## Livestock and Animal Research
Accredited by Directorate General of Strengthening for Research and Development No. 10/E/KPT/2019
Open Access Livest. Anim. Res. , November 2022, 20(3):312-320 p-ISSN 2721-5326 e-ISSN 2721-7086 https://doi.org/10.20961/lar.v20i3.64468

## Original Article

## Evaluasi pakan suplemen terproteksi berdasarkan kecernaan bahan kering, kecernaan bahan organik dan pH secara in vitro
Ahmad Pramono *,1 , Yulia Arnia Sari 1 , Sahrul Romadhon 1 , Muhammad Cahyadi 1 , Dimas Fajar Nugroho 2
1 Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret, Surakarta, 57126
2 Program Studi Produksi Ternak, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Muhammadiyah Karanganyar, Karanganyar, 57722 * Correspondence: ahmad_pram@staff.uns.ac.id
Received: August 12 nd , 2022; Accepted: November 24 th , 2022; Published online: November 27 th , 2022

## Abstrak
Tujuan: Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui kecernaan bahan kering, bahan organik dan nilai pH cairan rumen dari pakan suplemen terproteksi berbahan menir kedelai dan tepung cacing ( Lumbricus rubellus ) sebagai pakan tunggal maupun konsentrat. Metode: Metode yang digunakan in vitro two-stage dengan pengamatan tahap I (Rumen) dan tahap II (Total). Rancangan Acak Lengkap (RAL) digunakan sebagai desain penelitian dengan 6 perlakuan (5 ulangan per perlakuan). Perlakuan pakan terdiri dari P1= menir kedelai, P2= menir kedelai terproteksi, P3= tepung cacing, P4= tepung cacing terproteksi, P5= konsentrat (50% bekatul+50% pollard) dan P6= 75% konsentrat+20% menir kedelai terproteksi+5% tepung cacing terproteksi. Proteksi menir kedelai dan tepung cacing menggunakan 37% formaldehid sebanyak 1% dari bahan kering (BK.) Data yang diperoleh dianalisis dengan Analisis Variansi dengan Uji Lanjut Uji Kontas Orthogonal.
Hasil: Hasil yang diperoleh P2 lebih rendah dari P1 terhadap Kecernaan Bahan Kering (KcBK) dan Kecernaan Bahan Organik (KcBO) rumen, namun tidak berpengaruh terhadap KcBK dan KcBO total, begitu  pula  P4  lebih  rendah  dibandingkan  P3.  P1dan  P2  dibandingkan  P3  dan  P4  lebih  rendah terhadap seluruh peubah. P5 dibandingkan P6 berpengaruh tidak nyata terhadap seluruh peubah. P6  dibandingkan  perlakuan  lainnya  lebih  tinggi  terhadapKcBK  dan  KcBO  rumen  serta  KcBK  dan KcBO total.
Kesimpulan: Hasil  penelitian  disimpulkan  bahwa  proteksi  menir  kedelai  dan  tepung  cacing menggunakan  37%  formaldehid  sebanyak  1%  dari  BK  mampu  menurunkan  degradasi  KcBK  dan KcBO  rumen  sedangkan  menir  kedelai  dan  tepung  cacing    terproteksi  dapat  terdegradasi  dan tercerna di dalam abomasum sampai dengan usus halus. Nilai pH cairan rumen pada penelitian ini normal sehingga tidak mengganggu laju fermentasi rumen.
Kata Kunci: Kecernaan nutrien; Pakan suplemen terproteksi; pH cairan rumen

## Abstract
Objective: The  research  was  conducted  to  evaluate  protected  feed  supplement  made  of  soybean groats  and  worm  flour  ( Lumbricus  rubellus )  based  on  in  vitro  dry  matter  and  organic  matter digestibility and pH rumen fluids as a single feed or concentrate.
Methods: The  method  used  in  vitro  two-stage  with  observation  of  stage  I  (Rumen)  and  stage  II (Total). Completely Randomized Design (CRD) with 6 treatments and 5 replications was used. The treatments were P1 = soybeans groats, P2 = protected soybeans groats, P3 = worm flour, P4 = protected worm flour, P5 = concentrate (50% rice bran + 50% pollard) and P6 = 75% concentrate + 20% protected soybeans groats + 5% protected worm flour. The 37% formaldehyde was used to protect the soybean groats. The addition was determined at 1% from total dry matter. The data obtained were analyzed by Analysis of Variance with Orthogonal Counter Test.
Results: The result obtained for P2 was markedly lower than that of P1 on rumen KcBK and KcBO, while no significant effect was seen concerning the total KcBK and KcBO. Accordingly, similar trend was observed for P4 that was significantly lower in comparison to that of P3. Further, P1 and P2 when compared  to  P3  and  P4  possessed  the  lowest  score  among  variables.  Meanwhile,  no  effect  on variables was seen when P5 compared to P6. Additionally, With regard to P6, the result on KcBK and KcBO were significantly higher compared to remaining treatments.
Conclusions: The  results  could  be  concluded  that  the  37%  formaldehyde  was  used  to  protect  the soybean  groats.  The  addition  was  determined  at  1%  from  total  dry  matter  can  reduce  dry  matter digestibility and organic matter digestibility of soybean groats and worm flour (Lumbricus rubellus) in the rumen and it can be degraded and digested in the abomasum to the small intestine. Therefore, pH of rumen fluid is optimal, so it does not interfere with the fermentation in the rumen.
