Pengaruh  Dosis  Dan  Lama  Pemberian  Susu  Kedelai  Terhadap  Kadar Estradiol
(Influence Of Dosage And Duration Of Soy Milk To Estradiol Levels )
Inge Devita Fatma 1 , Taufiqurrachman .Nasihun 2 , Israhnanto Isradji 2
1 Program Studi DIII Kebidanan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bahrul Ulum Jombang 2 Program Studi  Magister Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung Semarang Email: devita.fatma16@gmail.com

## ABSTRAK
Susu  kedelai  mengandung  isoflavon  yang  merupakan  estrogen  alami  dari tumbuhan.  Kandungan  isoflavon  pada  susu  kedelai  dapat  berpengaruh  pada terganggunya  sistem  hormon  endokrin  dikarenakan  absorbsi  fitoestrogen  yang berlebihan,  sehingga  dikhawatirkan  dapat  mempengaruhi  perkembangan  organ reproduksi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah  dosis  dan  lama pemberian  susu  kedelai  berpengaruh  terhadap  kadar  estradiol.  Desain  penelitian yang digunakan yaitu experimental dengan rancangan post test only control group design ,  dilakukan  selama  satu  bulan  pada  24  ekor  mencit  betina  galur  balb/C, dibagi  6  kelompok  yaitu  dua  kelompok  kontrol  dan  empat  kelompok  perlakuan (dengan  lama  pengamatan  15  dan  30  hari).  Kelompok  kontrol  diberikan  diet  non kedelai  (pakan  pellet),  kelompok  perlakuan diberikan  susu  kedelai  (dosis  0,325 dan 0,65 mL per ekor) . Data dianalisa dengan uji one way ANOVA , post-hoc LSD. Uji One  Way  Anova diperoleh  nilai  p  <  0,05  hal  ini  menunjukkan  adanya perbedaan  bermakna  pada  kadar  estradiol.    Terdapat  pengaruh  dosis  dan    lama pemberian susu kedelai terhadap kadar estradiol mencit.
Kata kunci: estradiol, dosis, lama pemberian, susu kedelai.

## ABSTRACT
Soy  milk  contains  isoflavones  which  are  natural  estrogens  from  plants.  The content  of  isoflavones  in  soy  milk  influence  for  endocrine  hormone  system disruption due to  excessive absorption of phytoestrogens, which is feared to affect the development of reproductive organs. This study aims to determine whether the dose  and  duration  of  awarding    of  soy  milk  affect  the  level  of  estradiol.  The research design used was experimental with a post test only control group design, which conducted for one month at 24 strains of female mice balb / C, divided into 6 groups namely two control groups and four treatment groups (with 15 and 30 days observation period). The control group was given a non-soybean diet (pellet feed), the  treatment  group  was  given  soy  milk  (doses  0.325  and  0.65  mL  each  mice). Analyzed  of  data  by  one  way  ANOVA  test,  post-hoc  LSD.  One  Way  Anova  test earned  p  value  <0.05,  this  indicates  a  significant  difference  in  estradiol  levels. There is influence of the dosage of  awarding  of soy milk on the estradiol level of mice.
Keywords:  estradiol, dosage, duration, soy milk.

