## PENGARUH GLUTAMIN & GLUKOSA UNHIDRAT PADA JUMLAH LIMFOSIT TIKUS MODEL KURANG ENERGI PROTEIN

## Septa Katmawanti
Fakultas Ilmu Keolahragaan Universitas Negeri Malang
Bambang Wirdjadmaji Annis Catur Adi Universitas Airlangga e-mail: septakatma@gmail.com
Abstract: Protein-energy  malnutrition  condition  causes  lymphocytes  number  to decrease  which  then  lead  to  body's  cellular  immune  system  disorders,  the  condition where  patient  is  more  vulnerable  to  infection.  Number  of  lymphocytes  in  the  body  is dependent  to  some  factors,  some  of  them  are  anti-oxidant,  amino  acid  glutamine  and glucose.  The  aim  of  his  research  is  to  study  the  effect  of  L-glutamine  and  glucose unhidrate administration in rat model of protein-energy malnutrition to the increase of lymphocytes  number  in  the  blood.  This  is  an  experimental  study  with  Completely Random Design. Sample is malnutrition induced with parched rice for 15 days (n=20). Then some samples are examined to  figure out the lymphocytes number after the rate model experience lack of energy and protein. Sample is then divided into four treatment groups, they are: group with normal diet (control), normal diet + L-glutamine, normal diet  +  glucose  unhidrate,  and  normal  diet  +  L-glutamine  +  glucose  unhidrate. Lymphocytes  content  is  measured  again  after  10  days.  The  result  of  the  study  shows that number of lymphocytes increase significantly (P<0.05) in the four treatment groups after  the  intervention  compared  with  number  of  lymphocytes  in  the  malnutrition induced  group.  Statistical  analysis  of  the  four  groups  with  L-glutamine  and  glucose unhidrate  administered  shows  significant  difference  each  other  (p<0.05).  These observations imply that the glutamin and gluocose unhidrat has an effect to the increase of lymphocytes number in the blood.
Keywords: Protein-Energy Malnutrition (PEM), lymphocyte, l-glutamine, glucose unhidrate
Abstrak: Kondisi  KEP  menyebabkan  penurunan  jumlah  limfosit  yang  mengakibatkan gangguan  sistem  imun  seluler  tubuh,  sehingga  penderita  menjadi  lebih  rentan  terhadap infeksi.  Jumlah  sel  limfosit  pada  tubuh  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  antara  lain keberadaan  antioksidan,  asam  amino  glutamin  dan  glukosa.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian  glutamin  dan  glukosa  unhidrat  pada  tikus  model  KEP terhadap kenaikan jumlah limfosit darah. Studi ekperimental menggunakan metode Rancang Acak Lengkap. Sampel diinduksi malnutrisi dengan nasi aking (karak) selama 15 hari  (n=20).  Kemudian  subsampel  diperiksa  untuk  mengetahui  jumlah  limfosit setelah  tikus  mengalami  kekurangan  energi  dan  protein.  Sampel  kemudian  dibagi menjadi empat kelompok perlakuan, yaitu kelompok dengan diet normal (kontrol), diet normal  +  glutamin,  diet  normal  +  glukosa  unhidrat,  dan  diet  normal  +  glutamin  + glukosa  unhidrat.  Kadar  limfosit  diukur  kembali  setelah  10  hari.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  setelah  dilakukan  intervensi  terdapat  kenaikan  jumlah  limfosit secara  bermakna  (P<0,05)  pada  keempat  kelompok  perlakuan  dibandingkan  dengan jumlah  limfosit  pada  kelompok  induksi  malnutrisi.  Analisis  secara  statistik  pada keempat  kelompok  yang  diberikan  intervensi  Glutamin  dan  glukosa  unhidrat menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna satu sama lain (p<0,05).
Kata kunci: Kekurangan Energi Protein (KEP), limfosit, glutamin, glukosa unhidrat
Di  Indonesia  terdapat  4  masalah  gizi utama yang memerlukan perhatian khusus  untuk  segera  ditangani.  Masalah gizi  tersebut  antara  lain  Kurang  Energi Protein (KEP), Gangguan  Akibat Kurang
Yodium  (GAKY),  Anemia  dan  Kurang Vitamin A (KVA). KEP merupakan salah satu masalah gizi kurang akibat konsumsi makanan  yang  tidak  cukup  mengandung energi  dan protein serta karena gangguan kesehatan. Berdasarkan hasil Riset Kesehatan  Dasar  tahun  2010,  secara nasional terjadi penurunan prevalensi gizi kurang  (berat badan  menurut umur) pada balita  dari  18,4%  pada  tahun  2007 menjadi  17,9%  persen  pada  tahun  2010. Penurunan  juga  terjadi  pada  prevalensi gizi  buruk  pada  tahun  2007  yaitu  5,4% menjadi  4,9%  pada  tahun  2010.  Target MDGs untuk indikator prevalensi
kekurangan gizi pada anak sebesar 15,5% sedangkan  hasil  Riset  Kesehatan  Dasar tahun  2010  menunjukkan  bahwa  terjadi penurunan  tingkat  prevalensi  kekurangan gizi  dari  18,4%  (pada  tahun  2007) menjadi  17,9%  pada  tahun  2010.  Agar target  kekurangan  gizi  2015  sebesar 15,5%  diperkirakan  dapat  tercapai  maka percepatan perlu dilakukan untuk indikator  prevalensi  kekurangan  gizi sebesar  15,5%  dapat  segera  tercapai secara  nasional  (Depkes,2000).  Salah satu fungsi utama protein untuk meningkatkan pertahanan. Selain merupakan  komponen  dasar  dari  sistem imun  itu  sendiri,  protein  juga  memegang peranan  penting  terhadap  pematangan sistem imun (Mezenes,2003).