Keywords: Nutrient digestibility; Protected feed supplement; pH rumen fluid

## PENDAHULUAN
Pemenuhan asupan nutrien dapat meningkatkan  produktivitas  dari  ternak ruminansia.  Protein  merupakan  salah  satu nutrien  yang  dibutuhkan  ternak  sebagai sumber  asam  amino  untuk  mencapai produktivitas  yang  optimal.  Sumber  protein ternak  ruminansia  diperoleh  dari  protein mikrobia rumen dan protein pakan yang tidak terdegradasi  didalam  rumen  ( by  pass  protein ) [1].  Bahan  pakan  yang  potensial  sebagai sumber  protein  diantaranya  yaitu  menir kedelai  dengan  Protein  Kasar  (PK)  46%  dan tepung cacing dengan PK 63%.
Menir  kedelai  merupakan  pecahan  biji kedelai  yang  berasal  dari  sisa  pengambilan biji  kedelai  utuh  dan  memiliki  kandungan protein  cukup  tinggi.  Menir  kedelai  sebagai sumber  protein  tinggi  kurang  optimal apabila  diberikan  secara  langsung  kepada ternak  ruminansia  tanpa  perlakuan  karena akan mengalami degradasi oleh mikrobia di dalam rumen. Pakan yang kaya akan sumber protein akan memiliki kecernaan yang cukup tinggi di dalam rumen karena dimanfaatkan oleh  mikrobia  rumen  menjadi  protein mirobia [2].
Pakan  sumber  protein  untuk  ternak selain  dari  menir  kedelai  dapat  juga menggunakan  tepung  cacing  yang  juga
mengandung  protein  tinggi.  Kandungan protein  dalam  tepung  cacing  sebesar  63,06% [3].  Penggunaan  tepung  cacing  tanah  hasil budidaya  dengan  limbah  yang  sudah  tidak bermanfaat  pada  campuran  pakan  menjadi potensi  dikarenakan  dapat  meningkatkan efisiensi biaya pakan ternak [4].
Sumber  protein  yang  tinggi  pada  menir kedelai  dan  tepung  cacing  perlu  dilakukan upaya  proteksi  untuk  melindungi  dari degradasi mikrobia didalam rumen. Penggunaan  formaldehid  sebanyak  1% terbukti  mampu  memproteksi  protein  pakan dari degradasi mikrobia rumen [5].
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas diperlukan adanya penelitian untuk mengetahui  tingkat  kecernaan  nutrien  dan derajat  keasaman  (pH)  rumen  dari  menir kedelai  dan  tepung  cacing  tanah  ( Lumbricus rubellus )  sebagai  pakan  tunggal  maupun konsentrat  yang  diproteksi  menggunakan formaldehid 1% secara in vitro [6].

## MATERI DAN METODE

## Waktu dan tempat
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak
Ruminansia,  Program  Studi  Peternakan,
Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret,
Surakarta.

## Materi penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  timbangan  analitik  (uniweigh,  China) dengan  ketelitian  0,01  gram, waterbath (Memmerth,  Jerman),  oven  (Samsung,  Korea Selatan),  tanur  (Thermo  Scientific,  US), thermometer dan pH meter (Hanna, China)
Bahan yang diperlukan dalam penelitian antara lain:
a. Pemproteksian bahan pakan Menir  kedelai  dan  tepung  cacing diproteksi menggunakan 37% formaldehid sebanyak  1%  dari  BK  menir  kedelai  dan tepung  cacing  dengan  perbandingan formalin  dengan  air  yaitu  1:5.  Menir kedelai diperoleh dari UD. Barokah, Bantul sedangkan tepung cacing diproduksi oleh
CV.  Raja,  Malang.  Kandungan  nutrien bahan pakan perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1. Adapun susunan dan kandungan nutrien  ransum  perlakuan  dapat  dilihat pada Tabel 2.
b. Cairan rumen
Cairan  rumen  digunakan  sebagai sumber  mikroba  yang  diperoleh  dari  sapi Limousin  Peranakan  Ongole  (LimPO) yang  dipotong  di  Rumah  Potong  Hewan Jagalan, Surakarta. Cairan rumen disimpan di wadah tertutup dengan kondisi anaerob pada suhu 38- 42˚C.

## Metode
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  digunakan  sebagai
Tabel 1. Kandungan nutrisi bahan pakan perlakuan (BK) Nama bahan Kandungan nutrien (%) BK BO PK LK SK BETN Abu Menir kedelai 93,55 93,90 38,27 21,22 5,90 28,51 6,10 Menir kedelai terproteksi 90,73 93,98 31,82 22,59 3,90 35,67 6,02 Tepung cacing 95,79 92,92 42,80 2,15 3,00 44,97 7,08 Tepung cacing terproteksi 87,35 92,92 44,40 2,47 2,89 43,16 7,08 Pollard 88,69 94,67 13,54 4,61 8,00 68,52 5,33 Bekatul 89,97 84,69 6,58 11,15 18,00 48,96 15,31
Keterangan: Hasil analisis Laboratorium Nutrisi dan Makanan Ternak Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta.
BK=Bahan kering; BO= Bahan organik; PK= Protein kasar; LK= Lemak kasar; SK= Serat kasar.
