This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
Evaluasi  Aktivitas  Sitotoksik  Ekstrak  Paku  Tanduk  Rusa  [ Platycerium coronarium (J.Koenig  ex  O.F.Müll.)]  Desv.  Terhadap  Sel  Kanker  Payudara MCF-7
Evaluation  of  Cytotoxic  Activity  of  Paku  Tanduk  Rusa  [Platycerium  coronarium (J.Koenig ex O.F.Müll.)] Desv. Extract against Breast Cancer Cell Line MCF-7
Pinus Jumaryatno * , Kristy Tri Wardhani, Annisa Fitria Jurusan Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Indonesia Corresponding author: Pinus Jumaryatno Email: pinus.jumaryatno@uii.ac.id
Submitted: 12-06-2023 Revised: 18-10-2023 Accepted: 18-10-2023

## ABSTRAK
Platycerium coronarium (J.Koenig ex O.F.Müll.) Desv. atau dikenal dengan Paku Tanduk Rusa merupakan tanaman yang secara tradisional biasa digunakan untuk mengobati penyakit kanker di Sumatera Utara. Namun, kemampuannya dalam melawan kanker payudara masih belum diketahui. Oleh karena itu,  penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi sitotoksisitas ekstrak P. coronarium terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7.  Selain  itu,  skrining  fitokimia  terhadap  ekstrak  aktif  juga dilakukan  untuk  mengidentifikasi  golongan  senyawa  yang  terkandung  didalamnya.  Evaluasi sitotoksisitas dilakukan terhadap akar serabut, spora, daun fertil dan daun steril P. coronarium , dan ekstraknya  diperoleh  dengan  cara  maserasi  yang  dibantu  gelombang  gelombang  ultrasonik menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Sitotoksisitas  masing-masing  ekstrak  terhadap  sel  kanker payudara MCF-7 ditentukan dengan menggunakan MTT- assay . Hasil penelitian menunjukkan bahwa hanya ekstrak akar serabut yang menunjukkan aktivitas sitotoksik dengan nilai IC 50 sebesar 427,76 ppm,  sedangkan  ekstrak  lainnya  tidak  aktif.  Selanjutnya  senyawa  alkaloid,  flavonoid, triterpenoid/steroid, saponin dan fenolik  teridentifikasi pada skrining fitokimia terhadap ekstrak akar  serabut.  Berdasarkan  penelitian  ini,  ekstrak  akar  serabut P.  coronarium memiliki  aktivitas sitotoksik yang lemah terhadap sel kanker payudara MCF-7 dan penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mencari metabolit sekunder bioaktif yang bertanggung jawab atas aktivitas sitotoksik.
Kata kunci: kanker payudara; MCF-7; MTT- assay ; Platycerium coronarium; sitotoksik
ABSTRACT Platycerium coronarium (J.Koenig ex O.F.Müll.) Desv. or known as Paku Tanduk Rusa is a plant commonly used traditionally to treat cancer in North Sumatera. However, its capability against breast cancer remains unknown. Therefore, this study aimed to evaluate the cytotoxicity of P. coronarium extract  against  breast  cancer  cell  line  MCF-7.  In  addition,  the  phytochemical  profile  of  the  active extract was also screened. The cytotoxicity evaluation was conducted to the fibrous roots, spores, fertile  leaves  and  sterile  leaves  of P.  coronarium ,  and  the  extracts  of  which  were  obtained  by ultrasound-assisted maceration using ethanol 70%. Their cytotoxicity against MCF-7 cell line was determined  using  MTT  assay.  The  results  showed  that  only  the  fibrous  roots  extract  exhibited cytotoxic activity with an IC 50 value of 427.76 ppm, while other extracts were inactive. Furthermore alkaloids, flavonoids, triterpenoids/steroid, saponins and phenolic compounds were identified on the phytochemical screening of fibrous roots extract. Based on this study, the fibrous root extract of P. coronarium has weak cytotoxic activity against MCF-7 cell line and warrants further investigation for the search of the bioactive secondary metabolites that responsible for the cytotoxic activity.
