Bali Medika Jurnal . Special Issue
DOI: https://doi.org/10.36376/bmj.v9i2
Bali Medika Jurnal Vol 9 No 2, 2022: 145-156
Bali Medika Jurnal . Special Issue
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License. (CC BY 4.0)
Submitted 22 October 2022 Reviewed 26 October 2022 Accepted 28 December 2022

## Pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap c-reaktive protein dan sel penanda inflamasi

## The effect of biotin concentration variations on c-reactive protein and inflammation marker cells
Anak Agung Ayu Eka Cahyani 1* , Budi Santosa 2 , Ana Hidayati Mukaromah 3
Program Studi Magister Sains Laboratorium Medis, Universitas Muhammadiyah Semarang ekacahyanii@gmail.com

## ABSTRAK
Dislipidemia dapat menyebabkan aterosklerosis sehingga risiko penyakit jantung koroner, penyakit  kardiovaskular  atau Cardiovascular  Disease (CVD)  dan  stroke  meningkat. Peningkatan  kadar  C-Reaktive  Protein  (CRP)  serta  munculnya  sel  penanda  inflamasi menjadi  penanda  dalam  tahapan  perkembangan  lesi  awal  aterosklerosis.  Pemberian suplemen  seperti  penambahan  biotin  perlu  diberikan  untuk  menjaga  kadar  lipid  dalam darah.  Biotin  disebut  juga  vitamin  B7  atau  vitamin  H  yaitu  vitamin  larut  dalam  air, bertindak  sebagai  kelompok  prostetik  karboksilase  dalam  beberapa  jalur  metabolisme. Biotin  dinyatakan  vitamin  yang  aman,  asupan  dengan  kadar  300  kali  lipat  dari  normal terbukti tidak beracun. Penelitian ini dilakukan untuk melihat pengaruh pemberian variasi konsentrasi  biotin  terhadap  kadar  C-Reaktive  Protein  (CRP)  dan  sel  penanda  inflamasi pada tikus wistar dengan resiko dislipidemia. Tikus wistar jantan usia 8 minggu dengan berat awal 150-200 gram diadaptasi selama 7 hari, diberi pakan standar dan air minum ad libitum . Sampel setelah adaptasi, dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok kontrol  negatif
* How to Cite
Cahyani, A. E., Santosa, B. ., & Mukaromah, A. H. . Pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap c-reaktive protein dan sel penanda inflamasi : The effect of biotin concentration variations on c-reactive protein and inflammation marker cells. Bali Medika Jurnal, 9(2). https://doi.org/10.36376/bmj.v9i2.306
diberikan  pakan  standar, kelompok  kontrol  positif diberikan pakan dengan diet tinggi lemak.  Kelompok  perlakuan  1,  2  dan  3  diberi  pakan  diet  tinggi  lemak  dan  dosis  biotin berturut-turut  1,232  mg/kg;  68,39  mg/kg  dan  97,72  mg/kg  selama  6  minggu.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada perbedaan sel penanda inflamasi dengan uji One Way ANOVA (p  ≤  0,05),  namun  kadar  CRP  secara  kualitatif  tidak  menunjukkan  perbedaan. Simpulan  ada  pengaruh  pemberian  variasi  konsentrasi  biotin  terhadap  sel  penanda inflamasi pada tikus wistar dengan resiko dislipidemia.
Kata Kunci : Dislipidemia, CRP, Sel Penanda Inflamasi, Biotin

## ABSTRACT
Dyslipidemia  can  cause  atherosclerosis  so  that  the  risk  of  coronary  heart  disease, cardiovascular  disease  (CVD)  and  stroke  increases.  C-Reaktive  Protein  (CRP)  and appearance of inflammatory marker cells involved in the developmental stages of the early atherosclerosis lesions. Supplementation of biotin needs to be given to maintain lipid levels in the blood. Biotin, also called vitamin B7 or vitamin H, is a water soluble vitamin, acting as a prosthetic carboxylase group in several metabolic pathways. Biotin is declared a safe vitamin,  intake  with  levels  300  times  than  normal  level  is  proven  to  be  non-toxic.  This research  was  conducted  to  see  the  effect  of  varying  the  concentration  of  biotin  on  C- Reaktive Protein (CRP) levels and inflammatory marker cells in Wistar rats with a risk of dyslipidemia.  Eight-week-old  male  Wistar  rats  with  an  initial  weight  of  150-200  grams were adapted for 7 days, given standard feed and drinking water ad libitum. Samples after adaptation  were  divided  into  5  groups.  The  negative  control  group  was  given  standard feed, the positive control group was given feed with a high-fat diet. Treatment groups 1, 2 and 3 were given a high-fat diet and a dose of biotin 1.232 mg/kg; 68.39 mg/kg and 97.72 mg/kg over a periode of 6 weeks. The results showed that there was a significant difference in the results of inflammatory marker cells with the One Way ANOVA test (p ≤ 0.05) but there was not on CRP qualitative. In conclusion, there is an effect of giving biotin variant concentration on inflammatory marker cells in rat with a risk of dyslipidemia.