Glutamin memiliki kemampuan untuk  meningkatkan  imunitas  di  dalam tubuh. Mekanisme glutamin untuk meningkatkan  fungsi  imunitas  adalah dengan  cara  menstimulasi  produksi glutathione  (GSH)  di  beberapa  jaringan dan melindungi tempat penyimpanan glutamine  otot.  GSH  merupakan pusat  dari  sistem  pertahanan  tubuh terhadap  antioksidan  yang  mengatur semua  aspek  fungsi  imun.  Selain  itu, glutamin juga berfungsi dalam proses proliferasi limfosit dengan cara membentuk  replikasi  DNA  dan  RNA  di dalam sel (Lee WJ, Hawkins RA&Vina
JR,1998).  Penelitian  pada  hewan  coba yang  diberikan  diet  yang  terdiri  dari  40 gram glutamin selama 10 hari memberikan respon imun yang signifikan mencegah  influenza,  dipteri,  dan  tetanus (Lee WJ, Hawkins RA&Vina JR,1998).
Setiap sel dan jaringan yang terdapat di dalam tubuh makhluk hidup membutuhkan  glukosa  untuk  proses metabolisme.  Glukosa  adalah  zat  yang penting  dan  dibutuhkan  untuk survival , ukuran,  aktivasi  sel  dan  juga  untuk produksi  cytokine.  Glukosa  memberikan energi  yang  dibutuhkan  bagi  limfosit-T untuk  proses  metabolik  menghasilkan ATP  (Maclver  J,  Nancie&Jacobs  R Sarah,  2008).  Penelitian  yang  dilakukan oleh  Migeul et  al ,  menunjukkan  bahwa formula  gabungan  antara  glutamin  dan glukosa yang diberikan pada hewan coba selama  15  hari  dapat  meningkatkan jumlah sellimfosit-T hewan coba tersebut (Migeul  P,  Beeh  KM,  Schlaak  JF&Buhl R, 2001). Pada penelitian yang dilakukan oleh Curi pada tahun 2009  menunjukkan bahwa  pemberian  glutamin  dan  glukosa pada formula enteral menurunkan kejadian sepsis pada pasien pasca operasi (Curi et al, 2009).
Masalah  kurang energi  protein (KEP),  hingga  saat  ini  masih  merupakan masalah kesehatan masyarakat, walaupun usaha  perbaikan  gizi  keluarga  oleh lembaga pemerintah maupun non- pemerintah  sudah  banyak  dilaksanakan.
Pembuatan  makanan  alternatif  untuk percepatan  penanggulangan  KEP  telah banyak dilakukan dan dalam hal ini peneliti melakukan penelitian pendahuluan terhadap efektifitas glutamin  dan  glukosa  terhadap  jumlah limfosit  hewan  coba  dalam  kondisi kurang energi protein.

## METODE
Bahan Tikus strain wistar Rattus
novergicus yang  diambil  secara  acak, dengan  kriteria sebagai berikut: (1) Jenis kelamin  jantan  dan  aktif;  (2)  Umur  12 minggu; (3) Berat badan 100-200 gram;
(4) Warna  bulu  putih;  (5)  Diadaptasikan selama 3 hari di lingkungan laboratorium
pemberian  ransum  tikus  berdasarkan pada  jumlah  kebutuhan  pakan  tikus  per harinya  yaitu  30 gram  per hari, memakaipakan  BR-1.  Diet  KEP  yang digunakan  adalah  menggunakan  karak (nasiaking)  dengan  pemberian  per  hari sebanyak  25-30  gram  (Curi  et  al,  2009). Penghitungan  diet  pada  saat  perlakuan menggunakan  prinsip  diet  isokalori  dan isoprotein.  Pemberian  diet  didasarkan atas  kebutuhan  protein  tikus  serta disesuaikan  dengan  kemampuan  tikus untuk  menghabiskan  diet.  Diperkirakan dalam  sehari  kapasitas  makan  tikus adalah  sebanyak  ±30  g,  maka  diet diberikan  dengan  jumlah  kurang  lebih sebanyak ±30 g.
