* Corresponding Author: email: rinapps_unsri@unsri.ac.id
https://doi.org/10.56064/jps.v25i1.782 Naskah diusulkan: 15 Februari 2023;  Naskah disetujui: 18 Maret 2023
p-ISSN: 1410-7058 e-ISSN: 2597-7059 © 2023 JPS MIPA UNSRI

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index

## Aktivitas larvasida fraksi aktif daun bakau hitam Rhizophora mucronata Lamk . terhadap larva nyamuk Aedes aegypti Linn.
Syafrina Lamin*, Azira Nadia Pasya, Erwin Nofyan, Nita Aminasih, dan Agus Purwoko Jurusan Biologi, FMIPA Universitas Sriwijaya. Jln Raya Palembang Prabumulih Km32. Inderalaya Ogan Ilir Kode Pos 30862
Kata kunci: larvasida, daun Rhizophora mu- cronata, Aedes aegypti Linn.
ABSTRAK: Rhizophora  mucronata merupakan  tumbuhan mangrove yang  banyak  tersebar dipinggir pantai. R. mucronata memiliki metabolit sekunder yang dapat dijadikan sebagai ba- han pestisida alami. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui fraksi dari daun R. mucronata yang bersifat larvasida terhadap larva nyamuk Aedes aegypti , mengetahui LC 50 dari fraksi aktif daun R. mucronata , mengetahui perbandingan aktivitas fraksi aktif daun R. mucronata dengan abate,  dan  mengetahui  senyawa  aktif  dari  daun R.  mucronata yang  diamati  secara  kualitatif terdapat  pada  fraksi  aktif . Metode  ekstraksi  dengan  metode  maserasi  dan  fraksinasi  dengan fraksinasi cair-cair, uji aktivitas fraksi dan uji aktivitas larvasida dengan metode eksperimental laboratorium,  penentuan  golongan  senyawa  aktif  dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis. Hasil penelitian diperoleh, diketahui bahwa fraksi metanol air dari daun R. mucronata memili- ki aktivitas larvasida yang lebih tinggi daripada fraksi n-heksan dan etil asetat. LC 50 fraksi me- tanol  air  dari  daun R.  mucronata yang  mampu  membunuh  50%  dari  total  larva  uji  yaitu 1621,297  ppm.  Fraksi  metanol  air  membutuhkan  konsentrasi  yang  tinggi  untuk  membunuh larva uji dibandingkan dengan bubuk abate. Fraksi metanol air dari daun R. mucronata men- gandung senyawa tanin dan fenol. Kesimpulannya fraksi metanol air dari daun R. mucronata memiliki aktivitas larvasida yang lebih tinggi daripada fraksi n-heksan dan etil asetat, LC 50 frak- si metanol air dari daun R. mucronata yang mampu membunuh 50% dari total larva uji yaitu 1621,297 ppm, fraksi metanol air dari daun R. mucronata memiliki pengaruh yang lebih kecil terhadap kematian larva A. aegypti karena pada konsentrasi 3000 ppm membunuh 21 larva uji sedangkan abate memiliki pengaruh yang lebih besar karena pada konsentrasi 1000 ppm da- pat membunuh 30 larva uji, dan fraksi metanol air dari daun R. mucronata mengandung se- nyawa tanin dan fenol.
Keywords: larvicides, leaves Rhizophora mu- cronata , Aedes aegypti Linn.
ABSTRACT: Rhizophora  mucronata  is  that  many mangroves  scattered  off  the  coast.  R.  mu- cronata has a secondary metabolite that  can  be  used as  a  natural pesticide. This  study  aims to  determine  the  fraction  of  R.  mucrona ta leaves that are larvicides against mosquito larvae of  Aedes  aegypti, knowing LC50  of  the  active  fraction  of  the leaves  of  R.  mucronata, com- pare the  activity of  the  active fraction of  the  leaves of R.  mucronata to  abate, and knowing the  active  compounds  from  the  leaves  of  R.  mucronata observed  qualitatively contained in the  active fraction.  Extraction  method  with  maceration  and  fractionation  with  liquid-liquid fractionation,  the  fraction  of the activity test and test larvicidal activity with laboratory expe- rimental method, grouping the  active compound by  the  method  of  thin  layer  chromatogra- phy. The results were obtained, it is known that the methanol water fraction  from the leaves of R. mucronata has larvicidal activity higher than the fraction of n-hexane and ethyl acetate. LC50 methanol water fraction  from the leaves of R. mucronata were able to kill 50% of the total larvae test  is  1621.297  ppm.  Methanol water fraction requires  a  high  concentration to kill larvae test compared to abate powder. Methanol water fraction from the leaves of R. mu- cronata contains tannin and phenol. In conclusion methanol water fraction from the leaves of R.  mucronata  has  larvicidal  activity  higher  than  the  fraction  of  n-hexane  and  ethyl  acetate, methanol LC50 fraction of water from the leaves of R. mucronata were able to kill 50% of the total larvae test that is 1621.297 ppm, methanol water fraction from the leaves of R. mucrona- ta has a smaller effect on mortality of larvae of A. aegypti because of the concentration of 3 000  ppm killed 21 larvae, while abate test had greater influence since 1000 ppm can kill 30 test  larvae,  and  the  methanol  water  fraction  from  the  leaves  R.  mucronata  contains  tannin and phenol.

