## PENGARUH WAKTU EKSTRAKSI DENGAN METODE ULTRASONIK TERHADAP KANDUNGAN VITAMIN C,PROTEIN, DAN FITOKIMIA EKSTRAK RAMBUT JAGUNG (Zea mays L.)
The Effect of Time of Extraction with Ultrasonic Methods on the Content of Vitamin C, Protein and Phytochemicals of Corn Hair Extract (Zea Mays L.)
Muhammad Edi Setyantoro 1 , Haslina 2 , Sri Budi Wahjuningsih 3 1 Mahasiswa Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang,
2,3 Staff Pengajar Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang Jl. Soekarno-Hatta Tlogosari Semarang, 50196 edisetyantoro14@gmail.com

## ABSTRAK
Rambut  jagung  yang  dikenal  sebagai  limbah  pangan  kini  mulai  banyak  diteliti karena kandungan antioksidan yang tinggi. Rambut jagung memiliki kandungan berupa alkaloid,  steroid,  sitosterol  dan  stigmasterol,  tanin,  flavonoid,  protein,  karbohidrat, vitamin, minyak atsiri, dan garam mineral seperti: Na, K, Mg, Ca.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  penggunaan metode  ultrasonik  terhadap  kandungan  fitokimia,  vitamin  c,  dan  protein  dalam pengekstrakan rambut jagung dengan berbagai waktu ekstraksi.
Penelitian  ini  menggunakan  metode  ultrasonik  dengan  pelarut  methanol  70%. Rancangan  percobaan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Rancangan  Acak Kelompok  (RAK)  dengan  berbagai  macam  waktu  ekstraksi.  Dengan  5  perlakuan  dan diulang  sebanyak  4  kali,  dimana  setiap  perlakuan  dengan  konsentrasi  ekstrak (bahan:pelarut) 1:10, : P1 : 60 o C selama 20 menit, P2 : 60 o C selama 30 menit, P3 : 60 o C selama 40 menit, P4 : 60 o C selama 50 menit, dan P5 : 60 o C selama 60 menit. Data yang diperoleh  dianalisa  dengan  menggunakan  ANOVA  dan  apabila  ada  perbedaan  yang nyata  maka  akan  dilanjut  dengan  menggunakan  uji  DMRT  taraf  5%.  Adapun  variable yang  diamati  yaitu  uji  aktivitas  antioksidan,  uji  kandungan  flavonoid,  uji  total  fenol, vitamin C, dan protein.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  berbagai  macam  waktu  menggunakan metode  ultrasonik  terhadap  ekstrak  rambut  jagung  berpengaruh  nyata  (p  <  0,05) terhadap  uji  aktivitas  antioksidan,  uji  kandungan  flavonoid,  uji  total  fenolik,  kadar vitamin C, dan kadar protein. Dengan hasil terbaik adalah pada waktu 60 menit terhadap fitokimia memberi   hasil   uji   aktivitas   antioksidan  sebesar   70,55%,   uji   kandungan flavonoid sebesar  2,45   mg.QE/g  dan  uji  total  fenol  sebesar  1,78  mg.GAE/g,  vitamin c  sebesar 53,98 Mg100/ml, dan kadar protein sebesar 0,58%.
Kata Kunci : Rambut Jagung, Ekstraksi Ultrasonik, Waktu

## ABSTRACT
Corn  silk  which  is  known  as  food  waste  is  now  widely  studied  because  of  its high  antioxidant  content.  Corn  silk  contains  alkaloids,  steroids,  sitosterol  and stigmasterol,  tannins,  flavonoids,  proteins,  carbohydrates,  vitamins,  essential  oils,  and mineral salts such as: Na, K, Mg, Ca.
The  purpose  of  this  study was  to  determine  the  effect of  the  use of  ultrasonic methods on  phytochemical,  vitamin  C,  and  protein  content  in  extracting  corn  silk  with  various extraction times.
This  study  uses  an  ultrasonic  method  with  70%  methanol  solvent.  The experimental design used in this study was a Randomized Block Design  (RBD) with a variety  of  extraction  times.  With  5  treatments  and  repeated  4  times,  where  each treatment  with  a  concentration  of  extract  (material:  solvent)  1:10,:  P1:  60oC  for  20 minutes,  P2: 60 o C  for  30  minutes,  P3:  60 o C  for  40  minutes,  P4: 60 o C  for  50  minutes, and  P5:  60 o C  for  60  minutes.  The  data  obtained  were  analyzed  using  ANOVA  and  if there  were  significant  differences  it  would  be  continued  using  the  DMRT  test  of  5% level.  The  observed  variables  are  antioxidant  activity  test,  flavonoid  content  test,  total phenol test, vitamin C test, and protein test.
The  results  showed  that  various  times  using  the  ultrasonic  method  on  corn  silk extract  significantly  affected  (p  <0.05)  the  antioxidant  activity  test,  flavonoid  content test,  total  phenolic  test,  vitamin  C  content,  and  protein  content.  With  the  best  results, phytochemicals gave 60.55% of the antioxidant activity test, a flavonoid content test of 2.45 mg.QE / g and a total phenol test of 1.78 mg.GAE / g, vitamin c of 53.98 Mg100 / ml, and protein content of 0.58%.

