PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT OF PAPAYA LEAF

## ( Carica papaya L.) IN WHITE MALE RATS (Rattus norvegicus)
UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN PEPAYA ( Carica papaya L.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN (Rattus norvegicus)
Ni Putu Ratna Sari 1)* , Widdhi Bodhi 1) ,  Julianri Sari Lebang 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT *niputuratnasari0418@gmail.com

## ABSTRACT
Papaya  leaves  ( Carica  papaya L.)  contain  flavonoids  and  tannins  which  have  anti-inflammatory  actuvuty. This study aims to determined antiinflamatory activity of papaya leaves extract using caragenan induce paw edema. The test was carried out on 5 groups of animals, namely, the negative control group was given 1% CMC suspension, the positive control group was given sodium diclofenac 0,9mg / 200gBB and the test group was given a papaya leaf ethanol extract suspension at a dose of 9mg / 200gBB, 13,5mg / 200gBB, and 18mg /200gBB. The results showed that all extract doses were able to inhibit edema, respectively 92.13%, 100%, 89%  in  volume  measurements  and  96,66%,  100%,  93,49%  in  diameter  measurements  and  significantly different  from  negative  control  (ρ ≤0.05). It  can  be concluded  that the  extract dose  of 13,5  mg  /  200gBW provided the best inhibition of edema and was not significantly different from the positive control (ρ≥0.05).
Keywords : Carica papaya L ., Anti-inflammatory, Inflammatory Volume, Inflammation Diameter .

## ABSTRAK
Daun  pepaya  ( Carica  papaya L.)  mengandung  senyawa  flavonoid  dan  tanin  yang  berkhasiat  sebagai antiinflamasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  aktivitas  ekstrak  etanol  daun  pepaya  sebagai antiinflamasi.  Aktivitas  antiinflamasi  dilakukan  dengan  metode  induksi  edema  pada  telapak  kaki  tikus menggunakan karagenan 1%. Pengujian dilakukan pada 5 kelompok hewan yaitu kelompok kontrol negatif diberi suspensi CMC 1%, kelompok kontrol positif diberi natrium diklofenak 0,9mg/200gBB dan kelompok uji  diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  daun  pepaya  dengan  dosis  9mg/200gBB,  13,5mg/200gBB  dan 18mg/200gBB. Hasil penelitian menunjukan semua dosis ekstrak mampu menghambat edema berturut-turut sebesar  92,13%,  100%,  89%  pada  pengukuran  volume  dan  96,66%,  100%,  93,49%  pada  pengukuran diameter  dan  berbeda  signifikan  dengan  kontrol  negatif  (ρ≤0,05).  Dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  dosis 13,5mg/200gBB memberikan penghambatan edema paling baik serta tidak berbeda secara signifikan dengan kontrol positi (ρ≥0,05).
Kata kunci : Carica papaya L., Antiiflamasi, Volume Radang, Diameter Radang .
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Indonesia  adalah  Negara  yang  kaya  akan tumbuh-tumbuhan. Hutan tropis Indonesia diperkirakan terdapat sekitar 30.000 jenis tumbuhan,  diduga  dari  jumlah  tersebut  sekitar 9.600  jenis  diketahui  berkhasiat  sebagai  obat penting  bagi  industri  obat  tradisional  (Sriningsih et al., 2006).
Masyarakat  luas  beranggapan  bahwa penggunaan obat tradisional lebih aman dibandingkan dengan obat kimia sehingga mereka lebih  suka  menggunakan  obat  tradisional  untuk menyembuhkan penyakitnya. Walaupun demikian bukan berarti obat tradisional tidak memiliki efek samping  yang  merugikan  bila  penggunaannya kurang  tepat  dan  kurangnya  informasi  tentang obat  tradisional  merupakan  salah  satu  kendala dalam  penggunaan  obat  tradisional  sehingga penggunaannya menjadi kurang optimal (Anggraini, 2008).
Salah  satu  tumbuhan  yang  telah  lama dipergunakan  oleh  masyarakat  Indonesia  adalah daun  pepaya  ( Carica  papaya L.).  Skrinning fitokimia  daun  pepaya  menghasilkan  kandungan senyawa  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  glikosida jantung, antrakuinon bebas terikat dan phlobatinin,  pada  penelitian  lainnya  diperoleh bahwa  ekstrak  etanol  daun  pepaya  mengandung senyawa  saponin,  kardenolida,  fenolik,  steroid dan  gula.  Senyawa  flavonoid,  steroid,  dan  tannin dalam  bentuk  bebas  dan  kompleks  tannin-protein berkhasiat  sebagai  antiinflamasi  (Milind  dan Gurdita, 2011).
