## PERILAKU POLIGAMI VEKTOR DEMAM BERDARAH DENGUE
Aedes aegypti : KORELASINYA DENGAN FERTILITAS TELUR

## SERTA PENYEBARAN VIRUS DENGUE
Devita Febriani Putri 1

## ABSTRACT
Controlling dengue fever from vector especially Aedes aegypti mosquitoes has been the one of effective methods in stopping the tranmission and preventing the expansion of dengue fever endemic area. Technique to eradication vector DBD through mosquito mating behavior naturally have long been applied and and  the  phenomenon  of  transvenereal  transmission  (through  sexual behavior), male  Ae.  aegypti  has  ability  to  transmit  dengue  virus  (DENV)  to the  non  infectious  female  Ae.  aegypti,  so  information  about  the  mating behavior of DHF vector is very important to know. This study aims to find out the  potency  polygamous  behavior  in  male  Ae.  aegypti  (strain  Yogyakarta Indonesia) in mating female Ae. aegypti semi natural and correlation to fertile eggs  produced  by  female  mosquito.  Male  Ae.  aegypti  were  placed  into  cage 30 cm 3 contains of non-infectious one-day old female Ae. aegypti to polygamy mating (semi natural) with ratio male: female 1:3; 1:5; 1:10; 1:20 and 1:30. The sample is the number of female mosquitoes that are successfully mated by  male  mosquitoes  and  the  number  of  fertile  eggs  produced.  Data  analysis used  is  bivariate  analysis  with  Pearson  Correlation  test. The  results  of  the study  is  male  Ae.  aegypti  has  potency polygamous  behaviour    in  mating female  Ae.  aegypti  maximum  8  mosquito  with  total  fertile  egg  produce maximum  370  eggs. The  correlation  between  female  mosquitoes  that  were mated  by  male  mosquitoes  in  polygamy  was  positively  correlated  (directly proportional)  to  the  number  of  fertilized  eggs  produced.  The  polygamous behavior  of  male  mosquito  has  a  role  in  spreading  and  maintaining  the existence of DENV in Ae. aegypti mosquitoes  both in parental or F1.
Key word : Polygamous behavior, Aedes aegypti, egg fertility, dengue virus.

## ABSTRAK
Pengendalian  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  dari  segi  vektor  khususnya nyamuk Aedes  aegypti masih  menjadi  salah  satu  metode  efektif  dalam menghentikan  penularan  dan  mencegah  perluasan  daerah  endemis  DBD. Tehnik  pemberantasan  vektor  DBD  melalui  perilaku  kawin  nyamuk  secara alami telah lama diterapkan dan  fenomena penularan transvenereal (melalui perilaku  seksual), Ae.  aegypti jantan  mempunyai  kemampuan  menularkan virus  dengue  (DENV)  ke Ae.  aegypti betina  noninfeksius,  sehingga informasi tentang  perilaku  kawin  nyamuk  vektor  DBD  sangat  penting  diketahui. Penelitian ini bertujuan  mengetahui potensi sifat poligami Ae. aegypti jantan (strain  Yogyakarta,  Indonesia)  dalam  mengawini Ae.  aegypti betina  secara semi alami dan korelasinya terhadap telur yang dihasilkan Ae. aegypti betina tersebut. Ae. aegypti jantan dimasukkan ke kandang nyamuk 30 cm 3 dengan Ae.  aegypti betina  untuk  dikawinkan  (semi  alami)  secara  poligami  dengan rasio  jantan:  betina  1:3;  1:5;  1:10;  1:20  dan  1:30.  Sampel  adalah  jumlah nyamuk betina yang berhasil dikawini nyamuk jantan dan  jumlah telur yang fertil  yang  dihasilkan.  Analisis  data  yang  digunakan  adalah  analisis  bivariat dengan uji Pearson  Correlation . Hasil penelitian adalah perilaku poligami Ae.
aegypti jantan  berpotensi  mengawini Ae.  aegypti betina  maksimal  8  ekor dengan  total  telur  fertil  yang  dihasilkan  maksimal  370  telur.  Korelasi  antara nyamuk  betina  yang  dikawini  nyamuk  jantan  secara  poligami  berkorelasi positif (berbanding lurus) dengan jumlah telur fertil yang dihasilkan. Perilaku poligami  nyamuk  jantan  mempunyai  peranan  dalam  menyebarkan  dan memelihara  keberadaan  DENV  pada  nyamuk Ae.  aegypti baik  pada  parental ataupun F1nya.
