## Hubungan Keragaman Gen Leptin dengan Kualitas Fisik Daging Sapi
Lokal Di  Ciamis ( Relationship  between  Leptin  Gene  Diversity  with  Physical  Quality of Local  Beef In Ciamis)
N. Hilmia 1 , R. R. Noor 2 , C. Sumantri 2 , R. Priyanto 2 , Gurnadi E 2
1) Produksi  TernakFakultas  Peternakan  Universitas    Padjadjaran Jl.  Raya  Bandung  Sumedang  Km  21 Jatinangor  Sumedang  Jawa  Barat,    Indonesia 2) Ilmu  Produksi  dan  Teknologi  PeternakanFakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor Jl. Agatis Kampus IPB, Darmaga , Bogor16680Jawa Barat, Indonesia Email: nena.hilmia@unpad.ac.id

## Abstrak
Leptin  terlibat  dalam  berbagai  proses  fisiologispembentukan  lemak. Keragaman  gen Leptin  karena  adanya  SNP  Arg25Cys  pada  exon  2,  mempunyai  hubungan  dengan  deposisi lemak,  yang  dapat  mempengaruhi  kualitas  daging.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui keragaman gen leptin  dan hubungannya dengan kualitas fisik daging sapi lokal di Ciamis Jawa Barat.  Penelitian  ini  menggunakan  14  sampel daging  bagian  udamaru  yang  diperoleh  dari peternakan  rakyat.Sampel  DNA diisolasi  dari  daging.  Amplifikasi  DNA  menggunakan  PCR, dan  penentuan  genotipe  dianalisis  dari  hasil  sequencing  produk  PCR.  Hasil  penelitian menunjukkan Gen Leptin pada sapi lokal Ciamis bersifat polimorfik, terdapat tiga alel, yaitu C, T (memiliki mutasi Arg25Cys) dan H (memiliki mutasi Arg25His) serta terdapat tiga genotipe CC,  CT  dan  CH.  Perbedaan  genotipe  gen  Leptin  tidak  berpengaruh  terhadap  kualitas  fisik daging sapi lokal di Ciamis.
Kata kunci: Kualitas daging, Leptin

## Abstract
Leptin is involved in  physiological fat developing processes. Leptin polymorphisms is caused by SNP Arg25Cys at exon 2, has assosiation with fat depositionthat can  influence meat quality.  The objectives of this research were  to identify genetic variation of Leptin gene and their assosiation with meat quality of local cattle in Ciamis West Java. Identification of leptin polymorphisms  14 DNA with  different genotipe, were isolated from meat  which had got  from rural livestock. DNA was amplificated by PCR andgenotyping was conducted by direct analyzed from  sequencing  result. The  result  shows  that  the  Leptin  gene  in  Ciamis  local  cattle  was polymophic and  there  were  three  alleles i.e.    C,  T  (Arg25Cys  mutation)  and  H  (Arg25His mutation), there were three genotype i.e. CC, CT and CH. There were no significant assosiation between Leptin gene polymorphisms with meat quality at Ciamis local cattle.
Keywords:  Leptin, Meat quality, Mutation, Polymorphism

## Pendahuluan
Leptin dan  receptornya  adalah kandidat  gen  potensial  sebagai  marker Quantitative  Trait  Loci  (QTL)  untuk  seleksi genetik  .  Hosnner  (1998)  menyatakan  mutan Leptin  pada  tikus  meningkatkan  bobot  badan dan  diduga    dapat  berpengaruh  pada pertumbuhan yang lebih  cepat karena  adanya deposisi lemak lebih awal pada ternak. Leptin memegang  peran  secara  integral  pada  proses pertumbuhan, hal ini ditunjukkan denganadanya  kerja  Leptin  dalam  regulasi metabolisme  yang  diuji  melalui  aksinya  pada jaringan hypothalamus  pituitary adrenal.
Bobot  badan,  asupan  makanan,  status  nutrisi dan  masa  jaringan  lemak  pada  manusia maupun  hewanberkorelasi  dengan  sirkulasi Leptin  dan    tingkat  mRNAnya pada  jaringan lemak (Delavaud et al. 2002). Kualitas daging berkorelasi  positif  dengan  lemak  baik  pada karkas  maupun  jaringan  daging,  peningkatan lemak  intramuskuler  menghasilkan  daging yang lebih empuk (Taniguchi et al. 2004). Identifikasi gen Leptin pada beberapa bangsa sapitipe pedaging menunjukan adanya korelasi  antara  polimorphisme  gen  tersebut dengan  kualitas  fisik  daging.Hasil  penelitian Munoz et  al. (2008)  menunjukkan  bahwa  gen
Leptin dapat digunakan untuk pengembangan program seleksi genetik pada sapi Colombian Creole, karena  terdapat  hubungan  antara polimorfismenya dengan tebal lemak punggung  dan  luas  udamaru  pada  sapi tersebut.    Selanjutnya  De  Vuyst  (2011) mengemukakan  secara  ekonomis  mutasi  C menjadi  T  atau  SNP  pada  exon  2  yang mengubah  kode  protein  Arginina  menjadi Sitosina lebih menguntungkan karena menghasilkan kualitas karkas yang lebih baik, sapi  dengan  genotipe  TT  memberikan  profit lebih  tinggi  berkisar  $14  sampai  dengan  $60 per ekor.
