## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH
PEPAYA MUDA ( CARICCA PAPAYA L ) TERHADAP
ESCHERICHIA COLI DAN STAPHYLOCOCCUS AUREUS

## SECARA IN VITRO
Citra Trisna 1 , Mardyana Nizar 1
Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kemenkes Banten, Tangerang Korespondensi: citratrisna75@gmail.com

## ABSTRACT
Infections  caused  by  bacteria,  require  antibiotics  for  their  treatment.  The  use  of  inappropriate antibiotics  causes  bacterial  resistance.  Several  studies  conducted  research  on  plants  that  can  be used  to  treat  infectious  diseases.  From  the  research,  many  medicinal  plants  were  used  to  cure infectious diseases. One of them is the papaya plant (Carica papaya L). The purpose of this study was to determine the active substance on the fruit skin of Carica papaya L which functions as an antibacterial  and  to  know  the  activity  of  ethanol  extract  of  young  papaya  fruit  skin  (Carica papaya  L)  on  E.  coli  and  Staphylococcus  aureus.  This  type  of  research  is  a  laboratory experiment. The sample in this study was 3 kg of Carica papaya L. fruit peel. Ethanol extraction of Carica papaya L fruit peel was carried out to determine the content of secondary metabolites. Phytochemical tests were carried out to determine the antibacterial content in the samples, then tested the antibacterial activity against E. coli and Staphylococcus aureus, with concentrations of 25%, 50%, 75% and 100%. Phytochemical test results obtained positive contents of the ceiling, saponins  and  steroids.  In  the  antibacterial  activity  of  96%  ethanol  extract  against  E.  coli  no inhibition  was  found  at  all  concentrations.  The  results  of  the  antibacterial  activity  test  on Stapylococcus aureus bacteria, the inhibition was obtained from a concentration of 25% of 0.55 mm the highest inhibition power at a concentration of 100% of 2.95 mm.

## Keywords: Carica papaya L papaya peel, phytochemical test, antibacterial

## ABSTRAK
Penyakit  infeksi  yang  disebabkan  oleh  bakteri,  memerlukan  antibiotika  untuk  pengobatannya. Pemakaian  antibiotika  yang  tidak  tepat  menyebabkan  terjadinya  resistensi.  Beberapa  penelitian melakukan  penelitian  terhadap  tanaman  yang  dapat  digunakan  untuk  pengobatan  penyakit infeksi. Dari penelitian didapatkan banyak tanaman obat yang digunakan untuk menyembuhkan penyakit  infeksi.  Salah  satu  diantaranya  adalah  tanaman  pepaya  (Carica  papaya  L).  Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui zat aktif pada kulit buah Carica papaya L yang berfungsi sebagai  antibakteri  dan  mengetahui  aktivitas  ekstrak  etanol  kulit  buah  pepaya  muda  (Carica papaya  L)  terhadapa  bakteri  E.  coli  dan  Staphylococcus  aureus.  Jenis  penelitian  ini  adalah eksperimen laboratoratorium. Sampel pada penelitian ini sebanyak 3 kg kulit buah Carica papaya
L. Dilakukan ekstraksi etanol kulit buah Carica papaya L untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder.  Dilakukan  uji  fitokimia  untuk  mengetahui  kandungan  antibakteri  pada  sampel, selanjutnya  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  E.  coli  dan  Staphylococcus aureus,  dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan  100%.    Hasil  uji  fitokimia  didapatkan kandungan  positif    plafonoid,  saponin  dan  steroid.  Pada  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol 96%  terhadap  E.  coli  tidak  ditemukan  daya  hambat  pada  semua  konsentrasi.  Hasil  uji  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  Stapylococcus  aureus,  didapatkan  daya  hambat  mulai  dari konsentrasi  25%  sebesar  0,55  mm  daya  hambat  tertinggi  pada  konsentrasi  100%  sebesar  2,95 mm.
