## PENGARUH EKSTRAK REBUSAN DAUN Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH
1 Rinawati, 2 E. Suharyanto dan 3 Nastiti Wijayanti 1 Program Studi Kesehatan Masyarakat Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Teuku Umar;
2 Program Studi Biologi Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada;
3 Program Studi Biologi Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Email: rinawati@utu.ac.id

## ABSTRAK
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan    gangguan  metabolisme  yang  ditandai  dengan  tingginya  kadar glukosa  darah  ( hiperglikemia )  akibat  kerusakan    sel  β  pankreas  sehingga  menyebabkan  produksi insulin berkurang atau menurunnya sensitifitas reseptor insulin. Tithoniadiversifolia merupakan salah satu  tumbuhan  yang  berpotensi  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  senyawa  aktif  yang  terkandung  pada  ekstrak  rebusan  daun T.  diversifolia ,  mengetahui pengaruh  ekstrak  rebusan  terhadap  penurunan  glukosa  darah  dan  mengetahui  ekstrak  rebusan  yang paling  efektif  untuk  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Penelitian  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan kelompok  perlakuan penelitian  yaitu: Kn=kontrol normal  (tikus  normal  dan tidak diberi ektrak rebusan daun), Ka=kontrol STZ (tikus DM), Kp=kontrol perlakuan (tikus normal diberi  ekstrak  rebusan  daun),  P1=tikus  DM  +  diberi  ekstrak  rebusan  daun  muda,  P2=tikus  DM  + diberi ekstrak campuran rebusan daun muda dan daun dewasa, P3=tikus DM + diberi ekstrak rebusan daun  dewasa.  Kelompok  tikus  Kontrol  STZ,  Perlakuan  (P)  1,  2  dan  3  diinduksi  STZ  65  mg/KgBB. Daun  yang  digunakan  untuk  rebusan  adalah  urutan  1-6  dari  pucuk.  Analisis  kandungan  senyawa ekstrak rebusan daun T. diversifolia menggunakan spektrofotometer visible (analisis tanin, fenol dan flavonoid) dan  GC-MS  (analisis terpenoid).  Ekstrak  rebusan daun  mengandung  tanin, flavonoid  dan fenol,  sedangkan  terpenoid  tidak  terdeteksi.  Ekstrak  rebusan  daun T.  diversifolia berpengaruh terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus DM, terutama rebusan daun dewasa yang menurunkan kadar glukosa darah mencapai 71,16 %.
Kata Kunci: Daun, Tithonia diversifolia , Diabetes Mellitus

## ABSTRACT
Tithonia diversifolia is a plant that has the potential to reduce blood glucose levels that is crucial in Diabetes  Mellitus  therapy.  This  study  aims  to  determine  the  active  compounds  contained  in  the extract  of T.  diversifolia leaves  decoction,  the  effect  of  decoction  extract  on  the  reduction  of  blood glucose,  and  the  most  effective  decoction  extract  to  reduce  blood  glucose  levels  as  well.  The  study used  a  Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  the  research  treatment  groups,  namely:  Kn  = normal  control  (normal  mice  and not given  leaves decoction  extract),  Ka  =  STZ control  (DM  mice, which are normal mice induced by 65mg/Kg of STZ), Kp = treatment control (normal mice given leaf decoction extract) , P1 = DM + mice were given young leaf decoction extract, P2 = DM + mice were given a mixture of young leaf and adult leaf decoction extract, P3 = DM + mice were given adult leaf decoction extract. The leaves used for decoction were 1-6 leaves from the shoots. The analysis of T. diversifolia leaves decoction compounds is using the visible spectrophotometers for tannins, phenols and flavonoids and GC-MS for terpenoid analysis. The result found that Tithonia diversifolia leaves decoction  extracts  contain  tannins,  flavonoids  and  phenols,  while  terpenoids  are  not  detected.  The leaves  decoction  extracts  of T.  diversifolia influenced  the  decreases  in  blood  glucose  levels  of  DM mice, especially the decoction extract of adult leaves which reduced blood glucose levels to 71.16%.
Keywords: Tithonia diversifolia , leaves decoction extracts, Diabetes Mellitus.
