* Corresponding Author: email: indahsolihah@mipa.unsri.ac.id
https://doi.org/10.56064/jps.v25i2.799 Naskah diusulkan: 2 April 2023;  Naskah disetujui: 14 Juni 2023
p-ISSN: 1410-7058 e-ISSN: 2597-7059 © 2023 JPS MIPA UNSRI

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index

## Antihiperglikemia ekstrak daun karamunting ( Rhodomyrtus tomentosa
(Aiton) Hassk) pada tikus putih jantan galur wistar terinduksi aloksan
Sternatami Liberitera, Indah Solihah*, dan Yuni Eka Sari
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan 30862, Indonesia
Kata kunci: ekstrak,
hipoglikemi,
karamunting ABSTRAK: Diabetes  Melitus  (DM)  merupakan  penyakit  endokrin  yang  ditandai  dengan peningkatan kadar glukosa dalam darah secara abnormal. Pencegahan komplikasi DM dapat dihindari  dengan  menggunakan  terapi  antihiperglikemia.  Hal  tersebut  dapat  meningkatkan risiko  efek  yang  tidak  diinginkan.  Penemuan  senyawa  antihiperglikemia  dari  tanaman  obat dilakukan  untuk menghindari  efek  samping  tidak  diinginkan.  Salah  satu  tanaman  obat  yang memiliki  potensi  antihiperglikemia  adalah  karamunting  ( Rhodomyrtus  tomentosa (Aiton) Hassk).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  aktivitas  antihiperglikemia  ekstrak  daun karamunting  serta  senyawa  terdapat  pada  ekstrak  dengan  aktivitas  tertinggi.  Uji  aktivitas dilakukan secara in vivo menggunakan tikus putih jantan galur wistar. Ekstraksi dilakukan se- cara maserasi bertingkat menggunakan n-heksan, etil asetat, dan etanol 96% sebagai pelarut. Terdapat  6  kelompok  perlakuan,  yaitu  kelompok  normal,  kontrol  positif,  kontrol  negatif, ekstrak  n-heksan,  ekstrak  etil  asetat,  dan  esktrak  etanol  96%.  Kontrol  positif  adalah glibenklamid dan kontrol negatif adalah Na CMC 0,5 %. Identifikasi senyawa yang terkandung dalam  ekstrak  dilakukan  dengan  cara  skrining  fitokimia.  Analisis  data  statistik  menggunakan one Way ANOVA. Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% daun karamunting memiliki aktivitas  terbaik  menurunkan  kadar  glukosa  darah  dengan  persen  penurunan  sebesar  40%. Hasil  uji  statistik  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  antar  masing-masing  kelompok perlakuan  (p<0,05).  Pada  ekstrak  etanol  96%  daun  karamunting  teridentifikasi  senyawa flavonoid, fenol, tanin dan saponin. Keywords: extract, hypoglicemia, karamunting
ABSTRACT: Diabetes  Mellitus  (DM)  is  an  endocrine  disease  characterized  by  an  abnormal increase in blood glucose levels. Prevention of DM complications could be avoided by using antihyperglycemic  therapy.  Thus,  may  increase  the  risk  of  adverse  effects.  The  discovery  of antihyperglycemic compounds from medicinal plants was carried out to avoid adverse effects. One  of  the  medicinal  plants  that  has  antihyperglycemic  potential  is  karamunting (Rhodomyrtus  tomentosa  (Aiton)  Hassk).  This  study  was  aimed  to  examine  the antihyperglycemic  activity  of  karamunting  leaf  extract  and  the  compounds  present  in  the extract with the highest activity. Activity test was carried out in vivo using Wistar strain male white rats. Extraction was carried out by multilevel maceration using n-hexane, ethyl acetate, and  96%  ethanol  as  solvents.  There  were  6  treatment  groups,  namely  the  normal  group, positive  control,  negative  control,  n-hexane  extract,  ethyl  acetate  extract,  and  96%  ethanol extract. The positive control was glibenclamide and the negative control was 0.5% Na CMC. Identification  of  the  compounds  contained  in  the  extract  was  carried  out  by  phytochemical screening.  Statistical  data  analysis  using  one  way  ANOVA.  The  results  showed  that  96% ethanol  extract of karamunting  leaves had  the best  activity  in  reducing blood  glucose  levels with  a  decrease  of  40%.  The  statistical  test  results  showed  a  significant  difference  between each  treatment  group  (p<0.05).  In  96%  ethanol  extract  of  karamunting  leaves,  flavonoids, phenols, tannins and saponins were identified.
1 PENDAHULUAN
enyakit  degeneratif  merupakan  penyakit  tidak menular  yang  masih  menjadi  masalah  di
beberapa  negara.  Indonesia  merupakan  salah  satu negara dengan jumlah mortalitas tinggi pada pasien penyakit  tidak  menular.  Salah  satu  penyakit  tidak menular  yang  dapat  menyebabkan  kematian  tinggi
P
di  Indonesia  adalah  Diabetes  Melitus  (DM).  Hasil survei International Diabetes Foundation (IDF) tahun 2021 menyebutkan Indonesia menempati urutan ke 5 dari negara-negara dengan jumlah penderita dia- betes terbanyak di dunia. Angka penderita Diabetes Melitus  di  Indonesia  mencapai  19,5  juta  orang  [1] . Diabetes  Melitus  tipe-1  dapat  terjadi  akibat kerusakan  sel  beta  pankreas  ataupun  karena berkurangnya sensitivitas insulin. Tatalaksana utama pasien diabetes melitus ditujukan untuk mengontrol kadar  gula  darah  pasien.  Hal  ini  dilakukan  untuk mencegah  progresivitas  penyakit  karena  diabetes melitus  yang  tidak  terkontrol  dapat  menyebabkan komplikasi berupa mikrovaskular dan mikrovaskular yang  dapat  menurunkan  kualitas  hidup  dan meningkatkan  risiko  mortalitas  apabila  tidak ditangani.  Sejauh  ini,  telah  ditemukan  beberapa obat  sintesis  sebagai  antihiperglikemia  yang  bekerja dengan  beberapa  mekanisme  yaitu,  meningkatkan sensitivitas  insulin,  meningkatkan  produksi  insulin oleh  sel  beta  pankreas,  menghambat  pembentukan glukosa,  menghambat  glukoneogenesis,  dan  meng- hambat  alfa  glucosidase.  Obat-obat  antihipergli- kemia  dilaporkan  memiliki  banyak  efek  samping yang tidak diinginkan[2].
Indonesia  merupakan  negara  sub  tropis  dengan aneka  ragam  flora.  Beberapa  tanaman  Indonesia telah  banyak  diteliti  dan  memiliki  potensi  sebagai tanaman  obat.  Beberapa  penelitian  merekomen- dasikan untuk menggali potensi bahan alam sebagai terapi pendukung  beberapa penyakit [3]. Tanaman obat  memiliki  banyak  kandungan  bermanfaat sebagai  antioksidan  seperti  tannin,  flavonoid, vitamin  C,  dan  vitamin  E  yang  dapat  memberikan efek  untuk  menjaga  fungsi  sel β pancreas  dan menurunkan  kadar  glukosa  pada  darah  [4].  Salah satu  tamanan  yang  dilaporkan  memilki  potensi sebagai  tanaman  obat  adalah  karamunting ( Rhodomyrtus  tomentosa (Aiton)  Hassk)  yang termasuk  ke  dalam  famili Myrtaceae. Tanaman karamunting  merupakan  salah  satu  tanaman Indonesia yang telah banyak diteliti sebagai tanaman obat  [5].  Hasil  penelitian  sebelumnya  juga mengemukakan  bahwa  daun  karamunting  memiliki aktivitas antioksidan yang cukup tinggi [6]
Eksplorasi  terkait  aktivitas  antidiabetes  dari  ek- strak  dengan  berbagai  kepolaran  dari  daun  kara- munting belum pernah dilaporkan. Diabetes melitus juga merupakan penyakit dengan indikasi peningkatan kadar gula darah yang mengarahkan ke kejadian  stress  oksidatif  yang  berperan  dalam patogenesisnya  [7].  Pengunaan  senyawa  alam  yang memiliki aktivitas antoksidan seperti daun karamun- ting diperlukan untuk mengatasi penyakit seperti DM
karena  antioksidan  memodulasi  stress  oksidatif dengan  cara  menetralkan  molekul  reaktif  terutama nitrogen dan oksigen [8].

