PENGOLAHAN LIMBAH CAIR INDUSTRI PEMBEKUAN IKAN KACA PIRING (Sillago sihama) MENGGUNAKAN KOMBINASI BAKTERI Acinetobacter baumannii, Bacillus megaterium, Nitrococcus sp. D AN

## Pseudomonas putida SECARA AEROB
Liquid Waste Processing of Frozen Plate Fish (Sillago sihama) Industry using Aerobically Growth of Bacteria Combination of Acinetobacter baumannii, Bacillus megaterium, Nitrococcus sp. and Pseudomonas putida
Maghfirotin Banin Marta 1* , Yahya 2 , Happy Nursyam 2
1 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Mulawarman. Jl. Tanah Grogot, Kampus Gunung Kelua, Samarinda 75119, 2 Jurusan Teknologi Hasil Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Brawijaya Jl. Veteran No.16, Ketawanggede, Lowokwaru, Malang 65145
*)Penulis korespondensi: maghfirotinmb@faperta.unmul.ac.id
Submisi 28.7.2021; Penerimaan 21.9.2021; Dipublikasikan 22.9.2021

## ABSTRAK
Industri pembekuan ikan ( cold storage ) sangat besar mengkonsumsi air untuk proses pencucian bahan baku dan peralatan sehingga banyak menghasilkan limbah cair. Salah satu pengolahan  limbah  yaitu  secara  biologi  dengan  memanfaatkan  aktivitas  mikroorganisme untuk menurunkan substrat tertentu pada limbah. Bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah Acinetobacter baumannii, Bacillus megaterium, Nitrococcus sp. dan Pseudomonas putida . Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh penambahan kombinasi bakteri terhadap limbah cair industri pembekuan ikan kaca piring ( Sillago sihama ), dengan melihat perubahan nilai pH, TSS ( Total Solid Suspended ), amonia, minyak dan lemak, BOD ( Biochemical  Oxygen  Demand )  dan  COD  ( Chemical  Oxygen  Demand ).  Penelitian  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Kelompok  dengan  membandingkan  kelompok  perlakuan dengan kontrol. Dalam penelitian ini dilakukan pengamatan yaitu hari ke-0, hari ke-5 dan hari  ke-10.  Limbah  cair  yang  berasal  dari  pabrik  pembekuan  ikan  kaca  piring  ( Sillago sihama )  dari  PT.  Inti  Luhur  Fuja  Abadi,  kabupaten  Pasuruan.  Hasil  dari  penelitian  ini perlakuan  kombinasi  bakteri Acinetobacter  baumannii (A), Bacillus  megaterium (B), , Nitrococcus  sp. (N), dan Pseudomonas  putida (P) memberikan  pengaruh  yang nyata pada semua  parameter.  Nilai  yang  dihasilkan  telah  memenuhi  syarat  baku  mutu  limbah  cair pembekuan ikan pada peraturan Menteri Lingkungan Hidup nomor 5 tahun 2014. Nilai pH mengalami  kenaikan  dari  kontrol,  hari  ke  5  sampai  hari  ke  10.  Untuk  kombinasi  bakteri terbaik adalah A+P dengan nilai TSS sebesar 63,85 mg/L, kadar amoniak sebesar 1,02 mg/L, minyak dan  lemak sebesar 1,95 mg/L, BOD sebesar 20,05 mg/L, dan COD sebesar 79,95 mg/L.
Kata  kunci:  limbah  cair, Acinetobacter  baumannii,  Bacillus  megaterium,  Nitrococcus sp., Pseudomonas putida , aerasi

## ABSTRACT
The  fish  freezing  industry  consumes  a  lot  of  water  for  the  washing  process  of  raw materials and equipment, resulting in a lot of liquid waste. One of the waste  treatments is biologically by utilizing the activity of microorganisms to reduce certain substrates in the waste. The bacteria used in this study were Acinetobacter baumannii, Bacillus megaterium, Nitrococcus sp . and  Pseudomonas putida. The purpose of this study was to determine the effect of adding a combination of bacteria to the liquid waste of the frozen plate fish (Sillago sihama)  industry,  by  looking  at  changes  in  the  pH  value,  TSS  (Total  Solid  Suspended), ammonia,  oil  and  fat,  BOD  (Biological  Oxygen  Demand)  and  COD  (Chemical  Oxygen Demand).  This study used a Randomized Block Design by comparing the treatment group with the control group. In this study, observations were made on day 0, day 5 and day 10.

## Banin et al.
Liquid waste originating from the plate glass fish freezing factory (S. sihama) from PT. Inti Luhur Fuja Abadi, Pasuruan district. The results of this study were combination treatment of  bacteria  A.  baumannii  (A),  Bacillus  megaterium  (B),  Nitrococcus  sp.  (N),  and Pseudomonas putida (P) had a significant effect on all parameters. The resulting value has met the quality standards of fish freezing liquid waste in the regulation of the minister of the environment number 5 of 2014. The pH value has increased from control, day 5 to day 10. For the best bacterial combination is A + P with a TSS value of 63 .85 mg/L, 1.02 mg/L of ammonia, 1.95 mg/L of oils and fats, 20.05 mg/L of BOD, and 79.95 mg/L of COD.
Keywords:  Liquid waste,  Acinetobacter baumannii, Bacillus megaterium, Nitrococcus sp., Pseudomonas putida, aeration

## PENDAHULUAN
Industri perikanan di Indonesia kini telah mengalami  perkembangan  yang  sangat  pesat dan  tersebar  di  berbagai  daerah  di  Indonesia seperti Jawa Timur, Jawa Tengah, Jawa Barat, Jakarta, serta beberapa daerah lainnya di luar pulau  Jawa  (Pamungkas,  2016).  Industri pengolahan  hasil  perikanan  dengan  berbagai jenis  olahannya  serta  teknologi  yang  digu- nakan  dalam  proses  pengolahan  maupun penangkapan akan menghasilkan limbah, baik itu  limbah  cair  maupun  limbah  padat  yang memiliki  potensi  untuk  merusak  keseim- bangan ekologi, terutama  ekologi  air,  sungai maupun laut (Mukhtasor, 2007).
Limbah  cair  yang  dikeluarkan  oleh industri  perikanan  seperti  pengalengan, pembekuan  ( cold  storage ),  rumput  laut, tepung ikan dan lain sebagainya sangat besar volumenya, hal ini karena komsumsi air untuk proses pengolahan, pencucian bahan baku dan peralatan yang cukup tinggi (Ibrahim, 2004). Limbah  cair  yang  dihasilkan  oleh  industri pengolahan ikan mengandung protein, lemak, nitrat  (NO 3 ),  fosfat  (PO 4 ),  sulfida  (H 2 S), amoniak  (NH 3 -N),  dan  klorin  bebas  (Bestari dan Suharjono, 2015). Limbah tersebut dapat menyebabkan  pencemaran  atau  gangguan lingkungan  seperti  turunnya  kandungan oksigen terlarut dalam air, sehingga ketersediaan  oksigen  bagi  organisme  di lingkungan tersebut berkurang, bahkan dapat menyebabkan  kematian  bagi  organisme tersebut  serta  dapat  menimbulkan  bau  yang tidak sedap (Pamungkas, 2016).
Pengolahan  limbah  cair  bertujuan  agar limbah tersebut memenuhi  syarat  baku mutu untuk  dapat  dibuang  atau  dimanfaatkan kembali dengan menghilangkan atau menurunkan  kadar  bahan  pencemar  yang terkandung  di  dalamnya  (Junaidi  dan Hatmanto,  2006).  Berdasarkan  Peraturan
Menteri Lingkungan Hidup No 5 tahun 2014 tentang  Batas  Mutu  Air  Limbah  kegiatan pengolahan pembekuan hasil perikanan, maka batas  maksimum  yang  diperbolehkan  untuk parameter Biological Oxygen Demand (BOD) dan Total Suspended Solid (TSS) adalah 100 mg/L, Chemical Oxygen Demand (COD) 200 mg/L, amonia 10 mg/L, minyak dan lemak 15 mg/L  dengan  nilai  rentang  pH  sebesar  6-9. Oleh karena itu diperlukan suatu pengolahan limbah  cair  sehingga  sebelum  dibuang  ke badan air dapat memenuhi standar baku mutu yang telah ditetapkan (Sartika et al ., 2021).
Proses  pengolahan  limbah  cair  dapat dilakukan secara fisik, kimiawi, dan biologis. Pengolahan  limbah  secara  biologi  diarahkan untuk  menurunkan  substrat  tertentu  yang terkandung  dalam  limbah  dengan  meman- faatkan aktivitas mikroorganisme yang meng- gunakan  zat  pencemar  sebagai  substratnya (sumber  energi  dan  karbon)  untuk  pertum- buhan  dan  sintesis  sel  (Suligundi,  2013). Mikroorganisme  yang  digunakan  merupakan campuran  dari  beberapa  jenis  bakteri  yang hidup  bersimbiosis  secara  artifisial,  yang masing-masing  mempunyai  fungsi  spesifik dan  bekerja  sama  secara  sinergis  dalam menguraikan  bahan  organik,  senyawa  nitro- gen,  dan menangkap  gas  yang menyebabkan bau seperti amoniak dan asam sulfida sebagai sumber energi untuk pertumbuhannya (Saputra et al ., 2016).
Menurut  Zahidah  dan  Shovitri  (2013), beberapa jenis  bakteri  yang  dapat  digunakan dalam  pengolahan  limbah  cair,  antara  lain Pseudomonas spp .,  Achromobacter spp., Bacillus sp. p ., Flavobacterium spp ., Clostri- dium spp ., Streptomyces spp., Thermonospora spp .,  Microplyspora spp .,  Thermoactinomy- ces spp , dan  lain  sebagainya. Pseudomonas merupakan  bakteri  kelompok  proteolitik berperan  dalam  proses  dekomposisi  protein,
sedangkan Bacillus, Pseudomonas dan Vibrio kelompok  bakteri  yang  mendekomposisi  ki- tin. Nitrococcu s sp sebagai bakteri nitrifikasi yang  mampu  mengoksidasi  amonia  menjadi nitrit  (Yahya et  al .,  2014). Acinetobacter baumannii adalah bakteri yang menghasilkan enzim  lipase  untuk  mengkatalisis  hidrolisis lipid/minyak  menjadi  produk  yang  larut (Parwata dan Oviantari, 2015). Adharani dan Yusuf  (2019),  menjelaskan  bahwa Bacillus megaterium mampu  menurunkan  kandungan logam  kromium  dan  kandungan  bahan organik  (BOD,  COD,  pH  dan  suhu)  limbah cair  domestik  yang  di  kawasan  laut  Muncar Banyuwangi.
Oleh  karena  itu,  penggunaan  bakteri Acinetobacter baumannii, Bacillus megateri- um, Nitrococcus sp. dan Pseudomonas putida diharapkan  mampu  menurunkan  kandungan bahan  pencemar  pada  limbah  cair  industri pembekuan ikan kaca piring ( Sillago sihama ) sehingga memenuhi syarat baku mutu limbah cair.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Limbah  cair  pembekuan  ikan  Kaca Piring  yang  digunakan  pada  penelitian  ini diperoleh  dari  PT.  Inti  Luhur  Fuja  Abadi, kabupaten  Pasuruan,  Provinsi  Jawa  Timur. Pada proses pengambilan dibutuhkan es batu yang  berfungsi  untuk  menjaga  sampel  agar tidak  mengalami  perubahan  kimia  maupun fisika  saat  proses  menuju  laboratorium. Biakan murni  bakteri  yang  digunakan  antara lain A.  baumannii (A) ,  B.  megaterium (B) , Nitrococcus  sp (N)  dan P.  putida (P)  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi, Fakultas  Kedokteran  Universitas  Brawijaya Malang.

