ISSN Cetak         : 2087-9423
ISSN Elektronik : 2620-309X

## INVESTIGASI PENYAKIT PADA PEMBESARAN LOBSTER PASIR Panulirus homarus DI KARAMBA JARING APUNG (LOMBOK, PEGAMETAN DAN PANGANDARAN)
INVESTIGATION OF DISEASES IN GROW-OUT OF

## SPINY LOBSTER Panulirus homarus CULTURED IN FLOATING NET CAGES
(LOMBOK, PEGAMETAN AND PANGANDARAN)
Sudewi*, Zeny Widiastuti, Bejo Slamet, dan Ketut Mahardika Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan (BBRBLPP) Gondol, Bali *E-mail: dewigrim@gmail.com

## ABSTRACT
Spiny  lobster,  Panulirus  homarus  is  an  economically  important  fishery  product  which  indicated  by huge  demand  of  this  species  at  both  local  and  international  markets.  However,  high  mortalities recorded during grow-out period due to infection of diseases. This study was conducted to investigate disease  occurrences  in  grow-out  of  P.  homarus  cultured  in  floating  net  cages.  The  study  was  done throughout  collection  of  samples,  observation  of  parasites,  isolation  of  fungi  and  bacteria,  and detection  of  Milky  Hemolymph  Disease  of  Spiny  Lobster  (MHD-SL)  by  PCR.  The  samples  were obtained from Lombok, Pangandaran, and Pegametan (Bali), five lobsters each. Results showed that three lobsters from Pangandaran were infected with ectoparasite Octolasmis sp . that infect mostly in the gill lamellae. One sample from Lombok was found to be infected with Fusarium sp ., the causative agent of black gill disease which indicated by black coloration of the gill. Detection of milky disease showed that one lobster from Pegametan and two lobsters from Lombok were infected with the disease that indicated by milky hemolymph.
Keywords : lobster diseases, Panulirus homarus, MHD-SL, black gill disease, Octolasmis sp.

## ABSTRAK
Lobster  pasir, Panulirus  homarus adalah  salah  satu  komoditas  perikanan  yang  memiliki  nilai ekonomis  tinggi,  baik  di  pasar  lokal  maupun  internasional.  Akan  tetapi,  dalam  usaha  pembesaran lobster  terdapat  hambatan  yaitu  tingginya  mortalitas  yang  disebabkan  oleh  infeksi  penyakit.  Oleh karena  itu,  dilakukan  penelitian  ini  dengan  tujuan  untuk  melakukan  investigasi  penyakit  pada pembesaran  lobster  pasir P.  homarus di  tiga  lokasi  karamba  jaring  apung  (KJA).  Metode  penelitian meliputi  pengambilan  sampel  lobster,  pengamatan  parasit,  isolasi  bakteri  dan  jamur,  serta  deteksi Milky Hemolymph Disease of Spiny Lobster (MHD-SL) melalui analisis Polymerase Chain Reaction (PCR).  Lokasi  pengambilan  sampel  meliputi  Lombok  (NTB),  Pangandaran  (Jabar)  dan  teluk Pegametan  (Bali)  dengan  sampel  lobster  masing-masing  sebanyak  5  ekor.  Tiga  ekor  lobster  dari Pangandaran  terinfeksi  parasit Octolasmis sp.  yang  menginfeksi  terutama  pada  lamela  insang.  Satu sampel lobster dari Lombok terinfeksi jamur Fusarium sp. yang merupakan penyebab penyakit black gill  disease dengan  gejala  insang  yang  menghitam.  Dua  lobster  dari  Lombok  dan  1  lobster  dari Pegametan terinfeksi oleh MHD-SL yang ditandai dengan hemolimfa berwarna putih susu.
Kata kunci : penyakit lobster, Panulirus homarus , MHD-SL, black gill disease , Octolasmis sp.

## I. PENDAHULUAN
Lobster ialah anggota Crustacea yang menarik  untuk  dibudidayakan  mengingat tingginya  permintaan  pasar  dan  harga  yang mahal  baik  di  pasar  lokal  maupun  untuk
ekspor  diantaranya  ke  Asia,  Eropa,  dan Amerika  (Hart,  2009).  Budidaya  lobster menjadi sangat penting dikarenakan semakin menurunnya pasokan hasil tangkapan lobster di perairan laut (Jones and Shanks, 2009).
Budidaya  pembesaran  lobster  di Indonesia  dimulai  sejak  awal  tahun  2000, yaitu  dengan  ditemukannya  penempelan puerulus  di  perairan  teluk  Lombok.  Potensi berkembangnya  budidaya  pembesaran  ini didukung  oleh  adanya  transfer  pengetahuan dan  teknologi  dari  masyarakat  pembudidaya lobster  di  Vietnam.  Diantara  beberapa spesies  lobster, Panulirus  ornatus dan Panulirus homarus memiliki kelebihan untuk dipilih  sebagai  kandidat  spesies  budidaya. Hal  ini  terkait  dengan  permintaan  pasar, harga  yang  tinggi,  dan  ketersediaan  benih  di alam (FAO, 2015).
