Abstrak—Yeast merupakan mikroorganisme uniseluler eukaryotik yang bersifat saprofit atau parasit serta memiliki sifat antimikroba dan lebih bisa tahan terhadap stres lingkungan. Eksplorasi  yeast  di  kawasan mangrove indonesia  belum banyak dilakukan, terutama di daerah rhizofer Rhizophora mucronata Wonorejo.  Penelitian ini bertujuan  untuk mengidentifikasi yeast dari rhizosfer R. Mucronata  Wonorejo hingga tingkat genus. Yeast diidentifikasi berdasarkan karakteristik morfologi makroskopis dan mikroskopis, reproduksi seksual, serta ciri fisiologis dan biokimianya. Pada penelitian ini diperoleh 19 isolat yang diidentifikasikan ke dalam 6 genus, yakni  Candida, Saccharomyces, Pichia, Hansenula, Debaryomyces, dan Torulaspora.
Kata Kunci—Yeast, rhizosfer, R. Mucronata, Wonorejo.

## I. PENDAHULUAN
EAST  merupakan  mikroorganisme golongan fungi yang berbentuk uniseluler, bersifat eukariotik, dan hidup sebagai saprofit atau parasit [1]. Bentuk sel yeast bermacam- macam, yaitu bulat, oval, silinder atau batang, segitiga melengkung, berbentuk botol, bentuk apikulat atau lemon, membentuk pseudomiselium  [2]. Yeast dapat tumbuh dalam larutan yang pekat, misalnya dalam larutan gula, garam, dan asam yang berlebih. Yeast mempunyai sifat antimikroba sehingga dapat menghambat pertumbuhan bakteri dan kapang. Adanya sifat-sifat tahan terhadap stres lingkungan (gula, garam, dan asam berlebih) menjadikan yeast dapat bertahan atau bersaing dengan mikroorganisme lain [3].
Rhizosfer merupakan  daerah yang ideal untuk pertumbuhan mikroorganisme tanah yang umumnya didominansi oleh bakteri, aktinomicetes, dan fungi  [4]. Rhizosfer kaya akan eksudat yang dikeluarkan oleh tanaman melalui proses sekresi akar. Kandungan eksudat antara lain karbohidrat, asam amino, asam organik, enzim, dan senyawa-senyawa lain [5]–[6]. Mikroorganisme  termasuk yeast dapat  memanfaatkan eksudat melalui proses dekomposisi. Dekomposisi eksudat oleh mikroorganisme menghasilkan energi dan senyawa prekursor. Senyawa prekursor ini dapat dimanfaatkan oleh mikroorganisme dan tanaman [7].
Kawasan mangrove Wonorejo merupakan bagian dari kawasan  Pantai Timur Surabaya (Pamurbaya)  yang terletak di Kecamatan Rungkut, Kotamadya Surabaya pada koordinat
7 o 18’19.45”S - 7 o 19’17.73”S dan 112 o 50’41.84”T - 112 o 50’16.96”T. Daerah ini terletak di antara dua muara, yaitu muara sungai Wonokromo dan muara sungai Wonorejo [8].
Salah satu jenis tanaman  mangrove yang sering dijumpai di kawasan mangrove Wonorejo adalah Rhizophora mucronata [8].  Beberapa penelitian telah dilakukan untuk mengeksplorasi genus  yeast pada kawasan mangrove. Pada penelitian ini  akan dilakukan isolasi dan identifikasi yeast dari rhizosfer R.
Mucronata Wonorejo.

## Isolasi dan Identifikasi Yeast dari Rhizosfer

## Rhizophora mucronata Wonorejo
Naning Widiastutik dan Nur Hidayatul Alami
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia e-mail : nur_hidayatul@bio.its.ac.id
Y Tabel 1.
Karakteristik morfologi koloni Kode isolat
Morfologi koloni Bentuk Tekstur Warna Permukaan Elevasi Tepi RI.1 Filamen Butyrou s Putih Kusam Datar Filamen RI.2 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.3 Filamen Butyrou s Krem Kusam Timbul Filamen RI.4 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.5 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.6 Filamen Butyrou s Putih Kusam Datar Filamen RI.7 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.8 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.9 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RI.10 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata RII.1 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata RII.2 Bundar Butyrou s Krem Kusam Datar Berombak RII.3 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata RII.4 Bundar Butyrou s Krem Kusam Datar Berombak RIII.1 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RIII.2 Filamen Butyrou s Putih Kusam Timbul Filamen RIV.1 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata RIV.2 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata RIV.3 Bundar Butyrou s Putih Kusam Timbul Rata

