Biokonversi Limbah Kulit Ubi Kayu Menjadi Pakan Unggas

## Sumber Energi Menggunakan Bacillus amyloliquefaciens
(Bioconverstion of Cassava Feel Become Poultry Feed Energy Sources Using Bacillus amyloliquefaciens)
Mirzah 1 dan Helmi Muis 2 1 Jurusan Nutrisi dan Teknologi Pakan Fakultas Peternakan Universitas  Andalas
2 Kampus Unand Limau Manis Padang 25163. Telp: 0751 72400, Fax. 0751 72400, Email: mirzah@faterna.unand.ac.id

## Abstrak
Penelitian  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  interaksi  antara  dosis inokulum  dengan  lama  fermentasi  kulit  singkong  merasa  menggunakan  bakteri  Bacillus amyloliquefaciens untuk mengubah kandungan zat dan kualitas gizi produk tape singkong (FCFP). Penelitian  dilakukan  dengan  metode  eksperimen  menggunakan  pola  Rancangan  Acak  Lengkap faktorial  3  x  3  dengan  3  ulangan.  Faktor  pertama  adalah  dosis  inokulum  dari  amyloliquefaciens bakteri  Bacillus  terdiri  dari  A1  =  1%,  A2  =  2%  dan  A3  =  3%  per  100  g  substrat.  Faktor  kedua adalah  waktu  fermentasi  terdiri  dari  B1  =  4  hari,  B2  =  6  hari  dan  B3  =  8  hari.  Parameter  yang diamati  adalah  perubahan  isi  bahan  kering,  bahan,  protein  kasar,  dan  retensi  nitrogen.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ada  interaksi  yang  sangat  nyata  (P  <0,01)  antara  dosis  inokulum Bacillus  amyloliquefaciens  dengan  waktu  fermentasi  pada  bahan  bahan  kering,  protein  kasar  dan retensi. Kesimpulan dari penelitian ini adalah kualitas  FCFP gizi terbaik diperoleh pada  perlakuan A3B1  (3%  inokulum  dosis  dan  waktu  fermentasi  4  hari)  yang  dapat  menurunkan  bahan  kering 12,32%,  meningkatkan  protein  kasar  45,34%,  nilai  retensi  nitrogen  dari  66,64  %  dan  metabolis energi 2.135,41 kkal / kg.
Kata kunci : kulit ubi kayu, Bacillus amyloliquefaciens, fermentasi, nutrisi .

## Abstract
One  study  has  been  conducted  with  the  aim  to  find  out  the  influence  of  the  interaction between  a  dose  of  inokulum  with  length  of  fermentation    cassava  feel  using  bacteria  Bacillus amyloliquefaciens to changes the content of substances and nutrient quality of  fermented cassava feelproducts  (FCFP).  The  research  done  by  the  experiment  method  using  complete  randomize design  (CRD)  factorial  pattern  by 3  x  3   with 3  replicates.  The  first  factor  was  inokulum  doses  of bacteria Bacillus amyloliquefaciens consisting of A1 = 1%, A2 =  2% and A3 = 3% per 100 g of substrate. The second factor is the time fermentation consists of B1 = 4 days, B2 =  6 days and B3 = 8 days. The observed parameters are  changes to the content of the materials dry, matter, crude protein, and nitrogen retentions. The results showed that there was highly significant interaction  (P < 0.01) between dose inokulum of Bacillus amyloliquefaciens with time of fermentations on the dry matter material, crude protein and nitrogen retentions.Conclusion of this research is the quality of nutrition FCFP is best obtained at the treatment A3B1 (3% inokulum dose and time fermentation 4 days)  that  can  decrease  the  dry  matter  of  12.32%,  increase  crude  protein    of  45.34%,  nitrogen retention value of 66.64% and metabolizable energy 2135.41 kkal/kg.
Keywords: cassava feel, Bacillus amyloliquefaciens,fermentation, nutrition quality.

## Pendahuluan
Kulit ubi kayu merupakan limbah agro- industri  yang  mempunyai  potensi  untuk dikonversikan menjadi pakan ternak baik ternak ruminansia  maupun  ternak  unggas.  Potensi limbah  ini  tersedia  secara  kontinyu  seiring dengan  meningkat  juga  produk  ubi  kayu  di Indonesia  secara  umum,  maupun  di  Sumatera Barat  khususnya.  Menurut  Badan  Pusat Statistika (2014) produksi ubi kayu di Sumatera Barat adalah sebesar 209 790 juta ton/tahun,dan dengan  perkiraan  potensi  kulit  ubi  kayu  yang dihasilkan  kurang  lebih  16%  dari  produksi  ubi kayu  (Darmawan,2006),  maka  diperkirakan jumlah  kulit    ubi  kayu  yang  tersedia  adalah  33 566,40  ton/tahun.  Jumlah  kulit  ubi  kayu  ini cukup  besar,  apabila  diolah  dengan  baik  dan memanfaatkan    teknologi  pengolahan  pakan yang  tepat  akan  menghasilkan  bahan  baku pakan yang berkualitas.
Pemanfaatan  kulit  ubi  kayu  sebagai pakan  masih  terbatas  karena  kandungan  dan kualitas  nutrisi  masih  rendah.  Kulit  ubi  kayu mengandung  bahan  kering    67,97  %  dan berdasarkan  bahan  keringnya  kulit  ubi  kayu mengandung  protein  kasar  4,08%,  dan    serat kasar  yang  juga  tinggi  27,23%  (Lab.  Non Ruminansia Faterna, 2015). Kandungan makanan  lainnya  seperti  lemak  kasar  4,02  %, BETN  56,06  %,  abu  2,32  %  dan  kadar  HCN 228,4  ppm  (Nuraini  dkk,  2007).      Di  samping itu,  juga  terdapat  HCN  sebanyak  225  ppm, mengandung  lignin  12,56%    dan  selulosa 14,00%  (Lira  2012).  Kulit  ubi    kayu  hanya dapat  dipakai  sampai  level  10%  dalam  ransum ayam  broiler,  karena  rendahnya  protein  kasar, tingginya  serat  kasar  (lignin  dan  selulosa)  dan anti nutrisi HCN sebagai faktor pembatas(Siswanti 1993).
