Pengaruh Kombinasi Jenis Bahan Pembawa dan Lama Masa Simpan yang Berbeda terhadap Produksi Pelet Biofungisida Trichoderma harzianum

## Juni Safitri Muljowati dan Purnomowati
Laboratorium Mikologi dan Fitopatologi Fakultas Biologi Unsoed

## Abstract
This research  aimed to know  effect of carrier  material  combination and different storage duration on viability of T. harzianum , also to know the material type and storage duration  which yielding highest conidia.   Method used in this research was experimental by using Completely Randomized Design (CRD) with factorial pattern. The first factor was type of carrying material that were white sticky rice meal, mix of 75% white sticky rice meal and 25% mungbean meal, mix of 75% white sticky rice meal and 25% soybean meal, and mix of 75% white sticky rice meal and 25% skim milk that each of such material was inoculated by 10 8 conidia/ml of T. harzianum with storage duration levels that were 0 weeks, 3 weeks, 6 weeks, and 9 weeks.  Obtained data was analyzed by analysis of variance (F test) with significantly level 95% and 99% and followed by Honestly Significant Difference (HSD).   Result showed that there was interaction between types of carrying material   with   pellet   storage   period   that   showed   significant   effect   on   viability   of T.  harzianum . Carrying material type of white sticky rice meal with pellet storage period of 9 weeks resulting highest percentage acerrage of conidia seedling (viability) of T. harzianum that was 78,19%.
Keywords :  Viability, pellet of Trichoderma harzianum , carrying material, storage duration

## Pendahuluan
Trichoderma merupakan salah satu jamur antagonis yang digunakan sebagai agen biokontrol karena memiliki kemampuan untuk mengurangi kepadatan inokulum patogen dan menekan perkecambahan atau pertumbuhan patogen melalui kompetisi, antibiosis dan mikoparasitisme jamur patogen tular tanah. Papavizas (1985)  menyatakan bahwa Trichoderma dapat   digunakan   sebagai   agen   biokontrol   untuk   mengendalikan   patogen tular tanah pada berbagai jenis tanaman seperti Rhizoctonia solani , Fusarium oxysporum , dan Schlerotium rolfsii . Jamur ini dapat menghasilkan selulase yang memiliki komponen enzim   lengkap,   yaitu   C 1 (selobiohidrolase)   yang   aktif   merombak   selulosa   alami,   β- glukanase yang aktif merombak selulosa terlarut seperti CMC ( Carboxyl Methyl Cellulose ) dan β-glukosidase.   Ketiga komponen tersebut bekerja secara sinergis dalam memecah komplek substrat (Salma & Gunarto, 1996).
Salah satu spesies dari genus Trichoderma yang banyak dikembangkan yaitu T. harzianum .   Jamur ini banyak diproduksi secara komersial dalam berbagai bentuk dan kemasan untuk mengendalikan perkembangan jamur patogen tular tanah (Roco & Perez, 2001).     Menurut  Alexopoulos et   al. (1996), T.  harzianum termasuk   ke   dalam   Classis Deuteromycetes, Ordo Hypocreales dan Famili aHypocreaceae.  Jamur ini termasuk jenis jamur   tanah,   bersifat   kosmopolit,   mudah   diisolasi   dari   tanah   (Gandjar,   1999),   laju pertumbuhannya   cepat,   menghasilkan   berjuta-juta   spora   sehingga   memiliki   daya kompetitif yang tinggi (Chang & Baker 1986), mampu bertahan pada kondisi yang tidak menguntungkan   dan   mempunyai   sifat   antagonisme   mikoparasit,   menghasilkan   enzim kitinase, β-1-3 glukanase dan β-glukosidase (Wahyudi, 2001).
