## Penelitian

## PENGUJIAN EFEKTIVITAS EKSTRAK CAPSICUM ANNUUM SEBAGAI ANTI INFLAMASI PADA TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI
CCL4
Aldian Mulyanto Lokaria 1 , Berliana Islamiyarti Hydra 1 , Zelly Dia Rofinda 2
1 Program Studi Profesi Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Andalas, Padang
2 Bagian Parasitologi Klinik, Fakultas Kedokteran, Universitas Andalas/ RSUP DR. M. Djamil, Padang

## ABSTRAK
Pendahuluan: Inflamasi  memiliki  peran  besar  dalam  patogenesis  beragam  penyakit. Obat  anti  inflamasi  non  steroid  (OAINS)  menjadi  terapi  yang  sering  diterapkan,  namun penggunaan OAINS dapat menyebabkan masalah gastrointestinal dan efek samping lain. Capsaicin pada ekstrak cabai merah ( Capsicum annuum ) memiliki efek anti inflamasi dan sebagai kandidat pengganti OAINS.
Metode: Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan desain pre  and  post test untuk  menghitung  jenis  leukosit  dan  desain post  test  only untuk  menghitung  jumlah leukosit  dan  laju  endap  darah  (LED).  Keempat  kelompok  kontrol  positif  dan  kelompok perlakuan yang masing-masing berisi 5 sampel tikus wistar diinduksi CCl4 2% 0,5 ml/hari selama  30  hari.  Pasca  induksi  sampel  diberikan  perlakuan  selama  14  hari  berupa  diet standar ad  libitum (kontrol  negatif),  asetosal;  asetaminofen;  ibuprofen;  dan  asam mefenamat (kontrol positif), serta ekstrak C. annuum 2% (kelompok perlakuan).
Hasil: Hitung  jenis  leukosit  kelompok  ekstrak C.  annuum 2%  menunjukkan  penurunan limfosit  ( p<0,001 )  dibandingkan  sebelum  perlakuan.  Sementara  hitung  jumlah  leukosit dan  LED  kelompok  ekstrak C.  annuum 2%  menunjukkan  hasil  yang  lebih  kecil,  yaitu 5020 ± 2071 ( p=0,209 ) dan 2,00 ± 1,26 ( p=0,174 ) dibandingkan kelompok OAINS.
Simpulan: Ekstrak C.  annuum 5%  mampu  menurunkan  proporsi  limfosit  secara bermakna, namun menurunkan jumlah leukosit dan LED secara tidak bermakna.
Kata kunci: Anti Inflamasi, Capsicum annuum, Capsaicin, OAINS

## ABSTRACT
Background: Inflammation  has  a  major  role  in  the  pathogenesis  of  various  diseases. Non  steroidal  anti  inflammatory  drugs  (NSAIDs)  being  the  most  often  used  drug  in community,  but  prolonged  use  NSAIDs  can  cause  digestive  problems  and  other  side effects.  Capsaicin  from  red  chilli  (Capsicum  annuum)  extract  have  anti-inflammatory effects and as a replacement candidate of NSAIDs.
Methods: This  research  is  an  experimental  research  with  pre  and  post  test  design  for differential  count  and  post  test  only  design  to  leukocytes  count  and  erythrocyte sedimentation rate (ESR). The four positive control groups and treatment group contains 5 samples of wistar rat for each group induced by CCl4 2% 0,5 ml/day for 30 days. After induction,  the  samples  were  given  treatment  for  14  days  with  ad  libitum  standard  diet (negative  control);  aspirin;  acetaminophen;  ibuprofen;  mefenamic  acid  (positive  control), and extracts of C. annuum 2% (treatment group).
Results: The differential count from extracts of C. annuum 2% group showed a decrease in  lymphocytes  (p  <0,001)  than  before  treatment.  While  the  results  of  leukocytes  count and ESR from C. annuum extract 2% group showed smaller results, ie 5.020 ± 2.071 (p = 0,209) and 2,00 ± 1,26 (p = 0,174) compared to the NSAIDs groups. Conclusion: Extract  of  C.  annuum  2%  were  able  to  decrease  the  proportion  of lymphocytes significantly, but the reduced of leukocytes count and ESR unsignificantly.
