## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI AMPAS HASIL PENGOLAHAN SAGU (Metroxylon sagu Rottb)

## Selvian Talapessy, Edi Suryanto, Adithya Yudistira
Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT, MANADO, 95115

## ABSTRACT
The  study  aimed  to  determine  the  phenolic  content  and  antioxidant  activity  of  sago  waste processing  results.  Results  of  processing  sago  pulp  esxtraction  was  conducted  using  1  x  24 hour maceration using solvents ethanol with a concentration of 20, 40, 60 and 80%. Phenolic content was determined by Folin Ciocalteu method and determination of antioxidant activity using the DPPH free radical scavengers.  The results showed that the extract with the solvent concentration  of  40%  has  a  higher  total  phenolic  83,26  µg/mL  followed  by  solvent  extract concentration of 20, 60  and 80% respectively 70,01; 60,58; 22,04 µ g/mL. extract with 60% solvent concentration has free radical scavengers activity the highest of 82,75% followed by concentration  of  solvent  extracts  80,  20  and  60%  are  respectively  80,45;  76,62;  62,83%. These results suggest that the processing of sago pulp extract contains phenolic antioxidants and can be potentially as.
Keywords : pulp extract sago precessing results, phenolic compend, antioxidants.

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan  kandungan  fenolik  dan  aktivitas  antioksidan  dari ampas  hasil  pengolahan  sagu.  Ekstraksi  ampas  hasil  pengolahan  sagu  dilakukan  dengan metode maserasi 1 x 24 jam menggunakan pelarut etanol dengan konsentrasi 20, 40, 60 dan 80%. Kandungan fenolik ditentukan dengan metode Folin Ciocalteu dan penentuan aktivitas antioksidan  menggunakan  penangkal  radikal  bebas  DPPH.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa ekstrak dengan pelarut konsentrasi  40% memiliki total fenolik yang lebih tinggi yaitu 83,26 µg/mL diikuti ekstrak dengan pelarut konsentrasi 20, 60, dan 80% berturut-turut adalah 70,01;  64,58;  22,04  µg/mL.    Ekstrak  dengan  pelarut  konsentrasi  60%  memiliki  aktivitas penangkal radikal bebas  yang paling tinggi  yaitu  82,75% diikuti ekstrak dengan konsentrasi pelarut 80,  20 dan 60% berturut-turut  adalah 80,45; 76,62; 62,83%. Hasil ini menunjukkan bahwa  ekstrak  ampas  hasil  pengolahan  sagu  memiliki  kandungan  fenolik  dan  dapat berpotensi sebagai antioksidan.
Kata kunci : ekstrak ampas hasil pengolahan sagu , senyawa fenolik, antioksidan

## PENDAHULUAN
Sagu
adalah pohon yang menghasilkan  bahan  pangan  pokok  yang disantap  oleh  berbagai  suku  bangsa  yang mendiami  kepulauan  Maluku  dan  Papua serta  merupakan  bahan  pangan  tradisional suku-suku  bangsa  yang  mendiami  daerah lain  di  Indonesia.  Ampas  sagu  merupakan limbah  yang  dihasilkan  dari  pengolahan sagu,  kaya  akan  karbohidrat  dan  bahan organik  lainnya.  Pemanfaatnnya  terbatas dan biasanya dibuang begitu saja ketempat penampungan  atau  sungai  yang  ada  di daerah  sekitar  penghasil  tanpa  disadari ampas  sagu  atau  biasa  yang  disebut masyrakat  Maluku  ela  sagu  mempunyai manfaat  lain.  Limbah  padat  sagu  juga dapat  dijadikan  kerajinan  dan  disebut kerajinan  dari  limbah  sagu  karena  proses pengambilannya  adalah  memanfaatkan bagian yang terbuang pada proses penebangan pohon sagu (Risakotta, 2012).