Inflamasi  merupakan  respon  terhadap cedera  jaringan  yang  ditandai  dengan  elaborasi mediador  inflamasi,  serta  gerakan  cairan  dan leukosit  dari  darah  ke  jaringan  ekstravaskuler. Inflamasi melokalisasi dan menghilangkan mikroorganisme,  sel  yang  rusak,  partikel  asing, mengembalikan  struktur  dan  fungsi  normal jaringan (Murphy, 2007).
Umumnya  obat  antiinflamasi  mempunyai efek  samping  yang  berkaitan  dengan  penggunaan obat-obat  sintetik  terutama  terjadi  pada  lambung, usus, ginjal dan fungsi trombosit, maka salah satu cara  untuk  mengatasinya  yakni  mencari  bahan yang berasal dari alam (Katzung dkk, 2009).
Berdasarkan uraian diatas, maka penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas antiinflamasi ekstrak etanol daun pepaya ( Carica  papaya L.)  terhadap  tikus  putih  jantan (Rattus  norvegicus) yang  dilihat  dari  persen penghambatan  inflamasi  serta  dosis  yang efektif
dari  ekstrak  daun  pepaya  sebagai  antiinflamasi yang  ditinjau  melalui  penurunan  edema  pada telapak kaki tikus yang diinduksi karagenan 1 %.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Januari  2021  –  Februari  2021  di  Laboratorium Penelitian Program Studi Farmasi dan laboratorium  Program  Studi  Biologi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  oven,  blender,  ayakan  mesh  200,  alat- alat  gelas  ( pyrex) ,  wadah  maserasi  (toples), corong  pisah,  spatula,  kertas  saring,  spoit  injeksi, timbangan  analitik,  timbangan  hewan,  spidol, jarum  sonde  tikus, stopwatch ,  jangka  sorong, tabung  uji  (vial),  cawan  porselen,  inkubator  dan kandang tikus.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  simplisia  daun  pepaya,  etanol  96%, karagenan,  NaCl  fisiologis,  CMC  1%,  Natrium diklofenak dan aquadest.

## Prosedur Penelitian Pengambilan dan Penyiapan Sampel
Sampel  diambil  di  Kelurahan  Taas, Kecamatan  Tikala,  Kota  Manado,  Provinsi Sulawesi Utara. Penelitian ini menggunakan daun pepaya yang masih hijau yaitu daun diambil pada tangkai  ke  5  dan  6  dari  pucuk  paling  bawah. Sampel  yang  diperoleh  sebanyak  3  kg  sampel (berat  basah)  dan  dibersihkan  dari  kotoran  dan dicuci  dibawah  air  mengalir  sampai  bersih. Setelah  itu  sampel  dikeringkan  dalam  oven dengan  suhu    40ºC selama  1  hari.  Sampel  yang telah  kering  dihaluskan  sampai  menjadi  serbuk simplisia  dan  diayak  kemudian  simpan  dalam wadah yang bersih dan tertutup rapat.

## Ekstraksi Sampel
Sebanyak  500  g  simplisia  daun  pepaya dimasukkan  ke  dalam  toples  lalu  ditambahkan etanol  96%  sampai  dengan  1000  mL.  Wadah ditutup  rapat  dan  dibiarkan  selama  3  hari  di tempat  yang  tidak  terkena  sinar  matahari  sambil
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
sering diaduk. Setelah 3 hari, ekstrak disaring dan ampas  dimaserasi  lagi  dengan  menggunakan pelarut  yang  baru  sampai  diperoleh  ekstrak  akhir yang tidak berwarna. Seluruh maserat digabungkan  dan  duapkan  menggunakan  oven pada temperatur ± 40 0 C sampai diperoleh ekstrak kental . Hitung  nilai  rendemen  ekstrak  dengan rumus:
%Rendemen = 𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑝𝑒𝑟𝑜𝑙𝑒ℎ (𝑔) 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑎𝑤𝑎𝑙 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑡𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔 (𝑔) × 100%

## Pengambilan dan Penyiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  Tikus Putih  Jantan (Rattus  norvegicus) yang  sehat dengan umur 2-4 bulan dan  bobot badan 150-300 gram,  digunakan  15  ekor  yang  dibagi  dalam  5 kelompok masing-masing terdiri atas 3 ekor.

## Pengujian Aktivitas Antiinflamasi
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental laboratorium.