Keywords: Anti Inflammatory, Capsicum annuum, Capsaicin, NSAIDs

## 1. PENDAHULUAN
Inflamasi  adalah  suatu  proses peradangan  terhadap  adanya  benda asing,  invasi  mikroorganisme,  trauma, mediator  atau  bahan  kimia,  faktor  fisik maupun  alergi. [1] Pada  inflamasi  dapat terjadi  stres  oksidatif  yang  merupakan hasil  adanya  ketidakseimbangan  antara prooksidan  ( Reactive  Oxygen  Species ) dan  antioksidan. [2] Inflamasi  dan  stres oksidatif  memiliki  peran  penting  dalam perkembangan  beragam  jenis  penyakit, seperti  keganasan,  artritis  reumatoid, asma,  diabetes,  kelainan  kardiovaskular termasuk  aterosklerosis,  alzheimer  serta beragam  penyakit  degeneratif.  Dimana penyakit-penyakit  tersebut  menunjukkan prevalensi yang tinggi di dunia. [3],[4],[5] Beragam terapi dapat digunakan untuk mengatasi terjadinya inflamasi dan komplikasi  yang  menyertainya.  Salah satu  yang  paling  banyak  diterapkan hingga  sekarang  adalah  penggunaan obat  anti  inflamasi  non  steroid  (OAINS), namun  adanya  efek  samping  yang merugikan  pada  prnggunaan  jangka panjang  seperti  masalah  gastrointestinal menuntut  adanya  pengembangan  terapi baru yang lebih aman. [6] Sejak beberapa tahun  terakhir,  terdapat  peningkatan minat  dalam  bidang  potensi  kesehatan yang  didapat  dari  tanaman.  Sebagian tanaman  tersebut  tidak  hanya  memiliki efek tunggal sebagai anti inflamasi, tetapi juga  antioksidan  dan  efek  lain  untuk melawan  beragam  proses  patologis  di dalam tubuh. [5] Genus Capsicum meliputi  lebih dari  200  varietas  tanaman,  dan  memiliki buah  yang  beragam  baik  dari  segi ukuran,  bentuk,  warna,  rasa,  hingga kepedasan. [3],[4] Capsicum telah  lama dikenal  karena  memiliki  potensi  untuk menurunkan  respon  imun tubuh,  bekerja sebagai  anti  inflamasi,  antioksidan, menurunkan  tekanan  darah  dan  glukosa darah,  serta  sebagai  terapi  pada  iritasi
saluran  pencernaan,  kolik,  diare,  asma, keram,  osteoartritis,  neuropati  diabetes, artritis  reumatoid,  nyeri  pasca  operasi, psoriasis,  ruam  kulit,  gigitan  binatang, dan  luka. [4],[7],[8],[9] Meskipun  demikian belum  banyak  manfaat Capsicum yang telah berhasil dipublikasikan. [8] Terdapat  lima  spesies  utama tanaman Capsicum di  seluruh  dunia, yaitu C.  baccatum,  C.  chinense,  C. pubescens,  C.  frutescens  dan  C. annuum. [9],[10] Sedangkan  di  Indonesia hanya terdapat dua diantaranya, yaitu C. annuum (cabai merah) dan C. frutescens (cabai rawit), dimana C. annuum menjadi jenis  yang  memiliki  varietas  paling banyak  dan  persebaran  paling  luas. Pada  setiap  spesies Capsicum juga memiliki  beragam  komponen  fitokimia yang  berperan  dalam  memproteksi  dan mencegah timbulnya penyakit. [11] Dimana komponen fitokimia utama yang terdapat pada Capsicum adalah  senyawa  fenol, carotenoid, dan capsaicinoid. [10] Capsaicin  adalah  capsaicinoid utama  dan  memiliki  kadar  paling  besar pada Capsicum .  Capsaicin memiliki  efek anti  analgesik,  anti  nosiseptor,  dan  anti inflamasi. [5],[10] Bersama  senyawa  fenol dan  carotenoid,  capsaicin  juga  memiliki efek sebagai antioksidan. [11],[12],[13] Meskipun  sudah  banyak  manfaatnya yang  dikeathui,  penggunaan Capsicum atau  capsaicin  masih  terbatas  sebagai analgesik.  Dimana  capsaicin  dapat berikatan  dengan  reseptor Transient Receptor  Potential  Vanilloid 1 (TRPV1) pada nosiseptor dan menurunkan sensasi nyeri secara spesifik. [8],[14]
