Perbandingan Efektivitas Antibakteri Moringa oleifera dan Ziziphus mauritiana dengan Ekstrak Etanol 96% terhadap Escherichia Coli
Eli Sania 1* , Sandy Vitria Kurniawan 2 , Yohanna Angelina 3
1 Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya, Jakarta, Indonesia 2 Departemen Farmakologi dan Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya, Jakarta, Indonesia
3 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya, Jakarta,
Indonesia
E-mail : elisania.gunadi@gmail.com

## Abstrak
Escherichia  coli adalah  bakteri  normal  pada  pencernaan  bagian  bawah  manusia,  namun  jika  dalam  jumlah  di  atas normal, E.  coli akan  menimbulkan  berbagai  penyakit.  Penggunaan  antibiotik  yang  tidak  tepat  dapat  menyebabkan resistensi sehingga diperlukan pengobatan alternatif seperti obat-obatan herbal. Tanaman obat yang sudah banyak dieksplorasi sebagai senyawa antibakterial adalah daun kelor (Moringa oleifera) dan daun bidara ( Ziziphus mauritiana). Penelitian ini dilakukan untuk melihat perbandingan efektivitas antibakteri Moringa oleifera dan Ziziphus mauritiana dengan pelarut etanol 96% terhadap E.coli . Desain penelitian ini menggunakan studi eksperimental in vitro. Moringa oleifera dan Ziziphus mauritiana diekstrak pada 10 konsentrasi yang berbeda. Metode uji yang digunakan adalah difusi cakram  pada  agar  Mueller-Hinton.  Kelompok  perlakuan  yaitu E.  coli ATCC  25922,  Ciprofloksasin  digunakan  sebagai kontrol positif dan cakram yang direndam dalam etanol 96% digunakan sebagai kontrol negatif. Rata–rata zona inhibisi ekstrak daun Moringa oleifera adalah 10 mm, sedangkan ekstrak daun Ziziphus mauritiana menimbulkan rata–rata zona inhibisi sebesar 14 mm. Rata–rata zona inhibisi dari kontrol positif adalah 33 mm. Kontrol negatif tidak memiliki zona inhibisi. Ekstrak daun Moringa oleifera dapat menginhibisi pertumbuhan bakteri E. coli pada konsentrasi 30% dengan zona inhibisi sebesar 7 mm, dan ekstrak daun Ziziphus mauritiana dapat menginhibisi pertumbuhan bakteri E. coli pada konsentrasi 20% dengan zona inhibisi 12 mm. Hal ini membuktikan bahwa Ziziphus mauritiana memiliki kemampuan antibakteri yang lebih efektif daripada Moringa oleifera.
Kata kunci: Efektivitas Antibakteri, Escherichia coli, Moringa oleifera, Ziziphus mauritiana

## Abstract
Comparison of The Antibacterial Effectiveness of Moringa Oleifera and Ziziphus Mauritiana with 96% Ethanol Solvent Against Escherichia Coli. Escherichia coli is a normal bacterium in the lower part of human digestion, but if the amount is above normal, E. coli will cause various diseases. Inappropriate use of antibiotics can cause resistance, so alternative treatments such as herbal medicines are needed. Herbal plants that have been explored as antibacterial compounds are Moringa oleifera leaves and Bidara leaves (Ziziphus mauritiana). This research was conducted to see the comparison of the antibacterial effectiveness of Moringa oleifera and Ziziphus mauritiana with 96% ethanol solvent against E.coli. The design of this study used an experimental study conducted in vitro. Moringa oleifera and Ziziphus mauritiana were extracted  at  10  different  concentrations.  The  test  method  used  was  disk  diffusion  on  Mueller-Hinton  agar.  The treatment group is E. coli ATCC 25922, Ciproflxacin were used as positive controls and discs immersed in 96% ethanol were used as negative controls.The average zone of inhibition of Moringa oleifera leaf extract was 10 mm, while Ziziphus mauritiana leaf extract gave an average of inhibition zone of 14 mm. The average zone of inhibition from positive control is 33 mm. Negative control has no zone of inhibition. Moringa oleifera leaf extract can inhibit the growth of E. coli bacteria at a concentration of 30% with a zone of inhibition of 7 mm, and leaf extract of Ziziphus mauritiana can inhibit the  growth  of  E.  coli  bacteria  at  a  concentration  of  20%  with  a  12  mm  inhibition  zone.  This  proves  that  Ziziphus mauritiana has more effective antibacterial ability than Moringa oleifera.