## 2 BAHAN DAN METODA
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental yang telah mendapatkan persetujuan etik oleh KEPK RSUP  Muhammad  Hoesin  dan  FK  Universitas Sriwijaya dengan No. 226/kepkrsmhfkunsri/2017. Uji aktivitas  dilakukan  secara  in  vivo  pada  tikus  putih jantan galur wistar yang diinduksi aloksan. Efek anti hiperglikemia diuji dari ekstrak n-heksana, etil asetat, dan  etanol  96%  daun  karamunting  yang  didapat dengan metode maserasi bertingkat. Simplisia kering daun karamunting di dapat dari wilayah Kabupaten Ogan Ilir, Sumatera Selatan.
Terdapat 6 kelompok uji, yaitu kelompok normal, kontrol  negatif,  kontrol  positif,  ektrak  etanol  96%, ekstrak  etil  asetat,  ekstrak  n-heksan.  Masing-masing kelompok  uji  terdapat  4  ekor  tikus.  Hewan  uji diinduksi  menggunakan  aloksan  secara  intraperi- tonial untuk mendapatkan efek hiperglikemia akibat kerusakan  sel  beta  pankreas.  Kontrol  positif  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  glibenklamid yang  merupakan  obat  hipoglikemia  oral  golongan sulfonilurea  dengan  mekanisme  kerja  merangsang sekresi insulin oleh sel beta pankreas.

