## PERBANDINGAN PEMBERIAN MINYAK KUNING TELUR AYAM DAN BIOPLACENTON TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGI KULIT
Rondius Solfaine 1 , Dian Ayu Kartika Sari 1 , Yoko Shagitha 1 , Ratna Widyawati 1*
1 Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya *Email : drhratnagrey@gmail.com

## Abstract
This  study  was  conducted  to  determine  the  comparison  of  re-epithelialization, granulation and the number of inflammatory cells infiltration between topical application of chicken yolk oil and bioplacenton on white rat (Rattus norvegicus) skin that has induced with second degree burn wound. This research was a laboratory experimental study using 18 male white rats divided into control positive (K+) group, bioplacenton (P1) and chicken yolk oil (P2). Observation of the re-epithelialization, granulation and inflammatory cells infiltration were carried out 14 days after the rat were induced with second degree burn wound. The necropcy was performed on the 14 th day and then the skin organs were treated with HE staining and observed under a microscope. Data analysis was performed using Kruskal-Wallis followed by Mann Whitney. The results of the analysis showed that K + had significantly  different  results  (P  <0.05)  compared  to  P1  and  P2  in  the  scores  of  re- epithelialization, granulation and the number of inflammatory cell infiltrations. P1 and P2 were not significantly different (P> 0.05). In this study, it can be concluded that chicken egg yolk has a comparable effect with bioplacenton toward the score of re-epithelialization, granulation and the number of inflammatory cell infiltration.
Keywords:  Chicken  yolk  oil,  Bioplacenton,  Re-epithelialization,  Granulation, Inflammatory cell infiltrations

## PENDAHULUAN
Luka  bakar  merupakan  keluhan dermatologik yang terjadi ketika beberapa atau  seluruh  lapisan  kulit  dihancurkan oleh  cairan  panas,  kontak  dengan  benda panas  atau  nyala  api.  Luka  bakar  juga dapat disebabkan akibat radiasi
ultraviolet,  radioaktivitas,  listrik  atau bahan  kima,  serta  kerusakan  pernafasan akibat  menghirup  asap.  (Sandhiutami, dkk., 2018). Luka bakar merupakan salah satu dari bentuk perlukaan paling merusak diantara  bentuk  perlukaan  yang  lain, karena  memiliki  efek  besar  terhadap kondisi fisik, psikis dan fisiologi pasien.
Luka  bakar  masih  merupakan  salah satu  penyebab  kematian  dan  disabilitas tertinggi  di  dunia.  (Lee, et  al .,  2014). Terdapat  pembagian  derajat  luka  bakar yaitu  luka  bakar  derajat  I  (luka  bakar superfisial),  luka  bakar  derajat  II  (luka bakar  dermis)  dan  luka  bakar  derajat  III (luka  bakar  menyeluruh).  Luka  bakar derajat  II  merupakan  luka  bakar  dengan trauma  mencapai  lapisan  dermis  tetapi dengan  masih  ada  elemen  epitel  yang tersisa  seperti  sel  epitel  basal,  kelenjar sebasea,  kelenjar  keringat  dan  folikel rambut (Setiawan, dkk., 2015).
Obat  yang  sering  digunakan  untuk pengobatan  luka  bakar  adalah  gel Bioplacenton.  Bioplacenton  memiliki sediaan  berupa  gel  dengan  kandungan aktif ekstrak placenta 10% dan Neomycin sulfate 0,5%. Gel Bioplacenton diindikasikan  untuk  mengobati  luka bakar,  luka  dengan  infeksi,  luka  kronik dan  jenis  luka  yang  lain  (KalbeMed,
2020).
Pengobatan luka bakar harus dilakukan secara rutin untuk mendapatkan kesembuhan optimal. Kesulitan mendapat obat  di  tempat  terpencil  dan  penggunaan obat  dalam  jumlah  banyak  yang  tidak murah  dapat  menjadi  kendala  dalam pengobatan luka bakar, sehingga dibutuhkan produk alternatif menggunakan bahan yang mudah didapat, dapat  digunakan  dalam  jumlah  banyak dan ekonomis .
Minyak kuning telur merupakan obat alternatif  multifungsi  dengan  indikasi spesifik  pada  dematologi  dan  demam. Minyak kuning telur ayam juga digunakan sebagai  pengobatan  tambahan  untuk penyakit  jantung.  Minyak  kuning  telur ayam  populer  di  Jepang,  Korea  dan Bangsa  China  (China  daratan,  Taiwan, Hong  Kong,  Malaysia,  dll)  (Hu, et  al ., 2012).
Minyak kuning telur ayam merupakan sumber  kaya  fosfolipid,  trigliserida, kolesterol, tokoferol dan karotenoid yang memiliki  manfaat  untuk  penyembuhan luka, antiinflamasi, anti penuaan, antimikrobial  dan  anti  rakhitis.    Minyak kuning  telur  ayam  juga  dilaporkan memiliki sifat analgesik sehingga direkomendasikan  untuk  kasus  inflamasi persendian.  Minyak  kuning  telur  ayam tidak mengandung protein sehingga aman untuk pasien penderita alergi produk telur (Madan and Sanju, 2016).
Berdasarkan  uraian  diatas,  maka peneliti tertarik untuk mengetahui
perbandingan pengaruh pemberian topikal minyak  kuning  telur  ayam  dan  gel Bioplacenton terhadap gambaran histologi  kulit  pada  tikus  putih  yang diinduksi luka bakar derajat II.

