## EduMatSains
Jurnal Pendidikan, Matematika dan Sains http://ejournal.uki.ac.id/index.php/edumatsains
POTENSI BIOAKARISIDA EKSTRAK DAUN MIMBA ( Azadirachta Indica ) DAN BUNGA CENGKEH ( Syzygium Aromaticum ) TERHADAP TUNGAU PENYEBAB PENYAKIT KREPES PADA JAMUR KUPING
Meilani Apra 1 , Aniek Prasetyaningsih 2 , Kukuh Madyaningrana 3*
1,2,3 Fakultas Bioteknologi, Universitas Kristen Duta Wacana
Diterima: 30 Oktober 2020     Direvisi: 23 November 2020     Diterbitkan : 10 Januari 2021

## ABSTRACT
Wood ear mushrooms (Auricularia polythrica) is commonly known as one of the cultivated edible mushrooms in Indonesia. The demand for this commodity is still steadily high and leads mushroom farmers to optimize its cultivation. For mushroom farmers in Yogyakarta, the prevalence of krepes disease which is caused by a group of  species  belongs  to  Acarina  order  is  still  high  and  leads  to  total  loss  of  harvest.  In  order  to  diminish  these Acarina  species,  the  use  of  chemical  acaricides  is  common  because  of  their  effectiveness  in  eradicating  the pests  despite  their  toxic  effect  to  the  environment.  A  strategy  to  provide  environmental  friendly  acaricides which  are    extracted  from  plants  is  therefore  important.  This  research  aimed  to  study  the  potency  of  neem leaves  (Azadirachta  indica)  and  clove  flowers  (Eugenia  caryophyllata)  extracts  as  bioacarisides  for  Acarina species as the causal agent of krepes disease. Neem leaves and cloves flowers were extracted using maceration and soxhlet extraction  methods, using 96% methanol as their solvents. Obtained crude extracts would then be subjected to phytochemical analysis using qualitative biochemical tests and GC-MS. The effectivity of extracts as bioacaricides were tested both in in vitro and field scale. In vitro tests showed that neem leaves extract and clove flower extract had LC50 value of 0.22% and 0.48% respectively. Field scale test on mushroom baglogs showed  that  the  efficacy  of  the  neem  leaves  and  clove  flower  to  eradicate  acarina  were  above  50%.  Taken together, neem leaves and clove flower extracts are potential to be used as bioacaricides in mushroom farming.
Keywords: bioacaricide, clove flower wood, ear mushroom; krepes disease; neem leaf

## PENDAHULUAN
Jamur kuping ( Auricularia polythrica ) adalah  salah  satu  jamur  edibel  yang  banyak dibudidayakan  di  Indonesia.  Jamur  ini digemari  oleh  karena  cita  rasa  dan  nilai nutrisinya  yang  tinggi.  Data  yang  diperoleh dari Direktorat Jenderal Hortikultura Indonesia  (2019),  menunjukkan  bahwa konsumsi  jamur  di  Indonesia  pada  tahun 2017  meningkat  dua  kali  lipat  dari  tahun 2014,  tetapi  angka  produksi  jamur  secara
keseluruhan  menunjukkan  penurunan  dari tahun  2015  hingga  2018  dan  hanya  sedikit meningkat  sebesar  5%  pada  tahun  2019. Salah  satu  kendala  yang  menyebabkan turunnya  produksi  jamur  kuping  adalah serangan  hama  tungau  penyebab  penyakit krepes  yang  menyebabkan  gagal  panen sehingga menurunkan produksi jamur kuping.
Tungau merupakan jenis hewan anggota  ordo  Akarina.  Menurut  Itisha  et  al..
(2017), terdapat beberapa jenis  akarina  yang menyerang  jamur  edibel  yaitu Tyrophagus putrescentiae , Histiogaster sp., Caloglyphus mycophagus , Histiostoma sp. Rhizoglyphus echinopus , Tyroglyphus dimidatus , Luciaphorus sp.,  dan Schwiebea sp.  Qu  dan Li  (2015)  melaporkan  bahwa  jenis  tungau Tyrophagus  putrescentiae dapat  tumbuh  dan berkembang  pada  4  jenis  jamur  edibel  yaitu jamur kuping ( Auricularia polytricha ), jamur kancing  ( Agaricus  bisporus ),  jamur  tiram ( Pleurotus  ostreatus ),  dan  jamur  enoki ( Flammulina  velutipes ).  Para  petani  jamur lokal  di  Daerah  Istimewa  Yogyakarta  masih banyak mengandalkan menggunakan akarisida  buatan  pabrik  dalam  menangani tungau sebagai penyebab penyakit krepes ini. Meskipun  efektivitasnya  tinggi,  akumulasi segala  macam  pestisida  sintetik  buatan pabrik  berpotensi  menjadi  ancaman  bagi keseimbangan lingkungan di masa yang akan datang  (Ghorab  &  Khalil,  2016).  Sifat saprofitik jamur yang dapat menyerap bahan aktif akarisida  yang dipaparkan dalam usaha penanganan  hama  jamur  juga  menurunkan kualitas jamur konsumsi. Penelitian Insani et al.  (2018)  menyatakan  bahwa  paparan pestisida  kimia  pada  tubuh  manusia  dapat membentuk  radikal  bebas  yang  dapat menyebabkan  kerusakan  organ  tubuh  pada manusia.
Usaha untuk mereduksi dampak negatif  penanganan  penyakit  krepes  bisa ditempuh melalui penggunaan biosida
berbasis  tumbuhan.  Senyawa  fitokimia  yang dimiliki  oleh  tumbuhan  mempunyai  potensi untuk  dijadikan  bioakarisida.  Ekstrak  daun mimba ( Azadirachta  indica )  dan  bunga cengkeh  ( Syzygium  aromaticum )  memiliki potensi  sebagai  bioakarisida  terhadap  hama tungau penyebab penyakit krepes pada jamur kuping berdasarkan beberapa hasil penelitian.  Menurut  Irshad  et  al.  (2011), tanaman mimba memiliki metabolit sekunder yang  dapat  menjadi  racun  bagi  serangga seperti  azadirachtin,  salanin,  nimbine,  dan meliantriol.  Sudevan  dan  Vijayarghavan (2013) melaporkan senyawa fitokimia lainnya yang terkandung dalam ekstrak daun mimba  seperti  alkaloid,  tanin  dan  flavonoid memiliki  efek  terhadap  pencernaan  dan mengganggu  metabolisme  pada  serangga hingga menyebabkan serangga tersebut mati. Bunga cengkeh mengandung senyawa fitokimia memiliki kandungan utama minyak atsiri  dengan  komponen  terbesar  berupa eugenol.  Menurut  Johannah  et  al.  (2015), eugenol  dapat  berperan  sebagai repellent atau  penolak  dan antifeedant bagi  serangga.
Bunga  cengkeh  juga  mempunyai  fitokimia berupa  alkaloid  dan  flavonoid  berperan sebagai  racun  yang  dapat  mengganggu sistem  pencernaan  dan  metabolisme  pada serangga  (Johannah  et  al.  2015;  Taher  et  al. 2018).
Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari  potensi  ektrak  daun  mimba ( Azadirachta  indica )  dan  bunga  cengkeh
( Syzygium  aromaticum )  sebagai  bioakarisida tungau penyebab penyakit krepes pada jamur kuping ( Auricularia polythrica ).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Februari sampai Agustus 2020 di Laboratorium Lingkungan Fakultas Bioteknologi,  Universitas  Kristen  Duta Wacana,  Yogyakarta.  Pengujian  GC-MS dilaksanakan  di  Laboratorium  Terpadu, Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.
Ekstraksi  Daun  Mimba  dan  Bunga