Polimorphisme  gen  leptin  yang disebabkan  mutasi  pada  sekuen  nukleotide C1180T, mengakibatkan  perubahan  kode protein  dari  Arginina  menjadi  Sisteina (Arg25Cys).  Mutasi  pada  posisi  tersebut merupakan causative  mutation . sehingga menyebabkan  perubahan  fungsi  leptin  dalam proses fisiologi tubuh  (Buchanan et al. 2002; Leifers et  al .  2002;  Kononof et  al. 2005; Fortes et  al .  2009).  Selanjutnya  Buchanan et al. (2002)  menyatakan  SNP  pada  exon  2 merupakan mutasi yang mempengaruhi sistem biologis, didukung  dengan  tingginya  ekspresi leptin  mRNA  pada  sapi  homozigous  TT, peningkatan  ini  dapat  menunjukkan  respon terbalik,  dan kompensasinya  menurunkan fungsi biologis.  Perubahan Arginina menjadi Sisteina  mengakibatkan  kapasitas  pengikatan ( binding  capacity )  dan  fungsinya  kembali  ke tipe liar,  hal  ini  menunjukkann  pentingnya Sisteina  Sulfihydryl.Berdasarkan  informasi tersebut,  Leptin  diyakini  sebagai  salah  satu kandidat  gen  untuk  kualitas  fisik  daging. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui keragaman  gen  leptin  yang  disebabkan  SNP pada exon 2 dan hubungannya dengan kualitas fisik daging sapi lokal di Ciamis Jawa Barat
Materi  dan Metode Materi Penelitian Sampel DNA yang digunakan,sebanyak  14DNA  yang  diisolasi dari  daging,  mengikuti  prosedur  dari
Sambrook et  al .  1998.  Analisis  kualitas daging  menggunakan  14  sampel  daging bagian  udamaru  pada  pemotongan  antara rusuk  12  dan  13,  diamatipada  genotipe  yang berbeda

## Metode Penelitian Amplifikasi gen Leptin
Amplifikasi  gen  leptin  sepanjang 620 bp menggunakan primer forward 5’CTCACTGCTGCGTGGTCTAC3’;  revers 3’ GCACTAGGATTCCGGTCTGG
5’meliputi  sebagian intron  1, exon  2  dan sebagian intron 2.  Setiap pereaksi PCR dibuat sebanyak35  µl  dengan  komposisi :  50  ng DNA  template, thermal  buffer  10x  25mM MgCl 2 , 150  µM  dNTP, 0.25  µM  primer  F/R dan 0.5 U Taq DNA polymerase . Mesin PCR yang digunakan adalah GeneAmp System 9700
Applied Biosystem dan Mastercycler Personal 22331 Eppendorf. Amplifikasi dimulai dengan
denaturasi  awal  pada  suhu  95 o C  selama  5 menit dilakukan satu kali, dilanjutkan dengan 35  kali  denaturasi  pada  suhu  95 o selama  45 detik, annealing pada  suhu56 o C  selama  1 menit dan  ektensi  pada  suhu    72 o C  selama  1 menit.   Selanjutnya dilakukan ekstension lagi pada  suhu  72 o C  selama  5  menit.    Hasil Amplifikasi dievaluasi
menggunakan elektroforesis  agarose  1.5%  dengan  buffer 0.5x  TBE  yang  mengandung  200  ng/ml ethidium  bromide .    Selanjutnya  divisualisasi dengan UV transluminator Keragaman  gen  leptin  dinalisis dengan melakukan sequencing langsung  dari produk  PCR.  Hasil sequence disejajarkan ( alligment ) menggunakan  program  MEGA  4 (Tamura et  al. 2004),  selanjutnya  dianalisis posisi SNP-nya dan dilakukan genotiping .