Keywords: Antibacterial Effectiveness, Escherichia coli, Moringa oleifera, Ziziphus mauritiana
1. Pendahuluan Bakteri  merupakan  agen  penyebab infeksi  yang  menyebabkan  terjadinya proses invasi dan perkembangan organisme  di  dalam  jaringan  tubuh. 1 Berdasarkan  pernyataan  di  atas,  dapat diketahui  bahwa  bakteri  akan  merugikan tubuh  jika  terdapat  dalam  jumlah  di  atas normal. Salah satu bakteri tersebut adalah Escherichia  coli (E.  coli) . Escherichia  coli merupakan bakteri normal pada pencernaan  bagian  bawah  manusia, namun jika dalam jumlah di atas normal, E. coli akan  bersifat  patogen,  umumnya menyebabkan diare, infeksi saluran kemih, pneumonia, infeksi luka terutama di dalam abdomen  dan  meningitis.  Adapun beberapa jenis E. coli yang menyebabkan diare, antara lain : Shiga toxin-producing E. coli (STEC), Enterotoxigenic  E.  coli (ETEC),
Enteropathogenic E. coli (EPEC), Enteroaggregative  E.  coli (EAEC),  dan Enteroinvasive  E.  coli (EIEC), Diffusely adherent E. coli (DAEC). 2 Penyebaran E. coli dalam  menyebabkan  diare  dapat  terjadi melalui  air  atau  makanan  yang terkontaminasi  kotoran  manusia  yang terinfeksi  ( foodborne  disease) yaitu penyakit yang disebabkan karena mengkonsumsi  makanan  atau  minuman yang tercemar.
Infeksi  yang  disebabkan  oleh E.  coli dapat diobati dengan pemberian antibiotik,  antara  lain  : azithromycin, ciprofloksasin,
trimetropin- sulfometoxazole,  atau  fluoroquinolone. 3
Namun  terdapat  banyak  laporan  kasus mengenai resistensi penggunaan antiobiotik  karena  penggunaannya  yang tidak  tepat  seperti  terlalu  sering  atau dalam  jangka  waktu  yang  terlalu  lama. Salah  satu  alternatif  pengobatan  yang digunakan untuk mengobati infeksi bakteri E.  coli adalah  penggunaan  bahan  yang berasal dari alam.
Indonesia  merupakan  negara  yang kaya  akan  berbagai  macam  tumbuhan.
Sejak  zaman  dahulu,  nenek  moyang  kita telah  memanfaatkan  berbagai  macam tumbuhan  tersebut  untuk  memenuhi keperluan  hidupnya  termasuk  untuk pengobatan. Sampai saat ini, pemanfaatan tumbuhan  obat  masih  digunakan  dan dikonsumsi disamping pengobatan modern.  Berbagai  penelitian  juga  telah dilakukan  untuk  menguji  khasiat  dan efektivitas tanaman obat.
