## ESTIMASI KADAR KLOROFIL DAN KADAR N DAUN JAGUNG MENGGUNAKAN CHLOROPHYLL CONTENT INDEX
Estimating Chlorophyll and N Content in Corn Leaves Based on Chlorophyll Content Index
Muhammad Ardiansyah 1,2) *, Budi Nugroho 1) , Khalimatus Sa’diyah 3)
1) Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya Lahan, Fakultas Pertanian, IPB University, Jl. Meranti – Kampus IPB
Dramaga, Bogor, West Java 16680
2) Center for Climate Risk and Opportunity Management in Southeast Asia and Pacific, IPB University, Jl. Pajajaran – Kampus IPB Baranangsiang, Bogor, West Java 16143
3) Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya Lahan, Fakultas Pertanian IPB University, Jl. Meranti – Kampus IPB Dramaga, Bogor, West Java 16680

## ABSTRACT
The chlorophyll content is related to the condition of the plant so that it can be used to estimate nutrient content in plants.  The  conventional  measurement  of  leaf  chlorophyll  content  is  time  consuming  and  expensive,  so  a  fast  and    efficient technology  is  needed.  This  study  aims  to  (a)  analyze  the  chlorophyll  content  index  (CCI)  and  leaf  chlorophyll  content  in  10 fertilizer dosage treatments including control and several growth phases of corn, (b) analyze the relationship between CCI and leaf chlorophyll content, and (c) analyze the relationship between CCI and N content. In this study, the CCI was measured with a chlorophyll meter, while the chlorophyll content and N content of leaves were measured using a spectrophotometer and the Kjehdahl method, respectively. The relationship between CCI on chlorophyll content and N content was analyzed at 4 and 8 weeks after planting (WAP) using a simple linear regression model. The results showed that the CCI curve pattern in all dosage treatments  was  similar  as  indicated  by  the  CCI  increasing  with  increasing  plant  age  and  then  decreasing  with  plant  aging. Fertilizer dose had a significant effect on CCI except at 2 and 3 WAP, where the highest CCI was found at fertilizer doses with high nutrient adequacy, i.e. 2 Ultra Gen (UG) + 2/3 Standard (STD) at 7 MST. The CCI and chlorophyll content had a positive linear relationship at  4 WAP and 8 WAP with a strong (r = 0.67) and very strong (r = 0.76) correlation. The relationship model between CCI and leaf N content showed a very strong positive correlation at 8 WAP with the equation N (%) = 0.019*CCI + 1.795 (r = 0.75). These results indicate that the measurement of the CCI with a chlorophyll meter can be used to estimate the N nutrient status of plant leaves properly.
Keywords: CCM-200 Plus, leaf chlorophyll, zea mays L

## ABSTRAK
Kadar klorofil berkaitan dengan kondisi tanaman, sehingga dapat digunakan untuk menaksir kadar hara pada tanaman. Pengukuran kadar klorofil daun secara konvensional membutuhkan waktu dan biaya, sehingga perlu dikembangkan  teknologi yang cepat dan efisien. Penelitian ini bertujuan untuk (a) menganalisa indek kadar klorofil ( Chlorofil Content Index , CCI) dan kadar klorofil daun pada 10 perlakuan dosis pupuk termasuk kontrol dan beberapa fase pertumbuhan jagung, (b) menganalisa hubungan antara CCI dan kadar klorofil daun, dan (c) menganalisa hubungan CCI dan kadar N.  Pada penelitian ini CCI diukur dengan klorofil meter, sedangkan kadar klorofil dan kadar N daun masing-masing diukur dengan spektrofotometer dan metode Kjeldahl . Hubungan antara CCI terhadap kadar klorofil dan kadar N dianalisis pada umur 4 dan 8 minggu setelah tanam (MST) dengan model regresi linear sederhana. Hasil penelitian menunjukan bahwa pola kurva CCI pada semua perlakuan dosis mirip yang ditunjukan oleh CCI semakin meningkat dengan bertambahnya umur tanaman dan kemudian menurun dengan menuanya tanaman. Dosis pupuk berpengaruh nyata pada CCI kecuali pada umur 2 dan 3 MST, dimana nilai tertinggi CCI temukan pada dosis  pupuk  dengan  kecukupan  hara  tinggi  yaitu  2  Ultra  Gen  (UG)  +  2/3  Standar  (STD)  pada  umur  7  MST.  CCI  dan  kadar klorofil memiliki hubungan linear positif pada umur 4 MST dan 8 MST dengan korelasi tergolong kuat (r = 0,67) dan sangat kuat (r = 0.76). Model hubungan CCI dengan kadar N daun menunjukan korealsi positif sangat kuat pada umur 8 MST dengan persamaan N (%) = 0,019*CCI + 1,795 (r = 0,75). Hasil ini  menunjukan bahwa pengukuran  CCI dengan klorofil  meter bisa digunakan untuk memperkirakan status hara N daun tanaman.
Kata Kunci: CCM-200 Plus, klorofil daun , zea mays L

