© 2021 Penulis. Dibawah lisensi CC BY-SA 4.0. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Creative Commons Attribution (CC BY), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, selama penulis dan sumber aslinya disebutkan. Tidak diperlukan izin dari penulis atau penerbit.

## Journal of Experimental and Clinical Pharmacy (JECP)
Doi: 10.52365/jecp.v2i1.303 http://jurnal.poltekkesgorontalo.ac.id/index.php/JECP/
2022, 2(1), 1-8

## Research Article

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  merupakan  salah  satu  masalah kesehatan global di dunia. World Health Organization (WHO) (2014)
Abstrak: Senyawa  antioksidan  diketahui  dapat  meningkatkan  indeks aterosklerosis  dan  sekresi  insulin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  peran  asam  askorbat  sebagai  pengatur  aterosklerosis  dan kadar gula darah pada kondisi diabetes  (DM). Rancangan penelitian yang digunakan adalah penelitian  eksperimental dengan menggunakan 20 ekor tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus L.)  dengan  berat  badan  180-300  g, umur 23 bulan, sebagai hewan percobaan. Setelah aklimatisasi selama satu minggu,  tikus  tidak  diberi  makan  semalaman  dan  keesokan  harinya diinduksi  aloksan  dengan  dosis  145  mg/kg  berat  badan  (BB).  Tiga  hari kemudian,  darah  diambil  melalui  vena  ekor  tikus  untuk  menguji  gula darah.  Indeks  arteriosklerosis  (AI)  ditentukan  dengan  rumus  (kolesterol HDL  total)/HDL.  Sebagai  hewan  percobaan,  tikus dengan  kadar  glukosa darah 200 mg/dl atau lebih dipilih dan dibagi menjadi 4 kelompok yang masing-masing  terdiri  dari  5  ekor  tikus.  kelompok  I  pakan  standar; Kelompok  II  mendapat  diet  standar  majemuk  dan  metformin;  Kelompok III  diberi  diet  standar  dan  asam  askorbat  dan  kelompok  IV  diberi  diet standar dan kombinasi metformin dan asam askorbat. Pada awal diabetes, berat  tikus dikurangi dari 240 g menjadi 220 g. Namun, setelah 2 minggu terapi asam askorbat, berat badan stabil, gula darah turun 65,57 dan 324,94 mg/dl  menjadi  111,88  mg/dl,  dan  indeks  arteriosklerosis  menurun  dari 0,324 menjadi 0,320.
Kata kunci: Aloksan, Asam askorbat, Diabetes mellitus, Gula darah.

## ABSTRAK
Efek Asam Askorbat Menurunkan Indeks Aterogenik dan Kadar Gula Darah Tikus ( Rattus norvegicus L.) Diabetes Mellitus Induksi Aloksan
Sunarti 1,2* , Elly Wahyudin 1 , Hasyim Kasim 1
1 Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar
1 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Megarezky, Makassar

## INFO ARTIKEL
Dikirim : 16 Okt. 2021 Revisi : 20 Jan. 2022
Diterima : 30 Jan. 2022
*Corresponding Author:
Sunarti, Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar email:tantizainal12@g mail.com
menyatakan  bahwa  347  miliar  penduduk  dunia  menderita  diabetes  dan pada tahun 2030 diabetes diprediksi menjadi penyebab kematian utama ke tujuh  di  dunia.  Salah  satu  pemicu  DM  adalah  stres  oksidatif  di  dalam tubuh (Winarsi and Purwanto 2010; Balqis, Ramdhani, and Amelia 2021). Stres oksidatif, berkaitan dengan tingginya resiko penyakit kardiovaskuler (PKV), yang ditunjukkan oleh rendahnya kadar HDL
Baru-baru  ini,  Winarsi  (2010)  menemukan  bahwa  daun  kapulaga memiliki  potensi  antioksidan in  vitro yang  lebih  tinggi  daripada  batang kapulaga.  Kemungkinan  ini  tercermin  dari  kandungan  flavonoid  dan vitamin C. Beberapa peneliti telah melaporkan bahwa senyawa antioksidan dapat  memodulasi  kadar  gula  darah  dengan  meningkatkan  indeks aterosklerosis dan sekresi insulin (Winarsi and Purwanto 2010; Damiti et al. 2021).  Agen  hipoglikemik  oral  yang  tersedia  saat  ini  tidak  menunjukkan perubahan yang berarti pada stres oksidatif pada pasien diabetes (Apriani, Mutiara, and Ekaputri 2021). Oleh karena itu, perlu dicari alternatif yang dapat dikombinasikan dengan pengobatan modern yang memiliki potensi yang  jelas  sebagai  antioksidan.  Bukti  apakah  asam  askorbat  dapat menurunkan kadar gula darah sangat penting dan harus diuji pada tikus yang diinduksi aloksan.

