UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSRTRAK LUMUT HATI ( Marchantia polymorpha )
[Antioxidant Activity Assay of Liverworts ( Marchantia polymorpha ) Extract]
Nurhaeni 1 , Gladys 1* , Jaya Hardi 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
*)Coresponding author: gladyspatoki@gmail.com
Diterima 6 Desember 2019, Disetujui 29 Desember 2019

## ABSTRACT
The  research  is  about  antioxidant activity  of  the  liverworts  ( Marchatia  polymorpha )  extract  based  on the  level  of  a  polar  solvent.  This  research  was  done  by  maceration  of  liverworts  by  using  n-hexane, ethyl acetate and ethanol solvent. The n-hexane, ethyl acetate, and ethanol fraction  were tested the antioxidant activity by using DPPH method. The result was obtained for antioxidant activity (IC 50 ) on n- hexane  extract,  ethyl  acetate,  ethanol  and  vitamin  C  is  1065.33  ppm,  1326.52  ppm,  1876.11  ppm, and  13.45  ppm,  respectively.  The  liverworts  extract  was  identified  contains  secondary  metabolites compounds of flavonoid, tannins, polyphenol, alkaloid, and steroid.
Keywords: Liverwort extract, antioxidant, IC 50

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang aktivitas  antioksidan  ekstrak  lumut  hati  ( Marchantia  polymorpha ) berdasarkan  tingkat  kepolaran  pelarut.  Penelitian  ini  diawali  dengan  ekstraksi  lumut  hati  secara maserasi  bertingkat  menggunakan  3  macam  pelarut  meliputi  n-heksan,  etil  asetat  dan  etanol. Ekstrak  n-heksan,  etil  asetat  dan  etanol  diuji  aktivitas  antioksidannya  dengan  metode  DPPH.  Hasil yang diperoleh untuk aktivitas antioksidan (IC 50 ) pada ekstrak n -heksan, etil asetat, etanol dan vitamin C  masing –  masing  1065,33  ppm,  1326,52  ppm,  1876,11ppm,  13,45  ppm. Pada  ekstrak  lumut  hati teridentifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  golongan  flavonoid,  tanin  dan  polifenol,  alkaloid  dan steroid.
Kata Kunci : Lumut hati,  antioksidan, IC 50.

## LATAR BELAKANG
Lumut  merupakan  tumbuhan  tingkat
rendah
yang dapat beradaptasi
dilingkungan  basah  dan  kering,  seperti Indonesia    dan  dapat  (Saputra,  2013). Tumbuhan epifit ini yang banyak ditemukan tumbuh  di  batang  pohon,  kayu  mati,  kayu lapuk, tanah, atau batuan, dengan penyinaran yang cukup (Windadri, 2009).
Lumut berpotensi dimanfaatkan sebagai bahan obat-obatan karena dilaporkan  mengandung  senyawa  aktif metabolit  sekunder.  Krisnayana et  al.
(2010), melaporkan bahwa lumut mengandung  senyawa  aktif  metabolit sekunder  yang  dapat  digunakan  sebagai senyawa  antibakteri,  antifungi,  antitumor dan antikanker. Pengujian aktifitas antibakteri  pada  lumut Oktoblepharum albidium dapat menghambat bakteri S.epidermis dan P.aeruginosa .
Penghambatan yang terjadi terhadap bakteri dipengaruhi oleh adanya kandungan  senyawa  metabolit  sekunder (Wiwid et al., 2014). Kemampuan antibakteri  pada  lumut  ditentukan  oleh keberadaan  senyawa  bioaktif  yang  ada  di dalamnya seperti alkaloid, flavonoid, polifenol, saponin dan terpenoid (Fadhillah, 2010).   Berdasarkan  penelitian  senyawa tersebut,  lumut  juga  berpotensi  sebagai antioksidan.    Antioksidan    merupakan senyawa  pemberi  elektron  pada  senyawa yang memiliki elektron yang tidak berpasangan  (radikal  bebas).  Antioksidan dapat  meredam  atau  mengurangi  dampak negatif radikal bebas dengan cara
mengikatnya  lalu    mengubahnya  menjadi tidak berbahaya bagi tubuh.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan    dasar    yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  lumut  hati Marchantia polymorpha yang diperoleh dari kabupaten sigi,  kecamatan  kulawi,  desa  bulutono. Bahan-bahan  lain  yang  diperlukan  yaitu metanol teknis, n -heksan teknis, etil asetat teknis,  etanol  teknis,    akuades,  aluminum foil,  kertas  saring,  vitamin  C,  DPPH  ( 1,1 - difenil-2-pikrilhidrazil) ,  serbuk  Mg,  HCl pekat  (Merck),  FeCl 3 (Merck),  kloroform (Merck),  anhidrida  asam  asetat  (Merck) dan H 2 SO 4 pekat (Merck).
Peralatan  yang  digunakan  yaitu  : neraca  analitik,  blender,  pipet  mikro, corong  buchner,  corong  pisah,  kuvet, spektrofotometer UV-Vis ( Perkinelmer ) seperangkat alat rotary vakum evaporator.

