## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG JAMBU
METE (Annacardium occidentale L. ) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI DARI AIR LIUR PENDERITA SARIAWAN
Arleine R. I. Tangkuman 1) , Fatimawali 1) , Gayatri Citraningtyas 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Bacteria are one of the causes of infection. The bacteria were microorganisms, which cannot be  observe  with  the  naked  eye,  but  can  only  be  seen  with  the  aid  of  microorganisms  itself.  The purpose  of  this  study  was  to  determine  the  antibacterial  activity  of  ethanol  extract  of  cashew  bark (Annacardium  occidentale  L.)  on  the  inhibition  of  bacterial  growth  from  the  saliva  of  patients  with mouth  ulcers.  The  extraction  was  done  by  maceration  method  using  96  %  of  ethanol.  Testing  for antibacterial  activity  was  performing  using  agar  diffusion  method.  The  results  showed  that  the ethanol  extract  of  cashew  stem  bark  have  antibacterial  activity  against  the  bacteria  taken  from  the three of sprue patients. Extracts with the concentrations of 0.2 : 1; 0.4 : 1; 0.6 : 1; 0.8 : 1; perform as an  effective  concentration  in  inhibiting  the  growth  of  bacteria  from  the  saliva  of  three  patients  of sprue.
Keywords : Annacardium occidentale L., Antibacterial Activity, Saliva, Patients Sprue.

## ABSTRAK
Salah  satu  penyebab  infeksi  ialah  bakteri.  Bakteri  merupakan  mikroorganisme  yang  tidak dapat dilihat dengan mata telanjang, tetapi hanya dapat dilihat dengan bantuan mikroorganisme.Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  kulit batang jambu  mete  ( Annacardium occidentale L. ) terhadap penghambatan  pertumbuhan  bakteri  dari air  liur  penderita  sariawan.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol 96%. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi agar. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit batang jambu mete memiliki aktivitas sebagai antibakteri terhadap bakteri yang  diambil  3  orang  penderita  sariawan.  Konsentrasi  0,2:1;  0,4:1;  0,6:1;  0,8:1;  merupakan konsentrasi efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri dari air liur ketiga penderita sariawan.
Kata Kunci :  ( Annacardium  occidentale L. ), Aktivitas  Antibakteri,  Air  Liur  Penderita        Sariawan.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  jenis penyakit  yang  paling  banyak  diderita  oleh penduduk di negara berkembang, termasuk Indonesia.Salah  satu  penyebab  penyakit infeksi  ialah  bakteri.Bakteri  merupakan mikroorganisme  yang  tidak  dapat  dilihat dengan mata telanjang, Pengobatan terhadap penyakit infeksi biasanya digunakan  antibiotic  dan  telah  banyak dikembangkan.Akan  tetapi  penggunaan antiobiotik yang tidak tepat dapat menyebabkan  resistensi  bakteri  terhadap antibiotik.  Situasi  ini  mendorong  para ilmuwan  untuk  mengembangkan  senyawa antibakteri baru yang berasal dari tumbuhan (Yenny, 2005).
Salah  satu  tanaman  yang  digunakan sebagai  obat  tradisional  ialah  tanaman jambu  mete.  Tanaman jambu  mete ( Anacardium  occidentale L.)  yang  berasal dari Brazil Tenggara ini sering dimanfaatkan  biji,  buah,  daun,  akar  dan kulit  batangnya  oleh  masyarakat.  Salah satu bagian yang digunakan oleh masyarakat Indonesia ialah kulit batangjambu  mete  yang  digunakan  untuk mengobati sariawan, obat kumur, pengobatan disentri, diabetes, radang pada mulut, sakit gigi, dan pencahar (Prihatman, 2000).  Berdasarkan  hasil  penelitian  dari Abulude  dkk.  (2010),    kandungan  kulit batang  jambu  mete  yang  diekstraksi dengan  etanol  menunjukkan  bahwa  kulit batang  jambu  mete  mengandung  senyawa kimia fenolik seperti asam anakardat, asam galat,  flavonoid,  tanin,  dan  saponin  yang berpotensi sebagai antibakteri dan antiinflamasi.
