## Livestock and Animal Research
Accredited by Directorate General of Strengthening for Research and Development No. 10/E/KPT/2019
Open Access Livest. Anim. Res. , July 2020, 18(2): 132-141
p-ISSN 2721-5326 e-ISSN 2721-7086 https://doi.org/10.20961/lar.v18i2.42935

## Original Article
Tingkat peradangan mammary dan stabilitas susu sapi mastitis subklinis yang mendapat suplemen herbal dan Zn-Se proteinat

## Dian Wahyu Harjanti *, Dewi Wulandari, Rudy Hartanto, Anis Muktiani
Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang, 50275 * Correspondence: harjantidian@gmail.com
Received: January 21 st , 2020; Accepted: March 19 th , 2020; Published online: July 17 th , 2020

## Abstrak
Tujuan: Mastitis subklinis adalah peradangan mammary tanpa disertai perubahan fisik susu, namun menyebabkan  perubahan  kimiawi  susu.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  tingkat peradangan  mammary  dan  stabilitas  susu  sapi  mastitis  subklinis  yang  mendapatkan  suplemen pakan herbal daun papaya dan kunyit serta Zn-Se proteinat.
Metode: Penelitian  menggunakan  16  ekor  sapi  mastitis  subklinis.  Rancangan  penelitian  berupa rancangan acak lengkap dengan 4 perlakuan dan 4 ulangan. Pakan yang digunakan adalah rumput gajah dan konsentrat. Perlakuan berupa : To (pakan basal); T1 (pakan basal + suplemen daun pepaya dan kunyit 0,03% BB); T2 (pakan basal + Zn-Se propionate (Se 0,5 mg/kgBB dan Zn 60 mg/kgBB)); dan  T3(pakan  basal  +  suplemen  daun  pepaya  dan  kunyit  0,03%  BB  +  Zn-Se  propionate  (Se  0,5 mg/kgBB dan Zn 60 mg/kgBB)). Data dianalisis dengan analisis ragam dan perbedaan efek perlakuan diuji dengan Duncan’s Multiple Range Test.
Hasil: Kelompok  T1,  T2  dan  T3  memiliki  tingkat  peradangan  mammary  lebih  rendah  (P<0,05) dibandingkan T0. Peradangan intra-mammary menurun (P<0,05) seiring lamanya waktu perlakuan. Tingkat  peradangan  yang  paling  rendah  ditunjukkan  oleh  kelompok  T3  (P<0,05).  Nilai  pH  susu setelah  8  jam  penyimpanan  di  suhu  ruangan  pada  kelompok  T1,  T2,  T3  lebih  tinggi  (P<0,05) dibandingkan dengan T0. Pengujian stabilitas susu dengan uji alkohol dan uji didih menunjukkan hasil 100% negatif pada kelompok T3 hari ke 12, sedangkan T1 dan T2 pada hari ke 15.
Kesimpulan: Kombinasi  suplemen  herbal  daun  papaya  dan  kunyit  serta  Zn-Se  propionat  dapat digunakan untuk terapi mastitis subklinis pada sapi perah untuk menghasilkan susu yang lebih sehat dan memperbaiki stabilitas susu.
Kata Kunci: Mastitis; Stabilitas susu; Suplemen herbal; Zn proteinat; Se proteinat

## Abstract
Objective: Subclinical  mastitis  is  an  inflammatory  condition  of  the  mammary  gland  that  is  not accompanied by physical changes of milk, but it causes the chemical alteration of milk. This study aims to determine the mammary inflammation degree and milk stability of subclinical mastitis cows fed diets added with herbal and Zn-Se propionate supplements.
Methods: Sixteen  subclinical  mastitis  cows  were  used  in  a  completely  randomized  design  with  4 treatments  and  4  replications.  Dietary  treatments  were  T0  (basal  diet);  T1  (basal  diet+herbal supplement (papaya leaves and turmeric 0.03%BW); T2 (basal diet+ Zn-Se propionate (Se 0,5 mg/kg
BW  dan  Zn  60  mg/kg  BW));  and  T3  (basal  diet+herbal  supplement  (papaya  leaves  and  turmeric 0.03%BW  +  Zn-Se  propionate  (Se  0,5  mg/kg  BW  dan  Zn  60  mg/kg  BW)).  The  collected  data  were analyzed by ANOVA.
Results: The  CMT  (California  Mastitis  Test)  score  that  indicate  the  mammary  inflammation  was lower (P<0.05) in T1, T2 and T3 groups than T0. The degree of inflammation was decreased (P<0.05) with  duration  of  treatment.      The  lowest  level  of  mammary  inflammation  was  shown  by  the  T3 group (P<0.05). Milk stability evaluation with alcohol and heat stability test in T3 group showed 100% negative result on day 12, whereas T1 and T2 on the day 15  of treatment. Milk pH after 8 hours of storage was higher (P<0.05) in T1, T2 and T3 groups than T0 group.
Conclusions: This result indicates that the combination of herbal and Zn-Se propionate supplement can be used as mastitis therapy for dairy cows to produce healthy milk and improve milk stability.
