# Korespondensi:  Balai  Riset  Perikanan  Budidaya  Air  Tawar  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Sempur  No.  1,  Bogor  16129,  Indonesia Tel.:  +62  251  8313200 E-mail:  nu nan afiqoh @gmail.com
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/ma

## POTENSI  KOMBINASI  TANAMAN  OBAT  HERBAL  SEBAGAI BAHAN  PENGENDALI PENYAKIT BAKTERI,  JAMUR, DAN PARASIT  PADA IKAN  LELE
Nunak  Nafiqoh # ,  Lila  Gardenia,  Desy  Sugiani,  dan  Uni  Purwaningsih
Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan Jl. Sempur  No. 1, Bogor 16129
(Naskah  diterima:  2Maret  2020;  Revisi  final:  21  Desember  2020;  Disetujui  publikasi:  21  Desember  2020)

## ABSTRAK
Ikan  lele  merupakan  komoditas  ikan  yang  mempunya  nilai  jual  yang  cukup  baik  di  pasar.  Tingginya permintaan ikan lele memicu intensifikasi produksi dengan melakukan budidaya dengan padat tebar tinggi, sehingga  resiko  ikan  terserang  penyakit  akan  lebih  besar.  Upaya  untuk  menghindari  penggunaan  obat- obatan kimiawi terutama antibiotik perlu segera dilakukan. Oleh sebab itu informasi tentang bahan alami yang mampu menggantikan fungsi antibiotik sintetis namun tidak meninggalkan residu sangat diperlukan. Penelitian ini ditujukan untuk melihat potensi efektivitas dari kombinasi  enam jenis tanaman obat herbal dalam pengendalian penyakit akibat bakteri, jamur, dan parasit pada  ikan lele. Hasil menunjukkan bahwa kombinasi tanaman obat herbal dengan dosis yang diekstrak adalah 1:10 w/v (tanaman obat herbal: pelarut) efektif  dalam  menekan  pertumbuhan  bakteri  Flavobacterium  columnare  secara  in  vitro  dengan  diameter zona bening 16 ± 3 mm. Sementara untuk jamur yang tidak diidentifikasi spesiesnya dosis yang mampu mematikan  pertumbuhan  hifanya  adalah  300  L/mL -1 dan  pada  dosis  1  g.L -1 serbuk  kombinasi  tanaman obat herbal mampu menurunakan jumlah parasit  dari kelompok Trichodina, Gyrodactylus, dan Dactylogyrus mulai hari ke-2 pasca perendaman. Sedangkan dosis aman yang dapat digunakan oleh ikan lele adalah 1,82 g.L -1 .
KATA KUNCI: tanaman obat herbal; pengendali penyakit; lele
ABSTRACT: Potential  combination  of  herbal  medicine  plants  as  a  control  of  bacteria,  fungus  and parasites in  catfish. By:  Nunak Nafiqoh,  Lila Gardenia,  Desy Sugiani,  and Uni  Purwaningsih
Catfish  is  a  valuable  fish  commodity  in  local  and  national  markets.  The  increasing  demand  for  catfish  has led  to  the  farming  intensification  of  the  fish.  As  a  result,  fish  disease  outbreaks  frequently  occur  in  most  of catfish  farming  centres.  Efforts  to  prevent  these  outbreaks  and  reduce  the  use  of  antibiotics  and  other chemical  have  been  developed  primarily  through  the  use  of  natural  ingredients  such  as  medicinal  herbs. This  study  was  aimed  to  study  the  potential  use  of  six  medicinal  herbs  combination  in  controlling  diseases in  catfish  caused  by  bacteria,  fungi  and  parasites.  The  results  showed  that  the  medicinal  herbs'  combination effectively  suppressed  the  growth  of  the  bacterium  Flavobactrium  columnare  in  vitro  with  a  clear  zone diameter  of  16  ±  3  mm  after  the  application  of  the  herbs  combination  extract  of  1:10  w/v  (herbs:  solvent). The  extract  dosage  use  of  300  L/mL -1 was  able  to  destroy  the  hyphal  structure  of  an  unidentified  fungus. At  a  dose  of  1  g.L -1 ,  the  powder  form  of  the  combination  of  the  medicinal  herbs  was  able  to  reduce  the number  of  parasites  of  Trichodina,  Gyrodactylus  and  Dactylogyrus  on  the  2nd  day  after  immersion.  This study  recommends  that  the  safe  dose  of  the  extract  for  catfish  is  1.82  g.L -1 .
KEYWORDS: medicinal  herbs;  health  management;  catfish

