Pencampuran tepung daun gandarusa ( Justicia gendarussa ) dalam pakan untuk mengurangi fertilitas ikan nila gift, Oreochromis sp.
[The Application of the willow leaf powder ( Justicia gendarussa ) in the fish feed to reduce the level of fertility of gift tilapia, Oreochromis sp.]
Munawar Khalil  , Nurul Aida, Saiful Adhar, Prama Hartami
Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh Kampus Utama Reuleut, Kec. Muara Batu Aceh Utara, Aceh. Telp. 0645-57320  Faks. 0645-44450
Diterima: 29 Januari 2015; Disetujui: 10 November 2015

## Abstrak
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  tanggal  18  Maret-2  Mei  2014  di  Balai  Benih  Ikan  Keumala,  Kabupaten  Pidie,  Pro- vinsi Nangroe Aceh Darussalam. Tujuan penelitian untuk menguji penggunaan tepung daun gandarusa dalam pakan un- tuk mengurangi tingkat fertilitas  pada ikan nila gift ( Oreochromis sp., genetic improvement farmed tilapias ). Metode yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  rancangan  acak  lengkap  non  faktorial  dengan  empat  perlakuan  dan  tiga ulangan  yaitu  perlakuan  A:  tanpa  pemberian  tepung  daun  gandarusa,  perlakuan  B:  40  mg,  perlakuan  C:  50  mg  dan perlakuan D: 60 mg tepung daun gandarusa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pencampuran tepung daun gandarusa dalam pakan memberi pengaruh yang sangat berbeda nyata terhadap tingkat fertilitas dan tingkat penetasan telur ikan nila gift. Telur yang paling banyak tidak terbuahi adalah pada perlakuan D kemudian C, dan B, sedangkan yang paling banyak terbuahi adalah pada perlakuan A. Hasil penelitian ini juga menunjukkan bahwa tepung daun gandarusa tidak memberi pengaruh buruk terhadap pertumbuhan baik pertumbuhan bobot maupun panjang ikan nila gift (F hitung < F tabel ).
Kata  penting: daun gandarusa, daya tetas, fertilitas, ikan nila, pertumbuhan

## Abstract
The study was conducted on March, 18 th  - May, 2 nd 2014 at Balai Benih Ikan Keumala, Pidie Regency, Nangroe Aceh Darussalam Province.  The aim of this study was to test the use of willow leaf powder in the feed to reduce fertility le- vels of gift tilapia ( Oreochromis sp. genetic improvement farmed tilapias ). The method in this study used non-factorial completely randomized design with four treatments and three replications i.e. A: without giving willow leaf powder, B: 40 mg, C: 50 mg, D: 60 mg leaf powder. The results showed that the application of willow leaf powder in the fish feed gives a very significant effect on the level of fertility and hatching rate of tilapia, where (F value > F table ). The eggs were unfertilized on the treatment numbers D, C, and B, meanwhile almost of eggs were fertilized in the treatment numbers A (without giving  willow leaf powder). Otherwise, the results showed that the  willow leaf powder was not affect the growth weight and length of tilapia (F value < F table ).
Keywords : willow leaf powder, hatching rate, fertility, tilapia, growth

## Pendahuluan
Indonesia  memiliki  keanekaragaman  ha- yati ikan air tawar tertinggi ketiga di dunia sete- lah  Brazil  (3.316  spesies)  dan  Tiongkok  (1.637 spesies)  yaitu  sekitar  1.224  spesies  dengan  125 spesies  ikan  endemik  dan  20  spesies  ikan  intro- duksi  (Froese  &  Pauly  2015).  Saat  ini,  keaneka- ragaman  ikan  air  tawar  Indonesia  menghadapi ancaman dari berbagai aktivitas manusia. Berba- gai faktor penyebab menurunnya keanekaragam- an ikan air tawar dapat diklasifikasikan menjadi
enam  kategori  utama  yaitu  perubahan/lenyapnya habitat,  ekploitasi  yang  berlebihan,  introduksi ikan  asing,  pencemaran,  persaingan  penggunaan air, dan pemanasan global (McCully 2001, Cowx
&  Collares-Pereira  2002,  Drechsler  &  Watzold 2004, De Silva et al . 2007). Kepunahan ikan air tawar yang disebabkan oleh introduksi ikan asing yaitu mencapai 30% (Reid & Miller 1989, Moyle &  Leidy  1992,  Dudgeon  2000,  Lucas  &  Mar- mulla 2000).
Introduksi  ikan  dari  luar  diketahui  telah menimbulkan  dampak  negatif  berupa  penurunan kualitas  air  dan  sedimen  (Zambrano et  al. 2001,
_________________________
 Penulis korespondensi Surel: khalil@unimal.ac.id
Davis  2003),  gangguan  terhadap  komunitas  ikan asli (Stapp & Hayward 2002), penurunan kualitas materi  genetik  melalui  persilangan,  timbulnya penyakit  baru,  dan  menimbulkan  masalah  sosial ekonomi  bagi  masyarakat  nelayan  di  sekitar (Welcomme 1988, Vitousek et al. 1997, Simber- loff 2003).