Tabel 2. Susunan dan kandungan nutrien ransum perlakuan
Nama Bahan Perlakuan (%) P1 P2 P3 P4 P5 P6 Menir kedelai 100 - - - - - Menir kedelai terproteksi - 100 - - - 20 Tepung cacing - - 100 - - - Tepung cacing terproteksi - - - 100 - 5 Pollard - - - - 50 37,5 Bekatul - - - - 50 37,5 Jumlah (%) 100 100 100 100 100 100 Kandungan nutrien % Protein kasar (PK) 38,27 31,82 42,80 44,40 10,06 16,14 Lemak kasar (LK) 21,22 22,59 2,15 2,47 7,88 8,83 Serat kasar (SK) 5,90 3,90 3,00 2,89 13,00 10,68 Abu 6,10 6,02 7,08 7,08 10,32 9,03 BETN 28,51 35,67 44,97 43,16 58,74 53,42 Bahan kering (BK) 93,55 90,73 95,79 87,35 89,33 89,60 Bahan organik (BO) 93,90 93,98 92,92 92,92 89,68 90,80
Keterangan: Hasil perhitungan dari Tabel 1 dan Tabel 2.
P1=  menir  kedelai,  P2=  menir  kedelai  terproteksi,  P3=  tepung  cacing,  P4=  tepung  cacing  terproteksi,  P5= konsentrat  (50%  bekatul+50%  pollard)  dan  P6=  75%  konsentrat+20%  menir  kedelai  terproteksi+5%  tepung cacing terproteksi.
desain  penelitian  dengan  6  perlakuan  (5 ulangan  per  perlakuan).  Perlakuan  pakan terdiri  dari  P1=  menir  kedelai,  P2=  menir kedelai  terproteksi,  P3=  tepung  cacing,  P4= tepung  cacing  terproteksi,  P5=  konsentrat (50%  bekatul+50%  pollard)  dan  P6=  75% konsentrat+20% menir kedelai terproteksi+5% tepung cacing terproteksi.
Sampel  yang  akan  digunakan  digiling dengan  penyaring  berdiameter  1  mm, kemudian  menir  kedelai  dan  tepung  cacing diproteksi dengan 37% formaldehid sebanyak 1%  dari  BK.  Pengukuran  kecernaan in  vitro two-stage method dengan  pengamatan  tahap  I (Rumen) dan tahap II (Total), dari Tilley dan Terry  yang  telah  dimodifikasi  [6,7]  yakni tahap  I  ke  tahap  II  tanpa  adanya  pencucian residu tapi langsung ditambahkan HCl 20% 3 dan  pepsin.  Preparasi  sampel  ditimbang sebanyak 0,25 g BK dimasukkan kedalam tabung fermentor dan ditutup dengan karet penyumbat lalu diinkubasi 39 ℃ selama 8-12 jam.
Larutan  McDougall  (saliva  buatan) dibuat  dengan  mencampurkan  NaHCO 3 9,80 g;  Na 2 HPO 4 .12H 2 O  9,30  g;  KCl  0,57  g;  NaCl 0,47  g;  MgSO 4 .7H 2 O  0,12  g  lalu  ditambahkan aquadest  hingga  1000  ml  dan  dicampur menggunakan magnetic  stirrer dengan  suhu 39 ℃ sambil  dialiri  gas  CO 2 serta  pada  saat akan digunakan ditambahkan 0,04 g CaCl 2 . Penyimpanan  cairan  rumen  yakni  sapi LimPO  dengan  termos.  Termos  sebelumnya diisi  air  bersuhu  39 o C  hingga  penuh  dan dibuang ketika cairan rumen akan dimasukkan ke  termos.  Isi  rumen  diperas  untuk  diambil cairannya  dan  disaring  dimasukkan  dalam termos hingga penuh. Cairan rumen selanjutnya disaring  dengan  kain  kasa  4  lapis  ke  dalam erlenmeyer  sambil  dialiri  gas  CO 2 dan
diinkubasi 39 ℃ kemudian ditambahkan cairan rumen dengan perbandingan cairan rumen dan McDougall sebesar 1:4.
Sampel yang
telah diinkubasi ditambahkan  campuran  cairan  rumen  dan McDougall  25  ml  setiap  tabung/  sampel  dan dialiri gas CO 2 selama 15 detik dan diinkubasi selama 48 jam serta digojog setiap 8 jam sekali. Tahap I, setelah 48 jam setengah dari jumlah sampel  diambil  untuk  diukur  derajat keasaman dengan pH meter. Sampel disaring dengan  kertas  saring  yang  sebelumnya  telah dioven,  residu  dioven  selama  24  jam  dengan suhu 105 ℃ untuk memperoleh kadar BK nya, selanjutnya ditanur suhu 600°C selama 6 jam untuk memperoleh kadar BO nya.
Tahap  II  atau  total  yakni  sisa  setengah sampelnya lagi setelah 48 jam ditambahkan HCl 20%  sebanyak  3  ml  (0,5  ml;  0,5  ml;  2  ml)  dan pepsin 1 ml. Sampel diinkubasi kembali selama 48 jam 39 ℃ dengan  penggojogan 8  jam sekali. Selanjutnya  dilakukan  tahapan  penyaringan residu dengan kertas saring yang telah dioven, residu dioven selama 24 jam dengan suhu 105 ℃ untuk  mengetahui  kadar  Bk  nya,  selanjutnya ditanur selama 6 jam dengan suhu 600 ℃ untuk mengetahui kadar BO nya.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan menggunakan  Analisis  Variansi  (ANOVA) dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  [8] pola  searah  dan  diuji  lanjut  kontras orthogonal  menggunakan  aplikasi  R-studio versi 9.1.191.26 untuk mengetahui perbedaan antar perlakuan.

