## BAKTERI SIMBION AKAR MANGROVE
Avicennia sp.

## SEBAGAI PENDEGRADASI PEWARNA TEKSTIL
Nor Sa’adah
Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan Universitas Hang Tuah, Surabaya
Email: nor.saadah@hangtuah.ac.id

## ABSTRAK
Pewarna  tekstil  merupakan  bahan  yang  berpengaruh  negatif  terhadap  kualitas  lingkungan, salah  satu  pewarna  tekstil  tersebut  adalah crystal  violet. Biodegradasi  adalah  salah  satu  cara yang  digunakan  dalam  pengolahan  limbah  dan  dapat  memanfaatkan  kemampuan  aktivitas mikroba  untuk  mendegradasi  limbah.  Mangrove  merupakan  ekosistem  yang  banyak ditemukan di sepanjang pesisir perairan di area tropis dan subtropis. Mikroorganisme seperti bakteri  mampu  hidup  dan  berkembang  pada  perakaran  mangrove.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi  secara  morfologi  bakteri  yang  hidup  pada  akar mangrove dan mampu mendegradasi pewarna tekstil. Penelitian ini dilakukan dengan metode eksperimantal laboratories . Sampel diisolasi secara steril dari akar mangrove yang diperoleh di  Wonorejo  Surabaya.  Proses  isolasi  dan  identifikasi  morfologi  bakteri  dilakukan  di Laboratorium  Mikrobiologi  Universitas  Hang  Tuah  Surabaya.  Metode  isolasi  dilakukan dengan menggunakan metode spread , dan purifikasi bakteri dilakukan dengan metode streak . Hasil penelitian diperoleh 10 isolat bakteri dari hasil isolasi dan identifikasi secara morfologi, sedangkan bakteri yang mampu mendegradasi pewarna tekstil crystal violet ada 2 isolat yaitu AB.1.2 dan AB.1.5 yang ditunjukkan dengan adanya zona bening.
Kata Kunci : Bakteri, degradasi, isolasi, mangrove, pewarna tekstil

## ABSTRACT
Textile dye is a material that has a negative effect on environmental quality, one of the textile dyes  is  violet  crystal.  Biodegradation  is  one  of  the  methods  that  used  in  waste  treatment  and can take advantage of microbial activity to degrade waste. Mangroves are ecosystems that are found along coastal waters in tropical and subtropical areas. Microorganisms such as bacteria are  able  to  live  and  develop  in  mangrove  roots.  This  study  aims  to  isolate  and  identify  the bacteria  that  live  on  mangrove  roots  morphologically  and  are  able  get  degrade  textile  dyes. This  research  was  conducted  using  experimental  laboratory  methods.  Samples  were  isolated from  mangrove  roots  obtained  in  Wonorejo  Surabaya  sterilely.  The  process  of  isolation  and verification of bacterial morphology was carried out at the Microbiology Laboratory of Hang Tuah University, Surabaya. The method of isolation was carried out using the spread method, and  the  purification  of  the  bacteria  was  carried  out  using  the  streak  method.  The  results obtained  10  bacterial  isolates  from  the  results  of  isolation  and  morphological  examination, while  2  isolates  were  able  to  degrade  the  violet  crystal  textile  dye,  called  AB.1.2  and  AB.1.5 which were indicated by the presence of clear zones.
Keywords : Bacteria, degradation, isolation, mangroves, textile dyes
Sa’adah, N./Barakuda 45 2 (2), 50-55 e-ISSN : 2656-7474 DOI: https://doi.org/10.47685/barakuda45.v2i2.91 2020