Keywords : Biotin, CRP, Dyslipidemia, Inflammatory Marker Cells.

## PENDAHULUAN
Dislipidemia  dapat  menyebabkan  aterosklerosis  sehingga  risiko  penyakit jantung  koroner, penyakit kardiovaskular atau Cardiovascular Disease (CVD) dan stroke  meningkat  (Anneke  et  al.,  2018  &  Kopin  et  al.,  2013).  Pada  tahun  2016 diperkirakan  17,9  juta  orang  meninggal  karena  CVD,  mewakili  31%  dari  total kematian  global  (WHO,  2017).  Aterosklerosis  merupakan  bercak  noduler arteriosklerosis yang diawali perlekatan platelet dan influks lipoprotein (Ismawati, Asni,  and  Hamidy  2012). Low-density  lipoproteins (LDL) termodifikasi  masuk berlebihan  dan  akumulasi  ester  kolesterol  dalam  makrofag  intima  menyebabkan terbentuknya sel busa (Chistiakov et al. 2017; Maramis and Kaseke 2014).
Adanya  sel  busa  atau foam  cell menjadi  penanda  penting  pada  tahapan perkembangan lesi dari awal hingga terjadi plak lanjutan aterosklerosis (Chistiakov et  al.  2017).  Transisi  arteri  normal  menjadi  lesi  aterosklerosis  bergantung  pada jumlah  leukosit  yang  menginisiasi  dan  kemudian  melanjutkan  proses  inflamasi
secara  terus  menerus.  Meningkatnya  sel  penanda  inflamasi  yaitu  jumlah  leukosit dalam arteri menjadi penanda aterosklerosis awal. Dalam lesi aterosklerotik pada manusia  dan  hewan  percobaan  ditemukan C-reactive  protein (CRP)  yang terlokalisasi dengan LDL dan makrofag yang terlibat dalam modulasi patogenesis aterosklerosis  (Singh  and  Agrawal  2019).  CRP  adalah  protein  inflamasi  akut (Koenig  2013;  P.V.  and  D.M.  2011)  yang  meningkat  hingga  1.000  kali  lipat  di tempat infeksi atau peradangan (Sproston and Ashworth 2018). Kadar plasma CRP meningkat dari sekitar 1 μg/mL menjadi lebih dari 500 μg/mL dalam 24-72 jam dari kerusakan jaringan parah (Sproston and Ashworth 2018).
Laporan  Riset  Kesehatan  Dasar  Kementerian  RI  (Riskesdas)  tahun  2018 menunjukkan  bahwa  28,8%  dari  seluruh  penduduk  di  Indonesia  memiliki  kadar kolesterol  total  meningkat  yang  diperoleh  dari  gabungan  penduduk  kategori borderline (nilai kolesterol total 200-239  mg/dl) dan tinggi (nilai kolesterol total >240  mg/dl). Usaha-usaha  yang  dapat  dilakukan  dalam  mencegah  dislipidemia antara  lain  mengurangi  asupan  asam  lemak  jenuh,  meningkatkan  asupan  serat, mengurangi asupan karbohidrat dan alkohol, meningkatkan  aktivitas fisik sehari- hari,  mengurangi  berat  badan  berlebih  serta  menghentikan  kebiasaan  merokok (PERKI,  2013). Satuan  Tugas  Pelayanan  Preventif  Amerika  Serikat  ( The  U.S. Preventive Services Task Force ) menunjukkan modifikasi gaya hidup, seperti diet dan aktivitas fisik, tidak dapat mengurangi kadar lipid secara substansial.
