## SKRINING FITOKIMIA DAN UJI TOKSISITAS EKSTRAK ETANOL
DAUN LANGSAT ( Lansium domesticum Corr) TERHADAP Larva Artemia salina Leach DENGAN METODE Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Indriawati Yunus 1) , Widdhi Boddhi 1) , Edwin De Queljoe 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Langsat (Lansium domesticum Corr) is one of indigenous Indonesian plants that have long been used in traditional medicine. Some parts of  langsat widely used to treat various diseases that is one the skin of stems and fruit, among others as a worm medicine, fever medicine, diarrhea drugs, and also as an anti-cancer. Other parts of leafy plants such as leaves have not been utilized and known  toxicity levels. This study aims to identify phytochemical compounds and determine the toxicity value of leaf extracts of ethanol  to  leaf  Artemia  salina  Leach  through  toxicity  test  using  BSLT  (Brine  Shrimp  Lethality  Test) method. The results showed that leaf extract langsat (Lansium domesticum) contain phenolic compounds, saponins, triterpenoids, and steroids. The results of this study indicate that the leaf extract of ethanol is toxic, this is indicated by LC50 <1000 μg / mL, with LC50 value of 32.713 μg / mL.
Keywords: Leaf Langsat, Phytochemical, Toxicity, BSLT, LC50

## ABSTRAK
Langsat  (Lansium  domesticum  Corr)  merupakan  salah  satu  tanaman  asli  Indonesia  yang  telah lama digunakan dalam pengobatan tradisional. Beberapa bagian dari langsat banyak dimanfaatkan untuk mengobati berbagai penyakit yaitu pada kulit batang dan buahnya, antara lain sebagai obat cacing, obat demam, obat diare, dan juga sebagai antikanker. Bagian lainnya pada tanaman langsat seperti daun belum dimanfaatkan dan diketahui kadar toksisitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa fitokimia dan menentukan nilai toksisitas dari ekstrak etanol daun langsat terhadap udang Artemia salina Leach melalui uji toksisitas menggunakan metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test). Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  langsat  (Lansium  domesticum)  mempunyai  kandungan  senyawa fenolik,  saponin,  triterpenoid,  dan  steroid.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun langsat bersifat toksik, hal ini ditandai dengan nilai LC50 < 1000 μg/mL, dengan nilai LC50 yaitu 32,713 μg/mL.
Kata kunci: Daun Langsat, Fitokimia, Toksisitas, BSLT,  LC50

