ISSN 2085-2916  e-ISSN 2337-3652 Tersedia daring http://jai.ipb.ac.id J. Agron. Indonesia, April 2019, 47(1):105-110 DOI: https://dx.doi.org/10.24831/jai.v47i1.20653
PENDAHULUAN
Stevia  ( Stevia  rebaudiana Bertoni)  adalah  tanaman pemanis  berbentuk  perdu  famili Asteraceae berasal  dari Paraguay. Gula stevia memiliki beberapa keunggulan antara lain bersifat alami, sangat manis (200-300 kali lebih manis dari  gula  tebu),  tidak  mengandung  kalori,  dan  memiliki
indeks glikemik nol (Mogra dan Dashora, 2009). Kelebihan tersebut  menjadikan  gula  stevia  sesuai  untuk  penderita diabetes, obesitas atau kegemukan, seseorang yang sensitif terhadap  pemanis  sintetik,  dan  yang  peduli  terhadap kesehatan.
Stevia  mempunyai  daya  adaptasi  lingkungan  yang sangat  luas.  Di  daerah  asalnya,  stevia  tumbuh  di  wilayah subtropis  22-24 o LS,  ketinggian  tempat  500-1,500  m  di atas  permukaan  laut  (dpl)  dengan  kisaran  suhu  17-26 o C
Pertumbuhan, Produksi Biomassa, dan Kandungan Glikosida Steviol pada Lima Klon Stevia Introduksi di Bogor, Indonesia
Growth, Biomass Production, and Steviol Glycoside Contents of Five Introduced Clones of Stevia in Bogor, Indonesia
Masna Maya Sinta 1 dan Sumaryono 1*
1 Pusat Penelitian Bioteknologi dan Bioindustri Indonesia Jl. Taman Kencana No.1, Bogor 16128, Indonesia
Diterima 15 Maret 2018/Disetujui 6 Desember 2018

## ABSTRACT
Stevia rebaudiana Bertoni, a sweetener plant, has been cultivated in Indonesia since the early 1980s, but the yield is lower than in other countries. Five selected introduced stevia clones were planted at Megamendung, Bogor, Indonesia (6°39’ S, 106°56’ E, 800 m above sea level) on December 2014 until November 2015 to evaluate their growth and biomass yield. The growth and yield were observed from 6 to 12 months after planting. In addition, stevioside, rebaudioside A (reb A), and total steviol glycoside (TSG) contents of leaves were measured using high performance liquid chromatography (HPLC). At six months after planting, stem diameter was 8-11 mm, plant canopy diameter was 23-30 cm, plant height was 24-35 cm, and plant mortality was less than 5% except for clone BU at 30.7% due to Sclerotium attack. The plants flowered at different times, therefore had different harvest durations, from 4 weeks (clone BM) to 8 weeks (clone BP). The highest leaf yield was clone BM (6.04 ton ha -1 per year), followed by BX (4.91 ton ha -1 per year), and BP (4.38 ton ha -1 per year). From the five clones tested, clone BM was the best for leaf, TSG, and stevioside yields; whereas clone BS and BP were the best for reb A yield.
Keywords: rebaudioside A, Stevia rebaudiana, stevioside, total steviol glycoside

## ABSTRAK
Stevia rebaudiana Bertoni, tanaman pemanis, telah dibudidayakan di Indonesia sejak awal tahun 1980-an, namun produktivitasnya  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  di  negara  lain.  Lima  klon  stevia  introduksi  terpilih  diuji-lapang  di Megamendung, Bogor, Indonesia (6°39’ LS, 106°56’ BT, 800 m di atas permukaan laut) pada bulan Desember 2014 hingga November 2015 untuk mengkaji pertumbuhan dan produksi biomassanya. Pertumbuhan dan hasil tanaman diamati pada umur 6 bulan sampai 12 bulan setelah tanam. Selain itu, diukur kandungan steviosida, rebaudiosida A (reb A), dan total glikosida steviol (TSG) di dalam daun menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Pada umur enam bulan setelah tanam, diameter batang mencapai 8-11 mm, diameter tajuk tanaman 23-30 cm, tinggi tanaman 24-35 cm, dan persentase kematian tanaman kurang dari 5% kecuali klon BU pada tingkat 30.7% karena adanya serangan penyakit Sclerotium. Kelima klon stevia mulai berbunga pada waktu yang berbeda sehingga periode panen juga berbeda dari 4 minggu (klon BM) sampai 8 minggu (klon BP). Hasil daun kering tertinggi diperoleh pada klon BM (6.04 ton ha -1 per tahun), diikuti oleh BX (4.91 ton ha -1 per tahun), dan BP (4.38 ton ha -1 per tahun). Berdasarkan kelima klon stevia yang diuji, klon BM terbaik dalam menghasilkan daun, TSG, dan steviosida; sedangkan klon BS dan BP terbaik dalam menghasilkan reb A.
