## POTENSI OBAT KUMUR BERBAHAN CITRUS SINENSIS MENURUNKAN VIRAL LOAD COVID-19 DI RONGGA MULUT
(STUDI PUSTAKA)
THE POTENTIAL OF CITRUS SINENSIS MOUTHWASH TO REDUCE THE VIRAL LOAD OF COVID-19 IN THE ORAL CAVITY
(LITERATUR REVIEW)
Amira Rachmatillah 1 , Mahfita Ardyarum 2 , Yuanita Lely Rachmawati 3
1 Program Studi Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Brawijaya
2 Program Studi Teknik Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Brawijaya
3 Departemen Kesehatan Gigi Masyarakat Pencegahan, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Brawijaya
Correspondence email to: yuanita.rachmawati.fk@ub.ac.id

## ABSTRAK
Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) sebagai penyebab COVID-19 mengakibatkan sindrom pernafasan akut parah  dengan  sel  yang  ditargetkan;  sel  epitel  hidung  dan  bronkus  dan  pneumosit.  SARS-CoV-2 menggunakan  tipe  2  transmembran  serine  protease  (TMPRSS2)  sebagai  media  untuk  membelah angiotensin  2  converting  enzyme  receptor  (ACE2)  dan  mengaktifkan  protein  SAR-CoV-2.  ACE2 banyak  ditemukan  pada  sel  epitel  lidah.  Lonjakan  protein  struktural  virus  (S)  menunjukkan  adanya infeksi  pada  sel  yang  ditargetkan.  Tujuan  studi  pustaka  ini  adalah  untuk  mengetahui  potensi  obat kumur yang mengandung senyawa bioaktif flavonoid dari citrus sinensis untuk mengurangi viral load SARS-CoV-2. Ekstrak  flavonoid  seperti  hesperidin  dari  citrus  sinensis  dapat  menghambat  respon imun  bawaan  dan  melawan  COVID-19.  Hesperidin  dapat  memblokir  dengan  baik  SARS-CoV-2 masuk melalui reseptor ACE2 dengan meningkatkan kekebalan seluler inang terhadap aktivitas anti- inflamasi  dan  infeksi.  Hesperidin  yang  dihasilkan  dari  proses  ekstraksi  hidroalkohol  diencerkan dengan  air  suling  untuk  membuat  larutan  4%(v/v)  kemudian  ditambahkan  aspartam  dan  sodium benzoat untuk pembuatan sediaan obat kumur. Disimpulkan hesperidin dari kulit citrus sinensis dalam sediaan  obat kumur  dapat mengurangi viral load coronavirus  2 (SARS-CoV-2)  dalam rongga  mulut melalui pengikatan reseptor ACE2.
Kata kunci: obat kumur, citrus sinensis, viral load , COVID-19

## ABSTRACT
The COVID-19 outbreak caused by coronavirus 2 (SARS-CoV-2) resulted in severe acute respiratory syndrome with targeted cells; nasal and bronchial epithelial cells and pneumocytes. SARS-CoV-2 uses a  type  2  transmembrane  serine  protease  (TMPRSS2)  as  a  medium  for  cleaving  the  angiotensin  2 converting enzyme receptor (ACE2) and activating the SAR-CoV-2 protein. ACE2 is found mainly in the  epithelial  cells  of  the  tongue.  A  spike  in  viral  structural  protein  (S)  indicates  the  presence  of infection in the targeted cells. The objective of this study is to explore the potential for a mouthwash containing bioactive flavonoid compounds from citrus sinensis to reduce the viral load of SARS-CoV- 2  transmission.  Flavonoid  extracts  such  as  hesperidin  from  citrus  sinensis  can  inhibit  the  innate immune  response  and  fight  COVID-19.  Hesperidin  is  expected  to  stop  the  entry  of  SARS-CoV-2 through  the  ACE2  receptor  by  increasing  host’s  cellular  immunity  against  infection  and  anti- inflammatory.  The  hesperidin  produced from the  hydroalcoholic  extraction process  was  diluted  with distilled water to make a 4% (v/v) solution, and then aspartame and sodium benzoate were added to make  mouthwash  preparations.  This  study  concluded  that  hesperidin  from  citrus  sinensis  peel  in mouthwash  can  minimize  the  viral  load  of  coronavirus  2  (SARS-CoV-2)  in  the  oral  cavity  through binding to ACE2 receptors.
