Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra
# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Br.  Gondol  Ds.  Penyabangan  Kec. Gerokgak  Kab.  Buleleng,  Kotak  Pos  140,  Singaraja,
Bali  81155,  Indonesia Tel.:  +62  362  92272 E-mail:  moriasembiring@yahoo.co.id

## PEMBERIAN  PROBIOTIK  DAN  PREBIOTIK  DALAM  PAKAN PADA PEMELIHARAAN BENIH  TERIPANG PASIR, Holothuria  scabra
Sari Budi  Moria Sembiring # , Zeny Widi Astuti, Ni Ketut Maha Setiawati, I  Nyoman  Adiasmara  Giri,  dan  Haryanti
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Br. Gondol Ds. Penyabangan Kec. Gerokgak Kab. Buleleng, Kotak Pos 140, Singaraja, Bali 81155
(Naskah diterima: 20 Februari 2020; Revisi final: 22 April 2020; Disetujui publikasi: 22 April 2020)

## ABSTRAK
Peningkatan sintasan dan pertumbuhan benih teripang melalui pemberian probiotik  dan prebiotik dilakukan untuk  mengeksplorasi  kemungkinan  adanya  efek  stimulasi  sistem  pencernaan.  Penelitian  ini  bertujuan untuk mengevaluasi efek potensial dari probiotik dan prebiotik pada performa pertumbuhan, serta aktivitas enzim  pencernaan  teripang  pasir.  Pada  penelitian  ini  ada  empat  perlakuan,  yaitu:  (A)  pakan  buatan  + campuran tiga isolat bakteri (Gamma proteobacterium M-4, Bacillus subtilis Q-1, Bacillus sp. E-2); (B) pakan buatan + Mannanoligosaccharida (MOS) + campuran tiga isolat bakteri; (C) pakan buatan + MOS; dan (D) pakan buatan (kontrol). Masing-masing perlakuan diulang sebanyak tiga kali dan penelitian berlangsung selama tiga bulan. Benih teripang pasir (bobot 4,1 ± 1,6 g; panjang total 4,0 ± 0,8 cm) dipelihara dalam bak  persegi  berkapasitas  150  L  dengan  kepadatan  30  ekor  per  bak.  Parameter  yang  diamati  adalah pertumbuhan,  sintasan,  dan  aktivitas  enzim  pencernaan.  Analisis  aktivitas  enzim  dilakukan  dengan menggunakan  metode  spektrofotometer.  Data  pertumbuhan  dianalisis  dengan  analisis  ragam  (ANOVA) pada  selang  kepercayaan  95%.  Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa  benih  teripang  pasir  yang  diberi pakan buatan + campuran  tiga isolat (perlakuan A) menghasilkan pertambahan  bobot sebesar 210,5 ± 21,%;  lebih  tinggi  (P<0,05)  dibandingkan  dengan  perlakuan  C  dan  D.  Sintasan  untuk  semua  perlakuan mencapai  100%.  Penambahan  probiotik  dan  prebiotik  dalam  pakan  juga  meningkatkan  aktivitas  enzim lipase, amilase, protease dan selulase pada pencernaan benih teripang pasir mulai dari 30 hari pemeliharaan sampai akhir percobaan. Untuk efisiensi bahan dan penyiapan pakan, cukup hanya dengan menggunakan probiotik dalam pendederan benih teripang pasir.
KATA KUNCI: aktivitas  enzim;  pertumbuhan;  probiotik;  prebiotik;  teripang  pasir
ABSTRACT: The effects of probiotic and prebiotic addition in feed on the growth performace of sandfish, H. scabra juveniles. By: Sari Budi Moria Sembiring, Zeny Widi Astuti, Ni Ketut Maha Setiawati, I Nyoman Adiasmara Giri, and Haryanti
Increasing survival and growth of sandfish juveniles can be achieved through the administration of probiotic and prebiotic in the feed. These results are suspected to be caused by probiotic and prebiotic ability to stimulate and improve the early development of sandfish’s digestive system. This study aimed to determine the potential effects of probiotic and prebiotic on the growth performance and digestive enzymes activity of sandfish. The experiment was started by culturing three bacterial isolates in marine broth media, followed by formulating the experimental feed and then feeding the reared sandfish juveniles with different treatment feeds. There were four treatment feeds used, namely: (A) artificial feed + a mixture of three bacterial isolates (Gamma proteobacterium M-4, Bacillus subtilis Q-1, Bacillus sp. E-2); (B) artificial feed + MOS + mixture of three bacterial isolates; (C) artificial feed + MOS; and (D) artificial feed only (control). Each treatment was repeated three times. Sandfish juvenile (4.1 ± 1.6 g in body weight and a total length of 4.0 ± 0.8 cm) were reared in rectangular plastic containers with a volume of 150 L with a stocking density of 30 juveniles per container. The study lasted for three months, during which the research parameters observed were growth, survival, and digestive enzyme activity. Enzyme activity analysis was performed using the spectrophotometer
method. Growth data were statistically analyzed (one-way ANOVA) at 95% significant level. The results showed that sandfish juveniles fed with the artificial feed + three isolates mixture (treatment A) had gained weight as much as 210.5 ± 21.9% higher and significantly different (P<0.05) compare to that of treatment C and D. The sandfish survival rates in all treatments during the research were 100%. The addition of probiotic and prebiotic in the feed also increased the activity of lipase, amylase, protease, and cellulase enzymes in the digestion of sandfish juveniles starting from day-30 to the end of the experiment. This research concludes that feed usage can be reduced by only applying probiotic mix during sandfish juveniles nursery.