## PENDAHULUAN
Masa pubertas seorang wanita normal  ditandai  dengan  datangnya menstruasi. Siklus menstruasi tergantung  dari  perubahan  kadar estrogen sehingga berpengaruh pada siklus reproduksi yang normal (Sarwono, 2008) Susu kedelai merupakan  produk  minuman  yang sering dikonsumsi di Indonesia, dikarenakan  susu  kedelai  ini  sangat mudah  didapatkan  dan  sebagaian besar  masyarakat  menjadikan  susu kedelai  sebagai  salah  satu  alternatif favorit untuk menggantikan peran dari susu  sapi.  Penggunaan  susu  kedelai dapat berpengaruh dalam peningkatan estrogen, hal ini disebabkan  karena  susu  kedelai mengandung isoflavon yang merupakan estrogen alami dari tumbuhan.(Biben,  2012)  Kandungan isoflavon  pada  susu  kedelai  selain dapat meningkatkan kandungan estrogen  dalam  tubuh  juga  dapat menimbulkan  terganggunya  sistem hormon  endokrin,  serta  memberikan efek campuran antara efek estrogenik dan efek anti-estrogenik yang mempengaruhi perkembangan organ- organ tubuh, terutama dalam
perkembangan  organ  reproduksi  ( Dinsdale, E.C., et al. , 2010)
Ketersediaan kedelai di Indonesia  secara  rata-rata  pada periode  1993 –2016  adalah  9,07 kg/kapita/tahun,  pada  periode  ini ketersediaan  kedelai  tumbuh  sekitar 1,67%  setiap  tahunnya.  Produksi kedelai  yang  cukup  melimpah  di Indonesia mengakibatkan daya konsumsi  masyarakat  untuk  produk kedelai cukup tinggi. Konsumsi produk kedelai  masyarakat Indonesia menurut  Susenas  2014  mencapai 0,136  kg/minggu  (Nuryati,  L.,  et  al., 2015)
Kementrian Kesehatan RI
memaparkan bahwa presentasi perempuan  kelompok  umur  15-19 tahun di Indonesia, mengalami menstruasi  tidak  teratur  sebanyak 11,7% dengan berbagai alasan penyebab (Halim, 2013) Penggunaan produk kedelai yang dapat mempengaruhi siklus menstruasi dan tingginya konsumsi kedelai di masyarakat  Indonesia  perlu  adanya tinjauan  lebih  dalam,  dikarenakan siklus  menstruasi  yang  tidak  teratur menjadi  pertanda  bahwa  seseorang kurang  subur  (infertil)  (Sibagariang, 2010)  Studi  penelitian  (Margo,  2015)
memperoleh  hasil  bahwa  pemberian susu formula kacang kedelai ( Glycine max )  dengan  dosis  pemberian  5% dikalikan  BB  (gr),  diberikan  2  kali sehari  selama  21  hari  memberikan dampak  yang  cukup  signifikan  yaitu terjadinya  kenaikan  kadar  estrogen pada  bayi  tikus  putih  galur  Wistar jantan sebesar 48,09%. Belum terdapat  penelitian  mengenai  lama dan  dosis  pemberian  susu  kedelai terhadap  perubahan  kadar  estradiol dalam tubuh.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian  eksperimental  laboratorik dengan  design post  test  only  control group  design ,  menggunakan  hewan coba  mencit  betina  galur  BALB/C sebagai  objek  penelitian.  Populasi yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  mencit  ( Mus  musculus )  galur BALB/C  betina  yang  diperoleh  dari laboratorium  Pangan  dan  Gizi  UGM Sampel yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  4  ekor  mencit untuk  setiap  perlakuan  diperoleh dena  menggunakan  rumus  Federer. Pada penelitian ini terdapat 6 perlakuan yang terdiri dari kelompok I (P0a)  yaitu  kelompok  kontrol  selama
15  hari.  Kelompok  II  (P0b)  yaitu kelompok    kontrol  selama  30  hari. Kelompok  III  (P1)  yaitu  perlakuan dengan  menggunakan  susu  kedelai dengan  dosis  pemberian  0,325  mL per  ekor  berikan  per  oral  melalui sonde  2  kali  per  hari  selama  15  hari. Kelompok  IV  (P2)  yaitu  perlakuan dengan  menggunakan  susu  kedelai dengan  dosis  pemberian  0,325  mL per  ekor  diberikan  per  oral  melalui sonde  2  kali  per  hari  selama  30  hari. Kelompok  V  (P3)  yaitu    perlakuan dengan  menggunakan  susu  kedelai dengan dosis pemberian 0,65 mL per ekor  diberikan per oral melalui sonde 2  kali  per  hari  selama  15  hari. Kelompok  VI  (P4)  yaitu  perlakuan dengan  menggunakan  susu  kedelai dengan dosis pemberian 0,65 mL per ekor diberikan per oral melalui sonde 2 kali per hari selama 30 hari. Jumlah sampel  seluruhnya  yaitu  24  ekor mencit.
