UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK LENGKUAS MERAH ( Alpinapurpurata K.Schum ) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Eschericia coli SECARA IN VITRO

## Fioni
Fakultas Kedokteran Universitas Prima Indonesia
Email: fioni@unprimdn.ac.id

## ABSTRACT
Red  ginger  with  the  Latin  name  Alpina  purpurata  K.  Schum  is  a  plant  of  the  family zingiberaceae (family ginger family) which has several medical benefits. Zingiberaceous has  about  50  genera  and  1300  species  spread  throughout  the  world.  In  relation  to  the flavonoid  content,  routine,  kaempferol-3-rutionoside and  kaemferol-3-oliucronide  in  red ginger  (Alpina  purpurata  K.  Schum)  as  antimicrobial,  then  to  prove  this,  the  trials  of antimicrobial  efficacy  in  vitro  by  diffusion  disc  (method  Kirby  &  Bauer  test)  against Escherichia coli which is a gram negative bacteria. The results were analyzed with SPSS 20  software.  The  results  showed  that  red  ginger  extract  (Alpina  purpurata  K.  Schum) effective in the course of Escherichia coli growth was at 100% concentration. The mean inhibition  zone  diameter  was  7.825  mm  at  25%,  8,625  mm  at  concentration  50%,  9,350 mm at concentration 75%, and 10.7 mm at 100% concentration.
Keywords: red ginger, zingiberaceous, escherichia coli, antimicrobial

## PENDAHULUAN
Escherhicia  coli  normalnya  hidup  di dalam  usus  manusia  maupun  hewan. Hampir  sebagian  besar  E.coli  tidak begitu berbahaya dan sebenarnya merupakan bagian pentingdari kesehatan saluran  pencernaan  manusia.  Namun, beberapa strain E.coli bersifat patogenik yang berarti dapat menyebabkan penyakit  baik  diare  ataupun  penyakit diluar  saluran  cerna.  Tipe-tipe  E.coli yang  dapat  menyebabkan  diare  bisa ditularkan melalui makanan atau minuman  yang  terkontaminasi,  atau melalui  kontak  dengan  hewan  atau orang. E.coli sebagian bakteri patogen di kategorikan
menjadi beberapa pathotypes.  Ada  enam  pathotypes  yang
berhubungan  dengan  diare  dan  secara kolektif  disebut  diarrheagenic  E.coli.
Keenam  pathotypes  tersebut  adalah Shiga toxin-producing E.coli, Enteropathogenic, E.coli, Entero- aggregative E.coli, Enteroinvasive E.coli,  dan  Diffusely  adherent  E.coli (CDC, 2015). Pada  tahun  2000,  World  Health Organitations
(WHO) melaporkan bahwa  penyakit  infeksi  merupakan penyebab  kematian  balita  dua  tertinggi di  dunia  dimana  Proportional  Mortality Rate  (PMR)  Infeksi  Saluran  Pernafasan Akut adalah 19 % dan diare 13 %. Salah satu  penyakit  infeksi  terbanyak  di Indonesia  salah  satunya  adalah  diare, dari 2,812 pasien diare yang disebabkan
bakteri  yang  datang  kerumah  sakit  dari beberapa provinsi seperti Jakarta,
Padang,  Medan,  Denpasar,  Pontianak, Makasar  dan  Batam  yang  dianalisa  dari 1995  s/d  2001  penyebab  terbanyak adalah  Vibrio  cholerae  01,  diikuti dengan  Shigella  sp,  Salmonella  spp,  V. Parahaemoliticus, Salmonella typhi, Campylobacter  Jejuni,  V.  Cholera  no-
01,  Salmonella  paratyphi  A,  dan Escherichia coli (E. Coli). Salah  satu  keanekaragaman  hayati yang memiliki potensi untuk dikembangkan  sebagai  obat  tradisional
adalah lengkuas merah (Alpina purpurata  K.Schum).  Tanaman  dari keluarga  zingiberaceae  (keluarga  ginger family)  diketahui  memiliki  beberapa manfaat medis. Zingiberaceous memiliki sekitar  50  genus  dan  1300  spesies  yang tersebar  di  dunia.  Zingiberaceous  juga digunakan  sebagai  penyedap  makanan dalam  bentuk  bubuk  di  banyak  negara Asia. Kegunaan medisnya dapat mengobati  diare,  coryza,  dermatosis, dan  reumatoid  yang  disebut  dalam pengobatan tradisional. Lengkuas merah yang  dalam  bahasan  latin  Alpina purpurata  rhizobium  nya  memiliki  bau yang  sangat  tajam  dapat  memperbaiki nafsu  makan,  rasa  dan  suara.  Penelitian fitokimia  menunjukkan  bahwa  pada lengkuas  merah  terdapat  flavonoid, rutin, kaempferol-3-rutionoside dan
kaemferol-3-oliucronide  (Anushaat  al., 2015).
