## Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sungkai
( Peronema canescens Jack) terhadap pertumbuhan Escherichia coli dengan metode difusi cakram Kirby-Bauer
D. Fransisca 1* , D. N. Kahanjak 1 , A. Frethernety 2
1 Departemen Fisiologi Kedokteran, Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia
2 Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia
Abstrak .
Penyakit diare adalah suatu kondisi serius dan berbahaya, yang  salah  satu  penyebabnya  adalah  bakteri Escherichia coli .  Sungkai  merupakan  tanaman  yang  dengan  mudah ditemukan  di  Indonesia,  khususnya  Kalimantan  Tengah. Daun  muda  sungkai  digunakan  sebagai  obat  tradisional dan  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Tujuan  penelitian untuk  mengetahui  pengaruh  aktivitas  antibakteri  dari ekstrak  etanol  daun  sungkai  ( Peronema  canescens Jack) dalam  menghambat  pertumbuhan E . coli ,  yang  diamati dengan metode cakram Kirby-Bauer. Post-test only control group design adalah metode yang dipakai pada penelitian ini. Kadar ekstrak etanol daun sungkai ( P . canescens ) yang diujikan adalah 25%, 50%, 75% dan 100%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pertumbuhan E . coli dapat dihambat dengan ekstrak etanol daun sungkai ( P . canescens ) dengan konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan  100% , yang  dibuktikan dengan adanya zona hambat sebesar 3,75mm, 3,5 mm, 3,5 mm dan 7,75 mm pada masing-masing konsentrasi secara berurutan,  dengan  konsentrasi  efektif  sebesar  25%. Kesimpulan penelitian adalah ekstrak etanol daun sungkai ( P . canescens )  dapat  menghambat  pertumbuhan E . coli . Pengembangan penelitian perlu dilakukan lebih jauh untuk mengetahui  kadar  minimum  yang  diperlukan  untuk mendapatkan aktivitas antibakteri ekstrak sungkai.
Kata kunci: E . coli, kirby-bauer, sungkai, zona hambat
Abstract . Diarrhea is a serious and dangerous condition that could be caused  by  Escherichia  coli . Sungkai  is  a  plant  that  easily could be found in Indonesia, especially in Central Borneo . The young  leaf  of  sungkai  usually  used  as  traditional  medicine and potentially as an antibacterial . Aim of this study was to determine the antibacterial activity from the ethanol extract of  sungkai  (Peronema  canescens  Jack)  leaf  to  inhibit  the growth  of  E . coli,  examined  by  Kirby- Bauer’s  disc  method . Post-test only control group design was the method used in this study . The ethanol extract of sungkai (P . canescens) leaf was tested with various concentration (25%, 50%, 75% and 100%) . The results showed that the E . coli’s growth could be inhibited  by  ethanol  extract  of  sungkai  (P . canescens)  leaf with a concentration of 25%, 50%, 75% and 100%, proved by 3,75 mm, 3,5 mm, 3,5 mm and 7,75 mm inhibition zone in each  of  concentration  sequentially,  with  the  effective concentration  of  25% . It  is  concluded  that  the  ethanol extract  of  sungkai  (P . canescens)  leaf  could  inhibit  the growth  of  E . coli . Further  research  should  be  developed  to determine  the  minimum  levels  needed  to  obtain  the antibacterial activity of sungkai extract .
