## ANALISIS NILAI ABSORBANSI KADAR FLAVONOID TANAMAN HERBAL MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
Anita Purnamasari, Sri Zelviani*, Sahara, Nurul Fuadi
Jurusan Fisika
Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar Jl. Sultan Alauddin No. 63, Gowa, Sulawesi Selatan, Indonesia. 92113 *E-mail: sri.zelviani@uin-alauddin.ac.id
Abstrak: Flavonoid  merupakan  metabolit  sekunder  dari  polifenol  yang banyak  ditemukan  pada  tumbuhan  dan  makanan  serta  memiliki  aktivitas biologis. Kadar flavonoid dapat diukur dengan mengetahui nilai absorbansi pada  panjang  gelombang  tertentu  berdasarkan  prinsip  Lambert-Beer  dari setiap  tanaman  herbal  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  kadar  flavonoid  ekstrak  daun  sirih merah,  daun  kembang  sepatu  dan  ekstrak  daun  kapuk.  Proses  ekstraksi kandungan kimia dan daun sirih daun waru dan daun kapuk dilakukan dengan metode  maserasi  menggunakan  etanol  70%.  Hasil  peneltian  menunjukkan bahwa kandungan flavonoid total daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk adalah sebesar 1,18131%, 1,4445% dan 1,2985%. Sehingga dapat disimpulkan  bahwa  kandungan  flavonoid  tertinggi  dimiliki  oleh  daun  sirih merah dengan nilai sebesar 1,8131%.
Kata Kunci : daun kapuk; daun kembang sepatu; daun sirih merah; flavonoid; sprektofotometer UV-Vis
Abstract: Flavonoids  are  secondary  metabolites  of  polyphenols  that  are commonly found in plants and food and have biological activities. Flavonoid levels  can  be  measured  by  knowing  the  absorbance  value  at  a  certain wavelength based on the Lambert-Beer principle of each herbal plant using a UV-Vis spectrophotometer. The purpose of this study was to determine the flavonoid content of red betel leaf extract, hibiscus leaf extract and kapok leaf extract. The extraction process of chemical content and betel leaf of waru leaf and kapok leaf was carried out by maceration method using 70% ethanol. The results showed that the total flavonoid content of red betel leaf, hibiscus leaf and kapok leaf was 1.18131%, 1.4445% and 1.2985%. So it can be concluded that the highest flavonoid content is owned by red betel leaf with a value of 1.8131%.
Keywords:  flavonoids;  hibiscus  leaves;  kapok  leaf;  red  betel  leaf;  UV-Vis spectrophotometer

## PENDAHULUAN
ndonesia  merupakan  negara  yang  memiliki  keanekaragaman  hayati  yang  memiliki manfaat tidak hanya sebagai bahan pangan tetapi dapat digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit seperti demam. Tumbuhan yang dapat digunakan sebagai obat salah satunya yaitu daun kembang sepatu, daun kapuk dan daun sirih merah yang I
memiliki  kandungan  flavonoid,  dimana  flavonoid  banyak  terdapat  pada  daun,  batang, bunga,  buah,  biji  atau  kulit  batang.  Flavonoid  merupakan  senyawa  fenol  alam  yang terdapat dalam hampir semua tumbuhan (Markham KR, 1988).
Berdasarkan  Jenderal  POM  tahun  1991  dinyatakan  bahwa  terdapat  283  spesies tumbuhan obat yang digunakan oleh industri obat tradisional di Indonesia (Neldawati et al.,  2013).  Salah  satu  penyakit  yang  dapat  disembuhkan  menggunakan  daun  kembang sepatu, daun kapuk dan daun sirih merah adalah demam. Demam adalah keadaan dimana dapat berakibat serius pada anak sebab mampu menimbulkan gejala seperti meningitis, bakteremia, osteomyelitis, pneumonia, hingga infeksi saluran kemih (Arham, 2012).
