DOI: https://doi.org/10.35891/agx.v11i1.1901 p-ISSN: 2085-241X ; e-ISSN: 2599-3003
Efek subletal campuran ekstrak daun srikaya ( Annona squamosa L.) dan rimpang kunyit ( Curcuma domestica Val.) terhadap larva Spodoptera litura F.
Sublethal effects of mixed exstract of sweetshop leaves (Annona squamosa L.) and turmeric rhizomes (Curcuma domestica Val.) againts of Spodoptera litura F. larvae
Ramadhan Taufika 1)* , Siti Sumarmi 2) , Setyo Andi Nugroho 1)
1 Jurusan Produksi Pertanian Politeknik Negeri Jember, Jember, Indonesia
2 Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta,Indonesia Email: ramadhantaufika@polije.ac.id
Informasi artikel: Dikirim: 08/03/2020 ditinjau: 09/03/2020 disetujui: 23/03/2020
Copyright (c) 2020 Ramadhan Taufika, Siti
Sumarmi, Setyo Andi Nugroho
ABSTRACT: Spodoptera  litura  (Lepidoptera:  Noctuidae)  larvae  is  polyphagous insects  that  populations  cause  damage  to  many  kinds  of  plantations, horticulture,  and  food,  so  it  needed  control  technique.  One  way  to  control  the environmentally  friendly  population  of  S.  litura  larvae  is  to  use  botanical insecticide  was  the  mixed  extract  of  Annona  squamosa  leaves  and  Curcuma domestica rhizome (the mixed of experimental extracts). The aim of the research was  to  know  the  sublethal  effect  of  the  mixed  of  experimental  extract  mixture against  S.  litura  larvae,  namely  the  duration  of  larvae  and  pupae  stage,  pupae weight,  morphology  and  viability  of  the  imago,  and  the  ability  of  the  female imago to lay eggs to produce results. The test was carried out by the method of feed  dip  into  the  mixed  of  experimental  extracts.  Data  on  pupae  weight  were analyzed with ANOVA, then continue by Duncan test with significance level of 5% using  the  SPSS  21  program.  The  results  showed  the  mixed  of  experimental extracts could be extended the larval and  pupal stadia, pupal weight reduction, the wings of adults were not fully developed, adult size reduction, and also adults were  unable  to produced  eggs.  The  results  of  this  research  can  then  be  further tested  on  a  greenhouse  and  analysis  of  a  mixture  of  test  extracts  to  know  the bioactive composition collected as a botanical insecticide.
Keywords: egg, imago, insecticide, polyphagus, pupae
ABSTRAK: Larva Spodoptera  litura (Lepidoptera:  Noctuidae)  merupakan  serangga  polifagus  yang populasinya menyebabkan kerusakan pada berbagai jenis tanaman perkebunan, hortikultura, dan pangan sehingga perlu dilakukan upaya pengendalian. Salah satu cara pengendalian populasi larva S.  litura yang  ramah  lingkungan  adalah  menggunakan  insektisida  nabati  yaitu  campuran  ekstrak daun A.  squamosa dan  rimpang C.  domestica (campiran  ekstrak  uji).  Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui  efek  subletal  campuran  ekstrak  uji  terhadap  larva S.litura yaitu  lama  stadium  larva dan  pupa,  berat  pupa,  morfologi  dan  viabilitas  imago,  serta  kemampuan  imago  betina  untuk bertelur  sampai  menghasilkan  keturunan.  Pengujian  dilakukan  dengan  metode  celup  pakan  ke dalam  campuran  ekstrak  uji.  Data  berat  pupa  dianalisis  dengan  ANOVA  selanjutnya  uji  lanjut Duncan  dengan  taraf  kepercayaan  5%  menggunakan  program  SPSS  21.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa campuran ekstrak uji memperpanjang stadium larva dan pupa, mengurangi berat  pupa,  sayap  imago  tidak  berkembang  sempurna,  pengurangan  ukuran  imago,  serta  imago tidak  mampu  menghasilkan  telur.  Hasil  penelitian  ini  selanjutnya  bisa  dilakukan  uji  lebih  lanjut pada  skala green  house dan  analisis  fotokimia  campuran  ekstrak  uji  untuk  mengetahui  senyawa bioaktif yang berperan sebagai insektisida nabati.
Kata kunci: imago, insektisida, polifagus, pupa, telur
Sitas i:  Taufika, R., Sumarmi, S., & Nugroho, S. A. (2020). Efek subletal campuran ekstrak daun srikaya (Annona squamosa L.) dan rimpang kunyit (Curcuma domestica Val.) terhadap larva Spodoptera litura F. AGROMIX, 11 (1), 66-78. https://doi.org/10.35891/agx.v11i1.1901

## PENDAHULUAN
Larva Spodoptera litura Fabricius (Lepidoptera:  Noctuidae)  merupakan  serangga polifagus  yang  populasinya  menyebabkan kerusakan  pada  berbagai  jenis  tanaman pangan,  sayuran,  buah,  dan  perkebunan  yakni tanaman  kedelai,  terung,  cabai,  tomat,  kubis, kentang,  kacang  tanah,  jagung,  tembakau, tebu,  bawang,  kapas,  dan  sawi    (Kalshoven  & van  der  Laan,  1981;  Kumar  &  Sevarkodiyone, 2009;  Rao  dkk.,  2014;  Shahout  dkk.,  2011). Menurut Fitriani dkk. (2011) pada fase vegetatif tanaman,  larva S.  litura memakan  daun  muda dan  pada  fase  generatif  memakan  polong muda.  Hampir  setiap  daerah  di  Indonesia pernah dilaporkan mengenai adanya kerusakan tanaman  pertanian  yang  disebabkan  oleh populasi  larva S.  litura. Menurut  Adie  dkk. (2012)    populasi S.  litura merupakan  hama penting  yang  menyebabkan  kerusakan  pada daun  kedelai  dibandingkan  dengan  hama  lain seperti Chrysodeixis chalcites, Heliothis armigera , Lamprosema  indica .  Sumber  yang sama  menyebutkan  bahwa  tingkat  kerusakan pada  tanaman  kedelai  akibat  populasi  larva S. litura di Indonesia mencapai 23-45%.