Jurnal Biotik, ISSN: 2337-9812, Vol. 7, No. 1, Ed. April 2019, Hal. 41-48

## PENDAHULUAN
esehatan  manusia  sering  dikaitkan dengan  pola  hidup.  Seseorang  yang tidakmenjaga  pola  hidup  sehat  akan menimbulkan dampak negatif seperti munculnya berbagai  penyakit  degeneratif,  seperti Diabetes mellitus (DM). Penyakit ini merupakan gangguan  metabolisme  yang  ditandai  dengan tingginya  kadar  glukosa  di  dalam  darah (hiperglikemia)  akibat  kerusakan  biosintesis insulin.  Kerusakan  tersebutdapat  mengganggu metabolisme  karbohidrat,  lipid  dan  protein  [1]. Hiperglikemia  dalam  jangka  panjang  dapat menyebabkan  komplikasi,  seperti:  kerusakan mata,  kerusakan  pembuluh  darah,  penyakit jantung, dan gagal ginjal [2].
Gejala  DM  dapat  ditandai  dengan:  haus yang  berlebihan  ( polidipsi ),  sering  kencing
( poliuri ),  sering  merasa  lapar  ( poliphagi ),  berat badan  turun  dengan  cepat,  badan  lemah,  jika terjadi  luka  akan  sukar  sembuh.  Menurut Thongsom (2013) secara umum, DM dikelompokkan  menjadi  2  tipe.  DM  tipe  I merupakan diabetes yang disebabkan oleh faktor genetis,  pada  tipe  ini  produksi  hormon  insulin rendah  bahkan  dapat  tidak  diproduksi  sama sekali  dan  biasanya  diekspresikan  sejak  masa kanak-kanak. Oleh karena itu, DM tipe 1 sangat tergantung insulin dari luar. DM tipe II DM tipe II  merupakan  diabetes    yang  tidak  tergantung produksi  insulin  [2].  Hormon  ini  diproduksi secara  normal  atau  mendekati  normal  oleh  sel- sel  β  pankreas  namun  sel  tubuh  tidak  mampu memanfaatkan insulin tersebut akibat  defisiensi pada  reseptor  insulin.  DM  tipe  ini  dapat  terjadi seiring  dengan  pertambahan  usia,  obesitas,  pola makan tidak sehat atau kurangnya olah raga [3].
Penggunaan  hormon  insulin  dan  obat eksternal  dari  bahan  kimia  sintetis  secara  terus menerus dapat  menyebabkan efek samping bagi tubuh  serta    biaya  yang  dibutuhkan  semakin tinggi. Penderita DM biasanya mencari alternatif lain  untuk  mendapatkan  obat  yang  lebih ekonomis  dan  mudah  didapatkan.  Umumnya, masyarakat memilih untuk memanfaatkan tumbuhan  yang  diduga  berpotensi  memiliki kemampuan  untuk  menurunkan  kadar  glukosa darah. Salah satunya adalah Tithonia diversifolia . Masyarakat memanfaatkan T.  diversifolia sebagai  obat  herbal  dengan  cara merebus  daunnya.  Penggunaan  rebusan  daun T. diversifolia sebagai  obat  herbal    belum dilakukan  secara  ilmiah.  Oleh  karena  itu, peneliti  tertarik  melakukan  pengujian  terhadap pengaruh rebusan daun T. diversifolia terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  secara  ilmiah.
Pengujian  fitokimia  dilakukan  terhadap  rebusan daun (rebusan daun muda, rebusan daun dewasa dan  campuran  rebusan  daun  muda+dewasa).
Pengujian  penggunaan T.  Diversifolia sebagai obat  herbal  harus  diujicobakan  terhadap  hewan terlebih  dahulu  untuk  melihat  efektivitasnya menurunkan kadar glukosa darah pada penderita DM.

## METODE PENELITIAN Bahan
Ekstraksi:  akuades  dan  daun T.  divesifolia urutan  1-6  yang  diperoleh  dari  jalan  Kaliurang Km  21,5  Yogyakarta.  Hewan  uji:  Tikus  putih ( Rattus  novergicus )  betina  berusia  2  bulan dengan berat badan berkisar 109-170g sebanyak 18  ekor  yang  diperoleh  dari  Laboratorium Fakultas  Farmasi  UGM  Yogyakarta.  Tikus dikondisikan  diabetes  dengan  diinjeksi  secara peritonial menggunakan STZ.

## Alat
GCMS,  Spektrofotometer,jarum  suntik (syringe),  jarum  sonde,  kandang  tikus,  tempat makanan  tikus,  sarung  tangan,  seperangkat glukometer merk Easy Touch .

