## AKTIVITAS IMUNOMODULATOR FRAKSI ETIL ASETAT DAUN SOM JAWA (Talinum triangulare (Jacq.) Willd) TERHADAP RESPON IMUN NON SPESIFIK
Ika Puspitaningrum 1) , Lia Kusmita 1) , Yuvianti Dwi Franyoto 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “Yayasan Pharmasi Semarang”

## INTISARI
Imunomodulator  merupakan  senyawa  yang  mengubah  aktivitas  sistem  imun  tubuh dengan dinamisasi regulasi sel-sel imun seperti sitokin. Ada dua jenis respon imun yang mungkin terjadi  bila  tubuh  terpapar  zat  asing,  yaitu  respon  imun  non  spesifik  dan  spesifik.Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas imunomodulator fraksi etil asetat daun Som Jawa ( Talinum triangulare (Jacq.)Willd) terhadap respon imun non spesifik.Uji respon imun non spesifik dengan menggunakan  metode  bersihan  karbon  dan  indeks  organ  limfoid.  Analisa  data  yang  diperoleh menggunakan  SPSS  versi  16,0.  Hasil  uji  bersihan  karbon  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat daun  Som  Jawa  50  mg/kgBB  bersifat  imunostimulan  sedang  dengan  indeks  fagositik  (K)  1,34. Sedangkan  fraksi  etil asetat  daun  Som  Jawa  100  dan  150 mg/kgBB  bersifat  imunostimulan kuat dengan indeks fagositik (K) > 1,5. Hasil uji indeks organ limfoid menunjukkan adanya perbedaan signifikan persen indeks hati, limpa, dan timus antara fraksi etil asetat daun Som Jawa ketiga dosis dengan  kontrol negatif.Berdasarkan hasil  uji respon  imun non  spesifik  dapat  disimpulkan  bahwa fraksi etil asetat daun Som Jawa mempunyai aktivitas imunostimulan.
Kata kunci: daun Som Jawa, imunostimulan, bersihan karbon, indeks fagositik.

## ABSTRACT
Immunomodulatory  compounds  that  alter  the  activity  of  the  immune  system  with  the dynamic  regulation  of  immune  cells  such  as  cytokine.  There  are  two  types  of  immune  responses that  may  occur  when  the  body  is  exposed  to  a  foreign  substance,  the  immune  response  is  non- specific  and  specific.  This  study  aims  to  determine  the  immunomodulatory  activity  of  the  ethyl acetate fraction  of leaf  Som Java  (Talinumpaniculatum  (Jacq.)  Gaertn)  towards  the  non-specific immune  responses.  Test  a  non-specific  immune  response  by  using  carbon  clearance  index  and lymphoid  organs.  Analysis  of  data  obtained  using  SPSS  version  16.0.  Carbon  clearance  test results  showed  that  the  ethyl  acetate  fraction  Som  Java  leaves  50  mg/kg  bw  are immunostimulatory being the phagocytic index (K) 1,34. While the ethyl acetate fraction Som Java leaves 100 and 150 mg/kg bw is a powerful immunostimulant with phagocytic index (K)> 1,5. The test  results  lymphoid  organs  index  showed  significant  differences  percent  index  of  liver,  spleen, and thymus between ethyl acetate fractionSom Java leaves three doses with the negative control. Based on the test results of non-specific immune responses can be summed ethyl acetate fraction Som Java leaves have immunostimulatory activity.
Keywords: Som Java leaves, immunostimulant, carbon clearance, phagocytic index.

## PENDAHULUAN
Imunomodulator merupakan senyawa  yang  mengubah  aktivitas  sistem imun  tubuh  dengan  dinamisasi  regulasi  sel- sel  imun  seperti  sitokin  (Spelman et  al ., 2006).Cara  kerja  Imunomodulator  meliputi
mengembalikan fungsi imun yang terganggu (imunorestorasi), memperbaiki fungsi sistem imun (imunostimulasi) dan menekan respons imun (imunosupresi).Imunomodulator digunakan terutama pada penyakit
imunodefisiensi,  infeksi  kronis  dan  kanker (Katzung, 2007).
