## IDENTIFIKASI BAKTERI YANG MENGINFEKSI IKAN GARRA
RUFA ( Cyprinion macrostamus) DI BALAI BESAR KARANTINA

## IKAN SOEKARNO-HATTA
( Identification of Bacteria which Infected The Garra Rufa Fish Cyprinion Macrostomus at Quarantine Office of Soekarno-Hatta Airport )
Mustahal 1) , Anik Waqiah 2)
1) Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Jl. Raya Jakarta, KM 04. Pakupatan, Serang, Banten.
Email: mustahal13@yahoo.co.id
2) Balai Besar Karantina Ikan Bandara Soekarno-Hatta, Cengkareng, Tangerang, Banten.

## ABSTRACT
A study has  been carried out to identify the bacteria that  infected the  garra  rufa fish  (Cyprinion  macrostamus)  which  have  been  transported  through  the  Quarantine Office of Soekarno - Hatta Airport.  These fishes were among the freshwater commodities which frequently transported throughout various countries, because they were commonly used for decreasing the effect of psoriasis in a feet  spa  treatment, by  feeding  the  dead cells  of    feet    skin.    Therefore,  the  possibility  of  spreading  the  diseases  during    the treatment must be anticipated. In this study the bacteria samples were taken from the fish skin and then cultured in the laboratory. After purification of the  cultures,  the bacteria were then tested by a serial  microbiological methods to identify the bacteria. The results showed  that  the  Garra  rufa    fish  (Cyprinion  macrostomus)    observed  in  this  study indicated  the presence of   bacteria  of  (+) Motile Aeromonas Septicaemia,  and  (-) of Motile  Aeromonas  Septicaemia,  which  were  among  the  diseases  of  quarantine  fishes. While  the  Aeromonas  hydrophylla    was  also  found  out,  even  though  not    included  as diseases of quarantine fishes. Therefore, they may received the health  certificate  for  fish and fish product for export as well as  for therapeutic purposes .
Keyword: garra rufa, bacterial identification, bacterial pathogen

## PENDAHULUAN
Salah satu produk akuakultur dari segmen ikan hias air tawar saat ini  yang sedang berkembang baik untuk kegiatan ekspor dan untuk terapi kesehatan  adalah ikan  Garra  rufa ( Cyprinion  macrostamus ).    Ikan  ini  merupakan  spesies  yang memiliki  kemampuan  yang  unik  dibandingkan  dengan  ikan  hias  lainnya.  Para peneliti  menyatakan  bahwa  ikan  ini  mampu  mengurangi  efek  penyakit  psoriasis dan  penyakit    lainnya.  Apabila  seseorang  yang  mengalami  masalah  kulit melakukan  terapi  spa  dengan  ikan  ini,  maka  ikan  tersebut  secara  spontan  akan mengerumuni  kulit  yang  banyak  mengandung  sel  kulit  mati.  Penelitian menunjukkan bahwa saat ikan mengelupasi sel kulit mati maka secara bersamaan ikan  tersebut  akan  mensekresikan  enzim  ditrhanol  yang  dapat  membuat  awet muda (Clark 2010).
Karantina  ikan  merupakan  salah  satu  instrument  dalam  subsistem perdagangan produk perikanan di tingkat nasional maupun internasional, melalui Sertifikat  Kesehatan  Ikan  yang  terpercaya  (DKP  2002,  Puskari  2007).
Meningkatnya lalulintas komoditas perikanan baik untuk kegiatan antar pulau dan antar negara  berdampak pada kemungkinan tersebarnya hama dan penyakit ikan, khususnya  bakteri  (Oregon  State  Univ.  2011).    Dengan  demikian  untuk meningkatkan  kualitas  ekspor  dari  ikan  hias  ini  yaitu  mencegah  terjadinya serangan  penyakit  maka  perlu  upaya  tindakan  awal  berupa  identifikasi  dan karakteristik  bakteri  yang  menyerang  ikan  tersebut  (Khairuman  2002,  Amri  dan Khairudin 2002, Aryani et al . 2004). Oleh karena itu penulis melakukan penelitian terhadap jenis bakteri yang menyerang ikan ini.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  jenis  bakteri  yang menginfeksi  ikan  Garra  rufa  ( Cyprinion  macrostamus )  yang  dilalulintaskan melalui  Balai  Besar  Karantina  Ikan  (BBKI)  Soekarno-Hatta,  dengan  melakukan Observasi  dan  penelitian,  kemudian  melakukan  pengambilan  sampel  hingga pemeriksaan bakterial di laboratorium.

