## JURNAL VOICE OF MIDWIFERY
Volume 08 Nomor 01 Maret 2018 Halaman 734 - 743 IDENTIFIKASI SALMONELLA TYPHI PADA PENDERITA DEMAM TIFOID DI PUSKESMAS MALILI
Identification Of Salmonella typhi To Typhoid Fever Suspect In Malili Public Health Center

## Marhani
Dosen Tetap Yayasan AKBID Muhammadiyah Palopo Alamat Korespondensi : Jl. Durian no.68 Kota Palopo Hp. 081242172231 Email : marhani_mikro14@yahoo.co.id.

## ABSTRACT
The  success  of  epidemiological  survey  of Salmonella  is  associated  with  procedures  adopted to  differentiate  the  genotypes  of  Salmonella  typhi. The  research  aimed  identification  of  Salmonella typhi  from  the  blood  culture  of  typhoid  fever suspect.  The  research  was  conducted  in  the Microbiology  Laboratory,  Faculty  of  Medicine, Hasanuddin  University.  Samples  were  taken  from Public health centers (PHC) in Malili. This was an analytic  quantitative  research  with  the  cross sectional  approach.  Samples  were  collected  from the  blood  of  the  patients  with  suspected    positive typhoid fever suspects. The  samples were cultured to  obtain    S.typhi  isolates  finally  the  data  were analysed.  The  research  result  indicates  that  in  the culture  examination,  the  isolation  result  of  the Salmonella  typhi  from  the  blood  samples  of  98 patients,  its  obtained  20  (20.4%)  positive  typhoid fever  samples.  This  show  that  successfull identification  of  Salmonella  typhi  still  lower.  This is depend of several  factor such as using antibiotic before  take  of  blood,  limited  used  of  isolation media, total of   less  bacteria  in  blood, less  volume of blood and time to take of blood not exactly.
Keywords  : Salmonella  typhi, isolation,  typhoid fever.

## ABSTRAK
Demam  tifoid  adalah  infeksi  sistemik  yang disebabkan  oleh Salmonella  typhi .  Demam  ini menjadi  penyebab  penting  dari  penyakit  dan kematian  dengan  kejadian  infeksi  secara  global yaitu 21,6 juta dan sekitar 200.000 kematian setiap tahunnya  dari  demam  tifoid  (Bhutta,  2006). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi Salmonella  typhi dari  kultur  darah  pasien  demam tifoid.  Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Hasanuddin.  Sampel  diambil  di  Puskesmas  yang ada  di  Malili.  Penelitian  ini  adalah  penelitian kuantitatif  secara analitik dengan pendekatan cross sectional.  Sampel  yang  dikumpulkan  adalah  darah pasien  suspek  demam  tifoid  yang  positif.  Sampel dikultur  untuk  mendapatkan  isolat S.typhi lalu dilakukan analisis data. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada pemeriksaan kultur, hasil isolasi Salmonella  typhi dari  sampel  darah  98 pasien  demam  tifoid    diperoleh  20  sampel  positif. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tingkat  keberhasilan identifikasi S.typhi masih  rendah.  Hal ini tergantung  dari  beberapa  faktor  seperti  adanya penggunaan antibiotik sebelum pengambilan darah, keterbatasan  media  isolasi  yang digunakan,  jumlah bakteri  yang  sangat  minimal  dalam  darah,  volume darah    yang  tidak  mencukupi  dan  waktu pengambilan darah yang tidak tepat.
Kata Kunci : Salmonella typhi , isolasi, demam tifoid

