Penulis Korespondensi : Nur Herlina Nasir Program Studi Farmasi, Universitas Mandala Waluya nur.herlina.nasir@gmail.com
Informasi Artikel Submitted : 23 Agustus 2021 Accepted : 26 Desember 2021 Published : 31 Desember 2021
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol 7.No.2 Desember 2021 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p-ISSN : 2442-6032 e-ISSN :  2598-9979
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanolik Daging Buah Semangka (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsum. & Nakai) dengan Metode ABTS dan FRAP

## Nur Herlina Nasir*, Jastria Pusmarani, Filmaharani
Program Studi Farmasi, Universitas Mandala Waluya

## ABSTRAK
Pada  daging  buah  semangka  terdapat  kandungan  zat yang  penting  bagi  kesehatan  dan  berpotensi  sebagai sumber  antioksidan  alami,  seperti  sitrulin.  Sitrulin merupakan salah satu zat antioksidan yang bermanfaat bagi kesehatan kulit. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanolik daging  buah  semangka  berdasarkan  kemampuannya untuk  mereduksi  ABTS˙ + dan  ion  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ dalam  metode  ABTS  dan  FRAP.  Ekstraksi  senyawa kimia  menggunakan  metode  maserasi  dengan  cairan penyari  metanol.  Uji  antioksidan  yang  digunakan adalah uji ABTS dan FRAP menggunakan spektrofotometer  UV-Vis.  Uji  ABTS  diukur  pada panjang  gelombang  734  nm  dimana  ekstrak  daging buah  semangka  dibuat  seri  konsentrasinya  dan
direaksikan  dengan  larutan  ABTS  selama  2  jam  dalam kondisi  gelap,.  Hasil  penangkapan  radikal  ABTS dinyatakan  sebagai  ekuivalen  dalam  μM  Vitamin  C/g massa segar, sedangkan uji FRAP absorbansinya diukur pada  panjang  gelombang  700  nm.  Aktivitas  mereduksi ekstrak/fraksi  uji  ditentukan  sebagai  ekivalen  asam askorbat  (mg  AAE/g  ekstrak).    Hasil  penyarian  daging buah  semangka  adalah  334,491  g  dengan  persen rendamen sebesar 16,380. Rata-rata persen penangkapan  radikal  (IC 50 )  pada  metode  ABTS  adalah 24,996±0,059 µg/mL dengan kategori kuat, sedangkan daya  reduksi  antioksidan  melalui  metode  FRAP  yaitu 13,677±0,246 mg/g ekstrak.
Kata  kunci  :  Semangka,  Maserasi,  ABTS,  FRAP

## ABSTRACT
Watermelon pulp contains substances are important for health  and  have  the  potential  as  source  of  natural antioxidants,  as  if  citrulline.  Citrulline  is  one  of  the antioxidants  that  are  beneficial  for  skin  health.  The purpose of this study was to determine the antioxidant activity  of  the  methanolic  extract  of  watermelon  pulp based  on  its  ability  to  reduce  ABTS ˙+ and  Fe 3+ to  Fe 2+ using  ABTS  and  FRAP.  Extraction  of  chemical compounds using maceration with methanol. Antioxidant  assay  was  carried  out  by  the  method  of ABTS and FRAP using UV-Vis spectrophotometer. The ABTS assay was measured at 734 nm where the extract was serialized with a number of concentration and each
was reacted with ABTS solution for 2 hours in the dark. The yield of ABTS radical scavenging was expressed as equivalent  in  μM  vitamin  C/g.  FRAP  absorbance  assay was  measured  at  700  nm.  The  reducing  activity  of  the extract  was  determined  as  the  equivalent  ascorbic  acid (mg AAE/g extract). The result of maceration is 334,491 g with percent yield 16,380. The average percent radical scavenging  (IC 50 )  activity  using  ABTS  is  24.996±0.059 μg/mL  with  strong  category,  while  the  antioxidant reducing  power  through  FRAP  is  13.677±0.246  mg/g extract.
