## Polimorfisme Protein Darah Domba di Kabupaten Batanghari
Silvia Erina 1 dan  Helmi Ediyanto 1
1 Jurusan Produksi Ternak, Fakultas Peternakan, Universitas Jambi

## Intisari
Di Kecamatan Pemayung dan Kecamatan Muara Bulian  Kabupaten Batanghari populasi ternak domba cukup tinggi. Namun sampai saat ini informasi tentang karakteristik genetik domba belum  banyak  diketahui.  Sehingga  dalam  rangka  mewujudkan  salah  satu  tujuan  dalam pembangunan  peternakan  yaitu  untuk  mempertahankan  kelestarian  dan  kemurnian  bangsa ternak  asli  maka  perlu  diketahui  pola  polimorfisme  protein  darah  domba.  Salah  satu  cara pendekatan  yang  dilakukan  untuk  mengetahui  dan  membedakan  sifat  genetik  tersebut  adalah dengan menganalisis protein darah yang mempergunakan elektroforesis.Penelitian ini bertujuan untuk menelaah karakteristik genetik domba di Kabupaten Batanghari yang meliputi karakteristik protein darah domba dengan elektroforesis yaitu pola polimorfisme protein darah.Sampel darah diambil  dari  20  ekor  domba,  10  ekor  dari  Kecamatan  Pemayung  dan  10  ekor  dari  Kecamatan Muara  Bulian.  Analisis  dilakukan  di  Laboratorium  Genetika  Molekuler  Ternak  Fakultas Peternakan  IPB  Bogor.  Frekuensi  alel  dihitung  dengan  perhitungan  langsung  dan  diuji  dengan keseimbangan  Hardy  –  Weinberg,  sedang  jarak  genetik  dihitung  dengan  rumus  Nei.  Hasil Analisis  Elektroforesis  didapatkan  lima  jenis  protein,  yaitu  Albumin,  Postalbumin,  Transferin, Posttransferin-1, dan Posttransferin-2. Albumin dan Postalbumin dikontrol dua alel yaitu alel A = 0,6 dan alel B = 0,4, Transferin empat alel yaitu alel A = 0,025, alel B = 0,50, C = 0,45 dan D = 0,025. Sedangkan lokus Posttransferin-1 dan Posttransferin-2 dikontrol oleh satu alel yaitu alel A = 1,00. Dari  hasil  pembahasan  dapat  disimpulkan  ditemukan  lima  jenis  protein  yaitu  Albumin, Postalbumin,  Transferin,  Posttransferin-1,  dan  Posttransferin-2.  Tiga  lokus  ditemukan polimorfisme yaitu Albumin, Postalbumin dan Transferin dengan angka rata-rata heterozigositas 0,29 untuk Kecamatan Pemayung dan 0,287 untuk Kecamatan Muara Bulian. Lokus Albumin dan Postalbumin dapat dijadikan penciri genetik.
Kata Kunci : Lokus, alel, polimorfise, protein darah.

## Abstract
In  Pemayung and Muara Bulian Subdistrict, Batanghari District, the population of sheep is relatively high. However, information on  genetic characteristics of the sheep has not been well- identified  yet  .  Therefore,  in  order  to  reach  one  of  the  objectives  of  veterinary  development, conservating local breeds, it is necessary to know blood protein polymorphism of the sheep. One way  to  identify  genetic  characteristic  of  the  sheep  is  by  analizing  blood  protein electrophoretically.The research is aimed at analizing genetic characteristics of sheep in Batanghari District,  including  characteristics  of  blood  protein  by  electrophoresis  to  know  blood  protein polymorphism  patterns.  Blood  samples  were  taken  from  20  sheep,  10  sheep  from  Pemayung Subdistrict  and  10  sheep  from  Muara  Bulian  Subdistrict.  Analysis  was  conducted  at  Livestock Molecular  Genetic Laboratory Veterinary Faculty Bogor Agriculture Institute. Allelic Frequency was  directly  calculated  with  Hardy-weinberg  proportion  and  genetic  distance  is  was  calculated with  method  of  Nei  .  The  result  of  electrophoretic  analysis    has  found  5  kinds  of  proteins  ; Albumin,  Postalbumin,  Transferin,  Posttransferin-1  and  Posttransferin-2.  Albumin  and Postalbumin are controlled by 2 alleles ; Allele A=0,6 and allele B=0,4, Transferin is controlled by 4 alleles  ;  allele  A  =  0,025,  allele  B=0,50,  allele  C=0,45,  and  allele  D=0,025.  Posttransferin-1  and posttransferin-2 are controlled by an allele; allele A=1,00. In conclusion, there are 5 kinds of blood protein,  they  are  Albumin,  Postalbumin,  Transferin,  Posttransferin-1  and  Posttransferin-2.
Polymorphism  is  detected  in  3  loci;  Albumin,  Postalbumin  and  Transferin  with  Heterozigocity Average  0,29  in  Pemayung  Subdistrict  and  0,287  in  Muara  Bulian  Subdistrict.  Albumin  and Postalbumin loci can be considered as main genetic characteristics.
Key-words : Loci, allele, polymorphism, blood protein