Kata kunci: Kulit buah pepaya Carica papaya L, uji fitokimia, antibakteri

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  penyakit yang  disebabkan  oleh  mikroba  patogen (Darmadi, 2008). Salah satu mikroba patogen tersebut  adalah  bakteri.  Pengobatan  penyakit infeksi yang disebabkan bakteri ini diantaranya  dengan  pemberian  antibiotik (Hare,  1993).  Penggunaan  antibiotik  yang tidak tepat dapat menyebabkan berkembangnya  bakteri-bakteri  yang  kebal terhadap obat (Green, 2005).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pola kepekaan kuman terhadap antibiotik di ruang rawat  intensif  RS.  Fatmawati  Jakarta  tahun 2001-2002  oleh  Refdanita  et  al  (2004)  pola kepekaannya  menunjukan  bahwa  kuman patogen  yang  diteliti  ( Pseudomonas  sp, Klebsiella sp, Escherichia coli, Streptococcus haemophiliticus,  Staphylococcus  epidermidis dan  Staphylococcus  aureus )  mempunyai
resistensi tertinggi terhadap ampisilin, amoksisilin,  penisilin  G,  tetrasiklin  dan kloramfenikol.  Hal  ini  terjadi  permasalahan baru  dalam  dunia  kesehatan  oleh  karena  itu perlu dilakukan penelitian dan pengembangan  obat  antibakteri  secara  terus menerus untuk dapat mengatasi permasalahan  bakteri  yang  resisten  terhadap antibiotik.
Banyak  tanaman  obat  yang  menurut sejarah telah digunakan untuk menyembuhkan infeksi-infeksi yang disebabkan  oleh  bakteri  yang  sekarang  telah resisten.  Salah  satu  tanaman  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  tradisional  adalah tanaman  pepaya  ( Carica  pepaya  L ).  Seluruh bagian  pepaya  dari  akar,  daun,  buah,  kulit, getah  memiliki  nilai  medis  yang  tinggi (Tietze, 2002).Pada dasarnya kandungan kulit  pepaya kurang  lebih  sama  dengan
daging  buahnya,  Selain  enzim  papain,  kulit pepaya  juga  mengandung  alkaloid  karpina, glukosid, saponin, sakrosa,dextrose.
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh E.I.  Okoye  (2011)  telah  dilakukan  uji aktivitas  antibakteri  dan  antijamur  dari ekstrak etanol dan ekstrak air. Diperoleh hasil bahwa biji pepaya muda yang berwarna putih memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus, Pseudomona aeruginosa,  Salmonella  typhi,  Escherichia coli dan  anti  jamur  terhadap Aspergillus niger, Penicillium notatum, Fusarium solani, Candida  albican .  Oleh  karena  itu,  akan dilakukan penelitian tentang Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah Pepaya  Muda  ( Caricca  papaya  L )  Terhadap
Eschechia coli dan Staphylococcus aureus .

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  dengan  uji  laboratorium.  Uji laboratorium  dilakukan  untuk  mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah pepaya  muda  terhadap  bakteri  E.  coli    dan Staphylococcus  aureus.  Waktu  dan  tempat penelitian  dilaksanakan  di  laboratorium Mikrobiologi  Jurusan  Analis  Kesehatan Poltekkes Kemenkes Banten dan Biofarmaka IPB,  waktu  penelitian  pada  September-
Oktober  2017.  Sampel  yang  digunakan adalah  kulit  buah  papaya  muda  sebanyak  3 kg.  Kulit  buah  papaya  muda  dikeringkan dalam  oven  pada  suhu  37-  40  C  selama  4-5 jam.  Kulit  buah  pepaya  muda  kering kemudian  dihaluskan  menjadi  serbuk,  hasil yang  diperoleh  digunakan  sebagai  sampel. Selanjutnya  dibuat  Ekstraksi  Etanol  Kulit Buah  Pepaya  Muda  dengan  cara  Serbuk kering kulit buah pepaya muda sebanyak 200 g  ditambahkan  Ethanol  p.a  2000  ml kemudian  dilakukan  proses  ekstraksi  dengan metode  maserasi  (pengadukan  1  jam, pendiaman 2x24 jam). Hasilnya di saring dan diperoleh filtrat.  Filtrat  kemudian dipekatkan dengan  rotary  evaporator  sampai  didapatkan ekstrak kental.
