## THE RESPONSE OF CANDIDA ALBICANS AGAINTS RED FRUCTUS PIPER SP

## Ester Rampa
Dosen Program Studi Analis Kesehatan Fakultas Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Sains dan Teknologi Jayapura

## Abstrak
There has been done a research about respons of Candida albicans against red fructus Piper  Sp  extract  by  invitro  at  Microbiology  Laboratory,  Department  of  Biology,  Faculty  of Mathematics  and  Natural  Sciences  on  September  2012.    This  study  aims  to  determine  the inhibitory  effects  of  red  fructus  Piper  Sp  against  fungus  Candida  albicans,  as  well  as  the most  effective  concentration  of  red  fructus  Piper  Sp  that  has  the  highest  inhibition  against fungus Candida albicans. Population in this research were all kinds of betel, and the samples are  red  fructus  Piper  Sp.  The  method  used  is  a disk  diffusion with  a  concentration  of  10%, 5%,  2.5%  and  Fluconazole  control,  the  parameters  measured  were  the  inhibition  zone  or clear  zone.  The  study  design  used  was  a  completely  randomized  design  (CRD), When  the variance  analysis  showed Fhit>  of  F.  Tabs  with  α.05  and  α  .01,  then  followed  by  HSD (Honestly significant difference)  test. The results show extracts of red fructus Piper Sp can inhibit the growth of the fungus Candida albicans. The most effective concentration to inhibit the growth of Candida albicans is the concentration of 10% with a 17.42 mm inhibition zone on the  Red fructus Piper Sp.
Keywords : Candida Albican,   Red fructus Piper Sp, Inhibition.

## 1.   PENGANTAR
Penyakit  infeksi  adalah  penyakit  yang disebabkan  oleh  mikroorganisme,  misalnya virus,  bakteri,  protozoa,  cacing,  dan  jamur. Salah  satu  yang  sering  menyebabkan  penyakit pada  manusia  adalah  infeksi  jamur.  Kandidiasis adalah  penyakit  jamur  yang  mengenai  kulit, kuku,  selaput  lendir  (mulut,  vagina,  dan  usus) dan  alat  dalam  yang  disebabkan  oleh  banyak spesies kandida. Penyakit ini terdapat di seluruh dunia,  menyerang  semua  umur  baik  laki-laki maupun perempuan, telah diidentifikasi sebanyak  150  species  kandida  dan  paling banyak  menginfeksi  pada  manusia  sebesar  70 %  disebabkan  oleh Candida  albicans dan sisanya  jenis  kandida  yang  lain,  (Kuswadji, 1999).
Insidensi kandidiasis di Indonesia dilaporkan tahun 2003 sekitar 85  sampai 90% , jenis kandida yang paling banyak ditemukan dan mempunyai  prevalensi  yang  tinggi  adalah Candida  albicans yaitu  sekitar  81%  pada  organ genital  utamanya  vagina,  16  % Torulopsis glabarata,  dan sisanya  3%  disebabkan  oleh Candida  tropicalis,  ,  Pseudotropicalis,  Candida crusei, dan Candida  stellatoidea .  Tingginya
prevalensi oleh Candida albicans dapat disebabkan  karena  jamur  ini    menginfeksi berbagai  organ  tubuh  baik  pada  permukaan tubuh  bagian  luar  maupun  organ  dalam  tubuh manusia(Darmani, 2003).
Candida  albicans adalah  jamur  komensal yang  secara  normal  hidup  di  mukosa  manusia maupun  hewan.  Kandida  adalah  anggota  flora normal  terutama  saluran  pencernaan,  juga selaput  mukosa  saluran  pernafasan,  vagina, uretra,  kulit,  dan  di  bawah  jari-jari  kuku  tangan dan  kaki.  Di  tempat-tempat  ini  kandida  dapat menjadi  dominan  dan  menyebabkan  keadaan- keadaan  patologik  ketika  daya  tahan  tubuh menurun  baik  secara  lokal  maupun  sistemik. Dilaporkan  juga  bahwa  kandida  menyebabkan penyakit sistemik progresif pada  penderita  yang lemah  atau  bersistem  imum  rendah  maupun terganggu.  Kandida  dapat  menimbulkan  invasi dalam  aliran  darah,  tromboflebitis,  endocarditis, infeksi  pada  mata  spaderta  dapat  juga  dijumpai pada  organ-organ  lain  bila  menggunakan peralatan  medis  yang  tidak`  steril    secara intravena (kateter, jarum, hiperalimentasi, penyalahgunaan  narkotika,  dan  sebagainya, (Jawetz dkk , 2008).