Analisis Kualitas Fisik Daging 1. Luas  Urat  Daging  Mata  Rusuk,  adalah hasil  pengukuran  yang  dilakukan  pada irisan  melintang  otot longissimus  dorsi diantara rusuk ke- 12 dan 13.  Pengukuran dilakukan  dengan  melukis  batas  luas penampang  melintang  otot longissimus dorsi menggunakan  spidol  permanen pada plastik  transparan  yang  ditempel  pada permukaan  irisan  otot.  Perhitungan  luas dilakukan dengan planimeter
2. Nilai  Keempukan  Daging    diuji dengan menggunakan Warner  Bratzler  Shear Force (WBSF).  Tingkat  keempukkan daging ditunjukkan oleh besarnya kekuatan (kg/cm 2 ) yang diperlukan untuk memotong core daging  yang  ditunjukkan  oleh  jarum pada WBSF. Irisan daging yang digunakan adalah bagian udamaru
3. Susut  Masak  ( Cooking  Loss ), yaitu perbedaan  antara  bobot  daging  sebelum dan  sesudah  dimasak  yang  dinyatakan dalam  persen  (%).    Sebanyak  100  gram daging yang  sudah dipasangi thermometer bimetal  sampai  menembus  bagian  dalam daging  dimasukkan  kedalam  rebusan  air. kemudian  diangkat  ketika  thermometer bimetal menunjukkan angka 80 o C. Selanjutnya sampel didinginkan selama 60 menit lalu ditimbang, selanjutnya setiap 30 menit  ditimbang  sampai  berat  sampel daging konstan.
4. Daya  Mengikat  Air  ( Water  Holding Capacity )  dilakukan  dengan  metode penekanan  ( press  method ),    yaitu  sampel daging  sebanyak  0.3  gram  dibebani  pada kertas saring ( filter ) diantara dua plat kaca dengan beban  tekan  sebesar  35  kg  selama lima  menit.    Daerah    tertutup  sampel daging yang telah menjadi rata dan daerah basah  di  sekitarnya  ditandai  dan  diukur dengan menggunakan planimeter.    Luasan daerah basah diperoleh dengan menghitung selisih  antara  daerah  total  dengan  daerah yang tertutup daging.
Analisis  Hubungan    Keragaman  Gen
Leptin Dengan Kualitas Fisik Daging
Asosiasi  antara  keragaman  gen  leptin (antar genotipe) dengan kualitas dagingdianalisis  menggunakan  Uji  T.  Model Matematikanya sebagai berikut :
? = ? ? − ? ? ? ? ? ? ? ? + ? ? ? ? ? = ? ∑ (? ? − ? ? ) ² + ∑ (? ? − ? ? ) ² ? ?? ? ? ?? ? ? ? + ? ? − 2
Keterangan
X 1 dan X 2 = rataan asam lemak dari genotipe 1 dan genotipe 2 n 1 dan n 2 =  jumlah individu genotipe 1 dan 2 σ 2 =  ragam gabungan

## Hasil dan Pembahasan

## Hasil Amplifikasi Gen Leptin
Sekuen target gen  Leptin  meliputi sebagian intron 1, exon 2 dan sebagian intron 2,dengan  panjang  620  bp.    DNA  target berhasil  diamplifikasi  menggunakan  primer yang sudah didesain untuk mengetahui mutasi pada  posisi  C1047T  (No  akses  EU313203.1) atau Arg25Cys.
Gambar 1. Hasil Amplifikasi gen Leptin  dengan  panjang 620 bp. M = Marker 100bp. 1-
10 = individu sampel M    1     2     3     4     5     6     7     8      9    10 620 bp 500 bp 100 bp

## Keragaman Gen Leptin
Genotyping  gen  leptin  dianalisis dengan  mensekuen  langsung  produk  PCR sepanjang  620  bp.  Keragaman gen  leptin berdasarkan  kepada  penggantian  nukleotide cytosin  menjadi  tymin  yang  mengubah  asam amino  Arginina menjadi Sisteina  (Arg25Cys) merupakan åçå=ëóåçåáã çì ë=ã ì í~íáçå atau ã áëëÉåëÉ=ã ì í~íáçå .    Adapun  pengkodeannya berdasarkan perbedaan sekuen nukleotida dan
éÉ~âJ nya pada hasil sekuensing dalam bentuk
ÅÜêçã ~íçÖê~éÜK Genotipe homozigot ditunjukkan  dengan  sekuen  masing-masing nukleotide  satu éÉ~â ,  sedangkan  heterozigot terdapat    dua éÉ~â .    Terdapat  tiga  alel  yang dapat  dideteksi  yaitu  alel  C,  T  (memiliki mutasi  Arg25Cys)  dan  H  (memiliki  mutasi Arg25His), dengan 3 genotipe yaitu  ; CC, CT dan  CH.    Hasil  aligment alelnya adalah sebagai berikut :
10         20         30         40         50 60
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
Bos taurusCATCTGAAGACGTGGATGCGG

