## Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik (JIFFK)

## ANALISIS METIL PARABEN DAN PROPIL PARABEN PADA SEDIAAN KOSMETIK MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETER DERIVATIF DAN KEMOMETRIK MULTIVARIAT
Rollando * , Gytha Novella Ongkowijoyo, Chresiani Destianita Yoedistira, Eva Monica
Program Studi Farmasi, Fakultas Sains dan Teknologi , Universitas Ma Chung, Malang, Jawa Timur, Indonesia. *email: ro.llando@machung.ac.id
Received: 26-06-2022 Accepted:31-03-2023 Published:30-06-2023

## INTISARI
Bahan  pengawet  yang  sering  digunakan  pada  kosmetik  yaitu  metil  paraben  dan  propil  paraben. Panjang  gelombang  metil  paraben  dan  propil  paraben  berdekatan  dan  spektrum  tumpang  tindih sehingga  perlu  dilakukan  analisis  dengan  spektrofotometer  derivatif  dan  kemometrik  multivariat. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan  validasi  metode  analisis  dan  menetapkan  kadar  metil paraben dan propil paraben menggunakan spektrofotometer derivatif dan kemometrik  multivariat. Penelitian ini menggunakan model Partial Least Squares (PLS) 18 set kalibrasi dengan spektrum normal dan data derivatif. Metode tersebut divalidasi hingga didapatkan data spektrum normal yang baik. Hasil linieritas metil paraben 0,999 dan propil paraben 0,998. Hasil batas deteksi metil paraben 1,026 mg/L dan propil paraben 1,208 mg/L. Hasil  batas kuantitasi metil paraben 3,419 mg/L dan propil paraben 4,026 mg/L. Akurasi metil paraben 88,16%-110,271% dan propil paraben 86,23%- 108,397%.  Presisi  metil  paraben  1,685%-5,106%  dan  propil  paraben  2,348%-6,353%.  Penetapan kadar  senyawa  metil  paraben  terdeteksi,  sedangkan  propil  paraben  tidak  terdeteksi,  hal  ini disebabkan absorbansi senyawa dapat tertutupi oleh senyawa lain dalam sampel.
Kata  kunci :  metil  paraben,  partial  least  squares  regression,  propil  paraben,  spektrofotometer derivatif

## ABSTRACT
Preservatives  that  are  often  used  in  cosmetics  are  methyl  paraben  and  propyl  paraben.  The wavelengths of methyl paraben and propyl paraben are close together and the spectra overlap, so it is  suitable  to  be  carried  out  using  derivative  spectrophotometer  and  multivariate  chemometric methods.  This  study  aims  to  validate  the  analytical  method  and  determine  the  levels  of  methyl paraben and propyl paraben using a derivative spectrophotometer and multivariate chemometrics. This  study  uses  the  Partial  Least  Squares  Regression  (PLS)  model  with  18  calibration  sets  with normal spectra and derivative data. The developed method was validated, good normal spectrum data  was  obtained,  the  linearity  results  for  methyl  paraben  were  0.999  and  propyl  paraben  was 0.998. The Limit of detection results for methyl paraben 1.026 mg/L and propyl paraben 1.208 mg/L. Limit  of  quantification  results  for  methyl  paraben  3.419  mg/L  and  propyl  paraben  4.026  mg/L. Accuracy  for  methyl  paraben  is  88.16%  -110.271%  and  propyl  paraben  is  86.23%  -108.397%. Precision methyl paraben 1.685% -5.106% and propyl paraben 2.348% -6.353%. In determining the levels of methyl paraben compounds were detected, while propyl parabens were not detected, this was because the absorbance of the compounds could be covered by other compounds in the sample.
keywords :  methyl  paraben,  partial  least  squares  regression,  propyl  paraben,  derivative spectrophotometer.
Corresponding author: Nama
: Rollando Institusi : Universitas Ma Chung
Alamat institusi  :Villa Puncak Tidar, N-01, Dau, Malang, Jawa Timur, Indonesia Email
: ro.llando@machung.ac.id

