Mandala of Health : A Scientific Journal Vol.11, No.2, September 2018, Hal. 70-78 ISSN     : 0216-3098 E-ISSN : 2615-6954 DOI: 10.20884/1.mandala.2018.11.2.1316

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN FITOKIMIA KULIT BAWANG
MERAH ( Allium cepa L.) HASIL EKSTRAKSI METODE Microwave Assisted Extraction (MAE)
Microwave-Assisted Extraction Method (MAE) On Antibacterial Activity and Phytochemical Screening of Onion skin ( Allium Cepa L.)
Fitria Dewi Sulistiyono * , Trirakhma Sofihidayati dan Bina Lohitasari Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA Universitas Pakuan, Bogor Jl. Pakuan, Tegallega, Bogor Timur

## ABSTRAK
Ekstrak  kulit  bawang  merah  mengandung  flavonoid,  polifenol,  saponin,  terpenoid  dan alkaloid. Metode ekstraksi modern dengan memanfaatkan radiasi gelombang mikro yang disebut dengan MAE ( Microwave Assisted Extraction ) belum banyak dilakukan. Metode MAE terbukti lebih  efektif  karena  pemanasan  pelarut  secara  cepat  dan  efisien  dibandingkan  metode  ekstraksi secara  konvensional.  Tujuan  penelitan  ini  adalah  mengetahui  senyawa  fitokimia  dan  aktivitas ekstrak kulit bawang merah dengan metode MAE pada Staphylococcus aureus . Deteksi senyawa fitokimia  dilakukan  dengan  metode  kualitatif,  yaitu  ada  tidaknya  senyawa  flavonoid,  saponin, alkaloid  dan  tanin.  Aktivitas  ekstrak  kulit  bawang  merah  terhadap S.aureus dilakukan  dengan metode kertas cakram dengan melihat zona bening/hambat yang dihasilkan. Konsentrasi ekstrak yang digunakan adalah 5, 10, 15, 20 dan 25% (b/v). Hasil penelitian menunjukkan bahwa ektrak kulit  bawang  merah  mempunyai  senyawa  flavonoid,  saponin  dan  tanin.  Ekstrak  kulit  bawang merah  dapat  menghambat  pertumbuhan S.aureus ditunjukkan  dengan  adanya  zona  bening  dari kosentrasi 5, 10, 15, 20 dan 25% (b/v) adalah 14; 15,5; 16; 19; 19,5 mm. Hasil tersebut menunjukan bahwa MAE lebih efektif daripada metode konvensional (maserasi) dalam menghambat S. aureus . Berdasarkan  hasil  aktivitas  antibakteri,  ekstrak  kulit  bawang  merah  dapat  dimanfaatkan  dalam dunia industri sebagai salah satu komponen produk pencegahan infeksi bakteri. Kata kunci: fitokimia, kulit bawang merah, metode MAE, Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Onion  skin  extract  containing  flavonoid  ,  catakin  ,  saponin  ,  terpenoid  and  alkaloid  . Microwave Assisted Extraction (MAE) is modern method with microwave radiation. MAE have proven  more  effective  because  a  solvent  warming  quickly  and  more  efficient  compared  other methode (maseration). This study aims to explore the phytochemical activity presenced in onion skin  extract.  that  was  obtained  by  the Microwave  Assited  Extraction (MAE)  method  and  to evaluate the antibacterial activity against Staphilococcus aureus. The phytochemical screening of onion  skin  extracted  by  using  MAE  revealed  the  presence  of  alkaloids,  saponins,  tannins  and flavonoids. The antibacterial activity of onion skin extract was carried out against S. aureus by
measuring the diameter  of bacterial  growth  inhibition  zones through the  diffusion method. The results of qualitative phytochemical screening tests on onion skin extract shows that the positive sample  contains  alkaloids,  saponins,  tannins  and  flavonoids.  Range  of  onion  skin  extract concentration used in this research were 5, 10, 15, 20, and 25% w/v. The inhibition zone of extract at  concentration  5,  10,  15,  20,  and  25%  w/v  were  14.00;  15.50;  16.00;  19.00;  and  19.50  mm respectively. Base on antibacterial result, onion skin extract can be used as one ingredient in the manufacture of antibacterial products.
Keywords : MAE method, Onion skin, Phytochemical, Staphylococcus aureus
Penulis korespondensi:
Fitria Dewi Sulistiyono Program Studi Farmasi, Universitas Pakuan Jl. Pakuan, Tegallega, Bogor Timur Email: fitria.sulistiyono@unpak.ac.id

