Rimadani Eka Mareta, Subandiyono,Sri Hastuti /Jurnal Sains Akuakultur Tropis:  1 (201 7 )1:21-30

## Sains Aku a kultur Tropis D e p a r t e m e n A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan - Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id
PENGARUH ENZIM PAPAIN DAN PROBIOTIK DALAM PAKAN TERHADAP TINGKAT EFISIENSI PEMANFAATAN PAKAN DAN PERTUMBUHAN IKAN GURAMI
( Osphronemus gouramy)
Effect of Papain and Probiotics in Artificial Feed on Feed Efficiency Utilization Level and Growth Rate of Gourami (Osphronemus gouramy)
Rimadani Eka Mareta, Subandiyono*, Sri Hastuti
Program Studi Budidaya Perairan, Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto Tembalang-Semarang

## ABSTRAK
Pertumbuhan ikan gurami ( Osphronemus gouramy ) yang relatif lambat disebabkan oleh kecernaan pakan yang kurang maksimal, sehingga nutrisi dalam pakan tidak dapat dimanfaatkan dengan baik.  Enzim papain dan probiotik dalam  pakan  mampu  meningkatkan  pemanfaatan  pakan.    Enzim  papain  berperan  dalam  memecah  protein  menjadi senyawa  lebih  sederhana,  sehingga  mudah  diserap  ke  dalam  tubuh.    Sedangkan  mikroba  probiotik  yang  ada  dalam saluran pencernaan menghasilkan enzim eksogenus yang dapat meningkatkan kecernaan pakan dan penyerapan nutrisi dari pakan.  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengkaji pengaruh pemberian probiotik dan enzim dalam pakan terhadap  efisiensi  pemanfaatan  pakan  dan  pertumbuhan  ikan  gurami.    Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  benih  ikan gurami dengan bobot tubuh rata-rata sebesar 7,7±0,26 g/ekor, dengan kepadatan sebanyak 1 ekor/2 liter air.  Metode penelitian ini menggunakan experimental laboratoris dengan rancangan acak lengkap pola faktorial (2x2).  Faktor yang digunakan adalah enzim papain dan probiotik.  Masing-masing faktor diulang sebanyak 3 kali.  Faktor pertama adalah pakan dengan pemberian enzim papain sebesar 0,25 g/kg pakan (E1) dan 0,5 g/kg pakan (E2).  Faktor kedua adalah pemberian  pakan  dengan  probiotik  sebesar  10  ml/kg  pakan  (P1)  dan  15  ml/kg  pakan  (P2).    Variabel  yang  diamati meliputi  laju  pertumbuhan    relatif  (RGR),  efisiensi  pemanfaatan  pakan  (EPP),  tingkat  konsumsi  pakan  total  (TKP), rasio  efisiensi  protein  (PER),  dan  kelulushidupan  (SR).    Berdasar  pada  hasil  yang  telah  diperoleh  diketahui  bahwa pakan dengan penambahan enzim papain sebesar 0,25 g/kg pakan dan probiotik sebesar 15 ml/kg pakan memberikan pengaruh  yang  nyata  (P<0,05)  terhadap  nilai  EPP  dan  PER  ikan  gurami.    Namun,  pakan  tersebut  memberikan pengaruh  yang  sama  (P>0,05)  terhadap  nilai  RGR,  TKP,  dan  SR  ikan  gurami.    Hasil  tersebut  tidak  menunjukkan interaksi  pada  semua  variabel.    Selama  penelitian  berlangsung,  kualitas  air  ikan  gurami  masuk  dalam  kisaran  yang layak untuk pemeliharaan ikan gurami ( O. gouramy) . Kata kunci : efisiensi, gurami, papain, pemanfaatan pakan, pertumbuhan, probiotik

## ABSTRACT
A  relative  slow  growth  of  gourami (Osphronemus  gouramy) was  caused  by  lack  of  the  deficient  feed digestibility  capacity  of  the  fish  therefore,  feed  nutrition  could  not  be  used  appropriately.    Papain  enzyme  and probiotics had a function to increase feed efficiency utilization of the gourami.  Papain enzyme breaked down protein into simpler compounds that will be easily absorbed into the body of the fish.  While probiotics microbial on digestive track produced an exogenous enzymes to improve the feed digestibility and absorp of feed nutrients. This study aimed to assess the effect of different dietary papain enzyme and probiotics on feed efficiency utilization and growth rate of gourami.  Experimental fish used was juvenile of gourami with an average body weight of 7.7±0.26 g/tail and with the density of 1 per the two liters of water.   This study used laboratory experimental on completely randomized method factorial design with order (2x2).  Factor used was papain enzyme and probiotics.  Each factor was repeated 3 times. First factor was dietary papain enzyme of 0.25 g/kg of feed (E1) and 0.5 g/kg of feed (E2).  Second factor was dietary probiotics of 10 ml/kg of feed (P1) and 15 ml/kg of feed (P2).  The variables observed measured were relative growth rate (RGR), feed efficiency utilization (FEU), feed consumption (FC), protein efficiency ratio (PER), and survival rate (SR).  Based on the result showed that dietary papain enzyme of 0.25 g/kg of feed and probiotics of 15 ml/kg of feed had a significantly effect (P<0,05) on the value of FEU and PER.  However, dietary papain enzyme and probiotics had no effect (P>0,05) on the value RGR, FC, and SR.   The all variabels  were not showed the interaction.  During this experimental periode, water quality parameters used to reared gourami  were ranged between suitable criteria.
Keywords: efficiency, feed utilization, gourami, papain, growth rate, probiotics