## HASIL
Hasil  evaluasi  kecernaan  dan  derajat keasaman  (pH)  secara in  vitro dapat  dilihat
Tabel 3. Hasil analisis variansi kecernaan nutrien dan pH
Peubah Perlakuan (rata-rata) (%) Signifikasi P1 P2 P3 P4 P5 P6 KcBK rumen 72,79 41,91 23,80 11,52 50,94 45,36 ** KcBO rumen 73,18 42,97 26,43 14,82 52,92 48,63 ** KcBK total 76,78 72,84 38,40 34,42 60,64 63,84 ** KcBO total 77,64 74,17 41,33 36,05 61,27 64,83 ** pH rumen 7,07 7,07 7,19 7,24 6,97 7,03 ns
Keterangan: ** = sangat sugnifikan, ns = tidak signifikan.
P1=  menir  kedelai,  P2=  menir  kedelai  terproteksi,  P3=  tepung  cacing,  P4=  tepung  cacing  terproteksi,  P5= konsentrat  (50%  bekatul+50%  pollard)  dan  P6=  75%  konsentrat+20%  menir  kedelai  terproteksi+5%  tepung cacing terproteksi.
KcBK= Kecernaan bahan kering; KcBO=Kecernaan bahan organik.
pada  Tabel  3  dan  Tabel  4.  Analisis  variasi kecernaan nutrien dan pH berhasil menunjukkan  bahwa  KcBK  rumen,  KcBO rumen,  KcBK  total  dan  KcBO  total  sangat signifikan  berbeda  pada  perlakuan,  kecuali pH rumen tidak menunjukkan pengaruh pada perlakuan.
Analisis  lanjut  pada  peubah  yang signifikan  terhadap  perlakuan  dilakukan dengan uji lanjut kontras orthogonal. Hasil uji lanjut  kontras  orthogonal  antar  perlakuan menunjukkan bahwa P2 vs P1, P4 vs P3, P1P2 vs P3P4 berpengaruh lebih rendah pada KcBK rumen dan KcBO rumen, sedangkan P6 vs P1- P5  lebih  tinggi  pada  KcBK  rumen  dan  KcBO rumen  (P<001),  lain  halnya  dengan  P5  vs  P6 tidak  berpengaruh  pada  KcBK  rumen,  KcBO rumen,  KcBK  total  dan  KcBO  total. Selanjutnya,  P1P2  vs  P3P4  dan  P6  vs  P1-P5 menunjukkan  hasil  lebih  tinggi  pada  KcBO total dan KcBK total, sedangkan P1 vs P2 dan P3 vs P4 tidak berpengaruh pada KcBK total dan KcBO total.

## PEMBAHASAN
Hasil  analisis  variansi  menunjukkan bahwa proteksi pakan menggunakan formaldehid  berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01)  terhadap  kecernaan  bahan  kering dalam  rumen.  Berdasarkan  uji  lanjut  kontras orthogonal  KcBK  dalam  rumen  P2  lebih rendah  dibandingkan  P1,  begitupula  KcBK pada P4 lebih rendah dibandingkan P3. Hal ini dikarenakan terbentuknya ikatan formaldehid dengan  protein  menir  kedelai  dan  tepung cacing  sebagai  agen  proteksi  sehingga mikrobia  rumen  tidak  dapat  mencerna dengan  sempurna.  Hal  ini  didukung  oleh Suhartanto et  al .  [5]  penggunaan  1% formaldehid  mampu  melindungi  degradasi
dalam  rumen  yang  ditunjukkan  dengan penurunan degradasi bahan kering.
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBK dalam  rumen  P1  dan  P2  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  P3  dan  P4.  Hal  ini diduga  karena  metode  pembuatan  tepung cacing dengan pemanasan mampu memproteksi protein dalam tepung cacing itu sendiri sehingga kecernaan menurun. Hal ini sesuai  hasil  penelitian  Aldis  [9]  yang menyatakan  bahwa  proteksi  dengan  metode pemanasan pada bahan pakan dapat menurunkan  kecernaan  bahan  kering  dan kecernaan bahan organik.
Hasil  uji  lanjut  kontras  orthogonal  P5 dibandingkan  P6  berpengaruh  tidak  nyata terhadap  KcBK  dalam  rumen.  Hal  ini dikarenakan  kandungan  serat  kasar  (SK)  P5 dan P6 yang tidak berbeda jauh. Widodo et al .,
[10]  menyatakan  bahwa  KcBK  yang  setara antar perlakuan dapat disebabkan oleh kadar SK  antar  perlakuan  yang  relatif  sama.  Nilai kecernaan  pada  konsentrat  ini  sedikit  lebih rendah  dari  Sihombing et  al .  [11]  yakni kecernaan  bahan  kering  tepung  cacing  6% dalam  ransum  sebesar  58,84%  dan  sedikit lebih  tinggi  dari  Suhartanto et  al .  [5]  yaitu kecernaan  pakan  pelet  lengkap  dengan formaldehid 1% sebesar 35,26±2,54.
