Asosisasi Varian Genetik Angiotensin I Converting Enzyme terhadap Karakteristik Faktor Risiko Aterosklerosis pada Penderita Stroke Iskemik

## di Rumah Sakit Umum Pusat Dr. Kariadi Semarang
Dodik Tugasworo Pramukarso, Herlina Suryawati, Soetedjo, Jimmy Eko Budi Hartono, Trianggoro Budisulistyo, Arinta Puspita Wati, Aditya Kurnianto, Patria Adri Wibhawa
Latar belakang : Stroke merupakan penyebab utama kematian dan kecacatan di dunia. Terjadinya stroke iskemik ditengarai oleh faktor genetik, faktor lingkungan dan interaksi antar  keduanya.  Varian  genetik Angiotensin  Converting  Enzyme (ACE)  berhubungan dengan berbagai karakteristik faktor risiko terhadap kejadian stroke iskemik. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  varian  genetik Angiotensin  Converting  Enzyme (ACE)  dengan  metode Polymerase  Chain  Reaction (PCR)  dan  mencari  korelasinya terhadap faktor risiko pada penderita Stroke Iskemik di Rumah Sakit Umum Pusat Dr. Kariadi Semarang Metode : Subyek penelitian adalah 72 penderita stroke iskemik yang berobat di klinik rawat jalan Bagian Neurologi RSUP Dr. Kariadi Semarang pada bulan Januari – Desember 2013. Ekstraksi DNA subyek penelitian dilakukan di laboratorium Center Of Biomedical Research (CEBIOR) Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro pada Januari – Maret 2020. Amplifikasi dengan metode Polymerase Chain Reaction (PCR) dilakukan dengan menggunakan Eppendorf thermocycler . Analisis data menggunakan SPSS for Windows versi 25.
Hasil : 72 sampel yang dianalisis didapatkan varian genetik ACE II 39 (54,2%) sampel, varian genetik ACE DI 30 (41,7%) sampel, dan varian genetik ACE DD 3 (4,2%) sampel. Sedangkan hubungan antara varian genetik ACE terhadap berbagai karakteristik faktor risiko stroke iskemik yaitu usia, jenis kelamin, Body Mass Index , riwayat merokok, kadar trigliserida, kadar HDL, kadar LDL, obesitas dan hipertensi tidak terdapat hubungan yang signifikan ( p >0,05) . Simpulan  : Terdapat  tiga  jenis  varian  genetik  ACE,  yaitu  varian  genetik  ACE  II,  varian genetik ACE DI, dan varian genetik ACE DD. Di antara ketiga varian genetik tersebut, varian genetik ACE II merupakan varian terbanyak dan tidak terdapat hubungan yang signifikan terhadap  berbagai  karakteristik  faktor  risiko  yang  ditemukan  pada  penderita  stroke iskemik di Rumah Sakit Umum Pusat Dr. Kariadi Semarang.
Kata kunci : ACE; Angiotensin Converting Enzyme ; Stroke Iskemik

## Departemen Neurologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro / RSUP Dr. Kariadi

## Abstrak

## Original Article
Med Hosp 2021; vol 8 (3) : 297–303 p-ISSN: 2301-4369 e-ISSN: 2685-7898 https: https://doi.org/10.36408/mhjcm.v8i3.565
Diajukan: 29 Juni 2021 Diterima: 02 September 2021

## Afiliasi Penulis:
Departemen Neurologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro / RSUP Dr. Kariadi
Korespondensi Penulis: Dodik Tugasworo Pramukarso Jl. Dr. Sutomo No. 16, Semarang, Jawa Tengah 50244, Indonesia
E-mail: dodiktugasworo152314@gmail.com
Background : Stroke is the leading cause of death and disability in the world. The occurrence of ischemic stroke is indicated by genetic factors, environmental factors and the interaction between it. Angiotensin Converting Enzyme (ACE) genetic variant is associated with various characteristics of risk factors for ischemic stroke. The objectives of this study was to identifying genetic variants of Angiotensin Converting Enzyme (ACE) with the Polymerase Chain Reaction (PCR) method and to find it's correlation beetwen risk factor in patients with Ischemic Stroke at Dr. Kariadi Semarang.