Keywords: mouthwashes, citrus sinensis, viral load, COVID-19

## PENDAHULUAN
Penyakit  akibat  novel  coronavirus  2019 (COVID-19)  dilaporkan  pertama  kali  di Wuhan, Cina, pada Desember 2019, dan secara cepat  menyebar  ke  seluruh  dunia. 1 Ditemukan terdapat  lebih dari  28 juta kasus terkonfirmasi dan  896.481  kematian  secara  global  per  4 September  2020.  Di  Indonesia  dilaporkan 187.537  kasus  terkonfirmasi  dan  7.832 kematian. 2 COVID-19  disebabkan  oleh  virus coronavirus  2  (SARS-CoV-2). 1 Coronavirus merupakan  virus  RNA  dengan  untai  tunggal, SARS-CoV-2 memiliki diameter 60 nm hingga 140 nm dan berbentuk seperti korona matahari. Perjalanan infeksi, SARS-CoV-2 pada awalnya menargetkan  sel  inang,  seperti  sel  epitel hidung  dan  bronkial  serta  pneumosit,  melalui lonjakan  protein  struktural  virus  (S)  yang mengikat reseptor enzim pengubah angiotensin 2  (ACE2).  Reseptor  angiotensin-converting enzyme  2  (ACE2)  adalah  reseptor  utama manusia  yang  digunakan  oleh  virus  ini  untuk menginfeksi sel. Transmembrane serine protease  Tipe  2  (TMPRSS2)  yang  terdapat  di sel inang memediasi masuknya virus corona ke dalam sel inang virus dengan membelah ACE2 dan  mengaktifkan  protein  SARS-CoV-2  S. ACE2  dan  TMPRSS2  diekspresikan  dalam target  inang  sel,  terutama  sel  epitel  alveolar tipe II (sel septal). Mirip dengan penyakit virus pernapasan lainnya, seperti influenza, limfopenia  dapat  terjadi  ketika  SARS-CoV-2 menginfeksi  dan  membunuh  sel  limfosit  T. Respon  inflamasi  virus,  yang  terdiri  dari respon  imun  bawaan  dan  adaptif  (terdiri  dari imunitas humoral dan sel), merusak limfopoiesis  skaligus  meningkatkan  apoptosis limfosit. 3 SARS-CoV-2  akan  masuk  ke  dalam  sel epitel  alveolar  lalu  bereplikasi  cepat  sehingga memicu respon imun yang kuat mengakibatkan sindrom  badai  sitokin,  atau  hipertiroksinemia, dan  kerusakan  jaringan  paru.  Hal  ini disebabkan  oleh  sistem  kekebalan  yang bereaksi berlebihan untuk menghentikan penyebaran  virus 4 .    Gejala  umum  pada  pasien rawat  inap  antara  lain  demam  lebih  dari  70%, batuk  kering  >60%,  sesak  napas  >53%, kelelahan  38%,  mialgia  >15%,  mual/muntah atau diare 15%-39%, sakit kepala, lemas 25%), dan rinore 7%. Anosmia atau ageusia mungkin satu-satunya  gejala  yang  muncul  pada  sekitar 3% orang dengan COVID-19. 3

## Transmisi Covid-19
Sampai  saat  jnj  Penyakit  COVID-19 terbukti  memiliki  tingkat  penularan  tinggi (bahkan  dari  orang  yang  terinfeksi  tanpa gejala),  jangka  waktu  gejala  yang  lama  dan belum  adanya  terapi  definitif 4 .  Penularan  dari sindrom  pernapasan  akut  berat  coronavirus  2 (SARS-CoV-2) terjadi terutama melalui droplet dari  kontak  tatap  muka,  permukaan benda  yang  terkontaminasi,  dan  penyebaran melalui  aerosol  juga  dapat  terjadi,  Studi menunjukkan  48%  sampai  62%  penularan dapat  terjadi  melalui  pembawa  yang  tidak bergejala. 3
Masuknya  sel  COVID-19  tergantung pada  dua  langkah  berturut-turut,  pertama pengikatan  lonjakan  virus  (protein  S)  ke reseptor  seluler  inang  diikuti  oleh  priming protein S oleh protease sel. Baru-baru ini, para peneliti  menunjukkan  bahwa  COVID-19 menggunakan  reseptor  ACE-2  untuk  masuk dan serin protease TMPRSS2 untuk priming S- protein. 5 Salah  satu  pintu  masuk  utama  agen infeksi  adalah  rongga  mulut.  Keadaan  rongga mulut  dengan  suhu  rata-rata  37  °  C  dan  pH stabil kisaran 6,5–7 merupakan linkungan ideal untuk  pertumbuhan  mikrobiota  oral  spesies bakteri  dan  virus.  Rongga  mulut  berpotensi beresiko  tinggi  terhadap  kerentanan  infeksi SARS-CoV-2 karena sel epitel lidah kaya akan reseptor  ACE2. 6 Kebersihan  mulut  dapat berpengaruh terhadap komposisi jumlah bakteri perusak dalam biofilm dan perkembangan kronis infeksi. 7 Oleh karena itu kebersihan  rongga  mulut  harus  dijaga  agar mengurangi potensi infeksi.
