AKTIVITAS ANTIHIPERTENSI EKSTRAK ETANOL DAUN ALPUKAT ( Persea americana Mill.) PADA TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus )
Antihypertension activity test of avocado leaf ethanol extract (Persea americana mill.) In white rats (Rattus norvegicus)
Penulis / Author (s) Sitti Fauziah Noer 1 1,2,3 Universitas Islam Makassar, Makassar Nur Alfiah Irfayanti 2 Irpan Muna Rahmat 3
*e-mail korespondensi: irfananakmuna@gmail.com DOI:https://doi.org/10.32382/mf.v19i2.121 ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Keywords: The avocado leaf plant may lower blood pressure due to its content of  flavonoid  compounds.  These  compounds  prevent  the  enzymatic conversion from angiotensin I to angiotensin II. This study aims to assess the antihypertensive activity of ethanol extract from avocado leaves (Persea americana Mill.) on white rats (Rattus norvegicus). The powder of avocado leaf simplicia was extracted by maceration using 70% ethanol. Fifteen white rats were divided into 5 groups, each consisting of 3 rats. Blood pressure measurements were taken before induction, and then the rats were induced with 2% NaCl and 11.07  mg/kgBB  prednisone.  Blood  pressure  was  measured  after induction using the tail-cuff auto-pickup method and a non-invasive device  (CODA).  The  research  results  were  statistically  analyzed using a completely randomized design (CRD). The average reduction in systolic and diastolic blood pressure in the groups was as follows: dose  125  mg/kgBB  (28.01/29.79%);  dose  250  mg/kgBB (41.06/38.22%);  dose  375  mg/kgBB  (48.47/41.12%);  positive control (40.97/28.65%), and negative control (5.76/2.8%). Ethanol extract  from  avocado  leaves  (Persea  americana  Mill.)  at  250 mg/kgBB  and  375  mg/kgBB  of  rat  body  weight  showed antihypertensive activity that was not significantly different from the positive control, captopril. However, at a dose of 125 mg/kgBB, there was a significant difference from the positive control and a highly significant  difference  from  the  negative  control  CMC  1%.  For diastolic  blood  pressure,  the  extract  had  antihypertensive  activity that  was  not  significantly  different  from  the  positive  control
Persea americana Mill.,
Blood Pressure,
Rattus norvegicus
Kata Kunci
Alpukat
Tekanan Darah Tikus Putih
Poltekkes Kemenkes Makassar

## Media Farmasi
https://ojs3.poltekkes-mks.ac.id/index.php/medfar/

## Open access article
https://doi.org/10.32382/mf.v19i2.121
captopril,  but  there  was  a  significant  difference  from  the  negative control CMC 1%.
Tanaman  alpukat  dapat  memiliki  efek  menurunkan  tekanan  darah karena mengandung senyawa flavonoid. Senyawa ini bekerja dengan cara  mencegah  pengubahan  enzimatis  dari  angiotensin  I  menjadi angiotensin II. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas antihipertensi ekstrak etanol daun alpukat (Persea americana Mill.) pada tikus putih (Rattus novergicus). Serbuk simplisia daun alpukat diekstraksi  secara  maserasi  dengan  menggunakan  etanol  70%. Sebanyak 15 ekor tikus putih dibagi menjadi 5 kelompok, dengan tiap kelompok  terdiri  atas  3  ekor  tikus.  Pengukuran  tekanan  darah dilakukan sebelum induksi, kemudian tikus diinduksi dengan NaCl 2%  dan  prednison  11,07  mg/kgBB.  Tekanan  darah  diukur  setelah induksi  menggunakan  metode  tail-cuff  auto-pickup  dan  alat  non- invasive (CODA). Hasil penelitian dianalisis secara statistik dengan rancangan acak lengkap (RAL). Rata-rata penurunan tekanan darah sistolik  dan  diastolik  pada  kelompok  dosis  125  mg/kgBB (28,01/29,79%);  dosis  250  mg/kgBB  (41,06/38,22%);  dosis  375 mg/kgBB  (48,47/41,12%);  kontrol  positif  (40,97/28,65%),  dan kontrol  negatif  (5,76/2,8%).  Ekstrak  etanol  daun  alpukat  (Persea americana Mill.) pada dosis 250 mg/kgBB dan 375 mg/kg BB tikus menunjukkan  aktivitas  menurunkan  tekanan  darah  sistolik  yang tidak  berbeda  nyata  dengan  kontrol  positif  captopril.  Sementara pada dosis 125 mg/kgBB, terdapat perbedaan nyata dengan kontrol positif dan perbedaan sangat nyata dengan kontrol negatif CMC 1%. Untuk  tekanan  darah  diastolik,  ekstrak  ini  memiliki  aktivitas menurunkan  tekanan  darah  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan kontrol positif captopril, namun terdapat perbedaan nyata dengan kontrol negatif CMC 1%.

## PENDAHULUAN
WHO  menyebutkan  sekitar  972  juta orang  atau  26,4%  orang  diseluruh  dunia mengidap  hipertensi,  angka  ini  kemungkinan meningkat  menjadi  29,2%  di  tahun  2025.  Dari 972  pengidap  hipertensi,  333  juta  berada  di negara  maju  dan  639  juta  sisanya  berada  di negara berkembang, temasuk Indonesia. Hingga saat  ini,  hipertensi  masih  menjadi  tantangan besar  di  Indonesia.  Manakala  di  Sulawesi Selatan,  prevalensi  hipertensi  yang  didapatkan melalui  pengukuran  umur  ≥  18  tahun  sebesar 31,68%,  tertinggi  di  Soppeng  (42,57%),  diikuti Pinrang  (36,56%),  Tana  Toraja  (36.23%)  dan Bantaeng (35,12%). Hipertensi dianggap sebagai kondisi  medis  dimana  tekanan  darah  arteri meningkat  terus  menerus,  seseorang  dapat dikatakan hipertensi jika tekanan darah diastolik lebih dari 90 mmHg dan tekanan darah sistolik 140 mmHg atau lebih ( Wells et al ., 2017 ).
