e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan Volume I No 1 Oktober 2012 ISSN: 2302-3600

## HORMON TESTOSTERON DAN ESTRADIOL 17β DALAM PLASMA
DARAH INDUK BETINA IKAN BAUNG ( Mystus nemurus )

## TESTOSTERON AND 17β - ESTRADIOL HORMONE
CONCENTRATION IN BLOOD PLASMA BAUNG CATFISH ( Mystus nemurus ) FEMALE BROODSTOCK
I Gede Deta Kencana Putra * , Wardiyanto * dan Tarsim *

## ABSTRACT †
The research about application of bovine testicular e xtract on female baung catfish ( Mystus nemurus ) was  done for determining  an  optimum dosage and application periode  of  bovine  testicular e xtract.  The  aim  of  this  research  is  to  increase testosteron  and  estradiol  17β  concentration  on  blood  as  gonad  developing hormone  on  female  baung  catfish  broodstock.  This    research  used  randomize blocked design with five treatments and three groups. Dosages of bovine testicular e xtract  which  used  as  treatment  were  0;  0,75;  1,5;  2,5  and  4,5  mg/kg  feed.  The periodes  of  bovine  testicular e xtract  applied  were  10;  20  and  30  days.  This research used female baung catfish with average body weight of 400-500 g. This research  done  on  July-September  2011  at  Balai  Benih  Ikan  Sentral  (BBIS) Purbolinggo,  East  Lampung.  Testosterone  and  estradiol  17β  concentration was determined by Radioimmunoassay (RIA) technique at  Indonesian  Research Institute  for  Animal  Production  Ciawi,  West  Java.  The  result  showed  that  the application  of  bovine  testicular e xtract  could  increase  testosteron  and  estradiol 17β  concentration  in  blood  plasma.  Dosage  2.5  mg/kg  feed  could  increase testosterone  concentration  on  278.91  ±  66.76  pg/ml  and  estradiol  17β concentration  on  606.25  ±  187.97  pg/ml.  The  application  periode  of  Bovine Testicular Extract  for  30  days  could    increase  testosteron  and  estradiol  17β concentration on 254.38 ± 93.84 pg/ml and 514.55 ± 137.22 pg/ml.
Key words: bovine testicular extract, estradiol  17β,  testosterone, radioimmunoassay, blood plasma
* Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Lampung
† Corresponding Author: jrtbp@yahoo.com

## Pendahuluan
Baung (Mystus  nemurus) merupakan jenis  ikan  lokal  di  beberapa  sungai  di Indonesia  meliputi  Sumatera,  Jawa, Kalimantan  dan  Sulawesi.  Ikan  ini hidup  pada  kedalaman  2  m  sampai  40 m  dan  menyebar  dari  hulu  sungai hingga  ke  muara  sungai  (Tang  dkk., 2000).  Ikan baung dapat memijah satu kali  dalam  setahun.  Ikan  baung memijah sekitar Oktober sampai Desember  seperti  sebagian  besar  ikan memijah  di  perairan  umum  pada  awal atau  sepanjang  musim  hujan,  misalnya ikan-ikan dari famili catfish ( Siluridae, Claridae,
Pangasidae, Bagridae, Ariidae,  dan  Ictaluriidae )  (Yusuf, 2005).  Baung  mulai  dipijahkan  secara buatan  sejak  tahun  1998  di  BBPBAT Sukabumi.  Salah  satu  upaya  untuk dapat  memijahkan  ikan  baung  di  luar musim pemijahan adalah dengan memperoleh  induk-induk  yang  mampu matang gonad di luar musim pemijahan.
Cara  memperoleh  induk  matang  gonad dapat dilakukan  dengan rekayasa hormonal  sehingga  induk  ikan  dapat matang gonad dengan optimal. Hormon yang sudah digunakan untuk mempercepat  pematangan gonad induk ikan  yaitu  17α-metiltestosteron  dan LHRH-a  dengan  dosis  150  µg/kg  dan
25 µg/kg berat tubuh dapat mempercepat kematangan gonad belida ( Notopetrus chitala ) (Pamungkas,
2006).  Penggunaan  estradiol  17β  17β
(E2) dengan dosis 1 mg/kg berat tubuh dapat  meningkatkan  kadar  estradiol
17β  dalam  plasma  darah  untuk  proses vitelogenesis
pada balashark (Balantiocheilus  melanopetrus )  (Zairin dkk., 1996). Hormon 17α-
metiltestoteron  dapat  digunakan  untuk mempercepat  kematangan  gonad  ikan
balashark  yang  menunjukkan  bahwa pengamatan  pada  hari  ke-21  terjadi peningkatan  kadar  estradiol  17β  dan testosteron dalam plasma darah (Subagja, 2006).
