## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365

## POTENSI TANNIN PADA RAMUAN NGINANG SEBAGAI INSEKTISIDA NABATI YANG RAMAH LINGKUNGAN
1. Wulanda Setty Siamtuti, 1. Renika Aftiarani, 1. Zulvika Kusuma Wardhani, 2. Nanang Alfianto, 3. Indra Viki Hartoko,
1. Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Muhammadiyah Surakarta
2. Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta

## 3. Fakultas Teknik, Universitas Muhammadiyah Surakarta Email:  wulandasetty@gmail.com
Abstrack- Tannin is a molecular compound that produced by plants and acts as an antinutrient and enzyme inhibitor, resulting in low starch hydrolysis and decreasing response to blood sugar on animals. Tannin active substance has potential to be used as a plant-based insecticide. There are several types of plants or plants that can  produce  tannins,  including  betel  nut  plants,  acacia  plants,  cork,  mangroves,  pine  and  gambier.  Gambier is commonly used by the society of Indonesia for nginang activities. The ingredients in nginang include betel, tobacco, gambier and whiting. In order to develop organic farming / eco-friendly organic insecticides are highly potential  for  use  because  they  are  safe  for  humans  and  livestock  and  also  be  natural  preservatives  as  well  as selectively controlling plant-disturbing organisms in food plants that are already immune to synthetic chemicals. The purpose of this program is to create an innovative organic pesticide that made from nginang ingredients as the main ingredient by the name of INSEKDUBANG (Insecticide Idu Abang). Determination of tannin total equivalent tannic acid using test method in the form of Spektrofotometri.
Keywords: tannin, organic insecticide, insekdubang
Abstrak- Tannin merupakan senyawa molekul yang dihasilkam oleh tanaman dan berperan sebagai penolak  nutrisi  (antinutrient)  dan  penghambat  enzim  (enzyme  inhibitor)  sehingga  mengakibatkan rendahnya hidrolisis pati dan menurunkan respons terhadap gula darah pada hewan. Zat aktif tannin potensial digunakan sebagai insektisida nabati. Ada beberapa jenis tumbuh-tumbuhan atau tanaman yang dapat menghasilkan tannin, antara lain tanaman pinang, tanaman akasia, gabus, bakau, pinus dan gambir. Gambir biasa digunakan oleh masyarakat Indonesia untuk kegiatan nginang. Bahan-bahan pada nginang antara lain sirih, tembakau, gambir dan kapur sirih. Dalam rangka mengembangkan pertanian organik/ramah lingkungan insektsida organik sangat berpotensi untuk digunakan sebab aman untuk manusia dan binatang ternak dan dapat juga sebagai bahan pengawet alami serta selektif mengendalikan organisme pengganggu tanaman pada tanaman pangan yang sudah kebal terhadap bahan kimia sintetis. Tujuan program ini untuk menciptakan sebuah inovasi pestisida organik yang terbuat dari bahan ramuan nginang sebagai bahan utama dengan nama INSEKDUBANG (Insektisida Idu Abang). Penetapan tannin total equivalent tannic acid menggunakan metode uji berupa Spektrofotometri.
Kata Kunci : tannin, insektisida organik, insekdubang
PENDAHULUAN Tanaman sayuran sebagai salah satu bahan kelengkapan makanan pokok manfaatnya sangat besar sebagai sumber gizi yang berhubungan langsung dengan kesehatan. Namun, sering kali tanaman pertanian yang sedang dalam masa tanam harus gagal panen akibat serangan hama serangga. Upaya pengendalian
hama atau mikroorganisme penggangu tanaman dilakukan pada tanaman pangan, baik tanaman padi, holtikultura, maupun tanaman perkebunan dengan menggunakan pestisida sintetik. Penggunaan pestisida merupakan salah satu cara yang terbukti mampu meningkatkan produksi hasil tanaman pangan untuk memenuhi kebutuhan
Bioeksperimen Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
makanan penduduk yang semakin meningkat terutama di negara berkembang. Namun, pestisida merupakan bahan kimia beracun yang apabila digunakan berlebihan akan berbahaya. Residu bahan kimia yang ditinggalkan dapat menjadi sumber pencemar bagi bahan pangan, air dan lingkungan  hidup  (Komisi  Pestisida, 1997). Hasil pertanian yang beredar di Indonesia, baik yang berasal dari dalam negeri maupun luar negeri tidak boleh mengandung residu pestisida melebihi batas yang ditetapkan. Namun, regulasi ini belum mengatur multi-residu pestisida yang umumnya digunakan selama brcocok tanam. Sementara dalam Peraturan Menteri Pertanian No. 27 Tahun 2009 tentang pengawasan keamanan pangan terhadap pemasukan dan pengeluaran pangan segar asal tumbuhan hanya mengatur multi-residu pestisida pada buah dan sereal. Batas maksimum residu  ( Maximum  Residue  Limits ) dari ratusan jenis pestisida pada tanaman pangan telah diberlakukan di negara Uni Eropa dan Jepang. Beberapa jenis produk pertanian Indonesia pernah ditolak oleh Jepang karena kontaminasi residu pestisida sehingga perlu perbaikan proses produksi pertanian dan pengembangan sistem pengukuran multi residu pestisida secara kromatografi (Tampubolon, 2013).