## PENDAHULUAN
Bahan  alami  digunakan  sebagai bahan  untuk  pembuatan  obat-obatan  karena umumnya  mengandung  senyawa  metabolit sekunder.  Metabolit  sekunder  merupakan senyawa  yang  disintesis  oleh  tumbuhan, mikroba atau hewan yang memiliki aktivitas farmakologi dan biologis sehingga memiliki potensi  sebagai  bahan  obat  (Hendrawati, 2009).  Tumbuhan  umumnya  mengandung senyawa  bioaktif  dalam  bentuk  metabolit sekunder  yaitu  flavonoid,  tanin,  alkaloid, triterpenoid,  steroid,  saponin  dan  fenolik yang  terdapat  pada  tanaman  (Lenny,  2006). Salah  satu  tanaman  yang  dapat  digunakan sebagai  obat  tradisional  ialah  tanaman Langsat (Lansium domesticum).
Langsat merupakan salah satu tanaman  asli  Indonesia  yang  telah  lama digunakan  dalam  pengobatan  tradisional. Langsat  memiliki  banyak  kegunaan  karena kandungan  senyawa-senyawa  berkhasiat didalamnya.  Selain  khasiatnya  yang  telah turun  temurun  digunakan  oleh  masyarakat, tanaman ini lebih murah dan mudah didapat, namun  diperlukan  penelitian  yang  lebih lanjut  karena  banyaknya  tanaman  yang belum diketahui kadar toksisitasnya.
Beberapa  bagian  dari  langsat  banyak dimanfaatkan oleh masyarakat untuk mengobati  berbagai  penyakit,  antara  lain sebagai obat cacing, obat demam, obat diare, dan  juga  sebagai  anti  kanker  (Mokosuli, 2008). Penelitian dari Korompis et al (2010) juga  menunjukkan  bahwa  Ekstrak  kulit buah,  biji  dan  kulit  batang  langsat  memiliki aktivitas antibakteri .
Uji  toksisitas  merupakan  salah  satu persyaratan suatu tanaman dapat
dikembangkan  sebagai  obat.  Salah  satu metode  yang  digunakan  untuk  mengetahui toksisitas  dari  suatu  ekstrak  atau  senyawa bahan  alam  ialah  Bhrine  Shrimp  Lethality Test.  Beberapa  kelebihan  metode  ini  ialah mudah,  relatif  murah,  tidak  membutuhkan spesialisasi  tertentu  dalam  pelaksanaannya dan memiliki hasil dengan tingkat kepercayaan  tinggi  (95%)  untuk  mengamati aktivitas toksik dari suatu senyawa di dalam ekstrak  tanaman.  Aktivitas  toksik  diketahui dari  jumlah  kematian  larva  Artemia  salina Leach  karena  pengaruh  ekstrak  atau senyawa  bahan  alam  pada  konsentrasi  yang diberikan  (Silva  et  al,  2007).  Suatu  ekstrak atau  senyawa  bahan  alam  yang  diketahui memiliki  aktivitas  toksik  melalui  metode BSLT jika nilai LC50< 1000 μg/ ml (Meyer et al, 1982).
Berdasarkan uraian di atas, penelitian  untuk  mengetahui  kandungan metabolit  sekunder  pada  Tanaman  Langsat (Lansium domesticum) dan uji toksisitasnya perlu  dilakukan.  Penelitian  ini  dilakukan pada  bagian  daun,  mengingat  pemanfaatan tanaman  langsat  selama  ini  masih  terbatas pada  kulit  batangnya,  sedangkan  bagian daun  masih  belum  dimanfaatkan  secara maksimal.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  Daun  Langsat  (Lansium domesticum),  telur  udang  Artemia  salina, etanol 96 %, Air laut, aquadest, Besi Klorida (Merck),  Kloroform  (Merck),  Amoniak (Merck),  Asetat  anhidrat  (Merck),  Asam sulfat  (Merck),  Asam  klorida  (Merck), Magnesium (Merck), Pereaksi Meyer
(Merck),  Pereaksi  Dragendorf  (Merck),  dan Pereaksi Wagner (Merck).
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  :  Ayakan  mesh  200, Kertas  saring  whatman  42,  alat-alat  gelas Laboratorium  (Pyrex),  rak  tabung  reaksi, mikropipet, Beaker glass, Timbangan analitik  (AND),  oven  (Memmert),  water bath,  hot  plate,  aerator,  Alumunium  foil, vacum  rotary  evaporator  (Steroglass  3000)., Blender (laboratory blender), Spatula, Corong, Lampu pijar..

## Pengambilan dan Persiapan sampel
Sampel  yang  digunakan  ialah  daun langsat (Lansium domesticum) yang diambil dari  desa  Belang,  Minahasa  Tenggara, Sulawesi Utara. Selanjutnya sampel dibersihkan  dan  dikering  anginkan  hingga sampel  kering.  Setelah  kering  sampel diblender  hingga  sampel  menjadi  halus  lalu diayak dengan ayakan mesh 200.

## Ekstraksi Daun
Ekstraksi  bahan  aktif  dilakukan dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut etanol  96%.  Serbuk    daun  Langsat ditimbang sebanyak 100 gram dan dimasukkan ke dalam beaker glass, kemudian  ditambahkan  pelarut  hingga volume  akhir  mencapai  1000  mL  dengan perbandingan  1  :  10  (w/v).  Hasil  maserasi kemudian  disaring  dengan  kertas  saring Whatman  42  sehingga  dihasilkan  filtrat  dan residu.  Perendaman  dilakukan  1  kali remaserasi.  Filtrat  yang  diperoleh kemudian dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator pada suhu 400C hingga diperoleh ekstrak kental berupa pasta..
Uji Fitokimia (Harborne,1987)

## Uji Fenolik
Sejumlah  sampel  dilarutkan  dengan 20  ml  etanol  96%.  Larutan  yang  dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan  2  tetes  larutan  FeCl3  1  %. Reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau atau hijau biru.