Ekstrak  Testis  Sapi  (ETS)  diproduksi oleh  Badan  Tenaga  Nuklir  Nasional (BATAN).  ETS  diperoleh  dengan  cara memanfaatkan bahan lokal yang berasal dari testis sisa pemotongan sapi sehingga  memiliki  harga  yang  lebih terjangkau  yaitu  Rp  250.000  per  100 gram  dan  mampu  diproduksi  di  dalam negeri  dibandingkan  dengan  hormon 17α-metiltestoteron. ETS adalah produk olahan alami yang aman karena tidak menyisakan residu di lingkungan. ETS  mengandung  hormon  testosteron.
1  mg  ETS  mengandung  hormon testosteron sebesar 8,48 µg/ml. Kandungan testosteron yang terdapat di dalam ETS diharapkan dapat meningkatkan  kandungan  testosteron dalam  darah  sehingga  meningkatkan konsentrasi estradiol 17β yang dikonversi  oleh  enzim  aromatase.  Saat ini,  penelitian  tentang  pemanfaatan
ETS  masih  sangat  terbatas  pada  sex reversal  sehingga diperlukan penelitian tentang pemanfaatan ETS untuk memacu  perkembangan  gonad  ikan. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  dosis  dan  lama  pemberian ETS yang optimum untuk meningkatkan konsentrasi hormon testosteron  dan  estradiol  17β  pada darah sebagai hormon pemacu perkembangan  gonad  induk  betina baung.

## Bahan dan Metode
Pada tahap persiapan dilakukan beberapa kegiatan yang meliputi persiapan  kolam  dan  pemeliharaan induk.  Persiapan  kolam  dilakukan dengan melapisi kolam berukuran 30 x
15  x  1  m menggunakan  terpal. Selanjutnya  kolam  diisi  dengan  air sampai  ketinggian  sekitar  80  cm  dan dibiarkan sampai hari ke-7. Selanjutnya dilakukan  pemasangan  happa  sesuai pengacakan  yang  telah  dilakukan. Induk betina baung selanjutnya ditimbang dan diletakkan pada masing- masing  hapa  sebanyak  3  ekor.  Masa adaptasi  dilakukan  selama  7  hari dengan pemberian pakan buatan. Pemberian makan induk selama pemeliharaan  dilakukan  sebanyak  dua kali sehari sampai ikan kenyang. Pembuatan  pakan  yang  mengandung
ETS dilakukan dengan melarutkan ETS sesuai  dosis  pada  larutan  alkohol  70% sebanyak 50 ml. Larutan ETS selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam sprayer dan disemprotkan secara merata pada pakan yang telah disiapkan  berupa  pakan  tenggelam.
Pakan dikeringanginkan selama 24 jam agar alkohol menguap.
Induk  betina  baung  diberi  pakan  yang mengandung  ETS  sesuai  dosis  yaitu  0; 1;  2;  3;  4  mg/kg  pakan  dan pengelompokkan lama pemberian pakan  yaitu  10  hari,  20  hari,  30  hari.
Frekuensi  pemberian pakan dilakuakan 3  kali  sehari  yaitu  pada  pukul  07.00, 12.00 dan 17.00. pakan yang diberikan sebanyak  5%  dari  bobot  induk  betina baung.