Pemberian suplemen tambahan seperti penambahan biotin perlu diberikan untuk  menjaga  kadar  lipid  dalam  darah.(Asvini  et  al.,  2016)  Biotin  disebut  juga dengan  vitamin  B7  atau  vitamin  H  yaitu  vitamin  larut  dalam  air  (Depkes,  1979) yang  bertindak  sebagai  kelompok  prostetik  karboksilase  dalam  beberapa  jalur metabolisme  (Patel  et  al.,2017).  Menurut  Ardabilygazir  (2018),  biotin  adalah kofaktor enzyme karboksilase yang terlibat dalam sintesis asam lemak dan produksi energi. Food  and  Nutrition  Board  (1998) memberikan  referensi asupan  vitamin harian untuk orang dewasa yaitu 30 ug dan meningkat pada ibu menyusui yaitu 35 ug Biotin dinyatakan vitamin yang aman dan asupan dengan kadar 300 kali lipat dari normal terbukti tidak beracun. (Asvini et al., 2018 & Said, 2011) Biotin secara alami  dapat  ditemukan  dalam  makanan  antara  lain  kacang  almond,  kacang- kacangan, biji-bijian, nasi beras merah, dan kuning telur (Patel et al., 2017).
Biotin  mampu  menurunkan  kadar  TG  dan Very  Low  Density  Lipoprotein (VLDL) dalam plasma darah pada pasien pasien  diabetes tipe 2 dan nondiabetes dengan  hipertrigliseridemia  (Revilla-Monsalve  et  al.,  2006). Kombinasi  obat Atorvastatin  dan  biotin  bagi  pasien  dislipidemia  menunjukkan  hasil  penurunan kadar kolesterol total, kolesterol LDL dan trigliserida (Asvini et al., 2018). Pasien dengan  dislipidemia  sekunder  yang  telah  mengonsumsi  Atorvastatin  secara  rutin 20mg/hari diberikan tambahan biotin menunjukkan hasil baik pada rasio kolesterol total  :  kolesterol  HDL  ≤  3.5  pada  minggu  ke-empat  dan  ke-enam  (Asvini  et al.,2016). Biotin yang digunakan dalam bentuk tablet dengan dosis       5 mg (Asvini et al., 2018; Revilla-Monsalve et al. 2006 & Asvini et al., 2016).
Pemberian  biotin  sebagai  suplemen  pada  tikus  wistar  dipertimbangkan sebagai  langkah  preventif  terhindar  dari  dislipidemia.  Diet  tinggi  lemak  yang mengandung  lemak  babi  diberikan  pada  tikus  wistar  dapat  menyebabkan peningkatan kadar kolesterol total dan LDL hingga terbentuk sel busa. Penelitian
ini dilakukan untuk melihat pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap kadar CRP dan sel penanda inflamasi pada tikus wistar dengan resiko dislipidemia. Variasi  konsentrasi  biotin  mengacu  pada  penelitian  sebelumnya  (Larrieta  et  al., 2010; Boone-Villa et al., 2015; Aguilera-Méndez et al., 2012 & Moreno-Méndez et al., 2019) baru dapat menurunkan kadar TG hingga 35% pada mencit (Larrieta et al., 2010) sehingga penelitian ini konsentrasi biotin dinaikkan dengan harapan hasil lebih baik dengan konversi dosis hewan coba.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium  Hewan  Coba  Universitas Muhammadiyah  Semarang.  Pengukuran  kadar  serum  dilakukan  di  Balai Laboratorium  Kesehatan dan  Pengujian  Alat  Kesehatan Provinsi Jawa  Tengah. Pemeriksaan  sel  penanda  inflamasi  dilakukan  di  laboratorium  Patologi  Anatomi Akurat  Semarang.  Usulan  penelitian  telah  disetujui  oleh  Komite  Etik  Penelitian Kesehatan Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Muhammadiyah Semarang No:  382/KEPK-FKM/UNIMUS/2020.  Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Juli- September tahun 2020. Penelitian berjenis experimental dengan Post Randomized Controlled  Group  Design terdiri dari   1 kelompok kontrol negatif, 1 kelompok kontrol positif, 3 kelompok uji. Penentuan besar sampel menggunakan ketentuan WHO  (2001),  jumlah  minimal  sampel  per  kelompok  adalah  5  ekor  tikus.  Pada setiap kelompok ditambah satu ekor tikus sehingga didapatkan total besar sampel sebanyak  30  ekor  tikus.  Metode  pemilihan  sampel  menggunakan simple  random sampling .
