KESERAGAMAN  DAN  KESTABILAN  KARAKTER  TANAMAN MELON  ( CUCUMIS  MELO
L.  ‘TACAPA  GOLD’)

## BERDASARKAN  KARAKTER  FENOTIP  DAN INTER-SIMPLE SEQUENCE REPEAT
Character Uniformity and Stability of Melon (Cucumis Melo  L. ‘Tacapa Gold’) Based on Phenotype  Characters and Inter-Simple Sequence Repeat

## Faridatul Hidzroh dan Budi Setiadi Daryono
Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada,  Sleman - Yogyakarta 4552861, Telp./Fax: (0274) 580839 Email: bs_daryono@mail.ugm.ac.id
Abstrak
Melon  ‘Tacapa  Gold’  merupakan  varietas  melon  hasil  pemuliaan  yang  dilakukan  oleh Laboratorium Genetika dan Pemuliaan yang memiliki karakter berupa bentuk globular , kulit muda hingga tua berwarna dasar kuning dengan net pada kulit buahnya serta warna daging buah hijau.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  keseragaman  dan  kestabilan  karakter fenotip  berdasarkan  karakter  morfologis  dan  molekuler.  Metode  yang  yaitu  pengamatan karakter  fenotip  dan  amplifikasi  DNA  dengan  PCR-ISSR.  Analisis  karakter  kuantitatif menggunakan  analisis  sidik  ragam  menggunakan  PKBT-STAT  3.1.  dengan  metode Turkey (5%).  Pengambilan  data  keseragaman  secara  molekuler  dilakukan  dengan  menggunakan metode  PCR-ISSR  dengan  primer  UBC-807,  UBC-808,  UBC-  810,  dan  UBC-824.  Hasil analisis  fenotip  kualitatif  menunjukkan  karakter  melon  ‘Tacapa  Gold’  seragam.  Karakter fenotip secara kuantitatif cenderung masih bervariasi dan belum seragam apabila dibandingkan dengan melon 'Tacapa Gold’ generasi sebelumnya. Hasil keseragaman fenotip melon ‘Tacapa Gold’ berdasarkan penanda ISSR memiliki tingkat keseragaman yang tinggi (indeks similaritas ≥70%). Rata-rata polimorfisme pada melon ‘Tacapa Gold’ rendah yaitu 24,25%.
Kata Kunci : ISSR, melon, fenotip, keseragaman
Abstract Melon ‘Tacapa Gold’ is a melon variety produced by the Genetics and Breeding Laboratory which has the character of a globular shape, yellow rind, and green flesh color. The purpose of  this  study  is  to  determine  the  uniformity  and  stability  of  phenotypic  characters  based  on morphology  and  molecular.  The  methods  used  include  observation  of  phenotypic  and  DNA amplification  by  PCR-ISSR  Quantitative  character  analysis  uses  analysis  of  variance  using PKBT-STAT 3.1. (Turkey 5%). Molecular uniformity data collection is carried out using the PCR-ISSR  method  using  UBC-807,  UBC-808,  UBC-811,  and  UBC-824  primers.  The phenotypic  analysis  results  obtained  that  melon  character  ‘Tacapa  Gold’  is  qualitatively uniform. Quantitative phenotypic characters tend to be varied when compared to the previous generation of 'Tacapa Gold' melons. Melon Tacapa Gold’ undergoes a change in the shape of the fruit from globular to oblate The results of the 'Tacapa Gold' melon phenotype uniformity based on ISSR markers had a high level of uniformity (similarity index  ≥70%). The average polymorphism in melon ‘Tacapa Gold’ is low (24,25%).
Keywords: ISSR, melon, phenotype, uniformity

## PENDAHULUAN
Hortikultura merupakan  cabang  pertanian tanaman  yang  berkaitan  dengan  tanaman  baik yang  digunakan  sebagai  sumber  pangan, pengobatan  dan  atau  tanaman  hias  (NIFA, 2019).  Potensi  sub  sektor  hortikultura  di Indonesia  memiliki  peran  yang  cukup  besar dalam  pembangunan  perekonomian  (Dirjen Hortikultura,  2015).  Salah  satu  komoditas hortikultura  di  Indonesia  yang  memiliki pengembangan  potensi  yang  cukup  baik  serta menjanjikan  dalam  dunia  agrobisnis  adalah buah-buahan.  Hal  tersebut  disebabkan  salah satunya  karena  Indonesia  merupakan  negara penghasil buah-buahan yang kaya akan nutrisi dan beragam jenisnya (Rahman, 2018).
Melon ( Cucumis melo ) merupakan kelompok  buah-buahan  yang  memiliki  nilai ekonomi  yang  tinggi  serta  potensial  untuk dikembangkan  sebagai produk unggulan hortikultura. Melon merupakan tanaman introduksi  yang  berasal  dari  Afrika  namun banyak  dibudidayakan  di  Indonesia.  Varietas melon  yang  beredar  di  pasaran  beragam  dari bentuk  buah,  warna  kulit,  warna  daging  buah dan tingkat kemanisannya. Berdasarkan permukaan  buahnya,  melon  dikelompokkan menjadi 2 macam yaitu netted melon dan winter melon . Netted  melon yaitu  melon  yang memiliki  karakteristik  kulit  buah  yang  keras, kasar,  berurat,  dan  bergambar  seperti  jaring ( net ) sedangkan winter melon memiliki ciri-ciri yaitu kulit buah yang mengkilat, halus dan tidak berjaring (Daryono & Maryanto, 2017).
Melon ‘Tacapa Gold’ merupakan varietas melon  hasil  pemuliaan  yang  dilakukan  oleh Laboratorium Genetika dan Pemuliaan Fakultas  Biologi  Universitas  Gadjah  Mada. Melon  ini  merupakan  tipe netted  melon hasil persilangan dari kultivar melon ‘Tacapa Silver’ dan  melon  ‘Hikapel’.  Karakter  dari  melon ‘Tacapa  Gold’  yaitu  bentuk globular ,  kulit muda hingga tua berwarna dasar kuning dengan net pada  kulit  buah  serta  warna  daging  buah berwarna  hijau  seperti  pada  melon  kultivar ‘Tacapa’ pada umumnya (Husnun, 2018).