## Cengkeh
Daun  mimba  kering  dan  bunga cengkeh kering diperoleh dari Pasar Beringharjo,  Yogyakarta.  Ekstraksi  daun mimba  dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan  pelarut  metanol  96%.  Daun mimba  diblender  hingga  menjadi  bubuk  dan dimaserasi  dengan  pelarut  metanol  96% dengan perbandingan 1:3 (daun mimba:metanol).  Sampel  daun  mimba  yang diekstraksi  sebanyak  800  gram.  Maserasi dilakukan selama 3 hari dan diaduk setiap 24 jam  sekali.  Maserat  kemudian  disaring menggunakan  kain  monel  dan  disaring  lagi menggunakan  kertas  saring whatman .  Filtrat yang diperoleh kemudian diuapkan menggunakan rotary  evaporator dengan suhu  50 o C  hingga  semua  pelarut  menguap dan  didapatkan  hasil  ekstrak  dalam  bentuk pasta.  Ekstrak  dalam  bentuk  pasta  inilah
yang  disebut  ekstrak  kasar  dan  siap  diuji. Ekstraksi  bunga  cengkeh  juga  menggunakan pelarut  metanol  96%  dengan  metode ekstraksi  berbeda  yaitu soxhletasi. Sebanyak 30  gram  bunga  cengkeh  bubuk  yang  sudah diblender  dan  100  ml  pelarut  metanol  96% diekstraksi  dengan  alat  soxhlet.  Total  bubuk bunga  cengkeh  yang  diekstraksi  sebanyak 480 gram. Hasil ekstraksi diuapkan menggunakan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 50 o C hingga semua pelarut  menguap  dan  didapatkan  hasil ekstrak dalam bentuk pasta.

## Analisis Fitokimia
Senyawa  fitokimia  dari  ekstrak  kasar daun  mimba  dan  bunga  cengkeh  dianalisis dengan tes biokimia kualitatif untuk mendeteksi  keberadaan  senyawa  saponin, alkaloid,  tanin,  flavonoid,  dan  steroid. Analisis fitokimia dilanjutkan dengan pengujian  GC-MS  untuk  melihat  secara spesifik  jenis  dari  senyawa  fitokimia  yang dimiliki  ekstrak  daun  mimba  dan  bunga cengkeh.

## Uji Saponin
Ekstrak  kasar  diambil  sebanyak  0,3 gram dan dicampur dengan 5ml akuades lalu divortex  selama  30  detik.  Senyawa  saponin ditandai  dengan  adanya  gelembung  pada permukaan larutan.

## Uji Alkaloid
Ekstrak  kasar  diambil  sebanyak  0,3 gram dan dicampur dengan 5 ml HCl 2N lalu dihomogenkan. Larutan uji kemudian
dipanaskan selama 2 – 3 menit sambil diaduk lalu  disaring.  Filtrat  ditambahkan  dengan  5 ml  HCl  2N  dan  dihomogenkan.  Larutan berisi  filtrat  dan  HCl  2N  dibagi  menjadi  3 bagian, masing-masing bagian diambil 3 ml. bagian  1  ditambahkan  dengan  3  tetes aquades  dan  dijadikan  blanko,  bagian  2 ditambahkan dengan 3 tetes pereaksi Mayer, dan bagian 3 ditambahkan dengan 3 pereaksi Wagner.  Jika  pada  bagian  2  dan  bagian  3 terdapat  endapan  atau  keruh,  menunjukkan adanya kandungan alkaloid.

## Uji Tanin
Ekstrak  kasar  diambil  sebanyak  0,3 gram  dan  dicampur  dengan  10  ml  akuades panas lalu dihomogenkan dan ditambahkan 4 tetes NaCl 10%. Larutan uji dibagi menjadi 3 bagian  dan  masing-masing  bagian  diambil  3 ml  dari  larutan  uji.  Bagian  1  dijadikan sebagai  blanko.  Bagian  2  ditambahkan dengan  3  tetes  gelatin  dan  5  ml  NaCl  10%. Jika  didapatkan  endapan  putih  menunjukkan adanya kandungan tanin. Bagian 3 ditambahkan  dengan  3  tetes  FeCl 3 .  Jika larutan  berwarna  hijau  hitam,  menunjukkan adanya tanin.