Kata kunci: rebaudiosida A, Stevia rebaudiana, steviosida, total glikosida steviol
(Kinghorn, 2002). Tanaman stevia tumbuh dengan baik dari daerah tropis maupun subtropis sampai St. Petersburg, Rusia pada 60 o LU dengan suhu musim dingin sampai dengan -3 o C (Ramesh et al ., 2006).  Di  daerah  tropis stevia umumnya ditanam  di  dataran  tinggi  800-2,000  m  dpl  dengan  suhu 20-30 o C. Curah hujan optimum untuk stevia antara 1,500 sampai  2,300  mm  per  tahun  dengan  maksimum  3  bulan kering  (Kinghorn,  2002).  Kondisi  tanah  yang  ideal  untuk pertumbuhan stevia adalah pH 5-7, kapasitas menahan air baik, drainase baik, dan mengandung bahan organik yang cukup (Ramesh et al ., 2006). Stevia tidak toleran terhadap lahan dengan pH tinggi sehingga sebaiknya tidak ditanam pada lahan basa.
Penentu kemanisan stevia adalah kandungan glikosida steviol di dalam daun stevia. Sampai saat ini telah ditemukan 34 jenis glikosida steviol, namun hanya 11 glikosida steviol yang  umum  ditemukan  pada  tanaman  stevia  (Ceunen et al., 2012;  Ceunen  dan  Geuns,  2013a).  Steviosida  dan rebaudiosida A  (reb A)  merupakan  jenis  glikosida  steviol yang  paling  dominan  pada  stevia  (Chatsudthipong  dan Muanprasat, 2009; Yadav dan Guleria 2012; Prakash et al. , 2014).  Produktivitas  klon  stevia  lokal  Indonesia,  seperti klon seri BPP hanya sekitar 2.5-3.5 ton daun kering ha -1 per tahun  dengan  kandungan  steviosida  6.2-15.1%  dan  reb A 0.4-3.7% (Suhendi, 1988). Produktivitas klon unggul stevia di Amerika mencapai lebih dari 5 ton daun kering ha -1 per tahun dengan kandungan total steviol glycoside (TSG) 15% dan reb A 9% (Parris et al ., 2016), bahkan ada varietas baru yang  dinyatakan  memiliki  TSG  21%  dengan  reb  A  16% (Shock dan Parris, 2015, 2016).
Klon  stevia  generasi  lama  umumnya  memiliki kandungan  steviosida  tinggi  dan  reb  A  rendah,  namun sebaliknya pada klon generasi baru. Kandungan reb A penting karena memiliki tingkat kemanisan tinggi, rasa mendekati gula tebu, dan relatif tidak meninggalkan rasa pahit ( bitter aftertaste ) (Prakash et al. , 2014). Pengembangan stevia di Indonesia  sebaiknya  menggunakan  klon  stevia  introduksi agar mampu bersaing dengan negara produsen lainnya. Klon stevia unggul introduksi tersebut harus diuji adaptasi untuk mendapatkan klon atau varietas yang adaptif dengan tanah dan  iklim  Indonesia.  Klon  introduksi  terpilih  selanjutnya dapat diperbanyak secara cepat dan massal dengan teknik kultur jaringan (Sumaryono dan Sinta, 2011).
Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji daya adaptasi, pertumbuhan,  produksi  serta  kandungan  TSG,  steviosida, dan  reb A  tanaman  stevia  asal  biji  dari  luar  negeri  yang telah diseleksi dan diperbanyak secara klonal dengan kultur jaringan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  di  daerah  Megamendung, Kabupaten Bogor, Jawa Barat (6°39’ LS, 106°56’ BT), pada ketinggian  800  m  dpl  dengan  curah  hujan  rata-rata  2,536 mm  per  tahun,  suhu  rata-rata  25.7 o C,  kisaran  suhu  22.4- 31.4 o C, dan tanah berjenis andosol dengan pH 6.1. Benih stevia dari 5 genotipe yang berbeda diperoleh dari Kanada  dan  Peru.  Benih stevia kemudian dikecambahkan
di dalam cawan petri dengan alas kertas saring. Kecambah yang tumbuh kemudian dikultur secara in vitro . Planlet yang tumbuh dengan baik selanjutnya diaklimatisasi pada tray 128 lubang ukuran 3 cm x 3 cm x 3 cm berisi media campuran tanah, cocopeat, dan pupuk kandang (3:1:1) yang diletakkan di dalam sungkup plastik tertutup selama 3-4 minggu. Bibit yang sudah berakar selanjutnya ditanam di lapang. Tanaman yang tumbuh paling baik diseleksi dan digunakan sebagai bahan tanam. Bibit hasil seleksi dari 5 varietas selanjutnya masing-masing dinamakan sebagai klon BM, BP, BS, BU, dan BX. Kelima klon tersebut diperbanyak secara vegetatif dengan setek di lapang.
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Desember 2014 sampai dengan Juli 2015. Bibit stevia ditanam pada bedengan berukuran 1 m x 8 m dan tinggi bedengan 15 cm. Permukaan  bedengan  ditutupi  dengan  mulsa  plastik  yang dilubangi  dengan  diameter  3  cm  sebagai  tempat  tumbuh bibit. Sebelum ditutup plastik, setiap bedengan diberi pupuk kandang ayam dengan dosis 20,000 kg ha -1 . Tiap bedengan terdiri  atas  128  tanaman  dengan  jarak  tanam  25  cm  x  25 cm.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Kelompok Lengkap  Teracak  (RKLT)  satu  faktor  dengan  4  ulangan. Tanaman  dipangkas  pertama  kali  pada  umur  1  bulan setelah  tanam  pada  ketinggian  15  cm  di  atas  permukaan tanah. Pemangkasan berikutnya dilakukan setelah sebagian tanaman  mulai  berbunga  (5-10%  dari  populasi  tanaman telah berbunga).
Pengamatan pertumbuhan dan hasil mulai dilakukan 6 bulan setelah tanam yaitu saat tanaman mulai berproduksi dengan  stabil.    Karakter  pertumbuhan  tanaman  yang diamati pada saat tanaman berumur 6 bulan adalah diameter batang  (cm),  diameter  tajuk  (cm),  tinggi  tanaman  (cm), dan  persentase  kematian  tanaman  (%).  Karakter  hasil yang  diamati  terdiri  atas  waktu  munculnya  bunga  setelah panen  terakhir  (minggu),  bobot  biomassa  kering  panen (g), dan bobot daun kering (g). Frekuensi panen dilakukan berdasarkan pada kecepatan klon tanaman mulai berbunga, dengan  cara  memangkas  sekitar  1  cm  di  atas  pangkasan akhir menggunakan gunting stek. Pengamatan hasil stevia dilakukan  selama  6  bulan.  Bobot  biomassa  kering  dan bobot daun kering ditentukan berdasarkan total panen tiap klon setelah 6 bulan. Perkiraan hasil daun kering ditentukan dengan  mengkonversi  rata-rata  produksi  daun  kering, jumlah  panen  selama  setahun  dengan  populasi  tanam. Perkiraan  populasi  tanaman  per  hektar  dihitung  dengan asumsi  penggunan  lahan  efektif  60%  (setelah  dikurangi jarak antar bedengan dan infrastruktur), sehingga populasi bibit stevia dihitung dengan rumus adjustment per hektar = 60% x (10,000 : 8) x 128 = 96,000 tanaman. Analisis kandungan steviosida, reb A, dan TSG dalam daun  stevia  setiap  klon  menggunakan High  Performance Liquid  Chromatography (HPLC)  dilakukan  di  Daepyung, Korea menggunakan metode dari JECFA (FAO, 2010).

## Analisis Data
Data  pengamatan  diuji  statistik  menggunakan  sidik ragam  ( analysis  of  variance atau  ANOVA).  Apabila
terdapat  perbedaan  yang  nyata  antar  klon  pada  karakter yang diamati, maka diuji lanjut dengan uji jarak berganda Duncan (DMRT) pada taraf α = 0.05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pertumbuhan Tanaman
Pengamatan  pertumbuhan  tanaman  stevia  dilakukan pada umur 6 bulan setelah tanam, disajikan pada Tabel 1. Klon  BX  memiliki  diameter  batang  utama  terbesar  yaitu rata-rata  10.5  mm  sedangkan  diameter  batang  terkecil pada  klon  BP  yaitu  7.9  mm  (Tabel  1).  Diameter  batang menunjukkan  kekokohan  dari  tanaman  stevia.  Diameter batang  menunjang  struktur  percabangan  stevia  untuk menghasilkan  biomassa  daun.  Kelima  klon  yang  diuji mempunyai struktur percabangan dengan satu batang utama dan  beberapa  cabang  sekunder.  Hal  ini  berbeda  dengan percabangan tanaman stevia lokal di Tawangmangu maupun di Belgia (Ceunen dan Geuns, 2013b) yang umumnya tidak memiliki batang utama tetapi banyak cabang yang langsung tumbuh dari bonggol di permukaan tanah.