## PENDAHULUAN
Di  Indonesia banyak sekali tanaman  yang sering  dimanfaatkan oleh masyarakat  sebagai bahan pangan ataupun sebagai obat, akan tetapi untuk limbah tanaman masih jarang. Salah satu contohnya adalah limbah kulit bawang merah yang banyak dihasilkan dari limbah rumah tangga. Penelitian sebelumnya telah diketahui bahwa ekstrak kulit bawang merah mengandung senyawa kimia yang berpotensi sebagai antioksidan yaitu flavonoid yang dapat mencegah berkembangnya radikal bebas di dalam tubuh sekaligus memperbaiki sel-sel tubuh yang rusak (Soebagio, 2007).
Senyawa  flavonoid  pada  ekstrak  kulit  bawang  merah  dapat  dimanfaatkan  untuk mengurangi  penyakit  infeksi,  terutama  infeksi  pada  kulit  atau  dermatosis.  Penyakit  dermatosis sebagian  besar  disebabkan  oleh  bakteri Staphylococcus  aureus .  Menurut  Dewi  dkk  (2010) diperoleh data bahwa S. aureus merupakan bakteri terbanyak penyebab penyakit dermatosi yaitu sebesar 40%, diikuti Staphylococcus koagulase negatif (36,8%) , Enterobacter aerogenes ( 10,5%) , Streptococcus viridans (5,3%) dan Escherechia coli (5,3%). Penyakit kulit  merupakan peringkat ketiga  dari  sepuluh    penyakit  utama  dengan  86%  adalah  dermatotis  diantara  192.414  kasus penyakit kulit di beberapa Rumah Sakit Umum di Indonesia tahun 2011 (Kemenkes, 2011) (dalam Nuradilah Syarif, Andi Zulkifli dan Ansariadi 2013).
Pemanfaatan  metabolit  sekunder  dari  ekstrak  kulit  bawang  merah  sebagai  antibakteri dipengaruhi  oleh  metode  ekstraksi  dan  pelarut  yang  digunakan.  Berbeda  metode  ekstraksi  dan pelarut akan berpengaruh pada senyawa metabolit yang ditarik dalam ekstrak tersebut. Menurut Rahayu,  dkk  (2015)  hasil  fitokimia  ekstrak  kulit  bawang  merah  dengan  menggunakan  metode maserasi diperoleh fraksi air mengandung flavonoid, polifenol, saponin, terpenoid dan alkaloid. Fraksi  etil  asetat  mengandung  flavonoid,  polifenol  dan  alkaloid.  Fraksi n -heksana  mengandung saponin,  steroid  dan  terpenoid.  Senyawa  flavonoid  yang  terkandung  pada  ekstrak  kulit  bawang merah fraksi etil asetat adalah golongan flavonol.
Pengujian  ekstrak  kulit  bawang  merah  terhadap S.aureus dipengaruhi  oleh  jumlah kosentrasi  ekstrak  yang  digunakan.  Semakin  besar  konsentrasi  ekstrak    yang  digunakan  maka semakin lebar zona hambat  yang terbentuk. Ekstrak kulit  bawang merah  hasil maserasi  dengan
pelarut  etanol  86%  dapat  menghambat  pertumbuhan S.aureus .  Hasil  pengujian  diperoleh  zona hambat 5% adalah 7.00 mm, 10 % adalah 8.30 mm, 20 % adalah 9.60 mm, 40 % adalah 11.00 mm, 60 % adalah 12.33 mm, dan 80 % adalah 14.3 mm (Misna dan Diana, 2016).
Penelitian mengenai kulit bawang merah umumnya menggunakan metode ekstrasi dengan pemanasan (sokletasi) atau tanpa pemanasan (maserasi) atau yang sering disebut dengan metode secara konvensial. Metode ekstraksi modern dengan memanfaatkan radiasi gelombang mikro yang disebut  dengan  MAE  ( Microwave  Assited  Extraction )  belum  banyak  dilakukan.  Menurut Gharekhani (2012) metode MAE terbukti lebih efektif karena pemanasan pelarut secara cepat dan efisien dibandingkan metode ekstraksi secara konvensional. Oleh karena itu tujuan dari peneltian ini adalah untuk mengetahui senyawa fitokimia yang terdapat pada ekstrak kulit bawang merah hasil  MAE  serta  menguji  aktivitasnya  terhadap S.aureus .  Hasil  yang  diperoleh  diharapkan mempunyai zona hambat yang lebih besar dibandingkan penelitian dengan menggunakan metode yang konvensional.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  yang  akan  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain    timbangan  analitik,  oven, grinder, ayakan mesh 40, tanur, desikator, Vacuum epavorator , Moisture balance , Vacuumdryer , spektrofotometer, alat-alat gelas, corong pisah, alat Shaker , aluminium foil, penangas air, wadah dan stopwatch.
Bahan  yang  digunakan  adalah  kulit  bawang  merah,  kloroform, aquadest ,  asam  sulfat, serbuk  Magnesium,  amonia,  pereaksi  Dragendorff,  pereaksi  Mayer,  pereaksi  Wagner,  asam klorida, amil alkohol, besi (III) Klorida, asam asetat anhidrat.

