## Pengaruh Waktu Ekskresi terhadap Residu Kafein pada Urine Responden Pengkonsumsi Teh Celup Hitam menggunakan
Pereaksi Parry
Anik Eko Novitasari 1 , Nia Nadia Alfatika 2
1 Akademi Analis Kesehatan Delima Husada Gresik, Kabupaten Gresik, Jawa Timur, Indonesia
2 RSIA Nur Ummi Numbi Surabaya, Indonesia
Email : novitasarianik2@gmail.com
Article Info: Received: 7  Oktober 2022 in revised form: 29 November 2022 Accepted: 18  Desember 2022
Available Online: 20 Desember 2022

## ABSTRACT
Addictive substance is NAPZA component. Caffeine is one of addictive  substance  that  has  psychoactive  properties,  induce addicted,  and  as  drug  for  eleminating  drowsiness,  mood enhancer,  performance,  and  vigilance.  This  aim  study  is identification  residual  of  caffeine  in  urine  and  urine  effect excretion time after consumed a tea to caffeine visible in urine. Black  tea  is  one  of  caffeine  source.  Caffeine  reabsorbed  in tubules kidney and excretion through urine . This study use 10 urine  of  human  as  sample  examination.  Each  of  them  get instruction to consuming of 250 ml tea and record the time after consuming tea till urination. The urine extracted by eter using separating  funnel.  The  urine  extract  is  identified  by  Parry Reaction in qualitative method. This study has been shown that all  of  urine  sample  have  contained  caffeine  residual  after consuming tea with green complex colour marked due to Parry Reaction  and  it  visible  from  10  minutes  until  3  hours  after consuming tea. But, this study need some developments about comparing  other  reaction  to  identification  caffeine  in qualitative  method,  quantitative  method  to  show  level  of caffeine  in  and  out  from  body,  and  special  treatment  for subjects. Keywords :
Caffeine; Urine ; Parry method; Excretion
Corresponding Author: Anik Eko Novitasari Akademi Analis Kesehatan Delima Husada Gresik, Kabupaten Gresik, Jawa Timur, Indonesia E-mail: novitasarianik2@gmail.com
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Novitasari,A.E.,Alfatika,N.N. (2022). Pengaruh Waktu Ekskresi terhadap Residu Kafein pada Urine Responden Pengkonsumsi Teh Celup Hitam menggunakan Pereaksi Parry . Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e- Journal), 2(3), 247-256.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2022; 2 (3): 247 –257 ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v2i3.22162

## ABSTRAK
Zat  adiktif  merupakan  bagian  dari  NAPZA.  Kafein  merupakan  salah  satu  contoh  zat  adiktif bersifat  psikoaktif  yang  bekerja  pada  sistem  saraf  pusat,  dapat  menimbulkan  ketagihan,  dan biasanya  masyarakat  menggunakan  kafein  sebagai  obat  untuk  menghilangkan  rasa  kantuk, menambah mood ,  kinerja,  dan  rasa  kewaspadaan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui residu kafein dalam urine dan pengaruh waktu ekskresi urine setelah mengkonsumsi teh untuk melihat  kisaran  waktu  kafein  dapat  terlihat  di  dalam  urin.  Teh  hitam  merupakan  salah  satu sumber kafein. Hubungan kafein dan urine ini juga berkaitan dengan proses metabolisme kafein yang menyatakan bahwa kafein direabsorbsi pada tubulus ginjal dan diekkresikan melalui urine. Penelitian  ini  menggunakan  urine  dari  10  responden  yang  mengkonsumsi  teh.  Setelah  itu, mencatat  waktu  masing-masing  dari  setelah  mengkonsumsi  teh  hingga  waktu  pertama  kali mengeluarkan urine (waktu ekskresi urine). Hasil ekstraksi menggunakan pelarut eter tersebut diidentifikasi  secara  kualitatif  dengan  pereaksi  parry.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa keseluruhan  sampel  urine  responden  setelah  mengkonsumsi  teh  mengandung  kafein  yang ditandai adanya kompleks warna hijau dengan kisaran waktu 10 menit sampai ± 3 jam kafein dapat terlihat di dalam urin. Namun, penelitian ini membutuhkan perkembangan lebih lanjut mengenai  perbandingan  metode  kualitatif  pereaksi  lain  yang  dapat  mengidentifikasi  kafein, metode kuantitatif untuk mengetahui kadar kafein yang telah masuk ke dalam tubuh responden, dan perlakuan khusus kepada responden.