Akan  tetapi,  dalam  usaha  budidaya lobster  ini  sering  terjadi  kegagalan  karena tingginya  mortalitas  yang  disebabkan  oleh infeksi  penyakit  (Shields,  2011)  yang  pada umumnya  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri, rickettsia-like bakteri,  parasit,  jamur  dan virus  (Musthaq et  al .,  2006;  Nha et  al ., 2009). Bakteri seperti Pseudomonas aeruginosa ,  dan Vibrio  parahaemolyticus diketahui  menginfeksi Panulirus  homarus (Immanuel et  al .,  2006). Milky  Hemolymph Disease  of  Spiny  Lobsters (MHD-SL) merupakan  penyakit  yang  disebabkan  oleh Rickettsia-like  Bacteria (RLB),  menyebab- kan  mortalitas  yang  tinggi  pada Panulirus spp.  di  Vietnam  (OIE,  2007).  Penyakit MHD-SL  pada  budidaya  lobster  diketahui menyebabkan kerugian ekonomi dalam skala besar  yaitu  menyebabkan  kerugian  hingga US$10  million  di  sepanjang  800  km  garis pantai di Vietnam tahun 2007. Nilai ini setara dengan 10% dari produksi total lobster tahun 2007 (OIE, 2007).
Timbulnya  berbagai  penyakit  yang merugikan  budidaya  lobster  merupakan indikasi  pentingnya  studi  tentang  penyakit pada  lobster  (Behringer et  al .,  2012).  Oleh karena  itu,  diperlukan  pengetahuan  tentang penyakit  yang  timbul  pada  budidaya  lobster sehingga dapat dilakukan manajemen penyakit  secara  efektif  dan  efisien  untuk mengurangi  dampak  penyakit.  Penelitian mengenai  penyakit  pada  lobster  hasil budidaya  telah  dilakukan  di Lombok
(Koesharyani et al ., 2016), namun, di daerah lain  belum  dilakukan.  Oleh  karena  itu, diperlukan  penelitian  untuk  mengetahui jenis-jenis  penyakit  yang  menyerang  lobster dari  beberapa  lokasi  di  Indonesia  yang dimungkinkan  sama  atau  berbeda  dengan yang  telah  ditemukan  sebelumnya.  Tujuan penelitian  ini adalah  untuk  melakukan investigasi penyakit pada pembesaran lobster pasir P.  homarus di  tiga  lokasi  karamba jaring  apung  (KJA).  Penelitian  ini  memiliki implikasi penting dalam manajemen penyakit pada  budidaya  lobster,  dan  untuk  mencegah terjadinya  translokasi  penyakit  dari  satu daerah ke daerah lain di Indonesia.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1. Koleksi Sampel
Sampel  lobster  pada  penelitian  ini diperoleh  dari  budidaya  pembesaran  dalam karamba  jaring  apung  (KJA)  di  Lombok (NTB),  teluk  Pegametan-Bali,  dan  Pangan- daran-Jabar  masing-masing  sebanyak  5  ekor yang  dipilih  secara  acak  dalam  satu  KJA, KJA  ini  juga  dipilih  secara  acak  dari  satu pembudidaya. Jumlah sampel dalam penelitian  ini  lebih  banyak  dari  penelitian yang  dilakukan  oleh  Rungrassamee et  al . (2014)  yaitu  pada  udang Penaeus  monodon, dengan jumlah sampel 3 ekor. Sampel lobster dari Lombok berukuran berat 211,6±34,16 g, Pangandaran 128,95±30,07 g, dan Pegametan 123,00±26,11  g.  Pengambilan  sampel  di Lombok,  Pangandaran,  dan  Pegametan berturut-turut  dilakukan  pada  bulan  April, Agustus dan November 2016. Sampel lobster ditransportasikan  ke  Balai  Besar  Riset Budidaya  Laut  dan  Penyuluhan  Perikanan (BBRBLPP)  Gondol-Bali  dengan  metode kering  menggunakan  pasir  kering  dalam kotak styrofoam .

## 2.2. Observasi Kondisi Lobster
Pengamatan kondisi lobster dilakukan dengan  mengamati  kondisi  fisik  dan  organ lobster  untuk  mengetahui  adanya  gejala infeksi penyakit. Observasi dilakukan
terhadap  insang  untuk  mengetahui  ada tidaknya  parasit,  serta  warna  insang  sebagai indikator  infeksi  jamur.  Kondisi  dan  warna hepatopankreas, usus, daging dan hemolimfa untuk pengamatan gejala milky disease .

## 2.3. Infeksi Parasit
Pengamatan
parasit meliputi ektoparasit dan endoparasit. Lobster dibedah, carapace luar  dari  kedua  ruang  insang dipotong  (dibuang)  dan  insang  dikoleksi. Pengamatan  parasit  dilakukan  pada  semua lamela  insang  dan  bagian  luar  tubuh  lobster. Keberadaan  dan  ketiadaan  parasit  dicatat (Machado et  al .,  2013).  Untuk  pengamatan secara  makro,  parasit  dikoleksi  dari  insang dan diamati menggunakan mikroskop cahaya.  Pengamatan  endoparasit  dilakukan pada sampel daging.

## 2.4. Populasi Bakteri
Kultur  bakteri  dilakukan  untuk  me- ngetahui populasi atau kepadatan bakteri dari organ  insang,  usus,  hepatopankreas,  daging, dan  hemolimfa.  Masing-masing  sampel tersebut dikoleksi secara aseptis, dihomogen- kan, diencerkan dengan seri 10 menggunakan air  laut  steril,  diinokulasikan  masing-masing sebanyak  100  µl  (Payne et  al .,  2007) pada media  Marine  Agar  (MA)  dan  thiosulfate- citrate-bile salt-sucrose (TCBS) agar. Inkubasi  dilakukan  pada  suhu  29 ° C  selama 24  jam.  Jumlah  koloni  dalam  setiap plate kultur  dihitung  dalam colony  forming  unit per  ml  (cfu/mL)  untuk  sampel  hemolimfa dan  dalam colony  forming  unit per  gram (cfu/g) untuk sampel insang, hepatopankreas, daging, dan usus.

