## IDENTIFIKASI MIKROBA POTENSIAL FUNGI MIKORIZA ARBUSKULA (FMA) PADA LAHAN PASCATAMBANG PT. HOLCIM INDONESIA Tbk . CIBINONG, BOGOR, JAWA BARAT
Identification of Potential Microbes of Arbuscular Mycorrhizal Fungi (AMF) in Post Mining Land of PT. Holcim Indonesia Tbk, Cibinong, Bogor, West Java
Ceng Asmarahman ae , Sri Wilarso Budi b , Imam Wahyudi c , Erdy Santoso d
a Program Studi Silvikultur Tropika, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680 –ceng_ipk@yahoo.co.id.
b Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan. Institut Pertanian Bogor. Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680
c Departement Hasil Hutan Fakultas Kehutanan. Institut Pertanian Bogor. Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680
d Peneliti  senior  di  Lab.  Microbiologi,  Badan  penelitian  dan  Pengembangan  Kehutanan,  Kementerian  Lingkungan Hidup dan Kehutanan
e Jurusan Kehutanan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung
Abstract. Impact of mining activity on environment is very significant, especially in the form of pollution on surface water and ground water. Therefore, it is necessary to rehabilitate the damaged ecosystem in post mining land by introduction of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) as source of local potential inoculants. The objective of this research was identifying AMF species on the basis of size, color, and ornament of the spore. Research method comprised identification of species and number of AMF spore in shale post mining location (Site-1) and limestone post mining location (Site-2) with 4 replications for each site. Research result showed  the  finding  of  seven  species  of  AMF,  namely  species  Glomus  sp-1,  Glomus  sp-2,  Gigaspora  sp,    and  Acaulosopra scrobiculata, A. tuberculata, A. foveata and Sclerocystis sinuosa. Identification result in the first location showed findings of AMF Glomus sp-1 as many as 186 spores, Glomus sp-2 as many as 71 spores, A. scrobiculata as many as 40 spores, Gigaspora sp as many as 8 spores, A. foveata  as many as 8 spores, S. Sinuosa  as many as 7 sporecarps and A. tuberculata as many as 6 spores. On the second site there were identified AMF spores of Glomus sp-1 as many as 112 spores, Glomus sp-2 as many as 45 spores, A. scrobiculata as many as 7 spores,  Gigaspora sp as many as 7  spores, A. foveata as many as 6 spores and A. tuberculata as many as 1 spore. This research is useful for accelerating the success of revegetation in post mining land.
Keywords: Arbuscular mycorrhizal fungi (amf), limestone, shale, spore.
(Diterima: 23-08-2017; Disetujui: 21-11-2017)