Kata Kunci: Kafein, Urine, Metode Parry, Ekskresi

## 1. Pendahuluan
Zat adiktif merupakan salah satu bagian dari NAPZA (Narkotika, Psikotropika, dan  Zat  Adiktif  lainnya).  Zat  adiktif  juga  diistilahkan  sebagai  zat  psikoaktif  selain Narkotika dan Psikotropika, seperi, alkohol, tembakau, dan kafein [18], karena kembali pada  istilah  NAPZA  yakni  bahan/zat  yang  mempengaruhi  kerja  tubuh,  terutama otak/susunan saraf pusat, yang dapat menyebabkan ketergantungan (dependensi), dan ketagihan  (adiksi),  sehingga  dapat  menimbulkan  gangguan  fisik,  psikis,  dan  funsgi sosial  (Sholihah,  2013).  Zat  adiktif  dapat  menyebabkan  ketergantungan  yang  dapat merubah perilaku ataupun fenomena psikologis. Zat Adiktif ini juga merupakan bahan yang  banyak digunakan  oleh  masyarakat,  karena  jenis  napza  ini  mudah didapatkan, peredarannya banyak di kalangan masyarakat, dan harganya relatif murah, daripada NAPZA golongan Psikotropika yang penggunaannya sedikit akibat sulit didapatkan, dan mahal [4].
Teh  memiliki komponen zat  adiktif,  karena  di  dalam  teh mengandung  kafein dalam  dosis  kecil  yang  dapat  merangsang  tingkat  kewaspadaan,  menghilangkan kantuk,  mengurangi kelelahan,  dan menjadi  bahan  diuretik  [6].  Namun  teh  ( Camellia sinensis )  merupakan  salah  satu  jenis  tumbuhan  yang  memiliki  beberapa  kandungan senyawa antioksidan yang memiliki khasiat bagi kesehatan [5]. Teh menjadi minuman favorit di kancah internasional dimana permintaannya tinggi. Teh memiliki komposisi yang bervariasi seperti pada jenis pengolahannya, umur daun, spesies, asal dan iklim dengan masing-masing memiliki ciri rasa, khasiat kesehatan, dan tingkat kafein yang berbeda-beda. Di Indonesia memiliki 2 macam teh yang banyak dikonsumsi sehari-hari, yakni teh hijau / teh wangi (yang tidak difermentasi) dan teh hitam (yang difermentasi)
[8]. Teh hitam diketahui memiliki kadar kafein yang tinggi karena persiapannya melalui penguapan dari total air daun [19].
Kafein (C 8 H 10 N 4 O 2 ) merupakan salah satu dari zat adiktif dan termasuk alkaloid dari  famili  metilxantin  yang  secara  kimia  diketahui  sebagai  1,3,7-trimetilxantin  serta salah satu golongan obat psikoaktif [10] yang populer di dunia yang dapat ditemukan di beberapa minuman termasuk the [3]. Beberapa studi penelitian melaporkan bahwa kafein  dapat  meningkatkan mood ,  perhatian,  kinerja,  kecepatan  menerima  dan menanggapi  reaksi,  serta  kewaspadaan  [19].  Kafein  bukan  senyawa  berbahaya  [2], walaupun  beberapa  studi  lainnya  menunjukkan  adanya  hubungan  asupan  kafein dengan  risiko  kesehatan.  Bila  asupan  kafein  berlebihan,  akan  meningkatkan  resiko gejala kecemasan, insomnia, wajah memerah, dieresis, gangguan saluran cerna, kejang otot,  berbicara  bertele-tele,  takikardia,  aritmia,  peningkatan  energi  dan  agitasi psikomotor  [18].  Dalam  ilmu  farmakologi  kafein  merupakan  substansi  aktif  yang bergantung pada dosis dan dapat dijadikan stimulan sistem saraf pusat ringan.
Kafein  dimetabolisme  dalam  hati  oleh  sistem  enzim  P450  oksidase  dan dikeluarkan bersama metabolismenya melalui ekskresi urine [10] serta di dalam tubuh manusia,  sebanyak  70%  kafein  akan  diubah  menjadi  paraxanthine,  25%  selanjutnya dimetilasi membentuk Theo-Phyillin dan Theobromin kurang dari 5% mengalami reaksi yang tidak termasuk demetilasi [17]. Metilasi dari theobromin membentuk kafein [21].
