## Menara Perkebunan 2012 80(1), 25-31
Daya hidup planlet karet asal in vitro microcutting pada berbagai periode penutupan sungkup plastik dan komposisi media tumbuh
Survival rate of in vitro microcutting-derived rubber plantlets on various plastic cover closed periods and medium compositions
SUMARYONO *) , Masna Maya SINTA & NURHAIMI-HARIS
Balai Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia, Jl. Taman Kencana No. 1, Bogor 16151, Indonesia
Diterima tgl 22 Maret 2012/disetujui tgl 30 Mei 2012

## Abstract
In  vitro  culture  through  microcutting  technology  can be used for clonal propagation of rubber (Hevea brasiliensis Muell.  Arg. ) rootstocks.  Acclimatization  of  in  vitro  plantlets to  ex  vitro  conditions  is  a  major  bottleneck  in  the  micro- propagation  of  many  plants.This research  was  conducted  to study  the  effect  of  plastic  cover  closed  period  and  media composition  on  the  survival  rate  of  rubber  plantlets. Plantlets  derived  from  microcutting  were  planted  on  plastic pots  containing  a  mixture  of  soil,  cocopeat,  dung  manure, and sand or zeolite. The plantlets were then placed inside a closed transparent plastic cover that opened after 2, 3, 4 and 6  weeks.  The  cover  was  placed  under  tree  canopy.    The second experiment used the same media composition with or without  cocopeat  and  with  sand  or  zeolite.    At  1.5  month after  culture,  observation  was  done  on  the  number  of survived  plantlets,  plantlet  height  and  the  percentage  of rooted  plantlets.  The  results  show  that  the  best  coverclosed period  was  six  weeks  and  the  best  growing  medium  was  a mixture  of  soil,  cocopeat,  dung  manure,  and  zeolite (6:2:1:1v/v).  On  the  two  combined  treatments,  the  survival rate  was  73.3%  after  1.5  month  of  acclimatization.  The  use of  zeolite  and  a  higher  soil  percentage  gave  positive influences  on  rubber  plantlet  survival  rate.  The  second experiment  results  confirmed  that  the  use  of  zeolite  was better  than  sand  and  the  use  of  cocopeat  was  definitely needed.  It  can  be  concluded that  the  best  of  acclimatization of  rubber  plantlets  from  microcutting  was  on  a  medium mixture of soil, cocopeat, dung manure, and zeolite (6:2:1:1) and placed inside a closed plastic cover for six weeks before the cover was opened gradually.
[ Keywords: Hevea  brasiliensis ,  in-vitro  microcutting, rootstocks,  acclimatization,  closed  cover, cocopeat ]

## Abstrak
Kultur in  vitro melalui  teknologi microcutting dapat digunakan untuk perbanyakan klonal batang bawah tanaman karet  ( Hevea  brasiliensis Muell.  Arg.).  Aklimatisasi  planlet in vitro ke kondisi ex vitro merupakan hambatan utama pada mikropropagasi berbagai jenis tanaman. Penelitian ini dilaku- kan  untuk  mempelajari  pengaruh  lama  penutupan  sungkup plastik  dan  komposisi  media  tumbuh  terhadap  daya  hidup planlet karet.  Planlet  karet asal microcutting ditanam pada
pot  plastik  berisi  media  dengan  berbagai  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk  kandang,  dan  pasir  atau  zeolit.  Planlet selanjutnya  diletakkan  di  dalam  sungkup  plastik  transparan tertutup  rapat  yang  dibuka  setelah  2,  3,  4  dan  6  minggu. Sungkup  plastik  diletakkan  di  bawah  tajuk  pepohonan. Percobaan  kedua  menggunakan  komposisi  media  serupa dengan  atau  tanpa cocopeat dan  dengan  pasir  atau  zeolit. Pada umur 1,5 bulan, pengamatan dilakukan terhadap jumlah planlet  yang  hidup,  tinggi  planlet,  dan  persentase  planlet yang  berakar.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  lama penyungkupan  terbaik  adalah  enam  minggu  dan  media tumbuh  terbaik  adalah  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk kandang,  dan  zeolit  (6:2:1:1  v/v).    Pada  kombinasi  kedua perlakuan tersebut, daya hidup planlet karet mencapai 73,3% setelah  1,5  bulan  aklimatisasi.  Penggunaan  zeolit  dan persentase  tanah  yang  lebih  tinggi  berpengaruh  positif terhadap  daya  hidup  planlet  karet.  Hasil  percobaan  kedua menegaskan  bahwa  penggunaan  zeolit  lebih  baik  daripada pasir  dan  penggunaan cocopeat mutlak  diperlukan.  Dapat disimpulkan  bahwa  aklimatisasi  planlet  karet  asal micro- cutting terbaik  dilakukan  pada  media  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk  kandang,  zeolit  (6:2:1:1)  dan  diletakkan  di dalam  sungkup  plastik  tertutup  selama  enam  minggu sebelum sungkup dibuka secara bertahap.