Salah satu contoh ikan introduksi dari luar yang  masuk  ke  Indonesia  adalah  ikan  nila.  Ikan nila  merupakan ikan asli dari benua  Afrika  yang masuk  ke  Indonesia  pada  sekitar  tahun  1969 (Ayer et al . 2015). Gangguan ekologis yang telah timbul  akibat  introduksi  ikan  tersebut  diantara- nya  adalah  punahnya  ikan  endemik  seperti  ikan moncong  bebek (Adrianichthys  kruyti) dan  ikan Xenopoecilus  poptae dari  danau  Poso  serta  ikan Xenopoecilus  sarasinorum dari  danau  Lindu (Whitten et  al. 1987).  Ikan  nila  memiliki  sifat yang  sangat  agresif  bila  dibandingkan  dengan ikan-ikan  endemik  sehingga  dalam  waktu  cepat dapat  mendominasi  suatu  komunitas  ikan  dalam suatu kawasan (Doupé & Burrow 2008). Masalah lain  yang  ditimbulkan  ikan  jenis  ini  di  perairan yaitu  berkembangbiak  dengan  cepat,  sehingga mengonsumsi  sumber  makanan  berupa  plankton dalam  jumlah  banyak  dan  cepat,  dan  mengaki- batkan ikan asli perairan tersebut mengalami ke- kurangan  makanan  yang  pada  akhirnya  punah (Canonico et al. 2005, Doupé et al. 2010). Selain itu,  beberapa  penelitian  juga  menunjukkan  bah- wa  ikan  nila  yang  diintroduksikan  dalam  suatu lingkungan  perairan  telah  menyebabkan  penu- runan  jumlah  dan  kepunahan  ikan  endemik  di Amerika  Tengah,  Sri  Langka,  India,  Meksiko, dan  Venezuela,  dan  menyebabkan  penutupan kegiatan budi daya bandeng di Kepulauan Pasifik Naoru akibat persaingan makanan dan tempat hi- dup (Doupé et al. 2009, Attayde et al. 2011)
Secara  umum,  introduksi  ikan  asing  tidak boleh dilakukan jika dianalisis memiliki dampak
ekologis  yang  besar  dan  nyata  bagi  ikan  ende- mik. Sebaliknya, apabila diperlukan proses intro- duksi,  maka  penanganan  khusus  serta  pengon- trolan yang ketat haruslah dilakukan sehingga ti- dak  menyebar  dan  berkembangbiak  secara  tidak terkontrol  di  perairan  umum.  Salah  satu  cara pengontrolan  dan  pemeliharaan  ikan  introduksi dari luar yaitu melalui  metode menghambat pro- ses  fertilisasi.  Proses  penghambatan  fertilisasi dan motilitas pada beberapa jenis ikan telah dila- kukan dalam berbagai penelitian  sebelumnya se- perti penggunaaan  HgCl 2 pada Clarias  gariepi- nus (Rurangwa et  al .  1998),  penggunaan rever- sible CO 2 pada Oncorhynchus mykiss (Bencic et al. 2000),  dan  penggunaan  stress  kejutan  listrik pada Clarias spp. (Faqih 2012). N amun, penggu- naan  bahan-bahan  alami  seperti  daun  gandarusa untuk  menghambat  proses  fertilisasi  pada  ikan hingga saat ini belum pernah diterapkan.
Salah satu bahan alami yang diduga mam- pu menghambat proses fertilisasi atau pemijahan ikan adalah tepung daun gandarusa. Daun ganda- rusa merupakan tanaman pagar yang sering digu- nakan  sebagai  obat-obatan  tradisional  oleh  ma- syarakat  Indonesia.  Namun,  setelah  diamati  dan diteliti  tepung  daun  gandarusa  mengandung  se- nyawa  kimiawi  yang  dapat  membuat  spermato- zoa  melemah  atau  sering  disebut  motilitas  sper- ma rendah sehingga dapat digunakan sebagai alat kontrasepsi khususnya buat pria (Bambang 2001, 2002). Salah satu senyawa kimia tersebut adalah dari  jenis  alkaloid.  Sifat  dari  senyawa  alkaloid pada  daun  gandarusa  bersifat  toksik  pada  sper- matogenesis.  Berdasarkan  latar  belakang  inilah, maka  tujuan  penelitian  adalah  mengevaluasi penggunaan tepung daun gandarusa dalam pakan dalam mengurangi tingkat fertilitas pada ikan ni- la, Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758).

## Bahan dan metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Maret  hingga  Mei  2014  di  BBI  (Balai  Benih Ikan)  Keumala  Kabupaten  Pidie  Jaya,  Provinsi Aceh.  Penelitian  terdiri  atas  dua  tahapan  yakni penelitian  pendahuluan  dan  penelitian  utama. Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  metode  ekperimental  dengan  empat  per- lakuan dan tiga ulangan. Model umum rancangan dalam  penelitian  ini  sesuai  dengan  Gomez  & Gomez (1995) adalah :
Y ij =  μ + τ i + ∑ ij Keterangan: Y ij = hasil pengamatan pada perlakuan ke- i pada ulangan ke-j;  = nilai tengah umum; τ= penga- ruh perlakuan ke ke-I; ∑ ij = pengaruh galat percobaan dari perlakuan ke-i dan ulangan ke-j.

## Penelitian pendahuluan
Tujuan penelitian pendahuluan yaitu untuk melihat  apakah  ikan  mau  mengonsumsi  pakan yang  telah  dicampurkan  dengan  tepung  daun gandarusa  serta  melihat  kondisi  ikan  setelah mengonsumsi  pakan  tersebut.  Selain  itu,  peneli- tian pendahuluan ini bertujuan untuk melihat do- sis tepung daun gandarusa ideal yang akan digu- nakan untuk penelitian utama.
Rancangan  penelitian  pendahuluan  ini adalah memberikan pakan uji dengan jumlah: A:  10  mg  tepung  daun  gandarusa  per  190  gram bobot  tubuh  ikan  nila,  B:  20  mg  tepung  daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, C: 30 mg tepung daun  gandarusa per 190 gram bo- bot tubuh ikan nila.
Penyiapan  wadah  dan  ikan  uji. Wadah yang  digunakan  dalam  penelitian  pendahuluan yaitu bak beton sebanyak dua unit dengan ukuran
4 x 1 x 1 m 3 . Dalam persiapan wadah, bak dicuci menggunakan  air  bersih  serta  desinfektan  serta dimasukkan  air  bersih  sebanyak  20  liter.  Dua ekor  induk  jantan  (bobot  tubuh:  193-195  gram, panjang: 21-23 cm) satu ekor induk betina (bobot tubuh: 200 gram, panjang: 23 cm)  siap pijah ke-
mudian dimasukkan ke dalam setiap unit bak be- ton  yang  telah  disiapkan  sebelumnya.  Sebelum penelitian pendahuluan dilakukan, proses aklima- tisasi  dilakukan  dengan  tujuan  agar  induk  ikan uji  dapat  beradaptasi  dengan  baik  pada  wadah uji.
Penyiapan pakan uji . Daun gandarusa ter- lebih dahulu dikeringkan sampai benar-benar ke- ring,  kemudian  ditumbuk  sampai  halus  sehingga menjadi bubuk setelah itu disaring dengan meng- gunakan ayakan. Setelah itu ditambahkan sedikit air.  Setelah  menjadi  satu  adonan  lalu  dicetak kembali  dengan  menggunakan  cetakan  kue  dan dikeringkan dalam oven selama 24 jam pada su- hu 35 o C.
Prosedur  pemeliharaan. Pakan  yang  di- berikan  yaitu  5%  dari  bobot  tubuh.  Hal  ini  dila- kukan  agar  pakan  mudah  ditentukan  untuk  di- campurkan  dan  efisien  dalam  pemberian.  Pakan diberikan  sehari  dua  kali  yaitu  pagi  jam  08.00 dan  sore  jam  16.00.  Pengelolaan  kualitas  air  di- lakukan pada bak uji melalui penggantian air se- tiap  tiga  hari  sekali  dengan  cara  mengeluarkan air  sebanyak  50%  dan  memasukkan  air  bersih kembali.
