* Penulis untuk korespondensi. e-mail: moh.ubaidillah.pasca@unej.ac.id ISSN 2085-2916  e-ISSN 2337-3652 Tersedia daring http://jai.ipb.ac.id J. Agron. Indonesia, Desember 2022, 50(3):242-248 DOI: https://dx.doi.org/10.24831/jai.v50i3.41305 Karakterisasi Morfologi dan Molekuler Galur Padi Introduksi
Golden Rice F 8 terhadap Penyakit Blas dan Hawar Daun Bakteri
Morphological and Molecular Characterization of Introduced Golden Rice F 8 Lines to Blast and Bacterial Leaf Blight Diseases
Viki Bayu Wibisono 1 , Dwi Mai Abdul Imam Buqori 2 , Danny Agus Dyanshah 3 , Sri Hartatik 3 , dan Mohammad Ubaidillah 3*
1,2 Program Studi Magister Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Jember Jl. Kalimantan Tegalboto No.37, Krajan Timur, Sumbersari
Kecamatan Sumbersari, Kabupaten Jember, Jawa Timur 68121, Indonesia
3 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Jember Jl. Kalimantan Tegalboto No.37, Krajan Timur, Sumbersari Kecamatan Sumbersari, Kabupaten Jember, Jawa Timur 68121, Indonesia
Diterima 6 Juni 2022/Disetujui 13 Desember 2022

## ABSTRACT
Golden rice contains β-carotene or provitamin A in the seed endosperm. Various attempts have been made to improve the resistance of Golden rice against leaf blast and bacterial blight diseases. Breeding and selection have been done and obtained several stable F 8 breeding lines. This study aimed to elucidate the agromorphological characteristics and genotype of Golden rice F 8 lines of PAC Nagdong/IR36/IR64. The experiment were using F 8 lines of Golden rice PAC Nagdong/IR36/ IR64 with the code of 302/IR-2-2(6)/1, 302/IR-2-2(7)/2, 302/IR-2-2(8)/1, along with IR36 and IR64 varieties as the controls. Genotype analysis was performed to confirm the introgression of genes Pik-s, Pi54, Pi-ta, Xa4, and Xa7. This study showed that the Golden rice lines had relatively similar height as semidwarf, tiller numbers per plant > 24.6 with productive tillers of more than 85%, panicle lengths between 20.09-20.85 cm, and grain yield of 42.94 g per plant. All Golden rice lines have the targeted resistance genes to blast and bacterial leaf blight.
Keywords: β-carotene, introduction, marker, progeny

## ABSTRAK
Golden rice merupakan padi yang di dalam endosperma bijinya memiliki kandungan β-karoten atau provitamin A. Beberapa upaya telah dilakukan untuk meningkatkan ketahanannya terhadap penyakit blas dan hawar daun bakteri (��B). nya terhadap penyakit blas dan hawar daun bakteri (��B). �asil  pemuliaan  Golden  rice  telah  mendapatkan  turunan  ke  8  (F 8 )  yang  bersifat  stabil.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengkarakterisasi agromorfologi dan genotipe galur padi introduksi Golden rice F rice F 8 PAC Nagdong/IR36/IR64. Penelitian dilakukan di Laboratorium Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Jember. Benih yang digunakan yaitu tiga galur tiga galur padi  intorduksi  Golden  rice  F 8 PAC  Nagdong/IR36/IR64  dengan  kode  302/IR-2-2(6)/1,  302/IR-2-2(7)/2,  302/IR-2-2(8)/1 serta varietas IR36 dan IR64 sebagai tanaman kontrol. Analisis genotipe meliputi gen Pik-s, Pi54, Pi-ta, Xa4 dan Xa7. �asil penelitian  menunjukkan  bahwa  karakter  agromorfologi  pada  seluruh  galur  Golden  rice  untuk  karakter  tinggi  tanaman,, jumlah anakan dan jumlah anakan produktif tidak berbeda nyata. Tinggi tanaman Golden rice termasuk dalam kategori semidwarf, jumlah anakan >24.6 dengan anakan produktif mencapai lebih dari 85%, panjang malai antara 20.09-20.85 >24.6 dengan anakan produktif mencapai lebih dari 85%, panjang malai antara 20.09-20.85 20.09-20.85 cm, dan bobot per rumpun mencapai 42.94 g serta seluruh galur Golden rice memiliki gen pengkode sifat tahan terhadap bobot per rumpun mencapai 42.94 g serta seluruh galur Golden rice memiliki gen pengkode sifat tahan terhadap obot per rumpun mencapai 42.94 g serta seluruh galur Golden rice memiliki gen pengkode sifat tahan terhadap Golden rice memiliki gen pengkode sifat tahan terhadap penyakit blas dan ��B. ��B.
