## ULTRASONIC-ASSISTED EXTRACTION AND IN VITRO ANTIOXIDANT ACTIVITY OF GADUNG TUBER EXTRACT ( Dioscorea hispida Dennst )
Susanti*, Nitya Nurul Fadilah, Lina Rahmawati Rizkuloh
Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Perjuangan Tasikmalaya, Jalan Peta No. 177, Kahuripan, Tawang, Tasikmalaya, Jawa Barat, 46115, Indonesia
*Corresponding author:  Susanti (susanti@unper.ac.id)

## ARTICLE HISTORY
Received: 22 June 2021 Revised: 23 December 2021                        Accepted: 11 January 2022

## Abstract
Dioscorea  hispida Dennst  or  Gadung  tuber  has  known  to  contain  phenol  compound which  has  antioxidant  potency.  Phenolic  compound  extraction  made  of  Gadung  tuber research is still limited to explore the utility. The research aimed to extract the  Gadung tuber  phenolic  compound  by  ultrasonic-assisted  extraction  (UAE)  method  at  40 o C,  40 kHz for 40 minutes used various solvents such as water, ethanol and methanol, then in vitro  antioxidant  activity  test.  Total  Phenol  Content  (TPC)  was  measured  by spectrophotometer  UV-Visible  based  on  the  Folin-Ciocalteu  reduction  by  gallic  acid. DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) assay was conducted to measure the antioxidant activity.  The  result  indicated  that  the  highest  total  phenolic  compound  was  from  the methanol extract of gadung tuber (4,467 ± 0,752 gGAE/100g) and it also had the lowest IC 50 (4,395 μg/mL).
Key words: antioxidant, gadung, fenol, ultrasonic-assisted extraction

## EKSTRAKSI BERBANTU ULTRASONIK DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK UMBI GADUNG ( Dioscorea hispida

## Dennst) SECARA IN VITRO

## Abstrak
Dioscorea  hispida Dennst  atau  di  Indonesia  dikenal  dengan  umbi  gadung  diketahui mengandung  senyawa  aktif  fenol  yang  dapat  memberikan  aktivitas  antioksidan. Ekstraksi senyawa fenol dari umbi gadung masih belum banyak diteliti. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengekstraksi senyawa fenol menggunakan metode ultrasonic-assisted extraction (UAE)  dengan  pelarut  yang  bervariasi  yaitu  air,  etanol,  dan  metanol  serta menguji aktivitas antioksidannya. Penentuan kandungan fenol total (TPC) ekstrak secara kuantitatif telah dilakukan menggunakan metode spektrofotometri uv-vis dengan prinsip reaksi  reduksi  antara  Folin –Ciocalteu    dengan  asam  galat.  Pengujian  aktivitas antioksidan  ekstrak  menggunakan  metode  peredaman  2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH).  Dari  penelitian  ini  diketahui  bahwa  senyawa  fenol  total  paling  tinggi  terdapat pada ekstrak metanol  umbi gadung yaitu sebesar 4,467 ± 0,752 gGAE/100 g dengan aktivitas antioksidan terkuat yang dilihat dari nilai IC 50 -nya yaitu sebesar 4,395 μg/mL .
Kata kunci: antioksidan, fenol, gadung, ultrasonic-assisted extraction

