https://doi.org/10.22487/kovalen.2022.v8.i2.15897
Identifikasi Senyawa Fraksi Larut n -Heksana Rimpang Temu Mangga ( Curcuma mangga Val) Menggunakan LC-MS/MS dan Review Potensinya sebagai Antibakteri
[Identification of Compounds Soluble n -Hexane Fraction of Rhizome of Temu Mangga ( Curcuma mango Val) Using LC-MS/MS and Review of its Potential as Antibacterial]
Purwantiningsih Sugita 1  , Risda Fardilya Nihayah 2 , Moch Ikkbal Aditya Kasmaran 2 , Gustini Syahbirin 1 , Auliya Ilmiawati 1 , Budi Arifin 1 , Luthfan Irfana 1
1) Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University, Bogor 16680, Indonesia
2) Mahasiswa Program Studi Sarjana Kimia, Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University, Bogor 16680, Indonesia
Abstract. Plants  are  like  the  pharmaceutical  industry  that  provides  products  that  have  the  potential  as  active medicinal ingredients. In order to search for compounds useful for health, the purpose of this study was to identify secondary  metabolites  of Curcuma  mango ( temu mango)  growing  in  the  experimental  garden  of  Biopharmaca LPPM  IPB  and  review  its  activity  as  antibacterial.  Identification  begins  with  phytochemical  screening,  then separation  and  purification  by  chromatographic  techniques.  Intersection  mango  simplicia  was  extracted  with methanol,  and  the  crude  extract  of  methanol  was  partitioned  with n -hexane,  ethyl  acetate,  and  methanol, respectively. The n-hexane soluble fraction was carried out by phytochemical tests, fractionation by vacuum liquid chromatography (KCV) and radial (KR), and the selected fractions was analyzed by LC-MS/MS. The results of the phytochemical test of the soluble n -hexane fraction showed a positive presence of alkaloids and terpenoids through successive tests with Mayer, Wagner, Dragendorff (alkaloid) and Lieberman-Burchard reagents. Fractionation of the n-hexane soluble fraction with KCV resulted in 9 fractions (H1-H9) and the H5 fraction showed good separation between spots in the n-hexane: ethyl acetate eluent mixture (97:3). Purification of H5 with KR obtained 7 fractions (H5.1-H5.7). Based on LC-MS/MS, the H5.2 fraction was dominated by the terpenoid group, and the results of the literature review showed the contribution of terpenoids as antibacterial compounds.
Keywords: Curcuma mango, n-hexane soluble fraction, terpenoids
Abstrak. Tumbuhan ibarat industri farmasi yang menyediakan produk yang berpotensi sebagai bahan aktif obat. Dalam rangka pencarian senyawa-senyawa berguna untuk kesehatan, tujuan penelitian ini melakukan identifikasi metabolit sekunder dari Curcuma mangga (temu mangga) yang tumbuh di kebun percobaan Biofarmaka LPPM IPB,  dan  review  aktivitasnya  sebagai  antibakteri.  Identifikasi  diawali  dengan  penapisan  fitokimia,  kemudian pemisahan dan pemurnian dengan teknik kromatografi. Simplisia temu mangga diekstraksi dengan metanol, ektrak kasar metanol dipartisi berturut-turut dengan n-heksana, etil asetat, dan metanol. Fraksi larut n -heksana dilakukan uji fitokimia, fraksinasi dengan kromatografi cair vakum (KCV) dan radial (KR) serta fraksi terpilih dianalisis dengan LC-MS/MS. Hasil uji fitokimia fraksi larut n-heksana menunjukkan positif adanya alkaloid dan terpenoid melalui uji berturut-turut dengan pereaksi Mayer, Wagner, Dragendorff (alkaloid) dan Lieberman-Burchard. Fraksinasi fraksi larut n-heksana dengan KCV menghasilkan 9 fraksi (H1-H9) dan fraksi H5 menunjukkan keterpisahan antar spot yang baik pada campuran eluen n -heksana:etil asetat (97:3). Pemurnian H5 dengan KR diperoleh 7 fraksi (H5.1- H5.7). Berdasarkan LC-MS/MS, fraksi H5.2 didominasi kelompok terpenoid dan dari kajian literatur menunjukkan kontribusi terpenoid sebagai senyawa antibakteri.
Kata kunci : Curcuma mangga, fraksi larut n-heksana, terpenoid
Diterima:  18 Mei 2022, Disetujui: 13 Juli 2022
Sitasi:  Sugita, P., Nihayah, R.F., Kasmaran, M.I.A., Syahbirin, G., Ilmiawati, A., Arifin, B., dan Irfana, L. (2022). Identifikasi Senyawa Fraksi  Larut  n-Heksana  Rimpang  Temu  Mangga  ( Curcuma  mangga Val)  Menggunakan  LC-MS/MS  dan  Review  Potensinya sebagai Antibakteri. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 8(2): 99-112.
https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/kovalen
 Corresponding author
E-mail : purwantiningsih@apps.ipb.ac.id

## Sugita et al.

## LATAR BELAKANG
Tingkat  prevalensi  penyakit  infeksi  di Indonesia  tergolong  tinggi.  Penyakit  infeksi masih  menjadi  penyebab  kematian  terbanyak. Infeksi  dapat  disebabkan  oleh  bakteri,  virus, jamur,  dan  parasit.  Bakteri  merupakan  salah satu  mikroorganisme  yang  paling  sering menyebabkan infeksi. Angka kejadian penyakit infeksi bakteri pada tingkat layanan Rawat Inap Tingkat  Lanjut  sampai  Desember  2014 mencapai 148.703 kasus (Kementerian Kesehatan RI. 2015).
Pemberian  antibiotika  merupakan  salah satu  pilihan  terapi  dalam  menangani  penyakit infeksi.  Penggunaan  antibiotika  yang  tidak terkontrol  dapat  memicu  terjadinya  resistensi terhadap  pemberian  antibiotik  (Ibrahim et  al. 2011).  Salah  satu  upaya  pengobatan  untuk menghindari terjadinya resistensi melalui back to nature dengan penggunaan herbal.