## 2.1 Waktu dan tempat
Penelitian  dilakukan  mulai  bulan  April  hingga September  2017  di  Laboratorium  Biologi  dan Farmakologi  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  dan  UPT Klinik Universitas Sriwijaya.

## 2.2 Prosedur Penelitian

## Ekstraksi daun karamunting
Penelitian ini menguji aktivitas ekstrak dari tiga jenis pelarut  yaitu  n-heksana,  etil  asetat  dan  etanol  96%. Proses  ekstraksi dilakukan  dengan  metode  maserasi bertingkat pada 1 kg simplisia kering daun. Simplisia kering  ditambahkan  pelarut  n-heksana  sebanyak 18 L pada wadah yang terlindung cahaya selama 2 x 24 jam.  Maserat  yang  didapat  disaring  menggunakan kertas saring. Remaserasi menggunakan 16 L pelarut etil asetat selama 2 x 24 jam dilakukan pada residu serbuk  simplisia  yang  telah  kering  dari  pelarut  n- heksan.  Kemudian  dilakukan  kembali  remaserasi pada residu simplisia yang telah kering dari perlarut etil asetat menggunakan 8 L etanol 96% selama 2 x 24  jam.  Hasil  maserat  yang  didapat  dari  masing- masing  proses  ekstraksi  disaring  menggunakan
kertas  saring.  Setiap  proses  remaserasi  dilakukan hingga  didapat  maserat  yang  berubah  warna menjadi  bening.  Hasil  ekstrak  pekat  dari  masing- masing pelarut didapat dengan menguapkan pelarut menggunakan rotary evaporator pada suhu 50 o C [9].

## Preparasi Hewan Uji
Tikus putih jantan galur Wistar yang digunakan pada penelitian ini dipilih yang berusia 2 – 3 bulan dengan berat  badan  180  –  200  g.  Perlakuan  pada  masing- masing kelompok tersaji pada Tabel 1.
Tabel 1. Kelompok Perlakuan Normal Suspensi Na CMC 0,5% Kontrol negatif Aloksan + Suspensi Na CMC 0,5 % Kontrol positif Aloksan + Glibenklamid 0,59 mg/kgBB I Aloksan + Ekstrak etanol 280 mg/kg BB II Aloksan + Ekstrak etil asetat 280 mg/kg BB III Aloksan + Ekstrak n-heksana 280 mg/kg BB
Semua  kelompok  perlakuan  kecuali  kelompok normal diinduksi dengan aloksan dosis 130 mg/kgBB dalam larutan NaCl fisiologis secara intraperitoneal. Kadar  glukosa  dalam  darah  diukur  menggunakan strip  gluko-DR,  tiga  hari  setelah  penginduksian dengan mengambil sedikit darah melalui ekor tikus. Apabila KGD < 200mg/dL maka dilakukan kembali induksi aloksan 130mg/kgBB sampai KGD konstan > 200mg/dL  yang  menandakan  adanya  abnormalitas glukosa darah.

## Uji efektivitas anti hiperglikemia daun karamunting
Efektivitas  antihiperglikemia  diuji  dengan  cara mengambil  darah  hewan  uji  melalui plexus retroorbitalis dari  vena  bagian  mata  dengan menggunakan  pipet  hematokrit  sebanyak  1  mL. Darah  ditampung  dalam  tabung  non-EDTA kemudian  disentifugasi  2500  rpm  selama  10  menit untuk  mendapatkan  serum  darah.  Kemudian dilakukan penambahan 1 mL reagen pereaksi GOD- PAP  ( glucose  oxidase  phenol  aminoantipirin )  dan digojok  ad  homogen  lalu  sampel  diinkubasi  pada suhu  25 o C  selama  15  menit.  Inkubasi  sampel dilakukan dengan tujuan memberikan waktu kepada enzim  glukosa  oksidase  dan  peroksidase  bereaksi secara  optimum  karena  apabila  waktu  inkubasi kurang  dari  waktu  inkubasi  optimum,  maka  enzim tidak  akan  bereaksi  sempurna.  Sedangkan  apabila waktu  lebih  dari  waktu  optimum,  maka  senyawa yang  terbentuk  akan  terdegradasi  [10] . Prosedur pemeriksaan sampel darah terlampir pada Tabel 2.
Tabel 2. Prosedur Pengukuran KGD GOD-PAP
Larutan Sampel Baku   Blanko Serum darah 10 µL - - Glukosa standar - 10 µL - Pereaksi 1,0 mL 1,0 mL  1,0 mL

