EFEKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN EUKALIPTUS ( Eucalyptus globulus ) DALAM SEDIAAN KRIM SEBAGAI ANTIBAKTERI
Staphylococcus aureus ATCC 29213
Intan Martha Cahyani 1) , Miftakhul Khoeriyah 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “Yayasan Pharmasi Semarang”

## INTISARI
Staphylococcus  aureus merupakan  salah  satu  bakteri  penyebab  jerawat. 1,8-cineole merupakan  kandungan  pada  minyak  atsiri  daun  eukaliptus  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri Staphylococcus aureus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi efektif minyak atsiri daun  eukaliptus  sebagai  antibakteri Staphylococcus  aureus ATCC  29213.  Minyak  atsiri  daun eukaliptus  dibuat  seri  konsentrasi  5%,  7,5%  dan  10%  untuk  pengujian  aktivitas  antibakteri menggunakan  metode  difusi  sumuran.  Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  diperoleh  rata- rata diameter zona hambat minyak atsiri daun eukaliptus secara berturut-turut 1,286 cm; 1,424 cm; dan  1,574  cm.  Hasil  pengujian  statistika  menunjukkan  ada  perbedaan  signifikan  aktivitas antibakteri  minyak  atsiri  daun  eukaliptus  pada  konsentrasi  5%,  7,5%  dan  10%  terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus ATCC  29213.  Minyak  atsiri  daun  eukaliptus  memiliki konsentrasi  efektif  sebesar  10%  sebagai  antibakteri Stpahylococcus  aureus dan  dibuat  sediaan krim,  selanjutnya  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  menghasilkan  diameter  zona  hambat  sebesar 1,136 cm. Hasil uji t-test menunjukkan bahwa formula krim berpengaruh signifikan pada aktivitas antibakteri.
Kata kunci: Minyak atsiri daun eukaliptus, efektivitas antibakteri, krim.

## ABSTRACT
Staphylococcus  aureus  is  one  of  the  acne-causing  bacteria.  1,8  cineole  is  the  content  of eucalyptus leaves oil which has antibacterial activity Staphylococcus aureus. This research  aimed to examine the effective consentration of eucalyptus leaves oil as an Staphylococcus aureus ATCC 29213 antibacterial. Eucalyptus leaves oil made in series a concentration of 5%, 7,5% and 10% for antibacterial  activity  test  using  the  pitting  diffusion  method.  Based  on  the  test  result  of antibacterial  activity  gained  an  average  diameter  of  inhibition  zone  eucalyptus  leaves  oil successively  1,286  cm;  1,424  cm;  1,574  cm.  The  statistically  test  results  showed  significant difference  in  the  antibacterial  activity  of  eucalyptus  leaves  oil  in  concentrations  5%,  7,5%  and 10% to the growth of Staphylococcus aureus ATCC 29213. Eucalyptus leaves oil has  an effective concentration of 10% as an antibacterial stapgylocuccus aureus and made cream formula. Test of antibacterial  activity  obtained  resistibility  zone  diameter  1,136  cm.  The  result  of  t-test  indicated that cream formula has significant effect on antibacterial activity. Keywords: Eucalyptus leaves oil, antibacterial effectivity, cream.
PENDAHULUAN Infeksi merupakan salah satu penyakit  yang  masih  sering  ditemui  di Indonesia.  Sebagian  besar  penyakit  karena infeksi  yang  merugikan  bagi  manusia disebabkan  oleh  bakteri. Staphylococcus aureus merupakan  bakteri  yang  bersifat patogen menyebabkan penyakit infeksi salah satunya  adalah  jerawat  (Gould  &  Brooker, 2003).  Jerawat  atau acne  vulgaris adalah kelainan  berupa  peradangan  pada  lapisan polisebasea  yang  disertai  penyumbatan  dan
penimbunan  bahan  keratin  yang  dipicu  oleh bakteri Staphylococcus  aureus (Kumesan dkk., 2013).