## Keywords: Corn Silk, Ultrasonic extraction, Time

## PENDAHULUAN
Seperti  yang  sudah  diketahui  bersama  bahwa  pada  jagung  terdapat  rambut jagung  ( corn  silk )  yang  hingga  saat  ini  pemanfaatannya  masih  sangat  minim.  Rambut jagung  merupakan  sebutan  yang  mudah  untuk  menggantikan  pengertian  dari  putik bunga  dari  jagung.  Warna  dari  rambut  jagung  biasanya  dimulai  dengan  warna  hijau yang  kemudian  berubah  menjadi  kemerahan,  kuning  dan  cokelat  muda.  Panjang  dari rambut jagung bisa mencapai 30 cm atau lebih dengan rasa sedikit manis (Hasanudin et al ., 2012).
Ekstraksi   merupakan    suatu  proses   penarikan    komponen   senyawa    yang  di inginkan dari suatu bahan dengan  cara  pemisahan  satu atau lebih komponen dari suatu bahan  yang  merupakan  sumber  komponennya.  Pada  umumnya  ekstraksi  akan  semakin baik  bila  permukaan  serbuk  simplisia  yang  bersentuhan  dengan  pelarut  semakin  luas. Dengan   demikian,   semakin   halus   serbuk   simplisia   maka   akan   semakin   baik ekstraksinya.
Ekstraksi  ultrasonik  adalah  modifikasi  dari  metode  maserasi.  Ekstrak  diproses menggunakan  ultrasound  (gelomang  ultrasonik)  berfrekuensi,  dengan  getaran  yang tinggi,  yaitu  20kHz.  Prinsip  kerja  ini  yaitu  dengan  mengamati  sifat  akustik  gelombang ultrasonik yang dirambatkan melalui medium yang dilewati. Saat gelombang merambat, medium  yang  dilewati  akan  mengalami  getaran.  Medium  perambatan  dengan  cairan dikenal dengan nama ekstraksi ultrasonic bath. Getaran akan memberikan pengadukan intensif  terhadap  proses  ekstraksi.  Pengeadukan  akan  meningkatkan  osmosis  antara bahan dengan pelarut sehingga akan meningkatkan proses ekstraksi.
Metode ekstraksi ultrasonik juga dikenal dengan sonokimia, yaitu pemanfaatan efek gelombang ulgrasonik untuk mempengaruhi perubahan-perubahanyang terjadi pada proses  kimia.  Keuntungan  utama  ekstraksi  gelombang  ultrasonik  antara  lain  efisiensi lebih besar, waktu operasi lebih singkat dan biasanya laju perpindahan masa lebih cepat jika dibandingkan dengan ekstraksi

## Tempat Penelitian

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini di Laboratorium Terpadu Universitas Diponegoro,  Laboratorium Rekayasa  Pangan  dan  Laboratorium  Kimia  Fakultas  Teknologi  Pertanian  Universitas Semarang.
Waktu Penelitian
Penelitian ini berlangsung selama bulan Juli 2019.

## Bahan
Bahan  baku  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini      adalah  rambut  jagung varietas pertiwi  yang  berasal  dari  perkebunan  rakyat  Kabupaten  Blora,  bahan  untuk analisa,  yaitu  Metanol  70%,  Aquades,  Kertas  saring  halus,  Kain  mori,  dan  Alumunium foil.

## Alat
Alat    yang  digunakan    dalam    pembuatan  serbuk    rambut  jagung  meliputi loyang, ayakan 60 mesh, blender kering, termometer, sendok, baskom, dan plastik.
Alat  untuk  menguji  parameter  diantaranya  neraca  analitik  (Denver  Instrument M-310),  alat  ekstraksi  ultrasonik bath (Elmer), beaker  glass (Pyrex),  corong  kaca (Pyrex),  gelas  ukur  (Pyrex),  spatula, vacuum  rotary  evaporator (Buchi  B-490),  botol sampel, pipet tetes dan freezer (Gea AB-396 T-X). glassware (Pyrex), desikator, tabung reaksi  (Pyrex),  pipet  volume  (Pyrex),  labu  ukur  (Pyrex),  corong  kaca  (Pyrex),  oven listrik  (Memmert  U.30),  spektrofotometer  dan  kuvet  (Unico  UV-2100),  Vortex mixer (LW Scientific), dan rak tabung reaksi.

## RANCANGAN PERCOBAAN
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Rancangan  Acak Kelompok (RAK).  Dengan  5 perlakuan dan diulang sebanyak  4 kali, dimana  setiap  perlakuan  dengan  konsentrasi  ekstrak  (bahan:pelarut)  1:10.  Perlakuan adalah sebagai berikut :
Waktu Ekstraksi: P1= 20 menit P2=  30  menit P3=  40  menit P4=  50  menit P5=  60  menit

## Prosedur Penelitian

## PROSEDUR PENELITIAN
Dalam  penelitian  ini  ada  lima  parameter    yang  akan  diamati  yaitu  uji fitokimia (aktivitas total fenol, flavonoid  & antioksidan), vitamin c, dan protein
Prosedur penelitian dapat dilihat pada diagram alir dibawah ini :
Air bersih Air kotor dan kotoran makro
Gambar 1. Diagram pembuatan bubuk rambut jagung (A. Fuadi,  2012) yang telah termodifikasi
Sortir/Pembersihan Pemotongan 5 cm Rambut jagung bersih Pengeringan dengan Kabinet Dryer T = 60 o C, t = 6 jam
Penggilingan menggunakan blender
Pengayakan 60 mesh

## Bubuk rambut jagung

## Bubuk rambut jagung
Ekstraksi Ultrasonik Metanol 70% Bahan (1) : (10) Pelarut
T= 60°C, t= 20,30,40,50,60 menit Filtrasi Kain mori Rotary Evoporator Filtrasi kertas saring halus
Ekstrak rambut jagung Dianalisi: 1.     Uji Aktivitas Antioksidan 2.     Uji kandungan flavonoid 3.     Uji total fenolik 4.     Vitamin C 5.     Protein
Gambar 2. Diagram ekstrak rambut jagung (A. Fuadi,  2012) yang telah termodifikasi

