## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN TAPAK LIMAN (Elephantopus  Scaber  L) TERHADAP  BAKTERI SHIGELLA DYSENTERIAE DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM
The effectiveness of liman tread leaves (Elephantopus Scaber L) ethanol extract against shigella dysenteriae bacterial by disc diffusion method

## Sri Wahyuni Nasution , Nursoleha Lubis, Baby Cikita Lestari
Zendrato, Saharan R Silaban Universitas Prima Indonesia
Email: sriwahyuni_nst88@yahoo.com
Abstract Dysentery  is  an  inflammation  of  the  intestine  caused  by  shigella  bacteria  which  can  lead  to physiological disorders and becomes a health problem that needs to be considered. Liman Tread Leaves  (  Elephantopus  scaber)  contains  high  flavonoid  compounds,  phenols  and  saponins which  are  reported  to  have  antioxidants,  antibacterial,  antiviral  and anti-inflammation. This study aims to find out the activity of ethanol extract of liman tread leaves ( Elephantopus Scaber L) as an antibacterial and to find out the minimum microbial death rate value for Shigella spp bacteria. This research uses the True Experimental Post-Test Only Control Group Design where Liman Tread Leaves are extracted by maceration method and placed on MHA media overgrown by bacteria. Based on the statistics test results using regression test, the t-count value is 4,336 > 2,178 showing an influence of Liman Tread Leaf extract with a bland zone of 65.4%.
Keywords: Dysentery, Liman Tread Leaves, Shigella, Antibacterial
Abstrak Penyakit disentri  merupakan peradangan pada usus yang disebabkan oleh bakteri shigella dan dapat  menimbulkan  gangguan  fisiologis  tubuh  sehingga  penyakit  ini    menjadi  masalah kesehatan  yang  perlu  untuk  diperhatikan  .  Daun  Tapak  Liman  ( Elephantopus  Scaber  L) mengandung  senyawa  flavonoid  yang  tinggi,fenol  dan  saponin  yang  dilaporkan  memiliki antioksidan,  antibakteri,  antivirus  dan  antiradang.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas ekstrak etanol daun tapak liman ( Elephantopus Scaber L ) sebagai antibakteri dan untuk  mengetahui  nilai  kadar  bunuh  minimal  untuk  bakteri  Shigella  sp.  Penelitian  ini menggunakan rancangan penelitian True Experimental Post-Test Only Control Group Design dimana  Daun  Tapak  Liman  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dan  diletakkan  pada  media MHA  yang  ditumbuhi  oleh  bakteri  .  Berdasarkan  hasil  uji  statistic  menggunakan  uji  regresi didapatkan nilai t hitung 4,336 > 2,178 sehingga terdapat pengaruh ekstrak Daun Tapak Liman dengan zona hambat sebesar 65,4%.
Kata Kunci : Disentri, Daun Tapak Liman ( Elephantopus Scaber L ) , Shigella , Antibakteri