## 2.5. Infeksi Jamur
Pengamatan  terhadap  infeksi  jamur dilakukan  terhadap  organ  insang.  Infeksi jamur  ditunjukkan  oleh  adanya  diskolorasi ( discoloration ) insang yaitu dari warna coklat pucat  hingga  hitam  yang  merupakan  gejala infeksi black  gill  disease yang  disebabkan oleh jamur Fusarium sp. Satu lembar lamela insang  dari  setiap  sampel  lobster  dicuci
dalam  air  laut  steril  dan  dipotong  menjadi  2 dan  diinokulasikan  dalam  media Potatoes Dextrose Agar (PDA) dengan 2% NaCl dan 1 g/L  streptomisin  sulfat  serta  1  g/L  ampisilin untuk  menghindari  kontaminasi  bakteri. Setelah  inkubasi  selama  4  hari  pada  30 o C, dilakukan kultur single spore untuk memperoleh kultur murni dalam media PDA, lalu  diinkubasi  pada  30 o C  selama  4-10  hari (Nha et al ., 2009).

## 2.6. Infeksi  Milky  Hemolymph  Disease of Spiny Lobster (MHD-SL)
Deteksi milky  disease dilakukan dengan  amplifikasi  PCR  menggunakan primer (F/R) untuk target 254 bp (OIE, 2007; Thuy,  2011).  Urutan  basa  primer  254F  yaitu 5’-CGA-GGA-CCA-GAG-ATG-GAC-CTT- 3’ dan 254R yaitu 5’-GCT-CAT-TGT-CAC- CGC-CAT-TGT-3’.  Ekstraksi  DNA  dengan menggunakan  10%  chelex dalam  TE dengan pH  8.  Ekstraksi  DNA  dari  sampel  daging lobster  dengan  prosedur  yaitu  dengan menambahkan  200  –  250  µL  chelex  dalam TE buffer dalam mikrotube 1,5 ml kemudian digerus.  Kemudian  ditambahkan  5  –  7,5  µL pK  (20  mg/ml)  dan  diinkubasi  pada  55 o C selama  2,5  jam.  Inkubasi  yang  kedua  yaitu pada  89 o C  selama  8  menit.  Selanjutnya dilakukan  sentrifugasi  pada  13.000  rpm selama 5 – 7,5 menit, supernatan diambil dan disimpan pada suhu -20 o C hingga digunakan. Reaksi PCR untuk deteksi MHD yaitu 2x  KAPA  2G  Fast  Ready  Mix,  primer  254F (10  µM),  primer  254R  (10µM),  NFW  dan template DNA  dengan  total  reaksi  10  µl. Amplifikasi  dilakukan  pada  kondisi initial denaturation pada  suhu  96 o C  =  3  menit,  40
siklus penggandaan yang terdiri
denaturation :  96 o C  =  15  detik, annealing : 65 o C  =  30  detik,  dan extention :  72 o C  =  15 detik,  dilanjutkan  dengan final  extention : 72 o C = 1 menit (modifikasi dari Koesharyani et  al .,  2016).  Amplikon  yang  diperoleh diseparasi  dengan  Agarose  1,5%  dalam  1  x TBE  selama  30  menit  untuk  mengetahui lobster positif terinfeksi MHD-SL atau tidak.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Kondisi Lobster
Hasil pengamatan kondisi fisik menunjukkan  bahwa  lobster  dari  Lombok
dan  Pegametan  terlihat  lemah,  sedangkan lobster  dari  Pangandaran  terlihat  sehat. Kondisi  organ  insang,  hepatopankreas,  usus, daging,  serta  hemolimfa  lobster  ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Kondisi insang, hepatopankreas, usus, daging dan hemolimfa lobster Panulirus homarus dari Lombok, Pangandaran-Jabar dan Pegametan-Bali. NA: Not Available.
Insang Hepatopankreas Usus Daging Hemolimfa Lombok 1 Sebagian menghitam Sebagian kuning-oranye, sebagian putih kehijauan (pucat) Sebagian kuning kecoklatan, sebagian bening Putih NA 2 Sebagian menghitam Putih kekuningan Sebagian kuning kecoklatan, sebagian bening Putih NA 3 Putih Kuning cerah Sebagian kuning kecoklatan, sebagian bening Putih NA 4 Putih Putih kekuningan Sebagian kuning kecoklatan, sebagian bening Putih NA 5 Putih Putih kekuningan Sebagian kuning kecoklatan, sebagian bening Putih NA Pangandaran 1 Terdapat parasit, warna normal Oranye normal Bening kecoklatan Putih, bening, normal Putih bening, mengendap 2 Terdapat parasit, warna normal Kuning agak pucat Bening kecoklatan Putih, bening, normal Putih bening tidak mengendap 3 Normal Oranye normal Coklat dan berisi Putih, bening, normal Putih keruh 4 Normal Kuning pucat Bening dan berisi Putih, bening, normal Putih keruh 5 Normal Coklat tua Bening, normal Putih, bening, normal Bening agak keruh Pegametan
Insang Hepatopankreas Usus Daging Hemolimfa 1 Kemerahan Merah kecoklatan, gelap Kecoklatan Kemerahan Keruh 2 Putih Putih Putih Putih Keruh 3 Normal Kehitaman Pucat Putih pucat Putih susu 4 Kehitaman Pucat kehitaman  Pucat Pucat Keruh 5 Kehitaman Kehitaman Normal Pucat Keruh
Parasit  ditemukan  pada  insang  lobster  dari Pangandaran.  Gejala  penyakit black  gill disease terlihat  pada  sampel  lobster  dari Lombok  yang  ditandai  dengan  insang  yang menghitam.  Gejala  penyakit milky  disease terlihat  pada  lobster  dari  Lombok  yaitu insang  dan  hepatopankreas  yang  berwarna putih,  serta  lobster  dari  Pegametan  yang ditandai  dengan  hemolimfa  yang  berwarna putih susu ( milky hemolymph ).

