Jurnal Pendidikan Kimia Vol. 8, No. 3, Desember 2016, 183-187 ISSN:2085-3653 http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/jpk
Antimalarial activity and phitochemical analysis from Suruhan ( Peperomia pellucida ) extract
Nurhayati Bialangi 1* ; Moh. Adam Mustapa 2 , Yuszda K. Salimi 1 ; Ari Widiantoro 3 dan Boima Situmeang 4
1 Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo
2 Jurusan Farmasi, Fakultas Olah Raga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo
3 Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Negeri Tanjungpura, Pontianak
4 Jurusan Analis Kimia, Sekolah Tinggi Analis Kimia Cilegon, Banten *Korespondensi: nurhayatibialangi@yahoo.co.id
Abstract. Infectious and parasitic diseases is one of various disease that the most common. Based on data from the World Health Organization (WHO) in 2011, infectious and parasitic diseases become the third  largest  cause  of  death  in  the  world.  One  of  the  plants  that  have  potential  as  an  antimalarial  is suruhan  (Peperomia  pellucida).  The  purpose  of  this  study  is  to  test  antimalarial  activity  against Plasmodium  falciparum  and  analysis  photochemistry  consituen  from  extract  suruhan.  Antimalarial activity  test  using  Desjardin  method.  Extraction  was  done  by  using  maceration  wuth  methanol  as  a solvent  and  fractionation  using  partition  methods.  Results  of  phytochemical  screening  revealed  the presence  of  alkaloids,  flavonoid,  steroid,  saponins  and  triterpenoid  test  results  antimalarial  activity fraction  of  n-hexane,  ethyl  acetate  and  water  show  IC 50 values  are  12.80,  2.90  and  10.74  mg/  mL respectively.
Keyword: Peperomia pellucida, suruhan, antimalarial

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  dan  parasit  merupakan salah  satu  penyakit  yang  menjadi  pusat perhatian.  Berdasarkan  data  World  Health Organization  (WHO)  pada  tahun  2011, penyakit infeksi dan parasit menjadi penyebab kematian terbesar nomor tiga di dunia (Singh &  Pandeya,  2012;  Overgaard et  al .,  2014). Salah  satu  tumbuhan  yang  memiliki  potensi sebagai pengobatan adalah tumbuhan suruhan ( Peperomia pellucida). Genus Peperomia merupakan  genus  terbesar  yang kedua  pada  family Piperaceae dan  terdiri lebih  dari  600  spesies  yang  didistribusikan secara  luas  di  Indonesia  (Khan et  al .,  2008; Susilawati, 2015).
Secara tradisional herba suruhan ( Peperomia pellucida ) digunakan sebagai obat abses,  bisul  jerawat,  penyakit  kulit,  sakit kepala,  mengurangi  nyeri  pada  rematik  dan rematik gout (Nwokocha et al ., 2012; Martínez et  al .,  2013).  Hasil  analisis  proksimat menunjukkan kadar abu dan kandungan serat kasar  yang  tinggi  sementara  kandungan karbohidrat menjadi yang tertinggi (Majumder et  al .,  2011;  Yunarto,  2013). Tumbuhan  suruhan  biasanya  tumbuh  di celah-celah batuan basah yang ditemukan dari timur laut ke tenggara, Indonesia (Cera et al ., 2011).  Hasil  isolasi  metabolit  sekunder  dari spesies  peperomia  telah  banyak  dilaporkan namun  dari  spesies pellucida asal  Indonesia
masih  sedikit  yang  telah  dilaporkan  yaitu senyawa  pyran  yang  memiliki  aktivitas antibakteri,  sehingga  perlu  dilakukan  analisis kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dari tumbuhan  suruhan  asal  Gorontalo  dan menguji  aktivitas  fraksi  hasil  partisi  terhadap plasmodium falcipartum secara invitro .