Mengingat banyaknya dampak negatif yang ditimbulkan akibat penggunana pestisida sintetik, maka perlu dicari komponen pengendalian hama terpadu (PHT) yang  dinilai aman, efektif, dan murah untuk menyusun pengelolaan Organisme Pengganggu Tanaman (OPT) pada tanaman pertanian. Dalam masalah ini perlu dilakukan upaya pengendalian yang lebih bijaksana seperti pemakaian insektisida nabati. Zat aktif yang berpotensi digunakan sebagai insektisida nabati diantaranya seperti
alkaloid, terpenoid, fenolik, tannin dan zat-zat kimia sekunder lainnya yang dapat berpengaruh terhadap sistem saraf atau otot, keseimbangan hormon, reproduksi, perilaku seperti penolak, penarik, anti-makan ( antifeeding ), dan  sistem  pernafasan  (Setyawaty, 2002). Tannin merupakan senyawa makro molekul yang dihasilkan oleh tanaman dan berperan sebagai penolak nutrisi  ( antinutrient ) dan penghambat enzim  ( enzyme  inhibitor ) sehingga mengakibatkan rendahnya hidrolisis pati dan menurunkan respons terhadap gula  darah  pada  hewan  (Matsushita et  al., 2002). Sejalan dengan pendapat Mardiana  (2009),  bahwa  senyawa tannin adalah senyawa fenolik yang merupakan polimerasi polifenol sederhana. Senyawa ini ditemukan hampir didalam dua grup, yakni tannin yang dapat dihidrolisis dan tannin kondensasi. Zat ini umumnya digunakan untuk menurunkan kadar glukosa darah dengan cara memacu metabolisme glukosa dan lemak, sebagai antiseptic, obat luka bakar, sebagai penawar racun pada kasus keracunan alkaloid, dapat menghentikan pendarahan kecil dan menghentikan diare. Selain itu, penggunaan senyawa tannin dapat menyebabkan terjadinya penyerapan air pada tubuh organisme sehingga dapat mematikan organisme, karena tubuh organisme kekurangan air.
Senyawa tannin ini bisa ditemukan pada tumbuhan gambir dan sirih. Gambir  dan  sirih  biasa  digunakan oleh masyarakat pada aktivitas nginang. Nginang adalah istilah untuk mengunyah sirih dalam bahasa Jawa yang memerlukan bahan-bahan lain sebagai “ramuannya”. Perlengkapan atau “bumbu” untuk menyiapkan sirih pinang ini secara umum terdiri atas daun sirih,  pinang,  kapur  (basah/mentah  atau kering), gambir, dan tembakau. Ada

## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
juga yang menambahkan kapulaga ke dalam ramuan ini. Semua bahan tersebut kemudian dibungkus dengan daun sirih. Tembakau biasa dipakai di bagian akhir setelah selesai mengunyah kinang tersebut. Di daerah lain, ada yang nginang tanpa mengkonsumsi tembakau.
1.  Sirih Hijau ( Piper betle , L) Daun sirih dikunyah bersama pinang, kapur  sirih,  dan  tembakau  (kadang disertai dengan perasan jeruk nipis) yang menimbulkan sensasi ringan dan perasaan tubuh lebih sehat. Mengunyah daun sirih menghasilkan warna merah pada air liur.  Daun sirih mengandung minyak  atsiri  0,8  –  1,8%  (terdiri  atas khavikol,  chavibetol  (betel  phenol), allylpyrocatechol (hydroxychavikol), allylpyrocatechol-mono  dan  –diatcetate, karvakrol, eugenol, eugenol methylether, p-cymene, cineole, caryophyllene, cadinene, estragol, terpenena, seskuiterpena, fenil propana, tannin, diatase, karoten, tiamin, riboflavin, asam nikotinat, vitamin C, gula, pati, dan asam amino. Chavikol yang menyebabkan sirih berbau khas dan memiliki khasiat antibakteri (daya bunuh bakteri lima kali lebih kuat daripada fenol biasa) serta imunomodulator (Dalimartha, 2006).