## Pendahuluan
Ternak  domba  adalah  salah  satu jenis  ternak  yang  sudah  lama  dikenal para  petani  dan  mempunyai  prospek yang baik untuk dikembangkan. Hal ini disebabkan  untuk  pemeliharaan  domba hanya  memerlukan  sarana-sarana  yang relatif sangat sederhana dan modal yang dibutuhkan  tidak  terlalu  besar  ,  cepat berkembang  biak  dan  tidak  menuntut areal  tanah  yang  luas.  Ternak  domba bukan  hanya  berfungsi  mengasilkan daging  ,  susu,kulit  dan  wol  tetapi  juga sebagai  tabungan  yang  sewaktu-  waktu dapat dijual.
Di  Kecamatan  Pemayung  dan Kecamatan  Muara  Bulian  Kabupaten Batanghari  ternak  domba  sudah  sejak lama  dipelihara  dan  populasinya  cukup tinggi. Namun sampai saat ini informasi
– informasi tentang karakteristik morfolgis    dan  genetik  domba  di Kabupaten  Batanghari    belum  banyak diungkapkan  ,  sehingga  penelaahannya menjadi  sangat  penting  dan  mendasar dalam  rangka  menunjang  program konservasi  sebagai  plasma  nutfah. Dengan mengetahui karakteristik morfologis  dan  genetik  domba  ini diharapkan  dapat  berguna  sebagai patokan untuk mendeteksi dan memantau genetik domba.
Karakteristik  morfologis  atau fenotip seekor ternak dapat ditinjau dari dua  sifat  yaitu  sifat  kualitatif  dan kuantitatif . Sifat kualitatif sangat mudah dibedakan  tanpa  harus  mengukurnya  , sifat  ini  biasanya  dikontrol  oleh sepasang  gen  seperti  warna  ,  pola warna,  sifat  bertanduk  atau  tidak bertanduk,  variasi  sifat  ini  tidak kontinyu.  Sifat  kuantitatif  perbedaan
antar kelas fenotip sangat kecil, biasanya dikontrol  oleh  banyak  pasang  gen, variasinya kontinyu seperti bobot badan (Noor,  1996).  Pendekatan  yang  dapat dilakukan  untuk  mengetahui  dan membedakan  sifat-  sifat  genetik  domba tersebut  adalah  dengan  menganalisis polimorfisme  protein  darahnya  dengan menggunakan teknik elektroforesis. Pelitian  ini  bertujuan  untuk  menelaah karakteristik genetik domba di Kabupaten  Batanghari    yang  meliputi karakteristik  protein  darah  domba dengan  elektroforesis    yaitu  pola polimorfisme protein darah.
Informasi  –  informasi  tentang karakteristik genetik domba di Kabupaten  Batanghari  belum  begitu banyak  diungkapkan  .  Sehingga  upaya penelaahannya  sangat  penting  dan mendasar  dalam  rangka  mewujutkan salah satu tujuan pembangunan peternakan yaitu untuk mempertahankan kelestarian dan kemurnian    bangsa  ternak  asli.  Dengan mengetahui karakteristik genetik domba ini  diharapkan  dapat  berguna  sebagai patokan untuk mendeteksi dan memantau kemurnian genetik .
Salah satu pendekatan yang dapat dilakukan  untuk  mengetahui  dan membedakan  sifat  –sifat  genetik  domba tersebut  adalah  dengan  menganalisis protein darahnya dengan menggunakan teknik elektroforesis.
Protein merupakan makro molekul yang dihasilkan sel hidup yang diantaranya  berfungsi  sebagai  tempat peyimpan  informasi  genetik  serta merupakan  produk  langsung  gen  yang relative tidak terpengaruh oleh perubahan  lingkungan    (Roadwel,1993). Setiap kelompok protein diwariskan dari generasi  ke  generasi  dan  merupakan
penampilan  bentuk  alel  pada  lokusnya sehingga dengan mengetahui karakteristik  protein  darahnya  dapat diketahui  genotip  setiap  individu  dan populasinya (Nicholas,1987).
Berdasarkan  pokok  pemikiran diatas maka perlu dilakukan penelaahan polimorfisme  protein  darah  domba  di Kabupaten  Batanghari  dengan  teknik elektroporesis.
Materi dan Metoda

## Tempat dan Waktu Penelitian
Pengambilan contoh darah domba  dilaksanakan  di  Kabupaten Batang  Hari  Provinsi  Jambi.  Sedangkan untuk  analisis  polimorfisme  protein darah  dilakukan  di  Labor  Pemuliaan dan Genetika Ternak Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor. Penelitian  dilaksanakan    bulan
Juli  2011 sampai  Oktober 2011

## Materi Penelitian
Darah    20  ekor  domba    yang berumur  1  –  2  tahun  dari  Kabupaten Batanghari  diambil  sebagai  contoh,  10 ekor  dari  Kecamatan  Pemayung  dan  10 ekor dari Kecamatan Muara Bulian. Bahan-bahan analisa kimia yang digunakan  untuk  mengidentifikasi  pola polimorfisme  dombaa  yaitu  :  Tris (Hidroxy Methil) Amino Metan,
Akrilamide,  NN  –  Metil  Diakrilamide, Napthy  Phosphate,  Natrium  Salt,  Fast Blue  Salt  B,  Amonium  Peroksodisulfat, Amido  Black  10B,  Sukrosa,  TEMED  ( N,N,N,N  –  Tetra  Mtil  Etilendiamin),
Sodium  Asetat,  Asam  Khlorida  (HCl), Disodium Naptyl Pospat, ASam Barbituric,  Natrium  Hidroxide,  Starch hydrolyzed for electroforesis, filter paper whatman  no,  1,  methanol,  aquadest, comarie
brilliant blue 250R,
heparin,iodium  dan  alcohol  dengan konsentrasi 70%.
Peralatan  yang  diperlukan  adalah  spuit dan jarum suntik, termos es dan tabung
reaksi  untuk  tempat  sample,  iodium, alcohol  70%  dan  EDTA  yang  berfungsi sebagai  anti  koagulasi  sehingga  contoh darah tidak membeku.
Seperangkat  alat  elektroforesis  dengan perlengkapan yang menggunakan :
a. Power Supply model ELP 500S yang bertegangan maksimum 500 volt dan berkekuatan 250 miliamper.
b. Lembar  akrilamida  (slab)  yang berukuran  panjang  15  cm  ,  lebar  13 cm  dan  tebal  0,1  cm.  disamping  itu juga  digunakan  pipet  Mohr,  gelas piala  100  ml,  botol-botol  bahan analisis , labu takar, gelasukur, spuit dan  jarum  suntuk,  bola  pipet, pengaduk, baskom, timbangan digital,  lemari  pendingin,  sarung tangan  plastic,  label,  dan  sentrifuge 300 rpm.