Pemberian suplemen glutamin disesuaikan dengan penelitian Newsholme  (2001)  yang  menyatakan bahwa  tikus  yang  diberikan  glutamin sebanyak 20 gram dalam kurun waktu 10 hari memberikan efek dapat meningkatkan proliferasi limfosit, sehingga  untuk  penelitian  ini  jumlah suplementasi  glutamin  per  hari  adalah  2 gram. Penambahan glukosa sesuai dengan penelitian Curi et al (2010) menunjukkan bahwa perbandingan glutamin  dan  glukosa  yang  diberikan pada hewan coba adalah dengan pebandingan  1:1,  sehingga  penambahan glukosa sebanyak 2 gram. Pada penelitian Michael  (2008)  menunjukkan  bahwa pengenceran  yang  harus  dilakukan  untuk gabungan  suplementasi  glutamin  dan glukosa adalah 10 cc.

## Tikus Model
Penelitian menggunakan sampel tikus  karena  tikus  adalah  hewan  coba yang  paling  mudah  digunakan  dan kedekatan  dengan  manusia  antara  lain: mamalia,  pemakan  segala  ( omnivora ), mudah  berkembang  biak  dan  mudah dalam  perawatannya,  dan  mempunyai metabolisme  mirip  manusia  (Widiarti, 1995). Selain itu tikus merupakan spesies kecil  yang  murah  (Nurdiana,  dkk,  1998). Penelitian  ini  menggunakan  tikus  putih Rattus  novergicus  strain  Wistar dengan kelompok  1  sebagai  kontrol  positif (normal), kelompok 2 yaitu tikus kurang
energi protein dengan penambahan glutamin,  kelompok  3  yaitu  tikus  kurang energi protein dengan penambahan glukosa,  kelompok  4  yaitu  tikus  kurang energi protein dengan penambahan glutamin  dan  glukosa.  Sebanyak  20 sampel  ditambah  dengan  4  cadangan tikus  pada  setiap  perlakuan  diteliti homogen  dalam jenis  kelamin, umur dan berat badan. Untuk meningkatkan validitas internal, saat pembagian sampel menjadi  kelompok  dilakukan  dengan alokasi  random  ( random  assignment) yang  menggunakan  statistik  inferensial untuk mencapai tujuan penelitian.

## Pengumpulan Data
Data yang dikumpulkan meliputi:
1. Data  Berat  Badan  yang  diperoleh dari  hasil  penimbangan  berat  badan tikus  menggunakan timbangan  merk Sartorius  Melter dengan  ketelitian
0,1 Kg tiap minggu sekali
2. Data asupan makanan perhari dihitung  dengan  menimbang  sisa makanan yang diberikan pada hewan coba setiap harinya menggunakan timbangan merk Sartorius  Melter dengan  ketelitian
0,1 Kg 3. Jumlah sel T- limfosit dan Albumin darah. Teknik pengukuran jumlah limfosit didahului dengan pengambilan  darah  dengan  jarum suntik  ( disposable  syringe )  lewat vena abdominalis. Setelah itu dilakukan penghitungan di Laboratorium  Poliklinik  Universitas Brawijaya  Malang  menggunakan metode Cobas Micros

## Analisis Data
Hasil penilaian ada tidaknya perubahan pada kadar limfosit didapatkan data rata-rata kadar limfosit  darah hewan coba  pada  masing-masing  kelompok, selain  itu  dianalisis  pula  data-data  fisik klinis  berupa  berat  badan,  kadar  albumin dan  asupan  makanan  harian,  untuk mengetahui  apakah  sebaran  variabel diatas berdistribusi normal maka dilakukan  Uji  Formal  dengan test  of normality dari Kolmogorov–Smirnov dan
Saphiro-Wilk Analisa yang akan digunakan  adalah parametric  test yaitu uji One  Way ANOVA  ( Analysis  of
Variance ).  Uji  ini  adalah  suatu  uji statistik  inferensial  parametrik  yang memungkinkan para peneliti dapat menguji apakah dua atau lebih mean dari kelompok-kelompok  itu  berbeda  atau tidak dan menguji apakah varian populasi sama  atau  tidak.  Jika  ada  perbedaan dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc  Tuckey Test untuk  melihat  perbedaan  dari  tiap kelompok.  Pengujian  statistik  dilakukan dengan  menggunakan  kepercayaan  95%. Dalam  penelitian  ini  analisis  dengan Independent  Sampel  T  Test digunakan untuk  menguji  signifikansi  beda  rata-rata dua  kelompok  yaitu  variabel  perlakuan.
Uji  korelasi Pearson digunakan  untuk mengetahui hubungan antara dua variabel, sebagai alat bantu komputerisasi data,  peneliti  menggunakan  program komputer ( software ).

