## Karakterisasi Simplisia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi Daun Pidada Merah ( Sonneratia caseolaris L)
[Characterization and Evaluation of Antioxidant Activity of Red Pidada Leaves ( Sonneratia caseolaris L)]

## Eka Siswanto Syamsul*, Supomo, Siti Jubaidah
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Samarinda Jl. A. Wahab Sjahranie No.226 Samarinda, Kalimantan Timur
*Corresponding author: eka8382@gmail.com
ABSTRACT. Research on red Pidada leaves ( Sonneratia caseolaris L.) which is a mangrove plant with antioxidant potential  has  been  carried  out.  This  study  aims  to  determine  the  simplicia  characterization  and  activity  of  red Pidada leaf extracts and fractions as antioxidants. The results of the simplicia characterization were: water-soluble extract content of 11%, ethanol-soluble extract content of 16%, water content of 9%, ash content of 8.17%, and acid insoluble ash content of 0.48%. The antioxidant activity test was carried out using the DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl) method. The antioxidant activity was determined by the IC 50 (Inhibition Concentration) value. The results showed that the ethanol extract had an IC 50 value of 24.22 ppm (very strong), n-hexane fraction 88.18 ppm (strong), ethyl acetate fraction 15.39 ppm (very strong), and ethanol fraction 38.41 ppm (very strong)
Keywords : Sonneratia caseolaris L ., antioxidants, DPPH, IC 50
ABSTRAK. Telah dilakukan penelitian daun pidada merah ( Sonneratia caseolaris L.) yang merupakan tanaman mangrove yang berpotensi antioksidan Tujuan penelitian untuk mengetahui karakterisasi simplisia dan aktivitas ekstrak dan fraksi daun pidada merah sebagai antioksidan. Hasil karakterisasi simplisia yaitu: kadar sari larut air 11%, kadar sari  larut  etanol 16%,  kadar  air  9%,  kadar  abu 8,17%,  dan  Kadar abu  tidak  larut  asam 0,48%.  Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH ( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ). Aktivitas antioksidan ditentukan nilai IC 50. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol memiliki nilai IC 50 24,22 ppm (sangat kuat), fraksi n- heksana 88,18 ppm (kuat), fraksi etil asetat 15,39 ppm (sangat kuat), dan fraksi etanol 38,41 ppm (sangat kuat)
Kata Kunci : Sonneratia caseolaris L., antioksidan, DPPH, IC 50
Riwayat artikel: Diterima 2 November 2020, Disetujui 26 November 2020 Cara sitasi: Syamsul, E S., Supomo., & Jubaidah, S. (2020). Karakterisasi Simplisia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi Daun Pidada Merah ( Sonneratia caseolaris L). KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 6(3): 184-190. DOI: https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i3.15319