Dilakukan pengujian kualitatif komponen  kimia/  Uji  Fitokimia  berupa:  Uji
Alkaloid,  Uji  Terpenoid  dan  Steroid,  Uji Flavonoid, dan Uji Saponin. Untuk mengetahui  kandungan  kimia  yang  terdapat dalam  kulit  buah  papaya  muda.  Selanjutnya dilakukan Uji Daya Hambat Bakteri.        Uji daya  hambat  bakteri  dilakukan  dengan  cara: (1)  Media  Nutrien  Agar  (NA)  dibuat  dan dimasukan  ke  dalam  cawan  petri2,  (2) Dibiarkan  medium  memadat  sekitar  5  menit, (3) Dipipet 50µL suspensi  bakteri E.coli dan Staphylococcus  aureu, (4)  Diteteskan  diatas
media  Nutrien  Agar  (NA),  (5)  Disebar suspensi  bakteri  pada  seluruh  permukaan lempengan agar. Untuk mendapatkan pertumbuhan  yang  merata  gores  secara mendatar  dengan  menggunakan  swab  steril, (6) Kertas cakram  yang telah ditetesi ekstrak etanol  kulit  buah  pepaya  muda  dengan konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan  100% diletakkan  di  atas  permukaan  media  bakteri dengan  pinset  dan  di  tekan  sedikit,  (7) Sebagai  kontrol  positif  digunakan  tetrasiklin 1000  ppm,  (8)  Sebagai  kontrol  negatif digunakan kertas  cakram ditetesi  DMSO, (9) Diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37°  C, (10)  Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk diukur  dengan  penggaris  dan  dinyatakan dalam millimeter.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis  fitokimia  yang  dilakukan meliputi  berbagai  uji  keberadaan  metabolit sekunder  seperti  alkaloid,  tanin,  flavonoid, saponin,  steroid,  dan  triterpenoid.  Hasil  uji fitokimia  ekstak  etanol  kulit  buah Carica papaya L dapat dilihat pada Tabel 1. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit  buah Carica  papaya  L mengandung komponen-komponen yang berfungsi sebagai antibakteri.
Tabel 1. Hasil uji fitokimia
Metabolit Sekunder Hasil Flavonoid Alkaloid Tanin Saponin Quinon Steroid Triterpenoid + - - + -
+ -
Pada tabel 1 terlihat bahwa kulit buah Carica  papaya  L mengandung  flavonoid, saponin  dan  steroid.  Selanjutnya  dilakukan uji  aktivitas  antibakteri  terhadapa  bakteri E. coli dan Staphylococcus aureus .
Pengukuran  aktivitas  antibakeri  pada ekstrak  etanol  kulit  buah Carica  papaya  L terhadap E.  coli dan Stapylococcus  aureus , dengan kontrol positif tetrasiklin  dan kontrol negatif    Dimethyl  Sufoxide  (DMSO).  Hasil aktivitas  antibakteri  dapat  dilihat  pada gambar 1.