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini  merupakan  penelitian eksperimental laboratorik untuk mengetahui perbandingan pemberian topikal minyak kuning telur ayam ( Gallus gallus )  dan  bioplacenton  terhadap  re- epitelisasi,  granulasi  dan  infiltrasi  sel radang luka bakar pada tikus putih ( Rattus norvegicus )  yang  diinduksi  luka  bakar derajat II.
Variabel  bebas  pada  penelitian  ini adalah  sediaan  topikal  minyak  kuning telur  ayam  ( Gallus  gallus )  dan  gel bioplacenton yang diberikan untuk perawatan luka bakar derajat II pada kulit tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ).  Variabel terikat adalah re-epitelisasi, granulasi dan infiltrasi  sel  radang  pada  luka  bakar derajat  II  pada  kulit  tikus  putih  ( Rattus norvegicus )  dan  variabel  kendali  adalah 18  ekor  tikus  putih  jantan  ( Rattus norvegicus ).
Sampel tikus putih jantan yang akan digunakan  berjumlah  18  ekor  tikus  yang dibagi  menjadi  3  kelompok  yang  terdiri dari:  (1)  kelompok  kontrol  positif  (K+) yang  hanya  diberi  luka  bakar  tanpa pengobatan,  (2)  kelompok  perlakuan  1 (P1) yang diberi perlakuan pemberian gel Bioplacenton, dan (3) kelompok perlakuan  2  (P2)  yang  diberi  perlakuan pemberian  topikal  minyak  kuning  telur ayam.
Jumlah  sampel  yang  dibutuhkan dihitung  berdasarkan  rumus  yang dikemukakan  oleh  Arifin and Wan
(2017) dengan jumlah sampel minimum 10/k + 1 Sehingga didapatkan jumlah sampel minimum 18 ekor.
Analisis data dilakukan dengan data semi kuantitatif mode skoring.
Sedangkan untuk membedakan perlakuan  dengan  kontrol  dilakukan analisis non-parametrik menggunkan aplikasi  SPSS  dengan  metode  Kruskal-
Wallis,  apabila  terdapat  perbedaan  nyata maka  akan  dilajutkan  dengan  uji  Mann Whitney.
Penilaan mikroskopis dilakukan dengan 5 lapang pandang berbeda dengan mengamati  re-epitelisasi,  granulasi  dan infiltrasi  sel  radang  dilakukan  sesuai dengan sistem skoring yang dideskripsikan oleh Hazrati , et al. (2010).

