Pengaruh Metode Pengeringan Terhadap Kadar Total Fenolik Ekstrak Daun Singkil (Premna corymbose Rottl et Wild)
Effect of Drying Method on Total Phenolic LeveSingkil Leaf Extract (Premna corymbose Rottl et Wild)
Margareta Retno Priamsari 1 , Putri Marsela Danti 2 1,2 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Nusaputera Semarang marga_rhee@yahoo.co.id , putrimar12@gmail.com https://doi.org/10.55181/ijms.v9i1.349
Abstract: Singkil leaves (Premna corymbose Rottl et Wild ) contain secondary metabolites in the form of  flavonoids,  saponins,  triterpenoid/steroid  tannins  and  phenolic  compounds.  Phenolic  compounds have antioxidant, antitumor, antiviral and antibiotic activity. The drying process of simplicia will have an impact  on  the  content  of  phenolic  compounds.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of  the  drying method on the total phenolic compounds in singkil leaf extract. This type of research is experimental. Singkil leaf simplicia drying method was carried out using an oven at a temperature of 50°C and air- dried.  The  extraction  method  uses  maceration  with  70%  ethanol  as  solvent.  Determination  of  total phenolic  content  was  carried  out  by  colorimetric  method  using  UV-Vis  spectrophotometry  with  Follin Chiocalteau  reagent  and  gallic  acid  as  standard.  The  calibration  curve  was  made  in  5  concentration series, namely 6,8,10,12, and 14 ppm. The absorbance was calculated at a wavelength of  662.85nm and the readings were used as a determinant of the total phenolic content of the singkil leaf extract. The results showed that the drying method could significantly affect the total phenolic content of singkil leaf extract. The total phenolic content of singkil leaf extract using the wind dry method was 13.37±0.00% while the 50 o C oven drying method was 10.64±0.00057%. Key words: Premna corymbose, total phenolic content, drying method, gallic acid, Follin Chiocalteu
Abstrak : Daun  singkil  ( Premna  corymbose  Rottl  et Wild ) mengandung  senyawa  metabolit  sekunder berupa flavonoid, saponin, tanin triterpenoid / steroid dan senyawa fenolik.  Senyawa fenolik memiliki aktivitas  antioksidan,  antitumor,  antiviral  dan  antibiotik.  Proses  pengeringan  terhadap  simplisia  akan berdampak  pada  kandungan  senyawa  fenolik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh metode pengeringan terhadap kadar total senyawa fenolik pada ekstrak daun singkil. Jenis penelitian adalah eksperimental. Metode pengeringan simplisia daun singkil dilakukan menggunakan oven pada suhu 50°C dan dikeringkan angin. Metode ekstraksi menggunakan maserasi dengan pelarut etanol 70%. Penentuan kadar total fenolik dilakukan dengan metode kolorimetri menggunakan spektrofotometri UV- Vis dengan pereaksi Follin Chiocalteau dan senyawa asam galat sebagai standar. Kurva kalibrasi dibuat 5  deret  konsentrasi  yaitu  6,8,10,12,  dan  14  ppm.  Absorbansi  dihitung  pada  panjang  gelombang 662,85nm  dan  hasil  pembacaan  digunakan  sebagai  penentu  kadar  total fenolik  ekstrak  daun  singkil. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  metode  pengeringan  dapat  mempengaruhi  kadar  total  fenolik ekstrak daun  singkil secara signifikan. Kadar total fenolik ekstrak daun singkil menggunakan metode kering  angin  sebesar  13,37±0,00%  sedangkan  pada  metode  pengeringan  oven  50 o C  sebesar 10,64±0,00057%. Kata kunci: Premna corymbose, kadar total fenolik, metode pengeringan, asam galat, Follin Chiocalteu

