Carsono, N. ∙ A. Dewi ∙ N. Wicaksana ∙ S. Sari
Periode inkubasi, tingkat keparahan, dan ketahanan sepuluh genotipe padi harapan terhadap penyakit hawar daun bakteri strain III, IV, dan VIII
Sari. Genotipe padi harapan dari UNPAD memiliki keunggulan pada daya hasil, tahan terhadap wereng coklat, memiliki  amilosa  sedang,  aromatik  dan  kualitas  bulir  yang  sangat  baik.  Pengujian  ketahanan  genotipe  padi harapan yang berasal dari hasil seleksi molekuler dan fenotipik terhadap penyakit hawar daun bakteri (HDB) sangatlah dibutuhkan, karena ketahanan terhadap penyakit ini merupakan salah satu syarat pelepasan varietas padi  di  Indonesia.  Penyakit  HDB  disebabkan  oleh  bakteri Xanthomonas  oryzae pv. oryzae ( Xoo )  merupakan penyakit penting yang sering menyerang tanaman padi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memperoleh informasi potensi genotipe-genotipe padi yang tahan terhadap penyakit HDB yang disebabkan oleh Xoo strain III,  IV,  dan VIII  di  Rumah Kaca.  Eksperimen  ditata  dalam  rancangan  Split Plot,  dimana  strain  sebagai  petak utama  dan  genotipe  sebagai  anak  petak.  Sepuluh  genotipe  padi  dan  tujuh  varietas  cek  dievaluasi  dengan menggunakan  analisis  varians  dan  uji Least  Significant  Increase (LSI).  Hasil  penelitian  berdasarkan  uji  LSI menunjukkan  seluruh  karakter  pengamatan,  baik  pengamatan  periode  inkubasi,  keparahan  penyakit  dan jumlah stomata pada seluruh genotipe padi (SP101-3-1-5-2, SP101-3-1-5-8, SP101-3-1-19-26, SP101-3-1-38-4, SP87- 1-1-7-10, SP101-3-1-19-27, SP101-3-1-38-25, SP87-1-1-7-7, PP48-5-24 dan PP48-5-1) tidak menampilkan perbedaan nyata  dengan  tetua  (Sintanur,  Pandanwangi,  dan  PTB  33)  dan  varietas  cek  (Ciherang,  Inpari  32,  IRBB7,  dan TN1). Semua genotipe uji menunjukkan reaksi rentan pada strain III, dan sangat rentan pada strain IV dan VIII. Beberapa  individu  genotipe  mendapatkan  skor  1  dan  2  (tahan),  hal  tersebut  dapat  membuka  kemungkinan ditemukannya genotipe yang tahan. Riset ini menunjukkan bahwa komposisi genotipe berpengaruh terhadap reaksi ketahanan terhadap hawar daun bakteri dan terdapat variasi virulensi HDB.
Kata kunci : Genotip ∙ Hawar daun ∙ Resisten ∙ Strain ∙ Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Incubation period, severity, and resistance of ten rice promising genotypes against bacterial leaf blight strains III, IV, and VIII
Abstract . The  promising  rice  genotype  from  UNPAD  has  advantages  in  yield,  resistance  to  brown planthoppers, medium amylose content, aromatic, and excellent grain quality. Testing the resistance of the promising rice genotypes derived from the results of molecular and phenotypic selection against bacterial leaf  blight  (HDB)  is  very  necessary,  because  resistance  to  this  disease  is  one  of  the  requirements  for  the release of rice varieties in Indonesia. Bacterial leaf blight (BLB) disease is caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae ( Xoo ), that is an important disease frequently attacks rice plants. The objectives of the research was to obtain rice promising genotypes that resistant to BLB disease strains III, IV and VIII in the greenhouse. The experiment  was  arranged  in  a  split  plot  design,  i.e.,  strains  as  the  main  plot  and  tested  genotypes  as subplot. There were 10 tested rice genotypes and 7 check varieties were evaluated by analysis of variance and Least Significant Increase (LSI) test. Based on LSI, it was found that resistance level, number of stomata, incubation period and disease severity were not significantly different on all tested genotypes (SP101-3-1-5- 2,  SP101-3-1-5-8,  SP101-3-  1-19-26,  SP101-3-1-38-4,  SP87-1-1-7-10,  SP101-3-1-19-27,  SP101-3-1-38-25,  SP87-1- 1-7-7, PP48-5-24 and PP48-5-1) as compared to parents (Sintanur, Pandanwangi, PTB 33) and check varieties (Ciherang, Inpari 32, IRBB7, TN1). All tested genotypes showed a susceptible reaction to the strain III, and highly susceptible to strains IV and VIII. However, there were some individual genotypes scored 1 and 2 (resistant), leading to high possibility to find resistant genotypes. The genetic composition of rice genotype affected the resistance reaction to BLB strains and variations in BLB virulence were also revealed.