Pengendalian populasi larva S. litura yang dilakukan  oleh  petani  di  Indonesia  pada umumnya masih menggunakan insektisida yang berasal  dari  senyawa  kimia  sintetis  (Balfas  & Willis, 2016). Penggunaan insektisida kimia bagi kalangan  petani  di  Indonesia  masih  dianggap sebagai  salah  satu  cara  untuk  pengendali
populasi  Organisme  Pengganggu  Tanaman (OPT)  secara  cepat  dan  efektif    (Hasibuan, 2015).  Penggunaan  insektisida  kimia  terus- menerus  dalam  jangka  waktu  yang  lama memiliki banyak kelemahan yakni menyebabkan resistensi hama, matinya organisme  non-target,  residunya  berdampak pada kesehatan manusia, persisten di lingkungan,  dan  berdampak  negatif  bagi lingkungan  yakni  menimbulkan  pencemaran air,  udara,  dan  tanah  (Felsot  &  Racke,  2006; Hasibuan,  2015;  Kandagal  &  Khetagoudar, 2013;  Soemirat  &  Ariesyady,  2015).  Hasil penelitian  Negara  (2003)  melaporkan  telah terjadi  peningkatan  resistensi S.  exigua terhadap penggunaan insektisida kimia deltametrin  sampai  33  kali  dibandingkan populasi rentan di Daerah Istimewa Yogyakarta. Suryaningsih dan Hadisoeganda (2004) menyatakan  penggunaan  insektisida  kimia untuk    pengendali  populasi  OPT  hanya  sekitar 30%  mengenai  organisme  target,  sedangkan 70%  insektisida  terbuang  ke  lingkungan. Peningkatan  produk  pertanian  yang  bebas  dari residu  insektisida  kimia  penting  dilakukan  di Indonesia  seperti  yang  tertuang  dalam UU  No. 5 Tahun 1994 pasal 2 tentang Sistem Pertanian Berkelanjutan  (Untung,  2007),  maka  perlu dicari  pengendali  populasi  larva S.  litura yang berwawasan  lingkungan,  salah  satunya  adalah pemanfaatan  bahan  bioaktif  tanaman  sebagai insektisida nabati. Beberapa keunggulan penggunaan  insektisida  nabati  yakni  ramah
lingkungan,  bahan  mudah  diperoleh,  tidak menimbulkan  resistensi  pada  serangga  hama, tidak  toksik  pada  serangga  non  target,  tidak persisten  di  lingkungan,  menghasilkan  produk pertanian  yang  bebas  residu  insektisida  kimia serta  caranya  mudah  dan  murah  untuk diterapkan  langsung  oleh  petani  (Kumar  & Sevarkodiyone,  2009;  Liu  dkk.,  2000;  Selvaraj dkk., 2010; Singh & Saratchandra, 2005; Sutoyo & Wiriodmodjo, 1997).
Insektisida  nabati  merupakan  insektisida yang  memiliki bahan bioaktif  yang  berasal  dari ekstrak organ tanaman yang ramah lingkungan (Kumar  &  Sevarkodiyone,  2009;  S  Mann  &  E Kaufman,  2012).  Metabolisme  tanaman  selain menghasilkan  senyawa  metabolit  primer  juga menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder (Arivoli  &  Samuel,  2012;  Arivoli  &  Tennyson, 2013; Rani & Rajasekharreddy, 2009). Menurut Sadek  (2003)  metabolit  sekunder  tanaman yakni  alkaloid,  saponin,  flavanoid,  tanin,  dan terpenoid bersifat racun perut dan antifeedant bagi  serangga  herbivora  sehingga  berpotensi sebagai bahan bioaktif insektisida nabati.
Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan  sebagai  bahan  insektisida  nabati adalah  tanaman  srikaya  ( Annona  squamosa Linnaeus)  yakni  pada  organ  daun  dan  biji. Menurut  Tenrirawe  (2011)  tanaman  dari anggota Famili Annonaceae berpotensi sebagai insektisida  nabati.  Hasil  penelitian  sebelumnya menyatakan  bahwa  ekstrak  metanol  daun A. muricata efektif  mengendalikan  larva S.  litura
pada  konsentrasi  24.000  ppm.    Tanaman  lain yang  berpotensi  sebagai  bahan  insektisida nabati  adalah  kunyit  ( Curcuma  domestica Valeton)  yakni  pada  organ  rimpang. Curcuma domestica merupakan  salah  satu  tanaman anggota Famili Zingiberaceae yang mengandung  senyawa  fenolik  yakni  curcumin yang  berperan  dalam  pigmentasi  rimpang (Tavares  dkk.,  2013).  Senyawa  bioaktif  lainnya pada  rimpang C.  domestica adalah ar- turmerone yang merupakan kelompok senyawa sesquiterpen  dan  flavonoid  yang  diduga berpotensi  sebagai  bahan  aktif  insektisida (Zhang dkk., 2008).
Selain  menimbulkan  kematian  pada serangga,  metabolit  sekunder  tanaman  juga menyebabkan  efek  subletal.  Efek  subletal merupakan  efek  yang  ditimbulkan  dari  suatu zat  toksik  yang  tidak  mematikan,  tetapi menimbulkan  kelainan  atau  abnormalitas struktur  dan  fungsi  tubuh  pada  suatu organisme  (Connel  &  Miller,  2006).  Hasil penelitian  Herminanto  dkk.  (2004)  ekstrak  biji A.  squamosa pada  konsentrasi  15  cc/L memperlambat perkembangan larva C. pavonana menjadi pupa, mempercepat stadium pupa menjadi imago, dan imago hanya mampu  hidup  selama  kurang  dari  satu  hari. Balfas dan Willis (2016) mengemukakan bahwa pemberian  ekstrak  rimpang C.  domestica memperlambat  masa  perkembangan  larva S. litura menjadi  imago.  Dengan  demikian, diharapkan campuran ekstrak daun A.
squamosa dan  rimpang C.  domestica dapat secara optimal diaplikasikan sebagai insektisida nabati  yang  ramah  lingkungan  untuk  agensia pengendali populasi larva S. litura.

## METODE PENELITIAN
Pemeliharaan Spodoptera litura F.