Kata kunci: β-karoten, galur, ��B, introduksi, marka

## PENDAHULUAN
Padi ( Oriza sativa L.) merupakan salah satu komoditas tanaman  pangan  yang  banyak  dijadikan  sebagai  bahan makanan  pokok  oleh  negara-negara  di  dunia  khususnya di Asia  dan  Indonesia. Arifin et  al .  (2021)  menyebutkan bahwa  rata-rata  konsumsi  beras  di  Indonesia  pada  2019 mencapai 131.23 kg per kapita dalam satu tahun. Tingginya permintaan beras di Indonesia ini harus didukung dengan adanya  peningkatan  produktivitas  dan  peningkatan  mutu beras. Untuk  mendukung  peningkatan  produktivitas, tanaman padi perlu mempunyai sifat tahan terhadap berbagai cekaman, salah satunya sifat ketahanan terhadap hawar daun bakteri (HDB) dan blas. Blas merupakan salah satu penyakit yang dapat mengganggu produktivitas tanaman padi apabila keberadaannya tidak dikendalikan. Penurunan produktivitas tanaman diperparah dengan lingkungan yang terlalu lembab dan tingkat kerentanan kultivar padi terinfeksi cukup tinggi. Kondisi  kelembaban  yang  tinggi  menyebabkan  jamur penyebab blas meningkat. Kerugian yang diakibatkan dari blas mencapai 10% hingga 30% kehilangan hasil produksi padi (Kurrata et al ., 2021). Yadav et al. (2019), menjelaskan bahwa sampai saat ini terdapat lebih dari 100 gen ketahanan padi terhadap blas. Sebanyak 27 gen telah dikloning secara molekuler dan diidentifikasi dan dikarakterisasi yaitu Pib, Pb1, Pita, Pi9, Pi2, Pizt, Pid2, Pi33, Pii, Pi36, Pi37, Pikm, Pit, Pi5, Pid3, Pid3–A4, Pikh, Pish, Pik, Pikp, Pia, PiCO39, Pi25, Pi1, pi21, Pi50 and Pi65 (t). G olden  rice merupakan  salah  satu  hasil  penerapan teknologi DNA rekombinan untuk meningkatkan kandungan provitamin A atau β-karoten pada endosperma padi�� �ee padi. Lee . Lee et al. (2015) menjelaskan bahwa Golden  rice diperoleh dari tetua Nagdong, kultivar padi japonica. Nagdong memiliki gen  ketahanan  terhadap  virus  belang  dan  tinggi  serta berproduksi rendah dibandingkan dengan kultivar japonica berproduksi  tinggi.  Tanaman  transgenik  PAC  disilangkan dengan  IR36,  kultivar  indica  semi-kerdil  berdaya  hasil tinggi.
Mina et  al .  (2018)  mengintroduksikan  ketahanan terhadap penyakit HDB dan blas ke tanaman transgenic PAC Nagdog. Galur Golden rice berasal dari padi PAC Nagdong yang  tidak  memiliki  gen  ketahanan  penyakit  kemudian disilangkan  dengan  varietas  IR36  yang  mempunyai ketahanan terhadap penyakit hawar daun bakteri (HDB) dan blas ( Pita, Pik-s, Pib dan Xa7 ). Turunan F5 PAC Nagdong/ IR36 disilangkan dengan varietas IR64 yang memiliki gen ketahanan penyakit HDB dan blas ( Pi-ta, Piz-t, Pik-s, Pib, Pi54 dan Xa4 ). Hasil introduksi ini kemudian dikembangkan sampai F 8 dan dilakukan karakterisasi agromorfologi. Karakterisasi padi dengan sifat unggul tertentu dapat menggunakan  uji  karakterisasi  agromorfologi  (Kurniasih et  al .,  2019).  Karakterisasi  agromorfologi  tanaman  padi dilakukan untuk mengetahui kondisi tanaman yang tampak seperti jumlah anakan per rumpun, panjang akar, panjang malai, bentuk daun, dan karakter fisik lainnya, sedangkan karakterisasi  genotipe  dilakukan  untuk  menganalisis  gen- gen tanaman padi yang ada di dalamnya (Supriyanti et al ., 2015; Rembang et al ., 2018).