## Jalannya Penelitian

## A. Pengumpulan Bahan
Kulit bawang merah yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari petani bawang merah Sumenep,  Madura  dan  Jawa  Timur.  Determinasi  tanaman  dilakukan  di  Pusat  Konservasi Tumbuhan  Kebun  Raya  Bogor,  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI).  Pengeringan dilakukan  dengan  cara  diangin-anginkan,  tidak  langsung  terkena  cahaya  matahari.  Simplisia kering  disortasi,  diblender  sampai  halus  mejadi  serbuk,  dan  diayak  dengan  ayakan  mesh  40. Simplisia kering dilakukan penetapan kadar air dan kadar abu.

## B. Pembuatan Ekstrak dengan Metode MAE
Sebanyak 50 g serbuk kulit bawang merah dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan ditambahkan air sebanyak 500 ml (1:10) kemudian dimasukkan ke dalam microwave yang berdaya 700 watt selama 4 menit 30 detik. Larutan diradiasi dalam microwave secara berkala (radiasi 30 detik dan 2 menit  dimatikan) untuk menjaga suhu tidak naik  80 0 C. Hasil rendemen ekstraknya kemudian dihitung, Hasil ekstraksi didiamkan sampai suhu kamar, disaring dan filtratnya diuapkan dengan penguap vakum hingga menjadi ekstrak.

## C. Uji Fitokimia Flavonoid
Sebanyak 2 g serbuk kulit bawang merah ditambah dengan 5 ml air, lalu dipanaskan selama lima  menit  di  dalam  tabung  reaksi.  Selanjutnya  ditambah  beberapa  tetes  HCl  pekat.  Kemudian ditambahkan  0,2  g  bubuk  Zn.  Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  timbulnya  warna  merah  tua (magenta) dalam waktu 3 menit.