Pendekatan
pengobatan dengan menggunakan  herbal  masih  sangat  diminati sehingga pencarian metabolit sekunder antibakteri  berasal  dari  tanaman  sangatlah penting.  Salah  satu  tanaman  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  bahan  obat  antibakteri yaitu temu mangga
Temu mangga ( C. mangga Val . ) merupakan tanaman yang  berasal dari Benggala  India,  selanjutnya  tersebar  ke Malaysia  dan  Indonesia.  Temu  mangga  ( C. mangga Val . )  dimanfatkan  sebagai  bumbu masakan, suplemen, dan obat tradisional (Liu & Nair  2012).  Philip et  al. (2009)  melaporkan bahwa  pada  kosentrasi  50  mg/mL  ekstrak metanol, n -heksana,  dan  etil  asetat  temu mangga  menunjukkan  penghambatan  pada bakteri
Pseudomonas
aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis dengan zona hambat antara 7,0 –11,3 mm dan
dengan  menaikkan  konsentrasinya  menjadi 500  mg/mL  terjadi  peningkatan  zona  hambat berkisar 9,0 -19,3 mm. Perasan temu mangga segar  pada  konsentrasi  20  µl,  menghambat Escherichia  coli dan S.  aureus dengan  zona hambat berturut-turut 10,47 dan 9,26 mm (Adila et  al. (2013).  Sementara  ekstrak  dikloro- metana  pada  konsentrasi  15  µl  mampu menghambat  bakteri S.  aureus,  Bacillus cereus, P. aeruginosa dan E. coli dengan zona hambat  berturut-turut  10,00;  13,50;  9,00  dan 7,00 mm (Kamazeri et al. 2012).
Kamazeri et  al. (2012)  melaporkan  bahwa terdapat  27  senyawa  yang  terkandung  dalam ekstrak  temu  mangga  yang  tergolong  pada senyawa  terpenoid,  2  diantaranya  memiliki aktivitas antibakteri paling tinggi  yaitu kariofilena dan  kariofilena  oksida.  Terpenoid  lainnya  yang pernah diidentifikasi pada temu mangga diantaranya linalil asetat, geraniol, linalool (Wong et  al. 1999),  farnesen  (Kamazeri et  al. 2012), mirsena dan neral (Wahab et al. 2011). Yuandani
& Yuliasmi (2018) melaporkan bahwa komponen utama ekstrak etanol temu mangga asal Medan adalah  tiga  senyawa  turunan  kurkuminoid  yaitu kurkumin, demetoksikurkumin (DMC) dan bisdemetoksikurkumin (BDMC). Sementara
Wong et  al. (1999)  melaporkan  bahwa  minyak atsiri  temu  mangga  asal  Penang  mengandung 91,7% hidrokarbon monoterpenoid, 3,4% monoter-penoid  yang  mengandung  oksigen, 1,1% seskuiterpenoid,  0,2% komponen  lain  dan senyawa  mayor  yang  teridentifikasi  berupa 78,6% mirsen; 2,9% α-pinen; 3,7% β-pinen dan 5,1% osimen.
Meskipun telah banyak publikasi senyawaan  metabolit  sekunder  dari  temu mangga  dan  potensi  ekstrak  temu  mangga sebagai antibakteri, namun studi komprehensif tentang  senyawa  bioaktif  yang  bertanggung-

## Sugita et al.
jawab  sebagai  antibakteri  masih  terbatas. Perbedaan  tempat  tumbuh,  letak  geografis, variasi  fisiologis,  evolusi,  perubahan  genetik, penyimpanan, serta kondisi lingkungan lainnya akan  mempengaruhi  keberadaan  metabolit sekunder  pada  suatu  tanaman  (Figueiredo et al. 2008).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan  melakukan  identifikasi  metabolit sekunder  dari  temu  mangga  yang  tumbuh  di kebun  percobaan  Biofarmaka  LPPM  IPB,  dan review aktivitasnya sebagai antibakteri.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan yang digunakan ialah rimpang temu mangga dari perkebunan Biofarmaka di Cikabayan  Bogor,  pelarut  seperti  etil  asetat (EtOAc), n -heksana,  aseton,  kloroform  (CHCl 3 ), metanol  (MeOH),  silika  gel  Merck  60  GF254 (untuk KLT), silika gel 60 G (untuk KCV), silika gel Merck  60  PF254  (untuk  KR),  etanol  (EtOH), diklorometana  (DCM),  FeCl 3 ,  aquades,  serbuk Mg, HCl pekat, amil alkohol, Liberman Burchard, HCl  2N,  amonia  10%,  H 2 SO 4 2M,  pereaksi Dragendroff, Wagner dan Mayer.
Alat yang digunakan ialah peralatan gelas, radas  distilasi, rotatory  evaporator ,  lampu ultraviolet  merek  UVP  95-0007-06  model UVGL-58, kromatografi lapis tipis (KLT) GF254 (Merck®), kromatografi radial (KR), kromatografi  kolom  vakum  (KCV)  dan  LC- MS/MS  dengan  LC  sistem Ultra  Performance Liquid Chromatography
(UPLC) dan spektrometer
massa XEVO-G2SQTOF (Waters, USA).

## Prosedur Penelitian
Ekstraksi  simplisia  Temu  Mangga  (C. mangga Val.)
Prosedur  ekstraksi  merujuk  penelitian Purwantiningsih et  al. (2019).  Ekstraksi
dilakukan dengan teknik maserasi
menggunakan pelarut MeOH. Sebanyak 1870,59  g  simplisia  rimpang  temu  mangga dimasukkan ke dalam bejana dan ditambahkan pelarut  MeOH  (perbandingan  sampel  dengan pelarut 1:3), lalu dimaserasi selama 3×24 jam. Hasil  maserasi  dipekatkan  dengan rotatory evaporator .  Sebanyak  157,45  g  ekstrak  kasar MeOH selanjutnya diekstraksi cair-cair dengan n-heksana (1:1), fraksi larut heksana dipisahkan  dan  ekstraksi  diulangi  sebanyak  3 kali.  Fraksi  larut  n-heksana  dipekatkan, kemudian  diuji  fitokimianya  sesuai  protokol (Shaikh  &  Patil  2020)  dan  selanjutnya dipisahkan  dan  dimurnikan  dengan  metode kromatografi, KCV dan KR.