## A. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Hewan  Coba  Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya dan pembuatan preparat histopatologi  akan  dilakukan  di  Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya. Penelitian kemudian dilanjutkan  dengan  skoring  dan  foto histopatologi  di  Laboratorium  Patologi
Fakultas  Kedokteran  Hewan  Universitas Wijaya  Kusuma  Surabaya.  Penelitian  ini akan dilangsungkan pada bulan Mei 2020.

## B.Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  untuk penelitian  ini  terdiri  dari disposable syringe 1 cc sebagai alat injeksi anastesi, sarung  tangan  steril,  masker,  silet  untuk mencukur bulu, batang alumunium dengan  diameter  10  mm,  kompor,  panci dan kandang pemeliharaan.
Sedangkan  bahan – bahan  yang diperlukan  dalam  penelitian  ini  adalah alkohol, obat anastesi Ket-A-Xyl ® , formalin 10%, alkohol 70%, alkohol 80%, alkohol  90%,  alkohol  96%,  alkohol absolut,  etanol,  xylol,  dan  pewarna hematoksilin  eosin,  minyak  kuning  telur ayam dan gel bioplacenton .

## B. Prosedur Penelitian

## Pembuatan minyak kuning telur ayam
Telur  ayam  direbus  hingga  matang selama  10-15  menit.  Kemudian  kuning telur dipisahkan dari putih telur. Kuning telur  yang  sudah  dipisahkan  kemudian dihaluskan dan dipanaskan menggunakan  wajan  diatas  api  kecil hingga  berwarna  hitam  pekat  dan mengeluarkan  minyak.  Kuning  telur yang  berwarna  hitam  pekat  kemudian disaring untuk diambil minyaknya.

## Pembuatan luka bakar
Tikus putih dianestesi menggunakan Ket-A-Xyl ® .  Punggung  tikus  kemudian dicukur  seluas  3  x  3  cm  kemudian dibersihkan menggunakan alkohol.
Pembuatan  luka  bakar  derajat  II  pada punggung tikus dilakukan menggunakan batang  alumunium  dengan  diameter
10mm  yang  dipanaskan  hingga  100ºC menggunakan  air  mendidih.  Batang alumunium  kemudian  ditempelkan  pada
kulit yang sudah dicukur selama 15 detik tanpa  disertai  penambahan  tekanan (Pereira, et al ., 2012).

## Pengobatan luka bakar
Tikus putih jantan sebanyak 18 ekor dibagi  kedalam  3  kelompok  dengan perlakuan diberikan selama 1 kali sehari dengan  dosis  secukupnya  menutupi permukaan luka, selama 14 hari.

## Pembuatan preparat histologi
Area  luka  bakar  dipotong  dan difiksasi  menggunakan  larutan  formalin 10%.  Kemudian  dilanjutkan  dengan proses Pewarnaan
menggunakan
Hematoxylin-Eosin (HE).

## Skoring
Skoring  dilakukan  menggunakan mikroskop dengan menggunakan metode skoring yang dideskripsikan oleh Hazrati , et al. (2010).

## HASIL
Tabel 1. Uji mann whitney re-epitelisasi Perlakuan Mann Whitney- U Asymp. Sig K+ P1 3.000 0.011 P2 2.000 0.007 P1 P2 15.000 0.575
Tabel 2. Uji mann whitney granulasi Perlakuan Mann Whitney- U Asymp. Sig K+ P1 2.000 0.007 P2 2.000 0.007 P1 P2 18.000 1.000 Tabel  3 Uji mann  whitney infiltrasi  sel radang Perlakuan Mann Whitney- U Asymp. Sig K+ P1 1.000 0.004 P2 2.000 0.007 P1 P2 15.000 0.523 Berdasarkan hasil analisis, didapatkan masing - masing nilai sig (P < 0.05) yang menunjukkan adanya
perbedaan  nyata  rata  –  rata  nilai  re  – epitelisasi, granulasi dan jumlah infiltrasi sel radang antar kelompok kontrol positif dengan  kelompok  perlakuan.  Sedangkan kelompok perlakuan 1 (P1) dan kelompok perlakuan  2  (P2)  masing  –  masing menunjukkan  nilai  sig  (P  >  0.05)  yang menunjukkan  tidak  adanya  perbedaan nyata  rata  –  rata  nilai  re  –  epitelisasi,
granulasi dan jumlah infiltrasi sel radang. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  minyak kuning  telur  (P1)  efektif  digunakan sebagai  pengobatan  luka  bakar  sesuai dengan penelitian Rastegar, et al . (2011). Sedangkan antar kelompok perlakuan P1 dan P2 tidak ada perbedaan signifikan (P > 0.05).