Sehubungan  dengan  adanya  indikasi ekstrak lengkuas merah (Alpina purpurata  K.Schum)  mempunyai  daya anti  bakteri,  maka  untuk  membuktikan hal tersebut, perlu dilakukannya penelitian  untuk  mengetahui  aktivitas antimikroba dari ekstrak tanaman tersebut.  Pada  uji  aktivitas  anti  bakteri ini,  digunakan  bakteri  Escherichia  coli merupakan bakteri gram negatif (-).

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  menggunakan  metode difusi cakram dengan rancangan Posttest Only  Control  Group  Design untuk mengetahui  efektivitas  ekstrak  rimpang lengkuas merah (Alpina purpurata K.Schum) sebagai anti bakteri dari hasil ekstraksi lengkuas merah (Alpina purpurata K.Schum) terhadap
pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
Sampel  yang  digunakan  adalah rimpang lengkuas merah yang diperoleh dari  pasar  tradisional  yang  berlokasi  di Kecamatan Tanjung Pura.
Data  yang  diambil  selama  penelitian berlangsung  di  laboratorium  merupakan data  primer  yaitu  pengujian  efektivitas ekstrak rimpang lengkuas merah sebagai anti bakteri pada Escherichia coli .
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  berupa  pinset,  ose,  lampu  spiritus
,jangka  sorong,  kapas  lidi,  batang pengaduk, oven, penyaring,
labu erlenmeyer ,  gelas  ukur,  rotary evaporator,  inkubator,  cawan  petri.
Bahan  yang  digunakan  adalah  rimpang
lengkuas merah, biakan bakteri
Eschericia  coli,  Nutrient  broth ( NB ),
Nutrient agar ( NA ), DMSO, etanol 96%, kertas  cakram  steril  dan  antibiotik ciprofloxaxin.
Alur Penelitian
Mengumpulkan Lengkuas Merah ( Alpina purpurata
K.Schum )
Lengkuas Merah ( Alpina purpurata K.Schum ) dibersihkan
Dikeringkan di dalam oven pada suhu 40 o C selama 3 hari
Lengkuas Merah ( Alpina purpurata K.Schum ) yang sudah kering dihaluskan dengan blender
Pembuatan ekstrak Lengkuas Merah ( Alpina purpurata K.Schum )
Ekstrak lengkuas merah ( Alpina purpurata K.Schum )
dilarutkan dengan DMSO murni Lakukan Uji sensitivitas
Zona hambat yang terbentuk kemudian diukur dengan jangka sorong

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  efektivitas,  rata-rata  zona hambat  yang  terbentuk  adalah  7,825 mm,  8,625  mm,  9,350  mm,  dan  10,700
mm  pada  konsentrasi  25%,  50%,  75%, dan  100%,  secara  berurutan,  seperti pada Tabel 1 dan Gambar 1.
