Desember  2022, Vol. 9 No. 2: 127 – 135
pISSN : 2355-9942, eISSN:2656-792X
Terakreditasi Nasional, Dirjen Pendidikan Tinggi, Riset, dan Teknologi
Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset dan Teknologi RI
S.K. No. 105/E/KPT/2022 Received: 27 Juli 2022, Accepted: 10 Desember 2022 Published online: 18 Desember 2022
Doi: https://doi.org/10.35508/nukleus.v9i2.7835 https://ejurnal.undana.ac.id/index.php/nukleus/article/view/7835

## PENGARUH RASIO KARBON-NITROGEN DALAM ENSILAGE CAMPURAN MUKUNA LOKAL (MUCUNA SP) DAN RUMPUT KUME (SORGHUM PLUMOSUM VAR. TIMORENSE) SEGAR TERHADAP KANDUNGAN NUTRISI PRODUK
(The effects of carbon-nitrogen ratio in ensilage of local mucuna (mucuna sp.) And  kume grass (Sorghum plumosum var. Timorense) on nutrient content of the product)
Vinensius Darmin,  Twenfosel O. Dami Dato, Marthen L. Mullik Program Studi Peternakan, Fakultas Peternakan, Kelautan, dan Perikanan, Universitas Nusa Cendana Jln. Adisucipto, Penfui, Kupang, Nusa Tenggara Timur, Indonesia 850001
* Correspondent author, email: marthenmullik@staf.undana.ac.id

## ABSTRAK
Permasalahan  utama  yang  ditemui  dalam  pengawetan  hijauan  sumber  protein  menjadi  silase  adalah  proses pembusukan  akibat  dari  sifat  buffer  protein  yang  tinggi  dalam  hijauan  yang  mungkin  berkaitan  dengan  rasio karbon-nitrogen  (C-N)  yang  rendah.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  level  terbaik  rasio  C:N  dalam pembuatan  silase  campuran  rumput  dan  legum  terhadap  kandungan  nutrisi  silase.  Rancangan  acak  lengkap (RAL)  3  perlakuan  dan  4  ulangan  untuk  menguji  3  rasio  C-N  sebagai  perlakuan.    Perlakuan  tersebut  adalah Mucuna  sp  +  rumput  kume  +  dedak  padi  untuk  mencapai  nilai  C-N  20  (CN20)  ,  atau  30  (CN30),  atau  40 (CN40). Variabel yang diamati adalah kandungan bahan kering (BK), bahan organik (BK), protein kasar (PK), lemak kasar (LK), dan serat kasar (SK). Data dianalisis menggunakan prosedur general linear model untuk RAL di  mana  nilai  alfa  ditetapkan  sebesar  0.05.  Perbedaan  antar  perlakuan  ditentukan  menggunakan  uji  jarak berganda  Duncan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kandungan  BK  (22,5  -  32,0%),  dan  PK  (7,5  -  9,6%) sangat  nyata  meningkat  seiring  peningkatan  rasio  C-N,  di  mana  BK  tertinggi  pada  CN40,  sedangkan  PK tertinggi  pada  CN30.  Kandungan  BO  juga  secara  nyata  meningkat  dan  mencapai  tertinggi  pada  CN30,  tetapi tidak  berbeda  dengan  CN40.    Kandungan  SK  dan  LK  tidak  dipengaruhi  oleh  rasio  C-N.  Dapat  disimpulkan bahwa rasio C-N terbaik adalah 30, sebab perlakuan ini memiliki kandungan BO tertinggi dan kandungan PK- nya tidak berbeda dengan perlakuan CN20.
Kata-kata kunci: rasio C-N, biofermentasi, mucuna sp, rumput kume

## ABSTRACT
The main problem in preservation of  protein source forages  in silage making is spoilage due to high  buffering characteristic of protein. This might relates to low carbon-nitrogen (C-N) ratio in these plants. This study aimed at  determining  the  best  level  of  C-N  ratio  in  ensilage  process  of  a  grass-legume  mixture.  A  3x4  completely randomized design (CRD) was deployed to test three C-N ratio levels as treatments. The  treatments were CN20 (Mucuna sp + kume grass + rice bran to reach C-N ratio of 20, or 30 (CN30) or 40 (CN40). Variables measured were dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), ether extract (EE), and crude fiber (CF) content of the silage.  Data were analyzed using General Linear Model for CRD with an alfa value of 0.05. Treatment differences were determined using Duncan test. The results showed that C-N ratio had high significant effects on DM content (ranged from 22.5 to 32.0%), and CP content (ranged from 7.5 to 9.6%). Significant treatment effects were detected in OM content (ranged from 90.5 to 91.8%), and EE content (ranged from 2.82 to 3.66%). Meanwhile, CF was not effected by C-N ratio (ranged from 39.0 to 3.0%. 44.2%). It could be concluded that C- N the ratio of 30 is the best treatment in silage making using mixture of lelehanak-kume grass as it shows the highest OM content and  had no significant difference with CN20 in CP content.
Keywords: C-N ratio, biofermentation, mucuna sp, kume grass

## PENDAHULUAN
Dua  jenis  tumbuhan  pakan  lokal  yang banyak  dijumpai  di  lahan-lahan  kering  di  Nusa Tenggara  Timur  (NTT)  adalah  lelehanak (Mucuna  sp)  dan  rumput  kume  (Sorghum plumosum var. Timorense). Keduanya merupakan  jenis  tumbuhan  tahunan  yang memiliki  kandungan  nutrisi  dan  produksi biomasa  organik  yang  sangat  baik  sehingga menjadi  sumber  hijauan  potensial  bagi  ternak ruminansia  di  daerah  ini,  namun  keduanya memiliki beberapa kelemahan yang membutuhkan penanganan agar dapat dimanfaatkan secara optimum.
