## POTENSI BUAH SALAK (Salacca edulis, R.) SEBAGAI SUPLEMEN HIPOLIPIDEMIK DITINJAU DARI GAMBARAN HISTOPATOLOGI JANTUNG DAN HEPAR MENCIT YANG DIBERI DIET RENDAH LEMAK

## SNAKE FRUIT POTENT (Salacca edulis, R.) AS HYPOLYPIDEMIC SUPPLEMENT FROM THE VIEW OF HEART HYSTOPATHOLOGY AND FAT LOW DIET OF MICE HEPAR
Tri Hardjana * , Kartika Ratna Pertiwi dan Tutik Rahayu
Jurusan Pendidikan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta
*email: annandroo@ymail.com

## Diterima 5 Agustus 2016 disetujui 5 September 2016

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan mengetahui  struktur  histopatologi  jantung  mencit  yang  diberi  sari  buah  salak (Salacca  edulis,    R)  dan  diet  lemak  hewani  dan  untuk  mengetahui  struktur  histopatologi  hati  mencit  yang diberi  sari  buah  salak  (Salacca  edulis,    R)  dan  diet  lemak  hewani.  Penelitian  ini  mengguanakan  metode penelitian  eksperimen  dengan  tujuan  untuk  mengukur  respon  yang  muncul  dari  suatu  obyek  sebagai  akibat adanya perubahan suatu faktor yang mengenainya. Tempat penelitian dilakukan di Animal House Universitas Negeri Yogyakarta dan pengamatan preparat dilakukan di laboratorium  Zoologi Fakultas MIPA Universitas Negeri Yogyakarta, selama kurun waktu bulan Juni sampai Oktober 2015. Variabel penelitian bebas berupa sari  buah  salak,  sedangkan  variabel  tergayut  yaitu  gambaran  histopatologi  hati  meliputi  kerusakan  batas  sel dan  infiltrasi  sel  lemak  dan  diameter  vena  sentralis  sedangkan  jantung  meliputi  kerusakan  endotel  dan infiltrasi  sel  lemak.  Data  dianalis  secara  deskriptif  untuk  menyajikan  sebaran  frekuensi.  Keterkaitan  antar variabel tersebut disajikan dalam format tabel silang dan dianalisis dengan statistik deskriptif. Hasil penelitian menyatakan (1) Struktur histopatologi pembuluh darah jantung mencit yang diberi sari buah (Salacca edulis, R) dan diet lemak hewani mengalami kerusakan endotel dan infiltrasi lemak lebih kecil dibandingkan struktur histopatologi  pembuluh  darah  jantung  pada  mencit  yang  diberi  tambahan  diet  lemak;  (2)  Struktur histopatologi  sel  hepar  mencit  yang  diberi  sari  buah  salak  (Salacca  edulis,  R)  dan  diet  lemak  hewani mengalami kerusakan endotel dan infiltrasi lemak lebih banyak dibandingkan struktur histopatologi sel hepar pada mencit yang diberi tambahan diet lemak .
Kata kunci: buah salak, lemak, histopatologi, hepar, jantung

## Abstract
This study aims to study the structure of the heart histopathologic and the liver of white rat given the Salacca edulis, R extract and animal fat diet. This research used experimental research with the aim to measure the response of an object that appears as a result of the change in a factor that is about it. Place of research did in animal house of Yogyakarta State University and observation of preparations  did  in  the  laboratory  of  biological,  faculty  of  mathematics  and  natural  science,  at Yogyakarta  State  University  during  the  months  of  June  to  October  2015.  Independent  study variables such as salacca edulis, R extract, while the dependent variable is the description of liver histopathology includes damaged cells and fat cell infiltration, while the heart includes endothelial damage  and  infiltration  of  fat  cells.  Data  were  analyzed  descriptively  to  present  the  frequency distribution,  Linkages  between  these  variables  are  presented  in  table  format  and  analyzed  with cross descriptive statistics. The results are (1) the structure of the heart histopathologic white rat given salacca edulis, R extract and animal fat diet have endotel defect and fat infiltration less than structure of  the  heart  histopahologic  white  rat  given animal  fat diet.  (2)  the structure  of the  liver histopathologic  white  rat  given  salacca  edulis,  R  extract  and  animal  fat  diet  have  endotel  defect and fat infiltration more  than structure of the heart histopahologic white rat given animal fat diet.
Keywords: Salacca edulis, R, fat, histopathology, liver, heart

## Pendahuluan
Kabupaten Sleman adalah salah satu kabupaten  di  Propinsi  D.I  Yogyakarta  yang memiliki  luas  wilayah  574,82  Km2  (18,10%  dari luas  Prop.DIY)  dan  terletak  di  lereng  Selatan Gunung  Merapi.  Salah  satu  komoditas  unggulan Kabupaten  Sleman  adalah  salak  pondoh.  Sleman merupakan  sentra  penghasil  dan  penelitian  buah dan  bibit  Salak  Pondoh.  Terdapat  4.067.975 rumpun  dengan  produksi  266.938  Kw/Tahun (Pemkab Sleman, 2009). Hal tersebut menyebabkan  daerah  tersebut  terkenal  sebagai daerah  agrowisata  dengan  wisata  suasana  alam yang  sejuk  dan  alami,  serta  memiliki  potensi perkebunan  salak  pondoh  yang  berkualitas.  Salak Pondoh  menjadi  sebuah  ikon  yang  tidak  dapat dipisahkan dari Kabupaten Sleman dan Yogyakarta.  Salak  pondoh  dari  Sleman  memiliki rasanya  yang  manis  dan  segar,  rasa  salak  Pondoh dari  Sleman  juga  berbeda  dengan  rasa  salak  dari tempat  lain.  Tumbuh  di  daerah  ketinggian  sedang dengan  tingkat  kesuburan  yang  bagus  di  sekitar lereng  Merapi  menjadikan  rasa  salak  Pondoh berbeda  dengan  salak  dari  daerah  lain.  Salak Pondoh tidak hanya manis dan segar tetapi mampu menembus  pasar  ekspor  dan  menjadi  sebuah komoditas  tanaman  yang  menguntungkan  bagi petani.
Dampak abu dan material vulkanik dari erupsi gunung  berapi  pada  salak  pondoh  merupakan masalah  teraktual  yang  dihadapi  petani  salak  pada paska  erupsi  gunung  merapi  tahun  2010.  Temuan Aksan  dkk  (2010)  dalam  studi  kasus  kawasan agrowisata salak Pondoh, Turi, Sleman,
Yogyakarta  di  lahan  Salak  Pondoh  Di  Desa Girikerto,  Wonokerto  serta  Donokerto,  Turi   Kec.