## PENDAHULUAN
Tanaman  jagung  (Zea  mays  L.)  merupakan komoditi pangan ketiga terpenting setelah gandum dan padi sebagai sumber karbohidrat di Indonesia (Purwanto, 2008). Dari sisi kebutuhan, berdasarkan data dari Badan Ketahanan
Pangan  (BKP)  Kementrian  Pertanian,  kebutuhan  jagung tahun 2018 diperkirakan sebesar 15,5 juta ton pipilan kering (PK),  yaitu  untuk  pakan  ternak  sebesar  7,76  juta  ton  PK, peternak mandiri 2,52 juta ton PK, benih 120 ribu ton PK, dan  industri  pangan  4,76  juta  ton  PK  (Kementan,  2018). Lebih  jauh  Pusat  Data  dan  Sistem  Informasi  (Pusdatin)
*) Penulis Korespondensi: Telp. +62811112973; Email: ardysaja@gmail.com DOI: http://dx.doi.org/10.29244/jitl.24.2.53-61
Estimasi Kadar Klorofil dan N Daun Jagung Menggunakan Chlorophyll Content Index (Ardiansyah, M., B. Nugroho dan K. Sa’diyah)
Kementrian Pertanian melaporkan bawah luas panen jagung di Indonesia pada tahun 2020 mencapai 5,16 juta ha, yang menghasilkan sekitar 24,95 juta ton PK dengan kadar air 15 persen  (Kementan,  2021).  Oleh  karenanya  upaya  untuk mempertahankan ketersediaan jagung melalui peningkatan produksi  guna  memenuhi  kebutuhan  jagung  menjadi perhatian serius pemerintah.
Pertumbuhan  dan  perkembangan  tanaman  dapat dipengaruhi oleh faktor internal dan faktor eksternal. Faktor eksternal yang meliputi tanah, kelembaban, cahaya, dan air. Sementara  faktor  internal  meliputi  gen,  struktur  anatomi, hormon,  morfologi  tumbuhan,  serta  kadar  klorofil,  dan pigmen  lainnya.  Klorofil  merupakan  indikator  penting untuk kesehatan, evaluasi kemampuan fotosintesis tanaman dan status pertumbuhan. Menurut Putri et al. (2016) kadar klorofil  daun  berkaitan  dengan  kondisi  tanaman,  sehingga dapat digunakan untuk menentukan tambahan pupuk yang diperlukan  oleh  tanaman.  Pengukuran  klorofil  merupakan salah  satu  cara  yang  dapat  digunakan  untuk  mengukur tingkat pertumbuhan dan kesuburan tanaman yang nantinya dapat dikaitkan dengan prediksi produksi dari tanaman.
Penentuan kadar klorofil daun secara konvensional membutuhkan  waktu  yang  lama  dan  biaya  yang  mahal sehingga  diperlukan  teknologi  untuk  menduga  kadar klorofil  daun  secara  cepat  dan  efisien  yaitu  dengan menggunakan klorofil meter. Pengukuran tersebut menghasilkan Chlorophyl  Content  Index (CCI)  sebagai kadar  klorofil  relatif.  Alat  pengukur  klorofil  ini  biasanya mengukur transmisi dua panjang gelombang radiasi melalui daun  tanaman,  yaitu  spektrum  merah  pada  panjang gelombang 650 nm dan infra merah dekat ( near infra red , NIR) pada panjang gelombang sekitar 900 nm. Peningkatan konsentrasi  klorofil  meningkatkan  serapan  radiasi  merah. Menurut  Richmond  (2004)  energi  yang  digunakan  pada proses fotosintesis adalah dalam bentuk foton yang berasal dari  spektrum    cahaya  tersebut.  Energi  radiasi  matahari ditangkap  oleh  klorofil  kemudian  diubah  menjadi  energi kimia  melalui  proses  fotosintesis  (Suyatman,  2020). Tumbuhan memantulkan sebagian besar radiasi NIR karena pada  panjang  gelombang  tersebut  tidak  diserap  oleh fotoreseptor  dan  pantulan  radiasi  NIR  dapat    digunakan sebagai  panjang  gelombang  referensi  (Parry et  al., 2014). Kadar  klorofil  tumbuhan  menentukan  tinggi  rendahnya pantulan  gelombang  elektromagnetik  pada  spektrum  infra merah.  Semakin tinggi kadar klorofil maka reflektansi pada saluran NIR (700 nm – 1075 nm) juga semakin tinggi. Hal tersebut  terjadi  karena  NIR  tidak  dibutuhkan  oleh  klorofil dan  sebagian  besar  NIR  akan  dipantulkan.  Besar  atau kecilnya  NIR  yang  dipantulkan  dipengaruhi  oleh  struktur molekul  pada  tumbuhan.  Jika  kadar    molekul  organik termasuk  nitrogen  dan    air    lebih  banyak  dalam  suatu tumbuhan,  maka  semakin  banyak  NIR  yang  akan  diserap sehingga  reflektansi  spektral  semakin  kecil  (Afandi et  al., 2016).
Penentuan  kadar  klorofil  menggunakan  alat klorofil meter sudah banyak dilakukan. Penelitian Ghasemi et  al. (2011)  menunjukkan  hasil  bahwa  terdapat  korelasi positif dan linier antara data CCM-200 dengan klorofil A, B,  dan  klorofil  total.    Karena  kadar  klorofil  daun  sangat
terkait dengan status N tanaman, pengukuran klorofil meter dapat  digunakan  untuk  memantau  status  N  tanaman. Hubungan  antara  CCI  dan  kadar  klorofil  daun,  perlu dievaluasi  untuk  memantau  status  N  tanaman,    terutama ketika N diberikan dalam jumlah dan waktu yang berbeda. Pada penelitian ini dilakukan pengukuran CCI daun jagung pada  10  perlakuan  pupuk  berupa  penggunaan  jenis  serta dosis  pupuk  dan  hubungannya  dengan  kadar  klorofil  dan kadar N hasil pengukuran konvensional di laboratorium.
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari  uji  pupuk hayati cair. Data CCI  jagung pada umur 4 minggu setelah tanam  (MST)  dan  8  MST  digunakan  untuk  mengevaluasi kadar klorofil daun dan kadar N daun pada perlakuan pupuk yang  berbeda.    Tujuan  dari  penilitian  adalah  untuk:  (a) menganalisa  CCI  dan  kadar  klorofil  daun  pada  berbagai dosis pupuk dan fase pertumbuhan jagung, (2) menganalisa hubungan  antara  CCI  dan  kadar  klorofil  daun,  dan  (3) menganalisa  hubungan  CCI  dan  kadar  N  daun  pada berbagai dosis pupuk dan  fase pertumbuhan jagung.  Hasil penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan  informasi tentang manfaat klorofil meter untuk mengetahui CCI  dan hara tanaman di lapangan, sehingga dapat dilakukan respon cepat  mempertahankan  atau  memperbaiki  pertumbuhan tanaman, misalnya melalui tambahan pemupukan.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Lokasi
Percobaan lapang dilaksanakan dari Maret sampai Agustus  2021  di  kebun  percobaan  Cikabayan  IPB, Dramaga, Kabupaten Bogor, Provinsi Jawa Barat (Gambar 1).  Lokasi  penelitian  terletak  pada  ketinggian  192  m  dpl dengan curah hujan tahunan rata-rata adalah 3.930 mm dan curah  hujan  bulanan  rata-rata  tertinggi  adalah  414  mm (April) , dan terendah 180 mm (Agustus). Interpretasi dan analisis data dilakukan di Laboratorium Divisi Penginderaan  Jauh  dan  Informasi  Spasial,  sedangkan analisis kadar klorofil dan  kadar N daun di Laboratorium Kimia dan Kesuburan Tanah, Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya  Lahan,  Fakultas  Pertanian,  Institut  Pertanian Bogor.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah klorofil  meter  CCM-200  Plus,    yang  dikembangkan  oleh Opti  Sciences  dan  bekerja  dengan  cara  mengukur  serapan cahaya pada dua gelombang berbeda: 653 nm dan 931 nm (Gambar 2); Global Positioning System (GPS); dan aplikasi pendukung  seperti  Statistical  MiniTab  dan  ArcGIS  v10.3. Analisis  kadar    klorofil  dan  kadar-N  dilakukan  dengan menggunakan  serangkaian  alat  destruksi  dan  destilasi  di laboratorium.    Analisis  kadar  klorofil  memerlukan    bahan kimia  aceton  80%,  sedangkan  bahan  kimia  untuk  analisis kadar  N  adalah  H 2 SO 4 pekat,  campuran  Selenium,  NaOH 50%, H 3 BO 4 4% indikator Conway,  dan HCl  0,1  N yang telah dibakukan.