Keywords: breast cancer; MCF-7; MTT-assay; Platycerium coronarium; cytotoxic

## PENDAHULUAN
Platycerium coronarium atau Tanduk rusa merupakan salah satu tanaman paku dari keluarga Polypodiaceae  yang  banyak  tersebar  di  Asia  Tenggara  termasuk  di  Indonesia  dan  sering dimanfaatkan  sebagai  tanaman  hias  serta  memiliki  nilai  jual  yang  tinggi  (Aspiras,  2010).    Bagian tunas  paku P.  coronarium yang  telah  dicampur  dengan  benzoin  dan  air  hangat  dapat  digunakan
sebagai  obat  infeksi  di  Thailand  (Kitirattrakarn  and  Anantachoke,  2005),  sedangkan  daun P. coronarium dimanfaatkan  untuk  mengobati  demam,  gondok,  radang  rahim  (Mursito  and Prihmantoro, 2011; Thomas, 1989) mengatasi patah tulang dan mengobati kanker di Sumatera Utara (Silalahi et al., 2015).
Penelitian  yang  dilakukan  terhadap  tanaman  paku  dari  keluarga  Polypodiaceae  seperti Platycerium bifucartum dan Platycerium angolense menunjukkan adanya aktivitas antioksidan (Agbo et  al.,  2014;  Obafemi  et  al.,  2016),  sedangkan Pyrrosia  piloselloides dilaporkan  memiliki  aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7 (Wulandari et al., 2013). Hampir semua spesies dari keluarga  Polypodiaceae  mengandung phytoecdysteroids ,  suatu  senyawa  golongan  terpenoid  yang memiliki  aktivitas  dilaporkan  memiliki  aktivitas  sitotoksik  terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7 (Atta-ur-Rahman, 2008; Mamadalieva et al., 2013, Mamadalieva et al., 2014).
Penelitian mengenai paku tanduk rusa P. coronarium telah banyak dilakukan, namun masih terbatas dalam bidang agrokultural (Aspiras, 2010). Sejauh ini belum banyak penelitian ilmiah yang melaporkan aktivitas biologi dari paku tanduk rusa P. coronarium .   Dekoksi daun fertil P. coronarium dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan  IC 50 sebesar  507  μg /mL  dan  kandungan  total fenolik  pada  ekstrak  ini  sebesar  270,6  mg  GAE/g.  Kandungan  total  fenolik  berhubungan  dengan potensi suatu ekstrak sebagai antioksidan (Iwansyah et al., 2015). Senyawa yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan dapat mempengaruhi perkembangan sel kanker misalnya dalam menghambat pertumbuhan sel, memacu apoptosis sel, atau dalam penangkapan radikal bebas, mencegah mutasi DNA sehingga mencegah pembentukan sel kanker (Kunnumakkara, 2014). Meskipun secara empiris paku tanduk rusa P. coronarium digunakan sebagai obat tradisional untuk kanker, namun belum ada data ilmiah mengenai aktivitas P. coronarium terhadap sel kanker payudara MCF-7. Oleh karena itu, pada penelitian ini dilakukan pengkajian aktivitas sitotoksik ekstrak etanol serabut akar, spora, daun fertil  dan  daun  steril  paku  tanduk  rusa P.  coronarium terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7  dan identifikasi golongan senyawa yang terdapat pada ekstrak tersebut.

## METODE
Bahan
Tanaman  yang  digunakan  adalah  paku  tanduk  rusa P.  coronarium yang  telah  memiliki morfologi tanaman paku  lengkap, yaitu serabut  akar, daun steril, daun fertil, dan spora.Tanaman dikumpulkan  selama  bulan  Desember  2017-Januari  2018  dari  daerah  Malang  Jawa  Timur  dan determinati  tanaman  telah  dilakukan  di  Laboratorium  Sistematika  Tumbuhan  Fakultas  Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
Bahan lain yang  digunakan  adalah  etanol 70%,  DMSO,  sel kanker payudara MCF-7 dan sel normal  Vero  yang  diperoleh  dari  stok  Laboratorium  Parasitologi  Fakultas  Kedokteran  UGM,  PBS (phosphate-buffer  saline),  tripsin  1,25%,  media  kultur  DMEM,  media  kultur  M199,  antifungi (fungizon/amphotericin B), antibiotik (penicillin-streptomycin), FBS (fetal bovine serum), MTT [3- (4,5-dimetilthiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium  bromida],  reagen  SDS  (sodium  dodecyl  sulphate) 10%, aqua destilata, logam magnesium (Mg), logam seng (Zn), reagen Dragendorff, reagen Mayer, reagen  Wagner,  reagen  Liebermann-Burchard,  HCl  pekat,  H 2 SO 4 pekat,  kloroform,  FeCl 3 ,  NaOH, petroleum eter, asam asetat glasial.