## Uji Flavonoid
Ekstrak  kasar  diambil  sebanyak  0,3 gram  dan  dicampur  dengan  3  ml  n-heksana dan  dihomogenkan  hingga  larutan  tidak berwarna,  lalu  ditambahkan  dengan  20  ml etanol  80%  dan  larutan  uji  dibagi  menjadi  3 bagian.  Bagian  1  diambil  7  ml  dari  larutan uji  dan  dijadikan  sebagai  blanko.  Bagian  2
diambil  7  ml  dari  larutan  uji  lalu ditambahkan  dengan  0,5  ml  HCl  pekat kemudian dipanaskan selama 1-2 menit. Jika laruran berubah warna menjadi merah terang atau  ungu  menunjukkan  adanya  kandungan leukoantosianin.  Bagian  3  diambil  7  ml  dari larutan  uji  dan  ditambahkan  dengan  0,5  ml HCl  pekat  dan  4  potong  Magnesium.  Jika larutan berwarna jingga menunjukkan adanya  kandungan  flavon,  sedangkan  jika larutan  berwarna  merah  pucat  menunjukkan adanya kandungan flavani.

## Uji Steroid
Ekstrak  kasar  diambil  sebanyak  0,3 gram  dan  dicampur  dengan    15  ml  etanol, kemudian  larutan  uji  dibagi  menjadi  3 bagian.  Bagian  1  diambil  5  ml  dari  larutan uji  dan  dijadikan  sebagai  blanko.  Bagian  2 diambil  5  ml  dari  larutan  uji  dan ditambahkan  dengan  3  tetes  H 2 SO 4 lalu dihomogenkan. Jika didapatkan hasil berwarna hijau-biru, merah-ungu atau kuning muda  menunjukkan  adanya  kandungan steroid.  Bagian  3  diambil  5  ml  dari  larutan uji  dan  ditambahkan  dengan  1-2  ml  H 2 SO 4 pekat.  Jika  terdapat  endapan  berupa  cincin berwarna merah dibagian permukaan larutan, menunjukkan adanya kandungan steroid.

## Uji GC-MS
Ekstrak  daun  mimba  dan  bunga cengkeh masing-masing ditimbang sebanyak 10  gram,  disimpan  dalam  botol sampel  dan dikirimkan  untuk  dianalisa  di  Laboratorium
Terpadu  UII,  Yogyakarta  menggunakan instrumen GC-MS

## Uji Potensi Bioakarisida
Pengujian  ekstrak  kasar  daun  mimba dan  bunga  cengkeh  terhadap  hama  tungau penyebab  penyakit  krepes  dilakukan  dengan dua cara yaitu dengan skala in vitro dan skala lapang.  Hama  tungau  diperoleh  dari  jamur kuping  yang terserang penyakit krepes milik petani  jamur  di  Ngipiksari,  Cangkringan, Sleman. Jamur kuping yang terserang krepes memiliki  ciri-ciri  seperti  terdapat  kumpulan telur dan koloni berwarna bening pada tubuh buah  jamur,  dan  media  tumbuh  jamur,  serta miselium berubah warna menjadi coklat.

## Skala In Vitro
Pada uji invitro, ekstrak kasar diencerkan kedalam aquades dengan konsentrasi  0,5  ;  1  ;  1,5  ;  2,0  ;  2,5  (%). Disiapkan  kertas  saring  whatman  dan dimasukkan  kedalam  cawan  petri  kemudian diberi  perlakuan  ekstrak  dengan  cara disemprotkan dengan masing-masing konsentrasi    bioakarisida  dan  diletakkan  10 ekor tungau betina dewasa ke atas permukaan  kertas  saring  yang  sudah  diberi perlakuan  ekstrak.  Pengamatan  dilakukan setiap  6  jam  sekali  selama  4  hari.  Kontrol positif  diberikan  dengan  perlakuan  yang sama namun ekstrak tanaman diganti dengan akarisida  komersil  dengan  merk  dagang Samite 135 (PT. Tanindo Intertraco, Sidoarjo). Setiap perlakuan diulang sebanyak 3  kali.  Dosis  yang  paling  efektif  dalam
membunuh  tungau  digunakan  untuk  uji lapang  pada baglog jamur  kuping.  Mengacu kepada  Rizqillah  (2013),  perhitungan  LC50 menggunakan metode analisis probit persamaan garis lurus
y= ax + b                 (1) dengan :
Y = nilai probit konsentrasi 50% x = LC 50 dalam bentuk log a = log (ppm)
b = intercept Skala Lapang
Uji skala lapang dilakukan menggunakan baglog jamur  kuping  yang diperoleh  dari          CV.  Media  Agro  Merapi, Cangkringan,  Sleman. Baglog jamur  kuping yang  siap  panen  (tidak  terserang  hama tungau)  ditentukan  3  titik  untuk  diinokulasi dengan  hama  tungau  sebanyak  10  ekor  per titik  inokulasi. Baglog jamur  kuping  yang sudah  ditentukan  titiknya  disemprot  dahulu dengan  bioakarisida  masing-masing  ekstrak daun  mimba  dan  bunga  cengkeh  dari konsentrasi  1  ;  1,5  ;  2  (%),  kemudian  hama tungau  diinokulasikan  diatas  permukaan baglog jamur  kuping.  Pada  kontrol  positif perlakuan ekstrak bioakarisida diganti dengan  akarisida  komersil  dengan  merk dagang Samite 135 dan dibuat pengulangan 3 kali pada masing-masing konsentrasi. Penyemportan  ekstrak  daun  mimba  dan bunga cengkeh satu kali sehari dan dilakukan setiap hari. Pengamatan dilakukan selama 14 hari.  Data  hasil  pengamatan  uji  lapangan
bioakarisida  dihitung  menggunakan  rumus Abbot  seperti  yang  diacu  pada  penelitian Subiyakto et al. (2016) :
EI = x 100%       (2)
Keterangan :
EI = Efikasi Insektisida (%) Ca  =  populasi  hama  sasaran  pada petak nonperlakuan (kontrol negatif) Ta  =  populasi  hama  sasaran  pada petak  perlakuan  yang  diuji  setelah penyemprotan insektisida.