## Gambar 1. Lokasi penelitian di kebun percobaan Dramaga
Gambar 2 Alat klorofil meter CCM-200 Plus

## Desain Percobaan
Percobaan  disusun  dalam  Rancangan  Acak Kelompok (RAK) dengan 3 ulangan. Lahan berukuran lebih kurang 25  35 m 2 dibagi dalam  30 petak (10  3 ulangan) dengan  masing-masing    berukuran  7,5  3,3  m 2 . Jagung ditanam  pada tanggal 2 April 2021 dengan jarak tanam 70 x  35  cm  sehingga  terdapat  11  baris  tanaman/petak.  Data CCI,  kadar  klorofil  dan  kadar  N  dikumpulkan  dari  1  sub- petak seluas 1  1 m 2 yang terdiri 5 – 6 pokok jagung pada setiap  petak  perlakuan.  Standar  (STD)  dosis  pupuk  untuk
jagung  manis  ditetapkan  sebesar  300  kg  urea  /ha,  200  kg SP36 / ha dan 150 kg KCl / ha. Perlakuan terdiri dari pupuk hayati  Ultra Gen  (UG) dengan dosis : 8 l/ha (1 UG), 16 l/ha (2 UG) dan 24 l/ha (3UG) yang diberikan  murni atau dikombinasikan  dengan    1/3  STD,    2/3  STD,  ditambah dengan    1  STD  (tanpa  pupuk  hayati)  sehingga  terdapat  9 kombinasi perlakuan dan 1 kontrol tanpa pupuk (Tabel 1). Perlakuan pupuk hayati dilakukan dengan cara diencerkan 50  kali  dan  dikocorkan  ke  tanah  pada  1  minggu  sebelum tanam, umur 1 MST,  3 MST dan 5 MST.  Pupuk mineral diberikan    3  kali  masing-masing  1/3  dosis    dan  diberikan saat tanam,  30 April dan 21 Mei 2021.
Tabel 1. Kombinasi Perlakuan Perlakuan Keterangan Kontrol Tanpa pupuk 1 UG 8 lt Ultra Gel per ha 1 UG + ⅓ STD  8 lt Ultra Gel per ha + 1/3 (300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha) 1 UG+⅔ STD 8 lt Ultra Gel per ha + 2/3 (300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha) 2 UG 2 x 8 lt Ultra Gel per ha 2 UG+⅓ STD 2 x 8 lt Ultra Gel per ha + 1/3 (300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha) 2 UG+⅔ STD 2 x 8 lt Ultra Gel per ha + 2/3 (300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha) 3 UG 3 x 8 lt Ultra Gel per ha 3 UG+⅓ STD 3 x 8 lt Ultra Gel per ha + 1/3 (300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha) 1 STD
300 kg urea, 200 kg SP36 dan 150 kg KCl per ha

## Pengumpulan Data
Data CCI daun jagung dikumpulkan pada umur 2 MST – 8 MST yaitu 16 April , 23 April, 30 April, 7 Mei, 14 Mei,  21  Mei  dan  28  Mei  2021.  Data  diukur  pada  kondisi tanpa  awan  antara  jam    08.00  -  13.00  menggunakan Chlorophyll Meter Opti-Science CCM-200 Plus. Instrumen dihidupkan  dan  dikalibrasi  dengan  menjalankan  tombol kalibrasi  dan  menekan  lengan  sensor  ke  bawah  sampai bunyi beep .  Pengukuran  CCI  dilakukan  dengan  cara menjepit  bagian  tengah  daun  pada  sensor  CCM-200  Plus sampai  muncul  angka  konstan  di  monitornya.  Setiap perlakuan diukur nilai CCI–nya dari 6 tanaman pada setiap sub-petak  yang  kemudian  dihitung  nilai  rata-ratanya sehingga  didapatkan  satu    nilai  CCI  pada  setiap  petak perlakuan.
Contoh daun tanaman jagung diambil pada jagung umur 4 dan 8 MST untuk analisis kadar klorofil dan Kadar N  daun.    Contoh  daun  jagung  umur  4  MST  adalah  daun terakhir yang telah membuka sempurna dan terkena cahaya matahari,  dan  diambil  sebanyak  2  daun  setiap  petak percobaan.  Contoh  daun  jagung  umur  8  MST  masing- masing diambil 2 daun bendera (daun penyangga tongkol) per  petak  pengamatan.  Analisis  kadar  klorofil  dilakukan pada  daun  segar,  sedangkan  untuk  analisis  kadar  N  daun jagung dimasukkan dalam kantong kertas dan dikeringkan dengan oven.

