## Efektivitas Penambahan Vitamin C Terhadap Kadar Glukosa Darah Mencit Hiperglikemia dengan Pengobatan Glimepirid
The Effectiveness of Vitamin C Addition to Blood Glucose Levels of Hyperglycemic Mice with Glimepiride Treatment
Indi Kamilia Fitri 1 , Cholis Abrori 2 , Dion Krismashogi Dharmawan 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Farmakologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Labarotorium Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jalan Kalimantan No.37, Jember, Indonesia, 68121 e-mail korespondensi: dollis.dr@gmail.com

## Abstrak
Hiperglikemia  pada  DM  perlu  diturunkan  dengan  terapi  farmakologi  yaitu  glimepirid  sehingga  tujuan  dari penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efektivitas  penambahan  vitamin  C  terhadap  penurunan  KGD  mencit hiperglikemia dengan pengobatan glimepirid. Penelitian ini merupakan true experimental dengan sampel 25 ekor mencit  20-30  gram  dan  dibagi  menjadi  lima  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  (K0);  kelompok  induksi  STZ  (K1); kelompok  induksi STZ  dengan perlakuan glimepirid (K2);  kelompok  induksi STZ dengan perlakuan vitamin C (K3); kelompok  induksi  STZ  dengan  perlakuan  kombinasi  glimepirid  dan  vitamin  C  (K4).  STZ  diinjeksi  intraperitonial sebanyak  150  mg/kgBB.  Semua  kelompok  diukur  KGD  1  setelah  induksi  STZ  dan  KGD  2  setelah  perlakuan  obat selama  empat  belas  hari.  Hasil  penelitian  kelompok  induksi  STZ  dengan  perlakuan  kombinasi  glimepirid  dan vitamin C (K4) mengalami penurunan KGD yang lebih sedikit dan tidak signifikan terhadap kelompok  induksi STZ dengan perlakuan tunggal glimepirid (K2). Hasil tersebut diduga terdapat pengaruh dari interaksi antar obat yang menyebabkan  salah  satu  obat  tidak  dapat  bekerja  maksimal.  Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  pemberian glimepirid,  vitamin  C,  ataupun  keduanya  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah  mencit  hiperglikemia  dengan penurunan terbesar terjadi pada kelompok pemberian glimepirid.
Kata kunci: DM, antioksidan, glimepirid, vitamin C, streptozotocin

## Abstract
In people with diabetes mellitus (DM), there is a decrease in basal vitamin C levels, which is thought to be a result of  oxidative  stress  in  the  condition  of  hyperglycemia  that  it  needs  to  increase  vitamin  C  as  an  antioxidant. Hyperglycemia in DM needs to be lowered by pharmacological therapy, named glimepiride, so the purpose of this study is to determine the effectiveness of vitamin  C in  addition to the reduction of KGD hyperglycemic mice with glimepiride treatment. This study is true experimental with a sample of 25 mice 20-30 grams and divided into five groups, first the control group (K0); STZ  induction group (K1); STZ induction group with glimepiride treatment (K2); STZ induction group with the treatment  of vitamin C (K3); STZ induction group by treatment  of a combination of glimepiride and vitamin C (K4). STZ is injected intraperitoneally 150 mg / kgBW. All groups were measured for KGD 1 after induction of STZ and KGD 2 after treatment for fourteen days. The results of the STZ induction group with the  treatment  of  a  combination  of  glimepiride  and  vitamin  C  (K4)  experienced  a  smaller  and  not  significant decrease in BSL in the STZ induction group with a single glimepiride (K2) treatment. These results are thought to have an influence on interactions between drugs that cause one drug to not work optimally. The conclusion of this study is that the administration of glimepiride, vitamin C, or both can reduce blood glucose levels in hyperglycemic mice with the greatest decrease occurring in the glimepiride group.
Keywords : DM, antioxidant, glimepiride, vitamin C, streptozotocin

## Pendahuluan
Diabetes  melitus  (DM)  merupakan  gangguan metabolisme  karbohidrat,  protein,  serta  lemak akibat  ketidakseimbangan  antara  ketersediaan  dan kebutuhan  insulin.  Prevalensi  penyakit  ini  terus meningkat. Total penyandang diprediksi menjadi 350 juta  jiwa  pada  tahun  2020.    WHO  telah memperkirakan  sekitar  80%  kematian  akibat  DM terjadi di negara berkembang. Indonesia merupakan salah satu dari sepuluh negara yang memiliki jumlah penyandang  diabetes  paling  banyak  di  dunia, menduduki  posisi  keempat  setelah  Amerika  Serikat (WHO, 2007).