Tikus  wistar  jantan  usia  8  minggu  dengan  berat  awal  150-200  gram diadaptasi  terlebih  dahulu  selama  7  hari,  diberi  pakan  standar  dan  air  minum  ad libitum. Sampel setelah dilakukan adaptasi, dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok kontrol    negatif  diberikan    pakan    standar,  kelompok    kontrol    positif  diberikan pakan  dengan  diet  tinggi    lemak  dan  air  minum.  Diet  tinggi  lemak  untuk  pakan dibuat  dengan  mencampurkan  1000  gram  pakan  ayam  AD  II  dengan  100gram lemak babi. Pakan yang diberikan 40 mg/hari/tikus. Biotin produksi NATROL LLC Chatsworth, USA dalam bentuk tablet 10.000 mcg, digerus, diberikan pada tikus melalui sonde lambung. Kelompok perlakuan 1 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin sebanyak 1,232 mg/kg berat badan tikus. Kelompok perlakuan 2 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin sebanyak 68,39 mg/kg berat badan tikus. Kelompok  perlakuan  2  diberi  pakan  diet  tinggi  lemak  dan  dosis  biotin  sebanyak 97,72 mg/kg berat badan tikus. Dosis suplementasi biotin berdasarkan penelitian sebelumnya dengan konversi dari mencit – tikus, dengan penambahan variasi dosis sebesar 15% (Larrieta et al., 2010; Boone-Villa et al., 2015; Aguilera-Méndez et al., 2012 & Moreno-Méndez et al., 2019).
Pengambilan  sampel  darah  dilakukan  pada  minggu  ke-6  penelitian.  Tikus dipuasakan  selama  8-10  jam  selanjutnya  dilakukan  terminasi  dengan  anastesi menggunakan  Ketamine-xylazine  75-100  mg/Kg  dan  5–10  mg/Kg  secara intra peritoneal (IP) menggunakan metode cervical  dislocation. Darah diambil sekitar 2-3  ml  diambil  dari  mata,  diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  kamar.  Darah selanjutnya  disentrifuge  selama  10  menit  pada  kecepatan  3000  rpm  hingga
diperoleh  serum.  Pemeriksaan  kadar  CRP  menggunakan  metode  kualitatif. Pemeriksaan  sel  penanda  inflamasi  pada  aorta  tikus  dilakukan  dengan  memilih potongan arcus aorta, dicat dengan Oil Red O dan HE sesuai prosedur dalam Koss. Hasil  diperiksa  dibawah  mikroskop  pembesaran  100X  untuk  mencari  aorta  yang jelas lapisannya lalu dihitung dalam 20 lapangan pandang pembesaran 1000X untuk identifikasi dan penghitungan sel penanda inflamasi. Pengulangan dilakukan 3 kali pada masa yang berbeda oleh peneliti yang sama.
Data hasil penelitian akan dianalisa secara statistik dengan bantuan program Windows SPSS . Analisa deskriptif dilakukan untuk melihat gambaran karakteristik tikus  wistar  berdasarkan  berat  badan,  hasil  pemeriksaan  kadar  CRP  sesudah perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Penelitian

## Persentase Penambahan Berat Badan Tikus Wistar
Berat badan tikus wistar ditimbang setiap minggu untuk melihat kondisi tikus dan  menentukan  dosis  biotin  yang  diberikan  setiap  tikus  sesuai  berat  badannya. Penambahan berat badan tikus dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.

## Persentase Penambahan Berat Badan Tikus Wistar
Kelompok BB awal (g)  BB akhir (g) Persentase Penambahan BB Kontrol Negatif 162.33 295.00 81,72 % Kontrol Positif 163.33 277.00 69,59 % Perlakuan 1 158.50 265.33 67,40 % Perlakuan 2 160.00 248.33 55,21 % Perlakuan 3 157.67 254.00 61,10 %
Berat  badan  tikus  wistar  yang  digunakan  dalam  penelitian  mengalami penambahan  jika  dilihat  dari  minggu  awal  hingga  minggu  terakhir  penelitian. Persentase penambahan berat badan pada kelompok kontrol negatif sebesar   81,72 %.  Kelompok  kontrol  positif  yang  diberi  pakan  dengan  diet  tinggi  lemak mengalami penambahan berat badan sebesar 69,59%. Kelompok perlakuan 1, 2 dan 3 yang diberi pakan dengan diet tinggi lemak dan variasi konsentrasi biotin melalui sonde berturut turut sebesar 67,40%; 55,21% dan 61,10%.