## Artikel Penelitian

## PENDAHULUAN
Demam  tifoid  atau typhoid  fever merupakan  penyakit  infeksi  dan  menjadi masalah  serius  di  dunia.  Di  Indonesia penyakit ini adalah suatu penyakit endemis dengan  angka  kejadian  termasuk  yang tertinggi,  yaitu  antara  358-810/100.000 penduduk/tahun (Nurtjahyani, 2007).
Salmonella typhi adalah bakteri gram negatif  yang  menyebabkan  demam  tifoid yang merupakan penyakit infeksi sistemik, bersifat  endemik  dan  masih  menjadi problem kesehatan berbagai negara, bermunculannya galur yang resisten antibiotik, lambatnya diagnosis dan belum ada  vaksin  yang  benar-benar  efektif, sehingga  menyebabkan  kasus  demam tifoid  di  Indonesia  cukup  tinggi  (Hatta dkk., 2011).
Sulawesi  Selatan  merupakan  salah satu propinsi di Indonesia dengan prevalensi  demam  tifoid  yang  cukup tinggi. Berdasarkan data Depkes RI (2007) dalam  Hatta  dan  Ratnawati,  (2008),  pada tahun  1991  terdeteksi  257/100.000  kasus demam  tifoid  dan  meningkat  menjadi 386/100.000 tahun 2007.
Penyakit  ini  dilaporkan  endemik  di 24  kabupaten  di  Sulsel  dan  merupakan penyakit  infeksi  terbanyak  keempat  dari lima  penyakit  menular  di  Sulsel  selain influenza,  diare,  TBC  dan  pneumonia. Penyakit ini merupakan penyebab terpenting  terjadinya  septikemia  terkait komunitas,  dengan  insiden  rate  yang dilaporkan melebihi 2500/100.000 penduduk  (Dinas  Kesehatan  Prop.Sulsel, 2009).
Resistensi  obat  pada  demam  tifoid ini  merupakan  suatu  hal  yang  serius  di Indonesia  ,  karena  dibutuhkan  obat pengganti  yang  cukup  mahal  untuk  terapi tifoid.  Sebuah  usaha  serius  diperlukan dengan pelayanan medis untuk mendapatkan diagnosis yang benar sehingga  pengobatan  atau  vaksinasi  dapat digunakan untuk mengendalikan
penyebaran resistensi obat-obatan tifoid ini (Hatta dkk., 2008).
Penderita  demam  tifoid  atau  karier tifoid merupakan sumber penularan kuman S.typhi ,  oleh  karena  itu  kontak  langsung dengan  penderita  atau  karier  sangat  erat hubungannya dengan proses infeksi kuman Salmonella.  Umumnya  penularan  kuman S.typhi paling sering melalui makanan dan minuman yang terkontaminasi feses manusia.Penularan  melalui  air  minum yang  tercemar  kuman S.typhi disebabkan karena  sanitasi  yang  kurang  baik  atau secara langsung melalui penyebaran fekal- oral  karena  hygiene  yang  jelek,  terutama terjadinya  di  negara-negara  berkembang (Hatta and Smith, 2007).
Berdasarkan  uraian  tersebut  di  atas, maka  pada  penelitian  ini  dilakukan identifikasi Salmonella  typhi terhadap penderita demam tifoid. Hal ini menunjukkan  bahwa  perlu  dilakukan identifikasi S.typhi khususnya  di  Malili masih  sangat  terbatas,  oleh  karena  itu penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui identifikasi S. typhi pada penderita demam tifoid di Malili.

## TINJAUAN PUSTAKA

## 1. Demam Tifoid
Istilah  demam  tifoid  atau  biasa disebut  demam  enterik  merupakan karakteristik  untuk  infeksi Salmonella typhi dan  cenderung  lebih  berat dibandingkan
dengan infeksi Salmonella yang lain (Cleary, 2000). Tahun 1829 Pierre Louis (Prancis)  mengeluarkan  istilah  typhoid atau typhus (Yunani = typhos). Terminologi ini dipakai untuk penderita yang mengalami demam disertai kesadaran  terganggu.  Pada  tahun  1884 Gaffky  berhasil  membiakkan S.  typhi dan  memastikan  bahwa  penularannya melalui  air    dan  bukan  udara.  Tahun 1896  Widal  menemukan  salah  satu metode  untuk  diagnosis  demam  tifoid (Darmowandowo, 2003).
Demam  tifoid  termasuk  penyakit menular yang tercantum dalam Undang-Undang  Nomor  6  Tahun  1962 tentang  wabah.  Kelompok  penyakit menular  ini  merupakan  penyakit  yang
mudah  menular  dan  dapat  menyerang banyak orang sehingga dapat menimbulkan wabah (Widodo, 2006).
2. Epidemiologi  dan  Distribusi  Demam Tifoid
Demam tifoid merupakan penyakit  infeksi  akut  dan  bersifat endemis yang disebabkan oleh Salmonella typhi yang termasuk bakteri gram  negatif  berbentuk  basil  dan bersifat  patogen  intrasellular  obligat pada manusia yang menginfeksi makrofag  dan  sel  Schwann.(Kwenang, 2007).
Menurut data WHO (2003) memperkirakan lebih dari 16 juta kasus demam tifoid terjadi setiap tahunnya di seluruh  dunia  dengan  angka  kematian lebih  dari  16  juta  jiwa  dan  kebanyakan insiden  ini  terjadi  di  negara-negara berkembang  di  kawasan  Asia  dan Afrika. Demam tifoid merupakan penyakit  sistemik  yang  mengancam nyawa, karena menginvasi usus halus.Menurut World Health Organization diperkirakan  terjadi  17 juta  kasus  demam  tifoid  per  tahun  dan 600  ribu  diantaranya  berakhir  dengan kematian.Sekitar  70%  dari  seluruh kasus  kematian  itu  menimpa  penderita demam tifoid di Asia (Maskalyk, 2003).
Center  for  Disease  Control  and Prevention Indonesia melaporkan prevalensi demam tifoid mencapai 358-
810/100.000  populasi  pada  tahun  2007 dengan  64%  penyakit  ditemukan  pada usia 3-19 tahun dan angka mortalitasnya  bervariasi  antara  3,1- 10,4% pada pasien rawat inap
(Handjoeno, 2001).
Center  for  Disease  Control  and
Prevention Indonesia melaporkan
prevalensi demam tifoid mencapai 358- 810/100.000  populasi  pada  tahun  2007 dengan  64%  penyakit  ditemukan  pada usia 3-19 tahun dan angka mortalitasnya  bervariasi  antara  3,1- 10,4% pada pasien rawat inap (Handjoeno, 2001).
Demam  tifoid  sudah  menjadi endemik  di  Indonesia,  penyakit  ini
termasuk penyakit menular yang tercantum dalam Undang-Undang No. 6 tahun  1962  tentang  wabah.  Walaupun demam  tifoid  tercantum  dalam  UU wabah  dan  wajib  dilaporkan,  data  yang lengkap  belum  ada  sehingga  gambaran epidemiologisnya belum diketahui secara pasti (Santoso, 2003).
Penyakit  ini  dilaporkan  endemik di  24  kabupaten  di  Sulsel  dan merupakan  penyakit  infeksi  terbanyak keempat  dari  lima  penyakit  menular  di Sulsel  selain  influenza,  diare,  TBC  dan pneumonia.  Penyakit  ini  merupakan penyebab terpenting terjadinya
septikemia  terkait  komunitas,  dengan insiden  rate  yang  dilaporkan  melebihi 2500/100.000 penduduk (Dinas
Kesehatan Prop.Sulsel, 2009).