Pemuliaan  tanaman  merupakan  kegiatan untuk  mengubah  sifat-sifat  tanaman  untuk mendapatkan  tanaman  dengan  karakteristik yang  diinginkan  (Poehlman  &  Sleeper,  1995). Dalam proses pemuliaan, diperlukan serangkaian  kegiatan  yang  berkesinambungan sehingga dapat dihasilkan varietas yang unggul dalam  rangka  meningkatkan  persaingan  pasar benih  di  Indonesia.  Serangkaian  kegiatan
tersebut  dapat  berupa  evaluasi  karakteristik morfologis tanaman, karakter buah, dan potensi hasil tanaman (Huda et al ., 2017).
Pada umumnya, proses kegiatan pemuliaan  tanaman  meliputi  kegiatan  koleksi plasma  nutfah  sebagai  sumber  keragaman, identifikasi dan karakterisasi, induksi keragaman misalnya melalu persilangan, proses seleksi, pengujian dan evaluasi serta pelepasan, distribusi dan komersialisasi varietas (Nuraida, 2012). Suatu varietas dapat dikomersialisasikan apabila sudah lolos uji pelepasan yaitu dengan syarat sudah stabil dan seragam.  Keseragaman dalam  varietas  hasil  pemuliaan  ini  penting karena berkaitan dengan kemampuan tanaman untuk mempertahankan karakter fenotip sehingga masih sama dengan individu sejenisnya.
Pengujian  keseragaman  tanaman  dapat dilakukan  pada  karakter  fenotip  dan  secara molekuler. Karakter fenotip merupakan karakter  hasil  ekspresi  genotip  dan  adaptasi lingkungan yang dapat secara langsung diamati dan  diukur.  Dalam  pengujian  molekuler  ini, dibutuhkan  suatu  penanda  molekuler  yang dapat  mengetahui  variasi  genetik  dari  suatu tanaman.  Penanda  molekuler  ISSR (Inter- Simple  Sequence  Repeat) merupakan  suatu penanda genetik dominan yang dapat digunakan  untuk  studi  variasi  genetik  di berbagai  organisme.    Penanda  ini  memiliki variabilitas genetik yang tinggi dan kemampuan menghasilkan data multilokus dari genom yang diteliti sehingga cocok untuk studi variasi genetik (Ng & Tan, 2015).
Penelitian  ini  dilakukan  sebagai  salah satu  rangkaian  dalam  kegiatan  pemuliaan tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’  yaitu evaluasi karakteristik tanaman melon untuk mengetahui  apakah  melon  ‘Tacapa  Gold’ sudah cukup stabil dan seragam.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini akan dilakukan pada Januari 2019 sampai dengan September 2019.
Penanaman, pengambilan sampel tanaman dan karakterisasi  tanaman  dilakukan  di Green House Pusat  Inovasi  dan  Agroteknologi
Universitas  Gadjah  Mada,  Kalitirto,  Kab. Sleman, DIY dan Green House Jamusan.
Benih  melon  ( Cucumis  melo ‘Tacapa Gold’)  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini merupakan  benih  melon  hasil  panen  Oktober
2017  di Greenhouse Jamusan  dengan  kode Gold.I.1.Self.A (untuk benih A), Gold.I.30.Self.A (untuk benih B) dan
Gold.I.17.Self.A (untuk benih C).  Bahan yang digunakan  untuk  pengamatan  data  molekuler yaitu daun tanaman melon ‘Tacapa Gold’ yang berumur 3 – 4 minggu.

## Pengamatan karakter fenotip melon
Karakter  fenotip  yang  diamati  meliputi
karakter kualitatif yang menunjukkan
morfologi suatu tanaman dan karakter kuantitatif  yang  menunjukkan  sifat  agronomis suatu  tanaman.  Pengamatan  dilakukan  pada  3 populasi  tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’. Pengamatan  karakter  morfologis  meliputi  tipe pertumbuhan,  bentuk  daun,  bentuk  batang, bentuk  bunga,  bentuk  buah  (bentuk  buah diamati  dari  buah  hasil  panen  menggunakan panduan  IPGRI),  warna  buah,  batang,  bunga, dan  daun  (diamati  menggunakan  RHS Colour Chart ), rasa buah (buah yang telah dipanen dan siap  dikonsumsi,  diambil  daging  bagian  dasar dan  ujung  menggunakan hand  refractometer ), serta  tipe  permukaan  buah  ( net ).  Karakter agronomis  yang  diamati  meliputi  diameter buah, berat buah, tebal daging buah, dan jumlah buah per tanaman.
Isolasi DNA sampel daun melon menggunakan DNA  extraction  kit ( Nucleon Phytopure illustra genomic DNA extraction kit ; GE Healhtcare US).
Isolasi DNA
menggunakan  Kit Nucleon  Phytopure dan prosedurnya  mengikuti  protokol  isolasi  DNA untuk  melon  dari  penelitian  Daryono  dan Natsuaki (2012) dengan modifikasi.

## Amplifikasi DNA dengan PCR-ISSR
Primer  ISSR  yang  digunakan  untuk amplifikasi  DNA  yaitu  UBC-807,  UBC-808, UBC-810, dan UBC-824 (Tabel 1).
Tabel 1. Data Primer dengan urutan nukleotidan dan basa nitrogen
(Araújo et al ., 2016; Haritha et al ., 2016)
Komposisi mix PCR yang digunakan yaitu 12,5 μL Master Mix (Kit PCR; My Taq HS Red Mix 2X Bioline); 2 μL DNA template (konsentrasi 200 ng/μL); 2 μL primer ISSR (10pmol); 8,5 μL
ddH 2 O steril.
Tabel 2. Protokol PCR-ISSR

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Melon  ( Cucumis  melo L.  ‘Tacapa  Gold’) merupakan  varietas  hasil  pengembangan Laboratorium Genetika dan Pemuliaan Fakultas  Biologi  UGM  dan  merupakan  hasil dari  persilangan  polinasi  alami  antara  melon ‘Tacapa Silver’ dan ‘Hikapel’ (Husnun, 2017).