Hewan yang digunakan  adalah  Tikus  Putih  Jantan (Rattus norvegicus) sebanyak 15 ekor, pengujian dilakukan  dengan  5  kelompok  perlakuan  yang berbeda  yakni  3  kelompok  uji,  1  kelompok kontrol  positif  dan  1  kelompok  kontrol  negatif. Kelompok perlakuan tersebut yaitu:
a) Kelompok  perlakuan  I: Rattus  norvegicus + Kontrol negatif dengan CMC 1%
b) Kelompok  perlakuan  II: Rattus  norvegicus + Kontrol positif dengan Natrium Diklofenak 0,9 mg / 200g BB
c) Kelompok perlakuan III: Ascaris lumbricoides + ekstrak Carica papaya L. 9 mg / 200g BB
d) Kelompok perlakuan IV: Ascaris lumbricoides + ekstrak Carica papaya L. 13,5 mg / 200g BB
e) Kelompok  perlakuan  V: Ascaris  lumbricoides + ekstrak Carica papaya L. 18 mg / 200g BB
Prosedur  percobaannya  adalah  sebagai berikut,  tikus  dipuasakan  selama  ±18  jam  tetapi tetap  diberikan  air  minum.  Pengujian  dilakukan dengan  menimbang  berat  badan  masing-masing hewan  uji  dan  diberi  tanda  batas  menggunakan spidol  pada  sendi  kaki  belakang  kiri  tikus, kemudian  diukur  volume  dan  diameter  kaki  kiri tikus menggunakan vial yang berisi air dan jangka sorong.  Data  yang  diperoleh  dicatat  sebagai volume awal dan diameter awal (V 0 dan D 0 ) yaitu volume  dan  diameter  sebelum  diinduksi  dengan larutan  karagenan  dan  diberi  bahan  uji.  Masing- masing  telapak  kaki  tikus  disuntik  secara intraplantar  dengan  0,1  ml  larutan  karagenan  1%
menggunakan  spoit  injeksi,  setelah  30  menit dilakukan  pengukuran volume dan diameter kaki tikus.  Kemudian  masing-masing  tikus  diberi bahan  uji  secara  oral  menggunakan  jarum  sonde sesuai  dengan  kelompoknya.  Setelah  60  menit diinduksi,  dilakukan  pengukuran  volume  dan diameter  kaki  tikus,  dicatat  volume  dan  diameter kaki  tikus  (V t dan  D t )  sebagai  volume  dan diameter  kaki  tikus  setelah  diinduksi  dengan larutan  karagenan  1%  dan  diberi  bahan  uji. Pengukuran dilakukan setiap 60 menit selama 360 menit.

## Analisis Data
Analisa data dilakukan dengan menghitung  persen  edema  yang  bertujuan  untuk menggambarkan  besarnya  edema  yang  terbentuk pada  telapak  kaki  tikus  setelah  diinduksi karagenan dengan rumus sebagai berikut (Swathy et al. , 2010)
%𝑟𝑎𝑑𝑎𝑛𝑔 = 𝑉𝑡 − 𝑉0 𝑉0 𝑥100 %𝑟𝑎𝑑𝑎𝑛𝑔 = 𝐷𝑡 − 𝐷0 𝐷0 𝑥100 Keterangan : Vt / Dt
:  volume  /  diameter  telapak  kaki pada wakti t  (setelah diinduksi karagenan) V0 / D0 :  volume  /  diameter  telapak  kaki  pada waktu 0 (sebelum diinduksi karagenan)
Analisa data selanjutnya yaitu menghitung  persen  inhibisi  radang  yang bertujuan  untuk  meilhat  besarnya  nilai penghambat  edema  yang  dihasilkan  oleh senyawa uji (Kalabharathi et al. , 2011)
% 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 𝑟𝑎𝑑𝑎𝑛𝑔 = 𝐴 − 𝐵 𝐴 𝑥100
Keterangan :
A  :  Persentase  edema  pada  kelompok  kontrol negatif
B  :  Persentase  edema  pada  kelompok  kontrol positif dan kelompok uji
Data  hasil  penelitian  diuji  normalitasnya dengan  uji Saphiro  Wilk ,  data  dikatakan terdistribusi  normal  jika  p  >  0,05,  kemudian dilanjutkan  dengan  uji  homogenitas  (uji Levene ), nilai  p  >  0,05  berarti  data  yang  didapatkan homogeny,  kemudian  dianalisis  secara  statistik menggunakan  metode  ANOVA  ( Analysis  Of Variance) dengan  tingkat  kepercayaan  95%, dilanjutkan  dengan  uji  BNT  (Besar  Nyata Terkecil)  untuk  mengetahui  kelompok  perlakuan
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
yang  berbeda  signifikan  dibandingkan  dengan yang lainnya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Hasil  Rendemen  dapat  dihitung  dengan mengetahui  bobot  ekstrak  kental  dan  bobot simplisia  yang  ditimbang.  Hasil  dari  pembuatan simplisia  daun  pepaya  yaitu  500  gram  lalu dimaserasi  sehingga  diperoleh  ekstrak  kental sampel  yaitu  33,5  gram  dan  hasil  rendemen  yang didapat yaitu 6,7 %.
