UJI TOKSISITAS EKSTRAK AKAR TUBA ( Derris elleptica ) PADA IKAN NILA MERAH ( Oreochromis sp)
Toxicity Test Root Extract Tuba (Derris elliptica ) In Red Tilapia (Oreochromis sp)
Donny Prariska 1 , Tanbiyaskur 2 , dan M. Hanif Azhar 2
1) Mahasiswa  PPS Institut Pertanian Bogor
2) Staf Pengajar – Universitas Sriwijaya
3) Staf Pengajar – Universitas Airlangga

## Abstrak
Permintaan  komoditi  perikanan  di  pasar  internasional  maupun  domestik  terus  mengalami  perubahan mulai  dari  produk  dalam  bentuk  baku  ke  bentuk  segar  dan  dalam  bentuk  hidup.  Beberapa  komoditas perikanan yang memiliki nilai ekonomis tinggi dan banyak diperdagangkan dalam keadaan hidup antara lain  ikan  nila,  udang,  lobster  dan  beberapa  jenis  ikan  laut.  Salah  satu  alasan  permintaan  konsumen terhadap komoditi hidup perikanan adalah keinginan konsumen untuk memperoleh kepuasan cita rasa dan tekstur  daging  yang  lebih  baik.  Salah  satu  metode  yang  dapat  dilakukan  dalam  upaya  menurunkan aktifitas metabolisme ikan selama pengiriman adalah dengan pembiusan.tujuan dari penelitian ini adalah menguji toksisitas konsentrasi ekstrak akar tuba pada ikan nila merah.Mengetahui nilai LC 50 96 jam pada ekstrak akar tuba pada ikan  nila  merah ( Oreocromis sp). Memberikan informasi konsentrasi  yang aman untuk  penggunaan  ekstrak  akar  tuba  dalam  menurunkan  aktifitas  metabolisme  pada  ikan  nila  merah ( Oreocromis sp).  Penelitian  ini  dilaksanakan  selama  6  hari  pada  bulan  Januari  2015.  Metode  penelitian menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  terdiri  6  taraf  perlakuan  dengan  3  kali  ulangan.  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak akar tuba semakin banyak ikan uji yang  mati  dengan  kematian  hingga  (77,1%)  sudah  dapat  dicapai  pada  konsentrasi  perlakuan  P5  0,0036 ml/L dan kematian terendah (6,27%) terjadi pada perlakuan P1 (0,0013 ml/L) sedangkan pada konsentrasi (0  ml/L)  tidak  terjadi  kematian.  Sedangkan  untuk  kelangsungan  hidup  benih  Ikan  Nila  Merah ( Oreochromis sp) yang tertinggi yaitu pada perlakuan P0 dengan tingkat SR sebesar 100% serta terendah pada perlakuan P5 dengan tingkat SR sebesar 22,9%. Sedangkan Nilai tingkat kelangsungan hidup pada perlakuan P1 sebesar 93,73 %, diikuti perlakuan P2 (86,3 %) , perlakuan P3  (85,8 %) serta  perlakuan P4 (62,9%). Nilai kualitas air tiap perlakuan yaitu suhu berkisar antara 25-26 0 C, dan pH 6,0-7,0.
Kata Kunci : Ikan Nila Merah, Ekstrak Akar Tuba, Nilai LC 50 96 Jam, Kelangsungan Hidup, Mortalitas.

## Abstract
Fishery commodity demand in the international and domestic market continues to change from products in raw form to the fresh form and in the form of life. Some commodity that has a high economic value and many  live  sale  include  tilapia,  shrimp,  lobster  and  several  species  of  marine  fish.  One  of  the  reasons consumer  demand  for  commodities  fishery  life  is  the  desire  of  consumers  to  obtain  satisfaction  of  taste and texture of the meat better. Efforts to maintain the condition of live fish can be done in various ways, such as carrier media technology and material modifications that can lower the metabolic activity of fish (anesthesia material) on the shipping process fish. One method that can be done in an effort to reduce the activity  of  the  metabolism  of the  fish  during  shipment  is  under  anesthesia.  purpose  of  this  study  was  to test the toxicity of tuba root extract concentration on the red tilapia. Knowing the 96-hour LC 50 values on tuba root extract on red tilapia (Oreocromis sp). Provide information safe concentration for use tuba root extract in reducing metabolic activity in the red tilapia (Oreocromis sp). The research was conducted for 6 days in January 2015. The research method using completely randomized design (CRD), comprising 6 level  of  treatment  with  3  replications.  The  results  of  this  study  showed  that  the higher  concentration  of tuba  root  extract  more  test  fish  that  died  with  the  death  of  up  to  (77.1%)  have  been  achieved  in  the treatment  concentration  P5  0.0036  ml/L  and  the  lowest  mortality  (6.27%)  occurred  in  treatment  P1 (0.0013 ml/L), while the concentrations (0 ml / L) did not occur death. As for seed viability Red Tilapia (Oreochromis sp) the highest, the P0 treatment with SR rate of 100% and the lowest in P5 treatment with SR rate of 22.9%. While the the survival rate of 93.73% treatment P1, P2 followed by treatment (86.3%), treatment  P3  (85.8%)  and  P4  treatment  (62.9%).  Water  quality  values  for  each  treatment  is  the temperature range between 25-260C, and pH 6.0 to 7.0
Keywords : Red Tilapia, Tuba Root Extract, 96 Hour LC50 value, Survival, Mortality.

