## PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIOKIDAN EKSTRAK TERPURIFIKASI DAUN TEH HIJAU DAN JATI BELANDA
Abd. Malik, Aktsar Roskiana Ahmad, Ahmad Najib
Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia abd.malik@umi.ac.id

## ABSTRAK
Teh hijau memiliki nama spesies Camellia sinensis (L.) Kuntze, family Theaceae dan Jati belanda (Guazuma ulmifolia Lam.) termasuk kedalam family sterculiaceae . Ekstrakse dengan metode maserasi termodifikasi microwave dengan pelarut air. Purifikasi ekstrak dengan menggunakan pelarut dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda dimulai dengan petroleum eter, kloroform, etil asetat dan metanol. Pengujian aktivitas antioksidan dengan metode peredaman radikal DPPH. Hasil penelitian dipeoleh rendamen ekstrak terpurifikasi ekstrak teh hijau 13,33 % dan jati  belanda  46,66  %.Pengujian  antioksidan  menunjukkan  nilai  IC50  jati  belanda  yaitu  10,13  ppm,  lebih  besar dibandingkan teh hijau yaitu 31,13 %.
Keywords: Antioxidant, Camellia sinensis (L.) Kuntze, Guazuma ulmifolia Lam. Purification

## I. PENDAHULUAN
Indonesia memiliki keankeragaman flora yang sangat  melimpah,  yang  bisa  dijadikan  sebagai  sumber bahan baku obat tradisional. Penggunaannnya didasarkan  pada  pengalaman  empiris  yang  diwariskan secara turun temurun. Salah satu tanaman asli Indonesia yang  bisa  dimanfaatkan  dan  sebagai  sumber  senyawa bioaktif diantara adalah daun jati belanda dan teh hijau. Daun  jati  belanda  telah  banyak  dimanfaatkan  baik secara  empiris  maupun  berbasis  penelitian.  Secara umum  daun  daji  belanda  digunakan  sebagai  simplisia penurun berat badan, sehingga banyak digunakan untuk pasien  penderita  obesitas.  Teh  hijau  merupakan tanaman  yang  sangat  lekat  dengan  kehidupan  sehari- hari.  Teh  hijau  telah  banyak  digunakan  baik  sebagai minuman  penyegar  dahaga  maupun  minimal  herbal. Penggunaan  daun  jati  belanda  dan  teh  hijau  secara kombinasi  dapat  memberikan  efek  yang  sinergis. Pirfikasi  ekstrak  bertujuan  untuk  menghilangkan senyawa  kimia  tertentu  pada  ekstrak  sehingga  akan lebih efisien ketika dilakuakn pengujian antioksdan.

## II. METODE PENELITIAN

## A. Ekstraksi
Masing-masing  simplisia  daun  teh  hijau  dan jati  belanda  ditempatkan  dalam  bejana  maserasi, selanjutnya dimasukkan dalam  wadah meserasi dengan ditambahkan  pelarut  air  sebanyak  30  L,  kemudian  di microwave selama 15 menit, dilakukan sebanyak 3 kali. Disaring, ekstrak cair dikumpilkan. Residu reekstraksi kembali hingga ektraksi sempurna selesai. Ekstrak cair di keringkan dengan menggunakan freez dry. Dilakukan hal yang sama untuk sampel daun jati belanda.

## B. Purifikasi Ekstrak
Ekstrak kasar daun teh hijau  dan jati belanda di  purifikasi  dengan  menggunakan  beragam  pelarut yang berbeda mulai dari petroleum eter, kloroform, etil
asetat dan etanol. Masing-masing ekstrak air daun jati belanda  dan  teh  hijau,  ditambahkan  pelarut  n-hexan ditempatkan  di  dalam  labu  corong  pisah  ditambahkan petroleum eter, dikocok, dan  didiamkan, dan disaring. Purifikasi  selanjutnya  dilakukan  secara  berurutan dengan  pelarut  kloroform,  etil  asetat  dan  etanol. Lapisan  air  dikumpulkan  dan  dikentalkan  dikeringkan dengan frezz dry.

## C. Pengujian Antioksidan
Masing-masing  ekstrak  teh  hijau  dan  jati belanda  ditimbang  10  mg  dan  dibuat  seri  konsentrasi 20,40, 60, 80 dan 100 ppm.  Larutan uji dipipet  1 mL dimasukkan kedalam tabung reaksi, ditambahkan 1 mL DPPH, ditambhakan 2 mL metanol p.a, dikocok hingga homogen, diinkubasi pada suhu 37 o C selama 30 menit dan  diukur  serapannya  pada  panjang  gelombang  517 nm.  Dihitung  nilai  persentasi  redaman  radikal  DPPH dan  diplotkan  pada  kurva  regresi  liner.  Kemudian dihitung nilai IC 50 .