## GTGGTAACGGAGCACGTGGGTGTTC
TCGGAGATCGACGA Alel C ............................................................ Alel H ............................................................ Alel T ......................................................T..... 70         80         90        100        110 120 ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| Bos taurusTGTGCCACGTGTGGTTTCTTCT GTTTTCAGGCCCCAGAAGCCCATCC CGGGAAGGAAAAT Alel C ............................................................ Alel H ............................................................ Alel T    ............................................................ 130        140        150        160        170 180 ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| Bos taurusGCGCTGTGGACCCCTGTATCGA TTCCTGTGGCTTTGGCCCTATCTGTC TTACGTGGAGGC Alel C............................................................ Alel H............................................................ Alel T ................................................C........... 190        200        210        220        230 240 ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| Bos taurusTGTGCCCATCCGCAAGGTCCAG GATGACACCAAAACCCTCATCAAGA CAATTGTCACCAG Alel C............................................................ Alel H...........A................................................ Alel T ..........T................................................. 250        260        270        280        290 300 ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....| Bos taurusGATCAATGACATCTCACACACG GTAGGGAGGGACTGGGAGACGAGGT AGAACCGTGGCCA Alel C............................................................ Alel H............................................................ Alel T    ............................................................ Gambar  2.  Alel gen Leptin berdasarkan

## SNP pada R25C dan R25H

## Hubungan  Keragaman Gen Leptin  dengan
Kualitas Fisik Daging
Kualitas  fisik  daging  merupakan parameter  yang  cukup  penting dalam pengelolaan usaha ternak, karena memberikan nilai  lebih  pada  kualitas  ternak  yang dihasilkan.  Salah  satu  gen  yang  berperan dalam desposisi lemak adalah leptin, sehingga diduga  terdapat  hubungan  SNP  Arg25Cys pada gen leptin dengan kualitas daging.
Hasil  penelitian  pada  kualitas  fisik daging    menunjukkan  perbedaan  genotipe berdasarkan  SNP  Arg25Cys  pada  gen  leptin, tidak  berpengaruh nyata (P ≥ 0.05)  terhadap pH, luas  udamaru, keempukan, susut  masak dan  daya  mengikat  air  (DMA) seperti disajikan pada Tabel 1 berikut ini.
Tabel 1.   Rataan nilai kualitas fisik daging sapi lokal Ciamis berdasarkan genotipe gen leptin Parameter n Genotipe CC CT CH n = 6 n  = 6 n  = 2 PH 14 5.24 ns ± 0.06 5.22 ns ± 0.11 5.22 ns ± 0.10 Luas Udamaru (cm 2 ) 14 49.85 ns ± 4.08 48.84 ns ± 5.16 48.89 ns ±10.08 Keempukan (kg/cm 2 ) 14 8.75 ns ± 1.69 7.63 ns ± 2.59 9.32 ns ± 0.49 Susut Masak (%) 14 39.46 ns ± 3.18 39.10 ns ± 2.54 35.23 ns ± 0.33 DMA 14 98.00 ns ± 3.29 98.89 ns ± 5.9 94.39 ns ± 7.22 % DMA 14 32.90 ns ± 1.1 32.94 ns ± 1.97 31.47 ns ± 2.41
Keterangan  :  n  =  jumlah  sampel;  ns  Tidak  terdapat  perbedaan  nyata  pada  parameter  yang dianalisis (non signifikan) (P ≥ 0,05)
Rataan  pH  daging  yang  diperoleh berdasarkan  genotipe  gen  Leptin    berkisar antara  5.22  – 5.24.    Nilai  pH  yang  diperoleh sedikit  lebih  rendah  dari  pH ultimat  daging yaitu  5.4  – 5.7, namun  masih  diatas pH isoelektrik  5.0  – 5.1    (Lawrie  2003),  hal  ini menunjukkan kualitas daging sapi lokal dalam kategori  baik  (masih  dalam  kisaran  normal). Buckle Éí=~ä .  (1987) menyatakan nilai  pH akhir  yang  tercapai  berpengaruh  terhadap mutu daging karena nilai pH mempengaruhisifat  fisik  lainnya  seperti warna, daya  mengikat  air, keempukan  dan susut masak.  Selanjutnya Aberle Éí=~ä . (2001)
mengemukakan perubahan nilai pH
tergantung  dari  jumlah  glikogen  sebelum dilakukan  pemotongan, bila  jumlah  glikogen dalam  ternak  normal  akan  mendapatkan daging  yang  berkualitas  baik, tetapi  bila glikogen dalam ternak tidak cukup atau terlalu banyak  akan  menghasilkan  daging  yang kurang berkualitas.