Dalam prosesnya menjadi tanaman melon yang unggul,  melon  ‘Tacapa  Gold’  melewati berbagai  tahapan  proses  kegiatan  pemuliaan tanaman, meliputi identifikasi dan karakterisasi,  proses  seleksi,  pengujian  dan evaluasi baru kemudian uji pelepasan, distribusi dan komersialisasi varietas (Nuraida, 2012).  Penelitian  ini  merupakan  tahapan  dari proses  pengujian  dan  evaluasi  karakteristik melon  ‘Tacapa  Gold’  yang  bertujuan  untuk mengetahui tingkat keseragaman dan kestabilan  tanaman  baik  secara  fenotip  dan molekuler.  Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji karakterisasi  fenotip  tanaman  melon,  uji kuantitatif  hasil  isolasi  DNA,  amplifikasi  dan visualisasi  DNA  dengan  teknik  PCR-ISSR. Hasil yang didapatkan dari penelitian ini antara lain sebagai berikut:

## Hasil Analisis Karakter Fenotip
Karakter fenotip merupakan karakter hasil ekspresi genotip dan adaptasi lingkungan yang tampak  dari  luar  dan  dapat  diamati  secara langsung.  Pengamatan  karakter  fenotip  pada penelitian  ini  dibedakan  berdasarkan  karakter kualitatif  dan  kuantitatif.  Karakter  kualitatif merupakan  karakter  yang  tidak  dapat  diukur dengan  satuan  ukuran  dan  dikode  oleh  gen
Primer Urutan Nukleotida (5’ – 3’) Jumlah Basa Nitogen UBC-807 (AG) 8 T 17 UBC-808 (AG) 8 C 17 UBC-810 (GA) 8 T 17
UBC-824 (GA) 8 G 17 Reaksi
Suhu ( o C) Waktu Predenaturasi 95 5 menit Denaturasi 95 45 detik Annealing 40 – 50 30 detik Elongasi 72 45 detik Kembali ke step denaturasi sebanyak 35x siklus Pasca elongasi 72 5 menit Endless 4 ∞
tunggal  (Crowder,  2015).  Karakter  kualitatif umumnya dapat dibedakan dengan jelas secara visual sedangkan karakter kuantitatif umumnya dapat  diukur  dan  dinyatakan  menggunakan satuan  (Jones  &  Luchsinger,  1986).  Pada penelitian  ini,  karakter  fenotip  kualitatif  yang diamati pada 3 populasi benih yaitu
Gold.I.1.Self.A (untuk benih A), Gold.I.30.Self.A (untuk benih B) dan Gold.I.17.Self.A (untuk benih C) adalah bentuk batang,  warna  batang,  bentuk  daun,  warna daun,  bentuk  bunga,  warna  mahkota,  warna kelopak bunga, bentuk buah, warna kulit buah, tekstur  permukaan  buah,  warna  daging  buah, kerenyahan daging buah, bentuk biji dan warna biji.
Berdasarkan hasil pengamatan, dari ketiga populasi  yang  ditanam  umumnya  memiliki karakter  yang  seragam  termasuk  karakter kualitatif  buah  melon  ‘Tacapa  Gold’  yang muncul. Berdasarkan hasil pengamatan (Tabel 4) menunjukkan melon ‘Tacapa Gold’ memiliki penampang  bentuk  batang  silindris,  warna batang  hijau  gelap,  bentuk  daun  bangun segitiga, dan warna daun hijau gelap. Pada daun melon, terdapat tiga perkembangan lobus daun dari  lemah,  sedang,  hingga  kuat  (Gambar  7). Melon  ‘Tacapa  Gold’  memiliki  bentuk  bunga rotate dengan  warna  mahkota  kuning,  dan warna kelopak bunga hijau (Gambar 7). Bentuk buah oblate , warna  kulit  buah  kuning kehijauan, permukaan buah terdapat net , warna daging buah hijau muda dan tekstur kerenyahan daging buah renyah. Biji melon ‘Tacapa Gold’ berbentuk ellipse berwarna  kulit  terang. Karakter  fenotip  kualitatif C. melo ‘Tacapa Gold’ disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Karakter fenotip kualitatif C. melo ‘Tacapa Gold’ tiga populasi
Berdasarkan hasil pengamatan, dari ketiga populasi  yang  ditanam  umumnya  memiliki karakter  yang  seragam  termasuk  karakter kualitatif  buah  melon  ‘Tacapa  Gold’  yang muncul. Berdasarkan hasil pengamatan (Tabel 4) menunjukkan melon ‘Tacapa Gold’ memiliki penampang  bentuk  batang  silindris,  warna batang  hijau  gelap,  bentuk  daun  bangun segitiga, dan warna daun hijau gelap. Pada daun melon, terdapat tiga perkembangan lobus daun dari  lemah,  sedang,  hingga  kuat  (Gambar  7). Melon  ‘Tacapa  Gold’  memiliki  bentuk  bunga rotate dengan  warna  mahkota  kuning,  dan warna kelopak bunga hijau (Gambar 7). Bentuk buah oblate , warna  kulit  buah  kuning kehijauan, permukaan buah terdapat net , warna daging buah hijau muda dan tekstur kerenyahan daging buah renyah. Biji melon ‘Tacapa Gold’ berbentuk ellipse berwarna kulit terang.
Karakter  kualitatif  dari  buah  melon ‘Tacapa Gold’ berupa bentuk buah, warna kulit buah,  tekstur  permukaan  buah,  dan  warna daging  buah  menjadi  perhatian  utama  dari pengamatan  karena  merupakan  bagian  yang paling  membedakan  melon  ‘Tacapa  Gold’ dengan kultivar lainnya. Suatu tanaman dalam perakitan kultivar harus memenuhi sifat BUSS yaitu baru, unik, stabil, dan seragam (Daryono &  Maryanto,  2017).  Suatu  varietas  dapat dikatakan  unik  jika  memiliki  perbedaan  yang konsisten dan jelas  (Aryawati & Sobir, 2013).