## HASIL
Jumlah limfosit dalam darah dihitung  pada  masa  induksi  diet  KEP untuk  mengetahui  terjadinya  perubahan jumlah  limfosit  sampel  penelitian  setelah sampel  mengalami  kondisi  malnutrisi energi dan protein. Sampel diambil serum darah  yang  berasal  dari  ekor  untuk dihitung jumlah limfositnya setelah
diberikan  induksi  diet  KEP  (Kekurangan Energi  Protein),  setelah  serum  darah diambil,  sampel  penelitian  kemudian dirandomisasi dan dilakukan penyesuaian terhadap  jenis  intervensi  yang  akan dilakukan. Pada saat akhir masa intervensi,  jumlah  limfosit  dihitung  pada semua  sampel  di  keempat  kelompok perlakuan  dan  untuk  mengetahui  apakah ada  perbedaan  jumlah  limfosit  saat induksi KEP (Kekurangan Energi Protein)  dan setelah  diberikan  intervensi, untuk  melihat  ada  tidaknya  perbedaan pada masing-masing kelompok perlakuan dilakukan uji statistik dengan menggunakan metode one way Anova serta dilanjutkan dengan menggunakan  uji post  Hoc  Tuckey .  Pada tabel  5.12  berikut  ini  hasil  perhitungan rata-rata  jumlah  limfosit  pada  masa induksi  diet  KEP  (Kekurangan  Energi Protein)  dan  setelah  sampel  diberikan intervensi.
Hasil  uji  statistik  didapatkan  bahwa berat badan sampel pada semua kelompok  perlakuan  tidak  menunjukkan perbedaan  secara  bermakna  dengan  nilai p=0,165  (P>0,05).  Pada  tabel  1  berikut ini  merupakan  rerata  jumlah  limfosit sampel  penelitian  setelah  induksi  diet KEP
1,6
1,35
1,4 1,08 1,05
1,2
1 0,9 0,8 0,6 0,4 0,2 0
kelompok1 kelompok 2kelompok 3 kelompok 4 Kelompok Perlakuan Gambar 1 Rerata Jumlah Kadar Limfosit Setelah Induksi Diet KEP JumlahLimfosit Sampel setelah  dilakukan intervensi  terdapat Uji statistik One Way Anova yang kenaikan jumlah limfosit secara dilakukan  dapat  mengetahui bahwa bermakna dengan nilai p=0,000 (α<0,05)
pada keempat kelompok perlakuan dibandingkan  dengan  jumlah  limfosit pada  kelompok  diet  Kekurangan  Energi Protein.  Kenaikan  tertinggi  terjadi  pada kelompok perlakuan pemberian L- Glutamin+Glukosa Unhidrat (16,98 x 10 3 ),  sedangkan  kenaikan  terendah terdapat  pada  kelompok  diet  normal
tanpa  pemberian  perlakuan  (5,51x10 3 ), pada  Gambar  2  berikut  ini  merupakan rerata  jumlah  limfosit  setelah  diberikan intervensi. 20 16,13a 16,2a 16,98a
15
10 5,51b 5 0 kelompok 1 kelompok 2 kelompok 3 kelompok 4 Kelompok Perlakuan

## Gambar 2 Rerata Jumlah Limfosit Setelah Diberikan Intervensi
Analisis secara statistik pada keempat kelompok yang diberikan
intervensi  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan yang bermakna satu sama lain (p>0,05).  Metode post  Hoc  Tukey menunjukkan  bahwa  pada  kelompok  diet normal tanpa perlakuan memiliki perbedaan  yang  bermakna  terhadap ketiga  kelompok  yang  lain  (p>0,05). Sedangkan  pada  kelompok  perlakuan pemberian L-Glutamin menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok perlakuan glukosa unhidrat dan kelompok perlakuan pemberian L- glutamin+glukosa unhidrat. Analisis  terhadap  hubungan  jumlah limfosit  sebelum  dan  sesudah  diberikan perlakuan dilakukan dengan uji Paired T- Test dan  didapatkan  hasil  p=0,000  (α  = 0,05). Hal ini bermakna bahwa pemberian  L-Glutamin  dan  glukosa unhidrat  memiliki  pengaruh  yang  nyata terhadap  peningkatan  jumlah  limfosit darah  sampel  penelitian  yang  diberikan induksi  diet  Kurang  Energi  Protein (KEP).
Analisis statistik uji korelasi digunakan mengetahui hubungan antara
pemberian  intervensi  berupa  L-Glutamin dan  glukosa  unhidrat.  Tujuan  dari  uji korelasi adalah untuk mengetahui apakah terdapat hubungan antara variabel penambahan  perlakuan  L-Glutamin  dan Glukosa Unhidrat terhadap jumlah limfosit  darah  tikus  putih.  Hasil  uji korelasi  menunjukkan  adanya  hubungan yang  kuat  sebesar  0,678  dengan  tingkat signifikansi sebesar 0,000 (p<0,05).
Hasil korelasi menunjukkan hubungan  yang  linier  yang  berarti  jika penambahan  L-Glutamin  dan  glukosa unhidrat  semakin  besar  maka  akan semakin besar pula jumlah limfosit darah sampel penelitian

## PEMBAHASAN
Hasil perhitungan rerata jumlah limfosit  sebelum  diberikan  intervensi menunjukkan bahwa kadar limfosit mengalami penurunan pada semua
perlakuan  dengan  nilai  p=0,308  (α>0,05) yang berarti tidak berbeda secara bermakna, sedangkan jumlah limfosit normal  adalah  2-4  x10 3 .  Pemberian intervensi L-Glutamin dan Glukosa unhidrat  menyebabkan  kenaikan  jumlah limfosit pada semua kelompok perlakuan.