## 1. Pendahuluan

## 1.1. Latar Belakang
Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya  akan sumberdaya  alam,  baik  hayati  maupun  non  hayati termasuk  bahan  mineral  yang  ada  didalamnya. Sehingga  sumberdaya  alam  yang  ada  dieksploitasi untuk  meningkatkan  perekonomian  nasional.    Dalam pelaksanaan penambangan dan eksploitasi sumberdaya alam dan bahan mineral selalu menimbulkan perubahan terhadap  kondisi  lahan  yang  ada  yang  menyebabkan terjadinya  perubahan  terhadap  permukaan  tanah  serta hilangnya vegetasi penutup lahan.
Kegiatan  penambangan  bahan  galian  dari  lapisan bumi  telah  berlangsung  sejak  lama.  Konsep  dasar pengolahan relatif tidak berubah, yang berubah adalah sekala kegiatannya. Mekanisasi peralatan penambangan telah menyebabkan sekala penambangan semakin  membesar,  sehingga  menimbulkan  dampak lingkungan  yang  sangat  besar  dan  bersifat  penting. Pengaruh  kegiatan  penambangan  mempunyai  dampak
yang  sangat  signifikan  terhadap  lingkungan  terutama berupa pencemaran air permukaan dan air tanah.
Salah  satu  contoh  penambangan  batu  kapur,  shale dan  silika  sebagai  bahan  baku  semen  telah  merubah rona  lingkungan  yang  ada  yaitu  secara  biotik  telah menyebabkan  hilangnya  vegetasi  dan  terganggunya aktivitas  mikroorganisme  tanah.  Sedangkan  secara abiotik dapat merusak komponen tanah, baik struktur, tekstur maupun agregat, kemudian pH tinggi, hilangnya top soil,  mudah tererosi, drainase buruk, bersifat racun (toxic) dan miskin unsur hara. Suhu udara juga menjadi panas karena tidak adanya tumbuhan.
Akibat aktifitas dari penambangan telah menimbulkan  kondisi  fisik,  kimia  dan  biologis  tanah menjadi  buruk,  seperti  lapisan  tanah  tidak  berprofil, terjadi bulk  density (pemadatan),  kekurangan  unsur hara  yang  penting,  pH  rendah  bahkan  tinggi, pencemaran oleh logam-logam berat pada lahan bekas tambang,  serta  penurunan  populasi  mikroba  tanah. Sehinnga  menjadi  kewajiban  oleh  setiap  perusahaan penambangan  untuk  melakukan  kegiatan  rehabilitasi lahan yang telah di tambang/ dieksploitasi.
Teknik  rehabilitasi  pada  lahan  bekas  penambangan memerlukan  pendekatan  edaphik  dan  silvikultur, karena  lahan  bekas  tambang  umumnya  telah mengalami  perubahan  dari  pembentukan  tanah  yang terbentuk  secara  alamiah  sehingga  secara  fisik,  kimia dan biologi kurang mendukung pertumbuhan tanaman. Ciri  -  ciri  pedogenetik  pada  lahan  -  lahan  bekas tambang  tidak  dapat  diidentifikasi  dan  umumnya bersifat kritis karena hilangnya vegetasi penutup tanah, adanya tekanan yang berat dari pukulan air hujan, erosi, sentuhan  langsung  cahaya  matahari  maupun  aktifitas alat berat.
Rehabilitasi pada  lahan tambang  yang rusak adalah kegiatan  yang  bersifat  holistik  dengan  perencanaan yang  matang,  agar  masalah  lahan  tambang  ini  dapat terpulihkan. Pulih disini bermakna kembalinya keadaan ekosistem  seperti  mendekati  ke  kondisi  sebelum mengalami  kerusakan,  dengan  kata  lain  seluruh komponen  penyusun  ekosistem  baik  yang  biotik, abiotik, makro, maupun mikro beserta seluruh interaksi diantara  komponen  tersebut  dapat  berfungsi  dengan baik,  serta  menuntut  pemahaman  yang  menyeluruh tentang  ekosistem  dari  lahan,  dan  tidak  dapat  diatasi secara terpisah-pisah (Jordan et al. , 1987).
Alternatif  perlakuan  yang  dapat  digunakan  untuk membantu  pertumbuhan  tanaman  pada  lahan  -  lahan yang memiliki sifat fisik, kimia, dan biologi tanah yang buruk, seperti halnya pada tanah pascatambang adalah dengan  menciptakan  kondisi  tanah  supresif.    Tanah supresif  adalah  tanah  yang  kaya  akan  mikroba  tanah, sehingga  kondusif  untuk  pertumbuhan  tanaman,  dan dapat  menekan  perkembangan  mikroba  patogen  (Van Brugen,  2000;  Biwas,  2000;  Doran,  2000;  Qualls, 2000).  Penggunaan mikroba tanah dalam pertanaman dapat  membantu  penyediaan  nitrat,  fosfat  dan  kalium serta unsur hara lainnya sehingga dapat meningkatkan kualitas  pertumbuhan  tanaman  di  lapangan  (Van Brugen,  2000;  Biwas,  2000;  Doran,  2000;  Qualls, 2000).
Salah  satu  upaya  untuk  meningkatkan  kesuburan tanah bekas tambang tersebut adalah dengan introduksi
pupuk hayati (biofertilizer) atau pemanfaatan mikroba potensial lokal yang terdapat pada lahan pascatambang. Mikroba  potensial  ini  bisa  didapatkan  di  lokasi/site tambang atau intoduksi dari luar areal tambang. Namun dalam  rehabilitasi  lahan  tambang  lebih  diprioritaskan pemanfaatan  FMA  potensial  lokal  karena  secara ekologi dan alamiah FMA lokal ini sudah mampu hidup dan  beradaptasi  dengan  kondisi  lingkungan  tambang tersebut. Untuk mendapatkan sumber inokulan (FMA) potensial  tersebut  maka  perlu  dilakukan  identifikasi terhadap  keragaman  mikroba  potensial  (FMA)  yang terdapat  pada  lahan  pascatambang.  Sumber  inokulan yang didapatkan dapat menjadi mikroba potensial yang diharapkan  berperan  aktif  dalam  mempercepat  proses keberhasilan  revegetasi  pada  lahan  pascatambang  PT. Holcim Indonesia Tbk nantinya.

## 1.2. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk Mengidentifikasi jenis fungi  mikoriza  arbuskula  (FMA)  berdasarkan  ukuran, warna, ornamen dari spora FMA yang di temukan pada sampel  tanah  pada  lahan  pascatambang  PT.  Holcim Indonesia  Tbk  Cibinong,  Kabupaten  Bogor  Provinsi Jawa Barat.

## 2. Metode

## 2.1. Tempat dan Waktu
Waktu penelitian dilaksanakan pada bulan Mei 2015 sampai  dengan  Agustus  2015.  Tempat  penelitian dilakukan  lahan  pascatambang  PT.  Holcim  Indonesia Tbk.  Identifikasi  mikroba  Fungi  Mikoriza  Arbuskula dilakukan  di  Laboratorium  Teknologi  Mikoriza, Program  Studi  Silvikultur  Hutan  Tropika,  Fakultas Kehutanan IPB dan Laboratorium Bidang Botani, Pusat Penelitian  Biologi-LIPI,  Cibinong  Science  Centre, jalan Raya Jakarta-Bogor km 45, Cibinong.
Gambar 1. Peta Lokasi Penelitian
Sumber: Google earth November 2017
Lokasi penelitian

## 2.2. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah Cangkul, Garpu tanah, Kantong  plastik,  Label,  Spidol  permanen,  Satu    set penyaring ( sieve ) dengan 3 tingkatan ukuran  saringan (250µm,  125  µm,  60  µm),  Gelas  beaker,  Botol  film, tabung  sentrifuse,  Pinset  spora,  Botol  semprot, Sentrifuse,  Cawan  petri  dan  Mikroskop.    Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini adalah Sampel tanah uji pada  lahan Pascatambang  PT. Holcim Indonesia  Tbk, glukosa,  aquades,  air  Sukrosa  60%.  Sampel  tanah  uji diambil  pada  2  lokasi/site  yaitu  lahan  pascatambang shale  dan  batu  kapur  PT.  Holcim  Indonesia  Tbk Cibinong, Kabupaten Bogor, Provinsi Jawa Barat.