Keywords: Mastitis; Milk stability; Herbal supplement; Zn proteinate; Se propionate

## PENDAHULUAN
Susu  merupakan  bahan  pangan  yang dibutuhkan  oleh  manusia  pada  semua  umur dan merupakan bahan baku untuk pembuatan berbagai macam produk pangan, kosmetika  dan  obat.    Susu  mengandung nutrien  yang  tinggi  dan  sangat  mudah mengalami  kerusakan  sehingga  disebut sebagai perishable food. Selain karena kontaminasi  bakteri  dari  lingkungan,  cepat tidaknya  susu  menjadi  rusak  diduga  juga dipengaruhi  oleh  jumlah  sel  somatis  yang berasal  dari  peradangan  intra-mammary, yang  dikenal  sebagai  penyakit  mastitis. Prevalensi  penyakit  mastitis  pada  sapi  perah di Indonesia cukup tinggi, yaitu mencapai 65- 80%  [1,2].  Manifestasi  penyakit  mastitis dibedakan menjadi dua macam, yaitu mastitis klinis  dan  mastitis  subklinis.  Kasus  subklinis merupakan  yang  terbesar,  yaitu  mencapai 80%  dan  tidak  disertai  dengan  gejala  klinis yang  nampak  pada  mammary,  serta  tidak terjadi perubahan fisik pada susu [3]. Hal ini menyebabkan  peternak  seringkali  tidak mengetahui  bahwa  ternaknya  menderita penyakit  mastitis  subklinis.  Meskipun  tidak nampak  perubahan  fisik  pada  susu,  namun pada pengujian laboratorium akan ditemukan bakteri patogen dan sel somatik dalam jumlah yang  tinggi.    Sel  somatis  dikenal  sebagai indikator peradangan interna jaringan mammary.  Sel  somatis  tersebut  terdiri  dari 75% sel radang atau leukosit dan 25% berupa runtuhan sel mammary [4].
Selain  menjadi  bagian  penting  dari peradangan,  sel  somatis  merupakan  sumber bagi  endogenous  protein  seperti  enzim.
Beberapa  enzim  disekresikan  kedalam  susu setelah  sel  somatis  lisis,  diantaranya  adalah lipase  (lipoprotein  lipase),  oksidase  (katalase dan  peroksidase),  glikosidase  (lisosim)  dan protease  [5,6].  Salah  satu  enzim  tersebut diketahui  memiliki  peran  dalam  stabilitas susu  dan  daya  simpan,  yaitu  lipoprotein lipase.  Enzim  lipoprotein  lipase  tidak  dapat dihambat dan tetap aktif meskipun susu telah dipasteurisasi [7]. Enzim tersebut merupakan katalisator  dalam  hidrolisa  ikatan  ester  pada triasilgliserol, yang menghasilkan asam lemak bebas. Proses hidrolisis ini tidak dikehendaki dalam  industri  pengolahan  susu,  karena peningkatan  jumlah  asam  lemak  bebas  akan menurunkan  kualitas  organoleptik  susu  [8]. Tingginya  konsentrasi  asam  lemak  terbang pada  susu  segar  berhubungan  erat  dengan menurunnya stabilitas susu, pendeknya daya simpan,  susu  mudah  pecah  dan  penurunan cita  rasa  [7].  Peningkatan  jumlah  sel  somatis dalam susu pada sapi yang terinfeksi mastitis juga sangat berhubungan dengan penurunan kestabilan protein, kadar casein dan peningkatan  whey  protein  yang  diduga merupakan  akibat  dari  tingginya  aktivitas proteolitik maupun lipolitik [9]. Penyimpanan pada  pendingin  pada  suhu  maksimal  4°C diketahui  mampu  memperlambat  aktivitas enzim  [10].  Namun  demikian,  manajemen peternakan di Indonesia yang didominasi oleh peternakan rakyat pada umumnya melakukan  distribusi  susu  ke  tempat pengumpulan  susu  atau  KUD  tanpa  adanya sarana pendinginan yang memadai.
Selain  sel  somatik,  dampak  infeksi mastitis  pada  ternak  adalah  tingginya cemaran  bakteri  pada  susu  yang  dapat
mempersingkat daya simpan susu [4]. Bakteri penyebab  mastitis  seperti Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dapat meningkatkan produksi eurokinase yang merupakan activator  plasminogen  di  sel  epitel.    Plasmin yang  dihasilkan  akan  menghidrolisa  kasein, sehingga stabilitas susu menurun dan mudah terjadi  koagulasi  [9].  Peningkatan  kualitas susu  dan  produk  olahannya  perlu  dilakukan dengan  mengatasi  tingginya  sel  somatis  dan cemaran  bakteri  melalui  upaya  pengobatan sapi  yang  terinfeksi  mastitis  subklinis. Kestabilan  susu  dapat  diketahui  melalui pengujian cepat menggunakan alkohol, uji pH susu  dan  uji  didih  [10,11]. California  Mastitis Test (CMT)  digunakan  untuk  mengetahui
tingkat peradangan ambing
yang mencerminkan  tinggi  rendahnya  jumlah  sel somatis  di  dalam  susu.  Reagen  CMT  akan berinteraksi  dengan  DNA  sel  somatis  dan akan  berubah  menjadi  kental,  sehingga semakin  banyak  jumlah  sel  somatis  dalam susu  maka  semakin  cepat  dan  tinggi kekentalan susu [12].