Keywords :  Watermelon, Maceration, ABTS, FRAP
DOI : https ://doi.org/ 10.35311/jmpi. v7i2.91

## PENDAHULUAN
Antioksidan merupakan suatu
senyawa kimia yang pada konsentrasi rendah secara signifikan dapat  mencegah  oksidasi  substrat dalam  reaksi  rantai.  Kemampuan antioksidan adalah dapat
melindungi  sel-sel  dari  kerusakan yang  disebabkan  oleh  radikal  bebas. Antioksidan  alami  banyak  terdapat pada  buah-buahan,  sayur-sayuran, biji-bijian  dan  hewani.  Antioksidan alami  biasanya  lebih  diminati, karena  tingkat  keamanannya  lebih baik  dan  manfaat  yang  lebih  luas dalam  makanan,  kesehatan  dan
kosmetik (Retnaningtyas dan Setiadi, 2017). Semangka  (Citrullus  lanatus (Thunb.) Matsum. & Nakai) merupakan  tanaman  Angiospermae yang  dapat  berpotensi  sebagai sumber  antioksidan  alami.  Buah semangka  mengandung  banyak  air (sekitar  92  %),  likopen  sebesar  48,8 %,  protein  0,5%,  karbohidrat  5,3%, lemak  0,1%,  serat  0,2%  dan  vitamin (A,  B  dan  C),  asam  aminoasetat, asam  malat,  asam  fosfat,  arginin, betain,  likopen  (C 40 H 56 ),  karoten, bromin, natrium, kalium, silvit, lisin, fruktosa,  dekstrosa  dan  sukrosa (Dalimartha,  2004);  Tadmor  et  al.,
2005).  Pada  daging  buah  semangka memiliki  kandungan  zat-zat  yang penting bagi kesehatan dan diperlukan oleh tubuh, salah satunya adalah  sitrulin  (C 6 H 13 N 3 O 3 ).  Sitrulin merupakan salah satu zat
antioksidan  yang  bermanfaat  bagi kesehatan  kulit  (Rochmatika  et  al., 2012).  Selain  itu,  senyawa  fenolik seperti karotenoid (Likopen dan Beta Karoten)  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  dan  antiinflamasi  juga ditemukan pada daging buah semangka (Setiawan dan Widyastuti, 2016;  Neglo  et  al.,  2021).  Saponin yang  memiliki  sifat  antibakteri  dan antivirus;  flavonoid  sebagai  anti- inflamasi, analgesik, dan antioksidan (Kartika, 2014).
Metode yang digunakan dalam  pengujian  antioksidan  adalah metode ABTS (2,2’-azinobis-(3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid)) dan FRAP (Ferric Reducing Antioxidant  Power).  Uji  ABTS umumnya banyak digunakan karena kemudahan dan operation time yang singkat dimana metode ini berdasarkan  kemampuan  senyawa antioksidan  untuk  menstabilkan senyawa  radikal  bebas  dengan mendonorkan radikal proton (Durmaz,  2012;  Imrawati  et  al.,
2018).  Benzie  dan  Strain  (1996) mengemukakan bahwa metode FRAP adalah metode yang digunakan untuk menguji antioksidan dalam tumbuh- tumbuhan.  Kelebihan  metode  FRAP ini yaitu metodenya murah, reagennya  mudah  disiapkan  dan cukup  sederhana  dan  cepat.  Metode ini  dapat  menentukan  kandungan antioksidan  total  dari  suatu  bahan berdasarkan  kemampuan  senyawa antioksidan  untuk  mereduksi  ion Fe 3+ . Buah semangka
yang
memiliki  kandungan  air  tinggi banyak  dikonsumsi  karena  rasanya yang  manis  dan  menyegarkan, namun  penelitian  tentang  efek biologisnya  masih  langka.  Oleh karena itu, penting untuk melakukan penelitian tentang manfaat kesehatan dari daging buah semangka  ini  untuk  meningkatkan kesadaran  konsumen  tentang  efek menguntungkan  dari  buah  tersebut. Penelitian  yang  dilakukan  adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak metanolik daging  buah  semangka  berdasarkan kemampuannya  untuk  mereduksi ABTS˙ + dan  ion  Fe 3+ menjadi  Fe 2+
dalam metode ABTS dan FRAP.

## METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Mei sampai Juni 2021 di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia,  Program Studi  Farmasi,  Fakultas  Sains  dan Teknologi, Universitas Mandala
Waluya.

## B. Alat Penelitian
Ultra  sentrifugator  (Hitachi SCP  85H),  pH  meter  (TOA  HM- 60S),  neraca  elektrik  (Shimadzu, type  LS-6DT),  vacuum    rotary evaporator  (Heidolph  VV  2000),
spektrofotometer UV-VIS  (Genesys- 5),
inkubator (Memmert), mikropipet (Memmert) dan alat-alat gelas  yang  lazim  digunakan  di Laboratorium Kimia Farmasi.

