POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS SECARA ENDOGEN PADA DIABETES MELLITUS TIPE-2
Fathiyah  Safithri Fakultas  Kedokteran  Universitas  Muhammadiyah  Malang jl.  Bendungan  Sutami  No.  188A  Malang
Email  :  fathiyahsafithri@yahoo.com

## ABSTRAK
Penurunan massa sel-â pankreas terjadi pada sebagian besar pasien diabetes melitus tipe-II dan hal ini berlangsung secara progresif. Pankreas merupakan salah satu organ yang  mempunyai kemampuan meregenerasi dirinya sendiri dalam upaya mempertahankan massa sel-â. Regenerasi dapat terjadi melalui replikasi sel-â matur, diferensiasi/ transdiferesiasi sel punca/ progenitor.  Keadaan  resistensi  insulin  yang  berlangsung  secara  kronik  menyebabkan  kemampuan  regenerasi  tersebut menurun. Biji jintan hitam ( Nigella sativa ) yang mengandung bioaktif thymoquinone, asam oleat, asam linoleat dan saponin berpotensi meningkatkan kemampuan regenerasi pankreas secara endogen melalui stimulasi proses replikasi sel-â, mempengaruhi niche dan mengaktivasi sel punca endogen.
Kata kunci : diabetes mellitus type II, massa sel-â pankreas, regenerasi pankreas endogen, replikasi, diferensiasi, jintan hitam

## ABSTRACT
Decreasing  pancreatic  â-cell  mass  occurs  in  the  majority  of  patients  with  type  II  diabetes  mellitus  and  this  progresses progressively. Pancreas is one of  the organs that have the ability to regenerate itself  in an effort to maintain the â-cell mass. Regeneration can occur through mature cell-beta replication or stem cell / progenitor differentiation / transdifferentiation. The state of  chronic insulin resistance causes decreasing pancreatic regeneration ability. Black cumin seeds (Nigella sativa) contains  bioactive  thymoquinone,  oleic  acid,  linoleic  acid  and  saponin  that  potentially  increase  endogenous  pancreatic regeneration through stimulate â-cell replication, affect the stem cell niche and activate endogenous stem cells.
Keywords : diabetes mellitus type II, pancreatic â-cell mass, endogenous pancreatic regeneration, replication, differentiation, black cumin

## PENDAHULUAN
Diabetes Mellitus  (DM) merupakan  suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia  yang  terjadi  karena  kelainan  sekresi insulin, kerja insulin atau kedua-duanya. Pada tahun 2020,  jumlah  penderita  DM  tipe  2  diperkirakan akan  mencapai  250  juta  orang  di  seluruh  dunia (ADA,  2004).  Indonesia    saat  ini  menduduki rangking ke-empat jumlah penderita diabetes  setelah Amerika  Serikat,  China  dan  India.  Berdasarkan
data  dari  Badan  Pusat  Statistik  (BPS)  jumlah penderita  diabetes pada tahun 2003  sebanyak 13,7 juta  orang  dan  diperkirakan  pada  2030  ada  20,1 juta  penderita  diabetes,  sekitar  80%  -  90%  dari jumlah  tersebut  adalah  DM  tipe  2.  Tingginya prevalensi  DM  tipe  II  diperkirakan  juga  akan memicu  kenaikan komplikasi DM seperti penyakit jantung  iskemik,  stroke,  neuropati,  retinopati,  dan nefropati.
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 77 Resistensi  insulin  merupakan  patogenesis utama  DM  tipe-II.  Keadaan  resistensi  insulin awalnya  akan  menyebabkan  respon  kompensasi pada  pankreas,  namun  bila  hal  ini  berlangsung kronik  akan  menyebabkan  berkurangnya    massa sel-â secara progresif. Kehilangan massa sel-â akan semakin  menurunkan  kadar  insulin  dalam  darah (Rhodes,  2005)

## Kemampuan  Kompensasi  Pankreas  dalam Kondisi Resistensi Insulin
Diabetes  mellitus  tipe  II  ditandai  dengan produksi glukosa hepar yang berlebihan, penurunan sekresi insulin, dan resistensi insulin. Resistensi insulin merupakan  patogenesis  utama  DM  tipe  II  dan terjadi  mendahului  onset  DM.  Keadaan  resistensi insulin ini ditandai dengan ketidakmampuan insulin untuk  merangsang  uptake  glukosa  oleh  jaringan target, seperti otot dan  lemak. (Saini, 2010). Pada awal keadaan resistensi insulin, glukotoksisitas dan lipotoksisitas  menginduksi  pankreas  melakukan upaya kompensasi dengan cara meningkatkan sekresi insulin  untuk  mempertahankan  keadaan normoglikemi.  Peningkatan  sekresi  insulin  terjadi antara  lain  melalui  peningkatan  massa  sel-â  dan atau peningkatan fungsi sel-â. Penelitian terdahulu
membuktikan terjadi peningkatan massa sel-â pada pasien  obesitas,  hal  yang  sama  juga  terjadi  selama kehamilan  (Jetton, 2005). Peningkatan massa sel-â distimuli  terutama  oleh  FFA.  FFA  merangsang peningkatan  sekresi  GLP-1  oleh  sel  L  di  intestin. GLP-1 meningkatkan proliferasi sel-â (Prentki, 2006).
Untuk  mengkompensasi  keadaan hiperglikemi,  pankreas  juga  melakukan  upaya kompensasi  berupa  peningkatan  fungsi  sel-â (Gambar  1).  Hal  tersebut  terjadi  akibat  stimuli peningkatan metabolisme glukosa di sel-â, sinyaling lipid  (FFA),  GLP-1,  aktivasi  parasimpatis,  inhibisi simpatis atau up-regulasi ekspresi gen insulin (Prentki, 2006).  Metabolisme  glukosa  melalui  perubahan piruvat  menjadi acetyl  Co-A dan  oksidasi  di mitokondria  akan  meningkatkan  rasio  ATP/ADP di sel-â. Selanjutnya terjadi penutupan kanal K yang sensitif   ATP,  depolarisasi  membran  plasma, pembukaan kanal Ca 2+ dan peningkatan Ca 2+ yang mencetuskan eksositosis insulin. FFA meningkatkan sekresi  insulin  melalui  dua  mekanisme,  pertama interaksi FFA dengan reseptor FFA-1/GPR40 pada membran akan mengaktivasi sinyal intraseluler dan meningkatkan  Ca 2+ .  Kedua,  melibatkan  interaksi antar  anaplerosis  yang  menghasilkan malonyl-CoA dan LC-CoA (Roduit,  2004).