## 1 PENDAHULUAN
emam berdarah dengue (DBD) masih merupa- kan masalah kesehatan masyarakat yang cukup serius  di  Indonesia  sampai  saat  ini,  karena  sering menimbulkan  Kejadian  Luar  Biasa  (KLB).  DBD  ter- masuk  penyakit  yang  sangat  menular.  Penyakit  ter- sebut  disebabkan  oleh  virus dengue dengan  famili Flaviviridae, genus Flavivirus . Virus tersebut memili- ki empat serotype, yaitu DEN-1, DEN-2, DEN-3, dan DEN-4  {1} Tomia,  A.,  &  Tuharea,  R.  (2022 ). Aedes aegypti Linn. merupakan vektor dari beberapa penyakit  serius  yang  menyerang  manusia  seperti malaria, encephalitis , ― yelow fever ‖ , demam dengue atau demam berdarah dengue , filariasis, dan arbovi- rus. Salah satu masalah besar yang ditimbulkan oleh nyamuk A. aegypti di Indonesia adalah demam den- gue atau demam berdarah dengue (2, 3,19).
Metode yang dianggap paling efektif untuk men- gendalikan nyamuk vektor demam berdarah adalah dengan cara membunuh jentik-jentiknya (4). Larva- sida merupakan golongan dari pestisida yang dapat membunuh  serangga  belum  dewasa  atau  sebagai pembunuh  larva  (5,13).  Larvasida  yang  selama  ini digunakan  berupa  pestisida  sintetik.  Penggunaan pestisida  sintetik  secara  terus  menerus  dapat  men- cemari lingkungan, meningkatan resistensi, meracu- ni  dan  menyebabkan  kematian  organisme  non  tar- get  (6,  19).  Pengaruh  negatif  dengan  penggunaan zat  kimia  yang  terdapat  pada  pestisida  sintetik  se- baiknya  menjadi  pertimbangan  untuk  masa  yang akan datang.
Pengembangan  insektisida  baru  yang  tidak  me- nimbulkan bahaya dan lebih ramah lingkungan san- gat  dibutuhkan  untuk  saat  ini,  hal  ini  diharapkan dapat diperoleh melalui penggunaan pestisida alami. Pestisida  alami  adalah  suatu  insektisida  yang bahan dasarnya berasal dari tumbuhan yang mengandung bahan kimia (bioaktif) yang toksik terhadap serangga namun  mudah  terurai  ( biodegradable )  di  alam  se- hingga tidak mencemari lingkungan dan relatif aman bagi manusia. Selain itu insektisida nabati juga bersi- fat selektif (7).
Kelebihan  pestisida  alami  dibandingkan  dengan pestisida sintetik adalah pada senyawa yang terkan- dung di  dalamnya. Dalam  suatu  ekstrak  tumbuhan, selain  beberapa  senyawa  aktif  utama  biasanya  juga banyak terdapat senyawa lain yang kurang aktif, te- tapi keberadaanya dapat meningkatkan aktivitas ek- strak secara keseluruhan (sinergi). Hal ini memung- kinkan  serangga  tidak  mudah  menjadi  resisiten,  ka- rena  kemampuan  serangga  membentuk sistem  per- tahanan terhadap beberapa senyawa yang berbeda
secara bersamaan lebih kecil dari pada senyawa in- sektisida tunggal (8,11,12).
Salah  satu  alternatif  yang  dapat  digunakan  ada- lah  bahan  aktif  dari mangrove .  Penggunaan  bahan aktif  dari mangrove sebagai  alternatif  karena  jum- lahnya melimpah dan telah banyak digunakan seba- gi  obat-obatan  alamiah  (9). Rhizophora  mucronata merupakan salah  satu  tumbuhan  yang  sangat  ber- manfaat baik bagi komunitas hutan mangrove mau- pun  bagi  mahkluk  hidup  lain  (10). R.  mucronata yang  termasuk  famili Rhizophoraceae berpotensi  se- bagai  insektisida nabati  dikarenakan  tumbuhan R. mucronata memiliki  beberapa  kandungan  senyawa seperti:  alkaloid,  saponin,  tanin  dan  flavonoid  yang bersifat racun bagi hama (14 ).
Pada uji toksisitas ekstrak methanol daun R. mu- cronata dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Vibrio  harveyi dimulai  pada  konsentrasi  200  ppm (15).  Sedangkan  pada  uji  toksisitas  ekstrak kulit  ba- tang R.mucronata yang dilaporkan oleh (16) bahwa ekstrak  etanol  kulit  batang R.  mucronata dengan konsentrasi  LC 50 3,22%  pada  suhu  30 0 C  dan  LC 50 2,10% pada suhu 24 0 C dapat membunuh 50% larva instar V Helicoverpa armigera.
Berdasarkan informasi dan beberapa hasil peneli- tian  menunjukkan  bahwa  tumbuhan R. mucronata memiliki  senyawa  metabolit sekunder  yang  berpo- tensi  sebagai  antimikroba  dan  pestisida  nabati.  Un- tuk uji larvasida dengan menggunakan daun R. mu- cronata dan  diujikan  pada  larva  nyamuk A.  aegypti belum  banyak  dilakukan,  oleh karena  itu  penelitian ini  dilaksanakan  untuk  menguji  aktivitas  larvasida fraksi daun R. mucronata terhadap larva nyamuk A. aegypti Linn.