## Uji Alkaloid
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  etanol  daun Langsat.  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi kemudian  ditambahkan  2  mL  kloroform secukupnya  dan  10  mL  amoniak  lalu ditambahkan  10  tetes  H2SO4.  Campuran dikocok dan dibiarkan hingga membentuk 2 lapisan.  Lapisan H2SO4 dipindahkan dalam 3  tabung  reaksi  dengan  volume  masing- masing 2,5 mL. Ketiga larutan diuji  dengan pereaksi  Meyer,  Dragendorf  dan  Wagner. Terjadinya  endapan  putih  (untuk  Meyer), merah jingga (untuk Dragendorf) dan coklat (untuk Wagner) menandakan adanya alkaloid.

## Uji Saponin
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  etanol  daun Langsat.  dan  ditambahkan  dengan  10  mL akuades  kemudian  dikocok  kuat  selama kurang lebih 1 menit. Selanjutnya didiamkan selama 10 menit dan diamati buih atau busa yang terbentuk. Keberadaan senyawa saponin  dalam  sampel  ditandai  dengan terbentuknya  buih  yang  stabil  selama  10 menit..

## Uji Triterpenoid/Steroid
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  etanol  daun Langsat. ditambahkan dengan 1 ml kloroform.  Setelah  itu  campuran  dikocok  . ditambahkan  masing-masing  asetat  anhidrat dan  asam  sulfat  pekat  sebanyak  2  tetes. Larutan  dikocok  perlahan  dan  dibiarkan
selama beberapa menit. Steroid memberikan warna biru atau hijau, sedangkan triterpenoid  memberikan  warna  merah  atau ungu.

## Uji Tanin
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  etanol  daun Langsat. dan ditambahkan dengan 10 mL air panas,  kemudian  ditetesi  menggunakan  besi (III) klorida, keberadaan tanin dalam sampel di  tandai  dengan  timbulnya  warna  hijau kehitaman..
Penyiapan Larva Artemia Salina Leach Penetasan  telur Artemia  Salina Leach  dilakukan  dengan  cara  merendam sebanyak 30 mg telur Artemia Salina Leach dalam wadah berisi air laut dibawah cahaya lampu  25  watt.  Telur Artemia  Salina Leach akan  menetas  dan  menjadi  larva  setelah  24 jam.

## Pembuatan Konsentrasi Sampel Uji
Konsentrasi larutan  uji untuk BSLT ialah  1000  μg/mL,  500  μg/mL,  250  μg/mL, 100  μg/mL,  10  μg/mL,  dan  0    μg/mL (sebagai  kontrol  negatif).  Untuk  pembuatan larutan  stok  ekstrak  kental  etanol  96  % Ditimbang  sebanyak  50  mg,  kemudian dilarutkan  dengan  air  laut  sebanyak  50  mL, hingga  diperoleh  konsentrasi  larutan  stok 1000 μg/mL..

## Pelaksanaan Uji Toksisitas
Pada  uji  toksisitas  masing  -  masing konsentrasi  dilakukan  3  kali  pengulangan dengan  tiap  kelompok  sebanyak  l0  ekor larva  Artemia  salina.  Disiapkan  wadah untuk  pengujian,  untuk  masing  -  masing konsentrasi  ekstrak  sampel  membutuhkan  3 wadah  dan  1  wadah  sebagai  kontrol  untuk masing  –  masing  pengulangan.  Selanjutnya
pada  tiap  konsentrasi  larutan  dimasukan  10 ekor  larva  Artemia  salina,  pengamatan dilakukan selama 24 jam  terhadap kematian larva Artemia salina dimana setiap konsentrasi  dilakukan  3  kali  pengulangan dan  dibandingkan  dengan  kontrol.  Kriteria standar  untuk  menilai  kematian  larva Artemia  salina  yaitu  bila  larva  Artemia salina    tidak  menunjukkan  pergerakkan selama beberapa detik observasi.

## Analisis Data
Data hasil penelitian akan diolah dan disajikan  dalam  bentuk  tabel.  Data  dari  uji toksisitas  akan  dianalisis  dengan  analisis probit menggunakan SPSS (Statistical Product  and  Service  Solution)  23  untuk menentukan nilai LC50..