Penggunaan T.  harzianum sebagai   agen   biokontrol   memiliki   prospek   yang   baik karena   sifat   antagonismenya   dapat   menekan   pertumbuhan   patogen   yang   terdapat   di dalam tanah dan juga dapat memacu pertumbuhan tanaman (Djatmiko & Rohadi, 1997; Wahyudi, 1999). Trichoderma banyak diaplikasikan dalam bentuk biakan berupa substrat seperti campuran dedak padi dan serbuk gergaji, pasir dan tepung kulit sekam, pasir dan tepung   jagung   serta   penambahan   kulit   sekam   (Dharmaputra   &   Suwandi,   1998 dalam
Salamiah et al. , 2003).   Cara pemberian dalam bentuk substrat tersebut dirasa kurang efektif untuk diaplikasikan di lapangan, terutama untuk tujuan aplikasi dalam skala luas. Oleh karena itu, perlu dilakukan pengkajian lebih lanjut untuk mengetahui jenis bahan pembawa   dan   formulasi   yang   lebih   efektif.    Bahan   pembawa   yang   digunakan   harus mengandung   nutrisi   yang   dibutuhkan   oleh T.   harzianum .    Stamets   &   Chilton   (1983) menyatakan bahwa nutrisi dibutuhkan oleh jamur untuk berbagai proses metabolisme di dalam sel dalam rangka menghasilkan sumber energi yang cukup untuk pertumbuhanya. Menurut   Papavizas   (1986),   jamur Trichoderma membutuhkan   nutrisi   sebagai   sumber energi untuk pertumbuhannya.  Unsur terpenting yang harus terdapat dalam media alami maupun buatan yaitu unsur karbon (C) dan nitrogen (N). Selanjutnya,  Wahyudi (1999) menyatakan bahwa terdapat tiga bentuk biofungisida jamur T. harzianum dalam teknik aplikasi di lapangan yaitu bentuk pelet, granular dan terformulasi cair.   Masing-masing bentuk tersebut berbeda jenis bahan pembawa dan teknik aplikasinya yaitu (1) bentuk pelet. Bentuk pelet merupakan produk yang berbentuk seperti tablet yang terbuat dari campuran sekam padi, bekatul ataupun tepung dengan jamur Trichoderma yang memiliki diameter X tebal = 1 cm X 1 cm; (2) Bentuk granular .  Bentuk granular merupakan produk yang berbentuk seperti hasil percampuran matriks dan konidia jamur seperti Trichoderma ; dan (3)   Bentuk   terformulasi   cair .     Bentuk   terformulasi   cair   merupakan   produk   yang terformulasi dalam bentuk cair terlarut ataupun tersuspensi.  Dari ketiga bentuk formulasi tersebut, menurut Salamiah et al. (2003) bentuk pelet merupakan formulasi yang paling praktis   karena   ukurannya   yang   kecil   sehingga   praktis   untuk   dibawa   dan   diaplikasikan dalam skala yang luas.

## Materi dan Metode
Penelitian   ini   dilaksanakan   di   Laboratorium   Mikologi   dan   Fitopatologi   Fakultas Biologi Unsoed selama empat bulan.
Penyiapan pelet biofungisida T. harzianum . Tepung ketan putih dan kombinasi atau campuran tepung ketan putih dengan tepung kacang ijo, tepung kedelai, dan susu skim (sesuai   dengan   perlakuan)   masing-masing   ditimbang   sebanyak   100   gram.     Ke   dalam tepung   tersebut   dimasukkan   5   g   tepung   bawang   putih   (sebagai   antibiotik)   kemudian dibungkus dengan amplop kertas, selanjutnya disterilkan di dalam oven pada suhu 80°C selama 24 jam.   Setelah suhu tepung menurun, tepung tersebut dimasukkan ke dalam cawan   Petri   besar   berdiameter   14   cm,   kemudian   ditambahkan   60   ml   akuades   steril sampai   terbentuk   adonan   tepung   yang   tidak   lengket   di   tangan.     Suspensi   konidia T. harzianum dengan   konsentrasi   10 7 konidia/ml   sebanyak   20   ml   dicampurkan   dengan tepung  kemudian  dihomogenkan  agar  konidia  tersebar merata dalam   media.     Setelah homogen, tepung dipadatkan sampai ketebalan 1 cm.   Media tepung yang telah padat kemudian dibor (dibentuk dengan bor gabus) hingga membentuk pelet berdiameter 1 cm. Butiran pelet kemudian dikeringkan di dalam oven dengan suhu 40°C selama 24 jam. Pelet biofungisida T harzianum yang telah kering (Gambar 3) dibungkus menggunakan aluminium foil atau plastik kemudian diinkubasi dalam ruang sesuai dengan perlakuan. Lama   penyimpanan   sesuai   dengan   perlakuan   yaitu   0,   3,   6,   dan   9   minggu.     Semua tahapan   dalam   pembuatan   dan   penyiapan   pelet   biofungisida T.  harzianum dilakukan secara aseptis (Salamiah et al. , 2003). Rancangan percobaan. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan rancangan   percobaan   yang   digunakan   yaitu   Rancangan   Acak   Lengkap   (RAL)   pola faktorial. Faktor pertama adalah kombinasi/campuran jenis bahan pembawa, yaitu 100% tepung beras ketan putih (T1); campuran 75% tepung   beras ketan putih dengan 25% tepung kacang ijo (T2); campuran 75% tepung ketan putih dengan 25% tepung kedele (T3); dan campuran 75% tepung ketan putih dengan 25% susu skim (T4). Faktor kedua adalah lama penyimpanan (waktu), yaitu 0 minggu (W1), 3 minggu (W2), 6 minggu (W3), dan 9 minggu (W4).  Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 3 kali ulangan, sehingga diperoleh 48 unit percobaan.