Seiring berkembangnya kesadaran masyarakat akan keamanan pangan, pengobatan  penyakit  mastitis  semestinya tidak  berdampak  negatif  terhadap  kualitas, cita  rasa  dan  keamanan  susu.  Penyuntikan antibiotika pada sapi perah berdampak pada tersekresinya residu antibiotika kedalam susu. Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  dilaksanakan dengan  memanfaatkan  bahan  herbal  dan mineral yang relatif lebih aman untuk ternak, agar  tidak  menimbulkan  residu  berbahaya bagi  manusia  sebagai  konsumen  susu. Penelitian  ini  menggunakan  bahan  herbal berupa  tepung  daun  pepaya  dan  tepung kunyit, serta mineral Zn dan Se dalam bentuk Zn-Se  proteinat.  Daun  pepaya  mengandung flavonoid  yang  berfungsi  sebagai  anti inflamasi  dan  antioksidan  [13].  Kunyit mengandung kurkumin yang dikenal sebagai agen  anti-inflamasi.  Flavonoid  dan  saponin pada kunyit juga berfungsi sebagai antimikroba dan antioksidan [12]. Mineral Zn dan Se juga memiliki peranan penting dalam sistem  pertahanan  tubuh  di  mana  Zn  dapat menguatkan  lapisan  epitel  ambing,  sehingga tidak mudah rusak karena infeksi bakteri [14]. Mineral  Se  dapat  meningkatkan  aktivitas neutrofil  sebagai  pertahanan  utama  dalam
melakukan  proses  fagositosis  bakteri  [15,16]. Selain  itu,  Se  dalam  bentuk  fisiologisnya sebagai  Gluthation  peroksidase  (GSH-Px) mampu melindungi sel dari kerusakan seluler [17,18], sehingga diharapapkan dapat mengoptimalkan kualitas susu. Penelitian
ini bertujuan untuk mengetahui  pengaruh  pemberian  suplemen pakan herbal dan Zn-Se proteinat, baik secara tunggal maupun kombinasi terhadap tingkat peradangan  mammary  dan  kestabilan  susu yang  dihasilkan  dari  sapi  perah  mastitis subklinis. Hipotesis dari penelitian ini adalah pemberian suplemen pakan herbal dan Zn-Se proteinat  dapat  menurunkan  peradangan mammary  sehingga  memperbaiki  stabilitas susu.

## MATERI DAN METODE
Materi yang digunakan dalam penelitian ini adalah 16 ekor sapi perah Friesian Holstein yang terindikasi menderita mastitis subklinis, tepung daun papaya, tepung kunyit, serta Zn dan Se proteinat. Sapi dinyatakan terindikasi positif mastitis subklinis setelah menunjukkan hasil  positif  pada  uji  CMT  (++  sampai  +++) pada  setiap  putingnya.    Sapi  perah  berada pada paritas I – III, bulan laktasi ke 1 – 3, rata- rata  bobot  badan  sekitar  416,82  ±  33  kg/ekor (CV = 7,92%) dan rata-rata produksi susu per masa  laktasi  2.391,95  ±  544,12  L.  Pakan  yang digunakan terdiri dari rumput gajah (BK 22%, PK  11,5%,  TDN  58,2%)  dan  konsentrat komersial (BK 88,8%, PK 15,3%, TDN 80,6%).
Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap  dengan  4  perlakuan  dan  4  ulangan, sebagai berikut:
• T0  :  pakan  basal  (rumput  gajah  + konsentrat)
• T1 : pakan basal + suplemen herbal (tepung daun papaya dan tepung kunyit 0,03% BB)
• T2 : pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat  (Se  0,5  mg/kg  BB  dan  Zn  60 mg/kg BB).
• T3 : pakan basal + suplemen herbal (tepung daun papaya dan tepung kunyit 0,03% BB) + suplemen Zn-Se mineral proteinat (Se 0,5 mg/kg BB dan Zn 60
mg/kg BB).
Jumlah pemberian Zn dan Se propionate sesuai dengan kebutuhan 2 kali kebutuhan Zn
dan Se untuk sapi laktasi berdasarkan Nutrient Requirements  of  Dairy  Cattle [19].  Pemberian suplemen  pakan  dilakukan  selama  21  hari, dicampurkan  kedalam  konsentrat  pada pemberian pakan pagi dan sore hari.
Tingkat peradangan mammary diketahui melalui  uji  CMT.  Pengujian  dilakukan  pada hari  ke  0,  7  dan  21  perlakuan.  Susu  diperah sebanyak  2  ml  pada  setiap  puting  dan ditampung  didalam paddle. Selanjutnya
ditambahkan
reagen
CMT
dengan perbandingan  1:1,  dihomogenkan  dengan cara diputar secara horizontal selama 10 detik sambil diamati perubahan yang terjadi. Pada penelitian  ini,  skor  CMT  dikonversikan kedalam angka agar dapat dilakukan analisis statistika terhadap perbedaan tingkat peradangan  mammary  dari  setiap  kelompok perlakuan.  Pengujian  CMT  dengan  hasil negatif  diberi  nilai  1,  hasil  positif  (+)  diberi nilai  2,  hasil  positif  (++)  diberi  nilai  3,  hasil (+++) diberi nilai 4 dan hasil (++++) diberi nilai 5.
