## POTENSI EKSTRAK DAUN UNGU DALAM MENURUNKAN JUMLAH SEL OSTEOKLAS TIKUS YANG DIINDUKSI PORPHYROMONAS GINGIVALIS
THE POTENTIAL OF PURPLE LEAF EXTRACT TO REDUCE THE NUMBER OF OSTEOCLAST CELLS IN PORPHYROMONAS GINGIVALIS -INDUCED RATS
Atik Kurniawati 1 , Melok Aris Wahyukundari 2 , Syafira Dwi Astuti 3
1 Bagian Biologi Oral, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember
2 Bagian Periodonsia, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember
3 Program Pendidikan Dokter Gigi, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember Corresponding Author: atik.fkg@unej.ac.id

## Abstrak
Periodontitis  merupakan  penyakit  inflamasi  pada  jaringan  periodontal. Porphyromonas  gingivalis merupakan salah satu bakteri patogen pemicu periodontitis. Respons awal inflamasi dipicu oleh faktor virulen P.gingivalis antara  lain  lipopolisakarida  (LPS)  yang  berlanjut  pada  kerusakan  ligamen periodontal  sehingga  memicu  resorpsi  tulang  alveolar  yang  diperankan  oleh  sel  osteoklas.  Ekstrak daun ungu ( Graptophyllum pictum L. Griff ) diketahui dapat menghambat P.gingivalis secara in vitro, namun  kemampuannya  sebagai  antiinflamasi  dalam  menurunkan  jumlah  sel  osteoklas  pada  kejadian periodontitis belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi potensi  ekstrak daun ungu (EDU) dalam menurunkan jumlah sel osteoklas pada tikus wistar yang diinfeksi dengan P.gingivalis . Penelitian dilakukan pada tikus wistar yang terdiri atas 6 kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari  5  tikus  wistar.  Enam  kelompok  yang  terdiri  dari  kelompok  normal  (KN):  tanpa  perlakuan, kelompok  kontrol  negatif  (K-):  diinfeksi P.gingivalis (Pg),  kelompok  kontrol  positif  (K+):  Pg  + Tantum Verde, dan 3 kelompok perlakuan yaitu: KP2,5% (Pg + EDU 2,5%), KP5% (Pg + EDU 5%) serta KP10% (Pg + EDU10%). Pemeriksaan histologi dengan pengecatan Haematoxylin-Eosin (HE), jumlah  sel  osteoklas  pada  jaringan  gingiva,  ditentukan  dengan  menghitung  jumlah  rata-rata  dari  3 lapang  pandang  tiap  potongan  jaringan.  Analisis  data  dengan One  Way Anova dilanjutkan  LSD. Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak daun ungu berpotensi menurunkan jumlah sel osteoklas pada jaringan gingiva tikus wistar (p<0,05).
Kata Kunci : Ekstrak Daun Ungu, Periodontitis, Sel Osteoklas

## Abstract
Periodontitis  is  an  inflammatory  disease  of  the  periodontal  tissue.  Porphyromonas  gingivalis  is  a pathogenic  bacterium  that  triggers  periodontitis.  The  initial  response  to  inflammation  is  triggered  by P.gingivalis virulent factors, including lipopolysaccharide (LPS), which leads to periodontal ligament damage,  which  triggers  alveolar  bone  resorption,  played  by  osteoclasts.  Purple  leaf  extract (Graptophyllum  pictum  L.  Griff)  is  known  to  inhibit  P.gingivalis  in  vitro,  but  its  ability  as  an  anti- inflammatory in reducing the number of osteoclasts in the incidence of periodontitis is unknown. This study aims to evaluate the potential of purple leaf extract (EDU) in reducing the number of osteoclasts in  wistar  rats  infected  with  P.gingivalis.  The  research  was  carried  out  on  wistar  rats  consisting  of  6 groups.  Each  group  consisted  of  5  wistar  rats.  Six  groups  consisting  of  normal  group  (KN):  no treatment, negative control group (K-): infected  with  P.gingivalis (Pg), positive  control  group (K +): Pg + Tantum Verde, and 3 treatment groups, namely: KP2.5% (Pg + EDU 2.5%), KP5% (Pg + EDU 5%) and KP10% (Pg + EDU10%). Histological examination with Haematoxylin-Eosin (HE) staining, the number of osteoclasts in the gingival tissue was determined by calculating the average number of 3  view  fields  of  each  tissue  section.  Data  analysis  with  One  Way  Anova  followed  by  LSD.  The conclusion of this study is that purple leaf extract has the potential to reduce the number of osteoclasts in the gingival tissue of wistar rats (p <0.05).