Pengobatan terhadap penyakit yang disebabkan  oleh  jamur  (Mikosis)  selama  ini dilakukan dengan cara kimia menggunakan anti jamur  dan  juga  dengan  menggunakan  obat tradisional.  Perkembangan  obat  anti  jamur masih  terbatas,  berbeda  dengan  anti  bakteri berkembang  pesat,  hal  ini  ditunjukkan  dengan diproduksinya berbagai macam obat anti bakteri setiap tahun (Siswandono, Soekardjo,1995).
Keputusan Menteri Kesehatan No 381/2007 tentang anjuran penggunaan obat-obat tradisonal  secara  alamiah (Back  to  Nature) . Tumbuhan  obat  tradisional    menjadi  sumber pengobatan yang efektif di kalangan masyarakat utamanya  yang  tinggal  di  kampung-kampung dan  ekonomi  lemah.    Sekitar  80%  dari  populasi manusia di dunia,masih menggunakan tanaman sebagai  pengobatan  tradisional.  Salah  satu tanaman yang digunakan sebagai obat tradisional, bahkan sudah dikomersialkan dalam berbagai produk adalah tanaman sirih khususnya ekstrak daun sirih (Piper sp).
Selama  ini  telah  dilakukan  penelitian tentang penggunaan daya hambat ekstrak daun sirih  terhadap    penyebab  infeksi  (bakteri), bahkan saat ini telah dibuat ekstrak obat kumur, pasta  gigi,  dan  ekstrak  pembersih  organ  genital wanita. Namun penelitian terhadap ekstrak buah sirih sendiri belum pernah diuji coba, oleh sebab itu  penulis  tertarik  untuk  melakukan  penelitian ekstrak  buah  sirih  merah  yang  tumbuh  liar  dan merupakan  tanaman  endemik  di  Papua.  Buah sirih  merah  merupakan  sirih  yang  sangat  unik yaitu  daunnya  hijau  seperti  sirih  hijau  namun buahnya  berwarna  merah.  Sampai  saat  ini belum diketahui dengan pasti khasiatnya karena data  mengenai  khasiat  dan  kandungan  bahan aktifnya belum diketahui dengan pasti. Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  penulis  tertarik untuk  melakukan  penbelitian  tentang  ekstrak buah sirih merah terhadap pertumbuhan Candida albicans dengan metode difusi disk. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui daya hambat ekstrak buah sirih merah terhadap jamur Candida albicans serta mengetahui  konsentrasi  ekstrak  buah  sirih merah  yang paling efektif menghambat Candida albicans.

## 2.  METODE PENELITIAN
Penelitian ini  dilaksanakan di Laboratirum Mikrobiologi Jurusan Biologi F.MIPA-
Universitas  Cenderawasih  Jayapura  selama  10 bulan.  Material  penelitian    adalah  DMSO  yang berperan menarik semua bahan aktif dari dalam jaringan  jaringan  tanaman,  ekstrak  buah  sirih merah,  disk  blacnk,  dan  media Saboroud Dextrose Agar (SDA). Konsentrasi yang digunakan  menurut  Hermawan  dkk(2007)  yang dimodifikasi  adalah  K3(10%)  :  0.5  ml  ekstrak
buah sirih merah + 4.5 ml DMSO 10%, K2(5%) : 0.25  ml  ekstrak  buah  merah  +  4.75  ml  DMSO 10%,  dan  K1(2.5%)  0.125  ml  ekstrak  buah  sirih merah + 4.875  ml DMSO 10% dan (K0) kontrol flukonasol.