Keywords : Genotypes ∙ Bacterial leaf blight ∙ Resistance ∙ Strain ∙ Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Diterima : 18 Mei 2021, Disetujui : 8 Desember 2021, Dipublikasikan : 15 Desember 2021 DOI: 10.24198/kultivasi.v20i3.33373
Carsono, N. 1 ∙ A. Dewi 2 ∙ N. Wicaksana 1 ∙ S. Sari 1
1 Departemen Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Sumedang 45363
2 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Sumedang 45363 Korespondensi: n.carsono@unpad.ac.id
Carsono, N. dkk.: Periode inkubasi, tingkat keparahan, dan ketahanan sepuluh genotipe padi harapan terhadap penyakit hawar daun bakteri X strain III, IV, dan VIII

## ___________________________________________ Pendahuluan
Padi merupakan tanaman pangan yang menjadi makanan  pokok  masyarakat di  sebagian  negara di dunia,  termasuk  Indonesia.  Penyakit  penting yang  sering  merusak  dan  menyerang  tanaman padi  salah  satunya  ialah  hawar  daun  bakteri (HDB), yang disebabkan oleh bakteri Xanthomonas  oryzae pv. oryzae ( Xoo )  (Nuryanto, 2018).  Penyakit  HDB  adalah  penyakit  yang menyerang  tanaman  padi  sejak  tanaman  masih muda. Bakteri Xanthomonas oryzae menimbulkan gejala  awal  bercak-bercak  pada  tepi  daun  yang kemudian  menjadi  meluas  dan  berwarna  hijau keabu-abuan  sehingga  seluruh  daun  akan menjadi  keriput  dan  akhirnya  menjadi  layu seperti  tersiram  air  panas  (Sudir et  al. ,  2012). Menurut Nuryanto (2018), kehilangan hasil padi akibat  gangguan  penyakit  HDB  berkisar  antara 15-24%. Serangan penyakit ini dapat menurunkan  produktivitas  tanaman  padi hingga  terjadi  gagal  panen.  Salah  satu  upaya pengendalian  terhadap  penyakit  adalah dengan perakitan varietas tanaman yang tahan.
Perakitan tanaman dilakukan oleh pemulia dengan menggunakan tanaman-tanaman terbaik hasil  seleksi  yang  mempunyai  sumber  gen-gen yang  diinginkan  dan  digunakan  sebagai  tetua. Genotipe-genotipe  uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  merupakan  genotipe  generasi lanjut  yang  diambil  dari  genotipe-genotipe terbaik  hasil  seleksi  secara  molekuler  dan fenotipik.  Genotipe-genotipe  terbaik  ini  adalah hasil  persilangan  dari  varietas  padi  Sintanur  x PTB33  dan  Pandanwangi  x  PTB33.  Genotipe padi  harapan  yang  dipakai  pada  penelitian  ini memiliki  keunggulan  utama  diantaranya mempunyai  karakter  tahan  terhadap  wereng coklat,  aroma  yang  khas,  pulen,  rasa  nasi  yang enak,  biji  bernas,  dan  mempunyai  daya  hasil tinggi (Permanaputra, 2017; Asri, 2016; Hasan et al. ,  2020;  Afifah et  al .,  2020).  Sepuluh  genotipe padi harapan dipilih untuk kemudian dilakukan pengujian  ketahanan  terhadap  penyakit  HDB strain  III,  IV,  dan  VIII  yang  merupakan  strain umum yang ditemukan di Indonesia.
Sampai  saat  ini,  genotipe-genotipe  padi harapan  hasil    seleksi  molekuler  dan  fenotipik Laboratorium  Pemuliaan  Tanaman  Unpad tersebut belum diketahui ketahanannya terhadap penyakit HDB. Riset terkait ketahanan genotipe-genotipe padi harapan hasil pemuliaan masih  sangat  terbatas  (Hornai et  al. ,  2016).
Umumnya  pengujian  dilakukan  pada  varietas lokal dan masih sedikit dilakukan pada genotipe padi  yang  berasal  dari  hasil  seleksi  secara molekuler  dan  fenotipik  seperti  pada  genotipe harapan yang digunakan pada riset ini.
Periode  inkubasi  pada  beberapa  kultivar padi  lebih  lama  atau  lebih  cepat  bergantung pada  respons  ketahanan  pada  setiap  genotipe dan  perkembangan  penyakit  (Khaeruni et  al. , 2014).  Hasil  penelitian  lain  diperoleh  bahwa ketahanan  padi  lokal  terhadap  HDB  strain  IV, VIII,  dan  X,  menunjukkan  insidensi  penyakit bervariasi  antara  2,6 – 77,6%  sehingga  reaksi ketahanan  kultivar-kultivar  padi  lokal  tersebut bervariasi  dari  rentan  sampai  sangat  tahan (Khaeruni et  al. ,  2016).  Reaksi  setiap  tanaman berbeda,  dengan  tingkat  kompetisi  antara bakteri  dan  inang  yang  berbeda  menyebabkan adanya  interaksi  yang  berbeda  pada  setiap varietas.  Sementara  itu,  besar  kecilnya  gejala yang  ditimbulkan  patogen  pada  tanaman mempengaruhi  intensitas  penyakit.  Intensitas serangan  penyakit  dapat  dinilai  berdasarkan persentase  gejala  serangan  pada  tanaman  dan nilai dari intensitas tersebut dapat dilihat reaksi ketahanan tanaman terhadap penyakit.
