Aktivitas Ekstrak Daun Kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack) sebagai Hepatoprotektor pada Tikus yang Terpapar Asap Rokok
The Activity of Kemuning Leaves Extract ( Murraya paniculata (L.) Jack) as Hepatoprotector of Rats Exposed By Cigarette Smoke
Ani Pahriyani 1 *, Hadi Sunaryo 2 , Desti Kurnia 3 1 FFS UHAMKA, Jakarta Timur, DKI Jakarta, Indonesia anipahriyani@uhamka.ac.id

## ABSTRAK
Rokok merupakan sumber radikal bebas yang dapat menyebabkan stress oksidatif dan dapat  merusak  fungsi  organ-organ  penting  dalam  tubuh  diantaranya  organ  hati  yang  ditandai dengan peningkatan kadar SGPT dan SGOT . Penelitian bertujuan mengetahui aktivitas ekstrak etanol  70%  daun  kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) terhadap  penurunan  kadar SGPT dan SGOT pada tikus yang dipapar asap rokok.
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  menggunakan  25  tikus  yang  dibagi  menjadi  5 kelompok yaitu kontrol normal(Ko), kontrol negative(Kn), dan 3 kelompok perlakuan yang diberi ekstrak etanol 70% daun kemuning dengan dosis 100 mg/KgBB (K1), 200 mg/KgBB (K2), dan 400 mg/KgBB (K3). Data kadar SGPT dan SGOT dianalisis dengan ANOVA satu arah dan uji Tukey.
Hasil ANOVA satu arah menunjukkan terdapat pengaruh perlakuan terhadap kontrol ( p <  0,05).  Hasil  uji  Tukey  dapat  dilihat  bahwa  kadar SGPT pada  dosis  II  dan  III  berbeda bermakna  dengan  kontrol  negatif  dan  tidak  berbeda  bermakna  dengan  kontrol  normal  dengan hasil  kadar  sebesar  34,6  U/L  (dosis  II)  dan  14,4  U/L  (dosis  III).  Pada  kadar SGOT semua kelompok  perlakuan  menunjukkan  hasil  berbeda  bermakna  dengan  kontrol  negatif  dan  tidak berbeda bermakna dengan kontrol normal dengan nilai sebesar 193,6 U/L (dosis I), 191,4 U/L (dosis  II),  156,6  U/L  (dosis  III).  Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol 70% daun kemuning memiliki aktivitas sebagai hepatoprotektor.
Kata kunci : asap rokok, ekstrak kemuning, Murraya paniculata (L.) Jack), SGOT dan SGPT