Diameter  tajuk  memperlihatkan  cakupan  tajuk tanaman dalam menutup permukaan tanah. Diameter tajuk terbesar  pada  klon  BS  yaitu  30.4  cm,  sedangkan  terkecil adalah klon BU yaitu 23.3 cm. Dengan jarak tanam 25 cm x 25 cm maka semua klon stevia yang diuji telah menutup permukaan  tanah,  kecuali  stevia  klon  BU  (Tabel  1). Kemampuan  tajuk  stevia  menutup  permukaan  tanah  akan mengurangi pertumbuhan gulma yang muncul dari lubang tanam (Sumaryono dan Sinta, 2015).
Tinggi  tanaman  memperlihatkan  tinggi  perdu  stevia saat  akan  dipangkas,  yang  berkisar  antara  24-35  cm  dari atas  permukaan  tanah.  Tinggi  tanaman  stevia  klon  BM dan  BS  sekitar  24  cm,  sedangkan  ketiga  klon  lainnya sekitar 35 cm (Tabel 1). Tinggi tanaman klon BM dan BS yang  lebih  rendah  ini  berkaitan  dengan  lebih  seringnya periode panen dari kedua klon ini yakni setiap 4-5 minggu, sedangkan ketiga klon lainnya setiap 6-8 minggu (Tabel 3). Dibandingkan dengan stevia di daerah subtropis, tanaman stevia tropis lebih pendek. Hal ini karena frekuensi panen yang lebih sering. Tanaman stevia tumbuh jauh lebih tinggi di  daerah  subtropis  seperti  di  India  berkisar  36-65  cm (Kumar et al ., 2014), sedangkan di Bulgaria mencapai 80- 120 cm (Nikolova, 2015).
Tanaman  stevia  yang  mati  disulam  sampai  tanaman berumur  2  bulan,  setelah  itu  tidak  lagi.    Setelah  tanaman berumur 6 bulan, frekuensi kematian tanaman stevia sekitar 5%,  kecuali  pada  klon  BU  mencapai  30.7%  (Tabel  1). Tingginya  kematian  klon  BU  karena  terserang  penyakit Sclerotium  rolfsii .  Serangan Sclerotium rolfsii pada  stevia telah  dilaporkan  di  India  (Kamalakannan et  al. ,  2007), Amerika  Serikat  (Koehler  dan  Shew,  2014),  dan  Italia (Carrieri et al ., 2016) dengan periode penyebaran umumnya terjadi  dari  Mei  hingga  musim  panas  berakhir.  Gejala penyakit  ini  diawali  dengan  kelayuan  pada  tunas  muda kemudian  terjadi  klorosis  pada  daun,  selanjutnya  batang akan mati dan akar membusuk, dengan miselium berwarna putih ditemukan pada pangkal batang.

## Produksi Biomassa
Produksi biomassa daun kering stevia antara klon yang berbeda pada setiap kali panen menunjukkan fluktuasi yang cukup besar (Tabel 2). Selama 6 bulan,  tanaman stevia klon BM dipanen sebanyak 6 kali, klon BS sebanyak 5 kali, klon BU dan BX sebanyak 4 kali dan klon BP hanya 3 kali. Hal ini menunjukkan bahwa klon BM paling cepat berbunga (4 minggu setelah pangkas), sedangkan klon BP paling lambat berbunga  (8-10  minggu  setelah  pangkas)  (Tabel  3).  Daun stevia  dipanen  pada  saat  tanaman  mulai  berbunga  karena pada tahap perkembangan ini kandungan glikosida steviol paling tinggi (Ceunen dan Geuns, 2013b).