## METODE
Bahan dan peralatan
Bahan yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  tumbuhan Peperomia  pellucida L. Kunth yang diambil dari Kabupaten Gorontalo Utara,  metanol  teknis  dan  p.a, n -heksana teknis  dan  pro.analis  (pa),  kloroform, etilasetat  teknis  dan  p.a,  dan  aseton,  Kalium bromida (KBr),  asam  asetat anhidrat, Kalium hidroksida  (KOH)  10%,  Natrium  hidroksida (NaOH)  10%,  Asam  sulfat  (H2SO4)  pekat, Asam  Klorida  (HCl)  pekat,  pereaksi  Meyer, Wagner,  Liebermann-Burchard,  kertas  saring Whatman, aluminium foil, Nyamuk Anopheles spp, akuades, kertas saring. Peralatan yang digunakan pada penelitian  ini  adalah pisau,  blender,  neraca analitik,  corong,  gelas  ukur,  pipet  mikro, pipet  tetes,  batang  pengaduk,  botol  reagen, tabung  reaksi,  cawan  petri,  kuas,  kain  kasa, penguap putar vakum, desikator, seperangkat  alat  uji  antimalarial,  spatula, corong  pisah,  botol  semprot,  blender,  oven, tabung reaksi dan rak tabung reaksi.

## Uji fitokimia
Penapisan  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  golongan  senyawa  kimia  yang terdapat di dalam bahan. Penapisan fitokimia dilakukan  dengan  menggunakan  berbagai pereaksi atau reagent kimia.

## Uji flavonoid
Ekstrak  kental  metanol,  n-heksana,  etil asetat  dan  air  masing-masing  sebanyak  0,1 gram  dilarutkan  dengan  larutan  metanol sebanyak  8  mL,  kemudian  dibagi  kedalam  4 tabung  reaksi.  Tabung  reaksi  pertama  (I) dijadikan  sebagai  tabung  kontrol  (tidak mendapatkan  perlakuan  apa  pun).  Tabung reaksi  II  ditambahkan  dengan  larutan  HCl sebanyak  2-4  tetes  dan  serbuk  Mg.  Tabung reaksi III ditambahkan dengan larutan NaOH 1  M  sebanyak  2-4  tetes.  Tabung  reaksi  IV ditambahkan  dengan  larutan  H 2 SO 4 pekat sebanyak  2-4  tetes.  Setelah  ketiga  tabung reaksi tersebut mendapatkan perlakuan maka diamati  perubahan  warna  yang  terjadi  dan dibandingkan  dengan  warna  pada  tabung reaksi  I  sebagai  tabung  kontrol.  Jika  terjadi perubahan  warna  menunjukan  positif  adanya senyawa  flavonoid  dalam  sampel  (Rahayu et al. , 2015).

## Uji alkaloid
Ekstrak  kental  metanol,  n-heksana,  etil asetat  dan  air  masing-masing  sebanyak  0,1 gram  dilarutkan  dengan  larutan  10  mL kloroform  amoniakal  dan  hasilnya  dibagi  dua pada  tabung  reaksi.  Tabung  pertama ditambahkan dengan H 2 SO 4 2 N. lapisan asam dipisahkan,  dibagi  dalam  tiga  tabung  reaksi masing-masing  tabung  dilakukan  pengujian dengan menggunakan pereaksi Mayer, pereaksi  Wagner  dan  pereaksi  Dragendorff. Tabung  kedua  dilakukan  pengujian  dengan pereaksi Hager, jika terbentuk endapan maka sampel tersebut positif (+) alkaloid.

## Uji steroid dan terpenoid
Ekstrak  kental  metanol,  n-heksana,  etil asetat  dan  air  masing-masing  sebanyak  0,1 gram  dilarutkan  dengan  larutan  10  mL  dietil eter.  Kemudian  ditambahkan  2  tetes  asam asetat  anhidrat  dan  ditambahkan  1  tetes H 2 SO 4 pekat  (peraksi  Lieberman  Burchard). Jika  terbentuk  warna  hijau  menunjukkan positif  (+)  adanya  steroid,  sedangkan  warna merah  kecoklatan  menunjukkan  positif  (+) adanya terpenoid.

## Uji saponin
Ekstrak  kental  metanol,  n-heksana,  etil asetat  dan  air  masing-masing  sebanyak  0,1 gram  ditambahkan  aquades  sebanyak  2  mL dan  dipanaskan  selama  2-3  menit,  setelah dipanaskan kemudian dikocok. Jika terbentuk busa/buih  yang  cukup  stabil  (±  1  menit) menunjukkan positif (+) adanya saponin.