Secara  klinis  terdapat  dua  jenis  penyakit  DM,  yaitu DM  tipe  1  dan  DM  tipe  2.  DM  tipe1  ( Insulin Dependent  Diabetes  Mellitus )  merupakan  suatu kondisi  defisiensi  produksi  insulin  oleh  pankreas. Kondisi  ini  hanya  dapat  diterapi  dengan  insulin eksternal.  Sedangkan  DM  tipe  2  ( Non  Insulin Dependent  Diabetes  Mellitus )  merupakan  resistensi insulin  yang terjadi karena  insulin  tidak bisa  bekerja optimal  pada  sel-sel  target  insulin  seperti  sel  otot, sel  lemak  dan  sel  hepar  sehingga  tidak  tercapai kadar  glukosa  normal  dalam  darah  (Depkes  RI, 2005).  Selain  terjadi  penurunan  kepekaan  jaringan terhadap  insulin,  juga  terjadi  suatu  defisiensi respons  sel  beta  pankreas  terhadap  glukosa.  Kedua kerusakan  ini  menyebabkan  hiperglikemia,  sehingga diperlukan  terapi  untuk  memperbaiki  kondisi hiperglikemia  tersebut.  Selain  hiperglikemia,  DM juga  dicirikan  sebagai  stres  oksidatif,  peradangan, dan  resistensi  insulin.  Beberapa  peneliti  telah mengimplikasikan peran radikal bebas patologi pada DM (Depkes RI, 2005).
Terdapat  empat  pilar  utama  penatalaksanaan  DM yaitu  edukasi,  diet,  latihan  fisik  dan  terapi farmakologis.  Terapi  farmakologis  pada  pasien  DM bertujuan untuk mengendalikan kadar glukosa darah dengan  cara  penggunaan  insulin  eksogen,  dan  atau mengkonsumsi  obat  antidiabetik  oral  dalam  jangka waktu yang lama. (Departemen Kesehatan RI, 2005). Salah  satu  obat  antidiabetik  sintetis  yang  dikenal masyarakat,  murah  dan  mudah  didapatkan  adalah glimepirid.  Glimepirid  berasal  dari  golongan sulfonilurea dengan efek utama adalah meningkatkan  pelepasan  insulin  dari  pankreas sehingga  kadar  glukosa  darah  dapat  menurun.  Oleh sebab  itu,  glimepirid  hanya  bermanfaat  pada penyandang  yang  masih  mempunyai  kemampuan
untuk mensekresi insulin. Glimepirid memiliki waktu paruh  yang  pendek  sekitar  lima  jam,  dan  efek hipoglikemiknya panjang sekitar 12-24 jam sehingga dapat diberikan satu kali sehari (Katzung, 2015).
Satu dari penyebab utama resistensi insulin pada DM tipe 2 adalah pengaruh stres oksidatif. Stres oksidatif dimediasi  oleh  reaktif  spesies  oksigen  (ROS).  Stres oksidatif  dapat  menyebabkan  metabolisme  glukosa terganggu  dan  hiperglikemia.  Oleh  karena  itu, manfaat antioksidan untuk mencegah dan menangani DM tipe 2 secara biologis dapat menjadi pilihan pengobatan (Setiawan, 2005).
Terdapat  kemiripan  struktur  vitamin  C  dengan glukosa  sehingga  dapat  menggantikannya  dalam beberapa  reaksi  kimia  dan  dengan  demikian  efektif untuk  pencegahan  glikosilasi  nonenzimatik  protein. Asam  askorbat  (vitamin  C),  vitamin  antioksidan, memainkan  peran  penting  dalam  melindungi kerusakan akibat radikal bebas. Penelitian sebelumnya  telah  menunjukkan  penurunan  kadar vitamin C basal pada DM tipe 2. Meskipun DM tidak secara  langsung  dianggap  sebagai  faktor  risiko terjadinya  defisiensi  vitamin  C,  pasien  dengan diabetes  semua  harus  menerima  saran  diet  tentang makanan  sehat  dan  sumber  makanan  vitamin  C, termasuk  buah-buahan  dan  sayuran  segar.  Ada beberapa  data  yang  menunjukkan  bahwa  orang dengan  diabetes  mungkin  telah  meningkatkan serapan seluler dan pergantian vitamin C yang akan memerlukan  peningkatan  asupan,  dan  mereka  juga memiliki  peningkatan  risiko  defisiensi  (Setiawan, 2005).
Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  peneliti  ingin mengetahui  penggunaan  vitamin  C  sebagai  terapi adjuvan  dengan  pengobatan  glimepirid  dan membandingkannya  dengan  pemberian  glimepirid secara  tunggal.  Terapi  vitamin  C  sebagai  adjuvan dengan  pengobatan  glimepirid  dinilai  lebih  efektif apabila  kedua  unsur  bekerja  secara  sinergis  dan saling memperkuat khasiatnya.

## Metode
Jenis  penelitian  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah true  experimental  laboratory dengan menggunakan  populasi  mencit  putih  jantan  galur Balb-c  ukuran  20-30  gram  dan  diambil  sampel berdasarkan  rumus Federer dengan  jumlah  25  ekor
mencit  yang  dibagi  ke  dalam  5  kelompok.  Dalam penelitian  ini  mencit  dibuat  hiperglikemia  dengan menginjeksikan streptozotocin (STZ) secara intraperitoneal  sebanyak  150  mg/kgBB.  STZ kemudian  dilarutkan  dalam  larutan buffer sitrat dengan  dosis  22,5  mg.  Vitamin  C  yang  digunakan adalah  vitamin  C  1000  mg  (dosis  manusia)  sediaan serbuk.  Serbuk  vitamin  C  dilarutkan  dalam  larutan Carboxy  Methyl  Cellulose (CMC)  0,5%  dan  diberikan melalui sonde lambung. Kadar glukosa darah mencit diukur  setelah  dipuasakan  selama  enam  jam  agar makanan  yang  dikonsumsi  tidak  mempengaruhi glukosa  darah  mencit.  Selama  puasa,  mencit  tidak diberi makan namun tetap diberi minum dengan air. Glukosa  darah  mencit  diambil  dari  kapiler  di  ekor mencit  dan  selanjutnya  diukur  menggunakan glukometer.  Mencit  dinyatakan  hiperglikemia  jika kadar glukosa darah puasa mencapai 180 mg/kgBB.

## Hasil
Penelitian  ini  menggunakan  25  ekor  mencit  yang diinduksi  STZ  dan  dibagi  ke  dalam  lima  kelompok. Hasil  yang  digunakan  adalah  kadar  glukosa  darah puasa  yang  diukur  tiga  hari  setelah  induksi  STZ  150 mg/kgBB  dan  kadar  glukosa  darah  puasa  setelah pemberian obat masing-masing perlakuan selama 14 hari.
Tabel 1. Rata-rata hasil pengukuran berat badan dan KGD puasa mencit
Berdasarkan  Tabel  1  diketahui  bahwa  terjadi penurunan  KGD  terbanyak  di  K2  yaitu  kelompok yang  diinduksi  STZ  dan  diberi  sonde  glimepirid  saja selama  14  hari.  Analisis  yang  pertama  dilakukan adalah  analisis  berat  badan  untuk  menentukan  ada tidaknya  perbedaan  berat  badan  mencit  antar kelompok. Analisis dilakukan menggunakan one way Annova post hoc Bonferroni dengan syarat distribusi normal dan variansi homogen.
Dari  hasil  uji  normalitas  dan Levene  statistic berat badan  mencit  pada  tiap  kelompok  menunjukkan distribusi  normal    dan  variansi  homogen,  dengan nilai  p  >  0,05,  sehingga  dapat  dilanjutkan  dengan analisis one  way  Anova. Hasil one  way  Annova adalah p=0,725 (p < 0,05). Untuk mengetahui apakah terdapat  perbedaan  signifikan  berat  badan  antar kelompok  maka  dilanjutkan  dengan  uji post  hoc Bonferroni. Dari one way Anova post hoc Bonferroni didapatkan semua hasil menunjukkan angka p=1,000 yang  berarti  p>0,05  yaitu  tidak  ada  perbedaan signifikan  di  setiap  berat  badan  mencit  antar kelompok sehingga penelitian ini dapat meminimalisasi pengaruh hasil bias dari berat badan mencit.
