Efektivitas Ekstrak Etanol Biji Alpukat ( Persea americana Mill.) Terhadap Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Putih  Jantan (Rattus  Novergicus) Model Hiperkolesterolemia-Diabetes
( Effectiveness  of  Ethanol  Extract  of  Avocado  Seeds  (Persea  americana  mill.)  on  Blood Glucose  Levels  of  Male  White  Rat  (Rattus  novergicus)  Hipercolesterolemia-diabetes Model )
Recky Patala 1* , Niluh Puspita Dewi 1 , Meilinda Handayani Pasaribu 1
1* Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Pelita Mas (STIFA-PM) Palu, Indonesia. E-mail: reckyfarmasi@gmail.com
Article Info: Received: 10 Oktober 2019 in revised form: 10 Oktober 2019
Accepted: 24 Oktober 2019 Available Online: 02 Maret 2020

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  is  a  metabolic  disorder  characterized  by  increased  blood glucose  levels  due  to  a  deficiency  of  insulin  secretion  or  when  insulin resistance  occurs.  Herbal  medicine  is  one  alternative  method  that  can  be used  to  control  blood  glucose  levels  and  prevent  complications  of  diabetes mellitus.  One  of  the  medicinal  plants  is  avocado  seeds  ( Persea  americana Mill.)  The  active  compounds  contained  in  avocado  seeds  that  have antidiabetic  activity  are  flavonoids,  alkaloids,  tannins  and  saponins.  This study aims  to determine the content of  secondary  metabolites in the extract of avocado seed, the effect of extract of avocado seed and the dose of extract of  avocado  seed  that  is  effective  in  lowering  blood  glucose  levels.  This research  was  a  laboratory  experiment  using  a  modified  randomized controlled pretest and posttest group design. Test animals used were 30 rats which  were  divided  into  six  treatment  groups,  namely  normal  control, negative control, positive control, a dose of 250, 300 and 350 mg/kg groups. The  results  showed  that  extract  of  avocado  seed  contained  secondary metabolites:  flavonoids,  alkaloids,  saponins,  and  tanins;extract  of  avocado seed  gave  effect  to  decrease  blood  glucose  levels;  extract  of  avocado  seed with  a  dose  of  350  mg/kg  was  effective  in  lowering  blood  glucose  levels with an avarage decrease of 99,8 mg/dL.
Keywords : Avocado Seeds Hiperkolesterolemia-diabetic Blood Glucose Levels.
Corresponding Author: Recky Patala Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Pelita Mas (STIFA-PM) Palu
Indonesia email: reckyfarmasi@gmail.com
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Patala,  R.,  Dewi,  N.  P.,  &  Pasaribu,  M.  H.  (2020).  Efektivitas  Ekstrak  Etanol  Biji  Alpukat  ( Persea  americana Mill.) Terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Putih  Jantan  ( Rattus  Novergicus )  Model  Hiperkolesterolemia-Diabetes. Jurnal Farmasi Galenika :Galenika Journal of Pharmacy (e-Journal), 6 (1), 7-13. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.13929
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6 (1): 7 – 13 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.13929

## ABSTRAK
Diabetes  melitus  merupakan  suatu  kelainan  metabolisme  yang  ditandai  dengan  meningkatnya  kadar  glukosa darah  akibat  dari  suatu  defesiensi  sekresi  insulin  atau  ketika  terjadi  resistensi  insulin.  Pengobatan  herbal merupakan salah satu cara alternatif yang dapat digunakan untuk mengontrol kadar glukosa darah dan mencegah timbulnya  komplikasi  diabetes  melitus.  Salah  satu  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai  obat  yaitu  biji  alpukat ( Persea  americana Mill.)  Senyawa  aktif  yang  terkandung  pada  biji  alpukat  yang  memiliki  aktivitas  sebagai antidiabetes  adalah  flavonoid,  alkaloid,  tanindan  saponin.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  kandungan senyawa metabolit sekunder pada ekstrak biji alpukat, efek pemberian ekstrak biji alpukat dan menentukan dosis ekstrak  biji  alpukat  yang  efektif  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimen laboratorium dengan menggunakan rancangan penelitian modifikasi pretest and posttest randomized controlled  group  design .  Hewan  uji  yang  digunakan  sebanyak  30  ekor  tikus  dibagi  menjadi  6  kelompok perlakuan,  yaitu  kontrol  normal,  kontrol  negatif,  kontrol  positif,  dosis  250  mg/kgBB,  300mg/kgBB  dan  350 mg/kgBB.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  biji  alpukat  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder flavonoid, alkaloid, saponin, dan tanin; ekstrak biji alpukat memberikan efek terhadap penurunan kadar glukosa darah;  ekstrak  biji  alpukat  pada  dosis  350  mg/kgBB  merupakan  dosis  yang  efektif  dalam  menurunkan  kadar glukosa darah dengan nilai rata-rata penurunan sebesar 99,8 mg/dL.
Kata kunci: Biji alpukat, Hiperkolesterolemia-diabetes, Kadar glukosa darah.

