## PEMANFAATAN EKSTRAK Gracilaria sp. DARI PERAIRAN PAMEKASAN SEBAGAI ANTIOKSIDAN

## UTILIZATION OF Gracilaria sp. FROM PAMEKASAN WATERS AS ANTIOXIDANT
Ayu Nadila Insani, Hafiludin * , AB. Chandra
Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Jurusan Ilmu Kelautan dan Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang, PO. Box. 2 Kamal, Bangkalan, Jawa Timur
* Corresponden author email: hafiludin@trunojoyo.ac.id
Submitted: 09 Juny 2022 / Revised: 28 Juny 2022 / Accepted: 29 Juny 2022
http://doi.org/10.21107/juvenil.v3i1.14783

## ABSTRAK
Rumput laut merupakan salah satu sumber daya alam hayati laut yang  memiliki nilai ekonomis tinggi dan memiliki peranan ekologis serta memiliki banyak manfaat, salah satunya yaitu sebagai antioksidan alami karena mengandung senyawa bioaktif yang berfungsi untuk menangkal radikal bebas. Salah satu rumput  laut  yang  berpotensi  dikembangkan  dalam  bidang  farmasi  yaitu  Gracilaria  sp.  Penelitian  ini bertujuan untuk menganalisis kandungan proksimat, kandungan bioaktif dan aktivitas antioksidan dari rumput  laut  Gracilaria  sp.  Penelitian  dilakukan  dalam  beberapa  tahap  yaitu:  preparasi  rumput  laut, analisis  proksimat,  analisis  fitokimia  dan  uji  aktivitas  antioksidan  yang  dilaksanakan  di  Laboratorium Bioteknologi Laut, Universitas Trunojoyo Madura. Kandungan proksimat dari rumput laut Gracilaria sp. kaya akan kadar air dan abu dalam bentuk segar dan kering, sedangkan jumlah lemak dan proteinnya sangat rendah. Senyawa bioaktif dalam rumput laut Gracilaria sp. mengandung saponin, steroid dan fenol hidrokuinon.  Rumput laut Gracilaria  sp. mempunyai aktivitas antioksidan terbaik dengan pelarut metanol  dengan  IC 50 sebesar  308,19  ppm.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  rumput  laut Gracilaria  sp.  mempunyai  potensi  untuk  dikembangkan  dalam  bidang  farmakologi  dan  pangan fungsional.
Kata Kunci: Antioksidan, bioaktif, Gracilaria sp. proksimat.

## ABSTRACT
Seaweed is one of the marine biological natural resources that has high economic value and has an ecological  role  and  has  many  benefits,  one  of  which  is  as  a  natural  antioxidant  because  it  contains bioactive compounds that function to ward off free radicals. One of the seaweeds that has the potential to be developed in the pharmaceutical sector is Gracilaria sp. This study aimed to analyze the proximate content, bioactive content and antioxidant activity of seaweed Gracilaria sp. The research was carried out in several stages, namely: seaweed preparation, proximate analysis, phytochemical analysis and antioxidant  activity  tests  carried  out  at the  Marine  Biotechnology  Laboratory,  University  of  Trunojoyo Madura. Proximate content of seaweed Gracilaria sp. rich in ash content in fresh and dry form, while the amount of fat and protein is very low. Bioactive compounds in seaweed Gracilaria sp. contains saponins, steroids  and  phenol  hydroquinone.  Seaweed  Gracilaria  sp.  has  the  best  antioxidant  activity  with methanol solvent with IC 50 of 308,19 ppm. The results of this study indicate that the seaweed Gracilaria sp. has the potential to be developed in the fields of pharmacology and functional food.
Keywords: Antioxidant, bioactive, Gracilaria sp., proximate.

## PENDAHULUAN
Wilayah  Indonesia  sekitar  70%  merupakan lautan  yang  kaya  akan  berbagai  jenis sumberdaya  hayati,  salah  satunya  adalah rumput laut. Rumput laut merupakan salah satu sumberdaya hayati yang melimpah di perairan
Indonesia  yaitu  sekitar  8,6%  dari  total  biota  di laut. Luas wilayah yang menjadi habitat rumput laut di Indonesia mencapai 1,2 juta hektar dan merupakan  wilayah  terluas  di  dunia.  Produksi budidaya  rumput  laut  di  Indonesia  selama periode  2010-2014  mengalami  peningkatan yang cukup signifikan, dimana pada tahun 2014
produksi mencapai 10,2 juta ton atau naik  tiga kali lipat  dari  produksi  rumput laut  tahun  2010 yaitu sebesar 3,9 juta ton. Rata-rata peningkatan  produksi  rumput  laut  per  tahun mencapai 27,71% (Diachanty et al. , 2017).
Kabupaten  Pamekasan merupakan  salah  satu kabupaten yang membudidayakan rumput laut di  Pulau  Madura  karena  perairan  Pamekasan juga  berpotensi  besar  untuk  pengembangan budidaya  rumput  laut.  Potensi  rumput  laut  di Pamekasan tersebar di Kecamatan Pademawu dan  Kecamatan  Tlanakan.  Usaha  budidaya rumput laut di Pamekasan berawal sejak tahun 2007,  namun  diantara  kedua  kecamatan tersebut yang tetap bertahan hingga  sekarang adalah  kecamatan  Pademawu  tepatnya  di Desa Tanjung (Maftuhah dan Amanatuz, 2012).
Produksi rumput laut di Kabupaten Pamekasan dari tahun 2007 – 2010 mengalami peningkatan setiap  tahun,  dimana  produksi  rumput  laut basah  sekitar  402.390  kg  (2007),  489.030  kg (2008), 1.607.667 kg (2009) dan 1.736.938 kg pada  tahun  2010,  sedangkan  produksi  rumput laut kering sekitar  67.065 kg (2007), 81.505 kg (2008), 267.994,5 kg (2009) dan 289.489,7 kg pada  tahun  2010  (Dinas  Perikanan  dan Kelautan Pamekasan, 2011). Rumput laut dari kelas  alga merah  (Rhodophyceae) menempati urutan terbanyak dari jumlah jenis yang tumbuh di  perairan  laut  Indonesia  yaitu  sekitar  452 jenis,  setelah  itu  alga  hijau  (Chlorophyceae) sekitar 196 jenis dan alga coklat (Phaeophyceae) sekitar 134 jenis (Jibrael et al. , 2017). Gracilaria sp. termasuk pada kelas alga merah  (Rhodophyta)  yang  merupakan  jenis rumput laut yang umumnya mengandung agar sebagai hasil metabolisme primernya (Hernanto et al., 2015). Gracilaria sp.  selain sebagai  antibakteri  juga  memiliki  aktivitas antioksidan dan mengandung senyawa alkaloid,  flavonoid,  tanin,  dan  fenol.  Senyawa fenol  yang  ada  pada  jenis  alga  ini  terbukti memiliki khasiat sebagai antibakteri, antiinflamasi,  antivirus,  dan  antikarsinogenik (Amaranggana dan Wathoni, 2017).
Antioksidan merupakan senyawa yang mampu menghambat oksidasi molekul lain. Mekanisme kerja antioksidan terdiri dari menangkap radikal bebas, menghambat inisiasi rantai, menghambat dekomposisi peroksida, mencegah  berlanjutnya  abstraksi  hidrogen, daya reduksi dan pengikatan katalis ion logam transisi.  Rumput  laut  memungkinkan  untuk digunakan sebagai sumber antioksidan karena memiliki  kemampuan  untuk  menghambat peroksidasi  lemak  dan  dapat  mengurangi beberapa  efek  dari  radikal  bebas.  Senyawa
yang berperan sebagai antioksidan dari rumput laut  yaitu  senyawa  fenolik,  senyawa  ini merupakan  kelompok  senyawa  terbesar  yang berperan  sebagai  antioksidan  alami  pada tumbuhan  dan  juga  banyak  terdapat  pada hampir  semua  jenis  rumput  laut  (Loho et  al. , 2021).
Tingginya keanekaragaman potensi rumput laut di  perairan  Indonesia  perlu  terus  digali  untuk mengetahui  pemanfaatannya  secara  luas. Ironisnya,  rumput  laut  di  Indonesia  hanya dibiarkan sebagai sampah lautan, mengapung, hanyut  terbawa  arus,  ataupun  terdampar  di pinggir pantai dan sampai saat ini masih sedikit rumput  laut  yang  diketahui  komposisi  nutrisi dan potensi senyawa bioaktifnya. Terbatasnya informasi terkait potensi dari Gracilaria sp. asal perairan  Pamekasan  mendorong  pelaksanaan penelitian  eksploratif  seperti  yang  dilakukan dalam  penelitian  ini.  Tujuan  penelitian  ini adalah untuk mengetahui kandungan proksimat (kadar  air,  kadar  abu,  karbohidrat,  lemak, protein  dan  serat  kasar),  kandungan  bioaktif dan  aktivitas  antioksidan  pada Gracilaria sp. yang  melimpah  di  perairan  Pamekasan,  Jawa Timur.

