PEMBERIAN FUCOIDAN SECARA ORAL DARI HASIL EKSTRAKSI Sargassum sp.

## UNTUK MENANGGULANGI MOTILE AEROMONAS SEPTICEMIA PADA
IKAN LELE ( Clarias sp.)
Nuri Muahiddah *)# , Alim Isnansetyo **)
*) Jurusan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Mataram
**) Departemen Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Gadjah Mada
(Naskah diterima: 24 Agustus 2022; Revisi final: 13 Maret 2024; Disetujui publikasi: 13 Maret 2024)

## ABSTRAK
Motile aeromonas septicemia (MAS) adalah salah satu penyakit yang sering menyebabkan kematian pada ikan, dan disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila . Salah satu cara untuk menanggulangi penyakit bakteri yang menyerang ikan adalah dengan menggunakan imunostimulan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian fucoidan secara oral terhadap perkembangan gejala penyakit ikan lele yang diinfeksi A. hydrophila .  Penggunaan metode asam digunakan untuk mengekstraksi fucoidan dari Sargassum sp. Penelitian ini melibatkan empat perlakuan dan tiga ulangan. Perlakuan P1, P2, P3, dan P4, masing-masing meliputi kontrol, 2, 4, dan 6 g fucoidan per kilogram pakan. Pakan diberikan kepada ikan dalam jumlah 5% dari berat kering pakan terhadap biomassa ikan. Setelah itu, dilakukan uji tantang dengan memberikan dosis 0,1 mL per ikan dari A. hydrophila dengan kepadatan 2,77 x 10 7 sel per mL secara intraperitonial satu minggu setelah pemberian fucoidan secara oral. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian fucoidan secara oral dengan dosis 2, 4, dan 6 g fucoidan per kilogram pakan tidak menghasilkan peningkatan yang signifikan dalam sintasan (P>0,05) dan tidak mampu menunda MTD pada ikan yang terinfeksi A. hydrophila KP1 jika infeksi dilakukan di bawah LD 50 . Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menambahkan dosis fucoidan pada pakan ikan lele untuk mendapatkan hasil yang lebih baik.
KATA KUNCI: Clarias sp.; fucoidan; imunostimulan; MAS; Sargassum sp.
ABSTRACT: The Oral Administration of Fucoidan from the Extraction of Sargassum sp. to Combat Motile Aeromonas Septicemia in Catfish ( Clarias sp.)
Motile aeromonas septicemia (MAS) is a disease that often causes death in fish, and is caused by Aeromonas hydrophila . One of ways to overcome bacterial diseases that attack fish is to use immunostimulants. The aim of this study was to determine the effect of oral administration of fucoidan on the development of disease symptoms in catfish infected with A. hydrophila . The acid method was used to extract fucoidan from Sargassum sp. This experiment involved four treatments and three replications. Treatments P1, P2, P3, and P4, respectively, included control, 2, 4, and 6 g of fucoidan per kilogram of feed. Feed was given to fish in an amount of 5% of the dry weight of the feed to fish biomass. After that, a challenge test was carried out by giving a dose of 0.1 mL per fish of A. hydrophila with a density of 2.77 x 10 7 cells per mL intraperitoneally one week after oral administration of fucoidan. The results showed that
#Korespondensi: Jurusan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Mataram Email: nurimuahiddah@unram.ac.id
oral administration of fucoidan at doses of 2, 4, and 6 g of fucoidan per kilogram of feed did not result in a significant increase in survival (P>0.05) and was unable to delay MTD in fish infected with A. hydrophila KP1 if infection carried out below LD50. Further study needs to be done by adding a dose of fucoidan to catfish feed to get better results.
KEYWORDS: Clarias sp.; fucoidan; immunostimulants; MAS; Sargassum sp.