Flavonoid  mempunyai  sifat  antioksidan  karena  mengandung  gugus  hidroksil sehingga dapat berperan sebagai penangkap radikal bebas (Widyastuti, 2010). Senyawa yang memiliki antioksidan adalah senyawa fenol yang mempunyai gugus hidroksi yang tersubstitusi  pada  posisi  orto  terhadap  gugus  –OH  dan  –OR  (Pratiwi,  2006).  Senyawa flavonoid  seperti  quersetin,  morin,  mirisetin,  kaemferol,  asam  tanat  dan  asam  elagat adalah  antioksidan  kuat  yang  mampu  melindungi  makanan  dari  kerusakan  oksidatif (Silalahi,  2006).  Kuersetin  adalah  senyawa  aktif  yang  termasuk  dalam  golongan flavonoid, dimana flavonoid memiliki banyak manfaat terutama sebagai obat anti-piretik. Demam dapat hilang dengan mengonsumsi obat anti-piretik yang terdapat pada sejumlah tanaman herbal (Mutia & Zakiah, 2017). Flavonoid juga digunakan sebagai penangkap radikal  bebas,  dan  memiliki  efek  anti-inflamasi,  antivirus,  anti-trombosis  dan hepatoprotektif (Alwi, 2017).
Senyawa kuersetin memiliki mekanisme kerja sebagai anti-piretik dalam penurunan suhu  tubuh  yaitu  dengan  memblok  jalur  siklooksigenase  (COX-2)  dan  fosfolipase  A2 serta menjadi penghambat mediator inflamasi sehingga dapat menghambat pada proses terjadinya demam dan bila digunakan ketika demam berlangsung maka dapat memiliki efektivitas sebagai penurun demam (Mutia, 2017).
Kadar  flavonoid  dapat  diukur  dengan  mengetahui  nilai  absorbansi  pada  panjang gelombang  tertentu  berdasarkan  prinsip  Lambert-Beer  dari  setiap  tanaman  herbal menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis.  Flavonoid  adalah  metabolit  sekunder  dari polifenol yang banyak ditemukan pada tumbuhan dan makanan serta memiliki aktivitas biologis. Flavonoid dapat ditemukan pada semua jenis tumbuhan hijau, sehingga banyak ditemukan  di  setiap  ekstrak  tumbuhan  (Arifin,  2018).  Absorbansi  merupakan perbandingan intensitas sinar yang datang dengan intensitas sinar yang diserap. Metode ini  dikenal  dengan  metode  kolorimetri,  senyawa  yang  memiliki  spektrum  penyerapan pada  spektrum  UV-Vis  akan  menghasilkan  senyawa  turunannya  yang  memungkinkan pengukuran pada daerah UV-Vis. Apabila radiasi atau cahaya putih dilewatkan melalui larutan  berwarna  maka  radiasi  dengan  panjang  gelombang  tertentu  diserap  dan  radiasi lainnya diteruskan. Nilai absorbansi tergantung pada zat yang dikandung oleh tumbuhan, semakin  banyak  kadar  zatnya  maka  cahaya  panjang  gelombang  akan  semakin  banyak diserap oleh molekul-molekul tersebut (Neldawati et al., 2013).
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan analisis kandungan absorbansi dan flavonoid daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk yang dapat digunakan untuk menurunkan demam. Diharapkan dari penelitian ini akan diketahui nilai absorbansi dan kadar flavonoid daun sirih merah, daun kembang sepatu  dan  daun  kapuk  dan  menentukan  hubungan  antara  kapasitas  kalor  dan  nilai absorbansi sehingga dapat digunakan sebagai obat penurun demam.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Januari-Juli  2021  di  Laboratorium Anorganik  Kimia  Fakultas  Sains  dan  Teknologi  Universitas  Islam  Negeri  Alauddin Makassar  dan  Laboratorium  Kimia  Analitik  Jurusan  Teknik  Kimia  Politeknik  Negeri Ujung Pandang. Alat dan bahan yang digunakan adalah blender, gelas ukur, pipet tetes, spektrofotometer UV-Vis, mesh 40, kertas label, tabung reaksi, rak tabung reaksi, spatula, gelas  beker,  pengaduk  kaca,  corong  kaca,  timbangan  analitik,  kuvet,  mikropipet, inkubator,  daun  kapuk,  daun  kembang  sepatu,  daun  sirih  merah,  kuersetin,  aquades, etanol 70%, etanol 96%, natrium asetat dan aluminium klorida AlCl 3 . Prosedur kerja yang dilakukan pada penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Pembuatan serbuk simplisia
Sampel  yang  telah  dikumpulkan  dicuci  dengan  air  mengalir  sampai  bersih, kemudian daun diiris tipis-tipis dan dikeringkan selama 3 hari dalam suhu kamar. Daun yang kering dihaluskan menggunakan blender untuk mendapatkan serbuk sampel. Serbuk yang diperoleh diayak dengan mesh 40 lalu ditimbang.