## PENDAHULUAN
Sediaan  kosmetik  memerlukan  bahan  tambahan  yaitu  pengawet  untuk  menjaga  kualitas sediaan kosmetik. Menurut Peraturan Badan POM Nomor 23 Tahun 2019 bahan  pengawet adalah bahan atau campuran bahan yang digunakan untuk mencegah kerusakan kosmetika yang disebabkan oleh  mikroorganisme  (BPOM,  2019a).  Salah  satu  bahan  pengawet  yang  paling  umum  digunakan adalah  metil  paraben  dan  propil  paraben.  Menurut  data  survei  VCRP  ( Voluntary  Cosmetic Registration Program ) pada tahun 2019 bahan metil paraben digunakan dalam 11.739 formula dan propil paraben digunakan dalam 9.034 formula di Amerika (Cherian dkk., 2020).
Senyawa  paraben  akan  lebih  efektif  digunakan  dalam  bentuk  kombinasi  daripada  dalam bentuk  tunggal  (Cherian  dkk.,  2020).  Kadar  yang  digunakan  pada  sediaan  harus  memenuhi persyaratan yang ditetapkan. Kandungan metil paraben yang diizinkan dalam produk kosmetik yaitu 0,4% untuk penggunaan tunggal dan 0,8% untuk penggunaan kombinasi sedangkan propil paraben 0,14% untuk penggunaan tunggal dan 0,8% untuk penggunaan kombinasi (BPOM, 2019a). Label sediaan kosmetik dapat mencantumkan bahan metil paraben dan propil paraben sebagai pengawet, namun kadar yang digunakan tidak dicantumkan. Banyak penelitian mengungkapkan paraben dapat terdistribusi pada sampel biologis seperti urin, darah, serum, jaringan adiposa, tali pusar, plasenta, cairan ketuban, payudara sehat dan tumor payudara. Sumber utama paparan paraben pada manusia adalah penggunaan produk farmasi dan kosmetik (Matwiejczuk dkk., 2019).
Analisis kuantitatif metil paraben dan propil paraben dapat dilakukan menggunakan metode kromatografi  cair  kinerja  tinggi  (BPOM,  2019b).  Metode  lain  yang  dapat  digunakan  yaitu menggunakan instrumen spektrofotometer UV-Vis karena memiliki biaya operasional lebih murah dan analisis yang cepat. Spektrofotometer UV-Vis digunakan untuk menganalisis senyawa tunggal, sehingga  jika  lebih  dari  satu  senyawa  harus  dilakukan  pemisahan  senyawa  terlebih  dahulu. Spektrofotometri  derivatif  dan  kemometrik  multivariat  dapat  digunakan  untuk  analisis  campuran senyawa  meskipun  panjang  gelombang  zat  berdekatan  (Nurhidayati,  2007).  Metil  paraben memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 257 nm dengan pelarut etanol, sedangkan propil  paraben  memberikan  serapan  maksimum  pada  panjang  gelombang  255  nm  dengan  pelarut asam (Moffat dkk., 2011). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa spektrofotometer derivatif dan teknik  kemometrik  multivariat  akan  menghasilkan  data  yang  lebih  baik  pada  penentuan multikomponen  untuk  analisis  obat-obatan,  kosmetik,  dan  bahan  makanan  (Esteki  dkk.,  2016; Nagaraj  dkk.,  2007).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  dilakukan  untuk  melakukan  validasi  metode analisis  dan  penetapan  kadar  senyawa  metil  paraben  dan  propil  paraben  pada  sediaan  kosmetik dengan menggunakan spektrofotometer derivatif dan kemometrik multivariat.

## METODE PENELITIAN

## Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah etanol (Merck- analytical grade ), aquadest, metil paraben (Ueno- analytical grade ), propil paraben (Ueno- nalytical grade ), sampel kosmetik (A, B, C, D, dan E)

## Alat Penelitian
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  spektrofotometer  UV-Vis  (Jasco  V-760),  neraca analitik (Ohaus), Ultrasonik (Mosinix USA), Vortex, labu takar 25ml, 10 ml, dan 5 ml (Iwaki), pipet tetes, mikropipet 100-1000µm (Dragon Lab).

## Jalannya Penelitian Pengumpulan sampel
Sampel  kosmetik  sebanyak  5  didapatkan  dari  toko  supermarket  di  Kota  Malang.  Sampel  yang diambil dengan kriteria inklusi yaitu berupa sediaan krim, terdapat senyawa metil dan propil paraben yang tercantum pada keterangan bahan, dan memiliki jumlah penjualan tertinggi pada toko tersebut.