## Analisa Kadar Klorofil Daun
Analisis  kadar  klorofil  mengacu  pada  metode Arnon (1949).  Seberat 1 g contoh daun segar dimasukkan dalam  mortar  ditambahkan  10  ml  80%  aceton  dingin  dan ditumbuk  hingga  halus.    Hasil  ekstraksi  dimasukkan  ke dalam tabung sentrifuse 15 ml, dikocok dan disentrifugasi pada kecepatan 3000 gaya G selama 10 menit. Supernatan hasil sentrifugasi diambil sebanyak 1 ml dan diencerkan 2 kali.  Selanjutnya  larutan  dibaca  nilai  absorbansinya  pada spektrofotometer  dengan  panjang  gelombang  646  nm  dan 663  nm.  Nilai  klorofil  total  dihitung  dengan  persamaan dibawah :
Klorofil total (mg/g) = (7.15 × A663) + (18.71 × A646)
dimana, A663 dan A646 adalah nilai absorbansi pada spektrofotometer  dengan  panjang  gelombang  663  nm  dan 646 nm.

## Analisa Kadar N Daun
Analisis  kadar  N  daun  menggunakan  metode Kjehdahl yang  terdiri  dari  proses  destruksi,  destilasi,  dan titrasi.  Contoh daun dikeringkan    di oven  pada suhu 70°C selama ±2 hari dan digiling halus hingga lolos saringan  40 mesh.  Sebanyak  0,2    contoh  tanaman  kering  dan  halus dimasukkan ke labu destruksi, ditambahkan 1 g  campuran Se dan 5 ml H 2 SO 4 pekat dan didestruksi pada ruang asam dengan suhu 320 – 400°C selama ± 2 jam  hingga berubah menjadi  larutan  bening  (kuning  kehijauan).  Selanjutnya ditambahkan  25  ml  aquades  ke  hasil  destruksi  dan dipindahkan secara kuantitatif ke labu Kjeldahl, ditambahkan  20  ml  NaOH  50%,    100  ml  aquades  dan didestilasi.    Destilat  ditampung  dalam  Erlenmeyer  250  ml yang berisi 25 ml H 3 BO 4 4% dan 5 tetes indikator Conway hingga volume destilat 75 – 100 ml. Titrasi dilakukan pada destilat dengan larutan 0.1 N  HCl yang sudah distandarisasi hingga  berubah  warna  dari  hijau  muda  menjadi  merah muda. Kadar N dihitung dengan persamaan berikut :
Kadar N-Total (%) =
(ml HCl (Vc-Vb) × N × 14 × 100 × fp)/(BKM(mg))
dimana :
Vc dan Vb = ml titar sampel dan blanko N = normalitas larutan fp = faktor pengenceran bila ada BKM = bobot kering oven 105°C sampel

## Analisis Pengaruh Dosis Pupuk terhadap CCI, Kadar Klorofil dan Kadar N
Data pengukuran CCI dari setiap petak percobaan dianalisis ragam. Dalam penelitian ini, uji Tukey pada taraf 5%  digunakan  untuk  membandingkan  pengaruh  dosis pupuk  terhadap  CCI,  kadar  klorofil  dan  kadar  N  daun menggunakan paket aplikasi MiniTab. Untuk memudahkan melihat  pola  CCI,  dilakukan  pengelompokkan  CCI  per perlakuan  dosis  pupuk  dengan  menggunakan  analisis gerombol menggunakan dendogram metode Euclidean .

## Analisis Hubungan antara CCI dengan Kadar Klorofil dan Kadar N
Model  regresi  linier  sederhana  digunakan  untuk melihat hubungan antara CCI terhadap kadar klorofil dan N daun  akibat  perlakuan  dosis  pupuk.  Untuk  menentukan kekuatan hubungan antara CCI dengan klorofil dan kadar N dievaluasi  dari  koefisien  determinasi  dan  korelasi.  Nilai koefisien  determinasi  (R 2 )  digunakan  untuk  mengetahui seberapa  besar  CCI  mempengaruhi  kadar  klorofil  dan  N,
sedangkan  koefisien  korelasi  (r)  digunakan  untuk mengetahui hubungan antar variabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Dinamika CCI dan Kadar Klorofil Daun Jagung pada Perlakuan Dosis Pupuk