## Metode Penelitian
Contoh  darah  diambil  dari  20 ekor  domba.  Sedangkan  penentuan dilakukan  secara  acak.  Contoh  darah diambil  melalui  pembuluh  darah  di leher  (Vena  Jugularis)  sebanyak  5  ml. darah  disimpan  di  dalam  tabung penyimpan darah yang  telah  diberi anti koagulasi (heparin) dan disimpan dalam temos  yang  diberi  batu  es    untuk dibawa  ke  laboratorium.  Selanjutnya darah diolah untuk memisahkan plasma darah dari sel darah dengan menggunakan  sentrifuge  3000  rpm selama  15  menit.  Setelah  itu  dilakukan analisis  protein  darah    dengan  metoda elektroforesis.
Untuk  mengidentifikasi  pola polimorfisme  protein  darah  domba digunakan  metoda  elektoforesis  gel akrilamida.  Metoda  ini  digunakan untukpenentuan  plasma  darah  Ptf-1  ( Post Transferin -1), Ptf-2 (Post Transferin –  2),  Tf  (Transferin),  Pa  (Post  Albumin) dan  Alb  (Albumin)  serta  penentuan  sel darah merah Hb (Haemoglobin).
Tahapan
pekerjaan yang dilakukan  dalam  proses  elektroforesis
meliputi  :  pembuatan  bahan  analisis kimia,  pembuatan  gel  elektroforesis, penetesan  sample  darah  dan  proses pemisahan  protein,  pewarnaan  dan pencucian.  Pembuatan  bahan-bahan kimia  untuk  keperluan  analisa  protein darah  dilakukan  dengan  mengikuti metoda  Ogita  dan  Market  (1979)  yang dimodifikasi  oleh  Thohari  dkk.  (1991), disamping itu dalam keseluruhan proses analisa protein darah ini juga dilakukan mengikuti  prosedur  dari  Maeda  et  al (1978,  1980),  Martojo  et  al  (1988)  dan Thohari et al (1991).
Gel elektroforesis terdiri dari dua larutan  yaitu  larutan  pemisah  dan larutan  gel  penggertak.  Setelah  itu larutan gel pemisah dimasukkan kedalam  dua  keping  kaca  yang  telah diberi  pembatas  untaian  silinder  plastik dan  penjepit  dengan  menggunakan pipet  secara  perlahan-lahan  untuk menghindari terbentuk gelembung udara.
Larutan  gel  penggertak  yang terbentuk  dimasukkan  ke  dalam keping kaca  di  atas  dengan  menggunakan pipept  di  atas  gel  pemisah.  Pencetak wadah  contoh  yang  dibuat  berbentuk sisir  yang  jarang  dari  penggaris  plastik, diletakkan pada gel penggertak sebelum mmemmbeku.  Setelah  itu  keping  kaca diitutup  dengan  menggunakan  plalstik dan  disimpan  dalam  lemari  pendingin bersuhu  4 o C.  Penyimpanan  dilakukan untuk batas waktu maksimum 3 hari.
Evaluasi hasil penelitian dilakukan dengan melihat perbandingan karakteristik  morfologi  dan  pola  pita prooein  plasma  darah  yang  terbentuk dari hasil elektroforesis.
Untuk  melihat  perbandingan  pola  pita protein plasma darah dilakukan dengan melihat  pola  pita  protein  yang  tampak pada  hasil  elektroforesis  yaitu  dengan menghitung  jumlah  bentuk  dan  jarak antara  pita  (tipe/macam  pita)  yang ditampilkan  pada  individu  domba tersebut,  kemudian  dihitung  frekuensi
genetik  didasarkan  pada  jumlah  pita protein yang muncul pda tiap kelompok domba  dibagi  dengan  jumlah  pita  yang muncul  pada  semua  contoh  dikalikan dengan 100%.
Untuk mengetahui perbedaan frekuensi  gen  pada  lokus  yang  diamati dilakukan  uji  Chi  Square  (Suryo,  1989) dengan rumus sebagai berikut :
d 2 X 2 =   Σ  ------------- e dimana : X 2 =  Chi Square test e     =   Hasil yang diramalkan atau diharapkan d    =    Deviasi atau penyimpangan yaitu  selisih  antara  hasil  yang diperoleh   dengan hasil hasil yang diramalkan Σ   =     Sigma atau jumlah Berdasarkan  atas  hasil  interpretasi fenotip  masing-masing  individu yang  dianalisis  pada  jenis  domba, dihitung frekuensi alelnya. Pendugaan nilai variabilitas genetik di dalam populasi dihitung dengan  menggunakan  rata-rata angka heterozigositas
yang dihasilkan per individu. H  =  1 -  Σ iqi 2
Dimana : qi  adalah frekuensi dari alel ke   -   i  pada suatu lokus yang diuji.
Variasi  genetik  antara  populasi dihitung dengan menghitung kesamaan  genetik    (  I  )  dan  jarak genetik  (  D  )  berdasarkan  rumus Nei  (1975)  dalam  Thohari  (1983). Kesamaan genetik ( I xy )  dan jarak genetik  (  D xy )  antara  populasi- populasi  x  dan  y  dihitung mengikuti rumus :
J xy I xy =    ------------------ J x J y
D xy =   - log      e    I xy
X i Y i Dimana :  J xy =    Σ   -------------
N X i 2
J x =   ------------------ N Y i 2 J y =   -------------------
N
x i dan   y i adalah frekuensi alel ke    i    dalam  masing-masing populasi  yang  dibandingkan  (  x dan    y  )    dan    N    adalah  jumlah sampel yang dianalisa.

## Hasil dan Pembahasan

## Analisis  Polimorfisme Protein Plasma Darah
Dari  hasil  analisis  polimorfisme protein  plasma  darah  dengan  teknik elektroforesis terhadap 20 ekor domba di Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan Muara Bulian didapatkan 5 jenis protein yaitu Albumin (Alb),  Postalbumin (Pa) , Transferin  (Tf),  Posttransferin -1 (Ptf-1),
Posttransferin-2  (Ptf-2).  Hal  ini  sesuai dengan  apa  yang  pernah  dilaporkan Maria Astuti (1997) dengan menggunakan elektroforesis gel akrilamid  pada  plasma  darah    kambing didapatkan  5  lokus  protein  yaitu Albumin  (Alb),  Postalbumin  (Pa), Transferin (Tf), Posttransferin (Ptf).
Gambaran pola pita hasil analisis elektroforesis  pada  kedua  Kecamatan yaitu Kecamatan Pemayung dan Kecamatan  Muara  Bulian  dapat  dilihat pada Gambar  1 dan 2.

## Penampilan Lokus Albumin (Alb)
Dari  dua  Kecamatan    yang dianalisis, semua individu menampilkan lokus  Albumin  (Alb).  Pita  (band)  yang ditampilkan  diantara  masing  –  masing
individu  dari  dua  Kecamatan  adalah sama-sama dua pita yaitu tipe A (Alb A ), tipe  B  (Alb B ),  susunan  genotip  juga sama.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Nicholas (1987) bahwa elektroporetgram albumin  dapat  dilihat  2  jenis  pita. Ditemukan  adanya  variasi  genotip maupun  variasi  fenotip  pada  lokus albumin  di  antara  individu  dalam  satu lokasi kecamatan.
Hasil  analisis  protein  plasma darah domba pada dua lokasi penelitian ini  menunjukkan    dua  macam  genotip AB  dan  AA.  Dengan  demikian  dapat dilihat ada individu-individu
heterozigot,  hal  ini  berarti  ditemukan adanya  polimorfisme  lokus  albumin  di dua  lokasi  penelitian  ini.  Polimorfisme itu akan terjadi apabila pada lokus yang diamati  frekuensi  alel  umumnya  tidak lebih  besar  dari  0,99  atau  proporsi heterozigot  dapat    ditemukan  pada lokus  tersebut  paling  tidak  2%    (Nei, 1987).