## Pendahuluan
Gadung  ( Dioscorea  hispida Dennst.)  atau  secara  internasional  dikenal  dengan sebutan yam merupakan sejenis  umbi  yang juga  tumbuh  cukup melimpah  di  Provinsi Jawa  Barat.  Di  beberapa  daerah  di  Indonesia  termasuk  di  Provinsi  Jawa  Barat,  umbi gadung  sering  diolah  menjadi  berbagai  makanan. 1 Namun  umbi  gadung  mempunyai kandungan alkaloid beracun bernama senyawa diocscorin dan kadar  HCN tinggi yang dapat mengakibatkan mual, muntah dan pusing jika dikonsumsi secara langsung atau jika penanganannya tidak tepat. Hal ini menyebabkan umbi gadung kurang diminati. 2-5 Umbi  gadung  juga  dimanfaatkan  sebagai  hama  bagi  hewan  tikus  atau  rodentisida  di beberapa  tempat. 6 Umbi  gadung  diketahui  mengandung  senyawa-senyawa  bioaktif seperti  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  dan  fenolik.  Selain  itu  terdapat  pula  kandungan protein,  karbohidrat,  inulin,  glikosida  dan  diosgenin. 7-10 Uji  aktivitas  farmakologi  yang telah  dilakukan  menunjukkan  bahwa  umbi  gadung  dapat  bersifat  sebagai  antikanker, antioksidan, antiinflamasi dan antimikroba. 11-14
Zat  antioksidan  adalah  suatu  zat  yang  dapat  menangkal  senyawa  radikal  bebas. Senyawa  radikal  bebas  ( free  radical )  adalah  suatu  zat  toksik  yang  mengakibatkan beberapa gangguan stress oksidatif di antaranya peradangan kanker dan gejala-gejala penuaan  dini.  Zat  antioksidan  yang  berasal  dari  alam  seperti  fenol  menjadi  senyawa yang menarik minat para ilmuwan karena dapat mendukung perkembangan obat dengan efek samping yang lebih rendah. 15,16
Salah satu senyawa aktif yang terkandung cukup banyak pada spesies Dioscorea adalah  senyawa  fenol.  Bagian  daging  dari  umbinya  diketahui  mempunyai  kadar  fenol yang lebih besar daripada bagian daunnya. Pada penelitian terdahulu diketahui bahwa kadar fenol total pada ekstrak metanol hasil maserasi dari simplisia umbi gadung adalah sebesar  160,65  ±  0,18  mgGAE/g  dengan  IC 50 sebesar 141.3  ±  3.33  μg/mL  yang menunjukkan  aktivitas  antioksidan. 12 Senyawa  metal  ester  asam  protokatekuat,  p- hidroksibenzaldehid  asam  kafeat dan  asam  klorogenat merupakan senyawa-senyawa yang berhasil ditemukan pada tanaman umbi gadung dan golongan fenol. 17
Sampai penelitian ini dibuat, telah dilakukan penelitian ekstraksi terhadap senyawa aktif fenol dari umbi gadung dengan metode konvensional seperti maserasi, sokhletasi, dan  juga  metode  MSPD  ( Matrix  Solid  Phase  Dispersion ). 2,12,18,19 Oleh  karena manfaatnya  yang  cukup  besar dan potensial,  maka  riset  berkenaan dengan  ekstraksi senyawa  fenol  menjadi  suatu  tantangan  bagi  para  ilmuwan  untuk  mencari  metode ekstraksi  yang  paling  efektif.  Metode  ekstraksi  berbantu  ultrasonik  merupakan  suatu metode  ekstraksi  kerja  cepat,  ramah  lingkungan  ( environmentally  friendly )  dengan teknologi yang cukup baru, yang sesuai untuk ekstraksi senyawa aktif dengan optimal dan efisien. Metode ekstraksi berbantu ultrasonik atau disebut juga Ultrasound-assisted extraction (UAE) dapat menghasilkan gelembung kavitasi dalam sel biologi, khususnya sel tumbuhan. Metode ekstraksi ini diketahui dapat meningkatkan persentase rendemen ekstrak senyawa bioakti. 20 Metode ini juga cukup ekonomis dan  berpotensi besar untuk dapat dikembangkan dan diaplikasikan.
Maka  dari  itu,  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  memperoleh  informasi mengenai senyawa fenol secara kuantitatif dan aktivitas antioksidan dari umbi gadung dengan  metode  UAE  dengan  pelarut  air,  etanol  dan  metanol.  Ketiga  pelarut  tersebut memiliki  perbedaan  tetapan  dielektrik,  namun  kepolarannya  sesuai  dengan  senyawa fenol.

## Metode

## Alat
Ultrasonic bath (Skymen, China), Oven (Memmert, Jerman), Spektrofotometer Uv- vis  (Agilent  Technologies,  USA)  dan  alat  gelas  yang  biasa  digunakan  di  laboratorium analisis.

## Bahan
Dioscorea  hispida Dennst.  atau  umbi  gadung  liar  yang  berasal  di  Kabupaten Tasikmalaya  (Nomor  Surat  Determinasi  3262/I1.CO2.2/PL/2019  dari  SITH  ITB),  air, metanol (Sigma Aldrich, USA), etanol (Sigma Aldrich, USA), air, reagen Folin-Ciocalteu (Merck, Jerman), Asam Galat (Merck), Natrium Karbonat (Merck, Jerman), reagen 2,2- diphenyl-1-picrylhidrazyl  atau  DPPH  (Sigma  Aldrich,  USA)  dan  sebagai  pembanding digunakan Asam Askorbat (Merck, Jerman). Seluruh zat yang digunakan memiliki grade pro analisis.