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  merupakan  suatu  kelainan  metabolisme  karbohidrat,  yang  ditandai  dengan hiperglikemia  abnormal  sebagai  akibat  dari  suatu  defisiensi  sekresi  insulin,  berkurangnya  aktivitas fungsi  biologis  insulin  atau  adanya  resistensi  insulin  dan  kemudian  sel-sel  β  menunjukan  gangguan pada  sekresi  insulin  fase  pertama,  artinya  sekresi  insulin  gagal  mengkompensasi  resistensi  insulin (DM  tipe  2)  atau  kekurangan  insulin  secara  absolut  (DM  tipe  1)  (Tandi et  al., 2016). International Diabetes Federation (IDF) tahun 2015 menyebutkan bahwa lebih dari setengah juta anak-anak berusia ≤ 14 tahun hidup dengan penyakit diabetes tipe 1 dan sekitar 415 juta orang dewasa di dunia berusia 20-79  tahun  hidup  dengan  diabetes  tipe  2,  IDF  juga  menyebutkan  bahwa  318  orang  mengalami gangguan  toleransi  glukosa. World  Health  Organization (WHO) 2016 menyebutkan  jumlah  orang yang hidup dengan diabetes hampir empat kali lipat sejak tahun 1980 yaitu 422 juta, sebagian besar hidup di negara berkembang.
Pengobatan  tradisional  merupakan  salah satu  cara  alternatif  yang  dapat  digunakan  untuk  mengontrol kadar  glukosa  darah  dan  mencegah  timbulnya  komplikasi  diabetes  melitus.  Pengobatan  herbal memiliki  efek  samping  yang  kecil  jika  digunakan  pada  dosis  yang  tepat  dibandingkan  dengan  obat kimia, serta biaya yang relatif lebih murah dan mudah ditemukan (Wasito, 2012).
Salah satu tanaman yang berkhasiat sebagai obat yaitu biji alpukat ( Persea americana Mill.) Senyawa aktif yang terkandung pada biji alpukat yang memiliki aktivitas sebagai antidiabetes adalah flavonoid, alkaloid,  tanin  dan  saponin.  Biji  Alpukat  memiliki  berbagai  macam  kegunaan  antara  lain  mengobati diare,  sakit  gigi,  serta  pengobatan  kulit  dan  kecantikan.  Minyak  biji  alpukat  juga  memiliki  beberapa manfaat  kesehatan  salah  satunya  untuk  menurunkan  berat  badan.  Tanaman  alpukat  telah  banyak diketahui  memiliki  khasiat  sebagai  antinflamasi  dan  analgetik.  (Alhassan et  al., 2012).  Penelitian sebelumnya  menyatakan  bahwa  ekstrak  biji  alpukat  pada  dosis  1200  mg/kgBB  dapat  menurunkan kadar  glukosa  darah  tikus  putih  jantan  dengan  rata-rata  penurunan  134,8  mg/dL  (Yunita,2013). Ekstrak etanol 70% biji alpukat juga memiliki aefek antioksidan dengan nilai IC 50 31,5 ppm. Senyawa fenolik  dalam  biji  alpukat  lebih  besar  dibanding  dalam  buah  maupun  daun  alpukat  (Sutrisna et  al., 2015).
Berdasarkan uraian tersebut di atas maka perlu dilakukan penelitian tentang efek ekstrak biji alpukat terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus putih jantan di induksi streptozotocin. Tujuan penelitian ini  yaitu  untuk  mengetahui  efek  pemberian  ekstrak  etanol  biji  alpukat  ( Persea  americana Mill.)  dan
menentukan  dosis  yang  efektif  terhadap  penurunan  glukosa  darah  tikus  putih  jantan (Rattus novergicus) .