Sementara  itu,  mekanisme  membuka  dan menutupnya stomata secara otomatis berpeluang  menjadi  jalan  masuk  organisme yang  berperan  dalam  proses  infeksi  patogen tanaman.  Semakin  besar  kerapatan  stomata maka  peluang  terjadinya  infeksi  akan  semakin besar (Agustamina et al. , 2016).
Dalam  makalah  ini  dilakukan  pengujian ketahanan beberapa genotipe padi harapan hasil seleksi  molekuler  dan  fenotipik  melalui pengamatan  periode  inkubasi,  keparahan penyakit, reaksi ketahanan genotipe, dan jumlah stomata  secara  mikroskopis.  Dari  pengujian  ini diharapkan  adanya  genotipe-genotipe  yang memiliki reaksi ketahanan yang tinggi terhadap penyakit HDB.

## ___________________________________________

## Bahan dan Metode
Percobaan dilaksanakan di Rumah Kaca di Balai Besar Penelitian
Tanaman Padi, Desa Sukamandi,  Kecamatan  Ciasem,  Kabupaten Subang,  Jawa  Barat,  dan  Laboratorium Pemuliaan  Tanaman,  Fakultas  Pertanian, Universitas Padjadjaran. Penelitian ini berlangsung  pada  bulan  Agustus  2019  sampai April 2020. Bahan yang digunakan adalah isolat
bakteri Xoo strain  III,  IV,  dan  VIII  serta  benih sebanyak  10  genotipe  padi  dan  7  varietas  cek. Nomor genotipe yang digunakan yaitu SP101-3- 1-5-2,  SP101-3-1-5-8,  SP101-3-1-19-26,  SP101-3-1- 19-27, SP101-3-1-38-4, SP101-3-1-38-25, SP87-1-1- 7-7,  SP87-1-1-7-10,  PP48-5-1,  PP48-5-24,  dan varietas  cek:  Sintanur,  Pandanwangi,  PTB33, Ciherang,  Inpari  32,  IRBB7,  serta  TN1.  Bahan lain yang digunakan diantaranya kuteks bening (Revlon),  aquades,  media  tanah  sawah,  dan pupuk.  Pengamatan  stomata  menggunakan mikroskop  Bieco  dan  seperangkat  kamera  lensa binokuler.
Eksperimen ditata dalam Rancangan Petak Terbagi (Split Plot), dimana strain sebagai petak utama dan genotip sebagai anak petak. Terdapat 10  nomor  genotipe  tanaman  dan  7  varietas  cek yang  akan  diinokulasi  dengan  3  strain  bakteri Xoo strain III, IV, dan VIII, sehingga diperoleh 51 kombinasi perlakuan. Setiap perlakuan ditanam sekitar  10  benih  padi  yang  diulang  sebanyak  3 kali  ulangan  sehingga  total  tanaman  yang  di peroleh  sebanyak  1530  tanaman.  Karakter  yang diamati  dalam  percobaan  ini  ialah  periode inkubasi, keparahan penyakit, reaksi ketahanan, dan jumlah stomata.
Pengamatan Periode Inkubasi. Pengamatan  periode  inkubasi  berdasarkan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Yuriyah  (2013). Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  mulai  1  hari setelah inokulasi sampai munculnya gejala pada daun  yang  telah  diinokulasi  oleh  patogen. Periode  inkubasi  ini  berdasarkan  waktu inkubasi antara reaksi tanaman dengan patogen yang  telah  diinokulasikan  sampai  dengan munculnya  gejala  penyakit  yang  dihitung berdasarkan satuan hari.
Pengamatan Keparahan Penyakit. Pengamatan  keparahan  penyakit  dilakukan pada  2  pekan  setelah  inokulasi  pada  fase pertumbuhan  vegetatif  tanaman.  Perhitungan keparahan  diperoleh  dari  total  intensitas serangan  penyakit  yang  kemudian  dihitung sebagai  persentase  tanaman  terserang  ( diseases severity ).  Intensitas  penyakit  diamati  dengan mengukur  panjang  gejala  serangan  pada  daun di  setiap  genotipe  yang  diinokulasi  suspensi bakteri Xoo yang kemudian dihitung berdasarkan  panjang  gejala  pada  daun  (cm) dibagi  dengan  panjang  daun  keseluruhan  (cm) dan  dikalikan  100%.  Hasil  dari  intensitas penyakit  kemudian  dijadikan  acuan  untuk mendapatkan  persentase  keparahan  penyakit
yang  ditentukan  dengan  rumus  Horsfall  & Barratt (1945):
KP = ∑(ni X vi)
N X V x 100%
KP :  Keparahan Penyakit (%) Ni :  Banyaknya  tanaman  yang  diamati dengan   skor ke-i vi :  Skor tanaman ke-i V :  Skor serangan tertinggi N :  Total tanaman yang diamati Pengamatan Reaksi Ketahanan.
