Efektivitas Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) Sebagai Repelent

## Alami
The Effectiveness of Leaves of Starfruit (Averrhoa bilimbi L.) as Natural Repellent
Lian varis riandi *1 , Yudha Fahrimal 1 , Rinidar 1 , Siti Prawitasari Br. Hasibuan 2 , Farida Athaillah 1 , Sugito 1 , Darmawi 1
1 Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Syiah Kuala, Banda aceh, 23111, Indonesia
2 Fakultas Kesehatan, Universitas Ubudiyah Indonesia, Banda aceh, 23114, Indonesia *Koresponding penulis: lianvarisriandi@unsyiah.ac.id *1 , yudhafahrimal@yahoo.com 1 , rinidar@unsyiah.ac.id 1 , sitiprawitasarihasibuan@uui.ac.id 2 , farida_athaillah_fkh@unsyiah.ac.id 1 , sugitofkhunsyiah@unsyiah.ac.id 1 , darmawi@unsyiah.ac.id 1 ,

## Abstrak
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara  yang  beriklim  tropis,  sehingga  sangat mendukung dalam perkembangbiakan nyamuk sepanjang tahun. Nyamuk merupakan salah satu vektor  yang  memiliki  tingkat  penyebaran  penyakit  yang  tinggi  dibanding  beberapa  jenis serangga lainnya, sehingga sampai saat ini masalah kejadian penyakit yang ditularkan vektor nyamuk (mosquito borne disease) masih menjadi perhatian yang utama. Upaya pengembangan insektisida alami terhadap larva nyamuk adalah salah satu solusi yang sangat baik untuk saat ini, karena bahan dasar insektisida alami merupakan tumbuhan yang bersifat toksik terhadap serangga  namun  tidak  mencemari  lingkungan,  tidak  meninggalkan  residu  di  udara,  air  dan tanah,  mudah  terdegradasi  serta  memiliki  tingkat  keamanan  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  racun-racun  anorganik.  Informasi  tentang  daun  belimbing  wuluh  sebagai  larvasida dengan pelarut  etanol sudah ada dilaporkan, akan tetapi  pengujian terhadap metode  repelent yang dilarutkan dengan metanol, etil asetat dan n-hexan masih kurang.
Penelitian  ini  bertujuan  melihat  perbandingan  tingkat  potensi  daun  belimbing  wuluh ( Averrhoa  bilimbi L.)  sebagai  insektisida  alami  yang  dilarutkan  dengan  sifat  pelarut  yang berbeda.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  menggunakan  rancangan  acak lengkap dengan menggunakan metode repelent. Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan ekstrak daun belimbing wuluh yang dilarutkan dalam tiga jenis larutan yaitu metanol, etil asetat dan n-hexan. Data pengujian repelent ditentukan dari tingkat daya proteksi nyamuk. Analisa data menggunakan anova dengan uji lanjut BNT (beda nyata terkecil).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  yang  dilarutkan dengan  ketiga  jenis  pelarut  pada  metode  repelent  memiliki  pengaruh  terhadap  tingkat  daya proteksi. Kesimpulan dari hasil penelitian ini adalah ekstrak daun belimbing wuluh berpotensi sebagai repelent, tingkat daya proteksi yang paling tinggi dilarutkan dengan pelarut metahol, etil asetat dengan tingkat daya proteksi paling rendah n-hexan.