## Optimasi pelarut
Pemilihan pelarut dilakukan dengan cara membuat larutan standar metil paraben dan propil paraben yang  masing-masing  menggunakan  pelarut  etanol pro  analisis (p.a)  dan  campuran  etanol  p.a. Perbandingan pelarut yang dicari adalah campuran etanol p.a dan air dengan perbandingan (4:6 v/v; 1:4 v/v; 4:1 v/v, dan 6:4 v/v). Pelarut dipilih dengan komposisi etanol p.a: air (6:4 v/v). Semua larutan yang  disiapkan  dianalisis  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  dan  dipilih  pelarut  yang  cocok untuk digunakan.

## Preparasi larutan standar
Masing-masing  standar  metil  paraben  dan  propil  paraben  ditimbang  sebanyak  20  mg  lalu dimasukkan dalam labu takar 10 ml. Larutan kemudian dicampurkan dalam etanol p.a hingga tanda batas.  Larutan diencerkan menjadi  konsentrasi  akhir  larutan standar  20  mg/L  dan  200  mg/L  pada setiap standar metil paraben dan propil paraben.

## Penetapan panjang gelombang
Dibuat larutan metil paraben 7 mg/L, propil paraben 9 mg/L, dan campuran larutan metil paraben dan  propil  paraben.  Larutan  diukur  serapannya  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 200 – 400 nm. Rentang panjang gelombang yang dipilih adalah saat senyawa mulai  memberikan  serapan  sampai  senyawa  memberikan  serapan  mendekati  nilai  nol  atau  sudah tidak memiliki serapan.

## Pembuatan model kalibrasi
Dibuat  sebanyak  25  larutan  model  kalibrasi  menggunakan  rancangan  faktorial  lengkap  dengan  2 faktor dan 5 level konsentrasi. Larutan dibuat sesuai kadar pada tabel I.  Larutan standart 20 mg/L atau  200  mg/L  diambil  sebanyak  2mL  dan  dimasukkan  dalam  labu  ukur  10  ml  kemudian ditambahkan pelarut etanol p.a. Larutan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 220-300 nm dengan interval 1 nm. Model kalibrasi dibuat dengan metode Partial Least Squares Regression (PLS) menggunakan data raw spectra dan data derivatisasi.
Validasi Metode Analisis a. Linieritas
Linieritas  metil  paraben  dan  propil  paraben  didapatkan  dari  model  kalibrasi  pada  kemometrik PLS
b. Batas deteksi ( Limit of Detection / LOD) dan batas kuantitasi ( Limit of Quantification / LOQ) Batas deteksi dan batas kuantitasi untuk metil paraben dan propil paraben dapat dihitung dari data linieritas.
c. Akurasi
Akurasi dilakukan dengan 3 konsentrasi standar yang berbeda yaitu 10 mg/L, 12,5 mg/L, dan 15 mg/L  untuk  masing-masing  80%,  100%,  120%  pada  metil  paraben  dan  propil  paraben. Konsentrasi sampel yang ditambahkan yaitu 10 mg/L. Setiap konsentrasi yang dibuat direplikasi sebanyak 6 kali.
d. Presisi
Presisi dilakukan sebanyak 6 kali replikasi dari tiga konsentrasi yang berbeda. Presisi dilakukan secara intraday pada hari yang sama dan interday pada 3 hari berturut-turut.

## Penetapan Kadar
Masing-masing  sampel  yang  disiapkan  ditimbang  sebanyak  50  mg  dan  ditambahkan  etanol  p.a sebanyak 10 ml. Langkah tersebut dilakukan sebanyak 3 kali replikasi untuk masing-masing sampel (Tabel I). Dilakukan pengukuran absorbansi menggunakan spektrofotometer UV-Vis.
Tabel I. Komposisi campuran metil paraben dan propil paraben untuk model kalibrasi
No Metil paraben (mg/L) Propil paraben (mg/L) No Metil paraben (mg/L) Propil paraben (mg/L) 1. 20,0 1,0 14. 16,0 16,0 2. 4,0 1,0 15. 4,0 16,0 3. 10,0 16,0 16. 4,0 4,0 4. 1,0 16,0 17. 16,0 10,0 5. 20,0 10,0 18. 10,0 20,0 6. 1,0 20,0 19. 4,0 10,0 7. 4,0 20,0 20. 1,0 4,0 8. 16,0 20,0 21. 1,0 10,0 9. 1,0 1,0 22. 10,0 10,0 10. 16,0 1,0 23. 20,0 16,0 11. 16,0 4,0 24. 20,0 4,0 12. 20,0 20,0 25. 10,0 1,0 13. 10,0 4,0