Analisis kedua  yang dilakukan adalah analisis  KGD 1 dan  KGD  2  setiap  kelompok  untuk  mengetahui  ada tidaknya perbedaan antar KGD sebelum dan sesudah diberi  perlakuan.  Analisis  dilakukan  menggunakan Paired  Sample  T-test dengan  syarat  distribusi normal.  Analisis  kelompok  K0  dan  kelompok  K1 dilakukan  terpisah  dengan  kelompok  K2,  K3  dan  K4 karena  terdapat  perbedaan  hipotesis  awal  yaitu tidak  ada  perbedaan  signifikan  untuk  kelompok  K0 dan  K1  sedangkan  untuk  kelompok  K2,  K3,  dan  K4 terdapat perbedaan signifikan akibat induksi STZ.
Dari  hasil  uji  normalitas  pada  tiap  kelompok menunjukkan  distribusi  normal  (p  >  0,05)  untuk kelompok  K0  dan  K1  sehingga  dapat  dilanjutkan dengan Paired  Sample  T-test.  Paired  Sample  T-test didapatkan  hasil  0,067  (p  >  0,05)  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  tidak  ada  perbedaan  signifikan antara KGD 1 dan KGD 2 pada kelompok K0 dan K1. Hasil  analisis  uji  normalitas  juga  menunjukkan  data pada  kelompok  K3  tidak  terdistribusi  normal sehingga  analisis  yang  dapat  dilanjutkan  adalah Wilcoxon  test dan  didapatkan  hasil  0,001  sehingga dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  ada  perbedaan signifikan  antara  KGD  1  dan  KGD  2  di  kelompok  K2, K3,  dan  K4.  Hal  ini  terjadi  karena  KGD  2  diukur setelah  perlakuan  glimepirid  untuk  kelompok  K2, vitamin C untuk kelompok K3, glimepirid dan vitamin C untuk  kelompok  K4 sehingga nilai KGD 2 terdapat perbedaan yang signifikan dengan nilai KGD 1.
Analisis ketiga yang dilakukan adalah Analisis KGD 1 antar  kelompok  dilakukan  untuk  melihat  apakah terdapat perbedaan KGD 1 antara kelompok. Analisis yang  digunakan  adalah one  way  Anova untuk  data dengan distribusi normal. Namun hasil uji normalitas
data  menunjukkan  data  tidak  terdistribusi  normal sehingga  analisis  yang  digunakan  adalah Mann Whitney test (signifikansi p < 0,05).
Mann  Whitney  test menunjukkan  hasil  yang signifikan  antar  kelompok  K0  dengan  kelompok lainnya (K1,K2, K3 dan K4). Hal ini diharapkan terjadi karena  kelompok  K0  tidak  diinduksi  STZ  sedangkan kelompok  lainnya  diinduksi  STZ.  Data  selanjutnya yang  dapat  dianalisis  adalah  hasil  tidak  signifikan antar kelompok K1 dengan K2, K1 dengan K4, dan K3 dengan  K4.  Hal  ini  diharapkan  terjadi  karena kelompok  tersebut  seluruhnya  diinduksi  STZ sehingga  memang  seharusnya  tidak  terdapat perbedaan  signifikan  di  KGD  1.  Data  selanjutnya yang  dapat  dianalisis  adalah  hasil  signifikan  antar kelompok  K1  dengan  K3,  K2  dengan  K3,  K2  dengan K4. Hal ini tidak diharapkan terjadi karena kelompok- kelompok  tersebut  diinduksi  STZ  yang  seharusnya tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  di  KGD  1.  Hasil tersebut  dapat  dihindari  dengan  randomisasi  ulang setelah  pengukuran  KGD  1  namun  peneliti  tidak melakukan  hal  tersebut  sehingga  untuk  menguji efektivitas  sonde  perlakuan  tidak  dapat  langsung menggunakan  KGD  2  melainkan  menggunakan selisih KGD.
Analisis  yang  selanjutnya  adalah  analisis  efektivitas sonde perlakuan adalah analisis hasil selisih KGD dan hanya  dilakukan  untuk  kelompok  K1,  K2,  K3,  K4 karena  K0  adalah  kelompok  kontrol  yang  hanya dilihat  hasilnya  untuk  analisis  KGD  1.  Analisis  yang digunakan  adalah one  way  Anova dengan  syarat distribusi  data  normal  dan  variansi  homogen.  Hal pertama yang dilakukan adalah uji normalitas selisih KGD.