## Kata kunci: Nyamuk, Repelent, Daun Belimbing Wuluh

## Abstract
Indonesia  is  a  country  with  a  tropical  climate,  so  it  is  very  supportive  of  mosquito breeding throughout the year. Mosquitoes are a vector that has a high rate of disease spread
compared to other types of insects, so that until now, the problem of disease incidence that is transmitted by mosquito vectors (mosquito borne disease) is still a major concern. Efforts to develop natural insecticides against mosquito larvae are a very good solution for now, because the basic ingredients of natural insecticides are plants that are toxic to insects but do not pollute the environment, do not leave residues in the air, water and soil, are easily degraded and have high levels. higher safety compared to inorganic poisons. Information about starfruit leaves as a  larvicide  with  ethanol  solvent  has  been  reported,  however,  testing  of  the  repelent  method dissolved with methanol, ethyl acetate and n-hexan is still lacking.
This study aims to compare the potential levels of starfruit leaves (Averrhoa bilimbi L.) as  a  natural  insecticide  dissolved  with  different  solvent  properties.  This  research  is  an experimental study using a completely randomized design using the repelent method. This test was  carried  out  using  starfruit  leaf  extract  dissolved  in  three  types  of  solutions,  namely methanol, ethyl acetate and n-hexan. Repelent test data is determined from the level of mosquito protection power. Data analysis used ANOVA with LSD further test (smallest real difference).
The  results  showed  that  the  starfruit  leaf  extract  dissolved  with  the  three  types  of solvents in the repelent method had an effect on the level of protective power. The conclusion from the results of this study is that the starfruit leaf extract has the potential as a repelent, the highest level of protective power dissolved with metahol, ethyl acetate with the lowest level of protection power n-hexan.

## Key words: Mosquito, Repelent, Starfruit Leaves

## Pendahuluan
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara  yang  beriklim  tropis,  sehingga  sangat mendukung  dalam  perkembangbiakan  nyamuk.  Jumlah  populasi  nyamuk  yang  tinggi  di wilayah  tropis  didukung  oleh  curah  hujan  yang  tinggi,  sehingga  menyediakan  tempat  bagi nyamuk untuk berkembang biak. Nyamuk merupakan serangga  yang sering dijumpai sekitar lingkungan kita, disamping jenis yang beragam disertai pula dengan habitat yang berbeda baik yang hidup di rawa-rawa maupun yang hidup di lingkungan perumahan (Domy, 2011).
Nyamuk merupakan salah satu vektor yang memiliki tingkat penyebaran penyakit yang tinggi  diantara  beberapa  jenis  serangga  lainnya,  sehingga  sampai  saat  ini  masalah  kejadian penyakit yang ditularkan vektor (vector borne disease) masih menjadi perhatian yang utama. Nyamuk Culex sp., Aedes sp.  serta  beberapa  genus  lain  merupakan  vektor  biologis  yang berperan dalam penyebaran penyakit (BJEFI 2010).
Kebijakan  bersifat  preventif  merupakan  upaya  yang  sangat  penting  dilakukan  dalam memutuskan  rantai  penularan  penyakit  yang  ditularkan  oleh  vektor  tersebut.  Usaha pemberantasan vektor dilakukan dari tahap larva yaitu dengan menggunakan larvasida, hingga penggunaan insektisida untuk pembasmian nyamuk dewasa, usaha lain  yang dilakukan  yaitu dengan penggunaan repellent untuk mencegah dari gigitan nyamuk (Domy, 2011).
Penggunaan insektisida alami yang dilakukan oleh Domy (2011) pada nyamuk Culex sp. dewasa membuktikan bahwa air perasan buah belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) yang dilakukan dengan metode elektrik dapat berpotensi sebagai insektisida terhadap nyamuk Culex sp. dewasa. Kandungan buah belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) mempunyai zat aktif yang terdiri  dari  alkaloid,  saponin,  dan  flavonoid  efektif  untuk  membunuh  larva  serta  nyamuk dewasa (Parikesit, 2011).
Melihat potensi daun belimbing wuluh penulis tertarik untuk meneliti daun belimbing wuluh sebagai insektisida alami yang dilarutkan dengan 3 jenis sifat pelarut yang berbeda yaitu polar (metanol), semi polar (etil asetat) dan non polar (n-hexan) untuk mengetahui pelarut yang baik  untuk  mengektrak  daun  belimbing  wuluh  yang  digunakan  sebagai  insektisida  alami. Perbandingan pengujian juga dilihat terhadap 3 jenis nyamuk yang berbeda yaitu Aedes aegypti, Aedes albopictus, Culex sp. .