Keywords : Purple Leaf Extract, Periodontitis, Osteoclast Cells

## PENDAHULUAN
Penyakit  periodontal  di  Indonesia  masih tergolong  tinggi  prevalensinya  yaitu  sebesar 60%.  Dalam  kelompok  penyakit  gigi  dan mulut, penyakit periodontal menduduki peringkat  kedua  yang  banyak  diderita  rakyat Indonesia  karena  relatif  tidak  menimbulkan keluhan. 1,2 Penyakit  periodontal  umumnya merujuk  pada  keadaan  inflamasi  pada  struktur pendukung  gigi  yang  meliputi  gingiva,  tulang alveolar, ligamen periodontal, dan sementum. 3 Plak  terbentuk  dari  deposit  lunak  serta membentuk  lapisan  biofilm  yang  melekat  erat pada gigi, gingiva dan permukaan keras lainnya di  dalam  rongga  mulut. 5 Mikroorganisme patogen yang ada pada bakteri plak antara lain: Porphyromonas gingivalis (P.gingivalis), Treponema forsythia,
Aggregatibacter
actinomycetemco-mitans, Treponema denticola, dan Prevotela intermedia . P.gingivalis merupakan salah satu bakteri patogen periodontal dan faktor virulensi yang mempengaruhi pertahanan imun inang. 4 Bakteri patogen  yang  ada  sebagai  biofilm  plak kompleks pada permukaan gigi yang mengeluarkan  enzim  kolagenase  yang  dapat menyebabkan  kerusakan  jaringan  gingiva  dan tulang  pendukung  gigi. Di  antara    berbagai spesies  bakteri  periodontopatogen  tersebut, maka P.gingivalis ditemukan  dalam  plak subgingiva  pasien  periodontitis  kronis  sebesar 85,75%. 6 Mikroorganisme  yang  melekat  pada plak gigi dan berkontak dengan margin gingiva akan menimbulkan inflamasi 36 , termasuk Pg.
Respons  awal  inflamasi  dipicu  oleh faktor virulen P.gingivalis , seperti lipopolisakarida  (LPS).  Lipopolisakarida  pada dinding  sel  Pg  akan  berikatan  dengan Lipopolisakarida  Binding  Protein (LBP)  dan membentuk kompleks molekul. Reseptor CD14 ( Cluster  of  Differentiation 14)  yang  berada  di permukaan sel target akan mengenali kompleks molekul kemudian Toll Like Reseptor (TLR 4). Kompleks  yg  terbentuk,  selanjutnya  akan mengaktifkan makrofag. Makrofag akan mengeluarkan sitokin inflamatori berupa interleukin -1  (IL-1), tumor  necrosis  factor -α (TNF-α), dan prostaglandin (PGE2). 7,8
Mediator  dan  sitokin  inflamasi  tersebut memacu  terbentuknya  osteoklas  dari  sel progenitornya  melalui  jalur Receptor  Activator for  Nuclear  Factor-Kb  Ligant (RANKL) dengan Receptor Activator for Nuclear Factor- Kb (RANK)  serta Osteoprogerin (OPG). Macrophage-Colony  Stimulating  Factor (M-
CSF),  IL-1  dan  RANKL  akan  menyebabkan prekursor osteoklas berdiferensiasi dan mengalami  fusi  kemudian  menjadi  osteoklas multinuclear yang dapat mengaktifkan osteoklastogenesis.  Osteoklas  yang  aktif  akan mensekresikan Matrix  Metallo  Proteinase (MMP)  8  dan  enzim  lisosomal  Chatepsin  K yang  menyebabkan  resorbsi  tulang  melalui pelepasan mineral-mineral tulang dan melisiskan  protein  dalam  kolagen  tulang. Proses  itulah  yang  menyebabkan  terjadinya kerusakan ligamen periodontal sehingga memicu resorpsi tulang alveolar yang diperankan oleh sel osteoklas. 9
Kerusakan  tulang  alveolar  merupakan salah satu tahap advance periodontitis. Kerusakan  tulang  pada  periodontitis  bisa disebabkan  karena  meningkatnya  jumlah  sel osteoklas,  sehingga  penting  untuk  mengontrol jumlah  osteoklas  tersebut.  Sel  osteoklas  yang berlebih  dapat  dikontrol  menggunakan  obat kimiawi.  Salah  satu  obat  kimiawi  yang mengandung bahan antiinflamasi yang dijual di pasaran  yaitu  obat  kumur  Tantum  Verde.  Efek anti-inflamasi  dari  obat  kumur  ini  diketahui bermanfaat  dalam  pengobatan  periodontitis, sehingga dipilih obat ini sebagai kontrol positif pada  penelitian  ini. 12 Akan tetapi  ada  peneliti lain yang menyatakan bahwa sering menggunakan  Tantum  Verde oral  rinse dapat menyebakan  perubahan  warna  pada  gigi, 13 sehingga perlu dicari alternatif terapi periodontitis, salah satunya dari bahan alam.