Berdasarkan  uraian  diatas,  peneliti melakukan  penelitian  untuk menguji aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak  etanol kulit batang jambu mete dalam
menghambat  pertumbuhan  bakteri  dari  air liur penderita sariawan.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan  Alam, Universitas  Sam Ratulangi. Waktu penelitian dilaksanankan pada bulan Desember 2015 sampai dengan bulan Desember 2016 pengambilan sampel dan  bakteri  uji  serta  uji  aktivitas antibakteri.
Alat yang digunakan ialah Timbangan  analitik  ( Kern ),  toples  kaca, blender,  aluminium  foil,  ayakan  mesh  65, autoklaf (Automated  Labware  Positioners) , batang  pengaduk,  cawan  petri (Normax) , erlenmeyer (Approx) ,  gelas  ukur (Pyrex) , gelas kimia (Pyrex) , pipet tetes (Pyrex),hot plate ,  inkubator (Incucell) ,  kawat  ose, pencadang, lampu spritus, rotary evaporator ,  kertas  saring  no.1,  mikropipet (Ecopipette), mistar  berskala, Laminar  air flow  (Biotek), pingset,  tabung  reaksi (Pyrex) , corong, kapas, tissue, kertas label, sarung  tangan,  kamera,  masker,  lumpang dan alu.
Bahan  yang  digunakan  ialah  Kulit batang  jambu  mete ,  etanol  96%,  nutrient agar (Oxoid) ,  aquades,  ciprofloxacin 500mg,  NaCl  0,9%,  CMC  ( Carbooxy Methyl  Cellulose ),  alkohol  70%,  H 2 SO 4 , BaCl 2. 2H 2 O 1,175%, air liur dari penderita sariawan.

## Pengambilan dan Penyiapan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  kulit  batang  jambu mete yang  diambil  di  Desa  Kali, Kecamatan Pineleng. Bagian yang diambil adalah  kulit  batang  jambu  mete,  sampel dikumpulkan kemudian dibersihkan dengan  menggunakan  air  mengalir  bersih,
kemudian dikeringkan dengan cara
diangin-anginkan  tanpa  terkena  sinar matahari secara langsung, kemudian dihaluskan  dengan  menggunakan  blender, diayak  dengan  ayakan  mesh  65  sampai diperolah serbuk simplisia.
Bakteri  yang  akan  diuji  diambil melalui  air  liur  dari  3  orang  penderita sariawan  dan  di  simpan  pada  wadah  yang telah disterilkan.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstrak  dilakukan  dengan  cara maserasi  yaitu  sebanyak  75  gram  serbuk simplisia kulit batang jambu mete dimasukkan  dalam  toples  kaca  dan direndam dalam pelarut polar (etanol 96%) sebanyak  575  ml  atau  hingga  serbuk terendam sempurna, ditutup dengan aluminium foil dan dibiarkan selama 5 hari sambil  sesekali  diaduk,  lalu  disaring dengan kertas saring sehingga menghasilkan  satu  filtrat  dan  satu  residu. Residu  yang  ada  kemudian  direndam  lagi (remaserasi)  dengan  etanol  96%  sebanyak 500 ml, ditutup dengan aluminium foil dan dibiarkan  selama  2  hari  sambil  sesekali diaduk.  Setelah  2  hari,  sampel  tersebut disaring sehingga menghasilkan filtrat dua dan  residu  dua.  Filtrat  1  dan  filtrat  2 dicampurkan lalu dievaporasi menggunakan rotary  evaporator, lalu diuapkan menggunakan waterbath sehingga diperolah ekstrak kental.
Pembuatan  Larutan  Kontrol  Positif  (+) dan Kontrol Negatif (-)
Larutan  kontrol  positif  (+)  ialah ciprofloxacin  yang  dibuat  dengan  cara  1 tablet  Ciprofloxacin  500  mg  dihaluskan, setelah  itu  ditimbang  dan  disetarakan  50 mg  dan  dilarutkan  dalam  50  ml  CMC, dengan  cara  diambil  1  ml  larutan  dan ditambahkan CMC sampai 10 ml.