## C. Bahan Penelitian
Buah  semangka  (C.  lanatus) yang  diperoleh  dari  Kecamatan Baruga,  Kota  Kendari,  Sulawesi Tenggara;  reagen  kalium  ferisianida ( C 6 N 6 FeK 3 )  (Loba  Chemie); bufer fosfat  0,2  M    (pH  6,6);  besi(III) klorida  (Merck);  asam  triklorasetat (TCA)  (Merck);  ABTS  (Sigma); kalium  persulfat  (Loba  Chemie); vitamin  C  (Merck);  metanol  p.a. (Merck); dan aquadest (Joint Alfara Chemical).

## D. Prosedur Penelitian
1. Preparasi Sampel Buah semangka segar
diperoleh  dari  Kabupaten  Konawe Selatan,  Sulawesi  Tenggara.  Buah semangka  kemudian  dicuci  dengan aquadest.  Kulit  luar  dan  lapisan putih  dikupas  sehingga  menyisakan daging  buahnya  saja  (bagian  buah semangka yang berair) yang
berwarna  merah  atau  merah  muda. Daging  buah  semangka  diiris  dan diperas untuk menghilangkan sedikit kandungan  airnya  lalu    diblender dan selanjutnya diayak (Mariani dan Rahman, 2018).
2. Ekstr
aksi Sampel Penyiapan  sampel  dilakukan
dengan  membuat  ekstrak  metanol daging  buah  semangka  (C.  lanatus). Sebanyak  2.042  g  daging  buah semangka  diblender  dengan  2,5  L metanol,  lalu  dicampur  homogen sambil  sesekali  diaduk.  Campuran didiamkan selama 4 hari, selanjutnya  filtrat  diambil  melalui penyaringan dan diendapkan selama satu  hari.  Setelah  diendapkan, pelarut penyari diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator  hingga  diperoleh  sari pekat metanol. Ekstrak ini selanjutnya diuji aktivitas
antioksidan secara in vitro.
3. Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode ABTS Pengujian aktivitas antioksidan diawali dengan pembuatan  larutan  stok  vitamin  C, kemudian dilanjutkan dengan pengukuran absorbansi ekstrak metanolik daging buah semangka (C. lanatus),  vitamin  C,  dan  blanko (larutan tanpa ekstrak) menggunakan  spektrofotometer  UV- Vis. 2.1.  Pembuatan  Larutan  Baku Vitamin C Vitamin C ditimbang
sebanyak  25  mg,  dimasukkan  ke dalam  labu  ukur  25  mL  dan dilarutkan  dengan  aquadest  sampai tanda  batas,  sehingga  didapatkan konsentrasi  larutan  stok  1000  ppm. Kemudian  dipipet  0,1;  0,2;  0,3;  0,4; dan 0,5 mL, ditempatkan dalam labu ukur  dan  diencerkan  hingga  10  mL. Konsentrasi  larutan  baku  vitamin  C yang terbentuk secara berturut-turut adalah 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm.
2.2. Pembuatan Larutan Stok Ekstrak  Metanolik  Daging  Buah Semangka Sebanyak  25  mg  ekstrak
ditimbang  dan  dilarutkan  ke  dalam
25 mL aquadest. Diambil 10 mL dan disentrifuge selama 10 menit dengan kecepatan  2000  rpm.  1  mL  filtrat disimpan  dalam  labu  ukur  10  mL dan  ditambahkan  aquadest  sampai tanda.
2.3.  Pengukuran  Absorban  Ekstrak, Vitamin C, dan Blanko Kation radikal ABTS
dihasilkan  oleh  inkubasi  ABTS dengan  kalium  persulfat.  Kation radikal  biasanya  disiapkan  dengan menginkubasi  2  mL  dari  10  mM larutan  PDS  dengan  2  ml  20  mM ABTS  pada  suhu  kamar  selama  16 jam.  Konsentrasi  kation  radikal ABTS  ditentukan  pada  panjang gelombang  734  nm  (Osman  et  al.,
2006). Larutan ABTS segar disiapkan  untuk  setiap  pengujian. Dari  larutan  stok  ekstrak  daging buah semangka yang sudah
disiapkan  kemudian  dibuat  seri konsentrasinya  sebanyak  5,  10,  15,
20,  25  μg/mL  dan  masing-masing direaksikan  dengan  300  μL  larutan ABTS  selama  2  jam  dalam  kondisi gelap.  Proses  di  atas  sama  halnya pada pengujian penangkapan radikal pada  vitamin  C  dan  blanko  (tanpa ekstrak). Kemudian absorbansi
ekstrak,  vitamin  C,  dan  blanko diukur  pada  734  nm  menggunakan
spektrofotometer  (Thaipong  et  al., 2006).