Methods : The subjects of the study were 72 patients with ishcemic stroke who were treated at the polyclinic of the Neurology Department Dr. Kariadi Semarang in January – December 2013. DNA extraction of research subjects was carried out at the Laboratory of the Center of Biomedical Research, Faculty of Medicine, Diponegoro University from January to March 2020. Amplification using the Polymerase Chain Reaction (PCR) method was carried out using an Eppendorf thermocycler. Data were analyzed with Statistical Product and Servise Solution (SPSS) for Windows Version 25.
Results : 72 samples analyzed obtained genetic variants of ACE II 39 (54.2%) samples, genetic variants of ACE DI 30 samples (41.7%), and genetic variants of ACE DD 3 (4.2%) samples. Meanwhile, there was no significant relationship ( p >0,05 ) between genetic variants of ACE and the characteristics of risk factors for ischemic stroke, namely age, gender, Body Mass Index, smoking history, triglyceride levels, HDL levels, LDL levels, obesity and hypertension.
Conclusion : There are three types of ACE genetic variants, including the ACE II genetic variant, the ACE DI genetic variant, and the ACE DD genetic variant. Among the three genetic variants, ACE II genetic variant is the most common variant and there is no significant relationship to the various risk factor characteristics found in ischemic stroke patients at Dr. Kariadi General Hospital Semarang.
Keywords : ACE; Angiotensin Converting Enzyme; ischemic stroke

## Abstract
The Association Between Variants of Angiotensin I Converting Enzyme Gene with Risk Factors of Atherosclerosis in Patients with Ischemic Stroke at Dr. Kariadi Semarang

## PENDAHULUAN
Stroke  merupakan  penyebab  utama  kematian  dan 1,2 kecacatan  di  dunia.   Data  tahun  2013  menunjukkan bahwa  terdapat  sekitar  25,7  juta  kasus  stroke  di  dunia, dimana kurang lebih 80% kasus stroke merupakan stroke iskemik.  Stroke  iskemik  merupakan  penyakit 2,3 multifaktorial  dengan  komponen  genetik  yang  kuat. Stroke  iskemik  dipengaruhi  oleh  faktor  genetik,  faktor 1 lingkungan dan interaksi keduanya.  Saat ini Indonesia merupakan negara dengan angka kejadian stroke tertiggi di  Asia  yang  disebabkan  oleh  berbagai  macam  faktor risiko.  Badan  kesehatan  dunia  (WHO)  melaporkan kontirbusi  faktor  risiko  terbesar  adalah  hipertensi sebanyak  61,9%  di  seluruh  dunia.  Sistem  renin- angiotensin  (RAS)  adalah  mekanisme  pensinyalan hormonal yang terlibat dalam aterosklerosis dan regulasi
3 tekanan  darah. Angiotensin  Converting  Enzyme (ACE), merupakan  enzim  kunci  dalam  sistem  RAS  yang mengkatalisis konversi angiotensin I tidak aktif menjadi angiotensin  II  aktif,  dimana  memainkan  peran  penting dalam  remodeling  vaskular,  aterosklerosis,  dan  stroke 4–6 iskemik. Dengan  demikian,  eksplorasi  terhadap konsep  penanganan  pasien  dengan  hipertensi  adalah esensial.
Rigat  dan  kawan-kawan  melaporkan  pertama kalinya  pada  tahun  1990  terdapat  tiga  varian  genetik ACE  yaitu  delesi  homozigot  (DD)  dan  insersi  (II),  dan 7 juga  heterozigot  (DI).   Terdapat  banyak  studi  yang menyatakan  terdapat  hubungan  signifikan  antara
genetik  ACE  terhadap  berbagai  macam  faktor  risiko stroke seperti hipertensi dan aterosklerosis namun studi 8–11 genetik ini di Indonesia masih jarang. Menyikapi hal ini,  sangat  diperlukan  adanya  studi  yang  meneliti hubungan  antara  varian  genetik  ACE  terhadap  stroke iskemik  dengan  faktor    faktor  risiko  terkait.  Studi  ini dilakukan  untuk  mengetahui  asosiasi  antara  varian genetik ACE terhadap faktor  faktor risiko stroke iskemik kemudian  menyediakan  prinsip  teoritis  dan  juga masukan  terhadap  klinisi  mengenai  konsep  genetika yang terhubung dengan faktor risiko stroke iskemik.