Sehingga  diperoleh  larutan  ciprofloxacin dengan  konsentrasi  50  µg/  50  µL
Konsentrasi  ini  digunakan  sebagai  kontrol positif (+) pada pengujian.
Larutan  kontrol  negatif  (-)  yang akan digunakan dalam pengujian antibakteri  ialah  CMC  ( Carboxy  Methyl Cellulosa ) 1% dengan cara: 1 gram serbuk CMC  dilarutkan  dalam  100  ml  aquades steril.  Dikocok  sampai  larutan  homogen. Kontrol negatif digunakan sebagai pembanding  dan  pelarut  untuk  pembuatan larutan  kontrol  positif  dan  pembuatan larutan uji.

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat larutan uji secara berturut- turut  20%,  40%,  60%  dan  80%  dengan cara  ditimbang  0,2  g  ;  0,4  g  ;  0,6  g  ;  dan 0,8  g  ;  ekstrak  etanol  kulit  batang  jambu mete  kemudian  masing-masing  dilarutkan dalam CMC 1 ml.
Pembuatan Media a. Media Dasar
Nutrien  Agar (NA)  sebanyak  16,38 gram dilarutkan dalam 585 ml aquades (28 g/1000  ml)  menggunakan  erlenmeyer. Setelah  itu  dipanaskan  dengan  hot  plate sampai  mendidih  dan  diperoleh  larutan jernih. Kemudian, disterilkan dalam outoklaf  pada  suhu  121ºC  selama  15 menit.  Media  dasar  digunakan  dalam pembuatan media pengujian sebagai lapisan dasar.
b. Media pembenihan
Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  18,9 gram dilarutkan dalam 675 (28 g/1000 ml) ml  aquades  menggunakan  erlenmeyer. Setelah  itu  dipanaskan  diatas    hot  plate sampai  mendidih,  kemudian  disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121ºC selama 15 menit.  Media  pembenihan  digunakan dalam pembuatan media pengujian sebagai lapisan kedua.
Pembuatan Standar Kekeruhan (Larutan Mc.Farland) Larutan  H 2 SO 4 0,36  N  sebanyak 99,5  ml  dicampurkan  dengan  BaCl 2 .2H 2 O 1,175%  sebanyak  0,5  ml  dalam  tabung. Tabung  dikocok  sampai  terbentuk  larutan keruh.Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai standar  kekeruhan  suspensi  bakteri  uji (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  (Air  liur  penderita sariawan)  diambil  dengan  kawat  ose  steril lalu  disuspensikan  kedalam  tabung  yang berisi  5  ml  larutan  NaCl  0,9%  hingga diperoleh  kekeruhan  yang  sama  dengan standar  kekeruhan  larutan Mc.  Farland .
Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada setiap jenis bakteri uji.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Lapisan  dasar  dibuat  dengan  menuangkan masing-masing  65  ml  NA  kedalam  9 cawan  petri,  dan  dibiarkan  memadat. Setelah memadat, pada permukaan lapisan dasar  diletakkan  6  pencadang  baja  yang diatur sedemikian rupa.  Dituangkan 75 ml NA  pada  tiap  cawan  petri  yang  sudah diletakkan  pencadang  sebagai  lapisan kedua. Kemudian dibiarkan sampai memadat.  Suspensi  bakteri  dioleskan pada bagian  atas  lapisan  kedua.  Selanjutnya pencadang  diangkat  secara  aseptik  dari cawan  petri  sehingga  terbentuk  sumur- sumur  yang  akan  digunakan  dalam  uji antibakteri.

## Uji Aktivitas Antibakteri secara In-vitro
Larutan  uji  ekstrak  etanol  kulit batang  jambu  mete  dengan  berbagai konsentrasi  (20%,  40%,  60%  dan  80%), aquades  sebagai  kontrol  negatif,  larutan Ciprofloxacin  5  μg/50μl  sebagai  kontrol positif,  masing-masing  diteteskan  pada sumur  yang  berbeda  sebanyak  50  μl.
Kemudian  cawan  petri  diinkubasi  dalam inkubator  pada  suhu  37ºC  selama  1x24 jam.

## Pengamatan
Setelah  1x24  jam,  diamati  zona hambat  yang  terbentuk  disekitar  sumur kemudian  diukur  diameter  zona  hambat secara  horizontal  dan  vertical  dengan menggunakan mistar berskala.

