Evaluasi Antibakteri Kain Kasa Termodifikasi Ag, Kristalin TiO 2 /Ag, dan Kitosan/Ag dengan Variasi Urutan Pelapisan terhadap Aktivitas Escherichia coli
Sotya Rawiningtyas 1 *
1 Program Studi Penjaminan Mutu Industri Pangan, Politeknik AKA Bogor Jalan Pangeran Asogiri No. 283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
*E-mail: sotyarawiningtyas@gmail.com (Received : 23 November 2021; Accepted: 12 Agustus 2022; Published: 15 Agustus 2022)

## Abstrak
Sterilitas kain kasa  sangat berpengaruh terhadap pencegahan kontaminasi silang pada luka terbuka. Salah satu hal  yang  dapat  dilakukan  untuk  meningkatkan  sterilitas  dan  memberikan  nilai  tambah  pada  kain  kasa  adalah dengan pelapisan  menggunakan  bahan yang memiliki  aktivitas  antibakteri.  Pada  penelitian  ini  telah  dilakukan pelapisan kain kasa menggunakan kristalin TiO 2 /Ag, diaminperak, dan komposit kitosan/Ag melalui metode dip coating- teknik paddry  cure dengan  variasi  urutan  pelapisan.  Sintesis  kristalin  TiO 2 /Ag  dilakukan  dengan metode  sol-gel  menggunakan  pelarut  etanol.  Karakterisasi  hasil  sintesis  dilakukan  menggunakan  FTIR  dan XRD.  Kain  kasa  hasil  pelapisan  dikarakterisasi  menggunakan  XRD  dan  diuji  antibakterinya  menggunakan metode optical density terhadap aktivitas Escherichia coli pada variasi waktu inkubasi  jam ke-3, 6, 9, 12, dan 24.  Antibakteri  juga  dievaluasi  terhadap  kain  kasa  yang  telah  dilakukan  pencucian.  Hasil  uji  antibakteri optimum diperoleh pada kain kasa dengan urutan pelapis TiO 2 /Ag- kitosan/Ag- Ag yang memiliki daya hambat lebih  dari  65%  setelah  jam  ke-6  inkubasi.  Kain  kasa  yang  memiliki  daya  hambat  optimum  kemudian  dicuci dengan surfaktan Tween-80 0, 2 % (v/v) menggunakan sonic washer selama 5 menit. Daya hambat setelah 3x pencucian diketahui masih cukup baik yaitu 63, 54% pada jam ke-24.
Kata kunci: Antibakteri; Escherichia coli; diaminperak; kain kasa; kitosan; TiO 2

## Abstract
Gauze  sterility  affected  the  prevention  of  cross-contamination  in  wounds.  Coated  gauze  with  antibacterial materials  has  been  increased  sterility  and  provides  added  value.  In  this  study,  gauze  was  coated  using crystalline TiO2/Ag, diamine silver, and chitosan/Ag composites through the dip-coating method using the pad- dry  cure  technique.  Synthesis  of  crystalline  TiO2/Ag  was  carried  out  by  the  sol-gel  method  using  ethanol  as solvent. The characterization of the synthesized results was carried out using FTIR and XRD. Meanwhile, the gauze from the coating was characterized using XRD and evaluated for antibacterial using the optical density method against Escherichia coli activity at 3, 6, 9, 12, and 24 hours of incubation time. Antibacterial activity was  also  evaluated  on  the  gauze  that  had  been  washed.  The  optimum  antibacterial  activity  was  obtained  on gauze with a coating sequence of TiO2/Ag- Chitosan/Ag-Ag which had inhibition of more than 65% after the 6th hour of incubation. The gauze with optimum inhibition was  then washed with 0.2% (v/v) Tween-80 surfactant using a sonic washer for 5 minutes. The antibacterial activity after 3 times of washing was known to be quite good even though it decreased to 63.54% at the 24th hour.