## Alat
Alat-alat  gelas  steril,  inkubator  CO 2 ,  laminar  air  flow  cabinet  (LAF),  mikroskop  inverted, neraca  analitik,  mikropipet,  microplate  96  sumuran,  microplate  reader,  tabung  konikal, haemocytometer, bath sonicator, alat penyerbuk (grinder), rotary evaporator, cabinet dryer.

## Jalannya Penelitian
Ekstraksi Spora, daun steril, daun fertil, dan serabut akar dipisahkan, dibersihkan, dipotong-potong, dan dikeringkan  dalam cabinet  dryer pada  suhu  50  °C  selama  kurang  lebih  10  jam  hingga  kering, kemudian diserbuk dengan menggunakan alat penyerbuk ( grinder ) sehingga diperoleh serbuk halus. Sebanyak masing-masing 50 gram serbuk simplisia serabut akar, spora, daun fertil, dan daun steril  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  bantuan  sonikasi  ( ultrasound-assisted
maceration ) selama 30 menit. Pelarut yang digunakan adalah etanol 70% dengan perbandingan 1:10. Proses ekstraksi diulang 3 kali hingga larutan bening. Ampas dengan sari yang diperoleh dipisahkan dengan cara penyaringan. Pelarut pada ekstrak diuapkan dengan rotary evaporator menggunakan suhu 50 °C, rotasi labu 30 rpm, dan tekanan vakum 175 hingga 75 mbar, sehingga diperoleh empat ekstrak kental yaitu ekstrak serabut akar, ekstrak spora, ekstrak daun fertil, dan ekstrak daun steril.
Uji Sitotoksitas
Sel  MCF-7  dikultur  pada  medium  komplet  yang  terdiri  atas  RPMI  (Roswell  Park  Memorial Institute) 1640 ditambah dengan 10% Fetal Bovine Serum (FBS), 1% penicillin-streptomycin dan 0.5% fungizone (Gibco Amphotericin B). Sel diinkubasi pada suhu 37 °C di dalam inkubator 5% CO 2 . Uji  aktivitas  sitotoksik  ekstrak  etanol  serabut  akar,  spora,  daun  fertil  dan  daun  steril P. coronarium terhadap sel MCF-7 dan sel Vero dilakukan menggunakan metode MTT assay . Sel dalam medium  komplet  dengan  kepadatan  10.000-50.000  sel/ml  diambil  sebanyak  100  µL,  kemudian dimasukkan pada microplate (96 sumuran). Mikroplate diinkubasi selama 24 jam pada inkubator CO 2 dengan suhu 37 °C. Microplate yang telah diinkubasi dan dibuang medium kompletnya ditambah 100 µL ekstrak-ekstrak yang diujikan (konsentrasi 2000, 1000, 500, 250, 125 dan 62,5 µg/ml) yang telah dilarutkan terlebih dahulu dalam dimetilsulfoksida. Selanjutnya microplate tersebut diinkubasi kembali  selama  24  jam  pada  inkubator  CO 2 dengan  suhu  37  °C.  Setelah  itu  ditambahkan  100  µL larutan MTT 0,5% pada masing-masing sumuran yang telah diberi perlakuan dan diinkubasi selama 3-4 jam pada suhu 37 °C di dalam inkubator CO 2 . Setelah 3- 4 jam, 100 μL SDS stopper (SDS 10% dalam 0,01 N HCl) ditambahkan ke dalam masing-masing sumuran dan diinkubasi kembali selama 24 jam pada suhu kamar terhindar dari cahaya, dengan cara membungkus microplate menggunakan aluminium  foil.  Pembacaan  hasil  dilakukan  menggunakan microplate  reader pada  panjang gelombang  595  nm.    Uji  aktivitas  sitotoksik  terhadap  sel  MCF-7  dan  sel  Vero  dilakukan  secara triplicate (n=3). Hasil absorbansi yang diperoleh digunakan untuk menghitung persentase kematian sel dengan menggunakan persamaan sebagai berikut:
% kematian sel = 100% − [( Abs sampel uji − Abs kontrol media Abs kontrol sel − Abs kontrol media ) × 100%]
Uji Kandungan Golongan Senyawa
Skrining  fitokimia  untuk  mengidentifikasi  kehadiran  senyawa  golongan  alkaloid,  fenolik, flavonoid, glikosida, tanin, steroid/triterpenoid, dan saponin pada ekstrak etanol serabut akar, spora, daun fertil, dan daun steril paku tanduk rusa P. coronarium dilakukan menggunakan metode standar (Sarker et al., 2006).