Salah  satu  upaya  preventif  infeksi COVID-19 yaitu dengan memanfaatkan senyawa  bioaktif  alami  yang  mempunyai kemampuan  mencegah  virus  dengan  mengikat enzim  ACE2  sel  inang,  menghambat  replikasi virus  setelah  penetrasi  di  sel  inang,  serta menahan  atau  melawan  reaksi  berlebihan proinflamasi  dari  sistem  kekebalan.  Proses  ini dapat mengurangi viral load SARS-CoV-2. 8

## Viral Load
Viral  load  adalah  kuantitas  (atau  titer) virus  dalam  volume  cairan  pada  waktu tertentu. 9 Virus  hidup  dapat  terdeteksi  dalam saliva  dengan  melakukan  kultur  virus.  Saliva merupakan  biofluida  yang  dikeluarkan  oleh kelenjar ludah melalui duktus di rongga mulut.
Saliva   dapat   menjadi  spesimen   noninvasif yang menjanjikan untuk kepentingan diagnosis,  pemantauan,  dan  pengendalian infeksi  pada  pasien  dengan  infeksi  SARS- CoV-2. 10,11 Hal  ini  didukung  oleh  beberapa alasan  yaitu  selama  10  hari  pertama,  virus terakumulasi  di  daerah  hidung,  mulut,  dan faring,  jumlah  reseptor  ACE2  lebih  besar  di kelenjar  ludah dibandingkan  di  paru-paru,  dan tetesan saliva adalah tranmisi utama penularan SARS-CoV-2. 12 Hal  ini  sangat  penting  karena sejumlah  besar  aerosol  dihasilkan  selama prosedur  perawatan  gigi,  yang  berisiko  bagi personel  perawatan  gigi  dan  pasien.  Dengan demikian,  mengurangi  titer  SARS-CoV-2 dalam  air  liur  pasien  yang  terinfeksi  dapat menjadi  salah  satu  pendekatan  kunci  untuk mengurangi risiko penularan COVID-19, salah satunya yaitu selama prosedur perawatan gigi 9 Pengurangan viral  load saliva  pada mulut diharapkan dapat menurunkan keparahan penyakit pada subjek yang terinfeksi  dan  dapat  mengurangi  resiko transmisi  yang  bersumber  dari  tetesan  saliva mulut yang dihasilkan saat bernapas, berbicara, bersin,  batuk,  dan  lain-lain.  Bentuk  sediaan yang  sesuai  dengan  harapan  ini  dan  dapat diaplikasikan  dengan  mudah  adalah  dalam bentuk  obat  kumur.  Obat  kumur  yang mengandung unsur flavonoid memiliki aktivitas  antivirus,  efek  antibakteri  dan  anti- inflamasi,  efek  anti-alergi  dan  antiangiogenik, dan sitostatik,sifat analgesik, apoptosis, hepatoprotektif, antiestrogenik, dan estrogenik. Flavonoid adalah sekelompok fitokimia dengan  berbagai  aktivitas  biologis,  terutama karena  sifat  antioksidan  dan  kemampuannya untuk  mengatur  beberapa  reseptor  sel  atau enzim. 7 Flavonoid  sebagai  protease  inhibitor mirip chymotrypsin  coronaviral memiliki fungsi  esensial  untuk  replikasi  virus  corona dan  juga  memiliki  fungsi  tambahan  untuk menghambat  imun  bawaan  inang  tanggapan dan memerangi COVID-19.