## Teknik Pengumpulan Data  dan Analisis
Data
Pengumpulan data dilakukan dengan  mengukur  diameter  zona  bening dari  masing-masing  konsentrasi  yang inkubasi  selama  1x24  jam.  Data  dianalisa secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil ekstraksi
Kulit batang jambu mete diekstraksi  dengan  menggunakan  metode maserasi  dengan  menggunakan  pelarut etanol 96% p.a sehingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 19 g.
Tabel 1. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Kulit Batang Jambu Mete ( Anacardium occidentale L.) terhadap Air Liur Penderita Sariawan A.
Tabel 2.Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Kulit Batang Jambu Mete ( Anacardium occidentale L.) terhadap Air Liur Penderita Sariawan B.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Kulit Batang Jambu Mete ( Anacardium occidentale L.) terhadap Air Liur Penderita Sariawan C

## PEMBAHASAN
Pada penelitian ini proses ekstraksi dilakukan  dengan  menggunakan  metode maserasi.  Metode  ekstraksi  maserasi  ialah proses  mengekstraksi  simplisia  dengan
menggunakan  pelarut  dengan  beberapa kali  pengocokan  atau  pengadukan  pada temperatur  ruangan  kamar  (Anonim, 2000).Keuntungan utama metode ekstraksi maserasi  yaitu,  prosedur  dan  peralatan
yang digunakan sederhana, metode eskraksi maserasi tidak dipanaskan sehingga bahan alam tidak menjadi terurai (Heinrich,2004).
Pelarut yang digunakan ialah etanol karena  merupakan  pelarut  yang  universal. Untuk mendapatkan ekstraksi yang menyeluruh  maka  pemilihan  pelarut  yang digunakan untuk mengekstraksi merupakan  faktor  yang  penting.  Pelarut ideal  yang  sering  digunakan  ialah  etanol, karena  merupakan  pelarut  pengekstraksi yang terbaik untuk hampir semua senyawa dengan  berat  molekul  rendah  seperti alkaloid,  minyak  atsiri,  tanin,  saponin  dan flavonoid (Wijesekera, 1991).
Pada uji aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  kulit  batang  jambu  mete terhadap bakteri yang diambil dari 3 orang penderita  sariawan  menggunakan  metode difusi  agar.  Difusi  agar  yang  digunakan ialah media NA. , sampel  yang digunakan pada  penelitian  ini  ialah  ekstrak  etanol kulit  batang  jambu  mete  yang  diencerkan menjadi empat konsentrasi yaitu (I. 0,2:1 ; II.  0,4:1  ;  III.  0,6:1  ;  IV.  0,8:1) untuk mengetahui  apakah  ada  perbedaan  ukuran diameter zona hambat yang terbentuk pada masing-masing ekstrak.
Kontrol  negatif  yang  digunakan ialah  CMC,  dimana  hasil  yang  diperoleh menunjukkan  tidak  adanya  zona  hambat yang  terbentuk.Selanjutnya,  untuk  kontrol positif yang digunakan ialah Ciprofloxacin 50µg/50µL,  dimana  pada  kontrol  positif hasil  menunjukkan  terbentuknya  zona hambat  yang  lebih  besar  dari  keempat konsentrasi. Hal ini dikarenakan Ciprofloxacin  memiliki  efek  antibakteri yang besar (Spektrum luas).
Hasil  pengujian  dari  ekstrak  kulit batang jambu mete memberikan efek zona hambat yang berbeda-beda terhadap penghambatan  pertumbuhan  bakteri  yang
ada  pada  air  liur  3  orang  penderita sariawan.  Jumlah  rata-rata  hasil  pengujian untuk  ekstrak  kulit  batang  jambu  mete terhadap  air  liur  penderita  sariawan  (A) dengan  tiga  kali  pengulangan  terlihat adanya  zona  hambat  pada  konsentrasi (I.