## Re-epitelisasi
Gambar 1. kulit kelompok kontrol positif (K+) (HE, 10x)
Gambaran  histopatologi  kulit  pada kelompok kontrol positif (K+) menunjukkan  adanya  re-epitelisasi  yang buruk, hemoragi dan keropeng ( scab ).
Gambar 2. kulit kelompok P1
(Bioplacenton) (HE, 10x)
Gambaran  histopatologi  kelompok P1  menunjukkan  adanya  re-epitelisasi yang baik dengan batas batas yang terlihat jelas.
Gambar  3. kulit  kelompok  P2  (Minyak kuning telur ayam) (HE, 10x)
Gambaran  histopatologi  kelompok P2  menunjukkan  adanya  re-epitelisasi yang baik dengan batas batas yang terlihat jelas.
Pada  hasil  pengamatan  gambaran histopatologis luka, kelompok P1 dan P2 ditemukan  memiliki  proses  re-epitelisasi yang  lebih  baik  dari  kelompok  kontrol positif.  Ditandai  dengan  pembentukan epidermis  yang  baik  mulai  dari  stratum korneum  hingga  stratum  basalis  yang terlihat  jelas.  Sedangkan  pada  kelompok kontrol  positif,  masih  ditemukan  banyak jaringan scab diatas permukaan epidermis dan  bagian  -  bagian  epidermis  yang inkomplit.
Re-epitelisasi terjadi
melalui mekanisme  migrasi,  proliferasi  dan diferensiasi.  Minyak  kuning  telur  ayam dapat  menstimulasi  pelepasan  IL-8  dari keratinosit
yang berperan untuk
memanggil neutrofil,
limfosit dan
makrofag. Neutrofil, limfosit dan
makrofag  kemudian  distimulasi  oleh TNF-α dan IL-1 untuk menghasilkan IL-8 kembali. IL-8 dapat menstimulasi migrasi epitel  dan  proliferasi  sehingga  terjadi re- epitelisasi dan penutupan luka. (Hahn, et al . 2014)
Pada  gel  Bioplacenton  terdapat kandungan  aktif  berupa  ektrak  plasenta. Plasenta  merupakan  sumber  yang  kaya akan faktor pertumbuhan ( Growth
Factor ). Ektrak plasenta memiliki kandungan  FGF  ( Fibroblast  Growth Factor )  dan  TGF  ( Transforming  Growth Factor ).  FGF  dan  TGF  berperan  penting dalam  proses  re-epitelisasi,  TGF-beta dapat  meningkatkan  proses  migrasi keratinosit dan fibroblas yang membantu proses re-epitelisasi. (Chakraborty, et al ., 2009).
Granulasi
Gambar 4. kulit kelompok kontrol positif (K+) (HE, 40x)
Gambaran  histopatologi  kulit  pada kelompok kontrol positif (K+) menunjukkan adanya granulasi yang tidak padat,  banyak  infiltrasi  sel  radang  dan hemoragi.
Gambar 5. kulit kelompok P1
(Bioplacenton) (HE, 40x)
Gambaran  histopatologi  kelompok P1  menunjukkan  adanya  granulasi  yang padat dan rapi, sedikit infiltrasi sel radang dan pembentukan pembuluh darah baru.
Gambar  6. kulit  kelompok  P2  (Minyak kuning telur ayam) (HE, 40x)
Gambaran  histopatologi  kelompok P2  menunjukkan  adanya  granulasi  yang padat dan rapi, sedikit infiltrasi sel radang dan pembentukan pembuluh darah baru.