## Penampilan Lokus Post albumin (Pa)
Semua  individu    dari  dua  lokasi penelitian menampilkan lokus
Postalbumin (Pa), domba yang dianalisa menampilkan  2  pita  (band)  yaitu  tipe A(Pa A )  dan  tipe  B  (Pa B ).  Ini  tidak  jauh berbeda  dengan hasil penelitian   Maria Astuti (1997) pada kambing ditemukan 2 alel  mengontrol  post  albumin yaitu  tipe A dan tipe B. Ditemukan  variasi  genotip  pada 2  lokasi  penelitian  ini  yaitu  genotip  AB dan AA . Di Kecamatan  Pemayung  ada 2  macam  genotip    sedangkan  di Kecamatan  Muara  Bulian  hanya  satu macam  genotip  yaitu  AB.  Walaupun  di Kecamatan  Muara  bulian  hanya  satu macam genotip tetapi heterozigot berarti ditemukan  adanya  polimorfisme  lokus Post  albumin  (Pa)  di  dua  lokasi penelitian ini.

## Penampilan Lokus Transferin (Tf)
Dari  hasil  analisis  elektroforesis ditemukan    4  pita  (band)  alel    di Kecamatan Pemayung yaitu tipe A(Tf A ), tipe B (Tf B ), tipe C (Tf C ) dan tipe D (Tf D ). Sedangkan  di  Kecamatan  Muara  Bulian hanya ditemukan 2 tipe yaitu tipe B dan tipe  C.    Hal  ini  sama  dengan  hasil penelitian  Selvaraj  dkk  (1991)  pada kambing  ditemukan    empat  tipe transferin    yaitu  tipe  A,  tipe  B,  tipe  C, tipe  D  terdapat  pertama  kali  pada kambing Asia Tenggara.
Terdapat  variasi  genotip  baik yang heterozigot maupun tipe homozigot  untuk  pasangan  alel  AD
(Tf AD ), tipe BC (Tf BC ) , tipe BB (Tf BB ), tipe CC  (Tf CC ).    Dengan  demikian  dapat dikatakan  bahwa  pada  lokus  transferin di  semua  plasma  darah  yang  dianalisis terdapat  adanya  polimorfik  protein darah  yang  disebut  sebagai  satu  pola keragaman genetik domba-domba tersebut  .  Hal  ini  tidak  jauh  berbeda dengan  penelitian  Tsunnoda  dkk  (1993) pada  domba  asli  Nepal    dari  20  lokus yang  dianalisis  ditemukan  14  lokus polimorfik termasuk alel  Transferin (Tf).

## Penampilan  Lokus  Posttransferin-1 (Ptf -1)
Semua  individu  domba  yang dianalisis  tidak  menunjukkan  adanya variasi, semua menunjukkan  tipe alel A dengan  genotip  yang  sama  yakni homozigot untuk pasangan alel  Ptf-1 AA . Hal  ini  berarti  tidak  ditemukan polimorfisme  pada  posttransferin-1    di dua    Kecamatan  yang  dianalisis.
Menurut  Harris  (1994)  keadaan  yang
demikian  disebut  monomorfisme.    Hal ini  berbeda  dengan  hasil  penelitian Martojo (1994)pada domba lokal ditemukan    tiga  tipe  alel  pada  lokus postransferin-1 yakni tipe A, B , C.

## Penampilan  Lokus  Posttransferin-2 (Ptf-2)
Lokus  postransferin  -2    (Ptf-2  ) ditampilkan  oleh  semua  individu sampel    dari dua  lokasi  penelitian.  Dari hasil analisis ditemukan hanya satu tipe alel posttransferin -2 yaitu tipe A dengan genotip homozigot Ptf-2 AA , tidak terdapat  polimorfisme  protein  darah pada  lokus  posttransferin-2.  Hal  ini tidak  jauh  berbeda  dengan  hasil penelitian    Silvia  Erina  (1998)  pada kambing  kacang  didapatkan  hanya  satu alel  pada  posttransferin  -2  yaitu  tipe  A dengan  genotip  Ptf-2 AA .    Tapi  berbeda dengan  hasil  penelitian    Martojo  (1994) pada domba lokal ditemukan empat tipe alel Posttransferin -2 yaitu A, B, C, D.

## Frekuensi Genotip dan Frekuensi Alel Albumin (Alb)
Analisis  elektroforesis  genotip Albumin    di  dua  Kecamatan  yaitu Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan Muara  Bulian    (Tabel  1).  Semua  terdiri dari alel tipe A (Alb A ) dan tipe B (Alb B ) dengan  genotip  Alb AA dan  Alb BB ,  tidak ditemui  genotip  Alb BB di  dua  lokasi penelitian  ini,  ditemui  polimorfisme dalam lokus Albumin.
1           2          3         4           5         6           7        8           9         10 Ptf-2             AA         AA       AA       AA        AA        AA       AA        AA        AA       AA Ptf-1            AA         AA       AA       AA        AA        AA       AA        AA        AA       AA Tf                CC         BC       BC        BC       BC        AD       BC        BC        BC       CC Pa               AB         AB       AA        AA       AB        AB       AA         AB        AA       AB Alb             AB         AB       AA         AB      AB        AA        AB        AB         AB       AB
Gambar  1  :  Elektroporetgram  Albumin  (Alb),  Postalbumin  (Pa),  Transferin  (Tf), Posttransferin  (Ptf),  Posttransferin  -1  (Ptf-1),  Posttransferin  -2  (Ptf-2)  pada Plasma Darah Domba di Kecamatan Pemayung  Kabupaten Batang Hari
1             2              3              4              5              6              7              8               9             10
Gambar  2  :  Elektroporetgram  Albumin  (Alb),  Postalbumin  (Pa),  Transferin  (Tf), Posttransferin  (Ptf),  Posttransferin  -1  (Ptf-1),  Posttransferin  -2  (Ptf-2)  pada Plasma  Darah  Domba  di  Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan  Muara Bulian Kabupaten Batang Hari
Tabel 1 :  Variasi Elektroforesis Genotip dan Frekuensi Alel Albumin pada Plasma Darah Domba Populasi (Tahun) N Genotip Frekuensi alel A AB B Alb A Alb B Kec. Pemayung (2011) 10 exp 8 3,6 2 4,8 0 1,6 0,6 0,4 Kec.Muara Bulian (2011) 10 exp 8 3,6 2 2 0 1,6 0,6 0,4 Total 20 exp 16 7,2 4 3,6 0 3,2 0,6 0,4
Keterangan :   exp : Jumlah frekuensi  harapan ( Hardy – Weinberg, 1908)
Frekuensi  alel    Albumin  yang terbesar  terdapat  pada  alel  Alb A yaitu 0,6  sama  pada  kedua  lokasi  penelitian. Hal  ini  tidak  jauh  berbeda  dengan penelitian  Selvaraj  dkk  (1991)  di  Bogor, Medan,  Ujung    Pandang  0,7600,  0,7900, 0,7190.