## Tujuan
Mengidentifikasi  varian  genetik Angiotensin  Converting Enzyme (ACE) dengan metode Polymerase Chain Reaction (PCR)  dan  mencari  korelasinya  terhadap  faktor  risiko pada penderita Stroke Iskemik   di Rumah Sakit Umum Pusat Dr. Kariadi Semarang.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  ini  merupakan  penelitian observasional analitik, dengan desain studi retrospektif. Sampel  pada  penelitian  ini  adalah  materi Deoxyribo Nucleic  Acid (DNA)  72  subyek  penelitian  dari  Dr.  dr. Dodik  Tugasworo,  SpS(K)  di  klinik  rawat  jalan  Bagian Neurologi  RSUP  Dr.  Kariadi  Semarang  pada  Bulan Januari – Desember 2013 dengan judul “Pengaruh Faktor Risiko  terhadap  Progresivitas  Aterosklerosis  Penderita Pasca  Stroke  Non  Hemoragik”.  Subyek  penelitian
memiliki kriteria inklusi antara lain pasien stroke iskemik akut  pertama  kali,  onset  48  jam  yang  telah  dibuktikan dengan pemeriksaan CT Scan kepala tanpa kontras dan bersedia untuk  ikut  dalam penelitian.  Kriteria  Eksklusi subyek  penelitian  ini  antara  lain  pasien  dengan  stroke perdarahan,  dibuktikan  dengan  pemeriksaan  CT  scan kepala  non  kontras,  pasien  dengan  penyakit  sistemik berat,  antara  lain  : Chronic  Kidney  Disease ,  dibuktikan dengan pengukuran Glomerular Filtration Rate (GFR) dan pemeriksaan  ureum,  kreatinin,  penyakit  hepar  kronis, dibuktikan  dengan  pemeriksaan  laboratorium  fungsi hepar  (seperti  :  SGOT,  SGPT,  Gamma  GT,  Alkali Fosfatase),  keganasan,  dibuktikan  dengan  anamnesis lengkap  tentang  riwayat  keganasan  pada  pasien  dan keluarga serta pemeriksaan fisik, Congestive Heart Failure , dibuktikan dengan pemeriksaan fisik dan pemeriksaan elektrokardiografi,  pasien  stroke  iskemik  akut  yang meninggal atau pulang sebelum hari onset ke–7, pasien stroke iskemik akut yang meninggal sebelum hari onset ke–14,  pasien  meninggal  dunia,  pasien  mengundurkan diri.  Adapun  variabel-variabel  faktor  risiko  yang dikumpulkan adalah usia, jenis kelamin, Body Mass Index (BMI),  riwayat  merokok,  diabetes  melitus,  kadar trigliserida,  kadar high  density  lipoprotein (HDL),  kadar low  density  lipoprotein (LDL),  status  obesitas,  status hipertensi  dan  varian  genetik  ACE.  Rekrutmen  subjek penelitian  ini  telah  dilaksanakan  sejak  Januari  2012 sampai  dengan  Desember  2013.  Pada  tahap  awal didapatkan 231 penderita stroke iskemik yang berobat di Poliklinik  neurologi  RSUP  Dr.  Kariadi  Semarang  yang dapat dijadikan subjek penelitian. Pada periode kohort yang pertama dari 231 subjek didapatkan 155 subjek yang memenuhi kriteria inklusi dan ekslusi. Pada perjalanan penelitian selama 12 bulan terdapat 83 subjek penelitian loss of follow up sehingga tersisa 72 subjek penelitian.