Untuk  meningkatkan  kualitas  dan menurunkan  faktor  pembatas  dari  kulit    ubi kayu  serta  pemanfaatan  dalam  ransum  ternak dapat  maksimal,  maka  diperlukan  teknologi pengolahan pakan yang sesuai untuk meningkatkan  kualitas  nutrisi  dan  menurunkan kandungan  serat  kasar  terutama  lignin  dan selulosa. Salah satu upaya yang dapat dilakukan yaitu  dengan  melakukan  teknologi  fermentasi dengan bantuan bakteri
Bacillus
amyloliquefaciens .  Penggunaan  bakteri  dalam proses fermentasi mempunyai beberapa keuntungan.  Menurut  Fardiaz  (1989)  bakteri sebagai  inokulum  memerlukan  waktu  yang lebih sedikit dibandingkan kapang dalam proses fermentasi  sekitar  1-2  hari,  karena  waktu generatifnya  lebih  cepat(1-2  jam).  Di  samping itu,  beberapa  bakteri  dapat  menghasilkan banyak jenis enzim.
Bacillus merupakan  salah  satu  bakteri sebagai  penghasil  Protein  Sel  Tunggal  (PST) yang  juga  dapat  menghasilkan  berbagai  jenis enzim  yang  terhitung  sebagai  protein  serta mampu merombak zat makanan seperti karbohidrat,  lemak  dan  protein  menjadi senyawa  yang  lebih  sederhana  (Buckle, et  al ., 1987).
Pemakaian inokulum
Bacillusamyloliquefaciens dengan  dosis  2  %, suhu fermentasi 40 0 C dalam fermentasi onggok selama  6  hari,  mampu  menurunkan  serat  kasar 36  %  dan  meningkatkan    protein  kasar  48  % (Wizna, et al 2009). Bacillus amyloliquefaciens menghasilkan  enzim  seperti alfa  amylase yang digunakan  untuk  menghidrolisis  pati  dan  dapat mensintesis  subtilisin  yaitu  suatu  enzim  yang mengkatalis  protein  sebagaimana  halnya  enzim tripsin. Bacillus amyloliquefaciens juga bersifat selulolitik  dan  dapat  mendegradasi  serat  kasar karena menghasilkan enzim ekstraseluler selulase  dan  hemiselulase  (Wizna et  al., 2007). Disamping  itu  bakteri  ini  juga  menghasilkan beberapa  enzim  seperti alfa  acetolactate decarboxylase,  beta  glucanase,  hemicellulase, maltogenic amylase, urease, protease, xilanase, dan khitinase ( Luizmeira.com,
2005 ). Ditambahkan, Bacillus  amyloliquefaciens juga dapat  menghasilkan  enzim  fitase  (Kim et.  al., 1998).  Adanya  sel  tubuh  dan  beberapa  enzim yang dihasilkan oleh Bacillus amyloliquefaciens saat  fermentasi  onggok  dapat  meningkatkan protein  substrat,  karena  sel  tubuh  dan  enzim- enzim tersebut merupakan protein.
Fermentasi  menggunakan  inokulum Bacillus  amyloliquefaciens telah  menunjukkan hasil  yang  cukup  baik  pada  beberapa  substrat. Sebagai perbandingan berdasarkan hasil penelitian  bahwa  fermentasi  campuran  dedak padi dan darah dengan
Bacillus amyloliquefaciens yang  terbaik  pada  dosis  3 %
selama 3 hari dan dapat menurunkan serat kasar dari 11,27% menjadi 7,93 % dengan persentase penurunan  serat  kasar  dari  29,63%  dan peningkatan energi metabolisme dari 2956 kkal menjadi 3195 kkal dengan persentase peningkatan sebesar 7,48% (August,2013)
Dari  hasil-hasil  penelitian  sebelumnya menambahkan bahwa fermentasi kulit ubi kayu dengan kapang selulolitik seperti Trichodermasp hanya  dapat  menurunkan  kandungan  selulosa tetapi  kandungan  lignin  masih  tinggi.  Sabrina, dkk  (1997)  menyatakan  bahwa  fermentasi  kulit ubi kayu dengan Trichodermasp dapat meningkatkan  protein  kasar  dan  menurunkan serat  kasar  (selulosa)  tetapi  kandungan  lignin kulit  ubi  kayu  masih  tinggi.  Menurut  Nuraini dkk.  (2007),  fermentasi  kulit  ubi  kayu  dengan kapang Neurospora  crasa dapat  meningkatkan protein  kasar  dan  beta  karotennya  serta  hanya dapat menurunkan serat kasar sekitar 50 persen dari  serat  kasar  kulit  ubi  kayu,    karena  kapang Neurospora crasa tersebutsedikit menghasilkan enzim selulase.
Dalam  proses  fermentasi  ada  beberapa hal  yang  harus  diperhatikan,  diantaranya  dosis inokulum dan lama fermentasi. Dosis inokulum yang  tepat  akan  memberikan  kesempatan  pada mikroba  agar  tumbuh  dan  berkembang  dengan cepat,  dimana  semakin  banyak  dosis  inokulum yang  dipakai  maka  semakin  cepat  proses fermentasi  berlangsung,  sehingga  semakin banyak pula substrat yang dirombak. Selanjutnya  semakin  lama  waktu  fermentasi berlangsung  maka  zat-zat  yang  dirombak  juga semakin  banyak,  seperti  bahan  kering  dan bahan  organik.  Pertumbuhan  mikroorganisme ditandai dengan lamanya waktu yang digunakan,  sehingga  konsentrasi  metabolik semakin  meningkat  sampai  akhirnya  menjadi terbatas  yang  kemudian  dapat  menyebabkan laju  pertumbuhan  menurun  (Fardiaz,  1992). Oleh  karena  itu,  perlu  diketahui  tingkat  dosis dan  lama  fermentasi  yang  optimum  untuk menghasilkan kandungan nutrien terbaik.
