PENGARUH FRAKSI NONPROTEIN  KACANG KOMAK ( Lablab purpureus (L.) Sweet)

## TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH DAN MALONALDEHIDA TIKUS DIABETES
[Effect of Nonprotein Fraction of Hyacinth Bean ( Lablab purpureus (L.) Sweet) Diet on Glucose and Malonaldehyde Serum of Diabetic Rats]

## Arif Hartoyo*, Sukarno, dan Erma Rohmawati
Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fateta IPB
Diterima 7 Juli 2009 / Disetujui  14 Mei 2010

## ABSTRACT
The hypoglycemic response to Lablab nonprotein fraction (NPK) was evaluated in alloxan-induced diabetic rats. The objectives of this research were to evaluate the effect of Lablab nonprotein fraction diet on the blood  glucose concentration and the lipid  peroxide  level of alloxan-induced diabetic rats.  Two months old male Sprague Dawley rats were divided into 4 groups, each group contained of 5 rats. Three groups were diabetic rats  induced by alloxan injection (110 mg/kg of body weight by intra-pheritonial injection) while one group was a control,normal rat. The experiment groups were (1) normal (group I), (2) diabetic (group II), (3) diabetic+cholesteol 0.5% (control group, group III), and (4) diabetic+cholesterol 0.5% + lablab NPK (group IV). The concentration of rat’s blood glucose were periodically measured during diet intervenion (day 0,14,27, and 42). The Lipid peroxide was evaluated as the concentration of malonaldehyde (MDA) both in serum and liver of the rats by Thiobarbituric Acid Reactivity Test methode. The result demonstrated that after 42 days of intervention, the Lablab nonprotein diet decreased the blood  glucose  concentrations from 444.00 + 143.00 mg/dl to 310.50 +111.40 mg/dl (30%), while control group has  decreased the blood glucose concentration from 458.00 +164.99 mg/dl to 455.33 + 81.95 mg/dl (0.6%). Lablab nonprotein diet significantly (P<0.05) reduced the concentration of blood  glucose as compared to the control group. However, Lablab nonprotein fraction diet did not give a significant diferrence on the level of serum MDA and liver MDA as compared to the control group.

## Key words : Hyacinth Bean, hypoglycemic, malonaldehyde (MDA)

## PENDAHULUAN
Perkembangan  zaman  yang  semakin  maju  menuntut perubahan  gaya  hidup  masyarakatnya  temasuk  dalam  pola makan  yakni  dari  makanan  yang  berbasis  karbohidrat  menjadi makanan  berlemak  tinggi  dan  rendah  serat.  Hal  ini  memicu timbulnya  berbagai  penyakit  yang  menyerang  ‘masyarakat modern’ seperti jantung koroner, hipertensi, dan diabetes.
Departemen  Kesehatan  RI  melaporkan  bahwa  prevalensi penyakit diabetes secara nasional pada tahun 2007 adalah 1,1 %. Bahkan 17 propinsi mempunyai angka prevalensi diabetes di atas  angka  prevalensi  nasional  (Balitbangkes,  2007). Kecenderungan  ini  diperkirakan  akan  terus  meningkat  seiring dengan  perubahan  gaya  hidup  dan  modernisasi  yang berdampak  pada  perubahan  pola  makan  yang  kian  menjauh dari  standar  gizi  ideal.  Gunawan  dan  Tandra  (1998) menyatakan  bahwa  prevalensi  penderita  diabetes  melitus  di Indonesia  diperkirakan  mencapai  5  juta  pada  tahun  2020. Tingginya angka penderita diabetes ini tidak hanya menyangkut masalah  kesehatan  dan  kesejahteraan  masyarakat  tetapi  juga menyangkut  masalah  menurunnya  kualitas  sumberdaya manusia  yang  akan  berdampak  luas  terhadap  berbagai  aspek kehidupan. 1
*Korespondensi penulis : 08128814781 E-mail : ahartoyo@gmail.com
Atherosklerosis  sering  merupakan  komplikasi  dari  penyakit diabetes  melitus.  Berdasarkan  hasil  penelitian  Musthafa et  al . (2000),  diketahui  bahwa  radikal  debas  dalam  hal  ini  yang dinyatakan  dalam  kadar  malonaldehida  dapat  dipakai  sebagai prediktor atherosklerosis pada penyakit diabetes. Pengendalian tingginya kadar glukosa darah pada penderita diabetes melitus sangatlah  penting  untuk  menghindari  komplikasi  yang  lebih lanjut.
Oleh  karena  itu  dalam  pengaturan  diet  penderita  diabetes diperlukan bahan makanan yang bersifat hipoglikemik.
Fraksi  karbohidrat  kacang-kacangan  memiliki  potensi  yang baik  bagi  kesehatan  terutama  bagi  pencegahan  penyakit  yang berkaitan dengan resistensi insulin (Guillon dan Champ, 2002). Konsumsi  serat  dari  kacang-kacangan  juga  telah  diketahui dapat  meningkatkan  toleransi  kadar  glukosa  darah  serta memberikan  pengaruh  yang  positif  pada  kolesterolemia  dan trigliseridemia postprandial (Guillon dan Champ, 2002).
Penelitian tentang aktivitas antihiperglikemik kacang komak terutama  fraksi  nonprotein  kacang  komak  belum  banyak dilakukan  di  Indonesia  sehingga  menjadi  pendorong dilakukannya  penelitian  ini.    Penelitian  ini  bertujuan  untuk menguji sifat hipoglikemik dari fraksi non protein kacang komak dan  pengaruhnya  pada  kadar  malonaldehid  tikus  diabetes induksi aloksan.