% penangkapan radikal ABTS x 100 %

## 4. Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode FRAP
3.1.  Pembuatan  Larutan  Baku
Vitamin C
Vitamin  C  dari  larutan  stok 100  ppm  dipipet  sebanyak  0,01;
0,02;  0,03;  0,04  dan  0,05  mL,
ditempatkan  dalam  labu  ukur  dan diencerkan hingga 10 mL. Konsentrasi  larutan  baku  vitamin  C yang terbentuk secara berturut-turut adalah 1, 2, 3, 4, dan 5 ppm.
3.2.  Pengukuran  Absorban  Ekstrak,
Vitamin C, dan Blanko Penentuan aktivitas antioksidan  ekstrak  daging  buah semangka  (C.  lanatus)  dengan penentuan  uji  reduksi  besi(III) menjadi besi(II)
dilakukan berdasarkan  metode  Hinneburg  et al.,  (2006).  Sebanyak  1  mL  alikuot ekstrak  uji  dari  larutan  stok dilarutkan  dalam  air,  dicampur dengan  2,5  mL  bufer  fosfat  0,2  M (pH  6,6)  dan  2,5  mL  kalium ferisianida  1%  lalu  diinkubasi  pada suhu  50 o C  selama  30  menit.  Setelah
selesai inkubasi, campuran ditambah dengan  2,5  mL  asam  trikloroasetat 1%  untuk  menghentikan  reaksi.
Campuran  selanjutnya  disentrifuge pada  kecepatan  2790  x  g  selama  10 menit.  Sebanyak  2,5  mL  supernatan (lapisan  atas)  selanjutnya  dicampur dengan  2,5  mL  air  dan  0,5  mL besi(III) klorida 0,1%. Proses di atas sama halnya pada pengujian penangkapan radikal pada vitamin C
dan blanko (tanpa ekstrak). Absorbansi  ekstrak,  vitamin  C,  dan blanko diukur pada panjang
gelombang 700 nm. Aktivitas mereduksi  ekstrak  uji  ditentukan
sebagai  ekivalen  asam  askorbat  (mg AAE/g ekstrak).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyarian  dari  daging  buah semangka dilakukan dengan menggunakan  metode  maserasi. Pelarut  penyari  yang  digunakan adalah metanol. Diharapkan senyawa-senyawa  yang  terdapat  di dalam sampel daging buah semangka  dapat  tersari  secara sempurna, baik yang non polar, semi polar,  dan  polar.  Hasil  penyarian daging  buah  semangka  dapat  dilihat pada Tabel 1 berikut ini.
Tabel 1. Hasil Ekstraksi Daging Buah Semangka ( C. lanatus )
Sampel Metode Ekstraksi Pelarut Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendamen (%) Daging buah semangka Maserasi Metanol p.a. 2.042 334,491 16,380 Hasil  ekstraksi  2.042  g daging buah semangka menggunakan pelarut metanol
diperoleh 334,491 g ekstrak metanol berwarna  merah  kehitaman  dengan nilai  rendamen  sebesar  16,380%. Nilai  rendamen  berkorelasi  dengan
jumlah kandungan metabolit sekunder yang terkandung di dalam tumbuhan.  Menurut  Senduk  et  al.
(2020)  bahwa  nilai  rendamen
sebanding dengan kandungan
metabolit  sekunder  yang  tersari pada saat ekstraksi. Stres oksidatif, yang disebabkan  oleh  faktor  endogen seperti spesies oksigen reaktif (ROS)
termasuk  radikal  hidroksil,  radikal anion superoksida, hidrogen peroksida,  oksigen  singlet,  radikal oksida nitrat, radikal hipoklorit, dan lain-lain serta faktor eksogen seperti
merokok,  radiasi  pengion,  polusi, pelarut  organik,  pestisida,  dan  lain- lain  yang  dapat  menyerang  asam nukleat, protein, enzim, dan
molekul kecil lainnya yang menyebabkan  hilangnya  struktur dan  fungsinya  (González-Palma  et al., 2016).
Uji  ABTS  didasarkan  pada generasi  dari  ABTS˙ + biru/  hijau yang dapat direduksi oleh antioksidan  (Floegel  et  al.,  2011).
Pada  uji  ABTS .+ ,  terjadi  transfer elektron  yang  akan  mencapai  titik akhir yang mana senyawa antioksidan yang berbeda menyumbangkan  satu  atau  dua elektron  untuk  mengurangi  kation radikal (Wootton-Beard et al., 2011).