Berdasarkan penelitian terdahulu terkait perakitan melon ‘Tacapa Gold’ (Husnun, 2017) dan  tanda  daftar  varietas  tanaman  melon ‘Tacapa  Gold    No.  526/PVHP2017,  melon ‘Tacapa  Gold  merupakan  melon  kultivar
No. Parameter deskripsi varietas Gold.I.1.Self.A (Benih A) Gold.I.30.Self.A (Benih B) Gold.I.17.Self.A (Benih C) 1 Bentuk batang Silindris Silindris Silindris 2 Warna batang Hijau  gelap  ( Dark green RHS 145A) Hijau gelap ( Dark green RHS 145A) Hijau gelap ( Dark green RHS 145A) 3 Bentuk daun Bangun segitiga (triangularis) Bangun  segitiga (triangularis) Bangun  segitiga (triangularis) 4 Warna daun Hijau gelap ( moderate yellowish green
RHS2015 138A) Hijau gelap ( moderate yellowish  green RHS2015 138A) Hijau gelap ( moderate yellowish  green RHS2015 138A) 5 Bentuk bunga Rotate Rotate Rotate 6 Warna mahkota Kuning ( yellow RHS2015 12A) Kuning  ( yellow RHS2015 12A) Kuning  ( yellow RHS2015 12A) 7 Warna kelopak bunga Hijau ( green RHS   Hijau ( green RHS Hijau ( green RHS 8 Bentuk buah Oblate Oblate Oblate 9 Warna kulit buah  Kuning  kehijauan ( brilliant yellow green RHS2015 150B; RHS2015 150C) Kuning kehijauan ( brilliant  yellow green RHS2015 150C) Kuning kehijauan ( brilliant  yellow green RHS2015 150B;  RHS2015
150C) 10 Tekstur permukaan buah Terdapat net Terdapat net Terdapat net 11 Warna daging buah Hijau  muda  ( pale yellow green RHS2015 149D) Hijau muda ( pale yellow green RHS2015 149D) Hijau muda ( pale yellow green RHS2015 149D) 12 Kerenyahan daging buah Renyah Renyah Renyah 13 Bentuk biji Ellipse Ellipse Ellipse 14 Warna biji Kuning terang (light  yellow RHS 20A) Kuning terang (light yellow RHS 20A) Kuning terang (light yellow RHS 20A)
‘Tacapa’  yang  memiliki  karakteristik  bentuk buah globular ,  kulit  buah  muda  hingga  tua berwarna dasar kuning, memiliki net pada kulit buah  dengan  daging  berwarna  hijau,  dan bertekstur buah renyah. Perbandingan karakter fenotip  kualitatif  melon  ‘Tacapa  Gold’  hasil penelitian  dengan  karakter  melon  hasil penelitian 2017 ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Perbandingan karakter fenotip kualitatif C. melo ‘Tacapa Gold’
*)Tanda  Daftar  Varietas  Tanaman  Melon  Tacapa Gold No. 526/PVHP2017 tanggal 31 Agustus 2017
Berdasarkan  Tabel  4.  karakter  kualitatif pada melon  ‘Tacapa  Gold’  hasil  penelitian dengan  karakter  yang  terdaftar  di  Pusat Perlindungan Varietas Tanaman dan Perizinan Pertanian  memiliki    perbedaan    pada  bentuk buahnya.  Bentuk  buah  melon  ‘Tacapa  Gold’ yang terdaftar adalah globular (bulat) sedangkan  bentuk  buah  yang  dihasilkan  pada penelitian  ini  umumnya  berbentuk oblate (Gambar 9). Hal ini menunjukkan ketidakstabilan  bentuk  buah  dari  melon ‘Tacapa  Gold’.  Perubahan  bentuk  buah  dapat disebabkan oleh peristiwa segregasi atau karena respon  adaptasi  terhadap  penyakit.  Pada penelitian  ini,  tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’ sempat  terserang  penyakit  jamur  tepung ( powdery mildew ).
Penyakit jamur tepung merupakan penyakit  yang  umum  dan  berbahaya  untuk tanaman melon. Hal tersebut disebabkan karena
penyakit  ini  dapat  menyerang  hampir  seluruh tanaman dalam satu lahan dengan waktu yang singkat.  Penyakit  ini  ditandai  dengan  adanya tepung putih yang tumbuh dan menutupi daun. Penyakit jamur tepung tidak langsung menyerang buah namun menyebabkan pengguguran  daun  yang  lebih  cepat  sehingga proses  fotosintesis  terhambat  (Daryono  & Maryanto,  2017).  Proses  fotosintesis  yang terganggu  mengakibatkan  buah  kekurangan unsur  hara  sehingga  dapat  mengakibatkan pembentukan buah kurang sempurna.
(a)
(b)
Gambar 1. Perbedaan bentuk buah melon ‘Tacapa Gold’ (a) globular (bulat) (Hamzah, 2018) (b) oblate (Dokumentasi pribadi, 2019)
Pada karakter buah yang lain seperti warna daging  dan  warna  kulit  buah  seragam  yaitu berwarna  kuning  kehijauan  (warna  daging buah)  dan  hijau  muda  (warna  kulit  buah). Tekstur  permukaan  kulit  buah  pada  melon ‘Tacapa Gold’ semua memiliki net (jala), tidak ada  buah  yang  muncul  tanpa net walaupun tingkat  kerapatan net yang  muncul  masih beragam  (sedang  –  sangat  kuat).  Hasil  ini sesuai  dengan  karakter  awal  yang  diharapkan dari  perakitan  melon  ‘Tacapa  Gold’  yang masuk  ke  dalam  tipe netted  melon . Netted melon adalah  tipe  melon  yang  memiliki  kulit buah  keras,  kasar,  berurat  dan  bergambar seperti jala ( net ) (Daryono & Maryanto, 2017). Perbedaan  keraatan net dapat  disebabkan  oleh perbedaan suplly air  yang  didapatkan  oleh masing-masing  tanaman.  Pembentukan net ( netting )  dipengaruhi  oleh  manajemen  air. Penyediaan  air  yang  cukup  akan  mendorong proses pembentukan net (Daryono & Maryanto,
2017) .  Net dihasilkan  dari  respon  keretakan permukaan  atau kulit buah selama pembesaran sel  yang  lebih  cepat  menuju  pusat  buah daripada  permukaan  buah  (Gerchikov et  al ., 2008).