Penenelitian  ini  bertujuan  untuk melihat  efektivitas Capsicum sebagai sumber  alternatif  terapi  anti  inflamasi  di masa  mendatang.  Dipilih Capsicum annuum, karena sebagai jenis Capsicum yang  mudah  ditemukan  di  Indonesia. Sedangkan  parameter  inflamasi  yang akan  dinilai  berdasarkan  hitung  jenis
leukosit,  hitung  jumlah  leukosit,  dan  laju endap darah (LED).

## 2. METODE
Penelitian  ini  adalah  penelitian analitik  eksperimental  dengan  desain penelitian pre and post test design untuk hitung  jenis,  dan post  test  design  only untuk  hitung jumlah  dan  LED . Penelitian dilaksanakan  di  lab.  Biota  Sumatera untuk  pembuatan  ekstrak Capsicum annuum ,  laboratorium  hewan  Fakultas Kedokteran  Universitas  Andalas  untuk aklimatisasi  hingga  perlakuan,  dan laboratorium sentral Fakultas Kedokteran Universitas  Andalas  untuk  pengukuran hitung jenis, hitung jumlah, dan LED.
Sampel  berupa  tikus  wistar ( Rattus  norvegicus) yang jumlah minimal dihitung  dengan  menggunakan  rumus Federer (t-1)  (n- 1)  ≥ 15 , dimana t menyatakan  jumlah  kelompok  dan n menyatakan  jumlah  sampel  setiap kelompok. [15] Sampel  dibagi  dalam  6 kelompok, dimana pada setiap kelompok terdapat 5 ekor tikus wistar, atau  jumlah sampel  total  sebanyak  30  ekor  tikus wistar. Tikus diaklimatisasi dahulu selama  1  minggu  sebelum  diberikan induksi dan perlakuan. Ekstrak Capsicum annuum
berasal  dari  10  Kg  cabai  merah  yang dipisahkan  antara  biji  dengan  daging buahnya.  Dimana  simplisia  berupa  biji cabai  kering  yang  sudah  dihaluskan  dan kemudian  dimaserasi  selama  3  hari dengan  perbandingan  simplisia  (dalam gram)  dengan  jumlah  pelarut (dalam ml) adalah 1:8 . Maserasi dilakukan sebanyak 2  kali  dan  hasil  maserasi  didestilasi  dan diekstraksi  dengan rotary  evaporator untuk  membentuk  ekstrak Capsicum annuum. [16] Ekstrak Capsicum  annuum kemudian  dilarutkan  di aquades untuk membentuk  larutan  ekstrak Capsicum annuum dengan konsentrasi 2%.
Pada  keempat  kelompok  kontrol positif  dan  kelompok  perlakuan  yang sudah  diaklimatisasi,  kemudian  diinduksi inflamasi  dengan  larutan  CCl 4 dengan konsentrasi  2%  yang  sebelumnya  telah dilarutkan dalam minyak kelapa. CCl 4 2% diberikan  secara  per  oral  dengan  dosis 0,5  ml  larutan  CCl 4 2%/ekor/hari  selama 30  hari.  Selama  tahap  induksi,  berat badan  (BB)  sampel  terus  dimonitoring untuk  mengevaluasi  adanya  penurunan
berat  badan  yang  berarti.  Sementara pada  kelompok  kontrol  negatif  tidak diberikan induksi inflamasi.