Keberhasilan  suatu  fermentasi  media padat  sangat  tergantung  pada  kondisi  optimim yang diberikan. Beberapa faktor yang mempengaruhinya  adalah  seperti  komposisi subtrat,  ketebalan  subtrat,  dosis  inokulum    dan
lama  fermentasi  serta  suhu  dan  pH  (Nuraini 2006).Semakin tinggi dosis maka semakin cepat pertumbuhan  mikroba  dan  semakin  lama fermentasi  dilakukan  maka  semakin  banyak pula zat makanan dirombak (Winarno,1980).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  dan belum diketahuinya pengaruh fermentasi dengan Bacillus amyloliquefaciens pada limbah kulit  ubi  kayu,  perlu  dilakukan  penelitian  yang bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  dosis inokulum  dan  lama  fermentasi  kulit  ubi  kayu dengan Bacillusamyloliquefaciens terhadap kualitas produk fermentasi Kukaf. Kualitas  zat- zat  makanan  Kukaf  ini  diuji  melalui  sejauh mana  perubahan  kandungan  bahan  kering, proteinkasar,serat  kasar  dankualitasnya  dengan menguji  retensi  nitrogen,  kecernaan  serat  kasar dan  energi  metabolism.  Selanjutnya  kulit  ubi kayu  fermentasi  (Kukaf)  bisa  lebih  banyak dimanfaatkan  dalam  ransum  ternak  unggas sebagai sumber energi.

## Materi  dan Metode Penelitian Materi Penelitian
Penelitian ini dilakukan secara eksperimen  di  laboratorium.  Bahan  baku  yang digunakan  adalah  kulit  ubi  kayu  (KUK)  yang diperoleh  dari  usaha  pembuatan  kerupuk Christine  Hakim  kota  Padang.  Bakteri  yang digunakan  adalah Bacillus  amyloliquefaciens yang  diremajakan  di  Laboratorium  Nutrisi  Non Ruminansia  Fakultas  Peternakan  Universitas Andalas.  Bahan  lainnya  adalah  media  Nutrient Agar  (NA),  dedak  halus  dan  aquades.  Ternak percobaan  yang  digunakan  untuk  menguji retensi  nitrogen,  kecernaan  serat  kasar  dan energi metabolisme adalah ayam broiler umur 6 minggu  sebanyak  33  ekor  dengan  rataan  berat badan  1500  kg/ekor,  dan    terdiri  dari  27  ekor untuk  perlakuan,  3  ekor  untuk  koreksi  N endogenus dan 3 ekor yang diberi  bahan pakan kontrol.Peralatan yang digunakan adalah timbangan  analitik  dengan  merek  Ohause kapasitas 2610 gram, autoclave , oven, seperangkat  peralatan  untuk  analisis  proksimat dan kandang metabolik dan perlengkapannya.
Metode Penelitian Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metoda eksperimen
menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan  pola  faktorial  3x3  dan  3  kali  ulangan. Faktor  pertama  adalah  dosis  inokulum Bacillus amyloliquefaciens terdiri dari 3 level yaitu A1 = 1%,  A2  =  2%  dan  A3  =  3%.  Faktor  kedua adalah lama fermentasi terdiri dari 3 level yaitu B1 = 4 hari, B2 = 6 hari dan B3 = 8 hari.
Kegiatan  dalam  penelitian  ini  meliputi persiapan substrat, peremajaan bakteri, pembuatan inokulum Bacillus
amyloliquefaciens dan fermentasi kulit ubi kayu dengan Bacillus  amyloliquefaciens. Preparasi kulit  ubi  kayu  dengan  cara  dibersihkan, kemudian dilakukan pemotongan dengan ukuran  1  cm.  Setelah  itu  dikeringkan  dibawah sinar  matahari,  dan  setelah  kering  lalu  digiling menjadi tepung.
Peremajaan  bakteri  dilakukan  dengan cara bakteri Bacillus amyloliquefaciens
ditumbuhkan  kembali  pada  media  yaitu Nutrient  Agar  (NA)  selama  24  jam  seperti terlihat pada  Gambar 1.
Pembuatan inokulum
Bacillus amyloliquefaciens pada penelitian ini dilakukan dengan  menggunakan  substrat  yaitu  dedak sebanyak 100 gram disterilisasi dengan autoklave  selama  15  menit  pada  suhu  121 o C, tekanan 1atm, kemudian dinginkan sampai suhu kamar  (24 o C).  Kemudian  aquades  sebanyak  10 ml  dimasukkan  kedalam  cawan  petri  digoyang perlahan  sampai  mikroba  lepas  dari  media  lalu dimasukkan  kedalam  tabung  erlemeyer  yang telah  berisi  aquades  sebanyak  240  ml.  Dedak yang sudah steril dicampur dengan aquades 200 ml yang sudah ada suspensi Bacillus amyloliquefaciens. Inkubasi  selama  24  jam kemudian  keringkan  dengan  oven  pada  suhu 40 o C,  sehingga  berebentuk  tepung  yang dijadikan sebagai inokulum seperti terlihat pada Gambar 2.
Gambar 1. Skema Peremajaan Bakteri Bacillus amyloliquefaciens
Gambar 2.  Bagan  Pembuatan Inokulum (Wizna et al ., 2006 dimodifikasi)
Fermentasi  Kulit  Ubi  Kayu  dengan Bacillus amyloliquefaciens
Substrat yang digunakan yaitu kulit  ubi kayu  (KUK)  yang  telah  kering  dan  digiling. Substrat  KUK  lalu  ditambahkan    aquades. Kemudian kulit ubi kayu disterilisasi selama 15 menit,  lalu  dibiarkan  sampai  suhu  turun  (suhu kamar).  Setelah  itu  KUK  yang  telah  steril diinokulasi dengan bakteri Bacillus amyloliquefaciens dengan dosis sesuai perlakuan  dari  jumlah  substrat,  diaduk  secara merata  dan  diratakan  dengan  ketebalan  1  cm,
kemudian  diinkubasi  dengan  lama  fermentasi sesuai  dengan  perlakuan.  Produk  fermentasi kemudian  ditimbang  dan  dikeringan  pada  suhu 80 0 C  selama  2  jam  untuk  mematikan  kapang, lalu  dilanjutkan  pada  suhu  60 0 C  selama  6  jam. Setelah  itu  diaduk  merata  dan  diambil sampelnya  lalu  dikeringkan  dan  digiling. Kemudian  dilakukan  analisa  kandungan  bahan kering,  protein  kasar  dengan  metode  analisis proksimat  (AOAC,  1990)  dan  kualitas  nutrisi seperti retensi nitrogen diuji dengan menggunakan  metode force  feeding terhadap
100 gram dedak padi
Autoklave(suhu 121 o C tekanan 15 lbs selama 15 menit ) 10 ml aquades Biakan Bacillus amyloliquefaciens (10 12 CFU/ml) Digoyang perlahan
Tabung erlenmeyer + 240 ml aquades
Dedak padi diinokulasi dengan Bacillus amyloliquefaciens
Inkubasi pada suhu 40 o C selama 24  jam
Keringkan dalam oven
Dedak padi siap digunakan sebagai inokulum(10 12 CFU/gram)
sampel produk Kukaf pada ayam broiler dengan jumlah  sampel  20  gram  per  ekor.  Untuk memenuhi kebutuhan energi basal bahan pakan ini ditambahkan tepung tapioka sebagai sumber energi. Penentuan nilai retensi nitrogen dilakukan  secara  biologis  dengan  Sibbald (1975).  Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan analisis  ragam  sesuai  dengan  rancangan  acak lengkap    pola  faktorial  yang  digunakan  (Steel dan Torrie, 1991).