Hasil  penelitian  rataan  luas  udamaru pada  sapi  lokal  Ciamis  berdasarkan  genotipe Leptin  berkisar  antara  48.84  – 49.85  cm 2 . Luas  udamaru  sapi  lokal  Ciamis  lebih  kecil dari  luas  udamaru  sapi  pesisir  yang digemukkan dengan pakan yang berbeda yang berkisar  antara  66.33  – 71.00  cm 2 (Khasrad and  Ningrat  2010).    Hal  ini  diduga  karena sampel udamaru sapi lokal Ciamis berasal dari sapi  umur  1.5– 2.5  tahun,    dengan  bobot badan yang kecil. Selain itu sampel sapi lokal berasal  dari  peternak, dengan  pakan  hanya rumput, bukan hasil penggemukan.
Selanjutnya  Khasrad  and  Ningrat  (2010) mengemukakan luas udamaru sapi yang diberi pakan 75% konsentrat nyata lebih tinggi (P < 0.05)  dari  pada  sapi  dengan  pakan  50% konsentrat.
Hasil analisis menunjukkan perbedaan genotipe  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap luas udamaru (P ≥ 0.05).  Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian Fortes Éí=~ä .  (2009) pada  5  bangsa  sapi  persilangan _ çë=í~ì êì ë dengan _çë=áåÇáÅì ëI= yang  mengemukakan luas  udamaru  tidak  dipengaruhi  mutasi  pada gen Leptin  exon 2.  Demikian halnya dengan penelitian  Nkrumah Éí=~äK (2004) bahwa  luas udamaru  sapi  Angus, Charolais  dan Hereford tidak  dipengaruhi  oleh  genotipe  gen  leptin. Hasil penelitian berbeda dilaporkan Silva Éí=~ä
(2010) pada sapi Nellore dengan menggunakan 3 SNP  gen Leptin di promotor dan  exon  2., menunjukkan  genotipe berpengaruh terhadap luas udamaru.
Keempukan daging sapi  lokal  Ciamis yang diperoleh pada penelitian iniberdasarkan genotipenya  berkisar  antara  7.63  – 9.32 (kg/cm 2 ).Nilai  keempukan  yang  diukur dengan t ~êåÉê=_ä~íòäÉê=pÜÉ~ê=c çêÅÉ (WBSF) diatas 5.5 kg/cm 2 umumnya digolongkan tidak empuk, baik  oleh  panelis  terlatih  maupun konsumen (Shackelford Éí=~äK 1991), sehingga daging  sapi  ini  dapat  dikategorikan  tidak empuk  (alot).Rataan  nilai  keempukan  sapi lokal Ciamis lebih tinggi dari keempukan sapi pesisir,  seperti  yang  dilaporkan Khasrad  and Ningrat (2010) pada pemberian pakan dengan persentase  konsentrat  yang  berbeda,  nilai
keempukan  dagingnya  berkisar  4.42  kg/cm  - 6.29  kg/cm2.Selanjutnya  Lawrie  (2001) menyatakan  bahwa  penyebab  utama  kealotan daging adalah karena terjadi pemendekan otot pada  saat  proses  rigor  mortis  (kontraksi  dan pengerasan  otot  segera  setelah  ternak dipotong)  sebagai  akibat  dari  ternak  yang terlalu  banyak  bergerak  pada    saat pemotongan.  Sample  daging  sapi  lokal diperoleh  dari  tempat  pemotongan  hewan (TPH)  tradisional,  sapi  berasal  dari  peternak yang hanya memberikan pakan rumput, selain itu  TPH belum  menerapkan  tatalaksana pemotongan  untuk  meminimalisir  stress  pada sapi, pemotongan dilakukan dengan merobohkan  sapi  tanpa  penahan,  sapi  ditarik untuk  dijatuhkan, sehingga  diduga  sapi sebelum dipotong mengalami stress, akibatnya daging yang diperoleh lebih alot. Hasil  penelitian  ini  menunjukkan perbedaan  genotipe  tidak  berpengaruh nyata (P ≥ 0.05) terhadap nilai keempukkan.Hal ini sejalan dengan penelitian  Fortes Éí=~ä . (2009) yang  menyatakan  bahwa  genotipe  CC  nilai rataan  keempukannya  sebesar 3.68  ±    0.87 kg/cm 2 tidak  berbeda  nyata  dengan  genotipe CT  sebesar  3.70  ±  0.88  kg/cm 2 .  Berbeda dengan hasil penelitian Schenkel Éí=~äK (2005) yang  menyatakan  terdapat  pengaruh  genotipe terhadap  keempukan  otot äçåÖáëáã ì ë=Ççêëá , dengan nilai keempukan genotipe CC, CT dan TT, masing-masingsebesar 4.19 ± 0.27. 4.16 ± 0.23. dan    4.95  ±  0.26 kg/cm 2 .    Keempukan daging  berkorelasi  dengan  kandungan  lemak intamuskuler,  semakin  tinggi  kandungan lemak  intramuskuler  (IMF),  maka dagingnya semakin empuk.  Pada  sampel  daging  yang digunakan,  lemak  intramuskuler  sudah tampak,  namun  masih  sedikit.    Hal  ini disebabkan pada umur sapi (1.5 – 2.5 tahun), pembentukkan  lemak  IMF  belum  maksimal. Nishimura Éí=~äK (1999)  menyatakan  bahwa pada  sapi  Japanese  Black  umur  20  bulan pembentukan lemak IMF pada otot longisimus  dorsi  hanya  sekitar  40%  dari kapasitasnya, atau belum maksimal.