## MATERI DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah rumput laut Gracilaria sp. segar dan kering.  Bahan  lain  yang  digunakan  yaitu  n- heksan, metanol dan akuades.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  antara lain  cawan  porselen,  oven,  nampan,  gegep, desikator,  furnace,  waterbath,  soxhlet,  hot plate,  blender,  lemari  es,  timbangan  digital, erlenmeyer,  gelas  beaker,  spatula,  corong, tabung  ukur,  pipet  tetes,  rotary  evaporator, toples.

## Pengambilan Sampel
Rumput  laut Gracilaria sp.  diambil  secara langsung  di  tambak  dari  Desa  Lembung, Kecamatan Galis, Kabupaten Pamekasan.

## Preparasi Sampel
Rumput laut Gracilaria sp. dicuci menggunakan air  tawar  untuk  menghilangkan  kotoran  dan pasir. Rumput laut yang telah bersih kemudian dilakukan dua perlakuan yaitu disimpan dalam keadaan  segar  dan  dikeringkan  dibawah  sinar matahari  secara  langsung  selama  2-3  hari untuk sampel kering.

## Analisis Proksimat
Analisis proksimat penelitian ini meliputi: kadar air,  abu,  lemak,  serat  kasar,  protein  dan katbohidrat. Uji kadar air dengan metode oven, kadar  abu  dengan  metode  tanur,  uji  kadar protein menggunakan metode titrasi formol, uji kadar lemak menggunakan metode soxhlet, uji serat  kasar  dengan  ekstraksi  dan  pencucian asam-basa  serta  uji  karbohidrat  secara  by difference.

## Analisis kadar air (AOAC 2005)
Analisis  kadar  air  dilakukan  menggunakan metode  oven.  Cawan  yang  akan  digunakan dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  105°C selama 10 menit, setelah itu didinginkan dalam desikator kemudian ditimbang. Sampel ditimbang  dalam  cawan  sebanyak  2-3  g kemudian  dikeringkan  dalam  oven  dengan suhu  105°C  selama  3  jam  sampai  mendapat berat  konstan,  kemudian  didinginkan  dan ditimbang hingga diperoleh bobot tetap. Kadar air dihitung dengan rumus :
Kadar air (%) = a−b c x 100 % …………………(1)
Keterangan: a:  Cawan  +  sampel  sebelum  pengeringan;  b: Cawan + sampel setelah pengeringan; c: Berat sampel
Analisis kadar abu (AOAC 2005)
Analisis  kadar  abu  dilakukan  dengan  metode pengabuan kering. Cawan pengabuan dikeringkan dalam oven selama 10 menit pada suhu  105°C,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam desikator dan ditimbang. Sampel sebanyak 2-3 g  dimasukkan  ke  dalam  cawan  pengabuan, kemudian dimasukkan dalam tanur pengabuan dengan  suhu  650°C  selama  6  jam,  kemudian dimasukkan ke dalam desikator dan ditimbang. Kadar abu dihitung dengan rumus:
Kadar abu (%) = B2−B1 B0 x 100% ………...…….(2)
Keterangan: B 0 : Berat sampel; B 1 : Berat cawan kosong; B 2 : Berat cawan dengan sampel setelah ditanur