## Fraksinasi  fraksi  larut  n-heksana  temu mangga
Fraksi  larut  n-heksana  temu  mangga sebanyak 10 g dilarutkan dengan diklorometana  dan  diimpregnasi  dalam  30  g silika  gel  60  (0,2-0,5  mm).  Selanjutnya  kolom KCV disiapkan dengan mengemas silika gel 60 G  sebanyak  100  g  ke  dalam  kolom  dalam keadaan vakum. Sampel terimpregnasi dimasukkan  diatas  kolom  kemas  dan  ditutup dengan kertas saring diatasnya. Sampel dielusi dengan  eluen  berturu-turut  n-heksana:DCM yang dinaikkan kepolaran-nya, kemudian DCM 100% dan dicuci dengan metanol 100% dalam keadaan  kolom  divakum.  Eluat  dikonfirmasi dengan  KLT  dengan  eluen  terbaik  yaitu  n- heksana:DCM  (7:3)  dan  eluat  yang  memiliki profil  mirip  digabungkan.  Fraksinasi  dengan metode  ini  menghasilkan  9  fraksi  (H1-H9). Fraksi  H5  menunjukkan  profil  pemisahan dengan  keterpisahan  atar  spot  yang  baik, selanjutknya  dimurnikan  dengan  metode  KR. Pelat  radial  disiapkan  dengan  melarutkan serbuk silika gel 60GF 254 dalam aquades dingin

## Sugita et al.
dan  dikocok  kuat  hingga  terbentuk  bubur. Bubur silika dituangkan dalam pelat kaca radial, dikeringudarakan dan dibuat dengan ketebalan 1 mm. Selanjutnya, pelat KR ditempatkan pada rotor  KR  dan  elusi  dilakukan  dalam  lemari asam. Fraksi H5 sebanyak 122,6 mg dilarutkan dengan  EtOAc,  kemudian  diinjeksikan  dalam pelat dan dielusi dengan eluen n- heksana:EtOAc  kemudian  dinaikkan  tingkat kepolaranya  secara  bertahap.  Eluat  yang keluar kemudian ditampung setiap 5 ml dalam vial,  dan  profil  eluat  di  KLT  dengan  eluen  n- heksana:EtOAc  (97:3).  Profiling  eluat  diamati dengan menggunakan lampu UV pada panjang gelombang 254 nm dan 366 nm. Eluat dengan profiling  yang  mririp  digabungkan.  Pemisahan dengan metode KR menghasilkan 7 sub fraksi (H5.1-H5.7),  kemudian  fraksi  H5.2  dianalisis dengan  LC-MS/MS.  Potensi  senyawa  yang teridentifikasi  sebagai  antibakteri  dilakukan melalui  studi  literatur  jurnal  yang  diterbitkan pada  rentang  tahun  2005-2020  dari Google Scholar, Sciencedirect , dan Researchgate .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen Ekstrak Temu Mangga dan Hasil Uji Fitokimia Fraksi Larut n-heksana
Ekstrak kasar  MeOH  berwarna  coklat  tua, dan beraroma seperti jamu. Rendemen ekstrak kasar  temu  mangga  ditampilkan  pada  Tabel  1 dan  dibandingkan  hasilnya  dengan  peneliti lainnya.  Rendemen ekstrak temu mangga pada penelitian  ini  diperoleh  8,94%  berdasarkan bobot  kering  dengan  faktor  koreksi  kadar  air 11%,  sedangkan  rendemen  fraksi  larut n - heksananya  diperoleh  2,35%.  Perbedaan yield mungkin karena umur rimpang dan pelarut yang digunakan (Salamah et al. 2015).
Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  metanol  temu mangga  menunjukkan  keberadaan  kelompok senyawa  fenolik,  flavonoid,  alkaloid  dan terpenoid,  sedangkan  fraksi  larut  n-heksana teridentifikasi  senyawa  alkaloid  dan  terpenoid. Berbeda  dengan  temu  mangga  lainnya,  pada uji  fitokimia  selain  menunjukkan  keberadaan senyawa  tersebut,  juga  terdeteksi  adanya steroid dan saponin (Tabel 2).
Tabel 1 .  Rendemen ekstrak hasil penelitian dan komparasi temu mangga di berbagai daerah.
Asal Tanaman Metode dan lamanya Ekstraksi Pelarut Rendemen (%) Pustaka Kebun Biofarmaka IPB Maserasi (3x24 jam) MeOH 8,94 Yogyakarta Maserasi (7x24 jam) MeOH 35,85 Kusmiyati et al. (2011) Yogyakarta Maserasi (3x24 jam) MeOH 10,6 Malek et al. (2011) Thailand Maserasi (3x24 jam) EtOH 21,7 Kaewkroek et al. (2010) Medan Maserasi (3x24 jam) EtOH 11,0 Yuandani & Yuliasmi (2018)
Perbedaan  hasil  uji  ini  diduga  tempat tanam  temu  mangga  yang  beragam  oleh beberapa  faktor,  seperti environment  stress ,
umur  tanaman, growing  area dan  faktor  fisik seperti cuaca, kelembaban, dan suhu (Figueiredo et al. 2008).
Sugita et al.
Tabel 2. Hasil uji fitokimia dari penelitian dan komparasi temu mangga di berbagai daerah
Asal temu mangga Ekstrak Metabolit Sekunder Pustaka Flavonoid  Fenolik  Alkaloid  Triterpenoid  Steroid  Saponin Kebun Biofarmaka IPB MeOH + + + + - - - Fraksi larut n- heksana - - + + - - Aseton + + + + - - Ganur et al. (2021) Sumatera Utara n- heksana - x - + + - Yuandani et al. 2019 EtOAc + x - - - + EtOH + x - + + + Taman Nasional Lore  Lindu (TNLL), Sulawesi Tengah EtOH - - - - - - Ramadanil et al. 2019 Pasar Angso  duo Jambi n -heksan + x - + + + Yurleni 2018 MeOH (Soxhlet) + x - + - - MeOH (refluks) + x - + - + Garut EtOH l - x + - + - Henjani et al. 2018
Keterangan: (+) terdeteksi, (-) tidak terdeteksi, (x) tidak diuji

## Hasil Fraksinasi Fraksi Larut n-Heksana
Fraksi larut n- heksana dipisahkan menggunakan kromatografi cair vakum (KCV). Fraksionasi  fraksi n- heksana  sebanyak  10  g dilakukan  menggunakan  eluen n- heksana 100% dan dilanjutkan elusi bertingkat menggunakan  eluen n- heksana:DCM  dengan perbandingan 8:2 (2x100 mL); 7:3 (2x100 mL); 6:4  (3x100  mL);  4:6  (3x100  mL)  kemudian dengan DCM 100% dan dibersihkan menggunakan metanol 100%. Fraksinasi fraksi larut n- heksana menghasilkan 24 eluat dan dari hasil KLT eluat yang memiliki spot  yang sama digabungkan  dan  diperoleh  9  fraksi  (H 1 -H 9 ).
Profil KLT dari hasil KCV fraksi larut n- heksana
ditampilkan pada Gambar 1, sedangkan massa fraksi hasil KCV disajikan pada Tabel 3.