Parameter  yang  diuji  pada  penelitian  pen- dahuluan  ini  ialah  tingkat  konsumsi  pakan  dan derajat  pembuahan  induk  ikan  nila  jantan.  Ting- kat  konsumsi  pakan  diukur  dengan  mengamati jumlah  pakan  yang  dihabiskan  oleh  ikan  uji  per satuan waktu (detik) dengan tujuan untuk melihat apakah ikan mau mengonsumsi pakan yang telah dicampur  dengan  tepung  gandarusa.  Pengukuran derajat pembuahan dilakukan dengan mengguna- kan rumus Effendie (1979):
FR ×100
Keterangan:  FR=  derajat  pembuahan  (%);  JTT=  jum- lah telur total (butir); JTB= Jumlah telur yang dibuahi (butir)
Berdasarkan pengamatan klinis pada pene- litian pendahuluan, diketahui bahwa tepung daun gandarusa  tidak  memberikan  efek  negatif  terha- dap pergerakan dan daya makan induk uji. Pene- litian  pendahuluan  menunjukkan  bahwa  ikan  uji menghabiskan  pakan  yang  telah  dicampurkan dengan  tepung  daun  gandarusa  sebanyak  100% dalam waktu rata-rata 31 detik.
Penelitian pendahuluan juga menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  dosis  tepung  daun  ganda- rusa yang digunakan, maka jumlah telur yang ti- dak terbuahi semakin tinggi. Pada penelitian pen- dahuluan,  rata-rata  telur  yang  terbuahi  pada  per- lakuan  A  sebanyak  86,63%,  perlakuan  B  seba- nyak  83,87%  serta  perlakuan  C  sebanyak 79,47%.  Nilai  persentase  pembuahan  tersebut masih dalam kategori sangat baik sehingga diren- canakan  untuk  menaikkan  dosis  konsentrasi  te- pung daun gandarusa  yang diberikan pada induk ikan uji pada penelitian utama.

## Penelitian utama
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  meng- analisis  pengaruh  tepung  daun  gandarusa  ter- hadap  jumlah  telur  yang  dihasilkan,  persentase jumlah telur yang dibuahi, derajat penetasan, per- tumbuhan  induk  ikan  nila,  dan  tingkat  sintasan ikan  uji  yang  diberikan  dosis  tepung  daun  gan- darusa.
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak lengkap dengan empat perlakuan tiga ulang- an sebagai berikut: A= kontrol, B= 40 mg tepung daun gandarusa per 190 g bobot tubuh ikan nila, C= 50  mg tepung daun  gandarusa per 190 g bo- bot tubuh ikan nila, D= 60 mg tepung daun gan- darusa per 190 g bobot tubuh ikan nila.
Hal  ini  didasarkan  pada  penelitian  Bagia dan Lestari (2011) dan hasil penelitian pendahu- luan  yang  telah  dilakukan  sebelumnya.  Pada  pe- nelitian  pendahuluan,  dosis  tepung  daun  ganda-
rusa yang digunakan yaitu 10 mg, 20 mg, dan 30 mg.  Dosis  tersebut  diketahui  tidak  memberi  pe- ngaruh yang signifikan dalam menurunkan angka pembuahan  sehingga  pada  penelitian  utama  ini ditambahkan jumlah dosis dua kali lipat dari do- sis yang digunakan pada penelitian pendahuluan.
Wadah  yang  digunakan  adalah  bak  beru- kuran 1 x 1 x 1 m 3 yang dibuat sekatan sebanyak 12  buah.  Wadah  tersebut  dibersihkan  dengan menggunakan  sikat  dan  setelah  itu  dikeringkan selama  satu  hari.  Kemudian  wadah  dibilas  kem- bali  dan  diisi  dengan  air.  Dalam  bak  diletakkan sedikit  lumpur  agar  induk  cepat  melakukan  pe- mijahan.
Induk ikan yang digunakan memiliki ben- tuk tubuh yang lengkap yaitu memiliki bentuk si- rip dan sisik  yang  masih lengkap serta tidak ter- kelupas,  bebas  dari  infeksi  hama  dan  penyakit, memiliki ukuran tubuh seragam, dan benar-benar telah matang gonad. Umur induk yang digunakan yaitu  sekitar  4  bulan.  Induk  betina  mempunyai bobot  tubuh  200  gram  dan  panjang  23  cm,  se- dangkan  jantan  mempunyai  bobot  tubuh  190  g dan  panjang  22  cm.  Jumlah  induk  ikan  nila  gift yang  digunakan  adalah  36  ekor,  yang  mana  per wadah  tiga  ekor  dengan  perbandingan  2:1  (dua ekor jantan dan satu ekor betina).
Proses  aklimatisasi  (penyesuaian  induk- induk  terhadap  lingkungan  barunya)  dilakukan selama tiga hari di dalam bak/wadah yang sudah disediakan.  Pada  saat  aklimatisasi  diberikan  pa- kan  pelet  biasa  dengan  frekuensi  pemberian  pa- kan  dua  kali  sehari  pagi  pukul  09.00  dan  sore pukul 17.00.
Daun  gandarusa  yang  digunakan  sebagai pakan, terlebih dahulu dikeringkan sampai benar- benar  kering,  kemudian  ditumbuk  atau  digiling sampai  halus  sehingga  menjadi  bubuk,  dan  sete- lah  itu  disaring  dengan  menggunakan  ayakan. Langkah  berikutnya,  bubuk  daun  gandarusa  di-
campur  dengan  pakan  buatan  yang  sudah  dihan- curkan, lalu diberi CMC ( Carboxy Methyl Cellu- lose )  sebanyak  0,1%,  dan  kemudian  diberi  sedi- kit  air.  Setelah  menjadi  satu  adonan  lalu  dicetak kembali  dengan  menggunakan  cetakan  kue  dan dikeringkan dalam oven selama 24 jam pada su- hu  45 o C.  Dosis  daun  gandarusa  dicampurkan dengan pakan berdasarkan perlakuan.
Pemeliharaan  induk  ikan  nila  gift  dilaku- kan secara terpisah antara induk jantan dan induk betina. Hal ini untuk menghindari pemijahan liar. Cara pemeliharaan induk dijelaskan berikut.
Induk jantan yang digunakan dipelihara di dalam bak yang memiliki ukuran 6 x 4 x 1,5 m 3 . Bak  tersebut  dibuat  bentuk  sekatan  dalam  tiap- tiap sekatan induk jantan yang dipelihara berjum- lah  dua  ekor.  Pada  saat  pemeliharaan  induk  jan- tan,  pakan  yang  diberikan  yaitu  pakan  yang  su- dah  dicampurkan  dengan  tepung  gandarusa. Pemberian  pakan  yaitu  5%  dari  bobot  tubuh. Pakan diberikan dengan frekuensi dua kali sehari yaitu  pada  pagi  pukul  09.00  dan  sore  pukul 17.00. Lamanya percobaan adalah 21 hari.