[Kata  kunci: Hevea  brasiliensis,  microcutting  in-vitro , batang  bawah,  aklimatisasi,  sungkup  tertutup, cocopeat, ]

## Pendahuluan
Kultur in  vitro tanaman  karet  ( Hevea  brasiliensis Muell. Arg.) dapat dilakukan dengan microcutting dan embriogenesis  somatik  (Nayanakantha  &  Seneviratne, 2007;  Montoro et  al .,  2010).  Teknologi in  vitro microcutting karet dikembangkan untuk menghasilkan batang  bawah  klonal  (Carron  &  Enjalric,  1983)  guna memenuhi  kebutuhan  dan  meningkatkan  kualitas batang  bawah  yang  selama  ini  dihasilkan  dari  biji. Meningkatnya  kebutuhan  batang  bawah  menyebabkan ketersediaan  biji  tidak  mencukupi  lagi  karena tergantung  pada  beberapa  klon  karet  penghasil  biji batang  bawah  dan  pada  musim  biji  yang  hanya berlangsung satu kali dalam setahun.  Di samping itu, kelemahan  lain dari penggunaan bibit asal biji sebagai
*) Penulis korespondensi:osumaryono@yahoo.com
Daya hidup planlet karet asal in vitro microcutting pada berbagai periode ………. (Sumaryono et al.)
batang bawah adalah adanya keragaman batang bawah dan  kekurang-mampuan  kombinasi  batang  atas  dan batang  bawah  menampilkan  potensi  produksi  dan karakter  unggul  lain  secara  maksimal  karena  per- bedaan tingkat juvenilitas (Abbas & Ginting, 1981).
Perbanyakan batang bawah tanaman karet secara klonal  melalui  teknologi in  vitro  microcutting telah berhasil dilakukan (Carron et al. , 2000; Carron et al. , 2003).  Bibit  karet  yang  dihasilkan  melalui  teknik  ini memiliki perakaran yang kuat dan kokoh. Pengamatan di  lapang  pada  pertanaman  muda  menunjukkan  per- tumbuhan yang seragam dan memiliki bentuk konikal pada batang bagian bawah (Carron et al. , 2000; Carron et al. , 2003). Teknologi in vitro microcutting karet ini kemudian  berhasil  diaplikasikan  dan  diadaptasi  pada lingkungan  tropik  di  Indonesia,  walaupun  dijumpai beberapa  masalah  yaitu  tingginya  kontaminasi  saat kultur  awal  (Nurhaimi-Haris et  al .,  2009),  rendahnya laju  multiplikasi  (Nurhaimi-Haris et  al .,  2008),  dan rendahnya  daya  hidup  planlet  saat  aklimatisasi (Sumaryono et al ., 2008).
Periode aklimatisasi bahan tanaman (planlet) dari lingkungan in  vitro dalam  tabung  kultur  di  labora- torium ke kondisi ex vitro di lingkungan luar merupa- kan  salah  satu  periode  paling  kritis  dalam  kultur in vitro berbagai  tanaman  (Hazarika,  2003).  Planlet tumbuh  dalam  wadah  tertutup  yang  aseptik  dengan kelembaban  udara  tinggi,  intensitas  cahaya  rendah, suhu konstan, dan kadar CO 2 rendah (Hazarika, 2003). Di  sisi  lain,  lingkungan ex  vitro tidak  aseptik, kelembaban  udara  rendah,  intensitas  cahaya  tinggi, serta  suhu  tinggi  dan  fluktuatif.  Sebagian  bibit  asal kultur jaringan menjadi layu dan tidak bertahan hidup karena  laju  transpirasi  lebih  besar  dibandingkan dengan  laju  penyerapan  air  oleh  akar.  Pemindahan planlet  dari  kultur in  vitro ke ex  vitro memerlukan tahap  adaptasi  agar  planlet  tetap  hidup  dan berkembang (Pospisilova et al. , 2007).
