## JURNAL RESPIRASI

## JR
Vol. 1 No. 3 September 2015
Pengaruh  Jintan  Hitam  ( Nigella  Sativa )  pada  Konversi  Sputum  dan IFN- γ Penderita Tuberkulosis Paru yang Mendapat OAT Kategori I pada Akhir Minggu Kedua Fase Intensif

## Ahmad Nurdin, Helmia Hasan
Departemen Pulmonologi dan Ilmu Kedokteran Respirasi, Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga/RSUD Dr. Soetomo

## abstract
Background . Primary resistance is the resistance that occurs in patients who have never received treatment OAT or had ever received treatment OAT is less than 1 month. The incidence of primary MDR in Central Java in 2006 2.07%. Extrapulmonary TB about 15-20% of all cases of TB, and TB lymphadenitis is the highest form (35% of all extrapulmonary TB). Patients with decreased immune systems (SLE) can increase the incidence of TB. Research in Spain get 6x higher TB incidence in patients with SLE. Case . We present the case of 19 year old woman SLE who received treatment for 11 months whose came with shortness of breath and chronic cough since 2 month prior to admission. In physical examination we found right and left submandibula lymphonodi enlargement as solid, slightly mobile nodule with diameter 3 cm. Chest X ray showed lung inflammation which suspicion of specific process and minimal left pleural effusion, and concluded as pulmonary TB. FNAB confirmed lymphadenitis TB with granulomatous inflammation. One of AFB result is positive and Gene Xpert is M.tb positive with rifampicin resistant that make this patient categorized as primary MDR TB with lymphaden itis TB. This patient received Pirazinamid 1500 mg, Ethambutol 800 mg, Kanamicin 750 mg, Levofloxacin 750 mg, Ethionamide 500 mg, Cicloserin 500 mg, and B6 100 mg. Conclusion . MDR TB in general occur in patients with a history of OAT previous TB (MDR TB secondary). Primary MDR TB with lymphadenitis tb is a rare case, but can occur on the condition that decreases the immune system, one of SLE. This involves multiple immune disorders caused by the use of long-term immunosuppressive therapy.
Key words: primary resistance, lymphadenitis TB, SLE
Correspondence: Ahmad Nurdin, Departemen Pulmonologi dan Ilmu Kedokteran Respirasi, Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga/ RSUD Dr. Soetomo. Jl. Mayjen. Prof. Dr. Moestopo 6-8 Surabaya 60286. E-mail: ahmad.nurdin@gmail.com

## PENDAHULUAN
Tuberkulosis  (TB)  merupakan  masalah  kesehatan masyarakat  yang  penting  di  dunia  saat  ini.  Diperkirakan sekitar sepertiga penduduk dunia telah terinfeksi oleh kuman Micobakterium  tuberculosis  (M.tb).  Pada  tahun  1992, World  Health  Organization  (WHO)  telah  mencanangkan TB sebagai Global Emergency. Dari hasil data WHO tahun 2012,  Indonesia  menempati  peringkat  keempat  negara  di dunia  dengan  jumlah  0,4-0,5  juta  penderita  tuberkulosis setelah  India  (2-2,5  juta  penderita),  Cina  (0,9-1,1  juta penderita) dan Afrika Selatan (0,4-0,6 juta penderita). 1,2 TB Paru BTA positif adalah bentuk TB yang infeksius dan penyebab utama penyebaran penyakit. Penderita yang tidak diobati akan menularkan kepada 10-15 orang lain tiap tahun. Penularan ini tergantung dari bacillary load, adanya
kontak  dengan  pasien  dan  lamanya  waktu  pengobatan OAT. 3 Beberapa  peneliti  mendapatkan  penurunan  jumlah kuman  BTA  yang  cepat  setelah  mendapat  terapi  OAT selama  lebih  kurang  2  minggu. 4 Mitchison  dkk  melaporkan bahwa  80-85%  penderita  TB  paru  menjadi  tidak  infeksius setelah  sekitar 2  minggu pengobatan OAT, sedangkan Wang dkk  memperkirakan  lebih  dari  50%  penderita  tuberkulosis masih  infeksius  setelah  2  minggu  pengobatan. 5,6 Hutapea T  dikutip  dari  Chrisdiono  di  BP4  tahun  1998  melaporkan tingkat  konversi  sputum  dengan  kombinasi  4  macam obat  setelah  pengobatan  2  bulan  sebesar  68%,  sedangkan penelitian Indah Nur di Poli Paru RSUD dr Soetomo tahun 2000 sebesar 64%. 7
Micobacterium  tuberculosis  merupakan  bakteri fakultatif  intraseluler.  Dalam  menghadapi  mikroorganisme intraseluler, respons imun yang terjadi adalah respons
imun  seluler.  Sel  T  helper-1  (Th1)  sangat  berperan  pada sistem  pertahanan  tubuh  terutama  dalam  menghadapi infeksi  bakteri  intraselular.  Salah  satu  ciri  mikroorganisme intraseluler  adalah  kemampuannya  untuk  dapat  hidup  bahkan berkembangbiak  dalam  fagosit. 8 Pada  sistem  imun  seluler, sel  T  yang  terstimulasi  oleh  antigen  akan  mengaktivasi makrofag  untuk  menghancurkan  mikroorganisme  yang difagosit. 8 Makrofag  melaksanakan  sebagian  besar  fungsi efektornya  hanya  setelah  sel  itu  diaktivasi  oleh  macrophage activating  factors  (MAF).  Aktivasi  tersebut  dapat mengkonversi  oksigen  molekul  menjadi  reactive  oxygen intermediate  (ROI)  dan  memproduksi  Nitric  Oxide  (NO) yang  berperan  penting  sebagai  mediator  sitotoksik  terhadap sel tumor dan mikroorganisme intraseluler. 8,9,10
Micobacterium  tuberculosis  dapat  menginduksi  produksi ROS  (Reactive  Oxygen  Species).  Hal  ini  akan  memberikan kontribusi  terhadap  kondisi  immunosupresi,  terutama pada  mereka  dengan  gangguan  kapasitas  antioksidan. Selain  itu  kondisi  malnutrisi  yang  umumnya  terdapat  pada pasien  dengan  TB  dapat  menambah  gangguan  kapasitas antioksidan. Pasien  TB  tidak  dapat  menghasilkan  jumlah antioksidan  yang  cukup  untuk  mengatasi  stres  oksidatif yang  meningkat  di  dalamnya.  Oleh  karena  itu,  dianjurkan pemberian  suplemen  antioksidan  untuk  melindungi  mereka dari serangan radikal bebas. 9,10