Berdasarkan  permasalahan  yang  telah  dijelaskan maka  perlu  dilakukan  karakterisasi  agromorfologi  dan genotipe ketahanan terhadap galur padi F 8 PAC Nagdong/ IR36/IR64  yang  sudah  diseleksi.  Penelitian  dilakukan untuk  mendapatkan  informasi  yang  akurat  tentang  sifat fisik padi F 8 PAC Nagdong/IR36/IR64 sebelum dilakukan komersialisasi  dan  budidaya  jangka  panjang.  Tujuan  lain yaitu untuk mengetahui keberadaan gen ketahanan terhadap penyakit blas dan hawar daun bakteri (HDB) pada tanaman F 8 PAC Nagdong/IR36/IR64.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Greenhouse  Fakultas Pertanian  Universitas  Jember  dan  Laboratorium Agroteknologi,  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Jember pada bulan Desember 2020 sampai dengan November 2021. Genotipe  padi  yang  digunakan  dalam  penelitian  meliputi tiga  galur  padi  introduksi  PAC  Nagdong/IR36/IR64  F 8 kode  302/IR-2-2(6)/1,  302/IR-2-2(7)/2,  302/IR-2-2(8)/1, serta varietas IR36 dan varietas IR64 sebagai kontrol. Galur padi yang digunakan berasal persilangan padi Golden rice PAC Nagdong yang tidak memiliki gen ketahanan penyakit dengan varietas IR36 yang mempunyai ketahanan terhadap penyakit hawar daun bakteri (HDB) dan blas. Turunan F5 PAC Nagdong/IR36 kemudian disilangkan dengan varietas IR64 yang memiliki gen ketahanan penyakit HDB dan blas ( Pi-ta, Piz-t, Pik-s, Pib, Pi54 dan Xa4 ) (Mina et al ., 2018). Percobaan  disusun  menggunakan  rancangan  acak lengkap.  Faktor  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian merupakan  tiga  genotipe  padi Golden  rice ,  serta  padi varietas  IR36  dan  IR64.  Lima  genotipe  padi  ditanam dengan  10  ulangan,  sehingga  diperoleh  jumlah  50  satuan percobaan. Karakter agromorfologi yang diamati meliputi Karakter agromorfologi yang diamati meliputi tinggi tanaman, jumlah anakan produktif, panjang malai dan potensi hasil pada fase vegetatif akhir sesuai dengan panduan IRRI (2013). Analisis deskriptif kualitatif dilakukan untuk (2013). Analisis deskriptif kualitatif dilakukan untuk menganalisis keberadaan gen-gen pengkode sifat ketahanan terhadap penyakit blas dan HDB.
Prosedur  penelitian  diawali  dengan  melakukan perkecambahan benih di dalam potray dengan menggunakan media tanah hingga ¾ dari tinggi potray . Bibit tanaman padi dipindah tanam setelah berumur 21 hari dengan jumlah satu tanaman tiap pot tanam. Ukuran pot yang digunakan yaitu diameter 30 cm dengan tinggi 22.5 cm dan tanah sebagai media tanam. Pemeliharaan dilakukan meliputi pemberian nutrisi, pengairan atau penyiraman dan pembersihan gulma. Pemanenan  dilakukan  ketika  padi  berumur  3-4  bulan, atau  ketika  tanaman  berwarna  kuning  kecoklatan  yang menandakan bahwa padi sudah siap dipanen.