## Post Albumin (Pa)
Hasil  elektroforesis  untuk  lokus Postalbumin (Pa) menunjukkan bahwa
dalam  populasi  domba  baik  di Kecamatan  Pemayung  maupun  Muara Bulian    didapatkan  dua  tipe  alel  yaitu tipe  A  (Pa A )  dan  tipe  B  (Pa B ).    Genotip yang ditemukan  di dua lokasi ini adalah AA dan AB tidak ditemukan genotip BB, di    Kecamatan  Muara  Bulian  hanya ditemukan  genotip  AB  sedangkan  di Kecamatan    Pemayung  genotip  AA  dan AB  berarti  ditemukan  polimorfisme dalam lokus Postalbumin.
Frekuensi alel Pa A lebih tinggi di Kecamatan  Pemayung  dari  Kecamatan Muara Bulian  sedangkan  frekuensi    alel A  dan  B  seimbang  di  Muara  Bulian  ( Tabel  2)  Ini  berarti  perkawinan    di Muara  Bulian  lebih  acak.    Sedangkan peternak    di    Kecamatan    Pemayung sudah  lama  sekali  memelihara  ternak domba  jadi  pejantan  yang  digunakan berasal dari populasi itu sendiri, maka
pada populasi ini akan terjadi perkawinan    berkerabat  .      Menurut Yatim  (1986)  perkawinan    berkerabat (antara saudara dekat) akan
meningkatkan kehomozigositasan.

## Transferin (Tf)
Analisis  elektroforesis  plasma darah  domba  di  dua  lokasi  penelitian pada lokus transferin didapatkan empat tipe alel yaitu tipe A (Tf A ), tipe B (Tf B ) , tipe  C  (Tf C ),  tipe  D  (Tf D ).    Hal  ini  tidak jauh  berbeda  dengan      hasil  penelitian Maria  Astuti  (1997)  pada  kambing didapatkan  tiga  tipe  alel  pada  lokus transferin    yaitu  tipe    A,  B,  dan  C, sedangkan  Selvaraj  (1991)  menemukan empat tipe yaitu tipe A, B, C, D.
Dari  kedua  lokiasi  penelitian ditemukan  variasi  genotip  homozigot maupun  heterozigot,  di  Kecamatan Pemayung  genotip  CC,  BC,  dan  AD sedangkan di Muara  Bulian genotip BB, BC. Hal ini berarti ditemukan polimorfisme  pada  lokus  transferin (Tabel 3 ). Frekuensi alel  yang terendah adalah  tipe  A  dan  D  karena  hanya  satu individu  yang  bergenotip  AD  jadi invidu  yang  bergenotip  ini  memang jarang    terjadi  .  Menurut  Selvaraj    dkk (1991)  tipe  D  pertama  kali  ditemukan pada kambing di Asia Tenggara.
Tabel 2 : Variasi Elektroforesis Genotip dan Frekuensi Alel Post Albumin (Pa)
pada Plasma Darah Domba Populasi (Tahun) N Genotip Frekuensi Alel A AB B Pa A Pa B Kec. Pemayung (2011) 10 exp 4 4,9 6 4,2 0 0,9 0,7 0,3 Kec.Muara Bulian (2011) 10 exp 0 2,5 10 5 0 2,5 0,5 0,5 Total 20 exp 4 7,2 16 9,6 0 3,2 0,6 0,4 Keterangan :   exp : Jumlah frekuensi harapan ( Hardy – Weinberg, 1908 ) Tabel 3 :  Variasi Elektroforesis Genotip dan  Frekuensi Alel Transferin (Tf) pada Plasma Darah Domba Populasi (Tahun) N Genotip AD        BC        B           C Frekuensi  Alel Tf A Tf B Tf C Tf D Kec. Pemayung (2011) 10 exp 1            7           0          2 0,025  3,85   1,225 3,025 0,05    0,35   0,55    0,05 Kec. Muara Bulian (2011) 10 exp 0            5           4         1 0        4,55    4,225  1,225 0        0,65   0,35       0 Total 20 exp 1           12        4          3 0,0125   9        5       4,05 0,025  0,50  0,45  0,025
Keterangan :  exp :  Jumlah frekuensi harapan (Hardy – Weinberg, 1908)
Posttransferein – 1 (Ptf-1)
Dari  hasil  analisis  elektroforesis pada  lokus  Posttransferin  -1  (Ptf-1)  di dua lokasi penelitian tidak menunjukkan variasi  ,  semuanya  menunjukkan genotip  yang  sama  yakni  homozigot untuk  pasangan  alel  Ptf-1 AA .  Hal  ini membuktikan tidak ditemukan polimorfisme pada lokus Posttransferin - 1 domba di dua Kecamatan ini. Selanjutnya dari analisis elektroforesis  terlihat  bahwa  frekuensi alel  Ptf-1 A adalah  1,00  untuk  ke  dua populasi  yang  dianalisis  (Tabel  4).  Hal
inj berarti secara genetik tidak ditemukan  perbedaan  antara  domba    d Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan Muara Bulian.  Tidak adanya variasi ini mungkin  disebabkan  oleh  perkawinan individu yang berkerabat. Hal ini sejalan dengan  pendapat  Hardjosubroto  (1994) pada  sekelompok  ternak  yang  jumlah nya  terbatas  walaupun  perkawinan secara  acak  pada  kelompok  tersebut akan  terjadi  silang  dalam  (perkawinan berkerabat) yang mengakibatkan
peningkatan homozigositas.
Tabel 4 :  Variasi Elektroforesis Genotip dan Frekuensi Alel Posttransferin - 1(Ptf-
1) pada Plasma Darah  Domba Populasi (Tahun) N Genotip Frekuensi  Alel A AB B Ptf-1 A Ptf-1 B Kec. Pemayung (2011) 10 Exp 10 10 0 0 0 0 1,00 0,00 Kec. Muara Bulian (2011) 10 Exp 10 10 0 0 0 0 1,00 0,00 Total 20 Exp 20 20 0 0 0 0 1,00 0,00
Keterangan :    exp : Jumlah frekuensi harapan ( Hardy – Weinberg, 1908 )
Tabel 5 : Variasi Elektroforeis Genotip dan Frekuensi Alel         Posttransferin - 2(Ptf-2) pada Plasma Darah Domba Populasi (Tahun) N Genotip Frekuensi   Alel A AB B Ptf-2 A Ptf-2 B Kec. Pemayung (2011) 10 exp 10 10 0 0 0 0 1,00 0,00 Kec. Muara Bulian (2011) 10 exp 10 10 0 0 0 0 1,00 0,00 Total 20 exp 20 20 0 0 0 0 1,00 0,00
Keterangan  ;  exp ;  Jumlah frekuensi harapan ( Hardy – Weinberg, 1908 )
Posttransferin -2 (Ptf-2) Hasil elektroforesis lokus posttransferin-2  pada  plasma  darah domba  di  dua  lokasi  yaitu  Kecamatan
Pemayung dan Kecamatan Muara Bulian memnunjukkan  tidak  ada  variasi. Semuanya  menunjukkan  genotip  yang sama  yakni  homozigot  untuk  pasangan alel  Ptf-2 AA .  Hal  ini  berarti  tidak ditemukan    adanya  polimorfisme  pada lokus posttransferin-2 pada individu.
Dari Tabel  5  dapat dilihat  secara genetik  pada  lokus  ini  tidak  ditemukan perbedaan  antara  domba  di  Kecamatan Pemayung  dengan  di  Muara    Bulian  . Gambaran genotip  yang  homozigot  dan frekuensi  gen  1,00  diduga  disebabkan oleh  perkawinan  berkerabat  karena peternak sudah lama memelihara domba sedangkan  pejantan  yang  digunakan berasal  dari  populasi  itu  sendiri. Menurut  Suryo  (  1989  )  perkawinan
antara  individu  –  individu  berkerabat yang  berlansung  terus  menerus  akan melenyapkan  individu  heterozigot  dan menghasilkan individu homozigot.