Uji  normalitas  pada  tiap  kelompok  menunjukkan distribusi  normal  (p  >  0,05).  Selanjutnya  data  diuji homogenitas  dengan  uji  Lavene Statistic dan diperoleh  hasil  yang  menunjukkan  data  memiliki variansi  homogen  dengan  nilai  p=0,237  (p  >  0,05). Nilai one  way  Anova adalah  0,000  (p  <  0,005) sehingga  menunjukkan  hasil  yang  signifikan.  Untuk mengetahui hasil antar kelompok akan digunakan uji post  hoc  Bonferroni karena  distribusi  normal  dan variansi homogen, dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil uji post hoc Bonferroni Kelompok K1 K2 K3 K4 K1 - 0,000 0,006 0,000
K2 0,000 - 0,002 0.972* K3 0,006 0,002 - 0,022 K4 0,000 0,972* 0,022 - *tidak signifikan
Uji post  hoc  Bonferroni menunjukkan  hasil  yang signifikan  antara  kelompok  K1  dengan  kelompok lainnya  (K2,K3,dan  K4).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa selisih  KGD  di  kelompok  yang  diinduksi  STZ  dan perlakuan  CMC  mempunyai  perbedaan  yang bermakna  dengan  kelompok  induki  STZ  dan perlakuan glimepirid (K2), kelompok induksi STZ dan perlakuan vitamin C (K3), serta kelompok induksi STZ dan  perlakuan  kombinasi  glimpirid  dan  vitamin  C (K4). Hal ini terjadi karena kelompok K1 mempunyai KGD  1  yang  tinggi  dan  KGD  2  yang  tetap  tinggi  dan hanya  berkurang  sedikit  karena  hanya  diberi perlakuan CMC.
Hasil signifikan juga terdapat pada kelompok induksi STZ dan perlakuan glimepirid (K2) dengan kelompok induksi  STZ  dan  perlakuan  vitamin  C  (K3).  Hal  ini menunjukkan bahwa kelompok mencit hiperglikemia yang  diberi  glimepirid  mengalami  penurunan  kadar glukosa  darah  yang  bermakna  dibandingkan penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  mencit hiperglikemia  yang  diberi  vitamin  C.  Hasil  signifikan juga  terdapat  pada  kelompok  induksi  STZ  dan perlakuan  kombinasi  glimepirid  dan    vitamin  C  (K4) dengan  kelompok  induksi  STZ  dan  perlakuan kombinasi  vitamin  C  (K3).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kelompok  mencit  hiperglikemia  yang  diberi kombinasi  glimepirid  dan  vitamin  C  mengalami penurunan  kadar  glukosa  darah  yang  bermakna dibandingkan  penurunan  kadar  glukosa  darah  pada mencit hiperglikemia yang diberi vitamin C saja.
Hasil  lain  yang  dapat  dianilisis  dari  Uji post  hoc Bonferroni adalah terdapat hasil yang tidak signifikan antar kelompok induksi STZ dan perlakuan glimepirid (K2)  dengan  kelompok  induksi  STZ  dan  perlakuan kombinasi  glimepirid  dan  vitamin  C  (K4).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  selisih  KGD  di    kelompok mencit  hiperglikemia  yang  diberi  glimepirid  tidak mengalami  penurunan  kadar  glukosa  darah  yang bermakna  dibandingkan  dengan  penurunan  kadar glukosa darah pada mencit hiperglikemia yang diberi kombinasi glimpirid dan vitamin C.

## Pembahasan

## Efek Pemberian STZ
Dari hasil penelitian didapatkan bahwa rata-rata KGD puasa  saat  pengukuran  hari  ke-3  setelah  injeksi  STZ intraperitoneal  150mg/kgBB  pada  kelompok  K1,  K2, K3,  dan  K4  secara  berturut-turut x adalah  236,2 mg/dL;  258,75  mg/dL;  200,60  mg/dL x dan  233,8 mg/dL.  Sedangkan  untuk  rata-rata  standar  deviasi adalah  15,91.  Mencit  dikategorikan  hiperglikemik jika  KGD  puasa  lebih  dari  180  mg/dL,  sehingga keempat kelompok mencit tersebut telah mengalami hiperglikemia.  Sedangkan  mencit  kelompok  kontrol hanya memiliki rata-rata KGD 1 yaitu 90,25 dan tidak mengalami hiperglikemia karena tidak diinduksi STZ. Kondisi  hiperglikemia  yang  disebabkan  oleh  STZ dapat  mempengaruhi  kadar  glukosa  darah  melalui tiga  mekanisme  yaitu  penumpulan  respons  insulin tahap  pertama,  penurunan  sensitivitas  respons insulin  terhadap  glukosa,  dan  gagal  memberikan stimulasi terhadap respons insulin yang wajar.