## Analisis Data
Data dianalisis berupa pelarut optimal dan spektrum sampel dijabarkan secara deksriptif. Data berupa root-mean-standard  error  for  calibration (RMSEC)  dan root-mean-standard  error  for  cross- validation (RMSECV)  dijabarkan  berdasarkan  kesesuaian  dengan  syarat  kompendia.  Data  berupa limit  of  detection /  batas  deteksi  (LOD);  limit  of  quantification/  batas  kuantitasi  (LOQ),  presisi, akurasi  dan  penetapan  kadar  sampel  dianalisis  dengan Partial  Least  Square (PLS)  regression berdasarkan pemodelan software Unscrambler.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Optimasi Pelarut
Optimasi  pelarut  dilakukan  dengan  tujuan  menentukan  pelarut  yang  baik  untuk  digunakan dalam  analisis  senyawa  metil  paraben  dan  propil  paraben.  Syarat  dari  pemilihan  pelarut  adalah pelarut  yang  digunakan  harus  mampu  melarutkan  analit  secara  sempurna  dan  pelarut  tidak mempunyai serapan di panjang gelombang yang digunakan untuk analisis senyawa (Rohman dkk., 2022).  Hasil  yang  didapatkan  pelarut  yang  optimum  untuk  digunakan  adalah  etanol.  Hal  ini dikarenakan etanol menghasilkan larutan yang jernih serta kelarutan senyawa dengan etanol lebih tinggi.  Etanol  memiliki  serapan  pada  panjang  gelombang  202  nm  sehingga  tidak  mengganggu panjang gelombang senyawa metil paraben dan propil paraben.

## Spektrum UV Metil Paraben dan Propil Paraben
Metil paraben memiliki serapan UV pada panjang gelombang maksimal 257 nm, sedangkan propil  paraben  pada  panjang  gelombang  maksimal  258  nm.  Metil  paraben  dan  propil  paraben memiliki spektrum yang saling tumpang tindih seperti pada Gambar 1. Hal tersebut menyebabkan campuran  senyawa  tersebut  tidak  dapat  dianalisis  menggunakan  kalibrasi  univariat (Mincea  dkk., 2009).  Spektrofotometer  derivatif  dan  kemometrik  multivariat  dapat  digunakan  untuk  campuran senyawa dan panjang gelombang yang berdekatan dengan menghasilkan data yang lebih baik (Esteki dkk., 2016; Nagaraj dkk., 2007).

## Gambar 1. Spektrum UV metil paraben dan propil paraben

## Model Kalibrasi
Model  kemometrik  menggunakan  metode Partial  Least  Square (PLS)  dengan  software Unscrambler. Rentang panjang gelombang yang digunakan yaitu 220-300 nm. Pemotongan panjang gelombang  ini  bertujuan  untuk  memperoleh  hasil  kinerja  model  yang  optimum.  Hasil  dari  25  set kalibrasi dilakukan pengurangan data model menjadi 18. Hal ini dikarenakan untuk  mendapatkan hasil model yang lebih baik (Muawana dkk., 2017). Pembuatan model dilakukan menggunakan data spektra normal, dan data pra-proses berupa derivatisasi (Kumar dkk . , 2012). Hasil dari pra-proses data akan dibandingkan dengan kinerja hasil analisis yang berupa variabel asal atau spektrum normal (Rohman  dan  Riswanto,  2021).  Hasil  model  kalibrasi  dapat  dilihat  pada  Tabel  II.  Nilai  R  metil paraben  dan  propil  paraben  yang  telah  memenuhi  persyaratan  nilai  mendekati  1  yaitu  spektrum normal, derivatif 1, dan derivatif 2. Nilai RMSEC dan RMSECV metil paraben dan propil paraben yang telah memenuhi syarat Miller dan Miller (2010) dengan syarat nilai yang mendekati  0 yaitu spektrum  normal  dan  derivatif  1.  Nilai  RMSEC  dan  RMSECV  pada  derivatif  2,  derivatif  3,  dan derivatif 4 lebih tinggi dari pada raw spektra dan derivatif 1 serta nilai tersebut jauh dari 0.
Tabel II. Hasil model kalibrasi metil paraben dan propil paraben
Raw Spectra Derivatif 1 Derivatif 2 Derivatif 3 Derivatif 4 Metil Paraben R 2 0,997 0,996 0,995 0,832 0,788 r 0,999 0,998 0,997 0,912 0,888 Intercept 0,016 0,037 0,046 1,464 1,851 Slope 0,998 0,996 0,995 0,832 0,788 RMSEC 0,322 0,386 0,429 2,438 2,742 RMSECV 1,202 0,927 2,299 3,925 3,989 Propil Paraben R2 0,997 0,996 0,995 0,861 0,810 r 0,998 0,998 0,998 0,928 0,900 Intercept 0,016 0,035 0,038 1,154 1,569 Slope 0,998 0,996 0,995 0,861 0,810 RMSEC 0,379 0,438 0,452 2,494 2,909 RMSECV 1,557 1,097 2,612 4,909 4,682