Keywords: Antibacterial; Ag; chitosan; Escherichia coli; gauze; TiO 2

## PENDAHULUAN
Kain  kasa  merupakan  salah  satu  tekstil medis  yang  memainkan  peranan  penting  dalam perawatan  dan  mempercepat  penyembuhan  luka. Namun,  beberapa  jenis  bakteri  seperti Escherichia coli dapat  tumbuh  dan  bertahan  hidup  pada  material tekstil-tekstil  medis  termasuk  kain  kasa.  Keberadaan bakteri tersebut dapat menyebabkan resiko kontaminasi  silang  dan  memperbesar  resiko  infeksi
pada pasien (Sun, et al., 2007).  Untuk mengatasi hal tersebut perlu dilakukan peningkatan sifat antibakteri kain kasa. Salah satu cara yang dapat dilakukan untuk meningkatkan  sifat  antibakteri  kain  kasa  adalah dengan  pelapisan  ( coating )  atau  penyamakan ( laminating )  menggunakan  senyawa  yang  memiliki aktivitas  antibakteri  dan  memiliki  sifat  toksisitas yang rendah terhadap sel manusia (Singha, 2012).
Berdasarkan  penelitian  Siegfried  (2007), persenyawaan perak, TiO 2 , kitosan, dan kompositnya dapat  berperan  sebagai  agen  antibakteri  yang memiliki  toksisitas  rendah  pada  manusia.  Komposit kitosan/Ag  memiliki  daya  hambat  terhadap E.coli sebesar  14  mm  dalam  bentuk  larutan  dan  10  mm dalam  bentuk  lapis  tipis.  Sementara  itu,  komposit kitosan/Ag  yang  dilapiskan  pada  nylon  dengan metode  pelumuran  ( smeared )  menghasilkan  zona hambat  sebesar  2,0  mm  (Cao, et  al .,  2010). Penggunaan  komposit  kitosan-TiO 2 sebagai  agen antibakteri  pada  kain  kasa  dengan  menggunakan metode  pelapisan  sonikasi  menunjukkan  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Eschericia  coli , dengan daya  hambat  optimum  55,66  %  pada  komposisi kitosan:  TiO 2 sebesar  80:20  (Amrulia,  2012).  Salah satu alasan penambahan Ag adalah untuk mengoptimalisasi  aktivitas  antibakteri  TiO 2 pada kondisi  tanpa  penyinaran  UV  (Sun, et  al .,  2008). Sementara  itu,  Kedziora, et  al .,  (2012)  menyebutkan bahwa  kristalinitas  TiO 2 /Ag  mempengaruhi  daya antibakterinya. Minimum  Inhibitory  Concentration (MIC) terhadap Eschericia  coli dari  serbuk  TiO 2 /Ag amorf  lebih  besar  daripada  TiO 2 /Ag  kristalin. Penelitian  tersebut  menguji  daya  hambat  komposit TiO 2 /Ag tanpa pelapisan.
Penelitian  lain  menyebutkan  bahwa  perak yang  dilapiskan  pada  kain  katun  memiliki  zona hambat  terhadap  bakteri Eschericia  coli sebesar  1,5 mm  (sebelum  pencucian)  dan  0,5  mm  (sesudah pencucian)  menggunakan  metode  pelapisan padding dengan  konsentrasi  Ag  5  gr/L  (Zgondek, et  al ., 2008),  zona  hambat  sebesar  18  mm  menggunakan metode pelapisan paddry cure dengan konsentrasi Ag 25  gr/L  (Wasif  dan  Laga,  2009),  dan  zona  hambat sebesar  1,0  mm  menggunakan  metode  pelapisan chemisorptions dengan konsentrasi Ag sebesar 0,072 mmol/gr  (Kostic, et  al .,  2008).  Selain  memiliki ketahanan  biologis,  tekstil  medis  harus  memiliki ketahanan fisik dan mekanik yang baik.
Berdasarkan penelitian yang pernah dilakukan  sebelumnya  Ag,  kristalin  TiO 2 /Ag,  dan komposit  kitosan/Ag  berpotensi  untuk  digunakan sebagai  agen  antibakteri  pada  kain  kasa.  Sejauh  ini, belum  ada  penelitian  mengenai  aplikasi  ketiga senyawa tersebut secara bersamaan, evaluasi terhadap  aktivitas  antibakterinya,  dan  pengaruh pencucian  terhadap  ketahanan  sifat  antibakteri  kain kasa.

