Jurnal Pro-Life, Volume 10 Nomor 1, Maret 2023
Eksplorasi Fungi Endofit dari Tanaman Sambung Nyawa (Gynura procumbens (Lour.)Merr.)
Ranti, Ummi Hiras Habisukan * , Amin Nurokhman Universitas Islam Negeri (UIN) Raden Fatah Palembang, Sumatera Selatan, Indonesia
*Corresponding author : ummihirashabisukan@gmail.ac.id

## Article History
Received    :   07 February 2023 Approved   :   04 March 2023 Published   :  31 March 2023

## Keywords
Endophytic fungi, identification, isolation, sambung nyawa

## ABSTRACT
Sambung  nyawa  (Gynura  procumbens(Lour.)  Merr.)  is  a  plant  that can be used as herbal medicine such as healing cuts, lowering blood sugar  levels,  facilitating  menstruation,  and  preventing  cancer formation.  The  various  properties  possessed  by  sambung  nyawa plants  make  these  plants  continue  to  be  used  and  experience  plant scarcity.  Another  alternative  is  to  use  endophytic  fungi  which  are known as a source of efficacious medicinal secondary metabolites but have not been widely used. This study aims to isolate and identify the genus  of  endophytic  fungi  on  sambung  nyawa    plants.  The  method used in this study was sampling, namely root organs, root bark, stems and  leaves  of  sambung  nyawa  plants,  making  media  using  instant PDA  media  mixed  with  aquadest  and  antibiotics,  endophytic  fungi using  direct  planting  techniques  on  PDA  media  in  cups.  petri, purification  of  endophytic  fungi  by  eliminating  fungi  that  are considered  to  be  the  same  from  their  morphological  characteristics until  truly  pure  fungi  are  found,  endophytic  fungi  help macroscopically  by  observing  the  color,  texture,  and  pattern  of  the colony  then  observing  microscopically  using  the  culture  slide technique then observing under a hyrox microscope by observing the type of spore, spore shape and hyphae. The results of this study were 12  isolates  of  endophytic  fungi  identified  in  10  different  genera, namely Nigrospora, Blastomyces, Fusarium, Pythium, Cladosporium,
Trichoderma, Gliocladium, Papulaspora, Aspergillus, Monacrosporium.

## PENDAHULUAN
Sumber daya alam hayati di Indonesia sangat banyak. Untuk memenuhi kebutuhan  hidup  manusia,  sumber  daya
hayati digunakan dengan berbagai pemanfaatan.  Salah  satu  sumber  daya hayati yang memiliki berbagai keuntungan

## Prolife

## Jurnal Pendidikan Biologi, Biologi, dan Ilmu Serumpun
https://ejournal.uki.ac.id/index.php/prolife
© 2023 Universitas Kristen Indonesia Under the license CC BY-SA 4.0
dalam  pemanfaatannya  adalah  tanaman. Tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai obat  herbal  adalah  tanaman  Sambung Nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr) yang  merupakan  anggota  dari  famili Astraceae  (Sumadji  &  Pitoyo,  2019). Tanaman ini digunakan sebagai antihipertensi  (Helmi,  2020),  antikanker (Fadli,  2015),  antiinflamasi  (Uthia et  al .,
2018),  antibakteri  (Rahmadini  &  Fajar Utami, 2019), dan antihiperglikemik (Agustira & Trijayanthi, 2019).
Tanaman  Sambung  Nyawa  juga berfungsi  untuk  menjaga  imunitas  dan kekebalan  tubuh  terhadap  penyakit  dan juga  dapat  digunakan  sebagai  pengobatan alternatif  untuk  berbagai  macam  penyakit, seperti  diabetes  melitus  dengan  efek menurunkan  kadar  gula  darah  (Aprilani et al .,  2019),  kanker,  penyakit  jantung, kolesterol,  hipertensi  (Suryandari et  al .,
2020)  tifus  (Rahmadini  &  Fajar  Utami,
2019) dan malaria (Mou & Dash, 2016).
Menurut WHO, masyarakat yang ada di  negara-negara  anggota  WHO  di  Asia sekitar  90%  menggunakan  obat  herbal untuk  kesehatan.  Penggunaan  tanaman herbal  secara  terus  menerus  ini  akan menyebabkan  kelangkaan,  sehingga  harus dicari alternatif lain yaitu dengan menggunakan fungi endofit yang diketahui sebagai  sumber  utama  metabolit  sekunder berkhasiat  obat,  namun  untuk  saat  ini belum banyak dimanfaatkan oleh
masyarakat  (Melliawati,  2009).  Kegiatan mengisolasi fungi endofit ini juga merupakan upaya untuk mengurangi eksploitasi,  dimana  fenomena  eksploitasi bagian  tanaman  sebagai  obat  yang  terus meningkat  dalam kurun  waktu  belakangan ini  menyebabkan  sumber  daya  berkurang (Setiawan et al ., 2018).
Salah  satu  cara  untuk  menemukan metabolit  bioaktif  baru  adalah  melalui isolasi fungi dari tanaman obat (Mamangkey et  al .,  2022a).  Sejumlah besar  metabolit  dengan  struktur  berbeda dan  aktivitas  biologis  khusus  diproduksi oleh  fungi  endofit  (Mamangkey et  al ., 2022b)  Fungi  endofit  adalah  fungi  yang memiliki  hubungan  mutualistik  dengan inangnya dan membantu mempertahankannya  dari  patogen.  Fungi ini  juga  menghasilkan  metabolit  sekunder antibakteri  dan  antivirus  yang  mirip dengan  inangnya  (Hasyyati et  al .,  2017).