## ABSTRACT
Cigarettes  is  a  source  of  free  radicals  that  can  cause  oxidative  stress.  It  can  cause functional  failure  of  vital  organs  in  the  body  including  the  liver  that  indicated  by  SGPT  and SGOT  increment.  This  research  was  aimed  to  observe  the  activity  of  70%  ethanol  extract  of kemuning leaves (Murraya paniculata (L.) Jack) on SGPT and SGOT  digression of male white rats exposed by cigarette smoke.
This  research  was  performed  using  25  rats  that  were  divided  into  5  groups:  normal control (Ko), negative control (Kn), and 3 treatment groups that were given 70% ethanol extract of  kemuning  leaves  with  100  mg  /  KgBW  (K1),  200  mg  /  KgBW  (K2),  and  400  mg  /  KgBW (K3).The SGPT and SGOT levels were analyzed by one-way ANOVA and Tukey test.
One-way ANOVA results showed there was a treatment effect on controls (p <0.05). The  results  of  the  Tukey  showed  that  the  SGPT  levels  in  doses  II  and  III  were  significantly different from the negative  controls but did  not differ significantly from the normal controls  with level value of 34.6 U / L (dose II) and 14.4 U / L (dose III) . At SGOT levels all treatment groups showed  significantly  different  comparing  to  negative  controls  and  not  significantly  different  to normal controls with level value of 193.6 U / L (dose I), 191.4 U / L (dose II), 156.6 U / L L (dose III).  It  can  be  concluded  that  70%  ethanol  extract  of  kemuning  leaves  has  activity  as  a hepatoprotector
Keywords : ciggarete  smoke,  kemuning  extract,  Murraya  paniculata  (L.)  Jack),  SGOT  dan SGPT
PENDAHULUAN
Rokok  merupakan  hasil  olahan
tembakau terbungkus cerutu atau
bentuk lain yang dihasilkan dari tanaman Nicotianatabacum,  Nicotiana rustica , dan spesies lain atau sintesisnya  yang  mengandung  nikotin dan  tar  dengan  atau  tanpa  tambahan lainnya  (Kemenkes  RI  2010).  Masalah yang  ditimbulkan  rokok  belum  bisa tertangani  secara  optimal  hingga  saat ini.  Jumlah  perokok  di  seluruh  dunia terus  mengalami  peningkatan  dari tahun  ke  tahun.  Data  dari  GATS  tahun 2011  menyebutkan  bahwa  Indonesia merupakan  negara  ketiga  dengan jumlah  perokok  tertinggi  di  dunia setelah Cina dan India dengan prevalensi  perokok  sebanyak  36,1% (Sudibyo et al. 2013). WHO memperkirakan  separuh  kematian  di Asia dikarenakan tingginya peningkatan penggunaan tembakau. Angka
kematian  akibat  rokok  di  negara berkembang  meningkat  hampir  4  kali lipat. Pada tahun 2000 jumlah kematian akibat rokok sebesar 2,1 juta dan pada tahun  2030  diperkirakan  menjadi  6,4 juta  jiwa.  Sedangkan  di  negara  maju kematian akibat rokok justru mengalami penurunan,  yaitu  dari  2,8  juta  pada tahun  2000  menjadi  1,6  juta  jiwa  pada tahun 2030 (Sudibyo et al. 2013).
Telah  diketahui  bahwa  sebatang rokok  memiliki  berbagai  macam  bahan kimia  yang  terkandung  di  dalamnya. Apabila  rokok  tersebut  dibakar,  akan menghasilkan sekitar 4.800 jenis senyawa  bahan  kimia,  di  antaranya adalah  nikotin, hydrogen  cyanide ,  gas karbon  monoksida,  akrolein,  nitrogen oksida,  tar,  ammonia,  benzene,  dan etanol.  Beberapa  kandungan  rokok
tersebut  dapat  memberikan  dampak buruk  terhadap  kesehatan  (Unitly et  al. 2014).  Tar  merupakan  salah  satu sumber  radikal  bebas,  karena  tar mengandung  ion  besi,  semiquinol  dan hidroquinol. Ketiga bahan tersebut akan menghasilkan  radikal  peroksil  dan hidrogen  peroxida.  Jika  radikal  bebas masuk  ke  dalam  tubuh  secara  terus menerus  akan  membahayakan  bagi kesehatan, dikarenakan sel tubuh akan mengalami  stres  oksidatif  dan  pada akhirnya sel akan mengalami kerusakan  tak  terkecuali  sel  hati (Muliartha 2009). Organ hati sangat rentan terhadap  kerusakan  yang  disebabkan oleh  asap  rokok  yang  bisa  memicu terjadinya stres oksidatif. Sebagai organ  yang  berfungsi  untuk  melakukan detoksifikasi  hati  menghasilkan  enzim yang dapat digunakan sebagai parameter  kerusakan  hati.  Dua  macam enzim aminotransferase tersebut adalah Serum  Glutamic-Oxaloacetic
Transaminase ( SGOT )  dan Serum Glutamic  Pyruvic  Transaminase(SGPT) (Apreliantino et al . 2012).
Penelitian  Gautam et  al. (2012)
melaporkan bahwa ekstrak daun
kemuning  yang  diuji  secara in  vivo memiliki antioksidan melalui peningkatan  kadar GSH  (Glutathione Peroxides). Pemberian  dosis  oral  100 mg/kgBB  menghasilkan  kadar GSH 1,50  mmol/g  dan  dosis  400  mg/kgBB menghasilkan kadar GSH sebesar 2,15 mmol/g.  Selain  itu,  pada  penelitian secara in  vitro diperoleh  hasil,  bahwa ekstrak etanol daun kemuning mempunyai  nilai  IC50  sebesar  126,17 µg/ml. Daya antioksidan daun kemuning  kemungkinan  ditimbulkan
oleh karena adanya kandungan flavonoidnya (Rohman 2005). Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui pengaruh
pemberian
ekstrak etanol daun kemuning terhadap kadar SGPT dan SGOT tikus  putih jantan yang dipapar asap rokok.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan penelitian
Peralatan  yang  digunakan  ialah vaccum rotary evaporator, spektofometri  klinacal  varta,  centrifuge , smoking chamber. Bahan yang digunakan yaitu: daun kemuning ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) yang diperoleh  dari  Balitro,  etanol  70%, serum  darah  tikus,  reagen  kit SGPT dan SGOT , rokok kretek tanpa filter.