## METODOLOGI
Penelitian  dilaksanakan dari November sampai dengan  Desember 2011 di BBKI  Soekarno-Hatta,  Tangerang  -  Banten.      Metode  yang  digunakan  meliputi penelitian  eksplorasi  ( exploration  research )  yaitu  perlakuan  khusus  terhadap objek  yang  diteliti,  diikuti  dengan  observasi,  pengumpulan  data  dan  kemudian dianalisis  secara  komparatif.  Penelitian  ini  tidak  memerlukan  analisa  statistik sebab  tidak  untuk  membandingkan  atau  mencari  korelasi  perlakuan  pada  objek yang lain (Narbuko dan Achmadi 2005) .
Data  yang  dikumpulkan  terdiri  dari  data  primer  yang  diperoleh  secara langsung melalui wawancara, observasi serta partisipasi di lapangan dalam bentuk pengamatan  dan  terjun  langsung  mengikuti  kegiatan  identifikasi  penyakit bakterial pada ikan. Data primer yang diambil meliputi :
1) Jenis ikan sampel
2) Media tumbuh bakteri
3) Bagian tubuh yang diambil untuk identifikasi bakteri
4) Teknik pemeriksaan bakteri
5) Teknis Pengambilan sampel
Sedangkan data sekunder adalah data yang diperoleh dari kepustakaan. Data yang diambil sebagai data sekunder tersebut meliputi :
1) Data tentang keterangan bakteri yang terindentifikasi.
2) Frekwensi pengiriman ikan Garra rufa ( Cyprinion macrostamus ),
3) Perusahaan pengekspor ikan Garra rufa ( C. macrostamus ).
4) Frekuensi pengiriman ikan hias melalui di BBKI Soekarno Hatta.
Ikan  yang  diteliti  adalah  ikan  yang  berasal  dari  pengguna  jasa  khususnya eksportir  ikan  hias  di  wilayah  Jakarta,  Bogor,  Depok,  Tangerang    dan  Bekasi, yang  merupakan  ikan  contoh  yang  akan  dikirim  ke  beberapa  negara  yang mempersyaratkan bebas bakteri tertentu misalnya Singapore, Malaysia dan  Benua Eropa khususnya.
Alat  dan  Bahan  yang  digunakan  adalah  alat-alat  yang  tersedia  pada laboratorium    Mikrobiologi  dan  Bakteriologi  (Hadioetomo  1985,  Sarono  1996). Ikan  yang  digunakan  pada  penelitian  bakteri  adalah  Ikan  Garra  rufa C. macrostamus (rerata ukuran panjang tubuh 4 cm).
Gambar 1.  Contoh  Ikan Garra rufa
Tabel 1.  Media  yang  dipergunakan  di  Laboratorium  Bakteriologi  Balai  Besar Karantina Ikan Soekarno-Hatta
No Media Agar Media Solid Reagent 1 TSA NB Kovaks 2 TCBS Glukosa KOH 3 % 3 Levine -EMBA Sukrosa KOH 40 % 4 CBB Maltosa Gram A 5 Mc A Sorbitol Gram B 6 MHA Manitol Gram C 7 Casein Inositol Gram D 8 TSIA Arabinosa α-Naphol 9 Citrat Rhamnosa Bactident,  Katalase 10 LIA Aquadest Bactident,  Oksidase 11 - Gelatin pH Paper - Laktosa Methyl Red