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBK dalam rumen P6 lebih tinggi dibandingkan P1, P2, P3, P4 dan P5. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian  menir  kedelai  terproteksi  dan tepung  cacing  terproteksi  pada  konsentrat memiliki  efek  asosiasi  positif  dengan  bahan- bahan  penyusunnya  terhadap  KcBK  dalam rumen.  Kecernaan  dari  ransum  tergantung pada  keserasian  zat-zat  yang  terkandung didalamnya  yang  disebut  efek  asosiasi  [12]. Menurut  Pramono et  al .  [13]  suplementasi pakan terproteksi tidak memberikan dampak
Tabel 4. Hasil uji lanjut kontras orthogonal kecernaan nutrien dan pH
Kontras antar perlakuan Signifikasi KcBK rumen KcBO rumen KcBK total KcBO total P1 vs P2 ** ** ns Ns P3 vs P4 ** ** ns Ns P1, P2 vs P3, P4 ** ** ** ** P5 vs P6 Ns Ns ns Ns P6 vs P1, P2, P3, P4, P5 * ** ** *
Keterangan: **(P<0,01) menunjukkan pengaruh sangat nyata.
ns (P>0,05) menunjukkan pengaruh tidak nyata.
KcBK= Kecernaan bahan kering; KcBO=Kecernaan bahan organik.
negatif terhadap lingkungan rumen sehingga proses  pencernaan  fermentatif  rumen  dapat berjalan dengan baik.
Hasil  analisis  variansi  menunjukkan bahwa proteksi pakan menggunakan formaldehid  berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01)  terhadap  KcBO  dalam  rumen. Berdasarkan  uji  lanjut  kontras  orthogonal KcBO  dalam  rumen  P2  lebih  rendah dibandingkan P1, begitu pula KcBO pada P4 lebih rendah dibandingkan dengan P3. Hal ini disebabkan karena formaldehid yang dicampurkan  menir  kedelai  dan  tepung cacing  berfungsi  sebagai  agen  proteksi sehingga  tidak  bisa  dicerna  sempurna  oleh mikrobia  rumen.  Hasil  ini  didukung  oleh Suhartanto et al . [5] yang menyatakan    bahwa penggunaan 1% formaldehid mampu melindungi  bungkil  kedelai  (pakan)  dari degradasi  mikrobia  dalam  rumen.  Protein yang terikat dengan formaldehid tidak mudah larut dalam air (pH netral) dan tahan terhadap degradasi mikrobia rumen [14].
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBO dalam  rumen  P1  dan  P2  lebih  tinggi dibandingkan  P3  dan  P4.  Hal  ini  diduga karena  metode  pembuatan  tepung  cacing dengan  pemanasan  mampu  memproteksi protein  dalam  tepung  cacing  sehingga kecernaan  menurun.  Pernyataan  ini  sesuai hasil  penelitian  Aldis  [9]  yang  menyatakan bahwa  proteksi  dengan  metode  pemanasan pada  bahan  pakan  dapat  menurunkan kecernaan  bahan  kering  dan  kecernaan bahan  organik.  Tepung  cacing  mengandung zat lumbricine (anti  mikroba)  sebagai antibiotik yang dapat menurunkan kecernaan [15]. Hasil uji kontras orthogonal KcBO dalam rumen P5 berpengaruh tidak nyata dibandingkan  P6.  Hal  ini  disebabkan  karena kandungan  SK,  BO  dan  BETN  P5  dengan  P6 yang  tidak  berbda  jauh,  didukung  oleh Widodo et al . [10] nilai KcBO yang setara antar perlakuan  selain  disebabkan  kompenen  BO dan  BETN  juga  disebabkan  SK  antar perlakuan  yang  setara.  Nilai  kecernaan  pada konsentrat ini lebih rendah dari Sihombing et al . [11] yakni kecernaan bahan organik tepung cacing 6% dalam ransum sebesar 68,12% dan lebih  tinggi  dari  Suhartanto et  al .  [5] menyatakan  kecernaan  pelet  pakan  lengkap
dengan  proteksi    formaldehid  sebanyak  1% (volume/berat) sebesar 33,96±2,32.
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBO dalam  rumen  P6  lebih  tinggi  terhadap dibandingkan  P1,  P2,  P3,  P4  dan  P5.  Hal  ini menunjukkan bahwa kecernaan bahan organik  rumen  konsentrat  dengan  tambahan menir  kedelai  terproteksi  dan  tepung  cacing terproteksi  lebih  tinggi  dibandingkan  dari kecernaan dari masing-masing bahan penyusunnya.  Menurut  Tulung et  al .  [16], kebutuhan  nutrien  bagi  mikrobia  rumen belum  mampu  terpenuhi  apabila  hanya dengan  pemberian  pakan  tunggal  sehingga dibutuhkan pakan lain sebagai pelengkap.
Hasil  analisis  variansi  menunjukkan bahwa proteksi pakan menggunakan formaldehid  berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01) terhadap KcBK total. Berdasarkan uji kontras orthogonal KcBK total P1 berpengaruh tidak nyata terhadap P2, begitu pula  pada  P3  dibandingkan  P4.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  proteksi  hanya  efektif bekerja di dalam rumen sedangkan di dalam abomasum  akan  terurai  ( reversible ).  Pakan suplemen  yang  diproteksi  stabil  pada lingkungan pH netral (seperti rumen) namun akan  tercerna  ( reversible )  dalam  lingkungan asam  (seperti  abomasum)  [13].  Penambahan menir  kedelai  dan  minyak  kedelai  pada ransum dapat menurunkan produksi gas total dalam  rumen  dan  dapat  digunakan  untuk menurunkan gas metana yang dihasilkan dari fermentasi rumen [14].