## 2.3. Pengambilan Data dan Analisis Data
a. Teknik Pengambilan Data
Pengambilan  data  dilakukan  melalui  4  tahapan kegiatan sebagai berikut:
Tahap 1. Survey lokasi Survey  lokasi  merupakan  tahap  awal  yang  penting dilakukan  sebelum  memulai  suatu  kegiatan.  Dalam identifikasi mikroba potensial (FMA) lokal pada lahan pascatambang,  peneliti  melakukan  survey  awal  ini, tahap ini bertujuan untuk melihat kondisi exsiting lahan pascatambang  sebelum  dilakukan  tahapan  kegiatan selanjutnya.
Tahap 2. Pengambilan Sampel Tanah Pengambilan sampel tanah uji dilapangan merupakan  kegiatan  untuk  menyiapkan  bahan  atau materi  yang  akan  digunakan  sebagai  bahan  untuk identifikasi FMA. Pengambilan contoh tanah dilakukan secara  non  proporsional  yang  ditentukan  berdasarkan pada kondisi lapangan yang ada yaitu berdasarkan pada sebaran  nabatah  (vegetasi)  yang  tumbuh  dilokasi. Sampel  tanah  uji  diambil  dari  rhizosfer  kelompok tanaman  yang  sama,  pertumbuhannya  terbaik  dan terlihat sehat.
Tahap 3. Pemisahan Sampel tanah dari bahan lain dan Penimbangan Tanah Uji
Setelah  pengambilan  sampel  tanah  dari  lapangan maka  dilakukan  pemisahan  sampel  tanah  uji  dari bahan-bahan  lain  yang  tidak  penting,  yang  mungkin terbawa pada saat pengambilan sampel tanah.
Tahap 4. Sieving Spora FMA
Isolasi  spora  dari  tanah  dilakukan  dengan  metode tuang  dan  saring  dan  dilanjutkan  dengan  modifikasi sentrifugasi  dari  Brundret et  al. (1996)  untuk mendapatkan keragaman spora FMA.