Dalam  hal  ini  terjadi  oksidasi radikal  yang  mana  intensitas  warna berkurang  karena  direduksi  oleh molekul
ABTS dan terjadi perubahan  warna  menjadi  hijau- biru. Antioksidan menekan pembentukan  warna  karena  terjadi reduksi  ABTS .+ sehingga  terjadi penurunan absorbansi.
Aktivitas
penangkapan radikal  ABTS  dilakukan  dengan mengikuti  metode  Thaipong  et  al.,
(2006) . Berdasarkan
hasil penelitian  Thaipong  et  al.,  (2006),
uji  aktivitas  antioksidan  ABTS diukur pada panjang gelombang 734 nm dan operating time adalah 2 jam dalam  kondisi  gelap  pada  suhu kamar  yang  mana  pada  operating time tersebut terjadi serapan optimal  yang  ditandai  perubahan warna  larutan  dari  biru  menjadi bening.
Pengujian  dilakukan  pada larutan kontrol, sampel, dan pembanding  vitamin  C  yang  sudah terbukti  memiliki  kemampuan  yang poten sebagai
antioksidan (penangkap radikal ABTS). Aktivitas penangkap radikal bebas ABTS juga ditentukan  berdasarkan  parameter inhibitory  concentration  (IC 50 ).
Semakin kuat aktivitas penangkapan  radikal  ABTS  yang diberikan  suatu  sampel  maka  akan menghasikan  nilai  IC 50 semakin kecil.
Pada  penelitian  ini  diperoleh nilai  IC 50 vitamin  C  sebesar  3,936 ppm (Tabel 2), dalam hal ini vitamin C  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  lebih  kuat  daripada  ekstrak metanol  (IC 50 sebesar  24,996  ppm) (Tabel 3).
Tabel  2. Hubungan  antara  Kadar  Vitamin  C  dengan  Daya  Penangkapan  Radikal  Bebas  ABTS dengan  Absorbansi  yang  Diukur  pada  Panjang  Gelombang  734  nm  secara Spektrofotometri
Konsentrasi (μg/mL) Absorbansi %Penangkapan Radikal 1 2 3 1 2 3 10 20 30 40 50 0,623 0,587 0,465 0,378 0,254 0,621 0,588 0,464 0,388 0,256 0,625 0,585 0,465 0,377 0,257 16,711 21,559 37,861 49,487 66,057 17,015 21,425 37,995 48,151 65,790 16,481 21,826 37,861 49,621 65,657 y  =  12,662x  +  0,3489 R² = 0,9763 y  =  12,428x  +  0,7929 R² = 0,9711 y  =  12,615x  +  0,4454 R² = 0,9797
IC 50 = 3,921 IC 50 = 3,959 IC 50 = 3,928 Rata-rata IC 50 ±SD (µg/mL)
=3,936±0,020
Keterangan : absorbansi kontrol 0,748
Tabel  3. Hubungan  antara  Kadar  Ekstrak  Metanolik  dengan  Daya  Penangkapan  Radikal  Bebas ABTS Konsentrasi (μg/mL) Absorbansi %Penangkapan Radikal 1 2 3 1 2 3 5 10 15 20 25 0,679 0,569 0,501 0,465 0,399 0,670 0,566 0,503 0,464 0,340 0,675 0,568 0,500 0,465 0,398 13,168 27,020 35,741 40,359 48,824 13,039 27,404 35,485 40,487 49,080 13,424 27,148 35,613 40,359 48,952 y = 1,693x + 7,6271
R² = 0,9669
y  =  1,7033x  +  7,5495
R² = 0,9664
y  =  1,6853x  +  7,8191 R² = 0,9689
IC 50 = 25,028 IC 50 = 24,927 IC 50 = 25,033 Rata-rata IC 50 ±SD (µg/mL)
=24,996±0,059
Pada  metode  FRAP  atau reduksi  besi(III)  menjadi  besi(II) ini  terjadi  pengurangan  ion  feri (Fe 3+ )  dari  kalium  ferrisianida menjadi  ion  fero  (Fe 2+ )  (Floegel  et al.,  2011).  Dalam  metode  ini, kompleks Fe 3+ yang tidak berwarna direduksi  menjadi  kompleks  Fe 2+
berwarna  biru  (Erel,  2004).  Ion Fe 2+ dapat  dimonitor  dengan
pengukuran  warna  Pers’s  Prussian Blue  pada  panjang  gelombang  700 nm. Pembentukan warna biru akan menaikkan absorbansi sampel.