Pengurangan  cekaman  dan  manipulasi  kondisi aklimatisasi perlu  dilakukan  sehingga  tercipta  kondisi optimum  untuk  ketahanan  hidup  dan  pertumbuhan planlet.  Fase  awal  aklimatisasi  dilakukan  dalam sungkup  tertutup  rapat  sehingga  kelembaban  nisbi udara  mendekati  jenuh  (RH  hampir  100%).  Dengan menanam  planlet  karet  asal microcutting pada  media campuran  dan  diletakkan  di  dalam  sungkup  plastik diperoleh daya hidup sekitar 60% pada umur 1,5 bulan (Sumaryono et al ., 2008).  Persentase hidup planlet ini masih  dianggap  terlalu  rendah  sehingga  beberapa modifikasi  kondisi  lingkungan  dan  komposisi  media dilakukan  untuk  meningkatkan  daya  hidup  planlet karet asal in vitro microcutting .
Tujuan  penelitian  ini  adalah  menentukan pengaruh periode penutupan sungkup dan komposisi
media tumbuh terhadap daya hidup planlet karet hasil in  vitro  microcutting selama  aklimatisasi  ke  kondisi ex vitro di lingkungan luar.

## Bahan dan Metode

## Sumber planlet dan prosedur aklimatisasi
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  beberapa  genotipe  planlet  karet  hasil  per- banyakan in  vitro  microcutting dari  Laboratorium Biokimia  dan  Biologi  Molekuler,  Balai  Penelitian Bioteknologi  Perkebunan  Indonesia,  Bogor.    Planlet telah mengalami proses conditioning dan induksi akar in  vitro selama  satu  minggu,  sehingga  siap  untuk aklimatisasi (Gambar 2a). Tinggi rata-rata planlet karet yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  13  mm.  Planlet dicuci  hingga  bersih  dari  agar  dan  direndam  dalam Dithane  0,2%  selama  satu  menit  untuk  mencegah kontaminasi  saat  proses  aklimatisasi.  Pemotongan ujung  daun  dilakukan  untuk  mencegah  terjadinya transpirasi  berlebihan  dan  sebagai  penanda  muncul- nya  daun  baru.  Pencatatan  data  dilakukan  untuk mengetahui kondisi awal planlet antara lain: kelas akar (kelas  0  =  tanpa  akar;  1  =panjang  akar  <0,5  cm;  2= panjang  akar  0,5-1,4  cm;  3=panjang  akar>1,4  cm), jumlah akar, dan tinggi planlet. Planlet ditanam dalam pot  plastik  transparan  berukuran  diameter  7  cm  dan tinggi  10  cm  berisi  campuran  media  (Gambar  2b). Planlet  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  sungkup plastik  transparan  yang  kemudian  ditutup  rapat.  Suhu di  dalam  sungkup  plastik  berkisar  antara  23  sampai 32°C  dan  kelembaban  nisbi  lebih  dari  70%.    Pada siang  hari  yang  terik,  dilakukan  penyemprotan  air menggunakan water sprinkler untuk menurunkan suhu dan menjaga kelembaban udara.

## Pengaruh  lama  penutupan  sungkup  dan  komposisi media
Penanaman  planlet  dilakukan  pada  tiga  campuran media yaitu media satu terdiri dari tanah + cocopeat + pupuk kandang + pasir (6:2:1:1 v/v), media dua berupa tanah  + cocopeat +  pupuk  kandang +  zeolit  (6:2:1:1), dan media tiga  berupa    campuran  tanah  + cocopeat + pupuk  kandang  +  zeolit  (4:2:1:1).  Pot  berisi  planlet diletakkan  dalam  sungkup  plastik  rangka  bambu (1,5 m x 1 m x 1 m), dengan perlakuan lama penyung- kupan  2,  3,  4,  dan  6  minggu.    Pembukaan  sungkup dilakukan  secara  bertahap.  Total  planlet  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  sebanyak  216  planlet dari  tiga  kali  ulangan  waktu  dengan  masing-masing perlakuan terdiri dari rata-rata enam planlet. Sebanyak 75%  planlet    telah  berakar  dan  tiap  planlet  rata-rata me-miliki dua akar dengan panjang 0,5-1,4 cm.