Hasil  biomassa  daun  kering  stevia  per  tanaman beragam antar klon dan periode panen. Bobot kering daun setiap kali panen berkisar antara 2 g sampai dengan 10.6 g per tanaman.  Bobot daun kering terendah pada klon BM pada panen pertama sedangkan tertinggi pada klon BP pada panen  pertama.  Namun,  hasil  klon  BM  pada  panen  ke-2 meningkat  tiga  kali  lipat,  sedangkan  hasil  klon  BP  pada panen  ke-2  menurun.  Secara  keseluruhan,  produktivitas daun kering klon stevia per tanaman tersebut masih lebih rendah dibandingkan di negara subtropis. Produktivitas daun kering di India mencapai 15-35 g per tanaman (Mishra et al., 2010) dan 20.7 g per tanaman (Kumar et al., 2014), bahkan di Bulgaria dapat mencapai 50-70 g per tanaman (Nikolova, 2015),  dengan  frekuensi  panen  hanya  2-4  kali  per  tahun. Hasil biomassa daun stevia sangat tergantung pada varietas dan lingkungan penanaman (Parris et al ., 2016). Klon stevia Diameter batang (mm) Diameter tajuk (cm) Tinggi tanaman (cm) Kematian tanaman (%) BM 9.7ab 29.7ab 24.2b 0.2b BP 7.9c 27.8ab 35.1a 5.0b BS 8.8bc 30.4a 24.5b 3.5b BU 8.8bc 23.3c 35.4a 30.7a BX 10.5a 26.9b 34.3a 5.2a
Tabel 1.  Pertumbuhan tanaman lima klon stevia pada umur enam bulan
Keterangan: Angka-angka pada kolom yang sama yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan uji DMRT pada α = 0.05
Kecepatan  setiap  klon  stevia  untuk  mulai  berbunga sangat  beragam  sehingga  panen  untuk  setiap  klon  juga berbeda-beda.  Panen  biomassa  (daun  dan  batang  bagian atas) dilakukan pada waktu tanaman mulai berbunga. Hal ini disebabkan kandungan glikosida steviol akan menurun setelah tanaman berbunga, sebaliknya jika tanaman terlalu cepat dipanen, produksi biomassa daun masih rendah. Klon stevia yang paling cepat berbunga adalah klon BM yakni 4  minggu  setelah  panen  terakhir,  dan  yang  paling  lambat berbunga adalah klon BP yakni setiap 8-10 minggu setelah panen.  Lingkungan  produksi  mempengaruhi  kecepatan tanaman stevia berbunga, pada wilayah subtropis tanaman stevia hanya berbunga satu kali menjelang musim dingin, sedangkan pada wilayah tropis bergantung pada ketinggian tempat  ( altitute ). Tanaman  stevia  lebih  cepat  berbunga  di dataran  rendah  wilayah  tropis  dibandingkan  dengan  di dataran tinggi (Mubiyanto, 1990).
Stevia  termasuk  tanaman  hari  pendek  ( short-day plant ), yang berarti tanaman akan terinduksi untuk berbunga apabila periode siang hari kurang dari panjang hari kritisnya ( critical day length ). Panjang hari kritis pada tanaman stevia adalah 13 jam. Stevia cepat berbunga di daerah subtropis pada  musim  dingin,  sehingga  tanaman  hanya  dipanen satu atau dua kali per tanam saat musim panas. Kecepatan tanaman  stevia  berbunga  di  Indonesia  tidak  bergantung pada musim karena memiliki panjang hari yang relatif sama. Stevia dapat dipanen 6-12 kali per tahun selama satu siklus hidup 2-4 tahun. Hasil ini sesuai dengan yang diungkapkan oleh  Djajadi  (2014)  bahwa  stevia  di  Indonesia  umumnya
dipanen setiap 30-60 hari. Pereira et al. (2016) menyatakan bahwa semakin panjang lama penyinaran, semakin panjang periode panen.
Produktivitas  biomassa  daun  dan  batang  tertinggi dicapai oleh klon BM, disusul klon BX, BP, dan BS (Tabel 3).  Hal ini mengindikasikan bahan klon BP paling efisien dengan  tingkat  produksi  cukup  tinggi.  Hasil  daun  hampir sama dengan hasil biomassa, dengan rendemen daun sekitar 74-81%  dari  total  biomassa  (Tabel  4).  Karena  bagian tanaman stevia yang mengandung glikosida steviol paling tinggi adalah daun maka produktivitas daun tanaman stevia yang paling penting. Hasil tertinggi diperoleh dari klon BM yakni dengan potensi produksi sebesar 4.03 kg daun kering per 8 m 2 selama 6 bulan atau setara 6.04 ton daun kering ha -1 per tahun diikuti klon BX 4.91 ton daun kering ha -1 per tahun dan klon BP 4.38 ton daun kering ha -1 per tahun (Tabel 3).  Produksi  daun  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan produksi daun klon unggul stevia seri BPP sebesar 2.5-3.5 ton ha -1 per tahun (Suhendi, 1988).