Hasil  pengujian  statistik  jumlah limfosit  pada  tikus  wistar  kelompok  diet normal dengan penambahan L-Glutamin
menunjukkan  rata-rata  16,13±3,57x10 3 . Pada kelompok diet normal dengan penambahan glukosa unhidrat menunjukkan rata-rata jumlah limfosit sebesar 16,20±4,88 x 10 3 . Pada kelompok diet normal dengan penambahan L-Glutamin+glukosa unhidrat menghasilkan rata-rata jumlah limfosit  sebesar  16,98±4,30  x  10 3 .  Hasil rata-rata  jumlah  limfosit  terendah  pada kelompok diet normal tanpa penambahan perlakuan (kontrol) sebesar 5,51±0,29x10 3 . Kenaikan  tertinggi  terjadi  pada kelompok diet normal dengan penambahan perlakuan L- Glutamin+Glukosa unhidrat dengan rerata jumlah limfosit adalah sebesar 16,98x10 3.
Kenaikan  tertinggi  kedua adalah  pada  kelompok  perlakuan  diet normal  dengan  penambahan  glukosa unhidrat.  Penghitungan  secara  statistik dengan metode one way Anova menunjukkan terdapat perbedaan bermakna  antara  rerata  jumlah  limfosit pada keempat kelompok perlakuan p=0,01 (α<0,05). Rerata kelompok perlakuan diet normal dengan penambahan L-Glutamin dibanding dengan  kelompok  perlakuan  diet  normal dengan  penambahan  glukosa  unhidrat tidak memiliki perbedaan yang bermakna dengan nilai p=1,00 (α>0,05).
Rerata  kelompok  perlakuan  diet normal  dengan  penambahan  L-Glutamin dibanding  dengan  kelompok  perlakuan diet normal dengan penambahan L- Glutamin+glukosa unhidrat tidak memiliki perbedaan yang bermakna dengan nilai p=0,982 (α>0,05), sedangkan  rerata  kelompok  perlakuan diet normal dengan penambahan glukosa unhidrat dibandingkan kelompok perlakuan diet normal dengan penambahan L-Glutamin+glukosa unhidrat  tidak  memiliki  perbedaan  yang bermakna dengan nilai p=0,986 (α>0,05). Hasil  analisis  statistik  mengenai perbandingan  limfosit  pada  saat  sebelum diberikan perlakuan dengan pada saat
setelah  selesai  pemberian  perlakuan menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna p=0,000  (α<0,05).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  intervensi  berhasil  meningkatkan jumlah  limfosit  sampel  penelitian  yang mengalami  kondisi  kekurangan  energi protein (KEP).
Pembentukan  limfosit  dimulai  dari diferensiasi  stem  sel  di  tulang  belakang, dari  sum-sum  tulang,  limfosit  kemudian berdiferensiasi  menjadi  2  jenis  yaitu limfosit  B  dan  limfosit  T.  Limfosit  B kemudian  menuju  limfa,  sedangkan limfosit  T  menuju  kelenjar  thymus. Limfosit  T  mengalami  pematangan  di kelenjar  thymus  yang  selanjutnya  akan dilepas ke pembuluh darah.
Hasil  perhitungan  rerata  zat  gizi  pada masing-masing  perlakuan didapatkan bahwa  kelompok  perlakuan  diet  normal dengan  penambahan  L-Glutamin  dan glukosa unhidrat memiliki tingkat asupan energi tertinggi dibandingan ketiga perlakuan yang lain. Kelompok perlakuan diet normal dengan penambahan L-Glutamin memiliki tingkat  aupan  protein  yang  lebih  tinggi dibandingkan kedua perlakuan yang lain. Analisis korelasi antar zat gizi, didapatkan  bahwa  energi,  protein,  dan lemak  merupakan  zat  yang  memiliki korelasi  terhadap  peningkatan  limfosit dalam  darah.  Sedangkan  karbohidrat tidak  memiliki  korelasi  dibandingkan ketiga zat gizi yang lain. Perlakuan diet
normal dengan penambahan L- Glutamin+glukosa unhidrat bisa lebih meningkatkan jumlah limfosit
dikarenakan  jumlah  energi  dan  protein yang  tinggi,  sedangkan  energi  dan protein memiliki korelasi terhadap peningkatan  limfosit.  Kelompok  perlakuan penambahan  L-Glutamin  dan  perlakuan penambahan glukosa unhidrat juga meningkatkan jumlah limfosit namun tidak setinggi perlakuan penambahan Glutamin+glukosa unhidrat. L-Glutamin memegang peranan penting  dalam  pintalan  interorgan  dari nitrogen  dan  karbon  dan  telah  terlihat sebagai  energi  oksidatif  utama  untuk pembelahan sel seperti enterosit dan
kelompok L-