Salah  satu  tanaman  yang  sudah banyak  dieksplorasi  sebagai  senyawa antibakterial  adalah  tanaman  kelor  atau Moringa oleifera , tanaman ini merupakan famili Moringaceae ,  dan  termasuk tanaman  asli  di  India,  Pakistan, Bangladesh,  dan  Afghanistan  yang sebagian besar digunakan untuk penyembuhan infeksi bakteri, infeksi fungi, penyakit menular seksual, anti-inflammasi, malnutrisi  dan  diare.  Tanaman  ini  telah digunakan  sebagai  sumber  obat  rakyat  di Afrika  dan  Asia  (Rahman  et  al,  2009). 4 Shailemo et al (2016) 5 , melaporkan bahwa ekstrak M.  oleifera memiliki  aktivitas antibakterial  melawan Bacillus  cereus, Enterococcus faecalis dan Escherichia coli , dengan  zona  hambat  antara  7  –  9  mm, pada  konsentrasi  50  mg/mL. Kandungan kimia  yang  terdapat  didalam Moringa oleifera kaya akan vitamin A dan vitamin C,  senyawa glukosionat dan isotiosinat (Bharali,  2003) 6 .  Penelitian  sebelumnya yang  telah  dilakukan  Aditya  Nugraha (2013) 7 tentang Bioaktivitas Ekstrak Daun Kelor  ( Moringa  oleifera )  terhadap Escherichia  coli penyebab  kolibasilosis pada  babi  menunjukan  bahwa  ekstrak daun  kelor  pada  konsentrasi  25% menimbulkan  zona  inhibisi  sebesar  9,6 mm. Selain Moringa  oleifera ,  tanaman bidara  laut  atau Ziziphus  mauritiana juga mempunyai  efek  antibakteri  yang  sering digunakan  sebagai  obat  tradisional. Ziziphus  mauritiana merupakan  famili Rhamnaceae yang persebarannya terdapat  di  Jawa  dan  Bali.  Kandungan
kimia  dari  tumbuhan  daun Ziziphus mauritiana adalah  berbagai  senyawa seperti pektin  A,  glikosida  saponin, alkaloid, asam triterpenoat, flavonoid dan lipid . Ziziphus  mauritiana mengandung asam triterpenoat seperti asam kolubrinat, asam alpitolat, 3-O-trans-p- kumaroilmaslinat,  asam  oleanolat,  asam betulonat, asam oleanonat, asam zizyberenalat dan asam betulinat. 8
Berdasarkan  uraian  di  atas,  peneliti tertarik  untuk  melakukan  pengujian perbandingan  kemampuan  antibakteri Moringa  oleifera dan Ziziphus  mauritiana yang merupakan salah satu tanaman obat tradisional dan diharapkan dapat menjadi alternatif  bagi  pengobatan  infeksi, khususnya E.coli.

## 2. Metode
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  in  vitro.  Pengambilan  data dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan Atma Jaya pada bulan September sampai November  2019.  Penelitian  dimulai dengan  membuat  ekstrak  daun  kelor ( Moringa  oleifera) dan  daun  bidara ( Ziziphus mauritiana ) yang didapatkan dari Institut  Pertanian  Bogor.  2000  gram sampel  dari  kedua  jenis  daun  ditimbang dan  dikeringkan  lalu  diblender  menjadi serbuk. Serbuk dari sampel nantinya akan direndam dengan etanol 96% pada sebuah bejana  selama  tujuh  hari  dengan pengulangan sebanyak dua kali. Setelahnya  dilakukan  penyaringan  dan hasil maserat akan diuapkan menggunakan rotary  evaporator .  Hasil  ekstrak  nantinya akan  dibuat  menjadi  konsentrasi  10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100% dengan cara melarutkan ekstrak pada etanol 96%.
Setelah  terbentuk  berbagai  macam konsentrasi  ekstrak  daun  kelor  dan  daun bidara,  dilakukan  uji  antibakteri  dengan metode difusi cakram dengan
menggunakan  agar  Mueller-Hinton.  Pada proses  difusi  cakram,  disk  kosong steril direndamkan  pada  berbagai  macam konsentrasi ekstrak yang telah terbentuk, dan  etanol  96%  sebagai  kontrol  negatif. Kontrol positif yang digunakan adalah disk Ciprofloksasin .  Disk  kosong dan  disk Ciprofloksasin lalu  diletakkan  diatas  agar Mueller-Hinton yang sudah diswab dengan bakteri E.coli ATCC  25922  dan  diinkubasi selama  16-18  jam  pada  suhu  37°C.  Zona hambat yang terbentuk dibaca menggunakan penggaris dan dikelompokkan  menurut  klasifikasi  Davis dan Stout 9 sebagai berikut:
a. Lemah   : Diameter zona inhibisi < 5 mm
b. Sedang   : Diameter zona inhibisi 5 - 10 mm
c. Kuat : Diameter zona inhibisi 10 - 20 mm

## 3. Hasil
Daun Moringa  oleifera menghasilkan ekstrak  pekat  seberat  10,59  gram  dan 11,53  gram  untuk Ziziphus  mauritiana. Hasil  ekstrak  dibuat  menjadi  konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100% dan diuji efeknya terhadap bakteri E.coli  ATCC 25922  dengan menggukan  difusi  cakram.  Hasil  yang didapatkan  adalah  konsentrasi  minimal yang  menimbulkan  zona  inhibisi  pada ekstrak daun Moringa oleifera adalah 30% sebesar 7 mm dan daun Moringa oleifera dapat  menghambat E.coli dengan  zona inhibisi  terbesar  adalah  16  mm  pada konsentrasi  100%  sedangkan  konsentrasi minimal  yang  menimbulkan  zona  inhibisi pada  ekstrak  daun Ziziphus  mauritiana adalah 20%  sebesar 12 mm dan Ziziphus mauritiana menghasilkan  zona  hambat paling  besar  20  mm  pada  konsentrasi 100%.