Ada  berbagai  bahan  alam  yang  banyak digunakan  untuk  pengobatan  alternatif  suatu penyakit maupun sebagai pemeliharaan kesehatan.  Tanaman Graptophillum  pictum  L. Griff )  atau  karotong  (Madura),  daun  ungu (Jawa) dan handeleum (Sunda) termasuk bahan alam  yang  banyak  dan  mudah  ditemukan  oleh masyarakat Indonesia. DITJEN POM mengembangkan daun ungu yang masuk dalam tiga  belas  tanaman  obat  unggulan. 14 Tanaman ini  banyak  digunakan  oleh  masyarakat  untuk pengobatan  terhadap  tumor,  dermatitis,  abses, vulnus, dan secara eksperimental dapat menghambat  pembengkakan  dan  penurunan permeabilitas membran. 15
Daun  ungu  ( Graptophyllum  pictum  L. Griff )  memiliki  senyawa  kimia  antara  lain triterpenoid  atau  steroid  bebas,  alkaloid, flavonoid,  glikosida,  saponin  dan  tanin. 16
Flavonoid  berfungsi  sebagai  antiinflamasi dengan menghambat pembentukan prostaglandin yang dibentuk oleh asam
arakidonat. 18 Flavonoid  juga  berfungsi  sebagai antioksidan  dengan  menstabilkan  radikal  bebas sehingga  dapat  mengurangi  kerusakan  sel karena inflamasi. 19
Hasil  penelitian  sebelumnya  secara in vitro menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  ungu efektif  menghambat  pertumbuhan P.gingivalis pada kertas cakram zona hambat yang dibentuk semakin besar ketika semakin tinggi konsentrasi  dari  ekstrak. 20 Demikian  pula, Ekstrak etanol daun ungu sebagai anti inflamasi dapat mempengaruhi fungsi fagositosis makrofag,  pembentukan  immunoglobulin  M dan  TNF  alpha  pada  mencit  terinduksi  LPS
Saphylococcus
aureus . 21
Berdasarkan pernyataan  tersebut,  penulis  ingin  melakukan penelitian  secara in  vivo tentang  kemampuan ekstrak  daun  ungu  konsentrasi  2,5%,  5%  dan 10%  terhadap  penurunan  osteoklas  pada  tikus wistar yang diinduksi P.gingivalis .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini termasuk
jenis eksperimental  laboratoris,  dengan  desain The Post Test Only Control Group . Daun ungu yang digunakan  yaitu Graptophillum  pictum L.  Griff yang  sudah  diidentifikasi  di  UPT  Balai Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Purwodadi- Pasuruan melalui Surat Keterangan Identifikasi Tumbuhan  No.  1109/IPH.06/HM/2019  tanggal 11  Oktober  2019.  Jumlah  sampel  yang digunakan, yaitu 5 ekor tikus wistar pada setiap subkelompok.  Penelitian  ini  terdiri  atas  6 kelompok yaitu: kelompok normal (KN): tanpa perlakuan,  kelompok  kontrol  negatif  (K-): diinfeksi Pg, kelompok kontrol positif (K+): Pg +  Tantum  Verde,  kelompok  perlakuan  2,5% (KP2,5%): Pg + EDU2,5%, kelompok perlakuan  5%  (KP5%):  Pg  +  EDU5%  dan kelompok  perlakuan  10%  (KP10%):  Pg  + EDU10%.
Semua prosedur pada penelitian ini telah disetujui oleh Komisi Etik Penelitian Kesehatan Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas  Jember dengan No. 612/UN25.8/KEKP/DL/2019. Tikus  wistar  yang  digunakan  dengan  kriteria inklusi: tikus wistar jantan, berat 175-200 gram, usia 2-3 bulan, keadaan umum baik, dan  diberi makan minun seragam. Model tikus periodontitis  merupakan  tikus  wistar  jantan yang diinduksi P.gingivalis strain ATCC 33277 dengan  konsentrasi  2x10 9 CFU/ml  sebanyak 0,05ml.  Pelarut  yang  dipakai  pada  pembuatan ekstrak  daun  ungu  adalah  etanol  96%  dengan metode  maserasi dan hasil yang didapat berupa
ekstrak  pekat  yang  kemudian  diencerkan menjadi konsentrasi 2,5%, 5% dan 10%.