## Hasil dan Pembahasan

## 1. Pengaruh Perlakuan terhadap Perubahan Bahan KeringProduk Kukaf
Data  penurunan  bahan  kering,  protein kasar  dan  retensi  nitrogen  dari  kulit  ubi  kayu fermentasi (Kukaf)
dengan Bacillus
amyloliquefaciens untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1. Sementara kandungan  bahan  kering  sebelum  proses fermentasi  dilakukan  untuk  masing-masing adalah  perlakuan  A1=  67,91,  A2=  67,83,  A3= 67,44%. Dari tabel tersebut secara umum dapat dilihat  bahwa  semakin  tinggi  dosis  inokulum maka  kandungan  bahan  kering  cenderung semakin  meningkat,  disamping  itu  semakin lama  waktu  fermentasi  maka  semakin  turun kandungan  bahan  kering  produk.  Hal  ini disebabkan  pada  proses  fermentasi  ini  tidak ditambahkan  sumber  energi  dan  nitrogen  untuk pertumbuhan  bakteri  tersebut,  sehinggadalam suatu  proses  fermentasi  akan  terjadi  perubahan bahan kering produk Kukaf.
Tabel 1.  Rataan  Perubahan  Bahan  Kering,  Protein  Kasar,  Retensi  Nitrogen  dan  Energi Metabolisme dari Produk Fermentasi  Menggunakan Bacillus amyloliquefaciens . Zat Makanan Faktor A Faktor B Rataan B1 B2 B3 Bahan Kering (%) A1 8,90 e 9,03 e 9,28 de 9,07 b A2 10,04 cd 10,52 bc 11,30 b 10,62 a A3 12,32 a 12,94 a 7,75 f 11,00 a Rataan 10,42 ab 10,83 a 9,45 b 10,23 Protein Kasar (%) A1 29,22 c 22,78 d 29,53 c 27,17 b A2 34,53 bc 35,67 b 36,97 b 35,73 a A3 45,34 a 47,61 a 21,03 d 37,99 a Rataan 36,36 a 35,35 a 29,18 b 33,63 Retensi Nitrogen (%) A1 47,46 d 43,57 e 46,49 de 45,84 b A2 54,11 c 57,50 b 58,70 b 56,77 a A3 66,64 a 67,83 a 43,48 e 59,32 a Rataan 56,07 a 56,30 a 49,56 b 53,98 Energi Metabolis A1 1554,52 cd 1415,71 de 1777,33 bc 1582,52 (kkal/kg) A2 1987,27 ab 1916,52 ab 1750,12 bc 1884,83 A3 2135,41 a 1954,89 ab 1214,75 e 1768,35 Rataan 1892,40 1762,37 1580,73 1746,23
Keterangan:  Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  dan  kolom  menunjukkan  berbeda  sangat  nyata (P<0,01) A1= Dosis inokulum 1%, A2 = Dosis inokulum 2%, A3= Dosis inokulum 3% B1= Lama fermentasi 4 hari, B2 = Lama fermentasi  6 hari, B3= Lama fermentasi 8 hari
Dari  Tabel  1  dapat  dilihat  bahwa  penurunan bahan  kering  Kukaf  yang  tertinggi  adalah  pada perlakuan  A3B2  yaitu  12,94%  dan  yang terendah  pada  perlakuan  A3B3  yaitu  7,75%. Hasil  analisis  keragaman  menunjukkan  bahwa terdapat  interaksi  yang  sangat  nyata  (P  <  0,01) antara  dosis  inokulum  dan  lama  fermentasi terhadap  penurunan  bahan  kering,  begitu  juga faktor  dosis  inokulum  memberikan  pengaruh sangatnyata  (P  <  0,01),  namun  faktor  lama fermentasimemberikan  pengaruh  nyata  (P  < 0,05)  terhadap  penurunan  bahan  kering  produk Kukaf  yang  difermentasi  dengan  bakteri

## Bacillus amyloliquefaciens.
Dari  Tabel  1  dapat  dilihat  bahwa penurunan  bahan  kering  Kukaf  yang  tertinggi adalah pada perlakuan  A3B2 yaitu 12,94% dan yang  terendah  pada  perlakuan  A3B3  yaitu 7,75%.  Hasil  analisis  keragaman  menunjukkan bahwa terdapat interaksi yang sangat nyata (P < 0,01)  antara  dosis  inokulum  dan  lama fermentasi  terhadap  penurunan  bahan  kering, begitu  juga  faktor  dosis  inokulum  memberikan pengaruh sangatnyata (P < 0,01), namun faktor lama  fermentasimemberikan  pengaruh  nyata  (P <  0,05)  terhadap  penurunan  bahan  kering produk Kukaf yang difermentasi dengan bakteri Bacillus amyloliquefaciens.
Hasil  uji  DMRT  terlihat  bahwa penurunan  bahan  kering  pada  perlakuan  A3B2 (dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 6 hari) dan  A3B1  (dosis  inokulum  3%  dan  lama fermentasi 4 hari) menunjukkan berbeda sangat nyata  (P  <  0,01)  lebih  tinggi  dari  perlakuan lainnya.  Tingginya  penurunan  bahan  kering pada perlakuan tersebut karena banyaknya dosis inokulum  yang  diberikan  sehingga  bakteri tumbuh  subur  dan  merata,  sesuai  dengan pendapat  Sulaiman  (1998)  yang  menyatakan bahwa  semakin  banyak  dosis  inokulum  yang digunakan maka semakin cepat proses fermentasi  berlangsung,  akibatnya  jumlah  air yang  dikeluarkan  sebagai  hasil  metabolisme akan  lebih  banyak  pula  sehingga  bahan  kering menjadi rendah.
