Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol dari Kulit Batang Kelor ( Moringa oleifera Lam. ) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
[Antibacterial Activity of Methanol Extracts from The Stem Bark of Moringa oleifera Lam. Against Staphylococcus aureus and Escherichia coli ]
Nurul Cholifah 1* , Ahmad Rihday 1 , Pasjan Satrimafitrah 1 , Ruslan 1 , Hardi Ys 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu
* ) Coresponding author: nurulqholifa24@gmail.com
ABSTRACT. Antibacterial  activity  of Moringa  oleifera Lam.  stem  bark  has  been  tested  against Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli .  The  extraction  of Moringa  oleifera Lam.  stem  bark  was  used  maceration  method  with  methanol  solvent  and has  obtained  extract  yield  of  6.1%.  The  antibacterial  activity  test  of Moringa  oleifera stem  bark  extracts  used  a  well  diffusion method. The concentration of Moringa oleifera stem bark extract was varied to four concentrations of 1% 2% 3% 4% (w/v). The inhibition  zone  of  methanol  extract  of Moringa  oleifera stem  bark  against Staphylococcus  aureus at  extract  concentrations  of 1%,  2%,  3%,  and  4%  was  10.08  mm,  11.8  mm,  15.00  mm,  and  17.02  mm,  respectively.  The  methanol  extract  of Moringa oleifera stem bark at concentrations of 1%, 2%, 3%, and 4% could also inhibition of Escherichia coli growth with inhibition zone of 14.01 mm, 16.50 mm, 17.09 mm, and 17.10 mm, respectively.
Keywords: Moringa Oleifera Lam., a ntibacterial , Staphylococcus aureus, Escherichia coli
ABSTRAK. Telah  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  batang  kelor  ( Moringa  Oleifera Lam.)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Ekstraksi  kulit  batang  kelor  menggunakan  metode  meserasi  dengan  pelarut metanol  dan  menghasilkan  rendemen  ekstrak  6,1%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  batang  kelor  menggunakan metode  difusi  sumur.  Konsentrasi  ekstrak  kulit  batang  kelor  divariasikan  menjadi  4  konsentrasi,  yaitu:  1%  2%  3%  4%  (b/v). Zona hambat dari ekstrak kulit batang kelor pada konsentrasi 1%, 2%, 3% dan  4% terhadap bakteri Staphylococcus Aureus adalah masing-masing 10,08 mm, 11,8 mm, 15,00 mm dan 17,02 mm. Ekstrak kulit batang kelor pada konsentrasi 1%, 2%, 3% dan    4%  juga  dapat  menghambat  pertumbuhan Escherichia  coli dengan  zona  hambat  masing-masing  14,01mm,  16,50mm, 17,09mm dan 17,10mm.
Kata kunci : Moringa Oleifera Lam., antibakteri, Staphylococcus aureus , Escherichia coli
Riwayat artikel: Diterima 14 Juni 2019, Disetujui 11 April 2020 Cara sitasi: Cholifah, N., Ridhay, A., Satrimafitrah, P., Ruslan., Ys, H. (2020). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol dari Kulit Batang Kelor  ( Moringa  oleifera Lam.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli . KOVALEN:  Jurnal  Riset Kimia , 6(1): 34-38. DOI: https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i1.12854