Sebanyak  99%  kafein  diketahui  diketahui  memiliki  waktu  absorbsi  45  menit setelah kafein tersebut terkonsumsi, 20% pada tingkat pencernaan dan sebagian besar pada bagian usus kecil. Pada manusia, sebanyak 70% dari 7,5 mg/kg dosis kafein oral akan menurun dalam urine dengan 0,5%-2% diekskresikan tidak termetabolisme dalam urin, kafein urin yang rendah tersebut telah dipaparkan bahwa 98% reabsorbsi kafein dari setiap tubulus ginjal telah terfiltrasi oleh glomerulus. Hal ini juga ditambahkan oleh sumber lain bahwa kafein tidak terakumulasi dalam tubuh dalam jangka waktu panjang melainkan biasanya beberapa jam setelah dikonsumsi, zat tersebut diekskresikan dari tubuh. Pada penelitian Alsabri [1] menyatakan bahwa kafein memiliki volume distribusi 0,5 sampai 0,75 L/kg, serta tidak menunjukkan banyak akumulasi pada banyak jaringan tertentu.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  residu  kafein  dalam  urine  dan pengaruh waktu ekskresi urine setelah mengkonsumsi teh untuk melihat kisaran waktu kafein dapat terlihat di dalam urin.

## 2.  Metode
Rancangan penelitian ini dilakukan secara deskriptif untuk mengetahui gambaran mengenai  residu  kafein  dapat  terlihat  pada  urin  dengan  populasi  penelitian  ialah responden yang telah bersedia mengikuti percobaan dalam penelitian yakni sebanyak 10 orang yang dipilih secara acak dengan mengisi lembar informed consent yang telah disediakan. Sedangkan analisis sampel yang dilakukan dalam penelitian ini yakni urine responden  yang  telah  meminum  teh,  dengan  teknik  pengambilan  sampel  dilakukan secara Random Sampling .
Pengumpulan  data  dalam  penelitian  ini  menggunakan  data  primer  yang diperoleh  dari  hasil  catatan  waktu  ekskresi  urin  responden  dan  hasil  penelitian  di laboratorium,  dengan  menganalisis  data  menggunakan  tabel  dan  diagram  batang. Bahan  penelitian  menggunakan Cobalt  nitrate (Co(NO 3 ) 2 ),  methanol,  aquades, Ammoniak (NH 4 OH) encer, kafein murni dan dietileter.

## Pembuatan Larutan Teh
Tahap  awal  penelitian  ini  yakni  dengan  memberikan  perlakuan  kepada responden yakni dengan memberikan teh celup hitam yang telah diseduh dalam 250 ml air panas selama 5 menit untuk dikonsumsi.

## Instruksi Responden
Para  responden  yang  telah  mendapat  perlakuan  mengkonsumsi  teh,  diminta mencatat waktu dari setelah mengkonsumsi teh hingga keinginan untuk berkemih atau mengeluarkan urine, dan menampung urinnya ke dalam botol steril.

## Pembuatan Reagen Parry dan Persiapan Pereaksi Parry
Reagen parry dibuat dengan menimbang 0,25 gram Co(NO 3 ) 2,, dan ditambahkan methanol 16 ml dengan dilarutkan dalam aquades sebanyak 50 ml dalam labu ukur. Setelah itu, disiapkan ammoniak encer untuk melengkapi pereaksi parry [4].

## Pembuatan Larutan Blanko dan  Standart Kafein
Larutan blanko dibuat dengan aquades yang ditambahkan 1 ml reagen parry dan ammoniak 25%. Larutan blanko ini bertujuan sebagai koreksi reagen dan pelarut yang digunakan  dalam  penelitian  ini.  Larutan  standart  kafein  murni  dibuat  dengan menimbang sebanyak 0,009 gram yang telah dilarutkan dalam 10 ml eter dalam labu ukur.  Kemudian,  larutan  standart  ini  direaksikan  dengan  pereaksi  parry  yang  telah dibuat,  yaitu  dengan  meneteskan  larutan  standart  kafein  murni  beberapa  tetes  dan beberapa tetes pereaksi parry yang terdiri dari reagen parry dan dan NH 4 OH encer. Bila terdapat  kafein,  maka  akan  menunjukkan  reaksi  kompleks  warna  hijau.  Pembuatan larutan standart ini bertujuan untuk membandingkan larutan kontrol positif yang akan dibuat selanjutnya.

## Pembuatan Larutan Kontrol Negatif dan Kontrol Positif
Kontrol negatif dibuat dengan mencampurkan urin yang tidak mengkonsumsi makanan/minuman  berkafein  atau  tidak  ditambahkan  kafein  secara  sengaja. Kemudian, ditambah 5 ml eter, dan dimasukkan di corong pisah. Pada saat di corong pisah,  larutan  digojok  pelan.  Fasa  yang  diatas  dibuang  dan  fasa  yang  dibawah direaksikan dengan rangkaian pereaksi parry dengan memindahkan ke tabung reaksi dan diuapkan beberapa menit. Selanjutnya diteteskan beberapa tetes reagen parry dan ammonia encer. Cara ini diterapkan pada pembuatan larutan kontrol positif maupun ke uji  penelitian  responden.  Bila  hasil  larutan  kontrol  negatif  tidak  mengandung  kafein maka larutan tidak akan menunjukkan kompleks warna hijau.