## LATAR BELAKANG
Pidada  Merah  ( Sonneratia  caseolaris L.) adalah merupakan tanaman mangrove .
Masyarakat  banyak  menggunakan  rambai  laut sebagai obat tradisional khususnya di Kalimantan Selatan, buah dan daun rambai laut ini  sering  dijadikan  obat  serta  bahan  ramuan
bedak dingin dan penghilang bekas luka (Sadhu et  al .,  2006).  Selain  itu  bagian  buah,  kulit  kayu dan  daun  dari  spesies Sonneratia telah digunakan dalam obat tradisional untuk mengobati  sakit  asma,  obat  penurun  panas, bisul, hepatitis, keseleo, ambeien dan pendarahan (Nurmalasari et al. , 2016).
Tumbuhan  ini  dapat  dimanfaatkan  untuk bahan  makanan,  daunnya  yang  masih  muda dapat  diolah  menjadi  makanan  dan  campuran masakan,  dan  buahnya  yang  sudah  tua  dapat dimanfaatkan  sebagai  minuman,  dan  kayu  dari pohon  rambai  laut  dapat  dimanfaatkan  sebagai kayu  bakar.  Tumbuhan  pidada  yang  secara tradisional  digunakan  sebagai  ramuan  bedak dingin (Wijaya et al ., 2018). Penelitian yang telah dilakukan  oleh  (Suprianto  &  M,  2016)  bahwa tumbuhan  ini  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid,  glikosida,  saponin  dan  fenol.  Hal  ini sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Avenido  &  Serrano  Jr,  2012)  ekstrak  Pidada Merah memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat  sebesar  21,62  ppm  karena  memiliki metabolit sekunder  yang merupakan salah satu bahan  obat  dan  memiliki  struktur  molekul  serta memiliki  aktivitas  biologi  yang  beraneka  ragam. Hasil  isolasi  daun  Pidada  Merah  mengandung senyawa  asam  lemak,  sterol  hidrokarbon,  dan dua  flavonoid  yaitu  luteolin  dan  luteolin  7- O- β glukosida  yang  memiliki  daya  antioksidan  yang tinggi (Sadhu et al ., 2006; Sosio et al. , 2014).
Penelitian yang dilakukan oleh (Jubaidah et al. ,  2019)  diketahui  bahwa  fraksi  polar  daun Sonneratia  caseolaris L  memiliki  kadar  fenolik total  sebesar  213,49  ±  1,223  mg  GAE/g  yang artinya  dalam  setiap  gram  fraksi  polar  setara dengan 213,49 mg asam galat, sedangkan pada fraksi  nonpolar  daun  rambai  laut  diperoleh sebesar  55,79  ±  1,081  mg  GAE/g  yang  artinya dalam setiap gram fraksi nonpolar setara dengan 55,79 mg asam galat. Kadar fenolik total yang di hasilkan  lebih  besar  pada  fraksi  yang  polar. Senyawa fenolik yang terdapat didalam tumbuhan berfungsi melindungi jaringan tanaman terhadap kerusakan akibat radiasi sinar matahari. Senyawa fenolik  pada flavonoid punya potensi  kuat  untuk  antioksidan  karena  adanya
gugus kromofor yang mampu menangkap radikal bebas. Tujuannya untuk mengetahui karakterisasi  simplisia  dan  aktivitas  ekstrak  dan fraksi daun pidada merah sebagai antioksidan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  daun  Pidada  Merah  ( Sonneratia caseolaris L.)  yang  diperoleh  dari  daerah
Samboja Kabupaten Kutai Kartanegara Kalimantan Timur. Waktu panen diambil pada sore  hari  bertujuan  agar  proses  fotosintesis pada  tumbuhan  telah  sempurna.  Bahan lainnya  berupa  etanol  70%,  vitamin  C,  DPPH ( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ),  air  suling,  serbuk Mg,  Besi  (III)  Klorida,  amil  alkohol,  asam klorida  2  N,  pereaksi  Bouchardat,  pereaksi Dragendrof dan pereaksi Mayer.
Alat yang digunakan pada penelitian berupa seperangkat  alat  maserasi,  alat  gelas,  kertas saring, corong kaca, botol vial, kuvet, kaca arloji, sarung  tangan,  cawan  porselen,  timbangan analitik, blender, aluminium foil, ayakan mesh 60, batang pengaduk, mikropipet dan Spektrofotometri UV-Vis ( Shimadzu UV-1800 ).

## Prosedur Penelitian

## Determinasi tanaman
Determinasi  bertujuan  untuk  memastikan kebenaran  tumbuhan  yang  diteliti  dan  untuk menghindari  terjadinya  kesalahan  dalam pengambilan  bahan  penelitian  serta  proses dalam menentukan nama dan jenis tumbuhan secara  spesifik.  Determinasi  tumbuhan  yang dilakukan  di  Balai  Besar  Konservasi  Sumber Daya Alam Samboja Kalimantan Timur.