Keywords: E . coli, kirby-bauer, sungkai, inhibition zone

## 1. PENDAHULUAN
Data WHO (2013) menunjukkan bahwa setidaknya satu balita meninggal karena diare per detiknya. Riset kesehatan dasar tahun 2013 memperlihatkan angka kejadian diare adalah 3,5%, sementara di Kalimantan Tengah sekitar 2,6% (Balitbangkes Kemenkes 2013). Diare dapat terjadi karena adanya infeksi dari bakteri,  virus,  parasit  dan  jamur.  Penyebab  diare  kedua  terbanyak  adalah Escherichia coli yang termasuk dalam famili Enterobacteriacceae. E . coli adalah bakteri batang dan bakteri gram negatif yang habitat alaminya berada di dalam saluran cerna manusia dan juga hewan (Brooks et al . 2010; Zhou et al . 2018). E . coli termasuk  ke  dalam  bakteri  gram  negatif  dengan  ukuran  0,4 – 0,7  mikron
* Korespondensi Penulis Email : destaryadi@gmail.com
tanpa  spora,  berbentuk  batang  pendek  dan  bergerak  dengan  flagel  peritrik. Perbedaan  sifat  virulensi  dan  strain  yang  berbeda  menyebabkan  mekanisme yang  berbeda.  Secara  umum  mekanisme  diare  yang  disebabkan  oleh E . coli adalah dengan melakukan pelekatan di epitel sel usus besar atau usus halus yang disandi oleh gen pada plasmid (Brooks et al . 2010). Sungkai  ( Paronema  canescens Jack)  merupakan  tanaman  yang  sejatinya adalah tumbuhan liar, namun karena tumbuhan ini bernilai ekonomis, banyak masyarakat membudidayakannya. Biasanya tanaman sungkai dapat dijumpai di hutan, kebun, maupun halaman. Sungkai dapat tumbuh dengan mudah dan tidak perlu perawatan khusus, sehingga tanaman ini juga digunakan sebagai pembatas atau pagar hidup pekarangan rumah (Ningsih 2013; Yanarita et al . 2014) Tanaman  sungkai  termasuk  ke  dalam  tanaman  kayu-kayuan  yang diameternya mencapai 60 cm yang mampu tumbuh hingga setinggi 20-30 m dan memiliki batang bebas cabang sekitar 15 m. Batang sungkai berwarna abu-abu atau  sawo  matang  dengan  bentuk  yang  lurus  berlekuk  kecil,  beralur  dangkal terkelupas  kecil  dan  tipis.  Penampang  kulit  luar  batangnya  memiliki  warna kekuningan, merah muda, hingga coklat. Kayunya berteras (inti kayu atau bagian tengah kayu) dengan warna sawo muda. Bulu-bulu halus tersebar pada ranting dan anak daun bagian bawah. Daun bersirip ganjil dan majemuk yang terletak berpasangan  atau  berselang  serta  lancip  pada  ujung  daunnya.  Letak  bunga berpasangan dengan kedudukan malai dan buahnya kecil-kecil. Perakarannya menyebar  dangkal  dan  tidak  tahan  terhadap  kekurangan  zat  asam  lebih  dari sepuluh hari (Ningsih 2013).
Tanaman  sungkai  ( P . canescens )  dapat  tumbuh  dengan  baik  pada ketinggian 0-600 mdpl pada cuaca tropis dengan rata-rata curah hujan tahunan 2100-2700  mm.  Penanaman  pohon  sungkai  memerlukan  tanah  dengan kandungan  unsur  hara  yang  baik  dan  tidak  dianjurkan  dilakukan  pada  tanah yang terbentuk  antara batuan kapur  pasir yang bercampur dengan tanah liat, yang kadar airnya rendah atau dikenal dengan tanah mergel, karena tanaman akan menjadi layu dan kering.
Daun  muda  tanaman  sungkai  dari  suku  verbenaceae,  secara  tradisional sering digunakan sebagai obat pilek, obat cacingan ( ringworms ), pencegah sakit gigi  dengan  cara  berkumur,  campuran  rempah  di  air  mandi  bagi  wanita  yang baru saja melahirkan dan sebagai penurun panas. Daun muda yang digunakan direbus,  kemudian  air  rebusan  dikonsumsi  (Ningsih  2013). Pemanfaatan tanaman sungkai oleh suku Dayak Kalimantan disebabkan oleh kebiasaan dan faktor terjangkaunya bahan, karena tumbuhan ini banyak ditemui di Kalimantan. Banyaknya pemanfaatan tanaman ini tidak diiringi dengan pengetahuan tentang khasiatnya oleh masyarakat suku Dayak Kalimantan secara luas, sehingga efek dan manfaatnya bagi kesehatan perlu menjadi perhatian.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  antibakteri  dari ekstrak etanol daun sungkai ( P . canescens ) dalam menghambat pertumbuhan E . coli dengan menggunakan metode pengujian cakram Kirby-Bauer.