Antibakteri pada fenol daun sirih sangat efektif untuk mengurangi bahkan menekan pertumbuhan bakteri tanaman. H al tersebut dibuktikan pada hasil penelitian  Rumahlewang  (2011),  yang menunjukkan  bahwa  buah  sirih  ( Piper betle , L), memiliki kandungan fenol yang khas dan disebut betel fenol atau aseptol, khavikol, gula dan tannin, yang diduga mampu menekan pertumbuhan bakteri Xanthomonas campestris pv. campestris. Selain itu, biji sirih juga memilki kandungan eugenol yang dapat bersifat toksik terhadap bakteri, kemungkinan hal ini disebabkan oleh senyawa-senyawa tersebut yang bekerja secara sinergis
atau dengan yang lain dalam menekan pertumbuhan bakteri Xanthomonas Campestris pv. Campestris sehingga bakteri tidak mampu berkembang dengan baik karena dihambat oleh minyak yaitu eugenol yang menyebar dalam media. Ini menunjukkan bahwa eugenol mampu untuk menekan pertumbuhan bakteri karena eugenol berbau sangat menyengat dan terasa pedas.
2.  Gambir ( Uncaria gambir , Roxb)
Gambir  merupakan  produk  dari tanaman  gambir  ( Uncaria  gambir, Roxb) mengandung senyawa fungsional yang termasuk dalam golongan senyawa polifenol . Senyawa polifenol dalam gambir terutama adalah katekin (Heyne,  1987). Sejalan dengan pendapat Zeijlstra (1943), komponen utama gambir adalah catechin (asam  catechin  atau  asam  catechu)  dan asam  catechin  tannat  ( catechin anhydrid ). Gambir  juga  sedikit  mengandung quercetine, yaitu bahan pewarna yang memiliki warna kuning. Catechin bila mengalami pemanasan cukup lama atau pemanasan dengan larutan bersifat basa dengan mudah akan menjadi catechin tannat karena kondensasi sendiri dan menjadi mudah larut dalam air dingin atau air panas.
Senyawa polifenol dalam gambir memiliki khasiat antibakteri. Pernyataan tersebut dibuktikan pada hasil penelitian Pambayun  (2007),  yang  menunjukkan bahwa sifat antibakteri dari ekstrak produk gambir yang diperoleh dengan berbagai pelarut dan dinyatakan dalam diameter  daya  hambat  (DDH)  terhadap bakteri  uji  Gram-negatif  dan  bakteri  uji Gram-positif.  Dalam  ekstrak  produk gambir senyawa fenol total merupakan komponen terpenting terkait dengan sifat antibakteri. Oleh karena itu, dapat direkomendasikan bahwa ekstraksi menggunakan etil asetat pada produk gambir menghasilkan ekstrak yang paling
Bioeksperimen Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
besar daya hambatnya pada bakteri Gram-positif.
3.  Kapur Sirih (CaCO 3 ) Kapur sirih memiliki kandungan kalsium karena mempunyai rumus CaCO3. Secara umum, kalsium merupakan mineral yang amat penting bagi manusia terutama sebagai pembentuk tulang. Kapur sirih bisa digunakan sebagai obat bersamaan dengan bahan lain, seperti untuk mengatasi batuk selesma, gusi bengkak, bisul, masalah haid, digigit serangga serta penyakit kulit misalnya panu, kurap, dan kutil (Nurnabila, 2011). Rendaman air kapur sirih sangat efektif dilakukan sebagai pengendalian hama pada padi sawah karena selain dapat menetralkan tanah asam, kapur juga dapat dijadikan sebagai pupuk untuk menambah unsur kalsium yang berkurang akibat panen, erosi serta untuk menggemburkan tanah. Hal tersebut dibuktikan pada hasil penelitian Handayani  (2013),  yang  menunjukkan bahwa ternyata bahan nabati yang diuji dapat digunakan untuk mengendalian keong mas dengan sifat daya kerja yang berbeda. Interaksi antara rendaman kapur sirih dengan ekstrak daun ubi karet berpengaruh nyata terhadap mortalitas keong mas ( Pomacea canaliculata Lamarck) pada perlakuan selama 24, 48, dan 72 jam. Perbedaan konsentrasi dan jenis senyawa dapat memberikan pengaruh berbeda terhadap penghambatan aktivitas makan hama. Proses kematian hama akan semakin cepat dengan pertambahan konsentrasi yang digunakan.