## I.  PENDAHULUAN
Tumbuhan  singkil  dengan  nama  ilmiah Premna  corymbose Rottl  et  Wild  termasuk  ke dalam  famili Verbenaceae (Vavidu,  dkk,  2009). Daun  dan  akar  singkil  berkhasiat  sebagai astringen,  antiinflamasi,  antibakteri,  gangguan jantung,  batuk,  kusta,  penyakit  kulit,  sembelit, demam, diabetes, obesitas, sakit perut, antikoagulan, hepatoprotektif dan tumor (Ravinder,  2011).  Daun  dan  akar  singkil berkhasiat  sebagai  astringen,  antiinflamasi, antibakteri,  gangguan  jantung,  batuk,  kusta, penyakit  kulit,  sembelit,  demam,  diabetes, obesitas, sakit perut, antikoagulan, hepatoprotektif dan tumor (Ravinder, 2011).
Penelitian  oleh  Liya  (2016)  tentang karakterisasi  dan  skrining  fitokimia  daun  singkil ( Premna corymbose Rottl. et Willd) menyatakan bahwa  daun  singkil  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  yaitu  flavonoid,  saponin, tanin  dan  triterpenoid  /  steroid.  Daun  singkil mengandung senyawa flavonoid yang terdiri dari luteolin dan apigenin.
Senyawa fenolik di alam terdapat sangat luas  mempunyai  variasi  struktur  yang  luas, mudah  ditemukan  di  semua  tanaman,  daun, bunga dan buah. Ribuan senyawa fenolik di alam telah diketahui strukturnya antara lain flavonoid, fenol  monosiklik  sederhana,  fenil  propanoid, polifenol  (lignin,  melanin,  tanin),  dan  kuinon fenolik (Fauziah, 2008).
Senyawa  fenol  adalah  senyawa  yang memiliki  satu  atau  lebih  gugus  hidroksil  yang menempel  pada  cincin  aromatik.  Turunan senyawa  fenol  merupakan  metabolit  sekunder terbesar yang diproduksi oleh tanaman (Vermerris  &  Nicholson,  2006).  Senyawa  fenol memiliki aktivitas antioksidan, antitumor, antiviral dan antibiotik (Apak dkk ., 2007). Senyawa fenolik dapat mencegah berbagai jenis penyakit, seperti kanker  dan  jantung  koroner.  Senyawa  ini  pun berperan  sebagai  faktor  pelindung  terhadap bahaya  oksidasi  pada  tubuh  manusia  (Widia, 2007). Secara umum senyawa fenolik sederhana memiliki sifat bakterisidal, antiseptik dan antihelmentik  (Herlinda  dkk , 2012).  Senyawa fenolik  merupakan  senyawa  yang  tidak  tahan panas  atau  rusak  karena  panas  (termolabil). Senyawa  fenol  memiliki  sifat  yang  sensitif terhadap perlakuan panas.
Metode  dalam  pengeringan  antara  lain pengeringan dengan kering angin, dan pengeringan dengan oven. Pengeringan dengan kering  angin  merupakan  proses  pengeringan yang  paling  ekonomis  dan  paling  mudah dilakukan,  akan  tetapi  dari  segi  kualitas  alat pengering  buatan  (oven)  akan  memberikan produk  yang  lebih  baik  (Pramono,  2006). Pengeringan  dengan  oven  dianggap  lebih menguntungkan karena akan terjadi pengurangan  kadar  air  dalam  jumlah  besar dalam  waktu  yang  singkat  (Muller et  al, 2006), akan  tetapi  penggunaan  suhu  yang  terlampau tinggi dapat meningkatkan biaya produksi selain itu terjadi perubahan biokimia sehingga mengurangi  kualitas  produk  yang  dihasilkan sedang  metode  kering  angin  dianggap  murah akan  tetapi  kurang  efisien  waktu  dalam pengeringan simplisia (Pramono, 2006).
Pengeringan  dengan  dioven  50°C  dan pengeringan  dengan  kering  angin,  merupakan cara  pengeringan  ini  cukup  sederhana  dan mudah dilakukan. Pengeringan dengan menggunakan  oven,  membutuhkan  biaya  yang lebih  mahal.  Untuk    mendapatkan  senyawa bioaktif khususnya fenol dibutuhkan pengeringan yang tidak menggunakan energi panas.

## II.  METODOLOGI PENELITIAN
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi  neraca  analitik  (Mettler  Toledo),  alat gelas  (Pyrex),ayakan,  kain  flannel,  baskom, loyang,  oven  (Memmert),  blender  (Miyako), spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu), waterbath, moisture analyzer (Ohous). Bahan yang digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  daun singkil  (Premna  corymbosa)  yang  berumur kurang lebih 4 bulan, etanol 70% (teknis), serbuk magnesium,  akuades,  NaOH  (Merck),  FeCl 3 , asam  galat  (Sigma),  reagen  Follin  Ciocalteu,
butanol  (Merck),  Na 2 CO 3 (teknis),  etanol  pa (Merck).