Lelehanak merupakan jenis legum dengan kandungan  protein  kasar  mencapai  18,04%  dan produksi  biomasa  berkisar  8-10  ton  bahan kering/ha/thn  (Siarit et  al .,  2009).  Lelehanak memiliki  kemampuan  fiksasi  nitrogen  yang tinggi dan  tahan terhadap naungan (Laksono et al .,  2016).  Selain  itu,  pertumbuhannya  yang menjalar  dan  cepat  dengan  daun  yang  padat membuatnya  cocok  digunakan  sebagai  tanaman penutup tanah (cover crop). Sayangnya tumbuhan ini masih tumbuh secara liar di lahan- lahan yang tidak dikelola dan belum dibudidayakan  sebagai  penyedia  pakan  atau cover crop karena memiliki mayang pada polong kering  yang  sangat  gatal  dan  mengiritasi  kulit. Itulah sebabnya, maka tumbuhan ini hanya  bisa dimanfaatkan  sebagai  sumber  pakan  alternatif pada  fase  vegetatif  saja  yakni  pada  umur    1-3 bulan  setelah  tumbuh  di  awal  musim  hujan. Rumput  kume  sendiri  memiliki  kandungan protein  yang  dapat  mencapai  15%  pada  2-4 minggu awal tumbuh (Mullik et al ., 2019), tetapi menurun  secara  drastis  sehingga  kandungan proteinnya menjadi hanya berkisar 3-4% setelah berbunga  pada  umur  ±3  bulan  (Kamlasi et  al ., 2014).  Demikian  halnya  dengan  lelehanak, rumput  kume  juga  belum  dibudidayakan  dan hanya tumbuh  secara  liar dari biji  dorman  yang dihasilkan pada musim hujan tahun sebelumnya. Pada  kondisi  tanpa  diberi  pupuk,  produksi biomasa  organiknya  dapat  mencapai  10,5  ton bahan kering/ha/thn. Pemupukan dengan nitrogen  sebanyak  150  kg/ha  menghasilkan biomasa  sebesar  12  ton  bahan  kering/ha/tahun (Keraf et  al .,  2015).  Faktor  pembatas  lainnya
dalam  pemanfaatan  rumput  kume  adalah kandungan  komponen  karbohidrat  struktural terutama  lignoselulosa  yang  relatif  tinggi (7,51%)  pada  fase  setelah  berbuah  dan mengering  sehingga  membutuhkan  perlakuan awal sebelum diberikan pada ternak (Dami Dato dan Mullik, 2019).
Merujuk  pada  kandungan    nutrisi, produksi  biomasa  organik  dan  karakteristik agronomi  yang  diuraikan  di  atas,  maka  salah satu cara yang efektif untuk bisa memanfaatkan secara  optimum  lelehanak  dan  rumput  kume sebagai pakan  ruminansia adalah  dipanen  untuk pembuatan  silage  pada  fase  vegetatif  di  musim hujan sebelum  tumbuhan mencapai fase fisiologis  generatif.    Permasalahan  yang dihadapi  adalah  lelehanak  merupakan  jenis leguminosa  yang  memiliki  kandungan  protein relatif  tinggi  (18,04%)  sehingga  berpeluang untuk  terjadi  proses  pembusukan  akibat  dari sifat  buffer  protein  menaikan  pH  sehingga  pH yang  ditargetkan  dalam  proses  ensilage  tidak tercapai  (Mullik et  al .,  2019).  Selain  itu,  kadar air dalam kedua bahan tersebut relatif tinggi bila akan  dipanen  pada  umur  muda.  Kadar  air  yang tinggi juga akan membuat silage menjadi busuk. Namun,  beberapa  peneliti  (Mullik et  al .,  2019; Oematan et al ., 2020) telah berhasil menggunakan  prinsip  rasio  karbon-nitrogen dalam  pembuatan  silage  dari  hijauan  sumber protein karena penambahan karbon dalam media akan  menyediakan  kerangka  karbon  ekstra  bagi mikroba sehingga dapat memanfaatkan nitrogen dari protein untuk mensintesis protein tubuhnya. Dengan  mekanisme  ini,  maka    nitrogen  yang dibebaskan  dari  protein  media  selama  proses ensilage  tidak  menumpuk  dan  menyebakan naiknya pH mengingat sifat buffer dari protein.
Berdasarkan  hasil-hasil  tersebut,  maka penelitian ini dilakukan menggunakan campuran legum  (lelehanak)  dan  rumput  kume  yang semuanya  berbentuk  segar  dengan  menerapkan dua prinsip untuk menghindari proses pembusukan  selama  proses  ensilage  yaitu melakukan  pelayuan  dan  menggunakan  prinsip rasio karbon-nitrogen.

## METODE PENELITIAN
Penelitian experiment ensilasi pakan skala laboratorium  ini  berlangsung  selama  dua  bulan
dengan  waktu  ensilasi  selama  30  hari. Rancangan  Acak  Lengkap  berpola  3  perlakuan
dan  4  ulangan  digunakan  untuk  menguji  nilai nutrisi  silage  dari  tiga  komposisi  bahan  yang terdiri  dari  campuran  lelehanak  (legum)  dan rumput  kume  yang  dipanen  pada  fase  vegetatif sebagai perlakuan. Perlakuan-perlakuan tersebut adalah campuran cacahan rumput kume segar + mucuna segar + dedak padi yang diramu untuk  mencapai  rasio  C-N  sebesar  20  (CN20), atau 30 (CN30), atau 40 (CN40).