## METODOLOGI

## Bahan dan alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  antara  lain kacang komak yang diperoleh dari petani di Probolinggo (Jawa Timur),  tikus  percobaan  spesies Rattus  norvegicus galur Sprague  Dawley jantan  umur  ±  2  bulan,  bahan  kimia diabetogenik  ( Alloxan  monohydrate Sigma),  bahan-bahan penyusun  ransum    yang  dibuat  sesuai  rekomendasi  AIN-93G dengan  modifikasi  (Reeves, et  al .,  1993),  kolesterol  murni, bahan-bahan kimia untuk analisis proksimat, kadar serat kasar, kadar pati, dan kadar amilosa fraksi nonprotein kacang komak, dan  bahan-bahan  kimia  untuk  analisis  malonaldehida  serum darah  dan  hati  tikus  percobaan  yang  meliputi  larutan  buffer fosfat  (PBS),  TEP  (Tetraetoksipropana),  TCA  ( Trichloroacetic acid) , TBA ( Thiobarbituric acid ), serta HCl 0,25 N.
Alat-alat yang digunakan antara lain alat-alat untuk analisis proksimat,  kadar  serat  kasar,  kadar  pati,  dan  kadar  amilosa fraksi  nonprotein  kacang  komak,  alat-alat  untuk  pembuatan ransum  dan  pemeliharan  tikus,  alat-alat  untuk  penyuntikan larutan  aloksan  dan  pengukuran  kadar  glukosa  darah    yang meliputi syringe ,  gunting, glucose  test  strip ,  dan  glukometer GlucoTech R EZ, alat-alat untuk  pembedahan dan pengambilan darah  serta  organ  tikus,  dan  alat-alat  yang  digunakan  untuk analisis kadar malonaldehida serum dan hati tikus percobaan.

## Pembuatan fraksi non protein kacang komak
Fraksi  non  protein  kacang  komak  dibuat  dengan  cara mengeringkan bagian non-protein, pada pembuatan konsentrat protein  dengan  metode  ekstraksi  protein  pada  pH  basa  dan pengendapan  protein  pada  titik  isoelektriknya.  Pengeringan fraksi non-protein menggunakan oven vakum pada suhu 50 C selama 12 jam (Gambar 1).
Ditambah 1 liter aquades (1:10) bersuhu 60 o C
Ekstraksi alkali pada pH 8,5 – 8,7 dengan NaOH 2N pada suhu 60 o C selama 30 menit
Disentrifuse1175,93 G  selama 15 menit
Endapan                                                    Supernatan
Dikeringkan pada 50 C                               Proses untuk selama 12  jam pembuatan isolat protein
Gambar 1.  Proses pembuatan fraksi non protein kacang komak