## 3.2. Infeksi Parasit
Observasi  parasit  menunjukkan  ada- nya  infeksi  ektoparasit  dan  tidak  adanya infeksi  endoparasit.  Berdasarkan  karakter morfologi, ektoparasit yang ditemukan dalam penelitian ini adalah Octolasmis sp. Karakter morfologi Octolasmis sp.  yaitu  bagian  tubuh yang  terdiri  dari  peduncle  atau  tangkai, capitulum, dan bagian untuk menempel pada inang (Gambar 1).
Gambar  1.  Karakter  morfologi  parasit Octolasmis sp.  yang  ditemu- kan  pada  sampel  lobster P. homarus dari Pangandaran: (a) peduncle  atau  tangkai,  (b) capitulum,  (c)  bagian  untuk menempel pada inang.
Sampel  lobster  yang  terinfestasi  oleh parasit Octolasmis sp.  sebanyak  3  ekor  dari
Pangandaran dengan total parasit 85 individu.  Sementara  sampel  lobster  dari  Pe- gamatan tidak menunjukkan adanya infestasi parasit. Pengamatan parasit pada sampel dari Lombok tidak dapat dilakukan karena adanya keterbatasan  peralatan  penelitian.  Jumlah Octolasmis sp.  yang  tertingi  ditemukan  pada lamela  insang  yaitu  72  individu  (Tabel  2). Infestasi  parasit  tergolong  infestasi  berat. Infestasi Octolasmis sp. dinyatakan berat jika melebihi  50 Octolasmis sp.  dalam  satu  ekor inang (Pusat Karantina Ikan-KKP, 2010).
Distribusi spasial Octolasmis sp. pada inang  terlihat  tidak  random,  mengingat  lebih banyak Octolasmis sp.  ditemukan  pada insang dibandingkan dengan organ  yang lain seperti  bagian-bagian  mulut  dan  kaki  jalan (Gambar  2).  Penemuan  ini  mendukung argumentasi  bahwa  penempelan  dan  distri- busi  spesies  ini  dipengaruhi  terutama  oleh aliran  air  yang  memfasilitasi  ketersediaan pakan,  dan  pembuangan  metabolit,  serta menyediakan  ventilasi  (Santos et  al .,  2000). Insang  juga  merupakan  lingkungan  yang sesuai  untuk  penempelan  dan  berkembang- biaknya Octolasmis sp.,  karena organ insang memiliki area yang lebih luas sehingga dapat menampung  lebih banyak parasit. Sementara itu,  Machado et  al .  (2013)  menemukan Octolasmis  pada  dasar  dan  dinding  ruang insang.  Meskipun  infestasi Octolasmis sp. pada bagian luar mulut dan kaki jalan adalah rendah (Tabel 2), namun hasil ini menunjuk- kan  bahwa  organ  tersebut  merupakan ruangan  alternatif    untuk  menempelnya Octolasmis sp.  Bagian luar mulut merupakan area  yang  terlindung  dari  predator  dan ketersediaan  pakan  terjamin  dengan  adanya aliran air di bawah tubuh lobster.
c
b a
Tabel 2. Infestasi Octolasmis sp. pada lamela insang, bagian luar mulut dan kaki jalan lobster Panulirus homarus yang dipelihara di karamba jaring apung.
Sampel lobster Jumlah Octolasmis sp. Distribusi Spasial Pangandaran 1 72 Lamela insang 2 12 Bagian luar mulut dan kaki jalan 3 1 Lamela insang 4 0 5 0 Pegametan 1 0 2 0 3 0 4 0
5 0
Gambar 2. Parasit Octolasmis sp. menempel pada lamela insang (a) dan bagian luar mulut (b) lobster Panulirus homarus .
Beberapa penelitian menyatakan bahwa  infestasi Octolasmis sp.  yang  tinggi dapat  menurunkan  respirasi  lobster.  Infestasi Octolasmis sp. yang berat dapat menurunkan luas  permukaan  lamela  insang  sehingga menyebabkan  defisiensi  dalam  penyerapan
oksigen  (Ihwan,  2014).  Demikian  juga Lavilla-Pitogo et  al .  (2001)  melaporkan bahwa  infestasi Octolasmis sp.  menghambat pertukaran oksigen dan karbon dioksida. Hal ini  karena  terjadinya  penutupan  pada  insang oleh akumulasi parasit dan kotoran.

## 3.3. Populasi Bakteri
Populasi atau kepadatan bakteri untuk setiap lokasi terlihat bervariasi (Tabel 3). Hal ini  sehubungan  dengan  kondisi  lingkungan perairan,  perbedaan  pakan,  maupun  tingkat imunitas lobster itu sendiri. Kondisi lingkungan  perairan  ini  termasuk  limbah organik  di  sekitar KJA.  Junaidi dan Hamzah (2015)  menyatakan  bahwa  limbah  organik pada  budidaya  udang  karang  ( spiny  lobster ) tidak menyebar jauh dari lokasi KJA. Hal ini disebabkan  oleh  arus  laut  yang  lambat  yaitu berkisar  antara  0,068-0,2  m/dt.  Akibatnya, terjadi  penumpukan  partikel  limbah  organik di  dasar  KJA  (Junaidi  dan  Hamzah,  2015). Keberadaan  nutrisi  yang  tinggi  dalam lingkungan  budidaya  dapat  meningkatkan populasi  bakteri  termasuk  bakteri  patogen yaitu Vibrio  harveyi (Rungrassamee et  al ., 2014).