## 2 METODE

## Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan  dengan  metode  maserasi.  Daun R.  mucronata dikeringkan  dibawah  sinar  matahari, lalu dihaluskan dengan menggunakan blender, hasil yang sudah dihaluskan dinamakan simplisia. Simpli- sia  ditimbang  sebanyak  250  g,  dan  dimasukkan  ke dalam  erlenmeyer.  Kemudian  simplisia  diekstrak dengan  cara  direndam  metanol  sebanyak  100  ml dan dibiarkan dalam suhu ruang selama 2 x 24 jam. Setelah  2  x 24  jam disaring  simplisia  menggunakan kertas saring kemudian hasil ekstraksi diuapkan pada rotary  evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  yang berbentuk pasta (17).
D

## Fraksinasi
Fraksinasi dilakukan dengan metode FCC (Fraksinasi Cair-Cair)  dengan  pelarut  n-heksan,  etil  asetat  dan metanol.  Ekstrak  yang  diperoleh  dalam  tahap  ek- straksi  sebelumnya  ditambahkan  dengan  metanol  : air  dengan  perbandingan  1:1.  Selanjutnya  ditam- bahkan pelarut n-heksan sebanyak 1 liter secara ber- tahap.  Setiap  kali  dimasukkan  sebanyak  250  ml  n- heksan  (4  x  250  ml).  Fraksi  metanol  dan  n-heksan dipisahkan dengan corong pemisah. Fraksi metanol dilanjutkan  dengan  penambahan  pelarut  etil  asetat sebanyak  1  liter  secara  bertahap.  Setiap  kali  dima- sukkan sebanyak 250 ml etil asetat (4 x 250 ml). Ke- mudian  dipisahkan,  sehingga  dari  proses  fraksinasi diperoleh  3  fraksi  yakni  fraksi  n-heksan,  etil  asetat, dan  metanol.  Ketiga  fraksi  kemudian  diuapkan  di rotary  evaporator dilanjutkan  di  penangas  air.  Hasil akhir  diperoleh  bahan  bioaktif  berbentuk  pasta  un- tuk pengujian larva nyamuk A. aegypti Linn. Masing- masing  fraksi  akan  diuji  aktivitas  insektidisidanya (19).

## Uji Aktivitas Fraksi dari Ekstrak Metanol Daun Rhizophora mucronata
Menurut  WHO,  besar  sampel  dalam  penelitian  lar- vasida  adalah  20-30  ekor  larva Aedes  aegypti Linn. instar  III  untuk  masing-masing  perlakuan.  Berdasar- kan  acuan  tersebut,  disiapkan  empat  gelas  kimia, setiap  gelas  kimia  dimasukkan  larva Aedes  aegypti Linn. instar III 30 ekor dalam 100 ml air. Selanjutnya pada  gelas-gelas  percobaan  diberi  perlakuan  fraksi dengan dosis 1 g, sehingga konsentrasi akhir masing- masing  gelas  1%.  3  gelas  diberi  perlakuan  ekstrak dari pelarut berbeda dan 1 gelas dengan perlakuan kontrol. Pengujian aktivitas daun Rhizophora mucro- nata ini dilakukan dengan 3 kali ulangan. Pengama- tan terhadap mortalitas dilakukan pada 24 jam sete- lah ekstrak tanaman kontak dengan larva uji.

## Uji Aktivitas Larvasida dari Fraksi Aktif Daun R. mucronata
Disediakan  lima  gelas  percobaan  untuk  perlakuan fraksi daun R. mucronata dan 100 ml akuades dalam gelas  untuk  kontrol  negatif,  abate  dan  100  ml akuades  untuk  kontrol  positif.  Setiap  gelas  perco- baan  diberi  larva A.  aegypti  Linn.  instar  III  30  ekor dalam 100 ml air. Selanjutnya pada setiap gelas per- cobaan  diberi  perlakuan  fraksi  dengan  konsentrasi yang  berbeda  yaitu  dengan  konsentrasi  3000  ppm, 1500  ppm,  750  ppm,  375  ppm,  187,5  ppm.  Setiap perlakuan  dilakukan  empat  kali  pengulangan.  Pen- gamatan  dilakukan  selama  24  jam  dengan  menghi- tung persentase kematian larva.
Presentase  kematian  larva  pada  masing-masing konsentrasi  dihitung  menggunakan  rumus  sebagai berikut:
%Kematian larva uji = Jumlah larva uji yang mati Jumlah larva uji × 100%

## Penentuan Golongan Senyawa yang Terda- pat dari Fraksi Aktif
Penotolan cuplikan pada plat KLT dilakukan dengan menggunakan pipet mikro dan diusahakan diameter totolan sekecil mungkin karena jika diameter totolan besar  itu  akan  mengakibatkan  terjadinya  penyeba- ran noda-noda dan timbulnya noda berekor (Suirta (2007) dalam Ariska, 2015).
Plat  KLT  disiapkan  dan  dipotong  1x6  cm,  pipa kapiler untuk menyerap fraksi aktif. Diambil masing- masing fraksi yang telah dilarutankan yaitu metanol air,  etil  asetat  dan  n-heksan  dengan  menggunakn pipa kapiler dan ditotolkan 0,5 cm sebanyak 3 x pa- da  plat  KLT.  Dimasukkan  plat  KLT  ke  dalam  eluen yang  telah  disiapkan  sebelumnya,  didiamkan  se- hingga  terbentuk  3  bercak  kemudian  di  semprot dengan  H 2 SO 4 dan  dipanaskan  dilihat  perubahan warna pada bercak dan dicatat hasilnya.
Kemudian  dihitung  nilai Rf dari  masing-masing bercak berwarna yang muncul. Perhitungan nilai Rf ( Retordation  Factor )  didefinisikan  (Sastrohamidjojo, 2005) sebagai berikut:
𝑅𝑓 = Jarak titik awal ke tengah plat (bercak) Jarak titik teratas ( 𝑒𝑙𝑙𝑢𝑒𝑛 )