Perhitungan  jumlah  karbon  (C)  dalam dalam  setiap  bahan  menggunakan  rumus  yang ditemukan  oleh  Jimenez  dan  Garcia  (1992). Sedangkan  penentuan  jumlah  bahan  dalam campuran  menggunakan  prinsip  Latin  Square dua tahap. Tahap 1 adalah campuran dedak padi
dan rumput kume segar untuk mencapai rasio C- N  sebesar  45,0  sedangkan  rasio  target  tertinggi adalah 40,0.  Selanjutnya campuran ini digabung dengan lelehanak segar untuk mencapai rasio C- N sebesar 20, 30, dan 40.  Dedak padi digunakan untuk  menaikan  rasio  C-N  di  atas  40  karena hasil  perhitungan  rsaio  C-N  pada  rumput  segar hanya  sebesar  38,5  dan  lelehanak  sebesar  17,8. Kandungan  nutrisi  dan  rasio  C-N  bahan-bahan baku  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini sebagaimana tercantum dalam Tabel 1. Sedangkan  hasil  perhitungan  komposisi  bahan baku dan nutrisi pada setiap perlakuan disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1.  Kandungan  bahan  organik,  nitrogen  (N),  karbon  (C)  dan      rasio  C-N  pada  bahan-bahan pakan yang digunakan dalam penelitian Bahan Bahan kering (%) Protein kasar (%) Bahan organik (%) Serat Kasar (%) N (%) C (%) Rasio C:N Kume 40,0 8,5 90,0 19,24 1,2 52,3 38,5 Lelehanak 35,0 18,6 91,0 32,88 2,9 52,9 17,8 Dedak 70,0 4,7 92,0 12,59 0,7 53,5 71,1

## Prosedur Penelitian
Gallon  air  plastik  bervolume  5  kg  digunakan sebagai silo dalam pembuatan silage.  Lelehanak dan  rumput  dicacah  manual  sepanjang  3-5  cm, lalu  ditebar  di  atas  terpal  plastik  dan  dibiarkan pada  teduhan  selama  1  x  24  jam  dengan  tujuan menurunkan  kadar  air.  Setelah  dilayukan, masing-masing  bahan  ditimbang  dan  diambil sesuai sejumlah yang dibutuhkan untuk dicampur secara merata menurut rasio C-N yang ditetapkan.    Campuran  tersebut  dimasukan  ke dalam  silo  sambil  dipadatkan  sampai  penuh untuk  memastikan  bahwa  tidak  ada  udara  yang tersisa  dalam  silo  yang  dapat  menyebabkan terjadinya  proses  pembusukan.  Setelah  penuh, mulut  silo  ditekan  dan  ditutup  dengan  plastik bening  sebelum  penutupnya  diletakkan  dan dikencangkan.    Semua  silo  yang  telah  terisi diletakkan  di  ruangan  bersuhu  kamar  untuk mengalami  proses  ensilage  selama  30  hari. Setelah  diinkubasi,  silo  dibuka  dan  isinya dikeluarkan  ke  dalam  baskom  plastik,  ditebar merata,  lalu  diambil  sampel  sekitar  250  gram dan  dikirim  ke  laboratorium  untuk  analisis kandungan nutrisinya.

## Variabel Penelitian
Variabel  yang  diukur  adalah  kandungan nutrisi  yang  meliputi  bahan  kering  (BK),  bahan organik  (BO),  protein  kasar  (PK),  lemak  kasar (LK),  dan  serat  kasar  (SK).  Metode  proximat digunakan  dalam  analisis semua  nutrisi  tersebut sesuai  panduan  AOAC  Internasional  (2012),  di mana  BK  tentukan  dengan  pengovenan  sample pada  suhu  60oC    selama  24  jam,  BO menggunakan  teknik  pengabuan  pada  suhu 600oC  selama  3  jam,  PK  ditentukan  dengan teknik  mikro  Kjeldhal,  LK    dianalisis  dengan metode teknik ether,  dan  SK  ditentukan  dengan teknik perebusan.

## Analisis Data
Data-data  yang  diperoleh  dikenakan analisis  variance  (ANOVA)  sesuai  posedur general  linear  model  untuk  RAL,  di  mana pengaruh  perlakuan  ditetapkan  pada  nilai  alfa sebesar  0,05  dan  error  tipe  3.    Perbedaan  antar perlakuan  dideteksi  dengan  Duncan  test. Software  statistik    sebagai  alat  bantu  analisis data  yang  digunakan  adalah  SPSS  versi  25 (IBM, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kandungan Bahan Kering (BK)
Data  rata-rata  pengaruh  level  rasio  C-N terhadap  kandungan  nutrisi  silase  campuran rumput  kume  dan  lelehanak  secara  rinci disajikan pada Tabel 2.