Kontrol  positif  dibuat  dengan  mencampurkan  urin  yang  tidak  mengkonsumsi makanan/minuman  berkafein.  Namun,  ditambahkan  secara  sengaja  dengan  kafein murni  dan  direaksikan  dengan  rangkaian  pereaksi  parry.  Bila  hasil  positif  kafein menunjukkan warna biru tua atau hijau. Hasil kontrol positif ini dibandingkan dengan larutan standart kafein murni.

## Uji Penelitian Urine Responden
Urine  responden  yang  dimaksud  ialah  urin  responden  yang  telah  mendapat perlakuan untuk mengkonsumsi teh. Urine tersebut direaksikan dengan pereaksi parry. Bila  hasil  positif  kafein  menunjukkan  warna  biru  tua  atau  hijau.  Uji  penelitian  urine responden ini dibandingkan kontrol negatif dan kontrol positif yang telah dibuat.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Penelitian ini dilakukan dengan menyeduhkan teh celup dalam air panas 250 ml selama  5 menit,  hal  ini  biasanya  dilakukan  oleh  sebagian  masyarakat, dan  bertujuan supaya  kafein  teh  dapat  terekstrak  dengan  baik  pada  rentang  waktu  tersebut. Sedangkan menggunakan air panas bertujuan untuk melarutkan kafein, sebab kelarutan kafein  akan  naik  dalam  air  panas    [13] dan mempertahankan  kualitas  senyawa yang diinginkan  [5].  Kemudian,  larutan  diberikan  kepada  10  responden  masing-masing sebanyak  250  ml  untuk  diminum.  Selanjutnya,  masing-masing  responden  diminta untuk mengeluarkan urine  dan mencatat waktu reaksi dari setelah mengkonsumsi teh hingga mengeluarkan urine. Urine yang didapat diekstraksi dengan eter dengan corong pisah.  Kemudian,  hasil  ekstraksi  direaksikan  dengan  reagen  parry.  Hasil  identifikasi terdapat pada tabel 1 dan gambar 2.

## Tabel 1 Hasil Identifikasi Kafein dalam Urine
Suatu zat mengandung kafein, akan menghasilkan kompleks warna hijau [11, 12]. Reaksi  kimia  kafein  dengan  pepereaksi  parry  tersaji  pada  gambar  1.  Ion  kobalt  (Co) dalam pereaksi tersebut akan membentuk kompleks berwarna hijau, dimana ion kobalt bermuatan dua positif sehingga dapat memungkinkan mengikat gugus nitrogen yang terdapat pada senyawa kafein.
Gambar 1. Reaksi kimia kafein dengan pepereaksi parry [14].
Penelitian  ini  membutuhkan  sampel  berupa  urine  dari  responden  yang  telah diberikan perlakuan tersebut. Hal ini dilakukan berdasarkan kafein direabsorbsi dalam tubulus ginjal, maka hanya 3% kafein bahkan kurang, diekskresikan tidak berubah oleh ginjal  pada  urine  [1].  Menurut  suatu  penelitian  menunjukkan  bahwa  produk  akhir kafein di dalam tubuh manusia yakni 1 metil asam urat dan 1,3 dimetil asam urat dalam
Urin Waktu reaksi Ekskresi Urin (menit) Hasil Urin (+ / -) warna R1 10 + hijau R2 15 + hijau R3 10 + hijau R4 30 + hijau R5 30 + hijau R6 135 + hijau R7 125 + hijau R8 165 + hijau R9 185 + hijau R10 210 + hijau
jumlah  masih  ditemukan  secara  utuh  pada  urine  [17],  dan  metilasi  teobromin membentuk kafein [21]. Alasan selanjutnya megenai sampel urin yang digunakan pada penelitian  ini  karena  menurut  Nehlig  [15]  bahwa  pada  manusia  sekitar  70%  dari  7,5 mg/kg dosis oral kafein menyurut dalam urine, dengan kisaran 0,5%-2% diekskresikan tidak  termetabolisme  di  dalam  urine  .  Ekskresi  kafein  urin  yang  rendah  tersebut diperjelas lagi dengan 98% kafein terserap dari tubulus ginjal setiap kali difiltrasi oleh glomerulus.