## LATAR BELAKANG
Tanaman  kelor  merupakan  salah  satu tumbuhan  yang  tersebar  diseluruh  wilayah  di Indonesia  dan  memiliki  banyak  manfaat . Tumbuhan  kelor  ( Moringa  oleifera L. ) dikenal
juga  sebagai “miracle  of  tree” karena  hampir seluruh  bagian  tumbuhan  dari  daun,  kulit batang, biji kelor hingga akarnya dimanfaatkan oleh  manusia,  khususnya  sebagai  obat tradisional  (Gupta et  al. ,  2018).  Bagian  akar
kelor  sering  dimanfaatkan  sebagai  obat rematik,  epilepsi,  kekurangan  vitamin  C,  dan infeksi saluran kemih (Jonni et al ., 2008).
Berbagai penelitian telah dilakukan mengenai  bagian  dari  tanaman  kelor.  Salah satu  bidang  penelitian  yang  diarahkan  pada pemanfaatan  kelor  adalah  sebagai  anti antibakteri  (Wang et  al .,  2015).  Antibakteri merupakan  suatu  senyawa  yang  digunakan untuk  mengendalikan  pertumbuhan  bakteri yang merugikan. Beberapa bakteri yang dapat menyebabkan penyakit dan infeksi, diantaranya  adalah Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli . Bakteri E. coli merupakan    bakteri  pathogen  pada  manusia dan  menimbulkan  gangguan  pencernaan, sedangkan S. aureus merupakan bakteri  yang paling  sering  menyebabkan  infeksi  pada manusia  pada  mulut  dan  saluran  pernafasan (Septiani et  al. ,  2017) . Antibakteri  bekerja dengan  cara  merusak  dinding  sel  bakteri  dan mengganggu sintesis protein (Pelczar & Chan,
2006).
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun kelor  lebih  baik  dibanding  dengan  ekstrak  air dan  kloroform  daun  kelor  (Vinoth et  al 2012).
Selain  itu,  ekstrak      etanol  daun  kelor  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli,  S. aureus, dan B.  Subtilis (Kumar et  al .,  2012) .
Ekstrak  aseton  daun  kelor  juga  memilki aktivitas  sebagai  antibakteri Escherichia  coli,
Enterobacter cloace, Proteus vulgaris,
Staphylococcus  aureus dan Micrococcus kristinae. M. kristinae (Moyo et al. , 2012).
Bagian  dari  tanaman  kelor  lainnya  yang dapat  berfungsi  sebagai  antibakteri  adalah kulit  batang  kelor.  Kulit  batang  kelor  memiliki senyawa aktif yang berperan sebagi antibakteri,  antiinflamasi  dan  antioksidan. Menurut  (Ikalinus et  al. ,  2015),  uji  fitokimia
pada  batang  kelor  mengandung  senyawa seperti  tannin,  alkaloid,  fenolat,  flavonoid, steroid  dan  alkaloid.  Batang  kelor  juga  telah dilakporkan memiliki aktivitas antibakteri baaik pada  fraksi  polar,  semi  polar  maupun  non polar  (Zaffer et al. ,  2014).  Akan  tetapi,  bagian kulit  batang  kelor  belum  ada  informasi mengenai kemampuannya sebagai antibakteri.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  antara  lain:  kulit  batang  kelor, biakan bakteri E. coli dan S. aureus , akuades, metanol,  NaCl  fisiologis  0,9%,  kertas  saring, aluminuim  foil , handscoon ,  media  agar  (NA), dan DMSO.
Peralatan yang digunakan meliputi erlenmeyer, ayakan 60 mesh, blender, neraca analitik, vacuum  rotary  evaporator, gelas  ukur 1000  mL,  gelas  kimia  1000  mL,  labu  ukur  10 mL,  corong  kaca, autoclave ,  ose  dan  pinset,
bunsen, incubator ,  mikro  pipet,  tabung  reaksi, pipet tetes, cawan petri.

## Prosedur Kerja

## Ekstraksi sampel
Tepung  kulit  batang  kelor  sebanyak  100 gram dimaserasi menggunakan metanol sebanyak  500  mL,  selama  3x24  jam. Selanjutnya  sampel  disaring  dan  ekstrak metanol yang dihasilkan diuapkan menggunkan vacuum rotary evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak kental  akan  digunakan  sebagai  sampel  uji antibakteri.