Hipertensi  primer  tanpa  komplikasi terkadang tidak memiliki gejala awal, sedangkan pasien  dengan  hipertensi  sekunder  mungkin memiliki berbagai gejala, termasuk sakit kepala, berkeringat,  takikardia,  palpitasi,  dan  hipotensi
ortostatik (Wells et  al .,  2017 ).  Obat  hipertensi yang berasal dari sintetik memiliki efek samping bagi penggunanya contohnya obat Angiotensin- Converting  Enzime  Inhibitors (ACEI)  dimana efek samping yang paling menghawatirkan dari obat  ACEI  ( Angiotensin-Converting  Enzime Inhibitors )  adalah neutropenia,  agranulositosis, proteinuria, glomerulonephritis dan gagal ginjal akut ( Wells et al ., 2017 ).
Masyarakat  mengetahui  potensi  daun alpukat  sebagai  buah  dan  obat  herbal. Kebanyakan  masyarakat  telah  menggunakan daun alpukat secara ekstensif sejak zaman kuno. Daun  alpukat  telah  digunakan  sebagai  obat alternatif  pengganti  obat  antihipertensi  yang harganya  relatif  mahal  dan  harus  dikonsumsi oleh  penderita  hipertensi  sepanjang  hidupnya ( Bappenas, 2018 ; Setiawan, 2018 ). Daun  alpukat  ( Persea  americana Mill.) adalah  bagian  tanaman  yang  dikenal  memiliki efek  menurunkan  tekanan  darah  dalam pengobatan  tradisional.  Menurut  pengobatan tradisional,  mengonsumsi  tujuh  lembar  daun alpukat  yang  direbus  oleh  masyarakat  diyakini dapat  memanfaatkan  metabolit  sekunder
tanaman,  khususnya  flavonoid  dan  alkaloid, yang  berperan  dalam  pengobatan  hipertensi ( Mardiyaningsih  &  Ismiyati,  2014 ).  Skrining fitokimia yang dilakukan oleh Elisa et al ., (2021) menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  dari  daun alpukat  mengandung  senyawa  flavonoid  yang positif.  Penelitian  lebih  lanjut  menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari daun alpukat ( Persea americana Mill.)  menunjukkan  efek  paling signifikan  dalam  menurunkan  tekanan  darah pada  dosis  250  mg/kg  berat  badan  pada  tikus putih.  Hasil  penelitian  menunjukkan  penurunan persentase  tekanan  sistolik  sebesar  5,87±0,63% dan tekanan diastolik sebesar 10,96±6,62%, yang secara  statistik  signifikan  (p  <  0,05) dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif.
Terdapat beberapa faktor yang berpengaruh proses ekstraksi dimana hal ini yang dapat  mempengaruhi  jumlah  kadar  suatu senyawa,  salah  satunya  adalah  konsentrasi pelarut  yang  digunakan  pada  proses  ekstraksi. Penelitian  yang  dilakukan Elisa et  al .,  (2021) pada  prosedur  ekstraksi  menggunakan  pelarut etanol  96%.  Pelarut  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  etanol  70%  karena pengekstrakan  senyawa  flavonoid  lebih  efektif dibandingkan  dengan  menggunakan  pelarut metanol.  Etanol  70%  dipilih  karena  lebih  polar dibandingkan  dengan  etanol  96%,  sehingga senyawa flavonoid yang bersifat polar akan lebih larut dalam etanol 70%. Selain itu, penggunaan pelarut  etanol  di  atas  70%  dianggap  kurang efektif  untuk  melarutkan  senyawa  flavonoid dengan  berat  molekul  rendah  ( Kemit et  al ., 2016 ).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka permasalahan pada penelitian ini adalah apakah ekstrak  etanol  70%  daun  alpukat  ( Persea americana Mill.)  asal  Kabupaten  Bulukumba memiliki aktivitas antihipertensi pada tikus putih ( Rattus  novergicus )  dengan  parameter  sistolik dan diastolik?
Tujuan  pada  penelitian  ini  yaitu  untuk mengetahui  aktivitas  antihipertensi  ekstrak etanol  70%  daun  alpukat  ( Persea  americana Mill.)  asal  Kabupaten  Bulukumba  pada  tikus putih  ( Rattus  novergicus )  dengan  parameter sistolik dan diastolik.
Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah memberikan  informasi  mengenai  potensi manfaat daun alpukat ( Persea americana Mill.) yang berasal dari Kabupaten Bulukumba terkait dengan penurunan tekanan darah.

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan yang Digunakan Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat pengukur tekanan darah
Tail-Cuff  Auto-Pickup  Non  Invasif CODA ® , bejana  maserasi,  cawan  porselin,  gelas  kimia (pyrex),  gelas  ukur  (pyrex),  kertas  saring,  labu tentukur (pyrex), lumpang dan alu, rotary vacum evaporator (Heidolph), spuit, timbangan hewan dan timbangan analitik.