Di negara subtropis waktu panen lebih lambat, dengan frekuensi panen 1-2 kali per periode tanam.  Di Bulgaria, stevia  dipanen  2-3  kali  per  tahun  dengan  tinggi  tanaman mencapai 80-120 cm, dan total hasil daun kering 2.5-3.0 ton ha -1 per tahun (Nikolova, 2015). Di Amerika Serikat, dari uji lapang beberapa kultivar stevia di empat lokasi menunjukkan produksi  daun  rata-rata  4.12  ton  ha -1 per  tahun,  bahkan ada yang mencapai 7 ton ha -1 per tahun dengan frekuensi panen satu atau dua kali (Parris et al ., 2016), sedangkan di wilayah subtropis Brazil hasil daun mencapai 4.0 ton ha -1
Klon Panen ke- (g daun per tanaman) Jumlah panen Rerata hasil daun (g /panen per tanaman) 1 2 3 4 5 6 BM 2.0 6.9 4.7 8.3 4.6 5.3 6 5.3 BP 10.6 3.7 10.2 - - - 3 8.2 BS 3.2 5.2 6.1 4.0 3.5 - 5 4.4 BU 2.6 3.4 2.7 4.0 - - 4 3.2 BX 4.6 8.1 5.8 7.8 - - 4 6.6 Tabel 2. Hasil biomassa daun kering per tanaman dan frekuensi panen stevia selama enam bulan Klon Durasi panen (minggu) Jumlah panen per tahun Bobot biomassa kering (kg) Bobot daun kering (kg) Perkiraan hasil daun kering (ton ha -1 ) Rendemen daun (%) BM 4 13 5.47a 4.03a 6.04a 73.6b BP 8 6 3.61bc 2.92bc 4.38bc 81.0a BS 5 10 3.47c 2.70c 4.06c 78.3a BU 7 7 1.56d 1.09d 1.63d 78.0a BX 6 8 3.96b 3.27b 4.91b 79.2a
Tabel 3. Durasi panen, jumlah panen per tahun, hasil biomassa, dan daun kering stevia per tahun
Keterangan: Angka-angka  pada  kolom yang  sama yang diikuti oleh huruf  yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan uji DMRT pada α = 0.05
Keterangan:  - = tidak panen (pertumbuhan)
per tahun  dengan  panen  1-3 kali (Pereira et al ., 2016). Penanaman stevia di daerah tropis seperti Indonesia lebih menguntungkan dari segi kumulatif produksi, namun panen yang lebih sering meningkatkan biaya panen.

## Produksi Glikosida Steviol
Analisis  kandungan  total  glikosida  steviol  daun kelima  klon  stevia  introduksi  memperlihatkan  kandungan yang beragam antara 6.7% sampai dengan 13.5% (Tabel 4). Tingkat kandungan TSG ini relatif sedang, kecuali klon BU yang  hanya  6.7%  yang  tergolong  rendah.  Dua  komponen TSG utama adalah steviosida dan reb A, yang berkisar 77- 82% dari TSG, kecuali klon BU sebesar 57%. Kandungan steviosida  tinggi  adalah  klon  BM  (4.10%)  dan  klon  BX (4.06%),  sedangkan  kandungan  reb  A  tinggi  adalah  klon BS  (8.54%)  dan  klon  BP  (6.62%).  Klon  BP  mempunyai proporsi reb A tinggi dalam TSG yakni 67.3%. Kandungan dan  proporsi  reb  A  yang  tinggi  lebih  diutamakan  karena tingkat kemanisannya lebih tinggi dari steviosida dan tidak meninggalkan rasa pahit ( bitter aftertaste ) yang merupakan karakter  yang  tidak  diinginkan  terutama  apabila  untuk minuman dan makanan.
Berbagai  faktor  mempengaruhi  produktivitas  dan kandungan  glikosida  steviol  daun  stevia.  Pereira et  al.