Gb 1. Aktivitas Antibakteri
Pada  gambar  1  dapat  dilihat  bahwa pengujian  aktivitas  antibakteri  ektrak  etanol
dengan  menggunakan  kulit  buah  pepaya muda  ( Carica  papaya  L) sebagai  antibakteri E.  coli pada  konsentrasi  25  sampai  100% didapatkan  hasil  zona  bening  6  mm  dengan diameter cakram 6 mm, artinya tidak terdapat daya  hambat    terhadap  bakteri E.  coli . Pengujian aktivitas antibakteri dengan sampel yang sama pada antibakteri Stapylococcus  aeureus didapatkan  diameter zona  bening  mulai  dari  konsentrasi  25% sampai  dengan  konsentrasi  100%.  Zona bening  pada  konsentrasi  25%  sebesar  0,55, diameter zona bening tertinggi 8,95 mm pada konsentrasi  100%.  Sebagai  kontrol  positif digunakan tetrasiklin. Uji aktivitas antibakteri dengan  tetrasiklin  1000  ppm  sebagai  kontrol positif  didapatkan  diameter  zona  bening untuk E.coli sebesar  27,97  mm  dan Stapylococcus  aeureus  sebesar  25,88  mm. Pengujian dengan Dymethyl sufoxid (DMSO)  sebagai  kontrol  negatif  didapatkan hasil  zona  bening  6  mm  untuk  uji  aktivitas antibakteri E.coli dan Stapylococcus auereus , artinya  tidak  terdapat  daya  hambat  bakteri pada DMSO.
Pada penelitian ini digunakan ekstraksi  etanol  kulit  buah  papaya  muda (Carica  papaya  L).  Tahapan  ekstraksi merupakan tahapan penting untuk mengidentifikasi  bioaktif  yang  terdapat
dalam  sampel  kulit  buah  Carica  papaya  L. Ekstraksi  dilakukan  menggunakan  etanol 96%  sebanayk  2  L  dengan  metode  maserasi. Pelarut  ini  dipilih  karena  kemampuannya dalam  menarik  komponen-komponen  yang ada  pada  sampel  sangat  kuat  sehingga  dapat menarik seluruh senyawa metabolit sekunder dari  mulai  senyawa  polar  hingga  non  polar (Suwendiyanti, 2014).
Prinsip  maserasi  didasarkan  pada kontak  langsung  antara  pelarut  dan  bahan, pelarut  akan  masuk  ke  dalam  matriks  bahan melalui kapiler-kapiler dan melarutkan ekstrak karena adanya perbedaan konsentrasi antara  larutan  di  dalam  dan  luar  sel  (proses difusi).  Metode  ini  sederhana  dan  tidak merusak  senyawa  yang  tidak  tahan  panas. Senyawa  yang terbawa pada proses ekstraksi adalah  senyawa  yang  mempunyai  polaritas sesuai  dengan  pelarutnya.  Perlakuan  agitasi dilakukan  untuk  meningkatkan  efek  mekanis yang  akan  meningkatkan  perpindahan  massa dan  interaksi  antara  pelarut  dan  bahan.  Hal ini  dapat  memfasilitasi  ekstraksi  dengan meningkatkan  difusi  dan  melepaskan  larutan pekat  dari  permukaan  sampel  agar  proses difusi berlanjut hingga tercapai keseimbangan  konsentrasi  larutan  di  dalam dan luar sel (Imelda 2013).
Selanjutnya  Uji  kualitatif  fitokimia bertujuan  mengetahui  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  pada  kulit  buah  Carica papaya  L. Hasil uji fitokimia yang dilakukan pada pelarut yang berbeda akan menunjukkan hasil  yang  berbeda  dalam  kekuatan  sinyal yang  diidentifikasi,  yaitu  tingkat  kepekatan yang berbeda pada setiap pelarut (Egwaikhide  &  Gimba  2007).  Hasil  uji fitokimia  pada  ekstrak  etanol  kulit  buah Carica  papaya  L dapat  dilihat  pada  tabel  1 menunjukkan bahwa positif terhadap flavonoid,  saponin,  dan  steroid.  Flavonoid ditandai  dengan  adanya  warna  merah, kuning, dan jingga pada lapisan amil alkohol, steroid ditandai dengan warna hijau sedangkan saponin positif jika terbentuk buih yang stabil pada ekstrak.
Flavonoid merupakan golongan terbesar dari fenol dan terdapat dalam bentuk aglikon  maupun  glikosida  dalam  tanaman. Flavonoid  berperan  penting  dalam  biokimia dan fisiologi tanaman baik sebagai antioksidan,  inhibitor  enzim  dan  prekursor bagi  komponen  toksik.  Flavonoid  memiliki peranan  sebagai  antimikroba  dan  antivirus (Zulaicha  2011).  Metabolit  sekunder  yang  di sekresikan  oleh  tumbuhan  seperti  flavonoid, saponin  dan  steroid  memiliki  peran  yang beragam.