Peubah yang diamati adalah viabilitas T. harzianum yang direpresentasikan dalam persentase perkecambahan konidia. Parameter utama yang diukur adalah jumlah konidia
awal   dan   jumlah   konidia   akhir,   sedangkan   parameter   pendukung   yaitu   kecepatan munculnya koloni, pH media, temperatur dan kelembaban ruang inkubasi, dan rasio C/N. Penghitungan   persentase   perkecambahan   (viabilitas)   konidia T.   harzianum dilakukan dengan menghitung dengan rumus  menurut Hadioetomo (1994).   Data yang diperoleh dianalisis menggunakan uji F dan dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Jujur pada tingkat kepercayaan 95% dan 99% (Steel and Torrie, 1991).

## Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan   hasil   penelitian   yang   diperoleh   dapat   diketahui   bahwa   viabilitas T. harzianum yang direpresentasikan dalam persentase perkecambahan konidia (%) dari beberapa   jenis   bahan   pembawa   dan   lama   waktu   penyimpanan   pelet   yang   berbeda menunjukkan  viabilitas  rata-rata  tertinggi  adalah   perlakuan T1W4.    Perlakuan  tersebut yaitu bahan pembawa tepung beras ketan putih dengan lama waktu penyimpanan pelet selama 9 minggu menghasilkan viabilitas tertinggi yaitu sebesar 78,19%.  Viabilitas rata- rata   terendah   adalah   perlakuan   T3W1   yaitu   pada   bahan     pembawa   campuran   75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kedele, dengan lama waktu penyimpanan pelet   selama   0   minggu   sebesar   51,08%.    Data   selengkapnya   dapat   dilihat   pada Gambar  1.
Jenis Bahan Pembawa R at a -r at a V ia b il it as T. h ar zi an um ( % ) 100 80 60 40 20 0 W1 W2 W3
W4 T1 T2 T3 T4
Gambar 1. Histogram   Hubungan   antara   Beberapa   Jenis   Bahan   Pembawa   dan   Lama Waktu Penyimpanan dengan Rata-rata Viabilitas T. harzianum (%) Figure 1.  Relationship histogram among carrier materials and storage duration with mean viability of T. harzianum (%)
Keterangan : T1= Pelet T. harzianum dengan bahan pembawa tepung beras ketan putih 100%;
T2=   Pelet T.  harzianum dengan   bahan   pembawa   campuran   75%   tepung   beras   ketan   putih dengan 25% tepung kacang ijo;
T3=   Pelet T.  harzianum dengan   bahan   pembawa   campuran   75%   tepung   beras   ketan   putih dengan 25% tepung kedele;
T4=   Pelet T.  harzianum dengan   bahan   pembawa   campuran   75%   tepung   beras   ketan   putih dengan 25% susu skim;
W1= lama waktu penyimpanan 0 minggu; W2= lama waktu penyimpanan 3 minggu;
W3= lama waktu penyimpanan 6 minggu; dan W4= lama waktu penyimpanan 9 minggu.