Sampel  segar  daun  alpukat  ( Persea americana Mill.) yang telah dikumpulkan dicuci bersih  dengan  menggunakan  air  mengalir, ditiriskan  lalu  ditimbang  kemudian  dipotong– potong  kecil,  setelah  itu  dikeringkan  dibawah sinar matahari secara langsung dengan tutup kain hitam  selama  3  hari,  setelah  kering  kemudian ditimbang  dan diserbukkan lalu diayak dengan menggunakan ayakan mesh 40.

## Pengambilan dan pengolahan sampel
Daun  alpukat  diperoleh  dari  Desa Pantama,  Kec.  Kajang,  Kab.  Bulukumba. Pengambilan  sampel  dilakukan  secara  manual dengan  cara  memetik  daunnya.  Sampel  segar daun  alpukat  ( Persea  americana Mill.)  yang telah  dikumpulkan  dicuci  bersih  dengan menggunakan  air  mengalir,  ditiriskan  lalu ditimbang  kemudian  dipotong–potong  kecil, setelah  itu  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari secara langsung dengan tutup kain hitam selama 3 hari, setelah kering kemudian ditimbang  dan diserbukkan  lalu  diayak  dengan  menggunakan ayakan mesh 40.

## Proses ekstraksi
Serbuk  simplisia  daun  alpukat  ( Persea americana Mill.)  diekstraksi  melalui  metode maserasi.  Proses  dimulai  dengan  menimbang serbuk simplisia sebanyak 250 g, yang kemudian dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi.  Sampel ini  dibasahi  terlebih  dahulu  dengan  cairan penyari  etanol  70%  dan  dibiarkan  meresap selama  kurang  lebih  15  menit.  Setelah  itu, ditambahkan lagi pelarut hingga serbuk simplisia terendam  sepenuhnya,  dengan  jumlah  pelarut sebanyak  1500  mL.  Wadah  maserasi  ditutup rapat  dan  dibiarkan  selama  3  hari  pada  suhu ruang,  sesekali  diaduk  dalam  bejana  tertutup untuk  menjaga  kestabilan,  serta  terlindung  dari paparan  langsung  sinar  matahari.  Setelah  masa maserasi,  larutan  tersebut  disaring.  Filtrat  yang dihasilkan  diambil,  dan  residu  dari  proses maserasi tersebut diulangi dengan menggunakan pelarut yang sama sebanyak 1000 mL, kemudian disaring  lagi.  Filtrat  dari  hasil  maserasi  kedua tersebut  kemudian  diuapkan  menggunakan rotary  evaporator  hingga  diperoleh  ekstrak kental. Ekstrak tersebut selanjutnya dikeringkan dan ditimbang untuk mendapatkan berat ekstrak akhir.

## Pembuatan Larutan Koloidal CMC 1% b/v
Dalam  prosedur  ini,  sebanyak  1  gram CMC ( Carboxymethyl cellulose ) ditimbang dan secara  perlahan  dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer yang berisi air panas sebanyak 50 mL dengan suhu mencapai 70°C. Selama proses ini, larutan  diaduk  secara  hati-hati  untuk  mencapai kehomogenan. Selanjutnya, larutan ini dialirkan ke  dalam  labu  tentukur  berukuran  100  mL  dan dilengkapi  volumenya  dengan  penambahan  air suling  hingga  mencapai  tanda  batas  yang ditentukan.  Setelah  itu,  larutan  ditempatkan dalam wadah yang rapat dan tertutup secara rapat untuk penggunaan atau penyimpanan selanjutnya.
Pembuatan Larutan NaCl 2% b/v Diimbang  2-gram  NaCl,  masukkan  ke dalam  botol  takar,  tepatkan  dengan  air  suling sampai tanda 100 ml dan homogenkan.

## Pembuatan Suspensi Tablet Prednison 0,05%
Dalam  penghitungan  dosis  untuk  tikus yang  memiliki  berat  terberat,  pertama-tama dihitung  konsentrasi  larutan  stok  yang  akan digunakan. Setelah itu, sejumlah tablet prednison ditimbang untuk mendapatkan berat rata-ratanya, lalu  dihaluskan.  Kemudian,  dihitung  jumlah serbuk  prednison  yang  akan  digunakan,  dan beratnya  pun  diukur.  Selanjutnya,  dihitunglah konsentrasi  larutan  stok  sebenarnya.  Setelah konsentrasi  larutan  stok  ditentukan,  selanjutnya CMC 01% dikembangkan. Prednison kemudian disuspensikan dalam larutan CMC 01%, proses ini  dimulai  dengan  memasukkan  larutan  CMC dan  prednison  ke  dalam  labu  takar,  selanjutnya tambahkan  aquadest  secara  perlahan  hingga mencapai  tanda  batas  dalam  labu  takar,  sambil terus  diaduk  hingga  mencapai  kehomogenan yang diinginkan.

## Pembuatan Bahan Kontrol Positif
Dalam  prosedur  ini,  10  tablet  captopril ditimbang  untuk  menghitung  bobot  rata-rata setiap  tablet.  Setelah  itu,  tablet  ditempatkan  ke dalam  mortar  dan  digerus  hingga  mencapai tekstur  yang  halus  dan  homogen.  Proses penggerusan bertujuan untuk memastikan bahwa bahan  aktif  dari  tablet,  dalam  hal  ini  captopril, terdistribusi  secara  merata  dan  dapat  dengan mudah diukur atau diambil dalam percobaan atau formulasi selanjutnya.. Serbuk captopril disiapkan sesuai dengan dosis yang akan digunakan yaitu 2,25 mg/kg berat badan tikus, dibuat sebanyak 100 mL, ditimbang sejumlah 54.45 mg serbuk c aptopril, kemudian
ditempatkan dalam mortar dan disuspensikan secara bertahap dalam CMC 1%, homogenkan, kemudian dibuat suspensi CMC 1% hingga 100 mL dalam labu ukur dan diisi sampai tanda.