## Rancangan Percobaan
Penelitian dilaksanakan bulan Januari–Mei 2015  yang  dilaksanakan  di  Laboratorium Struktur Perkembangan Tumbuhan, Laboratorium  FALITMA  Fakultas  Biologi UGM dan Laboratorium Pangan dan GIZI  PAU
UGM  Yogyakarta.  Rancangan  penelitian  ini bersifat  eksperimental  yaitu  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Jumlah keseluruhan  tikus  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah 18 ekor yang dibagi ke dalam enam  kelompok.  Analisis  kandungan  senyawa menggunakan spektrofotometer dan GC-MS.

## Pembuatan Ekstrak Rebusan
Ekstraksi  rebusan  daun T.diversifolia menggunakan  pelarut  air  yang  dibedakan
menjadi  rebusan  daun  muda  (urutan  1-3), rebusan  daun  dewasa  (urutan  4-6),  dan campuran rebusan daun muda+daun dewasa.
Penentuan Kandungan Total Fenol Pengukuran kadar fenol total menggunakan  metode  Folin  Ciocalteau  [4]. Ekstrak  sampel  sebanyak  100  μl  ditambahkan dengan  100  μl  reagen  Folin  Ciocalteau  50% kemudian  diinkubasi  selama  3  menit  pada  suhu ruang  dan  ditambahkan  2  ml  Natrium  karbonat 2%.  Volume  campuran  dibuat  menjadi  3  ml dengan  menambahkan  akuades.  Setelah  itu, campuran  disimpan  1  menit  dalam  water  bath 100°C  kemudian  dibiarkan  dingin  dalam  gelap. Sampel kemudian diabsorbansi dengan spektrofotometer Visible pada panjang gelombang  720  nm.  Total  fenol  kemudian dihitung  menggunakan  kurva  standar  dari  asam galat 1 mg/ml. Penentuan Kandungan Total Flavonoid Pengukuran kadar flavonoid total menggunakan  spektrofotometer  [4].  Sebanyak 20  μl  ekstrak  sampel  ditambahkan  dengan  150 μl  NaNO 2 5%  dan  diinkubasi  pada  suhu  ruang selama 5 menit. Setelah itu, sampel ditambahkan dengan  2,5  ml  AlCl 3 10%  dan  diinkubasi  pada suhu  ruang  selama  6  menit.  Sampel  kemudian diabsorbansi  pada  panjang  gelombang  510  nm. Total  flavonoid  dihitung  menggunakan  kurva standar dari Quercetin 1 mg/ml.

## Penentuan Kandungan  Tanin Total
Tanin  total  diukur  dengan  metode  Folin  – Ciocalteu  [5].  Sebanyak  0,1  ml  ekstrak  sampel ditambahkan  ke  dalam  labu  ukur  berisi  7,5  ml akuades dan 0,5 ml reagen Folin Phenol, serta 1 ml  Na 2 CO 3 35  %  yang  dilarutkan  dalam  10  ml akuades.  Campuran  kemudian  dikocok  dan
disimpan  pada  suhu  kamar  selama  30  menit. Asam  galat  digunakan  sebagai  standar  dan dibuat  seri  (100,  200,  300,  400  μg/ml).  Larutan sampel  dan  standar  diukur  absorbansinya menggunakan  spektrofotometer  visible  pada panjang gelombang 725 nm.

## Analisis Terpenoid
Sebanyak  180  ml  air  rebusan  daun T. diversifolia dimasukkan  ke  dalam  corong pemisah  kemudian  ditambahkan  100  ml  etil asetat  teknis  (Merk)  dan  di  gojog    sampai terlihat  adanya    pemisahan.  Fraksi  etil  asetat berada  pada  lapisan  atas  dan  fraksi  air  pada lapisan bawah.  Fraksi yang di uji menggunakan GCMS  adalah fraksi etil asetat.

## Pengukuran Kadar Glukosa
Pengukuran  glukosa  darah  dilakukan dengan  cara  mengambil  sampel  darah  dari bagian  sinus  orbitalis.  Darah  yang  diperoleh diteteskan  pada  strip  glukosa  kemudian  diukur menggunakan alat glukometer merk easy touch.