## BAHAN DAN METODE

## Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ultrasonic  vibrator  bandelin (Sonorec  digitec  DT 100H), autoclave (Tomy  ES-315  Steam  sterilizer, Rotary incubator (Infors HT Ecotron), Spektrofotometer  UV-Vis  Double  beam  (Perkin Elmer lambda 25), Biosafety laminar airflow (ESCO
Class  II  BSC),  micropipet  (Brand), Blue  tip (Brand) 1000  µL.,  jarum  ose,  spektrofotometer  infra  merah (Prestige  Shimadzu  8201  PC),  XDR  (Bruker  D8 Advance),  Oven  (  ESCO  Iotherm), stirrer ,  neraca analit, hot plate-stirrer , dan alat-alat gelas. Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  kain  kasa  steril,  kitosan/Ag dengan  DD  kitosan  95,15%  (Samiyatun,  2010), titanium (IV)  isoproksida (AR grade; 97%, Aldrich), garam  perak  nitrat  (AgNO 3 ),  etanol  emsure (C 2 H 5 OH;  96%,  Merck),  asam  asetat  glasial (CH 3 COOH;  100%,  Merck),  asam  akrilat  (Merck), surfaktan  Tween  80  n-nonionik, Demineralize  water (Aqua DM), ammonium hidroksida  ( AR grade ; 25%, Merck),  metanol  emsure  (CH 3 OH;  98%,  Merck), media tripthone  soya  broth (TSB,  Sigma  Aldrich  30 gr/L),  Mac  conkey  agar  (MC,  Sigma  Aldrich  51,5 gr/L),  bakteri Eschericia  coli ATCC  35218,  spirtus, kapas,  kertas  saring,  karet  gelang,  dan  alumunium foil.

## Sintesis Perak Klorida dan Diaminperak
Sintesis  kristal  AgCl  menggunakan  AgNO 3 sesuai  dengan  penelitian  Kedziora et  al .,  2012  . Kristal AgCl dikarakterisasi menggunakan FTIR dan XRD  (Kumar, et  al .,  2000).  Diaminperak  sebagai prekusor  Ag  disintesis  dengan  cara  menambahkan larutan  ammonium  hidroksida  (NH 4 OH;  25%)  ke dalam  1  gr  perak  klorida  kemudian  diaduk  hingga semua AgCl terlarut dan ditepatkan dengan labu ukur 100  mL.  Untuk  keperluan  karakterisasi,  larutan diaminperak  dikeringkan  pada  suhu  80 o C  selama  6 jam  hingga  diperoleh  kristal  diaminperak.  Kristal diaminperak  kemudian  dikarakterisasi  menggunakan FTIR dan XRD.

## Sintesis Kristal TiO
2 /Ag Sebanyak  5  ml  asam  asetat  glasial ditambahkan  ke  dalam  100  mL  Etanol  tetes  demi tetes  sambil  distrirer  selama  10  menit.  Ke  dalam campuran  tersebut  ditambahkan  6  ml  titanium  (IV) isoproposida  dan  distirer  selama  60  menit.  Setelah itu,  ditambahkan  20  ml  larutan  Diaminperak. Campuran  larutan  distirer  hingga  terbentuk  gel.  Gel yang  terbentuk  kemudian  disentrifuse  dengan kecepatan  2000  rpm  selama  40  menit.  Gel  yang terpisah  dari  filtrat  dicuci  dengan  menggunakan methanol  dan  aquades  kemudian  dikeringkan  pada suhu  80 o C  selama  5  jam  dan  dikalsinasi  selama  2 jam  pada  suhu  400 o C.  Kristal  yang  terbentuk dikarakterisasi menggunakan FTIR dan XRD (Gupta, et al ., 2008; Kedziora, et al ., 2012).
Sebanyak  1  gram  kristal  TiO 2 /Ag  ditambah  dengan 97,5  ml  akua-  demineralisasi,  dua  belas  tetes Surfaktan Tween-80 nonionik, dan 1 ml asam akrilat. Campuran  disonikasi  selama  30  menit  dan  distirer selama 60 jam hingga terbentuk emulsi (Kedziora, et al .,2012).
Pelapisan  Kristal  TiO 2 /Ag,  Kitosan/Ag,  dan Diaminperak (Ag) pada Kain Kasa
Sebelum  dilakukan  pelapisan,  kain  kasa berukuran  6  x  8  cm 2 dicelupkan  pada  tiga  jenis larutan  yaitu  diaminperak,  emulsi  TiO 2 /Ag  kristal, dan  kitosan/Ag  dalam  asam  asetat  1  %  (b/v)  dengan urutan  pencelupan  seperti  yang  ditunjukkan  pada Tabel  1.  Masing-masing  pencelupan  dilakukan pengeringan pada suhu kamar dan disetrika selama 1 menit  pada  suhu  ±  100 o C.  Kain  kasa  hasil pencelupan  kemudian  dikarakterisasi  menggunakan XRD.