Data  hasil  penelitan  telah  diperoleh, selanjutnya  dilakukan  uji  statistik  secara komputerisasi terhadap data tersebut. Uji yang  pertama  dilakukan  adalah  uji
normalitas data dengan Shapiro Wilk , yang memberi hasil ( p >0.05) yang  berarti data terdistibusi  normal  untuk  hasil  ekstrak kedua  daun.  Selanjutnya  dilakukan  uji T Independent untuk  melihat  apakah  hasil zona  hambat  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus  mauritiana memiliki  hasil  yang bermakna. Hasil uji T Independent adalah ( p<0.05) yang  berarti  ada  perbedaan bermakna  antara  efektivitas  kedua  daun dalam  menghambat  bakteri E.coli ATCC 25922.
Tabel 1. Hasil Uji Sensitivitas Antibakteri
Moringa oleifera Konsentrasi (%) Hasil Uji Sensitivitas (mm) Moringa oleifera I II X` Golongan 10 0,0 0,0 0,0 Lemah 20 0,0 0,0 0,0 Lemah 30 6,0 8,0 7,0 Sedang 40 7,0 9,0 8,0 Sedang 50 10,0  10,0  10,0 Sedang 60 11,0  13,0  12,0 Kuat 70 13,0  12,0  12,5 Kuat 80 14,0  14,0  14,0 Kuat 90 15,0  17,0  16,0 Kuat 100 17,0  15,0  16,0 Kuat Kontrol Negatif 0,0 0,0 0,0 Lemah Kontrol Positif 35 32 33,5 Kuat Tabel 2. Hasil Uji Sensitivitas Antibakteri Ziziphus mauritiana Konsentrasi (%) Hasil Uji Sensitivitas (mm) Ziziphus mauritiana I II X` Golongan 10 0,0 0,0 0,0 Lemah 20 11,0  13,0  12,0 Kuat 30 13,0  13,0  13,0 Kuat 40 12,0  16,0  14,0 Kuat 50 15,0  15,0  15,0 Kuat 60 16,0  16,0  16,0 Kuat 70 17,0  15,0  16,0 Kuat 80 17,0  18,0  17,5 Kuat 90 18,0  18,0  18,0 Kuat 100 21,0  19,0  20,0 Kuat Kontrol Negatif 0,0 0,0 0,0 Lemah Kontrol Positif 30,0 33 31,5
Kuat

## 4. Pembahasan
Ekstrak  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus mauritiana dengan pelarut etanol 96%  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli. Menurut  Vinoth et  al 10 ekstrak  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus  mauritiana yang  menggunakan  etanol  96%  sebagai pelarut,  etanol  96%  dapat  menarik sebagian  besar  senyawa  aktif  yang terdapat pada masing-masing daun, sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh peneliti,  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus  mauritiana memiliki  senyawa yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri.  Terdapat  beberapa  faktor  yang dapat memengaruhi aktivitas antibakterial masing–masing daun terhadap Escherichia coli, konsentrasi  ekstrak  tiap  daun merupakan  salah  satunya.  Konsentrasi daun yang lebih tinggi menimbulkan zona inhibisi  yang  lebih  besar.  Menurut Prescott 11 ,  ukuran  zona  inhibisi  bakteri juga  dipengaruhi  oleh  tingkat  sensitifitas dari  organisme  uji,  medium  kultur  dan kondisi  inkubasi,  kecepatan  difusi  dari senyawa antibakteri.