Turi Kabupaten Sleman, terlihat berbagai kerusakan  yang  terjadi  khususnya  pada  tahap pertanaman  salak.  Berupa  meterial  awan  panas, pasir,  debu  vulkanik  bahkan  lumpur  berpasir  yang ternyata  mengganggu  agroekosistem  sekitar  salak pondoh  sekitar.  Kerusakan  pertanaman  salak  akan mengakibatkan  penurunan  perekonomian  petani salak.  Pengembalian  kondisi  tersebut  seperti semula,  selain  kembali  melakukan  pemulihan perkebunan  salak,  perlu  adanya  cara  untuk  tetap menjaga  nama  salak  pondoh  sebagai  ikon  yang tidak dapat dipisahkan dari Kabupaten Sleman dan Yogyakarta.  Penelitian  tentang  manfaat  salak pondoh  juga  dapat  membantu  untuk  memberikan nilai  lebih  terhadap  salak  pondoh.  Pengetahuan tentang  manfaat  dari  salak  pondoh  dalam  bidang kesehatan  diharapkan  salak  pondoh  akan  semakin dibutuhkan  oleh  masyarakat  dan  secara  langsung
akan  memberikan  dampak  positif  terhadap  petani salak.
Penyakit jantung dan pembuluh darah menjadi penyebab  utama  kematian  di  negara  maju  dan negara berkembang pada akhir abad 20. Berdasarkan  Survei  Kesehatan  Rumah  Tangga (SKRT)  tahun  2013,  kematian  akibat  penyakit jantung  dan  pembuluh  darah  di  Indonesia  sebesar 26,3%,  meningkat  dibandingkan  data  kematian  di rumah  sakit  tahun  2005  sebesar  16,7%.  Prevalensi ini  meningkat  dari  tahun  ke  tahun  sehingga penyakit  jantung  menduduki  peringkat  pertama sebagai  penyebab  kematian  (Ruhyana,  2007). Penyakit  jantung  koroner  merupakan  salah  satu jenis  kelainan  yang  disebabkan  oleh  penyempitan atau penghambatan pembuluh arteri yang mengalirkan  darah  ke  otot  jantung  (Soeharto, 2000:30).  Penyakit  ini  umumnya  menjangkiti penderita-penderita  di  atas  umur  40  tahun,  tetapi dalam  dekade  terakhir  ini  sudah  sering  didapati pada  penderita  yang  lebih  muda.  Faisal  (2000:1) mengatakan  bahwa  penyakit  jantung  koroner berhubungan  erat  dengan  pola  hidup  sehari-hari yang tidak sehat.
Pola  hidup  yang  tidak  sehat  yang  sering  kali dilakukan  oleh  masyarakat  adalah  mengenai  pola memilih  makanan.  Banyak  sekali  makanan  yang mengandung  lemak  saat  ini.  Soeharto  (2000:30) menyebutkan  bahwa  konsumsi  jenis  makanan berlemak  yang  berlebihan  akan  mengakibatkan terbentuknya kolesterol dalam tubuh yang melebihi batas normal. Kolesterol dalam batas normal sangat diperlukan  dalam  tubuh  di  antaranya  sebagai komponen  pembentuk  dinding  sel,  garam  empedu, dan  hormon,  namun  jika  dalam  tubuh  kolesterol berlebih dapat menyebabkan terjadinya penyempitan  pembuluh  darah  atau  biasa  disebut aterosklerosis.  Aterosklerosis  merupakan  suatu proses  pelapisan  dinding  nadi  oleh  endapan- endapan  bahan  berlemak  yang  disebut  ateroma. Penyebab  pastinya  tidak  diketahui  tetapi  berbagai faktor  resiko  terbukti  telah  meningkatkan  peluang aterosklerosis.  Faktor  resiko  tersebut  antara  lain adalah  kenaikan  kolesterol  darah,  kebiasaan merokok,  diabetes  melitus,  kebiasaan  makan- makanan berlemak, riwayat kondisi dalam keluarga, obesitas, kurang olahraga dan stres (Patel, 1998:16).
Jantung  dan  hati  memiliki  hubungan  dengan kolesterol.  LDL  (Low  Density  Lipoprotein) kolesterol  atau  kolesterol  lipoprotein  berkepadatan rendah  adalah  kolesterol  jahat,  karena  kolesterol LDL  melekat  pada  dinding  arteri  dan  bisa
menyebabkan terjadinya penutupan arteri.
Kolesterol  lipoprotein  berkepadatan  tinggi  dikenal sebagai  kolesterol  baik  atau  HDL  (High  Density Lipoprotein) berperan membawa kembali kolesterol  buruk  ke  organ  hati  untuk  pemrosesan lebih  lanjut.  Kadar  HDL  yang  tinggi  akan melindungi  jantung  dari  penyakit,  kadar  LDL dalam  kategori  yang  sangat  baik  bisa  berisiko untuk  terkena  penyakit  jantung.    Kelebihan  lemak juga  mempunyai  dampak  terhadap  keadaan  hati, kondisi  yang  dinamakan  non-alcohol  steato- hepatitis (NASH). NASH adalah keadaan penumpukan lemak dalam hati sehingga menciptakan  jaringan parut  dan  sirosis.  Kelebihan berat  badan  (obesitas)  meningkatkan  risiko terbentuknya non-alcohol steato-hepatitis.
Terdapat bermacam-macam cara untuk mencegah bahkan menyembuhkan berbagai penyakit  yang  dialami  oleh  masyarakat.  Terdapat cara  pengobatan  modern  maupun  konvensional. Walaupun perdebatan para medis tentang bisa atau tidaknya penyakit kronis tersebut untuk disembuhkan, tidak sedikit penderita yang kembali mencari sistem pengobatan tradisional. Keunggulan dari  pemakaian  obat  tradisional  adalah  dapat melepaskan  ketergantungan  dari  obat  kimiawi  dan biaya yang dikeluarkan relatif terjangkau khususnya bagi masyarakat yang kurang mampu.