## Tahap Ekstraksi Umbi Gadung
Setelah dibersihkan dari pengotor, umbi dikupas dan dibersihkan Kembali dengan air  yang  mengalir.  Bagian  daging  umbi  kemudian  dirajang  sampai  ukuran  lebih  kecil sehingga dapat mempercepat proses pengeringan. Tahap pengeringan dilakukan pada oven  pengering  dengan  suhu  40 o C,  kemudian  dihaluskan  sampai  terbentuk  simplisia serbuk 12 .  Simplisia serbuk sebanyak 10 gram dihomogenisasi dengan masing-masing pelarut  yaitu  aquabides,  etanol  96%  dan  metanol  90%  sebanyak  100  mL  pada  botol gelas  yang  berwarna  gelap.  Kemudian  ekstraksi  dilakukan  dengan ultrasonic  bath dengan pengaturan frekuensi pada 40 kHz dan temperatur 40 o C dengan waktu selama 40  menit.  Ekstrak  cair  yang  diperoleh  kemudian  disaring  dan  filtratnya  dipekatkan sehingga diperoleh ekstrak kental. Persentase rendemen dihitung dengan rumus yang terdapat pada persamaan (1).
% Rendemen = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑘𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑥 100% …..(1)

## Tahap Analisis Kuantitatif Fenol Total
Analisis kuantitatif senyawa fenol total dilakukan dengan prosedur seperti yang telah dilakukan  Miah  tahun  2018  dengan  modifikasi  pada  variasi  konsentrasi  asam  galat. Kandungan total enyawa fenol ekstrak dianalisis menggunakan reagen Folin-Ciocalteu. Asam galat dilarutkan menjadi larutan standar dengan variasi konsentrasi 20, 25, 30, 35, 40, 45 dan 50 μg/mL. Asam galat sebanyak 0,5 mL dicampurkan dengan Na 2 CO 3 7,5% sebanyak  2  mL  dan  reagen  Folin-Ciocalteu  2,5  mL.  Sebanyak  10  mg  ekstrak  kental dilarutkan dalam 5 mL metanol. Selanjutnya, sebanyak 0,5 mL larutan ekstrak ditambah 2 mL larutan Na 2 CO 3 dan 2,5 mL reagen Folin-Ciocalteu dan. Proses inkubasi dilakukan selama 35 menit, kemudian nilai  absorbansi diukur  pada panjang gelombang 760 nm menggunakan  spektrofotometer  Uv-Visible.  Kurva  baku  asam  galat  diperoleh  dengan menghubungkan  absorbansi  dengan  konsentrasi.  Satuan  gGAE  ( Gallic  Acid Equivalent )/100 g ekstrak adalah satuan yang digunakan untuk menyatakan kadar fenol total (TPC) ekstrak umbi gadung.

## Tahap Uji Aktivitas Antioksidan
Asam  askorbat  sebagai  pembanding  dilarutkan  dalam  pelarut  metanol  sampai diperoleh  konsentrasi  1000 μg/mL  yang  kemudian  disebut  sebagai  larutan  stok. Kemudian  dilakukan beberapa  pengenceran  terhadap  larutan  stok  untuk memperoleh konsentrasi larutan 0,5 – 2,5 μg/mL. Sejumlah 15,78 mg zat DPPH dilarutkan ke dalam
100 mL pelarut metanol sehingga diperoleh larutan DPPH dengan konsentrasi 0,4 mM. Ekstrak dan larutan pembanding masing-masing sebanyak 2 mL dicampurkan dengan larutan  DPPH  sebanyak  3  mL.  Kemudian  dilakukan  tahap  inkubasi  selama  30  menit dalam  kondisi  gelap  pada  temperatur  kamar.  Absorbansi  diamati  dengan spektrofotometer  UV-Visible  pada  panjang  gelombang  517  nm.  Peredaman  radikal bebas DPPH dinyatakan sebagai persentase inhibisi.
% inhibisi = ( 𝐴𝑏𝑠 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝐴𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙) (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜) x 100%.......... (2)
Abs = Absorbansi

## Tahap Analisis Data
Untuk  tahapan  analisis  data  statistik,  maka  masing-masing  percobaan  dilakukan secara  triplo  (n=3)  dan  dihitung  nilai  standar  deviasinya  (±).  Uji  Tukey  Post  Hoc digunakan dalam uji lanjutan dengan interval kepercayaan 95%.