Pengamatan reaksi ketahanan dilakukan berdasarkan  dengan  nilai  persentase  keparahan penyakit kemudian dimasukan ke dalam kriteria tingkat  ketahanan  tanaman  yang  diuji  pada setiap  strain  berdasarkan  nilai  skoring  yang ditetapkan  dalam Standard  Evaluation  System (SES) oleh IRRI (1996) (Tabel 1).
Pengamatan Jumlah Stomata. Pengamatan jumlah stomata dilihat menggunakan mikroskop dengan  perbesaran  400X  (40X  perbesaran  lensa okuler  dan  10X  ukuran  perbesaran  lensa objektif)  dan  didokumentasikan  menggunakan kamera  binokuler  yang  telah  terkoneksi  pada aplikasi  di  laptop.  Pengambilan  sampel  daun menggunakan clipping method , yaitu dengan cara mengolesi  sampel  daun  dengan  kuteks  pada bagian  epidermis  bawah  daun  secara  merata, kemudian  didiamkan  kurang  lebih  10  menit atau  sampai  kuteks  kering  dan  tempelkan selotip  bening  agar  bagian  yang  terolesi  kuteks dapat  terbawa  untuk  diamati.  Pengamatan jumlah  stomata  dilakukan  sebanyak  tiga  kali ulangan  dari  tiga  daun  sampel  tiap  genotipe tanaman  padi.  Pengambilan  sampel  dilakukan pada  pagi  sampai  siang  hari,  waktu  dimana stomata tanaman mulai terbuka.
Analisis  Data. Analisis  data  dilakukan secara  statistik  dengan  menggunakan  aplikasi software IBM SPSS v20 dan Microsoft Excel.  Uji normalitas dilakukan pada data hasil pengamatan utama sebelum melakukan analisis ragam. Selanjutnya, apabila Anova berpengaruh nyata  maka  dilakukan  uji  lanjut  menggunakan uji Least Significant Increase (LSI) pada taraf nyata 5%  untuk  membandingkan  antara  genotipe  uji dengan  varietas  cek/pembanding  (Petersen, 1994).
Genotipe  uji  akan  dibandingkan  dengan varietas  pembanding  (cek)  untuk  mengetahui apakah  genotipe  mempunyai  karakter  yang lebih baik dengan varietas pembanding. Rumus
Carsono, N. dkk.: Periode inkubasi, tingkat keparahan, dan ketahanan sepuluh genotipe padi harapan terhadap penyakit hawar daun bakteri X strain III, IV, dan VIII
LSI  menurut  Petersen  (1994)  adalah  sebagai berikut:
𝐿𝑆𝐼 = 𝑡 𝛼 √ 2𝐾𝑇𝐺
𝑟
Keterangan : tα
: Nilai t tabel satu arah pada taraf nyata
5% untuk db galat pada analisis ragam KTG  : Nilai kuadrat tengah galat genotipe r : Jumlah ulangan
___________________________________________

## Hasil dan Pembahasan
Periode  Inkubasi. Pada  pengamatan  periode inkubasi,  seluruh  genotip  padi  yang  diuji mempunyai  masa  inkubasi  yang  sama  dengan varietas  pembandingnya,  baik  dengan  tetua padi  yaitu  Sintanur,  Pandanwangi,  dan  PTB 33, serta  dengan  varietas  pembanding  tahan  yaitu IRBB  7  (Tabel  1).  Genotip  uji  yang  mempunyai masa inkubasi paling lama adalah genotip SP 87- 1-1-7-10  dengan  masa  inkubasi  rata-rata  4,92 hari,  sedangkan  genotip  uji  dengan  masa inkubasi tercepat adalah SP101-3-1-19-27 dengan periode inkubasi rata-rata 3,94 hari.
Periode  inkubasi  suatu  penyakit  menjadi salah  satu  faktor  penentu  virulensi  patogen, dengan  demikian  periode  inkubasi  penyakit yang  lama  memungkinkan  suatu  varietas  tahan terhadap  suatu  patogen  (Rahim et  al .,  2012). Patogen membutuhkan waktu untuk berkembang  dan  meningkatkan  populasi optimal pada inang dan perkembangan patogen bergantung  pada  waktu  patogen  diinokulasi (Noroozi et  al. ,  2015).  Menurut  Khaeruni et  al . (2014),  cepatnya  periode  inkubasi  pada perlakuan  waktu  inokulasi  saat  persemaian karena  gejala  penyakit  HDB  ini  secara  spesifik diamati  pada  daun  dan  jaringan  daun  masih sangat muda saat dilakukan inokulasi pada fase pesemaian, sehingga patogen mudah berkembang  dan  gejala  terbentuk  dalam  waktu singkat.  Reaksi  genotipe  padi  yang  berbeda menunjukkan  bahwa  komposisi  genetik  suatu genotipe  dalam  hal  ini  gen  ketahanan  terhadap Xoo berperan  penting  dalam  menghambat perkembangan  suatu  patogen  seperti  gen Xa3 yang mampu meningkatkan ketahanan terhadap serangan  bakteri Xoo strain  PX079  (Liu et  al ., 2020).