## PENDAHULUAN
Kesadaran  pembudidaya  yang  semakin meningkatnya akan bahaya penggunaan bahan-bahan kimia  sintetik  dalam  industri  perikanan  merupakan
kemajuan yang patut di apresiasi. Dengan mengurangi penggunaan bahan kimia sintetis secara masif, dapat berdampak  pada  meningkatnya  kualitas  sumber pangan  yang  berasal  dari  ikan  budidaya.  Tidak dipungkiri, bahan kimia sintetis telah terbukti ampuh dalam menanggulangi permasalahan kesehatan pada komoditas perikanan budidaya. Namun residu yang tertinggal  pasca  penggunaan  bahan  kimia  sintetik berdampak negatif, baik pada lingkungan dan pada
ikan  yang  dibudidaya  yang  nantinya  mempengaruhi kualitas hidup manusia sebagai konsumen terahir dari ikan hasil yang dibudidaya.
Sebuah studi yang melakukan fokus penelitian di daerah  Jawa  Barat  menyebutkan  bahwa  50%  petani pembudidaya  di  daerah  tersebut  menggunakan tanaman obat herbal dalam kegiatan budidayanya. Hal ini terutama ada di daerah Sukabumi, Bogor, Cirebon, dan Bandung, dengan komoditas terbanyak adalah ikan koi,  lele,  dan  ikan  hias  (Caruso  et  al.,  2013).    Jenis tanaman  obat  herbal  yang  banyak  digunakan  oleh pembudidaya  antara  lain,  daun  kipahit,  mengkudu, sirih, pepaya, jambu biji, dan rimpang kunyit.
Daun  kipahit  (Tihonia  diversifolia)  mengandung quassinoid yang bersifat oksidator dinding sel bakteri, mengkudu (Orinda citrifolia L.) sebagai imunostimulan, sirih (Piper betle L.) biasa digunakan sebagai antibiotik alami untuk mengobati luka, borok, dan kulit melepuh, pepaya (Carica papaya L.) seringkali digunakan sebagai zat antibakteri, jambu biji (Psidium guajava L.) biasa digunakan  sebagai  antibakteri,  dan  anti  parasit, sedangkan rimpang kunyit (Curcuma longa) merupakan antibiotik  alami  untuk  pengobatan  luka  borok (Lusiastuti & Taukhid, 2012).
Dalam  kegiatan  budidaya  keberadaan  patogen merupakan  salah  satu  risiko  yang  harus  dihadapi, bahkan infeksi yang terjadi terkadang melibatkan lebih dari satu jenis agen penyakit (ko-infeksi) Secara alami ko-infeksi dapat terjadi baik antar spesies (ko-infeksi homolog),  atau  antar  agen  penyakit  (ko-infeksi heterolog). Kedua tipe  ko-infeksi ini masing-masing cukup mempengaruhi tingkat keparahan dari serangan penyakit terhadap ikan budidaya (Kotob et al., 2016).
Berdasarkan berbagai manfaat tanaman obat herbal yang telah digunakan, maka dilakukan penelitian awal untuk  mendapatkan  informasi  lanjutan.  Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi dari kombinasi  tanaman  obat  herbal  sebagai  bahan pengendalian  penyakit  ikan  yang  disebabkan  oleh bakteri, parasit dan jamur pada  ikan lele.