Kenaikan  absorbansi  pada  panjang gelombang  700  nm  menunjukkan suatu  kenaikan  daya  reduksi. Besarnya  daya  reduksi  suatu ekstrak  antioksidan  menunjukkan kemampuannya sebagai donor
elektron dan dapat bereaksi dengan radikal  bebas  untuk  mengubahnya menjadi  stabil  serta  mengakhiri reaksi rantai radikal.
Penentuan  aktivitas  untuk mereduksi besi(III) menjadi besi(II) mengikuti metode Hinneburg et al. (2006) yang mana aktivitas  antioksidan  dinyatakan dalam mg ekivalen asam askorbat 1 gram  sampel.  Pengujian  dilakukan pada  larutan  kontrol,  sampel,  dan
standar  vitamin  C  yang  merupakan reduktor  kuat  ketika  mereduksi superoksida,  radikal  hidroksil,  dan spesies  oksigen  reaktif.  Absorbansi dan  kadar  vitamin  C  (Tabel  4) digunakan  sebagai  kurva  baku untuk  menentukan  daya  reduksi sampel  uji  (Tabel  5).  Absorbansi kontrol  yang  digunakan  pada pengukuran  konsentrasi  vitamin  C adalah 0,748.
Tabel  4. Kadar  Vitamin  C  dalam  Mereduksi  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ dengan  Absorbansi  yang  Diukur pada Panjang Gelombang 700 nm secara Spektrofotometri
Konsentrasi (μg/mL) Absorbansi %Penangkapan Radikal 1 2 3 1 2 3 1 2 3 4 5 0,572 0,467 0,444 0,335 0,228 0,571 0,460 0,432 0,331 0,226 0,565 0,457 0,399 0,329 0,226 23,563 37,595 40,668 55,234 69,532 23,697 34,530 46,281 55,768 69,800 24,499 38,931 46,682 56,036 69,800 y  =  10,958x  +  12,446 R² = 0,9689 y  =  10,944x  +  13,982 R² = 0,9884
y  =  10,771x  +  14,878
R² = 0,9891
IC 50 = 3,43 IC 50 = 3,29 IC 50 = 3,26 Rata-rata IC 50 ±SD (µg/mL)
=3,33±0,090
Keterangan : absorbansi kontrol 0,748
Tabel  5. Aktivitas  Ekstrak  Metanolik  dalam  Mereduksi  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ dengan  Absorbansi yang Diukur pada Panjang Gelombang 700 nm secara Spektrofotometri
Sampel Daya Reduksi (mg AAE/g ekstrak) Rata-Rata±SD (mg AAE/g ekstrak) 1 2 3 Ekstrak metanolik daging buah semangka 13,893 13,408 13,731 13,677±0,246
Keterangan : AAE ( Ascorbic Acid Equivalent ) Kekuatan  daya  reduksi
sampel  ditentukan  berdasarkan
donasi  elektron  dalam  reduksi ferri  sianida  [Fe(CN) 6 ] 3- menjadi
ferro sianida [Fe(CN) 6 ] 4- . Kompleks Fe 3+ yang tidak berwarna direduksi menjadi kompleks  Fe 2+ berwarna  biru.
Dari  hasil  pengukuran  daya reduksi besi(III) diperoleh bahwa ekstrak  metanolik  daging  buah semangka  memiliki  daya  reduksi terbesar 13,677±0,246 mg AAE/g ekstrak.
Pada  dasarnya,  senyawa
yang  memiliki  sifat  pereduksi bekerja  dengan  menyumbangkan sebuah  atom  Hidrogen  yang mengakibatkan terputusnya rantai  radikal  bebas.  Dalam  uji FRAP,  adanya  antioksidan  dalam sampel berfungsi sebagai reduktor dalam reaksi kolorimetri terkait redoks. Uji FRAP biasanya dilakukan untuk penentuan status  antioksidan  total  dalam sampel (Rahim et al., 2017). Aktivitas penangkapan radikal  daging  buah  semangka dengan  metode  DPPH  menurut penelitian  yang  dilakukan  oleh Mariani  dan  Rahman  (2018) yaitu  sebesar  16,619  mg/L,  lebih rendah bila dibandingkan dengan kulit  buah  semangka  (16,575 mgL).  Menurut  penelitian  yang dilakukan  oleh  Neglo  et  al.,
(2021) menyatakan bahwa daging buah  semangka  memiliki  persen penangkapan  radikal  ABTS  yang paling  rendah  (41,46±3,45)  bila dibandingkan  dengan  bagian buah semangka yang lain,
walaupun  masih  dalam  kategori antioksidan kuat. Hal ini dikaitkan  dengan  kandungan fenolik  total  yang  rendah  pada daging  buah  semangka  dan senyawa fenolik berkaitan dengan potensi antioksidan.