Metode  kerja  yang  digunakan  adalah metode  difusi  disk,  disk  blanck  direndam kedalam  setiap  konsentrasi  ekstrak  buah  sirih selama  10  menit.  Setelah  10  menit  disk  diambil dengan  pinset  kemudian  diletakkan  ditengah media Saboroud  Dextrose  Agar pada  cawan petri  yang  telah  diinokulasi  dengan  jamur C. Albicans secara  taburan  dengan  menggunakan ose  bengkok,  selanjutnya  diinkubasi  selama  24 jam  pada  suhu  37 o C.  Parameter  yang  diamati dan  diukur  adalah  adanya  sona  hambat  atau bening,  pengukuran  diameter  zona  hambat dengan menggunakan jangka sorong.
Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  setiap perlakuan  diulang  4  kali  dan  analisis  lanjut dengan menggunakan BNJ      α 0.01 ( Stell dan Torrie 1991).

## 3.  HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengujian  respons Candida  albicans terhadap  ekstrak  buah  sirih  merah    secara invitro dengan 3 konsentrasi dalam dimetyl sulfo poksida  (DMSO)  menunjukkan  bahwa  semua konsentrasi  ekstrak  buah  sirih  merah,  dan kontrol  fluconazol  dapat    memberikan  respons positif  terhadap pertumbuhan Candida albicans ( gambar  3.1).
Gambar  3.1  Zona  hambat  ekstrak  buah  sirih  merah terhadap  jamur Candida  albicans pada konsentrasi K3,K2,K1, dan K0
Tabel 3.1 di bawah ini menunjukkan rata- rata  diameter  sona    hambat  ekstrak  buah  sirih merah    terhadap Candida  albicans setelah
dinokulasi  24  jam  pada  medium Saboroud Dexrtose Agar ( SDA).
Tabel 3.1 Rata-rata diameter (mm) zona hambat ekstrak  buah  sirih  merah      terhadap Candida albicans
Keterangan : K1 = Kosentrasi 2.5% K2 = Konsentrasi 5% K3 = Konsentrasi 10% K0 = Kontrol Fluconazol (25 µm)
Tabel 3.1 menunjukkan rata-rata diameter zona  hambat ekstrak buah sirih merah terhadap Candida  albicans yaitu  pada  konsentrasi  2.5% dengan  zona  hambat  14.61  mm,  konsentrasi  5 %  dengan  zona  hambat  14.70  mm,  konsentrasi 10%  dengan  zona  hambat  17.42  mm,  dan kontrol    menggunakan  flukonazol  dengan  zona hambat  8.48  mm.  Rata-rata  zona  hambat  yang dihasilkan menunjukkan bahwa semua perlakuan konsentrasi memberikan zona hambat  yang  berbeda  dalam  menghambat pertumbuhan Candida albicans .
Tabel 3.2. Analisis Ragam Ekstrak Buah Sirih Merah Terhadap 5 Candida albicans
Tabel  3.2  di  atas  menunjukkan  analisis ragam ekstrak buah sirih merah pada taraf nyata α  0.05  dan  α  0.01  dengan  derajat  bebas  3  dan 12,  pada  tabel  F  diperoleh  nilai  5.95  dan  3.49 nilai  tersebut  menunjukkan  hasil  perlakuan sangat  signifikan,  maka  dilakukan  uji  lanjut dengan  menggunakan  uji  beda  nyata  jujur (BNJ),  untuk  mengetahui  konsentrasi  yang paling efektif.

## 4.  Pembahasan.
Uji  lanjut  dengan  menggunakan  uji  nyata jujur  (  BNJ)    pada  taraf  nyata  α  0.01  dilakukan untuk  mengetahui  perbedaan  respons    ekstrak buah  sirih  merah  yang  paling  efektif  terhadap Candida albicans (tabel 436).
Tabel  3.3  Beda  rata-rata  dua    konsentrasi perlakuan ekstrak buah sirih merah terhadap C. albicans dengan BNJ α 0,01
Tabel  3.3  di  atas  menunjukkan  semua perlakuan konsentrasi ekstrak  buah sirih merah berbeda  nyata  dengan  control,  ini  menunjukkan bahwa ekstrak buah sirih merah dapat menghambat  pertumbuhan Candida  albicans , jika dibandingkan dengan kontrol yang menggunakan fluconazole.
