## JIUBJ
DOI 10.33087/jiubj.v19i2.610
ISSN 1411-8939 (Online) | ISSN 2549-4236 (Print) Pieter Julius. Daely, Sarwendah, Yusliana, Heronimus C. G. Laia, Suhartina Damardi

## Uji Daya Hambat Anti Bakteri Air Perasan Daging Buah Nanas
(Ananas Comosus (L) Merr Var. Queen) terhadap Bakteri Eschericia Coli
Pieter Julius. Daely 1 , Sarwendah 2 , Yusliana 3 , Heronimus C. G. Laia 4 , Suhartina Damardi 5 1,2,3,4,5 Fakultas Kedokteran Universitas Prima Indonesia, Medan Email: pieterdaely.07@gmail.com
Abstract.  Pineapple  fruit  (Ananas  comosus  (L)  Merr)  is  one type  of  tropical  fruit that  is consumed by  many  people.  Pineapple  is also commonly used by the community as an antibacterial, anti-inflammatory, anti-coagulant, and anti-cancer. The purpose of this study  was  to  determine  the  effectiveness  of  the  antibacterial  inhibitory  effect  of  pineapple  juice  (Ananas  comosus  (L)  Merr  Var. Queen) on Eschericia coli bacteria. This study used an experimental laboratory method with disc diffusion and using ciprofloxacin disc as a positive control and distilled water as a negative control. Based on the results of research that has been done, it can be concluded that pineapple juice (Ananas comosus (L) Merr Var. Queen) at a concentration of 25%, 50%, 75%, and 100% has the effectiveness as an antibacterial in inhibiting the growth of Eschericia coli bacteria.
Keywords : inhibitory power, pineapple fruit, bacteria.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  dinyatakan  masih  merupakan penyebab  utama  tingginya  angka  kesakitan (morbidity) dan  angka  kematian (mortality) di  seluruh  dunia termasuk  Indonesia.  Infeksi  dapat  disebabkan  oleh berbagai  mikroorganisme  seperti  bakteri,  virus,  jamur, dan parasit (Radji, 2018).
Salah  satu  pengobatan  klinis  untuk  menangani penyakit  infeksi  adalah  penggunaan  antibiotik.  Namun, penggunaan  antibiotik  diketahui  menyebabkan  masalah baru  yaitu  munculnya  resistensi  terutama  pada pemakaian  antibiotik  yang  tidak  prosedural  dan  tidak terkontrol,  sehingga  pengobatan  penyakit  menular menjadi  tidak  efektif.  Resistensi  antibiotik  adalah  salah satu  ancaman  utama  terhadap  pengobatan  modern, sehingga membutuhkan strategi baru dalam membangun  alternatif  dalam  kasus  infeksi  (Erviani, 2013).
Obat  herbal  telah  diterima  secara  luas  di  hampir seluruh negara di dunia. Menurut WHO (2016), negara- negara  di  Afrika,  Asia  dan  Amerika  Latin  menggunakan obat  herbal  sebagai  pelengkap  pengobatan  primer. Bahkan  di  Afrika,  sebanyak  80%  dari  populasi menggunakan  obat  herbal  untuk  pengobatan  primer. Faktor  pendorong  terjadinya  peningkatan  penggunaan obat  herbal  di  negara  maju  adalah  usia  harapan  hidup yang lebih panjang pada saat prevalensi penyakit kronik meningkat, adanya kegagalan penggunaan obat modern untuk  penyakit  tertentu  di  antaranya  kanker  serta semakin  luas  akses  informasi  mengenai  obat  herbal  di seluruh  dunia.  WHO  merekomendasi  penggunaan  obat tradisional  dalam  pemeliharaan  kesehatan  masyarakat, pencegahan  dan  pengobatan  penyakit,  terutama  untuk penyakit  kronis,  penyakit  degeneratif  dan  kanker (Bustanusalam, 2016).
Penggunaan  obat  tradisional  secara  umum  dinilai lebih  aman  dari pada  penggunaan obat  modern.  Hal ini disebabkan  karena  obat  tradisional  memiliki  efek samping  yang  relatif  lebih  sedikit.  Bangsa  Indonesia telah  lama  mengenal  dan  menggunakan  tanaman berkhasiat  obat  sebagai  salah  satu  upaya  dalam menanggulangi masalah kesehatan. Pengetahuan tentang  tanaman  berkhasiat  obat  berdasarkan  pada pengalaman dan ketrampilan yang secara turun temurun
telah  diwariskan  dari  satu  generasi  ke  generasi berikutnya dikenal sebagai jamu (Jumiarni, 2017).
Tanaman  obat  adalah  tanaman  yang  bermanfaat untuk obat-obatan dan kesehatan yang di konsumsi atau digunakan  dari  bagian-bagian  tanaman  seperti  buah, batang, daun, umbi (rimpang) ataupun akar (Lestaridewi, 2017).
Buah  nanas (Ananas  comosus  (L)  Merr) merupakan  salah  satu  jenis  buah-buahan  tropis  yang banyak  diminati  masyarakat  lokal  dan  internasional. Selain rasanya yang manis, buah ini mempunyai banyak manfaat bagi kesehatan tubuh (Maisarah, 2014).
Nanas termasuk buah yang mempunyai kandungan  sangat  kompleks,  kaya  akan  mineral  baik makromaupun  mikro,  zat  organik,  air,  vitamin  dan kandungan  senyawa  lain  seperti  Klor,  Iodium,  Fenol, Flavanoid dan Enzim Bromealin (Manarisong, 2015).