4.  Tembakau  ( Nicotinana tobacum , Linn) Nikotin dihasilkan dari akar tanaman dan selanjutnya didistribusikan di daun melalui batang, dalam bentuk murni merupakan cairan yang tidak berwarna, rasa pahit dan pedas, mudah larut dalam
air dan pelarut organik. Tembakau mengandung bahan aktif golongan alkaloid seperti anobarin,  anatobine, myosine,  nicotinoid,  nicotelline,  nicotyrine, norcotine dan pirolidine, yang dapat bertahan selama seminggu. Ekstrak tembakau mampu digunakan sebagai larvasida, sejalan dengan hasil  penelitian  Susanti  (2012),  bahwa tumbuhan zodia dan tembakau efektif digunakan sebagai pengendali jentik Aedes  aegypti . Ekstrak zodia lebih baik dalam membunuh jentik Aedes  aegypti. Konsentrasi minimal dari ekstrak zodiac maupun ekstrak tembakau yang dapat membunuh jentik Aedes  aegypti adalah 1,56%.
Hasil  penelitian  Listiyati  (2012), menunjukkan bahwa, hasil maserasi daun tembakau seberat 1 kg menghasilkan 100,7 ml maserasi tembakau. Untuk penyemprotan ke nyamuk dilakukan sebanyak 3 kali penyemprotan dengan konsentrasi 90%. Penyemprotan I : efektivitas 86,9% Penyemprotan II : efektivitas 100% Penyemprotan III : efektivitas 100%. Hal ini pun bisa dipercobakan untuk serangga lain. Kandungan bahan kimia dalam tanaman tersebut menunjukkan bioaktivitas pada serangga, seperti bahan penolak ( repellent ), penghambat makan ( antifeedant ), penghambat perkembangan serangga ( insect growth regulator ), dan penghambat peneluran ( oviposition deterrent ).

## METODE PENELITIAN
1.  ProduksI Waktu pelaksanaan produksi dan pengujian INSEKDUBANG selama 3  bulan,  yaitu  pada  bulan  Mei–Juli 2016. Pelaksanaan proses produksi INSEKDUBANG  di  Jl.  Ahmad  Yani  130 RT. 03/06 Kartasura, Kartasura, Sukoharjo, Jawa Tengah 57167 .
Alat yang digunakan dalam proses produksi adalah:

## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
Tabel 1. Alat produksi Alat Volume Satuan Blender 2 Buah Timbangan  digital kapasitas  5 kg 1 Buah Gelas takaran 1 liter 2 Buah Pengaduk kayu 2 Buah Drum plastik 100 liter 1 Buah Saringan alumunium 2 Buah Saringan kasa/halus 2 Buah Ember 20 liter 2 Buah Pisau tanggung 2 Buah Aquarium  power  liquid filter 1 Buah Botol air mineral 20 liter 1 Buah Air pump 1 Buah Gayung air 1 Buah Baskom plastic 2 Buah Bahan yang digunakan dalam proses produksi INSEKDUBANG
adalah
sebagai berikut: Tabel 2. Bahan Pendukung Jenis Bahan Volume Satuan % Sirih Hijau 1 Kg 4,32 Gambir 1 Ons 0,432 Kapur Sirih/ Enjet 1 Ons 0,432 Tembakau Su- sur ½ Kg 2,16 Tetes 1 Liter 6,26 Air Mineral 20 Liter 86,39 Botol 250 ml 80 Buah - Stiker 80 Lembar - Proses  produksi  INSEKDUBANG dilakukan melalui beberapa tahap agar dapat menghasilkan sebuah produk yang berkualitas, diantaranya:
a. Persiapan
Mempersiapakan alat dan bahan yang dibutuhkan yaitu blender, baskom, pengaduk, timbangan, takaran gelas, drum sedang, sirih
hijau, gambir, kapur sirih, dan tembakau kering

## b. Pencampuran
Bagan 1. Proses pencampuran
c.  Pencetakan Memasukkan hasil tersebut kedalam kemasan dan ditutup rapat.