Data dikumpulkan dan disajikan  dalam  bentuk  deskriptif kemudian  dilakukan  uji  normalitas data  dengan  uji Shapiro  Wilk dan  uji homogenitas  menggunakan Levene Test dikarenakan  data  rasio  dan jumlah  sampel  tiap  kelompok  <  50. Uji  normalitas Shapiro  Wilk dan uji
homogenitas  varian  data  antar  6 kelompok dengan uji Levene (p>0,05) diperoleh  nilai  p  pada  pemeriksaan kadar  estradiol  masing –  masing kelompok  >0,05  hal  ini  berarti  bahwa data  kadar  estradiol  berdistribusi normal  dan  bervariasi  homogen, kemudian  dilakukan  analisis  dengan uji parametrik one way anova setelah itu untuk mengetahui kelompok mana yang  berbeda  signifikan  antar  enam kelompok dilakukan uji Post hoc LSD.

## Pembuatan Susu Kedelai
Biji kedelai kuning impor varietas  American  produksi  USA  di impor  oleh  PT  FKS  Multi  Agro,Tbk Indonesia.  Pembuatan  susu  kedelai dalam penelitian ini dilakukan dengan cara  modern  dan  otomatis  dengan menggunakan Soybean  Milk  Maker merk Sayodachi dengan perbandingan  1:8  yaitu  sebesar  100 gram  biji  kedelai  dengan  jumlah  air sebesar  800  ml. Kadar  isoflavon  dari pembuatan  susu  kedelai  dengan menggunakan  alat Soybean  Milk
Maker merk Sayodachi sebesar 287,86 –  290,72  mg/100  mL.  Dosis pemberian diperoleh dari hasil konversi  dosis  manusia  ke  dosis mencit dengan faktor konversi mencit
(0,0026)  menurut  tabel  konversi Lawrence kemudian hasil dari perkalian  di  bagi  menjadi  dua  porsi pemberian  (untuk  pagi  dan  sore), yaitu  (500x0,0026):2=  0,65  mL  dan (250x0,0026):2=  0,325  mL  diberikan sesuai dengan lama pemberian masing – masing kelompok perlakuan.

## Cara Pengukuran Kadar Estradiol
Pemeriksaan  kadar  estradiol dilakukan  di  laboratorium  dengan metode  ELISA  menggunakan  alat spektrofotometer dengan  panjang gelombang  450  nm.  Sampel  darah mencit diambil pada masing – masing kelompok penelitian dilakukan pemeriksan  kadar  estradiol.  Darah mencit  diambil  sebanyak  0,5cc  dari medial  kantus  sinus  orbitalis  mata kanan,  sebelum  pengambilan  darah dilakukan tindakan asepsis dan antiseptik dengan pengusapan alkohol  sekitar  daerah  yang  akan diambil darahnya. Darah yang diambil kemudian  dimasukkan  ke  dalam tabung ependorf ,  diendapkan  selama
2  jam  pada  temperatur  kamar, kemudian  di sentrifuge selama  15 menit kecepatan 4000 rpm, kemudian serum  diambil  dan  dimasukkan  ke
dalam ependorf dan dilakukan pemeriksaan  dengan  metode  ELISA
dengan panjang gelombang spektrofotometer 450 nm.

## HASIL PENELITIAN
Hasil  deskripsi  statistik  pengaruh  pemberian  susu  kedelai  dengan  hasil pemeriksaan kadar estradiol dalam penelitian ini dapat dipaparkan dalam Tabel 1. Tabel  1.  Hasil  Analisis  Perbedaan  Pemberian  Susu  Kedelai  Terhadap  Kadar Estradiol
Variabel
Kelompok P value P0a
n:4 (x+SD) P0b n:4 (x+SD) P1 n:4 (x+SD) P2 n:4 (x+SD) P3 n:4 (x+SD) P4 n:4 (x+SD) Kadar Estradiol 6,03+0,3 4 5,79+0,2 9 8,86+0,7
9 15,27+0,1 4
15,95+0,2 3 18,9+0,1 5 Shapiro- Wilk 0.506* 0,634* 0,772* 0.783* 0.716* 0,954* Levene test 0,114* One  way ANOVA 0,001**
Keterangan:  * sig >0,05, ** sig < 0,05
Nilai mean kadar  estradiol  tertinggi  terdapat  pada  kelompok  perlakuan dengan  dosis  pemberian  0,65  mL  susu  kedelai  selama  30  hari  (P4)  yaitu 18,9+0,15pg/mL,  nilai mean kadar  estradiol  yang  terendah  kelompok  kontrol  30 hari (P0b) yaitu 5,79+0,29 pg/mL.
