Pengaruh Konsentrasi dan Waktu Perendaman Ampas Tebu terhadap Kandungan Akrilamida pada Minyak Jelantah

## Effect of Concentration and Soaking Time of Sugarcane Bagasses on Acrylamide Content in Used Cooking Oil
Gatut Ari Wardani * , Widdy Erlinasari, Lilis Tuslinah Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Bakti Tunas Husada email: gatutariwardani@universitas-bth.ac.id
(tanggal diterima: 23-08-2021 , tanggal disetujui: 28-12-2021)

## INTISARI
Kandungan akrilamida yang terdapat dalam minyak goreng bekas telah berhasil ditentukan. Kadar akrilamida dapat dikurangi dengan merendam ampas tebu ke dalam minyak jelantah. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk melihat pengaruh konsentrasi dan durasi perendaman ampas tebu atas kandungan senyawa akrilamida dalam minyak jelantah.
Sampel dianalisis dengan memanfaatkan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi dengan kolom Agilent TC-C18. Analisis dilakukan menggunakan fase gerak H 3 PO 4 0,1% dan metanol (95:5) dengan  laju  alir  1  mL.menit -1 ,  serta  volume  sampel  yang  diinjeksikan  sebanyak  20µL.  Kapasitas adsorpsi ditentukan dengan studi kinetika.
Waktu retensi akrilamida pada minyak adalah 4,939 menit, dengan plat teoritis 39.029 dan nilai  HETP  0,00064,  serta  faktor  kapasitas  2,265.  Metode  ini  dapat  dikatakan  valid  dengan persamaan linear y = 25,34x + 103,32 (r = 0,9996). Parameter validitas yang diperoleh dengan persen SBR  kurang  dari  2%,  LOD  =  0,46  ppm,  LOQ  =  1,396  ppm,  dan  persen  recovery  94,94%  sampai 100,06%. Adsorpsi ini akrilamida dalam minyak bekas oleh ampas tebu diketahui mengikuti model kinetika adsorpsi Ho dengan kapasitas adsorpsi sebesar 47,39 mg/g. Ampas tebu sebanyak 5% dapat menurunkan kandungan akrilamida sebesar 65% ketika direndam dalam minyak jelantah selama 24 jam.
Kata kunci : Akrilamida; Ampas Tebu; KCKT; Validasi Metode

## ABSTRACT
The acrylamide content in used cooking oil has been determined. Acrylamide levels can be reduced by soaking bagasse in used cooking oil. The purpose of this study was to examine the effect of concentration and duration of soaking bagasse on the content of acrylamide compounds in used cooking oil.
Samples were analyzed using the High Performance Liquid Chromatography method with an  Agilent  TC-C18  column.  The  analysis  was  carried  out  using  0.1%  H 3 PO 4 mobile  phase  and methanol  (95:5)  with  a  flow  rate  of  1  mL.min -1 ,  and  the  injected  sample  volume  was  20µL.  The adsorption capacity was determined by kinetic studies.
The retention time of acrylamide in oil was 4.939 minutes, with a theoretical plate of 39,029 and a HETP value of 0,00064, and a capacity factor of 2,265. This method can be said to be valid with the linear equation y = 25.34x + 103.32 (r = 0.9996). The validity parameters were obtained with SBR percent less than 2%, LOD = 0.46 ppm, LOQ = 1.396 ppm, and the percent recovery was 94.94% to 100.06%. This adsorption of acrylamide in used oil by bagasse is known to follow the Ho adsorption kinetics model with an adsorption capacity of 47.39 mg/g. Sugarcane bagasse as much as 5% can reduce the acrylamide content by 65% when soaked in used cooking oil for 24 hours.
Keyword : Acrylamide; Bagasse; HPLC; Method Validation

## 1. PENDAHULUAN
Minyak goreng yang sering digunakan oleh masyarakat salah satunya adalah minyak  kelapa  sawit.  Minyak  mengandung  asam  lemak  bebas  yang  mudah teroksidasi.  Kandungan  asam lemak  bebas  (ALB)  yang  terdapat  di  dalam  minyak kelapa  sawit  semakin  meningkat  seiring  dengan  bertambahnya  waktu penggorengan. Kandungan ALB pada minyak kelapa sawit sebelum penggorengan sebesar  0,26%,  sedangkan  kadar  tersebut  meningkat  menjadi  0,29%  pada  saat minyak digunakan sebanyak 1-2 kali penggorengan. Pada penggunaan yang ketiga kandungan tersebut meningkat lagi mencapai 0,32% [1].
Peningkatan ALB dalam minyak kelapa sawit dikarenakan terjadinya reaksi hidrolisis pada saat proses penggorengan. Reaksi hidrolisis terjadi karena adanya air yang larut di dalam minyak sehingga terjadi interaksi antara keduanya. Minyak kelapa  sawit  sendiri  mengandung  kadar  air  yang  lebih  tinggi  dari  jenis  minyak lainnya[1]. Reaksi hidrolisis dari minyak goreng akan membentuk gliserol dan ALB. Gliserol  akan  menghasilkan  senyawa  akrolein  ketika  terjadi  proses  pemanasan (Gambar  1).  Akrolein  merupakan  senyawa  dari  golongan  aldehida  volatile  yang dapat menghasilkan bau tengik[2].