## Uji Skrining Fitokimia pada Ekstrak Daun Karamunting Paling Potensial
a.  Flavonoid
Sebanyak 0,1 g sampel ekstrak etanol dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi,  dilarutkan  5  mL  etanol, kemudian dipanaskan selama 5 menit dan disaring. Filtrat  yang  terbentuk  diberi  beberapa  tetes  HCl pekat  lalu  tambahkan  kurang  lebih  0,2  mg  bubuk magnesium  (logam  Mg).  Flavonoid  identifikasi apabila timbul warna merah [11]
b.  Fenolik dan Tanin
Sebanyak  0,1  g  sampel  ekstrak  etanol  dilarutkan dalam  aquades  10  mL,  dipanaskan  5  menit  dan disaring.  Filtrat  yang  terbentuk  ditetesi  4  –  5  tetes FeCl 3 . Adanya fenol dan tanin diidentifikasi dengan adanya warna biru tua atau hijau kehitaman [12].
c.  Alkaloid
Sebanyak  0,1  g  ekstrak  etanol  dilarutkan  dengan  9 mL  air  suling  dan  1  mL  HCl  2  N,  kemudian  dipa- naskan  di  atas  penangas  air  selama  2  menit  kemu- dian  didinginkan  dan  disaring.  Filtrat  yang  didapat dilakukan  pengujian  dengan  cara  berikut  berikut: Sejumlah 1 mL filtrat dipindahkan pada cawan por- selen tambahkan 2 tetes pereaksi Wagner. Hasil po- sitif menunjukkan adanya endapan coklat. Sejumlah 1 mL filtrat dipindahkan pada cawan porselen tam- bahkan 2 tetes pereaksi Mayer. Hasil positif menun- jukkan adanya endapan putih. Sejumlah 1 mL filtrat dipindahkan  pada  cawan  porselen  tambahkan  2 tetes pereaksi Dragendorf. Hasil positif menunjukkan adanya endapan jingga [11].
d.  Saponin
Sebanyak 0,1 g  sampel  ekstrak  etanol ditambahkan 10 mL air panas. Setelah itu didinginkan dan kocok secara  kuat.  Saponin  diidentifikasi  apabila  ditemu- kan busa putih  1 cm yang stabil dan busa tidak hi- lang saat penambahan 1 tetes HCl 2N [11].
e.  Steroid dan Triterpenoid Sebanyak  0,1 g  sampel  ekstrak  etanol  dilarutkan dalam  kloroform  kemudian  disaring.  Hasil  saringan diteteskan  pada  plat  tetes  sebanyak  2  –  3  tetes, biarkan mengering. Setelah kering, ditetesi pereaksi Lieberman-Burchad  (2  tetes  asam  asetat  anhidrat dan  1  tetes  asam  sulfat  pekat).  Hasil  positif
mengandung terpenoid apabila terbentuknya warna merah,  merah  jambu,  atau  violet,  sedangkan  jika berwarna  hijau  atau  biru  menandakan  positif adanya steroid [12].

## 2.3  Analisis Data
Data  kadar  gula  darah  berupa  data  rasio  yang kemudian  diuji  normalitas  menggunakan  Shapiro- wilk.  Data  yang  terdistribusi  normal  (p>0,05),  diuji hipotesis  menggunakan One  Way ANOVA ( Confidence  Interval 95%).  Uji  statistik  dilakukan menggunakan  SPSS  ver.  21.  Selain  itu,  dilakukan juga  perhitungan  persen  perubahan  kadar  glukosa darah menggunakan microsoft excel.

## 3 HASIL

## 3.1  Ekstraksi daun karamunting
Hasil ekstraksi dari masing-masing pelarut dipresentasikan  pada  Tabel  3.  Berdasarkan  data tersebut dapat terlihat rendemen ekstak paling tinggi diperoleh  menggunakan  pelarut  etanol  96%. Penelitian  ini  menemukan  bahwa  pelarut  n-heksan paling sedikit memperoleh rendemen.
Tabel 3. Data hasil berat dan % rendemen ekstrak  etanol,
etil asetat, dan n-heksana daun karamunting Ekstrak Berat Ekstrak (g)  % Rendemen Ekstrak n-heksana 16,62 1,66 Ekstrak etil asetat 19,81 1,98 Ekstrak etanol 96% 44,61 4,4

## 3.2  Preparasi Hewan Uji
Gambar 3 merupakan profil KGD hewan uji dengan induksi  aloksan.  Kemudian  dilakukan  uji  statistik untuk  memastian  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan yang  signifikan  pada  KGD  antar  kelompok  hewan uji. Artinya, KGD hewan uji sebelum diujikan ekstrak daun karamunting adalah sama.
Gambar 1. Grafik perbandingan KGD sebelum dan sesu- dah induksi aloksan.
Dari  hasil  uji  t-test  berpasangan  antar  kelompok terhadap  kadar  glukosa  darah  didapatkan  ada perbedaan yang signifikan (p<0,05) antar kelompok perlakuan  baik  sebelum  mendapatkan  aloksan  dan setelah mendapatkan aloksan.