## Analisis kadar lemak (AOAC 2005)
Analisis  kadar  lemak  menggunakan  metode soxhlet.  Kertas  saring  dan  benang    sebelum digunakan untuk membungkus sampel dikeringkan menggunakan suhu 105°C  selama 10  menit,  kemudian  dimasukkan  ke  desikator dan  ditimbang  beratnya.  Menimbang  2-3  g sampel,  kemudian  dibungkus  dengan  kertas
saring  dan  benang,  selanjutnya  dimasukkan dalam  tabung  ekstraksi  Soxhlet  dan  dilakukan refluks  terhadap  sampel  paling tidak  selama  6 jam hingga pelarut yang turun kembali ke labu lemak  berwarna  jernih.  Sampel  yang  sudah  di ekstraksi  dimasukkan  ke  dalam  oven  bersuhu 105°C untuk pengeringan, kemudian didinginkan  dalam  desikator  dan  dilakukan penimbangan.  Kadar  lemak  dihitung  dengan rumus :
Kadar lemak (%) = W3−W2 W1 x 100% .................(3)
Keterangan: W 1 :  Berat  sampel;  W 2 :  Berat  kertas  saring  + sampel  setelah  ekstraksi;  W 3 :  Berat  kertas saring + sampel sebelum Ekstraksi

## Analisis kadar protein (AOAC 2005)
Analisis  kadar  protein  menggunkaan  metode titrasi  formol  dengan  cara  menimbang  2  gr sampel, kemudian tambahkan akuades sebanyak  60  mL  selanjutnya  memipet  20  mL sampel dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Tambahkan  0,4  mL  kalium  oksalat,  kemudian tambahkan 1 mL indikator fenolflatelin dan 2 mL formalin,  kemudian  dihomogenkan.  Titrasi dilakukan  dengan  larutan  NaOH  0,1N  sampai timbul  warna  merah  muda,  banyaknya  NaOH 0,1  N  yang  terpakai  dicatat.  Titrasi  blanko dibuat  dengan  cara  menambahkan  10  mL akuades dengan 0,4 mL kalium oksalat jenuh, 1 mL  indikator  fenoflatelin  dan  2  mL  formalin, kemudian dititrasi dengan NaOH 0,1 N sampai terbentuknya  warna  merah  muda,  banyaknya NaOH  yang  terpakai  dicatat.  Kadar  protein dihitung dengan rumus:
% N = A−B g x 10 𝑥 𝑁 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑥 14,008 ……………..(4)
Kadar protein = %N x Faktor konversi ………(5)
Keterangan:
A:  mL  titrasi  blanko;  B:  mL  titrasi  sampel;  N: Normalitas  NaOH;  g:  Berat  sampel;  Faktor konversi : 6,25

## Analisis kadar serat kasar
Analisa  kadar  serat  kasar  dilakukan  dengan cara kertas saring dan gelas beaker dikeringkan menggunakan  oven  dengan  suhu  105°C selama 10 menit. Menimbang sampel sebanyak 1-2  g  dan  tambahkan  50  mL  larutan  H 2 SO 4 , kemudian  didihkan  selama  30  menit  dengan menggunakan  hot  plate.  Tambahkan  25  mL NaOH  dan  didihkan  lagi  selama  30  menit, kemudian  disaring  dalam  keadaan  panas menggunakan kertas saring yang telah
dikeringkan  dan  diketahui  bobotnya.  Cuci endapan  yang  terdapat  pada  kertas  saring berturut-turut  dengan  etanol  dan  akuades panas. Angkat kertas saring beserta isinya dan keringkan  pada  oven  dengan  suhu  105°C, kemudian  dinginkan  dengan  desikator  dan ditimbang bobotnya. Kadar serat kasar dihitung dengan rumus:
Kadar serat kasar (%) = W1−W2 W x 100% .........(6)
Keterangan: W:  Berat  sampel;  W 1 :  Berat  sampel  sebelum perlakuan;  W 2 :  Berat  endapan  pada  kertas saring

## Analisis karbohidrat
Kadar  karbohidrat  dilakukan  dengan  cara  by difference dengan persamaan:
Kadar karbohidrat (%) = 100% - (%kadar abu + %kadar  air  +  %protein  +  %lemak  +  %serat kasar)............................................................(7)

## Ekstraksi Sampel
Rumput  laut  segar  dicuci  dengan  air  tawar untuk menghilangkan kotoran, lumpur dan pasir yang  menempel.  Kemudian  rumput  laut dipotong-potong  atau  digunting  menjadi  kecil- kecil,  setelah  itu  sampel  ditimbang  sebanyak 1,5  kg  dan  dihaluskan  menggunakan  blender dan  dimasukan  ke  dalam  3  toples.  Kemudian ditambah  pelarut  n –heksana,  metanol  dan akuades hingga terendam sempurna.
Perendaman  dilakukan  3  kali  sampai  filtrat mendekati  bening,  pada  perendaman  pertama menggunakan  pelarut  dengan volume  650 mL dengan  perbandingan  1:1,3  (w/v),  kemudian perendaman kedua dengan volume pelarut 550 mL  dengan  perbandingan  1:1,1  (w/v)  dan perendaman ketiga dengan volume pelarut 500 mL  dengan  perbandingan  1:1  (w/v).  Hasil maserasi  kemudian  disaring  dengan  kertas saring Whatman no. 1 sehingga dihasilkan filtrat dan residu. Filtrat tersebut langsung dievaporasi menggunakan alat rotary evaporator.

## Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  bioaktif  pada  ekstrak Gracilaria sp.  terdiri  dari  analisis  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpenoid,  steroid dan fenol hidrokuinon mengacu pada prosedur Purwaningsih dan Deskawati (2020).

## Alkaloid
Uji  alkaloid  dilakukan  dengan  mengambil sampel yang sudah di ekstrak ebanyak 0,05 g dilarutkan  dalam  asam  sulfat  (H2  SO4)  2N sebanyak  2  tetes.  Larutan  sampel  diletakkan pada plat tetes dan ditetesi pereaksi. Pengujian menggunakan  tiga  pereaksi  alkaloid  yaitu Dragendorff,  Meyer,  dan  Wagner.  Hasil  uji positif apabila terbentuk endapan merah hingga jingga  dengan  pereaksi  Dragendorff,  endapan putih  kekuningan  dengan  dengan  pereaksi Meyer,  dan  endapan  coklat  dengan  pereaksi Wagner.

## Flavonoid
Uji  flavonoid  dilakukan  dengan  mengambil sampel yang sudah di ekstrak sebanyak 0,05 g, kemudian  ditambah  dengan  0,05  mg  serbuk Mg.  Hasil  uji  positif  apabila  terbentuk  warna merah,  kuning  atau  jingga  pada  lapisan  amil alkohol.

## Saponin
Uji  saponin  dapat  dideteksi  dengan  uji  busa dalam air panas, dilakukan dengan mengambil sampel  sebanyak  0,05  g  dan  dimasukkan dalam  tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan air  panas  20  mL  lalu  dikocok.  Hasil  uji  positif apabila  busa  yang  terbentuk  stabil  selama  30 menit  dan  tidak  hilang  pada  penambahan  1 tetes HCl 2N.