Pembuatan  suspensi  ekstrak  etanol  daun Alpukat ( Persea americana Mill.) Prosedur  ini  melibatkan  pembuatan suspensi dari ekstrak etanol daun alpukat (Persea americana Mill.) untuk dosis 125 mg/kgBB, 250 mg/kgBB,  dan  375  mg/kgBB.  Masing-masing ekstrak etanol daun alpukat seberat 0,625 g, 1,25 g,  dan  1,875  g  ditimbang  dan  dipindahkan  ke dalam  lumpang.  Selanjutnya,  bahan  tersebut disuspensikan dengan CMC 1% secara bertahap sambil  digerus  hingga  homogen.  Setelah mencapai  homogenitas  yang  diinginkan, suspensi  tersebut  dimasukkan  ke  dalam  labu takar berukuran 100 mL. Volumenya dilengkapi hingga  mencapai  tanda  batas  yang  ditentukan. Proses  ini  bertujuan  untuk  memastikan  bahwa suspensi  yang  dihasilkan  memiliki  konsistensi dan  kehomogenan  yang  baik  untuk  digunakan dalam percobaan atau formulasi selanjutnya.

## Pemilihan dan Penyiapan Hewan Uji Pemilihan Hewan Uji
Dalam  penelitian  ini,  hewan  uji  yang digunakan adalah tikus putih jantan yang sehat, berusia  sekitar  2-3  bulan,  dan  memiliki  berat badan antara 200 hingga 250 gram.

## Penyiapan  Hewan  Uji  dan  Pengelompokan Hewan Uji
Hewan  uji  telah  diadaptasi  dalam lingkungan laboratorium dengan suhu sekitar 25 ± 2°C dan terus diberikan pakan dan air minum. Setelah  diadaptasi,  bobot  badan  masing-masing hewan uji diukur. Tikus kemudian dikelompokkan  menjadi  5  kelompok  sesuai dengan  jumlah  perlakuan  yang  akan  diberikan. Setiap  kelompok  perlakuan  terdiri  dari  3  ekor tikus  dengan  demikian,  setiap  kelompok perlakuan  terdiri  dari  3  tikus  yang  akan mendapatkan perlakuan yang sama.

## Pengujian Terhadap Hewan Uji
Prosedur  pengujian  dimulai  dengan mengadaptasi semua hewan uji selama periode 2 minggu. Setelah periode adaptasi, tekanan darah awal masing-masing tikus diukur menggunakan alat  pengukur  tekanan  darah  Non  Invasif CODA®.  Setelah  itu,  seluruh  tikus  diinduksi dengan  pemberian  NaCl  2%  dan  prednison sebanyak  13,5  mg/kg  berat  badan  melalui  oral selama  14  hari.  Setelah  14  hari,  tekanan  darah
pada hewan uji diukur kembali, dan pada hari ke- 15  dilanjutkan  dengan  perlakuan  sesuai  dengan kelompok  masing-masing.  Hewan  uji  dibagi menjadi  5  kelompok,  dengan  masing-masing kelompok mendapatkan perlakuan tertentu.
a) Kelompok  I:  Diberi  ekstrak  etanol  daun alpukat (125 mg/kg BB)
b) Kelompok  II:  Diberi  ekstrak  etanol  daun alpukat (250 mg/kg BB)
c) Kelompok  III:  Diberi  ekstrak  etanol  daun alpukat (375 mg/kg BB)
d) Kelompok IV: Diberi captopril (10,89 mg/kg BB) sebagai kontrol positif.
e) Kelompok  V:  Diberi  suspensi  CMC  1% sebagai kontrol negatif Sebelum dilakukan perlakuan, hewan uji menjalani  puasa  selama  8  jam  di  mana  mereka tidak  diberikan  makanan,  hanya  diperbolehkan minum agar lambung hewan uji kosong dan tidak mempengaruhi  penyerapan  zat  yang  diberikan. Setelah  masa  puasa,  berat  badan  hewan  uji diukur  untuk  disesuaikan  dengan  volume pemberian zat perlakuan. Selanjutnya, hewan uji diberi  tanda  untuk  mempermudah  identifikasi dan pemantauan selama periode perlakuan.

## Pengukuran Tekanan Darah
Pengukuran  tekanan  darah  sistolik  dan diastolik pada tikus dilakukan melalui beberapa langkah. Pertama, dilakukan pengukuran tekanan darah awal sebelum tikus diinduksi, selanjutnya setelah  proses  induksi,  dan  terakhir  setelah pemberian  simplisia.  Metode  pengukuran tekanan  darah  yang  digunakan  adalah  metode Tail-Cuff  Auto-Pickup .  Proses  pengukuran tekanan darah non-invasif dimulai dengan tahap pemanasan  tikus  menggunakan warming  pad pada suhu 37°C hingga mencapai suhu optimum. Setelah itu, ekor tikus dijepit menggunakan alat occlusion  cuff  yang  dilengkapi  dengan  karet disposibel,  diikuti  oleh  pemasangan Volume Pressure Recorder (VPR) cuff sebagai detektor jantung. Cuff secara  otomatis  mengembang untuk  menekan  ekor  tikus  yang  mengalirkan darah,  dan  denyut  aliran  darah  akan  terdeteksi. Prinsip  pengoperasian  manset  tekanan  darah adalah bahwa manset otomatis akan mengembang  hingga  tekanan  darah  di  atas tekanan darah sistolik tikus. Pada titik ini, denyut nadi  akan  menghilang,  dan  tekanan  manset secara  perlahan  akan  menurun.  Ketika  tekanan darah  turun  di  bawah  tekanan  sistolik,  denyut nadi  akan  ditampilkan  di  layar  monitor.  Proses ini  memungkinkan  pengukuran  tekanan  darah yang akurat pada tikus melalui metode yang non- invasif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Hasil Perhitungan Persen Rendamen Ekstrak Etanol Daun Alpukat ( Persea americana Mill.)