## Material dan Metode
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  daun  Belimbing  wuluh,  nyamuk dewasa Aedes sp. dan Culex sp.  Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  kandang nyamuk.
Proses Ekstrak daun belimbing wuluh
Daun  belimbing  wuluh  yang  didapat  dari  perkebunan  masyarakat  di  desa  Bukloh Kabupaten Aceh Besar dibawa ke Laboratorium Farmakologi Kedokteran Hewan Universitas
Syiah  Kuala  untuk  dilakukan  proses  ektraksi.  Daun  belimbing  wuluh  yang  akan  diekstraksi terlebih  dahulu  dikering  anginkan  selama  24  jam,  sebelum  daun  belimbing  wuluh  direndam dengan  pelarut,  daun  tersebut  dipotong-potong  sehalus  mungkin  dan  dimasukkan  kedalam tabung perendaman. Perendam daun belimbing wuluh dengan pelarut dilakukan hingga daun terendam secara keseluruhan. Hasil perendaman setelah 24 jam disaring dengan menggunakan kertas  saring,  hasil  dari  penyaringan  selanjutnya  di  masukkan  kedalam rotary  evaporator hingga pelarut tersebut terpisah dari komponen dan didapatkan hasil ekstraknya. Ekstrak daun belimbing wuluh yang diperoleh dimasukan kedalam botol dan disimpan kedalam refrigerator.

## Pengujian Repelent
Pengujian  potensi  ektsrak  daun  belimbing  wuluh  sebagai  repelent  diuji  terhadap nyamuk betina dewasa yang telah dipuasakan selama 4-5 hari. Ekstrak daun belimbing wuluh diencerkan  dengan  menggunakan  parafin  cair  karena  penggunaan  parafin  cair  sebagai pengenceran  bersifat  netral  (tidak  bersifat repellent /menolak  ataupun  attractant/memikat) terhadap nyamuk (Kardinan, 2007). Parafin cair yang tidak dicampukan dengan ekstrak daun belimbing wuluh dijadikan sebagai control negatif.
Nyamuk  dewasa  betina  yang  diuji  sebanyak  25  ekor  yang  berada  didalam  kandang dengan ukuran 60x60x60 cm dngan pintu berdiameter 15 cm. Pengujian dibutuhkan bantuan naracoba  yang  berpartisipasi  dalam  uji  ini  bersedia  menandatangani  Informed  Consent  dan memiliki tangan harus bersih, tidak ada bulu, tidak ada luka dan tidak memiliki riwayat alergi kulit.  Tangan  naracoba  di  beri  Karet  lengan  ( rubber  sleeve )  dengan  memiliki  lubang  pada bagian lengan 5 cm persegi.
Tangan  naracoba  dioleskan  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  yang  telah  diencerkan dengan  kosentrasi  tertentu  pada  kedua  tangan  dan  tangan  tersebut  dimasukkan  kedalam kandang. Pengujian ini dimulai dari kontrol negatif dan kosentrasi paling rendah hingga paling tinggi dengan 3 kali pengulangan.
Perhitungan jumlah nyamuk yang hinggap pada lengan naracoba dilakukan pada tangan mulai dimasukkan kedalam kandang selama 10 menit, pada tiap interval waktu mulai jam ke 1, 2, 3. Perhitungan daya proteksi daun belimbing wuluh dilakukan dengan menggunakan rumus dengan menggunakan rumus ( Xue, et al., 2001) :

## Analisis data penelitian
Data  dianalisis  dengan  analisis  varian  (ANAVA),  jika  hasil  menunjukkan  pengaruh yang nyata (P<0,05) maka dilanjutkan dengan uji BNT (Beda Nyata Terkecil). Setiap pengujian dilakukan Analisis Probit dengan program SPSS ver18.