Tabel  3 .  Massa  fraksi  larut n- heksana  temu mangga hasil KCV
Fraksi Massa (mg) H 1 4,8 H 2 233,6 H 3 190,4 H 4 164,1 H 5 141,5 H 6 240,6 H 7 243,8 H 8 1041,2 H 9 TS (Tidak Tuntas)
Gambar 1. Kromatogram fraksi larut n- heksana temu mangga hasil KCV pada panjang gelombang 254 nm (a)  dan  366  nm  (b)  yang  dielusi dengan n -heksana:DCM (7:3)
Gambar 2. Tampilan  kromatogram  fraksi  H5 pada  254  nm  (a)  dan  366  nm  (b) pada eluen n -heksana:EtOAc
(97:3)
Tabel 4. Massa  fraksi  H5  hasil  KR  dengan eluen n -heksana:EtOAc (97:3) Fraksi Massa (mg) H5.1 47,9 H5.2 31,1 H5.3 92,8 H5.4 12,9 H5.5 30,5 H5.6 66,0 H5.7 103,2
Gambar 3. Kromatogram  fraksi  H5  hasil  KR pada  panjang  gelombang  254  nm (a)  dan  366  nm  (b)  pada  eluen n - heksana:EtOAc (97:3)
Fraksi dengan pola pemisahan sederhana dan  massa  yang  memadai  dipilih  untuk dilakukan tahap fraksinasi selanjutnya.
Berdasarkan profil KLT menggunakan eluen n - heksana:etil asetat (97:3), fraksi H5

## Sugita et al.
menunjukan  keterpisahan  spot  yang  baik (Gambar  2).  Fraksinasi  fraksi  H5  dengan metode  KR  menghasilkan  45  eluat  dan  dari hasil KLT eluat yang memiliki keterpisahan spot yang mirip digabungkan dan diperoleh 7 fraksi (H5.1 –H5.7).  Profil  KLT  fraksi  H5  hasil  KR ditampilkan pada Gambar 3, sedangkan massa fraksi hasil KR disajikan pada Tabel 4.
Hasil  Identifikasi  Fraksi  Larut  n-heksana H5.2 dengan LC-MS dan Potensinya sebagai Antibakteri
Fraksi  larut n- heksana  H5.2  ekstrak metanol temu mangga dianalisis menggunakan LC-MS/MS dengan LC sistem Ultra Performance  Liquid  Chromatography (UPLC) dan  spektrometer  massa  XEVO-G2SQTOF (Waters,  USA).  Kondisi  pengukuran  yang digunakan  adalah  kolom  C18  (1,8µm  2,1x100 mm)  HSS,  suhu  50ºC  (kolom)  dan  25ºC (ruangan),  fase  gerak  air,  5  mM  amonium format dan asetonitril, dan  0,05% asam format, laju  alir  20  µl/menit  ( gradien-step )  selama  23 menit, volume injeksi 250 µL dengan sistem MS ES  ( electrospray  ionization )  dalam  mode  ion positif,  suhu desolvasi 350ºC dan deteksi pada 50 eV.
Analsis kromatogram fraksi H5.2 diperoleh banyak  puncak  dengan  4  puncak  utama  pada waktu retensi menit ke 11,34; 12,02; 12,97 dan 15,27  yang  diduga  merupakan  kelompok terpenoid dan berdasarkan penelusuran literatur  serta  basis  data PubChem berturut- turut  diduga  sebagai  gwikurkulakton  ( 1 ); curzerenon  ( 2 );    6-(1-hidroksimetilvinil)-4,8a- dimetil-3,5,6,7,8, 8a-heksahidro-1H-naftalen-2- on  ( 3 )  dan  (E)-15,16-bisnorlabda-8(17),11- dien-13-on ( 4 ).
Senyawa 1 dilaporkan sebelumnya terdapat pada C.  wenyujin (Wang et al. 2008) dan  baru  pertama  kali  dilaporkan  pada  temu
mangga.  Senyawa 2 pernah  dilaporkan sebelumnya  terdapat  pada  minyak  atsiri  temu mangga  yang  berasal  dari  Congo-Brazzaville (Bikindou et  al. 2020)  dan  pada  spesies curcuma  lainnya  seperti  pada C.  zedoaria
(Makabe et  al. 2006,  Singh et  al. 2013,
Purkayastha et al. 2006, Jarikasem et al. 2005, Bordoloi et  al. 1999),  pada  minyak  atsiri C.
aromatica (Herath et al. 2017), C. inodora Blatt (Malek et al. 2006), dan C. kwangsiensis (Zeng et al. 2009). Curzerenone merupakan seskuiterpen  tipe  eleman  dan  Li et  al .  (2015) melaporkan  bahwa  fragmentasi  curzerenone cenderung  kehilangan  ion  fragmen  utama sekaligus etilen dan air [M+H + -C 2 H 4 -H 2 O] + dan teridentifikasi pada m/z 185.1334. Dalam genus Curcuma, telah ditemukan 12 sekuiterpen tipe elemane, antara lain β-elemane , ƴ-elemane, δ- elemane , curzerene ,  dan curzerenone yang tersebar  luas  di  seluruh  spesies  Curcuma. Senyawa 3 teridentifikasi  sebelumnya  pada minyak  atsiri  temu  mangga  yang  berasal  dari Malaysia  (Kamazeri et  al. 2012),  sedangkan senyawa 4 teridentifikasi  sebelumnya  pada fraksi  heksana  temu  mangga  asal  Songkhla Province, Thailand (Kaewkroek et al. 2010) dan Yogjakarta (Malek et al. 2011).
Pada  temu  mangga asal Thailand teridentifikasi juga  (E)-15,15-dietoksilabda- 8(17),12-dien,16-al ( 5 ), sedangkan temu mangga asal Yogjakarta teridentifikasi senyawa (E)-labda-8(17)-12-dien-15,16-dial ( 6 ) dan steroid β-sitosterol ( 7 ) (Malek et al. 2011). Pratiwi et al . (2020) melaporkan bahwa ekstrak metanol  dan n- heksana C.  mangga asal Padang, Sumatera Barat menunjukkan aktivitasnya  sebagai  antibakteri  terhadap M. tuberculosis strain  H 37 Rv  dengan  konsentrasi berturut- turut sebesar 0,5 μg/mL dan 1 μg/mL.