## Hasil Pemeriksaan Kadar CRP
Analisis  data  kadar  CRP  dilakukan  secara  deskriptif.  Hasil  analisis  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Kadar CRP Serum Tikus Wistar
No Hasil Kadar CRP Jumlah sampel Persentase 1 Negatif 29 100% 2 Positif 0 0 % Total 29 100%
Tabel 2 menunjukkan bahwa hasil pemeriksaan kadar CRP dengan hasil Negatif sebanyak  29  sampel  (100%)  dan  sampel  Positif  0  (0%).  Hasil  kadar  CRP menunjukkan bahwa tidak ada pengaruh peningkatan konsentrasi biotin terhadap kadar CRP tikus wistar.

## Analisis Data Sel Penanda Inflamasi Tikus Wistar
Penampakan sel penanda inflamasi pada aorta tikus wistar dengan perbesaran 400x dapat dilihat pada Gambar 1.
A B C D
A. Kontrol Negatif; B. Kontrol Positif; C.Perlakuan 1; D. Perlakuan 2;
E. Perlakuan 3 (Tanda panah menunjukkan adanya sel penanda inflamasi)
Lapisan pembuluh arteri tersusun dari lapisan tunika adventitia yang terletak paling  luar,  lapisan  tunika  media,  dan  lapisan  tunika  intima.  Tidak  ditemukan adanya sel penanda inflamasi pada potongan melintang aorta tikus wistar kelompok kontrol  negatif  (Gambar  A).  Sel  penanda  inflamasi  ditemukan  pada  kelompok kontrol  positif  (Gambar  B)  yang  ditunjukkan  oleh  tanda  panah  dan  kelompok perlakuan 1 (Gambar C)  yang diberi biotin dosis rendah. Kelompok perlakuan 2 yang ditunjukkan oleh Gambar D, sel penanda inflamasi masih terlihat jelas, namun jumlahnya sudah berkurang begitu juga pada kelompok perlakuan 3.
Analisis  data  sel  penanda  inflamasi  aorta  tikus  wistar  diawali  dengan analisis  secara  deskriptif  untuk  melihat  hasil  pembacaan  jumlah  sel  penanda inflamasi  pada  aorta  tikus  wistar.  Perhitungan  jumlah  sel  penanda  inflamasi dilakukan oleh dokter spesialis Patologi Anatomi dengan scoring . Hasil persentase jumlah sel penanda inflamasi tiap kelompok dapat dilihat dalam Gambar 2.
Gambar 2. Persentase Jumlah Skor Sel Penanda Inflamasi Aorta Tikus Wistar
0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 120,00 KN KP Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3 Persentase Jumlah Sel Penanda Inflamasi Score 0 Score 1 Score 2 Score 3
E
Score 0 : Tidak ditemukan sel penanda inflamasi Score 1 : Ditemukan sel penanda inflamasi < 10 % dari luas lapang pandang Score 2 : Ditemukan sel penanda inflamasi 10 - 30 % dari luas lapang pandang Score 3 : Ditemukan sel penanda inflamasi > 30 % dari luas lapang
pandang
Gambar 2 menunjukkan bahwa pada kontrol negatif 100% tidak ditemukan sel penanda inflamasi(skor 0). Sampel kontrol positif 100% ditemukan sel penanda inflamasidengan  skor  3.  Sampel  perlakuan  1  ditemukan  sel  penanda  inflamasi sebanyak 61,11% dengan skor 2 dan 38,89 % skor 3. Sampel perlakuan 2 ditemukan sel  penanda  inflamasi  sebanyak  11,11%  skor  1  dan  88,89%  skor  2.  Sampel perlakuan 3 ditemukan sebanyak 77,78% skor 0 dan 22,22% skor 1.
Analisis  data  dilanjutkan  dengan  analisis  bivariat  meliputi  uji  normalitas dan uji Kruskal-Wallis . Uji normalitas data menggunakan uji Saphiro-Wilk untuk mengetahui  distribusi  data  karena  jumlah  sampel  kurang  dari  50.  Hasil  uji normalitas jumlah sel penanda inflamasidapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Uji Normalitas Jumlah Sel Penanda Inflamasi
Perlakuan Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Hasil Sel Busa Perlakuan 1 0,566 18 0,000 Perlakuan 2 0,566 18 0,000 Perlakuan 3 0,457 18 0,000
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  hasil  uji  normalitas  data  menggunakan  uji Saphiro-Wilk diperoleh nilai p ≤ 0,05 maka dapat diartikan bahwa distribusi data tidak normal. Analisis data dilanjutkan dengan uji non parametrik yaitu Kruskal- Wallis Test  dan Uji  lanjut  ( Mann-Whitney ).  Hasil  uji Kruskal-Wallis dan Mann- Whitney dapat dilihat dari Tabel 4.