## PEMBAHASAN
Kelompok P1 dan P2 memiliki proses granulasi  yang  lebih  baik  dari  kelompok kontrol  positif.  Hal  ini  ditandai  dengan jaringan  granulasi  yang  lebih  padat, pembentukan  pembuluh  darah  baru, fibroblas  yang  ramping  memanjang  dan sedikit  sel  radang.  Sedangkan  pada kelompok  kontrol  positif  ditemukan jaringan  granulasi  yang  kurang  padat dengan  hemoragi  dan  edema,  banyak infiltrasi  sel  radang  dan  pembentukan fibroblas yang tidak seragam.
Hal  tersebut  dikarenakan  minyak kuning  telur  ayam  merupakan  sumber vitamin  larut  lemak  seperti  vitamin  E, vitamin D dan vitamin A. Vitamin E yang terkandung  dalam  minyak  kuning  telur adalah  α-tokoferol  (Kovalcuks,  2015). Tokoferol  dapat  mempercepat  tingkat kesembuhan  luka  dan  meningkatkan jumlah  konten  protein  secara  signifikan, selain  itu  secara  histologis,  penggunaan tokoferol dapat
meningkatkan
pembentukan jaringan epitel dan kolagen yang lebih baik dan rapi (Lin, et al ., 2012)
Sedangkan ekstrak plasenta pada gel bioplacenton bekerja dengan cara meningkatkan  produksi  TGF-beta  yang
dapat menstimulasi pembentukan jaringan granulasi. Selain itu ekstrak plasenta juga dapat meningkatkan produksi VEGF yang meningkatkan  pembentukan  pembuluh darah baru (Hong, et al ., 2010).

## Infiltrasi sel radang
Jumlah infiltrasi sel radang kelompok
P1  dan  P2  lebih  sedikit  dari  kelompok kontrol  positif.  Sel  radang  yang  banyak dijumpai berupa sel radang mononuklear karena kondisi luka sudah memasuki hari ke  -14.  Hal  ini  menunjukkan  tingkat kesembuhan  kelompok  P1  dan  P2  lebih tinggi dari pada kelompok kontrol positif.
Hal  tersebut  dikarenakan  minyak kuning  telur  ayam  memiliki  efek  anti inflamasi  dan  analgesik  terutama  pada minyak  yang  diekstraksi  menggunakan metode  panas.  Efek  anti  inflamasi  dari minyak kuning telur didapat dari kandungan Gamma-linolenic acid (GLA) yang  merupakan  asam  lemak  omega-6 yang secara natural terdapat pada kuning telur (Mahmoudi, et al ., 2013). Linolenic acid atau asam linoleat dapat mempengaruhi  status  struktural  dan imunologis kulit karena dapat mempengaruhi permeabilitas kulit. Asam linoleat  dapat  menghambat  produksi eikosanoid  proinflamasi,  ROS  ( Reactive Oxygen  Species )  dan  sitokin,  sehingga dapat mempengaruhi respon inflamasi dan kesembuhan luka (Silva, et al ., 2018). Hal yang sama dikemukakan oleh Hahn, et al . (2014)  yaitu  minyak  kuning  telur  dapat mengurangi proses inflamasi dan produksi ROS,  sehingga  membantu  kesembuhan luka terutama pada luka kronis. Produksi interleukin  selain  IL-8  dalam  minyak kuning  telur  ayam  dikurangi  sebanyak 70% sehingga minyak kuning telur ayam berperan  dalam  mengurangi  proses  pro- inflamasi yang ekstensif.
Sedangkan  ekstrak  plasenta  juga memiliki sifat anti-inflamasi dengan cara membatasi  dan  mengaktivasi  mediator inflamasi  dan  menghambat  produksi prostaglandin.  Prostaglandin  berperan
dalam  membatasi  atau  mengaktivasi proses agregasi platelet, yang merupakan bagian  penting  dalam  proses  inflamasi. Sehingga  ekstrak  plasenta  memiliki  sifat anti agregasi platelet. (Chakraborty, et al ., 2009).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa  minyak  kuning  telur  ayam memiliki  efek  yang  sebanding  dengan bioplacenton terhadap proses re- epitelisasi,  granulasi  dan  infiltrasi  sel radang pada kulit tikus putih dengan luka bakar derajat II.