Singh et  al. (2010)  melaporkan  senyawa
Sugita et al.
diterpenoid  kerangka  labdane  senyawa 6 dari fraksi  kloroform C.  amada asal  Jadopur,  India berpotensi menghambat bakteri M. tuberculosis strain  H 37 Rv  dengan  nilai  minimum  inhibitory concentration  (MIC) sebesar  500  μg/mL. Struktur  senyawa 1-7 ditampilkan  pada Gambar 4.
Penelitian sebelumnya, Ganur et al. (2021) melaporkan bahwa analisis
LC-MS/MS
senyawa  pada  fraksi  larut  n-heksana  dari ekstrak  aseton  teridentifikasi  sebagai 13-
Hydroxygermacrone ( 8 ), curcumenone ( 9 ), curcumenol ( 10 ),  dan  zedoarondiol  ( 11 ). Senyawa 8 telah  dilaporkan  sebelumnya teridentifikasi pada C. zedoaria (Shiobara et al.
1986),  dan C.  xantoriza (Zhang et  al. 2015).
Senyawa 9 dan 10 teridentifikasi bersama pada C.  longa , C.  wenyujin , C.  phaeocaulis dan C. kwangsiensis (Liu et  al. 2016,  Chen et  al.
2018), C. zedoaria (Shiobara et al. 1986, Zhang et al. 2020), C. aeruginosa (Rahayu et al. 2018,
Purwantiningsih et al. 2019).
1 2 3 4 5 6
7
Gambar 4. Dugaan senyawa 1-4 pada fraksi H5.2 dari ekstrak metanol temu mangga asal Bogor dan senyawa 5-7 dari temu mangga asal Thailand dan Yogjakarta
Selain  itu,  senyawa 9 telah  dilaporkan sebelumnya  pada C.  caesia (Vairappan et  al.
2013),  sedangkan  senyawa 10 juga  telah dilaporkan  pada C.  wenyujin (Wang et  al. 2008), C.  heyneana (Sugita et  al. 2018), C. aeruginosa (Awin et  al. 2016)  dan C. kwangsiensis (Yang et  al. 2005),  sedangkan Senyawa 11 pernah diisolasi sebelumnya dari C. heyneana (Cho et al. 2009), C.  aeruginosa (Thainaa et al. 2009), C longa (Matsuda et al.
2011),  dan C.  zedoaria (Kouno  &  Kawano
1985).  Rahayu et  al. (2018)  melaporkan
aktivitas  antibakteri  senyawa 10 dan  ekstrak metanol C.  aeruginosa asal  Pusat  Studi Biofarmaka IPB, Jawa Barat terhadap 2 bakteri Salmonella typhi dan E. coli . Hasil pengujiannya  menunjukkan  zona  pengham- batan  senyawa 10 dan  ekstrak  metanol C.
aeruginosa berturut-turut sebesar 8,0 dan  7,0 mm  ( S.  typhi )  dan  5,0  dan  6,0  mm  ( E.  coli ). Struktur  senyawa 8-11 ditampilkan  pada Gambar 5.
Sugita et al.
Wong et  al. (1999)  melaporkan  bahwa pada minyak atsiri rimpang temu mangga terdiri dari  91,7%  monoterpen  hidrokarbon,  3,4% monoterpen  beroksigen,  1,1%  seskuiterpen dan  0,3%  senyawa  lain  dengan  senyawa dominan mirsena sebanyak 78,6%, sedang dari temu  mangga  lainnya  teridentifikasi  78,6% monoterpen, 5,9% diterpen, 4,8% seskuiterpen dan  0,2%  senyawa  lain  dengan  komponen utama  yang  teridentifikasi  adalah  mirsena (46, 5%)  dan  β-pinena  (14,6%)  (Wahab et  al.
2011).  Sementera  penelitian  Kamazeri et  al.
(2012)  melaporkan  bahwa  minyak  atsiri C. mangga asal  pasar  lokal  di  Kuantan,  Pahang memiliki zona inhibisi tertinggi terhadap bakteri P. Aeruginosa, E. Coli , S. aureus dan B. Cereus dengan  zona  inhibisi  berturut-turut  9±0  mm,
7±0  mm,  10±0  mm,  13±0,7  mm  dibandingkan minyak atsiri C. aeruginosa dan Z. cassumunar .
Nilai
MIC dan minimum bactericidal
concentration (MBC)  minyak  atsiri C.  mangga terhadap  bakteri S.  aureus dan B.  Cereus berturut- turut  sebesar  11,1  μL/mL  dan  1,2 μL/mL. Berdasarkan analisis GC-MS, senyawa yang teridentifikasi pada minyak atsirinya terdiri dari  52,67%  seskuiterpen  dengan  senyawa utama  kariofilena oksida (18.71%) dan kariofilena  (12,69%),  31,44%  monoterpen  dan 15,89%  diterpen  dengan  senyawa  utama 2,6,11,15-tetrametil-heksadeka-2,6,8,10,14- pentaena (8,06%).
Baharudin et  al. (2015)  menyatakan bahwa  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri berkaitan dengan komponen kimia utama yang terkandung  didalamnya.  Komponen  minyak atsiri  secara  umum  dikelompokan  dalam golongan  monoterpen  rantai  hidrokarbon, monoterpen  beroksigen,  seskuiterpen  rantai hidrokarbon, dan seskuiterpen beroksigen.
8 9 10 11
Gambar 5. Senyawa  terpenoid  yang  teridentifikasi  pada  fraksi  larut n -heksana  dari  ekstrak  aseton temu mangga
Komponen utama pada minyak atsiri temu mangga  adalah  α-pinena  ( 12 )  dan  β-pinena ( 13 ) yang diduga berkontribusi dalam aktivitasnya menghambat pertumbuhan bakteri. Bentuk β-isomer  lebih  aktif  dibandngkan bentuk  α-isomernya.  Dhar et  al. (2014) melaporkan bahwa keoptikan stereisomer juga berperan  dalam  kontribusinya  terhadap  sifat antibakteri, (+)- α-pinena ( 12a ) memiliki aktivitas lebih  tinggi  dibandingkan  bentuk  (-)- α-pinena
( 12b ).  Dari  penelusuran  Pustaka lainnya melaporkan  bahwa senyawa  borneol  ( 14 ) memiliki  daya  hambat  bakteri kategori  sedang dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  6  mm terhadap  bakteri S.  aureus (Al-Farhan et  al.
2010),  sedangkan  senyawa  isoborneol  ( 15 ) memiliki  daya  hambat  bakteri  kategori  kuat dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  19,5 mm  terhadap  bakteri  yang  sama  (Zhu et  al.
2013). 12-15 ditampilkan pada Gambar 6.