Kata kunci: Perilaku poligami, Aedes aegypti , fertilitas telur, virus dengue

## PENDAHULUAN
Demam  Berdarah  Dengue (DBD) merupakan salah satu penyakit  tular  vektor  yang  menjadi masalah  kesehatan  dunia.  Agen penyebab  penyakit  DBD  adalah virus dengue
(DENV) genus
Flavivirus,  dan  ditularkan  melalui nyamuk
Aedes (Ae)  subgenus Stegomyia,  terutama Aedes  aegypti (Linnaeus)  (Kreamer et  al. ,  2015; WHO  SEARO,  2017).  Program pencegahan  dan  pemberantasan DBD di Indonesia telah berlangsung lebih  kurang  43  tahun  dan  berhasil menurunkan  angka  kematian  dari 41,3%  pada  tahun  1968  menjadi 0,87  %  pada  tahun  2010,  tetapi belum  berhasil  menurunkan  angka kejadian  DBD.  Salah  satu  metode efektif menghentikan penularan DBD  dan  mencegah  perluasan daerah  endemis  DBD  melalui  segi vektor  khususnya  nyamuk Ae. aegypti (Ditjen PPPL, 2016).
Nyamuk Ae.  aegypti jantan tidak  menghisap  darah  manusia karena  keterbatasan  dari  morfologi “ mouth  part ”  yang  tidak  bisa
menembus  kulit  manusia.  Namun nyamuk  jantan  dibutuhkan  untuk reproduksi nyamuk betina ( Klowden, 1995 ). Penggunaan  nyamuk  jantan yang  dimodifikasi  secara  genetik atau  steril  telah  dilepaskan  di daerah  endemis  dengue  melalui tehnik pemberantasan nyamuk
vektor dengan perilaku kawin secara alami  (Ponlawat  dan  Harrington, 2009).
Selain
itu fenomena penularan  transvenereal  (melalui perilaku  seksual),  terbukti  dapat menularkan  DENV  dari  nyamuk Ae. aegypti jantan  infeksius  ke  nyamuk Ae.  aegypti betina  noninfeksius (Putri, 2018). Pada akhirnya
informasi  tentang  perilaku  kawin nyamuk Ae.  aegypti secara  alami perlu diketahui.
Perkawinan
nyamuk Ae. aegypti secara  alami  berkaitan  erat dengan  perilaku  poligami  nyamuk Ae. aegypti jantan. Penelitian tentang  perilaku  poligami  nyamuk Ae.  aegypti strain  Thailand,  telah dilakukan  oleh  Choochote et  al.
(2001)  yang  menyatakan  nyamuk Ae. aegypti jantan dapat mengawini
maksimal  14  betina  dalam  kandang berukuran  30  cm 3 dengan  rasio jantan:  betina  =  1:  30.  Namun penelitian  ini  belum  pernah  di lakukan  di  Indonesia.  Berdasarkan pemaparan  latar  belakang,  maka tujuan
penelitian ini adalah
mengetahui  potensi  sifat  poligami nyamuk Ae.  aegypti jantan  (strain
Yogyakarta,
Indonesia) dalam mengawini  nyamuk Ae.  aegypti betina  secara  semi  alami  dan korelasinya  terhadap  telur  fertil yang dihasilkan nyamuk Ae. aegypti betina  tersebut.  Perilaku  poligami nyamuk  jantan  merupakan  faktor pendukung  terjadinya  penyebaran virus  dengue  secara  transvenereal pada  vektor  demam  berdarah dengue.