KEYWORDS: enzyme activity; growth; probiotic; prebiotic; sandfish
adalah grobiotik TM AE, grobiotik R -A, Inulin, oligofruktosa, rafinosa,  mannanoligosaccharida  (MOS),  fructoligo- saccharida  (FOS),  galactooligosaccharida  (GOS)  dan transgalactooligosaccharida (TOS) yang berperan dalam meningkatkan  pertumbuhan,  tingkat  kelangsungan hidup, kecernaan, efisiensi pakan, sistem kekebalan tubuh, dan komposisi bakteri yang menguntungkan (probiotik) dalam saluran pencernaan ikan (Merrifield et al., 2010). Kombinasi Bacillus spp. dan MOS telah diuji pada larva lobster Eropa (Hommarus gammarus L.) (Daniels et al., 2013), serta kombinasi Enterococcus faecalis dan MOS pada rainbow trout (Oncorhyncchus mykiss) (Rodriguez-Estrada et al., 2009). Namun sampai saat  ini,  pemberian  prebiotik  pada  teripang  pasir belum  ada  yang  melakukan, oleh  karena  itu,  dalam penelitian  ini  dilakukan  aplikasi  probiotik  dan prebiotik dalam pakan untuk mengevaluasi pengaruh probiotik dan prebiotik terhadap pertumbuhan, serta aktivitas enzim pencernaan teripang pasir.

## BAHAN DAN METODE

## Kultur Bakteri Probiotik
Bakteri probiotik yang digunakan terdiri atas tiga isolat, yaitu: Gamma proteobacterium strain M-4, Bacil- lus subtilis strain Q-1, dan Bacillus sp. strain E-2. Masing- masing isolat tersebut dikultur secara terpisah pada media Marine Broth hingga mencapai kepadatan puncak (10 9-10 cfu/mL). Media kultur terlebih dahulu disterilkan menggunakan autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit.  Kultur  bakteri  dilakukan  selama  48  jam  dan diberi  aerasi  untuk  memacu  pertumbuhan  bakteri tersebut.

## Pembuatan  Pakan  Percobaan
Pakan  percobaan  dalam  bentuk  pelet  disiapkan dengan mencampurkan bahan berupa tepung rumput laut Sargassum sp. dan Ulva sp., tepung kedelai, tepung beras, tepung ikan, tepung klekap, minyak ikan, vita- min  mix,  mineral  mix,  serta  perekat  (CMC).  Pada penelitian ini ada empat perlakuan, yaitu: (A) pakan buatan  +  campuran  tiga  isolat  bakteri  (Gamma proteobacterium strain M-4, Bacillus subtilis strain Q-1, Bacillus  sp.  strain  E-2);  (B)  pakan  buatan  +  MOS  + campuran tiga isolat bakteri; (C) pakan buatan + MOS; dan (D) pakan buatan (kontrol), serta masing-masing

## PENDAHULUAN
Teripang pasir, H. scabra merupakan salah satu jenis teripang  yang  memiliki  nilai  komersial  yang  sangat tinggi, karena ekstrak dari teripang mengandung nilai nutrisi  dan  senyawa  aktif  yang  dapat  dimanfaatkan untuk pangan fungsional maupun kesehatan (Bordbar et al., 2011; Chatterji et al., 2010; Karnila et al., 2011). Namun,  karena  eksploitasi  yang  berlebih mengakibatkan terancamnya kelestarian teripang pasir di  alam.  Untuk  memenuhi  permintaan  publik  yang meningkat, maka Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan (BBRBLPP) Gondol sudah berhasil membenihkan  dan  membudidayakan  teripang  pasir tersebut  (Sembiring  et  al.,  2015;  Giri  et  al.,  2017). Keberhasilan  ini  membuka  kesempatan  yang  besar untuk memproduksi bahan pangan fungsional berbasis teripang H. scabra hasil budidaya.