Secara  umum,  populasi  bakteri    usus lebih  banyak  jika  dibandingkan  dari  insang maupun organ yang lain (Tabel 3). Tingginya populasi  bakteri  ini  disebabkan  karena masukya  bakteri  ke  dalam  usus  melalui pakan.  Selain  itu,  tersedianya  nutrisi  dalam usus  mendukung  spesies  bakteri  untuk berproliferasi dengan cepat (Immanuel et al ., 2006).  Total  bakteri  dan  total  Vibrio  yang tertinggi diperoleh dari organ usus sedangkan yang  terendah  diperoleh  dari  hemolimfa. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak ada  Vibrio  yang  tumbuh  dari  hemolimfa (Tabel  4).  Total  bakteri  yang  tertinggi diperoleh  dari  sampel  usus  yaitu  1,72  x  10 8 cfu/g  dan  1,07  x  10 7 cfu/g  masing-masing dari  Lombok  dan  Pangandaran.  Sementara total Vibrio tertinggi  yaitu dari usus masing- masing 3,55 x 10 7 cfu/g dan 1,86 x 10 6 cfu/g untuk  lokasi  Lombok  dan  Pangandaran (Tabel 4).
A B
Tabel  3.  Total  bakteri  dari  organ  usus,  insang,  hepatopankreas,  daging  (cfu/g),  dan  dari hemolimfa (cfu/ml) sampel lobster Panulirus homarus . Lokasi Usus Insang Hepatopankreas Daging Hemolimfa Lombok 1,72 x 10 8 1,03 x 10 7 9,32 x 10 6 1,60 x 10 6 1,94 x 10 5 Pangandaran 1,07 x 10 7 2,48 x 10 5 4,08 x 10 4 2,78 x 10 4 1,26 x 10 4 Pegametan 1,92 x 10 6 6,02 x 10 4 1,54 x 10 4 0 0
Tabel  4.  Total  Vibrio  dari  organ  usus,  insang,  hepatopankreas,  daging  (cfu/g),  dan  dari hemolimfa (cfu/ml) sampel lobster Panulirus homarus . Lokasi Usus Insang Hepatopankreas Daging Hemolimfa Lombok 3,55 x 10 7 1,36 x 10 6 1,34 x 10 6 0,60 x 10 3 0 Pangandaran 1,86 x 10 6 5,00 x 10 3 0 0,60 x 10 3 0 Pegametan 1,31 x 10 6 9,40 x 10 4 1,96 x 10 4 0 0
Total  bakteri  dari  lobster  hasil budidaya  dalam  penelitian  ini  tidak  jauh berbeda  dengan  hasil  penelitian,  baik  pada Japanese  spiny  lobster Panulirus  japonicus maupun P.  homarus hasil  tangkapan  dari alam  yang  telah  dilakukan  terdahulu.  Total bakteri  dari  insang  dan  usus  lobster P. japonicus (ukuran berat  45,5 – 54,6 g), yang baru ditangkap berkisar antara 10 6 hingga 10 7 cfu/g dan 10 7 hingga 10 9 cfu/g (Sugita et al ., 1987).  Sementara  itu,  total  bakteri  yang dikultur dari usus lobster P. homarus dengan berat  130  ±  8.0  g  yaitu  1,50±2,0x10 8 cfu/ml (Immanuel et al ., 2006).
Kultur bakteri dari sampel hemolimfa menunjukkan tidak tumbuhnya koloni Vibrio untuk setiap lokasi. Akan tetapi, dari hasil ini tidak  dapat  dinyatakan  bahwa  di  dalam hemolimfa  tidak  terdapat  Vibrio.  Hal  ini karena dalam proses kultur, sampel hemolimfa  diencerkan  hingga  10 2 .  Jika sampel  hemolimfa  tidak  diencerkan  maka ada  kemungkinan  terdapat  Vibrio  yang tumbuh  dalam  media  TCBS.  Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa diperoleh 4 spesies Vibrio yang meliputi Vibrio alginolyticus, Vibrio vulnificus, Vibrio harveyi dan Vibrio  mimicus yang  diisolasi dari sampel hemolimfa P. homarus (Raissy et al ., 2011).
Meskipun  diperoleh  banyak  koloni bakteri,  dari  hasil  isolasi  bakteri  ini  belum dapat  diketahui  apakah  bakteri  tersebut merupakan  bakteri  yang  patogen  terhadap lobster.  Populasi  bakteri  yang  tinggi  belum tentu  menyebabkan  penyakit  karena  ada kemungkinan  bakteri  tersebut  tidak  bersifat patogen  atau  bahkan  berpotensi  sebagai kandidat  bakteri  probiotik.  Demikian  halnya dengan Vibrio yang  merupakan  patogen oportunistik yang menimbulkan penyakit jika kondisi  lingkungan  menurun  dan  imunitas lobster yang rendah.