## Pembuatan simplisia
Daun Pidada Merah yang telah dikumpulkan lalu dipisahkan dari kotoran yang
melekat.  Dicuci  dengan  air  bersih  dan mengalir.  Dirajang  dan  dikeringkan  dengan cara  diangin-anginkan  di  tempat  yang  teduh, proses  pengeringan  dilakukan  kurang  lebih selama  1  minggu.  Simplisia  kering  ditimbang kemudiaan dihaluskan hingga menjadi serbuk dan  diayak  menggunakan  ayakan  mesh  60. Pengayakan dengan mesh 60 bertujuan untuk memperkecil  ukuran  serbuk  dan  memperluas permukaan serbuk
Karakterisasi daun pidada merah (Sonneratia caseolaris L.)
Meliputi  pemeriksaan  parameter  spesifik yaitu: Makroskopik. Mikroskopik, pemeriksaan kadar simplisia (kadar sari larut air dan etanol) dan  parameter  non  spesifik  yaitu  kadar  air, kadar abu dan Kadar abu tidak larut asam.

## Ekstraksi dan fraksinasi daun pidada merah (Sonneratia caseolaris L.)
Metode ekstraksi  yang digunakan adalah metode  maserasi,  metode  ini  merupakan metode  ekstraksi  yang  sederhana.  Metode maserasi dipilih
karena
memperkecil kemungkinan  terjadinya  kerusakan  pada senyawa  yang  terdapat  pada  sampel  akibat proses  pemanasan.  Pelarut  yang  digunakan dalam  proses  ekstraksi  adalah  etanol  70%. Etanol 70% semipolar sehingga menghasilkan jumlah bahan aktif yang optimal.
Ekstrak etanol difraksinasi secara bertingkat  dengan  metode  fraksinasi  cair-cair menggunakan  pelarut  n-heksana  dan  etil asetat  Ekstrak  etanol  dilarutkan  dengan aquades  kemudian  ditambahkan  pelarut  n- heksana dan dilakukan penggojogan/ pemisahan  menggunakan  prosedur  corong pisah.  Setelah  itu,  didiamkan  beberapa  saat hingga  terbentuk  dua  lapisan  yaitu  lapisan  n- heksana (lapisan atas) dan lapisan air (lapisan bawah). Selanjutnya fraksi n-heksana
dipisahkan  dan  ditampung  untuk  diuapkan pelarutnya,  sedangkan  fraksi  air  dimasukkan kembali kedalam corong pisah untuk dilanjutkan  pada  proses  fraksinasi  berikutnya. Untuk mendapatkan fraksi etil asetat dan fraksi etanol (sisa).

## Pengujian antioksidan
Ekstrak dan fraksi dari daun pidada merah dibuat larutan baku induk (stok) sebesar 1000 ppm, dari larutan stok dibuat larutan uji dengan 5  seri  konsentrasi.  Selanjutnya,  disiapkan larutan  DPPH  dengan  konsentrasi  40  ppm. Larutan  uji  dengan  berbagai  seri  konsentrasi sebanyak  2  mL  ditambahkan  dengan  2  mL larutan  DPPH  40  ppm  dalam  tabung  reaksi bertutup  lalu dihomogenkan dan didiamkan di tempat  gelap  pada  suhu  kamar  selama  30 menit. Kemudian, dilakukan pengukuran absorbansinya  pada  panjang  gelombang maksimum DPPH yaitu 522 nm menggunakan Spektrofotometer  UV-Visible  (Suprianto  &  M, 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Parameter Spesifik
Hasil  pemeriksaan  parameter  spesifik yaitu  pemeriksaan  makroskopik  tumbuhan daun pidada merah memiliki rasa pahit, bentuk daunnya  bulat  telur  atau  memanjang,  ujung daunnya membulat atau tumpul, tepi daunnya rata, susunan tulang daunnya menyirip, warna daunnya  hijau  tua,  dan  ukuran  daunnya panjang 8,5 cm, lebar 4 cm. Hasil pemeriksaan mikroskopik pada gambar 1. Berdasarkan hasil yang  diperoleh  diketahui  bahwa  daun  pidada merah  memiliki  fragmen  pengenal  seperti jaringan  epidermis  atas,  jaringan  epidermis bawah dengan stomatanya, berkas pembuluh, stomata.