Gambar  1.    Faktor  yang  Menstimuli  Reaksi  Kompensasi  Sel-â  (Prentki,  2006)

## 78 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
Regulasi transkripsi gen insulin melibatkan interaksi kompleks  antara  sinyal second  messenger dari metabolisme  nutrien  dan  rangsangan  hormon (misalnya P13K dan p38 MAPK ), faktor transkripsi (misalnya Pdx1, mafA, Beta2/Neuo D ) dan beberapa faktor  transkripsi DNA  binding  site .  Glukosa  dan GLP-1 merupakan stimulator utama untuk aktivasi transkripsi  gen  insulin  dan  selanjutnya  terjadi  up- regulasi biosintesa insulin (Prentki, 2006)
Peningkatan  metabolisme  oksidasi  glukosa dan  FFA  di  mitokondria  akan  meningkatkan membran  potensial  mitokondria  dan    produksi superoksid.  Peningkatan  produksi  superoksid menyebabkan    paparan  sel  terhadap  ROS meningkat  dan  terjadi  aktivasi uncoupling  protein-2 (UCP2).  Glukotoksiksistas  dan  lipoksisitas  yang berlangsung kronik menginduksi gen UCP2 di sel- â.  Peningkatan  UCP2  membantu  untuk menghilangkan  peningkatan  membran  potensial mitokondria  secara  aman  dan  mempromosikan detoksifikasi  bahan  bakar  karena  oksidasi  bahan bakar  ini  menjadi  semakin  panas  dibanding produksi  ATP.  Namun,  hal  ini  terjadi  dengan mengorbankan  efisiensi  sintesis  ATP  dan berdampak  pada sekresi insulin  Dengan  kata lain, uncoupling fosforilasi  oksidatif  menyebabkan gangguan  kemampuan  sekresi  insulin  tetapi mengurangi  produksi  ROS,  sebagai  upaya  sel-â
mempertahankan  kelangsungan  hidupnya  dalam keadaan jenuh bahan bakar. Sel-â mengkompensasi resistensi  insulin  dengan  cara    melakukan  oksidasi glukosa  tingkat  tinggi  atau  mengalami  defisiensi fungsi mitokondria  yang beresiko terjadi kegagalan fungsional dan kerusakan oksidatif. (Lowell, 2005).

## Kerusakan Sel-â Pankreas pada Diabetes tipe- 2
Kemampuan  kompensasi  sel  â  terbatas, jika reaksi kompensasi tidak mampu lagi dilakukan, maka selanjutnya terjadilah fase dekompensasi, yang ditandai salah satunya adalah penurunan massa sel- â.  Penurunan  massa  sel-â  terjadi  pada  sebagian besar  pasien  diabetes.  Pada    DM  tipe  II  terjadi penurunan massa sel-â sebesar 25-50% dan terjadi secara  progresif.  Penyebab  penurunan  massa  sel-â pada  DM  tipe  II  belum  dapat  dipastikan,  karena massa sel-â hanya dapat diukur post-mortem, tidak bisa  ditentukan  in  vivo.  Apakah  pada  DM  tipe  II memiliki  massa  sel-â  lebih  sedikit  sejak  awal kehidupan,  ataukah  terjadi  kegagalan  peningkatan massa sel-â saat menghadapi resistensi insulin ataukah juga terjadi kehilangan massa sel-â secara progresif. Kehilangan  massa  sel-â  dapat  disebabkan peningkatan  apoptosis  sel-â,  reduksi  pembentukan sel-â  baru  dari  duktus  eksokrin  (neogenesis)  / replikasi sel-â matur, atau keduanya (Rhodes, 2005).
Gambar  2.  Patofisiologi  Kerusakan  sel-â  pada  DM  tipe  II.(Marzban,  2015)
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 79
Apoptosis  merupakan  mekanisme  utama kematian  sel-â  pada  DM  tipe-II.  Glukotoksisitas dan  lipotoksisitas  pada  DM  tipe  II  yang  terus berlanjut menginduksi respon inflamasi pad sel islet dengan  cara  memproduksi  sitokin  dan  kemokin serta  mengaktivasi  sistem  immun  innate.  Pada awalnya respon inflamasi di islet memberikan efek protektif dan regeneratif dengan cara meningkatkan fungsi dan replikasi sel-â. Namun produksi sitokin dan  kemokin  yang  terus  menerus  karena  stres metabolik  yang  berkelanjutan,  menyebabkan deregulasi  jalur  apoptosis  dalam  sel-â.  Apoptosis pada DM tipe II tidak melalui jalur aktivasi NF-kB dan  produksi  NO.  Peningkatan  sitokin  khususnya IL-1b  dan  IFNã  menginduksi  apoptosis  melalui aktivasi  jalur  MAPK/JNK  dan  stimuli  ekspresi reseptor  FasL  (Cnop,  2005).
Tingginya  kebutuhan  akan  sintesa  dan sekresi  insulin  dapat  menyebabkan  stres  pada endoplasmik retikulum (ER), sebagai tempat assembly , pembentukan pro-insulin. Stres pada ER yang berat dan    tidak  diimbangi  dengan  UPR  ( unfolded  protein response ) yang adekuat  akan menginisiasi terjadinya apoptosis  (Kim,  2012).  Peningkatan  glukosa,  FFA dan  leptin  yang  berlangsung  kronik  menyebabkan inflamasi  pulau  Langerhans  dan  terjadilah peningkatan    IL1â  .  IL1â  menginduksi  upregulasi Fas  dan  mengaktivasi  jalur  apoptosis  (Marzban, 2015).