## Prosedur Penelitian

## Preparasi Sampel
Sampel  lumut  hati  dalam  keadaan segar, dibersihkan menggunakan air bersih,  kemudian  dikeringkan  pada  suhu ruang  sampai  kering,  dan  selnjutnya dihaluskan  menggunakan  blender  serta diayak menggunakan ayakan 60 mesh.
Tahap  eksraksi  lumut  hati  dengan metode maserasi (Lisnawati, 2014 )
Eksraksi  dilakukan  menggunakan metode maserai secara bertinggkat dengan  menggunakan  tiga  jenis  pelarut. Eksraksi  pertama  digunakan  pelarut  n-
Heksan  dengan  cara  menimbang  tepung lumut  hati  sebanyak  100  g,  kemudian dimasukan  kedalam  elenmeyer  1000  ml lalu  ditambahkan  1000  ml  n-heksan campuran  disimpan  selama  48  jam  sambil sesekali diaduk, kemudian disaring dengan penyaring  vakum.  Filtrat  yang  diperoleh pelarutnya dipisahkan dengan rotary vakum  evaporator  sehingga  didaptkan eksrak  kental  lumut  hati.  Residu  yang diperoleh  dikeringkan,  dan  selanjutnya dimasukan dalam elenmeyer untuk dieksrak kembali dengan pelarut etil asetat dan  kemudian  pelarut  etanol  dengan perlakuan yang sama pada eksrak menggunakan n-heksan
Uji Golongan Senyawa Secara Kualitatif (Harborne, 1987).

## 1.  Uji Flavonoid
Sebanyak  1  ml  sampel  ditambahkan 0,5  gram  serbuk  magnesium  dan  10  tetes HCl pekat (pereaksi shinoda), bila bereaksi positif akan menghasilkan larutan berwarna jingga, merah muda atau merah.
2.  Uji Polifenol dan Tanin
1  ml  sampel  ditambahkan  10  tetes larutan FeCl 3 1% bila bereaksi positif akan menghasilkan  warna  hijau,  merah,  ungu, biru atau hitam yang kuat.

## 3.  Uji Alkaloid
Sebanyak  1  ml  sampel  ditambahkan 2-3 tetes pereaksi Dragendorf, bila bereaksi positif akan menghasilkan endapan merah jingga .
4.  Uji Steroid / Triterpenoid
Sebanyak  1  ml  sampel  ditambahkan 2-3  tetes  kloroform  lalu  ditambahkan
anhidrida  asam  asetat  dan  5  tetes  asam sulfat  pekat,  bila  bereaksi  positif  akan menghasilkan  larutan  berwarna  biru  atau hijau.

## Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan
Menggunakan  Metode  DPPH  (Zuhra  et al., 2008).
Ekstrak  n-heksan,  etil  asetat  dan etanol masing - masing ditimbang sebanyak 25 mg dan dimasukkan kedalam labu  ukur  25  mL  kemudian  dilarutkan dengan metanol dan dicukupkan volumenya sehingga diperoleh konsentrasi
1000 ppm. Kemudian dilakukan pengenceran dengan menambahkan metanol sehingga diperoleh sampel dengan  konsentrasi  (10,  30,  50,  70,    dan 90  ppm).  Untuk  penentuan  aktivitas antioksidan  masing-masing  konsentrasi dipipet  sebanyak  0,2  ml  larutan  sampel dengan  pipet  mikro  dan  dimasukan  ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan  3,8  ml  larutan  DPPH  50  µM. Campuran  dihomogenkan  dan  dibiarkan selama  30  menit  ditempat  gelap,  serapan diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm. Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh besarnya hambatan serapan radikal DPPH melalui  perhitungan  persentase  inhibisi serapan  DPPH  dengan  menggunakan rumus :
% Inhibisi= -
Keterangan: Abs. Kontrol  = Absorban DPPH 50 µM Abs. Sampel  = Absorbansi Sampel Uji
Nilai IC 50 masing-masing konsentrasi sampel  dihitung  dengan  menggunakan rumus  persamaan  regresi  linier.  IC 50 adalah bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang mampu menghambat aktivitas suatu radikal sebesar  50%  Untuk  menentukan  IC 50 , diperlukan  persamaan  kurva  standar  dari % inhibisi sebagai sumbu y dan konsentrasi  fraksi  antioksidan  sebagai sumbu  x.  IC 50 dihitung  dengan  cara memasukkan nilai 50% ke dalam persamaan kurva standar sebagai sumbu y kemudian dihitung nilai x sebagai konsentrasi IC 50.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Lumut Hati
Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak  polar  dan  lumut  hati  memiliki kandungan  flavonoid  dan  tannin  serta polifenol  (Tabel  1).  Kandungan  flavonoid dan polifenol diasumsikan mampu menghasilkan aktvitas antioksidan.
Tabel 1 Hasil uji fitokimia ekstrak lumut hati
No Golongan Senyawa Ekstrak n - Heksan Etil Asetat Etanol 1 Flavonoid - - + jingga 2 Tanin & Polifenol - + merah + merah 3 Alkaloid + Endapan merah jingga + Endapan merah jingga + Endapa n merah jingga 4 Steroid + Hijau pekat + Hijau pekat + Hijau pekat
Keterangan : (+)  : Teridentifikasi (-)  : Tidak teridentifikasi
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Lumut Hati
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan  dengan  penentuan  %  inhibisi ekstrak n- heksan,  etil  asetat  dan  etanol pada  masing –masing  konsentrasi  yaitu  10 ppm  ;  30  ppm  ;  50  ppm  ;  70  ppm  dan  90 ppm.  Nilai  inhibisi  tertinggi  masing – masing  untuk  pelarut n- heksan,  etil  asetat dan  etanol  yaitu  6,26  %;  8,23%  ;  dan 13,92% (Gambar 1).
Perbandingan dari ketiga jenis pelarut  yang  digunakan  dalam  proses ekstraksi mempengaruhi aktivitas antioksidan yang diperoleh. Hasil ekstraksi menggunakan  tiga  jenis  pelarut  yang memiliki  tingkat  kepolaran  yang  berbeda- beda, akan menghasilkan rendemen eksrak yang berbeda pula (Nurjanah et al. , 2012).    Soeksmanto et  al. (2007), menyatakan  bahwa  penggunaan  pelarut yang berbeda tingkat kepolaran mempengaruhi jenis senyawa yang terekstrak.