Sistem  imun  bila  terpapar  oleh  zat yang  dianggap  asing,  maka  ada  dua  jenis respon  imun  yang  mungkin  terjadi,  yaitu: respon  imun  non  spesifik  dan  respon  imun spesifik. Respon imun non spesifik umumnya  merupakan  imunitas  bawaan ( innate  immunity )  dalam  arti  bahwa  respon terhadap  zat  asing  dapat  terjadi  walaupun tubuh  sebelumnya  tidak  pernah  terpapar dengan zat tersebut, sedangkan respon imun spesifik  umumnya  merupakan  respon  imun didapat  ( acquired )  yang  timbul  terhadap antigen tertentu (Kresno, 2001).
Adanya  senyawa-senyawa  bioaktif yang  dapat  meningkatkan  aktivitas  sistem imun,  sangat  membantu  untuk  mengatasi penurunan  sistem  imun  dan  senyawa- senyawa  tersebut  dapat  diperoleh  dari tumbuh-tumbuhan.Som jawa ( Talinum triangulare (Jacq.)Willd) merupakan tumbuhan  yang  bagian  daunnya  secara empiris digunakan untuk menguatkan sistem kekebalan  tubuh  (Rusli  dan  Towaha,
2010).Pada bagian daun som jawa mengandung  banyak  senyawa  metabolit sekunder,  salah  satunya  adalah  flavonoid. Flavonoid  terbukti  dapat  meningkatkan sistem imun dengan cara memicu proliferasi limfosit,  meningkatkan  jumlah  sel  T  dan meningkatkan  aktivitas  IL-2  (Jiao et  al. , 1999). Oleh  karena  itu,  penelitian  perlu dilakukan untuk mengetahui aktivitas imunomodulator  fraksi  etil  asetat  daun  Som Jawa  ( Talinum  triangulare (Jacq.)Willd) terhadap respon imun non spesifik.

## METODOLOGI
Bahan
Bahan  utama  adalah  daun  Som
Jawa  ( Talinum  triangulare (Jacq.)  Willd)
yang diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman  Rempah  dan  Obat  (BALITRO) Bogor  Jawa  Barat,  etanol,  n-heksana,  dan etil asetat (kualitas teknis),aquadest,
aquabidest, karbon (tinta pelikan B17), asam asetat 0,1%, gelatin, eter,mencit jantan galur Swiss usia 2-3 bulan. Alat Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah rotary  evaporator ,
spektrofotometer, kuvet, mikropipet berbagai  ukuran,  kandang  hewan,  spuit
injeksi  dengan  jarum  berujung  tumpul (sonde),timbangan  ohauss,  neraca  digital, scalpel.

## DeterminasiTanaman
Determinasi som jawa dilaksanakan di  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia (LIPI),  Pusat  penelitian  Biologi  yang beralamat di Jl. Raya Jakarta-Bogor Km. 46 Cibinong 169111 Bogor.

## Pengeringan dan pembuatan serbuk
Daun  som  jawa  yang  diperoleh dibersihkan  dari  bahan-bahan  pengotor dengan menggunakan air  bersih.  Daun  yang telah  dibersihkan  tersebut  lalu  dikeringkan dalam  oven  pada  suhu  50ºC  sampai  kering. Simplisia  yang  telah  kering  kemudian diblender dan diayak.

## Penapisan Fitokimia
Sampel  diperiksa  ada  tidaknya kandungan  alkaloid,  flavonoid,  saponin, kuinon,  tanin,  dan  steroid/triterpenoidnya secara penapisan fitokimia.
