## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETIL ASETAT DAUN SUKUN
( Artocarpus altilis ) METODE PERKOLASI TERHADAP Pseudomonas aeroginusa
Yusianti Silviani 1 , Ardi Prian Nirwana 2
STIKES Nasional Email: yusianti.silviani@gmail.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  daya  hambat  ekstrak  etil  asetat  daun sukun  metode  perkolasi  dan  konsentrasi  optimal  ekstrak  daun  sukun  yang  dapat menghambat Pseudomonas  aeroginusa .  Metodologi  penelitian  yang  digunakan adalah analitik eksperimental dengan pendekatan post tes  with control. Penelitian ini dilakukan  pada  Juli  2018  sampai  dengan  Mei  2019  di  Laboratorium  Bakteriologi STIKES  Nasional.  Analisis  data  menggunakan  uji  Kruskal  Wallis  dengan  uji  lanjut Man Whitney. Hasil penelitian menunjukkan diameter zona hambat ektrak etil asetat daun  sukun  terhadap P  aeroginusa metode  perkolasi  berturut  turut  pada  konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% adalah .9; 12 mm; 13.17 mm; 14.17 mm; 15.67 mm, hasil  uji  Kruskal  Wallis  didapati  nilap  p  0.000,  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa ektrak  etil  asetat  daun  sukun  mampu  menghambat  pertumbuhan Pseudomonas aeroginusa dengan konsentrasi optimal 100%.
Kata kunci : Pseudomonas aeroginusa , Artocarpus altilis, perkolasi

## ABSTRACT
The  research  about  Antibacteria  of  Percolation  Etyl  Acetate  of  Breadfruit  Leaf  Extract  to inhibit Pseudomonas aeroginusa had finished.. This study is an analytic experimental design and  post  test  with  control.  The  research  was  done  during  Juli  2018  to  May  2019  at Bacteriological Laboratory of STIKES Nasional. Hypothesis test is done with Kruskal Wallis, post hoc test followed by Man Whitney. The result of this study has been found radical zone diameter  in  20%,  40%,  60%,  80%  and  100%  concentration  are  9  mm;  12  mm;  13.17  mm; 14.17  mm;  15.67  mm.  The  result  Kruskal  Wallis  test  is  found  to  be  signicant,  which  means Artocarpus altilis  leaf ethyl acetate extract are able to inhibit the growth of  P. aeroginusa with optimum concentration is 100%.
Keywords : Pseudomonas aeroginusa , Artocarpus altilis, percolation method

## 1. PENDAHULUAN
Infeksi  nosokomial  merupakan  infeksi yang terjadi pada pasien-pasien yang sedang dalam  proses  perawatan  di  rumah  sakit (Tombokan.,  dkk,  2016).  Infeksi  ini  baru timbul  3  x  24  jam  pada  saat  pasien  dirawat di  rumah  sakit  (Nugraheni,  dkk,  2012). Menurut data Prevalensi  kejadian  infeksi  nosocomial  di Rumah  Sakit  Pendidikan  Indonesia  angka kejadian infeksi nosocomial adalah sebesar 6 -  16  %,  dengan  rata-rata  9,8%  (Baharutan,
dkk.,  2015). Pseudomonas  aeroginusa menyebabkan infeksi nosocomial sebesar 10 – 20%. Sebanyak 4 – 60% kasus luka bakar dari  infeksi  nosocomial  yang  disebabkan P aeroginusa mengalami  kematian  (Kamaria, dkk, 2016).
Penggunaan  antibiotic  secara  terus menerus  dapat  meningkatkan  kemungkinan terjadinya  resistensi  (Wahyudi  dan  Silviani, 2014).  Salah  satu  alternatif  herbal  yang mempunyai aktivitas antibakteri adalah daun sukun  ( Artocarpus  altilis ).  Daun  sukun
mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin, steroid dan tanin (Dwi, 2011).
Metode perkolasi adalah metode
ekstraksi dengan mengalirkan pelarut secara terus  menerus  pada  serbuk.  Menurut Handayani  (2016)  perkolasi  dapat  menarik senyawa  metabolit  sekunder  lebih  baik  dari maserasi.