## Rancangan Percobaan dan Analisis Data
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Kelompok  dengan  membandingkan kelompok perlakuan dengan kontrol. Perlakuan  yang  digunakan  antara  lain kombinasi  bakteri A.  baumannii dan B. megaterium (A+B),  kombinasi  bakteri A. baumannii dan Nitrococcus  sp ( A+N ) dan kombinasi bakteri A. baumannii dan P. putida (A+P).  Pengamatan  dan  pengujian  selama aerasi dilakukan pada hari ke 0, 5 dan 10.
Dalam  penelitian  ini  terdapat  tiga variabel yaitu variabel kontrol, variabel bebas dan  variabel  terikat.  Variabel  kontrol  adalah limbah cair yang tidak ditambahkan inokulum dan  diaerasi  selama  10  hari.  Variabel  bebas meliputi variasi inokulum yaitu A. baumannii +  B.  megaterium,  A.  baumannii  +  Nitroco- ccus sp . dan A. baumannii + P. putida , dengan kadar bakteri 1 mL/L dan diaerasi selama 10 hari. Variabel terikat meliputi kualitas limbah yang  diukur berdasarkan  parameter  pH,  TSS ( Total  Suspended  Solid )  minyak  dan  lemak, amoniak,  BOD  dan  COD.  Data  yang  diper- oleh  kemudian  dianalisis  dengan  ANOVA pada  taraf  kepercayaan  5%  dan  dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT).
Prosedur Penelitian
Penelitian ini terdiri dari tahap pengambilan sampel limbah cair, tahap aerasi dan  tahap  pengujian  kualitas  limbah  cair berupa  pengukuran  pH,  TSS,  amonia, minyak/lemak, BOD dan COD.

## Pengambilan Sampel Limbah Cair
Limbah cair pembekuan ikan Kaca piring ( Sillago sihama ) diperoleh dari PT. Inti Luhur Fuja  Abadi,  Kabupaten  Pasuruan,  Provinsi Jawa Timur. Sampel diambil dari bak pencu- cian ikan yang pertama dan kedua, dicampur rata  dan  dihomogenkan.  Sampel  kemudian dimasukkan  ke  dalam  jeriken  steril  dan dimasukkan ke dalam coolbox yang telah diisi es batu, selanjutnya dibawa menuju Laborato- rium. Setelah sampai di laboratorium, sampel langsung dimasukkan ke dalam stoples sesuai dengan  kode  sampel  dan  dipasang  aerator yang  berfungsi  sebagai  tempat  perlakuan sampel.

## Proses aerasi
Aerasi  berfungsi  sebagai  pemasok oksigen  (O 2 )  ke  dalam  limbah  cair  yang digunakan  oleh  bakteri  aerob  untuk  proses metabolisme. Menurut Jasmiyati et al . (2010), proses  aerob  lebih  baik  dari  pada  proses anaerob dalam menurunkan konsentrasi BOD dan  COD  limbah  cair.  Aerator,  selang,  kran, pemecah  udara  serta  stoples  dirangkai  dan selanjutnya dimasukkan 2 liter sampel limbah cair  ke  dalam  stoples  tersebut.  Bakteri A. baumannii,  B.  megaterium,  Nitrococcus sp. dan P. putida dengan kepadatan 10 6 CFU/mL diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi

## Banin et al.
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
Fakultas  Kedokteran  Universitas  Brawijaya Malang  ditambahkan  sebanyak  2  mL  dari kombinasi  bakteri  untuk  2  liter  limbah  cair. sehingga masing-masing bakteri ditambahkan sebanyak  1  mL.  Menurut  Ishartanto  (2009), dosis bakteri sebesar 1mL/L limbah (1,5x10 16 CFU/mL)  dapat  menurunkan  nilai  BOD sebesar 96%. Zalfiatri et al (2017), menyebut- kan bahwa penambahan Bacillus sp. sebanyak 3  mL/L  (1,6  x  10 5 CFU/mL)  mengalami penurunan  terbesar  terhadap  nilai  BOD hingga  91,31%  dan  dapat  mengolah  air limbah  domestik  untuk  memenuhi  standar baku mutu. Proses aerasi berlangsung selama 10 hari dan pada hari ke-0, 5 dan 10 dilakukan analisis kualitas limbah cair.