Tabel 4. Uji Kruskal-Wallis dan Mann-Whitney Jumlah Sel Penanda Inflamasi
Jumlah Sel busa Syarat Nilai p  Nilai p Uji Kruskal-Wallis ≤ 0,05 0,003 Uji Mann-Whitney 0,213
Uji Kruskal-Wallis adalah uji nonparametrik yang digunakan untuk menguji rerata perbedaan data antara dua kelompok atau lebih. Hasil Tabel 4 menunjukkan nilai p ≤ 0,05 maka ada pengaruh pemberian biotin terhadap jumlah sel penanda inflamasiaorta tikus wistar dengan risiko dislipidemia . Uji lanjut ( Mann-Whitney ) dilakukan  untuk  melihat  perbedaan  masing-masing  kelompok.  Hasil  Tabel  10 menunjukkan nilai p 0,213  (p ≥ 0,05) maka tidak ada perbedaan jumlah sel penanda inflamasiyang signifikan antara tiap kelompok perlakuan.

## Diskusi Hasil
Kadar  CRP  meningkat  dalam  berbagai  infeksi, immuno-inflammatory diseases , trauma, dan keganasan (P.V. and D.M. 2011). Inflamasi dibagi menjadi 3 jenis berdasarkan waktu merespon penyebab cedera yaitu akut, kronis dan sub-akut (periode  transformasi  dari  akut  menjadi  kronis  berlangsung  dari  2  -  6  minggu) (Hannoodee and Nasuruddin 2020). CRP merupakan protein inflamasi akut tetapi studi prospektif skala besar menunjukkan bahwa CRP juga diketahui terkait dengan peradangan kronis seperti penyakit kardiovaskular (Luan and Yao 2018; Sproston and Ashworth 2018) Dalam lesi aterosklerotik pada manusia dan hewan percobaan ditemukan  CRP  yang  terlokalisasi  dengan  LDL  dan  makrofag  dimana  CRP dinyatakan terlibat dalam modulasi patogenesis aterosklerosis (Singh and Agrawal 2019).  Peningkatan  kadar  CRP  serum  menjadi  prediktor  kuat  untuk  penyakit kardiovaskular pada individu tanpa gejala (Sproston and Ashworth 2018).
Hewan coba yang diberi pakan tinggi lemak menunjukkan adanya hubungan kadar  plasma  dan  lesi  CRP  dengan  pembentukan  dan  perkembangan  lesi aterosklerotik (Yu et al. 2012). Kadar CRP dalam plasma berkorelasi kuat dengan ukuran  lesi  intima  lengkung  aorta,  yang  menunjukkan  bahwa  kadar  CRP mencerminkan perkembangan lesi (Yu et al. 2012). Beberapa penelitian dalam Fu (2020) melaporkan bahwa CRP tidak memainkan peran bahkan pada aterosklerosis awal (Fu, Wu, and Liu 2020).
Hasil  penelitian  diperoleh  bahwa  pemberian  suplemen  biotin  tidak  ada pengaruh  terhadap  kadar  CRP  pada  tikus  wistar. Keterbatasan  pemeriksaan  CRP kualitatif  pada  penelitian  ini  hanya  mampu  mendeteksi  nilai  CRP  10  mg/L, sehingga nilai <10mg/L  dinyatakan negatif. Metode pemeriksaan lain  yang lebih sensitif  adalah high-sensitivity CRP  (hs-CRP)  dapat  mengukur  nilai  CRP  pada konsentrasi ≤0,3 mg/ L.
Banyaknya  jumlah  sel  penanda  inflamasi  menunjukkan  meningkatnya jumlah  kolesterol  LDL  teroksidasi  yang  diakumulasi  makrofag  melalui  reseptor scavenger (berbeda  dengan  LDL  reseptor)  (Kumar,  Abbas,  and  Aster  2015; Samiasih  et  al.  2018).  Adanya  peradangan  pada  inisiasi  dan  perkembangan  lesi aterosklerotik  dipicu  oleh  penumpukan  kolesterol  dan  asam  lemak  bebas  di makrofag  serta  sel  lainnya  (Kumar,  Abbas,  and  Aster  2015).Suplementasi  biotin yang  dapat  menurunkan  jumlah  sel  penanda  inflamasi  pada  tikus  wistar  dengan resiko dislipidemia mungkin dapat menjadi salah satu langkah preventif, khususnya dari penyakit kardiovaskuler.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ada  pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap jumlah sel penanda inflamasi tikus wistar dengan resiko dislipidemia. Saran dari penelitian ini adalah untuk melakukan penelitian lanjutan pemberian biotin pada parameter lain yang berhubungan dengan penyakit kardiovaskuler.