## PENDAHULUAN
Disentri  merupakan  peradangan  di  usus yang  menyebabkan  bab  cair  pada  penderita  serta ditemukannya  feses  bercampur  darah  dan  lendir (Wulandari and Purwaningsih, 2016).
Pada umumnya bakteri patogen yang paling sering    menyebabkan  gejala  diare  berat  yaitu shigella  dysenteriae.  Transmisi  shigella    terjadi secara fekal-oral langsung atau dengan mengkonsumsi  makanan  dan  minuman  yang terpapar oleh shigella. Masa inkubasi dari disentri ini  sendiri  adalah  1-7  hari  dan  gejalanya  dapat berlangsung  selama  1-2  minggu  (Zakwan et  al. , 2018) . Bakteri  shigellosis  dapat  menimbulkan gejala  diare  serta dehidrasi  yang  ringan  dan  berat sehingga  bakteri  ini  menjadi  penyebab  tingginya angka kesakitan  dan  kematian terutama  di  negara berkembang  (Wulansari,  Suswati  and  Wahyudi, 2018)
Menurut  laporan  data  WHO  (  Organisasi Kesehatan Dunia ) , kasus diare yang terjadi secara global sebanyak 4 miliar di tahun 2000 dengan 2,2 juta kasus diantaranya meninggal dunia dan lebih banyak  anak-anak  berusia  kurang  dari  5  tahun (Ferdi and Saleh, 2019)
Saat  ini,  dalam  hal    mengobati  disentri basiler terbatas hanya pada penggunaan antibiotik. Penggunaan  antibiotik  jangka  panjang  dan  dosis yang  tidak  tepat  mengakibatkan    terjadinya resistensi,  bahkan  dapat  menimbulkan  gangguan fungsi  beberapa  organ  seperti  jantung  berdebar- debar,  irama  jantung  abnormal  hingga  rusaknya fungsi hati yang menyebabkan penyakit kuning.
Keanekaragaman  tanaman  yang  tumbuh  di Indonesia sebagai alternatif pengganti obat-obatan yang  mengandung  bahan  kimia.  Salah  satunya bahan  nabati  yang  dikenal  masyarakat  memiliki potensi mengobati berbagai penyakit adalah  Daun Tapak Liman ( Elephantopus Scaber L ).     Daun tapak  liman  adalah  tumbuhan  herbal  yang mempunyai  nama  latin elephantopus  Scaber  L . Daun  tapak  liman  salah  satu  jenis  kelas  dari tumbuhan  asteracease  dan  sub  asteridae.  Secara empiris  daun  dan  akar  dari    tanaman  E.scaber memiliki  banyak  kegunaan  seperti  mengobati demam,malaria,batuk,sariawan  di  mulut  dan anemia  (Djarot,  Rahmadini  and  Utami,  2019). Manfaat  lain  yang  dapat  ditemukan  dari  E.scaber ini  yaitu  sebagai  antimikroba  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri  gram positif dan bakteri gram negatif karena tumbuhan ini mengandung senyawa flavonoid yang
tinggi,fenol  dan  saponin  yang  dilaporkan memiliki  antioksidan,  antibakteri,  antivirus, anti radang (Fitriani, 2018).

## METODOLOGI
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental. Bentuk desain penelitian yang dipilih  adalah Post-Test  Only  Control  Group Design .

## Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan pada tanggal 16 Juli  sampai  22  September  2020  bertempat  di Laboratorium
Mikrobiologi
Fakultas
Kedokteran  Universitas Prima Indonesia.

## Sampel dan Penelitian
Sampel pada penelitian  ini adalah Daun Tapak  Liman  ( Elephantopus  Scaber  L )  yang diperoleh  dari  tanaman  liar  yang  tumbuh  di daerah  kota Medan, Sumatera Utara.

## Metode Pengumpulan Data
Data  penelitian  ini  merupakan  data primer yang artinya  mengamati zona hambat yang terbentuk pada berbagai konsentrasi dari ekstrak  Daun  Tapak  Liman  ( Elephantopus Scaber  L )  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae .

## Bahan dan Cara
Pada  penelitian  ini    dilakukan  4 kelompok  perlakuan  dan  dilakukan  kontrol positif serta control negatif yaitu :
a. Kelompok  1  :  Ekstrak  daun tapak liman 2,5%
b. Kelompok  2  :  Ekstrak  daun tapak liman 5%
c. Kelompok  3  :  Ekstrak  daun tapak liman 7,5%
d. Kelompok  4  :  Ekstrak  daun tapak liman 10%
e. Chloramfenicol sebagai kontrol positif f. Aquades sebagai kontrol negative
Alat  yang  digunakan  :  Cawan  petri, tabung reaksi, kertas saring, pisau, gelas ukur, autoclave,  incubator,  kertas  cakram,  cotton swab,  pinset  anatomis,  kapas  steril,  jangka sorong, pipet tetes, labu erlenmeyer, alumunium  foil,  alat  tulis,  laminar  air  flow timbangan analitik, rak tabung reaksi.