## Mekanisme Regenerasi Pankreas secara
Endogen Pankreas  merupakan  salah  satu  organ  yang mempunyai  kemampuan  meregenerasi  dirinya sendiri. Secara umum regenerasi dapat terjadi melalui tiga mekanisme, yang dilakukan oleh sel kompeten yang  berbeda.  Hiperplasia  kompensasi  adalah regenerasi  dengan  cara  proliferasi  yang  dilakukan oleh sel yang telah terdiferensiasi (misalnya hepatosit). Regenerasi  melalui  dediferensiasi  oleh  sel  matur membentuk sel progenitor yang mampu membelah. Regenerasi oleh cadangan sel punca / sel progenitor di  jaringan  yang  mampu  diaktivasi.  Ketiga mekanisme tersebut mempunyai tujuan yang sama yaitu  memperbaiki  jaringan  dan  fungsinya  setelah jaringan mengalami jejas (Stocum, 2002). Pankreas dapat  meningkatkan  massa  sel-â  dengan  cara meningkatkan  replikasi  sel-â  matur  dan meningkatkan  proses  maturasi  sel  punca  menjadi sel-â.  Sel  punca  merupakan  sel  lini  pertama  yang dapat  berkembang  menjadi  sel  dewasa  /  matur. Proses perkembangan tersebut meliputi neogenesis (dari  sel  progenitor  yang  ada  di  dalam  pankreas), diferensiasi  (dari  sel  punca  embrional  maupun dewasa)  ,  dan  transdiferensiasi  (dari  sel  punca  di luar pankreas).
Gambar  3.  Mekanisme  pembentukan  sel-â  baru  (Banerjee,  2005)

## 80 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
a.  Regenerasi  Pankreas  Endogen  oleh  Sel-â matur Setiap sel dalam tubuh mempunyai potensi untuk replikasi ( self-duplication ) sekalipun sudah matur atau  berada  pada  tahap  akhir  diferrensiasi. Kemampuan untuk bereplikasi ini bertujuan untuk menjamin  kelangsungan  hidup  dan  fungsi  suatu jaringan atau organ. Namun kemampuan bereplikasi tersebut terbatas, demikian pula halnya dengan sel- â pankreas. Dari keseluruhan populasi sel-â pankreas orang  dewasa  normal,  jumlah  sel-â  pankreas  yang secara  aktual  melakukan  replikasi  hanya  0,5-2%. Pada  kondisi  normal  dengan  jumlah  sel  yang mengalami  apoptosis  (kematian  sel  secara  alami) terbatas,  tubuh  masih  mampu  mempertahankan kondisi homeostasis bahkan jika komponen seluler dari  salah  satu  jaringan  tersebut  memiliki  tingkat replikasi tak terbatas (Banerjee, 2005).
Pada  keadaan  diabetes,  kerusakan  sel-â pankreas  akibat  inflamasi  akan  menstimuli  tubuh untuk  melakukan  upaya  perbaikan  yang  disebut sebagai  regenerasi.  Beberapa  penelitian  terakhir membuktikan bahwa sekalipun sel-â tidak memiliki potensi  replikasi  yang  tinggi,  tapi  ia  mampu meregenerasi  massa  selnya  sendiri.    Penelitian terdahulu membuktikan bahwa pankreas fetus tikus yang diinduksi STZ mampu melakukan regenerasi sel-â  secara  in  vivo.  Meningkatnya  massa  sel-â bukan karena hipertrofi tapi hiperplasia yang ditandai dengan  meningkatnya  densitas  pulau  Langerhans (Yamamoto, 2004 dalam Banerjee, 2005). Penelitian telah membuktikan bahwa diferensiasi dan maturasi
(neogenesis) sel-â diregulasi antara lain oleh insulin (Guz,  2001  dalam  Banerjee,  2005),  dan  gastrin/ EGF  (Brand,  2002).
Pada  tikus,  faktor  pertumbuhan  seperti beta cellullin ,  kombinasi GLP-1/gastrin atau EGF/ gastrin potensial menstimuli replikasi sel-â pankreas (Suarez-Pinzon  WL,  2008).  Sampai  saat  ini  belum diketahui  dengan  pasti  bagaimana  pankreas  pada manusia  dapat  mempertahankan  diri,  melakukan regenerasi  dan  bagaimana  peran  faktor-faktor tersebut  pada  regenerasi  pankreas.  Namun pemberian  agonis  reseptor  glukaogon-like  peptide (GLP-1) / hormon  incretin pada pasien DM tipe II terbukti dapat menstimuli sekresi insulin (Garber, 2011). GLP-1 meningkatkan proliferasi sel-â melalui beberapa jalur. Pertama, GLP-1 mengaktivasi IRS2 menyebabkan fosforilasi PKB dan inaktivasi forkhead- O  transcription  factor  1 (FOXO1)  dan  selanjutnya meningkatkan  ekspresi  gen pancreas-duodenum homeobox1 (Pdx1)  (Jetton,  2005).  Kedua,  GLP-1 mengaktivasi  IRS2  dan  protein  kinase  B  (PKB) melalui cAMP response element binding protein (CREB) juga menyebabkan transaktivasi epidermal growth factor recepto r  (EGFR).  Aktivasi  PKB  juga  memberikan efek protektif terhadap apoptosis melalui fosforilasi dan hambatan protein pro-apoptosis seperti BAD. Insulin  dan  IGF  1  dan  2  melalui  IRS2  dan  PKB juga meningkatkan ekspresi Pdx-1 (Prentki, 2006). Selain  melalui  GLP-1,  FFA  memberikan  efek proliferasi melalui FFA receptor 1 (FFAR1 /GPR40) (Prentki, 2006).
Gambar  4.  Stimulator  Proliferasi  Sel-â  (Suarez-Pinzon  WL,  2008).
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 81 b.  Regenerasi  Pankreas  Endogen    oleh Adult Stem  Cell/Progenitor  Cell Pada regenerasi pankreas endogen in vivo, sel yang mensekresi insulin dapat berasal sel punca dewasa.  Sumber  sel  punca  dewasa  antara  lain  dari pankreas  (sel  eksokrin,  sel  duktus,  sel  islet  )  atau direkrut  dari  organ  lain  seperti  sumsum  tulang,
hepar, intestin, dan sirkulasi (Gambar 5). Sel punca dari  sumsum  tulang  melalui  sirkulasi  menuju  ke jaringan  lain,  usus,  hepar,  pankreas  dan  darah.  Di pankreas  sel  punca  tersebut  akan  berdiferensiasi menjadi  sel-â.  Sel  punca  dari  organ  lain  akan berdiferensiasi atau transdiferensiasi menjadi sel-â  .
