brhane,  G. (2014). Determination Of Quality And Adulteration Effects Of Honey From

## Adigrat And Its Surrounding Areas.
International   Journal    Of   Technology Enhancements And Emerging Engineering Research, 2, 2347-4289 Molan PC. (1992). The Antibacterial Activity of Honey: 1. The Nature of  The
Antibacterial Activity, Bee World 73: 5– 28.
Arifin Z. (2017). Pengaruh Pemberian Suplemen Madu Pada Pakan Terhadap Pertumbuhan Dan Fcr Ikan Lele Dumbo (Clarias gariepinus). Jurnal Fisherina 2017, Volume 1 Nomor 1 ISSN: 2579- 4051.
Wijaya, R. (2009). Penerapan Peraturan Dan Praktek  Keamanan  Pangan Jajanan Anak Sekolah Di Sekolah Dasar Kota Dan Kabupaten Bogor (Skripsi). Bogor:
Institut Pertanian Bogor.
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  RI.
(2009). Peraturan Kepala Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik Indonesia  Nomor  HK.00.06.1.52.4011
tentang  Penetapan  Batas  Maksimum Cemaran  Mikroba  dan  Kimia  Dalam Makanan. Jakarta: Badan POM RI. Ahmed S, Othman NH. (2013) Honey as a potential natural anticancer agent: A review of its mechanisms. Evid Based
Complement Alternat
Med. 2013;2013:829070.
Khalil I, Moniruzzaman M, Boukraâ L, Benhanifia M, Islam A, Islam N, et al. (2002). Physicochemical and antioxidant properties of Algerian honey. Molecules. 2012;17:11199–215.
Rio. (2012). Perbandingan efek antibakteri madu asli sikabu dengan madu lubukminturun terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Jurnal Kesehatan Andalas. 2012;1(2).
Dewi, M. A., Kartasasmita, R. E., & Wibowo, M. S. (2017). Uji Aktivitas Antibakteri Beberapa  Madu  Asli    Lebah Asal Indonesia   Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi. https://doi.org/10.26874/kjif.v5i1.86. Siregar, H.C.H., A. M. Fuah, & y. Octaviany.
(2011). Propolis  Madu Multikhasiat.
Penebar swadaya, jakarta.
Fatoni A. (2008). Pengaruh Propolis Trigona spp Asal Bukit Tinggi Terhadap
Beberapa Bakteri Usus Halus Sapi dan
AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU TRIGONA TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF (Staphylococcus Aureus) DAN BAKTERI GRAM NEGATIF (Escherichia Coli)
Penelusuran Komponen Aktifnya [Tesis]. Sekolah PascaSarjana IPB, Bogor. Suarez.  (2010). Contribution  Of  Honey In Nutrition And Human Health: A Review. Mediterr j nutr metab. 2010. 3:15–23. Sihombing, D. T. H. (2005). Ilmu Ternak Lebah Madu . Gajah Mada University Press, Yogyakarta. Bognadov, S. (2011). Honey As Nutriest And Function  Food. Bee  Product Science. (online).Www.apitherapie.ch/files/files/.. ./8honeynutrientfunctionalreview.pdf. Bee product science, www.bee- hexagon.net. Harahap.   (2013). Mengenal  target pest Karantina tumbuhan Golongan bakteri. Popt   ahli    muda  pada    balai  besar karantina pertanian Belawan. (Online) http://bbkpbelawan.deptan.go.id/wpconte nt/uploads/2013/02/MENGENAL%20B AKTERI.pdf. Cappucino,  J.  G  &  Natalie  Sherman. (2001). Microbiology,  A  Laboratory  Manual . Soxth Edition. Jawetz E., J. L. Melnick, E. A. Adelberg, G. F. Brooks, J. S. Butel, L. N. Ornston, (1995), Mikrobiologi Kedokteran, ed. 20 ,
University of California, San Francisco. Orla    Sherlock,  Anthony   Dolan, Rahma Athman, Alice Power, Georgina Gethin, Seamus Cowman, et    al, 2010. Comparison    of   The Antimicrobial Activity of Ulmo Honey from Chile and Manuka    Honey  Against   Methicilin- Resistant    Staphylococcus aureus, Escherichia   coli,    and Pseudomonas aureginosa. BMC Complementary and Alternative Medicine.