Gambar 2. Larutan Blanko (A), Larutan Kafein (B), Murni Larutan blanko, kafein murni, kontrol positif, kontrol negatif, dan hasil urin responden 1 (C)
Metabolisme  kafein  awal  mulanya  berada  dalam  hati.  Beberapa  studi menunjukkan bahwa sebagian besar kafein (>80%) dimetabolisme di dalam hati [1]. Hati memiliki  serangkaian  reaksi  metabolisme  kafein.  Berbagai  enzim  metabolisme  yang terlibat  dalam  jalur  metabolisme  kafein.  Enzim  tersebut  yakni  N-asetiltransferasi  2 (NAT2), xanthine oxidase (XO), dan sitokrom P450. Enzim sitokrom P450 mempunyai dua isoenzim yakni berupa CYP1A2 (1A2) dan CYP2A6 (2A6). Keempat enzim tersebut terlibat dalam metabolisme kafein dan aktivitas metabolismenya dapat bervariasi pada individu.  Metabolisme  tersebut  menghasilkan  campuran  N-metilasi,  asam  urat,  dan urasil  asetat,  sebagai  metabolitnya.  N-Asetiltransferase-2  (NAT2)  juga  terlibat  dalam metabolisme  kafein  dan  mengkatalisis  konversi  dari  paraxantin  ke  5-aselitamino-6- formilamino-3-metilurasil, dan oksidasi xantin mengkatalisis konversi 1-metilxantin ke 1-meil asam urat. Namun, sistem enzim oksidase sitokrom P450 (khususnya CYP1A2) bertanggung  jawab  lebih  dari  95%  dari  metabolisme  kafein  yang  utama  yakni paraxantin,  teofilin,  dan  teobromin.  Namun,  menurut  Thorn  dkk,  2012,  jalur  utama metabolisme kafein pada manusia yakni sekitar (70-80%) yang melewati demetilasi pada paraxantin yang telah diketahui sebagai 1,7 dimetil xantin. Reaksi ini dibawa keluar oleh CYP1A2 dalam hati.
Berkenaan dengan distribusi kafein yang menurut Nehlig bahwa kafein memasuki bagian jaringan yang berair dan terdisitribusi di seluruh cairan tubuh seperti plasma darah, cairan otak ( cerebrospinal ), air lir ( saliva ), empedu, ASI, dan semua organ. Namun kafein dan metabolitnya tersebut tidak berakumulasi di dalam tubuh, yang ditunjukkan dengan  penelitian  pada  tikus  oleh  penelitian  sebelumnya  dengan  menggunakan molekul  radiolabel.  Kafein  cukup  lipofilik  untuk  menyebrangi  semua  membran  sel,
A B C
termasuk  penghambat  darah  otak  dan  plasenta,  yanag  berlawanan  pada  metabolit dimetilxantinnya [15].
Pada  penelitian Alsabri  [1]  kafein  secara  cepat  diabsorbsi  dari  usus  halus  pada nilai  konstanta  absorbsi  sekitar  0,33  menit,  dan  waktu  maksimum  untuk  mencapai konsentrasi  plasma  bervariasi,  berkisar  antara  15  menit  dan  2  jam,  dengan  memiliki volume  distribusi  0,5  sampai 0,75  L/kg,  serta  tidak menunjukkan  banyak  akumulasi pada banyak jaringan tertentu. Kemudian, kafein dan metabolitnya dapat diidentifikasi melalui  urine  Kim  dkk,  2019.  Hasil  dari  salah  satu  metabolit  utama  kafein,  yakni teobromin akan memetilisai membentuk kafein [21].
Hasil  10  urine  responden  setelah  mengkonsumsi  teh  dalam  penelitian  ini menunjukkan bahwa keseluruhan telah mengandung kafein dalam urine. Hal ini bisa terjadi,  sebab  di  dalam  tubuh  kafein  tidak  terakumulasi  dalam  tubuh  dalam  jangka waktu  panjang  melainkan  biasanya  beberapa  jam  setelah  dikonsumsi,  zat  tersebut diekskresikan dari tubuh [21]. Pada studi literatur sebelumnya juga telah dipaparkan bahwa  kafein  dengan  cepat  dan  komplit  diabsorbsi  ke  dalam  usus  dan  menyebar  di dalam  tubuh  melalui  darah  dibawa  ke  otak,  selanjutnya  dikeluarkan  oleh  ginjal  dan masuk  ke  aliran  darah,  kemudian  diekskresikan  ke  dalam  urine,  dan  seperti  pada penjelasan sebelumnya bahwa proses metabolisme kafein akan mengalami demetilasi dan  oksidasi  yang  biotransformasinya  terutama  terjadi  di  hati  dengan  metabolisme umumnya  paraxantin,  teofilin,  teobromin  yang kemudian  menjadi  derivat  asam  urat dan diamino urasil [17].