Pengamatam untuk melihat respon ikan uji  terhadap  perlakuan  diamati  pada awal  dan  akhir  periode  penelitian dengan  mengambil  sampel  darah. Pengumpulan  data  dilakukan  dengan mengambil  darah  induk  baung  pada tiap  happa.  Ikan  yang  akan  diambil darahnya  dipingsankan  terlebih  dahulu menggunakan  minyak  cengkeh  dengan dosis  0,3  ml/liter  air.  Ikan  yang  telah pingsan  selanjutnya  diambil  darahnya menggunakan  alat  suntik  yang  telah
dilapisi  dengan  larutan  EDTA  untuk mencegah  penggumpalan  darah.  Darah diambil sebanyak 1-1,5 ml pada bagian pangkal  sirip  ekor.  Darah  selanjutnya ditampung  pada  tabung  polietilen.
Darah yang telah terkumpul selanjutnya disentrifuse dengan kecepatan  3000  rpm  selama  2-4  menit untuk  memisahkan  antara  sel  darah dengan  plasma  darah.  Plasma  darah ( supernatan ) yang diperoleh selanjutnya  ditampung  kembali  dalam tabung polietilen untuk diuji kandungan  testosteron  dan  estradiol 17β-nya. Plasma darah disimpan dalam freezer -20°C  untuk  mencegah  plasma darah  mengalami  kerusakan  (Zanuy et al., 1999). Uji kadar hormon testosteron dan estradiol 17β dilakukan di Balai Penelitian Ternak (BALITNAK)  Ciawi,  Jawa  Barat dengan  metode Radioimmunoassay
(RIA). Hasil pengamatan kadar hormon testosteron  dan  estradiol  17β  dalam darah  induk  betina  baung  diuji  dengan menggunakan  sidik  ragam  dengan selang kepercayaan 95% menggunakan software  SPSS  versi  19.  Hasil  yang diperoleh  terdapat  perbedaan  antara perlakuan yang diberikan, maka dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  dengan selang kepercayaan 95%.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemberian  ETS  yang  dicampurkan dalam  pakan  pada  dosis  0;  0,75;  1,5; 2,5; dan 4,5 mg/kg pakan menunjukkan bahwa  konsentrasi  hormon  testosteron secara berturut-turut dalam darah induk betina ikan baung sebesar 196,03 ± 24; 234,9 ± 94,69; 186,1 ± 88,02; 278,91 ± 66,76;  dan  177,2  ±  93,66  pg/ml. Konsentrasi hormon testosteron tertinggi  di  dalam  darah  induk  ikan baung  betina  terdapat  pada  pemberian
pakan  yang  dicampurkan  dengan  ETS pada  dosis  2,5  mg/kg    pakan  yaitu 278,91  ±  66,76  pg/ml.  Konsentrasi testosteron terendah terdapat pada dosis 4,5  mg/kg  yaitu  177,2  ±  93,66  pg/ml (Gambar 1).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemberian  pakan  yang  dicampurkan dengan ETS pada berbagai pengelompokkan  lama  pemberian  10, 20 dan 30 hari menghasilkan konsentrasi  hormon  testosteron  secara
berturut-turut  sebesar  185,7  ±  70,7;
218,83 ± 71,34;  254,38 ± 93,84 pg/ml. Konsentrasi hormon testosteron tetinggi  terdapat  pada  kelompok    lama pemberian ETS  selama 30 hari sebesar
254,38  ±  93,84  pg/ml  dan  konsentrasi hormon  testosteron  terendah  terdapat pada  kelompok  lama  pemberian  ETS selama  10  hari  sebesar  185,7  ±  70,7 pg/ml. (Gambar 2) .
*huruf superscript yang  sama  menunjuk  bahwa  perlakuan  tidak  berbeda  nyata  pada  selang kepercayaan 95%
Gambar  1.  Grafik  konsentrasi  rata-rata  testosteron  induk  betina  baung  pada berbagai dosis pemberian ETS.
*huruf superscript yang  sama  menunjuk  bahwa  perlakuan  tidak  berbeda  nyata  pada  selang kepercayaan 95%
Gambar  2.  Grafik  konsentrasi  hormon  testosteron  induk  betina  baung  pada berbagai pengelompokkan lama hari pemberian ETS.