## Prosedur Analisis
Uji Kandungan Flavonoid (Nugroho et al., 2013)
Metode  yang  digunakan  mengacu  pada  metode  Nugroho et  al. (2013)  dengan menggunakan  pereaksi  AICI 3 .  Sebanyak  0,5  ml  ekstrak  buah  peredangan  konsentrasi 1000 ppm  dipipet  ke  dalam  tabung  reaksi,  ditambahkan  1,5  ml  etanol  0,1  ml  AICI 3 10%,  0,1  ml CH 3 COO  IM  dan  2,8  ml  aqudest.  Larutan  dihomogenkan  dan  diinkubasi  selama  30  menit. Absorbansi  larutan  di  ukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang 415 nm. Pengukuran absorbansi dilakuakan 3 kali ulangan.
Kuersetin digunakan sebagai standar dengan seri  konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm  dan  200  ppm.  Kurva  kalibrasi  kuersetin  digunakan  untuk  menentukan  kadar  senyawa total  flavonoid  yang  tergandung  dalam  sampel  melalui  persamaan  regresi  dan  dinyatakan dalam mg ekuivaken kuersetin ekstrak (mg QE/g ekstrak) dengan rumus perhitungan :
Keterangan: C : Flavonoid (mg QE/g ekstrak) M : Berat kstrak (g) C1 : Konsentrasi kuersetin (mg/I) FP :Faktor pengenceran
V : Volume ekstrak (I)
Uji Total Fenolik (Margaretta et al., 2011).
Pengujian total  fenol  dapat dilakukan  dengan menggunakan teori FolinCiocalteau . Langkah pertama yang dilakukan adalam menyiapkan sampel sebanyak 2 mg yang kemudian dilarutkan kedalam 1 mL metanol. Larutan dicampur dengan 5 mL reagen Folin-ciocalteau 1:10  (w/v)  dengan  pelarut  akuades.  Kemudian  ditambahkan 4  mL  larutan  natrium  karbonat  7,5%  (w/v)  dengan  pelarut  akuades.  Dibiarkan selama  30 menit   pada   suhu   ruang   dan   kemudian   diukur   serapan   pada   panjang gelombang  maksimal    yaitu    765    nm    dengan    menggunakan    spektrofotometer (Margaretta et  al ., 2011).
C =  konsentrasi total fenolik, mg GAE/g
c =  konsentrasi gallic acid , mg GAE/mL
V     =  volume   larutan   ekstrak   rambut   jagung   dalam   metanol   10   mL
m =  massa sampel ekstrak, gram

## Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH Sharma dan Bhat (2009)
Berdasarkan  Sharma  dan  Bhat  (2009),  sebanyak  1  ml  larutan  sampel  atau standar  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi,  lalu  penambahan  7  ml  methanol  (sebagai blanko  adalah  8  ml  methanol).  Suspensi  kemudian  ditambahkan  2  ml  larutan  DPPH 0,25  mM  (sehingga  konsentrasi  akhir  DPPH  dalam  larutan  menjadi  50  µM)  yang kemudian  di  homogenkan  dengan  menggunakan  vortex.  Rangkaian  kegiatan  reaksi dilakukan pada ruang gelap.  Inkubasi dilakukan  selama 30 menit pada  suhu ruang dan kemudian  diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  517  nm.  Kapasitas dinyatakan  dalam  bentuk  persentase  penghambatan  terhadap  radikal  DPPH  dengan perhitungan :
( 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 - 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 ) Kapasitas antioksidan (%)= 𝑥 100% 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜
Keterangan:      Ablanko = nilai absorbansi blanko,
Asampel = nilai absorbandi larutan sampel

## Kadar Vitamin C (AOAC,2005)
Penetapan  kadar  Vitamin  C  dalam  bahan  pangan  dapat  dianalisa  dengan berbagai  metode,  salah  satunya  dengan  metode  titrimetri.  Penetapan  dengan  metode titrimetri  sudah  sesuai  dengan  metode  prosedur  analisis  kimia  yang  didasarkan  pada pengukuran  jumlahlarutan  titran  yang  digunakan  untuk  mentitrasi.  Prinsip  penetapan dengan  metode  titrimetri  adalah  asam  askorbat  dioksidasi  oleh  diklorofenol-indofenol menjadi  senyawa  dehidro  askorbat.  Akhir  dari  titrasi  ditandai  dengan  terjadinya perubahan warna pada larutan sampai menjadi ungu.
𝑇𝑒𝑡𝑒𝑠𝑎𝑛 𝑖𝑜𝑑𝑖𝑛 × 0,88 × 𝑚𝑙 𝑎𝑚𝑖𝑙𝑢𝑚 Vitamin C = 𝑚𝑙 𝑎𝑚𝑖𝑙𝑢𝑚 ×  100%