Menurut  Haetami et  al. (2008) penurunan  bahan  kering  terjadi  karena Bacillus merupakan  salah  satu  mikroba  yang  dapat menghasilkan  berbagai  jenis  enzim  yang
terhitung sebagai protein serta mampu merombak  zat  makanan  seperti  karbohidrat, lemak  dan  protein  menjadi  senyawa  yang  lebih sederhana.  Perkembangbiakan  mikroba  yang semakin  meningkat  menyebabkan  molekul  air yang  dihasilkan  meningkat  dan  terjadinya penurunan  bahan  kering  pada  produk  Kukaf. Perubahan  bahan  kering  dapat  terjadi  karena pertumbuhan  bakteri  dan  perubahan  kadar  air. Perubahan  kadar  air  terjadi  akibat  hidrolisis substrat  atau  produksi  air  metabolik  (Gervais, 2008).  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Ramachandran et al. (2008) menyatakan selama fermentasi berlangsung mikroorganisme menggunakan  karbohidrat  dari  substrat  sebagai sumber  energi  dan  menghasilkan  molekul  air dan CO 2 .
Rendahnya  penurunan  bahan  kering pada  perlakuan  A3B3  (dosis  inokulum  3%  dan lama fermentasi 8 hari) dibandingkan perlakuan lainnya,    dikarenakan  pada  perlakuan  tersebut dosis  inokulum  yang  diberikan  banyak  tetapi lama fermentasi panjang sehingga bakteri sudah mulai  mengalami  fase  kematian.  Menurut (Fardiaz, 1989) semakin lama waktu fermentasi yang  digunakan  akan  semakin  banyak  bahan yang  dirombak  oleh  enzim,  tetapi  dengan bertambahnya waktu fermentasi maka ketersedian nutrien pada media fermentasi habis sehingga  bakteri  lama  kelamaan  akan  mati. Rendahnya  penurunan  bahan  kering  pada perlakuan A2B1, A2B2 dan A2B3
dibandingkan  A3B2  dan  A3B1  karena  pada perlakuan tersebut bakteri Bacillus amyloliquefaciens tidak  berkembang  dengan baik (kurang merata) sehingga proses perombakan  zat  makanan  sedikit  dan  air  yang dihasilkan  juga  sedikit  akibatnya  bahan  kering yang  dihasilkan  masih  banyak  dan  penurunan bahan  kering  rendah . Rendahnya  penurunan bahan  kering  pada  perlakuan  A1B1,  A1B2  dan A1B3  dibandingkan  pada  perlakuan  A2B1, A2B2  dan  A2B3  karena  dosis  inokulum    yang diberikan  sedikit  yaitu  1%  yang  menyebabkan bahan  kering  yang  dihasilkan  pada  perlakuan tersebut masih banyak.
2. Pengaruh Perlakuan terhadap Peningkatan  Protein  Kasar  Produk Kukaf
Data  peningkatan  protein  kasar  dari kulit  ubi  kayu  fermentasi  (Kukaf)  dengan bakteri Bacillus amyloliquefaciens untuk masing-masing  perlakuan  dapat  dilihat  pada Tabel  1.  Sementara  kandungan  protein  kasar produk Kukaf sebelum proses fermentasi adalah berturut-turut sebesar A1= 5,43, A2= 6,41, A3= 6,91%.
Dari  Tabel  1  dapat  dilihat  bahwa peningkatan  protein  kasar  dari  Kukaf  dengan Bacillus amyloliquefaciens tertinggi pada perlakuan  A3B2  yaitu  47,61%  dan  yang terendah pada perlakuan A3B3 sebesar 21,03%. Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa terdapat  interaksi  yang  sangat  nyata  (P  <  0,01) antara  dosis  inokulum  dan  lama  fermentasi terhadap  peningkatan  protein  kasar  dari  Kukaf, begitu  juga  faktor  dosis  inokulum  memberikan pengaruh  yang  sangat  nyata  (P  <  0,01), sedangkan  faktor  lama  fermentasi  memberikan pengaruh  yang  nyata  (P  <  0.05)  terhadap peningkatan protein kasar Kukaf.
Hasil  uji  DMRT  terlihat  bahwa peningkatan protein kasar pada perlakuan A3B2 (dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 6 hari) dan  A3B1  (dosis  inokulum  3%  dan  lama fermentasi  4  hari)  berbeda  sangat  nyata  (P <0.01)  lebih  tinggi  dari  perlakuan  lainnya. Peningkatan protein kasar terjadi karena adanya penambahan  protein  yang  disumbangkan  oleh sel  mikroba  akibat  pertumbuhannya  yang menghasilkan produk protein sel tunggal (PST) atau biomassa sel yang mengandung sekitar 40- 65% protein (Krishna et al ., 2005).
Selama proses fermentasi mikroba akan mengeluarkan  enzim  dimana  enzim  tersebut adalah  protein  dan  mikroba  itu  sendiri  juga merupakan sumber protein sel tunggal. Bacillus amyloliquefaciens dapat menghasilkan beberapa  enzim  seperti alfa  amylase,  alfa acetolactate  decarboxylase,  beta  glucanase, hemicellulase,  maltogenic  amylase,  urease, protease,  xilanase,  khitinase dan  enzim  fitase serta enzim ekstraseluler selulase dan hemiselulase  (Luizmeira,  2005  ;  Kim et.  al.,
1998  ;  Wizna et  al., 2007).  Dengan  adanya  sel tubuh  dan  enzim  protease  yang  dihasilkan  oleh Bacillus amyloliquefaciens pada saat fermentasi kulit  ubi  kayu  dapat  meningkatkan  protein substrat,  karena  sel  tubuh  dan  enzim-enzim tersebut merupakan protein.
Tingginya  peningkatan  protein  kasar pada  perlakuan  A3B2  dan  A3B1  disebabkan banyaknya  dosis  inokulum  yang  diberikan sehingga pertumbuhan bakteri subur dan merata akibatnya  bakteri  memberikan  sumbangan protein  yang  cukup  tinggi  dibandingkan perlakuan  lainnya.  Hal  ini  menyebabkan kandungan  protein  kasar  produk  fermentasi meningkat.  Semakin  banyak  dosis  inokulum yang dipakai maka semakin banyak pula bahan yang  dirombak,  sehingga  kombinasi  dosis inokulum dan substrat fermentasi akan meningkatkan  nilai  zat  makanan  produk fermentasi (Sulaiman, 1989 dan Nuraini, 2006).