## Analisis proksimat
Kadar  air,  kadar  abu,  kadar  lemak,  dan  kadar  protein sampel  fraksi  non  protein  kacang  komak  dianalisis menggunakan  metode  Apriyantono, et  al .  (1989)  sedangkan kadar  lemak  dianalisis  menggunakan  metode  mikro  Kjeldahl dan kadar karbohidrat dengan metode by difference .
Analisis malonaldehid (Singh, et al . 2002)
Sebanyak  0.5  ml  supernatan  organ  atau  serum  darah ditambah  2.0  ml  HCL  dingin  (0,25  N)  yang  mengandung  15% TCA, 0,38 TBA dan 0,5% BHT.  Campuran dipanaskan 80 0 C selama  1  jam.    Setelah  dingin,  campuran  sentrifus  822  x  G selama 10 menit.  Absorbansi supernatan diukur pada 532 nm. Sebagai larutan standar digunakan TEP ( tetraetoksi propana ).

## Perlakuan hewan coba
Sebanyak  20  ekor  tikus  jantan  galur Sprague  Dawley berumur ± 2 bulan dibagi ke dalam empat kelompok perlakuan. Kelompok  I  adalah  kelompok  tikus  normal  dengan  ransum standar.  Kelompok  II  adalah  kelompok  tikus  diabetes  dengan ransum  standar.  Kelompok  III  adalah  kelompok  kontrol  yaitu kelompok  tikus  diabetes  dengan  ransum  standar  ditambah kolesterol 0,5%. Kelompok IV adalah kelompok perlakuan fraksi nonprotein kacang komak yaitu kelompok tikus diabetes dengan modifikasi  ransum  standar  yaitu  dengan  mengganti  maizena (sumber  pati)  dengan  fraksi  nonprotein  kacang  komak  dan ditambah  kolesterol  0,5%.  Penambahan  kolesterol  sebesar 0,5%  pada  ransum  bertujuan  membuat  ransum  menjadi  lebih atherogenik. Perlakuan dilaksanakan selama 42 hari.
Ransum  yang  diberikan  disesuaikan  dengan  kebutuhan nutrisi  tikus  seperti  yang  direkomendasikan  AIN-93G  (Reeves, et al.,  1993)  dengan  modifikasi.  Komposisi  ransum    untuk masing-masing  kelompok  tikus  perlakuan  dapat  dilihat  pada Tabel  1.  Lamanya  masa  adaptasi  adalah  4  hari  dengan pemberian  ransum  standar  dan  minum  secara ad  libitum . Induksi aloksan dilakukan terhadap 15 ekor tikus dengan dosis 110 mg/kg BB (Ismiyati, 2005), sedangkan 5 ekor tikus lainnya diinduksi dengan larutan fisiologis.
Tabel 1.  Komposisi ransum tikus percobaan
Bahan Ransum Kelompok Perlakuan I II III IV Pati Jagung 530 530 530 - Kasein 200 200 200 140,6 Sukrosa 100 100 100 100 Minyak Kedelai 70 70 70 67,6 Fiber 50 50 50 50 Mineral Mix 35 35 35 35 Vitamin Mix 10 10 10 10 Kolesterol - - 5 5 Fraksi Nonprotein Kacang Komak - - - 690,4 I  :  normal III : diabetes + kolesterol II :  diabetes IV : diabetes + kolesterol+komak
Sumber : Reeves et al ., (1993) yang dimodifikasi
Selama  masa  perlakuan  tikus  diberikan  ransum  sesuai dengan  kelompok  perlakuannya  dan  air  minum  secara ad
Fraksi non Protein Kacang Komak
Tepung  kacang komak
libitum .  Selama  masa  perlakuan  ini  dilakukan  pengamatan terhadap konsumsi ransum setiap hari, berat yang badan tikus setiap  dua  hari  sekali,  dan  pengukuran  kadar  glukosa  darah setiap 14 hari sekali sampai hari ke-42.
Pengukuran  kadar  glukosa  darah  dilakukan  melalui  bagian ekor  tikus.  Ekor  tikus  dibersihkan  terlebih  dahulu  dengan alkohol  70%  dan  dikeringkan  dengan  kapas,  kemudian  ujung ekor  digunting  sedikit  dengan  gunting  khusus  yang  tajam. Tetesan  darah  yang  diperoleh  diteteskan  di  atas  strip glukometer. Kadar glukosa darah akan terukur pada alat setelah 5 detik dan dinyatakan dalam satuan mg/dl. Setelah akhir masa perlakuan (hari ke-42), tikus dibedah satelah sebelumnya tikus dipuasakan selama 10 jam untuk diambil sampel serum darah dan  organnya  untuk  keperluan  analisis  malonaldehida  serum darah  dan  hati.  Analisis  malonaldehida  serum  darah  dan  hati menggunakan metode Thiobarbituric Acid Reactivity Test (Conti et al ., 1991).