Hasil uji kontras orthogonal menunjukkan bahwa  KcBK  total  P1  dan  P2  lebih  tinggi dibandingkan  P3  dan  P4.  Hal  ini  diduga akibat metode pemanasan pembuatan tepung cacing  mampu  memproteksi  protein  dalam tepung  cacing  sehingga  kecernaan  total menurun.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian Aldis  [9]  yang  menyatakan  bahwa  proteksi dengan metode pemanasan pada bahan pakan dapat  menurunkan  kecernaan  bahan  kering dan  kecernaan  bahan  organik.  Kedelai memiliki  degradasi  protein  relatif  tinggi dibanding  sumber  protein  berkualitas  baik lainnya ± 75% [16].
Hasil  uji  kontras  orthogonal  KcBK  total P5 berpengaruh tidak nyata terhadap P6. Hal ini menunjukkan adanya penambahan menir kedelai  terproteksi  dan  tepung  cacing
terproteksi
secara
statistik
tidak mempengaruhi  KcBK  total  namun  pada pakan  yang  terproteksi  memiliki  KcBK  total cenderung  meningkat.  Hal  ini  dikarenakan proteksi hanya efektif bekerja di rumen pada pH  netral  sedangkan  di  abomasum  akan terurai  ( reversible )  dengan  pH  asam  serta disebabkan  karena  kandungan  serat  kasar dari  P5  dan  P6  yang  setara,  didukung  oleh Yamashita et  al .  [12]  kecernaan  pakan  erat hubungannya  dengan  komposisi  kimianya seperti serat kasar memiliki pengaruh terbesar pada  kecernaan,  semakin  tinggi  serat  kasar maka semakin rendah kecernaannya.
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBK total P6 lebih tinggi dibandingkan P1, P2, P3, P4  dan  P5.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kecernaan  bahan  organik  rumen  konsentrat dengan  tambahan  menir  kedelai  terproteksi dan  tepung  cacing  terproteksi  lebih  tinggi dibandingkan  dari  kecernaan  dari  bahan penyusunnya.
Menurut Febrina [19], kecernaan bahan kering yang tinggi dikarenakan  adanya  suplementasi  sumber protein  dan  sumber  energi  pada  ransum mempunyai  efek  asosiasi  positif  karena tersedianya  nutrien  untuk  pertumbuhan  dan perkembangan mikrobia rumen dengan baik.
Hasil  analisis  variansi  menunjukkan bahwa proteksi pakan menggunakan formaldehid  berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01) terhadap KcBO total. Berdasarkan uji lanjut  kontras  orthogonal  KcBO  total  P1 berpengaruh tidak  nyata terhadap P2, begitu pula  pada  P3  terhadap  P4.  Hal  ini menunjukkan proteksi hanya efektif bekerja di rumen  pada  pH  netral  sedangkan  di abomasum  yang  memiliki  pH  asam  akan terurai  ( reversible )  sehingga  diduga  ikatan formaldehid  pada  menir  kedelai  dan  tepung cacing  belum  terlepas  secara  sempurna. Suplementasi  pakan  yang  diproteksi  stabil pada  lingkungan  pH  netral  (seperti  rumen) namun  akan  tercerna  ( reversible )  dalam lingkungan  asam  (seperti  abomasum)  [13]. Hal  ini  disebabkan  juga  karena  kecernaan bahan  kering  bahan  tersebut  juga  tidak berbeda  nyata.  KcBK  dan  KcBO  memiliki saling  keterkaitan  karena  nutrien  dalam bahan organik ada juga di bahan kering [20].
Hasil  uji  kontras  orthogonal  KcBO  total P1 dan P2 lebih  tinggi dibandingkan dengan
P3  dan  P4.  Hal  ini  diduga  akibat  metode pemanasan pembuatan tepung cacing mampu memproteksi pakan sumber protein sehingga kecernaan  menurun.  Hal  ini  sesuai  hasil penelitian  Aldis et  al. [9]  yang  menyatakan bahwa  proteksi  dengan  metode  pemanasan pada  bahan  pakan  dapat  menurunkan kecernaan bahan kering dan kecernaan bahan organik.  Tepung  cacing  mengandung  zat lumbricine (anti  mikroba)  sebagai  antibiotik yang  dapat  menurunkan  kecernaan  [15]. Kedelai  memiliki  degradasi  perotein  relatif tinggi  dibanding  sumber  protein  berkualitas baik lainnya ± 75% [17].
Hasil uji lanjut kontras orthogonal KcBO total P5 berpengaruh tidak nyata terhadap P6. Hal ini disebabkan karena ikatan formalin dan protein  yang  dari  pakan  terlepas  kurang sempurna akibat pH rendah yang disebabkan oleh  sekresi  HCl  di  abomasum  [17].  Nilai kecernaan  pada  konsentrat  ini  lebih  rendah dari  Sihombing et  al .,  [11]  yakni  kecernaan bahan  organik  tepung  cacing  6%  dalam ransum sebesar 68,12%.
Hasil  uji  lanjut  kontras  orthogonal  KcBO total P6 berpengaruh tidak nyata tehadap P1, P2, P3,  P4  dan  P5.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian menir kedelai terproteksi dan tepung cacing  terproteksi  pada  konsentrat  memiliki efek asosiasi dengan bahan-bahan penyusunnya terhadap KcBO total. Menurut Nuswantara et al . [21], pemberian sumber energi maupun protein pada pakan basal akan memberikan efek positif asosiasi  pakan  positif  karena  adanya  kenaikan perkembangan mikrobia rumen.