Keparahan Penyakit. Data hasil pengamatan persentase keparahan penyakit (%)
berdasarkan uji LSI menunjukkan bahwa semua genotipe  uji  tidak  berbeda  nyata  dibandingkan dengan  seluruh  pembandingnya.  Rata-rata  nilai persentase  keparahan  penyakit  pada  seluruh genotip  uji  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan nyata  dengan  semua  varietas  pembandingnya, baik tetua (Sintanur, Pandanwangi, dan PTB 33) maupun varietas cek lainnya (Tabel 1).
Reaksi  ketahanan  suatu  varietas  tanaman terhadap  patogen  yaitu  berdasarkan  panjang pendeknya  periode  inkubasi,  tinggi  rendahnya keparahan  penyakit  yang  dinyatakan  dalam persen,  dan  tinggi  rendahnya  laju  infeksi serangan  patogen  (Rahim et  al .,  2012).  Tingkat keparahan penyakit HDB yang tinggi umumnya dijumpai pada varietas padi yang tidak memiliki gen  ketahanan  atau  memiliki  gen  ketahanan tetapi  hanya  tahan  terhadap  patotipe/strain tertentu.
Perbedaan  perkembangan  gejala  serangan HDB selain ditentukan oleh virulensi patogen juga dipengaruhi adanya ketahanan tanaman terhadap patogen  yang  ditentukan  oleh  faktor  genetik (Hafiah et  al .,  2015).  Varietas  TN1  merupakan varietas  yang  paling  rentan  dengan  persentase keparahan  yang  paling  tinggi  yang  disebabkan kemungkinan  tidak  adanya  faktor  genetik,  yaitu gen  ketahanan.  Varietas  IRBB7  yang  merupakan varietas tahan terhadap penyakit HDB, kemungkinan  memiliki  gen  ketahanan Xa7 terhadap Xoo (Yuriyah et al ., 2016).
Tanaman  yang  memiliki  ketahanan  yang tinggi  tidak  akan  memberi  kesempatan  bagi bakteri atau patogen untuk berkembang, begitu sebaliknya,  tanaman  yang  tidak  memiliki ketahanan  atau  tingkat  ketahanannya  rendah menjadi kesempatan bakteri dan patogen untuk berkembang  dengan  pesat.  Tingginya  nilai keparahan  penyakit  HDB  kemungkinan  karena umur  tanaman  padi  yang  di  uji  berada  pada stadia  yang  rentan.  Hal  ini  sesuai  dengan  yang dikemukakan  oleh  Khaeruni et  al .  (2014)    yang menyatakan  bahwa  pada  fase  pertumbuhan vegetatif,  umur  5 – 8  MST,  perkembangan penyakit  HDB berlangsung  cepat  dibandingkan dengan  fase  pertumbuhan  lainnya,  khususnya pada  varietas  rentan  dengan  perkembangan penyakit HDB rata-rata mencapai 68,5% sampai 90%,  sedangkan  pada  fase  pertumbuhan generatif,  laju  perkembangan  penyakit  mulai melambat atau terhenti.
Selain  pengaruh  gen  ketahanan  yang  di miliki  oleh  varietas  tanaman,  keparahan penyakit  mengindikasikan  bahwa  semakin
muda  umur  tanaman  terinfeksi  maka  semakin cepat  perkembangan  penyakit,  sebaliknya semakin  tua  umur  tanaman  pada  saat  awal terinfeksi  maka  semakin  lambat  perkembangan penyakit  HDB  (Khaeruni et  al .  2014).  Gen ketahanan pada penyakit HDB oleh bakteri Xoo yaitu disebut gen R mayor (Nino-Liu et al ., 2006) sebagai  gen  resistensi  kualitatif  (Zhang  dan Wang,  2013).  Uji  patogenitas  pada  galur isogenik,  gen-gen  ketahanan  Xa  yang  efektif adalah Xa5, Xa7 , dan Xa21 (Tasliah, 2012). Reaksi  Ketahanan. Data  hasil  reaksi ketahanan  genotipe  uji  padi  terhadap  HDB berdasarkan  tabel  skoring  SES  dari  IRRI  (1996) menunjukkan  bahwa  pada  strain  III  semua genotipe  uji  menampilkan  reaksi  rentan  dan sangat  rentan  pada  strain  IV  dan  VIII.  Pada strain  III,  baik  genotipe  uji  dan  tetua  varietas menunjukkan  skor  lima  (rentan),  sedangkan strain  IV  dan  strain  VIII  menunjukkan  skor
antara  skor  enam  dan  tujuh  (sangat  rentan) (Tabel  2).  Walaupun  begitu,  beberapa  individu tanaman  mendapatkan  skor  1  dan  2.  Hal  ini menunjukkan  masih  terdapat  tanaman  tahan bahkan imun di dalam 10 genotipe ini.
Dua  varietas  tetua,  yaitu  Sintanur  dan Pandanwangi,  menunjukkan  penurunan  reaksi ketahanan. Menurut Yuliani dan Rohaeni (2017), bahwa  varietas  Sintanur  tahan  terhadap  strain III,  sementara  rentan  pada  strain  IV  dan  VIII. Sedangkan  varietas  Pandanwangi  diketahui rentan  terhadap  strain  IV,  namun  dari pengamatan  hasil  reaksi  ketahanan  bahwa Sintanur dan Pandanwangi menunjukkan reaksi rentan  pada  strain  III,  serta  sangat  rentan  pada strain  IV  dan  VIII.  Patut  diduga  bahwa  bakteri Xoo berekombinasi  ataupun  mengalami  mutasi yang  menghasilkan  strain-strain  yang  lebih virulen,  sehingga  mampu  mematahkan  gen ketahanan pada kedua varietas ini.
