J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol.  2,    No. 2:  215  –  219,    Mei  2014

## PEMANFAATAN  KITOSAN DAN  Trichoderma  sp. Rifai.  UNTUK MENGENDALIKAN  PENYAKIT ANTRAKNOSA  (Colletotrichum gloeosporioides  Penz.)  PADA  BUAH  PISANG  CAVENDISH
Fikriyah  Shofiah  Mawaddah,  Joko  Prasetyo  &  Muhammad  Nurdin
J urusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Lampung Jl. Prof. Soemantri Brodjonegoro, No. 1, Bandar Lampung 35145 E-mail: fikriyah_sm@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Antraknosa yang disebabkan oleh Colletotrichum gloeosporioides merupakan penyakit pascapanen penting pada buah- buahan.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektifitas kitosan dan Trichoderma sp. dalam menghambat pertumbuhan koloni jamur C. gloeosporioides secara in vitro dan mengetahui efektifitas kitosan dan Trichoderma sp.  terhadap intensitas penyakit  antraknosa  yang  disebabkan  oleh C.  gloeosporioides pada  buah  pisang cavendish .    Penelitian  dilakukan  di Laboratorium Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung dari bulan Mei 2013 sampai dengan September 2013.  Percobaan ini disusun dalam rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri atas lima perlakuan dan lima ulangan, yaitu kontrol (P0), kitosan (P1), Trichoderma sp. (P2), kombinasi kitosan dan Trichoderma sp. (P3) dan fungisida mankozeb (P4). C. gloeosporioides diperoleh dari isolasi buah pisang yang bergejala antraknosa.  Pengujian secara in vitro , perlakuan kitosan konsentrasi 0,75% dicampurkan ke dalam media potato sukrose agar , perlakuan Trichoderma sp. ( dual culture method ), perlakuan kombinasi kitosan dan Trichoderma sp. dengan mencampurkan kitosan pada media dan dikombinasikan dengan Trichoderma sp. ( dual culture method ) serta perlakuan fungisida mankozeb konsentrasi 0,1% dicampurkan ke dalam media. Metode  tersebut juga digunakan untuk pengujian secara in vivo pada buah pisang.  Hasil pengujian secara in vitro , perlakuan kitosan, Trichoderma sp. dan kombinasi kitosan dan Trichoderma sp. efektif menghambat pertumbuhan koloni jamur C. gloeosporioides . Pada uji in vivo , masing-masing perlakuan tidak efektif menghambat intensitas penyakit antraknosa.
Kata kunci: C. gloeosporioides , kitosan, Trichoderma sp.

## PENDAHULUAN
Pisang  ( Musa spp.)  merupakan  salahsatu tanaman tropika penting yang tersebar luas dan menjadi buah unggulan Indonesia.   Di Indonesia ada beberapa jenis pisang antara lain pisang ambon, pisang raja, pisang barangan, pisang cavendish dan pisang lainnya.  Pisang cavendish ( Musa parasidica L. var. cavendish) sudah sudah dibudidayakan di Indonesia, sekalipun bukan merupakan jenis pisang  asli Indonesia.   Pisang cavendish berasal dari Negara Brazil dan masuk ke Indonesia pada tahun 1990-an  (Andhika,  2007).  Salah  satu  pat ogen pascapanen  yang  paling  banyak  dijumpai  pada  buah pisang adalah penyakit antraknosa yang menyebabkan buah pisang secara visual tidak menarik seperti kulit yang kehitaman  dan  terdapat  bintik-bintik  kecoklatan (Soesanto, 2006).  Berbagai metode pengendalian telah dilakukan  untuk  mengatasi  penyakit  antraknosa, diantaranya  pengendalian  secara  kimiawi  dengan penggunaan fungisida berbahan aktif benomil, mankozeb atau  karbendazim.    Namun,  penggunaan  bahan  kimia dalam  jangka  waktu  yang  lama  akan  menyebabkan
resistensi  pada C.  gloeosporioides dan  merugikan kesehatan  konsumen.    Oleh  karena  itu,  penelitian  ini dilakukan sebagai alternatif lain pengendalian penyakit antraknosa dan meningkatkan daya simpan buah pisang, yaitu dengan penggunaan agensia hayati Trichoderma sp. dan produk olahan kitosan.

