## EFEK BIOLARVASIDA NYAMUK Aedes aegypti DARI GRANUL

## EKSTRAK DAUN JERUK NIPIS ( Citrus aurantifolia)
Submitted : 30 Juli 2017 Edited : 19 Desember 2017
Accepted : 29 Desember 2017
Yunita Mangampa, Michrun Nisa,
Nurul Fahimah, Sriwanti Lisu Rannu, Muh Anugrawan, Febi Rofina Doa
Akademi Farmasi Kebangsaan Makassar Jln. Perintis Kemerdekaan KM 13,Daya,Makassar 90242 Email : mnmichrunnisa84@gmail.com

## ABSTRACT
Dengue  Haemorrhagic  Fever  (DHF)  is  still  one  of  the  problems  in  Indonesia.  Natural materials that has the property of killing the mosquito vector one of them is a lime leaf. lime leaf extract contains limonoids compounds that serve as larvacide.Tujuan of this research is to make granule  extract  lime  leaf  (Citrus  aurantifolia)  which  has  the  ability  as  a  mosquito  killer biolarvacide.  This  type  of  research  is  a  laboratory  experiment.  The  population  in  this  study were all three instars of Aedes aegypti larvae aged 3-4 days. The results showed that there was granule effect of lime leaf extract (Citrus aurantifolia) to the death of Aedes aegypti mosquito larvae. The granule concentration of lime leaf extract (Citrus aurantifolia) which is effective in killing Aedes aegypti mosquito larvae is 15% extract concentration formulated in granule form with percent mortality of 76.7% larvae.
Keywords : Granule, Citrus aurantifolia, Biolarvacide, Aedes aegypti

## PENDAHULUAN
Demam Berdarah Dengue (DBD) atau Dengue Haemorrhagic Fever (DHF)
merupakan  penyakit  dengan  angka  kejadian yang  cenderung  meningkat  di  daerah  tropis dan subtropis. DBD pertama kali ditemukan di  Indonesia  pada  tahun  1975  di  Sulawesi Selatan  tepatnya  wilayah  Makassar  dan dilaporkan  telah  tersebar  serta  meluas  di seluruh  Indonesia  pada  tahun  1980 (1) . Berbagai pencegahan dilakukan untuk mengatasi  masalah  tersebut  salah  satunya menggunakan  bubuk  larvasida  sintetik. Penggunaan  larvasida  sintetik  memiliki berbagai macam kekurangan seperti distribusi bubuk abate yang tidak merata dan tidak  selalu  tersedia  dalam  pasaran.  Selain itu penggunaan pestisida sintetik secara terus menerus  dapat  mencemari  lingkungan  dan dapat meningkatkan resistensi larva terhadap
pestisida bahkan dapat menyebabkan mutasi secara genetik.
Beberapa  tanaman  memiliki  fungsi sebagai  larvasida  alami.  Larvasida  nabati yang  berasal  dari  tumbuhan  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  yang  bersifat racun  bagi  serangga.  Senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  pada  tumbuhan misalnya  fenilpropan,  terpenoid,  alkaloid, asetogenin,  steroid  dan  tanin.  Kandungan beberapa senyawa metabolit sekunder dalam satu  macam  tumbuhan  dapat  mencegah terjadinya  resistensi  pada  serangga  salah satunya  adalah  dengan  penggunaan  ekstrak daun  jeruk  nipis.  Daun  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia )  mengandung  zat  limonoida. Limonoida  adalah  suatu  zat  yang  dinilai beracun  terhadap  jentik  nyamuk (2) .  Dosis yang  di  gunakan  adalah  dosis  yang  telah terbukti  efektif  dari  penelitian-penelitian
yang  telah  dilakukan  sebelumnya  yaitu  100 mg per liter air (3) .
Penggunaan  ekstrak  dinilai  kurang efektif  dan  efisien  untuk  digunakan  karena penampakan  visual  yang  kurang  nyaman, oleh  karena  itu  ekstrak  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia )  dibuat  formula  dalam  bentuk sediaan granul.
Metode  granulasi  yang  digunakan adalah  metode  granulasi  basah,  dimana metode  tersebut  merupakan  metode  yang akan  menghasilkan  granul  dengan  ukuran yang lebih seragam dan spheris.
Berdasarkan  latar  belakang  diatas  penelitian ini  bertujuan  membuat  formulasi  granul dengan  variasi  konsentrasi  ekstrak  serta pengujian biolarvasida