Konsentrasi  ekstrak  buah  sirih  merah pada  K1  (2,5  %)  dan  K2  (5  %)  secara  statistik tidak  terdapat  perbedaan  secara  bermakna  hal ini  disebabkan    penyebaran  senyawa  aktif  di dalam  media  bedanya  sangat  kecil  sehingga pengaruhnya terhadap pertumbuhan C. albicans tidak    jauh  berbeda.    Konsentrasi  ekstrak  buah sirih  merah  pada  K3  (10  %)  secara  bermakna berbeda  nyata  dengan  K1  (2,5  %),  K2  (5  %), dan  K0  (kontrol).          Adanya  perbedaan  zona hambat antar perlakuan kemungkinan disebabkan  semakin  tinggi  konsentrasi    ekstrak buah sirih merah yang digunakan semakin besar senyawa  aktif  yang  terkandung  di  dalamnya, sehingga semakin besar zona hambatnya untuk menghambat  pertumbuhan C.  albicans (Grafik 4.2).
Keterangan : K1 = Kosentrasi 2.5%
K2 = Konsentrasi 5%
K3= Konsentrasi 10% K0 = Kontrol Fluconazol (25 µm) Garis Merah  = Buah Sirih Merah
Menurut  Depkes  (1988)  dan  Hermawan (2007)  bahwa  zona  daya  hambat  yang  masih sensitif  adalah  12-24  mm,  hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  buah  sirih  merah  juga  dapat digunakan  untuk  mengobati  penyakit  jamur terutama  yang disebabkan  oleh Candida albicans dengan    zona  hambat  14.61 –  17.42 mm  karena  zona  hambatnya  terdapat  diantara zona hambat yang dianjurkan.
Hermawan  (2007)  melaporkan  hasil penelitiannya  tentang  pengaruh  ekstrak  daun sirih  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  yang digunakan  zona  hambatnya  semakin  besar.  Hal ini  sama  yang  dilaporkan  oleh  Gholib  dan Kusumaningtyas (2008) mengenai daya hambat ekstrak daun sirih terhadap jamur Trychophyton mentagrophytes yaitu semakin
besar
konsentrasi  yang  digunakan,  maka    zona hambatnya semakin besar.
Damayanti dan
Mulyono (2008)
melaporkan  bahwa  aktivitas  anti  cendawan diduga berasal dari minyak atsiri daun sirih yaitu isoeugenol,  limonene, β-pinen  dan  kariofilena. Minyak  atsiri  dari  ekstrak  etanol  daun  sirih dilaporkan  mempunyai  aktifitas  anti  cendawan terhadap Candida  albicans. Meskipun  daun sirih  yang  menjadi  objek  penelitian  akan  tetapi buah  merupakan  modifikasi  batang  dan  daun sehingga kandungan minyak atsiri yang terdapat pada daun  juga  terdapat  pada buah. Hermawan dkk (2007)  melaporkan bahwa  karvakol  pada  daun  sirih  bersifat desinfektan  dan  anti  jamur  sehingga  dapat digunakan  sebagai  anti  septik.  Selain  karvakol pada  daun  sirih  juga  terdapat  eugenol  dan methyl-  euganol  dapat  digunakan  untuk  infeksi pada  gigi  atau  mengurangi  sakit  gigi.  Syukur dan  Hernani  (1999)  melaporkan  bahwa  selain karvakol,  dan  euganol –methyl  yang  terdapat pada  daun  sirih,    juga  terdapat  flavanoid, saponin  dan  tanin.  Menurut  Mursito  (2002), saponin  dan  tanin  bersifat  sebagai  antiseptik pada  luka  atau  infeksi  permukaan  baik  yang disebabkan  oleh  bakteri  maupun  jamur  baik sistemik maupun superfisialis.
Menurut  Pragoyo  dan  Sutaryadi  (1992) melaporkan bahwa aktivitas antimikroba disebabkan  oleh  kandungan  senyawa  kavibetol dan  kavikol  yang  mempunyai  daya  antiseptic yang sangat kuat (fungisidal). Minyak atsiri daun sirih  mengandung  senyawa  fenil  propane  yang dapat  mengganggu  aktivitas  enzim  protease, dimana  enzim  tersebut  sangat  dibutuhkan  oleh Candida  albicans untuk  mendegradasi  protein sehingga mengakibatkan metabolisme terganggu  dan  pertumbuhan  jamur  terhambat (Suhartini, 1991).