## 2. METODE PENELITIAN
Design  penelitian  ini  adalah  analitik eksperimental  dengan  pendekatan posttest with  control .  Tempat  pengambilan  sampel dilakukan di Desa Sawahan, Jaten, Karanganyar. Tempat penelitian dilaksanakan  di  laboratorium  Farmokologi dan Bakteriologi STIKES Nasional pada Juli 2018 sampai dengan Februari 2019.
Populasi  penelitian  ini  adalah  daun sukun  yang  diambil  dari  Desa  Sawahan, Jaten,  Karanganyar  secara Quota Sampling dengan  kriteria  sampel  adalah  daun  muda yang  segar  dengan  urutan  ke  3-4  dari  ujung cabang  daun  dengan  warna  hijau  tua (Retnaningsih, 2016).
Uji daya hambat ekstrak etil asetat A. artilis dilakukan  dengan  metode disk  diffusion . Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah ciprofloxaxin,  sedangkan  kontrol  negatif menggunakan Dimetil Sulfooksida (DMSO). Diameter  zona  hambat  dianalisis  dengan menggunakan Uji Kruskal Walis.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Karakteristik  bakteri Pseudomonas aeruginosa
Hasil  pengecatan  gram P.  aeroginusa ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Berdasarkan hasil  karakterisasi  kultur  murni  bakteri Paeruginosa didapatkan  hasil  pada pemeriksaan  mikroskopis  yaitu  bakteri Gram  (-)  berbentuk  batang  berwarna merah (Tabel 1.). Alkohol yang
terkandung dalam gram C akan meningkatkan  porositas  dinding  sel,
dengan  melarutkan  lapisan  lipid  lapisan luar,  sebagai  akibatnya  kompleks  kristal violet  pada  peptidoglikan  akan  terlepas dan sel menjadi tidak berwarna. Sel yang
tidak  terwarnai  akan  menyerap  safranin, sehingga  gram  negatif  akan  berwarna merah (Rahayu, Gumilar, 2017).
Tabel  1.  Morfologi  bakteri Pseudomonas aeruginosa pada pengecatan gram
b. Pengamatan  koloni  pada  media Mac Conkey
Hasil  pengamatan  koloni  pada  media Mac Conkey tergambar dalam tabel 2.
Tabel 2. Morfologi bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac conkey
c. Uji biokimia
Hasil  uji  biokimia P.  aeroginusa adalah sebagai berikut:
Tabel  3.  Hasil  uji  biokimia  bakteri

## Pseudomonas aeruginosa
NO UJI HASIL 1 KIA - Fermentasi - H2S - Gas Al/al - - 2 SIM  H2S  Indol  Motil - - + 3 Urea - 4 Citrat + 5 MR/VP -/-
No Keterangan Hasil 1 Bentuk Batang 2 Susunan Tersebar 3 Cat Gram 4 Sifat cat Gram negatif 5 Warna sel Merah 6 Background Merah muda No Keterangan Hasil 1 Bentuk Bulat 2 Ukuran 1  mm 3 Elevasi Cembung 4 Tepian Rata 5 Inti Ada 6 Warna Koloni Coklat 7 Warna Media Coklat muda
6 PAD - 7 Glukosa - 8 Maltosa - 9 Manitol - 10 Sakarosa - 11 Laktosa - d. Skrining  fitokimia  ekstrak  etil  asetat daun sukun ( A. altilis )
Hasil  skrining  fitokimia  pada  ekstrak  etil asetat  pada  daun  sukun  tergambar  dalam tabel 4.