## Perbedaan Genetik
Analisis    perbandingan  inilai rata-rata  hasil  elektroforesis  pada masing-masing lokus yang di uji dengan menggunakan  t-  student,  menunjukkan adanya  perbedaan  diantara  frekuensi alel  dari  kedua  lokasi  yang  dianalisis yaitu  pada  Kecamatan  Pemayung  dan Kecamatan  Muara Bulian. Perbedaan itu terutama terlihat pada lokus transferin . Gambaran  hasil  analisis  perbandingan rata – rata frekuensi gen dari lokus-lokus yang  diuji  plasma  darah  domba disajikan pada Tabel 6.
Tabel 6 : Perbandingan  Nilai Rata-rata Frekensi Gen  Plasma Darah Domba di Kecamatan Pemayung dan Kecamatan Muara Bulian No. Jenis Lokus Kec. Pemayung         -        Kec. Muara Bulian (  Uji   t  Student) 1. Albumin   (  Alb  ) A B 0,0000  ns 0,0000  ns 2. Post albumin  ( Pa ) A B 1,3192  ns 1,3192  ns 3. Transferin A B C D 10,2041 ** 2,8113 ** 1,8742 ns 10,2041 ** 4. Post transferi n  - 1 ( Ptf – 1 ) A 0,0000 ns 5. Post transferin  - 2  ( Ptf -  2 ) A 0,0000 ns ** = Berbeda nyata  ( P < 0,01 ) ;    ns =Tidak berbeda nyata Total 20 20 Keterangan :    *    =    Berbeda nyata ( P<0,05 ) **    =    Berbeda nyata ( P<0,01 ) Untuk  melihat  sejauh  mana perbedaan  frekuensi  genotip  hasil
observasi  pada  penelitiaan  ini  dengan frekuensi  genotip  harapan    menurut hukum  keseimbangan  genetic  dari Hardy  –  Weinberg  (1908)  dilakukan  uji
chi-square  (X 2 )  dan  hasilnya  dapat dilihat pada Tabel 7.
Tabel  7  : Frekuensi  Genotip dan Frekuensi Genotip Harapan Menurut (Hardy-
Weinberg, 1908) Plasma Darah Domba di Kabupaten Batanghari No Lokus Genotip Jml  yg diamati (O) Jml yg diharapkan (E) ( O -  E ) 2 X  =∑  ---------------- E 1. Albumin A AB B 4 16 0 7,2 9,6 3,2 8,8889 * Total 20 20 2. Post albumin A AB B 4 16 0 7,2 9,6 3,2 8.8889  * Total 20 20 3. Transferin AD B BC C 1 4 12 3 0,0125 5 9 4,05 79,4882  **
Tabel  8 .  Perhitungan Variabilitas Genetik Pada Domba  (Nilai Heterozigositas h, Rataan Heterozigositas H)
Lokus Heterozigositas Kec. Pemayung Kec. Muara Bulian Albumin  (Alb) Post albumin ( Pa ) Transferin   (TF) Post transferin – 1 (Ptf-1 ) Post transferin -2  ( Ptf-2 ) 0,48 0,42 0,57 0,00 0,00 0,48 0,50 0,455 0,00 0,00 Rataan Heterozigot ( H   ±    SE ) 0,294     ±     0,1224 0,287         ±      0,1173 t    =   0,00412  ns  (6) Keterangan  :  SE  = Standar Eror;   ns  = tidak berbeda nyata (6) = db
Dari  Tabel  7  didapatkan  bahwa adanya perbedaan yang nyata frekuensi genotip  pada  lokus  Albumin  ,  Post albumin,  Transferin, pada taraf 1 %. Jika dibandingkan dengan frekuensi harapan menurut  hukum  keseimbangan  genetik dari    Hardy  –  Weinberg  (1908).  Hal  ini berarti  untuk  mengidentifikasi  besarnya pengaruh  seleksi,  mutasi,  tingkat fertilitas  dan  sistim  perkawinan  yang dilakukan  dalam  keseluruhan  pada domba  di  Kabupaten  Batanghari,  kita dapat  menggunakan  frekuensi  genotip Albumin,  Post  albumin,  Transferin. Menurut  Yatim  (1986)  bahwa  apabila dalam  populasi  tidak  ada  mutasi, migrasi  dan  seleksi  maka  frekuensi  gen dan frekuensi genotip akan konstan dari generasi  kegenerasi  dan  keseimbangan akan terjadi dalam satu generasi.
Analisis Keragaman Genetik (Heterozigositas )
Berdasarkan  hasil  interpretasi fenotip  masing-masing  individu  yang dianalisis dapat diduga tingkat variabilitas genetik individu – individu domba  dalam  masing-masing populasi  dengan  menggunakan  angka- angka  heterozigos  itas  pada  masing- masing lokus yang diuji  (lihat Tabel 8). Dari  Tabel  8  dapat  dilihat  angka heterozigositas tertinggi pada Kecamatan  Pemayung    terdapat  pada lokus  Transferin  (Tf)  yakni  0,57 sedangkan terendah pada lokus Posttransferin – 1 (Ptf -1), Posttransferin -2  (Ptf-2)  dengan  angka  heterozigositas masing-masing  0,000. Sedangkan angka rata-rata  heterozigositas  (H)  0,294  atau 29,4% dari semua lokus yang dianalisis.
Pada  Kecamatan  Muara  Bulian angka  heterozigositas  tertinggi  terdapat lokus  Postalbumin  (Pa)  yakni  0,50 sedangkan terendah pada lokus Posttransferin -1 (Ptf-1) dan Posttransferin  -2  (Ptf-2)  yakni  0,000 dengan  angka  rata-rata  heterozigositas
(H)  adalah  0,287  atau  28,7%  dari  lokus
yang diuji. Rata-rata
angka heterozigositas  di  dua  lokasi  penelitian termasuk sedang. Hal ini sesuai dengan pendapat  Nei  (1987)  bahwa  rataan heterozigositas  untuk  hewan  vertebrata berkisar antara 0,1  - 0,4.