## Pengujian antibakteri (Lay, 1994)

## 1.  Pembuatan media agar
Nutrient agar (NA) sebanyak 20 gram dilarutkan  k  edalam    500  mL  aquades,
kemudian  dipanaskan  dan    diaduk  hingga larut.  Selanjutnya  disterilisasi  selama  15 menit  pada  suhu  121 o C.  Media  yang  telah jadi disimpan ditempat sejuk dan aseptis.
2.  Pembuatan suspensi bakteri
Bakteri  uji  dibiakan  pada  media  NA miring  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C, kemudian  diambil  sebanyak  1  ose  dengan sengkelit  dan  disuspensikan  dengan  cara dimasukkan  ke  dalam  tabung  berisi  5  mL larutan NaCl fisiologis

## 3.  Uji antibakteri
Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan  metode  sumur  difusi.  Media Nutrient  Agar  (NA)  sebanyak  25  mL dicampur dengan 25 μL suspensi bakteri uji ( S.  aureus dan E.  coli ),  dihomogenkan  lalu dituang  dalam  cawan  petri  steril  dan dibiarkan  sampai  memadat.  Setelah  itu dibuat  sumuran  yang  berdiameter  ±  9  mm meinggunakan alat pelubang. Cawan pertama berisi 2 lubang atau sumur (lubang I untuk kontrol positif, kloramfenikol 1% dan lubang  II  berisi  kontrol  negatif,  DMSO). Cawan  kedua  berisi  2  lubang  atau  sumur (lubang  I  dan  II  berisi  ekstrak  metanol  kulit batang  kelor  1%  2%,dan  cawan  ketiga terdapat 2 lubang atau sumur (lubang I dan II  berisi  ekstrak  metanol  kulit  batang  kelor 3% dan 4%. Setiap sumur diisi ekstrak kulit batang  kelor dan  kontrol  sebanyak  50  μL, kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  37 o C.  Selanjutnya  diamati  dan  diukur diameter  zona  hambatnya  menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak Metanol Kulit Batang Kelor
Ekstraksi sampel dilakukan menggunakan metode  maserasi.  Ekstra  kulit  batang  kelor
diperoleh sebanyak 6,1 % (6,1 g dalam 100 g sampel  kulit  batang  kelor).  Pemilihan  metanol sebagai  pengekstrak  dikarenakan  metanol sebagai  pelarut  universal  yang  mampu melarutkan  semua  komponen  kimia  yang  ada dalam sampel.