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis  penelitian  berupa  eksperimental  untuk mengetahui  kualitas  ekstrak  dan  kadar  total fenolik  ekstrak  daun  singkil  yang  mengalami perbedaan metode pengeringan simplisia. Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah rancangan  acak  kelompok  satu  faktor  yaitu metode pengeringan daun singkil. Analisis kadar total fenolik dengan metode kolorimetri menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  dan dilakukan replikasi 3 kali.

## Preparasi Sampel dan Ekstraksi
Daun  singkil  setelah  dideterminasi  kemudian ditimbang  dan  dibagi  menjadi  dua  bagian, kemudian  dilakukan  pencucian  dan  dikeringkan dengan dua metode berbeda, yaitu menggunakan oven suhu 50°C dan kering angin di bawah tempat teduh yang terlindung dari sinar matahari  secara  langsung  (BPOM  RI,  2013). Pengeringan  dilakukan  hingga  didapat  kadar susut  pengeringan  dibawah  10%  kemudian diekstraksi  secara  maserasi  dengan  pelarut etanol 70% selama 3 hari.

## Analisis Kualitas Ekstrak
Penentuan  kualitas  ekstrak  dilakukan  secara organoleptis,  perhitungan  rendemen,  dan  susut pengeringan.

## Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Singkil
Metode analisis kadar total fenolik ekstrak daun singkil  dengan  perbedaan  metode  pengeringan yang digunakan adalah dengan metode kolorimetri menggunakan pereaksi Follin
Ciocalteu. Baku standar yang digunakan adalah asam  galat.  Kurva  baku  asam  galat  didapat dengan cara larutan baku standar asam galat (6, 8, 10, 12, 14 ppm) diambil 1 mL dan ditambahkan 3 mL etanol (pa), 0,4 mL reagen Follin Ciocalteu, dihomogenkan  kemudian  ditambahkan  4,0  mL larutan  Na 2 CO 3 ,  dikocok  hingga  homogen. Kemudian  dicukupkan  dengan  aquabidestillata hingga 10 mL dan didiamkan selama 2 jam pada suhu  ruangan.  Diukur  absorbansi  pada  panjang gelombang maksimal 662,85 nm.

## Penentuan Kadar Total Fenolik
Penentuan kadar fenolik total pada ekstrak daun singkil merujuk pada prosedur Chun dkk., (2003) yaitu  dibuat  dengan  cara  menimbang  10  mg ekstrak daun singkil kemudian dilarutkan dengan 10 mL etanol 96% p.a dan dihomogenkan. Pipet 1 mL dari larutan tersebut, kemudian ditambahkan  dengan  0,4  mL  reagen  Folin Ciocalteau  dikocok  dan  dibiarkan  4-8  menit,
tambahkan 4,0 mL larutan Na ₂ CO ₃ kocok hingga homogen.  Cukupkan  dengan  aquabidestillata hingga  10 mL  dan  diamkan  selama  2 jam  pada suhu ruangan.

## III. HASIL PENELITIAN
Hasil penentuan kontrol kualitas ekstrak dapat dilihat pada Tabel 1 berikut.

## Tabel 1. Kontrol Kualitas Ekstrak
Parameter Metode Pengeringa n Oven Metode Pengeringa n Kering angin Organolepti s Konsisten si Ekstrak kental Ekstrak kental Bau Khas Khas Warna Coklat kehitaman Coklat kehitaman Rendemen (%) 18,87 37 Kadar Susut pengeringan (%) 9,36 9,57
kurva  kalibrasi  diperoleh  persamaan  y= 0,0387k –  0,0096  dengan  nilai  korelasi  (R2) adalah  0,94.  Nilai  korelasi  ini  menunjukkan hubungan  linieritas  yang  baik  antara  variabel absorbansi dengan variable konsentrasi, sehingga setiap kenaikan konsentrasi diikuti juga dengan  kenaikan  absorbansi  yang  sesuai.Hasil penentuan  kurva  kalibrasi  asam  galat  dapat dilihat pada tabel 2 berikut.