(2016)  melaporkan  bahwa  suhu  dan  total  cahaya  yang diterima  oleh  stevia  mempengaruhi  kandungan  glikosida steviol  pada  stevia.  Pada  penelitian  ini  terlihat  bahwa perbedaan  klon  stevia  mempengaruhi  waktu  panen  dan kandungan glikosida steviol. Kualitas daun stevia umumnya dikorelasikan  dengan  produksi  glikosida  steviolnya terutama steviosida dan reb A. Berdasarkan hasil produksi stevia  pada  5  klon  introduksi,  terdapat  2  klon  harapan untuk produksi reb A yaitu BS dan BP dengan produksi reb A mencapai 347 kg ha -1 per tahun pada klon BS dan 290 kg ha -1 per tahun pada klon BP (Tabel 4), sedangkan klon BM sesuai untuk produksi steviosida dengan hasil 248 kg ha -1 pertahun.  Perbandingan  antara  semua  klon  introduksi yang  diuji  menunjukkan  klon  BM  memiliki  potensi  yang paling baik untuk menghasilkan biomassa daun, TSG, dan steviosida.  Cahaya  mempengaruhi  kandungan  flavanoid tanaman Gynura pesudochina (Ghulamahdi et al., 2008). Produksi TSG, steviosida, dan reb A yang dihasilkan pada  penelitian  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  produksi  di India dengan total steviosida dan reb A mencapai 157 kg ha -1 per tahun  dengan adjustment populasi 111,111 tanaman per ha (Kumar et al., 2014) dan sebanding dengan produksi di Amerika Serikat yaitu rata-rata TSG 490 kg ha -1 per tahun dan  reb A  300  kg  ha -1 per  tahun  dengan  populasi  90,000 tanaman per ha (Parris et al ., 2016).

## KESIMPULAN
Uji  adaptasi  klon  stevia  introduksi  di  Bogor Indonesia  memberikan  hasil  yang  baik,  apabila    dilihat dari produktivitas, pertumbuhan maupun kandungan TSG, steviosida, dan reb A. Kelima klon stevia mulai berbunga pada waktu yang berbeda sehingga periode panennya juga berbeda.  Klon  terbaik  yang  menghasilkan  produktivitas biomassa daun kering, TSG, dan steviosida tertinggi adalah klon BM, klon terbaik yang menghasilkan reb A tinggi adalah klon BS dan BP, sedangkan klon yang mampu menghasilkan steviosida  dan  reb  A  dalam  jumlah  yang  hampir  sama tinggi  adalah  klon  BX.  Dari  hasil  kajian  produksi  daun dan kandungan glikosida steviol maka klon yang potensial dikembangkan lebih lanjut adalah klon BM, BS, BX, dan
BP.  Kajian  dilakukan  di  dataran  menengah  yaitu  800  m dpl  sehingga  apabila  akan  dikembangkan  di  lokasi-lokasi lain maka keempat klon tersebut dapat digunakan sebagai sumber bahan tanam.

## DAFTAR PUSTAKA
Carrieri, R., E. Cozzolino, P. Tarantino, D. Cerrato, E. Lahoz. 2016.  First  report  of  southern  blight  on  candyleaf ( Stevia  rebaudiana )  caused  by Sclerotium  rolfsii in Italy. Plant Disease 100:220.
Ceunen,  S.,  J.M.C.  Geuns.  2013a.  Steviol  glycosides: chemical diversity, metabolism, and function. J. Nat.
Prod. 76:1201-1228. Klon stevia Kandungan (%) Perkiraan hasil (kg ha -1 per tahun) TSG Steviosida Reb A Daun kering TSG Steviosida Reb A BM 9.17 4.10 2.90 6,039 554 248 175 BP 9.84 1.50 6.62 4,382 431 66 290 BS 13.54 2.42 8.54 4,058 549 98 347 BU 6.73 1.60 2.23 1,629 110 26 36 BX 10.32 4.06 4.14 4,907 506 199 203
Tabel 4. Kandungan dan perkiraan hasil TSG, steviosida, dan rebaudiosida A dari lima klon stevia
Keterangan: TSG = total glikosida steviol; Reb A = rebaudiosida A
Ceunen,  S.,  J.M.C.  Geuns.  2013b.  Influence  of photoperiodism on the spatio-temporal accumulation of steviol glycosides in Stevia rebaudiana (Bertoni). Plant Sci. 198:72-82.
Ceunen, S., S. Werbrouck, J.M.C. Geuns. 2012. Stimulation of steviol glycoside accumulation in Stevia rebaudiana by LED light. Plant Physiol. 169:749-752.
Chatsudthipong,  C.,  C.  Muanprasat.  2009.  Stevioside  and related  compounds:  therapeutic  benefits  beyond sweetness.  Pharmacology  &  Therapeutics  121:41- 54.