## Pembuatan ekstrak
Simplisia  yang  telah  diserbuk  di maserasi  dengan  cara  dimasukkan  ke dalam  botol  berwarna  gelap,  maserasi dilakukan  dengan  cara  menuangkan etanol  70%  sampai  seluruh  serbuk terendam dan pelarut dilebihkan
setinggi  kurang  lebih  2  cm  di  atas permukaan serbuk simplisia dan
didiamkan selama 3 hari sambil
sesekali diaduk agar senyawa-senyawa yang  terkandung  di  dalam  daun  dapat lebih larut. Setelah itu disaring, maserat yang diperoleh disimpan sebagai maserat  1.  Selanjutnya  ampas  diberi perlakuan yang sama seperti maserat 1 hingga  diperoleh  maserat  2  dan maserat  3.  Ketiga  maserat  kemudian dicampur  dan  pelarut  diuapkan  dengan vacum  rotary  evaporator pada  tekanan rendah  dan  suhu  tidak  lebih  dari  50 ℃ hingga  diperoleh  ekstrak  kental  dan pekat  tetapi  masih  dapat  mengalir.
Selanjutnya  dikeringkan  dalam  oven pada suhu 40 ℃ selama 7 hari sehingga diperoleh  ekstrak  kering  (Depkes  R1 2008).

## Uji penapisan fitokimia
Uji  penapisan  fitokimia  yang diujikan  pada  ekstrak  etanol  70%  daun kemuning,  yaitu  senyawa  alkaloid, flavonoid,  saponin,  triterpenoid  dan tanin.

## Pemeriksaan mutu ekstrak
Pemeriksaan mutu ekstrak etanol  70%  daun  kemuning  meliputi penetapan kadar abu, susut pengeringan, dan perhitungan rendemen.

## Pemaparan asap rokok
Rokok  yang  digunakan  adalah rokok  kretek  tanpa  filter.  Tikus  diberi paparan asap rokok 2 kali dalam sehari dalam waktu 10 menit. Proses paparan dilakukan  pada  pagi  dan  sore  hari. Pemaparan  dilakukan  selama  14  hari. 30  menit  setelah  paparan  tikus  diberi ekstrak  etanol  daun  kemuning  peroral sesuai kelompok dosis dan berat badan tikus  yang  dilakukan  pada  sore  hari atau  pemaparan  kedua.  Pemaparan asap rokok menggunakan alat modifikasi smoking, dimana menggunakan  spuit  50  cc  kemudian ujungnya  diberi yellow  tip, lalu  siapkan selang  plastik  sesuai  dengan  ukuran rokok dan  pasangan  di dalam  kandang khusus  pengasapan,  kemudian  asap rokok disedot menggunakan spuit yang ujungnya  dipasangkan  dengan yellow tip .  Asap  rokok  kemudian  ditransferkan ke dalam kandang khusus pengasapan hewan  coba.  Hal  tersebut  dilakukan sampai rokok habis ±5 menit.

## Perlakuan hewan percobaan
Penelitian  ini  dibagi  menjadi  5 kelompok,  masing-masing  kelompok terdiri  dari  5  ekor tikus dan  pemaparan asap rokok dilakukan selama 14 hari.
1.  Kontrol  normal  yaitu  kelompok tikus tanpa perlakuan
2.  Kontrol negatif yaitu kelompok tikus yang  dipapari  asap  rokok  tanpa pemberian  ekstrak  etanol  70% daun kemuning
3.  Kelompok  perlakuan  dosis  I  yaitu kelompok  tikus  yang  dipapari  asap rokok  dan  diberi        ekstrak  daun kemuning  sebanyak  100  mg/KgBB selama 14 hari
4.  Kelompok  perlakuan  dosis  II  yaitu kelompok  tikus  yang  dipapari  asap rokok  dan  diberi  ekstrak  daun kemuning  sebanyak  200  mg/KgBB selama 14 hari.
5.  Kelompok  perlakuan  dosis  III  yaitu kelompok  tikus  yang  dipapari  asap rokok  dan  diberi  ekstrak  daun kemuning  sebanyak  400  mg/KgBB selama 14 hari.

## Pengambilan sampel darah
Pada  hari  ke-15  semua  hewan
percobaan dibius menggunakan
ketamin  lalu  dibedah,  dan  dilakukan pengambilan darah pada organ jantung tikus.  Pengambilan  darah  pada jantung menggunakan  spuit.  Sampel  darah dimasukan  ke  dalam  tabung  reaksi tanpa antikoagulan untuk mendapatkan serumnya.  Tabung  reaksi  yang  berisi darah  tanpa  antikoagulan  didiamkan selama  60  menit  pada  suhu  kamar. Kemudian disentrifugasi dengan kecepatan  1500  rpm  selam  15  menit. Cairan  bening  di  atas  sel  darah  yang menggumpal selanjutnya diambil dengan  pipet  mikro  dan  dimasukan  ke dalam  tabung  ependorf.  Kemudian dilakukan pengukuran kadar SGOT dan SGPT dengan  menggunakan  reagen Kit.