## 3.3  Uji aktivitas anti hiperglikemia daun karamunting
Tabel 4 menyajikan hasil profil KDG hewan uji saat diberikan perlakuan. Setelah pemberian sediaan uji satu  kali  sehari  selama  15  hari  pengukuran  kadar glukosa darah dilakukan pada hari ke-5, 10, dan 15 diukur  dengan  menggunakan  spektrofotometer DTN-410-K.  Pada  data  tersebut  terlihat  bahwa adanya  kenaikan  KGD  pada  kontrol  negatif,  dan penurunan KGD pada kontrol positif. Gambar 2 juga menampilkan grafil KGD mulai hari ke 0 hingga hari ke 15, terlihat bahwa kadar glukosa darah kelompok normal  stabil  berada  pada  rentang  kadar  glukosa darah <126 mg/dL sedangkan kelompok perlakuan mengalami  perbedaan  (kenaikan  tinggi  dan penurunan  tinggi)  disetiap  hari  pengamatan  KGD dilakukan.
Tabel 4. Data rata-rata kadar glukosa darah pada hari ke-0 sampai hari ke-15
Kel. Rata-rata kadar glukosa darah (mg/dL) KGD Perlakuan Hari ke-0 Hari ke-5 Hari ke-10 Hari ke-15 Normal 122,48  22,6 114,89  19,6 109,75  2,1 111,89  35,2 Kontrol Negatif 264,30  21,6 264,30  21,5 267,34  20,7 274,56  20,9 Kontrol Positif 247,27  34,9 163,71  0,5 138,76  8,9 85,10  26,1 Etanol 96% 302,27  3,8 160,29  37,6 115,71  28,2 105,86  18,1 Etil asetat 252,48  22,7 176,51  42,4 138,15  29,8 118,73  22,3 N-Heksana 263,21  16,6 202,63  4,8 173,74  9,9 112,40  6,7
Gambar 2. Grafik rata-rata KGD tikus setelah induksi aloksan

## S. Liberitera dkk. / Antihiperglikemia ekstrak daun karamunting ...
Nilai  luas  daerah  dibawah  kurva  / Area  Under Curve (AUC)  kadar  glukosa  darah  dari  hari  ke-0 sampai  hari  ke-15,  dihitung  untuk  mengetahui perubahan  kadar  glukosa  darah  dari  hari  ke-0 sampai  hari  ke-15.  Hasil  perhitungan  AUC 0-15 dipresentasikan  pada  Tabel  5.  Nilai  AUC 0-15 ber- banding  terbalik dengan  aktivitas  antihiperglikemia. Semakin  rendah  nilai  AUC  kelompok  perlakuan, maka  semakin  baik  aktivitasnya  dalam  penurunan kadar  glukosa  darah.  Semakin  besar  persentase penurunan  kadar  glukosa  maka  aktivitas  anti- hiperglikeminya semakin baik. Tabel 5 menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  memiliki  aktivitas  paling baik dalam menurunkan kadar glukosa darah dilihat dari nilai AUC dan %PKGD.
Tabel 5. Data rata-rata AUC 0-15 dan % penurunan kadar glukosa darah (% PKGD) Kelompok AUC 0-15 %PKGD Normal 1709 Kontrol Negatif 4007 0 Kontrol Positif 2342,75 41,53 Etanol 96% 2400 40,10 Etil asetat 2500,75 37,59 N-heksana 2820,5 29,62 Tabel 6. Analisis statistik kadar glukosa darah antar kelompok perlakuan Sum of Squares df Mean Square F p Between Groups 8779379.544 5 1755875.909  22.239  <0,001 Within Groups 947474.834 12 78956.236 Total 9726854.378  17
Kelompok  kontrol  positif  dan  kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  tidak  memiilki  perbedaan yang  signifikan  (p>0,05)  karena  glibenklamid  dan ekstrak etanol daun karamunting mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Sedangkan kelompok  kontrol  negatif  dan  kelompok  ekstrak terdapat perbedaan yang signifikan (p<0,05) karena pemberian  suspensi  Na  CMC  0,5%  pada  kontrol negatif  tidak  mempengaruhi  penurunan  kadar glukosa  darah  tikus.  Perbedaan  yang  signifikan (p<0,05) antar kelompok kontrol positif dan negatif menunjukkan  adanya  penurunan  kadar  glukosa darah  pada  pemberian  glibenklamid  dari  pada kontrol  negatif  karena  tidak  adanya  senyawa  yang memilki aktivitas antidiabetes.