## Tanin
Uji  tanin  dilakukan  dengan mengambil  sampel yang  sudah  di  ekstrak  sebanyak  0,05  g ditambah dengan 20 mL air panas dan ditetesi FeCl3  1%  sebanyak  2  tetes.  Hasil  uji  positif apabila  larutan  berwarna  biru  atau  hijau kehitaman.

## Steroid atau Triterpenoid
Uji  steroid  atau  triterpenoid  dilakukan  dengan mengambil  sampel  yang  sudah  di  ekstrak sebanyak  0,05  g  dan  ditambah  dengan  2  mL kloroform  kemudian  ditetesi  asam  asetat sebanyak  5  tetes  dan  asam  sulfat  pekat  (H 2 SO 4 )  2N  sebanyak  3  tetes.  Hasil  uji  positif ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna merah kecokelatan untuk petama kali yang  kemudian  berubah  menjadi  biru  atau hijau.  Warna  biru  atau  hijau  pada  larutan menandakan adanya kandungan steroid sedangkan warna merah kecokelatan menandakan adanya kandungan triterpenoid.

## Fenol Hidrokuinon
Uji  fenol  hidrokuinon  dilakukan  dengan mengambil  sampel  yang  sudah  di  ekstrak sebanyak  0,05  g,  kemudian  dilarutkan  dalam 0,25  mL  etanol  70%.  Larutan  ditambahkan FeCl3  5%  sebanyak  2  tetes.  Hasil  uji  positif apabila terbentuk warna hijau atau hijau biru.

## Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan dengan metode peredaman  radikal  DPPH  mengacu  pada prosedur Handayani et al. (2020).
Pembuatan Larutan 1,1- diphenyl-2- picryhydrazyl (DPPH)
Larutan  1,1-  diphenyl-2-picryhydrazyl  (DPPH) dibuat dengan cara  menimbang DPPH sebanyak  5  mg  kemudian  dilarutkan  dengan menggunakan 100 mL pelarut metanol p.a (50 ppm).

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimal
Penentuan  panjang  gelombang  maksimum terhadap larutan DPPH dilakukan dengan cara mengukur  pada  panjang  gelombang  515  nm, kemudian  dari  hasill  pengukuran  ditentukan panjang gelombang maksimumnya.

## Pengukuran Blanko
Larutan  DPPH  (1,1-  diphenyl-2-picryhydrazyl) sebanyak 3,5 mL ditambahkan metanol p.a 0,5 mL kemudian diinkubasi selama 30 menit, lalu diukur pada panjang gelombang 515 nm.

## Pembuatan Larutan Sampel
Membuat  larutan  stok  1000  ppm  dengan  cara menimbang sampel ekstrak  n-heksan, metanol dan  akuades  masing-masing  sebanyak  10 mg dan  dilarutkan  dengan  metanol  p.a  dan dihomogenkan  lalu  dicukupkan  volumenya hingga 10 mL. Selanjutnya dilakukan pengenceran  masing-masing  larutan  stok dipipet  0,1  mL,  0,2  mL,  0,3  mL,  dan  0,4  mL sesuai dengan konsentrasi yang dibuat yaitu 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, dan 80 ppm. Kemudian dicukupkan  dengan  methanol  p.a  sampai volume akhir 5 mL.

## Pembuatan Larutan Pembanding
Membuat  larutan  stok  1000  ppm  dengan  cara menimbang  asam  askorbat  sebanyak  10  mg dan  dilarutkan  dengan  metanol  p.a  dan dihomogenkan  lalu  dicukupkan  volumenya hingga 10 mL. Selanjutnya dilakukan pengenceran    masing-masing  larutan  stok
dipipet 0,01 mL. 0,02mL, 0,03 mL, dan 0,04 mL sesuai dengan konsentrasi yang dibuat yaitu 20 ppm,  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm.  Kemudian dicukupkan dengan metanol p.a sampai volume akhir 5 mL.

## Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Sampel  pengujian  dilakukan  dengan  memipet 0,5 mL larutan sampel dari berbagai konsentrasi.
Kemudian masing-masing ditambahkan  3,5  mL  DPPH  50  ppm.  Larutan campuran  kemudian  di inkubasi  30 menit, lalu serapannya diukur menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm.  Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada asam askorbat sebagai baku pembanding.

## Perhitungan nilai IC 50
Persentase  inhibisi  radikal  DPPH  di  hitung dengan rumus:
Persen inhibisi = (Ao - As)/Ao X 100%..........(8)
Keterangan:
Ao: absorbansi blanko; As: absorbansi mengandung sampel dan DPPH
Nilai IC 50 merupakan bilangan yang menunjukkan  konsentrasi  sampel  uji  yang memberikan peredaman sebesar 50% (mampu menghambat  atau  meredam  proses  oksidasi sebesar  50%).  Nilai  IC 50 ditentukan  dengan cara  dibuat  kurva  linear  antara  konsentrasi larutan uji (sumbu x) dan % peredaman (sumbu y) dari persamaan y = a + bx dapat dihitung nilai IC 50 dengan menggunakan rumus :
IC 50 = (50-a)/b ………………..………………..(9)
Keterangan:
y:  %  inhibisi  (50);  a:  Intercept  (Perpotongan garis  di  sumbu  y);  b:  Skype  (Kemiringan);  x: Konsentrasi