## BAHAN  DAN  METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei 2013 sampai dengan September 2013.  Pelaksanaan dilakukan di Laboratorium Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung.   Bahan yang  diperlukan antara lain  biakan C.  gloeosporioides ,  media  PSA,  biakan Trichoderma sp.,  kitosan  dan  fungisida  mankozeb. Percobaan  ini  disusun dalam  rancangan  acak  lengkap (RAL) yang terdiri atas lima perlakuan dan lima ulangan, yaitu kontrol (P0), kitosan (P1), Trichoderma sp. (P2), kombinasi  kitosan  dan Trichoderma sp.  (P3)  dan fungisida mankozeb (P4).  Data yang diperoleh dianalisis dengan sidik ragam dan perbandingan nilai tengah antar perlakuan di uji dengan uji BNT pada taraf nyata 5%. Isolat C. gloeosporioides didapatkan dari buah pisang
matang yang terinfeksi antraknosa.  Kulit buah pisang yang  terinfeksi Colletotrichum dipotong  kecil-kecil dibagian  antara  yang  sehat  dan  yang  sakit,  kemudian potongan-potongan  tersebut  didesinfektan  dengan larutan natrium hipoklorit 1% selama 1 menit dan dibilas dengan  akuades,  selanjutnya  potongan-potongan tersebut  diletakkan  di  atas  tisu  agar  airnya  terserap. Setelah  kering  potongan  tersebut  ditumbuhkan  pada media PSA.  Biakan yang tumbuh kemudian dimurnikan dan diidentifikasi.
Isolat Trichoderma sp.  didapatkan  dari  koleksi Laboratorium Penyakit Tumbuhan.  Isolat Trichoderma dibiakan   pada media,  kemudian  biakan  yang tumbuh dimurnikan dan diidentifikasi. Kitosan yang digunakan dalam penelitian dibuat oleh peneliti sendiri menurut Toan (2009).    Kitosan  ditimbang  sebanyak  0,75  g  yang dilarutkan dalam 100 ml (15 ml asam asetat 5% dan 85 ml  akuades) (Hamdayanty et  al .,  2012).    Konsentrasi ini  digunakan  untuk  pengujian  secara in  vitro dan in vivo .  Pisang  yang  digunakan  adalah  jenis  pisang cavendish yang  diperoleh  di  Supermarket  dalam keadaan  bersih,  sehat  dan  dikemas  dalam  kotak sebanyak  25  buah,  kemudian  pisang  tersebut  dicuci menggunakan akuades hingga bersih dan diletakkan di atas nampan steril berukuran 30 x 30 cm.
Pengujian secara in vitro dilakukan dengan cara mencampurkan  kitosan  ke  dalam  media  PSA.    Media PSA  yang  dicampurkan  kitosan  diletakkan  isolat C. gloeosporioides dan  media  PSA  yang  dicampurkan kitosan diletakkan isolat Trichoderma sp. dan isolat C. gloeosporioides ( dual  culture  method ),  sedangkan media  PSA  tanpa  campuran  kitosan  diletakkan  isolat Trichoderma sp.  dan  isolat C.  gloeosporioides ( dual culture  method ).    Media  PSA  yang  dicampurkan fungisida ma nkozeb diletakkan isolat C. gloeosporioides ,   kemudian  diinkubasi.
Pengujian secara in vivo aplikasi dilakukan sekali, seluruh aplikasi dilakukan menggunakan hand sprayer dengan  cara  menyemprotkan  langsung  ke  seluruh permukaan buah  pisang dengan  kitosan, Trichoderma sp.,  kombinasi  kitosan  dan Trichoderma sp.  dan fungisida  mankozeb.    Buah  pisang  yang  t elah disemprotkan  dengan  masing-masing  bahan  tersebut dikeringanginkan ± 1 menit. Setelah kering buah pisang diinokulasi dengan suspensi C. gloeosporioides dengan cara  disemprotkan  langsung  ke  seluruh  permukaan pisang  tersebut,  kemudian  pisang  diletakkan  di  atas nampan yang ditutup plastik wrap dan diinkubasi.
Pengamatan secara in vitro dilakukan setiap hari dan  dihentikan  bila  koloni  jamur C.  gloeosporioides yang ditumbuhkan pada media tanpa kitosan (kontrol) sudah  diinkubasi  selama  dua  minggu.    Variabel  yang
diamati  adalah  diameter  koloni  jamur C. gloeosporioi des dan  pesentase  penghambatan pertumbuhan  koloni  jamur C.  gloeosporioides pada media  PSA.    Perlakuan  kontrol,  kitosan,  kombinasi kitosan  dan Trichoderma sp.  menggunakan  variabel diameter  koloni,  sedangkan  perlakuan  kontrol  dan Trichoderma sp.  menggunakan  variabel  persentase penghambatan pertumbuhan.