## Gambar 1. Mekanisme pembentukan akrolein dari gliserol [3]
Akrolein  dapat  membentuk  senyawa  akrilamida  (Gambar  2),  selain  dari akrolein akrilamida terbentuk dari makanan yang memiliki kandungan karbohidrat tinggi dan diolah dengan cara dipanaskan dengan suhu di atas 120˚C[4]. Akrilamida bersifat karsinogenik dan dapat menyebabkan efek neurologis. Paparan akrilamida lebih dari dosis wajar menyebabkan kerusakan Deoxyribo Nucleic Acid (DNA). The International  Agency  for  Research  of  Cancer menyatakan  bahwa  akrilamida memungkinkan  dapat menyebabkan kanker, selain itu akrilamida dapat merusak syaraf dan menyebabkan gangguan kesuburan[5].
Pencegahan  pembentukan  akrilamida  yang  bersifat  karsinogenik  dapat dilakukan  dengan  cara  mengurangi  kandungan  ALB  pada  minyak  kelapa  sawit. Asam  lemak  bebas  atau  ALB  yang  terbentuk  dapat  dikurangi  melalui  proses adsorpsi.  Material  yang  umum  dipakai  untuk  adsorpsi  salah  satunya  yaitu  arang aktif. Namun, penggunaan arang aktif sebagai adsorben dapat meningkatkan kadar akrilamida.  Peningkatan  kadar  akrilamida  disebabkan  karena  terjadi  peristiwa otooksidasi  minyak  yang  diakibatkan  oleh  pemanasan  saat  penjernihan  minyak menggunakan arang aktif aktif[4].
Proses adsorpsi bisa dilakukan dengan memanfaatkan sisa hasil pertanian sebagai adsorben, salah satunya adalah ampas tebu.  Ampas tebu diketahui dapat digunakan memurnikan minyak jelantah.  Minyak jelantah yang direndam dengan
memanfaatkan  ampas  tebu  diketahui  bisa  mengurangi  kadar  air  dan  ALB[7],[8]. Ampas  tebu  mampu  mengurangi  kadar  air  pada  minyak  jelantah  dari  0,900% menjadi 0,367%, sedangkan ALB turun dari 0,500% menjadi 0,267%[9].

## Gambar 2. Mekanisme pembentukan akrilamida dari akrolein [6]
Maka dari itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ampas tebu terhadap kandungan akrilamida yang terkandung di dalam minyak jelantah. Asam  lemak  bebas  yang  dapat  diserap  oleh  ampas  tebu  diharapkan  dapat mengurangi pembentukan akrilamida.

## 2. METODE PENELITIAN

## 2. 1. ALAT DAN BAHAN
Seperangkat  alat  KCKT  (Agilent  Technologies  120  Compact  LC),  Sonikator (Skymen),  Spektofotometer  UV-Vis  (Genesys  10S  UV-Vis),  syiringe  filter,  vial  for HPLC, mikro pipet, pengaduk ultrasonic (Dlab), ayakan 40 mesh, water bath shaker (18-One)
Bahan  yang  dipakai  pada  penelitian  ini  adalah  minyak  goreng  bekas penggorengan/minyak jelantah, ampas tebu, asam fosfat 85% (Merck), akrilamida (Sigma Aldrich), aqua pro injeksi, diklorometan (Merck) dan methanol for HPLC.

## 2. 2. CARA KERJA

## Penyiapan Bahan
Sampel minyak jelantah disaring dan dimasukkan ke dalam 4 botol dengam masing-masing berisi 50 mL minyak jelantah kemudian ampas tebu yang didapat dari  pedagang  air  tebu  di  Tasikmalaya  dicuci  dan  dikeringkan  dibawah  sinar matahari,  setelah  kering  ampas  tebu  tersebut  dihaluskan  menggunakan  blender simplisia.

## Pembuatan Fase Gerak
Fase  gerak  disiapkan  dari  metanol  dan  asam  fosfat  0,1%  dengan perbandingan 5:95. Campuran tersebut dihomogenkan dan disaring menggunakan filter  eluen.    Udara  yang  berada  pada  fase  gerak  dihilangkan  menggunakan pengaduk ultrasonik.

## Uji Kesesuaian Sistem KCKT
Sampel simulasi diambil 20 µL dan dimasukkan ke dalam KCKT. Persyaratan kesesuaian uji menurut Office of Solid Waste (OSW) jumlah plat teoritis (N) > 2500, nilai HETP < N. Waktu retensi tR (1 menit < tR < 10 menit) dan faktor kapasitas ( 1 ≤ k’ ≤ 10).

## Validasi Metode
Sampel simulasi dibuat dengan cara menyaring minyak baru kemudian di- spike dengan akrilamida pembanding dengan variasi konsentrasi 1 sampai 6 ppm . Linearitas
Sampel simulasi diambil 20 µL dan dianalisi menggunakan KCKT, kemudian luas  puncak  yang  diperoleh  dicatat.  Setelah  itu,  kemudian  membuat  plot  kurva antara sumbu x (konsentrasi) dengan y (luas puncak) sehingga didapat persamaan y = bx + a[10].