Pengujian efek antiinflamasi ini menggunakan  metode hind  paw  edema atau pembentukan radang buatan pada telapak kaki kiri tikus  putih  jantan.  Edema  dibuat  dengan penginduksian  larutan  karagenan.  Adapun  hasil dari  volume  dan  diameter  kaki  tikus  telah dirangkum pada tebel 1 dan 2.
Tabel 1 . Volume edema rata-rata telapak kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai  dari  rata-rata  volume  edema  melalui  grafik dibawah ini.
Keterangan: EEDP  : Ekstrak Etanol Daun Pepaya Gambar 1 . Grafik Volume edema rata-rata tiap kelompok perlakuan
Tabel 2 . Diameter edema rata-rata telapak kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai  dari  rata-rata  diameter  edema  melalui  grafik dibawah ini.
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Gambar 2 . Grafik Diameter edema rata-rata tiap kelompok perlakuan
Dari  data  volume  dan  diameter  dapat dihitung  nilai  persentase  edema.  Nilai  persentase menggambarkan  besarnya  edema  yang  terbentuk pada  telapak  kaki  tikus  setelah  diinduksi karagenan.  Adapun  hasil  dari  persen  edema volume  dan  diameter  kaki  tikus  telah  dirangkum pada tebel 3 dan 4.
Tabel 3 . Persen volume edema rata-rata telapak
kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai  dari  rata-rata  persen  volume  edema  melalui grafik dibawah ini.
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya Gambar 3 . Grafik persen volume edema rata-rata tiap kelompok perlakuan
Tabel 4 . Persen diameter  edema rata-rata telapak kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai dari rata-rata persen diameter edema melalui grafik dibawah ini.
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya Gambar 4 . Grafik persen diameter edema rata- rata tiap kelompok perlakuan
Setelah  dihitung  persentase  dari  volume dan  diameter  edema  pada  telapak  kaki  tikus, dilanjutkan  dengan  menghitung  persen  inhibisi radang,  dalam  pengujian  aktivitas  antiinflamasi besarnya nilai penghambat edema yang dihasilkan oleh  senyawa  uji  disebut  persen  inhibisi  edema (radang). Adapun hasil dari persen inhibisi edema volume  dan  diameter  kaki  tikus  telah  dirangkum pada tebel 5 dan 6.
Tabel 5 . Persen inhibisi volume edema rata-rata telapak kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai dari rata-rata inhibisi volume edema  melalui grafik dibawah ini.
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya
Gambar 5 . Grafik persen inhibisi volume edema rata-rata tiap kelompok perlakuan
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Tabel 6 . Persen inhibisi diameter edema rata-rata
telapak kaki tikus
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya Dari tabel diatas maka dapat digambarkan nilai  dari  rata-rata  inhibisi  diameter  edema melalui grafik dibawah ini .
Keterangan : EEDP : Ekstrak Etanol Daun Pepaya Gambar 6 . Grafik persen inhibisi diameter edema rata-rata tiap kelompok perlakuan

## Pembahasan
Pemilihan  daun  papaya  sebagai  sampel untuk  antiinflamasi  karena  adanya  kandungan senyawa  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  glikosida jantung, antrakuinon bebas dan terikat, phlobatinin  dan  sopanin,  pada  penelitian  lainnya diperoleh  bahwa  ekstrak  etanol  daun  pepaya mengandung  kardenolida,  fenolik,  steroid  dan gula.  Senyawa  flavanoid,  steroid,  dan  tannin dalam  bentuk  bebas  dan  kompleks  berkhasiat sebagai antiinflamasi (Milind dan Gurdita, 2011).