## Analisis Data
Data  dianalisis  dengan  menggunakan
ANOVA  dan  dilanjutkan  dengan Duncan’s Multiple  Range  Test (DMRT)  pada  taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kandungan  Senyawa  pada  Ekstrak  Rebusan Daun T. diversifolia Hasil  uji  fitokimia  pada  ekstrak  rebusan daun T. diversifolia menggunakan spektrofotometer  Visible  menunjukkan  bahwa ekstrak  tersebut  mengandung  senyawa  tanin, fenol dan flavanoid dengan kadar yang berbeda- beda. Hasil ditunjukkan pada Tabel 1berikut:
Tabel 1. Kandungan Senyawa Ekstrak Rebusan Daun T. diversifolia Sampel Jenis kandungan senyawa  ekstrak rebusan daun T. diversifolia Tanin (µgGAE/mg) Fenol (µgGAE/mg) Flavonoid (µgQE/mg) Rebusan Daun Muda 14,49±0,20 a 6,60±0,30 4,20 ±0,45 Campuran Rebusan Daun Muda+Tua 43,78±0,36 b 8,19±0,51 2,37±0,29 Rebusan Daun Tua 41,83±0,32 c 5,04±0,23 1,09±0,22

## Rinawati, dkk
Perbedaan kandungan senyawa dapat dipengaruhi  oleh  faktor  lingkungan  maupun faktor  umur  daun.  Tabel  di  atas  menunjukkan kandungan  senyawa  pada  ketiga  jenis  ekstrak yang  paling  tinggi  adalah  Tanin.  Kemungkinan ini berkaitan dengan peranannya pada tumbuhan.  Fenol  dan  flavonoid  paling  tinggi terdapat  pada  rebusan  daun  muda,  hal  ini dianggap  wajar  karena  kandungan  fenolik  pada saat  daun  muda  sudah  terbentuk.  Menurut
Kahkonen (2001), kandungan fenol dan
flavonoid  paling  tinggi  terdapat  pada  daun muda, karena biasanya senyawa fenolik terkonsentrasi  pada  daun  yang  lebih  muda dibandingkan  pada  yang  tua.  Analisis  terpenoid mengunakan  GC-MS  tidak  terdeteksi,  hal  ini dapat  dimungkinkan  oleh  beberapa  sebab:  1).
Kadarnya  yang  terlalu  kecil  pada  ekstrak rebusan  daun T.  diversifolia karena  hanya menggunakan beberapa helai daun saja (±6 helai daun)  pada  setiap  macam  rebusan.  2).  Pelarut yang  digunakan  adalah  pelarut  air  yang  sifanya polar  sehingga  tidak  dapat  menarik  terpen  yang sifatnya  lebih  ke  arah  non  polar,  3).  Cara ekstraksi  yang  digunakan  adalah  dengan perebusan,  dimungkinkan  senyawa  terpen  dapat menguap karena bersifat volatile [6].

## Penurunan Kadar Glukosa Darah
Kadar  glukosa  darah  pada  tikus  DM setelah  diberikan  ekstrak  rebusan  daun T. diversifolia menunjukkan  penurunan    pada  hari ke 5, 10 dan 15.
Tabel 2. Rerata Kadar Glukosa (mg/dL) Setelah Pemberian Ekstrak Rebusan Daun T. diversifolia Perlakuan Rerata Kadar Glukosa Sesudah Pemberian Ekstrak Rebusan Hari ke- 0 5 10 15 Kontrol Normal 132,00±3,60 b 98,67±1,52 a 105,00±2,00 a 105,67±3,21 b Kontrol STZ (+) 447,00±2,00 d 389,00±1,73 f 464,33±2,08 f 411,67±3,51 f Kontrol Perlakuan (-) 100,00±2,64 a 117,67±1,15 b 120,67±3,05 b 93,00±2,00 a Perlakuan I 455,67±1,55 e 331,33±2,51 d 244,00±4,00 e 314,00±2,00 e Perlakuan II 456,00±1,00 e 345,00±1,00 e 180,00±2,00 d 134,00±1,00 d Perlakuan III 430,33±2,50 c 266,33±2,00 c 136,00±3,40 c 124,00±1,73 c Pengukuran  kadar  glukosa  darah  setelah pemberian  ekstrak  dimulai  pada  hari  ke  5. Pemberian  ekstrak  rebusan  memberi  pengaruh yang nyata pada penurunan kadar glukosa darah.
Berdasarkan  uji  ANOVA  terhadap  hasil pengukuran  kadar  glukosa  darah,  masing- masing  kelompok  menunjukkan  beda  nyata.