2. Pembuatan ekstrak sampel dengan maserasi
Memasukkan  daun  yang  sudah  dihaluskan  sebanyak  200  gram  ke  dalam  toples maserasi  dengan  etanol  70%  untuk  dilakukan  maserasi  selama  3  hari.  Kemudian dilakukan proses pemisahan ampas dan filtratnya. Selanjutnya ampas dimaserasi kembali dengan menggunakan etanol 70% yang baru.
3. Analisis senyawa flavonoid dengan spektrofotometer UV-Vis
a. Pengukuran panjang gelombang maksimum Mencampur 1,0 ml larutan kuersetin dengan etanol sampai pada volume 5 ml dalam labu tentukur kemudian dikocok dan diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya.
b. Pengukuran kurva standar kuersetin Melarutkan  kuersetin  sebanyak  10  mg  dengan  100  ml  etanol  96%,  kemudian membuat pengenceran kuersetin dengan konsentrasi 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm sebagai larutan kuersetin pembanding. Sebanyak 0,1 ml larutan kuersetin  diencerkan  dengan  1,5  ml  etanol  kemudian  menambahkan  0,1  ml aluminium (III) klorida 10%, 0,1 ml Natrium asetat 1 M dan 2,8 ml aquades. Setelah diinkubasi  selama  30  menit,  absorbansi  dari  larutan  pembanding  diukur  dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 434 nm. Selanjutnya membuat kurva larutan standar untuk mendapatkan persamaan regresi linier.
4. Penetapan Kadar Flavonoid ekstrak sampel
Sebanyak 1 ml sampel ditambahkan dengan 1,5 ml etanol kemudian 2,8 ml aquades, 0,1 ml aluminium (III) klorida dan 0,1 ml kalium asetat. Melakukan inkubasi selama 30 menit dan mengukur absorbansi menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang  maksimum  439  nm.  Pada  penentuan  kadar  flavonoid  maka  menggunakan persamaan regresi dari kurva standar antara absorbansi dan konsentrasi larutan standar. Secara sistematis dapat dituliskan:
𝑦 = 𝑎𝑥 ± 𝑏
(1)
Keterangan:
y = Nilai absorbansi a = Perpotongan kurva garis lurus b = Perpotongan kurva dengan kordinat x = Konsentrasi ekstrak (mg/L)
Selanjutnya nilai absorbansi disubtitusikan ke dalam persamaan regresi sebagai (y) sehingga  untuk  menentukan  kadar  flavonoid  pada  sampel  herbal  dapat  digunakan persamaan:
𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝐹𝑙𝑎𝑣𝑜𝑛𝑜𝑖𝑑 = 𝐶×𝑉 𝑀 (2) Keterangan: C = Konsentrasi (mg/L) V = Volume larutan sampel (M) M
= Massa ekstrak (g)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  dilakukan  menggunakan  200  gram  serbuk  simplisia  daun  sirih  merah, daun  kembang  sepatu  dan  daun  kapuk  yang  dimaserasi  dengan  menggunakan  pelarut etanol 70% selama 3 hari. Hasil ektraksi daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk dapat dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Hasil ekstraksi tanaman herbal
No Sampel Hasil Ekstrak (Gambar) Keterangan 1. Daun kembang sepatu Hasil  ekstrak  maserasi  daun kembang  sepatu  menghasilkan warna kejinggaan 2. Daun kapuk Hasil ekstrak maserasi daun kapuk menghasilkan warna hijau 3. Daun sirih merah Hasil  ekstrak  maserasi  daun  sirih merah menghasilkan warna merah bata