## PENDAHULUAN
Kontribusi bidang akuakultur dalam menyediakan produk ikan terus meningkat. Produksi budidaya ikan lele di Indonesia tahun 2020 saja bernilai 17,3 miliar Rupiah. Dalam sistem budidaya yang intensif, ikan sering dipelihara dalam kepadatan populasi yang tinggi. Hal ini dapat menyebabkan stres pada ikan dan memicu penurunan sistem kekebalan tubuh karena adanya persaingan yang tinggi untuk sumberdaya seperti pakan, ruang hidup, dan oksigen sehingga ikan mudah terserang penyakit (Alfisha et al ., 2020).
Motile aeromonas septicemia (MAS) adalah salah satu penyakit yang sering menyebabkan kematian pada ikan, dan disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Bakteri A. hydrophila merupakan bakteri Gram-negatif yang umumnya ditemukan di lingkungan air, termasuk dalam sistem budidaya ikan. Penyakit ini dapat menyebabkan gejala yang beragam pada ikan, termasuk luka terbuka, pembengkakan, dan perubahan warna pada tubuh ikan. Penyakit MAS umumnya berkembang pesat pada kondisi stres, seperti yang sering terjadi dalam sistem budidaya intensif (Muahiddah & Diamahesa, 2022a). Thomas et al . (2013) juga melaporkan bahwa penyakit ini memang merupakan salah satu penyakit yang dominan menyerang ikan di Pulau Jawa. Tanda-tanda umum dari penyakit MAS pada ikan meliputi lesi atau luka terbuka pada kulit ikan, pembengkakan pada bagian tubuh tertentu, seperti perut atau mata, perubahan warna tubuh ikan menjadi lebih gelap atau kusam, kerontokan sisik, dan kehilangan nafsu makan. Perilaku yang tidak biasa, seperti berenang secara tidak teratur
atau mengapung di permukaan air dan ematian mendadak dalam jumlah yang signifikan dalam populasi ikan juga merupakan gejala dari MAS.
Pengendalian penyakit MAS sering kali masih mengandalkan penggunaan obat-obatan dan antibiotik. Meskipun penggunaan obat- obatan ini dapat memberikan hasil yang efektif dalam mengobati infeksi bakteri pada ikan, terdapat beberapa masalah yang terkait dengan ketergantungan pada penggunaan antibiotik. Penggunaan antibiotik secara berlebihan dan tidak tepat dapat menyebabkan bakteri menjadi resisten terhadap antibiotik. Hal ini membuat pengobatan menjadi kurang efektif dan dapat mengancam kesehatan ikan serta kesehatan manusia melalui rantai pangan. Antibiotik yang digunakan dalam pengobatan penyakit ikan dapat mencemari lingkungan air jika tidak terurai dengan baik. Hal ini dapat mengganggu ekosistem perairan dan mengancam keberlanjutan lingkungan (Nirmala et al ., 2022). Menurut Azhar dan Wirasisya (2019), salah satu cara untuk menanggulangi penyakit bakteri yang menyerang ikan adalah dengan menggunakan imunostimulan. Imunostimulan adalah senyawa atau bahan alami yang dapat merangsang atau meningkatkan sistem kekebalan tubuh ikan, sehingga membantu ikan untuk melawan infeksi bakteri, virus, atau patogen lainnya. Muahiddah & Diamahesa (2022a) mengungkapkan bahwa imunostimulan dapat berupa beta-glukan yang merupakan polisakarida yang ditemukan dalam beberapa jenis alga, ragi, dan jamur. Beta-glukan telah terbukti dapat meningkatkan aktivitas fagositosis dan produksi sitokin pada ikan, yang merupakan mekanisme pertahanan tubuh terhadap infeksi.  Beberapa jenis alga, seperti Spirulina dan Chlorella , mengandung
senyawa bioaktif yang dapat merangsang sistem kekebalan tubuh ikan. Ekstrak alga telah digunakan sebagai imunostimulan untuk meningkatkan ketahanan tubuh ikan terhadap infeksi. Menurut Rahma et al . (2015), salah satu bahan imunostimulan yang efektif digunakan pada ikan lele adalah Sargassum sp.
Fucoidan merupakan salah satu imunostimulan yang dapat diisolasi dari Sargassum sp. yang melimpah di perairan. Darmawan (2023) menyebutkan bahwa fucoidan yang diekstraksi dari Sargassum polycystum yang dicampurkan ke pakan dapat mengurangi dampak dari infeksi white spot syndrome virus (WSSV) pada Penaeus monodon . Muahiddah dan Diamahesa (2022b) juga melaporkan bahwa fucoidan yang diekstraksi dari rumput laut coklat Sargassum wightii yang dicampurkan ke pakan dapat meningkatkan sintasan P. monodon yang terinfeksi WSSV. Aplikasi imunostimulan pada ikan budidaya dengan cara mencampurkannya pada pakan (oral) adalah metode paling efisien (praktis) (Nugroho & Haryadi, 2017). Pemberian fucoidan dari ekstrak Sargassum sp. secara oral pada ikan lele untuk menanggulangi serangan A. hydrophila penyebab penyakit MAS belum pernah diteliti. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian fucoidan secara oral terhadap perkembangan gejala penyakit serta mean time to death (MTD) ikan lele yang diinfeksi A. hydrophila. Penelitian ini diharapkan mampu menjadi solusi ramah lingkungan dan praktis dalam menanggulangi MAS pada ikan lele. Aplikasi penggunaan fucoidan sebagai imunostimulan akan memberikan nilai tambah Sargassum sp. sebagai sumber fucoidan.