## I. PENDAHULUAN
Beberapa komoditas perikanan yang memiliki  nilai  ekonomis  tinggi  dan  banyak diperdagangkan  dalam  keadaan  hidup  antara  lain ikan  nila,  udang,  lobster  dan  beberapa  jenis  ikan laut  (Junianto  2003).  Ikan  nila  merah  merupakan hasil  budidaya  yang  terdapat  hampir  di  seluruh wilayah Indonesia. Permintaan terhadap jenis ikan nila  merah  tersebut  dalam  keadaan  hidup  akan terus meningkat di pasaran (Lee dan Sadovy 1998 dalam Suryaningrum et  al. 2005).  Dalam  rangka kampanye keamanan pangan  ( food  safety ) produk akuakultur,  maka  upaya  penggunaan  berbagai bahan  kimia  mulai  dialihkan  kepada  paradigma bahan nabati. Karena sifatnya yang organik, bahan nabati  mudah  terurai  di  alam  dan  daya  racunnya akan  hilang  dalam  beberapa  hari.  Akan  tetapi, tingkat  efektifitasnya  yang  rendah  menyebabkan penggunaan  bahan  nabati  kurang  diminati  di kalangan pembudidaya, sebagai contoh; penggunaan  saponin  (biji  teh)  harus  pada konsentrasi  20  mg/L  sedangkan  penggunaan Thiodan  cukup  pada  konsentrasi  0,012  mg/L (Rohman, 1986). Untuk itu, perlu kajian lebih jauh tentang  berbagai  jenis  bahan  nabati  yang diharapkan  dapat  mengimbangi  keefektifan  bahan anorganik,  tetapi  tetap  ramah  lingkungan  dan menjamin  keamanan  pangan.    Salah  satu  bahan nabati  yang  dapat  digunakan  sebagai  bahan penurun  metabolisme  ikan  adalah  ekstrak  akar tuba (Rusdiansyah, 2004).
Menurut  Acevado-Rodriquez  1990 dalam Hien et  al .  2003,  Akar  tuba  ( Derris  elliptica ) merupakan  tumbuhan  perdu  yang  memiliki kandungan aktif dominan berupa rotenon. Senyawa  ini  merupakan  senyawa  isoplavon  yang memiliki  kadar  toksisitas  rendah.  Namun  kadar toksisitas  akar  tuba  terhadap  ikan  masih  belum banyak  di  kaji.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan suatu penelitian tentang uji toksisitas ekstrak akar tuba  pada  ikan  nila  merah  untuk  melihat potensinya  sebagai  bahan  anastesi  pada  ikan. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  :  1).  Menguji toksisitas  konsentrasi  ekstrak  akar  tuba  pada  ikan nila merah, 2). Mengetahui nilai LC 50 96 jam pada ekstrak  akar  tuba  pada  ikan  nila  merah ( Oreocromis sp),  dan  3).  Memberikan  informasi konsentrasi  yang aman  untuk penggunaan ekstrak akar tuba dalam menurunkan aktifitas metabolisme  pada  ikan  nila  merah  ( Oreocromis sp)

## II. METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  Kampus  C Fakultas  Perikanan  Universitas  PGRI  Palembang. Uji  toksisitas  merupakan  uji  hayati  yang  berguna
untuk menentukan  tingkat toksisitas dari suatu zat atau  bahan  pencemar  dan  digunakan    juga  untuk pemantauan  rutin    suatu    limbah.    LC 50 ( Median Lethal  Concentration )  yaitu  konsentrasi  yang menyebabkan  kematian  sebanyak  50%  dari organisme uji yang dapat diestimasi dengan grafik dan  perhitungan  pada  suatu  waktu  pengamatan tertentu,  misalnya  LC 50 48  jam,  LC 50 96  jam sampai  waktu  hidup  hewan  uji  (Koesoemadinata 1983 dalam Rusdiyanti dan Astri 2009). Dosis LC 50 diperoleh dari uji ambang batas atas  dan  bawah.  Nilai  ambang  batas  berfungsi untuk  menentukan  konsentrasi  perlakuan  pada  uji toksisitas lethal. Pengujian toksisits lethal dilakukan  dengan  menggunakan  Racangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  6  perlakuan dengan  masing  -  masing  perlakuan  dilakukan  3 kali  pengulangan.  Konsentrasi  perlakuan  uji toksisitas  lethal  ditentukan  dengan  menggunakan perhitungan  Busvine  (1971) dalam Yosmaniar et al (2009), sebagai berikut : Log (N/n) = K log (a/n) ................................................ (1) a/n  =  b/a  =  c/b  =  d/c  =  e/d  =  f/e .................................... (2) keterangan :