Pada  pemeliharaan  benih  teripang  pasir  telah berhasil  diperoleh  komposisi  pakan  buatan  yang diformulasi  menggunakan  tepung  Sargassum  sp., tepung  Ulva  sp.,  tepung  kedelai,  tepung  beras,  dan tepung klekap dapat mendukung pertumbuhan dan sintasan teripang pasir (Giri et al., 2017). Selanjutnya juga telah diperoleh isolat bakteri probiotik Gamma proteobacteriumstrain M-4, Bacillus subtilis strain Q-1, dan Bacillus sp. strain E-2 hasil isolasi dari usus teripang pasir.  Dari  hasil  pemberian  kombinasi  dari  ketiga isolat  bakteri  tersebut  yang  dicampur  dalam  pakan buatan  menunjukkan  pertumbuhan  juvenil  teripang pasir yang lebih baik dibandingkan tanpa penggunaan probiotik  (Sembiring  et  al.,  2018).  Peran  probiotik telah terbukti pada pemeliharaan hewan akuatik dalam akuakultur yaitu meningkatkan kualitas air sehingga dapat  meningkatkan  kesehatan,  menekan pertumbuhan  bakteri  patogen,  dan  menghilangkan penggunaan  antibiotik  untuk  meminimalkan  risiko resistansi  antibiotik,  menstimulasi  sistem  imunitas, meningkatkan  flora  usus  dan  insidensi  penyakit menjadi  rendah,  serta  asimilasi  pakan  meningkat. Prebiotik merupakan bahan pangan yang tidak dapat dicerna  oleh  inang  tetapi  memberikan  efek menguntungkan bagi inang dengan cara merangsang pertumbuhan  mikroflora  normal  di  dalam  saluran pencernaan inang (Lin et al., 2012). Beberapa prebiotik telah digunakan pada kegiatan akuakultur di antaranya
perlakuan  diulang  tiga  kali.  Penambahan  bakteri probiotik hasil kultur pada pakan pelet masing-masing 300  mL/kg  pakan,  sedangkan  penambahan  MOS (Mannanoligo-saccharida)  dilakukan  sebanyak  5  g/kg pakan (Tabel 1). Setelah tercampur, adonan kemudian dicetak  menjadi  pelet.  Selanjutnya  pelet  tersebut dikering-anginkan  selama  tiga  jam  dan  disimpan  di dalam  lemari  pendingin  dengan  suhu  5°C-6°C. Pembuatan pakan pelet dilakukan secara berkala untuk menghindari terjadinya penurunan kualitas pakan.

## Pemeliharaan  Benih  Teripang  Pasir
Wadah pemeliharaan benih teripang pasir adalah bak plastik bervolume 150 L sebanyak 12 buah. Bak dilengkapi  dengan  sistem  air  mengalir  dan  aerasi sebagai pasokan oksigen. Pergantian air sebanyak 50% dan pembersihan dasar bak dilakukan setiap hari. Benih teripang yang digunakan berasal dari hasil pembenihan di hatchery  BBRBLPP  dengan ukuran  rata-rata  bobot 4,1 ± 1,6 g dan panjang total 4,0 ± 0,8 cm. Kepadatan benih yang ditebar dalam bak percobaan adalah 30 ekor/ bak. Pakan diberikan sekali dalam sehari yaitu pada sore hari dengan dosis pemberian pakan sebanyak 4% per biomassa.