## Pemeriksaan Mikroskopik
Pustaka Jaringan epidermis atas (perbesaran 10 x 40) Jaringan epidermis atas Jaringan epidermis bawah (perbesaran 10x40)
Jaringan epidermis bawah dengan stomata Berkas pembuluh (perbesaran 12,5x40)
Berkas pembuluh Stomata (perbesaran 10x40)
Stomata
Gambar 1. Hasil pemeriksaan mikroskopik
Berdasarkan  Tabel  1  penetapan  kadar sari larut air untuk mengetahui kadar senyawa kimia bersifat polar  yang terkandung di dalam simplisia, didapatkan hasil sebesar 11%.
Tabel  1. Hasil  kadar  serbuk  simplisia  daun pidada merah Uji Kadar (%) Kadar sari larut air 11 Kadar sari larut etanol 16
Kadar  sari  larut  etanol  dilakukan  untuk mengetahui kadar senyawa larut dalam etanol, baik  senyawa  polar  maupun  non  polar didapatkan    hasil  sebesar  16%.  Kandungan sari larut air lebih kecil daripada kadar sari larut etanol,  ini  berarti  senyawa  kimia  lebih  larut dalam  etanol    dibandingkan  larut  air. Parameter  spesifik  sudah  sesuai  dengan ketentuan  standar  yang  ditetapkan  oleh literatur dari panduan Kementerian Kesehatan RI (Kemenkes RI, 2020).

## Parameter Non Spesifik
Berdasarkan  tabel  2  penetapan  kadar  air bertujuan untuk mengetahui kandungan kadar air dalam simplisia. Hasil penetapan kadar air yang diperoleh pada simplisia memenuhi persyaratan yaitu  9%  karena  persyaratan  yang  ditetapkan yaitu  kurang  dari  10%.  Kadar  air  yang  tidak memenuhi persyaratan mengakibatkan pertumbuhan  mikroba,  karena  air  merupakan media  pertumbuhan  mikroorganisme  dan  juga sebagai reaksi enzimatis yang dapat menguraikan senyawa aktif.
Penetapan  kadar  abu  bertujuan  untuk mengetahui kandungan mineral dalam simplisia. Hasil yang diperoleh dari penetapan kadar  abu  simplisia  daun  pidada  merah  yaitu 8,17%. Penetapan kadar abu tidak larut asam bertujuan  untuk  mengetahui  kadar  senyawa yang tidak larut  asam, misalnya silika, logam- logam  berat  seperti  Pb  dan  Hg  (Depkes  RI, 1985).  Hasil  yang  diperoleh  dari  penetapan kadar  abu  tidak  larut  asam  simplisia  daun pidada  merah  yaitu  0,48%.  Nilai  Non  Spesifik ini  sudah  sesuai  dengan  ketentuan  standar yang  ditetapkan  oleh  literatur  dari  panduan Kementerian  Kesehatan  RI  (Kemenkes  RI, 2020).
Tabel 2. Hasil  kadar  serbuk  simplisia  daun pidada merah Uji Kadar (%) Kadar air 9 Kadar abu 8,17 Kadar abu tidak larut asam 0,48