## Prosedur kerja
Ikan  sampel  diamati  di  Laboratorium  BBKI  Soekarno-Hatta  dengan mengikuti  prosedur  baku  karantina,  dengan  mencatat  jenis,  jumlah  dan  tanggal serta  target  pemeriksaan  sesuai  dengan  area  ataupun  negara  tujuan  yang mempersyaratkan  (Sarono  1996).  Teknik  isolasi  bakteri  dari  sampel  ikan mengikuti  prosedur  mikrobiologi  Cowan  1974,  dan  Sarono  1996).  Pengujian yang dilakukan meliputi:  Uji Dasar  diantaranya Uji Gram, Uji Katalase, dan uji Oksidase.  Uji Biokimia terdiri dari Uji Motility, Uji glukosa, Uji O/F, Uji TCBS , Uji  Levine-EMBA, Uji MCA,  Uji   Ornithin   Decarboxylase,   Uji TSIA dan Uji Sensitifitas (Hadioetomo 1985, Laminem 2003).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisa Pengujian
Hasil pengujian  yang telah dilakukan dapat  dilihat  pada Tabel  2.   Hasil uji glukosan menunjukkan warna yang dihasilkan setelah pengujian berubah menjadi kuning  berarti  positif  (+),  artinya  bakteri  tersebut  dapat  memfermentasikan glukosa.
Tabel 2. Hasil  Pengujian  Bakteria  pada  sampel  ikan  garra  rufa Cyprinion macrostamus Parameter Pengujian Organ Target Hati Insang Ginjal Lendir Gram + + - - Motility + + - - Katalase + + + + Oksidase + + + + Glukose + + + + O/F F F F - Tumbuh pada TCBS NG NG y/+ y/+ Tumbuh pada Levine EMBA Pink Trans Pink Trans Pink Trans Pink Trans Tumbuh pada Mc A y/+ y/+ y/+ y/+ Ornithin Decaboxylase - - - - Indol + + + + TSIA A/k. Gas A/k. Gas A/k. gas A/k. Gas Sensititas Nov 30ug R R S S Hasil Pemeriksaan (+) Motil Aeromonas (+) Motil Aeromonas (-) Motil Aeromonas (-) Motil Aeromonas
Hasil  uji  oksidase/fermentase  yang  diperoleh  terjadi  perubahan  warna  dari hijau  ke  kuning  berarti  Fermentatif  dimana  pengujian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  kemampuan  bakteri  dalam  melakukan  respirasi  (Oksidatif)  maupun (fermentatif)  karbohidrat  (glukosa).  Media  O/F  merupakan  semi  solid  berwarna hijau.
Media  TCBS  (Thiosulphate  Citrate  Bile  Salt  Sukrose)  adalah  media  yang mengandung sukrosa berwarna hijau dan dibuat pada cawan petri. Hasil pengujian yang  diperoleh  adalah  :  bakteri  yang  tumbuh  membentuk  koloni  dan  memiliki warna  yang  berbeda,  dimana  bakteri  sukrosa  fermenters    merubah  warna  hijau pada media menjadi kuning dan bakteri yang non fermenters tidak akan merubah warna asal pada media.
Media    uji  levine-emba  berwarna  merah  marun  yang  mengandung  laktosa dan  dibuat  pada  cawan  petri.  Hasil  dari  pengujian  adalah  bakteri  yang  tumbuh dapat menyerap warna sehingga warna yang terjadi adalah transparan.
Media  Mac  Conkey  Agar  adalah  media  selektif  untuk  bakteri  golongan gram  negatif  dengan  menghambat  bakteri  golongan  gram  positif,  juga membedakan  antara  laktosa  fermenters  dan  non  laktosa  fermenters.  Hasil  dari pengujian  adalah  bakteri  yang  akan  membentuk  koloni  dengan  warna  yang berbeda ( yellow /+).
Uji  Ornithin  Decarboxylase  menggunakan  media  MIO  (Motility      Indol Ornithin) yang berfungsi untuk 3 pengujian yaitu motility, ornithin decarboxylase dan  indol)  yang  bertujuan  untuk  mengkarboksilase    orthinin  menjadi  bentuk amine.  Hasil uji yang diperoleh  (-) warna media terjadi perubahan
Media  TSIA  ( Triple  Sugar  Iron  Agar )  merupakan  media  miring  dalam tabung reaksi yang berwarna merah orange.  Hasil pengujian yang diperoleh : A/k. Gas yang berarti Asam-Alkalin H 2 S . Pembacaan butt berwarna kuning dan slank berwarna merah serta adanya endapan hitam pada bagian butt.