limfosit.  L-glutamin  adalah  substrat penting  untuk  menghasilkan  ammonia oleh  ginjal,  yang  merupakan  prekursor untuk  pembentukan  purin  dan  pirimidin, serta  memegang  peranan  penting  dalam regulasi  sintesis  protein.  L-Glutamin terbukti  memiliki  fungsi  yang  penting terhadap  fungsi  berbagai  sistem  organ, meliputi  intestinal,  sistem  imunitas,  dan untuk  mempertahankan  keseimbangan asam basa. L-glutamine menjadi nutrisi yang esensial selama menderita sakit 8 , Sebelumnya L-glutamin belum digunakan  sebagai  suplemen  nutrisi karena  beberapa  alasan  yaitu  karena  L- glutamin  merupakan  asam  amino  non esensial karena tubuh mempunyai kemampuan  untuk  mensintesa  asam amino melalui reaksi sintetase glutamine. Pada  diet  normal  dan  tidak  pada kondisi  stres/  infeksi  sepertinya  L- glutamin tidak diperlukan sebagai suplemen pada individu yang sehat. Namun pada penelitian Neu J (2001) 9 menyatakan bahwa terputusnya pemberian glutamine akan sangat mengganggu  pada  bayi  yang  sangat premature  dengan  tingkat  stress  yang tinggi  dan  sedang  dalam  pertumbuhan. Pada penelitian pada 68 bayi berat badan lahir rendah yang menerima tambahan L- glutamin  pada  bulan  pertama  kehidupan menunjukkan  30%  bayi  pada  kelompok kontrol  mengalami  sepsis,  dimana  hanya 11% bayi yang menerima glutamine yang mengalami  sepsis.  Penelitian  lainnya pada  suplemen  glutamine  pada  jalur parenteral  menunjukkan  berkurangnya lama  pemakaian  ventilasi  mekanik  pada bayi  dengan  berat  badan  <  800  g (Newsholme,2001).
Proliferasi limfosit membutuhkan L- glutamin  sebagai  bahan  baku  (Curi  R, Pithon  Curi&M.Pires,  2000).  Selain  L- Glutamin, glukosa juga diperlukan  dalam proses proliferasi limfosit (Mahan . L.K, Escott,2003). Sel-T menggunakan glukosa  dan  glutamin  sebagai  sumber bahan bakar primer, tetapi zat ketone dan asam  lemak  bisa  digunakan  untuk  ini meski  dalam  jumlah  kecil.  Dari  sekian nutrisi  ini,  glukosa  adalah  yang  penting dan dibutuhkan untuk survival, ukuran,
aktivasi  sel,  dan  juga  untuk  produksi cytokine.  Glukosa  memberikan  energi yang dibutuhkan bagi limfosit dalam cara berikut.  (1)  Glukosa  bisa  menjadi substrat primer untuk pembentukan ATP; (2) Glukosa bisa  menjadi sumber  karbon bagi  sintesis  nutrisi  makro  lainnya, seperti asam nukleik dan fosfolipid; dan
(3) Glukosa bisa dimetabolis oleh pathwaypentosefosfat untuk menghasilkan NADPH. Untuk pembentukan ATP, glukosa bisa dimetabolis lewat glikolisis atau
fosforilasi  oksidatif.  Glikolisis  terjadi dalamsitosol, dimana satu molekul glukosa  dipecah  menjadi  dua  molekul piruvat. Reaksi ini adalah proses independen-oksigen  (tidak  terpengaruh oksigen), dan  menghasilkan  dua  molekul ATP  untuk  setiap  molekul  glukosa. Piruvat  dikonversi  menjadi  laktat,  dan menghasilkan  NAD  akseptor  elektron lewat  NADH.  Metabolisme  lainnya adalah  fosforilasi  oksidatif,  yaitu  proses dependen-oksigen  dan  ini  dilakukan  di dalam  mitokondria.  Proses  berisi  dua reaksi,  yaitu  (1)  konversi  molekul intermediate  (asam  piruvat  dan  asam lemak)  menjadi  koenzim  asetil  A  (coA) dan  (2)  degradasi  asetil  coA  menjadi
CO2  dalam  siklus  asam  trikarboksilik, yang  menghasilkan  elektron  bebas  yang dibawa  NADH dan  flavina  denin dinukleotida (FADH2), atau ada transfer elektrondari NADH dan FADH2 kerantai transport elektron, yang nantinya membuat  proton  keluar  dari  matrik mitokondrial.  Potensi  elektro  kimia kemudian  digunakan  oleh  sinthase  ATP untuk  membuat  ATP,  dengan  hasil  total sebanyak  30  molekul  ATP  dari  setiap molekul  glukosa.  Karena  itu,  fosforilasi oksidatif  adalah  cara  efisien  untuk menghasilkan  ATP  dari  glukosa,  meski beberapa metabolit masih bertahan dalam biosinthesis  (KarinchAM  et  all,  2001) Limfosit  resting memiliki  kebutuhan energi-rendah,  dan  mendapatkan  banyak ATP-nya dari fosforilasi oksidatif.