## Validasi Metode Analisis
Linieritas data metil paraben dan propil paraben dilihat menggunakan nilai koefisien korelasi ditunjukkan pada Tabel III. Nilai koefisien korelasi yang baik ditunjukkan pada model data spektrum normal yang menunjukan nilai mendekati 1 (Kamble dkk., 2011). Perhitungan LOD & LOQ dihitung menggunakan data prediksi model kalibrasi. Hasil LOD & LOQ dapat dilihat pada Tabel IV. Pada spektrum normal nilai perhitungan LOD secara berturut-turut untuk metil paraben dan propil paraben yaitu 1,026 mg/L dan 1,208  mg/L. Sedangkan nilai LOQ untuk metil paraben dan propil paraben masing-masing yaitu 3,419 mg/L dan 4,027 mg/L.

## Tabel III. Hasil uji linieritas
Raw Spectra Derivatif 1 Derivatif 2 Derivatif 3 Derivatif 4 Metil Paraben r 0,999 0,998 0,997 0,912 0,888 a 0,016 0,037 0,046 1,464 1,851 b 0,998 0,996 0,995 0,832 0,788 Propil Paraben r 0,998 0,998 0,998 0,928 0,900 a 0,0165 0,035 0,038 1,154 1,569 b 0,998 0,996 0,995 0,861 0,810 Tabel IV. Hasil uji LOD & LOQ Data Metil paraben Propil paraben LOD (mg/L) LOQ (mg/L) LOD (mg/L) LOQ (mg/L) Raw Spektra 1,026 3,419 1,208 4,026 Derivatif 1 1,233 4,109 1,398 4,660 Derivatif 2 1,375 4,585 1,444 4,815 Derivatif 3 9,324 31,081 9,223 30,742 Derivatif 4 11,074 36,912 11,422 38,073
Hasil akurasi dapat dilihat pada Tabel V. Nilai data spektrum normal menunjukkan hasil yang baik dan memenuhi syarat persentase recovery 80-110% (Rohman dan Riswanto, 2021).   Hasil data menggunakan  spektrum  normal  untuk  metil  paraben  dan  propil  paraben  masing-masing  yaitu 88,16%-110,271%  dan  86,23%-108,397%.  Hasil  presisi intraday maupun interday pada  masing- masing  metil  paraben  dan  propil  paraben  dapat  dilihat  pada  Tabel  VI  dan  Tabel  VII.  Nilai  yang memenuhi syarat (%RSD  ≤ 7,3%)  menggunakan data spektrum normal dengan hasil  metil paraben dan propil paraben masing-masing yaitu 1,685%-5,106% dan 2,348%-6,353%.
Data hasil uji validasi metode analisis menunjukkan hasil bahwa semua parameter memenuhi syarat dan dapat menjadi model yang baik yaitu pada data spektrum normal, namun data hasil uji derivatif belum memenuhi syarat. Hal tersebut dapat terjadi dikarenakan spektrum derivatif pertama sampai keempat dengan zero crossing tidak dapat ditemukan pemisahan senyawa metil paraben dan propil  paraben.  Hasil  spektrum  derivatif  dapat  dilihat  pada  Gambar  2.  Metil  paraben  dan  propil paraben memiliki panjang gelombang yang hampir sama dan tumpang tindih disebabkan kedua zat memiliki struktur kimia yang hampir mirip (Bhandari dkk . , 2019).