## Hasil dan Pembahasan
Pengujian repelent dilakukan pada nyamuk dewasa betina yang telah dipuasakan selama 4-5  hari,  pengujian  ini  disesuaikan  dengan  kondisi  waktu  nyamuk  aktif  menghisap  darah. Nyamuk Aedes  aegypti dewasa memiliki  kebiasaan  menghisap  darah  pada  jam  08.00-12.00 WIB dan sore hari 15.00-17.00 WIB dan nyamuk Aedes albopictus lebih aktif pada siang hari (Soegijanto, 2006). Nyamuk Culex sp. dewasa memiliki kebiasaan menghisap darah pada pukul 22.00-02.00 WIB (Hadi dan Koesharto, 2006).
Hasil rata-rata pengujian ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) dengan metode repelent (ditampilkan  pada  tabel  1)  memiliki  hasil  yang  bervariatif  diantara  setiap pelarut.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  setiap  pelarut  memiliki  tingkat  kemampuan masing-masing pada daya hinggap nyamuk. Daya hinggap nyamuk pada setiap ektrak dengan pelarut tertentu, memiliki tingkat daya hambat yang berbeda, dapat dilihat pada tabel berikut.
Daya Proteksi =
∑ nyamuk hinggap pada kontrol - ∑ pada perlakuan
Tabel  1. Rata-rata jumlah nyamuk yang hinggap (ekor)

