## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN AVOCAD TERHADAP PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus
Hardiyanti 1) , Mujahidah Basarang 1) , Andi Yunita Irwan P. 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar

## Abstrak
Salah satu permasalahan kulit yang sering muncul adalah jerawat. Peradangan yang terjadi pada jerawat  dapat  dipicu  oleh  bakteri  salah  satunya  bakteri  Staphylococcus  aureus.  Salah  satu tanaman  herbal  yang  dapat  digunakan  untuk  pengobatan  jerawat  adalah  daun  avocad  (Persea americana  Mill).  Daun  avocad  mengandung  senyawa  aktif  seperti  flavonoid,  polifenol,  saponin, tanin, dan alkaloid sebagai  antibakteri yang dapat  menghambat pertumbuhan bakteri. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  ekstrak  daun  avocad  dalam  menghambat pertumbuhan  Staphylococcus  aureus  dengan  menggunakan  metode  difusi  agar  berlapis  dan menggunakan penicillin  G sebagai  kontrol  positif. Selanjutnya diukur  zona hambat yang terjadi pada  beberapa  seri  konsentrasi  daun  avocad  (25%,  50%,  75%).  Hasil  pengukuran  zona  bening didapatkan diameter rata-rata pada konsentrasi 25% sebesar 14,7 mm, 50% sebesar 15,8 mm dan 75%  sebesar  16,7  mm  dan  kontrol  positif  20  %  sebesar  33,2  mm.  Hasil  evaluasi  menunjukkan bahwa zona hambat yang paling baik adalah konsentrasi 75%. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak  daun  avocad  pada  konsentrasi  25%,  50%,  dan  75%  mampu  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus.
Kata Kunci: Ekstrak Daun Avocad, Daya Hambat, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Tanaman  avocad  adalah  tumbuhan (herbal) yang menjadi salah satu alternatif pengobatan  bagi  masyarakat  Indonesia. Tanaman  avocad  ( Persea  americana ) adalah  jenis  tanaman  pekarangan  yang mulai  diperkenalkan  di  Indonesia  sekitar abad  ke-19  oleh  pemerintah  kolonial Belanda (Wardany, 2016). Namun, masih banyak masyarakat Indonesia yang belum mengetahui  khasiat  tanaman  avocad khususnya  daun  avocad  yang  digunakan untuk pengobatan jerawat.
Salah satu penyebab jerawat adalah bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus merupakan mikroflora  normal  pada  kulit  dan  saluran pernapasan bagian atas yang menimbulkan  infeksi  bernanah  dan  abses pada  keadaan  tertentu  seperti  adanya perubahan kuantitas mikroorganisme menjadi  tidak  seimbang  dan  penurunan daya  tahan  tubuh host (Radji.  2010), dengan  demikian  permasalahan  kulit seperti jerawat sangat mengganggu penampilan  sehingga  diperlukan  solusi untuk  menghilangkan  jerawat.  Saat  ini
mulai  banyak  yang  memilih  obat  herbal dalam  pengobatan  jerawat  karena  efek samping  lebih  ringan  dari  pengobatan secara medis.