## REFERENSI
Sandhiutami,  Ni  Made  Dwi,  Yesi Desmiaty,  Nuryenti,  2018. Efek Pemberian  Ekstrak  Etanol  Daun Jati Belanda (Guazuma ulmifolia
Lamk.)  Terhadap  Penyembuhan
Luka  Bakar  Derajat  IIA  Pada Tikus  Putih. Fakultas  Farmasi. Universitas Pancasila.
Lee,  K.  C.,  Kavita  Joory,  Naiem  S.
Moiemen, 2014. History of burns: The  past,  present  and  the  future .
Burns  &  Trauma,  October  2014, Vol 2, Issue 4. Setiawan, M. Riza, Afiana Rohmani, Ika Dyah Kurniati, Kanti Ratnaningrum, Rochman Basuki, 2015. Buku  Ajar  Ilmu  Bedah . Fakultas Kedokteran. Universitas Muhammadiyah Semarang. KalbeMed, 2020. Bioplacenton ® . https://kalbemed.com/Products-
Diseases/Products/Read-Product- Article/ArtMID/458/ArticleID/1
79/BIOPLACENTON.  Diakses Mei 2020 Hu,  T.  M.,  Tsuo-Hung  Lan  and  El-Wui Loh, 2012. An Emerging Complimentary Medicine-Yolk
Oil  Made  from  Heating  Method. Journal of Traditional and Complementary Medicine Vol. 2, No. 2, pp. 202-203. Madan,  K.  dan  Sanju  Nanda,  2016. Hen egg yolk oil: A potential source of bioavailable lutein and zeaxanthin  for  skin  and  sun protection. World Journal Pharmaceutical  Sciences.  5(1): 71-80.
Guo, S. dan L.A. DiPietro, 2010. Factors Affecting Wound Healing. Center for  Wound  Healing  and  Tissue Regeneration, Department of Periodontics, College of Dentistry. University of Illinois at Chicago.
Tiwari, V.K., 2019. Burn wound: How it differs  from  other  wounds?. Department  of  Burns  and  Plastic Surgery,  VMMC  and  Safdarjung Hospital, New Delhi, India
Alhasyimi,  Ananto  A.,  2016.  I NDUKSI RE-EPITELISASI PADA PROSES PENYEMBUHAN LUKA GINGIVA OLEH APLIKASI  TOPIKAL  EKSTRAK DAUN  SAGE  (Salvia  officinalis L.) KONSENTRASI 50% (Kajian In  Vivo  Pada  Tikus  Sprague Dawley. Bagian  Ortodonsi,  Fkg Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta Gonzales,  Ana  C.O.,  Zilton  A.A.,  Tila F.C.  Alena  R.A.P.M.,  2017. Wound healing-A ltiteratire review .  Anais  Brasileiros  de
Dermatologia.
Kartikaningtyas,  Aqilla  T.,  Prayitno  dan Sri  P.  L.,  2015. Pengaruh Aplikasi Gel Ekstrak Kulit Citrus Sinensis terhadap Epitelisasi pada Penyembuhan Luka Gingiva Tikus  Sprague  Dawley. Majalah
Kedokteran Gigi Indonesia
Nasution, Abdillah I., 2016. BUKU AJAR BIOMOLEKULER  untuk  Ilmu Kedokteran  Dasar .  Syiah  Kuala University Press Batthacharya, Geetika K., 2017. Pathology  for  Dental  Students (Second Edition). ELSEVIER