## Tabel 2. Hasil pengukuran kurva baku
Konsentrasi (ppm) Absorbansi pada 662,85 nm 6,00 0,191 8,00 0,278 10,00 0,430 12,00 0,470 14,00 0,473

## Gambar 1. Kurva Kalibrasi Asam Galat
Tahap  selanjutnya  yaitu  penetapan  kadar  total fenolik ekstrak daun singkil dengan hasil sebagai berikut:
Tabel 3. Kadar Total Fenolik

## Ekstrak Daun Singkil
Metode Pengeringan Kadar Total Fenolik (%) ± SD Oven 10,64 ± 0,00057 Kering angin 13,37 ± 0,0000

## IV. PEMBAHASAN
Tabel  1.  menunjukkan  bahwa  pada pengujian  secara  organoleptis  ekstrak  daun singkil  dengan  perbedaan  metode  pengeringan simplisia  memberikan  hasil  yang  sama  yaitu memiliki  konsistensi  ekstrak  kental  dengan warna  coklat  kehitaman  dan memiliki  bau  khas. Pengujian  kontrol  kualitas  ekstrak  selanjutnya adalah perhitungan persen rendemen. Rendemen  merupakan  perbandingan  antara jumlah  ekstrak  hasil  ekstraksi  dengan  bahan baku  pembuatan  ekstrak.  Hasil  rendemen menunjukkan bahwa ekstrak daun singkil dengan metode  pengeringan  angin-angin  lebih  besar yaitu 37% sedangkan persen rendemen ekstrak daun  singkil  dengan  metode  pengeringan  oven sebesar 18,87%. Jumlah
rendemen menunjukkan  jumlah  zat  yang  tersari  selama proses ekstraksi.
Hasil  pengujian  susut  pengeringan ekstrak menunjukkan bahwa ekstrak daun singkil dengan  metode  pengeringan  kering  angin memiliki  kadar  susut  pengeringan  lebih  tinggi yaitu  sebesar  9,57%  dibanding  ekstrak  daun singkil  dengan  metode  pengeringan  oven sebesar 9,37%. Kadar susut pengeringan kedua jenis  ekstrak  dengan  perbedaan  metode pengeringan tersebut masih memenuhi persyaratan  kadar  susut  pengeringan  yaitu kurang  dari  10%  (Voight,  1994)  karena  kadar susut  pengeringan  lebih  dari  10%  akan mempengaruhi stabilitas ekstrak.
Prinsip pengukuran analisis kadar fenolik total  ekstrak  daun  singkil  yang  merujuk  pada prosedur  Chun  dkk.,  (2003)  menggunakan pereaksi  Follin  Ciocalteau  yang  mengandung kompleks ion polimerik yang dibentuk dari asam fosfomolibdat  dan  asam  heteropolifosfotungstat (Singleton  dkk,  1965).  Metode  ini  merupakan metode  yang  paling  umum  digunakan  untuk menentukan  kandungan  fenolik  total  dalam tanaman  dengan  pertimbangan  bahwa  dengan teknik  ini  pengerjaannya  lebih  sederhana  dan reagen  Folin  Ciocalteau  digunakan  karena senyawa  fenolik  dapat  bereaksi  dengan  Folin membentuk larutan yang dapat diukur absorbansinya.
Larutan standar yang digunakan adalah asam galat. Asam galat jika direaksikan dengan reagen  Folin  Ciocalteau  menghasilkan  warna kuning  yang  menandakan  bahwa  mengandung fenolik,  setelah  itu  ditambahkan  dengan  larutan Na 2 CO 3 sebagai pemberi suasana basa. Selama reaksi  berlangsung,  gugus  hidroksil  pada senyawa fenolik bereaksi dengan pereaksi Folin
0.1910 0.2780
0.43000.47000.4730
y = 0,0378x - 0,0096 R² = 0,94 0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 4 6 8 10 12 14 16 A b so rb an si Konsentrasi (ppm)