## Analisis data
Data  yang  diperoleh  dianalisis terlebih  dahulu  dengan  uji  prasyarat, yaitu uji Normalitas Kolmograv-Smimov (K-S) dan uji homogenitas Levene. Bila data  homogen  dan  terdistribusi  normal maka  dilanjutkan  dengan  uji  analisa varian  (ANAVA)  satu  arah  pada  taraf kepercayaan  (a=0,05).  Bila  nilai  sig <0,05  maka  dilanjutkan  dengan  uji perbandingan berganda (Tukey).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan ekstrak etanol 70% daun kemuning
Tabel 1. Hasil ekstrak etanol 70% daun kemuning No  Jenis Hasil 1 Daun kemuning segar 5kg 2 Daun kemuning kering 2,5 kg 3 Serbuk kering 1kg 4 Ekstrak kental etanol 70% daun kemuning 156,246 g
Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak
Tabel 2. Hasil Rendemen, Kadar Abu Total, dan Susut Pengeringan
Ekstrak Etanol 70% Daun Kemuning No  Jenis Uji Hasil (%) 1 Rendemen Ekstrak 15,62 2 Kadar Abu Total 5,87 3 Susut Pengeringan 4,03 Uji penapisan fitokimia Tabel 3. Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Daun Kemuning No Penapisan Hasil 1 Alkaloid + 2 Saponin + 3 Flavonoid + 4 Tanin + 5 Terpenoid dan steroid - Keterangan : (+) = Ada (-) = Tidak ada
Hasil pengukuran kadar SGOT dan SGPT
Gambar 1 Grafik Rata-Rata Pengukuran Kadar SGOT
Hasil pengukuran kadar SGOT menunjukkan data yang didapat terdistribusi  normal  dan  bervariasi homogen ( p > 0,05).
Kemudian
dilanjutkan  dengan  uji  ANOVA  satu arah dan hasilnya menunjukkan adanya perbedaan  ( p< 0,05).  Hasil  dari  uji
193,6 191,4 156,6 101,2 294,2 0 50 100 150 200 250 300 350 dosis 1 dosis 2 dosis 3 normal negatif A K TIV ITA S (U/L) KELOMPOK Kadar SGOT
Tukey menunjukkan terdapat perbedaan
Gambar 2 Grafik Rata-Rata Pengukuran Kadar SGPT antara kelompok negatif dengan kontrol normal,  dosis  1,  dosis  2,  dan  dosis  3.
Pada kelompok
negatif terjadi peningkatan  kadar SGOT hal  ini dikarenakan kelompok negatif merupakan  kelompok  yang  dipapari asap rokok. Nilai rata-rata pada kelompok ini yaitu 294,2. Paparan asap rokok  dapat  menginduksi  kerusakan pada  hati  karena  asap  rokok  banyak mengandung  senyawa  radikal  bebas dan  menyebabkan  stress  oksidatif sehingga  dapat  merusak  organ  seperti hati (Muliartha 2009).
Pada dosis 1, dosis 2, dan dosis
3 mempunyai kemampuan dalam menurunkan kadar SGOT jika dibandingkan dengan kelompok negatif, tetapi masih belum efektif bila dibandingkan dengan kelompok normal (Gambar  1).Hasil  pengukuran  kadar
SGPT menunjukkan  data  yang  didapat terdistribusi  normal  dan  bervariasi homogen ( p > 0,05).
Kemudian dilanjutkan  dengan  uji  ANOVA  satu
arah dan hasilnya menunjukkan adanya perbedaan  ( p< 0,05).  Hasil  dari  uji Tukey menunjukkan terdapat
perbedaan  bermakna  antara  kelompok negatif  dengan kontrol  normal,  dosis  2, dan  dosis  3  tetapi  tidak  berbeda bermakna  dengan  dosis  1.  Pada kelompok  negatif  terjadi  peningkatan kadar SGPT hal  ini  dikarenakan kelompok  negatif  merupakan  kelompok yang  dipapari  asap  rokok.  Nilai  rata- rata  pada  kelompok  ini  yaitu  86,6. Paparan asap rokok dapat menginduksi kerusakan pada hati karena asap rokok banyak  mengandung  senyawa  radikal bebas dan menyebabkan stress oksidatif sehingga dapat merusak
organ  seperti  hati  (Muliartha  2009). Adanya peningkatan kadar SGPT merupakan indikator terjadinya kerusakan pada hati. Hal ini dikarenakan SGPT merupakan  enzim yang utama banyak ditemukan pada sel hati  yang  efektif  dalam  mendiagnosis kerusakan pada hati (Kee 2007).
62 34,6 14,4 12,2 86,6 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Normal Negatif A K TIV ITA S (U/L) KELOMPOK Kadar SGPT
Hasil analisa statistik pada dosis 1  tidak  terdapat  perbedaan  bermakna dengan  kelompok  negatif.  Hal  ini menandakan dosis 1 belum mempunyai efek hepatoprotektor karena tidak berbeda  bermakna  dengan  kelompok negatif.Analisa  statistik  pada  dosis  2 menunjukkan terdapat
perbedaan bermakna  dengan  kelompok  negative.
Hal ini menandakan dosis 2 mempunyai kemampuan dalam menurunkan  kadar SGPT tetapi  masih belum  efektif  bila  dibandingkan  dengan dosis 3 dan kontrol normal (Gambar 2)
Hasil analisa statistik pada dosis 3  menunjukkan  terdapat  perbedaan bermakna  dengan  kelompok  negatif tetapi  tidak  berbeda  bermakna  dengan kontrol  normal.  Hal  ini  menandakan dosis 3 mempunyai kemampuan menurunkan kadar SGPT dan
mempunyai  efek  hepatoprotektor  yang sebanding dengan kontrol normal KESIMPULAN ekstrak etanol 70% daun kemuning mempunyai kemampuan
menurunkan  kadar SGOT dan SGPT .
Pada dosis 100mg/KgBB ekstrak etanol
70% daun kemuning mampu menurunkan aktivitas SGOT tetapi tidak pada  aktivitas SGPT .  Pada  dosis
200mg/KgBB dan 400 mg/KgBB ekstrak  etanol  70%  daun  kemuning memiliki kemampuan menurunkan kadar SGOT dan SGPT sebanding dengan kontrol normal.