0,2:1  ;  II.  0,4:1  ;  III.  0,6:1  ;  IV.  0,8:1) sebesar  13,5mm;  12,66mm;  14,16mm  dan 14,66mm.  Pada  hasil  pengujian  ekstrak kulit  batang  jambu  mete  terhadap  bakteri yang  ada  pada  air  liur  penderita  sariawan (B)  terlihat  memiliki  zona  hambat  untuk setiap  konsentrasi.  Jumlah  rata-rata  hasil pengujian  dengan  tiga  kali  pengulangan pada  konsentrasi (I.  0,2:1  ;  II.  0,4:1  ;  III. 0,6:1  ;  IV.  0,8:1) masing-masing  sebesar 14,83mm;  16,16mm;  16mm  dan  17, 66mm. Hasil pengujian untuk ekstrak kulit batang  jambu  mete  terhadap  bakteri  yang ada  pada  air  liur  penderita  sariawan  (C) terlihat  juga  memiliki  zona  hambat  yang berbeda  untuk  setiap  konsentrasi  dengan jumlah rata-rata untuk tiga kali pengulangan pada konsentrasi (I. 0,2:1 ; II.
0,4:1  ;  III.  0,6:1  ;  IV.  0,8:1) masing- masing sebesar 14mm; 14,16mm; 15,5mm dan 14,16mm.
Hal ini menunjukkan bahwa masing-masing  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  menurut  teori  David  dan Stout  (1971)  dapat  dikategorikan  dengan daerah zona hambat yang kuat.Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan, ekstrak kulit batang jambu mete terbukti  memiliki  aktivitas  antibakteri  dan mampu  menghambat  pertumbuhan  dari bakteri  yang  terdapat  pada  air  liur  tiga orang  penderita  sariawan  dengan  zona hambat  yang  berbeda-beda.  Hal  itu  dapat dibuktikan  dari  besarnya  diameter  zona hambat yang terdapat pada bakteri uji.
Berdasarkan  hasil  penelitian  dari Abulude  dkk.  (2010),    kandungan  kulit batang  jambu  mete  yang  diekstraksi
dengan  etanol  menunjukkan  bahwa  kulit batang  jambu  mete  mengandung  senyawa kimia fenolik seperti asam anakardat, asam galat,  flavonoid,  tanin,  dan  saponin  yang berpotensisebagai antibakteri dan antiinflamasi.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  kulit  batang  jambu mete memiliki aktivitas sebagai antibakteri terhadap bakteri yang diambil dari 3 orang penderita  sariawan.  Konsentrasi (I.  0,2:1  ; II. 0,4:1 ; III. 0,6:1 ; IV. 0,8:1) merupakan konsentrasi yang efektif dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  yang diambil dari 3 orang penderita sariawan.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut mengenai aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  kulit  batang  jambu  mete terhadap  bakteri  yang  lain  dan  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui bakteri-bakteri  yang  terdapat  pada  air  liur penderita sariawan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abulude,  F.  O.,  Ogunkoya,  M.  O.,
Adebote, V. T., 2010. Phytochemical  and  Antibacterial Investigation  of  Crude  Extracts  of Leafes and Stem Barks of Anacardium occidentale .
Continental J. Biologist 1 Sciences
2.
Anonim.  2000. ParameterStandar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Depkes RI : Jakarta.
Davis dan Stout. 1971. Disc Plate Method
of Microbiological Antibiotics
Essay.  Journal  of  Microbiology .
Vol. 22 No. 4.
Heinrich, Michael., Barnes, Joanne., Gibbons, Simon., Williamso,
Elizabeth  M.  2004. Fundamental  of Pharmacognosy  and  Phytotherapi . Elsevier : Hungary.
Prihatman, K., 2000. Jambu Mete, Tentang Budidaya Pertanian, Sistem Informasi Manajemen Pembangunan di Pedesaan .
BAPPENAS.
Victor, L., 1980. Antibiotics in Laboratory Test .  The  williams  and  Wilkins Company, USA.
Wijesekera,  ROB.  1991. The  Medical
Plant Industry . CRC Press, pp.85-90
: Washington DC. Yenny, H. E., 2005. ResistensidaribakteriEnterik :Aspek Global Terhadap Antimikroba. Universa Medicine,
Vol.  26.  No.  1  Januari  –Maret 2007; 26 : 46-56.