Pengujian  pH  susu  dilakukan  pada  hari ke-21  menggunakan  pH  meter  (ATC  190012 Digital pH Meter), pada jam ke-0, 2, 4, 6 dan 8 setelah  pemerahan  dan  disimpan  pada  suhu ruangan (suhu 26,4±0,5 °C, RH 69 ± 4%) sesuai dengan manajemen yang umumnya diterapkan  oleh  peternak  rakyat.  Pengujian stabilitas  susu  berupa  uji  alkohol  dan  didih dilakukan pada hari ke 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18 dan
21  pada  jam  ke-4  penyimpanan  pada  suhu ruangan.  Uji  alkohol  70%  dan  uji  didih dinyatakan  positif  jika  terdapat  butiran  di dinding tabung reaksi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh  pemberian  suplemen  pakan herbal dan Zn-Se proteinat pada sapi mastitis subklinis terhadap pH susu ditampilkan pada Tabel  1.  Nilai  pH  susu  mastitis  subklinis sebelum  pemberian  terapi  suplemen  pakan (hari  ke-0)  berada  kisaran  6,78 – 6,80.  Hasil tersebut berada pada batas atas nilai pH susu segar yang dipersyaratkan oleh SNI 3141-2011 [20],  yaitu  pH  6,3 – 6,8.  Sapi  perah  dengan mammary  yang  sehat  (JSS  <  100.000  sel/ml) memiliki rataan nilai pH 6,4 pada awal laktasi dan  6,6  pada  masa  kering  kandang  [20]. Meskipun pengujian mastitis subklinis menggunakan  indikator  nilai  pH  memiliki nilai  sensitivitas  yang  cukup  rendah  [21,22], namun  terdapat  hubungan  yang  erat  antara kenaikan  pH  susu  dengan  tingkat  reaksi positif pada pengujian mastitis menggunakan tes IPB-1 [22], California Mastitis Test [4] dan analisa  laboratoris  terhadap  jumlah  sel somatis  [21].  Pengujian  pH  susu  dan ekstrapolasi physicochemical model dari plasma
Tabel 1. pH susu sapi mastitis
Perlakuan (hari ke-) Waktu pengamatan (jam) 0 2 4 6 8 Hari ke-0 T0 6,80±0,01 a 6,78±0,03 a 6,23±0,06 b 6,22±0,06 b 6,19±0,07 b T1 6,81±0,03 a 6,75±0,03 a 6,20±0,03 b 6,20±0,05 b 6,16±0,07 b T2 6,78±0,03 a 6,73±0,06 a 6,26±0,03 b 6,25±0,02 b 6,20±0,01 c T3 6,78±0,03 a 6,75±0,03 a 6,35±0,05 b 6,33±0,03 b 6,22±0,01 c Hari ke-21 T0 6,75±0,03 a 6,70±0,03 a 6,35±0,02 b 6,30±0,04 b 6,15±0,03 c T1 6,63±0,03 a 6,63±0,03 a 6,54±0,05 b 6,48±0,03 b 6,38±0,01 c T2 6,63±0,03 a 6,60±0,03 a 6,58±0,04 ab 6,45±0,01 c 6,40±0,05 c T3 6,65±0,03 a 6,61±0,04 a 6,59±0,05 ab 6,49±0,03 c 6,41±0,06 c
T0,  pakan  basal  (rumput  gajah  +  konsentrat);  T1,  pakan  basal  +  suplemen  herbal  (tepung  daun  papaya  dan  tepung  kunyit sebanyak 0,03% BB); T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat (dosis Se 0,5 mg/kg BB dan Zn 60 mg/kg BB); T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat.
a,b,c superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05).
darah  [23]  serta  urin  sapi  mastitis  subklinis [24]  terhadap  pH  susu  menyatakan  bahwa peningkatan pH susu pada kuartir mammary berhubungan dengan peningkatan perbedaan konsentrasi  kation  (sodium)  dan  konsentrasi anion (klorida dan kasein). Pada penelitian ini, pH  susu  dari  semua  kelompok  mengalami penurunan (P<0,05) pada jam ke-4 penyimpanan  suhu  ruangan,  baik  pada  hari ke 0 (sebelum perlakuan), maupun pada hari ke 21.    Hasil yang berbeda terjadi pada pada kelompok T2 dan T3 setelah 21 hari perlakuan, dimana  pH  susu  relatif  stabil  selama  4  jam penyimpanan, hal ini dapat diketahui dari pH
susu yang tidak berbeda nyata antara jam ke 0, 2 dan 4. Nilai pH susu kelompok T2 dan T3 tersebut  mulai  turun  secara  signifikan  pada jam  ke-6.  Rataan  nilai  pH  susu  pada pengamatan terakhir yaitu jam ke-8 menunjukkan bahwa pH susu pada kelompok sapi  T1,  T2  dan  T3  lebih  tinggi  (P<0,05)  jika dibandingkan dengan T0 (Gambar 1). pH susu pengamatan  jam  ke-8  pada  kelompok  T1,  T2 dan T3 sebesar 6,38; 6,40 dan 6,41, sedangkan pH  susu  kelompok  T0  sebesar  6,15.  Hasil tersebut  mengindikasikan  bahwa  pemberian suplemen pakan herbal dan Zn-Se proteinate maupun kombinasi keduanya mampu
Gambar 1. Rataan pH susu sapi mastitis subklinis pada jam ke 8 penyimpanan suhu ruang setelah mendapat perlakuan suplemen pakan herbal dan Zn-Se mineral propionate selama 21 hari. T0, pakan basal; T1, pakan basal + suplemen herbal; T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat; T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat
Tabel 2. Skor  California  Mastitis  Test  sapi  mastitis  subklinis  yang  mendapatkan  suplemen  herbal dan  Zn-Se proteinat
Kelompok Lama perlakuan (hari) Rataan 0 7 14 21 T0 2,75 3,00 2,19 2,63 2,64 a T1 2,75 2,06 1,44 0,50 1,69 b T2 2,75 2,13 1,31 0,38 1,64 b T3 3,00 1,56 0,94 0,25 1,44 c Rataan 2,81 a 2,19 ab 1,47 b 0,94 c
T0,  pakan  basal  (rumput  gajah  + konsentrat);  T1,  pakan  basal +  suplemen  herbal  (tepung  daun  papaya  dan  tepung  kunyit sebanyak 0,03% BB); T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat (dosis Se 0,5 mg/kg BB dan Zn 60 mg/kg BB); T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat.
a,b,c superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05).
memperbaiki  stabilitas  dan  keawetan  susu. Perbaikan pH susu pada kelompok T1, T2 dan T3  tersebut  diduga  terkait  dengan  turunnya tingkat peradangan mammary yang diketahui melalui  pengujian  CMT.  Derajat  skor  CMT menunjukkan  tinggi  rendahnya  sel  somatis dan peradangan pada mammary, yaitu ketika skor CMT menurun mengindikasikan turunnya jumlah sel somatis dan peradangan pada mammary [4,12].