Kadar  glukosa  darah  pada  kelompok  Perlakuan I,  II,  dan  III  (kelompok  diabetik)  berbeda  nyata dibandingkan Kontrol STZ dan Kontrol Normal. Pemberian  masing-masing  ekstrak  rebusan  juga memberi  pengaruh  beda  nyata  pada  masing- masing  kelompok.  Pada  ketiga  kelompok tersebut  (Perlakuan  I,  II,  dan  III)  penurunan kadar  glukosa  darah  terendah  berada  pada kelompok  Perlakuan  II  (345  mg/dL)  dan penurunan  tertinggi  terdapat  pada  kelompok Perlakuan  III  (266  mg/dL).  Meskipun  terjadi penurunan,  kadar  glukosa  darah  pada  ketiga
kelompok  tersebut  masih  lebih  dari  200  mg/dL, sehingga masih tergolong DM.
Hasil  pengukuran  kadar  glukosa  pada  hari ke 10 sebagai berikut: kadar glukosa darah pada Perlakuan  I,  II,  dan  III  berbeda  nyata dibandingkan  kelompok  kontrol  normal  dan kontrol  STZ.  Kadar  glukosa  darah  dari  3 kelompok  tersebut,  yang  paling  rendah  terdapat pada  kelompok  Perlakuan  III  yang  mencapai 136 mg/dL berbeda nyata dibandingkan Perlakuan I dengan kadar glukosa mencapai 244 mg/dL,  dan  juga  berbeda  nyata    bila dibandingkan  dengan  kelompok  Perlakuan  II dengan  kadar  glukosa  180  mg/dL.  Jika  dilihat dari  nilainya,  maka  kadar  glukosa  darah  pada kelompok  Perlakuan  III  telah  mencapai  kisaran normal. Hal ini dimungkinkan karena kandungan  senyawa  ekstrak  rebusan  daun T. diversifolia dewasa  lebih  berperan  aktif  untuk
memperbaiki  sel  β  pankreas  dibandingkan  pada daun muda dan campuran. Pengukuran kadar glukosa darah pada hari ke  15  pada  Perlakuan  I,  II,  dan  III  masih  tetap berbeda  nyata  dibandingkan  kelompok  kontrol normal  dan  kontrol  STZ.  Pola  penurunan  kadar glukosa  pada  hari  ke  15  sama  dengan  yang terjadi pada hari ke 10 namun dengan nilai yang berbeda.  Kadar  glukosa  terendah  terdapat  pada Perlakuan  III  (124  mg/dL),  diikuti  dengan perlakuan II (134 mg/dL) dan yang paling tinggi pada  kelompok  Perlakuan  I  (314  mg/dL).  Pada hari  ke  15,  kadar  glukosa  kelompok  II  dan  III telah  mencapai  kisaran  normal,  namun  pada kelompok Perlakuan I masih tetap dalam kondisi hiperglikemia . Ekstrak  rebusan  daun T.  diversifolia selama  15  hari  memberikan  pengaruh  nyata terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus yang diinduksi  STZ, namun kemampuan ketiga jenis  ekstrak  rebusan  tersebut  berbeda-beda. Ekstrak rebusan daun muda mampu menurunkan kadar  glukosa  pada  kelompok    Perlakuan  I selama  15  hari  pemberian.  Penurunan  tersebut belum  mampu  mengembalikan  kadar  glukosa hingga pada kisaran normal. Hal ini dimungkinkan,  kandungan  senyawa  pada  daun muda  belum  mampu  memperbaiki  sel  β pankreas secara optimal. Ekstrak campuran rebusan daun muda dan dewasa  mampu  menurunkan  kadar  glukosa darah  pada  kelompok  tikus  Perlakuan  II. Penurunan  kadar  glukosa  hingga  mencapai kisaran  normal  terjadi  pada    hari  ke  15. Pengaruh  ini  dimungkinkan  pada  ekstrak campuran  rebusan  ini  memiliki  kandungan senyawa  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  pada ekstrak  rebusan  daun  muda.  Kandungan senyawa  metabolit  sekunder  pada  ekstrak campuran ini dimungkinkan mampu meregenerasi sel β pankreas tikus. Kadar  glukosa  darah  pada  kelompok Kontrol  Perlakuan  berbeda  nyata  dengan Kontrol  Normal,  namun  bila  dilihat  dari  nilai kadar  glukosa  darahnya  masih  termasuk  pada kisaran  normal.  Pada  hari  ke  15,  kadar  glukosa pada  kelompok  ini  menurun.  Hal  ini  mungkin dapat  disebabkan  oleh  dua  hal,  yaitu  (1)
Pemberian  ekstrak  rebusan  daun  dewasa  pada kelompok  Kontrol  Perlakuan    menyebabkan penurunan  kadar  glukosa  pada  tikus  normal  (2)
tikus  mengalami  stres  saat  pengambilan  darah atau  disebabkan  oleh  sistem  hormonal  tikus betina.  Menurut  Miura(2005)  yang  melakukan penelitian  dengan  ekstrak  etanol  daun T. diversifolia yang diberikan pada mencit normal menunjukkan tidak berpengaruh terhadap penurunan kadar glukosa [7].