Antioksidan  adalah  senyawa  kimia yang  dapat  digunakan  untuk  melindungi komponen  biologi  seperti  lipida,  protein, vitamin  dan  DNA  melalui  perlambatan kerusakan,  ketengikan  atau  perubahan warna  yang  disebabkan  oleh  oksidasi. Antioksidan  mampu  bertindak  sebagai penyumbang  radikal  hidrogen  atau  dapat bertindak  sebagai  aseptor  radikal  bebas sehingga  dapat  menunda  tahap  inisiasi (Suryanto  2012).  Penelitian  ini  bertujuan untuk  menentukan  aktivitas  antioksidan dan  tabir  surya  dari    ampas  hasil pengolahan sagu.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan pada bulan Maret  -  Mei  2013  di  Laboratorium Advance,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi Manado.
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  adalah  ampas  hasil  pengolahan sagu  yang berasal dari Maluku. Jenis sagu yang digunakan adalah sagu molat.  Bahan kimia  yang  digunakan  adalah  etanol  80%, etanol  60%,  etanol  40%,  etanol  20%, reagen Folin-Ciocalteu 50%, 1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil  (DPPH)  93µM,  larutan natrium karbonat 2%. Alat yang digunakan alat-alat  gelas  pyrex,  mikropipet,  spatula, vortex,  saringan,  Spektrofotometer  Milton Roy, timbangan analitik, blender.

## Ekstraksi
Ekstraksi  ampas  hasil  pengolahan sagu  menggunakan  pelarut  etanol  dengan konsentrasi  20%,  40%,  60%  dan    80%. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak  2  g  ampas  sagu  dimasukkan  ke dalam  masing-masing  tabung  reaksi  yang telah  diberikan  lebel    lalu  ditambahkan pelarut  20  mL  hingga  sampel  terendam semuanya.  Dilakukan  ekstraksi  selama  24 jam  kemudian  disaring.  Filtrat  diuapkan untuk  menghilangkan  pelarutnya  dengan cara dikering anginkan sehingga diperoleh ekstrak ampas hasil pengolahan sagu.

## Penentuan Kandungan Total Fenolik
Kandungan  total  fenolik  ekstrak ampas  hasil  pengolahan  sagu  ditentukan menggunakan  metode  Folin  Ciocalteu (Conde  dkk.  1997).  Sebanyak  0,1  mL larutan  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam masing-masing  tabung  reaksi  yang  telah diberi  lebel  20%,  40%,  60%,  80%,  lalu ditambahkan 0,1 mL reagen folin
Ciocalteu 50%. Campuran tersebut divortex,  lalu  ditambahkan  2  mL  larutan natrium  karbonat  2  mL.  Selanjutnya campuran  diinkubasi  dalam  ruang  gelap selama  30  menit.  Absorbansinya  dibaca pada λ 750 nm.
Penentuan  penangkal  Radikal  Bebas DPPH
Penentuan aktivitas penangkal radikal  bebas  DPPH  menurut  Burda  dan Olezek  (2001).  Sebanyak  0,1  mL  masing- masing larutan ekstrak ditambahkan dengan  1,5  mL  larutan  1,1-difenil-2- pikrilhidrazil (DPPH) 93 µ M dalam etanol dan divortekx selama 2 menit. Berubahnya warna  larutan  dari  kuning  ke  biru menunjukkan  efisiensi  penangkal  radikal bebas.  Selanjutnya  pada  5  menit  terakhir menjelang  30  menit  inkubasi,  absorbansi diukur pada λ 517 nm dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Aktifitas penangkapan radikal bebas
dihitung  sebagai  persentase  berkurangnya warna DPPH dengan menggunakan persamaan :
Aktifitas penangkal radikal bebas
(%) = 1 –
x 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi Ampas  dari Pengolahan Sagu
Penelitian  ini  menggunakan  metode maserasi  untuk  mengektraksi  ampas  dari hasil  pengolahan  sagu.  Sampel  yang digunakan  adalah  ampas  dari  hasil pengolahan  sagu  yang  sudah  dikeringkan. Ampas dari hasil pengolahan sagu diambil kemudian  di  kering  anginkan  selama  1  x 24  jam  hari  pada  suhu  kamar,  kemudian dihaluskan dengan alat penggiling. Ampas dari  hasil  pengolahan  sagu  ditimbang sebanyak  2  g  lalu  diekstraksi  dengan metode  maserasi  dengan  menggunakan pelarut etanol 20, 40, 60 dan 80%. Setelah diekstraksi  selama  1  x  24  jam,  sampel disaring  dengan  menggunakan  kertas saring  untuk  memisahkan  ekstrak  dari pelarutnya.  Ekstrak  yang  telah  terpisah dari  pelarut  dikeringkan  di  dalam  oven pada  suhu  40°C  sampai  kering.  Setelah kering  ekstrak  dikeruk  dan  ditempatkan pada  wadah  dan  diencerkan  lagi  dengan menggunakan etanol 50%.