Salah  satu  tanaman  avocad  yang digunakan  untuk  mengobati  jerawat  yaitu daun  avocad  karena  memiliki  potensi sebagai  antimikroba  (Wardany,  2016). Daun  avocad  ( Persea  americana Mill) mengandung senyawa aktif seperti saponin,  alkaloid,  flavonoid,  polifenol, quersetin dan tanin yang bersifat antiradang,  antidiuretika,  dan  antibakteri. Sebagian  besar  senyawa  tersebut  larut dalam  pelarut  polar  salah  satunya  pelarut air.  Beberapa  penelitian  mengungkapkan bahwa daun avocad memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan mikroba (Ismiyati, 2014). Penelitian yang dilakukan  oleh Felina,  et  al  (2014)  menyatakan  bahwa ekstrak  etanol  95%  daun  avocad  dapat menghambat pertumbuhan
bakteri
Enterococcus  faecalis pada  konsentrasi 50%  yang  menghasilkan  diameter  zona hambat  sebesar 10,75  mm.  Menurut Andriani  (2016)  dalam  penelitiannya
bahwa  ekstrak  etil  asetat  daun  avocad dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus dengan  zona hambat sebesar 12,45 mm pada konsentrasi 35%. Proses pemisahan zat aktif pada daun avocad  menggunakan  metode  ekstraksi maserasi  dengan  pelarut  etanol.  Etanol biasanya digunakan dalam proses ekstraksi  karena  mempunyai  titik  didih yang  rendah  dan  cenderung  aman,  tidak beracun  dan  tidak  berbahaya,  pelarut etanol  memiliki  polaritas  yang  tinggi sehingga dapat menghasilkan persen hasil lebih banyak dalam melarutkan metabolik sekunder dibandingkan menggunakan pelarut  lainnya.  Zat  aktif  yang  telah  larut memiliki  berbagai  macam  fungsi  salah satunya menghambat
pertumbuhan mikroba (Azis T, et al . 2014)
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas peneliti  menganggap  bahwa  ekstrak  daun avocad  dengan  maserasi  etanol  70% memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap
Staphylococcus  aureus .  Maka  peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang  uji  daya  hambat  ekstrak  daun avocad ( Persea americana Mill) terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus.
METODE PENELITIAN Alat dan Bahan Alat yang digunakan adalah bunsen,  batang  pengaduk,  cawan  petri, pencadang,  timbangan  analitik,  autoklaf, labu  ukur,  inkubator,  mistar  geser,  ose bulat,  rak  tabung,  pinset,  pipet  volume, oven dan tabung reaksi, rotavapor. Bahan yang digunakan adalah daun avocad hijau muda,  larutan  Mc.  Farland  0,5%,  media Muller  Hinton  Agar, Penicillin  G ,  kain kasa,  akuades,  koloni Staphylococcus aures ,  media  MSA  (Manitol  Salt  Agar), NaCl fisiologis.
Prosedur Penelitian

## Preparasi Daun Avocad
Daun  avocad  hijau  muda  yang masih  segar  dicuci  bersih,  diiris  kecil- kecil  kemudian  dikeringkan  di  ruang terbuka sampai daun berwarna coklat dan kering sempurna.

## Pembuatan Ekstrak Daun Avocad
Daun  avocad  hijau  muda  yang kering  ditimbang  sebanyak  200  gram kemudian  dimasukkan  ke  dalam  wadah lalu  direndam  dengan  cairan  etanol  70% sebanyak  ±  1  liter.  Perendaman  dibiarkan selama    3-5  hari  pada  temperatur  37 o C dan  terlindung dari  cahaya  sambil  diaduk sekali-kali,  kemudian  disaring.  Ekstrak etanol  cair  yang  diperoleh  kemudian dikumpulkan, diuapkan dengan menggunakan rotavapor, kemudian diangin-anginkan di tempat yang