Serhan,  Charles  N.,  Peter  A.W.,  Derek W.G.,  2010. Fundamentals  of Inflamation. Cambridge University Press Anderson,  James  M.,  2013.  I nflamation, Wound Healing and the Foreign- Body Response dalam Biomaterials Science (Third Edition). Elsevier Academic Press Anderson, James M., 2019. Biocompatibility and Bioresponse to Biomaterials dalam Principles of Regenerative Medicine (Third Edition) . Elsevier Academic Press Ivanalee,  S.  K.,  Ira  Sari  Y.,  Maya Nurwartanti Y., Nusdianto Triakoso, Iwan Sahrial H., Amung Logam S., 2018 . Efektivitas Sugar Dressing (100% Gula) dalam Meningkatkan Kepadatan Kolagen pada Proses Penyembuhan Luka Bakar Buatan  pada  Kulit  Tikus  Putih (Rattus norvegicus) Jantan . Jurnal  Medik  Veteriner  Vol.1 No.3: 134-141
Navadiya,  S.K.,  Yagnesh  L.  Vaghani, Mukesh P. Patel, 2012., Study of
Topical Placental Extract Versus Povidone  Iodine  and  Saline Dressing  in  Various  Diabetic Wounds. National  Journal  of Medical  Research.  Volume  2: Issue 4.
Arifin, Wan N. dan Wan Mohd Z., 2017. Sample  Size  Calculation  in
Animal  Studies  Using  Resource
Equation  Approach .  Malaysia Journal  Medical  Sciences  24(5): 101-105.
Hazrati, M., D. Mehrabani, A. Japoni, H. Montasery,  N.  Azarpira,  A.R. Hamidian-shirazi,  N.  Tanideh, 2010. Effect of Honey on Healing of Pseudomonas aeruginosa Infected  Burn  Wounds  in  Rat. Journal of Applied Animal Research  Res.  37  (2010):  161- 165.
Pereira, D.d.S.T.P., Maria Helena M.L.R, Nicodemos  Teles  d.P.F,  Ana Maria  d.A.C.L,  Maria  Tereza d.S.C,  2012. Development  of Animal Model for Studying Deep Second-Degree  Thermal  Burns . Hindawi  Publishing  Corporation Journal  of  Biomedicine  and Biotechnology  Volume  2012, Article ID 460841.
Rastegar,  F.,  N.  Azarpira,  M.  Amiri,  A. Azarpira, 2011. The Effect of Egg Yolk  Oil  in  the  Healing  of  Third Degree Burn Wound in Rats . Iran Red  Crescent  Medical  Journal 13(10):739-743.
Hahn,  Jurgen  B.,  August  B.,  Heiker  B.,
Irina  E.,  Stefan  K.,  Maila  R.,
Valentina  S.,  Nadja  Z.,  2014.
CELLULAR  RESPONSES  TO EGG-OIL (CHARISMON©). ACTA MEDICA (Hradec Králové) Chakraborty, P.D., De D., Bandyopadhyay S., Bhattacharyya  D.,  2009. Human aqueous  placental  extract  as  a wound  healer .  Journal  of  wound care Kovalcuks, Aleksandrs, 2015. Comparison of Bioactive Compound  Content  in  Egg  Yolk Oil Extracted from Eggs Obtained  from  Different  Laying Hen  Housing  Systems. World
Academy of Science, Engineering and  Technology  International Journal  of  Nutrition  and  Food Engineering
Lin,  Teoh  S.,  Azian  A.L.,  Noor  A.A.H., Wan  Z.W.N., Musalmah  M., 2012.  Evaluation  of  Topical Tocopherol Cream on Cutaneous Wound Healing in Streptozotocin-Induced  Diabetic Rats . Hindawi Publishing Corporation Hong,  Jong  Won,  Won  Jai  Lee,  Seung Boem  Hahn,  Bom  Jin  Kim,  Dae Hyun  Lew,  2010. The  Effect  of
Human  Placenta  Extract  in  a Wound Healing Model. Annals of Plastic Surgery, volume 65
Silva,  Jessica  R.,  Beatriz  B.,  Carolina M.C.K.,  Thamiris  C.,  Mariah
B.P.A.,  Hosana  G.R.,  2018. Wound  Healing  and  Omega-6
Fatty Acids: From Inflamation to Repair. Hindawi Publishing