Rendemen  yang  diperoleh  dari  hasil ekstraksi  2  gram  ampas  hasil  pengolahan sagu dengan pelarut etanol konsentrasi 20, 40,  60  dan  80%    sebanyak  20mL  dapat dilihat pada Tabel berikut.
Tabel 1. Rendemen ekstrak ampas pengolahan sagu
Ekstrak Etanol (%) Rendeman (%) Warna E 20 E 40 E 60 E 80 2,48 2,46 2,20 1,76 Coklat Coklat Coklat Coklat Muda
Berdasarkan  tabel  diatas,  dapat diketahui  bahwa  rendeman  terbanyak dihasilkan  oleh  ekstrak  dengan  pelarut etanol  konsentrasi  20%  (2,48%)  diikuti dengan  ekstrak  pelarut  etanol  40% (2,46%),  ekstrak  etanol  60%  (2,20%)  dan esktrak  etanol  80%  (1,76%).  Dari  hasil penelitian  ini  dapat  diketahui  bahwa
ekstrak  dengan  pelarut  etanol  dengan konsentrasi  20%  memiliki  rendemen  yang lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  etanol dengan  konsentrasi  40,  60  dan  80%. Suryanto (2012) menyatakan bahwa tingkat kelarutan senyawa fenolik
dipengaruhi  juga  dengan  tipe  pelarut (polaritas) yang digunakan interaksi senyawa  fenolik  dengan  komponen  lain tanaman  sehingga  membentuk  senyawa komplek  yang  tak  larut.  Pelarut  yang sering  digunakan  untuk  ekstraksi  senyawa fenolik adalah metanol, etanol, aseton, air, etil  asetat,  propanol,  dan  kombinasi campuran pelarut.
Penentuan Kandungan Total Fenolik Hasil ekstraksi ampas dari pengolahan  sagu  dengan  menggunakan ekstraksi  maserasi  dengan  konsentrasi  20, 40, 60 dan 80%, kemudian diuji kandungan  total  fenolik,.  Hasil  analisis kandungan  total  fenolik  yang  diperoleh pada penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Kandungan  total  fenolik  dari  esktrak ampas sagu
Jenis Ekstrak Kandungan Total Fenolik (µg/mL) E 20% E 40% E 60% E 80% 70,01 83,26 64,58 22, 04
Analisis  kandungan  total  fenolik dilakukan untuk megetahui seberapa besar kandungan  senyawa  fenolik  yang  terdapat dalam  ekstrak  ampas  hasil  pengolahan sagu.  Penentuan  total  fenolik  dinyatakan sebagai  asam  galat  µg/mL  ekstrak.  Total kandungan  fenolik  dari  ekstrak  ampas pengolahan  sagu  dengan  metode  maserasi 20,  40,  60  dan  80%  dapat  dilihat  pada tabel 2.
Pada  tabel  dapat  diketahui  bahwa ekstrak  ampas  dari  pengolahan  sagu dengan    pelarut  dengan  konsentrasi  40%
(83,26  µg/mL),  diikuti  dengan  pelarut etanol  20%    yang  tidak  berbeda  jauh (70,01  µg/mL),  etanol  60  %  (64,58 µg/mL)  dan  etanol  80%  (22,04  µg/mL). Hal  ini  dapat  terjadi  karena  senyawa
golongan  fenol  banyak  terdapat  pada pelarut  etanol  yang  berkonsentrasi  kecil karena  senyawa  golongan  fenol  bersifat polar.