## Hasil dan Pembahasan

## Hasil
Ultrasound-Assisted  Extraction (UAE)  dengan  variasi  3  jenis  pelarut  ekstraksi menunjukan perbedaan nilai rendemen yang dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Persentase Rendemen Ekstrak Gadung
Jenis Ekstrak Rendemen (%) Metanol Etanol Air 3,69 ± 1,27 4,62 ± 0,63 7,12 ± 0,47
Data  hubungan  antara  konsentrasi  asam  galat  dengan  nilai  absorbansi  yang diperoleh disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2 . Data Konsentrasi Dan Absorbansi Standar Asam Galat
Konsentrasi (μg/mL) Absorbansi 20 25 30 35 40 45 50 0,265 0,338 0,433 0,534 0,631 0,719 0,818
Gambar 1. Kurva kalibrasi baku asam galat
Hasil analisis kuantitatif fenol total ekstrak umbi gadung disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Analisis Kuantitatif Total Fenol Dalam Umbi Gadung
Jenis Pelarut Kadar Fenol Total (g GAE/100g) Metanol Etanol Air 4,467 ± 0,752 3,274 ± 0,352 2,726 ± 0,242
Hubungan persentase inhibisi dengan konsentrasi ekstrak disajikan pada Gambar 2, 3 dan 4.
Gambar 2. Kurva persentase inhibisi dengan konsentrasi ekstrak etanol
y = 0,0187x - 0,1207 R² = 0,9988 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 0 10 20 30 40 50 60 A b s o rb a n s i Konsentrasi Asam Galat ( μg/mL ) y = 11,332x - 27,007 R² = 0,9927 0 10 20 30 40 50 60 0 1 2 3
4 5 6 7 8 % I n h ib is i Konsentrasi ( μg/mL)
Gambar 3. Kurva persentase inhibisi dengan konsentrasi ekstrak metanol
Gambar 4. Kurva persentase inhibisi dengan konsentrasi ekstrak air
Hasil perhitungan nilai IC 50 ekstrak umbi gadung disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4 . Aktivitas Antioksidan Ekstrak Umbi Gadung
Pelarut IC 50 (μg/mL) Metanol Etanol Air 4,395 6,796 8,809

## Pembahasan
Ekstrak air umbi gadung memiliki nilai rendemen tertinggi dengan perbedaan yang signifikan bila dibandingkan dengan ekstrak metanol dan ekstrak etanol (p<0,05). Hasil tersebut menunjukkan pemilihan jenis kepolaran  pelarut dalam ekstraksi berpengaruh pada rendemen ekstrak yang diperoleh. Kepolaran suatu pelarut dapat ditunjukkan dari nilai  tetapan dielektriknya.  Nilai tetapan dielektrik diartikan sebagai suatu gaya antara dua partikel pada suatu molekul yang saling tolak menolak dan bermuatan listrik. Nilai tetapan  dielektrik  berbanding  lurus  dengan  kepolaran  pelarut,  artinya  semakin  tinggi nilainya maka semakin  polar sifat suatu pelarut. Tetapan dielektrik metanol, etanol dan air  berturut-turut  adalah  24,70,  33,60  dan  80,10. 21 Nilai  rendemen  ekstrak  air  umbi gadung yang tinggi menunjukkan bahwa air mampu menarik senyawa aktif lebih banyak dibandingkan  pelarut  lainnya  karena  perolehan  senyawa  aktif  dalam  proses  ekstraksi berdasarkan kemiripan polaritas dengan pelarut sehingga dapat diperoleh ekstrak yang lebih banyak.
y = 11,384x - 0,0346 R² = 0,9949 0 10 20 30 40 50 60 0 1 2 3 4 5 6 % I n h ib is i Konsentrasi ( μg/mL ) y = 9,083x - 30,017 R² = 0,992 0 10 20 30 40 50 60 0 2 4 6 8 10 % In h ib is i Konsentrasi ( μg/mL)
Senyawa  fenol  merupakan  senyawa  yang  bersifat  polar,  maka  proses  ekstraksi senyawa fenol sebaiknya menggunakan pelarut yang bersifat polar. Efektivitas proses ekstraksi bergantung pada sifat kelarutan senyawa senyawa bioaktif dalam pelarutnya, selaras dengan prinsip like dissolve like. 22 Contoh pelarut yang sering digunakan dalam ekstraksi dan bersifat polar adalah air, etanol, metanol, dan air.