Model  tikus  periodontitis  dibuat  dengan menginjeksikan P.gingivalis ATCC  33277 sebanyak  10 6 CFU  dalam  30µl  (0,03  ml)  pada sulkus  gingiva  gigi  molar  1  kiri  bawah  pada bagian  bukal.  Injeksi  dilakukan  3  hari  sekali selama  14  hari  hingga  mengalami  periodontitis yang  ditandai  dengan  adanya  inflamasi  pada gingiva  dan  resorbsi  tulang  alveolar  secara radiografi.  Perlakuan  Tantum  Verde  dan ekstrak  daun  ungu  diaplikasikan  dengan  cara irigasi  menggunakan needle 30G  pada  sulkus gingiva  satu  kali  sehari  selama  7  hari. Kelompok  normal  adalah    kelompok  tanpa perlakuan  apapun.  Kelompok  kontrol  negatif adalah  kelompok  yang  diinduksi P.gingivalis . Kelompok kontrol positif merupakan kelompok yang  diinduksi P.gingivalis kemudian  diberi perlakuan  Tantum  Verde.  Kelompok  perlakuan 2,5%, 5% dan 10% merupakan kelompok  yang diinduksi P.gingivalis kemudian diberi perlakuan  ekstrak  daun  ungu  2,5%,  5%  dan 10%. Selanjutnya pembuatan preparat histologi dan  pewarnaan  menggunakan Hematoxylin- Eosin (HE).  Pengamatan  dan  perhitungan  sel osteoklas  dilakukan  di    bawah  mikroskop dengan  perbesaran  400x  dan  dilakukan  oleh  3 observer.  Jumlah  sel  osteoklas  ditentukan dengan  menghitung  jumlah  rata-rata  sel osteoklas dari 3 lapang pandang tiap sampel.
Data  yang  diperoleh  dari  penelitian, dianalisis  dengan Statistical  Product  and
Service Solutions (SPSS). Selanjutnya dilakukan  uji Saphiro-wilk untuk  melihat normalitas  data  dan  uji Lavene untuk  melihat homogenitas  data.  Data  yang  diperoleh  adalah normal  dan  homogen  kemudian  dianalisis dengan One Way Anova , bermakna bila p<0,05, kemudian dilanjutkan uji LSD.

## HASIL
Hasil penelitian yang diperoleh menunjukkan  rerata  jumlah  sel  osteoklas  yang terendah pada KP10% yaitu kelompok perlakuan dengan pemberian ekstrak daun ungu konsentrasi  10%.  Kelompok  KP10%  diperoleh rata-rata  jumlah  sel  osteoklas  sebesar  2,57. Kemudian  kelompok  KP5%  sebesar  2,98, kelompok  KP2,5%  sebesar  4,34,  kelompok K(+)  sebesar  3,96  dan  kelompok  KN  sebesar 2,04.  Rata-rata  jumlah  sel  osteoklas  yag tertinggi  pada  kelompok  K(-)  yang  merupakan kelompok  kontrol  negatif  yang  diinduksi  Pg.
Pada  kelompok  K(-)  rata-rata  jumlah  sel osteoklas sebesar 6,71.
Gambar  1.  Gambaran  histologi  sel  osteoklas  (anak panah  hitam),  pewarnaan  HE  dengan  mikroskop pembesaran  400x.  Keterangan  :  A.Kelompok normal,  B.  Kontrol  negatif,  C.  Kontrol  positif, D.Perlakuan  2,5%  ,  E.  Perlakuan  5%    dan  F. Perlakuan 10% . TL : tulang alveolar, LP : ligamen periodontal, SM : sementum, D : dentin
Tabel 1. Hasil Rerata Jumlah Sel Osteoklas Kelompok Rerata Sel Osteoklas St. Deviasi KN 2,04 0,33 K(-) 6,71 0,72 K(+) 3,96 0,35 KP2,5% 4,34 0,86 KP5% 2,98 0,26 KP10% 2,57 0,81 Keterangan : KN : normal K(-) : induksi Pg K(+) : induksi Pg+ Tantum Verde KP2,5% : induksi Pg+ ekstrak daun ungu 2,5%
KP5% : induksi Pg+ ekstrak daun ungu 5% KP10% : induksi Pg+ ekstrak daun ungu 10%

## Gambar 2. Grafik Batang Rata-Rata Jumlah Sel Osteoklas
Hasil  uji  normalitas  dan  uji  homogenitas menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi  normal dan  homogen  (p>0,05).  Selanjutnya  dilakukan uji One  Way  Anova menunjukkan  hasil signifikan (p<0,05). Hasil uji LSD menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang signifikan  antara  kelompok  kontrol  negatif dengan  kelompok  normal,  kelompok  kontrol positif, kelompok  ekstrak daun ungu 2,5%, 5% dan 10%. Tetapi tidak berbeda signifikan antara kelompok  kontrol  positif  dengan  kelompok ekstrak daun ungu 2,5% (p<0,05).