Tabel 1. Urutan Pencelupan Kain Kasa
Kode Urutan Pencelupan A0 Kain kasa-Ag K0 Kain kasa-Kitosan/Ag T0 Kain kasa- TiO 2 /Ag AKT1 Kain kasa-Kitosan/Ag-Kristal TiO 2 /Ag-Ag AKT2 Kain kasa- Kristal TiO 2 /Ag- Kitosan/Ag-Ag AKT3 Kain kasa-Kitosan/Ag-Ag-Kristal TiO 2 /Ag AKT4 Kain kasa-Ag-Kitosan/Ag-Kristal TiO 2 /Ag AKT5 Kain kasa- Kristal TiO 2 /Ag-Ag- Kitosan/Ag AKT6 Kain kasa-Ag-Kristal TiO 2 /Ag- Kitosan/Ag

## Pencucian kain kasa hasil pencelupan
Kain  kasa  berukuran  6  x  8  cm 2 disetrika pada  suhu  ±  100 o C  selama  satu  menit  kemudian dicuci  dengan  surfaktan  Tween-80  0,2  %  (v/v) selama  5  menit  (Pramita,  2011)  dan  dibilas menggunakan akuades selama  5 menit menggunakan Sonic  washer .  Setelah  itu,  kain  dikeringkan  pada suhu kamar dan disetrika pada suhu ± 100 o C selama satu menit.

## Uji Antibakteri Kain Kasa
Uji antibakteri kain kasa dilakukan menggunakan  metode optical  density (Au,  dkk., 2012).  Kain  kasa  hasil  pelapisan  dimasukkan  ke dalam  25  mL  media  TSB  3%  (b/v)  steril  (Goldman dan Green, 2009). Setelah itu, ditambahkan inokulum
bakteri Eschericia  coli hasil  inkubasi  selama  24  jam sebanyak 0,5 mL (Amrulia, 2012).  Pembuatan kultur kerja  dilakukan  secara  aseptis.  Kultur  kerja diinkubasi  pada rotary  incubator suhu  37  °C,  100 rpm  (Pal et  al .,  2007).    Pengukuran  absorbansi sampel  dilakukan  pada  jam  ke-3,  6,  9,  12,  dan  24 menggunakan spektrofotometer UV-VIS pada panjang gelombang 600 nm (Pal, et al ., 2007; Musil, et al ., 2009). Pengujian dilakukan secara duplo.  Dari data  tersebut,  dihitung  prosentase  daya  hambat (inhibisi)  kain  kasa  terhadap  pertumbuhan  bakteri Eschericia coli.
I (%)= % 100 ) ( ) A - A ( 0 0 0 t x A A B B t t − − −
(1)
Keterangan: A 0 = OD kontrol jam ke-nol A t = OD bakteri kontrol jam ke-t B 0 = OD bakteri sampel jam ke-nol B t = OD bakteri sampel jam ke-t.
Signifikansi  berbagai  keragaman  (variabel) dari kelompok data antibakteri antar sampel kain kasa diprediksi menggunakan uji analisis variansi (Anava) dengan  metode  Duncan.  Berdasarkan  uji  Anava metode  Duncan  diketahui  kelompok-kelompok  yang berbeda  signifikan  atau  tidak  berbeda  signifikan dengan  cara  membandingkan  varians  dari  kedua kelompok  data.  Data  populasi  dikatakan  berbeda secara signifikan apabila F hitung > F (α;df1;df2) tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sintesis Perak Klorida dan Pembuatan Diaminperak
Diaminperak  sebagai  prekusor  Ag  dalam komposit  TiO 2 /Ag  dan  sebagai  bahan  antibakteri yang dilapiskan pada kain kasa disintesis melalui dua tahap  yaitu  sintesis  perak  klorida  (AgCl)  dari  perak nitrat (AgNO 3 ) dan sintesis diaminperak dari AgCl. Perubahan  persenyawaan  perak  selama sintesis  diaminperak  diamati  melalui  analisis  data spektroskopi  FTIR  untuk  mengetahui  perubahan gugus fungsi  dan  XRD  untuk  mengetahui perubahan kristalinitas.