Induk betina dipelihara di dalam bak yang memiliki ukuran 6 x 4 x 1,5 m 3 . Induk betina di- pelihara sebanyak 12 ekor. Induk tersebut dipilih yang benar-benar matang gonad. Pada saat peme- liharaan induk betina pakan yang diberikan yaitu pelet  terapung  biasa  tanpa  pencampuran  dengan tepung  daun  gandarusa.  Pemberian  pakan  yaitu 5%  dari  bobot  tubuh.  Pakan  diberikan  dengan frekuensi  sehari  dua  kali  pagi  pukul  09.00  dan sore pukul 17.00.
Pengelolaan  kualitas  air  dilakukan  baik pada  bak  induk  betina  maupun  pada  bak  induk jantan yaitu dengan cara melakukan penggantian air tiga hari sekali dengan cara mengeluarkan air sebanyak  50%  melalui  saluran  pembuangan  dan memasukkan air kembali. Selain pengelolaan ku- alitas  air,  juga  dilakukan  pengukuran  parameter
kualitas air (pH dan suhu) sebanyak dua kali se- tiap  hari  yakni  pada  pagi  dan  sore  hari.  Pengu- kuran  pH  dan  suhu  air  dilakukan  secara  lang- sung  pada  media  pemeliharaan  dengan  menggu- nakan alat water quality checker .
Parameter  yang  diamati  pada  penelitian utama  adalah  fertilitas  (jumlah  telur  yang  diha- silkan,  telur  yang  dibuahi,  dan  telur  yang  mene- tas),  pertumbuhan  (bobot  dan  panjang),  dan  sin- tasan induk.
Penghitungan  jumlah  telur  dilakukan  de- ngan  membuka  mulut  induk  betina  dan  menge- luarkan telur dalam mulut kemudian dihitung se- cara  manual.  Setelah  dihitung  telur  dimasukkan kembali  ke  dalam  bak  pemijahan,  agar  induk mengutip  kembali  dan  mengeraminya  di  dalam mulut.
Telur  yang  terbuahi  dihitung  dengan  me- lihat secara kasat mata. Telur yang terbuahi tam- pak kuning cerah sedangkan telur yang tidak ter- buahi  tampak  pucat.  Untuk    mendapatkan  per- sentase  pembuahan  digunakan  rumus  Effendie (1979):
FR ×100
Keterangan: FR: derajat pembuahan (%);  JTT: jumlah telur total (butir); JTB: jumlah telur yang dibuahi (bu- tir).
Persentase  penetasan  diperoleh  dengan menggunakan rumus Effendie (1979):
HR ×100
Keterangan: HR=  derajat  penetasan  (%);  JTM= jumlah  telur  yang  menetas  (butir);  JTB:  jumlah telur yang dibuahi (butir).
Pertumbuhan  merupakan  perubahan  fisik yang  terjadi  pada  ikan  baik  bobot  maupun  pan- jang.  Pengamatan  pertumbuhan  ikan  jantan  dila- kukan  setiap  tujuh  hari  sekali.  Hal  ini  dikarena- kan  penerapan  daun  gandarusa  dilakukan  dalam jangka  waktu  21  hari.  Pengukuran  yang  dilaku- kan  meliputi pertumbuhan  bobot  tubuh ikan nila
dengan  menggunakan  timbangan  berketelitian 0,1 gram dan pengukuran panjang menggunakan penggaris. Laju pertumbuhan ikan nila gift jantan dihitung menggunakan rumus Effendie (1979):
W = (Wt-Wo)
Keterangan:  W=  pertambahan  bobot  (gram);  Wt=  bo- bot akhir (gram); Wo= bobot awal (gram).
P = (Pt-Po)
Keterangan:  P=  pertumbuhan  panjang  (cm);  Pt=  pan- jang akhir (cm); Po= panjang awal (cm).
Tingkat  sintasan  ikan  nila  jantan  dihitung berdasarkan Effendie (1979):
SR = (N t / N 0 )  x 100
Keterangan:  SR=  tingkat  sintasan  (%);  Nt=  jumlah ikan pada akhir pemeliharaan (ekor); No= jumlah ikan pada awal pemeliharaan (ekor).
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian dianalisis menggunakan uji sidik ragam dan apa- bila menunjukkan perbedaan yang nyata dilanjut- kan dengan uji beda nyata terkecil (BNT).

## Hasil
Jumlah  telur  yang  dihasilkan  oleh  induk ikan nila dapat dilihat pada Gambar 1. Hasil uji F
menunjukkan  bahwa  pemberian  tepung  daun gandarusa tidak memberikan pengaruh yang nya- ta terhadap jumlah telur yang dihasilkan oleh in- duk ikan nila uji (F hitung 3,26 < F tabel 7,59).
Jumlah  telur  ikan  nila  gift  yang  dibuahi atau derajat pembuahan (FR) pada saat diberikan asupan tepung daun gandarusa selama 21 hari da- pat  dilihat  pada  Gambar  2.  Angka  pembuahan paling  tinggi  terdapat  pada  perlakuan  A  dengan rata-rata 92,88% dan yang terendah terdapat pada perlakuan  D  dengan  rata-rata  40,06%.  Analisis statistik uji F  menunjukkan bahwa pencampuran tepung  daun  gandarusa  dalam  pakan  ikan  uji memberikan pengaruh yang sangat berbeda nyata terhadap persentase pembuahan telur atau derajat pembuahan  ikan  nila  gift,  di  mana  F hitung >  F tabel (54,63  >  7,59).  Selanjutnya,  uji  lanjut  BNT  me- nunjukkan  bahwa  tepung  daun  gandarusa  mem- berikan  pengaruh  dengan  tingkat  yang  berbeda- beda  diantara  tiap  perlakuan  dengan  pengaruh yang paling tinggi terdapat pada perlakuan D.