## 3. Penularan/transmisi
Penyebaran  penyakit  ini  terjadi sepanjang  tahun  dan  tidak  tergantung pada iklim, tetapi lebih banyak dijumpai  di  negara-negara  sedang berkembang  di  daerah  tropis,  hal  ini disebabkan  karena  penyediaan  air bersih, sanitasi lingkungan dan kebersihan  individu  yang  masih  kurang baik  oleh  karena  itu  pencegahan penyakit demam  tifoid mencakup sanitasi  dasar  dan  kebersihan  pribadi, yang  meliputi  pengolahan  air  bersih, penyaluran air dan pengendalian limbah, penyediaan fasilitas cuci tangan,  pembangunan  dan  pemakaian WC,  merebus  air  untuk  keperluan minum dan pengawasan terhadap penyedia makanan (Ivanov, 1998).
Sumber  penyebaran Salmonella typhi di populasi dapat melalui lingkungan  yang  tercemar.  Daya  tahan hidup S.typhi di alam bebas seperti air, tanah  atau  pada  bahan  makanan  dapat bertahan hidup lebih lama. Dalam feses di luar tubuh manusia, bakteri ini dapat bertahan  hidup  antara  1-2  bulan. Sedangkan  dalam  air  susu  dapat berkembang  biak  dan  hidup  lebih  lama sehingga  sering  merupakan  faktor utama penularan penyakit demam tifoid (Widodo, 2006).
Penderita  demam  tifoid  atau karier tifoid merupakan sumber penularan  kuman S.typhi ,  oleh  karena itu  kontak  langsung  dengan  penderita atau  karier  sangat  erat  hubungannya dengan proses infeksi kuman Salmonella  typhi.  Umumnya  penularan kuman S.typhi paling  sering  melalui makanan dan minuman yang
terkontaminasi feses manusia.
Penularan  melalui  air  minum  yang tercemar  kuman S.typhi disebabkan karena  sanitasi  yang  kurang  baik  atau secara  langsung  melalui  penyebaran fekal-oral  karena  hygiene  yang  jelek, terutama  terjadinya  di  negara-negara berkembang (Hatta and Smith, 2007).

## 4. Patogenesis
Demam  tifoid  adalah  penyakit
demam  akut  yang  disebabkan  oleh bakteri Salmonella  typhi .  Penyakit  ini khusus  menyerang  manusia,  bakteri  ini ditularkan melalui makanan dan minuman  yang  terkontaminasi  oleh kotoran  atau  tinja  dari  seseorang pengidap atau penderita demam tifoid.
Salmonella typhi penyebab demam  tifoid  masuk  kedalam  tubuh manusia, setelah masuk kedalam tubuh, bakteri S.  typhi menuju  kesaluran pencernaan dan melekat pada sel fagosit mononuclear  (makrofag  dan  monosit).
Sel  pagosit  ini  merupakan  sel  dari sistem  imun  yang  bekerja  untuk membunuh  bakteri  dan  virus  pathogen yang masuk ke dalam tubuh.
Namun, S. typhi mampu mempertahankan  dan  memperbanyak diri  dalam  sel  ini.  Karena  kemampuan S.  typhi bertahan  dalam  sel  maka bakteri ini digolongkan ke dalam parasit fakultatif  intraselluler.    Ada  sebagian bakteri  yang  dihancurkan  oleh  asam lambung  dan  sebagian  lagi  masuk  ke usus  halus  dan  mencapai  jaringan limfoid  plak  peyer  dipusat  ileum  yg mengalami hipertrofi (Everest 2001, De Witt 2002).

## 5. Gejala Klinis
Masa inkubasi demam tifoid rata- rata 7-20 hari. Inkubasi terpendek 3 hari dan  terlama  60  hari.  Masa  inkubasi  ini mempunyai  korelasi  dengan  jumlah kuman  yang  tertelan,  umur,  status  gizi dan status imunologik penderita.
Gejala  klinik  yang  timbul  sangat bervariasi dari ringan atau asimptomatik  sampai  berat.  Perbedaan ini  tidak  saja  ditemukan  antar  negara, tetapi juga daerah yang sama dari waktu ke  waktu.  Gambaran  klinik  sangat bervariasi  dari  yang  ringan  sampai penyakit  yang  khas  disetai  komplikasi dan  kematian.  Hal  ini  menyebabkan seorang ahli mengalami kesulitan untuk membuat diagnosis klinik demam tifoid (Widodo, 2006).