## MATERIAL DAN METODE

## Material
Penelitian  eksperimental  yang  menggunakan  rancangan  acak lengkap  ini  merupakan  lanjutan  temuan  Winarsi et  al., (2013).  sebagai hewan percobaannya digunakan 20 ekor tikus ( Rattus norvegicus L.) jantan, umur 2-3 bulan, dengan berat 180-300 gram. Setelah dilakukan aklitimasi selama  1  minggu,  tikus  dipuasakan  semalam,  lalu  keesokan  harinya diinduksi aloksan dengan dosis 145 mg/kg berat badan (BB). Setelah tiga hari  tikus  diuji  kadar  gula  darahnya  dengan  mengambil  darah  melalui vena ekor.  Sampel darah diambil melalui vena lateralis ekor tikus. Tikus dengan kadar glukosa > 200 mg/dL, sebagai hewan percobaan.

## Metode

## Intervensi Hewan Percobaan
Tikus  yang  telah  hiperglikemia  kemudian  dibagi  menjadi  4 kelompok  masing-masing  5  ekor.  Kelompok  I,  diberi  pakan  standar; kelompok  II,  dineri  pakan  standard  an  metformin;  kelompok  III,  diberi pakan standard an asam askorbat, dan kelompok IV, diberi pakan standard an kombinasi metformin-asam askorbat.

## Evaluasi aktivitas antidiabetes
Penimbangan BB dan pengambilan sampel darah tikus dilakukan 3 kali yaitu baseline (saat tikus dinyatakan menderita diabetes), dilanjutkan 1 dan  2  minggu  setelah  intervensi.  Sampel  darah  sebanyak  3  mL  diambil melalui  vena  ekor,  setelah  tikus  dianestesi  menggunakan  eter.  Darah disentrifuge dengan kecepatan 3.000 rpm, selama 10 menit. Bagian plasma dilakukan  pengujian  kadar  kolesterol  total  dan  HDL  dengan  metode enzimatis  guna  menghitung  indeks  atherogenik  (IA)  (Sari  et  al.  2020; Paulina, Asni, and Gaffar 2015). IA dihitung berdasar rumus:
Keterangan : IA : Indeks Aterogenik HDL : High Density Lipoprotein Analisis Statistik
Data dari penelitian ini diuji secara statistik menggunakan one-way analysis  of  variance (ANOVA)  dan  uji  jarak  berganda  Duncan  (DMRT). Perbedaan yang signifikan antara perawatan diidentifikasi dengan tingkat kepercayaan 95%.