## BAHAN DAN METODE
Ekstraksi dan Purifikasi Fucoidan dari Sargassum sp.
Sampel rumput laut dikeringkan tanpa terkena sinar matahari langsung, kemudian dicacah hingga mencapai ukuran + 0,5 cm. Ekstraksi ini menggunakan larutan hidrogen
klorida (HCl) 0,1 N selama 24 jam. Cacahan rumput laut (100 g) dimaserasi dalam larutan 0,1 N HCl. Ekstrak yang diperoleh, dipisahkan dari filtrat, kemudian rumput laut diekstrak ulang. Ekstraksi dilanjutkan dengan menggunakan larutan 0,2 N HCl dengan dipanaskan dengan suhu 70 o C selama 2 jam. Ekstrak yang diperoleh dijadikan satu, kemudian dipekatkan menggunakan evaporator pada suhu 60 o C. Setelah tahap evaporasi, ekstrak dipresipitasi dengan etanol 95% dingin dan dilanjutkan dengan sentrifugasi dengan kecepatan 3.500 rpm selama 15 menit. Supernatan dibuang dan pelet dilarutkan dalam akuades pH 2, kemudian dilakukan presipitasi kembali menggunakan CaCl 2 dan disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3.500 rpm selama 15 menit. Supernatan diambil dan pelet dibuang. Fucoidan kemudian dipresipitasi dengan etanol 95% dingin lalu disentrifugasi untuk diambil peletnya. Pelet hasil sentrifugasi dikeringkan dengan oven pada suhu 60°C selama ± 2 hari.
Revirulensi Aeromonas hydrophila
Aeromonas hydrophila yang akan digunakan untuk menginfeksi lele harus ditingkatkan virulensinya terlebih dulu. Bakteri yang digunakan adalah A. hydrophila KP1. Bakteri A. hydrophila KP1 dikultur di trypticase soy broth (TSB) pada suhu 37ºC dan diinkubasi selama 24 jam. Panen bakteri dilakukan dengan ditambahkannya phosphate buffer saline (PBS) ke dalam media tumbuh.  Suspensi A. hydrophila KP1 dari medium TSB disuntikkan secara intraperitonial ke ikan lele ukuran 7-9 cm sebanyak sembilan ekor dengan dosis 0,1 mL per ekor dengan kepadatan bakteri 3,52 x 10 8 CFU mL -1 . Reinfeksi dilakukan tiga kali sehingga diperoleh A. hydrophila yang virulen atau ganas.

## Rancangan Percobaan
Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan empat perlakuan yang terdiri atas tiga perlakuan fucoidan dan satu kontrol dengan tiga kali ulangan. Secara rinci perlakuan
Pemberian Fucoidan Secara Oral dari Hasil ...... (Nuri Muahiddah)
tersebut sebagai berikut: P1: Pemberian pakan (oral) kontrol fucoidan 0 g kg -1 berat pakan ikan P2: Pemberian pakan (oral) 2 g fucoidan kg -1 berat pakan ikan P3: Pemberian pakan (oral) 4 g fucoidan kg -1 berat pakan ikan P4: Pemberian pakan (oral) 6 g fucoidan kg -1 berat pakan ikan

## Penyiapan Pakan
Fucoidan diberikan secara oral pada pakan komersial (kadar protein 28%) yang dilakukan dengan cara pakan D 0 dicampurkan dengan fucoidan sesuai perlakuan. Setelah itu pakan dicetak dengan pencetak pelet.

## Pemeliharaan Ikan Lele
Ikan lele yang dibeli dari petani ikan di Bantul, Daerah Istimewa Yogyakarta, dengan ukuran 7-9 cm dipelihara dalam bak dengan jumlah tebar 10 ekor per bak dengan volume bak 25 L. Pakan diberikan tiga kali sehari yaitu pagi 07:00 WIB, siang 12:00 WIB, dan sore hari 16:00 WIB dengan pemberian sebesar 5% dari biomassa ikan per hari berdasar berat kering pakan. Ikan uji diberi pakan uji selama 7 hari sebelum diuji tantang dengan A. hydrophila . Pemeliharaan kualitas air dilakukan secara berkala dengan cara penyiponan dasar bak serta pergantian air sebanyak 10% sebanyak tiga kali seminggu

## Uji Tantang
Uji tantang dilakukan setelah 1 minggu ikan lele diberikan fucoidan secara oral. Uji tantang dilakukan dengan cara menyuntikkan A. hydrophilla KP1 secara intraperitonial dengan kepadatan bakteri 2,77 x 10 7 CFU mL -1 sebanyak 0,1 mL per ekor. Ikan dipelihara selama 7 hari setelah uji tantang.