N = Konsentrasi ambang atas (mL.L -1 ) n  = Konsentrasi ambang bawah (mL.L -1 ) K = Jumlah interval konsentrasi a,b,c,d,e,f  adalah  konsentrasi  yang  diuji dengan  a  sebagai  konsentrasi  terkecil  dengan menggunakan  rumus  (1)  dan  (2)  maka  didapat nilai uji toksisitas lethal (LC 50 96 jam). P0 =  Kontrol ( 0 mL/L) P1 =  Ekstrak Akar Tuba 0,0013 P2 =  Ekstrak Akar Tuba 0,0017
P3 =  Ekstrak Akar Tuba 0,0022
P4 =  Ekstrak Akar Tuba 0,0028 P5 =  Ekstrak Akar Tuba 0,0036 a. Uji Toksisitas (LC 50 96 jam) Data Mortalitas
Pengamatan mortalitas dilakukan pada jam ke- 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84 dan 96.  Penentuan mortalitas  dilakukan  dengan  jumlah  ikan  pada awal dikurang jumlah ikan pada akhir pemeliharaan  kemudian  dibandingkan  dengan jumlah  ikan  pada  awal  pemeliharaan  (Effendie,
1997) : M = x 100%
Keterangan : M = Mortalitas % Nt  = Jumlah ikan akhir pemeliharaan (ekor) No  = Jumlah ikan awal pemeliharaan (ekor) b. Pengukuran Kualitas Air
Parameter  pengukuran  kualitas  air  yang diuji disajkan pada Tabel 1 sebagai berikut :
Tabel 1 . Parameter, alat ukur dan frekuensi pengukuran pada uji toksisitas lethal.
No Parameter Frekuensi Pengukuran Acuan 1 Suhu ( o C) Awal dan akhir APHA (2005) 2 pH 12 jam sekali APHA (2005) c. Pengamatan Bukaan Operculum Ikan
Pada hampir semua ikan, insang merupakan  komponen  penting  dalam  pertukaran gas.  Insang  terbentuk  dari  lengkungan  tulang rawan  yang  mengeras,  dengan  beberapa  filamen insang  di  dalamnya.  (Fujaya,  2008).  Pengamatan operculum  dilakukan  pada  hari  pertama  setelah terpapar  ekstrak  akar  tuba,  kemudian  dihitung banyaknya  gerakan  membuka  dan  menutup operculum ikan tersebut selama 1 menit pada tiap – tiap perlakuan.
d. Pengamatan Kelangsungan Hidup
Perhitungan kelangsungan hidup dilakukan sesuai pernyataan Effendie (1979) sebagai berikut :
SR = x 100%
Keterangan :
SR = Kelangsungan hidup (%)
Nt  = Jumlah benih hidup akhir pemeliharaan No = Jumlah benih hidup awal pemeliharaan
Data kumulatif mortalitas ikan nila pada uji lethal  dianalisa  menggunakan  analisis  probit dengan  bantuan  tabel  probit  untuk  mengetahui nilai  Lc 50 96  jam  (Wallace  (1982) dalam Yosmaniar,  (2009).  Untuk  mengetahui  pengaruh dari  pemberian  ekstrak  akar  tuba  pada  berbagai konsentrasi  terhadap  kelangsungan  hidup  pada ikan nila dilakukan dengan  menggunakan analisis sidik  ragam.  Apabila  terdapat  pengaruh  yang nyata maka dilakukan uji lanjut BNT dengan taraf kepercayaan 99% (Hanafiah, 2011).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## a. Uji Toksisitas Lethal
Uji  toksisitas  lethal  dilakukan  untuk menentukan nilai atau dosis ekstrak akar tuba pada uji  sub  lethal.    Adapun  data  mortalitas  pengujian toksisitas  lethal  disajikan  pada Tabel    2 berikut :

## Tabel 2. Mortalitas Ikan Nila pada Uji Pendahuluan
Waktu Pengamatan (jam) Mortalitas (%) / Konsentrasi (ml/ L) 0 (kontrol) 0,001 (ml/ L) 0,002 (ml/ L) 0,003 (ml/ L) 0,004 (ml/ L) 24 0 0 20 30 70 36 0 0 20 50 100 48 0 0 20 50 100
Berdasarkan  dari  hasil  uji  toksisitas  lethal diperoleh bahwasanya pada konsentrasi 0,004 ml/ L akar tuba dapat membunuh ikan uji dalam kurun waktu  36  jam,  sedangkan  pada  konsentrasi  0,001 ml/ L akar tuba tidak menyebabkan kematian ikan uji  selama  48  jam  perendaman.  Dosis  konsentrasi suspensi akar tuba adalah antara nilai 0,001 ml/ L sampai 0,004 ml/ L dengan nilai ambang atas (N) 0,004  ml/  L  dan  0,001    ml/  L  sebagai  ambang bawah (n).