## 2. METODOLOGI
Tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah sungkai ( Peronema canescens Jack). Metode penelitian adalah metode cakram Kirby-Bauer. Metode ini merupakan metode yang sederhana dan mudah dilakukan untuk menentukan aktivitas anti mikroba, yakni  dengan mengamati zona hambat yang terbentuk pada  uji  cakram.  Keunggulan  metode  ini  adalah  fleksibilitas  yang  lebih  besar dalam memilih obat antibiotik tertentu yang diperiksa (SHCM 2013).
Peneliti mengendalikan semua variabel luar yang memberikan pengaruh selama berlangsungnya eksperimen, jenis penelitian seperti ini disebut sebagai penelitian experimental .  Peneliti  membagi  sampel  menjadi  dua  kelompok, kelompok pertama diperlakukan sebagai kelompok eksperimen dan kelompok lainnya diperlakukan sebagai kelompok kontrol. Kedua kelompok ini diuji pada akhir  penelitian  ( post-test )  (Sastroasmoro  dan  Ismael  2011).  Kelompok eksperimen  terdiri  dari  perlakuan  ekstrak  daun  sungkai  dengan  konsentrasi 25%,  50%,  75%  dan  100%,  sedangkan  kelompok  kontrol  terdiri  dari  kontrol negatif dan positif.
Setelah  dilakukan  pengukuran,  data  dianalisis  menggunakan One  Way Anova yang bertujuan untuk mengetahui suatu hubungan atau pengaruh dengan membandingkan  lebih  dari  dua  kelompok  perlakuan  berbeda.  Selain  itu, digunakan  juga  uji  MIC  ( Minimum  Inhibitory  Concentration) untuk  melihat konsentrasi  hambat  minimum  pada  pertumbuhan  bakteri  sesudah  dilakukan inkubasi selama 18 sampai 24 jam (Balouiri 2015).

## 2.1. Lokasi kajian dan waktu penelitian
Pengambilan sampel dilakukan secara acak pada tumbuhan sungkai yang tumbuh di daerah Kuala Kurun, Kabupaten Gunung Mas. Tumbuhan yang diteliti merupakan tumbuhan yang dibibit dan diberikan perawatan berkala di daerah kebun  sungkai.  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Penelitian  Universitas Muhammadiyah,  Palangka  Raya.  Uji  determinasi  terhadap  tumbuhan  yang digunakan dilakukan di Laboratorium Taksonomi Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas  Jenderal  Soedirman.  Pengujian  kandungan  dari  daun  sungkai dilakukan di Laboratorium Pendidikan Kimia, Universitas Palangka Raya.

## 2.2. Prosedur penelitian dan analisis data
Penelitian  ini  menggunakan  daun  sungkai  seberat  6  kg.  Daun  sungkai sebagai  sampel  uji  penelitian  terlebih  dahulu  diuji  kandungan  zat  aktifnya.
Selanjutnya,  daun  sungkai  diolah  menjadi  serbuk,  lalu  diayak  dengan  ayakan nomor 60 mesh menjadi serbuk simplisia dan dimaserasi.  Hasil dari maserasi adalah  cairan  filtrat  yang  dikumpulkan  dari  beberapa  kali  proses  maserasi hingga filtrat tidak berwarna, sebanyak 5200 ml. Cairan filtrat yang terkumpul disatukan dan diuapkan dengan waterbath pada suhu 84˚C selama kurang lebih 17  jam,  hasilnya  diperoleh  ekstrak  kental  sebesar  62  gram.  Setelah  ekstrak diperoleh,  ekstrak  dibuat  dalam  berbagai  konsentrasi  yaitu  25%,  50%,  75%, 100%  dengan  pelarut  etanol  96%  (Yani  and  Putranto  2014).  Pemilihan konsentrasi  ini  dibuat  berdasarkan  pembagian  sederhana,  karena  peneliti membuat  konsentrasi  tertinggi  adalah  100%  dan  kemudian  diturunkan konsentrasinya dengan perbandingan.