## II. METODE PENELITIAN

## A. Pembuatan medium
Pada  penelitian ini menggunakan mediaYMB ( Yeast Malt Extract )  (3 g ekstrak yeast , 3 g ekstrak malt, 5 g pepton, dan 10 g glukosa  dalam 1 liter akuades), YMEA ( Yeast Malt Extract Agar ) (3 g ekstrak yeast , 3 g ekstrak malt, 5 g pepton, 10 g glukosa, dan 20 g agar  dalam 1 liter akuades), media Corn Meal Agar (CMA)-Tween 80 (12,5 g tepung jagung kuning, 10 ml Tween 80 dan 3,8 g agar dalam 300 ml akuades), media fermentasi gula ( trypticase ( protease peptone ) 10 g, beef extraxt 1 g, NaCl 5 g, glukosa/sukrosa/maltosa/galaktosa/laktosa 10 g, dan fenol red 0,025 g dalam 1 liter akuades), dan media Christensen’s urea agar (1 g pepton, 1 g glukosa, 5 g NaCl, 2 g KH 2 PO 4 , dan 0,012 g fenol red dalam 1 liter akuades).

## B. Isolasi
Sampel yeast diambil dari tanah rhizosfer tanaman mangrove R.  mucronata Wonorejo. Tanah diambil menggunakan cetok pada kedalaman 0-10 cm dari permukaan tanah. Tanah sampel diambil 10 g dan dimasukkan ke dalam 90 ml air fisiologis, diaduk rata dan diendapkan selama ± 5 menit. Kemudian 10 ml supernatan diambil dan dimasukkan ke dalam 40 ml media YMB, lalu diinkubasi pada rotary shaker selama 4 hari. Selanjutnya dilakukan pengenceran bertingkat sampai pengenceran 10 -5 . Dari setiap pengenceran diambil 100 µl dan dinokulasikan pada media padat YMEA  pada cawan. Selanjutnya diinkubasi selama 3 hari dan diamati

## pertumbuhannya.

## C. Purifikasi
Purifikasi untuk memperoleh isolat murni dilakukan dengan memilih koloni yang tumbuh dominan yang memiliki karakteristik morfologi koloni berbeda dari yang lainnya. Kemudian dilakukan inokulasi pada media padat baru menggunakan metode 16 streak  plate . Setelah diperoleh isolat murni, ditumbuhkan pada media agar miring dan selanjutnya dilakukan uji identifikasi hingga tingkat genus.

## D. Identifikasi Hingga Tingkat Genus
Identifikasi yeast hingga  tingkat  genus terdiri atas berbagai uji, yaitu:

## Pengamatan morfologi makroskopis
Pengamatan morfologi makroskopis merupakan pengamatan morfologi koloni pada saat isolasi dan purifikasi, meliputi bentuk, tekstur, warna, permukaan, elevasi dan tepi.

## Pengamatan morfologi mikroskopis
Pengamatan ini merupakan pengamatan sel yeast meliputi bentuk sel, ukuran, budding (pertunasan), ada tidaknya hifa atau pseudohifa, dan tipe spora yang diperoleh dari isolate yang diinokulasikan pada media cair YMB dan media Corn Meal Agar -Tween 80 ( slide culture ).

## Uji pertumbuhan pada media cair
Uji ini untuk mengamati  ciri pertumbuhan  isolat yeast pada media cair  YMB, seperti keberadaan cincin, pelikel pada permukaan media, serta endapan pada dasar media (sedimen) [9].

## Uji askospora
Pewarnaan askospora dilakukan dengan metode modifikasi Schaeffer-Fulton’s  dengan menggunakan pewarna malachite green 0,5% dan pewarna pembanding safranin 0,5%. Askospora dewasa akan berwarna hijau, sedangkan sel vegetatif akan tampak merah [10].