Fungi  endofit  ini  hidup  di  dalam  sel  pada jaringan  tanaman  yang  sehat,  antara mikroba endofit dengan tumbuhan inangnya  bersimbiosis  mutualisme  yaitu hidup  saling  menguntungkan  (Akmalasari et al. , 2013). Tumbuhan akan memilih dan membiarkan  jamur  tertentu  yang  dirasa cocok  dan  kooperatif  untuk  bersimbiosis mutualisme  dengannya.  Sayangnya,  tidak semua  mikroba  yang  hidup  di  akar tanaman bermanfaat, jamur tertentu adalah penyakit  yang  dapat  menyerang  jaringan
tanaman  dan  membunuh  inangnya  (Putra, 2020).  Fungi  endofit  mampu  membuat metabolit  sekunder  yang  sama  dengan inangnya karena adanya pertukaran genetik  intergenerik  antara  tumbuhan  dan fungi  (Kumar  &  Subrahmanyam,  2013). Oleh  karena  itu,  senyawa  bioaktif  yang dapat  dijadikan  sebagai  antibakteri  yang dianggap  lebih  efektif  dapat  di  produksi dari  fungi  ini.  Lalu  fungi  endofit  yang didapatkan  bisa  di  produksi  dengan  cara fermentasi senyawa metabolit yang berkhasiat obat  secara terus menerus tidak menimbulkan kerusakan ekologis.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  autoclave,  erlenmeyer,  gelas ukur, hotplate ,  neraca  digital, magnetic stirrer , kapas, kasa,  wrapping, cawan petri, bunsen, laminar air flow (LAF), rak tabung reaksi,  tabung  reaksi,  pinset,  gelas  beaker, gunting,  tisu,  jarum  ose,  tusuk  gigi, alumunium  foil,  dan  scapel,  mikroskop, object  glass,  deck  glass,  tisu,  dan  buku identifkasi  .  Bahan  yang  digunakan  yaitu daun,  akar,  kulit  akar  dan  batang  tanaman sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.)Merr ) aquades, Medium  Potato  Dekstrosa  Agar  (PDA), antibiotik, NaOCl , alkohol 70%, , aquadest steril.

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel
Sampel  tanaman  Sambung  Nyawa (Gynura  procumbens (Lour.)  Merr)  yang diambil  berupa  akar,  kulit  akar,  batang, dan  daun  dari  satu  individu  tanaman  yang sehat.  Kemudian,  dengan  menggunakan gunting  atau  pisau  bedah  yang  sudah disterilkan, organ tanaman dipotong menjadi  2  potongan  untuk  akar,  kulit  akar dan batang, sedangkan daun menggunakan 3 potongan organ. Sampel lalu dimasukkan kedalam  wadah  plastik  bening  dan  diberi label. Setelah itu, plastik tersebut diangkut ke laboratorium dan disimpan di lemari es atau cooler box (Suliati et al ., 2017).

## Pembuatan Media
Medium  yang  digunakan  adalah PDA instan dengan merek Mark. Pembuatannya dengan cara mencampurkan 13,45  gram  bubuk  PDA  dengan  345  ml aquades  steril,  menambahkan  magnetic stirrer  dan  antibiotik  clorampenicol  ke dalam Erlemeyer aduk dan tutup erlemeyer menggunakan sumbat. Setelah itu, letakkan  di  atas  hotplate  dipanaskan hingga  mendidih  dan  homogen.  Larutan media  yang  sudah  homogen  masukkan kedalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15  menit  untuk  disterilkan.  Setelah  itu, media  yang  telah  disterilkan  dimasukkan ke cawan petri dan dibiarkan mengeras, dilakukan secara aseptis didalam LAF.

## Isolasi Fungi Endofit
Isolasi  fungi  endofit  pada  tanaman sambung  nyawa  ini  dilakukan  dengan Teknik    tanam  langsung.  Yang  pertama adalah  pencucian,  yaitu  membersihkan permukaan  tanaman  dengan  air  mengalir sehingga  hanya  fungi  yang  berasal  dari dalam jaringan tanaman yang dapat tumbuh di  sana  (Ariyono et  al .,2014)  Setelah dicuci,  sampel  tanaman  dipotong  dengan gunting  steril  ukuran  1x1  untuk  daun  dan ukuran  2x1  untuk  batang  dan  akar. Selanjutnya,  permukaan  sampel  tanaman disterilkan  dengan  merendamnya  dalam larutan NaOCL 1 menit, etanol 1 menit, dan aquadest  steril  1  menit  secara  bergantian. Selanjutnya sampel yang sudah di sterilisasi di  masukkan  kedalam  cawan  petri  yang sudah  di  tuangkan  medium  PDA  lalu  di wrapping.  Dan  di  inkubasi  selama  7  hari. Isolasi  fungi  endofit  ini  dilakukan  dengan keadaan aseptis di dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) (Ariyono et al ., 2014)

## Pemurnian Fungi Endofit
Masing-masing  isolat  fungi  yang sudah tumbu di pindahkan pada cawan petri baru yang berisi  media PDA  menggunakan jarum  Ose.  Setelah  itu  diamati  secara makroskopik untuk mengetahui permukaan, warna, permukaan balik, bentuk permukaan,  dan  bentuk  koloni  fungi (Murdiyah,  2017).  Isolat  yang  dianggap sama  yaitu  isolat  dengan  kriteria  yang sama. Setiap koloni dengan morfologi yang
berbeda dipisahkan menjadi isolat tersendiri.  Setelah  5-7  hari,  penyelidikan morfologi  diulangi,  dan  jika  pertumbuhan koloni  yang  berbeda  secara  makroskopis ditemukan  lagi  pada  satu  isolat,  mereka diisolasi  lagi  sampai  ditemukan  isolat murni (Lestari et al ., 2019).