Pengendalian  kadar  kolesterol  pada  darah dapat dilakukan dengan melakukan diet yang dapat menurunkan  kadar  kolesterol  pada  darah  atau bersifat  hipokolesterolemik.  Pengaturan  diet  yang dikonsumsi  merupakan  cara  yang  sederhana, murah,  dan  aman  untuk  pengendalian  kadar kolesterol  pada  darah.  Menurut  Povey  (1996:106), diet yang baik untuk penderita hiperlipidemia yang dapat berfungsi menurunkan kadar kolesterol harus makanan  yang  mengandung  karbohidrat  termasuk serat  pangan,  rendah  sukrosa  dan  glukosa,  rendah kolesterol  dan  asam-asam  lemak  jenuh,  serta mengandung  protein  yang  memadai.  Bahan makanan yang memiliki potensi menurunkan kadar kolesterol darah adalah buah-buahan terutama yang mengandung vitamin C dan memiliki serat.
Pencarian dan penemuan bahan alam atau obat alami  yang  murah  dan  mujarab  untuk  mengobati dan  mencegah  penyakit  degeneratif,  diketahui bahwa  sayuran  maupun  buah-buhan  contohnya buah salak (Salacca edulis, R.) dapat mengendalikan  kadar  kolesterol  pada  darah. Kandungan  buah  salak  (Salacca  edulis,  R)  pada 100  gram  bagian  buah  yang  dapat  dimakan  antara lain mengandung air (78,00 mg), protein (0,40 gr), serat  kasar,  vitamin  C  (2,00  mg),  kalasium  (28,00
mg),  fosfor  (18,00  mg)  (I  ketut  Suter,  1998:137). Vitamin  C  berkisar  antara  1,54-2,93  mg/100  gram dan  serat  kasar  3,23  mg/gram,  serat  zat  aktif saponin  1,05  mg/00  gram  dan  flavanoida  1,53 mg/100gram.
Kandungan fitokimia dalam buah salak adalah flavanoida yang dapat menurunkan kadar kolesterol. Menurut Rusdi (1988:14), yang dimaksud  dengan  fitokimia  adalah  senyawa- senyawa  aktif  biologis  yang  terdapat  dalam simplisia  tumbuhan.  Senyawa  aktif  flavanoida berguna  sebagai  anti  oksidan  dalam  tubuh  yang berfungsi  dalam  meningkatkan  toleransi  glukosa, mencegah  jantung  koroner,  meningkatkan  fungsi sel  beta  pankreas  dan  dapat  menekan  kolesterol dalam  tubuh.  Peran  dari  vitamin  C  adalah melindungi  kesehatan  tubuh  manuasia,  seperti pembentukan  kolagen  (Linder,1992:  166-168), meningkatkan  daya  tahan  tubuh,  meningkatkan aktivitas fagositosis sel darah putih dan meningkatkan absorbsi zat besi dalam usus (Dedy, 1993:41).  Menurut  Potter  (Bunga,  2009:  2),  serat kasar  dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  karena serat  kasar  dapat  mengganggu  proses  sintesis kolesterol.  Manfaat  serat  antara  lain  mampu melindungi usus dari gangguan sembelit (kontipasi),  diare,  divertikulum,  wasir,  dan  kanker usus,  selain  itu  serat  makanan  juga  mencegah terjadinya  gangguan  metabolisme,  sehingga  tubuh terhindar  dari  kegemukan    dan  kemungkinan serangan  penyakit  diabetes  millitus,  jantung koroner, dan batu empedu. Penelitian ini dilakukan untuk    mendapat  informasi  tentang  potensi  salak sebagai  agen  hipolipidemik  dengan  melihat gambaran  histologi  hati  dan  jantung  pada  mencit yang  telah  mendapat  perlakuan  pemberian  sari buah salak dan diet lemak hewani.

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode penelitian eksperimen dengan tujuan untuk mengukur respon yang  muncul  dari  suatu  obyek  sebagai  akibat adanya perubahan suatu faktor yang mengenainya. Penelitian  pemeliharaan,  pemberian  perlakuan, pengambilan  sampel  darah  mencit  dilakukan  di Animal  House  Universitas  Negeri  Yogyakarta sementara  pengamatan  preparat  dilakukan  di laboratorium  zoologi  Fakultas  MIPA  Universitas Negeri  Yogyakarta.  Waktu  penelitian:  bulan  Juni sampai  Oktober  2015.  Variabel  bebas:  Sari  buah salak;  Variabel  tergayut  preparat  hati  :  (1) Kerusakan  batas  sel  (2)  Infiltrasi  sel  lemak;
variable tergayut preparat jantung : (1) Kerusakan endotel (2) Infiltrasi sel lemak.
Subjek  penelitian  adalah  21  ekor  mencit  yang dibagi  ke  dalam  3  kelompok  yaitu:  kelompok  A yang  diberi  BR  II  tanpa  diet  lemak  hewani, kelompok  B  yang  diberi  BR  II  dan  diet  lemak hewani, kelompok C yang diberi BR II, diet lemak dan sari buah salak.
Cara kerja dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:  (1)  Mencit  uji  dimatikan  terlebih  dahulu dengan membiusnya. Kemudian didiamkan beberapa  menit  di  atas  bak  paraffin  sampai  tidak bergerak  lagi;  (2)  Pembedahan  dilakukan  pada hewan uji yang telah mati untuk pengmbilan organ yang  akan  digunakan  sebagai  preparat.  Labelling (pemberian  label)  Organ  hepar  dan  jantung  di tempeli  label  yang  sesuai.  Permukaaan  tulisan ditelungkupkan  kemudian  di  masukkan  kedalam fixative  maka  kertas  akan  melekat  erat  karena terjadi koagulasi; (3) Organ hepar yang telah diberi label langsung dimasukkan ke dalam fixative, agar tidak terjadi autolysis post mortable. Dalam hal ini fixatve  yang  digunakan  adalah  larutan  formalin 10%;  (4)  Proses  pencucian  dilakukan  langsung menggunakan  larutan  alkohol  mulai  dari  30%, 40%,  50%  dan  60%;  (5)  Dehidrasi  adalah menggantikan molekul air dengan molekul alkohol bertingkat  dari  konsentrasi  rendah  hingga  absolut dengan  waktu  tertentu;  (6)  Proses  ini  bertujuan menghilangkan  alkohol  agar  paraffin  dapat  masuk ke  dalam  jaringan.  Proses  penjernihan  ini menggunakan  toluol  tujuannya  agar  preparat  tetap lunak,  walaupun  lama  berada  didalam  toluol preparat tidak akan mengalami kerusakan sitologik; (7)  Proses  infiltrasi  dilakukan  di  dalam  oven (incibator)  dengan  temperatur  55 0 C-60 0 C,  atau dapat  menggunakan  kotak  logam  yang  diberi lampu  listrik  60  watt  yang  dapat  diturun-naikkan temperaturnya  sesuai  dengan  keperluan;  (8)  blok paraffin dipotong dengan mikrofon untuk pembuatan  preparat;  (9)  Meletakkan  sejumlah coupes  pada  kaca  benda  yang  telah  diberikan perekat  menggunakan  mayers  albumen,  lalu ditetesi  aquades  secukupnya;  (10)  staning  yaitu dilakukan deparaffinasi dan dilanjutkan pewarnaan Haematoksylin-Eosin.