Sebanyak  115  larva  instar  kedua  dan ketiga S. litura diperoleh dari perkebunan sawi di Desa Ketep, Kecamatan Sawangan, Kabupaten  Magelang.  Pengambilan  larva S. litura dilakukan  dengan  menggunakan  pinset dan  kuas  lukis  nomor  4  secara  berhati-hati, agar  tidak  merusak  struktur  tubuh  larva S. litura. Larva S.  litura dimasukkan  ke  dalam toples  plastik  diameter  15  x  20  cm  yang tutupnya  dimodifikasi  menggunakan  kain  kasa. Larva  yang  diperoleh  dari  perkebunan  sawi dipelihara di Laboratorium Entomologi, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada. Satu larva  dimasukkan  ke  dalam  satu  botol  plastik diameter  3,5  x  4  cm  yang  telah  diisi  dengan pakan buatan modifikasi dari formulasi Poitout dkk. (1972) dalam Saljoqi dkk.  (2015) ukuran 1 x 1 x 1 cm.
Pengamatan perkembangan larva S. litura dilakukan setiap hari dan dilakukan pengukuran suhu  dan  kelembaban  ruangan  pemeliharaan dengan menggunakan higrotermometer. Setelah  larva S.  litura berubah  menjadi  pupa, kemudian  pupa  dimasukkan  ke  dalam  toples kaca  berukuran  diameter  14  x  22  cm  yang alasnya  diberi  3  lembar  tisu.  Selanjutnya,
dimasukkan  potongan  kertas  buram  ukuran  15 x  15  cm  sebanyak  3  lembar  yang  dilipat  dan diletakkan  dalam  posisi  berdiri  untuk  tempat imago  betina S.  litura bertelur.  Toples  kaca ditutup  meggunakan  kain  kasa.  Jumlah  pupa yang  dimasukkan  ke  dalam  satu  toples  kaca berjumlah  20  pupa.  Pupa  yang  telah  menjadi imago  diberi  pakan  berupa  larutan  madu dengan aqudest 10% yang ditambah 0,59 gram asam  askorbat.  Pemberian  pakan  pada  imago dilakukan  dengan  cara  larutan  madu  10% diserapkan pada gulungan kapas, lalu gulungan kapas  tersebut  digantung  di  tutup  toples  kaca yakni  kain  kasa  menggunakan  karet  gelang. Gulungan kapas diganti setiap dua hari sekali.
Pengambilan  telur S.  litura dilakukan dengan  cara  menggunting  kertas  yang  berisi telur S.  litura .  Potongan  kertas  buram  yang berisi telur S. litura dimasukkan ke dalam toples plastik  berukuran  diameter  14  x  5  cm  dan ditutup menggunakan plastik wrap. Satu toples plastik  berisi  tiga  potong  kertas  buram  yang berisi  koloni  telur.  Setelah  telur  menetas, kertas  buram  yang  berisi  cangkang  telur S. litura dikeluarkan  dari  toples  plastik  yang selanjutnya dimasukkan pakan buatan berukuran  5  x  1  x  1  cm  sebanyak  3  potong  ke dalam  toples  plastik  tersebut.  Perkembangan larva  diamati  setiap  hari.  Larva  yang  siap  ganti kulit menjadi instar kedua dan ketiga diletakkan dalam  toples  plastik  terpisah  dari  larva  lain. Larva instar kedua dan ketiga generasi pertama digunakan untuk pengujian.
Ekstraksi  daun A.  squamosa dan  rimpang C.

## domestica
Metode  ekstraksi  daun A.  squamosa dan rimpang C.  domestica mengacu  dari  Kamaraj dkk.  (2011)  dengan  modifikasi.  Modifikasi tersebut meliputi proses pengeringan daun dan proses  penguapan  pelarut  sampai  menjadi ekstrak.  Daun A.  squamosa dan  rimpang C. domestica tersebut  diletakkan  di  dalam ruangan  tanpa  terkena paparan  sinar  matahari secara  langsung  dengan  suhu  26-29 0 C  dan dikeringanginkan  menggunakan  kipas  angin selama  26  hari.  Setelah  26  hari,  pengeringan daun A.  squamosa dan  rimpang C.  domestica dilanjutkan dengan cara sampel dimasukkan ke dalam  oven  pada  suhu  40 0 C  selama  24  jam.
Daun  dan  rimpang  yang  telah  kering,  lalu dihaluskan  dengan  blender  (tanpa  air)  sampai menjadi serbuk.
Serbuk daun A. squamosa dan rimpang C. domestica diekstraksi  menggunakan  pelarut etanol  96%  dengan  teknik  maserasi  selama  48 jam dan dilakukan pengadukan secara perlahan setiap  enam  jam  sekali  menggunakan  batang pengaduk kaca panjang 30 cm. Larutan ekstrak lalu  dimasukkan  kea  lam  mangkuk  kaca kapasitas  1  L.  Selanjutnya  mangkuk  kaca  yang berisi  larutan  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam almari  kaca  ukuran  70  x  70  x  70  cm  yang  di dalamnya  terdapat  kipas  angin.  Ekstrak  yang diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  gelas  kaca diameter  3  x  6  cm  lalu  ditutup  menggunakan
aluminium foil dan disimpan di dalam almari es suhu ± 40 0 C.

## Waktu dan tempat penelitian
Pemeliharaan  larva S.  litura ,  pembuatan ekstrak  daun A.  squamosa dan  rimpang C. domestica ,  serta  pengujian  dilakukan  di Laboratorium  Entomologi,  Fakultas  Biologi, Universitas Gadjah Mada. Penelitian dilaksanakan pada bulan Maret sampai dengan Desember 2016.

## Pengujian campuran ekstrak uji
Konsentrasi  campuran  ekstrak  uji  yang digunakan  untuk  pengujian  efek  subletal  larva instar kedua S. litura yakni 1.000, 4.000, 7.000, dan  10.000  ppm  serta  instar  ketiga S.  litura yakni  9.000,  10.000,  11.000  dan  12.000  ppm. Kontrol  negatif  berupa  pakan  buatan  yang direndam  ke  dalam  larutan  etanol  1%, sedangkan sebagai kontrol positif berupa pakan buatan  yang  direndam  ke  dalam  insektisida Dipel WP konsentrasi 5.000 ppm. Pengujian ini dilakukan dengan tiga kali ulangan.