## b. Analisis Data
Analisis data menggunakan  analisis morfologi spora FMA  (warna,  bentuk,  ukuran,  hifa  attachment  dan ornamen spora) dan pembuatan preparat slide (larutan melzer’s)  (Schneck  dan  Perz,  1988;  Brundrett et  al. ,
1996;  Invam,  2003)  yang  kemudian  dianalisis  genus dari masing-masing FMA yang ditemukan.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan  hasil  identifikasi  mikroba  potensial FMA pada lahan pascatambang PT. Holcim Indonesia Tbk Cibinong Kabupaten Bogor, Provinsi Jawa Barat, untuk  jenis  dan    jumlah  spora  yang  di  temukan  pada lokasi pascatambang shale ( Site - 1 ) dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Jenis FMA yang ditemukan pada lokasi pascatambang shale PT. Holcim Indonesia Tbk Cibinong, Bogor-Jawa Barat.
Hasil identifikasi jenis FMA pada lahan pascatambang  shale  (Gambar  2)  ditemukan  7  jenis FMA yaitu Glomus sp-1, Glomus sp-2, Gigaspora sp, Acaulospora  scrobiculata,  A.  tuberculata,  A.  foveata dan Sclerocystis sinuosa . Pada site pertama spora FMA Glomus sp- 1 merupakan yang paling tinggi jumlahnya ditemukan  pada  sampel  tanah  uji.  Sedangkan  spora FMA A.tuberculata yang  paling  sedikit  ditemukan. Hasil Identifikasi FMA pada lahan pascatambang shale jenis  spora Glomus  sp- 1  (186  spora),  selanjutnya Glomus  sp -2  sebanyak  71  spora, A.  scrobiculata sebanyak 40 spora, Gigaspora sp sebanyak 8 spora, A. foveata sebanyak  8  spora, S.  Sinuosa sebanyak  7 sporocarp dan A. tuberculata sebanyak 6 spora.
Hasil  spora  yang  didapatkan  dari  tempat  yang berbeda menunjukkan adanya keragaman dalam bentuk, jenis,  ukuran,  serta  jumlah  spora.  Ukuran  spora mikoriza  bervariasi.  Keadaan  tersebut  menunjukkan bahwa keberadaan spora di  lahan pascatambang  shale PT.  Holcim  Indonesia  Tbk  pada  site  dan  titik pengambilan sampel sangat beragam.  Menurut Lovera dan  Cuenca  (1995) dalam Saptiningsih  (2001), mikoriza  arbuskula  merupakan  cendawan  yang  tidak mempunyai inang spesifik bahkan sampel tanaman dari golongan Cyperaceae di  daerah  savana  yang  miskin hara,  mikoriza  berkembang  baik  dengan  membentuk arbuskula pada daerah kortek. Dilaporkan pula bahwa satu  individu  tanaman  dapat  berasosiasi  dengan  lebih dari satu mikobion dan satu mikobion dapat berasosiasi
dengan satu atau lebih autobion (Nuhamara et al ., 1985 dalam Prihastuti, 2007). Sementara hasil identifikasi mikroba potensial FMA pada  lahan  pascatambang  batu  kapur  ( Site -2)  PT. Holcim  Indonesia  Tbk  Cibinong  Kabupaten  Bogor, Provinsi  Jawa  Barat,  jenis  dan  jumlah  spora  yang  di temukan pada lokasi dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3. Jenis spora FMA yang ditemukan pada lokasi pascatambang batu kapur PT. Holcim Indonesia Tbk Cibinong, Bogor-Jawa Barat.
Hasil identifikasi jenis FMA pada lahan pascatambang  batu  kapur  (Gambar  3)  ditemukan    6 jenis FMA yaitu Glomus sp-1, Glomus sp-2, Gigaspora sp, dan Acaulospora  scrobiculata,  A.  tuberculata,  A. foveata .  Tipe  dan  karakteristik  spora  yang  ditemukan mempunyai  berbagai  perbedaan  mulai  dari  bentuk perhiasan,  warna,  tekstur  maupun  ukuran  spora.  Dari hasil identifikasi spora yang dilakukan jenis Glomus sp dominan  dijumpai.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  jenis Glomus  sp mempunyai  tingkat  adaptasi  yang  cukup tinggi  terhadap  lingkungan.  Hal  ini  menunjukkan bahwa genus Glomus sp masih memiliki adaptasi yang cukup tinggi dibandingkan dengan jenis FMA yang lain.
Dari  data  yang  disajikan  pada  Gambar.  3  terlihat bahwa  spora  FMA Glomus  sp- 1    merupakan  jumlah yang  paling tinggi ditemukan. Sedangkan  spora FMA A.  tuberculata yang  paling  sedikit  jumlahnya ditemukan.  Hasil  Identifikasi  FMA  pada  site  kedua lahan pasca tambang batu kapur PT. Holcim Indonesia Tbk, jenis spora Glomus sp- 1 ditemukan sebanyak 112 spora, selanjutnya Glomus sp -2 sebanyak 45 spora, A. scrobiculata dan Gigaspora  sp masing-masing ditemukan  sebanyak  7  spora, A.  foveata sebanyak    6 spora dan A. tuberculata sebanyak 1 spora.
Spora FMA terbentuk sebagai akibat penggelembungan  satu  atau  lebih  dudukan  hifa ( subtending  hypha )  dalam  tanah  atau  dalam  akar (Brundrett et al ., 1996). Pembentukan spora umumnya berlangsung  jika  terjadi  remobilisasi  hara  dari  akar yaitu  pada  saat  simbiosis  FMA  dan  tanaman  akan mengalami  kematian.  Bentuk  spora  umumnya  bulat sampai  lonjong  dengan  ukuran  garis  tengah  yang beragam.  Setiap  spora  dibatasi  oleh  satu  atau  lebih lapisan  yang  di  sebut  dinding  spora  yang  masing-
masing  memiliki  ketebalan  tertentu  (Nusantara et  al. , 2012).
Warna spora beragam mulai dari bening atau jernih, kuning  sampai  hitam.  Spora  berisi  lemak,  sitoplasma dan banyak inti. Oleh karena itu, spora dapat berfungsi sebagai  propagul.  Spora  dapat  mengelompok  menjadi gugus-gugus  kecil  yang  disebut  tandan  spora (sporocarp). Sporokarp  dapat  berisi  hifa-hifa  khusus dan dapat terletak di lapisan terluar (peridium). Selain itu, spora juga merupakan organ yang ada pada tahapan istirahat (dorman). Ketika kondisi lingkungan mungkinkan,  spora  akan  berkecambah  dengan mengeluarkan  hifa  yang  langsung  menembus  dinding spora atau membentuk struktur perkecambahan khusus (Nusantara et al. , 2012).
Morfologi spora FMA merupakan karakter biologi yang mudah diamati dengan bantuan mikroskop. Spora dapat dipisahkan dari tanah dan kemudian dikelompokkan  karakter  morfologinya,  misalnya ukuran,  warna,  jumlah  dan  tebal  dinding  spora,  ada tidaknya struktur khas, hiasan dinding spora (ornamen), dan  lain sebagainya. Berdasarkan  identifikasi tersebut kemudian  fungi  mikoriza  arbuskula  dapat  ditentukan genus dan spesiesnya.
Gambar  4. Foto keragaman spora FMA hasil isolasi