Ekstraksi
Serbuk daun som jawa di remaserasi dengan 1 liter etanol 96% selama 5 hari, sampai filtrat jernih. Hasil filtrat dari penyarian ini digabung dan diuapkan dengan rotary  evaporator sampai  diperoleh  ekstrak kental. Fraksinasi Ekstrak kental kemudian difraksinasi dengan n-heksana dan dilakukan berulang-ulang.  Hasil  filtrat  dari  penyarian ini  digabung  dan  diuapkan  dengan rotary evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kental. Kemudian  fraksi  metanol:air  (9:1 v / v ) diuapkan hingga habis metanol dan selanjutnya difraksinasi dengan menggunakan  air  dan  etil  asetat  dengan perbandingan  1:1,  dilakukan  berulang-ulang sampai  pelarut  jernih,  sehingga  akan diperoleh  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  air. Hasil  filtrat  dari  penyarian  ini  diuapkan dengan rotary  evaporator sampai  diperoleh fraksi kental.
Uji Respon Imun Non Spesifik a) Uji bersihan karbon
Pengujian  terhadap  respon  imun non  spesifik  didasarkan  pada  aktivitas fagositik.  Kelompok  I  kontrol  negatif  CMC Na  0,5%,  kelompok  II  kontrol  positif suspensi herba meniran, kelompok III fraksi etil  asetat  som  jawa  50  mg/kgBB  mencit, kelompok IV fraksi etil asetat som jawa 100 mg/kgBB  mencit,  kelompok  V  fraksi  etil
asetat  som  jawa  150  mg/kgBB  mencit. Pemberian  sediaan  uji  satu  kali  sehari selama  5  hari  secara  oral.Pada  hari  ke-6 sebelum diinduksi, masing-masing kelompok  diambil  darah  sebagai  nilai  awal
(menit  ke-0).  Setelah  itu  mencit  diinduksi dengan  karbon  dalam  gelatin  0,1ml/10g  BB melalui  vena  ekor,  kemudian  darah  diambil setiap 4 menit sekali (pada menit ke 4, 8, 12, dan  16)  sebanyak  50µl  kemudian  dicampur dengan  4ml  asam  asetat    0,1%,  lalu  diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada  panjang  gelombang  660nm.  Aktivitas fagositik ditentukan berdasarkan perbandingan antara kemiringan garis regresi linier antara 100%-Transmitan terhadap  waktu  pada  kelompok  uji  dan kontrol. b) Pengujian indeks organ limfoid Mencit dieuthanisasi dengan menggunakan  eter  selama  beberapa  menit hingga  mencit  kehilangan  kesadaran.Mencit dibedah dan diambil organ-organ limfoidnya (hati,  limpa,  dan  kelenjar  timus).Organ- organ  limfoid  tersebut  ditimbang  dan dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol serta dihitung indeks organnya (%).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  imunomodulator  fraksi etil  asetat  daun  Som  Jawa  ( Talinum triangulare (Jacq.)Willd)  terhadap  respon imun  non  spesifik.Langkah  awal  dengan melakukan determinasi daun Som Jawa yang diperoleh untuk memastikan bahwa tanaman yang  diambil  sudah  sesuai  dengan  yang diinginkan.Sampel  diperoleh  dari  Balai Penelitian  Tanaman  Rempah  dan  Obat (BALITRO), Bogor, Jawa Barat.
Sampel  yang  sudah  dipanen  dari kebun milik BALITRO, selanjutnya dilakukan  determinasi  tanaman  di  Lembaga Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI),  Pusat penelitian  Biologi  yang  beralamat  di  Jl. Raya  Jakarta-Bogor  Km.  46  Cibinong 169111  Bogor.  Hasil  identifikasi  atau determinasi  tumbuhan  yang  dikirim  ke “Herbarium  Bogoriense”  bidang  botani Pusat  Penelitian  Biologi-LIPI  bahwa  daun som  jawa  yang  digunakan  dalam  penelitian ini mempunyai nama latin Talinum fruticosum (L.) Juss.sinonim Talinum triangulare (Jacq.) Willd.