## Respon dan Pola CCI Daun Jagung
Nilai  CCI    daun  jagung  dan  hasil  uji  Tukey pengaruh  perlakuan pemupukan  terhadap CCI yang diukur pada  umur 2 -10 MST disajikan  pada Tabel 2. Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan pemupukan berpengaruh tidak nyata terhadap CCI daun pada tanaman berumur  2  dan  3  MST.  Perlakuan  pemupukan  mulai berpengaruh nyata terhadap CCI pada 4, 5, 6, 7, 8, 9, dan 10 MST.  Hasil  penelitian  Syafruddin,  (2015)  menunjukkan bahwa serapan hara jagung rendah pada awal pertumbuhan jagung,  kemudian  meningkat  dengan  cepat  pada  fase
vegetatif  sampai  awal  generatif,  lalu  menurun  pada  fase pengisian biji. Hasil percobaan  menunjukkan bahwa dosis pupuk  berpengaruh  pada    CCI  baik  pada  fase  vegetative, generatif  maupun    produktif.  CCI  tertinggi  pada  semua umur tanaman ditemukan pada perlakuan dosis pupuk 2 × 8 lt Ultra Gel dan 2/3 dosis pupuk NPK standar bersamaan dengan  produksi  tongkol  dan  brangkasan  jagung  manis yang tinggi. Roy et al. (2006) menyatakan bahwa tanaman dapat  tumbuh  baik  dan  berproduksi  tinggi  jika  unsur  hara tanaman tersedia dan mencukupi.
Kurva CCI pada 10 perlakuan pupuk  pada   umur jagung 2 – 10 MST disajikan pada Gambar 3. Berdasarkan analisis  dendogram  kurva  tersebut  dapat  dikelompokan dalam  4  gerombol  ( cluster )  berdasarkan    nilai  CCI-nya. Gerombol 1 terdiri dari perlakuan kontrol, 1 UG, dan 2 UG; gerombol 2 adalah perlakuan 3 UG; gerombol 3 terdiri dari kelompok perlakuan l UG + ⅓ STD, 1 UG + ⅔ STD, 2 UG +  ⅓  STD,  dan  3  UG  +  ⅓  STD;  dan  gerombol  4  adalah perlakuan 2 UG + ⅔ STD dan 1 STD (Gambar 4).
Tabel 2. Hasil Uji Tukey pengaruh dosis pupuk pada nilai CCI pada umur 2 - 10 MST
Perlakuan MST 2 3 4* 5*
6* 7* 8* 9* 10* KONTROL 10,83 7,28 8,22c 14,35b 14,91b 18,44d 10,91c 14,41c 13,84bc 1 UG 12,36 9,68 10,36bc 18,64ab 17,42ab 20,25bcd 9,85c 14,00c 11,94c 2 UG 11,06 9,70 10,89bc 20,52ab 20,09ab 20,91bcd 10,18c 14,34c 14,25bc 3 UG 10,76 15,00 13,67abc 23,97ab 20,67ab 22,38abcd 12,75bc 16,40bc 16,15bc 1 UG + ⅓ STD  14,43  14,38 24,66a 25,97a 23,05ab 20,10cd 18,27abc 21,75abc 22,43abc 1 UG + ⅔ STD  12,77  14,77  18,64abc 25,73a 27,01a 30,97a 20,74abc 28,95a 23,89abc 2 UG + ⅓ STD  14,08  13,60 17,18a 24,44ab 23,36ab 26,01abcd 20,21abc 23,13abc 22,98abc 2 UG + ⅔ STD  13,48  15,33 21,71ab 28,79a 28,87a 29,03ab 26,53a 31,50a 29,34a 3 UG + ⅓ STD  12,73  14,14 19,76ab 23,91ab 23,38ab 28,26abc 19,77abc 25,07ab 25,49ab 1 STD 11,06 15,82 23,06 a 27,64 a 23,63 ab 30,73 a 24,02 ab 27,91 a 31,07 a
*angka yang diikuti huruf berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata pada α 5%
Gambar 3. Kurva index CCI pada 10 perlakuan pupuk menurut MST
Estimasi Kadar Klorofil dan N Daun Jagung Menggunakan Chlorophyll Content Index (Ardiansyah, M., B. Nugroho dan K. Sa’diyah)
Gambar 4. Analisis gerombol indek CCI dari 10 perlakuan dosis pupuk
Gerombol 1 merupakan kelompok perlakuan yang ditunjukkan  oleh  CCI  paling  rendah.  Menurut  Hidayah et al. (2019)  kadar  klorofil  pada  tanaman  mengalami penurunan dan peningkatan sejalan dengan kecukupan hara. Gerombol  2  ditunjukan  oleh  CCI  yang  lebih  tinggi  dari gerombol  1  karena  kecukupan  hara  pada  perlakuan  3  UG pada  gerombol  2  lebih  baik  dari  gerombol  1.  Perlakuan  3 UG merupakan perlakuan dengan dosis pupuk hayati 3 kali lebih  tinggi  dibandingkan  perlakuan  kontrol,  1  UG,  dan 2 UG  pada  gerombol  1.  Gerombol  3  ditunjukan  oleh  CCI lebih tinggi dari gerombol 1 dan 2 tetapi lebih rendah dari gerombol  4.  Secara  berurutan  CCI  pada  gerombol  3  dari terbesar sampai terkecil adalah perlakuan 1 UG + ⅔ STD, 3 UG + ⅓ STD, 2 UG + ⅓ STD, dan l + ⅓ STD. CCI tinggi pada gerombol ini menunjukkan kecukupan hara yang lebih baik  sehingga  berpengaruh  pada  nilai  CCI.    Meskipun demikian nilai CCI  fluktuatif menurut umur tanaman dan berpola  mirip  dengan  gerombol  1.  Gerombol  4 memperlihatkan  CCI  tertinggi,  dan  ditemukan  pada perlakuan  2  UG  +  ⅔  STD  disusul  1  STD.  Diduga kecukupan hara   pada perlakuan 2 UG + ⅔ STD lebih baik dari perlakuan  1 STD sehingga nilai CCI-nya lebih tinggi. Gambar 3 menunjukkan bahwa nilai CCI perlakuan 2 UG + ⅔ STD lebih stabil dibandingkan dengan perlakuan 1 STD, yang  indek  CCI-nya  naik  dan  turun  seiring  dengan  waktu pemberian  pupuk.  CCI  pada  perlakuan  1  STD  meningkat satu  minggu  setelah  pemupukan  dan  2  minggu  kemudian menurun  kembali.  Secara  keseluruhan  pada  umur  2  MST dan  3  MST    nilai  CCI  daun  rendah  dan  relatif  tidak terpengaruh  oleh  perlakuan  pupuk  karena  jagung    masih tergantung  pada endosperm biji.  CCI  meningkat  pada  5 MST, lalu menurun pada 6 MST, meningkat kembali pada 7 MST dan menurun pada 8 MST, dan kemudian meningkat kembali pada  9 MST setelah pemupukan  ke 2 dan 3  yang dilakukan pada umur 4 MST dan  8 MST.
Hasil  percobaan    menunjukan  CCI  pada  fase generatif (10 MST) lebih rendah dari fase vegetatif  umur 5 MST, 6 MST, 7MST dan 9 MST, tetapi lebih tinggi dari fase vegetative  umur  8  MST.  Dinamika  CCI  daun  dipengaruhi oleh  tingkat  perkembangan  tanaman  dan  translokasi  N. Penelitian Solikhah et al. (2019) menunjukkan bahwa kadar klorofil  meningkat  seiring  dengan  meningkatnya  umur tanaman  sampai  daun  berkembang  penuh,  kemudian menurun  menuanya  daun.  Lebih  lanjut  Setiawati et  al.
(2016)  menyatakan  bahwa  CCI  daun  tanaman  berkorelasi linier  dengan  kadar  klorofil  daun.  Efendi et  al. (2012) mengemukakan  bahwa  penurunan  CCI  sesudah  fase vegetatif,  akibat translokasi N dari daun ke biji. Pada fase vegetatif  jagung  mengakumulasi  N  dalam  jumlah  banyak untuk  pertumbuhan  organ  vegetatif,  kemudian  sebagian besar  N  dalam  jaringan  tanaman  ditranslokasi  ke  bagian generatif  pada  saat  tanaman    memasuki  fase  generaif, terutama  biji,  sehingga  pada  fase  generatif  nilai  klorofil daun jagung cenderung mengalami penurunan. (Lattanzi et al., 2005).