Bioeksperimen Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
2.  Pengujian Kandungan Pengujian kandungan INSEK- DUBANG  dilakukan  di  Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas  Gajah  Mada  Jl.  Kaliurang Km  4  Sekip  Utara  Yogyakarta.  Berupa uji kualitatif kuantitatif dengan metode spektrofotometri untuk mengetahui jenis zat aktif dan kadar zat aktif yang ada pada 85 gram INSEKDUBANG yang telah diubah menjadi bentuk padatan dengan parameter berupa alkaloid, tannin dan minyak atsiri dalam dua kali ulangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN 1.  Penetapan Tannin Total Equivalent
Tannic  Acid  Metode  Spektrofo- tometri Metode penetapan Tannin ini melalui beberapa tahap, yaitu: mengekstraksi 0,1 g sampel dengan 10 ml dietil eter selama 20 jam, kemudian menyaring dan meresidu yang diperoleh, kemudian mendidihkan dengan 10 ml aquades selama 2 jam, kemudian mendinginkan dan menyaring. Menambahkan ekstrak yang diperoleh dengan aquades hingga volume ekstrak 5 ml. Menambahkan 1 ml ekstrak dengan 0,1 ml reagen Folin Ciocalteu dan
divortex, menambahkan dengan 2 ml Natrium Carbonat 20% dan divortex lagi. Menambahkan dengan aquades hingga volume 5 ml. Membaca absorbansi pada λ 760 nm setelah menginkubasi selama 30 menit pada suhu kamar (Chanwitheesuk, 2004).
2.  Penetapan Kurva Baku Standar Penetapan kurva baku standar ini melalui beberapa tahap, yaitu: menimbang dengan seksama standar asam tanat, menambahkan dengan 0,1 ml reagen Folin Ciocalteu dan divortex, menambahkan dengan 2 ml Natrium Carbonat 20% dan divortex lagi, kemudian menambahkan dengan aquades hingga volume 5 ml, membaca absorbansi pada λ  760  nm  setelah  menginkubasi  selama 30 menit pada suhu kamar. Membuat larutan stok, menambahkan sebanyak 5 ml pipet larutan standar dengan aquades. Mengencerkan sesuai tabel pengenceran. Berat standar tannic acid: 0,0100 g. Pada uji kandungan tannin pada sampel INSEKDUBANG dengan metode uji Spektrofotometri diperoleh hasil sebagai berikut:
Tabel 3. Tabel Pengenceran Standar Quinine Conc 3,125 6,25 12,5 25 50 Ppm Lart Induk 312,5 625 1250 2500 5000 µl Chloroform 9987,5 9375 8750 7500 5000 µl Volume 10 10 10 10 10 Ml Tabel 4. Kadar Tannin Equivalent Tannic Acid metode Spektrofotometri Sampel Replikasi Berat Sampel (g) FP (x) Volume add (ml) Hasil pembacaan (ppm) Total Tannin Equivalent Tannic Acid (% b/b) Rata- rata (% b/b) INSEKDUBANG 1 0,1004 10 100 68,109 67,84 67,65 2 0,1009 10 100 68,071 67,46

## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
Senyawa tannin adalah senyawa astringent yang memiliki rasa pahit dari gugus polifenolnya yang dapat mengikat dan mengendapkan atau menyusutkan protein. Zat astringent dari tannin menyebabkan rasa kering dan puckery (kerutan)  di  dalam  mulut setelah mengkonsumsi teh pekat, anggur merah atau buah yang mentah. Dekstruksi atau modifikasi tannin selama ini berperan penting dalam pengawet kayu, adsorben logam berat, obat-obatan, antimikroba dll. Tannin merupakan senyawa phenol yang larut dalam air dan memiliki berat molekul antara 500 dan  3000  Da.  Tannin  diklasifikasikan menjadi hydrolyzable tannin dan condensed tannins (proanthocyanidins).
Gambar 2. Struktur gallotannins (Hagerman, 2002)
3.  Hydrolyzable Tannin Struktur molekul hydrolyzable tannin di tengah-tengahnya memiliki gugus  karbohidrat  (biasanya  D-glukosa) merupakan hidroksil dari karbohidrat atau phenolic esterified seperti asam gallat (dalam  gallotannins)  atau  asam  ellagat (dalam  ellagitannins).  Hydrolyzable tannin yang dihidrolisis oleh asam lemah atau basa lemah menghasilkan karbohidrat dan asam phenolik. Contoh
gallotannins adalah ester asam gallic glukosa  dalam  asam  tannic  (C 76 H 52 O 46 ), ditemukan dalam daun dan kulit di banyak spesies tanaman.