## Hasil Analisis Kuanatitatif Fenol Total
Analisis kuantitatif senyawa fenol total dilakukan untuk memperoleh data banyaknya senyawa  fenol  yang  terkandung  pada  ekstrak  gadung.  Analisis  kuantitatif  fenol  total dilakukan dengan menggunakan instrumen spektrofotometer UV-Vis dan reagen Folin- Ciocalteu  didasarkan  pada  prinsip  reaksi  reduksi  oksidasi.  Asam  galat  merupakan pembanding yang digunakan pada analisis ini. Hasil uji pendahuluan diperoleh panjang gelombang  maksimum  760  nm  dan  lama  inkubasi  35  menit  setelah  dilakukan  uji penentuan operating time .
Pereaksi  utama  dalam  analisi  ini  adalah  Folin-Ciocalteu  (3H 2 O-P 2 O 5 -13WO 3 - 5MoO 3 -10H 2 O)  atau  disebut  juga  molibdo  tungsto  fosfotungstat  heteropolianion. Pereaksi  ini  akan  bereaksi  dengan  fenol  membentuk  suatu  senyawa  kompleks [(PMoW 11 O 4 ) 4 -]    yang  berwarna  biru  dan  dapat  diamati  serapannya  pada  panjang gelombang  760  nm  dengan  metode  spektrofotometri  uv-visible.  Warna  biru  yang terbentuk  diakibatkan  oleh  reduksi  logam  Mo  (VI)  atau  molybdenum  dalam  kompleks Folin-Ciocalteu menjadi logam Mo (V) karena terdapat donasi elektron dari fenol. 23 Kadar senyawa  reduktor,  seperti  fenol  berbanding  lurus  terhadap  instensitas  warna  yang terbentuk. 24 Jika suatu sampel memiliki kadar fenol yang tinggi, maka warna biru yang terbentuk pada hasil analisis akan semakin pekat.
Larutan  standar  asam  galat  dibuat  dalam  beberapa  konsentrasi,  yaitu  dari  mulai konsentrasi  20 μg/mL  sampai  dengan  konsentrasi  50  μg/mL.  Kurva  standar  yang terbentuk diperoleh berdasarkan hubungan absorbansi dengan konsentrasinya.
Hubungan  nilai  absorbansi  dan  konsentrasi  asam  galat  menghasilkan  suatu persamaan garis y= 0,0187x – 0,1207 dan nilai R (koefisien kolerasi) sebesar 0,9988. Nilai R tersebut menunjukkan bahwa persamaan garis tersebut layak digunakan dalam suatu metode analisis.
Persamaan regresi linear yang dihasilkan kemudian digunakan untuk menghitung kadar fenol total dalam ekstrak umbi gadung. Berdasarkan hasil  perhitungan tersebut diketahui  bahwa  kadar  fenol  total  tertinggi  diperoleh  dari  ekstrak  metanol  yaitu 4,467±0,752  gGAE/100g  ekstrak  yang  menunjukkan  bahwa  dalam  100  gram  ekstrak terdapat senyawa fenol yang jumlahnya setara dengan jumlah asam galat. Berdasarkan hasil  uji  statistik,  semua  jenis  ekstrak  tidak  memiliki  perbedaan  yang  signifikan  yang ditunjukkan dengan nilai p>0,05.
Dilihat  dari  tingkat  kepolarannya,  air  memiliki  kepolaran  lebih  tinggi  dibandingkan dengan metanol dan secara teori seharusnya dapat menarik senyawa fenol lebih banyak dibandingkan  metanol.  Hal  ini  bisa  disebabkan  karena  adanya  zat-zat  pengganggu seperti pengotor atau senyawa lainnya yang ikut terekstraksi sehingga mengganggu uji kadar fenol total. Senyawa fenol yang terdapat pada umbi gadung merupakan senyawa bioaktif yang cukup potensial dalam efek farmakologinya sebagai antioksidan. 12

## Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Gadung
Perubahan warna larutan dari ungu ke kuning merupakan hasil reaksi yang terjadi berdasarkan  prinsip  dari  metode  peredaman  radikal  bebas  DPPH  untuk  uji  aktivitas antioksidan  ekstrak  umbi  gadung  yaitu  radikal  bebas  DPPH  akan  mengalami  reduksi akibat  proses  donor  atom  hidrogen  atau  elektronnya.  Intensitas  warna  sebanding
dengan jumlah elektron yang didonasikan dan diikuti dengan berkurangnya absorbansi DPPH. 25 Pada penelitian ini, Panjang gelombang maksimal DPPH adalah 516 nm dan absorbansi sebesar 0,578 yang sesuai dengan panjang gelombang teoritis untuk DPPH yaitu antara 515 –520 nm. 26
Asam askorbat berperan sebagai baku pembanding dalam penelitian ini dan dipilih karena dapat meredam radikal bebas DPPH. Besarnya aktivitas antioksidan dari suatu zat ditentukan oleh nilai Inhibitory Concentration (IC 50 ) yaitu nilai konsentrasi suatu zat yang dapat menghambat 50% aktivitas radikal bebas. Adanya variasi konsentrasi dari larutan asam askorbat dan ekstrak bertujuan untuk mengukur nilai absorbansi sehingga persentase inhibisi dapat dihitung.
Nilai  IC 50 dapat  ditentukan  dari  persamaan  yang  dihasilkan  oleh  kurva  yang menghubungkan  antara  konsentrasi  dengan  persentase  inhibisi.  Nilai  IC 50 asam askorbat sebagai pembanding pada uji ini adalah 2,061 μg/mL. Hasil perhitungan nilai IC 50 ekstrak  umbi  gadung  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  mempunyai  aktivitas antioksidan terkuat jika dibandingkan dengan dua ekstrak lainnya yaitu dengan nilai IC 5 0 sebesar  4,395 μg/mL.  Bila  dibandingkan  dengan  penelitian  sebelumnya, 12 nilai  IC 50 ekstrak  metanol  umbi  gadung  dengan  metode  ekstraksi  maserasi  adalah  sebesar 141.3±3.33 μg/mL, lebih besar dibandingkan nilai IC 50 ekstrak metanol pada penelitian ini. Hal ini menunjukkan bahwa ekstraksi umbi gadung dengan Teknik UAE lebih baik dibandingkan dengan Teknik maserasi.
Berdasarkan  pernyataan  Blois  (1958)  bahwa  aktivitas  antioksidan  suatu  zat termasuk kategori aktivitas lemah jika nilai IC 50 > 150 μg/mL, kategori aktivitas sedang jika nilai IC 50 101- 150 μg/mL, termasuk kategori kuat jika nilai IC 50 50- 100 μg/mL dan kategori sangat kuat jika nilai IC 50 < 50 μg/mL. 27
Hasil perhitungan nilai IC 50 pada penelitian ini menunjukkan bahwa semua ekstrak umbi  gadung  mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat.    Hasil  penelitian  ini menunjukkan bahwa adanya korelasi antara konsentrasi fenol dengan nilai IC 50 ekstrak umbi gadung. Hubungan tersebut menunjukkan bahwa semakin tinggi total fenol, maka kekuatan antioksidannya semakin tinggi.  Senyawa fenol yang terdapat pada tanaman mempunyai  sifat  oksidasi-reduksi,  sehingga  dapat  berperan  sebagai  senyawa antioksidan. 28 Aktivitas antioksidan dari senyawa fenol terjadi berdasarkan mekanisme reaksi reduksi-oksidasi, yaitu senyawa fenol berfungsi sebagai pereduksi radikal bebas yang pada awalnya zat reaktif kemudian akan  terbentuk menjadi zat yang non reaktif. Oleh karena itu, zat radikal bebas terhambat pembentukannya dan efek serangan radikal bebas seperti kerusakan dapat diperbaiki maupun dihambat. Mekanisme lainnya yaitu bahwa  senyawa  fenol  mempunyai  gugus  hidroksi  yang  dapat  mendonasikan  atom hidrogennya dan mampu menetralisasi kekurangan elektron pada zat radikal bebas. 29