## Citrus Sinensis
Jeruk  Manis  ( citrus  sinensis) masuk dalam  kelompok  budidaya  terbesar  yang ditanam  di  penjuru  dunia.  Total  produksi tahunan  terhitung  sekitar  70%  dari  spesies jeruk.  Secara  anatomis,  buah  terdiri  dari  dua daerah  yang  berbeda, pericarp ,  juga  disebut kulit  buah,  dan endocarp atau pulp dengan kelenjar  kantung  jus.  Kulit  terdiri  dari
epidermis  lilin  epikutikular  dengan  banyak kelenjar minyak aromatik kecil yang memberikan ciri khasnya bau. Pericarp terdiri dari  flavedo  luar  atau epicarp ,  sebagian  besar terbuat dari sel parenkim dan kutikula. Albedo atau mesocarp yang terletak  di  bawah flavedo terdiri  dari  sel-sel  seperti  tabung  yang bergabung  membentuk  massa  jaringan  yang terkompresi  ke  dalam  area  interseluler. 13 Terdapat beberapa flavonoid pada jeruk manis yaitu  7-O-rutinosida  (eriocitrin,  narirutin, hesperidin,  dan  didymin).  Kandungan  terbesar di  kulit  jeruk  berdasarkan  analisis  HPLC ( High-Performance  Liquid  Chromatography ) kuantitatif  menegaskan  bahwa  hesperidin adalah  glikosida  flavonoid  utama  yang ditemukan dalam kulit jeruk. 13
Beberapa  penelitian  in-vitro  tentang ekstrak  etanol  kulit  jeruk  berhasil  mengurangi patogen  periodontal  dengan  obat  kumur mengandung  ekstrak  hidroalkohol  kulit  jeruk. Selain itu dari penelitian sebelumnya penggunaan formula obat kumur ekstrak jeruk 4%  dari  keseluruhan  larutan  dapat  digunakan untuk  tujuan  jangka  pendek  tanpa  efek samping  potensial  sebagai  alternatif  dari  obat kumur Chlorhexidine 0,2% dalam mengurangi plak dan peradangan gingiva. 14
Senyawa bioaktif flavonoid yang dimanfaatkan  sebagai  pengurangan viral  load dan  transmisi  virus  SARS-CoV-2  melalui droplet yang diformulasikan dalam obat kumur adalah hesperidin. Sumber senyawa hesperidin melimpah  terdapat  pada  jeruk  terutama  kulit jeruk  manis.    Pada  kulit  jeruk  kaya  akan senyawa flavonoid dan antioksidan yang dapat membantu  mengurangi  peradangan. 14 Kulit jeruk merupakan salah satu limbah yang masih jarang  dimanfaatkan  selain  menjadi  kompos. Kulit  jeruk  memiliki  banyak  manfaat,  salah satunya bila  diekstraksi  dapat  dimanfaatkan kandungan hesperidinnya.

## Hesperidin
Hesperidin (C 28 H 34 O 15 ) diklasifikasikan sebagai glycoside  flavanone ,  mengandung hesperitin  (bentuk  aglycone)  dan  sukrosa. 15 Aktivitas  komputasi  yang  diusulkan  dari  78 obat  anti-virus  terhadap  reseptor  ACE2 manusia  disaring  menggunakan  pemodelan homologi.  Studi  ini  menunjukkan  bahwa hesperidin  adalah  satu-satunya  senyawa  yang dapat  menargetkan binding  interface antara SARS-CoV-2  Spike  dan  reseptor  manusia
ACE2.
Berdasarkan skrining virtual,
hesperidin  dapat  mengganggu  interaksi  ACE2 dengan RBD SARS-CoV-2 sehingga menghalangi masuknya ke dalam sel paru-paru (Gambar 1). 5
Hesperidin diharapkan dapat memblokir COVID-19  dengan  masuk  pada  sel  inang melalui  reseptor  ACE2  sehingga  infeksi  dapat dicegah. COVID-19 mengikat reseptor ACE-2 melalui urutan Spike-Receptor Binding Domain (RBD)  yang  secara  spesifiknya membentuk  kompleks  SARS-CoV-2-RBD-
ACE-2. Hesperidin dapat menganggu terjadinya  ikatan  antara spike SARS-CoV-2 dengan reseptor ACE2 sehingga SARS-CoV-2 akan terhalangi masuk ke dalam sel. 5 Penderita  yang  terinfeksi  COVID-19 menunjukkan apa yang disebut “badai sitokin” yang  dimulai  terutama  sebagai  respons inflamasi  dan  menghasilkan  produksi  penanda inflamasi  terlarut  yang  berlebihan  dan  tidak terkendali.  Bukti  yang  tersedia  menunjukkan bahwa  badai  sitokin,  merupakan  penyebab utama perkembangan acute respiratory distress syndrome (ARDS).