## Menara Perkebunan 2012 80(1), 25-31
Pengaruh  penggunaan  cocopeat,  pasir  dan  zeolit dalam media
Penelitian  kedua  ini  menentukan  komposisi media  terbaik  yakni  penggunaan cocopeat dan  pasir atau zeolit.  Media yang digunakan adalah media satu berupa  campuran  tanah: cocopeat :pasir:pupuk  kandang dengan  perbandingan  6:2:1:1(v/v),  media  dua  adalah tanah:pasir:pupuk  kandang  (6:1:1),  media  tiga  adalah tanah: cocopeat :zeolit:pupuk  kandang  (6:2:1:1),  dan media empat yaitu tanah:zeolit:pupuk kandang (6:1:1). Planlet  yang  telah  ditanam  diletakkan  di  dalam sungkup  plastik  tertutup  dengan  kerangka  PVC  (3  m x1m  x1  m)  selama  enam  minggu  (Gambar  2c).  Total planlet  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  sebanyak 263  planlet  dari  empat  kali  ulangan  waktu  dengan masing-masing  perlakuan  terdiri  dari  rata-rata  16 planlet.  Pada  awal  penelitian,  sebanyak  62%  planlet telah  berakar,  rata-rata  memiliki  dua  akar  dengan panjang  0,5-1,4 cm.

## Sifat fisik dan kimia media
Sifat fisik dan kimia dari lima media aklimatisasi yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  dianalisis  yakni berat  jenis,  kapasitas  menahan  air,  ruang  pori,  pH, kapasitas  tukar  kation  (KTK)  dan  kandungan  C- organik.  Analisis  sifat  fisik  media  dilakukan  di  Lab Fisika Tanah, Balai Besar Penelitian Tanah, sedangkan sifat  kimia  dilakukan  di  Lab  Kimia  Analitik,  Balai Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia.  Setiap analisis  diulang dua atau tiga kali.

## Pengamatan dan analisis statistik
Pengamatan  terhadap  daya  hidup  planlet,  tinggi planlet, dan frekuensi adanya akar dilakukan 1,5 bulan setelah  aklimatisasi.  Penelitian  ini  dilakukan  meng- gunakan rancangan acak lengkap (RAL). Aklimatisasi dilakukan  sebanyak  tiga  kali  ulangan  waktu  pada penelitian pertama dan empat kali ulangan waktu pada penelitian  kedua.  Data  semua  parameter  pengamatan dan hasil analisis  sifat  tanah  diuji  statistik  mengguna- kan  analisis  keragaman  (ANOVA).  Perbedaan  antar- perlakuan  ditentukan  dengan  uji  jarak  berganda Duncan pada taraf α = 0,05.

## Hasil dan Pembahasan

## Lama penyungkupan dan media
Daya  hidup  planlet  karet  1,5  bulan  setelah aklimatisasi  pada  lama  penyungkupan  enam  minggu secara  nyata  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  lama penyungkupan  2,  3  dan  4  minggu  (Gambar  1).    Pada lama penyungkupan  enam minggu, daya hidup planlet karet  rata-rata  mencapai  58%,  sedangkan  pada  lama penyungkupan  2, 3,  dan 4   minggu  menurun  drastis
menjadi  17-25%.  Hasil  ini  memperlihatkan  bahwa penyungkupan  planlet  karet  dalam  sungkup  plastik tertutup memerlukan periode yang cukup lama sampai dengan  enam  minggu.  Lama  penyungkupan  enam minggu juga digunakan oleh Sumaryono et al. (2008). Periode  penyungkupan  lebih  dari  enam  minggu kemungkinan  sudah  tidak  diperlukan  lagi  mengingat telah  terbentuknya  daun  baru  yang  menunjukkan bahwa  akar  planlet  karet  telah  mampu  menyerap  air dan hara dari media tumbuh.
Dalam  sungkup  plastik  yang  tertutup  rapat, kelembaban  nisbi  udara  sangat  tinggi  mencapai  lebih dari  90%.    Pada  keadaan  kelembaban  yang  hampir jenuh  ini  laju  transpirasi  sangat  rendah  sehingga kehilangan  air  lewat  daun  karena  transpirasi  dapat ditekan sebelum akar planlet mampu menyerap air dari media.  Laju  transpirasi  yang  lebih  tinggi  dari  laju penyerapan  air  oleh  akar  merupakan  faktor  utama penyebab  bibit  asal  kultur  jaringan  tidak  mampu bertahan  hidup.  Planlet  memerlukan  periode  adaptasi ke  kondisi ex  vitro agar  tetap  bertahan  hidup (Pospisilova et  al .,  2007),  pada  planlet  karet  asal microcutting diperlukan  periode  selama  enam  minggu sebelum sungkup plastik dibuka secara bertahap.
