## UJI AKTIVITAS ANTIJAMUR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG RAMBUTAN (Nephelium lappaceum L.) TERHADAP JAMUR Candida Albicans SECARA IN

## VITRO
Frendsiane R. Pangalinan 1) , Novel Kojong 2) , Paulina V.Y. Yamlean 3)
1) Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Farmasi FMIPA UKIT, Tomohon
3) Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRAK
Infeksi  jamur  banyak    dijumpai  pada  masyarakat  di  negara  tropis  termasuk  Indonesia  karena  iklim yang  panas  dan  lembab  sehingga    mempermudah  pertumbuhan  jamur.  Secara  empiris  kulit  batang Rambutan  (Nephelium  lappaceum L.)  digunakan  untuk  mengatasi  sariawan  yang  disebabkan  oleh jamur Candida  albicans.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antijamur  dari  ekstrak etanol  kulit  batang  Rambutan  terhadap Candida  albicans dan  pengaruh  peningkatan  konsentrasi ekstrak etanol  kulit  batang  Rambutan  terhadap  aktivitas  antijamur.  Ekstrak  etanol  kulit  batang Rambutan diperoleh dari proses maserasi pada sampel basah dan sampel kering yang dibuat dengan konsentrasi  10%,  20%,  40%  dan  80%.  Uji  aktivitas  antijamur  dilakukan  dengan  metode  difusi  cara sumuran  untuk  mengetahui  efektivitas  antijamur  dengan  mengamati  daerah  hambatan.  Hasil penelitian membuktikan bahwa kulit batang Rambutan efektif digunakan untuk menghambat aktivitas antijamur  terhadap Candida  albicans.  Uji one  way  anova menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan yang nyata pada diameter zona hambat dan dilanjutkan dengan uji Duncan dengan taraf kepercayaan 5 % menunjukkan diameter zona hambat tertinggi pada konsentrasi 80% dan kontrol(+) ketokonazol. Kata kunci: Antijamur, Nephelium lappaceum L., metode difusi, Candida albicans
ANTIFUNGAL ACTIVITY TEST OF RAMBUTAN  (Nephhelium lappaceum L.) BARK ETHANOL EXTRACT TOWARD Candida albicans FUNGUS BY IN VITRO

## ABSTRACT
Fungal  infections  are  often  found  in  people  in  tropical  countries  including  Indonesia  because  the climate  is  hot  and  humid  making  it  easier  for  mold  growth.  Empirically Rambutan  bark (Nepheliumlappaceum  L.)  used  to  treat  ulcers  caused  by  the  fungus  Candida  albicans.  The experimentwasaimed to know the  antifungal  activity  of  ethanol  extract  of Rambutan  bark  against Candida albicans and the effect of increasing concentrations of the Rambutan bark ethanol extract to the  antifungal  activity.  Rambutan  bark  ethanol  extract  obtained  from  the  maceration  process  in samples  of  wet  and  dry  samples  are  prepared  with    concentrations of  10%,  20%,  40%  and  80%. Antifungal  activity test was done by difussion  method  of  well  treatment to know the antifungal effectiveness  by observing the inhibition zone. The resultof the experiment that effective Rambutan bark is used to inhibit the antifungal activity against Candida albicans. One way ANOVA test showed that there were significant differences in inhibition zone diameters and followed by Duncan test with a confidence level of 5% showed the highest inhibition zone diameters at a concentration of 80% and ketoconazole(+)control.
Key words: Antifungals, Nepheliumlappaceum L., difussion method, Candida albicans