## PENDAHULUAN
Ikan  gurami  ( Osphronemus  gouramy )  merupakan  ikan  dengan  nilai  ekonomis  tinggi.  Namun, pertumbuhan yang relatif lambat menjadi salah satu kendala dalam upaya melestarikannya (Effendi et al ., 2006; Nirmala  dan  Rasmawan,  2010;  Rohy et  al., 2014).  Pakan  merupakan  faktor  yang  paling  penting  dalam menentukan  pertumbuhan  ikan,  pertumbuhan  akan  terjadi  apabila  memiliki  protein  yang  tepat  sehingga  dapat digunakan  untuk  tubuh  melakukan  pertumbuhan  (Adelina et  al., 2000).    Pertumbuhan  akan  meningkat  apabila diberikan  pakan  dengan  kebutuhan  nutrisi  yang  sesuai  dengan  kebutuhan  tubuh  ikan  sehingga  pemanfaatan protein  akan  maksimal  (Sanjayasari  dan  Kasprijo,  2010;  Dani et  al .,  2005).    Peningkatan  pemanfaatan  pakan dapat dilakukan dengan penambahan enzim papain dalam membantu memcah protein dan penambahan probiotik dengan menggunakan mikroorganisme sebagai aplikator peningkatan kecernaan pakan.
Enzim  papain  merupakan  enzim eksogeneous yang  terdapat  dalam  buah  pepaya  yang  memiliki  fungsi memecah  protein  dalam  pakan  sehingga  protein  dapat  lebih  mudah  diserap  oleh  tubuh  ikan  dan  akan meningkatkan  kecernaan  pakan  (Sari et  al., 2013;  Hutabarat et  al. ,  2014; Taqwdasbriliani et  al., 2013).  Enzim papain  merupakan  enzim  proteolitik  yang  bekerja  memecah  protein  menjadi  asam  amino  (Darmodaran,  1996). Protease  digolongkan  menjadi  proteinase  ( eksopeptidase )  dan  peptidase  ( endopeptidase ). Endopeptidase memutus ikatan peptida yang spesifik pada bagian tengah rantai protein.   Enzim yang tergolong endopeptidase, yaitu tripsin, pepsin, papain, bromelin dan enzim endopeptidase lainnya. Eksopeptidase memutus ikatan peptida di  bagian  ujung  rantai  peptida,  pada  gugus  amino  maupun  gugus  karboksil  (Rawlings et  al .,  2007). Hasan (2000),  menyatakan  penambahan  papain  dalam  pakan  buatan  mampu  meningkatkan  retensi  protein,  efisiensi pakan, dan laju pertumbuhan harian ikan gurami.  Papain diharapkan mampu meningkatkan pemanfaatan protein pakan untuk pertumbuhan.  Penambahan enzim papain pada pakan dilakukan untuk dapat memanfaatkan protein secara maksimal dan lebih optimal pada kultivan.
Penggunaan probiotik merupakan upaya yang dilakukan guna meningkatkan kemampuan dalam mencerna pakan dengan penambahan mikroorganisme.  Mikroorganisme yang terdapat dalam pakan tersebut akan melepas enzim-enzim  pencernaan  makanan,  mengatur  lingkungan  mikroba  pada  usus,  menghalangi  mikroorganisme patogen  usus.  Bakteri  probiotik  ini  mempunyai  sifat  dapat  mengsekresikan  enzim  protease,  lipase  dan  amilase (Jusadi et al ., 2004).  Probiotik merupakan mikroba tambahan yang memebrikan pengaruh menguntungkan bagi inang  melalui  peningkatan  nilai  nutrisi  pakan,  respon  terhadap  penyakit  atau  memperbaiki  kualitas  lingkugan. Umumnya,  bakteri  probiotik  terdiri  dari  bakteri  nitrifiying  atau  bakteri heterotropik .    Bakteri  heterotropik merupakan bakteri yang mengkonsumsi oksigen untuk menghasilkan karbondioksida dan amoniak dalam proses oksidasi  (Putra,  2010;  Murtiati et  al. ,  2007).  Keuntungan  penggunaan  probiotik  karena  probiotik  melakukan modifikasi  atau  berasosiasi  dengan  inang,  menjamin  perbaikan  dalam  penggunaan  pakan  atau  memperbaiki nutrisinya,  meningkatkan  respon  inang  terhadap  penyakit  dan  memperbaiki  kualitas  lingkungannya (Rahmawan, 2014).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  pengaruh  pemberian  probiotik  dan  enzim  yang  berbeda  dalam pakan  terhadap  efisiensi  pemanfaatan  pakan  dan  pertumbuhan  Ikan  Gurami  ( O.  gouramy ).    Hasil  penelitian diharapkan  mampu  memberikan  informasi  kepada  pembaca  pada  umumnya  dan  pembudidaya  pada  khususnya tentang  peran  penting  penggunaan  enzim  papain  dan  probiotik  dengan  dosis  sesuai  untuk  pertumbuhan  benih gurami ( O. gouramy ).  Penelitian ini dilaksanakan pada 25 Desember 2015–12 Februari 2016 di Balai Benih Ikan Mijen,  Semarang.    Meliputi  persiapan  alat,  persiapan  media  pemeliharaan,  aklimatisasi  dan  pelaksanaan penelitian selama 42 hari.

## MATERI DAN METODE
Ikan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  benih  ikan  gurami  ( O.  gouramy )  yang  berasal  dari Banjarnegara,  Jawa  Tengah.    Ikan  uji  yang  digunakan  memiliki  bobot  rata-rata  7,7±0,26g/ekor  dengan  padat tebar  1  ekor/2  liter  air  (Beauty et  al., 2012).  Pakan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  pakan  buatan berbentuk  pelet  ukuran  1-2  mm.  Pakan  uji  ditambahkan  enzim  papain  yang  berasal  dari  BBPAP  Jepara  dan probiotik  dengan  kandungan Lactobacillus  casei dan Saccharomyces  sereviceae .    Pemberian  pakan  dilakukan dengan  metode at  satiation dengan  frekuensi  pemberian  pakan  tiga  kali  sehari,  yaitu  pukul  08.00,  12.00  dan 16.00 WIB. Wadah pemeliharaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah  ember sebanyak 12 buah dengan volume  air  yang  digunakan  sebanyak  20  l,  yang  dilengkapi  dengan  sirkulasi  air  sederhana  guna  mengurangi intensitas  pergantian  air.    Pengelolaan  kualitas  air  dilakukan  dengan  melakukan  penyiponan.    Pada  saat penyiponan, air yang terbuang akan dilakukan penambahan air sampai volume yang sama sebelumnya.   Proses penyiponan dan memasukan air baru pada  wadah dilakukan secara bersamaan, dengan tujuan agar ikan mampu beradaptasi dengan suhu air yang baru, dengan tujuan agar ikan tidak mengalami stres.
Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap (RAL) pola faktorial 2x2.  Faktor pertama adalah pemberian enzim papain 0,25 g/kg pakan (E1) dan pemberian enzim papain 0,5 g/kg pakan (E2), sedangkan  faktor  kedua  adalah  pemberian  probiotik  10  ml/kg  pakan  (P1)  dan  dengan  pemberian  probiotik  15
ml/kg pakan (P2).  Penelitian ini menggunakan 4 perlakuan dan 3 kali pengulangan.  Perlakuan yang dilakukan adalah sebagai berikut:
Perlakuan E1P1:  Kandungan 0,25 g/kg enzim papain dan 10 ml  probiotik Perlakuan E1P2:  Kandungan 0,25 g/kg enzim papain dan 15 ml probiotik Perlakuan E2P1:  Kandungan 0,5 g/kg enzim papain dan 10 ml probiotik Perlakuan E2P2:  Kandungan 0,5 g/kg enzim papain dan 15 ml probiotik Ikan  uji  dipilih  berdasarkan  keseragaman  ukuran,  kelengkapan  organ  tubuh  dan  kesehatan  secara  fisik. Ikan uji yang telah diseleksi, dimasukan ke dalam  wadah media pemeliharaan selama 1 minggu untuk adaptasi terhadap pakan dan lingkungan baru.  Sebelum dilakukan perlakuan, ikan uji dipuasakan selama satu hari.
Berdasarkan  uji  analisis  kandungan  pakan  yang  digunakan  diketahui  bahwa  kandungan  pakan  yang diberikan pada Ikan Gurami ( O. gouramy ) tersaji pada Tabel 1.
Tabel 1.  Hasil Analisis Uji Proksimat Pakan yang diberikan pada Ikan Gurami ( O. gouramy ) Bahan Air Abu Lemak Karbohidrat Protein Total E1P1 0,00 15,20 9,46 45,35 29,98 100 E1P2 0,00 12,54 10,15 44,43 32,88 100 E2P1 0,00 11,37 10,88 41,86 35,88 100 E2P2 0,00 10,70 11,19 39,54 38,57 100
Sumber : Unit Pelaksana Teknis (UPT) Laboratorium Ilmu Gizi dan Teknologi Pangan, Program Studi Ilmu Gizi dan Teknologi Pangan Universitas Muhammadiyah Semarang (2016).
Data  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  meliputi  nilai  laju  pertumbuhan  relatif,  efisiensi  pemanfaatan pakan, rasio efisiensi protein, tingkat konsumsi pakan dan kelulushidupan.