## BAHAN DAN METODE

## Estraksi  Tanaman Obat Herbal
Tanaman  obat  herbal  yang  digunakan  sebanyak enam jenis  yakni: daun  kipahit, pepaya,  mengkudu, jambu biji, dan rimpang kunyit. Semua bahan diperoleh dari kebun tanaman obat herbal Balai Tanaman Obat Herbal  dan  Tumbuhan  Tropis  (Balitro).  Proses ektstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan pelarut akuades steril. Untuk melakukan ekstraksi tanaman obat herbal, 10 g serbuk tanaman
obat herbal dimasukkan ke dalam  tabung erlemeyer dan  ditambahkan  pelarut  berupa  akuades  steril sebanyak  100  mL  (Daud  et  al.,  2002).  Rendaman tanaman  obat  herbal  kemudian  disaring  untuk membuang  sisa  serbuk  tanaman,  hasil  ekstrak kemudian digunakan untuk uji lebih lanjut. Kombinasi dari  keenam  tanaman  obat  herbal  yang  digunakan mempunyai rasio daun kipahit : daun mengkudu : daun sirih : daun pepaya : daun jambu biji : rimpang kunyit= 1:1:3:2:1:1. Tanaman obat herbal dalam bentuk ekstrak digunakan  pada  uji-uji  in  vitro  yakni  uji  anti-bakteri dan anti-jamur, sedangkan tanaman obat herbal dalam bentuk serbuk digunakan pada uji-uji in vivo yakni uji anti-parasit dan uji-dosis.

## Ikan dan  Bakteri Uji
Ikan uji yang digunakan adalah ikan lele berukuran 9-11  cm  hasil  pemuliaan  dari  Balai  Riset  Pemuliaan Ikan, Sukamandi-Jawa Barat. Sebelum perlakuan ikan diaklimatisasi pada kondisi laboratorium selama tujuh hari.  Agen  penyakit  yang  digunakan  adalah  bakteri patogen  yang  merupakan  koleksi  dari  Instalasi Penelitian dan Pengembangan Pengendalian Penyakit Ikan  terdiri  atas  bakteri  patogen  Aeromonas hydrophila,  Streptococcus  agalactiae,  Mycobacterium fortuitum,  dan  Flavobacterium  columnare.  Semua bakteri dikultur dan diinkubasi pada suhu 28°C selama 24 jam kecuali S. agalactiae diinkubasi selama 48 jam.

## Uji  Antibakteri
Bakteri  patogen  A.  hydrophila,  S.  agalctiae,  F. columnare, dan  M. fortuitum dikultur terlebih dahulu dalam media cair Mueller Hinton Broth (MHB) sebanyak 5  mL.  Setelah  diinkubasi  selama  48  jam  untuk  M. fortuitum  dan  semalam  untuk  A.  hydrophila,  S. agalctiae,  F.  columnare,  dan  diencerkan  sebanyak empat kali, 100 µL kultur cair bakteri patogen disebar pada media Mueller Hinton Agar (MHA) dan diratakan dengan  batang  penyebar.  Setelah  cairan  bakteri mengering, tiga buah lubang dibuat pada media agar dan  bahan  ekstrak  tanaman  obat  herbal  kombinasi dimasukkan ke  dalam lubang  tersebut sebanyak  50 µL. Kemudian media diinkubasi semalam pada suhu 28°C untuk menumbuhkan bakteri. Zona bening yang terbentuk di sekitar lubang yang dibuat diukur untuk menggambarkan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak tanaman obat herbal kombinasi (Turker et al., 2009).

## Uji  Anti-Jamur
Uji  jamur  merupakan  uji  in  vitro,  di  mana  jamur yang digunakan merupakan jamur yang diisolasi dari ikan yang menunjukkan gejala terserang jamur. Tidak dilakukan identifikasi pada jamur yang diisolasi, karena
penelitian  ini  masih  merupakan  skining  awal  untuk potensi  tanaman  obat  herbal  herbal  kombinasi. Kombinasi  tanaman  obat  herbal  disiapkan  dalam berbagai  dosis  (10,  20,  40,  50,  80,  100,  300,  500 µL/mL -1 ).  Ekstrak  tanaman  obat  herbal  kombinasi dicampurkan kedalam Glucose Yeast Agar (GYA) steril hangat (±40°C). Sebuah lubang dibuat di tengah me- dia GYA menggunakan pipet steril, dan lubang dengan ukuran yang sama diambil pada media yang telah berisi jamur. Inkubasi dan amati perkembangan jamur dengan mengukur panjang hifa dari jamur yang tumbuh pada media GYA.