Analisis  varian  genetik Angiotensin  Converting Enzyme (ACE)  dilakukan  pada  Januari  –  Maret  2020  di Laboratorium Center  of  Biomedical  Research (CEBIOR). Amplifikasi  dengan Polymerase  Chain  Reaction (PCR) dilakukan  dengan  menggunakan  sepasang  primer o l i g o n u k l e o t i d a s e n s e 5 ' CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT    3  'dan  primer antisense 5'   GATGGTGGCCATCACATTCGTCAGAT - 7 3',  oleh  Rigat  dan  kawan-kawan   dengan  modifikasi. Template DNA sampel  penelitian  sebelumnya  yang tersimpan  di  Lab  CEBIOR  FK  UNDIP  dilakukan amplifikasi  dengan Polymerase  Chain  Reaction yang mengandung 2 μL genomic DNA, ditambah go taq green 10  μL  kemudian  ditambah  air  destilasi  sebanyak  8  μL dalam volume final 20 uL. Amplifikasi dilakukan dengan denaturasi  pada  suhu  94°C  dalam  1  menit, annealing (attachement  pada  nukleotida  primer) pada  suhu  58°C selama 1 menit, dan extension (elongasi DNA) pada suhu 72°C selama 2 menit dan di putar 30 kali lalu diikuti final extension pada suhu 72°C selama 2 menit. Hasil PCR ini dipisahkan dengan elektroforesis yang menggunakan gel
agarosa  2%,  lalu  divisualisasikan  dengan  sinar Ultraviolet dan didokumentasikan menggunakan geldoc (Biorad, USA) . Untuk genetik normal (wild type) memiliki genotype (II)  adalah  produk  PCR  pada  490  bp.  Subjek homozigot genotype DD  pada  190  bp  dan  heterozigot genotype DI pada dan fragmen  190 dan 490 bp.
Sebelum  dilakukan  analisa  data  terlebih  dahulu diperiksa  kelengkapan  datanya,  diberi  kode (coding) , ditabulasi  dan entry ke  dalam  komputer.  Data  diolah dengan program SPSS for Windows versi 25. Analisis data dilakukan  tahapan  statistik  deskriptif  yaitu  untuk menentukan karakteristik dasar subyek penelitian. Hasil disajikan dalam bentuk tabel. Variabel dengan jenis data kategorik  (nomial  dan  ordinal)  dilakukan  analisis univariat untuk mendapatkan proporsi dan persentase. Kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  bivariat  untuk mengetahui  pengaruhnya.  Data  numerik  akan ditampilkan  dalam  rerata  ±SD  kemudian  dilakukan  uji ANOVA  dilanjutkan  dengan independent  t-test .  Apabila syarat  parametrik  tidak  terpenuhi  makan  dilanjutkan dengna  uji Kruskal  Wallis dilanjutkan  dengan  uji Mann Whitney .  Hasil  analisis  dinyatakan  bermakna  bila didapatkan p <0,05.  Pada  penelitian  sebelumnya  sudah mendapat ethical  clearance dari  komite  etik  RSUP D r .   K a r i a d i   S e m a r a n g   d e n g a n   n o m o r 377/EC/FK/RSDK/2012.  Subek  penelitian  telah menandatangani lembar persetujuan.

## HASIL
Pada  periode  kohort  yang  pertama  dari  231  subjek didapatkan  155  subjek  yang  memenuhi  kriteria  inklusi dan ekslusi. Pada perjalanan penelitian selama 12 bulan terdapat  83  subjek  penelitian loss  of  follow  up sehingga tersisa 72 subjek penelitian, dimana loss of follow up subjek penelitian  disebabkan  karena  meninggal  dunia,  tidak melanjutkan  pemeriksaan,  dan  tidak  mendapatkan rujukan  serta  pindah  tempat  tinggal  (gambar  1). Karakteristik  subjek  penelitian  didapatkan  rerata  usia subjek adalah 61,64 ± 7,99 tahun, sebagian besar subjek berjenis  kelamin  laki-laki  (59,1%).  Rerata  BMI  subjek
2 penelitian  adalah  normal,  yaitu  22,27  ±  2,13  kg/m . Varian gen ACE terbanyak yang ditemukan pada sampel adalah  varian  II  sebanyak  54,2%.  Faktor  risiko  yang paling  banyak  dijumpai  pada  subjek  penelitian  adalah riwayat merokok (43,1%) (tabel 1).