## PENDAHULUAN
Jamur  merupakan salah  satu  penyebab penyakit  infeksi  terutama  di  negara-negara tropis.  Penyakit  kulit  akibat  jamur  merupakan penyakit  kulit  yang  sering  muncul  di  tengah masyarakat  Indonesia.  Iklim  tropis  dengan kelembaban  udara  yang  tinggi  di  Indonesia sangat mendukung pertumbuhan jamur.
Candida  spp dikenal  sebagai  jamur
dimorfik yang secara normal ada pada saluran pencernaan,  saluran  pernafasan  bagian  atas dan  mukosa  genital  pada  mamalia  tetapi populasi  yang  meningkat  dapat  menimbulkan masalah. Jamur Candida  albicans dianggap sebagai spesies patogen dan menjadi penyebab utama kandidiasis.
Candida albicans merupakan  jamur  opportunistik  penyebab sariawan,  lesi  pada  kulit,  vulvavaginistis, candida pada urin (kandiduria), gastrointestinal kandidiasis yang dapat menyebabkan gastric ulcer, atau bahkan dapat menjadi  komplikasi  kanker  (Kurniawan,  2009 dan Mutschler, 1991).
Menurut Hariana,  2008 bahwa  salah  satu jenis  tanaman  yang  berkhasiat  obat  yaitu rambutan (NepheliumlappaceumL.). Rambutan merupakan salah satu tumbuhan  yang banyak dibudidayakan di Indonesia untuk dimanfaatkan buahnya. Bagian tumbuhan ini yang  dapat digunakan sebagai obat yaitu kulit buah digunakan untuk mengatasi disentri dan demam, kulit batang digunakan untuk mengatasi sariawan,  daun digunakan untuk mengatasi diare dan menghitamkan rambut, akar digunakan untuk mengatasi demam,  dan biji digunakan untuk mengatasi kencing manis (diabetes mellitus).
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas anti jamur ekstrak etanol kulit batang rambutan terhadap jamur Candida  albicans yang merupakan salah satu penyebab sariawan. Pengujian aktivitas anti jamur menggunakan metode Kirby  baeur yang dimodifikasi yaitu dengan metode sumuran dengan cara membuat lubang pada  agar  padat yang telah diinokulasi dengan jamur.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium Mikrobiologi  dan  Science  Advans  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Unsrat  pada  bulan  November - Desember 2011.

## Bahan
Kulit  batang  rambutan,  Potato  Dextrose  Agar (PDA), jamur Candida  albicans,  kontrol positif  (+)  tablet  ketokonazol  200mg,  dan kontrol  negatif  (-)  larutan  CMC  1%,  larutan standar Mc  Farland,  larutan  NaCl  0,9%, aquades,  dan  larutan  etanol  96%  pro  analisis (p.a)

## Pembuatan Ekstrak
Sampel  kulit  batang  Rambutan yang digunakan  diambil  dari  pohon  Rambutan  di Kota  Manado.  Untuk  sampel  kering,  kulit batang  rambutan  dicuci  sampai  bersih  dan dikeringkan.  Kemudian  dihaluskan  dengan cara di blender lalu diayak.  Sedangkan untuk kulit  batang  Rambutan  yang  akan  dijadikan sampel basah tidak perlu dikeringkan melainkan dirajang dan langsung dicampurkan dengan  larutan  pelarut.  Sampeldi  maserasi dengan  larutan  etanol  kemudian  disaring hingga diperoleh filtrat. Filtrat pelarut tersebut kemudian  diuapkan  dengan  menggunakan vakum evaporator.  Setelah  diperoleh  ekstrak yang agak pekat dilanjutkan dengan menguapkan  diatas  penangas  air  hingga ekstrak  menjadi  kental,  dan  diperoleh  ekstrak kental(Depkes, 1986).

## Pembuatan  Variasi  Konsentrasi  Larutan Uji
Pembuatan variasi konsentrasi larutan uji dibuat sebagai berikut:
a. Konsentrasi 10 % ( b / v ): 0,1 g ekstrak etanol + larutan CMC 1% sebanyak 1 ml. b. Konsentrasi 20 % ( b / v ) : 0,2 g ekstrak etanol + larutan CMC 1% sebanyak 1 ml. c. Konsentrasi 40 % ( b / v ): 0,4 g ekstrak etanol + larutan CMC 1% sebanyak 1 ml. d. Konsentrasi 80 % ( b / v ): 0,8 g ekstrak etanol + larutan CMC 1% sebanyak 1 ml.