## HASIL

## Kadar Glukosa Darah Tikus Diabetes
Berdasarkan  hasil  penelitian,  Persentase  penurunan  gula  darah tikus dapat dilihat pada gambar 1. Setelah pemberian terapi metfomin 850 mg, pada hari ke-10 mengalami penurunan sebesar 58,29% dan hari ke-17 mengalami  penurunan  sebesar  69,96%.  Setelah  pemberian  asam  askorbat 100 mg mengalami penurunan pada hari ke-10 sebesar 45,62 % kemudian pada  hari  ke-17  mengalami  penurunan  sebesar  65,57  %.  Kombinasi metformin  dan  asam  askorbat  pada  hari  ke10  mengalami  penurunan sebesar 51,18 % dan pada hari ke-17 mengalami penurunan sebesar 66,92%. Jadi,  yang  paling  baik  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  tikus adalah  terapi metformin tunggal yaitu dengan penurunan kadar  glukosa darah pada hari ke-17 mencapai 69,96 % dibandingkan dengan terapi asam askorbat tunggal atau kombinasi metformin dana asam askorbat.
Gambar 1. Histogram gasil pengukuran rata rata kadar glukosa darh tikus (I : Kelompok kontrol; II : Kelompok terapi metformin 850 mg; III : Kelompok terapi asam askorbat 100 mg; IV : Kelompok kombinasi metformin dan asam askorbat
Analisis    ANOVA  menunjukkan  nilai  signifikansi  pada  perlakuan hari  ke  10  yaitu  dengan  nilai  signifikansi  <0,05  maka  dapat  disimpulkan bahwa  terdapat  pengaruh  signifikan  antar  kelompok  perlakuan.  Untuk mengetahui  perbedaan  pada  tiap  perlakuan,  maka  perlu  dilakukan  uji lanjut dengan menggunakan posthoc Duncan .

## Indeks Aterogenik Tikus Diabetes
Nilai indeks aterogenik semua perlakuan pada hari ke-3 mengalami peningkatan  dibandingkan    pada  hari  ke-0  (Gambar  2).  Artinya,  bahwa induksi  alloxan  mengakibatkan  tikus  diabetes  dan  meningkatnya  IA. Setelah  1  minggu  intervensi  yaitu  pada  hari  ke-10,  IA  ketiga  kelompok tikus percobaan tersebut mengalami peningkatan dari 0,327 menjadi 3,121 terjadi pada kelompok yang diberi terapi metformin.
Gambar 2. Histogram Hasil Rata-Rata IndeksAterogenik Tikus (I: kelompok kontrol ; II: kelompok terapi metformin 850 mg ; kelompok terapi asam askorbat 100 mg ; IV: kelompok kombinasi metfomin dan asam askorbat
0
1 2 3 4 5 I II III IV Hari-0 Hari-3 Hari-10 Hari-17 In d ek s A te rog en ik
Analisis  statistik  menggunakan one  way ANOVA  dengan  taraf signifikansi  99%.  Setelah  memenuhi  syarat,  uji  normalitas  dengan Kolmogorov -Smirnov test dan uji homogenitas dengan Levene test . Analisis ANOVA  menunjukkan  nilai  p>0,005  pada  semua  perlakuan  maka  dapat disimpulkan  bahwa  tidak  terdapat  pengaruh  signifikan  antar  kelompok perlakuan.