b. Uji Toksisitas Sub Lethal
Berdasarkan hasil uji kisaran kritis pada uji toksisitas  lethal  penentuan  konsentrasi  setiap perlakuan untuk uji lanjutan dihitung dengan
menggunakan  rumus  Busvine  (1971) dalam
Yosmaniar et  al. (2009),  di  mana  diperoleh  6 rentang konsentrasi untuk mendapatkan konsentrasi nilai tengah perlakuan atau konsentrasi  mematikan  50  %  ikan  nila  dalam waktu  96  jam  (LC 50 -96  jam),  yakni  :  PO  sebagai kontrol  (0  ml/  L),  P1  (0,0013  ml/  L),  P2  (0,0017 ml/ L), P3 (0,0022 ml/ L), P4 (0,0028 ml/ L), dan P5  (0,0036  ml/  L).  Dari  hasil  pengujian  yang dilakukan  pada  uji  toksisitas  sub  letal,  terlihat bahwa  tingkat  kematian  benih  ikan  nila  cukup bervariasi. Adapun data mortalitas ikan nila merah pada  pengujian  LC 50 96  jam  disajikan  pada Gambar 1 berikut :
Gambar 1. Grafik Mortalitas Ikan Nila Merah ( Oreochromis sp )
Berdasarkan  grafik  diatas  menunjukkan bahwa  tingkat  kematian  ikan  selama  96  jam pengujian  searah  dengan  level  konsentrasi  akar tuba  yang  dipaparkan.  Di  mana  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak akar tuba semakin banyak ikan uji  yang  mati  dengan  kematian  hingga  (77,1%) sudah dapat dicapai pada konsentrasi perlakuan P5 0,0036  ml/L  dan  kematian  terendah  (6,27%) terjadi  pada  perlakuan  P1  (0,0013  ml/L) sedangkan  pada  perlakuan  kontrol  (0  ml/L)  tidak terjadi  kematian.  Hal  ini  disebabkan  di  dalam ekstra  akar  tuba  mengandung  senyawa  rotenon yang dapat menurunkan tingkat konsumsi oksigen pada  ikan  (John  1944 dalam Irwan  2006).  Gejala yang  timbul  hampir  sama  dengan  penelitian Yosmaniar et  al. (2009)  dimana  gejala  fisiologis berupa ikan berenang tidak teratur dengan sesekali menghentak,  sedangkan  gejala  klinis  yaitu  ikan mengeluarkan lendir yang berlebihan dari permukaan  tubuhnya,  warna  kulit  ikan  memucat dan  mengalami  luka  sirip  dan  kulit.  Menurut Connel dan Miller (1995) dalam Yosmaniar et al . (2009), bahwa gejala tersebut merupakan tanggapan  yang  terjadi  pada  saat  zat  –  zat xenobiotik  tertentu  mengganggu  proses  sel  dalam makhluk  hidup  sampai  suatu  batas  yang menyebabkan kematian secara langsung.
Dari  analisa  sidik  ragam  terhadap  nilai mortalitas  ikan  nila  merah,  diketahui  pemberian dosis  ekstrak  akar  tuba  memberikan  pengaruh nyata  terhadap  nilai  mortalitas  ikan  nila  merah. Hasil  uji  lanjut  terhadap  nilai  mortalitas, menunjukkan  bahwa  pada  perlakuan  P4  dan  P5 berbeda nyata dengan perlakuan lainnya. Sedangkan  perlakuan  P0,  P1,  P2  dan  P3  nilai mortalitasnya  tidak  berbeda  nyata.  Ikan  nila  yang terpapar suspensi akar tuba pada 60 menit pertama memberikan  respon  yang  berbeda  pada  masing- masing  konsentrasi  perlakuan.  Pada  perlakuan  P5 respon  mulai  terjadi  dalam  30  menit  berupa pergerakan  ikan  yang  tidak  terkontrol  ( parkitson syndrome ),  berenang  berputar  ( swirling) dan megap-megap  ke  permukaan  air  dan  kehilangan keseimbangan,  bukaan  operculum  sangat  cepat, kemudian tenggelam di dasar dan mulai mati pada menit  ke-50  sampai  satu  jam  setelah  perendaman suspensi ekstrak akar tuba.