## PEMBAHASAN
Tujuan  dilakukan  penelitian  ini  adalah untuk  mengevaluasi  potensi  ekstrak  daun  ungu ( Graptophillum  pictum L. Griff )  terhadap penurunan  jumlah  sel  osteoklas  pada  tikus wistar  yang  diinduksi P.gingivalis. Rata-rata jumlah  sel  osteoklas  pada  kelompok  kontrol negatif  menunjukkan  hasil  yang  paling  tinggi dibandingkan  kontrol  positif  dan  kelompok lainnya.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan bahwa P.gingivalis dapat menyebabkan terstimulasinya prostaglandin dan prekursornya,  interleukin  1-α  dan  β,  sitokin pro-inflamasi  TNF-α  yang  dihasilkan  host sehingga  menyebabkan  terjadinya  kerusakan ligamen periodontal selanjutnya memicu resorpsi  tulang  alveolar  yang  diperankan  oleh sel osteoklas 9,10 .
Ekstrak  daun  ungu  pada  konsentrasi 2,5%,  5%  dan  10%  dapat  menurunkan  jumlah sel  osteoklas  pada  tikus  wistar  yang  diinduksi P.gingivalis .  Ekstrak  daun  ungu  memiliki kandungan  senyawa  kimia  meliputi  alkaloid, flavonoid, fenolik, tanin, tripenoid, saponin dan glikosida.  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  uji kandungan  senyawa  kimia  ekstrak  daun  ungu. Senyawa  kimia  yang  banyak  terkandung meliputi  alkaloid  sebesar  64,48,  flavonoid sebesar  54,04,  fenolik  sebesar  13,53  dan  tanin
sebesar 12,17. Flavonoid, alkaloid, dan saponin dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat  kumur antiinflamasi  yang  sekaligus  berperan  sebagai antibiotik untuk penderita periodontitis (Pratiwi,  2012).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa penurunan jumlah sel osteoklas pada penelitian ini karena adanya efek sinergis antara senyawa kimia dalam ekstrak daun ungu.
Hasil  uji One  Way  Anova menunjukkan hasil  signifikan  (p<0,05).  Artinya  terdapat kemampuan  pada  masing-masing  kelompok penelitian  dalam  menurunkan  jumlah  sel osteoklas  pada  tikus  wistar  yang  diinduksi P.gingivalis .  Baik  itu  kelompok  perlakuan ekstrak  daun  ungu  konsentrasi  2,5%,  5%  dan 10%  maupun  kelompok  kontrol  positif  dengan obat  kumur  Tantum  Verde.  Hal  ini  disebabkan adanya  kandungan  senyawa  aktif  dalam kelompok perlakuan maupun kelompok kontrol positif.  Hasil  uji  LSD  menunjukkan  bahwa  KP 5%  dan  KP  10%  yang  bermakna  (p<0,01) terhadap  K(+).  Artinya  konsentrasi  efektif sebagai  terapi  periodontitis  dengan  parameter penurunan  jumlah  osteoklas,  pada  KP5%  dan KP10%  yang  efektif.  Hal  ini  sesuai  dengan hasil  penelitian  Prasetyaningrum  dkk  (2018) yang  meneliti  efek  ekstrak  daun  teh  hijau terhadap  sel  osteoklas  tulang  alveolar  tikus putih  ( Rattus  norvegicus )  periodontitis  bahwa jumlah konsentrasi suatu ekstrak mempengaruhi efektifitas penurunan sel osteoklas. 32
Kelompok yang diberi ekstrak daun ungu 10% tidak berbeda signifikan dengan kelompok normal.  Hal  ini  dapat  diartikan  bahwa  ekstrak daun  ungu  konsentrasi  10%  mempunyai kemampuan  sama  dalam  menurunkan  jumlah sel  osteoklas  dan  mengembalikan  jumlah  sel osteoklas seperti keadaan normal. Ekstrak daun ungu  10%  memiliki  efek  antiinflamasi  yang berpotensi  sebagai  terapi  untuk  periodontitis. Hal  ini  dikarenakan  daun  ungu  memiliki kandungan    tanin  dan  flavonoid  yang  mampu menurunkan  kadar  TNF-α  pada  kelompok perlakuan  sampai  mendekati  kelompok  yang hanya  diberi  pakan  standar  dan  minum (normal). 