Kandungan  total  fenolik  dalam sampel  ditentukan  dengan  menggunakan metode Folin Ciocalteu berdasarkan kemampuan senyawa fenolik dalam ampas pengolahan  sagu,  bereaksi  dengan  asam fosfomolibdat-fosfotungstat  dalam  reagen Folin-ciocalteu  yang  berwarna  kuning  dan akan berubah menjadi warna biru. Semakin tua intensitas warnanya menandakan semakin tingginya kandungan total  fenol  didalam  ekstrak  (Sahidi  dan Naczk, 1995). Menurut Singleton dan Rosi (1965)  warna  biru    yang    teramati berbanding  lurus  dengan  konsentrasi  ion fenolat  yang  terbentuk,  semakin  besar konsentrasi senyawa fenolik maka semakin banyak ion fenolat yang terbentuk sehingga  warna  biru  yang  dihasilkan semakin  pekat.  Fenolat  hanya  terdapat pada  larutan  basa,  tetapi  pereaksi  Folin Ciocalteu  dan  produknya  tidak  stabil  pada kondisi  basa.  Nely  (2007)  mengatakan, penambahan  Na 2 CO 3 pada  uji  fenolik bertujuan  untuk  membentuk  suasana  basa agar  terjadi  reaksi  reduksi  Folin oleh  gugus  hidroksil  dari  fenolik  didalam sampel.  Metode ini mempunyai kelebihan diantaranya  penampakan  warna  lebih  baik (Rita  2006).  Dalam  hal  ini  ekstrak  ampas dari  pengolahan  sagu  dengan  pelarut etanol  40%  memiliki  kandungan  total fenolik  tertinggi,  diikuti  dengan  ekstrak etanol 20, 60 dan etanol 80% yang terkeci kandungannya.
Aktivitas Penangkal Radikal Bebas (%)
Senyawa  radikal  bebas  biasanya digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas penangkal  radikal  bebas.  Radikal  bebas yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  DPPH.  Masing-masing  ekstrak ampas dari hasil pengolahan sagu  dihitung nilai  persen  aktivitas  penangkal  radikal bebas. Hasil pengujian aktivitas antioksidan  dengan  metode  DPPH  dapat dilihat pada gambar 1.
Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 2 No. 03        Agustus 2013 ISSN 2302
golongan  fenol  banyak  terdapat  pada pelarut  etanol  yang  berkonsentrasi  kecil karena  senyawa  golongan  fenol  bersifat
Kandungan  total  fenolik  dalam sampel  ditentukan  dengan  menggunakan metode Folin Ciocalteu berdasarkan
kemampuan senyawa fenolik dalam ampas pengolahan  sagu,  bereaksi  dengan  asam
fosfotungstat  dalam  reagen
berwarna  kuning  dan akan berubah menjadi warna biru. Semakin tua intensitas warnanya menandakan semakin tingginya kandungan total  fenol  didalam  ekstrak  (Sahidi  dan Naczk, 1995). Menurut Singleton dan Rosi (1965)  warna  biru    yang    teramati dengan  konsentrasi  ion fenolat  yang  terbentuk,  semakin  besar konsentrasi senyawa fenolik maka semakin banyak ion fenolat yang terbentuk sehingga  warna  biru  yang  dihasilkan semakin  pekat.  Fenolat  hanya  terdapat pada  larutan  basa,  tetapi  pereaksi  Folin- alteu  dan  produknya  tidak  stabil  pada .  Nely  (2007)  mengatakan, pada  uji  fenolik juan  untuk  membentuk  suasana  basa agar  terjadi  reaksi  reduksi  Folin-Ciocalteu oleh  gugus  hidroksil  dari  fenolik  didalam
mempunyai kelebihan diantaranya  penampakan  warna  lebih  baik (Rita  2006).  Dalam  hal  ini  ekstrak  ampas dari  pengolahan  sagu  dengan  pelarut etanol  40%  memiliki  kandungan  total fenolik  tertinggi,  diikuti  dengan  ekstrak etanol 20, 60 dan etanol 80% yang terkecil

## Aktivitas Penangkal Radikal Bebas (%)
Senyawa  radikal  bebas  biasanya digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas penangkal  radikal  bebas.  Radikal  bebas yang  digunakan  dalam  penelitian  ini
masing  ekstrak han sagu  dihitung nilai  persen  aktivitas  penangkal  radikal bebas. Hasil pengujian aktivitas antioksidan  dengan  metode  DPPH  dapat
Gambar  1.  Grafik  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH dari ekstrak ampas hasil pengolahan sagu.