Dalam penelitian ini diketahui bahwa ekstrak  kulit  buah Carica  papaya  L tidak dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri E. coli . Penelitian Niken (2014) dengan menggunakan  ekstrak  etanol  biji  pepaya mendapatkan  hasil  yang  berbeda.  Hasil  yang didapatkan oleh Niken (2014), ekstrak etanol biji  pepaya  pada  konsentrasi  50%  dan  75% mempunyai  daya  hambat  terhadap  bakteri E. coli .  Perbedaan  hasil  ini  bisa  disebabkan karena  bagian  pepaya  yang  diambil  berbeda, sehingga kandungan zat antibakteri didalamnya juga berbeda.
Pengujian  kandungan  fitokimia  pada tanaman  yang  sama  dapat  memberikan  hasil yang  berbeda.  Pengujian  terhadap  bagian yang berbeda dalam tanaman yang sama juga memungkinkan terjadinya perbedaan. Hal ini karena kandungan fitokimia dapat dipengaruhi  oleh  beberapa  hal  seperti lingkungan tempat tumbuh termasuk perbedaan  varietas  dan  kondisi  geografis tempat  tumbuh  (Kardono  2003).  Metode yang  digunakan  dalam  ekstraksi,  reagen- reagen,  dan  kesensitifan  alat  juga  menjadi penentu  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan. Penggunaan  pelarut  yang  berbeda  dalam proses  ekstraksi  juga  menentukan  jenis metabolit  sekunder  yang  terekstrak  (Salim 2006).
Penelitian  Maria  Tuntun  (2016)  Uji efektivitas  Ekstrak  daun  pepaya  terhadap bakteri E.coli dan Staphylococcus  aureus didapatkan  hasil  konsentrasi  10%    belum dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia,    sedangkan  pada  konsentrasi 20%  sampai  100%  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus , ekstrak daun pepaya konsentrasi 10% dan 20 %  belum  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus ,  sedangkan pada  konsentrasi  30%  sampai  100%  mampu menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus  aureus.  Hasil  penelitian Oladimeji  (2007)  yang  mendapatkan  zona hambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli sebesar 10 mm pada konsentrasi ekstrak daun pepaya  1,5%  dan  11  mm    pada  konsentrasi ekstrak  daun  pepaya  3%.  Dan  mendapatkan zona hambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus  sebesar  13  mm  pada konsentrasi ekstrak daun pepaya 1,5% dan 15 mm    pada  konsentrasi  ekstrak  daun  pepaya 3%.  Perbedaan  ini  dapat  disebabkan  karena beberapa hal, seperti perbedaan varietas daun pepaya, dan metode ekstraksi yang digunakan (Soranta,   2009).
Perbedaan daya hambat bakteri terhadap E. coli dan Staphylococcus
disebabkan  oleh  jenis  kumannya  yang berbeda.  E.  coli  merupakan  kuman  gram positif,  sedangkan  Staphylococcus  aureus merupakan  kuman  gram  negatif.  Hasil  yang berbeda ini disebabkan karena ada perbedaan struktur  kedua  dinding  bakteri,  dimana bakteri  gram  negatif  mempunyai  struktur dinding  sellebih  kompleks  dibanding  gram negatif. Hal ini akan menyebabkan antibakteri  lebih  sukar  masuk  ke  dalam  sel untuk menghambat bakteri tersebut (Siswandono, 2000).