33 Terhambatnya  sitokin  pro-inflamasi akan  menurunkan  asam  arakidonat.  Penurunan asam  arakidonat  dapat  menurunkan  apoptosis sel osteoblas. Sel osteoblas mensekresi osteoprotegerin (OPG).  OPG  berfungsi  untuk menghambat  ikatan  RANKL  dengan  RANK, sehingga  terjadi  apoptosis  sel  osteoklas  yang menyebabkan penurunan resorpsi tulang. 34
Kelompok kontrol positif (Tantum Verde)  tidak  berbeda  signifikan  dengan kelompok  yang  diberi  ekstrak  daun  ungu  5% dan  10%.  Hal  ini  artinya  ekstrak  daun  ungu konsentrasi  tersebut  bisa  sebagai  alternatif terapi  untuk  penyakit  periodontitis.  Tantum Verde  yang  mengandung benzydamine HCl 0.15%  mempunyai  efek  yang  sama  dengan ekstrak  daun  ungu  konsentrasi  5%  dan  10% sebagai  antiinflamasi  yang  mempengaruhi jumlah  osteoklas. Benzydamine HCl  termasuk golongan NSAID yang bekerja dengan menghambat jalur siklooksigenase. COX memproduksi  berbagai  zat  kimia  seperti prostaglandin yang menyebabkan inflamasi.
Benzydamine HCl dapat mencegah terjadinya  inflamasi  dan  rasa  sakit  dengan menghambat terbentuknya prostaglandin. 35 Penelitian  farmakologi  menunjukkan  bahwa benzydamine HCl  memiliki  sifat  analgesik, antiinflamasi,  antipiretik,  anastesi  lokal  dan antibakteri. Benzydamine HCl  berpengaruh pada  mekanisme  lokal  proses  inflamasi. Benzydamine HCl  berada  pada  konsentrasi tinggi  di  jaringan  yang  inflamasi  sedangkan jaringan  normal  konsentrasinya  sangat  rendah, dengan demikian pemberian topikal meningkatkan efektifitasnya. 12 Dari hasil penelitian  ini,  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak daun  ungu  mampu  menurunkan  jumlah  sel osteoklas  pada  tikus  wistar  yang  diinduksi P.gingivalis dan  berpotensi  sebagai  terapi alternatif pada periodontitis dengan  konsentrasi efektif 5% dan 10%, dengan cara diaplikasikan melalui irigasi pada sulkus gingiva.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak  daun  ungu (Graptophyllum  pictum  L. Griff) memiliki  potensi  untuk  menurunkan junlah  sel  osteoklas  pada  tikus  wistar  yang diinduksi P.gingivalis dengan  konsentrasi optimal 5% dan 10%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Depkes  RI.  Riset  Kesehatan  Dasar. http://www.depkes.co.id  [diakses  pada  20 Juni 2019] :118-220.
2. Susilawati, I. D. A. Periodontal infection is a  “Silent  Killer”. Stomatognatic  (J.K.G. Unej) 2011; 8(1): 21-26.
3. Bostanci,  N.  &  Belibasakis,  G.  N. Porphyromonas  gingivalis:  an  Invasive  &
Evasive. FEMS  Microbiol  Lett 2012;
333(1): 1-9.
4. Newman,  M.G.,  Caranza,  F.A.,  Takei, H.H.,  dan  Klokkevold,  P.R. Newman  and Carranza’s  Clinical  Periodontology .  13th
Edition.Philadelphia: Elsevier. 2019: 89. 5. Toar,  A.  I.,  Posangi,  J.,  dan  Wowor,  V.
Daya Hambat Obat Kumur Cetylpyridinium Chloride dan Obat Kumur Daun Sirih Terhadap Pertumbuhan
Streptococcus  mutans. Jurnal  biomedik (JBM) 2013; 5(1): 163-168.
6. How, K. Y., Song, K. P., dan Chan, K. G. Porphyromonas  gingivalis:an  Overview  of Periodontopathic Pathogen below the Gum Line. J.  Frontiers  in  Microbiology 2016; 7(53): 1-14.