Rendahnya persentase peningkatan protein kasar pada perlakuan A3B3 dibandingkan  perlakuan  A3B2  dan  A3B1,  ini disebabkan  oleh  lama  fermentasi  yang  terlalu lama,  sesuai  dengan  pendapat  Wang et  al . (1979)  apabila  pertumbuhan  bakteri  telah mencapai fase stasioner maka laju pertumbuhan akan  menurun  akibatnya  persediaan  nutrien berkurang  dan  terjadi  akumulasi  zat-zat metabolik  yang  menghambat  pertumbuhan  dan kemudian laju pertumbuhan akan terus menurun  sampai  nilainya  sama  dengan  nol (jumlah  sel  yang  tumbuh  sama  dengan  jumlah sel  yang  mati),  selanjutnya  total  masa  sel  akan konstan  dan  jumlah  sel  yang  hidup  akan berkurang karena lysis sehingga massa sel terus berkurang.
Rendahnya  peningkatan  protein  kasar pada  perlakuan  A2B1,  A2B2  dan  A2B3 dibandingkan  perlakuan  A3B2  dan  A3B1 karena  bakteri  tidak  berkembang  dengan  baik. Rendahnya  peningkatan  protein  kasar  pada perlakuan A1B1, A1B2 dan A1B3
dibandingkan  perlakuan  A2B1,  A2B2  dan A2B3  karena  pada  perlakuan  tersebut  dosis inokulum  yang  diberikan  masih  sedikit  yaitu 1%.  Menurut  Sukara  dan  Atmowidjojo  (1980) besarnya  dosis  inokulum  akan  mempengaruhi biomassa  dan  sintesa  protein.  Makin  sedikit
dosis  inokulum  yang  dipakai  maka  semakin sedikit    pula  bahan  yang  di  rombak,  sehingga peningkatan  protein  kasar  produk  Kukaf  akan rendah pula.
Pada  Tabel  1  dapat  juga  dilihat  bahwa peningkatan  protein  kasar  Kukaf  pada  A3B1 (dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 4 hari) menunjukkan  peningkatan  protein  kasar  yang terbaik yaitu 45.34%. Hal ini tidak jauh berbeda jika  dibandingkan  dengan  penelitian  Wizna et al .  (2009)  bahwa  fermentasi  substrat  onggok dengan Bacillus  amyloliquefaciens dengan dosis  inokulum  2%  dan  lama  fermentasi  6  hari meningkatkan  protein  kasar  sebesar  48%  dan fermentasi  campuran  dedak  padi  dan  darah limbah RPH dengan Bacillus amyloliquefaciens dengan  dosis  3%  selama  3  hari  meningkatkan protein  kasarnya  sebesar  42.73%  (Busrizal, 2013).

## 3.  Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Retensi Nitrogen Produk Kukaf
Data retensi nitrogen dari kulit ubi kayu fermentasi  (Kukaf)  dengan  bakteri Bacillus amyloliquefaciens untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1. Pada tabel dapat  dilihat  bahwa  retensi  nitrogen  tertinggi terdapat  pada  perlakuan  A3B2  (dosis  inokulum 3%  dan  lama  fermentasi  6  hari)  yaitu  67,83% dan yang terendah pada perlakuan A1B2 (dosis inokulum 1% dan lama fermentasi 6 hari) yaitu 43,48%.  Sedangkan  retensi  nitrogen  kulit  ubi kayu tanpa fermentasi sebesar 30,06%.
Hasil analisis keragaman menunjukkan bahwa faktor A (dosis inokulum), faktor  B  (lama  fermentasi)  memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P  <0,01)  dan  terdapat interaksi  yang  sangat  nyata  (P  <0,01)  antara dosis  inokulum  dan  lama  fermentasi  terhadap retensi  nitrogen  dari  kulit  ubi  kayu  yang difermentasi dengan Bacillus amyloliquefaciens .  Uji  DMRT  menunjukkan bahwa  retensi  nitrogen  pada  perlakuan  A3B1  ( dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 4 hari) dan  A3B2  (dosis  inokulum  3%  dan  lama fermentasi  6  hari)  berbeda  sangat  nyata  (P  < 0,01) lebih tinggi dari perlakuan lainnya.
Tingginya retensi nitrogen pada perlakuan  A3B1  dan  A3B2  disebabkan  pada
proses fermentasi dengan menggunakan Bacillus amyloliquefaciens menghasilkan beberapa  enzim  yang  mengakibatkan  kualitas protein  Kukaf  menjadi  lebih  baik.  Tingginya nilai  retensi  nitrogen  pada  perlakuan  tersebut disebabkan oleh bakteri Bacillus amyloliquefaciens yang  memproduksi  enzim protease  dan  juga  berfungsi  untuk  mengurai protein  menjadi  asam-asam  amino  bekerja dengan baik (Wizna et al ., 2007).
Meningkatnya  retensi  nitrogen  pada perlakuan  A2B1,  A2B2  dan  A2B3  tidak terlepas  dari  meningkatnya  kualitas  protein pada produk Kukaf, karena peningkatan retensi nitrogen  berbanding  lurus  dengan  kualitas protein.  Wahju  (1997)  menyatakan  bahwa  bila kualitas protein rendah karena kekurangan salah satu  asam  amino  maka  retensi  nitrogen  akan rendah  pula,  dan  kualitas  protein  yang  baik adalah  tersedia  dan  seimbanganya  asam  amino esensial termasuk lisin, methionin dan tripthopan.  Rendahnya  retensi  nitrogen  pada perlakuan  A1B1  dan  A1B3  karena  kualitas protein  pada  perlakuan  tersebut  juga  rendah. Sesuai  dengan  pendapat  Corzo et  al. (2005) bahwa  faktor-faktor  yang  menentukan  besar kecilnya  retensi  nitrogen  adalah  konsumsi ransum  terutama  konsumsi  protein,  daya  cerna protein,  keseimbangan  konsumsi  nitrogen  dan energi metabolisme ransum.