## Uji  Anti-Parasit
Parasit untuk uji tanaman obat herbal dipersiapkan dengan  metode  kohabitasi.  Ikan  yang  ditemukan parasit di tubuhnya dipelihara bersama ikan yang sehat. Sebanyak total 20 ekor ikan dipelihara dalam wadah dengan  volume  air  20  liter.  Kemudian  ditambahkan serbuk  tanaman  obat  herbal  yang  sudah dikombinasikan  dengan  dosis;  0,  1,  2,  4,  5  g/liter media pemeliharaan. Pengamatan dilakukan pada hari ke-2, 4, dan  6, jumlah parasit yang  ada pada setiap kelompok perlakuan diamati dan dihitung. Hasil yang didapatkan dibandingkan dengan hari ke-0 sebelum perlakuan tanaman obat herbal.

## Uji  Dosis
Kombinasi  tanaman  obat  herbal  yang  telah berbentuk serbuk dicampurkan dan ditimbang dengan dosis;  1, 2, 4, 5, 8, 10 g.L -1 media pemeliharaan dan 0 g.L -1 sebagai kontrol.  Ikan lele mutiar diaklimatisasi pada wadah berupa bak plastik dengan volume air 20 liter. Setelah kondisi ikan stabil, ikan di tebar dengan kepadatan satu ekor/liter. Dan kombinasi tanaman obat herbal dimasukkan ke dalam bak pemeliharaan sesuai dosis yang ditentukan, kematian ikan diamati hingga hari ke-7 setelah pemberian tanaman obat herbal.

## Analisis  Data
Semua percobaan dilakukan dengan menggunakan RAL (rancangan acak lengkap), dan dilanjutkan dengan uji  beda  nyata  terkecil  (BNT).  Untuk  analisa  uji konsentrasi  mematikan  dilakukan  dengan  metode probit dan dikoreksi dengan kematian pada kelompok kontrol mengikuti rumus:
di mana: KM = koreksi mortalitas MO= mortalitas observasi MK = mortalitas kontrol

## HASIL DAN BAHASAN

## Uji  Anti-Bakteri
Uji anti-bakteri menggunakan empat jenis bakteri patogen yang merupakan koleksi dari Instalasi Riset Pengendalian  Penyakit  Ikan  (IRPPI),  Balai  Riset Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan (BRPBATPP)  yakni  Aeromonas  hydrophila,  Mycobac- terium  fortuitum,  Streptococcus  agalactiae,  dan  Fla- vobacterium columnare. Metode yang digunakan adalah metode  well-diffusion  didapatkan  hasil  bahwa kombinasi  tanaman  obat  herbal  kombinasi  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen  F. columnare dengan baik, dan perlu digali lebih dalam untuk  diaplikasikan  terhadap  bakteri  S.  agalactiae. Namun untuk bakteri A. hydrophila dan M. fortuitum penggunaan  kombinasi  tanaman  obat  herbal kombinasi  masih  belum  mendapatkan  hasil  yang memuaskan (Tabel 1).
Efektivitas antibakteri dilihat dari besarnya zona hambat  yang  terbentuk,  zona  tersebut menggambarkan  kemampuan  tanaman  obat  herbal dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen. Kombinasi keenam tanaman mempunyai kandungan yang sama,  yakni: alkaloid carpinine,  carpaine,  vita- min C dan E dari daun papaya (Aravind et al., 2013); alkaloid,  flavonoid,  sesquiterpenes,  monoterpenes, dan diterpenes dari daun kipahit  (Chukwuka & Ojo, 2014; Otusanya & Ilori, 2012); serta tannin dalam jambu biji (Mailoa et al., 2014). Dengan aktivitas antibakteri pada    Staphylococcus  aureus,  Pseudomonas aeruginosa,  Escherichia  Coli,  Klebsiella  Pneumonia, Proteus  vulgaris  (Aruljothi  et  al.,  2014;  Mailoa  et  al., 2014; Peter et al., 2014). Selain antibakteri senyawa yang terkandung dalan tanaman obat herbal mampu bersifat  sebagai  anti-oksidan  dan  anti-inflamasi (Chukwuka & Ojo, 2014; Gutiérrez et al., 2008).
  100 x MK 100 MK MO % KM    Bakteri Bacteria
Diamater zona hambat Diam eter  obstacles zone (mm) Aeromonas hydrophila TH a Myc obac terium fortuitum TH a Streptoc oc c us agalactiae 6   1 b Flavobac terium c olumnare 16   3 c ± ±