Hasil yang diperoleh diketahui bahwa pada penggunaan pelarut etanol menunjukkan  nilai  IC 50 paling  kecil,  yaitu 1065,33  ppm  atau  dengan  kata  lain memiliki  aktivitas  antikoksidan  yang  lebih tinggi  dibandingkan  fraksi  etil  asetat (1326,52  ppm)  dan  n-heksan  (1876,11 ppm).  Hal  ini  terjadi  karena  di  dalam eksrak  etanol  lumut  hati  mengandung senyawa  flavonoid  dan  polifenol  yang bersifat  polar  yang  memiliki  kemampuan menangkal  radikal  bebas  karna  memiliki gugus (-OH).
Gambar 1  Kurva Hubungan Konsentrasi
ekstrak  n-heksan  (a),  etil  asetat  (b), etanol  (c),  dan  Vitamin  C  (d) Terhadap Persentase  Inhibisi.
Asakawa, 2007 dalam Fadhilla, 2012 melaporkan sebagian besar lumut marchantia kaya akan senyawa fenolik dan terpenoid terutama jenis mono, sesqui, dan diterpenoid, senyawa-senyawa lipofilik
aromatis  (bibenzil,  bisbibenzil,  benzoad, sinamat, alkil fenol rantai panjang, naftalen, isokumarin) dan asetogenin umumnya senyawa-senyawa tersebut larut dalam pelarut organic yang bersifat polar.
Jika  dibandingkan  nilai  IC 50 pada pembanding  asam  askorbat  dengan  nilai IC 50 ekstrak  etanol  yang  diperoleh,  dapat diketahui  bahwa  nilai  IC 50 asam  askorbat 13,45  ppm.  Hal  ini  menandakan  bahwa sifat  antioksidan  senyawa  bioaktif  yang terkandung  dalam  eksrak  lumut  hati bersifat  sangat  lemah  jika  dibandingkan dengan asam askorbat.
Menurut  penelitian  Nurjanaj et  al.
(2012)  mengenai  aktivitas  antioksidan  dan komponen  bioaktif  semanggi  Air  (marsilea crenata)  dengan  menggunakan  pelarut klorofom,  etil  asetat  dan  metanol  nilai  IC 50 masing – masing ekstrak sebesar 1285,39 ppm;  915,03  ppm  dan  634,73  ppm. Sedangkan menurut penelitian yang dilakukan  oleh  Tristanto et  al. (2014) tentang  optimalisasi  pemanfaatan  daun lamun (thalassia hemprichii) Sebagai sumber  antioksidan  alami  pada  pelarut  n- heksan  dan  etil  asetat  nilai  IC 50 masing- masing ekstrak sebesar 139,50 ppm; 25,98 ppm.  Dan  menurut  penelitian  Azkiyah (2013)  tentang  isolasi  senyawa  aktif antioksidan dari Fraksi n-heksana tumbuhan  paku  memiliki  nilai  IC 50 38,701 ppm.  Hasil  penelitian  tersebut  lebih  baik dibandingkan  uji  aktivitas  antioksidan antioksidan  ekstrak  lumut  hati  ( Marchantia polymorpha ).
y = 0.0244x + 4.2227
R² = 0.9178 0 2 4 6 8 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % in hi bi s i konsentrasi (ppm) y = 0.0336x + 5.4292 R² = 0.9617 0 2 4 6 8 10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % in hi bi s i konsetrasi (ppm) y = 0.0371x + 10.476 R² = 0.9899 0 5 10 15 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % in hi bi s i konsentrasi (ppm) y = 3.3584x + 4.8069 R² = 0.9817 0 5 10 15 20 25 30 0 5 10 % in hi bi s i konsentari (ppm) (a) (b) (c) (d)
Blois  (1985)  dalam Molyneux  (2004) menyatakan  bahwa  aktivitas  antioksidan dapat  dibagi  menjadi  beberapa  kategori yaitu sangat kuat, kuat, sedang, lemah dan sangat lemah. Antioksidan dikatakan sangat  kuat  apabila  memiliki  nilai  IC 50 kurang  dari  50  ppm,  antioksidan  kuat memiliki  nilai  IC 50 berada  pada  kisaran  50 ppm  hingga  100  ppm,  antioksidan  sedang memiliki nilai IC 50 berkisar antara 100 ppm hingga  150  ppm,  antioksidan  lemah memiliki kisaran 150 ppm hingga 200 ppm dan  antioksidan  dikatakan  sangat  lemah apabila  memiliki  nilai  IC 50 lebih  dari  200 ppm.