Gambar  5.  Sumber  Sel  Punca  Pankreatikus  (Soria,  2005)
Pada  keadaan  tertentu  misalnya hiperglikemia,    kemampuan  regenerasi  tersebut menurun  dan    secara  progresif  dapat  tejadi kerusakan  sel-â  pankreas  sehingga  terjadi  diabetes mellitus. Beberapa faktor yang diduga memberikan regulasi negatif pada proses diferensiasi dan ekspansi sel punca dewasa antara lain diet yang tidak seimbang, malnutrisi,  supernutrisi,  dan  stres  oksidatif.  Pada DM tipe II terjadi perubahan niche sel punca yang mensupresi kemampuan regenerasi jaringan. Ekspresi VEGF dan Wnt3a endogen menurun pada mencit diabetik.  VEGF  merupakan  faktor  proangiogenik yang mendukung penyembuhan luka dan regenerasi jaringan melalui neovaskularisasi dan proliferasi MSC. Wnt3a  merupakan  suatu  sinyal  autokrin  yang dilepaskan  MSC  dan  berperan  sebagai  faktor proliferasi,  mendukung  proses  proliferasi, diferensiasi, migrasi dan invasi MSC ke area  injuri (Shin, 2012)
Pada DM tipe II terjadi perubahan niche sel punca  yang  mensupresi  kemampuan  regenerasi jaringan.  Ekspresi  VEGF  dan  Wnt3a  endogen
menurun pada mencit diabetik. VEGF merupakan faktor  proangiogenik  yang  mendukung penyembuhan luka dan regenerasi jaringan melalui neovaskularisasi  dan  proliferasi  sel  punca mesenkimal (MSC). Wnt3a merupakan suatu sinyal autokrin yang dilepaskan MSC dan berperan sebagai faktor  proliferasi,  mendukung  proses  proliferasi, diferensiasi, migrasi dan invasi MSC ke area injuri (Shin, 2012)

## Jintan Hitam
Jintan hitam  ( Nigella sativa ) ad alah tanaman yang  dikenal  dengan  berbagai  nama,  antara  lain black seed, black caraway, natura seed , black cumin, nigella sativa , kaluduru, Al Habba Al Sauda atau Al Habba Al  Barokah dalam  bahasa  Arab.  Tanaman  jintan hitam  merupakan  jenis  tanaman  rempah  yang tergolong  dalam  famili Ranunculaceae .  Tanaman  ini tumbuh  di berbagai  daerah  di  dunia khususnya  di negara timur tengah dan banyak digunakan sebagai bumbu  penyedap  makanan  maupun  sebagai  obat tradisional (Paarakh, 2010). Jintan hitam digunakan

## 82 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
sebagai  herbal  pengobatan  sejak  2000-3000  tahun sebelum Masehi dan tercatat dalam banyak literatur kuno  oleh  peneliti  seperti Ibnu  Sina  (980  -  1037 M),  dan  Al-Biruni  (973-1048  M). Abu  Hurairah pernah  mendengar  Rasulullah Muhammad  SAW bersabda: “Pada Habbatussauda ada obat bagi segala jenis  penyakit kecuali Al-Sam, yaitu maut”  ..
Kedudukan tanaman jintan hitam dalam sistematik tumbuhan  (taksonomi)  sebagai  berikut
Kingdom : Plantae Divisi : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsida Ordo : Ranunculales Famili : Ranunculaceae
Genus : Nigella Spesies :  Nigella  sativa (Yu,  2015)
Tanaman jintan hitam merupakan tanaman semak  dengan  ketinggian  lebih  kurang  30  cm. Ekologi dan penyebaran tanaman ini tumbuh mulai dari daerah Levant di Mediterania Timur Samudra Indonesia  sebagai  gulma  semusim  dengan keanekaragaman yang kecil. Budi daya perbanyakan tanaman    dilakukan dengan  biji  (Botnick,  2012)
Gambar  6.    Biji  Jintan  Hitam  ( N.  Sativa ) (Mathur,  2011)
Jintan  hitam  memiliki  kelopak  bunga  kecil, berjumlah  lima,  berbentuk  bulat  telur.,    ujungnya agak meruncing  sampai agak tumpul.. Buah jintan hitam  seperti  polong,  bulat panjang,  dan   coklat kehitaman.  Di  dalam  buah  tersebut  terdapat  biji. Bijinya  kecil,  bulat,  hitam,  jorong    bersusut  tiga tidak  beraturan  dan  sedikit  berbentuk  kerucut, panjang  3  mm,  serta  berkelenjar    (Mathur,  2011).
Kandungan  dan  Efek  Antidiabetik  Biji  Jintan Hitam
Biji  jintan  hitam  ( Nigella  sativa L.) mengandung  35-41% fixed  oil dan  0,5-1,6% volatil oil (Botnick, 2012). Terdapat 8 asam lemak dan 32 senyawa  (86,7%)  telah  diidentifikasi  dari fixed  oil . Beberapa kandungan asam lemak utama dalam biji jintan  hitam  yaitu  asam linoleic (55,6%),  asam oleic (23,4%) dan asam palmatic (12,5%) (Nickavar,2003). Fraksi utama volatile oil dari biji jintan hitam matur adalah monoterpene dan sisanya sesquiterpene. Monoterpene biji jintan hitam  berupa 27,8-57% thymoquinone dan sisanya monoterpen yang lain seperti p-cymene (7,1- 15,5%), ã-terpinene,  á-pinene ,  â- pinene,  á-thujene ,  dan carvacrol (5,8-11,6%). Thymoquinone merupakan bioaktif  utama biji jintan hitam. S esquiterpene berupa longifolene . Indazole  alkaloid ,  seperti nigellicine dan nigellidine , dan  saponin  juga dapat diisolasi dari biji jintan hitam   (Botnick, 2012; Barnosa, 2015).
Komponen utama dalam  biji Asam lemak utama Komponen Persentase (w/w) Asam lemak Persentase dari total asam lemak Karbohidrat total 30-378 Linoleat 50-87 Lemak 30 Palmitat 6-12,5 Protein 20 Oleat 19,9-23,4 Serat 6 - 10 Margarik 10,3 Uap 2,5 - 6 Ash 4 - 4,5
Tabel.1  Komponen  Utama  Biji  Jintan  Hitam  dan  Asam  lemak  utama  (dikutip  dari  Barnosa,  2015)
Biji  jintan  hitam  juga  mengandung oxy-coumarin,  6-methoxycoumarin ,  dan 7-hydroxy-coumarin , saponin  alpha-hedrin , steryl-glucoside, flavonoids, tannins , asam amino esensial, asam askorbat, besi dan kalsium (Randhawa 2008). Selain itu, biji jintan hitam juga mengandung senyawa fenchone (1,1%), terpinen-4-ol (0,7%), carvacrol (3%), dan citronellol (Paarakh,  2010).