## Protein (AOAC,2005)
Pengujian kadar protein dilakukan dengan menggunakan metode Kjeldahl, ada 3 tahap dalam menggunakan metode Kjeldahl yaitu : tahap destruksi, tahap destilasi dan tahap titrasi.
a.  Tahap Destruksi
Di  timbang  1gr  sampel  yang  telah  dihancurkan.  Masukan  sampel  ke  dalam Kjeldahl  100ml,  kemudian  pipet  10ml  asam  sulfat   pekat  masukkan  kedalam  labu Kjeldahl.  Ditambahkan  katalisator  untuk  mempercepat  destruksi.  Labu  Kjeldahl dipanaskan  dengan  menggunakan  api  kecil  dan  lama  –  kelamaan  api  dibesarkan hinga  suhu  menaik.  Destruksi  dihentikan  apabila  didapatkan larutan  berwarna jernih kehijauan.
b.  Tahap Destilasi
Hasil  yang  didapatkan  dari  proses  destruksi  didinginkan,  setelah  itu  dilakukan pengenceran  mengunkan  aquadest  sebanyak  100ml.  dihomogenkan  dan  dinginkan, setelah  itu  diambil  sampel  sebanyak  5ml  dan  dimasukkan  ke  dalam  labu  destilasi. Ditambahkan  10ml  larutn  natrium  hidrosida  30%  melalui  dinding  labu  destilasi hingga   terbentuk   lapisam  dibawah  larutan   asam.  Dipasangkan  labu  destila   dan dihubungkan  dengan  kondensor,  setelah  itu  ujung  kondensor  dibenamkan  dalam cairan penampung. Uap air dari cairan yang mendidih melalui kondensor da  menuju erlenmeyer  penampung.  Pada  erlenmeyer  penampung  ditambahkan  10ml  larutan asam  klorida  0,1  N  yang  sudah  ditetesi  degan  indikator  metih  merah.  Hasil  dari proses  destilasi  dapat  di  cek  menggunakan  kertas  lakmus,  jika  sudah  tidak  bersifat basa maka penyulingan dihentikan.
c.  Tahap Titrasi
Hasil  dari  proses  destilasi  masuk  kedalam  tahap  titrasi.  Tabung  erlemeyer digunakan  sebaigai  hasil  destilasi  yang  berisi  asam  klorida  0,1  N  dan  ditambahkan indikator  metil  merah  sebanyak  5  tetes.  Kemudian  dilakuakn  titrasi  dengan menggunkan  larutan  natrium  hidroksida  0,1  N.  Akhir  dari  titrasi  ditandai  dengan perubahan warna larutan menjadi mrah mudah dan tidak hilang selama 30 detik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji Aktivitas Antioksidan RSH-DPPH
Hasil   analisis   varian   menunjukkan   bahwa   semua   perlakuan   berbeda   nyata. Peningkatan  ini  diduga  dengan  pengaruh  waktu  ekstraksi  menyebabkan  aktivitas antioksidan mengalami peningkatan.
Waktu Ekstraksi (Menit) P1: (20) P2: (30) P3: (40) P4: (50) P5: (60)
Tabel 1. Rerata Hasil Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rambut Jagung Antioksidan (%) 65,44 ± 0,32 a
67,19 ± 0,78 b 68,31 ± 0,34 c 69,05 ± 0,24 d
70,55 ± 0,18 e
Keterangan  :  angka  yang  di  ikuti  oleh  huruf  yang  berebeda  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata (p<0,05).
Hal  ini  diungkapkan  oleh Wangensteen et al. (2004) yang menyatakan  bahwa penggunaan  pelarut  yang  bersifat  polar  akan  diperoleh  ekstrak  polar  yang  menunjukan aktifitas  antioksidan  yang  efektif.  Hasil  penelitian  ini  didukung  oleh  Haslina et  al. (2019)  yang  memperoleh  antioksidan  tertinggi  sebesar  50,41%  pada  rambut  jagung yang diekstrak dengan pelarut metanol 80% dengan perlakuan 60 menit dan suhu 40 o C dengan  ini  ekstraksi  menggunakan  ultrasonik  lebih  efisien,  waktu  operasi  lebih  singkat dan laju perpindahan masa lebih cepat jika dibandingkan dengan ekstraksi konvensional menggunakan soxhlet .   Hastuti,   (2012)   mengatakan   bahwa   perlakuan   pemanasan menyebabkan  rusaknya  dinding  sel  dan  subseluler  dari  tanaman  herbal  untuk membebaskan  komponen  aktif  yang  terkandung  di  dalamnya,  dalam  jumlah  besar sehingga menghasilkan komponen yang dapat menangkap radikal bebas.

## Hasil Uji Total Fenol
Analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  waktu  ekstraksi  berpengaruh  nyata (p<0,05)  terhadap  total  fenol.  Hasil  analisa  total  fenol  ekstrak  rambut  jagung  dapat dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2. Rerata Hasil Uji Total Fenol Ekstrak Rambut Jagung
Waktu Ekstraksi (Menit) Total Fenol (mg.GAE/g) P1: (20) 1,48 ± 0,10 a P2: (30) 1,61 ± 0,07 b P3: (40) 1,71 ± 0,07 b P4: (50) 1,86 ± 0,06 c P5: (60) 1,98 ± 0,09 d
Keterangan : angka yang di ikuti oleh huruf yang berebeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05).
Tabel 2 menunjukkan bahwa total fenol berkisar antara 1,48 – 1,98 mg.GAE/g terjadi perbedaan nyata terhadap rerata  uji total fenol pada ekstrak rambut jagung. Hasil analisa  varian  menunjukan  P1,  P4,  dan  P5  beda  nyata  sedangkan  P2  dan  P3  tidak berbeda    nyata.    Peningkatan    ini    diduga       pengaruh    waktu    ekstraksi    sehingga menyebabkan total fenol mengalami peningkatan.
Peningkatan total fenol karena lama waktu ekstraksi dapat merusak dinding sel untuk   mengeluarkan   fenol    dari   jaringan   tanaman,    sehingga    senyawa    fenol    yang terekstrak  semakin  tinggi  jumlahnya.  Selain  faktor  panas,  tingginya  kandungan  fenolik karena  ekstraksi  yang  dilakukan  pada  penelitian  ini  menggunakan  metanol  70%  serta menggunakan alat ultrasonik.
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Haslina et  al., (2019)  ekstraksi meggunakan pelarut  metanol  dengan  suhu  60 0 C  selama  20  menit  dengan  rasio  bahan  : pelarut  (1:4)  menghasilkan  total  fenol  paling  tinggi  sebesar  8216,89  Mg.QE/g  jika dibandingkan  dengan  ekstraksi  menggunakan  pelarut  ethanol,  aseton,  dan  ethil  asetat. Hal  ini  diungkapkan  oleh  Wangensteen et  al. (2004)  yang  menyatakan  bahwa penggunaan pelarut yang  bersifat  polar  akan  diperoleh  ekstrak  polar  yang  menunjukan kandungan fenol yang efektif.
Hal  ini  karena  dengan  suhu  dan  lamanya  waktu  ekstraksi,  ia  akan  dapat melepaskan  senyawa  fenolik  sel  dinding  atau  senyawa  fenolik  terikat,  sehingga menyebabkan  lebih  banyak  senyawa  fenol  diekstraksi.  Penggunaan  suhu  tinggi  untuk ekstraksi  dapat  meningkatkan  kelarutan  fenol.  Suhu  tinggi  dapat  melepaskan  sel-sel dinding fenol  atau  mengikat  senyawa  fenolik  yang  disebabkan  kerusakan  pada  elemen sel, menyebabkan lebih banyak senyawa fenolik diekstraksi (Haslina et al., 2019).