## Identifikasi Fungi Endofit
Pengamatan  secara  mikroskopis  dan makroskopik  yang  digunakan  peneliti untuk  mengidentifikasi  jamur  endofit. Identifikasi makroskopis dilakukan dengan mengamati, warna koloni, bentuk (konsentris  atau  tidak),  dan  tekstur  koloni (Sulistiyono & Mahyuni, 2019). Sedangkan identifikasi mikroskopis dilakukan dengan menggunakan mikroskop.  Pada  pengamatan  mikroskopis dilihat  ada  atau  tidaknya  septa  pada  hifa, perkembangan  hifa,  warna  hifa,  dan konodia  semuanya  diamati  di  bawah mikroskop  dengan  menggunakan  metode slide  kultur.  (Wulandari et  al .,2014). Selanjutnya  hasil  pengamatan  dicocokkan dengan  buku  kunci  identifikasiPictorial Atlas  of  Soil  and  Seed  Fungi  (Watanabe, 2010).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil isolasi fungi endofit  dari  tanaman  sambung  nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr) menghasilkan  12  isolat  dari  4  organ tanaman  yaitu,  akar,  kulit  akar,  daun  dan
batang.  Dapat  dilihat  pada Gambar  1
berikut ini.
Gambar  1. Penampakkan  miselium  yang  tumbuh  disekitar  organ  tanaman  sambung  nyawa  yang dilukai, a) akar, b) kulit akar, c) batang, d) daun.
Pengamatan  dilakukan  mulai  hari  ke 3  –  7  masa  inkubasi  dan  dilakukan  proses pemurnian    berdasarkan  perbedaan  secara makroskopis yaitu warna dan bentuk koloni
jamur. Seluruh isolat kemudian di identifikasi berdasarkan morfologi makroskopis dan mikroskopisnya ( Gambar 2 ).
c d c d a b a b a b c d GPDA 2 GPDA 1 500 µm 100 µm
c d c d a b
a b c d
c d a b
a b c d
c d a b a b GPD 2 GPD 1 GPKA 1 GPBA GPKA 3 GPKA 2 50 µm 100 µm 100 µm 100 µm
500 µm 100 µm
Gambar 2. Penampakan makroskopis dan mikroskopis fungi endofit dari tanaman   sambung nyawa , a) warna koloni depan, b) warna koloni balik, c) hifa, d) spora
Tabel  1 .  Karakteristik  makroskopis fungi  endofit  dari  tanaman  sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.)Merr.) Isolat Warna koloni depan Warna koloni belakang Tekstur Topografi Lingkaran Konsentris Genus GPDA 1 Putih Abu-abu Cottony Zonate - Nigrospora GPDA 2 Putih, hijau kehitaman Putih, abu-abu kehijauan Cottony Zonate - Blastomyces GPD 1 Putih hijau Putih hijau Cottony Zonate - Monacrosporium GPD 2 Putih, abu- abu kehijauan Putih hijau Cottony Zonate - Pythium GPBA Putih Putih Cottony Zonate - Cladosporium GPKA 1  Putih cream Putih cream Cottony Zonate - Trichoderma GPKA 2 Kuning kehijauan, hitam Kuning kehijauan, coklat tua Powdery Zonate - Aspergillus a b a b GPAA 2 GPAA 1 a d c b GPAN 2 GPAN 1 c d c d c b a d 50 µm 100 µm 500 µm 100 µm
GPKA 3 Putih kecoklatan Coklat muda Cottony Zonate - Papulaspora GPAA 1 Putih Putih Cottony Zonate - Cladosporium GPAA 2 Putih abu – abu kehitaman Putih abu – abu kehitaman Cottony Zonate - Fusarium GPAN 1  Putih coklat Putih coklat Cottony Zonate - Gliocladium GPAN 2 Putih Putih Cottony Zonate - Trichoderma
Tabel  2 .  Karakteristik  mikroskopis  fungi  endofit  dari  tanaman  sambung  nyawa  (G ynura  procumbens (Lour.)Merr.).
Isolat Jenis Spora Bentuk Spora Hifa Genus GPDA 1 Konidia Elipsoidal Bersekat Nigrospora GPDA 2 Sporangiospora Globose Bersekat Blastomyces GPD 1 Konidia Subglobose Tidak bersekat Monacrosporium GPD 2 Klamdiospora Globose atau subglobose Bersekat Pythium GPBA Konidia Elips Bersekat Clodosporium GPKA 1 Konidia Subglobose Bersekat Trichoderma GPKA 2 Sporangiospora Globose Tidak Bersekat Aspergillus GPKA 3 Konidia Globose Tidak bersekat Papulasora GPAA 1 Konidia Elips Bersekat Cladosporium GPAA 2 Konidia Ellipsoidal Tidak bersekat Fusarium GPAN 1 Konidia Globose Bersekat Gliocladium GPAN 2 Konidia Elipsoidal Bersekat Trichoderma
Tanaman sambung nyawa merupakan tanaman  yang  memiliki  banyak  sekali khasiat, seperti nama nya tanaman ini dapat digunakan  sebagai  penyambung  nyawa. Pada  penelitian  Rahmi  (2019),  tanaman sambung  nyawa  ini  mengandung  senyawa kimia  yaitu  akoloid,  flavonoid,  tannin, saponin,  dan  steroid  yang  dapat  memberi efek  sebagai  antipiretik.  Begitu  juga menurut  Novia et  al (2022),  tanaman sambung  nyawa  ini  bermanfaat  sebagai penyembuhan uka sayat, menurut Tan et al (2016),  Flavonoid  yang  ada  pada  daun sambung  nyawa  mengurangi  penyerapan glukosa  dan  mengatur  aktivitas  ekspresi enzim  yang  teribat  dalam  metabolism
karbohidrat sehingga ekstrak daun sambung nyawa  berpotensi  sebagai  penurun  kadar gula darah, mencegah pembentukan kanker (Ghofur et  al .,  2015),  dan  obat  penyakit liver,  magh,  ambeien,  ginjal,kolestrol tinggi,  serta  melancarkan  haid  (Utami  and Puspaningtyas, 2013).