Dari  tiga  komposisi  media  tumbuh  yang diguna- kan, media dua yaitu campuran tanah, cocopeat , pupuk kandang dan zeolit dengan perbandingan 6:2:1:1 (v/v) merupakan  media  terbaik  dalam  hal  persentase  hidup planlet karet. Secara konsisten daya hidup planlet pada media  dua  tersebut  lebih  baik  dibandingkan  dengan komposisi  media  lainnya  pada  semua  perlakuan  lama penyungkupan (Gambar 1).  Pada lama penyungkupan enam  minggu,  daya  hidup  planlet  pada  media  dua mencapai  73,3%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  peng- gunaan  zeolit  lebih  baik  dibandingkan  dengan  pasir dan  penggunaan  tanah  60%  lebih  baik  dibandingkan dengan  tanah  50%.  Zeolit  mampu  meningkatkan kapasitas menahan air, KTK tanah, dan kandungan C- organik  dibandingkan  dengan  pasir  (Tabel  2).    Porsi tanah  lebih  banyak  akan  meningkatkan  daya  hidup planlet karet asal microcutting memperlihatkan bahwa perakaran planlet karet memerlukan media yang cukup padat sehingga dapat menopang akar dengan kuat.
Pada  awal  aklimatisasi  sekitar  20,4%  planlet belum  berakar.  Adanya  akar  saat  planlet  karet  diakli- matisasi mempengaruhi daya hidup planlet karet.  Dari planlet yang tidak mempunyai akar, daya hidup planlet rata-rata  sebesar  18,8%,  sedangkan  dari  planlet  yang telah  berakar  daya  hidup  planlet  sebesar  43,7%  pada umur 1,5 bulan.  Angka rata-rata ini berasal dari semua perlakuan  penyungkupan  dan  media  tumbuh.    Hasil serupa  juga  diperoleh  Sumaryono et  al .  (2008)  yang melaporkan  bahwa  kondisi  awal  planlet  yang  lebih vigor akan meningkatkan daya hidup vitro plant . Pada umur  1,5  bulan  sebagian  planlet  telah  mulai  mem- bentuk daun baru (Gambar 2d) dan terjadi penambahan tinggi planlet rata-rata sebesar 1,6 mm.
Daya hidup planlet karet asal in vitro microcutting pada berbagai periode ………. (Sumaryono et al .)

## Komposisi media
Komposisi  media  tumbuh  pada  saat  aklimatisasi berpengaruh  terhadap  daya  hidup  planlet  karet  asal microcutting .  Dari  hasil  penelitian  dengan  mem- bandingkan  empat  komposisi  media,  terlihat  bahwa penggunaan zeolit lebih baik daripada pasir (Tabel 1). Hasil  ini  menegaskan  kembali  hasil  yang  telah  diper- oleh pada percobaan pertama (Gambar 1).  Media yang mengandung  zeolit  mempunyai  nilai  kapasitas  tukar kation  (KTK)  dan  kapasitas  menahan  air  yang  lebih baik  dibandingkan  dengan  media  yang  mengandung pasir  (Tabel  2).    Zeolit  merupakan  kristal  tetrahedral alami  aluminosilikat  berstruktur  jaring  rigid  yang terdiri  dari  AlO 4 dan  SiO 4 (Bernardi et  al. ,  2010). Zeolit  dikenal  memiliki  nilai  KTK  yang  tinggi (Ghazvini et  al. ,  2007)  sehingga  banyak  digunakan dalam  pertanian karena meningkatkan  efisiensi  pemu- pukan  (Bernadri et  al. ,  2010)  dan  kelembaban  tanah (Ippolito et  al. ,  2011)  sehingga  meningkatkan  daya hidup dan vigor tanaman (Sonmez et al. , 2010).
Hasil  penelitian  ini  juga  memperlihatkan  bahwa penggunaan cocopeat berpengaruh  positif  terhadap daya hidup planlet karet.  Tanpa pemakaian cocopeat , daya hidup planlet rata-rata menurun 20 – 30% (Tabel 1).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  penggunaan cocopeat sebesar 20%  dari total media mutlak diperlukan dalam aklimatisasi planlet karet. Cocopeat merupakan salah
satu  bahan  yang  mampu  menyerap  dan  menahan  air dalam  media  sehingga  ketersediaan  air  selalu  men- cukupi  untuk  pertumbuhan  planlet  karet.  Hasil  peng- ukuran  menunjukkan cocopeat mampu  meningkatkan kapasitas menahan air sebesar 2,2 – 5,1% (Tabel 2). Di samping  itu, cocopeat 20%  pada  media  dua  juga meningkatkan  kandungan  bahan  organik  di  dalam media menjadi 2,95%. Cocopeat merupakan campuran media yang banyak digunakan dalam aklimatisasi bibit asal  kultur  jaringan  dan  terbukti  meningkatkan  daya hidup  misalnya  pada  planlet Garcinia  indica (Chabukswar  &  Deodhar,  2005)  dan  apel  (Modgil et al. , 2009).