## Analisis Data
Untuk  menganalisa  data  jumlah  kematian  larva  di- gunakan analisi analitik (uji statistik) untuk mengeta- hui  nilai  LC 50 dari  pengaruh  pemberian  fraksi  dari daun R. mucronata . Data hasil penelitian akan diolah dan  disajikan  dalam  bentuk  tabel  menggunakan program statistik komputer (SPSS 17.0 for Windows) dengan analisis Regresi Probit.

## 3 HASIL

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Pada  penelitian  ini  digunakan  daun R. mucronata yang  telah  di  jemur  selama  8  hari  dan didapatkan berat  simplisia  daun R.  mucronata menjadi  250  g. Hasil ekstraksi tercantum pada Tabel 1.
Tabel 1 Hasil Ekstraksi
Berat simplisia     Berat ekstrak  Persen Berat
250 g 61,5 g 24,5 %
Berdasarkan Tabel 1, hasil ekstraksi daun R. mu- cronata yang didapatkan sebesar 61,5 gr atau 24,5% dari berat simplisia, ekstrak yang didapatkan berben- tuk  pasta.  Ekstrak  tersebut  kemudian  diambil  seba- nyak 60  g  kemudian dilanjutkan ke  tahap  fraksinasi dengan menggunakan 3 pelarut yang berbeda yaitu n-heksan, etil asetat, dan metanol air. Hasil dari frak- sinasi tercantum pada Tabel 2.
Tabel 2 Hasil Fraksinasi Fraksi Berat Fraksi (g)  Persen Berat (%) N-heksan 5,2 8,7 Etil asetat 8,4 14 Metanol air 45,6 76
Berdasarkan Tabel 2 hasil fraksinasi dari 60 g ek- strak daun R. mucronata didapatkan fraksi n-heksan paling sedikit yaitu 8,7% sedangkan fraksi etil asetat sebanyak 14%  dan  fraksi  metanol  air  paling  banyak yaitu  76%.  Metanol  air  memiliki  berat  fraksi  yang paling besar diantara fraksi n-heksan dan etil asetat yaitu 45,6 g. Menurut (20) metanol merupakan pela- rut  universal  yang  memiliki  gugus  polar  (-OH)  dan gugus nonpolar (-CH 3 ) sehingga dapat menarik ana- lit-analit yang bersifat polar dan nonpolar.

## Uji Aktivitas Fraksi dari Ekstrak Metanol Daun Rhizophora mucronata
Fraksi  yang  diperoleh  dari  tahap  fraksinasi  dilan- jutkan ke tahap uji aktivitas fraksi dari ekstrak meta- nol daun R. mucronata . Uji aktivitas fraksi bertujuan untuk mengetahui fraksi yang paling aktif dari fraksi n-heksan,  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  metanol  air yang  dapat  membunuh  larva  nyamuk A.  aegypti . Pengujian  ini  dilakukan  dengan  memasukkan  30 larva  uji  kedalam  gelas  percobaan  yang  telah  diisi 100 ml aquades, tween 80 dan fraksi 1%. Tween 80 berfungsi  untuk  membantu  melarutkan  fraksi  yang sulit untuk larut dalam aquades.
Tabel 3 Persentase kematian larva dengan perlakuan menggunakan fraksi 1% Fraksi Jml larva yg mati (n)  Persentase (%) N-heksan 4 13,3 Etil asetat 1 3,3 Metanol air 13 43,3 Kontrol negatif 0 0
Keterangan: n = populasi larva uji setiap perlakuan (30 ekor)
Berdasarkan  Tabel  3,  persentase  kematian  larva uji A.  aegypti pada  kontrol  negatif  0%,  fraksi  n- heksan 13,3%,  etil  asetat  3,3%, dan  pada  fraksi  me- tanol air 43,3%. Hal ini menunjukkan fraksi yang pal-
ing  aktif  dari  daun R.  mucronata yang  dapat  mem- bunuh larva A. aegypti adalah fraksi metanol air. Da- lam  24  jam  fraksi  metanol  air  mampu  membunuh 43,3% dari larva uji. Hal ini dikarenakan kandungan senyawa yang terdapat pada fraksi metanol air dari daun R. mucronata bersifat  toksik  terhadap  larva nyamuk A. aegypti . Menurut (20,21), kematian larva disebabkan  adanya  ketidakmapuan  larva  dalam mendetoksifikasi  senyawa  toksik  yang  masuk  ke  da- lam tubuhnya. Toksisitas kandungan senyawa meta- bolit  sekunder  pada  ekstrak  memberi  efek  toksisitas pada larva yang terlihat melalui gejala-gejala subletal hingga kematian larva.