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  ayakan  nomor  40  mesh,  batang  pengaduk,  bejana  maserasi,  blender (National) ,  botol  larutan  stok,  botol  minum  hewan  uji,  cawan  porselin,  corong  kaca (Pyrex) , erlenmeyer (Pyrex) , gelas kimia 100 mL dan 1000 mL (Pyrex) , gelas ukur 25 mL, 50 mL, dan 100 mL (Pyrex) ,  glukometer (Accu  Chek) ,  gunting,  kandang  hewan  uji,  mortir  dan  stamper,  penangas  air (Denville) , pipet tetes, rak tabung, rotary vaccum evaporator (Eyela) , spidol, spuit oral, spuit injeksi 3 mL (Terumo  Syringe), tabung  reaksi (Pyrex) ,  tempat  makan  tikus,  timbangan  analitik (Ohaus) , timbangan  gram  ( Cook  master ).  Bahan  yang  digunakan  yaitu  Air  suling,  alumunium  foil,  alkohol 70%,  asam  klorida  2  N,  aqua  pro  injeksi,  biji  alpukat  ( Persea  americana Mill.),  besi  (III)  klorida (FeCl 3 ),citrate-buffer saline, dragendrof LP, etanol 96%, etanol 95%, handskund, kapas, kertas label, kertas  saring,  lakban,  masker,  Na.CMC,  natrium  klorida  (NaCl)  10%,  pakan  standar,  serbuk magnesium P, streptozotocin, strip glukotest ( Accu check), tablet metformin dan tissue.

## Metode
Penelitian  ini  menggunakan  metode  eksperimental  dengan  rancangan  modifikasi pre  and  post  test randomized controlled group design .

## Persiapan bahan uji
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  biji  alpukat  ( Persea  americana Mill.)    yang diperoleh  di  daerah  Kecamatan  Palu  Selatan  Kota  Palu.  Determinasi  tanaman  dilakukan  di  UPT. Sumber  Daya  Hayati  Sulawesi,  Universitas  Tadulako.  Biji  alpukat  tersebut  dikering  anginkan, kemudian  dihaluskan  sampai  diperoleh  serbuk  simplisia  kering.  Sebanyak  1  Kg  serbuk  simplisia kering  biji  alpukat  dimaserasi  dengan  etanol  96%    sebanyak  5  Liter  selama  3  x  24  jam,  kemudian disaring.  Selanjutnya  filtrat  diuapkan  dengan  menggunakan rotary  vaccum  evaporator pada  suhu 70°C dan dilanjutkan dengan menggunakan  waterbath  suhu 60°C  hingga diperoleh hingga ekstrak kental.

## Uji Penapisan Fitokimia
Ekstrak  biji  alpukat  yang  telah  diperoleh  kemudian  dilakukan  penapisan  fitokimia  terhadap  adanya senyawa alkaloid, flavonoid, saponin dan tannin (Harborne, 1987).

## Pengujian Aktivitas Antidiabetes
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  tikus (Rattus  novergicus) berjumlah  30  ekor, kemudian  dibagi  menjadi  6  kelompok  dengan  masing-masing  kelompok  berjumlah  5  ekor. Pengambilan darah dilakukan pada ekor masing-masing tikus untuk pemeriksaan kadar glukosa darah awal ( baseline ) untuk memastikan tikus yang digunakan normal sebelum hewan uji diberi perlakuan. Setelah diukur kadar glukosa darah awal diberikan pakan tinggi kolestesrol dengan komposisi standar (80%),  lemak  babi  (15  %),  dan  kuning  telur  bebek  (5%)  dengan  konsumsi  sebanyak  20  gram/tikus selama 28 hari kemudian tikus diinduksi streptozotocin dengan  30 mg/kgBB secara  intraperitoneal. . Hari  ketujuh  setelah  penginduksian,  tikus  dipuasakan  selama  16  jam  kemudian  mengukur  kembali kadar  glukosa  darah  tikus  sesudah  penginduksian.    Setelah  kadar  glukosa  darah  puasa  tikus  telah mencapai  keadaan  hiperglikemia  (>  200  mg/dL),  diberikan  perlakuan  peroral  selama  14  hari  yaitu sebagai berikut :
Kelompok 1, sebagai kontrol normal, diberi pakan standar tanpa induksi.
Kelompok 2, sebagai kontrol negatif, diberikan larutan koloidal Na CMC 0,5% secara per oral setiap hari.
Kelompok 3, sebagai kontrol positif, diberikan suspensi metformin 45 mg/kgBB secara per oral setiap hari selama 14 hari.
Kelompok 4, sebagai kelompok uji, diberikan ekstrak etanol biji alpukat dengan dosis 250 mg/kg BB secara per oral setiap hari.
Kelompok 5, sebagai kelompok uji, diberikan ekstrak etanol biji alpukat dengan dosis 300 mg/kg BB secara per oral setiap hari.
Kelompok 6, sebagai kelompok uji, diberikan ekstrak etanol biji alpukat dengan dosis 350 mg/kg BB secara per oral setiap hari.
Data  pengukuran  kadar  glukosa  darah  sebelum  dan  setelah  perlakuan  yang  diperoleh  dicatat  dan dianalisis.