## Tabel V. Hasil uji akurasi metil paraben dan propil paraben
Konsentrasi Metil Paraben Propil Paraben Rata-rata %recovery (mg/L) SD %CV Rata-rata %recovery (mg/L) SD %CV Raw Spektra 80% 101,72 5,117 5,03 101,692 5,223 5,136 100% 92,677 4,401 4,749 95,155 6,353 6,676 120% 105,957 1,786 1,685 98,582 2,315 2,348 Derivatif 1 80% -428,812 8,293 -1,934 488,405 9,799 2,006 100% -405,342 5,656 -1,395 462,587 7,217 1,56 120% -457,071 9,617 -2,104 521,108 11,5 2,207 Derivatif 2 80% 94,644 25,726 27,182 -110,424 30,147 -27,3 100% 85,196 6,876 8,071 -99,025 7,727 -7,803 120% 68,79 6,963 10,122 -81,603 7,565 -9,271 Derivatif 3 80% 96,871 31,405 32,419 -149,195 45,767 -30,676 100% 89,183 16,03 17,975 -135,68 24,77 -18,256 120% 65,496 10,902 16,645 -104,52 15,653 -14,976 Derivatif 4 80% 120,67 61,614 51,06 -55,77 72,117 -129,31 100% 72,556 34,952 48,172 -5,886 35,507 -603,23 120% 42,834 96,968 226,38 40,621 105,85 260,565

## Tabel VI. Hasil uji presisi metil paraben
Perlakuan 80% 100% 120% Rata-rata %kadar (mg/L) SD %RSD Rata-rata %kadar (mg/L) SD %RSD Rata-rata %kadar (mg/L) SD %RSD Raw Spektra Intraday 101,72 5,117 5,03 92,677 4,401 4,749 105,957 1,786 1,685 Interday 1 102,197 4,715 4,613 90,708 2,844 3,136 103,073 4,059 3,938 Interday 2 97,329 4,969 5,106 84,649 3,979 4,7 104,893 3,562 3,396 Interday 3 102,965 3,78 3,671 97,179 3,673 3,779 104,095 3,311 3,181 Derivatif 1 Intraday -428,812 8,293 -1,934 -405,342 5,656 -1,395 -457,071 9,617 -2,104 Interday 1 -434,632 6,999 -1,61 -415,235 8,15 -1,963 -456,079 7,997 -1,753 Interday 2 -419,934 3,079 -0,733 -400,156 6,475 -1,618 -468,889 3,178 -0,678 Interday 3 -438,128 20,662 -4,716 -409,624 2,246 -0,548 -468,195 3,899 -0,833 Derivatif 2 Intraday 94,644 25,726 27,182 85,196 6,876 8,0707 68,79 6,963 10,122 Interday 1 94,807 12,436 13,117 89,372 10,012 11,203 80,106 7,197 8,985 Interday 2 94,781 3,361 3,546 89,812 12,76 14,204 71,239 4,914 6,898 Interday 3 89,968 11,668 12,969 90,71 5,324 5,869 71,231 6,940 9,743 Derivatif 3 Intraday 96,871 31,405 32,419 89,183 16,03 17,975 65,496 10,902 16,645 Interday 1 89,033 10,619 11,927 84,712 9,587 11,317 67,473 6,219 9,217 Interday 2 78,796 15,068 19,122 70,67 12,472 17,649 77,294 12,755 16,502 Interday 3 99,891 39,639 39,682 69,128 14,486 20,955 77,571 15,649 20,173 Derivatif 4 Intraday 120,67 61,614 51,06 72,556 34,952 48,172 42,834 96,968 226,38 Interday 1 103,048 15,405 14,949 81,402 50,273 61,758 61,511 11,76 19,118 Interday 2 103,914 48,52 46,692 73,161 62,542 85,486 27,420 48,566 177,12 Interday 3 64,29 39,559 61,533 60,964 29,133 47,788 22,734 46,373 203,98
Tabel VII. Hasil uji presisi propil paraben
Perlakuan 80% 100% 120% Rata-rata %kadar (mg/L) SD %RS D Rata- rata %kadar (mg/L) SD %RS D Rata- rata %kadar (mg/L) SD %RS D Raw Spektra Intraday 101,692 5,223 5,136 95,155 6,353 6,676 98,582 2,315 2,348 Interday 1 101,396 5,493 5,417 104,772 4,06 3,875 101,008 5,086 5,035 Interday 2 102,519 5,837 5,693 106,027 3,529 3,328 98,651 4,936 5,004 Interday 3 101,964 3,973 3,897 88,701 3,535 3,986 99,643 3,731 3,745 Derivatif 1 Intraday 488,405 9,799 2,006 462,587 7,217 1,56 521,108 11,5 2,207 Interday 1 495,541 8,179 1,651 473,409 9,106 1,923 520,671 9,714 1,866 Interday 2 477,939 3,719 0,778 456,039 7,064 1,549 535,665 4,149 0,775 Interday 3 499,598 25,259 5,056 468,244 3,069 0,656 535,037 4,510 0,843 Derivatif 2 Intraday -110,424 30,147 -27,3 -99,0248 7,727 -7,803 -81,603 7,565 -9,271 Interday 1 -110,531 14,342 -12,98 -103,748 11,259 -10,85 -94,191 8,226 -8,734 Interday 2 -110,991 3,776 -3,403 -104,505 14,42 -13,8 -84,378 5,697 -6,752 Interday 3 -105,908 13,312 -12,57 -105,491 6,269 -5,942 -84,499 7,378 -8,731 Derivatif 3 Intraday -149,195 45,767 -30,68 -135,68 24,77 -18,26 -104,52 15,653 -14,98 Interday 1 -136,372 15,452 -11,33 -128,821 14,119 -10,96 -106,467 9,786 -9,191 Interday 2 -122,419 22,016 -17,98 -108,182 16,892 -15,61 -121,643 18,362 -15,1 Interday 3 -151,084 64,228 -42,51 -104,834 21,564 -20,57 -120,594 22,44 -18,61 Derivatif 4 Intraday -55,77 72,117 -129,3 -5,886 35,507 -603,2 40,621 105,85 260,57 Interday 1 -31,797 29,787 -93,68 1,981 57,642 2909,3 19,6647 16,231 82,541 Interday 2 -18,931 46,868 -247,6 2,133 72,268 3388,3 50,293 45,989 91,442 Interday 3 10,726 48,854 455,47 15,199 27,26 179,36 59,195 48,859 82,54
(a)
(b)
Gambar 2. Spektrum derivatisasi (a) derivatif 1, (b) derivatif 2
(c)
(d)
Gambar 3. Spektrum derivatisasi (c) derivatif 3, (d) derivatif 4