## Uji aktivitas antimalaria
Uji  aktivitas  antimalaria  dilakukan dengan menggunakan metode Desjardins. Uji aktivitas  antimalaria  ditentukan  dengan parasitemia.  Uji  ini  dilakukan  dengan menggunakan kultur P. falciparum galur 3D7. Kultur P.  falciparum ditempatkan  ke  dalam lempeng sumur 24 masing-masing berisi 1 mL kultur dengan parasitemia±1% dalam medium RPHS.  Medium  RPHS  diganti  dengan medium  RPHS  yang  mengandung  sampel  uji berbagai  konsentrasi.  Kultur  diinkubasi selama  48  jam,  setelah  inkubasi  parasit dipanen  dan  dibuat  sediaan  apusan  darah tipis  yang  diberi  pewarnaan  Giemsa. Selanjutnya  dihitung  persen  parasitemia P. falciparum dengan  menghitung  jumlah eritrosit yang terinfeksi terhadap 500 eritrosit (Zaridah et al ., 2006). Perhitungan parasitemia dan penghambatan pertumbuhan parasit  dengan  menghitung  jumlah  eritrosit yang  terinfeksi  setiap  500  eritrosit  di  bawah mikroskop sebagai berikut:
100% x eritrosit 500 i terinfeks yang eritrosit a Parasetimi %   100% x kontrol a parasitemi % uji a parasitemi % n Pertumbuha
%  100% x kontrol a parasetimi uji a parasetimi % - kontrol a parasetimi % an Penghambat %  Persentase penghambatan tiap
konsensentrasi  digabungkan  dan  dianalisis menggunakan  analisa  probit  dengan  program SPSS untuk menentukan IC 50 . Hasil perhitungan dalam bentuk konsentrasi μg/mL (ppm).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil preparasi sampel dan ekstraksi
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  tumbuhan Peperomia  pellucida L. Kunth  segar  yang  diambil  dari  Kabupaten Gorontalo  Utara  sebanyak  2125g  yang  telah dicuci  dan  dipotong  kecil-kecil.  Kemudian dilakukan  proses  pengeringan  tanpa  paparan sinar  matahari  langsung  selama 2  minggu sehingga  diperoleh  sampel  kering  sebanyak 104g, selanjutnya digiling sampai halus. Hasil ekstraksi  terhadap  104  g  serbuk  kering  herba Peperomia  pellucida ,  dengan  cara  maserasi dengan  pelarut  metanol  (MeOH),  diperoleh ekstrak  kasar  sebanyak  11,31g  yang  berwarna hijau  kehitaman,  (rendemen  sebesar  5.7%). Selanjutnya  sebanyak  10  gram  ekstrak metanol  (MeOH)  dipartisi  secara  bertahap dengan  campuran n -heksan  dan  air  (3:1), sehingga diperoleh filtrat n -heksan dan filtrat air.  Filtrat n -heksan  diuapkan  dengan  alat penguap  vakum  diperoleh  ekstrak  kental fraksi n -heksan  sebanyak  5,0  gram  (50%). Lapisan  air  dipartisi  dengan  etil  asetat menghasilkan  filtrat  etil  asetat  dan  filtrat  air. Filtrat etil asetat dengan alat penguap vakum diperoleh ekstrak etil asetat 3,20 gram (32%). Masing-masing  ekstrak  metanol  dan  fraksi- fraksinya  diuji  fitokimia  dan  diuji  aktivitas anti malaria.

## Hasil uji fitokimia ekstrak tumbuhan
Peperomia pellucida
Terhadap ekstrak Tumbuhan Peperomia pellucida dilakukan uji fitokimia, dipaparkan pada Tabel 1. Pada Tabel 1 terlihat bahwa hasil uji fitokimia ekstrak metanol tumbuhan
P.pellucida menunjukkan positif terhadap uji alkaloid, steroid dan saponin, serta flavonoid dan terpenoid.
Tabel 1. Hasil uji fitokimia ekstrak tumbuhan Peperomia pellucida Golongan Senyawa Ekstrak Metanol n-Heksan Etilasetat Flavonoid +++ – ++ Alkaloid ++ + ++ Saponin + + + Steroid ++ + + Triterpenoid ++++ – +++ Ket: (-): tidak terdeteksi;  (+): positif  lemah;  (++): positif; (+++): positif  kuat; dan (++++): positif sangat  kuat.

