Jurnal Biologi Edukasi Edisi 30, Volume 15 Nomor 1, Juni 2023, hal 10-17
Efek Terapi Ekstrak Etanol Sirih Cina ( Peperomia pellucida L.) terhadap Peningkatan Konsentrasi dan Motilitas Spermatozoa Tikus ( Rattus norvegicus ) Terpapar Sopi
Therapy Effect of Pepper Elder (Peperomia pellucida L.) Ethanol Extract on Increasing Spermatozoa Concentration and Motility of Rat (Rattus norvegicus) Exposed with Sopi
Marlyn Wattimena, Pieter Kakisina, Adrien Jems Akiles Unitly Program Studi Biologi, Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pattimura, Jl. Ir. M. Putuhena, Kampus Poka, Ambon, 97234, Maluku, Indonesia Email: adebiologi@yahoo.co.id

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  terapi  ekstrak  etanol  sirih  cina  ( Peperomia pellucida L.)    terhadap  peningkatan  konsentrasi  dan  motilitas  spermatozoa  tikus Rattus  norvegicus terpapar  sopi.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL),  dimana  15  ekor  tikus Rattus norvegicus dibagi dalam 5 kelompok perlakuaan dengan 3 kali ulangan, yaitu K(-):Kelompok kontrol negatif yaitu kelompok tikus yang diberi sopi 5.4 ml/ekor/hari selama 14 hari, K(+):Kelompok kontrol  positif  yaitu  kelompok  tikus  yang  diberi  sopi  5.4  ml/ekor/hari  selama  14  hari  kemudian vitamin C 3.2 mg/kg BB selama 14 hari, P1: Kelompok tikus yang diberi sopi 5.4 ml/ekor/hari selama 14 hari kemudian diberi ekstrak etanol sirih cina 0.36 g/kg BB selama 14 hari, P2: Kelompok tikus yang diberi sopi 5.4 ml/ekor/hari selama 14 hari kemudian diberi ekstrak etanol sirih cina 0.72 g/kg BB selama 14 hari dan P3: Kelompok tikus yang diberi sopi 5.4 ml/ekor/hari selama 14 hari kemudian diberi ekstrak etanol sirih cina 1.44 g/kg BB selama 14 hari. Hasil yang diperoleh dianalisis dengan Analysis  of  Variance  (ANOVA)  dan  dilanjutkan  dengan  uji  duncan  pada  tarif  nyata  =  0.05 menggunakan perangkat lunak SAS dan dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil untuk mengetahui perbedaan  perlakuan  yang  diberikan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  sirih  cina ( Peperomia  pellucida L.)  berpengaruh  terhadap  peningkatan  konsentrasi  dan  motilitas  spermatozoa tikus Rattus norvegicus terpapar sopi, dengan dosis efektif adalah 1.44 gr/kg BB.
Kata kunci : Peperomia pellucida L., sirih cina, spermatozoa, sopi

## Abstract
This  study  aims  to  determine  the  therapeutic  effect  of  pepper  elder  (Peperomia  pellucida  L.) ethanol  extract  on  increasing  the  concentration  and  motility  of  spermatozoa  of  rats  (Rattus norvegicus)  exposed  to  sopi.  This  study  used  a  completely  randomized  design  (CRD),  in  which  15 Rattus norvegicus rats were divided into five treatment groups with three repetitions, namely K(-): The negative control group, namely the group of rats  that were given sopi 5.4 ml/head/day for 14 days, K(+): Positive control group, namely the group of rats that were given sopi 5.4 ml/head/day for 14 days and vitamin C 3.2 mg/kg body weight for 14 days, P1: Group of rats that were given sopi 5.4 ml/head/day for 14 days then given ethanol extract of Chinese betel 0.36 g/kg body weight for 14 days, P2:  Group  of  rats  that  were  given  sopi  5.4  ml/head/day  for  14  days  then  given  ethanol  extract  of chinese betel 0.72 g/kg body weight for 14 days and P3: The group of rats that were given sopi 5.4 ml/head/day for 14 days was then given 1.44 g/kg body weight Chinese betel ethanol extract for 14 days. The results obtained were  analyzed by Analysis of Variance (ANOVA) and continued with the Duncan test at the real rate  = 0.05 using SAS software and continued with the smallest significant difference test to determine the difference in the treatment given. The results showed that the ethanol extract of pepper elder (Peperomia pellucida L.) affected increasing the concentration and motility of spermatozoa  of  Rattus  norvegicus  rats  exposed  to  sopi,  with  an  effective  dose  of  1.44  g/kg  body weight..
Keywords : Peperomia pellucida L., pepper elder, spermatozoa, sopi