Larutan diaminperak diuapkan pada suhu 80 o C  membentuk  lempengan  kristal  berwarna  putih bening  diaminperak  yang  selanjutnya  dikarakterisasi dengan FTIR. Karakter spektra IR diaminperak pada Gambar 1.
Gambar 1. FTIR Diaminperak
Spektra IR tersebut menunjukkan perubahan serapan  yang  signifikan.  Hal  ini  mengindikasikan perubahan  senyawa  dari  AgCl  menjadi  diaminperak yang  ditandai  dengan  munculnya  serapan  medium pada  bilangan  gelombang  3435,22  cm -1 dan  1402,25 cm -1 adalah  serapan  gugus  N-H  amina stretching (Stuart, 2004). Adanya gugus amin diperkuat dengan munculnya  serapan  pada  bilangan  gelombang 1631,78 cm -1 yang merupakan serapan N-H bending . Serapan  Ag  pada  Diaminperak  ditunjukkan  oleh serapan pada bilangan gelombang 669,3- 576,72 cm -1 (Tripathi et al ., 2011). Sintesis  diaminperak  dari  AgCl  juga dianalisis menggunakan XRD (Gambar 2.). Meskipun data IR memperlihatkan perubahan spektra yang  mengindikasikan  terjadinya  transformasi  dari AgCl menjadi
diaminperak perbandingan difraktogram  antara  AgCl  dan  diaminperak  tidak menunjukkan  perubahan  yang  signifikan.  Perubahan hanya  terjadi  pada  intensitas.  Intensitas peak pada diaminperak  lebih  rendah  dibandingkan  dengan intensitas peak AgCl. Penurunan intensitas diaminperak menunjukkan bahwa kisi kristal diaminperak lebih tidak teratur dibandingkan dengan kisi  kristal  AgCl.  Sementara  itu,  tidak  terjadi perubahan  yang  signifikan  pada  pergeseran  2θ difraktogram Diaminperak. Hal tersebut kemungkinan  karena  gugus  amin  merupakan  ligan netral  sehingga  tidak  merubah  jarak  dan  bentuk  kisi kristal.
Gambar 2. XRD senyawa perak
Sintesis Gel TiO 2 /Ag Komposit TiO 2 /Ag disintesis dengan metode sol-gel  di  dalam  etanol solution .  Menurut  Gupta et. al. (2008), TiO 2 hasil sintesis dari prekusor Titanium (IV)  isopropoksida  dan  penghidrolisis  asam  asetat glasial  dalam  etanol solution memiliki  distribusi ukuran  partikel  yang  seragam  dan  proses  aglomerasi yang  lebih  cepat  (5-6  jam  pada  temperatur  ruang). Penambahan prekusor diaminperak dilakukan setelah terbentuk  sol  TiO 2 Hasilnya  diperoleh  ukuran aglomerat sol TiO 2 yang lebih besar yang terlihat dari intensitas  peak  TiO 2 pada  difraktogram  TiO 2 /Ag lebih tinggi dibandingkan dengan peak TiO 2 saja. Hal tersebut  disebabkan  karena  adanya  ammonium hidroksida  yang  merupakan  salah  satu  katalis  dalam tahapan  hidrolisis  TiO 2 (Kedziora et  al .,  2012).  Sol gel TiO 2 /Ag selanjutnya dikeringkan pada suhu 80 o C untuk membentuk xerogel.
Difraktogram TiO 2
(Gambar 3.) menunjukkan  bahwa  intensitas  tipe  anatase  lebih dominan  dibandingkan  dengan  intensitas  tipe  rutil. Dari  perbandingan  intensitas  tersebut  diperoleh presentase  anatase  dalam  TiO 2 hasil  sintesis  adalah sebesar  73,22%  dan  presentase  tipe  rutil  sebesar 24,78%.