## Analisis Data
Data  uji  in  vitro  dan  uji  lapang dianalisis  menggunakan General  Linear Model Univariate tests dan uji lanjut duncan pada  taraf  5%  untuk  melihat  pengaruh variabel  faktor  terhadap  hasil.  Nilai  LC50 dan  LC95  dihitung  menggunakan  analisis probit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  Daun  Mimba  dan  Bunga Cengkeh
Hasil ekstraksi daun mimba dan bunga cengkeh  menunjukkan  adanya  perbedaan pada  presentase  rendeman.  Hasil  rendemen dari  ekstraksi  daun  mimba  dan  bunga cengkeh  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Rendemen  ekstrak  kasar  yang  dihasilkan memiliki  nilai  yang  berbeda  dikarenakan metode,  berat  simplisia  dan  jumlah  pelarut yang  digunakan  berbeda.  Pada  tanaman mimba  metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah maserasi selama 3 hari dengan pelarut metanol  96%,  volume  larutan  3.950  ml  dan didapatkan rendemen sebesar 7,9% sedangkan  pada  tanaman  cengkeh,  metode ekstraksi  yang  digunakan  adalah  soxhletasi dengan pelarut metanol  96% volume larutan 1.600  ml  dan  didapatkan  rendemen  paling banyak  sebesar  26,3%.  Menurut  Harborne (1987),  metode  ekstraksi  soxhletasi  dapat mengekstrak  minyak  atsiri  dan  senyawa asam  lemak.  Rendemen  yang  didapatkan pada  ekstraksi  soxhletasi  bunga  cengkeh besar  karena  terdapat  campuran  ekstrak kasar,  minyak  atsiri  dan  senyawa  asam lemak.
Tabel 1. Rendemen ekstrak kasar daun mimba dan bunga cengkeh Tanaman Berat simplisia (g) Berat ekstrak kasar (g) Rendemen (%) Mimba 790 62,4 7,9 Cengkeh 480 150,2 26,3