## Uji Komponen Fucoidan
Hidrolisis fucoidan dilakukan dengan fucoidan hasil ekstraksi sebanyak 10 mg dilarutkan di dalam microtube dengan akuades sebanyak 500 µl. Larutan dipindahkan di dalam tabung reaksi kaca dan ditambahkan 500 µl
trifluoroasetat (TFA) kemudian dihomogenisasi dengan vortex . Setelah itu dipanaskan dalam waterbath dengan suhu 100˚C; 6 jam. Selama pemanasan, dilakukan penggojokan setiap 30 menit sekali. Setelah itu sampel disentrifugasi pada 3.000 rpm; 15 menit untuk mendapatkan supernatan.

## Parameter yang Diamati
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah mortalitas dan perkembangan gejala patologi makroskopis secara internal dan eksternal, panjang dan berat relatif ikan serta parameter kualitas air. Parameter kualitas air yang diamati adalah suhu dan pH yang diukur menggunakan water quality checker (WQC). Pengukuran amoniak dilakukan di Balai Besar Teknik Kesehatan Lingkungan (BBTKL) Kabupaten Bantul.

## Analisis Data
Data sintasan, mean time to death (MTD) dan berat serta panjang relatif dianalisis menggunakan ANOVA. Uji statistik dilakukan dengan menggunakan aplikasi Mini Tab.