Berat segar (g) Berat kering (g) Volume etanol 70% (mL) Bobot simplisia yang dimaserasi (g) Bobot ekstrak (g) Rendamen (%) 1719 707 2500 250 29,10 11,64 Tabel 2. Hasil Pengukuran Tekanan Darah Tikus ( Rattus norvegicus ) Pengujian Pengamatan 1 2 3 4 5 Berat Badan Tikus (g) 224,3 ±16,8 211,3±50,1 212,7±29,6 231,0±12,3 241,0±9,8 Penuruna tekanan Tekanan darah Sistolik (%) 28,01±5 41,06±7 48,47±3 40,97±19 5,76±3 Penuruna tekanan Tekanan darah Diastolik (%) 29,79±11 38,22±6 41,12±9 28,65±20 2,8±13 Keterangan Kelompok 1 : Ekstrak etanol daun alpukat 125 mg/kg BB Kelompok 2 : Ekstrak etanol daun alpukat 250 mg/kg BB Kelompok 3 : Ekstrak etanol daun alpukat 375 mg/kg BB Kelompok 4 : Kaptopril 10,89 mg/kg BB Kelompok 5 : Na.CMC 1%

## Pembahasan
Hipertensi  didefinisikan  sebagai  kondisi terus-menerus  meningkatannya  tekanan  darah arteri  melebihi  batas  normal.  Seseorang  dapat dianggap  mengalami  hipertensi  ketika  nilai tekanan  darah  diastolik  ( Diastolic  Blood Pressure ) lebih dari 90 mmHg dan nilai tekanan darah  sistolik  ( Systolic  Blood  Pressure ) mencapai  140  mmHg  atau  lebih  ( Wells et  al ., 2017 ).
Hipertensi  disebabkan  oleh  kondisi aterosklerosis  pada  arteri,  terutama  arteri  yang mengalir menuju aorta jantung. Pada kondisi ini, arteri  mengalami  pengerasan  dan  kekakuan, sementara aorta dan arteri kehilangan elastisitasnya  selama  berkontraksi.  Kehilangan elastisitas pada dinding arteri membuatnya sulit bagi  darah  untuk  mengalir  dengan  lancar  dari jantung ke seluruh tubuh. Tekanan darah tinggi yang terjadi sebagai akibatnya dapat menyebabkan  sejumlah  gejala  pada  organ sasaran,  termasuk  risiko  stroke,  penyakit  arteri koroner, dan masalah pada pembuluh darah dan otot  jantung.  Parameter  sistolik  mencerminkan keadaan jantung pada fase kontraksi, sementara parameter  diastolik  mencerminkan  keadaan jantung  pada  fase  relaksasi.  Kondisi  hipertensi dapat memengaruhi keduanya, sehingga mengganggu  fungsi  normal  jantung  dan meningkatkan  risiko  komplikasi  serius.  Oleh karena  itu,  penanganan  dan  pengelolaan hipertensi  sangat  penting  untuk  menjaga kesehatan  jantung  dan  mencegah  risiko komplikasi  yang  dapat  timbul (Isnaini  & Fulanah, 2019 ; Elisa et al ., 2021) . Sampel yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  daun  alpukat  ( Persea  americana Mill.).  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  efek  antihipertensi  ekstrak  etanol daun  alpukat  Kabupaten  Bulukumba  ( Persea americana Mill.)  pada  tikus  putih  ( Rattus novergicus )  terhadap  parameter  sistolik  dan diastolik.
Etanol  memang  sering  dipilih  karena memiliki beberapa keunggulan, seperti kemampuan  untuk  dengan  mudah  diuapkan, memiliki toksisitas rendah, dan tidak memerlukan  suhu  yang  sangat  tinggi  untuk proses pemekatan. Pemilihan etanol 70% sebagai pelarut dalam penelitian ini juga didasarkan pada pertimbangan  yang  baik.  Pelarut  etanol  70% dianggap  lebih  efektif  untuk  mengekstraksi senyawa flavonoid dibandingkan dengan etanol 96%, karena keberadaan air dalam pelarut dapat meningkatkan  kelarutan  senyawa  polar  seperti flavonoid.  Keberadaan  air  dalam  etanol  70% membuatnya  lebih  polar  dan  memungkinkan larutnya  lebih  banyak  senyawa  polar  seperti
flavonoid. Penggunaan etanol di atas 70% kurang efektif  untuk  melarutkan  senyawa  flavonoid yang  memiliki  berat  molekul  rendah.  Ini mungkin karena keberadaan kadar air yang lebih rendah  pada  etanol  dengan  konsentrasi  yang lebih  tinggi  dapat  mengurangi  daya  larut  untuk senyawa-senyawa tertentu. Sehingga, pemilihan etanol 70% sesuai dengan tujuan penelitian untuk mendapatkan  ekstrak  dengan  kandungan flavonoid yang optimal ( Kemit et al ., 2016 ). Penggunaan  captopril  sebagai  kontrol positif dalam penelitian ini memiliki dasar yang kuat.  Sebagian  besar  masyarakat  mengonsumsi tablet  captopril  sebagai  obat  antihipertensi, menjadikannya  pilihan  yang  relevan  sebagai kontrol  positif.  Tujuan  dari  menggunakan kontrol  positif,  dalam  hal  ini  captopril,  adalah untuk  memberikan  gambaran  tentang  potensi aktivitas  penurunan  tekanan  darah  dari  ekstrak etanol daun alpukat pada tikus. Captopril adalah obat  lini  pertama  yang  umumnya  digunakan untuk  mengatasi  tekanan  darah  tinggi.  Obat  ini termasuk dalam kelas penghambat ACE (enzim pengubah  angiotensin)  dan  berperan  dalam menghambat sistem renin-angiotensin- aldosteron.  Mekanisme  kerjanya  melibatkan blokade  konversi  angiotensin  I  menjadi angiotensin  II,  menyebabkan  vasodilatasi (pelebaran  pembuluh  darah)  dan  penurunan sekresi aldosteron. Vasodilatasi yang dihasilkan langsung berkontribusi pada penurunan tekanan darah, sementara pengurangan sekresi aldosteron mengakibatkan  ekskresi  air  dan  natrium,  serta retensi kalium. Kombinasi efek ini memberikan dampak  positif  dalam  menangani  hipertensi. Oleh  karena  itu,  pemilihan  captopril  sebagai kontrol  positif  memberikan  dasar  yang  rasional untuk  menilai  potensi  aktivitas  penurunan tekanan  darah  dari  ekstrak  etanol  daun  alpukat ( Syarif, 2007 ; Harvey, 2014 ).