Tabel  4.  Hasil  pemeriksaan  uji  fitokimia ekstrak etil asetatdaun A. altilis No Senyawa Aktif Hasil Keterangan 1. Tanin + Terbentuk warna biru kehitaman 2. Flavonoid + Terbentuk warna coklat orange 3. Saponin + Timbul busa setinggi 1 cm  selama 5 menit
Hasil uji fitokimia yang telah dilakukan  (Tabel  4),  ekstrak  etil  asetat daun  sukun  ( A  altilis )  metode  perkolasi positif  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yaitu  flavonoid,  tanin  dan saponin.  Etil  asetat  dapat  menarik senyawa fitokimia yang bersifat polar dan non  polar  (Putri,  2013).  Pemanasan  pada suhu 40 o C selama lebih dari 72 jam akan menurunkan  kadar  flavonoid.  (Khanal et al., 2010). Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak etil asetat daun sukun ( Artocarpus altilis ) memiliki daya
antibakteri.  Tanin  merupakan  metabolit sekunder yang kompleks,
sukar dipisahkan, sukar mengkristal dan mengendap  pada  protein  dari  larutannya (Malangi, 2012). Tanin merupakan senyawa polifenol yang terdiri dari gugus hidroksi  dan  karboksil  dengan  berat molekul  besar  (Sari  dkk,  2015)    Tanin
bekerja sebagai antibakteri dengan menginaktivasi  enzim,  mempresipitatkan protein, dan menginaktivasi materi genetik  yang  berada  pada  sel  bakteri (Sulastrianah  dkk.,  2014).  Toksisitas tanin  yaitu  pembentukan  ion  logam    dari tanin  yang  dapat  merusak  membran  sel (Ngajow, 2013).
Flavonoid  merupakan  senyawa  fenol yang dapat ditemukan pada semua bagian tumbuhan  baik  akar,  daun  maupun batang, senyawa ini terdiri dari dua cincin benzene tersubstitusi, disambungkan oleh rantai alifatik tiga karbon
(Wahyulianingsih,  dkk,  2016).  Interaksi anatara  flavonoid  dan  DNA  akan menyebabkan  kerusakan  permiabilitas dinding  sel,  mikrosom,  dan  lisosom (Bempa,  dkk,  2016).  Saponin  merupakan senyawa metabolit sekunder yang menyerupai  sabun,  sifat  ini  disebabkan karena  saponin  struktur  saponin  yang terdiri  dari  gula  yang  berikatan  dengan aglikon yang memiliki rantai steroid atau triterpenoid  (Fahrunnida  dan  Pratiwi, 2015).    Saponin  merusak  membrane  sel dengan cara mengganggu stabilitas membrane  sel,  hal  ini  menyebabkan cairan intracellular keluar dan sel menjadi lisis (Kurniawan dan Aryana, 2015).
Daya  hambat  ekstrak  etil  asetat  daun sukun  dapat  dilihat  pada  Gambar  1. Ekstrak  etil  asetat  daun  sukun  ( A  altilis ) metode  perkolasi  mampu  menghambat pertumbuhan Pseudomonas  aeruginosa , semakin tinggi konsentrasi ekstrak, semakin  besar  daya  hambat  yang dihasilkan.  Pada  penelitian  ini,  kontrol positif yang digunakan adalah ciprofloxacin  5  µg  dan  kontrol  negatif DMSO.
Gambar  1.  Diameter  Rata-rata  Daya Hambat  Ekstrak  Etil  Asetat A  altilis terhadap P. aeroginusa .
Kontrol  positif  ciprofloxacin  5  µg mampu membentuk diameter zona hambat  radikal  dengan  rata-rata  sebesar 36 mm sehingga dapat dikatakan sensitif. Akan  tetapi  pada  kontrol  negatif  DMSO tidak  menunjukkan  terbentuknya  zona hambat  karenaDMSO  tidak  mengandung senyawa antibakteri.
Data  hasil  uji  aktivitas  antibakteri ekstrak etil asetat daun sukun ( Artocarpus  altilis )  metode  perkolasi terhadap  pertumbuhan P  aeruginosa tersebut kemudian diolah secara statistik
Tabel 5. Hasil uji normalitas data KONS ENTR ASI Kolmogorov- Smirnov a Shapiro-Wilk Statis tic df Sig. Statis tic df  Sig. ZONA_ HAMB AT 60% .492 6  .000  .496 6  .000 80% .492 6  .000  .496 6  .000 100% .407 6  .002  .640 6  .001
Uji  normalitas  data  menggunakan
Saphiro-Wilk pada  didapatkan  nilai signifikan  p  <  0,05  sehingga  dapat dikatakan  bahwa  data  terdistribusi  tidak normal.