4.  Condensed Tannins Condensed tannins dikenal sebagai proanthocyanidins merupakan polimer yang terdiri dari 2 sampai 50 (atau lebih) unit  flavonoid  yang  bergabung  dengan ikatan karbon-karbon, yang tidak rentan terhadap hidrolisis. Tannin terkondensasi adalah  produk  polimerisasi  flavan-3- ols  dan  flavan-3,4-diol  atau  campuran dari dua polimer, yang disebut sebagai ‘’flavans”  (Salunkhe,  Chavan,  &  Kadan, 1989; Sanderson et al ., 2001 ).
Gambar 3. Struktur catechin dan procyanidin (Hagerman, 2002)
Beberapa kegunaan tannin antara lain sebagai pelindung pada tumbuhan pada saat masa pertumbuhan bagian tertentu pada tanaman, sebagai anti hama bagi tanaman sehingga mencegah serangan fungi, digunakan dalam proses metabolisme pada bagian tertentu tanaman sejalan dengan hasil penelitian yang telah dilakukan (Iwan, 2002) untuk pengujian tersebut diperoleh hasil yaitu bahan pengawet kayu dengan tannin
Bioeksperimen Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
dapat meningkatkan ketahanan kayu terhadap serangan rayap kayu kering.
5.  Penentuan Total Alkaloid Metode penentuan total alkaloid ini melalui beberapa tahap, yaitu: menimbang sampel dengan seksama, menambahkan 5 ml HCl 2 N, mengocok kemudian menyaring. Mencuci larutan dengan 10 ml larutan chloroform sebanyak 3 kali dalam corong pisah, menetralkan larutan dengan   menambahkan 0,1 N NaOH, menambahkan 5 ml larutan BCG  dan  5  ml  buffer  fosfat,  kemudian menambahkan larutan chloroform 5 ml,
mengaduk dengan magnetic stirrer selama 15 menit dengan kecepatan 500 rpm, mengulangi ekstraksi dengan chloroform sebanyak 2 kali. Mengumpulkan fase chloroform, mengevaporasi dengan gas nitrogen. Setelah itu, menambahkan 10 ml chloroform pada labu ukur 10 ml, kemudian membaca serapan pada panjang gelombang 470 nm, kemudian membuat kurva baku standar dengan menimbang standar quinine sebanyak 10 mg. Dari hasil pengujian 85 g sampel INSEKDUBANG,  diperoleh  hasil  kadar alkaloid sebagai berikut:
Tabel 5. Tabel Pengenceran Standar Quinine Conc 6,25 12,5 25 50 100 200 400 Ppm Lart Induk 31,25 62,5 125 250 500 1000 2000 µl Chloroform 4968,75 4937,5 4875 4750 4500 4000 3000 µl Tabel 6. Total alkaloid equivalent quinine Sampel Replikasi Berat Sampel (g) FP (x) Volume add (ml) Hasil pembacaan (ppm) Total Tannin Equivalent Tannic Acid (% b/b) Rata- rata (% b/b) INSEKDUBANG 1 0,1052 1 10 147,031 1,40 1,43 2 0,1020 1 10 148,784 1,46
Beberapa kelompok alkaloid diantaranya adalah benzyl isoquinon, seperti paverin, berberin, tubokuranin dan morfm. Alkoloid dapat berfungsi sebagai larvasida botani. Alkaloid dengan struktur indol, dikelompokkan sebagai alkaloid indol seperti strikhnin dan quinine yang terasa pahit dan merupakan senyawa yang berfungsi repelen bagi serangga. Alkoloid purin terdiri dari berbagai jenis alkaloid yang merupakan derivat dari asam nikotinat, purin, asam antranilat, poliasetat, dan terpenes. Penggunaan bahan-bahan yang berasal dari tumbuhan dapat digunakan sebagai salah satu alternatif penggunaan insektisida kimia yang sering disebut pestisida nabati atau bioinsektisida.