## PEMBAHASAN
Diabetes melitus (DM) adalah gangguan metabolisme karbohidrat, protein,  dan  lemak  yang  disebabkan  oleh  ketidakseimbangan  antara ketersediaan  dan  kebutuhan  insulin.  Jenis  diabetes  secara  klinis diklasifikasikan menjadi  diabetes  tipe  1  dan  diabetes  tipe  2, dan  diabetes tipe 1 (diabetes mellitus tergantung insulin) adalah suatu kondisi di mana produksi  insulin  tidak  mencukupi  di  pankreas.  Kondisi  ini  hanya  dapat diobati  dengan  insulin  eksternal.  Diabetes  melitus  tipe  2  (insulin- dependent diabetes mellitus) adalah resistensi insulin yang terjadi karena insulin tidak  bekerja secara optimal pada sel target insulin, seperti sel otot, sel  lemak,  dan  sel  hati,  hingga  mencapai  kadar  normoglikemik  (Fitri, Abrori, and Dharmawan 2020; Siregar, Iryani, and Sofjeni 2013).
Pada  penelitian  ini,  kami  memperoleh  bahwa  yang  paling  baik dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  tikus  adalah    terapi  metformin tunggal  yaitu  dengan  penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  hari  ke-17 mencapai 69,96 % dibandingkan dengan terapi asam askorbat tunggal atau kombinasi metformin dana asam askorbat. Penurunan kadar glukosa darah setelah  pemberian  vitamin  C  tidak  begitu  signifikan  dengan  penurunan kadar glukosa darah setelah pemberian glimepiride. Ini karena mekanisme kerja  vitamin  C  dalam  pengobatan  hiperglikemia  berbeda  dengan glimepiride. Sebagai antioksidan, vitamin C  dapat menghambat kerusakan oksidatif pada sel dengan mengurangi efek negatif dari kelebihan oksidan yang  disebabkan  oleh  gula  darah  tinggi.  Peran vitamin  C  pada    diabetes adalah sebagai penghambat enzim aldose reductase (AR). Enzim AR dapat mengubah  kelebihan  glukosa    menjadi  sorbitol,  sehingga  akumulasi sorbitol  mungkin  disebabkan  oleh  hiperglikemia.  AR  dihambat  oleh vitamin  C  untuk  mencegah  penumpukan  sorbitol,  yang  dapat menyebabkan  kerusakan  sel.  Manfaat  lain  dari  vitamin  C  sebagai antioksidan  adalah  meminimalkan  pembentukan  produk  akhir  glikasi (AGEs).  Selama  hiperglikemia,  AGE  x  terakumulasi  di  berbagai  jaringan (Setiawan and Suhartono 2005; Yasin, Kartasurya, and RMD 2016).
Pada penelitian ini kami memperoleh nilai indeks aterogenik semua perlakuan pada hari ke-3 mengalami peningkatan dibandingkan  pada hari
ke-0.  Artinya,  bahwa  induksi  alloxan  mengakibatkan  tikus  diabetes  dan meningkatnya IA.  Setelah 1 minggu intervensi yaitu pada hari ke-10, IA ketiga  kelompok  tikus  percobaan  tersebut  mengalami  peningkatan  dari 0,327  menjadi  3,121  terjadi  pada kelompok  yang  diberi  terapi  metformin. Berbeda  halnya  dengan  kelompok  tikus  yang  diberi  terapi  kombinasi metformin  dan  asam  askorbat  yang  mengalami  peningkatan  dari  0,407 menjadi 1,901. Dengan demikian,  sekresi dan disfungsi insulin tidak hanya mempengaruhi  kadar  gula  darah,  tetapi  juga  kadar  kolesterol  dan trigliserida. Diabetes juga dikaitkan dengan penurunan HDL, suatu bentuk kolesterol  baik  yang  berperan  dalam  membuang  kelebihan  lemak  dari darah  (Ahmad  and  Crandall  2010).  Artinya,  pada  diabetes  terjadi peningkatan indeks arteriosklerosis. HDL  rendah dikombinasikan dengan trigliserida tinggi dapat meningkatkan penumpukan plak di dinding arteri, akhirnya menyumbat dinding arteri, yang menyebabkan serangan jantung dan  stroke  (Hegazi  et  al.  2003;  Wattanakit  et  al.  2007).  Oleh  karena  itu, perlu untuk memantau peningkatan IA  dan  segera menguranginya. Dua minggu  setelah  intervensi,  yaitu  pada  hari  ke-17,  indeks  arteriosklerosis menurun pada semua kelompok eksperimen baik pada kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan obat.

## KESIMPULAN
Pemberian asam askorbat menunjukkan perbaikan indeks aterogenik penurunan  gula  darah  sebesar  65,57%,  tidak  berbeda  nyata  dengan penurunan  kdara  gula  darah  menggunakan  terapi  metformin  sebesar 69,96%  tunggal  maupun  kombinasi  antara  metformin  dan  asam  askorbat sebesar 66,92%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada  semua  pihak  yang  telah  membantu penelitian ini.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Tidak ada