Metode  pengukuran  tekanan  darah  non- invasif  dilakukan  dengan  menggunakan  manset ekor yang dipasang pada ekor tikus uji. Manset ini  dirancang  untuk  mengukur  tekanan  sistolik dan diastolik pada beberapa hewan uji sekaligus, menyediakan  data  yang  akurat  dan  konsisten. Metode  ini  memberikan  keunggulan  dalam kepraktisan dan keselamatan, tanpa memerlukan intervensi langsung pada pembuluh darah tikus. Di sisi lain, metode invasif melibatkan kanulasi arteri karotis menggunakan kateter berisi cairan. Meskipun  metode  ini  dapat  memberikan  data yang  lebih  rinci,  penggunaannya  melibatkan intervensi  klinis  yang  lebih  besar.  Penggunaan kateter  dapat  menimbulkan  efek  samping  yang berbahaya, terutama pada tikus yang lebih kecil, dan  menciptakan  risiko  potensial  yang  perlu dipertimbangkan.  Oleh  karena  itu,  pemilihan
antara  metode  non-invasif  dan  invasif  harus mempertimbangkan tujuan penelitian, etika, dan keselamatan  hewan  uji.  Metode  non-invasif seringkali  menjadi  pilihan  yang  lebih  etis  dan aman,  sementara  metode  invasif  dapat memberikan  informasi  yang  lebih  terperinci dengan risiko yang lebih tinggi ( Malkoff, 2011 ). Penurunan  tekanan  darah  pada  tikus disebabkan  karena  adanya  kandungan  senyawa flavonoid,  alkaloid  dan  saponin  yang  terdapat pada daun alpukat. Senyawa flavonoid pada daun alpukat  dapat  juga  digolongkan  kedalam  zat penghambat  ACE  ( Angiotensin  Converting Enzyme )  dimana  senyawa  flavonoid  bekerja dengan  cara  mencegah  pengubahan  enzimatis dari  angiotensin  I  menjadi  angiotensin  II. Alkaloid  dalam  daun  alpukat  bertindak  sebagai β-blocker,  yang  memiliki  efek  inotropik  dan kronotropik  negatif  pada  jantung,  mengurangi curah  jantung  dan  detak  jantung,  yang menyebabkan penurunan tekanan darah ( Aaronson dan Ward, 2010 ).
Data  yang  diperoleh  menunjukkan peningkatan  tekanan  darah  pada  hewan  uji setelah diinduksi, dengan selisih masing-masing yang  tercatat  dalam  Tabel  3.  Menurut Sharp  & Villano,  2012 ,  parameter  tekanan  darah  normal pada  tikus  putih  berkisar  antara  sistolik  88-184 mmHg dan diastolik 58-145 mmHg. Peningkatan tekanan  darah  pada  hewan  uji  ini  dapat diatribusikan  kepada  pemberian  NaCl  2%  dan suspensi serbuk prednison 0,45 mg/kgBB selama 14  hari  dengan  interval  satu  kali  sehari. Pemberian  NaCl  2%  diyakini  menyebabkan penumpukan  garam  dalam  tubuh  subjek, meningkatkan  volume  cairan  ekstraseluler,  dan memicu hipertensi. Selain itu, obat-obatan yang termasuk dalam golongan kortikosteroid, seperti prednison, juga dapat menyebabkan peningkatan tekanan  darah.  Mekanisme  ini  melibatkan peningkatan retensi natrium dan air di ginjal oleh prednison,  yang  pada  gilirannya  meningkatkan volume  darah  dan  dapat  menyebabkan peningkatan  tekanan  darah.  Dengan  demikian, hasil peningkatan tekanan darah pada hewan uji dapat diinterpretasikan sebagai respons terhadap pemberian  NaCl  2%  dan  prednison  sesuai dengan  mekanisme  yang  telah  dijelaskan.  Data ini  mendukung  observasi  bahwa  faktor-faktor tersebut  dapat  memberikan  dampak  signifikan terhadap  tekanan  darah  pada  tikus  uji  dalam periode  pengamatan  ( Center  Desease  Control , 2012 ; Fardet et,al 2007 ).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa kelompok  V,  yang  merupakan  kontrol  negatif yang  diberikan  suspensi  CMC  1%,  mengalami penurunan  tekanan  darah  yang  paling  kecil dibandingkan dengan kelompok lainnya, dengan
persentase  rata-rata  5,76/2,8%.  Kelompok  IV, sebagai  kontrol  positif  yang  diberikan  suspensi captopril,  menunjukkan  penurunan  tekanan darah yang signifikan dengan persentase rata-rata sebesar  40,97/28,65%.  Kelompok  I,  yang mendapatkan dosis 125 mg/kg BB, menunjukkan penurunan tekanan darah dengan persentase rata- rata  sebesar  28,01/29,79%.  Sementara  itu, kelompok  II  dan  III,  yang  masing-masing mendapatkan  dosis  250  mg/kg  BB  dan  375 mg/kg  BB,  menunjukkan  penurunan  tekanan darah  dengan  persentase  rata-rata  sebesar 41,06/38,22% dan 48,47/41,12%. Dari hasil ini, dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  alpukat memiliki  efek  antihipertensi,  karena  dapat menurunkan tekanan darah sistolik dan diastolik tikus uji. Efek antihipertensi dianggap signifikan jika  zat  uji  mampu  menurunkan  tekanan  darah sistolik  dan  diastolik  sebesar  ≥20  mmHg. Meskipun  penurunan  tekanan  darah  pada kelompok  I  belum  mencapai  ambang  batas  ini, penurunan  tersebut  tetap  menunjukkan  efek potensial dalam menangani tekanan darah tinggi. Penelitian lebih lanjut mungkin diperlukan untuk memahami  lebih  lanjut  potensi  dan  mekanisme antihipertensi  dari  ekstrak  daun  alpukat ( Thompson, 1990 ). Analisis penurunan tekanan darah sistolik dilakukan dengan menggunakan rancangan acak lengkap  (RAL).  