## Analisis Data
Hasil pengamatan berupa data kadar glukosa dara yang dianalisis secara statistik menggunakan uji non parametrik  Kruskal-Wallis  dengan  uji  lanjut  Mann-Whitney  pada  tingkat  kepercayaan  95%.  Data dianalisis menggunakan program SPSS 23.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil randemen yang diperoleh dari proses ekstraksi sebesar 3,037%. Data hasil penapisan fitokimia ekstrak etanol biji alpukat dapat dilihat pada tabel 1 berikut :
Tabel 1. Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Biji Alpukat
No Pengujian Hasil 1 Uji Alkaloid + 2 Uji Flavonoid + 3 Uji saponin + 4 Uji Tanin +

## Keterangan : (+) : Mengandung golongan senyawa yang diuji
Selama  penelitian  dilakukan  pengamatan  terhadap  kadar  glukosa  darah  tikus,  baik  sebelum  induksi dan setelah hiperglikemia yang dilanjutkan dengan pemberian perlakuan selama 14 hari. Pada hari ke- H-35, H-42, dan H-49 dilakukan pengukuran kadar glukosa darah dalam setiap kelompok. Data rerata kadar glukosa darah hewan uji ditampilkan pada tabel 2 berikut :
0 50 100 150 200 250 300 350 Hari Ke 0 Hari ke 35  Hari ke 42  Hari ke 49 K ad ar Gl u ko sa Dar ah R ata -r ata
(m g/ d l) Hari Pengambilan Darah Kontrol Normal Kontrol Negatif Kontrol Positif
Dosis 250 mg/kg BB
Dosis 300 mg/kg BB
Dosis 350 mg/kg BB
Tabel 2. Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada H-35, H-42, dan H-49
Kelompok N Kadar Glukosa Darah (mg/dL) Selama 14 Hari Pengamatan % penurunan H-35 ( pre-test ) H-42 ( post-test I) H-49 ( post-test II) ( post-test I) ( post-test II) Kontrol Normal 5 90.2 ± 7.94 101.8 ± 6.97 90.6 ± 7.02 -12% 0% Kontrol Negatif 5 249.2 ± 40.60 232.6 ± 43.75 226.8 ±30.89 6% 8% Kontrol Positif 5 297 ± 26.76 97.6 ± 4.21 78 ± 7.07 67% 73% Ekstrak Etanol Biji Alpukat 250 mg/kgBB 5 256 ± 57.08 144.4 ± 40.36 121.4 ± 22.74 44% 53% Ekstrak Etanol Biji Alpukat 300 mg/kgBB 5 282.8 ± 32.48 130.8 ± 29.79 119.4±21.36 53% 57% Ekstrak Etanol Biji Alpukat 350 mg/kgBB 5 288 ± 16.35 113.6 ± 13.70 99.8 ± 14.30 60% 65%
Grafik  profil  kadar  glukosa  darah  tikus  sebelum  induksi  (hari  ke-0),  setelah  hipergilkemia  (hari  ke-35)  dan setelah  hari  ke-42  dan  49  pemberian  ekstrak  biji  alpukat  dengan  berbagai  variasi  dosis  (Gambar  1)  adalah sebagai berikut.:
Gambar 1. Profil rerata hasil pengukuran kadar glukosa darah pada tikus
Hasil  pengukuran  kadar  glukosa  darah  hari  ke-0  menunjukkan  kadar  glukosa  darah  rata-rata  semua kelompok  perlakuan  berkisar  84,8  –99,8  mg/dL,  kadar  glukosa  darah  tersebut  dinyatakan  normal, karena berada dalam rentang 50 – 135 mg/dL (Azhari et al., 2016).
Hasil  pengukuran  pada  hari  ke-35  menunjukkan  kadar  glukosa  darah  rata-rata  semua  kelompok perlakuan  berkisar  antara  90,2–  297  mg/dL.  Kenaikan  kadar  glukosa  darah  disebabkan  pemberian streptozotocin  dosis  30  mg/kgBB  secara  i.p.  Mekanisme  kerja  streptozotocin  menyebabkan hiperglikemia dengan cara streptozotocin masuk ke sel β pankreas melalui glucose transporter (GLUT