Jamur dalam pertumbuhannya membutuhkan nutrisi yang cukup sebagai sumber energi untuk pertumbuhan yang optimal.   Sumber nutrisi tersebut diperoleh dari media atau   substrat   tempat   tumbuh   jamur   tersebut.     Penggunaan   beberapa   jenis   bahan pembawa bertujuan  memberikan sumber nutrisi bagi pertumbuhan jamur.   Kandungan nutrisi yang terkandung dalam bahan pembawa merupakan faktor penting  yang dapat mempengaruhi pertumbuhan T. harzianum dan mempengaruhi pula viabilitas (daya tahan hidup).  Menurut   Papavizas   (1986),   jamur Trichoderma membutuhkan   nutrisi   sebagai sumber   energi   untuk   pertumbuhannya.     Unsur   terpenting   yang   harus   terdapat   dalam media alami maupun buatan yaitu unsur karbon (C) dan nitrogen (N). Peranan vitamin dan mineral dalam media yang berfungsi sebagai komponen pendukung pertumbuhan
dapat   diabaikan.     Bilgrami   dan   Verma   (1978)   menyatakan   bahwa   unsur   karbon   dan nitrogen sangat penting dibutuhkan oleh jamur untuk meningkatkan jumlah dan viabilitas konidia.   Unsur karbon dibutuhkan dalam proses pertumbuhan sebagai sumber energi dan sintesis komponen sel untuk memperbaiki sel-sel yang rusak.  Unsur ini dibutuhkan oleh jamur dalam bentuk karbohidrat seperti monosakarida, disakarida, dan polisakarida. Unsur   nitrogen   dibutuhkan   untuk   mendukung   proses   pertumbuhan   vegetatif   dan pembentukkan organel sel.  Unsur ini dibutuhkan oleh jamur dalam bentuk nitrat (NO 3 - ), nitrit (NO 2 - ), ammonium (NH 4 + ), N organik dan asam amino serta protein. (Garraway & Evans, 1984). Menurut Tjokrokusumo et al. (2004), sebagian besar unsur karbon yang dibutuhkan oleh jamur yaitu sebagai sumber energi yang digunakan dalam pertumbuhan dan perbanyakan sel, sedangkan nitrogen diperlukan untuk pertumbuhan melalui proses sintesis protein.
Waktu penyimpanan pelet yang cukup lama juga akan mempengaruhi viabilitasnya. Menurut Salamiah et al. (2003), jenis bahan pembawa yang digunakan dalam formulasi pelet T. harzianum dan lama waktu penyimpanan akan mempengaruhi viabilitasnya.
Tabel 1.   Analisis Ragam Viabilitas T. harzianum (%) pada beberapa macam campuran bahan Pembawa dan Lama Waktu Penyimpanan yang Berbeda
Table 1.  Analysis of variances of T. harzianum (%)  viability on several  carrier material combination and different storage duration
Hasil analisis ragam menggunakan uji F pada tingkat kepercayaan 95% dan 99% (Tabel 1) menunjukkan bahwa interaksi antara macam bahan pembawa dan lama waktu penyimpanan  pelet  memberikan  pengaruh yang nyata  yaitu meningkatkan  viabilitas T. harzianum .  Untuk mengetahui perbedaan antara perlakuan pada beberapa jenis bahan pembawa dan lama waktu penyimpanan dilakukan uji beda Nyata Jujur (BNJ) dengan tingkat kepercayaan 95%.  Hasil uji BNJ ditampilkan pada Tabel 2 sebagai berikut :
Hasil uji BNJ dengan tingkat kepercayaan 95% pada perlakuan T1W4 yaitu bahan pembawa  tepung beras  ketan  putih dengan  lama  waktu penyimpanan   pelet  selama  9 minggu menunjukkan viabilitas tertinggi (78,19%) dibandingkan dengan perlakuan yang lain.   Perlakuan T3W1 yaitu bahan pembawa campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kedele, dengan lama waktu penyimpanan pelet selama 0 minggu menunjukkan viabilitas terendah (51,08%) dibandingkan dengan perlakuan lain.   Hal ini menunjukkan   bahwa   terjadi   interaksi   antara   bahan   pembawa   dan   lama   waktu penyimpanan yang memberikan pengaruh terhadap viabilitas T. harzianum .   Selain itu, dapat   diketahui   pula   bahwa   perlakuan   yang   memberikan   viabilitas T.  harzianum yang tertinggi adalah bahan pembawa tepung beras ketan putih dengan lama penyimpanan 9 minggu.