Penggunaan  imunomodulator  menarik  perhatian  untuk menbantu  mengatasi  TB,  terutama  karena  peningkatan persentase  penderita  yang  resisten  terhadap  OAT. Imunomodulator  diharapkan  dapat  digunakan  untuk memperbaiki  atau  membangun  kembali  sistem  imun  yang kurang  sempurna  atau  mengalami  disfungsi. 11 Nigella sativa  atau  yang  dikenal  sebagai  jintan  hitam  telah  lama digunakan  untuk  meningkatkan  kesehatan  dan  melawan penyakit. Kandungan  kimia  Nigella  sativa  terdiri  atas bermacam  zat  tapi  yang  telah  diketahui  memiliki  peran secara  farmakologis  adalah  thymoquinone  dan  asam linoleat. 12 El-Kadi  dan  Kandil  membuktikan  bahwa Nigella sativa dapat meningkatkan populasi sel T helper (Th) serta rasio sel Thelper terhadap sel T suppressor (Ts)  yang  rendah. 13 Nigella  sativa  juga  dilaporkan  dapat meningkatkan  produksi  IL-3  dan  IL-1ß. 15 Penelitian  yang dilakukan  oleh  Randhawa  secara  in  vitro  melaporkan  bahwa thymoquinone  memiliki  aktifitas  yang  layak  sebagai  anti tuberkulosis  dengan  MIC  20  mikrogram/ml. 16 Berbagai penelitian  yang  telah  membuktikan  efek  Nigella  sativa dalam  menstimulasi  sitokin  MAF  mengindikasikan  potensi Nigella  sativa  dalam  meningkatkan  fungsi  makrofag  yang berperan dalam sistem imun seluler. 17
Berdasarkan  data-data  tersebut,  maka  pada  penelitian ini  akan  dilakukan  pemberian  jintan  hitam  (Nigella sativa)  sebagai  suplemen  pada  penderita  TB  Paru guna  mengoptimalkan  hasil  pengobatan.  Penambahan jintan  hitam  sebagai  antioksidan,  antimikroba  dan imunomodulator  alami  pada  penderita  TB  Paru  BTA positif diharapkan dapat membantu terjadinya konversi
Jurnal Respirasi (JR), Vol. 1. No. 3 September 2015: 73 - 80
sputum  dan  meningkatkan  kadar  IFN-γ  sehingga  dapat mempercepat  respons  kesembuhan  dan  mengurangi  risiko penularan terhadap orang lain.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental dengan  desain  penelitian  Randomized  Controlled  Trial  Pre Test-Post  Test  Control Group Design  yang teknik dalam pengambilan  sampel  yaitu  dengan  cara  random  sampling, yakni pemilihan secara acak  dari sampel  yang telah ada, jenisnya  adalah  secara  acak  sederhana  (simple  random sampling).  Sampel  penelitiannya  adalah  pasien  TB  Paru BTA  positif  kasus  baru  di  ruang rawat  jalan  maupun  rawat inap  RSUD  Dr.  Soetomo  Surabaya  yang  memenuhi  kriteria inklusi.  Kriteria  inklusi  adalah  pasien  TB Paru  BTA  positif kasus  baru,  bersedia  menjadi  subyek  penelitian  dengan menandatangani  surat  persetujuan,  berjenis  kelamin  laki- laki dan  perempuan, usia diatas 15 tahun,  sedangkan kriteria eksklusi  adalah  penderita  dengan  HIV/AIDS,  IMT  sangat kurus  (<17  kg/m 2 ),  penderita  dengan  DM,  penderita  hamil dan  kondisi  imunosupresi  (penyakit  autoimun,  keganasan, terapi steroid dosis tinggi).
Instrumen  yang  digunakan  adalah  Penelitian  ini menggunakan  spuit  10  cc,  elastic  band,  tabung  vaculab, pot  sputum,  ELISA  kit  IFN-γ,  Jintan  hitam  kapsul  minyak dosis 2  500 mg/hari, lembar pengumpul data, alat timbang berat  badan  dan  tinggi  badan.  Sistem  kerja  penelitian yang  pertama  adalah;  masukkan  jarum  ke  dalam  vena, sambungkan  jarum  dengan  tube  dan  diisi  dengan  darah sanple,  lepaskan  elastic  band  dari  lengan,  letakkan  kapas pada  bekas  suntikan,  kedua;  pemeriksaan  kadar  IFN-γ. Kadar  IFN-γ  diukur  dengan  menggunakan  ELISA  (Enzym- linked  immunosorbent  assay)  yang  dinyatakan  dalam  satuan pg/ml  dan  yang  ketiga  adalah;  pemeriksaan  hapusan  sputum BTA  dilakukan  pada  awal  penegakan  diagnosis  dan  minggu kedua fase intensif.
Pasien  diminta  membatukkan  sputum  secara  spontan ke  dalam  3  pot  sputum.  Bila  penderita  tidak  mampu membatukkan  akan  dilakukan  induksi  sputum.  Sputum yang  diambil  untuk  pemeriksaan  adalah  sewaktu,  pagi hari  dan  sewaktu. Sputum dari  batuk  spontan diberi  label nama,  umur,  nomer  register,  tanggal  pengambilan  spesimen lalu  dikirim  ke  Bagian  Mikrobiologi  untuk  dilakukan pemeriksaan  pengecatan  sputum  dengan  metode  Ziehl Nielsen.  Hasil  pengecatan  Ziehl  Nielsen  dibaca  dengan skala IUALTD.
Analisis  data  menggunakan  SPSS  15.0  untuk membuktikan  pengaruh  pemberian  jintan  hitam  (Nigella sativa)  terhadap  konversi  sputum  BTA  dan  peningkatan kadar  IFN-γ  jika  ditambahkan  pada  terapi  OAT  standar. Analisis  yang  digunakan  untuk  menguji  hipotesis  dilakukan uji t-berpasangan (paired T-test).

## HASIL
Subyek pada penelitian ini adalah pasien TB Paru BTA positif yang diterapi OAT kategori 1 dan suplemen Jintan Hitam  (Nigella  sativa)  sebagai  kelompok  perlakuan  dan pasien TB Paru BTA positif yang diterapi OAT kategori 1 saja tanpa suplemen Jintan Hitam (Nigella sativa) sebagai kelompok  kontrol,  dengan  jumlah  sampel  masing-masing sebanyak 28 pasien. Berikut adalah karakteristik pasien TB Paru BTA positif subyek penelitian pada kelompok perlakuan dan kelompok control dapat dilihat pada tabel 1.