## Pengamatan  Pertumbuhan
Untuk  mengetahui  respons  teripang  terhadap perlakuan, setiap dua minggu dilakukan pengukuran panjang  dan  bobot  badan  terhadap  30  ekor  benih teripang. Selanjutnya pada akhir percobaan dilakukan penghitungan  laju  pertumbuhan  spesifik  (SGR), pertambahan bobot (Wg), konversi pakan (FCR), dan sintasan  (SR).  Nilai  SGR,  Wg,  dan  FCR  dihitung berdasarkan formula sebagai berikut:
di mana:
Wo = bobot rata-rata teripang pada  awal percobaan  (g) Wt = bobot rata-rata teripang pada  akhir percobaan (g) t = lama pemeliharaan  (hari)

## Analisis  Aktivitas  Enzim  Pencernaan  pada Usus
Analisis  aktivitas  enzim  pencernaan  dengan spektrofotometer dilakukan di Laboratorium Nutrisi, Fakultas  Peternakan,  Institut  Pertanian  Bogor, sedangkan  untuk  preparasi  sampel  dilakukan  di Laboratorium Bioteknologi BBRBLPP. Analisis aktivitas enzim  pencernaan  menggunakan  sampel  usus  yang diambil dengan rentang waktu 30 hari pemeliharaan sebanyak dua individu dari masing-masing perlakuan dan ulangan. Sebelum dilakukan pengambilan usus, maka terlebih dahulu benih teripang dipuasakan selama 24  jam  untuk  mengosongkan  isi  usus  tersebut. Setelah  dipuasakan,  benih  teripang  dibedah  untuk mengambil ususnya. Selanjunya usus dihomogenisasi larutan buffer Tris (20 mM Tris HCl, 1 mM EDTA, 10 mM CaCl2, pH 7,5) dengan perbandingan 10%. Setelah dihomogenisasi,  kemudian  disentrifugasi  dengan kecepatan 10.000 rpm selama 20 menit pada suhu 4°C
Tabel 1. Komposisi pakan pelet untuk pemeliharaan benih teripang pasir, H. scabra (g/kg pakan) Table 1. Pellet feed composition used to feed reared sandfish juveniles, H. scabra (g/kg diet)
      teripang biomassa n Pertambaha pakan Jumlah FCR Wo Wo Wt x 100 % Wg t Wo Ln Wt Ln x 100 %/hari SGR            A
B C D Tepung Sargassum  sp. (Sargassum meal ) 300 300 300 300 Tepung Ulva  sp. (Ulva meal ) 350 350 350 350 Probiotik/Probiotic  (CFU/mL) 10 8 -10 9 10 8 -10 9 - - MOS - 5 5 - Tepung kedelai (Soybean meal ) 40 40 40 40 Tepung beras (Rice flour ) 180 175 175 180 Tepung ikan (Fish meal ) 30 30 30 30 Tepung klekap (Lap lap meal ) 55 55 55 55 Minyak ikan (Fish oil ) 10 10 10 10 Vitamin mix 10 10 10 10 Mineral mix 10 10 10 10 Binder 15 15 15 15 Total 1.000 1.000 1.000 1.000 Perlakuan (Treatments ) Bahan (Ingredients )
(Wang et al., 2015).  Selanjutnya supernatan  diambil dan ditempatkan dalam tabung eppendorf 1,5 mL; lalu disimpan pada suhu 4°C  untuk analisis lebih lanjut. Analisis enzim lipase menggunakan metode Tietz & Friedrick dalam Borlongan (1990); enzim amilase dan protease dengan metode Bergmeyer & Grassi (1983) dalam Natalia et al. (2004) dan enzim selulase dengan metode Ghose (1987).

## Analisis  Statistik
Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan  satu  faktor.  Data  pertumbuhan  dianalisis dengan  analisis  ragam (ANOVA)  menggunakan  soft- ware  R  3.3.2.  Apabila  terdapat  perbedaan  antar perlakuan, maka analisis data dilanjutkan dengan uji Tukey pada selang kepercayaan 95%.

## HASIL DAN BAHASAN
Sintasan  benih  teripang  pasir  selama  90  hari pemeliharaan tidak berbeda untuk semua perlakuan dengan  nilai  mencapai  100%  (Tabel  2).  Hal  ini disebabkan karena kuantitas dan kualitas pakan yang diberikan cukup untuk mempertahankan kebutuhan pokok  benih  teripang  pasir,  serta  lingkungan  yang terjaga  dengan  baik  selama  pemeliharaan.  Hasil  uji kinerja pertumbuhan disajikan pada Tabel 2, dan pola pertumbuhan tertera pada Gambar 1. Pemberian pakan dengan penambahan bakteri probiotik dan prebiotik memiliki  aktivitas  enzim  yang  tinggi  sehingga
memberikan pengaruh yang nyata (P<0,05) terhadap pertumbuhan  benih  teripang  pasir  dibandingkan dengan  pertumbuhan  benih  teripang  pasir  tanpa penambahan  probiotik  (pakan  kontrol).  Selain pertambahan bobot biomassa dan laju pertumbuhan harian  yang  lebih  tinggi,  juga  rasio  konversi  pakan yang  lebih  rendah  (P<0,05)  dibandingkan  dengan kontrol. Pemberian pakan mengandung probiotik (A) dan  campuran  prebiotik  (B)  mampu  meningkatkan pertambahan bobot benih teripang pasir dibandingkan dengan perlakuan C dan D masing-masing 210,5% dan 160,2%  pada  perlakuan  A  dan  B,  sementara  pada perlakuan C dan D hanya 93,5% dan 96,97%. Efek positif bagi  inang  yang  disebabkan  oleh  probiotik  adalah menyesuaikan  jumlah  bakteri  di  dalam  saluran pencernaan  yang  mampu  meningkatkan  aktivitas enzim  lipase,  amilase,  protease,  dan  selulase  benih teripang pasir. Demikian juga tingginya bobot akhir pada perlakuan B, dibandingkan dengan perlakuan C, karena  sinergisme  antara  probiotik  dan  prebiotik, yang  dapat  meningkatkan  regenerasi  saluran pencernaan, dan meningkatkan  fungsinya, sehingga dapat  meningkatkan  aktivitas  enzim  pencernaan. Menurut  Abareethan  &  Amsath  (2015),  keberadaan bakteri  probiotik  dalam  saluran  pencernaan  sangat menguntungkan bagi ikan dan krustasea, karena bakteri tersebut kemungkinan menstimulasi produksi enzim endogen  oleh  benih.  Peningkatan  aktivitas  enzim pencernaan  pada  benih  cenderung  meningkatkan pencernaan dan penyerapan makanan.