## Pembuatan Media

## a. Media Peremajaan Jamur

## PDA dilarutkan dalam 20 ml aquadest pada
Erlenmeyer kemudian  dipanaskan  di  atas hot  plate sampai  mendidih  dan  diperoleh larutan jernih. Kemudian dituang ke dalam beberapa  tabung  reaksi  disterilkan  dalam
autoclave pada  suhu  121 0 C  selama  15 menit  kemudian  dimiringkan  30 0 dan dibiarkan mengeras.  Koloni  jamur diambil dari  biakan  murni  yang  tersedia, dilakukan secara  aseptis  dengan  jarum  ose  dan digoreskan  pada  media  agar  miring kemudian diinkubasikan dalam inkubator.(Gozali, dkk., 2009 ; Rostinawati, dkk., 2009). b. Media Dasar PDA  dilarutkan  dalam  aquadest  kemudian dipanaskan  di  atas hot  plate sampai mendidih  dan  diperoleh  larutan  jernih. Media disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit.
c. Media Pembenihan
PDA  dilarutkan  dalam  aquadest  kemudian dipanaskan  di  atas hot  plate sampai mendidih  dan  diperoleh  larutan  jernih  lalu disterilkan  ke  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 0 C selama 15 menit.

## Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Larutan kontrol positif (+) yang digunakan yaitu ketokonazol dengan konsentrasi  50µg/50µl.  Larutan  ini  dibuat dengan  cara    tablet  ketokonazoldigerus  dan ditimbang sehingga diperoleh serbuk ketokonazol setara dengan 50mg  ketokonazol, dan dilarutkan dalam 50ml CMC 1%.

## Pembuatan Larutan Kontrol Negatif
Larutan  kontrol  (-)  digunakan  larutan CMC 1% dibuat dengan cara: CMC ditimbang sebanyak  1  g  dan  ditambahkan  aquadest sampai  100  ml  kemudian  dikocok  sampai homogen (Dewi, 2010).
Pembuatan Standar Kekeruhan (Mc. Farland )
Larutan  H 2 SO 4 0,36  N  dicampurkan dengan  BaCL 2 .2H 2 O  1,175%  dalam  sebuah tabung.  Tabung  dikocok  sampai  terbentuk larutan  yang  keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai sebagai  standar  kekeruhan  jamur  (Biesher, 1983).

## Pembuatan Suspensi Jamur Uji
Biakan Candida  albicans dalam  media agar  miring  disuspensikan  dengan  NaCl. Kemudian diambil secukupnya dan dimasukan
kedalam  media  pembenihan.  Lalu  dicampur dan  diatur  kekeruhannya sama  dengan  larutan Mc.Farland (Carter dan Cole, 1990).