Karakterisasi  XRD  komposit  TiO 2 /Ag  gel menunjukkan munculnya peak baru yang merupakan peak senyawa diaminperak. Hasil analisis difraktogram  komposit  TiO 2 /Ag  gel  menunjukkan bahwa  TiO 2 dalam  komposit  TiO 2 /Ag  gel  berada pada  fasa  amorf.  Hal  tersebut  terlihat  dari  intensitas peak yang rendah dan melebar pada 2θ Ti O 2 . Komposisi  TiO 2 dan  Ag  dalam  komposit TiO 2 /Ag gel tidak dapat ditentukan melalui data XRD karena TiO 2 /Ag gel berada pada fase amorf.
Gambar 3. XRD TiO 2 /Ag
Gambar  4.  Memperlihatkan  spektra  IR  komposit kristal  TiO 2 /Ag.  Serapan  Ti-O  terlihat  pada  bilangan gelombang  3425,58  cm -1 yang  merupakan  serapan Ti – OH stretching dan 1631,78 cm -1 yang merupakan serapan  Ti-OH bending .  Serapan  oksida  logam  dari Ti-O  dan  Ag-O  terlihat  pada  bilangan  gelombang 673,16 – 430,13  cm -1 .  Secara  umum  letak  bilangan gelombang  serapan  oksida  logam  dipengaruhi  oleh jenis  logam  dan  komposisi  senyawa  organik  di dalamnya (Skoog, 1971).
Pelapisan  Kristal  TiO 2 /Ag,  Kitosan/Ag,  dan Diaminperak (Ag) pada Kain Kasa
Diaminperak, komposit TiO 2 /Ag, dan komposit Kitosan/Ag dilapiskan pada kain kasa steril menggunakan  metode  pelapisan dip  coating dengan lama  pencelupan  5  menit.  Urutan  pencelupan  antara diaminperak,  komposit  TiO 2 /Ag,  dan  komposit kitosan/Ag  divariasi  seperti  ditunjukkan  pada  Tabel 1. Setiap pencelupan dilakukan pemantapan ( padding )  dengan  disetrika  untuk  memperkuat interaksi  yang  terjadi  antara  selulosa  kain  kasa  dan senyawa  antibakteri.  Kain  kasa  hasil  pelapisan  tidak mengalami  perubahan  yang  mencolok  baik  pada warna maupun bentuk. Perubahan hanya terjadi pada kekakuan/  fleksibilitas  kain  kasa.  Kain  kasa  hasil pelapisan  memiliki  tingkat  kekakuan  yang  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  kain  kasa  tanpa perlakuan  dengan  kata  lain  fleksibilitas  kain  kasa hasil pelapisan menurun.

## Gambar 5. Kain kasa hasil pelapisan

## Uji Antibakteri Kain Kasa
Uji  aktivitas  antibakteri  kain  kasa  terhadap bakteri Eschericia  coli dilakukan  menggunakan metode optical  density untuk  menentukan  urutan pencelupan yang memiliki daya hambat paling besar. Selain  itu,  uji  antibakteri  juga  dilakukan  untuk mengetahui  efek  pencucian  ( laundering )  terhadap daya  tahan  antibakteri  kain  kasa. Optical  density (OD)  sampel  diukur  menggunakan  spetrofotometer UV-Vis (Au et al ., 2012) dengan panjang gelombang 600 nm (Pal et al ., 2007) pada jam ke-0, 3, 6, 9, 12, dan 24.
Kekeruhan sampel yang terukur dari metode optical  density sebanding  dengan  jumlah  bakteri. Semakin  tinggi  OD  sampel  maka  semakin  banyak bakteri  yang  berada  pada  sampel.  Sebaliknya,  jika OD  rendah  maka  bakteri  yang  berada  pada  sampel semakin sedikit.
Perak  dalam  komposit  kitosan/Ag  dapat meng-inaktivasi enzim chitosanase . Enzim chitosanase diproduksi oleh bakteri untuk meningkatkan resistensinya terhadap aktivitas antibakteri  kitosan.  Ketika  berinteraksi  dengan kitosan,  enzim chitosanase akan  menyebabkan endohydrolisis ikatan  β 1,4-D  glukosamin  dan mengurangi  kemampuan  antibakteri  kitosan  (Gao et al. , 2008).