## Prosedur Analisis
Sampel limbah cair dianalisis kualitasnya pada  hari  ke-0,  5  dan  10  dan  dilakukan pengujian  di  Laboratorium  Lingkungan PERUM Jasa Tirta I Malang. Prosedur analisa pH berdasarkan SNI 06-6989.11-2004 dengan menggunakan pH meter. Analisis TSS secara gravimetri  berdasarkan  SNI  06-6989.3-2004 prinsipnya  yaitu  sampel  dihomogenkan  dan disaring  dengan  kertas  saring  yang  telah ditimbang.  Residu  yang  tertahan  pada saringan  dikeringkan  sampai  mencapai  berat konstan  pada  suhu  103ºC  sampai  dengan 105ºC.  Kenaikan  berat  saringan  mewakili TSS.  Untuk  memperoleh  estimasi  TSS, dihitung  perbedaan  antara  padatan  terlarut total dan padatan total.
Analisa  minyak  dan  lemak  dalam  air limbah  berdasarkan  SNI  06-6989.10.2004 dengan  diekstraksi  menggunakan  pelarut organik  dalam  corong  pisah  dan  untuk menghilangkan air yang masih tersisa diguna- kan  Na 2 SO 4 anhidrat.  Ekstrak  minyak  dan lemak dipisahkan dari pelarut organik secara destilasi.  Residu  yang  tertinggal  pada  labu destilasi  ditimbang  sebagai  minyak  dan  le- mak. Analisis kadar amonia berdasarkan SNI 06-6989.30-2005  dengan  spektrofotometer secara  fenat  yang  prinsipnya  amoniak  bere- aksi  dengan  hipoklorit  dan  fenol  yang  dika- talis  oleh  natrium  nitroprusida  membentuk senyawa biru indofenol dan diukur absorban- sinya pada panjang gelombang 640 nm.
Uji  kebutuhan  oksigen  biokimia  BOD berdasarkan SNI 6989.72:2009 pada prinsipnya  sampel  ditambahkan  ke  dalam
larutan  pengencer  jenuh  oksigen  yang ditambah  larutan  nutrisi  dan  bibit  mikroba, kemudian diinkubasi dalam ruang gelap pada suhu  20±1 o C  selama  5  hari.  Nilai  BOD dihitung  berdasarkan  selisih  konsentrasi oksigen terlarut 0 (nol) hari dan 5 (lima) hari. Bahan  kontrol  standar  dalam  uji  BOD  ini, digunakan  larutan  glukosa-asam  glutamat. Pada  uji  kebutuhan  oksigen  kimia  COD berdasarkan  SNI  6989.2-2009  prinsipnya yaitu  senyawa  organik  dan  anorganik, terutama  senyawa  organik  dalam  sampel dioksidasi oleh Cr 2 O 7 2- dalam refluks tertutup menghasilkan  Cr 3+ .  Jumlah  oksidan  yang dibutuhkan  dalam  ekuivalen  oksigen  (O 2 mg/L)  diukur  secara  spektrofotometri  sinar tampak.  Cr 2 O 7 2- kuat  (nilai  COD  lebih  kecil atau  sama  dengan  90  mg/L)  mengabsorpsi pada  panjang  gelombang  420  nm  dan  Cr 3+ kuat (nilai COD 100 mg/L sampai dengan 900 mg/L)  mengabsorpsi  pada  panjang  gelom- bang 600 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh  jenis  kombinasi  bakteri  pada pengolahan  limbah  cair  industri  pembekuan ikan kaca piring sampai dengan 10 hari proses aerasi disajikan pada Tabel 1.

## Nilai pH
Penambahan  kombinasi  bakteri A. baumannii,  B.  megaterium,  Nitrococcus  sp . dan P.  putida pada  limbah  cair  pembekuan ikan kaca piring memberikan pengaruh nyata terhadap  nilai  pH,  perubahan  tersebut  dapat dilihat pada Tabel 1.
Nilai  pH  merupakan  parameter  pendu- kung  yang  penting  untuk  dianalisis  karena sebagai  indikator  bagi  keberlangsungan proses  penguraian  oleh  mikroorganisme  di dalam  suatu  sistem  pengolahan  limbah (Indrayani  dan  Rahmah,  2018).  Nilai  pH limbah  cair  yang  diberikan  perlakuan kombinasi  bakteri  baik  A+B,  A+N  dan  A+P mengalami  peningkatan  dibandingkan  hari ke-0  dan  lebih  tinggi  bila  dibandingkan dengan  pH  pada  kontrol.  Nilai  pH  sampel berkisar 8-8,4 pada hari ke 5 dan 10, rentang pH  tersebut  masih  dalam  baku  mutu  air limbah kegiatan pengolahan pembekuan hasil perikanan  yang  ditetapkan  oleh  peraturan Menteri Lingkungan Hidup No 5 tahun 2014 yaitu pH 6-9.
Tabel  1. Pengaruh  jenis  kombinasi  bakteri  pada  pengolahan  limbah  cair  industri pembekuan ikan kaca piring ( Sillago sihama ) dengan aerasi
Parameter (mutu baku) Jenis Kombinasi Bakteri Lama Aerasi 0 hari 5 hari 10 hari pH (6-9) Kontrol 6.65 ± 0.15 a 7.10 ± 0.10 a 7.57 ± 0.40 a A+B 6.65 ± 0.15 a 8.00 ± 0.20 b 8.20 ± 0.10 b A+N 6.65 ± 0.15 a 8.05 ± 0.05 c 8.30 ± 0.10 c A+P 6.65 ± 0.15 a 8.05 ± 0.05 c 8.40 ± 0.10 d TSS (100 mg/L) Kontrol 106.30 ± 1.20 a 102.40 ± 1.10 d 98.00 ± 0.36 d A+B 106.30 ± 1.20 a 97.05 ± 0.35 b 68.25 ± 0.45 b A+N 106.30 ± 1.20 a 98.20 ± 0.60 c 74.20 ± 0.70 c A+P 106.30 ± 1.20 a 80.85 ± 0.45 a 62.85 ± 0,45 a Amonia (10 mg/L) Kontrol 16.10 ± 0.30 a 13.60 ± 0.85 d 13.00 ± 0.36 c A+B 16.10 ± 0.30 a 9.72 ± 0.14 c 1.40 ± 0.34 b A+N 16.10 ± 0.30 a 8.62 ± 0.12 b 1.13 ± 0.37 a A+P 16.10 ± 0.30 a 5.90 ± 0.01 a 1.02 ± 0.32 a Minyak dan lemak (15 mg/L) Kontrol 2.75 ± 0.25 a 2.60 ±0.20 c 3.00 ±0.05 c A+B 2.75 ± 0.25 a 2.35 ±0.05 a 2.15 ±0.05 a A+N 2.75 ± 0.25 a 2.45 ±0.05 b 2.25 ±0.05 b A+P 2.75 ± 0.25 a 2.15 ±0.05 a 1.95 ±0.05 a BOD (100 mg/L) Kontrol 70.85 ± 0.25 a 68.80 ±0.35 d 64.00 ±0.36 d A+B 70.85 ± 0.25 a 61.20 ±0.70 b 39.10 ±0.30 b A+N 70.85 ± 0.25 a 68.20 ±0.70 c 52.95 ±0.45 c A+P 70.85 ± 0.25 a 47.35 ±0.55 a 20.05 ±0.65 a COD (200 mg/L) Kontrol 256.45 ± 0.65 a 249.60 ± 0.75 d 247.30 ± 1.28 d A+B 256.45 ± 0.65 a 173.10 ± 0.40 b 84.91 ± 0.40 b A+N 256.45 ± 0.65 a 195.35 ± 0.55 c 108.15 ± 0.35 c A+P 256.45 ± 0.65 a 112.85 ± 0.65 a 79.95 ± 0.44 a
Keterangan :  A+B  (kombinasi  bakteri Acinetobacter  baumannii dan Bacilus  megaterium ); A+N (kombinasi bakteri A. baumannii dan Nitrococcus sp ); A+P (kombinasi bakteri A. baumannii dan Pseudomonas  putida ).  Data  pada  kolom  yang  sama  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda menyatakan berbeda nyata ( p <0,05). Batas maksimal yang dianjurkan berdasarkan pada peraturan Menteri Lingkungan Hidup No 5 tahun 2014 tentang Batas Mutu Air Limbah kegiatan pengolahan pembekuan hasil perikanan.
Aktivitas  mikroorganisme  akan  sangat ditentukan  oleh  derajat  keasaman  (pH)  air limbah  yang  optimum  pada  pH  6,5–8,3. Lingkungan  dengan  pH  >  9,5  dan  <  4 menyebabkan  mikroorganisme  tidak  aktif atau  bahkan  mati  (Jenie  dan  Rahayu,  2007). Pertumbuhan  mikroba  secara  normal  pasti menuju  pH  netral  sehingga  mikroba  dapat berkembang  biak  untuk  mendegradasi  bahan organik  yang  ada  dalam  limbah  cair. Peningkatan pH dapat disebabkan oleh mikro- organisme  dalam  limbah  yang  menghasilkan amoniak, mikroorganisme tersebut mengurai- kan  bahan-bahan  organik  dan  menghasilkan amonia  yang  dapat  menaikkan  nilai  pH (Megasari et al ., 2012). Silalahi et al . (2018),
menjelaskan bahwa peningkatan pH mengindikasikan bahwa terjadinya degradasi protein  menjadi  amonium  yang  merupakan bufer  alami.  Penguraian  senyawa  organik terdapat  pendegradasian  protein  menjadi amoniak nitrogen (NH 3 -N), kemudian bereaksi  dengan  air  membentuk  amonium nitrogen (NH 4 -N). Menurut  Jasmiyati et  al .  (2010), peningkatan nilai pH disebabkan oleh mikro- organisme yang merombak sisa bahan organik dari  limbah  cair.  Dari  penguraian  senyawa organik  dapat  menghasilkan  amoniak  dan karbon  dioksida  yang  secara  otomatis meningkatkan nilai pH. Ketersediaan oksigen menyebabkan  bahan  organik  pada  limbah
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
akan  terurai  menjadi  gas  CO 2 ,  NH 4 pada kondisi pH larutan basa, sehingga kadar bahan organik di dalam limbah akan berkurang.

