## ISSN: 0215-7950
*Alamat penulis korespondensi: Fakultas Pertanian Universitas Nusa Cendana. Jalan Adisucipto Penfui, Kupang, NTT, Indonesia. 85001 Tel: (0380) 881580. Surel: asimamora@staf.undana.ac.id

## Volume 19, Nomor 6, November 2023
Halaman 238–245 DOI: 10.14692/jfi.19.6.238–245
Patogenisitas Botryodiplodia theobromae pada Batang Cendana dan Penghambatannya secara in Vitro oleh Trichoderma spp.
Pathogenicity of Botryodiplodia theobromae on Sandalwood Stems and Its in Vitro Inhibition by Trichoderma spp.
Sane Wolagole, Agnes Virginia Simamora * , Mayavira Veronica Hahuly Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Nusa Cendana, Kupang. Jalan Adisucipto Penfui, Kupang, 85001
(diterima Agustus 2023, disetujui November 2023)

## ABSTRAK
Penelitian dilaksanakan untuk menentukan patogenisitas Botryodiplodia theobromae dalam menginfeksi batang cendana dan menguji kemampuan 10 isolat Trichoderma spp. dalam menghambat pertumbuhan dua isolat B. theobromae secara in vitro. Uji patogenisitas dilakukan dengan menginokulasi potongan isolat B . theobromae pada batang cendana. Uji antagonis dilakukan menggunakan metode kultur ganda dengan 10 isolat Trichoderma spp. dan  dua isolat B. Theobromae sebagai kombinasi perlakuan. Hasil uji patogenisitas membuktikan bahwa B. theobromae menyebabkan gejala penyakit dimulai pada hari ke 30 setelah inokulasi. Hasil uji antagonis menunjukkan bahwa isolat-isolat Trichoderma spp. mampu menghambat pertumbuhan dua isolat B. theobromae melalui antibiosis dan kompetisi. Penghambatan terbaik terhadap B. theobromae Bt01 dicapai oleh T. viride TVJKS (53.20%), sedangkan penghambatan terbaik terhadap B. theobromae Bt02 dicapai oleh T. hamatum THAK (53.26%).
Kata kunci: antibiosis, kompetisi, metode kultur ganda, uji antagonis, uji patogenisitas

## ABSTRACT
Research was carried out to determine the pathogenicity of Botryodiplodia theobromae in infecting sandalwood stems, and to test the ability of 10 isolates of Trichoderma spp. in inhibiting in vitro growth of two isolates of B. theobromae . The pathogenicity test was carried out by inoculating B. theobromae isolates on sandalwood stems. The antagonist test was conducted using the dual culture method with 10 isolates of Trichoderma spp. and two isolates of B. theobromae as combination treatment. The pathogenicity test proved that B. theobromae caused disease symptoms starting on the day 30 th after inoculation. Antagonist test showed that isolates of Trichoderma spp. were able to inhibit the growth of two isolates of B. theobromae through antibiosis and competition activities. The best inhibition against B. theobromae Bt01 was achieved by T. viride TVJKS (53.20%), while the best inhibition against B. theobromae Bt02 was achieved by T. hamatum THAK (53.26%).
Keywords: antagonist test, antibiosis, competition, dual culture methode, pathogenicity test
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Wolagole et al.