Ekstrak  rebusan  daun  dewasa  yang diberikan kepada kelompok perlakuan III paling efektif  untuk  menurunkan  kadar  glukosa  darah dibandingkan dua jenis ekstrak lainnya. Ekstrak rebusan  daun  dewasa  dapat  menurunkan  kadar glukosa  mencapai  kisaran  normal  sejak  hari  ke 10.    Hal  ini  menunjukkan  ekstrak  rebusan  daun dewasa  lebih  cepat  dalam  membantu  proses regenerasi  sel  β  pankreas  dan  mengembalikan sensitivitas reseptor insulin.
Berdasarkan  data  yang  telah  diperoleh, dapat  dibuktikan  bahwa  pemberian  ekstrak rebusan  daun T.  diversifolia baik  daun  muda maupun  daun  dewasa  menggunakan  pelarut  air memiliki  kemampuan  untuk  menurunkan  kadar glukosa  darah  pada  tikus  DM.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Miura  (2005)  pada  ekstrak  daun T.  diversifolia dengan  pelarut  etanol  yang diberikan  kepada  mencit  juga  memberikan pengaruh  terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah  pada  mencit  DM  dari  550  mg/dl  menjadi 350  mg/dL  [7],  begitu  pula  penelitian  yang dilakukan  oleh  Montakarn et  al., (2013)  pada mencit DM yang diberikan ekstrak kental serbuk daun T.  diversifolia dengan  metode  maserasi dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah  mencit dari 350 mg/dL menjadi 200 mg/dl [8].
Penurunan kadar glukosa darah pada tikus positif  DM    dapat  disebabkan  karena  senyawa yang  terkandung  dalam  rebusan  daun T. diversifolia mencegah  terjadinya  oksidasi  lebih lanjut  sel  β  pankreas  sehingga  kerusakan  dapat diminimalkan  [9].  Senyawa  aktif  berupa antioksidan berperan dalam  menurunkan proses apoptosis  pada sel β pada kondisi hiperglikemia [10]. Insulin dapat dihasilkan kembali oleh sel β pankreas akibat adanya  senyawa-senyawa yang bersifat  antioksidan  seperti  tanin,  flavonoid  dan fenol  dari  ekstrak  rebusan  daun T.  diversifolia . Ketika  kadar  glukosa  dalam  darah  tinggi,  dapat memberikan  sinyal  pada  pankreas.  Pankreas akan  merespon  sinyal  tersebut  dengan  cara melepaskan  hormon  insulin  pada  sel    β  dan mengirimnya  ke  hati.  Insulin  memberikan
pengaruh  pada  sejumlah  sel  seperti  sel  otot,  sel darah  merah  dan  sel-sel  lemak.  Akibat  adanya insulin,  sel-sel  ini  dapat  menyerap  glukosa dalam darah sehingga kadar glukosa darah dapat menurun dan kembali normal. Hasil  pemberian  ekstrak  rebusan  daun T. diversifolia pada  tikus  DM,  yang  paling berpengaruh  terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah  adalah  ekstrak  rebusan  daun  dewasa.  Hal ini  dimungkinkan  terkait  jumlah  trikoma glandularnya.  Fenol  dapat  mempercepat  laju perbaikan  kerusakan  jaringan  pada  sel  β pankreas  dan  mengembalikan  sel  menjadi normal  [11].  Aktivitas  antioksidan  mampu menangkap  radikal  bebas  yang  menyebabkan perbaikan  pada  kerusakan  sel  β  pankreas sehingga  terjadi  peningkatan  jumlah  insulin didalam  tubuh.  Peningkatan  jumlah  insulin menyebabkan glukosa darah akan mudah masuk kedalam  sel,  pada  akhirnya  terjadi  penurunan glukosa darah dalam tubuh [12], [13]. Zao et al., (2013)  menyebutkan golongan monoterpen  pada    ektrak  daun T.  diversifolia dapat membantu penyerapan glukosa dalam 3T3 - L1 adiposit, sehingga dapat menurunkan kadar glukosa darah [14]. Golongan senyawa monoterpen  diantaranya  adalah  taginin  A  dan taginin C (C11H16O5 [15]. Tanin yang terdapat pada  rebusan  daun T.  diversifolia mempunyai aktivitas  hipoglikemik  yaitu  dengan    cara meningkatkan glikogenesis. Tanin juga berfungsi  sebagai  astringent  atau  pengkhelat yang  dapat  mengerutkan  membran  epitel  usus halus  sehingga  mengurangi  penyerapan  sari makanan.  Pengurangan  penyerapan  asupan  gula
mengakibatkan  laju  peningkatan  gula  darah tidak terlalu tinggi [9].