Beragam  khasiat  pengobatan  yang dimiliki  dari  tanaman  sambung  nyawa membuat  tanaman  ini  banyak  digunakan masyarakat, sehingga di  lakukan eksplorasi fungi  endofit  dari  tanaman  ini  untuk mengurangi  eksploitasi  tanaman  .  Fungi endofit  adalah  fungi  yang  memiliki  sistem metabolit  skunder  yang  sama  dengan inangnya dan memiliki manfaat yang sama.
Berdasarkan  hasil  dari  penelitian yang    telah  dilakukan  pada  Tanaman Sambung  Nyawa tersebut  maka didapatkan 12  isolat  fungi  dari  yang  teridentifikasi pada  10  genus  yang  berbeda,  diantaranya yaitu
Aspergillus,
Blastomyces,
Cladosporium, Fusarium, Gliocladium, Monacrosporium, Nigrospora, Papulaspora, Pythium,  Trichoderma  Hasil  ini  diperoleh dari    pengamatan  secara  makroskopis  dan mikroskopis. Berdasarkan ( Tabel 1 ) Pengamatan makroskopis yang telah dilakukan  menunjukkan  keragaman  warna (Putih, abu – abu, hijau, coklat, dan cream) serta  keragaman  tekstur  (Cottony  dan powdery). Berdasarkan ( Tabel 2 )
pengamatan  secara  mikroskopis  terdapat perbedaan hifa (bersekat dan tidak bersekat), bentuk spora (subglobose, globose,  elipsoidial,  dan  bundar,  tipe  spora (konidia dan zoospore) (Afzal et al ., 2013 ; Habisukan et al ., 2021)
Sampel  tanaman  yang  digunakan  di ambil  di  kota  Palembang  yang  dimana memiliki  lingkungan  tropis  dan  basah  , dengan  curah  hujan  yang  melimpah, kelembaban sedang, serta  intensitas  cahaya yang  tinggi,  dan  tidak  tergenang  dengan jenis  tanah  alluvia,  regosol,  andosol, latosol, litosol, asosiasi litosol dan padsolik merah kuning (Hanifah & Ari, 2018).
Keadaan geografis inilah yang menyebabkan  bervariasi  nya  fungi  endofit
yang didapatkan, karena adanya mekanisme adaptasi  dari  fungi  endofit  terhadap mikroekologi  dan  kondisi    fisiologis  yang spesifik  dari  masing  –  masing    tumbuhan inang.  Satu  jaringan  hidup  suatu  tumbuhan dapat  menjadi  inang  tempat  tumbuh  dari satu jenis fungi endofit (Noverita, 2009).
Pada ( Gambar 2 ) dengan kode isolat GPDA 1, memiliki ciri makroskopis warna koloni  depan  putih  putih  dan  warna  koloni balik putih abu-abu, dengan tekstur cottony dan  tidak  memiliki  lingkaran  konsentris, sedangkan ciri mikroskopisnya hifa bersepta  dengan  konidiofor  pendek  yang membengkak  dan  kemudian  meruncing pada titik pembentukkan konidium (Watanabe,  2010).    Setelah  dilakukan pengamatan secara makroskopis dan mikroskopis  fungi  ini  termasuk  kedalam genus  Nigrospora.  lima  spesies  telah dibedakan  berdasarkan  dimensi  konidia dalam  genus  Nigrospora,  dengan  tingkat duplikasi tertentu satu sama lain. Nigrospora menunjukkan pertumbuhan yang  sangat  baik  pada  ph  6  –  8  dan  suhu optimal  20  –  30°C  .  Fungi  ini  berfungsi sebagai  pathogen  pada  daun,  akar,  ranting, dan cabang (Ramadhani et al ., 2017).
Pada ( Gambar 2 ) dengan kode isolat GPDA  2  memiliki  ciri  makroskopis  warna koloni putih dan ditengahnya hijau
kehitaman dengan tekstur cottony . Sedangkan ciri mikroskopisnya hifa
bersekat dengan konidia bulat atau berbentuk  buah  pir  dan  berkembang dipuncak  konidiofor  atau  langsung  pada hifa.  Setelah  dilakukan  pengamatan  secara makroskopis  dan  mikroskopis  fungi  ini teridentifikasi  kedalam  genus  Blastomyces. Hal  ini  juga  dijelaskan  oleh  Barnet  dan Hunter (1972) menyatakan bahwa Blastomyces  sp,  mempunyai  ciri  warna koloni  gelap  atau  hitam  pekat,  membentuk sel  tunas  (Blatospora),  hifa  berseptat, konidia satu  sel  dan berbentuk  bulat.Genus Blastomyces sp terdapat juga pada tanaman kopi  biasanya  pada  bagian  mahkota bunganya (Barnet & Hunter, 1972).
Berdasarkan  ( Gambar  2 )  dengan kode isolat GPD 1, memiliki ciri makroskopis warna koloni putih ditengahnya  hijau  dengan  tekstur cottony dan  pola zonate ,  Serta  memiliki  ciri mikroskopis  hifa  tidak  bersekat,  konidia tunggal secara apical, bentuknya geondong, dengan  pusat  berbentuk  tong.  Hiain, sederhana,  meruncing  dan  tegak,  serta bersel 4 (Ozimek, 2021). Setelah dilakukan pengamatan secara makroskopis dan mikroskopis  fungi  ini  termasuk  kedalam genus
Monacrosporium kelas Deuteromycotina.