Teknik  pengumpulan  data  untuk  preparat hepar  yang  kerusakan  batas  sel  diperoleh  dengan cara membagi 1 lobulus yang di dalamnya terdapat vena  sentralis  menjadi  4  bagian  yaitu  atas,  kanan, bawah, dan kiri. Selanjutnya  menentukan 5 lamina (lempeng)  yang  didalamnya  terdapat  sel-sel  hati
pada  ke  empat  bagian  tersebut,  kemudian menentukan  5  sel  hati  didalam  1  bagian  lamina yang  telah  ditentukan,  sehigga  1  lobulus  dengan  1 vena  sentralis  ditengahnya  akan  diperoleh  100  sel hati  yang  diamati  kerusakan  batas  selnya.  Data infiltrasi sel lemak diperoleh dengan menggunakan cara  yang  sama  dengan  pengumpulan  data kerusakan  batas  sel  yaitu  dengan  cara  membagi lobulus  menjadi  4  bagian,  kemudian  menentukan 25 sel pada masing-masing bagian lobulus tersebut, sehingga  setiap  1  lobulus  terdapat  100  sel  yang diamati. Infiltrasi sel lemak ditandai dengan adanya tetes-tetes  yang  besar  sehingga  mendesak  nukleus kearah tepi atau hanya tampak sebagai tetes lemak yang  kecil  dalam  hepatosit.  Pengumpulan  data kerusakan  endotel  jantung  dengan  cara  mengamati ada  tidaknya  kerusakan  endotel  arteri  atau  aorta. Pengumpulan data infiltrasi sel lemak pada jantung dengan  cara  mengamati  ada  tidaknya  bulatan  atau tetes-tetes transparan.
Pengumpulan  data  untuk  kerusakan  endotel dan  infiltrasi  sel    digunakan  chek-list  dengan coding  untuk  “ya”  adalah  1  dan  0  untuk  jawaban “tidak”,  “Ya”  bila sesuai dengan pernyataan pada chek-list  yaitu  adanya  kerusakan  endotel  atau infiltrasi sel lemak dan “Tidak” untuk sebaliknya.
Analisis  data  dilakukan  dengan  statistic deskriptif.  Hal  ini  karena  skor-skor  yang  ada  pada penelitian  aorta  dan  arteria  koronaria  jelas  tidak homogen.  Sedangkan  hasil  rata-rata  sel  nekrosis dan infiltrasi lemak pada hati menunjukkan standar deviasi  besar  sehingga  tidak  bisa  dilakukan  uji statistic  parametric.  Uji  beda  non  parametric  juga tidak  dilakukan  karena  ada  sel-sel  yang  kosong pada tabulasi silangnya.

## Hasil dan Pembahasan

## Data hepar
1. Perlemakan hepar
Profil  perlemakan  hepar  disajikan  pada Gambar  1.  Perlemakan  hepar  paling  tinggi  pada perlakuan  2  dan  paling  rendah  pada  normal. Perlemakan pada perlakuan 2 lebih tinggi daripada 1. Hal ini kemungkinan disebabkan pemberian sari buah salak belum optimal dosisnya dan belum tepat lama waktunya.
Gambaran  histopatologi  perlemakan  hepar dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 1. Data perlemakan hepar dengan variasi perlakuan
(a) (b)
Gambar 2 Perlemakan lemak pada sel hepar yang menunjukkan gambaran (a) sinusoid hati dan (b) vena centralis
Gambar 3 Profil nekrosis hepar pada berbagai perlakuan
2. Nekrosis pada hepar
Profil  nekrosis  hati  pada  variasi  perlakuan ditampilkan  pada  Gambar  3,  sedangkan  gambaran histopatologinya  dapat  dilihat  pada  Gambar  4. Nekrosis  sel  hepar  paling  tinggi  pada  perlakuan  2 dan  paling  rendah  pada  normal.  Nekrosis  pada perlakuan  2  lebih  tinggi  daripada  1.  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  pemberian  sari  buah salak belum optimal dosisnya dan belum tepat lama waktunya.

## Gambar 4. Struktur histopatologi nekrosis hati
Pemeriksaan histologi pada preparat hati yang mengalami  kerusakan  menunjukkan  beberapa perubahan.  Perubahan  tersebut  Nampak  pada struktur histopatologi berupa degenerasi sel berupa penimbubnan  lemak  dan  nekrosis.  Pengamatan struktur  histopatologi  pada  preparat  penelitian  ini meliputi nekrosis dan penimbunan/infitrasi lemak.
Lemak  akan  terlihat  dalam  lemak  sel menunjukkan terjadinya proses degenerasi. Degenerasi perlemakan adalah suatu keadaan yang terlihat  pada  sel  yang  mengalami  tetes-tetes  yang besar  sehingga  mendesak  nucleus  kearahtepi  atau hanya tampak sebagai tetes lemak yang kecil dalam hepatosit.  Nekrosis  koagulatif  bisa  terjadi  dari degenerasi  hyaline  yang  ditandai  oleh  kelompok bulatan-bulatan yang terlihat risin bila dicat dengan H  Ematoxyllin  Eosin  (HE)  senyawa-senyawa protein fusfolipida menyususn bulatan-bulatan ini.
Nekrosis  sel  yang  terjadi  akan  nampak  dalam gambaran  histologi  berupa  proses  menghilangnya inti.  Proses  perubahan  tersebut  terdiri  dari  tahap proses piknosis, karioseksis dan kariolisis. Pengerutan  inti  terjadi  pada  proses  piknosis,  yang diikuti dengan perubahan inti dari struktur retikula menjadi  gelap  merata.  Tanda  karioseksis  terjadi berupa  fragmentasi  isi  sel  inti  dan  kemudian terdispasi ke dalam sitoplasma. Terjadinya kariolisis dapat diketahui  dengan  munculnya  tanda berupa  inti  secara  lengkap  menghilang  bersama- sama kromatin.