## Tingkat konsumsi pakan
Perhitungan nilai tingkat konsumsi pakan harian dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
Dimana :
TFC
= Total konsumsi pakan  (gram)
F1 = Jumlah pakan awal (gram) F2 = Jumlah pakan akhir (gram)

## Efisiensi pemanfaatan pakan (EPP)
Nilai efisiensi pemanfaatan pakan dapat ditentukan dengan rumus Tacon (1987), sebagai berikut:
EPP =
Dimana :
EPP
: Efisiensi pemanfaatan pakan (%)
W 0 : Bobot biomassa pada awal penelitian (g) Wt : Bobot biomassa pada akhir penelitian (g) F : Jumlah pakan ikan nila larasati yang dikonsumsi selama penelitian (g)

## Rasio efisiensi protein (PER)
Nilai rasio efisiensi protein dihitung menggunakan rumus Tacon (1987), sebagai berikut:
PER = ( Wt-Wo ) x 100%
Pi
Dimana :
PER
: Rasio efisiensi pakan (%)
W 0 : Bobot biomassa pada awal penelitian (g) Wt : Bobot biomassa pada akhir penelitian (g)
Pi : Jumlah pakan uji yang dikonsumsi dikali kandungan protein pakan uji Laju pertumbuhan relatif (RGR)
Laju pertumbuhan relativedapat dihitung menggunakan rumus De Silva dan Anderson (1995):
RGR = W t – W 0 x 100% W 0 x t Dimana : RGR : Laju pertumbuhan relatif (%) W 0 : Bobot biomassa pada awal penelitian (g)
x 100%
Wt
: Bobot biomassa pada akhir penelitian (g) T : Lama penelitian (hari)
Kelulushidupan (SR) Menurut  Effendi  (1997), Survival  Rate (SR)  merupakan  prosentase  kelulushidupan  ikan  yang  dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Dimana :
SR
= Tingkat kelulushidupan ikan (%)
N t
= Jumlah ikan pada akhir penelitian (ekor) N 0 = Jumlah ikan padaawal penelitian (ekor)
Data  tersebut  terlebih  dahulu  dilakukan  uji  normalitas,  uji  homogenitas,  dan  uji  addivitas  guna mengetahui bahwa data bersifat normal, homogen dan additiv untuk dilakukan uji lebih lanjut yaitu analisis sidik ragam.  Nilai variabel yang didapatkan kemudian dianalisis menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA) selang kepercayaan  yang  digunakan  adalah  95%.    Data  kualitas  air  dianalisis  secara  deskriptif  untuk  mendukung pertumbuhan.

## HASIL
Hasil penelitian pemberian enzim papain dan probiotik dalam pakan buatan terhadap RGR, EPP, PER, TFC, dan SR benih gurami ( O.gouramy ) tersaji pada Tabel 2.
Tabel 2.  Nilai Rata-rata meliputi laju pertumbuhan  relatif (RGR), efisiensi pemanfaatan pakan (EPP), tingkat konsumsi pakan total (TFC), rasio efisiensi protein (PER), dan Kelulushidupan (SR) selama Penelitian
Perlakuan Variabel yang Diamati TKP (g) EPP (%) PER (%) RGR (%/hari) SR (%) Enzim 1 Probiotik 1 102,10±1,23 34,29±5,08 1,15±0,17 1,09±0,18 73,33±5,77 Probiotik 2 114,60±18,59 49,48±3,81 1,51±0,12 1,74±0,34 83,33±5,77 Enzim 2 Probiotik 1 105,41±10,45 30,57±1,35 0,85±0,04 1,05±0,04 76,67±5,77 Probiotik 2 103,56±8,96 35,33±5,78 0,92±0,15 1,17±0,27 73,33±5,77
Berdasarkan  data  laju  pertumbuhan  relatif  (RGR),  efisiensi  pemanfaatan  pakan  (EPP)  dan  rasio efisiensi protein (PER) ikan gurami ( O. gouramy ) selama penelitian dibuat grafik seperti pada Gambar 1.
102.10±1.23 114.60±18.59 105.41±10.45 103.56±10.93 80 87 94 101 108 115 122 129 136 10 ml 15 ml T o tal Ko n su m si P ak an ( g) Probiotik Total Konsumsi Pakan 0.25 g 0.5 g 34.29±5.08 49.48±3.81 30.57±1.35 35.33±5.78 20 25 30 35 40 45 50 55 10 ml 15 ml E fis ien si P em an faat an P ak an ( %) Probiotik Efisiensi Pemanfaatan Pakan 0.25 g 0.5 g SR  = N t x 100 % N 0 Papain Papain (a) (b)
Gambar 1.   Nilai Total Konsumsi Pakan (a), Efisiensi Pemanfaatan Pakan (b), Rasio Efisiensi Protein (c), Laju Pertumbuhan  Relatif  (d),  dan  Kelulushidupan  (e)  pada  Benih  Gurami  ( O.  gouramy )  selama Penelitian
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  dalam  pakan  buatan tidak memiliki interaksi yang berpengaruh nyata (P>0,05) terhadap laju pertumbuhan relatif (RGR) dan efisiensi pemanfaatan pakan (EPP), rasio efisiensi protein (PER) pada benih gurami ( O. gouramy ), karena nilai F hitung < F  tabel  (0,05),  namun  memiliki  pengaruh  perlakuan  yang  nyata  (P<0,05)  pada  probiotik  terhadap  EPP  dan pengaruh perlakuan yang nyata (P<0,05) terhadap enzim papain pada nilai PER. Hasil pengukuran kualitas air dalam media pemeliharaan benih gurami ( O. gouramy ) selama penelitian tersaji pada Tabel 3.
Tabel 3.  Hasil Parameter Kualitas Air pada Media Pemeliharaan Benih Gurami ( O. gouramy ) selama Penelitian
Parameter Kualitas Air Kisaran Nilai Parameter Kualitas Air Pustaka (Kelayakan) Suhu ( 0 C) 28-33 25 – 32 a pH 7-8 6,5 – 8,5 a DO (mg/l) 4,46-4,93 ≥3 b NH 3 (%) 0,00-0,89 <1 c
Keterangan: a Boyd (1982), b Zonneveld (1991), c Robinette (1976)