Monacrosporium memiliki konidiofor sederhana,  Panjang,  tegak,  ramping,  hialin dan  terdapat  konidia  di  ujungnya.  Konidia tersebut  memiliki  sel  lebih  darisatu  dengan pembengkakan  pada  salah  satu  selnya.
Monacrosporium ini mampu mengendalikan nematodadengan cincin non-kontriksi  pada  hifanya  (Shindy et  al , 2020).
Berdasarkan  ( Gambar  2 )  dengan isolat  fungi  endofit  kode  GPD  2  memiliki ciri  makroskopis  yaitu  permukaan  dengan tekstur cottony berwarna  depan  putih  abu- abu  kehijauan  dan  belakang  putih  hijau, sedangkan  ciri  mikroskopis  dari  isolat  ini konidianya  berbentuk  bundar,  globose, bulat,  berdinding  halus,  terjadi  penebalan hifa  dan  spora  terdapat  ditengah  hifa. Setelah  dilakukan  pengamatan  fungi  ini masuk  kedalam  genus  Pythium  kelas mastigomycota  dan  banyak  terdapat  pada tumbuhan  dengan  iklim  lembab  yang hangat  (Andre et  al ,  2016;  Hon,  2009; Watanabe, 1937).
Berdasarkan ( Gambar 2 ) isolat fungi endofit  dengan  kode  GPBA  dan  GPAA  1, teridentifikasi  genus  Cladosporium  dengan ciri  makroskopis  warna  koloni  putih  dan tengahnya  kuning  dengan  tekstur cottony, serta  memiliki  ciri  mikroskopis  Konidiofor hialin,  tegak,  bercabang  di  bagian  tengah, dan  seperti  dendroid,  membawa  konidia catenulate  di  puncak  cabang.  Konidia blastospora,  tidak  jelas  antara  konidia  dan cabang,  hialin,  silindris,  berbentuk  spindel, bulat telur atau berbagai bentuk (Watanabe, 1937).
Berdasarkan  ( Gambar  2 )  isolat fungi  endofit  dengan  kode  GPKA  1  dan
GPAN  2  setelah  dilakukan  pengamatan secara makroskopis dan mikroskopis termasuk  kedalam  genus  yang  sama  yaitu Trichoderma  dari  kelas  Ascomycetes, dengan  ciri  makroskopis  memiliki  bentuk koloni  yang  berwarna  putih  kemudian cream bertekstur cottony . dan ciri mikroskopis  spora  yang  berwarna  hijau kekuningan,  hifa  bersepta,  konidiofor bercabang dan banyak, bentuk konidia semi bulat dan bergerombol diantara hifa, phialid lonjong, konidia berbentuk oval namun ada juga  konidia  yang  berbentuk globose, subglobose ,  silindris  dengan  ujung  basal yang  terpotong  dan  meruncing  (Fauziah et al ., 2018; Sopialena et al ., 2019; Hapida et al ., 2021).
Pertumbuhan fungi Trichoderma cukup  cepat  dalam  5  hari  pada  suhu  ruang koloni  dari  fungi  ini  sudah  terlihat  dan banyak (Rahmawati, 2017). Fungi Trichoderma  umumnya  terdapat  pada  kulit batang dan akar tanaman (Habisukan et al ., 2021;  Misra et  al .,  2009).  Trichoderma berfungsi  sebagai  pengendali  fungi  yang bersifat  pathogen,  stimulator  pertumbuhan tanaman,  pengurai  bahan  organik  dalam tanah  sehingga  sering  disebut  bio  fertilizer dan sering diaplikasikan bersamaan dengan pupuk  kimia  untuk  meningkatkan  efesiensi pemupukan  di  tanah  yang  tandus  (Imam et al ., 2018; Akhsan, et al ., 2022).
Berdasarkan  ( Gambar  2 )  isolat dengan  kode  GPKA  2  setelah  dilakukan
pengamatan secara makroskopis dan mikroskopis  termasuk  kedalam  genus Aspergillus  kelas  Euritiomycetes,  dengan ciri  makroskopis  warna  koloni  kuning kehijauan dan di tengah nya hitam, dengan tekstur powdery .  Djair  (2003)  juga menjelaskan bahwa warna koloni Aspergillus  sp  memiliki  warna  yang gelap.  Hal  ini  juga  dijelaskan  oleh Wulandari (2016) pada hasil penelitiannya bahwa,  pada  genus  Aspergillus  secara makroskopis  yang  ditumbuhkan  pada media  PDA  menunjukkan  koloni  dengan tekstur powdery serta  berwarna  hita kekuningan atau juga kecoklatan. Berdasarkan  ( Tabel  2 )  memiliki  ciri mikroskopis  hifa  tidak  bersekat  ,  konidia bulat  dan  berwarna  coklat  kehitaman dengan hifa tegak tidak bercabang. Hal ini sejalan  dengan  pendapat  wulandari  (2016) dalam  penelitian  nya  bahwa  Aspergillus memiliki  hifa  hialin  dan  struktur  hifa memanjang  dan  tidak  bercabang,  serta memiliki bentuk  spora bulat dan berwarna gelap. Fungi Aspergillus sp dapat dijadikan agen bikontrol untuk pengandilan  jamur,  jamur  ini  diketahui dapat  menghasilkan  senyawa  aspergilin dan memproduksi zat yang dapat menghambat perkembangan jamur patogenik (Wulandari, 2016).