Pada  kelompok  kontrol  terdapat  19  (67,9%)  pasien laki-laki dan 9 (32,1%) pasien perempuan. Pada kelompok perlakuan Jintan Hitam terdapat 17 (60,7%) pasien laki-laki dan  11  (39,3%)  pasien  perempuan.  Hasil  chi-square  test menunjukkan  bahwa  tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna proporsi  jenis  kelamin  antara  kelompok  kontrol  dan kelompok perlakuan  Jintan  Hitam dengan  nilai p sebesar 0,781 >  0,05. Rerata usia pada  kelompok  kontrol  adalah 37,9  tahun,  dengan  umur  termuda  19  tahun  dan  umur tertua  57  tahun,  kelompok  usia  terbanyak  adalah  21-30 tahun  yaitu 9 (32,1%) pasien. Rerata usia pada kelompok perlakuan  Jintan  Hitam  adalah  33,4 tahun, dengan  umur termuda 18 tahun dan umur tertua 57 tahun, kelompok usia terbanyak  adalah  21-30  tahun  yaitu  10  (35,7%)  pasien. Hasil  independent  t  test  menunjukkan  bahwa  tidak  ada perbedaan  yang  bermakna  antara  usia  kelompok  kontrol dan usia kelompok perlakuan Jintan Hitam dengan nilai p sebesar 0,144 > 0,05. Rerata IMT pada kelompok kontrol adalah  18,7,  dengan  nilai  IMT  terendah  17,1  dan  nilai IMT  tertinggi  21,3,  terdapat  14  (50%)  pasien  termasuk BB  kurang  dan  14  (50%)  pasien  termasuk  BB  normal. Rerata IMT pada kelompok perlakuan Jintan Hitam
Tabel  1 .      Karakteristik  Pasien  TB  Paru  BTA  Positif  Subjek
Penelitian Kelompok Karakteristik Perlakuan
Nilai p
adalah  18,6,  dengan  nilai  IMT  terendah  17,1  dan  nilai IMT  tertinggi  21,2,  terdapat  15  (53,6%)  pasien  termasuk BB kurang dan 13 (46,4%) pasien termasuk BB  normal. Hasil  independent  t  test  menunjukkan  bahwa  tidak  ada perbedaan  yang  bermakna  antara  IMT  kelompok  kontrol dan IMT kelompok perlakuan Jintan Hitam dengan nilai p sebesar 0,643 > 0,05.
Berdasarkan  hasil  uji  normalitas  data  variabel  penelitian dengan  kolmogorov  smirnov  test  (lihat  tabel  2)  didapatkan semua  data  variabel  penelitian  berdistribusi  normal  dengan nilai  p  >  0,05.  Berdasarkan  perbandingan  kadar  IFN-γ antara  sebelum  terapi  dan  setelah  terapi  pada  kelompok kontrol  dan  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam  (lihat tabel  3)  disimpulkan  bahwa  pada  kelompok  kontrol rerata  kadar  IFN-γ  sebelum  terapi  adalah  54,7  pg/mL, dengan  nilai  terendah  34,3  pg/mL  dan  nilai  tertinggi  87,1 pg/mL.  Sedangkan  rerata kadar IFN-γ  setelah  terapi  adalah 57,3  pg/mL,  dengan  nilai  terendah  34  pg/mL  dan  nilai tertinggi  87,9  pg/mL.  Hasil  paired  t  test  pada  kelompok kontrol  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  yang  bermakna antara  kadar  IFN-γ  sebelum  terapi  dan  setelah  terapi  dengan nilai p sebesar 0,015 < 0,05. Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif  yang  diterapi  OAT  kategori  1 tanpa pemberian suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa),  setelah  dilakukan terapi mempunyai kadar IFN-γ yang lebih tinggi.
Pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam  rerata  kadar IFN-γ  sebelum  terapi  adalah  56,7  pg/mL,  dengan  nilai terendah  23,8  pg/mL  dan  nilai  tertinggi  92,6  pg/mL. Sedangkan  rerata  kadar  IFN-γ  setelah  terapi  adalah 65,7 pg/mL, dengan nilai terendah 37,5 pg/mL dan  nilai tertinggi  99,9  pg/mL.  Hasil  paired  t  test  pada  kelompok perlakuan  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  yang bermakna antara kadar IFN-γ sebelum terapi dan setelah terapi dengan  nilai p sebesar 0,000 < 0,05. Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif  yang diterapi OAT kategori 1 dengan  pemberian  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa), setelah  dilakukan  terapi  mempunyai  kadar  IFN-γ  yang lebih tinggi.
Kontrol Jintan Hitam Tabel 2. Kolmogorov Smirnov Test Jenis Kelamin Laki-laki 19 (67,9%) Perempuan 9 (32,1%) Usia (mean ± SD) 37,9 ± 11,8 17 (60,7%) 0,781 11 (39,3%) Variabel Kontrol 33,4 ± 10,6 0,144 Nilai p Perlakuan  Jintan Hitam 16-20 tahun 1 (3,6%) 21-30 tahun 9 (32,1%) 31-40 tahun 6 (21,4%) 41-50 tahun 6 (21,4%) 51-60 tahun 6 (21,4%) IMT (mean ± SD) 18,7 ± 1,2 BB kurang 14 (50,0%) BB normal 14 (50,0%) Kelebihan BB 0 (0,0%) 2 (7,1%) Usia (tahun) 0,877 0,814 10 (35,7%) IMT 0,618 0,941 9 (32,1%) Kadar IFN- γ Sebelum Terapi 0,289 0,530 4 (14,3%) (pg/mL) 3 (10,7%) Kadar IFN- γ Setelah Terapi 0,507 0,888 18,6 ± 1,1 0,643 (pg/mL) 15 (53,6%) Perubahan Kadar IFN- γ (pg/ 0,374 0,126 13 (46,4%) mL) 0 (0,0%)
Tabel 3. Perbandingan kadar IFN-γ antara sebelum terapi dan setelah terapi
Kelompok Kadar IFN- γ (pg/mL) Kontrol Perlakuan Jintan Hitam mean ± SD Nilai p mean ± SD Nilai p Sebelum Terapi 54,7 ± 15,2 0,015 56,7 ± 18,3 0,000 Setelah Terapi 57,3 ± 15,9 65,7 ± 17,4 Tabel 4 .   Perbandingan sputum BTA sebelum dan setelah terapi pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan Jintan Hitam
Kelompok Sputum BTA Kontrol Perlakuan Jintan Hitam Positif Negatif Nilai p Positif Negatif Nilai p Sebelum Terapi 28 (100,0%) 0 (0,0%) 0,000 28 (100,0%) 0 (0,0%) 0,000 Setelah Terapi 9 (32,1%) 19 (67,9%) 3 (10,7%) 25 (89,3%)
Tabel 5. Perbandingan perubahan kadar IFN-γ antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan Jintan Hitam
Kelompok Perubahan Kadar IFN-γ (pg/mL) mean ± SD Nilai p Kontrol 2,5 ± 5,1 0,000 Perlakuan Jintan Hitam 9,0 ± 7,5 Tabel 6. Perbandingan perubahan sputum BTA antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan Jintan Hitam Sputum BTA Tidak Terjadi Konversi Sputum Perubahan Sputum BTA Terjadi Konversi Sputum Nilai p Kontrol 9 (32,1%) 19 (67,9%) 0,101 Perlakuan Jintan Hitam 3 (10,7%) 25 (89,3%) Tabel 7. Hubungan perubahan kadar IFN-γ dengan jenis kelamin, usia dan IMT
Perubahan Kadar IFN- γ Nilai p Kontrol Perlakuan Jintan Hitam Chi-Square Test Jenis Kelamin 1,000 1,000 Pearson Correlation Usia 0,004 0,463 IMT 0,881 0,745
Berdasarkan  perbandingan  sputum  BTA  sebelum dan  setelah terapi  pada kelompok kontrol dan  kelompok perlakuan  Jintan Hitam (lihat tabel  4)  didapatkan  bahwa pada kelompok kontrol, sebelum dilakukan terapi semuanya yaitu  28  (100%)  pasien  memiliki  sputum  BTA  positif. Setelah  dilakukan terapi terdapat  9 (32,1%) pasien  yang memiliki  suptum  BTA  positif,  sedangkan  19  (67,9%) memiliki  suptum  BTA  negatif.  Hasil  mcnemar test  pada kelompok kontrol menunjukkan bahwa ada perbedaan yang bermakna  antara  sputum  BTA  sebelum  terapi  dan  setelah terapi  dengan  nilai  p  sebesar  0,000  < 0,05.  Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif yang diterapi OAT kategori 1 tanpa pemberian  suplemen  Jintan Hitam (Nigella sativa), setelah  dilakukan terapi  lebih  banyak  yang  lebih  banyak terjadi konversi sputum.
Pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam,  sebelum dilakukan terapi semuanya yaitu 28 (100%) pasien memiliki
sputum BTA positif. Setelah dilakukan terapi terdapat 3  (10,7%)  pasien  yang  memiliki  suptum  BTA  positif, sedangkan  25  (89,3%)  memiliki  suptum  BTA  negatif. Hasil  mcnemar  test  pada  kelompok  perlakuan  menunjukkan bahwa  ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  sputum  BTA sebelum  terapi  dan  sesudah  terapi  dengan  nilai  p  sebesar 0,000  <  0,05.  Disimpulkan  pasien  TB  Paru  BTA  positif yang  diterapi  OAT  kategori  1  dengan  pemberian  suplemen Jintan  Hitam  (Nigella  sativa),  setelah  dilakukan  terapi  lebih banyak terjadi konversi sputum.
Sedangkan  berdasarkan  tabel  5  bahwa  rerata  perubahan kadar  IFN-γ  pada  kelompok  kontrol  sebesar  2,5  pg/mL, dengan  perubahan  terkecil  -5,5  pg/mL  dan  perubahan terbesar  18,1  pg/mL  dan  rerata  perubahan  kadar  IFN-γ  pada kelompok  perlakuan  Jintan Hitam  sebesar  9  pg/mL,  dengan perubahan  terkecil  1,6  pg/mL  dan  perubahan  terbesar  36,7 pg/mL. Hasil independent t test menunjukkan bahwa ada
perbedaan  yang  bermakna  antara  perubahan  kadar  IFN-γ kelompok kontrol  dan perubahan  kadar IFN-γ kelompok perlakuan Jintan Hitam dengan nilai p sebesar 0,000 < 0,05. Disimpulkan  pasien  TB  Paru  BTA  positif  yang  diterapi OAT kategori 1 dengan pemberian suplemen Jintan Hitam (Nigella sativa) mempunyai perubahan kadar IFN- γ yang lebih  tinggi  daripada  pasien  TB  Paru  BTA  positif  yang diterapi OAT kategori 1 tanpa pemberian suplemen Jintan Hitam (Nigella sativa).
Berdasarkan  perbandingan  perubahan  sputum  BTA antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan  Jintan Hitam (lihat tabel 6) disimpulkan bahwa pada kelompok kontrol  terdapat  19  (67,9%)  pasien  yang  mengalami konversi  sputum  BTA  dari  positif  menjadi  negatif. Sedangkan pada kelompok perlakuan Jintan Hitam terdapat 25  (89,3%)  pasien  yang  mengalami  konversi  sputum BTA  dari  positif  menjadi  negatif.  Hasil  chi-square  test menunjukkan  bahwa  tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna antara  perubahan  sputum  BTA  kelompok  kontrol  dan perubahan  sputum  BTA  kelompok  perlakuan  Jintan Hitam  dengan  nilai  p  sebesar 0,101 >  0,05. Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif yang diterapi OAT kategori 1 dengan  pemberian  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa) mempunyai  perubahan  sputum  BTA  yang  tidak  berbeda nyata dengan pasien TB Paru BTA positif  yang diterapi OAT kategori  1 tanpa  pemberian suplemen  Jintan  Hitam (Nigella sativa).
Berdasarkan  hasil  chi-square  test  dan  pearson correlation  antara  perubahan  kadar  IFN-γ  dengan  jenis kelamin, usia dan IMT pasien TB Paru BTA positif subyek penelitian dapat dilihat pada tabel 7 dengan hasil chi-square test  antara  perubahan  kadar  IFN-γ  dengan  jenis  kelamin pada kelompok kontrol maupun pada kelompok perlakuan Jintan  Hitam  menyimpulkan  bahwa tidak  ada  hubungan yang bermakna antara perubahan kadar IFN-γ dengan jenis kelamin dengan nilai p > 0,05. Hal ini berarti jenis kelamin tidak  mempengaruhi  perubahan  kadar  IFN-γ  pasien  TB Paru  BTA  positif  baik  pada  kelompok  kontrol  maupun pada kelompok perlakuan Jintan Hitam.
Sedangkan  hasil  pearson  correlation  antara  perubahan kadar  IFN-γ  dengan  usia  pada  kelompok  kontrol menyimpulkan  bahwa ada hubungan  yang  bermakna antara perubahan kadar IFN-γ dengan usia dengan nilai p < 0,05. Hal  ini  berarti usia  bisa  mempengaruhi  perubahan  kadar IFN-γ pasien TB Paru BTA positif pada kelompok kontrol, semakin  tua  usia  maka  perubahan  kadar  IFN-γ  semakin kecil ditunjukkan dengan nilai koefisien sebesar -0,521.