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  ekstraksi  dengan  pelarut  organik menghasilkan  ekstrak  kasar  (crude  extract)  sehingga dalam  beberapa  penelusuran  senyawa  aktif  perlu dilakukan  purifikasi  untuk  menghilangkan  komponen yang  dianggap  sebagai  pengganggu  seperti  lemak, klorofil, dll.
Proses  purifikasi  adalah  metode  untuk mendapatkan  komponen bahan alam  murni bebas dari komponen  kimia  lain  yang  tidak  dibutuhkan.  Untuk tingkatan  kemurnian  ( purity )  suatu  struktur  senyawa tertentu, kemurnian bahan  harus 95-100%. Sedangkan ekstrak  terpurifikasi  harus  dijelaskan  bahwa  ekstrak terpurifikasi  dari  komponen  apa  sehingga  tidak menimbulkan  multipersepsi.  Komponen  kimia  dalam ekstrak  yang  tidak  dibutuhkan  seperti  lipid,  pigmen
(klorofil),  tanin,  plastisiser,  dan  pelumas  yang  dapat berasal dari alat (nugroho et al, 2013).

## Tabel 1 . Hasil purifikasi ekstrak
No. Ekstrak Ekstrak kasar (g) Ekstrak terpurifikasi (g) Rendamen (%) 1 Teh hijau 15 2 13,33 2 Jati belanda 10 7 46,66 Penggunaan ekstrak terpurifikasi adalah alternatif  untuk  meminimalkan  massa  suatu  ekstrak dalam  tujuan  praktis  pembuatan  sediaan  secara farmasetis karena beberapa komponen yang terkandung dapat  direduksi  dengan  proses  tersebut.  Hal  ini  juga
untuk menjaga beberapa kandungan kimia ekstrak yang berefek  sinergisme  sehingga  dapat  memaksimalkan proses  pengobatan  karena  dalam  beberapa  kasus, komponen kimia yang telah diisolasi justru menunjukkan penurunan efek.
Tabel 2 . Pengujian Antioksidan Teh hijau
No Konsentrasi Absorban Inhibisi (%) IC 50 1 20 0.476 48.981 31,13 2 40 0.459 50.803 3 60 0.444 52.411 4 80 0.419 55.091 5 100 0.409 56.162 Persamaan linear y = 0.0933x + 47.095 R² = 0.9877
Tabel 3 . Pengujian Antioksidan Jati Belanda
No Konsentrasi Absorban Inhibisi (%) IC 50 1 20 0.437 53.161 10,13 2 40 0.384 58.842 3 60 0.348 62.7 4 80 0.285 69.453 5 100 0.224 75.991 Persamaan linear y = 0.2814x + 47.148 R² = 0.9917
Proses  peredaman  radikal  bebas  melalui mekanisme pengambilan atom hidrogen dari senyawa antioksidan oleh radikal bebas, sehingga radikal bebas menangkap  satu  elektron  dari  antioksidan.  Radikal bebas  sintetik  yang  digunakan  adalah  DPPH. Senyawa DPPH bereaksi dengan senyawa antioksidan melalui  pengambilan  atom  hidrogen  dari  senyawa antioksidan  untuk  mendapatkan  pasangan  elektron (Pokorny, Yanishlieva dan Gordon, 2001).
Senyawa  radikal  DPPH  berwarna  ungu  tua akan  memudar  menjadi  kuning  jika  direduksi  oleh antioksidan  menjadi  DPPH  non  radikal  (Liangli  Yu,
2008), ketika elektron ganjil dari radikal DPPH telah berpasangan dengan elektron dari senyawa penangkap radikal bebas (antioksidan) akan membentuk DPPH- H  tereduksi  selanjutnya  radikal  bebas  DPPH  akan membentuk  senyawa  bukan  radikal  yaitu  DPP Hidrazin yang stabil (Molyneux, 2004).
Hasil  penelitian  menunjuukan  niai  IC50 ekstrak teh hijau sebear 31,13 µg/mL  sedangkan jati belanda  sebesar  10,13  µg/mL.  Sehingga  aktivitas antioksidan  baik  teh  hijau  mapun  jati  belanda termasuk kategori antioskdan kuat.
Aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 paling kecil  adalah  ekstrak n -butanol  dan  etil  asetat  yaitu IC 50 <10 µg/mL termasuk dalam  kategori antioksidan sangat  kuat.  Ekstrak  diklorometana,  metanol  dan  air menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak  berada  pada  rentang 10-50  µg/mL  termasuk  dalam  kelas  antioksidan  kuat (Phongphaichit, 2007).