## Nilai TSS
Pengolahan limbah cair pembekuan ikan kaca  piring  dengan  kombinasi  bakteri A. baumannii,  B.  megaterium,  Nitrococcus  sp . dan P.  putida memberikan  pengaruh  nyata terhadap nilai TSS, perubahan tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
TSS atau total padatan tersuspensi adalah padatan yang tersuspensi di dalam air berupa bahan-bahan  organik  dan  anorganik  yang dapat disaring dengan kertas millipore berpori 0,45 μm. Materi yang tersuspensi mempunyai dampak  buruk  terhadap  kualitas  air  karena mengurangi  penetrasi  matahari  ke  dalam badan air, sehingga kekeruhan air meningkat dan  menyebabkan  gangguan  pertumbuhan bagi  organisme  produser  (Indrayani  dan Rahmah, 2018).
Nilai  TSS  pada  limbah  cair  sebelum diberi  perlakuan  bakteri  (hari  ke-0)  yaitu 106,3 mg/L, kemudian mengalami penurunan pada  hari  ke  5  dan  10  dengan  tiga  macam kombinasi bakteri yaitu A+B, A+N dan A+P. Penurunan  nilai  TSS  berkisar  antara  97,05 hingga  62,85  mg/L  pada  hari  ke-5  dan  10 aerasi.  Jenis  kombinasi  bakteri  A+P  ( A. baumannii + P. putida ) memberikan penurun- an  yang  signifikan  pada  nilai  TSS  hari  ke-5 dan 10 dibandingkan dengan jenis kombinasi bakteri  lainnya  yaitu  mencapai  62,85  mg/L pada  hari  ke-10.  Menurut  peraturan  Menteri Lingkungan Hidup No 5 tahun 2014 kandung- an  TSS  maksimal  yaitu  sebesar  100  mg/L, maka hasil yang didapatkan dari penelitian ini menunjukkan  bahwa  kandungan  TSS  telah memenuhi standar karena nilai yang dihasilkan di bawah 100 mg/L.
Susilo et al . (2015), menjelaskan bahwa pengolahan  limbah  yang  semakin  lama menunjukkan semakin menurunnya kandung- an TSS yang terdapat pada limbah cair. Hal ini dikarenakan waktu tinggal pengolahan limbah yang lebih lama menyebabkan suplai oksigen dalam air secara kontinu terus meningkat dan berakibat  pada  aktivitas  degradasi  limbah secara aerob.
Penurunan  TSS  juga  dapat  disebabkan oleh mikroorganisme  yang  dapat  mengguna- kan  padatan  tersuspensi  dari  limbah  cair
industri  perkembangbiakan  dan  aktivasinya. Padatan tersuspensi yang berupa bahan-bahan organik  akan  mengalami  pembusukan  dan bahan  padatannya  akan  mengapung  oleh adanya dorongan gas yang menyebabkan bau busuk dan kotoran mengambang (Megasari et al .,  2012).  Doraja et  al .  (2012),  juga menjelaskan bahwa bahan organik  kompleks dihidrolisis menjadi organik sederhana (asam organik). Nilai TSS akan turun karena bahan organik yang berukuran besar diubah menjadi ukuran  yang  lebih  kecil  (proses  degradasi) serta  asam  organik  diubah  menjadi  karbon dioksida (CO 2 ) dan metana (CH 4 ).

## Nilai Amonia
Kombinasi  bakteri A.  baumannii,  B. megaterium,  Nitrococcus  sp .  dan P.  putida pada pengolahan limbah cair pembekuan ikan kaca  piring  memberikan  pengaruh  nyata terhadap  nilai  amonia,  perubahan  tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
Hasil  analisa  kadar  Amonia  hari  ke  0 sebelum  diberi  perlakuan  bakteri,  kadar amoniak  limbah  cair  pembekuan  ikan  kaca piring  didapatkan  hasil  16,1  mg/L.  Pada limbah  cair  yang  diberikan  perlakuan kombinasi bakteri yaitu A + B, A + N dan A +  P  menghasilkan  nilai  amonia  yang  jauh lebih  rendah  dibandingkan  dengan  kontrol. Nilai  Amonia  pada  kontrol  hari  ke-5  dan  10 yaitu 13,6 mg/L dan 13 mg/L, sedangkan pada pemberian  perlakuan  kombinasi  bakteri berkisar  antara  9,72  hingga  1,02  mg/L  pada hari ke-5 dan 10. Perlakuan kombinasi A + P ( A. baumannii + P. putida ) pada hari ke-5 dan 10  didapatkan  hasil  yang  lebih  rendah dibandingkan  perlakuan  kombinasi  bakteri A+B  dan  A+N  yaitu  5,90  mg/L  dan  1.02 mg/L.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa pengolahan limbah dengan penambah- an  kombinasi  bakteri  telah  memenuhi  syarat pada  peraturan  Menteri  Lingkungan  Hidup No  5  tahun  2014  yaitu  kandungan  amonia maksimal sebesar 10 mg/L.
Amonia yang berlebihan dalam air akan menimbulkan  penurunan  kadar  oksigen  ter- larut  dan  cenderung  bersifat  toksik  sehingga secara  tidak  langsung  akan  mempengaruhi kehidupan dalam air (Irianto, 2016). Dari hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  konsentrasi amonia  mengalami  penurunan  seiring  lama- nya  proses  pengolahan  limbah  cair.  Hal  ini
menerangkan  bahwa  proses  penguraian amonia  pada  saat  nitrifikasi  dilakukan  oleh mikroorganisme autotrof dan mikroorganisme heterotrof  untuk  mensintesis  sel.  Semakin lama  proses  tersebut  maka  konsentrasi amoniak  dalam  air  limbah  akan  semakin berkurang (Adisuasono et al ., 2014).
Untuk menyisihkan kandungan nitrogen di  dalam  air  limbah,  pada  kondisi  aerobik terjadi proses nitrifikasi, yaitu amonia diubah menjadi nitrat (NH 4 + NO 3 - ) dan pada kondisi anaerobik (anoxic) terjadi proses denitrifikasi, yaitu nitrat yang terbentuk diubah menjadi gas nitrogen  (NO 3 - N 2 )  (Satria et  al .,  2019). Perubahan pH pada air limbah menunjukkan bahwa telah terjadi aktivitas mikroorganisme yang mendegradasi bahan organik. Degradasi protein  dan  nitrogen  organik  yang  menjadi amonium (NH 4 ) dapat menaikkan pH menjadi basa.  Kondisi  pH  yang  relatif  tinggi  akan melarutkan  nitrogen  dan  selanjutnya  akan diemisikan sebagai amoniak (NH 3 ) (Doraja et al ., 2012).
Bakteri heterotrof dan autotrof menggu- nakan  oksigen  dalam  proses  pemanfaatan amonia.  Bakteri  heterotropik  adalah  bakteri yang  mengkonsumsi  oksigen  dalam  proses perubahan  amonia  dengan  produk  akhir berupa  biomassa  sel.  Beberapa  bakteri  yang memiliki  sifat  heterotrof  ialah E.  coli, Lactobacillus  bulgaricus dan Bacillus  sp. (Rosmaniar, 2011). Ditambahkan oleh
Agustiyani et al. (2004), bakteri pengoksidasi amonia  yang  bersifat  autotrofik  adalah kelompok bakteri yang berperan dalam proses oksidasi  amonia  menjadi  nitrit  pada  siklus nitrogen, juga pada proses peruraian nitrogen dalam sistem pengolahan limbah cair. Bakteri autotrofik  yang  berperan  dalam  oksidasi amonia  menjadi  nitrit  adalah Nitrosomonas, Nitrosococcus,  Nitrosospira,  Nitrosolobus , dan Nitrosovibrio.