Tabel 2. Sintasan, bobot akhir, pertambahan bobot, pertumbuhan bobot spesifik, panjang total akhir, dan konversi pakan benih teripang pasir, H. scabra yang diberi pakan mengandung probiotik, prebiotik, dan kontrol
Table 2. Survival rate, final weight, weight gain, specific growth rate, final total length, and feed conversion ratio of sandfish, H. scabra juvenile fed with probiotic, prebiotic, and control
Keterangan: Huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan antar perlakuan (P<0,05)
Note: Values  in  the  same  row  with  different  superscript  letters  are  significantly  different  (P<0.05)
A B C D Pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri Artificial feed + a mixture of 3 bacterial isolates Pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri Artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolate Pakan buatan +MOS Artificial feed +MOS Pakan buatan Artificial feed Sintasan/Survival rate  (%) 100.0 ± 0.0 a 100.0 ± 0.0 a 100.0 ± 0.0 a 100.0 ± 0.0 a Bobot akhir/Final weight  (g) 12.8 ± 0.9 b 11.0 ± 1.4 ab 8.1 ± 0.6 a 8.1 ± 2.6 a Pertambahan bobot/Weight gain  (%) 210.5 ± 21.9 b 160.2 ± 25.6 ab 93.5 ± 9.9 a 96.9 ± 6.3 a Pertumbuhan bobot spesifik (%/hari) Specific growth rate  (%/days) 1.3 ± 0.1 b 1.1 ± 0.1 ab 0.7 ± 0.6 a 0.7 ± 0.3 a Panjang total akhir Final total length  (cm) 6.1 ± 0.2 c 5.5 ± 0.3 b 5.5 ± 0.1 b 4.7 ± 0.2 a Konversi pakan/Feed conversion ratio 2.7 ± 0.1 a 3.1 ± 0.0 a 4.9 ± 0.8 ab 8.1 ± 2.4 b
Parameter Perlakuan (Treatments )
Berdasarkan hasil analisis  aktivitas enzim lipase, amilase,  protease,  dan  selulase  pada  saluran pencernaan  benih  teripang pasir  di  akhir  penelitian menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  nyata  antara perlakuan dengan kontrol (Tabel 3). Aktivitas enzim pencernaan benih teripang  pasir dengan pemberian pakan mengandung probiotik menunjukkan nilai yang lebih tinggi untuk semua enzim dibandingkan dengan pemberian prebiotik dan kontrol. Hasil analisis enzim pencernaan menunjukkan bahwa perlakuan A memiliki nilai yang lebih tinggi untuk aktivitas lipase, amilase, protease,  dan  selulase  masing-masing  sebesar  0,18 ± 0,002 IU/mL/menit; 1.05 ± 0,012 IU/mL/menit; 0,10 ± 0,004 IU/mL/menit; dan 0,05 ± 0,001 IU/mL/menit jika  dibandingkan  perlakuan  lainnya.  Melalui
pemberian  probiotik  dapat  memicu  peningkatan aktivitas  enzim  endogenus  yang  diproduksi  oleh bakteri dalam saluran pencernaan benih teripang pasir dan  aktivitas  tersebut  mulai  terlihat  pada  30  hari pemeliharaan (Gambar 2).
Tingginya tingkat aktivitas enzim pada perlakuan pakan yang mengandung probiotik dapat membantu benih  untuk  meningkatkan  kecernaan  protein, karbohidrat, lemak, dan selulosa sehingga performa pertumbuhan  semakin  meningkat.  Aktivitas  enzim tertinggi  pada  semua  periode  pengamatan diperlihatkan  oleh  enzim  amilase  yang  diikuti  oleh protease dan lipase, sedangkan terendah adalah enzim selulase. Aktivitas enzim pencernaan benih teripang
Gambar 1. Pola pertambahan bobot teripang pasir yang diberi pakan percobaan selama 90 hari pemeliharaan. Figure 1. Growth patterns of sandfish, H. scabra fed with the experimental diets for 90 days.