Badai  sitokin  melibatkan  pelepasan berbagai molekul  imun-aktif seperti  Interferon (misalnya  IFNγ),  interleukin  (misalnya  IL-1β, IL-2,  IL-6),  kemokin,  dan  tumor  necrosis factor-alpha (TNF-α). 5
Aktivitas  anti-inflamasi  yang  tinggi yang  dimiliki  Hesperidin  menghambat  sekresi sitokin  pro-inflamasi  seperti  IFN-γ  dan  IL-2. Selain  itu,  hesperidin  menghambat  respon inflamasi  yang  dirangsang  IL‑1  dengan menghambat aktivasi pensinyalan NFkB. Oleh karena itu, hesperidin dapat digunakan sebagai terapi  adjuvant  untuk  mengontrol  reaksi inflamasi parah terhadap COVID-19. Aktivitas anti-virus  hesperidin  dapat  dijadikan  alternatif pengobatan untuk COVID-19 dengan terjadinya  peningkatan  imunitas  seluler  inang terhadap  infeksi  dan  aktivitas  anti-inflamasi yang  dapat  membantu  mengendalikan  badai sitokin. 5
Gambar 1. Pengaruh Hesperidin pada profilaksis dan pengobatan Covid-19
Tabel 1. Kandungan Hesperidin dan Naringin Pada Berbagai Jenis Jeruk 15 Food source (g/kg fresh weight) Hesperidin Naringin Sweet orange 0.0256–0.393 0.000–0.017 Tangerine 0.043–0.471 0.000 Sour orange 0.000–0.005 0.061–0.341 Lime 0.052–0.430 0.000 Lemon 0.019–1.422 0.000–0.016 Grapefruit 0.000–0.18 0.000–0.48

## Metode Pembuatan Obat Kumur
Kulit  jeruk  manis  ( citrus  sinensis) berdasarkan  studi  yang  telah  dilakukan  dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  kumur  sebagai upaya  preventif  COVID-19.  Pembuatan  obat kumur dilakukan dengan cara ekstraksi hingga penambahan  larutan.  Ekstraksi  hesperidin secara  sederhana  dapat  dilakukan  metode ekstraksi alkalin dengan cara merendam albedo (bagian putih kulit jeruk) yang telah dipisahkan  dari  flavedo  (bagian  kuning  kulit jeruk)  dalam  larutan  alkalin  seperti  NaOH dengan  pH  11-11.5  pada  temperatur  ruangan. Larutan    yang  dihasilkan  diasidifikasi  untuk mendapatkankan  pH  sekitar  4.2-4.5  diikuti dengan  pemanasan  selama  12-24  jam.  Akhir dari metode ekstraksi alkalin  akan didapatkan hasil  berupa  kristal  hesperidin.  Metode ekstraksi  alkalin  terbatas  untuk  flavonoid kompleks  yang  mengandung  hesperidin  60%- 70%,  selain  itu  prosedur  ini  juga  memakan waktu  yang  cukup  lama,  serta  membutuhkan asam dan basa dalam jumlah banyak. 4
Ketidakefektifan waktu ekstraksi, penggunaan  alkali  dan  asam  dalam  jumlah banyak,  serta  terbatas  hanya  untuk  flavonoid komplek dengan jumlah hesperidin diatas 60% dari  penggunaan  metode  ekstraksi  alkalin, maka  direkomendasikan  metode  yang  lebih efektif dan efisien yaitu menggunakan ekstraksi  hidroalkohol dengan  pelarut  yang umum  digunakan  berupa  metanol  atau  etanol. Metode  ekstraksi  hidroalkohol  selalu  diikuti dengan  prosedur  purifikasi  flavonoid  dengan tahapan  adsorpsi  resin  untuk  menghasilkan larutan  berkonsentrasi  tinggi  yang  kemudian akan  menghasilkan  kristal  hesperidin  dalam jumlah lebih banyak.