Gambar 1. Jumlah telur yang dihasilkan oleh induk ikan nila gift pada masing-masing perlakuan. A: Kon- trol, B: 40 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, C: 50 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, D: 60 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila
678.67 572.33 512.00 434.33 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 A B C D J um la h telur (bu tir) Perlakuan
Gambar 2. Persentase jumlah telur yang terbuahi oleh induk ikan nila gift pada masing-masing perlakuan. A:  Kontrol,  B:  40  mg  tepung  daun  gandarusa  per  190  gram  bobot  tubuh  ikan  nila,  C:  50  mg tepung  daun  gandarusa  per  190  gram  bobot  tubuh  ikan  nila,  D:  60  mg  tepung  daun  gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila
Gambar 3. Persentase jumlah telur yang menetas oleh induk ikan nila gift pada masing-masing perlakuan. A: Kontrol, B: 40 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, C: 50 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, D: 60 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila
Derajat penetasan telur ikan uji dapat dili- hat  pada  Gambar  3.  Angka  penetasan  telur  ikan nila  gift  yang  diberi  asupan  tepung  daun  ganda-
rusa rata-rata berada di atas 95%. Angka penetas- an  telur  yang  tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  A dengan  rata-rata  angka  penetasan  yaitu  99,63%
92.88 64.50 49.45 40.06 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 A B C D J um la h telur ter bu a hi (%) Perlakuan 99.63 99.49 98.85 95.33 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 A B C D Der a ja t penet a sa n ( % ) Perlakuan
dan  yang  terendah  didapatkan  pada  perlakuan  D dengan  rata-rata  angka  penetasan  95,33%.  Ber- dasarkan  analisis  statistik  dengan  uji  F  didapat- kan bahwa pencampuran tepung daun  gandarusa dalam  pakan  berpengaruh  secara  signifikan  ter- hadap persentase daya tetas telur ikan nila gift di mana  F hitung >  F tabel (59,70  >  7,59).  Selanjutnya, uji  BNT  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan pengaruh  antarperlakuan  dan  pengaruh  tepung daun gandarusa  yang paling tinggi terdapat pada perlakuan D.
Pertumbuhan  bobot  ikan  nila  gift  selama 21 hari yang diukur dalam tujuh hari sekali dapat dilihat  pada  Gambar  4.  Analisis  statistik  dengan menggunakan uji F menunjukkan bahwa pembe- rian  tepung  daun  gandarusa  tidak  berpengaruh terhadap pertambahan bobot ikan nila gift jantan (F hitung 0,1 <  F tabel 7,59).
Pertumbuhan  rata-rata  panjang  ikan  nila gift  yang  diberi  asupan  tepung  daun  gandarusa yang  diukur  selama  tiga  kali  dapat  dilihat  pada Gambar  5.  Hasil  uji  F  menyatakan  bahwa  pen- campuran  tepung  daun  gandarusa  dalam  pakan untuk  mengurangi  fertilitas  juga  tidak  memberi pengaruh  terhadap  pertumbuhan  panjang  ikan nila gift jantan (F hitung (0,28) < F tabel (7,59).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  selama  pe- meliharaan diperoleh hasil bahwa semua perlaku- an memiliki angka sintasan induk ikan nila jantan yang  diberikan  asupan  tepung  daun  gandarusa yaitu 100%.
Parameter kualitas air yang diukur selama penelitian  yaitu  suhu  dan  pH.  Hasil  pengukuran kualitas air dapat dilihat pada Tabel 1.
Gambar 4. Pertambahan bobot induk ikan nila gift jantan pada masing-masing perlakuan. A: Kontrol, B: 40 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, C: 50 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, D: 60 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila
0.67 0.67 0.33 0.67 -0.4 -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 A B C D B o b o t tu b u h ikan n ila jan tan ( gr am ) Perlakuan
Gambar 5. Pertumbuhan panjang induk ikan nila gift jantan pada masing-masing perlakuan. A: Kontrol, B: 40  mg  tepung  daun  gandarusa  per  190  gram  bobot  tubuh  ikan  nila,  C:  50  mg  tepung  daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila, D: 60 mg tepung daun gandarusa per 190 gram bobot tubuh ikan nila
Tabel 1. Nilai suhu dan pH selama penelitian Parameter Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D Nilai mutu air* Suhu ( o C) 28-29 (28,7) 28-29 (28,5) 28-29 (28,5) 28-29 (28,7) 27-30 pH 7,9-8,2 (8,0) 7,9-8,2 (8,1) 7,9-8,2 (8,0) 7,9-8,2 (8,1) 5-10 *Sumber: El-Sayed (2006)

## Pembahasan
Daya hambat daun gandarusa terhadap proses fertilisasi
Jumlah  telur  yang  dihasilkan  oleh  semua induk  ikan  nila  pada  tiap  perlakuan  dan  ulangan hampir sama. Terjadi sedikit perbedaan pada per- lakuan  A1,  jumlah  telur  yang  dihasilkan  menca- pai 835 butir. Tingginya jumlah telur pada perla- kuan  A1 disebabkan induk ikan nila betina  yang digunakan memiliki ukuran bobot tubuh dan pan- jang  tubuh  yang  lebih  besar  dibandingkan  de- ngan  induk-induk  pada  perlakuan  yang  lain.  Pe- nelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ukuran tubuh  merupakan  salah  satu  faktor  yang  meme- ngaruhi  jumlah  telur  yang  dihasilkan. Tilapia nilotica dengan  ukuran  panjang  tubuh  sehingga
32 cm  mampu  menghasilkan  telur sebanyak 800 telur (Babiker & Ibrahim 1979). O. niloticus de- ngan  bobot  tubuh  42-75  gram  dapat  menghasil-
kan  telur  antara  305-756  telur  (El-Sayed et  al . 2003). Jumlah telur ikan nila yang dihasilkan da- lam penelitian ini berkisar di atas 300-800 butir. Ini  menunjukkan  bahwa  telur  yang  dihasilkan oleh semua induk ikan nila hampir seragam, baik ikan  nila  yang  diberikan  asupan  tepung  daun gandarusa maupun ikan nila yang tidak diberikan tepung  daun  gandarusa. Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan  de  Graaf  &  Huisman  (1999)  bahwa ikan  nila  dapat  memproduksi  telur  antara  100- 3000  telur  dalam  sekali  pemijahan.  Selanjutnya,
Pena- Mendoza et  al .  (2005)  dan Gómez-Már- quez et al . (2003) menyatakan bahwa induk ikan