Menurut  penelitian  yang  dilakukan oleh  Wayan  dkk 12 senyawa  aktif  yang terdapat  pada Moringa  oleifera adalah alkaloid,  flavonoid,  triterpenoida,  dan tannin.  Flavonoid  merupakan  zat  pada Moringa  oleifera yang  berperan  sebagai antimikroba,  zat  ini  menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri, mikrosom, dan lisosom sebagai  hasil  interaksi  antara  flavonoid dengan  DNA  bakteri.  Yudistira et  al 13 menyatakan  flavonoid  juga  bersifat desinfektan  yang  bekerja  dengan  cara mendenaturasi  protein  yang  dapat menyebabkan  aktifitas  metabolisme  sel bakteri berhenti. Menurut Muharrofatul 14 Ziziphus mauritiana memiliki senyawa aktif yaitu  alkaloid,  triterpenoida,  tannin, flavonoid, dan saponin. Kadungan saponin pada Ziziphus mauritiana sangat berperan
menghambat  aktivitas  bakteri.  Senyawa saponin termasuk golongan glikosida yang terdapat  pada  berbagai  jenis  tumbuhan yang berfungsi untuk menyimpan karbohidrat  dan  sebagai  pelindung  dari serangan  hama,  dengan  mekanisme menurunkan tegangan permukaan dinding sel  dan  apabila  berinteraksi  dengan dinding  bakteri,  maka  dinding  tersebut akan  pecah  atau  lisis.  Saponin  akan mengganggu tegangan permukaan dinding sel,  maka  saat  tegangan  permukaan terganggu  zat  antibakteri  akan  masuk dengan  mudah  kedalam  sel  dan  akan mengganggu  metabolism  hingga  akhirnya terjadilah kematian bakteri.
Berdasarkan penggolongan efektivitas antibakteri oleh Davis and Stout 9 hasil zona inhibisi  yang  didapatkan  dari Moringa oleifera pada  konsentrasi  10%  dan  20% menimbulkan zona inhibisi yang termasuk pada  golongan  lemah,  konsentrasi  30% sampai  50%  termasuk  pada  golongan sedang, dan konsentrasi 60% sampai 100% termasuk pada golongan kuat. Konsentrasi minimal Moringa oleifera  yang  dapat menimbulkan  zona  inhibisi  adalah  30% rata-rata  sebesar  7  mm  dan  zona  inhibisi terbesar  terdapat  pada  konsentrasi  100% rata-rata  sebesar  16  mm.  Rata-rata  zona inhibisi  dari  sepuluh  konsentrasi Moringa oleifera adalah  9,5  mm.  Zona  inhibisi Ziziphus  mauritiana dengan  konsentrasi 10%  menimbulkan  zona  inhibisi  yang termasuk  pada  golongan  lemah,  20% sampai  100%  termasuk  golongan  kuat. Konsentrasi  minimal Ziziphus  mauritiana yang  dapat  menimbulkan  zona  inhibisi adalah 20% rata-rata sebesar 12 mm dan zona  inhibisi  terbesar  terdapat  pada konsentrasi  100%  yaitu  rata-rata  20  mm . Rata-rata  zona  inhibisi  dari  sepuluh konsentrasi Ziziphus mauritiana adalah 14 mm. Sedangkan jika dibandingkan dengan kontrol  positifnya  yaitu  ciprofloksasin , ciprofloksasin  masih  memiliki  rata-rata zona inhibisi yang lebih besar (30 - 35 mm)
daripada  kedua  jenis  daun,  namun  efek antibakteri tetap timbul pada kedua jenis daun. Ciprofloksasin merupakan antibiotik golongan fluorokuinolon ,  yaitu  golongan kuinolon  baru  dengan  atom  fluor  pada cincin kuinolon. Fluorokuinolon