## a. Nyamuk Aedes aegypti
Pelarut Dosis 0 25 50 100 N-Heksan 104 92,33 ± 5,39 93,33 ± 5,39 94,33 ± 5,39 Methanol 104 57,67 ± 35,16 41,00 ± 35,16 21,67 ± 35,16 Etil Asetat 104 95,33 ± 15,07 87,00 ± 15,07 68,67 ± 15,07 Jumlah 312 245,33 221,33 184,67
b. Nyamuk Aedes albopictus Pelarut Dosis 0 25 50 100 N-Heksan 108 99 ± 14,55 92 ± 14,55 73,67 ± 14,55 Methanol 108 55,33 ± 36,82 46 ± 36,82 20,33 ± 36,82 Etil Asetat 108 95,33 ± 19,89 81 ± 19,89 61,67 ± 19,89 Jumlah 324 249,66 219 155,67
c. Nyamuk Culek Pelarut Dosis 0 25 50 100 N-Heksan 82 44 ± 21,56 41,67 ± 21,56 33,67 ± 21,56 Methanol 82 24 ± 33,26 17,33 ± 33,26 8,67 ± 33,26 Etil Asetat 82 43,67 ± 23,09 35 ± 23,09 32 ± 23,09 Jumlah 246 111,67 94 74,34
Hasil  rata-rata  jumlah  nyamuk  yang  hinggap  bila  dilihat  dari  jenis  nyamuk menunjukkan nyamuk Culek memiliki daya hinggap yang lebih rendah dibandingkan dengan nyamuk Aedes Albopictus dan Aedes aegypti . Perbandingan daya hinggap nyamuk dilihat dari ekstrak  yang dilarutkan pada ketiga jenis pelarut, menunjukkan bahwa hasil rata-rata jumlah nyamuk  yang hinggap pada ekstrak dengan pelarut methanol lebih sedikit bila dibandingkan
dengan pelarut etil asetat dan N-heksan.
Hasil  peneitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  ( Averrhoa bilimbi L.)  yang  dilarutkan  dengan  ketiga  jenis  pelarut  tersebut  memiliki  aktifitas  repelent terhadap  nyamuk  betina Aedes  aegypti,  Aedes  albopictus dan Culex dalam  kondisi laboratorium.  Hasil  identifitaksi  menunjukkan  bahwa  hasil  ekstrak  daun  belimbing  wuluh (( Averrhoa bilimbi L.) mengandung senyawa aktif golongan terpenoid yang berperan sebagai repelent. Kandungan terpenoid berperan aktif pada uji repelent, pengujian pada nyamuk Aedes aegypti betina  dengan  menggunakan  ektrak  kulit  jeruk  nipis  dalam  sediaan  lotion  dengan kosentrasi 55% mengandung senyawa golongan terpenoid dapat menolak nyamuk selama 36 menit  1  detik  (Tesaviani,  2009).  Penelitian  Choi,  dkk.  (2002)  kandungan  terpenoid  yang terdapat pada minyak atsiri Thymus vulgaris pada kosentrasi 0,05% dan penelitian Jebanesan dan Rajkumar (2005), minyak atsiri dari tanaman Moschosma polystachyum pada konsentrasi 4% mengandung terpenoid yang dapat menghasilkan aktivitas repelent.
Untuk  melihat  hasil  pengaruh  nyata  pada  setiap  pelarut  maka  dilanjutkan  dengan  uji BNT (Beda Nyata Terkecil). Hasil uji BNT terhadap jenis pelarut menunjukkan bahwa daya hinggap nyamuk pada pelarut metanol berbeda secara nyata (P <0,05) bila dibandingkan dengan pelarut etil asetat dan n-hexan, sedangkan pelarut etil asetat tidak berbeda secara nyata (P>0,05) dibandingkan dengan pelarut n-hexan. Hasil ini membuktikan bahwa pelarut metanol ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa  bilimbi L.) pada semua kelompok konsentrasi  mempunyai daya hambat yang lebih baik dibandingkan dengan pelarut n-heksan dan etil asetat.
Jumlah nyamuk yang hinggap pada setiap pengujian mempunyai pengaruh dari pelarut ekstraksi  yang  digunakan.  Hal  ini  membuktikan  penggunaan  pelarut  metanol  diasumsikan bahwa zat toksik yang terdapat pada senyawa non polar dan polar serta berperan dalam daya
repelent terlarut secara sempurna pada saat proses ekstraksi (Sihombing, 2015). Renanggalih et al., (2014), menyatakan bahwa kandungan flavonoid, saponi dan tanin pada daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) dapat berperan sebagai repelent nyamuk.
Hasil uji BNT pada tingkat dosis menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang nyata (P<0,05)  diantara  kelompok  konsentrasi  0,  25%,  50%  dan  100%  (Tabel  2).  Daya  hinggap nyamuk  yang  paling  rendah  terdapat  pada  kosentrasi  100%,  kemudian  diikuti  dengan konsentrasi 50%, 25 % dan 0%.  Hasil ini membuktikan bahwa konsentrasi 100 % ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) pada semua kelompok pelarut mempunyai daya hambat yang lebih baik dibandingkan dengan konsentrasi 50%, 25% dan 0%.
Tingkatan dosis pada pengujian repelent berpengaruh terhadap daya hinggap nyamuk. Kemampuan repelent merupakan  suatu  senyawa  yang  bereaksi  secara  lokal  atau  pada  jarak tertentu memiliki kemampuan terhadap daya hambat antropoda untuk mendarat atau menggigit pada  permukaan  kulit  manusia  atau  hewan  (Nerio, et  al., 2010).  Dengan  demikian  hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Djadmiko, et  al., (2004), menyatakan pada kosentrasi 40% memiliki daya repelent lebih tinggi bila dibandingkan dengan kosentrasi 20% dan 10%.
Hasil uji BNT terhadap jenis nyamuk menunjukkan bahwa daya hinggap pada nyamuk Culex sp. berbedaan secara nyata (P<0,05) dibandingkan dengan nyamuk Aedes aegypti dan Aedes  albopictus ,  namun  daya  hinggap  nyamuk Aedes  aegypti tidak  berbeda  secara  nyata (P>0,05) dibandingkan dengan Aedes albopictus (lampiran 6).
Untuk melihat tingkat daya proteksi ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) yang dilarutkan dengan masing-masing dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel  3.  Daya  Proteksi  uji  repelent  terhadap  daya  hinggap  nyamuk Aedes  aegypti,  Aedes albopictus dan Culek sp.  setelah  pemberian  ekstrak  daun  belimbing  wuluh  dalam  berbagai pelarut.
Pelarut DOSIS (%) Jenis Nyamuk dan waktu pengamatan perjam Aedes Aegypti Aedes Albopictus Culex sp 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Metanol 25 40,95  41,90  45,08    49,69  47,53  48,77 67,89  69,51  70,73 50 57,46  56,51  58,10    58,95  56,79  57,41 76,83  78,05  78,86 100 79,37  80,32  79,37    81,48  80,86  81,17 89,84  90,24  89,43 Etil asetat 25 12,06  11,11  10,16    11,73  14,20  11,73 47,15  47,56  46,75 50 24,76  17,46  17,14    22,53  28,09  25,00 55,28  58,13  57,32 100 38,10  42,86  34,60    44,14  48,77  42,90 62,20  64,63  60,98 N- hexan 25 2,54 8,57 6,35 11,11 9,26 8,33 46,75  44,72  46,34 50 15,56  11,75 9,52 22,22  15,43  14,81 48,37  50,00  49,19 100 26,98  29,21  25,71    28,70  26,85  31,79 57,32  58,54  58,94
Pada tabel 4 terlihat menunjukkan bahwa daya proteksi nyamuk pada pengujian repelent berbanding  terbalik  dengan  jumlah  hinggap  nyamuk.  Semakin  tinggi  daya  proteksi  yang  di dapatkan semakin rendah daya hinggap nyamuk yang diperoleh. Pada ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) dengan menggunakan pelarut metanol daya proteksi lebih tinggi dibandingkan dengan pelarut etil asetat dan n-hexan pada semua kosentrasi. Daya proteksi yang paling  rendah  terlihat  pada  pelarut  n-hexan  pada  jenis  nyamuk Aedes  aegypti pada  semua kosentrasi.
Pada  penelitian  ini  juga  memperlihatkan  bahwa  pada  uji repelent semakin  tinggi kosentrasi  yang digunakan pada berbagai pelarut semakin tinggi daya proteksinya. Hal  yang mengembirakan  bahwa  dalam  waktu  3  jam  pengamatan  ke-3  ekstrak  dengan  pelarut  yang berbeda masih mampu bekerja sebagai repelent dan berbanding lurus dengan daya proteksi.