Hasil ekstrak kental yang didapat berwarna  kehitaman  dan  rendemen  yang  didapat dari  ekstraksi  dengan  menggunakan  teknik maserasi pada sampel daun papaya sebesar 6,7%. Ada beberapa faktor yang mempengaruhi rendemen  yang  diperoleh  dari  maserasi  seperti faktor  lama  perendaman  sampel  dalam  ekstraksi. Semakin  lama  perendaman  dengan  pelarut  maka
kontak  pelarut  dengan  sampel  akan  semakin  baik sehingga  komponen  didalam  sampel  dapat terekstrak  lebih  maksimal,  hal  ini  menyebabkan rendeman yang didapat semakin besar. Pemilihan pelarut etanol dalam proses maserasi dikarenakan sifat  etanol  yang  dapat  melarutkan  hampir  semua zat.  Kehalusan  bahan  juga  mempengaruhi rendemen ekstrak yang  dihasilkan, semakin halus bahan  yang  digunakan  semakin  tinggi  rendemen yang  dihasilkan.  Hal  ini  dikarenakan  permukaan bahan  semakin  luas  sehingga  memperbesar terjadinya  kontak  antara  partikel  serbuk  dengan pelarut  (Arifin et al., 2006).
Hewan  uji  dibuat  edema  dengan  cara diinduksi menggunakan karagenan 1%.
Keunggulan  penggunaan  karagenan  dalam  uji aktivitas antiinflamasi yaitu mampu menstimulasi peradangan  (edema)  tanpa  menyebabkan  cedera atau  kerusakan  jaringan  pada  telapak  kaki  tikus yang  diuji,  sehingga  metode  ini  yang  paling banyak  digunakan  dalam  pengujian  antiinflamasi (Ismail et  al. ,  2017).  Pengujian  aktivitas antiinflamasi  karagenan  memiliki  kelemahan, dalam  bentuk  cair  karagenan  tidak  dapat digunakan jika lebih dai 24 jam, sedangkan dalam bentuk padat karagenan sangat mudah membentuk gumpalan  yang  sukar  larut,  oleh  karena  itu pembuatan  suspensi  karagenan  harus  dilakukan dengan cermat dan memperhatikan sifat karagenan yang digunakan, sehingga menghasilkan  suspensi  karagenan  yang  baik  dan tidak menghambat pengujian aktivitas antiinflamasi secara prosedur (Morris, 2003).
Bahan  pembanding  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  natrium  diklofenak, dimana  natrium  diklofenak  ini  mempunyai  daya absorbsi  yang  cepat  dalam  tubuh  dengan  efek samping  lebih  rendah  dari  yang  lainnya (indometaxim,  piroxicam)  (Tjay  dan  Kirana, 2002).  Natrium  diklofenak juga  sering  digunakan sebagai  kontrol  pembanding  pada  penelitian  efek antiinflamasi.
Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus  putih  jantan  karena  dapat  diperoleh  dalam jumlah  banyak,  ukuran  telapak  kaki  tikus  lebih mudah  diamati  saat  diukur  edemanya.  Perlakuan hewan  dimulai  dengan  aklimatisasi  terlebih dahulu  selama  dua  minggu  agar  hewan  dapat beradaptasi  dengan  lingkungan,  kemudian  tikus dikelompokan  menjadi  lima  kelompok  yang masing-masing  kelompok  terdiri  dari  tiga  ekor tikus.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Pembentukan  radang  oleh  karagenan menghasilkan peradangan akut dan tidak menyebabkan kerusakan jaringan meskipun radang  dapat  bertahan  selama  360  menit  dan berangsur-angsur  berkurang  selama  satu  hari. Karagenan  sebegai  penyebab  radang  dapat dipengaruhi  oleh  obat  antiradang.  Responnya terhadap obat antiinflamasi lebih peka dibandingkan  dengan  antiiritan  lainnya  (Rowe et al. , 2009).
Tabel  1  dan  tabel  2  dapat  dilihat  bahwa peningkatan  volume  dan  diameter  edema  yang berbeda-beda  pada  masing-masing  kelompok, kontrol  negatif  tidak  memiliki  efek  terhadap penghambatan  radang  akibat  induksi  karagenan karena  tidak  terjadi  penurunan  edema  yang signifikan.  Gambar  grafik  4  dan  5  terlihat  jelas bahwa  kontrol  negatif  mengalami  kenaikan volume  dan  diameter  edema  tertinggi  pada  setiap jam  dibandingkan  dengan  kelompok  lainnya. Sementara  itu  kelompok  positif,  kelompok  uji dosis 13,5 mg/200g BB dan dosis 18 mg/200g BB mengalami peningkatan dari jam pertama dan jam ke-2 lalu menurun pada jam  ke-3 sampai jam ke- 6, sedangkan pada kelompok dosis 9 mg/200g BB mengalami kenaikan dari jam pertama sampai jam ke-3 dan menurun dari jam ke-4 sampai jam ke-6.