Selain  itu,  hubungan  kafein  di  dalam  urin  juga  saling  mengikat  karena  sistem mekanisme  urinaria  kafein  diketahui  dapat  membuat  efek  diuretik.  Hubungan kemampuan  kafein  terhadap  natrium dan  air meningkatkan  rasio  filtrasi  glomerulus dan  penghambatan  reabsorbsi.  Lebih  lanjut,  kafein  meningkatkan  ekskresi  natrium melalui peningkatan pelepepasan renin dari ginjal. Namun, efek ini merupakan kondisi efek jangka pendek [1].
Gambar 3. Waktu Ekskresi Urine dan Hasil Kafein dalam Urine
10 15 10 30 30 135 125 165 185 210 0 50 100 150 200 250 R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 R9 R10 W ak tu (m e n it ) Urin Responden Waktu Ekskresi Urine Para Responden Setelah Mengkonsumsi Teh Positif Kafein
Novitasari  et al., 2022 ; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 2(3): 247-256
Gambar 3 menunjukkan diagram hasil waktu ekskresi berkemih para responden yang  berbeda-beda  setelah  mengkonsumsi  teh  secara  berturut-turut  dari  responden awal  sampai  terakhir,  yakni  10;15;10;30;30,135,125,165;185;210  menit,  atau  dalam rentang  10  menit  sampai  ±  3  jam  setelah  mengkonsumsi  teh.  Waktu  ekskresi  ini menggambarkan  bahwa  rentang  waktu  responden  setelah  mengkonsumsi  teh  dalam 250  ml  sampai  mengeluarkan  (ekskresi)  urine.  Waktu  ekskresi  ini  sesuai  dengan kemauan  para  responden  berkemih  (tidak  ada  waktu  khusus  untuk  mengeluarkan urine).
Pada  rentang  waktu  10 – 210  menit,  kafein  teridentifikasi  dalam  urin.  Hasil penelitian ini memberikan gambaran bahwa metabolisme kafein pada setiap individu dapat  berbeda-beda.  Merujuk  kembali  pada  pernyataan  Fauziah  [6]  bahwa  teh merupakan  salah  satu  obat  diuresis,  dan  kafein  itu  sendiri  juga  diketahui  dapat menginduksi efek diuresis dan natriuresis. Mekanisme akibat efek tersebut masih belum diketahui  [7].  Selain  itu,  perbedaan  waktu  ekskresi  urine  ini  dapat  memungkinkan perbedaan kondisi kesehatan, dan kecepatan metabolisme masing-masing responden, sehingga  penelitian  ini  memungkinkan  waktu  berkemih  responden  cepat  dan bervariasi.
Waktu ekskresi responden menyatakan bahwa kafein mempunyai waktu paruh untuk diekskresikan bersama urine sekitar 4 jam dan tidak dipengaruhi oleh usia  [1]. Pernyataan tersebut juga didukung oleh [20] waktu paruh kafein berkisar pada 4 – 5 jam, dimana  dapat  diperpanjang  pada  pasien  dengan  penyakit  hati,  seperti  bayi  dan neonatus yang dapat sampai 100 jam, atau pada orang hamil, dan dapat diperpendek pada  kelompok  tertentu  (perokok  dewasa  laki-laki).  Hal  ini  juga  disampaikan  oleh Wanyika dkk, [21] kafein tidak terakumulasi dalam tubuh dalam jangka waktu panjang melainkan biasanya beberapa jam setelah dikonsumsi, zat tersebut diekskresikan dari tubuh.
Pada  penelitian  ini,  urine  yang  dikeluarkan  dalam  10  menit  sampai  15  menit setelah  mengkonsumsi  teh,  yang  dimiliki  oleh  R1,  R2,  dan  R3  menunjukkan  sedikit kompleks warna hijau yang terlihat, sehingga terlihat tidak jelas (samar) (Gambar  4). Kemudian, urine yang dikeluarkan ±30 menit ke atas, seperti pada contoh urine R4 dan R5, menunjukkan hasil kompleks warna hijau lebih banyak terlihat (Gambar 4). Hasil- hasil  tersebut  dapat  dinyatakan  bahwa  semakin  panjang  ekskresi  urine  setelah mengkonsumsi  kafein  teh,  maka  semakin  jelas  kompleks  warna  hijau  terlihat  pada gambar 4.