## METODE PENELITIAN
Nyamuk Aedes aegypti Nyamuk Ae.  aegypti (strain
Yogyakarta,  Indonesia)  didapatkan dari  hasil  kolonisasi  laboratorium yang  terbebas  dari  infeksi  penyakit di  Departemen  Parasitologi  Fakultas Kedokteran  Kesehatan  Masyarakat dan Keperawatan Universitas
Gadjah Mada, Yogyakarta. Telur dari laboratorium  yang  berasal  dari parental  nyamuk  non  infeksius ditetaskan  dalam  nampan  yang berisi  air.  Setelah  menetas,  proses pemeliharaan  larva  agar  tetap bertahan  hidup  diberi  pakan  hati ayam sebanyak 0,5 g pada hari ke-0
dan  selanjutnya  dari  hari  pertama sampai kelima atau sebelum menjadi  pupa  sempurna  diberi pakan  hati  ayam  1  g.  Jika  terdapat sekam  pada  permukaan  air  pada nampan segera dibersihkan sebelum diberi  pakan,  air  diganti  2-3  kali seminggu.  Larva  dipelihara  menjadi stadium pupa. Ketika stadium pupa, pupa  jantan  dan  pupa  betina dipisahkan
dan
dimasukkan kekandang  terpisah.  Ketika  proses kolonisasi Ae. aegypti menjadi pupa, pupa  jantan  dan  betina  dipisahkan. Cara  pemisahannya  dengan  melihat ukuran  pupa,  pupa  nyamuk  jantan berukuran lebih kecil dengan nyamuk betina. Setiap 10 ekor pupa jantan dan pupa betina dimasukkan ke kandang yang berbeda. Pupa lalu dibiakkan  menjadi  imago  atau nyamuk dewasa. Untuk
mengkonfirmasi  apakah  benar  pupa jantan  dan  betina,  dilihat  dari perkembangan  stadium  nyamuk dewasa.  Nyamuk  jantan  memiliki antena  berambut  lebat  ( plumose ) dan  nyamuk  betina  memiliki  antena berambut  jarang  ( pilose )  (Arthur et al .,  2014).  Apabila  ada  salah  satu nyamuk dewasa jantan yang tercampur  pada  nyamuk  betina  dan sebaliknya,  maka  kandang  berisi nyamuk  tersebut  di  drop  out. Pupa jantan  dan  betina  dipelihara  hingga menjadi  nyamuk  dewasa . Semua perlakuan  dilakukan  diinsektarium dengan  kondisi  suhu  27  ±  2 o C; kelembaban  88  ±  6%  dan  12  jam
cahaya:  12  jam  gelap  (Umniyati et al. , 2008).
Perkawinan poligami semi alami nyamuk Ae. aegypti
Nyamuk Ae.  aegypti jantan berumur  2  hari  dimasukkan  ke kandang  nyamuk  berukuran  30  cm 3 dengan  nyamuk Ae.  aegypti betina berumur  1  hari  untuk  dikawinkan secara poligami dengan rasio nyamuk  jantan:  nyamuk  betina adalah  1:3;  1:5;  1:10;  1:20  dan 1:30  (5  kelompok  perlakuan). Perkawinan dilakukan selama 7 hari, untuk mempertahankan hidup nyamuk  diberikan  larutan  gula  10 %,  diresapkan  pada  kapas  dan diganti  setiap  hari.  Pada  hari  ke  7, nyamuk jantan dikoleksi, lalu disimpan di
freezer
-80˚C,
sedangkan nyamuk betina diberikan blood feeding dengan menggunakan darah  mencit.  Tahap  selanjutnya nyamuk  –  nyamuk  betina  tersebut dikurung  secara  terpisah  di paper cup (gelas  kertas)  yang  ditutupi kassa untuk proses
bertelur ( individual  rearing ),  kapas  yang
dibasahi larutan
gula 10% diletakkan  diatas  kassa,  diganti setiap  hari.  Paper  cup  untuk  proses individual  rearing  dimasukkan  ke dalam  kotak  stereofoam  yang tertutup.    Nyamuk  betina  dipelihara selama  7  hari  untuk  bertelur  dan telurnya  diberi  label.  Pada  hari  ke 14  nyamuk  betina  dikoleksi  lalu disimpan  pada  freezer  -80˚C.  Telur
dikeringkan  lalu  disimpan  selama  7 hari di suhu ruang.

## Potensi  perilaku  poligami  dan
Fertilitas Telur.
Telur  yang  disimpan  selama seminggu ditetaskan dalam nampan plastik  ukuran  24x36x6  cm  yang berisi  air.  Pemeliharaan  larva  untuk bertahan  hidup  diberi  pakan  hati ayam kering dan air diganti 2-3 kali dalam  1  minggu,  dipelihara  sampai nyamuk  dewasa  sesuai  dengan masa  penyimpanannya.  Rearing telur  nyamuk  sampai  stadium dewasa  dilakukan  di  Departemen Parasitologi  Fakultas  Kedokteran Kesehatan
Masyarakat dan Keperawatan  Universitas  Gadjah Mada, Yogyakarta. Semua perlakuan dilakukan diinsektarium dengan kondisi suhu 27 ± 2 o C; kelembaban 88  ±  6%  dan  12  jam  cahaya:  12 jam  gelap  (Umniyati et  al. ,  2008). Telur yang menetas sampai stadium larva,  ditelusuri  parental  nyamuk betina, sebagai bukti bahwa nyamuk jantan melakukan perkawinan poligami  dengan  nyamuk  betina secara semi alami dikandang.