## Uji  Fitokimia  Daun  Mimba  dan  Bunga Cengkeh
Berdasarkan hasil identifikasi fitokimia yang ditunjukkan pada Tabel 2, ekstrak daun mimba  memiliki  senyawa  saponin,  alkaloid, tanin,  dan  flavonoid.  Menurut  Sudevan  dan Vijayarghavan  (2013)  senyawa  fitokimia pada  daun  mimba  yang  diekstraksi  dengan pelarut  metanol  adalah  alkaloid,  tanin, flavonoid,  steroid  dan  saponin.  Pada  uji steroid  skrining  fitokimia  ekstrak  daun mimba,  tidak  terdeteksi.  Hal  ini  dapat disebabkan  karena  senyawa  tersebut  tidak terekstraksi  dengan  baik.  Pada  bunga cengkeh  senyawa  aktif  yang  terdeteksi
adalah alkaloid, tanin, flavonoid dan steroid. Menurut  Taher  et  al.  (2018),  ekstrak  bunga cengkeh  memiliki  senyawa  aktif  seperti triterpenoid, steroid, flavonoid, phenol, tanin, dan  alkaloid.  Pada  uji  saponin  skrining fitokimia  ekstrak  bunga  cengkeh,  tidak terdeteksi  karena  metode  ekstraksi  yang digunakan adalah soxhletasi. Senyawa saponin  memiliki  sifat  seperti  detergen sehingga  menghasilkan  buih.  Soxhletasi dapat  menghasilkan  ekstrak  yang  memiliki kandungan  minyak  atsiri  dan  asam  lemak yang tinggi sehingga memungkinkan saponin tidak terdeteksi.
Tabel 2. Hasil uji identifikasi fitokimia melalui tes biokimia kualitatif
Keterangan : tanda (+) menandakan adanya senyawa, tanda (-) menandakan tidak ada senyawa aktif.
Tabel 3. Hasil GC-MS Ekstrak Daun Mimba (Azadirachta indica)
Peak   Waktu
retensi Area % SI* BM* Perkiraan Senyawa Rumus molekul 1 25.422 90.72 55 307 Silane C 32 H 58 OSI 2 28.808 9.28 46 300 1,4-Benzenediol C 14 H 22 O 2
Keterangan *: SI: Similarity Index, BM: Berat Molekul
Senyawa Aktif Tanaman Cengkeh Mimba Saponin - + Alkaloid + + Tanin + + Flavonoid + + Steroid + -
Dari  hasil  skrining  fitokimia,  senyawa  yang terdeteksi  merupakan  senyawa  metabolit sekunder  secara  umum  yang  dapat  berperan sebagai  bioakarisida.  Menurut  Irshad  et  al. (2011), senyawa alkaloid, tanin, dan flavonoid memiliki efek terhadap pencernaan dan mengganggu metabolisme pada serangga hingga menyebabkan serangga tersebut mati. Senyawa  saponin  memiliki  rasa  pahit sehingga  dapat  bersifat  sebagai reppelent atau penolak bagi serangga.
Hasil  analisa  GC-MS  terhadap  ekstrak daun mimba dan bunga cengkeh ditunjukkan pada  Tabel  3  dan  4.  Hasil  GC-MS  ekstrak daun  mimba  menunjukkan  keberadaan  2 puncak  yang  terdeteksi  sebagai  dasar perkiraan  senyawa  dari  puncak  tersebut. Pada  puncak  1,  senyawa  yang  terdeteksi
pada  waktu  retensi  25.422  adalah  silane dengan  area  90.72%.  Senyawa  silane merupakan senyawa anorganik yang digunakan  untuk  pengikat  serat  alam  dan matrik  polimer.  Pada  puncak 2,  senyawa yang  terdeteksi  pada  waktu  retensi  28.808 adalah  1,4-Benzenediol  dengan  area  9.28%. Menurut  Dewi  et  al.  (2017)  menyebutkan bahwa 1,4-Benzenediol yang memiliki nama IUPAC  Hidrokuinon  termasuk  kedalam kelompok  fenol.  Menurut  Irshad  et  al. (2011),  senyawa  fenol  berperan  sebagai penolak pada serangga. Ekstrak daun mimba mengandung  senyawa  fenolik.  Berdasarkan hasil  GC-MS  ekstrak  daun  mimba,  senyawa yang  terdeteksi  sebagai  puncak  2  dapat berperan sebagai bioakarisida.
Tabel 4. Hasil GC-MS Ekstrak Bunga Cengkeh ( Syzygium aromaticum )
Peak Waktu retensi Area (%) SI*  BM * Perkiraan Senyawa Rumus molekul 1 8.334 0.13 84 318 Eugenol C 10 H 12 O 2 2 23.526 3.21 78 342 Octadecanal C 18 H 35 BRO 3 24.267 6.39 79 381 Oleic acid C 39 H 76 O 3 4 24.522 2.55 53 324 2-((1- 14C)Decanoyl)Cyclodec anone C 19 14CH 36 O 2 5 24.758 10.36 74 351 Hexadecanoic acid C 36 H 72 O 3 6 25.007 7.88 71 337 Hexadecanoic acid C 36 H 72 O 3 7 25.885 10.70 75 377 Glycerine-1-Oleate-3- Palmitate C 37 H 70 O 5 8 26.726 16.15 76 384 Glycerine-1-Oleate-3- Palmitat C 37 H 70 O 5 9 27.142 12.34 69 316 isochiapin B C 19 H 26 O 6 10 27.641 5.11 52 291 Isopulegol C 10 H 18 O 11 27.898 7.60 68 322 Thiosulfuric acid  C 2 H 7 NO 3 S
(H2S2O3) 12 28.200 17.57 76 486 Oleic acid C 21 H 40 O 2 Keterangan *: SI: Similarity Index, BM: Berat Molekul
Berdasarkan  hasil  GC-MS  ekstrak bunga  cengkeh,  terdapat  beberapa  senyawa yang  termasuk  dalam  kelompok  minyak atsiri  yaitu  eugenol  (0.13%),  isopulegol (5.11%) dan isochiapin  B (12.34%). Rousdy et  al.  (2017)  melaporkan  bahwa  senyawa eugenol  diketahui  dapat  berperan  sebagai antimakan ( antifeedant ), dan bekerja sebagai neurotoksin  pada  serangga.  Isopulegol  dan isochiapin  B  merupakan  turunan  dari senyawa  terpenoid  yang  dapat  bersifat sebagai  penolak  ( repellent )  pada  serangga.