## METODE PENELITIAN Alat Dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  alat-alat  gelas  (pyrex), lemari  pengering  simplisia,  alat  distribusi ukuran partikel ( Sieve Shaker ), alat uji kadar air ( Heating Drying Oven ), ayakan no 6, 18, 20, 24, 40 dan 100, timbangan analitik.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah daun jeruk nipis ( Citrus aurantifolia ),  H 2 SO 4 (asam  sulfat  pekat), asam  asetat  anhidrat,  aquadest,  etanol  96%, laktosa  dan  PVP  ( Polyvinylpyrrolidone ) (diperoleh  dati  Quadran),  Larva  nyamuk Aedes  aegypti (Lab  Parasitologi  Fakultas Kedokteran UNHAS)

## Penyiapan Sampel
Sampel berupa daun jeruk nipis dicuci bersih, dilakukan sortasi basah, dikeringkan, sortasi kering dan di kecilkan ukurannya.

## Penyiapan Ekstrak
Simplisia  seberat  300  g    dimaserasi dengan  cara  direndam  dengan  etanol  96% dengan  perbandingan  1  :  7,5  hingga  tiga hari.  Setelah  tiga  hari  larutan  disaring
menggunakan  kertas  saring  lalu  dirotavapor hingga diperoleh ekstrak kental.

## Identifikasi  Kualitatif  Ekstrak  Daun Jeruk Nipis
Ekstrak  yang  diperoleh  selanjutnya diuji  secara  kualitatif  kandungan  senyawa limonoida menggunakan pereaksi Lieberman–Burchardt . Amati hingga terbentuk warna orange merah atau kuning

## Rancangan Formula
Pada  penelitian  ini  dibuat  3  formula granul  dengan  konsentrasi  ekstrak  5%,10% dan  15%.  Granul  dibuat  dengan  metode granulasi  basah.  Pembuatan  granul  diawali dengan  menimbang  bahan-bahan  (Ekstrak kental  daun  jeruk  nipis,  PVP,  Laktosa), ekstrak  kental  daun  jeruk  nipis  dimasukkan kedalam  wadah  yang  telah  ditimbang kemudian ditambahkan PVP , laktosa hingga volumenya  cukup  100  g  kemudian  ditetesi dengan etanol tetes demi tetes sambil diaduk hingga terbentuk massa yang kompak (dapat dikepal),  massa  yang  basah  kemudian diayak  menggunakan  ayakan  mesh  no.16 hingga  terbentuk  granul  yang  basah. Selanjutnya  granul  dikeringkan  di  dalam lemari  pengering  pada  suhu  40 o -  50 o C selama  lebih  kurang  satu  jam  hingga terbentuk  granul  kering,  granul  kering  yang diperoleh diayak kembali dengan menggunakan ayakan mesh no.20.

## Evaluasi Granul Uji Kadar Air
Timbang granul kering seberat 1 gram dan  masukkan  kedalam  kurs  porselin  yang telah  dikeringkan,  setelah  itu  masukkan kedalam  oven  pada  suhu  105 o C  selama  1 jam,  kemudian  dinginkan  dalam  destikator dan ditimbang. Kadar air dihitung.
Persentase MC =
Uji Kecepatan alir Aliran granul diuji dengan
mengalirkan  25  g  granul  ke  dalam Flowmeter sampai  masa  granul  melewati corong,  kemudian  dicatat  waktunya.  Daya alir  granul  dihitung  dengan  perbandingan antara  waktu  dan  masa  granul  habis melewati corong.
Kecepatan alir Tabel l. Rancangan Formula Bahan F1 FII FIII Ekstrak  Kental Daun Jeruk Nipis(g) 5% 10% 15% PVP 2% 2% 2% Laktosa Ad 100g Ad 100g Ad 100g Uji Sudut Istirahat Sudut  istirahat  ditentukan  dengan memasukkan sejumlah massa granul
kedalam  corong.  massa  yang  jatuh  akan membentuk  kerucut,  lalu  diukur  tinggi  dan diameter kerucut.
Tan α

## Distribusi Ukuran Partikel
Sejumlah  25  gram  granul  ditimbang, dimasukkan  kedalam  pengayak  bertingkat yang  memiliki  panci  penampung  dan  tutup yang  sesuai  pengayak  digetarkan  dengan gelombang  elektro  magnetik  selama  15 menit.  Ditetapkan  jumlah  presentasi  yang tertinggal dalam setiap dasar ayakan melalui timbangan.