## Kesimpulan
Proses ekstraksi senyawa golongan fenol dari gadung dengan metode UAE lebih efisien dan cepat dibandingkan metode maserasi. Perbedaan pada jenis pelarut dalam ekstraksi  dapat  mempengaruhi  total  kadar  fenol  serta  kekuatan  sifat  antioksidan  dari ekstrak  gadung.  Semua  jenis  ekstrak  umbi  gadung  mempunyai  aktivitas  antioksidan yang  cukup  tinggi  yang  ditunjukkan  dengan  IC 50 <  50 μg/mL.  Kandungan  fenol  total ekstrak umbi gadung memiliki korelasi dan berbanding lurus dengan kekuatan aktivitas antioksidan. Dari hasil penelitian ini memperlihatkan potensi farmakologi umbi gadung yang cukup baik sebagai antioksidan.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Masyarakat  (LP2M)  Universitas  Perjuangan  Tasikmalaya  atas  Dana  Hibah  Kompetitif Internal UNPER Tahun Anggaran 2020/2021 yang telah membiayai penelitian ini.

## Daftar Pustaka
1. Nugroho LH, Anna E. The potency of gadung (Dioscorea hispida Dennst.) tuber as a functional food: toxicicty, phytochemical content and starch characters. AIP Conf Proc 2002. 2018; Available from: doi: https://doi.org/10.1063/1.5050133
2. Masdar N, Roslan R, Hasan S&, Kamal M. Determination of antioxidant from ubi gadong tubers for facial soap bar. In: Charting the Sustainable Future of ASEAN in  Science  and  Technology.  Singapore:  Springer;  2020.  Available  from: https://doi.org/10.1007/978-981-15-3434-8_17%5C
3. Kresnadipayana  D,  Helmy  I.  The  concentration  of  NaCl  soaking  to  decreasing cyanide  levels  in  Gadung  (Dioscorea  hispida  Dennst).  J  Teknol  Lab. 2019;8(1):36 –40. Available from: doi: 10.29238/teknolabjournal.v8i1.156.
4. Gunawan S, Aparamarta B, Anindita, Antari A. Effect of fermentation time on the quality of modified gadung flour from gadung tuber (Dioscorea hispida Dennst.). In:  IOP  Conf  Series:  Materials  Science  and  Engineering  673,  012002.  2019. Available from: doi:10.1088/1757-899X/673/1/012002
5. Kumoro A, Retnowati D, Budiyati C. Removal of cyanides from gadung (Dioscorea hispida dennst.) tuber chips using leaching and steaming techniques. J Appl Sci Res. 2011;7(12):2140 –6.
6. Sari D, Fitrawati, Bahtiar. Effect of Dioscorea hispida dennst. against Rattus sp. In:  IOP  Conf  Series:  Earth  and  Environmental  Science  484,  012109.  2020. Available from: doi:10.1088/1755-1315/484/1/012109
7. Putri  A,  Kurniasih  E,  Hasanah  U,  Rahmawati.  Isolation  of  prebiotic  inulin  from Gadung Aceh tuber (Dioscorea hispida) using hydrolysis reaction. In: IOP Conf Series:  Materials  Science  and  Engineering  725,  012061.  2020.  Available  from: doi:10.1088/1757-899X/725/1/012061
8. Padhan  B,  Nayak  J,  Panda  D.  Natural  antioxidant  potential  of  selected underutilized wild yams (Dioscorea spp.) for health benefit. J Food Sci Technol. 57:2370 –2376.
9. Raina, Archana P, Misra R. Evaluation of diosgenin, a bioactive compound from natural  source  of  dioscorea  species:  a  wild  edible  tuber  plant.  J  Pharmacogn Phytochem. 2019;9(1):1120 –4.
10. Kumar T, Murthy G, Suresh A, Suresh V, Kumar N, Raviashanka H. Evaluation of antitumour activity and antioxidant status in Dioscorea hispida Dennst. leaves on Ehrlich Ascites Carcinoma in Swiss Albino Mice. J Drug Dev Res. 2011;3(2):203 – 210.
11. Susanti,  Mardianingru  R.  Antibacterial  activity  of  methanol  extract  of  gadung tubers  (Dioscorea  hispida  dennst.)  against  Propionibacterium  acnes. Farmagazine. 2020;7(1):13 –7.