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 83
Tabel.2  Mineral  dan  Vitamin  utama  dalam  biji  jintan  hitam  (dikutip  dari  Barnosa,  2015)
penderita  DM  tipe  II  terbukti  dapat  menurunkan status  redoks  pasien  (Kaatabi,  2015)
Potensi  Biji  Jintan  Hitam  dalam Regenerasi  Pankreas  secara  Endogen Beberapa  penelitian  terdahulu  telah membuktikan  potensi  biji  jintan  hitam  dalam regenerasi pankreas. Pemberian injeksi minyak jintan hitam  0,20mL/kg  /hari  secara  i.p  selama  30  hari pada tikus yang telah diinduksi streptozotocin (STZ) terbukti secara histologis terjadi parsial regenerasi / proliferasi  sel-â  pankreas,  yang  ditandai  dengan ukuran  pulau  Langerhans  meningkat, immunoreaktifitas terhadap insulin terekspresi positif kuat pada pulau Langerhans tersebut  (Kanter et al, 2003)  dan  terjadi  peningkatan  kada  insulin  serum (Kanter  et  al,  2004).  Penelitian  Bilal,  2009 membuktikan  bahwa  terjadi  peningkatan  kadar insulin  dan  penurunan  gula  darah  puasa  (GDP) signifikan pada 41 orang pasien DM tipe II setelah pemberian terapi minyak biji jintan hitam selama 40 hari. Terjadi peningkatan kadar insulin menunjukkan perbaikan fungsi pankreas. Pemberian Hal tersebut memunculkan  dugaan  bahwa  biji  jintan  hitam berpotensi    membantu  regenerasi  pankreas  secara endogen.  Biji  jintan  hitam  merupakan nutriceutical yang mengandung beberapa bioaktif ( multicompound ) antara lain thymoquinone , saponin a-hederin asam linoleat, asam  oleat,  dan  suatu alkaloid  nigellone (Rooney, 2005;  Paarakh,  2010).  Kelima  bioaktif  tersebut dapat memberikan efek anti diabetik diduga melalui efek  regenerasi  sel  beta  pankreas.  Regenerasi  sel-â secara endogen bisa terjadi melalui induksi proliferasi sel-â matur , diferensiasi / transdiferensasi dari sel punca  /  sel  progenitornya,  atau  dengan  cara mempengaruhi beberapa komponen di dalam niche sel punca , sehingga mampu mengaktivasi sel punca yang  sedang  dalam  keadaan  tidak  aktif  ( quiscent ).
Mineral Vitamin mineral mg/100g vitamin µ/100g K 823-1180 B1 (thiamin) 831-1540 Mg 80 B2 (riboflavin) 63 Ca 160-188 B6 (pyridoxin) 789 Zn 2,5 PP (niacin) 5700-6311 Mn 1,5 Asam folat 42 Cu 0,9-1,8 Fe 10,5-65
Secara  umum  biji  jintan  hitam  terdiri  dari dua  bagian  yaitu  kulit  biji  ( seed  coat )  dan  bagian dalam  biji  (endosperm  dan  embrio). Volatile  oil termasuk tymoquinone terakumulasi pada lapisan dalam kulit  biji,  sehingga  untuk  ekstraksi  tidak  dapat langsung  dari  biji  utuh  jintan  hitam  namun  perlu dilakukan perusakan kulit terlebih dahulu. Alkaloid nigellidine dan nigellicine terakumulasi hampir seluruhnya di kulit biji dan sedikit di bagian  dalam, sedangkan saponin  á-hederin terdistribusi  rata  di  kulit  maupun bagian dalam  biji jintan  hitam (Botnick,  2012) Efek  antidiabetik  biji  jintan  hitam  telah banyak dibuktikan melalui penelitian eksperimental. Efek antidiabetik biji jintan hitam antara lain melalui efek  protektif  sel  beta  terhadap  stres  oksidatif (Kanter,  2004),  induksi  proliferasi  sel-â  (Kanter, 2003), menurunkan kadar MDA di jaringan pankreas (Kanter,  2004),  penurunan  kadar  plasma  hormon leptin, meningkatkan ekspresi Glut-4 dan penurunan glukoneogenesis di hati (Ali, 2011).
Penelitian  klinik  juga  telah  membuktikan efek anti diabetik biji jintan hitam. Pemberian minyak jintan  hitam  2,5  mL  dua  kali  sehari  selama  6 minggu  pada  pasien  sindrome  metabolik  terbukti secara signifikan dapat menurunkan GDP dan LDL serta menurunkan LDL (Najmi, 2009). Penurunan signifikan pada GDP dan peningkatan insulin telah diobservasi  pada  41  orang  penderita  DM  tipe  II yang menggunakan terapi minyak jintan hitam selama 40  hari.  Tidak  terjadi  perubahan  kadar  ureum, SGPT,  lekosit  total  dan  platelet  (Bilal,  2009). Pemberian adjuvan biji jintan hitam (1, 2, 3 g/hari) selama  3  bulan  pada  94  pasien  DM  tipe  II  yang juga  mendapat  terapi  metformin  terbukti  secara signifikan menurunkan GDP, GD2jPP dan HbA1C (Barnosa,  2010).  Pengaruh  biji  jintan  hitam  pada gula  darah,  serum  lipid  dan  tekanan  darah  juga pernah  dilaporkan  oleh  Qidwai,  2009.  Pemberian suplemen  biji  jintan  hitam  bersama  OAD  pada

## 84 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
Thymoquinone  (TQ)  sebagai  bioaktif utama  biji  jintan  hitam  telah  dibuktikan  selain memberikan  efek  antiinflamasi  juga  efek  pro inflamasi  Penelitian  terdahulu  telah  membuktikan TQ bekerja sebagai agonis speseifik G-protein coupled receptor (GPCR)  sel  makrofag.  Aktivasi  GPCR selanjutnya akan mengaktivasi protein sub unit Gái dan matriks  metaloproteinase-9 (MMP-9).    MMP-9 akan  mengaktivasi neuraminidase-4  (Neu4)  sialidase pada  membran  sel.      Aktivasi  Neu4  akan menginduksi  pembentukan  kompleks  MyD88/ TLR4  dan  selanjutnya  akan  mengaktivasi  NF-B (Abdulkhalek, 2013). Aktivasi NF-kB melalui jalur non-canonical yaitu  ynag melibatkan  cRel,  diduga dapat  memberikan  efek  proliferasi  sel-â  dengan menginduksi  cMyc  yang  ada  di  dalam  niche  sel punca  pankreas.Efek  proliferatif   NS  / thymoquinone  juga  pernah  dibuktikan  pada  saraf (Kanter, 2008; Kaleem, 2006, Bai, 2013). TQ juga bekerja  melalui  TLR4,  aktivasi  GPCR  maupun TLR4  dapat  menyebabkan  transaktivasi  reseptor EGF  (EGFR)  tanpa  adanya  ligan  EGF  (Evaul, 2008).  Aktivasi  EGFR  di  pankreas  menyebabkan proliferasi sel-â. Di lain pihak, TQ sebagai agonis GPCR di makrofag selanjutnya akan mengaktivasi jalur p38-mitogen-protein kinase (p38/MAPK) (Finlay, 2010;  Yu,  2015).  Aktivasi  jalur  MAPK  akan menyebabkan aktivasi jalur Wnt/â-catenin. Aktivasi jalur  Wnt/catenin  mengaktifkan  cyclin  D2    yang bertanggung  jawab  pada self   renewal sel  punca mesenkimal (MSC) (Stewart,2015). Sel punca MSC yang  sudah  teraktivasi  akan  mengeluarkan  faktor pertumbuhan  HGF.  Aktivasi  MAPK  juga  akan mengaktivasi  protein  regulator  transkripsi c-myc . HGF  , c-myc  dan  cyclin  D2 merupakan  bagian  dari niche  cell yang  berperan  penting  dalam  induksi quiescent endogenous mesencymal stem cell untuk regenerasi sel-â pankreas. Terjadinya differensiasi dan regenerasi sel-â pankreas akan ditandai dengan meningkatnya ekspresi  faktor  transkripsi  pankreas,  Pdx-1  dan Nkx6.1(Roux,  2004).