## Uji Aktivitas Larvasida dari Fraksi Metanol Air Rhizophora mucronata
Uji aktivitas fraksi dari ekstrak metanol daun R. mu- cronata diperoleh fraksi metanol air memiliki aktivi- tas  larvasida  yang  paling  tinggi  dibandingkan  fraksi n-heksan dan  etil  asetat.  Sehingga  fraksi  yang digu- nakan pada uji lanjut yaitu fraksi metanol air dengan menggunakan konsentrasi yang bertingkat dengan 4 kali  ulangan.  Konsentrasi  yang  digunakan  yaitu 187,5 ppm, 375 ppm, 750 ppm, 1500 ppm dan 3000 ppm, serta 2 kontrol yaitu kontrol negatif (akuades) dan kontrol positif (bubuk abate 1%). Kontrol negatif digunakan  untuk  mengetahui  pengaruh  sebelum dilakukan  perlakuan  dengan  fraksi  aktif  sedangkan kontrol  positif  untuk  mengetahui  perbandingan  an- tara  bubuk  abate  (1%)  dengan  fraksi  aktif  dengan beberapa konsentrasi. Hasil uji disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4 Jumlah larva mati pada perlakuan konsentrasi fraksi metanol air daun R. mucronata selama 24 jam
Perlakuan (ppm)
Jml larva yg mati (n)  Notasi Kontrol negatif (aq- uades) 0 a 187,5 0 a 375 0 a 750 6 b 1500 17 c 3000 21 d Kontrol positif (abate) 30 e
Keterangan:  Angka-angka  rerata  yang  diikuti oleh   hu- ruf   yang   sama   untuk masing-masing kelompok perla- kuan menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% n= populasi larva uji setiap perlakuan (30 ekor)
Berdasarkan  gambar  di  atas,  larva  yang  yang  ti- dak  terpapar  fraksi  metanol  air  daun Rhizophora mucronata terlihat  bagian  tubuhnya seperti  caput, thoraks,  abdomen, anal  gill ,  dan  sifon  masih  leng- kap.  Selain  itu  sisi  kiri  dan  kanan  tubuhnya  masih terdapat  rambut-rambut  ( lateral  hair ).  Sedangkan pada  larva  yang  diberi  perlakuan  bagian  thoraks
terlihat  lebih  transparan,  bagian  abdomen  organ didalamnya  terlihat  hancur,  susunan  pada  sifon  su- dah tidak teratur, anal gill terlihat lebih transparan.

## Penentuan Golongan Senyawa Aktif
Fraksi aktif yang telah didapat selanjutnyadi uji den- gan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  yang  bertujuan untuk mengetahui golongan senyawa aktif yang ter- kandung  dalam  fraksi  metanol  air  yang  dilihat  dari bercak warna yang terdapat pada plat KLT.

## Tabel 5 Golongan senyawa aktif
Metanol Fraksi Metanol Eluen Rf Warna Senyawa air: Etil asetat 0,62 Coklat Tanin 5 : 5 0,87 Kuning Fenol
Berdasarkan  hasil  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) menggunakan eluen metanol dan etil asetat dengan perbandingan yaitu 5:5. Warna yang terbentuk pada plat KLT yaitu coklat dan kuning. Warna coklat me- rupakan senyawa tanin dan warna kuning yang ter- dapat dibagian atas merupakan senyawa fenol, hasil yang diperoleh seperti gambar 1.
Gambar 1 Bercak pada plat KLT dengan eluen perban- dingan n-heksan dan etil asetat; a. fenol, b. tanin

## Penentuan Nilai LC 50
Setelah didapatkan hasil dari pengujian aktivitas lar- vasida dengan  konsentrasi  terkecil  sampai  terbesar, selanjutnya dihitung nilai LC 50 fraksi metanol air dari daun R. mucronata . Hasil LC 50 dari fraksi metanol air dapat dilihat pada Tabel 6.
Tabel 6 Nilai LC 50 dari fraksi metanol air Konsentrasi kematian (%) 95% Batas konsentrasi diinginkan Perkiraan (ppm) Batas Bawah (ppm) Batas Atas (ppm) 50 1621,297 1396,548 1918,636