Kain  kasa  terlapisi  Ag,  kitosan/Ag,  dan TiO 2 /Ag  kristal  dengan  variasi  urutan  pencelupan menghasilkan  sifat  antibakteri  optimum  pada  kain kasa  K4  yaitu  dengan  daya  hambat  lebih  dari  65% setelah  jam  ke-6.  Kain  kasa  K6  memiliki  daya hambat  lebih  dari  70%  pada  jam  ke-3,  6,  dan  9. Namun,  daya  hambat  kain  kasa  K6  mengalami penurunan  pada  jam  ke-12  dan  24  yang  disebabkan karena  efek  antibakteri  dari  TiO 2 /Ag  kristal  yang semakin berkurang.
Hasil  uji  antibakteri  menunjukkan  bahwa proses  pelapisan  memengaruhi  daya  antibakteri  kain kasa.  Kain  kasa  memiliki  daya  antibakteri  optimum ketika  Ag  dilapiskan  pada  urutan  terakhir  dengan kata  lain  lapisan  Ag  berada  pada  sisi  terluar  kain kasa.  Uji  aktibakteri  dilakukan  tanpa  menggunakan sinar UV.
Penentuan  metode  urutan  pelapisan  yang memberikan  sifat  antibakteri  paling  baik  pada  kain kasa  dilakukan  menggunakan  analisis  variansi/ Anava  metode  Duncan  dengan  tingkat  kepercayaan 95%.  Varians  hitung  (F  hitung)  dari  uji  Anava sebesar  7,953  untuk  kain  kasa  terlapisi  komposit kristal.  Sementara  itu,  nilai  varians  tabel  (F  tabel) sebesar  1,847.  Perbandingan  nilai  varians  dapat diketahui bahwa F hitung > F (0,05;29;30) tabel sehingga terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antar  variasi urutan pelapisan. Berbagai kelompok yang dibandingkan,  sampel kain kasa  terlapisi  kitosan/Ag, komposit  TiO 2 /Ag  kristal,  dan  Ag  memiliki  sifat antibakteri  paling  baik  pada  kain  kasa  K4.  Setelah diperoleh  kain  kasa  dengan  urutan  pelapisan  yang memiliki  aktivitas  antibakteri  paling  tinggi,  maka dilakukan  pencucian  terhadap  variasi  kain  kasa tersebut.  Aktivitas  bakteri  kain  kasa  setelah pencucian  masih  cukup  baik  yaitu  sebesar  63,54% pada jam ke-24.
Gambar 6. Presentase daya hambat sampel kain kasa terlapisi kristal sebelum pencucian terhadap bakteri Eschericia coli pada jam ke- 3,6,9,12, dan 24.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  ini  memperlihatkan  bahwa urutan pelapisan berpengaruh pada aktivitas antibakteri  kain  kasa  terhadap  bakteri E.coli dimana kain  kasa  dengan  urutan  pelapisan  K4  memiliki aktivitas  antibakteri  tertinggi  yaitu  sebesar  65% setelah jam ke-6. Selain itu, aktivitas antibakteri kain kasa  tidak  terpengaruh  secara  signifikan  oleh pencucian.  Hal  ini  terlihat  dari  aktivitas  antibakteri kain  kasa  setelah  pencucian  masih  tinggi  yaitu sebesar 63,54 % pada jam ke-24.

## DAFTAR PUSTAKA
Amrulia,  W.  (2012). Uji  Aktivitas  Antibakteri Kitosan-TiO 2 pada Tekstil Terhadap Eschericia coli , FMIPA UNS; Surakarta Au, Hang Thi, Lan Ngoc Pham, Thu Ha Thi Vu, dan Jun  Seo  Park.  (2012).  Fabrication  of  An Antibacterial  Non-Woven  Mat  of  a  Poly (lactic acid)/ Chitosan Blend by
Electrospinning, Macromolecular Research 20(1). 51-58.
https://doi.org/ 10.1007/s13233-012- 0010-9
Cao, X. L., Cheng, C., Ma, Y. L., Zhao, C. S.  (2010). Preparation  of  Silver  Nanoparticles  With Antimicrobial Activities and The Researches of  Their  Biocompatibilities. J  Mater  Sci: Mater Med 21. 2861 – 2868.
https://doi.org/ 10.1007/s10856-010- 4133-2
Gao  X.-A.,  Ju,  W.  T.,  Jung,  W.  J.,&  Park,  R.  D. (2008).  Purification  and  Characterization  of Chitosanase  from Bacillus  cereus D-11, Carbohyd. Polym 72. 513 – 520. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2007.09.02
5
Goldman, E. & Green, L. H., (Ed.). (2009). Practical Handbook  of  Microbiology  Second  Edition , CRC Taylor and Francis: Boca Raton
Gupta,  K.  K.,  Jassal,  J.,  &  Agrawal,  A.K.  (2008).