7. Yustina,  A.  R.,  Suardita,  K.,  dan  Agustin, D.  Peningkatan  Jumlah  Osteoklas  pada Keradangan  Periapikal  Akibat  Induksi
Lipopolisakarida Porphyromonas gingivalis. JBP 2012; 14(3): 140-44.
8. Kim,  H.  J., Seo,  J.  Y.,  Suh,  H. J.,  Lim,  S. S., dan Kim, J. S. Antioxidant Activities of Licorice-derived  Prenylflavonoids. Nutr Res Pract 2012; 6(6): 491-98.
9. Mescher, A. L. Histologi Dasar Junqueira Teks  dan  Atlas .  14th  Edition.  Jakarta: EGC. 2015 p.138-59
10. Rubin,  J.&  Greenfield,  E.  M.  Osteoclast: Origin  &  Differentiation. Journal  of Medical and Dental 2012; 59(3): 65-74.
11. Zulfa,  L.  &  Mustaqimah,  D.  N.  Terapi Periodontal Non-Bedah. Dentofasial 2011; 10(1): 36-41.
12. Firza,  T.A.,  Umar,  N.,  dan  Ihsan,  M. Perbandingan  Obat  Kumur  Benzydamine HCl  22,5  mg  dan  Ketamin  40  mg  dalam Mengurangi  Nyeri  Tenggorok  &  Suara Serak  Akibat  Intubasi  Endotrakeal. Jurnal Anestesi Perioperatif . 2017; 5(1): 57-66.
13. Ulusoy, N. B., Arikan, V., dan Oba, A. A. Effect of Mouthwashes On The Discolouration  of  Restorative  Materials Commonly  Used  In  Paediatric  Dentistry. European Archives of Paediatric Dentistry 2018: 1-7.
14. Balai  Besar  Pelatihan  Pertanian  (BBPP) Lembang. Potensi Tanaman Obat Indonesia. Lembang , Kementerian Pertanian Badan Penyuluhan dan Pengembangan  Sumber  Daya  Manusia Pertanian. 2012: 1-3.
15. Sumarny,  R.,  Yuliandini,  dan  Rohani,  M. Efek Anti-Inflamasi dan Anti-Diare
Ekstrak Etanol Herba Meniran (Phyllanthus  niruriL.)  &  Daun  Ungu (Garptophyllum pictumL. Griff). Prosiding Seminar Nasional Perkembangan Terkini Sains Farmasi Dan Klinik III 2013: 207-11.
16. Sitompul,  N.  Aktivitas  Antibakteri  & Analisis  Kandungan  Kimia  Daun  Ungu
(Graptophyllum pictum (L.) Griff). Prosiding Seminar Nasional Biologi Meningkatkan Peran Biologi dalam Mewujudkan  “NationalAchievement  with
Global  Reach” .Medan:  USU  Press  2011: 245-49.
17. Purwanto,  B. Herbal  &  Keperawatan
Komplementer . Yogyakarta: Nuha Medika. 2013. 18. Ardiana,  T.,  Kusuma,  A.  R.  P.,  dan Firdausy, M. D. Efektivitas Pemberian Gel Binahong (Anredera Cordifolia) 5% Terhadap  Jumlah  Sel  Fibroblast  Pada
Soket  Pasca  Pencabutan  Gigi  Marmut (Cavia  Cobaya). J.  ODONTO  Dental . 2015; 2(1): 64-70.
19. Fitria, L., Utami, I. D., dan Suranto, R. D. P.  Uji  Potensi  Buah  Luwingan  (Ficus hispida  L.f)  Sebagai  Penurun  Kadar Kolesterol  Darah  dengan  Hewan  Model Tikus Wistar (Rattus norvegicus Berkenhout,1769) Hiperlipidemia. Laporan Penelitian Fakultas Biologi Dana BOPTN 2015 . Fakultas Biologi Universitas  Gajah  Mada  Yogyakarta.
2015: 1-20.
20. Baskhara,  M.  E.,  Ratih,  P.  H.,  dan Failasufa,  H.  Efektivitas  Ekstrak  Daun Ungu  (Graptophyllum  pictum  (L.)  Griff) dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Porphyromonas  gingivalis  (In vitro).
Skripsi .Semarang:  Fakultas  Kedokteran Gigi Universitas Muhammadiyah Semarang. 2018:.5-6. 21. Kusumaawati,  I.  Pengaruh  Ekstrak  Etanol
Daun Ungu (EEDU) Graptophyllum pictum L.Griff terhadap Fungsi Fagositosis serta Pembentukan Imunoglobuli  M  dan  TNF-alpha  pada mencit. Disertasi ,  Fakultas  Pasca  Sarjana, Universitas Airlangga, Surabaya 2002: 32- 64.