Pada ( Gambar 2 ) isolat dengan kode GPKA  3  setelah  dilakukan  pengamatan secara  makroskopis  dan  mikroskopis
termasuk kedalam genus Papulaspora kelas Deuteromycota.  Isolat  ini  memiliki  ciri makroskopis warna koloni putih kecoklatan,  dengan  tekstur cottony dan topography  berupa zonate ,  serta  ciri mikroskopis  yang  dimiliki  yaitu  spora berbentuk globose dengan  konidiofor pendek yang tidak berdiferensiasi dari hifa (Suliati et al ., 2017; Watanabe, 1937).
Pada ( Gambar 2 ) yang menunjukkan  kode  GPAA  2  )  memiliki ciri  makroskopis  warna  koloni  putih  dan ditengahnya  abu  –  abu  kehitaman  dengan tekstur cottony ,dan memiliki ciri
mikroskopis
konidiofor hialin, mengandung  konidia  dalam  rantai  dan massa spora pada puncak cabang, makrokonidia  berspora,  dengan  sel  apikal sedikit  melengkung,  sel  kaki  bengkok  , beroentuk ellipsoidal ,  serta  klamidospora tidak  terbentuk  (Watanabe,  1937).  Setelah dilakukan pengamatan secara makroskopis dan  mikroskopis  termasuk  kedalam  genus fusarium.
Berdasarkan  ( Gambar  2 )  isolat dengan  kode  GPAN  1  memiliki  ciri makroskopis  warna  koloni  putih  dengan tekstur cottony dan  pola zonate dan  ciri mikroskopis  konidiofor  bersekat  dan bercabang, konidia kecil menumpuk diatas phialid, phialid berbentuk eipsoidial bersel 1 dan meruncing ke bagian atas (Suhartina et al ., 2018). Setelah dilakukan pengamatan secara makroskopis dan
mikroskopis  termasuk  kedalam  genus Gliocladium.  Fungi  Gliocladium  berperan sebagai  penyuplai  hayati  serta  memiliki daya  hambat  yang  cukup  besar  terhadap fungi  yang  bersifat  pathogen  dan  sebagai agensia  pengendalian  hayati  penyakit tumbuhan  (Yuricha et  al ,  2015;  Imam et al ., 2018).

## SIMPULAN
Penelitian  ini  berhasil  mengoleksi  12 isolat  fungi  endofit  dari  tanaman  sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.)Merr. ) yang  termasuk  kedalam  10  genus  yang berbeda, antara lain Aspergillus, Nigrospora,
Blastomyces, Fusarium, Phythium,  Cladosporium,  Trichoderma, Gliocladium, Papulaspora,
Monacrosporium  yang  diketahui  memiliki senyawa akoloid, flavonoid, tannin, saponin,  dan  steroid  yang  berpotensi sebagai penyembuhan berbagai penyakit.

## DAFTAR PUSTAKA
Afzal,  H.,  Shazad,  S.,  Qomar,  S.,  Nisa,  U. (2013).  Morphological  identification of  aspergillus  species  from  the  soil  of larkana district (Sindh pakistan). Asian Journal  of  Agriculture  and  Biology ,
1 (3), 105–117.
Agustira,  A.,  &  Trijayanthi,  W.  (2019).
Tanaman  Sambung  Nyawa(Gynura procumbens)Sebagai Antihiperglikemi. Jurnal Medula ,
9 (1), 1–5.
Akhsan,  N.I.M,  Sila,  S.,  Syaifudin,  E.  A., dan  Kurniati,  I.  R.  A.  (2022).
Identifikasi  jamur  Rhizosfer  di  Lahan Tanaman  Bawang  Merah  (Alliuma ascalonicum  L)  Bergulma  di  desa Bendang Raya Kecamatan Tenggarong. Jurnal  Agroekoteknologi
Tropika Lembab , 4 (1), 99–106.
Akmalasari,  I.,  Purwati,  E.  S.,  &  Dewi,  R.
S.  (2013).  Isolasi  dan  identifikasi jamur endofit tanaman manggis (Garcinia  mangostana  L). Biosfera , 30 (2), 82–89.
Andre, A. W.  A. dan C. (2016). Molecular phyogeny  and  taxonomy  of  genus pythium. Mycological research.
Mycological Research , 108 (12), 1363– 1383.
Aprilani, D., Mustofa, S., & Mutiara, U. G.
(2019). Efek Pemberian Daun Sambung Nyawa ( Gynura procumbens  )  Terhadap  Kadar  Gula
Darah. Medical  Journal  Of  Lampung University , 8 (2), 305–308.
Ariyono,  R.Q.,  S.  D.  and  L.  &  S.  (2014).
Keanekaragaman  Jamur  Endofit  Daun Kangkung  Darat  (Ipomoea  reptans Poir.)  pada  Lahan  Pertanian  Organik dan Konvensional. Hama Dan Penyakit Tumbuhan , 2 (1), 19–28.
Barnet,  H.L  &  Hunter,  B.  .  (1972).
Illustrated  genera  of  imperfect  fungi (Third Edition). Minneapolis, Minnesota . Fadli,  M.  Y.  (2015).  Benefits  Of  Sambung Nyawa (Gynura procumbens)
Subtance  As  Anticancer. J  Majority ,
4 (5), 50–53.
Fauziah,  N.,  Noviyanti.,  dan  Musthapa,  I. (2018).  The  utilization  of  jambu  bol (Syzigium  malaccense)  stem  as  a  new source  of  antioxidants. Jurnal  Ilmiah Farmaka Bahari , 10 (1), 33–41.
Ghofur,  A.,  Hamid,  I.S.,  A.  L.  D.  (2015). Anticarcinogenik  activity  of  gynura procumbens
extrac through
cytochrome  p450  and  glutathione  s- transerase. Int.J.  PharmTech  Res , 8 ,
24.