Karakterisasi  gen  ketahanan  dengan  menggunakan marka gen Pik-s , Pi54 , Pi-ta , Xa4 dan Xa7 diawali dengan melakukan isolasi DNA yang diambil dari daun padi muda berumur  lebih  kurang  3  minggu  menggunakan  metode Buffer  CTAB  (Cethyl  Trimethyl    Ammonium  Bromide) (Handayani et al ., 2016; Kurrata et al ., 2021). Konsep marka yang  digunakan  yaitu  MAS  ( marker  assisted  selection ) berbasis SSR ( simple sequence repeat ). Template DNA yang didapatkan kemudian dianalisis menggunakan metode PCR
( polymerase  chain  reaction )  dengan  primer  spesifik  gen Pik-s , Pi54 , Pi-ta , Xa4 dan Xa7 (Tabel 1) serta campuran bahan per sampel yaitu 5 µL Taq DNA Polymerase,  1 µL primer  F,  1  µL  primer  R,  1  µL  DNA  template  dan  2  µL nuclease  free  water .  Program  yang  diatur  dalam  mesin PCR  yaitu  pra-denaturasi  selama  2  menit  dengan  suhu 95 °C, sebanyak 30 siklus mencakup denaturasi selama 30 detik dengan suhu 95 °C, proses annealing selama 30 detik dengan suhu 53 °C (gen Pi ), 55 °C ( Xa4), dan  57.2 °C (Xa7 ), extension selama  1  menit  dengan  suhu  72  °C  dan final extension selama 5 menit dengan suhu 72 °C. Analisis DNA dilakukan dengan metode elektroforesis menggunakan media agarose 1% serta menggunakan EtBr sebanyak 5 µL sebagai pewarna pita DNA.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Agromorfologi Tanaman
Hasil  analisis  sidik  ragam  terhadap  seluruh  variabel pengamatan  agromorfologi  menunjukkan nilai F-hitung menunjukkan  nilai  F-hitung yang  tidak  nyata (Tabel 2). Hasil analisis agromorfologi (Tabel  2).  Hasil  analisis  agromorfologi pada  galur  F 8 menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  karakter dibandingkan dengan IR64 dan IR36 sebagai kontrol . Hasil penelitian  pada  parameter  tinggi  tanaman  menunjukkan bahwa rata-rata tinggi tanaman galur introduksi Golden rice lebih tinggi dibandingkan dengan tanaman kontrol (Gambar 1). Rata-rata tinggi tanaman kontrol berkisar antara 83.70- 84.00 cm (Gambar 2) atau termasuk dalam kategori tanaman semidwarf , sedangkan galur intorduksi Golden rice F 8 302/ IR-2-2(8)/1,  F 8 302/IR-2-2(7)/2  dan  F 8 302/IR-2-2(6)/1 memiliki  tinggi  dengan  rentang  antara  97.30-102.30  cm yang  juga  termasuk  dalam  kategori  tanaman semidwarf (IRRI,  2013).  Perbedaan tinggi tanaman dan karakter Perbedaan  tinggi  tanaman  dan  karakter komponen  hasil  tanaman  padi  dikendalikan  oleh  banyak gen yang sangat dipengaruhi oleh lingkungan (Ikeda et al ., 2013). Jumlah  anakan  pada  tanaman  kontrol    mencapai 32.30 anakan per rumpun tidak berbeda nyata dengan galur
F 8 Golden rice yang berjumlah 28.80 anakan per rumpun (Gambar 3). Jumlah anakan akan terus bertambah hingga mencapai jumlah anakan maksimum (Suyani dan Wahyono, 2016). Jumlah anakan pada masing-masing tanaman dalam penelitian ini lebih dari 25 anakan per tanaman yang artinya seluruh tanaman memiliki potensi jumlah anakan kategori very high (IRRI, 2013).
Jumlah  anakan  produktif  tanaman  kontrol  tidak berbeda nyata dengan jumlah anakan produktif pada galur F 8 Golden rice (Gambar 4). Panjang malai tanaman semua genotipe menunjukkan nilai di atas 15 cm. Rata-rata panjang malai tanaman kontrol yaitu antara 18.87 cm sampai dengan 19.43 cm, sedangkan panjang  malai  galur Golden  rice antara  20.09  cm  sampai dengan 20.85 cm. Panjang malai galur Golden rice secara kuantitatif  memiliki  rata-rata  panjang  malai  yang  tidak berbeda nyata dengan kedua tanaman kontrol (Gambar 5).