## Tabel 1. Aktivitas  anti-bakteri  dari  tanaman  obat herbal kombinasi terhadap beberapa bakteri patogen
Table  1. Anti-bacterial  activity  of  medicinal  herbs combination  against  several  pathogenic bacteria
Keterangan  (Note): TH=  Tidak ada zona  hambat (no drag zone)
Perbedaan hasil yang ditunjukkan diduga karena adanya perbedan struktur yang berbeda dari masing- masing  bakteri  yang  digunakan.  Setiap  bakteri mempunyai karakter yang berbeda dari setiap jenisnya. Terutama yang berasal dari jenis gram yang berbeda. Namun hasil menunjukkan kombinasi tanaman yang digunakan  mempunyai  efek  menghambat  terhadap F.columnare  tetapi  tidak  menghambat  pertumbuhan A. hydrophila, meskipun keduanya merupakan bakteri gram  negatif.  Diduga  perbedaan  ini  diakibatnya perbedaan struktur dari dinding sel di antara keduanya. Seperti diketahui dinding sel bakteri dari gram negatif adalah lipopolisakarida (LPS) yang dibentuk dari lipid A, oligosakarida (OS) dan O-polisakarida spesifik (O- antigen). Pada tiap gram bakteri gram negatif bentuk O-antigen ini bervariasi dalam  hal komposisi kimia, struktur dan antigenitasnya (Tomás, 2012).
Mekanime  sifat  anti-bakteri  dari  tanaman  obat herbal  karena  adanya  kemampuan  dari  bahan  aktif tanaman  obat  herbal  yang  mampu  menurunkan integritas dan permeabilitas dari dinding sel bakteri target  (Chitemerere  &  Mukanganyama,  2014). Penurunan  integritas  dan  permeabilitas  bakteri diakibatkan adanya interaksi antara bahan aktif dengan membran bakteri, sebagai contoh  polifenol mampu merubah struktur membrane protein sedangkan sa- ponin  mampu  merubah  struktur  dari  membrane kolesterol (Wink, 2015).
Efektivitas kombinasi tanaman obat herbal untuk anti-jamur  menunjukkan  bahwa  penambahan kombinasi tanaman obat herbal pada dosis 100 µL/mL mampu menghambat pertumbuhan hypha jamur hingga
50%.  Penambahan  dosis  yang  lebih  tinggi, menyebabkan jamur tidak mampu lagi tumbuh pada saat uji in vitro  (Gambar  1).
Belum ada studi  tentang penggunaan kombinasi tanaman  obat  herbal  terhadap  aktivitas  anti-jamur, namun studi penggunaan tanaman obat herbal tunggal terhadap jamur sudah dilakukan oleh beberapa peneliti. Studi secara in vitro sebelumnya menyebutkan bahwa buah jambu biji mempunyai aktivitas anti-jamur pal- ing  baik  dibandingkan  bagian  lainya  saat  diekstrak menggunakan  pelarut  methanol,  sedangkan  daun menunjukkan aktivitas antifungal yang sama dengan buah  saat  diekstrak  menggunakan  pelarut  ethanol (Pandey  &  Shweta,  2011).  Buah  mengkudu menunjukkan  aktivitas  antifungal  secara  in  vitro terhadap Candida albicans, dan dapat digunakan tanpa efek  samping  (Alsaeed,  2013),  namun  belum  ada laporan tentang penggunaan daun mengkudu terhadap penyakit akibat jamur sebelumnya. Pada ekstrak daun pepaya dilaporkan mampu menghambat pertumbuhan Fusarium  spp.  dan  Colletotrichum  gloeosporioide (Chávez-Quintal et al., 2011).
Efektivitas  tanaman  obat  herbal  sebagai antiparasitik belum banyak dikaji. Pada hasil penelitian ini  menunjukkan  bahwa  penambahan  kombinasi tanaman  obat  herbal  mampu  menurunkan  jumlah parasit yang menempel pada ikan uji secara signifikan (Gambar 2). Jumlah parasit menurun dibandingkan awal pemberian  tanaman  obat  herbal,  hal  ini mengindikasikan  bahwa    kombinasi  tanaman  obat herbal  berpotensi  digunakan  sebagai  pengendali parasit  pada  budidaya  ikan  lele.  Jenis  yang  dapat
0                   20                40                 60                 80                100               120 a a a a a c c b 500 300 100 80 50 40 20 10 Panjang hypha (Hypha length) (mm) D o si s (D os ag
e) (  L/ m L)
Gambar 1. Aktivitas  anti-jamur  dari  kombinasi  tanaman  obat  herbal  yang digambarkan melalui pengamatan pertumbuhan hypha. Dosis: 10, 20, 40, 50, 80, 100, 300, dan 500 µL.mL -1 .
Figure  1. Anti-fungal  activity  of  medicinal  herbs  combination  through  hy- pha  observation  by  dose  10,  20,  40,  50,  80,  100,  300,  and  500 µL.mL-1.
diamati  pada  saat  perhitungan  parasit  adalah  dari kelompok Trichodina, Gyrodactylus,  dan  Dactylogyrus.