Jumlah  kematian  ikan  banyak  terjadi  pada 24  jam  pertama  perendaman,  kematian  ikan  juga
terjadi  ketika  memasuki  jam  ke-96  setelah perendaman.  Kondisi  ini  lebih  disebabkan  oleh efek kronis sehingga kematian ikan uji memungkinkan terjadi pada ikan yang  tidak dapat pulih  selama  96  jam.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Smart  (1976)  bahwa  daya  racun  akar tuba  dapat  terjadi  pada  konsentrasi  rendah walaupun  tidak  mematikan  toksisitas  dapat mengakibatkan  efek  subletal  berupa  kerusakan insang  hingga  kematian  ikan.  Untuk  mengetahui konsentrasi  yang  mematikan  50%  hewan  uji selama 96 jam pengujian (LC 50 -96 jam) atau lethal median
concentration , maka dilakukan pengolahan  data  dengan  analisis  regresi  probit. Hasil  yang  diperoleh  dari  perhitungan  tersebut untuk  LC 50 -96  jam  diperoleh  nilai  sebesar  0,003 ml/  L.    Hal  ini  menjelaskan  bahwa  ekstrak  akar tuba  dengtan  konsentrasi  0,003  ml/  L  dapat menyebabkan kematian 50% pada benih ikan nila merah  selama  96.  Menurut  Koesumadinata  dan Sutrisno  (1997) dalam Syafriadiman  (2010), menyatakan bahwa kerentanan organisme terhadap  toksikan  berbeda-beda  berdasarkan konsentrasi  bahan  toksik,  spesies  dan  ukuran organisme.
Ekstrak  akar  tuba  termasuk  toksik  tinggi terhadap hewan yang berdarah dingin seperti ikan namun  termasuk  toksisitas  rendah  pada  hewan mamalia.  Sehingga  pada  penelitian  ini  terlihat bahwa  pada  dosis  0,003  ml/l  sudah  dapat membuhuh  50%  dari  total    ikan  uji.  Namun  50% ikan  yang  hidup  masih  dapat  melakukan  aktivitas metabolisme secara`normal kembali setelah mengalami  penurunan  metabolisme.  Dari  hasil pengujian  LC50  96  jam  ekstrak  akar  tuba  ini, diduga untuk penggunaan akar tuba sebagai bahan anastesi  dapat  dilakukan  pada  dosis  yang  jauh lebih  rendah  dari  dosis  LC50  96  jam  tersebut. Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak akar  tuba  lebih  toksik  dibandingkan  dengan minyak cengkeh, dimana hasil penelitian Pamungkas  (2010),  yang  menunjukkan  bahwa penggunaan  minyak  cengkeh  dengan  dosis  20-60 ppm dapat digunakan sebagai bahan anastesi.
c. Kelangsungan Hidup (SR)
Hasil  pengamatan  untuk  kelangsungan hidup (SR) ditampilkan  dalam Gambar  2 berikut ini :
Gambar 2. Grafik rata – rata SR Ikan Nila Merah ( Oreochromis sp)
Dari grafik diatas menunjukkan
Kelangsungan  hidup  benih  Ikan  Nila  Merah ( Oreochromis sp)  yang  tertinggi  yaitu  pada perlakuan  P0 dengan  tingkat  SR  sebesar  100  % serta  terendah  pada  perlakuan  P5  dengan  tingkat SR  sebesar  22,9%.    Sedangkan  nilai  tingkat kelangsungan  hidup  pada  perlakuan  P1  sebesar 93,73%,  diikuti  perlakuan  P2  (86,3%),  perlakuan P3 (85,8%) serta  perlakuan P4  (62,9 %).