## Aktivitas Antibakteri
Tujuan dari pengujian aktivitas
antibakteri  ini  adalah  untuk  mengetahui kemampuan senyawa yang ada pada tumbuhan  untuk  menghambat  pertumbuhan atau membunuh  bakteri  tertentu yang bersifat patogen. Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak  metanol  kulit  batang  kelor  (terhadap bakteri S.  aureus dan E.  coli menggunakan metode  difusi  sumur.  Hasil  positif  ditandai dengan  terbentuknya  zona  bening  disekitaran sumuran,  setelah  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 37 o C.
Hasil  pengujian  aktivitas  ekstrak  metanol kulit batang kelor dengan konsentarsi 1%,2%,3%  dan  4%  terhadap  bakteri  uji S. aureus dan E.  coli menunjukkan  bahwa ekstrak  tersebut  memiliki  aktivitas  antibakteri dengan terbentuknya zona bening (Tabel 1).
Tabel 1 Hasil  pengukuran  zona  hambat bakteri  gram  positif  ( S.  aureus )  dan bakteri gram negatif (E. coli ).
Bahan uji Konsentrasi (%) Rata-rata diameter zona hambat (mm) S.aureus E.Coli Ekstrak 1 2 3 4 10,08 11,8 15,00 17,02 14,01 16,50 17,09 17,10 Kontrol (+) 1 39,4 35,66 Kontrol (-) 99 0 0
Zona  hambat  yang  dihasilkan  dari pengujian ekstrak kulit batang kelor bertambah luas seiring dengan bertambahnya konsentrasi
ekstrak  (Gambar  1).  Hal  ini  sesuai    dengan penelitian Kumala (2008) dalam Andries et al. , 2014)  menyatakan  bahwa  konsentrasi  ekstrak mempengaruhi kecepatan difusi zat berkhasiat,  yaitu    semakin besar konsentrasi ekstrak  maka  semakin  besar  pula  aktivitas antibakteri  yang  dihasilkan  sehingga  dapat menghasilkan  diameter  zona  hambat  yang semakin  luas.  Selain  itu,  kontrol  positif  yang digunakan yaitu kloramfenikol, dan menghasilkan  zona  hambat  sebesar  39,4  mm terhadap S.aureus dan  35,66  mm  terhadap E.coli. Nilai  yang  dihasilkan  termaksud  pada aktifitas  antimikroba  yang  tergolong  kuat. Karena  kloramfenikol  merupakan  golongan antibiotik dengan kekuatan daya  hambat  yang tinggi  dalam  menghambat  dan  membunuh bakteri (Alviana, 2016).
Gambar 1. Hasil  pengujian antibakteri  ekstrak kulit  batang  kelor  terhadap  bakteri S. aureus dan E.coli
Menurut  Pelczar  &  Chan  (2006),  untuk dapat  membunuh   mikroorganisme, bahan uji harus  masuk  dalam  sel  melalui  dinding  sel. Kedua  jenis  mikroorganisme  uji  tersebut memiliki komposisi dinding sel yang berbeda. Dinding sel S.aureus yang merupakan  kelompok  bakteri  gram  positif memiliki  struktur  dengan  sedikit  lipid  sedang pada E.coli yang  merupakan  bakteri  gram negatif  relatif lebih banyak  mengandung lipid.
Senyawa  terpenoid    mudah  larut  dalam  lipid sifat  inilah  yang  mengakibatkan  senyawa  ini mudah  menembus  dinding  sel  bakteri  gram positif dan gram negatif.
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  ( one  way ANOVA)  menunjukkan  pengaruh  konsentrasi ekstrak  kulit  batang  kelor  terhadap  nilai  zona hambat  bakteri S.  aureus menghasilkan  nilai signifikan  0,04< α  (0,05)  atau  berpengaruh nyata, sehingga dilanjutkan dengan uji Duncan yang menunjukkan setiap konsentrasi memiliki perbedaan  nyata.  Hasil  uji  statistika  pengaruh konsentrasi ekstrak kulit batang kelor terhadap nilai  daya  hambat E.  coli menunjukkan  nilai signifikan  0,74> α  (0,05)  atau  berpengaruh tidak nyata.
Aktivitas  antimikroba  yang  menghasilkan zona  penghambatan  20  mm  dinyatakan sebagai  antimikroba  yang  tergolong  sangat kuat,  sedangkan  pada  daerah  10-20  mm tergolong
kuat. Apabila
diameter penghambatan  yang  dihasilkan  antara    5-10 mm, aktivitas antimikrobanya tergolong sedang dan jika diameter penghambatan yang dihasilkan  sebesar  5  mm,  maka  aktivitas antimikroba  tergolong  lemah  (Davis  &  Stout, 1971).  Sifat  antibakteri  ekstrak  kulit  batang kelor  pada  konsentrasi  1%,  2%,  3%,  dan  4% terhadap S.  aureus termasuk  kuat.  Daya hambat  antibakteri  yang  dihasilkan  ekstrak kulit  batang  kelor  terhadap E.  coli pada konsentrasi  1%,  2%,  3%,  dan  4%  juga tergolong sebagai antimikroba dengan aktivitas yang kuat.
Mekanisme  penghambatan  pertumbuhan bakteri oleh senyawa antibakteri dapat berupa suatu  perusakan  dinding  sel  dengan  cara menghambat pembentukannya atau mengubahnya setelah selesai terbentuk, dimana  perubahan  permeabilitas  membran
0 5 10 15 20 1% 2% 3% 4% z on a ha m ba t (m m ) Konsentrasi ekstrak S. aureus
E. Colli
sitoplasma  yang  menyebabkan  keluarnya suatu  bahan  makanan  dari  dalam  sel, mengubah  bentuk  molekul  protein  dan  asam nukleat,  menghambat  kerja  enzim,  dan menghambat  proses  sintesis  asam  nukleat dan protein (Pelczar & Chan, 2006).