terlindung  dari  cahaya  matahari  langsung sampai  diperoleh  ekstrak  kental  daun avocad.  Ekstrak  kental  daun  avocad kemudian dibuat 3 konsentrasi yaitu 25%, 50%, 75%. Pembuatan Konsentrasi Ekstrak Kental Daun Avocad Konsentrasi  100%  ekstrak  daun avocad akan dibuat ke dalam 3 konsentrasi  yaitu  25%  50%  dan  75%. Pada  konsentrasi  25%  ditimbang  0,75  g ekstrak  kental  kemudian  dilarutkan  ke dalam  1  mL  akuades  steril.  Pada konsentrasi 50% ditimbang 0,50 g ekstrak kental  kemudian  dilarutkan  ke  dalam  1 mL  akuades  steril.  Pada  konsentrasi  25% ditimbang 0,25 g ekstrak kental kemudian dilarutkan ke dalam 1  mL akuades steril. Pembuatan Media Muller Hinton Agar Media  MHA  ditimbang  sebanyak 5,7 gram yang akan digunakan ditimbang kemudian  dilarutkan  dalam  erlenmeyer dengan 150 mL akuades, dipanaskan pada hot  plate  agar  semua  bahan  larut sempurna,  dan  disterilkan  pada  autoklaf pada  suhu  121 0 C  selama  15  menit. Pembuatan Larutan Mc Farland 0,5 %
Sebanyak  0,5  mL  larutan  Barium Klorida  0,048  M  (BaCl 2 2H 2 O  1,175%) dicampurkan dengan 9,5 mL larutan asam sulfat  0,18  M        (H 2 SO 4 1%)  dalam  labu takar  dan  dihomogenkan.  Suspensi  ini digunakan sebagai larutan standar pembanding  kekeruhan  suspensi  bakteri uji.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Dilakukan  peremajaan  bakteri  uji dengan  cara  stok  kuman Staphylococcus aureus di  tanam  pada  media  MSA (Manitol Salt Agar) diinkubasi selama 1 x 24  jam  pada  suhu  37 0 C.  Dilakukan pembuatan  suspensi  bakteri  dengan  cara kuman Staphylococcus aureus yang sudah diremajakan  diambil  dan  disuspensikan pada Nacl 0,9% kemudian dibuat kekeruhannya dibandingkan dengan standar Mc Farland 0,5%. Pengujian Daya Hambat Media  MHA  (Muller  Hinton  Agar) dituang  secara  aseptis  ke  dalam  cawan petri sebanyak 10 mL sambil digoyangkan,  dibiarkan  membeku  (base layer).  Selanjutnya,  pencadang diletakkan di  atas  lapisan  pertama  (base  layer) dengan  menggunakan  pinset  dan  media MHA dituangkan di  atas  permukaan  base layer  dibiarkan  menjadi  padat  (seed layer),  kemudian  pencadang  diangkat dengan  menggunakan  pinset  sehingga terbentuk sumur.
Suspensi  bakteri  yang  telah  dibuat digoreskan  dengan  menggunakan  swab steril  pada  permukaan  media  MHA. Selanjutnya  diisi  200  µl  ke  dalam  sumur masing-masing disk  penicillin (kontrol positif),  akuades  steril  (kontrol  negatif) dan  ekstrak  daun  avocad  dengan  masing- masing  konsentrasi,  yaitu  25%,  50%, 75%.   Selanjutnya,  diinkubasi  selama  1  x 24 jam pada suhu 37 o C dan diukur daerah zona  hambatan  di  sekitar  pecadang dengan menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  pada  tanggal  5  -  9  Mei 2017  yaitu  uji  daya  hambat  ekstrak  daun avocad  ( Persea  americana Mill ) pada pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan  metode  difusi  agar  dalam  cawan petri  berisi  media  MHA  (Muller  Hinton Agar)  yang  telah  diinkubasi  selama  24 jam  pada  suhu  37 0 C  diperoleh  hasil sebagai berikut:
Tabel  1.Hasil  Uji  Daya  Hambat
Ekstrak  Daun  Avocad  Pada Pertumbuhan Staphylococcus aureus Anti Bakteri Rata-Rata Diameter Zona Hambat Staphylococcus aureus (mm) Ekstrak Daun Avocad 25% 14, 7 Ekstrak Daun Avocad 50% 15, 8 Ekstrak Daun Avocad 75% 16, 7 Penicillin G (K+) 33, 2 Aquadest (K-) 0 Keterangan  :  Diameter  pecadang  sebesar 8 mm. Hasil  yang  didapat  pada  penelitian tersebut, pada konsentrasi 25% didapatkan  rata-rata  luas  zona  hambat sebesar  14,7  mm,  pada  konsentrasi  50% didapatkan  rata-rata  luas  zona  hambat 15,8 mm, pada konsentrasi 75% didapatkan  rata-rata  luas  zona  hambat sebesar 16,7%. Penelitian  uji  daya  hambat  ekstrak daun avocad pada pertumbuhan
Staphylococcus  aureus dilakukan  secara Eksperimen dengan menggunakan metode difusi  agar  berlapis  yang  bertujuan  untuk mengetahui  kemampuan  ekstrak  daun avocad  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri yang dijadikan ukuran.