Dari  analisa  sidik  ragam  terhadap  nilai kelangsungan  hidup  ikan  nila  merah,  diketahui pemberian  dosis  ekstrak  akar  tuba  memberikan pengaruh nyata terhadap nilai kelangsungan hidup ikan  nila  merah.    Hal  ini  disebabkan  di  dalam ekstra  akar  tuba  mengandung  senyawa  rotenon yang dapat membunuh ikan dengan menonaktifkan  enzim  respirasi  dan  menghasilkan asam  glutamik  oksidase  dalam  kondisi  oksigen rendah (John 1944 dalam Irwan 2006). Hasil uji lanjut terhadap nilai kelangsungan  hidup,  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  P4  dan  P5  berbeda  nyata  dengan perlakuan  lainnya.    Sedangkan  perlakuan  P0,  P1, P2  dan  P3  nilai  kelangsungan  hidupnya    tidak berbeda  nyata.  Dari  hasil  penelitian,  rendahnya nilai kelangsungan hidup P4 dan P5 dibandingkan dengan  perlakuan  lainnya  dapat  terjadi  karena dosis  ekstrak  akar  tuba  pada  perlakuan  tersebut berada  di  luar  kisaran  toleransi  benih  ikan  nila. Kadar toksik yang terlalu tinggi pada perlakuan P4 dan P5 diduga  menyebabkan  terjadinya gangguan fisiologis berupa terhambatnya aliran oksigen dari jantung  menuju  seluruh  jaringan,  sehingga  semua
jaringan  dan  organ  kekurangan  oksigen  dan akhirnya berhenti bekerja. Hal ini jika berlangsung dalam kondisi yang cukup lama dapat menyebabkan kematian.
Namun  secara  keseluruhan,  kelangsungan hidup  ikan  nila  selama  uji  toksisitas  sub  letal masih  cukup  tinggi.    Menurut  Effendie  (1997), menjelaskan  bahwa  kelangsungan  hidup  terdiri dari  dua  faktor,  yaitu  faktor  internal  dan  faktor eksternal.    Faktor  internal  yaitu  faktor  yang berasal  dari  dalam  tubuh  ikan  itu  sendiri  antara lain  daya  tahan  tubuh  terhadap  penyakit,  jumlah pakan  yang  dapat  diserap  tubuh  dan  menjadi energi  untuk  tumbuh.  Faktor  eksternal  meliputi kondisi lingkungan dimana ikan hidup yang terdiri dari  sifat  fisik,  kimia  dan  biologi  perairan. Kematian  ikan  nila  merah  mulai  terjadi  pada konsentrasi  P1  (0,0013).    Hal  ini  diduga  karena adanya  bahan  organik  yang  besifat  toksik  dalam ekstrak akar tuba.  Kondisi fisik dan kimia air juga mempengaruhi  kelangsungan  hidup  ikan  nila merah seperti menurunnya oksigen terlarut.
d. Bukaan Operculum
Bukaan  opercolum  merupakan  tempat pertukaran  gas  dalam  insang.  Insang  terbentuk dari  lengkungan  tulang  rawan  yang  mengeras dengan  beberapa  filamen  insang  di  dalamnya, Tiap-tiap  filamen  insang  terdiri  atas  banyak lamella  yang  merupakan  tempat  pertukaran  gas (Yonvery,  2015).  Frekuensi  bukaan  operculum pada ikan normalnya 120 kali/menit.
Hasil pengamatan untuk bukaan operculum ditampilkan dalam Gambar 3 berikut ini :
Gambar 3. Grafik Bukaan Operculum Ikan Nila Merah ( Oreochromis sp)
Berdasarkan  grafik  diatas  menunjukkan bahwa  frekuensi  membuka  serta  menutupnya operculum  pada  ikan  nila  merah  terjadi  lebih sering  pada  setiap  kenaikan  dosis  ekstrak  akar tuba,  jadi  apabila  dosis  ekstrak  akar  tuba  lebih tinggi  maka  gerakan  membuka  dan  menutupnya operculum  ikan  akan  lebih  cepat  dari  pada  tanpa pemberian ekstrak akar tuba.
Hasil  uji  lanjut  terhadap  nilai  gerakan membuka dan menutupnya operculum, menunjukkan  bahwa  pada  perlakuan  P0  berbeda nyata  dengan  P1,  P2,  P3,  P4,  dan  P5.    Perlakuan P1  tidak  berbeda  nyata  dengan  P2,  P3  dan  P4,
namun  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P5.  P3 dan  P4  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P5. Pada  perlakuan  P1  (131),  P2  (132),  P3  (142),  P4 (147),  dan  P5  (157)  melebihi  frekuensi  bukaan operculum  pada  ikan  normalnya  120  kali/  menit, maka  apabila  dosis  ekstrak  akar  tuba  lebih  tinggi gerakan  membuka  dan  menutupnya  operculum ikan  akan  lebih  cepat  dari  pada  tanpa  pemberian ekstrak  akar  tuba.  Hal  ini  disebabkan  di  dalam ekstra  akar  tuba  mengandung  senyawa  rotenon yang dapat menurunkan tingkat konsumsi oksigen pada  ikan  (John  1944 dalam Irwan).  Menurut Maharajan et  al (2013),  menyatakan  bahwa
peranan  pernafasan  dan  konsumsi  oksigen  adalah parameter  fisiologis  yang  penting  untuk  menilai toksisitas racun.