## PEMBAHASAN

## Total Konsumsi Pakan
Hasil analisis ragam menunjukkan penambahan enzim papain dan probiotik pada pakan tidak memberikan pengaruh  yang nyata (P>0,05) terhadap nilai total  konsumsi pakan (TKP)  ikan  gurami ( O. gouramy ) dan tidak menunjukkan  interaksi.    Hasil  penelitian  menunjukkan  nilai  konsumsi  pakan  yang  sama  antar  perlakuan,  nilai masing-masing  perlakuan  yaitu  E1P1  102,10±1,23  g,  perlakuan  E1P2  sebesar  114,60±18,59  g,  selanjutnya perlakuan  E2P1  sebesar  105,41±10,45  g,  perlakuan  E2P2  103,56±10,93  g.    Hasil  analisis  ragam  menunjukkan penambahan enzim papain dan probiotik pada pakan tidak memberikan pengaruh yang nyata (P>0,05) terhadap nilai total konsumsi pakan (TKP) ikan gurami ( O. gouramy ) dan tidak menunjukkan interaksi.  Hasil penelitian menunjukkan  nilai  konsumsi  pakan  yang  sama  antar  perlakuan,  nilai  masing-masing  perlakuan  yaitu  E1P1 102,10±1,23  g,  perlakuan  E1P2  sebesar  114,60±18,59  g,  selanjutnya  perlakuan  E2P1  sebesar  105,41±10,45  g, perlakuan E2P2 103,56±10,93 g.  Haetami (2012), menyatakan bahwa tingkat konsumsi pakan dipengaruhi oleh tingkat  energi  dalam  pakan.    Apabila  tingkat  energi  protein  melebihi  kebutuhan  maka  akan  menurunkan konsumsi pakan, yang akan berakibat penyerapan nutrien lainnya termasuk protein akan menurun.
1.15±0.17 1.51±0.12 0.85±0.04 0.92±0.15 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 10 ml 15 ml Ras io E fis ien si P ro te in ( %) Probiotik Rasio Efisiensi Protein 0.25 g 0.5 g 1.09±0.18 1.74±0.34 1.05±0.04 1.17±0.27 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 10 ml 15 ml L aj u P er tu m b u h a n Re lat if ( %/h ar i) Probiotik Laju Pertumbuhan Relatif 0.25 g 0.5 g 73.33±5.77 83.33±5.77 76.67±5.77 73.33±5.77 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 10 ml 15 ml Kelu lu sh id u p a n ( %) Probiotik Kelulushidupan 0.25 g 0.5 g Papain Papain Papain (c)
(d)
(e)
Menurut  Amin (2007), bahwa  meningkatnya proses  metabolisme dalam tubuh akan  memacu ikan  untuk mengkonsumsi  pakan  lebih  banyak.    Semakin  banyak  pakan  yang  dikonsumsi  dan  penggunaan  pakan  yang efisien  maka  akan  semakin  banyak  protein  yang  diretensi,  sehingga  pertumbuhan  akan  meningkat.    Menurut Robinson et. al. (2001), energi dalam pakan akan mempengaruhi asupan pada ikan yang diberi makan secara at stiation .  Jika  energi  dalam  pakan  terlalu  tinggi,  ikan  akan  cepat  kenyang  sehingga  menghentikan  konsumsi pakannya.

## Efisiensi Pemanfaatan Pakan
Hasil  analisis  ragam  efisiensi  pemanfaatan  pakan  ikan  gurami  ( O.  gouramy )  menunjukkan  pemberian enzim papain dan probiotik dalam pakan memberikan pengaruh yang nyata (P<0,05) pada nilai EPP ikan gurami ( O.  gouramy ),  namun  tidak  menunjukkan  interaksi.    Papain  mampu  meningkatkan  daya  cerna  dan  penyerapan protein oleh ikan atas pakan yang dikonsumsi, sehingga meningkatkan pemanfaatan pakan oleh tubuh.  Selain itu penambahan  probiotik  juga  mampu  meningkatkan  pemanfaatan  pakan  hal  tersebut  dikarenakan  kandungan mikroorganisme  yang  mampu  menghasilkan  enzim  amilase,  lipase,  protease  sehingga  nutrisi  dalam  pakan mampu  dimanfaatkan  dengan  maksimal  dalam  pencernaan  ikan.    Ghouse  (2015),  probiotik  adalah mikroorganisme hidup yang diberikan dalam jumlah tertentu kedalam pakan atau suplemen yang memiliki efek menguntungkan  pada  keseimbangan  mikroba  pada  usus  ikan  dan  dapat  meningkatkan  kesehatan.    Selain  itu penambahan enzim papain juga mampu meningkatkan pemanfaatan pakan hal tersebut dikarenakan enzim papain yang mampu memecah protein menjadi lebih sederhana sehingga dapat meningkatkan kecernaan pakan. Riyanti et al. (2014) mengemukakan bahwa papain mampu meningkatkan daya cerna dan penyerapan protein oleh ikan atas pakan yang dikonsumsi, sehingga meningkatkan pemanfaatan pakan oleh tubuh.
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  diperoleh  nilai  pemanfaatan  pakan  dengan  peningkatan dosis probiotik menghasilkan efisiensi pakan yang berbeda pada dosis papain 0,25 g/kg pakan namun nilai EPP ikan gurami pada peningkatan probiotik memiliki nilai yang sama pada peningkatan dosis enzim papain menjadi 0,5  g/kg  pakan.    Nilai  EPP  tertinggi  yaitu  perlakuan  E1P2  dengan  nilai  49,48±3,81  %,  selanjutnya  adalah perlakuan  E2P2  dengan  nilai  35,33±5,78  %,  perlakuan  E1P1  dengan  nilai  34,29±5,08  %  dan  perlakuan  E2P1 yaitu 30,57±1,35 %.  Hal tersebut diduga karena dosis penambahan enzim papain sebesar 0,25 gr/kg pakan dan probiotik  15  ml/kg  pakan  merupakan  penambahan  yang  dapat  meningkatkan  kecernaan  pakan  sehingga pemanfaatan pakan ikan gurami (O. gouramy ) lebih maksimal.  Nilai tersebut lebih rendah dari penelitian dengan enzim  papain  oleh  Hasan  (2000),  yaitu  sebesar  124±30,2%  dengan  dosis  1,5%  pada  gurami  ukuran  0,03  g, namun  lebih  tinggi  dari  penelitian  Sari et  al. (2013)  pada  ikan  nila  ukuran  3-5  cm  dengan  nilai  epp  tertinggi 21,93±1,43% dengan penggunaan papain 1,5% yang dihidrolisis ke tepung kedelai. Nilai epp pada  penelitian ini lebih tinggi dari Juliani (2013) dengan dosis probiotik 15 ml/kg 24,56±3,35% pada ikan gurami ukuran 4-6 cm, Ahmadi et  al. (2012)  nilai  epp  43,93  %  dengan  tambahan Acetobacter pada  probiotik  yang  digunakan,  namun hasil penelitian ini lebih rendah dari Noviana et al. (2014) dengan nilai epp 77,23±1,88% dengan penambahan probiotik 10 ml/kg pakan pada ikan nila ukuran 4,2±0,13 g.
Lestari (2001), menyatakan kecernaan pakan juga digunakan sebagai indikator penilaian tingkat efesiensi pakan yang diberikan pada ikan, maka semakin besar kecernaan pakan akan meningkatkan pemanfaatan nutrien dalam  pakan.    Menurut  Marzuqi et  al. (2012),  bahwa  efisiensi  pakan  menunjukan  seberapa  besar  pakan  yang dapat dimanfaatkan oleh ikan.  Nilai efisiensi pakan yang rendah menunjukkan bahwa ikan memerlukan pakan dengan  jumlah  yang  lebih  banyak  untuk  dapat  meningkatkan  beratnya  karena  hanya  sebagian  kecil  energi  dari pakan yang diberikan digunakan oleh ikan untuk pertumbuhan.