Kandungan flavonoid pada ekstrak rebusan daun T.  diversifolia juga  berperan  untuk menurunkan kadar glukosa. Menurut Bhushan et al.,( 2010)  aktivitas  flavonoid  dalam  peranannya pada  penyakit  DM  adalah  sebagai  berikut: menekan  kadar  glukosa  darah,  menurunkan kolestrol  yang  tinggi  pada  plasma  dan trigliserida dan meningkatkan aktifitas glukokinase pada hati, sehingga terjadi peningkatan pelepasan hormon insulin dari sel β pancreas [16].
Senyawa flavonoid dapat berperan sebagai inhibitor alfa amilase dan alfa glukosidase yang dapat  memperbaiki    dan    mencegah    kerusakan sel    akibat    peristiwa    oksidatif    oleh  radikal bebas  (Tadera., et  al. 2006)  hal  ini  karena memiliki    aktivitas antioksidan   dengan   cara menangkap  atau    menetralkan    radikal    bebas terkait  dengan     gugus     OH      fenolik  selain  itu flavonoid juga memiliki mekanime menurunkan kadar    glukosa      darah      dengan    meningkatkan sekresi insulin [18].
Katekin  dari  golongan  flavonoid  dapat meningkatkan kada glikogen hepar, peningkatan kadar glycogen  synthase dan  penurunan  kadar glycogen  phosporilase [19].  Silibinin  dari golongan flavonoid juga mempunyai kemampuan untuk menghambat proses glikogenolisis  dengan  cara  inaktivasi  enzim glucose-6-phosphatase. Enzim ini terlibat dalam hidrolisis  glikogen  yang  disimpan  dalam  sel hepar pada proses glikogenolisis [20].
KESIMPULAN Ekstrak rebusan daun T.diversifolia mengandung golongan senyawa tanin, fenol dan flavonoid,  terpenoid  tidak  terdeteksi  dengan alasan yang telah dikemukakan pada pembahasan.    Ekstrak  rebusan  daun T.
diversifolia berpengaruh  terhadap  penurunan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  DM.  Ekstrak rebusan  yang  paling  berpengaruh  terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  adalah  ekstrak rebusan daun dewasa.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  Rang  et  al.,  2006. Pharmacology  5th Edition . Elsevier Inc. USA. [2]  Thongsom,  M.,  Chunglok,  W.,  Kuanchuea,
R  dan  Tangpong,  J.  2013. Antioxidant and  Hypoglikemic  Effect  of  Tithonia
diversifolia  Aqueous  Leaves  Extract  in Alloxan-Induce Diabetic Mice . Original Article  of  Advences  in  Environmental
Biology. 7(9):2125.