## Penetapan Kadar
Penetapan  kadar  dilakukan  setelah  semua  parameter  validasi  metode  dinyatakan  valid. Penetapan  kadar  metil  paraben  dan  propil  paraben  dilakukan  dengan  model  PLS  data  spektrum normal. Hasil penetapan kadar dapat dilihat pada Tabel VIII. Hasil dari kadar propil paraben nilai negatif sehingga tidak dapat ditentukan kadarnya. Hal ini dikarenakan kadar propil dalam sampel di bawah batas LOQ sehingga tidak terdeteksi. Menurut BPOM (2019a) syarat penambahan tunggal propil  paraben  maksimal  0,14%  dan  metil  paraben  maksimal  0,4%,  serta  untuk  kombinasi  0,8%. (BPOM, 2019a). Berdasarkan ketentuan tersebut terlihat bahwa kadar propil paraben  lebih sedikit dari metil paraben. Alasan lainnya yaitu terdapat senyawa lain yang terdeteksi pada sampel, sehingga senyawa  metil  paraben  dan  propil  paraben  tertutup  oleh  senyawa  lain  yang  memiliki  kadar  lebih tinggi. Penetapan kadar yang dapat terdeteksi yaitu metil paraben (Tabel VIII) dengan rentang kadar sampel dari 0,380-3,87%.
Tabel VIII. Hasil penetapan kadar sampel metil paraben dan propil paraben
Sampel Metil paraben Propil paraben %Kada r Rata-rata %kadar %Kada r Rata-rata %kadar A 4,032 3,871 -5,009 -4,598 4,339 -5,022 3,243 -3,763 B 0,353 0,380 -0,373 -0,399 0,381 -0,399 0,407 -0,426 C 0,529 0,546 -0,379 -0,395 0,561 -0,413 0,549 -0,393 D 1,011 1,042 -1,137 -1,167 1,057 -1,183 1,058 -1,182 E 1,700 1,709 -2,065 -2,069 1,719 -2,082 1,708 -2,062