Menurut  Rattan  (2010)  terpenoid  memiliki aroma  yang  tidak  disukai  oleh  serangga  dan dapat  mengganggu  fungsi  saraf  sehingga mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan  pada  serangga  dan  akhirnya mati.  Oleh  sebab  itu,  senyawa  yang terdeteksi  pada  puncak  1,  9  dan  10  dapat
berperan  sebagai  bioakarisida.  Senyawa lainnya  merupakan  senyawa  dari  kelompok asam  lemak  yaitu oleic  acid,  hexadecanoic acid , dan Glycerine-1-Oleate-3-Palmitat yang  dapat  berpotensi  sebagai  bioakarisida karena  memiliki  sifat  dapat  menurunkan viabilitas atau daya hidup serangga. (Darmawan dan Ismanto, 2016).
Uji Potensi Bioakarisida Ekstrak terhadap Tungau Penyebab Krepes Hasil  pengujian  potensi  bioakarisida ekstrak  daun  mimba  dan  bunga  cengkeh terhadap  tungau  penyebab  penyakit  krepes ditunjukkan  pada  Tabel  5  untuk  uji  skala in vitro dan Tabel 6 untuk uji skala lapang.
Tabel 5. Mortalitas Tungau setelah Diberi  Perlakuan Ekstrak Mimba dan Cengkeh selama 96 Jam.
Perlakuan Konsentrasi Rata-rata Mortalitas Krepes (%) LC 50 Jam ke-24 Jam ke-48 Jam ke-72 Jam ke-96 Mimba 0,5% 3,33 a 20,00 cd 63,33 gh
80,00 i
0,22% Mimba 1% 6,67 ab 46,67 e 63,33 gh 83,33 ij Mimba 1,5% 20,00 cd 50,00 ef 70,00 h 86,67 ij Mimba 2% 26,67 d 50,00 ef 70,00 h 90,00 jk Mimba 2,5% 20,00 cd 50,00 ef 80,00 i 100,00 l Cengkeh 0,5% 6,67 ab 46,67 e 50,00 ef 56,67 fg 0,48%
Cengkeh 1% 6,67 ab 23,33 d 50,00 ef 70,00 h Cengkeh 1,5% 10,00 ab 26,67 d 63,33 gh 86,67 ij Cengkeh 2% 13,33 bc 50,00 ef 63,33 gh 86,67 ij Cengkeh 2,5% 13,33 bc 56,67 fg 83,33 ij 96,67 kl Samite 0,1% 10,00 ab 60,00 g 100,00 l 100,00 l -
Keterangan:  angka  pada  kolom  yang  berbeda  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda    menunjukkan  nila  yang berbeda nyata pada uji duncan taraf 5%.
Hasil  uji in  vitro menunjukkan  bahwa seiring  waktu  pengamatan,  semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  daun  mimba  atau  bunga cengkeh  yang digunakan akan menyebabkan semakin tingginya tingkat mortalitas tungau. Kontrol  positif  berupa  akarisida  komersil Samite sebesar  0,1  %  digunakan  sebagai kontrol positif.
Berdasarkan  hasil  mortalitas  tungau setelah  pengamatan  ke-96  jam,  ekstrak mimba  dan  cengkeh  mampu  menyebabkan kematian  pada  hama  tungau  dengan  kisaran angka  mortalitas  3,33  –  100,00  %.  Jika dibandingkan  dengan  akarisida  komersil yaitu samite , perlakuan ekstrak mimba 2,5% dan  cengkeh  2,5%  memiliki  kemampuan yang  hampir  sama  dengan  samite  dilihat berdasarkan kelompok subset. Potensi bioakarisida  ekstrak  daun  mimba  dan  bunga cengkeh ini terkait senyawa fitokimia berupa alkaloid,  tanin,  flavonoid,  saponin  dan steroid  yang  dimilikinya.  Menurut  Javandira et al. (2016) senyawa alkaloid dan flavonoid pada ekstrak daun mimba bersifat toksik dan berperan  sebagai  antimakan  ( anti  feedant ) dan  racun  perut  ( stomach  poisoning ).  Saat senyawa  tersebut  masuk  kedalam  tubuh
serangga  akan  menyebabkan  metabolisme serangga terganggu, kemudian racun tersebut akan  tersebar  diseluruh  tubuh  serangga  dan akan  mempengaruhi  sistem  saraf  yang akhirnya  mengakibatkan  serangga  mati. Senyawa tanin juga berpengaruh pada sistem pencernaan  serangga,  karena  tanin  memiliki rasa pahit dan dapat mengikat protein dalam tubuh  serangga  yang  dibutuhkan  untuk pertumbuhan sehingga menyebabkan serangga  sulit  untuk  menyerap  protein.  Hal ini  sesuai  dengan  penelitian  Ahadian  et  al. (2012) yang melaporkan bahwa ekstrak daun mimba  memiliki  sifat  akarsida  dan  efektif membunuh tungau Sarrcoptes scabiei dengan konsentrasi optimal 13,18%.
Perlakuan ekstrak daun mimba menunjukkan  nilai  LC 50 sebesar  0,22%, sedangkan  perlakuan  ekstrak  bunga  cengkeh menunjukkan  nilai  LC 50 0,48%.  Menurut Meyer  et  al.  (1982),  nilai  LC50  <  0,1% menunjukkan  ekstrak  tanaman  tersebut memiliki  tingkat  toksisitas  yang  tinggi  dan sebaliknya  jika  nilai  LC50  >  0,1%  maka tingkat  toksisitas  ekstrak  tersebut  rendah. Meskipun  nilai  LC50  pada  ekstrak  daun mimba  dan  bunga  cengkeh  pada  penelitian