## Analisis data
Analisis data percobaan menggunakan analisis ragam one- way ANOVA dan bila terdapat perbedaan yang nyata dilakukan uji lanjut Duncan menggunakan taraf α = 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis proksimat
Fraksi  nonprotein  kacang  komak  dianalisis  proksimat terlebih  dahulu  sebelum  diaplikasikan  untuk  formulasi  ransum perlakuan.  Hasil  analisis  proksimat  fraksi  nonprotein  kacang komak dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2.  Hasil analisis proksimat fraksi nonprotein kacang komak
Komponen % bobot basah (bb) % bobot kering (bk) Air 12,19 - Abu 2,08 2,37 Protein 8,61 9,89 Lemak 0,35 0,40 Karbohidrat 76,77 87,43
Hasil  analisis  proksimat  menunjukkan  bahwa  komponen utama  dalam  fraksi  non  protein  kacang  komak  adalah karbohidrat  yaitu  sebesar  87,43%  (bk).  Kadar  karbohidrat  ini tidak berbeda jauh dengan kadar karbohidrat fraksi non protein kacang  komak  yang  digunakan  dalam  penelitian  sebelumnya (Hartoyo, et al ., 2008) yaitu sebesar 90,42% (bk).
Selain kadar protein, lemak, karbohidrat dan abu, dianalisis juga  kadar serat kasar,  kadar pati, kadar amilosa, dan kadar amilopektin fraksi nonprotein kacang komak. Kadar serat kasar yang  diperoleh  sebesar  22,46%  (bk),  sedangkan  kandungan serat larut dan serat tak larut fraksi nonprotein kacang komak diketahui  sebesar  4,93%  dan  6,31%  (Hartoyo et  al .  2008). Kadar  pati  yang  diperoleh  sebesar  52,70%  (bk)  dengan kandungan amilosa sebesar 20,68 %  dan amilopektin sebesar 32,02%.
Berdasarkan  hasil  ini  diketahui  bahwa  kandungan  amilosa (39,24%  dari  total  pati)  pada  fraksi  nonprotein  kacang  komak tergolong tinggi, sama dengan yang ditemukan pada berbagai
kacang-kacangan  yaitu  sebesar  30-40%  (Andayani,  2003; Guillon dan Champ, 2002).