Tabel 1. Data hasil uji LSI untuk karakter periode inkubasi, keparahan penyakit, dan jumlah stomata pada taraf kepercayaan 5%.
No Genotipe Periode Inkubasi (hari) Keparahan Penyakit (%) Jumlah Stomata (buah) Genotipe Uji 1 SP101-3-1-5-2 4,28  tn 51,24  tn 3,26  tn 2 SP101-3-1-5-8 4,50  tn 51,56  tn 3,16  tn 3 SP101-3-1-19-26 4,28  tn 51,25  tn 3,29  tn 4 SP101-3-1-19-27 3,94  tn 52,20  tn 3,26  tn 5 SP101-3-1-38-4 4,28  tn 49,26  tn 3,04  tn 6 SP101-3-1-38-25 4,28  tn 50,58  tn 3,05  tn 7 SP87-1-1-7-7 4,39  tn 53,20  tn 2,90  tn 8 SP87-1-1-7-10 4,92  tn 48,78  tn 3,25  tn 9 PP48-5-1 4,05  tn 59,54  tn 2,82  tn 10 PP48-5-24 4,25  tn 54,44  tn 2,76  tn Genotipe Pembanding 11 Sintanur 4,19 55,63 3,22 12 Pandanwangi 4,30 55,96 2,84 13 PTB 33 3,94 51,68 3,21 14 Ciherang 4,50 56,87 3,49 15 Inpari 32 3,97 40,25 3,38 16 IRBB 7 ( x ) 4,08 30,22 3,36 17 TN 1 3,97 70,49 3,37 LSI (5%) 1,40 46,10 1,21
Keterangan  : Angka yang diikuti dengan huruf tn menunjukkan tidak berbeda nyata. Angka yang diikuti huruf (a/b/c/d/e/f/g)  menunjukkan  berbeda  nyata  terhadap  genotipe  pembanding/cek  dengan  tanda  yang  sama berdasarkan uji lanjut LSI pada taraf nyata 5%. ( χ ) merupakan varietas pembanding terbaik
Tabel  2.  Data  reaksi  ketahanan  dan  skor  penyakit  HDB  pada  strain  III,  IV  dan  VIII  berdasarkan persentase keparahan.
Genotip Skor Penyakit dan Reaksi Keparahan Strain III Strain IV Strain VIII KP (%) Skor Reaksi  KP (%) Skor Reaksi  KP (%) Skor Reaksi Genotip Uji SP101-3-1-5-2 35,20 5 R 73,73 6 SR 71,10 6 SR SP101-3-1-5-8 38,17 5 R 74,77 6 SR 68,90 6 SR SP101-3-1-19-26 48,90 5 R 68,13 6 SR 64,80 6 SR SP101-3-1-19-27 41,83 5 R 77,80 7 SR 65,20 6 SR SP101-3-1-38-4 33,70 5 R 69,27 6 SR 67,77 6 SR SP101-3-1-38-25 34,80 5 R 77,03 7 SR 64,43 6 SR SP87-1-1-7-7 38,90 5 R 84,10 7 SR 59,63 6 SR SP87-1-1-7-10 40,00 5 R 71,10 6 SR 56,63 6 SR PP48-5-1 49,97 5 R 87,03 7 SR 78,90 7 SR PP48-5-24 43,70 5 R 81,10 7 SR 64,43 6 SR Genotip Pembanding Sintanur 44,83 5 R 76,67 7 SR 78,13 7 SR Pandanwangi 41,83 5 R 83,70 7 SR 71,10 6 SR PTB33 40,37 5 R 69,23 6 SR 72,60 6 SR Ciherang 45,93 5 R 81,50 7 SR 72,97 6 SR Inpari-32 33,70 5 R 51,83 6 SR 40,37 5 R IRBB-7 20,73 4 AR 33,27 5 R 22,97 4 AR TN-1 78,20 7 SR 95,57 9 SR 85,93 7 SR
Keterangan : KP = keparahan penyakit, skor berdasarkan Tabel SES IRRI (2003). AR = agak rentan, R = rentan, SR = sangat rentan.
Jumlah  Stomata. Pada  karakter  jumlah stomata,  seluruh  genotip  genotipe  uji  tidak menunjukkan  jumlah  stomata  yang  lebih  tinggi dari  pembandingnya  (Tabel  1).  Genotip-genotip tersebut  memiliki  jumlah  stomata  yang  tidak berbeda  nyata  dengan  varietas  tetuanya,  yaitu Sintanur,  Pandanwangi,  dan  PTB33.  Proses masuknya  mikroba  ke  dalam  jaringan  tanaman sedikitnya  terjadi  melalui  tiga  cara,  yaitu mencerna  dinding  sel,  masuk  melalui  bagian yang  terluka,  dan  menyerang  melalui  bukaan alami seperti stomata (Ed-har et al. , 2017). Dalam kasus ini, bakteri masuk melalui pelukaan daun yang menginduksi terbukanya  stomata (Jiang et al ., 2019).