A B C
D Pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri Artificial feed + a mixture of 3 bacterial isolates Pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri Artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolate Pakan buatan + MOS Artificial feed + MOS Pakan buatan Artificial feed Lipase (Lipase) 0.18 ± 0.002 b 0.16 ± 0.002 ab 0.13 ± 0.006 ab 0.11 ± 0.028 a Amilase (Amylase) 1.05 ± 0.012 d 0.96 ± 0.014 c 0.74 ± 0.009 b 0.49 ± 0.013 a Protease (Protease) 0.10 ± 0.004 d 0.09 ± 0.002 c 0.06 ± 0.001 b 0.04 ± 0.001 a Selulase (Cellulose) 0.05 ± 0.001 d 0.04 ± 0.001 c
0.04 ± 0.001 b 0.03 ± 0.001 a Perlakuan (Treatments )
Aktivitas enzim (IU/mL/menit) Enzyme activity
(IU/mL/minute)
Tabel 3. Aktivitas enzim pencernaan benih teripang pasir, H. scabra yang diberi pakan mengandung probiotik, prebiotik, dan kontrol
Table 3. Digestive  enzyme  activity  of  sandfish,  H.  scabra  juveniles  fed  with  diets  containing  probiotic, prebiotic, and control
Keterangan: Huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan antar perlakuan (P<0,05)
Note: Values  in  the  same  row  with  different  superscript  letters  are  significantly  different  (P<0.05) 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0 Awal I II III IV V B o b o t (We ig ht ) (g ) Pengamatan (2 minggu) / Observation (two weeks) A (Pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri/ Artificial feed + a mixture of 3 bacterial isolates)
B (Pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri/ Artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolates)
C (Pakan buatan + MOS/ Artificial feed + MOS) D (Pakan buatan/ Artificial feed ) B (pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri) B (artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolates) C (pakan buatan + MOS) C (artificial feed + MOS)
D (pakan buatan) D (artificial feed)

## A (pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri)
A (artificial feed + mixture of 3 bacterial isolates)
pasir dengan jadwal pemberian pakan percobaan A dan B  selama 90 hari pemeliharaan pada semua periode pengamatan  cenderung  mengalami  peningkatan, dibandingkan dengan perlakuan C dan D.
Menurut Merrifield et al. (2010), keberadaan bakteri probiotik dapat meningkatkan produksi enzim exog- enous  dalam  saluran  intestinal  ikan  dan  probiotik mampu menghasilkan beberapa enzim exogenous untuk pencernaan pakan seperti  amilase, protease, lipase, dan selulase. Michael et al. (2014) juga menyatakan bahwa  berbagai  mikroorganisme  berperan  penting dalam  sistem  pencernaan  untuk  mensuplai  nutrisi seperti asam lemak dan vitamin budidaya ikan.
Hasil penelitian Zhou et al. (2010)  menunjukkan bahwa  penambahan  prebiotik  GOS  dan  MOS  dapat meningkatkan  kecernaan  pakan  dan  mampu meningkatkan  pertumbuhan  ikan  red  drum.  Hal tersebut  didukung  oleh  Widanarni  et  al.  (2014), prebiotik  mampu  secara  selektif  menstimulasi pertumbuhan dan aktivitas metabolik bakteri potensial yang  menguntungkan.  Hasil  serupa  juga  diperoleh pada penelitian pemberian probiotik pada udang yang menunjukkan terjadinya peningkatan aktivitas enzim amilase,  protease,  dan  lipase  dalam  saluran pencernaannya  (Zokaeifar  et  al.,  2012).  Wang  et  al. (2015) juga menjelaskan bahwa aplikasi probiotik yang sesuai  akan  memperbaiki  keseimbangan  mikroflora intestinal  dan  pada  akhirnya  akan  meningkatkan penyerapan nutrien pada Apostichopus japonicus. Oleh karena  itu,  dengan  adanya  penambahan  probiotik
dalam pakan pada pemeliharaan benih teripang pasir dapat meningkatkan aktivitas pencernaan dan secara langsung juga meningkatkan aktivitas enzimatik pada saluran pencernaan.
Dengan adanya peningkatan pertumbuhan melalui pemberian  probiotik  dalam  pakan  buatan  untuk pendederan  benih,  maka  perlu  dilakukan  produksi massal probiotik untuk peningkatan usaha budidaya sampai  ukuran  konsumsi.  Di  samping  itu,  perlu penelitian lanjutan tentang aplikasi probiotik untuk ukuran benih yang berbeda pada media kultur berbeda yang lebih mudah dan biaya rendah. Penelitian lanjutan lainnya yang perlu dilakukan adalah teknik pemadatan dan penyimpanan atau kemasan probiotik sehingga produk  probiotik  tersebut  tersedia  secara berkesinambungan dalam bentuk siap pakai.