## KESIMPULAN
Ekstrak metanol kulit batang kelor mampu menekan pertumbuhan bakteri S. aureus dan E. coli . Pengujian ekstrak metanol kulit batang kelor pada konsentrasi 4% terhadap bakteri S. aureus dan E. coli menghasilkan zona hambat >17  mm  atau  tergolong  antibakteri  dengan aktivitas  yang  kuat.  Ekstrak  metanol  kulit batang  kelor  berpotensi  untuk  digunakan sebagai bahan antibakteri terbaru.

## DAFTAR PUSTAKA
Alviana,  N.  (2016).  Uji  Efektivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Daun Krisan ( Chrysanthemum morifolium Syn. Dendrathema grandiflora) Terhadap
Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. [ Skripsi ].  Universitas  Atma  Jaya, Yogyakarta.
Andries,  J.  R.,  Gunawan,  P.  N.,  &  Supit,  A.
(2014).  Uji  Efek  Anti  Bakteri  Ekstrak Bunga Cengkeh Terhadap BakterI
Streptococcus mutans Secara In Vitro. E- GIGI, 2(2).
https://doi.org/10.35790/eg.2.2.2014.5763 Davis, W. W., & Stout, T. R. (1971). Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Assay. Applied  Microbiology, 22(4):  659 – 665.
Gupta, S., Jain, R., Kachhwaha, S., & Kothari,
S.  L.  (2018).  Nutritional  and  medicinal applications  of Moringa  oleifera Lam.
Review  of  Current  Status  and  Future Possibilities. Journal  of  Herbal  Medicine,
11: 1 –11. https://doi.org/10.1016/j.hermed.2017.07.
Ikalinus, Widyastuti,  S.,  &  Setiasih,  N.  (2015).
Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Kulit
Batang Kelor ( Moringa oleifera ).
Indonesia  Medicus  Veterinus .,  4(1):  71 – 79.
Jonni,  M.,  Sitorus, M., &  Katharina,  N. (2008). Cegah Malnutrisi dengan Kelor . Kanisius, Jakarta.
Kumar, V., Pandey, N., Mohan, N., & Singh, R. P.  (2012).  Antibacterial  &  Antioxidant Activity  of  Different  Extract  of Moringa Oleifera Leaves –  An  In-Vitro  Study.
I nternational  Journal  of  Pharmaceutical Sciences  Review  and  Research ,  12(1):
89 –94.
Lay, B. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium (1st  ed.).  Raja  Grafindo Persada, Jakarta.
Moyo, B., Masika, P. J., & Muchenje, V. (2012). Antimicrobial  Activities  of Moringa  oleifera
Lam  Leaf  Extracts. African  Journal  of Biotechnology , 11(11): 2797 –2802.
https://doi.org/10.4314/ajb.v11i11.
Pelczar,  M.,  &  Chan,  E.  (2006). Dasar-  dasar Mikrobiologi 2. UI Press, Jakarta.
Septiani,  S.,  Dewi,  E.  N.,  & Wijayanti,  I.  (2017).
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Lamun ( Cymodocea  rotundata )  Terhadap  Bakteri
Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. SAINTEK  PERIKANAN :  Indonesian Journal of Fisheries Science and Technology , 13(1): 1 –6. https://doi.org/10.14710/ijfst.13.1.1-6
Wang,  Z.,  Koenig,  H.  G.,  Zhang,  Y.,  Ma,  W.,  &
Huang,  Y.  (2015).  Religious  Involvement and  Mental  Disorders  in  Mainland  China.
Medicinal chemistry , 10(6).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0128 800
Zaffer,  M.,  Ahmad,  S.,  Sharma,  R.,  Mahajan, S.,  Gupta,  A.,  &  Agnihotri,  R.  K.  (2014). Antibacterial  Activity  of  Bark  Extracts  of Moringa  oleifera Lam.  Against  Some Selected  Bacteria. Pakistan  Journal  of Pharmaceutical  Sciences ,  27(6):  1857 – 1862.