Sementara itu, limfosit aktif membutuhkan kenaikan metabolisme
yang  besar  selama  aktif.  Ini  dibutuhkan agar bisa meningkatkan energi yang
diperlukan untuk menstimulasi pertumbuhan dan proliferasi, dan memproduksi produk protein yang diekspresikan oleh sel immunaktif. Metabolisme glukosa bisa berubah dalam sel-T aktif, dan transisi  dari sel-T resting kesel-T aktif akan menyebabkan perpindahan  dari  metabolisme  katabolik metabolisme  anabolik.  Di  perpindahan itu, ATP digunakan untuk menghasilkan molekul makro kompleks dari intermediate yang lebih sederhana. Limfosit aktif menghasilkan sebagian  besar  energinya  lewat  proses up-regulasi  glikolisis  aerobik.  Ini  adalah program  metabolik  dimana  sebuah  sel tetap  mengkonversi  piruvat  menjadi laktat,  meski  oksigennya  masihcukup. Program metabolik bersama antara
limfosit  aktif  dan  sel  kanker  memiliki relevansi  dengan  metabolisme  limfosit, dan  menjadi  topik  yang  bisa  diangkat dalam  studi  metabolisme  limfosit.  Meski begitu,  tidak  jelas  mengapa  sel-T  aktif memilih  menggunakan  glikolisis  aerobik untuk pembangkitan energinya, padahal glikolisis membutuhkan kecepatan metabolisme  yang  tinggi,  prekursor biosinthetik  juga  tersedia  banyak,  dan produksi ATP dari metabolisme oksidatif selalu tinggi. Namun perlu  dicatat bahwa kegagalan  meningkatkan  metabolisme glukosa  selama  aktivasi  limfosit  bisa menghambat  pertumbuhan  sel.  Glutamin bersama dengan glukosa berperan penting  dalam  proses  proliferasi  dan replikasi  limfosit,  berikut  ini  adalah proses  metabolisme  sel  limfosit  dengan glukosa  dan  glutamin  sebagai  bahan bakarnya (Newsholme,2001). Glukosa merupakan pusat dari
semua metabolisme.  Glukosa  adalah  bahan bakar  universal  bagi  sel  manusia  dan merupakan  sumber  karbon  untuk  sintesis sebagian  besar  senyawa  lainnya.  Semua jenis  sel  manusia  menggunakan  glukosa untuk  memperoleh  energi.  Gula  lain dalam  makanan  (terutama  fruktosa  dan glukosa) diubah menjadi glukosa atau zat antara dalam metabolisme glukosa
(Mahan . L.K &Escott, 2003). Glukosa  memberikan  energi  yang dibutuhkan bagi limfosit dengan cara
glukosa  menjadi  substrat  primer  untuk pembentukan ATP; glukosa bisa menjadi sumber  karbon  bagi  sintesis  nutrisi makro  lainnya,  seperti  asam  nukleik  dan fosfolipid;  dan  glukosa  bisa  dimetabolis oleh pathway pentosa  fosfat  untuk menghasilkan NADPH. Pada saat pembentukan ATP, glukosa bisa dimetabolis lewat glikolisis atau fosforilasi  oksidatif.  Glikolisis  terjadi dalam  sitosol,  dimana  satu  molekul glukosa  dipecah  menjadi  dua  molekul piruvat. Reaksi ini adalah proses independen  oksigen  (tidak  terpengaruh oksigen), dan  menghasilkan  dua  molekul ATP  untuk  setiap  molekul  glukosa. Piruvat  dikonversi  menjadi  laktat,  dan menghasilkan  NAD  akseptor  elektron lewat  NADH.  Metabolisme  lainnya adalah  fosforilasi  oksidatif,  yaitu  proses dependen-oksigen dan proses ini dilakukan di mitokondria (Maclver J,
Nancie, Jacobs R Sarah, 2008) .
Limfosit  resting  memiliki  kebutuhan energi  rendah,  dan  mendapatkan  banyak ATP-nya dari fosforilasi oksidatif.
Limfosit  aktif  membutuhkan  kenaikan metabolisme  yang besar selama aktif, ini dibutuhkan agar bisa meningkatkan energi yang diperlukan untuk menstimulasi pertumbuhan dan proliferasi,  dan  memproduksi  protein yang  diekspresikan  oleh  sel  imun  aktif. Metabolisme glukosa bisa berubah dalam sel-T aktif, dan transisi  dari sel-T resting ke  sel-T  aktif  akan menyebabkan perpindahan  dari  metabolisme  katabolik ke  metabolisme  anabolik.  Limfosit  aktif menghasilkan  sebagian  besar  energi lewat proses upregulasi glikolisis
aerobik 4 .  Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Ardawi  dan  Newsholme, aktivitas  L-glutamine  meningkat  seiring dengan  meningkatnya  kebutuhan  tubuh akan sistem imun (Curi, 2000). Pada pemberian perlakuan L-Glutamin menunjukkan rerata jumlah limfosit sebesar  16,13±3,57x10 3 ,  pada  kelompok perlakuan  pemberian  glukosa  unhidrat menunjukkan rerata jumlah limfosit
sebesar 16,20±4,88x10 3 , sedangkan pada kelompok perlakuan L-glutamin+glukosa unhidrat menunjukkan rerata tertinggi
diantara  kelompok  perlakuan  yang  lain yaitu 16,98±4,30x10 3 .