## PENDAHULUAN
Tanaman cendana ( Santalum album ) merupakan tumbuhan asli Indonesia yang berkembang endemik di wilayah Nusa Tenggara Timur (NTT) dan banyak ditemukan di sebagian Pulau Timor, Sumba, Alor, Solor, Pantar, Flores, dan Rote. Tanaman cendana dapat menghasilkan minyak atsiri serta hasil produksi kayu teras yang khas. Hal tersebut membuat tanaman cendana mempunyai nilai ekonomi yang sangat tinggi (Ariyanti dan Asbur 2018). Dilaporkan oleh Sakan et al. (2022) bahwa jumlah tanaman cendana di Provinsi NTT mengalami penurunan yang sangat nyata dalam kurun waktu 1987–1997. Salah satu penyebab menurunnya hasil produksi kayu cendana ialah keberadaan organisme pengganggu tumbuhan. Pada survei yang telah dilakukan, ditemukan penyakit busuk batang pada tanaman cendana yang diakibatkan oleh infeksi cendawan patogen Botryodiplodia theobromae . Penyakit busuk batang cendana umumnya menunjukkan gejala kanker pada batang dan keluarnya cairan bening kekuningan yang lengket pada cabang yang luka atau rusak. Gejala penyakit pada cendana ini sama seperti gejala penyakit busuk batang pada jeruk yang disebabkan oleh B. theobromae (Dwiastuti dan Aji 2021). Cendawan B. theobromae atau dikenal sebagai Lasiodiplodia theobromae , bersifat kosmopolitan, memiliki kisaran inang yang luas dan merupakan patogen penting yang merusak berbagai jenis tanaman perkebunan, hortikultura, dan pangan di daerah tropis dan subtropic (Vitoria et al . 2012). Cendawan patogen tersebut cenderung memanfaatkan peluang yang ada dengan menginfeksi tanaman melalui luka atau jaringan yang sudah mati, terutama pada bagian tanaman yang bersifat berdaging atau berkayu, seperti busuk buah, hawar daun, busuk ujung batang, gumosis, kanker batang, dan mati ujung (Rossman et al . 2017; Karunanayake dan Adikaram 2020). Pemanfaatan agens biokontrol seperti Trichoderma spp . telah dilaporkan sebagai antagonis untuk B. theobromae pada tanaman pala (Susanna et al . 2018),
makadamia (Li et al . 2022), dan pomelo (Khuong et al . 2023), tetapi belum pernah diuji pada tanaman cendana. Trichoderma spp. memiliki pertumbuhan yang relatif cepat dan kemampuan untuk dibiakkan dengan mudah baik di lingkungan budi daya maupun lingkungan alami. Di samping itu, beberapa spesies Trichoderma dapat bertahan hidup dalam kondisi yang tidak mendukung dengan membentuk klamidospora, dan juga cukup tahan terhadap fungisida dan herbisida (Kumar et al . 2023). Penelitian ini bertujuan mengetahui patogenisitas B. theobromae dalam menginfeksi batang cendana, dan menguji kemampuan 10 isolat Trichoderma spp. dalam menghambat pertumbuhan dua isolat B. theobromae secara in vitro.

## BAHAN DAN METODE
Pengambilan Sampel dan Isolasi Patogen Pengambilan sampel batang tanaman cendana dengan gejala penyakit busuk batang dilakukan di halaman Fakultas Pertanian Universitas Nusa Cendana Kupang. Bagian batang tanaman diambil dan dimasukkan ke dalam kantung plastik, kemudian dibawa ke laboratorium untuk tahap isolasi dan identifikasi  patogen.  Di  laboratorium  bagian batang tanaman dibersihkan menggunakan air mengalir, kemudian jaringan tanaman yang sakit dipotong sebesar 5–10 mm menggunakan skalpel steril.  Potongan sampel selanjutnya direndam berturut-turut dalam akuades steril dan alkohol 70% masing- masing selama 1 menit, kemudian ditiriskan pada tisu steril. Jaringan tanaman yang telah steril ditumbuhkan dalam cawan petri yang berisi medium agar-agar dekstrosa kentang (ADK). Pengamatan pertumbuhan, bentuk, dan warna koloni dilakukan setiap hari selama empat hari. Koloni cendawan yang tumbuh kemudian dimurnikan dan diinkubasi pada suhu ruang untuk pengujian berikutnya.
Identifikasi Cendawan Patogen Identifikasi  dilakukan  dengan  mengamati ciri makroskopis dan mikroskopis cendawan berdasarkan Barnett dan Hunter (1998).
Ciri makroskopis yang diamati ialah bentuk koloni, tipe koloni, pola koloni, pertumbuhan koloni, dan warna koloni. Pengamatan ciri mikroskopis menggunakan mikroskop mencakup hifa, spora, sporangium, konidium, dan konidiofor serta ciri khusus yang akan menentukan jenis cendawan tersebut.
Uji Patogenesitas B. theobromae Uji patogenisitas dilakukan dengan menginokulasikan patogen pada batang tanaman cendana sehat. Batang tanaman cendana sehat berukuran 13 cm disterilkan permukaannya menggunakan alkohol, lalu disayat sepanjang 3 cm menggunakan pisau steril. Potongan inokulum isolat cendawan B. theobromae diletakkan pada bagian yang disayat, kemudian diikat menggunakan cling wrap , dan diinkubasi pada kotak steril yang sudah dialasi dengan tisu basah agar terjaga kelembapannya. Gejala yang muncul diamati dan dicocokan dengan gejala yang ditemukan pada tanaman asal sampel. Pengamatan dilakukan setiap dua minggu sekali selama ±2 bulan.