Tabel  3  dan  tabel  4  menunjukan  bahwa persen  radang  terbesar  terdapat  pada  kontrol negatif  yaitu  volume  461,66  %  dan  diameter  144 %.  Persen  radang  pada  semua  kelompok  uji mengalami  penurunan  secara  bertahap  sedangkan pada kelompok kontrol negatif masih berlangsung sampai jam  ke-5  dan  meurun  pada jam  ke-6.  Hal ini menunjukan bahwa karagenan konsentrasi 1% dengan  volume  penyuntikan  0,1  mL  merupakan agen  penginduksian  yang  baik  dan  dapat menimbulkan peradangan yang sigifikan.
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persentase inhibisi  radang,  kelompok  uji  yang  memiliki persen  inhibisi  terbesar  adalah  dosis  uji  13,5 mg/200g  BB  yakni  sebesar  100%  pada jam  ke-6. Penghambatan  edema  dosis  13,5  mg/200g  BB dimulai  dari jam  ke-3.  Daya  hambat  edema  dosis 13,5  mg/200g  BB  hampir  sama  dengan  kontrol positif  dari  jam  ke-4  sampai  jam  ke-6.  Dosis  uji yang  memiliki  persen  inhibisi  radang  terkecil yaitu dosis 18 mg/200g BB yaitu volume 25,50% dan  diameter  30,17%  dan  dosis  9  mg/200g  BB mampu  menghambat  edema  sebesar  volume 92,13% dan diameter 96,66% pada jam ke-6. Dari gambar  7  dan  8  dapat  dilihat  penghambatan edema  dosis  9  mg/200g  BB  mulai  mengalami
peningkatan  pada  jam  ke-4.  Hal  ini  menunjukan bahwa  dosis  9  mg/200g  BB  mulai  memberikan efek  antiinflamasi  pada  jam  ke-4  dan  terus meningkat  hingga  jam  ke-6.  Peningkatan  persen inhibisi  radang  pada  jam  ke-6  dapat  dipengaruhi oleh  terjadinya  penurunan  edema  dijam  tersebut. Pada  tabel  5  dan  6  dapat  dilihat  bahwa  jam  ke-6 persentase  edema  telapak  kaki  tikus  mengalami penurunan.  Penurunan  edema  yang  terjadi  pada jam  ke-6  ini  berhubungan  dengan  durasi  kerja karagenan  dalam  menginduksi  edema.  Edema yang disebabkan oleh karagenan mampu bertahan selama 5-6 jam, sehingga telah berkurangnya efek karagenan  dalam  menginduksi  edema  dan dipengaruhi  besarnya  persentase  inhibisi  edema yang dihasilkan (Morris, 2003).
Berdasarkan  data  persen  inhibisi  radang, besarnya  kemampuan  dalam  menghambat  edema bergantung  pada  dosis.  Artinya,  dosis  yang berbeda akan menghasilkan aktivitas antiinflamasi yang  berbeda.  Pada  dosis  yang  paling  tinggi, yakni 18 mg/200g BB besarnya nilai penghambatan edema lebih kecil jika dibandingkan  dengan  dosis  13,5  mg/200g  BB yakni  100%  pada  jam  ke-6,  dari  data  persen inhibisi  edema,  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa dosis  13,5  mg/200g  BB  merupakan  dosis  yang memiliki  kemampuan  menghambat  edema  yang paling  tinggi  dibandingkan  dengan  dua  dosis  uji lainnya.
Tahap  terakhir  dari  penelitian  ini  adalah analisis  data  secara  statistik.  Adapun  data  yang dianalisa  secara  statistik  adalah  data  persentase edema  (Umar et  al., 2012).  Langkah  pertama dilakukan  uji Saphiro  Wilk untuk  melihat normalitas  data  dan  uji Levene untuk  melihat homogenitas  data.  Dari  data  dua  pengujian tersebut  disimpulkan  bahwa  data  persentase edema  tidak  terdistribusi  normal  dan  tidak terdistribusi secara homogen. Langkah selanjutnya  adalah  pengujian T-test karena  data pengujian yang terdistribusi normal dan homogen hanya  dua  data  saja,  dan  karena  ada  data  pada penelitian  ini  tidak  memenuhi  persyaratan normalitas  dan  homogenitas  maka  pengujian dilanjutkan dengan metode Kruskal-wallis. Hasil  Uji Kruskal-wallis menunjukan persentase  edema  seluruh  kelompok  dari  jam  ke- 2,4,5,6  berbeda  secara  signifikan  (ρ  ≤  0,05). Selanjutnya  dilakukan  uji  BNT  (Besar  Nyata Terkecil)  untuk  mengetahui  kelompok  perlakuan yang  berbeda  signifikan  dibandingkan  dengan yang  lainnya.  Dari  uji  BNT  (Besar  Nyata
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Terkecil)  persentase  kelompok  kontrol  negatif berbeda  secara  bermakna  dengan  kontrol  positif dan  kelompok  uji  dosis  9  mg/200g  BB,  13,5 mg/200g  BB,  18  mg/200g  BB  (ρ  ≤  0,05).  Jika dibandingkan  dengan  kelompok  konrol  positif persentase  edema  dosis  9  mg/200g  BB  berbeda secara bermakna pada jam ke-2 dan jam ke-5 (ρ ≤ 0,05).  Sedangkan  dosis  13,5  mg/200g  BB  tidak berbeda  secara  bermakna  dengan  kontrol  positif (ρ ≥ 0,05). Dosis 18 mg/200g BB berbeda secara bermakna  dengan  kelompok  kontrol  positif  pada jam ke-5 (ρ ≤ 0,05).