Saponin menstimuli pelepasan GLP-1(Liu, 2013). Aktivasi reseptor  GLP-1 memberikan efek proliferasi sel-â (Campbell, 2013). S aponin a-hederin dan nigellone merupakan  agonis  peroxisome proliferator-activated  receptor  (PPARã).  Aktivasi jalur PPARã berperan dalam diferensiasi / maturasi sel-â  (Moibi,  2010).    Dengan  aktivasi  sel  punca endogen  dan proliferasi - diferensisasi sel-â matur akan  terjadi  regenerasi  sel-â  pankreas,  sehingga
menambah  jumlah  sel-â  dan  selanjutnya  dapat menghasilkan insulin secara adekuat dan gula darah akan  terkontrol.  Peningkatan  sintesa  dan  sekresi insulin ditandai dengan  peningkatan kadar c-peptide sebagai precursor insulin (Banerjee, 2005).
Peran asam lemak bebas tak jenuh terhadap proliferasi sel-â pankreas masih kontroversi. Massa sel-â  tergantung  pada  keseimbangan  antara proliferasi(  dari  replikasi  sel-â  yang  ada  dan  dari pembentukan  sel-â  baru)  dan  kematian  sel-â (apoptosis).  Pada  mencit  dibuktikan  bahwa mekanisme adaptif paling dominan pankreas dalam menghadapi keadaan hiperglikemi adalah proliferasi sel-â  karena  glukosa  merupakan  stimulator proliferasi  sel  beta.  Penelitian  oleh  Pascoe membuktikan  bahwa  asam  lemak  bebas menghambat  glukosa  menginduksi  proliferasi  sel beta  pada  mencit  melalui  hambahatan  siklus  sel p16 dan p18 (Pascoe, 2012). Namun hasil tersebut tidak  tepat  untuk  manusia.  Studi  dari  hasil  otopsi menunjukkan  bahwa  massa  sel-â  pankreas  pada pasien obese diabetik berkurang 50-60% dibanding pasien  obese  non-diabetik  (Klöppel  G,  1985). Kehilangan  massa  sel-â  pada  pasien  DM  tipe  II terutama disebabkan oleh meningkatnya apoptosis (Butler  et  al,  2003).  Penelitian  lain  membuktikan peran  asam  lemak  bebas  pada  proliferasi  sel  dari sisi  yang  berbeda.  Asam  linoleat  dan  asam  oleat mempengaruhi  proliferasi  sel  punca,  ekspresi  gen, sekresi protein, dan migrasi sel punca mesenkimal (MSC).  Asam  linoleat  menginduksi  proliferasi  sel punca embrional mencit ( Kim et al, 2009). Penelitian invitro  membuktikan  asam  linoleat  juga mempengaruhi engrafment MSC  menuju  area  jejas. Diketahui  bahwa  sel  punca  mesenkimal  untuk regenerasi  sel-â  pankreas  dapat  berasal  dari  antara lain dari pankreas (sel eksokrin, sel duktus, sel islet )  atau    direkrut  dari  organ  lain  seperti  sumsum tulang, hepar, intestin, dan sirkulasi (Gambar 5). Di pankreas,  sel  punca  mesenkimal  yang  bermigrasi dari  organ-organ  tersebut  akan  berdiferensiasi menjadi  sel-â.  Peningkatan  kemampuan  migrasi MSC setelah pemberian asam linoleat,  tidak melalui jalur  NF-kB,  PPAR-ã  ataupun  HIF-1á,  namun melalui peningkatan sekresi sitokin IL-6, IL-8 dan faktor pertumbuhan VEGF yang meregulasi respon selular lokal daerah jejas  (Smith  et al,  2012).
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 85

## KESIMPULAN
Biji jintan hitam ( Nigella sativa ) berpotensi sebagai  terapi  tambahan  pada  pasien  diabetes mellitus. Mekanisme  penting dari biji jintan hitam adalah kemampuannya dalam membantu regenerasi sel-â  pankreas  secara  endogen,  sehingga  dapat mempertahankan  /  meningkatkan  massa  sel-â. Beberapa  bioaktif  dari  biji  jintan  hitam  yang berperan  dalam  regenerasi  sel-â  pankreas  adalah thymoquinone ,  asam  lemak  tak  jenuh  (asam  linoleat dan asam oleat), saponin a- hederin dan nigellone .