Tabel  2  menampilkan  skor  CMT  pada kelompok  T0,  T1,  T2  dan T3  yang  dievaluasi pada hari ke 0, 7, 14 dan 21. Skor CMT pada kelompok  yang  mendapatkan  suplemen pakan herbal dan Zn-Se proteinate (T1, T2, T3) lebih  rendah  (P<0,05)  dibandingkan  dengan kontrol  (T0).  Hasil  tersebut  menunjukkan adanya  efek  terapi  terhadap  persembuhan peradangan  mammary.  Sapi  laktasi  yang
mendapatkan  aditif  pakan  herbal  tepung daun  papaya  dan  kunyit  +  Zn-Se  propionate (T3)  memiliki  skor  CMT  yang  paling  rendah (P<0,05),  serta  persentase  penurunan  tingkat peradangan  mammary  tertinggi  diantara kelompok  perlakuan  lainnya  (Gambar  2). Hasil tersebut menunjukkan bahwa pemberian  kombinasi  pakan  herbal  tepung daun  papaya-kunyit  dan  Zn-Se  propionat sangat efektif untuk menurunkan peradangan kelenjar  mammary  pada  kasus  mastitis subklinis. Peradangan intra-mammary menurun secara signifikan (P<0,05) setelah 14 hari pemberian suplemen herbal tepung daun papaya  dan  kunyit,  serta  suplemen  Zn-Se proteinat. Peradangan  tersebut  terus menurun  seiring  lamanya  waktu  pemberian suplemen (Tabel 2).
Gambar 2. Persen penurunan jumlah sel radang pada susu yang dievaluasi dengan California Mastitis Test. T0, pakan basal; T1, pakan basal + suplemen herbal; T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat; T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat
Tabel  3. Persen  hasil  negatif  pada  uji  alkohol  yang  dilakukan  selama  pemberian  suplemen  herbal  dan  Zn-Se proteinat pada sapi mastitis subklinis
Perlakuan Lama perlakuan (hari) 0 3 6 9 12 15 18 21 T0 25% 25% 50% 50% 50% 50% 50% 50% T1 25% 50% 50% 50% 75% 100% 100% 100% T2 25% 50% 50% 75% 75% 75% 100% 100% T3 25% 50% 50% 75% 100% 100% 100% 100%
T0 , pakan basal (rumput gajah + konsentrat); T1, pakan basal + suplemen herbal (tepung daun papaya dan tepung kunyit sebanyak 0,03% BB);
T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat (dosis Se 0,5 mg/kg BB dan Zn 60 mg/kg BB); T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat.
Zn  dan  Se  merupakan  mikronutrien penting dan harus tersedia dalam pakan sapi perah untuk menjaga kesehatan dan produktivitas  ternak  [14].  Suplementasi  Zn dan  Se  pada  pakan  berperan  dalam meningkatkan
kapasitas
antioksidan
superoxide dismutase (CuZnSOD),
glutathione  peroxidase  (GSH-Px)  dan  serum ceruloplasmin yang berperan dalam persembuhan peradangan mammary sehingga  jumlah  sel  somatis  menurun  [15]. Mineral Zn dan Se yang cukup tersedia dalam peredaran darah selama masa laktasi memiliki hubungan positif yang kuat dengan ketebalan dan  integritas  stratum  corneum  dari ductus papillary kelenjar mammary dan berhubungan negatif dengan jumlah sel  radang [26]. Peran GSH-Px  dalam  imunitas  mammary  sangat penting  yaitu  melindungi  sel  dari  kerusakan seluler  sehingga  sehingga  persembuhan peradangan  pada  jaringan  mammary  lebih cepat  [15,17,18].  Penggunaan  daun  papaya sebagai  pakan  ternak  ruminansia  sudah pernah  diteliti  sebelumnya.  Pada  kajian in vitro rumen,  daun  papaya  dapat  digunakan dalam manipulasi rumen untuk menurunkan jumlah methanogen dan produksi gas metan. Kunyit  juga  telah  diketahui  manfaatnya sebagai suplemen pakan. Penelitian pada sapi mastitis  subklinis  yang  diberikan  suplemen kombinasi  kunyit  dengan  herbal  lainnya berupa daun katuk, sirih dan lengkuas merah mampu  menurunkan  tingkat  peradangan mammary  dan  meningkatkan  produksi  susu [4].  Suplemen  herbal  yang  mengandung kunyit dapat meningkatkan jumlah konsumsi pakan  dan  produksi  susu  sehingga  efisisensi penggunaan pakannya meningkat [26]. Selain
manfaat  pada  produktivitas  ternak,  bahan aktif  pada  daun  papaya  dan  kunyit  juga berperan  sebagai  antibakteri,  antioksidan, antiradang  dan  memperkuat  imunitas  tubuh [27]. Selain kurkumin, kunyit juga mengandung  minyak  atsiri,  flavonoid  dan saponin yang bersifat sebagai antibakteri dan antioksidan.
Flavonoid dan saponin adalah metabolit sekunder  dari  tanaman.  Flavonoid  termasuk dalam  golongan  polyphenol  yang  umumnya berkonjugasi  dengan  glikosida.  Saponin  juga termasuk  dalam  golongan  glikosida  dengan foaming  characteristic .  Flavonoid  dan  saponin mempunyai sifat antimikroba dan antioksidan sehingga  banyak  digunakan  sebagai  bahan aditif  pakan  untuk  ternak.  Flavonoid  dan saponin juga memiliki daya antioksidan yang kuat.  Su  et  al.  [28]  menemukan  bahwa suplementasi  flavonoid  pada  sapi  perah mampu  meningkatkan  kapasitas  antioksidan sel  epitel  mammary  dengan  meningkatkan aktivitas  catalase  (CAT)  dan  glutathione peroxidase  (GSH-Px),  serta  menurunkan konsentrasi  malondialdehyde  (MAD).  Hasil serupa ditemukan pada penelitian suplementasi saponin pakan sapi perah yang juga  menunjukkan  penurunan  konsentrasi plasma  MAD  dan  peningkatan  superoxide dismutase  (SOD),  sedangkan  untuk  GSH-Px tidak  ada  pengaruh  yang  signifikan.  MAD, SOD, CAT dan GSH-Px merupakan oksidatif parameter  untuk  mengukur  tingkat  stress oksidatif  yang  dapat  diakibatkan  karena infeksi dan peradangan.