## Aktivitas Antioksidan
Ekstrak  dan  fraksi  daun  pidada  merah postensi sebagai antioksidan aktivitas antioksidan  vitamin  C  termasuk  kategori antioksidan  sangat  kuat  karena  nilai  IC 50 kurang  dari  50  ppm  (Tabel  3).  Menurut Molyneux (2003) nilai IC 50 kurang dari 50 ppm termasuk  kategori  antioksidan  sangat  kuat. Aktivitas antioksidan vitamin C pada pengujian ini lebih tinggi, dimana vitamin C memiliki nilai IC 50 sebesar 7,22 ppm.
Menurut  penelitian  dari  Duke  (2006) menyatakan bahwa pada spesies soneratia ini telah  dilakukan  isolasi  ditemukan  adanya metabolit sekunder yaitu (-)-(R)-nyasol, (-)-(R)- 4’-O-metilnyasol  dan  asam  maslinat  ketiga senyawa  ini  menunjukkan  aktivitas  sitotoksik terhadap tikus glioma garis sel C6 dengan nilai IC 50 masing-masing  19,02,  20,21  dan  31,71 ppm. Hal ini menunjukkan potensi antioksidan yang tinggi.
Gambar 2. Perbandingan nilai IC 50 ekstrak dan fraksi daun pidada merah
2 4 .2 2 8 8 .1 8 1 5 .3 9 3 8 .4 1
E K S T R A K E T A N O L F R A K S I   N - H E K S A N A F R A K S I   E T I L
A S E T A T
F R A K S I E T A N O L IC 50 JENIS PELARUT
Tabel 3. Hasil pengujian antioksidan ekstrak dan fraksi daun pidada merah Jenis ppm IC Persamaan IC 50 Ekstrak Etanol 10 30,9987
y = 1,3732x+16,959 r 2 = 0,9953 24,06 20 43,0053 30 60,3477 40 70,5206 50 85,8995 Fraksi n-Heksana 25 14,3828 y = 0,5631x+ 0,3444 r 2 = 0,9902 88,18 50 30,7459 75 40,4044 100 54,4105 125 72,9366 Fraksi  Etil Asetat 5 19,7376 y = 3,0502x+3,0375 r 2 = 0,9943 15,39 10 32,1687 15 49,1271 20 61,689 25 81,2336 Fraksi Etanol 10 19,7376 y = 1,1151x+7,1583 r 2 = 0,9891 38,41 20 41,1687 30 55,2309 40 73,689 50 87,2336 Pembanding (Vitamin C) 5 34,5419 y = 6,2443x+4,935
r 2 = 0,9519 7,22 7,5 48,7404 10 71,6412 12,5 90 15 91,9656
Dari  ke  empat  sampel  uji,  fraksi  etil  asetat memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  paling  baik jika dibandingkan dengan ekstrak etanol, fraksi n- heksana,  dan fraksi etanol  karena memiliki  nilai IC 50 (konsentrasi  penghambatan  50  %  radikal) terkecil  yaitu  15,39  ppm  (Gambar  2). Menurut penggunaan obat tradisional tumbuhan Perepat Merah,  diketahui  memiliki  kandungan  senyawa bioaktif seperti flavonoid, steroid, fenol hidrokuinon, tanin dan dua flavonoid yaitu luteolin dan luteolin 7- O- β glukosida (Sadhu et al ., 2006).
Menurut  penelitian  Yushar (2011)  pada spesies Sonneratia alba mengandung tanin, steroid, fenol, dan saponin.

## KESIMPULAN
Hasil  karakterisasi  simplisia  yaitu:  kadar sari larut air 11%, kadar sari larut etanol 16%, kadar air 9%, kadar abu 8,17%, dan Kadar abu tidak  larut  asam  0,48%.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  dan  fraksi  daun pidada  merah  memiliki  aktivitas  antioksidan, yaitu  ekstrak  etanol  memiliki  nilai  IC 50 24,22 ppm (sangat kuat), fraksi n-heksana 88,18 ppm (kuat),  fraksi  etil  asetat  15,39  ppm  (sangat kuat),  dan  fraksi  etanol  38,41  ppm  (sangat kuat)

## UCAPAN TERIMAKASIH
Tim  Peneliti  mengucapkan  terimakasih kepada  Direktorat  Riset  dan  penagbdian masyarakat  Kementrian  Riset  dan  Teknologi Badan  Riset  dan  Inovasi  nasional  atas pendanaan  pada  penelitian  ini  pada  Skim Penelitian  Terapan  dengan  nomer  kontrak SPPK: 191/SP2H/AMD/LT/DRPM/2019 Tanggal 12 November 2019.