## Glomus sp
Genus  ini  ditemukan  di  pada  semua  sampel  tanah uji  baik  pada  site  pertama  lahan  pascatambang  shale (S1T1,  S1T2,  S1T3,  S1T4  dan  site  kedua  lahan pascatambang  batu  kapur  (S2T1,  S2T2,  S2T3  dan S2T4)  dengan  jumlah  spora  yang  ditemukan  setiap sampel  bervaritif.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  ada dua Glomus yang  ditemukan  hal  ini  dibedakan berdasarkan  pada  perbedaan  ukuran  spora.  Spora Glomus terbentuk  dari  pembengkakan  ujung  hifa sampai  mencapai  batas  maksimumnya.  Ujung  hifa yang  menggelembung  itu kemudian akan terlepas dan berubah menjadi spora. Spora berasal dari perkembangan  hifa,  sehingga  di  sebut  klamidospora. Hifa  juga  kadang–kadang  bercabang–cabang  dan  tiap cabang  terbentuk  chlamydiospora  dan  membentuk sporokarp. Karakteristik khasnya adalah pada Glomus sering  terlihat  jelas  sisa  dinding  hifa  pada  permukaan spora  (INVAM,  2009).  Ukuran  spora Glomus  sp ditemukan  bervariasi  yaitu  90  x  71µm,  120  x  120µm dan  150  x  150µm.  Spora  berbentuk  bulat  dan jumlahnya banyak. Jumlah dinding spora berlapis-lapis.
Tidak  memiliki  ornamen  dan  adanya  dudukan  hifa ( subtending  hyphae )  lurus  (Nusantara et  al .,  2012). Berdasarkan  hasil  pengamatan  dari  sampel  tanah  uji spora Glomus memiliki  warna  bening,  putih,  kuning, coklat, coklat kehitaman dan merah gelap.
Glomus sp- 1 Glomus sp -2
Gambar  5. Foto bentuk spora FMA jenis Glomus sp

## Gigaspora sp
Dari  hasil  pengamatan  dan  identifikasi  pada  site pertama jenis ini hanya ditemukan pada sampel S1T1, sedangkan pada sampel tanah uji site kedua ditemukan pada semua sampel tanah uji (S2T1, S2T2  dan  S2T3) namun  jumlahnya  lebih  sedikit  jika  dibandingkan dengan  jenis Glomus sp.  Jenis Gigaspora  sp yang ditemukan  memiliki  ciri-ciri  yaitu  ukuran  spora bervariasi yaitu berukuran 225 x 216µm dan berukuran 357,5 x 357µm, lapisan dinding spora tipis (± 2 lapis), bereaksi  dengan  Melzer  secara  menyeluruh,  memiliki bulbus  suspensor,  spora  yang  ditemukan  berwarna kuning  dan  merah  gelap.  Proses  perkembangan Gigaspora tidak  langsung  dari  hifa.  Pertama-tama ujung hifa (subtending hifa) membulat yang dinamakan bulbuos  suspensor .  Di  atas bulbuos  suspensor ini timbul  bulatan  kecil  yang  semakin  lama  semakin membesar  dan  mencapai  ukuran  maksimum  yang akhirnya menjadi spora. Spora ini disebut azygospora. Karakteristik  khasnya  adalah  pada Gigaspora , mempunyai bulbuos suspensor tanpa germination sheld (INVAM, 2009).
Gambar 6. Foto bentuk spora FMA jenis Gigaspora sp

## Acaulospora sp
Dari  hasil  pengamatan  dan  identifikasi  pada  site pertama genus ini ditemukan pada sampel S1T1, S1T2 dan S1T3, sedangkan pada site kedua ditemukan pada sampel  tanah  uji  (S2T1,  S2T3  dan  S2T4).  Genus Acaulospora sp merupakan jenis FMA yang  memiliki ciri-ciri spora yaitu ukuran spora 100-200 µm, lapisan
luar  tidak  bereaksi  dengan  Melzer,  lapisan  dalam bereaksi  dengan  Melzer  warna  lebih  gelap-merah keunguan),  memiliki  ornamen  bergantung  kepada spesiesnya,  dari  hasil  isolasi  terdapat  3  jenis Acaulospora yang  ditemukan  yaitu Acaulospora scrobiculata,  A.  tuberculata dan A.  foveata. Jenis A. scobiculata dicirikan  dengan  adanya  cekungan- cekungan    seperti  bulan  sabit  pada  permukaan  spora dengan  ukuran  spora  bervariasi  90  x  75µm,  135  x 129µm.  Jenis A.  tuberculata permukaan  spora berbentuk tabung atau tonjolan-tonjolan, ukuran spora yang  ditemukan  bervariasi  yaitu  135  x  96µm,  159  x 135µm  dan  165  x  165µm  dan  jenis A.  foveata pada permukaan  spora  terdapat  lekukkan-lekukan  ukuran spora 240 x 189µm. Dan warna spora dominan merah, dan  memiliki  mother  cell  dan  satu  cycatrix  sebagai tanda.
a b