Selain  karakter  fenotip  kualitatif,  melon ‘Tacapa Gold’ juga dikarakterisasi berdasarkan karakter kuantitatif. Karakter kuantitatif tanaman  merupakan  sifat  poligenik  yaitu dipengaruhi oleh hubungan beberapa gen yang berbeda.  Gen-gen  tersebut  berjumlah  banyak namun  masing-masing  gen  pengaruhnya  kecil dan  umumnya  pewarisan  sifat  tersebut  sangat dipengaruhi  oleh  lingkungan  (Arumningtyas, 2016).  Karakter fenotip kuantitatif pada melon
No. Parameter deskripsi varietas
Melon ‘Tacapa Gold’ (2017)* Melon ‘Tacapa Gold’ (2019) 1 Bentuk batang Silindris Silindris 2 Warna batang Hijau gelap ( Dark green RHS 145A) Hijau gelap ( Dark green RHS 145A) 3 Bentuk daun Bangun segitiga (triangularis) Bangun segitiga (triangularis) 4 Warna daun Hijau gelap ( dark green RHS 137A) Hijau  gelap  ( moderate yellowish green RHS2015 138A) 5 Bentuk bunga Rotate Rotate 6 Warna mahkota
Kuning  ( yellow RHS 12A) Kuning ( yellow RHS2015 12A) 7 Warna kelopak bunga Hijau ( green RHS
139A) Hijau ( green RHS 8 Bentuk buah Bulat/globular Oblate 9 Warna kulit buah Kuning kehijauan ( green yellow 1B) Kuning kehijauan ( brilliant  yellow  green
RHS2015 150C) 10 Tekstur permukaan buah Terdapat net
Terdapat net 11 Warna daging buah Hijau muda ( pale yellow green D) Hijau muda ( pale yellow green RHS2015 149D) 12 Kerenyahan daging buah Renyah Renyah 13 Bentuk biji Ellipse Ellipse 14 Warna biji Kuning  terang (light yellow RHS 20A) Kuning  terang (light yellow RHS 20A)
‘Tacapa  Gold’  hasil  penelitian  disajikan  pada Tabel 5.
Tabel 5. Karakter fenotip kuantitatif C. melo ‘Tacapa Gold’
Berdasarkan  Tabel  5,  melon  ‘Tacapa  Gold’ memiliki  panjang  daun  8  –  14  cm  dan  lebar helai  daun  10  –  16,8  cm.  Karakter  buah  yang diamati  meliputi  berat  per  buah,  diameter vertikal  dan  horizontal,  keliling  vertikal  dan horizontal,  tebal  kulit  dan  daging  buah  serta kadar  bahan  terlarut  (brix).  Berat  per  buah melon ‘Tacapa Gold’ berkisar 878  – 1241 gr. Berdasarkan  ukuran  tersebut,  melon  ‘Tacapa Gold’  pada  penelitian  ini  tergolong  ke  dalam buah  berukuran  kecil  –  sedang  dan  sedang. Berdasarkan  IPGRI,  ukuran  buah  melon digolongkan  menjadi  9,  antara  lain  1)  sangat kecil (<100gr);  2)  sangat  kecil  sampai  dengan kecil  (±200gr);  3)  kecil  (±450  gr);  4)  kecil sampai  dengan  sedang  (±800gr);  sedang (±1200gr);  sedang  sampai  dengan  besar (±1600gr);  besar  (±2000gr);  besar  sampai dengan sangat besar (±2600gr) dan sangat besar (>3000gr) (Daryono & Maryanto, 2017). Tebal kulit buah 0,3 – 1 cm, tebal daging buah 2 – 3,4 cm  dan  memiliki  kadar  bahan  terlarut  7  –  14 brix diukur menggunakan atago hand refractometer .  Kadar  bahan  terlarut  tersebut menunjukkan kandungan sukrosa yang terdapat dalam daging buah. Berdasarkan kadar terlarut tersebut, buah  melon  ‘Tacapa  Gold’  termasuk ke dalam buah yang memiliki rasa manis. Tabel 6. Rekapitulasi sidik ragam melon ‘Tacapa Gold’
Keterangan:  *)  berbeda  nyata  pada  P>0,05;  **) berbeda nyata pada P>0,01; kk= koefisien korelasi (BNJ/ Turkey ) pada taraf 5%
Buah melon ‘Tacapa Gold’ hasil penelitian ini  kemudian  dibandingkan  dengan  hasil penelitian  sebelumnya  yaitu  melon  ‘Tacapa
Gold’ perakitan pertama (2017) yang ditanam di GH Jamusan (F 1 ) melon ‘Tacapa Gold. Pada Tabel  6,  semua  karakter  buah  kecuali  brix menunjukkan  hasil  berbeda  sangat  nyata  pada taraf  kepercayaan  99%  dengan  kemungkinan data  eror  1%  antar  ulangan  buah  dari  melon hasil penelitian dengan F 1 nya.  Untuk karakter brix  menunjukkan  hasil  berbeda  nyata  pada taraf  kepercayaan  95%  dengan  kemungkinan data  eror  5%.  Data  ini  menunjukkan  bahwa secara karakter kuantitatif, buah melon ‘Tacapa Gold’ antar generasi belum seragam dan stabil. Ketidakseragaman  ini  mungkin  juga dipengaruhi  oleh  penyakit  yang  menyerang tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’  penelitian. Melon  ‘Tacapa  Gold’  penelitian  terkena penyakit jamur tepung pertama kali pada umur 29HST  dan  makin menyebar  di  umur  30HST. Penyakit  jamur  tepung  ( powdery  mildew ) merupakan penyakit yang menyebabkan terjadinya pengguguran  daun  lebih  cepat  pada tanaman melon sehingga organ tanaman untuk fotosintesis berkurang. Powdery mildew tidak menyerang buah secara langsung, namun buah akan  mengalami  kekurangan  unsur  hara sehingga  otomatis  ukuran  buah  menjadi  lebih kecil (Daryono & Maryanto, 2017).