## Rasio Efisiensi Protein
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada  pakan  terhadap  nilai rasio pemanfaatam protein ikan gurami (O. gouramy ) menunjukkan pengaruh yang nyata (P<0,05) terhadap nilai PER  ikan  gurami  ( O.  gouramy ),  namun  tidak  menunjukkan  interaksi.    Peningkatan  dosis  probiotik  yang diberikan  menghasilkan  nilai  PER  yang  berbeda  pada  pemberian  dosis  enzim  papain  0,25  g/kg  pakan,  namun pada peningkatan dosis probiotik 10 ml/kg pakan dan 15 ml/kg pakan nilai PER ikan gurami ( O. gouramy ) tidak berbeda  pada  pemberian  enzim  papain  sebesar  0,5  g/kg  pakan.    Hepher  (1988),  menyatakan  PER  merupakan nilai  yang  menunjukkan  jumlah  bobot  ikan  yang  dihasilkan  dari  tiap  unit  berat  protein  dalam  pakan  dengan asumsi bahwa semua protein  digunakan  untuk pertumbuhan.  PER digunakan untuk  mengukur  kualitas protein dalam pakan.
Hasil  menunjukkan  nilai  rasio  pemanfaatan  protein  tertinggi  adalah  perlakuan  E1P2  sebesar  1,51±0,12 (%) dengan penambahan enzim 0,25g/kg pakan dan probiotik sebesar 15ml/kg pakan.  Penambahan enzim pada pakan dilakukan agar dapat memanfaatkan protein secara maksimal dan lebih optimal pada kultivan (Giri et al ., 1999).    Selain  itu  adanya  peningkatan  rasio  pemanfaatan  protein  diduga  juga  meningkat  dengan  pemberian probiotik,  karena  bakteri  yang  terdapat  di  probiotik  mampu  meningkatkan  kecernaan  pakan.    Handayani et  al . (2000)  menyatakan  bahwa,  bakteri  pengurai  yang  ikut  termakan  akan  membantu  proses  pencernaan  dalam saluran  pencernaan  udang  dan  hewan  akuatik  lainnya.    Hal  ini  dikarenakan  bakteri  ini  mampu  memproduksi enzim protease, amilase serta lipase dan meningkatkan keseimbangan bakteri dalam saluran pencernaan
Hal  pada  penelitian  ini  menunjukkan  hasil  yang  lebih  tinggi  dari  penelitian  sebelumnya  oleh  penelitian sebelumnya oleh Sari et al . (2013) pada ikan nila Larasati 0,67±0,05 % dengan penambahan dosis papain 1,5% yang dihidrolisis ke tepung kedelai, namun lebih rendah dari penelitian Singh et al . (2011) pada ikan mas yaitu sebesar 2,24±0,02 % dengan dosis 2 % papain pada pakan dan Noviana et al . (2014) dengan nilai per 2,17±0,05 %  pada  ikan  nila  dengan  dosis  probiotik  10  ml/kg  pakan.    Perbedaan  nilai  yang  diperoleh  berdasarkan  hasil penelitian  sebelumnya  diduga  karena  perbedaan  kultivan  yang  digunakan.    Hal  ini  diduga  bahwa  setiap  ikan memiliki daya cerna pakan yang berbeda-beda dan kualitas pakan.  Nilai rasio efisiensi protein dipengaruhi oleh kemampuan  ikan  untuk  mencerna  pakan.    Selain  itu,  kualitas  pakan  merupakan  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi nilai efisiensi protein (Hepher, 1988; Nurhidayatullah, 2003).