## 3.4  Uji Skrining Fitokimia pada Ekstrak Daun Karamunting Paling Potensial
Berdasarkan hasil uji aktivitas didapat bahwa ekstrak etanol  96%  daun  karamunting  merupakan  ekstrak yang  memiliki  aktivitas  paling  baik.  Kemudian dilakukan  uji  skrining  fitokimia  dari  ekstrak  daun karamunting untuk mengetahui kandungan senyawa yang  terdapat  pada  ekstrak  yang  paling  potensial tersebut.  Hasil  pengamatan  skrining  fitokimia disajikan pada Tabel 4. Tabel 4 menunjukkan bahwa ekstrak  etanol95%  daun  karamunting  mengandung senyawa flavonoid, fenol, tanin dan saponin.
Tabel 7. Data hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 96%
daun karamunting Golongan Senyawa  Hasil Fitokimia Flavonoid + Alkaloid - Fenol Tanin Terpenoid Steroid Saponin + + - - +
Keterangan: (+) : Positif (-) : Negatif

## 4 PEMBAHASAN

## 4.1 Ekstraksi
Rendemen suatu ekstrak merupakan ukuran jumlah senyawa  yang  dapat  diekstrak  dari  suatu  simplisia. Berat  rendemen  dapat  dipengaruhi  oleh  sifat polaritas  senyawa  yang  terkandung  dalam  simplisia juga  pelarut  yang  digunakan  dalam  menyari.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  96% merupakan  pelarut  dengan  rendemen  tertinggi. Etanol  merupakan  pelarut  universal  yang  dapat digunakan  untuk  ekstraksi  berbagai  senyawa  [13]. Hal ini dikarenakan etanol bersifat semipolar karena memiliki  struktur  yang  dapat  melarutkan  molekul polar  dan  nonpolar  [14].  Berdasarkan  hasil rendemen  juga  dapat diduga  bahwa senyawa  yang bersifat  polar  pada daun  karamunting  lebih  banyak yang  bersifat  nonpolar.  Pernyataan  tersebut  dapat didukung  dengan  hasil  penelitian  ini  yang menunjukkan  bahwa  ekstrak  dengan  rendemen paling  rendah  adalah  ekstrak  dengan  N-heksan. Pelarut  n-heksan  yang  memiliki  sifat  tidak  polar dibandingkan  etanol  96%,  hal  tersebut  dapat menjadi  latar  belakang  penyebab  ektral  n-heksan memiliki rendemen paling rendah [15].
Selain  polaritas  pelarut,  hal  lain  yang  dapat memengaruhi  berat  rendemen  adalah  proses ekstraksi  dan  luas  penampang  simplisia  yang berkontak  dengan  pelarut.  Semakin  kecil  ukuran
partikel  simplisia  maka  akan  semakin  besar  luas permukaan  partikel  sehingga  pelarut  semakin mudah  menarik  komponen  senyawa  dari  simplisia [16].  Hal  lain  yang  dapat  memengaruhi  persen rendemen adalah lama proses ekstraksi, karena lama durasi  ekstraksi  berbanding  lurus  dengan  jumlah rendemen yang dihasilkan  [17]

## 4.2 Preparasi hewan uji
Pemilihan  hewan  uji  pada  penelitian  ini  didasari oleh sifat fisiologis hewan uji. Penelitian ini menguji antihiperglikemia  sehingga  digunakan  tikus  jantan karena untuk mengurangi adanya bias pengamatan akibat  hormon  esterogen  pada  tikus  betina.  karena esterogen  tersebut  yang  menjadi  alasan  diabetes melitus  memiliki  prevalensi  yang  lebih  tinggi  pada jenis  kelamin  laki-laki  [18].  Hal  ini  dikarenakan estrogen  menyebabkan  pertambahan  sel-sel β pada pankreas Langerhans tikus putih diabetes [19]. Hasil penelitian  menunjukkan  distribusi  data  KGD  yang sama  antar  kelompok  perlakuan  yang  diinduksi aloksan  (tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan). Aloksan merupakan penginduksi hiperglikemik yang digunakan  pada  penelitian  ini.  aloksan  bekerja dengan cara untuk berikatan dengan reseptor GLUT 2 dan menyebabkan kerusakan sel sehingga didapat kondisi  hiperglikemi  seperti  pada  pasien  diabetes [20].  Selain  itu,  aloksan  juga  dapat  merusak  sel  pankreas    sehingga  produksi  insulin  berkurang  dan menyebabkan  hewan  uji  pada  kondisi  diabetes melitus  tipe  1  [21].  Prosedur  tersebut  dilakukan dengan  harapan  hewan  uji  akan  mengalami peningkatan  kadar  glukosa  darah  akibat  kurangnya stimulasi transport glukosa.
Pengukuran  glukosa  darah  puasa  pada  tahapan ini dilakukan untuk mengetahui respon dari induksi yang diberikan dan mengetahui besar respon insulin dalam  menyeimbangkan  gula  darah  dan  proses  ini lebih  efektif  untuk  pengukuran  glukosa  darah  pada penderita DM [22].
Induksi aloksan dilakukan secara berulang hingga didapat  terget  KGD  200  mg/dL  (kondisi hiperglikemi)  pada  tikus[21].  Dosis  minimun  yang dibutuhkan  untuk  menginduksi  tikus  adalah  120 mg/kgBB [23]. Pada penelitian ini dosis yang dipilih pada 130 mg/kgBB difungsikan untuk merusak sel  pankreas secara parsial dan perlahan sehingga sel  Langerhans  masih  dapat  mengasilkan  insulin[24] . Hasil  menunjukkan  bahwa  induksi  aloksan  pada dosis tersebut  menjukan  kondisi  hiperglikemia  yang ditandai  dengan  kadar  GKS  200mg/dL.  Hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil  penelitian  sebe- lumnya  yang  menyatakan  bahwa  induksi  aloksan menyebabkan fase peningkatan glukosa darah yang
diikuti  dengan  kondisi  DM  yang  stabil  [25].  Pada awal  induksi  aloksan  terjadi  penurunan  glukosa darah  yang  disebabkan  oleh  mekanisme  stimulasi sekresi insulin sementara [26]