196,03±24 a 234,90±94,69 a 186,10±88,02 a 278,91±66,76 a 177,22±93,66 a 0 50 100 150 200 250 300 350 400 K o ns ent ra si Tes to st er o n (pg /m l) Dosis ETS (mg/kg pakan) 0 0,75 1,5 2,5 4,5 170,98±48,11 a 218,53±71,34 a 254,38±93,84 a 0 50 100 150 200 250 300 350 400 K o ns ent ra si Tes to st er o n (pg /m l) Lama Pemberian ETS (Hari) 10 20 30
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemberian  ETS  yang  dicampurkan dalam  pakan  pada  dosis  0;  0,75;  1,5; 2,5; dan 4,5 mg/kg pakan menunjukkan bahwa  konsentrasi  hormon  estradiol 17β  secara  berturut-turut  dalam  darah induk betina ikan baung sebesar 461,41 ±  49,02;  392,53  ±  79,92;  515,91  ±
225,87;  606,25  ±  187,97  dan  374,15  ±
22,28  pg/ml.  Konsentrasi  hormon testosteron  tertinggi  di  dalam  darah induk  ikan  baung  betina  terdapat  pada pemberian  pakan  yang  dicampurkan dengan  ETS  pada  dosis  2,5  mg/kg pakan  yaitu  606,25  ±  187,97  pg/ml.
Konsentrasi testosteron terendah terdapat  pada  dosis  4,5  mg/kg  yaitu 374,15 ± 22,28 pg/ml (Gambar 3).
*huruf superscript yang  sama  menunjuk  bahwa  perlakuan  tidak  berbeda  nyata  pada  selang kepercayaan 95%
Gambar  3.  Konsentrasi  rata-rata  estradiol  17β  induk  betina  baung  pada  berbagai dosis pemberian ETS.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemberian  pakan  yang  dicampurkan dengan ETS pada berbagai pengelompokkan  lama  pemberian  10,
20 dan 30 hari menghasilkan konsentrasi  hormon  estradiol  17β secara  berturut-turut  sebesar  398,04  ±
75,66;  497,56  ±  200,78;    514,55  ± 137,22  pg/ml.  Konsentrasi  hormon estradiol  17β  tetinggi  terdapat  pada kelompok    lama  pemberian  ETS selama 30 hari sebesar 514,55 ± 137,22 pg/ml dan konsentrasi hormon testosteron  terendah  terdapat  pada kelompok lama pemberian ETS selama 10  hari  sebesar  398,04  ±  75,66  pg/ml.
(Gambar 4).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang dilakukan selama dua periode pengamatan    menunjukkan  bahwa konsentrasi  hormon  testosteron  pada induk  betina  ikan  baung  mengalami
peningkatan  untuk  setiap  dosis  yag diberikan. Pengamatan konsentrasi hormon  testosteron  yang  diperoleh pada  awal  periode  penelitian    yaitu 116,00;  186,57;  57,03;  155,63  dan 134,73 pg/ml. Pengamatan yang dilakukan  di  akhir  periode  penelitian menunjukkan bahwa
konsentrasi hormon  testosteron  pada  induk  ikan baung  secara  berurutan  pada  berbagai dosis pemberian ETS  0;  0,75;  1,5;  2,5; dan  4,5  mg/kg  pakan    yaitu      196,03; 234,90;  186,10;  278,91  dan    177,22 pg/ml. Pengamatan konsentrasi hormon estradiol  17β  pada  awal  periode penelitian  yaitu    166,46;  172,90; 123,22;  184,52  dan  224,59  pg/ml  dan pada  pengamatan  pada  akhir  periode penelitian    menjadi  461,4;  392,53; 515,91;  606,25  dan  374,15  pg/ml (Tabel 1).
461,41 ± 49,02 a 392,53 ± 79,92 a 515,91 ± 225,87 a 606,25 ± 187,97 a 374,15 ± 22,28 a 0 200 400 600 800 1000 K o nse nt a si Est ra dio l (pg /m l) Dosis ETS (mg/kg pakan) 0 0,75 1,5 2,5
4,5
*huruf superscript yang  sama  menunjuk  bahwa  perlakuan  tidak  berbeda  nyata  pada  selang kepercayaan 95%
Gambar  4.  Konsentrasi  hormon  estradiol  17β  induk  betina  baung  pada  berbagai pengelompokkan lama hari pemberian ETS.