Ciocalteau,  membentuk  kompleks  molibdenum- tungsten  berwarna  biru  dengan  struktur  yang belum  diketahui  dan  dapat  dideteksi  dengan spektrofotometer. Warna biru yang terbetuk akan semakin  pekat,  setara  dengan  konsentrasi  ion fenolak  yang  terbentuk,  artinya  semakin  besar konsentrasi  senyawa  fenolik  maka  semakin banyak  ion  fenolak  yang  akan  mereduksi  asam heteropoli  (fosfomolibdatfosfotungstat)  menjadi kompleks  molibdenumtungsten  sehingga  warna yang dihasilkan semakin pekat.
Pengukuran  kadar  fenolik  total,  terlebih dahulu  dilakukan  running  panjang  gelombang larutan  standar  asam  galat  dari  range  400-800 nm  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis. Panjang  gelombang  maksimal  yang  diperoleh yaitu 662,85 nm. Selanjutnya dilakukan pengukuran  absorbansi  larutan  standar  asam galat  dari  beberapa  konsentrasi  yang  diukur pada  panjang  gelombang  maksimal  yang diperoleh.
Hasil  penetapan  kadar  total  fenolik PADA  Tabel  3.  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun  singkil  dengan  metode  pengeringan  oven sebesar 10,64±0,00057% lebih kecil dibandingkan dengan kadar total fenolik ekstrak daun singkil menggunakan metode pengeringan kering  angin  sebesar  13,37±0,0%.  Hasil  ini memiliki  arti  bahwa  metode  pengeringan simplisia  dapat  mempengaruhi  kadar  total fenolik,  dimana  pengeringan  simplisia  daun singkil  menggunakan  metode  kering  angin memiliki kadar total  fenolik  lebih tinggi dibandingkan  ekstrak  menggunakan  metode pengeringan oven suhu 50°C. Hal ini disebabkan karena  senyawa  fenolik  dalam  ekstrak  daun singkil  mudah  rusak  pada  suhu  tinggi  sehingga dengan  adanya  pemanasan  menyebabkan penurunan  kadar  total  fenolik.  Pengeringan simplisia dengan kering angin mampu mempertahankan  dan  menghasilkan  total  fenol yang  tinggi  pada  bahan  (Dylla  dkk,  2019). Pengeringan  simplisia  kering  angin  mampu mempertahankan komponen-komponen polifenol dari kerusakan akibat suhu tinggi. Hal ini sejalan  dengan  penelitian  Nafisah,dkk  (2018), yang menyatakan bahwa pengeringan menggunakan kering angin mampu
mempertahankan kandungan senyawa fenol dan berdampak  pada  banyaknya  total  fenol  yang dapat terlarut.
Pada  tahap  awal  proses  pengeringan senyawa fenol cenderung mengalami penurunan sangat  cepat  yang  disebabkan  karena  selama pengeringan senyawa fenol mengalami oksidasi oleh  enzim  polifenol  oksidase  menjadi  kuinon. Semakin tinggi suhu pengeringan yang digunakan akan menyebabkan semakin tingginya  inaktivasi  enzim  polifenol  oksidase sehingga  aktivitas  enzim  akan  semakin  rendah
dan  kerusakan  fenol  semakin  kecil.  Stabilitas fenol  juga  akan  terganggu  oleh  semakin meningkatnya  suhu  pengeringan  sehingga jumlah  total  fenol  terdeteksi  akan  mencapai puncak  maksimum  kemudian  konstan  dan cenderung menurun (Nafisah,dkk 2018).