Tabel 6. Hasil uji Kruskal-Wallis
Setelah dilakukan uji alternatif Kruskal-Wallis, didapatkan nilai signifikan  sebesar  0.000  maka  dapat disimpulkan  ekstrak  etil  asetat  daun sukun ( A altilis ) metode perkolasi mampu
menghambat  pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa. Kemudian  dilanjutkan  uji Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok mana yang memberikan perbedaan paling bermakna.
Tabel  7.  Hasil  uji Mann-Whitney zona radikal
Keterangan :  Huruf  yang  berbeda  di belakang angka menunjukkan beda signifikan  berdasarkan  uji Mann  – Whitney α 0,05
P  aeroginusa merupakan  bakteri pathogen oppurtunistik, bakteri ini resisten  terhadap  berbagai  antibiotik, diantaranya  amoxixilin,  kloramphenicol dan  eritromicin  (Putri,  dkk,  2014). Resistensi P aeroginusa terhadap antibiotik dipengaruhi kemampuanya dalam  menghasilkan  eksopolisakarida biofilm. Resistensi P aeroginusa terhadap berbagai  antibiotik  diakibatkan  proses mutasi,  tranfer  materi  gen  resisten  yang menyebabkan P  aeroginusa mampu memompa keluar antibiotik,
menginaktivasi  antibiotik  dan  mengubah target antibiotik (Gunardi, 2017). Berdasarkan  uji  lanjut  uji Mann- Whitney (Tabel 7) menunjukan konsentrasi optimum ekstrak etil asetat A. altilis adalah 100%. Konsentrasi optimum  adalah  kosentrasi  terendah menunjukkan  tidak  adanya  perbedaan siqnifikan  dengan  konsentrasi  tertinggi. Penelitian ini mendukung penelitian yang telah dilakukan oleh Retnaningsih (2016), Bempa  dkk.,  (2016)  bahwa  ekstrak  daun sukun  ( A.  altilis )  dapat  menghambat pertumbuhan Streptococcus mutans. ZONA_HAMBAT Chi-Square 34.462 df 5 Asymp. Sig. .000
Konsentrasi Rata-rata zona hambat (mm) Kontrol (-) 6 a 20% 9 b 40% 12 c 60% 13,17 d 80% 14,17 e 100% 15,67 f Kontrol (+) 36,33 g
4. Kesimpulan
Kesimpulan  dalam  studi  ini  adalah  ektrak etil  asetat  daun  sukun  mampu  menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeroginusa dengan konsentrasi optimal 100%.

## REFERENSI
Baharutan,  A.  2015.  Pola  bakteri  penyebab infeksi nosokomial pada ruang perawatan  intensif  anak.  E-Biomedik (eBm), Vol. 3, No.1. pp. 412–19.
Bempa,  S.,  Fatimawali  dan  Parengkuan,  W.
(2016).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak A. altilis ( Artocarpus  altilis )  Terhadap
Pertumbuhan Streptococcus mutans. Jurnal  Ilmiah  Farmasi Vol.  5,  No. 4, pp 1-9 Gunardi, D.W. 2017. Mekanisme Biomolekuler  Pseudomonas  aeroginusa dalam  Pembentukan  Biofilm  dan  Sifat Resistensi Terhadap Antibiotika. Naskah  Ilmiah. Fakultas  Kedokteran Universitas  Kristen  Krida  Wacana, Jakarta
Fahrunnida,  Pratiwi,  R.  2015.  Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.). Prosedding    Seminar  Nasional Konservasi  dan  Pemanfaatan  Sumber Daya Alam 2015
Handayani,  I.A.  Eliyanoor,B.  Ulva,  D.D. 2016.  Perbandingan  Kadar  Flavonoid Ekstrak Buah Mahkota Dewa ( Phaleria macrocarpa [Scheff]  Boerl)  Secara Remaserasi  dan  Perkolasi  . Jurnal Ilmiah Ibnu Sina Vol. 1, No. 1.