Nyamuk  betina  menghasilkan  telur yang  fertil  (telur  yang  dapat menetas  dan  menghasilkan  stadium immature )  mengindikasikan  terjadi fertilisasi  melalui  perilaku  kawin. Perhitungan  yang  dilakukan  adalah jumlah nyamuk betina yang berhasil dikawini  nyamuk  jantan  dan  jumlah telur  yang  fertil  (jumlah  telur  yang
menetas) dari nyamuk betina
tersebut perkelompok perlakuan.
Desain  Penelitian  dan  Analisis Data
Desain  penelitian  ini  adalah analisis  deskriptif.  Analisis  data yang digunakan dalam penelitian ini adalah  analisis  bivariate  dengan menggunakan uji Pearson Correlation.  Uji  ini  bertujuan  untuk melihat  korelasi  antara  jumlah nyamuk betina yang berhasil
dikawini  dan  jumlah  telur  yang fertil.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  (Gambar  1) mengindikasikan bahwa nyamuk Ae. aegypti jantan  dapat  mengawini nyamuk Ae. aegypti betina maksimal  8  ekor  apabila  rasio nyamuk  jantan:  nyamuk  betina  di dalam kandang adalah 1:20 (perlakuan  4  dengan  total  21  ekor
nyamuk).  Hal  ini  membuktikan perilaku  poligami  nyamuk Ae. aegypti jantan  (strain  Yogyakarta,
Indonesia)  berpotensi  mengawini nyamuk Ae. aegypti betina
maksimal  8  ekor  dalam  perkawinan nyamuk  semi  alami  dan  total  telur
fertil  dari  masing  –  masing  nyamuk betina tersebut maksimal 370 telur.
Pada  perlakuan  5  dengan rasio  nyamuk  jantan:  betina  adalah 1:  30  (total  31  ekor  nyamuk) ternyata mengalami penurunan jumlah nyamuk betina yang berhasil dikawini nyamuk jantan dibandingkan perlakuan 4.
Kemungkinan  yang  terjadi  adalah kandang  nyamuk  berukuran  30  cm 3
(0.00003  m 3 )  terlalu  kecil  untuk nyamuk  jantan  dan  nyamuk  betina (total  31  ekor  nyamuk)  melakukan perkawinan. Penelitian Polanwat dan Harrington
(2009) menyatakan
perkawinan  nyamuk  cukup  sukses (female  insemination  rates  81.6- 98.7%)  pada  ukuran  kandang nyamuk  0.009  m 3 dengan  rasio nyamuk  jantan:  betina  5:20  (total 25  ekor  nyamuk).  Faktor  lain  yang menyebabkan  penurunan  jumlah nyamuk betina yang berhasil
dikawini adalah ukuran tubuh nyamuk  jantan  pada  perlakuan  5 kemungkinan lebih
kecil dibandingkan ukuran tubuh  nyamuk jantan  pada  perlakuan  4.  Ukuran tubuh  nyamuk Ae.  aegypti jantan merupakan  salah  satu  faktor  yang berhubungan  dengan  suksesnya kemampuan  nyamuk  jantan  dalam mengawini nyamuk betina (Polanwat  dan  Harrington,  2009; Helinski  dan  Harrington,  2011). Namun  keterbatasan  dari  penelitian ini  tidak  melakukan  pengukuran tersebut.
Hasil
analisis korelasi Pearson  (Tabel  1)  menyatakan  ada hubungan  positif  (0.988)  antara jumlah nyamuk betina yang berhasil dikawini  dengan  jumlah  telur  yang fertil,  pada  kelompok  perlakuan  1 dan  5  yang  memiliki  pengaruh bermakna  dilihat  dari  nilai  P  0.049 (P<0.05).  Hubungan  positif  (0.091) juga didapatkan kelompok perlakuan  3  dan  4  yang  memiliki pengaruh bermakna dilihat dari nilai P  0.044  (P<0.05).  Interpretasinya adalah  semakin  banyak  nyamuk betina  yang  dikawini  oleh  nyamuk jantan  secara  poligami  berkorelasi (berbanding  lurus)  dengan  jumlah telur  fertil  yang  dihasilkan.  Untuk hubungan  perlakuan yang lain tidak terdapat hubungan positif kemungkinan disebabkan perbedaan jumlah  nyamuk  betina  yang  akan dikawini  nyamuk  jantan,  antar perlakuan kurang dari 10 ekor.