Dilakukan  pengukuran  aktivitas antioksidan  metode  DPPH  adalah  salah satu  uji  kuantitatif  untuk  mengetahui seberapa besar aktivitas kombinasi ekstrak pelarut  ampas  hasil  pengolahan  sagu. Metode  pengujian  menggunakan  DPPH merupakan metode konvensional dan lama  digunakan  untuk  penetapan  aktivitas antioksidan.    Untuk  mengetahui  tingkat peredaman  warna  sebagai  akibat  adanya senyawa antioksidan yang mampu mengurangi  intensitas  warna  ungu  dari DPPH,  maka  pengukuran  reaksi  warna dilakukan  pada  konsentrasi berbeda  beda.  Semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak akan semakin besar pula peredamannya yang ditandai  dengan terbentuknya  warna  kuning.  Dikarenakan pada  konsentrasi  tinggi  senyawa  yang terkandung  akan  semakin  banyak  dan menyebabkan semakin besar antioksidannya.
Uji  aktivitas  antioksidan  DPPH berdasarkan  reaksi  penangkapan  radikal DPPH  oleh  senyawa  antioksidan  melalui mekanisme donasi atom hidrogen sehingga akan  dihasilkan  DPPH  (bentuk  non radikal)  dan  menyebabkan  terjadinya penurunan  intensitas  warna  ungu  dari DPPH (Windono dkk, 2004).
Pada  saat  penambahan  larutan DPPH pada sampel ampas hasil pengolahan  sagu,  maka  terjadi  perubahan warna dari ungu menjadi kuning.
Intensitas  berkurangnya  warna  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelom 517  nm.  Penurunan  absorbansi  ekstrak menunjukkan  peningkatan  potensi  ekstrak sebagai  antioksidan.  Berdasarkan  hasil yang diperoleh pada gambar 3,maka dapat diketahui  bahwa  ekstrak  dengan  pelarut etanol 60% memiliki kemampuan
2013 ISSN 2302 - 2493
Gambar  1.  Grafik  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH dari ekstrak ampas hasil pengolahan sagu.
Dilakukan  pengukuran  aktivitas antioksidan  metode  DPPH  adalah  salah satu  uji  kuantitatif  untuk  mengetahui seberapa besar aktivitas kombinasi ekstrak pelarut  ampas  hasil  pengolahan  sagu. Metode  pengujian  menggunakan  DPPH merupakan metode konvensional dan telah lama  digunakan  untuk  penetapan  aktivitas antioksidan.    Untuk  mengetahui  tingkat peredaman  warna  sebagai  akibat  adanya senyawa antioksidan yang mampu mengurangi  intensitas  warna  ungu  dari DPPH,  maka  pengukuran  reaksi  warna dilakukan  pada  konsentrasi  ekstrak  yang berbeda  beda.  Semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak akan semakin besar pula peredamannya yang ditandai  dengan terbentuknya  warna  kuning.  Dikarenakan pada  konsentrasi  tinggi  senyawa  yang terkandung  akan  semakin  banyak  dan menyebabkan semakin besar pula aktivitas
Uji  aktivitas  antioksidan  DPPH berdasarkan  reaksi  penangkapan  radikal DPPH  oleh  senyawa  antioksidan  melalui mekanisme donasi atom hidrogen sehingga akan  dihasilkan  DPPH  (bentuk  non radikal)  dan  menyebabkan  terjadinya nan  intensitas  warna  ungu  dari
DPPH (Windono dkk, 2004).