Rendahnya  retensi  nitrogen  pada perlakuan  A1B2  dan  A3B3  dibandingkan perlakuan  lainnya,  karena  pada  perlakuan tersebut  daya  cerna  protein  tidak  maksimal, akibatnya proses perombakan zat makanan juga tidak banyak dan tidak terjadinya keseimbangan dari  konsumsi  nitrogen.  Jika  dibandingkan retensi nitrogen kulit ubi kayu tanpa fermentasi dengan  Kukaf  yang  terbaik  yaitu  pada  A3B1, menunjukkan bahwa terjadi peningkatan retensi nitrogen  yaitu  dari  30,06%  menjadi  66,64% dengan  peningkatan  nilai  retensi  nitrogen sebesar  55  %  dibandingkan  kulit  ubi  tanpa fermentasi.

## 4.  Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Energi Metabolis Produk Kukaf
Data  energi  termetabolis  dari  kulit  ubi kayu  fermentasi  (Kukaf)  dengan  bakteri
Bacillus  amyloliquefaciens untuk  masing- masing  perlakuan  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Pada tabel  dapat dilihat bahwa retensi nitrogen tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  A3B1  (dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 3 hari) yaitu 2135,41  kkal/kg  dan  yang  terendah  pada perlakuan  A3B3  (dosis  inokulum  3%  dan  lama fermentasi  8  hari)  yaitu  1214,73  kkal/kg. Sedangkan  energy  metabolis  kulit  ubi  kayu tanpa  fermentasi  adalah    sebesar    2436,64 kkal/kg.
Hasil analisis keragaman menunjukkan bahwa faktor A (dosis inokulum) dan  faktor  B  (lama  fermentasi)  memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P  <0,01)  dan  terdapat interaksi  yang  sangat  nyata  (P  <0,01)  antara dosis  inokulum  dan  lama  fermentasi  terhadap kandungan  energi  dari  kulit  ubi  kayu  yang difermentasi
dengan Bacillus amyloliquefaciens .  Uji  DMRT  menunjukkan bahwa  energi  metabolisme  pada  perlakuan A3B1 ( dosis inokulum 3% dan lama fermentasi 4  hari),  A2B1  (dosis  inokulum  2  %  dan  lama fermentasi  4  hari),    dan  A3B2  (dosis  inokulum 3%  dan  lama  fermentasi  6  hari)  dan  A2B2 (dosis  inokulum  2  %  dan  lama  fermentasi  6 hari)    berbeda  sangat  nyata  (P  <  0,01)  lebih tinggi  dari  perlakuan  lainnya.  Hasil  uji  lanjut juga  menunjukkan  bahwa  pada  kondisi  lama fermentasi  4  dan  6  hari,  peningkatan  dosis inokulum    akan  meningkatkan  kandungan energi  metabolisme  pada  produk  fermentasi yang    berbeda    nyata  (  P  <  0,05),  kecuali  pada kandisi  lama  fermentasi  8  hari,  dimana peningkatan dosis inokulum menurunkan kandungan  energi  yang  nyata  (P  <  0,05)  lebih rendah.  Hal  ini  disebabkan  makin  lamanya proses fermentasi menyebabkan fase pertumbuhan  optimal  sudah  dilewat  dan memasuki fase kematian dari mikroba, sehingga  banyak  energi  bahan  pakan  yang sudah  terpakai  untuk  mikroba  bertahan  hidup pada  medianya>    Energi  metabolis  terbaik terdapat pada perlakuan A3B1 (dosis permentasi  3  %  dan  lama  fermentasi  4  hari, yaitu sebesar 2135,41 kkal/kg.
Kesimpulan Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa peningkatan dosis inokulum dan waktu fermentasi  kulit  ubi  kayu  menggunakan  bakteri Bacillus amyloliquefaciens menurunkan kandungan  bahan  kering  produk  Kukaf,  namun juga  meningkatan  kandungan  protein  kasar, retensi  nitrogen  dan  energi  metabolisme. Perlakuan  terbaik  pada  penelitian  ini  adalah produk  Kukaf  dengan  perlakuan  A3B1  (dosis inokulum  3%  dan  lama  fermentasi  4  hari) dengan  nilai  penurunan  bahan  kering  sebesar 12,32%,  peningkatan  protein  kasar  sebesar 45,34%  dan  nilai  retensi  nitrogen  meningkat sebesar  55  %  (dari  30,06  %  menjadi  66,64%) serta  kandungan  energy  metabolisme  produk fermentasi sebesar 2135,41 kkal/kg.

## Ucapan Terimakasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada Kemenrisetdikti yang telah memberikan dana  untuk  penelitian    ini,  dan    Ketua Laboratorium  Nutrisi  Non  Ruminasia  Fakultas Peternakan  Unand,  Padang  untuk    penggunaan pasilitasnya  serta  Saudara Nur  Afni  Okdalia yang  membantu  dalam  proses  penelitian, analisis  di  laboratorium,  dan  koleksi  data penelitian.

## Daftar  Pustaka
AOAC.  1990.  Official  Methods  of  Analysis .
15 th ed.  “Agricultural  Chemicals;
Contaminantc; Drugs”,
Vol. 1.,
Association  of  Official  Analyticals Chemists, Inc., Washington DC, 6 – 90. August, D. 2013. Pengaruh dosis inokulum dan lama fermentasi campuran dedak   padi dan darah dengan Bacilius Amyliquefaciens terhadap  kandungan serat  kasar,  kecernaan  serat  kasar  dan energi  metabolisme.  Skripsi.Fakultas Peternakan Universitas Andalas.
Badan Pusat Statistik. 2014. Statistik Indonesia. Badan Pusat Statistik, Jakarta.
Buckle,  K.A,.R.A.Edwards,  G.R.Fleed  and  M.
Wooton. 1987. Ilmu Pangan. Terjemahan  Adiono  dan  Purnomo.  UI Press, Jakarta.
Busrizal.  2013.  Pengaruh  dosis  inokulum  dan lama  fermentasi  campuran  dedak  padi dan darah limbah RPH dengan Bacillus amyloliquefaciens terhadap perubahan bahan  kering,  protein  kasar  dan  retensi nitrogen.  Skripsi.  Fakultas  Peternakan Universitas Andalas. Padang.
Corzo,A., Fritts C.A., Kidd, M. T and Kerr, B.J. 2005.  Response  of  broiler  chicks  to essensial  and  non-essensial  amino  acid suplementation  of  low  crude  protein diet.  Animal  Feed  Science  Technology 118: 319-327.