[3]  Takada  J.  2008. Metabolic  Recovery  of Adipose  Tissue  is  Associated  With Improvement In Insulin Resistance In A Model  Of  Experimental  Diabetes .  J  of Endocrinology.198:51-60. [4]  Mullick,  A.,  Mandal,  S.,  Bhattacharjee,  R. dan  Banerjee,  A.  2013.  In-Vitro  Assay of Antioxidant and Antibacterial Activity  of  Leaf  Extract  and  Leaf Derived  Callus  Extract  of Acalypha indica L. International  Journal  of Pharmacy  and  Biological  Sciences , 3(1): 504-510. [5]  Mythili, K., Reddy, C.U., Chamundeeswari, D., dan Manna, P.K. 2014. Determination of Total Phenol, Alkaloid,  Flavonoid  and  Tannin  in  38 Different Extracts of Calanthe Triplicata. Journal  of  Pharmacognsoy and Phytochemistry , 2(2): April – Juni. [6]  Kahkonen,  M.P.,  Hopia,  A.I  and  Hoinen. 2001. Berry  Phenolics  And  Their Antioxidant  Activity. Journal  of Agriculture  and    Food  Chemistry. 49 :4076 . [7]  Miura,  T.  2005. Antidiabetic  Effect  of Nitobegiku, The Herb Tithonia diversifolia,  in  KK-Ay  Diabetic  Mice . Department  of  Clinical  Nutrition, Suzuka  University  of  Medical  Science. Biol. Pharm. Bull 28(11): 2152-2154. [8]  Montakarn et  al. 2013.Montakarn  T, Waragkana  C,  Rapeeporn  K,  Jibanjong T. 2013. Antioxidant and Hypoglycemic  effects  of Tithonia diversifolia Leaves  Extract  in  Alloxan- Induced  Diabetic  Mice. Advances  in Environmental  Biology ,  7  (9):  2116- 2125. [9]  Prameswari,  O.  K  dan  Widjarnato,  S,  B. 2014. Uji  Efek  Ekstrak  Air  Daun Pandan  Wangi. Jurnal    Pangan  dan Agroindustri. 2(2). Pp.23. [10]  Kaneto, H., Xu, G., Song, K.-H., Suzuma, K.,  Bonner-Weir,  S.,  Sharma,  A.  & Weir,  G.  C.  2001.  Activation  Of  The Hexosamine Pathway Leads To Deterioration  Of  Pancreatic  Β-Cell Function  Through  The  Induction  Of Oxidative Stress. Journal Of Biological Chemistry . 276: 31099-31104. [11]  Dyahnugra,  A.A  dan  Widjarnato,  S.B. 2015. Pemberian Ekstrak Bubuk Simplasia  kulit  manggis  ( Garcinia Mangostana L)  Menurunkan  Kadar Glukosa  Pada  Tikus  Putih  ( Rattus norvegicus) Strain Wistar Jantan Kondisi Hiperglikemik. 3(1):122. [12]  Suryani,  N.,  T.  Endang.  2013.  Pengaruh Ekstrak Metanol Biji Mahoni Terhadap Peningkatan  Kadar  Insulin,  Penurunan Ekspresi TNF-α dan Perbaikan Jaringan Pankreas Tikus Diabetes. Jurnal Kedokteran  Brawijaya ,  Vol.  27,  No.  3. Hal 40. [13]  Arjadi,  F,.  Susatyo,  P.  2010. Regenerasi Sel Pulau Langerhans pada Tikus Putih (Rattus  norvegicus)  Diabetes  yang Diberi Rebusan Daging Mahkota Dewa ( Phaleria  macrocarp  (Scheff.) Boerl.). Vol. 2, No. 2. Hal 34. [14]  Zhao, G., Li, X., Huang, G.,Chen,W., Li, J and Sun, L. 2013 . Two New Monoterpenes From Tithonia diversifolia and Their Anti- Hyperglycemic  Activity. Rec.  Natural Product 7(4):351-354. [15]  Taiwo,  L.B.,  and  J.O.  Makinde.  2005. Influence  of  Water  Extract  of  Mexican Sunflower  (Tithonia  diversifolia)  on Growth of Cowpea (Vigna unguiculata). African Journal of Biotechnology. 4(4): 355-360. [16]  Bhushan, RAO C., OJHA S., Vijayakumar M.  and  Verma  A.,  2010, An  analytical review  of  plants  for  anti  diabetic activity with their , IJPSR:1(1) 29–46. [17]  Tadera, K., Y. Minami, K. Takamatsu, and T.  Matsuoka  (2006).  Inhibition  of  α- Glukosidase and α-Amylase of Flavonoids. J Nutr. Sci. Vitaminol., 52: 149-153. [18]  Nurfadhliawati., Joni, T., Nasyrah, A.S dan Yunlis,  S.  2019. Efek  Ekstrak  Etanol Kulit  Batang  Ketapang  Terhadap Gambaran Histopatologi Pankreas Tikus  Putih  Jantan .  Farmakologika Jurnal Farmasi. Vol. XVI No.1. Hal 67. [19]  Valsa, A.K., Sudheesh, S and Vijayalakshmi,  N.R.  1997. Effect  of Catechin on Carbohydrate Metabolism.
Indian  Journal  Biochem  Biophys, 34(4): 406-408.
[20]  Guigas,  B.,  Naboulsi,  R.,  Gloria,  R., Villanueva,  Taleux,  N.,  Lopez-Novoa, J.M.,  Leverve,  X.M  and  El-Mir,  M.Y. 2007. The Flavonoid Silibinin Decrease Glucose-6-Phosphate  Hydrolysis  in Perifused  Rat  Hepatocytes  by  an
Inhibitory Effect on Glucose-6- Phosphatase . Cell Physiology
Biochem. 20: 925-934.