Setelah  tahap  induksi,  setiap sampel  dari  keenam  kelompok  diambil darahnya  sebanyak  0,5  ml/ekor  untuk dilakukan  pemeriksaan  awal  ( pre  test ) hitung  jenis  leukosit  dengan  pewarnaan giemsa.  Keenam  kelompok  selanjutnya diberikan perlakuan yang berbeda. Pada kelompok  kontrol  negatif  diberikan perlakuan  berupa  diet  standar ad  libitum selama  14  hari.  Pada  kelompok perlakuan  diberikan  larutan  ekstrak Capsicum annum 2% secara oral dengan dosis  0,1  ml/ekor/hari  selama  14  hari. Sedangkan  pada  keempat  kelompok kontrol  positif  diberikan  OAINS,  yaitu asetosal  40mg/kg  BB/hari,  asetaminofen 62,5 mg/kg BB/hari, ibuprofen 100 mg/kg BB/hari,  dan  asam  mefenamat  500 mg/kg  BB/hari  selama  14  hari  dengan mengunakan sonde oral.
Setelah tahap perlakuan, sampel didekapitasi  untuk  diambil  darah  dari intrakoroner  sebanyak  5  ml.    Kemudian dilakukan pemeriksaan ulang hitung jenis leukosit  dengan  metode  yang  sama, pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit dengan  metode  kamar  hitung Improved Neubauer, serta  LED  dengan  metode Westergreen .  Kelompok  yang  berhasil menurunkan  hitung  jumlah  leukosit, menormalkan  distribusi  jenis  leukosit, dan  menurunkan  nilai  LED  menunjukan potensinya sebagai anti inflamasi.

## 3. HASIL PENELITIAN
Dari  10  kg  cabai  merah  dapat dihasilkan 470 gram simplisia berupa biji cabai  merah  yang  telah  dikeringkan  dan dihaluskan.  Hasil  ekstraksi  didapatkan 17,4  ml  ekstrak Capsicum  annuum . Persentase  kadar  zat  aktif  pada  cabai merah dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 1. Evaluasi Ekstraksi Biji Cabai
Berat biji cabai halus (gr) Volume ekstrak biji Cabai (ml) Persentase kadar zat aktif ml/mg (%) 470 17,4 3,70
Pasca  induksi  inflamasi  dan pemberian  perlakuan  didapatkan  hasil distribusi jenis leukosit seperti pada tabel 2.  Hasil  distribusi  jenis  leukosit  pasca induksi  inflamasi  ( pre  test )  didapatkan
shift to the right pada keenam kelompok, dimana  limfosit  menjadi  jenis  leukosit yang  paling  mendominasi  dan  memiliki proporsi di atas normal.
Pasca  perlakuan  ( post  test ) terjadi perubahan distribusi jenis leukosit, dimana  penurunan  proporsi  limfosit  ke arah  normal  terjadi  pada  kelompok ekstrak Capsicum  annuum dan  keempat kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan terapi  OAINS.  Pada  kelompok  ekstrak Capsicum  annuum terjadi  penurunan proporsi  limfosit  terbesar  dibandingkan keempat kelompok kontrol lain, yaitu dari awalnya  92,20%  ±  0,55%  ke  72,00%  ± 4,85%.
Tabel  2  menunjukkan  kelompok ekstrak Capsicum  annuum menjadi kelompok  yang  paling  baik  dalam menurunkan  limfosit  sebagai  komponen sel  leukosit  utama  pada  sampel  ( Rattus norvegicus ). Hal ini menandakan potensi dari ekstrak Capsicum annuum yang jauh lebih  baik  dalam  menghambat  migrasi limfosit  bila  dibandingkan  kelompok kontrol  positif  yang  diberikan  OAINS.
Sedangkan  kelompok  kontrol  negatif yang tidak diberikan anti inflamasi, terjadi peningkatan limfosit dan proporsi limfosit yang bermakna di atas normal.