Eukaliptus merupakan tanaman penghasil  minyak  atsiri  (Damanik,  2009). Minyak  atsiri  daun  eukaliptus  mampu menghambat  pertumbuhan  dan  membunuh bakteri Staphylococcus  aureus .  Kandungan senyawa  aktif  pada  minyak  atsiri  daun eukaliptus yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  adalah 1,8-cineole, linalool, dan pinocarveol (Vratnica  dkk.,
2011).  Minyak  atsiri  daun  eukaliptus diformulasikan dalam bentuk sediaan krim.
Berdasarkan  hal  tersebut,  maka perlu dilakukan penelitianuntuk menentukan konsentrasi  efektif  minyak  atsiri  daun eukaliptus dalam menghambat bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  29213  dan dilakukan  pengujian  aktivitas  antibakteri pada sediaan krim.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat  penelitian  yang  digunakan adalah  cawan  petri  ( pyrex ),  tabung  reaksi ( pyrex ),  pinset,  ose  bulat,  lampu  spiritus, mikropipet, yellow  tip,  blue  tip ,  inkubator ( Binder ),  LAF  ( Laminar  Air  Flow ),  otoklaf ( All  American  type B0011062),  jangka sorong, cylinder cup.
Bahan Bahan  yang  digunakan  adalah minyak atsiri daun eukaliptus (diperoleh dari CV.Lansida), bakteri Staphylococcus aureus ATCC  29213, Nutrien  Broth (Merck), Nutrien  Agar (Oxoid), Mannitol  Salt  Agar , kontrol  positif  (klindamisin  HCl),  kontrol negatif (DMSO).
Minyak  atsiri  daun  eukaliptus diperoleh  dari  CV.  Lansida  Yogyakarta.
Minyak  atsiri  daun  eukaliptus  dianalisis menggunakan metode GCMS di Laboratorium  Teknik  Kimia  Universitas Negeri Semarang. Jalannya Penelitian Sterilisasi Alat dan Media Sterilisasi alat dan media menggunakan otoklaf pada suhu 121 o Cselama 15 menit dengan tekanan 1 atm perhitungan waktu dilakukan setelah mencapai suhu 121 o C. Pembuatan  Agar  Miring  NA  ( Nutrient
Agar ) Pembuatan agar miring NA ( Nutrient Agar ) dilakukan dengan menimbang sebanyak 2,8 gram, dimasukkan dalam beaker  glass ,  kemudian  ditambahkan aquadest  hingga  mencapai  volume  100  ml. Larutan  dipanaskan  diatas  penangas  air sampai  larut  dan  disterilkan  dengan otoklaf pada  suhu  121 o C  selama  15  menit.  Media NA  yang  telah  disterilkan  didinginkan sampai  suhu  50 o Ckemudian  dituang  pada tabung reaksi yang telah steril sebanyak 5 ml kemudian  diletakkan  miring  dan  dibiarkan
pada  suhu  kamar  hingga  memadat  (Atlas, 2004).
Pembuatan  Media  Agar  NB  ( Nutient Broth ) Pembuatan media agar NB ( Nutient Broth ) dilakukan dengan menimbang sebanyak 3,25 gram dalam 250 ml aquadest, media  diaduk–aduk  sampai  larut,  kemudian disterilkan  dengan  otoklaf  suhu  121°C selama 15 menit (Atlas, 2004).
Pembuatan  Media  MSA  ( Manitol  Salt Agar)
Pembuatan  media  MSA  ( Manitol Salt  Agar) dilakukan  dengan  menimbang 111,1  g  MSA  dilarutkan  dalam  1  liter  air, dipanaskan  sambil  diaduk  hingga  larut. Setelah  itu  disterilkan  dengan  otoklaf  pada suhu  121 o Ctekanan  1  atm  selama  15  menit
(Atlas, 2004). Pembuatan Suspensi Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213 Pembuatan suspensi bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213, biakan murni bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213 diambil  menggunakan  ose  yang telah disterilkan  kemudian  ditanam  dalam  media miring  NA  ( Nutrient  Agar )  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o Cselama  24  jam. Bakteri yang telah diinkubasi didalam media NA  ( Nutrient  Agar )  diambil  menggunakan ose yang telah disterilkan kemudian ditanam pada  media  NB  ( Nutrient  Broth )  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o Cselama  24  jam, kemudian dibaca
absorbansinya menggunakan  spektrometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 625 nm.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dengan metode  difusi  sumuran,  sebanyak  10  ml media  MSA  ( Mannitol  Salt  Agar )  dituang kedalam  cawan  petri  steril  dan  dibiarkan memadat  sebagai  lapisan  dasar,  kemudian diletakkan 5 cylinder cup dengan jarak yang tidak terlalu
berdekatan.