## Uji Daya Hambat Cendawan Antagonis
Cendawan antagonis yang digunakan merupakan koleksi dari Laboratorium Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Nusa Cendana. Sebanyak 10 isolat Trichoderma s pp. (Tabel 1) digunakan pada uji daya hambat cendawan antagonis terhadap dua isolat B. theobromae , yaitu isolat Bt01 yang diisolasi dari tanaman cendana di
lingkungan Universitas Nusa Cendana, dan isolat B. theobromae Bt02 yang diisolasi dari tanaman cendana di Kabupaten Timor Tengah Selatan, yang merupakan koleksi dari Laboratorium Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Nusa Cendana. Uji daya hambat dilakukan dengan metode uji ganda ( dual culture ), yaitu masing-masing isolat Trichoderma spp. berukuran 5 mm ditumbuhkan sejajar dengan isolat patogen B. theobromae berukuran sama dengan jarak keduanya ialah 3 cm. Kontrol perlakuan ialah pertumbuhan cendawan patogen tanpa cendawan antagonis. Pengamatan terhadap daya hambat dilalukan setiap hari hingga perlakuan kontrol memenuhi cawan petri. Daya hambat masing-masing isolat cendawan antagonis dihitung menggunakan rumus:
P  = R1 – R2
R1 × 100%, dengan
P, daya hambat (%); R1, jari-jari koloni patogen yang menuju ke tepi cawan; dan R2, jari-jari patogen yang menuju ke koloni Trichoderma spp.

## HASIL
Patogenesitas B. theobromae Gejala infeksi dua isolat B. theobromae pada batang tanaman cendana mulai muncul pada 30 hari setelah inokulasi (HSI). Batang cendana ditumbuhi spora patogen berwarna putih dan lama-kelamaan berubah menjadi abu-abu kehitaman. Pada 60 HSI, batang tanaman cendana berubah warna menjadi
Tabel 1 Isolat Trichoderma spp. yang digunakan pada uji daya hambat Isolat Trichoderma Tanaman inang Lokasi asal T. asperellum asal akar cendana (TAAC) Cendana Kabupaten Timor Tengah Selatan T. asperellum asal jeruk keprok soe (TAJKS) Jeruk keprok soe  Kabupaten Timor Tengah Selatan T. asperellum asal kentang (TAK) Kentang Kabupaten Timor Tengah Selatan T. hamatum asal jeruk keprok soe (THAJKS) Jeruk keprok soe Kabupaten Timor Tengah Selatan T. hamatum asal kentang (THAK) Kentang Kabupaten Timor Tengah Selatan T. harzianum asal akar cendana (THRAC) Cendana Kabupaten Timor Tengah Selatan T. harzianum asal kentang (THRK) Kentang Kabupaten Timor Tengah Selatan T. harzianum asal jeruk keprok soe (THRJKS) Jeruk keprok soe Kabupaten Timor Tengah Selatan T. viride asal akar cendana (TVAC) Cendana Kabupaten Timor Tengah Selatan T. viride asal jeruk keprok soe (TVJKS) Jeruk keprok soe Kabupaten Timor Tengah Selatan
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Wolagole et al.
cokelat kehitaman, namun pada kontrol tidak menunjukkan gejala sakit (Gambar 1). Gejala yang ditimbulkan oleh kedua isolat B . theobromae cenderung sama, namun pada isolat Bt02gejala yang tampak berupa adanya garis-garis sempit dan terus berkembang sehingga batang yang disayat terjadi luka yang tidak teratur, luas tapi dangkal, dan berwarna kehitaman. Gejala penyakit pada batang cendana ini mirip dengan gejala penyakit pada batang cendana tempat pertama kali isolat B . theobromae diisolasi.