Rataan  nilai  susut  masak    masak daging sapi  lokal  Ciamis    berdasarkan  gen Leptin berkisar  antara  35.23  – 39.46%  . Soeparno  (2005)  menyatakan  susut  masak ( ÅççâáåÖ=äçëë )  daging  sapi  yang  termasuk dalam kisaran normal adalah antara 15 – 40%. Hasil  penelitian  Khasrad  and  Ningrat(2010)
menunjukkan  nilai  susut  masak  daging  sapi pesisir berkisar antara 37.27 – 44.16% dengan rata-rata  40.02%.  Besarnya  susut  masak dipengaruhi  oleh  banyaknya  kerusakan membran  seluler.Banyaknya  air  yang  keluar dari  daging, umur  simpan  daging, degradasi protein  dan  kemampuan  daging  untuk mengikat  air  (Shanks Éí= ~ä .. 2002). Selanjutnya Soeparno  (2005)  mengemukakan bahwa  susut  masak  merupakan  penurunan bobot  yang  terjadi  selama  pemasakan. Susut masak  merupakan  indikator  nilai  nutrisi daging  yang  berhubungan  dengan  kadar  jus daging, yaitu  banyaknya  air  yang  terkandung di  dalam  dan  di  antara  serabut  otot. Berdasarkan  paparan  tersebutsusut  masak daging  sapi  lokal  Ciamis  dalam  kisaran normal, dan  daging tidak  mengalami kerusakan  pada  membran  selnya.  Hasil analisis menunjukkan perbedaan genotipe gen leptin tidak berpengaruh terhadap susut masak (P ≥ 0.05).  Hal  ini  menunjukkan, susu  masak tidak  dipengaruhi  oleh  gen,  namun  oleh proses penanganan setelah sapi dipotong.
Rataan  daya  mengikat  air    %  DMA daging  sapilokal  Ciamis  berdasarkan  gen Leptin masing-masing berkisar  31.47 -32.94. Nilai  DMA  ini  lebih  rendah  dari  daya mengikat air daging sapi Pesisir yang berkisar antara 44.86 – 51.19%. (Khasrad and Ningrat 2010).Tiga  per  empat  bagian  dari    daging adalah air. pada ternak hidup 10% terikat pada protein  otot  dan  5  – 10%  berada  di    bagian ekstraseluler  di  antara  serat  otot.    Daya mengikat  air  merupakan  kemampuan    otot menahan kehilangan cairan.Daya mengikat air rendah  jika  pengeluaran  cairan  di  dalam  otot banyak dan  sebaliknya  daya  mengikat  air tinggi jika sedikit  pengeluaran cairan (Werris 2000).    Hasil  penelitian  menunjukkan polimorfisme  gen  Leptin  tidak  berpengaruh terhadap DMA (P ≥ 0.05).
Variasi  alel  yang  disebabkan  adanya SNP  (Arg25Cys)  tidak  berpengaruh  terhadap kualitas  fisik  daging  sapi  lokal  Ciamis. Beberapa  penelitian  menunjukkan  SNP  pada exon  leptin  ini,  berimplikasi  terhadap pembentukan  lemak,  diantaranya  terhadap kualitas  lemak  karkas.  deposisi  lemak, tebal lemak  punggung  dan  lemak  pada  susu (Buchanan Éí=~äK 2002;  Leifers Éí=~äK= 2002; Buchanan Éí=~äK 2003;  Nkrumah Éí=~äK 2004; Schenkel Éí=~äK 2005;  Kononof Éí=~äK= 2005;
Lusk Éí=~äK 2007; DeVuyst 2010).  Sementara itu  pada  penelitian  ini  kualitas  fisik  daging dianalisis  pada  daging  sapi  umur  1.5  – 2.5 tahun,  diduga  pembentukkan  lemak  belum maksimal,  sehingga  belum  tampak  pengaruh perbedaan  genotipe  terhadap  kualitas  fisik daging.    Kualitas  fisik  daging  sapi  salah satunya ditentukan oleh desposisi lemak pada bagian intra muskuler.