## Pengujian Aktivitas Antijamur
a. Media dasar PDA dituang ke dalam  cawan petri dan dibiarkan mengeras.
b. Pada permukaan lapisan dasar diletakkan 6 pencadang  dan  diatur  sedemikian  rupa sehingga  terdapat  daerah  yang  baik  untuk mengamati zona hambat yang terjadi.
c. PDA  yang  mengandung  suspensi  jamur uji dituang  ke  dalam  cawan  petri  di  sekeliling pencadang.
d. Dikeluarkan  pencadang  dari  cawan  petri sehingga  terbentuk  sumur  yang  akan digunakan untuk larutan uji, larutan kontrol positif (+) dan larutan kontrol negatif (-).
e. Diteteskan  larutan  uji  ekstrak  sampel kering etanol, ekstrak sampel basah etanol, larutan  kontrol  positif  (+)  dan  larutan kontrol negatif  (-).
f. Dilakukan pengulangan secara triplo dengan cara yang sama.
g. Diinkubasikan  dalam  inkubator  pada  suhu 37 0 C selama 1x24 jam.
h. Diamati zona hambat yang terjadi di sekitar sumuran  kemudian  diukur  diameter  zona hambat  secara  horizontal  dan  vertikal dengan menggunakan penggaris berskala.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  apakah  ada  pengaruh diameter  zona  hambat  terhadap  pertumbuhan jamur Candida  albicans maka  dilakukan  uji statistik  dengan  menggunakan  uji one  way anova dengan  metode  SPSS  17,0.  Dan  untuk melihat  perlakuan  mana  yang  memberikan pengaruh dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  aktivitas  antijamur  menggunakan metodeKirby  baeur yang  dimodifikasi  yaitu dengan metode sumuran dengan cara membuat lubang pada  agar padat  yang  telah diinokulasi dengan  jamur. Jumlah  dan  letak  lubang disesuaikan dengan tujuan penelitian, kemudian  lubang  diinjeksikan  dengan  ekstrak yang  akan  diuji. Pengukuran  diameter  zona hambat  dari  hasil  uji  aktivitas  antijamur ekstrak  etanol  kulit  batang  rambutan  terhadap
pertumbuhan  jamur Candida  albicans pada daerah bening atau jernih di sekitar sumuran .
Tabel  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat Ekstrak  Etanol  Kulit  Batang  Rambutan  Terhadap Candida albicans dengan Masa Inkubasi 1x24 jam.
Konsentra si Ratan Diameter zona hambat (mm) Sampel Basah Sampel Kering Kontrol (- ) 7,000 7,000 10 % 10,083 10,583 20% 11,25 10,916 40% 12,083 12,667 80% 12,75 14,00 Kontrol (+) 30,5 30,167 Keterangan:Penghitungan  diameter  zona  hambat termasuk diameter sumuran .
Menurut  Hermawan,  dkk  (2007)  bahwa interpretasi  daerah  hambatan  pertumbuhan antimikroba  mengacu  pada  standar  umum yang  di  keluarkan  Departemen  Kesehatan (1988)  disebutkan  bahwa  mikroba  dikatakan peka  terhadap  antimikroba  asal  tanaman apabila  mempunyai  ukuran  diameter  daya hambatan sebesar 12-24 mm.Hal ini membuktikan  bahwa  diameter  zona  hambat pada  ekstrak  etanol  sampel  kering  di konsentrasi  40%  (12,667mm)  dan  konsentrasi 80%  (14,00mm)  serta  ekstrak  etanol  sampel basah  di  konsentrasi  40%  (12,083mm)  dan konsentrasi  80%  (12,75mm)  dapat  digunakan sebagai  bahan  antijamur  terhadap  jamur Candida albicans.
Diameter Zona Hambat sampel Basah
Ulangan N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 5 Kontrol (-) 10% 3 3 7.000 10.0833 20% 3 11.2500 40% 3 12.0833 12.0833 80% 3 12.7500 Kontrol (+) 3 30.5000 Sig. 1.000 1.000 .053 .111 1.000 Diameter Zona Hambat sampel kering Ulangan N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 5 Kontrol (-) 10% 3 3 7.000 10.5833 20% 3 10.9167 40% 3 12.6667 80% 3 14.0000 Kontrol (+) 3 30.1667 Sig. 1,000 ,403 1,000 1,000 1,000
Hasil analisis statik dengan uji one way anova pada  ekstrak  etanol  kulit  batang rambutan  diperoleh  nilai  signifikan  0.000 kurang  dari  α  (0,05)  ini  membuktikan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  nyata(signifikan) terhadap  diameter  zona  hambat  pada  setiap perlakuan.  Setelah  itu  dilanjutkan  lagi  dengan uji  Duncan    menunjukkan  bahwa  setiap perlakuan  berada  pada  kolom  subset  yang berbeda.  Kecuali  untuk  ekstrak  etanol  sampel basah konsentrasi 20% dan 40% serta konsentrasi  40%  dan  80%  juga  pada  sampel kering  konsentrasi  10%  dan  20%    masuk  ke dalam  kolom  subset  yang  sama  menunjukkan tidak adanya perbedaan yang nyata (signifikan)  dimana  hal  ini  menunjukkan bahwa  konsentrasi  tersebut  memberikan  efek antijamur  yang  sama.  Pada  kontrol  (+) ketokonazol  menunjukkan  hasil  pengukuran diameter  zona hambat  yang  paling  tinggi. Hal ini dimungkinkan karena ketokonazol merupakan obat pilihan pertama untuk  infeksi
yang  disebabkan  oleh Candida  albicans. Menurut Tan dan Rahardja (1986) ketokonazole bekerja berdasarkan pada pengikatan  enzim  sitokrom  P450,  sehingga sintesa  ergosterol  dirintangi  dan  terjadi kerusakan  membran  sel  pada  jamur.  Hasil  uji kontrol (-) yaitu CMC 1% tidak menunjukkan adanya  daya  hambat  terhadap  jamur Candida albicans.
Dari hasil penelitian ini membuktikan bahwa kulit batang rambutan dapat digunakan untuk menghambat pertumbuhan jamur
Candida  albicans karena  diduga  disebabkan oleh senyawa kimia yang terkandung di dalam kulit  batang  rambutan  tersebut.  Dimana  kulit batang  mengandung  tanin, saponin, flavonoid, pectic substance, dan zat besi (Dalimarta,2003). Flavonoid, tanin dan saponin merupakan senyawa yang mempunyai efek  farmakologi  sebagai  antijamur.  Dimana flavonoid  dengan kemampuannya  membentuk kompleks  dengan  protein  dan  merusak membran  sel  dengan  cara  mendenaturasi ikatan  protein  pada  membran  sel,  sehingga membran  sel  menjadi  lisis  dan  senyawa tersebut menembus kedalan inti sel menyebabkan jamur tidak berkembang (Harmita, 2006; Sulistyawati dkk, 2009).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  kulit  batang  rambutan (Nephelium  lappaceum L.) memiliki  aktivitas antijamur  terhadap Candida  albicans dan peningkatan  konsentrasi  10%,  20%,  40%  dan 80%  pada  ekstrak  etanol  sampel  basah  dan sampel kering kulit batang rambutan (Nephelium  lappaceum L.)  diikuti  dengan adanya  penambahan  diameter  zona  hambat pada setiap variasi konsentrasi.