## Pendahuluan
Sopi  merupakan  minuman  tradisional beralkohol  yang  populer  pada  masyarakat Maluku.  Alkohol  yang  terkandung  dalam  sopi berupa  etanol  (CH3CH2-OH)  dari  fermentasi nira aren yang telah mengalami destilasi (Wael dan Mahulette, 2013). Alkohol dapat mengganggu  sistem  reproduksi  pria  yang dimulai dari hipotalamus, hipofisis anterior dan testis,  sehingga  dapat  menyebabkan  infertilitas dan mengurangi karakteristik seksual sekunder. Pada  testis,  alkohol  dapat  mempengaruhi  sel leydig  dan  sel  sertoli  yang  berperan  dalam produksi testosteron dan pematangan spermatozoa.  Hasil  metabolisme  alkohol (asetaldehid)  berperan  dalam  pembentukan spesies  oksigen  reaktif  (ROS).  Stres  oksidatif merupakan  suatu  kondisi  ketidakseimbangan antara produksi radikal bebas atau ROS dengan antioksidan,  dimana  kadar  radikal  bebas  lebih tinggi dibandingkan antioksidan (Wuisan, et al ., 2016).  Meningkatnya  senyawa  ROS  oleh radikal bebas pada jaringan yang memproduksi spermatozoa  dapat  menyebabkan  kerusakan membran  spermatozoa  (Wael  dan  Mahulette, 2013). Sehingga  dibutuhkan  cara  untuk mengatasi  serta  mengobatinya.  Cara  yang efektif  yang  dapat  dilakukan  oleh  masyarakat yaitu  memanfaatkan  kekayaan  alam  di  sekitar, salah  satunya  dengan  memanfaatkan  tumbuh- tumbuhan obat tradisonal.
Salah  satu  tumbuhan  obat  yang  diduga mampu  mengatasi  masalah  penurunan  kualitas spermatozoa  adalah  sirih  cina  ( Peperomia pellucida
L.). Tumbuhan sirih cina mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin,  tanin  dan  triterpenoid  (Karomah, 2019), dimana senyawa-senyawa ini merupakan antioksidan yang dapat memperbaiki  kerusakan sel  akibat  radikal  bebas,  sehingga  spermatozoa tidak mengalami kerusakan atau abnormal yang dapat  menyebabkan  kematian.  Hal  ini  senada dengan  Zuraida,  (2015)  yang  menyatakan antioksidan merupakan senyawa yang berfungsi sebagai anti radikal bebas, memperbaiki sel dan melindungi  DNA  dari  radikal  bebas  sehingga sel  spermatozoa  berada  dalam  kondisi  baik (Candrawati,  2018).  Hal  ini  menjadi  dasar dilakukannya  penelitian  tentang  efek  terapi ekstrak  etanol  sirih  cina  ( Peperomia  pellucida l.)  terhadap  peningkatan  konsentrasi  dan motilitas  spermatozoa  tikus Rattus  norvegicus terpapar sopi.

## Metode Penelitian

## Jenis Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorik,  dilakukan  pada Laboratorium Zoologi Jurusan Biologi Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Pattimura,  Ambon.  Penelitian  ini menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL) yang  terdiri  dari  lima  perlakuan  dan  tiga  kali ulangan.  Perlakuan  yang  diteliti  adalah perbedaan  dosis  ekstrak  etanol  sirih  cina  yang diberikan pada tikus yaitu:
K(-) :  Kelompok  kontrol  negatif  yaitu kelompok  tikus  yang  diberi  sopi 5.4 ml/ekor/hari selama 14 hari.
K(+)  :  Kelompok  kontrol  positif  yaitu kelompok  tikus  yang  diberi  sopi 5.4  ml/ekor/hari  selama  14  hari kemudian  vitamin  C  3.2  mg/kg BB selama 14 hari.
P1 :  Kelompok  tikus  yang  diberi  sopi 5.4  ml/ekor/hari  selama  14  hari kemudian  diberi  ekstrak  etanol sirih cina 0.36 g/kg BB selama 14 hari.
P2 :  Kelompok  tikus  yang  diberi  sopi 5.4  ml/ekor/hari  selama  14  hari kemudian  diberi  ekstrak  etanol sirih cina 0.72 g/kg BB selama 14 hari.
P3 :  Kelompok  tikus  yang  diberi  sopi 5.4  ml/ekor/hari  selama  14  hari kemudian  diberi  ekstrak  etanol sirih cina 1.44 g/kg BB selama 14 hari.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  jarum  sonde,  kandang  tikus,  timbangan analitik,  blender,  gelas  ukur,  kaca  preparat, cover  glass,  Erlenmeyer,  jarum  sonde,  papan bedah,  pipet  tetes,  wadah  plastik,  batang pengaduk,  cawan  petri,  mikroskop  dan  kamera digital,  shaker,  rotary  evaporator,  kertas  label, hemocytometer,  disecting  kit  dan  alat  tulis menulis.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  tumbuhan  sirih  cina  ( Peperomia pellucida L.),  tikus  jantan,  sekam  padi,  pakan tikus,  alumunium  foil,  kertas  saring  whatman, aquades,  eosin  negrosin,  etanol  70%,  alcohol 70%, dan sopi.
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 30, Volume 15 Nomor 1, Juni 2023, hal 10-17