## PENDAHULUAN
Industri  tekstil  memberi  pengaruh negatif  terhadap  kualitas  perairan,  efek negatif  ini  berasal  dari  bahan  kimia  pada proses  pewarnaan  dan  bersifat  racun  serta berbahaya.  Selain  dapat  menyebabkan pencemaran  lingkungan,  limbah  pewarna dapat juga berdampak buruk bagi kesehatan karena mengakibatkan
disabilitas  fisik  dan  mental  (Widowati et al ., 2008).
Crytal  Violet adalah  pewarna  tekstil golongan  trifenilmetana yang  mudah terlarut  dalam  air  dan  memberikan  warna ungu  pada  tekstil.  Pewarna  ini  biasanya digunakan  dalam  metode  gram  untuk mengklasifikasikan jenis bakteri dan merupakan  pewarna  umum  dalam  industri kain,  tekstil,  kulit,  dan  kosmetik  (Khataee et  al., 2009).  Crystal  Violet  memiliki  sifat karsinogenik  yang  berbahaya  bagi  hewan maupun manusia, serta akan menetap pada lingkungan  dalam  waktu  yang  lama (McKay 1992).
Wonorejo adalah kelurahan di wilayah kecamatan Rungkut kota Surabaya yang menjadi kawasan konservasi mangrove dalam program Mangrove
Ecosystem  Conservation  and  Sustainable Use (MECS). Avicennia  sp. merupakan salah  satu  jenis  mangrove  yang  tumbuh  di Wonorejo  dan  dijumpai  di  sepanjang pantai. Avicennia  sp. mempunyai  akar berbentuk  seperti  pensil  yang  tumbuh  di atas substrat.
Mangrove  memiliki  banyak  manfaat bagi  kehidupan  manusia,  diantaranya sebagai  obat  tradisional.  Mikroorganisme seperti bakteri dapat  menjadi sumber  yang kaya  produk  alami.  Hal  ini  dikarenakan kondisi  hidup  mereka  dipengaruhi  oleh berbagai faktor seperti
salinitas, nutrisi, temperatur yang bervariasi  dan  kompetisi  dengan  sesama mikroorganisme  lainnya  (Atalla et  al. , 2008).  Ekosistem  mangrove  diketahui memiliki  keanekaragaman  mikroba,  salah satunya adalah bakteri. Bakteri di ekosistem  mangrove  dapat  berupa  bakteri asosiasi ataupun simbion (Sahoo and Dhal, 2009).
Bakteri  adalah  organisme  yang sangat berperan dalam proses biodegradasi limbah.  Penelitian  ini  perlu  dilakukan untuk  mendapatkan    bahan  alami  ramah lingkungan  yaitu  bakteri  yang  dapat mendegradasi  pewarna  tekstil,  khususnya bakteri  yang  berasosiasi  atau  bersimbion dengan  mangrove  di  bagian  akar  dengan cara  mengisolasi,  dan  mengidentifikasi secara  morfologi  dan  melakukan  uji potensi  bakteri  yang  dapat  mendegradasi pewarna crystal violet . Penelitian ini hanya sebatas  mengetahui  ada  tidaknya  bakteri yang mampu mendegradasi pewarna tekstil berdasarkan zona bening yang terlihat pada saat  uji  potensi  bakteri.  Penelitian  ini  juga dimaksudkan sebagai awal untuk penelitian selanjutnya,  seperti  manfaat  bakteri  yang ditemukan  pada  akar  mangrove  di  bidang kelautan.

## METODE PENELITIAN

## Materi Penelitian
Materi yang digunakan pada penelitian ini  adalah  akar  yang  diambil  dari  mangrove jenis Avicennia sp . yang  terdapat  di  daerah Wonorejo, Surabaya. Penelitian ini dilaksanakan  pada  bulan  Februari  2018 sampai dengan Agustus 2018.

## Persiapan Alat dan Bahan
Alat  yang berbahan kaca  dibersihkan dengan  cara  dicuci  sebelum  dipakai. Selanjutnya dibungkus kertas dan
Sa’adah, N./Barakuda 45 2 (2), 50-55 e-ISSN : 2656-7474 DOI: https://doi.org/10.47685/barakuda45.v2i2.91 2020
disterilkan  dengan autoclave pada  suhu 121 o C  selama  20  menit  dan  tekanan  1,5 atm. Kemudian dikeringkan menggunakan  oven,  sedangkan  media disterilkan  pada  suhu  121 o C  selama  15 menit dan tekanan 1,5 atm.

## Pengambilan Sampel
Akar  mangrove  diambil  dengan  cara diptong sepanjang 3-5  cm.  Akar mangrove Avicennia sp.  dibersihkan  dengan  air  laut steril, dimasukkan ke dalam plastik zip lock kemudian disimpan dalam cool box .