## Analisis Data
Penelitian  ini  terdiri  dari  dua  perlakuan  yaitu rumput laut dari bahan basah dan bahan kering. Rancangan percobaan dalam penelitian adalah rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri dari dua  perlakuan  dengan  tiga  kali  ulangan.  Data yang  diperoleh  di  analisis  menggunakan  uji  T dengan taraf kepercayaan 5%. Uji fitokimia dan aktivitas antioksidan di analisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kandungan Proksimat Gracilaria sp.
Analisis  proksimat  pada  penelitian  ini  meliputi kadar air, kadar abu, kadar lemak, kadar serat
kasar,  kadar  protein  dan  kadar  karbohidrat. Kandungan  proksimat  rumput  laut Gracilaria sp.dapat dilihat pada tabel 1 .
Tabel 1 . Kandungan proksimat Gracilaria sp. Parameter Gracilaria sp. (Basah) Gracilaria sp. (Kering) Kadar air (%) 83,48±0,38 16,25±0,73 Kadar abu (%) 6,47±0,44 21,02±0,70 Kadar lemak(%) 0,36±0,21 0,09±0,07 Kadar serat kasar (%) 0,75±0,07 0,62±0,24 Kadar protein(%) 0,25±0,0 0,22±0,0 Kadar karbohidrat(%) 8,69±0,32 61,80±0,19 Sumber: Data primer,2021
Kadar  air  yang  didapatkan  pada  rumput  laut Gracilaria sp.  basah  sangat  tinggi  sebesar 83,48%, hal tersebut sesuai dengan penelitian Purwaningsih  dan  Deskawati  (2021)  yaitu 83,28%, dan lebih tinggi dibandingkan dengan hasil  penelitian  Musa et  al .,  (2017)  yaitu 71,77%.  Hasil  kadar  air Gracilaria sp.  kering sebesar  16,25%  lebih  tinggi  dibandingkan penelitian  Masrikhiyah,  (2021)  yaitu  sebesar 7,45%.  Hasil  penelitian  ini  berbeda  dengan beberapa  penelitian  tersebut  dikarenakan beberapa hal  seperti perlakuan yang berbeda, umur  rumput  laut  dan  habitat  tempat  rumput laut tumbuh.
Nilai kadar air kedua sampel pada penelitian ini masih  termasuk  dalam  kisaran  kadar  air  pada umumnya, hal ini didukung dengan pernyataan Kurniawati et  al., (2016)  yang  menyatakan bahwa kandungan air rumput laut segar, sama seperti tanaman pada umumnya yaitu berkisar antara  80-90%  dan  setelah  pengeringan dengan  udara  menjadi  10-20%.  Kadar  air Gracilaria sp.  basah  memiliki  nilai  yang  lebih tinggi  dibandingkan Gracilaria sp.  kering, dikarenakan  pada  proses  pengeringan  terjadi proses  penguapan  air  pada  sampel  yang diakibatkan  oleh  suhu  panas  (matahari). Diachanty et  al., (2017)  menyatakan  bahwa kandungan  air  pada  bahan  pangan  yang dikeringkan  akan  mengalami  penurunan  lebih tinggi  dan  menyebabkan  pemekatan  dari bahan-bahan  yang  tertinggal  salah  satunya mineral.  Perbedaan  nilai  kadar  air  yang didapatkan dalam suatu bahan segar diakibatkan  oleh  kondisi  lingkungan,  lama penyimpanan, suhu dan kelembaban (Yanuarti et al ., 2017).
Kadar  abu  dalam  rumput  laut  menunjukkan kandungan  total  mineralnya.  Kadar  abu  yang diperoleh  pada Gracilaria sp.  segar  sebesar 6,47%,  lebih  rendah  dibandingkan  penelitian (Musa et  al .,  2017)  20,78%  dan  penelitian (Masrikhiyah,  2021)  yaitu  sebesar  32,44%.
Hasil  kadar  abu Gracilaria sp.  kering  21,02%, lebih  tinggi  dibandingkan  pada  penelitian (Andiska et  al., 2019)  yaitu  sebesar  14,62%. Kadar  abu  pada  penelitian  ini  masih  sesuai dengan standarisasi yang ditentukan oleh FAO, dimana  kadar  abu  yang  dikatakan  baik  tidak lebih dari 40%. Kadar abu pada sampel kering lebih  tinggi  dibandingkan  pada  sampel  basah, karena  pada  proses  pengeringan  kandungan air  akan  menurun  dan  komponen-komponen lainnya akan meningkat.
Tingginya  kadar  abu  pada  rumput  laut berhubungan  dengan  kandungan  mineral, dimana  semakin  banyak  kandungan  mineral maka kadar abu semakin tinggi. Waluyo et al.,
(2019) menyatakan bahwa kandungan mineral tersebut  dapat  dipengaruhi  oleh  kondisi perairan  asal  rumput  laut  dibudidayakan, semakin lama rumput laut dibudidayakan maka kandungan abunya semakin meningkat karena mineral  yang  terserap  juga  akan  semakin banyak. Penyebab lainnya yaitu masih adanya sisa-sisa  karang  atau  pasir  yang  terbawa karena kurang bersih saat pencucian (Andiska et al., 2019).
Kadar  lemak  yang  diperoleh Gracilaria sp. segar pada penelitian ini sebesar 0,36%, lebih rendah  dibandingkan  penelitian  (Musa et  al ., 2017) yaitu sebesar 8,10%. Kadar lemak yang didapatkan pada sampel kering sebesar 0,09%, lebih  rendah  dibandingkan  penelitian  (Andiska et al ., 2019) yaitu 0,43%.
Kadar  lemak Gracilaria sp.  basah  lebih  tinggi dari Gracilaria sp.  kering,  namun  kedua  nilai tersebut  masih  dalam  kisaran  kadar  lemak rumput  laut  pada  umumnya.  Secara  umum, kadar  lemak  pada  semua  jenis  rumput  laut tergolong  rendah  yaitu  sekitar  0,9 –40  % (Masrikhiyah,  2021).  Rendahnya  kandungan lemak  tersebut  dikarenakan  rumput  laut  serta tanaman pada umumnya menyimpan cadangan  makanan  dalam  bentuk  karbohidrat terutama  polisakarida  (Yanuarti et  al .,  2017).
Kandungan lemaknya yang
rendah menyebabkan  rumput  laut  digunakan  sebagai salah  satu  bahan  penyusun  utama  pada makanan diet rendah lemak.
Kadar serat kasar yang diperoleh pada sampel basah Gracilaria sp. sebesar 0,75%, sedangkan  pada  sampel  kering  0,61%.  Kadar serat kasar yang diperoleh pada sampel kering lebih  rendah  dibandingkan  pada  penelitian (Jibrael et al., 2017) yaitu 7,62%.
Kadar  serat  kasar Gracilaria sp.  basah  lebih tinggi  dari Gracilaria sp.  kering,  namun keduanya  masih  rendah  dibandingkan  dengan kandungan  serat  rumput  laut  pada  umumnya yang  dapat  mencapai  30-40%,  dengan persentase  berat  kering  lebih  besar  daripada serat  larut  air.  Kadar  serat  kasar  pada  rumput laut bergantung pada spesies dan tempat hidup dari  rumput  laut  tersebut.  Rumput  laut Gracilaria  sp. mempunyai  kandungan  lemak sangat rendah dan kaya akan serat, oleh sebab itu  rumput  laut  ini  aman  dikonsumsi  dalam jumlah banyak (Jibrael et al., 2017).
Kadar  protein  yang  diperoleh  pada Gracialria sp.  segar  sebesar    0,25%,  lebih  rendah dibandingkan  penelitian  (Musa et  al .,  2017) yaitu  sebesar  3,95%. Gracilaria sp  kering didapatkan  sebesar  0,22%,  lebih  tinggi dibandingkan  pada  penelitian  (Jibrael,  2017), yaitu  sebesar  0,01%  dan  lebih  rendah dibandingkan  penelitian  (Andiska et  al .,  2019) yaitu 8,59%. Kadar protein Gracilaria sp. basah dan  kering  pada  penelitian  ini  sangat  rendah. Rendahnya kadar protein tersebut diperkirakan karena  rumput  laut  ini  merupakan  hasil budidaya  yang  lingkungannya  tidak  begitu bervariasi.
Kandungan protein pada rumput laut dipengaruhi oleh jenis dan daerah tumbuhnya. Rumput  laut  yang  berasal  dari  perairan  yang sama dapat ditemukan kandungan protein yang berbeda,  karena  kondisi  perairan  tempat tumbuhnya  bibit  rumput  laut  yang  ditanam dapat  mempengaruhi  kandungan  protein, misalnya unsur hara nitrat dan fosfat. (Jibrael et al., 2017).  Perubahan  kandungan  nitrat  dan fosfat  pada  rumput  laut Gracilaria  sp. dapat menyebabkan  perubahan  kandungan  protein pada sel rumput laut.
Kadar karbohidrat yang diperoleh Gracilaria sp. segar sebesar 8,69%, lebih rendah dibandingkan  penelitian  (Purwaningsih  dan Deskawati,  2021)  yaitu  sebesar  11,09%, Gracilaria sp.  kering  sebesar  61,79%,  lebih rendah dibandingkan penelitian (Andiska et al ., 2019)  67,19%,  dan  (Jibrael et  al., 2017) 14,84%. Kadar karbohidrat Gracilaria sp. basah lebih  rendah  dari Gracilaria sp.  kering. Perbedaan  tersebut  dapat  disebabkan  dari jumlah  beberapa  komponen  proksimat lainnya seperti kadar air, kadar abu, protein, lemak, dan serat  kasar  pada  sampel  kering  lebih  rendah daripada  sampel  basah  sehingga  jumlah karbohidrat  yang  terkandung  dalam  sampel dapat diukur dengan melihat perbedaan jumlah pada beberapa komponen tersebut.