12a 12b
13 14                                                15
Gambar 6. Struktur kimia 12-15 komponen minyak atsiri temu mangga
Gambar 7. Kalsterisasi 60 terpenoid berdasarkan metode hierarki melalui penentuan nilai MIC pada bakteri E. coli, P. aerugiosa dan S. aureus (Griffin, 2000)
Griffin  (2000)  mengidentifikasi  hubungan antara  struktur  60  terpenoid  dengan  aktivitas antibakterinya berdasarkan nilai MIC terhadap 3  bakteri  yaitu E.  coli,  P.  aerugiosa dan S. aureus .  Berdasarkan  metode  hirarki  (Gambar
7)  menunjukan  bahwa  60  terpenoid  tersebut
terbagi  menjadi  5  golongan  berdasarkan aktivitas  antibakterinya.  Golongan  terpenoid yang  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  tinggi (grup I, II dan V) terdiri dari alkohol, keton dan aldehida  sedangkan  golongan  yang  tidak  aktif (grup  IV)  kebanyakan  terdiri  dari  hidrokarbon

## Sugita et al.
dan  asetat.  Grup  III  memiliki  aktivitas antibakteri yang sedang terdiri dari oksida dan eter. Analisis aktivitas senyawa yang terdiri dari 5  grup  ini  memiliki  kesamaan  dengan  hasil yang  telah  dilaporkan  oleh  Knobloch et  al.
(1989)  yaitu  secara  umum  peningkatan  efek antibakteri  terpenoid  mengandung  gugus keton,  aldehid,  alkohol,  fenol  lebih  kuat berturut-turut dari  eter  dan  eter  siklik  (oksida), serta hidrokarbon dan asetat.
Kajian hubungan struktur kelompok terpenoid terhadap aktivitasnya sebagai antibakteri  secara  eksperimen  masih  sangat terbatas. Oleh karenanya, kajian perlu dikembangkan dengan bantuan metode lainnya yaitu  secara in  silico . In  silico, suatu  aplikasi teknologi  komputer  yang  digunakan  untuk memecahkan  permasalahan  biologis.  Dengan teknik  ini  dapat  dilakukan  penapisan  senyawa terpenoid  yang  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri dan memprediksi aktivitasnya.

## KESIMPULAN
Fraksi heksana H5.2 dari ekstrak metanol temu  mangga  diduga  mengandung  senyawa utama gwikurkulakton ( 1 ); kurzerenon ( 2 ); 6-(1-hidroksimetilvinil)-4,8a-dimetil-
3,5,6,7,8,8a-heksahidro-1H-naftalen-2-on ( 3 ) dan (E)-15,16-bisnorlabda-8(17),11-dien-13-on ( 4 )  berdasar  analisis  LC-MS/MS.  Senyawa teridentifikasi  sebagai  senyawa  terpenoid beroksigen,  grup  I,  II,  III  atau  IV.  Hasil  studi literatur menunjukkan bahwa grup terpenoid ini memiliki aktivitas sebagai antibakteri kuat atau sedang.    Selain  gugus  fungsi  pada  kerangka atau  rantai  hidrokarbonnya,  parameter  yang juga berkontribusi dalam menentukan aktivitas adalah  stereokimia  dan  sifat  optis  aktif  dari strukturnya

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  bagian  dari  penelitian  yang didanai LPPM IPB University, Bogor Indonesia. melalui  Hibah  Penelitian  Dasar  Unggulan Perguruan  Tinggi  (PDUPT)  2020  RISTEK-IPB No.  1/E1/KP.PTNBH/2020  dan  amandemen kontrak No. 1/AMD/E1/KP.PTNBH/2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Adila  R,  Nurmiati,  Agustien  A.  (2013).  Uji antimikroba Curcuma spp.  Terhadap pertumbuhan Candida albicans, Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. J Bio UA. 2(1): 1-7. ISSN: 2303-2162. Al-Farhan KA, Warad I, Al-Resayes SI, Fouda MM,  Ghazzali  M.  (2010).  Synthesis, structural  chemistry  and  antimicrobial activity of -(-) borneol derivative. Cent Eur J Chem. 8(5):1127 –1133.
doi:10.2478/s11532-010-1093-0.
Awin  T,  Mediani  A,  Maulidiani, et  al. (2016). Phytochemical  profiles  and  biological activities of Curcuma species subjected to different  drying  methods  and  solvent systems: NMR-based metabolomics approach. Ind  Crops  Prod .  94:342-352. doi:10.1016/j.indcrop.2016.08.020
Baharudin  M,  Hamid  S,  Susanti  D.  (2015). Chemical  composition  and  antibacterial activity of essential oils from three arimatic plants  of  the  Zingiberceae  family  in Malaysia. Journal  of  Physical  Science. 26(1): 71-81
Bikindou  K,  Bitemou  E,  Boungou-Tsona  G, Bounkosso HM, Loumouamou A, Chalard P, Figueredo G. (2020). Physico-chemical characterization  and  chemical  profile  of Curcuma  mangga (Valeton  &  Zijp) essential  oils  acclimated  in  Congo- Brazzaville. Adv Med Plant Res . 8(3): 43-
52. ISSN: 2354-2152. doi: 10.30918/AMPR.83.20.024.
Bordoloi AK, Sperkova J, Leclercq PA. (1999). Essential oils of curcuma aromatica Salisb. From  northeast  India. J  Essent  Oil  Res . 11(5):537-540. doi:10.1080/10412905.1999.9701209
Chen  C,  Long  L,  Zhang  F, et  al. (2018). Antifungal activity, main active components  and  mechanism  of  Curcuma longa extract against Fusarium
Sugita et al.
graminearum . PLoS  One .  13(3):1-19. doi:10.1371/journal.pone.0194284
Cho, W., Nam, J. W., Kang, H. J., Windono, T., Seo,  E.  K.  and  Lee,  K.  T.  (2009). Zedoarondiol isolated from the rhizoma of Curcuma  heyneana  is  involved  in  the inhibition  of  iNOS,  COX-2  and  pro- inflammatory  cytokines  via  the  down regulation  of  NF- κB  pathway  in  LPS- stimulated  murine  macrophages. Int. Immunopharmacol. 9(9):1049-1057.
Dhar  P,  Chan  P,  Cohen  DT,  Khawam  F, Gibbons  F,  Synder-Leiby  T,  Dickstein  E, Rai  PK,  Watal  G.  (2014).  Synthesis,
antimicrobial evaluation, and
structureactivity  relationship  of  α-pinene derivatives. Agricultural and Food Chemistry . 62:3548-3552.