## Uji  Dosis
Informasi tentang dosis tanaman obat herbal yang mampu  diterima  oleh  ikan  lele  mutiara  sangat diperlukan  sebagai  dasar  pemberian  kombinasi tanaman  obat  herbal  secara  in  vivo  pada  saat  uji aplikasi  di  lapangan  atau  uji  skala  akuarium. Berdasarkan perhitungan metode probit didapatkan bahwa nilai konsentrasi yang mengakibatkan kematian (Lethal  Concentration/LC 50 )  adalah  pada  pemberian dosis  1,82  g.L -1 .  Nilai  tersebut  didapatkan  setelah pengamatan kematian selama tujuh hari (Tabel 2).
Plotting dari hasil  pengamatan di gambarkan pada Gambar 3.
Selanjutnya dengan memasukkan hasil plotting dari gambar  3    pada  persamaan  garis  y  =  4,3849x  + 3,8733, nilai y dianggap 5 sesuai dengan nilai probit 50%.
Dengan demikian Nilai LC 50 merupakan antilog nilai X, Antilog 0,26 = 1,82 Jadi LC 50 = 1,82 g/liter
Gambar 2. Aktivitas anti-parasit kombinasi tanaman obat herbal yang digambarkan melalui pengamatan keberadaan parasit. A: kontrol; B: 1 g.L 1 ; C: 2 g.L 1 ; D: 4 g.L 1 /L; E: 5 g.L 1 .
Figure  2. Anti-parasitic  activity  of  medicinal  herbs  combination  by  parasite  exist- ence observation. A: Control;  B: 1 g.L 1 ; C:  2 g.L 1 ; D:  4 g.L 1 /L; E:  5 g.L 1 . b a Ju m la h r er at a p ar as it y an g d it em u ka n A ve ra ge n um be r of p ar as it es f ou nd Pengamatan hari ke- (Observation day-) 60 50 40 30 20 10 0 0                            2                           4                            6 a b A B
C D E Dosis Dose  (g/L) Log konsentrasi Log of concentration Total ikan yang diuji Num ber of test fish Mortalitas Mortality % mortalitas % mortality Koreksi % mortalitas Correction % of m ortality Nilai probit % mortalitas Probit value % of m ortality 0 - 20 1 5 - - 1 0 20 4 20 16 4.01 2 0.301 20 10 50 47 4.92 4 0.602 20 19 95 95 6.65 5 0.699 20 20 100 100 - Jumlah 1.602 100 54
Tabel 2. Penghitungan nilai LC 50 pada pengamatan kematian ikan lele pada hari ketujuh Table  2. LC 50 calculation  result  on  catfish  mortality  on  seven  days  post  treatment  observation
  0.26 4.3849 3.8733 5 X 3.8733 4.3849x 5     
Hasil penelitian ini  menunjukkan bahwa aplikasi tanaman  obat  herbal  melalui  metode  perendaman sangat perlu memperhatikan  dosis yang digunakan. Hal ini diduga karena adanya gangguan terhadap proses osmoregulasi  dari  ikan  pada  saat  media  budidaya mengandung bahan aktif dari tanaman obat herbal.
Penggunaan  tanaman  obat  herbal  sudah  banyak diteliti oleh studi-studi sebelumnya. Daun jambu biji, daun sirih, meniran, bawang putih dan daun sambiloto sudah diteliti untuk mengatasi penyakit akibat bakteri patogen  A.  hydrophila  (Angka,  2005;  Dwi,  2000; Wahjuningrum et al., 2010). Penggabungan beberapa tanaman obat herbal terlihat sangat berpotensi dalam pengendalian  penyakit  yang  disebabkan  oleh  agen yang berbeda, informasi ini dibutuhkan dikarenakan dalam  kegiatan  budidaya  sering  ditemukan  adanya “secondary infection” yang membahayakan kegiatan budidaya.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kombinasi keenam tanaman obat herbal  dengan perbandingan yang digunakan mampu bersifat sebagai antibakteri, anti-fungal, dan anti-parasitik. Pengunaan dosis untuk pengobatan  ikan  ikan  lele  perlu  diperhatikan  agar konsentrasi tanaman obat herbal yang diberikan tetap aman.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dibiayai  oleh  Balai  Riset  Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan, Bogor tahun anggaran DIPA 2016.   Terima kasih tak terhingga kepada Saudara Edy Farid, Ahmad Wahyudi, Setiadi, Johan Afandi, dan Dadi Pratama atas bantuannya selama pelaksanaan kegiatan penelitian.