## Nilai Minyak dan Lemak
Pengolahan limbah cair pembekuan ikan kaca  piring  dengan  kombinasi  bakteri A. baumannii,  B.  megaterium,  Nitrococcus  sp . dan P.  putida pada  memberikan  pengaruh nyata  terhadap  nilai  minyak  dan  lemak, perubahan tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
Hasil  analisa  kadar  Minyak  dan  Lemak hari  ke  0  sebelum  diberi  perlakuan  bakteri, kadar  minyak  dan  lemak  limbah  cair
pembekuan ikan kaca piring didapatkan hasil 2,75 mg/L. Kemudian pada kontrol hari ke 5 mengalami  penurunan  yaitu  2,6  mg/L  dan pada hari ke 10 mengalami peningkatan yaitu 3  mg/L.  Pada  semua  perlakuan  limbah  cair dengan kombinasi bakteri yang berbeda yaitu A+B,  A+N  dan  A+P  memiliki  nilai  minyak dan lemak lebih rendah dibandingkan dengan kontrol  baik  pada  hari  ke-5  dan  10,  berkisar antara 2,45 hingga 1,95 mg/L. Pada perlakuan kombinasi bakteri A+B dan A+P nilai minyak dan lemak tidak berbeda signifikan dan lebih rendah  dibandingkan  dengan  kombinasi bakteri A+N. Pada perlakuan kombinasi A + P  hari  ke-10  memiliki  nilai  terendah dibandingkan perlakuan lain yaitu 1,95 mg/L. Hasil  ini  menunjukkan  bawa  perlakuan kombinasi bakteri pada limbah cair pembekuan ikan kaca piring telah memenuhi peraturan  Menteri  Lingkungan  Hidup  No  5 tahun 2014 yaitu maksimal kandungan lemak sebesar 15 mg/L.
Menurut Januar et al . (2013) , penurunan kadar  lipid  disebabkan  oleh  aktivitas  kultur bakteri  untuk  merombak  senyawa  organik pada limbah tersebut. Perombakan oleh kultur bakteri  disebabkan  enzim membrane-bound oxygenase yang  dikeluarkan  bakteri.  Fungsi dari  enzim  tersebut  adalah  untuk  mening- katkan kontak secara langsung antara minyak dan  bakteri.  Dengan  demikian  minyak  dapat dimanfaatkan  oleh  bakteri  sebagai  sumber karbon.  Penurunan  kadar  minyak  dan  lemak juga  terjadi  karena  pemanfaatan  minyak  dan lemak  sebagai  substrat  oleh  bakteri  aerobik dan  juga  dimungkinkan  karena  proses fermentasi  (anaerob)  air  limbah  (Romayanto et al ., 2006).
Zalfiatri et al . (2017), menjelaskan bah- wa  bakteri  yang  dapat  menguraikan  minyak antara lain Bacillus sp. dan Pseudomonas sp., Pseudomonas sp.  Bakteri  tersebut  dapat menguraikan  kandungan  minyak  limbah  cair kelapa  sawit  (trigliserida)  menjadi  asam lemak  bebas  dengan  enzim  lipase  ekstrasel. Bacillus sp . juga  mampu  menguraikan  kan- dungan  minyak  limbah  cair  kelapa  sawit (Romayanto et  al .,  2006). Pseudomonas dan Rhodococcus dapat mendegradasikan limbah melalui  metabolis  sintropi  yang  terjadi  pada rantai metabolis (Maharani, 2017). A. bauma- nnii merupakan  bakteri  penghasil  enzim lipase  yang  dapat  mengkatalisis  hidrolisis

## Banin et al.
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
lipid/minyak  menjadi  produk  yang  larut (Parwata  dan  Oviantari,  2015). Beberapa proses inilah yang menyebabkan minyak dan lemak  pada  limbah  menurun  setelah  proses pengolahan limbah.

## Nilai BOD
Kombinasi  bakteri A.  baumannii,  B. megaterium,  Nitrococcus sp.  dan P.  putida pada pengolahan limbah cair pembekuan ikan kaca  piring  memberikan  pengaruh  nyata terhadap nilai BOD, perubahan tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
BOD  atau  Kebutuhan  Oksigen  Biologi adalah suatu karakteristik yang menunjukkan jumlah oksigen terlarut yang diperlukan oleh mikroorganisme  (biasanya  bakteri)  untuk mengurai atau mendekomposisi bahan organik dalam kondisi aerobik (Indrayani dan Rahmah, 2018).
Hasil  analisa  kadar  BOD  pada  limbah cair  pembekuan  ikan  kaca  piring  hari  ke  0 sebelum diberi perlakuan bakteri yaitu  70,85 mg/L dan mengalami penurunan pada kontrol hingga  64  mg/L  pada  hari  ke-10.  Perlakuan kombinasi bakteri A+B, A+N dan A+P pada limbah  cair  memberikan  penurunan  yang signifikan dibandingkan dengan kontrol yaitu antara 68,2 mg/L hingga 20,05 mg/L pada hari ke 5 dan 10. Perlakuan kombinasi bakteri A. baumannii dan P.  putida memberikan  penu- runan  yang  paling  signifikan  dibandingkan dengan  kombinasi  bakteri  lain  yaitu  47,35 mg/L dan 20,05 mg/L pada hari ke 5 dan 10. Pada  peraturan  Menteri  Lingkungan  Hidup No 5 tahun 2014 kandungan BOD maksimal yaitu  sebesar  100  mg/L,  maka  pada  limbah cair  pembekuan  kaca  piring  ini  sudah memenuhi  baku  mutu  yang  telah  ditetapkan. Pada penelitian Maharani dan Wesen (2018), menunjukkan  bahwa  aktivitas  dua  jenis bakteri P.  putid a  dan P.  aeruginosa mampu merombak  dan  mengoksidasi  secara  optimal bahan  organik  dan  anorganik  dalam  sampel limbah menjadi karbon dioksida dan air.
Penurunan  nilai  BOD  menunjukkan terjadinya proses penguraian senyawa organik. Jumlah bahan organik yang diuraikan semakin besar maka semakin banyak oksigen yang  digunakan  (Ibrahim et  al .,  2017). Senyawa  organik  tersebut  diuraikan  oleh bakteri aerob yang terdapat di dalam limbah. Semakin lama waktu pengolahan limbah, nilai
BOD  akan  semakin  menurun  karena  mikro- organisme pada air limbah akan mengoksidasi bahan organik menggunakan molekul oksigen sebagai  agen  pengoksidasian  dan  meng- uraikan  bahan  organik  sehingga  menyebab- kan  hilangnya  oksigen  terlarut  dalam  air (Zalfiatri et al ., 2017). Mikroorganisme yang banyak  melakukan  kolonisasi  dengan  suplai oksigen  yang  memadai,  mikroorganisme tersebut  akan  aktif  melakukan  degradasi senyawa organik dalam air limbah (Haerun et al .,  2018).  Penurunan  BOD  sebanding terhadap  peningkatan  nilai  pH  pada  limbah cair.  Peningkatan  pH  dapat  disebabkan  oleh terpakainya  oksigen  untuk  menguraikan bahan organik, sehingga kadar CO 2 menurun dan tertahannya bahan organik yang mempengaruhinya (Susilo et al ., 2015). Pengolahan dengan menggunakan
bakteri  aerobik  yang  diberi  aerasi  bertujuan untuk  menurunkan  karbon  organik  atau nitrogen  organik.  Dalam  hal  menurunkan karbon organik, bakteri yang berperan adalah heterotropik.  Sumber  energi  berasal  dari oksidasi senyawa organik dan sumber karbon adalah karbon organik. BOD dipakai sebagai ukuran atau satuan yang menyatakan konsen- trasi karbon organik. Bahan organik dalam air limbah  diuraikan  oleh  mikroorganisme  men- jadi karbon dioksida, amonia dan untuk pem- bentukan sel baru serta hasil lain yang berupa lumpur  (sludge).  Bakteri  juga  perlu  respirasi dan  melakukan  sintesis  untuk  kelangsungan hidupnya (Romayanto et al ., 2006).