## Konsumsi ransum dan berat badan tikus
Hasil  pengamatan  terhadap  konsumsi  ransum  tikus percoban disajikan pada Tabel 3, sedangkan hasil pengamatan terhadap berat badan tikus percobaan disajikan pada Tabel 4.
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  dan  uji  lanjut  Duncan diketahui  bahwa  kelompok  I  (normal),  kelompok  II  (diabetes), dan  kelompok  III  (diabetes+kolesterol)  memiliki  tingkat konsumsi  ransum  yang  tidak  berbeda  nyata.  Sedangkan kelompok  perlakuan  fraksi  nonprotein  kacang  komak  memiliki tingkat  konsumsi  ransum  paling  tinggi  dan  berbeda  nyata dibandingkan dengan ketiga kelompok perlakuan lainnya. Hasil ini  menunjukkan  bahwa  kondisi  diabetes  dan  penambahan kolesterol  pada  ransum  tidak  mempengaruhi  tingkat  konsumsi ransum tikus pecobaan.
Tabel 3.  Konsumsi ransum tikus percobaan Kelompok Konsumsi Ransum (g/hari) I (normal) 11,14 ± 1,90 b II (diabetes) 12,55 ± 1,78 b III (diabetes+kolesterol) 13,07 ± 0,18 b IV (diabetes+kolesterol+komak) 17,16 ± 1,08 a
Keterangan:  Nilai  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (α>0,05) Tabel 4.  Berat badan tikus percobaan Kelompok Berat Awal (g) Berat Akhir (g) Kenaikan Berat Badan (%) I (normal) 150 ± 14,70 227 ± 43,61 50,46 II (diabetes) 157 ± 2,04  174 ± 35,40 11,35 II (diabetes+kolesterol) 126 ± 3,39  151 ± 23,76 20,36 IV (diabetes+kolesterol+komak)  145 ± 2,97  187 ± 50,58 28,98
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  yang  ditunjukkan  pada Tabel  3  dan  Tabel  4,  diketahui  pula  bahwa  pada  tingkat konsumsi  ransum  yang  sama  dan  bahkan  lebih  tinggi,  tikus diabetes  memiliki  kenaikan  berat  badan  yang  lebih  rendah dibandingkan dengan tikus normal (kelompok I). Hal ini karena pada  penderita  diabetes,  sel-sel  dalam  tubuhnya  tidak  dapat memanfaatkan  glukosa  dalam  darah  sehingga  sel-sel  tersebut kekurangan  bahan  bakar  untuk  menghasilkan  tenaga  akibat kekurangan  insulin  (Subekti,  1995).  Untuk  kelangsungan hidupnya,  sumber  glukosa  yang  dibutuhkan  akan  diperoleh melalui  pemecahan  glikogen  (glikogenolisis)  di  dalam  hati  dan pembentukan  glukosa  dari  bahan-bahan  selain  karbohidrat (glukoneogenesis).  Sumber  glukosa  juga  dapat  diperoleh melalui  oksidasi  lemak  pada  jaringan  lemak  dan  katabolisme protein, sehingga penderita diabetes akan mengalami ganguan pertumbuhan  dan  penurunan  berat  badan  karena  hilangnya lemak  dan  protein  yang  berada  di  dalam  tubuh,  meskipun jumlah makanan yang dikonsumsi dalam jumlah besar.