Langkah selanjutnya pakan buatan dipotong dengan ukuran seragam yakni 1 x 1 x 1  cm.  Potongan  pakan  buatan  direndam  ke dalam glass  jam diameter  6  x  9  cm  yang masing-masing  berisi  100  ml  larutan  dengan konsentrasi  yang  berbeda  (campuran  ekstrak uji) selama 60 menit. Masing-masing glass jam berisi 15 potong pakan buatan. Potongan pakan buatan yang telah direndam lalu dimasukkan ke dalam botol plastik diameter 3,5 x 4 cm dengan menggunakan  pinset  untuk  dikeringkan  pada
suhu  26-28 0 C  selama  30  menit  sebelum pengujian.
Larva S.  litura yang  digunakan  untuk pengujian adalah  larva  instar  kedua dan ketiga hari pertama yang diperoleh dari pemeliharaan di  laboratorium  yang  sebelumnya  dipuasakan selama 4 jam. Satu larva dimasukkan ke dalam satu  botol  plastik  diameter  3,5  x  4  cm  yang sudah  berisi  satu  potong  pakan buatan ukuran 1 x 1 x 1 cm (perlakuan) dengan menggunakan kuas  lukis  nomor  4.  Pakan  buatan  diganti dengan  pakan  buatan  yang  baru  (tanpa perlakuan) ukuran 1 x 1 x 1 cm setelah 24 jam pengujian  sampai  menjadi  pupa.  Selama pengujian dan pengamatan kematian, temperatur dan kelembaban ruangan uji diukur tiga  kali  setiap  hari  yakni  pada  pukul  07.00, 12.00,  dan  17.00  WIB  dengan  menggunakan higrotermometer. Kotoran larva di dalam botol plastik  dibersihkan  setiap  hari  menggunakan kuas lukis nomor 4.

## Pengamatan efek subletal
Larva  uji  yang  berhasil  hidup  48  jam setelah  pengujian,  tetap  dipelihara  sampai membentuk  pupa  dan  menjadi  imago  untuk diamati  efek  subletal  yang  terjadi.  Paramater subletal  yang  diamati  meliputi  lama  stadium larva,  lama  stadium  pupa,  berat  dan  ukuran pupa,  morfologi  imago,  viabilitas  imago,  dan kemampuan  imago  betina  untuk  bertelur sampai menghasilkan keturunan. Cara pemeliharaan dilakukan sama seperti pemeliharaan S.  litura untuk  perbanyakan
dengan  menggunakan  pakan  buatan  seperti pada  subbab  (a).  Pemeliharaan Spodoptera litura F.  Selama  pengamatan  efek  subletal, dilakukan  pencatatan  suhu  dan  kelembaban ruang uji tiga kali setiap hari yakni pukul 08.00, 12.00 dan 17.00 WIB.
Imago  yang  berhasil  keluar  dari  pupa pada  setiap  kelompok  uji  dan  kontrol dipasangkan  untuk  diamati  fekunditas  imago betinanya.  Satu  pasang  imago  dimasukkan  ke dalam  satu  toples.  Satu  pasang  imago  dari pengujian yang dipasangkan bukan berasal dari kelompok  uji  yang  sama,  melainkan  antar kelompok  uji,  kecuali  pada  kelompok  kontrol. Dua  penyebab  yang  melandasi  pemasangan imago  antar  kelompok  uji.  Penyebab  pertama yakni  pupa  pada  setiap  kelompok  uji  tidak semua  berhasil  menjadi  imago,  bahkan  pada beberapa  kelompok  uji  hanya  satu  pupa  yang berhasil menjadi imago. Penyebab kedua yakni imago  yang  berasal  dari  kelompok  uji  tidak dapat  dibedakan  jenis  kelaminnya.  Hal  ini disebabkan  karakter  pembeda  jenis  kelamin yakni  warna  sayap  imago  tidak  bisa  dilihat dengan jelas karena ukuran sayapnya mereduksi.

## Analisis data
Data  yang  diperoleh  disajikan  secara deskriptif dalam bentuk Tabel. Pengolahan dan analisis  data  menggunakan  program  SPSS  21. Analisis statistik yang digunakan yakni:
1. Analisis ANOVA digunakan untuk
mengetahui perbedaan efektivitas campuran
ekstrak  uji  terhadap  berat  pupa S.  litura (Gomez & Gomez, 2010).
2. Jika  nilai probability  <  0,05  maka  digunakan uji  lanjut Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  untuk  mengetahui  beda  nyata efektivitas tiap konsentrasi campuran ekstrak uji (Gomez & Gomez, 2010).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Campuran ekstrak uji selain menyebabkan  kematian  juga  menimbulkan efek  subletal  pada  fase  pupa  dan  imago S. litura .  Connel  and  Miller  (2006)  menyatakan bahwa  efek  subletal  merupakan  efek  yang ditimbulkan  dari  suatu  racun  yang  masuk  ke dalam tubuh organisme yang tidak menyebabkan  kematian  organisme  tersebut, tetapi menimbulkan kelainan atau abnormalitas  fungsi  dan  struktur  tubuh.  Hasil pengamatan periode siklus hidup menunjukkan bahwa  dari  semua  kelompok  pengujian  larva instar kedua dan ketiga S. litura membutuhkan waktu  yang  lebih  lama  untuk  menyelesaikan fase  larva  dan  pupa  yakni  secara  berturut  19 hari  dan  10  hari  daripada  kelompok  kontrol negatif yakni 13 hari dan 5 hari. Hasil penelitian ini  sama  dengan  hasil  penelitian  Balfas  dan Willis  (Balfas  &  Willis,  2016)  yang  menyatakan bahwa ekstrak rimpang C. domestica memperlambat  masa  perkembangan  larva, pupa  dan  imago S.  litura. Hasil  penelitian Herminanto  dkk.  (2004)  juga  menyatakan ekstrak  biji A.  squamosa memperlambat  masa
perkembangan  larva C.  pavonana menjadi pupa.