## 6. Diagnosis Demam Tifoid
Beberapa faktor penyebab demam tifoid masih menjadi masalah kesehatan penting  di  negara  berkembang  meliputi keterlambatan penegakan diagnosis pasti.  Penegakan  diagnosis  demam tifoid  saat  ini  dilakukan  secara  klinis dan  melalui  pemeriksaan  laboratorium. Diagnosis  demam  tifoid  secara  klinis tidak  tepat  karena  tidak  ditemukannya gejala  yang  sama  pada  beberapa penyakit  lain  terutama  pada  minggu pertama sakit.
Hal  ini  menunjukkan  perlunya pemeriksaan  penunjang  laboratorium untuk  konfirmasi penegakan  diagnosis demam  tifoid.  Akan  tetapi  di  daerah- daerah dimana pemeriksaan laboratorium  bakteriologi  dan`serologis sulit  dilakukan  sehingga  diagnosis hanya  ditegakkan  atas  dasar  gejala  dan tanda  klinis  yang  ada.  Oleh  karena  itu maka ketajaman pengenalan gejala serta tanda  klinis  sangat  penting  untuk memastikan  diagnosis  demam  tifoid (Hatta et al , 2002).
Metode  serologi  yang  biasa  digunakan dalam  diagnosis  demam  tifoid  antara lain :
A. Uji Widal Reaksi  widal  adalah  suatu reaksi serum (sero-test) untuk
mengetahui  ada  tidaknya  antibodi terhadap Salmonella  typhi dengan jalan  mereaksikan  serum  seseorang dengan  antigen  O;  H  dan  Vi  di laboratorium.  Bila  terjadi  aglutinasi, dikatakan  reaksi  Widal  positif  yang berarti serum orang tersebut mempunyai antibody terhadap Salmonella typhi , baik setelah vaksinasi, setelah sembuh dari penyakit    typhus  atau  yang  sedang menderita  typhus.  Reaksi  Widal negatif artinya tidak memiliki antibody  terhadap Salmonella  typhi . Reaksi widal dipakai untuk menegakkan diagnosa penyakit demam  tifoid. Peninggian titer agglutinin  O  menunjukkan  adanya infeksi  yang aktif;  peninggian  titer agglutinin H menunjukkan disebabkan  vaksinasi;  peninggian titer  agglutinin  Vi  menunjukkan karier (Entjang, 2003).
Pemeriksaan serologi yang masih  dikerjakan  pada  pasien  yang dirawat  dengan  demam  typhoid  di Rumah Sakit adalah tes Widal. Nilai diagnostik  tes  Widal  adalah  melihat adanya  kenaikan  titer  antibodi  yang bermakna  dalam  darah  terhadap antigen O (somatik) dan/atau antigen H  (flagellar)  Salmonella  enterica serotype typhi pada 2 kali pengambilan spesimen
serum dengan  interval  waktu  10-14  hari (Mulyawan, dkk., 2004).
Tes  Widal  merupakan  tes aglutinasi  yang  digunakan  dalam diagnosis  serologi  penyakit  demam typhoid atau demam enterik (Sridhar, 2009).
Tes  Widal  mengukur  level
aglutinasi  antibodi  terhadap  antigen
O (somatik) dan antigen H (flagellar).  Level  tersebut  diukur dengan  menggunakan  dilusi  ganda serum  pada  tabung  tes.Biasanya,
antibodi  O  terlihat  pada  hari  ke  6-8 dan  antibodi  H  terlihat  pada  hari  ke 10-12  setelah  munculnya  gejala penyakit demam typhoid.
Tes  biasanya  dilakukan  pada serum akut (serum yang pertama kali diambil  saat  pertama  kali  kontak dengan  pasien).  Minimal  harus didapatkan  1  ml  darah  untuk mendapatkan  jumlah  serum  yang cukup.
Tes Widal memiliki sensitifitas dan spesifisitas rendah. Tes ini dapat memberikan  hasil  negatif  sampai 30% dari pembuktian tes kultur yang positif penyakit demam typhoid. Hal ini  disebabkan  karena  pemberian terapi antibiotik sebelum pemeriksaan  dapat  menumpulkan respon antibody (WHO, 2003).
Prinsip tes Widal adalah pasien dengan  demam  typhoid  atau  demam enterik  akan  memiliki  antibodi  di dalam serumnya yang dapat bereaksi dan beraglutinasi dilusi ganda.(Sridhar, 2009).
Pada  daerah  endemis  demam typhoid  sering  ditemukan  level antibodi  yang  rendah  pada  populasi normal.  Penentuan  diagnosis  yang tepat  untuk  hasil  positif  dapat menjadi sulit pada area yang berbeda (WHO, 2003).
Oleh  karena  itu,  penting  untuk menetapkan  level  antibodi  pada populasi  normal  di  daerah  atau  area khusus supaya penentuan nilai ambang  batas  atas  titer  antibodi signifikan.  Hal  tersebut  khususnya penting jika hanya ada sampel serum akut tanpa ada sampel serum periode convalescence untuk pengetesan Widal (Kulkarni, 2007).
B. ELISA
(Enzyme Linked Immunosorbent Assay) ELISA adalah
suatu pengujian  yang  melibatkan  enzim dan  yang  penting  dalam  teknik  ini adalah  uji  kadar  immunosorbent terikat  enzim.  ELISA  digunakan untuk  melacak  antibodi  terhadap antigen S.typhi .  Keragaman  terbesar dalam merancang ELISA  dapat  dilihat  dalam pemilihan konyugat dan substratnya.
Berbagai enzim telah tersedia, enzim ini  mengikat  secara  langsung  ke antibodi  atau  antigen  atau  secara tidak langsung melalui biotin/ streptavidin. Uji ini digunakan untuk imunodiagnosa  infeksi  oleh  virus dan  antigen  microbial  lain.  Selain itu, metode ini juga dapat digunakan untuk  mendeteksi  anti  lipopoli- sakarida dan anti flagellum IgG pada demam  tifoid  (Baratawidjaja,  1996; House, 2001).