Tabel 1.   Pengamatan  konsentrasi  hormon  testosteron  dan  estradiol  17β    induk betina  ikan baung pada 2 periode pengamatan.
Dosis ETS (mg/kg pakan) Konsentrasi Testosteron (pg/ml)  Konsentrasi Estradiol 17β (pg/ml) awal akhir awal akhir 0 116,00 196,03 166,46 461,41 0,75 186,57 234,90 172,90 392,53 1,5 57,03 186,10 123,22 515,91 2,5 155,63 278,91 184,52 606,25 4,5 134,73 177,22 224,59 374,15 Proses  perkembangan  dan  pematangan gonad diprediksi melalui sintesis testosteron  dan  estradiol  17β,  oleh sebab  itu  konsentrasi  steroid  dapat digunakan  sebagai  indikator  aktivitas dan  kematangan  gonad  (Zairin  dkk., 1992).    Pada  studi  ini  konsentrasi hormon  testosteron  pada  akhir  periode penelitian  menunjukkan  konsentrasi hormon  testosteron  mencapai  nilai kisaran  177,2  ±  93,66  pg/ml  sampai dengan  278,91 ± 66,76 pg/ml. Dosis  terbaik  pemberian  ETS  yang dicampurkan  di  dalam  pakan  untuk dapat meningkatkan konsentrasi hormon  testosteron  dalam  darah  induk betina  baung  yaitu  pada  dosis  2,5 mg/kg  pakan.    Konsentrasi  hormon testosteron  tinggi  akan    mampu
memasok  ketersedian  estradiol  17β yang memadai untuk proses vitelogenesis, dimana hormon testosteron  akan  dikonversi  menjadi estradiol  17β    oleh  enzim  aromatase pada  sel  granulosa  (Susana,  2008). Konsentrasi  hormon  testosteron  yang diperoleh  pada  dosis  pemberian  ETS sebanyak  2,5    mg/kg  pakan  adalah sebesar 278,91 ± 66,76 pg/ml.
Berdasarkan  lama  waktu  pemberian, ETS  yang  diberikan  secara  oral  dalam pakan  menunjukkan  bahwa  selama  30 hari  mampu  meningkatkan  konsentrasi hormon  testosteron  paling  tinggi  yaitu sebesar  254,38  ±  93,84  pg/ml.  Hal serupa  telah  dilaporkan  pada  ikan jambal  Siam  setelah  disuntik  dengan testosteron 100µg/kg pada penyuntikan
398,04 ± 75,66 a
497,56 ± 200,78 a
514,55 ± 137,22 a 0 100 200 300 400 500 600 700 800 K o ns ent ra si Es tra dio l (pg /m l) Lama Pemberian ETS (Hari) 10 20 30
hari ke-30 mampu meningkatkan kadar hormon  testosteron  di  dalam  darah ikan.  Pemberian  ETS  dalam  jangka waktu  yang lebih lama akan lebih baik dalam  meyediakan  testosteron  yang memadai  sebagai  materi  sintesis  dari estradiol 17β untuk proses vitelogenesis. Pemberian ETS pada induk betina ikan baung  dengan  dosis  sebesar  2,5  mg/kg pakan  mampu memberikan  konsentrasi hormon  estradiol  17β  paling  tinggi dibandingkan  dengan  dosis  lainnya. Konsentrasi hormon estradiol 17β yang diperoleh  dengan  pemberian  ETS  pada dosis  2,5  mg/kg  pakan  yaitu  sebesar 606,25  ±1  87,97  pg/ml.  Hal  ini menunjukkan  kondisi  yang  sama  pada konsentrasi  hormon  testosteron  yaitu konsentrasi hormon testosteron tertinggi  terdapat  pada  pemberian  ETS sebanyak  2,5  mg/kg  berat  badan  ikan. Sedangkan,  pada  pemberian  ETS sebanyak  4  mg/kg  berat  badan  ikan menghasilkan konsentrasi hormon estradiol 17β paling rendah. Djojosoebagio  (1996)  mengemukakan bahwa  jika  kadar  hormon  estrogen yang  dihasilkan  oleh  gonad  dalam darah melebihi jumlah yang diperlukan,  hormon  estrogen  ini  akan mengirim  sinyal  ke  hipofisis  untuk mengurangi  GtH-I.  Selain  itu,  hormon estrogen juga dapat menghambat hipotalamus untuk memproduksi GnRF