Gambar 4. Hasil Urine Positif Kafein
Hasil penelitian mengenai hubungan waktu ekskresi urine dan kejelasan warna uji  kualitatif  pereaksi  parry  pada  ekskresi  urine  ini  tidak  dapat  disimpulkan  sebagai hasil yang akurat, karena pada penelitian ini tidak memberikan perlakuan khusus untuk
R1 R3 R4 R5 R2
responden  tentang  konsumsi  makanan  dan  minuman  yang  perlu  dihindari,  jenis aktivitas,  dan  kondisi  fisik/kesehatan,  dan  suhu  tubuh  masing-masing  responden selama  penelitian  berlangsung,  serta  keakuratan  uji  kualitatif  pereaksi  parry  dalam identifikasi kafein pada urine. Diketahui makanan/minuman yang mengandung kafein selain  teh  sangat  banyak  ditemukan,  seperti  susu  coklat,  coca-cola,  minuman  ringan ataupun pada biji- bijan/tanaman-tanaman yang memiliki metabolit sekunder, karena kafein  dapat  ditemukan  pada  daun,  buah  atau  biji-bijian  pada  lebih  dari  60  spesies tumbuh-tumbuhan yang telah ditemukan [9].
Adapun mengenai jenis aktivitas bahwa memungkinkan semakin panjang waktu responden  berkemih,  maka  kafein  yang  terkandung  di  dalam  urine,  akan  semakin nampak.  Namun,  berbeda  dengan  jenis  aktivitas  yang  berat  dan  lebih  banyak pergerakan, seperti berolahraga, berjalan jauh, dan lain-lain, memungkinkan ekskresi kafein  tidak  hanya  lewat  pada  urine.  Melainkan  ada  pada  jalur  ekskresi  yang  lain, seperti air keringat, sehingga memungkinkan kafein yang teridentifikasi dalam urine hanya sedikit. Menurut Nehlig [15] bahwa metabolisme kafein juga dipengaruhi oleh banyak  faktor  eksogen  dan  endogen,  seperti  gen  penentu,  usia,  jenis  kelamin, kehamilan,  makanan,  gaya  hidup,  merokok,  faktor  lingkungan,  pengobatan,  dan penyakit. Pada penelitian ini menggunakan analisa kualitatif yang merupakan analisa visual,  yang  pembacaanya  harus  dilakukan  secara  cepat  dan  tepat  supaya  tidak menimbulkan negatif palsu (Urine R4 dan R5 awalnya menunjukkan kompleks warna hijau. Namun, setelah beberapa menit dibiarkan, tidak menunjukkan indikasi kompleks warna hijau kembali.

## 4.  Kesimpulan
Penelitian ini menghasilkan sebuah kesimpulan, yakni Secara keseluruhan urine yang  didapat  pada  penelitian  ini  menunjukkan  terdapat  residu  kafein  yang teridentifikasi  dalam  urine  setelah  mengkonsumsi  teh  menggunakan  pereaksi  parry. Pada kisaran waktu 10 menit sampai ± 3 jam setelah mengkonsumsi teh, kafein dapat terlihat di dalam urin.

## Referensi
[1]  Alsabri,  S.G,    BscPharm,  MS.,    Mari,  W.O.,  MD,  MS.,    Younes,  S.,  MD,  MS., Alsadawi,  M.A.,  MD,    &    Oroszi,  T.L.,  MS,  EdD.  2018.  Kinetic  and  Dynamic Description of Caffeine. Journal of Caffeine and Adenosine Research . 8(1): 3-9
[2]  Astill, C.,  Birch, M.R.,  Dacombe, C.,  Humphrey, P.G.,  &  Martin, P.T. 2001. Factors Affecting the Caffeine and Polyphenol Contents of Black and Green Tea Infusions. J. Agric. Food Chem . 49(11):5340-5347
[3]  Chin, J.M.,  Merves, M.L.,  Goldberger, B.A.,  Cone, A.S.,  Cone, E.J. 2008. Caffeine Content of Brewed Teas. Journal of Analytical Toxicology . 32:702-704
[4]  Dewi,  R.I,S.  2016.  Karakteristik  Individu  Pengguna  dan  Pola  Penyalahgunaan NAPZA pada Narapidana di Lembaga Pemasyarakatan Maninjau. Jurnal Kesehatan Medika Saintika . 7(1): 77-86
[5]  Fajar, R.I.,  Wrasiati, L.P.,  & Suhendra, L. 2018.  Kandungan Senyawa Flavonoid dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Teh Hijau pada Perlakuan Suhu Awal dan Lama Penyeduhan. Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri . 6(3): 196-202
Novitasari  et al., 2022 ; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 2(3): 247-256
[6]  Fauziah, F.,  Zulharmita,  &  Ningsih, W.2017. Pembuatan Kafein Benzoat Secara Semisintesis dari Seerbuk Teh Kayu Aro. Jurnal Farmasi Higea . 9(1):9-19
[7]  Fenton, R.A.,  Poulsen, S.B.,  Chavez, S.D.L.M.,  Soleimani,  Manoocher,  Busslinger, M.,    Rieg,  J.A.D.,    &    Rieg,  T.  2015.  Caffeine-Induced  Diuresis  and  natriuresis  is Independent of Renal Tubular NHE3. Am J Physiol .