Kadar  estradiol  pada  6  kelompok  dilakukan  analisis  sebaran  normalitas data  dengan    uji Shapiro-Wilk dikarenakan  data  rasio  dan  jumlah  sampel  tiap kelompok  <  50.  Hasil  uji Shapiro  Wilk diperoleh  nilai  p  pada  pemeriksaan  kadar estradiol  masing –  masing  kelompok  >0,05  dapat  disimpulkan  bahwa  sebaran data  kadar  estradiol  pada  kelompok  normal.  Hasil  uji  homogenitas  varian  data pada  6  kelompok  dengan  uji Levene  test menghasilkan  nilai  p  sebesar  0,114 (p>0,05)  menunjukkan  bahwa  varian  data  kadar  estradiol  pada  6  kelompok homogen. Untuk mengetahui kelompok mana yang berbeda bermakna, dilakukan uji Post hoc LSD yang terpaparkan dalam tabel 2 sebagai berikut:
Tabel 2. Perbedaan Mean Kadar Estradiol dengan Uji Post Hoc LSD
Pemberian Susu Kedelai Pemberian Susu Kedelai Poa P0b P1 P2 P3 P4 P0a 0.399 0.001*  0.001*  0.001*  0.001* P0b 0.399 0.001*  0.001*  0.001*  0.001* P1 0.001*  0.001* 0.001*  0.001*  0.001* P2 0.001*  0.001*  0.001* 0.027*  0.001* P3 0.001*  0.001*  0.027*  0.001* 0.001* P4 0.001*  0.001*  0.001*  0.001*  0.001*
Keterangan:
Hasil uji post hoc LSD kadar estradiol memiliki nilai p < 0,05 untuk semua pasangan enam kelompok,  kecuali  untuk  perbandingan  kadar  estradiol  pada  kelompok  kontrol  15 hari dan  kontrol 30 hari (p>0,05). Hasil uji post hoc LSD dapat diartikan bahwa terdapat perbedaan kadar estradiol yang bermakna antara kelompok satu dengan kelompok lainnya, kecuali antara kelompok kontrol 15 hari (P0a) dan kontrol 30 hari (P0b).

## DISKUSI
Penelitian  ini  menggunakan susu  kedelai  yang  langsung  diolah dari biji kedelai kuning impor varietas American produksi USA d impor oleh PT  FKS  Multi  Agro,  TBK  Indonesia.
Hal  ini  dikarenakan  saat  ini    produk kedelai  yang  banyak  tersebar  di pasaran dan dikonsumsi oleh masyarakat  pada  umumnya  adalah kedelai  impor  dikarenakan  harga yang relatif lebih murah dibandingankan dengan kedelai lokal. Pembuatan  susu  kedelai  pada  saat penelitian, menggunakan alat otomatis  yang  lebih  praktis  dan efisien  sehingga  didapatkan  kadar
isoflavon  sebesar  287,86 –  290,72 mg/100  mL,  menurut  (Krisnawati,  A., Adie,  2009)  dari  127  galur  kedelai memiliki  kandungan  isoflavon  total berkisar  antara  78,8-175,6  mg/100  g (rata-rata  101,1  mg/100  gram  biji kedelai).