sehingga sekresi GtH-I menjadi berkurang. Berkurangnya sekresi GtH-I oleh  hipofisis  secara  langsung  akan menghasilkan penurunan sintesis estradiol  17β  oleh  lapisan  sel  teka  dan granulosa.  Selain  itu,  tubuh  memiliki keseimbangan hormon dimana jika ada hormon  dari  luar  yang  yang  diberikan berlebihan  maka  kelebihan  hormon akan dikeluarkan dari tubuh (Djojosoebagio, 1990). Selama  dua  periode  pengamatan  yang dilakukan pada awal periode penelitian dan akhir periode penelitian menunjukkan  bahwa  pemberian  ETS sebanyak  2,5  mg/kg  pakan  selama  30 hari secara oral melalui pakan memberikan  peningkatan  konsentrasi hormon  testosteron  dalam  darah  yang paling  tinggi  dibandingkan  dengan dosis  lainya  yaitu  dari  155,63  pg/ml pada  awal  penelitian    menjadi  278,91 pg/ml pada akhir penelitian. Peningkatan konsentrasi hormon estradiol  17β  tertinggi  pada  awal penelitian  yaitu  184,02  pg/ml  menjadi 606,25  pg/ml  pada  akhir  penelitian. Peningkatan konsentrasi hormon testosteron  dan  estradiol  17β  sangat dipengaruhi  perbedaan  spesies  yang berhubungan dengan teknik pemberian, dosis  dan  jenis  hormon  seperti  pada Salmo  gairdneri diperoleh  bahwa peningkatan kadar estradiol 17β plasma darah  tertinggi  terjadi  pada  hari  ke  28 setelah implantasi estradiol 17β.

## Daftar Pustaka
Djojosoebagio  A.S.  1996.  Fisiologi Kelenjar  Endokrin  Volume  ke- 1.  Bogor:PAU  Ilmu  Hayat. Intitut Pertanian Bogor. Pamungkas,  A.  J.  2006.  Efektifitas Hormon  17α-Metiltestosteron dan  LHRH-α  dalam  Mencapai
Tingkat  Kematangan  Gonad Siap Memijah pada Ikan Belida (Notopetrus chitala). Tesis Program Pascasarjana. IPB. Bogor. Subagja,  J.  2006.  Implantasi  LHRH-α dengan  Kombinasi  Dosis  17α- Metiltestosteron terhadap Perkembangan Gonad Ikan Balashark (Balantiocheilus melanopetrus BLEEKER).
Tesis  program  pascasarjana.
IPB. Bogor. Susana,  B.P.  2008.  Growth  Hormone and Somatolactin Function During  Sexual  Maturation  of Female Atlantic Salmon. Dissertation.  Departement  of Zoology/Zoophisiology. Gotenborg University. Sweden. Tang, U. M., R. Affandi, R. Widjajakusuma,  H.  Setijanto, dan  M.  F.  Rahardjo.  2000. Pengaruh Salinitas terhadap gradient  Osmotik  dan  Tingkat Kelangsungan Hidup Larva Ikan Baung. Hayati 7:97-100.
Yusuf,  N.  S.  2005.  Efektifitas  Hormon LHRH  analog  dan  Estradiol- 17β  melalui  Emulsi  W/O/W
terhadap  Perkembangan  Gonad Ikan  Baung.  Tesis  program pascasarjana.  IPB.  Bogor.  7-10 hal.
Zairin,  M.  JR.,  K.  Sumartadinata  dan
H.  Arafah.  1996.  Aktivasi Proses Vitelogenesis untuk Pematangan Gonad ikan Balashark (Balantiocheilus melanopetrus BLEEKER) Betina. Biosfera 5: 39-47. Zanuy,  S.,  M.  Carillo,  J.  Mateos,  V. Trudeau  and  O.  Kah.  1999. Effect of Sustained administration of Testoterone in Pre-pubertal Sea Bass (Dicentrartus labrax L). Aquaculture 177: 21-35.