O. niloticus pada satu kali melakukan pemijahan dapat  menghasilkan  telur  dengan  dalam  jumlah 104-847 butir.
Hasil penelitian  menunjukkan bahwa ikan nila yang diberi asupan daun gandarusa yang di- campurkan  dalam  pakan  dengan  dosis  yang  ber-
0.67 0.30 0.33 0.33 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 A B C D P a nja ng t ub uh ik a n nil a j a nta n (cm ) Perlakuan
beda  berpengaruh  terhadap  derajat  pembuahan dari ikan nila gift sehingga mengurangi nilai fer- tilitas  telurnya.  Persentase  angka  pembuahan yang  paling  rendah  terdapat  pada  perlakuan  D (dosis 60 mg) diikuti perlakuan C (dosis 50 mg), kemudian perlakuan A (dosis 40 mg), dan derajat pembuahan tertinggi pada perlakuan D (kontrol). Perlakuan  D  dan  C  memiliki  angka  pembuahan yang  sangat  rendah  yaitu  berada  di  bawah  50%. Hal  ini  disebabkan  dosis  yang  diberikan  pada perlakuan D dan C tinggi. Dosis ini diperkirakan dapat  melemahkan  kinerja  sperma  dalam  mem- buahi telur-telur yang dikeluarkan oleh induk be- tina.  Hal  ini  sesuai  dengan  dengan  pernyataan Bagia & Lestari (2011) yang menyatakan bahwa daun gandarusa dapat memengaruhi indeks bobot organ  reproduksi  dan  kualitas  spermatozoa.  Se- lanjutnya, Soemardji e t al. (2009) juga  menyata- kan bahwa alkaloid yang terkandung dalam daun gandarusa dapat berefek sitotoksik dan dapat me- nyerang  sel  saraf  pusat . Efek  sitotoksik  tersebut menyebabkan  gangguan  metabolisme  sel  sper- matogenik. Dalam suatu data empirik ditemukan bahwa daun Justicia gendarussa Burm.f. terbukti dapat menurunkan aktivitas enzim hyalurodinase (Widodo  2001).  Selanjutnya  ditambahkan  pula oleh  Bagia  &  Lestari  (2011)  yang  menyatakan bahwa  beberapa  kandungan  bahan  kimiawi  da- lam  daun  gandarusa  seperti hesperidine dapat mencegah  penetrasi  spermatozoa  serta  dapat menurunkan  aktivitas  enzim hyalurodinase .  En- zim hialuronidase berfungsi  mendispersikan  ku- mulus  ooforus  dan  dengan  demikian  memung- kinkan  spermatozoa  menembus  lapisan  terluar ovum. Tetapi dengan banyaknya dosis daun gan- darusa  memberi  efek  bagi  sperma  yaitu  mele- mahkan  kinerja spermatozoa  sehingga tidak ber- hasil  menembus  lapisan  terluar  ovum  sesuai  de- ngan  waktunya.  Hal  inilah  yang  menjadikan  ba- nyak  telur-telur  tidak  terbuahi.  Akan  tetapi,  Pra-
jogo et  al. (2009)  dan  Handayani  (2011)  me- nyatakan bahwa kerja yang paling optimal selain hesperidine dalam  menurunkan  kerja  spermato- zoa dalam membuahi telur yaitu karena kandung- an fraksi n-butanol yang termasuk golongan poli- fenol  dalam  daun  ganda-rusa  yang  dapat  meng- hambat aktivitas enzim hyalurodinase .
Berbeda  dengan  perlakuan  B  dan  A  yang mana  telur-telur  ikan  nila  yang  terbuahi  masih berada pada kisaran yang tinggi yaitu berada pa- da  kisaran  di  atas  50  %.  Hal  ini  menunjukkan bahwa kualitas dan jumlah sperma pada perlaku- an B masih baik untuk membuahi telur sehingga dapat  diperkirakan  bahwa  pada  dosis  ini  tepung daun  gandarusa  belum  bekerja  dengan  optimal dalam  menurunkan  ativitas  enzim hialurodinase sehingga telur-telur ikan nila banyak yang terbu- ahi,  sedangkan  pada  perlakuan  A  (kontrol)  atau tanpa  tepung  daun  gandarusa,  telur  terbuahi  se- perti  biasanya  atau  dalam  keadaan  normal.  Se- perti  penelitian  Chao et  al. (1987)  bahwa  pada keadaan  normal  telur O.  niloticus bisa  terbuahi sampai 85,7%. Ini menjelaskan bahwa kerja daun gandarusa sangat efektif dalam menekankan daya pembuahan  ikan.  Semakin  tinggi  dosis  yang  di- berikan  maka  semakin  banyak  telur  yang  tidak terbuahi.
Persentase  penetasan  telur  ikan  sangat bergantung  kepada  derajat  pembuahan.  Apabila telur terbuahi dengan baik maka angka penetasan telurpun tinggi. Derajat penetasan merupakan ke- mampuan  telur  ikan  untuk  menetas  menjadi  lar- va.  Penelitian  ini  mendapatkan  hasil  bahwa  per- sentase derajat penetasan telur ikan nila gift yang paling  tinggi  terdapat  pada  perlakuan  A  (kon- trol). Tingginya derajat penetasan pada perlakuan A  disebabkan  pada  perlakuan  A  telur  terbuahi dengan sempurna tanpa ada gangguan. Selain itu tingginya  daya  tetas  telur  ikan  juga  dipengaruhi oleh faktor luar seperti kualitas air dan lingkung-
an  (Babiker  &  Ibrahim  1979,  Masithah  & Alamsjah 2002).
Nilai  penetasan  telur  ikan  nila  tertinggi kedua  terdapat  pada  perlakuan  B.  Setelah  itu perla-kuan  dan  menurun  pada  perlakuan  D. Menurun-nya  angka  penetasan  telur  pada perlakuan  D  di-sebabkan  zigot  yang  sedang berkembang  men-jadi  embrio  melemah.  Hal  ini mengakibatkan berhentinya proses perkembangan  pembentukan  stadia  berikutnya sehingga  telur  mengalami  ke-matian.  Jadi  dapat disimpulkan  bahwa  semakin  tinggi  dosis  atau asupan  tepung  daun  gandarusa  dalam  pakan maka  semakin  rendah  nilai  fertili-sasi  dan semakin menurun angka penetasan telur ikan nila gift.  Namun  persentase  angka  penetasan  telur ikan  nila  pada  setiap  perlakuan  tergolong  tinggi dan  baik.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Tamamdusturi  &  Basuki  (2012) yang  menyatakan  bahwa  strain  ikan  nila ( Oreochromis niloticus ) memiliki angka penetas- an telur rata-rata 88,70-89,24%.

## Efek pemberian daun gandarusa terhadap sintas- an dan pertumbuhan induk ikan nila
Penelitian ini menunjukkan bahwa tingkat sintasan  induk  ikan  nila  jantan  yang  dipelihara selama  penelitian  mencapai  100%,  pada  semua perlakuan A, B, C dan D.  Senyawa yang terkan- dung dalam daun gandarusa tidak toksik bagi in- duk  ikan  karena  dosis  yang  ditambahkan  tidak terlalu  tinggi  dan  masih  dapat  ditoleransi  oleh sistem  tubuh  induk  ikan  nila.  Elya et  al .  (2010) menyatakan bahwa daun gandarusa mengandung senyawa  alkaloid  yang  apabila  diberikan  dalam dosis  tinggi  dapat  menyebabkan  kematian  pada organisme. Jadi dapat disimpulkan bahwa asupan daun  gandarusa  tidak  memberi  pengaruh  terha- dap angka sintasan ikan nila gift.