## 4 PEMBAHASAN
Pengamatan pada gambar 4.2. bahwa fraksi metanol air mengandung senyawa tanin dan fenol. Kematian larva yang terpapar oleh ekstrak daun R. mucronata ini  diduga  disebabkan daun R.  mucronata mengan- dung  senyawa  kimia berupa  metabolit  sekunder yang  bersifat  toksik  pada  serangga.  Menur  (20,8), metanol dapat melarutkan banyak senyawa metabo- lit sekunder, selain itu senyawa polar (metanol) me- miliki daya larvasida yang lebih tinggi dibandingkan senyawa semipolar dan non polar (n-heksan).
Berdasarkan  Tabel  6  persentase  kematian  larva uji A. aegypti pada  kontrol  negatif  0%,  fraksi  n- heksan 13,3%,  etil  asetat  3,3%, dan  pada  fraksi  me- tanol air 43,3%. Hal ini menunjukkan fraksi yang pal- ing  aktif  dari  daun R.  mucronata yang  dapat  mem- bunuh larva A. aegypti adalah fraksi metanol air. Da- lam  24  jam  fraksi  metanol  air  mampu  membunuh 43,3% dari larva uji. Hal ini dikarenakan kandungan senyawa yang terdapat pada fraksi metanol air dari daun R.  mucronata bersifat  toksik  terhadap  larva nyamuk A.  aegypti .  Menurut  (20,9),  kematian  larva disebabkan  adanya  ketidakmampuan  larva  dalam mendetoksifikasi  senyawa  toksik  yang  masuk  ke  da- lam tubuhnya. Toksisitas kandungan senyawa meta- bolit  sekunder  pada  ekstrak  memberi  efek  toksisitas pada larva yang terlihat melalui gejala-gejala subletal hingga kematian larva.
Berdasarkan  Tabel  6,  uji  Duncan  pada  taraf  uji 5% bertujuan untuk mengetahui perbedaan dari se- tiap  perlakuan.  Pada  kontrol  negatif,  konsentrasi 187,5 ppm dan 375 ppm menunjukkan tidak berbe- da  nyata  yang diikuti  oleh  huruf  yang  sama  karena tidak  ada  kematian  larva  uji.  Pada  perlakuan  750 ppm, 1500 ppm, 3000 ppm, dan kontrol positif me- nunjukkan  berbeda  nyata  yang  diikuti  oleh  huruf yang  berbeda  karena  masing-masing  perlakuan memiliki  kemampuan  untuk  membunuh  larva  uji dengan jumlah kematian yang berbeda.
Perlakuan  kematian  larva  uji  terendah  terjadi pada konsentrasi 750 ppm dengan jumlah kematian 6 larva, pada konsentrasi 1500 ppm dapat membu- nuh  17  larva  uji  sedangkan  kematian  larva  uji  ter- tinggi  terjadi  pada  konsentrasi  3000  ppm  dengan jumlah  kematian  21  larva.  Pada  konsentrasi  1500 ppm dan 3000 ppm disini dapat membunuh ≥ 50% larva  instar  nyamuk A.  Aegypti .  Jika  dibandingkan fraksi metanol air dengan bubuk abate, bubuk abate dengan  konsentrasi  1000  ppm  dapat  membunuh 100% larva uji. Sehingga fraksi metanol air memiliki potensi untuk digunakan sebagai larvasida walaupun daya bunuh dari fraksi metanol air harus mengguna- kan konsentrasi yang tinggi untuk membunuh larva
uji.  Menurut    (21)  semakin  besar  konsentrasi  maka semakin banyak senyawa larvasida yang terkandung, sehingga daya bunuh larva juga semakin besar.
Larva A.  aegypti yang  diberi  abate  mengalami kejang-kejang  kemudian  mati.  Abate  mengandung bahan aktif temefos yang yang merupakan senyawa organofosfat. Komposisi organofosfat terdiri dari un- sur  fosfat,  karbon,  dan  hidrogen.  Bahan  aktif  yang terkandung di dalam orgaonofosfat adalah
Tanin  merupakan  metabolit  sekunder  yang  ber- peran  sebagai  pertahanan  tanaman  terhadap  se- rangga  dan  menyebabkan  gangguan  pada  sistem pencernaan  serangga.  Tanin  dapat  menurunkan kemampuan  mencerna  makanan  dengan  cara  me- nurunkan  aktivitas  enzim  pencernaan.  Menurut (21,20),  tanin  dapat  memasuki  tubuh  larva  dengan dua  cara  yaitu  menembus dinding  tubuh  larva dan masuk melalui saluran pencernaan. Tanin yang me- nembus  dinding  tubuh  larva  dapat  mempengaruhi aktivitas  otot  sehingga  menyebabkan  kelemahan otot gerak. Sedangkan tanin yang masuk ke saluran pencernaan larva dapat menurunkan aktivitas enzim pencernaan  dan  menghambat  penyerapan  maka- nan. Menurut (20,8,9)menjelaskan mekanisme tanin menganggu  sistem  pencernaan  dengan  cara  mem- bentuk ikatan kompleks antara tanin sebagai inhibi- tor  dengan  enzim  pencernaan  sehingga  mengham- bat pemecahan molekul menjadi lebih sederhana.