1.  Diameter  koloni  ditentukan  dengan  rumus  sebagai berikut:
Keterangan: d1 = Diameter horizontal d2 = Diameter vertikal
2. Persentase penghambatan ditentukan dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan: I    = Tingkat penghambatan R1 = Jari-jari koloni jamur pada kontrol R2 = Jari-jari koloni jamur pada perlakuan
Pengamatan  secara in  vivo dilakukan  3  hari setelah  aplikasi  (HSA)  dengan  melihat  infeksi antraknosa dilakukan pengamatan dengan interval 3 hari dan  dihentikan  apabila  bercak  pada  buah  pisang perlakuan  kontrol  (P0)  sudah  memenuhi  permukaan buah.  Variabel yang diamati sebagai berikut: Keparahan Penyakit (%) dihitung dengan rumus:
Keterangan: KP =  Keparahan penyakit n =  Jumlah buah yang terinfeksi dalam setiap
kategori
v =  Kategori (skor) infeksi
N =  Jumlah buah yang diamati
Z =  Kategori (skor) tertinggi yang digunakan

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Buah pisang yang digunakan sebagai inokulum dalam isolasi jamur Colletotrichum menunjukkan gejala penyakit antraknosa.  Gejala antraknosa sangan mudah dikenali  dengan gejala  awal pada  buah pisang  berupa
2 2 1 d d koloni Diameter   % 100 1 2 1    R R R I % 100 ) (      Z N v n KP
bercak kecil berwarna coklat seperti luka terkena sinar matahari.    Busuk  meluas  hingga  mencapai  3  –  4  cm pada buah pisang yang berukuran besar.  Pada infeksi lanjut, gejala tersebut menyebabkan kulit buah terbuka dan kulit buah berwarna coklat menyala hingga warna hitam.
Kultur Colletotrichum sp.  yang  tumbuh  pada media PSA diidentifikasi sehingga diketahui bahwa kultur tersebut  adalah C . gloeosporioides .    Selanjutnya secara  mikroskopik  terlihat  menunjukkan  ciri-ciri C . gloeosporioides yaitu konidium berbentuk tabung, ujung konidiumnya tumpul dan tidak bersekat, kemudian jamur dimurnikan pada media PSA.
Perlakuan  kitosan,  dan  kombinasi  kitosan  dan Trichoderma sp. menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata.    Perlakuan  kitosan  dan  kombinasi  kitosan  dan Trichoderma sp.  berbeda  nyata  dengan  perlakuan fungisida mankozeb  dan kontrol.   Perlakuan fungisida
Tabel 2.  Diameter (cm) koloni jamur C . gloeosporioides pada media  PSA.
Perlakuan Rerata  diameter ( cm) pada  hari ke- 3 6 9 12 15 Kontrol 0,88a 1,47a 2,04a 2,93a 4,11a Fu ng isida Mankozeb 0,76a 1,68a 2,32a 2,32a 2,32a Kitosan + Trichoderma sp. 0,50b 0,50b 0,50b 0,50b 0,50b Kitosan 0,50b 0,50b 0,50b 0,50b 0,50b Nilai F 0,05 9,00* 5,31* 5,69* 9,14* 17,67* BNT 0,17 0,82 1,23 1,24 1,23
Keterangan: Angka dalam kolom yang diikuti huruf berbeda menunjukkan  perbedaan yang nyata pada uji BNT taraf 5%; hsa = hari setelah aplikasi; tn = tidak nyata pada taraf 5%; * = nyata pada taraf 5%.
mankozeb tidak berbeda nyata dengan perlakuan kontrol (Tabel 2).
Perlakuan Trichoderma sp.  menunjukkan  hasil yang sangat nyata  kecuali pada pengamatan hari  ke-4 (Tabel  3).    Perlakuan Trichoderma sp.  mampu menghambat  pertumbuhan C . gloeosporioides , persentase penghambatan semakin meningkat pada 12 hari  setelah  aplikasi  (45,61%)  (Tabel  3).  Pada pengamatan  3,  6  dan  9  hsa  persentase  keparahan penyakit  antraknosa  pada  buah  pisang  yang  diberi perlakuan kitosan, Trichoderma sp., kombinasi kitosan dan Trichoderma sp.  dan  fungisida  mankozeb menunjukkan pengaruh yang tidak nyata (Tabel 4).  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan  kitosan, Trichoderma sp.,  kombinasi kitosan dan Trichoderma sp.  dan  fungisida  mankozeb  tidak  dapat  menekan penyakit antraknosa pada buah pisang.