Nyamuk Ae.  aegypti jantan dianggap  kurang  berperan  dalam penyebaran  DENV,  karena  tidak dapat  menghisap  darah  manusia.
Namun nyamuk jantan dapat terinfeksi  DENV  melalui  penularan vertikal  yang  berasal  dari  parental nyamuk yang terinfeksi (Themmonzhi et. al. 2000).
Beberapa studi membuktikan bahwa DENV  diturunkan  secara  vertikal  ke progeni  (F1)  nyamuk Ae.  aegypti jantan  di  alam.  Kow et  al. (2001) kali  pertama  membuktikan  DENV terdeteksi  pada  nyamuk  jantan Ae. aegypti yang ditangkap dari alam di Singapura  (VIR/ Vertical  infection rate 1.33%). Penelitian Tavara et al. (2006),  menyatakan  nyamuk Ae. aegypti jantan  yang  dikoleksi  dari alam  di  Thailand  bagian  Selatan, terdeteksi  positif  DENV-2,  DENV-3, DENV-4  dan  kombinasi  DENV-2&3 (VIR  15,2  %).    Pada  negara  Tamil Nadu  India,  Arucnachalam et  al.
(2007)  menyatakan  DENV-2  dan
DENV-3 terdeteksi pada nyamuk Ae.
aegypti jantan  yang  dikoleksi  dari alam MIR tertinggi 28/1000). DENV- 3  juga  terdeteksi  di  nyamuk Ae. aegypti
jantan yang dikoleksi
menggunakan  ovitrap  di  Minas Gerais,  Brazil  dengan  MIR  10/1000 (Vilela et al. , 2010). Studi Mulyatno et  al. (2012),  juga  membuktikan penularan transovarial DENV-1 pada nyamuk jantan Ae. aegypti (MIR 16
-  26/1000)  yang  dikoleksi  dari Stadium  larva  dan  dewasa  di  kota Surabaya, Indonesia.
Nyamuk Ae.  aegypti jantan juga telah terbukti dapat menularkan DENV-3 ke nyamuk Ae. aegypti betina  non  infeksius  secara transvenereal. Fakta ini
mengindikasikan,  jika  satu  nyamuk jantan  infeksius  DENV-3  mengawini nyamuk  betina  yang  non  infeksius dengan  jumlah  tertentu  (karena sifat  poligaminya)  dan  sebagai akibatnya  nyamuk  betina  infeksius akan  menghasilkan  telur  yang  fertil (Putri,  2018).  Telur  yang  fertil apabila  menetas  memungkinkan terjadi penularan secara transovarial DENV-3 dari parental nyamuk betina infeksius  DENV-3  ke  keturunannya (F1)  nyamuk.  Penelitian  skala laboratorium dan secara alami telah banyak  membuktikan  bahwa  DENV dapat ditransmisikan secara transovarial  dari  nyamuk  betina yang  infeksius  DENV  ke  F1nya (Angel dan Joshi, 2008; Arunachalam et al. , 2008; Rohani et
al ., 2008; Seran, 2010; Thongrungkiat et  al. ,  2011;  Goff et al. ,  2011;  Martins et  al. ,  2012;
Espinosa et  al. ,  2014;  Martinez et al. ,  2014). Hal  ini  mengasumsikan perilaku  poligami  nyamuk  jantan mempunyai
peranan dalam
menyebarkan dan memelihara
keberadaan DENV pada nyamuk Ae.
aegypti baik  pada  parental  ataupun F1nya.