Hasil pearson correlation antara perubahan kadar IFN-γ dengan  usia  pada  kelompok  perlakuan  menyimpulkan bahwa tidak ada hubungan yang bermakna antara perubahan kadar  IFN-γ  dengan  usia  dengan  nilai  p  >  0,05.  Hal  ini berarti  usia tidak  mempengaruhi  perubahan kadar IFN-γ pasien  TB  Paru  BTA  positif  pada  kelompok  perlakuan Jintan Hitam.
Hasil  pearson  correlation  antara  perubahan  kadar IFN-γ dengan IMT pada kelompok kontrol  maupun pada kelompok perlakuan Jintan Hitam menunjukkan bahwa
tidak  ada  hubungan  yang  bermakna  antara perubahan kadar IFN-γ dengan IMT dengan nilai p > 0,05. Hal ini berarti IMT  tidak  mempengaruhi  perubahan  kadar  IFN-γ  pasien TB Paru  BTA  positif  baik  pada  kelompok kontrol  maupun pada kelompok perlakuan Jintan Hitam.
Berdasarkan  hasil  chi-square  test  antara  perubahan sputum BTA dengan jenis kelamin, usia dan IMT pasien TB Paru  BTA  positif  subyek  penelitian  pada  kelompok  kontrol maupun  pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam  dapat disimpulkan  bahwa  tidak  ada  hubungan  yang  bermakna antara  perubahan  sputum  BTA  dengan  jenis  kelamin,  usia dan IMT dengan nilai p > 0,05. Hal ini berarti jenis kelamin, usia dan IMT tidak  mempengaruhi  perubahan  sputum  BTA pasien TB Paru BTA  positif  baik pada kelompok  kontrol maupun pada kelompok perlakuan Jintan Hitam

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  suplemen  jintan  hitam  (Nigella  sativa) bersama  OAT  kategori  1  pada  konversi  sputum  BTA  dan peningkatan  kadar  IFN-γ  pada  penderita  tuberkulosis paru BTA positif di Rawat Jalan dan Rawat Inap RSUD Dr. Soetomo pada akhir minggu kedua fase intensif.
Dari  analisa  data  statistik  untuk  sebaran  jenis  kelamin dengan  menggunakan  chi-square  test  menunjukkan  bahwa tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna  proporsi  jenis  kelamin antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan  Jintan Hitam  dengan  nilai  p  sebesar  0,781  >  0,05  sebaran  usia dengan  menggunakan  independent  t  test  menunjukkan bahwa  tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  usia kelompok  kontrol  dan  usia  kelompok  perlakuan  Jintan Hitam  dengan  nilai  p  sebesar  0,144  >  0,05  (tabel  1), dengan  demikian  sampel  kedua  kelompok  tersebut  adalah homogen.
Data  karakteristik  subyek  penelitian  pada  tabel  1 menunjukkan  jumlah  penderita  TB  Paru  BTA  positif terbanyak  adalah  laki-laki  yaitu  pada  kelompok  kontrol sebanyak  19  orang  (67,9%)  dan  kelompok  perlakuan sebanyak  17  orang  (60,7%).  Untuk  kelompok  usia terbanyak adalah kelompok usia 21-30 tahun yaitu sebanyak 9  orang  (32,1%)  pada  kelompok  kontrol  dan  10  orang (35,7%)  pada  kelompok  perlakuan,  hal  ini  sesuai  dengan WHO Global Tuberculosis Report 2012 yaitu rasio laki-laki : perempuan sebesar 1.9. 1
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kelompok  usia  yang rentan  terkena  TB  adalah  kelompok  usia  produktif  dan berjenis  kelamin  laki-laki  yang  sebagian  besar  mempunyai kebiasaan  merokok  dan  lebih  banyak  beraktifitas  di  luar rumah sehingga  mudah untuk tertular TB. Seorang penderita TB  dewasa  diperkirakan  akan  kehilangan  rata-rata  waktu kerjanya  3-4  bulan  sehingga  berakibat  pada  kehilangan pendapatan  rumah  tangganya  yaitu  sekitar  20-30%.  Hasil uji  normalitas  data  penelitian  dengan  kolmogorov  smirnov test  didapatkan  semua  data  variabel  penelitian  berdistribusi normal (tabel 2).
Micobacterium  tuberculosis  merupakan  bakteri fakultatif  intraseluler.  Dalam  menghadapi  mikroorganisme intraseluler,  respons  imun  yang  terjadi  adalah  respons imun  seluler.  Sel  T  helper-1  (Th1)  sangat  berperan  pada sistem  pertahanan  tubuh  terutama  dalam  menghadapi infeksi  bakteri  intraselular.  Salah  satu  sitokin  yang diproduksi  sel  Th1  adalah  IFN-γ  yang  berperan  penting dalam  mengeliminasi  bakteri  M.tb.  Pada  penderita  TB terjadi  depresi  dari  Th1  yang  ditandai  dengan  rendahnya IFN-γ.  Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Widjaja  dkk, didapatkan  bahwa  pada  penderita  tuberkulosis  paru  terjadi penurunan  kadar  IFN-γ  yang  secara  statistik  bermakna. Beberapa  studi  juga  memperlihatkan  bahwa  terjadi penurunan kadar IFN-γ pada penderita TB aktif. 35
Kandungan  Thymoquinone  yang  terdapat  pada  jintan hitam  memiliki  aktifitas  sebagai  imunomodulator  yang berfungsi  untuk  memperbaiki  atau  membangun  kembali sistem  imun  yang  kurang  sempurna  atau  mengalami disfungsi. 13 Pada  penelitian  ini  didapatkan  hasil  rerata rerata  kadar  IFN-γ  pada  kelompok  kontrol  sebelum  terapi adalah  54,7  pg/mL,  dengan  nilai  terendah  34,3  pg/mL  dan nilai  tertinggi  87,1  pg/mL.  Sedangkan  rerata  kadar  IFN-γ setelah  terapi  adalah  57,3  pg/mL,  dengan  nilai  terendah  34 pg/mL  dan  nilai  tertinggi  87,9  pg/mL.  Hasil  paired t  test pada  kelompok  kontrol  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan yang  bermakna  antara  kadar  IFN-  γ  sebelum  terapi  dan setelah  terapi  dengan  nilai  p  sebesar  0,015  <  0,05.  Pada kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam  rerata  kadar  IFN-γ pre  terapi  adalah  56,7  pg/mL,  dengan  nilai  terendah  23,8 pg/mL  dan  nilai  tertinggi  92,6  pg/mL.  Sedangkan  rerata kadar  IFN-γ  post terapi  adalah  65,7  pg/mL,  dengan  nilai terendah  37,5  pg/mL  dan  nilai  tertinggi  99,9  pg/mL.  Hasil paired  t  test  pada  kelompok  perlakuan  menunjukkan  bahwa ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  kadar  IFN-γ  pre terapi  dan  post  terapi  dengan  nilai  p  sebesar  0,000  <  0,05. Disimpulkan  pasien  TB  Paru  BTA  positif  yang  diterapi OAT  kategori  1  dengan  pemberian  suplemen  Jintan  Hitam (Nigella  sativa),  setelah  dilakukan  terapi  mempunyai  kadar IFN-γ yang lebih tinggi (tabel 3).