## Presisi
Sampel  simulasi  disuntikkan  ke  dalam  kolom  sebanyak  20  µL  dengan keadaan yang telah disesuaikan dan dilakukan pengulangan sebanyak 3 kali. Persen Simpangan Baku Relatif (% SBR) akan diperoleh dengan metode ini. Nilai % SBR yang baik menurut ICH ≤ 2%.
Akurasi
Sampel simulasi dengan kadar 80, 100 dan 120% dari hasil LoD disuntikkan ke dalam kolom sebanyak 20µL dan hitung % Recovery. % Recovery yang baik 80 – 110%[11].

## Batas Deteksi dan Batas Kuantifikasi
Batas  deteksi  (LoD)  dan  batas  kuantifikasi  (LoQ)  dapat  dihitung menggunakan data statistik dengan persamaan regresi linear dari kurva kalibrasi.
𝐿𝑜𝑄 = 10×𝜎 𝑏 … (1)
𝑳𝒐𝑫 = 𝟑,𝟑 × 𝝈 𝒃 … (𝟐)
𝝈 =   √ ∑ 𝒙𝒊 𝟐
𝒏(𝒙𝒊  − 𝒙 ̅) 𝟐 … (𝟑)
Dimana b = Slope dan 𝝈 = Simpangan baku respon

## Pengaruh Lama Perendaman dan Konsentrasi Ampas Tebu Terhadap Kadar Akrilamida
Untuk  mengetahui  pengaruh  penambahan  ampas  tebu  terhadap  kadar akrilamida dilakukan percobaan dengan memasukkan ampas tebu ke dalam minyak jelantah yang sudah di- spike dengan akrilamida 50 ppm sebanyak 5, 10 dan 15%. Perendaman minyak jelantah menggunakan ampas tebu masing-masing dilakukan selama 24, 48 dan 72 jam.

## Penentuan Kinetika Adsorpsi
Sebanyak 5% adsorben dimasukkan ke dalam minyak yang sudah di- spike dengan  akrilamida  kemudian  diaduk  menggunakan magnetic  stirrer selama  45 menit  dan  didiamkan  dengan  variasi  waktu  12,  24,  48  dan  72  jam.  Setelah  itu, dilakukan  ekstraksi  akrilamida  untuk  memisahkan  akrilamida  dengan  minyak kemudian  lakukan  analisis  kadar  akrilamida  dengan  menggunakan  KCKT.  Hasil yang diperoleh kemudian di-plot-kan ke dalam model persamaan Santosa, Lagergen dan Ho.