## 3.4. Infeksi Jamur
Jumlah  isolat  jamur  yang  diisolasi dari  organ  insang  lobster  dari  Pegametan, Lombok,  dan  Pangandaran  masing-masing sebanyak  2,  7,  dan  9  isolat  (Tabel  5).  Salah satu  isolat  jamur  yang  diperoleh  dari  satu sampel lobster dari Lombok yaitu isolate L1- B-I2-5,  berdasarkan  morfologi  koloni  dan organ  reproduksinya  merupakan  jamur  jenis Fusarium sp. yang ditunjukkan oleh Gambar 3.  Koloni Fusarium sp.  pada  media  PDA yang  diinkubasi  pada  suhu  30 0 C  berwarna putih  hingga olive  yellow kuning  pucat hingga  kuning  kecoklatan  mulai  pada  hari ke-7  setelah  inokulasi.  Pertumbuhan  koloni mencapai 6 cm pada hari ke-4, dan mencapai 9  cm  pada  hari  ke-7.  Hasil  pengamatan
morfologi  organ  reproduksi  berupa  konidia dengan 4 septat. Hasil penelitian sebelumnya menunjukkan  bahwa Fusarium sp.  memiliki hifa  berseptat,  konidiopora  memanjang dengan  mikrokonidia  berupa  satu sel berbentuk  oval  atau  elip,  dan  makrokonidia terbentuk  7  hari  setelah  inokulasi,  berbentuk subsilindris  dengan  2-4  septat  (Nha et  al ., 2009).
Tabel  5:    Jumlah  isolat  jamur  yang  diisolasi dari organ insang lobster Panulirus homarus .
Gambar  3.  Isolat  jamur  L1-B-I2-5  yang diisolasi dari insang lobster budi- daya dari Lombok. (A) Permuka- an  atas  koloni,  umur  10  hari setelah  inokulasi.  (B)  Permukaan bawah  koloni.  (C)  Organ  re- produksi  yang  berupa  konidia dengan 4 septat.
Hasil  infeksi  buatan Fusarium sp. terhadap  lobster,  yang  telah  dilakukan  oleh Nha et al . (2009), menunjukkan bahwa jamur ini  merupakan  penyebab  penyakit black  gill disease . Fusarium sp.  telah  dilaporkan  di Vietnam  menyebabkan  mortalitas  lobster  di keramba  jaring  apung.  Lobster  yang  ter- infeksi black  gill  disease menjadi  lemah, menunjukkan lethargic ,  pucat,  kesulitan bernafas  dan  selalu  berenang  di  dekat permukaan  air.  Insang  menjadi  merah  coklat hingga hitam dengan lesi atau filamen insang rusak yang terjadi pada tahap infeksi lanjutan
yang  menyebar  pada  insang.  Titik  hitam terbentuk  oleh  adanya  pigmen  melanotic pada  insang  lobster  yang  terinfeksi.  Lesi insang  yang  basah  menunjukkan  invasi miselia fungi dan konidia (Nha et al ., 2009). Dalam  penelitian  ini,  sampel  lobster  yang terinfeksi Fusarium sp.  yaitu  sampel  lobster no.  2  dari  Lombok,  memiliki  insang berwarna  menghitam  (Tabel  1).  Dengan demikian, miselia fungi dan konidia jamur ini telah berkembang dalam insang lobster.
Sementara  itu,  isolat  jamur  yang  lain belum diketahui jenis dan sifat patogenisitas- nya.  Oleh  karena  itu,  diperlukan  penelitian selanjutnya  yaitu  identifikasi  jamur  dan  uji patogenisitas  terhadap  lobster.  Hasil  iden- tifikasi  dan uji patogenistas akan bermanfaat untuk  menemukan  jenis  jamur,  baik  yang bermanfaat maupun yang patogen.
3.5. Infeksi Milky  Hemolymph  Disease of Spiny Lobster (MHD-SL)
Lobster  yang  terinfeksi  MHD-SL menunjukkan satu atau lebih gejala penyakit. Observasi  di  keramba  jaring  apung  di  teluk Pegametan  menunjukkan  bahwa  lobster dengan  gejala  penyakit  ini  terlihat  lemah, tidak  aktif  bergerak,  nafsu  makan  turun drastis  dan  segera  mengalami  kematian  (3-5 hari)  setelah  menunjukkan  gejala milky disease .  Gejala  patologis  pada  lobster  yang terinfeksi  berat  oleh  MHD  adalah  abdomen yang  membengkak  dan  berwarna  putih  susu, hemolimfa  berwarna  putih  susu  ( milky hemolymph )  yang  memancar  keluar  saat dilakukan  pembedahan  organ  dalam,  dan hemolimfa  tidak  menggumpal  meskipun tanpa  zat  anti-coagulant.  Selain  itu,  terjadi hypertropi  jaringan  ikat  pada  hampir  semua organ dan jaringan yang menimbulkan warna putih. Insang, hepatopankreas, dan usus yang berwarna  putih  ditunjukkan  pada  Gambar  4. Hypertropi  jaringan  ikat  ini  juga  dilaporkan oleh Nunan et al . (2010) dan DAFF (2012). Berdasarkan  pengamatan,  penularan penyakit  ini  diketahui  melalui  transmisi horizontal.  Penularan  dapat  terjadi  melalui kontak  langsung  dengan  individu  lobster
Lokasi Jumlah isolat jamur Teluk Pegametan 2 Lombok 7 Pangandaran 9 A (1000X) mag) B
C
yang  terinfeksi  dalam  jaring  apung  yang sama, atau melalui air yang terkontaminasi di antara  jaring  apung  yang  terletak  ber- sebelahan. Penelitian terdahulu menunjukkan bahwa  penyakit  ini  dapat  menular  diantara lobster  melalui  eksperimen  kohabitasi  dan melalui injeksi hemolimfa  yang tidak difilter ke  lobster  yang  sehat  (Hoa et  al .,  2009; DAFF, 2012).