Figueiredo AC, Barroso JG, Pedro LG, Scheffer JJC.  (2008).  Factors  affecting  secondary metabolite  production  in  plants:  volatile components and essential oils. FLAVOUR
FRAG
J. 23:213-226. doi: 10.1002/ffj.1875.
Ganur  A.N.A.,  D.U.C.  Rahayu,  H.  Dianhar,  I. Irwanto  and  P.  Sugita.  (2021). Terpenoid from  Indonesian  temu  mangga  (Curcuma mangga,  Val)  rhizomes  and  review  of  its anticancer  towards  MCF-7  breast  cells. AIP Conf. Proc . 2349, 020044-1 –020044- 7; https://doi.org/10.1063/5.0051538
Griffin  S.  (2000).  Aspects  of  antimicrobial activity  of  terpenoids  and  the  relationship to  their  molecular  structure.  New  South Wales  (AU):  University  of  Western Sydney.
Henjani  N.  Fathurrahman.  Hadi  Z.  (2018).
Efektivitas ekstrak
temu mangga ( Curcuma  mangga) sebagai  senyawa sitotoksik dalam kemopreventif dan strategi kemoterapi. Dinamika Kesehatan . 9(2): 458-466.
Herath  HMIC,  Wijayasiriwardene  TDCMK, Premakumara  GAS.  (2017).  Comparative GC-MS  analysis  of  all Curcuma species grown  in  Sri  Lanka  by  multivariate  test.
Ruhuna J Sci . 8(2):103.
doi:10.4038/rjs.v8i2.29
Ibrahim  TA,  Opawale  BO,  Oyinloye  JMA. (2011).  Antibacterial  activity  of  herbal extracts against multi drug resistant strains of  bacterial  from  clinical  origin. Life  Sci Leafl . 15:490-498.
Jarikasem S, Thubthimthed
S, Chawananoraseth  K,  Suntorntanasat  T, Brophy  JJ.  (2005).  Essential  oils  from
three  Curcuma  species  collected  in Thailand.
Acta Hortic . 675:37-40. doi:10.17660/ActaHortic.2005.675.4
Kaewkroek K, Wattanapiromsakul C, Tewtrakul S.  (2010).  Anti-infammatory  mechanisms of  compounds  from Curcuma  mangga rhizome  using  RAW264.7  macro  phage cells. Nat Prod Com . 5(10): 1547-1550
Kamazeri  T,  Samah  O,  Taher  M,  Susanti  D,
Qaralleh  H.  (2012).  Antimicrobial  activity and essential oils of Curcuma aeruginosa,
Curcuma
mangga,
and Zingiber cassumunar from  malaysia. Asian  Pasific
Journal  of  Tropical  Medicine. 5(3):  202- 209. ISSN: 1995-7645. doi:
10.1016/S19957645(12)60025-X.
Kementerian Kesehatan RI. (2015). Pusat Data dan Informasi. Jakarta selatan.
Knobloch K, Pauli A, Iberl B, Weigand H, Weis N.  (1989).  Antibacterial  and  antifungal properties  of  essential  oil  components. J
Essent Oil Res . 1(3):119 –128. doi:10.1080/10412905.1989.9697767. Kouno  I,  Kawano  N.  (1985).  Structure  of  a guaiane from Curcuma zedoaria .
Phytochemistry. 24(8):1845- 1847. doi:10.1016/S0031-9422(00)82567-4
Li  P,  Su  W,  Xie  C,  Zeng  X,  Peng  W,  Liu  M.
(2015). Rapid Identification and Simultaneous  Quantification  of  Multiple Constituents in Nao-Shuan-Tong Capsule by Ultra-Fast Liquid Chromatography/Diode-Array Detector/Quadrupole Time-of-Flight Tandem Mass Spectrometry. J Chromatogr Sci . 53(6):886-897.
doi:10.1093/chromsci/bmu137
Liu  F,  Bai  X,  Yang  FQ, et  al. (2016). Discriminating from species of Curcumae radix (Yujin) by a UHPLC/QTOFMS-based metabolomics  approach. Chinese  Med (United
Kingdom).
11(1):1-11.
doi:10.1186/S13020-016-0095-8
Liu  Y,  Nair  MG.  (2012). Curcuma  longa and Curcuma mangga leaves exhibit functional food property. Food Chem. 135: 634-640. Makabe  H,  Maru  N,  Kuwabara  A,  Kamo  T, Hirota M. (2006). Anti-inflammatory sesquiterpenes  from Curcuma  zedoaria .
Nat Prod Res . 20(7):680-685. doi:10.1080/14786410500462900
Malek  SN,  Lee  GS,  Hong  SL,  Yaacob  H, Wahab NA, Faizal WJB, Shah SA. (2011). Phytochemical and cytotoxic investigation
Sugita et al.
of Curcuma  mangga rhizome. Molecules . 16(6): 4539-4548.
Malek N, Seng CK, Zakaria Z, Ali NA, Ibrahim H,  Jalil  MN.  (2006).  The  essential  oil  of Curcuma inodora aff. blatter from malaysia. J Essent Oil Res . 18(3):281-283. doi:10.1080/10412905.2006.9699088
Matsuda  H,  Tewtrakul  S,  Morikawa  T,
Nakamura  A,  Yoshikawa  M.  (2004).  Anti- allergic  principles  from  Thaizedoary: Structural  requirements  of  curcuminoids for inhibition of degranulation and effect on the release of TNF- α and IL-4 in RBL-2H3 cells. Bioorganic Med Chem. 12(22):5891- 5898. doi:10.1016/j.bmc.2004.08.027
Philip, K., Malek, S. N. A., Sani, W., Shin, S. K., Kumar,  S.,  Lai,  H.  S.,  Serm,  L.  G.  & Rahman,  S.  N.  (2009).  Antimicrobial Activity  of  Some  Medicinal  Plants  from Malaysia.  American  Journal  of  Applied
Sciences, 6(8), 1613-1617. https://doi.org/10.3844/ajassp.2009.1613. 1617
Pratiwi R, Alam G, Rante H, Massi N. 2020. Anti Mychobacterium tuberculosis activity strain  H37Rv  and  MDR  ( Multi  Drug Resistant )  from Curcuma  mangga Val. Rhizome  extract. GALENIKA  J  Pharm. 6(1): 70-76. Doi: 10.22487/j24428744.2020.v6.il.13102.