ini  bernilai  lebih  besar  dari  0,1%,  ekstrak kedua tanaman ini masih mampu membunuh tungau  dalam  uji in  vitro dalam  rentang waktu 96 jam dengan daya bunuh berbanding lurus dengan peningkatan konsentrasi ekstrak yang diberikan (Tabel 5).
Tabel 6. Efikasi Ekstrak Daun Mimba dan Bunga Cengkeh terhadap Tungau Penyebab
Krepes di Baglog Jamur Kuping Perlakuan Waktu Pengamatan (hari) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Kontrol JP  33 34,3  40,3  50,3  62,7  72,3  73,7  81,3  99,3  105 123,3  99,3  94,7  93,7 Samite 0,1% JP  30 28,5  25,5  23 19 14,5  9,5 5 1,5 0,5 0 0 0 0 EI  9,1 16,9  36,7  54,3  69,7  79,9  87,1  93,8  98,5  99,5  100 100 100 100 Mimba 1,5% JP  30,0  35,0  31,3  34,0  31,0  22,5  20,5  19,5  17,0  14,0  13,7 9,3 3,0 0,0 EI  9,1 -2,0  22,2  32,4  50,6  68,9  72,2  76,0  82,9  86,7  88,9 90,6  96,8  100 Mimba 2% JP  30,0  33,0  37,0  35,3  30,0  28,0  23,7  21,0  19,0  13,3  8,7 2,3 0,0 0,0 EI  9,1 3,8 8,2 29,8  52,2  61,3  67,9  74,2  80,9  87,3  93,0 97,7  100 100 Mimba 2,5% JP  30,0  33,0  35,0  33,7  30,7  30,0  27,3  22,0  15,3  8,7 3,3 0,0 0,0 0,0 EI  9,1 3,8 13,2  33,1  51,1  58,5  62,9  72,9  84,6  91,7  97,3 100 100 100 Cengkeh 1,5% JP  30,0  36,3  35,0  36,7  38,3  32,5  32,5  29,5  25,0  21,5  19,0 15,3  11,0  0,7 EI  9,1 -5,9  13,2  27,1  38,9  55,0  55,9  63,7  74,8  79,5  84,6 84,6  88,4  99,3 cengkeh 2% JP  30,0  35,0  38,7  37,7  34,7  27,5  23,0  19,5  17,0  14,0  13,7 9,3 4,3 0,0 EI  9,1 -2,0  4,1 25,1  44,7  62,0  68,8  76,0  82,9  86,7  88,9 90,6  95,4  100 Cengkeh 2,5% JP  30,0  30,0  31,7  35,3  31,3  29,7  29,7  25,7  20,7  15,0  10,0 3,3 0,0 0,0 EI  9,1 12,5  21,4  29,8  50,0  59,0  59,7  68,4  79,2  85,7  91,9 96,6  100 100
Keterangan: JP = Jumlah Populasi ; EI = Efikasi Insektisida (%)
Jumlah  individu  yang  tetap  hidup setelah  diinokulasikan  dan  diberi  perlakuan ekstrak  tanaman  pada baglog jamur  adalah tujuan  dari  uji  lapang  bioakarisida  yang dilakukan  untuk  menghitung  nilai  efikasi bioakarisida.  Menurut  Kementrian  Pertanian (2012),  uji  efikasi  insektisida  merupakan pengujian yang digunakan untuk mengetahui kekuatan  atau  daya  bunuh  dari  pestisida dalam  mengendalikan  OPT  (Organisme Pengganggu  Tanaman)  sasaran.  Konsentrasi yang  digunakan  dalam  uji  lapang  adalah konsentrasi  1,5%,  2%  dan  2,5%  yang diperoleh  berdasarkan  hasil  optimal  yang
diperoleh  pada  uji in  vitro .  Rentang konsentrasi tersebut menghasilkan mortalitas tungau sebesar 86,67% - 100%,. Penggunaan konsentrasi  ekstrak  1,5%,  2%  dan  2,5% diharapkan efektif dalam menghambat pertumbuhan tungau pada uji lapang. Jumlah individu  tungau  pada baglog jamur  kuping dengan  perlakuan  ekstrak  mimba,  cengkeh, dan samite (kontrol  positif)  yang  teramati selama  14  hari  dibandingkan  dengan baglog yang  tidak  diberi  perlakuan  atau  kontrol negatif.
Pada penelitian ini, efikasi bioakarisida terhadap  tungau  yang  diinokulasikan  pada
baglog jamur kuping terhitung dari pengamatan  hari  ke-1  sampai  hari  ke-14 memiliki  nilai  efikasi              9,1  %  sampai 100%.  Pada  perlakuan samite (kontrol positif)  konsentrasi  0,1%  sebagai  akarisida pembanding, hasil efikasi bioakarisida dengan  nilai  lebih  besar  dari  50  %  mulai teramati pada hari ke-4, dan mencapai 100% pada  hari  ke-11.  Perlakuan  ekstrak  daun mimba  dengan    konsentrasi  1,5%,  2%,  dan 2,5% menunjukkan hasil efikasi bioakarisida lebih besar dari 50% teramati pada hari ke-5. Perlakuan  ekstrak  bunga  cengkeh  dengan konsentrasi    2,5%  memberikan  hasil  efikasi bioakarisida  lebih  dari  50%  pada  hari  ke-5, sedangkan konsentrasi 1,5% dan 2% teramati pada hari ke-6.
Menurut  Subiyakto  et  al.  (2016)  jika pada  sekurang-kurangnya  (1/2n  +  1)  kali pengamatan  (n=  jumlah  total  pengamatan stelah  diberi  perlakuan)  tingkat  efikasi insektisida  lebih  besar  atau  sama  dengan 50%,  maka  insektisida  tersebut  dapat dikatakan  bekerja  secara  efektif.    Pada penelitian  ini,  pengamatan  pada baglog jamur kuping yang diberi perlakuan dilakukan  dalam  rentang  waktu  14  hari  (14 kali).  Hasil  efikasi  bioakarisida  yang memiliki  nilai  lebih  besar  atau  sama  dengan 50%  teramati  selama10  hari  (10  kali) pengamatan. Hal  ini  menunjukkan  bahwa perlakuan  mimba  dan  cengkeh  efektif mengendalikan  hama  tungau  penyebab penyakit krepes.