## Efek Pemberian Glimepirid
Efek pemberian glimepirid pada mencit hiperglikemia  mengalami  penurunan  rata-rata  KGD yang signifikan dari 258,75 mg/dl menjadi 118 mg/dl dengan  rata-rata  standar  deviasi  yaitu  13,84 (Gambar  1).  Hal  ini  disebabkan  oleh  mekanisme kerja  glimepirid  dalam  menurunkan  kadar  glukosa darah  secara  intra  pankreas  maupun  ekstra pankreas. Glimepirid bekerja di kanal kalsium ATPase pada  sel  beta  pankreas  untuk  menstimulasi pelepasan  insulin x sehingga  mampu  memperbaiki sekresi  insulin  fase  pertama  maupun  fase  kedua. Glimepirid mampu menstimulasi sekresi insulin lebih rendah namun menghasilkan kendali metabolik yang setara  dengan  obat  antidiabetes  golongan  sulfonil urea  lainnya  sehingga  mampu  mengurangi  kejadian hipoglikemia berat. Glimepirid juga dapat bekerja di ektra pankreas dengan memperkuat respon jaringan perifer  terhadap  insulin  dengan  cara  meningkatkan lipogenesis dan glikogenesis serta meningkatkan laju klirens  metabolik  glukosa.  Efek  glimepirid  dapat bertahan  selama  24  jam  setelah  konsumsi. (Sulistianingsih, 2016).
Gambar 1. Diagram rata-rata KGD 1 dan KGD 2 di kelompok perlakuan glimepirid
Glimepirid  diberikan  setelah  makanan  mencit diambil selama sepuluh menit bertujuan mengosongkan  sisa  makanan  yang  tersisa  di kerongkongan
untuk mencegah mencit memuntahkan  obat  ketika  dan  setelah  diberikan melalui sonde lambung dengan volume berdasarkan dosis yang sudah dihitung.

## Efek Pemberian Vitamin C
Efek pemberian vitamin C pada mencit hiperglikemia mengalami penurunan rata-rata KGD yang signifikan dari  200,6  mg/dl  menjadi  127,6  mg/dl  dengan  rata- rata  standar  deviasi  yaitu  15,79  (Gambar  2). Penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  pemberian vitamin  C  tidak  sebanyak  penurunan  kadar  glukosa darah  karena  pemberian  glimepirid.  Hal  ini  terjadi karena  mekanisme  vitamin  c  yang  berbeda  dengan glimepirid  dalam  menangani  hiperglikemia.  Vitamin C sebagai antioksidan yang dapat meredam dampak negatif  oksidan  berlebih  akibat  hiperglikemia sehingga  dapat  menghambat  kerusakan  oksidatif suatu sel. Peran vitamin C pada perjalanan diabetes adalah  sebagai  inhibitor  enzim  aldose  reduktase (AR). Enzim AR dapat mengkonversi glukosa berlebih menjadi  sorbitol  sehingga  penumpukan  sorbitol dapat terjadi  karena  hiperglikemia.  AR dihambat oleh  vitamin  C  agar  tidak  terjadi  penumpukan sorbitol  yang  dapat  menyebabkan  kerusakan  sel. Manfaat  lain  dari  vitamin  C  sebagai  antioksidan adalah  meminimalisasi  pembentukan advance glycosylation end products (AGEs). Pada hiperglikemia  terjadi  akumulasi  AGE  xdi  berbagai jaringan (Setiawan, 2005).