Sementara  itu,  lobster  yang  sehat ditandai  dengan  performa  organ  luar  dan organ dalam yang normal. Lobster yang tidak terinfeksi MHD menunjukkan abdomen yang cerah, segar dan tekstur kenyal, insang cerah dan  segar,  hemolimfa  bening  segar,  usus segar berisi makanan, daging putih segar, dan hepatopankreas kuning cerah (Gambar 5).
Gambar  4.    Gejala  patologis  lobster  yang  terinfeksi  berat  MHD-SL:  a)  abdomen,  b)  cairan putih  susu  yang  keluar  dari  abdomen  dan  rongga  organ  dalam,  c) milky- hemolymph ,  d)  insang  dan  hepatopankreas  berwarna  putih,  e)  usus  berwarna putih dan tidak berisi makanan, daging putih pucat dengan tekstur lembek.
Gambar 5.  Lobster yang tidak terinfeksi MHD: a) abdomen cerah dan segar, b) insang cerah dan  segar,  c)  usus  segar  berisi  makanan,  daging  putih  segar,  d)  hepatopankreas kuning cerah.
A B C D D E C B A
Konfirmasi  infeksi  MHD-SL  pada sampel  lobster  telah  dilakukan  melalui analisis  PCR  menggunakan  primer  254  F, dan  254  R.  Sampel  yang  menunjukkan  pita DNA  pada  254  bp  mengindikasikan  adanya Rickettsia-Like Bacteria (RLB) dalam daging lobster, sehingga specimen dinyatakan positif terinfeksi MHD. Sejumlah 3 lobster dari total 10 sampel ditemukan terinfeksi  penyakit ini. Lobster  yang  terinfeksi  MHD-SL  yaitu  1 ekor  dari  Pegametan  dan  2  ekor  lobster  dari Lombok (Tabel 6).
Tabel  6.  Hasil  deteksi Milky  Hemolymph Disease  of  Spiny  Lobster (MHD- SL)  pada  pembesaran  lobster
Panulirus  homarus di  Karamba
Jaring Apung (KJA) melalui analisis  PCR  dengan  primer  254F dan 254R. Nomor Sampel Hasil PCR Sampel Lombok  Pegametan Pangan- daran 1 - - - 2 - - - 3 + - - 4 + + - 5 - - -
MHD-SL  merupakan  penyakit  yang paling  berbahaya  pada  lobster  yang  dapat menyebabkan  mortalitas  dalam  waktu  5  hari sejak  terlihat  gejala  infeksi,  dan  dapat menular  dengan  cepat.  Prosedur  biosecurity dan karantina terhadap lobster yang terinfeksi penyakit  perlu  diterapkan  untuk  mencegah translokasi penyakit antar daerah di Indonesia.

## IV. KESIMPULAN
Parasit  yang  ditemukan  menginfeksi lobster Panulirus homarus adalah Octolasmis sp.  yang  menginfeksi  terutama  pada  lamela insang.  Satu  sampel  lobster  dari  Lombok terinfeksi  jamur Fusarium sp.  yang  merupa- kan  penyebab  penyakit  black  gill  disease
dengan  gejala  insang  yang  menghitam. Sebanyak  2  ekor  lobster  dari  Lombok  dan  1 ekor  lobster  dari  Pegametan  terinfeksi  oleh Milky  Hemolymph  Disease  of  Spiny  Lobster (MHD-SL)  yang  ditandai  dengan  hemolimfa berwarna putih susu.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  menyampaikan  terimakasih kepada  Ibu  Sri  Suratmi,  Ibu  Ni  Nengah  Suri Adnyani,  dan  Ibu  Luh  Yuliani  Dewi  atas bantuan  selama  sampling  dan  persiapan penelitian di laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Behringer,  D.C.,  M.J.  Butler,  and  G.D. Stentiford.  2012.  Disease  effects  on lobster fisheries, ecology, and culture: overview of DAO Special 6. Diseases of aquatic organisms , 100:89–93.
Department  of  Agriculture,  Fisheries  and
Forestry (DAFF). 2012. Milky hemolymph  disease  of  spiny  lobster ( Panulirus spp.)  (Also  known  as milky  hemolymph  syndrome  (MHS). Aquatic  Animal  Diseases  Significant to  Australia:  Identification  Field Guide.    4 th ed.  Department  of Agriculture,  Fisheries  and  Forestry. Australian Government. 1-3pp.
Food  and  Agriculture  Organization  of  the United Nations (FAO). 2015.
Cultured Aquatic Species Information Program: Panulirus  homarus .  http:// www.fao.org/fishery/culturedspecies/ Panulirus_homarus/en.  [Retrieved  on 03 July 2015].
Hart,  G.  2009.  Assessing  the  South-East Asian  tropical  lobster  supply  and major market demands. ACIAR Final Report  (FR-2009-06).  Centre  for International  Agricultural  Research (ACIAR).  Canberra,  Australia.  15- 22pp.
Hoa,  D.T.,  N.T.  Cuong,  N.H.    Dung,  N.T.T. Giang, P.V. Ut, N.T.N. Hue and D.T.
Ha.  2009.  Milky  disease–causing agents  in  cage  cultured  lobsters ( Panulirus ornatus ) in central area of Vietnam. J.  of  fisheries  science  and technology , 50:9-13.