## Penentuan Kadar Akrilamida dalam Sampel Minyak Jelantah
Sampel  di- spike dengan  akrilamida  pembanding,  kemudian  ditambahkan adsorben  ampas  tebu  5%  lalu  diaduk  menggunakan magnetic  stirrer selama  45 menit dan didiamkan selama 24 jam. Setelah dilakukan perendaman 24 jam minyak jelantah tersebut diektraksi dan dilakukan pengujian menggunakan KCKT.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Adsorben Ampas Tebu
Ampas  tebu  (Gambar  3)  memiliki  warna  putih  kekuningan,  rasa  manis, memiliki aroma harum dan mudah dikeringkan sehingga tidak menghasilkan bau busuk.  Batang  ampas  tebu  tidak  keras  juga  tidak  fleksibel  karena  bagian  tengah batang terdapat gabus yang cukup tebal.
Gambar 3. Serbuk Ampas Teb u
Ampas  tebu  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  secara  langsung  dalam waktu  3  hari  berturut-turut  bertujuan  untuk  mendapatkan  adsorben  yang  tidak mudah rusak dan terhindar dari pertumbuhan mikroba dan jamur. Setelah ampas
tebu kering dihaluskan dengan menggunakan blender simplisia kemudian diayak menggunakan  ayakan  berukuran  40  mesh  bertujuan  untuk  meningkatkan  luas permukaan sehingga memudahkan adsorben untuk menjerat adsorbat . Ampas  tebu  mengandung  0,79%  lignin  [12]  dan  beberapa  gugus  organik yang berpotensi sebagai adsorben. Pada Gambar 4.a daerah I terlihat bahwa ampas tebu  memiliki  serapan  pada  bilangan  gelombang  3339  cm -1 .  Serapan  tersebut mengindikasikan adanya gugus -OH di dalam ampas tebu. Gugus -OH yang terdapat dalam  ampas  tebu  merupakan  salah  satu  gugus  yang  berpotensi  dapat  mengikat senyawa akrilamida. Kepolaran akrilamida yang tinggi menyebabkan dapat terikat dengan gugus-gugus polar seperti pada gugus -OH.  Serapan -OH tidak terlihat pada spketra  4.b  daerah  I  karena  senyawa  akrilamida  (Gambar  2)  tidak  mengandung gugus -OH. Namun, pada daerah tersebut terdapat dua serapan yang berdekatan. Serapan  tersebut  mengindikasikan  adanya  gugus  -NH 2 pada  senyawa  akrilamida yang  dikarakterisasi.  Hal  ini  sesuai  dengan  struktur  akrilamida  yang  memang mempunyai gugus tersebut. Serapan -NH 2 tidak terlihat pada spektra 4.c yaitu pada ampas  tebu  setelah  direndam  oleh  minyak  jelantah.  Gugus  -OH  inilah  yang mempunyai peranan besar dalam proses penyerapan akrilamida.
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 1032 1034 IV 3335 2922 3335 1666 1743 2853 2813 3169 1603 2899 % Transmitan (a. u) Bilangan Gelombang ( cm -1 ) 3339 ( a ) ( b ) ( c ) I II III
Gambar 4. Hasil FTIR (a) Ampas Tebu; (b) Akrilamida Pembanding dan (c) Ampas Tebu setelah Penyerapan
Pada Gambar 4 daerah II merupakan serapan dari gugus -CH dengan jenis vibrasi ulur. Serapan -CH semakin terlihat jelas pada gambar 4.c karena pada ampas
tebu  yang  sudah  direndam  ke  dalam  minyak  telah  menyerap  senyawa  akrilamid sehingga gugus tersebut bertambah.
Pada Gambar 4.b daerah III terlihat serapan pada bilangan gelombang 1666 cm -1 .  Hal  itu  menandakan  adanya  gugus  amina  primer  (-CONH 2 )  dalam  struktur akrilamida.  Gugus  tersebut  tidak  terdeteksi  pada  spektra  4.c.  Hilangnya  gugus amina  primer dan  gugus  -NH 2 (pada  serapan  3335  cm -1 ) setelah proses  adsorpsi karena  dimungkinkan  terjadi  reaksi  dengan  sisi-sisi  aktif  dari  adsorben.  Reaksi tersebut  yang  menyebabkan  senyawa  akrilamida  dapat  terikat  dengan  adsorben. Prediksi  ini  diperkuat  dengan  munculnya  gugus  karbonil  ester  (-COOR)  pada spektra  4.c  yang  diketahui  dengan  adanya  serapan  yang  muncul  pada  bilangan gelombang 1743 cm -1 . Dengan demikian, adsorpsi akrilamid oleh adsorben ampas tebu  dimungkinkan  terjadi  reaksi  yang  mengubah  gugus  amina  primer  menjadi gugus karbonil ester.
Daerah  IV  pada  Gambar  4  disebut  dengan  daerah fingerprint (sidik  jari). Setiap senyawa memiliki pola spektra yang spesifik pada sidik jari tersebut. Pada Gambar  4.c  menunjukkan  pola  yang  sama  dengan  Gambar  4.a.  Hal  ini memperlihatkan bahwa secara umum proses adsorpsi yang terjadi tidak mengubah kerangka  struktur  dari  ampas  tebu.  Serapan  yang  ada  pada  bilangan  gelombang 1034 cm -1 (Gambar 4.a) dan 1032 (Gambar 4.c) merupakan serapan yang berasal dari adanya vibrasi ulur simetrik gugus C-O-C.

## Ekstrak Akrilamida dalam Minyak
Ekstrak akrilamida dalam minyak diperoleh dengan menggunakan senyawa diklorometan, asam fosfat 0,1%, metanol dan etanol 96%. Akrilamid bersifat polar sehingga  diekstraksi  oleh  diklorometan  yang  dapat  mengikat  akrilamida, penambahan etanol 96%, asam fosfat 0,1% dan metanol bertujuan untuk mengikat akrilamida yang tersimpan dalam diklorometan ketika dilakukan pemanasan untuk menguapkan diklorometan, kemudian dilakukan analisis untuk mengetahui kadar akrilamida yang terdapat dalam minyak.

## Panjang Gelombang Maksimum Akrilamida
Akrilamida pembanding dilarutkan dalam larutan H 3 PO 4 0,1 % dan metanol dengan  perbandingan  95  :  5.  Hasil  pengukuran  panjang  gelombang  maksimum senyawa  akrilamida  menggunakan  Spektrofotometri  Uv-Vis  ialah  198  nm. Akrilamida  bisa  dideteksi  dengan  menggunakan  spektrofotometri  Uv-Vis  sebab memiliki  gugus  kromofor  dan  auksokrom.  Senyawa  akrilamida  memiliki  gugus kromofor diantaranya C = C – C = O (dienon) sedangkan gugus auksokrom terdiri dari gugus -NH 2 (amin)[11]. Spektrum serapan dapat dilihat pada Gambar 5.
200 250 300 350 400 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 Abs orbansi Panjang Gelombang (nm) 198