Hasil  penelitian  serupa  juga  dilaporkan oleh  Zhan  et  al.  [29],  bahwa  konsentrasi plasma  MAD  menurun  dan  aktivitas  SOD
Tabel  4. Persen  hasil  negatif  pada  uji  didih  yang  dilakukan  selama  pemberian  suplemen  herbal  dan  Zn-Se proteinat pada sapi mastitis subklinis
Perlakuan Lama perlakuan (hari) 0 3 6 9 12 15 18 21 T0 0% 25% 50% 50% 50% 75% 75% 75% T1 25% 50% 50% 75% 75% 100% 100% 100% T2 25% 50% 50% 75% 75% 100% 100% 100% T3 25% 50% 50% 75% 100% 100% 100% 100%
T0,  pakan  basal  (rumput  gajah  +  konsentrat);  T1,  pakan  basal  +  suplemen  herbal  (tepung  daun  papaya  dan  tepung  kunyit sebanyak 0,03% BB); T2, pakan basal + suplemen Zn-Se mineral proteinat (dosis Se 0,5 mg/kg BB dan Zn 60 mg/kg BB); T3, pakan basal + suplemen herbal + Zn-Se proteinat.
cenderung  meningkat  akibat  suplementasi flavonoid  pada  pakan  sapi  perah.  Penelitian tersebut  menunjukkan  bahwa  flavonoid  dan saponin  mampu  meningkatkan  aktivitas enzim  antioksidan  yang  melindungi  sel mammary  dari  kerusakan.  Selain  aktivitas antioksidan, Zhan et al. [29] juga melaporkan bahwa suplementasi flavonoid meningkatkan jumlah  neutrophil  dan  mengurangi  proporsi limfosit  dalam  darah  sapi  penderita  mastitis. Hal tersebut mengindikasikan bahwa flavonoid mampu meningkatkan kemampuan ternak untuk menghadapi infeksi bakteri dan bertindak sebagai antiradang.
Hasil penelitian ini membuktikan bahwa penurunan jumlah sel radang yang disekresikan kedalam susu dapat memperbaiki stabilitas dan daya simpan susu. Pengamatan stabilitas susu dilakukan dengan uji  alkohol  (Tabel  3)  dan  uji  didih  (Tabel  4). Berdasarkan hasil pengamatan yang sebelumnya  ditampilkan  pada  Tabel  1,  pH susu  mulai  mengalami  penurunan  pada  jam ke-4  penyimpanan  di  suhu  ruangan.  Oleh karena  itu,  uji  alkohol  dan  uji  didih  susu dilakukan  pada  jam  ke  4  penyimpanan. Pengujian  tersebut  dilakukan  pada  sample susu yang diambil pada hari ke 0 hingga hari ke-21  perlakuan.    Susu  dari  sapi  mastitis subklinis  pada  kelompok  kontrol  (T0) mempunyai  stabilitas  yang  paling  rendah, yaitu  hanya  50%  sampel  menunjukkan  hasil negatif  (tidak  terkoagulasi)  pada  uji  alkohol selama  21  hari  pengamatan.  Hasil  terbaik ditunjukkan pada sapi kelompok T3, dimana uji  alkohol  menunjukkan  hasil  negatif terhadap semua sampel (100%) pada hari ke- 12.  Sedangkan  pada  kelompok  T1  hasil  uji alkohol  100%  negatif  terjadi  pada  hari  ke-15, dan kelompok T2 hari ke-18.
Hasil  serupa  diperoleh  pada  uji  didih yang  ditampilkan  pada  tabel  4,  dimana sampel  susu  dari  sapi  kelompok  T3 menunjukkan  hasil  uji  didih  100%  negatif pada  hari  ke-12,  sedangkan  T1  dan  T2  pada hari  ke-15.  Perbaikan  kualitas  dan  keawetan susu  pada  kelompok  T3  tersebut  diduga berkaitan  dengan  tingkat  peradangan  dan jumlah sel somatis yang menurun. Sel somatis merupakan  sel  radang  (leukosit)  yang tersekresikan kedalam susu
akibat
peradangan intra-mammary, sehingga
digunakan  sebagai  indikator  utama  pada penyakit mastitis [3,30].