## Uji Waktu Terdispersi Granul
Ditimbang  lebih  kurang  400  mg granul, dituang kedalam gelas lalu ditambahkan  ke  dalamnya  air  kurang  lebih satu liter, diaduk sampai terdispersi
sempurna,  dicatat  waktu  yang  dibutuhkan sampai terdispersi.
Pengujian Larvasida Nyamuk Menggunakan  Granul  Ekstrak  Daun Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia)
Setiap  percobaan  menggunakan  11 buah wadah, sembilan wadah sebagai wadah eksperimen  dan  dua  wadah  sebagai  kontrol positif  dan  negatif.  Setiap  wadah  berisi  10 ekor  jentik  nyamuk Aedes  spp .  Dilakukan tiga  kali  pengulangan  untuk  memenuhi jumlah  sampel  yang  diperlukan.  Sebelum dilakukan  eksperimen  jentik  di  seleksi dilakukan  pemeliharaan  jentik  yang  sehat dan  tidak  cacat  lalu  dilakukan  karantina. Percobaan dilakukan dengan mencampurkan 1  g  granul  yang  mengandung  ekstrak  daun jeruk  nipis  ke  dalam  wadah  eksperimen kemudian  di  observasi  setiap  kelipatan  15 menit  pada  2  jam  pertama  setelah  itu dilakukan observasi pada 12 jam, 24 jam, 48 jam, 72 dan 96 jam.

## Analisis Data
Analisis data dilakukan dengan membandingkan  hasil  yang  diperoleh  dari evaluasi dengan nilai standar pada literatur.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi  Kualitatif  Ekstrak  Daun Jeruk Nipis
Identifikasi terpenoid dengan pereaksi asam  asetat  anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat terjadi perubahan warna pada larutan ekstrak yakni orange  kemerahan yang menunjukkan hasil  positif  bahwa  ekstrak  mengandung terpenoid. Pengujian terpenoid ini menunjukkan  terdapat  senyawa  limonoida dalam  ekstrak  kental  daun  jeruk  nipis  yang memiliki aktivitas penghambat pertumbuhan larvasida nyamuk Aedes aegypti .
Formula Granul
Gambar 1. Ekstrak  kental  daun  jeruk  nipis 5%(F1),  Ekstrak  kental  daun jeruk  nipis  10%(F2),  Ekstrak kental daun jeruk nipis (F3).

## Uji Kadar Lembab
Uji  kadar  lembab  (tabel  2),  diperoleh hasil  persentase  kadar  lembab  granul  semua formula berkisar dari 2,26%-4,94%,
hilangnya  air  dalam  granul  saat  proses pengeringan  bertujuan  untuk  menjamin stabilitas  dan  pengawetan  yang  efektif (4) . Semakin  kecil  kadar  air  yang  dihasilkan akan  makin  memperbaiki  kualitas  granul yang dihasilkan.
Tabel 2. Hasil uji kadar lembab Formula % Kadar Lembab I 2,26 II 2,32 III 4,94

## Uji Kecepatan Alir
Uji Kecepatan alir (tabel 3), diperoleh hasil  bahwa  semua  formula  memenuhi persyaratan  kecepatan  alir  yaitu  pada rentang  4  –  10  g/detik  atau  bersifat  mudah mengalir (5) . Pengujian sifat alir granul sangat penting  untuk  dilakukan  karena  berperan penting  dalam  homogenitas  dosis  pada  saat pengemasan  granul.  Sifat  alir  yang  baik dapat  membuat  bobot  granul  yang  mengalir pada  pengisian  kemasan  akan  seragam sehingga dosis setiap kemasan akan
seragam.
Tabel 3. Hasil Uji Kecepatan Alir Formula Kecepatan Alir ( g / detik ) I 5,17 II 4,20 III 4,52

## Uji Sudut Istirahat
Hasil evaluasi sudut istirahat (tabel 4), diperoleh  semua  formula  memiliki  kriteria sudut baik dengan rentang 5-35 o (6) .
Tabel 4. Hasil Uji Sudut Istirahat
Formula Uji Sudut Istirahat ( o ) I 30 II 28 III 29

## Uji Distribusi Ukuran Partikel
Hasil  distribusi  ukuran  partikel  (tabel 5) pada semua formula menunjukkan bahwa granul yang dihasilkan memiliki sifat coarse powder (serbuk kasar) karena sebagian besar granul  tidak  dapat  melewati  ayakan  nomor 20.