Non  alcoholic  Fatty  liver  Disease  (NAFDL) menyebabkan  akumulasi  steatosis  dalam  hati  yang terjadi bukan karena konsumsi alkohol. Prevalensinya  diatas  30%  di  negara  maju  dan mendekati  10%  di  negara  berkembang,  sehingga sangat  besar  diseluruh  dunia.  Patogenesis  NAFDL berhubungan  dengan  resistensi  insulin  dan  sering ditemukan pada orang gemuk sentral atau diabetes. Resistensi insulin dan kelebihan lemak dihubungkan  dengan  peningkatan  penimbunan lemak di hati (Smith & Adams, 2011: 97-113).
NAFDL  sering  menutupi  kondisi  steatosis sederhana  yang  relatif  jinak  dan  nonalcoholic steatohepatitis  (NASH).  NASH  ditandai  dengan penyakit hepar yang kronis dan progresif yang bisa berlanjut  sebagai  sirrosis  dan  tahap  akhir  penyakit hepar  dan  carcinoma  hepar  (hepatoma).  Untuk mencegah  terjadinya  penyakit  ini  adalah  dengan menghindari  obesitas,  hiperlipid,  diabetes  tipe  2 dan mengatur pola hidup supaya berat badan turun serta  olahraga  (Basaranoglu  dan  Ormece,  2014: 127-132). Penyakit-penyakit diatas karena hiperlipidemia dan terjadi perlemakan hati sehingga  salak  harus  diteliti  lebih  lanjut  sampai bisa terbukti mencegah penyakit-penyakit tersebut. Penelitian  ini  merupakan  penelitian  awal,  bisa dilanjutkan  dengan  penelitian  yang  lain  dan  teliti pada tikus sehingga bisa dipakai sebagai data dasar untuk penelitian pada manusia.

## Aorta dan Pembuluh Darah Koronaria
1. Kerusakan endotel Gambar  5  menunjukkan  kerusakan  endotel pada  aorta.  Kelompok  kontrol  pada  penelitian  ini ditemukan  seluruh  endotel  aorta  (gambar  10)  dan pembuluh  darah  koroner  dalam  keadaan  tidak rusak.
Kelompok  perlakuan  1  menyebabkan  50% endotel  aorta  rusak  berat  dan  96,67%  endotel pembuluh  darah  koronaria  rusak.  Kerusakan endotel pembuluh darah koronaria terdiri dari rusak ringan  26,67%;  rusak  sedang  26,67%;  rusak  berat 50%  dan  rusak  total  13,33%.  Kelompok  ini mendapat  diet  lemak.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat Mark, dkk. (2000:523) yang menyebutkan terjadinya cedera di sel endotel akan mengawali  aterosklerosis.  Cidera  yang  terjadi  bisa secara  mekanis  maupun  karena  aadanya  bahan- bahan  sitotoksis.  Bahan  tersebut  bisa  dengan  LDL yang teroksidasi.
Kelompok  ini  tidak  mengalami  kerusakan endotel  semua  pembuluh  darahnya,  karena  belum ada  pemicu  aterosklerosis  berupa  diet  lemak. Endotel pembuluh kelompok perlakuan 2
menunjukkan hasil 97,71% endotel aorta rusak dan 93,33%  endotel  arteri  koroneria  mengalami kerusakan. Kerusakan endotel aorta pada kelompok perlakuan  2  memang  lebih  besar  daripada kelompok  perlakuan  1,  tetapi  sebagian  besar kerusakan  endotel  aorta  hanya  ringan  dan  sedang
yaitu  sebesar  28,57%  dan  42,86%  (dijumlah  jadi 71,43%).  Kerusakan  endotel  aorta  pada  kelompok perlakuan  1  memang  hanya  50%  tetapi  semuanya pada tahap rusak berat.
Gambar 5 Profil kerusakan endotel pada aorta
a B c D
e
Gambar 6 Struktur histopatologi kerusakan endotel aorta (a) normal (b) 25% ringan (c) 25-50% sedang (d) 50-75% berat (e) >75% total
Gambar 7 Profil kerusakan endotel pada arteri koronaria
a B c D

## e
Gambar 8 Struktur histopatologi kerusakan endotel arteri koronaria (a) normal (b) 25% ringan (c) 25-50% sedang (d) 50-75% berat (e) >75% total
Data  kelompok  perlakuan  2  pada  kerusakan endotel  arteria  koroneria  secara  total  hampir  sama dengan  kelompok  perlakuan  1,  tetapi  sebagian besar  keolmpok  perlakuan  2  hanya  rusak  sedang (27,28%).  Sebagian  besar  kerusakan  endotel  pada arteria  koroneria  pada  perlakuan  1  berupa  tingkat kerusakan  berat  dan  total  yaitu  20%  dan  13,11%, sedangkan pada perlakuan 2 yang rusak total hanya 11,11% (Gambar 7 dan Gambar 8).
Kondisi  diatas  sesuai  dengan  teori  timbulnya aterosklerosis  yang  biasanya  dikaitkan  dengan kadar  lemak  darah.  Kadar  lemak  dalam  darah (terutama  kolestrol)  yang  meningkat  maka  risiko untuk terjadi aterosklerosis menjadi tinggi.
Menurut Simorangkir dalam
Bunga
Citraningrum  (2010:  52)  konsumsi  makanan  yang mengandung  lemak  dan  kolesterol  tinggi  memicu peningkatan  kolestrol  dalam  darah.  Kondisi tersebut disebut
hiperkolesterolemia.
Hiperkolesterolemia merupakan salah satu penyebab  obstruksi/penyumbatan  pembuluh  darah. Hal  ini  terjadi  karena  hiperkolesterolemia  secara perlahan  akan  menimbulkan  penimbunan  kolestrol pada  dinding  arteri,  sehingga  terjadi  proses aterosklerosis.  Kolestrol  yang  berlebihan  dalam darah  akan  melekat  pada  dinding  pembuluh  darah, selanjutnya LDL akan menembus dinding pembuluh  darah  melalui  sel  endotel,  masuk  ke lapisan  pembuluh  darah  berupa  tunika  intima, sehingga bisa dilihat sebagai kerusakan sel andotel.
2. Infiltrasi sel lemak
Infiltrasi  lemak  pada  aorta  tidak  terjadi  pada kelompok  kontrol,  jadi  100%  normal.  Kelompok perlakuan  1  menyebabkan  semua  (100%)  preparat aorta  menunjukkan  infiltrasi  sel  lemak  sedang. Preparat kelompok perlakuan 2 hanya menunjukkan  infiltrasi  sel  lemak  57,15%  dan
42,86% hanya merupakan infiltrasi ringan (Gambar 8)
Infiltrasi sel lemak pada arteria koronaria tidak terjadi  pada  70%  kelompok  kontrol  dan  infiltrasi lemak  yang  terjadi  pada  kelompok  ini  hanya tingkat  ringan  dan  sedang  yaitu  sebesar  20%  dan 10%  saja.  Kelompok  perlakuan  2  paling  tinggi infiltrasi lemaknya yaitu 96,67% dan paling banyak infiltrasi  lemak  total  yaitu  sebesar  33,33%. Kelompok  perlakuan  2  hanya  terinfiltrasi  lemak sebesar 55,56% dan sebagian besar hanya infiltrasi ringan (16,67%) dan sedang (22,22%).