[8]  Kertadjaja, W.2005. Manfaat Teh ( Camelia sinensis ). Meditek . 13(34):31-35
[9]  Kim, H.J.,  Choi, M.S.,  Rehman, S.U.,  Ji, Y.S.,  Yu, J.S.,  Nakamura, K.,  &   Yoo, H.H. 2019.  Determination  of  Urineary  Caffeine  Metabolites  as  Biomarkers  for  Drug Metabolic Enzyme Activities. Nutrients .11 : 1-15
[10]  Kumar, T.H.,  Mounika, P.,  Likhitha, S.S.,  Aswini, S.,  Kavya, T.,  Sudandhini, T., &    Sree,  A.V.  2019.  Application  of  Stability  Indicating  UV  Spectrophotometric Method  for  Estimation  of  Caffeine  in  Gel  Formulation,  Plasma,  and  Urine. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research . 10(12) : 5481-5488
[11]  Latunra,  A.I.,    Johannes,  E.,    Mulihardianti,  B.,    &    Sumule,  O.  2021.  Analisis Kandungan  Kafein  Kopi  ( Coffea  arabica )  pada  Tingkat  Kematangan  Berbeda Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan . 12(1):45- 50
[12]  Maramis, R.K.,  Citraningtyas, G.,  Wehantouw, F. 2013. Analisis Kafein dalam Kopi Bubuk di Kota Manado Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi . 2(4) : 122-128
[13]  Martono,  B.,  &  Udarno,  L.  2015.  Kandungan  Kafein  dan  Karakteristik  Morfologi Pucuk Enam Genotipe Teh. J.TIDP . 2(2): 69-76
[14]  Mutmainnah, N. 2017. Penentuan Suhu dan Waktu Penyeduhan Batang Teh Hijau Terhadap Kandungan Antioksidan Kafein, Tanin dan Katekin. Makassar: Fakultas Sains dan teknologi UIN Alauddin Makassar. Skripsi
[15]  Nehlig,  A.  2018.  Interindividual  Differences  in  Caffeine  Metabolism  and  Factors Driving Caffeine Consumption. Pharmacological Review . 384 – 411
[16]  Sholihah,  Q.  2013.  Efektivitas  Program  P4GN  Terhadap  Pencegahan Penyalahgunaan NAPZA. Jurnal Kesehatan Masyarakat . 9(1): 153-159
[17]  Sihaan,  M.A.  2019.  Korelasi  Antara  Jumlah  Kafein  yang  Dikonsumsi  dalam  Air Kkopi  dengan  Jumlah  Kafein  yang  Diekskresikan  dalam  Urine. Majalah  Ilmiah Methoda . 9(2): 86-88
[18]  Suaniti, N.M.,  Wirajana, I.N.,  Ariati, N.K.,  Manurung, M. 2018. Pengetahuan Dan Pemahaman  Dini  Narkoba  Dan  Zat  Aditif  Pada  Generasi  Muda  Sebagai  Aset Bangsa Di Desa Mengwi Badung. Buletin Udayana Mengabdi . 17(4):67-74
[19]  Tfouni, S.A.V.,  Camara, M.M.,  Kamikata, K.,  Gomes, F.M.L., & Furlani, R.P.Z. 2017. Caffeine in teas: levels, transference to infusion and estimated intake. Food Science and Technology . 38(4): 661-666
[20]  Thorn, C.F.,  Aklillu, E.,  McDonagh, E.M.,  Klein, T.E., & B, R. 2012. PharmGKB Summary : Caffeine Pathway. Pharmacogenet Genomics . 22(5) : 389-395
[21]  Wanyika, H.N.,  Gatebe, E.G.,  Gitu, L.M.,  Ngumba, E.K., & Maritim, C.W. 2010. Determination  of  caffeine  content  of  tea  and  instant  coffee  brands  found  in  the Kenyan market. African Journal of Food Science . 4(6): 353-358