## Saponin
Sebanyak  100  mg  serbuk  kulit  bawang  merah  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi, ditambah 10 ml air suling sehingga seluruh cuplikan terendam, dididihkan selama 2-3 menit, dan selanjutnya  didinginkan,  kemudian  dikocok  kuat-kuat  selama  30  menit,  letakkan  tabung  dalam posisi tegak selama 30 menit, hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya buih yang stabil.

## Uji Tanin
Sebanyak  2  g  serbuk  kulit  bawang  merah  ditambah  air  sampai  terendam  semuanya. sebanyak 1 ml larutan dipindahkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 2-3 tetes larutan FeCl 3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau.

## D. Pembuatan Suspensi mikroba
Bakteri  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah S.  aureus .  Bakteri  yang  telah diremajakan selama 2 hari diambil menggunakan jarum ose kemudian masukkan kedalam tabung reaksi berisi NaCl fisiologis steril. Bakteri yang digunakan adalah kepadatan 10 6 /ml sebanyak 1 ml dengan metode pour plate (Hadioetomo, 1993).

## E. Pengujian Antimikroba
Pengujian  ekstrak  terhadap S.  aureus dilakukan  dengan  metode  difusi  kertas  cakram. Kertas  cakram  yang  digunakan  berisi  ekstrak  berkisar  0,2  µl  dengan  diameter  6  mm.  Diameter zona  bening/hambat  yang  terbentuk  diukur  dengan  menggunakan  jangka  sorong.  Kosentrasi ekstrak yang digunakan adalah 5, 10, 15, 20 dan  25 % b/v.  Medium yang digunakan adana nutrient agar (NA). Medium NA dan suspensi mikroba dimasukkan secara bersamaan dan ditunggu hingga memadat. Masing-masing kertas cakram yang telah berisi ekstrak dan kontrol dimasukan ke dalam medium  dan  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C.  Kontrol  +  yang  digunakan  adalah Amoxilin 100 ppm dan kontrol – adalah DMSO.

## Analisis Data
Antibakteri ditentukan dengan mengukur zona bening (tidak ditumbuhi bakteri) yang terdapat pada media (Hadioetomo, 1993). Posisi pengujian ekstrak dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Posisi Pengujian dengan metode Difusi Cakram (Kumalasari, 2012) Keterangan :
1= ekstrak kulit bawang merah; 2= kontrol positif (antibiotik) ; 3= kontrol negative