## C. Uji dipstick
Tes  dipstik Salmonella adalah tes yang dapatdipercaya untuk
mendeteksi  antibodi  IgM  spesifik terhadap  antigen  lipopolisakarida (LPS)  dari Salmonella  typhi dan Salmonella paratyphi , yang
didasarkan  atas  ikatan  antara  IgM spesifik. Salmonella  typhi dengan LPS  tanpa  membutuhkan  peralatan dan  keterampilan  khusus  serta  dapat diterapkan di perifer.
Hasil  positif  dipstick  secara bermakna  lebih  tinggi  daripada kultur  darah.  Berdasarkan  hasil penelitian  Hatta et  al .  tahun  2002, dilaporkan  bahwa  spesifitas  uji Dipstik  mencapai  100%,  sedangkan sensitivitasnya  diperlukan  5-7  hari untuk  dapat  mendeteksi  antibodi tersebut  hingga  92,9%.  Dipstick mengandung  2  pita  horizontal;  pita antigen  mengandung  antigen S.typhi dan pita kontrol .
Sejak  ditemukannya  teknik dalam  bidang  biologi  molekuler yaitu    penggunaan  enzim  untuk menggandakan  DNA,  maka  reaksi rantai  polymerase  atau  Polymerase Chain  Reaction  (PCR)  merupakan satu-satunya  teknik  yang  dapat dipakai untuk melacak DNA S.typhi .
Dengan  ditemukannya  tes  PCR berdasarkan  sekuen  unik  region  VI dari  Hi-d  atau  Hi-j  gen  flagellin S.typhi dapat  memberi  kemungkinan dikembangkannya  teknik  -  teknik untuk  mendiagnosis  karier  tifoid  di Inggris (Frankel, 1989).

## 7. Morfologi Salmonella typhi
Salmonellae adalah  basil  gram negative  tidak  berkapsul,  ukurannya bervariasi  antara  1-3,5  µm  x  0,5  -  0,8 µm,  besar  koloni  rata-rata  2-4  mm, tidak berspora, motil dengan menggunakan peritrichous flagella (flagella  perithrik)  kecuali  S.pullorum dan  S.gallinarum.    Bakteri  ini  biasanya memproduksi  H2S,  tetapi  hampir  tidak pernah  memfermentasikan  laktosa  atau sukrosa.
Bakteri ini juga dapat membentuk asam  dan  kadang-kadang  gas  dari glukosa  dan  mannosa  (Brooks,  et  al., 2002).

## 8. Klasifikasi Salmonella typhi
Klasifikasi  Salmonella  typhi  menurut Garrity  (2000)  dalam  Bergey’s  Manual of Systematic Bacteriology.
Kingdom  : Procaryotae
Phylum  : Proteobacteria
Class : Gammaproteobacteria Ordo : Enterobacteriales Family : Enterobacteriaceae Genus : Salmonella
Spesies  : Salmonella typhi
9. Fisiologi Salmonella typhi S.  typhi adalah  bakteri  yang berdasarkan  kebutuhan  oksigen  bersifat fakultatif  anaerob,  membutuhkan  suhu optimal  37 o C  untuk  pertumbuhannya, memfermentasikan D- glukosa menghasilkan asam tetapi tidak membentuk  gas,  oksidase  negatif, katalase  positif,  tidak  memproduksi indol  karena  tidak  menghasilkan  enzim tryptophanase  yang  dapat  memecah tryptophan  menjadi  indol,  methyl  red (NIIR)  positip  menunjukkan  bahwa fermentasi glukosa menghasilkan sejumlah  asam  yang  terakumulasi  di dalam  medium  sehingga  menyebabkan pH  medium  menjadi  asam  (pH=4,2), dengan penambahan indikator metyl red maka  warna  medium  menjadi  merah.
Voges-Proskauer(VP)  negatif,  citrat negatif,  menghasilkan  H2S  yang  dapat ditunjukkan  pada  media  TSIA  (Triple Sugar lron Agar).
Bakteri  menghasilkan  H2S  yang merupakan  produk  hasil  reduksi  dari asam  amino  yang  mengandung  sulfur, H2S  yang  dihasilkan  akan  bereaksi dengan  garam  Fe  dalam  media  yang kemudian menjadisenyawa FeS berwarna hitam yang mengendap dalam media.  Urease  negatip,  nitrat  direduksi menjadi  nitrit,  lysin  dan  ornithin dekarboksilase positip, laktosa, sukrosa, salisin  dan  inositol  tidak  difermentasi, Uji ONPG negatif karena tidak menghasikan enzim betha galaktosidase sehingga bakteri tidak dapat memfermentasikan laktosa, oleh karena itu  strain  bakteri S.typhi termasuk anggota familia enterobacteriaceae yang bersifat tidak memfermentasikan laktosa  (non  lactosa  fermenter  ),  Iipase dan
deoksiribonuklease tidak diproduksi  (Koneman,  et  al.  1992; Talaro et al.,2002).