Tabel 3.  Jari-jari  (cm) koloni jamur C . gloeosporioides pada media PSA dan persentase penghambatan.
Keterangan: Angka dalam kolom yang diikuti huruf berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata pada uji BNT taraf 5%; hsa = hari setelah aplikasi; tn = tidak nyata pada taraf 5%; * = nyata pada taraf 5%.
Perlakuan Rerata jari- jari (cm) pada hari ke- 4 hsa 6 hsa 8 hsa 10 hsa 12 hsa Kontrol 0,29 0,53 a 0,57 a 0,57 a 0,57 a Trichoderma sp. 0,25 0,29 b 0,31 b 0,31 b 0,31 b Nilai F 0,05 2,67 tn 19,20* 22,53* 22,53* 22,53* BNT 0,15 0,15 0,15 0,15 Perlakuan Persentase Penghambatan (%) 4 hsa 6 hsa 8 hsa 10 hsa 12 hsa Kontrol - - - - - Trichoderma sp. - 45,28 45,61 45,61 45,61
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa perlakuan kitosan  konsentrasi  0,75%  secara  umum  mampu menekan pertumbuhan koloni jamur C . gloeosporioides. Penghambatan  pertumbuhan  jamur terjadi karena kemampuan kitosan  sebagai anti jamur. Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  Hamdayanty et  al . (2012)  bahwa  kitosan  konsentrasi  0,75%  dapat menghambat pertumbuhan C . gloeosporioides sebesar 72,17-85,21%.  Kemampuan kitosan sebagai anti jamur karena kitosan dapat menghambat pertumbuhan jamur yang  secara  umum  terususun  atas  lapisan  lemak  dan protein.  Menurut Restuati (2008), gugus amino dalam bentuk  asetil  amino  (HCOCH 3 )  dan  glukosamin (C 6 H 9 NH 2 ) dalam kitosan yang bermuatan positif dapat berikatan  dengan  bagian  makromalekul  bermuatan negatif pada permukaan sel jamur.  Hal ini menyebabkan pertumbuhan  jamur  akan  terhambat.Selanjutnya perlakuan Trichoderma sp.  menunjukkan  kemampuan mengambat  pertumbuhan  koloni  jamur C . gloeosporioi des (45,61%).     Jamur   antagonis Trichoderma sp.  mempunyai  kemampuan  antagonis terhadap pertumbuhan jamur C . gloeosporioides yang bersifat kompetisi ruang dan tidak terlihat adanya zona hambatan.  Hal ini sejalan dengan penelitian Umrah et al . (2009), jamur Trichoderma sp. mampu menghambat pertumbuhan  jamur patogen Phytophthora  palmivora secara in  vitro .    Mekanisme  antagonis Trichoderma sp.  dapat  terjadi  melalui  parasitisme,  kompetisi memperoleh  ruang,  nutrisi  dan  oksigen  serta kemampuannya memproduksi antibiotik atau senyawa penghambat yang disekresikan ke media tumbuh.
Selanjutnya  perlakuan  kombinasi  kitosan  dan Trichoderma sp. menyebabkan pertumbuhan jamur C . gloeosporioides dan Trichoderma sp.  tidak  dapat tumbuh secara normal.  Kitosan dan Trichoderma sp. tidak  terjadi  sinergi  dalam  menghambat  pertumbuhan jamur C . gloeosporioides karena  jamur Trichoderma sp.  sendiri  tidak  dapat tumbuh  pada media  PSA  yang tela h  dicampurkan  kitosan  konsent rasi  0, 75%. Kema mpuan  kitosan  sebagai  anti  jamur  selain menghambat  pertumbuhan  jamur C . gloeosporioides dapa t  juga  menghamba t  pertumbuhan  jamur Trichoderma sp.