2)  dan  menginhibisi  siklus  krebs  menginduksi (nitrit  oxide) NO  sehingga  menyebabkan  kerusakan DNA. Gugus alkil yang terdapat pada streptozotocin menyebabkan alkalisasi DNA. Alkalisasi tersebut akan mengaktifan poli (ADP – ribosilasion) yang membuat penurunan Nikotinamida Adenosin (NAD) dan (adenosin trifosfat) ATP yang menyebabkan kerusakan pada sel β pankreas (Suryani , 2013).
Hasil  pengukuran  pada  hari  ke-42  menunjukkan  kadar  glukosa  darah  rata-rata  semua  kelompok perlakuan berkisar antara 97,6  – 232,6 mg/dL. Hal ini menunjukkan bahwa adanya penurunan kadar glukosa  darah  pada  semua  kelompok  perlakuan  kecuali  kontrol  normal  dan  kontrol  negatif.  Kontrol positif  menunjukkan  adanya  penurunan  kadar  glukosa  darah  mendekati  nilai  normal  dengan  hasil persentase  penurunan  kadar  glukosa  darah  sebesar  67%,  sedangkan  kelompok  dosis  250  mg/kgBB belum mencapai kadar glukosa darah normal dengan persentase sebesar 44%, dosis 300 mg/kgBB dan dosis  350  mg/kgBB  menunjukkan  adanya  penurunan  kadar  glukosa  darah  mencapai  kadar  glukosa darah normal dengan hasil persentase penurunan berturut-turut sebesar 53% dan 60%.
Hasil  pengukuran  pada  hari  ke-49  menunjukkan  kadar  glukosa  darah  rata-rata  semua  kelompok perlakuan  berkisar  antara  78  –  226,8mg/dL.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  adanya  penurunan  kadar glukosa darah pada semua kelompok perlakuan kecuali kontrol normal dan kontrol negatif. Kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  biji  alpukat  dosis  250,  300,  350  mg/kg  BB  memberikan  efek menurunankan  kadar  glukosa  darah  setelah  14  hari  perlakuan.  Persentase  penu runan  kadar glukosa  darah  pada  kelompok  ekstrak  etanol  biji  alpukat  dosis  250  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB, 350  mg/kg  BB  masing-masing  sebesar  53%,  57%,  dan  65%  sedangkan  kontrol  positif (metformin)  sebesar  73%.Hasil  uji  statistik  non  parametrik  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan  dari  semua  kelompok  perlakuan.  Kelompok  dosis  350  mg/KgBB  memberikan  perbedaan yang signifikan bila dibandingkan dengan kelompok dosis 250 mg /KgBB dan 300 mg/KgBB dalam memberikan  efek  penurunan  kadar  glukosa  darah. Kelompok  dosis  350  mg/KgBB  memberikan  nilai rata-rata  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  sebesar  99,8  mg/dL.  Adanya  efek  penurunan  kadar glukosa  darah  disebabkan  karena  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  seperti  tanin,  saponin, flavanoid,  dan  alkaloid.  Aktivitas  antiinflamasi  senyawa  flavonoid,  serta  aktivitas  antioksidan  dapat mencegah  dan  menghentikan  kerusakan  sel  beta  pankreas  lebih  lanjut.  Sedangkan,  dimungkinkan alkaloid  berperan  dalam  regenerasi  sel,  dengan  memulihkan  sel  beta  pankreas  yang  mengalami kerusakan  parsial  (Gupta et  al .,  2006).  Saponin  dapat  menstimulasi  sekresi  insulin  dari  sel  beta pankreas  (Patel et  al., 2012;  Murray, et  al., 2003).  Pulihnya  sel  beta  pankreas  diharapkan  akan memulihkan fungsinya dalam memproduksi insulin. Peningkatan jumlah insulin di dalam tubuh akan meningkatkan  jumlah  glukosa  darah  yang  masuk  ke  dalam  sel,  sehingga  terjadi  penurunan  kadar glukosa darah.