Kandungan BK setiap perlakuan cenderung meningkat sejalan dengan peningkatan  rasio  C-N  yaitu  dari  22,5%  ke 32,0%.  Peningkatan ini sangat nyata berbeda (P =  0,001),    di  mana  kandungan  BK  tertimggi pada  perlakuan  CN40.    Peningkatan  kandungan BK  seiring  peningkatan  nilai  rasio  C-N  terjadi karena  by  design,  proporsi  rumput  kume  dan dedak  padi  yang  juga  memiliki  kandungan  BK lebih  tinggi  (Tabel  1)  semakin  besar  dalam campuran  media,  sehingga  dengan  sendirinya kandungan BK produk ensilage lebih tinggi dari
perlakuan  yang  memiliki  rasio  C-N  sebesar  20. Sebenarnya  kandungan  BK  dalam  perlakuan CN30  juga  meningkat  tetapi  besarannya  belum cukup  tinggi  untuk  mencapai  taraf  perbedaan secara  statistik  dengan  perlakuan  CN20. Kandungan  BK  dalam  penelitian  ini  relatif rendah,  namun  masih  berada  dalam  rentangan nilai  BK  silage  yang  dilaporkan  oleh  peneliti lain (Saloko, 2005; Mustika dan Hartutik, 2021) yang  berkisar  24,7  -  31,2%.  Kandungan  BK yang lebih rendah dalam penelitian ini dibanding BK  standar  untuk  silage  (35%)  karena  baik kume maupun lelehanak dipanen pada pertengahan  fase  vegetatif  di  mana  kadar  air relatif  tinggi,  sementerlangsung  ara  pelayuan hanya b24 jam di bawah naungan (dalam rumah) sehingga  kadar  air  dalam  bahan  baku  belum banyak yang menguap.
Tabel 2. Kandungan Nutrisi Silase Campuran Lelehanak (Mucuna sp) dan Rumput Kume (Sorghum plumosum  var.  Timorense)  Dengan  Ditambahkan  Dedak  Padi  Untuk  Mencapai  Rasio Karbon-Nitrogen Sebesar 20 (CN20) atau 30 (CN30) atau 40 (CN40)
Variabel Perlakuan SEM Nilai P CN20 CN30 CN40 Bahan Kering (%) 22,4 a 25,5 a 32,0 b 2,81 0,001 Bahan Organik (%) 90,5 a 91,8 b 91,7 b 0,40 0,054 Protein Kasar (%) 9,6 b 9,3 b 7,5 a 0,66 0,005 Lemak Kasar (%) 3,7 b 2,8 a 2,5 a 0,26 a 0,020 Serat Kasar (%) 42,8 44,2 39,0 1,54 0,150
Superskrip yang berbeda pada baris yang sama menggambarkan bahwa perlakuan berbeda sesuai nilai p.
Pada  penelitian  ini  kandungan  BK  lebih tinggi  dibandingkan  penelitian  (Kurniawan et al .,  2019)  yang  melaporkan  bahwa    kandungan BK  silage  berbahan  dasar  sorgum  galur  stay green  yakni  20,57%,  dan  lebih  rendah  dari  BK yang dilaporkan oleh Nahak et al . (2019) dalam silage berbahan dasar sorgum dengan penambahan  aditif  yang  berbeda  yang  berkisar 35%  -  40%  .  Pada  penelitian  ini  kandungan bahan  kering  meningkat  di  setiap  perlakuan sesuai  dengan  meningkatnya  level  perlakuan imbangan  C-N.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa dengan  meningkatnya  penambahan  dedak  padi maka  bahan  kering  silase  campuran  lelehanak dengan rumput kume mengalami peningkatan di setiap perlakuan. Hal ini sesuai dengan pendapat Anas  dan  Syahrir  (2017)  bahwa  tingginya kandungan  bahan  kering  silase  dikarenakan adanya penambahan bahan kering yang terkandung dalam bahan aditif.

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kandungan Bahan Organik (BO)
Kandungan  BO  dalam  ketiga  perlakuan berkisar  90,5%  –  91,8%  di  mana  nilai  tertinggi diperoleh pada perlakuan CN30. Rentangan nilai BO  ini  juga  berada  dalam  rentangan  nilai  BO yang  dilaporkan  para  peneliti  lain  (Mullik  dkk., 2019;  Oematan  dkk.,  2020)  yang  mendapatkan rasio  terbaik  pada  rasio  C-N    sebesar  30  pada proses biofermentasi daun Chromolaena odorata segar  yang  merupakan  hijauan  sumber  protein. Sebaliknya, kandungan BO dalam penelitian ini lebih tinggi dari BO silage yang dilaporkan oleh peneliti  lain  (Boko et  al .,  2022;  Balo et  al ., 2022) yang masing-masing memperoleh 85,10% dan  79,04%.  Kandungan  BO  yang  lebih  tinggi dalam  penelitian  sekarang  karena  bahan  baku yang digunakan masih muda sehingga kandungan  isi  sel  lebih  tinggi  dibanding  bahan
baku  yang  digunakan  Boko et  al (2022)  yaitu batang  sorghum,  dan  Balo  dkk  (2022)  yaitu campuran rumput kume-daun gamal. Kandungan  BO  dalam  penelitian  ini  relatif tinggi  dan  masih  berada  dalam  rentangan  nilai BO  silage  yang  dilaporkan  oleh  peneliti Trisnadewi et  al .  (2017)  yang  berkisar  90,3%  - 91,6%.
Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa kandungan  BO  perlakuan  CN30  dan  CN40 cenderung  lebih  tinggi  (P=0,054)  dibanding dengan perlakukan CN20. Peningkatan kandungan  BO  seiring  peningkatan  rasio  C-N kemungkinan berkaitan dengan semakin meningkatnya  populasi  mikroba  selama  proses fermentasi sehingga terjadi peningkatan aktivitas perombakan  serat  kasar  yang  membebaskan lebih  banyak  senyawa  organik.  Hal  ini  selaras dengan  adanya  sedikit  penuruan  kadar  serat kasar    (meskipun  tidak  nyata).  Selain  itu, peningkatan  populasi  mikroba  juga  mungkin turut  menyumbang  BO  dalam  produk  akhir fermentasi. Peningkatan populasi  mikroba terjadi  karena  tersedia  lebih  banyak  kerangka karbon  tambahan  (pada  rasio  C-N  tinggi) sehingga  mikroba  akan  menggunakan  karbon ekstra  tersebut  untuk  mengasimilasi  yang berlebihan  selama  proses  fermentasi  untuk pembentukan  selnya  dan  aktivitas  dalam  proses fermentasi.