Kualitas daging adalah sifat
kuantitatif  yang  dipengaruhi  oleh  banyak pasang  gen  (Polygenes).  Analisis  QTL menunjukkan  kromosom  yang  signifikan berpengaruh  terhadap  kualitas  daging  di deteksi terdapat pada kromosom 1, 5, 6, 7, 8, 12,  15  and  17  (Rothschild Éí=~äK 2004). Selanjutnya  pada  penelitian  ini  sampel  yang digunakan  dengan  genotipe  yang  berbeda terbatas,  sehingga    data  yang  ada  kurang mewakili  parameter  yang  dianalisis,  untuk diasosiasikan  dengan  keragaman  genetik. Fortes Éí=~äK (2009) mengemukakan rendahnya frekuensi  alel  T,  yang  dapat  diidentifikasi menyulitkan untuk analisis hubungan polimorphisme  gen  Leptin  dengan  sifat karkas,  karena  data  fenotipe  yang  diperoleh hanya dari 4 ekor sapi bergenotipe TT.

## Kesimpulan
Gen  Leptin  pada  sapi  lokal  Ciamis bersifat polimorfik, terdapat tiga alel, yaitu C, T  (memiliki  mutasi  Arg25Cys)  dan  H (memiliki mutasi Arg25His) dan terdapat tiga genotipe CC, CT, dan CH.Perbedaan genotipe gen  Leptin  tidak  berpengaruh terhadap kualitas fisik daging sapi lokal Ciamis.

## Daftar Pustaka
Aberle  DE,  Forrest  JC,  Gerrard  DE,  Milles EW.      2001. mêáåÅáéäÉë=çÑ=j É~í= pÅáÉåÅÉ . 4 th edition San Francisco (US). W.H. Freeman and Company.
Buchanan  FC,  Fitzsimmons  CJ,  Van  Kessel AG, Thue TD.Winkelman_Sim DC, and Schmutz  SM.    2002.    Association  of  a missense  mutation  in  the  bovine  leptin gene with carcass fat content and leptin mRNA  levels. d ÉåÉíK=pÉäK=bî çäK= 34: 105-116. doi: 10.1051/gse:2001006.
Buchanan FC, Van Kessel AG, Boisclair YR, Block  HC.  and  McKinnon  JJ.  2007.
The
leptin arg25cys affects
performance,  carcass  traits  and  serum leptin  concentrations  in  beef  cattle K= ` ~åK=gK=^ åáã K=pÅáK 87: 153–156. Buckle  KA,  Edward  RA,  Fleet  GH,  Wooton M. 1987.  Ilmu  Pangan.  Purnomo  H. Adiono, penerjemah. Jakarta: UI Press. Terjemahan dari : Food Science.
Da  Silva  RC , Ferraz  JB , Meirelles  FV , Eler JP , Balieiro  JC , Cucco  DC , Mattos EC , Rezende  FM , Silva  SL .    2012. Association  of  single  nucleotide polymorphisms in the bovine leptin and leptin  receptor  genes  with  growth  and ultrasound  carcass  traits  in  Nellore cattle.
Delavaud  C,  Ferlay  A,    Faulconnier  Y, Bocquier  F,  Kann  G,  and  Chilliard  Y. 2002.  Plasma  leptin  concentration  in adult cattle: Effects of breed, adiposity, feeding level, and meal intake. J.Anim. Sci. 80:1317–1328.
DeVuyst EA.  2010.  The  Economics  of  Gene Testing  Cattle. l âä~Üçã ~=` ççéÉê~íáî É= bñíÉåëáçå=pÉêî áÅÉ .  [Internet].  Diunduh
2011 Nov 8. Tersedia pada: http://osufacts.okstate.edu .
Fortes  MRS,  Curi  RA,  Chardulo  LAL, Silveira  AC,  Assumpção  MEOD, Visintin JA,  and de Oliveira HN. 2009. Bovine  gene  polymorphisms  related  to fat  deposition  and  meat  tenderness. d ÉåÉí=~åÇ=j çä=_áçä , 32.(1): 75-82. Hossner  KL.  1998.    Cellular  molecular  and physiological aspect of  leptin:  Ptential application  in  animal  production.  Can. J. Anim Sci :463-472
Khasrad and Ningrat RWS. 2010.  Improving carcass  quality  of  indigenous  cattle  of west sumatera fed local feed resources. m~âáëí~å=gK==k ì íêá 9 (8): 822-826. Kononoff  PJ,  Deobald  HM,  Stewart  EL, Laycock AD and Marquess FLS. 2005. The effect of a leptin single nucleotide polymorphism  on  quality  grade,  yield grade, and carcass weight of beef cattle. gK=^ åáã K=pÅáK= 83:927-932. Liefers  SC,  Veerkamp  RF,  Te  Pas  MFW, Delavaud C, Chilliard Y, Platje M, and Van  der  Lende  T.  2002. Associations between  leptin  gene  polymorphisms and  production,  live  weight,  energy balance,  feed  intake,  and  fertility  in
holstein  heifers. g=a ~áêó=pÅá .  85:1633– 1638 Liefers  SC,  Veerkamp  RF,  Te  Pas  MFW, Delavaud C, Chilliard Y, Platje M, and Van  der  Lende  T.  2005.  Leptin promoter  mutations  affect  leptin  levels and  performance  traits  in  dairy  cows.