Menurut   Papavizas   (1986),   jamur Trichoderma membutuhkan   nutrisi   sebagai sumber   energi   untuk   pertumbuhannya.  Unsur   terpenting   yang   harus   terdapat   dalam media alami maupun buatan yaitu unsur karbon (C) dan nitrogen (N).   Peranan vitamin dan mineral dalam media yang berfungsi sebagai komponen pendukung pertumbuhan dapat   diabaikan.     Bilgrami   dan   Verma   (1978)   menyatakan   bahwa   unsur   karbon   dan nitrogen sangat penting dibutuhkan oleh jamur untuk meningkatkan jumlah dan viabilitas konidia.
Sumber variasi Derajat Bebas Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F hitung F tabel 5% 1% Perlakuan T W T x W Galat 15 3 3 9 32 2055,624 480,859 1418,810 155,955 215,054 137,042 160,286 472,937 17,328 6,721 20,390 ** 23,849 ** 70,367** 2,578* 2,01 2,92 2,92 2,21 2,70 4,51 4,51 3,07 Total 47 2270,680
Tabel 2.  Hasil   uji   BNJ   Viabilitas T.   harzianum (%)   pada   beberapa   macam   bahan pembawa dan lama waktu penyimpanan yang berbeda.
Table   2.  Honestly   Significant   Difference   (HSD)   test   of T.  harzianum viability  (%)  on several carrier material combination and different storage duration
Perlakuan Rata-rata Persentase Perkecambahan Konidia (Viabilitas) T. harzianum (%) T1W1 T1W2 T1W3 T1W4 T2W1 T2W2 T2W3 T2W4 T3W1 T3W2 T3W3 T3W4 T4W1 T4W2 T4W3 T4W4 58,89  ef 62,28  bcde 66,55  b 78,19  a 51,69  g 59,54  def 63,75  bc 65,48  bc 51,08  g 57,88  f 61,94  cde 63,39  bc 51,16  g 57,99  f 63,16  bcd
64,33  bc
Keterangan : Data dalam uji BNJ telah ditransformasi ke dalam Arc sin √%. Angka yang diikuti dengan   huruf   yang   sama   menunjukkan   berbeda   tidak   nyata   pada   tingkat kepercayaan 95%
Unsur karbon dibutuhkan dalam proses pertumbuhan sebagai sumber energi dan sintesis komponen sel untuk memperbaiki sel-sel yang rusak.  Unsur ini dibutuhkan oleh jamur   dalam   bentuk   karbohidrat   seperti   monosakarida,   disakarida   dan   polisakarida. Unsur   nitrogen   dibutuhkan   untuk   mendukung   proses   pertumbuhan   vegetatif   dan pembentukkan organel sel.   Unsur ini dibutuhkan oleh jamur dalam bentuk nitrat (NO 3 - ), nitrit (NO 2 - ), ammonium (NH 4 + ), N organik dan asam amino serta protein (Garraway dan Evans, 1984).   Menurut Tjokrokusumo et al. (2004), sebagian besar unsur karbon yang dibutuhkan oleh jamur yaitu sebagai sumber energi yang digunakan dalam pertumbuhan dan perbanyakan sel, sedangkan nitrogen diperlukan untuk pertumbuhan melalui proses sintesis protein. Hasil uji kandungan unsur C, N, dan rasio C/N dari keempat jenis bahan pembawa ditampilkan pada Tabel 3.