Koloni E . coli yang  ditumbuhkan  pada  cawan  petri  berisi Muller  Hinton Agar (MHA) diberikan perlakuan dengan meletakan kertas cakram Kirby-Bauer yang sebelumnya sudah direndam dalam ekstrak daun sungkai selama 15 menit dan  kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37°C.  Setelah  24  jam inkubasi,  diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  pada  tiap  konsentrasi  dan pengulangannya  masing-masing  dihitung  dan  dijumlahkan,  kemudian  dibagi sesuai  dengan  banyaknya  pengulangan  untuk  menentukan  nilai  rerata  zona hambat untuk tiap konsentrasi.
Data dianalisis dengan menggunakan One Way Anova . Metode ini  dipilih karena kelompok perlakuan lebih dari dua buah (penelitian ini menggunakan 6 perlakuan  dengan  masing-masing  sebanyak  4  kali  pengulangan,  total  24 sampel).  Apabila  data  menyebar  normal,  maka  dianalisis  untuk  validitas  data dengan Post-Hoc . Hipotesis dinyatakan diterima apabila nilai p <0,05 (Aedi 2010; Sastroasmoro dan Ismael 2011; Dahlan 2013).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  analisis  kandungan  zat  aktif  dalam  daun sungkai sebelum dibuat menjadi ekstrak. Hasil uji kandungan zat aktif pada daun sungkai disajikan pada Tabel 1 . Senyawa daun sungkai yang tertera pada hasil uji dalam Tabel 1 tersebut merupakan antibakteri. Setelah diidentifikasi kandungan antibakteri pada daun sungkai, dilakukan ekstraksi dan percobaan untuk menilai zona hambat. Gambar 1 menunjukkan bahwa  zona  hambatan  tertinggi  diperoleh  pada  konsentrasi  ekstrak  daun sungkai 100%, sedangkan yang terendah pada konsentrasi 25%. Ekstrak sungkai memiliki kemampuan sebagai antibakteri dibuktikan dengan terbentuknya zona hambat  pada  pertumbuhan E . coli .  Hal  ini  sesuai  dengan  hipotesis  pada penelitian  ini  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  sungkai  dapat menghambat pertumbuhan E . coli .
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan daun sungkai.
Uji Identifikasi Hasil Keterangan Alkaloid Lapisan heksana + asam nitrat pekat + asam sulfat Terbentuk warna kuning +++ Steroid Lapisan heksana + asam asetat anhidrat + asam sulfat Terbentuk warna hijau ++ Terpenoid Lapisan heksana + asam sulfat  Tidak terbentuk warna merah - Flavonoid Lapisan etanol + serbuk logam Mg + HCl Tidak terbentuk warna oranye - Fenolik/Tanin  Lapisan etanol + FeCl 3 Terbentuk cincin warna hijau +++ Saponin Lapisan etanol (dikocok kuat) Terbentuk busa + Keterangan :  +++   : Banyak
++   : Sedang + : Sedikit
- : Tidak ada
Gambar 1 . Zona hambat terbesar yang terbentuk (kiri) dan zona hambat terkecil yang terbentuk (-).
Jangka  sorong  digunakan  untuk  mengukur  zona  hambat  yang  terbentuk dari beberapa perlakuan konsentrasi ekstrak etanol daun sungkai. Pengukuran dilakukan terhadap diameter zona hambatan di sekeliling tiap disc (Kourmouli et  al .  2018).  Pengukuran  yang  dilakukan  adalah  mengamati  dan  mengukur diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  di  sekeliling paper  disc menggunakan jangka sorong, lalu hasil pengukuran dikurangi dengan diameter paper disc yaitu 6 mm dari setiap pengukuran (Novaryatiin et al . 2018). Hasil pengukuran zona hambat menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun  sungkai ( P . Canescens ) yang diuji  dalam  berbagai  konsentrasi  (25%,  50%,  75%  dan  100%),  mampu membentuk diameter zona hambat pada pertumbuhan E . coli . Secara lengkap, hasil pengukuran zona hambat pada setiap konsentrasi disajikan pada Tabel 2 . Rata-rata zona hambat beserta standar deviasi dari masing-masing konsentrasi juga digambarkan dalam bentuk grafik pada Gambar 2 .