Kondisi  rumen  sangat  penting  dalam proses fermentasi karena didalamnya terdapat  kehidupan  mikroorganisme.  Salah satu  pengukuran  kondisi  rumen  yakni mengukur  derajat  keasamannya  (pH)  yang berhubungan  dengan  kondisi  lingkungan dalam  rumen.  Mikrobia  rumen  dapat  hidup dan  bekerja  optimal  melakukan  fermentasi pada pH netral.
Hasil  analisis  variansi  menunjukkan bahwa proteksi pakan menggunakan formaldehid  berpengaruh  tidak  nyata  antar perlakuan  terhadap  derajat  keasaman  (pH) rumen.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  pemakaian  formaldehid  pada  menir kedelai maupun tepung cacing tidak mengganggu  kehidupan  mikrobia  dalam
rumen.  Derajat  keasaman  dari  perlakuan penelitian  ini  sebesar  6,97 – 7,24  masih  dalam kisaran  normal  yang  berarti  penggunaan formaldehid  1%  sebagai  proteksi  tidak memberikan  pengaruh  negatif  terhadap mikrobia  rumen  sehingga  proses  fermentasi berjalan  baik.  Menurut  Wanapat et  al .  [22], proses  dan  laju  fermentasi  rumen  dapat berjalan  dengan  baik  pada  pH  normal  sekitar 6,7 – 7,0. Menurut Nurjana [23] kisaran nilai pH yang normal karena penggunaan saliva buatan sebagai  buffer  mampu  menjaga  kestabilan kondisi rumen selama proses fermentasi.

## KESIMPULAN
Penggunaan  37%  formaldehid  sebanyak 1% dari BK untuk memproteksi pakan tunggal menir  kedelai  dan  tepung  cacing  dapat menurunkan degradasi rumen. Proteksi dengan 37%  formaldehid  sebanyak  1%  dari  bahan kering menir kedelai dan tepung cacing dalam konsentrat  menunjukkan  pola  menurunkan degradasi rumen dan meningkatkan kecernaan pascarumen  (total).  Proteksi  dengan  37% formaldehid  sebanyak  1%  dari  BK  tidak mempengaruhi  pH  rumen  sehingga  proses fermentasi tidak terganggu. Penggunaan menir kedelai  dan  tepung  cacing  tanah  terproteksi potensial digunakan untuk pakan suplementasi dalam  ransum  ternak  ruminansia  termasuk kambing perah.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis  menyatakan  dengan  sebenar- benarnya bahwa tidak ada konflik kepentingan  dengan  pihak  manapun  terkait materi yang ditulis dalam naskah ini.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada LPPM UNS atas dukungan pembiayaan  penelitian  skema  Penelitian Unggulan  Terapan  (PUT  UNS)  dengan  No Kontrak 260/UN27.22/HK.07.00/2021

## DAFTAR PUSTAKA
1. Widyawati,  S.  D.  2008.  Efek  perbedaan sumber  protein  dan  rasio  urea-molases
dalam pakan suplemen yang ditambahkan dalam ransum terhadap produksi mikrobia  rumen  secara  in  vitro.  Sains Peternakan. 6(1):34 – 41. Doi: 10.20961/sains pet.v6i1.4942
2. Pramono, A., Kustono, D. T. Widayati, P. P. Putro,  dan  H.  Hartadi.  2016.  Evaluasi pakan suplemen minyak Ikan Lemuru dan hidrolisat  darah  terproteksi  berdasarkan kecernaan  bahan  kering  dan  kecernaan bahan organik di dalam rumen dan pasca rumen. Sains Peternakan. 14(1):36 – 42. Doi:
10.20961/sainspet.v14i1.8776
3. Istiqomah,  L.,  A.  Sofyan,  E.  Damayanti, and H. Julendra. 2009. Amino acid profile of  earthworm  and  earthworm  meal ( Lumbricus rubellus ) for animal feedstuff. J.
Indones. Trop. Anim. Agric. 34(4):253 – 257. Doi: 10.14710/jitaa.34.4.253-257
4. Trisnawati, Y., Suminto, dan A.
Sudaryono.  2014.  Pengaruh  kombinasi pakan buatan dan cacing tanah (Lumbricus rubellus) terhadap  efisiensi  pemanfaatan pakan,  pertumbuhan  dan  kelulushidupan Lele Dumbo (Clarias gariepinus) . Journal of Aquaculture Management and Technology. 3(2):86 – 93.
5. Suhartanto, B., R. Utomo, Kustantinah, I. G. S.  Budisatria,  L.  M.  Yusiati,  dan  B.  P. Widyobroto. 2014. Pengaruh penambahan formaldehid pada pembuatan undegraded protein aktivitas mikrobia rumen secara in vitro. Buletin  Peternakan.  38(3):141 – 149. Doi: 10.21059/buletinpeternak.v38i3.5249
6. Wahyono, T., E. Jatmiko, Firsoni, S. N. W. Hardani,  dan  E.  Yunita.  2019.  Evaluasi nutrien  dan  kecernaan in  vitro beberapa spesies  rumput  lapangan  tropis  di Indonesia.  Sains  Peternakan.  17(2):17-23. Doi: 10.20961/sainspet.v%vi%i.29776
7. Utomo,  R.  2010.  Modifikasi  metode penetapan kecernaan in vitro bahan kering atau  bahan  organik.  Bulletin  Sintesis.