## Isolasi Bakteri
Sampel
akar dibersihkan menggunakan air laut steril dan dihaluskan. Kemudian,  memasukkan  1  mL  sampel kedalam  tabung  reaksi  9  mL  air  laut  steril dan akan diperoleh pengenceran 10 -0 . 1 mL sampel    pada    pengenceran  10 -0 diambil menggunakan  pipet  steril  dan dimasukkan ke    dalam    tabung    reaksi    yang    berisi    9 mL  dan  diperoleh  pengenceran  10 -1 .
Demikian  seterusnya  hingga  pengenceran sampel  10 -2 , 10 -3 , 10 -4 , dan 10 -5 (Radjasa et al. , 2007). Pengenceran  10 -3 ,  10 -4 ,  dan  10 -5 diambil  35  μL  dan  di spread ke  dalam cawan  petri  steril  yang  sudah  diberi  media agar (media Zobell 2216E) dengan menggunakan spreader (Radjasa et  al , 2007).  Cawan  petri  tersebut  dibungkus plastik wrap agar terhindar dari kontaminasi.  Cawan  petri  diinkubasi  pada suhu  30 o C  selama  2  sampai  7  hari.  Koloni bakteri yang tumbuh diamati bentuk, warna, dan teksturnya. Setiap koloni  yang berbeda warna dan bentuk dipisahkan, dan dilakukan pemurnian isolat tiap-tiap bakteri (Radjasa  dan  Sabdono,  2003;  Murniasih dan Rasyid, 2010).