## KESIMPULAN
Pada pendederan benih teripang pasir, pemberian pakan hanya dengan penambahan probiotik saja dapat meningkatkan pertumbuhan, sintasan, dan aktivitas enzim (lipase, amilase, protease, dan selulase) secara signifikan  dibandingkan  dengan  pakan  tanpa pemberian  probiotik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini dibiayai oleh APBN DIPA Balai Besar Riset  Budidaya  Laut  dan  Penyuluhan  Perikanan (BBRBLPP),  Gondol  tahun  anggaran  2019.  Penulis sampaikan terima kasih kepada Made Buda, I Nengah
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 3 0 h ar i/d ay s
6 0 h ar i/d ay s 9 0 h ar i/d ay s
3 0 h ar i/d ay s
6 0 h ar i/d ay s 9 0 h ar i/d ay s 3 0 h ar i/d ay s
6 0 h ar i/d ay s 9 0 h ar i/d ay s 3 0 h ar i/d ay s 6 0 h ar i/d ay s 9 0 h ar i/d ay s Lipase Amilase Protease Selulosa A kt ivi ta s en zi m En zy m ac ti vi ty ( IU /m L/ m en it ) A (Pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri/ Artificial feed + a mixture of 3 bacterial isolates)
B  (Pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri/ Artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolates) C (Pakan buatan + MOS/ Artificial feed + MOS) D (Pakan buatan/ Artificial feed ) B (pakan buatan + MOS + campuran 3 isolat bakteri)
B (artificial feed + MOS + mixture of 3 bacterial isolates)
C (pakan buatan + MOS) C (artificial feed + MOS) D (pakan buatan)
D (artificial feed)
A (pakan buatan + campuran 3 isolat bakteri) A (artificial feed + mixture of 3 bacterial isolates) 3 0 h a ri ( d a y ) 6 0 h a ri ( d a y )
9 0 h a ri ( d a y )
3 0 h a ri ( d a y ) 6 0 h a ri ( d a y ) 9 0 h a ri ( d a y ) 3 0 h a ri ( d a y ) 6 0 h a ri ( d a y ) 9 0 h a ri ( d a y ) 3 0 h a ri ( d a y ) 6 0 h a ri ( d a y ) 9 0 h a ri ( d a y ) Lipase Amilase Protease
Selulosa Gambar 2. Aktivitas  enzim  pencernaan  lipase,  amilase,  protease,  dan  selulase  benih  teripang  pasir,  H.
scabra yang diberi pakan mengandung probiotik, prebiotik, dan kontrol pada berbagai periode pengukuran.
Figure 2. Digestive enzyme activity of lipase, amylase, protease, and cellulose of sandfish, H. scabra fed with feed containing probiotic, prebiotic, and control at various measurement periods.
Gde Suparta, Ahmad Rifa’i, dan Ni Made Meita (teknisi hatchery teripang), serta Ni Nengah Suri Adnyani dan Luh Yuliani Dewi (teknisi Laboratorium Bioteknologi) BBRBLPP, Gondol atas bantuannya dalam pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Abareethan,  M.  &  Amsath,  A.  (2015).  Characteriza- tion and  evaluation of probiotic fish  feed. Inter- national Journal of Pure and Applied Zoology, 3(2), 148-153.
Bordbar, S., Anwar, F., & Saari, N. (2011). High value compounds  and  bioactives  from  sea  cucumbers for  functional  foods:  A  review.  Journal  Marine Drugs, 9, 1761-1805.
Borlongan, T.G. (1990). Studies on the lipases of milk- fish (Chanos chanos). Aquaculture, 89, 315-325.
Chatterji, A., Kassim, Z., Hassan, A., Therwath, A., & Shaharom,  F.  (2010),  Marine  living  resources  in the  practice  of  traditional  medicine.  Journal Coastal Environment, 1(1), 41-52.
Daniels,  C.L.,  Merrifield,  D.L.,  Ringo,  E.,  &  Davies, S.J.  (2013).  Probiotic,  prebiotic,  synbiotic  appli- cations  for the  improvement  of larval  European lobster (Homarus gammarus) culture. Aquaculture, 416-417, 396-406.
Ghose. (1987). Measurement cellulase activities. Appl. Chem., 59(2), 252-268.
Giri,  N.A.,  Sembiring,  S.B.M.,  Marzuqi,  M.,  & Andamari, R. (2017). Formulasi dan aplikasi pakan buatan  berbasis  rumput  laut  untuk  pendederan benih teripang pasir (Holothuria scabra). Jurnal Riset Akuakultur, 12(3), 263-273.