Tehnik pemberantasan
vektor  DBD  melalui  perilaku  kawin nyamuk  secara  alami,  telah  lama diterapkan untuk menurunkan perluasan  daerah  endemis  DBD, sehingga  informasi  tentang  perilaku kawin  nyamuk  vektor  DBD  sangat penting diketahui. Negara Indonesia telah menggunakan Teknik Serangga  Mandul  (TSM)  yang  telah lama  dikembangkan  oleh  Badan Tenaga  Nuklir  Nasional  (BATAN). TSM  adalah  teknik  yang  digunakan untuk memandulkan nyamuk jantan dengan  menggunakan  radiasi  sinar gamma,
yang bertujuan
menurunkan jumlah populasi nyamuk  dengan  cara  menyebarkan nyamuk  jantan  pada  habitatnya. Meskipun  terjadi  perkawinan  antara nyamuk  jantan  dengan  nyamuk betina,  namun  dari  perkawinan tersebut tidak
akan
terjadi
pembuahan. Dengan
demikian, jumlah  populasi  nyamuk  semakin lama akan semakin menurun (Nurhayati et al. , 2013; Setyaningsih et al. ,
2014).
Pelepasan  nyamuk  berwolbachia juga  merupakan  salah  satu  tehnik penanggulangan  perluasan  kasus DBD  melalui  perkawinan  vektor nyamuk Ae.  aegypti .  Wolbachia adalah  suatu  bakteri  gram  negatif intraseluler  yang  apabila  hidup
didalam  tubuh  nyamuk Aedes  sp. yang  mampu  mengintervensi  masa hidup  nyamuk  mengganggu  sistem reproduksi nyamuk, dan juga
mampu menghambat replikasi DENV di  dalam  tubuh  nyamuk.  Nyamuk laboratorium yang sudah dimodifikasi dengan
wolbachia diharapkan  dapat  bersaing  dan mengawini  nyamuk  lokal,  sehingga keturunan  dari  perkawinan  tersebut akan  membawa  bakteri  wolbachia dan  dapat  mengurangi  transmisi DENV.
Demikian seterusnya, sehingga diharapkan seluruh nyamuk  Aedes  sp.  di  alam  akan tertular bakteri Wolbachia
(Lusiyana, 2014; Bukchori, 2017).
Pengetahuan tentang perilaku  kawin  nyamuk  serta  faktor
–  faktor  yang  berhubungan  seperti fisik optimal dari nyamuk, mekanisme fisiologi yang meregulasi perkawinan nyamuk, perilaku poligami  nyamuk  jantan,  kondisi lingkungan  yang  sesuai  dan  faktor lainnya,  penting  relevansinya  dalam pengendalian  DBD  dari  segi  vektor. Terutama  untuk  nyamuk  yang dimodifikasi  genetik  atau  program steril  nyamuk  jantan  (Polanwat  dan Harrington,  2009).  Selain  itu  perlu kajian lebih lanjut untuk memahami mekanisme pertahanan
DENV secara  vertikal  di  nyamuk  melalui perilaku kawin. Kajian ini memberikan informasi penting
dalam pengembangan
strategi pengendalian DBD dari segi vektor.

## KESIMPULAN
Kesimpulan dari penelitian ini
adalah  perilaku  poligami  nyamuk
Ae. aegypti jantan (strain
Yogyakarta,  Indonesia)  berpotensi mengawini  nyamuk Ae.  aegypti betina  maksimal  8  ekor  dalam perkawinan nyamuk semi alami dan total  telur  fertil  dari  masing  – masing  nyamuk  betina  tersebut maksimal  370  telur.  Korelasi  antara nyamuk betina yang dikawini nyamuk  jantan  secara  poligami berkorelasi  positif  dengan  jumlah telur  fertil  yang  dihasilkan,  yang artinya  semakin  banyak  nyamuk betina  yang  dikawini  berkorelasi (berbanding  lurus)  dengan  jumlah
telur fertil yang dihasilkan. Penelitian selanjutnya lebih berfokus kepada  peranan  sifat  poligami dalam penularan transvenereal DENV, melalui pemeriksaan individual  pada  masing  –  masing nyamuk Ae.  aegypti betina  yang menghasilkan  telur  fertil,  untuk memahami  mekanisme  terjadinya penularan transvenereal DENV.

## Daftar Pustaka
Angel, B., Joshi, V. 2008. Distribution and Seasonality of Vertical  Transmitted  Dengue
Viruses in Aedes Mosquitoes in Arid  and  Semi-Arid  Areas  of
Rajasthan,  India. J.  Vector. Borne. Dis . 48: 56-9. Arthur, B. J., Emr, K.S., Wyttenbach R.A., Hoy R.R. 2014. Mosquito ( Aedes  aegypti )  flight  tones: Frequency, harmonicity, spherical spreading, and phase relationships. The  Journal  of the  Acoustical  Society  of America , 135(2): 933–41. Arunachalam,  N.,  Tewari,  S.C.,
Thenmozhi,  V.,  Rajendran,  R., Paramasivan,  R.,  Ayanar,  K., Tyagi,  B.K.  2008.  Natural Vertical Transmission of Dengue  Viruses  by Aedes aegypti in  Cennai,  Tamil, India. Indian.  J.  Med.  Res . 127: 395-7.