Tabel 3.  Kandungan unsur karbon, nitrogen, dan rasio C/N empat jenis bahan pembawa Table 3. Carbon, nitrogen, and C/N ration content of four types of carrier materials
Moerdiati et   al. (1999)   menyatakan   bahwa   salah   satu   faktor   yang   berpengaruh terhadap   kualitas   media   pertumbuhan   jamur   adalah   rasio   C/N.     Pada   penelitian   ini, rasioC/N   tertinggi   sebesar   14,29   (tepung   beras   ketan   putih),sedangkan   rasio   C/N
No Jenis Bahan Pembawa C (%) N (%) Rasio C/N 1. 2. 3. 4. Tepung Beras Ketan Putih Campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kacang ijo Campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kedele Campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% susu skim 26,3 52,0 38,4 48,1 1,82 5,44 6,21 6,78 14,29 9,56 6,12 7,08
terendah   yaitu   6,12   (campuran   75%   tepung   beras   ketan   putih   dengan   25%   tepung kedele).   Menurut Musnamar (2004), rasio C/N yang terlalu tinggi dalam substrat hidup suatu mikroorganisme dapat menjadi faktor penghambat pertumbuhan.   Lopez (2002), menyatakan bahwa kondisi substrat dengan C berlebih dan sumber N yang berkurang akan menjadi faktor penghambat pertumbuhan miselium jamur.   Menurut Aiman (1999), rasio C/N yang terkandung dalam substrat pertumbuhan jamur yang baik adalah relatif rendah atau hampir sama dengan tanah yaitu berkisar antara 10 – 20.  Rasio C/N berkisar antara 10-20 dapat memacu pertumbuhan miselium jamur dan meningkatkan produksi konidia,   sedangkan   rasio   C/N   yang   terlalu   tinggi   dapat   menghambat   pertumbuhan miselium dan menurunkan produksi konidia.
Selain   kandungan nutrisi yang  terdapat  di dalam masing-masing  jenis campuran bahan   pembawa,   lama   waktu   penyimpanan   pelet   memberikan   pengaruh   terhadap viabilitas T.  harzianum .     Lama   waktu   penyimpanan   pelet   selama   0   minggu   sampai   9 minggu menunjukkan viabilitas yang terus meningkat disetiap jenis bahan pembawa.  Hal ini   didukung   dengan   semakin   bertambahnya   jumlah   konidia   awal   di   dalam   pelet   dan meningkatnya   jumlah   konidia   yang   berkecambah   (jumlah   konidia   akhir)   selama   waktu penyimpanan   sehingga   viabilitas T.  harzianum semakin   meningkat   seiring   lama   waktu penyimpanan disetiap jenis campuran bahan pembawa.  Lama waktu penyimpanan pelet selama 9 minggu merupakan waktu yang menghasilkan viabilitas tertinggi untuk setiap jenis campuran bahan pembawa.  Hal tersebut karena kandungan nutrisi yang terkandung di dalam masing-masing campuran bahan pembawa memberikan kebutuhan nutrisi yang cukup bagi pertumbuhan T. harzianum selama waktu penyimpanan pelet 9 minggu. Salamiah et   al. (2003)   menyatakan   bahwa   viabilitas T.   harzianum yang diformulasikan dalam bentuk pelet dengan bahan pembawa berupa tepung beras ketan putih,   beras  IR66   dan   jagung   manis   yang   disimpan   selama   8   minggu   menghasilkan viabilitas yang terus meningkat.  Viabilitas T. harzianum tertinggi yaitu pada tepung beras ketan putih dengan lama waktu penyimpanan 8 minggu.  Namun demikian, semakin lama waktu penyimpanan pelet yang dilakukan maka dimungkinkan viabilitas T harzianum akan semakin   menurun   seiring   ketersediaan   nutrisi   dan   kondisi   lingkungan   yang   tidak mendukung pertumbuhannya.