Berdasarkan  hasil  analisis  data menggunakan paired  T-test didapatkan hasil  yang  signifikan  ( P  value <  0,05) pada  perubahan  hasil  hitung  jenis neutrofil  segmen  ( P =0,048),  limfosit ( P <0,001),  dan  monosit  ( P =0,002)  di kelompok  ekstrak Capsicum  annuum pada sebelum  dan  sesudah  pemberian perlakuan.
Sedangkan  berdasarkan  analisis data  terhadap  perbedaan  hasil  distribusi jenis leukosit pasca perlakuan ( post test ) menggunakan One  way  ANOVA pada keenam kelompok, perbedaan hasil yang signifikan  terjadi  pada  jumlah  neutrofil batang  ( P =0,024),  neutrofil  segmen ( P =0,024), dan limfosit ( P =0,009). Sementara  hasil  yang  tidak  signifikan terdapat  pada  jumlah  basofil  ( P= 0,219), eosinofil  ( P= 0,226),  dan  monosit  ( P= 0,136).
Pasca pemberian perlakuan juga dilakukan  pemeriksaan  terhadap  hitung jumlah  leukosit  dan  LED.  Berdasarkan hitung jumlah leukosit didapatkan jumlah leukosit  kelompok  ekstrak Capsicum annuum menunjukkan  nilai  yang  lebih kecil  dari  keempat  kelompok  kontrol positif yang diberikan OAINS, yaitu 5.020 ±  2.071  sel/  mm 3 .  Sedangkan  dari perhitungan  LED  didapatkan  hasil  yang tidak  terlalu  berbeda  antar  kelompok ekstrak Capsicum  annuum dengan keempat  kelompok  kontrol  positif  yang diberikan  OAINS  seperti  pada  tabel  3. Meskipun  kelompok  ekstrak Capsicum annuum selalu  berada  pada  nilai  yang paling  rendah  dibandingkan  kelompok kontrol positif yang diberikan OAINS.
Tabel 3. Hasil Pemeriksaan Hitung Jenis Leukosit dan LED Kelompok Hitung Jumlah LED Aspilet 7.220 (±3.015) 2,00 (±1,00) Parasetamol 6.340 (±1.447) 2,60 (±1,34) Ibuprofen 6.830 (±2.671) 2,20 (±0,84) Asam mefenamat 5.420 (±2.389) 3,20 (±1,30) Capsicum annumm 5.020 (±2.071) 2,00 (±1,26) P-value 0,209 0,174 Berdasarkan  hasil  analisis  data terhadap hitung jumlah leukosit dan LED pasca perlakuan menggunakan One way ANOVA didapatkan  hasil  perbedaan yang  tidak  signifikan  pada  hitung  jumlah leukosit  dan  LED  sebagai  parameter inflamasi.