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kandungan Protein Kasar (PK)
Kandungan  PK  memperlihatkan  pola linear  negatif  seiring  peningkatan  rasio  C-N (Tabel  2),  di  mana  proporsi  penurunannya berkisar  3,1%  -  21,9%.  Kandungan  PK  silage campuran  lelehanak  dan  rumput  kume  yang didapati  dalam  penelitian  ini  tergolong  cukup rendah  karena  hanya  berkisar  7,5%  -  9,6%. Trend  penurunan  PK  pada  silage  campuran rumput  kume  dan  daun  gamal  (legum)  juga dilaporkan  oleh  Ndun et  al .  (2015)  yang memperlihatkan  adanya  penurunan  nilai  PK ketika  proporsi  rumput  meningkat.  PK  silage tebon  jagung  sebesar  7,8%  (Mustika  dan Hartutik,  2021)  dan  PK  silage  pakan  komplit kombinasi jerami  padi dan  daun lamtoro  9,02% (Jamluddin et al ., 2018) .
Rendahnya  nilai  PK  pada  penelitian  ini perlu  dipahami  secara  hati-hati  karena  dua alasan.  Pertama,  kandungan  protein  terendah dari  bahan  utama  silage  yang  dipakai  (rumput kume) berkadar protein 8,5% sehingga kalaupun produk  biofermentasi terbuat  dari  100%  rumput
kume, seharusnya protein kasar produk biofermentasi  tidak  menurun  jauh  di  bawah kadar  protein  bahannya  meskipun  terjadi  juga penurunan selama proses biofermentasi (Wati et al ., 2018; Nuraini, 2017) bahkan ada kecenderungan  terjadi  peningkatan  kandungan PK  akibat  proses  biofermentasi  pada  jenis rumput-rumputan  (Yana,  2011;  Sulistyo et  al ., 2020)  dan  campuran  rumput  leguminosa  (Ndun et  al .,  2015).  Kedua,  kontribusi  protein  dari mucuna  dan  protein  mikroba  seharusnya  juga turut menaikan kandungan PK produk biofermentasi.      Namun  demikian,  rendahnya kandungan  PK  produk  biofermentasi  dibanding kandungan  PK  bahan  baku  (rumput  kume  dan lelehanak)  yang  digunakan,  kemungkinan  dapat terjadi  karena  ada  protein  dalam  bahan    baku yang  telah  digunakan  oleh  mikroba  selama berlangsungnya proses biofermentasi.
Uji  beda  perlakuan  mengindikasikan bahwa sangat nyata terjadi penurunan kandungan  PK  (P=0,005)  ketika  resio  C-N meningkat  dari  20  ke  30  dan  ke  40.    Ada  dua faktor yang dapat dijasikan justifikasi dalam hal ini,  Pertama,  kandungan  PK  secara  otomatis terjadi  sejalan  dengan  meningkatnya  rasio  C-N ini,  sebab  menaikan  jumlah  karbon  (dari  kume dan  dedak)  untuk  mencapai  rasio  C-N  tinggi akan semakin menurunkan kandungan nitrogen/protein  dalam  campuran  media,  karena meningkatnya  proporsi  rumput  kume  yang memiliki  kandungan  PK  lebih  rendah  dari lelehak    pada  perlakuan  CN30  dan  CN40. Kedua, meskipun populasi mikroba tidak diukur dalam  penelitian  ini,  tetapi  diduga  bahwa peningkatan  rasio  C-N  menyediakan  kerangka karbon  (sumber  energi)  ekstra,  dan  ditunjang dengan nitrogen yang tersedia dari legum,  akan menyediakan substrat yang mendukung perkembangbiakan  mikroba,  termasuk  mikroba proteolitik.  Apalagi  pada  kondisi  penelitian  ini yang  memiliki  kandungan  BK  yang  rendah  ( Avila dan Carvalho, 2019) seperti yang ada pada penelitian  ini.  Meskipun  populasi  bakteri proteolitik  tidak  diamati  dalam  penelitiana  saat ini,  tetapi  dengan  kadar air  silage  yang  berkisar 68-68% (Table 2) dan pH tinggi pada penelitian ini  yang  diukur  Dami  Dato  dkk  (data  belum dipublikasi) sehingga mennyediakan lingkungan favorit  bagi  berkembangnya  kelompok  mikroba ini, maka kemungkinan besar terjadi peningkatan  populasi  mikroba  proteolitik  yang berakibat  pada  proses  perombakan  protein selama  proses  biofermentasi  semakin  intensif. Hal  ini  sejalan  dengan  McDonald et  al (1991)
yang menyatakan bahwa pada kondisi pH tinggi (basa)  aktivitas  mikroba  proteolitik  meningkat dan  hasil  perombakan  mikroba  proteolitik adalah  gas methan.  Dengan  demikian,    penurun protein  kasar  secara  gradual  seiring  dengan peningkatan  rasio  C-N  dapat  terjelaskan  dari mekanisme ini.