## KONTRIBUSI PENULIS
Semua penulis berkontribusi sama

## PENDANAAN

## Tidak Disebutkan

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, Leena A, and Jill P Crandall. 2010. “Type 2 Diabetes Prevention: A Review.” Clinical Diabetes 28 (2): 53–59.
Apriani, Mareda, Ratna Mutiara, and Choirunnisa Ekaputri. 2021. “Analisis Perkembangan Diabetes Melitus Tipe 2 Di Kota  Bogor Jawa Barat.” Journal of Experimental and Clinical Pharmacy 1 (2): 112–20.
Balqis, Asyifa Yan, Humaira Ramdhani, and Eria Khoirunisa Amelia. 2021. “Perkembangan Terapi Diabetes Mellitus Tipe 2 Pada Pasien  Yang Terinfeksi COVID-19.” Journal of Experimental and Clinical Pharmacy 1
(2): 121–42.
Damiti,  Sukmawati  A,  Ysrafil  Ysrafil,  Zaenal  Abidin,  Rahmawati
Rahmawati,  Vyani  Kamba,  Hartati  Hartati,  Pratiwi  Yahya  Ishak, and Ghaitsa Zahira Sopha Yusuf. 2021. “Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Metanol Daun Tembelekan (Lanatana Camara Linn.) Secara In  Vitro  Menggunakan  Metode    Stabilitasi  Membran  Sel  Darah Merah.” Journal of Experimental and Clinical Pharmacy 1 (1): 47–55.
Fitri,  Indi  Kamilia,  Cholis  Abrori,  and  Dion  Krismashogi  Dharmawan.
2020.  “The  Effectiveness  of  Vitamin  C  Addition  to  Blood  Glucose Levels of Hyperglycemic Mice with Glimepiride Treatment.” Journal of Agromedicine and Medical Sciences 6 (3): 149–56.
Hegazi, Refaat A F, Kim Sutton ‐ Tyrrell, Robert W Evans, Lewis H Kuller,
Steven Belle, Monica Yamamoto, Daniel Edmundowicz, and David E  Kelley.  2003.  “Relationship  of  Adiposity  to  Subclinical
Atherosclerosis  in  Obese  Patients  with  Type  2  Diabetes.” Obesity Research 11 (12): 1597–1605.
Paulina,  Ariza  Julia,  Enikarmila  Asni,  and  Mardhiah  Gaffar.  2015.
“Pengaruh  Lama  Pemberian  Diet  Aterogenik  Terhadap  Indeks Aterogenik  Serum  Rattus  Novergicus  Strain  Wistar  Jantan.”  Riau University.
Sari, Kartika Aulia, Rismawati Yaswir, Tuty Prihandani, and Efrida Efrida.
2020.  “Korelasi  Kadar  Adiponektin  Dengan  Indeks  Aterogenik Plasma Pada Penyandang Obes.” Jurnal Kesehatan Andalas 9 (3): 343– 50.
Setiawan, Bambang, and Eko Suhartono. 2005. “Stres Oksidatif Dan Peran Antioksidan Pada Diabetes Melitus.” Majalah Kedokteran Indonesia 55 (2): 87–90.
Siregar, Sri Hastuti, Iryani Iryani, and Erda Sofjeni. 2013. “Uji Bioaktivitas
Ekstrak Etil Asetat Kulit Manggis (Garcinia Mangostana L.) Sebagai
Antidiabetes Pada Mencit Putih (Mus Musculus L.) Jantan.” Periodic
2 (2): 113–16.
Wattanakit,  Keattiyoat,  Aaron  R  Folsom,  Daniel  A  Duprez,  Beth  D
Weatherley,  and  Alan  T  Hirsch.  2007.  “Clinical  Significance  of  a High  Ankle-Brachial  Index:  Insights  from  the  Atherosclerosis  Risk in Communities (ARIC) Study.” Atherosclerosis 190 (2): 459–64. Winarsi, Hery, and Agus Purwanto. 2010. “Soy Germed Protein plus Zn as an Inducer Insulin Secretion on Type-2 Diabetes Mellitus.” HAYATI Journal of Biosciences 17 (3): 120–24.
Yasin, Yade Kurnia, Martha I Kartasurya, and R K RMD. 2016. “Pengaruh Kombinasi  Vitamin  c  Dan  Vitamin  e  Terhadap  Kadar Malondialdehid Plasma Pasien Diabetes Mellitus Tipe 2.” Jurnal Gizi
Indonesia (The Indonesian Journal of Nutrition) 4 (1): 1–8.