Gambar 1. Diameter Zona Hambat
Berdasarkan  Gambar  1  di  atas merupakan  hasil  zona  hambat  untuk bakteri Eschericia  coli yang  diperoleh pada  percobaan  untuk  konsetrasi  25% adalah  7,3  mm,  pada  pengulangan pertama adalah 8,0 mm, pada
pengulangan kedua adalah 8,6 mm, pada pengulangan  ketiga  7,4  mm.  Untuk konsentrasi 50% pada percobaan didapatkan diameter zona hambat sebesar  8,3  mm,  pada  pengulangan pertama  8,8  mm,  pada  pengulangan kedua 8,7 mm, pada pengulangan ketiga
8,7  mm.  Untuk  konsentrasi  75%  pada percobaan  didapatkan  diameter  zona hambat  sebesar  9,4  mm,  pengulangan pertama  9,9  mm,  pada  pengulangan kedua sebesar 9,2 mm, pada pengulangan  ketiga  sebesar  9,2  mm. Untuk konsentrasi 100% pada percobaan didapatkan diameter zona hambat sebesar  11,4  mm,  pengulangan  pertama sebesar  10,4  mm,  pada  pengulangan kedua sebesar 10,3 mm, pada pengulangan ketiga 10,7 mm. 0 5 10 15 20 25 30 25% 50% 75%
100% Kontrol Positif Kontrol Negatif
D iam ete r Z o n a H am b at (m m ) Konsentrasi Ekstrak Lengkuas Merah ( Alpina purpurata ) Diameter Zona Hambat I II III IV
Gambar 2. Daya Hambat Maksimal terhadap Escherichia coli (EC) pada konsentrasi 25%, 50%, 75%, dan 100%
Sebelum  dilakukannya  uji  hipotesis, dengan  menggunakan  uji Shapiro  wilk dilakukan  pengujian  normalitas  data. Pada  uji Shapiro  wilk didapati  nilai  p adalah  0,467,  0,103,  0,272,  dan  0,329 pada  konsentrasi  25%,  50%,  75%,  dan
100%,  secara  berurut,  maka  dapat
disimpulkan bahwa data tersebut terdistribusi normal. Kemudian dilanjutkan  dengan  uji Levene didapati nilai p adalah  0,122,  maka  dapat disimpulkan bahwa  keempat varian data adalah identik.
Tabel 1.  Hasil  Pengukuran  Zona  hambat  berbagai  konsentrasi  ekstrak  lengkuas merah  ( Alpina  purpurata  K.Schum )  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Eschericia Coli ( E. coli ) Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) Rata-Rata Zona Hambat (mm) Nilai P Pengulangan I II III IV 25% 7,3 8,0 8,6 7,4 7,825 0,000 50% 8,3 8,8 8,7 8,7 8,625 75% 9,4 9,6 9,2 9,2 9,350 100% 11,4 10,4 10,3 10,7 10,700 Kontrol Positif 26,7 Kontrol Negatif 6
Data  terdistribusi  normal  dan  varian dari  keempat  data  adalah  identik. Sehingga  data  dianalisa  dengan  uji One Way  ANOVA .  Didapati  hasil  p=  0.000
dimana  nilai  p  <  0,05,  hal  ini menunjukan  bahwa  terdapat  perbedaan rata-rata  zona  hambat  antara  masing- masing konsentrasi.
100% 50% 75% 25% EC
Tabel 2.  Hasil Analisa Multikomparasi dengan Menggunakan PostHoc Test pada Escherichia coli
Konsentrasi I Konsentrasi II Nilai P 25% 50%` 0,113 75% 0,001 100% 0.,000 50% 25% 0,113 75% 0,180 100% 0,000 75% 25% 0,001 50% 0,180 100% 0,004 100% 25% 0,000 50% 0,000 75% 0,004
Dari  Tabel  2,  dapat  dilihat  pada konsentrasi  25%  terdapat  perbedaan yang signifikan dengan konsentrasi 75% (p=  0,001)  dan  100%  (p=0,000),  namun tidak terdapat perbedaan yang signifikan dengan  konsentrasi  50%  ( p =  0,113).