at  penambahan  larutan DPPH pada sampel ampas hasil pengolahan  sagu,  maka  terjadi  perubahan warna dari ungu menjadi kuning. Intensitas  berkurangnya  warna  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 517  nm.  Penurunan  absorbansi  ekstrak menunjukkan  peningkatan  potensi  ekstrak sebagai  antioksidan.  Berdasarkan  hasil yang diperoleh pada gambar 3,maka dapat diketahui  bahwa  ekstrak  dengan  pelarut etanol 60% memiliki kemampuan
penangkal radikal bebas yang paling tinggi yaitu  82,75%,  selanjutnya  diikuti  oleh ekstrak  etanol  80%  (80,45%),  20% (76,62%) dan yang terendah ekstrak etanol 40% (62,83%). Hal ini menunjukan bahwa senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam ekstrak  ampas  hasil  pengolahan  sagu memiliki  kemampuan  dalam  menangkal radikal  bebas  pada  konsentrasi  dengan pelarut etanol 60%.
Senyawa  yang  bereaksi  sebagai penagkap  radikal  bebas  akan  mereduksi DPPH membentuk DPPH-H yang tereduksi.  Reaksi  ini  diamati  dengan adanya  perubahan  warna  DPPH  dari  ungu menjadi  kuning  ketika  elektron  ganjil  dari radikal  DPPH  telah  berpasangan  dengan hodrogen  dari  senyawa  penangkap  radikal bebas ( Molyneux, 2004).

## KESIMPULAN
Ekstrak  ampas  hasil  pengolahan sagu memiliki kandungan fitokimia fenolik. Hasil yang diperoleh dari penentuan  total  fenolik  menunjukkan esktrak  dengan  pelarut  etanol  konsentrasi 40%  yang  paling  tertinggi  diikuti  dengan pelarut etanol konsentrasi 20, 60 dan 80%. Hasil pengujian aktivitas penangkal radikal  bebas  DPPH  menunjukkan  bahwa ekstrak  dengan  pelarut  etanol  konsentrasi 60% memiliki kemampuan sebagai penangkal radikal bebas yang paling tinggi dibandingkan  dengan  pelarut  20,40  dan 80%.

## DAFTAR PUSTAKA
Burda, S. dan Olezek,W., 2001. Antioxidant and Antiradical Activities  of  Flavonoids.  J.  Agric.
Food Chem. 49 : 2774-2779.
Conde, E.E., 1997. Cadahia,M.C., Vallejo, G.,  Simon,  B.E.D  dan  Adrados, J.R.G.,  Low  Molecular  Weight polyphenol  in  Cork  of  Querceus Suber.  J.  Agric.  Food  Chem.  45  : 2695-2700.
Molyneux,  P.  2004.  The  use  of  the  Stable
Free Radical Dipehenylpicryl-
hydrazyl  (DPPH)  for  Estimating Antioxidant Activity.Songklanakarin
Journal  of  Science  and  Technology. 26 : 211-219.
Nely,  F.  2007.    Aktivitas  Antioksidan Rempah  Pasar  dan  Bubuk  Rempah Pabrik dengan Metode Polifenol dan
Uji AOM (Active Oxygen Method).Institud  Pertanian  Bogor.
Bogor.
Rita,  Y.  2006.  Kandungan  Tanin  dan Potensi  Anti  Streptococcus  Mutans Daun  The  Varietas  Assamica  pada Berbagai Tahap Pengolahan. Skripsi. Institut  Pertanian  Bogor,  Bogor. 2006
Shahidi,  F.  and  M.  Naczk.  1995.  Food Phenolic  :  Sources,  Chemistry,
Effect, Applications. Lancaster, Technomic Publishing, co.inc.
Suryanto  .E.,  2012.  Fitokimia  Antioksida.
Putra Media Nusantara. Surabaya. Windono,T., dkk. 2004. Studi Hubungan Struktur-Aktivitas Kapasitas Peredaman Radikal Bebas Senyawa Flavonoid terhadap 1,1-Difenil-2- Pikrilhidrazil (DPPH ). Artocarpus
4: 42-52