Hasil penelitian dapat diketahui bahwa pengaruh pemberian susu kedelai terhadap kadar estradiol pada 6 kelompok penelitian, berdasarkan  dari  hasil  uji One  Way Anova menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  bermakna  pada  kadar estradiol, pada uji post hoc LSD antar 6  kelompok,  namun  pada  kelompok kontrol  15  hari  (P0a)  dan  kontrol  30 hari (P0b) tidak menunjukkan
perbedaan  yang  bermakna,  hal  ini dikarena pada kelompok kontrol tidak dilakukan  perlakuan  pemberian  susu kedelai  sehingga  pada  masing – masing  kelompok  kontrol  tersebut cenderung  tidak  terjadi  kenaikan pada  kadar  estradiol,  dan  kenaikan kadar  estradiol  paling  tinggi  terjadi pada kelompok perlakuan (P4) dengan dosis 0,65 selama 30 hari
Susu kedelai mengandung fitoestrogen dari kelas isoflavon dengan potensi aktivitas seperti hormon estrogen, karena mempunyai cincin  fenolat  yang  dapat  berikatan dengan RE. Kandungan susu kedelai ini  mempunyai  2  (dua)  tipe  isoflavon kacang  kedelai  yang  dominan,  yaitu: genistein  (67,1%  dari  total  kadar isoflavon)  dan  daidzein  (28,7%  dari total  isoflavon),  yang  dapat  berikatan dengan  RE  α  dan  RE  β  karena struktur dan fungsi dari genestein dan daidzein  menyerupai  17  β-estradiol, sehingga dapat mempengaruhi konsentrasi  estradiol  dalam  tubuh. (Dinsdale,  E.  C.,  &  Ward,  2010)  hal ini  sesuai  dengan  Studi  penelitian (Margo,  2015)  memperoleh  hasil bahwa pemberian susu formula kacang kedelai ( Glycine max ) dengan dosis  pemberian  5%  dikalikan  BB
(gr), diberikan 2 kali sehari selama 21 hari  meningkatkan  kadar  estrogen pada  bayi  tikus  putih  galur  Wistar (Rattus  norvegicus) jantan  sebesar 48,09%
Kelompok  perlakuan  dengan pemberian susu kedelai dengan lama pemberian  dari  susu  kedelai  tersebut selama  30  hari  dosis  0,65  mL  (P4) menunjukkan kenaikan kadar estradiol  paling  tinggi  dibandingkan dengan 5 kelompok lainnya, kemudian  disusul  dengan  kelompok perlakuan  dengan  dosis  pemberian yang  sama  0,65  mL  selama  15  hari (P3),  hal  ini  dapat  di  artikan  bahwa lama  pemberian  susu  kedelai  yang mengandung  isoflavon  didalamnya berperan cukup penting dalam kenaikan kadar estradiol dalam tubuh. Isoflavon kedelai dapat berikatan  dengan  RE  (Reseptor Estrogen) di hipotalamus mensintesis GnRH ( Gonadotropin- Releasing Hormone )  untuk  menstimulus  sekresi FSH  ( Follicle  Stimulating  Hormone ) dan LH ( Luteinizing Hormone ). Hipothalamus dan hipofise mempunyai  resptor  androgen  dan estrogen.  Pada  ovarium  sel  teka interna  memiliki  banyak  reseptor  LH, dan  LH  bekerja  melalui  cAMP  ( cyclic
Adenosine  Monophosphate )  untuk meningkatkan  perubahan  kolesterol menjadi  androstenedion.  Sebagian androstenedion diubah menjadi estradiol,  yang  masuk  ke  dalam sirkulasi.  Sel –  sel  teka  interna  juga memberikan  androstenedion  dalam bentuk testosterone ke sel granulosa. Sel granulosa menghasilkan estradiol bila  mendapatkan  androgen.  Sel granulosa  memiliki  banyak  reseptor estrogen β yang  memiliki  ikatan  kuat dengan  genestein  dan  FSH,  FSH meningkatkan  sekresi  estradiol  dari sel granulosa dengan bekerja melalui AMP siklik untuk meningkatkan aktivitas  aromatase.  Sel  granulosa matang juga merangsang pembentukkan  estradiol  (Ganong, 2008)
Semakin lama waktu pemberian isoflavon  pada  tubuh  maka  semakin banyak  pula  reseptor  estrogen  yang berikatan  dengan  genestein  yang mengakibatkan  efek  estrogenik  pada tubuh,  sehingga  terjadilah  kenaikan kadar estradiol. Genistein pada isoflavon  dapat  terikat  dengan  - ER.