Menurut  Tjitrosoepomo  (2005)  bahwa dalam  daun  sirih  terkandung  minyak  atsiri kurang  lebih  30  %  fenol,  derivatnya  adalah
kavikol  dan  kavibetol  yang  bersifaf  antijamur yang  diduga      ada  di  dalam  buah  sirih,  namun kandungan    buah  sirih  merah  hingga  saat  ini belum  diperoleh  data  mengenai  senyawa  aktif yang  terkandung  di  dalamnya,  sehingga  perlu dilakukan  kajian  tersendiri  mengenai  buah  sirih merah.  Kartasapoetra  (1992)  melaporkan  daun sirih  antara  lain  mengandung  kavikol  dan kavibetol  yang  merupakan  turunan  dari  fenol yang  mempunyai  daya  antibakteri  lima  kali  lipat dari  fenol  biasa  terhadap Staphylococcus aureus .  Dimana  cara  kerja  fenol  dalam membunuh  mikroorganisme  yaitu  dengan  cara mendenaturasi  protein  sehingga  pertumbuhan jamur  terhambat  dan  mati  (Pelczar  dan Chan,1988).  Menurut  Ingram  (1981)  senyawa fenol  ini  diduga  membunuh  jamur  dengan  cara merusak  membrane  selnya,  hal  ini  akan berakibat terjadinya kebocoran sel yang ditandai dengan  keluarnya  makromolekul  seperti  protein dan  asam  nukleat  dari  dalam  sel  sehingga terjadi kematian sel.
Jabarsyah dkk (2008) melaporkan bahwa  senyawa  fenol  merupakan  antimikroba bekerja  meracuni  protoplasma  dengan  cara merusak dan menembus dinding sel menyebabkan  protein  sel  mikroba  rusak. Senyawa fenol juga dapat menonaktifkan  enzim di  dalam  sel  mikroba,  mengubah  tegangan permukaan,  merusak  permeabilitas  selektif  dari membrane sel.
Pemilihan  disk  floconazol  (25  µm) sebagai pembanding adalah karena ketersediaan  disk  anti  jamur  yang  sangat terbatas  dan  fluconazol  memiliki  spectrum antijamur yang luas, dan aktif terhadap Candida albicans,
Candida
tropicalis,
Candida parapsilosis namun tidak peka terhadap Candida krusei dan
Candida glabrata (Amelia,2011).  Fluconazol bekerja dengan cara mengganggu biosintesis ergosterol (sterol utama yang berfungsi mempertahankan
integritas membrane sel jamur) dengan menginhibisi  enzim  lausterol  14- α  demitilase sitokrom  P-450.  Enzim  esensial  dalam  sintesis ergosterol  membrane  sel  jamur  (  Neal,2005  ; Rushing, 2008).
Menurut Sukandar
dkk (2009), mekanisme  flukonazol  mempengaruhi  aktifitas cytochrome
P-450, menurunkan sintesa ergosterol  (sterol  utama  pada  membrane  sel jamur)  dan    menghambat    pembentukan membrane  sel.
Beberapa  sirih  yang  dapat  digunakan sebagai  obat  dijelaskan  secara  detail  mengenai ciri-ciri  morfologi  akar,  batang,  daun  dan  buah serta kandungan bahan aktifnya dan khasiatnya. Khusus  mengenai  buah  sirih  merah  tidak dijelaskan,  di  dalam  buku  tanaman  obat dijelaskan  manfaat  sirih  merah  tetapi  secara
morfologi  sangat  berbeda  dengan    buah  sirih merah.  Sirih  merah  daunnya  merah  hati  dan kecil,  tidak  berbuah  sedangkan    buah  sirih merah melekat pada pohon, daunnya menyerupai  sirih  hijau,  ukuran  buahnya  hampir sama yang membedakan adalah warna buahnya yang merah serta proses pembentukan warna  dari  hijau  menjadi  merah  tua  atau spesifik. Kemungkinan buah sirih merah merupakan tanaman endemik khas Papua, oleh sebab  itu  perlu  dikaji  secara    khusus  dari  segi taksonomi dan kandungan senyawa aktifnya.