Faktor-faktor  yang  mempengaruhi  kadar  IFN-γ  yaitu genetik,  status  gizi,  jenis  kelamin  dan  usia  penjamu. 34 Hasil pearson  correlation  antara  perubahan  kadar  IFN-γ  dengan IMT  pada  kelompok  kontrol  maupun  pada  kelompok perlakuan  Jintan  Hitam  menunjukkan  bahwa  tidak  ada hubungan  yang  bermakna  antara  perubahan  kadar  IFN-γ dengan IMT dengan nilai p > 0,05. Pada penelitian ini IMT tidak mempengaruhi perubahan kadar IFN-γ pasien TB Paru BTA  positif  baik  pada  kelompok  kontrol  maupun  pada kelompok perlakuan Jintan Hitam.
Hasil  chi-square  test  antara  perubahan  sputum  BTA dengan  jenis  kelamin,  usia  dan  IMT  pada  kelompok kontrol  maupun  pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam menyimpulkan  bahwa  tidak  ada  hubungan  yang  bermakna antara  perubahan  sputum  BTA  dengan  jenis  kelamin,  usia dan IMT dengan nilai p > 0,05. Hal  ini  berarti  jenis  kelamin, usia dan IMT tidak mempengaruhi perubahan sputum BTA
Jurnal Respirasi (JR), Vol. 1. No. 3 September 2015: 73 - 80
pasien  TB  Paru  BTA  positif  baik  pada  kelompok  kontrol maupun  pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam.  Hasil  ini sesuai  dengan  penelitian  multivarian  terhadap  penderita tuberkulosis  paru  yang  dilakukan  oleh  Maderuelo  et  al., yang  menyimpulkan  bahwa  kadar  IFN-γ  tidak  mutlak dipengaruhi oleh jenis kelamin. 43
Usia  turut  berpengaruh  terhadap  respons  imun.  Vasto  et al.,  melakukan  penelitian  mengenai  hubungan  usia  dengan imunitas  dan  menyatakan  bahwa  pada  usia  yang  lebih  tua terjadi penurunan sistem imun. Jumlah sel T relatif tetap namun  fungsinya  menurun  seiring  bertambahnya  usia. Penurunan  sel  T  disebabkan  oleh  adanya  perubahan  pada lipid  membran  sel  yang  menyebabkan  lambatnya  proses penghantaran  sinyal  pada  sel  T  CD4. 44 Pada  penelitian  ini di  dapatkan  pada  kelompok  kontrol  ada  hubungan  yang bermakna antara perubahan kadar IFN-γ dengan usia  dengan nilai  p  <  0,05.  Hal  ini  berarti  usia  bisa  mempengaruhi perubahan  kadar  IFN-γ  pasien  TB  Paru  BTA  positif  pada kelompok kontrol,  semakin  tua  usia  maka  perubahan  kadar IFN-γ  semakin  kecil  ditunjukkan  dengan  nilai  koefisien sebesar  -0,521.  Sedangkan  pada  kelompok  perlakuan disimpulkan  bahwa  tidak  ada  hubungan  yang  bermakna antara  perubahan  kadar  IFN-γ  dengan  usia  dengan  nilai p > 0,05. Hal  ini berarti usia tidak mempengaruhi perubahan kadar  IFN-γ  pasien  TB  Paru  BTA  positif  pada  kelompok perlakuan  Jintan  Hitam.  Hasil  penelitian  ini  lebih  sesuai dengan  kesimpulan  Maderuelo  et  al.,  yang  mengatakan bahwa kadar IFN-γ tidak dipengaruhi oleh usia. 43
Jintan  hitam  bekerja  menstimulasi  sel  T  CD4  untuk mensekresi  IFN-γ  yang  berguna  untuk  mengaktifkan respons  imun  seluler.  Pemberian  jintan  hitam  terbukti meningkatkan  level  IFN-γ  sehingga  mengurangi  kerusakan paru.  Thymoquinone  dilaporkan  dapat  meningkatkan aktifitas  sel  T  CD4  dan  IFN-γ  serta  peningkatan  fungsi sel NK. 13
Sputum  BTA  merupakan  satu  hal  penting  yang  harus dievaluasi  pada  penderita  tuberkulosis  paru  BTA  positif. Pada  penelitian  ini  didapatkan  hasil  hapusan  sputum  BTA yang  menurun  secara  kuantitatif  dan  kualitatif  pada  akhir minggu  kedua  fase  intensif.  Pada  kelompok  kontrol,  setelah dilakukan  terapi  terdapat  9  (32,1%)  pasien  yang  memiliki suptum  BTA  positif  (  2  subyek  dari  ++  menjadi  +,  6 subyek dari + tetap + dan 2 subyek ++ sebelum dan setelah terapi),  sedangkan  19  (67,9%)  terjadi  konversi  suptum. Hasil  mcnemar  test  pada  kelompok  kontrol  menunjukkan bahwa  ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  sputum  BTA sebelum  terapi  dan  setelah  terapi  dengan  nilai  p  sebesar 0,000  <  0,05.  Pada  kelompok  perlakuan  Jintan  Hitam, setelah  dilakukan  terapi  terdapat  3  (10,7%)  pasien  yang memiliki  suptum BTA positif (satu subyek +++  menjadi ++,  satu  subyek  ++  tetap  +  dan  satu  subyek  +  tetap  +), sedangkan  25  (89,3%)  terjadi  konversi  suptum.  Hasil mcnemar  test  pada  kelompok  perlakuan  menunjukkan bahwa  ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  sputum  BTA sebelum  terapi  dan  sesudah  terapi  dengan  nilai  p  sebesar 0,000 < 0,05. Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif
yang diterapi OAT kategori 1 dengan pemberian suplemen

## KESIMPULAN
Jintan Hitam (Nigella sativa), setelah dilakukan terapi lebih banyak terjadi konversi sputum.