## Purifikasi dan Identifikasi Bakteri
Purifikasi pada penelitian ini
dilakukan  dengan streak  metode yaitu dengan  cara  menggoreskan  koloni  bakteri ke media agar.  Jarum ose digunakan untuk memisahkan  koloni  bakteri  berdasarkan perbedaan warna dan bentuk koloni bakteri yang tumbuh pada media agar. Selanjutnya diperoleh  isolat  murni  sehingga  harus disimpan pada media agar miring (Radjasa dan Sabdono, 2003; Murniasih dan Rasyid, 2010).
Uji  Potensi  Bakteri  terhadap Crystal Violet
Uji potensi degradasi bakteri terhadap crystal violet dilakukan menggunakan  metode overlay (Sabdono et al., 2015).  Bakteri  diambil  satu  ose  dan ditumbuhkan  di  media  zobell  2216E  pada cawan petri (4 titik koloni bakteri ditumbuhkan  pada  satu  cawan  petri)  dan dibentuk  menjadi  bulatan  kecil.  Selanjutnya cawan  petri  dibungkus  dengan  plastik wrap dan  diinkubasi  selama  48  jam.  Setelah  48 jam, pewarna crystal violet dengan konsentrasi  50  ppm  dimasukkan  ke  dalam media agar dengan volume 200 mL.
Media  agar  dituang  ke  cawan  petri yang  berisi  biakan  bakteri  yang  sudah diinkubasi  48  jam  sebelumnya,  kemudian diinkubasi  selama  12-24  jam  dan  diamati perkembangannya.  Jika  terbentuk  zona bening  (zona  hambat),  maka  isolat  bakteri tersebut diduga mampu mendegradasi pewarna crystal  violet (Sabdono et  al., 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  bakteri  pada  penelitian  ini diperoleh  10  isolat  bakteri  simbion (Gambar 1). Isolat bakteri tersebut masing- masing  memiliki  koloni  yang  berbeda. Koloni bakteri memiliki perbedaan morfologi,  morfologi  koloni  yang  diamati pada  penelitian  ini  meliputi  warna,  bentuk
Sa’adah, N./Barakuda 45 2 (2), 50-55 e-ISSN : 2656-7474 DOI: https://doi.org/10.47685/barakuda45.v2i2.91 2020
dan  elevasi  (Tabel  1).  Isolat  bakteri  yang diidentifikasi  secara  morfologi  tersebut dipisahkan dan dimurnikan dengan metode  goresan  ( streak  metode ).  Hasil purifikasi ditunjukkan pada Gambar 2
Gambar 1. Bentuk Koloni dan Isolat Bakteri akar mangrove Avicennia sp.
Gambar  2. Hasil  purifikasi  Isolat Bakteri akar mangrove Avicennia sp.
Isolasi  bakteri  pada  penelitian  ini menggunakan  metode  pengenceran  dan metode spread  plate (Brock  and  Madigan, 1991)  dengan  media  agar,  dimana  media tersebut  merupakan  media  yang  umum digunakan untuk  menumbuhkan bakteri  laut (Radjasa et  al .,  2007).  Berdasarkan  hasil isolasi bakteri dari akar mangrove Avicennia sp. Didapatkan 10 isolat bakteri. Beberapa  penelitian  yang  berhasil mengisolasi bakteri dari mangrove
diantaranya  adalah:  isolasi  bakteri  dari serasah  daun Avicennia  alba di  hutan mangrove  Peniti  Pontianak  sebanyak  14 isolat  (Ningsih et  al .,  2014).  Isolasi  bakteri dari  lumpur  di  kawasan  mangrove  Cilacap sebanyak  30  isolat  dan  di  Indramayu diperoleh  10  isolat  (Triyanto et  al .,  2009). Permadi  dan  Zulaika  (2016),  mendapatkan 11  isolat  dari  tanah  di  kawasan  mangrove Wonorejo.
Tabel 1. Hasil Identifikasi Morfologi Bakteri dan Zona Hambat akar mangrove Avicennia sp.
No. Kode Bakteri Warna Bentuk Elevasi Zona Hambat 1. AB.1.1 Putih Susu Circular Raised - 2. AB.1.2 Putih Susu Circular Convex + 3. AB.1.3 Putih Keruh Irregular Raised - 4. AB.1.4 Putih Keruh Irregular Convex - 5. AB.1.5 Putih Susu Irregular Raised + 6. AB.2.1 Putih Bening Irregular Convex - 7. AB.2.2 Putih Susu Irregular Convex - 8. AB.2.3 Putih Bening Circular Convex - 9. AB.2.4 Coklat Bening Irregular Convex - 10. AB.2.5 Coklat Bening Circular Raised - Morfologi  koloni  pada  penelitian  ini, diperoleh 4 variasi warna koloni yaitu putih susu,  putih  keruh,  putih  bening,  dan  coklat
bening,  2  variasi  bentuk  yaitu circular dan irregular dan  2  variasi  elevasi  yaitu convex dan raised (Tabel. 1).
Gambar 3. Hasil Zona Hambat pada Isolat AB.1.2 dan AB.1.5.
Hasil  uji  potensi  bakteri  terhadap pewarna crystal  violet terdapat  2  isolat bakteri yang  menunjukkan  adanya  zona hambat  (zona  bening)  yang  artinya  isolat bakteri tersebut dapat mendegradasi pewarna tekstil crystal  violet ,  yaitu  AB.1.2  dan AB.1.5  (Tabel  1  dan  Gambar.  3).  Isolat bakteri  tersebut  mempunyai  kemampuan mendegradasi pewarna tekstil. Hal ini sesuai dengan  bakteri  yang  bersimbion  dengan tumbuhan  mangrove  maupun  berinteraksi dengan berbagai biota laut lainnya, mempunyai  peran  penting  dalam  menjaga keberlangsungan  kehidupan  laut  karena mampu  mendegradasi  senyawa  organik menjadi  senyawa anorganik  (nutrisi).  Dalam keadaan aerobic beberapa bakteri dilaporkan terdapat aktivitas sebagai penghilang pewarna tekstil, diantara adalah
Streptococcus  faecalis,  Bacteroides sp., Proteus  vulgaris , Clostridium sp.,  dan , Eubacterium sp., (Bragger et al ., 1997 dalam Suhendra et al ., 2013).
KE SIMPULAN
Hasil isolasi bakteri pada akar mangrove Avicennia sp.  dari  kawasan mangrove  Wonorejo  diperoleh  10  isolat
bakteri  yang  mempunyai  ciri  morfologi  yang berbeda  dan  diperoleh  2  isolat  bakteri  yang mampu  mendegradasi  pewarna crystal  violet yaitu isolat AB.1.2 dan AB.1.5.