## Hasil Uji Kandungan Flavonoid
Analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  waktu  ekstraksi  berpengaruh  nyata (p<0,05) terhadap flavonoid. Hasil analisa flavonoid ekstrak rambut jagung dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Rerata Uji Kandungan Flavonoid Ekstrak Rambut Jagung
Waktu Ekstraksi (Menit) Flavonoid (mg.QE/q) P1 : (20) 2,05 ± 0,07 a P2 : (30) 2,25 ± 0,03 b P3 : (40) 2,11 ± 0,06 a P4 : (50) 2,31 ± 0,05 b P5 : (60) 2,44 ± 0,04 c
Keterangan : angka yang di ikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang  nyata (p<0,05)
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  kandungan  flavonoid  berkisar  antara  20,05  – 2,44Mg.QE/ml  mengalami  peningkatan.  Peningkatan  ini  diduga  pengaruh  waktu ekstraksi  menyebabkan  kandungan  flavonoid  mengalami  peningkatan.  Hasil  analisis varian  menunjukkan  P1  sampai  P2  berpengaruh  nyata  sedangkan  pada  P3  sampai  P5 tidak berbeda nyata.
Kandungan  flavonoid  ini  meningkat  dari  P1  sampai  P5  dikarenakan bahwa meningkatnya  suhu  ekstraksi  dapat  meningkatkan  kandungan  flavonoid  pada  ekstrak rambut  jagung. Menurut  Haslina et  al., (2019)  dalam  flavonoid  terdapat  senyawa  fenol yang  larut  dalam  pelarut  polar  bersama  flavonoid  yang  menghasilkan  nilai  flavonoid yang tinggi  dalam  pelarut  metanol. Pelarut  yang memiliki  sifat polar  yang  sama seperti flavonoid  adalah  metanol  sehingga  menghasilkan  flavonoid  yang  tinggi.  Flavonoid sangat  sensitif  terhadap  panas  karena  tergabung  dalam  kelompok  gugus  hidroksil  dan keton, dan terbungkus ikatan ganda tetapi flavonoid akan terdegradasi pada suhu di atas 100°C.
Winata  dan  Yunianta.,  (2015)  menyatakan  bahwa  semakin  lama  waktu ekstraksi,  kuantitas  bahan  yang  terekstrak  juga  semakin  meningkat  dikarenakan kesempatan  untuk  bersentuhan  antara  bahan  dengan  pelarut  semakin  besar  sehingga hasilnya akan bertambah sampai titik jenuh larutan

## Hasil Kadar Protein
Analisis    ragam    menunjukkan    bahwa    waktu    ekstraksi    berbeda    nyata (p<0,05) terhadap kadar protein. Hasil analisa kadar protein ekstrak rambut jagung dapat dilihat pada Tabel 4.

## Tabel 4. Rerata Kadar Protein Ekstrak Rambut Jagung
Waktu Ekstraksi (Menit) Protein (%) P1 : (20) 0.63 ± 0,01 a P2 : (30) 0,64 ± 0,03 b P3 : (40) 0.61 ± 0,01 a P4 : (50) 0.59 ± 0,01 b P5 : (60) 0.58 ± 0,00 c
Keterangan : angka yang di ikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang  nyata (p<0,05)
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  kadar  protein  berkisar  antara  0,63  –  0,58%, mengalami  penurunan.  P1  hingga  P5  berbeda  nyata.  Kadar  protein  mengalami penurunan,   hal   diduga   karena   pada   pengekstrakan   rambut   jagung   mengalami peningkatan  waktu  yang  disebabkan  kandungan  protein  pada  ekstrak  rambut  jagung berkurang  karena  adanya  proses  denaturasi  protein.  Damayanti  (2004)  menyatakan bahwa  protein  sangat  peka  terhadap  panas  dan  akan  mengalami  perubahan  struktur kimia   (denaturasi)   akibat   adanya   pemanasan.   Winarno   (1995),   menambahkan pemanasan  yang  tinggi  akan  menyebabkan  terjadinya  degradasi  pada  molekul-molekul protein. Hasil degrasasi tersebut banyak menghasilkan turunan protein yang larut dalam air.
Tabel  4  menunjukkan  kenaikan  kadar  protein  pada  perlakuan  P1  sampai  P2 namun  pada  P3  sampai  P5  kadar  protein  mengalami  penurunan  karena  disebabkan semakin  lama  waktu  pengesktrakan  maka  kadar  protein  mengalami  penurunan.  Hal  ini dikarenakan dengan semakin lama waktu ekstraksi akan menurunkan kadar protein pada ekstrak   rambut   jagung.   Terjadinya   penurunan   kadar   protein   karena   perlakuan pemanasan  pada  ekstraksi  suhu  dan  menggunakan  waktu  yang  lama  menyebabkan terjadinya  denaturasi  protein.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Haslina et  al., (2019) diduga  semakin  tinggi  suhu  dan  lama  ekstraksi,  maka  semakin  rendah  kandungan protein  dari  ekstrak  rambut  jagung  serta  semakin  banyak  protein  larut  dalam  pelarut polar  seiring  meningkatnya  suhu  dan  waktu  ekstraksi.  Kelarutan  protein  umumnya meningkat  ketika  suhu  naik  dari  0  ke  40 o C,  dan  semakin  lama  waktu  pengekstrakan, kontak  antara  zat  terlarut  dan  pelarut  lebih  lama  maka  akan  banyak  zat  terlarut  yang diambil.