Antioksidan  alami  seperti asam  fenolik  dan  flavonoid senyawa  dari  tanaman  dapat menawarkan  resistensi  terhadap stres oksidatif dengan menangkap radikal bebas, menghambat  lipid  peroksidasi, dan  dengan  mekanisme  lainnya
(Jemli  et  al.,  2016).  Jadi penelitian  ini  dilakukan  dengan tujuan untuk menunjukkan potensi  antioksidan  dari  daging buah  semangka  (C.  lanatus) menggunakan  metode  ABTS  dan FRAP.  Ternyata  metode  yang digunakan  memiliki  mekanisme reaksi  yang  berbeda.  ABTS didasarkan pada transfer elektron dan atom H, sedangkan uji FRAP didasarkan  pada  reaksi  transfer
elektron.  Namun,  kedua  metode
dengan jelas menunjukkan bahwa tanaman  yang  diteliti  memiliki aktivitas antioksidan dan antiradikal  yang  besar.  Untuk studi  selanjutnya  diharapkan untuk  menghitung  fenolik  dan flavonoid  total  dalam  daging buah semangka untuk mengetahui  korelasinya  dengan aktivitas antioksidannya. KESIMPULAN Berdasarkan pengujian yang  telah  dilakukan  maka didapatkan hasil penyarian daging  buah  semangka  adalah 334,491 g dengan persen rendamen  sebesar  16,380.  Rata- rata  persen  penangkapan  radikal (IC 50 )  pada  metode  ABTS  adalah
24,996±0,059  µg/mL  dengan kategori  kuat,  sedangkan  daya reduksi antioksidan melalui metode  FRAP  tergolong  tinggi yaitu 13,677±0,246 mg/g ekstrak.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih kami
sampaikan  kepada  Program Studi  Farmasi  dan  Universitas Mandala  Waluya  yang  telah mendukung penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Benzie,  I.F.,  Strain,  J.J.,  1996.  The ferric  reducing  ability  of plasma  (FRAP)  as  a  measure of  “antioxidant  power”:  the FRAP  assay.  Anal.  Biochem. 239, 70–76. https://doi.org/10.1006/abio.1 996.0292 Dalimartha, S., 2004. Atlas tumbuhan obat Indonesia jilid 3, Cet. 2. ed. Puspa Swara. Durmaz,  G.,  2012.  Freeze-dried ABTS+  method:  A  ready-to- use  radical  powder  to  assess antioxidant capacity of vegetable  oils.  Food  Chem., Advances in Potato Chemistry, Nutrition and Technology  133,  1658–1663.
https://doi.org/10.1016/j.food chem.2012.02.064
Erel,  O.,  2004.  A  novel  automated direct  measurement  method for  total  antioxidant  capacity using a new generation, more stable  ABTS  radical  cation. Clin.  Biochem.  37,  277–285. https://doi.org/10.1016/j.clinb iochem.2003.11.015 Floegel,  A.,  Kim,  D.-O.,  Chung,  S.- J.,  Koo,  S.I.,  Chun,  O.K., 2011. Comparison of ABTS/DPPH assays to measure  antioxidant  capacity in  popular  antioxidant-rich US  foods.  J.  Food  Compos. Anal. 24, 1043–1048. https://doi.org/10.1016/j.jfca. 2011.01.008
González-Palma, I., Escalona- Buendía, H.B., Ponce- Alquicira,  E.,  Téllez-Téllez,
M., Gupta, V.K., Díaz- Godínez,  G.,  Soriano-Santos, J.,  2016.  Evaluation  of  the Antioxidant Activity of Aqueous and Methanol Extracts of Pleurotus ostreatus in Different Growth
Stages.  Front.  Microbiol.  0. https://doi.org/10.3389/fmicb. 2016.01099 Hinneburg, I., Damien Dorman, H.J., Hiltunen, R., 2006. Antioxidant activities of extracts from selected culinary  herbs  and  spices. Food  Chem.  97,  122–129. https://doi.org/10.1016/j.food chem.2005.03.028 Imrawati,  I.,  Mus,  S.,  Gani,  S.A., Bubua, K.I., 2018. Antioxidant Activity of Muntingia calabura L. Leaves Ethyl Acetate Fraction. J. Pharm. Med. Sci. 2. Jemli,  M.E.,  Kamal,  R.,  Marmouzi, I.,  Zerrouki,  A.,  Cherrah,  Y., Alaoui,  K.,  2016.  Radical- Scavenging Activity and Ferric  Reducing  Ability  of Juniperus  thurifera (L.), J. oxycedrus (L.), J.  phoenicea (L.) and Tetraclinis articulata (L.), Radical-Scavenging Activity  and  Ferric  Reducing Ability of Juniperus thurifera (L.), J.  oxycedrus (L.), J. phoenicea (L.) and Tetraclinis  articulata (L.). Adv.  Pharmacol.  Sci.  2016, 2016. https://doi.org/10.1155/2016/ 6392656 Kartika, L.D., 2014. Pengaruh Perbedaan  Volume  Ekstrak Lapisan Putih Buah Semangka ( Citrullus Vulgaris Schrad) Terhadap Sifat Organoleptik  Kosmetik  Hair Tonic. J. Tata Rias 3. Mariani,  S.,  &  Rahman,  N.  (2018). Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak Buah Semangka ( Citrullus  Lanatus ). Jurnal Akademika Kimia , 3 , 8.