22. Mysak,  J.,  Podzimek,  S.,  Sommerova,  P., Lyuya-Mi,  Y.,  Bartova,  J.,  Janatova,  T.,
Prochazkova, J., dan Duskova, J. Porphyromonas
gingivalis:
Major
Periodontopathic  Pathogen  Overview. J. Immunology Research 2014; 2014: 1-8.
23. Nasution,  A.  I. Hubungan  Molekuler Osteoporosis,  Inflamasi,  Sistem  Imunologi dan Aging . Biologi Oral FKG UI.
24. Iskandar,  P.  &  Ismaniati,  N.  A.  Peran Prostaglandin pada Pergerakan Gigi Ortodontik. Dentofasial 2010;  9(2):  91- 100. 25. Cochran,  D.  L.  Inflammation  and  Bone Loss In Periodontal Disease. J. Periodontol 2008; 79(8): 1569-76.
26. Zhang, W., Ju, J., Rigney, T., dan Tribble, G.  Porphyromonas  gingivalis  Increases Osteoclastic Bone Resorption & Osteoblastic Bone Formation in a
Periodontitis  Mouse  Model. BMC  Oral Health 2014: 1-9.
27. Kurniawan, B. & Aryana, W. F. Binahong (Cassia alataL) as Inhibitor of Escherichiacoli  Growth. J  Majority. 2015;
4(4): 100-104.
28. Sani,F.  &  Yustimartina,  P.  Uji  Efektivitas
Antiinflamasi  Esktrak  Metanol  Daun Subang-subang  (Scaevola  taccada  L.). terhadap Mencit yang Diinduksi Karagenan. Seminar Nasional Ilmu
Kesehatan. 2016: 40-45.
29. Astuti,  S.  M. Skrining  Fitokimia  dan  Uji
Aktivitas Antibiotika Ekstrak Etanol Daun,
Batang, Bunga & Umbi Tanaman
Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten)
Steenis.) .  Bogor:  Balai  Besar  Pengujian Mutu dan Sertifikasi Obat Hewan (BBPMSOH). 2011: 3-4
30. Pramitaningastuti,  A.  S.  &  Anggraeny,  E. N.Uji  Efektivitas  Antiinflamasi  Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona
squamosa.L) Terhadap  Edema  Kaki  Tikus Putih  Jantan  Galur  Wistar. J  Ilmiah Farmasi. 2017; 13(1): 8-14.
31. Pratiwi,  L.  C.  Adhesi  Porphyromonas gingivalis  pada    Netrofil    yang    Diinduksi Ekstrak  Kelopak  Bunga  Rosella  (Hibiscus sabdariffa  L.) Skripsi .  Jember:  Fakultas Kedokteran  Gigi  Universitas  Jember. 2012: 41-50.
32. Prasetyaningrum,  N.  Soemardini,  M. Fadil.  Efek  Ekstrak  Daun  Teh  Hijau (Camellia  cinensis)  Terhadap  Jumlah  Sel Osteoklas  Tulang  Alveolar  Tikus  Putih (Rattus  norvegicus). E-Prodenta  Journal of Dentistry 2018: 130-39.
33. Tjahjani,  N.  P.,  Kristina,  T.  N.,  dan Lestari,  E.  S.  Efektivitas  Ekstrak  Etanol
Daun  Ungu  (Gratophyllum  pictum(L.)) untuk  Menurunkan  Kadar  TNF-α  &  NO. Pharmaciana. 2016; 6(2): 191-200.
34. Bartold,  P.  M.,  Cantley,  M.  D.,  dan Haynes,  D.  R.  Mechanisms  &  Control  of
Pathologic  Bone  Loss  In  Periodontitis. Periodontology 2000 . 2010; 53: 55-69.
35. Suparwi, A. D. Perbedaan Efektivitas Obat
Kumur  Chlorhexidine  &  Methylsalicylate dalam Menurunkan Jumlah Koloni Bakteri
Rongga Mulut. Skripsi . Surakarta:
Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sebelas Maret. 2010: 12-20.
36. Sunarto, H. Plak Sebagai Penyebab Utama Keradangan  Jaringan  Periodontal. Skripsi . Jakarta:  Departemen  Periodonsia  Fakultas Kedokteran  Gigi  Universitas  Indonesia. 2014: 1-12.