Analisis Hasil
Analisis  kualitatif  terhadap  skrining  fitokimia  dilakukan  dengan  pengamatan  visual terbentuknya  endapan  atau  perubahan  warna,  untuk  mendeteksi  ada  atau  tidaknya  golongan senyawa yang diuji.
Analisis  kuantitatif  terhadap  uji  sitotoksik  dilakukan  dengan  menggunakan  perhitungan matematis dan regresi linier. Berdasarkan data hasil perhitungan persen kematian sel, dibuat kurva baku yang menghubungkan antara konsentrasi ekstrak pada sumbu X dan nilai persentase kematian sel  pada  sumbu  Y.  Konsentrasi  yang  menyatakan  50%  kematian  sel  (IC 50 )  dihitung  dengan memasukkan nilai 50 sebagai variabel Y. Semakin kecil nilai IC 50 yang diperoleh, maka semakin tinggi aktivitas antikanker.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi
Pada penelitian ini, bagian tanaman yang digunakan adalah serabut akar, spora, daun fertil, dan daun steril paku tanduk rusa P. coronarium . Hasil ekstraksi menggunakan metode maserasi yang dibantu dengan gelombang ultrasonik dan pelarut etanol 70% berupa ekstrak kental dengan jumlah rendemen seperti yang tersaji pada tabel I.
Aktivitas Sitotoksik
Potensi aktivitas sitotoksik ekstrak etanol serabut akar, spora, daun fertil, dan daun steril paku tanduk  rusa P.  coronarium dapat  dilihat  dari  nilai  IC 50 ,  yaitu  konsentrasi  ekstrak  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  50%  populasi  sel.  Hasil  uji  aktivitas  sitotoksik  ekstrak  etanol  paku tanduk rusa P. coronarium menunjukkan bahwa ekstrak serabut akar memiliki aktivitas sitotoksik paling baik dibandingkan dengan ekstrak spora, daun fertil, dan daun steril, dengan nilai IC 50 sebesar 427,76 ppm. Ketiga ekstrak lainnya yaitu ekstrak spora, ekstrak daun fertil, dan ekstrak daun steril tidak menunjukkan aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7 dengan nilai IC 50 lebih dari 1000 ppm (Tabel II). Ekstrak dikatakan memiliki aktivitas sitotoksik kuat apabila memiliki nilai IC 50 kurang  dari  50  ppm,  sitotoksik  sedang  bila  memiliki  nilai  IC 50 diantara  50  hingga  200  ppm, sitotoksisitas  lemah  bila  memiliki  nilai  IC 50 diantara  200  hingga  1000  ppm,  serta  tidak  memiliki aktivitas sitotoksik bila memiliki IC 50 lebih dari 1000 ppm (Kuete, 2017).