## S W NASUTION, N LUBIS, B C L ZENDRATO, S R SILABAN
Alat  yang  digunakan  Daun  tapak  liman ( Elephantopus Scaber  L ),  bakteri  (Shigella dysentriae), pelarut etanol 70%, aquabidest,aquadest,  alkohol,  NaCl,  cakram  uji kosong  dan  cakram  uji  chloramphenicol,  media NB, media Mueller-Hinton Agar (MHA).

## Pembuatan Ekstrak Daun Tapak Liman
Daun Tapak Liman 1 kg dicuci bersih,dikeringkan dan dihaluskan hingga diperoleh sebanyak 500 gram kemudian direndam dengan  etanol  5  L.  Wadah  maserasi  ditutup  dan disimpan  selama  3x24  jam  di  tempat  yang  tidak disinari  matahari  secara  langsung  dengan  setiap 1x24 jam diaduk.Lakukan penyaringan & pisahkan ampas dengan filtratnya. Tuangkan kembali etanol yang baru pada sisa ampas dan dilakukan dengan 3 kali  pengulangan.  Setelah  itu,  simplisia  disaring menggunakan  kertas  saring  dan  dimasukkan kedalam rotary  evaporator pada  temperatur  70- 80 o C  hingga  hasilnya  berupa  ekstrak  kental  dan lakukan  penimbangan  dengan  timbangan  analitik sesuai dengan konsentrasi yang dibutuhkan.

## Pembuatan Konsentrasi
Hasil ekstraksi diuapkan kembali pelarutnya menggunakan  alat rotary  evaporator pada  suhu 40 o C  hingga  ekstrak  kental.    Ekstrak  kental  daun tapak  liman  dibuat  dalam  berbagai  konsentrasi, yaitu  2,5%,  5%,  7,5%  dan  10%  dengan  pelarut aquades.

## Pembuatan Media Mueller-Hinton Agar (MHA)
Sebanyak  34  gram  medium  disuspensikan ke dalam 1 liter aquades kedalam labu erlenmeyer lalu diaduk dengan menggunakan hot plate  stirrer selama  1  menit  atau  hingga  larut.  Selanjutnya disterilkan dengan autoclave selama 15 menit pada suhu 121°C dengan tekanan 1,5 lbs. Setelah selesai media  agar  langsung  dituangkan  ke  dalam  cawan petri dan didinginkan hingga agar membeku.

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Koloni bakteri Shigella Dysentriae didapatkan dari biakan murni kemudian digoreskan memakai  ose  steril  pada  media  NB.  Kemudian inkubasi  bakteri  pada  temperatur  37˚C  selama  24 jam. Bakteri yang tumbuh pada media ditunjukan dengan  warna  media  menjadi  kuning  kekeruhan. Suspensi bakteri dari media NB dipindahkan ke 4- 5 ml media BHI dan diinkubasi (kira-kira 2-6 jam) pada temperatur 37˚C  sampai mencapai kekeruhan yang  sama  dengan  0,5  McFarland.  Setelah disamakan dengan standar McFarland menggunakan  steril  saline,  suspense  bakteri
diencerkan  100  kali  sehingga  konsentrasinya 10 6 CFU/mL. Suspense ini kemudian dipakai untuk pengujian antibakteri.

## HASIL

## Uji Fitokimia

## Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia
Berdasarkan hasil uji skrining fitokimia pada  tabel  1  diketahui  bahwa  ekstrak  daun tapak  liman  ( Elephantopus  Scaber  L ) memiliki  kandungan  kimia  berupa  alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, Triterpenoid /steroid, dan polifenol .