## METODE PENELITIAN
Jenis Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan menggunakan metode  difusi  cakram,  untuk  melihat  pengaruh  air perasaan daging buah nanas ( Ananas comosus (L) Merr Var  Queen) terhadap  pertumbuhan  bakteri Salmonella typhi .Penelitian  ini  dilakukan  pada  Desember  2018  - Januari  2019  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Prima  Indonesia.  Sampel  yang digunakan  adalah  buah  nanas  muda  dengan  umur  3 bulan  yang  dibeli  dari  pasar  tradisional  Perbaungan, Kabupaten Serdang Bedagai.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah juicer,  pisau,  tabung  Erlenmeyer,  bekker  glass,  tabung reaksi,  rak  tabung,  cawan  petri,  pinset,  lidi  kapas,  ose, kertas  whatman,  pipet  tetes,  autoklaf,  oven,  inkubator, api  Bunsen,  timbangan  analitik,  alumunium  foil,  jangka sorong,  kamera,  kertas  stiker  label,  perforator,  masker, sarung tangan. Bahan yang diperlukan dalam penelitian ini adalah buah nanas, sabun antiseptik (Dettol), bakteri Salmonella  typhi , disc ciprofloxacin,  aquades, Mueller Hinton Agar (MHA), dan Nutrient Broth (NB).

## Pembuatan  Muller  Hinton  Agar  (MHA)  Dan  Media Nutrien Broth (NB)
6,8  gram  bahan  media  MHA  dilarutkan  dengan menggunakan  aquadest  sebanyak  200  ml  ke  dalam tabung  Erlemeyer,  kemudian  diletakkan  diatas  hotplate autoklaf  dengan  suhu  121 0 C  selama  15  menit.  Media MHA dituang ke dalam cawan petri  sebanyak 25 ml.
Untuk  membuat  media  cair  (NB),  ditimbang sebanyak  1  gram  serbuk  NB  dan  dimasukkan  kedalam gelas  piala  500  mL,  kemudian  ditambahkan  aquades sebanyak 150 mL. Kemudian dipanaskan diatas hotplate sampai  semua  bahan  larut  dan  homongen.  Setelah  itu, larutan  dimasukakan  kedalam  tabung  Erlenmeyer  dan selanjutnya  siap  untuk  di  autoklaf  pada  suhu  121 0 C selama  45  menit.  Kemudian  media  cair  dimasukkan dalam  tabung  reaksi.  Media  yang  telah  di  sterilkan tersebut  disimpan  dalam  kulkas  dan  siap  untuk digunakan (Saridewi NM, 2017).

## Sterilisasi Alat
Juicer  dicuci  dengan  air  bersih  dan  buah  nanas yang  sudah  dikupas  kulitnya.  Pisau,  gelas  beaker,  labu ukur  dan  tabung  reaksi  dicuci  dengan  sabun  cuci  yang mengandung  bahan  antiseptik  kemudian  dikeringkan dan  alat-alat  yang  terbuat  dari  gelas  disterilkan  dengan cara  dimasukkan  ke  dalam  oven  pada  suhu  170 0 C selama  1  jam.  Media  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121 o C selama 15 menit. Ose dan pinset disterilkan dengan melakukan pemijaran di atas api Bunsen.