Fase  larva  dan  pupa S.  litura pada kelompok  perlakuan  lebih  lama  daripada kelompok kontrol negatif. Hal ini kemungkinan disebabkan  senyawa  tanin  yang  terdapat  di dalam  ekstrak  daun A.  squamosa dan  rimpang C. domestica . Hasil penelitian ini sejalan dengan pernyataan Matsushita dkk. (2002) bahwa tanin merupakan  senyawa  makromolekul  yang dihasilkan  oleh  tanaman dan  berperan  sebagai penolak  nutrisi  dan  penghambat  enzim α- amylase yang menyebabkan rendahnya pemecahan pati yang berfungsi sebagai sumber energi  serangga  untuk  pertumbuhan.  Firdausi dkk. (2013) menambahkan α-amylase merupakan  enzim  penting  dalam  pencernaan yang  berperan  dalam  daya  hidup  serangga. Sumber yang sama juga menyatakan bahwa α- amylase merupakan enzim yang menghidrolisis ikatan glukan pada komponen pati dan glikogen untuk  diubah  menjadi  energi  yang  digunakan oleh serangga untuk pertumbuhan. Penghambatan  aktivitas  enzim α-amylase akan menurunkan kemampuan untuk mencerna pati yang  merupakan  sarana  penyedia  energi, sehingga  fase  larva  dan  pupa S.  litura dari kelompok  pengujian  larva  instar  kedua  dan ketiga  lebih  lama  daripada  kelompok  kontrol negatif.
Mekanisme  kerja  penghambatan  tanin terhadap  enzim α-amylase serangga  yakni melalui  penghambatan  interaksi  antara  sisi
substrat  yang  seharusnya  berikatan  dengan enzim,  menjadi  berikatan  dengan  tanin. Akibatnya  terbentuk subsite yang  terdiri  dari molekul lain sehingga struktur yang seharusnya terlibat  dalam  proses,  menjadi  berikatan dengan struktur molekul bebas yang merupakan inhibitor, sehingga proses hidrolisis pati  terhambat  (Payan,  2004).  Menurut  Miller (2001)  adanya  kemampuan  tanin  untuk berikatan  dengan  sisi  substrat  mampu menghambat α-amylase yang  menyebabkan enzim  tersebut  kehilangan  fungsinya.  Makkar dkk.  (2007)  menyatakan  bahwa  senyawa  tanin yang  terdapat  dalam  tanaman  secara  alami memiliki kemampuan  untuk berinteraksi dengan  substrat  dan  membentuk  protein kompleks.  Protein  kompleks  tersebut  bersifat toksik  yang  menyebabkan  pengurangan  nafsu makan  dan  penghambatan  pertumbuhan serangga misalnya lamanya fase larva dan pupa serta  pengurangan  berat  dan  ukuran  pupa. Chapman (1998) mengemukakan proses pergantian  kulit  dan  metamorfosis  serangga melibatkan  sedikitnya  tujuh  jenis  hormon, yakni hormon juvenile, hormon protorakikotropik  (PTTH),  ekdison,  hormon pemicu  ekdisis  (ETH),  hormon  eklosi  (EH), burkison,  dan crustacean  cardioactive  peptide (CCAP).  Terganggunya  produksi  satu  jenis hormon  karena  terhambatnya  produksi  energi pada organ penghasil hormon akan berdampak terhadap  fungsi  sistem  hormon  secara keseluruhan, sehingga serangga akan
terhambat pertumbuhan dan perkem- bangannya.  Hasil  analisis  statistik  rerata  berat pupa  dari  kelompok  pengujian  larva  instar kedua S.  litura setelah  pengujian  campuran ekstrak uji tersaji pada Tabel 1.
Tabel 1.  Analisis  statistik  berat  pupa  dari kelompok  pengujian  larva  instar kedua Spodoptera litura F.
Konsentrasi (ppm) Jumlah pupa yang terbentuk Rerata berat pupa (gram) ± standar deviasi Larutan etanol 1% 27 0,43±0,01 a 1.000 7 0,24±0,15 b 4.000 4 0,23±0,01 b 7.000 3 0,23±0,12 b 10.000 2 0,20±0,01 c Dipel WP (5.000) 0 0,00±0,00 d
Keterangan:  Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada kolom  yang  sama  menunjukkan    berbeda nyata  berdasarkan  uji  DMRT  dengan  taraf nyata 0,05
Data  hasil  pengamatan  berat  pupa  dari kelompok pengujian larva instar kedua S. litura dianalisis statistik dengan ANOVA. Hasil analisis statistik  menunjukkan  bahwa  pada  semua kelompok  perlakuan  menyebabkan  perbedaan berat  pupa  dengan  kelompok  kontrol  negatif dan  setiap  kelompok  perlakuan  dengan konsentrasi yang berbeda menyebabkan pengaruh  yang  sama  terhadap  penurunan berat  pupa,  kecuali  pada  konsentrasi  10.000 ppm  yang  memberikan  pengaruh  paling  besar terhadap  penurunan  berat  pupa.  Hasil pengamatan jumlah dan analisis statistik rerata berat  pupa  dari  kelompok  pengujian  larva instar ketiga S. litura tersaji pada Tabel 2.