Pada  Konsentrasi  50%  sendiri  terdapat perbedaan yang signifikan dengan konsentrasi  100%  (p=0,000),  namun tidak terdapat perbedaan yang signifikan dengan  konsentrasi  25%  (p=0,113)  dan 75%  (p=0,180).  Pada  konsentrasi  yang lebih tinggi yaitu 75% terdapat perbedaan yang signifikan dengan konsentrasi 25% (p=0,001) dan
konsentrasi  100%  (p=  0,004),  namun tidak terdapat perbedaan yang signifikan terhadap  konsentrasi  50%  (p=0,180). Sedangkan  pada  konsentrasi  paling pekat  yaitu  100%  terdapat  perbedaan yang  signifikan  pada  semua  konsentrasi (25%  [p=0,000],  50%  [p=0,000],  75% [p=0,004]).
Penelitian  ini  menunjukkan  adanya aktivitas  antibakteri  yang  dihasilkan oleh  lengkuas  merah  (Alpina  purpurata K.Schum)  dengan  terbentuknya  zona bening  pada  daerah  disekitar  cakram yang  telah  diberi  ekstrak  lengkuas merah dengan menggunakan konsentrasi 100%, 75%, 50%, dan 25%.
Terbentuknya  zona  bening  pada daerah  sekitar  cakram  berhubungan dengan  terdapatnya  kandungan  saponin, tannin,  flavonoid,  fenol,  dan  minyak atsiri  (Rukmana  et  al.,  2016).  Zona hambat  terbesar  terbentuk  dari  ekstrak lengkuas merah (Alpina purpurata K.Schum)  dengan  konsentrasi  100% pada  bakteri  Escherichia  colidengan rata-rata  zona  hambat  sebesar10,700 mm,  semakin  besar  konsentrasi  ekstrak lengkuas merah (Alpina purpurata K.Schum) yang digunakan maka
diameter  zona  hambat  yang  terbentuk semakin luas.
Klasifikasi respon hambatan peertumbuhan bakteri menurut greenwood  (Mulyadi  et  al.,  2013), sebagai berikut: Tabel 3. Klasifikasi Respon Hambatan Pertumbuhan menurut Greenwood Rata-Rata Diameter Zona Hambat Respon Hambatan Pertumbuhan > 20 mm Kuat 16-20 mm Sedang 10-15 mm Lemah > 10 mm Kurang Efekif Berdasarkan tabel di atas maka dapat disimpulkan  bahwa  konsentrasi  25%, 50%, dan 75% memiliki respon hambatan yang kurang efektif (7,825mm,  8,625  mm,  dan  9,350  mm)
sedangkan pada konsentasi 100% memiliki  respon  hambatan  yang  lemah (10,700  mm).  Hal  ini  menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak lengkuas merah (Alpina purpurata  K.Schum),  maka  meningkat jugalah  respon  hambatan  dari  ekstrak terhadap pertumbuhan Escherichia coli.
Penelitian  ini  tidak  jauh  berbeda dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Kochuthressia et al. (2010), menyatakan hal yang sama bahwa ekstrak etanol dari rhizome lengkuas merah (Alpina purpurata K. Schum) dapat menghambat pertumbuhan  beberapa  jenis  bakteri salah  satunya  Escherichia  coli  dengan rata-rata zona hambat 10 ± 0.2 mm.
Berdasarkan  kandungan  Tannin  dan
Flavonoid dalam lengkuas merah(Alpina purpurata K.Schum) merupakan kandungan yang memiliki efek antimikroba. Tannin merupakan polifenol larut air yang dilaporkan dapat mencegah perkembangan dari mikroorganisme melalui presipitas protein  mikroba  dan  menyebabkan mikroba-mikroba  tersebut  kekurangan protein  sebagai  nutrisi  (Subramanian  & Suja, 2011).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  diambil kesimpulan sebagai berikut:
1. Ekstrak  lengkuas  merah  ( Alpina purpurata  K.  Schum )  efektif  dalam menghambat pertumbuhan Escherichia coli adalah pada konsentrasi 100%.