## c
Gambar  7. Foto bentuk spora FMA jenis Acaulospora (a: A.scrobiculata, b: A. tuberculata, c: A. foveata)

## Sclerocystis sp
Dari  hasil  isolasi  jenis  dilapangan  FMA  maka ditemukan  FMA  jenis S.  Sinuosa. Jenis  ini  hanya ditemukan pada pada site pertama lahan pascatambang shale yaitu pada sampel tanah uji S1T4 dengan jumlah sporocarp yang temukan sebanyak 7 sporocarp, dengan sporocarp    berwarna  kecoklatan,  ukuran  sporocarp sekitar  429  x  286µm,  dan  ukuran  single  spore  70  x 60µm.
Gambar  8. Foto bentuk spora FMA jenis S. sinuosa
Berdasarkan  pada  hasil  pengamatan  dan  hasil identifikasi bahwa penyebaran FMA sangat ditentukan oleh kondisi lingkungan atau edafis. Setiap jenis FMA yang  berbeda  dan  secara  tidak  langsung  mempunyai adaptasi lingkungan yang berbeda. Tingkat adaptasi ini masing-masing memiliki variasi toleransi dan keunikan tersendiri. Perbedaan site/lokasi dan rhizosfer menyebabkan perbedaan keanekaragaman spesies dan populasi FMA.
Selain penjelasan diatas bahwa jumlah spora dalam tanah juga dipengaruhi oleh musim dan umur tanaman inang.  Pada  musim  panas  jumlah  spora  tertinggi, demikian  halnya  pada  tanaman  yang  telah  tua  jumlah spora juga tinggi (Siradz dan Kabirun, 2007). Solaiman dan  Hirata  (1995),  mengatakan  bahwa  efektivitas mikoriza  dipengaruhi  oleh  faktor  lingkungan  tanah yang  meliputi  faktor  abiotik  (konsentrasi  hara,  pH, kadar  air,  temperatur,  pengolahan  tanah,  dan penggunaan  pupuk/pestisida)  dan  faktor  biotik (interaksi mikrobial, spesies cendawan, tanaman inang, tipe perakaran tanaman inang dan kompetisi antar fungi mikoriza).  Adanya  kolonisasi  mikoriza  tapi  respon tanaman  yang  rendah  atau  tidak  ada  sama  sekali menunjukkan bahwa cendawan mikoriza lebih bersifat parasit.
Faktor-faktor  yang  mempengaruhi  tanaman  inang juga akan mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan mikoriza.  Menurut  Pfleger  dan Linderman  (1996) dalam Prihastuti  (2007)  dikatakan bahwa  perkembangan  mikoriza  dipengaruhi  oleh kepekaan  tanaman  inang  terhadap  suhu  tanah, intensitas cahaya, kandungan unsur hara dan air tanah, pH tanah, bahan organik, residu akar dan logam berat.
Ekosistem alami mikoriza di daerah tropika ( tropical rain  forest )  dicirikan  oleh  keragaman  spesies  yang sangat tinggi.  Keberadaan  tanaman  inang  yang  cocok dan compatible terhadap  suatu  spesies  mikoriza arbuskula  berlanjut  dengan  peningkatan  pertumbuhan hifa dan infeksi mikoriza arbuskula. Hifa mengadakan pertumbuhan terpolarisasi dan membentuk apresorium. Jumlah dan morfologi apresorium akan berubah apabila mikoriza  arbuskula  bersinggungan  dengan  tanaman yang  tidak  merupakan  inangnya.  Apresorium  akan tumbuh  menjadi  hifa  dan  masuk  kedalam  epidermis akar tanaman  inang, membentuk hifa  interseluler, dan intraseluler,  vesikel,  serta  arbuskula  (Bagyaraj,  1991; Bianciotto dan Bonfate, 1998 dalam Prihastuti, 2007). Tanah  yang  didominasi  oleh  fraksi  lempung  ( clay ) merupakan  kondisi  yang  diduga  sesuai  untuk perkembangan spora Glomus , dan tanah berpasir genus Gigaspora ditemukan dalam jumlah tinggi. Pada tanah berpasir,  pori-pori  tanah  terbentuk  lebih  besar dibanding tanah lempung dan keadaan ini diduga sesuai untuk perkembangan spora Gigaspora yang berukuran lebih  besar  daripada  spora Glomus (Baon,  1998). Glomus mempunyai  daerah  sebaran  yang  paling  luas dan  paling  toleran  terhadap  kondisi  salinitas  tanah. Tingginya kehadiran spora Glomus dimungkinkan juga karena spora FMA tipe Glomus ini mempunyai jumlah spesies yang sangat banyak dibandingkan lainnya.
Mikoriza bersifat musiman, sehingga keberadaannya ditentukan  oleh  musim.  Kelimpahan  mikoriza  terjadi pada  musim  semi  dan  awal  musim  panas,  kadang- kadang tidak ada atau hanya dalam bentuk spora pada saat  dormansi  akar.  Brundrett  (2006)  menyatakan bahwa  dalam  kondisi  yang  tidak  menguntungkan, keberadaan  mikoriza  dapat  diamati  dalam  bentuk spora.  Dalam  bentuk  spora  ini,  fungi  mikoriza  dapat mempertahankan  kehidupannya  dan  spora  dapat berkecambah  setelah  kondisi  memungkinkan,  yang diawali dengan proses infeksi akar.
Perkembangan  mikoriza  diawali  sejak  berada  di tanah  dalam  bentuk  spora  hingga  dapat  menginfeksi akar tanaman. Solaiman dan Hirata (1995) menyatakan bahwa  mikoriza  tidak  hanya  berkembang  pada  tanah yang berdrainase baik saja, pada lahan yang tergenang seperti  pada  padi  sawah  mikoriza  juga  mampu  hidup. Aggangan, et  al .  (1998)  menyatakan  bahwa  pada lingkungan yang miskin hara atau pun lingkungan yang telah  tercemar  limbah  berbahaya  sekalipun,  mikoriza mampu memperlihatkan eksistensinya.
Faktor-faktor  yang  memengaruhi  tanaman  inang, biasanya juga memengaruhi  pertumbuhan  dan perkembangan  mikoriza.  Perkembangan  mikoriza dipengaruhi  oleh  kepekaan  tanaman  inang  terhadap suhu  tanah,  intensitas  cahaya,  kandungan  unsur  hara dan air tanah, pH tanah, bahan organik, residu akar, dan logam berat (Pfleger dan Linderman, 1996).