## HASIL DAN BAHASAN
Hasil Ekstraksi Fucoidan dari Sargassum sp.
Sargassum sp . adalah salah satu jenis alga cokelat yang menghasilkan senyawa fucoidan. Fucoidan adalah polisakarida alami yang ditemukan dalam dinding sel alga cokelat seperti Sargassum (Gazali et al., 2018). Hasil ekstraksi fucoidan pada penelitian ini adalah dari 100 g berat kering Sargassum sp. menghasilkan 680 mg berat kering fucoidan. Hasil ekstraksi fucoidan dari alga cokelat bisa sangat bervariasi tergantung metode ekstraksi dan spesies alga cokelatnya (Ode & Wasuha . , 2014) . Perbedaan waktu pengambilan sampel juga memengaruhi hasil ekstraksi yang didapat (Djaeni et al ., 2017). Kadar air dari pakan yang mengandung fucoidan dari Sargassum sp. berkisar 6,89-10,99% (Tabel 1).
Sintasan dan Mean Time to Death Ikan Lele
Perbedaan tingkat ketahanan ikan lele terhadap infeksi A. hydrophila ditunjukkan dengan sintasan dan MTD. Mean time to death dapat dilihat pada Tabel 2. Semakin banyak ikan yang mati dan semakin cepat waktu kematian, maka semakin buruk tingkat ketahanan ikan tersebut (Nastir & Khalil, 2016). Perlakuan P3 (fucoidan 4 g kg -1 pakan) menghasilkan MTD paling tinggi yaitu 38,67 ± 25,40 jam, namun pada hasil ANOVA menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan nyata (P>0,05) antarperlakuan. Hal ini menunjukkan bahwa perlakuan penambahan fucoidan dalam pakan pada penelitian ini tidak menekan MTD ikan uji. Pada perlakuan P1, P2, dan P4, serangan A. hydrophila KP1 bersifat akut dengan gejala yang ditimbulkan berbahaya dan dalam waktu yang singkat yaitu 28,00 ± 6,93, 25,60 ± 2,77, dan 28,33 ± 4,51 jam. Pada perlakuan P3, ikan lele mengalami infeksi yang bersifat sub-akut. Hal tersebut ditandai dengan beberapa ikan mati 1 hari setelah infeksi A. hydrophila KP1 dan beberapa ikan mati 6 hari setelah infeksi A. hydrophila KP1. Kematian ikan 6 hari setelah infeksi memperlihatkan proses timbulnya penyakit secara perlahan-lahan dan bertahan cukup lama (Mangunwardoyo et al ., 2010). Hal tersebut mengindikasikan bahwa perlakuan P3 memiliki MTD tinggi namun dengan mortalitas yang juga tinggi yaitu mencapai 53,3%.
Perlakuan P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) menghasilkan sintasan paling tinggi yaitu 63,33%, namun pada hasil ANOVA tidak terdapat perbedaan nyata antarperlakuan (P>0,05) (Tabel 3). Imunostimulan termasuk fucoidan memang dipercaya dapat meningkatkan sistem imun ikan sehingga dapat meningkatkan proteksi ikan terhadap penyakit. Hal tersebut dapat terlihat jika serangan bakteri atau penyakit yang menyerang ikan tinggi (Maryani & Rosdiana, 2020). Perbedaan pengaruh pemberian fucoidan pada ikan atau udang untuk menahan serangan penyakit dapat disebabkan oleh perbedaan dari struktur dan komponen fucoidan yang didapat serta sumber spesies alga cokelat yang digunakan (Fakar, 2023).
Azhar dan Wirasisya (2019) menyatakan salah satu cara menghambat serangan penyakit adalah dengan menambahkan imunostimulan pada pakan, sehingga nutrisi yang masuk dapat meningkatkan pertumbuhan ikan. Hasil ANOVA dari panjang relatif menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05) antarperlakuan. Perlakuan P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) menunjukkan nilai paling rendah yaitu 7,07 ± 2,77% dan berbeda nyata dengan perlakuan P1, P2, dan P4 (Tabel 4).
Berat relatif paling tinggi yaitu pada perlakuan P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan) dengan nilai 65,58 ± 16,94% dan nilai terendah ada pada perlakuan P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) yang hanya 50,53 ± 14,65% (Tabel 5). Berat relatif ikan lele dengan pemberian fucoidan pada dosis yang berbeda tidak menunjukkan perbedaan nyata (P>0,05) antarperlakuan.
No. Perlakuan Treatments Kadar air (%) Water content (%) 1. P1 kontrol (0 g fucoidan kg -1 pakan) P1 control (0 g fucoidan kg -1 feed) 6,89 2. P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) P2 (2 g fucoidan kg -1 feed)
10,99 3. P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) P3 (4 g fucoidan kg -1 feed)
10,31 4. P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan)
P4 (6 g fucoidan kg -1 feed) 8,48
Tabel 1. Kadar air pakan yang diberi fucoidan dari Sargassum sp. Table 1. Water content of feed given fucoidan from Sargassum sp.
No. Perlakuan
Treatments Mean time to death (jam) Mean time to death (hours)
1. P1 kontrol (0 g fucoidan kg -1 pakan)
P1 control (0 g fucoidan kg -1 feed)
28,00 ± 6,93 2. P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) P2 (2 g fucoidan kg -1 feed)
25,60 ± 2,77 3. P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) P3 (4 g fucoidan kg -1 feed)
38,67 ± 25,40 4. P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan)
P4 (6 g fucoidan kg -1 feed)
28,33 ± 4,51
Tabel 2. Mean time to death dalam jam ikan lele yang diberi dosis fucoidan berbeda secara oral setelah diinfeksi dengan Aeromonas hydrophila KP1
Table 2. Mean time to death in hours of catfish given different doses of fucoidan orally after being infected with Aeromonas hydrophila KP1
Tabel 3. Sintasan ikan lele yang diberi dosis fucoidan berbeda secara oral setelah diinfeksi dengan

## Aeromonas hydrophila KP1
Table 3. Survival of catfish given different doses of fucoidan orally after being infected with Aeromonas hydrophila KP1 No. Perlakuan Treatments
Sintasan (%) Survival (%)
1. P1 kontrol (0 g fucoidan kg -1 pakan) P1 control (0 g fucoidan kg -1 feed)
60,00 ± 0,00 2. P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) P2 (2 g fucoidan kg -1 feed) 63,33 ± 15,28 3. P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) P3 (4 g fucoidan kg -1 feed)
46,67 ± 5,77 4. P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan) P4 (6 g fucoidan kg -1 feed)
43,33 ± 25,17
Tabel 4. Panjang relatif ikan lele yang diberi dosis fucoidan berbeda
Table 4. Relative length of catfish given different doses of fucoidan No. Perlakuan Treatments
Panjang relatif (%) Relative length (%) 1. P1 kontrol (0 g fucoidan kg -1 pakan) P1 control (0 g fucoidan kg -1 feed)
9,88 ± 2,49 b 2. P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) P2 (2 g fucoidan kg -1 feed)
10,69 ± 2,95 b 3. P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan)
P3 (4 g fucoidan kg -1 feed)
7,07 ± 2,77 a
4. P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan) P4 (6 g fucoidan kg -1 feed)
10,98 ± 2,76 b
*Rerata dengan huruf superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05) *Mean values with different superscript letters indicate significant differences (P<0.05)