## Laju Pertumbuhan Harian
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  kedalam  pakan  ikan gurami  ( O.  gouramy )  tidak  menunjukkan  pengaruh  dan  interaksi  terhadap  pertumbuhan  harian  ikan  gurami. Hasil menunjukkan nilai pertumbuhan harian ikan gurami memiliki nilai yang sama disetiap perlakuannya. Nilai RGR ikan gurami berturut yaitu E1P1 sebesar 1,09±0,18%/hari, E1P2 dengan nilai laju pertumbuhan relatif yaitu sebesar 1,74±0,34 %/hari, perlakuan E2P1 1,04±0,45%/hari, dan perlakuan E2P2 1,17±0,27%/hari.  Nilai  yang sama  disetiap  perlakuan  menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  ikan  gurami  relatif  lambat.  Menurut  Nirmala  dan Rasmawan  (2010),  salah  satu  kendala  yang  dihadapi  dalam  budidaya  ikan  gurami  adalah  pertumbuhan  yang relatif lambat, sehingga untuk mencapai ukuran yang diinginkan diperlukan waktu yang lebih lama.
Berdasarkan  hasil  diketahui  pertumbuhan  ikan  gurami  pada  penambahan  enzim  papain  0,25  g/kg  pakan maupun  0,5  g/kg  pakan  menghasilkan  nilai  yang  sama  pada  penambahan  peningkatan  dosis  probiotik. Begitupula  sebaliknya,  peningkatan  dosis  probiotik  yang  diberikan  memberikan  nilai  pertumbuhan  relatif  yang sama pada peningkatan dosis  enzim papain.   Hal tersebut diduga peningkatan penambahan dosis enzim papain maupun probiotik memberikan pengaruh yang sama pada masing-masing perlakuan sehingga akan menghasilkan nilai pertumbuhan relatif  yang sama.   Hasan (2000), menyatakan bahwa enzim protease  yang terdapat didalam tubuh  ikan  gurami  akan  terus  meningkat  hingga  sampai  ukuran  tertentu,  kemudian  akan  terhenti  apabila  telah mencapai  puncaknya.    Manush et  al. (2013),  menyatakan  enzim  eksogenus  yang  memiliki  sifat  proteolitik memiliki  peran  penting  dalam  kecernaan  pakan  pada  ikan  seperti  memanfaatkan  tripsin  dan  papain  dalam penambahan pakan ikan  mas.  Aktivitas protease dalam  saluran pencernaan  merupakan  penentu daya cerna dan efisiensi protein yang dicerna.
Putra dan Dodi (2014) menyatakan bahwa, probiotik merupakan kompenen sel mikroba pada pakan atau lingkungan  hidupnya  yang  menguntungkan  inang-nya.  Probiotik  antara  lain  memiliki  mekanisme  dalam menghasilkan beberapa enzim exogenous untuk pencernaan pakan seperti amilase, protease, lipase dan sellulase. Enzim exogenous tersebut  akan  membantu  enzim endogenous dari  dalam  tubuh  ikan  untuk  menghidrolisis nutrien pakan seperti memecah karbohidrat, protein dan lemak yang menyusun pakan yang diberikan agar lebih sederhana.  Menurut Sucipto dan Eko (2005), fungsi protein bagi tubuh ikan antara lain sebagai zat pembangun, pembentuk  sel-sel  baru  dalam  proses  pertumbuhan,  sumber  kalori,  pembentuk  enzim  dan  hormon  serta pengangkut oksigen

## Kelulushidupan
Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa penbambahan enzim papain dan probiotik  dalam pakan buatan tidak  berpengaruh  nyata  (P>0,05)  terhadap  kelulushidupan  ikan  gurami  ( O.  gouramy ).    Hasil  penelitian menunjukkan nilai kelulushidupan tertinggi didapat pada perlakuan E1P2 sebesar 83,33±5,77%, sedangkan nilai kelulushidupan terendah yaitu pada perlakuan E1P1 dan E2P2 yaitu sebesar 73,33±5,77%.  Nilai kelulushidupan yang  tinggi  diduga  karena  ikan  gurami  sudah  mampu  memanfatakan  pakan  yang  diberikan  dengan  baik, sehingga  kebutuhan  energi  untuk  aktifitas,  pertumbuhan  dan  kelangsungan  hidup  bisa  digunakan  dengan  baik. Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Effina et  al. (2014),  bahwa  sintasan  kelulushidupan  ikan  gurami tertinggi yaitu 86,67% dan terendah yaitu 72,00%.
Kelulushidupan ikan tidak dipengaruhi secara langsung oleh pakan.  Ikan yang mati diduga karena stress selama pemeliharaan penelitian.  Hal tersebut diduga kualitas air terutama suhu yang fluktuatif.  Menurut Fitria (2012), tingkat kelangsungan hidup sangat dipengaruhi oleh kualitas air terutama suhu dan kandungan oksigen. Suhu merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan.  Suhu dapat mempengaruhi aktifitas ikan, seperti  pernafasan  dan  reproduksi.    Suhu  air  sangat  berkaitan  dengan  konsentrasi  oksigen  terlarut  dan  laju konsumsi  oksigen  ikan.    Siregar  dan  Adelina  (2009),  kelulushidupan  dapat  dipengaruhi  oleh  faktor  biotik  dan abiotik.    Faktor  biotik  terdiri  dari  umur  dan  kemampuan  ikan  dalam  menyesuaikan  diri  dengan  lingkungan. Faktor abiotik antara lain ketersediaan makanan dan kualitas media hidup.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Kesimpulan  yang dapat diberikan berdasarkan penelitian  mengenai prngaruh  Penambahan enzim papain dan probiotik memberikan pengaruh yang nyata (P<0,05) terhadap nilai efisiensi pemanfaatan pakan (EPP) dan
rasio pemanfaatan protein (PER) ikan gurami ( O. gouramy ) dengan peningkatan EPP dan PER pada penambahan enzim  papain  0,25  g/kg  pakan  dan  probiotik  15  ml/kg  pakan;  Penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  tidak memberikan pengaruh terhadap nilai pertumbuhan relatif, total konsumsi pakan dan kelulushidupan ikan gurami; Penambahan enzim papain dan probiotik tidak menunjukkan interaksi pada variabel TKP, EPP, PER, RGR, dan SR; dan  Kualitas air ikan gurami masuk dalam kisaran yang layak dalam budidaya ikan gurami ( O. gouramy) .