## KESIMPULAN
Validasi metode analisis metil paraben dan propil paraben didapatkan hasil yang linier, akurat dan presisi yaitu menggunakan data spektrum normal, sedangkan data derivatif tidak dapat dideteksi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada Program Studi Farmasi Universitas Ma Chung yang telah memberi fasilitas penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
BPOM  (2019a) Peraturan  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Nomor  23  Tahun  2019  Tentang Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika . Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
BPOM (2019b) Laporan Tahunan Pusat Pengembangan Pengujian Obat dan Makanan Nasional , Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Bhandari, T., Patel A., Dhodi K., Desai Z. dan Desai S., (2019) “Determination of Methyl Paraben from  Cosmetics  by  UV  Spectroscopy”, International  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences Review and Research , 59(04), hal. 17–21.
Cherian, P., Zhu, J., Bergfeld, W.F., Belsito, D. V., Hill, R.A., Klaassen, C.D., Liebler, D.C., James G.  Marks,  Jr.,  Shank,  R.C.,  Slaga,  T.J.,  Snyder,  P.W.,  dan  Heldreth,  B.  (2020)  “Amended Safety Assessment of Parabens as Used in Cosmetics”. Int. J. Toxicol . 39. Esteki, M., Nouroozi, S., dan Shahsavari, Z., (2016) “A fast and direct spectrophotometric method for the simultaneous determination of methyl paraben and hydroquinone in cosmetic products using successive projections algorithm”. Int. J. Cosmet. Sci . 38, 25–34.
Kamble,  R.  M.,  Singh,  S.  G.  dan  Singh,  S.,  (2011)  “Simultaneous  determination  of  preservatives (methyl paraben and propyl paraben) in sucralfate suspension using high performance liquid chromatography”, E-Journal of Chemistry , 8(1), 340–346. doi: 10.1155/2011/360431. Kumar, N., Vaghela, B., Reddy, P.S., dan Sangeetha, D., (2012) “Development and validation of a novel  stability  indicating  RP-UPLC  method  for  simultaneous  determination  of  nizatidine, methylparaben and propylparaben in oral liquid pharmaceutical formulation”, Quimica Nova , 35(4).
Matwiejczuk, N., Galicka, A., dan Brzóska, M.M., (2019) “Review of the safety of application of cosmetic products containing parabens”, J. Appl. Toxicol , 30(3)
Mincea,  M.  M.,  Luspa,  I.R.,  Cinghita,  D.F.,  Radovan,  C.P.,  Talpos,  I.,  dan  Ostafe,  V.,  (2009), “Determination  of  methylparaben  from  cosmetic  products  by  ultra  performance  liquid chromatography”, Journal  of  the  Serbian  Chemical  Society ,  74(6),  669–676.  doi: 10.2298/JSC0906669M.
Moffat,  A.C.,  Osselton,  M.D.,  dan  Widdop,  B.,  (2011), Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons . Pharmaceutical Press, USA.
Muawana, Rasyid, N. Q. dan Rahmawati, (2017) “The Determination of Paraben Preservatives in Body Scrub”, Jurnal Akta Kimia Indonesia (Indonesia Chimica Acta) , 10(1),  59–63. Nagaraj, Vipul, K., dan Rajshree, M., (2007) “Simultaneous Quantitative Resolution of Atorvastatin Calcium  and  Fenofibrate  in  Pharmaceutical  Preparation  by  Using  Derivative  Ratio Spectrophotometry and Chemometric Calibrations. Anal. Sci . 23.
Nurhidayati, L., 2007 “Spektrofotometri Derivatif dan Aplikasinya dalam Bidang Farmasi”. J. Ilmu Kefarmasian Indonesia . 5, 93–99.
Rohman,  A.,  Irnawati,  dan  Riswanto,  F.D.O.,  (2022), Analisis  Farmasi  dengan  Spektrofotometer UV-VIS dan Kemometrika . UGM Press, Yogyakarta.
Rohman, A., dan Riswanto, F.D.O. (2021) Kemometrika . UGM Press. Yogyakarta.