Walaupun rataan angka heterozigositas (H) populalsi di Kecamatan  Pemayung  lebih  besar  dari populasi  di  Kecamatan  Muara  Bulian secara statistik tidak berbeda nyata (Uji t student).  Hal  ini  berarti  tidak  terdapat perbedaan  genetic  yang  mendasar antara  populasi  domba  di  kedua  lokasi peneitian  tersebut.  Pada  sejumlah  besar dari lokus yang diuji untuk mengidentifikasi gen dari suatu populasi,  variasinya  sering  diukur  dari proporsi lokus yang polimorik dan rata- rata angka heterozigot setiap lokus (Nei, 1987).
Homozigositas  maksimum  pada individu-individu  domba  (100%)  di kedua lokasi penelitian yaitu pada lokus Posttransferin -1 (Ptf-1) dan Posttransferin -2 (Ptf-2) kemungkinan ini disebabkan
sumber bibit yang digunakan  berasal  dari  satu  populasi. Hal ini perlu diwaspadai karena dengan terusnya  terjadi  tekanan  silang  dalam akan mengakibatkan terjadinya implikasi  negative  pada  perkembangan populasi domba pada generasi berikutnya  di  Kabupaten  Batang  Hari. Menurut  Hardjo  Subroto  (1994)  proses silang dalam akan menurunkan produksi, angka reproduksi dan menaikkan  angka  mortalitas  pada domba,  setiap  kenaikan  10%  kofisien silang  dalam  akan  menurunkan  berat sapih  4%,  berat  umur  dewasa  7%  , produksi wool 8%.
Keanekaragaman  genetic  dapat diartikan  sebagai  alelik  (yaitu  jumlah alel-alel khas yang terdapat dalam suatu populasi  dan  heterozigositas  atau frekuensi alel). Pemeliharaan keanekaan alelik dan heterozigositas akan menambah  lebih  banyak  kesulitan
sebagian  populasi  menjadi  lebih  kecil, konsekuensi  hilang  keanekaragaman genetiknya dimanifestasikan oleh banyak  kesulitan,  baik  dari      (1) penyimpangan  genetic  secara  acak,  (2) peningkatan  derajat  inbreeding  dan  (3) peningkatan populasi
efektif.
Penyimpangan  gentik  secara  acak adalah  perubahan  secara  acak  dalam frekuensi  gen  ditimbulkan  oleh  sebab mutasi,  seleksi  alam  atau  migrasi.
Penyimpangan  merupakan  kelemahan utama dalam
menentukan keanekaragaman  genetik  dalam  suatu populasi dan dapat menghasilkan silang dalam,  perubahan  fenotip  secara  acak dan  mengurangi  variasi  genetik  (Lacy, 1987 dalam Haig dan Nardstrom, 1991).
Jika satwa-satwa terpisah kedalam  populasi  kecil,  penyimpangan akan  segera  memnyebabkan  individu- individu  dalam  setiap  populsi  menjadi homozigot  untuk  alel-alel  spesifik. Dengan  demikian  hal  ini  dapat menyebabkan  masalah  silang  dalam pada  popullasi  lokal.  Spesies  tersebut secara keseluruhan dapat menguntungkan,  jika  setiap  populasi mengandung alel-alel berbeda keanekaragaman alelik secara keseluruhan  tidak  berkurang.  Alel-alel ini dapat dijaga dalam populasi terpisah dan bercampur pada waktu selanjutnya.
Sebaliknya  jika  satwa  tidak  terpisah populasi tidak akan kehilangan variabilitas  genetiknya  (heterozigositas)
secepat  itu  dan  dapat  memiliki kesempatan  lebih  untuk  hidup  dalam jangka pendek.
Dalam  jangka  panjang  populasi besar  pasti  kehilangan  variabilitas  ini sebab  adanya  penyimpangan  kecuali individu  baru  dimasukkan  kedalam populasi  tersebut.  Strategi  ini  dapat diterapkan  pada  populasi  kecil  adalah memperbesar  populasi  tersebut  secepat mungkin  dan  kemudian  secara  teratur memasukkan  indiividu  baru  dari
populasi  lain  (Haig  dan  Nardstrom, 1991).
Untuk  meningkatkan  variabilitas genetic domba di Kecamatan Pemayung dan  Kecamatan  Muara  Bulian,  sebagai upaya  untuk  menghindari  implikasi negative  khususnya  yang  mengarah pada penurunan potensi genetik diperlukan  usaha  pengelolaan  genetik. Dalam hal ini untuk domba yang ada di Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan Muara  Bulian  perlu  dilakukan  seleksi dan  dengan  memasukkan  domba- domba  dari  daerah  lain.  Langkah selanjutnya  perlu  dilakukan  grading-up dengan  memasukkan  pejantan  unggul lainnya.  Program  peningkatan  mutu genetik  bisa  didasarkan  pada  seleksi dalam  ternak  lokal,  persilangan  antara sesama  bangsa  lokal  atau  antara  ternak lokal  dengan  ternak  impor,  bahkan persilangan  antara  bangsa  impor  yang berbeda  atau  memadukan  beberapa bangsa  baik  lokal  atau  impor  harus dipertimbangkan. (Devendra dan Burns, 1994).  Selanjutnya  Cunningharn  (1982) menyatakan  bahwa  perbaikan  mutu genetik  ternak  tidak  selalu  melalui kawin  silang  dengan  memasukkan darah  baru  tetapi  dapat  melalui  seleksi ternak  lokal  (asli)  di  masing-masing daerah.  Pemusnahan  ternak  asli  dapat terjadi melalui percampuran (persilangan)  secara  progresif  dengan darah  bangsa  ternak  impor  yang didatangkan dengan teknik IB.