Sifat  fisik  dan  kimia  dari  lima  campuran  media yang digunakan dapat dilihat pada Tabel 2. Kandungan tanah  yang  lebih  banyak  meningkatkan  berat  jenis media,  misalnya  pada  perlakuan  lima  dengan  kom- posisi tanah 66,7% mempunyai berat jenis 0,81 g/cm 3 , sedangkan  pada  perlakuan  empat  dengan  komposisi tanah  50%  mempunyai  berat  jenis  0,68  g/cm 3 . Komposisi  campuran  dalam  media  tidak  berpengaruh terhadap  ruang  pori  total,yang  nilainya  cukup  tinggi yakni  67  –  73%,  hal  ini  mungkin  karena  campuran media  masih  cukup  longgar  dan  tidak  padat.  Penam- bahan cocopeat meningkatkan  secara  nyata kapasitas menahan  air  campuran  media.  Kapasitas  menahan  air pada campuran media dengan zeolit selalu lebih tinggi dibandingkan dengan pasir (Tabel 2).
0 10 20 30 40 50 60 70 80 2 3 4 6 media 1 media 2 media 3 D ay a hi dup/ sur vi val r at e (%)
Lama penyungkupan (minggu)/ Cover closed period (week)
Gambar  1.  Pengaruh  lama  penyungkupan  dan  komposisi  media  terhadap  daya  hidup  planlet  karet  asal microcutting setelah  aklimatisasi  selama  1,5  bulan.  Media  1=  tanah: cocopeat :  pupuk  kandang: pasir  (6:2:1:1);  media  2  =  tanah: cocopeat :  pupuk  kandang:  zeolit  (6:2:1:1);  media  3  =tanah: cocopeat : pupuk kandang: zeolit (4:2:1:1).
Figure 1.   Effect of cover closed period and medium composition on the survival rate of rubber plantlets after 1,5  month  of  acclimatization.  Medium  1=  soil:  cocopeat:dung  manure:  sand  (6:2:1:1);  medium 2=  soil:cocopeat:dung  manure:  zeolite  (6:2:1:1);  medium  3=soil:  cocopeat:  dung  manure: zeolite(4:2:1:1).
C D A B C Menara Perkebunan 2012 80(1), 25-31
Tabel 1. Pengaruh komposisi media tumbuh terhadap daya hidup planlet karet asal microcutting .
Table 1. Effect of growing medium composition on the survival rate of rubber plantlets derived from microcutting.
Komposisi media Medium composition Daya hidup planlet Plantlet survival rate (%) Tanah : cocopeat : pupuk kandang : pasir Soil : cocopeat : dung manure : sand (6:2:1:1) 62,6  ab *) Tanah : pupuk kandang : pasir Soil : dung manure : sand (6:1:1) 40,9   b Tanah : cocopeat : pupuk kandang : zeolit Soil : cocopeat : dung manure : zeolite (6:2:1:1) 75,3  a Tanah : pupuk kandang : zeolit Soil : dung manure : zeolite (6:1:1) 40,2   b
*) Angka dalam kolom diikuti oleh huruf yang sama berarti tidak berbeda nyata menurut uji jarak berganda Duncan padaα = 0,05.
*) Means in the column followed by the same letters are not significantly different according to Duncan’s multiple range test atα = 0.05.
Komposisi  media  berpengaruh  terhadap  pH  tanah, yang berkisar antara 5,6 sampai 6,0 (Tabel 2).  Penam- bahan cocopeat menurunkan  pH  media  secara  nyata, adanya zeolit menyebabkan penurunan pH media yang mengandung cocopeat menjadi lebih kecil. Penambah- an  zeolit  meningkatkan  secara  nyata  kapasitas  tukar kation  (KTK)  tanah  dan  kandungan  C-organik  tanah dibandingkan  dengan  penambahan  pasir.  Penambahan cocopeat tidak berpengaruh terhadap KTK tanah tetapi
sangat  berpengaruh  terhadap  peningkatan  kandungan C-organik  tanah.  Penambahan cocopeat 20%  menye- babkan  kandungan  C-organik  media  menjadi  2,95%, sedangkan  pada  penambahan cocopeat 25%  (karena komposisi  tanah  menjadi  50%)  kandungan  C-organik mencapai 4,52%. Komposisi media terbaik untuk daya hidup  dan  pertumbuhan  bibit  karet  asal microcutting yakni  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk  kandang  dan zeolit  (6:2:1:1).  Media  ini  mempunyai  kapasitas
Gambar  2.  (A)  Planlet  karet  berakar  asal microcutting yang  siap  diaklimatisasi,  (B)  Planlet  ditanam  di  pot berisi campuran media, (C) Sungkup plastik tertutup, dan (D) Planlet telah membentuk daun baru pada 1,5 bulan setelah aklimatisasi.