## SARAN
Penelitian lanjutan terkait jenis bakteri yang  mendegradasi  pewarna  perlu  dilakukan untuk mengetahui jenis atau spesies bakteri.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih Peneliti sampaikan  kepada  Universitas  Hang  Tuah yang memberikan pendanaan dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Atalla,  M.  M.,  H.  K.  Zeinab,  R.  H.  Eman,  A. Y. Amani, A. Abd. El Aty Abeer. 2008. Production  of  some  biologically  active secondary  metabolites  from  marine- derived fungus Varicosporina ramulosa .
Malay. J. Microb. , Vol. 4 (1): 14-24. Brock, T.D. and M.T. Madigan. 1991. Biology
of Microorganism Sixth Edition. Prentice  Hall.  Englewood  Cliff.  New
Jersey. 361-362
Khataee,  A.  R.,  M.  N  Pons,  dan  O.  Zahraa. 2009.  Photocatalytic  degradation  of three  azo  dyes  using  immobilized  TiO2
Sa’adah, N./Barakuda 45 2 (2), 50-55 e-ISSN : 2656-7474 DOI: https://doi.org/10.47685/barakuda45.v2i2.91 2020
nanoparticles  on  glass  plates  activated by  UV  light  irradiation:  Influence  of dye  molecular  structure.  J.  Hazard. Mater. 168, 451– 457.
McKay,  G.  1992.  The  Removal  of  Dye Colours  from  Aqueous  Solutions  by Adsorption  on  Low-cost  Materials.  J. Chem. Technol. Biotechnol. 32, 759. Murniasih,  T.  dan  A.  Rasyid.  2010.  Potensi Bakteri yang Berasosiasi dengan Spons
Asal Barrang Lompo (Makasar)
Sebagai  Sumber  Bahan  Antibakteri. Oseanol.  Lomnol.  Indonesia.  Vol.  36 (3): 281 – 292.
Ningsih,  R.L.,  S.  Khotimah  dan  I.  Lovadi. 2014.  Bakteri  Pendegradasi  Selulosa dari  Serasah  Daun Avicennia  alba Blume  di  Hutan  Mangrove  Peniti Kabupaten Pontianak . Protobiont. Vol. 3 (1): 34-40.
Permadi,  L.M  dan  E.  Zulaika.  2016.  Isolasi
Bakteri Resisten Antibiotik dari Kawasan Mangrove Wonorejo Surabaya.  Jurnal  Sains  dan  Seni  ITS. Vol. 5 (2): 71-73.
Radjasa,  O.K.  dan  A.  Sabdono.  2003. Keanekaragaman Genetik Bakteri Laut Penghasil Senyawa Anti Bakteri dalam Pengendalian  Penyakit  pada  Udang. Laporan  Kegiatan  Proyek  Penelitian Ilmu  Pengetahuan  Dasar,  Pusat  Kajian Pesisir  dan  Laut  Tropis  Lembaga Penelitian Universitas Diponegoro. Radjasa,  O.K.,  A.  Sabdono,  Junaidi  and  E.
Zoochi.  2007.  Richness  of  Secondary
Metabolite  Producing  Marine  Bacteria Assosiated  with  Sponge Haliclone sp. J. Pharmaca., Vol. 3 (3): 275 – 279.
Sabdono, A., P.G. Sawonua, A.G.D. Kartika,
J.M. Amelia and O.K. Radjasa. 2015. Coral  Diseases  in  Panjang  Island,
Java Sea: Diversity of Anti– Pathogenic Bacterial Coral Symbionts. Elsevier. Procedia Chemistry. 14 : 15-21. Sahoo,  K,  and  N  K  Dhal.  2009.  Potential Microbial  Diversity  in  Mangrove
Ecosystems  :  A  Review. Indian Journal  of  Marine  Sciences .  Vol.38
(2): 249–56.
Suhendra,  E.,  Purwanto.,  dan  E.  Kardena. 2013.  Potensi  Keberadaan  Polutan Klorozianilin  di  Sungai  Citarum  Akibat Biotranformasi  Pewarna  Azo  dari  Air Limbah  Tekstil. Prosiding  Seminar Nasional  Pengelolaan  Sumberdaya  dan Lingkungan . 475-481.
Triyanto , A.  Isnantsetyo,  I.D.  Prijambada,  J.
Widada  dan  A.  Tarmiawati.  2009. Isolasi,  Karakterisasi  dan  Uji  Infeksi
Bakteri Proteolitik dari Lumpur Kawasan Hutan Bakau. Jurnal Perikanan
( J. Fish. Sci ). Vol. XI (1): 13-18. Widowati,  W.,  A.  Sastiono  dan  R.  Jusuf. 2008. “Efek Toksik Logam” Pencegahan dan Penanggulangan Pencemaran. Penerbit ANDI Yogyakarta