Mitchison dkk melaporkan jumlah kuman BTA menurun dengan  cepat  setelah  dimulai  pengobatan  OAT,  80-85% penderita tuberkulosis paru menjadi tidak infeksius setelah sekitar 2 minggu pengobatan. 5 Sedangkan menurut  A. van Deun  besarnya  konversi  sputum  setelah  empat  minggu pengobatan sebesar 52% pada konversi hapusan sputum. 28 Pada penelitian ini didapatkan tingkat konversi pada akhir minggu kedua fase intensif pada kelompok kontrol sebesar 67,9% dan kelompok perlakuan sebesar 89,3%. Pada fase intensif  kuman  mikobakterium  terbunuh  dengan  cepat dalam waktu 2 minggu sehingga penderita  yang  infeksius menjadi tidak infeksius dan terjadi perbaikan klinis. Hasil hapusan sputum BTA penderita dipengaruhi oleh berbagai hal  misalnya  kemampuan  penderita  untuk  batuk  yang adekuat,  volume  dahak  yang  sedikit (jumlah  ideal  untuk pemeriksaan  5-10  ml),  konsistensi  sputum  (mukoid  atau purulen).  Konversi  sputum BTA sangat dipengaruhi oleh paduan  obat  yang  tepat,  dosis  yang  tepat,  keteraturan minum obat, status gizi dan status imun penderita. Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian suplemen jintan hitam (Nigella sativa) bersama OAT  kategori  1  pada  konversi  sputum  dan  peningkatan kadar IFN-γ penderita TB Paru BTA positif.
Rerata perubahan kadar IFN-γ pada kelompok kontrol sebesar  2,5  pg/mL,  dengan  perubahan  terkecil  -5,5  pg/ mL  dan  perubahan  terbesar  18,1  pg/mL.  Sedangkan rerata  perubahan  kadar  IFN-γ  pada  kelompok  perlakuan Jintan Hitam sebesar 9 pg/mL, dengan perubahan terkecil 1,6  pg/mL  dan  perubahan  terbesar  36,7  pg/mL.  Hasil independent t test  menunjukkan bahwa ada perbedaan yang bermakna antara perubahan  kadar IFN-γ kelompok kontrol dan  perubahan  kadar  IFN-γ  kelompok  perlakuan  Jintan Hitam  dengan  nilai p  sebesar 0,000  < 0,05.  Disimpulkan pasien TB Paru BTA positif yang diterapi OAT kategori 1 dengan  pemberian  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa) mempunyai  perubahan  kadar  IFN-  γ  yang  lebih  tinggi daripada pasien TB Paru BTA positif  yang diterapi OAT kategori 1 tanpa pemberian suplemen Jintan Hitam (tabel 5). Pada kelompok kontrol terdapat 19 (67,9%) pasien yang mengalami  konversi  sputum.  Sedangkan pada  kelompok perlakuan Jintan Hitam terdapat 25 (89,3%) pasien yang mengalami konversi sputum.
Hasil  penelitian  ini  menunjang  hipotesis  bahwa suplemen  jintan  hitam  (Nigella  sativa)  bersama  OAT kategori  1  dapat  membantu  terjadinya  konversi  sputum dan  meningkatkan kadar  IFN-γ  penderita TB  Paru  BTA positif.  Selama  penelitian  berlangsung  tidak  didapatkan efek samping  dari suplemen  jintan  hitam (Nigella sativa) seperti  rasa  tidak  enak  pada  perut,  mual  dan  konstipasi, akan tetapi pada penelitian ini tidak dilakukan kultur untuk diagnosis dan menyingkirkan kuman MOTT dan tidak pula dilakukan  pemeriksaan  khusus  terhadap  faktor-faktor  lain yang  dapat  mempengaruhi  kadar  IFN-γ  seperti  penyakit autoimun dan keganasan.
Pemberian  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa) bersama  OAT  kategori  1  secara  bermakna  dapat meningkatkan  kadar  IFN-γ  penderita  TB  Paru  BTA positif  pada  akhir  minggu  kedua  fase  intensif  serta  dapat meningkatkan  konversi  sputum  penderita  TB  Paru  BTA positif  pada  akhir  minggu  kedua  fase  intensif,  dan  pada penelitian  ini terdapat peningkatan  kadar IFN-  γ  dan tingkat konversi  yang  lebih tinggi pada penderita TB Paru BTA positif  yang  diberikan  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella sativa)  bersama  OAT  kategori  1  dibandingkan  yang  tidak diberikan  suplemen  Jintan  Hitam  (Nigella  sativa)  pada  akhir minggu kedua fase intensif .

## DAFTAR PUSTAKA
1.   World Health Organization. Global Tuberculosis Report 2012. Genewa, Swiss.
2.   Perhimpunan Dokter Paru Indonesia. Tuberkulosis. Dalam: Tuberkulosis, Pedoman diagnosis dan penatalaksanaan di Indonesia. Balai Penerbit FKUI. Jakarta. 2011; h. 1-64.
3.   Pajankar S, Khandekar R, Al Amri M, Al Lawati MR, Factor influencing sputum smear conversion of one and two month of Tuberculosis treatment. Oman Medical Journal 2008: Vol. 23.
4. Soedarsono. Evaluasi terapi tuberkulosis: klinis dan program. Dalam TB Update-II. Simposium Nasional, Lab/SMF Ilmu Penyakit Paru FK Unair/RSUD Dr. Soetomo Surabaya, 2003. 49-68.
5.   Mitchison DA. Infectivity of patients with pulmonary tuberculosis during chemotherapy. Eur Respir J. 1990; 3: 385-6.
6.   Wang JY, Lee LN, Yu CJ, Chien YJ, Yang PC, Tami Group. Factors influencing time to smears conversion in patients with smear positive pulmonary tuberculosis. Respirol. 2009;14:1012-9.
7.   Chrisdiono H. Konversi sputum BTA pada penderita TB Paru kasus baru yang mendapat terapi OAT kategori 1 dan Phyllantus Niruri L. Penelitian karya akhir Bagian Paru UNAIR. 2003.
8.   Bhatt K, Salgem P. Host innate immune response to Mycobacterium tuberculosis. J Clin Immunol. 2007; 27 (4): 347-62.
9.   Reddy YN, Muthy SV. Role of free radicals and antioxidants in tuberculosis patients. Indian J Tuberc. 2004; 51: 213-18.
10.  Mohod K, Dhok A, Kumar S. status of oxidants and antioxidants in  pulmonary  tuberculosis  with  varying  bacillary  load.  Journal  of Experimental Sciences 2011; 2 (6): 35-7.
11.  Djauzi S. Perkembangan obat imunomodulator. Med J Ked 2003; 4 (2): 13-5.
12.  Salem M. L. Immunomodulatory and Therapeutic Properties of The Nigella sativa L. Seed. International Immunopharmacology 2005; 5: 1749-70.
13.  ElKadi A, Kandil O. Effect of Nigella sativa (the black seed) on immunity. Proceeding of 4 th International Conference on Islamic Medicine, Kuwait. Bull Islamic Med 1986; 4: 344-8.