Tabel 2.  Analisis  statistik  berat  pupa  dari kelompok pengujian larva instar ketiga Spodoptera litura F. Konsentrasi (ppm) Jumlah pupa yang terbentuk Rerata berat pupa (gram) ± standar deviasi Larutan etanol 1% 30 0,46±0,15 a 9.000 13 0,24±0,23 b 10.000 9 0,24±0,15 b 11.000 6 0,24±0,01 b 12.000 2 0,24±0,00 b Dipel WP (5.000) 0 0,00±0,00 c
Keterangan:  Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada kolom  yang  sama  menunjukkan  berbeda nyata  berdasarkan  uji  DMRT  dengan  taraf nyata 0,05
Data  hasil  pengamatan  berat  pupa  dari kelompok pengujian larva instar ketiga S. litura dianalisis statistik dengan ANOVA. Hasil statistik menunjukkan  bahwa  pada  semua  kelompok perlakuan    menyebabkan  perbedaan  berat pupa  dengan  kelompok  kontrol  negatif  dan setiap kelompok perlakuan dengan konsentrasi yang  berbeda  memberikan  pengaruh  yang sama  terhadap  penurunan  berat  pupa.  Hal  ini diduga  karena  adanya  senyawa  tanin  yang termakan  saat  pengujian  larva  menyebabkan menurunnya aktivitas makan larva dan efisiensi penyerapan  makanan  yang  pada  akhirnya mempengaruhi  berat  dan  ukuran  pupa  yang terbentuk dari pengujian larva instar kedua dan ketiga S.  litura. Pernyataan  ini  sejalan  dengan Firdausi dkk. (2013) yang menyatakan serangga hama anggota Ordo Coleoptera, Hymenoptera, Diptera,  Lepidoptera,  dan  Hemiptera  selalu hidup  pada  kondisi  yang  kaya  polisakarida  dan kelangsungan hidupnya mulai dari telur sampai imago  sangat  tergantung  pada  keefektifan enzim α-amylase. Sumber yang sama
menyatakan  penghambatan  aktivitas  enzim α- amylase pada  serangga  anggota  ordo  tersebut menyebabkan  kerusakan  struktur  dan  fungsi tubuh  misalnya  bentuk  dan  ukuran  pupa  serta bentuk imago.
Konsentrasi campuran ekstrak uji berbanding  terbalik  dengan  berat  dan  ukuran pupa S.  litura .  Semakin  tinggi  konsentrasi campuran  ekstrak  uji,  maka  semakin  rendah berat  dan  ukuran  pupa.  Hal  ini  kemungkinan konsentrasi  campuran  ekstrak  uji  yang  tinggi memiliki  lebih  banyak  senyawa  aktif  yang bersifat  toksik  sehingga  konsentrasi  campuran ekstrak yang tinggi memberikan pengaruh yang besar terhadap pengurangan berat dan ukuran pupa S.  litura seperti  yang  dikemukakan  oleh Firdausi dkk. (2013).
Morfologi  imago S.  litura dari  kelompok pengujian  larva  instar  kedua  dan  ketiga  yang berhasil keluar dari pupa memiliki abnormalitas pada  bagian  sayap  yakni  kedua  pasang sayapnya  mereduksi  dan  ukuran  tubuhnya lebih  kecil  daripada  kelompok  kontrol  negatif (Gambar  10).  Berdasarkan  hasil  pengamatan, semua  imago S.  litura dari  pengujian  tidak mampu  terbang  dan  hanya  mampu  berjalan lambat,  bahkan  pada  beberapa  individu  tidak mampu  berjalan.  Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan  Firdausi  dkk.  (2013)  senyawa  tanin yang  ada  dalam  tumbuhan  menghambat aktivitas  enzim α-amylase yang  berperan penting dalam pemecahan pati yang merupakan  sumber  energi  bagi  serangga.
Terhambatnya  aktivitas  enzim α-amylase menyebabkan  kerusakan  struktur  dan  fungsi tubuh  misalnya  bentuk  dan  ukuran  pupa, sehingga akan mempengaruhi morfologi imago yang terbentuk misalnya kelainan pada anggota tubuh yakni sayap, kaki, atau  antena. Tavares, dkk.  (2013)  menambahkan  senyawa  terpenoid yang  terdapat  pada  tumbuhan  mengganggu
perkembangan  dan  reproduksi  serangga. Sumber  yang  sama  menyebutkan  bahwa terpenoid  berfungsi  sebagai ecdyson  blocker yang  menghambat  kelenjar prothoracic dalam menghasilkan  hormon ecdyson yang  berfungsi untuk molting dan akan mengganggu terbentuknya struktur tubuh pada fase imago.
Gambar 2.  Imago Spodoptera  litura F.  a)  Kelompok  pengujian.  dan  b)  kelompok  kontrol  negatif. Tanda panah warna merah menunjukkan  bentuk sayap yang mengalami abnormalitas, sedangkan  tanda  panah  hitam  menunjukkan  bentuk  sayap  normal.  (skala  1  mm) (koleksi pribadi)
Campuran  ekstrak  uji  juga  menyebabkan viabilitas imago S. litura rendah. Imago S. litura dari  kelompok  pengujian  hanya  mampu  hidup rata-rata selama 1-3 hari, tetapi pada kelompok kontrol negatif mampu hidup selama 9-12 hari. Hasil  ini  sama  dengan  penelitian  Dono  dkk. (2008)  yang  menyatakan  lama  hidup  imago Crocidolomia  pavonana setelah  pengujian ekstrak  biji Barringtonia  asiatica lebih  pendek daripada kelompok kontrol. Sumber yang sama menduga  senyawa  bioaktif  penurun  aktivitas makan larva yang terdapat pada biji B. asiatica menyebabkan  lama  hidup  imago  lebih  pendek daripada  kelompok  kontrol.  Hasil penelitian  ini
juga didukung oleh penelitian Herminanto  dkk. (2004)  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  biji A. squamosa menyebabkan  imago C.  pavonana mampu  hidup  hanya  kurang  dari  satu  hari. Menurunnya  aktivitas  makan  larva S.  litura sebagai sumber energi untuk pertumbuhan dan perkembangan  akan  menghambat  proses fisiologi  yang  ada  dalam  tubuh  serangga misalnya  molting,  reproduksi,  dan  oviposisi telur.