mempunyai  daya  antibakteri  yang  lebih besar  dan  toksisitas  yang  lebih  rendah. Menurut  Jawetz et  al 15 ,  ciprofloksasin memiliki efek antibakteri dengan spektrum luas. Berdasarkan penggolongan efektivitas  antibakteri  dengan  standar ciprofloksasin  pada  CLSI 16 adalah  resisten (R) jika luas zona hambatan kurang dari 15 mm,  intermediate  (I)  jika  luas  zona hambatan 16-20 mm, dan sensitif jika luas zona  hambatan  diatas  21  mm.  Pada kontrol negatif menggunakan etanol 96%. Etanol  96%  yang  digunakan  sebagai kontrol  negatif  di  sini  sebenarnya  sudah dikeringkan  terlebih  dahulu,  oleh  karena itu  etanol  yang  terkandung  pada  disk kosong kemungkinan sudah menguap. Hal ini  menyebabkan  disk  kosong  yang direndam  etanol  96%  dan  dikeringkan tersebut  tidak  menimbulkan  zona  inhibisi terhadap pertumbuhan Escherichia coli . Pada  penelitian  yang  dilaksanakan oleh  Lusi  dkk 17 ditemukan  bahwa konsentrasi Moringa  oleifera sebesar  5% dapat  menginhibisi  aktivitas Escherichia coli dan menimbulkan zona inhibisi sebesar 13,33  mm.  Lusi  dkk  melakukan  teknik maserasi yang pertama selama 5 hari dan maserasi  kedua  selama  2  hari,  berbeda dengan peneliti yang menggunakan teknik maserasi  pertama  dan  kedua  selama  7 hari,  namun  hal  ini  kemungkinan  tidak menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan karena  proses  maserasi  akan  mencapai equilibrium  selama  24  jam  yang  artinya setiap  24  jam  sebaiknya  etanol  yang digunakan sebagai pelarut harus diganti. 18 Lusi  dkk  menggunakan nutrient  agar sebagai  media  pembenihan  dan  media pengujian,  berbeda  dengan  peneliti  yang menggunakan  agar Muellen  Hinton,
walaupun terdapat perbedaan media agar, hal  ini  tidak  memengaruhi  zona  hambat yang  dihasilkan  oleh  senyawa  antibakteri ekstrak  daun Moringa  oleifera. Lusi  dkk menggunakan well  diffusion sebagai metode  ujinya.  Metode  uji  menggunakan well  diffusion menghasilkan  penyebaran senyawa  aktif  yang  lebih  baik. 19 Hal  ini berbeda  dengan  yang  dilakukan  oleh peneliti yang menggunakan disc diffusion. Hasil  yang  didapat  oleh  Bello  dkk 20 menyatakan  bahwa  ekstrak  biji Moringa oleifera
konsentrasi 25% dapat menimbulkan zona inhibisi sebesar 12 mm. Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  oleh  biji Moringa  oleifera yang mengandung senyawa aktif yang lebih banyak daripada bagian  daun. 21 Pada  penelitian  yang dilakukan  oleh  Donny  Kurniawan 22 membuktikan  bahwa  pada  konsentrasi 10%  jus  daun Moringa  oleifera dapat menghambat  pertumbuhan Escherichia coli dengan  menimbulkan  zona  inhibisi sebesar  7,49  mm  dengan  menggunakan nutrient broth sebagai media pengujian. Penelitian  yang  dilakukan  Taufiq 23 yang  menggunakan nutrient  agar sebagai media  pengujian, Ziziphus  mauritiana memiliki  efektivitas  antibakteri  pada kosentrasi 1% dengan diameter 11,33 mm. Kemungkinan  hal  ini  terjadi  karena penelitian  Taufiq  menggunakan  metode maserasi  yang  menggunakan  pelarut etanol  70%  dan  dilakukan  penyaringan sebanyak  3  kali.  Penelitian  lain  dilakukan oleh  Ayu 24 yang  menggunakan  metode dilusi membuktikan bahwa pada konsentrasi  12,5%  ekstrak  akar Ziziphus mauritiana dapat menghambat pertumbuhan Escherichia  coli. Hal  ini kemungkinan
terjadi karena
Ayu menggunakan  pelarut  etanol  70%  saat maserasi  dan  menggunakan  akar  dari Ziziphus mauritiana. 25
Hasil  percobaan  yang  dilakukan  oleh beberapa  peneliti  di  atas  menunjukkan zona  hambat  yang  dihasilkan Ziziphus
mauritiana lebih  besar  daripada  zona hambat  yang  dihasilkan  oleh Moringa oleifera, hal tersebut membuktikan bahwa Ziziphus mauritiana mempunyai efektivitas antibakteri  lebih  besar  daripada Moringa oleifera.