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Fitokimia
Pengujian  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  aktif  yang terdapat  pada  tanaman.  Uji  fitokimia  pada penelitian  ini  dilakukan  terhadap  daun langsat yang sudah dimaserasi menggunakan pelarut  etanol.  Proses  maserasi  sangat menguntungkan  dalam  isolasi  senyawa bahan alam karena selain murah dan mudah dilakukan,  dengan  perendaman  sampel tumbuhan  akan  terjadi  pemecahan  dinding dan  membran  sel  akibat  perbedaan  tekanan antara  di  dalam  dan  di  luar  sel,  sehingga metabolit  sekunder  yang  ada  di  dalam sitoplasma  akan  terlarut  dalam  pelarut (Harbone,  1987).  Maserasi  terhadap  bagian daun  dari  tamanan  Langsat  menghasilkan ekstrak  kental  berwarna  hitam  kehijauan sebanyak  15  gram.  Pengujiannya  dilakukan
dengan  cara  mengambil  sedikit  sampel  dari ekstrak tersebut kemudian dilihat perubahan warna  yang  terjadi.  Uji  fitokimia  dilakukan terhadap golongan senyawa fenolik,
alkaloid,  saponin,  triterpenoid/steroid  dan tanin.  Hasil  pengujian  dapat  dilihat  pada Tabel 1..
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Langsat
Pengujian  fitokimia  yang  telah dilakukan menunjukkan bahwa ekstrak daun langsat  memiliki  kandungan  metabolit sekunder berupa Fenolik, Saponin, Triterpenoid,  dan  Steroid.  Keberadaan metabolit  sekunder  tersebut  menunjukkan bahwa  daun  langsat  mempunyai  efek farmakologis dan berpotensi untuk dijadikan sebagai bahan obat-obatan. Dengan demikian  penelitian  dilanjutkan  dengan  uji aktivitas toksik menggunakan metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test).