Pertumbuhan  adalah  perubahan  ukuran baik  panjang,  bobot  atau  volume  dalam  jangka
waktu  tertentu.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa pemberian asupan tepung daun gandarusa tidak memberikan pengaruh terhadap pertumbuh- an  ikan  uji.  Kandungan  flavonol-3-glikosida  fla- von,  luteolin,  iso-orientin  (luteolin-6-C-  gliko- sida),  kumarin,  iridoid,  triterpen  atau  sterol,  mi- nyak  atsiri,  tanin,  kalsium  oksalat,  dan  garam- garam  dari  kalium  (Correa  &  Alcantara  2011) yang  terdapat  dalam  daun  gandarusa  diketahui bukan  merupakan  unsur  yang  dapat  meningkat- kan  bobot  dan  pertambahan  panjang  tubuh  ikan uji.  Kemudian, p ada  ikan  nila  yang  sudah  mulai matang  gonad,  asupan  energi  akan  lebih  banyak digunakan  untuk  kematangan  gonad  dibanding- kan energi yang diinvestasikan untuk pertumbuh- an  somatik  dan  pertumbuhan  basal  (Al-Hafedh 1999, Syahrir 2013).

## Simpulan
Pencampuran  tepung  daun  gandarusa  da- lam  pakan  tidak  memberi  pengaruh  terhadap jumlah  telur  yang  dihasilkan  oleh  induk  ikan, akan  tetapi  memberi  pengaruh  terhadap  derajat pembuahan  dan  derajat  penetasan  telur  ikan  uji. Daun  gandarusa  baik  digunakan  untuk  mengu- rangi angka fertilisasi pada ikan introduksi kare- na  dapat  menurunkan  kerja  spermatozoa  dalam membuahi telur serta tidak toksik bagi induk.

## Persantunan
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  atas bantuan  teknis  dan  penyediaan  sarana  penelitian kepada  Balai  Benih  Ikan  Keumala  Kabupaten Pidie, Aceh.

## Daftar pustaka
Al-Hafedh  YS.  1999.  Effects  of  dietary  protein on  growth  and  body  composition  of  Nile tilapia, Oreochromis niloticus L. Aquacul- ture Research , 30(5): 385-393.
Attayde  JL,  Brasil  J,  Menescal  RA.  2011.  Im- pacts  of  introducing  Nile  tilapia  on  the
fisheries  of  at  tropical  reservoir  in  north- eastern Brazil. Fisheries Management and Ecology, 18(6): 437-443.
Ayer Y, Mudeng J, Sinjal H. 2015. Daya tetas te- lur dan sintasan larva dari hasil penambah- an  madu  pada  bahan  pengencer  sperma ikan  nila ( Oreochromis niloticus ). e-Jour- nal Budidaya Perairan , 3(1): 1149-153.
Babiker M, Ibrahim H. 1979. Studies on the bio- logy of reproduction in the cichlid Tilapia nilotica (L.):  gonadal  maturation  and  fe- cundity. Journal  of  Fish  Biology ,  14(5): 37-448.
Bagia  NL,  Lestari  F.  2011.  Efek  ekstrak  etanol daun gandarusa ( Justicia gendarusa Burm. F) terhadap sistem reproduksi dan kualitas spermatozoa  serta  reversibilitasnya  pada mencit jantan galur swiss webster. In : Ce- ha  R,  Kartadarma  E,  Orgianus  Y,  Judian- tono, T, Hindersah H, Suwanda, Kudus A, Hajarisman N, As’ad N, Suwendar, Suhai- di  D  (ed.). Prosiding  SNaPP:  Sains,  Tek- nologi dan Kesehatan. 2(1). pp. 63-70.
Bambang PEW. 2001. Pengaruh hisperidine pada aktivitas  hialuronidase  spermatozoa  men- cit  ( Mus  musculus ). Media  Kedokteran Hewan , 17(1): 1-8.
Bambang PEW. 2002. Aktivitas antifertilitas fla- vonoid  daun Justicia gendarussa brm.f. penelitian  eksperimental  pencegahan  pe- netrasi  spermatozoa  mencit  dalam  proses fertilisasi  in  vitro . Disertasi.  Universitas Airlangga. 317 hlm.
Bencic DC, Cloud JG, Ingermann RL. 2000. Car- bon dioxide reversibly inhibits sperm mo- tility  and  fertilizing  ability  in  steelhead ( Oncorhynchus  mykiss ). Fish  Physiology and Biochemistry , 23(4): 275-281.
Canonico  GC,  Arthington  A,  McCrary  JK,
Thieme  ML.  2005.  The  effects  of  intro- duced  tilapias  on  native  biodiversity.
Aquatic Conservation: Marine and Fresh- water Ecosystems , 15(5): 463-483.
Chao NH, Chao WC, Liu KC, Liao I. 1987. The properties of tilapia sperm and its cryopre- servation. Journal  of  Fish  Biology ,  30(2):
107-118 .
Correa  GM,  Alcantara  AFDC.  2011.  Chemical constituents  and  biological  activities  of species of Justicia: a review. Revista Bra- sileira de Farmacognosia , 22(1): 220-238.
Cowx IG, Collares-Pereira MJ. 2002. Freshwater fish conservation: option for the future. In : Collares-Pereira  MJ,  Cowx  IG,  Coelho MM  (ed.). Conservation  of  Freshwater
Fishes:  Option  for  the  Future. Fishing News  Books,  Blackwell  Science,  UK.  pp. 443-452.
Davis MA. 2003. Biotic globalization: does com- petition  from  introduced  species  threaten biodiversity? Bioscience , 53(5): 481-489.
de  Graaf  GJ,  Huisman  EA.  1999.  Reproductive biology  of  pond  reared  Nile  tilapia, Oreochromis  niloticus L. Aquaculture Research , 30(1): 25-33.
De Silva SS, Abery NW, Nguyen TT. 2007. En- demic freshwater finfish of Asia: distribu- tion  and  conservation  status. Diversity Distribution , 13(3): 172-184.
Doupé  RG,  Burrows  DW.  2008.  Thirty  years later, should we be more concerned for the ongoing  invasion  of  Mozambique  Tilapia in  Australia? Pacific  Conservation  Bio- logy , 14(4): 235-238.
Doupé RG, Knott MJ, Schaffer J, Burrows DW, Lymbery  AJ.  2010.  Experimental  herbi- vory  of  native  Australian  macrophytes  by the  introduced  Mozambique  tilapia Oreo- chromis  mossambicus . Austral  Ecology , 35(1), 24-30.
Doupé  RG,  Schaffer  J,  Knott  MJ,  Burrows  D. 2009.  How  might  an  exotic  fish  disrupt success  in  a  sympatric  native  species?
Marine  and  Freshwater  Research ,  60(5):
379-383.
Drechsler M, Watzold F. 2004. A decision model for  the  efficient  management  of  a  conser- vation fund over time. Animal Biodiversity Conservation, 27(1): 283-285.