Hasil Analisis Karakter Molekuler Berdasarkan PCR-ISSR Selain  uji  karakterisasi  karakter  fenotip organ tanaman, pengujian keseragaman tanaman  dapat  dilakukan  melalui  pengujian profil senyawa kimiawi, dan penanda molekuler.  Pengujian  karakter  fenotip  dan profil senyawa kimia memiliki kelemahan yaitu karakter  sangat  dipengaruhi  oleh  faktor lingkungan  dan  fase  perkembangan  spesies sedangkan  penanda  molekuler  berdasarkan pada  polimorfisme  sekuens  DNA  tidak tergantung  pada  kondisi  lingkungan  dan menunjukkan tingkat polimorfisme yang lebih tinggi (Domyati et al ., 2011). Pengujian secara molekuler  dapat  digunakan  untuk  mengetahui variasi  genetik  sehingga  dapat  menentukan apakah  populasi  suatu  tanaman  seragam  atau tidak. Dalam pengujian molekuler ini, dibutuhkan  suatu  penanda  molekuler  yang dapat  mengetahui  variasi  genetik  dari  suatu tanaman.  Penanda  molekuler  ISSR (Inter- Simple  Sequence  Repeat) merupakan  suatu penanda  genetik  dominan  yang  memiliki variabilitas genetik yang tinggi dan kemampuan menghasilkan data multilokus dari genom yang diteliti  (Ng & Tan, 2015).  Teknik
No. Parameter Deskripsi Varietas
Hasil pengukuran 1 Panjang helai daun 8 – 14 cm ± 1,50 2 Lebar helai daun 10 – 16,8 cm ± 1,53 3 Berat per buah 763 – 1241 gr ± 138,89 4 Diameter vertikal buah 9,3 – 11,2 cm ± 0,57 5 Diameter horizontal buah 12 – 14,4 cm ± 0,67 6 Keliling vertikal buah 36,3 – 43,1 cm ± 2,18 7 Keliling horizontal 38,6 – 45,5 cm ± 2,06 8 Tebal kulit buah 0,3 – 1 cm ± 0,21 9 Tebal daging buah 2 – 3,4 cm ± 0,43
10 Kadar bahan terlarut
7 – 14 brix ± 1,96
Karakter
Melon ‘Tacapa Gold’ kk (%)
Berat per buah ** 9,53 Diameter vertikal buah ** 7,14 Diameter horizontal buah ** 4,82 Keliling vertikal buah ** 4,60 Keliling horizontal ** 5,03 Tebal kulit buah ** 18,45 Tebal daging buah ** 24,23 Brix * 20,10
PCR-ISSR  mengamplifikasi  segmen  DNA  di antara  dua  mikrosatelit  identik  dengan  arah yang  berlawanan.  Panjang  mikrosatelit  yang digunakan  16-25bp    dan  dapat  digunakan sebagai  penanda  molekuler  untuk  penelitian pewarisan  Mendel  sederhana  (Reddy, et  al ., 2002).  Analisis  molekuler  pada  penelitian  ini terdiri  dari  beberapa  tahap  yaitu  isolasi  DNA, analisis kuantitatif hasil isolasi DNA, amplifikasi dan visualisasi DNA dengan teknik PCR-ISSR,  serta  analisis  variasi  genetik  data molekuler menggunakan MVSP.
Tabel 7. Hasil uji kuantitatif DNA daun melon ‘Tacapa Gold
Berdasarkan Tabel 7, konsentrasi dan kemurnian masing-masing sampel daun melon ‘Tacapa Gold’ memiliki hasil yang bervariasi. Menurut Sambrook & Russel (2001), kemurnian  DNA  murni  berkisar  antara  1,8–2 pada panjang gelombang 260/280 nm. Dari 15 sampel,  10  di  antaranya  memiliki  kemurnian dalam  rentang  tersebut  (1,83–1,99)  namun untuk 5 sampel lainnya yaitu 1A, 53B, 63B, 7 memiliki kemurnian <1,8 dan pada sampel 72B memiliki  kemurnian  2,43  (kemurnian>2,0). Isolat  DNA  yang  memiliki  kemurnian  <1,8 menandakan adanya kontaminan berupa protein  sedangkan  isolat DNA dengan kemurnian  >2,0  mengandung  kontaminan berupa RNA (Held, 2001).
Perbedaan  rasio  kemurnian  DNA  yang mencolok  pada  sampel  disebabkan  oleh kualitas  sampel  daun  yang  bervariasi.  Pada populasi  sampel  daun  melon  ‘Tacapa  Gold’ benih B, empat dari lima sampel tidak masuk ke dalam  rentang  DNA  murni,  disebabkan  oleh karena sampel daun yang dipakai sudah terlalu lama  disimpan  sebelum  diisolasi  sehingga menurunkan  kualitas  sampel  daun  dan berpengaruh  terhadap  kemurnian  DNA.  Rasio yang berada di luar rentang 1,8–2,0 sebenarnya dinilai kurang baik untuk digunakan dalam uji molekuler  selanjutnya,  namun  pada  penelitian
ini  sampel  tetap  dianalisis  terlebih  dahulu dengan  metode  elektroforesis  sampel  DNA maupun analisis produk PCR. Munculnya pita DNA  pada  analisis  mengindikasikan  sampel masih  layak  digunakan  untuk  uji  molekuler (Irsyad, 2019).
Prinsip dasar dari ISSR adalah perbedaan multilokus dan pola polimorfisme untuk dapat menentukan  variasi  genetiknya.  Polimorfisme pada  pita  DNA  sendiri  merupakan  hasil amplifikasi  selama  proses  PCR.  Primer  ISSR menempel  pada  DNA  genom  antara  2 mikrosatelit  yang  komplemen  dengan    urutan basa  nukleotida  pada  primer.  Semakin  banyak bagian  DNA  genom  yang  komplemen  dengan primer, maka semakin banyak pita DNA yang dihasilkan.   Variasi genetik dari melon ‘Tacapa Gold’ ditunjukkan dari perbedaan jumlah, pola, serta  ukuran  dari  setiap  pita  DNA  yang teramplifikasi  pada  masing-masing  primer. Adanya  variasi  genetik  pada  melon  ‘Tacapa Gold’ mengindikasikan ketidakseragaman pada melon ‘Tacapa Gold’. Data polimorfisme yang dihasilkan dari keempat sampel kultivar melon setelah  diskoring  pada  keempat  primer  yang digunakan disajikan pada Tabel 8.