Uji T-test menunjukan  persentase  edema seluruh kelompok tidak berbeda secara signifikan (ρ ≥ 0,05). Selanjutnya dilakukan Uji BNT (Besar Nyata  Terkecil)  untuk  mengetahui  kelompok perlakuan  yang  berbeda  signifikan  dibandingkan dengan  yang  lainnya.  Dari  persentase  kelompok kontrol  negatif  berbeda  secara  bermakna  dengan kontrol positif dan kelompok uji dosis 9 mg/200g BB,  13,5  mg/200g  BB,  18  mg/200g  BB  (ρ  ≤ 0,05).  Kontrol  positif  persentase  edema  dosis  9 mg/200g  BB  berbeda  secara  bermakna  pada  jam ke-1  dan  jam  ke-3  (ρ  ≤  0,05),  sedangkan  dosis 13,5 mg/200g BB tidak berbeda secara bermakna dengan  kontrol  positif  (ρ  ≥  0,05).  Dosis  18 mg/200g  BB  berbeda  secara  bermakna  dengan kelompok  kontrol  positif  pada  jam  ke-1  dan  jam ke-3 (ρ ≤ 0,05). Selain itu persentase edema dosis 9  mg/200g  BB  berbeda  secara  signifikan  dengan dosis  uji  13,5  mg/200g  BB  dan  dosis  uji  18 mg/200g  BB  pada  jam  ke-3.  Hal  ini  menunjukan bahwa  penghambatan  edema  pada  dosis  9 mg/200g  BB  lebih  kecil  dibandingkan  dengan dosis  uji  13,5  mg/200g  BB  dan  dosis  uji  18 mg/200g BB.
Berdasarkan  data  statistik  tersebut    dapat diambil  kesimpulan  bahwa  dosis  uji  9  mg/200g BB, 13,5 mg/200g BB, 18 mg/200g BB memiliki aktivitas antiinflamasi sehingga mampu menghambat  peningkatan  volume  dan  diameter edema  pada  telapak  kaki  tikus  dan  dapat disimpulkan juga bahwa kemampuan penghabatan edema  yang  dimiliki  dosis  13,5  mg/200g  BB signifikan dengan kontrol positif .
Penelitian  uji  efek  antiinflamasi  ekstrak etanol  96%  daun  papaya  ini  menunjukan  bahwa efek tergantung dari dosis pada peningkatan dosis tertentu.  Efek  antiinflamasi  dapat  dilihat  dari kandungan  pada  daun  pepaya  yaitu  senyawa flavonoid, steroid, dan tannin dalam bentuk bebas dan  kompleks  berkhasiat  sebagai  antiinflamasi. Pada  penelitian  lain  mengenai  uji  antiinflamasi
oleh  Sukmawati,  Yuliet  dan  Ririen  Hardani (2015) pada tumbuhan yang sama-sama mempunyai  senyawa  yaitu  flavonoid  dan  tanin serta  dosis  yang  sama,  terjadi  hasil  yang  hampir sama  bahwa  dosis  sedang  adalah  dosis  dengan penghambatan  edema  yang  paling  baik,  Pada penelitian  tersebut  dari eksrak  daun  dengan  dosis 9  mg/200g  BB,  13,5  mg/200g  BB  dan  18 mg/200g  BB  didapatkan  bahwa  dosis  13,5 mg/200g BB adalah dosis yang paling baik dalam menghambat  inflamasi  dibandingkan  dengan variasi dosis lainnya.