Penyebab  penyakit  (patogen)  menginfeksi tanaman  padi  pada  bagian  daun  dengan  cara melalui  luka  daun  atau  melalui  lubang  alami berupa  stomata  dan  merusak  klorofil  daun, sehingga  menurunkan  kemampuan  tanaman untuk berfotosintesis (Sudir et al ., 2012). Bakteri juga  dapat  menginfeksi  tanaman  melalui hidatoda  daun,  melalui  luka  pada  bagian tanaman,  tidak  hanya  melalui  stomata,  yang kemudian  bakteri  memperbanyak  diri  dan menyebar  (Amrulloh,  2008).  Patogen  bergerak
dan  mengisi  jaringan  xylem  pada  daun, kemudian  keluar  melalui  hidatoda  membentuk untaian eksudat pada permukaan daun. Bakteri berkembang  biak  di  ruang  antarsel  dari epidermis,  lalu  masuk  dan  menyebar  ke tanaman melalui xylem (Nino-Liu et al ., 2006).
___________________________________________

## Kesimpulan
Reaksi ketahanan genotipe uji terhadap penyakit HDB adalah rentan pada strain III, sangat rentan pada  strain  IV  dan  VIII.  Pada  strain  III,  baik genotipe  uji  dan  tetua  varietas  menunjukkan skor  lima  (rentan),  sedangkan    strain  IV  dan strain  VIII  menunjukkan  skor  antara  skor  enam dan  tujuh  (sangat  rentan).  Ditemukan  adanya penurunan  ketahanan  varietas  Sintanur  dan Pandanwangi  yang  perlu  mendapat  perhatian dari  pihak  terkait  agar  dapat  ditingkatkan ketahananannya  terhadap  bakteri  ini  sehingga tidak  menimbulkan  kerugian  bagi  petani.  Riset ini  juga  menunjukkan  bahwa  komposisi genotipe berpengaruh terhadap reaksi ketahanan  terhadap  hawar  daun  bakteri  dan terdapat variasi virulensi.

## Ucapan Terima Kasih
Kementerian  Pendidikan,  Kebudayaan,  Riset dan  Teknologi  Republik  Indonesia  atas  Hibah Riset  Terapan  yang  membiayai  penelitian  ini. Terima  kasih  disampaikan  juga  kepada  Kelti Hama  Penyakit  Tanaman  BB  Padi  Subang  dan pihak-pihak  yang  membantu  dalam  percobaan di lapangan.
___________________________________________

## Daftar Pustaka
Afifah,  Z.,  N.  Carsono,  S.  Sari,  dan  Anas.  2020. Uji  daya  hasil  10  genotipe  padi  harapan hasil  persilangan  sintanur  x  ptb33  dan pandanwangi x ptb 33 di Jatinangor. Jurnal Agrosainstek 4 (1): 28-34.
Agustamina,  C.,  A.  Widiastuti,  dan  C.
Sumardiyono. 2016. Pengaruh stomata dan klorofil  pada  ketahanan  beberapa  varietas jagung  terhadap  penyakit  bulai.  Jurnal Perlindungan  Tanaman  Indonesia.  20  (2): 89 – 94.
Amrulloh, I. 2008. Uji potensi ekstrak daun sirih ( Piper  betle L.)  sebagai  antimikroba terhadap  bakteri Xanthomonas  oryzae pv. oryzae dan jamur Fusarium oxysporum . UIN Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Asri,  A.P.  2016.  Skoring  ketahanan  genotipe padi  harapan  tahan  wereng  coklat berdasarkan  standard  seedbox  screening test  (SSST)  dan  marka  molekuler  simple sequence  repeats  (SSR).  Sumedang.  Fakul- tas Pertanian, Universitas Padjadjaran. Ed-har, A.A., R. Widyastuti, dan G. Djajakirana. 2017. Isolasi dan identifikasi mikroba tanah pendegradasi  selulosa  dan  pektin  dari rhizosfer  Aquilaria  malaccensis.  Buletin Tanah dan Lahan 1 (1) 2017: 58-64.
Hafiah, W., A.L. Abadi, dan L. Qurata’aini. 2015. Ketahanan lima galur padi ( Oryza sativa L.) terhadap dua isolat Xanthomonas oryzae pv. oryzae penyebab  penyakit  HDB  pada tanaman padi. Jurnal HPT. 3(2).
Hasan, F.U., S. Sari, Anas, and N. Carsono. 2020. New promising rice genotypes of SP87-1-1- 2  and  SP73-3-17  adaptive  to  lowland  and medium  Land.  Planta  Tropika:  Jurnal Agrosains  8  (1):  21  -  32.  DOI  10.18196/ pt.2020.110.21-32.