Hasil uji flavonoid ekstrak daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang maksimum 439 nm menghasilkan  nilai  absorbansi  pada  masing-masing  ekstrak  sampel  sebagaimana ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Kandungan flavonoid total daun kembang sepatu, daun sirih merah, daun kapuk
Sampel Berat ekstrak (gram) Absorbansi Kadar Ekuivalen (ppm) Kadar Flavonoid total (%) Daun sirih merah 200 0,421 36,262 1,8131 Daun kembang sepatu 200 0,320 28,890 1,4445 Daun kapuk 200 0,280 25,970 1,2985
Hasil dari pengukuran kuersetin sebagai pembanding 20, 30, 40, 50, 60 dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Nilai absorbansi kuersetin sebagai pembanding pada panjang gelombang nm Konsentrasi Absorbansi 20 0,204 30 0,316 40 0,482 50 0,621 60 0,737
Berdasarkan  Gambar  1,  hubungan  antara  konsentrasi  dan  absorbansi  dapat disimpulkan bahwa larutan standar pembanding kuersetin yaitu 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50  ppm  dan  60  ppm  diperoleh  nilai  absorbansi  kuersetin  yang  berbeda-beda  yaitu berturut-turut  0,204,  0,316,  0,482,  0,621,  dan  0,737.  Hasil  yang  diperoleh  dari pengukuran kurva baku adalah semakin tinggi nilai konsentrasi maka semakin tinggi nilai absorbansinya dengan range kadar flavonoid total yang baik berkisar antara 0,2-0,8.
Gambar 1. Grafik kurva baku kuersetin sebagai larutan standar pembanding
Tumbuhan  sirih  merah,  kembang  sepatu  dan  kapuk  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu hanya pada bagian daunnya saja. Ketiga tanaman herbal ini memiliki kandungan  senyawa  flavonoid  yang  dapat  dimanfaatkan  untuk  menurunkan  demam. Flavonoid hampir terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk buah, akar, daun dan kulit  luar  batang.  Flavonoid  merupakan  senyawa  alam  yang  berpotensi  sebagai antioksidan  yang  dapat  menangkal  radikal  bebas.  Pada  penelitian  ini  ketiga  tanaman herbal diperoleh dari Kabupaten Luwu Utara, Sulawesi Selatan. Kotoran yang menempel pada daun harus dibersihkan karena dapat menganggu dan berpengaruh pada proses hasil ekstraksi. Daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk dipotong-potong kecil untuk  mempercepat  proses  pengeringan.  Proses  pengeringan  ini  bertujuan  untuk mengurangi kadar air yang terdapat pada sampel sehingga mencegah pembusukan oleh bakteri.
y = 0,0137x - 0,0758 R² = 0,9961 0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 10 20 30 40 50 60 70 Abs or b an si 434 n m Konsentrasi (ppm) Kurva Baku Kuersetin
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  maserasi. Metode maserasi merupakan metode yang dapat meminimalisir kemungkinan rusaknya komponen senyawa kimia. Proses maserasi dilakukan dengan merendam sejumlah serbuk simplisia  dalam  etanol  70%.  Penggunaan  etanol  70%  pada  penelitian  ini  disebabkan karena senyawa flavonoid umumnya dalam bentuk glikosida yang bersifat polar sehingga harus dilarutkan dengan pelarut yang bersifat polar. Cairan penyari ini akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif yang berperan dalam proses keseimbangan larutan antara di luar dan di dalam sel.