## Prosedur
Tahap Persiapan Hewan Model Hewan  model  adalah  tikus  jantan Rattus norvevicus yang  memiliki  berat  badan  ±200g sebanyak  15  ekor,  di  dapat  dari  induk  tikus yang  dipelihara.    Dibagi  dalam  5  kelompok, dimana masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor  tikus  kemudian  ditempatkan  dalam kandang  beralaskan  sekam  padi  yang  kering dan  ditutupi  kawat  kemudian  diberikan  makan dan minum secara teratur. Tikus di aklimatisasi selama 7 hari.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Tumbuhan Sirih Cina
Tumbuhan  sirih  cina  sebanyak  57  gram dibersihkan  dibawah  air  mengalir  kemudian  di keringkan. Setelah kering, sirih cina dihaluskan menggunakan  blender  hingga  menjadi  serbuk. Kemudian  diekstraksi  dengan  cara  meserasi menggunakan  etanol  70%  dan  didiamkan selama  24  jam.  Setelah  24  jam  didiamkan kemudian  ekstrak  etanol  sirih  cina  dipisahkan dengan  cara  disaring  menggunakan  kertas saring, kemudian pada residu/ampas ditambahkan  pelarut  etanol  yang  baru  untuk proses ekstraksi berikutnya. Proses ekstraksi ini dilakukan  beberapa  kali  sampai  semua komponen senyawa/metabolit sekunder terekstraksi.  Semua  etanol tumbuhan sirih  cina yang  diperoleh  diuapkan  dengan rotary evaporator hingga  mendapatkan  ekstrak  kental etanol.
Pemberian Minuman Sopi 15  ekor  tikus  dicekok  dengan  minuman sopi,  sebanyak  5.4  ml/ekor/hari.  Namun  dosis yang digunakan dibagi menjadi dua pencekokan pada  pagi  dan  sore  hari  sebanyak  2.7 ml/ekor/hari  (Sanaky,  2016).  Pencekokan dilakukan selama  14  hari,  menggunakan  sonde yang  berbentuk  sperti  jarum  suntik  berujung tumpul.

## Melarutkan  Vitamin  C  dan  Pencekokan Vitamin C
Vitamin  C  dimasukan  ke dalam  aquades sebanyak  100  ml,  kemudian  di  aduk menggunakan pengaduk hingga larut. Kemudian  di  cekokan  pada  3  ekor  tikus  yang terpapar  sopi  dengan  dosis  3,2  mg/ekor/hari selama 14 hari.

## Pemberian Ekstrak Etanol Sirih Cina
Setelah pencekokan sopi selama 14 hari, dilanjutkan  dengan  pencekokan  ekstrak  etanol sirih  cina  yang  dilakukan  pada  9  ekor  tikus yang dibagi menjadi 3 kelompok selama 14 hari menggunakan dosis yang telah ditentukan yaitu, pada  kelompok  pertama  0.36  g/ekor/hari,  pada kelompok  kedua  0.72  g/ekor/hari  dan  pada kelompok ketiga 1.44 g/ekor/hari.

## Pembuatan Larutan Stok Spermatozoa
Tikus  dinekropsi  dengan  cara  dislokasi leher  selanjutnya  dibuat  sayatan  pada  bagian abdomen  yang  di  lakukan  oleh  Sulanda  dkk, spermatozoa diperoleh dengan cara pemotongan epididimis  0,5  cm.  selanjutnya,  dimasukan  ke dalam gelas arloji yang berisi 1 ml NaCl 0,9%, kemudian  di  potong-potong  hingga  halus  dan diaduk  hingga  menjadi  homogen.  Larutan  ini disebut  larutan  stok  spermatozoa  yang digunakan  untuk  pengamatan  konsentrasi  dan motilitas spermatozoa.