^ åáã K= d ÉåÉí . 36:111–118.
doi:10.1111/j.1365-2052.2005.01246.x.
Lawri RA. 2003. fäã ì =a ~ÖáåÖ . Parakkassi A.
Penerjemah.  Jakarta (ID). Universitas Indonesia Press.  Meat Science. Lusk  JL.    2007.  Association  of  single nucleotide polymorphisms in  the leptin gene  with  body  weightand  backfat growth curve parameters for beef cattle. gK= ^ åáã K= pÅáK= 85:1865-1872.  doi: 10.2527/jas.2006-665. Munoz  MC.  Bravo  ET.  and  Corrales  JD. 2008.    Leptin  gene  polymorphism  and beef  longissimus  muscle  association  in Hartón Del Valle  and  Blanco Orejinegro  cattle. i áî ÉëíçÅâ=o ÉëÉ~êÅÜ=
Ñçê=oì ê~ä=a Éî Éäçéã Éåí 20 (7): 105
Nei    M,.  1987. j çäÉÅì ä~ê=b î çäì íáçå~êó= d ÉåÉíáÅë .    New  York  (US):  Columbia University Press.
Nkrumah  JD, Li  C, Basarab JB, Guercio S, Meng  Y,  Murdoch  B,  Hansen  C,  and Moore  SS.  2004.  Association  of  a single  nucleotide  polymorphism  in  the bovine  leptin  gene  with  feed  intake, feed  efficiency,  growth,  feeding behaviour,  carcass  quality  and  body composition. ` ~åK=gK=^ åáã K=pÅá .  84: 211–219.
Nkrumah  JD,  Li  C,  Yu  J,  Hansen  C,  Keisler
DH, and Moore SS. 2005 Polymorphisms  in  the  bovine  leptin promoter  associated  with  serum  leptin concentration,  growth,  feed  intake, feeding  behavior,  and  measures  of carcass merit. gK=^ åáã K=pÅáK 83:20-28. Rothschild  MF, Bidanel JP and Ciobanu DC. 2004.  Genome  Analysis  of  QTL  for
Muscle  Tissue  Development  and  Meat Quality. Te  Pas  MFW,  Everst  ME. Haagsmann  HP.  (Ed)    Muscle Development  of  Livestock  Animals, Physiology, Genetics and Meat Quality. CABI Publishing (US).p. 247-262. Sambrook    J,  EF  Fritsch  and  T  Maniatis. 1989.  Molecular  Cloning  :  a Laboratory  Manual.  2 nd Ed.  United State  of  America  :  CSH  Laboratory Press. SAS. 2004. p^ pLpq^ qK==r ëÉê?ë=d ì áÇÉ=êÉäÉ~ëÉ= VKNP=b Çáíáçå .  North  Carolina  :  SAS Institute Inc, cary Schenkel  FS,  Miller  SP,  Ye  X,  Moore  SS, Nkrumah  JD,  Li  C,  Yu  J,  Mandell  IB, Wilton  JW,  and  Williams  JL.    2005. Association  of  single  nucleotide polymorphisms  in  the  leptin  gene  with carcass  and  meat  quality  traits  of  beef cattle. gK=^ åáã K=pÅá . 83:2009-2020. Shackelford SD, Wheeler TL and Koohmaraie M.  1997.    Tenderness  classification  of beef:  I. Evaluation  of  beef  longissimus shear  force  at  1  or  2  days  postmortem as a predictor of aged beef tenderness. gK= ^ åáã K=pÅáK 75:2417-2422. Soeparno.  2005. fäã ì =Ç~å=qÉâåçäçÖá=a ~ÖáåÖK Yogyakarta  (ID).  Gadjah  Mada. University Press.
Tamura  K,  Dudley  J,  Nei  M  and  Kumar  S. 2008. MEGA4: Molecular Evolutionary Genetics  Analysis  (MEGA)  software version  4.0.    Centre  of  Evolutionary Functional Genomics Biodesign Institut. Arizona: Arizona State University. Taniguchi  M. Éí=~äK 2004.    Genotype  of stearoyl-CoA  desaturase  is  associated with fatty acid composition in Japanese Black Cattle. j ~ã ã =d Éåçã É 14 : 142– 148. Warris  PD.  2000. j É~í= pÅáÉåÅÉK= ^ å= fåíêçÇì Åíçêó=qÉñíK= New  York  (US)  : CABI Publishing.