Uji  pendahuluan  dimulai  dengan
melakukan skrining fitokimia untuk
mengetahui  senyawa-senyawa  yang  ada  di dalam  fraksi  etil  asetat  Som  Jawa  yang diduga  berefek  imunostimulan.  Skrining fitokimia  meliputi  uji  fenolik,  alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin,  dan  triterpenoid. Apabila hasilnya positif maka dilanjutkan uji penegasan menggunakan KLT untuk memastikan  benar  terdapat  zat  yang  positif di  uji  skrining  fitokimia.  Hasil  yang diperoleh baik skrining fitokimia maupun uji penegasan  menunjukkan  fraksi  etil  asetat daun  Som  Jawa  mengandung  metabolit sekunder  flavonoid,  tannin,  saponin,  steroid dan polifenol.
Fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa selanjutnya  dilakukan  uji  imunomodulator terhadap responimun non spesifik.Imunomodulator adalah suatu senyawa yang dapat mempengaruhi
kekebalan  dalam  tubuh.Sistem  imun  non spesifik  merupakan  sistem  imun  bawaan ( innate  immunity )  dalam  arti  bahwa  respon terhadap  zat  asing  dapat  terjadi  walaupun tubuh  sebelumnya  tidak  pernah  terpapar dengan  zat  tersebut.Sistem  imun  non spesifik  berfungsi  memberikan  respon  dini terhadap patogen.
Langkah  awal  uji  imunomodulator terhadap  respon  imun  non  spesifik  dengan melakukan  orientasi  tinta  cina  kering sebagai  antigen.  Tinta  cina  yang  digunakan sebagai  antigen  dibuat  dalam  bentuk suspensi  dengan suspending  agent gelatin dalam  larutan NaCl fisiologis 0,9%. Suspensi  tinta  cina  yang  telah  dibuat sebelum digunakan harus diinkubasi terlebih dahulu  dalam  inkubator  suhu  37 0 C  selama 1x24 jam.Hal ini bertujuan untuk memaksimalkan kerja gelatin sebagai suspending  agent .  Dosis  suspensi  tinta  cina dalam  gelatin  sebesar  0,1  ml/10  g  BB mencit, dan diberikan secara intravena ekor.
Pemberian  suspensi  tinta  cina dilakukan  setelah  hewan  uji  diberikan perlakuan  sesuai  kelompoknya.  Kelompok perlakuan  terdiri  dari  kelompok  I  CMC  Na 0,5%  (Kontrol  –),  Kelompok  II  Suspensi Meniran  (Kontrol  +),  Kelompok  III,  IV dan V Fraksi etil asetat daun Som Jawa dosis 50 mg/kgBB  mencit,  100  mg/kgbb  mencit  dan 150  mg/kgbb  mencit.  Perlakuan  diberikan secara oral selama 5 hari dan pada hari ke 5 dilakukan  uji  bersihan  karbon  dengan diberikan suspensi tinta cina secara iv. Nilai
transmitan  yang  diperoleh  dari  menit  ke  o
sampai dengan 16 dapat dilihat pada tabel I.
Tabel I. Rata-rata Nilai Transmitan (%) menit ke 0 sampai dengan menit ke 16 semua kelompok Kelompok menit ke- 0 (%) 4(%) 8(%) 12(%) 16(%) Suspensi Meniran (Kontrol +) 43,62 45,06 49,48 47,72 46,88 CMC Na 0,5% (Kontrol -) 55,04 55,9 57,92 57,10 55,98 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 50 mg/kgbb mencit 40,27 44,42 49,51 55,70 46,71 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 100 mg/kgbb mencit 46,19 49,61 62,77 57,77 59,78 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 150 mg/kgbb mencit 53,89 52,81 66,53 61,38 69,27 Sedangkan aktivitas fagositik ditentukan  berdasarkan  perbandingan  antara kemiringan garis regresi linier antara 100%- Transmitan  terhadap  waktu  pada  kelompok uji  dan  kontrol.  Nilai  kemiringan  garis regresi  linier  (K)  kelompok  kontrol  negatif, kontrol  positif,  fraksi  etil  asetat  daun  som jawa dosis 50, 100 dan 150 mg/kgBB mencit dapat dilihat pada tabel II.