## Hasil uji aktivitas antimalaria
Perhitungan parasitemia dan
penghambatan  pertumbuhan  parasit  pada sampel  tumbuhan Peperomia  pelucida asal Gorontalo  dilakukan  dengan  menghitung jumlah  eritrosit  yang  terinfeksi  pada  setiap 500 eritrosit di bawah mikroskop ditunjukkan pada Tabel 2, 3, dan 4.
Kontrol  positif  yang  digunakan  pada pengujian ini adalah klorokuinon. Pembangding yang digunakan adalah artemisin dengan konsentrasi 10 ⁻ ³ M. Setelah didapat  nilai  %  Parasitemia  dan  nilai  % Pertumbuhan  maka  selanjutnya  dilakukan perhitungan  terhadap  %  Hambatan.  Untuk mengetahui  nilai  IC 50 maka  data  tersebut dimasukkan  dalam  kurva  regresi  liner  untuk memperoleh  persamaan  regresi  linearnya. Hasil  uji  aktivitas  antimalaria  fraksi  n- heksana, etil asetat dan metanol menunjukkan nilai  IC 50 berturut-turut  sebesar  12.80,  2.90, dan 10.74 µg/mL.
Tabel 2. Hasil uji aktivitas antimalaria ekstrak fraksi etilasetat (EtOAc)  tumbuhan Peperomia pellucida Terhadap Plasmodium falciparum D10.
Dosis (µg/ml)
R % Parasitemia % Pertumbuhan % Hambatan % Hambatan rata- rata 0 jam 48 jam Kontrol (-) 1 1.15 4.78 3.57 - - 2 1.15 4.73 3.60 - 100 1 1.15 1.45 0.12 90.67 91.16 2 1.15 1.39 0.11 91.60 10 1 1.15 1.97 0.84 69.78 70.30 2 1.15 1.99 0.82 70.81 1 1 1.15 2.98 1.82 44.90 45.89 2 1.15 2.91 1.79 46.89 0,1 1 1.15 3.89 2.89 20.21 20.76 2 1.15 3.92 2.85 21.30 0,01 1 1.15 4.21 3.33 10.10 9.60 2 1.15 4.24 3.35 9.10
Gambar 1. Nilai  IC50 (µg/mL)  ekstrak etil asetat (EtOAc) fraksi etilasetat (EtOAc) tumbuhan Peperomia pellucida terhadap Plasmodium falciparum D10.
Tabel  3. Hasil  uji  aktivitas  antimalaria  ekstrak  fraksi  n-heksan  tumbuhan Peperomia  pellucida Terhadap Plasmodium falciparum D10.
Dosis (µg/ml) R % Parasitemia % Pertumbuhan % Hambatan % Hambatan rata-rata 0 jam 48 jam Kontrol (-) 1 1.15 4.88 3.57 - - 2 1.15 4.90 3.60 - 100 1 1.15 1.90 1.10 80.80 81.65 2 1.15 1.98 1.07 82.50 10 1 1.15 2.97 1.71 48.98 49.61 2 1.15 2.90 1.69 50.23 1 1 1.15 3.80 2.45 26.24 25.51 2 1.15 3.87 2.50 24.78 0,1 1 1.15 4.57 3.12 10.11 10.65 2 1.15 4.59 3.10 11.20 0,01 1 1.15 4.76 3.42 1.90 1.86 2 1.15 4.70 3.45 1.87
Tabel  4. Hasil  uji  aktivitas  antimalaria  ekstrak  metanol  (MeOH)  tumbuhan Peperomia  pellucida terhadap Plasmodium falciparum D10.
Dosis (µg/ml)
R % Parasitemia % Pertumbuhan % Hambatan % Hambatan rata-rata 0 jam 48 jam Kontrol (-) 1 1.15 4.59 3.50 - - 2 1.15 4.65 3.53 - 100 1 1.15 1.25 0.15 90..23 90.32 2 1.15 1.23 0.17 90.40 10 1 1.15 2.26 1.60 49.59 50.06 2 1.15 2.28 1.58 50.60 1 1 1.15 3.33 2.29 32.23 32.16 2 1.15 3.38 2.33 32.10 0,1 1 1.15 3.63 2.76 23.12 23.15 2 1.15 3.60 2.74 23.18 0,01 1 1.15 4.20 3.01 9.27 9.31 2 1.15 4.18 2.98 9.35
Gambar  2. Nilai  IC50  (µg/mL)  ekstrak  fraksi  n-
Heksan tumbuhan Peperomia pellucida terhadap Plasmodium falciparum D10. Gambar 3. Nilai  IC50 (µg/mL)  ekstrak metanol (MeOH)
tumbuhan Peperomia  pellucida terhadap Plasmodium falciparum D10.
IC 50 = 2.90 µg/mL
IC 50 = 12.80 µg/ml IC 50 = 10.74 µg/ml

## KESIMPULAN
Hasil  skrining  fitokimia  mengungkapkan adanya  alkaloid,  flavonoid,  steroid,  saponin dan triterpenoid. Hasil uji aktivitas antimalaria  fraksi  n-heksana,  etil  asetat  dan metanol  menunjukkan  nilai  IC 50 berturut- turut sebesar 12.80, 2.90, dan 10.74 µg/mL.