2. Rata-rata  diameter  zona  hambat yang terbentuk adalah sebesar 7,825 mm  pada  25%,  8,625  mm  pada konsentrasi  50%,  9,350  mm  pada konsentrasi 75%, dan 10,7 mm pada konsentrasi 100%.
3. Konsentrasi  100%  dari  ekstrak lengkuas  merah  ( Alpina  purpurata K. Schum ) secara signifikan berbeda terhadap  semua  konsentrasi  baik 25%, 50%, maupun 75%.
4. Pada  konsentrasi  25%,  50%,  dan
75%  menujukkan  respon  hambatan pertumbuhan  yang  tidak  efektif, tetapi pada konsentrasi 100% terdapat respon hambatan pertumbuhan yang lemah.

## DAFTAR PUSTAKA
Anusha, Kona Laxmi, Thofeeq MD, dan
Venkata  Reddy.  (2015).  In  Vitro Studies  and  Antibacterial  Activity  of
Alpinia Purpurata. Austun Journal of
Biotechnology  &  Bioengineering, 2(4). 1-2 Arisman  (2009). Keracunan  makanan: buku ajar ilmu gizi , Jakarta: EGC.
Badan  Penelitian  dan  Pengembangan
Kesehatan Kementrian Kesehatan RI.
(2013).  Riset  Kesehatan  Dasar; RISKESDAS. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan  Kementerian  Kesehatan RI. Carroll,  C.,  Karen.,  Janet  S.,  Bute.l,  S,
A..,  Norse.,  &  Timothy  Mietzner. (2016). Medical  Microbiology. 27th Edition. US: McGraw-Hill Education. Centers  for  Disease  and  Control Disease.  2015. General  Information Eschericia Coli . https://www.cdc.gov/ecoli/general/in dex.html.
Church,  L.  W.,  &  Preston.  (2015).
Enterobacteriaceae .  In:  Schlossberg, David. Clinical Infectious Disease Second  Edition.  UK:  Cambridge
University Press.
Fakhrurrazi,  (2012).  Inhibition  of  10% Alpina galangal and Alpina purpurata rhizome  extract  on  Candida  albicans growt. Dental journal, vol 45 , 85-6
Megasari,  N.  P.  (2015).  Uji  Aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc. var rubrum) terhadap bakteri klebsiella  pneumoniae  isolat  sputum
penderita  bronkitis  Secara  In  vivo. Parmacon, 4 (3). 104-109
Mulyadi, M., & Wuryanti, R. P., (2013).
Konsentrasi hambat minimum (KHM)  kadar  sampel  alang-alang
(imperata  cylindrical)  dalam  etanol melalui metode difusi cakram. Jurnal Chem Info. 1 (1). 35-42
Natta,  L.,  Orapin,  K.,  Krittika.  N.  dan Pantip,  B.  (2008).  Essential  oil  from five zingiberaceae for anti foodborne bacteria . International Food Research Journal 15 (3). 337-346 Oirere, E. K., Palanirajan, A., Deivasigamani,  M.,  Chinthamony  A. R.,  &  Velliyur,  K.  G.  (2016). Antioxidant,  cytotoxic  and  apoptotic activities  of  crude  extract  of  Alpinia purpurata on cervical cancer cell line. Int .  J.  Pharm.  Sci.  Rev.  Res.,  36 (2). 28-34
Pratiwi,  S.  T.  (2008). Mikrobiologi farmasi . Jakarta.: EMS.
Rialita,  T.,  Rahayu,  W.  P.,  Nuraida,  L.,
&  Nurtama,  B.  (2015).  Aktivitas antimikroba  minyak  esensial  jahe merah (Zingiber  ofﬁcinale  var.
rubrum) dan lengkuas merah (Alpinia purpurata  K.  Schum)    terhadap bakteri  patogen  dan  perusak  pangan. Agritech 35 (1). 43-52.