Senyawa  lain  yang  terdapat  pada  daun R. mu- cronata yaitu  fenol.  Sifat  racun  pada  senyawa fenol termasuk dalam racun kontak. Senyawa fenol mem- punyai sifat racun dehidrasi ( desiscant ). Racun terse- but  merupakan  racun  kontak  yang  dapat  mengaki- batkan  kematian  karena  kehilangan  cairan  terus menerus. Kehilangan cairan tubuh serangga dikare- nakan  pada  bagian  luar  (kutikula)  tubuh  serangga yang berfungsi untuk melindungi tubuh tekikis bah- kan  hilang  oleh  senyawa  yang  masuk  melalui  kulit oleh  karena  itu  serangga  akan  kehilangan  cairan sehingga  menyebabkan  kematian.  Racun  kontak adalah  larvasida  yang  masuk  ke  dalam  tubuh  larva melalui kulit, celah/ lubang alami pada tubuh (sifon). Larva  akan  mati  apabila  bersinggungan  langsung (kontak)  dengan  larvasida  tersebut.  Kebanyakan racun kontak juga berperan sebagai racun lambung seperti  malathion,  asetat,  dan  diazinon.  Menurut Veriswan  (2006),  abate  merupakan  senyawa  fosfat organik  yang  mengandung  gugus phosphorothioate. Seperti halnya senyawa-senyawa fosfat organik lain- nya,  abate  juga  bersifat anticholinesterase yang  ker- janya  menghambat  enzim cholinesterase baik  pada vertebrata  maupun  invertebrata  sehingga  menim- bulkan  gangguan  pada  aktivitas  syaraf  karena  ter-
timbunnya acetylcholin pada  ujung  syaraf  tersebut, hal inilah yang mengakibatkan kematian.
Gambar 2 A. Larva A. aegypti normal, B. Larva A. aegypti dengan perlakuan, C. Larva A. aegypti dengan abate (Perbesaran 4×10)
Keterangan  :  a.  Kepala  (caput),  b. Dada (thoraks).   c. Perut   (abdomen), d. Insang anal ( anal gill ), e. Corong pernapasan (sifon)
Berdasarkan  gambar  di  atas,  larva  yang  yang  ti- dak  terpapar  fraksi  metanol  air  daun Rhizophora mucronata terlihat  bagian  tubuhnya  seperti  caput, thoraks,  abdomen, anal  gill ,  dan  sifon  masih  leng- kap.  Selain  itu  sisi  kiri  dan  kanan  tubuhnya  masih terdapat rambut-rambut ( lateral hair ).
Berdasarkan analisis probit yang dilakukan untuk mengetahui  LC 50 dari  daun R.  mucronata yaitu  be- sarnya  konsentrasi  fraksi  daun R.mucronata yang dapat membunuh 50% dari total larva uji. Perkiraan LC 50 dengan  analisis  probit  yaitu  pada  konsentrasi fraksi metanol air 1621,297 ppm. Interval konsentra- si yang dapat membunuh 50% dari larva uji dengan batas  konsentrasi  terendah  yaitu  1396,548  ppm  se- dangkan batas tertinggi yaitu 1918,636 ppm. Menu- rut    (18,9),  semakin  rendah  nilai  LC 50 suatu  zat be- rarti  zat  tersebut  mempunyai  aktivitas  yang  lebih tinggi  dalam  membunuh  hewan coba.  Karena den- gan zat tersebut perlu konsentrasi yang lebih rendah untuk  mematikan  hewan  coba  dalam  waktu  yang sama.
Pada  penelitian    (8)  tentang  uji  toksisitas diketa- hui bahwa ekstrak etanol kulit batang R. mucronata dapat  membunuh  sebanyak  50%  larva Helicoverpa amigera pada  konsentrasi  3,222%.  Penelitian    (20) tentang  uji  toksisitas  potensi  insektisida  nabati  dike- tahui bahwa ekstrak polar kulit batang R. mucronata berpotensi  sebagai  bioinsektisida karena  dapat membunuh  50%  dari  populasi  dengan  masa  pema-
paran  24  jam  pada  konsentrasi  83,4586%  (LC 50 -24 jam=83,4586%).
Dibandingkan  dengan  penelitian  yang  serupa, penelitian  yang  banyak  dilakukan  menggunakan kulit  batang R. mucronata sehingga  pada  penelitian ini  dilakukan  untuk  melihat  kemampuan  aktivitas larvasida dari daun R. mucronata sebagai biolarvasi- da. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan LC 50 dari  fraksi  metanol  air  daun R.  mucronata dapat membunuh  50%  larva  uji  dengan  perkiraan 1621,297  ppm.  Sehingga  metanol  air  memiliki  po- tensi  untuk  menggantikan  abate  karena  senyawa tanin dan fenol di dalam metanol air dapat membu- nuh larva uji.