## Hasil Kadar Vitamin C
Analisis  ragam   menunjukkan  bahwa   waktu   ekstraksi  tidak   berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar vitamin C. Hasil analisa kadar vitamin C ekstrak rambut jagung dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Rerata Kadar Vitamin C Ekstrak Rambut Jagung
Waktu Ekstraksi (Menit)   Vitamin C (Mg100/ml)
P1: (20) 57,15 ± 0,63 a P2: (30) 58,08 ± 6,74 a P3: (40) 57,71 ± 1,37 a P4: (50) 55,80 ± 0,44 a P5: (60) 53,98 ± 0,48 a
Keterangan : angka yang di ikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang  nyata (p<0,05)
Tabel 5. menunjukkan bahwa kadar vitamin  C berkisar   antara   57,71   –   53,98 Mg100/ml. P1 hingga P5 menunjukkan tidak berbeda nyata.   Kadar vitamin C pada P1 dan  P2  mengalami  kenaikan,  hal  ini  diduga  karena  waktu  ekstraksi  yang  tepat,  namun pada  P3,P4,  dan  P5  mengalami  penurunan,  diduga  penurunan  ini  disebabkan  waktu pengekstrakan rambut jagung.
Tabel 5 menunjukkan pada P1 dan P2 mengalami peningkatan kadar vitamin C hal ini  disebabkan  waktu  ekstraksi  yang tidak  merusak  kadar  vitamin.  Namun  pada P3 hingga P5  mengalami penurunan  kadar  vitamin C,  hal ini dikarenakan  dengan semakin lama  waktu  ekstraksi  akan  menurunkan  kadar  vitamin  C  pada  ekstrak  rambut  jagung. Disebabkan  vitamin  C  sangat  sensitif  terhadap  perlakuan  pemanasan.  Hal  ini  sesuai dengan  pendapat  Octaviani  (2014)  bahwa  semakin  tinggi  suhu  dan  lama  pemanasan menyebabkan  degradasi  vitaminC  juga  semakin  besar.  Oksidasi  vitamin  C  (asam askorbat)  akan  mengubah  asam  askorbat  menjadi  asam  L-dehidroaskorbat  yang  secara kimia  sangat  labil  dan  dapat  mengalami  perubahan  lebih  lanjut  menjadi  asam  L- diketogulonat yang tidak memiliki keaktifan vitamin C lagi.
Asam  askorbat  merupakan  nutrisi  penting  sensitif  terhadap  panas,  oksigen dan cahaya, hal  ini  dikarenakan vitamin C sangat rentan terhadap degradasi  (Nindoa et al ., 2007).  Faktor  lain  yang dapat menyebabkan berkurangnya  vitamin C dan menurut Rui et al. (2008), terjadinya reaksi antara vitamin C dengan peralatan yang digunakan pada pengolahan,  misalnya  bereaksi  dengan  kaca,  logam,  terutama  tembaga  dan  besi dapat menurunkan kadar vitamin C.

## Analisa Keputusan
Analisa    keputusan    menggunakan    uji    de    garmo    (sarah-dejesus,    2014) terhadap  aktivitas  antioksidan,  total  fenolik,  flavonoid,  vitamin  C,  dan  protein. Adapun  hasil rekapitulasi dapat dilihat pada Tabel 8.
Tabel 6. Total nilai penentuan perlakuan terbaik Perlakuan Total Nilai P1 0.254 P2 0.485 P3 0.567 P4 0.567 P5 0.670
Berdasarkan  Tabel  6.  Dapat  dijelaskan  bahwa  keputusan  perlakuan  terbaik terhadap  aktivitas  antioksidan,  total  fenolik,  flavonoid,  vitamin  C,  dan  protein  pada perlakuan pengesktrakan dengan suhu 60 o C selama  60 menit. Hal ini dikarenakan pada perlakuan P5 memiliki jumlah nilai yang tinggi serta memiliki korelasi, diantaranya total fenol  dan  flavonoid  yang  tinggi  dalam  ekstrak  rambut  jagung  menunjukkan  aktivitas antioksidan  yang  tinggi.  Ada  hubungan  antara  kemampuan  senyawa  fenol  sebagai antioksidan  dan  struktur  kimianya.  Konfigurasi  dan  kelompok  hidroksil  total  adalah dasar  yang  secara  signifikan  mempengaruhi  mekanisme  aktivitasnya  sebagai antioksidan.  Ada  korelasi positif  antara  aktivitas  antioksidan  dan  kandungan  senyawa  polifenol  (Haslina et  al., 2019). Hal ini membuktikan bahwa teknik ekstraksi ultrasonik dapat digunakan sebagai alternatif  dalam   mengekstrak  senyawa   antioksidan  dari  bahan  alami.   Keuntungan metode  ultrasonik  adalah  untuk  mempercepat  proses  ekstraksi  dan  memperbesar  hasil ekstraksi.