Gambar  2.  Diagram  rata-rata  KGD  1  dan  KGD  2  di kelompok perlakuan vitamin C

## Efek Pemberian Glimepirid Dan Vitamin C
Pemberian  glimepirid  dan  vitamin  C  pada  mencit hiperglikemia  menyebabkan  penurunan  kadar glukosa  darah  yang  signifikan  dengan    rata-rata selisih  119,6  mg/dL  dan  rata-rata  standar  deviasi yaitu  20,13  (Gambar  3).  Penurunan  glukosa  pada kelompok  ini  lebih  sedikit  daripada  kelompok pemberian  glimepirid  saja.  Namun  perbedaan penurunan yang terjadi tidak signifikan. Hal ini dapat terjadi karena interaksi antar obat yang menyebabkan  fungsi  salah  satu  komponen  tidak dapat berjalan maksimal. Interaksi obat yang terjadi adalah  vitamin  C  yang  mampu  menghambat  enzim sitokrom  P450.  Enzim  sitokrom  P450  berperan dalam metabolism glimepirid namun dapat membentuk  radikal  bebas  sehinnga  vitamin  C mencegah hal tersebut terjadi dengan menghambat pembentukan enzim sitokrom P450. Lama penggunaan  dan  banyaknya  dosis  akan  semakin mempengaruhi  fungsi  inhibitor  tersebut  (Jones  dan Brown,  1997).  Namun,  hal  ini  kurang  lazim  terjadi karena  vitamin  C  bukan  merupakan  inhibitor  poten enzim  sitokrom  P450  seperti  obat  itrakonazol, fluoksetin, mikonazol, dan siprofloksasin (Stevens et al ,  1993).  Selain  itu,  kesalahan  dalam  penelitian akibat kelalaian peneliti seperti saat induksi STZ atau pemberian perlakuan dapat menyebabkan hasil-hasil yang tidak diharapkan tersebut.
Gambar 3. Diagram rata-rata KGD 1 dan KGD 2 di kelompok perlakuan glimepirid dan vitamin C
Perbedaan  Efek  Pemberian  Glimepirid,  Vitamin  C, Glimepirid  Dan  Vitamin  C  dalam  Menurunkan  KGD Mencit Hiperglikemia
Efek pemberian glimepirid, vitamin C, dan kombinasi keduanya  terlihat pada  gambar 4. Rata-rata standar deviasi  yaitu  22,15.  Rata-rata  Selisih  KGD  di kelompok  perlakuan  vitamin  C  mempunyai  selisih terkecil  di  antara  ketiga  perlakuan  karena  efek vitamin  C  yang  menurunkan  kadar  glukosa  darah secara tidak langsung dengan memperbaiki kerusakan  sel  akibat  kerusakan  oksidatif  dampak hiperglikemia.  Perbedaan  penurunan  juga  bernilai signifikan  jika  dibandingkan  dengan  perlakuan glimepirid  saja  maupun  kombinasi  glimepirid  dan vitamin  C.  Penurunan  kadar  glukosa  darah  di kelompok  perlakuan  glimepirid  dan  vitamin  C mempunyai  angka  lebih  kecil  daripada  penurunan kadar  glukosa  darah  di  kelompok  perlakuan glimepirid.  Hal  ini  tidak  sesuai  hipotesis  yang menyatakan  bahwa  penurunan  kadar  glukosa  darah di  kelompok  kombinasi  glimepirid  dan  vitamin  C dapat  lebih  besar  daripada  kelompok  perlakuan glimepirid  saja  karena  adanya  fungsi  kombinasi  dari efek langsung menurunkan kadar glukosa darah dari glimepirid  dan  efek  tidak  langsung  menurunkan kadar  glukosa  darah  dari  vitamin  C.  Perbedaan penurunan  yang  terjadi  adalah  21,6  mg/dl  dan berdasarkan  analisis  data,  perbedaan  penurunan tersebut tidak signifikan.
Gambar  4.  Diagram  rata-rata  KGD  1,  KGD  2,  dan  selisih KGD di K1, K2, K3, K4

## Kesimpulan
Penambahan  vitamin  C  dosis  1000  mg  pada  mencit hiperglikemia  dengan  pemberian  glimepirid  2  mg dapat  berpengaruh  dalam  menurunkan  kadar glukosa x darah  mencit  namun  tidak  lebih  baik daripada  pemberian  tunggal  glimepirid  dengan perbedaan  yang  tidak  signifikan.  Saran  untuk penelitian  ini  adalah  randomisasi  ulang  diperlukan jika  hasil  analisis  KGD  1  antar  kelompok  yang diinduksi STZ mempunyai perbedaan yang signifikan. Randomisasi  ulang  tersebut  dilakukan  untuk mencegah  terjadinya  bias  pada  analisis  data selanjutnya.  Selain  itu,  perlu  penelitian  lebih  lanjut tentang  pengaruh  vitamin  C  terhadap  aktivitas sitokrom  P450  pada  metabolisme  glimepirid,  perlu penelitian  serupa  menggunakan  sampel  pasien dengan  mempertimbangkan  aspek  bioavaibilitas obat  dan  vitamin  C  serta  kadar  kortisol  yang berkaitan dengan psikis pasien.