## Kadar glukosa darah
Pengaruh pemberian ransum perlakuan dan injeksi aloksan terhadap    kadar  glukosa  darah  tikus  percoban  disajikan  pada Tabel 5.
Tabel 5.  Kadar glukosa darah tikus percobaan Kel. Kadar Glukosa Darah (mg/dl) Hari ke-0 (a) Hari ke-14 Hari ke-27 Hari ke-42 (b) Δ Penurunan(a-b) I (normal) 75,40 ± 11,52 130,2 ± 41,92 110,00 ±16,64 94,80 ±19,49 -19,4 II (diabetes) 468,00 ± 228,63 234,3 ± 168,56 220,66 ±188,22 242,7 ± 145,06 225,3 a III  (diabetes+kolesterol) 458,00 ± 164,93 394,7 ± 179,31 258,30 ± 91,27 455,3 ± 81,89 2,7 b IV (diabetes+kolesterol+komak) 444,00 ±143,00 378,3 ± 96,4 259,20 ± 111,40 310,5 ± 111,4 133,5 a
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (α>0,05)
Pengukuran kadar glukosa darah tikus percobaan dilakukan dimulai dari awal masa perlakuan (hari ke-0) dan selama masa perlakuan yaitu setelah tikus diberi ransum yang sesuai dengan kelompok perlakuannya (hari ke-14, 27, 42). Hasil pengukuran kadar  glukosa  darah  tikus  percobaan  pada  awal  masa perlakuan, menunjukkan kadar glukosa darah kelompok  II, IIl, dan  IV  sangat  tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  I.  Hal  ini terjadi  karena  ke  tiga  kelompok  tersebut  mengalami  induksi larutan  aloksan  dengan  dosis  110  mg/kg  BB,  sedangkan  tikus kelompok I hanya diinduksi dengan larutan garam fisiologis. Hal ini  menunjukkan  bahwa  induksi  larutan  aloksan  dengan  dosis 110  mg/kg  BB  dapat  membuat  tikus  percobaan  mengalami kondisi hiperglikemia yang permanen.
Pada akhir masa perlakuan kelompok I mengalami kenaikan kadar glukosa darah sebesar 19,40 mg/dl (kadar glukosa masih normal),  kelompok  II  mengalami  penurunan  kadar  glukosa darah  sebesar  225,33  mg/dl,  kelompok  III  mengalami penurunan  kadar  glukosa  darah  sebesar  2,57  mg/dl,  dan kelompok  IV  mengalami  penurunan  kadar  glukosa  darah sebesar 133,50 mg/dl. Berdasarkan hasil tersebut menunjukkan bahwa  penambahan  kolesterol  dalam  ransum  memperparah kondisi  diabetes.  Hal  ini  ditunjukkan  pada  kelompok  II  yang ransumnya  tidak  ditambahkan  kolesterol  dapat  mengalami penurunan  kadar  glukosa  darah  hingga  225,33  mg/dl,  lebih tinggi  dibandingkan  penurunan  kadar  glukosa  darah  pada kelompok  III  yang  ransumnya  mendapatkan  penambahan kolesterol sebesar 0,5%.
Kadar  glukosa  darah  kelompok  perlakuan  fraksi  nonprotein kacang  komak  di  akhir  masa  perlakuan  masih  dalam  kondisi hiperglikemia  (kadar  glukosa  darah  >  200  mg/dl).  Hasil  ini sejalan dengan penelitian Laswati et al ., (2000) dan Noor et al ., (2000) yang meneliti efek hipoglikemik residu ekstraksi protein kacang kedelai.
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  dan  uji  lanjut  Duncan diketahui  bahwa  kelompok  perlakuan  fraksi  nonprotein  kacang komak  mengalami  penurunan  kadar  glukosa  darah  yang  lebih besar  secara  nyata  dibandingkan  dengan  kelompok  III (diabertes+kolesterol). Hal ini kemungkinan disebabkan adanya peranan  serat  pangan  larut  dan  serat  pangan  tak  larut  fraksi nonprotein kacang komak. Serat pangan larut dan tak larut dari kacang-kacangan  diketahui  mampu  mengurangi  respon glikemik setelah makan akibat sifat fisikokimia yang dimilikinya (Chau dan Cheung, 1999). Selain itu, kadar amilosa yang tinggi dalam  fraksi  non  protein  kacang  komak  kemungkinan  turut berperan  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Seperti diketahui,  tingginya  amilosa  menyebabkan  bioavaibilitas  pati menjadi  rendah.  Komponen  amilosa  pada  kacang-kacangan
inilah  merupakan  salah  satu  faktor  penyebab  indek  glikemik kacang-kacangan menjadi rendah (Guillon dan Champ, 2002).