## Uji Waktu Terdispersi Granul
Uji  waktu  terdispersi  granul  (tabel  6) diperoleh  hasil  bahwa  semua  formula memenuhi  persyaratan  waktu  terdispersi granul, yakni kurang dari 5 menit (7) .

## Uji  Larvasida  Granul  Ekstrak  Daun Jeruk Nipis
Uji  larvasida    (tabel  7)  pengamatan dari  24  jam  sampai  96  jam,  menunjukkan bahwa persentase ekstrak 15% dalam granul memiliki kemampuan persen kematian larva nyamuk Aedes  aegypti sebesar  76,7% setelah  96  jam,  hasil  ini  masih  kurang optimal dibandingkan dengan kontrol positif dan  ekstrak.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa pengaruh bahan tambahan dalam pembuatan granul  memiliki  peran  yang  sangat  penting dalam proses  terlepasnya  senyawa aktif dari sediaan.
F1 F2 F3

## Tabel 5. Hasil Uji Distribusi Ukuran Partikel
No. Mesh Ukuran Partikel (µm) Bobot Granul Formula I Formula II Formula III Bobot (g) % Bobot Bobot (g) % Bobot Bobot (g) % Bobot 18 1,00 0,06 0,33 2,71 20 850 0,86 2,73 6,09 24 701 2,83 7,76% 4,70 0,52% 6,84 0,96% 40 737,5 7,79 9,35 6,30 100 181 11,52 7,65 2,93 Total 23,06 24,76 24,87 Tabel 6. Hasil Uji Waktu Terdispersi Granul
Formula Waktu (detik) FI R1 85,02 R2 85,07 R3 85,09 FII R1 100,6 R2 100,10 R3 100,12 FIII R1 110,80 R2 110,85 R3 110,89 Tabel 7. Hasil uji Larvasida granul Ekstrak Daun Jeruk Nipis Formula % Kematian 24 jam % Kematian 48 jam % Kematian 72 jam % Kematian 96 jam Fl 0 16,7 30 33 F2 10 26,7 33 46,7 F3 20 36,7 56,7 76,7 Kontrol + 100 100 100 100 Kontrol - 0 0 0 0 Ekstrak 50 70 90 90 SIMPULAN Berdasarkan hasil uji aktivitas
larvasida  dari  granul  ekstrak  daun  jeruk nipis  terhadap  larva  nyamuk Aedes  aegypti diperoleh  %  kematian  larva  yang  tertinggi sebesar 76,7% yakni pada formula konsentrasi ekstrak 15%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Dirjen  Belmawa  KemenRistekDikti
PKM-P 2017.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Suparta IW. 2008. Pengendalian Terpadu Vektor Virus Demam Berdarah  Dengue,  Aedes  Aegypti (Linn.)  dan  Aedes  albopictus  (Skuse)
(Diptera)  :  Culicidae.  FK  Universitas
Udayana. Bali. Dies Natalis.
2. Ningtyas DR. 2008.Uji Toksisitas Akut
Ekstrak Daun dan Batang Sereh Wangi sebagai  Pestisida  Botani  Pembasmi Larva Nyamuk Aedes aegypti . Semarang; IKIP Jurusan Biologi.
3. Wahyudi  I.  2008.Pengaruh  Konsentrasi Ekstrak  Daun  Jeruk  Nipis Citrus aurantifolia terhadap  Mortalitas  Larva Nyamuk Aedes  spp .  Malang,  FK UNDIP.
4. Palobo,  F.N.,  Yamelan,  P.V.Y.,  dan
Yudistira,  A.,  2012,    Formulasi  granul effervescent    ekstrak  daun  leilem (Clerodendrum  minahassae  L),  Jurnal Pharmacon, 1(2): 64-71. 5. Aulton,    M.,  and  Summers  M.,    2013. Tablet and Compaction. In: Pharmaceutics  The  Science  of    Dosage Form Design, 4th. Philadelphia: Churchill Livingstone, 397-439. 6. Rani,  C.K.,  Parfati,  N.,  Putri,  W.J., 2017, Formulasi sediaan orally Disintegrating  Tablet  Atenolol  dengan Sodium Starch Glycolate sebagai
Superdisintegrant, Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas, 64-71.
7. Siregar,  C.J.P.  dan  Wikarsa,  S.,  2010, Teknologi  Farmasi  Sediaan  Tablet Dasar-Dasar  Praktis,  Buku  Kedokteran EGC, Jakarta.