Sedangkan hubungan antara varian genetik ACE terhadap  berbagai  karakteristik  faktor  risiko  stroke iskemik  yaitu  usia,  jenis  kelamin, Body  Mass  Index , riwayat merokok, kadar trigliserida, kadar HDL, kadar LDL,  obesitas  dan  hipertensi  tidak  terdapat  hubungan yang signifikan ( p >0,05) ditunjukkan dalam tabel 2. Untuk  genetik  normal (wild  type) memiliki genotype (II)    adalah  produk  PCR  pada  490  bp.  Subjek homozigot genotype DD    pada  190  bp  dan  heterozigot genotype DI  pada  dan  fragmen  190  dan  490  bp.  Pada
Jumlah pasien paska stroke di poliklinik RSUP Dr. Kariadi periode 1 Januari 2012 – 31 Desember 2012 n = 231
Jumlah sampel yang tidak masuk kriteria inklusi dan eksklusi = 76
n = 155
n = 141
Periode Januari 2012 – Juni 2012 Jumlah drop out = 14
Meninggal dunia (1)  Tidak melanjutkan karena tidak mendapatkan rujukan dari pusat kesehatan atau
 dokter keluarga yang terkait (5)
Tidak melanjutkan karena tidak mau datang untuk kontrol kembali ke RS dengan
 alasan yang tidak jelas (4)
Tetap datang ke RS Kariadi untuk kontrol tetapi menolak untuk melakukan

pemeriksaan karena dianggap merepotkan atau membuang waktu (4)
n = 99
Periode Juli 2012 – Desember 2012
Jumlah drop out n = 42 • Meninggal dunia (n=4)
• Tidak melanjutkan karena tidak mendapatkan rujukan dari pusat kesehatan atau dokter keluarga yang terkait (n=12)
• Tidak melanjutkan karena tidak mau datang untuk kontrol kembali ke RS dengan alasan yang tidak jelas (n=7)
• Tetap datang ke RS Kariadi untuk kontrol tetapi menolak untuk melakukan pemeriksaan karena dianggap merepotkan atau membuang waktu (n=11)
• Pindah tempat tinggal ke luar kota (n=2)
• Memberikan alamat atau nomor telepon yang tidak tepat (n=6)
n = 79 Periode Januari 2013 – Juni 2013
Jumlah drop out n = 20 • Meninggal dunia (n=8)
• Tidak melanjutkan karena tidak mendapatkan rujukan dari pusat kesehatan atau dokter keluarga yang terkait (n=4)
• Tidak melanjutkan karena tidak mau datang untuk kontrol kembali ke RS dengan alasan yang tidak jelas (n=3)
• Pindah tempat tinggal ke luar kota (n=5)
Jumlah pasien paska stroke yang mengikuti prosedur pemeriksaan lengkap pertama, kedua dan ketiga n =72
Periode Juli 2013 – Desember 2013 Jumlah drop out n = 7 • Meninggal dunia (n=5) • Pindah tempat tinggal ke luar kota (n=2)
Gambar 1. Tahapan pengambilan subyek penelitian
gambar  2  menunjukkan  hasil  PCR  genetik  ACE  pada subyek penelitian.

## PEMBAHASAN
Angiotensin  Converting  Enzyme (ACE)  adalah monomeric bivalent  dipeptidyl  Zinc  Metallopeptidase  Ectoenzyme dengan  berat  molekul  170  kDa  yang  memiliki  dua  sisi katalitik.  Kepustakaan  lain  menyebutkan  ACE  adalah suatu  karboksilpeptidase  dengan  nomor  EC  3.4.15.1 terkenal  juga  dengan  nama  petidil  dipeptidase  A  atau kinase  II  yang  mengkatalis  konversi  dikapeptida angiotensin  I  menjadi  oktapeptida  angiotensin  II,  yang
8 banyak  didapatkan  pada  sel-sel  endotel.   ACE  sudah lama  dikenal  sebagai  bagian  kunci  pada  sistem  renin angiotensin  yang  penting  pada  pengaturan  tekanan darah.  Secara  umum  peran  ACE  dalam  mengatur tekanan darah yang memicu terjadinya hipertensi, dapat terjadi  melalui  dua  jalur.  Sistem  yang  pertama  yaitu dimana ACE membantu proses pengubahan angiotensin
I  menjadi  angiotensin  II  yang  berperan  sebagai vasokonstriktor.  Sedangkan  jalur  kedua  adalah  ACE pada  sistem  kinin  –  kalikrein  mengkonversi  bradikinin yang  merupakan  vasodilator  menjadi  peptida  inaktif dengan memotong C terminal dipeptide phenyl-alanyl- arginine.