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kandungan Lemak Kasar (LK)
Kandungan  LK  dalam  produk  silage juga menurun  selaras  bertambahnya  rasio  C-N. Dengan nilai LK berkisar 2,5% - 3,7%, di mana nilai tertinggi diperlihatkan oleh perlakuan yang memiliki  rasio  C-N  terrendah  CN30  yang memiliki  proporsi  legum  terbesar.    (Ülger  dan Kaplan,  2017)  juga  melaporkan  kandungan  LK silage  jagung  berkisar  2.62%  -  2.94%.    Pada penelitian  ini  kandungan  LK  lebih  rendah  dari silage  campuran  rumput  alam,  hijauan  sorgum dan rumput raja yakni berkisar 5,23-7,29% (Bira et al ., 2020).
Uji  beda  antar  perlakuan  menggunakan Duncan  Test  menunjukkan  bahwa  kandungan LK  perlakuan  CN20    secara  nyata  (P=0,02) lebih  tinggi  dari  kedua  perlakuan  lainya. Sedangkan kedua perlakuan lainnya  (CN30 dan CN40)  tidak  memperlihatkan  perbedaan  yang signifikan. Penurunan kadar LK ini kemungkinan  dipengaruhi  oleh  dua  faktor. Faktor  pertama  adalah  proporsi  rumput  yang meningkat  dalam  perlakuan  CN20  dan  CN30 sehingga  dengan  sendirinya  konsentrasi  lemak dalam  produk  fermentasi  menurun.  Hal  ini terjadi  karena  kandungan  LK  pada    rumput kume  lebih  rendah  dari  lelehanak  (legum). Kedua,  aktivitas mikroba  dalam  proses ensilage pada  kedua  perlakuan  tersebut  lebih  tinggi selama  proses  ensilage  sehigga  ada  lemak  dari bahan  yang  dibiofermentasi  telah  digunakan oleh  mikroba  untuk  keperluan  metabolismenya. Naiknya  kandungan  PK  (Tabel  2)  yang diperoleh mendukung adanya dugaan peningkatan  populasi  mikroba  selama  proses ensilage pada perlakuan yang memiliki rasio C- N  tinggi.  Kandungan  LK  meningkat  dalam
proses fermentasi  silage karena  terdapat aktivitas  bakteri  yang  dapat menghasilkan  asam lemak yang cukup tinggi. Hal ini didukung oleh (Juwandi et al ., 2018) menyatakan bahwa dalam proses fermentasi silage kandungan LK meningkat  disebabkan  oleh  massa  sel  mikroba yang  tumbuh  dan  berkembang  biak  pada  media selama fermentasi.

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kandungan Serat Kasar (SK)
Kandungan  SK  yang  diperioleh  berkisar 39,0%  -  44,2%  (Tabel  2).    Nilai  SK  pada penelitian ini lebih tinggi dibandingkan kandungan  SK  silase  rumput  Clitoria  ternatea sebesar 27,80% (Ora et al ., 2016) maupun silase campuran  rumput  gajah  dan  jus  tape  singkong sebesar 27,49% (Sulistyo et al ., 2020) atau silase rumput  kume  dan  daun  gamal  berkisar  yang berkisar 27,99%  – 33,36%  (Ndun et al ., 2015), atau      silage  campuran  50%  rumput:  50  legum yang  dilaporkan  Yusuf,  (2001)    sebesar  32,9%. Perbedaan kandungan serat kasar antar perlakuan  baik  yang  diperoleh  dalam  penelitian maupun yang dilaporkan oleh para peneliti yang dikutip di atas lebih berkaitan dengan perbedaan bahan  (jenis  heijauan)  yang  digunakan  oleh setiap peneliti .
Analisis  varians  tidak  memperlihatkan bahwa rasio  C-N  tidak  memiliki  pengaruh  yang nyata    (P=0,150)  terhadap  kadungan  SK  silage campuran  lelehanak-kume  yang  sama-sama dipanen  pada  fase  vegetative.  Hasil  ini bertentangan  dengan  hasil  yang  dilaporkan Mullik et  al .  (2019)  pada  silage  Chromolaena odorata  menggunakan  rasio  C-N  memberikan pengaruh  yang  nyata  terhadap  kandungan  SK. Absennya pengaruh rasio C-N terhadap SK yang didapati  pada  perlakuan  ini  kemungkinan  besar terjadi  karena  kedua  bahan  (lelehanak  dan kume)  masih  berada  dalam  masa  awal pertumbuhan  sehingga  kadar  SK  masih  rendah. Penelitian  ini  memperoleh  kandungan  SK  lebih tinggi daripada yang dilaporkan oleh Mustabi et al . (2019) dengan SK berkisar 14%-18,9% pada silase ransum pakan komplit.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  rasio  C-N  30  merupakan perlakuan  terbaik  dalam  pembuatan  silase campuran  lelehanak  (Mucuna  sp)  dengan rumput kume (Sorghum plumosum var.
Timorense)  karena  memiliki  kandungan  bahan organik  tertinggi  dan  protein  kasar  yang  juga tinggi karena tidak berbeda secara nyata dengan CN 20.

## SARAN
Kadar    air  bahan  baku  dalam  penelitian masih cukup tinggi sehingga kemungkinana ikut mempengaruhi hasil biofermentasi. Oleh karena itu, panelitian untuk melihat pengaruh rasio C:N dan  kadar  air  bahan  akan  sangat  penting  untuk
mengetahui  apakah  salah  satunya  berpangeruh dominan atau keduanya memiliki pengaruh yang sama  dalam  pengawetan  hijauan  berkualitas tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Anas MA, Syahrir. 2017. Pengaruh penggunaan jenis  aditif  sebagai  sumber  karbohidrat terhadap  komposisi  kimia  silase  rumput mulato. Jurnal Agrisains 18 (1): 13-22. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/ AGRISAINS/article/download/9929/791 .