## Pengamatan Konsentrasi Spermatozoa
Pengamatan  konsentrasi  spermatozoa dilakukan  dengan  menggunakan  gelas  objek yang  ditetesi  larutan  stok  spermatozoa  dan ditetesi larutan eosin-negrosin dengan menggunakan pipet tetes dan tutup objek gelas menggunakan  gelas  penutup.  Preparat  tersebut juga  di  pasangkan  hemositometer  untuk perhitungan  konsentrasi.  Spermatozoa  yang hidup  tidak  akan  berwarna  sedangkan spermatozoa  yang  telah  mati  kepalanya  akan berwarna  merah  (Unitly, et  al .,  2014). Perhitungan  konsentrasi  diamati  dibawah mikroskop pada bidang A, B, C, D, dan E pada bilik hitung haemasitometer dengan pembesaran  400  kali  dan  jumlah  total perhitungannya  dimasukkan  dalam  rumus penentuan konsentrasi atau jumlah spermatozoa/ml suspensi sekresi cauda epididimis  menurut  Batubara  dkk.,  2013 sebagai berikut.
C =  ×10 5
Keterangan: C = Konsentrasi spermatozoa/ml suspensi N = Jumlah spermatozoa yang dihitung pada 5 kotak

## Pemeriksaan Motilitas Spermatozoa
Pemeriksaan motilitas spermatozoa
dilakukan  dengan  menggunakan  gelas  objek yang  ditetesi  larutan  stok  spermatozoa  dengan menggunakan pipet tetes dan tutup objek gelas menggunakan  gelas  penutup.  Amati  sediaan  di bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  400  kali gerakan-gerakan  spermatozoa.  Periksa  4-6 lapangan  pandang  untuk  mendapatkan  100 spermatozoa  secara  berurutan.  Kategorikan hasilnya  untuk  mendapatkan  presentasi  setiap kategori  motilitas  spermatozoa.  Kategori motilitas  spermatozoa  yaitu:  Motilitas  A: gerakan  spermato-zoa  maju  lurus  dan  cepat (progresif),  motilitas  B:  gerakan  spermatozoa belok-belok,  sulit  maju  lurus/lambat,  motilitas C: spermatozoa bergerak di tempat, motilitas D: spermatozoa  diam  atau  tidak  tampak  bergerak. Motilitas  yang  normal  merupakan  jumlah  dari motilitas  A  dan  motilitas  B  mengikuti  metode Batubara  dkk  (2013).  Motilitas  spermatozoa dihitung menggunakan rumus sebagai berikut.
M = [(Y-X)/Y] × 100%
Keterangan: X = Spermatozoa tidak motil Y = Konsentrasi total spermatozoa

## Teknik Analisis Data
Hasil data konsentrasi dan motilitas yang diperoleh  dianalisis  dengan Analysis  of Variance (ANOVA)  kemudian  dilanjutkan  Uji Duncan pada taraf nyata α = 0.05 menggunakan perangkat lunak SAS.