Selain  flavonoid  senyawa  bioaktif  lain yang  berpotensi  sebagai  antiinflamasi  yaitu tannin.  Tannin  mempunyai  aktivitas  antioksidan. Antioksidan berperan sebagai antiinflamasi dengan berbagai cara yaitu menghambat produksi oksidan  oleh  neutrophil,  monosit  dan  makrofag. Penghambatan  produksi  oksidan  dan  mengurangi pembentukan  H 2 O  yang  mengakibatkan  produksi asa, hipoklorid dan OH ikut terhambat. Antioksidan  juga  berperan  sebagai  penghambat langsung  oksidan  reaktif  seperti  radikal  hidroksi dan asam hipoklorid (Robinson, 2011).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  pepaya  ( Carica papaya L.) memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi  terhadap  tikus  putih  jantan  yang diinduksi  karagenan.  Dosis  ekstrak  etanol  yang paling  efektif  memberikan  efek  antiinflamasi yaitu dosis 13,5mg/200gBB dengan penghambatan  edema  100%  dan  tidak  berbeda secara signifikan dengan kontrol positif (ρ≥0,05).

## SARAN
Disarankan  bagi  peneliti  selanjutnya untuk  melakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk mengetahui  mekanisme  kerja  dan  kandungan spesifik zat aktif yang berperan dalam antiinflamasi.  Serta  perlu  dilakukan  penelitian lebih lanjut mengenai metode peradangan lainnya seperti kasus OA (Osteoarthritis), luka bakar atau penyebab autoimun lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Helmi  Arifin.,  Melissa.,  Almahdy.  2004.  Efek Antidiabetes  Ekstrak  Etanoldaun  Eugenia Cumini Merr Pada Mencit Diabetes Yang Diinduksi  Aloksan. Journal  Matematika dan pengetahuan Alam . 13(1): 32-37.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Ismail,  S.M.,  Rao,  K.S.,  Bhaskar,  M.  2017. Evaluation  of  Antiinfammatory  Activity of  Boswellia  Serrata  On  Carrageenan Inducted  Paw  Edema  In  Albino  Wistar Rats. International Journal of Research In Medical Sciences . 4(7): 2980-2986.
Kalabharathi, H.L. et al.
2011. Anti Inflammatory  Activity  of  Fresh  Tulsi Leave  (Ocimum  Sanctum)  in  Albino Rats . International Journal of Pharma and Bio Sciences. 4(2): 45-50.
Katzung,  B.G. et  al .  2009. Basic  And  Clinical
Pharmacology. Eleventh Edition.
McGraw Hill, New York.
Milind,  P.  &  Guardita.  2011.  Basketful  Benefits Of Papaya. IRJP . 2(7): 6-12.
Murphy,  H.  2007 .  Inflammation .  Saunders Elsevie, Philadelphia.
Morris,  C.J.  2003.  Carrageenan-inducted  Paw
Edema  In  The  Rat  And  Mouse.
Journal  Inflammation  Protocols .  115-
121.
Rowe,  R.C.,  Sheskey,  P.J.,  &  Quinn,  M.E.  2009.
Handbook of Pharmaceutical Excipients. Lexi-Comp, American Pharmaceutical Association. Robinson, T. 2011. Kandungan Organik
Tumbuhan Tinggi. ITB, Bandung.
Sriningsih dan Agung, E.W. 2006. Efek Protektif
Pemberian  Ekstrak  Etanol  Herba Meniram ( Phyllanthur  niruri L.) Terhadap  Aktivitas  dan  Kapasitas Fagositosis Makrofag Peritoneum Tikus. Journal Artocarpus  Media
Pharmaceutical Indonesia . 6(2): 91-96.
Swathy,  B. et  al. 2010.  Evaluation  of  Analgesic and  Antiinfammatory  Properties  of Chloris  Babata  (sw.). International
Journal of Phytopharmacology.
2(1): 92-96.
Tjay,  Tan  H.,  Kirana  Rahardja.  2002.  Obat Penting:  Khasiat,  Penggunaan,  dan Efek-efek  Sampingnya,  Edisi  Kelima. PT  Elexmedia  Kopuntido  Kelompok Gramedia, Jakarta.
Umar.,  M.I.,  Asmawi,  M.Z.,  Sadikun,  A., Atangwho,  I.J.,  Yam,  M.F.,  Altaf,  R., & Ahmed, A. 2012. Bioactivity-guided Isolation of Ethyl-p-methoxycinnsmate, and Anti-inflamatory Constituent, from Kaempferia  Galanga  L.  Extracts . Molecules. 17(7): 8720-8734.