5:0853 – 9812.
8. Mattjik, A. A. dan I. M. Sumertajaya. 2002. Perancangan  Percobaan,  Jilid  I  Edisi Kedua. IPB, Bogor.
9. Aldis,  R.  E.  2017.  Nilai  degradasi  dan karakteristik fermentasi rumen secara in vitro
bahan pakan sumber protein yang diproteksi dengan lama pemanasan
berbeda.
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
10. Widodo,  W.  F.  dan  Sutrisno.  2012. Kecernaan bahan kering, kecernaan bahan organik,  produksi  VFA  dan  NH3  pakan komplit dengan level jerami padi berbeda secara in vitro . Animal Agriculture Journal. 1(1):215 – 230.
11. Sihombing,  G.,  W.  Pratitis,  dan  G.  A. Dewangga.  2010.  Pengaruh  penggunaan tepung  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus ) terhadap  kecernaan  bahan  kering  dan bahan organik ransum domba lokal jantan. Caraka  Tani.  25(1):79 – 86.  Doi:  10.20961/ carakatani.v25i1.15746
12. Yamashita,  S.  A.,  R.  D.  Rachmat,  A.  R. Tarmidi,  B.  Ayuningsih,  dan  I.  Hernaman. 2020. Kecernaan ransum yang mengandung limbah  roti  pada  domba.  Jurnal  Ilmu  dan Teknologi  Peternakan  Tropis.  7(1):47-51.
Doi: 10.33772/jitro.v7i1.9701
13. Pramono,  A.,  A.  Yusuf,  S.  D.  Widyawati, dan H. Hartadi. 2018. Pengaruh suplementasi  lemak  terproteksi  terhadap konsumsi dan kecernaan nutrien sapi perah Friesian Holstein. Sains Peternakan. 16(1):34. Doi: 10.20961/sainspet.v16i1.19700
14. Pramono, A., R. F. Hadi, J. Sutrisno, and M. Cahyadi.  2019.  The  effect  of  protected soybean oil and soybean groats base on in vitro  dry  matter  digestibility,  in  vitro organic  matter  digestibility  in  the  rumen and post rumen. IOP Conf. Ser. Earth and Environ.  Sci.  347(1).  Doi:  10.1088/1755- 1315/347/1/012016
15. Bhorgin,  A.  J.  and  K.  Uma.  2014. Antimicrobial  activity  of  earthworm powder  ( Lampito  mauritii ).  Int.  J.  Curr. Microbiol. App. Sci. 3(1):437-443.
16. Tulung,  Y.  L.  R.,  A.  F.  Pendong,  dan  B. Tulung. 2020. Evaluasi nilai biologis pakan lengkap berbasis tebon jagung dan rumput campuran  terhadap  kinerja  produksi  sapi Peranakan Ongole (PO). Zootec. 40(1):363 – 379.
17. Pramono,  A.,  Lutojo,  Prayitno,  and  M Cahyadi.  2019.  The  effect  of  protected soybean  groats  and  soybean  oil  as  feed supplement  on  total  gas  production.  IOP Conf.  Ser.  Earth  Environ.  Sci.  250:012027. Doi: 10.1088/1755-1315/250/1/012027 18. Rustiyana,  E.,  Liman,  dan F.  Fathul.  2016.
Pengaruh substitusi rumput gajah ( Pennisetum  purpureum )  dengan  pelepah daun  sawit  terhadap  kecernaan  protein kasar  dan  kecernaan  serat  kasar  pada kambing. Jurnal Ilmiah Peternakan
Terpadu. 4(2): 161-165. 19. Febrina,  D.  2012.  Kecernaan  ransum  sapi
Peranakan Ongole berbasis limbah perkebunan kelapa sawit yang diamoniasi urea. Jurnal Peternakan. 9(2):68 – 74. 20. Suparwi,  D.  Santoso,  dan  M.  Samsi.  2017. Kecernaan  bahan  kering  dan  bahan organik,  kadar  amonia  dan  VFA  total in vitro suplemen  pakan  domba.  Prosiding Seminar Nasional Pengembangan dan Call of Papers VII. 750 – 757.
21. Siti, N.W., N. M. Witariadi, N. K. Mardewi, K. N. N. Candrasih, I. M. Mudita, N. G. K. Roni,  I  G.  L.  O.  Cakra,  dan  N.  M.  S. Sukmawati.  2013.  Utilisasi  nitrogen  dan komposisi  tubuh  kambing  Peranakan Etawah yang diberi pakan hijauan rumput lapangan  dengan  suplementasi  dedak padi. Majalah Ilmiah Peternakan. 16(1).
22. Wanapat,  M.,  P.  Gunun,  N.  Anantasook, and S. Kang. 2014. Changes of rumen pH, fermentation  and  microbial  population  as influenced by different ratios of roughage (rice  straw)  to  concentrate  in  dairy  steers. Journal  of  Agricultural  Science.  152:675 – 685. Doi:10.1017/S0021859613000658
23. Nurjana, D. J. 2012. Pengaruh suplementasi asam fulvat terhadap karakteristik fermentasi  rumen  dan  populasi  protozoa in vitro . Institut Pertanian Bogor.