Dalam skala laboratorium,  rendaman  kulit  jeruk  pada pelarut
hidroalkohol diagitasi dengan
kecepatan  120  rpm  dan  suhu  50 °C  selama  4 jam. 16 Campuran  pelarut  organik  dan  kulit jeruk dikeringkan di rotary evaporator dengan tekanan rendah dan suhu 45°C. Air ditambahkan  ke  dalam  campuran  ekstraksi kulit  jeruk  dan  metanol.  Selama  30  menit larutan  tersebut  diaduk  pada  suhu  60°C-70°C sebelum  dipindahkan  ke  dalam  corong  pisah. Penambahan Diklorometana ke dalam campuran  ditujukan  untuk  melarutkan  kulit jeruk ke dalam pelarut (meningkatkan persentase  kelarutan).  Campuran  selanjutnya akan  disimpan  di  dalam  labu  erlenmeyer tertutup  dengan  kondisi  temperatur  ruangan hingga  layer  organik  tidak  ada  dalam campuran dan kristal hesperidin akan terbentuk setelah melalui proses filtrasi dan pengeringan dengan menggunakan desikator. 17
Tahap  purifikasi  hesperidin  umumnya menggunakan  resin  FPX66  dan  EXA-118, kedua  resin  diaktivasi  selama  satu  malam menggunakan  metanol bed  volume (volume minimum  pelarut  yang  dibutuhkan  untuk membasahi  sorben  hingga  kuantitas  yang diinginkan  pada  kolom  kromatografi)  dan dicuci dengan air deionisasi sebelum digunakan.  Untuk  meningkatkan  kelarutan hesperidin  dan  memastikan  distribusi  partikel pelarut  dan  zat  terlarut  seimbang  maka digunakan dimetil sulfoksida. Adsorbsi dilakukan  secara  adsorbsi  kinetik  dengan menambahkan resin kedalam ekstrak hesperidin  pada  temperatur  ruang.  Campuran diaduk  dengan orbital  shaker berkecepatan 150 rpm selama 5 jam. Sampel dari campuran akan  diambil  dalam  waktu  yang  berbeda selama  pengadukan  untuk  mengetahui  total flavonoid yang terkandung, 16
Kandungan
hesperidin yang diekstraksi  dari citrus  sinensis kemudian
dianalisis  dengan  menggunakan  teknik  HPLC. Sampel  hasil  ekstraksi  diambil  sebanyak  10 mikro  liter  untuk  difiltrasi  menggunakan suntikan  filter  berukuran  0,45  mikro  meter  ke dalam  unit  HPLC.  Sampel  dielusi  (pemisahan suatu campuran) dengan metode elusi isokratik yaitu  digunakannya  komposisi  pelarut  yang konstan selama proses pemisahan. Fase seluler selama  pemisahan  terdiri  atas  air  (40%  air asidifikasi  dengan  asam  asetatnya  0,1%)  dan 60% metanol. Identifikasi hesperidin dilakukan dengan  sinar  ultraviolet  yang  mempunyai panjang gelombang 280 nm. Semua sampel di filtrasi  dengan  membran  0,45  mikrometer kemudian  dilakukan  sonikasi  (pemanfaatan gelombang ultrasonik untuk memecah senyawa). 16
Metode  HPLC  yang  digunakan  untuk mencari  kuantitas  hesperidin  dalam  sampel perlu  adanya  proses  validasi.  Parameter validasi  pertama  yaitu  berupa  linearitas, tujuannya  untuk  mengetahui  seberapa  besar tingkat error yang dihasilkan berdasarkan nilai regresi  dari  kurva  yang  ditunjukkan.  Kurva linearitas menampilkan plot antara luas puncak standar  setiap  tingkat  terhadap  konsentrasi sampel setiap injeksi. Semakin mendekati nilai 1  maka  regresi  semakin  baik  artinya  tingkat ke-erroran sangat kecil. 18 Parameter selanjutnya yaitu Limit Deteksi  (LoD)  dan  Limit  Kuantisasi  (LoQ). Nilai  LoD  merupakan  parameter  uji  batas terkecil  yang  dimiliki  oleh  suaty  instrumen untuk  menentukan  konsentrasi  terendah  dari analit  yaitu  hesperidin  dalam  sampel  yang dapat  terdeteksi.  