Avila,  C.L.S.  dan  B.F.  Carvalho.  2019.  Silage fermentation—updates  focusing  on  the performance  of  micro-organisms.  Journal of Applied Microbiology 128:966-984. https://sfamjournals.onlinelibrary.wiley.co m/doi/epdf/10.1111/jam.14450 .
Official  methods  of  analysis  of  AOAC
International.    2012.  Official  methods  of analysis. Association of official analytical chemist, 19th edition. AOAC
International, Gaithersburg, https://www.worldcat.org/title/official- methods-of-analysis-of-aoac- international/ oclc/817542290 .
Balo EFS, Pendong AF, Tuturoong RAV, Waani
MR,  Malalantang  SS.  2022.  Pengaruh Lama  Ensilase  terhadap  Kandungan Bahan  Kering,  Bahan  Organik,  Protein Kasar  Sorgum  Varietas  Pahat  Ratun  ke-1 sebagai Pakan Ruminansia. Jurnal Zootec 42(1): 74-80. DOI: https://doi.org/10.35792/zot.42.1.2022.41 090
Bira  GF,  Tahuk  PK,  Seran  T.  2020.  Pengaruh Penggunaan  Jenis  Hijauan  Berbeda  pada Pembuatan  Silase  Komplit  terhadap Kandungan  Nutrisi  yang  Dihasilkan.
Journal  Of  Tropical  Animal  Science  and Technology. 2(1): 43-51. DOI: https://doi.org/10.32938/jtas.v2i1.589 Boko BRW, Lawa EDW, Jelantik IGN, Lazarus
EJL.  2022.  Pengaruh  penggunaan  dedak sorghum  terhadap  kandungan  nutrisi silase  campuran  rumput  kume  (Sorghum plumosum  var.  Timorense)  dan  daun gamal (Gliricida sepium). Jurnal
Peternakan  Lahan  Kering.  4(1):  1904- 1911.
http://publikasi.undana.ac.id/index.php/JP
LK/article/view/k931
Dami  Dato  TO,  Mullik  ML.  2019.  Peningkatan
Rasio Urea:Urease Dalam Proses Hidrolisis  Alkali Menurunkan  Komponen Karbohidrat  Struktural  Pada  Rumput Kume (Sorghum plumosum var.
Timorense)  Kering.  Jurnal  Pastura,  9(1): 24-27. https://doi.org/10.24843/Pastura.2019.v09 .i01.p07
Jamluddin  D,  Nurhaeda,  Rasbawati.  2018. Analisis  Kandungan  Protein  Kasar  dan Serat  Kasar  Silase  Pakan  Komplit Berbahan  Dasar  Kombinasi  Jerami  Padi dan Daun Lamtoro Sebagai Pakan Ternak Ruminansia. Jurnal Bionature. 19(2): 105- 111. DOI: https://doi.org/10.35580/bionature.v19i2.9 727
Jimenez  EL,  Garcia  CV.  1992.  Relationship between  organic  carbon  dan  total  organic matter in municipal solid waste and refuse composts.  Bioresource  Technology,  41: 25-272. https://doi.org/10.1016/0960- 8524(92)90012-M
Juwandi,  Munir,  Fitriani.  2018.  Evaluasi Kandungan  Lemak  Kasar  dan  BETN Silase  Daun  Lamtoro  pada  Level  yang Berbeda  Sebagai  Bahan  Pakan  Utama Pakan  Komplit.  Jurnal  Bionature.  19(2): 112-118. http://dx.doi.org/10.35580/bionature.v19i 2.9728
Kamlasi  Y,  Mullik  ML,  Dami  Dato  TO.  2014. Pola  produksi  dan  nutrisi  rumput  Kume (Shorgum  plumosum  var.  Timorense) pada lingkungan alamiahnya. Jurnal Ilmu- Ilmu Peternakan 24 (2): 31- 40. http://jiip.ub.ac.id/index.php/jiip/article/vi ew/170/239
Keraf FK, Nulik Y, Mullik ML. 2015. Pengaruh Pemupukan Nitrogen dan Umur Tanaman
terhadap  Produksi  dan  Kualitas  Rumput
Kume (Sorghum plumosum var. Timorense).  Jurnal  Peternakan  Indonesia. 17(2): 123-130. https://doi.org/10.25077/jpi.17.2.123- 130.2015
Kurniawan  W,  Wahyono  T,  Sandiah  N,  Has  H, Nafiu  LO,  Napirah  A.  2019.  Evaluasi Kualitas  dan  Karakteristik  Fermentsi
Silase  Kombinasi  stay  green  sorgum (Sorghum  bicolor  L.  Moenth)-  Indigofera sp. Zolingeriana dengan Perbedaan Komposisi.  Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi Peternakan Tropis. 6(1): 62-69. http://jurnal.unsyiah.ac.id/agripet/article/d ownload/14857/11580
Laksono  PB,  Wachjar  A,  Supijatno.  2016.