## Gambar 5. Spektra UV-Vis senyawa akrilamida

## Hasil Uji Kesesuaian Sistem
Sistem  kromatografi  yang  dipakai  pada  penelitian  ini  menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Metode KCKT yang digunakan adalah fase terbalik karena akrilamida merupakan senyawa polar sehingga digunakan kolom C- 18  yang  memiliki  sifat  non  polar,  detektor  yang  dipakai  UV-Vis  dengan  panjang gelombang  maksimal  198  nm,  jenis  elusi  yang  dipakai  adalah  isokratik  dimana komposisi fase gerak sama selama elusi.  Fase gerak yang dipakai ialah campuran asam fosfat 0,1% dan metanol (95:5). Pemilihan asam fosfat 0,1% sebagai fase gerak dikarenakan keasaman asam fosfat lebih lemah dibandingkan dengan asam sulfat dan asam klorida yang dapat merusak kolom karena bersifat oksidator, methanol dipilih karena bersifat polar dan memiliki tingkat toksisitas yang rendah. Kondisi yang dipilih laju alir 1 mL.menit -1 dan volume sampel yang diinjeksikan 20µL.  Untuk memastikan alat yang digunakan dalam penelitian bekerja dengan baik atau tidak maka  sebelumnya  dilakukan  uji  kesesuaian  sistem  dengan  beberapa  parameter diantaranya  waktu  retensi  (t R ),  plat  teoritis  (N),  nilai  HETP  dan  faktor  kapasitas. Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  (Tabel  1),  maka  dapat  diketahui  waktu retensi pada 4,939 menit, plat teoritis 39.029 dan nilai HETP 0,00064 serta faktor kapasitas 2,265 menunjukkan bahwa sistem yang digunakan sesuai standar yang ditentukan.
Tabel 1. Uji Kesesuaian Sistem
Parameter KCKT Hasil Nilai Standar (OSW EVA Method, 8316) Waktu Retensi 4,939 Menit 1 - 10 Menit Plat Teoritis (N) 39,029 N>2500 HETP 0,00064 HETP<N Faktor Kapasitas (k') 2,265 01-Oct

## Hasil Validasi Metode Linearitas
Uji  linearitas  bertujuan  untuk  mengetahui  hubungan  yang  linear  antara konsentrasi  analit  dalam  hal  ini  adalah  akrilamida  dengan  respon  alat (Kromatografi Cair Tingkat Tinggi) yang dinyatakan dalam koefisien korelasi atau disimbolkan dengan r. Uji linearitas dikerjakan dengan cara mengukur AUC deret sampel  simulasi  kemudian  data  diolah  menggunakan  statistik.  Kurva  kalibrasi dikatakan  linear  jika  nilai  r  mendekati  1,  nilai  intersep  yang  dihasilkan  dari persamaan regresi menunjukkan ada atau tidaknya respon instrumen yang terjadi, jika  intersep  yang  dihasilkan  nol  maka  tidak  ada  respon  instrument  yang  terjadi atau dapat dikatakan metode pengukuran akurat sedangkan nilai slope merupakan ukuran sensitif dari suatu metode pengujian. Kurva kalibrasi sampel simulasi dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6. Kurva Kalibrasi Sampel Simulasi
Berdasarkan  hasil  uji  linearitas  pada  gambar  3  diperoleh  nilai  koefisien korelasi  sebesar  0,9996  sehingga  menghasilkan  kelinearitasan  yang  baik  karena sudah memenuhi syarat validasi (r ≥0,995). Nilai intersep yang diperoleh sebesar 103,39  yang  berarti  ditemukannya  respon  instrumen  pada  saat  pengukuran,  hal tersebut dapat disebabkan karena adanya kontaminasi pada eluen.  Nilai slope yang diperoleh sebesar 259,37 yang berarti metode pengujian memberikan sensitifitas cukup  tinggi,  semakin  tinggi  nilai slope maka  respon  instrument  cukup  kuat terhadap perubahan kadar.
2. Presisi
Presisi  (keseksamaan)  merupakan  ukuran  keterulangan  metode  analisis yang dinyatakan sebagai Standar Deviasi (SD) dan persen Simpangan Baku Relatif (% SBR), pengujian dilakukan secara repitibility (Pengulangan). Nilai SBR yang baik
y = 259,37x + 103,39 R² = 0,9993 357 757 1157 1557 1957 1 2 3 4 5 6 7 AUC Konsentrasi (ppm)
menurut ICH ≤ 2%. Hasil uji keterulangan dapat dilihat dari Tabel 2. Berdasarkan hasil data pengujian presisi pada tabel 2, diperoleh nilai % SBR dari setiap sampel < 2%  dengan  demikian  metode  yang  divalidasi  memiliki  nilai  presisi  yang  baik, semakin kecil % SBR yang diperoleh maka semakin baik tingkat ketelitiannya.

## 3.  Batas  Deteksi  (Limit  of  Detection)  dan  Batas  Kuantifikasi  (Limit  of Quantification)
Nilai LoD dan LoQ diperoleh dari persamaan kurva kalibrasi, LoD ditentukan untuk  mengetahui  jumlah  konsentrasi  terkecil  dalam  analit  yang  masih memberikan  respon  signifikan  terhadap  metode  sedangkan  penentuan  LoQ bertujuan  untuk  mengetahui  konsentrasi  terkecil  dalam  analit  yang  masih  dapat dikuantifikasi.
Berdasarkan hasil nilai LoD diperoleh sebesar 0,46 ppm menunjukan bahwa batas minimum kadar yang dapat dideteksi oleh metode ini ialah sebesar 0,46 ppm apabila  kadar  dalam  analit  dibawah  0,46  ppm  maka  metode  ini  tidak  dapat mendeteksi kadar dalam analit dan mungkin memiliki kesalahan yang tinggi. Nilai LoQ  yang  diperoleh  sebesar  1,396  ppm  menunjukkan  bahwa  kadar  analit  yang dapat dikuatifikasi diatas 1,396 ppm.
Tabel 2. Hasil Uji Presisi Konsentrasi Area Kadar Hasil Rata-Rata SB % SBR 1 357,73 0,980607 0,979746 0,000849 0,07 357,5 0,97972 357,29 0,97891 2 621,89 1,999075 2,003213 0,005761 0,29 624,67 2,009793 622,33 2,000771 3 874,57 2,973281 2,965596 0,006656 0,22 871,58 2,961753 871,58 2,961753 4 1163,98 4,089101 4,09 0,006333 0,15 1165,96 4,096734 1162,7 4,084165 5 1395,07 4,980067 5,004228 0,021069 0,42 1405,11 5,018776 1403,83 5,013841 6 1516,65 5,448818 5,446505 0,003841 0,07 1516,6 5,448626 1514,9 5,442071