Sol-Gel Derived Titanium Dioxide Finishing of  Cotton  Fabric  for  Self  Cleaning, Indian Journal of Fibre and Textile Research , Vol.
33, hal. 443-450
Kedziora,  A.,  Strek,  W.,  Kepinski,  L.,  Bugla- Ploskonska,  G.  &  Doroszkiewicz,  W.
(2012).  Synthesis  and  Antibacterial  Activity of  Novel  Titanium  Dioxide  Doped  with Silver, Journal Sol-Gel Science Technology. https://doi.org/10.1007/s10971-012-2688-8 Kostić,  M . ,  Radić, N., Obradović ,  B.  M., Dimitrijević, S.,  Kuraica  M.  M.,  & Škundrić ,  P.  (2008).  Antimicrobial  Textile Prepared  by  Silver  Deposition  on  Dielectric Barrier  Discharge  Treated  Cotton/Polyester Fabric, CI&CEQ . 14. 4. 219 − 221. https://doi.org/10.2298/CICEQ0804219K
Kumar,  P.  M.,  Badrinarayanan  S.,  &  Sastry,  M.
(2000).  Nanocrystalline  TiO2  Studied  by Optical,  FTIR  and  X-ray  Photoelectron Spectroscopy:  Correlation  to  Presence  of Surface  States, Journal  of  Thin  Solid  Films , Vol. 358, Hal. 122-130
Pal,  S.,  Tak,.  Y.K.  ,  &  Song,  J.M.  (2007).  Does
Antibacterial Activity
of Silver
Nanoparticles  Depend  in  the  Shape  of  the Nanoparticles  A  Study  of  the  Gram- Negative Bacterium Eschericia coli , Journal of  Applied  Environmental  Microbiology , Vol. 73, No. 6, Hal. 1712-1720 Pramita,  D.  (2011). Daya  Hambat  Lapisan SiO 2 dan Komposit  Kitosan/Ag  pada  Kain  Katun Terhadap  Aktivitas  Bakteri  Staphylococcus aureus , FMIPA UNS; Surakarta
A n tibak te ri ( % ) Sampel jam ke-3 jam ke-6 jam ke-9
jam ke-12
jam ke-24
Singha,  K.  (2012).  A  Review  on  Coating  & Lamination  in  Textiles:  Processes  and Applications, American  Journal  of  Polymer Science , Vol. 2, No. 3, Hal. 39-49 Skoog,  D.  A.  (1971). Principle  of  Instrumental
Analysis  Fifth  Edition ,  USA;  Saunder College Publishing
Stuart,
B .(2004). Infrared Spectroscopy; Fundamentals and Applications, John Wiley and Son
Sun,  G.,  Badrossamay,  M.,  &  Wang,  D.  (2007). Integrated  Production  of  Functional  Fibers and  Nonwoven  Fabrics, National  Textile Center Project: M06-CD04
Sun,  S-Q.,  Sun,  B.,  Zhang,  W.,  &  Wang,  D.  (2008). Preparation  and  Antibacterial  Activity  of Ag-TiO 2 Composite  Film  by  Liquid  Phase
Deposition  (LPD)  Methods, Bulletin  of Material Science , Vol. 31, No. 1, Hal. 61-66 Tripathi,  S.,  Mehrotra,  G.  K.,  &  Dutta,  P.K.  (2011).
Chitosan-Silver-Oxide Nanocomposite Film; Preparation  and  Antimicrobial  Activity, Bulletin of Material Science , Vol. 34, No. 1, Hal. 29-35
Wasif, A.I. & Laga, S.K. (2009). Use of Nano Silver as  an  Antimicrobial  Agent  for  Cotton, AUTEX Research Journal , Vol. 9, No. 1 Zgondek,  E.  M.,  Bacciarelli,  A..,  Rybicki,  E., Szynkowska,  M.  I.,  & Kołodziejczyk ,  M.
(2008).  Antibacterial  Properties  of  Silver- Finished  Textiles, Fibres  &  Textiles  in Eastern  Europe ,  Vol.  16,  No.  5  (70),  Hal. 101-107