Nilai kemiringan garis regresi linier (K) menunjukkan besaran indeks fagositik.Nilai  rata-rata  indeks  fagositosis menunjukkan  aktivitas  fagositosis  sel-sel fagositik  terhadap  partikel  karbon  sebagai
antigen  akibat  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol  dan  fraksi  etil  asetat  Som  Jawa.  Jika nilai  rata-rata  indeks  fagositosis  lebih  besar dari  satu  (>1)  berarti  menunjukkan  zat  uji mempunyai kemampuan imunostimulan (Kresno,  2001;  Wirawandan  Erwin,  1996).
Aktivitas imunomodulator bahan uji diklasifikasikan berdasarkan indeks fagositosisnya, apabila nilai indeks
fagositosisnya  (k)  <  1,2  berarti  berefek imunostimulan  lemah,  k  antara  1,3-1,5 berarti memiliki daya imunostimulan sedang dan  jika  k  >  1,5  berarti  memiliki  daya imunostimulan kuat (Wagner, 1989).
Tabel II. Nilai kemiringan garis regresi linier (K) Semua Kelompok
Kelompok K Keterangan Suspensi Meniran (Kontrol +) 1,47 Sedang CMC Na 0,5% (Kontrol -) 1 - Fraksi etil asetat daun Som Jawa 50 mg/kgbb mencit 1,34 Sedang Fraksi etil asetat daun Som Jawa 100 mg/kgbb mencit 1,62 Kuat Fraksi etil asetat daun Som Jawa 150 mg/kgbb mencit 1,72 Kuat Berdasarkan tabel II, terlihat bahwa fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa  terbukti mempunyai kemampuan
imunostimulan.Semakin  tinggi  dosis  fraksi etil asetat daun Som Jawa maka kemampuan imunostimulan  juga  semakin  meningkat yaitu  dari  sedang  menjadi  kuat.Bahkan kemampuan imunostimulan  fraksi  etil asetat daun  Som  Jawa  lebih  kuat  dibandingkan
dengan  kontrol  positif  sediaan  fitofarmaka Meniran.
Selanjutnya  dilakukan  pengujian indeks  organ  limfoid.Cara  yang  dilakukan mencit  dibedah  dan  diambil  organ-organ limfoidnya  (hati,  limpa,  dan  kelenjar timus).Organ-organ limfoid tersebut ditimbang dan dibandingkan dengan
kelompok  kontrol  serta  dihitung  indeks
organnya.Hasil  yang  diperoleh  dapat  dilihat
pada tabel III dan IV.
Tabel III. Rata-rata Data Berat Organ-organ Limfoid Semua Kelompok
Kelompok berat hati (g) berat limpa (g) berat timus (g) CMC Na 0,5% (Kontrol -) 2,09214 0,306575 0,1224 Suspensi Meniran (Kontrol +) 2,46548 0,36956 0,1608 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 50 mg/kgbb mencit 2,48674 0,32534 0,15624 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 100 mg/kgbb mencit 2,44658 0,33862 0,1663 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 150 mg/kgbb mencit 2,43838 0,3415 0,15928
Tabel IV. Rata-rata Indeks Organ Semua Kelompok
Kelompok indeks organ hati (%) indeks organ limpa (%) indeks organ timus (%) CMC Na 0,5% (Kontrol -) 5,26 0,72 0,28 Suspensi Meniran (Kontrol +) 5,69 1,00 0,41 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 50 mg/kgbb mencit 6,08 0,80 0,38 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 100 mg/kgbb mencit 5,92 0,82 0,40 Fraksi etil asetat daun Som Jawa 150 mg/kgbb mencit 6,30 0,88 0,41 Limfa sebagai organ limfoid
sekunder  mengandung  sel  limfosit  B  dan limfosit T yang berperan pada proses respon imun  spesifik.  Selain  itu,  pada  limfa  juga terdapat  sel  dendritik  dan  makrofag  yang berperan  sebagai  APC  ( Antigen  Presenting Cell )  yang  berfungsi  menyajikan  antigen kepada  sel  limfoid  (Wirawandan  Erwin, 1996).Peningkatan  sel-sel  imun  tersebut berkorelasi dengan  bobot  limfa  seperti  yang terlihat pada tabel III dan IV.Kenaikan bobot limfa  relatif  ini  menunjukkan  adanya  efek fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa  terhadap aktivitas imunostimulan.