## Saran
Saran  yang  dapat  diberikan  berdasarkan  penelitian  mengenai  prngaruh  penambahan  enzim  papain  dan probiotik terhadap pemanfaatan protein dan pertumbuhan ikan gurmae ( O. gouramy )  adalah sebagai berikut : 1. Sebaiknya  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada  ikan gurami ( O. gouramy ) dengan menggunakan waktu pemeliharaan yang lebih lama;
2. Sebaiknya menggunakan faktor lebih dari 2 taraf agar hasilnya lebih dapat diketahui perbedaannya; dan
3. Penggunaan dosis 0,25 g/kg pakan papain dan 15 ml/kg pakan probiotik merupakan dosis yang disarankan untuk ikan gurami ( O. gouramy ).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Edi selaku Kepala Balai Benih Ikan Mijen, Semarang yang telah  memberikan  sarana  dan  prasarana  pada  peneltian  ini  dan  semua  pihak  yang  telah  membantu  mulai  dari persiapan  penelitian,  jalannya  penelitian  sampai  terselesaikannya  makalah  seminar  ini  dan  Tim  Klowor  (Sarah Sekar,  Mia  Mutiara,  Sulasi,  Bunga  Indrasari,  M.  Vickry,  Rizky  Fajar,  dan  Mahaswi  Yudha)  yang  telah memberikan dukungan dan bantuan selama penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  I.A.  2007.  Pengaruh  Penambahan  Probiotik  Em-4  (Effective  mikroorganisme-4)  dalam  Pakan  Terhadap Pertumbuhan, Fcr dan Sintasan Ikan Gurame ( Osphronemus gouramy ). Animal Fishery. (Abstrak).
Adelina,  I.  Mokoginta,  R.  Affandi  dan  D.  Jusadi.  2000.  Pengaruh  Kadar  Protein  dan  Rasio  Energi  Protein  Pakan Berbeda Terhadap Kinerja Pertumbuhan Benih Ikan Bawal Air Tawar ( Colossoma macropomum ). Jurnal J.11. Pert. Indo, 9 (2): 31-36.
Ahmadi,  H.,  Iskandar,  dan  N.  Kurniati.  2012.  Pemberian  Probiotik  dalam  Pakan  Terhadap  Pertumbuhan  Lele Sangkuriang ( Clarias gariepinus ) pada Pendederan II. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(4): 99-107. Amin,  M.  2007.  Pengaruh  Enzim  Fitase  dalam  Pakan  Terhadap  Kecernaan  Nutrien  dan  Kinerja  Pertumbuhan  Ikan Lele Dumbo ( Clarias sp.). [Tesis]. Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor, Bogor, 56 hlm.
Beauty,  G.,  A.  Yustiati,  dan  R.  Grandiosa.  2012.  Pengaruh  Dosis  Mikroorganisme  Probiotik  pada  Media Pemeliharaan Terhadap Kelangsungan Hidup dan Pertumbuhan Benih Mas Koki (Carasslus auratus ) dengan Padat Penebaran Berbeda. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(3): 1-6.
Boyd,  C.E.  1990.  Water  Quality  in  Pond  for  Aquaculture.  Alabama  Agricultural  Experiment  Station  Auburn University. Birmingham Publishing Co. Alabanma. 482 hlm.
Damodaran S. 1996. Amino Acids, Peptides and Protein. Di dalam: Fennema OR, editor.  Food Chemistry. Ed ke-3.
New York: Marcel Dekker, Inc.
Dani, N. P., A. Budiharjo dan S. Listyawati. 2005. Komposisi Pakan Buatan untuk Meningkatkan Pertumbuhan dan Kandungan Protein Ikan Tawes ( Puntius javanicus Bleeker.). Bio SMART., 7(2): 83-90. De Silva, S.S. and Anderson, T.A., 1995. Fish Nutrition in Aquaculture.Chapman & Hall. London. 319 hlm. Effendi,  I.,  H.J.  Bugri  dan  Widanarni.  2006.  Pengaruh  Padat  Penebaran  Terhadap  Kelangsungan  Hidup  dan
Pertumbuhan Benih Ikan Gurame Osphronemus gouramy .  Jurnal Akuakultur Indonesia, 5(2): 127-135.
Effendie, M. 1997. Biologi Perikanan. Yogyakarta : Yayasan Pusat Nusatama.
Effina,  N.,  M.  Amri,  dan  M.  Sulhi.  2014.  Pengaruh  Pemberian  Ampas  Tahu  Fermentasi  Sebagai  Ganti  Bungkil Kedelai  pada  Pakan  Ikan  terhadap  Sintasan  dan  Laju  Pertumbuhan  Ikan  Gurame  ( Osphronemus  gouramy Lac.). Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Bung Hatta, Padang.
Fitria,  A.S.  2012.  Analisis  Kelulushidupan  dan  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Nila  Larasati  ( Oreochromis  niloticus )  F5 D30-D70 pada Berbagai Salinitas. [Skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu  Kelautan, Universitas  Diponegoro. Journal of Aquaculture Management and Technology 1 (1) : 18-34 hlm.
Ghouse,  M.S.  2015.  Use  of  Probiotics  as  Biological  Control  Agents  in  Aquaculture  for  Sustainable  Development. International Journal of Food, Agriculture and Veterinary Science. 5(1) : 112-119.
Giri,  I.N.A,  F.  Johnny,  K.  Suwirya  dan  M.  Marzuqi.  2003.  Kebutuhan  vitamin  C  untuk  pertumbuhan  dan meningkatkan ketahanan benih kerapu macan, Epinephelus fuscoguttatus . Laporan Hasil Penelitian Balai Besar Riset Perikanan Budidaya Laut Gondol-Bali . TA. 2003. Halaman: 133-143. Hasan,  O.D.S.  2000.  Pengaruh  Pemberian  Enzim  Papain  dalam  Pakan  Buatan  terhadap  Pemanfaatan  Protein  dan Pertumbuhan  Benih  Ikan  Gurame  ( Osphronemus  gouramy  Lac.). [Tesis].  Program  Pascasarjana,  Institut Pertanian Bogor, Bogor, 71 hlm.
Haetami, K. 2012. Konsumsi dan  Efisiensi Pakan dari Ikan Jambal  Siam  yang diberi Pakan  dengan Tingkat Energi Protein yang Berbeda. Jurnal Akuatika, 3(2): 146-158.
Handayani, S., M.Z. Jr., I. Mokiginta, M. Bintang, dan A.O. Sudrajat. 2008. Perubahan Enzim-Enzim Pencernaan pada Ikan  Gurame  ( Osphronemus  gouramy )  Sebagai  Respon  Terhadap  pakan  yang  Mengandung  Protein  dan Karbohidrat yang Berbeda. Aquaculture Indonesiana, 9(1): 25-29.
Hepher, B. 1988. Nutrition of Pond Fishes. Cambridge University Press, Cambridge. New York. Hutabarat,  G.M.,  D.  Rachmawati,  dan  Pinandoyo.  2015.  Performa  Pertumbuhan  Benih  Lobster  Air  Tawar  (C . quadricarinatus )  Melalui  Penambahan  Enzim  Papin  Dalam  Pakan  Buatan.  Journal  of  Aquaculture Management and Technology, 4 (1): 10-18.
Juliani, Y. 2013. Tingkat Kelangsungan Hidup dan Pertumbuhan Benih Ikan  Gurame ( Osphronemusgouramy ) yang diberi Pakan Mengandung Probiotik. [Skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Padjajaran, Jatinangor.