Buchori D., Aryati, Hadi U.K., Joseph H.K.  2017.  Kajian  Resiko Terhadap  Pelepasan  Nyamuk Ber-Wolbachia. Kementrian Riset Teknologi dan Pendidikan
Tinggi. Jakarta.
Choochote,  W.,  Tippawangkosol,  P.,
Jitpakdi,  A.,  Sukontason,  K.L.,
Pitasawat,  B.,  Sukantonson, K., Jariyapan, N. 2001. Polygamy: The Possibly Significant  Behavior  of Aedes Aegypti and Aedes  Albopictus in Relation to Efficient Transmission  of  Dengue  Virus. Research Note Southeast
Asian  J.  Trop.  Med.  Public Health . 32 (4): 745-48. Espinosa,  M.,  Giamperetti  S.,  Abril M.,  Seijo  A.  2014.  Vertical transmission  of  dengue  virus in Aedes  aegypti collected  in Puerto Iguazu, Misiones, Argentina.
Rev.  Inst.  Med . Trop. Sao Paulo 56: 165–67. Goff,  L.  G.,  Revollo,  J.,  Guerra,  M.,
Cruz,  M.,  Simon,  B.Z.,  Roca, Y.,  Flores,  V.J.,  Herve,  J.P. 2011. Natural vertical transmission of Dengue viruses  by Aedes  aegypti in Bolivia. Parasite 18: 277–80. Helinski,  M.E.H.,  Harrington,  L.C. 2011. Male Mating History and Body  Size  Influence  Female Fecundity and Longevity of the
Dengue  Vector Aedes  aegypti . J.  Med.  Entomol. 48(2):202- 11. Kementrian Republik Indonesia, 2016. Direktorat Jendral Pengendalian  Penyakit  dan Penyehatan Lingkungan (Ditjen,  PP  dan  PL). Informasi Umum Demam
Berdarah
Dengue 2016 . Jakarta.
Klowden, M J. 1995. Blood, Sex, and the Mosquito. BioScience .
45(5): 326–31 Kow,  C.  Y.,  L.  L.  Koon,  Yin  P.  F. 2001.  Detection  of  dengue viruses  in  field  caught  male Aedes  aegypti and Aedes albopictus (Diptera:  Culicidae) in  Singapore  by  type-specific PCR. J.  Med.  Entomol .  38: 475–9.
Kraemer, M.U.G, Sinka, M.E., Duda, K.A.,  Mylne,  A.Q.N.,  Shearer, F.M., et  al .  2015.  The  global distribution  of  the  arbovirus vectors Aedes aegypti and Ae. albopictus . eLife . 4:1–18. Lusiyana, N. 2014. Wolbachia sebagai alternatif pengendalian  vector  nyamuk
Aedes sp. JKII. 6(3):1-3. Martınez,  N.  E.,  Dzul-manzanilla  F., Gutierrez  C.,  Ibarralopez  J.,
Bibiano-marın W.,
Lopez- damian  L.,  Martinijaimes  A.,
Huerta  H.,  Che  Mendoza  A., Ayora  G.,  et  al.  2014.  Natural vertical transmission of dengue-1  virus  in Aedes aegypti populations in Acapulco,  Mexico. J.  Am.
Mosq . Control Assoc. 30: 143– 146. Martins,  V.E.P.,  Alencar,  C.H., Kamimura,  M.T.,  De  Carvalho Araujo, F.M., De Simone, S.G., Dutra,  R.F.,  Guedes,  M.I.F. 2012.  Occurrence  of  natural
Vertical Transmission of Dengue-2 and Dengue-3 Viruses  in Aedes  aegypti and Aedes  albopictus in  Fortaleza, Ceara,  Brazil. PLoS  ONE .  7: e41386.