Moorothy  dan  kawan-kawan  menunjukkan bahwa  faktor  genetik  mungkin  berperan  dalam
5 perkembangan  penyakit  kardiovaskular.   ACE mengubah angiotensin menjadi oktapeptida aktif, yang disebut angiotensin II, yang merupakan komponen aktif utama  dalam  RAS  dan  telah  dikenal  sebagai  faktor aterogenik.  Berbagai  penelitian  telah  menunjukkan bahwa  polimorfisme  ACE  I  /  D  dapat  menjadi  faktor 9,10 risiko untuk CAD, MI, dan kardiomiopati.
Hubungan antara genotipe DD dan telah diteliti dalam  beberapa  penelitian.  Telah  ditemukan  bahwa genotipe  DD  merupakan  faktor  risiko  untuk perkembangan  aterosklerosis  pada  arteri  karotis  pada populasi India di Cina, Australia, dan Asia. Selain itu, alel

## TABEL 1 Karakteristik Subyek Penelitian
Usia Variabel (n=72) Jenis Kelamin Riwayat Merokok 2 BMI (kg/m ) Diabetes Melitus Trigliserida HDL Hipertensi LDL Varian Genetik ACE DD F 42
43
31
12 60 58 11 20
52 35 39 3 30 1 – 60 >60
Laki-Laki Perempuan Merokok Tidak Merokok Ya Tidak Tinggi
Rendah
Tinggi
Rendah
Rendah Tinggi Ya Tidak II DI
29 41
14 61 37 30 % 58,3 59,7 43,1 16,7 83,3 80,6
15,3
27,8 72,2 46,6 54,2 4,2 41,7 40,3 56,9 19,4 84,7 51,4 41,7 Mean±SD 22,27 ± 2,13 61,64 ± 7,99
D  memiliki  peran  dalam  kejadian  CAD  dengan 9–12 meningkatkan kadar ACE pada beberapa populasi.
Beberapa penelitian yang dilakukan sebelumnya tidak menemukan hubungan antara polimorfisme ACE I / D dengan kejadian CAD. Studi yang dilakukan Benion dan kawan - kawan menunjukkan bahwa polimorfisme ACE I / D tidak dapat berperan dalam terjadinya CAD 13 pada populasi Kaukasia dan Eropa.
Enzim ACE berperan penting dalam RAS dengan mengubah  angiotensin  I  menjadi  angiotensin  II. Angiotensin  II  telah  terbukti  memiliki  sifat  aterogenik. Peningkatan  aktivitas  enzim  ACE  dapat  berkontribusi pada peningkatan risiko penyakit dengan meningkatkan produksi angiotensin II. Oleh karena itu, tingkat aktivitas ACE  yang  dapat  dipengaruhi  oleh  berbagai  faktor, termasuk faktor genetik, dapat dianggap sebagai risiko
penyakit.  Banyak  penelitian  telah  menunjukkan hubungan  antara  kadar  serum  ACE  dan  polimorfisme 14–16 ACE I / D pada populasi yang berbeda. Berdasarkan penelitian yang dilakukan Pena dan kawan-kawan,  tekanan  darah,  riwayat  merokok, diabetes  melitus,  dan  kolesterol  adalah  faktor  yang
15 berpengaruh  terhadap  kejadian  stoke  iskemik.   Sesuai dengan  hasil  penelitian  ini,  faktor  risiko  terbanyak adalah  hipertensi  sebesar  51,4%.  Pada  penelitian  ini hubungan  antara  varian  gen  ACE  dengan  riwayat hipertensi  menggunakan  Uji Pearson  Chi  Square tidak terbukti  secara  statistik  ( p >0,05).  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian oleh Pall dan kawan-kawan yang menyatakan bahwa  varian  gen  ACE  tidak  berhubungan  dengan
17 kejadian hipertensi di Hungaria.  Studi oleh Zawilla dan kawan-kawan menyebutkan bahwa terdapat hubungan
Medica Hospitalia | Vol. 8, No. 3, November 2021

## TABEL 2
Karakteristik Subyek Penelitian Berdasarkan Varian Genetik Angiotensin Converting Enzyme (ACE)
Varian gen ACE (%)