Pestisida nabati mengandung senyawa bioaktif sepeti alkaloid, terpenoid, fenolik dan zat-zat kimia sekunder lainnya yang dapat berpengaruh terhadap sistem saraf atau otot, keseimbangan hormon, reproduksi, perilaku seperti penolak, penarik,  anti-makan  (antifeeding)  dan sistem  pernafasan  (Setyawaty,  2002). Daun sirih ( Piper betle L.) termasuk dalam famili piperaceae (sirih-sirihan)  yang mengandung minyak atsiri dan senyawa alkaloid (Nugroho, 2003). Alkaloid yang terkandung dalam daun sirih ( Piper betle L.) adalah arecoline.
6.  Penetapan kadar minyak atsiri Metode penetapan kadar minyak atsiri ini melalui beberapa tahap, yaitu:

## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
menimbang sampel dengan seksama, memasukkan sampel ke dalam labu, menambahkan aquades 500 ml, menambahkan batu didih, memasangkan pada rangkaian alat destilasi stahl, mengisi buret buret dengan aquades
hingga penuh, memanaskan selama 4 jam setelah mendidih, setelah penyulingan selesai membiarkan selama 1 jam, menghitung volume minyak atsiri pada buret.
Tabel 8. Kadar minyak atsiri Sampel Replikasi Berat Sampel (g) Volume sampel (ml) Kadar Minyak (% b/b) Kadar rata-rata (% b/b) INSEKDUBANG 1 5,00 0,01 0,2 0,2 2 5,00 0,01 0,2
Minyak atsiri merupakan minyak yang mudah menguap dan mengandung aroma atau wangi yang khas (Sastroamidjojo, 1988). Minyak atsiri dari daun sirih mengandung 30% fenol dan beberapa derivatnya. Kavikol merupakan komponen paling banyak dalam minyak atsiri yang memberi bau khas pada sirih. Menurut  Maryani  (2004),  sirih merupakan tanaman yang dikenal merupakan tanaman yang tingginya mencapai 15 m. Daun berbentuk jantung, jika diremas mempunyai aroma sedap. Bagian tanaman yang digunakan adalah daunnya. Daun sirih mengandung minyak atsiri  sebanyak  4%  (hidroksi  kavikol, kavikol, kavibetol, estragol, eugenol, metil eugenol, karvakrol, terpen, dan seskuiterpen), tannin, diastae, gula, dan pati. Kandungan minyak atsirinya memiliki daya  membunuh  kuman  (bakteriosid), fungi, dan jamur. Sejalan dengan pendapat Dalimartha (2008), bahwa rasa sirih pedas, bersifat hangat, astringen, aromatik, dan stimulan. Chavikol yang menyebabkan sirih berbau khas dan memiliki khasiat antibakteri (daya bunuh bakteri lima kali lebih kuat daripada fenol biasa) serta imunomodulator.

## SIMPULAN DAN SARAN
1. Simpulan Bahan ramuan nginang yang berupa sirih, tembakau, gambir dan kapur
sirih berpotensi digunakan sebagai bahan dasar pembuatan insektisida nabati yang ramah lingkungan karena mengandung senyawa kimia berupa tannin sebesar 67,65%, alkaloid sebesar 1,43% dan minyak atsiri sebesar 0,2%. Senyawa tersebut dapat menurunkan intensitas penyakit pertanian seperti wereng, walang sangit, dll dengan cara menghambat pertumbuhan serangga dewasa maupun larvanya.
2. Saran Setelah adanya pemaparan tentang kandungan  INSEKDUBANG  serta  uji laboratorium kandungan zat kimianya, disarankan  produk  INSEKDUBANG yang sudah dibuat untuk ditindaklanjuti sebagai penelitian yang menginginkan produk INSEKDUBANG tersebut.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada Ristek Dikti atas didanainya program usaha kami dalam Program Kreativitas Mahasiswa Kewirausahaan 2017, kepada Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah memfasilitasi dalam pelaksanaan program usaha kami dalam Program Kreativitas Mahasiswa Kewirausahaan 2017 dan pihak-pihak yang telah membantu terlaksananya program ini
Bioeksperimen Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
DAFTAR PUSTAKA Dali martha,  S.  (2008). Atlas  Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 4 . Jakarta: Puspa Swara, Anggota Ikapi.
Hagerman, A.E. (2002). Tannin Chemistry . Miami University, Oxford, USA.
Handayani,  D.  (2013).  “Uji  Efektivitas Pengendalian  Keong  Mas  ( Pomacea canaliculata Lamark) pada Padi Sawah dengan Menggunakan Rendaman Air Kapur Sirih (CaCO3) dan Ekstrak Daun Ubi Karet
( Manihot  glaziovii M. A)”. Jurnal EduBio Tropika . 1(2). 61-120.