## DAFTAR  ACUAN
Alsaeed,  A.  (2013).  Review  of  studies  on  biological activities  and  medical  use  of  Morinda  citrifolia (Noni).  International  Journal  of  Tropical  Medicine, 8, 99-108.
Angka, S.L. (2005). Kajian penyakit MAS pada ikan lele dumbo  patologi,  pencegahan  dan  pengobatan dengan  fitofarmaka.  Institute  Pertanian  Bogor.
Aravind,  G., Bhowmik,  D.,  Duraivel,  S., &  Harish,  G. (2013).  Traditional  and  medicinal  uses  of  Carica papaya.  Journal  of  Medicinal  Plants  Studies,  1(1), 7-15.
Aruljothi,  S.,  Uma,  C.,  Sivagurunathan,  P.,  & Bhuvaneswari,  M.  (2014).  Investigation  on  anti- bacterial  activity  of  Carica  Papaya  leaf  extracts against  wound  infection-causing  bacteria.  Inter- national  Journal  of  Research  Studies  in  Bio - sciences,  2(11),  8-12.
7 6 5 4 3 2 1 0 0                      0.2                    0.4                    0.6                     0.8 N il ai p ro b it % m o rt al it as Pr ob it v al ue % m or ta lit y Log konsentrasi (Concentration log) LC 50 Linear (LC 50 ) 4.01 4.920 6.650 y= 4.3849x + 3.8733 R 2 =  0.9688
Gambar 3. Persamaan garis hubungan antara Log konsentrasi dengan nilai probit %
mortalitas.
Figure  3. The  equation  of  the  line  of  the  relationship  between  the  Log  concentra- tion  and  the  probability  value  of%  mortality.
Caruso,  D.,  Lusiastuti,  A.M.,  Slembrouck,  J., Komarudin, O., & Legendre, M. (2013). Traditional pharmacopeia in small scale freshwater fish farms in West Java , Indonesia: An ethnoveterinary ap- proach.  Aquaculture,  416-417,  334-345.  https:// doi.org/10.1016/j.aquaculture.2013.09.048.
Chávez-Quintal,  P.,  González-Flores,  T.,  Rodríguez- Buenfil, I., & Gallegos-Tintoré, S. (2011). Antifun- gal activity in ethanolic extracts of Carica papaya L. cv. maradol leaves and seeds. Indian Journal of Microbiology,  51(1),  54-60.
Chitemerere, T.A. & Mukanganyama, S. (2014). Evalu- ation  of  cell  membrane  integrity  as  a  potential antimicrobial  target  for  plant  products.  BMC Complementary  and  Alternative  Medicine, 14(278), 1:8. https://doi.org/10.1186/1472-6882-14- 278
Chukwuka, K.S., & Ojo, O.M. (2014). Extraction and characterization  of  essential  oils  from  Tithonia diversifolia  (Hemsl.)  A.  Gray.  American  Journal  of Essential  Oils  and  Natural  Products,  1(4),  1–5.
Daud,  M.F.,  Sadiyah,  E.R.,  &  Rismawati,  E.  (2002). Pengaruh perbedaan  metode ekstraksi  terhadap aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun jambu biji  (Psidium  guajava  L.)  berdaging  buah  putih. Prosiding  SNaPP2011  Sains,  Teknologi,  Dan Kesehatan,  55-62.