Hornai, E.M.L., Purwoko, B. S., Suwarno, W. B., dan Dewi, I. S. 2016. Pengujian Daya Hasil dan  Ketahanan  Penyakit  Hawar  Daun
Bakteri  Tanaman  Padi  Hibrida.  Jurnal Agronomi Indonesia (Indonesian Journal of Agronomy),  44(2),  pp.  126-132.  doi: 10.24831/jai.v44i2.13478.
Horsfall,  J.  G.,  and  Barratt,  R.  W.  1945.  An improved  grading  system  for  measuring plant disease. Phytopathology, 35:655.
IRRI.  1996.  Standard  evaluation  system  for  rice (SES).
Jiang, Y., Ye, J., Rasulov, B., and Niinements, U. 2019.  Role  of  stomatal  conductance  in modifying  the  dose  response  of  stress- volatile  emissions  in  methyl  jasmonate treated leaves of cucumber ( Cucumis sativa ). International  Journal  Molecular  Sciences (21):10-18.
Khaeruni, A., E. Najamuddin, T. Wijayanto, dan Syair.  2016.  Ketahanan  berbagai  kultivar padi  lokal  terhadap  penyakit  HDB.  Jurnal Fitopatologi  Indonesia  12(3)  :  89-93. DOI: https://doi.org/10.14692/jfi.12.3.89 Khaeruni, A., M. Taufik, T. Wijayanto, dan E.A. Johan,  2014.  Perkembangan  penyakit  HDB pada  tiga  varietas  padi  sawah  yang diinokulasi
pada beberapa
fase pertumbuhan. Jurnal Fitopatologi
Indonesia.  10  (4)  2014  :  119-125. DOI: https://doi.org/10.14692/jfi.10.4.119 Liu, F., W. Zhang, B. Schwessinger, T. Wong, D. Ruan  and  P.  Ronald.  2020.  The  rice Xa3 gene  confers  resistance  to Xanthomonas oryzae pv. Oryzae in the model rice Kitaake genetic background. Front. Plant Sci. 11:19. doi: 10.3389/fpls.2020.00049 Nino-Liu,  D.O.,  P.C.  Ronald,  and  A.J.
Bogdanove.  2006. Xanthomonas  oryzae pathovars:  model  pathogens  of  a  model crop.  Molecular  plant  pathology  7(5):  303- 324. DOI: 10.1111/j.1364-3703.2006.00344.x Noroozi,  M., Beheshtizadeh, H.,  dan  Sattari, A., 2015.  Bacterial  Blight  Resistance  in  Rice:  A Review.  International  Journal  of  Scientific Research  in  Science  and  Technology  1  (2): 20 – 23.
Nuryanto,  B.  2018.  Pengendalian  penyakit tanaman  padi  berwawasan  lingkungan melalui  pengelolaan  komponen  epidemik. Jurnal  Penelitian  dan  Pengembangan Pertanian 37 (1) : 1-12.
Permanaputra. 2017. Studi Kebaruan, Keunikan, Keseragaman  Dan  Kestabilan  (BUSS)  Pada Beberapa  Genotipe  Padi  Harapan  Tahan Wereng Coklat Generasi F5. Skripsi. Fakul- tas Pertanian, Universitas Padjadjaran.
Petersen, R.G. 1994. Agricultural Field Experiments : Design and AnalysisBooks in Soils,  Plants,  and  the  Environment.  Marcel Dekker, Inc., New York.
Rahim,  A.,  Khaeruni,  A.,  dan  Taufik,  M.  2012. Reaksi  ketahanan  beberapa  varietas  padi komersial  terhadap  strain  Xanthomonas oryzae pv. oryzae isolat Sulawesi Tenggara. Berkala Penelitian Agronomi. 1 (2): 132-138. Sudir,  Nuryanto,  B.,  dan  S.K.  Kadir.  2012. Epidemiologi, strain dan strategi pengendalian penyakit HDB pada tanaman padi. Iptek Tanaman Pangan. 7 (2).
Tasliah.  2012.  Gen  ketahanan  tanaman  padi terhadap bakteri hawar daun ( Xanthomonas oryzae pv. oryza e).  J.  Litbang  Pertanian. 31(3): 103-112.
Yuliani, D., dan W.R. Rohaeni. 2017. Heritabili-
tas, sumber gen, dan durabilitas ketahanan varietas  padi  terhadap  penyakit  hawar daun  bakteri.  Jurnal  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian, 36(2): 99-108 Yuriyah,  S., D.W.  Utami, dan  I. Hanarida.  2013. Uji  ketahanan  galur-galur  harapan  padi terhadap  penyakit  HDB  ( Xanthomonas oryzae pv. oryzae )  ras  III,  IV  dan  VIII. Buletin Plasma Nutfah 19 (2): 53-60.
Yuriyah,  S.,  Nurani  S.,  D.W.  Utami  dan  T.S. Silitonga.  2016.  Evaluasi  dan  identifikasi marka  penanda  gen  ketahanan  penyakit hawar  daun  bakteri  pada  padi  local Sulawesi  Selatan.  JurnalAgroBiogen  12(1): 11-20.
Zhang,  H.  dan  S.  Wang.  2013.  Rice  versus Xanthomonas  oryzae pv. oryzae :  a  unique pathosystem. Plant Biology 16:188 – 195.