## Uji kapsul
Pewarnaan kapsul dilakukan dengan membuat olesan ( smear ) pada kaca obyek. Kemudian ditetesi Kristal violet selama ± 5 menit  lalu dibilas dengan larutan CuSO 4 .  Kapsul tampak sebagai lingkuran biru pucat yang mengelilingi sel berwarna ungu [10].

## Uji fermentasi gula
Gula yang digunakan adalah glukosa, sukrosa, maltosa, galaktosa, dan laktosa.  Isolat diinokulasikan pada media fermentasi gula dan diamati perubahannya setiap hari sampai hari ke tujuh. Hasil positif jika terjadi perubahan warna  pada media menjadi kekuningan [11].

## Uji urease
Isolate diinokulasikan pada media Agar Base Urea (Christensen’s urea agar) dan diamati selama 7 hari. Jika yeast positif menghasilkan urease, media akan berubah warna dari

## Tabel 2. Karakteristik morfologi mikdrokopis
Kode isolat Morfologi mikroskopis Bentuk sel Pertunasan Ukuran (µm) Hifa Tipe dan jumlah spora RI.1 Oval memanjang Multilateral (1-3) x (3- 14) Pseudohifa - RI.2 Bulat, oval Multilateral (2,5-6,5) x (3-7) Pseudohifa Askospora (1-4) RI.3 Oval Multilateral (1-2) x (2- 21) Pseudohifa Askospora (1-4) RI.4 Bulat, oval Multilateral (2-6,5) x (2,5-8) Pseudohifa Askospora (1-4) RI.5 Bulat, oval Multilateral (2,5-6) x (3-6,5) Hifa dan Pseudohifa Blastospora dan Askospora (1-3) RI.6 Oval memanjang Multilateral (2-5) x (4- 6,5) Pseudohifa Askospora (2-4) RI.7 Oval memanjang Multilateral (2-5) x (3- 14) - Askospora (1-4) RI.8 Bulat, oval Multilateral (1,5-6) x (2,5-6) - Askospora (1-2) RI.9 Bulat, oval Multilateral (2-6) x (3- 8) Pseudohifa Askospora (1-2) RI.10 Bulat Multilateral (1-4) x (1- 4,5) - Askospora (1-2) RII.1 Bulat Multilateral (1-3) x (1- 3,5) - Askospora (1-2) RII.2 Oval memanjang Multilateral (1,5-4) x (2,5-8,5) - Askospora (1-2) RII.3 Bulat, oval Multilateral (1,5-3) x (2-5,5) Hifa dan Pseudohifa Blastospora dan Askospora (2-4) RII.4 Oval memenjang Multilateral (1,5-3) x (3-10) - Askospora (2-4) RIII.1 Bulat, oval Multilateral (2-5,5) x (3,5-7) Pseudohifa Askospora (1) RIII.2 Bulat, oval Multilateral (1,5-6) x (3-6,5) - Askospora (1-3) RIV.1 Bulat Multilateral (2-5,5) x (2-6) - Askospora (1-3) RIV.2 Bulat Multilateral (2-5) x (2- 5,5) - Askospora (1-3) RIV.3 Bulat Multilateral (2-5,5) x (3-5,5) - Askospora (1-3)
kuning menjadi merah keunguan [10].