Dudgeon D. 2000. The ecology of tropical asian rivers  and  stream  in  relation  to    biodiver- sity  conservation. Annual  Review  of  Eco- logy and Systematics , 31: 239-236. Effendie  MI.  1979. Metode Biologi  Perikanan .
Yayasan Dwi Sri. Bogor. 112 hlm.
El-Sayed  AFM,  Mansour  CR,  Ezzat  AA.  2003. Effects  of  dietary  protein  level  on spawning  performance  of  Nile  tilapia ( Oreochromis niloticus ) broodstock reared at  different  water  salinities. Aquaculture ,
220(1): 619-632.
El-Sayed AFM. 2006. Tilapia culture . CABI Pu- blishing. UK. Oxfordshire. 277 p.
Elya B, Amin J, Emiyanah. 2010. Toksisitas akut daun Justicia  gendarussa Burm. Makara of Science Series , 14(2): 129-134.
Faqih  AR.  2012.  Penurunan  motilitas  dan  daya fertilitas sperma ikan lele dumbo ( Clarias
spp.) pasca perlakuan stress kejutan listrik. The Journal of Experimental Life Science , 1(2): 72-82.
Froese  R,  Pauly  D.  2015.  Fishbase. World  Wide Web electronic
publications : www.fishbase.org, version (08/2015).
Gomez KA, Gomez AA. 1995. Prosedur Statistik untuk  Penelitian  Pertanian .  Diterjemah- kan  oleh  Sjamsuddin  E,  Baharsjah  JS. Universitas  Indonesia  Press.  Jakarta.  698 hlm.
Gómez-Márquez  JL,  Peña-Mendoza  B,  Salgado- Ugarte IH, Guzmán-Arroyo  M. 2003. Re- productive  aspects  of Oreochromis  niloti- cus (Perciformes: Cichlidae) at Coatetelco lake,  Morelos,  Mexico. International
Journal  of  Tropical  Biology  and  Conser- vation , 51(1): 221-228.
Handayani  L.  2011.  A  male  contraceptive  pill consist  of  gandarusa  ( Justicia  gendarussa Burm.  F). Journal  of  the  Indonesian  Me- dical Association , 57(08): 279-284.
Lucas  M,  Marmulla  G.  2000.  An  assessment  of anthropogenic  activities  on  and  rehabili- tation of river fisheries: current status and future direction. In : Cowx IG (ed.). Mana- gement  and  Ecology  of  River  Fisheries.
Fishing  News  Books,  Oxford.  pp.  261- 278.
Masithah  ED,  Alamsjah  MA.  2002. Penggunaan ovaprim  dalam  pemijahan  buatan  untuk meningkatkan  ovulasi  ikan  mas  punten ( Cyprinus  carpio L.).  Lembaga  Penelitian Universitas Airlangga. Surabaya. 57 hlm.
McCully  P.  2001. Silenced  Rivers.  The  Ecology and  Politics  of  Large  Dams .  Zed  Books, London. 359 p.
Moyle PB, Leidy RA. 1992. Loss of biodiversity in  aquatic  ecosystem:  evidence  from  fish faunas. In : Fiedler PL, Jain SK (ed.). Con- servation  Biology:  the  Theory  and  Prac- tice of Nature Conservation, Preservation and  Management. Chapman  and  Hall, New York. pp. 127-169
Pena-Mendoza  B,  Gómez-Márquez  JL,  Salgado- Ugarte IH, Ramírez-Noguera D. 2005. Re- productive biology of Oreochromis niloti- cus (Perciformes:  Cichlidae)  at  Emiliano
Zapata  dam,  Morelos,  Mexico. Internati- onal  Journal  of  Tropical  Biology  and Conservation , 53(3-4): 515-522.
Prajogo  B,  Guliet  D,  Queiroz  F,  Wolfender  J, Cholies  N,  Aucky  H,  Hostettmann  K.
2009.  Isolation  of  male  antifertility  com- pound  in  n-butanol  fraction  of Justicia
gendarussa Burm. F. leaves. Folia Medica Indonesiana , 45(1): 28-31.
Reid  WV,  Miller  KR.  1989. Keeping  Options Alive:  the  Scientific  Basis  for  Conserving Biodiversity .  World  Resources  Institute Washington, DC, 128 p.
Rurangwa  E,  Roelants  I,  Huyskens  G,  Ebrahimi M, Kime DE, Ollevier F. 1998. The mini- mum  effective  spermatozoa:  egg  ratio  for artificial  insemination  and  the  effects  of mercury  on  sperm  motility  and  fertiliza- tion ability in Clarias gariepinus . Journal of Fish Biology , 53(2): 402-413.
Simberloff  D.  2003.  Confronting  introduced species: a form of xenophobia? Biological Invasions, 5(3): 179-192.
Soemardji  AA,  Kumolosasi  E,  Aisyah  C.  2009. Toksisitas  akut  dan  penentuan  dl50  oral ekstrak  air  daun  gandarusa  ( Justicia  gen- darussa Burm.  F.)  pada  mencit  Swiss Webster. Jurnal  Matematika  &  Sains , 7(2): 57-62.
Stapp P, Hayward GD. 2002. Effects of an intro- duced  piscivore  on  native  trout:  insights from  a  demographic  model. Biological Invasions , 4(3): 299-316.
Syahrir  MR.  2013.  Kajian  aspek  pertumbuhan ikan  di  perairan  pedalaman  Kabupaten Kutai  Timur. Jurnal  Ilmu  Perikanan  Tro- pis , 18(2): 8-13.
Tamamdusturi  R,  Basuki  F.  2012.  Analisis  ka- rakter  reproduksi  ikan  nila  kunti  ( Oreo- chromis  niloticus )  F4  dan  F5. Journal  of Aquaculture  Management  and  Techno- logy , 1(1): 180-192.
Vitousek PM, D'antonio CM, Loope LL, Rejma- nek  M,  Westbrooks  R.  1997.  Introduced species:  a  significant  component  of  hu- man-caused  global  change. New  Zealand Journal of Ecology , 21(1): 1-16.
Welcomme  RL.  1988. Internasional  introduction of  inland  aquatic  spesies. FAO  Fisheries Technical Paper , 294: 318 p.
Whitten  AJ,  Bishop  KD,  Nash  SV,  Clayton  L.
1987. One or more extinctions born Sula- wesi,  Indonesia? Conservation  Biology , 1(1): 42-48.
Widodo FY. 2001. Metode kontrasepsi pria. Jur- nal Kesehatan , 4(6): 22-29.
Zambrano L, Scheffer M, Martinez-Ramos M. 2001. Catastrophic response of lake to benthivorous fish introduction. Oikos, 94(2): 344-350.