Nilai  LoD  yang  dihasilkan tidak  perlu  memenuhi  kriteria  akurasi  dan presisi. Kriteria akurasi standart adalah kurang dari 5% sedangkan batas nilai presisi jika nilai standar  deviasi  relatif  kurang  dari  ⅔. Sedangkan  LoQ  adalah  konsentrasi  terendah yang  masih  dapat  ditentukan  untuk memenuhi kriteria  akurasi  dan  presisi. 19 Nilai  LoD  dan LoQ  pada  penentuan  hesperidin  dilakukan dengan  menghitung  perbandingan  dari  nilai kebisingan dasar dan sinyal analit. 18 Formula obat kumur dengan bahan dasar ekstrak  kulit  jeruk  yang  berupa  hesperidin yang  dihasilkan  melalui  proses  ekstraksi hidroalkohol  diencerkan  dengan  air  suling untuk  membuat  larutan  4%(v/v).  Zat  lain berupa aspartam ditambahkan ke dalam larutan sebagai  agen  pemanis  dalam  obat  kumur. Selain  itu  Sodium  Benzoat  sebanyak  0,1  g
ditambahkan sebagai pengawet. 14 Untuk meningkatkan  ketersediaan  zat  bioaktif  yang diformulasikan  sebagai  produk  obat  dalam konteks  obat  kumur  maka  perlu  adanya penambahan Siklodekstrin. Senyawa Siklodekstrin merupakan senyawa alami turunan  glukosa  dengan  struktur  siklik  kaku. Dengan  penambahan  siklodekstrin  selain meningkatkan  fungsi  zat  biologi  dalam  obat juga  berfungsi  meningkatkan  kelarutan  zat dalam air. 6

## KESIMPULAN
Berdasarkan uraian diatas dapat disimpulkan  bahwa COVID-19  memiliki tingkat  penularan  tinggi,  jangka  waktu  gejala yang  panjang,  belum  adanya  terapi  definitif, dan  pada  beberapa  kasus  ditemui  panjangnya waktu  tunggu  pelayanan  khususnya  di  unit perawatan intensif. Penularan sindrom pernapasan  akut  berat  akibat  coronavirus  2 (SARS-CoV-2) terjadi terutama dengan perantara  droplet  dan  bersentuhan  dengan permukaan  yang  terkontaminasi.  Penggunaan obat  kumur  dapat  menjadi  salah  satu  upaya menurunkan viral  load coronavirus  2  (SARS- CoV-2)  pada  rongga  mulut.  Sediaan  obat kumur  yang  mengandung  hesperidin  imunitas seluler  inang  terhadap  infeksi  dan  aktivitas anti-inflamasi.  Dengan  demikian  obat  kumur yang  mengandung  hesperidin  dapat  dibuat dalam  formulasi  terapeutik  sebagai  kontrol terhadap  mikrobiota  pada  rongga  mulut, termasuk coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Penelitian terkait formula ini disarankan untuk segera  dikembangkan  sehingga  efisiensi  obat kumur dapat diketahui.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Sanders JM, Monogue ML, Jodlowski TZ dan Cutrell JB. Pharmacologic treatments for  coronavirus  disease  2019  (COVID- 19):  a  review. JAMA ,  2020.  323(18),
1824-1836
2. Situasi Covi-19 Nasional. https://covid19.go.id/situasi,  diakses  pada 04 September 2020
3. Wiersinga  WJ,  Rhodes  A,  Cheng  AC, Peacock SJ, dan Prescott HC. Pathophysiology,  transmission,  diagnosis, and treatment of coronavirus disease 2019 (COVID-19):  a  review. JAMA ,  2020.
324(8):782-93
4. Meneguzzo F, Ciriminna R, Zabini F dan
Pagliaro M. Review of Evidence Available on Hesperidin-Rich Products as Potential  Tools  against  COVID-19  and Hydrodynamic Cavitation-Based Extraction  as  a  Method  of  Increasing
Their  Production. Processes ,  2020.  8(5),
549.
5. Haggag  YA.,  El-Ashmawy  NE,  dan Okasha,  KM.  Is  Hesperidin  Essential  for Prophylaxis and  Treatment  of  COVID-19 Infection?, Medical  Hypotheses, 2020.
144: 109957.
doi:10.1016/j.mehy.2020.109957
6. Xu  H,  Zhong,  Deng  J,  Peng  J,  Dan  H, Zeng,  X,  et  al.  High  expression  of  ACE2 receptor  of  2019-nCoV  on  the  epithelial cells of oral mucosa. International journal of oral science , 2020. 12(1), 1-5.