## Ucapan Terimakasih
Ucapan  terimakasih  kami  sampaikan kepada  Kementerian  Riset,  Tegnologi  dan Pendidikan Tinggi Republik Indonesia (RISTENDIKTI)  atas  dana  penelitian  melalui hibah penelitian 2016.

## DAFTAR PUSTAKA
Cera,  G.M.D.P.,  Ramos,  N.R.B.,  &  Siazon, N.I.T.  2011.  In  vitro  evaluation  of potential chemotherapeutic and chemopreventive biocompounds
in P.pellucida (L.) Kunth on HCT 116 cancer cell line. Journal of Pharmacology, 143. Khan,  A.,  Rahman,  M.,  &  Islam,  S.  2008.
Antipyretic Activity of Peperomia pellucida  Leaves  in  Rabbit. Turk  J  Biol ,
32:37-41.
Majumder, P., Abraham, P., & Satya, V. 2011.
Ethno-medicinal, Phytochemical and Pharmacological  review  of  an  amazing medicinal  herb  Peperomia  pellucida  (L.) HBK. Research. Journal of Pharmaceutical Biological and Chemical , 2(Issue 4):358-364. Martínez,  R.R.,  Jesús,  A.,  Leticia,  Cruz- Antonio.,  Daniel,  Arrieta-Baez.,  Antonio, M.Velázquez-Méndez., & María, E.Sánchez-Mendoza.  2013.  Dillapiole, Isolated  from Peperomia  pellucida , Shows  Gastroprotector  Activity  against Ethanol-Induced Gastric Lesions in
Wistar Rats. Molecules , 18:11327-11337. Nwokocha,  C.R.,  D.U.  Owu.,  K.  Kinlocke.,  J. Murray.,  R.  Delgoda.,  K.  Thaxter.,  G. McCalla.,  &  L.    Young.    2012.  Possible Mechanism  of  Action  of  the  Hypotensive Effect  of Peperomia  pellucida and Interactions between Human Cytochrome    P450  Enzymes. Medicinal and  Aromatic Plants, 1 :1-5. Overgaard,  H.,  Siriscopa,  P.,  Mikolo,  B.,  & Malterud, K.,  2014.  Insecticidal  Activities of  Bark,  Leaf  and  Seed  Extracts  of Zanthoxylum  heitzii against  the  African Malaria  Vector. Anopheles  gambiae.
Molecules, 19:21276-21290. Rahayu  S,  Kurniasih  N,  Amalia  V.  2015. Ekstraksi  dan  Identifikasi  Senyawa Flavonoid  Dari  Limbah  Kulit  Bawang Merah  Sebagai  Antioksidan  Alami. Bandung: UIN  Sunan  Gunung  Djati vol 2(1), 2015, 1-8.
Singh,  G.S.,  &  Pandeya,  S.N.  2011.  Natural product in discovery of potential and safer antibacterial  agent. Natural  product  in medicinal  chemistry .  63-101:  978-81- 308-0448-4
Susilawati,  Y.,  Nugraha,  R.,  Muhtadi,  A., Soetardjo, S., & Supratman, U. 2015. ( S )- 2-Methyl-2-(4-methylpent-3-enyl)-6- (propan-2-ylidene)-3,4,6,7- tetrahydropyrano[4,3- g ]  chromen-9(2 H )- one. Molbank, 1422-8955. Yuniarto,  N.  2013.  Efek  ekstrak  Air  dan heksana  Herba  Suruhan  Peperomia pellucidia  Terhadap  Penurunan  kadar Asam Urat Serum Darah Ayam Kampung Jantan. Media litbagas , 23( 1 ) 8-14. Zaridah, M.S., Azah, M.A., & Rohani, A. 2006. Mosqutocidal  activities  of  Malaysian plants. Journal  of  Tropical  Forest Science, 18( 1 ):74-80.