## 10. Struktur Antigen
S.typhi adalah  bakteri  enterik yang bersifat gram negatip,
mempunyai  antigen  permukaan  yang cukup komplek dan mempunyai peran penting  dalam  Proses  patogenitas, selain  itu  juga  berperan  dalam  proses terjadinya  respon  imun  pada  individu yang  terinfeksi.  Antigen  permukaan tersebut  terdiri  dari  antigen  flagel (antigen H), antigen somatik (antigenO)  dan  antigen  kapsul  atau antigen Vi (Darmawati, 2009).

## BAHAN DAN METODE
1. Lokasi dan Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian ini menggunakan metode kuantitatif analitik  dengan  pendekatan    cross sectional, dilaksanakan di Laboratorium Imunologi  dan  Biologi  Molekuler, Fakultas Kedokteran,
Universitas Hasanuddin, Makassar.

## 2. Populasi dan Sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini adalah  semua  pasien  yang  didiagnosa demam tifoid dengan widal tes ≥ 1/160 di  Puskesmas  di  Malili  yang  diambil secara  acak  dengan  sampel  penelitian sebanyak  98  sampel.  Isolat  diperoleh dari  sampel  darah  penderita  demam tifoid dipilih secara Systematic Sampling  yang telah memenuhi kriteria inklusi yaitu lama demam mulai dari 3- 7  hari  dan  di  diagnosis  oleh  dokter sebagai  suspek  tifoid  dan  menyetujui dan menandatangani informed consent.
Pengambilan darah dilakukan oleh  petugas  laboratorium  yang  terlatih dan  data  seperti  umur,  jenis  kelamin, alamat  dan  hasil  tes  widal  dilakukan dengan  mengambil  data  dari  status pasien.

## 3. Analisis Data
Data diolah dengan menggunakan data  laboratorium  yang  dilaporkan berupa  tabel  pengamatan,  gambar pertumbuhan koloni S. typhi , dan isolat S. typhi positif dengan menggunakan uji biokimia TSIA.

## HASIL PENELITIAN

## Kultur Salmonella typhi
Telah  dilakukan  identifikasi  bakteri Salmonella  typhi dengan  metode  kultur pada  darah  penderita  demam  tifoid  di Puskesmas  Malili,  Luwu  Timur  Sulawesi Selatan  pada  periode  Maret  –  Mei  2017 sebanyak 98 sampel.
Tabel 4.1.
Hasil uji kultur, jumlah dan persentase.
Uji Kultur  Jumlah  Persentase(%) Positif (+) Negatif (-) 20 78 20,4% 79,6%
Hasil  identifikasi  bakteri Salmonella typhi dengan  metode  kultur  dengan menggunakan  sampel  darah  penderita demam  tifoid  sebanyak  98  sampel,di peroleh  20  (20,4%)  sampel  yang  positif
pada  penumbuhan  di  media  kultur  dan sebanyak 78 (79,6%) sampel negatif.

## PEMBAHASAN
Pada  pemeriksaan  kultur,  hasil isolasi Salmonella typhi dari sampel darah 98  pasien  demam  tifoid    diperoleh  20 (20,4%)    sampel  yang  menunjukkan  hasil positif  adanya  bakteri Salmonella  typhi dan 78 (79,6%) sampel negatif (Tabel 1) .
Hasil biakan yang positif memastikan demam tifoid akan tetapi hasil negatif tidak menyingkirkan demam tifoid , karena  hasilnya  tergantung  pada  beberapa faktor  diantaranya,  keterbatasan  media isolasi yang digunakan, adanya penggunaan
antibiotik
sebelum pengambilan  darah,  jumlah  bakteri  yang sangat minimal dalam darah, volume darah yang tidak mencukupi dan waktu pengambilan  darah  yang  tidak  tepat, respon  imun  dari  host  dan  karakteristik intraselluler  dari Salmonella  typhi (Massi et al., 2003; Zhou&Pollard, 2010).
Beberapa hasil penelitian menunjukkan  tingginya biakan darah yang positif  pada  minggu  pertama.  Menurut Lakare  2001  dan  Zhou  &  Pollard  2010, tingginya  kultur  positif  pada  minggu pertama karena merupakan fase bakterikimia  dan  septikemia  yang  berat, keadaan  ini  menunjukkan  adanya  basil Salmonella  dalam  jumlah  yang  banyak dalam  darah  sehingga  persentase  positif untuk kultur darah bisa mencapai 80%.
Penelitian  Massi  et  al,  (2003)  dalam mendeteksi S.typhi menunjukkan sensifitas  teknik  PCR  sebesar  63%  bila dibandingkan dengan kultur darah (13,7%) dan  uji  Widal  (35,6%).  Sensifitas  yang tinggi  dari  metode  PCR  dalam  deteksi kuman  S.typhi  juga  dilaporkan  oleh  Hatta & Smith (2007) pada darah, urin dan feses dibandingkan  metode  kultur  dan  widal.
Akan  tetapi  penggunaan  PCR  untuk diagnosa  penyakit  masih  jarang  dilakukan secara  rutin  karena  biaya  yang  mahal sehingga masih terbatas untuk penelitian.

## SIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  identifikasi S.  typhi pada  penderita  demam  tifoid  di  Malili masih  kurang  disebabkan  karena  beberapa faktor  seperti  keterbatasan  media  isolasi yang  digunakan,  adanya  penggunaan antibiotik  sebelum  pengambilan  darah, jumlah bakteri yang sangat minimal dalam darah,  volume  darah    yang  tidak mencukupi  dan  waktu  pengambilan  darah yang tidak tepat, respon imun dari host dan karakteristik  intraselluler  dari Salmonella typhi.

## SARAN
1. Perlu  melakukan  penelitian  dengan jumlah sampel darah yang lebih banyak lagi
2. Perlu penelitian lebih lanjut identifikasi S.typhi menggunakan PCR.

## DAFTAR PUSTAKA
Baratawidjaja,  1996.  Immunologi  Dasar. Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia. Jakarta.
Bhutta.,  2006.  Current  concepts  in  the diagnosis  and  treatment  of  typhoid fever. BMJ 333:78–82
Brooks, et  al .,  2005.  Mikrobiologi Kedokteran, Alih Bahasa.
Mudihardi  E,  Kuntaman,  Wasito EB, et al . Salemba Medika, Jakarta.
Campbell N.A., 2002.Biologi, edisi kelima jilid 1. Penerbit Erlangga, Jakarta.
Chanh  N.Q, et  al .,  2004.  A  Clinical Microbiological  &  Pathological Study  of  Intestinal  Perforation Associated  with  Thypoid  Fever. Clinical InfectiousDiseases:39.61-7
Cleary,  TG.,  2000.  Salmonella.  Dalam  : Behrman  RE,  Kliegman  RM, Jenson  HB,  Eds.  Nelson  Textbook of Pediatrics, edisi 16.
Philadelphia: WB Saunders: 842-8.
Darmawati,
2009.Keanekaragaman Genetik  Salmonella  typhi.  Jurnal
Kesehatan  Unimus  Vol.2,  No.  I
Juni 2009.
Darmowandowo, D., 2003. Demam Tifoid. Dalam  :  Continuing  Education Ilmu  Kesehatan  Anak  XXXIII. Surabaya  :  Surabaya  Intellectual Club : 19-34.
DeWitt,2002.TyphoidFever.http://healthat oz.com/healthatoz/atoz/typhoid_fev er.jsp, diakses 1 Juli 2015.
Dinas  Kesehatan  Prop.Sulsel,  2009.  Profil Kesehatan Sulsel 2008.
Entjang,  I.,  2003.  Mikrobiologi  dan
Parasitologi Untuk Akademi Keperawatan.  PT  Citra  Aditya Bakti, Bandung.2 nd Edition.
Everest et  al .,  2001.  The  Molecular Mechanism  of  severe  Typhoid Fever.  Trends  in  Microbiology.Vol 9 No.7.
Frankel, 1989. Intragenic recombination in a  flagellin  gene:characterization  of the  H1-j  gene  of  Salmonella  typhi,
The  EMBO  Journal  vol.8.no  10,
p.3149-3152.
Garrity,G.,  2000.  Bergey’s  Manual  Of
Systematic Bacteriology. http :www.cme.msu/Bergeysoutline.trn. pdf
Grossman et  al .,  1995.Flagellar  Serotypes of  Salmonella  typhi  in  Indonesia;
Relationship among Motility, Invasiveness  and  Clinical  Illness.
The Journal of Infectious Disesases vol 171.No 6:212-216.
Handjoeno,  2001.Diagnosis  Laboratorium
Demam Tifoid.Jurnal Klinik
Indonesia vol.7 117-122..
Hatta M, et al ., 2002.Antibody response in thypoid fever in endemic Indonesia and  the  relevance  of  serology  and culture  to  diagnosis.  Southeast Asian  Journal  Tropical  Medicine and Public Health. Vol 33;182-191.
Hatta M and Smith H., 2007. Detection of Salmonella typhi by Nested Polymerase  Chain  Reaction  in Blood,  Urin  and  Stool  Samples. Amd J Med Hyg 76(1), 2007; 139- 143.
Hatta  M  and  Ratnawati,  2008.  Enteric Fever  in  Endemic  Areas  of Indonesia.An  Increasing  Problem of  Resistance. J  Infect.  Developing Countries 2(4) : 298-301.
Hatta et al ., 2011. New Flagellin Gene for Salmonella  enterica serovar  Typhi from the East Indonesian Archipelago. Am.  J.  Trop.  Med. Hyg., 00(0),  2011,  pp.  000–000 doi:10.4269/ajtmh.2011.10-0605 Copyright © 2011 by The American  Society  of  Tropical Medicine and Hygiene.
Hatta et.al .,  2014.  Reproducibility  of  the multiplex  RAPD-PCR  assay  in genotyping of Mycobacterium tuberculosis isolates from Sulawesi,Indonesia. American