## Kadar Klorofil Daun Jagung Umur 4 MST dan 8 MST
Kadar klorofil daun jagung pada umur 4 MST dan 8 MST disajikan pada Tabel 3.  Secara umum kadar klorofil meningkat  dengan  meningkatnya  umur  dari  4  MST  ke  8 MST.  Secara  visual  hal  ini  teramati  dengan  warna  daun jagung umur 8 MST berwarna hijau tua, lebih tua dari warna daun pada umur 4 MST.  Kadar klorofil pada daun hijau tua 50% lebih tinggi daripada daun berwarna hijau lebih muda. Faktor  yang  mempengaruhi  pembentukan  klorofil  adalah genetik  tanaman,  cahaya,  dan  unsur  N,  Mg,  Fe  sebagai pembentuk dan katalis dalam sintesis klorofil (Solikhah et al. , 2019).
Tabel 3.  Hasil Uji Tukey pengaruh dosis pupuk pada kandungan klorofil daun jagung pada umur 4 MST dan 8 MST Perlakuan 4 MST (mg/g)* 8 MST (mg/g) KONTROL 12,42     d 19,55 1 UG 13,38   cd 20,16 2 UG 16,67abcd 15,89 3 UG 18,10  abc 26,08 1 UG + ⅓ STD 15,08  bcd 21,66 1 UG + ⅔ STD 14,70  bcd 24,29 2 UG + ⅓ STD 14,40  bcd 23,68 2 UG + ⅔ STD 15,81abcd 27,10 3 UG + ⅓ STD 20,28      a 28,55 1 STD 18,71    ab 27,86
*angka  yang  diikuti  huruf  berbeda  pada  kolom  yang  sama menunjukkan berbeda nyata pada α 5%
Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan pemupukan berpengaruh nyata pada kadar klorofil tanaman umur  4  MST,  sedangkan  pada  umur  8  MST  berpengaruh tidak  nyata.  Hasil  pengukuran  kadar  klorofil  pada  umur  4
MST menunjukkan bahwa kadar klorofil tertinggi diperoleh pada  perlakuan  3  UG  +  ⅓  STD  yang  nyata  lebih  tinggi dibandingkan perlakuan kontrol, 1 UG, 1 UG + ⅓ STD, 1 UG + ⅔ STD, dan 2 UG + ⅓ STD, tetapi tidak berbeda nyata dengan perlakuan, 2 UG, 2 UG + ⅔ STD, 3 UG, dan 1 STD. Sementara kontrol tidak berbeda nyata dengan 1 UG, 1 UG + ⅓ STD, 1 UG + ⅔ STD, 2 UG, 2 UG + ⅓ STD, dan 2 UG +  ⅔  STD,  sebaliknya  perlakuan  kontrol  berbeda  nyata dengan perlakuan 3 UG, 3 UG + ⅓ STD, dan 1 STD. Hal ini dapat disimpulkan bahwa umur tanaman dan kecukupan hara dapat mempengaruhi kadar klorofil.