Syarat suatu bahan dapat digunakan sebagai obat untuk terapi kanker adalah selektivitasnya terhadap sel normal. Pada penelitian ini, uji aktivitas sitotoksik juga dilakukan terhadap sel normal Vero dengan menggunakan seri kadar ekstrak yang sama dengan yang digunakan pada sel MCF-7. Hasil  pengujian  terhadap  sel  Vero  menunjukkan  bahwa  hanya  ekstrak  serabut  akar  memiliki
Tabel I. Rendemen ekstrak P. coronarium Simplisia Berat serbuk untuk ekstraksi Berat ekstrak Rendemen ekstrak Serabut akar 50 g 0,5927 g 1,19 % Spora 50 g 3,2256 g 6,45 % Daun fertile 50 g 16,6035 g 33,21 % Daun steril 50 g 1,198 g 2,4 % Tabel II. Hasil Uji Aktivitas Sitotoksik Sampel Kadar (ppm) %Kematian sel MCF-7 IC 50 (ppm) terhadap sel MCF-7 %Kematian sel Vero IC 50 (ppm) terhadap sel Vero SI ( Selectivity Index ) Ekstrak 1000 89,178 427,76 84,867 488,978 1,143 serabut akar 500 81,363 67,068 250 39,158 38,005 125 22,084 16,423 62,5 0 0 Ekstrak 2000 41,563 2775,59 42,734 2605,142 0,939 Spora 1000 0 5,245 500 0 0 250 0 0 125 0 0 62,5 0 0 Ekstrak 2000 13,908 6811,94 0 Not N/A daun fertil 1000 6,212 0 Available 500 0 0 250 0 0 125 0 0 62,5 0 0 Ekstrak 2000 65,972 1523,28 60,619 1662,005 1,091 daun steril 1000 33,868 34,480 500 14,629 0 250 0 0 125 0 0 62,5 0 0
aktivitas sitotoksik lemah terhadap sel vero dengan nilai IC 50 sebesar 488,98 ppm, sedangkan ketiga ekstrak lainnya tidak memiliki aktivitas terhadap sel normal Vero (Tabel 2). Hal ini menunjukkan tidak adanya variasi aktivitas ekstrak etanol paku tanduk rusa P. coronarium terhadap sel kanker payudara MCF-7 dan terhadap sel normal Vero. Ekstrak etanol serabut  akar paku  tanduk rusa P. coronarium memiliki  aktivitas  sitotoksik  lemah  terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7  dan  juga terhadap sel normal Vero. Ekstrak spora, daun fertil, dan daun steril paku tanduk rusa P. coronarium tidak  menunjukkan  aktivitas  sitotoksik  terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7  dan  tidak  bersifat toksik terhadap sel normal Vero.
Selektivitas  aktivitas  suatu  bahan,  dapat  dilihat  dari  nilai  indeks  selektivitasnya.  Indeks selektivitas  (selectivity  index/SI)  aktivitas  suatu  ekstrak  dihitung  dengan  merasiokan  nilai  IC 50 ekstrak terhadap sel normal Vero dengan nilai IC 50 ekstrak terhadap sel kanker payudara MCF-7. Pada pengujian sitotoksik, suatu bahan dikatakan selektif apabila memiliki indeks selektivitas lebih dari  10  (Kuete,  2017;  Peña-Morán  et  al.,  2016).  Pada  penelitian  kali  ini,  nilai  indeks  selektivitas ekstrak etanol serabut akar, spora, daun fertil, dan daun steril paku tanduk rusa P. coronarium adalah kurang dari 10, menunjukkan keempat ekstrak tersebut tidak selektif terhadap sel kanker (Tabel 2). Skrining Fitokimia
Aktivitas  farmakologis  suatu  ekstrak  berkaitan  dengan  kandungan  senyawa  dalam  ekstrak tersebut. Suatu ekstrak mengandung berbagai golongan senyawa, yang memiliki aktivitas biologis berbeda-beda. Skrining fitokimia pada ekstrak merupakan langkah awal proses isolasi senyawa yang memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai obat. Golongan senyawa yang umum terdapat pada paku-pakuan adalah alkaloid, fenolik, tanin, flavonoid, terpenoid, steroid, dan saponin (de Winter and Amoroso, 2003). Pada penelitian ini, senyawa yang terdapat pada ekstrak etanol serabut akar, spora,  daun  fertil,  dan  daun  steril  paku  tanduk  rusa P.  coronarium diidentifikasi  menggunakan beberapa  pereaksi  yang  sesuai  untuk  golongan  alkaloid,  flavonoid,  fenolik,  glikosida,  saponin, triterpenoid,  steroid,  dan  tanin.  Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  paku  tanduk  rusa P. coronarium disajikan pada Tabel III.