## KESIMPULAN
Senyawa  metabolit  sekunder  yang teridentifikasi  dalam  ekstrak  kasar  lumut hati  yakni  flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan polifenol,  steroid.  Nilai  IC 50 eksrak  etanol, etil asetat dan n-heksan lumut hati masing- masing  diperoleh  1065,33  ppm,  1326,52 ppm,  1876,11ppm.  Ketiga  ekstrak  ini tergolong  antioksidan  sangat  lemah.  Jadi, dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  lumut  hati tidak  berpotensi  sebagai  antioksidan.  Dari pengujian  fitokimia  eksrak  lumut  hati diketahui  dari ketiga  ekstrak  bersifat  polar, semi polar, dan nonpolar.

## DAFTAR PUSTAKA
Azkiyah.  2013.  Isolasi    senyawa  aktif antioksidan  dari  fraksi  n-heksan tumbuhan  paku. Skripsi .  Jakarta: Fakultas kedokteran dan ilmu kesehatan. UIN.
Fadhilla,  R.  2010.  Aktivitas  Antimikroba Ekstrak Metanol Lumut Hati ( Marchantia paleacea ) Terhadap
Bakteri  Patogen  Dan  Pembusuk Makanan. Tesis. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Harborne  J.B.  1987. Metode  Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis tumbuhan. Ed. II. Diterjemahkan oleh Padmawinata  K,  Sudiro  I.  Bandung:
Institut Teknologi Bandung. 1978.hlm. 3-15.
Krisnayana,  MP,  Putra,  IP,  Putra  dan Rahayu,  AT.  2010. Potensi  Lumut Sebagai  Zat  Antimikroba ,  Bogor:
Institut Pertanian Bogor.
Lisnawati,  2014.  Aktivitas  Antioksidan
Ekstrak Daun Kelor ( Moringa olefera  L .)  dari  Berbagaitingkat Kepolaran  Pelarut. Skripsi .  Palu: FMIPA
Kimia. Universitas
Tadulako.
Molyneux, P. 2004. The Use Of The Stable Free  Radical    Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)  for  Estimating  Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci.
Technol., 26(2): 211-219.
Nurjanah.,  Azka,  A.,  Abdullah,  A.  2012.
Aktivitas  antioksidan  dan  komponen bioaktif semanggi air ( Marsilea renata). Asian  Journal  of  Innovation and Entrepreuneurship, 1(3) .
Saputra,  A.  2013.  Identifikasi  Lichen  di Kebun  Raya  Bukit  Sari  Kabupaten Tebo  Provinsi  Jambi. Skripsi. Jambi: FKIP Universitas Negeri Jambi.
Soeksmanto, A. Hapsari, Y. dan Simanjuntak,  P.    2007.  Kandungan
Antioksidan  pada  Beberapa  Bagian Tanaman  Mahkota  Dewa,  Phaleria macrocarpa
(Scheff)
Boerl. (Thymelaceae ). Biodiversita ,  8(2):
92-95
Tristanto, R., Putri, M A., A.D, Situmorang,
A  P.,  Suryanti.  2014.  Optimasi
pemanfaatan  daun  lamun  Thalasia Hemprichii sebagai
sumber antioksidan  alami. Jurnal  Saintek Perikanan, 10(1) : 26-29.
Widyana, W., Khotimah, S.,Lovadi, I. 2014. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Lumut
Octoblepharum albidium Hedw terhadap Pertumbuhan Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas
aeruginosa.
Protobiont, 3(2): 166-170.
Windadri,  F.I.  2009.  Keanekaragaman Lumut  Pada  Marga  Pandanus  Di
Taman Nasional Ujung Kulon,
Banten. Jurnal  Natur  Indonesia . 11(2): 89-93
Zuhra,  C.F,  Tarigan,  JBT.,  Sihotang,  H. 2008.  Aktivitas  antioksidan  senyawa flavonoid  dari  daun  katuk (souropus androgunus  (L)  merr).  Jurnal  Biologi
Sumatra , 3(1): 7-10.