Hasil  analisis  menunjukkan bahwa  ekstrak  yang  diberikan  pada  tikus memiliki  aktivitas  yang  sangat  nyata  dalam menurunkan tekanan darah sistolik, sebagaimana dapat dilihat dari tabel ANOVA dengan nilai F hitung yang lebih besar dari F tabel pada tingkat signifikansi  1%  dan  5%.  Untuk  lebih  lanjut mengetahui  perbedaan  antara  kelompok, dilakukan uji lanjutan dengan uji Duncan. Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  captopril  pada dosis  125  mg/kg  berat  badan,  250  mg/kg  berat badan, dan 375 mg/kg berat badan, serta kontrol positif, secara sangat nyata berpengaruh terhadap penurunan tekanan darah sistolik jika dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  yang diberikan 1% CMC. Dengan demikian, dosis 250 mg/kg  BB  dan  375  mg/kg  BB  menunjukkan aktivitas  dalam  menurunkan  tekanan  darah sistolik  pada  tikus  yang  tidak  signifikan  atau tidak  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan kontrol positif captopril. Namun, pada dosis 125 mg/kg  BB  terdapat  perbedaan  nyata  dengan kontrol  positif  captopril.  Hasil  ini  menegaskan bahwa  ekstrak  daun  alpukat  memiliki  potensi yang  signifikan  dalam  menurunkan  tekanan darah  sistolik  pada  tikus  uji,  dan  dosis  tertentu menunjukkan  aktivitas  yang  setara  atau  bahkan lebih  baik  daripada  kontrol  positif  captopril dalam hal penurunan tekanan darah sistolik.
Nilai  penurunan  tekanan  darah  diastolik dianalisis  dengan  rancangan  acak  lengkap (RAL). Hasil dapat menunjukkan bahwa ekstrak yang  diberikan  pada  tikus  memiliki  aktivitas dalam menurunkan tekanan darah diastolik  yang nyata    (signifikan).  Hasil  ini  dapat  dilihat  pada tabel ANOVA dimana nilai F hitung < F tabel 1% dan < F tabel 5%. Dilakukan uji lanjutan untuk mengetahui seberapa besar perbedaan antara tiap kelompok.  Uji  lanjutan  yang  digunakan  adalah uji  duncan.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa  dosis  125  mg/kgBB,  250  mg/kgBB  dan 375  mg/kgBB  memiliki  aktivitas  menurunkan tekanan  darah  diastolik  yang  tidak  signifikan atau tidak berbeda nyata dengan kontrol positif captopril yang  sudah  beredar  dipasaran sedangkan  ada  perbedaan  nyata  dengan  kontrol negatif CMC 1%.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Elisa et al .(2021) menyatakan  bahwa  daun  alpukat (Persea americana Mill.) memiliki potensi untuk menurunkan  tekanan  darah,  dengan  persentase penurunan  sistolik  sebesar  5,87  ±  0,63%  dan diastolik  sebesar  10,96  ±  6,62%  pada  dosis ekstrak  terbaik  yaitu  250  mg/kg  BB.  Hasil  ini konsisten dengan temuan dari penelitian Anda, di mana dosis 250 mg/kg dan dosis 375 mg/kg dari ekstrak daun alpukat menunjukkan kemampuan menurunkan  tekanan  darah  dengan  persentase penurunan yang signifikan. Meskipun demikian, penelitian ini memiliki kekurangan, yaitu sampel yang  digunakan  masih  dalam  bentuk  ekstrak etanol. Oleh karena itu, belum dapat dipastikan dengan  pasti  kandungan  senyawa  apa  yang memberikan  efek  antihipertensi.  Untuk  lebih memahami  mekanisme  dan  senyawa  aktif  yang terlibat,  penelitian  lebih  lanjut  dengan  isolasi senyawa-senyawa  spesifik  dari  ekstrak  tersebut mungkin diperlukan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  analisis data,  dan  pembahasan  yang  dilakukan,  dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun alpukat ( Persea  americana Mill.)  memiliki  aktivitas menurunkan  tekanan  darah  sistolik  pada  tikus. Dosis  250  mg/kg  BB  dan  375  mg/kg  BB menunjukkan aktivitas tersebut, dan perbedaannya tidak signifikan jika dibandingkan dengan kontrol positif captopril. Sementara pada dosis  125  mg/kg  BB,  terdapat  perbedaan signifikan dengan kontrol positif dan perbedaan sangat  signifikan  dengan  kontrol  negatif  CMC 1%. Selain itu, ekstrak etanol daun alpukat juga memiliki  aktivitas  menurunkan  tekanan  darah diastolik.  Pada  dosis  250  mg/kg  BB  dan  375 mg/kg  BB,  aktivitas  tersebut  tidak  berbeda signifikan  dengan  kontrol  positif  captopril.