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  uji  fitokimia  secara  kualitatif,  maka  ekstrak  kulit  bawang  merah  memiliki senyawa  flavonoid,  saponin  dan  tanin.  Hal  tersebut  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna magenta/merah  pada  uji  flavonoid.  Estrak  terdapat  buih  menunjukkan  adanya  saponin  setelah dilakukan pengocokan. Hasil positif senyawa tanin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau pada  ekstrak.  Hasil  fitokimia  tersebut  sesuai  dengan  penelitian  Misna  dan  Diana  (2016)  bahwa ekstrak  kulit  bawang  merah  dengan  metode  maserasi  dan  pelarut  etanol  96%  terdapat  senyawa flavonoid dan tanin.
Hasil pengujian antibakteri ekstrak kulit bawang merah dengan metode MAE menunjukkan bahwa kosentrasi 5,10, 15, 20 dan 25% mempunyai zona bening/hambat  yaitu 14; 15,5; 16; 19; 19,5 mm (Tabel I).
Tabel  I.  Diameter  zona  hambat  ekstrak  kulit  bawang  merah  dengan  metode  MAE  terhadap S. aureus
Ket: 0-3 mm : lemah; 3-6 mm: sedang; > 6 mm: kuat (Pan et al ., 2009)
Hasil penelitian tersebut berbeda dengan hasil penelitian Misna dan Diana (2016), dimana pada kosentrasi yang sama yaitu 5, 10 dan 20% mempunyai zona hambat 7; 8,3 dan 9,6 mm dengan metode maserasi pelarut etanol 96%. Hasil tersebut menunjukan bahwa metode MAE lebih efektif dan  menghasilkan  zona  hambat  lebih  besar  dibandingkan  dengan  metode  maserasi.  Menurut Gharekhani (2012) metode MAE terbukti lebih efektif karena pemanasan pelarut secara cepat dan efisien dibandingkan metode ekstraksi secara konvensional.
Hasil  penelitian  ekstrak  kulit  bawang  merah  dengan  metode  MAE  terhadap  bakteri S.aureus pada  kosentrasi  5,  10,  15,  20,  dan  25  %  b/v  menunjukkan  bahwa  semakin  besar kosentrasinya maka semakin besar zona hambat yang dihasilkan (Gambar 1). Kosentrasi hambat minimum  dari ekstrak kulit  bawang merah berada pada kosentrasi  5% b/v. Hal  ini ditunjukkan dengan telah terbentuknya zona hambat pada kosentrasi minimum (5% b/v) dengan diameter 14 mm.  Hasil  penelitian  Ibriani  (2012)  menyebutkan  bahwa  ekstrak  umbi  bawang  merah  yang dilarutkan  dengan  beberapa  pelarut  memberikan  hasil  yang  berbeda  setelah  diujikan  dengan S.aureus. Ekstrak kental umbi bawang merah dengan konsentrasi  ekstrak 10% b/v  menunjukan hasil kurang menghambat pertumbuhan S.aureus, sedangkan ekstrak dengan fraksi larut n-heksan dan fraksi tidak larut n-heksan menunjukan hasil yang lebih buruk dari ekstrak kental yaitu tidak terbentuk zona hambat.  Hal  ini menunjukkan bahwa metode MAE lebih  efektif dalam  menarik
No Kosentrasi (b/v) Rata-Rata
(mm) Keterangan 1 5 % 14 Kuat 2 10 % 15,5 Kuat 3 15 % 16 Kuat 4 20 % 19 Kuat 5 25 % 19,5 Kuat 6 K + ( Amoxilin 100 ppm) 35 Kuat 7 K –  (DMSO) 0 Lemah
senyawa  metabolit  yang  terdapat  pada  ekstrak,  sehingga  kosentrasi  hambat  minimum  yang dihasilkan lebih kecil.
Gambar 1. Zona hambat ekstrak kulit bawang merah terhadap Staphylococcus aureus Keterangan : 5
: konsentrasi ekstrak 5% 10
: konsentrasi ekstrak 10%
15 : konsentrasi ekstrak 15%
20 : konsentrasi ekstrak 20%
25 : konsentrasi ekstrak 25%
K (-)  : kontrol negatif K (+)  : kontrol positif (antibiotik)
Besar kecilnya zona hambat yang terbentuk pada berbagai ekstrak dipengaruhi oleh metode ekstraksi  serta pelarut  yang digunakan.  Zona hambat  yang terbentuk  dipengaruhi oleh senyawa yang bersifat sebagai antibakteri pada ekstrak tersebut. Penggunaan metode ekstraksi dan pelarut yang  tepat  akan  mempengaruhi  luas  sempitnya  zona  hambat  (antibakteri)    yang  terbentuk (Lapornik et  al .,  2005).  Selain  kosentrasi,  adanya  zona  hambat  yang  terbentuk,  dikarenakan ekstrak  kulit  bawang  merah  mempunyai  senyawa  metabolit  sekunder  yang  bersifat  sebagai antibakteri. Senyawa tersebut diantaranya adalah flavonoid, saponin dan tanin (Tabel II).