Variabel (n=72) Jenis Kelamin, laki-laki (%)
Diabetes Melitus (%) Riwayat Merokok (%) HDL, rendah (%) Obesitas (%) Varian gen ACE γ 0,054 p II DI DD Usia (tahun) 2 BMI (kg/m ) Trigliserilda, tinggi (%) LDL, tinggi (%)
Hipertensi (%) 63,15 ± 8,77 40,3
8,3 48,6% 13,9 26,4 54,2 22,29 ± 2,35 12,5% 9,7 29,2
60,43 ± 6,68 18,1
8,3
31,9% 11,1
23,6 41,7
22,22 ± 1,93
5,6% 4,2
11,1 54,00 ± 2,00 1,4
0,0
4,2% 2,8 1,4
4,2 22,60 ± 1,51 1,4% 0 2,8 α 0,088 γ 0,021 γ 0,642 γ 0,246 γ 0,306 γ 0,658 α 0,096 γ 0,493 γ 0,496 α β γ Uji One Way Anova ,  Uji Kruskal Wallis ,  Uji Chi Square
Gambar 2. Analisis Varian Genetik Angiotensin Converting Enzyme (ACE)
antara varian gen ACE dengan kejadian hipertensi yang 18 dipapar oleh suara bising.  Hasil dari penelitian tersebut menyebutkan  bahwa  varian  gen  DD  memiliki  risiko hipertensi akibat suara bising. ACE merupakan senyawa yang berperan terhadap konversi angiotensin I menjadi angiotensin  II  sehingga  berperan  terhadap  kendali tekanan darah sistemik. Penelitian yang dilakukan oleh Mekki  dan  kawan-kawan  pada  populasi  Sudan menyatakan  bahwa  tidak  terdapat  hubungan  antara variasi  gen  ACE  dengan  kejadian  diabetes  melitus,
19 trombosis,  penyakit  kardiovaskuler,  dan  merokok. Hasil  yang  sama  juga  didapatkan  pada  penelitian  ini didapatkan bahwa varian gen ACE tidak berhubungan secara statistik dengan usia, merokok, diabetes melitus, Dislipidemia  dan  obesitas  ( p >0,05).Penelitian  ini memiliki keterbatasan antara lain tidak melihat pajanan obat-obatan  yang  dikonsumsi  oleh  pasien  terhadap faktor  risiko  stroke,  peneliti  tidak  melhat  pola  asupan makanan  yang  dikonsumsi  subjek  selama  porses pengambilan  data  yang  dapat  mempengaruhi  kadar LDL,  maupun  tingkat  BMI  subjek  penelitian,  dan kemungkinan kurangnya jumlah sampel penelitian.

## SIMPULAN
Terdapat tiga varian genetik ACE dalam penelitian ini, yaitu varian II, DI, dan DD. Varian gen ACE II merupakan varian  genetik  terbanyak.  Pada  penelitian  ini  tidak didapatkan  adanya  hubungan  yang  signifikan  antara karakteristik faktor risiko stroke iskemik terhadap varian genetik ACE.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Zhong L-L, Ding L-S, He W, Tian X-Y, Cao H, Song Y-Q, et al . Systolic hypertension related single nucleotide polymorphism is  associated  with  susceptibility  of  ischemic  stroke. European Rev for Med and Pharm Sci . 2017; 21: 2901–6
2. Rasyid A, Hidayat R, Harris S, Kurniawan M, Mesiano T. Stroke iskemik.  In  Buku  ajar  neurologi.  Tangerang:  Penerbit Kedokteran Indonesia; 2017. p. 452–75.
3. Wang X, Cheng S, Brophy VH, Erlich HA, Mannhalter C, Berger K, et al . A meta-analysis of candidate gene polymorphism and ischemic  stroke  in  six  study  populations:  association  of lymphotoxin-alpha  in  non-hypertensive  patients. Stroke . 2009;40(3): 683–95
4. Morishita R, Gibbons GH, Ellison KE, Lee W, Zhang L, Yu H, et al .  Evidence  for  direct  local  effect  of  angiotensin  in  vascular hypertrophy. In vivo gene transfer of angiotensin converting enzyme. J Clin Invest . 1994;94(3): 978–84.