Keterbatasan penelitian yang dijumpai adalah disc diffusion, kekurangan dari disc diffusion adalah  senyawa  aktif  yang terdapat  pada  ekstrak  kedua  jenis  daun belum  tentu  dapat  masuk  ke  dalam  disk kosong dan difusi obat dari disk yang sudah direndam  dengan  berbagai  konsentrasi ekstrak  daun  juga  lebih  sulit  daripada metode yang lain. 19
Saran bagi penelitian berikutnya, yaitu untuk  melakukan  penelitian  lanjutan mengenai  efek  antibakteri  ekstrak  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus  mauritiana terhadap  bakteri  lain,  melakukan  uji fitokimia terhadap kedua daun supaya bisa dipastikan kadar dan kandungan senyawa aktif  pada  hasil  ekstrak,  dan  melakukan penelitian  dengan  uji  antibakteri  lain seperti metode well diffusion .

## 5. Kesimpulan
Ekstrak  daun Moringa  oleifera dan Ziziphus mauritiana dengan menggunakan pelarut etanol 96% terbukti memiliki efek antibakteri terhadap bakteri E.coli , dengan Ziziphus  mauritiana memiliki  efek  yang lebih besar daripada Moringa oleifera. Konsentrasi minimal yang menimbulkan  aktivitas  antibakteri  (zona inhibisi)  pada  ekstrak  daun Moringa oleifera adalah  30%,  sedangkan  pada ekstrak  daun Ziziphus  mauritiana adalah 20%.

## Daftar Pustaka
1. Darsana  IGO,  Besung  INK,  Mahatmi  H. Potensi  Daun  Binahong  (Anredera Cordifolia  (Tenore)  Steenis)  dalam
Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia Coli secara In Vitro. Indones Med Veterinus. 2012;15.
2. E.coli  (Escherichia  coli)  |  E.coli  |  CDC [Internet].  2018  [dikutip  23  Oktober 2018]. Tersedia pada: https://www.cdc.gov/ecoli/index.html 3. Noviana  H.  Pola  kepekaan  antibiotika Escherichia  coli  yang  diisolasi  dari berbagai  spesimen  klinis.  Escherichia Coli. 2004;5.
4. Rahman MM, Sheikh MMI, Sharmin SA, Islam  MS,  Rahman  MA,  Rahman  MM, dkk.  Antibacterial  Activity  of  Leaf  Juice and  Extracts  of  Moringa  oleifera  Lam. against  Some  Human  Pathogenic Bacteria. :1.
5. Shailemo  DHP,  Kwaambwa  HM,
Kandawa-Schulz  M,  Msagati  TAM. Antibacterial  Activity  of  Moringa ovalifolia and Moringa oleifera Methanol,  N-Hexane  and  Water  Seeds and  Bark  Extracts  against  Pathogens That  Are  Implicated  in  Water  Borne Diseases. Green Sustain Chem. 2016;06(02):71–7. 6. Bharali, R., Tabassum, J., Azad, M. R. H.
Chemomodulatory  effect  of  Moringa oleifera  Lam.  on  Hepatic  Carcinogen Metabolizing  Enzymes,  Antioxidant Parameters, and Akin Papillomagenesis in Mice. Asian Pacific J Cancer Prevent 4.
2003;
7. Aditya  Nugraha.  Bioaktivitas  (Moringa oleifera)  Terhadap  Eschericia  coli Penyebab  Kolibasilosis  Pada  Babi.
UDAYA Denpasar. 2013;
8. Taradipta,  I  Dewa  Made  Roni.  Uji Adaptogenik Ekstrak Etanol Daun Bidara Laut (Ziziphus mauritiana Lam.) Dengan Metode Swimming Endurance Test Pada Mencit Galur BALB/C. Skripsi. FMIPA Jur Farm Univ Udayana Bali. 2015;
9. Davis WW, Stout TR. Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Assay. Appl Microbiol. 1971;22:7.
10.   Vinoth  B,  Manivasagaperumal  B,
Balamurungan S. Phytochemical Analysis  and  Antibacterial  Activity  of Moringa Oleifera Lam. Int J Res Biol Sci 2012. 2012;2(3): 98-102. 11.   Prescott  LM,  J.  P.  H,  D.A.  K.