## Hubungan CCI dengan Kadar Klorofil Daun
Hubungan antara CCI dengan kadar klorofil daun jagung dianalisis dengan model regresi linier pada umur 4 MST  (Gambar  5)  dan  8  MST  (Gambar  6).  Regresi  antara CCI  dan  kadar  klorofil  pada  umur  4  MST  membentuk persamaan : Kadar klorofil = 0,2688*CCI + 11,444 dengan koefisien  determinasi  (R 2 )  sebesar  0,44**  (r  =  0,67). Sementara, regresi CCI dengan kadar klorofil pada umur 8 MST membentuk persamaan: Kadar klorofil = 0,4388*CCI + 11,628 dengan R 2 0,57** (r = 0,76).
Koefisien  determinasi  model  regresi  linier  kadar klorofil  pada  umur  8  MST  lebih  tinggi  dibandingkan koefisien determinasi pada umur 4 MST (Gambar 5 dan 6). Selain itu, kisaran nilai kadar klorofil daun lebih lebar pada umur  8  MST  dibandingkan  4  MST.  Hal  ini  dikarenakan dalam  siklus  pertumbuhan  jagung  pada  umur  8  MST merupakan  puncak  pertumbuhan  dan  secara  fisiologis jagung  mulai  beralih  dari  fase  pertumbuhan  vegetatif  ke generatif,  yang  ditandai  dengan  mulai  munculnya  bunga jantan dan tongkol.  Selanjutnya, koefisien korelasi sebagai ukuran  dari  kedekatan  antar  CCI  dan  kadar    klorofil tergolong  kuat  pada  umur  4  MST  dengan  r  sebesar  0,67, sedangkan pada umur 8 MST tergolong sangat kuat dengan r sebesar 0,76 (Nugroho, 2005).  Selain itu, uji berpasangan CCI dan kadar  klorofil daun diperoleh hubungan yang linier satu sama lain, dimana hasil uji T berpasangan diperoleh T hitung lebih besar dari T tabel (Tabel 4).
Tabel 4.  Hasil Uji T berpasangan antara  CCI dan kadar klorofil
daun Parameter T-hitung T-tabel CCI-Kadar klorofil 4 MST 4,09 2,080 CCI-Kadar klorofil 8 MST 5,55 2,069
Gambar 5.  Hubungan  linier  indek  CCI  dan  kandungan  klorofil daun jagung pada 4 MST
Gambar 6.  Hubungan  linier  indek  CCI  dan  kandungan  klorofil daun jagung pada 8 MST

## Hubungan CCI dan Kadar N Daun
Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan pemupukan berpengaruh nyata pada kadar N  daun umur 8 MST  (Tabel  5).  Kadar  N  tertinggi  pada  umur  8  MST diperoleh pada perlakuan 2 UG + 2/3 STD sebesar 2,33 % yang  nyata  lebih  tinggi  dibandingkan  perlakuan  3  UG, sebaliknya pada umur 4 MST perlakuan berpengaruh tidak nyata pada kadar N daun. Kisaran kadar N dalam daun pada umur  8  MST  lebih  kecil  dibandingkan  4  MST.  Hal  ini menunjukkan bahwa pada fase vegetatif jagung mengakumulasi banyak N pada organ vegetatif, kemudian sebagian  besar  N  tersebut  ditranslokasikan  ke  bagian generatif, terutama biji  seperti dikemukakan sebelumnya.
Hubungan CCI dengan kadar N daun pada 8 MST dengan  model  regresi  linear  membentuk  persamaan:  N  = 0,019*CCI    +  1,795  (Gambar  7)  dengan  koefisien determinan  R 2 sebesar  0,58  (58%)  atau  koefisien  korelasi sebesar  0,75.  Menurut  Nugroho  (2015)  suatu  model hubungan  dengan  koefisien  korelasi  lebih  besar  dari  0,71 sampai 0,90 tergolong sangat kuat, dengan demikian dapat disimpulkan  bahwa  korelasi  antara  CCI  dengan  kadar  N daun  pada  8  MST  tergolong  sangat  kuat.    Hasil  tersebut diperkuat dengan hasil uji T dua contoh berpasangan yang menunjukkan  bahwa  CCI  dan  kadar  N  membentuk persamaan linier dengan korelasi sangat kuat.  Lotfiomran et  al. (2016)  menyatakan  bahwa  CCI  dan  kadar  N  daun berkorelasi  positif  kuat  satu  sama  lain.  Dengan  demikian CCI  sensitif  terhadap  perubahan  klorofil  dan  kadar  N sehingga  CCI  dapat  dipertimbangkan  untuk  digunakan memperkirakan kadar N daun tanaman.  Padilla et al. (2018) mengkonfirmasi  bahwa  pengukuran  CCI  dengan  klorofil meter dapat digunakan untuk  memantau status N tanaman karena  kadar  klorofil  daun  sangat  terkait  dengan  kadar  N tanaman.
Tabel 5.  Hasil  Uji  Tukey  pengaruh  dosis  pupuk  pada  kadar  N
daun jagung pada umur 4 MST dan 8 MST Perlakuan 4 MST (%) 8 MST (%)* KONTROL 2.59 2.12ab 1 UG 2.67 1.90ab 2 UG 2.53 2.02ab 3 UG 2.55 1.72  b 1 UG + ⅓ STD 2.15 2.20ab 1 UG + ⅔ STD 2.52 2.27  a 2 UG + ⅓ STD 2.38 2.16ab 2 UG + ⅔ STD 2.58 2.33  a 3 UG + ⅓ STD 2.48 2.32  a 1 STD 2.53 2.30  a
Estimasi Kadar Klorofil dan N Daun Jagung Menggunakan Chlorophyll Content Index (Ardiansyah, M., B. Nugroho dan K. Sa’diyah)
Gambar 7.  Hubungan linier indek CCI dan kadar N daun jagung pada 8 MST