Penurunan  konsumsi  oksigen  terjadinya kerusakan  pada  insang  ikan  nila  merah  yang menyebabkan  ikan  sulit  bernafas  dimana  difusi oksigen kedalam kapiler darah terganggu. Menurut  Sahetapy  (2011),  pergerakan  oksigen  ke dalam  kapiler  darah  di  insang  ditentukan  oleh perbedaan  tekanan  oksigen  yang  terdapat  dalam insang  dengan  tekanan  oksigen  dalam  kapiler darah  insang.  Sedangkan  tekanan  oksigen  dalam insang  sangat  ditentukan  oleh  struktur  lamella. Jika struktur lamella insang terganggu atau rusak, maka dapat dipastikan akan menurunkan kemampuan  insang  mengikat  oksigen.  Salah  satu jaringan tubuh organisme yang cepat terakumulasi bahan  toksik  adalah  jaringan  insang  karena  letak insang  yang  berhubungan  langsung  dengan lingkungan dan strukturnya yang tipis menjadikan insang sangat rentang terhadap perubahan kondisi lingkungan  (Yuniar,  2009).  Kerusakan  struktur organ  insang  akan  menyebabkan  terganggunya proses  pertukaran  ion-ion  dan  gas-gas.    Oleh karena itu, kerusakan struktur lamella yang sangat ringan  sekalipun  dapat  mempengaruhi  proses respirasi pada ikan nila merah.
e. Kualitas Air
Parameter  kualitas  air  selama  penelitian, seperti  suhu  dan  pH  masih  berada  para  kriteria yang layak untuk kehidupan ikan nila.
Tabel 3. Parameter Kualitas Air selama Penelitian
Perlakuan Parameter Suhu ( o C) pH P0 (Kontrol) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 P1 (0,0013 ml/ L) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 P2 (0,0017 ml/ L) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 P3 (0,0022 ml/ L) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 P4 (0,0028 ml/ L) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 P5 (0,0036 ml/ L) 25 – 26 o C 6,0 – 7,0 Kisaran Toleransi 25 – 30 o C * 6,0 - 8,0 *
Ket  :  * = Badan Standarisasi Nasional (2006) Suhu sangat berperan dalam
mengendalikan kondisi ekosistem perairan. Perubahan  suhu  berpengaruh  terhadap  proses fisika, kimia  dan  biologi  suatu  perairan. Kecepatan  metabolisme  dan  respirasi  biota  air dipengaruhi oleh peningkatan suhu yang selanjutnya akan meningkatkan konsumsi oksigen. Peningkatan suhu ini juga diikuti oleh menurunnya  kandungan  oksigen  terlarut  dalam air.    Selama  penelitian  dilakukan,  suhu  berkisar antara  25-26 o C.  Kisaran  tersebut  masih  dalam batas tolerensi untuk pemeliharaan benih ikan Nila Merah.  Menurut Badan Standar Nasional (2006), suhu  air  yang  sesuai  untuk  Ikan  Nila  berkisar antara 25-30 0 C. Cari  sumber yang lain.
Nilai  pH  suatu  perairan  berkaitan  erat dengan  suhu  dan  kandungan  oksigen  terlarut. Semakin  tinggi  nilai  pH  maka  akan  semakin rendah  suhu  dan  semakin  tinggi  kandungan oksigen  terlarut  (Boyd  1982).    Saat  penelitian terhadap  benih  ikan  Nila  Merah  pH  pada  media hidup  ikan  setiap  perlakuan  masih  dalam  batas toleransi berkisar antara 6,0 – 7,0. Menurut Badan Standar Nasional (2006), pH air yang sesuai untuk Ikan Nila berkisar 6,0 – 8,0.

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN

## A. Kesimpulan
Berdasarkan    hasil  penelitian  dapat disimpulkan bahwa:
1.   Tingkat toksisitas kosentrasi ekstrak akar tuba tertinggi  diperoleh  pada  perlakuan  P5  0,0036 ml/ L dengan kematian 77,1 %.
2.  LC 50 -96  jam  diperoleh  nilai  sebesar  0,003  ml/ L  yang  berada  pada  nilai  kisaran  tertinggi 0,0036  ml/  L  dan  kisaran  terendah  0,0013  ml/ L.
3.  Konsentrasi  yang  aman  untuk  penggunaan ekstrak  akar  tuba  di  anjurkan  di  bawah  nilai LC 50 96 jam sebesar 0,003 ml/ L.
B. SARAN
1.  Perlu  dilakukkan  penelitian  lanjut  untuk mencari  dosis  yang  tepat  untuk  menurunkan aktivitas  metabolisme  ikan  (bahan  anastesi) pada  proses  pengiriman  ikan  Nila  Merah ( Oreochromis sp ).