## 4.3  Uji aktivitas anti hiperglikemia daun karamunting
Menurut  teori  aktivitas  antihiperglikemia  untuk pasien  DM  dapat  dilakukan  melalui  beberapa  cara yaitu  meningkatkan  produksi  insulin,  meningkatkan sensitivitas  insulin  pada  reseptornya,  menghambat gluconeogenesis, menghambat DPP-4, menghambat SGLT2,  dan  menghambat  enzim  glucosidase  alfa [27]–[32].
Kelompok kontrol positif mendapatkan Glibenklamid  dengan  dosis  0,59  mg/200KgBB. Glibenklamid  merupakan  obat  antihiperglikemia oral golongan sulfonilurea yang bekerja dengan cara merangsang sekresi insulin pada sel  pankreas. Hal ini sesuai dengan kondisi hewan uji dengan aloksan yang  telah  mengalami  kerusakan  sel  pankreas parsial  sehingga  masih  terdapat  produksi  insulin pada  jumlah  yang  sedikit.  Grafik  hasil  uji menunjukkan bahwa ketiga ekstrak daun karamunting  yang  diuji  memiliki  aktivitas  terhadap penurunan  KGD  hal  ini  terlihat  pada  penurunan grafik  pada  kelompok  perlakuan.  Artinya,  terdapat aktivitas  hipoglikemi  yang  diberikan  oleh  ekstrak daun  karamunting,  baik  menggunakan  pelarut etanol,etil asetat dan n-heksan. Aktivitas antihiperglikemia  pada  ekstrak-ekstrak  yang  diuji memiliki  aktivitas  hampir  sama  dengan  kontrol positif.  Glibenklamid  sebagai  kontrol  positif  bekerja dengan mekanisme stimulasi sekresi hormon insulin dari  sel  langerhans  pankreas  sehingga  terjadi depolarisasi  membran  akibat  adanya  interaksi Glibenklamid  dengan ATP-sensitive-K-channel pada membran sel  sehingga kanal kalsium (Ca) terbuka. Kanal  Ca  yang  terbuka  menyebabkan  ion  Ca 2+ masuk  ke  dalam  sel  dan  memberikan  stimulasi kepada  sel  [33].  Kelompok  perlakuan  ekstrak etanol 96%, etil asetat, dan n-heksana dengan dosis sama  280  mg/kgBB  mengalami  penurunan  kadar glukosa  darah  yang  diduga  akibat  adanya  senyawa yang memiliki aktivitas antihipreglikemia.