## Hasil Penelitian dan Pembahasan
Konsentrasi spermatozoa Hasil pengamatan konsentrasi spermatozoa  menunjukkan  bahwa  pemberian ektrak  etanol  sirih  cina  mampu  meningkatkan konsentrasi  spermatozoa  yang  disajikan  pada Tabel 1.
Tabel 1. Rataan konsentrasi spermatozoa tikus jantan terpapar sopi pasca diterapi ektrak etanol sirih cina.
Parameter Perlakuan Sopi 5.4 Sopi  5.4  dan Vitamin C 0.32 Dosis Ekstrak Etanol Sirih Cina 0.36 0.72 1.44 Konsentrasi (juta/ml) 54.0 ± 3.46 a 98.7 ± 1.15 b 64.7 ± 0.57 c 74.7± 5.03 d 102.7 ± 4.16 b
Keterangan:  Huruf  superscrip  yang  berbeda  dalam  satu  baris  menunjukan  hasil  yang  berbeda  nyata (P<0.05).
Hasil  analisis  statistik  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  sirih  cina  berpengaruh terhadap  peningkatan  konsentrasi  spermatozoa tikus terpapar sopi. hasil uji Duncan pada taraf signifikan  0.05  menunjukan  bahwa  tikus  yang hanya  diberi  sopi  berbeda  nyata  dengan  tikus yang diterapi vitamin C dan tikus yang diterapi ektrak etanol sirih cina dosis 0.36 g/kg BB (P 1 ), dosis 0.72 g/kg BB (P 2 ), dan dosis 1.44 g/kg BB (P 3 ) (P<0.05), namun pada dosis 1.44 (P 3 ) tidak berbeda  nyata  dengan  tikus  yang  diterapi Vitamin C (P>0.05). Hal ini menunjukan bahwa dosis  ektrak  etanol  sirih  cina  mampu meningkatkan  konsentrasi  spermatozoa  sejalan dengan  peningkatan  dosis  dan  sama  dengan pemberian Vitamin C.
Konsentrasi spermatozoa sangat berpengaruh  penting  dalam  menentukan kualitas dari spermatozoa. Jumlah spermatozoa yang  dihasilkan  tergantung  pada  proses spermatogenesis  yang  terjadi  didalam  tubulus
seminiferus.  Hasil  penelitian  menunjukan persentasi  konsentrasi  spermatozoa  pada kelompok  K(-)  lebih  rendah  dibandingkan dengan  K(+)  dan  kelompok  perlakuan  lainnya (yang  diberi  minuman  sopi  dan  ektrak  etanol sirih  cina)  dengan  dosis  0.36g/kg  BB,  dosis 0.72g/kg BB dan dosis 1.44g/kg BB. Penurunan kualitas  spermatozoa  akibat  pemberian  sopi dikarenakan  sopi  mengandung  etanol  yang metabolismenya  dapat  membentuk  senyawa radikal  bebas  yaitu  ROS  yang  mengakibatkan stress  oksidatif  sehingga  dapat  merusak membran sel spermatozoa yang mengakibatkan spermatozoa  mengalami  cacat  dan  bahkan mengalami  kematian,  penelitian  ini  sesuai dengan  pendapat  Haris et  al .,  (2016)  yang menyatakan bahwa penururan kualitas spermatozoa ini disebabkan oleh stress oksidatif yang  diakibatkan  adanya  peningkatan  ROS sehingga  menyebabkan  kerusakan  DNA  dan akhirnya  menyebabkan  necrosis  spermatozoa
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 30, Volume 15 Nomor 1, Juni 2023, hal 10-17
sehingga  akan  terjadi  penurunan  jumlah spermatozoa.  ROS  yang  disebabkan  oleh radikal  bebas  dapat  mengakibatkan  kematian sel sehingga dapat berpengaruh terhadap jumlah spermatozoa.
Hasil  penelitian  ini  menyatakan  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  sirih  cina  memiliki potensi  yang  sama  dengan  vitamin  C  dalam meningkatkan  konsentrasi  spermatozoa  tikus terpapar sopi, dikarenakan tumbuhan sirih cina juga  mengandung vitamin C. Selain vitamin C, juga  mengandung  flavonoid  yang  memiliki peran  yang  sama  sebagai  antioksidan. Antioksidan vitamin C dan flavonoid pada sirih cina  diduga  mampu  meningkatkan  kualitas membran  sel  spermatozoa  yang  rusak  akibat adanya  senyawa  radikal  bebas.  Hal  ini  dapat dijelaskan  oleh  Boydens,  (2015 ) ,  bahwa antioksidan  alami  adalah  untuk  mengurangi stres oksidatif secara langsung melalui beberapa jalur,  seperti  mengatur  pembentukan  radikal bebas,  pemulungan  radikal  bebas,  dan  dengan mengganggu  kaskade  reaksi  berantai  radikal bebas,  sehingga  menghilangkan  kerusakan oksidatif,  menyebabkan  terjadi  perbaikan membran spermatozoa. Senada dengan penelitian  Khaki  (2011),  yang  menemukan antioksidan  flavonoid  mampu  menetralkan radikal  bebas  sehingga  terjadi  perbaikan kerusakan  pada  membran  spermatozoa  dalam pembentukan spermatozoa. Ditambahkan Novia, et  al .,  (2018)  Penghambatan  ROS  oleh antioksidan  flavonoid  dapat  meningkatkan kualitas testis sehingga proses spermatogenesis
yang  terjadi  di  dalam  tubulus  seminiferous dapat berjalan dengan baik (Anzila et al ., 2017). Selain  flavonoid,  sirih  cina  juga mengandung  senyawa  saponin  yang  diduga merupakan  antioksidan  alami  yang  dapat meningkatkan  kinerja  hormon  androgen  yang berperan dalam meningkatkan kualitas spermatozoa.  Selain  itu,  triterpenoid  pada  sirih cina  memiliki  hormon  androgen  yang  dapat merangsang hormon testoteron untuk melindungi  spermatogenesis  sehingga  proses pembentukan  spermatozoa  dapat  berjalan dengan  baik.  Menurut  Sarapi, et  al .,  (2015) senyawa triterpenoid memiliki mekanisme kerja merangsang  produksi  hormon  testosteron  yang berperan dalam perilaku seksual, ketika terdapat rangsangan  maka  senyawa  steroid  akan menghantarkan  sinyal  ke  pangkal  tulang belakang  menuju  penis  sehingga  akan mendorong untuk mengeluarkan neurotransmiter  NO  yang  akan  mengaktifkan enzim  guanine  cyclase  yang  mendorong perubahan  guaniltriphospate  menjadi  cGMP (cyclic  guanosine  monophosphate).  Hormon androgen  terutama  testosteron  dan  DHT (Dihidrotestoteron) yang dihasilkan oleh sel-sel leydig  testis  berperan  sangat  penting  untuk memelihara spermatogenesis.