## 5 KESIMPULAN
Metanol air dari daun R. mucronata memiliki aktivi- tas  larvasida  yang  lebih  tinggi  daripada  fraksi  n- heksan  dan  etil  asetat.  LC 50 fraksi  metanol  air  dari daun R.  mucronata yang  mampu  membunuh  50% dari total larva uji yaitu 1621,297 ppm. Fraksi meta- nol  air  dari  daun R. mucronata memiliki  pengaruh yang  lebih  kecil terhadap  kematian  larva A.  aegypti karena  pada  konsentrasi  3000  ppm  membunuh  21 larva  uji  sedangkan  abate  memiliki  pengaruh  yang lebih besar karena pada konsentrasi 1000 ppm dapat membunuh 30 larva uji. Fraksi metanol air dari daun R. mucronata mengandung senyawa tanin dan fenol.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  penulis  tujukan kepada  Bapak Kepala Balitbangkes Baturaja yang telah membantu dalam  memanfaatkan  sarana  dan  prasarana  pada laboratorium entomologi dan parasitologi,

## REFERENSI ______________________________
[1] Tomia, A., & Tuharea, R. (2022). Gambaran Penularan Transovarial Virus Dengue Antar Nyamuk Aedes Ae- gypti Di Kota Ternate. Biomedika, 14(2), 127-135.
[2] Supardan ,P.,Widodo, J., Wibawa,F., Jayanti. 2018. Uji Viabilitas Virus Dengue Serotipe  pada beberaa Ga- lur Sel. Biota ([1) 118-127
[3] Ditjen P2P, 2017. Pedoman Pencegahan dan Pengen- dalian Demam Berdarah Dengue Di Indonesia. Jakar- ta: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia
[4] Astriani Y dan Widawati M. 2016. Potensi Tanaman di Indonesia sebagai  Larvasida Alami untuk Aedes aegypti. SPIRAKEL,8(2): 37–46
[5] Ibrahim, Y. M. M., Dotulong, V.,Wonggo., D. 2019. infusa daun muda mangrove Sonneratia alba kering.
Jurnal Media Teknologi Hasil Perikanan. Vol 7,No. 2.
[6] Kerandeng,F., Hanizar, D., Sri,D.N. 2022.    Potensi EkstrakDaun Rhizophora macronata sebag Anti Bakte- ri,  Staphylococcus aureuJ. Biosapphire 1:1;10-19
[7] Panghiyangani, R., Rahmiati, Noor Adha F. 2009. Po- tensi Ekstrak Daun Dewa ( Gynura Pseudochina Ldc) Sebagai Larvasida Nyamuk Aedes Aegypti Vektor Pe- nyakit Demam Berdarah Dengue. Jurnal Kedokteran Indonesia . Vol.1 No.2: 121-125
[8] Sharma, S., Loach, N., S, Gupta., Mohar, L. 2022. Evaluation of larva Toxicity, Made of Action  and Chemical Compisition of Citrus Essential oil Againt Anopheles  and Culex. J. Biocatalyst and Agriculture BiotechnologyVol 39: 124-132
[9] Indriaty, J., Ginting, B., Hasbala,K., Jufri. 2021. As- sessment cytotoxic of Rhizhopra Plant mangrove Using Brime Shrimp (Artemia salinal) Model. JJ of Conf. Se- ries Earth and Enviroment 951
[10] Ardiansyah, S. (2021). Lethal Efficacy of Banana Leaves Extract (Musa paradisiaca L.) Against Aedes ae- gypti Larvae. Medicra (Journal of MedicalLaboratoryS- cience/Technology) , 4 (1), 7-12.
[11] Lestari, M.A., Mukarlina., Yanti, A.H. 2014. Uji Aktivitas Ekstrak Metanol dan n Heksan Daun Buas-Buas ( Prem- na serratifolia Linn.) pada Larva Nyamuk Demam Ber- darah ( Aedes aegypti Linn.). Jurnal protobiont volume:
3 (2): 247-251.
[12] Lisqorina., Pratiwi, L., dan Natalia, D. 2021. Uji Aktivi- tas Ekstrak Etanol Daun Senggani ( Melastoma mala- bathricum L) Sebagai Larvasida Aedes aegypti . Jurnal Kedokteran Universitas Tanjungpura No.2: 94-105.
[13] Cahyati WH dan Nuryanti S. 2021. Potensi Elektrik Mat Ekstrak Daun Tembakau (Nicotia- na tabacum L)  Upaya Pengendalian Vektor Nyamuk Aedes aegypti. Journal Of Public Health Research De- velopment, 5(1):   171 181.
[14] Menisasti, R., Sunita, R. & Krisyanella, 2019. Uji Efekti- fitas Kematian Larva Aedes Sp Larvasida Dengan Infu- sa Daun Jambu Biji (Psidium Guajava Linn). Journal of Nursing and Public Health, 7(2), pp. 48-50
[15] Ningtyas, D.R., dan Endah, R.S.D. 2012. Pemanfaatan Cymbopogon nardus Sebagai Larvasida Aedes aegypti . Jurnal Biologi . Jurusan Pendidikan Biologi. IKIP PGRI Semarang 1-13.
[16] Linggama, G. A., Montolalu, L. A. D. Y., Salindeho, N. 2019. Aktivitas antibakteri ekstrak air re- busan mangrove segar Sonneratia alba di Desa Wori Kabupaten Minahasa Utara. Jurnal Media Teknologi Hasil Perikanan. Vol. 7, No. 2
[17] Wijaya, H., & Novitasari, J. S. (2018). Perbandingan Metode Ekstraksi Terhadap Rendemen Ekstrak Daun Rambai Laut (Sonneratia caseolaris L. Engl). Jurnal IlmiahManuntung, 4(1), 79-83
[18] Nofyan, E., Marisa, H., Kamal, M. 2013. Eksplorasi Bi- olarvasida Dari Tumbuhan Untuk Pengendalian Larva Nyamuk Aedes aegypti Di Sumatera Selatan. Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung 275-281
[19] NST, B. M. & Isnayanti, D., 2020. Perbandingan Efek- tivitas Infusa Daun Jambu Biji Merah(Psidium Guajava L.) Dengan Temephos Terhadap Kematian Larva Nyamuk Aedes aegypti. Anatomica Medical Journal, 3(1), pp. 41-49
[20] Paputungan, F., Yamlean, P.V.P., Citraningtyas, G.
2014. Uji Efektivitas Salep Ekstrak Etanol Daun Bakau Hitam ( Rhizophora mucronata Lamk) Dalam Meng- hambat Pertumbuhan Aeromonas salmonicida Dan Vi- brio harveyi . Jurnal Rekayasa Dan Teknologi Budidaya Perairan Vol. I No. 1 : 1-8
[21] Suciati, A., Wardiyanto., Sumino. 2012. Efektifitas Ek- strak Daun bakau hitam dalam Menghambat Pertum-
buhan Aeromonas salmonicida Dan Vibrio harveyi . Jur- nal Rekayasa Dan Teknologi Budidaya Perairan Vol. I No. 1 : 1-8.
[22] Veriswan, I. 2006. Perbandingan Efektivitas Abate Dengan Papain Dalam Menghambat Pertumbuhan Larva Aedes aegypti . Artikel ilmiah . Fakultas Kedokte- ran. Universitas Diponegoro. Semarang.
[23] Widawati, M dan Heni, P. 2013. [20]Efektivitas Ekstrak Buah Beta vulgaris L. (Buah Bit) Dengan Berbagai Fraksi Pelarut Terhadap Mortalitas Larva Aedes aegypti . Aspirator Vol. 5, No. 1 : 23-29. _____________________