## Kesimpulan

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian pengaruh waktu ekstraksi menggunakan metode ultrasonik terhadap fitokimia ekstrak rambut jagung dapat disimpulkan bahwa :
1.  Pengaruh  waktu  ekstraksi  menggunakan  metode  ultrasonik  terhadap  fitokimia ekstrak  rambut  jagung  berpengaruh  nyata  (p  <  0,05)  terhadap  uji  aktivitas antioksidan,  uji  total  flavonoid,  fenol,  kadar  vitamin  C,  namun  tidak  berbeda nyata pada uji kandungan protein
2.  Pengaruh  waktu  ekstraksi  rambut  jagung  terbaik  adalah  pada  waktu   60  menit dengan  hasil  uji  aktivitas  antioksidan  sebesar  70,55%,  uji  kandungan  flavonoid sebesar  2,44  mg.QE/g,  uji  total  fenol  sebesar  1,98  mg.GAE/g,  kandungan vitamin c sebesar 53,98 Mg100/ml, dan kadar protein sebesar 0,58%.

## Saran
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  proses  ekstraksi  rambut  jagung menggunakan metode ultrasonik dengan waktu 60 menit yang telah dilakukan, sebaiknya menggunakan  waktu  sampai  titik  optimum  dan  perlu  dilakukan  penalitian  lebih  lanjut.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  M.M.,  2006, Anti  Inflammatory  Activity  Of  Nigella  Sativa  Linn(kalong,  black seed), http://lailanurhayati.multiply.com/journal,  diakses  tanggal  13  Desember 2019
Akhilender. 2003. Dasar-Dasar Biokimia I . Erlangga, Jakarta. Almatsier S. 2005. Prinsip Dasar Ilmu Gizi . Bandung: Alfabeta. Aulina, Risqie. 2001. Gizi dan Pengolahan Pangan . Yogyakarta : Karya Nusa.
Association   of   Official   Analytical   Chemist   (AOAC).   2005.   Official   Methods   of Analysis   of   AOAC    International   Horwitz   W.   Ed   ke-18.   Publ   AOAC International Maryland USA.
Barnes,  Joanne,  Linda  A.A.  dan  Phillipson  JD.  2007.  Herbal  Medicine:  a  Guide  for Health  Care  Professionals.  Third  edition,  Hal  191-192.  Pharmaceutical  Press. London.
Bi  YG,  Wang  Z,  Huang  HL,  Chen  XW,  Liu  XM,  Deng  ST.  Experimental  research  on single    factor    ultrasonic    assisted    extraction    of    polysaccharides    from Gracilaria lemaneiformis . Advances in Engineering Research. 10: 85-89.
Chew, K. K., Ng, S., Y. Thoo, Y. Y., Khoo, M. Z., Wan, A. W. M and Ho, C. W, 2011.
Effect  of  ethanol  concentration,  extraction  time  and  extraction  temperature  on the   recovery  of  phenolic   compounds  and  antioxidant  capacity  of  Centella asiatica extracts. International Food Research Journal. 18: 566-573.
Damayanti. 2004, Ilmu Teknologi Pangan Bahan Tambahan Makanan. Undip.
Duke, James A. 2017. Zea mays (Poaceae) Handbook of Phytochemical Constituents of GRAS Herbs and Other Economic Plants. https://phytochem.nal.usda.gov/phytochem/plants/show/2128?et=P.  [Diakses  12 desember 2019].
Erukainure  OL,  Oke  OV,  Ajiboye  AJ,  Okafor  OY.  2011.  Nutritional  qualities  and phytochemical  constituents  of  Clerodendrum  volubile,  a  tropical  non- conventional vegetable. International Food Research Journal 18(4):1393-1399.
Faesal. 2013.  Pengolahan  Limbah Tanaman Jagung Untuk Pakan Ternak  Sapi Potong. Prosiding   Seminar   Nasional   Inovasi   Teknologi   Pertanian.   Badan   Litbang Pertanian, Jakarta.
Fuadi   A.   2012.   Ultrasonik   sebagai   alat   bantu   ekstraksi   oleoresin   jahe. Jurnal Teknologi . 12(1):14-21.
Garcia    J.L.,    Castro    M.D.L.,    2004.    Ultrasound-assisted    soxhhlet    extraction    :    an expeditive  approach for  solid  sample treatment,  Application to  the  extraction  of total fat from oleaginous seeds, Jornal of Chromatography A, Ed. 1034, pp.237- 242.
Guo J, Liu T, Han L, and Liu Y. 2009. The effect of corn silk on glycaemic metabolism.
JournalNutrition and Metabolism Biomed Central, 6:47.
Hala,  A.  2011.  Comparative  Antioxidant  Activity  Study  of  Some  Edible  Plants  Used Spices in Egypt. Journal of American Science. 7 (1): 230-239.
Harborne. 1987. Metode Fitokimia. Institut Teknologi Bandung Press Bandung.
Hasanudin,   Khairunnisa,  P.   Hasyim,  dan  S.  Mustafa.  2012.  “Corn  Silk (Stigma maydis) in   Healthcare:   A   Phytochemical   and   Pharmalogical   Review”. Journal Molecules . 17: 9697-9715.
Hasttuti, Ningrum Dwi. 2012. Pembuatan Minuman Fungsional dari Maru dan Ekstrak Rosella ( Hibiscus sabdariffa Linn). Jurnal Teknologi Pangan. Vol 3 no.1.