Tabel 8. Persentase polimorfik DNA tanaman melon ‘Tacapa Gold’
Berdasarkan  hasil  penelitian  PCR-ISSR dari empat primer yang gunakan pada tanaman melon  ‘Tacapa  Gold’  menghasilkan  22  pita DNA  teramplifikasi  dengan  DNA  polimorfik berjumlah  7  lokus  dan  DNA  monomorfik berjumlah 15 lokus. Polimorfisme yang tinggi dihasilkan  oleh  primer  UBC-824  yaitu  ≥  50% sehingga  primer  ini  baik  digunakan  dalam analisis variasi genetik untuk membandingkan tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’.  Persentase polimorfisme  rendah  dari  primer  UBC-808, UBC-810,  dan  UBC-811 menunjukkan bahwa tanaman  melon  ‘Tacapa  Gold’  pada  setiap generasi  memiliki  similaritas  yang  tinggi. Keempat primer secara keseluruhan menunjukkan  persentase  polimorfisme  yang cenderung  rendah  (<50%),  yaitu  sebesar 29,75%.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa tingkat  variasi  genetik  dari  15  sampel  melon ‘Tacapa Gold’ cenderung rendah atau seragam.
No.
Sampel Kode Konsentrasi (ng/ μl) Kemurnian (ℷ260/(ℷ280) 1 Tacapa Gold Benih A1 1A 459,58 1,46 2 Tacapa Gold Benih A7 7A 1282,34 1,88 3 Tacapa Gold Benih A17 17A 957,88 1,83 4 Tacapa Gold Benih A20 20A 2456,78 1,99 5 Tacapa Gold Benih A32 32A 1442,72 1,83 6 Tacapa Gold Benih B53 53B 1279,11 1,66 7 Tacapa Gold Benih B63 63B 90,51 1,54 8 Tacapa Gold Benih B72 72B 42,99 2,43 9 Tacapa Gold Benih B75 75B 48,54 1,27 10  Tacapa Gold Benih B78 78B 268,71 1,89 11  Tacapa Gold Benih C2 2G 1337,12 1,99 12  Tacapa Gold Benih C6 6G 427,64 1,98 13  Tacapa Gold Benih C12 12G 690,47 1,85 14  Tacapa Gold Benih C27 27G 485,70 1,93 15  Tacapa Gold Benih C32 32G 609,43 1,87
No. Primer Sequence  Jumlah
pita DNA Jumlah pita DNA monomorfik Persentase polimorfik (%) Ukuran pita DNA (bp) 1 UBC-807 (AG) 8 T 4 4 0 289-929
2 UBC-808 (AG) 8 C 7 5 22 221-1454
3 UBC-810 (GA) 8 T 4 4 0 406-987 4 UBC-824 (GA) 8 G 4 1 75 679-2228 TOTAL 19 14 Rata-rata 24,25
Hal  ini  sesuai  dengan  hipotesis  yang  dibuat, karena  dalam  satu  spesies  yang  sama diasumsikan memiliki komponen genetik yang cenderung  sama  sehingga  memiliki  variasi genetik yang rendah (Singh et al ., 2014).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Innark et al . (2014) pada Cucumis sativus menggunakan primer  UBC-807,  UBC-808,  dan  UBC-824 menghasilkan  persentase  polimorfisme  100%. Hal ini menunjukkan bahwa primer UBC-807, UBC-808, dan UBC-824 pada penelitian yang tersebut dapat menunjukkan polimorfisme pada tingkat  spesies.  Pada  penelitian  tersebut, sampel C. sativus yang digunakan berasal dari aksesi  yang  berbeda  dan  berasal dari  berbagai negara  (Taiwan,  Pakistan,  China,  Malaysia, India, Zambia, India dan Thailand) sedangkan pada  penelitian  ini,  individu  yang  digunakan berasal  dari  tetua  yang  sama  dan  merupakan varietas yang sama yaitu ‘Tacapa Gold’. Hasil polimorfisme  DNA  yang  dihasilkan  dapat berbeda apabila protokol PCR yang digunakan berbeda.
Pada penelitian ini dilakukan pengklasteran dari hasil skoring yang dilakukan untuk mengetahui hubungan keseragaman atau
kekerabatan pada setiap sampel yang digunakan. Hasil  dendogram yang didapatkan dari  analisis  molekuler  dengan  menggunakan software MVSP ditunjukkan pada Gambar 14. Gambar 2. Dendogram hungan kekerabatan fenetik tanaman  melon ‘Tacapa  Gold’  berdasarkan  primer ISSR dengan algoritma UPGMA
Berdasarkan  hasil  penelitian,  diketahui bahwa  sampel  72B  dan  75B  mempunyai  sifat yang  berbeda  dengan  sampel  yang  lainnya. Tiga belas sampel lain, tergabung dalam 1 grup dengan tingkat similaritas
100%
mengindikasikan  sampel  tersebut  sama  atau seragam  secara  molekuler,  sampel  72B  juga dianggap  masih  seragam  karena  memiliki persen similaritas lebih dari 82%. Nilai tersebut
sudah melebihi 70 % yang menunjukkan bahwa sampel tersebut masih seragam. Semakin tinggi nilai  persen  similaritas  semakin  dekat  pula kekerabatanya  atau  keseragamannya.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  sampel  ini seragam.  Berdasarkan  prinsip  taksonomi Adansonian,  semakin  banyak  karakter  yang digunakan  maka  semakin  dipercaya  hasil taksonomi  yang  didapatkan.  Semakin  banyak persamaan  karakter  antar  individu  yang dibandingkan  maka  kekerabatannya  semakin dekat, sedangkan jika persamaan karakter antar individu  yang  dibandingkan  semakin  sedikit maka semakin jauh kekerabatannya. Hasil data uji  molekuler  menjadi  data  pendukung  dan pelengkap  untuk  memperkuat  hasil  data  uji morfologi untuk menentukan hubungan kekerabatan  suatu  organisme  berdasarkan variasi  genetik.  Uji  molekuler  memberikan hasil  yang  lebih  akurat    dibandingkan  dengan karakter morfologis. Sekuen DNA menghasilkan  data  yang  akurat  melalui pengujian  homologi  yang  lebih  baik  terhadap karakter-karakter  yang  ada  (Baldwin  et  al., 1995; Hidayat & Pancoro, 2008). Sekuen DNA menyediakan  banyak  status  karakter  karena besarnya  perbedaan  laju  perubahan  basa-basa nukleotida di dalam lokus yang berbeda (Moritz &  Hillis,  1996).  Sekuen  DNA  telah  terbukti menghasilkan  sebuah  hubungan  kekerabatan yang lebih alami dari pada yang lain (Chase et al ., 1993).