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Tabel 2. Hasil pengukuran zona hambat pada pertumbuhan E . coli yang diberikan ekstrak etanol daun sungkai ( P . canescens ) menggunakan metode Kirby-Bauer.
Pengulangan Diameter zona hambat (mm) Konsentrasi ekstrak etanol daun sungkai ( Peronema canescens Jack)  Kontrol (+) Kontrol (-) 25% 50% 75% 100% 1 2 3 4 8 38 0 2 3 3 4 10 37 0 3 4 4 3 7 37 0 4 6 4 3 6 39 0 Mean 3,75 3,5 3,5 7,75 38 0 Standar Deviasi 1,7 0,5 0,5 1,7 0,9 -
Gambar 2. Rata-rata diameter zona hambat.
Hasil ukur diameter zona hambat dianalisis lebih lanjut untuk mengetahui apakah data yang dimiliki telah terdistribusi normal atau tidak. Pada penelitian ini jumlah sampel yang digunakan kurang dari 30, oleh karena itu uji Shapiro- Wilk merupakan  pengujian  yang  lebih  sensitif  untuk  menilai  normalitas distribusi data. Hasil uji normalitas ditampilkan pada Tabel 3 .
Tabel 3. Hasil uji normalitas data menggunakan Shapiro-Wilk (jumlah data <50).
Statistic df Significance Zona hambat ekstrak daun sungkai 0,855 16 0,016 Tabel  3 memperlihatkan  bahwa  diameter  zona  hambat  pada E . coli memiliki  nilai  signifikan  yaitu  0,016  yang  berarti  nilai  ini  >0,05,  sehingga distribusi data dinyatakan normal. Karena data dinyatakan terdistribusi normal, selanjutnya dilakukan Uji varians data untuk memenuhi syarat One Way Anova . Pengujian  terhadap  varians  data  pada  penelitian  ini  menggunakan  uji Levene . Hasil  uji  varians  data  menunjukkan  bahwa  nilai  signifikan  yaitu  0,342  yang
0 5 10 15 20 25 30 35 40 25% 50% 75% 100% (+) (-) Re ra ta z ona h am ba t (m m ) Rata-rata
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
berarti nilai ini >0,05 ( Tabel 4 ). Berdasarkan hipotesis pada pengujian varians data dalam penelitian ini, hipotesis yang diterima adalah H 0 atau dengan kata lain data tersebut memiliki varians yang sama.
Tabel 4. Uji varians data. Levene Statistic df1 df2 Significance 1,227 3 12 0,342 Tabel  5 memperlihatkan  nilai  signifikan  dari  uji One  Way  Anova yaitu 0,001  yang  berarti  H 1 diterima  atau  terdapat  perbedaan  rata-rata  antar kelompok  konsentrasi  pada  penelitian  ini.  Untuk  mengetahui  pada  kelompok mana terdapat perbedaan tersebut, maka dilakukan analisis selanjutnya yaitu uji Post-Hoc . Hasil uji Post-Hoc menunjukkan adanya perbedaan atau selisih yang signifikan dari masing-masing kelompok data terhadap kelompok data lainnya ( Tabel 6 ). Namun demikian, ada pula yang tidak memiliki perbedaan signifikan. Kelompok  data  konsentrasi  25%  terhadap  kelompok  50%  dan  75%  tidak berbeda  signifikan,  sedangkan  kelompok  data  konsentrasi  100%  terhadap kelompok data konsentrasi lainnya memiliki perbedaan yang signifikan. Terlihat pada Tabel 6 , nilai rerata masing-masing konsentrasi memiliki perbedaan yang sangat  signifikan  (hingga  mencapai  angka  4)  saat  dibandingkan  dengan  nilai rerata konsentrasi 100%. Data memiliki perbedaan yang signifikan apabila nilai signifikannya <0,05.
Tabel 5. Hasil uji One Way Anova .
Keterangan: *konsentrasi.
Tabel 6 . Perbandingan masing-masing kelompok perlakuan (konsentrasi) dengan uji Post-Hoc .