## V.  SIMPULAN
1.  Metode  pengeringan  berpengaruh  signifikan terhadap  kadar  total  fenolik  ekstrak  daun singkil  metode  pengeringan  dengan  kering angin  menghasilkan  kadar  yang  lebih  besar dibandingkan dengan metode oven 50°C.
2.  Hasil  penetapan  kadar  total  fenolik  ekstrak daun singkil menggunakan baku pembanding asam  galat  dengan  menggunakan  metode pengeringan kering angin sebesar 13,37±0,0%b/b  lebih  besar  dari  kadar  total fenolik ekstrak daun singkil yang menggunakan  metode  pengeringan  oven 50°C sebesar 10,64±0,00%b

## DAFTAR PUSTAKA
Apak, R., Cuclu, K., Demirata., N., Ozyurek, M.,
Celik,  S.E.,  Bektasoglu,  B.    Berker  K.I  & Ozyurt, D. 2007. Comperative Evaluation of Various  Total  Antioxidant  Capacity  Assay Applied  to  Phenolic  Compounds  with  The Cupract Assay. Molecules , 12:1496-1547.
BPOM,  2013,  Pedoman  Cara  Pembuatan Simpliasi yang Baik, BPOM RI, Jakarta.
Chun,  O.K.,  Kim,  D.O.,  dan  Lee,  C,  Y.,  2003, Superoxide  Radical  Scavenging  Activity  of The  Major  Polyohenols  in  Fresh  Plums. Journal Agric Food Chem , 51(27):8067-72.
Dylla, H. Dyah, P., Ni Luh. 2019, Effect of Drying towards  the  Total  Phenol  and  Antioxidant Capacity  of  Arabica  Coffee  Rind  ( Coffea arabica L),  Bali:  Fakultas  Ilmu  Kesehatan Sains  dan  Teknologi  Universitas  Dhyana Pura.
Fauziah,  L.,  2008, Studi  Dimerisasi  Asam , FMIPA, Universitas Indonesia, Depok.
Herlinda,  A.,  Malik,  A.,  Najib,  A.,  2012, Penetapan Kadar Fenolik Total dari Ekstrak Etanol  Bunga  Rosella  ( Hibiscus  sabdariffa
L.) Berwarna Ungu Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis., Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.1.
Liya.  Handayani,  F.,  Supriningrum  2016. Karakterisasi  dan  Skrining  Fitokimia  Daun Singkil  ( Premna  corymbosa Rottl  &  Willd).
Karya Tulis Ilmiah. Samarinda: D-III Farmasi Akademi Farmasi Samarinda.
Muller, J., Heindl. 2006. Drying Of Medical Plants In  R.J.  Bogers,  L.E.Cracer,  and  D  Lange (Eds), Medical and Aromatic Plant , Springer, The Netherland, p.237-252.
Nafisah,  Dzurratun.,  Tri  D.W.,  2018.  Kajian
Metode Pengeringan Dan Rasio Penyeduhan  Pada  Proses  Pembuatan  The
Cascara  Kopi  Arabika  ( Coffea  arabica L.). Jurnal Pangan dan Agroindustri Vol 6: 3, 37- 47
Pramono,  S.  2006.  Penanganan  Pasca  Panen dan  Pengaruhnya  terhadap  Efek  Terapi Obat  Alami. Prosiding  Seminar  Nasioal Tumbuhan Obat Indonesia XXVIII , Hal 1-6.
Ravinder.  S.  C,  Nelson.  R,  Krishnan.  P.M,  dan Pargavi.  B.,  2011.  Identification  of  Volatile Constituents  From Premna  serratifolia L. Journal of PharmTech Researc h. Vol. 3
Singleton, V.L., Rossi, J.A., 1965, Colorimetry of Total  Phenolics  with  Phosphomolybdic- Phosphotungstic Acid Reagent, Am. J. Enol. Vitic , Vol.16, 144-158
Vadivu, R., Suresh, A. J., Girinath, K., Kannan, P.
B.,  Vimala,  R.,  dan  Kumar,  N.  M.  S.  2008. Evaluation  of  Hepatoprotective  and  In-vitro Cytotoxic  Activity  of  Leaves  of  Premna serratifolia  Linn.  Journal  of  Scientific
Research  Publications.  Department  of Pharmacognosy,  College  of  Pharmacy, Madras Medical College, Chennai-03, India.
Vermerris,  W,  Nicholson,  R.  2006.  Phenolic
Compound Biochemistry.
Spinger,
Dordrecth.
Voight,  R.  1995. Buku  Pelajaran  Teknologi Farmasi .  Penerjemah:Soendani  Noerono
Soewandhi.  UGM  Press.  Yogyakarta.  Hal 561; 567-569; 577.
Widia, Ningsih. 2007. Evaluasi Senyawa Fenolik (Asam Ferulat  dan  Asam  p-Kumarat) Pada biji,  Kecambah  &  Tempe  Kacang  Tunggak ( Vigna  unguiculata ), Skripsi. Bogor:  Institut Pertanian Bogor.