## SARAN
Setelah  dilakukan  penelitian  uji  aktivitas antijamur  terhadap Candida  albicans, maka dapat  disarankan  bahwa  perlu  dilakukan penelitian lebih lanjut ke arah isolasi senyawa aktif dari kulit batang rambutan (Nepheliumlappaceum L.).

## DAFTAR PUSTAKA
Biesher.  1983.  Microbiology  in  Practice. Individualized  Introduction  for  The  Allied Heath  Science.  3rd  ed.  Harper  and  Row Publisher. New York
Carter,  G.R.  and  J.R.  Cole,  Jr.  1990.
Diagnostic Procedures in Veterinary Bacteriology  and  Micology.  5th  ed. Academic Press. Inc. San Diego California.
108-123
Dalimartha,  Setiawan.  2003.  Atlas  Tumbuhan Obat  Indonesia.  Jilid  III.  Trubus Agriwidya: Jakarta.
Departemen  Kesehatan. 1988.  Inventaris  Obat Indonesia  Jilid  I.  Badan Penelitian  dan Pengembangan  Kesehatan.  Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Departemen Kesehatan. 1986. Sediaan Galenik.  Departemen  Kesehatan  Republik
Indonesia.
Dewi, K.F. 2010.Aktivitas Antibaketri Ekstrak
Etanol Buah Mengkudu (Morinda citrifolia L.)Terhadap  Baketri  Pembusuk  Daging
Segar.  [skripsi].  Jurusan  Biologi  FMIPA
Universitas Sebelas Maret. Surakarta.
GozaliDolih, Rusmiati, D. danUtama, P. 2009. FormulasidanUjiStabilitasMikroemulsiKeto konazoleSebagaiAntijamurCandida albicansdanTricophytonmentagrophytes. Farmaka. 7(2)
Hariana,  A.    2008.  Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya  Seri  3. Penebar  Swadaya. Jakarta
Hermawan,  A.,  Hana,  E.,  dan  Tyasningsi,  W. 2007.  Pengaruh  Estrak  Daun  Sirih  (Piper betle L.) Terhadap Pembuhanrtu Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan  Metode  Difusi  Disk.  Fakultas
Kedokteran  Hewan  Universitas  Airlangga. Surabaya
Kurniawan, J.A. 2009. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak  Rimpang  Binahong  (Anredera cordifolia(Tenore)  Steen)  Terhadap  Jamur
Candida
albicansserta
Skrining
Fitokimianya.[skripsi]    Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Mutschler,  E.  1991.  Dinamika  Obat.  ITB. Bandung.
Rostinawati, T. Sulistyaningsih., danAriani, D. 2009. Penentuan  Fraksi  Aktif  Ekstrak Metanol Daun Sukun (Artocarpus communis Forst.)  Sebagai  Penghambat Pertumbuhan Candida
albicansdan
Microsporum gypseum. Farmaka. 7(3). Sulistyawati,  D.  dan  Mulyati,  S.  2009.  Uji Aktivitas  Antijamur  Infusa  Daun Jambu Mete (
Anacardium
occidentale, L.)  Terhadap Candida albicans. Biomedika.2(1)
Tan,  H  dan  Rahardja,  K.  2002.  Obat-Obat Penting. PT. Elex Media Komputindo. Jakarta