## 5.  PUSTAKA
Amelia,S.2011. Obat Anti Jamur.
http://repository.USU.ac.id/handle/12345 6789/30412 .
Darmani. E. Herliyanti. 2003 . Hubungan antara pemakaian AKDR dengan kandidiasis Vagina di RSUD Dr. Pirngadi Medan . Damayanti,R. M dan Mulyono. 2008. Kasiat dan Mamfaat Daun Sirih . Agromedia
Pustaka. Jakarta
Departemen  Kesehatan.  1988. Investaris  Obat Indonesia  Jilid  1 .  Balai  Penelitian  dan Pengembangan Kesehatan. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Gholib Djaenudin,dan Kusumaningtyas 2007. Uji Daya Hambat Ekstrak Rimpang Lengkuas  Dan  Daun  Sirih  Terhadap Kapang  Dermatofit  Secara  In  Vitro
Dan In Vivo
Hermani  ,  S.  Yuliani,  1991. Peranan  Sirih Sebagai  Obat  Tradisonal ,  prosiding seminar sirih.  Jakarta. Hermawan A., Eliyani H., Tyasningsih W., 2007. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Sirih . (Piper betle L) Terhadap Pertumbuhan
Staphylococus aereus dan Esherichia coli dengan Metode Difusi Disk. Ingram C O. 1981. Mechanisme of Lysis of E. coli by Ethanol and Other Chaotropic Agents . J Bacterial 146: pp : 331-335 Jabarsyah, Rugian dan Arniati. 2008. Pengaruh Ekstrak Daun Sirih Terhadap Pertumbuhan Vibrio Sp . Jawetz, Melnick,
dan Adelberg. 2008. Mikrobiologi Kedokteran . Edisi 23,cetakan 1 Buku Kedokteran.
Jawetz, Melnick, dan Adelbergs. 2005. Mikrobiologi  Kedokteran .  Buku  2. Salemba Medika. Kartasapoetra,G.  1992. Budidaya  Tanaman Berkhasiat Obat . Rineka Cipta. Jakarta. Hal 25-26 Kuswadji,  Djuanda  Adhi,  Hamzah  Mochtar, Aisah Siti. 1999. Ilmu  Penyakit Kulit
Dan  Kelamin FK  UI.  Edisi  Ketiga .
Jakarta..
Mursito,  B.  2002. Ramuan  Tradisional  Untuk Penyakit Malaria . PT. Penebar Swadaya, Jakarta.
Neal,  J.M.  2005. At  a  Glance  Farmakologi Media  Edisi  ke Lima .  Diterjemahkan oleh  Jualita  Surajsari.  2006.  Erlangga, Jakarta.
Prayogo  B,  Sutaryadi.,  1992. Pemamfaatan Sirih  Untuk  Pelayanan  Kesehatan Primer . Warta Tumbuhan Obat. 1 : 9 Rushing,A.M. Tineacorporis .(online) http://www.emedicine.com/derm/byname
/tinea-corporis.html.  Diakses  2  Februari 2012 . Siswandono  dan  Soekardjo,    1995 . Kimia Medisinal . Penerbit. Airlangga Universitas Press. Steel R.G.D. dan Torries J.H. 1991. Prinsip dan
Prosedur  Statistika .  PT  Grmaedia Utama Jakarta.
Suhartini,  T.  1991. Studi  Beberapa  Isolat Mikroba  Asal  Rongga  Mulut  Sebagai Uji  Kepekaan  Terhadap  Daun  Sirih (Piper  betle L.).  Skripsi.  Universitas Padjajaran. Bandung.
Sukandar, Elin Yulianah, R. Andrajati, J.I. Sigit &
I.K. Adryana. 2009. ISO Farmakoterapi . PT. ISFI , Jakarta.
Syukur,  C.  dan  Hermani.  1999. Budidaya Tanaman Obat Tradisional . PT.
Penebar Swadaya, Jakarta.
Tjitrosoepomo,  Gembong.  2005. Taksonomi Tumbuhan Obat-Obatan . Gadjah Mada University Press.