## Kadar Malonaldehida (MDA)
Radikal bebas yang dihasilkan dari berbagai reaksi di dalam tubuh merupakan senyawa oksigen reaktif yang sitotoksis serta dapat  berdampak  negatif  terhadap  membran  sel,  nukleotida (DNA), dan  protein  seperti  halnya  enzim  yang  ada  dalam  tubuh. Atherosklerosis  sering  merupakan  komplikasi  dari  penyakit diabetes melitus. Informasi terakhir menyebutkan bahwa radikal bebas  dapat  menjadi  penyebab  yang  mendasari  berbagai macam  keadaan  patologis  termasuk  penyakit  atherosklerosis pada umumnya dan khususnya penyakit jantung atherosklerosis yang dikenal sebagai penyakit jantung koroner (PJK) (Musthafa et  al .,  2000).    Berdasarkan  hasil  penelitian  Musthafa et  al ., (2000),  diketahui  bahwa  radikal  bebas  dapat  dipakai  sebagai prediktor atherosklerosis pada penyakit diabetes.
Salah  satu  cara  mengukur  kadar  radikal  bebas  adalah dengan mengukur produk metabolit yang terbentuk setelah aksi senyawa  radikal.    Pengukuran  ditujukan  pada  produk-produk peroksida asam lemak tidak jenuh seperti malonaldehida. Hasil pengukuran  kadar  MDA  pada  sampel  serum  darah  tikus percoban  disajikan  pada  Gambar  2.  Tikus  kelompok  IV  dan kelompok  I  memiliki  kadar  MDA  serum  darah  paling  rendah masing-masing  7,09  dan  7,32  nmol/ml,  kemudian  diikuti kelompok  III  (8,49  nmol/ml),  dan  kelompok  II  (8,88  nmol/ml). Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  kadar  MDA  serum darah  keempat  kelompok  perlakuan  tidak  berbeda  nyata (p>0,05).
Keterangan : I  :   normal
III  : diabetes+kolesterol
II :   diabetes IV  : diabetes+kolesterol+komak
Gambar 2.  Kadar  malonaldehida  serum  darah  tikus  percobaan setelah perlakuan 42 hari
7,09 a 8,49 a 8,88 a 7,32 a 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 I II III IV Kelompok M D A (nm ol /m l)
Hasil pengukuran kadar MDA pada sampel organ hati tikus percoban disajikan pada Gambar 3. Tikus kelompok II memiliki kadar MDA hati paling rendah (0,024 μmol/g), kemudian diikuti kelompok  I  (0,030  μmol/g),  kelompok  perlakuan  fraksi nonprotein kacang komak (0,032 μmol/g), dan kelompok kontrol (0,033 μmol/g). Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa kadar MDA  hati  keempat  kelompok  perlakuan  tidak  berbeda  nyata (p>0,05).  Kadar  MDA  serum  darah  dan  hati  tikus  percobaan yang  tidak  berbeda  nyata  pada  keempat  kelompok  perlakuan menunjukkan  bahwa  penambahan  kolesterol  murni  sebesar 0,5%  pada  ransum  dan  kondisi  diabetes  selama  42  hari perlakuan belum menunjukkan pengaruh terhadap peningkatan radikal bebas pada serum darah maupun hati tikus percobaan.
Keterangan : I :   normal III : diabetes+kolesterol
II :  diabetes
IV : diabetes+kolesterol+komak
Gambar 3.  Kadar malonaldehida hati tikus percobaan setelah 42 hari perlakuan

## KESIMPULAN
Penelitian ini menunjukkan bahwa ransum fraksi nonprotein kacang komak  mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus diabetes secara nyata dibandingkan kontrol.
Pemberian  kolesterol  pada  ransum  tikus  diabetes  mem- perparah  kondisi  hiperglikemik  tikus  percobaan.  Sedangkan kadar  malonaldehida  (MDA)  serum  darah  dan  hati  tikus percobaan  pada  semua  kelompok  tidak  menunjukkan  per- bedaan yang nyata.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  mengucapkan  terimakasih  kepada  Dirjen  Dikti  yang membiayai  penelitian  ini  melalui  Program  Hibah  Penelitian Kompetitif  Hibah Bersaing XIV.