## SIMPULAN
Pola  kurva  CCI  daun  jagung  menunjukkan  CCI semakin  meningkat  dengan  bertambahnya  umur  tanaman dan kemudian menurun dengan menuanya tanaman. Dosis pupuk berpengaruh nyata pada CCI kecuali pada umur 2 dan 3  MST,  nilai  CCI  tinggi  pada  berkesuaian  dengan kecukupan  hara  tinggi  dan  rendah  berkesuaian  dengan kecukupan  hara  rendah  (perlakuan  kontrol).  CCI  tertinggi dicapai  pada  jagung  umur  7  MST  pada  perlakuan  dosis kombinasi 2 × 8 lt Ultra Gen dan 2/3 pupuk NPK standar per ha.
CCI  dan  kadar  klorofil  pada  umur  4  MST  dan  8 MST  memilki  hubungan  linear  positif  dengan  korelasi tergolong  kuat  (umur  4  MST)  dan  sangat  kuat  (umur  8 MST). CCI sensitif terhadap perubahan klorofil daun.
Model  hubungan  CCI  dengan  kadar  N  daun berkorealsi  positif  yang  sangat  kuat  pada  jagung  umur  8 MST.  CCI  sensitif  terhadap  kadar  N  daun,  sehingga pengukuran  CCI  dengan  klorofil  meter  bisa  digunakan untuk menduga status hara N daun tanaman jagung.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Para  penulis  menyampaikan  ucapan  terima  kasih kepada Departemen Ilmu Tanah dan Sumber Daya Lahan, Fakultas  Pertanian,  IPB  University,  khususnya  Divisi Penginderaan Jauh dan Informasi Spasial serta Divisi Kimia dan Kesuburan Tanah,  yang telah  memfasilitasi penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Afandi,  S.D.,  Y.  Herdiyeni,  L.B.  Prasetyo,  W.  Hasbi,  K. Arai  and  H.  Okumura.  2016.  Nitrogen  content estimation of rice crop based on near infrared (NIR) reflectance  using  artificial  neural  network  (ANN). Procedia Environmental Sciences , 33:63–69.
Arnon, D.I.  1949.  Copper enxymes in isolated chloroplasts polyphenolexidase in Beta vugaris. Plant Physiol. . 24 (1): 1 -15
Efendi,  R., Suwardi, Syafruddin  dan  Zubachtirodin. 2012. Penentuan  takaran  pupuk  nitrogen  pada  tanaman jagung hibrida berdasarkan klorofil meter dan bagan warna  daun. Jurnal  Penelitian  Pertanian  Tanaman Pangan , 31(1): 27–34.
Ghasemi,  M.,  K.  Ghasemi,  A.  Yadollahi,  S.  Ghasemi  and S.S.  Khorrami.  2011.  Estimate  of  leaf  chlorophyll
and  nitrogen  content  in  Asian  Pear  (Pyrus  serotina Rehd.)  by  CCM-200. Notulae  Scientia  Biologicae , 3(1): 91–94.
Hidayah,  F.,  S.  Santosa  dan  R.E.  Putri.  2019.  Model prediksi  hasil  panen  berdasarkan  pengukuran  non- destruktif  nilai  klorofil  tanaman  padi. Agritech. , 39(4): 289-297.
[KEMENTAN] Kementrian Pertanian Republik Indonesia. 2018. Kementan  Pastikan  Produksi  Jagung Nasional Surplus . https://www.pertanian.go.id/home/ ?show=news&act=view&id=3395.
[KEMENTAN] Kementrian Pertanian Republik Indonesia. 2021. Inilah 10 Provinsi Produsen Jagung Terbesar Indonesia . https://www.pertanian.go.id/home/ ?show=news&act=view&id=4639#:~:text=Berdasa rkan%20laporan%20prognosa%20penghitungan%2 0Pusat,mencapai%205%2C16%20juta%20ha.
Lattanzi,  F.A.,  H.  Schnyder  and  B.  Thornton.  2005.  The sources  of  carbon  and  nitrogen  supplying  leaf growth.  Assessment  of  the  role  of  stores  with compartmental  models. Plant  Physiol. ,  137:  383– 395.
Lotfiomran, N., M. Köhl and J. Fromm. 2016. Interaction effect  between  elevated  CO 2 and  fertilization  on biomass,  gas  exchange  and  C/N  ratio  of  European Beech (Fagus sylvatica L.). Plants , 5(3) 38: 1-13. Nugroho, B.A. 2005. Strategi Jitu Memilih Metode Statistik Penelitian  dengan  SPSS.  Andi,  Yogyakarta.  131 hlm.
Padilla, F.M., R. de Souza, M.T. Peña-Fleitas, M. Gallardo, C.  Giménez  and  R.B.  Thompson.  2018.  Different responses  of  various  chlorophyll  meters  to increasing nitrogen  supply  in  Sweet Pepper. Front. Plant Sci. , 9:1752
Parry,  C.,  J.M.  Blonquist  and  B.  Bugbee.  2014.  In  situ measurement of leaf chlorophyll concentration:analysis of the optical/absolute relationship. Plant Cell and Environment , 37:2508– 2520.
Purwanto, S. 2008. Perkembangan Produksi dan Kebijakan dalam  Peningkatan  Produksi  Jagung.  Direktorat Budi Daya Serealia. Bogor (ID): Direktorat Jenderal Tanaman Pangan
Putri,  R.E.,  A.  Yahya,  N.M.  Adam  and  S.A.  Aziz.  2016. Variability of rice yield with respect to crop health. Jurnal Teknologi , 78(1–2):79–85.
Richmond,  A.  2004. Handbook  of  Microalgal  Culture: Biotechnology  and  Applied  Phycology .  Blackwell Science Ltd, Oxford. 566 p.
Roy, R.N., A. Finck, G.J. Blair and H.L.S. Tandon. 2006. Plant  nutrition  for  food  security:  A  guide  for integrated nutrient management . FAO fertilizer and plant nutrition bulletin 16, Rome Italy. 347 pp Syafruddin.  2015.  Manajemen  pemupukan  nitrogen  pada tanaman  jagung. Jurnal  Litbang  Pertanian , 34(3):105–116.
Setiawati, T., I.E. Saragih, M. Nurzaman and A.Z. Mutaqin. 2016.  Analisis  Kadar  Klorofil  dan  Luas  Daun Lampeni  (Ardisia  humilis  Thunberg)  pada  Tingkat Perkembangan  yang  Berbeda  di  Cagar  Alam Pangandaran., Jatinangor: 27–28 Oktober 2016. Hal. 122–126.
Solikhah  R.,  E.  Purwantoyo  dan  E.  Rudyatmi.  2019.
Aktivitas  antioksidan  dan  kadar  klorofil  kultivar singkong  di  daerah  Wonosobo. Life  Science ,  8(1): 86–95.
Suyatman.  2020.  Menyelidiki  energi  pada  fotosintesis tumbuhan. Jurnal Pendidikan IPA , 9(2): 125-131.