## DAFTAR  PUSTAKA
Abdulkhalek S, Hrynyk M, Szewczuk MR, 2013, A novel  G-protein-coupled  receptor-signaling platform and its targeted trajintan hitamlation in human disease, Research and Reports  in Biochemistry  3  ;  17–30
American  Diabetes  Association  (ADA),  2004, Global  Prevalence  of  Diabetes;  Estimates for the year 2000 and projectiojintan hitam for  2030
Bai  T,  Lian  L,  Wu  Y,  Wan  Y,  Nan  J,  2013, Thymoquinone  attenuates  liver  fibrosis  via PI3K  and  TLR4  signaling  pathways  in activated  hepatic  stellate  cells,  International Immunopharmacology Volume 15, Issue  2, Pages  275–281
Banerjee  M,  Kanitkar  M,  Bhonde  RR,  2005, Endogenous Pancreatic Regeneration, Review of   Diabetic  Studies    Vol.  2  Å”  No.  3  Å”p 165-176
Bamosa AO, 2015, A Review on the Hypoglycemic Effect of Nigella Sativa and Thymoquinone, Saudi  Journal  of  Medicine  &  Medical Sciences    Volume.  3  ,  Issue  1,    2-7 Bilal  A,  Masud  T,  Uppal  AM,  Naveed  AK,  2009, Effects of Nigella sativa oil on some blood parameters in type 2 diabetes mellitus patients. Asian  J.  Chem.,  v.21,  p.5373-5381.
Botnick I, Xue W, Bar E,   Ibdah  M, Schwartz  A, Joel  DM,  Lev  E,  Fait  A  and  Lewijintan hitamohn  E, 2012,  Distribution  of  Primary and Specialized Metabolites in  Nigella sativa Seeds,  a  Spice  with  Vast  Traditional  and Historical Uses, Molecules, 17, 10159-10177;
Brand  SJ,  Tagerud  S,  Lambert  P,  Magil  SG, Tatarkiewicz  K,  Doiron  K,  Yan  Y,  2002 Pharmacological  treatment  of   chronic diabetes  by  stimulating  pancreatic  â-cell regeneration with systemic co-administration of   EGF  and  gastrin.  Pharmacol  Toxicol 91:414-420
Butler AE, Janson J, Bonner-Weir S, Ritzel R, Rizza RA,  Butler  PC,  2003,    â-cell  deûcit  and increased  b-cell  apoptosis  in  humans  with type  2  diabetes,    Diabetes  52:102–110
Campbell  JE,  Drucker  DJ,  2013,  Pharmacology, physiology,  and  mechanisms  of   incretin hormone  action.  Cell  Metab  2013;17:819– 837
Cnop  M,  Welsh  N,  Jonas  J,  Jo¨  rjintan  hitam  A, Lenzen S, Eizirik DL, 2005, Mechanisms of Pancreatic â-Cell Death in Type 1 and Type 2  Diabetes  :  Many  Differences,  Few Similarities, Diabetes 54 (Suppl. 2) S97–S107 Evaul,  K.  and  S.R.  Hammes,  2008,  Cross-talk between  G  Protein-coupled  and  Epidermal Growth  Factor  Receptors  Regulates Gonadotropin-mediated  Steroidogenesis  in Leydig Cells. J. Biol. Chem.,283(41):  27525- 27533
Finlay  TM,  Abdulkhalek  S,  Gilmour  A,  2010. Thymoquinone-induced  Neu4    sialidase activates  NFkappaB  in  macrophage  cells and  proinflammatory  cytokines  in  vivo. Glycoconj  J.  2010;27(6):583–600.
Garber AJ, 2011, Long-acting glucagon-like peptide 1 receptor agonists: A review of their efficacy and  tolerability.  Diabetes  Care  34  Suppl 2:S279–S284.
Guz  Y,  Nasir  I,  Teitelman  G,  2001  Regeneration of  pancreatic  beta-cells  from  intra-islet precursor cells in an experimental model of diabetes. Endocrinology. 142:4956-4968.IDF ( International Diabetes Federation tahun 2012 Jetton, T.L., et al. 2005. Mechanisms of compejintan hitamatory  beta-cell  growth  in  ijintan hitamulin-resistant rats: roles of Akt kinase. Diabetes.  54:2294–2304
Kaatabi  H,  Bamosa  AO,  Badar  A,  Al-Elq  A, Abou-Hozaifa  B,  Lebda  F,  2015,  Nigella sativa  Improves  Glycemic  Control  and Ameliorates Oxidative Stress in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus: Placebo Controlled

## 86 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
Participant Blinded Clinical Trial, PLOS ONE |  DOI:10.1371/journal.pone.0113486 Kaleem M, Kirmani D, Asif  M., Ahmed Q, Bano B,  2006,  Biochemical  Effects  of   Nigella sativa L seed in Diabetic Rats, Indian Journal of   Experimental  Biology  vol  44  pp  745- 748
Kanter M, Meral I, Yener Z, Ozbek H, Demir H, 2003  Partial  regeneration/proliferation  of the beta-cells in the islets Of  Langerhajintan hitam by Nigella sativa L. in streptozotocin- induced  diabetic  rats.  Tohoku  J  Exp  Med 201(4):213-219.
Kanter  M,  2008,  Effects  of  Nigella  sativa  and  its major  cojintan  hitamtituent,  thymoquinone on  sciatic  nerves  in  experimental  diabetic neuropathy.  Neurochem  Res  33(1):87-96.
Kim  MH,  Kim  MO,  Kim  YH,  Kim  JS,  Han  HJ, 2009,. Linoleic acid induces mouse embryonic stem  cell  proliferation  via  Ca2+/PKC, PI3K/Akt,  and  MAPKs, Cell  Physiology Biochemitry 23:53–64.