Kondisi kerusakan endotel dan infiltrasi lemak pada  aorta  dan  arteri  terjadi  karena  kondisi hiperlepidemia  yang  dibuat  dengan  pemberian  diet lemak hewan. Makanan tersebut terdiri dari 500 gr BR II, 20 ml kuning telur bebek dan 60 ml minyak babi,  sehingga  didapatkan  perbandingan  24:1:3. Komposisi  tersbut  didapatlkan  dengan  penelitian pendahuluan  sehingga  didapatkan  bahan  makanan yang disukai tikus dengan melihat selera makanannya  terhadap  pakan  tersebut  serta  sisa pakan  yang  tidak  dimakan  hewan  uji  tersbu=ut. Menurut Rumanoff dan Rumanof (bunga Citraningrum,  2010:  51)  dalam  telur  bebek  bagian kuning terdapat 47,0 gr air; 17,0 gr protein; 35,0 gr lemak;  0,8  gr  karbohidrat;  398  kkalori;  150  mg kalsium, 400 mg fosfor, 7,0 mg besi; 2870 sl vit A; 0,60  mg  vit  B1.  Sedangkan  putih  telur  bebek mengandung  88,0  gr  air;  11,0  gr  protein;  0  gr lemak;  0,8  gr  karbohidrat;  54  kkalori;  21  mg kalsium;  20  mg  fosfor;  0,1  mg  besi;  0,01  mg  vit B1.  Menurut  Bharata  (2005:  45)  minyak  atau lemak mengandung 902 kkalori dan 100 gr lemak.
Masyarakat  Indonesia  sering  menggunakan bahan-bahan lokal untuk pencegahan dan pengobatan  suatu  penyakit  secara  tradisional.
Pencegahan penyakit degeneratif sering memanfaatkan buah salak sebagai salah satu

## Gambar 5 Profil infiltrasi lemak pada aorta
sumber  daya  alam  yang  melimpah  di Sleman. Cara  tersebut  sesuai  dengan  prinsip  pencegahan penyakit  degeneratif  yaitu  dengan  cara  menjaga pola  makan  dengan  mengurangi  makanan  yang berlemak tinggi dan memperbanyak makanan yang berserat tinggi.
Data  pada  perlakuan  kelompok  2  yang menunjukkan kecenderungan penurunan kerusakan endotel  dan  infiltrasi  lemak  pada  aorta  dan  arteri dibandingkan  yang  terjadi  pada  perlakuan  1 merupakan  bukti  bahwa  struktur  histopatologi pembuluh darah jantung yang diberi lemak hewani dan  salah  sari  buah  sebagian  mengalami  proses terjadinya  aterosklerosis  dalam  jumlah  yang  lebih sedikit dibandingkan pada pembuluh darah jantung hewan  uji  dengan  perlakuan  1  yang  hanya  diberi diet lemak hewani.
Kandungan  vitamin  C  yang  tinggi  pada  salak yaitu  sebesar  2,00  per  100  gr  merupakan  alasan yang  mendasari  pemilihan  buah  ini  sebagai alternatif  bahan  alam  utuk  menurunkan  kolestrol darah.
Mekanisme  pemecahan  kolestrol  menjadi asam  empedu  dan  garam  empedu  oleh  vitamin  C tidak  terkait  langsung  melainkan  hanya  berperan sebagai  kofaktor  bagi  enzim  pemecah  kolestrol  di dalam hati (Hertog, 1992: 151) . vitamin C yang di berikan  akan  menurunkan  kadar  kolestrol  darah dengan cara membantu memecah kolestrol menjadi asam empedu (asam kholat dan asam kenokdeoksalat).
Asam  empedu  disintesis  oleh  hati  dan disekresikan  melalui  kantong  empedu  ke  dalam lumen  usus,  kemudian  menghasilkan  senyawa emfipatik  atau  sering  disebut  garam  empedu. Garam  empedu  bertugas  sebagai  detergen,  yaitu memecah  lemak  menjadi  bentuk  yang  lebih  kecil dan  mengabsorbsi  lemak.  Sintesis  asam  empedu yang  terjadi  di  hati  menjadi  garam  empedu  yang kemudian  mensekresikan  ke  usus  dan  dikeluarkan dari tubuh melalui feses. Semakin banyak kolestrol dari  tubuh  yang  dieliminir  dari  usus  melalui  feses dalam  bentuk  asam  empedu  dan  garam,  maka kolestrol  di  dalam  darah  akan  menurun  (Sitepoe, 1992: 101).
Vitamin  C  juga  berperan  sebagai  oksidan. Vitamin  C  yang  diberikan  pada  mencit  dapat mencegah  terjadinya  peninggian  sel-sel  endotel tunika intima arteri sebagai gejala awal arterosklerosis dan menjadikan normalnya keadaan pembuluh  darah  arteri  koronaria.  Vitamin  C sebagai  vitamin  antioksidan  dapat  mencegah terjadinya  atherosclerosis.  Vitamin  C  bersama- sama  dengan  darah  akan  bereaksi  dengan  radikan bebas  sebagai  produk  oksidasi  LDL,  sehingga menyebabkan LDL kurang aterogenik dan oksidasi LDL terhambat. Terhambatnya oksidasi LDL maka tidak terjadi penimbunan kolestrol di dinding arteri tersebut  sehingga  tidak  terjadi  keradangan  dan proliserasi sel-sel otot polos dan hal itu menjadikan tetap  normal  sebagai  vitamin  antioksidan  berperan dalam  menghambat  terjadinya  oksidasi  senyawa lemak (Satoto, 1998: 298).