## III. HASIL DAN DISKUSI
Yeast yang diperoleh sebanyak 19 isolat dengan karakteristik makroskopis dan mikroskopis, reproduksi seksual, serta cirri fisiologis dan biokimia.
Berdasarkan  Tabel 1  dapat dilihat bahwa semua isolat memiliki beberapa ciri morfologi koloni yang sama, yaitu tekstur butyrous berwarna putih hingga krem dengan permukaan yang kusam. Namun beberapa di antaranya memiliki bentuk, tepi dan elevasi koloni yang berbeda. Isolat RI.1 hingga RI.9 memiliki karakteristik koloni yang hampir sama, yaitu bentuk dan tepi filamen  dengan elevasi timbul. Tetapi dua di antaranya memiliki perbedaan dengan elevasi
datar, yaitu isolat RI.1 dan RI.6. Karakteristik morfologi koloni yang sama juga dimiliki oleh isolat RIII.1 dan RIII.2 dengan bentuk dan tepi filamen  serta elevasi timbul.  Selain bentuk koloni yang filamen, juga ditemukan bentuk koloni yang bundar, yaitu isolat RI.10, semua isolat RII dan semua isolat RIV yang hampir semuanya memiliki tepi rata dan elevasi timbul, kecuali isolat RII.2 dan RII.4 yang memiliki tepi berombak dan elevasi datar.
Pada Tabel 2 dapat dilihat bahwa semua isolat memiliki cara reproduksi aseksual yang sama, yaitu dengan  pertunasan multilateral. Bentuk sel isolat ada yang oval memanjang yang dimiliki oleh isolat RI.1, RI.3, RI.6, RI.7, RII.2, dan RII.4 dengan ukuran sel secara berurutan (1-3)x(3-14) µm, (1-2)x(2- 21) µm,  (2-5)x(4-6,5) µm, (2-5)x(3-14) µm, (1,5-4)x(2,5-8,5) µm, dan (1,5-3)x(3-10) µm. Dua bentuk sel sekaligus dalam satu isolat, yakni bulat dan oval dimiliki oleh isolat RI.2, RI.4, RI.5, RI.8, RI.9, RII.3, RIII.1, dan RIII.2 dengan ukuran sel secara berturut-turut  (2,5-6,5)x(3-7) µm, (2-6,5)x(2,5-8) µm, (2,5-6)x(3-6,5) µm, (1,5-6)x(2,5-6) µm, (2-6)x(3-8) µm, (1,5- 3)x(2-5,5) µm, (2-5,5)x(3,5-7) µm, dan (1,5-6)x(3-6,5) µm. Bentuk sel bulat dimiliki oleh isolat RI.10, RII.1, RIV.1, RIV.2 dan RIV.3 dengan ukuran sel masing-masing (1-4)x(1-4,5) µm, (1-3)x(1-3,5) µm, (2-5,5)x(2-6) µm, (2-5)x(2-5,5) µm, dan (2- 5,5)x(3-5,5) µm. Beberapa isolat mampu membentuk pseudohifa, yaitu isolat RI.1, RI.2, RI.3, RI.4, RI.5, RI.6, RI.9, RII.3, dan RIII.1. Dua di antara isolat yang membentuk pseudohifa juga dapat membentuk blastospora, yaitu isolat RI.5 dan RII.3. Dari hasil uji askospora menunjukkan bahwa hampir semua isolat yang diperoleh termasuk dalam yeast Ascomycetes, yakni golongan yeast yang dapat membentuk
askospora kecuali isolat RI.1. Jumlah askospora dalam satu askus tiap isolat pun berbeda-beda, seperti pada isolat RI.2, RI.3, RI.4, dan RI.7 yang memiliki 1-4 askospora dalam satu askus. Isolat RI.6, RII.3 dan RII.4 memiliki 2-4 askospora dalam satu askus. Isolat RI.5, RIV.1, RIV.2, dan RIV.3 memiliki 1-3 askospora dalam satu askus. Isolat RI.8, RI.9, RI.10, RII.1, dan RII.2 memiliki 1-2 askospora dalam satu askus. Dan isolat RIII.1 hanya memiliki 1 askospora dalam satu askus.
Berdasarkan hasil uji fisiologis dan biokimia pada Tabel  3 dapat dilihat bahwa semua isolat tidak ada yang memiliki kapsul. Pada uji urease yang menunjukkan hasil positif menghasilkan urease adalah isolat RI.1, RI.3, RI.6, RI.7, RI.10, RII.1, RII.2, RII.3, RII.4, RIV.1, RIV.2, dan RIV.3.
Tabel 3.
Hasil uji kapsul, uji urease, uji fermentasi gula, dan uji pertumbuhan pada media cair
Kode isolat Uji kapsul Uji urease Uji fermentasi gula Ciri pertumbuhan pada media cair
Glu Suk Mal Gal Lak RI.1 - + + - - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RI.2 - - + + + + - Tumbuh di dasar
dan ada endapan berwarna putih RI.3 - + + - - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RI.4 - - + + + + - Tumbuh di dasar
dan ada endapan berwarna putih RI.5 - - + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RI.6 - + + - - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RI.7 - + + - - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RI.8 - - + + + + - Tumbuh di dasar
dan ada endapan berwarna putih
RI.9 - - + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RI.10 - + + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RII.1 - + + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RII.2 - + + + - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RII.3 - + + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RII.4 - + + - - - - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RIII.1 - - + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih RIII.2 - - + + + + - Tumbuh di dasar dan ada endapan berwarna putih
RIV.1 - + + + + + - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RIV.2 - + + + + + - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih RIV.3 - + + + + + - Tumbuh di permukaan dan ada endapan berwarna putih Gambar. 1. Hasil identifikasi genus Candida .
Pada uji fermentasi gula, semua isolat tidak ada yang mampu mengfermentasi gula laktosa. Isolat RI.I, RI.3, RI.6, RI.7, dan RII.4 hanya mampu mengfermentasi gula glukosa. Isolat RI.2, RI.4, RI.5, RI.8, RI.9, RI.10, RII.1, RII.3, RIII.1, RIII.2, RIV.1, RIV.2, dan RIV.3 mampu mengfermentasi gula glukosa, sukrosa, maltosa, dan galaktosa. Sedangkan isolat RII.2 mampu melakukan fermentasi pada gula glukosa dan sukrosa. Pada uji pertumbuhan pada media cair,  isolat RI.I, RI.3, RI.6, RI.7, RII.2, RII.4, RIV.1, RIV.2, dan RIV.3 tumbuh di permukaan dan didasar membentuk endapan putih pada media cair. Sedangkan isolat RI.2, RI.4, RI.5, RI.8, RI.9, RI.10, RII.1, RII.3, RIII.1, dan RIII.2 hanya tumbuh di dasar membentuk endapan berwarna putih pada media cair. Yeast oksidatif tumbuh membentuk lapisan (film) atau pelikel pada kultur cair, sedangkan yeast fermentatif biasanya tumbuh di seluruh kultur cair [12].
Yeast diidentifikasi  berdasarkan karakteristik morfologi makroskopis dan mikroskopis, reproduksi seksual, serta ciri fisiologis dan biokimianya.  Menurut  buku  “ The Yeast A Taxonomic Study ” [10] isolat-isolat yang diperoleh berasal dari genus Candida , Saccharomyces , Pichia , Hansenula , Debaryomyces , dan Torulospora .