## DAFTAR PUSTAKA
Aguilera-Méndez,  Asdrúbal,  and  Cristina  Fernández-Mejía.  2012.  “The Hypotriglyceridemic  Effect  of  Biotin  Supplementation  Involves  Increased Levels  of  CGMP  and  AMPK  Activation.”  BioFactors  38  (5):  387–94. https://doi.org/10.1002/biof.1034.
Anneke,  Ruth,  and  Sulistiyaningsih.  2018.  “Review:  Terapi  Herbal  Sebagai Alternatif Pengobatan Dislipidemia.” Farmaka 16: 213–21.
Asvini, N, G Hemavathy, and K Vasanthira. 2016. “Combination Of Biotin With Atorvastatin Achieves Favourable Total Cholesterol : Hdl Ratio In Secondary Dyslipidemia : A Single Centre , Prospective , Open Label , Parallel Group , Comparative Study .” 6 (4): 34–40.
Asvini, N, and Prof G Hemavathy. 2018. “Effect of Biotin on the Lipid Profile – Total  Cholesterol  ,  LDL  ,  Triglyceride  ,  VLDL  and  HDL  of  Dyslipidemic Patients” 2 (8): 12–20.
Boone-Villa, Daniel, Asdrubal Aguilera-Méndez, Adriana Miranda-Cervantes, and Cristina  Fernandez-Mejia.  2015.  “Effects  of  Biotin  Supplementation  in  the Diet on Adipose Tissue CGMP Concentrations, AMPK Activation, Lipolysis, and Serum-Free Fatty Acid Levels.” Journal of Medicinal Food 18 (10): 1150– 56. https://doi.org/10.1089/jmf.2014.0170.
Chistiakov,  Dimitry  A.,  Alexandra  A.  Melnichenko,  Veronika  A.  Myasoedova, Andrey V. Grechko, and Alexander N. Orekhov. 2017. “Mechanisms of Foam Cell Formation in Atherosclerosis.” Journal of Molecular Medicine 95 (11): 1153–65. https://doi.org/10.1007/s00109-017-1575-8.
Depkes, RI. 1979. Farmakope Indonesia. Ketiga. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Fu,  Yu,  Yi  Wu,  and  Enqi  Liu.  2020.  “C‑reactive  Protein  and  Cardiovascular Disease:  From  Animal  Studies  to  the  Clinic  (Review).”  Experimental  and Therapeutic Medicine 20 (2): 1211–19.
https://doi.org/10.3892/etm.2020.8840.
Hannoodee, Sally, and Dian N Nasuruddin. 2020. Acute Inflammatory Response. StatPearls  [Internet].  Treasure  Island  (FL):  StatPearls  Publishing;  2020  Jan. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK556083/.
Ismawati, Ismawati, Enikarmila Asni, and M Yulis Hamidy. 2012. “Pengaruh Air Perasan  Umbi  Bawang  Merah  (Allium  Ascalonicum  L.)  Terhadap
Malondialdehid (MDA) Plasma Mencit Yang Diinduksi Hiperkolesterolemia.” Jurnal Natur Indonesia 14 (1): 150.
https://doi.org/10.31258/jnat.14.1.150-154.
Koenig, Wolfgang. 2013. “High-Sensitivity C-Reactive Protein and Atherosclerotic
Disease:  From  Improved  Risk  Prediction  to  Risk-Guided  Therapy.” International Journal of Cardiology 168 (6): 5126–34.
https://doi.org/10.1016/j.ijcard.2013.07.113.
Kopin,  Laurie,  and  Charles  J.  Lowenstein.  2017.  “[Dyslipidemia].”  American College of Physicians 71 (2): 275–79. https://doi.org/10.7326/aitc201712050.
Kumar,  Vinay,  Abul  K.  Abbas,  and  Jon  C.  Aster.  2015.  Robbins  and  Cotran
Pathologic Basis of Disease. 9th ed. Elsevier Inc. papers3://publication/uuid/5EA1AA7A-8B6E-424A-B367-0DC1E86B0C47.