Karnila,  R.,  Astawan,  M.,  Sukarno,  T.,  &  Wresdiyati, T.  (2011).  Karakteristik  konsentrat  protein teripang  pasir  (Holothuria  scabra)  dengan  bahan pengekstrak aseton. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 16(1), 90-102.
Lin,  S.,  Mao,  S.,  Guan,  Y.,  Luo,  L.,  &  Pan,  Y.  (2012). Effect of dietary Chitosan oligosaccharides and Ba- cillus  coagulans  on  the  growth,  innate  immunity and resistance of koi (Cyprinus carpio koi). Aqua- culture, 342-343, 36-41.
Merrifield,  D.L.,  Dimitroglou,  A.,  Foey,  A.,  Davies, S.J.,  Baker,  R.T.M.,  Bogwald,  J.,  Castex,  M.,  & Ringo,  E.  (2010).  The  current  status  and  future focus of probiotic and prebiotic applications for salmonids. Aquaculture, 302, 1-18.
Michael,  E.T.,  Amos,  S.O.,  &  Hussaini,  L.T.  (2014). A review on probiotics application in aquaculture. Fisheries  and  Aquaculture  Journal,  5(4),  111.  DOI: 10.4172/2150-3508.1000111.
Natalia,  Y.,  Hasyim,  R.,  Ali,  A.,  &  Chong,  A.  (2004).
Characterization  of  digestive  enzymes  in  a  car- nivorous ornamental fish, the Asia Bony Tongoe, Sceleropages formosus (Osteoglossidae). Aquaculture, 233(3), 305-320.
Rodriguez-Estrada,  U.,  Satoh,  S.,  Haga,  Y.,  Fushimi, H.,  &  Sweetman,  J.  (2009).  Effect  of  single  and combined supplementation of Enterococcus faecalis, mannanoligosaccharide, and polyhydrobutyric acid on growth performance and immune response of rainbow  trout  (Oncorhynchus  mykiss).  Aquaculture Science, 57, 609-617.
Sembiring, S.B.M., Hutapea, J.H., Sugama, K., Susanto, B.,  Giri,  N.A.,  &  Har yanti.  (2015).  Teknik perbenihan teripang pasir Holothuria scabra, Dalam Rekomendasi  Teknologi  Kelautan  dan  Perikanan 2015  (Soekadi,  F.,  Sugama,  K.,  Nurhakim,  S., Heruwati,  E.S.,  Purba,  M.,  Kusnendar,  E., Djunaidah,  I.S.,  Sudibjo,  E.R.,  &  Sakti,  I.  (Eds.). hlm. 187-200. Badan Penelitian dan Pengembangan Kelautan dan Perikanan, Kementerian Kelautandan Perikanan, Jakarta.
Sembiring, S.B.M., Wibawa, G.S., Septory, R., Nasuka, A.,  Giri,  N.A.,  &  Haryanti.  (2018).  Penggunaan probiotik pada pemeliharaan juvenil teripang pasir, H, scabra dan pembesaran benih dengan kurung tancap di laut. Laporan Teknis BBRBLPP Gondol, 25 hlm. (Unpublish).
Wang, J.H., Zhao, L.Q., Liu, J.F., Wang, H., & Xiao, S. (2015).  Effect of  potential probiotic  Rhodotorula benthica D30 on the growth performance, diges- tive enzyme activity and immunity in juvenile sea cucumber  (Apostichopus  japonicas).  Fish  Shellfish Immunol., 43(2), 330-336.
Widanarni,  Noermala,  J.I.,  &  Sukenda.  (2014). Prebiotik,  probiotik,  dan  sinbiotik  untuk mengendalikan koinfeksi Vibrio harveyi dan IMNV pada  udang  vaname.  Jurnal  Akuakultur  Indonesia, 13(1), 11-20.
Zhou,  Q.C.,  Buentello,  J.A.,  &  Gatlin,  D.M.  (2010). Effects  of  dietary  prebiotics  on  growth  perfor- mance, immune response and intestinal morpho- logy of red drum (Sciaenops ocellatus). Aquaculture, 309, 253-257.
Zokaeifar,  H.,  Balcazar,  J.L.,  Saad,  C.R.,  Kamarudin, M.S.,  Sijam,  K.,  Arshad,  A.,  &  Nejat,  N.  (2012). Effects  of  Bacillus  subtilis  on  the  growth  perfor- mance,  digestive  enzymes,  immune  gene  ex- pression and disease resistance of white shrimp (Litopenaeus vannamei). Fish Shellfish Immunol., DOI: 10.1016/j.fsi.2012.05.027.