Dwi,  G.  (2000).  Efektivitas  Ekstrak  Daun  Jambu  Biji,
(Psidium  guajava  L.),  Sambiloto  (  Andrographis paniculata  (Burm.  F.)  Nees)  Dan  Sirih  (Piper  betle L.).  Terhadap  Infeksi  Bakteri  Aeromonas  hydrophila Pada  Ikan  Patin  (Pangasius  hypophtalmus).  Insti- tute Pertanian Bogor.
Gutiérrez,  R.M.P.,  Mitchell,  S.,  &  Solis,  R.V.  (2008).
Psidium guajava: A review of its traditional uses , phytochemistry and pharmacology phytochemis- tr y and pharmacology. Journal of Ethnopharmacology, 117, 1-27.
Kotob,  M.H.,  Menanteau-Ledouble,  S.,  Kumar,  G., Abdelzaher,  M.,  &  El-Matbouli,  M.  (2016).  The impact  of co-infections  on fish:  A review.  Veteri-
nary  Research,  47(1),  98.  https://doi.org/10.1186/ s13567-016-0383-4.
Lusiastuti, A.M. & Taukhid, T. (2012). Direktori Herbal untuk  Pengelolaan  Kesehatan  Ikan  Air  Tawar.  IPB Press, 75 hlm.
Mailoa, M.N., Mahendradatta, M., Laga, A., & Djide, N. (2014). Antimicrobial activities of tannins ex- tract  from  guava  leaves  (Psidium  guajava  L)  on pathogens  microbial.  International  Journal  of  Sci- entific  &  Technology  Research,  3(1),  236-241.
Otusanya, O. & Ilori, O.  (2012). Phytochemical Screen- ing and the Phytotoxic Effects of Aqueous Extracts of Tithonia  diversifolia (Hemsl)  A. Gray.  Interna- tional  Journal  of  Biology,  4(3),  97–101.  https:// doi.org/10.5539/ijb.v4n3p97.
Pandey, A. & Shweta, S. (2011). Antifungal properties of Psidium guajava leaves and fruits against vari- ous pathogens. Journal of Pharmaceutical and Bio- medical  Sciences,  13(13),  6.
Peter,  J.K., Kumar,  Y., Pandey,  P., &  Masih, H.  (2014). Antibacterial activity  of seed  and leaf  extract of Carica  papaya  var.  Pusa  dwarf  Linn.  IOSR  Journal of  Pharmacy  and  Biological  Sciences,  9(2),  29-37.
Tomás, J.M. (2012). The main Aeromonas pathogenic factors.  ISRN  Microbiology,  2012,  1–22.  https:// doi.org/10.5402/2012/256261.
Turker, H., Yildirim, A.B., & Karaka_, F.P. (2009). Sen- sitivity of bacteria isolated from fish to some me- dicinal  plants.  Turkish  J.  Fish.  Aquat.  Sci.,  9,  181- 186. https://doi.org/10.4194/trjfas.2009.0209.
Wahjuningrum,  D.,  Solikhah,  E.H.,  Budiardi,  T.,  & Setiawati,  M.  (2010).  Pengendalian  infeksi Aeromonas  hydrophila  pada  ikan  lele  dumbo (Clarias sp.) dengan campuran meniran (Phyllanthus niruri)  dan  bawang  putih  (Allium  sativum)  dalam pakan.  Jurnal  Akuakultur  Indonesia,  9(2),  93-103.
Wink,  M.  (2015).  Modes  of  Action  of  Herbal  Medi- cines and Plant Secondary Metabolites. Medicines, 2,  251–286.  https://doi.org/10.3390/medi- cines2030251.