Efek  subletal  lain  yang  diamati  adalah fekunditas  imago  betina.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  tidak  ada  telur  yang dihasilkan oleh imago yang berhasil keluar dari
A
B
pupa baik dari kelompok pengujian larva instar kedua dan ketiga. Selama penelitian berlangsung  suhu  dan  kelembaban  ruang  uji yakni berkisar antara 26,1-27,4 o C dan kelembaban  berkisar  74-83%.  Suhu  dan kelembaban  ruang  uji  dalam  kisaran  normal seperti  yang  dikemukakan  oleh  Selvaraj  dkk. (2010). Dengan demikian, suhu dan kelembaban  tidak  mempengaruhi  fekunditas imago  betina.  Hal  ini  dibuktikan  juga  oleh imago  betina  pada  kelompok  kontrol  negatif yang  menghasilkan  telur dan  menetas  menjadi larva.  Tidak  adanya  telur  pada  pengamatan subletal kemungkinan karena senyawa penurun aktivitas  makan  pada  saat  fase  larva  yakni senyawa tanin mempengaruhi proses perkembangan  imago  tersebut.  Pada  saat pengamatan  berlangsung,  semua  imago  yang berhasil menetas berjalan lambat bahkan pada beberapa individu tidak mampu berjalan. Dono dkk.  (2008)  mengemukakan  senyawa  toksin yang termakan oleh serangga akan menurunkan pemanfaatan nutrisi untuk aktivitas pertumbuhan dan reproduksi, sehingga  secara  keseluruhan  mengganggu viabilitas  imago,  proses  pembentukan  telur, produksi telur, masa oviposisi, dan perkembangan serangga.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa campuran  ekstrak  uji  memperpanjang  stadium larva dan  pupa,  mengurangi  berat pupa,  sayap
imago tidak berkembang sempurna, pengurangan  ukuran  imago,  serta  imago  tidak mampu menghasilkan telur.
Perlu dilakukan penelitian tahap berikutnya pada skala green house dan analisis fitokimia campuran ekstrak uji untuk mengetahui  senyawa  bioaktif  yang  berperan sebagai insektisida nabati.

## DAFTAR PUSTAKA
Adie,  M.  M.,  Krisnawati,  A.,  &  Mufidah,  A.  Z.
(2012).  Derajat  ketahanan  genotipe kedelai  terhadap  hama  ulat  grayak.
Prosiding Seminar Hasil Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi , 5 , 29–
36.
Arivoli,  S.,  &  Samuel,  T.  (2012).  Antifeedant activity of plant extracts against Spodoptera  litura  (Fab.)(Lepidoptera: Noctuidae). American-Eurasian Journal of Agricultural  and  Environmental  Sciences , 12 (6), 764–768.
Arivoli,  S.,  &  Tennyson,  S.  (2013).  Antifeedant activity,  developmental  indices  and morphogenetic variations of plant extracts against Spodoptera litura (Fab)(Lepidoptera:  Noctuidae). Journal  of Entomology  and  Zoology  Studies , 1 (4),
87–96.
Balfas, R., & Willis, M. (2016). Pengaruh ekstrak tanaman  obat  terhadap  mortalitas  dan kelangsungan  hidup  Spodoptera  litura  F.
(Lepidoptera: Noctuidae). Buletin Penelitian  Tanaman  Rempah  Dan  Obat , 20 (2), 148–156.
https://doi.org/10.21082/bullittro.v20n2. 2009.%p Chapman,  R.  F.,  &  Chapman,  R.  F.  (1998). The insects: Structure and function . Cambridge university press.
Connel, D. W., & Miller, G. J. (2006). Kimia dan ekotoksikologi  pencemaran. Universitas Indonesia: UI-Press .
Dono, D., Hidayat, S., Nasahi, C., & Anggraini, E.
(2008). Pengaruh ekstrak biji Barringtonia
asiatica L. (Kurz) (Lecythidaceae) terhadap  mortalitas  larva  dan  fekunditas Crocidolomia  pavonana  F.  (Lepidoptera: Pyralidae). Agrikultura , 19 (1),  Article  1. https://doi.org/10.24198/agrikultura.v19i
1.601
Felsot,  A.  S.,  &  Racke,  K.  D.  (2006).  Chemical pest control technology: Benefits, disadvantages,  and  continuing  roles  in crop  production  systems.  Dalam Crop Protection
Products for Organic Agriculture (Vol.  947,  hlm.  1–18). American Chemical Society. https://doi.org/10.1021/bk-2007- 0947.ch001
Firdausi,  A.,  Siswoyo,  T.  A.,  &  Wiryadiputra,  S.
(2013).  Identifikasi  tanaman  potensial penghasil  tanin-protein  kompleks  untuk penghambatan aktivitas α-amylase kaitannya  sebagai  pestisida  nabati. Pelita Perkebunan , 29 (1), 31–43.
Fitriani,  U.  l,  Melina,  M.,  &  Gassa,  A.  (2011).
Kemampuan memangsa Euborellia
annulata  (Dermaptera:  Anisolabididae) dan  preferensi  pada    berbagai    instar larva Spodoptera
litura. Jurnal Fitomedika , 7 (3), 182–185.
Gomez, K. A., & Gomez,  A. A. (2010). Prosedur statistik  untuk  penelitian  pertanian (2
ed.). Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia.
Hamilton-Miller, J. M. T. (2001). Anti-cariogenic properties  of  tea  (Camellia  sinensis). Journal  of  Medical  Microbiology, 50 (4), 299–302.  https://doi.org/10.1099/0022- 1317-50-4-299
Hasibuan, R. (2015). Insektisida organik sintetik dan biorasional . Xplantaxia.
Herminanto,  W.,  &  Sumarsono,  T.  (2004).
Potensi  ekstrak  biji  srikaya  (Annona squamosa  L.)  untuk  mengendalikan  ulat krop  kubis  Crocidolomia  pavonana  F.
Fakultas  Pertanian  UNSOED,  Agrosains ,
1 (1), 31–35.
Kalshoven, L. G. E., & van der Laan, P. A. (1981). Pests  of  Crops  in  Indonesia  (revised) . Jakarta: Indonesia: Ichtiar Baru.
Kamaraj,  C.,  Bagavan,  A.,  Elango,  G.,  Zahir,  A.
A.,  Rajakumar,  G.,  Marimuthu,  S.,
Santhoshkumar,  T.,  &  Rahuman,  A.  A. (2011).  Larvicidal  activity  of  medicinal plant extracts against Anopheles subpictus  &  Culex  tritaeniorhynchus. The Indian  Journal  of  Medical  Research ,
134 (1), 101–106.
Kandagal,  A.  S.,  &  Khetagoudar,  M.  C.  (2013). Stud on larvicidal activit of weed e tracts against  Spodoptera  litura. Journal  of environmental biology , 34 , 253–257. Kumar,  A.  G.,  &  Sevarkodiyone,  S.  P.  (2009). Effect  of  seed  extracts  of  Annona squamosa  L.  and  Lepidium  sativum  L.  on the pupal development and reproductive parameters of tobacco cutworm,
Spodoptera  litura  (Fabricius). Hexapoda , 16 (2), 132–135.