7. Carrouel  F,  Conte  MP,  Fisher  J., Gonçalves LS, Dussart C, Llodra JC, dan
Bourgeois, D. COVID-19: A
Recommendation  to  Examine  the  Effect of  Mouthrinses  with  β-Cyclodextrin
Combined  with  Citrox  in  Preventing Infection  and  Progression. Journal  of Clinical  Medicine ,  2020.  9(4),  1126. doi:10.3390/jcm9041126
8. Wu F, Wang A, Liu M, Wang Q, Chen J, Xia S, Ling, Y. Zhang Y, Xun, J, Lu L, et al.  Neutralizing  antibody  responses  to SARS-CoV-2  in  a  COVID-19  recovered patient  cohort  and  their  implications. medRxiv (unpublished). 2020
9. Walsh KA, Jordan K, Clyne B, Rohde D, Drummond  L,  Byrne  P.,et  al  (2020). SARS-CoV-2  detection,  viral  load  and infectivity over the course of an infection: SARS-CoV-2  detection,  viral  load  and infectivity . J Infect , 2020. 81:357-71
10. To  KKW,  Tsang  OTY,  Yip  CCY,  Chan KH, Wu TC, Chan JMC, et al. Consistent detection  of  2019  novel  coronavirus  in saliva. Clin Infect Dis , 2020. 28;71(15):841-843. doi:
10.1093/cid/ciaa149
11. Azzi  L,  Carcano  G,  Gianfagna  F,  Grossi P,  Dalla  Gasperina  D,  Genoni  A.,  et  al. Saliva  is  a  reliable  tool  to  detect  SARS- CoV-2. J  Infect ,  2020  Jul;81(1):e45-e50. doi: 10.1016/j.jinf.2020.04.005.
12. Herrera D, Serrano J, Roldán S, dan Sanz, M.  Is  the  oral  cavity  relevant  in  SARS-
CoV-2 pandemic?. Clinical oral investigations . 2020. 24(8), 2925-2930. 13. Favela-Hernández JMJ, González- Santiago O, Ramírez-Cabrera MA, Esquivel-Ferriño  PC,  dan  Camacho- Corona, MDR. Chemistry and
Pharmacology  of  Citrus  sinensis .  2016.
Molecules, 21(2), 247.
14. Mandal A, Manohar B, Shetty N, Mathur A,  Makhijani  B  dan  Sen  N.  A Comparative Evaluation of Anti- Inflammatory  and  Antiplaque  Efficacy  of Citrus Sinesis Mouthwash
and
Chlorhexidine  Mouthwash. Journal  of Nepalese  Society  of  Periodontology  and Oral  Implantology, 2018.  2(1),  9–13.
doi:10.3126/jnspoi.v2i1.23602
15. Yumol JL, dan Ward WE. The Polyphenolic  Compound  Hesperidin  and Bone Protection. In Polyphenols:
Mechanisms  of  Action  in  Human  Health and  Disease. Academic  Press. (pp.  431- 440). 2018. doi:10.1016/b978-0-12-
813006-3.00032-5
16. Rosa  JDP,  Palomino  PR,  Guevara  EA, Fajardo  JG,  Sandoval  G  dan  Morales GMG. A Green Process for the Extraction and  Purification  of  Hesperidin  from Mexican  Lime  Peel  (Citrus  aurantofiia Swingle)  that  is  Extendible  to  the  Citrus Genus. Processes . 2018. 6, 266.
doi:10.3390/pr6120266
17. Victor  MM,  David  JM,  Cortez  MVM, Leite  JL,  dan  Silva  GSB.  A  High-Yield Process for Extraction of Hesperidin from Orange  (Citrus  Sinensis  L.  osbeck)  Peels Waste adn Its Transformation to
Diosmetin,  A  Value  and  Biosactive Flavonoid, Processes 27(2), 2020.
Doi:10.1007/s12649-020-00982-x
18. Satinsky,  D.,  Katerina  J  dan    Lucie Havlikova.  A  New  and  Fast  HPLC Method  for  Determination  of  Rutin, Troxerutin,  Diosmin,  and  Hesperidin  in Food  Supplements  Using  Fused-Core Column  Technology. Springer ,  2012.
6(5). Doi:10.1007/s2161-012-9551-y
19. Torowati dan Galuh, BS. Penentuan Nilai Limit  Deteksi  dan  Kuantisasi  Alat  Titrasi Potensiometer  Untuk  Analisa  Uraniuum PIN , 2014. 13, ISSN1979-2409