Daya Hambat Trichoderma spp. terhadap B. theobromae secara In Vitro Isolat T. viride TVJKS memiliki kemampuan penghambatan tertinggi ter- hadap B. theobromae Bt01 yaitu sebesar 53.2% diikuti oleh T. asperellum TAJKS (42.64%) (Tabel 2). Hasil pengamatan secara makroskopis terlihat bahwa isolat T . viride TVJKS mampu menghambat pertumbuhan B. theobromae Bt01 dengan mekanisme antibiosis (Gambar 2; Tabel 3). T. hamatum THAK mempunyai kemampuan penghambatan tertinggi terhadap B. theobromae Bt02
Tabel 2  Daya hambat Trichoderma spp. terhadap Botryodiplodia theobromae Cendawan antagonis Daya hambat (%) Bt01 Bt02 T. asperellum asal akar cendana (TAAC) 23.13 a 17.23 a T. asperellum asal jeruk keprok soe (TAJKS) 42.64 b 33.99 a T. asperellum asal kentang (TAK) 33.73 ab 51.80 b T. hamatum asal jeruk keprok soe (THAJKS) 21.07 a 17.22 a T. hamatum asal kentang (THAK) 29.87 ab 53.26 b T. harzianum asal akar cendana (THRAC) 20.24 a 17.02 a T. harzianum asal kentang (THRK) 23.58 a 17.86 a T. harzianum asal jeruk keprok soe (THRJKS) 27.09 a 32.79 a T. viride asal akar cendana (TVAC) 27.46 a 20.98 a T. viride asal jeruk keprok soe (TVJKS) 53.20 b 27.75 a
Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama berbeda tidak nyata pada uji BNJ 5%.
Gambar 1  Gejala dan tanda penyakit pada batang tanaman cendana pada uji patogenisitas 60 hari setelah inokulasi. a, Isolat Bt01 menyebabkan gejala cokelat kehitaman pada bidang sayatan; b, Isolat Bt02 menyebabkan munculnya miselium berwarna putih yang kemudian berubah menjadi cokelat kehitaman dan mucul celah-celah luka di sekitar bidang sayatan; dan c, Kontrol batang nampak sehat tanpa gejala penyakit.
a b c
peran ekologi yang berbeda. Cendawan ini dapat  bertindak  sebagai  saprobik,  endofitik, atau patogen laten (Batista et al . 2021). Anggota Botryosphaeriaceae juga dikenal sebagai patogen pada berbagai tumbuhan berkayu, termasuk spesies pohon hutan seperti Eucalyptus globulus , Pinus pinaster , dan Quercus suber (Batista et al . 2020). Salah satu anggota Botryosphaeriaceae yang diakui sebagai patogen yang agresif ialah B. theobromae , yang sudah dilaporkan dapat menginfeksi tanaman bernilai ekonomi tinggi di Indonesia seperti jeruk, kakao, karet, manggis, dan pisang (Sandra et al . 2021).
Pada penelitian ini, dua isolat B . theobromae yang digunakan pada uji patogenisitas mampu
yaitu sebesar 53.26%, tetapi tidak berbeda nyata dengan T. asperellum TAK (51.80%). Cendawan T. hamatum THAK mampu menghambat pertumbuhan B. theobromae Bt02 dengan mekanisme kompetisi (Gambar 2; Tabel 3). T. harzianum THRAC memiliki kemampuan penghambatan terendah baik terhadap B. theobromae Bt01 maupun isolat Bt02. Secara umum, mekanisme penghambatan yang yang terjadi ialah kompetisi (Tabel 3).

## PEMBAHASAN
Famili Botryosphaeriaceae merupakan kelompok cendawan yang tumbuh di daerah tropis dan sub tropis dan dikenal memiliki
Tabel 3 Mekanisme penghambatan Trichoderma spp. terhadap Botryodiplodia theobromae
Cendawan antagonis Mekanisme penghambatan isolat B. theobromae Bt01 Bt02 A K A K T. asperellum asal akar cendana (TAAC) √ √ T. asperellum asal jeruk keprok soe (TAJKS) √ √ T. asperellum asal kentang (TAK) √ √ T. hamatum asal jeruk keprok soe (THAJKS) √ √ T. hamatum asal kentang (THAK) √ √ T. harzianum asal akar cendana (THRAC) √ √ T. harzianum asal kentang (THRK) √ √ T. harzianum asal jeruk keprok soe (THRJKS) √ √ T. viride asal akar cendana (TVAC) √ √ T. viride asal jeruk keprok soe (TVJKS) √ √
Keterangan: A, antibiosis; K, kompetisi
Gambar 2 Mekanisme penghambatan Trichoderma t erhadap B. theobromae . a, Aktivitas penghambatan antibiosis, tanda panah menunjukkan terdapat pemisahan/zona bening atau ruang kosong pada daerah kontak antara miselium isolat T. viride TVJKS   dan Bt01; b, Aktivitas penghambatan kompetisi, T. asperellum THAK tumbuh cepat berkompetisi memperebutkan ruang dan makanan dengan Bt02 sehingga pertumbuhan Bt02 terhambat.