## Uji  toksisitas  dengan  Metode  Brine Shimp Lethaly Test (BSLT)
BSLT  (Brine  Shrimp  Lethality  Test) merupakan  salah  satu  uji  praskrining  atau pendahuluan  untuk  mendapatkan  aktivitas biologis  yang  sederhana  untuk  menentukan tingkat  toksisitas  akut  suatu  senyawa  atau
ekstrak dengan menggunakan Artemia salina sebagai  hewan  uji.  Artemia  salina  yang digunakan  pada  pengujian  toksisitas  ialah Artemia  salina  yang  berada  pada  tahap nauplii atau tahap larva. Hal ini dikarenakan Artemia  salina  pada  tahap  nauplii  sangat mirip dengan sel manusia (Meyer, 1982).
Pengujian  toksisitas  ekstrak  etanol daun langsat dilakukan dengan menggunakan konsentrasi 1000 μg/mL, 500 μg/mL,  250  μg/mL,  100  ,  10  μg/mL  dan  0 μg/mL  sebagai  kontrol  negatif.  Pengujian terlebih  dahulu  dilakukan  dengan  cara menetaskan  telur  larva  artemia  salina  leach. Pada  awalnya,  penetasan  dilakukan  dengan cara merendam  telur A. salina dalam wadah yang  berisi  air  laut  namun  telur  A.  salina tidak menetas. karena tidak menetasnya telur A.salina  tersebut,  maka  dibuat  air  laut
Senyawa Metabolit Perubahan Warna Hasil Pengujian Fenolik warna hijau atau hijau biru + Alkaloid warna hijau - Saponin terbentuknya buih yang stabil selama 10 menit + Triterpenoid/Steroid warna biru atau hijau (Steroid), merah atau ungu (Triterpenoid) + Tanin warna putih kecokelatan -
buatan  (sintetik)  yaitu  20  g  garam  non yodium  dilarutkan  dalam  1  L  aquades. Setelah  48  jam  telur  A.  salina  berhasil menetas  dengan  sempurna.  Selanjutnya, Pengujian  dilakukan  dengan  memindahkan larva artemia dewasa, masing-masing sepeluh  ekor  ke  dalam  setiap  konsentrasi untuk  dibuat  perlakuan.  Jumlah  larva Artemia  salina  Leach  diuji  dengan  tiga  kali pengulangan  yaitu  30  ekor.  Jumlah  total larva  Artemia  salina  Leach  yang  digunakan sebanyak  180  ekor  larva.  Total  kematian diperoleh  dengan  menjumlahkan  larva  yang mati  pada  setiap  konsentrasi,  sedangkan rata-rata  kematian  larva  diperoleh  dengan membagi  total  kematian  larva  pada  tiap
konsentrasi  dengan  jumlah  pengulangan yang  dilakukan  yaitu  tiga  kali.  Kemudian dihitung persentase kematian larva dari rata- rata kematian pada tiap konsentrasi. Ekstrak daun  langsat  diuji  ketoksikannya  dalam mematikan larva dengan perlakuan konsentrasi yang berbeda, rentang konsentrasi  ini  dipilih  karena  sampel dikatakan  toksik  apabila  nilai  LC50  kurang dari  1000  ppm.  Kemampuan  toksisitas ekstrak  etanol  dari  daun  langsat  dalam mematikan  larva  udang  yang  telah  diberi perlakuan dapat dilihat dalam Tabel 2.
Tabel 2. Pengaruh berbagai konsentrasi ekstrak daun langsat terhadap larva udang
Pengujian Kontrol Negatif Jumlah Kematian Setiap Konsentrasi 10 g/mL  100 g/mL  250 g/mL  500 g/mL  1000 g/mL 1 0 2 6 10 10 10 2 0 2 6 9 10 10 3 0 5 7 7 9 10 Total Kematian Larva 0 9 19 26 29 30 Rata- rata 0 3 6,3 8,6 9,6 10 Presentase Kematian 0 30% 63,3% 86,6% 96,6% 100%
Tabel 2 menunjukkan bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka kematian larva  akan semakin  tinggi.  Hal  ini sesuai  dengan  Harborne  (1994),  yang menyebutkan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  sifat  toksiknya akan  semakin  tinggi,  sehingga  kematian larva dipengaruhi oleh peningkatan konsentrasi  dalam  sampel.  Hasil  pengujian yang  diolah  menggunakan  analisis  probit, menunjukkan  nilai  LC50  dari  daun  langsat yaitu:  32,713  μg/ml.  dimana  tingkat kematian tertinggi terdapat pada konsentrasi 1000  μg/mL  dan  kematian  terendah  pada konsentrasi 10 μg/mL. Hal ini membuktikan bahwa Artemia salina yang mati disebabkan oleh  sifat  toksik  dari  ekstrak  daun  langsat tersebut.
Senyawa  fitokimia  yang  memiliki efek  toksik  pada  tanaman  tersebut,  antara lain fenolik, triterpenoid/steroid, dan saponin. Diantara metabolit sekunder tersebut,  fenolik  diperkirakan  memiliki peran  terbesar,  fenol  merupakan  salah  satu gugus  dari  acetogenin  (senyawa  toksik). Fenol  sering  digunakan  sebagai  antiseptik dan  antibakteria,  mekanisme  kerja  senyawa ini adalah dengan penghancuran dinding sel dan  presipitasi  (pengendapan)  protein  sel dari mikroorganisme sehingga terjadi koagulasi dan  kegagalan  fungsi dari mikroorganisme  tersebut.  Senyawa  fenol diduga  mempunyai  aktivitas  antioksidan, antitumor, antiviral, dan antibiotik (Harborne,  1987;  Apak  et  al.,  2007).  Selain Fenolik,  metabolit  sekunder  yang  lain  juga memberikan  aktivitas  toksik  yaitu  dengan bertindak  sebagai  racun  perut.  Apabila senyawa-senyawa  tersebut  masuk  ke  dalam tubuh  larva,  alat  pencernaannya  akan
terganggu  dan  dapat  menghambat  reseptor perasa pada mulut larva. hal ini mengakibatkan larva gagal mendapat stimulus  rasa,  sehingga  tidak  mampu mengenali  makanannya  sehingga  larva  mati kelaparan.
Suatu  ekstrak menunjukkan aktivitas ketoksikan  dalam  BSLT  jika  ekstrak  dapat menyebabkan kematian 50% hewan uji pada konsentrasi kurang dari 1000 μg/ml (Meyer, 1982  ;  Anderson,  1991).  Berdasarkan  data hasil  pengujian  yang  kemudian  diolah menggunakan analisis probit LC50, didapatkan  nilai  LC50  dari  esktrak  etanol daun  langsat  yaitu  32,713  μg/ml.  dari pernyataan di atas, maka hal ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun langsat  bersifat  toksik.  Sehingga  dapat dikembangkan  ke  penelitian  lebih  lanjut untuk mengisolasi senyawa sitotoksik tumbuhan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dapat  ditarik  kesimpulan sebagai berikut:
1) Senyawa  metabolit  sekunder  yang terdapat  dalam  ekstrak  etanol  96  % daun  langsat  (Lansium  domesticum Corr) yaitu Fenolik, Saponin, Triterpenoid, dan Steroid.
2) Ekstrak  etanol  96  %  daun  langsat (Lansium  domesticum  Corr)  memiliki sifat  toksik  dengan  nilai  LC50  yaitu 32,713 μg/mL.