## IV. KESIMPULAN
Ekstrak terpurifikasi daun teh hijau dan jati belanda  memiliki aktivitas antioksidan  yang sangat kuat  dengan  nilai  IC5  untuk  jati  belanda  10,13 µg/mL dan teh hijau 31,13 µg/mL.

## V. UCAPAN TERIMAKASIH
We  would  like  to  thank  you  to  Lembaga Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya,
Universitas  Muslim  Indonesia  for  Funding  this research.

## DAFTAR PUSTAKA
Patil, Jayshree and Biradar, S. D. 2013.
P harmacognostic Study Of Guazuma ulmifolia . International Research Journal Of Pharmacy.
Patel Jalpa G*, Dhamat Ashish D, Amit A Patel, N. M Patel. 2012. Ethnomedicinal, Phytochemical And Preclinical Profile Guazuma Ulmifolia Lam. International Journal Of Pharmaceutical Sciences Vol-3, Issue-2 Sharma M., Chopra S., Prasad, S. B. 2015. Guazuma tomentosa : A  Valuable  Medicinal  Plant .
International Journal of Pharmacognosy and Phytochemical Research Sukandar EY, Nurdewi, Elfahmi. 2012. Antihypercholesterolemic Effect of Combination  of  Guazuma  ulmifolia  Lamk. Leaves  and  Curcumaxanthorrhiza Roxb.
Rhizomes Extract in Wistar Rats . International Journal of Pharmacology.
Reto, M. Almeida, C., Rocha, J., Sepodes B., Figueira, Maria-Eduardo. 2014. Green Tea (Camellia sinensis):  Hypocholesterolemic  Effects  in Humans  and  Anti-Inflammatory  Effects  in Animals .  Food  and  Nutrition  Sciences,  5, 2185-2194. Namita,  Parmar.,  Mukesh,  R  and  Vijay,  Kumar  J. 2012. Camellia  sinensis  (Green  Tea):  A Review .  Global  Journal  of  Pharmacology  6 (2): 52-59
Ogle,  Naomi.  2009.  Green  tea Camellia  sinensis. Australian  Journal  of  Medical  Herbalism 21(2)
Mota,  Matheus  A.  de  Lima,  Landim,  José  S.  P., Targino, Thiago S. S., Silva, Silvia F. R. da, Silva,  Sônia  L.  da,  Pereira,  Márcio  R.  P. Evaluation  of  the  anti-inflammatory  and analgesic  effects  of  green  tea  (Camellia sinensis)  in  mice .  Acta  Cirúrgica  Brasileira Vol. 30 (4)
Jain, Tripti, Jain. V, Pandey. R, Vyas. A and Shukla.S.
2009.  Microwave  Assisted  Extraction  for Phytoconstituents AnOverview.
Langat  M.  K.  2011.  Chemical  Constituents  of  East European Forest Species. In A. f.  Standards, Book  of  Extended  Extracts  (pp.  77-78). Kenya
Molyneux,  P.,  2004,  Use  of  DPPH  to  Estimate antioxidant Activity. Journal Science
Tecnology . 26 (2). Liangli  Yu.,  (2008). Wheat  Antioxidants .  Wiley- Interscience,  A  John  Wiley  &  Sons,  Inc., Publication.
Phongpaichit,  S.,  Nikom,  J.,  Rungjindamai,  N.,
Sakayaroj,  J.,  Hutadilok-Towatana,  N., Rukachaisirikul,  V.,  Kirtikara,  K.  (2007). Biological  Activities  of  Extracts  From Endophytic  Fungi  Isolated  From Garcinia Plants. Immunology & Medical Microbiology , 51, 517–525.
Pokorny,  J.,  Yanishlieva,  N.,  Gordon,  M.,  (2001).
Antioxidants in Food. Practical
Applications .  ,  USA:  Woodhead  Publishing Limited.
Malik, A., and Ahmad, A.R. 2014. Determination of Phenolic  and  Flavonoid  Contents  of Ethanolic  Extract  of  Kanunang  Leaves ( Cordia  myxa L.) International  Journal  of PharmTech Resesarh , Vol. 7. No. 2.
Nugroho,  A.  E.,  Malik,  A.,  &  Pramono,  S.  (2013).
Total phenolic and flavonoid contents, and in vitro  antihypertension  activity  of  purified extract  of  Indonesian  cashew  leaves (Anacardium  occidentale  L.). International food research journal , 20 (1).