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun belimbing wuluh yang  dilarutkan  dengan  pelarut  metanol,  etil  asetat  dan  n-hexan  dapat  berfungsi  sebagai repelent , dan pelarut  yang paling baik adalah metanol, Semakin tinggi dosis yang digunakan pada pengujian repelent semakin besar daya proteksi.

## Referensi
[BJEFI]  Buletin  Jendela  Epidemiologi  Filariasis  di  Indonesia.  (2010).  Pusat  Data  dan Surveilans Epidemiologi Kementrian Kesehatan RI. Volume.1
Choi,  W.S.,  Park  B.S.,  Ku  S.K.,  Lee  S.E.  2002.  Repellent  activities  of  essential  oils  and monoterpenes againts Culex pipiens pallens , J. Am. Msog. Control. Assoc . 18 (4): 348- 351.
Hadi,  U.K., dan F. Koesharto. 2006. Nyamuk.  di  dalam :  Sigit S.H, Hadi  UK, editor. Hama Pemukiman Indonesia Pengenalan, Biologi, dan Pengendalian. IPB, Bogor. Hal 23-51.
Jebanesan,  A.  and  Rajkumar,  S.,  2005,  Repellency  of  volatile  oils  from Moschosma polystachyum and Solanum xanthocarpum againts filarial vector Culex quinquefasciatus Say, Trop. Biomed. 22 (2) : 139-142.
Kardinan, A. 2001. Pestisida Nabati Ramuan dan Aplikasi . Penebar Swadaya, Jakarta. Parikesit, Mario. 2011. Khasiat dan manfaat belimbing wuluh . Stomata, Surabaya. Hal 1-13; 67-104.
Renaninggalih, R. 2014. Karakterisasi dan pengujian aktivitas penolak nyamuk minyak atsiri daun kecombrang (etlingera elatior (jack) r. M. Smith). Program Studi Farmasi, FMIPA UNISBA. Bandung.
Sihombing, M., Y. Afiffuddin. dan L. Hakim. 2015. Bahan Anti Nyamuk (Mosquito repellent) dari Akar Tuba (Derris elliptica (Roxb.) Benth) (Material Mosquito Repellent of Tuba Root  (Derris  elliptica (Roxb.) Benth) Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan.
Soegijanto,  S.  2006. Demam  Berdarah  Dengue .  Edisi  kedua.  Airlangga  University  Press. Surabaya.
Tesaviani,  K.,  2009, Daya  Repelan  Ekstrak  Kulit  Buah  Jeruk  Nipis ( Citrus  aurantifolia Swingle)  dalam  Sediaan  Lotion  Terhdap  Nyamuk Aedes  aegypti , Skripsi ,  Fakultas Kedokteran UGM, Yogyakarta.