## Kandungan senyawa bioaktif Gracilaria sp.
Senyawa  bioaktif  merupakan  bagian  dari senyawa  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan dari rumput laut. Komponen bioaktif dari rumput laut didapatkan dengan menggunakan metode ekstraksi yaitu maserasi dengan cara merendam  sampel  dengan  pelarut  organik seperti  n-heksana,  akuades  dan  metanol. Kandungan  senyawa  bioaktif Gracilaria sp. dapat dilihat pada tabel 2 . Tabel 2 . Kandungan senyawa bioaktif Gracilaria sp.
Parameter Solvent N M A Alkaloid - - - Flavonoid - - - Fenol Hidroquinon - + - Saponin - + + Steroid - + - Triterpenoid - - - Tanin - - - Note: N= n-hexane, M= methanol, A= akquades. Hasil  analisis  fitokimia  pada  penelitian  ini menunjukkan
bahwa Gracilaria sp. mengandung  komponen  bioaktif  antara  lain fenol  hidrokuinon,  saponin  dan  steroid.  Hasil analisis fitokimia ekstrak Gracilaria sp. dengan pelarut  n –heksan  tidak  menunjukkan  adanya kandungan senyawa bioaktif. Hasil uji
memperlihatkan  ekstrak Gracilaria sp.  dengan pelarut  metanol  memiliki  komponen  bioaktif paling banyak yaitu fenol hidrokuinon, saponin dan  steroid,  sedangkan  ekstrak Gracilaria sp. menggunakan  pelarut  akuades  menunjukkan adanya senyawa saponin. Senyawa yang tidak terdeteksi dikarenakan sampel yang digunakan
pada  penelitian  ini  dalam  kondisi  basah  serta konsentrasinya  kurang  pekat  masih  banyak kandungan air didalamnya sehingga pada saat proses  maserasi  pelarut  yang  digunakan  tidak dapat melarutkan komponen senyawa- senyawa lainnya secara optimal. Hal ini sesuai dengan pendapat Kurniawati et al., (2016) yang menyatakan bahwa faktor yang mempengaruhi hasil  maserasi  adalah  jenis  pelarut,  lama perendaman  dan  kepekatan  jenis  pelarut. Penggunaan  pelarut  merupakan  hal  paling berpengaruh  dalam  mempengaruhi  kepekatan atau penentuan senyawa yang akan terdeteksi, dimana aturan umum dari polaritas adalah polar menyukai yang polar sebaliknya yang non polar menyukai non polar (Kurniawati et al., 2016).
Senyawa  fenol  hidrokuinon  pada  penelitian ini terdeteksi  pada  pelarut  metanol,  dimana metanol merupakan pelarut yang bersifat semi polar,  maka  dari  itu  bebas  berikatan  dengan non  polar  ataupun  polar  (Edison et  al., 2020). Hal  ini  sesuai  pernyataan  Kurniawati et  al.,
(2016)  bahwa  senyawa  fenol  cenderung  larut dalam senyawa polar.
Kandungan  senyawa  steroid  memiliki  bagian non polar dan polar sehingga dapat ditarik oleh pelarut  non  polar  maupun  polar  seperti  pada penelitian  ini  terdeteksi  pada  pelarut  metanol yang bersifat semi polar. Hal ini sesuai Nome et al., (2019)  menyatakan  bahwa  steroid  dapat ditemukan pada ekstrak metanol dan etil asetat. Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid  dan  steroid  dapat  digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat.
Kandungan  senyawa  saponin  pada  penelitian ini  terdeteksi  pada  ekstrak  metanol  dan akuades  karena  saponin  merupakan  senyawa glikosida  yang  tidak  larut  dalam  pelarut  non polar, sehingga senyawa tersebut mudah larut dalam senyawa polar seperti akuades. Perbedaan kepolaran pelarut merupakan salah satu faktor yang menyebabkan tidak terdeteksinya  saponin  pada  ekstrak  dengan pelarut non polar seperti n-heksan (Purwaningsih dan Deskawati, 2021).
Kandungan  senyawa  bioaktif Gracilaria sp. pada  penelitian  ini  berbeda  dengan  hasil penelitian Purba et al., (2019) yang menjelaskan  bahwa Gracilaria sp.  memiliki komponen bioaktif yaitu alkaloid,  fenol, saponin, flavonoid dan triterpenoid, sedangkan pada  penelitian  Amaranggana  dan  Wathoni, (2017)  menyatakan  bahwa Gracilaria sp. mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, tanin,  dan  fenol  yang  memiliki  aktivitas antioksidan juga sebagai antibakteri.
Perbedaan  kandungan  senyawa  fitokimia beberapa  jenis  rumput  laut  kemungkinan dipengaruhi  beberapa  hal  seperti  jenis  atau spesies  yang  berbeda,  tempat  hidup,  musim dan beberapa faktor lain. Hal ini sesuai dengan Julyasih  dan  Putu,  (2020)  menyatakan  bahwa kandungan  senyawa  fitokimia  dipengaruhi berbagai faktor yaitu spesies, varietas, kondisi pertumbuhan, variasi musim, metode pengolahan dan penyimpanan. Faktor lingkungan, seperti lokasi budidaya, ketinggian, suhu,  waktu  paparan  sinar  matahari,  curah hujan,  iklim,  dan  tanah  dapat  mempengaruhi metabolit primer dan sekunder suatu tanaman.