Suspensi Staphylococcus  aureus sebanyak  3  μl dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  yang berisi 20 ml media MSA, kemudian suspensi kultur  bakteri  dan  media  dihomogenkan. Media  MSA  yang  berisi  kultur  bakteri dituang secara aseptis pada cawan petri yang telah  diisi  lapisan  pertama  dan cylinder  cup untuk  membentuk  sumuran.  Setelah  media atas  memadat, cylinder  cup diambil  dan masing-masing sumuran diisi dengan minyak  atsiri  daun  eukaliptus  konsentrasi
5%,  konsentrasi  7,5%,  konsentrasi  10%, kontrol positif (klindamisin HCl 0,01%) dan kontrol negatif (DMSO). Medium diinkubasi pada  suhu  37ºCselama  24  jam.  Diameter zona  hambat  diukur  menggunakan  jangka sorong.  Dilakukan  preparasi  dengan  cara yang  sama  pada  krim  minyak  atsiri  daun eukaliptus dengan konsentrasi 10%.
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN Komponen minyak  atsiri  daun  eukaliptus  berdasarkan hasil  uji  GCMS  didapatkan  senyawa myrcene (40,14%) , β-pinene (2,10%) , α-
pinene (3,76%) ,  1,8  cienole  ( 45,44%) ,  α- terpineol (2,51), dan terpinen-4- ol (6,04%).Senyawa 1,8cienole mempunyai konsentrasi  yang  tertinggi  yaitu  45,44%. Senyawa dalam minyak atsiri daun eukaliptus yang berperan sebagai antibakteri adalah 1,8  cienole (Vratnica  dkk.,  2011). Minyak atsiri  merupakan golongan senyawa terpenoid  yang  dapat  merusak  membran  sel bakteri dengan protein transmembran sehingga  menghambat  pertumbuhan  sel bakteri. Pengujian aktivitas antibakteri minyak  atsiri  daun  eukaliptus  dilakukan untukmemastikan bahwa kandungan senyawa  yang  terdapat  dalam  minyak  atsiri daun eukaliptus memiliki kemampuan menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus
ATCC  29213  dan  menentukan  konsentrasi efektif  minyak  atsiri  daun  eukaliptus  dalam
menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 29213. Pengujian aktivitas
antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi sumuran.  Prinsip  dari  metode  ini  adalah mendifusikan  senyawa  antibakteri  kedalam media  melalui  lubang  sumuran.Media  yang digunakan  adalah  MSA  ( Mannitol  Salt Agar) karena  bersifat  selektif  terhadap bakteri
Staphylococcus  aureus .  Bakteri
Staphylococcus  aureus pada  media  MSA mampu
memfermentasi manitol
menghasilkan  asam  organik  dan  asam tersebut dapat mengubah pHindikator phenol red dari  merah  menjadi  kuning.  Pembuatan konsentrasi  minyak  atsiri  daun  eukaliptus dilarutkan dengan DMSO ( Dimethyl Sulphoxide ),  sehingga  kontrol  negatif  yang digunakan  adalah  DMSO.  Kontrol  positif yang  digunakan  adalah  klindamisin  HCl 0,01%  yang  memiliki  efek  menghambat pertumbuhan bakteri di permukaan kulit dan mengurangi  konsentrasi  asam  lemak  pada sebum (Miratunnisa dkk., 2015).