Kamaria,  P.A.  Aring,  B.J.  Sinha,  M.  2016. Incidence of Multidrug Resistant
Pseudomonas Aeruginosa Isolated From
Burn  Patients  Tertiary  Care  Hospital, Jamnagar,  Gujarat,  India. IOSR  Journal of  Dental  and  Medical  Sciences (IOSR- JDMS) . Vol 15, No 7.
Kurniawan, B. Aryana, W.F. 2015. Binahong  ( Cassia  alata L)  as  Inhibitor
of Escherichia coli Growth. J Majority Vol. 4, No. 4.
Malangi.  L.P,  Sangi,  M.S,  Paendong,  J.J.E. 2012.  Penentuan  Kandungan  Tanin  dan Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Biji Buah Alpukat ( Persea americana Mill.). Jurnal MIPA UNSTRAT ONLINE Vol. 1. No. 1.
Ngajow, M. Abidjuju, J. Kamu, V.S. 2013. Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap Bakteri  Staphylococcus aureus Secara Invitro. Jurnal MIPA UNSTRAT Vol. 2, No. 2. pp 128 - 132
Nugraheni,  R.  Suhartono.  Winarni,  S.  2012.
Infeksi Nosokomial di RSUD Setjonegoro Kabupaten Wonosobo. Media Kesehatan Masyarakat Indonesia. Vol. 11, No 1.
Putri,  W.  S.,  Warditiani,  N.K.,  dan Larasanty,  L.  P.  F.  2013.  Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat Kulit Buah Manggis  ( Garcinia  mangostana L.). Artikel  Ilmiah .  Universitas  Udayana,
Bali.
Rahayu, P. Winiati. 2000. Aktivitas Antimikrobia Bumbu Masakan Tradisional Hasil Olahan Industri
Terhadap  Bakteri  Patogen  dan  Perusak. Buletin  Teknologi  dan  Industri  Pangan . Vol. 11, No. 2.
Retnaningsih,  A.  2016.  Uji  Daya  Hambat
Ekstrak A. altilis Terhadap
Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli Dan Shigella  dysenteriae. Jurnal Kebidanan Vol. 2, No. 2.
Sari,  P.P,  Rita,  W.S,  Puspawati,  N.M. 2015.Identifikasi  dan  Uji  Aktivitas Senyawa  Tanin  dari  Ekstrak  Daun Trembesi( Samanea  saman (Jacq.) Merr) sebagai Antibakteri Escherichia  coli  (E.  coli).Jurnal Kimia . Vol. 9, No.1.
Sulastrianah, Imran, dan Fitria, E, S. (2014). Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Sirsak  ( Annona  muricata L.)  dan Daun Sirih ( Piper betle L. ) Terhadap Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli. Artikel Ilmiah.Universitas Halu Oleo: Kendari.
Tombokan,  C.  Waworuntu,  O.  Buntuan  V.
2016.  Potensi  Penyebaran  Infeksi
Nosokomial  Di  Ruangan  Instalasi Rawat  Inap  Khusus  Tuberkulosis (Irina  C5)  BLU  RSUP  PROF.  DR. R.D.  Kandou  Manado. Jurnal  e- Biomedik . Vol. 4, No. 1. Wahyudi, D. Silviani, Y. 2015. Penghambatan Produksi Eksoprotease  Dan  Biofilm  Pada Pseudomonas  aeruginosa Ekstrak Apium graveolens L. Jurnal
KesMasDa . Vol. 6, No. 2.
Wahyulianingsih, S. H.dan Abdul, M. 2016. Penetapan  KadarFlavonoid  Total Ekstrak  Daun  Cengkeh  ( Syzygium aromaticum (L.)  Merr  &  Perry). Jurnal  Fitofarmaka  Indonesi.Vol.  3, No. 2.