## 4. Akurasi
Akurasi bertujuan untuk mengetahui keakuratan metode yang dipakai dalam suatu penelitian. Suatu metode dikatakan mempunyai akurasi yang baik jika nilai % recovery berada dalam rentang 80-110% [13]. Konsentrasi yang dipilih ialah 80, 100
dan 120% dari kadar akrilamida yang ada pada minyak jelantah. Hasil uji akurasi bisa diamati pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Akurasi
Konsentrasi AUC Kadar Hasil % Recovery 2,08 ppm 622,33 2,0008 100,04 2,6 ppm 741,46 2,4583 94,55 3,1 ppm 890 3,0328 97,83
Hasil  pengujian  akurasi  pada  tabel  3  diperoleh  nilai  %  Recovery  berada  pada rentang  94,55  –  100,04%,  hasil  tersebut  memenuhi  kriteria  syarat,  yaitu  nilai  % Recovery  berada  dalam  rentang  80  –  110%.  Dengan  demikian  metode  yang divalidasi ini mempunyai tingkat akurasi yang tinggi.

## Pengaruh Lama Perendaman dan Konsentrasi Ampas Tebu Terhadap Kadar Akrilamida
Waktu  perendaman  ampas  tebu  sebagai  adsorben  sangat  mempengaruhi jumlah senyawa akrilamida yang dapat terserap. Semakin lama perendaman yang dilakukan membuat kadar akrilamida semakin menurun. Hal ini bisa terlihat pada Gambar 7, bahwa jumlah akrilamida terbanyak yang dapat diserap oleh ampas tebu Ketika  direndam  selama  24  jam.  Hal  ini  dikarenakan  pada  waktu  tersebut  telah terjadi  kesetimbangan  dan  kejenuhan  dari  adsorben.  Semakin  jenuh  adsorben tersebut,  maka  akan  terjadi  proses  desorpsi  atau  pelepasan  Kembali  senaywa akrilamida yang telah diserap.
Gambar 7. Pengaruh waktu perendaman ampas tebu berbagai konsentrasi terhadap akrilamida yang teradsorpsi 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 20 30 40 50 60 70 80 A kr ila mida Te ra dsorp si (pp m) Lama Perendaman (Jam) 5% 10% 15%
Jumlah  ampas  tebu  yang  terlalu  banyak  juga  dapat  menurunkan  jumlah akrilamida  yang  teradsorpsi.  Ampas  tebu  sebanyak  5%  dapat  mengadsorpsi akrilamida lebih maksimal yaitu sebanyak 33 ppm. Ampas tebu dengan jumlah yang lebih  banyak  yaitu  10%  dan  15%  masing-masing  hanya  mampu  menyerap akrilamida sebanyak 32 ppm dan 30 ppm dalam waktu perendaman 24 jam.
Hasil adsorpsi akrilamida menggunakan ampas tebu konsentrasi 5% dengan variasi waktu lama perendaman dapat dilihat pada gambar 8. Berdasarkan gambar 8, kadar akrilamida yang teradsorpsi paling tinggi terjadi pada perendaman minyak dengan ampas tebu selama 24 jam. Sedangkan pada waktu perendaman 48 dan 72 jam mengalami penurunan kembali kadar akrilamida yang teradsorpsi oleh ampas tebu di dalam minyak. Hal ini disebabkan terjadinya desorpsi, proses penyerapan terjadi  secara  fisika  dimana  proses  penyerapan  terjadi  secara  reversibel  yang mengakibatkan adsorbat kembali terlepas ke dalam larutan. Tahap awal adsorpsi merupakan tahap adsorpsi yang paling baik, sehingga ketika sudah berada dalam keadaan  kesetimbangan  antara  adsorpsi  dan  desorpsi  maka  akan  meningkatnya desorpsi adsorbat[14]. Selain itu proses desorpsi juga bisa disebabkan oleh adanya sifat  kompetitif  adsorpsi  antara  konsentrat  yang  ada  dalam  minyak  dibuktikan dengan  adanya  puncak  selain  akrilamida  yang  memungkinkan  memiliki  afinitas yang tinggi sehingga mampu menggantikan adsorbat sehingga terjadi desorpsi.