## DAFTAR PUSTAKA
Avenido,  P.  edro,  &  Serrano  Jr,  A.  (2012). Effects of the apple mangrove ( Sonneratia caseolari s)  on  growth,  nutrient  utilization and  digestive  enzyme  activities  of  the black  tiger  shrimp  Penaeus  monodon postlarvae. European
Journal
of
Experimental Biology , 2 : 1603 –1608.
Depkes RI. (1985). Cara Pembuatan Simplisia .
Departemen  Kesehatan  RI,  Jakarta,  hal. 2-15.
Duke,  N.  (2006). Australias  Mangroves  The Autoritative Guide to Australias Mangrove Plants . University of Queensland, Brisbane, hal. 200.
Jubaidah,  S.,  Sundu,  R.,  &  Sabriningsih,  N. (2019).  Penetapan  Kadar  Fenolik  Total Fraksi  Polr  Dan  Nonpolar  Daun  Rambai Laut  ( Sonneratia  caseolaris L.)  Dengan Metode  Spektrofotometri  UV-Vis. Jurnal Riset  Kefarmasian  Indonesia , 1 (2):  140 – 147. https://doi.org/10.33759/jrki.v1i2.23
Kemenkes  RI.  (2020). Farmakope  Herbal
Indonesia Edisi VI . Kementerian Republik
Indonesia, Jakarta.
Molyneux,  P.  (2003).  The  use  of  the  stable radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating
antioxidant
activity.
Songklanakarin  J.  Sci.  Technol. 26  (2):
211-219.
Nurmalasari,  F.,  Ersam,  T.,  &  Fatmawati,  S.
(2016). Isolasi Senyawa Antioksidan Dari Kulit  Batang  Sonneratia  Ovata  Backer.
Jurnal  Sains  dan  Seni  ITS , 5 (2). https://doi.org/10.12962/j23373520.v5i2.1 9484
Sadhu,  S.  K.,  Ahmed,  F.,  Ohtsuki,  T.,  & Ishibashi,  M.  (2006).  Flavonoids  from
Sonneratia  caseolaris. Journal  of  Natural Medicines , 60 (3): 264 –265.
https://doi.org/10.1007/s11418-006-0029- 3
Sosio,  Yudasakti,  P.,  Rahmadhani,  T.,  & Nainggolan, M. (2014). Mangroves Siak & Kepulauan Meranti. Energi Mega Persada, Jakarta, hal. 21-23.
Suprianto,  H.,  &  M,  M.  A.  (2016).  Aktivitas
Ekstrak  Dan  Fraksi  Daun  Pidada  Merah ( Sonneratia caseolaris L.) Sebagai Antioksidan. PROSIDING SEMINAR KIMIA 2013, hal. 164-169.
http://jurnal.kimia.fmipa.unmul.ac.id/index .php/prosiding/article/view/116
Wijaya,  H.,  Novitasari,  N.,  &  Jubaidah,  S.
(2018).  Perbandingan  Metode  Ekstraksi Terhadap  Rendemen Ekstrak Daun
Rambai  Laut  (Sonneratia  caseolaris  L. Engl). Jurnal Ilmiah Manuntung , 4 (1): 79 –
83.
Yushar,  A.  D.  (2011). Ekstraksi  dan  Uji Fitokimia  Sonneratia  alba .  Universitas Padjajaran,  Bandung.  (diunduh  pada https://www.academia.edu/7344560/EKS TRAKSI_DAN_UJI_FITOKIMIA_Sonnera tia_alba?auto=download).