Aktivitas  sitotoksik  berkaitan  dengan  kandungan  senyawa  aktif  yang  terdapat  pada  suatu ekstrak. Perbedaan senyawa yang terkandung pada masing-masing bagian tanaman paku, serta jenis senyawa  yang  dapat  terekstrak  dengan  pelarut  tertentu  menunjukkan  keragaman  senyawa  yang terdapat  pada  tanaman  paku-pakuan/Pteridophyta  (Baltrushes  and  Harris,  2006).  Aktivitas sitotoksik  tanaman  paku  spesies Selaginella dari  keluarga Selaginellaceae berhubungan  dengan kandungan senyawa biflavonoid (Silva et al., 1995), sedangkan kandungan senyawa flavonoid pada paku Pityrogramma calomelanos dari keluarga Adiantaceae berkaitan dengan aktivitas sitotoksiknya (Sukumaran  and  Kuttan,  1991).  Pada  paku Pteris  semipinnata dan Pteris  multifida dari  keluarga Pteridaceae, senyawa yang memiliki aktivitas sitotoksik adalah golongan diterpen (Li et al., 1998). Kandungan  triterpenoid  pada  tanaman Premna  serratifolia Linn.  dari  keluarga Lamiaceae menunjukkan aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7 (Biradi and Hullatti, 2015). Pada penelitian ini, kandungan golongan senyawa pada ekstrak etanol paku tanduk rusa P. coronarium cukup  beragam,  namun  tidak  menunjukkan  aktivitas  sitotoksik  yang  cukup  baik terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7.  Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh  beberapa  hal  diantaranya, senyawa-senyawa  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol  paku  tanduk  rusa P.  coronarium saling berinteraksi  sehingga  melemahkan  aktivitas  sitotoksiknya  terhadap  sel  kanker  payudara  MCF-7, atau  senyawa-senyawa  yang  terdapat  pada  ekstrak  tersebut  memang  tidak  memiliki  aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7.
Hasil pada penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol serabut akar paku tanduk rusa P.  coronarium memiliki  aktivitas  sitotoksik  yang  lebih  kuat  dibandingkan  dengan  ekstrak  bagian tanaman  yang  lain.  Ekstrak  etanol  serabut  akar  paku  tanduk  rusa P.  coronarium mengandung senyawa dengan golongan yang sama dengan daun fertil, yaitu alkaloid, fenolik, flavonoid, glikosida, tanin, saponin, triterpenoid, dan steroid. Meskipun mengandung golongan yang sama, namun pada bagian tanaman yang berbeda memiliki jenis senyawa yang bervariasi, dan menunjukkan perbedaan aktivitas. Penelitian lain menunjukkan bahwa ekstrak akar tanaman paku Blechnum orientale Linn. dari keluarga Blechnaceae dengan konsentrasi 100 ppm menghasilkan aktivitas sitotoksik yang lebih kuat terhadap sel kanker payudara MCF-7 dibandingkan dengan ekstrak daun dan ekstrak batang dari tanaman yang sama (Kumar et al., 2015).
Hasil  yang  sama  juga  ditunjukkan  oleh  perbedaan  aktivitas  golongan  senyawa  tanin  yang mana pada bagian akar tanaman paku berfungsi untuk melindungi tanaman dari serangan jamur atau bakteri,  sedangkan  pada  bagian  daun  berfungsi  untuk  metabolisme  pertumbuhan  jaringan tumbuhan (de Winter and Amoroso, 2003). Senyawa saponin yang diisolasi dari fraksi etil asetat kulit batang Pseudocedrela kotschyi dari keluarga Meliaceae menunjukkan aktivitas sitotoksik yang lebih kuat  dengan  IC 50 sebesar  1,05  ppm  dibandingkan  dengan  senyawa  saponin  yang  diisolasi  dari ekstrak metanol akar dari tanaman yang sama dengan nilai IC 50 sebesar 86,8 ppm (Elufioye et al., 2017). Hal ini menjadi dasar yang menjelaskan hasil ditemukannya perbedaan aktivitas sitotoksik setiap bagian tanaman paku tanduk rusa P. coronarium terhadap sel kanker payudara MCF-7pada penelitian ini.