Figure  2.  (A)  A  rooted  rubber  plantlet  from  microcutting  ready  for  acclimatization,  (B)  Plantlets  were planted  in  plastic  pot  containing  media  mixture,  (C)  Closed  plastic  cover,and  (D)  Plantlet has formed new leaves at 1.5 month after acclimatization.
Daya hidup planlet karet asal in vitro microcutting pada berbagai periode ………. (Sumaryono et al.)
Tabel 2. Sifat dari komposisi media yang digunakan dalam aklimatisasi planlet karet.
Table 2. Characteristics of the medium composition used for rubber plantlets acclimatization.
Komposisi media Medium composition Berat jenis Bulk density (g/cm 3 ) Ruang pori total Total porosity (g/cm 3 ) Kapasitas menahan air Water holding capacity (%) KTK tanah Soil CEC (Cmol/kg) pH tanah Soil pH Kandungan C-organik C-organic content (%)
Tanah: cocopeat : pupuk kandang: pasir
Soil: cocopeat: dung manure: sand (6:2:1:1) 0,74 ab 67,5 a 35,9 bc 17,66 c 5,59 c 2,23 c
Tanah: cocopeat : pupuk kandang: zeolit
Soil: cocopeat:dung manure: zeolite (6:2:1:1) 0,74 ab 69,5 a 41,7 a 25,93 ab 5,72 bc 2,95 b
Tanah: cocopeat : pupuk kandang: zeolit
Soil: cocopeat:dung manure: zeolite (4:2:1:1) 0,68 b 73,5 a 40,7 a 27,32 a 5,78 b 4,52 a Tanah: pupuk kandang: pasir Soil: dung manure: sand (6:1:1) 0,81 a 67,2 a 33,7 c 15,74 c 5,98 a 1,54 d Tanah: pupuk kandang: zeolit Soil: dung manure: zeolite (6:1:1) 0,72 ab 70,2 a 36,6 b 23,42 b 5,86 ab 1,85 cd
*) Angka dalam kolom yang sama diikuti oleh huruf yang sama berarti tidak berbeda nyata menurut uji jarak berganda Duncan pada α = 0,05.
*) Means in the same column followed by the same letters are not significantly different according to Duncan’s multiple range test at α = 0.05.
menahan  air  tertinggi,  sedangkan  ruang  pori  total, KTK  tanah,  dan  kandungan  C-organik  cukup  tinggi. Penggunaan  komposisi  tanah  sebesar  60%  berguna untuk  meningkatkan  kemampuan  menopang  per- akaran  planlet  dengan  kuat.  Sifat  fisik  media  ini mampu  menciptakan  lingkungan  yang  baik  bagi sistem  perakaran  bibit  karet  asal microcutting untuk bertahan  hidup,  ditopang  pula  dengan  lingkungan mikro  dalam  sungkup  tertutup  rapat  dengan kelembaban nisbi sangat tinggi selama enam minggu. Pada  saat  sungkup  mulai  dibuka  secara  bertahap setelah  enam  minggu,  perakaran  bibit  sudah  mampu menyerap  air  untuk  mengimbangi  kehilangan  air melalui transpirasi tanaman.

## Kesimpulan
Kondisi  aklimatisasi  terbaik  untuk  planlet  karet asal in  vitro  microcutting adalah  ditanam  pada medium  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk  kandang, zeolit dengan perbandingan 6:2:1:1 (v/v) dan diletak- kan di dalam sungkup plastik transparan tertutup rapat selama enam minggu sebelum dibuka secara bertahap. Pada kondisi ini daya hidup planlet rata-rata mencapai 73 – 75% pada umur 1,5 bulan.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada  PT Perkebunan  Nusantara  III  atas  dana  kerjasama  yang diberikan  untuk  kelangsungan  penelitian  ini  serta kepada  Sdr.  Nani  Yuliani  dan  A.  Sudrajat  atas bantuan teknisnya.

## Daftar Pustaka
Abbas BS & S Ginting (1981). Influence of rootstock and scion  on  girth  increment  in  rubber  trees. Buletin Balai Penelitian Perkebunan Medan 12, 145-152.