Heyne,  K.  (1987). Tumbuhan  Berguna Indonesia. Jilid II . Diterjemahkan oleh Badan Litbang Kehutanan, Jakarta.
Yayasan Sarana Wana Jaya, Jakarta.
Iwan R. (2002), Tannin, Fakultas Pertanian Jurusan Ilmu Kehutanan, Universitas Sumatera Utara.
Listiyati, A. K., Nurkalis, U., Sudiyanti,
&  Hestiningsih,  R.  (2012).  “ Ekstraksi Nikotin dari Daun Tembakau  ( Nicotina  Tabacum ) dan Pemanfaatannya Sebagai Insektisida Nabati Pembunuh Aedes sp.” Jurnal Ilmiah Mahasiswa. 2(2). 67-70.
Mardiana,  Lina.  (2009). Mencegah  dan Mengobati Kanker pada Wanita dengan Tanaman  Obat . Jakarta: Penebar Swadaya.
Maryani, H. dan Lusi, K. (2004). Tanaman Obat  untuk  Influenza . Tangerang: Agromedia Pustaka.
Matsumura,  F.  (1985). Toxicology  of Insecticides , 2 nd Edition.  New  York:
Plenum Press.
Matsushita, H.; T. Mio & O. Haruko (2002). Porcine Pancreatic α -amylase Shows binding activity toward N-linked Oligosaccharides  of  Glycoproteins. The  Journal  of  Biological  Chemistry , 277, 4680—4686

## Nurnabila,  Nida.  (2011).  “Formulasi
Tablet Hisap Ekstrak Etanol Sirih (Piper  betle,  L.)  Dan  Kapur  Sirih (CaCO 3 ) Dengan Mikrokristalin Selulosa  (Avicel)  sebagai  Pengikat serta Pengaruhnya Terhadap Kadar CD4 dalam Darah”. Skripsi . Jurusan Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan  Universitas  Negeri  Syarif Hidayatullah.
Pambayun, R. dkk. (2007). ” Kandungan Fenol dan Sifat Antibakteri dari berbagai Jenis Ekstrak Produk Gambir  ( Uncaria  gambir Roxb)”. Majalah Farmasi Indonesia . 18(3). 141- 146.
Rumahlewang, Filhemina.
(2011). “Efektifitas  Extrak  Buah  Sirih Sebagai Pestisida Botanis terhadap Xanthomonas
campestris pv. Campestris”. Jurnal  Agroforestri.
6(2). 109-113.
Salunkhe, D., Chavan, J., & Kadan, S.
(1989).  Nutritional  Consequence of dietary Tannins in ‘‘Dietary Tannins”: Consequents and Remedies. Boca Raton, FL: CRC Press. p. 113.
Sanderson,  G.,  Ranadive,  A.,  Eisenburg, L., Farrel, F., Simons, R., Manley, C.,  et  al.  (2001).  “Contribution  of Polyphynolic Compounds to the taste of tea, Sulfur and Nitrogen compound  in  food  flavors.  In  G. Charalambous,  I.  Katz  (Eds.)”. Acs  symposium  series (Vol.  26,  p. 14). Washington, DC: American Chemical Society.
Sastroamidjojo,  S.,  (1988). Obat  Asli Indonesia , Jakarta: Penerbit Dian Rakyat.
Susanti,  L.  Dan  Boesri,  H.  (2012). “Toksisitas Biolarvasida Ekstrak Tembakau Dibandingkan dengan Ekstrak Zodia terhadap Jentik

## Bioeksperimen
Volume 3 No.2, (September 2017) ISSN 2460-1365
Vektor Demam Berdarah Dengue ( Aedes  aegypti )”. Bulan  Penelitian Kesehatan. 40(2). 75-84.
Tampubolon, B. D. dkk. (2013). Pertanian Standar dan Penilaian Kesesuaian. Jakarta: Indeks.
Zeijlstra,  F.  Z.  N.  (1943).  “Sirih,  Pinang en  Gambier.  Dalam  C.  J.J.  Van Hall  en  C.  Van  de  Koppel  (Eds.). Landbouw in Indische Archipel, W. Van Hoeve’s, Gravenhage”. Majalah Farmasi Indonesia . 18(3). 141-146.