Mulyatno,  K.C.,  Yamanaka,  A.,
Yotopranoto,  S.,  Konishi.  E. 2012.Vertical  transmission  of dengue  virus  in Aedes  aegypti collected in Surabaya, Indonesia,  during  2008–2011. J. Infect. Dis . 65: 274–6. Nurhayati, S., Yunianto, B., Ramadhani,  T.,  Ikawati,  B., Santoso, B., Rahayu, A. 2013. Controlling Aedes
aegypti Population  as  DHF  Vector  with
Radiation  Based-Sterile  Insect Technique  in  BanjarNegara Regency, Central Java. Indonesian  Journal  of  Nuclear Science and Technology. 14(1): 1-10. Putri  D.F.,  2018.  Kajian  Penularan Transvenereal  Virus  Dengue Serotipe-3 dan Perilaku Poligami  Nyamuk Ae.  aegypti L . serta Dampak pada Progeninya Dalam Kondisi Insektarium Disertasi . Program Doktor Ilmu Kedokteran  dan  Kesehatan, Fakultas Kedokteran, Kesehatan  dan  Keperawatan. Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Ponlawat  A.,  Harrington  L.C.  2009. Factors  Associated  with  Male Mating  Succes  of  Dengue Vector Mosquitos, Aedes aegypti . Am.  J.  Trop.  Med. Hyg. 80(3): 395-400. Rohani, A., Zamree, I., Joseph, R.T., Lee  H.L.  2008.  Persistency  of Transovarial  Dengue  Virus  in Ae.  aegypti (LINN). Southeast Asian  J.  Trop.  Med.  Pub. Health . 39: 813-16. Seran,  M.D.  2010.  Uji  Laboratorium Penularan  Tran-Stadial  Virus Dengue  Pada  Stadium  Telur, Larva,  Pupa  dan  Imago  dari
Nyamuk Aedes aegypti (Diptera:  Culicidae). Tesis . Ilmu Kedokteran Tropis. Fakultas Kedokteran. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta. Setyningsih,  R.,  Agustini,  M., Boewono,  D.T.,  Rahayu.  A. 2014. Aplikasi Teknik
Serangga Mandul (TSM) Terhadap  Sterilitas  Telur  dan Penurunan Populasi Aedes aegypti  di  Daerah  Urban  Kota Salatiga. Bul. Penelit. Kesehat. 42(1): 15-24. Thavara, U., Siriyasatien, P., Tawatsin, A., Asavadachanukorn, P., Anantapreecha, S., Wongwanich,  R.,  Mulla.,  M.S. 2006.  Double  infection  of heteroserotypes  of  dengue viruses  in  field  populations  of Aedes  aegypti and Aedes albopictus (Diptera:  Culcidae) and  serological  featurs  of dengue viruses found in patients  in  Southern  Thailand. Southeast  Asian  J.  Trop.  Med.
Public Health . 37: 468–76. Thenmozhi, V., Tewari, S.C., Manavalan, R., Balasubramanian, A., Gajanana,  A.  2000.  Natural Vertical Transmission of Dengue  Viruses  in Aedes aegypti in  Southern  India. Trans. of Roy. Soc. Trop. Med.
Hyg . 94:507.
Thongrungkiat,  S.,  Maneekan,  P.,
Waspiyamongkol, L., Prumongkol, S. 2011. Prospective  Field  Study  of Transovarial Dengue Virus Transmission  by  Two  Different Forms  of Aedes  aegypti in  an Urban Area of Bangkok, Thailand.
Jur. of Vec. Ecology . 36:147-52.
Umniyati  S.R.,  Sutaryo,  Wahyono D.,  Artama  W.T.,  Mardihusodo
S.J.,  Soeyoko,  Mulyaningsih B.,  Utoro  T.  2008.  Application of monoclonal antibody DSSC7 for  detecting  dengue  infection in Aedes  aegypti based  on immunocytochemical streptavidin  biotin  peroxidase complex assay (ISBPC). Dengue Bull. 32: 83-98. Vilela, A.P.P., Figueiredo,  L. B., Dos Santos,  J.  R.,  Eiras,  A.  E., Bonjardim,  C.  A.,  Ferreira, P.C.P.,  Kroon,  E.  G.  2010. Dengue  virus  3  genotype  I  in
Aedes  aegypti mosquitoes  and eggs,
Brazil, 2005–2006.
Emerg.  Infect.  Dis .  16  (6): 989–92. World  Health  Organization  SEARO. 2017. Negleted Tropical Diseases .  Dengue.  New  Delhi.
India.