Kim MK, Kim HS, 2012, Endoplasmic Reticulum Stress and Ijintan hitamulin Biosynthesis: A Review/  Hindawi  Publishing  Corporation Experimental  Diabetes  Research  Volume 2012,  Article  ID  509437,  7  pages Klöppel  G,  Löhr  M,  Habich  K,  Oberholzer  M, Heitz  PU,  1985,.  Islet  pathology  and  the pathogenesis  of  type  1  and  type  2  diabetes mellitus  revisited.  Surv  Synth  Pathol  Res 4:110–125
Li  L,  Seno  M,  Yamada  H,  Kojima  I.  Betacellulin improves glucose metabolism by promoting conversion  of  intra-islet  pre-cursor  cells  to â-cells  in  streptozotocin-treated  mice. American  Journal  of   Physiology Endocrinology  and  Metabolism  2003. 285:577-583
Li  Y,  Cao  X,  Li  LX,  Brubaker  PL  Edlund  H, Drucker  DJ,  2005,  â-Cell  Pdx1  Expression Is  Essential  for  the  Glucoregulatory, Proliferative, and Cytoprotective Actiojintan hitam of Glucagon-Like Peptide-1, Diabetes 54:482–491
Liu  C,  Zhang  M,  Hu  M,  Guo  H,  Li  J,  Yu  Y,  Jin S,  Wang  X,  Liu  L,  Liu  X,  2013,  Increased
glucagon-like  peptide-1  secretion  may  be involved  in  antidiabetic  effects  of  gijintan hitamenosides,  Journal  of   Endocrinology 217,  185–196
Lowell, B.B., and Shulman, G.I. 2005. Mitochondrial dysfunction  and  type  2  diabetes.  Science. 307:384–387
Marzban L, 2015, New Ijintan hitamights Into the Mechanisms of  Islet Inûammation in Type 2 Diabetes,  Diabetes  2015;64:1094–1096 Mathur ML, Gaur J, Sharma R, Haldiya KR, 2011, Antidiabetic  Properties  of  a  Spice  Plant Nigella  sativa,  J  Endocrinol  Metab 2011;1(1):1-8
Moibi  JA,  Gupta  D,  Jetton  TL,  Peshavaria  M, Desai  R,  Leahy  JL,  2010,  Peroxisome Proliferator–Activated  Receptor-ã  Regulates Expression  of  PDX-1  and  NKX6.1  in IJINTAN  HITAM-1  Cells
Najmi  A,  Haque  S.F,  Khan  RA,  Nasiruddin,  M, 2009.Therapeutic  Effect  of  Nigella  Sativa oil  on  different  clinical  and  biochemical parameters  in  metabolic  syndrome.  Int.  J. Diabetes  Metabol.,  v.16,  p.85-87.
Nickavar  B,  Mojaba  F,  Javidniab  K,  and  Amoli MAR,  2003,  Chemical  Composition  of  the Fixed  and  Volatile  Oils  of   Nigella  sativa L.from  Iran, Naturforsch .  58c,  629-631 Paarakh  PM,  2010,  Nigella  sativa  Linn-A comprehejintan  hitamive  review,  Indian Journal  of  Natural  Product  and  Resources, vol1  (4),  pp  409-429
Pascoe  J,  Hollern  D,  Stamateris  R,  et  al.,  2012, Free fatty acids block glucose-induced b-cell proliferation  in  mice  by  inducing  cell  cycle inhibitors p16and p18. Diabetes 61:632–641 Prentki  M,  Nolan  CJ,  2006,  Islet  b  cell  failure  in type  2  diabetes,  J.  Clin.  Invest.  116:1802– 1812
Qidwai  W,  Hamza  HB,  Qureshi,  R,  Gilani  A,  , 2009,  Effectiveness,  safety,  and  tolerability of powdered Nigella sativa (Kalonji) seed in capsules  on serum lipid  levels, blood  sugar, blood  pressure,  and  body  weight  in  adults: results  of  a  randomized,  double-blind controlled  trial.  J.  Alt.  Compl.  Med.  v.15, p.639-644.
POTENSI BIJI JINTAN HITAM ( NIGELLA SATIVA) DALAM REGENERASI PANKREAS 87
Rhodes  CJ,  2005  Type  2  diabetes:  a  matter  of   â- cell  life  and  death?  Science  307:380–384 Roduit,  R.,  et  al.  2004.  A  role  for  the  malonyl- CoA/long-chain  acyl-CoA  pathway  of  lipid signaling in the regulation of ijintan hitamulin secretion in respojintan hitame to both fuel and nonfuel stimuli. Diabetes. 53:1007–1019.
Rooney  S  and  Ryan  MF,  2005,  Effects  of   Alpha- hederin  and  Thymoquinone,  cojintan hitamtituents  of  Nigella  sativa,  on  Human Cancer  Cell  Lines,  Anticancer  Research  25: 2199-2204
Roux PP and Blenis J, 2004, ERK and p38 MAPK- Activated Protein Kinases: a Family of Protein Kinases with Diverse Biological Functiojintan hitam, Microbiology And Molecular Biology Reviews,  Vol.  68,  No.  2,  p.  320–344
Saini  V,  2010,  Molecular  mechanisms  of   ijintan hitamulin resistance in type 2 diabetes mellitus. World  Journals  Diabetes    1(3):  68­75 Shin L, Peterson DA, 2012, Impaired Therapeutic Capacity  of  Autologous  Stem  Cells  in  a Model  of   Type  2  Diabetes,  Stem  Cells Translational Medicine 1:125–135
Smith AN, Muffley LA, Bell AN, Numhom S, dan Hocking  AM, 2012,  Unsaturated fatty  acids induce  mesenchymal  stem  cells  to  increase secretion  of   angiogenic  mediators, Journal Cell  Physiology .  ;  227(9):  3225–3233 Stewart  AF,  Hussain  MA,  Ocana  AG,  Vasavada RC, Bhusnan A, Bernal-Mizrachi E Kulkarni RN,  Mizrachi  EB,  2015,  Human  â-cell proliferation and intracellular signaling: Part 3,  Diabetes  64:1872-1885
Stocum  DL,  2002,  Regenerative  biology  and medicine, Journal of Musculoskeletal Neuron Interaction 2(3):270-273
Suarez-PinzonWL,  Power  RF,  Yan  Y, 2008,Combination  therapy  with  glucagon- like  peptide-1  and  gastrin  restores normoglycemia  in  diabetic  NOD  mice. Diabetes  57:3281–3288
WHO.,  2016.  WHO  methods  and  data  sources for country-level causes of death 2000-2015. http://www.who.int
Yamamoto  M,  Yasuda  M,  Hori  A,  Arishima  K, Eguchi  Y,  2004,  Recovery  in  the  fetal pancreatic islet following fetal administration
of  streptozotocin  in  the  rat  in  vivo  and  in vitro.  Anat  Rec  A  Discov  Mol  Cell  Evol Biol  ;  281:1319-1325.
Yu  S,  Kim,  S,  2015,  The  thymoquinone-induced production  of  reactive  oxygen  species promotes dedifferentiation through the ERK pathway and inflammation through the p38 and  PI3K  pathways  in  rabbit  articular chondrocytes,  International  Journal  Of Molecular  Medicine    35:    325-332