Bobot gabah per pot varietas IR64 dan seluruh Golden rice F 8 tidak  berbeda  nyata  (Gambar  6).  Perbedaan  berat gabah  antar  tanaman  hanya  sebesar  0.82  g  atau  0.39% dengan kadar air berkisar antara 12-15%. Bobot gabah per rumpun varietas IR36 sebesar 40.19 g per rumpun, varietas IR64  sebesar  41.52  g  per  rumpun,  F 8 302/IR-2-2(8)/1 sebesar  42.94  g  per  rumpun,  F 8 302/IR-2-2(7)/2  sebesar 42.68 g per rumpun, dan F 8 302/IR-2-2(6)/1 sebesar 42.08 g per rumpun. Widyastuti et al . (2015) menjelaskan tingginya jumlah anakan produktif menjadi komponen penting yang berpengaruh terhadap gabah yang dihasilkan oleh tanaman padi.

## Analisis Genotipe Tanaman
Analisis  genotipe  dilakukan  dengan  tujuan  untuk mendeteksi  gen  ketahanan  blas  dan  HDB  galur  padi introduksi F 8 PAC Nagdong/IR36/IR64 (Mina et al ., 2018). Hasil analisis genotipe ketahanan pada galur padi intorduksi F 8 PAC  Nagdong/IR36/IR64  dengan  menggunakan  2 sampel dari setiap galur menunjukkan bahwa gen pengkode sifat resisten terhadap penyakit blas ( Pik-s, Pi54, dan Pi-ta ) Ketahanan penyakit Gen Marka Target ukuran pita DNA Primer Referensi Blas ( Leaf Blast ) Pik-s RM1233 200 bp Forward : 5’ TTCGTTTTCCTTGGTTAGTG 3’ Reverse : 5’ ATTGGCTCCTGAAGAAGG 3’ Fjellstrom et al ., 2004 Pi54 Pikh-MAS 100 bp Forward : 5’ CAATCTCCAAAGTTTTCAGG 3’ Reverse : 5’ GCTTCAATCACTGCTAGACC 3’ Ramkumar et al ., 2011 Pi-ta Pi-ta 440 450 bp Forward : 5’ CAACAATTTAATCATACACG 3’ Reverse : 5’ ATGACACCCTGCGATGCAA 3’ Jia, 2009 Hawar Daun Bakteri ( Bacterical Leaf Blight ) Xa4 RM224 250 bp Forward : 5’ ATCGATCGATCTTCACGAGG 3’ Reverse : 5’ TGCTATAAAAGGCATTCGGG 3’ He et al ., 2006 Xa7 RM20582 250 bp Forward : 5’ AGAGCGTCGTCCTTCACCATCC 3’ Reverse : 5’ GGCCAATACGACGATACATTACACG 3’
Tasliah et al., 2013
Tabel 1. Daftar marka gen ketahanan penyakit hawar daun bakteri (HBD) dan blas
dan hawar daun bakteri ( Xa4 dan Xa7 ) telah dimiliki oleh masing-masing galur. Hasil analisis genotipe padi introduksi F 8 PAC  Nagdong/IR36/IR64  menunjukkan  bahwa  hasil padi introduksi mempunyai gen ketahanan dari tetua baik dari  IR36  atau  IR64  (Gambar  7  dan  Gambar  8).  Kondisi ini  sejalan  dengan  penelitian  Mina et al .  (2018)  yang menyatakan bahwa dari 11 galur padi introduksi F5 PAC/ Nagdong/IR36/IR64 sebanyak 7 galur memiliki gen Pik-s , 7
galur memiliki gen Pi54 , 6 galur memiliki gen Pi-ta , 9 galur memiliki gen Xa4 dan 7 galur memiliki gen Xa7 . Gen Pik-s , Pi54 , dan Pi-ta ini merupakan gen spesifik yang mampu mengatasi serangan blas sesuai dengan daerah masing-masing,  seperti  halnya  gen Pi-ta yang  menjadi gen  spesifik  pengendali  penyakit  blas  (Ariya-anandech et  al .,  2018).  