## Motilitas Spermatozoa
Hasil  pengamatan  motilitas  spermatozoa menunjukkan  bahwa  pemberian  ektrak  etanol sirih  cina  mampu  meningkatkan  motilitas spermatozoa yang disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Rataan motilitas spermatozoa tikus jantan terpapar sopi pasca diterapi ektrak etanol sirih cina.
Parameter Perlakuan Sopi 5.4 Sopi  5.4  dan Vitamin C 0.32 Dosis Ekstrak Etanol Sirih Cina 0.36 0.72 1.44 Motilitas (%)  28.3 ± 2.88 c 49.3 ± 7.02 b 35.7 ± 0.57 d 37.3 ± 2.51 d 51.3 ± 2.08 b
Keterangan:  Huruf  superscrip  yang  berbeda  dalam  satu  baris  menunjukan  hasil  yang  berbeda  nyata (P<0.05).
Hasil statistik pada motilitas spermatozoa menunjukan  bahwa  pada  tikus  yang  diberikan sopi  berbeda  nyata  dengan  tikus  yang  diterapi vitamin  C  dan  diterapi  ektrak  etanol  sirih  cina dosis 0.36 g/kg BB (P 1 ), dan dosis 0.72 g/kg BB (P 2 ),  dosis  1.44  g/kg  BB (P 3 )  (P<0.05),  namun tikus yang dipapar sopi dan diterapi Vitamin C tidak berbeda nyata dengan dosis 1.44 g/kg BB (P 3 )  (P<0.05).  Hal  ini  menunjukan  bahwa ekstrak  etanol  sirih  cina  mampu  meningkatkan
motilitas  spermatozoa  yang  sama  dengan pemberian vitamin C.
Analisis
motilitas spermatozoa merupakan  salah  satu  komponen  utama  untuk evaluasi  kualitas  spermatozoa  (Ducha et  al ., 2012).  Motilitas  menjadi  salah  satu  indikator penentu fertilisasi. sehingga penurunan motilitas spermatozoa dapat disebabkan karena adanya  gangguan  dalam  proses  fertilisasi. Pemberian  sopi  dapat  menurunkan  motilitas spermatozoa  dikarenakan  kandungan  senyawa
asetaldehid  yang  terkandung  dalam  sopi  dapat mengakibatkan ROS (stress oksidatif) sehingga dapat  merusak  membran  sel  spermatozoa  yang mengakibatkan penurunan motilitas spermatozoa.  Sejalan  dengan  penelitian  dari Wael  dan  Mahulette  (2013)  yang  menyatakan Kemungkinan  rendahnya  motilitas  dan  jumlah spermatoza  pada  tikus  Sprague  dawley  yang diberi  minuman  tradisional  sopi  diakibatkan karena  senyawa  asetaldehid  dari  minuman tradisional  sopi  dapat  merangsang  enzim sitokrom  P450s  yang  dapat  menyebabkan produksi  ROS  yang  berlebihan.  Ditambahkan oleh  Yuliyantika et  al .,  (2019)  bahwa  Stres oksidatif  mengakibatkan  kerusakan  endotel pembuluh darah dan menyebabkan mikroangiopati yang dapat menghambat proses spermatogenesis  pada  organ  testis  tidak sempurna  akibat  adanya  gangguan  nutrisi  dari pembuluh darah ke jaringan-jaringan pembentuk sprematozoa.
Perubahan  jumlah  motilitas  spermatozoa yang meningkat secara bertahap pada kelompok pemberian  ektrak  etanol  sirih  cina  dosis bertingkat, menunjukkan bahwa adanya kandungan  senyawa-senyawa  fitokimia  dalam Sirih  cina  yang  diduga  dapat  meningkatkan motilitas spermatozoa. Senyawa-senyawa fitokimia  etanol  sirih  cina  yang  dapat meningkatkan  motilitas  spermatozoa  salah satunya  yaitu  flavonoid  yang  merupakan antioksidan  yang  mampu  melindungi  sel – sel dari  kerusakan  akibat  radikal  bebas.  Adanya kandungan  flavonoid  dalam  tumbuhan  sirih cina  yang  berperan  sebagai  antoksidan  mampu meningkatkan  presentasi motilitas spermatozoa yang didukung oleh penelitian dari Rohmah, et al ., (2020) bahwa Pemberian antioksidan dapat meningkatkan metabolisme tubuh yang mempercepat  pembentukan  ATP  sehingga meningkatkan motilitas spermatozoa.
Ditambahkan  oleh  Palupi  (2006),  bahwa kandungan flavonoid sebagai antioksidan dapat meningkatkan  kualitas  spermazoa  dengan  cara mencegah adanya kerusakan membran spermatozoa.
Kandungan saponin yang terdapat dalam sirih  cina  ( Peperomia  pellucida L.)  dapat meningkatkan  gairah  seksual  Dan  dapat meningkatkan LH dan FSH yang bekerja sama untuk  menjaga  fungsi  testis  selama  masa reproduksi  sehingga    dapat  membantu  dalam percepatan daya gerak dari spermatozoa yang di keluarkan.  Diperkuat  dengan  penelitian  dari Andini (2014) bahwa saponin dapat
meningkatkan kadar LH dan FSH,
meningkatkan  produksi  androgen  dan  berperan dalam biosintesis DHEA
(dehydroepiandrosteron)  yang  meningkatkan kadar  testosteron  dalam  tubuh  sehingga meningkatkan libido. Sirih cina juga mengandung  tannin  yang  diketahui  dapat menangkal efek stres oksidatif yang disebabkan oleh radikal bebas yang akan merusak membran sel  sehingga  akan  mengganggu  motilitas spermatozoa (Barawi et al ., 2018).