Penurunan  kolestrol  dalam  darah  mencit disebabkan juga oleh kandungan serat kasar dalam salak  yang  cukup  tinggi.  Serat  dalam  makanan terdiri  atas  dua  komponen  utama,  yaitu  larut  dan tak larut. Serat mempunyai fungsi metabolisme zat gizi  yang  penting,  walaupun  tidak  dapat  dicerna oleh  tubuh.  Serat  kasar  tidak  dapat  dicerna  maka tubuh hanya bisa sedikit menghasilkan glukosa dan mengakibatkan  penurunan  jumlah  asam  piruvat, dan  secara  tidak  langsung  jumlah  Asetil  Co-A dalam  tubuh  menurun  karena  asam  piruvat merupakan  pembentuk  Asetil  Co-A.  apabila  Asetil Co-A  dalam  tubuh  menurun  maka  proses  sintesis kolestrol  juga  ikut  terganggu,  sehingga  kadar kolestrol dalam darah menurun, karena Asetil Co-A berfungsi sebagai prekursor sintesis kolestrol. Serat kasar  dapat  menurunkan  kadar  kolestrol  dalam plasama,  dimungkinkan  mengikat  kolestrol  dan asam  empedu  yang  ada  dalam  usus  terjadi  ikatan intraluminal  antara  serat,  kolestrol  dan  asam empedua yang kemudian dikeluarkan melalui feses, keadaan ini akan mengurangi sirkulasi enterohepatik  asam  empedu  dan  meningkatkan perubahan kolestrol menjadi asam empedu sehingga  kolestrol  plasma  menurun  (Potter,  1979: 233).  Kondisi  kadar  kolestrol  hewan  uji  pad perlakuan  2  yang  menurun  akibat  tambahan konsumsi  buah  salak  menyebabkan  kerusakan endotel  pembuluh  darah  dan  sel  hepar  serta infiltrasi lemak pada pembuluh darah dan sel hepar juga menurun.
Zat  aktif  flavanoida  menurunkan  kadar kolestrol  dalam  darah  yang  ada  pada  flavanoida adalah iso-flavon. Dalam perlakuan pemberian diet lemak hewani yang diimbangi pemberian sari buah salak,  kadar  kolestrol  darah  mencit  mengalami penurunan.  Dalam  sintesis  kolestrol  dalam  darah Asetil  Co-A  merupakan  prekursor.  Iso-flavon diduga  mampu  mengahambat  enzim  untuk  sintesis asam  lemak  dalam  hati.  Iso-flavon  kemungkinan dapat  menghambat  enzim  HMG  Co-A  Reduktase. Enzim  HMG  Co-A  reduktase  merupakan  enzim utama dalam sintesis kolestrol. Enzim ini berperan dalam  proses  esterefikasi  kolestrol,  yaitu  sebelum kolestrol  diserap  dan  diubah  menjadi  kilomikron dalam  usus  (Winarsi,  2005:  50).  HMG  Co-A menjadi  mevalonat,  bila  jumlah  kolestrol  tinggi maka  sintesis  kolestrol  hati  akan  menurun. Penghambatan  umpan  balik  pembentuk  kolestrol mungkin dengan pengaturan produksi enzim HMG Co-A  reduktase.  Kolestrol  diabsorbsi  dari  diet menghambat  jalur  biosintetik  hepar  dengan menurunkan  sintesis  pada  reaksi  HMG  Co-A reduktase (Titik Ismiyati, 1999: 79)
Isoflavon  juga  memiliki  aktifitas  antioksidan karena  adanya  gugus  hidroksil  fenolit,  ketika senyawa  ini  bereaksi  dengan  radikal  bebas  maka reaksi  berantai  radikal  bebas  akan  dihambat  oleh efek resonansi inti aromatik. Mekanisme kerja iso- flavon  melalui  mekanisme  perbaikan  profil  lipid, yaitu  menurunkan  kolestrol  total,  LDL  dan trigliserida  serta  meningkatkan  HDL.  Mekanisme lain  penurunan  kolestrol  oleh  iso-flavon  adalah peningkatan  sekresi  asam  empedu  dan  penurunan metabolism  kolestrol. Efek dari kardoprotektif iso- flavon  juga  melalui  penurunan  agregasi  platelet (trombosit)  dan  terbentuknya  gumpalan,  serta penghambatan  atherosklerosis,  baik  oleh  kerja antioksidan  maupun  dengan  cara  menghambat proliferasi dan adesi sel-sel dalam arteri.
Flavanoida  bekerja  melindungi  pembuluh darah  agar  tidak  mudah  terjadinya  ateroma  yaitu dengan  cara,  menghambat  poliferasi  sel-sel  otot polos, meningkatkan fungsi sel endotel, baik dalam pertumbuhan  maupun  perbaikan  dan  mencegah terjadinya  inflamasi.  Iso-flavon  tidak  mengandung kolestrol,  oleh  karenanya  berefek  meningkatkan ekskresi  asam  empedu,  dan  mengubah  kecepatan sintesis  kolestrol  hepatik.  Melalui  mekanisme seperti ini pula, diduga iso-flavon memberikan efek proteksi  terhadap  serangan  LDL  teroksidasi. Kondisi ini berhubungan dengan potensi antioksidan  iso-flavon  yang  mampu  mencegah LDL teroksidasi, dan mempertahankan kerja sistem vaskuler (Winarsi, 2005: 50-53).

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan,  maka  dapat  dibuat  simpulan  sebagai berikut:    Struktur  histopatologi  pembuluh  darah jantung  mencit  yang  diberi  sari  buah  (Salacca edulis,  R)  dan  diet  lemak  hewani  mengalami kerusakan  endotel  dan  infiltrasi  lemak  lebih  kecil dibandingkan  struktur  histopatologi  pembuluh darah  jantung  pada  mencit  yang  diberi  tambahan diet lemak.
Struktur  histopatologi  sel  hepar  mencit  yang diberi  sari  buah  salak  (Salacca  edulis,  R)  dan  diet lemak  hewani  mengalami  kerusakan  endotel  dan infiltrasi lemak lebih banyak dibandingkan struktur histopatologi  sel  hepar  pada  mencit  yang  diberi tambahan diet lemak.

## Pustaka
Agus  Suryanto.  1994.  Pengaruh  Ekstrak  Biji
Termemer (Luffa acutangula, Roxb.)
terhadap  Struktur  Mikroanatomi  Hepar Mencit (Mus musculus, L) setelah Perlakuan dengan Sodium
Siklamat. Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Biologi UGM.
Ali  Khomsan.  2004.  Pangan  dan  Gizi  untuk Kesehatan.  Jakarta:  PT.  Raja  Grafindo Persada.
Astawan  Made.  2008.  Seri  Kesehatan  Keluarga Sehat dengan Buah. Jakarta: Dian Rakyat.
Bunga  Citraningrum.  2010.  Pengaruh  Pemberian
Ekstrak  buah  Salak  (Salacca  edulis,  R)  pada Lipid Darah Mencit yang Diberi Diet Lemak. Skripsi. FMIPA. UNY: Yogyakarta.