## Genus Candida
Genus Candida memiliki bentuk sel bervariasi dari bulat, oval, silindris hingga memanjang, jarang apikulat, ogival, triangular atau bentuk botol dengan atau tanpa pseudohifa. Reproduksi aseksual dengan pertunasan multilateral. Genus Candida tidak membentuk askospora, arthrospora, teliospora, atau pun ballistospora, tetapi klamidospora mungkin terbentuk pada beberapa spesies. Tidak memiliki pigmen karotenoid sehingga berwarna putih hingga krem. Beberapa spesies Candida dapat melakukan fermentasi, dan beberapa yang lain tidak  [10].  Karakteristik ini dimiliki oleh isolate RI.1 yang memiliki warna koloni putih, bentuk sel oval memanjang, bereproduksi secara pertunasan multilateral, dan mampu melakukan fermentasi gula glukosa. Pada uji askospora,  tidak dijumpai adanya askospora sehingga diduga isolat ini termasuk yeast imperfekti yang belum diketahui reproduksi seksualnya. Tidak adanya kapsul dan pseudohifa menguatkan dugaan bahwa isolat ini termasuk ke dalam genus Candida seperti terlihat pada Gambar 1.

## Genus Saccharomyces
Genus Saccharomyces memiliki sel berbentuk bulat, elips atau silindris dengan mungkin membentuk pseudohifa tapi tidak untuk hifa. Reproduksi aseksual dengan pertunasan multilateral dan secara seksual dengan askospora (1-4 atau lebih per askus). Pada media cair tidak membentuk pelikel atau cincin serta mampu melakukan fermentasi dengan cepat [10].  Isolat RI.2, RI.4, RI.8, RI.9, RIII.1, dan RIII.2 memiliki bentuk bulat oval, terlihat adanya pseudohifa dan askospora (1-4 per askus), dan bereproduksi dengan pertunasan multilateral. Isolat-isolat ini mampu melakukan fermentasi dengan cepat pada gula glukosa  dan sukrosa  yang hasilnya sudah terlihat pada hari kedua setelah inokulasi dan tidak membentuk pelikel atau cincin pada media cair sehingga diduga kuat isolat-isolat ini termasuk genus Saccharomyces seperti terlihat pada Gambar 2.