## Simpulan
Ektrak  etanol  sirih  cina  ( Peperomia pellucida L.)  dapat  meningkatkan  konsentrasi dan  motilitas  spermatozoa  tikus Rattus norvegicus terpapar  sopi,  dengan  dosis  yang baik adalah 1.44 g/kg BB.

## Daftar Pustaka
Anzila,  I.,  Pramana, W. M.  A.,  Soewondo,  A., &  Rahayu,  S.  (2017b).  Pengaruh Ekstrak  Ethanol  Kemangi  (Ocimum canum  Sims.)  terhadap  Struktur
Histologi Testis Mencit (Mus musculus) Jantan. Biotropika: Journal of Tropical Biology . https://doi.org/10.21776/ub.biotropika
.2017.005.01.4
Andini,  D.  A.  (2014).  Potential  of  katuk  leaF (Sauropus  androgynus  L.  Merr)  as aphrodisiac. Jurnal Majority , 3 (7). 17- 21. https://juke.kedokteran.unila.ac.id/ind ex.php/majority/article/view/471 Berawi, K. N., & Marini, D. (2018). Efektivitas
Kulit Batang Bakau Minyak (Rhizopora apiculata) sebagai
Antioksidan. Jurnal  Agromedicine , 5 (1), 412 – 417. https://juke.kedokteran.unila.ac.id/ind ex.php/agro/article/download/1975/pd f.
Boydens  C.,  Pauwels  B.,  Decaluwe  K., Brouckaert  P,  Van  de  Voorde  J. (2015).  Kapasitas  relaksasi  dan antioksidan  dari  polifenol  anggur merah, resveratrol dan quercetin, pada tikus  terisolasi  corpora  cavernosa. J Seks Med. 12. Pp. 303 – 12.
Candrawati, M. K. (2018). Pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  70%  biji rambutan  (Nephelium  lappaceum  L.) terhadap kualitas sperma mencit (Mus
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 30, Volume 15 Nomor 1, Juni 2023, hal 10-17
muscullus L.) yang diinduksi streptozotocin [Skripsi,  Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim].  Etheses  of  Maulana  Malik
Ibrahim State Islamic University.
Ducha,  N.,  Susilawati,  T.,  Aulanni’am, Wahyuningsih,  S.,  &  Pangestu,  M. (2012).  Ultrastructure  and  Fertilizing Ability of  Limousin  Bull Sperm  after Storage  in  Cep-2  Extender  with  and Without  Egg  Yolk. Pakistan  Journal of Biological Sciences . https://doi.org/10.3923/pjbs.2012.979.
985 Haris, R. A., Tendean, L., & Turalaki, G. L. A. (2016).  Pengaruh  pemberian  kopi terhadap  kualitas  spermatozoa  tikus wistar  (Rattus  norvegicus)  yang terpapar  stres. Jurnal  e-Biomedik ,
4 (2).
https://doi.org/10.35790/ebm.4.2.2016 .14634 Karomah,  S.  (2019). Uji  Ekstrak  Tumbuhan Sirih  Cina  (Peperomia  pellucida  L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus  epidermidis [Tesis,
Universitas  Medan  Area].  Medan Area University Repository.
Khaki,  A.,  Fathiazad,  F.,  Nouri,  M.,  &  Khaki, A.  A.  (2011).  Effect  of  Ocimum basilicum on apoptosis in testis of rats after  exposure  to  electromagnetic field. Afr  J  Pharm  Pharmacol , 5 (12),
1534-1537.
Vinnata,  N.  N.,  Salni,  S.,  &  Nita,  S.  (2018b). Pemberian  Fraksi  Daun  Kemangi (Ocimum  americanum  L.)  terhadap