Purkayastha  J,  Nath  SC,  Klinkby  N.  2006. Essential  oil  of  the  rhizome  of Curcuma zedoaria (christm.) rose. native to northeast  India .  J  Essent  Oil  Res . 18(2):154-155. doi:10.1080/10412905.2006.9699050
Purwantiningsih,  Hartono,  Firdaus  SO, et  al. 2019.  Sesquiterpenes  from  Indonesian  of Curcuma  aeruginosa rhizome  and  its antibacterial activities. Drug Invent Today . 11(2):386-390
Rahayu  DUC,  Hartono,  Sugita  P.  2018.
Antibacterial  activity  of  curcumenol  from rhizomes of Indonesian Curcuma aeruginosa (Zingiberaceae). RASAYAN  J Chem. 11(2): 762-765. ISSN: 0974-1496.
Ramadanil,  Damry,  Rusdi,  Hamzah  B,  Zubair MS. 2019. Traditional usage and phytochemical  screenings  of  selected Zingiberaceae  from  central  Sulawesi, Indonesia. Pharmacogn J. 11(3): 505-510
Salamah,  Nina,  Widyasari,  Erlinda.  2015. Aktivitas antioksidan ekstrak metanol daun kelengkeng  ( Euphoria  longan (L)  Steud.) dengan metode penangkapan radikal 2,2-
difenil-1-pikrilhidrazil. Pharmaciana. 5(1): 25-34.
Shiobara Y, Asakawa Y, Kodama M, Takemoto T. 1986. Zedoarol, 13-hydroxygermacrone and  curzeone,  three  sesquiterpenoids from  Curcuma  zedoaria.  Phytochemistry. 25(6):1351-1353. doi:10.1016/S0031-
9422(00)81288-1
Singh  S,  Kumar  JK,  Saikia  D,  Shanker  K, Thakur JP, Negi AS, Banerjee S. 2010. A bioactive labdane diterpenoid from Curcuma  amada and  its  semisynthetic analogues as antitubercular agents. Eur J
Med Chem. 45: 4379-4382. DOI: 10.1016/j.ejmech.2010.06.006.
Singh  P,  Singh  S,  Kapoor  IPS,  Singh  G, Isidorov V, Szczepaniak L. 2013. Chemical composition  and  antioxidant  activities  of essential oil and oleoresins from Curcuma zedoaria  rhizomes,  part-74. Food  Biosci . 3:42-48. doi:10.1016/j.fbio.2013.06.002
Sugita  P,  Firdaus  SO,  Ilmiawati  A,  Rahayu DUC. 2018. Curcumenol : A Guaiane-Type Sesquiterpene  from  Indonesian Curcuma heyneana Rhizome  and  it’s  Antibacterial Activity  Towards Staphylococcus  Aureus and Escherichia Coli . J Chem Pharm Res . 10(6):68- 75.
Thainaa P., P. Tungcharoena, M. Wongnawaa, W.  Reanmongkol,  S.  Subhadhirasakul. 2009. Uterine relaxant effects of Curcuma aeruginosa Roxb. rhizome extracts.
Journal  of  Ethnopharmacology 121:  433 – 443. DOI:10.1016/j.jep.2008.10.022
Vairappan, C. S., Elias, U. M., Ramachandram, T.  R.  and  Kamada,  T.  2013.  Secondary metabolites  from  rhizome  of Curcuma caesia Roxb.  (Zingiberaceae). Biochem. Syst. Ecol. 48, 107-110
Wahab I, Blagojevic P, Radulovic N, Boylan F.
2011.  Volatiles  of Curcuma  mangga Val. and  Zijp  (Zingiberaceae)  from  Malaysia. Chemistry & Biodiversity. 8(1): 2005-2014.
Wang D, Huang W, Shi Q, Hong C,  Cheng  Y,
Ma Y, Qu H. 2008. Isolation and cytotoxic activity of compound from the root tuber of Curcuma wenyujin . Natural Product Communications. 3(6): 861-864.
Wong  KC,  Chong  TC,  Chee  GS.  1999. Essential oil of Curcuma mangga Val. And van  Zijp  rhizomes. J  Essent  Oil  Res. 11: 349-351.
Yang  FQ,  Li  SP,  Chen  Y, et  al. 2005. Identification  and  quantitation  of  eleven sesquiterpenes  in  three  species  of

## Sugita et al.
Curcuma  rhizomes  by  pressurized  liquid extraction  and  gas  chromatography-mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal . 39(3- 4):552-558. doi:10.1016/j.jpba.2005.05.001
Yuandani, Y. and Yuliasmi, S. 2018. “CURCUMINOIDS ANALYSIS IN Curcuma  mangga RHIZOMES”, Asian Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research , 11(13): 129 –131. doi:
10.22159/ajpcr.2018.v11s1.26586.
Yuandani, Yuliasmi S, Satria D, Dongoran RF, Sinaga  MS,  Merpaung  NHA.  2019. Correlation  between  the  phytochemical constituents  of Curcuma  mangga and  its immunomosulatory  effect. RASAYAN  J Chem. 12(1): 1-6. Doi:
10.31788/RJC.2019.1215050.
Yurleni.  2018.  Penggunaan  beberapa  metode ekstraksi  pada  rimpang Curcuma untuk memperoleh komponen aktif secara kualitatif. Biospecies. 11(1): 48-56.
Zeng JH, Xu GB, Chen X. 2009. Application of the chromatographic fingerprint for quality control  of  essential  oil  from  GuangXi Curcuma  kwangsiensis . Med  Chem  Res . 18(2):158-165.  doi:10.1007/s00044-  008- 9115-2
Zhang,  C.,  Ji,  J.,  Ji,  M.  and  Fan,  P.  2015.
Acetylcholinesteraseinhibitors and compounds promoting SIRT1
expressionfrom  Curcuma  xanthorrhiza. Phytochemistry Letters . 12: 215 –219.
Zhang,  Y.;  T.  Xiaoping;  Tu  Xiao;  L.  Fei; Wang.Gaoxue. 2020. Efficacy
and antiparasitic  mechanism  of  curdione  from Curcuma  zedoaria  against  Gyrodactylus kobayashii in goldfish. Aquaculture, 523(), 735186 – . doi:10.1016/j.aquaculture.2020.735186 Zhu J, Lower-Nedza AD, Hong M, Jiec S, Wang Z,  Yingmao  D,  Tschiggerl  C,  Bucar  F, Brantner AH. 2013. Chemical composition and antimicrobial activity of three essential oils  from Curcuma  wenyujin . Nat  Prod Commun . 8(4):523 –526.
doi:10.1177/1934578x1300800430.