Ketersediaan   nutrisi   yang   baik   di   dalam   bahan   pembawa   dapat   memacu   laju pertumbuhan sehingga viabilitas konidia T. harzianum akan terus meningkat.   Menurut Pelczar dan Chan (1986), keadaan tersebut disebut juga fase logaritma atau eksponensial yang menunjukkan massa sel menjadi dua kali lipat dan keadaan pertumbuhan menjadi seimbang.   Semakin lama waktu penyimpanan pelet lebih dari 9 minggu dimungkinkan kemampuan perkecambahan konidia (viabilitas) T. harzianum akan tetap atau mengalami penurunan.     Hal   tersebut   karena   pertumbuhan   mikroorganisme   seperti   jamur   akan memasuki   fase   statis   (stasioner)   kemudian   fase   penurunan   atau   kematian.     Menurut Pelczar   dan   Chan   (1986),   fase   statis   (stasioner)   merupakan   fase   pertumbuhan mikroorganisme   di   mana   nutrisi   dalam   media   mulai   habis   dan   beberapa   sel   mati sedangkan   yang   lainnya   tumbuh   membelah,   sehingga   jumlah   sel   yang   hidup   menjadi tetap.   Fase penurunan atau kematian merupakan fase yang menunjukkan banyak sel yang   mati   karena   nutrisi   dalam   media   telah   habis   dan   sel-sel   yang   mati   lebih   cepat dibandingkan dengan pertumbuhan pada fase logaritma.  Kondisi ini bergantung kepada jenis   mikroorganismenya   sehingga   dimungkinkan   semua   sel   akan   mati   dalam   waktu beberapa hari atau beberapa bulan.
T. harzianum merupakan jamur antagonis yang digunakan sebagai agen biokontrol dan   dapat   diformulasikan   ke   dalam   berbagai   bentuk   aplikasi.     Formulasi   jamur T. harzianum dalam bentuk pelet  dengan menggunakan beberapa jenis bahan pembawa berupa tepung beras ketan putih, campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kacang ijo, campuran 75% tepung beras ketan putih dengan 25% tepung kedele, dan  campuran   75%  tepung  beras   ketan   putih  dengan   25%   susu  skim.     Ketersediaan nutrisi di dalam bahan pembawa yang cukup dan lama waktu penyimpanan pelet yang tepat   menjadi   faktor   utama   yang   dapat   mempengaruhi   viabilitas T.  harzianum .     Jenis bahan pembawa tepung beras ketan putih dengan lama waktu penyimpanan pelet selama
9   minggu   menghasilkan   persentase   perkecambahan   konidia   (viabilitas)   tertinggi dibandingkan dengan ketiga macam campuran jenis bahan pembawa lainnya.    Hal ini karena pada jenis bahan pembawa tepung beras ketan putih memiliki kandungan nutrisi yang sesuai untuk mendukung pertumbuhan T. harzianum dan lama waktu penyimpanan pelet 9 minggu merupakan fase pertumbuhan jamur T. harzianum dalam fase logaritma, di mana pertumbuhan akan terus meningkat.   Selain ketersediaan nutrisi di dalam bahan pembawa dan lama waktu penyimpanan pelet, faktor lingkungan seperti temperatur, pH, kelembaban dan intensitas cahaya dapat mempengaruhi viabilitas, sporulasi dan daya antagonisme.
Moerdiati et al. (1999), menyatakan bahwa salah satu faktor yang berpengaruh terhadap   kualitas   media   pertumbuhan   jamur   adalah   rasio   C/N.    Menurut   Musnamar (2004), rasio C/N yang terlalu tinggi dalam substrat hidup suatu mikroorganisme dapat menjadi   faktor   penghambat   pertumbuhan.   Lopez   (2002)   menyatakan   bahwa   kondisi substrat dengan C berlebih dan sumber N yang kurang akan menjadi faktor penghambat pertumbuhan miselium jamur.  Menurut Aiman (1999), rasio C/N yang terkandung dalam substrat pertumbuhan jamur yang baik adalah relatif rendah atau hampir sama dengan tanah yaitu berkisar antara 10 – 20.  Rasio C/N berkisar antara 10 – 20 dapat memacu pertumbuhan miselium jamur dan meningkatkan produksi konidia, sedangkan rasio C/N yang terlalu tinggi dapat menghambat pertumbuhan miselium dan menurunkan produksi konidia.

## Kesimpulan
Berdasarkan   hasil   penelitian   dan   pembahasan   maka   dapat   diambil   kesimpulan sebagai   berikut   :   1)   interaksi   antara   jenis   bahan   pembawa   dengan   lama   waktu penyimpanan pelet berpengaruh terhadap viabilitas Trichoderma harzianum , dan 2) jenis bahan   pembawa   dan   lama   waktu   penyimpanan   yang   menghasilkan   viabilitas T. harzianum tertinggi yaitu bahan pembawa 100% tepung beras ketan putih dengan lama waktu penyimpanan pelet selama 9 minggu.