Konsentrasi (I) Konsentrasi (J) Perbedaan rata-rata (I-J) Significance 25% 50% 0,250 0,795 75% 0,000 1,000 100% -4,500* 0,000* 50% 25% -0,250 0,795 75% -0,250 0,795 100% -4,750* 0,000* 75% 25% 0,000 1,000 50% 0,250 0,795 100% -4,500* 0,000* 100% 25% 4,500* 0,000* 50% 4,750* 0,000* 75% 4,500* 0,000* Keterangan: *terdapat perbedaan rata-rata yang signifikan. Uji One Way Anova Significance
Kelompok perlakuan ekstrak etanol daun sungkai*
0,001

## 3.2. Pembahasan
Kontrol negatif  yang menggunakan DMSO tidak  memperlihatkan adanya zona  hambat.  DMSO  dapat  digunakan  sebagai  pengencer  larutan  dan  tidak berpengaruh terhadap aktivitas antibakteri. Dengan demikian aktivitas inhibisi dapat  dipastikan  berasal  dari  ekstrak  tumbuhan  yang  digunakan,  bukan  dari pengencer yang dipakai (Rachmawati et al . 2014).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dalam  konsentrasi  25%  masih didapatkan  zona  hambat  meskipun  minimum.  Dengan  kata  lain,  konsentrasi 25%  pada  penelitian  ini  merupakan  MIC  ( Minimum  Inhibitory  Concentration) , karena  konsentrasi  tersebut  merupakan  konsentrasi  terendah  yang memberikan  aktivitas  antibakteri  dalam  penelitian  ini,  dibuktikan  dengan adanya zona hambat pada sekeliling cakram.
Zona  hambat  yang  lebih  besar  dapat  terlihat  pada  konsentrasi  100% dibandingkan  dengan  yang  terbentuk  pada  konsentrasi  75%,  50%  dan  25%. Besar  zona  hambat  yang  terbentuk  berbanding  lurus  dengan  tingginya konsentrasi ekstrak yang digunakan, hal ini berarti bahwa aktivitas antibakteri juga semakin tinggi. Hasil tersebut sesuai dengan penelitian Arum et al . (2012), daya  hambat  terhadap  bakteri  semakin  besar  seiring  bertambah  tingginya konsentrasi  sebuah  ekstrak,  karena  dalam  konsentrasi  ekstrak  yang  semakin tinggi  maka  bahan  aktif  antibakteri  yang  terkandung  juga  semakin  banyak. Penambahan  konsentrasi  senyawa  antibakteri  juga  diduga  memperkuat penetrasi  senyawa  antibakteri  yang  berpotensi  untuk  merusak  sistem metabolisme  sel  dan  menyebabkan  kematian  sel  hingga  ke  bagian  dalam  sel mikroba (Ningtyas 2010).
Semakin  lama  proses  inkubasi,  maka  diameter  zona  hambatnya  akan semakin luas. Hal ini karena senyawa aktif yang ada di dalam ekstrak tersebut akan  semakin  meningkat  dan  memberikan  zona  hambat  yang  semakin  luas seiring  bertambah  lamanya  inkubasi.  Namun,  selanjutnya  kecepatan pembentukan  zona  hambat  akan  melambat  karena  ekstrak  akan  mengalami penurunan jumlah kandungan senyawa aktif. Hal yang melambat hanya terjadi pada kecepatan pembentukan zona hambatnya saja (Hidayat et al . 2013). Terbentuknya zona hambat pada setiap konsentrasi merupakan akibat dari senyawa  aktif  yang  dimiliki  oleh  daun  sungkai  seperti  flavonoid,  saponin  dan tanin. Kandungan-kandungan tersebut memiliki aktivitas yang dapat digunakan sebagai  antibakteri  (Ningsih  2013;  Kusriani  2014;  Yani  and  Putranto  2014). Membran  sel  bakteri  dirusak  dan  dihancurkan  keutuhannya  oleh  flavonoid dengan  pembentukan  senyawa  kompleks  baru  terhadap  protein  ekstrasel, sehingga  membran  sel  yang  rusak  tersebut  tidak  bisa  diperbaiki  kembali (Ningsih  2013).  Fungsi  saponin  sebagai  antibakteri  adalah  bekerja  dengan merusak porin di  membran luar dinding sel bakteri, dengan cara membentuk
sebuah ikatan polimer kuat. Pertumbuhan bakteri terhambat atau mati akibat rusaknya  porin  sebagai  jembatan  untuk  jalan  keluar  masuknya  senyawa, sehingga  menyebabkan  krisis  nutrisi  pada  sel  bakteri  (Ningsih  2013).  Tanin sebagai antibakteri menggagalkan pembentukan sel bakteri dengan menghalau kerja  dari  DNA  topoisomerase  dan reverse  transcriptase  enzyme .  Adhesi  sel mikroba  dihambat,  enzim  dinonaktifkan  dan  pada  lapisan  dalam  sel  transpor protein dikacaukan. Dinding sel terbentuk tidak sempurna, karena polipeptida yang dimiliki oleh dinding sel dirusak, sehingga sel bakteri menjadi lisis dan mati karena adanya tekanan osmotik dan fisik (Moh Syafiq 2013; Pang et al . 2014).