## SARAN
Hasil  uji  toksisitas  menunjukkan daun langsat bersifat toksik  yang berpotensi sebagai bahan obat, sehingga perlu
dilakukan pengujian bioaktivitas lebih lanjut terhadap tanaman ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson, J. E., Goetz C.M., Mc Laughlin J. L.  1991. A  Blind  Comparison  of
Simple  Bench-top  Bioassay  and Human Tumor Cell Cytotoxicities as Antitumor Prescrenss , Natural Product Chemistry, Elseiver, Amsterdam.
Apak  R.,  K.Guclu,  B.  Demirata  M. Ozytirek,  S.  E.  Qelih  B.  Bektaqollu, K.I.  Berker  and  D.  Ozyurt.  2007. Comparative  Evaluotion  of  Various Total  Antioxidont  Capacity  Assay Applied to Phenolic Compounds with The CWPMC Assay . Molecules, 12 :
1496-1547.
Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia: Penentuan Cara Modern Menganalisa  Tumbuhan.Terjemahan Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang
Soediro. ITB, Bandung.
Harborne,  J.  B.  1994. The  Flavonoids . Chapman and Hall. London.
Hendrawati,  A.  R.  S.  2009. Uji  Toksisitas Akut  Ekstrak  Etanol  Daun  Kemangi (Ocinumsanctum  Linn.)  Teerhadap Artemia salina Leach Dengan Metode  Brine  Shrimp  Letholity  Test (BSLT) . [Skripsi]. Fakultas
Kedokteran, Universitas Diponegoro.
Semarang.
Kanwar,  A.S.  2007. Brine  Shrimp  (Artemia salina)  A  Marine  Animal  for  Simple and Rapid Biological Assays .
Chinese Clinical Medicine.
Korompis  GEC,  Danes  VR,  Sumampouw
OJ.  2010. Uji  invitro  aktivitas antibakteri Langsat (Lansium domesticum) . Bul Penenlitian
Kesehatan 3: 13-19.
Lawalata  N.  V.  2012. Rekayasa  Proses Ekstraksi Kulit Buah Langsat (Lansium  domesticum  L)  Sebagai Bahan  Antibakteri  dan  Antioksidan [Skripsi]. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian : Bogor. Lenny,  S.  2006. Senyawa  Flavonoida, Fenilpropanoida dan Alkaloida .
Departemen  Kimia  FMIPA  USU, Medan.
Mc  Laughlin  JL  et  al.  1998.  The  use  of biological assays to evaluate botanicals. Drug Information Journal 32:513-524.
Meyer,  B.  N.  Ferrigni,  Putnam,  J.  E. Jacobsen,  L.  B.  Nichols,  Mclaughin. 1982. Brine  Shrimp:  A  Cowenient General  Bioassay  for  Active  Plant Constituenls .  Planta  Medica.  45:31- 34.
Mokosuli  YS.  2008. Aktivitas  antioksidan dan  antikanker  ekstrak  kulit  batang langsat  (Lansium  domesticum  L.)
[Tesis]. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor. Silva,T.M., Nascimento,R.J., Batista, M.B.,Agra,M.F.,dan Camara,C.A. 2007. Bhrine  shrimp  bioassay  of some  species  of  solanum  from northeastern brazil. Revista Brasileirade  Farmacognosia .  17(1)
:35-38