Tabel II. Uji fitokimia ekstrak kulit bawang merah metode secara kualitatif
No  Zat aktif Hasil teori Hasil uji Keterangan 1 Flavonoid Berwarna magenta/merah Berwarna magenta/merah + 2 Saponin Terbentuknya buih Terbentuknya buih + 3 Tanin Berwarna hijau Berwarna hijau +
Menurut  Kmar  &  Pandey,  (2013)  Flavonoid  merupakan  senyawa  fenolik  yang terhidroksilasi dan disintesis oleh tanaman sebagai respon terhadap infeksi mikroba. Sifat kimia flavonoid  tergantung  pada  struktur,  tingkat  hidroksilasi,  substitusi  dan  konjugasi,  serta  derajat polimerisasi. Senyawa flavonoid suatu kelompok senyawa fenol yang terbesar ditemukan di alam. Flavon  salah  satu  jenis  flavonoid  yang  terbesar  jumlahnya  dan  sering  ditemukan  di  alam. Flavonoid yang bersifat polar merupakan senyawa yang larut dalam air, dalam  jaringan tumbuhan sifat kelarutan dan reaksi warna meliputi antosianin, proantosianin, flavonol, flavon, glikoflavon, biflavonol, kalkon dan auron, flavonon dan isoflavon. Penggunaan pelarut air pada metode MAE sesuai dengan senyawa yang akan ditarik yaitu senyawa yang bersifat polar.
Mekanisme kerja flavonoid menghambat fungsi membran sel adalah membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler dan terlarut sehingga dapat merusak membran sel bakteri dan diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler (Nuria dkk 2009). Penelitian lain menyatakan mekanisme flavonoid menghambat fungsi membran sel dengan cara mengganggu permebealitas membran sel dan menghambat ikatan enzim seperti ATPase dan phospholipase (Li dan Liu 2003). Flavonoid dapat menghambat metabolisme energi dengan cara menghambat penggunaan oksigen oleh  bakteri.  Flavonoid  menghambat  pada  sitokrom  C  reduktase  sehingga  pembentukan metabolisme terhambat. Energi dibutuhkan bakteri untuk biosintesis makromolekul (Cushnie et al 2005).
Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri yaitu dapat menyebabkan kebocoran protein dan enzim dari dalam sel (Madduluri, 2013). Saponin dapat menjadi anti bakteri karena zat aktif permukaannya mirip detergen, akibatnya saponin akan menurunkan tegangan permukaan dinding sel bakteri dan merusak permebialitas membran. Rusaknya membran sel ini sangat mengganggu kelangsungan  hidup  bakteri  (Harborne,  2006).  Saponin  berdifusi  melalui  membran  luar  dan dinding  sel  yang  rentan  kemudian  mengikat  membran  sitoplasma  sehingga  mengganggu  dan mengurangi kestabilan membran sel. Hal ini menyebabkan sitoplasma bocor keluar dari sel yang mengakibatkan kematian sel. Agen antimikroba yang mengganggu membran sitoplasma bersifat bakterisida.
Mekanisme kerja antibakteri tanin mempunyai daya antibakteri dengan cara memprepitasi protein. Efek antibakteri tanin melalui reaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim dan inaktivasi fungsi  materi  genetik.  Mekanisme  kerja  tanin  sebagai  antibakteri  adalah  menghambat  enzim reverse transkriptase dan DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk ( Nuria, dkk 2009) . Tanin memiliki aktivitas antibakteri yang berhubungan dengan kemampuannya untuk menginaktifkan  adhesin  sel  mikroba,  menginaktifkan  enzim,  dan  menggangu  transport  protein pada lapisan dalam sel (Cowan , 1999).