Namun,  terdapat  perbedaan  signifikan  dengan kontrol negatif CMC 1%. Hasil ini memberikan gambaran  bahwa  ekstrak  etanol  daun  alpukat dapat memiliki potensi sebagai agen antihipertensi,  terutama  pada  dosis  250  mg/kg BB  dan  375  mg/kg  BB.  Meskipun  demikian, perlu  dicatat  bahwa  studi  lebih  lanjut  mungkin diperlukan  untuk  lebih  memahami  mekanisme dan senyawa-senyawa aktif yang terlibat dalam efek antihipertensif dari ekstrak tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Aaronson,  P.  I.;  Ward,  J.  P.,  2010. Sistem Kardiovaskuler . Erlangga: Jakarta.
Badan  Perencanaan  Pembangunan  Nasional (Bappenas),  2018. Alpukat  (Persea americana Mill/Persea gratissima Gaerth) . Budidaya Pertanian (Menegristek Bidang Pendayagunaan dan Pemasyarakatan  Ilmu  Pengetahuan  dan Teknologi):1–18.
Center  Disease  Control,  2012. Centers  for Disease Control and Prevention . Atlanta: DCD. Elisa  N.;  Barry,  A.A.;  Indriyanti,  E.,  2021. Aktivitas  Antihipertensi  Ekstrak  Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Avokad (Persea americana  Mill)  Pada  Tikus  Jantan Dengan Parameter Sistolik Dan Diastolik . Jurnal Ilmiah Sains 21(2):145. doi: 10.35799/jis.v21i2.35625.
Fardet, L., Kassar, A., Cabane, J., & Flahault, A. 2007. Corticosteroid-induced  adverse events in adults: frequency, screening and prevention . Drug safety, 30(10), 861–881. https://doi.org/10.2165/00002018- 200730100-00005 Isnaini,  N.;  Fulanah,  U.,  2019. Penurunan tekanan  darah  dengan  simplisia  daun alpokat  Decreasing  blood  pressure  with avoid simplicia leaves . JHeS (Journal of Health Studies), 3(1), 44– 52.https://doi.org/10.31101/jhes.839 Harvey,  R.A.,  2014. Farmakologi  Ulasan
Bergambar Edisi  4.  Penerbit  Buku Kedokteran EGC: Jakarta.
Kemit, N.; Widarta, I. W. R.; Nocianitri, K. A., 2016. Pengaruh Jenis Pelarut dan Waktu Maserasi Terhadap Kandungan Senyawa Flavonoid  dan  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Daun  Alpukat  (  Persea americana Mill ). Jurnal Ilmu Teknologi Pangan, 5(2), 130–141. Mardiyaningsih,  A.;  Ismiyati,  N.,  2014. Cytotoxic  Activity  Of  Ethanolic  Extract Of  Persea  americana  Mill  .  Leaves  On
Hela  Cervical  Cancer  Cell .  Traditional Medicine Journal, 19(1): 24–28. Malkoff, J., 2011. Non-invasive Blood Pressure for  Mice  and  Rats ,  Kent  Scientific Corporation, Animal Lab News.
Setiawan,  A.  B.,  2018. The  effect  of  avocado leaves  decoction  against  the  blood pressure to hypertension patients . Jurnal Ilmu Kesehatan, 6(1), 1–10. Sharp  Patrick.;  Villano  Jason.  2012. The Laboratory  RAT  Second  Edition .  CRC Press: Taylor & Francis Group.
Syarif,  2007.  Farmakologi  dan  Terapi  Edisi  5.
Gaya Baru: Jakarta. Thompson, E, B., 1990. Drug Bioscreening Drug Evaluation Techniques in Pharmacology . VCH Publ. New York. Wells, B. G.; DiPiro, J. T.; Schwinghammer, T. L.; DiPiro, C. V., 2017. Pharmacotherapy Handbook,  Tenth  Edition .  In  McGraw- Hill Companies.
Open  Access  This  article  is  licensed  under  a  Creative  Commons Attribution  4.0  International  License,  which  permits  use,  sharing, adaptation, distribution, and reproduction in any medium or format, as long  as  you  give  appropriate  credit  to  the  original  author(s)  and  the
source, provide a link to the Creative Commons license, and indicate if changes were made. The images or other third-party material in this article are included in the article’s Creative Commons license unless indicated otherwise in a credit line to the material. If material is not included in the article’s Creative Commons license and your intended use is not permitted by statutory regulation or exceeds the permitted use, you will need to obtain permission directly from the copyright holder. To view a copy of this license, visit http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.