( Estrogen Reseptor ), terutama dengan ß-ER (  Beta –  Estrogen Reseptor) genestein mempunyai ikatan sama dengan estrogen
sehingga  dapat  menimbulkan  efek estrogenik,  hal  ini  terkait  dengan struktur isoflavon yang dapat ditransformasikan menjadi equol, dimana  equol  ini  mempunyai  struktur fenolik  yang  mirip  dengan  hormon estrogen  (Sri,  2009).  Namun  belum diketahui  secara  pasti  berapa  lama waktu  yang  diperlukan  untuk  dapat membuat  kenaikan  kadar  estradiol kembali normal seperti semula.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh dapat diambil kesimpulan sebagai berikut: Terdapat pengaruh  dosis  susu  kedelai  dan lama  pemberian  terhadap  kadar estradiol  mencit.  Ada  perbedaan kadar yang  bermakna  pada  enam kelompok.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian serupa yang lebih mendalam mengenai analisa berapa lama waktu yang  diperlukan  agar  kadar  estradiol mencit  kembali  ke  ukuran  semula, selain  itu  ditujukan  untuk  masyarakat agar lebih bijak dalam mengkonsumsi
susu  kedelai  agar  tidak  terlalu berlebihan  dengan  jangka  waktu yang lama, karena dapat berpengaruh  pada  keseimbangan sistem  endokrin  dan  fisiologis  organ reproduksi, sehingga
dapat
berpengaruh juga terhadap fertilitas.

## DAFTAR PUSTAKA
Biben, A. (2012). Fitoestrogen Khasiat Terhadap Sistem Reproduksi, Non Reproduksi
Dan Keamanan Penggunaannya ,
1 –7.
Dinsdale,  E.  C.,  &  Ward,  W.  E.
(2010).  Early  exposure  to  soy isoflavones and effects on reproductive  health:  A  review  of human and animal studies.
Nutrients , 2 (11), 1156 –1187.
https://doi.org/10.3390/nu211115
6
Ganong,  W.  (2008). Buku  Ajar
Fisiologi  Kedokteran (22nd  ed.).
Jakarta: EGC.
Halim,  A.  M.  (2013).  Hubungan Konsumsi  Fitoestrogen  Dengan Siklus  Menstruasi  Pada  Siswi  Di SMA  Negeri  1  Tinggimoncong Kabupaten Gowa, 1 –13.
Krisnawati,  A.,  Adie,  M.  M.  (2009).
Karakter Agronomik dan Kandungan Isoflavon Galur
Kedelai  F5. Penelitian  Pertanian Tanaman Pangan , 28 , 1 –6.
Margo,  E.  (2015).  Pemberian  Susu
Formula Kacang Kedelai ( Glycine max) Meningkatkan
Kadar  Hormon  Estrogen  dan Menurunkan Kadar Hormon
Testosteron  pada  Bayi  Tikus
Putih Galur Wistar (Rattus norvegicus) Jantan.
Nuryati,  L.,  Waryanto,  B.,  Noviati, Widaningsih,  R.  (2015). Outlook Komoditas  Pertanian  Tanaman Pangan  Kedelai .  (P.  D.  dan sistem  I.  P.  K.  Pertanian,  Ed.). Jakarta.
Sarwono,  P.  (2008).  Ilmu  kebidanan.
Jakarta:  Yayasan  Bina  Pustaka , 218 –220.
https://doi.org/10.1016/S0969- 4765(04)00066-9
Sibagariang, E. E. (2010). Kesehatan Reproduksi Wanita. Jakarta:
Trans Info Media.
Sri,  A.  (2009).  Prosiding  Seminar Nasional  Penelitian,  Pendidikan
dan  Penerapan  MIPA  Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta. In POTENSI

## SENYAWA  ISOFLAVON  DAN
DERIVATNYA  DARI  KEDELAI (GLYCINE  MAX.  L)  SERTA MANFAATNYA UNTUK
KESEHATAN (p. 9). Yogyakarta.