## Aktivitas antioksidan Gracilaria sp.
Analisis  aktivitas  antioksidan Gracilaria sp . menggunakan metode DPPH (1,1- diphenyl-2- picryhydrazyl)  dengan  menggunakan  asam askorbat sebagai larutan pembanding. Aktivitas antioksidan  ditunjukkan  dengan  nilai  IC 50 , dimana  nilai  IC 50 menyatakan  besarnya konsentrasi  larutan  sampel  yang  dibutuhkan untuk mereduksi  radikal  bebas  DPPH  sebesar 50%. Zat atau bahan yang mempunyai aktivitas antioksidan  tinggi,  akan  mempunyai  nilai  IC 50 yang  rendah.  Hasil  aktivitas  antioksidan Gracilaria sp. dapat dilihat pada tabel 3 .
Tabel 3. Aktivitas antioksidan Gracilaria sp.
Solvent Antioxidant activity IC 50 (ppm) Asam askorbat 347,45 n-heksan 457,94 Metanol 308,19 Akuades 407,10
Figure 1. Relationship of inhibition and ascorbic acid.
Uji aktivitas antioksidan penelitian ini mengguanakan larutan pembanding yaitu asam askorbat  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  347,45 ppm. Nilai tersebut menunjukkan bahwa asam askorbat  memiliki  aktivitas  lemah  dalam kemampuannya sebagai antioksidan.
y = 0,0451x + 34,33 R² = 0,9994 35 35,5 36 36,5 37 37,5 38 38,5 0 20 40 60 80 100 In h ib is i (%) Concentration (ppm)
Figure 2. Relationship of inhibition and n- hexane.
Figure 3. Relationship of inhibition and methanol.
Figure 4 . Relationship of inhibition and aquades.
Nilai aktivitas antioksidan ekstrak Gracilaria sp. dengan  pelarut  n –heksan  diperoleh  sebesar 457,94  ppm,  metanol  sebesar  308,19  ppm, akuades sebesar 407,10 ppm. Nilai IC 50 ekstrak Gracilaria sp. pelarut metanol lebih rendah dari nilai  IC 50 larutan  standar  asam  askorbat, dimana  nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa ekstrak Gracilaria sp.  memiliki aktivitas antioksidan  yang  lebih  kuat  dibandingakan dengan  larutan  standar,  sedangkan  nilai  IC 50 ekstrak Gracilaria sp. dengan pelarut n-heksan dan  akuades  lebih  tinggi  dari  nilai  IC 50 asam askorbat,  artinya  aktivitas  antioksidan  ekstrak n-heksan  dan  akuades  lebih  lemah  dari  asam askorbat.  Penelitian  lain  yang  dilakukan Purwaningsih  dan  Deskawati,  (2020)  aktivitas antioksidan  ekstrak Gracilaria sp.  dengan
pelarut n –heksan mempunyai nilai IC 50 sebesar 109,12  ppm  yang  tergolong  aktivitas  sedang. Penelitian  Widowaty,  (2020) menunjukkan bahwa ekstrak metanol Gracilaria sp. mempunyai nilai IC 50 sebesar 221,76 ppm yang tergolong aktivitas lemah.
Aktivitas  antioksidan  terbaik  terdapat  pada ekstrak Gracilaria sp. dengan  pelarut metanol, hal  ini  sesuai  dengan  kandungan  komponen bioaktif  pada  penjelasan  sebelumnya,  yaitu ekstrak metanol mengandung fenol hidrokuinon,  saponin  dan  steroid  yang  dapat berfungsi  sebagai  antioksidan.  Nilai IC 50 tinggi menunjukkan  aktivitas  antioksidan  semakin lemah  dan  begitu  pula  sebaliknya.  Aktivitas antioksidan  sangat  kuat  apabila  memperoleh nilai IC 50 50-100 ppm, kuat 101-250 ppm, lemah 251-500  ppm  dan  sangat  lemah  >500  ppm (Edison et al ., 2020).
Ketiga  ekstrak  pada  penelitian  ini  tergolong sangat  lemah,  hal  ini  diduga  karena  sampel yang  diuji  berupa  ekstrak  kasar.  Mekanisme kerja antioksidan ekstrak kasar diduga dihambat  karena masih  terdapatnya  senyawa- senyawa  lain  seperti  garam,  mineral,  dan nutrien-nutrien  lainnya.  Aktivitas  antioksidan suatu bahan juga dipengaruhi oleh tipe pelarut, metode  ekstraksi,  musim,  lokasi,  dan  jenis spesies (Edison et al., 2020).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Kandungan proksimat dari rumput laut Gracilaria sp.  kaya  akan  kadar  abu  dalam bentuk  segar  dan  kering,  sedangkan  jumlah lemak dan proteinnya sangat rendah.
Kandungan  bioaktif  yang  terdapat  dalam ekstrak Gracilaria sp.  dengan  pelarut  yang berbeda  menghasilkan  beberapa  senyawa yaitu  fenol  hidrokuinon,  saponin  dan  steroid. Senyawa  fenol  hidrokuinon  dan  steroid terdeteksi  pada  pelarut  metanol,  sedangkan saponin  terdeteksi  pada  pelarut  metanol  dan akuades.  Aktivitas  antioksidan  terbaik  pada penelitian  ini  terdapat  pada  ekstrak Gracilaria sp.  dengan  pelarut  metanol,  hal  ini  sesuai dengan kandungan komponen bioaktifnya yang paling  banyak  dibandingkan  pelarut  lainnya yaitu  ekstrak  metanol  mengandung  fenol hidrokuinon,  saponin  dan  steroid  yang  dapat berfungsi sebagai antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amaranggana,  L.,  dan  Wathoni,  N.  (2017).