## Gambar 8. Pengaruh waktu perendaman ampas tebu 5% terhadap jumlah akrilamida yang teradsorpsi

## Kinetika Adsorpsi
Untuk mengetahui model kinetika adsorpsi yang terbentuk maka dilakukan studi kinetika, model kinetika yang dilakukan pada penelitian ini diantaranya model persamaan  kinetika  Santosa,  Lagergren  dan  Ho.  Hasil  uji  kinetika  adsorpsi  bisa diamati pada Tabel 4. Berdasarkan Tabel 4, bisa diketahui bahwa adsorpsi senyawa akrilamida  oleh  ampas  tebu  mengikuti  model  kinetika  Ho  atau  pseudo  orde  dua dengan  kapasitas  adsorpsi  sebesar  47,85  mg/g.  Mekanisme  adsorpsi  umumnya
22,15 33,03 28 23,75 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 10 20 30 40 50 60 70 80 A kr ila mida Te ra dsorp si (pp m) Lama Perendaman (Jam)
dipengaruhi  oleh  dua  hal,  yaitu  difusi  permukaan  dan  difusi  intrapartikel.  Pada umumnya, faktor difusi intrapartikel yang sering terjadi dalam proses adsorpsi [15]. Pada  awal  reaksi,  laju  adsorpsi  lebih  dominan  daripada  laju  desorpsi  sehingga adsorpsi berjalan dengan cepat. Namun, pada saat tertentu laju adsorpsi berjalan lambat, berbalik dengan laju desorpsi yang semakin cepat. Pada saat laju adsorpsi sama  dengan  laju  desorpsi,  maka  saat  itu  disebut  dengan  keadaan kesetimbangan[16].
Tabel 4. Hasil Parameter Kinetika Adsorpsi
Model Kinetika R 2 Konstanta Kesetimbangan, (L/mol) Konstanta Laju Adsorpsi (menit -1 ) Kapasitas Adsorpsi (mg/g) Santosa 0,00002 0,0376 0,000001 - Lagergreen 0,0339 - 0,00003 39,64 Ho 0,9752 - 0,0001 47,85
Ampas tebu dan modifikasinya diketahui mempunyai kemampuan yang baik untuk  digunakan  sebagai  adsorben.  Kemampuan  ampas  tebu  dalam  menyerap senyawa yang berpotensi sebagai polutan dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Kapasitas Adsorpsi Ampas Tebu dan modifikasinya terhadap Beberapa Senyawa
Senyawa yang diadsorpsi Kapasitas Adsorpsi Sumber Gentian violet 1273,2 mg/g [17] Metilen biru 148,5 mg/g [17] Ion timbal(II) 51,3 mg/g [18] Metilen biru 82 mg/g [19] Ion merkuri 178 mg/g [20] Pewarna kristal ungu 293,02 mg/g [21] Ethylene dichloride 1,1 mg/g [22] Ion timbal(II) 1,61 mg/g [23] Ion nikel(II) 123,46 mg/g [23]