## Pembuatan Konsentrasi
Buah nanas dipotong dan dipisahkan daging buah dari  kulit  dan  bonggolnya  menggunakan  pisau.  Daging buah  nanas  yang  selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam juicer.  Jus  yang  dihasilkan  kemudian  disaring  dengan mengunakan  corong  gelas  yang  di  alasi  dengan  kertas whatman    kemudian  ditampung  menggunakan  tabung erlenmeyer  selanjutnya  di  pindahkan  ke  dalam  gelas beaker untuk di lakukan pemekatan dengan menggunakan  water  bath  selanjutnya  ditutup  dengan alumunium  foil .  Air  perasan  tersebut  merupakan  air perasan  daging  buah  nanas  dengan  konsentrasi  100%. Konsentrasi yang digunakan diperoleh dengan rumus :
M1.V1 = M2.V2 Keterangan : M1 = molaritas sebelum pengenceran M2 = molaritas setelah pengenceran V1 = volume sebelum pengenceran V2 = volume setelah pengenceran

## Uji Efek Antibakteri
Metode pengujian efek antibakteri yang digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  cakram.  Untuk pengujian  ini  digunakan  media Mueller  Hinton  Agar (MHA)  sebanyak  dua  cawan  petri  dan  10  buah  cakram kertas  whatman.  Kertas  whatman  dibuat  dengan perforator  sehingga  berbentuk  cakram  dengan  diameter 6  mm.  Sebelum  bakteri  ditanam  pada  media Mueller Hinton  Agar (MHA),  bagian  depan  cawan  petri  dibagi menjadi  empat  dan  diberi  kode  menggunakan  kertas stiker  label.  Lidi  kapas  dicelupkan  ke  dalam  suspensi bakteri  pada  media Nutrient  Broth (NB)  kemudian digoreskan pada media Mueller Hinton Agar (MHA).
Air perasan daging buah nanas yang ada di dalam labu  ukur  dikocok  terlebih  dahulu  kemudian  dituang  ke dalam  tabung  reaksi.  Pada  masing-masing  tabung reaksi konsentrasi air perasan daging buah nanas (25%, 50%,  75%,  100%)  dicelupkan  satu  cakram  kertas whatman,  kontrol  positif  digunakan  dua  buah  disc ciprofloxacin  dan  kontrol  negatif  digunakan  dua  cakram kertas  whatman  dicelupkan  pada  aquades.  Setelah  itu, kertas  cakram  diletakkan  pada  permukaan  media Mueller Hinton Agar (MHA) dengan bantuan pinset steril dengan sedikit penekanan agar cakram kertas  whatman melekat  dengan  baik,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 o C  selama  48  jam.  Hitung  zona  hambat  atau  zona bening  yang  terbentuk  pada  cakram  kertas  whatman dengan  menggunakan  jangka  sorong  (Makalew,  dkk., 2016).
Tabel 1. Kekuatan daya hambat antibakteri (Darvis
dan Stout, 1997) Kriteria kekuatan daya antibakteri Diameter zona hambat (mm) Lemah <5 Sedang 5-10 Kuat 10-20 Sangat kuat >20

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Zona  hambat  yang  terbentuk  diukur  diameter vertikal dan diameter horizontal pada permukaan media dengan  menggunakan    jangka  sorong  dalam  satuan milimeter (mm). Pengukuran dilakukan sebanyak 10 kali, yaitu  dua  kali  pada  tiap  kelompok  perlakuan  kontrol. Hasil penelitian dengan menggunakan konsentrasi 25%, 50%,  75%  dan  100%  didapatkan  zona  hambat  seperti yang tercantum dalam tabel,grafik, dan gambar.
Tabel 2. Hasil Diameter Zona Hambat Air Perasan Daging Buah Nanas Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Eschericia coli. Bakteri Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata (mm) Pengulangan1 Pengulangan 2 Escherichia coli Konsentrasi 25% 8,12 mm 10 mm 9,06 Konsentrasi 50% 8,4 mm 11,6 mm 10 Konsentrasi 75% 8,68 mm 12,3 mm 10,49 Konsentrasi 100% 8,80 mm 13,2 mm 11 Kontrol positif 20,8 mm 24,3 mm 22,55 Kontrol negatif - - -
Grafik 1. Hasil pengukuran zona hambat air perasan daging buah nanas terhadap bakteri E.coli.