Faktor  pendukung  lainnya  untuk  mengatasi penyebaran  penyakit  blas  adalah  dengan  menggunakan benih dan bibit yang sehat, menentukan waktu tanam yang tepat yaitu menghindari fase pembungaan dengan kondisi kelembaban tinggi, pemilihan jarak tanam serta pengaturan sanitasi lingkungan, dan melakukan pemupukan berimbang (Sudir et al ., 2014). Akumulasi  dari  gen Pik-s,  Pi54,  Pi-ta,  Xa4, dan Xa7 yang terdapat pada Golden rice dapat memungkinkan tingkat resistensi yang lebih tinggi pada galur dibandingkan dengan 1 atau 2 sifat ketahanan saja. Hasil pemuliaan ini menunjukkan  bahwa  introduksi  melalui  persilangan  yang dilakukan  mampu  menggabungkan  seluruh  gen  pada individu atau galur yang terseleksi. Gen Xa4 dan Xa7 ini dapat menjadi solusi dari tingginya angka serangan penyakit hawar daun bakteri pada tanaman padi di Indonesia. Tasliah et al. (2016) menjelaskan bahwa gen Xa7 dapat meredakan serangan penyakit hawar daun bakteri di berbagai wilayah, khususnya  di  Jawa  dan  Bali.  Selain  itu,  pemberian  dosis
No. Karakteristik agromorfologi F-Hitung F-tabel 0.05 F-tabel 0.01 1 Tinggi tanaman 0.0046tn 2.58 3.77 2 Jumlah anakan 0.0444tn 2.58 3.77 3 Jumlah anakan produktif 0.0761tn 2.58 3.77 4 Panjang malai 0.1239tn 2.58 3.77 5 Bobot gabah per pot 0.2177tn 2.58 3.77

## Tabel 2. Analisis ragam terhadap karakteristik agromorfologi padi
IR3 IR6 A B
C
Gambar  1. Tinggi  tanaman  tiga  galur  padi  tahan  blas  dan  HDB dibandingkan  dengan  tanaman  kontrol  (A  =  F 8 302/ IR-2-2(8)/1, B = F 8 302/IR-2-2(7)/2, C = F 8 302/IR-2 2(6)/1, IR3 = Varietas IR36, IR6 = Varietas IR64) 97.3 99.05 102.3 84 83.7 0 20 40 60 80 100 120 F8 302/IR-2-2(8)/1 F8 302/IR-2-2(7)/2 F8 302/IR-2-2(6)/1 IR36
IR64
Ti ng gi ta na m an (c m )
Gambar 2. Tinggi tanaman tiga galur padi Golden rice dibandingkan dengan tanaman kontrol ( error bar = standar deviasi)
28.8 24.6
26.7 31.9 32.3 0 5 10 15 20 25 30 35 40 F8 302/IR-2-2(8)/1 F8 302/IR-2-2(7)/2 F8 302/IR-2-2(6)/1 IR36 IR64 Ju m la h an ak an (b at an g) 24.4 22.6 23.7 26.2 28.1 0 5 10 15 20 25 30 35 F8 302/IR-2-2(8)/1 F8 302/IR-2-2(7)/2 F8 302/IR-2-2(6)/1 IR36 IR64 Ju m la h an ak an p ro du kt if (b at an g)
Gambar 4. Jumlah anakan produktif tiga galur padi Golden rice dibandingkan dengan tanaman kontrol ( error bar = standar deviasi)
Gambar 3. Jumlah anakan tiga galur padi Golden rice dibandingkan dengan tanaman kontrol ( error bar = standar deviasi)
Gambar 5. Panjang malai tiga galur padi Golden rice dibandingkan dengan tanaman kontrol ( error bar = standar deviasi)
20.85 20.09 20.75 18.87 19.43 0 5 10 15 20 25 F8 302/IR-2-2(8)/1 F8 302/IR-2-2(7)/2 F8 302/IR-2-2(6)/1 IR36
IR64
Pa nj an g m al ai (c m )
42.94 g per rumpun. Masing-masing tanaman Golden rice F 8 galur padi introduksi PAC Nagdong/IR36/IR64 memiliki gen pengkode sifat resisten terhadap serangan penyakit blas ( Pik-s , Pi54 ,  dan Pi-ta )  dan  penyakit  hawar  daun  bakteri ( Xa4 dan Xa7 ).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Laboratorium  Agroteknologi Universitas  Jember  atas  dukungan  sehingga  penelitian  ini dapat diselesaikan.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifin, A. Z., N. Hanani, D. Kustiono, S. Syafrial, R. Asmara. 2021. Forecasting the basic conditions of indonesia’s rice  economy  2019-2045. Agric.  Soc.  Econ.  J.  21: 111-120. Doi:10.21776/ub.agrise.2021.021.2.4.