Larrieta,  Elena,  Fidel  Velasco,  Paz  Vital,  Teresita  López-Aceves,  María  Luisa Lazo-de-la-Vega-Monroy,  Alberto  Rojas,  and  Cristina  Fernandez-Mejia. 2010. “Pharmacological Concentrations of Biotin Reduce Serum Triglycerides and the Expression of Lipogenic Genes.” European Journal of Pharmacology 644 (1–3): 263–68. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2010.07.009.
Luan, Ying Yi, and Yong Ming Yao. 2018. “The Clinical Significance and Potential Role of C-Reactive Protein in Chronic Inflammatory and Neurodegenerative Diseases.” Frontiers in Immunology 9 (JUN): 1–8.
https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.01302.
Maramis,  Reinaldo,  and  Marie  Kaseke.  2014.  “Gambaran  Histologi  Aorta  Tikus Wistar  Dengan  Diet  Lemak  Babi  Sirsak  (Annona  Muricata  L  .).”  Jurnal  E- Biomedik 2: 431–35.
Moreno-Méndez,  Ericka,  Alain  Hernández-Vázquez,  and  Cristina  Fernández- Mejía.  2019.  “Effect  of  Biotin  Supplementation  on  Fatty  Acid  Metabolic Pathways  in  3T3-L1  Adipocytes.”  BioFactors  45  (2):  259–70. https://doi.org/10.1002/biof.1480.
P.V.,  Ingle,  and  Patel  D.M.  2011.  “C-  Reactive  Protein  in  Various  Disease Condition  -  an  Overview.”  Asian  Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical
Research 4 (1): 9–13. http://www.embase.com/search/results?subaction=viewrecord&from=export &id=L361820446%0Ahttp://www.ajpcr.com/Vol4Issue1/190.pdf.
Patel, Deepa P., Shane M. Swink, and Leslie Castelo-Soccio. 2017. “A Review of the Use of Biotin for Hair Loss.” Skin Appendage Disorders 3 (3): 166–69. https://doi.org/10.1159/000462981.
PERKI. 2013. “Pedoman Tata Laksana Dislipidemia.” PP PERKI. https://doi.org/10.1136/bcr.09.2008.0970.
Revilla-Monsalve,  Cristina,  Iván  Zendejas-Ruiz,  Sergio  Islas-Andrade,  Armida Báez-Saldaña,  Miguel  Angel  Palomino-Garibay,  Pedro  Martín  Hernández- Quiróz,  and  Cristina  Fernandez-Mejia.  2006.  “Biotin  Supplementation
Reduces Plasma Triacylglycerol and VLDL in Type 2 Diabetic Patients and in Nondiabetic  Subjects  with  Hypertriglyceridemia.”  Biomedicine  and Pharmacotherapy 60 (4): 182–85. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2006.03.005.
Said,  H.  M.  2011.  “Chapter  1  Biotin:  Biochemical,  Physiological  and  Clinical Aspects.”  Water  Soluble  Vitamins,  Subcellular  Biochemistry,  301–22. https://doi.org/10.1007/978-94-007-2199-9.
Samiasih,  R.  Ngt.,  Hertanto  S.W,  Edi  Dharmana,  and  Hardhono  Susanto.  2018. “Efek  High  Fructose  Fat  Diet  (  HFFD  )  Pada  Histologi  Aorta  Kelinci  New Zealand White Model Hewan Coba Aterosklerosis” 1: 85–91.
Singh, Sanjay K., and Alok Agrawal. 2019. “Functionality of C-Reactive Protein for  Atheroprotection.”  Frontiers  in  Immunology  10  (JULY):  1–8. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.01655.
Sproston, Nicola R., and Jason J. Ashworth. 2018. “Role of C-Reactive Protein at Sites of Inflammation and Infection.” Frontiers in Immunology 9 (APR): 1– 11. https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.00754.
World  Health  Organization.  2017.  “Cardiovascular  Diseases  (CVDs).”  World Health Organization. 2017. https://www.who.int/news-room/fact-
sheets/detail/cardiovascular-diseases-(cvds).
Yu, Qi, Yafeng Li, Yanli Wang, Sihai Zhao, Peigang Yang, Yulong Chen, Jianglin Fan, and Enqi Liu. 2012. “C-Reactive Protein Levels Are Associated with the Progression  of  Atherosclerotic  Lesions  in  Rabbits.”  Histology  and Histopathology 27 (4): 529–35. https://doi.org/10.14670/HH-27.529.