2.  Perlu  dilakukan  uji  histopathologis  untuk mengamati  kerusakan  yang  terjadi  pada  organ dan jaringan Ikan Nila
( Oreochromis sp) akibat terpapar suspensi akar tuba.

## DAFTAR PUSTAKA
American  Public  Health  Association  (APHA).
2005. Standard Metods For the
Examination  of  Water  and  Waste .  21 st ed. APHA, Washington DC.1993 pp. Badan  Standar  Nasional,  2006. Standarisasi Kualitas Air . Bogor. Boyd  CE.  1982. Water  Quality  Management  for Pond  Fish  Culture .  Elsevier  Scientific Publishing Company. New York. P: 318. Effendie, M. I. 1979. Biologi Perikanan . Yayasan Dewi Sri. Bogor.
Effendie, M. I. 1997. Biologi Perikanan . Yayasan Pustaka Nusantara. Bogor. Hanafiah,  K.A.  2011. Rancangan  Percobaan: Teori  dan  Aplikasi .  PT.  Raja  Grafindo Persada. Jakarta.
Hien PP, Gortnizka H, Kraemer. 2003. Rotenone – Potential  and  Prospect  for  Sustanable Agriculture . Omonrice Vol 11. Irwan  S.  2006. The  yield  and  biological  activity (LC50)  rotenone  extracted  from  Derris elliptica .  [tesis].  Master  of  Engineering (Bioprocess),  Faculty  of  Chemical  and Natural  Resources  Engineering,  Universiti Teknologi Malaysia.
Junianto. 2003. Teknik Penanganan Ikan . Jakarta:
PT Penebar Swadaya.
Maharajan,  A.,  R.  Usha,  P.  S.  P.  Rucmani,  B.  S. Vijaykuman, V. Ganapiriya dan P. Kumarasamy.  2013. Sub  Lethal  Effect  of Profenofos  on  Oxygen  Consumption  and Gill  Histopatologi  of  the  India  Mayor Carp, Catla catla (Hamilton) . Internasional Jurnal of fure and  Applied Zoologi. Vol. 1 Issue. 2: 196-204) Pamungkas. R. T. (2010). Efektivitas Penambahan Zeolit,  Karbon  aktif,  Minyak  cengkeh,  dan Garam Dalam Transportasi Tertutup Benih Ikan  Patin  Dengan  Kepadatan  berbeda . Bogor Rohman,  M.  1986. Efektifitas  Bungkil  Biji  Teh (Saponin)  Sebagai  Pemberantas  Ikan  Liar di  Tambak .  Skripsi.  Institut  Pertanian Bogor. Rusdiansyah.  2004. Toksisitas  Akut  Thiodan  25 EC  terhadap  ikan  mas  (Cyprinus  carpio) .
Skripsi.
Universitas
Mulawarman.
Samarinda.
Sahetapy,  J.M.F.  2011. Toksisitas  Logam  Berat Timbal  Dan  Pengaruhnya  Pada  Konsumsi
Oksigen  Dan  Respon  Hematologi  Juvenil
Ikan
Kerapu Macan (Epinephinus fuscoguttatus ).  Tesis.  Ilmu  Akuakultur. Sekolah Pascasarjana. IPB. Bogor. Smart,  E.  1976. The  Effects  of  Ammonia  Exposed on the Gill Structure of the Rainbow Trout (Salmo gairdneri ). J. Fish. Res. Board Can. 328-329. Suryaningrum TD, Utomo BSD, Wibowo S. 2005. Teknologi  Penanganan  dan  Transportasi Krustasea  Hidup .  Jakarta:  Badan  Riset Kelautan dan Perikanan, Slipi. Syafriadiman.  2010 Toksisitas  Limbah  Cair Minyak  Kelapa  Sawit  Dan  Uji  Sub  Lethal Terhadap  Ikan  Nila  Merah .  Berkala Perikanan Terubuk. 38 (1) : 95 - 106 Yonvery,  H.  D.  2004. Histologi  Insang  Ikan  Mas (Cyprinus  carpio)  Yang  Dipaparkan  Oleh Limbah  Cair  Kelapa  Sawit .  Skripsi  Pada Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Universitas Riau. Pekanbaru. Tidak Diterbitkan. Yosmaniar.    2009. Toksisitas  niklosamida terhadap pertumbuhan, kondisi hematologi
dan  histopatologi  juvenil  iakan  mas (Cyprinus  carpio) .  Tesis.  Program  Study Ilmu  Perikanan.  Sekolah  Pancasarjana. IPB. Bogor.
Yuniar,  V.  2009. Toksisitas  merkuri  (Hg) terhadap  tingkat  kelangsungan  hidup, pertumbuhan, gambaran darah dan
kerusakan organ pada ikan nila (Oreochromis  niloticus). Skripsi.  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan.  IPB.  Bogor