Analisis nilai absorbansi untuk menentukan kadar flavonoid dari ekstrak daun sirih merah,  daun  kembang  sepatu  dan  daun  kapuk  dengan  menggunakan  spektrofotometer UV-Vis. Penentuan kadar flavonoid dalam suatu sampel tumbuhan dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis merupakan salah satu metode dengan memanfaatkan interaksi cahaya  dengan  atom  dan  molekul.  Cahaya  datang  yang  mengenai  permukaan  zat  dan cahaya setelah melewati zat tidak dapat diukur, yang dapat diukur adalah perbandingan intensitas cahaya datang dengan intensitas cahaya setelah melewati sampel.
Berdasarkan hasil pengukuran larutan standar pada kurva kalibrasi diperoleh nilai regresi dengan koefisien relatif sebesar (0,9980) dan garis linier sebesar 0,0137x - 0,0758 yang berada pada titik potong (0,0) pada sumbu tegak. Dari persamaan regresi tersebut diperoleh nilai kadar flavonoid dari ekstrak daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk yang ada pada Tabel 1.
Penentuan kadar flavonoid total dilakukan dengan larutan standar kuersetin 20 ppm, 30  ppm,  40  ppm,  50  ppm  dan  60  ppm.  Pengukuran  absorbansi  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang  gelombang  434  nm.  Masing-masing  nilai absorbansi  standar  kuersetin  memiliki  nilai  absorbansi  yang  berbeda-beda  adalah berturut-turut  0,204,  0,316,  0,482,  0,621,  dan  0,737.  Hasil  yang  diperoleh  dari pengukuran kurva baku adalah semakin tinggi nilai konsentrasi maka semakin tinggi nilai absorbansinya.  Range  kadar  flavonoid  total  berdasarkan  nilai  absorbansinya  berkisar antara 0,2-0,8.
Untuk menghitung kadar total flavonoid, mula-mula absorbansi sampel yang telah dibuat  dihitung  rata-ratanya.  Hasil  rata-rata  sampel  yang  telah  didapat  dimasukkan  ke dalam  persamaan  garis  linear  y  =  0,0137x  –  0,0758  dengan  koefisien  korelasi  sebesar 0,9961 sehingga diperoleh kadar total flavonoid untuk ekstrak etanol daun sirih merah, daun  kembang  sepatu  dan  daun  kapuk.  Panjang  gelombang  maksimum  yang  diukur berada pada panjang gelombang 439 nm. Perhitungan kadar flavonoid total dalam sampel berdasarkan hukum Lambert-Beer yang menunjukkan hubungan lurus antara absorbansi dan kadar analit.
Gambar 2. Grafik hubungan antara kadar flavonoid dan nilai absorbansi ekstrak daun sirih merah, daun kembang sepatu dan kapuk y = 0,274x - 0,0758 R² = 1 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0 0,5 1 1,5 2 Abs or b an si Kadar Flavonoid Hubungan antara kadar flavonoid dan nilai absorbansi ekstrak tanaman herbal
Kadar flavonoid dalam berbagai tanaman herbal dapat dihitung berdasarkan nilai absorbansi  yang  terbaca  pada  spektrofotometer  UV-Vis.  Pada  hasil  perhitungan  yang telah  dilakukan  diperoleh  bahwa  kadar  flavonoid  pada  masing-masing  daun  tanaman herbal berbeda. Untuk daun sirih merah memiliki kadar flavonoid sebesar 1,8131%, untuk daun  kembang  sepatu  sebesar  1,4445%  dan  untuk  daun  kapuk  sebesar  1,2985%. Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  daun  sirih  merah  memiliki kandungan senyawa flavonoid yang lebih besar dibanding dengan daun lainnya, dimana daun  kapuk  memiliki  kadar  flavonoid  yang  paling  sedikit.  Dalam  uji  identifikasi flavonoid  daun  sirih  merah  menunjukkan  warna  yang  lebih  merah  dari  daun  lainnya. Semakin  merah  warna  yang  diperoleh  maka  semakin  tinggi  kadar  flavonoid  yang terkandung dalam daun. Hal ini setara dengan nilai absorbansi yang terukur, dimana daun sirih merah memiliki absorbansi tertinggi dari daun kembang sepatu dan daun kapuk atau dapat dikatakan bahwa kadar flavonoid dan nilai absorbansi berbanding lurus, semakin tinggi absorbansi maka semakin tinggi kadar flavonoid yang terkandung pada tanaman herbal.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, diperoleh nilai absorbansi daun sirih merah, daun kembang sepatu dan daun kapuk masing-masing sebesar 0,421, 0,320 dan  0,280  sedangkan  kadar  flavonoid  total  sebesar  1,8131%,  1,3578%  dan  1,2985% sehingga dapat disimpulkan bahwa kadar flavonoid tertinggi dimiliki oleh ekstrak etanol daun sirih merah yaitu 1,8131%.