## Perbandingan diameter zona hambat
Ekstrak daun tapak liman ( Elephantopus Scaber L ) terhadap pertumbuhan bakteri Shigella disentri menggunakan metode difusi cakram ditunjukkan dengan adanya zona hambat atau zona  bening  disekitar  kertas  cakram.  Zona hambat  diukur  dengan  menggunakan  jangka sorong. Hasil penelitian menggunakan
No Golongan Senyawa Nama Pereaksi Warna yang terbentuk Ha- sil 1. Alkaloid Meyer Kuning - Dragendorf f End.kunin g jingga + Bouchart End. Merah Coklat + 2. Tanin Air  panas  + FeCl 3 10 % Hijau kebiruan + 3. Saponin Air  panas  + HCL 2N Terbentuk busa  yang stabil + 4. Flavonoid HCL  pekat + serbuk Mg Kuning + 5. Triterpenoid /steroid Lieberman – burchat Hijau kebiruan + 6. Glikosida Gula LP molish Tidak terbentuk cincin ungu _ 7. Glikosida non gula Liebermann Burchard Putih bening - 8. Glikosida Antrakuinon CCl 4 + ammonia encer Lapisan ammonia berwarna coklat - 9. Polifenol FeCl 3 1 % Hijau Kehitaman +
konsentrasi K(+), K(-), 2,5%, 5%, 7,5%, dan 10%. Didapatkan  zona  hambat  yang  tercantum  pada tabel dan gambar berikut :
Tabel  2  :  Diameter  Zona  Hambat  Bakteri Shigella Disentri
Konse- ntrasi Diameter Zona Hambat (mm) Rata- rata Petri Ke-1 Petri Ke-2 Petri Ke-3 2,5% 10,0 9,8 8,2 9,3 5% 11,6 10,7 10,2 10,8 7,5% 11,9 11,2 10,9 11,3 10% 12,4 11,9 11,2 11,8 K+ 33,0 32,5 30,0 31,8 K- 0 0 0 0
Berdasarkan  tabel  2  menunjukkan  bahwa terjadi  peningkatan  zona  hambat  terhadap pertumbuhan  bakteri Shigella  Disentri pada  daun tapak  liman  ( Elephantopus  Scaber  L )    dari konsentrasi 2,5% (9,3 mm), 5% (10,8 mm), 7,5% (11,3 mm), 10% (11,8mm), K+ (31.8 mm), dan K- (0).
Gambar  1  :  Diameter  zona  Zona  Hambat Ekstrak  Daun  Tapak  Liman  (Elephantopus Scaber  L)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Shigella Disentri
Gambar 2 : Grafik diameter Ekstrak Daun Tapak  Liman  (Elephantopus  Scaber  L) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Shigella
Disentri. Tabel 3. Uji Normalitas Konsentrasi Sig. Kesimpulan 2,5% 0,19 Normal 5% 0,68 Normal 7,5% 0,57 Normal 10% 0,82 Normal K+ 0,3 Normal Hasil uji normalitas di atas menunjukkan  bahwa  data  zona  hambat  pada masing-masing konsentrasi berdistribusi
normal karena nilai sig. > α (0,05).
Tabel  4.  Uji  Homogenitas  : Test  of
Homogeneity of Variances Zona Hambatan Ekstrak Daun Tapak Liman Levene Statistic df1 df2 Sig. 2.532 4 10 .106 Hasil uji homogenitas di atas menunjukkan  bahwa  varians  data  homogen karena nilai sig. > α (0,106 > 0,05) sehingga pengujian One  Way  ANOVA dapat  dilakukan karena  asumsi  normalitas  dan  homogen terpenuhi.