a b Bt01 TVJKS Bt02 THAK
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Wolagole et al.
menimbulkan gejala penyakit pada batang cendana. Postulat Koch telah dilakukan dalam penelitian ini, yaitu B . theobromae berhasil diisolasi kembali dari batang yang terinfeksi dan tidak ditemukan pada batang cendana kontrol. Gejala hasil uji patogenisitas yang muncul pada batang cendana ini juga mirip dengan gejala pada tanaman jeruk (Salamiah et al . 2008) dan tanaman pala (Biju et al . 2021), yaitu adanya luka nekrotik yang tidak teratur dan batang yang terserang berwarna hitam. Nilai daya hambat Trichoderma spp. terhadap B. theobromae berada dalam kategori daya hambat minimal, dikarenakan nilainya kurang dari 60%. Diuraikan oleh Ratnasari et al. (2014) bahwa jika persentase penghambatan cendawan antagonis mencapai lebih dari 60% dari permukaan cawan petri, maka dinyatakan bahwa cendawan antagonis mampu menyerang dan menghambat pertumbuhan dari cendawan patogen secara maksimal. Sebaliknya, jika cendawan antagonis memiliki efek hambatan kurang dari 60% dari permukaan cawan petri, maka dinyatakan bahwa cendawan antagonis memiliki kemampuan menyerang pertumbuhan cendawan patogen secara minimal.
Kemampuan penghambatan isolat Trichoderma spp. terhadap B. theobromae yang berbeda-beda diduga disebabkan oleh perbedaan mekanisme antagonis yang dimiliki oleh Trichoderma . Mekanisme aktivitas Trichoderma sebagai agens biokontrol terhadap cendawan patogen tumbuhan secara umum dibagi menjadi tiga macam, yaitu kompetisi tempat tumbuh dan nutrisi, antibiosis, dan parasitisme (Kumar et al . 2023). Berdasarkan pengamatan maksroskopis, terlihat bahwa mekanisme penghambatan Trichoderma spp. terhadap B. theobromae dalam penelitian ini ialah antibiosis dan kompetisi (Tabel 3). Antibiosis adalah mekanisme antagonisme yang melibatkan hasil metabolit penyebab lisis, enzim, senyawa volatil dan non-volatil atau toksin yang dihasilkan oleh suatu mikroorganisme. Metabolit sekunder yang dihasilkan Trichoderma spp. juga berperan penting dalam aktivitas antifungalnya
(Guzmán-Guzmán et al . 2023). Mekanisme antibiosis nampak pada hifa T . viride TVJKS yang tumbuh tidak menyatu dengan hifa B. theobromae Bt01 dan terlihat zona bening di antara kedua cendawan tersebut. Terbentuknya zona bening ini diduga karena adanya senyawa aktif yang dihasilkan oleh T. viride TVJKS. Dilaporkan sebelumnya bahwa T. viride menghasilkan beberapa metabolit sekunder, diantaranya adalah alkyl pyrenos yang bersifat antifungal; isonitriles yang merupakan salah satu antibiotik yang berfungsi sebagai antibakteri dan antifungal, peptaibols (peptida yang mengandung asam α -aminoisobutyric) yang bersifat antimikroba, dan merangsang resistensi sistemik pada tanaman terhadap invasi patogen; dan viridin yang mempunyai kemampuan menghambat spora beberapa jenis cendawan patogen (Mukhopadhyay dan Kumar 2020; Tyskiewicz et al . 2022; Guzmán- Guzmán et al. 2023; Kumar et al . 2023). Mekanisme kompetisi terjadi karena dua jenis cendawan tumbuh berdekatan dan bersaing satu sama lain. Persaingan ini muncul karena keduanya memiliki kebutuhan yang sama, seperti kebutuhan akan ruang tumbuh dan nutrisi (Ali dan Samosir 2021). Hasil pengamatan menunjukkan bahwa mekanisme kompetisi ditunjukkan oleh T. hamatum THAK terhadap Bt02. Pada awal pertumbuhan, koloni kedua cendawan menyebar secara teratur, tetapi pada hari keempat, terlihat bahwa T. hamatum THAK mulai tumbuh lebih cepat berkompetisi dalam mendapatkan ruang dan