## DAFTAR PUSTAKA
Andayani  Y.  2003.  Mekanisme  Aktifitas  Antihiperglikemik Ekstrak  Buncis  ( Phaseolus  vulgaris Linn)  pada  Tikus Diabetes  dan  Identifikasi  Komponen  Aktif.  Disertasi. Program Pasca Srjana. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Apriyantono A, Fardiaz D, Puspitasari NL, Yasni S, Budijanto S.
1989. Analisis Pangan. IPB Press, Bogor.
Association of Official Analytical Chemist (AOAC). 1970. Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemist. AOAC, Washington DC.
Association of Official Analytical Chemist (AOAC). 1984. Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemist 14 th edition.  AOAC, Arlington, Virginia.
Balitbangkes.  2007.  Laporan  Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar Nasional. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Chau  CF,  Cheung  PCK.  1999.  Effects  of  the  phisico-chemical properties  of  three  legume  fibers  on  cholesterol  absorption in hamster. J Nut. Research, Vol. 19, No. 2: 257-265.
Conti M, Moramd PC, Levillaind P, Lemonnier A. 1991. Improve fluorometric determination of malonaldehyde. J Clin Chem Soc. 103: 6472-6477.
Guillon  F,  Champ  MMJ.  2002.  Charbohydrate  fraction  of legumes: uses in human nutrition and potential for health. B J Nutr. 88 (suppl): 293-306.
Gunawan  A  ,Tandra  H.  1998.  Patogenesis  diabetes  millitus tidak tergantung insulin (DMTII). Pusat Diabetesi dan Nutrisi RSUD. Dr. Soetomo-FK Unair. Majalah Diabetes, Vol. 4, No. 1, Surabaya.
Hartoyo  A,  Dahrulsyah,  Sripalupi  N,  Nugroho  P.    2008. Pengaruh  Fraksi  Karbohidrat  Kacang  Komak  (Lablab purpureus (L.) sweet) terhadap Kolesterol dan Malonaldehid Serum  Tikus  Percobaan  yang  Diberi  Ransum  Tinggi Kolesterol. J. Teknol. dan Industri Pangan. Vol XIX No. 1.
Ismiyati  L.  2005.  Mempelajari  Pengaruh  Minuman  Sari  Lidah Buaya  ( Aloe  vera )  Terhadap  Kadar  Glukosa  Darah, Kolesterol,  Trigliserida,  dan  HDL  Serum  Darah  Tikus Sparague Dawley . Skripsi.  Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan,  Fakultas  Teknologi  Pertanian,  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Juliano  BO.  1971.  Asimplified  assay  for  milded  rice  amylase.
Cereal Science Today 16: 334-360.
Laswati  DT,  Marsono  Y,  Noor  Z.  2000.  Pengaruh  Diet  Residu Ekstraksi  Protein  Kedelai  pada  Kadar  Gula  Darah  Tikus Diabetes. Dalam Nuraida L, Haryadi RD, Budijanto S. (eds). Pemberdayaan Industri Pangan dalam Rangka Peningkatan Daya  Saing  Menghadapi  Era  Perdagangan  Bebas. Prosiding  Vol.  III  Siminar  Nasional  Industri  Pangan  PATPI, Surabaya. 10-11 Oktober 2000.
Musthafa  Z,  Lawrence  GS,  Saweang  A.  2000.  Radikal  bebas sebagai prediktor Atherosklerosis pada tikus wistar diabetes melitus. Cermin Dunia Kedokteran. No.127, Hal: 30-31.
Noor  Z,  Marsono  Y,  Astuti  M.    2000.  Sifat  Hipoglikemik Komponen  Kedelai.  Dalam  Nuraida  L,  Haryadi  RD, Budijanto  S  (eds).  Pemberdayaan  Industri  Pangan  dalam Rangka  Peningkatan  Daya  Saing  Menghadapi  Era Perdagangan  Bebas.  Prosiding  Vol.  III  Siminar  Nasional Industri Pangan PATPI, Surabaya. 10-11 Oktober 2000. Reeves  PG,  Nielsen  FH,  Fahey  Jr.  GC.  1993.  AIN-93  Purified Diets for Laboratory Rodents: Final Report of The American Insitute  of  Nutrition  Ad  Hoc  Writing  Committee  on  the Reformulation of the AIN-76A Rodent Diet. J. Nut. Vol. 123, No. 11, pp. 1939-1951.
Singh  RP,  Murthy,  KNC,  Jayaprakasha.  2002.  Studies  on Antioxidant Activity of Pomegranate (Punica granatum) Peel and  Seed  Extracts  Using  in  vitro  Models.  J.  Agric.Food Chem. 50,  81-86.
Subekti  I.  1995.  Apa  Itu  Diabetes?:  Patofisiologis,  Gejala,  dan Tanda. dalam: Soegondo S, Soewondo P, Subekti I (eds). 1995.  Penatalaksanaan  Diabetes  Melitus  Terpadu.  Balai Penerbit FK-UI, Jakarta. Hal 251-256.
0,032 a 0,033 a 0,024 a 0,03 a 0 0,01 0,02 0,03 I II III IV Kelompok M D A (u m ol/ m l)