## Gambar 2. Zona Hambat Air Perasan Daging Buah Nanas Terhadap Bakteri Eschericia coli.

## Pembahasan
Berdasarkan  tabel  1  dan  grafik  1.  Didapatkan bahwa  hasil  zona  hambat  dari  tiap  konsentrasi  berbeda dengan rata-rata diameter zona hambat pada konsentrasi  25%  sebesar  9,06  mm,  50%  sebesar  10 mm, 75% sebesr 10,49 mm dan 100% sebesar 11 mm.
Berdasarkan  gambar  1.  Hasil  pengamatan  yang dilakukan  pada  cawan  petri  yang  berisi  kontrol  positif memiliki  efektifitas  sangat  kuat  sebagai  antibiotik  dan pada  kontrol  negatif  tidak  menunjukkan  efektifitas sedangkan  pada  air  perasan  daging    buah  nanas ( Ananas  comosus(L)  Merr  Var.  Queen)  yang dilakukan pengenceran  dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75% memiliki efektivitas sedang sebagai antibakteri dan pada kosentrasi  100%  memiliki  efektivitas  kuat  sebagai antibakteri  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Eschericia coli.

## SIMPULAN
Hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan  bahwa  air  perasan  daging  buah  nanas (Ananas  comosus  (L)  Merr  Var.    Queen) pada konsentrasi  25%,  50%,  70%,  dan  100%  memiliki efektivitas  sebagai  antibakteri  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahamed,  AA.  Etc.  2016.  Evaluation  of  Antimicrobial Activity  of  Pineapple  Extrac  Against  Selected Microbes.  International  Journal  of  Pharma  and Biosciences. no. 55. Page 277-278, 2016. Bustanusalam.  Pemanfaatan  Obat  Tradisional  (Herbal) Sebagai Obat Alternatif. BioTrends. vol.7, no.1 pp 20-25, 2016.
Davis  dan  Stout.  Dics  Plate  Method  Of  Microbiologi Antibiotic Eassay. J . Of Microbiologi. 22:4-9,1997.
Erviani  EA.  Analisis  Multidrug  Resisten  Antibiotik  Pada Salmonella typhi Dengan Teknik Multiplex PCR. J. Ilmiah Biologi .vol 1, no. 1, pp 51-60, 2013. Jumiarni  WO,  Komalasari  O.  Jenis  Dan  Pemanfaatan Tumbuhan Obat Pada Masyarakat  Suku Muna Di Permukiman Kota Wuna.Trad. Med. J.vol. 22(1), p 45-56,2017.
Lestaridewi  KN,  Jamhari  M,  Isnainar.  Pemanfaatan Aman  Sebagai  Obat  Tradisional  Di  Desa  Tolai Kecamatan  Torue  Kabupaten  Parigi  Moutong.e- JIPBIOL.vol.5(2):92-108, 2017.
Maisarah.  Panduan  Paraktis  Budaya  Nanas.  Edisi  1.
Yogyakarta: Penerbit Indopublika; 2014.
Makalew  MAJ,  Nangoy  E,    Wowor    PM.  Uji  Antibakteri Air  Perasaan  Daging  Buah  Nanas (Ananas comosus  (L)  Merr) Terhadap  Bakteri Klebsiella Pneumoniae . J. e-Biomedik. 2016.
Manarisong A, Abidjulu J, Siagian VS. Uji Daya Hambat Ekstrak  Kulit  Nanas  ( Ananas  comosus  L ) Terhadap Bakteri Staphylococus aureus Secara In Vitro. J. Ilmiah  Farmasi –  UNSRAT.    vol.  4  no.  4, pp 27-23, 2015.
Radji M.  Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran.  Jakarta.  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC; 2018.
Saridewi  NM,  Meiskha  B,  Anisa.  Uji  Efektivitas Antibakteri  Perasan  Jus  Buah  Nanas  ( Ananas comosus )    Terhadap  Pertumbuhan  Isolat  Bakteri Plak  Gigi  di  Puskesmas  Kecamatan  Tanah Abang. J . Biogenesis.; vol.6(2): pp 104-110.2017.