Djajadi.  2014.  Pengembangan  tanaman  pemanis Stevia rebaudiana (Bertoni) di Indonesia. Perspektif 13:25-
33.
[FAO] Food Agricultural Organization. 2010. Compendium of  food  additive  specification.  FAO  JECFA Monograph. Roma, IT.
Ghulamahdi, M., S.A. Aziz, Nirwan. 2008. Peningkatan laju pertumbuhan  dan  kandungan  flavonoid  klon  daun dewa ( Gynura pseudochina (L.) DC) melalui periode pencahayaan. Bul. Agron. 36:40-48
Kamalakannan,  A.,  V.  Valluvaparidasan,  K.  Chitra,  E. Rajeswari,  K.  Salaheddin,  D.  Ladhalakshmi,  A. Chandrasekaran.  2007.  First  report  of  root  rot  of stevia  caused  by Sclerotium  rolfsii in  India.  Plant Pathol.  56:350.
Kinghorn,  A.D.  2002.  The  Genus  of  Stevia.  Taylor  & Francis. London and New York, USA.
Koehler, A., H. Shew. 2014. First report of stem and root rot  of  Stevia  caused  by Sclerotium  rolfsii in  North Carolina. Plant Disease 98:1005.
Kumar, R., S. Sharma, S. Sood. 2014. Yield components, light interception and marker compound accumulation of  stevia  ( Stevia  rebaudiana Bertoni)  affected  by planting  material  and  plant  density  under  western Himalayan  conditions. Arch. Agron.  Soil  Sci.  1:1- 15.
Mishra, P., R. Singh, U. Kumar, V. Prakash. 2010. Stevia rebaudiana –  A  magical  sweetener.  Global  J. Biotechnol. Biochem. 5:62-74.
Mogra, R., V. Dashora. 2009. Exploring the use of Stevia rebaudiana as a sweetener in comparison with other sweeteners. J. Hum. Ecol. 25:117-120.
Mubiyanto,  B.O.  1990.  Analisis  pertumbuhan  tanaman Stevia  rebaudiana Bertoni  pada  tiga  tinggi  tempat. Disertasi.  Sekolah  Pascasarjana.  Institut  Pertanian Bogor.
Nikolova,  E.  2015.  Development  in  the  production  of natural sweetener ( Stevia rebaudiana) in Bulgaria. J. Environ. Agric. Sci. 3:61-71.
Parris, C.A., C.C. Shock, M. Qian. 2016. Dry leaf and steviol glycoside  productivity  of Stevia  rebaudiana in  the Western United States. Hort. Sci. 51:1220-1227.
Pereira, C., L. Storck, S.J. Lopes, T.N. Martin, D.A. Bisognin. 2016. Dry biomass and glycoside yield from Stevia rebaudiana leaves under different harvesting times. Biosci. J. 32:1462-1471.
Prakash, I., A. Markosyan, C. Bunders. 2014. Development of  next  generation  stevia  sweetener:  Rebaudioside M. Foods 3:162-175.
Ramesh,  K.,  V.  Singh,  N.W.  Megeji.  2006.  Cultivation of  stevia  ( Stevia  rebaudiana (Bert.)  Bertoni):  A comprehensive review. Adv. Agron. 89:137-177.
Shock,  C.C.,  C.A.  Parris.  2015.  Stevia  plant  named  ‘SW 129’.  U.S.  plant  patent  application  No.  14757095, filed  17  November  2015.  S&W  Seed  Co.,  Fresno, CA.
Shock, C.C., C.A. Parris. 2016. Stevia plant named ‘SW 107’. U.S. plant patent US 2016/ 0157403 Pl, published 2 June 2016. S&W Seed Co., Five Points, CA.
Suhendi, D. 1988. Seleksi massa tanaman Stevia rebaudiana Bertoni. Menara Perkebunan 56:93-95.
Sumaryono, M.M. Sinta. 2011. Peningkatan laju multiplikasi tunas  dan  keragaan  planlet Stevia  rebaudiana pada kultur in vitro. Menara Perkebunan 79:49-56.
Sumaryono,  M.M.  Sinta.  2015.  Petunjuk  teknis  budidaya tanaman stevia. PPBBI. Bogor, ID.
Yadav, S.K., P Guleria. 2012. Steviol glycoside from stevia: biosynthesis pathway review and their application in food and medicine. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 52:988- 998.