makanan dengan B . theobromae Bt02. Persaingan antara ruang pertumbuhan dan kebutuhan nutrisi antara cendawan antagonis dan patogen akan mengakibatkan penekanan pada pertumbuhan miselium cendawan patogen. Akibatnya, pertumbuhan miseliumnya cenderung berorientasi ke arah vertikal daripada horisontal (Ali dan Samosir 2021) Kemampuan penghambatan Trichoderma spp. terhadap B. theobromae sudah dilaporkan oleh beberapa peneliti. Susanna et al. (2018) juga menyimpulkan bahwa T. harzianum dan T. asperellum mampu menghambat pertumbuhan B. theobromae yang menyebabkan penyakit
mati meranggas pada tanaman pala secara in vitro. Hasil penelitian Li et al. (2022) juga menyatakan bahwa T. hamatum mampu menghambat pertumbuhan B. theobromae yang menyebabkan penyakit busuk pada kulit buah, kanker batang, dan nekrosis tunas pada tanaman makadamia secara in vitro dan in vivo . Trichoderma asperellum juga terbukti menghambat pertumbuhan B. theobromae , patogen busuk ujung batang pada jeruk pomelo ( Citrus maxima ) secara in vitro (Khuong et al. 2023).
Penelitian ini berhasil mengisolasi B. theobromae dari batang cendana yang bergejala busuk batang. Dua isolat B. theobromae tersebut terbukti bersifat patogenik dan menyebabkan gejala luka nekrotik berwarna cokelat kehitaman. Trichoderma spp. yang diuji sebagai agens antagonis menunjukkan aktivitas antibiosis dan kompetisi. Berdasarkan hasil uji antagonis disimpulkan bahwa penghambatan terbaik terhadap B. theobromae Bt01 dicapai oleh T. viride TVJKS (53.20%), sedangkan penghambatan terbaik terhadap B. theobromae Bt02 dicapai oleh T. hamatum THAK  (53.26%).

## DAFTAR PUSTAKA
Ali M, Samosir IY. 2021. Uji antagonisme jamur  endofit  tanaman  aren  ( Arenga pinnata Merr.) terhadap Ganoderma boninense Pat. penyebab penyakit busuk pangkal batang kelapa sawit. Jurnal Agrikultura 32(3):304–311. DOI: https:// doi.org/10.24198/agrikultura.v32i3.36611. Ariyanti M, Asbur Y. 2018. Cendana ( Santalum album L.) sebagai tanaman penghasil minyak atsiri. Jurnal Kultivasi . 17(1):558– 567. DOI: https://doi.org/10.24198/ kultivasi.v17i1.15804.
Barnett HL, Hunter BB. 1998. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. APS Press. Batista E, Lopes A, Alves A. 2020. Botryosphaeriaceae species on forest trees in Portugal: diversity, distribution and pathogenicity. European Journal of Plant Pathology. 158:693–720. DOI: https://doi. org/10.1007/s10658-020-02112-8.
Batista E, Lopes A, Alves A. 2021. What we know about Botryosphaeriaceae? An overveiw of a worldwide cured dataset. Forest. 12(3):313. DOI: https://doi. org/10.3390/f12030313.
Biju CN, Jeevalatha A, Peeran MF, Bhai RS, Basima F, Nissar VAM, Srinivasan V, Thomas L. 2021. Association of Lasiodiplodia theobromae with die- back and decline of nutmeg as revealed through phenotypic, pathogenicity and phylogenetic analyses. 3 Biotech. 11:422. DOI: https://doi.org/10.1007/s13205-021- 02961-y.
Dwiastuti WE, Aji TG. 2021. Citrus stem rot disease ( Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griff. & Maubl) problem and their control strategy in Indonesia. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 752(1):012030. DOI: https://doi. org/10.1088/1755-1315/752/1/012030.
Guzmán-Guzmán P,  Kumar A,  de los Santos- Villalobos S, Parra-Cota, FI,  Orozco- Mosqueda MdC, Fadiji AE,  Hyder S,  Babalola OO, Santoyo G. 2023. Trichoderma species: our best fungal allies in the biocontrol of plant diseases—a review. Plants. 12(3):432. DOI: https://doi. org/10.3390/plants12030432.