## SIMPULAN
Analisis  kualitatif  yang  dilakukan pada ekstrak etanol kulit buah Carica papaya L menunjukkan bahwa mengandung senyawa flavonoid,  saponin,  dan  steroid.  Perlu dipertimbangkan  pemanfaatan  kulit  buah pepaya  karena  adanya  kandungan  senyawa flavonoid,  saponin  dan  steroid  yang  bagus untuk  kesehatan.  Analisis  kuantitatif  pada aktivitas  antibakteri  menunjukkan  tidak terdapat  daya  hambat  ekstrak  terhadap bakteri E. coli . Terdapat daya hambat ekstrak pada Stapylococcus  aureus mulai  pada konsentrasi  terendah  yaitu  25%  sebesar  0,55 mm.  Daya  hambat  meningkat  sebanding dengan peningkatan konsentrasi, daya
hambat  paling  tinggi  didapatkan  pada konsentrasi  100%  yaitu  sebesar  2,95.  Dari penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  daya  hambat  ekstrak  etanol  kulit buah papaya  carica  L pada  bakteri  pada
Staphylococcus  aureus ,  sebaliknya  tidak terdapat daya hambat bakteri pada E. coli.

## DAFTAR PUSTAKA
Darmadi. 2008. Infeksi
Nasokomial,
Problematika  dan  Pengendaliannya.
Jakart. Penerbit Salemba Medika.
Egwaikhide  &  Gimba.2007.  Analysis  of  the Phytochemical  Content  and  Anti- Microbial  Actifity  of  Plectrantus Glandulosis  Whole  Plant.  Middle  of East Journal of Scientific Research Green.  2005.Health  Program  Planning.  An
Educational Ecological Approach.New  York.The  MeGraw- Hill Companies, Inc Hare. 1993. Mikrobiologi dan Imunologi.Diterjemahkan oleh Prasero.  Penerbit.  Yayasan  Essentia Medica. Yogya Imelda. 2013. Peranan Garlic pada Pengelolaan Hipertensi. CDK-209.
Okoye.  2011.  Pleriminary  Phytochemical Analysis  and  Antimicrobial  Activity of Seeds of Carica papaya. Journal of Basic Physical Research
Paramesti  N.  2014.  Efektifitas  Ekstrak  Biji Pepaya  (Carica  Papaya  L)  Sebagai
Antibakteri terhadap Bakteri
Eschericia  coli.  Skripsi.  Universitas Islam NegeriHidayatullah. Jakarta Refdanita.  2004.  Pola  Kepekaan  Kuman terhadap  Antibiotik  di  Ruang  Rawat Intensif  Rumah  Sakit  Fatmawati Jakarta  Tahun  2001-2002.  Jakarta: Makara Kesehatan. Vol 8 No 2 Salim  A.  2006.Potensi  Rebusan  Daun  Sirih
Merah (Piper cratum)Sebagai senyawa Antihiperglikemia pada Tikus Galur Sparague- dawley.(Skripsi). Bogor: Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor
Tuntun  Maria.  2016.  Uji  Efektivitas  Ekstrak
Daun  Pepaya  (Carica  papaya  L) terhadap Pertumbuhan Bakteri
Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus.  Jurnal  Kesehatan  Poltekkes Tanjungkarang.  Vol.  VII.  No.  3. November 2016
Tietze.  2002.  Terapi  Pepaya.  Jakarta:Prestasi Pustaka Publisher
Suwendiyanti.  2014.  Efektifitas  Ekstrak Akar,  Batang,  Kulit,  Daun  dan Fraksia  Vicennia  Marina  sebagai
Antioksidan (Skripsi) Universitas Padjajaran Siswandono.2000. Kimia Medisinal. Airlangga. University Press Surabaya
Soronta. 2009. Akativitas Antbakteri Ekstrak
Etanol  Daun  Pepaya  (Carica  Papaya
L)  terhadap  Eschericia  coli  dan Staphylococcus  aureus  Multiresisten
Antibiotik. Skripsi. Universitas Muhammadiyah Surakarta Zulaicha.  2011.  Penggunaan  Ekstrak  Daun Sirsak (Annona Muricata Linn)
Sebagai  Pengendali  Jamur  Fusarium oxyporum  Secara  invitro.  Skripsi. Surabaya.