## 4. Kesimpulan
1. Hasil identifikasi keanekaragaman jenis spora FMA pada  ke-dua  lokasi  lahan  pascatambang  shale  dan batu  kapur  PT.  Holcim  Indonesia  Tbk,  Cibinong Kabupaten  Bogor,  Provinsi  Jawa  Barat  ditemukan tujuh  jenis  FMA  yaitu Glomus sp-1, Glomus  sp-2, Gigaspora  sp,  A.  scrobuculata,  A.tuberculata,  A. foveata dan S. sinuosa
2. Jumlah masing-masing spora FMA yang ditemukan pada  ke-dua  lokasi  lahan  pascatambang  bervariasi yaitu  pada  lahan  pascatambang  shale  ditemukan FMA jenis spora Glomus sp- 1 sebanyak 186 spora, Glomus  sp -2  sebanyak  71  spora, A.  scrobiculata sebanyak 40 spora, Gigaspora sp sebanyak 8 spora,
A. foveata sebanyak 8 spora, S. Sinuosa sebanyak 7  sporocarp  dan A.  tuberculata sebanyak  6  spora.
Sedangkan  pada  lahan  pascatambang  batu  kapur ditemukan jumlah spora Glomus sp- 1 sebanyak 112 spora, Glomus  sp -2  sebanyak  45  spora, A. scrobiculata dan Gigaspora  sp masing-masing sebanyak 7 spora, A. foveata sebanyak  6 spora dan A. tuberculata sebanyak 1 spora.