Bharata.  2005.  Komposisi  Bahan  Makanan. Yogyakarta: Bhatara.
Deddy  Muchtadi.  1993.  Metabolisme  Zat  Gizi.
Jakarta: pustaka Sinar Harapan.
Dellmann, H.D dan Brown, E.M. 1992. Buku Teks Histologi Veteriner II. Edisi 3. (Alih bahasa: R. hartono). Jakarta: UI press.
Denny  Santoso.  2000.  Makan  Sehat  Hidup  Sehat. Yogyakarta: Kompas.
Dwi Rita Anggraini. 2008. Gambaran Makroskopis dan  Mikroskopis  Hati  dan  Ginjal  Mencit akibat  Pemberian  Plumbum  Asetat.  Tesis. Medan: Universitas Sumatera Utara.
Faisal  Yatim.  2000.  Waspadai  Jantung  Koroner, Stroke,  Meninggal  Mendadak  Atasi  dengan Pola  Hidup  Sehat.  Jakarta:  Yayasan  Obor Indonesia.
Femi  Dwi  Aldini.  2010.  Laporan  Akhir  PKM-P Studi  Efek  Samping  Penggunaan  Undur- Undur  Darat  (Myrmeleon  sp)  sebagai  Obat Antidiabetik pada Tikus Putih Jantan(Rattus norvegicus).  Surakarta:  Universitas  Sebelas Maret.
Gardjito,  dkk.  1992.  Pengantar  Ilmu  Pangan Nutrisi  dan  Mikrobiologi.  Yogyakarta: Universitas Gajah Mada Press.
Guyton  and  Hall.  1996.  Fisiologi  Kedokeran. Jakarta: EGC.
Handoko,  Ari.  2009.  Obat  Hipertensi  Dengan
Mentimun.  Diakses  selasa  25  Mei  2011 pukul  09.00  WIB  di  akses dari alamat  situs: http://mig33sukabumi.forumotion .
Harper,  H.  A.,  Rodwell,  V.  W.,  and  Mayes  P.  A. 2001. Harper’s Biochemistry. Jakarta: EGC. Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia. Jakarta: Yayasan  Sarana Wana Jaya.
Hull,  Alison.  1996.  Penyakit  Jantung  Hipertensi dan Nutrisi. Jakarta: Bumi Aksara Imam Soeharto. 2000. Pencegahan &
Penyembuhan  Penyakit  Jantung  Koroner.
Jakarta: Gramedia Pustaka Utama
John  B.  Smith  B.  V.  Sc.  1988.  Pemeliharaan
Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan  Di  Daerah  Tropis.  Jakarta:  UI Press.
Jordan,  Akhmad.  2010.  Aneka  Buah  dan Khasiatnya. Yogyakarta: Aulia Publishing. Junqueira, L. C; Carneiro, J dan Kelley, R.O. 1997.
Histologi  Dasar.  Edisi  8.  (Alih  bahasa:  Jan Tambayong). Jakarta: EGC
Lesson,  C.  Roland,  Lesson,  T.S  dan  Paparo,  A.A. 1996.  Buku  Teks  Histologi.  Edisi  5.  (Alih bahasa: Yan Tambayong). Jakarta: EGC.
Linder,  M.  C.  1992.  Biokimia  Nutrisi  dan Metabolisme  dengan  Pemkaian  Secara Klinis. Jakarta: UI Press.
Mariano. 1996. Atlas Histologi Manusia. (Terjemahan  oleh  Moh.  Martoprawiro). Jakarta: EGC penerbit Buku Kedokteran.
Muttaqin,  Arif.  2009.  Asuhan  Keperawatan  Klien dengan Gangguan Sistem Kardiovasvaskuler dan Hematologi. Jakarta: Salemba Medika.
Povey,  R.  1999.    Memantau  Kadar  Kolesterol Anda. Jakarta: Penerbit Arcan.
Price,  S.A  dan  Wilson,  L.M.  1994.  Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Buku pertama.  Edisi  4.  (Alih  Bahasa:  Peter Anugerah). Jakarta: EGC.
Ramadhan,  A.  J.  2010.    Mencermati  Berbagai Gangguan  Pada  Darah  dan  Pembuluh Darah. Yogyakarta: DIVA Press
Ruhyana.  2007.  Hipertensi  penyebab  utama
penyakit jantung. Alamat
situs: http://ruhyana.wordpress.com .
Santoso,  H.  B  dan  Nurliani,  A.  2006.  Efek Doksisiklin  Selama  Masa  Organogenesis pada  Struktur  Histologi  Organ  Hati  dan Ginjal Fetus Mencit. Bioscientiae. Volume 3, Nomor 1.  Halaman 15-27.
Sediaoetama  dan  Achmad  Djaelani.  2008.  Ilmu Gizi  untuk  Mahasiswa  dan  Profesi.  Jakarta: Dian Rakyat.
Setiawan  Dalmartha.  1999.  Atlas  Tumbuhan  Obat.
Jakarta: Niaga Swadaya. Sitepoe, Mangku. 1993. Kolesterol Fobia Keterkaitannya  dengan  Penyakit  Jantung. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama
Sitepoe,  Mangku.  1997.  Penyakit  Jantung  dan Usaha  Pencegahannya.  Jakarta:  Gramedia Pustaka Utama.
Smith  &  Adams.  2011.  Non-alcoholic  fatty  liver disease. Critical Reviews in Clinical Laboratort Sciences, 48:3, 97-113.
Soewolo,  dkk.  2005.  Fisiologi  Manusia.  Malang:
Universitas Negeri Malang
Sumeru Ashari. 1995. Hortikultura Aspek Budaya. Jakarta: UI-Press Swarth, Judith. 2006. Stres dan Nutrisi (Terjemahan oleh dr. Irawan). Jakarta: Bumu Aksara.
Ward,  Jeremy.  et  al.  2009.  At  a  Glance
FISIOLOGI. Jakarta : Erlangga
Warisno.  2001.  Membuat  Telur  Asin  Aneka  Rasa. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.
Winarno.  1997.  Kimia  Pangan  dan  Gizi.  Jakarta:
Gramedia Pustaka Yetti  M.A.  2009.  Toksisitas  Inserktisida  Decis Terhadap Mortalitas dan Pengaruh Histologik  Hepar  Ikan  Nila  Merah  Strain “Lokal  Cangkringan”.  Skripsi.  Yogyakarta:
Jurusan Pendidikan Biologi FMIPA UNY.