Jumlah  sel  somatis  juga  mempunyai keterkaitan  dengan  aktivitas  enzim  di  dalam susu yang dapat mempengaruhi stabilitas dan daya simpan susu. Endogenous enzim seperti lipase  (lipoprotein  lipase),  oksidase  (katalase dan  peroksidase),  glikosidase  (lisosim)  dan protease  (cathepsin,  elastase  dan  kolagenase) akan  disekresikan  kedalam  susu  ketika  sel somatis  mengalami  lisis  [5,6].  Sehingga semakin tinggi jumlah sel somatis dalam susu, maka  diduga  aktivitas  enzim  tersebut  di dalam  susu  juga  meningkat.  Lipoprotein lipase  merupakan  merupakan  katalisator dalam hidrolisa ikatan ester pada triasilgliserol yang menghasilkan asam lemak bebas  [8],  sekaligus  berhubungan  dengan penurunan  kestabilan  protein  [9].  Tingginya konsentrasi  asam  lemak  terbang  pada  susu menyebabkan  pendeknya  daya  simpan,  susu mudah  pecah  dan  penurunan  cita  rasa  susu [7]. Peningkatan persentase hasil negatif pada uji  alkohol  dan  uji  didih  pada  penelitian  ini membuktikan  keterkaitan  peran  sel  somatis pada kestabilan susu. Berdasar hasil penelitian ini dapat diduga bahwa menurunnya  jumlah  sel  somatis  berdampak pada  penurunan  jumlah  enzim  dan  aktifitas lipolitik  serta  proteolitiknya.  Kestabilan komponen  susu  untuk  penyimpanan  dalam jangka  waktu  tertentu  diketahui  dapat diupayakan  dengan  menyimpan  susu  pada suhu dibawah 4°C, karena pada suhu tersebut kerja enzim terhambat [9]. Namun demikian, peternak  rakyat  pada  umumnya  belum memiliki  sarana  pendinginan  susu  yang memadai  sehingga  menyimpan  susu  pada suhu ruangan sebelum masuk kedalam cooling unit di  Koperasi  Unit  Desa  (KUD).  Jarak waktu
antara
pemerahan hingga penyimpanan  kedalam cooling  unit di  KUD akan menjadi permasalahan jika kualitas dan stabilitas  susu  kurang  baik.  Melalui  upaya pengobatan mastitis subklinis ini, diharapkan kualitas dan stabilitas susu menjadi lebih baik sehingga dapat memperpanjang daya simpan susu.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kombinasi  suplemen  herbal  tepung  daun
papaya  dan  kunyit  serta  Zn-Se  propionat dapat  digunakan  untuk  terapi  mastitis subklinis pada sapi perah untuk menghasilkan  susu  yang  lebih  sehat  dan memperbaiki stabilitas susu.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis  menyatakan  tidak  ada  konflik kepentingan  dengan  pihak  manapun  terkait materi yang ditulis dalam naskah ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Wicaksono,  A.  and  M.  Sudarwanto.  2016. Prevalensi  mastitis  subklinis  dan  evaluasi mikrobiologis  susu  peternakan  rakyat  di Boyolali.  Acta  Vet.  Indones.  4:51-56. doi:10.29244/avi.4.2.51-56.
2. Harjanti,  D.  W.,  R.  Ciptaningtyas,  F. Wahyono,  and  E.  T.  Setiatin.  2017. Antibacterial  and  antifungal  activities  of Muntinga  calabura  leaves  extract  as alternative  to  antibiotic  in  mastitis treatment.  Proc.  Int.  Conf.  Sustainable Anim.  Agric.  for  Developing  Countries. 6:1454-1456.
3. Harjanti,  D.  W.,  R.  Ciptaningtyas,  and  F. Wahyono. 2019. Phytochemical properties and  antibacterial  activity  of  Ageratum conyzoides, Piper betle, Muntinga calabura and  Curcuma  domestica  against  mastitis bacteria  isolates.  IOP  Conf.  Ser.  Earth Environ. Sci. 247:012049. doi:10.1088/1755- 1315/247/1/012049.
4. Harjanti, D. W., F. Wahyono, D. N. Afifah. 2019. Milk production and milk quality of sub-clinical  mastitis  cows  feed  with different supplementation of herbal in the diet.  IOP  Conf.  Ser.  Earth  Environ.  Sci. 250:012062. doi:10.1088/1755-
1315/250/1/012062.
5. Li,  N.,  R.  Richoux,  M.  Boutinaud,  M. Boutinaud,  P.  Martin,  and  V.  Gagnaire. 2014.  Role  of  somatic  cells  on  dairy processes  and  products:  A  review.  Dairy
Sci. Technol. 94:517-538.
doi:10.1007/s13594-014-0176-3.
6. Savić,  N.  R.,  D.  P.  Mikulec,  and  R.  S. Radovanović.  2017. Somatic  cell  count s  in bulk  milk  and  their  importance  for  milk processing. IOP Conf. Ser.: Earth Environ.
Sci. 85:012085.
doi:10.1088/1755-
1315/85/1/012085.
7. Somella E., M. G, Basilicata, G. C. Tenore, M.  Manfra,  R.  Mastrocinque,  C.  Ostacolo, A. Vitale, M. Chieppa, P. Campiglia, and G. Pepe. 2018. Modification of lipid profile in commercial  cow  milk  sample  before  and after  their  expiration  date:  Evaluation  of storage  crucial  parameters  and  possible environmentally
friendly disposal
alternatives.  J.  Food  Qual.  2018:1-8.
doi:10.1155/2018/8751317.
8. Dickow,  J.  A.,  L.  B.  Larsen,  Hammershøj, and  L.  Wiking.  2011.  Cooling  causes changes  in  the  distribution  of  lipoprotein lipase  and  milk  fat  globule  membrane proteins between the skim milk and cream phase. J.
Dairy Sci. 94:646-656. doi:10.3168/jds.2010-3549.
9. Murphy,  S.  C.,  N.  H.  Martin,  D.  M. Barbano,  and  M.  Wiedmann.  2016. Influence of raw milk quality on processed dairy  products:  How  do  raw  milk  quality test  results  relate  to  product  quality  and yield?.  J.  Dairy  Sci.  99:10128-10149. doi:10.3168/jds.2016-11172.
10. De Silva, S. A. S. D., K. N. P. Kanugala, and N.  S.  Weerakkod.  2016.  Microbiological quality of raw milk and effect on quality by implementing good management practices.  Procedia.  Food  Sci.  6:92-96. doi:10.1016/j.profoo.2016.02.019.
11. Horne,  D.  S.  2016.  Ethanol  Stability  and Milk  Composition.  In:  McSweeney  P., O'Mahony  J.  (eds)  Advanced  Dairy Chemistry. Protein: Applied Aspects. New
York: Springer; 2016. p. 225-246. doi:10.1007/978-1-4939-2800-2_9.