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun  mimba ( Azadirachta indica ) dan ekstrak bunga cengkeh ( Syzygium  aromaticum )  memiliki  potensi sebagai  bioakarisida  terhadap  hama  tungau penyebab  penyakit  krepes  pada  jamur kuping.  Hal  ini  ditunjang  oleh  keberadaan senyawa  fitokimia  yang  terdeteksi  melalui analisa  biokimia  kualitatif  dan  analisa  GC- MS. Meskipun nilai LC 50 dari uji biosida in vitro kedua  ekstrak  tanaman  ini  masih  lebih besar  dari  0,01%,  ekstrak  masih  mampu membunuh  tungau  dalam  rentang  waktu  96 jam  dan  daya  bunuh  yang  dihasilkan berbanding lurus dengan naiknya konsentrasi ekstrak  yang  digunakan.  Hasil  efikasi bioakarisida  pada  uji  lapang  ekstrak  daun mimba  dan  bunga  cengkeh  pada baglog jamur  kuping  menunjukkan  nilai  efikasi lebih dari 50%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Fakultas  Bioteknologi,  Universitas  Kristen Duta  Wacana  ,Yogyakarta  atas  pembiayaan melalui  Hibah  Penelitian  Internal  Fakultas Tahun Anggaran 2020 dan semua pihak yang telah berkontribusi dalam memberikan bantuan  selama  proses  penelitian  dan penulisan hasil penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahadian,  F.,  Ginting,  N.,  &  Wahyuni,  T.  H.
(2012).  Efektivitas  Skabisida  Ekstrak Daun  Mimba  ( Azadirachta  indica A. juss)  Terhadap  Tungau Sarcoptes Scabiei In  Vitro. Jurnal  Peternakan Integratif, 1 , 1-10.
Darmawan,  Ujang,  W.,  Ismanto,  &  Agus. (2016).  Mortalitas  Larva  Hama  Kupu Kuning  ( Eurema sp)  akibat  Pemberian Ekstrak  Biji  Nona  Sebrang  ( Annona glabra L.). Jurnal  Penelitian  Hutan Tanaman, 13 , 157-164.
Dewi,  S.  A.,  Chozin,  M.  A.,  Guntoro,  & Dwi.  (2017).  Identifikasi  Senyawa Fenol  Beberapa  Aksesi  Teki  ( Cyperus rotundus L.) serta Pengaruhnya terhadap  Perkecambahan  Biji Borreria alata (Aubl.)  DC. Jurnal  Agron Indonesia, 45 , 93-99.
Direktorat  Jenderal  Hortikultura.  (2019). Data  Konsumsi  Pangan. Jakarta: Departemen Pertanian.
Ghorab, M.  A., & Khalil, M. S. (2016). The Effect  of  Pesticides  Pollution  on  Our Life  and  Environment. Journal  of Pollution Effects & Control, 4 , 1-2.
Hapsoh,  &  Hasanah.  (2011). Budidaya Tanaman  Obat  dan  Rempah. Medan: USU press.
Harborne,  J.  B.  (2011). Phytochemical methods. Bandung: ITB press.
Insani, A. Y., Marchianti, A. C., & Wahyudi, S.  S.  (2018).  Perbedaan  Efek  Paparan Pestisida  Kimia  dan  Organik  terhadap Kadar  Glutation  (GSH)  Plasma  pada Petani Padi. Jurnal Kesehatan
Lingkungan Indonesia, 17 , 63-67.
Irshad  ,  S.,  Butt,  M.,  &  Younus,  H.  (2011).
In-Vitro  Antibacterial  Activity  of  Two Medical  Plants  Neem  (Azadirachta indica)  and  Peppermint. International Research  Journal  of  Pharmaceuticals,
1 , 9-14.
Itisha,  Gulati,  R.,  Anita,  &  Manoj.  (2017).
Damage  Potential  of Tyrophagus putrescentiae Schrank (Acari:
Acaridae) in Mushroom. Emergent Life
Sciences Research, 3 , 6-15.
Javandira, C., Widnyana, I. K., & Suryadarmawan,  I.  G.  (2016).  Kajian Fitokimia  dan  Potensi  Ekstrak  Daun Tanaman  Mimba  ( Azadirachta  indica ) sebagai  Pestisida  nabati. Seminar
Nasional  Inovasi  IPTEKS  Perguruan Tinggi
untuk
Meningkatkan
Kesejahteraan  Masyarakat ,  (hal.  402- 406). Denpasar.
Johannah, N. M., Renny, R. M., Gopakumar,
G.,  Maliakel,  Balu,  Surehskumar,  D., et  al.  (2015).  Beyond  the  Flavour:  a De-flavoured  Polyphenolrich  Extract of  Clove  Buds  ( Syzygium  aromaticum L.)  as  a  Novel  Dietary  Antioxidant Ingredient. Food  & Function, 6 , 3373- 3382.
Kementrian  Pertanian.  (2012). penyediaan Efikasi  Pestisida/Ketahanan  Varietas . Diakses  30  Agustus,  2020,  dari pertanian.go.id:
http://satulayanan.pertanian.go.id/artik el/eselon_3/59
Meyer, B. N., Ferrigni, N. R., Putnam, J. E.,
Jacobsen,  L.  B.,  Nichols,  D.  E.,  & McLaughlin,  J.  L.  (1982).  Brine Shrimp: A Convenient General Bioassay for Active Plant Constituents. Journal  of  Medicinal  Plant  Research, 45 , 31-34.
Qu,  S.  X.,  &  Li,  H.  P.  (2015).  Effect  of Different  Edible  Mushroom  Host  on the  Development,  Reproduction  and
Bacterial  Community  of Tyrophagus putrescentiae (Schrank). Journal  of
Stored Product Research, 61 , 70-75.
Rattan, & Rameshwar, S. (2010). Mechanism  of  Action  of  Insecticidal Secondary Metabolites of Plant Origin.
Crop Protection, 29 , 913-920.
Rizqillah,  N.  (2013).  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak  N-heksana  Daun Garcinia benthami Pierre terhadap Larva
Artemia  salina Leach  dengan  Metode Brine  Shrimp  Lethality  Test  (BSLT). Skripsi, Universitas Islam Negri Syarif
Hidayatullah.
Diakses
dari http://repository.uinjkt.ac.id/dspace/bit
stream/123456789/26401/1/Nur%20Ri
zqillah-FKIK.pdf
Rousdy,  Diah,  W.,  Rusmiyanto,  Elvi,  & Kustiati.  (2017).  Aktivitas  Insektisida Asap  Cair  Limbah  Serbuk  Kayu Manggis  ( Garcinia  dulcis (ROXB.) KURZ) terhadap Nyamuk Aedes
aegypti Strain VCRU. Seminar Nasional Penerapan Ilmu Pengetahuan dan Teknologi 2017 , (hal.
107-111). Pontianak.
Subiyakto, Asbani, Nur, Sunarto, Dwi, A., &
Sujak.  (2016).  Efikasi  Pestisida  Alami Kalsium  Polisulfida  (Sulfur)  terhadap
Tungau  ( Polyphagotarsonemus  latus
L.). AGROVIGOR, 9 , 42-47.
Sudevan, Susmitha, Vijayarghavan, & Ramasamy. (2013). Phytochemical Extraction and Antimicrobial Properties of Azadirachta indica
(Neem). Global
Journal of
Pharmacology, 7 , 316-320.
Taher,  D.  M.,  Solihin,  D.  D.,  Cahyaningsih,
Umi,  Sugita,  &  Purwantiningsih.
(2018).  Ekstrak  Metanol  Cengkeh
( Syzygium  aromaticum L.)  Varietas
Tuni Buru Selatan Sebagai Antimalaria. Acta Veterinaria
Indonesiana, 6 , 38-47.