Habisukan,  U.  H.,  Elfita,  Widjajanti,  H., Setiawan,  A.,  &  Kurniawati,  A.  R.
(2021).  Diversity  of  endophytic  fungi
in  syzygium  aqueum. Biodiversitas , 22 (3), 1129–1137.
Hapida, Y., Elfita E., Widjajanti, H.,  dan S.
(2021).  Biodiversity  and  antibacterial activity  of  endophytic  fungi  isolated from jambu bol (Syzygium malaccence). Jurnal  Biodiversitas ,
22 (12), 5668–5677. Hasyyati, N. S., Suprihadi, A., Raharjo, B., &  Dwiatmi,  K.  (2017).  Isolasi  dan
Karakterisasi  Kapang  Endofit  dari Pegagan (Centella asiatica (L.) URBAN). Jurnal Biologi , 6 (2), 66–74.
Hon,  H.  .  (2009).  No  TThe  genus  pythium in  taiwan,  china  (1). A  Synoptic Review.  Front,  Biol  China , 4 (1),  15–
28.
Imam,  S.,  Cico,  J.K.S.,  Dini,  A.  (2018). Penggunaan cendawan endofit sebagai agens  pengendali  hayati  pada  lada (Piper  ningrum  L.). Jurnal  Agroqua , 16 (2), 143–151.
Lestari,  K.,  Agustien,  A.,  &  Djamaan,  A. (2019).  The  Potential  of  Endophytic Fungi  Isolated  from  Leaves,  Stems, Mangrove  Roots  Avicennia  marina  as a Producer of Antibiotics.
Metamorfosa:  Journal  of  Biological Sciences , 6 (1), 83–89.
Mamangkey,  J,  Mendes,  LW,  Harahap,  A,
Briggs,  D,  &  Kayacilar,  C.  (2022a). Endophytic  Bacteria  and  Fungi  from Indonesian  Medicinal  Plants  with Antibacterial,  Pathogenic  Antifungal and  Extracellular  Enzymes  Activities: A  Review. International  Journal  of Science,  Technology  &  Management ,
3 (1), 245-255.
Mamangkey, J, Pardosi, L,
&
Wahyuningtyas, R, S. (2022b). Aktivitas  Mikrobiologis  Endofit  dari Ekstrak  Daun  Binahong  (Anredera cordifolia  (Ten.)  Steenis)  Jendri. Jurnal  Pendidikan  Biologi  Dan  Ilmu Serumpun , 9 (1), 376–386.
Melliawati,  R.  .  H.  (2009).  Senyawa Antibakteri  Escherichia  coli  ATCC 35218  dan  Staphylococcus  aureus ATCC  25923  dari  Kapang  Endofit Taman  Nasional  Gunung  Halimun.
Jurnal Natur Indonesia , 12 (1), 21–27.
Misra, A.k., Gupta, V. (2009).
Trichoderma:Biology,  Biotechnology and biodiversity. J,Eco-Friendly Agric , 4 (2), 99–117.
Mou,  K.  M.,  &  Dash,  P.  R.  (2016).  A

## COMPREHENSIVE  REVIEW  ON GYNURA PROCUMBENS LEAVES.
A  Comprehensive  Review  on  Gynura
Procumbens , 3 (4), 167–174. www.ijpjournal.com
Murdiyah,  S.  (2017).  Endophytic  fungi  of various  medicinal  plants  collected from evergreen forest Baluran national park  and  its  potential  as  laboratory manual  for  mycology  course. JPBI (Jurnal Pendidikan Biologi Indonesia) , 3 (1), 64–71.
Noverita, F. D. dan S. E. (2009). Isolasi dan
Uji Aktivitas Antibakteri Jamur Endofit  dari  Daun  dan  Rimpang Zingiber  Ottensi. Jurnal  Farmasi Indonesia , 4 (4), 172.
Novia, D., Lestari, G.,  &  Malasari. (2022). Uji  Efektivitas  Ekstrak  Etanol  96  % Daun  Sambung  Nyawa  (  Gynura procumbens ( Lour ) Merr . ) Terhadap Luka  Sayat  Pada  Kelinci  Jantan  ( Oryctolagus cuniculus ). Ilmiah
Pharmacy , 9 (1), 145–153.
Ozimek, E., Hanaka, A. (2021). Mortierella species  as  the  plant  growth  promoting fungi  present  in  the  agriculture  soils. Agriculture  (Swizerland). Agriculture (Swizerland) , 11 (1), 1–8.
Pavan Kumar, G. V., & Naga
Subrahmanyam, S. (2013). Phytochemical analysis, in-vitro screening for antimicrobial and anthelmintic  activity  of  combined hydroalcoholic  seed  extracts  of  four selected  folklore  Indian  medicinal plants. Der  Pharmacia  Lettre , 5 (1), 168–176.
Putra, I. P. (2020). Ulasan: politik simbiosis fungi  dan  tumbuhan. Pro-Life , 7 (2),
144–156. http://ejournal.uki.ac.id/index.php/prol ife/article/view/1953
Rahmadini,  A.,  &  Fajar  Utami,  N.  (2019).
Uji Antibakteri Ekstrak Daun Sambung Nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.) dan Daun Tapak Liman ( Elephantopus  scaber L.)  terhadap Salmonella  thypi. Jurnal  Ilmiah  Ilmu Dasar  Dan  Lingkungan  Hidup , 19 (1), 1–11.
Rahmawati, E. (2017). Isolasi Dan Identifikasi  Fungi  Endofit  Dari  Buah Dan  Daun  Strawberry  (Fragaria  X Anannasa). Skripsi.UIN Malang . Rahmi,  S.  (2019). Pemanfaatan  ekstrak daun  sambung  nyawa  (  Gynura procumbens ( Lour . Sebagai antipiretik  pada  tikus  putih  jantan . 1797–1803.