Spermatozoa  Tikus  Putih  Jantan (Rattus norvegicus). Jurnal Kesehatan, 9 (3), 366-375. https://doi.org/10.26630/jk.v9i3.1021 Palupi,  H.  D.  (2006). Pengaruh  pemberian  jus buah Tomat (Lycopersicum esculentum  mill)  terhadap  viabilitas spermatozoa  mencit  Balb/c  jantan yang  diberi  paparan  asap  rokok
[Doctoral  dissertation,  Faculty  of Medicine]. UNDIP Institutional Repository.
Rohmah,  L.,  Triana,  I.  N.,  Sunarso,  A., Susilowati,  S.,  Hidajati,  N.,  & Kurnijasanti,  R.  (2021).  Pengaruh pemberian  ekstrak  kulit  semangka (Citrullus  lanatus)  terhadap  motilitas
dan  viabilitas  spermatozoa  tikus (Rattus  norvegicus)  dengan  paparan suhu  panas. Ovozoa:  Journal  of Animal  Reproduction , 7 (2),  131 – 136. https://doi.org/10.20473/ovz.v7i2.201 8.131-136. Sanaky  M.  (2016) .  Pengaruh  pemberian minuman sopi beralkohol pada jumlah sel  sertoli  tubulus  seminiferus  tikus putih  (Rattus  norvegicus) [Tesis, Universitas  Airlangga].  Universitas Airlangga Repository. Sarapi,  V.  A., Bodhi, W.,  &  Citraningtyas,  G. (2015).  Uji  efek  afrodisiak  ekstrak etanol buah pare (momordica charantia  L.)  terhadap  libido  tikus putih  jantan  galur  wistar  (Rattus norvegicus). Pharmacon , 4 (3),  147- 154.
https://doi.org/10.35799/pha.4.2015.8 853 Unitly, A. J. A., Kusumorini, N.,
Agungpriyono,  S.,  Satyaningtijas,  A. S., & Boediono, A. (2014). Perubahan kualitas  spermatozoa  dan  jumlah  sel- sel spermatogenik tikus yang terpapar asap  rokok. Jurnal  Kedokteran
Hewan , 8 (2), 116-119. https://doi.org/10.21157/j.ked.hewan.
v8i2.2629
Wael  S.,  Mahulette  F.  2013.  Pengaruh pemberian  minuman  tradisional  Arak Ambon  (Sopi)  terhadap  spermatozoa
Tikus Sprague Dawley. MIPA
Kependidikan  Dan  Terapan .  Vol.  4. Pp. 495 – 498.
Wuisan M., Tendean L., Rumbajan J. M. 2016. Pengaruh  ekstrak  kulit  buah  manggis Garcinia  mangostana  L.)  terhadap kualitas  spermatozoa  tikus  wistar ( Rattus  norvegicus )  yang  dipapari asap  rokok. Jurnal  E-Biomedik .  Vol.
4, No. 1.
Yuliyantika,  Iswari,  R.,  Marianti,  A.  2019. Daya  Proteksi  Ekstrak  Tauge  Kacang Hijau  terhadap  Kualitas  Spermatozoa dan  Kadar  Enzim  Superoksida Dismutase  Mencit  yang  Terpapar Transfluthrin. Life Science . Vol 8, No. 2. Pp. 138 – 149.
Yoshiki,  Y.,  Kudo,  and  K.  Okobo.  1998.
Relationship between Chemical
Structure  and  Biologica  Activities  of Triterpenoid  Saponin  from  Soybean (Review).  Biosience  Biotechnology
and  Biochemistry  Vol.  62.  Pp.  2291- 2292.
Zuraida.,  Eti  Yerizel.,  Eliza  Anas.  2015.
Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Rosella ( Hibiscus  sabdariffa Linn.)  Terhadap
Kadar  Molondialdehid  dan  Aktivitas Katalase Tikus yang Terpapar Karbon Tetraklorida. Jurnal Kesehatan Andalas . Vol. 4, No. 03.