## Identifikasi Bakteri
Bakteri  yang  ditemukan  kemudian  diidentifikasi  menurut  tabel  bakteri  gram positif  dan  tabel  bakteri  gram  negatif  (Cowan  (1974).  Selama  melakukan penelitian pada ikan garra rufa ( C. macrostomus ) bakteri yang terindikasi adalah : (+) Motile  Aeromonas  Septicaemia dan  (-) Motile  Aeeromonas  hydrophylla . Aeromonas  hydrophylla adalah  bakteri  gram  negatif  yang  berbentuk  batang, dikenal  dengan Motile  Aeromonas  Septicaemia (MAS), Haemorrhaagic septicemia, penyakit ulcer atau Red-Sore  Diseases.  Aeromonas .sp  merupakan bakteri yang banyak dijumpai pada budidaya ikan khususnya ikan air tawar.

## Identifikasi Bakteri
Bakteri  diidentifikasi  menurut  tabel  bakteri  gram  positif  dan  tabel  bakteri gram negatif  (Cowan (1974).  Selama melakukan penelitian pada ikan garra rufa ( Cyprinion  macrostomus )  bakteri  yang  terindikasi  adalah  (+) Motile  Aeromonas Septicaemia dan  (-) Motile  Aeeromonas  hydrophylla . Aeromonas  hydrophylla adalah  bakteri  gram  negatif  yang  berbentuk  batang,  dikenal  dengan Motile Aeromonas  Septicaemia (MAS), Haemorrhaagic  septicemia,  penyakit  ulcer  atau Red-Sore Diseases. Aeromonas .sp merupakan bakteri yang banyak dijumpai pada budidaya ikan khususnya ikan air tawar.

## KESIMPULAN
1) Ikan  Garra  rufa  ( Cyprinion  macrostomus )  yang  diperiksa  dalam  penelitian ini   terindikasi mengandung  bakteri (+) Motile Aeromonas Septicaemia dan (-) Motile Aeeromonas Septicaemia .
2) Bakteri Aeeromonas  hydrophylla merupakan  bakteri  golongan  non  HPIK (Hama  Penyakit  Ikan  Karantina)  sehingga  dapat  diberikan  Sertifikat Kesehatan  Ikan  atau Health  Certificate  For  Fish  And  Fish  Product untuk kegiatan  ekspor  ataupun  sebagai  ikan terapi  untuk kesehatan pada kondisi ikan yang benar-benar sehat.

## SARAN
1) Pengujian  secara  konvensional  membutuhkan  waktu  yang  lama  sehingga perlu bimbingan  langsung dengan orang yang ahli dibidangnya
2) Peningkatan  sarana  dan  prasarana  laboratorium  penguji  bakteri  sehingga dapat    memperlancar  proses  pengujian  bakteri  dengan  metode  yang  lebih cepat (PCR).
3) Pendeteksian  penguji  bakteri  yang  cepat,  tepat,  akurat  dan  biaya  yang terjangkau.

## DAFTAR PUSTAKA
Amri K dan  Khairudin. 2002. Menanggulangi Penyakit Ikan Pada Ikan mas dan Koi, PT.Gramedia Pustaka. Jakarta
Aryani N, Syawal H, Lukistyowati I, Riauwaty M. 2004 Parasit dan Penyakit Ikan
Unri  Press , Pakanbaru
Cowan S T. 1974. Manual For The Identification Of Medical Bacteria. University
Clark  WA.  2010. Aeromonas  hydrophila. http://en.wikipedia.org/wiki/File: Aeromonas_hydrophila.jpg. [20 Oktober 2011]
[DKP]  Departemen  Kelautan  dan  Perikanan.  2002.  Peraturan  Pemerintah Indonesia No. 15. th 2002.
Hadioetomo RS. 1985. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. PT Gramedia, Jakarta
Khairuman. 2002. Wabah Penyakit Bakteri Pada Ikan. Agromedia Jakarta. Laminem.  2003.  Pemeriksaan  Penyakit  Ikan  Golongan  Bakteri.  BKI  Bandara
Juanda Surabaya.
Oregon  State  University.  2011. Microbiology  Science. www.microbiology. science.oregonstate.edu/salmonbacteria. [20 Oktober 2011].
Narbuko C., Achmadi A. 2005. Metodologi Penelitian. Bumi Aksara. Jakarta
[PUSKARI]  Pusat  Karantina  Ikan.  2007.  Pedoman  Teknis  Pemeriksaan  Ikan
Karantina.  Departemen Kelautan dan Perikanan jakarta.
Sarono  A.  1996.    Petunjuk    Teknis  Operasional  Instalasi  Karantina  Ikan.    Balai
Karantina Ikan Soekarni-Hatta. Jakarta .