14.  Mansour MA, Ginwai OT, El-Hadiya T, ElKhatib AS. Effects of volantile oil constituents of Nigella sativa on carbon tetrachlorida- induced  Hepatotoxicity in  mice: evidence  for antioxidant  effect  of thymoquinone.  Res  Commun  Mol  Pathol  Pharmacol.  2001;  110: 239-51.
15.  Swamy SM, Tan BK. Cytotoxic and imunopotentiating effects of ethanolic extract of Nigella sativa L Seeds. J Ethnopharmacol 2000; 70: 1-7.
16.  Randhawa MA. In Vitro Antituberculous activity of thymoquinone, An active principle of Nigella sativa. Journal Ayub Med Coll Abbottabad 2011; 23 (2):78-1.
17.  Haq A, Abdullatif M, Lobo PI, Khabar KS, Sheth KV, Al-Sedairy ST. Nigella sativa : Effect on Human Lymphocytes and Polymorphonuclear Leucocyte  Phagocytic  Activity.  Immunopharmacology  1995;  30  (2): 147-155.
18.   Pedoman Diagnosis dan Terapi Bagian/SMF Ilmu Penyakit Paru RSU Dr. Soetomo Surabaya, 2005.
19.   Departemen Kesehatan Republik Indonesia (2008), Pedoman Penanggulangan Tuberkulosis, edisi ke-2, Editor Aditama TY dkk, Balai Pustaka, Jakarta, hal. 3-4.
20.   Schlossberg D. Tuberculosis and Non tuberculosis Mycobacterium Infection, 5 nd ed. McGraw-Hill company, Philadelphia 2006, p.94- 103.
21.   Baratawidjaya KG. Imunologi Dasar. edisi 7, Penerbit FKUI, Jakarta. 2006; hal. 411-7.
22.   Abbas AK, Litchtman AH, Puber JS. Immunity to microbes. In: cellular and molecular immunology, 2 nd ed. WE Saunders Company Philadelphia. 1994: p. 320-33. 23.   Parslow TG, Bainton DF. Innate immunity. In: Parslow TG, Stites DP, Terr AL, Imboden JB, (Eds). Medical Immunology, 10 th ed. New York The McGraw-Hill Companies 2001; 19-40. 24.   Iseman MD. Immunity and pathogenesis. In: Iseman MD, A clinician’s Guide to Tuberculosis. Lippincott Williams and Wilkins. Philadelphia. 2000: p. 63-96.
25.   Mattheas L, Steinmuller C, Ulliman GF. Pulmonary macrophage. Eur Respir J. 1994; 7: 1683-4.
26.   Hashmi MA, Ahsan B, Shah SI. Antioxidant capacity and lipid peroxidation product in pulmonary tuberculosis. Al Ameen J Med Sci. 2012; 5 (3): 313-19.
27.   Cohen K, Nyska A. Oxidation of biological system : Oxidative stress phenomena. Antioxidants, redox reaction and methods for their quantifications. Toxicologic part. 2002; 30 (6): 620-50.
28.   Warren JR, Bhattacharya M, De Almeida KN, Trakas K, Peterson LR. A minimum 5.0 ml of sputum improves the sensitivity of acid fast smears for Mycobacterium tuberculosis. Am J Respir Crit Care Med. 2000 May; 161 (5): 1559-62.
29.   Parikh R, Nataraj G, Kanade S, Khatri V, Mehta P. Time to sputum conversion in smear positive pulmonary TB patients on category I DOTS  and  factors  delaying  it.  Journal  Association  of  Physicians India. 2012: 60: 22-6.
30.   A. van Deun. What is the role of mycobacterial culture in diagnosis and case definition? Toman’s Tuberculosis. Case detection, treatment, and monitoring-question Second edition. WHO, 2004; p 122-3.
31.   Barnes PF, Wizel B. Type 1 cytokines and the pathogenesis of tuberculosis. A, J Respir Crit care Med. 2000; 161: 1773-4.
Jurnal Respirasi (JR), Vol. 1. No. 3 September 2015: 73 - 80
32.   Dannenberg AM, Rook GAW. Pathogenesis of pulmonary tuberculosis: Interplay of tissue-and answers. Second edition. World Health Organization. Geneva. 2004.
33.   Toman, K. What is the purpose of the initial intensive phase of two- phase treatment In: Toman’s Tuberculosis case detection, treatment and  monitoring  question  and  aswers.  Eddamaging  and  macrophage- activating  immune  response,  dual  mechanism  that  control  bacillary multiplication. In : Bloom BR, editor. ASM Press. Washington. 1994: p. 459-84.
34.   Widjaja JT, Jasaputra DK. Analisis kadar interferon gamma pada penderita tuberkulosis paru dan orang sehat. J Respir Indo. 2010; 30 (2): 119-24.
35.   Gilani A, Jabeen Q, Khan M. A Review of medicinal uses and pharmacological Activities of Nigella sativa . Pakistan Journal of Biological Sciences 7 (4): 441-51.
36.   Nickavara B, Mojaba F, Javidniab K, Amolia MAR. Chemical composition of the fixed and volatile oils of Nigella sativa L. From Iran. Z. Naturforsch 2003; 58c, 629-1.
37.   Farid BA, Aoumeur B, Brahim MY, Farid C. Chemical composition of seed essential oils from Algerian Nigella sativa extracted by microwave and hydrodistillation. Flavour and Fragrance journal 2007; 22 (2): 148-3.
38.   Hutapea JR. Inventaris tanaman obat indonesia (III), Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Depkes RI. 1994: 163-5.
39.   Randhawa MA. An update on antimicrobial effect of Nigella sativa and  experience  at  King  faisal  University,  Dammam,  Saudi  Arabia.  J Saudi Society Dermatol Dermatologic Surg 2008; 12: 37-44.
40.   Farrakh KM, Atoji Y, Shimizu Farrakh KM, Atoji Y, Shimizu Y,  Takewaki  T.  Isulinotropic  properties  of  Nigella  sativa  oil  in streptozotocin  plus  nicotinamide  diabetic  hamster.  Res  Vet  Sci  2002; 73: 279-82.
41.   El-Gazzar M, El-Mezayen R, Marecki JC, Nicolls MR, Canastar. Anti Inflammatory effect of thymoquinone in mouse model of allergic lung  Inflammation.  International  immunopharmacology  2006;  6: 1135-42.
42.   Maderuelo DL, Arnalich F, Serantes R, Gonzales A, Codoceo R, IFN-γ and IL-10 gene polymorphisms in pulmonary tuberculosis. Am J Respir Crit Care Med. 2003; 167: 970-5.
43.   Vasto S, Malavolta M, Pawelec G. Age and immunity. Immunity & Ageing. 2006; 3 (2). 1-5.