## Genus Pichia
Genus Pichia memiliki bentuk sel bulat, elips atau memanjang, sering membentuk  pseudohifa  namun sangat
Gambar. 2. Hasil identifikasi genus Saccharomyces .
Gambar. 3. Hasil identifikasi genus Pichia .
Gambar. 4. Hasil identifikasi genus Hansenula .
Gambar. 5. Hasil identifikasi genus Debaryomyces .
jarang membentuk true hifa. Reproduksi aseksual dengan pertunasan multilateral  dan secara seksual dengan askospora (1-4 per askus). Pada beberapa spesies mungkin membentuk arthrospora.  Genus ini mungkin atau tidak melakukan fermentasi gula [10]. Karakteristik mikroskopis yang sama juga dijumpai pada isolat RI.3, RI.6, RI.7, RII.2, dan RII.4 seperti yang diperlihatkan pada Gambar  3. Isolat-isolat ini memiliki bentuk sel oval memanjang, bereproduksi dengan pertunasan multilateral  dan membentuk askospora (1-4 per askus), serta mampu melakukan fermentasi pada gula glukosa. Karakteristik yang menonjol pada isolat ini adalah hanya terlihat adanya pseudohifa tanpa adanya true hifa.

## Genus Hansenula
Genus Hansenula memiliki bentuk sel bulat, elips atau memanjang dengan true hifa atau pseudohifa mungkin terbentuk. Reproduksi aseksual dengan pertunasan multilateral dan secara seksual dengan askospora (1-4  per askus). Genus ini mungkin atau tidak melakukan fermentasi gula [10].  Isolat RI.5 dan RII.3  memiliki bentuk sel bulat oval, bereproduksi dengan  pertunasan multilateral, mampu mengfermentasi gula glukosa, sukrosa, maltosa, dan galaktosa, namun tidak bisa pada gula laktosa.  Karakteristik yang menguatkan isolat ini termasuk dalam genus Hansenula adalah terlihatnya pseudohifa dan true hifa seperti pada Gambar 4 di bawah ini.

## Genus Debaryomyces
Genus Debaryomyces memiliki sel berbentuk bulat, oval sampai silindris  dengan atau tanpa pesudohifa. Reproduksi aseksual dengan pertunasan multilateral  dan secara seksual dengan membentuk askospora yang biasanya berjumlah  1-2 atau  bisa  lebih sampai 4 per askus  pada beberapa spesies. Genus ini cenderung lamban atau lemah dalam fermentasi [10]. Karakteristik mikroskopis yang sama juga dimiliki oleh isolat RI.10 dan RII.1  yang dapat dilihat pada Gambar  5, yaitu sel berbentuk bulat oval, tidak terlihat adanya pseudohifa, dan memiliki askus yang berisi 1-2 askospora. Karakteristik yang paling menonjol adalah kemampuan isolat RI.10 dan RII.1 yang sangat lambat dalam fermentasi gula. Hal ini terbukti pada hasil uji fermentasi sukrosa, pada isolat lainnya perubahan media dari merah menjadi kuning sudah terlihat setelah 2 hari inokulasi, namun pada isolat RI.10 dan RII.1 baru terlihat pada hari keempat.

## Genus Torulaspora
Genus Torulospora memiliki bentuk sel bulat  atau  elips dengan pseudohifa mungkin terbentuk tapi tidak membentuk hifa. Reproduksi  aseksual  dengan pertunasan multilateral dan secara seksual dengan askospora (1-4 per askus). Genus ini mampu melakukan fermentasi dengan cepat [10]. Isolat RIV.1, RIV.2, dan RIV.3  memiliki bentuk sel bulat, tidak memiliki hifa, bereproduksi dengan pertunasan multilateral dan memiliki askospora berjumlah 1-4 per askus. Isolat-isolat ini mampu melakukan fermentasi dengan cepat seperti pada genus Saccharomyces , bedanya genus Saccharomyces tidak membentuk pelikel atau cincin pada media cair, sedangkan isolat-isolat ini membentuk pelikel atau cincin pada media cair seperti pada Gambar 6.