Ramadhani,  S.  H.,  Samingan,  &  I.  (2017).
Isolasi  dan  Identifikasi  Jamur  Endofit pada  Daun  Jamblang  (Syzygium cumini  L). Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa
Fakultas
Keguruan Dan Ilmu
Pendidikan Unsyiah , 2 (2), 77–90.
Setiawan, M. A., Hasnawati, H., Sernita, S., &  Sulistia,  L.  (2018).  Uji  Daya
Hambat  Antibakteri  Fungi  Endofit Kulit  Jeruk  Nipis  (Citrus  aurantifolia) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Jurnal  Sains  Farmasi  & Klinis , 3 (1), 14. Shindy,  C.I.,  Akhsan,  N.,  S.  (2020).
Eksplorasi  Jamur  Nematofagus  Dari Pupuk  Kandang  Di  Kota  Samarinda: Studi  Kasus  Kelurahan  Lempake.
Jurnal Agroekoteknologi Tropika
Lembab , 3 (1), 55–60.
Sopialena,  S.,  Sopian,  S.,  &  Allita,  L.  D. (2019). Diversitas Jamur Endofit Pada Tanaman  Padi  (Oryza  sativa  L.)  dan Potensinya  Sebagai  Pengendali  Hama.
Jurnal Agroekoteknologi Tropika
Lembab , 2 (1), 44–49.
Suhartina, Kandou, F. E. F., & Singkoh, M. F.  O.  (2018).  Isolasi  dan  Identifikasi Jamur  Endofit  Pada  Tumbuhan  Paku Asplenium  nidus. Jurnal  MIPA , 7 (2),
24.
Suliati,  Rahmawati,  &  Mukarlina.  (2017).
Jenis-  Jenis  Jamur  Endofit  Tanaman Jeruk  Siam  (  Citrus  nobilis  var  . microcarpa  )  di  Perkebunan  Dungun
Prapakan  Sambas. Jurnal  Protobiont , 6 (3), 173–181.
Sulistiyono,  F.  D.,  &  Mahyuni,  S.  (2019).
Isolasi  Dan  Identifikasi  Jamur  Endofit Pada  Umbi  Talas  (Colocasia  es- culenta  (L.)  Schoot). Jurnal  Sains Natural , 9 (2), 66.
Sumadji,  A.  R.,  &  Pitoyo,  D.  J.  (2019).
Potensi Pengembangan Tanaman Sambung  Nyawa  Sebagai  Tanaman Obat  Dan  Pangan  Skala  Rumah Tangga. Prosiding , 223–227.
https://pmat.unirow.ac.id/prosiding/ind ex.php/SNasPPM/article/view/253
Suryandari,  R.  Y.,  Kasikoen,  K.  M.,
Martini,  E.,  &  Kurnianto,  A.  (2020). Pandemi  Covid-19  Dan  Kearifan Lokal: Penyuluhan Budidaya Tanaman Sambung Nyawa (Gynura Procumbens)  Di  Dusun  Jomblang, Tegaltirto,  Berbah,  Sleman,  Daerah Istimewa  Yogyakarta. Anoa :  Jurnal Pengabdian Masyarakat Sosial, Politik,  Budaya,  Hukum.  Ekonomi ,
1 (3), 167–177.
Tan,  H.  L.,  Chan,  K.  G.,  Pusparajah,  P., Lee,  L.  H.,  &  Goh,  B.  H.  (2016). Gynura  procumbens:  An  overview  of the  biological  activities. Frontiers  in
Pharmacology , 7 (52), 1–14.
Utami, P., and Puspaningtyas, D, E. (2013). The  Miracle  of  Herbs .  PT  Agromedia Pustaka.
Uthia,  R.,  Kardela,  W.,  &  Transida,  K.  B. (2018). Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol  Daun  Sambung  Nyawa  (
Gynura  procumbens  (  Lour  .)  Merr  .) Terhadap  Kaki  Tikus  Putih  Jantan. Farmasi Higea , 10 (1), 25–32.
Watanabe, T. (1937). Pictorial atlas of soil and  seed  fungi  morphologies  of cultured fungi and key to species.
Watanabe,  T.  (2010). Pictorial  Atlas  Of Soil And Seed Fungi Pictorial Atlas Of Soil And Seed Fungi Morphologies Of Cultures Fungi . CRC Press.
Wulandari,  D.,  Liliek,  S.,    dan  A.  M.
(2014). Keanekaragaman Jamur Endofit Pada Tanaman Tomat
(Lycopersicum  esculentum  Mill.)  Dan Kemampuan  Antagonisnya  Terhadap Phytophthora  infestans. Jurnal  HPT ,
2 (1).
WuLandari. (2016). Potensi berbagai macam  ekstrak  tumbuhan  sebagai antifungi  dalam  memperpanjang  masa penyimpanan  serta  mempertahankan kualitas  jagung. SKRIPSI  Fakultas Perternakan Universitas Andalas
Padang . Y,  H.  (2020). Pengaruh  Pemberian Rebusan Daun Sambung Nyawa (Gynura pro-cumbens) Terhadap Penurunan  Tekanan  Darah  Pada Penderita Hipertensi.
Yuricha,  K.,  Liliek,  S.,  Abdul,  C.  (2015). Potensi  Antagonisme  Jamur  Endofit Pada  Tanaman  Lada  (Piper  Ningrum
L).  Terhadap  Jamur  Phythophora Capsici  Leioniam  Penyebab  Penyakit Busuk  Pangkal  Batang. Jurnal  HPT ,
3 (1).