Tabel 2. Hasil Pemeriksaan Hitung Jenis Leukosit (Persen)
Jenis leukosit Kontrol Aspilet Para- setamol Ibu- profen Asam mefenamat Capsicum annumm Basofil Pre test 0,60 (±0,55) 0,00 (±0,00) 0,20 (±0,45) 0,40 (±0,55) 0,60 (±1,34) 0,00 (±0,00) Post test 0,00 (±0,00) 1,20 (±1,64) 0,00 (±0,00) 1,71 (±0,89) 0,00 (±0,00) 0,20 (±0,45) P 0,070 0,178 0,347 0,621 0,347 0,374 Eosinofil Pre test 1,80 (±1,10) 0,20 (±0,45) 1,40 (±0,55) 0,40 (±0,55) 1,40 (±2,60) 0,60 (±0,89) Post test 1,20 (±1,64) 0,80 (±0,84) 0,00 (±0,00) 0,40 (±0,89) 1,20 (±1,64) 0,20 (±0,45) P 0,501 0,070 0,157 1,000 0,910 0,477 Neutrofil Batang Pre test 3,80 (±2,28) 1,20 (±1,10) 2,00 (±1,45) 3,00 (±2,55) 3,60 (±4,16) 1,20 (±1,64) Post test 0,40 (±0,55) 1,20 (±1,30) 0,80 (±0,84) 2,00 (±1,22) 3,40 (±2,30) 2,60 (±1,67) P 0,048 1,000 0,330 0,473 0,943 0,338 Neutrofil Segmen Pre test 26,80 (±7,4) 12,40 (±4,72) 9,00 (±5,10) 11,60 (±4,78) 16,20 (±14,69) 5,60 (±1,95) Post test 4,60 (±3,29) 7,60 (±2,88) 3,60 (±2,07) 8,80 (±5,72) 12,00 (±4,58) 11,00 (±5,43) P 0,003 0,208 0,139 0,025 0,537 0,048 Limfosit Pre test 62,60 (±10,46) 83,20 (±6,18) 85,00 (±3,67) 78,60 (±0,55) 76,40 (±15,95) 92,20 (±0,55) Post test 88,20 (±6,46) 71,80 (±9,34) 80,40 (±4,83) 76,80 (±6,69) 66,60 (±14,79) 72,00 (±4,85) P 0,001 0,008 0,002 0,043 0,149 0,000 Monosit Pre test 5,80 (±4,32) 3,00 (±1,87) 2,60 (±0,89) 7,60 (±4,50) 2,20 (±2,59) 0,40 (±0,89) Post test 5,60 (±2,60) 17,40 (±12,22) 15,20 (±6,76) 11,80 (±1,30) 17,00 (±9,51) 16,00 (±0,55) P 0,916 0,076 0,043 0,123 0,390 0,002

## 4. PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat  dilihat  adanya  potensi  anti inflamasi dari ekstrak Capsicum annuum. Pada  inflamasi  sendiri  terjadi  reaksi berantai  yang  disebabkan  peningkatan mediator  atau  sitokin  pro-inflamasi.  Hal ini  memicu  perubahan  permeabilitas vaskuler,  udem,  hingga  mingrasi  sel-sel peradangan  (leukosit).  Beberapa  jenis tanaman  dan  komponen  di  dalamnya seperti  polifenol,  asam  askorbat,  dan capsaicinoid memiliki potensi yang besar untuk  menghambat  terjadinya  proses inflamasi  tersebut,  sehingga  menjadi kandidat  utama  sebagai  agen  anti infalamasi. [8],[17]
Capsaicin  pada Capsicum dapat menginaktivasi nuclear transcription factor  kappa -B  (NF- кB )  serta  inhibisi produksi  beragam  mediator  inflamasi seperti  prostaglandin  E-2  (PEG-2), nitric oxide (NO),  sitokin  pro-inflamasi tumor necrosis  factor- α  (TNF - α),  Interleukin -1
(IL-1)  dan  interleukin-6  (IL-6).  Dimana inhibisi  PEG-2  dan  NO  menyebabkan kebocoran  vaskuler  serta  perubahan permeabilitas  vaskuler,  sedangkan  TNF- α dan IL -1 berperan pada migrasi sel-sel peradangan. [18],[19] Capsaicin  pada Capsicum tidak hanya  berperan  mengikat  reseptor TRVP1  yang  menyebabkan  hambatan tranduksi  nyeri.  Sebagai  anti  inflamasi, capsaicin  juga  dapat  mengaktivasi  jalur TRVP1  yang  menyebabkan  penurunan sitokin  pro-inflamasi  dan  permeabilitas vaskuler. [14],[20]
Meskipun  demikian  potensi  anti inflamasi dari ekstrak Capsicum  annuum belum  terlihat  secara  signifikan  dalam penelitian  ini  untuk  menurunkan  jumlah leukosit  dan  LED.  Hal  ini  dapat disebabkan  penggunaan  biji Capsicum annuum yang  secara  umum  memiliki kadar flavonoid  dan  senyawa  fenol  yang lebih  tinggi,  sehingga  memiliki  aktivitas antioksidan yang lebih dominan.