Pertumbuhan  Mucuna  bracteata  DC  pada berbagai  waktu  inokulasi  dan  dosis inokulan.  Jurnal  Agron.  Indonesia.  44(1): 104-110. https://doi.org/10.24831/jai.v44i1.12510 McDonald,  P.,  A.R.  Henderson  and  S.J.E. Heron. 1991. Biochemistry of Silage, 2nd edition.  Chalcombe Publication, GB. https://www.goodreads.com/book/show/4 705913-the-biochemistry-of-silage
Mullik L.M, Oematan G, Dami Dato TO, Mullik YM.  2019.  Rasio  karbon:  nitrogen  dalam pengawetan hijauan sumber protein mempengaruhi  kualitas  nutrisi  produk biofermentasi. Jurnal Pastura, 9(1): 11-14. https://doi.org/10.24843/Pastura.2019.v09 .i01.p03
Mustabi  J,  Rinduwati,  Mutmainna.  2019. Kandungan Protein Kasar dan Serat Kasar Silase  Ransum  Komplit  Pada  Berbagai bentuk  dan  Lama  Penyimpanan.  Buletin Nutrisi  dan  Makanan  Ternak.  13(1):  10- 16. https://doi.org/10.20956/bnmt.v13i1.8189 Mustika  LM,  Hartutik.  2021.  Kualitas  silase tebon  jagung  (Zea  mays  L.)  Dengan penambahan berbagai bahan aditif ditinjau  dari  kandungan  nutrisi.  Jurnal Nutrisi Ternak Tropis,  4 (1): 55-59. https://doi.org/10.21776/ub.jnt.2021.004.0 1.755
Nahak OR, Tahuk PK, Bira GF, Bere A, Riberu H.  2019.  Pengaruh  Penggunaan  Jenis Aditif  yang  berbeda  terhadap  Kualitas Fisik dan Kimia Silase Komplit Berbahan dasar  Sorgum  (Sorghum  bicolor  L. Moenth). Journal of Animal Science. 4(1): 3-5.
https://savana- cendana.id/index.php/JA/article/download /649/273
Ndun  AN,  Hilakore  MA,  Enawati  LS.  2015.
Kualitas  silase  campuran  rumput  Kume (Sorghum plumosum var. Timorense) dan daun  gamal  (Gliricidia  sepium)  dengan rasio berbeda. Jurnal Nukleus Peternakan, Juni 2015, 2(1): 83-87. https://doi.org/10.35508/nukleus.v2i1.73 Nuraini,  N.  2017.  Limbah  Sagu  Fermentasi Sebagai Pakan Alternatif Unggas. Limbah Sagu Fermentasi Sebagai Pakan Alternatif Unggas, 1(2502), 6–8. https://doi.org/10.25077/car.6.4 Oematan G, Hartati E, Mullik ML, Tara Tiba N.
2020. Optimalisasi
biofermentasi peningkatan nilai gizi pemanfaatan Chromolena  odorata  sebagai  sumber pakan  sapi  Bali.  International  Journal  of Science and Research (IJSR). 9(8): 1524- 1533.
https://www.ijrnet/get.abstract.php?paperi d=ART20203455
Ora  U,  Jelantik  IGN,  Jalaludin.  2016.  Kualittas silase  hijauan  Clitoria  ternatea  yang ditanam  monokultur  dan  terintegrasi dengan jagung. Jurnal
Nukleus
Peternakan. 3(1): 24-33.
https://doi.org/10.35508/nukleus.v3i1.783
Saloko  F.  2005.  Pengaruh  tingkat  penambahan bahan  pengawet  terhadap  kadar  bahan kering  dan  persentase  keberhasilan  silase rumput  Panicum  sarmentosum,  Robx.  J. Agrisains 6 (3) : 166-170.
https://docplayer.info/storage/64/51156693/5115
6693.pdf
Siarit  J,  Simanihuruk  K,  Junjungan.  2009. Pemanfaatan  Mucuna  bracteata  untuk pakan  kambing:  produksi,  nilai  nutrisi, palatabilitas,  dan  kecernaan.  Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. 425-433. https://docplayer.info/storage/60/4531342
1/45313421.pdf
Sulitstyo  HE,  Subagyo  I,  Yulinar  E.  2020.
Kualitas  silase  rumput  gajah  (Pennisetum purpureum)  dengan  penambahan  jus  tape singkong.  Jurnal  Nutrisi  Ternak  Tropis. 3(2): 63-70.DOI: https://doi.org/10.21776/UB.JNT.2020.00
3.02.3
Trisnadewi  AAAS,  Cakra  IGLO,  Suarna  IW.
2017.  Kandungan  Nutrisi  Silase  Jerami Jagung  Melalui  Fermentasi  Pollard  dan
Molases.  Majalah  Ilmiah  Peternakan, Fakultas Peternakan Universitas Udayana. 20(2): 55-59.
https://doi.org/10.24843/MIP.2017.v20.i0 2.p03 Ülger,  Mahmut  Kaplan.  2017.  Effects  of Ensiling Duration on Chemical Composition  of  Maize  Silages.  European Journal of Development Research, 2(1):63-65. Retrieved from https://dergipark.org.tr/en/pub/ejsdr/issue/ 27742/295075
Wati  WS,  Mashudi,  Irsyammawati  A.  2018.
Kualitas  silase  rumput  odot  (Pennisetum purpureum cv. Mott) dengan penambahan
Lactobacillus plantarum dan molases pada waktu  inkubasi  berbeda.  Jurnal  Nutrisi Ternak Tropis. 1 (1): 45-53.
http://dx.doi.org/10.21776/ub.jnt.2018.00 1.01.6
Yana  R.  2011.  Kualitas  Fermentasi  Dan
Kandungan Nutrien Silase Beberapa Jenis Rumput  Yang  Dipanen  Pada  Waktu Berbeda.  Departemen  Ilmu  Nutrisi  Dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan,IPB. http://repository.ipb.ac.id/handle/1234567
89/47257
Yusuf,  A.  2001.  Kandungan  protein  kasar  dan serat  kasar  pada  silase  campuran  rumput gajah  (Penisetun  pupuereum)  dengan legum. Fapet universitas Hasanuddin. http://repository.unhas.ac.id/id/eprint/198 94/1