## Nilai COD
Pengolahan limbah cair pembekuan ikan kaca  piring  dengan  kombinasi  bakteri A. baumannii,  B.  megaterium,  Nitrococcus  sp . dan P.  putida pada  memberikan  pengaruh nyata terhadap nilai COD, perubahan tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
COD  atau  Kebutuhan  Oksigen  Kimia adalah jumlah oksigen yang diperlukan untuk mengurai  seluruh  bahan  organik  yang terkandung dalam air (Indrayani dan Rahmah, 2018).  Nilai  COD  pada  limbah  cair  pembe- kuan ikan kaca piring hari ke-0 sebesar 256,45 mg/L dan sedikit mengalami penurunan pada hari  ke-5,  dan  10  yaitu  249,6  mg/L  dan  247 mg/L.  Pada  limbah  cair  yang  diberikan perlakuan  kombinasi  bakteri  A+B,  A+N  dan A+P  mengalami  penurunan  yang  signifikan
bila  dibandingkan  dengan  kontrol  baik  pada hari  ke  5  maupun  hari  ke-10  yaitu  antara 195,35 mg/L hingga 79,95 mg/L. Kombinasi bakteri A. baumannii dan P. putida memiliki nilai  COD  yang  terendah  bila  dibandingkan dengan  kombinasi  bakteri  lainnya  yaitu 112,85 pada hari ke 5 dan 79,95 pada hari ke 10. Peraturan Menteri Lingkungan Hidup No 5  tahun  2014  menegaskan  bahwa  maksimal kandungan  COD  yaitu  200  mg/L,  sehingga pemberian kombinasi bakteri pada limbah cair pembekuan  ikan  kaca  piring  memberikan penurunan nilai COD di bawah 200 mg/L.
Nilai BOD ditentukan dari bahan organik yang biodegradable ,  sedangkan  nilai  COD ditentukan dari bahan organik yang biodegra- dable maupun non-biodegradable sehingga penetapan  nilai  COD  selalu  lebih  tinggi  dari nilai BOD (Haerun et al ., 2018). Pada sampel limbah  cair  sebagai  kontrol  menunjukkah konsentrasi  BOD  maupun  konsentrasi  COD relatif  konstan  dari  hari  pertama  hingga  hari ke-10. Fungsi kontrol hanya sebagai pemban- ding  terhadap  perlakuan  limbah  cair  yang ditambahkan bakteri dan waktu proses aerasi.
Doraja et al. (2012), menjelaskan bahwa semakin lama waktu tinggal mikroorganisme akan memberikan waktu kontak antara bahan organik  yang  terdapat  dalam  limbah  cair dengan  mikroorganisme  juga  semakin  lama, sehingga degradasi senyawa organik (penurunan COD) menjadi besar. Hal ini juga didukung  oleh  penelitian  Jasmiyati et  al . (2010),  bahwa  mikroorganisme  mampu mendegradasi  limbah  secara  terus-menerus dan melakukan proses metabolisme sepanjang kebutuhan  energinya  terpenuhi  serta  akan menghasilkan  senyawa-senyawa  yang  dapat memberikan dampak terhadap turunnya nilai COD.  Nuryana  (2017)  menjelaskan  bahwa bakteri A.  baumannii dan Pseudomonas sp. mampu  menurunkan  kadar  COD  mencapai 86,282%  pada  bioremediasi  in  vitro  limbah minyak bumi pengilangan di Sungai Pakning.
Penurunan  dari  COD  dan  BOD  seban- ding  terhadap  peningkatan  nilai  pH  pada limbah cair, hal ini dapat disebabkan kondisi alkali  (pH  basa)  pertumbuhan  bakteri  lebih baik  dibandingkan  pada  kondisi  netral ataupun  asam.  Hal  ini  dapat  disebabkan proses  peningkatan  pH  akan  memperbesar laju  hidrolisis  senyawa  organik  kompleks sehingga  kemampuan  proses  biodegradasi
pada senyawa organik mengalami peningkat- an  pula  (Rohim et  al. ,  2015).  Susilo et  al. (2015), juga menjelaskan bahwa peningkatan pH  dapat  disebabkan  oleh  terpakainya oksigen  untuk  menguraikan  bahan  organik, sehingga kadar CO 2 menurun dan tertahannya bahan organik yang mempengaruhinya.

## Hubungan Antar Kombinasi Bakteri
A+B  (Acinetobacter  baumannii  +  Bacillus megaterium)
Genus Acinetobacter memiliki  karakte- ristik  morfologi  sel  bakteri  berbentuk  basil atau  kokobasil  dan  termasuk gram  negatif, tumbuh  dengan  baik  pada  semua  media kompleks  dengan  suhu  20-30 0 C.  Bakteri  ini secara  alami  hidup  di  dalam  tanah,  air  dan limbah (Choirunnisa et al ., 2017). Sedangkan genus Bacillus memiliki  karakteristik  mor- fologi sel  bakteri berbentuk  basil dan  terma- suk gram positif, dapat ditemukan di berbagai habitat  baik  di  tanah,  air  dan  makanan (Ningsih  dan  Ermavitalini,  2012).  Menurut Dwipayana et  al .  (2009), B.  megaterium memiliki beberapa sifat seperti memproduksi enzim katalase, dapat mendegradasi senyawa organik (protein, pati, selulosa, dan hidrokar- bon),  dapat  memfermentasikan  senyawa glukosa. Sedangkan A. baumannii juga dapat memproduksi  enzim  katalase  atau  katalase positif  (Noorhamdani,  2004).  Ditambahkan oleh Giyanto et al . (2009), A. baumannii dapat tumbuh  dengan  menggunakan  berbagai  jenis karbohidrat sebagai sumber nutrisi dan resis- tan terhadap berbagai antibiotik, sedangkan B. megaterium mampu  bertahan  dan  berkem- bang  biak  pada  sisa-sisa  bahan  organik  dan juga  berperan  sebagai  antibiotik.  Sehingga mampu  menghambat  perkembangan  mikro- organisme  patogen  lainnya  yang  tidak diinginkan.
Acinetobacter sp.  dapat  menggunakan nitrat  dan  amonia  sebagai  sumber  N. Kemampuan  dalam  mereduksi  nitrat  oleh bakteri  yang  terkandung  dalam  lumpur  aktif disebabkan  karena  bakteri  memiliki  enzim nitrat  reduktase  yang  ada  di  periplasma  dan enzim nitrat reduktase yang ada di membran plasma.  Dengan  memiliki  enzim  nitrat reduktase  tersebut  maka  bakteri  dapat mereduksi  nitrat  pada  kondisi  aerob  dan anaerob  (Megasari et  al .,  2012).  Selain  itu
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
Acinetobacter mampu  memfermentasikan laktosa dan sukrosa (Sayuti et al ., 2015). Bacillus sp. bersifat aerob dan fakultatif anaerob  serta  merupakan  salah  satu  bakteri yang bermanfaat dalam proses pengolahan air limbah. Bacillus sp. sangat  resistan  terhadap kondisi  yang  kurang  baik  seperti  suhu,  pH, dan  salinitas  sehingga  distribusinya  di  alam sangat  luas.  Peran  utama  bakteri  pada  ling- kungan  perairan  adalah  menguraikan  bio- massa  organik  dan  mendaur  ulang  berbagai elemen  penting  (nitrogen,  fosfor  dan  sulfur) yang  terdapat  pada  berbagai  macam  bahan organik yang masuk ke perairan. Bacillus sp. dapat memproduksi enzim ekstraseluler peng- urai  selulosa  dan  hemiselulosa  (Megasari et al ., 2012).
Bacillus sp. merupakan  bakteri  dekom- poser  bahan  organik  yang  tumbuh  dengan baik  pada  temperatur  (41  –  45 o C)  dan  pH  8 (Benito et al ., 2012). Hal ini  juga didukung oleh  Adharani  dan  Yusuf  (2019),  yang menegaskan bahwa aplikasi Bacillus sp. pada limbah  cair  mampu  mendegradasi  bahan organik dengan cara melepaskan enzim untuk menguraikan senyawa organik untuk mengha- silkan  produk  sampingan  berupa  gas  karbon dioksida (CO 2 ), metana (CH 4 ), hidrogen (H 2 ) dan air (H 2 O), serta energi sebagai penunjang aktivitas metabolisme (Retnosari dan
Shovitri, 2013).
A+N (Acinetobacter baumannii +