Sedangkan  capsaicin  sebagai  senyawa yang  diharapkan  efek  anti  inflamasinya dalam  penelitian  ini lebih  banyak  berasa pada  bagian  buah Capsicum dari  pada bagian biji Capsicum . [5]

## 5. KESIMPULAN
Berdasarkan  pembahasan  dan analisis data, dapat disimpulkan terdapat
perubahan  distribusi  jenis  leukosit  yang terjadi  antara  sebelum  dan  setelah pemberian  ekstrak Capsicum  annuum . Perubahan yang bermakna dari distribusi jenis  leukosit  terjadi  pada  neutrofil segmen,  limfosit,  dan  monosit.  Jika dibandingkan  antara  kelompok  ekstrak Capsicum  annuum dengan  kelompok kontrol  positif  dan  kontrol  negatif didapatkan  perbedaan  distribusi  jenis leukosit  yang  signifikan,  terutama  pada proporsi neutrofil batang, neutrofil segmen, dan limfosit.
Sedangkan  berdasarkan  hasil hitung  jumlah  leukosit  dan  LED,  tidak ditemukan  perbedaan  yang  signifikan pada  keduanya,  yaitu  diantara  kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak Capsicum annuum dan kelompok kontrol positif  yang  diberikan  OAINS.  Meskipun demikian hitung jumlah leukosit dan LED pada  kelompok  yang  diberikan  ekstrak Capsicum  annuum menunjukkan  hasil yang  lebih  kecil  dari  kelompok  lain  yang diberikan OAINS.

## 6.   SARAN
Peneliti  menyerankan  penelitian berikutnya untuk menggunakan capsaicin yang  sudah  terstandarisasi,  yaitu  hasil isolasi  murni  dari  ekstrak Capsicum annuum untuk  menghindari  pengaruh dari  zat  metabolit  sekunder  lainnya. Peneliti  juga  menyarankan  untuk  meng- gunakan  parameter  lain  dalam  menilai efek anti inflamasi yang ditimbulkan.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Baratawidjaja  KG,  dan  Rengganis  I. Imunologi  Dasar.  Edisi  ke-11  ed. Jakarta:  Balai  Penerbit  Fakultas Kedokteran  Universitas  Indonesia,
2014.
2. Arifin  H,  Almahdy  A,  dan  Delvita  V. Pengaruh  Pemberian  Vitamin  C Terhadap  Fetus  pada  Mencit  DM. Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi . 12:1 (2007):32-40.
3. Menichini  F,  Tundis  R,  Bonesi  M, Loizzo  MR,  Conforti  F, et  al .  The Influence  of  Fruit  Ripening  on  the Phytochemical  Content  and  Biolo- gical  Activity  of Capsicum  chinense Jacq. cv Habanero. Food Chemistry.
114:1 (2009): 553-560.
4. Mueller  M.,  Hobiger  S.,  dan  Jung- bauer A. Anti-inflammatory activity of
extracts  from  fruits,  herbs  and spices. Food  Chemistry. 122:1 (2010):987-996.
5. Zimmer  AR,  Leonardi  B,  Mirona  D, Schapoval E, de Oliveirac JR, et  al .
Antioxidant  and  anti-inflammatory pro-perties  of Capsicum  baccatum : From  traditional  use  to  scientific approach. Journal  of  Ethnopharma- cology . 139:1 (2012): 228-233.
6. Pengurus  Besar Indonesian  Rheu- matism Association (PB  IRA). Rekomendasi  Perhimpunan  Reuma tologi  Indonesia  Tentang  Obat  Anti Inflamasi  Non  Steroid.  PB  IRA; 2014.  22  Oktober  2016.  <http:// reumatologi.or.id/var/rekomendasi/R ekomendasi_IRA_OAINS_2014.pdf >.