Beberapa tanaman paku yang telah diteliti dan memiliki aktivitas kuat terhadap sel kanker payudara MCF-7 diantaranya adalah ekstrak metanol daun paku Marsilea quadrifolia dari keluarga Marsileaceae ,  dengan  IC 50 39,06  ppm  (Uma  and  Pravin,  2013),  ekstrak  tanaman  paku  sisik  naga Pyrrosia piloselloides dari keluarga Polypodiaceae , dengan IC 50 39,54 µg/mL (Wulandari et al., 2013), dan ekstrak tanaman paku Pteridium aquilinem (L.) Kuhn. dari keluarga Dennstaedtiaceae (Roudsari et al., 2012). Untuk mengetahui jenis senyawa spesifik yang terdapat pada serabut akar, spora, daun fertil,  dan  daun  steril  paku  tanduk  rusa P.  coronarium beserta  aktivitasnya,  perlu  dilakukan penelitian lebih lanjut.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  serabut  akar  paku  tanduk  rusa P.  coronarium memiliki  aktivitas  sitotoksik lemah terhadap sel kanker payudara MCF-7 dengan nilai IC 50 sebesar 427,76 ppm dan bersifat tidak selektif.  Ekstrak  etanol  spora,  daun  fertil,  dan  daun  steril  paku  tanduk  rusa P.  coronarium tidak memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7 dengan nilai IC 50 lebih dari 1000 ppm. Aktivitas sitotoksik dipengaruhi oleh kandungan senyawa yang terdapat didalamnya. Ekstrak etanol serabut akar, spora, dan daun fertil paku tanduk rusa P. coronarium mengandung senyawa golongan  alkaloid,  fenolik,  flavonoid,  glikosida,  triterpenoid,  steroid,  saponin,  dan  tanin.  Ekstrak etanol  daun  steril  paku  tanduk  rusa P.  coronarium mengandung  senyawa  dengan  golongan  yang sama dengan ketiga ekstrak lainnya, namun tidak mengandung saponin.

## DAFTAR PUSTAKA
Agbo, M.O., Nnadi, C.O., Ukwueze, N.N., Okoye, F.B.C., 2014. Phenolic constituents from Platycerium bifurcatum and their antioxidatant properties. J. Nat. Prod. 7, 48 – 57. Aspiras, R.A., 2010. Sporophyte and gametophyte development of Platycerium coronarium (Koenig) Desv. and P. grande (Fee) C. Presl. (Polypodiaceae) through in vitro propagation. Saudi J. Biol. Sci. 17, 13 – 22. Atta-ur-Rahman, 2008. Studies in Natural Products Chemistry. Elsevier.
Tabel III. Hasil Skrining Fitokimia Golongan senyawa Ekstrak serabut akar Ekstrak spora Ekstrak daun fertil Ekstrak daun steril Alkaloid + + + + Flavonoid + + + + Fenolik + + + + Glikosida + + + + Saponin + + + - Triterpenoid/steroid + + + + Tanin + + + +
Keterangan:  (+)  →  ekstrak mengandung  golongan  senyawa  yang  diujikan;  (- )  →  ekstrak  tidak mengandung golongan senyawa yang diujikan.
Baltrushes,  N.  and  Harris,  E.D.,  2006.  Medical  Ethnobotany,Phytochemistry,and  Bioactivity  of  the Ferns of Moorea, French Polynesia. diambil dari: http://ucjeps.berkeley.edu/moorea/Baltrushes2006.pdf. diakses 13 Juni, 2018.
Biradi,  M.,  Hullatti,  K.,  2015.  Cytotoxic  activity  of  isolated  constituents  from  leaves  of Premna serratifolia on MCF-7 and HT-29 cell lines. Bangladesh J. Pharmacol. 10, 205 – 208. de Winter, W.P., Amoroso, V.B., 2003. Plant Resources of South-East Asia Cryptogams: Ferns and fern allies. Backhuys Publishers, Leiden.
Elufioye,  T.O.,  Abdul,  A.A.,  Moody,  J.O.,  2017.  Cytotoxicity  Studies  of  the  Extracts,  Fractions,  and Isolated Compound of Pseudocedrela kotschyi on Cervical Cancer (HeLa), Breast Cancer (MCF- 7) and Skeletal Muscle Cancer (RD) Cells. Pharmacogn. Res. 9, 46 – 50.
Iwansyah, A.C., Desnilasari, D., Hanifah, I.S., 2015. Natural antioxidant activities of “Tanduk Rusa” fern
( Platycerium  coronarium ).  Proceedings  of  International  Conference  on  Appropriate Technology Development (ICATDev) 1, Bandung 5-7 Oktober, 2015:96-9.
Kitirattrakarn, T., Anantachoke, C., 2005. Herbs from Peat Swamp Forests in Narathivas, Thailand. Acta Hortic.
Kuete,  V.,  2017.  Medicinal  Spices  and  Vegetables  from  Africa:  Therapeutic  Potential  against Metabolic, Inflammatory, Infectious and Systemic Diseases. Academic Press.