## Tabel 5. Berat relatif ikan yang diberi dosis fucoidan berbeda
Table 5. Relative weight of catfish given different doses of fucoidan
No. Perlakuan Treatments
Berat relatif (%) Relative weight (%)
1. P1 kontrol (0 g fucoidan kg -1 pakan) P1 control (0 g fucoidan kg -1 feed)
56,81 ± 22,93 2. P2 (2 g fucoidan kg -1 pakan) P2 (2 g fucoifan kg -1 feed) 55,20 ± 11,33 3. P3 (4 g fucoidan kg -1 pakan) P3 (4 g fucoidan kg -1 feed) 50,53 ± 14,65 4. P4 (6 g fucoidan kg -1 pakan)
P4 (6 g fucoidan kg -1 feed)
65,58 ± 16,94

## Gejala Penyakit Makroskopis
Fucoidan termasuk salah satu imunostimulan yang dapat meningkatkan aktivitas makrofag, fagosit, lizozim, dan komplemen, sehingga lebih responsif dan kuat dalam menahan serangan penyakit (Jasminandar et al ., 2020). Fucoidan kemudian dikenali untuk menstimulasi aktivitas makrofag dalam tubuh ikan. Makrofag tersebut kemudian mengaktifkan berbagai bahan yaitu lizozim, komplemen, interferon dan sitokin serta limfosit yang berperan penting dalam imunitas non-spesifik pada ikan. Interferon yang dikenal juga sebagai reseptor kimia kemudian mengaktifkan sel natural killer (NK) yang kemudian membunuh sel bakteri. Komplemen meningkatkan kemampuan fagositosis dan menimbulkan lisis pada bakteri.
Mulia dan Vauziyah (2021) menjelaskan bahwa gejala yang ditimbulkan akibat infeksi A. hydrophila meliputi ikan kehilangan nafsu makan, diikuti dengan berkurangnya berat badan, hemoragik di kulit, kerusakan pada insang dan sirip, kehilangan keseimbangan serta akhirnya mati. Hasil pengamatan gejala penyakit ikan setelah uji tantang secara eksternal adalah ikan kesulitan bernafas, tidak
nafsu makan, menggantung di permukaan, diam di dasar bak, berenang tidak beraturan, kulit ikan mengelupas, sirip geripis, dan perut membengkak. Pada pengamatan internal terlihat usus dan ginjal mengalami pendarahan serta produksi cairan berlebih di dalam perut ikan (Tabel 6). Gejala yang ditunjukkan ikan uji pada Gambar 1 sesuai dengan gejala MAS yang dinyatakan pustaka sehingga kematian ikan uji setelah infeksi memang disebabkan oleh penyakit MAS.