Penelitian  ini  dilakukan  di  Rumah Sakit  Umum  Pendidikan  Universitas Hasanuddin  Makassar.  Sampel  pada penelitian  ini  menggunakan  ekstrak  daun avocad  yang  dibagi  dalam  konsentasi 25%,  50%,  dan  75%.  Daun  avocad digunakan  sebagai  sampel  dikarenakan dalam  daun  avocad  terdapat  beberapa senyawa  aktif  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri, utamanya
flavonoid,  polifenol,  saponin,  tanin  dan alkaloid  yang  memiliki  sifat  larut  dalam pelarut  etanol  70%.  Sedangkan  bakteri yang diuji adalah Staphylococcus aureus .
Kontrol  positif  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah disk penicillin
G 20% . Hal  ini  didasarkan  bahwa antibiotik ini diketahui dapat menghambat pertumbuhan sebagian besar bakteri Gram positif. Penicillin  G bekerja  dengan menghambat  pembentukan  dinding  sel bakteri. Fungsi Kontrol positif yaitu untuk menguji  apakah  kultur  bakteri  yang digunakan  dalam  penelitian  masih  layak untuk  diuji  atau  tidak.  Sedangkan kontrol negatif  yang  digunakan  adalah  akuades steril.  Kontrol  negatif  digunakan  untuk mengetahui apakah sampel memberi hasil negatif atau tidak.
Hasil penelitian yang telah dilakukan  menunjukkan  adanya  zona hambat  yang  terbentuk  di  mana  pada kosentrasi 25% yang dilakukan pengukuran  pada  zona  bening  dengan menggunakan  jangka  sorong  pada  kedua sisi  yaitu  atas  bawah  dan  kanan  kiri didapatkan  hasil  15  mm  pada  pengujian pertama. Untuk pengujian kedua didapatkan hasil 15 mm. Adapun pengujian ketiga didapatkan hasil 14 mm.
Selanjutnya  pada  ketiga  hasil  zona hambat  tersebut  dirata-ratakan  kembali dan  didapatkan  hasil  zona  hambat    14,7 mm.
Sampel daun avocad dengan konsentrasi 50% yang dilakukan pengukuran  pada  zona  bening  dengan menggunakan  jangka  sorong  pada  kedua sisi  yaitu  atas  bawah  dan  kanan  kiri didapatkan  hasil  16  mm  pada  pengujian pertama. Untuk pengujian kedua didapatkan hasil 16 mm. Adapun pengujian  ketiga  didapatkan  hasil  15,5 mm.  Selanjutnya  pada  ketiga  hasil  zona hambat  tersebut  dirata-ratakan  kembali dan  didapatkan  hasil  zona  hambat    15,8
mm.
Sampel daun avocad dengan konsentrasi 75% yang dilakukan pengukuran  pada  zona  bening  dengan menggunakan  jangka  sorong  pada  kedua sisi  yaitu  atas  bawah  dan  kanan  kiri didapatkan  hasil  17  mm  pada  pengujian pertama. Untuk pengujian kedua didapatkan  hasil  17  mm.  Adapun  pada pengujian ketiga didapatkan hasil 16 mm.
Selanjutnya  pada  ketiga  hasil  zona hambat  tersebut  dirata-ratakan  kembali dan didapatkan hasil zona hambat  16,7.