7. Meghvansi  MK,  Siddiqui  S,  Khan MH,  Gupta  VK,  Vairale  MG, et  al . Naga  Chilli:  a  Potential  Source  of Capsaicinoids  with  Broadspectrum Ethno pharmacological Applications. Journal of Ethnopharmacology. 132: 1 (2010): 1-14.
8. Spiller  F,  Alves  MK,  Vieira  SM, Carvalho  TA,  Leite  CE, et  al .  Anti- inflammatory  Effects  of  Red  Pepper ( Capsicum  baccatum )  on  Carra- geenan and Antigen Induced Inflammation. Journal  of  Pharmacy and  Pharmacology. 60:1  (2008): 473-478.
9. Jolayemi    AT,  dan  Ojewole  JAO.
Comparative anti inflammatory properties  of  Capsaicin  and  ethyla Acetate extract of Capsicum frutescens  linn (Solanaceae) in rats. African Health Sciences. 13:2 (2013) : 357-361.
10. Ortega  MH,  Moreno  AO,  Navarro MDH,  Cevallos  GC,  Alvarez  LD, et
al . Antioxidant, Anti-Nociceptive, and Anti-Inflammatory Effects of Carotenoids  Extracted  from  Dried Pepper  (Capsicum  annuum  L.).
Journal of Biomedicine and Biotech- nology . (2012): 1-10. 11. Khabade  VK,  Lakshmeesh  NB,  dan Roy  S.  Comparative  Study  on  Anti oxidant and Anti-Inflammatory Properties  of  Three  Colored  Varie- ties of Capsicum annuum . Int. J.
Fundamental Applied Sci . 1:3 (2012)
: 51-54
12. Deepa  N,  Kaur  C, George  B,  Singh B,  dan  Kapoor  HC.  Antioxidant Constituents in Some Sweet Pepper ( Capsicum  annuum  L .)  Genotypes During Maturity. Food Sci Tech ; 40:1 (2007):121-129.
13. Singh  UP,  Suman  A,  Sharma  M, Singh  J,  Singh  A, et  al .  HPLC Analysis  of  the  Phenolic  Profiles  in Different  Parts  of  Chilli  ( Capsicum annum )  and  Okra  ( Abelmo-schuses culentus  L .)  Moench. The  Int  J Alternative Med . 5:2 (2008): 1-6.
14. López  P,  Gorzalczany  S,  Acevedo C,  Alonso  R,  and  Ferraro  G. Chemical Study and Anti Inflammatory  activity  of Capsicum chacoense and C. baccatum . Brazilian Journal of Pharmacognosy .
22:2 (2012): 455-458. 15. Federer WT. Procedure and Designs  Usefull  for  Screening Material  in  Selection  and  Allocation with a Bibliography. Biometrics . 19:1 (1963): 553-587.
16. Triska  HCD,  Lia  UK,  dan  Kawiji. Optimasi  Ekstraksi  Oleoresin  Cabai Rawit  Hijau  ( Capsicum  Fuitescens L .)  Melalui  Metode  Maserasi. JTP .
1:1 (2012): 58-67.
17. Yoon  JH,  dan  Baek  SJ.  Molecular targets  of  dietary  polyphenols  with anti-inflammatory  properties. Yonsei Med. J 46:1 (2005): 585-596.
18. Kim  CS,  Kawada  T,  Kim  BS,  Han IS,  Choe  SY, et  al. Capsaicin exhibits  anti-inflammatory  property by  inhibiting  IkB-a  degradation  in LPS-stimulated  peritoneal  macro- phages. Cell  Signal .  15:1  (2003):
299-306.
19. Liu  Y,  dan  Nair  MG.  Capsaicinoids in  the  hottest  pepper  Bhut  Jolokia and  its  antioxidant  and  anti  inflam- matory  activities. Natural  Product Com . 5:1 (2010): 91-94.
20. Alawi  K,  dan  Keeble  J.  The paradoxical  role  of  the  transient receptor  potential  vanilloid  1  recep- tor in inflammation. Pharmacol Ther. 125:1 (2010):181-195