Darmawan.  2006.  Pengaruh  kulit  umbi  ketela pohon  fermentasi  terhadap  tampilan kambing  kacang  jantan.  Jurnal  Ilmiah Ilmu-Ilmu Peternakan, Universitas Jambi. 9(2): 115-122. Fardiaz,  S.  1989.  Fisiologi  Fermentasi.  Pusat
Antar    Universitas    Pangan    dan    Gizi Ilmu Pertanian Bogor, Bogor.
Fardiaz,  S.  1992.  Mikrobiologi  Pangan  1. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. Gervais  P.  2008.  Water  relations  in  solid  state
fermentation.  In:  Pandey  A,  C.R. Soccol,  C.  Larroche,  editor.  Current Developments in Solid-State Fermentation.  Asiatech  Publisher  Inc. New Delhi. Haetami,  K.  Abun.  Mulyani,  Y.  2008.  Studi pembuatan probiotik ( Bacillus Licheniformis, Aspergillus Ringer, dan Sacharomices  Cereviseae )  sebagai feed  suplement  serta  implikasinya terhadap pertumbuhan ikan nila. Laporan Penelitian. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran. Bandung. Lab.  Nutrisi  Non-Rum.  2015.  Hasil  Analisa Kulit  Ubi  Kayu.  Laboratorium  Nutrisi Non  Ruminansia  Fakultas  Peternakan.
Universitas Adalas. Padang
Kim,  Y.O.,  J.K.,  Yu,  J.H.  and  Oh,  T.K.  1998. Cloning  of  the  thermostable  phytase gene (phy) from Bacillus sp. DS11 and its  overexpression  in Escherichia  coli, FEMS microbiol. 162 : 185-191.
Krishna,  S.  B.  N  and  K.  L.  Devi. 2005.Optimization of thermostable
alkaline  protease  production  from species of Bacillus using Groundnutcake . African J.Biotechnol . 4 (7), 724726.
Lira.  Y.  M,  2012. Pengaruh  komposisi  susbtrat kulit  umbi  ubi  kayu  dan  ampas  tahu fermentasi dengan Phanerochaete chrysosporium terhadap perubahan nutrisi.Skripsi.  Fakultas  Peternakan. Universitas Andalas. Padang.
Luizmera.com/enzimas.htm .  USD  Recomendar esta  Pagina.  ( Diakses  tgl  12  Januari 2016 ).
Nuraini.  2006.  Potensi  kapang  karotenogenik untuk  memproduksi  pakan  sumber  β- karoten  dan  pengaruhnya  terhadap ransum  ayam  pedaging  dan  petelur. Disertasi. Program Pasca Sarjana Universitas Andalas, Padang. Nuraini,  S.A.Latif  dan  Sabrina.    2007. Peningkatan kualitas limbah agroindustri dengan kapang Neurospora crasa sebagai pakan ternak unggas.  Laporan  Penelitian  Hibah Bersaing,  Dikti.  Lembaga  Penelitian
Universitas Andalas, Padang.
Ramachandran, S., P. Fontanille, A. Pandey and C. Larroche. 2008. Fed-batch Production of gluconic acid by terpene- treated Aspergillus niger spores. Applied  Biochem.  Biotech.  151  :  413-
423.
Rahayu,  K.  1990.  Tehnologi  Enzim.  Penerbit Pusat  Antar  Uneversitas  Pangan  dan Gizi UGM. Yogyakarta.
Sabrina,  Harnentis.dan  Mirnawati    1997.
Biokonversi  Kulit  umbi  ubi  kayu  dengan kapang Rhizopus olygosporus,Trichoderma Sp dan Neurospora  crasa sebagai  pakan  unggas.
Laporan  Penelitian,  Hibah  Bersaing, Lembaga Penelitian. Universitas Andalas, Padang.
Sibbald  ,I,  R.  1976.  The  effect  of  level  of  feed intake  on  metabolizable  energy  value. Adult  Roasters.  Journal  Poultry  Sci 54:130-14.
Siswanti,  V.  1993.  Pengaruh  pemberian  kulit umbi ubi kayu terhadap performa ayam
broiler.  Skripsi.  Fakultas  Peternakan Universitas Andalas. Padang.
Steel, R.G.D, dan T.H.Torrie. 1991. Prinsip dan Prosedur  Statistik.  Suatu  Pendekatan Biometric    P.T  Gramedia  Pustaka Utama Jakarta.
Sulaiman,  A.  H.,  1998.  Dasar-Dasar  Biokomia Untuk Pertanian. Cetakan 2.USU-Press. Wahju  ,J.  1997.  Ilmu  Nutrisi  Unggas,  Cetakan ke-14. Gadjah University Press.Yogyakarta. Wang, D. J. C., C. L. Cooney., A.L. Deman, A.
E  Numphrey  and  M.D.  Lilly.  1979. Fermentation  and  enzyme  technology. Jhon Willey and Sons, Inc. New York. Winarno,  F  .  G  .  S.  Fardiaz  dan  D.  Fardiaz.
1980.  Pengantar  Teknologi  Pangan. PT.XI (4): 175-181. Wizna, 2006. Potensi Bacillus amyloliquefaciens isolat  serasah  hutan dalam  peningkatan  kualitas  campuran empelur  sagu  dan  isi  rumen  dan implikasinya  terhadap  produktifitas
ternak  unggas. Disertasi. Pascasarjana Universitas Andalas, Padang.
Wizna, H. Abbas, Y. Rizal, A. Dharma dan I. P. Kompiang.  2006.  Potensi Bacillus amyloliquefaciens dari  serasah  hutan sebagai probiotik ayam broiler. Dalam :  Prosiding  Seminar  Nasional  dan Rapat  Tahunan  Dekan-Dekan  Bidang Ilmu  Pertanian  BKS-PTN  Wilayah Barat, Padang.
Wizna,  H.  Abbas,  Y.  Rizal,  A.  Dharma  &  I.  P. Kompiang. 2007. Selection and identification  of  cellulase-producing bacteria  isolated  from  the  litter  of mountain  and  swampy  forest.  J. Microbiology  Indonesia,  1(3):135- 139.
Wizna,  H.  Abbas,  Y.  Rizal,  A.  Dharma  &  I.  P. Kompiang.  2009.  Improving  the quality of tapioca by-products (Onggok)  as  poultry  feed  throud fermentation by Bacillus amyloliquefaciens . Pakistan Journal of Nutrition 8(10): 1636-1640.