## DAFTAR PUSTAKA
Alwi, H. (2017).  Validasi  Metode Analisis Flavonoid  Dari  Ekstrak Etanol Kasumba Turate ( Carthamus tinctorius L.) secara Spektrofotometri UV-VIS. [Skripsi]. Makassar: UIN Alauddin Makassar.
Anisa,  K.  D  (2019).  Efektivitas  kompres  hangat  untuk  menurunkan  suhu  tubuh  pada  AN.D  dengan hipertermia. Jurnal Ilmiah Ilmu Kesehatan: Wawasan Kesehatan , 5(2),122-127.
Arham. (2012). Studi penentuan sifat termal tanaman herbal sebagai obat demam. [Skripsi]. Makassar: UIN Alauddin Makassar.
Arifin, B., & Ibrahim, S. (2018). Struktur, bioaktivitas dan antioksidan flavonoid. Jurnal Zarah , 6(1), 21- 29. https://doi.org/10.31629/zarah.v6i1.313. Bintang, M. (2018). Biokimia Teknik Penelitian . Jakarta: Erlangga.
Habibah,  S.  (2014).  Perbedaan  Efektifitas  Kompres  Air  Hangat  Dengan  Kompres  Air  Biasa  terhadap Penurunan Suhu Tubuh Pada Anak Dengan Demam di Ruang Al Farisi Rumah Sakit Islam Jakarta Sukapura. [Skripsi]. Jakarta: Universitas Muhammadiyah Jakarta.
James, J., Baker, C., & Swain, H. (2006). Prinsip-Prinsip Sains Untuk Keperawatan . Jakarta: Erlangga. Kurniati, H. S. (2016). Gambaran Pengetahuan Ibu dan Metode Penanganan Demam pada Balita di Wilayah Puskesmas Pisangan Kota Tangerang Selatan. [Skripsi]. Jakarta: UIN Syarif Hidayatullah. Markham, K. R. (1988). Techniques of Flavonoid Identification. London: Academic Pr. Mutia, V., & Oktarlina, R. Z. (2017). Efektivitas daun jarak kepyar ( Ricinus communis L.) sebagai anti- piretik. Majority , 7(1), 36-40.
Neldawati., Ratnawulan., & Gusnedi. (2013). Analisis nilai absorbansi dalam penentuan kadar flavonoid untuk berbagai jenis daun tanaman obat. Pillar of Physics , 2, 76-83. http://dx.doi.org/10.24036/756171074.
Praptiwi., Dewi, P., & Harapini, M. (2006). Nilai peroksida dan aktivitas anti radikal bebas diphenyl picril hydrazil hydrate (DPPH) ekstrak metanol Knema laurina . Majalah Farmasi Indonesia , 17(1), 32- 36. Silalahi, J. (2006). Makanan Fungsional . Yogyakarta: Kanisius. Suhartati,  T.  (2017). Dasar-Dasar  Spektrofotometri  UV-VIS  dan  Spektrometri  Massa  Untuk  Penentuan Struktur Senyawa Organik. Lampung: Anugrah Utama Raharja.
Widyastuti,  N.  (2010).  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Dengan  Metode  Cuprac,  DPPH,  Frap  Sria Korelasinya Dengan Fenol dan Flavonoid Pada Enam Tanaman . [Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.