Liu, S. Q., Shi, J. J., Cao, H., Jia, F. B., Liu, X. Q., & Shi,  G.  L.  (2000).  Survey  of  pesticidal component in plant. Entomology in China in 21st Century, Proceedings of
Conference  of  Chinese  Entomological Society,  Science  &  Technique  Press, Beijing, China. pp , 1098–1104.
Makkar,  H.  P.  S.,  Sidhuraju,  P.,  &  Becker,  K.
(2007). Plant  secondary  metabolites . Humana
Press. https://doi.org/10.1007/978-1-59745- 425-4 Matsushita,  H.,  Takenaka,  M.,  &  Ogawa,  H.
(2002).  Porcine  Pancreatic  α-Amylase Shows  Binding  Activity  towardN-Linked Oligosaccharides of Glycoproteins.
Journal  of  Biological  Chemistry , 277 (7),
4680–4686. https://doi.org/10.1074/jbc.M105877200
Negara,  A.  (2003).  Penggunaan  analisis  probit untuk  pendugaan  tingkat  kepekaan populasi  spodoptera  exigua  terhadap deltametrin di Daerah Istimewa
Yogyakarta. Informatika Pertanian , 12 , 1– 9.
Payan,  F.  (2004).  Structural  basis  for  the inhibition  of  mammalian  and  insect  α- amylases  by  plant  protein  inhibitors. Biochimica  et  Biophysica  Acta  (BBA)  - Proteins  and  Proteomics , 1696 (2),  171–
180.
https://doi.org/10.1016/j.bbapap.2003.1 0.012
Rani, P. U., & Rajasekharreddy, P. (2009). Toxic and  antifeedant  activities  of  Sterculia Foetida  (L.)  seed  crude  extract  against Spodoptera  litura  (F.)  and  Achaea  Janata (L.). Journal  of  Biopesticides , 2 (2),  161– 164.
Rao, M. S., Rao, C. R., Vennila, S., Manimanjari, D.,  Maheswari,  M.,  &  Venkateswarlu,  B. (2014). Estimation of number of generations  of  Spodoptera  litura Fab.  On peanut  in  India  during  near  and  distant future climate change scenarios. Scientific Research and Essays , 9 (7), 195–203.
S  Mann,  R.,  &  E  Kaufman,  P.  (2012).  Natural product  pesticides:  Their  development, delivery  and  use  against  insect  vectors. Mini-reviews  in  organic  chemistry , 9 (2),
185–202.
Sadek,  M.  M.  (2003).  Antifeedant  and  toxic activity  of  Adhatoda  vasica  leaf  extract against Spodoptera littoralis (Lep., Noctuidae). Journal of Applied Entomology , 127 (7), 396–404. https://doi.org/10.1046/j.1439-
0418.2003.00775.x
Saljoqi,  A.-U.-R.,  Khan,  J.,  &  Ali,  G.  (2015).
Rearing  of  Spodoptera  litura  (Fabricius) on  Different  Artificial  Diets  and  its Parasitization with Trichogramma chilonis (Ishii). Pakistan Journal of Zoology , 47 (1), 169–175.
Selvaraj,  S.,  Adiroubane,  D.,  Ramesh,  V.,  &
Narayanan,  A.  L.  (2010).  Impact  of ecological  factors  on  incidence  and development  of  tobacco  cut  worm, Spodoptera  litura  Fabricius  on  cotton. Journal of biopesticides , 3 (1), 43–46.
Shahout,  H.,  Xu,  J.,  Yao,  X.,  &  Jia,  Q.  (2011). Influence  and  mechanism  of  different host  plants  on  the  growth,  development and,  fecundity  of  reproductive  system  of common  cutworm  Spodoptera  litura (Fabricius)(Lepidoptera: Noctuidae).
Asian J. Agric. Sci , 3 (4), 291–300.
Singh,  R.  N.,  &  Saratchandra,  B.  (2005).  The development  of  botanical  product  with special  reference  to  seri-ecosystem.
Caspian Journal of Environmental Sciences , 3 (1), 1–8.
Soemirat,  J.,  &  Ariesyady,  H.  D.  (2015).
Toksikologi lingkungan . Yogyakarta:
Universitas Gadjah Mada Press.
Suryaningsih,  E.,  &  Hadisoeganda,  W.  W.
(2004). Pestisida botani untuk
mengendalikan  hama  dan  penyakit  pada tanaman sayuran (1 ed.). Bandung:  Balai Penelitian Tanaman Sayuran.
Sutoyo,  &  Wiriodmodjo,  B.  (1997).  Uji insektisida botani daun nimba (Azadirachta indica), daun pahitan (Eupatorium inulifolium) dan daun kenikir (Tagetes  spp)  terhadap  kematian  larva Spodoptera litura F. (Lepidoptera: Noctuidae)  pada  tanaman  tembakau. Prosiding Kongres Perhimpunan Entomologi  Indonesia  V  dan  Symposium Entomologi , 317–321.
Tavares,  W.  de  S.,  de  Sousa  Freitas,  S.,
Grazziotti, G. H., Parente, L. M. L., Lião, L. M.,  &  Zanuncio,  J.  C.  (2013).  Ar- turmerone from Curcuma longa (Zingiberaceae)  rhizomes  and  effects  on Sitophilus zeamais (Coleoptera: Curculionidae) and Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae).
Industrial  Crops  and  Products , 46 ,  158– 164.
https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2013.0
1.023
Tenrirawe,  A.  (2011).  Pengaruh  ekstrak  daun sirsak  (Annona  muricata  L.)  terhadap mortalitas  larva  Helicoverpa  armigera  H. pada jagung. Seminar Nasional Serelia , 1 , 521–529.
Untung,  K.  (2007). Kebijakan  Perlindungan Tanaman . Gadjah Mada University Press. Zhang,  J.  S.,  Guan,  J.,  Yang,  F.  Q.,  Liu,  H.  G., Cheng, X. J., & Li, S. P. (2008). Qualitative and  quantitative  analysis  of  four  species of  Curcuma  rhizomes  using  twice development  thin  layer  chromatography. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis , 48 (3), 1024–1028. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2008.07.0