## KESIMPULAN
Adapun  kesimpulan  yang  diperoleh  dalam  penelitian    ini  bahwa  ekstrak  etanol  biji  alpukat  ( Persea americana Mill.) mampu memberikan efek dalam menurunkan kadar glukosa darah tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ) yang diinduksi streptozotocin dengan dosis yang efektif dalam menurunkan kadar glukosa darah tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ) yaitu dosis 350 mg/kgBB  dengan nilai rata-rata penurunan  99,8  mg/dL.  Perlu  dilakukan  standarisasi  ekstrak  dengan  parameter  spesifik  dan nonspesifik untuk menentukan kualitas dari ekstrak etanol biji alpukat ( Persea americana Mil.).

## DAFTAR PUSTAKA
Alhassan,  M.  S.,  Sule,  M.  K.,  Atiku,  A.  M.,  Wudil,  H.,  Abubakar,  S.  A.,  &  Mohammed.  (2012). Effects  of  aqueous  avocado  pear  ( Persea  americana Mill)  seed  extract  on  alloxan  induced diabetes rats. Department of Biochemistry Bayero University. Kano, 2 , 5.
Azhari, D. M., Yuliet, Y., & Khaerati, K. (2016). Uji Aktivitas Serbuk Jamur Tiram Putih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.)  P.Kumm)  Terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  Pada  Model  Hewan
Hiperkolesterolemia-Diabetes. Jurnal  Farmasi  Galenika  (Galenika  Journal  of  Pharmacy)  (e- Journal), 2 (2), 96-102.
Gupta,  M.,  &  Neera,  S.  (2006).  Regeneration  of  beta  Cells  in  Islet  of  Langerhans  of  Pancreas  of Alloxan Diabetic Rats by Acetone Extract of Momordica charantia (Linn) (bitter gourd) Fruits. Indian Journal of Experimental Biology, 45 , 1055-1062.
Harborne,  J.  B.  ( 1987 ). Metode  Fitokimia  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis.  Tumbuhan . Bandung: Penerbit ITB.
Internasional Diabetes Federation . 2015. IDF Diabetes Atlas. Edisi 7. Hal 9, 17, 28-29, 51.
Murray,  R.  K.,  Granner,  D.  K.,  Mayes,  P.  A.,  &  Rodwel,  V.  W.  (2003). Biokimia Harper (Vol. 25). Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Patel,  D.,  Kumar,  R.,  Laloo,  D.,  &  Hemalatha,  S.  (2012).  Natural  Medicines  From Plant  Source  Used  For  Therapy  of  Diabetes  Mellitus:  An  Overview  of  Its Pharmacological
Aspects. Asian Pacific Journal of Tropical Disease , 239-250.
Suryani,  N.,  Tinny  E.H.,  &  Aulanni’am.  (2013).  Pengaruh  Ekstrak  Metanol  Biji  Mahoni  Terhadap Peningkatan Kadar Insulin, Penurunan Ekspresi TNF-α dan Perbaikan Jaringan Pankreas Tikus Diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 27 (3), 137-145.
Sutrisna,  E.,  Azizah,  T.,  &  oktaria,  Y.  E.  (2015).  The  hypoglicemic  effect  of  avocado  seed  ( Persea americana mill)  and  histophatologic  profile.  Department  of  Pharmacology  of  Faculty  of Medicine of Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta
Tandi,  J.,  Muthi’ah,  H.  Z.,  Yuliet.,  &  Yusriadi.  (2016).  Efektivitas  Ekstrak  Daun  Gedi  Merah Terhadap Glukosa Darah, Malondialdehid, 8-Hdroksi-Deoksiguanosin, Insulin Tikus Diabetes. J. Trop Pharm. Chem, 3 (4) .
Wasito, H. (2012). Obat Tradisional Kekayaan Indonesia. Yogyakarta: Graha Ilmu. pp 12-17.
World Health Organization (WHO). 2016. Global report on diabetes. pp. 6, 23-25.
Yunita, E. O. (2013). Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Alpukat ( Persea Americana Mill) terhadap Tikus Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan. Jurnal Farmasi.