5. Moorthy  N,  Ramegowda  K.S,  Jain  S,  Bharath  G,  Sinha  A, Nanjappa M.C, et al. Role of angiotensin converting enzyme gene polypmorphism and ACE activity in predicting outcome after  myocardial  infarction.  Int  J  Cardiol  Heart Vasc.2021;32:100701
6. Raynolds M.V, Bristow M.R, Bush E.W, Abraham W.T, Lowes B.D,  Zisman  L.S,  et  al.  Angiotensin-converting  enzyme  DD genotype  in  patients  with  ischaemic  or  idiopathic  dilated cardiomyopathy. Lancet . 1993;342 (8879): 1073–5.
7. Rigat  B,  Hubert  C,  Alhenc-Gelas  F,  Cambien  F,  Corvol  P, Soubier  F.  An  insertion/deletion  polymorphism  in  the angiotensin I-converting enzyme gene accounting for half the variance  of  serum  enzyme  levels. J  Clin  Invest .  1990;86(4): 1343–6
8. Yulan  Zhao,  Chunlian  Xu.  Structure  and  function  of angiotensin converting enyme and its inhibitors. Chin J Biotech . 2008; 24(2):171–6
9. Islam  M.S,  Lehtimaki  T,  Juonala  M,  Kahonen  M,  Hutri- Kahonen  N,  Kainulainen  K, et  al .  Polymorphism  of  the angiotensin-converting  enzyme  (ACE)  and  angiotesinogen (AGT)  genes  and  their  associations  with  blood  pressure  and carotid artery intima media thickness among healthy Finnish young adults ‒ The Cardiovascular risk in young Finns study. Atherosclerosis . 2006; 188(2): 316–22
10. Kogawa K, Nishizawa Y, Hosoi M, Kawagishi T, Maekawa K, Shoji T, et al . Effect of polymorphism of apolipoprotein E and angiotensin-converting  enzyme  genes  on  arterial  wall thickness. Diabetes . 1997; 46(4): 682–7
11. Purnamasari  D,  Widjojo  BD,  Antono  D,  Syampurnawati  M. ACE gene polymorphism and atherosclerotic lesion of carotid artery among offsprings of type 2 diabetes mellitus. Acta Med Indones . 2012; 44(2): 128–34
12. Hong S.H, Park H.M, Ahn J.Y, Kim O.J, Hwang T.S et al . ACE I/D Polymrphysm In Korean Patients With Ishemic Stroke And Silent Brain Infarction. Acta Neurol Scand . 2008; 117(4) : 244–9 13. Douglas M.B, Christian A.R, Emily A.H, Robert W.R, Colin S, Michael F.W. Serum activity of angioensin converting enzyme 2 is decreased in patients with acute ischemic stroke. J Of Renin – Angiotensin Aldosteron Syst . 2016 ; 1–7
14. Bennion  D.M,  Haltigan  E.A,  Irwin  A.J,  Donnangelo  L.L, Regenhardt  R.W,  Pioquionto  D.J, et  al .  Activation  of  the neuroprotective  angiotensin  –  converting  enzyme  2  in  rat ischemic stroke. Hypertension . 2015; 66(1) : 141–8
15. Pena  –  Silva  R.A,  Heistad  D.D.  Stages  In  Discovery  : Angiotensin  –  Converting  Enzyme  Type  2  And  Stroke. Hypertension . 2015; 66(1) : 15–6
16. Jiang  F,  Yag  J,  Zhang  Y,  Dong  M,  Wang  S,  Zhang  Q, et  al .
Angiotensin  –  Converting  Enzyme  2  and  angiotensin  novel therapeutic targets. Nat Rev Cardiol . 2014;11(7) : 413–26
17. Pall  D,  Szanto  I,  Szabo  Z.  Triple  combination  therapy  in hypertension : the antihypertensive efficacy of treatment with Perindropril,  amlodipine,  and  indamine  SR. Clin  Drug Invest .2002;34(10) : 701–8
18. Zawilla  N,  Shaker  D,  Abdelaal  A,  Aref  W.  Angiotensin Converting Enzyme gene polymorphisms and hypertension in occupational noise exposure in egypt. Int J Occup environ Health . 2014;20(3): 194–203
19. Mekki  L.B,  Ali  E.W.  Genotype  distribution  of  angiotensin converting  enzyme  insertion  /  deletion  polymorphism  in sudanese  patient  with  ischemic  stroke. Int  J  of  adv  Pharm  Bio Chem .2015; 4(1):1–5