## Daftar Pustaka
Aiman,  A.,   1999.    Pengujian   Laju   Dekomposisi   dan   Mineralisasi   Hara   Slude   Sebagai Pupuk Organik Alternatif. Agusta , 3(1) :1 – 6.
Alexopoulos,   C.J.,   Mims,   C.W.,   and   Blackwell,   M.,     1996.    Introductory   Mycology   4 th Edition. John Wiley and Sons. Inc, New York.
Bilgrami, K.S. and Verma R.N., 1978.  Physiology of Fungi. Vikhas Publishing House PVT Ltd.
Chang, Y.C, and Baker, R.,   1986.   Increased Growth of Plants in the Presence of the Biological Control Agent Trichoderma harzianum . Journal Plant Disease , 70: 145 – 148.
Djatmiko,   H.A   dan   Rohadi,   S.,     1997.     Efektivitas Trichoderma   harzianum Hasil Perbanyakan Dalam Sekam Padi dan Bekatul Terhadap Intensitas Plasmodiophora brassicae Pada   Tanah   Latosol   dan   Andosol.     Laporan   Penelitian   (tidak dipublikasikan).  Fakultas Pertanian Unsoed.  Purwokerto.
Gandjar, I.,  1999.  Pengenalan Kapang Tropik Umum.  Yayasan Obor Indonesia, Jakarta.
Garraway, M.D. and Evans, P.C.,  1984.   Fungal Nutrition and Physiology. John Wiley & Sons. New York.
Hadioetomo,R.S., 1994. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek: Teknik dan Prosedur Dasar laboratorium. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Lopez, J.L.C.S., 2002.  Production of lovastin by Aspergillus terreus . Elsevier Inc, AS.
Moerdiati, E., Ainurrasyid, R.B., and Endah, S., 1999.  Pengaruh Berat Media dan Berat Bibit   Terhadap   Pertumbuhan   dan   Hasil   Jamur   Tiram   Putih   ( Pleurotus   florida ).
Habitat 10 (105) : 22 – 47.
Musnamar, E.F.,  2004.  Pupuk Organik : Cair dan padat, Pembuatan, Aplikasi.  Penebar Swadaya, Jakarta.
Papavizas, G.C., 1985. Trichoderma and Gliocladium Biology, Ecology and Potential for Biocontrol. Annual Review of Phytopathology , 23 : 23 – 54.
Roco, A. and Perez, L.M., 2001.  In Vitro Biocontrol Activity of Trichoderma harzianum on Alternaria alternate in The Presence of Growth Regulators. Electronic Journal of Biotechnology , 4(2): 1 – 10.
Salma,   S.   and   Gunarto,   L.,     1996.     Aktivitas   Isolat Trichoderma dalam   Perombakan Selulosa. Jurnal Penelitian Pertanian Tanaman Pangan , 15(1): 43 – 47.
Salamiah,  E., Fikri, N., dan Asmarabia,  2003.    Viabilitas Trichoderma harzianum Yang Disimpan Pada Beberapa Bahan Pembawa dan Lama Penyimpanan Yang Berbeda. Jurnal Penelitian Pertanian Hama Penyakit Tanaman , 1 – 12.
Stamets,  P.  anf  Chilton, J.S.,  1983. The Mushrooms Cultivar. Agaricon Press Olympia, Washington.
Steel, R.E.D. dan Torrie, J.H., 1991.   Prinsip dan Prosedur Statistika Suatu Pendekatan Biometrik. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Tjokrokusumo, D., Hendritomo, H.I., dan Widyastuti, N.,  2004.  Pengaruh Penambahan Dedak dan Molasses Pada Substrat Pertumbuhan Jamur Tiram Coklat ( Pleurotus cystidiosus ). Jurnal Biotika , 3(2) : 8 – 12.
Wahyudi,   P.,   1999.     Uji   Aplikasi   Biofungisida Trichoderma   harzianum Pada   Tanaman Selada di Dalam Rumah Kaca. Biosfera , 13 : 17 – 27.
__________.,   2001.     Biofungisida Trichoderma harzianum .   Laporan Penelitian Badan Pengkayaan dan Penerapan Teknologi, Jakarta.