Journal of Clinical & Experimental Medicine, 2(2):14-21.
Hensel,  2004.  Evolution  of  pathogenicity islands of Salmonella enterica. Int J Med Microbiol 294(2-3): 95-102.
House, et  al .,  2001.  Serology  of  typhoid Fever  in  an  area  of  endemicity  & its  relevance  to  diagnostic,  Journal of  clinical  microbiology,  Vol.39 No.3.
Holt, et.al .,  1994.  Bergey's  manual  of Determinative  Bacteriology.  Ninth edition.  Williams  and  Wilkins. Ballimore, Maryland
USA.
186,242.
Ivanov,  1998.  Typhoid  fever:  Current  and future  control  approaches.  Medical Journal of Indonesia,S 5-1,pp.81-2
Karim,  A.,  2005. Analysis  of  Culture, Resistance  and  Polymerase  Chain reaction  Tests  Of  Salmonella  typhi On Children Suspected To Typhoid
Fever In DR. Wahidin Sudirohusodo Hospital in
Makassar. Thesis HasanuddinUniversity, Makassar. Koneman, et  al .,  1992.  Color  Atlas  and Texbook Of Diagrrostic Microbiology. Fourth edition. J.B. ' Lippincott Company. Philadelphia.
Kulkarni  M,  2007.  Value  of  Single  Widal Test  In  The  Diagnosis  Of  Typhoid Fever. Vol 31. 2007. p. 1373-77.
Kwenang,  AO.,  2007.  Serologic  and Molecular  Aanalysis  On  Typhoid
Endemic  Population  To  Determine The  Endemic  Level  In  Jeneponto, South Sulawesi, Disertasi of Hasanuddin University, Makassar.
Maskalyk,  J.,  2003.  Typhoid  Fever. Available  from:  http://www.cmaj. ca/content/169/2/132.  full  [diakses 20 Juli 2015].
Massi, et  al .,  2003.  Rapid  Diagnosis  of
Typhoid  Fever  by  PCR  Assay Using  One  Pair  of  Primers  From Flagellin Gene of Salmonella typhi. Jurnal Infect Chemother 9:233-237.
Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia
(MENKES  RI).  2006:  Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 364/MENKES/SK/V/2006  Tentang Pengendalian Demam Tifoid, MENKES RI, Jakarta.
Mulyawan  Sylvia,  dkk.,  2004.  Tinjauan Ulang  Peranan  Uji  Widal  Sebagai Alat  Diagnostik  Penyakit  Demam Typhoid  Di  Rumah  Sakit.Jakarta  : p. 14-6. accessed 7 januari 2011.
Nurtjahyani,  D.,  (2007). Studi  Biologi Molekuler  Resistensi  Salmonella typhiTerhadap  Cloramfenikol. Post Graduate  Airlangga  University, halaman1-2  diakses  tanggal  15 September 2015.
Ruiz M et al ., 2003.Usefulness of different techniques  in  the  study  of  the epidemiology of salmonellosis.
APMIS 111(9) :848-856.
Santoso, 2003.Protein Adhesin Salmonella typhi  Sebagai  Faktor  Virulensi
Berpotensi Imunogenik Pada Produksi S-Iga Protektif. Universitas Airlangga. Surabaya.
Sridhar, R. Widal Test. Davangere : 2009.
Availble from http://www.microrao .com/micronotes/widal.pdf.accesse d 7 januari 2011.
Syarurachman  et.al.,  2005.  Buku  ajar Mikroboilogi  Kedokteran. Jakarta  : Binarupa Aksara.
Talaro,  K.P.  and  Talaro,  A.  2002.
Foundations in Microbiology.
Fourth  edition.Mc  Graw  Hill.612- 617.
Tumbelaka,  AR.,  2001.  Imunodiagnosis
Demam Tifoid. Dalam : Kumpulan
Naskah  Pendidikan  Kedokteran Berkelanjutan Ilmu Kesehatan Anak  XLIV.  Jakarta  :  BP  FKUI, p.65-73. WHO,  2003.  The  Diagnosis,  Treatment, and Prevention of Thypoid Fever.Geneva : 2003. p. 11-16.
Widodo D., 2006. Demam Tifoid. Dalam : Sudoyo  AW, Setiyohadi B, Alwi  I. Buku  Ajar Ilmu Penyakit Dalam. 4 th  ed.  Jakarta  :  Departemen  Ilmu Penyakit Dalam FKUI : 1752-57.
Windarti  dan  Hardjoeno,  1998. Sensifitas Hasil  Pemeriksaan  Gall  Kultur pada  Penderita  Demam  Tifoid  di RSUP.  Dr.  Wahidin  Sudirohusodo.
BagianPatologi  Klinik Fakultas Kedokteran  UNHAS,  Kumpulan Makalah Pertemuan Ilmiah Berkala (PIB) X; 341-344.
Zhou, L and Pollard, A.J., 2010. A fast and highly  sensitive  blood  culture  PCR method  for  clinical  detection  of Salmonella  enterica  serovar  typhi. Annals  of  Clinical  Microbiology and Antimicrobials, 9:14:1-8.