Perlakuan  fungisida  mankozeb  tidak  mampu menghambat  pertumbuhan  koloni  jamur C . gloeosporioi des karena  fungisida  mankozeb konsentrasi  0,1%  daya  hambatnya  rendah  sehingga jamur C . gloeosporioides masih  dapat  tumbuh  pada media  PSA.    Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Sumardiyono et al . (2011) bahwa fungisida mankozeb konsentrasi  0,1-0,4%  daya  hamba t  terhadap pertumbuhan miselium jamur Colletotrichum sp. lebih
rendah  dibandingkan  dengan  campuran  fungisida karbendazim dan mankozeb. Fungisida karbendazim dan mankozeb  memberikan  hasil  perlindungan  lebih  baik dalam  menghambat  pertumbuhan  miselium  jamur Colletotrichum sp.
Keparahan penyakit antraknosa pada buah pisang menunjukkan  perhitungan  statistika  tidak  nyata  pada masing-masing  perlakuan  sehingga  tidak  berpengaruh terhadap intensitas penyakit antraknosa yang disebabkan oleh C . gloeosporioi des .  Perlakua n  kitosan, Trichoderma sp., kombinasi kitosan dan Trichoderma sp.  serta  fungisida  mankozeb  tidak  efektif  menekan keparahan penyakit antraknosa pada buah pisang.  Hal ini  terjadi  karena  buah  pisang  yang  digunakan  untuk penelitian diperoleh dari supermarket yang sebelumnya telah  diberi  perlakuan  fungisida  iprodion  sehingga berbagai  perlakuan  yang  diberikan  tidak  dapat berpengaruh  terhadap  keparahan  penyakit  pada  buah pisang.   Selain  itu,  satuan  percobaan yang  digunakan pada masing-masing perlakuan dan setiap ulangan hanya satu sehingga data yang diperoleh adalah data tunggal.

## KESIMPULAN
Kitosan, Trichoderma sp. dan  kombinasi kitosan dan Trichoderma sp.  dapat  efektif  menghambat pertumbuhan koloni jamur C. gloeosporioides secara in  vitro .  Kitosan, Trichoderma sp.  serta  kombinasi kitosan  dan Trichoderma sp.  tidak  efektif  menekan intensitas penyakit antraknosa yang disebabkan oleh C. gloeosporioides pada  buah  pisang cavendish .

## DAFTAR  PUSTAKA
Andhika,  D.      2007. Analisis  Pengendalian  Pasokan Pisang Cavendish Berdasarkan  Hasil  Ramalan Penjualan Time  Series Terbaik  Untuk  Wilayah Pemasaran JABOTABEK pada PT. Sewu Segar Nusantara.  (Skripsi).  Program Sarjana Ekstensi Manajemen Agribisnis.  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Efri. 2010.  Pengaruh Ekstrak Berbagai Bagian Tanaman Mengkudu  ( Morindacitrif olia )  Ter hadap Perkembangan  Penyakit  Antraknosa  Pada Tanaman  Cabai  ( Capsicum  anuun .  L) .    Jurnal Hama  Penyakit  Tumbuhan  Tropika 10  (1):  52- 58.
Hamdayanty, Rita Y., Nurul N. A. dan Tri A. D.  2012. Pemanfaatan  Kitosan  untuk  Mengendalikan Antr aknosa  pada  Pepa ya Coll etotri chum gloeosporioides dan  Meningkatkan  Daya
Simpan Buah. Jurnal Fitopatologi Indonesia 8 (4): 97-102.
Soesanto,  L.    2006. Penyakit  Pascapanen  Sebuah Pengantar .  Yogyakarta: Kanisius.
Sumardiyono C., Tri J., Yuli K. dan Yufita D. C.  2011. Diagnosis dan Pengendalian Penyakit Antraknosa pada  Pakis  dengan  Fungisida. Jurnal  HPT Tropika 11 (2): 194-200.
Restuati, M.  2008.  Perbandingan Chitosan Kulit Udang dan  Kulit  Kepiting  dalam  Mengha mbat Pertumbuha n  Kapang Aspergillus  flavus . Prosiding Seminar Nasional Sains danTeknologi- II Universitas Lampung, 17-18 November 2008.
Hlm. 582-590.
Toan, N. V.  2009.  Production of Chitin and Chitosan from Partially Autolyzed Shrimp Shell Materials.
The  Open  Biomaterials  Journal (1):  21-24.
Umrah, Tjandra A., Rizkita R. E. dan Aryantha I. N. P. 2009.  Antagonisitas dan Efektifitas Trichoderma sp. dalam Menekan P erkemba ngan
Phytophthora  palmivora pada  Buah  Kakao. Jurnal Agroland 16  (1):  9-16.