12. Miah M, Das P, Ibrahim Y, Shajib M, Rashid M. In vitro antioxidant, antimicrobial, membrane  stabilization  and  thrombolytic  activities  of  dioscorea  hispida  dennst.
Eur J Integr Med. 2018;19:121 –7. Available from: doi:
10.1016/j.eujim.2018.02.002
13. Kumar S, Das G, H.S. Shin H, Patra J. Dioscorea spp (a wild edible tuber): a study on its ethnopharmacological potential and traditional use by  the  local people of similipal  biosphere  reserve,  India.  Pharmacol.  2017;8(52):1 –17. Available from:
doi: 10.3389/fphar.2017.00052
14. Lim T. Edible medicinal and non-medicinal plants, modified stems, roots, bulbs. Dordrecht,Netherlands: Springer; 2016.
15. Moure A, Cruz J, Franco D, Domínguez J, Sineiro J, Domínguez H, et al. Natural antioxidants from residual sources. Food Chem. 2001;72(2):145 –171. Available from: doi: 10.1016/S0308-8146(00)00223-5
16. Lobo V, Patil A, Phatak A, Chandra N. Free radicals, antioxidants and functional foods: impact on human health. Pharmacogn Rev. 2010;4(8):118 –26. Available from: doi: 10.4103/0973-7847.70902
17. Theerasin  S,  Baker  A.  Analysis  and  identification  of  phenolic  compounds  in Dioscorea hispida dennst. Asian J Food Agro-Industry. 2009;2(4):547 –60.
18. Sari S, Berna E, Katrin. Determination of specifc and non-specifc parameters of simplicia  and  ethanolic  70%  extract  of  gadung  tubers  (Dioscorea  hispida). Pharmacogn J. 2019;11(4):759 –63.
19. Susanti  R,  Mardianingrum  S,  Yuliawati,  Ferbriani  Y.  pengaruh  lama  ekstraksi terhadap  kadar  fenol  total  ekstrak  metanol  daging  umbi  gadung  (Dioscorea hispida  dennst.).  J  Pharmacopolium.  2019;3(1):149 –55.  Available  from:  doi: 10.36465/jop.v2i3.541
20. Chaoting  W,  Zhang  J,  Zhang  H,  Courage  Sede  DMZ,  Yuqing  D,  Ma  H,  et  al. Advances  in  ultrasound  assisted  extraction  of  bioactive  compounds  from  cash crops –  A  review.  Ultrason  Sonochem.  2018;48:538–49.  Available  from: https://doi.org/10.1016/j.ultsonch.2018.07.018
21. Lide D. CRC handbook of chemistry and physics: 8th Edition. Boca Raton: CLC Press; 2005.
22. Verdiana M, Widarta I, Permana, D.G.M I. Pengaruh jenis pelarut pada ekstraksi menggunakan gelombang ultrasonik terhadap aktivitas antioksidan ekstrak kulit buah  lemon  (Citrus  limon  (Linn.)  Burm  F.).  J  Ilmu  dan  Teknol  Pangan. 2018;7(4):213 –22.
23. Salim  S,  Saputri  F,  Saptarini  N,  Levita  J.  Review  artikel:  kelebihan  dan keterbatasan  pereaksi  folin-ciocalteu  dalam  penentuan  kadar  fenol  total  pada tanaman. Farmaka. 2020;18(1):46 –57.
24. Margraf T, Karnopp A, Rosso N, Granato D. Comparison between folin-ciocalteu and prussian blue assays to estimate the total phenolic content of juices and teas using 96-well microplates. J Food Sci. 2015;80(11):2397 –403.
25. Dris  R,  Jain  S.  Production  practices  and  quality  assessment  of  food.  In:  crops: quality handling and evaluation. New York: Kluwer Academic; 2004.
26. Molyneux P. The use of the stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J Sci Technol. 2004;26(2):211 –9. 27. Blois  M.  Antioxidant  determinations  by  the  use  of  a  stable  free  radical.  Nature. 1958;181:1199 –1200.
28. Johari  M,  Khong  H.  Total  phenolic  content  and  antioxidant  and  antibacterial activities of pereskia bleo. Hindawi Adv Pharmacol Sci. 2019;2019:1 –4.
29. Kahkonen M, Hopia A, Vourela H, Rauha J, Pihlaja K, Kujala T, et al. Antioxidant activity  of  extract  containing  phenolic  compounds.  J  Agric  Food  Chem. 1999;47(10).