## Kesamaan Genetik dan Jarak Genetik
Dari  analisis  lima  lokus  protein plasma darah domba secara elektroforesis  maka  dapat  dihitung kesamaan  genetik  (I)  dan  jarak  genetic (D) antara populasi domba di Kecamatan  Pemayung  dan  Kecamatan Muara Bulian. Dengan  menggunakan  rumus dari  Nei  (1987)  didapatkan  kesamaan genetik ( I ) dan jarak genetik ( D ) antara populasi domba di Kecamatan
Pemayung dan Kecamatan Muara Bulian berturut-turut adalah sebesar 0,9697 dan 0,134.  Hal  ini  berarti  antara  kedua populasi domba di dua lokasi penelitian ini  mempunyai  kesamaan  genetik  yang sangat  tinggi,    jadi  dalam  penampilan genetik  domba  di  dua  lokasi  penelitian ini hampir sama. Nei (1987) menyatakan bahwa semakin beragam lokus polimorfik yang diamati antara populasi maka  akan  memperluas  jarak  genetik, jadi  keeratan  hubungan  genetik  akan terjadi  bila  lokus-lokus  polimorfik  yang diamati  memberi  nilai  heterozigositas sama (homogen).

## Kesimpulan
Dari hasil dan pembahasan dapat disimpulkan :
1. Hasil analisis elektroforesis menunjukkan  adanya  lima  jenis protein darah yang bisa diidentifikasi  dari  plasma  darah domba  di  Kabupaten  Batanghari yaitu  Albumin  (Alb),  Postalbumin (Pa),  Tranferin  (Tf),  Posttransferin  -1 (Ptf-1) dan Posttransferin -2 (Ptf-2).
2. Ditemukan  adanya  polimorfisme genetic  pada  lokus    Albumin,
Postalbumin  dan  Transferin  di Kecamatan Pemayung dan Kecamatan Muara Bulian. 3. Hasil  analisis  lokus-lokus  yang  ada, menunjukkan lokus Albumin, Postalbumin        dapat  dijadikan sebagai  penciri  genetic  domba  di Kabupaten Batanghari.
4. Analisis  polimorfisme  menunjukkan rataan  angka  heterozigositas  pada domba di Kecamatan Pemayung dan Kecamatan  Muara  Bulian  masing- masing 0,294 dan 0,287.

## Saran
Dari  lima  lokus  yang  diuji menunjukkan  bahwa  perlu  dilanjutkan analisis  polimorfisme  untuk  lokus seperti Hb, esterase dan lain-lain dengan metode  elektroforesis  lain  seperti selolosa  asetat  dan  gel  pati  untuk mendapatkan  gambaran  karakteristik yang  lebih  lengkap,  juga  perlu dilanjutkan dengan analisis DNA

## Daftar Pustaka
Astuti,  M.1997.  Estimasi  jarak  genetik antar  populasi  kambing  Kacang, kambing  Peranakan  Etawah  dan kambing Lokal berdasarkan polimorfisme protein darah. Bulletin Peternakan 21 : 1 – 9. Devendra,  C.  dan  B.  Marca.  1994. Produksi Kambing Daerah Tropis.  Penerbit  ITB  Bandung dan Universitas Udayana. Erina,  S.  1998.  Karakteristik  Kambing Kacang di Sumatera Barat. Thesis Pasca sarjana Universitas Andalas Padang.
Gatenby,  R.M.  1995.  Sheep  Mac  Millan
Education  Ltd.  London  and
Basingstoke.
Haig,  S.M.  dan  L.H.  Nordstrom.  1991. Genetic  Management  of  Small Population  dalam  Challenges  in the  Conservation  of  Biological
Resources. A Practitioner’s
Guide.  Edt.  Decker,  D.J.,  M.E, Krasny,  G.R.  Goff,  C.R.  Smith, dan D.W. Gross. Westview Press. dan Fransisco.
Hardjosubroto, W. dan Astuti. J.M. 1993.
Buku  Pintar  Peternakan.  PT. Gramedia Widiasarana Indonesia. Jakarta. Hardjosubroto,  W.  1993.  Aplikasi Pemuliaan  Ternak  di  Lapangan.
Grasindo. Jakarta.
Maeda,  Y.,  K.W.  Washburn  and  H.L.
Marks.1980. Protein polymorphism in quail popullation  selected  for  large body.  Anim.  Blood.  Grps. Biochem. Genet.11 : 215 – 260. Martin,  D.W.  1983.  Plasma  Darah  dan Pembekuan  Biokimia  (  Review of  Biochemistry).  Edisi  19.  EGC. Penerbit Buku Kedokteran.
Martojo, H., I.K. Abdulgani, H. Najib, M.
Katsumata, T. Amano, S. Suzuki.
1981.  Morpholocigal  characters and blood protein gene constitution  of  Indonesian  Goats and  Philogeny  of  Indonesian Native  Livestock.  Part  II.  Micro Printing  Co.  Ltd.  Jinbocho,  3-13. Chiyoda-ku. Tokyo. Japan Martojo, H. 1994. Perbandingan efektifiitas  metode  persilangan konvensional  dengan  metode pembentukan  chimera  antara domba  Garut  dengan  domba lokal ekor tipis. Laporan Penelitian Hibah Bersaing Perguruan Tinggi. Fakultas Peternakan IPB Bogor. Masyud, H.B. 1992. Penampilan reproduksi  dan  karakteristik genetic  jalak  bali  (Leucopsar rotschildi)  hasil  penangkaran. Thesis Pascasarjana. IPB Bogor. Nei,.  1987.  Molecular  Evolutionary Genetics.  Columbia  University Press. New York.
Nicholas, F.M. 1987. Veterinary Genetics. Columbia  University  Press.  New York. Noor,  R.R.  1996.  Genetika  Ternak. Cetakan  ke  –  1.  Penebar Swadaya. Jakarta. Pirchner, F. 1983. Population Genetics in Animal  Breeding.  2 nd .  Ed.
Plenum  Press.  New York.
London. Rodwell,  V.N.  1983.  Protein  Biokimia
(Review  of  Biochemistry)  Edisi
19. ECG. Penerbit Buku Kedokteran.
Selander.  R.K.  1976.  Genetic  variation.
Natural  Population  in  Molecular
Evolution.  Sinnauer  Associate Inc. Sunderland.
Selvaraj,  O.S.,  T.K.  Mukherjee,  S.G.  Tan and  J.S.F.  Barker.  1991.  Genetic differences  among  Southeast Asian  native  goat  population based  biochemical  markers  in goat  production  in  the  Asian Humid  Tropic.  Edit  Saithanoo and B.W. Norton. Proceedings of an  international  seminar  held  in Hat  Yai,  Thailand,  28  –  31  May. hal : 108-111.
Suryo,.  1989.  Genetika.  Strata  I.  Gajah Mada University Press. Yogyakarta.
Thohari,  M.,  B.  Masyud,  S.S.  Mansjoer, C.  Sumantri,  E.K.H.  Muntasib dan  A.H.  Hikmat.  1991.  Studi polimorfismeprotein  darah  jarak bali  (Leucopsar  Rotschildi)  hasil penangkaran  dari  Indonesia, Amerika  dan  Inggris.  Media Konservasi  Sumber  Daya  Hutan. Fakultas Kehutanan IPB Bogor.
Tsunnoda,  K.,  K.  Doge.,  Y.    Yamamoto. 1993. Biochemical Polymorphism of Nepalese Native Sheep Breeds. Anim. Sci. Technol. (Jpn.) 64 (11) :
1061-1069, 1993. Yatim,  W.  1986.  Genetika.  Edisi  ke empat. Transito, Bandung