Kumar, D.G., Syafiq, A.M., Ruhaiyem, Y., Shahnaz, M., 2015. Blechnum orientale Linn.: An Important Edible Medicinal Fern. Int. J. Pharmacognosy and Phytochem. Res. 7. Kunnumakkara, A.B., 2014. Anticancer properties of fruits and vegetables: a scientific review. World Scientific.
Li, J., Liang, N., Mo, L., Zhang, X., He, C., 1998. Comparison of the cytotoxicity of five constituents from Pteris semipinnata L. in vitro and the analysis of their structure-activity relationships. Yao Xue Xue Bao 33, 641 – 644.
Mamadalieva, N.Z., Ashour,  M.L., Hamoud, R., Wink, M., 2013. Antiproliferative, antimicrobial and antioxidant activities of the chemical constituents of Ajuga turkestanica . Phytopharmacology 4, 1 – 18.
Mamadalieva, N.Z., El-Readi, M.Z., Janibekov, A.A., Tahrani, A., Wink, M., 2014. Phytoecdysteroids of silene guntensis and their in vitro cytotoxic and antioxidant activity. Z. Für Naturforschung C 66, 215 – 224.
Mursito, B., Prihmantoro, H., 2011. Tanaman hias berkhasiat obat. Penebar Swadaya Grup. Obafemi, T.O., Onasanya, A., Olaoye, O.A., Afolabi, O.B., Awe, O.J., Anadozie, S.O., Ojo, O.A., Adedeji, E.,
2016.  In  vitro  antioxidant  activity  and  high  performance  liquid  chromatography  (HPLC) analysis of methanolic extract of Platycerium angolense . Int.J.Pharmacogn.Phytochem.Res. 8, 1497-1502.
Peña-Morán, O.A., Villarreal, M.L., Álvarez-Berber, L., Meneses-Acosta, A., Rodríguez-López, V., 2016. Cytotoxicity,  Post-Treatment  Recovery,  and  Selectivity  Analysis  of  Naturally  Occurring Podophyllotoxins  from Bursera  fagaroides var.  fagaroides  on  Breast  Cancer  Cell  Lines. Molecules.
Rahmawati NE. Uji aktivitas sitotoksik ekstrak etanol akar, kulit batang, dan biji jarak pagar ( Jatropha curcas linn)  terhadap  sel  kanker  payudara  T47D  [skripsi].  Surakarta:  Unversitas Muhammadiyah; 2018. p.12.
Roudsari, M.T., Bahrami, A.R., Dehghani, H., 2012. Bracken-fern extracts induce cell cycle arrest and apoptosis in certain cancer cell lines. Asian Pac. J. Cancer Prev. APJCP 13, 6047 – 6053.
Sarker, S.D., Latif, Z., Gray, A.I., 2006. Natural Products Isolation. Humana Press, Totowa, New Jersey. Silalahi, M., Nisyawati, Walujo, E.B, Supriatna, J., Mangunwardoyo, W., 2015. The local knowledge of medicinal plants trader and diversity of medicinal plants in the Kabanjahe traditional market, North Sumatra, Indonesia. J. Ethnopharmacol. 175, 432 – 443.
Thomas, A.N., 1989. Tanaman obat tradisional. Kanisius.
Silva, G.L., Chai, H., Gupta, M.P., Farnsworth, N.R., Cordell, G.A., Pezzuto, J.M., Beecher, C.W.W., Douglas
Kinghorn, A., 1995. Cytotoxic biflavonoids  from Selaginella willdenowii . Phytochemistry 40, 129 – 134.
Sukumaran, K., Kuttan, R., 1991. Screening of 11 ferns for cytotoxic and antitumor potential with special reference to Pityrogramma calomelanos . J. Ethnopharmacol. 34, 93 – 96.
Uma, R., Pravin, B., 2013. In vitro cytotoxic activity of Marsilea quadrifolia Linn. of MCF-7 cells of human breast cancer. Int. Res. J. Med. Sci. 1.
Wulandari, E.T., Elya, B., Hanani, E., Pawitan, J.A., 2013. In vitro antioxidant and cytotoxicity activity of extract and fraction Pyrrosia piloselloides (L) M.G Price. International J. PharmTech Res. 5, 119 – 25.