## KESIMPULAN
Ekstrak kulit bawang merah dengan metode Microwave Assisted Extraction (MAE) dapat menarik senyawa flavonoid, saponin dan tanin serta dapat menghambat bakteri S.aureus lebih baik dibandingkan dengan metode maserasi.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  berterima  kasih  kepada  Kementerian  Riset,  Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi Republik  Indonesia,  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  Masyarakat  Universitas  Pakuan  dan Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan.

## DAFTAR PUSTAKA
Akiyama, H. K. Fujii. O. Yamasaki., T. Oono. K. Iwatsuki. 2001. Antibacterial action of several tannin against Staphylococcus aureus. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 48: 487 – 491.
Cavalieri, S.J., I.D. Rankin., R.J. Harbeck., R.S. Sautter., Y.S. McCarter., S.E. Sharp., J.H. Ortez., dan  C.A.  Spiegel.  2005.  Manual  of  antimicrobial  susceptibility  testing.  USA:  American Society for Microbiology.
Cowan, M.M.  1999. Plant  products  as antimicrobial agents. Clinical Microbiology Reviews 12: 564 – 582.
Cushnie,  T.P.Tim.  Lamb,  Andrew  J.  2005.  Amtimicrobial  activity  of  flavonoids. International Journal of Antimicrobial Agents 26: 343-356.
Dewi, Rosalina, Sunarko, Martodihardjo, M. Y. Listiawan. 2010. Staphylococcus aureus sebagai penyebab  tersering  infeksi  sekunder  pada  semua  erosi  kulit  Dermatosis  Vesikobulosa  . Berkala Ilmu Kesehatan Kulit & Kelamin 22.(2): 102-108.
Gharekhani,  M.,  Ghorbani  M.,  dan  Rasoulnejad  N.,  2012.  Microwave  assisted  extraction  of phenolic and flavonoid compounds from eucalyptus camaldulensis dehn leaves as compared with ultrasound-assisted ectraction . Lat.Am.appl.res . 42 (3).
Hadioetomo,  R.  S.  1993.  Mikrobiologi  Dasar  Dalam  Dalam  Praktek.  Penerbit  PT  Gramedia Pustaka Utama. Jakarta
Harborne, J.B. 2006. Metode Fitokimia Edisi ke-2. Bandung: ITB.
Lapornik, B., M. Prosek and A.K. Wondra. 2005. Comparison of extracts prepared from plant by- products  using different  solvents  and extraction time. Journal of  Food Engineering 71 (2): 214-222.
Li, H. Wang, Z. Liu, Y. 2003. Review in the studies on tannins activity of cancer prevention and anticancer. Zhong-Yao-Cai . 26(6): 444-448.
Madduluri, Suresh. Rao, K. Babu. Sitaram, B. 2013. In vitro evaluation of antibacterial activity of five  indegenous  plants  extract  against  five  bacterial  pathogens  of  human. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 5(4): 679-684.
Nuria, Maulita Cut, Faizaitun, Arvin, Sumantri. 2009. Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun Jarak  Pagar  ( Jatropha  Curcas L)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus Atcc  25923, Escherichia Coli Atcc 25922, Salmonella typhi Atcc 1408. Mediagro 5(2):26–37.
Misna  dan  Diana  K.  2016.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  bawang  merah  (Allium  cepa  L) terhadap bakteri Staphylococcus Aureus . Galenika Journal of Pharmacy 2(2): 138-144.
Palczar, J.M dan Chan, E.C.S. 1988. Dasar-dasar Mikrobiologi 2. Jakarta: Penerbit UI Press.
Pan, X., Chen, F., Wu, T., Tang, H., and Zhao, Z. 2009. The acid, bile tolerance and antimicrobial property of Lactobacillus acidophilus . J. Food Control 20: 598-602.
Rahayu, Siti; N. Kurniasih,  Dan V Amalia.  2015. Ekstraksi  dan identifikasi  senyawa flavonoid dari limbah kulit bawang merah sebagai antioksidan alami. Al Kimiya 2 (1): 1-8
Sari, F.P. dan S. M. Sari. Ekstraksi zat aktif antimikroba dari tanaman yodium ( Jatropha multifida Linn) sebgai bahan baku alternatif antibiotik alami. Semarang: Fakultas Teknik Universitas Diponegoro. 2011.
Soebagio,  B.,  Rusdiana,  T.  dan  Khairudin.  2007.  Pembuatan  Gel  dengan  Aqupec  HV-505  dari Ekstrak  Umbi  Bawang  Merah  (Allium  cepa,  L.)  sebagai  Antioksidan.  Fakultas  Farmasi, Universitas Padjadjaran. Bandung