## DAFTAR PUSTAKA
Apreliantino, Nur Pradana, et al ., 2012.
Pengaruh  Sidestream  Smoke pada  Kadar  SGPT  Tikus  wistar
Jantan (Rattus norvegicus) . Jember  :  UNEJ  Jurnal.  Vol  1:1- 4. Departemen Kesehatan RI. 2008. Farmakope  Herbal  Indonesia Edisi  I. Departemen  Kesehatan RI. Jakarta. Hlm. 187
Gautam et  al. 2012. Antihyperglycemic and  antioxidant  potential  of murraya paniculata linn. Leaves: a preclinical study. Journal of Pharmacy Research 2012,5(3),1334-1337
Kee,  Joyce  LeFever.  2007. Pedoman Pemeriksaan  Laboratorium  & Diagnostik, Terjemahan : Sari Kurnianingsih. EGC. Jakarta. Hal. 15, 75. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Riskesdas. 2010. Penggunaan Rokok .   Hlm.78 Muliartha, K.I.G., Sriwahyuni, E., Yuliawati. 2009. Pemberian Kombinasi Vitamin C  dan  E Peroral Memperbaiki Kerusakan Hepar  Akibat  Paparan  Rokok Kretek  Sub Kronik .
Jurnal  Kedokteran  Brawijaya .
Vol. 26.
Pokorni  J,  Yanishlieva  N,  Gordon  M.
2001. Antioksidan in food: Pratical Applications , CRC Press, New York. Hlm. 20- 22 Rohman,  A.,  dan  S.  Riyanto.,  2005. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Daun   Kemuning (Murraya  paniculata  (L)  Jack) secara in vitro . Majalah Farmasi Indonesia, 16  (3): 136-140
Sudibyo et al. 2013. Aliansi Pengendalian Tembakau Indonesia. Peta Jalan Pengendalian Produk Tembakau Indonesia. Surakarta , Muhammadiyah University Press. Unitly, A.J.A., Kusumorini, N., Agungpriyono, S., Satyaningtijas,  A.S.,  Boediono A.,  2014. Perubahan  Kualitas
Spermatozoa  Dan  Jumlah  Sel- Sel  Spermatogenik  Tikus  Yang Terpapar  Asap  Rokok .  Jurnal Kedokteran   Hewan. Vol. 8 Rohman,  A.,  dan  S.  Riyanto.,  2005. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Daun   Kemuning (Murraya  paniculata  (L)  Jack) secara in vitro . Majalah Farmasi Indonesia, 16  (3): 136-140