## Daftar Pustaka
[1] Abbott,  L.  K.,  and  Robson,  A.  D.,  1982.  The  Role  of  VA mycorrhizae fungsi in agriculture and the selection of fungi for inoculation. Journal Agricultur , 33: 389-395.
[2] Abbott,  L.  K  and  Robson,  A.  D.,  1984 . The  effect  of mycorrhizae  on  plant  growth . CRC  Press,  Inc.  Boca  Raton. Florida.
[3] Allen  M.F.,  1992.  Mycorrhizal  Functioning.  Chapman  and Hall, New York. 126.
[4] Aggangan,  N.S.,  Dell,  B  dan  Malakezuk  N,  1998.  Effect  of chromium and nickel on growth of the ectomycorrhizal fungus Pisolithus dan  formation  of  ectomycorrhizae  on Eucalyptus urophylla . S. T. Blake Geoderma , 84: 33–39.
[5] Azwir, L., 2001. Dampak Aktifitas Industri PT Semen Padang terhadap  Kualitas  Air  Sungai  Limau-Limau:  Kasus  di Sumatera Barat. Tesis. Bogor: Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
[6] Baon,  J.B.,  1998.  Peranan  Mikoriza  VA  Pada  Kopi  Dan Kakao. Makalah disampaikan dalam workshop aplikasi fungi mikoriza arbuskula pada tanaman pertanian, perkebunan dan kehutanan. Bogor.
[7] Brundrett,  M.C,  Bougher,  N.,  Dells,  B.,  Grove,  T.,  dan Malajozuk,  N.  1996.  Working  with  mycorrhizas  in  forestry and  agriculture.  Australian  Centre  for  International Agricultural Research, Canberra.
[8] Brundrett,  M.,  2006.  Mycorrhizae-mutualistic  plant  fungus symbioses. http://mycorrhiza.ag.utk.edu/
[9] Biwas  J.C.,  2000.  Rhizobia  Inoculation  Improves  Nutrient Uptake and Growth of Lowland Rice. Soil Sci. Soc. Am J (64): 1644-1650.
[10] Cahyono  A.,  2001.  Daerah,  Jangan  dibunuh  Oleh  Prasangka
Yang Tidak terbukti. http://www.mailarchive.com/lingkungan@indoglobal.com/m
sg01314.html.
[11] Daniels, B. A. H., dan Trappe, J. M. 1980., Factors affecting spora  germination  of  the  VAM  fungus, Glomus  epigaeus . Mycology, 72: 457- 463.
[12] Doran,  JW.,  2000.  Soil  Health  and  Sustainability:  Managing the Biotic Component of Soil Quality. Applied Soil Ecology. (14): 223-229.
[13] Delvian,  2003.  Keanekaragaman  dan  potensi  pemanfaatan cendawan  mikoriza  arbuskula  (CMA)  di  Hutan  Pantai. Program Pasca Sarjana Institut Pertanian Bogor: Bogor.
[14] INVAM, 2009. International  culture collection  of (vesicular) arbuscular  mycorrhizal  Fungi.  URL:http://invam.  caf.  wvu.
Edu/Myco - info.
[15] Janouskova,  M.,  Pavlikova,  D.,  dan  Vosatka,  M.,  2006.
Potensial  contribution  of  arbuscular  mycorrhiza  to  cadmium immobili sation in soil. Chemosphere 65 (11): 1959-1965.
[16] Lakitan,  B.,  2000.  Dasar-dasar  fisiologi  tumbuhan.  PT.  Raja Grafindo Persada. Jakarta.
[17] Maas,  E.V.  dan  Nieman,  R.  H.,  1978.  “Physiology  of  plant tolerance to salinity. Dalam GA Jung (Ed). Crop tolerance to suboptimal land conditions”. ASA Spec: 277-299.
[18] Manan, S., 1993. Pengaruh mikoriza pada pertumbuhan semai Pinus  merkusi  di  persemaian.  Kuliah  silvikultur  umum.
Fakultas Kehutanan IPB. Bogor: 247-261.
[19] Marx,  D.H.,  1982 . Mycorrhiza  in  interaction  with  other microorganism.  In  Method  dan  Principles  of  mycorrhizal research. The Am. Phyt. Soc Minessota: 225-228.
[20] Moreira,  Dilmar,  dan  Tsai,  S.M.,  2007.  Biodiversity  dan
Distribution  of  Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  in  Araucaria angustifolia Forest. Journal agriculture 64: 393-399.
[21] Pfleger,  F.L.  dan  Linderman  R.G.,  1996.  Mycorrhizae  and plant  health.  APS  Press.  The  American  Phytopathology Society St. Paul, Minnesota, 274.
[22] Pujianto,  2001.  Pemanfaatan  Jasad  Mikro,  Jamur  Mikoriza Dan  Bakteri  Dalam  Sisitem  Pertanian  Berkelanjutan  Di
Indonesia,  Tinjauan  dari  prespektif  falsafah  Sains.  Makalah Falsafah  Sains  Program  Pasca  Sarjana  Institut  Teknologi pertanian Bogor.
[23] Qualls,  R.G.,  2000.  Phosphorus  Enrcment  Effects  Litter Decomposition, Imobilization and Soil Microbial Phosphorus in wetland Mesocosms. Soil Sci. Soc. Am.J. (64): 799-808.
[24] Schenck,  N.C.,  dan  Schroder,  V.  N.  1974.  Temperature response of endogone micorrhiza on soybean roots. Mycologia 66: 71.
[25] Solaiman,  M.Z.  and  Hirata,  H.,  1995.  Effect  of  indigenous arbuscular  mycorrhizal  fungus  and  root  effect  on  soil aggregation. Soil Sci. Soc. Am. J. 57: 77–81.
[26] Setiadi, Y., 2001. Peranan mikoriza arbuskula dalam reboisasi lahan kritis di Indonesia. Makalah seminar penggunaan CMA dalam  sistem  pertanian  organik  dan  rehabilitas  lahan . Bandung. 21-23 April 2001.
[27] Siradz,  S.  A.  dan  Kabirun,  2007.  Pengembangan  lahan marginal pesisir pantai dengan bioteknologi masukan rendah. Jurnal Ilmu Tanah dan Lingkungan 7: 83-92.
[28] Nuhamara  S.T.,  1994.  Peranan  Mikoriza  Untuk  Reklamasi Lahan  Kritis . Program  Pelatihan  Biologi  dan  Bioteknologi Mikoriza. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
[29] Nusantara  D.A.,  Bertham  H.Y.,  Mansur  I.,  2012.  Bekerja dengan  Fungi  Arbuskula.  Fakultas  Kehutanan  IPB  dan SEAMEO BIOTROP. Bogor, Indonesia.
[30] Prihastuti, 2007. Isolasi dan karakterisasi Mikoriza Vesikular- Arbuskular  di  Lahan  Kering  Masam,  Lampung  Tengah. Berk.Penel.Hayati. 12 (99-106).
[31] Saptiningsih  E.,  2001.  Pertumbuhan  Vigna  radiate  L. Wilezeck  Dalam  Persaingan  Dengan  Cyperus  rotundus  L. Pada  Perlakuan  Inokulasi  Rhizobium  Dan  Mikorhiza Arbuskula. Fakultas Biologi. Program Pascasarjana Universitas Gajah Mada.  Jogjakarta.
[32] Solaiman,  M.Z.  and  Hirata,  1995.  Effect  of  indigenous Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  in  Paddy  Fields  on  Rice Growth  and  NPK  nutrition  Under  Different  water  regimes. Soil Sci. Plant Nutr., 41 (3): 505-514.
[33] Van Brugen, A.H.C., 2000. In Search of Biological Indicators for Soilhealth and Disease Supression. Applied Soil Ecology (15) 25-36.