## Nitrococcus sp)
Kombinasi  ini  juga  memiliki  beberapa kesamaan sifat yaitu sama-sama bakteri gram negatif, termasuk golongan bakteri aerob, dan suhu pertumbuhannya 15-30 o C (Yahya et al ., 2014).  Menurut  Noorhamdani  (2004), A. baumannii dapat  memproduksi  enzim  kata- lase  atau  katalase  positif,  sedangkan Nitro- coccus sp. tidak memproduksi enzim katalase atau  kalase  negatif  namun Nitrococcus sp mampu mengoksidasi glukosa dan menstabil- kan konsentrasi asam yang tinggi dan mampu menghasilkan  enzim  urease  dan  melepaskan amonia (Nainggolan et al ., 2015).
Ditambahkan  oleh  Yahya et  al .  (2014), bakteri Nitrococcus sp.  bersifat  obligat kemolitotropik,  mampu  mengoksidasi  nitrit menjadi nitrat untuk menghasilkan energi dan memerlukan  CO 2 untuk  kebutuhan  karbon- nya.  Oksidasi  amonia  menjadi  nitrit  (nitrifi-
kasi tahap I) dilakukan oleh Nitrosomonas dan Nitrosococcus .  Nitrit  yang  terbentuk  dioksi- dasi lebih lanjut (nitrifikasi tahap II) menjadi nitrat oleh mikroba kemoautotrop lain seperti Nitrobacter dan Nitrococcus. Oleh karena itu Nitrococcus  sp digolongkan  sebagai  bakteri Nitrifikasi.
A+P (Acinetobacter baumannii + Pseudomonas putida) Menurut Nugroho (2012), Genus Acine- tobacter anggota  Moraxellaceae  keluarga  di urutan Pseudomonadales . A.  baumannii ter- masuk  bakteri  aerob  dari  golongan  bakteri gram negatif, suhu pertumbuhannya 20-30 o C dan  mempunyai  kelebihan  dapat  mengoksi- dasi  glukosa.  Ditambahkan  oleh  Noorham- dani (2004), bahwa A. baumannii dapat mem- produksi enzim katalase atau katalase positif, dapat bertahan hidup pada berbagai suhu, pH, dan  media  seperti  tanah,  air  dan  limbah. Bakteri  ini  juga  resistan  pada  semua  jenis antibiotik yang artinya bakteri ini tidak akan terganggu  dengan  kehadiran  bakteri  lain meski bersifat antibiotik, dan bakteri ini akan tetap bertahan. A. baumannii tergolong bakte- ri amilolitik yang dapat menguraikan amilum menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana  yang memudahkan penyerapan nutrisi. A.
baumannii juga memiliki aktivitas proteolitik yang  berfungsi  untuk  menghidrolisis  protein (Choirunnisa et al ., 2017).
Sedangkan P.  putida menurut  Yahya et al .  (2014),  yaitu  bakteri  aerob,  golongan bakteri  gram  negatif,  tumbuh  pada  kisaran suhu  25-30 o C.  Bakteri  jenis Pseudomonas merupakan bakteri kelompok proteolitik yang berperan  dalam  proses  dekomposisi  protein, serta  tergolong  bakteri  amilolitik  yang  ber- peran  dalam  menghidrolisis  amilum  (Choi- runnisa et al ., 2017). Ditambahkan oleh Suyo- no  dan  Salahudin  (2011),  bakteri P.  putida juga  memproduksi  enzim  katalase  atau katalase positif dan oksidase positif. Pseudo- monas banyak ditemukan pada tanah, tanam- an  dan  air. P.  putida dapat  menghilangkan kandungan  logam  Fe  pada  tanah  dan  juga mampu  menguraikan  trigliserida  menjadi asam  lemak  bebas  (Zalfiatri et  al .,  2017; Farida et al ., 2016).