Neglo,  D.,  Tettey,  C.  O.,  Essuman,
E. K., Kortei, N. K., Boakye, A.  A.,  Hunkpe,  G.,  Amarh,
F.,  Kwashie,  P.,  &  Devi,  W.
S. (2021). Comparative antioxidant  and  antimicrobial activities  of  the  peels,  rind, pulp and seeds of watermelon ( Citrullus lanatus ) fruit. Scientific African , 11 , e00582. https://doi.org/10.1016/j.sciaf .2020.e00582 Rahim, N.A., Zakaria, N., Dzulkarnain, S.M.H., Azahar, N.M.Z.M.,  Abdulla,  M.A., 2017.  Antioxidant  activity  of Alstonia angustifolia ethanolic  leaf  extract.  AIP Conf.  Proc.  1891,  20012. https://doi.org/10.1063/1.500
5345
Retnaningtyas,  Y.,  &  Setiadi,  Y.
(2017). Study Of Antioxidant Activity Combination Of Arabica  Coffee Leaf  Ethanol Extract  And  Roselle  Flower Petal Water Extract. UNEJ E- Proceeding , 62–65.
Rochmatika,  L.D.,  Kusumastuti,  H., Setyaningrum, G.D., & Muslihah, N.I. Analisis Kadar Antioksidan  Pada  Masker Wajah Berbahan Dasar Lapisan Putih Kulit Semangka ( Citrullus Vulgaris Schrad).  Seminar  Nasional Penelitian,  Pendidikan  dan Penerapan  MIPA,  2  Juni 2012, Jogjakarta: FMIPA UNY. Hal 25-32. Senduk,  T.W.,  Montolalu,  L.A.D.Y., Dotulong,  V.,  2020.  The rendement  of  boiled  water extract  of  mature  leaves  of mangrove Sonneratia alba . J. Perikan.  DAN  Kelaut.  Trop. 11, 9–15. https://doi.org/10.35800/jpkt. 11.1.2020.28659 Setiawan, M.I., Widyastuti, N., 2016. Pengaruh Pemberian Jus Semangka  Kuning  ( Citrulus Lanatus ) Terhadap Konsumsi Oksigen Maksimal (Vo2max) Pada Atlet Sepak Bola
(Journal:eArticle).
Diponegoro University.
Tadmor,  Y.,  King,  S.,  Levi,  A., Davis, A., Meir, A., Wasserman,  B.,  Hirschberg,
J.,  Lewinsohn,  E.,  2005.
Comparative fruit colouration in  watermelon  and  tomato.
Food Res. Int.
Thaipong,  K.,  Boonprakob,  U., Crosby, K., Cisneros- Zevallos,  L., Hawkins Byrne, D.,  2006.  Comparison  of ABTS,  DPPH,  FRAP,  and ORAC  assays  for  estimating antioxidant activity from
guava  fruit  extracts.  J.  Food
Compos.  Anal.,  Biodiversity and  nutrition:  a  common pathBiodiversity and nutrition:  a  common  path  19, 669–675. https://doi.org/10.1016/j.jfca.
2006.01.003
Wootton-Beard,  P.C.,  Moran,  A., Ryan,  L.,  2011.  Stability  of the  total  antioxidant  capacity and  total  polyphenol  content of  23  commercially  available vegetable  juices  before  and after in vitro digestion measured  by  FRAP,  DPPH,
ABTS  and  Folin–Ciocalteu methods.  Food  Res.  Int.  44, 217–224. https://doi.org/10.1016/j.food res.2010.10.033