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1. Kesimpulan
Pertumbuhan E . coli dapat  dihambat  dengan  aktivitas  antibakteri  yang dimiliki  oleh  ekstrak  etanol  daun  sungkai  ( P . canescens ).  Konsentrasi  25% merupakan konsentrasi efektif ekstrak etanol daun sungkai dalam menghambat pertumbuhan E . coli , terlihat dari zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram dengan diameter sebesar 3,75 mm.

## 4.2. Saran
Penelitian  berikutnya  diharapkan  dapat  terus  berkembang  dengan mengoreksi  kekurangan-kekurangan  yang  ada  selama  proses  penelitian  ini. Kekurangan  yang  dimaksud  seperti  keterbatasan  alat  dan  bahan  pendukung penelitian, waktu inkubasi yang cukup singkat, hingga pembagian konsentrasi yang  tergolong  sederhana  untuk  mengetahui  sebuah  konsentrasi  hambat minimal.  Saran  pengembangan  penelitian  pada  bagian  pembuatan  ekstrak adalah  memperbaharui  peralatan  dan  metode  yang  lebih  modern  untuk memperoleh  hasil  yang  maksimal.  Disarankan  untuk  melakukan  penelitian lanjutan  dengan  mempertimbangkan  penggunaan  konsentrasi  yang  lebih rendah  dari  konsentrasi  terendah  pada  penelitian  ini  untuk  memastikan  MIC ( Minimum  inhibitory  concentration) pada  ekstrak  daun  sungkai.  Selain  itu, disarankan  pula  untuk  melakukan  penelitian  kandungan  daun  sungkai secara kuantitatif  agar  dapat  membandingkan  kandungan  sungkai  yang  tumbuh  di Kalimantan dengan luar Kalimantan.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Aedi  N.  2010.  Pengolahan  dan  analisis  data  hasil  penelitian.  Universitas Pendidikan Indonesia. Bandung.
Arum  YP,  Supartono  dan  Sudarmin.  2012.  Isolasi  dan  uji  daya  antimikroba ekstrak daun kersen ( Muntingia calabura ). Jurnal MIPA 35(2):165-174.
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
[Balitbangkes  Kemenkes]  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan Kementerian  Kesehatan.  2013.  Riset  kesehatan  dasar.  Balitbangkes Kemenkes. Jakarta.
Balouiri M. 2015. Methods for in vitro evaluating antimicrobial activity: A review.
Journal of Pharmaceutical 6(2016):71-79.
Brooks GF, Carroll KC, Butel JS, Morse SA dan Mietzner TA. 2010. Mikrobiologi kedokteran (Jawetz, Melnick, & Adelberg) edisi 25. EGC. Jakarta.
Dahlan  MS.  2013.  Statistik  untuk  kedokteran  dan  kesehatan  edisi  5.  Salemba Medika. Jakarta.