Ihwan,  M.  2014.  Epibiosis  of  pedunculate barnacle Octolasmis spp. of wild mud crab genus Scylla from Setiu Wetland, Terengganu, Malaysia. Universiti Terengganu. Malaysia. Immanuel,  G.,  P.  Iyappa  Raj,  P.  Esakki  Raj, A. Palavesam. 2006. Intestinal bacterial diversity in live rock lobster
Panulirus homarus (Linnaeus)
(Decapoda,  Pleocyemata,  Palinur- idae)  during  transportation  process. Pan-American J. of Aquatic Sciences , 1(2):69-73.
Jones, C.M. and S. Shanks. 2009. Requirements  for  the  aquaculture  of Panulirus ornatus in Australia. In: K. C.  Williams  (Ed.),  Proceedings  of  an International  Symposium  on  Spiny lobster  Aquaculture  in  the  Asia- Pacific  Region,  Australian  Centre  for International  Agricultural  Research, Canberra. 98-109pp.
Junaidi,  M.  dan  M.S.  Hamzah.  2015.  Laju sedimentasi  dan  dispersi  limbah organik  budidaya  udang-  karang dalam    keramba  jaring  apung  di  per- airan  teluk  Ekas  provinsi  Nusa Tenggara Barat. J. Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis , 7(1):287- 297.
Koesharyani,  I.,  L.  Gardenia  and  N.L.A. Lasmika.  2016.  Molecular  detection and cloning for rickettsia-like bacteria of milky hemolymph disease of spiny lobster Panulirus spp. Indonesian Aquaculture J., 11(2): 81-86. Lavilla-Pitogo,  C.R.,  H.S.  Marcial,  S.A.G. Pedrajas,  E.T.  Quinitio,  O.M.  Milla- mena.  2001.  Problems  associated with  tank-held  mud  crab  ( Scylla sp.). Asian Fisheries Science, 14:217-224. Machado, G.B. de O., F.H.C. Sanches, M.D. Fortuna,  and  T.M.  Costa.  2013.
Epibiosis  in  decapod  crustaceans  by stalked  barnacle Octolasmis  lowei (Cirripedia: Poecilasmatidae).
Zoologia, 30(3):307–311.
Musthaq,  S.S.,  R.  Sudhakaran,  G.  Balasub- ramanian,  and  A.S.  Sahul  Hameed. 2006.  Experimental  transmission  and tissue tropism of white spot syndrome virus  (WSSV)  in  two  species  of lobsters, Panulirus  homarus and Panulirus  ornatus . J.  of  Invertebrate Pathology, 93:75–80.
Nha,  V.V.,  D.T.  Hoa,  and  L.V.  Khoa.  2009.
Black  gill  disease  of  cagecultured ornate rock lobster Panulirus ornatus in central Vietnam caused by Fusarium species. Aquaculture  Asia Magazine , 11(4):35-37.
Nunan, L.M., B.T. Poulos, S. Navarro, R.M. Redman,  and  D.V.  Lightner.  2010. Milky  hemolymph  syndrome  (MHS) in spiny lobsters, penaeid shrimp and crabs. Diseases of aquatic organisms ,
91(2):105-112.
Office  International  des  Epizooties  (OIE).
2007.  Milky  Hemolymph  Disease  of Spiny  Lobsters  ( Panulirus spp.).
Aquatic Animal Disease Cards. Paris, France. 3p.
Payne,  M.S.,  M.R.  Hall,  L.  Sly,  and  D.G. Bourne.  2007.  Microbial  diversity within  early-stage  cultured Panulirus ornatus Phyllosomas. Applied  and Environmental  Microbiology ,  73(6):
1940–1951.
Pusat Karantina Ikan, KKP, 2010. Mengenal
Octolasmis ,  parasit  leher  angsa  pada Crustacea. Infokarikan, 7(1):28-33.
Raissy,  M.,  H.  Momtaz,  M.  Moumeni,  M.
Ansari, and E. Rahimi. 2011. Molecular detection of Vibrio spp.  in lobster  hemolymph. African  J.  of Microbiology  Research, 5(13):1697- 1700.
Rungrassamee, W., A. Klanchui, S.
Maibunkaew,  S.  Chaiyapechara,  P. Jiravanichpaisal,  N.  Karoonuthaisiri. 2014.  Characterization  of  intestinal
bacteria  in  wild  and  domesticated adult  black  tiger  shrimp  ( Penaeus monodon ). PLoS  ONE, 9(3):  e91853. 1-11pp.  doi:10.1371/journal.pone.009 1853.
Santos, C., S.L.S. Bueno, and R.M. Shimizu.
2000.  Distribution  of Octolasmis lowei and Carcinemertes  carcino- phila  imminuta in  the  branchial chamber  of Callinectes  danae and Callinectes  ornatus. Nauplius, 8:25-
34.
Shields,  J.D.  2011.  Diseases  of  spiny lobsters:  A  review. J.  of  Invertebrate Pathology, 106:79–91.
Sugita, H., R. Yutaro Ueda, L.R. Berger, and Y.  Deguchi.  1987.  Microflora  in  the Gut  of  Japanese  Coastal  Crustacea. NipponS  uisanG  akkaishi, 53(9): 1647-1655.
Thuy,  N.T.T.  2011.  Nghiêncứumộtvàiđặcđi- ểm sinh họccủa RLB ở tômhùmBông. Nha  Trang  University,  Khanh  Hoa.
Vietnam. 30p.
Diterima : 8 Desember 2017 Direview : 9 Desember 2017 Disetujui : 23 Maret 2018