42.94 42.68 42.08 40.19 41.52 34 36 38 40 42 44 46 F8 302/IR-2-2(8)/1 F8 302/IR-2-2(7)/2 F8 302/IR-2-2(6)/1 IR36 IR64 Bo bo t g ab ah p er p ot (g )
Gambar 6. Bobot gabah per tanaman tiga galur padi Golden rice dibandingkan dengan tanaman kontrol ( error bar = standar deviasi)
Gambar  7.  Hasil  elektroforesis  PCR  gen  pengkode  ketahanan terhadap penyakit blas menggunakan primer RM1233, Pikh-MAS, dan Pi-ta440. (M = Marker, 36 = IR36,
64 = IR64, A1 = 302/IR-2-2(6)/1-1, A2 = 302/IR-2- 2(6)/1-2,  B1  =  302/IR-2-2(7)/2-1,  B2  =  302/IR-2- 2(7)/2-2,  C1  =  302/IR-2-2(8)/1-1,  C2  =  302/IR-2- 2(6)/1-2) Gambar  8.  Hasil  elektroforesis  PCR  gen  pengkode  ketahanan terhadap penyakit hawar daun bakteri menggunakan primer  RM224  dan  RM20582  (M  =  Marker,  36  = IR36, 64 = IR64, A1 = 302/IR-2-2(6)/1-1, A2 = 302/ IR-2-2(6)/1-2, B1 = 302/IR-2-2(7)/2-1, B2 = 302/IR- 2-2(7)/2-2, C1 = 302/IR-2-2(8)/1-1, C2 = 302/IR-2- 2(6)/1-2)
pupuk  N  yang  tepat  juga  dapat  menunjang  ketahanan tanaman  padi  sehingga  lebih  toleran  terhadap  penyakit hawar daun bakteri, sebab pemberian dosis pupuk N yang terlalu  tinggi  dapat  menjadi  salah  satu  faktor  penyebab meningkatnya frekuensi serangan penyakit blas dan hawar daun bakteri (Sudir et al ., 2014).

## KESIMPULAN
Karakter  agromorfologi  tiga tanaman tiga  tanaman Golden  rice F 8 galur  padi  introduksi  PAC  Nagdong/IR36/IR64  yaitu tinggi tanaman kategori kategori semidwarf , jumlah anakan kategori sangat banyak, presentase jumlah anakan produktif tinggi mencapai  diatas  85%,  dan bobot per rumpun mencapai bobot  per  rumpun  mencapai
Ariya-anandech, K., C. Chaipanya, W. Teerasan, S. Kate- Ngam, C. Jantasuriyarat. 2018. Detection and allele identification  of  rice  blast  resistance  gene, Pik ,  in Thai  rice  germplasm.  Agric.  Nat.  Resour.  52:525- 535. Doi:10.1016/j.anres.2018.11.009.
Fjellstrom,  R��,  C��A��  Conaway‐Bormans,  A��M��  McClung, M.A.  Marchetti,  A.R.  Shank,  W.D.  Park.  2004. Development  of  DNA  markers  suitable  for marker  assisted  selection    of  three  Pi  genes conferring resistance to multiple Pyricularia grisea pathotypes.  Crop  Sci.  44:1790-1798.  Doi:10.2135/ cropsci2004.1790.
Handayani, F., R.A. Wulandari, R.H. Murti. 2016. Genomic DNA  extraction  method  from  mature  leaf  of  lai ( �urio  kutejensis  B ecc.).  Agrivita  38:73-79.  Doi: 10.17503/agrivita.v38i1.659.
He, Q., D. Li, Y. Zhu, M. Tan, D. Zhang, X. Liun. 2006. Fine mapping of Xa2, a bacterial blight resistance gene in rice. Mol. Breed. 17:1-6.
Jia, Y., G. Liu, S. Costanzo, S. Lee, Y. Dai. 2009. Current progress on genetic interactions of rice with rice blast and sheath blight fungi. Front. Agric. China 3:231- 239. Doi:10.1007/s11703-009-0062-6.
Ikeda,  M.,  K.  Miura,  K.  Aya,  H.  Kitano,  M.  Matsuoka. 2013.  Genes  offering  the  potential  for  designing yield-related traits in rice. Curr. Opinion Plant Biol. 16:213-220.