Pengujian
aktivitas antibakteri dilakukan  empat  kali  replikasi.  Hasil inokulasi  diinkubasi  pada  suhu  37 o Cselama 24 jam karena pada suhu dan waktu tersebut merupakan  kondisi  yang  optimum  untuk pertumbuhan  bakteri.  Konsentrasi  minyak atsiri daun eukaliptus yang digunakan adalah 5%,  7,5%,  dan  10%.Data  hasil  uji  aktivitas antibakteri  minyak  atsiri  daun  ekaliptus disajikan pada Tabel 1. Tabel 1. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Ekaliptus Replikasi Minyak Atsiri 5% (cm) Minyak Atsiri 7,5% (cm) Minyak Atsiri 10% (cm) Kontrol + Klindamisin 0,01% (cm) I 1,276 1,485 1,628 1,602 II 1,308 1,435 1,586 1,623 III 1,369 1,402 1,554 1,594 IV 1,197 1,374 1,527 1,574 Rerata ± SD 1,286 ± 0,072 1,424 ±0,048 1,574 ±0,044 1,598 ±0,020 Data diameter zona hambat hasil uji aktivitas antibakteri  minyak  atsiri  daun  eukaliptus dengan pembanding kontrol positif
(klindamisin HCl0,01%)  diolah secara statistika dengan menggunakan SPSS ( Statistical  Product  and  Service  Solution )
kemudian  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas. Hasil uji normalitas
dinyatakan  bahwa  data  yang  diperoleh
berdistribusi  normal  dengan  nilai  signifikasi p>0,05. Berdasarkan uji homogenitas dinyatakan  bahwa  data  menunjukan  hasil yang homogen dengan nilai signifikasi 0,314 (p>0,05).
Berdasarkan  hasil  uji Post  Hoc , pada  konsentrasi  5%  yang  dibandingkan dengan  konsentrasi  7,5%;  10%,  dan  kontrol positif  klindamisin  HCl  0,01%    dan
konsentrasi 7,5% yang dibandingkan dengan konsentrasi 10% dan kontrol positif klindamisin  HCl  0,01%  didapatkan  nilai signifikasi  <0,05  sehingga  mempunyai  efek yang berbeda signifikan dalam  menghambat bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213.  Namun,  pada  konsentrasi  10%  yang dibandingkan dengan
kontrol positif
klindamisin  HCl  0,01%  didapatkan  nilai signifikasi >0,05 menunjukkan hasil berbeda tidak  signifikan  artinya  pada  kelompok konsentrasi  10%  dengan  kontrol  positif memiliki efek yang sama dalam menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus
ATCC 29213.
Tabel 2. Hasil Uji Post Hoc Perbedaan Konsentrasi Minyak Atsiri Daun Eukaliptus Kelompok Signifikasi Keterangan Konsentrasi 5% vs konsentrasi 7,5% 0,002 Berbeda signifikan Konsentrasi 5% vs konsentrasi 10% 0,000 Berbeda signifikan Konsentrasi 5% vs kontrol positif 0,000 Berbeda signifikan Konsentrasi 7,5% vs konsentrasi 10% 0,001 Berbeda signifikan Konsentrasi 7,5% vs kontrol positif 0,000 Berbeda signifikan Konsentrasi 10% vs kontrol positif 0,495 Berbeda tidak signifikan Berdasarkan hasil pengujian menunjukkan bahwa konsentrasi 10%
memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  sama dengan  kontrol  positif  klindamisin  HCl 0,01%  sehingga  konsentrasi  10%  dapat digunakan  untuk  formulasi  sediaan,  salah satunya sediaan krim. Formula sediaan krim dipilih karena sediaan krim mampu memberikan  sistem  penghantaran  zat  aktif berupa  minyak  atisri  untuk  mencapai  target yang  diinginkan  yaitu  membran  sel  bakteri sehingga  dapat  meningkatkan  efektivitasnya sebagai  antibakteri.  Perbandingan  formula optimum  sediaan  krim  didapatkan  dari penelitian  Khoeriyah  dkk.,  (2017)  dengan basis  setil  alkohol  dan  tween  80,  kemudian
dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri,  diperoleh hasil  diameter  zona  hambat  bakteri  sebesar 1,136  cm  dan  basis  formula  krim  tidak mampu menghambat bakteri Staphylococcus aureus ATCC  29213.  Hasil  pengujian aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri  daun eukaliptus  selanjutnya  dibandingkan  dengan hasil  pengujian  formula  optimum  krim minyak  atsiri  daun  eukaliptus  menggunakan uji one sample t-test dengan taraf kepercayaan  95%.  Hasil  uji  aktivitas antibakteri  minyak  atsiri  daun  eukaliptus konsentrasi  10%  dengan  formula  optimum krim  yang  mengandung  minyak  atsiri  daun eukaliptus dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel  3.  Hasil  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Minyak  Atsiri  Daun  Eukaliptus  dan
Formula Optimum Krim Minyak Atsiri Daun Eukaliptus Uji Minyak atsiri 10% Krim minyak atsiri 10% Signifikasi Kesimpulan Diameter zona hambat (cm) 1,574 1,136 0,000 Berbeda signifikan Berdasarkan  tabel  3,  hasil  pengujian aktivitas antibakteri minyak atsiri
konsentrasi  10%  dibandingkan  dengan  hasil pengujian  aktivitas  antibakteri  formula optimum  krim  yang  mengandung  minyak atsiri  konsentrasi  10%  didapatkan  nilai signifikasi  p<0,05 , menunjukkan  bahwa minyak  atsiri  daun  eukaliptus  berpengaruh terhadap  formula  krim  minyak  atsiri  daun eukaliptus  sedangkan  basis  formula  krim tidak  berpengaruh  pada  diameter  zona hambat bakteri.

## SIMPULAN
1. Minyak atsiri daun eukaliptus memiliki aktivtas antibakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213 dengan konsentrasi efektif sebesar 10%
2. Formula  krim  berpengaruh  signifikan pada  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri daun  eukaliptus  dengan  konsentrasi
10%. DAFTAR PUSTAKA Atlas, R.M. 2004. Handbook Of Microbiological Media. 3rd Edition. London:  CRC Press.
Damanik,  M.  2009.  Kajian  Minyak  Atsiri pada Ekaliptus ( Eucalyptus
urophylla )  Umur  4  Tahun  di  PT
Toba  Pulp  Lestari  Tbk. Skripsi.
Fakultas Pertanian Universitas Sumatra Utara. Gould, D., & Brooker, C. 2003. Mikrobiologi Terapan Untuk Perawat . Jakarta: EGC. Khoeriyah, M., Cahyani, I.M., dan Bagiana, I.K.  2017.  Optimasi  Setil  Alkohol dan Tween 80 dalam Krim Minyak Atsiri Daun Eukaliptus ( Eucalyptus globulus ) Ssebagai Antibakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213. Skripsi. Semarang:  Sekolah
Tinggi Ilmu Farmasi.
Kumesan,  Y.A.N.,  Paulina  V.Y.Y.,  &
Hamidah  S.S.  2013.  Formulasi  dan Uji Aktivitas  Gel  Antijerawat
Ekstrak  Umbi  Bakung  ( Crium asiaticum L.)  terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus secara  In Vitro. Jurnal
IlmiahFarmasi. Manado:  Program  Studi  FMIPA
Unsrat.
Miratunnisa.,  Mulqie,  L.,  &  Hajar,  S.  2015.
Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Kulit  Kentang  ( Solanum tuberosum L.) terhadap Staphylococcus   aureus. Bandung:
Fakultas Farmasi Unisba Vratnica,  B.D.,  Dakov,  T.,  Sukovic,  D  & Damjanovic, J. 2011. Antimicrobial Effect  of  Essential  Oil  Isolated from Eucalyptus  globulus Labill from Montenegro. Czech
Journal  Food  Sciene . 29 (3):  277- 284.