12. Priono, D., E. Kusumanti, and Harjanti D. W.  2016.  Jumlah  bakteri Staphylococcus aureus dan  skor  California  Mastitis  Test (CMT)  pada  susu  kambing  Peranakan Etawa  akibat  dipping  ekstrak  daun Babadotan  (Ageratum  conyzoides  L.) Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan. 26:52-57.
13. Zunjar, V., D. Mammen, B. M. Trivedi, and M. Daniel. 2011. Pharmacognostic, physicochemical and phytochemical studies  on  Carica  papaya  Linn.  Leaves. Phcog. J. 20:5-8. doi:10.5530/pj.2011.20.2.
14. Cope, C. M., A. M. Mackenzie, D. Wilde, L. A. Sinclair. 2009. Effects of level and form
of  dietary  zinc  on  dairy  cow  performance and  health.  J.  Dairy  Sci.  92:2128-2135. doi:10.3168/jds.2008-1232.
15. Grace,  N.  D.,  K.  A.  Perkins,  A.  M. Alexander,  and  R.  M.  Marchant.  2001. Relationship  between  blood  selenium concentration  or  glutathione  peroxidase activity, and milk selenium concentrations in  New  Zealand  dairy  cows.  N.  Z.  Vet.  J. 49:24-28. doi:10.1080/00480169.2001.36198.
16. Cortinhas,  C.  S.,  B.  G.  Botaro,  M.  C.  A. Sucupira,  F.  P.  Renno,  and  M.  V.  Santos. 2010.  Antioxidant  enzymes  and  somatic cell  count  in  dairy  cows  fed  with  organic source  of  zinc,  copper  and  selenium.
Livest. Sci. 127:84-87. doi:10.1016/j.livsci.2009.09.001. 17. Sharma,  N.  2007.  Alternative  approach  to control  intramammary  infection  in  dairy cows: A Review. Asian J. Anim. Vet. Adv. 2:50-62. doi:10.3923/ajava.2007.50.62.
18. Mahapatra, A., S. Panigrahi, R. C. Patra, M. Rout,  and  S.  Ganguly.  2018.  A  study  on bovine  mastitis  related  oxidative  stress along  with  therapeutic  regimen.  Int.  J. Curr.  Microbiol.  Appl.  Sci.  27:247-256. doi:10.20546/ijcmas.2018.701.027.
19. NRC. 2000. Nutrient requirements of dairy cattle.  7th  rev.  ed.  Natl.  Acad.  Press, Washington DC. p. 141-154.
20. SNI.  2011.  SNI  No  3141.1:2011  susi  segar- bagian  1:  Sapi.  Badan  Standardisasi Nasional, Jakarta.
21. Kandeel,  S.,  P.  D.  Constable,  and  A. Megahed.  2019.  Ability  of  milk  pH  to predict subclinical mastitis and intramammary  infection  in  quarters  from lactating dairy cattle. J. Dairy Sc. 102:1417- 1427. doi:10.3168/jds.2018-14993.
22. Sudarwanto,  M.  and  E.  Sudarnika.  2008. Hubungan antara pH susu dengan jumlah sel  somatik  sebagai  parameter  mastitis subklinis. Media Peternakan. 31:107-113.
23. Constable, P. D. 1997. A simplified strong ion  model  for  acid-base  equilibria: Application  to  horse  plasma.  J.  Appl. Physiol.
83:297-311.
doi:10.1152/jappl.1997.83.1.297.
24. Constable, P. D., C. C. Gelfert, M. F u ̈ rll, R. Staufenbiel,  and  H.  R.  Stämpfli.  2009. Application of strong ion difference theory to urine and the relationship between urine
pH and net acid excretion in cattle. Am. J. Vet. Res. 70:915-925. doi:10.2460/ajvr.70.7.915. 25. Yang,  F.  L.  and  X.  S.  Li.  2015.  Role  of antioxidant vitamins and trace elements in mastitis dairy cows. J. Adv. Vet. Anim. Res. 2:1-9. doi:10.5455/javar.2015.b48.
26. Cigari, F. H., M. Khorvash, G. R. Ghorbani, M. Kadivar, A. Riasi, and  Q. Zebeli.  2014. Effects  of  supplementation with  a phytobiotics-rich herbal mixture on performance, udder health, and metabolic status of Holstein cows with various levels of  milk  somatic  counts.  J.  Dairy  Sci. 97:7487-7497. doi:10.3168/jds.2014-7989.
27. Boroumand, N., S. Samarghandian, and S. I.  Hashemy.  Immunomdulatory,  anti- inflammatory  and  antioxidant  effects  of curcumin.  J.  Herbmed.  Pharmacol.  7:211- 219.
28. Su, X. S., J. S. Zhan, K. Zhan, M. M. Liu, and G.  Q.  Zhao.  2015.  Proliferation  stimulus and antioxidant effect of alfalfa flavonoids on  dairy  cow  mammary  epithelial  cells cultured in vitro. Acta Pharm. Sin. 24:139- 45.
29. Zhan,  J.,  L.  Mingmei,  X.  Su,  K.  Zhan,  C, Zhang, and G. Zhao. 2017. Effects of alfafa flavonoids on the production performance, immune system, and ruminal fermentation of  dairy  cows.  Asian-Australas.  J.  Anim. Sci. 30:1416-1424. doi:10.5713/ajas.16.0579.
30. Dalen,  G.,  A.  Rachah,  H.  Nørstebø,  Y.  H. Schukken, and O. Reksen. 2019. Dynamics of somatic cell count patterns as a proxy for transmission of mastitis pathogen. J. Dairy Sci.  102:11349-11358.  doi:10.3168/jds.2019- 16847.