## Kualitas Air
Sulasi et al . (2018) menyatakan bahwa kualitas air (lingkungan) harus dipertahankan pada kisaran optimal sehingga mendukung kesehatan dan pertumbuhan ikan lele.  Kualitas air selama pemeliharaan masuk dalam kisaran normal bagi ikan lele dapat dilihat pada Tabel 7. Nilai pH berkisar 6,85-7,22, suhu berkisar 24,6-26,2 o C, dan NH 3 (amoniak) berkisar 0,03- 0,09 ppm. Nilai pH, suhu, dan amoniak pada penelitian ini masih dalam kisaran normal kualitas air pemeliharaan ikan sehingga kualitas air ini tindak mengganggu kesehatan dan pertumbuhan ikan uji.
Gambar 1. Gejala internal ikan lele setelah diinfeksi dengan Aeromonas hydrophila KP1. A. pendarahan pada usus dan ginjal, B. produksi cairan tubuh berlebihan Figure 1. Internal symptoms of catfish after being infected with Aeromonas hydrophila KP1. A. bleeding in the intestines and kidneys, B. excessive body fluid production
No. Perlakuan Treatments Hari ke-1 Day 1 Hari ke-2 Day 2 Hari ke-3 Day 3 Hari ke-4 Day 4 Hari ke-5 Day 5 Hari ke-6 Day 6 Hari ke-7 Day 7 1. P1 1, 6, 7, 8 1, 2 6, 7, 8 9 9 9 9 2. P2 1, 4, 5, 6, 8 1,2, 6, 7 1 9 9 9 9 3. P3 1, 2, 4, 5, 6, 8 1, 4, 6, 7 9 9 9 6, 7 9 4. P4 1, 2, 3, 6, 8 1, 4, 5, 6, 7 1, 4, 5, 6, 7 1 1 1 9
Deskripsi: Description :
1.  Ikan kehilangan nafsu makan
1.  Fish loss of appetite
2.  Ikan berkumpul di dasar bak (lethargi)
2.  Fish staying at the bottom of the pond (lethargic)
3.  Ikan berenang tidak beraturan
3.  Fish swimming irregularly
4.  Ikan menggantung di permukaan air
4.  Fish hanging at the water surface
5.  Ikan mengalami kesulitan bernafas
5.  Fish experiencing difficulty in breathing
6.  Lesi hemoragik tampak pada permukaan tubuh
6.  Hemorrhagic lesions appearing on the body surface
7.  Perut membengkak (produksi cairan berlebihan)
7.  Swollen abdomen (excessive fluid production)
8.  Sirip tampak kasar
8.  Fins appearing ragged
9.  Ikan normal
9.  Fish normal
Tabel 6. Perkembangan gejala penyakit pada ikan lele yang diberi dosis fucoidan berbeda setelah diinfeksi dengan Aeromonas hydrophila KP1
Table 6. Development of disease symptoms in catfish given different doses of fucoidan after being infected with Aeromonas hydrophila KP1
Tabel 7. Kualitas air selama pemeliharaan ikan lele yang diberi dosis fucoidan berbeda Table 7. Water quality during rearing period of catfish given different doses of fucoidan
No. Parameter Parameters P1 P2 P3 P4 1. pH 6,92-7,1 6,92-7,22 6,91-7,21 6,85-7,15 2. Suhu (˚C) Temperature (˚C) 24,6-26,2 25,6-26,2 25,5-26,2 25,9-26,2 3. Amoniak (ppm) Ammonia (ppm) 0,03-0,09 0,03-0,09 0,03-0,09 0,03-0,09

## KESIMPULAN
Penambahan fucoidan pada pakan sebanyak 2, 4, dan 6 g kg -1 pakan belum berpengaruh nyata terhadap sintasan ikan lele yang diinfeksi A. hydrophila KP1 apabila infeksi di bawah LD 50 . Penambahan fucoidan pada pakan sebanyak 2, 4, dan 6 g kg -1 pakan belum berpengaruh nyata terhadap MTD ikan lele yang diinfeksi A. hydrophila KP1 pada infeksi di bawah LD 50 . Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menambahkan dosis fucoidan pada pakan ikan lele untuk medapatkan hasil yang lebih baik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis memberikan ucapan terima kasih Prof. Alim Isnansetyo atas dukungan dan bimbingannnya dalam penelitian ini. Terima kasih kepada Tyas Ayu Wulansari dan Husni Mubarak M.I. atas kerjasamanya dalam membantu penelitian ini.