## Tabel 5. Uji One Way ANOVA
Zona hambatan ekstrak daun tapak liman
Sum of Squares df Mean Square F  Sig. Between Groups 1068.90 0 4 267.22 5 285 .09 1 .000

## S W NASUTION, N LUBIS, B C L ZENDRATO, S R SILABAN
Within Groups 9.373 10 .937 Total 1078.27 3 14
Berdasarkan  hasil  uji  anova  diperoleh  nilai signifikan 0,00 apabila nilai signifikan < α = 0,05, maka  rata-rata  kelima  daun  tapak  liman ( Elephantopus Scaber L ) sama.
Tabel 6. Regresi Sederhana Model Summary Model R R Square Adjust ed R Square Std. Error of the Estimate 1 .808 a .653 .618 .7146 a.Predictors:(Constant), Konsentrasi daun tapak liman
Berdasarkan  hasil  uji  regresi  didapatkan  nilai signifikansi  =  0,001  dan  nilai  t  hitung  sebesar 4,336.

## Tabel 7. Konsentrasi Hambatan Minimum
No. Konsentrasi Daun Tapak Liman (%) Keterangan 1. 2,5 Terdapat zona hambat dengan terbentuknya  zona bening. 2. 5 Terdapat zona hambat dengan terbentuknya  zona bening. 3. 7,5 Terdapat zona hambat dengan terbentuknya  zona bening. 4. 10 Terdapat zona hambat dengan terbentuknya  zona bening.
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) daun tapak liman  yang  digunakan  yaitu  2,5%  (9,3  mm),  5% (10,8 mm), 7,5% (11,3 mm), dan 10% (11,8mm).
Tabel  8  : Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM)
Konsentrasi Ekstrak Daun Tapak Liman (%) Interpretasi Ekstrak Daun Tapak Liman 2,5 Terdapat  zona  bening dengan diameter 10.0 mm 5 Terdapat  zona  bening dengan diameter 11,6 mm 7,5 Terdapat  zona  bening dengan diameter 11,9 mm 10 Terdapat  zona  bening dengan diameter 12,4 mm
Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) ekstrak daun  tapak  liman  ( Elephantopus  Scaber  L ) yang  digunakan  yaitu  2,5%  (10,0  mm),  5% (11,6  mm),  7,5%  (11,9  mm),  dan  10% (12,4mm).

## PEMBAHASAN
Aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  daun liman  dapat  diketahui  dengan  pengukuran diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  pada media  nutrient  agar.  Data  yang  didapat menunjukkan ekstrak daun liman mempunyai kemampuan  dalam  menurunkan  jumlah bakteri Shigella  Disentri dengan  cara menghambat pertumbuhan bakteri tersebut. Banyaknya  khasiat  pada  daun  tapak liman  hingga  dapat  digunakan  sebagai  obat astringen,  disentri,  obat  demam,  malaria, batuk,  sariawan  mulut,  anemia  ,  mencret, sariawan mulut. Hasil fitokimia daun E.scaber positif    mengandung  flavonoid,  saponin  & tanin (Prasetyorini, 2019).
Senyawa flavonoid merupakan senyawa polifenol  dengan  15  atom  karbon  yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6, artinya kerangka karbonnya terdiri atas dua gugus C6 (cincin  benzena  tersubstitusi)  disambungkan oleh  rantai  alifatik  tiga  karbon.  Senyawa flavonoid berfungsi  sebagai  antioksidan yang  mampu  menghambat  autooksidasi melalui  mekanisme  penangkapan  radikal bebas, berperan  dalam  menghentikan  dan menetralisir  serta  memperbaiki  kerusakan- kerusakan  yang  terjadi  di  dalam  tubuh (Bustanul  Arifi,  2018).  (Suci  Nurfazri Rismawati1, 2017)
Senyawa tanin dapat  membentuk ikatan yang  stabil  dengan  protein  sehingga  terjadi koagulasi  protoplasma  bakteri.  Senyawa saponin  mampu  mempengaruhi  metabolisme bakteri dengan terjadinya tegangan permukaan pada  dinding  sel  bakteri    hingga  akhirnya terjadi kematian bakteri (Prasetyorini, 2019).
Berdasarkan  hasil  penelitian  diketahui
bahwa  adanya  variasi  diameter  zona  hambat bakteri Shigella Disentri yang terbentuk disebabkan  oleh  perbedaan  konsentrasi  ekstrak daun  liman.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak daun  liman  maka  semakin  besar  diameter  zona hambat  bakteri Shigella  Disentri yang  terbentuk serta  semakin  besar  kemampuan  penghambatan yang ditimbulkan .
Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  Prasetyorini  DKK  2019,  menunjukan bahwa  Ekstrak  etanol  96%  daun  E  scaber mempunyai LDH( Laju Daya Hambat) terhadap S. typhi  yang  berbeda  nyata  dengan  kontrol  positif dan masuk dalam kategori lemah dengan rata-rata LDH  paling  tinggi  4.33  mm  pada  konsentrasi ekstrak 50% . (Prasetyorini, 2019).