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  karakter  fenotip  melon  ‘Tacapa  Gold’ secara  umum  seragam  secara  kuantitatif  dan kualitatif. Melon ‘Tacapa Gold’ hasil penelitian dibandingkan  dengan  generasi  sebelumnya belum  stabil  pada  bentuk  dan  ukuran  buah. Melon  ‘Tacapa  Gold’  mengalami  perubahan bentuk  buah  dari globular (bulat)  menjadi bentuk oblate (cakram).  Karakter  molekuler melon  ‘Tacapa  Gold’  berdasarkan  penanda ISSR  memiliki  tingkat  keseragaman  yang tinggi (indeks similaritas ≥70%) kecuali untuk sampel  75B  yang  memiliki  indeks  similaritas 68%.  Rata-rata  persentase  polimorfisme  pada melon ‘Tacapa Gold’ rendah yaitu 24,25%.

## DAFTAR PUSTAKA
Araújo,  F.  d.  S.  et  al.,  2016.  ISSR  molecular markers  for  the  study  of  the  genetic diversity  of  Mimosa  caesalpiniaefolia Benth.. IDESIA (Chile), 34(3): 47-52. Arumningtyas,  E.  L.,  2016. Genetika  Mendel:
UPGMA Simple Matching Coefficient 1A 7A 17A 20A 32A 53B 63B 78B 6G 12G 23G 27G 32G 72B 75B 0.64 0.7 0.76 0.82 0.88 0.94 1
Prinsip Dasar Pemahaman Ilmu Genetika. Malang: Universitas Brawijaya Press.
Crowder,  L.,  2015. Genetika  Tumbuhan. Yogyakarta:  Gadjah  Mada  University Press.
Daryono,  B.  S.  &  Maryanto,  S.  D.,  2017.
Keanekaragaman  dan  Potensi  Sumber Daya Genetik Melon. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Domyati, F. M., Younis, Rania A. A., Edris, S., Mansour, A. G., Sabir., Bahieldin, A.G ., 2011 . Molecular markers associated with genetic diversity of some medicinal plants in  Sinai. Journal  of  Medicinal  Plants Research, 5(2): 200-210.
Gerchikov,  N.,  Keren-Keiserman,  A.,  Perl- Treves,  R.  &  Ginzberg,  I.,  2008. Wounding  of  melon  fruits  as  a  model system  to  study  rind  netting. Scientia Horticulturae, 177(2): 115-122.
Haritha,  G.,  Sudakhar,  T.,  Chandra,  D.  &  T.
Ram, B. D. N. S., 2016. Informative ISSR
Markers Help Identify Genetically Distinct Accessions of Oryza rufipogon in Yield Improvement. Rice Science, 13(5): 225-241.
Hartl,  D.  &  Clark,  A.,  1997. Principles  of
Population Genetics. 3th ed. Sunderland: Sinauer Assoc. Held, P. G., 2001. BioTek: Nucleic Acid Purity Assessment  using  A260/280  Ratios. [Online]
Available at:
https://www.biotek.com/resources/docs/P owerWave200_Nucleic_Acid_Purity_As sessment.pdf [Accessed 8 December 2019]. Hortikultura,  D.,  2015. Rencana  Strategis
Direktorat  Jendral  Hortikultura  2015- 2019. [Online] Available at: http://hortikultura.pertanian.go.id/wp-
content/uploads/2015/06/Bab-II.pdf [Accessed 29 January 2019]. IPGRI, 2003. Descriptors for Melon (Cucumis melo L .). Rome:  International  Plant Genetic Resources Institute. Jones,  S.  &  Luchsinger,  A.,  1986. Plant
Systematic. 2nd ed. New York: McGraw- Hill.
National  Institute  of  Food  and  Agriculture, 2019. USDA Definition of Specialty Crop.
[Online] Available
at:
https://nifa.usda.gov/sites/default/files/res ources/definition_of_specialty_crops.pdf [Accessed 24 September 2019].
Ng,  W.  L.  &  Tan,  S.,  2015.  Inter-Simple Sequence  Repeat  (ISSR)  Markers:  Are We  Doing  It  Right?. ASM  Science Journal, 9: 30-39.
Nuraida, D., 2012 . Pemuliaan Tanaman Cepat dan  Tepat  melalui  Pendekatan  Marka Molekuler. El-Hayah, 2(2): 97-103. Poehlman, J. M. & Sleeper, D., 1995. Breeding Field  Crops. 4th  ed.  United  States:
Westport Connecticut, Ani..
Reddy,  M.  P.,  Sarla,  N.  &  Siddiq,  E.,  2002. Inter  simple  sequence  repeat  (ISSR) polymorphism and its application in plant breeding. Euphytica, 128:  9-17.
Sambrook,  J.  &  Russel,  D.,  2001. Molecular Cloning:  A  Laboratory  Manual. 3rd  ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press. Singh,  P.  et  al.,  2014.  Development  and characterization
of polymorphic microsatellites  markers  in  endangered Aquila malaccensis . Conservation genetic resources, 7(1): 61-63.