Hidayat MN, Hifiza A dan Asmar I. 2013. Uji daya hambat ramuan herbal (bawang putih, daun sirih dan kayu manis) terhadap pertumbuhan Bacillus subtilis dan Escherichia coli . Jurnal Ilmu dan Industri Peternakan 1(1):13-23. Kourmouli A, Valenti M, van Rijn E, Beaumont HJE, Kalantzi OI, Schmidt-Ott A and Biskos  G.  2018.  Can  disc  diffusion  susceptibility  test  assess  the antimicrobial  activity  of  engineered  nanoparticles?.  J  Nanopart  Res. 20(3):62.
Kusriani. 2014. Uji aktivitas antibakteri ekstrak dan fraksi kulit batang dan daun sungkai ( Peronema Canescens Jack) terhadap Staphylococcus aureus . Jurnal Farmasi Galenika 2(1):4-6.
Moh  Syafiq  A.  2013.  Efektivitas  antibakteri  biji  pepaya  ( Carica  papaya  Linn ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa secara  in  vitro  [Skripsi].  Universitas  Muhammadiyah Semarang. Semarang.
Ningsih  A.  2013.  Potensi  antimikroba  dan  analisis  spektroskopi  isolat  aktif ekstrak  n-heksan  daun  sungkai  ( Peronema  canescens .Jack)  terhadap beberapa  mikroba  uji  [Tesis].  Pascasarjana  Program  Studi  Farmasi, Universitas Hasanudin. Makassar.
Ningtyas  R.  2010.  Uji  antioksidan,  antibakteri  ekstrak  air  daun  kecombrang ( Etlingera  elatior (Jack)  R.M.Smith)  sebagai  pengawet  alami  terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus [Skripsi]. Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negri Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Novaryatiin S, Handayani R dan Chairunnisa R. 2018. Uji daya hambat ekstrak etanol umbi hati tanah ( Angiotepris Sp.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus . Jurnal Surya Medika 3(2):23-31.
Pang Y, Wang D, Fan Z, Chen X, Yu F, Hu X, Wang K and Yuan L. 2014. Blumea balsamifera — a  phytochemical  and  pharmacological  review.  Molecules 19(7):9453-9477.
Rachmawati  F,  Nuria  CM  dan  Sumantri.  2014.  Uji  aktivitas  antibakteri  fraksi kloroform  ekstrak  etanol  pegagan  ( Centella  asiatica (L)  Urb)  serta
identifikasi  senyawa  aktifnya  [Prosiding].  Prosiding  Seminar  Nasional Peranan dan Kontribusi Herbal dalam Terapi Penyakit Degeneratif 7-13. Sastroasmoro  S  dan  Ismael  S.  2011.  Dasar-dasar  metodologi  penelitian  klinis edisi ke-4. CV. Sagung Seto. Jakarta.
[SHCM] Student Health Center Manuals. 2013. Kirby Bauer antibiotic sensitivity [internet].  Tersedia  di:  http://shs-manual.ucsc.edu/policy/kirby-bauer- antibiotic-sensitivity.
[WHO] World Health Organization. 2013. Diarrhoea: why children are still dying and what can be done [Internet]. Tersedia di: http://www.who.int/media centre/fact sheets/fs330/en/.
Yanarita, Naiem M, Budiadi and Sukarna. 2014. Development of the dayak ngaju community  forest  in  the  forest  and  peatland  area,  Central  Kalimantan, Indonesia.  IOSR  Journal  of  Environmental  Science,  Toxicology  and  Food Technology (IOSR-JESTFT) 8(3):40-47.
Yani AP and Putranto AMH. 2014. Examination of the sungkai’s young leaf extract ( Peronema  canescens Jack)  as  an  antipiretic,  immunity,  antiplasmodium and teratogenity in mice ( Mus . muculus ). International Journal of Science and Engineering (IJSE) 7(1):30-34.
Zhou Y, Zhu X, Hou H, Lu Y, Yu J, Mao L, Mao L and Sun Z. 2018. Characteristics of diarrheagenic Escherichia coli among children under 5 years of age with acute diarrhea: a hospital based study. BMC Infectious Diseases 18(63):1- 10.