Bernardi  ACD,  PPA  Oliviera,  M  Monte,  JC  Polidoroc  & F  Saouza-Barros  (2010).  Brazilian  sedimentary zeolite  use  in  agriculture. In:  The  19 th World Congress  Soil  Sci:  Soil  Solutions  for  a  Changing World . Brisbane Australia, 1-6 August 2010.
Carron  MP  &  F  Enjalric  (1983).  Perspectives  du  micro bouturage  de  l’Hevea  brasiliensis. Caoutchoucs  et Plastiques 627-628, 65-68.
Carron MP, L Lardet, ALeconte, C Boko, BG Dea & J Keli (2003).    Field  growth  and  rubber  yield  of Hevea brasiliensis (Muëll. Arg.) from budded versus in vitro micropropagated  plants  from  clone  IRCA  18. In:
Proc.  1 st Internat  Symp  Acclimat  Establish  Micro- propagated  Plants .  Sani-Halkidiki,  Greece,  p.  283- 293.
Carron  MP,  Y  Le  Roux,  J  Tison,  BG  Dea,  V  Caussanel,
J  Clair  &  J  Keli  (2000).  Compared  root  system architectures  in  seedlings  and in  vitro plantlets  of Hevea  brasiliensis ,  in  the  initial  years  of  growth  in the field. Plant & Soil 223(2), 73-85.
Chabukswar  MM  &  MA  Deodhar  (2005).  Rooting  and hardening  of  in  vitro  plantlets  of Garciniaindica Chois. Indian J Biotechnol 4, 409-413.
Ghazvini  RF,  G  Payvast  &  H  Azarian  (2007).  Effect  of clinoptilolitic-zeolite  and  perlite  mixture  on  the  yield and quality  of strawberry in soil-less culture. Internat J Agric Biol 6, 885-888.
30
Menara Perkebunan 2012 80(1), 25-31
Hazarika  BN  (2003).    Acclimatization  of  tissue-cultured plants. Current  Sci 85(12), 1704-1712.
Ippolito  JA,  DD  Tarkalson  &  GA  Lehrsch  (2011).  Zeolite soil  application  method  affects  inorganic  nitrogen, moisture, and corn growth. Soil Sci 176, 136-142.
Modgil  M,  T  Sharma  &  M  Thakur  (2009).  Commercially feasible  protocol  for  rooting  and  acclimatization  of micropropagated  apple  rootstocks. Acta  Hort 839, 209-214.
Montoro  P,  MP  Carron,  L  Lardet,  A  Clement-Demange  & J  Leclercq  (2010).  Biotechnologies  of  rubber  tree ( Hevea  brasiliensis ). Aus  Pac  J  Mol  Biol  Biotechnol 18(1), 81-83.
Nayanakantha NMC & P Seneviratne (2007). Tissue culture of  rubber: past, present and future prospects. Ceylon J Sci 36(2), 116-125.
Nurhaimi-Haris,  Sumaryono  &  MP  Carron  (2009). Pengaruh bahan  pra-sterilan,  tutup tabung  kultur,  dan musim  terhadap  tingkat  kontaminasi  eksplan  pada kultur microcutting karet. Menara  Perkebunan 77(2), 89-99.
Nurhaimi-Haris, Sumaryono, PD Kasi, Siswanto, Sumarmadji  &  MP  Carron  (2008).  Achievements  in the  implementation  of  microcutting  technology  for clonal rubber rootstock propagation. In: Proc Internat Workshop  Rubber  Planting  Materials ,  Bogor,  28-29 October 2008, p.117-128.
Pospisilova  J,  H  Synkova,  D  Haisel  &  S  Semoradova (2007).  Acclimation  of    plantlets  to ex  vitro conditions:  effects  of  air  humidity,  irradiance, CO 2 concentration  and  abscisic  acid  (a  review). Acta
Hort 748, 29-38.
Sonmez  I,  M  Kaplan,  H  Demir  &  E  Yilmaz  (2010).  Effect of  zeolite  on  seedling  quality  and  nutrient  content  of tomato  plant  ( Solanum  lycopersicon cv.  Malike  F1) grown in different mixtures of growing media. J Food Agric Environ 8(2), 1162-1165
Sumaryono, PD Kasi, Nurhaimi-Haris & MP Carron (2008). Aklimatisasi  planlet  karet  yang  diperbanyak  melalui teknologi microcutting . Dalam:  Pros  Lokakarya Nasional  Agribisnis  Karet, Yogyakarta,  20-21
Agustus 2008, p.323-329.