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  penambahan  konsentrasi ampas tebu tidak mempengaruhi penurunan kandungan senyawa akrilamida dalam minyak jelantah. Lama perendaman ampas tebu dalam minyak jelantah juga tidak berpengaruh  terhadap  penurunan  kadar  akrilamida.  Perendaman  yang  terjadi selama  24  jam  dapat  menurunkan  kadar  akrilamida  lebih  besar  dibandingkan dengan perendaman selama 12, 48 dan 72 jam.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
[1] S. Karouw and C. Indrawanto, “Perubahan mutu minyak kelapa dan minyak sawit  selama  penggorengan,” Bul.  Palma ,  vol.  16,  no.  1,  pp.  1–7,  2015,  doi: 10.21082/bp.v16n1.2015.1-7.
[2] D. Ariani, S. Yanti, and D. S. Saputri, “Studi kualitatif dan kuantitatif minyak goreng yang digunakan oleh penjual gorengan di kota Sumbawa,” J. TAMBORA , vol. 2, no. 3, pp. 1–8, 2017, doi: 10.36761/jt.v2i3.173.
[3] A. Talebian-Kiakalaieh, N. A. S. Amin, and H. Hezaveh, “Glycerol for renewable acrolein  production  by  catalytic  dehydration,” Renew.  Sustain.  Energy  Rev. , vol. 40, pp. 28–59, 2014, doi: 10.1016/j.rser.2014.07.168.
[4] N. Sri Gunarti, L. Tuslinah, and S. Amin, “Perbandingan kadar akrilamida pada minyak goreng bekas,” Pharma Xplore J. Sains dan Ilmu Farm. , vol. 1, no. 1, 2016.
[5] Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, Petunjuk meminimalkan terbentuknya cemaran  kimia  pada  pangan  siap  saji  dan  pangan  industri  rumah  tangga sebagai pangan jajanan anak sekolah . Jakarta: Direktorat Standarisasi Produk Pangan, Deputi Bidang Pengawasan Keamanan Pangan dan bahan Berbahaya, BPOM RI, 2012.
[6] M. H. Youssef, H. A. Abou-Gharbia, and H. A. Abou-Bakr, “Acrylamide in food : an overview,” Alexandria J. Food Sci. Technol. , vol. 1, no. 1, pp. 1–22, 2004, doi: 10.21608/ajfs.2004.18933.
[7] E. W. I. Hajar, A. F. W. Purba, P. Handayani, and Mardiah, “Proses pemurnian minyak jelantah menggunakan ampas tebu untuk pembuatan sabun padat,” J. Integr. Proses , vol. 6, no. 2, pp. 57–63, 2016.
[8] Nurdiani,  “Pengaruh  Ukuran  Partikel  dan  Waktu  Perendaman  Ampas  Tebu pada Peningkatan Kualitas Minyak Jelantah,” J. Chem. Inf. Model. , vol. 53, no. 9, pp. 1689–1699, 2013.
[9] N. Sulung, A. Chandra, and D. Fatmi, “Efektivitas ampas tebu sebagai adsorben untuk pemurnian minyak jelantah produk Sanjai,” J. Katalisator , vol. 4, no. 2, pp. 125–132, 2019.
[10]  H.  Swandi,  A.  Hadriyati,  and  M.  Sanuddin,  “Validasi  dan  analisis  kadar akrilamida pada kopi tungkal dengan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT),” Ekol. J. Ilm. Ilmu Dasar dan Lingkung. Hidup , vol. 20, no. 1, pp. 40–44, 2020, doi: 10.33751/ekologia.v20i1.1983.
[11]  Harmita, Analisis Fisikokimia: Kromatografi . Jakarta: EGC, 2015.
[12]  E.  W.  I.  Hajar  and  S.  Mufidah,  “Penurunan  asam  lemak  bebas  pada  minyak goreng bekas menggunakan ampas tebu untuk pembuatan sabun,” J. Integr. Proses , vol. 6, no. 1, pp. 22–27, 2016.
[13]  S.  M.  Sirait,  “Analisis  akrilamida  dalam  minyak  goreng  bekas  pakai  secara kromatografi cair kinerja tinggi,” Universitas Sumatera Utara, 2011.
[14]  J. P. Holmberg, “Competitive adsorption and displacement behaviour of heavy metals on peat,” Chalmers University of Technology, Goteborg, 2006.
[15]  V.  Liem,  A.  Putranto,  and  A.  Andreas,  “Sintesis  karbon  aktif  dari  kulit  salak aktivasi  kimia-senyawa  KOH  sebagai  adsorben  proses  adosprsi  zat  warna metilen biru,” in Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia “Kejuangan,” 2015, pp. 1–7.
[16]  F.  Sukarta,  “Pemanfaatan  arang  aktif  tempurung  kelapa  sawit  dan  tongkol jagung sebagai adsorben logam berat pada limbah batik,” Institut Pertanian bogor, 2014.
[17]  K. A. Guimarães Gusmão, L. V. Alves Gurgel, T. M. Sacramento Melo, and L. F. Gil, “Application of succinylated sugarcane bagasse as adsorbent to remove
methylene  blue  and  gentian  violet  from  aqueous  solutions  -  Kinetic  and equilibrium  studies,” Dye.  Pigment. ,  vol.  92,  no.  3,  pp.  967–974,  2012,  doi: 10.1016/j.dyepig.2011.09.005.
[18]  H. C. Tao, H. R. Zhang, J. B. Li, and W. Y. Ding, “Biomass based activated carbon obtained  from  sludge  and  sugarcane  bagasse  for  removing  lead  ion  from wastewater,” Bioresour.  Technol. ,  vol.  192,  pp.  611–617,  2015,  doi: 10.1016/j.biortech.2015.06.006.
[19]  M. Ge et al. , “A maleic anhydride grafted sugarcane bagasse adsorbent and its performance  on  the  removal  of  methylene  blue  from  related  wastewater,” Mater. Chem. Phys. , vol. 192, pp. 147–155,
2017, doi: 10.1016/j.matchemphys.2017.01.063.
[20]  N.  Sun,  X.  Wen,  and  C.  Yan,  “Adsorption  of  mercury  ions  from  wastewater aqueous solution by amide functionalized cellulose from sugarcane bagasse,” Int.  J.  Biol.  Macromol. ,  vol.  108,  pp.  1199–1206,  2018,  doi: 10.1016/j.ijbiomac.2017.11.027.
[21]  R. F. Wang, L. G. Deng, K. Li, X. J. Fan, W. Li, and H. Q. Lu, “Fabrication and characterization of sugarcane bagasse–calcium carbonate composite for the efficient removal of crystal violet dye from wastewater,” Ceram. Int. , vol. 46, no. 17, pp. 27484–27492, 2020, doi: 10.1016/j.ceramint.2020.07.237.
[22]  A. Bozorgian, “Chemical Review and Letters Investigation and Comparison of Experimental  Data  of  Ethylene  Dichloride  Adsorption  by  Bagasse  with Adsorption Isotherm Models,” Chem Rev Lett , vol. 3, pp. 79–85, 2020.
[23]  B. A. Ezeonuegbu et al. , “Agricultural waste of sugarcane bagasse as efficient adsorbent  for  lead  and  nickel  removal  from  untreated  wastewater: Biosorption,  equilibrium  isotherms,  kinetics  and  desorption  studies,”
Biotechnol. Reports , vol. 30, p. e00614, 2021, doi:
10.1016/j.btre.2021.e00614.