Manfaat alga merah (Rhodophyta) sebagai  sumber  obat  dari  bahan  alam. Farmasetika.Com (Online) , 2 (1), 16.
Andiska, P. W., Susanto, A., dan Pramesti, R.
y = 0,0306x + 35,987 R² = 0,9776 36 36,5 37 37,5 38 38,5 39 0 50 100 In h ib is i (%) Concentration (ppm) y = 0,0548x + 33,111 R² = 0,9072 34 35 36 37 38 0 20 40 60 80 100 In h ib is i (%) Concentration (ppm) y = 0,0403x + 33,594 R² = 0,7833 34 34,5 35 35,5 36 36,5 37 0 50 100 In h ib is i (%) Concentration (ppm)
(2019).  Hasil  kandungan  agar  ekstraksi non-alkali Gracilaria sp.  yang  tumbuh  di lingkungan  berbeda. Journal  of  Marine
Research , 8 (4), 387 –392.
Diachanty,  S.,  Nurjanah,  N.,  dan  Abdullah,  A. (2017).  Antioxidant  activities  of  various brown  seaweeds  from  seribu  islands. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 20 (2), 305.
Edison, E., Diharmi, A., Ariani, N. M., dan Ilza, M.  (2020).  Komponen  bioaktif  dan aktivitas antioksidan ekstrak kasar
Sargassum
plagyophyllum . Jurnal
Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia , 23 (1), 58 –66.
Hernanto, A., Sri R. dan Restiana, W. A. (2015). Pertumbuhan budidaya rumput laut ( Eucheuma  cottoni dan Gracilaria sp.) dengan  metode  long  line  di  perairan pantai Bulu Jepara. Journal of Aquaculture Management and Technology , 4 (2), 60 –66.
Jibrael, N. B. A., Junet, F. C. dan  Theresia, P. E.  S.  (2017).  Analisis  kandungan  nutrisi Gracilaria  edule (s.g.  Gmelin)  p.c.  Silva dan Gracilaria  coronopifolia j.  Agardh untuk pengembangan perekonomian
masyarakat pesisir. Jurnal Ilmu Kesehatan , 5 (2), 0 –6.
Julyasih,  K.  S.  M.,  dan  Putu,  N.  L.  M.  (2020). Komponen  fitokimia  makro  alga  yang diseleksi  dari  pantai  Sanur  Bali. Jurnal Seminar Nasional Riset Inovatif , 28 –31. Kurniawati,  I.,  Maftuch,  dan  Hariati,  A.  M. (2016).  Penentuan  pelarut  dan  lama ekstraksi  terbaik  pada  teknik  maserasi Gracilaria sp. Serta pengaruhnya terhadap  kadar  air  dan  rendemen.
Samakia: Jurnal Ilmu Perikanan , 7 (2), 72 – 77.
Loho,  R.  E.  M.,  Tiho,  M.,  Assa,  Y.  A.  (2021). Kandungan  dan  aktivitas  antioksidan pada  rumput  laut  merah. Medical  Scope Jurnal (MSJ) . 3 (1), 113 –120.
Maftuhah,  dan  Amanatuz,  Z.  (2012).  Kajian pemasaran rumput  laut (Eucheuma
Cottoni) studi  kasus  Desa  Tanjung,
Pademawu, Pamekasan).
Agriekonomika , 1 (2).
Masrikhiyah,  R.  (2021).  Aktivitas  antioksidan dan total fenolik rumput laut Gracilaria sp. Kabupaten  Brebes:  Antioxidant  Activity and Total Phenolic Of Seaweed Gracilaria sp. from Brebes. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 24 (2), 236 –242.
Musa,  S.,  Sanger, G.,  dan  Dien,  H.  A.  (2017).
Komposisi  kimia,  senyawa  bioaktif  dan angka  lempeng  total  pada  rumput  laut Gracilaria  edulis . Jurnal  Media  Teknologi Hasil Perikanan. 5(3), 184 –189.
Nome,  W.,  Salosso,  Y.,  dan  Crisca,  B.,  E.
(2019).  Analisis  metabolit  sekunder  dan kandungan  nutrisi  dari  makroalga  hijau (chlorophyceae) di Perairan Teluk
Kupang. Jurnal Aquatik. 2 (1), 12 –55.
Purba, N. E., Suhendra, L.,  dan Wartini, N. M.
(2019). Pengaruh suhu dan lama ekstraksi dengan cara maserasi terhadap karakteristik  pewarna  dari  ekstrak  alga merah  ( Gracilaria sp.). Jurnal  Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri , 7 (4), 488.
Purwaningsih,  S.,  dan  Deskawati,  E.  (2020).
Karakteristik  dan  aktivitas  antioksidan rumput  laut Gracilaria sp.  asal  Banten.
Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 23 (3), 503 –512.
Waluyo, Aef, P. dan Norma Aprilia Fanni, A. S.
(2019).  Quality  analisys  of  seaweed Gracilaria  verrucosa in  Karawang  district ponds,  West  Java. Jurnal  Grouper . 10(April), 32 –41. Widowaty, W.,  Setiawan,  Y.,  dan  Perdana, W. W.  (2020).  Aktivitas  antioksidan  ekstrak metanol Gracilaria sp. . dan Ulva Sp. dari Pantai  Sayang  Heulang. Agroscience . 10 (2), 203 –209.
Yanuarti,  R.,  Nurjanah,  N.,  Anwar,  E.,  dan Pratama, G. (2017). Kandungan senyawa penangkal  sinar  ultra  violet  dari  ekstrak rumput  laut Eucheuma  cottonii dan Turbinaria conoides . Biosfera , 34 (2), 51.