## KESIMPULAN
1. Berdasarkan  hasil  penelitian  didapati  nilai  t hitung  sebesar  4,336  >  2,178  sehingga  dapat disimpulkan bahwa “ada pengaruh ekstrak daun tapak liman  ( Elephantopus  Scaber  L )  terhadap pertumbuhan  bakteri Shigella  Disentri sebesar 65,4%  dari  konsentrasi  2,5%  (9,3  mm),  5%
(10,8  mm),  7,5%  (11,3  mm),  10%  (11,8  mm), K+ (31.8 mm), dan K-(0).
2. Kelompok perlakuan yang paling efektif untuk menurunkan  pertumbuhan  bakteri Shigella
Disentri adalah konsentrasi 10 % ekstrak daun tapak  liman  ( Elephantopus  Scaber  L )    dengan zona hambatan 11,8 mm.

## SARAN
1. Disarankan  kepada  penelitian  berikutnya  lebih berhati-hati dalam pembiakan bakteri.
2. Penelitian lebih lanjut melihat efek daun liman yang  bisa  menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella typhi dan Streptococcus pyogene.
3. Disarankan  berhati-hati  dalam  menjaga  alat tetap steril.

## DAFTAR PUSTAKA
Djarot, P., Rahmadini, A. and Utami, N. F. (2019) ‘UJI  ANTIBAKTERI  EKSTRAK  DAUN SAMBUNG  NYAWA  (Gynura  procumbens (Lour.) Merr.) DAN DAUN TAPAK LIMAN (Elephantopus scaber L.) TERHADAP
Salmonella thypi’, Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup , 19(1), pp. 1–11.
Ferdi,  R.  and  Saleh,  M.  I.  (2019)  ‘Uji  Efek
Antibakteri  Propolis  terhadap  Escherichia Coli  Dan  Shigella  Dysenteriae  Secara  In
Vitro’, Uji  Efek  Anti  Bakteri  Propolis terhadap E. Coli , 5(2), pp. 52–61.
Fitriani,  I.  and  P.  R.  (2018)  ‘THE ANTIBACTERIAL MOUTHWASH OF TAPAK  LIMAN  LEAVES  EXTRACT (Elephantopus  scaber  L)  AGAINST Streptococcus mutans’, 3(May), pp. 48– 59.
Wulandari,  D.  and  Purwaningsih,  D.  (2016) ‘Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Suruhan ( Peperomia pellucida L . Kunth  )  Terhadap  Bakteri  Shigella dysentriae’, Jurnal  Farmasi  Indonesia ,
13(2), pp. 171–177.
Wulansari, Y., Suswati, E. and Wahyudi, S. S.
(2018) ‘Uji in vitro Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Batang Sereh (Cymbopogon citratus) terhadap Shigella dysenteriae’, 6(2), pp. 262–266.
Zakwan,  M. et  al. (2018)  ‘lISOLASI BAKTERI  Shigella  sp  DARI  FESES SAPI ACEH DI BPTU-HPT INDRAPURI’, 2(3), pp. 329–334.