Hasil rerata jumlah limfosit menunjukkan bahwa gabungan pemberian  L-Glutamin+glukosa  unhidrat lebih cepat meningkatkan jumlah limfosit dibandingkan pemberian L-Glutamin dan glukosa  unhidrat  secara  terpisah,  hal  ini dikarenakan  metabolisme  limfosit  di dalam  tubuh  membutuhkan  dua  zat tersebut  secara  bersamaan.  Pada  kondisi KEP  cadangan  glukosa  dan  glutamin dalam  tubuh  berkurang,  sehingga  perlu adanya  pemberian  glutamin  dan  glukosa dari  luar  agar  proliferasi  limfosit  lebih cepat terjadi.
Pemisahan  pemberian  L-glutamin dan  glukosa  unhidrat  tidak  banyak memberikan  perubahan  yang  signifikan pada jumlah limfosit namun agar mendapat hasil maksimal maka gabungan pemberian L-Glutamin dan glukosa unhidrat lebih direkomendasikan. Menurut Newsholme (2001), proliferasi limfosit membutuhkan L-Glutamin sebagai  bahan  baku,  sedangkan  menurut Curi et  al (2009)  glukosa  diperlukan dalam proses proliferasi limfosit, sehingga pemberian gabungan L- glutamin  dan  glukosa unhidrat lebih baik dibandingkan pemberian L-glutamin dan glukosa unhidrat secara terpisah khususnya pada kondisi KEP PENUTUP Tikus  yang  diberi  penambahan perlakuan L-Glutamin (1,2 gram), glukosa unhidrat (1,2 gram) dan percampuran  antara  L-glutamin+glukosa unhidrat  (2,4  gram)  signifikan  memiliki jumlah limfosit yang lebih tinggi
dibanding  kelompok  diet  normal  tanpa perlakuan (kontrol )

## DAFTAR RUJUKAN
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  2000. Pedoman Tata Laksana  Kurang  Energi Protein Pada  Anak Di Rumah Sakit Kabupaten/Kodya . Direktorat Jenderal Bina Gizi Kesehatan Masyarakat : Jakarta Mezenes, Juscilene  da  Silva.  2003.
Stimulation by food proteins plays a critical role in the maturation of the immune system . 78(online)(http://intimm.oxfordjourn als.org/cgi/content/full/15/3/447).
diakses tanggal 10 Julio 2012 Lee  WJ, Hawkins  RA,  Vina  JR.
Glutamine  Transport  by  The  Blood Brain  Barrier ; PosibleMechanism For  Nitrogen  Removal .  Am.  J Physiol Cell 274;1101-1107, 1998 Maclver J, Nancie, Jacobs R Sarah, 2008.
Glucose Metabolism in Lymphocytes is  A  Regulated  Process  With
Significant Effect on Immune Cell
Function and Survival . Journal of Leukocyte Biology. Vol. 84.
Migeul P, Beeh KM, Schlaak JF, Buhl R, 2001.  Oral  supplementation  with whey  proteins  increases  plasma gluthatione  levels  of  HIV-Infected patiens.  Eur  J  Clin  Invest.  31:171- 178
Curi  et  al,  2009. Intracelluler  Distribution of Enzymes of The Glutamine Metabolism  in  Rat  Lymphocytes . Biochem. Biophys. Res. Commun. 138:318-322 Irawan, Rudi.2010. Pengaruh Pemberian glutamin pada mikrovili usus tikus malnutrisi . Disertasi. Fakultas
Kedokteran. Universitas Airlangga Parimi PS,  Devapatla  S,  Gruca  LL,
Amini SB, Hanson RW, Kalhan SC.
Effect  of  Enteral  Glutamine  or Glysin on Whole Body Nitrogen Kinetics in very low birth weight infant. Am J Nutr. 2004; 79: 402-9 Newsholme, Philip. Why Is L-Glutamine Metabolism  Important  to  Cells of The  Immune  System  in Health, Postinjury,  Surgery  of  Infection .
2001.  J Nutrvol  131  No.9 2515s-
2522s Curi R, PithonCuri, M.Pires.
2000. Metabolic Fate of Glutamine in Lymphosites, Macrophages and Neutrophils : Braz J Med Mahan . L.K, Escott. 2003. 11. Krausse’s Food  Nutrition Diet  and Therapy . Philadelphia; W.B. Saunders Co Ed
10 th
KarinchAM, Pan M, Lin CM, Strange Rand, Souba WW. Glutamine Metabolism in Sepsis and Infection . J. Nutr. 2001; 131:1535s-2538s .