Adanya  aktivitas  imunomodulator fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa  terhadap respon  imun  non  spesifik  diduga  karena adanya kandungan flavonoid.Flavonoid dapat mengaktivasi sel NK untuk merangsang  produksi  interferon  γ.  IFN - γ
yang  diproduksi  berbagai  sel  sistem  imun merupakan sitokin utama
MAC ( Macrophage  Activating  Cytokine )  dan berperan  terutama  dalam  imunitas  non spesifik  seluler.IFN- γ  adalah  sitokin  yang dapat  mengaktifkan  makrofag,  sehingga makrofag  mengalami  peningkatan  aktivitas fagositosis  secara  cepat  dan  efisien  dalam menyingkirkan antigen (Baratawidjaja,
2010). Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh, maka  pada  dosis  50,  100  dan  150  mg/kgbb mencit  fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa terhadap  respon  imun  non  spesifik  pada mencit  jantan  galur  Swiss  menunjukkan adanya peningkatan aktivitas imunomodulator dari kriteria imunostimulan sedang sampai dengan imunostimulan kuat.

## KESIMPULAN
1. fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa ( Talinum  triangulare (Jacq.)  Willd) mempunyai efek aktivitas imunomodulator terhadap respon imun nonspesifik. 2. Fraksi  etil  asetat  daun  Som  Jawa ( Talinum triangulare (Jacq.) Willd)dosis 50, 100 dan 150 mg/kgbbmencit  dapat  memberikan aktivitas  imunomodulator  terhadap respon  imun  nonspesifik  dengan indeks fagositosis masing-masing sebesar 1,34 (imunostimulan sedang), 1,62 dan 1,72 (imunostimulan kuat).

## UCAPAN TERIMAKASIH
KementerianRiset, TeknologidanPendidikanTinggiatasdanapene litianmelaluiHibahBersaing  tahun  anggaran 2015.

## DAFTAR PUSTAKA
Baratawidjaja, K.G., danRengganis, I., 2010, ImunologiDasar , Edisi VIII, FakultasKedokteranUniversitas Indonesia, Jakarta. Jiao  Y.,Wen  J.,Yux.  1999.  Influence  of Flavonoid of Astragalusmembranaceus Stem  and Leaves  on  the  Function  of  Cell Mediated  Immunity  in  Mice  : Chinese  Journal  of  Integrated
Traditional  and  Western  Medicine.
Heilongjian University . 19 (6) : 356- 358.
Katzung,  B.  G.  2007.  Basic  and  Clinical Pharmacology,  10th  ed. McGraw- Hill Medical , NewYork, 908-934. Kresno, S. B. 2001. Diagnosis danProsedurLaboratorium. Edisi IV (DenganPerbaikan).Jakarta : FKUI. RuslidanTowaha, 2010, SomJawa ( Talinumpaniculatum ) Ginseng Indonesia PenyembuhBerbagaiPenyakit .Wart
aPenelitiandanPengembanganTana man , 16 (2)
Spelman  K.,  Burns  J.,  Nichols  D.,  Winters N.,  Ottersberg  S.,  danTenborg  M. 2006.  Modulation  of  Cytokine Expression by Traditional Medicines  :  A  Review  of  Herbal Immunomodulator, Alternative Medicine Review , 11 (2) : 128-50. Wagner,  H.  1989.  Immunostimulans  from Higher  Plants  (recent  advances),  in Biologically Active Natural Products ,  K.  Hostettman  and  P.  J. Lea (Eds), Clarendon Press, Oxford, 127-141. Wirawan, S dan Erwin, S. 1996. PemeriksaanLaboratoriumHematol ogiSederhana. Edisi II. Jakarta: FakultasKedokteranUniversitas Indonesia.