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian penanganan limbah cair  industri  pembekuan  ikan  kaca  piring ( Sillago  sihama )  menggunakan  kombinasi bakteri Acinetobacter  baumanii,  Bacillus megaterium, Nitrococcus sp dan Pseudomonas putida secara aerob
memberikan  pengaruh  dalam  mendegradasi limbah  cair  meningkatkan  nilai  pH  dan menurunkan  nilai  TSS,  minyak  dan  lemak, amonia,  COD,  dan  BOD.  Kombinasi  bakteri A.  baumannii dan P.  putida memberikan pengaruh yang paling signifikan
dibandingkan  kombinasi  bakteri  lainnya, dengan  nilai  TSS  sebesar 63,85 mg/L,  kadar amoniak  (NH 3 )  sebesar  1,02  mg/L,  minyak dan  lemak  sebesar  1,95  mg/L,  BOD  sebesar 20,05  mg/L,  dan  COD  sebesar  79,95  mg/L. Hasil  pengolahan  limbah  cair  dengan kombinasi  bakteri  ini  telah  memenuhi peraturan  Menteri  Lingkungan  Hidup  No  5 tahun  2014  tentang  Batas  Mutu  Air  Limbah kegiatan pengolahan pembekuan hasil perikanan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adharani, N., Yusuf, F.I., 2019. Pemanfaatan Eceng  Gondok  ( Eichorma  crassipe ) dan Bacillus  megaterium Sebagai Bioremediator  Bahan  Organik  Dan Logam  Kromium  (Cr)  Pada  Limbah Laut Muncar Banyuwangi, in:
Prosiding  Seminar  Nasional  MIPA UNIBA. pp. 310–319. Adisuasono,  R.T.,  Wardana,  I.W.,  Sutrisno, E.,  2014.  Penurunan  Konsentrasi Amoniak Dalam Limbah Cair Domestik  Dengan  Teknologi  Kolam (Pond)-Biofilm Menggunakan Media Biofilter Pipa Pvc Sarang Tawon Dan
Bata Ringan. Tek. Lingkung. 3, 1–12.
Agustiyani, D., Imamuddin, H., Faridah, E.N., Oedjijono,  O.,  2004.  Pengaruh  pH dan  Substrat  Organik  Terhadap Pertumbuhan  dan  Aktivitas  Bakteri Pengoksidasi  Amonia.  Biodiversitas J. Biol. Divers. 5, 43–47. https://doi.org/10.13057/biodiv/d050 201
Benito, A.., Yuli, A.., Zamzam, D.., Sudiarto,
B.,  2012.  Identifikasi  Bakteri  yang Dominan  Berperan  pada  Proses
Pengomposan  Filtrate  Pengolahan Pupuk  Cair  Feses  Domba.  J.  Ilmu Ternak 12, 7–10. Bestari, N.C., Suharjono, 2015. Uji Kualitatif dan Kuantitatif Isolat Bakteri Lipolitik  dari  Limbah  Cair  Pabrik Pengolahan Ikan Kecamatan Muncar, Banyuwangi.  J.  Biotropika  3,  151–
155.
Choirunnisa,  H.N.,  Sari,  R.Y.,  Hastuti,  U.S., Witjoro,  A.,  2017.  Identifikasi  dan
Uji  Kemampuan  Hidrolisis  pada Bakteri  Amilolitik  dan  Proteolitik yang  Diisolasi  dari  Wadi,  Makanan Khas Kalimantan Tengah. J. Bionature 18, 99–109. Doraja, P.H., Shovitri, M., Kuswytasari, N.D., 2012. Biodegradasi Limbah Domestik Dengan  Menggunakan Inokulum Alami Dari Tangki Septik. J. Sains dan Seni ITS 1, 44–47. Dwipayana,  Ariesyady,  H.D.,  Sukandar, 2009. Identifikasi Keberagaman Bakteri Pada Lumpur Hasil Pengolahan  Limbah  Cat  Dengan Teknik Konvensional. J. Tek. Lingkung. 15, 7–17.
Farida,  A.N,  2016. Peran  Bakteri Bacillus cereus dan Pseudomonas  Putida Dalam Bioremediasi Logam Berat (Fe,  Cu,  dan  Zn)  Pada  Tanah Tercemar  Minyak  Bumi.  Skripsi
Jurusan  Teknik  Kimia  Fakultas Teknologi Industri. Institut Teknologi  Sepuluh  Nopember Surabaya Giyanto, Suhendar, A., Rustam, 2009. Kajian Pembiakan Bakteri Kitinolitik Pseudomonas fluorescens dan
Bacillus  sp .  Pada  Limbah  Organik
Dan  Formulasinya  Sebagai  Pestisida Hayati  (Bio-Pesticide),  in:  Prosiding Seminar  Hasil-Hasil  Penelitian  IPB. pp. 849–858.
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
Haerun, R., Mallongi, A., Natsir, M.F., 2018.
Efisiensi  Pengolahan  Limbah  Cair Industri Tahu Menggunakan Biofilter
Sistem Upflow Dengan Penambahan Efektif  Mikroorganisme  4.  J.  Nas.
Ilmu Kesehat. 1, 1–11.
Ibrahim,  B.,  2004.  Pendekatan  Penerapan Produksi Bersih Pada Industri Pengolahan  Hasil  Perikanan.  Bul. Teknol.  Has.  Perikan.  7,  1–11. https://doi.org/10.17844/jphpi.v7i1.1 049
Ibrahim, B., Suptijah, P., Adjani, Z.N., 2017.
Kinerja Microbial Fuel Cell Penghasil Biolistrik  Dengan  Perbedaan  Jenis Elektroda  Pada  Limbah  Cair  Industri Perikanan.  J.  Pengolah.  Has.  Perikan. Indones. 20, 296–304. https://doi.org/10.17844/jphpi.v20i2.1 7946 Indrayani,  L.,  Rahmah,  N.,  2018.  Nilai
Parameter  Kadar  Pencemar  Sebagai Penentu Tingkat Efektivitas Tahapan
Pengolahan  Limbah  Cair  Industri Batik. J. Rekayasa Proses 12, 41–50. https://doi.org/10.22146/jrekpros.357 54
Irianto,  K.,  2016.  Penanganan  Limbah  Cair, PT. Percetakan Bali Denpasar.
Ishartanto, W.A., 2009. Pengaruh Aerasi dan Penambahan  Bakteri  (Bacillus  sp) dalam  Mereduksi  Bahan  Pencemar Organik  Air  Limbah  Domestik. Skripsi.  Fak.  Perikan.  dan  Ilmu
Kelaut.  Inst.  Pertan.  Bogor.  Institut Pertanian Bogor. Januar, W., Khotimah, S., Mulyadi, A., 2013. Kemampuan Isolat Bakteri Pendegradasi  Lipid  dari  Instalasi Pengolahan  Limbah  Cair  PPKS PTPN-XIII Ngabang Kabupaten Landak. J. Protobiont 2, 136–140. Jasmiyati, Anita, S., Thamrin, 2010. Bioremediasi  Limbah  Cair  Industri Tahu Menggunakan Efektif Mikroorganisme (EM4). Ilmu Lingkung. 2, 148–158. Jenie, B.S.L., Rahayu, W.P., 2007. Penanganan  limbah  industri  pangan. Kanisius, Yogyakarta. Junaidi,  Hatmanto,  B.P.D.,  2006.  Analisis
Teknologi  Pengolahan  Limbah  Cair Pada Industri Tekstil (Studi Kasus Pt. Iskandar  Indah  Printing  Textile Surakarta).  J.  Presipitasi  1,  1–6. https://doi.org/10.14710/presipitasi.v 1i1.1-6
Maharani,  V.S.,  2017.  Studi  Literatur: Pengolahan  Minyak  dan  Lemak Limbah Industri. Skripsi Departemen Teknik  Lingkungan  Fakultas  Teknik Sipil dan Perencanaan. Institut Teknologi Sepuluh Nopember Surabaya. Maharani, M. dan Wesen, P. 2018. Degradasi LAS  dan  BOD  dengan  Proses Lumpur Aktif Menggunakan Kombinasi  Bakteri Pseudomonas Aeruginosa dan Pseudomonas Putida . J. Envirotek., 9 (2). Megasari,  R.,  Biyatmoko,  D.,  Ilham,  W., Hadie, J., 2012. Identifikasi Keragaman Jenis Bakteri Pada Proses Pengolahan  Limbah  Cair  Industri Minuman  Dengan  Lumpur  Aktif
Limbah Tahu. EnviroScienteae 8, 89– 101.
Mukhtasor,  2007.  Pencemaran  pesisir  dan laut, PT. Pradnya paramita Jakarta.
Nainggolan, T.A., Khotimah, S., Turnip, M.,
2015.  Bakteri  Pendegradasi  Amonia Limbah Cair Karet Pontianak Kalimantan  Barat.  J.  Protonbiont  4, 69–76.
Ningsih,  R.S.,  Ermavitalini,  D.,  2012. Bioaugmentasi Bakteri Pelarut Fosfat Genus  Bacillus  pada  Modifikasi Media  Tanam  Pasir  dan  Kompos (1:1)  untuk  Pertumbuhan  Tanaman
Sawi  ( Brassica  sinensis ).  Institut Teknologi Sepuluh Nopember Surabaya. Noorhamdani, 2004. Aktivitas Hemaglutinasi Bakteri Acinetobacter  baumannii yang  Berasal  Dari  Spesimen  Klinik
Dan Lingkungan. J. Kedokt. Brawijaya 20, 105–109. Nugroho,  R.B.A.S.,  2012.  Hubungan  Faktor Risiko  Terjadinya  Acinetobacter  Sp Mdro  Terhadap  Kematian  Penderita Sepsis  Di  Picu  Rumah  Sakit  Dr Kariadi Semarang. Universitas Diponegoro. Nuryana,  D.  2017.  Review:  Bioremediasi Pencemaran Minyak Bumi. Journal of Earth Energy Engineering, 6 (2) : 9- 13 Pamungkas, M.T.O.A., 2016. Studi Pencemaran  Limbah  Cair  Dengan Parameter  BOD5  Dan  pH  Di  Pasar Ikan  Tradisional  Dan  Pasar  Modern Di Kota Semarang. J. Kesehat. Masy.
4, 166–175.
Parwata, P.I., Oviantari, M.V., 2015. Produksi Lipase dari Acinetobacter baumannii Teramobil,  in:  Seminar  Nasional Riset Inovatif III. pp. 496–503. Retnosari, A.A., Shovitri, M., 2013. Kemampuan Isolat Bacillus sp. dalam Mendegradasi Limbah Tangki Septik. J.  Sains  dan  Seni  Pomits  2,  2337– 3520. Rohim,  M.F.,  Samudro,  G.,  Sumiyati,  S., 2015. Pengaruh Konsentrasi Chemical  Oxygen  Demand  (COD) dan  pH  Terhadap  Kinerja  Dual Chamber Microbial Fuel Cells
(DCMCs). J. Tek. Lingkung. 1–10. Romayanto,  M.E.W.,  Wiryanto,  Sajidan, 2006.  Pengolahan  Limbah  Domestik dengan  Aerasi  dan  Penambahan Bakteri Pseudomonas putida . Bioteknologi 3, 42–49. https://doi.org/10.13057/biotek/c030 202 Rosmaniar, 2011. Dinamika Biomassa Bakteri Dan Kadar Limbah Nitrogen Pada  Budidaya  Ikan  Lele  ( Clarias gariepinus ) Intensif Sistem Heterotrofik. Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Saputra,  A.D.,  Haeruddin,  Widyorini,  N., 2016. Efektivitas Kombinasi
Mikroorganisme  dan  Tumbuhan  Air Lemna minor Sebagai Bioremediator Dalam Mereduksi Senyawa Amoniak,  Nitrit,  Dan  Nitrat  Pada Limbah Pencucian Ikan. Diponegoro J. Maquares (Management Of Aquat. 5, 80–90. Sartika,  S.,  Apriani,  I.,  Pramadita,  S.,  2021. Efektivitas Tanaman Kiambang (Salvinia  Molesta)  dan  Tanaman Coontail  ( Ceratophyllum  demersum ) Dalam  Pengolahan  Limbah  Cair Pencucian Ikan. J. Rekayasa Lingkung. Trop. 5, 1–10. Satria,  A.W.,  Rahmawati,  M.,  Prasetya,  A., 2019. Pengolahan Nitrifikasi Limbah
Amonia  dan  Denitrifikasi  Limbah Fosfat  dengan  Biofilter  Tercelup.  J. Teknol.  Lingkung.  20,  243–250.
https://doi.org/10.29122/jtl.v20i2.34
79
Sayuti,  I.,  Nursal,  Butar-butar,  I.H.,  2015.
Isolasi  Dan  Identifikasi  Bakteri Limbah  Minyak  Bumi  Dari  Perairan Pelabuhan Sungai Duku Kota Pekanbaru Sebagai Rancangan Modul Pembelajaran Biologi SMA. J. Online  Mhs.  Fak.  Kegur.  dan  Ilmu Pendidik. Univ. Riau 1–15. Silalahi,  F.T.N.,  Halimatuddahliana,  Husin, A.,  2018.  Pengolahan  Limbah  Cair Tahu Menggunakan Bioreaktor Anaerob Satu Tahap Dan Dua Tahap Secara  Batch.  J.  Tek.  Kim.  USU  7, 34–40.
https://doi.org/10.32734/jtk.v7i1.163
4 Suligundi, B.T., 2013. Penurunan Kadar COD (Chemical  Oxygen  Demand)  Pada Limbah Cair Karet Dengan Menggunakan Reaktor Biosand Filter Yang  Dilanjutkan  Dengan  Reaktor Activated Carbon. J. Tek. Sipil Untan
13, 29–44.
Susilo, F.A.P., Suharto, B., Susanawati, L.D., 2015.  Pengaruh  Variasi  Waktu Tinggal  Terhadap  Kadar  BOD  dan COD Limbah Tapioka dengan Metode Rotating Biological

## Banin et al.
DOI: http://dx.doi.org/10.35941/jtaf.3.1.2021.6119.49-62
Contactor.  J.  Sumberd.  Alam  dan Lingkung. 2, 21–26. Suyono, Y., Salahudin, F., 2011. Identifikasi dan Karakterisasi Bakteri Pseudomonas Pada  Tanah  Yang Terindikasi  Terkontaminasi  Logam.
J. Biopopral Ind. bal 2, 8–13.
Yahya, Nursyam, H., Risjani, Y., Soemarno, 2014. Karakteristik Bakteri di Perairan  Mangrove  Pesisir  Kraton Pasuruan. Ilmu Kelautan. 19, 35–42. https://doi.org/10.14710/ik.ijms.19.1. 35-42 Zahidah,  D.,  Shovitri,  M.,  2013.  Isolasi  , Karakterisasi  dan  Potensi  Bakteri Aerob Sebagai Pendegradasi Limbah Organik. J. Sains dan Seni Pomits 2, 2337–3520. Zalfiatri, Y., Restuhadi, F., Maulana, T., 2017. Pemanfaatan Simbiosis Mikroorganisme B-DECO3 dan Mikroalga Chlorella sp untuk Menurunkan  Pencemaran  Limbah Cair  Pabrik  Kelapa  Sawit.  Din. Lingkung. Indones. 4, 8–17. https://doi.org/10.31258/dli.4.1.p.8- 17