## DAFTAR ACUAN
Alfisha, T. H., Syakirin, M. B., Mardiana, T. Y., Linayati, & Madusari, B. D. (2020). Penambahan vitamin C pada pakan buatan terhadap pertumbuhan benih ikan gabus ( Channa striata ). Jurnal Litbang Kota Pekalongan , 18 (2), 168-174. https://doi. org/10.54911/litbang.v19i0.131
Azhar, F., & Wirasisya, D. G. (2019). Pelatihan penanganan streptococcusis pada ikan nila (Oreochromus niloticus) menggunakan pakan fermentasi di Desa Gontoran Lingsar. Jurnal Abdi Insani , 6 (2), 229-240. https://doi.org/10.29303/abdiinsani. v6i2.240
Darmawan, M. (2023). Isolasi, penapisan, karakterisasi, dan identifikasi bakteri penghasil fukoidanase dari Sargassum polycystum [Disertasi, Universitas Lampung). Universitas Lampung.
Djaeni, M., Ariani, N., Hidayat, R., & Utari, F. (2017). Ekstraksi antosianin dari kelopak bunga rosella ( Hibiscus sabdariffa L.) berbantu ultrasonik: Tinjauan aktivitas antioksidan. Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan , 6 (3), 1-15.
Fakar, W. A. (2023). Senyawa fucoidan pada teripang laut untuk pengobatan diabetes mellitus: Sebuah tinjauan pustaka. Jurnal Medika Hutama , 5 (01), 3768-3778.
Gazali, M., Nurjanah, & Zamani, N. P. (2018).
Eksplorasi senyawa bioaktif alga cokelat Sargassum sp. Agardh sebagai antioksidan dari Pesisir Barat Aceh. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 21 (1), 167- 178. https://doi.org/10.17844/jphpi.
v21i1.21543
Jasmanindar, Y., Salosso, Y., & Dahoklory, N. (2020). Imunostimulan Gracilaria verrucosa pada budidaya ikan lele Clarias sp. Jurnal Aquatik , 3 (2), 67-72. https://doi. org/10.35508/aquatik.v3i2.3235
Mangunwardoyo, W., Ismayasari, R., & Riani,
E. (2016). Uji patogenisitas dan virulensi Aeromonas hydrophila Stanier pada ikan nila ( Oreochromis niloticus Lin.) melalui postulat Koch. Jurnal Riset Akuakultur , 5 (2), 145-255. http://dx.doi.org/10.15578/ jra.5.2.2010.145-255
Maryani, & Rosdiana. (2020). Peranan imunostimulan akar kuning Arcangelisia flava Merr pada gambaran aktivasi sistem imun ikan mas ( Cyprinus carpio L). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia , 8 (1), 22-36. https://doi.org/10.36706/jari.v8i1.10328
Muahiddah, N., & Diamahesa, W. A. (2022a). Pengaruh imunostimulan dari bahan-bahan alami pada ikan dalam meningkatkan imun non-spesifik untuk melawan penyakit ( Review ). Clarias: Jurnal Perikanan Air Tawar , 3 (2), 37-44. https://doi. org/10.56869/clarias.v3i2.397
Muahiddah, N., & Diamahesa, W. A. (2022b). Potential use of brown algae as an immunostimulant material in the aquaculture field to increase non-specific immunity and fight disease. Journal of Fish Health , 2 (2), 109-115. https://doi. org/10.29303/jfh.v2i2.2075
Mulia, D. S., & Vauziyyah, S. (2021). Pengobatan lele dumbo ( Clarias gariepinus L.) yang terinfeksi Aeromonas hydrophila di Kabupaten Banyumas dengan menggunakan ekstrak daun api-api ( Avicennia marina ). Sainteks , 18 (1), 9-24. https:// doi.org/10.30595/sainteks.v18i1.10650
Nasir, M., & Khalil, M. (2016). Pengaruh penggunaan beberapa jenis filter alami terhadap pertumbuhan, sintasan dan kualitas air dalam pemeliharaan ikan mas ( Cyprinus carpio ). Acta Aquatica: Aquatic Sciences Journal , 3 (1), 33-39. https://doi. org/10.29103/aa.v3i1.336
Nirmala, A., Hardiatma, A., Nurhikmah, & Saleh, L. (2022). Penggunaan batang pepaya dalam pengendalian penyakit infeksi bakteri pada pembesaran ikan Nila. Prosiding Seminar Nasional Politeknik Pertanian Negeri Pangkajene Kepulauan , Pangkep , 3 , 154-162. https://doi.org/10.51978/proppnp.v3i1.259
Nugroho, E., & Haryadi, J. (2017). Budidaya lele dengan sistim total akuakultur . Penebar Swadaya Grup.
Ode, I., & Wasahua, J. (2014). Jenis-jenis alga coklat potensial di perairan pantai Desa Hutumuri Pulau Ambon. Agrikan: Jurnal Agribisnis Perikanan , 7 (2), 39-45. https:// doi.org/10.29239/j.agrikan.7.2.39-45
Rahma, F. W., Mahasri, G., & Surmartiwi, L.
(2015). Pengaruh pemberian ekstrak Sargassum sp. dengan pelarut metanol pada pakan terhadap jumlah eritrosit dan differensial leukosit ikan lele dumbo ( Clarias gariepinus ). Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan , 7 (2), 213-218. https://doi. org/10.20473/jipk.v7i2.11209
Sulasi, Hastuti, S., & Subandiyono. (2018).
Pengaruh enzim papain dan probiotik pada pakan buatan terhadap pemanfaatan protein pakan dan pertumbuhan ikan mas ( Cyprinus Carpio ). Sains Akuakultur Tropis: Indonesian Journal of Tropical Aquaculture , 2 (1), 1-10. https://doi. org/10.14710/sat.v2i1.2448
Thomas, J., Madan, N., Nambi, K. S. N.,
Majeed, S. A., Basha, A. N., & Hameed, A. S. S. (2013). Studies on ulcerative disease caused by Aeromonas caviae - like bacterium in Indian catfish, Clarias batrachus (Linn). Aquaculture , 376-379 , 146-150. https://doi.org/10.1016/j. aquaculture.2012.11.015