Karunanayake KOLC, Adikaram NKB. 2020.
Stem-end rot in major tropical and sub- tropical fruit species. Ceylon Journal of Science. 49(5):327–336. DOI: https://doi. org/10.4038/cjs.v49i5.7800.
Khuong NQ, Nhien DB, Thu LTM, Trong ND, Hiep PC, Thuan VM, Quang LT, Thuc LV, Xuan DT. 2023. Using Trichoderma asperellum to antagonize Lasiodiplodia theobromae causing stem-end rot disease on Pomelo ( Citrus maxima ). Journal of Fungi. 9(10):981. DOI: https://doi. org/10.3390/jof9100981.
Kumar V, Koul B, Taak P, Yadav D, Song M. 2023. Journey of Trichoderma from pilot  scale to mass production: A review. Agriculture. 13(10):2022. DOI: https:// doi.org/10.3390/agriculture13102022.
Li X, Leng J, Yu L, Bai H, Li X, Wisniewski M, Liu J, Sui Y. 2022. Ef fi cacy of the
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Wolagole et al.
biocontrol agent Trichoderma hamatum against Lasiodiplodia theobromae on macadamia. Frontiers in Microbiology. 13:994422. DOI: https://doi.org/10.3389/ fmicb.2022.994422.
Mukhopadhyay R, Kumar D. 2020.
Trichoderma :  a  beneficial  antifungal agent and insights into its mecahnism of biocontrol potential. Egyptian Journal of Pest Control. 30(1):1–8. DOI: https://doi. org/10.1186/s41938-020-00333-x.
Ratnasari JD, Isnawati, Ratnasari E. 2014.
Uji antagonis jamur agens hayati terhadap jamur Cercospor a musae penyebab penyakit  Sigatoka secara in vitro . LenteraBio. 3(2):129–135. Rossman AY, Allen WC, Castlebury LA. 2017. Proposals to conserve Botryodiplodia theobromae ( Lasiodiplodia theobromae ) against Sphaeria glandicola , Diplodia gossypina , and Physalosporarhodina
( Botryosphaeria rhodina ); Phyllosticta yuccae against Leptodothiorella notabilis ; and Ramularia brunnea against Sphaerella tussilaginis ( Mycosphaerella tussilaginis ) (Ascomycota: Dothideomycetes). Taxon. 66(3):747–748. DOI: https://doi. org/10.12705/663.17.
Sakan R, Seran W, Mau AE. 2022. Identifikasi hama pada kayu cendana ( Santalum album Linn.) di hutan pendidikan dan pelatihan sisimeni sanam Kabupaten Kupang. Jurnal Wana Lestari. 6(1):65–30.
Salamiah, Badruzsaufari, Arsyad M. 2008. Jenis tanaman inang dan masa inkubasi patogen Botryodiplodia theobromae pat.
penyebab penyakit kulit diplodia pada jeruk. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika. 8(2):123–131.  DOI: https://doi. org/10.23960/j.hptt.28123-131.
Sandra FK, Nurhasanah YS, Mutaqin KH,
Wiyono S, Tondok ET. 2021. Keragaman morfologi dan molekuler Lasiodiplodia theobromae dari tanaman jeruk, kakao, karet, manggis, dan pisang. Jurnal Fitopatologi Indonesia. 17(2):58–66. DOI: https://doi.org/10.14692/jfi.17.2.58-66 .
Susanna, Sinaga MS, Wiyono S, Triwidodo H.
2018. Pemanfaatan cendawan antagonis in situ sebagai agens biokontrol Lasiodiplodia theobromae penyebab dieback pada pada di Aceh Selatan. Jurnal Pertanian Tropik. 5(3):447–454. DOI: https://doi. org/10.32734/jpt.v5i3.3119.
Tyskiewicz R, Nowak A, Ozimek E, Jaroszuk- ´Sciseł J. 2022. Trichoderma : the current status of its application in agriculture for the biocontrol of fungal phytopathogens and stimulation of plant growth. Internal Journal of Molecular Science. 23(4):2329. DOI: https://doi.org/10.3390/ ijms23042329.
Vitoria NS, Cavalcanti M, Bezerra JL 2012. Lasiodiplodia theobromae : a new host and a revision of plant hosts reported in Brazil. Agrotrópica. 24(1):63–66. DOI:  https://doi.org/10.21757/0103- 3816.2012v24n1p63-66.