Hasil penelitian pada sampel ekstrak  daun  avocad  dengan  konsentrasi 25%,  50%,  75%  dapat  dikatakan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  daun  avocad maka semakin tinggi zona hambatnya dan semakin  tinggi  zona  hambat  ekstrak  daun avocad  menunjukkan  semakin  tinggi  pula daya  hambatnya  terhadap Staphylococcus aureus, hal  itu  dikarenakan  dalam  daun avocad terdapat beberapa senyawa metabolik sekunder yang dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  seperti flavonoid,  polifenol,  saponin,  tanin  dan alkaloid. Flavonoid berfungsi sebagai antibakteri dan memiliki mekanisme kerja dengan cara menghambat fungsi membran sehingga  terjadi  kerusakan  permeabilitas dinding sel bakteri membran (Poeloengan dan Pratiwi, 2010).
Polifenol berperan sebagai antibakteri dan memiliki mekanisme kerja dengan  cara  menghambat  dan  merusak pembentukan  dinding  sel  sehingga  akan memudahkan  senyawa  lain  berinteraksi dengan  komponen  penyusun  sel  lain  dari bakteri (Ainurrochmah, et at. 2013).
Saponin  merupakan  senyawa  aktif yang permukaannya mirip detergen Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri  yaitu  dapat  menyebabkan kebocoran  protein  dan  enzim  dari  dalam sel  (Ngajow, et  al.  2013 ) . Saponin  dapat menjadi  antibakteri  karena  zat  aktif permukaannya  mirip  detergen,  akibatnya saponin  akan  menurunkan  tegangan permukaan  dinding  sel  bakteri  dan merusak permeabialitas
membran.
Rusaknya  membran  sel  ini  sangat mengganggu  kelangsungan  hidup  bakteri (Junanto, et al. 2008).
Tanin  merupakan  suatu  senyawa polifenol  yang  berasal  dari  tumbuhan. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri dengan cara menyerang polipeptida dinding sel yang menyebabkan kerusakan pada dinding sel (Sudirman T. A., 2014).
Alkaloid berperan sebagai antibakteri dan memiliki mekanisme kerja dengan  cara  mengganggu  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian  sel  tersebut  (Retnowati, et  al.
2011). Penelitian terhadap uji daya hambat ekstrak daun avocad juga pernah dilakukan  sebelumnya  oleh  Felina,  et  al (2014). Pada penelitian tersebut menggunakan  ekstrak  etanol  95%  daun avocad dengan konsentrasi 25%, 50% dan
100%  dengan  bakteri  uji Enterococcus faecalis .    Hasil  penelitian  tersebut  juga menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  95% daun avocad mampu menghambat bakteri dengan  zona  hambat  pada  konsentrasi 25%,  50%,  dan  100%  masing-masing sebesar  8.99  mm,  10.73  mm,  dan  11.82 mm.
Penelitian  lain  terhadap  uji  daya hambat  ekstrak  daun  avocad  juga  pernah dilakukan  oleh  Andriani  (2016)  dalam penelitiannya  menggunakan  ekstrak  etil asetat  daun  avocad  dengan  konsentrasi 15%,  20%,  25%,  30%,  dan  35%  dengan bakteri  uji Staphylococcus  aureus .  Pada penelitian  tersebut  menunjukkan  hasil yang  sama  bahwa  ekstrak  etil  asetat  daun avocad  pertumbuhan  ekstrak  etil  asetat daun avocad memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan Staphylococcus.  aureus .  Diameter  zona hambat  yang  dihasilkan  oleh  masing- masing  ekstrak  etil  asetat  daun  avocad (sebesar  7,18  mm,  8,11  mm  9,15  mm, 11,25 mm dan 12,45 mm).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak daun avocad ( Persea americana Mill) memiliki kemampuan untuk menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus.
2. Diameter  zona  hambat  ekstrak  daun avocad ( Persea americana Mill)  pada konsentrasi  25%  rata-rata  14,7  mm, pada konsentrasi 50% rata-rata sebesar
15,8  dan  konsentrasi  75%  rata-rata sebesar 16,7.

## SARAN
1. Perlu  dilakukan  penelitian  yang  lebih lanjut  dengan  pemanfaatan  ekstrak daun  avocad  sebagai  obat  jamur  yang sebabkan oleh bakteri.
2. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  uji  daya  hambat  ekstrak daun  avocad  (Persea  americana  Mill) dengan  menggunakan  bakteri  uji  lain agar  semakin  bayak  informasi  yang diperoleh  bagi  masyarakat  tentang kemampuan daun avocad dalam mengatasi berbagai macam penyakit.

## DAFTAR PUSTAKA
Ainurrochmah, A., et al . 2013. Efektivitas Ekstrak Daun Binahong (Anredera  cordifolia)  terhadap Penghambatan Pertumbuhan Bakteri  Shigella  flexneri  dengan Metode  Sumuran . Jurnal  Mipa (Online). http://ejournal.unesa.ac.i d/index.php/lenterabio /article/view/4343/6817. Andriani  C.R.,et  al.  2016. Uji  Zona
Hambat Ekstrak  Etil  Asetat  Daun Avocad ( Persea  americana Mill) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus (online), Jurnal  Kedokteran  syiah  kuala 16(1),jurnal.unsyiah.ac.id/JKS/art icle/download/3936/3554 Azis  T, et  al .  2014 .  Pengaruh  Jenis Pelarut Terhadap Persen Yieldalkaloid  Dari  Daun  Salam India (Murraya Koenigii) . (Online) Vol. 20 http://jtk.unsri.ac.id/index.php/jtk/ article/download/174/173. Jurusan  Teknik  Kimia , Fakultas Teknik, Universitas Sriwijaya. Ismiyati, N., Trilestari. 2014 . Pengembangan Formulasi Masker Ekstrak Air Daun Avocad (Persea  Americana Mill )  Sebagai Antibakteri Staphylococcus aureus Untuk Pengobatan Jerawat. (Online), Vol
4,(http://journal.uad.ac.id/index.p hp/PHARMACIANA/article/view /397). Junanto,  T. et  al .  2008. Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  Angsana (Pterocarpus  indicus)  Terhadap Bacillus subtilis Dan Klebsiellapneumonia(Online), 5(2 ), http://biosains.mipa.uns.ac.id/C/
C0502/C050204.pdf.
Felina  Lucia, et  al .  2014. Daya  Hambat
Ekstrak  Daun  Avocad  (Persea americana, Mill .) Terhadap Pertumbuhan Enterococcus faecalis. ( online),8(1).http://hangtuah.ac.id /fkg/images/denta_megazine.pdf Ngajow,  et  al. 2013. Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa  (Pometia pinnata) Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus  secara In vitro  Jurnal  MIPA  UNSRAT
(Online). Vol.2, (http://ejournal.unsrat.ac.id/index php/jmuo). Poeloengan, M., Pratiwi. 2010. Antibacterial  Activity  Test  Of Mangos Teen ( Garcinia mangostana  linn ).  Media  Litbang
Kesehatan. 20(2) : 65-9. Radji.  2010. Buku  Ajar  Mikrobiologi;
Panduan  Mahasiswa  Farmasi  & Kedokteran .  Edisi  8.  Jakarta.
Penerbit buku kedokteran, EGC. Retnowati,  Y.  Bialangi,  N.  Posangi,  N.
W.  2011. Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus aureus Pada Media  Yang  Diekspos  Dengan Infus Daun Sambiloto (Andrographispaniculata) (Online). https://repository.ung.ac.
id/Pertumbuhan- bakteri Staphylococcus -  aureus - Pada-Media-Yang-Diekspos- Dengan-Infus-Daun Sambiloto   - Andrographis-Paniculata.pdf.
Sudirman  T.  A.,  2014. Uji  Efektivitas
Ekstrak  Daun  Salam  (eugenia polyantha) Terhadap
Pertumbuhan Staphylococcus aureus    Secara  in  vitro .  (Online), Makassar: Universitas Hasanuddin  Fakultas  Kedokteran Gigi Makassar. Wardany,  K.  H.  2016. Sehat  Tanpa  Obat Dengan Avocad , Ed I. Yogyakarta: Rapha Publishing.