Jusadi, D., E. Gandara, dan I. Mokoginta. 2004. Pengaruh Penambahan Probiotik Bacillus Sp. Pada Pakan Komersil Terhadap  Konversi  Pakan  Dan  Pertumbuhan  Ikan  Patin  Pangasius  hypophthalmus.  Jurnal  Akuakultur Indonesia. 3 (1): 15-18.
Lestari, S. 2001. Pengaruh Kadar Ampas Tahu yang Difermentasikan terhadap Efisiensi Pakan dan Pertumbuhan Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). [Skripsi]. Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. 46 hlm.
Manush,  S.M.,  P.P.  Srivastava,  M.P.S.  Kohli,  K.K  Jain,  S.  Ayyappan,  dan  S.Y.  Metar.  2013.  Combined  Effect  of Papain  and  Vitamin-C  Levels  on  Growth  Performance  of  Freshwater  Giant  Prawn, Macrobrachium rosenbergii . Turkish Journal of Fisheries and Aquatic Science, 13 : 479-486.
Marzuqi, M., N. W. W. Astuti dan K. Suwirya. 2012. Pengaruh Kadar Protein dan Rasio Pemberian Pakan Terhadap Pertumbuhan  Ikan  Kerapu  Macan  ( Epinephelus  fuscoguttatus ).  Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi  Kelautan  Tropis., 4(1):55-65.
Murtiati,  K.  Simbolon,  T.  Wahyuni,  dan  Juyana.  Penggunaan  Biokatalisator  pada  Budidaya  Udang  Galah.  Jurnal Budidaya Air Tawar, 4 (1):19-26.
Nirmala K. Dan Rasmawan. 2010. Kinerja Pertumbuhan Ikan Gurame ( Osphronemus gouramy ) yang dipelihara pada Media Bersalinitas dengan Paparan Medan Listrik. Jurnal Akuakultur Indonesia., 9(1): 46-55.
Noviana,  P.,  Subandiyono,  dan  Pinandoyo.  2014.  Pengaruh  Pemberian  Probiotik  dalam  Pakan  Buatan  terhadap Tingkat  Konsumsi  Pakan  dan  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ).  Jurnal  of  aquaculture Management and Technology 3(4): 183-190.
Nugraha, A.P. 2013. Pengaruh Penggunaan Papain terhadap Pemanfaatan Protein Pakan dan Pertumbuhan Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). [Skripsi]. Universitas Diponegoro, Semarang. 72 hlm. Nurhidayatullah. 2003. Keefisienan Penggunaan Protein dan Energi Pakan Ikan Patin ( Pangasius sp.) yang Dipelihara dengan Frekuensi Pemberian Pakan yang Berbeda. [Skripsi]. Fakultas Biologi Unsoed, Purwokerto.
Putra  A.N.  2010.  Kajian  probiotik  prebiotik  dan  sinbiotik  untuk  meningkatkankinerja  pertumbuhan  ikan  nila Oreochromis niloticus [Tesis]. IPB, Bogor.
Putra,  A.N.  dan  D.  Hermawan.  2014.  Seleksi  Bakteri  Probiotik  Amilolitik  pada  Saluran  Pencernan  Ikan  Gurame ( Osphronemus gouramy ). Jurnal Ilmu Pertanian dan Perikanan, 3 (1): 37-45.
Rahmawan,  H.  2014.  Pengaruh  Penambahan  Ekstrak  Pepaya  dan  Ekstrak  Nanas  terhadap  Tingkat  Pemanfaatan Protein  Pakan  dan  Pertumbuhan  Lobster  Air  Tawar  (Cherax  quadricarinatus).  [Skripsi].  Universitas Diponegoro, Semarang. 83 hlm.
Rawlings  ND,  Morton  FR,  Barret  AJ.  2007.  An  Introduction  to  Peptidases  and  the  MEROPS  Database.  Di  dalam: Polaina  J,  MacCabe  AP,  editor.  Industrial  Enzymes:  Structure,  Function  and  Application . Netherlands: Springer.
Riyanti, A., A. Susanto, dan K. Sukarti.  Penambahan Tepung Buah Papaya ( Carica papaya ) dalam Pakan terhadap Pertumbuhan dan Efisiensi Pakan pada Ikan Nila Gift ( Oreochromis sp ) Ukuran 3-5 cm. Jurnal Ilmu Perikanan Tropis, 20 (1) : 60-67.
Robinette, H.R. 1976. Effect of Sublethal Level of Ammonia on The Growth of Channel Catfish ( Ictalarus punctatus R.) Frog. Fish Culture, 38 (1) : 26-29 hlm.
Robinson,  E.H., M.H.  Lie, dan B.B. Manning. 2001.  A. Practical Guide  to Nutrition. Feeds  and  Feeding of  Catfish (2an. Rev). Bulleting 1113. Misissipi Agricultural and Foresty Experiment Station. USA. 44 hlm.
Rohy,  G.S.,  B.S.  Rahardja,  dan  Agustinus.    Jumlah  Total  Bakteri  dalam  Saluran  Pencernaan  Ikan  Gurame ( Osphronemus  gouramy )  dengan  Pemberian  Beberapa  Pakan  Komersial  yang  Berbeda.  Jurnal  Ilmiah Perikanan dan Kelautan, 6(1): 21-24.
Sanjayasari. D. dan Kasprijo. 2010. Estimasi Nisbah Protein Energi Pada Pakan Ikan Sengaringan (Mystus Nigricips) Dasar Nutrisi untuk Keberhasilan Domestikasi. Jurnal Perikanan dan Kelautan Vol 15 (2). 89-97 Hlm.
Sari, W.A.P., Subandiyono dan S. Hastuti. 2013. Pemberian Enzim Papain untuk Meningkatkan Pemanfaatan Protein Pakan  dan  Pertumbuhan  benih  Ikan  Nila  Larasati  (Oreochromis  niloticus  Var.).  Universitas  Diponegoro, Semarang. Journal of Aquaculture Management and Technology. 2 (1): 1-12.
Singh, P.,  S.  Maqsood,  M.H.  Samoon, V. Phulia, M. Danish,  and  R.S.  Chalal. 2011.  Exogenoush  Supplementation of Papain  as  Growth  Promoter  in  Diet  of  Fingerlings  of  Cyprinus  carpio. Faculty  of  Fisheries,  Shere-e-Kashmir University of Agricultural Science and Technology of Kashmir, India. International Aquatic Research. 3:1-9 pp.
Siregar,  Y.I.,  dan  Adelina.  2009.  Pengaruh  Vitamin  C  terhadap  Peningkatan  Hemoglobin  (Hb)  Darah  dan Kelulushidupan Benih Ikan Kerapu Bebek ( Cromileptes altivelis ). Jurnal Natur Indonesia, 12 (1): 75-81. Sucipto,  A. Dan P. Eko.  2005. Pembesaran Nila Merah Bangkok. Penebar Swadaya, Jakarta, 155 hlm. Tacon,  A.G. J., Metian. 2008.  Global Overview on  the  Use of  Fish  Meal and  Fish  Oil in  Industrially  Compounded Aquafeeds: Trends and Future Prospects. Aquaculture, 285 (1–4): 146–158.
Taqwdasbriliani,  E.B.,  J.  Hutabarat  dan  E.  Arini.  2013.  Pengaruh  Kombinasi  Enzim  Papain  dan  Enzim  Bromelin terhadap Pemanfaatan Pakan dan Pertumbuhan Ikan Kerapu  Macan ( Epinephelus fuscogutattus ).  Universitas Diponegoro, Semarang. Journal of Aquaculture Management and Technology, 2 (3): 76-85.
Zonneveld, N., E.A. Huisman, dan J.H. Boon. 1991. Prinsip-Prinsip Budidaya Ikan. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. 318 hlm.