Mikrobiology.6thEd.  Mc  Graw-Hill  N  Y.
2005;
12.   Putra,  I.  W.  D.  P.,  A.  A.  G.  O. Dharmayudha, and Luh Made Sudimartini. Identifikasi Senyawa Kimia Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor  (Moringa oleifera  L)  di  Bali.  Indones  Med Veterinus 55. 2016;464–73.
13.   Yudistira FA, Murwani S, Trisunuwati P.
Potensi  Antimikroba  Ekstrak  Air  Daun
Kelor  (Moringa  oleifera)  Terhadap Salmonella enteritidis (SP-1-PKH) Secara In  Vitro.  Program  Kedokteran  Hewan Universitas  Brawijaya  Malang.  2013;4– 5.
14.   Jannah M. Jurusan Kimia Fakultas Sains Dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana  Malik  Ibrahim  Malang.
2018;88. 15.   Jawetz, E., Melnick, J.L. & Adelberg, E.A. Mikrobiologi Kedokteran, diterjemahkan  oleh  Mudihardi,  E., Kuntaman, Wasito, E. B., Mertaniasih, N. M.,  Harsono,  S.,  Alimsardjono,  L.,  Edisi
XXII,  327-335,  362-363,  Penerbit Salemba Medika, Jakarta. 2005; 16.   M100-S24:  Performance  Standards  for Antimicrobial  Susceptibility  Testing; Twenty-Fourth Informational Supplement. :50. 17.   Lusi L.R.H Dima, Fatmawali, Widya Stuty Lolo.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun  Kelor (Moringa  Oleifera  L.) terhadap  Bakteri  Escherichia  coli  dan Staphylococcus aureus. Pharmacon J Ilm Farm. 2016;5.
18.   Yulianingtyas A, Kusmartono B. Optimasi Volume  Pelarut  Dan  Waktu  Maserasi Pengambilan Flavonoid Daun Belimbing Wuluh. 2016;7.
19.   Khusuma A, Safitri Y, Yuniarni A, Rizki K.
Uji  Teknik  Difusi  Menggunakan  Kertas Saring  Media  Tampung  Antibiotik dengan Escherichia Coli Sebagai Bakteri Uji.  J  Kesehat  Prima.  9  Agustus 2019;13(2):151. 20.   Bello, S.A1 and Jamiu, A.T1. Antibacterial Activity of Moringaoleifera Seed  Extracts  On  Escherichia  coli, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Niger J Microbiol. 2017;31(1): 3873-3881.
21.   Ariyatun,  Ningrum  P,  Musyarofah,
Inayah  N.  Analisis  Efektivitas  Biji  dan Daun  Kelor  (Moringa  oleifera)  Untuk Penjernihan  Air.  Walisongo  J  Chem. 2018;2:61–6.
22.   Donny  Kurnianto,  Sarwiyono,  Puguh Surjowardjojo.  Inhibition  Activity  of Moringa  oleifera Leaves  Juice  on Staphylococcus  aureus  and  Escherichia coli Bacteria caused Mastitis Disease In Dairy Cattle. 2014; 23.   Taufiq.  Aktivitas  Efek  Antimikroba Ekstrak  Etanol  Daun  Bidara  Laut (Ziziphus  mauritiana  Lam.)  TERHADAP PERTUMBUHAN  Candida  albicans  DAN
Escherichia  coli.  Akad  Farm  Yamasi Makassar. 2015;
24.   Ulfa  AR.  (Zizyphus  mauritiana  Lamk.) terhadap  Escherichia  Coli  Atcc  25922. 2018;97.
25.   Luginda  RA,  Lohita  B,  Indriani  L. Pengaruh  Variasi  Konsentrasi  Pelarut Etanol. :9.