IRRI. 2013. Standard evaluation system for rice (5th ed.).
Los Baños, Philippines: International Rice Research Institute.
Kurniasih,  N.S.,  R.  Susandarini,  F.A.  Susanto,  T.R. Nuringtyas,  G.  Jenkins,  Y.A.  Purwestri.  2019. Characterization  of  Indonesian  pigmented  rice ( Oryza  sativa L.)  based  on  morphology  and  single nucleotide  polymorphisms.  Biodiversitas.  20:1208- 1214. Doi:10.13057/biodiv/d200437.
Kurrata, G., T. Kuswinanti, A. Nasruddin. 2021. Keparahan penyakit  blas Pyricularia  oryzae dan  analisis gen  virulensi  menggunakan  metode  sequence characterized amplified region. J. Fitopatol. Indonesia 17:19-27. Doi:10.14692/jfi.17.1.19-27.
Lee, H.S., G. Yi, K.M. Kim. 2015. Stability of PAC (Psy- 2A-CrtI)  gene  and  agronomic  traits  in  the  F 2 :  3  of
IR36/PAC transgenic plants. J. Integr. Agric. 14:1163- 1170. Doi:10.1016/S2095-3119(14)60865-0
Mina, K. M., B. Sugiharto, K. Kyung-Min, M. Ubaidillah. 2018. Introgression blast resistance gene (pita, Pik-s, Pib, Piz-t, and Pi54), and blight resistance gene (Xa4 and Xa7) into transgenic plant 940302-2 golden rice through  marker-assisted  selection.  Biosci.  Res.  15: 2272-2285.
Ramkumar, G., K. Srinivasarao,K.M. Mohan, I. Sudarshan, A.K.P. Sivaranjani, K. Gopalakrishna, M.S. Madhav. 2011.  Development  and  validation  of  functional marker  targeting  an  InDel  in  the  major  rice  blast disease  resistance  gene  Pi54  (Pik  h).  Mol.  Breed. 27:129-135. Doi:10.1007/s11032-010-9538-6.
Rembang,  J.H.W.,  A.W.  Rauf,  J.O.M.  Sondakh.  2018. Karakter morfologi padi sawah lokal di lahan petani Sulawesi Utara. Bul. Plasma Nutfah. 24:1-8.
Sudir,  N.,  Santoso,  Nuryanto.  2014.  Penyakit  blas Pyricularia  grisea pada  tanaman  padi  dan  strategi pengendaliannya. Iptek Tan. Pangan 9:85-96.
Suprihatno,  B., A.A.  Daradjat,  Satoto,  Baehaki, Widiarta. 2009. Deskripsi varietas padi.
Supriyanti, A., Supriyanta, Kristamtini. 2015. Karakterisasi dua  puluh  padi  ( Oryza  sativa L.)  lokal  di  daerah istimewa Yogyakarta. Vegetalika 71:121-126.
Suyani, I.S., D. Wahyono. 2017. Korelasi pertumbuhan & hasil tanaman padi ( Oryza sativa L.) dengan teknik penanaman dan dosis pupuk organik. Agrotechbiz: J. Ilmiah Pertanian 4(1).
Tasliah, T., M. Ma’sumah, K.R. Trijatmiko, J. Prasetiyono. 2016.  Analisis  molekuler  dan  keragaan  agronomis galur-galur  padi  BC1F1  persilangan  code  x qTSN4  dan  code  x  qDTH8.  J. AgroBiogen  11:17. Doi:10.21082/jbio.v11n1.2015.p17-24.
Widyastuti, Y., Satoto, Rumanti. 2015. Pemanfaatan analisis regresi  dan  ammi  untuk  evaluasi  stabilitas  hasil genotipe  padi  dan  pengaruh  interaksi  genetik  dan lingkungan. Inform. Pertan. 22:21-27. Doi:10.21082/ ip.v22n1.2013.
Yadav, M.K., S. Aravindan, U. Ngangkham,S. Raghu, S.R. Prabhukarthikeyan,  U.  Keerthana,P.C.  Rath.  2019. Blast  resistance  in  Indian  rice  landraces:  Genetic dissection by gene specific markers. Plos one 14(1), e0211061. Doi: 10.1371/journal.pone.0211061.