## Daftar Pustaka
American  Diabetes  Association  (ADA).  2015. The Journal  of  Clinical  and  Applied  Reseacrh  and Education . 38(1)
Brunner dan Suddarth. 2001. Buku Ajar Keperawatan Medikal Bedah . Edisi 8.
Clinical  Diabetes  Association  (CDA).  2013. Clinical Practice  Guidelines  for  the  Prevention  and Management of Diabetes in Canada
David  DJ,  Girgis  CM  dan  Gunton  JE.  2015. Nutrition and Dietary Supplements . 7: 21–28
Etuk EU. 2010. Animals Models for Studying Diabetes Mellitus. Agriculture  and  Biology  Journal  of
North America. 1(2): 130-134
International  Diabetes  Federation  (IDF).  2014. IDF
Diabetes Atlas
Jones  dan  Brown.    1997. Vitamin  C  in  Health  and Disease . Marcel Dekker Inc: New York
Katzung  BG,  Masters  SM  dan  Trevor  AJ.  2015. Farmakologi Dasar & Klinik . Lenzen  S.  2008.  The  Mechanisms  Of  Alloxan  and Streptozotocin Induced Diabetes. Diabetologia. 51: 216-226 PERKENI. 2011. Konsesus Pengelolaan dan
Pencegahan  Diabetes  Mellitus  Tipe  2  di Indonesia, Jakarta
Sakinah  EN.  2013.  Pharmacodynamics  Study  Of Cholecalciferol to Glut 4 Protein Translocation in Muscle Fiber of Hyperglycemia Mice which Inducted  by  Streptozotocin. Folia  Medica Indonesiana . 49(3): 134-138
Santosh  HN  dan  David  CM.  2017.  Role  of  Ascorbic Acid  in  Diabetes  Mellitus:  A  Comprehensive Review. Journal  of  Medicine,  Radiology, Pathology & Surgery . 4: 1-3
Setiati  A,  Alwi  I,  Sudoyo  AW,  Simadibrata  M, Satiyohadi  B  dan  Syam  AF.  2014. Ilmu Penyakit Dalam . Jilid 2. Edisi VI
Setiawan  B  dan  Suhartono  E.  2005.  Stres  Oksidatif dan Peran Antioksidan pada Diabetes Melitus. Majalah Kedokteran Indonesia. 55(2)
Soelistijo  SA,  Novida  H,  Rudijanto  A, et  al., 2015. Konsensus  Pengelolaan  dan  Pencegahan Diabetes Melitus Tipe 2 di Indonesia.
Sulistianingsih,  D.  R.  2016.  Sulfonilurea  sebagai Terapi  Tambahan  Lini  Pertama,  diakses  di http://www.mims-
cpd.co.id/Portals/0/CME_San1.pdf
Stevens  JC,  Wrighton  SA.  1993. Interaction  of  the enantiomers  of  fluoxetine  and  norfluoxetine with human liver cytochromes P450 . 266:964- 71
Szkudelski  T.  2001.  The  Mechanism  Of  Alloxan  And Streptozotocin  Action  in  β  Cells  Of  The  Rat Pancreas. Physiology Research . 50: 536-54
Tam  WT,  Akhtar  H,  Arnason  JT, et  al., 2011. Inhibition  of  Human  Cytochrome  P450 Metabolism  by  Blended  Herbal  Products  and Vitamins. J Pharm Pharmacist Sci. 14(1):1-16
Williamson  EM,  Okpoko  DT  dan  Evans  FJ.  1996.
Pharmacological  Methods  in  Phytotherapy
Research. John  Wiley  and  sons,  Inc.  Third Avenue
WHO.  2006. Definition  of  Diagnosis  of  Diabetes Mellitus  and  Intermediate  Hyperglicemia .
Geneva.
Widowati  W.  2008.  Potensi  Antioksidan  sebagai
Antidiabetes. JKM . Vol.7