## IV. KESIMPULAN/RINGKASAN
Kesimpulan dari penelitian  ini adalah genus yeast yang ditemukan berasal dari genus Candida , Saccharomyces , Pichia , Hansenula , Debaryomyces, dan Torulaspora.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis N.W. mengucapkan terima kasih kepada Kementrian Agama  Republik Indonesia yang telah memberikan dukungan finansial melalui program Penerima Beasiswa Santri Berprestasi  2009-2014,  Ibu Nur Hidayatul Alami, S.Si, M.Si selaku  dosen pembimbing,  Ibu Dr. rer. nat. Ir. Maya Shovitri, M.Si, selaku Ketua Jurusan Biologi, FMIPA, ITS Surabaya, serta Tim dosen penguji Ibu Dra. Nurlita Abdulgani, M.Si, Ibu N.D Kuswytasari, S.Si, M.Si, dan Ibu Tutik Nurhidayati, S.Si, M.Si. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada ayahanda dan ibunda, adik-adik serta keluarga tercinta atas kasih sayang dan doanya, teman-teman seperjuangan satu jurusan Biologi ITS 2009, teman satu angkatan PBSB 2009 dan Pramuka ITS, serta seluruh pihak yang telah membantu  dalam proses penyelesaian penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] S. Sumarsih. Mikrobiologi Dasar .  Yogyakarta: Jurusan Ilmu Tanah, Fakultas Pertanian UPN Veteran (2003).
[2] S. Fardiaz. Mikrobiologi Pangan 1 . Jakarta: Gramedia Pustaka Utama (1992).
[3] D. O. Satife, A. Rahmawati and M. Yazid . Potensi Yeast pada Pengurangan Konsentrasi Uranium dalam Limbah Organik TBP-Kerosin yang Mengandung Uranium. Prosiding Seminar Nasional Teknologi Pengelolaan Limbah IX. Pusat Teknologi Limbah Radioaktif-BATAN. Universitas Sultan Ageng Tirtayasa. ISSN (2012) 1410-6086.
[4] W.  Meng, C. Jia-Kuan and L. Bo.  Characterization of bacterial community structure and diversity in rhizosphere soils of three plants in rapidly changing salt marshes using 16S rDNA. Pedosphere ,  Vol.17, No.5 (2007) 545–556.
[5] R. E. Hoagland and R. D. Williams. The Influence of Secondary Plant Compounds on The Associations of Soil Microorganisms and Plant Roots . In The Chemistry of Allelopathy. Biochemical Interactions among Plants. Washington D. C: American Chemical Society (1985) 301–325.
[6] S. A. Cheema, M. I. Khan, X. Tang, C. Zhang, C. Shen, Z. Malik, K. Shen, X. Chen and Y. Chen. Enhancement of phenanthrene and pyrene
Gambar. 6. Hasil identifikasi genus Torulaspora .
degradation in rhizosphere of tall fescue ( Festuca arundinacea ). Journal of Hazardous Materials , Vol. 166 (2008) 1226-1231.
[7] Kartasapoetra, A. G., M. M. Sutedjo and R. D. S. Sastroatmodjo . Mikrobiologi Tanah . Jakarta: Rineka Cipta (1991).
[8] A.  N. Prasetya. Struktur Komunitas Mangrove di Daerah Wonorejo
Pantai Timur Surabaya. Skripsi . Surabaya: UNAIR (2011).
[9] T.  Nurhariyati. Keanekaragaman khamir pendegradasi minyak hasil isolasi dari Pelabuhan Tanjung Perak Surabaya. Berk. Penel. Hayati , Vol. 9 (2004) 87-91.
[10] Kreger-van Rij,  N.  J.  W. The Yeast: A Taxonomic Study . Amsterdam: Elsevier Science Publisher B. V. (1987).
[11] Harley, J. P. a nd L. M. Prescott. Laboratory Exercise in Microbiology. 5 th edition. New York: McGraw-Hill Education (2002).
[12] Frazier, W. C. Food Microbiology . New York: Mc-Graw Hill Book Company (1986).