Haslina  dan  Sri  Untari.  2017.      Pengaruh  Waktu  Ekstraksi  dan  Konsentrasi  Ekstrak Rambut Jagung ( Corn Silk) Terhadap pH, Total Fenol Dan Aktivitas Antibakteri. Fakultas Teknologi Hasil Pertanian. Universitas Semarang, Semarang.
Haslina, D. Praseptiangga, V. Priyo Bintoro dan Bambang P. 2019.The Optimization of
Temperature   and    Length    of   Extraction  of   LocalCorn    Silk   Powder   Using Response Surface Methodology. International Journal on Advanced ScienceEngineering Infromation Technology . Vol. 9, No. 2.
Haslina,  D.  Praseptiangga,  V.  Priyo  Bintoro  dan  Bambang  P.  2017.  Chemical  and Phytochemical  Characteristics  of  Local  Corn  Silk  Powder  of  Three  Different Varieties. International  Journal  on  Advanced  ScienceEngineering  Infromation Technology . Vol. 7, No. 5.
Lee,  S.  K  and  Kader,  A.  A.  2000.Preharvest  and  Postharvest  Factors  Influencing Vitamin  C  Content  of  Horticulture  Crops. Postharvest  Biology  andTechnology Journal. 20 (3): 207−220.
Liu  QM,  Yang  XM,  Zhang  L,  Majetich  G.  2010.  Optimization  of  ultrasonic  assisted extraction  of  chlorogenic  acid  from Folium  eucommiae and  evaluation  of  its antioxidant activity. Journal Medical Plants Res . 4(23):2503–2511.
Markham,  K.R.,  1988,  Cara  Mengidentifikasi  Flavonoid,  diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB, Bandung.
Margaretta,  Sheila,  S.  D.  Handayani,  N.  Indraswati  dan  H.  Hindarso.  2011.  Ekstraksi Senyawa  Phenolic Pandanus  amaryllifolius Roxb . Sebagai  Antioksidan  Alami. Vol.  10,  No.  1,  Hal:  21-30.  Fakultas  Teknik  Kimia  Universitas  Katolik  Widya Mandala, Surabaya.
Mittal  R,  Tavanandi  HA,  Mantri  VA,  Raghavarao  KS.  2017.  Ultrasound  assisted methods  for  enhanced  extraction  of  phycobiliproteins  from  marine  macroalgae, Gelidium pusillum (Rhodophyta). Ultrasonics Sonochemistry . 38: 92-103.
Morais S. 2013. Functional Ingredients from Algae for Foods and Nutraceuticals . Porto (PT): Woodhead.
Nindoa, C.I., T. Sun., S.W. Wang., J. Tang and J.R. Powers. 2007. Evaluation of Drying Technologies  For Retention of Physical Quality Andantioxid Ants in Asparagus (Asparagus  officinalis,  L.) Lebensm.-Wiss.u.  Technol.  36  507–516  SwissSociety of  Food  Science  andTechnology.  Published  by  Elsevier  Science  Ltd.  All  rights reserved.
Nugroho,  A.  E.,  Suhardjono,  D.,  Mulyono,  S.a,  dan  Malik,  A.  2013.  Tptal  Flavanoid and   Fenolik  Contents  and  in  Vitro  Antyhipertention  Activity  of   Indonesia Cashew Leaves anacardiumoccidentale L. Fakultas Farmasi. UGM. Yogyakarta.
Nugroho  Agung  R.  2017.  Pengaruh  Ukuran  Partikel  Terhadap  Karakteristik  Ekstrak Rambut  Jagung  Hibrida  DK  77  (Zea  mays  L).  Fakultas  Teknologi  Pertanian, Universitas Semarang : Semarang,
Octaviani    LF.2014.    Pengaruh   Berbagai    Konsentrasi    Gula   terhadap   Aktivitas Antioksidan  dan  Tingkat  Penerimaan  Sari  Buah  Buni  (Antidesma  bunius). [Skripsi].Semarang: Universitas Diponogoro.
Prayoga  G.  Fraksinasi.  2013.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan  Metode  DPPH  dan Identifikasi  Golongan  Senyawa  Kimia  dari  Ekstrak  Teraktif  Daun  Sambang Darah  (Excoecaria  cochinchinensis  Lour).  Fakultas  Farmasi  Program  Studi Sarjana Ekstensi Universitas Indonesia.2013.
Sharma,  Om  P.  dan  Bhat,  Tej  K.  2009.  DPPH  Antioxidant  Assay  Revisited. Food Chemistry (113): 1202 – 1205.
Simamora   A.   2011.   Flavonoid   dalam   apel   dan   aktivitas   antioksidannya.   [thesis]. Universitas Kristen Krida Wacana.
Wangensteen,  H.,  Samuelsen  and  Maltrud,  K.  E.  2004.  Antioxidant  activity in  extracts from coriander. International Journal Food Chem. 88: 293- 297.
Vanselow , M., KH, Lippermeire S, Hintze R. 2007. Determinioation of DPPH Radical Oxidation  Caused  by  Methanolic    Extracts  of  some  Microalgal  Species  by Linear Regression Analysis of Spectrophotometric Measurements Sensor . Winarno,  F.G.  1995. Enzim  Pangan .  Penerbit  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama.  Jakarta. 113 Hlm.
Winarno, F.G. (2004). Kimia Pangan dan Gizi . Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.