## 4.4  Uji Skrining Fitokimia pada Ekstrak Daun Karamunting Paling Potensial
Penurunan  kadar  glukosa  darah  yang  ditemukan pada  penelitian  ini  dapat  disebabkan  oleh  adanya senyawa  kimia  dalam  masing-masing  ekstrak  daun karamunting  yang  diduga  memiliki  aktivitas  agen hipoglikemia.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan
bahwa  ekstrak  etanol  96%  memiliki  aktivitas  paling baik  mengandung  senyawa  flavonoid,  fenol,  tanin, dan  saponin.Salah  satu  metaboli  sekunder  yang diidentifikasi  terkandung  pada  ekstrak  etanol  96% daun karamunting adalah flavonoid yang diklasifikasikan  menjadi  6  subkelas  (flavonols, flavones,  flavanones,  isoflavones,  flavanols,  and anthocyanidins)  yang  masing-masing  dari  senyawa tersebut  memiliki  mekanisme  sebagai  agen hipoglikemi yang berbeda [34].
Beberapa  senyawa  flavonoid  subkelas  favonol seperti kuersetin memiliki mekanisme mirip dengan kerja  sulfonilurea  dan  tiazolidindion  dalam  sekresi insulin  dan  sensitivitasnya  terhadap  insulin  [35]. Beberapa senyawa flavonol yang diketahui memiliki aktivitas  yang  mirip  dengan  kontrol  positif  pada penelitian  ini  (glibenklamid)  adalah  kuersetin  dan kaemferol  [35],  [36].Selain  itu,  terdapat  juga  rutin yang  merupakan  senyawa  yang  golongan  flavonol memiliki  aksi  dalam  peningkatan  penyerapan glukosa dan menghambat glukoneogensesis jaringan seperti pada kerja obat akarbosa dan biguanid [37].
Golongan  flavon  khususnya  hesperidin  dan narigin diketahui dapat memberikan efek antihiperglikemia  dengan  memengaruhi  GLUT  4 (Glucose Transporter Type 4) dengan meningkatkan transport glukosanya seperti mekanisme kerja insulin dalam mentransport glukosa [38]. Selain itu, narigin dapat memberikan efek dalam pengaturan produksi enzim  yang  memengaruhi  glikolisis  [39].  Senyawa flavon  (baikalein)  juga  ada  yang  memiliki  aktivitas untuk  melemahkan  resistensi  insulin  dengan meningkatkan signaling AMPK  (AMP-activated  pro- tein kinase) [40]
Senyawa  tanin  yang  diidentifikasi  dari  ekstrak etanol  96%  daun  karamunting  pada  peneitian  ini memiliki  efek  aktivitas  antihiperglikemia  [41].  Tanin berperan dalam menstimulasi transport glukosa dan menghambat  difrensiasi  adiposa  pada  sel  3T3-L1 [42]. Kemudian saponin yang juga teridentifikasi pa- da ekstrak penelitian ini juga memiliki aktivitas anti- hiperglikemia dengan cara meregulasi jalur signaling secara  bersamaan  pada  reseptor-reseptor  yang  ter- dapat  di  pancreas,  hati,  dan  saluran  cerna.  Selain itu,  saponin  juga  memiliki  mekanisme  kerja  meng- hambat enzim α -glukosidase seperti obat OHO akar- bose [43].
Berdasarkan  litratur  pendukung  yang  telah diuraikan  tersebut  maka  dapat  disimpulkan  pada penelitian  ini  mekanisme  antihiperglikemik  dari ekstrak  etanol  96%  daun  karamunting  bisa  didapat dari  berbagai  mekanisme  menyerupai  mekanisme kerja  OHO  yang  berkerja  sinergis,  sehingga  pada
hasil uji aktivitas terpresentasikan aktivitas mendeka- ti  kontrol  positif  (sulfonilurea)  yang  hanya  bekerja untuk  meningkatkan  sekresi  insulin  oleh  sel β pankreas.  Namun,  hal  ini  perlu  penelitian  lebih lanjut terkait senyawa pasti pada ekstrak etanol 96% daun  karamunting  yang  diduga  memiliki  aktivitas dalam penurunan kadar glukosa darah.

## 5 KESIMPULAN
Ekstrak  daun  karamuting  ( Rhodomyrtus  tomentosa (Aiton) Hassk) memiliki persentase penurunan kadar glukosa darah tertinggi pertama pada ekstrak etanol 96% (40,10%) mendekati penurunan kadar oleh gli- benklamid  (41,53%).  Pada  ekstrak  etanol 96% daun karamunting teridentifikasi senyawa flavonoid, fenol, tanin dan saponin.

## REFERENSI ______________________________
[1] World Health Organization, “Indonesia: diabetes coun- try profile,” 2016.
[2] A. Chaudhury et al. , “Clinical Review of Antidiabetic Drugs: Implications for Type 2 Diabetes Mellitus Man- agement,” Front Endocrinol (Lausanne) , vol. 8, Jan. 2017, doi: 10.3389/fendo.2017.00006.
[3] M. A. Lim and R. Pranata, “The insidious threat of jamu and unregulated traditional medicines in the COVID- 19 era,” Diabetes & Metabolic Syndrome: Clinical Re- search & Reviews , vol. 14, no. 5, pp. 895–896, Sep. 2020, doi: 10.1016/j.dsx.2020.06.022.
[4] W. Kooti, M. Farokhipour, Z. Asadzadeh, D. Ashtary- Larky, and M. Asadi-Samani, “The role of medicinal plants in the treatment of diabetes: a systematic re- view,” Electron Physician , vol. 8, no. 1, pp. 1832–1842, Jan. 2016, doi: 10.19082/1832.
[5] T. Vo and D. Ngo, “The Health Beneficial Properties of Rhodomyrtus tomentosa as Potential Functional Food,” Biomolecules , vol. 9, no. 2, p. 76, Feb. 2019, doi: 10.3390/biom9020076.
[6] W. Suryadinata et al. , “Telaah Fitokimia Senyawa An- tioksidan dari Ekstrak dan Fraksi Daun Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk.) Fitokimia Studies on Antioxidants from Extract and Karamunting Leaves (Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk,” Pro- siding Farmasi Spesial , vol. 2, no. 2, pp. 664–669, 2016.
[7] O. O. Elekofehinti, “Saponins: Anti-diabetic principles from medicinal plants – A review,” Pathophysiology , vol. 22, no. 2, pp. 95–103, Jun. 2015, doi:
10.1016/j.pathophys.2015.02.001.
[8] M. Kawser Hossain et al. , “Molecular Mechanisms of the Anti-Obesity and Anti-Diabetic Properties of Flavo- noids,” Int J Mol Sci , vol. 17, no. 4, p. 569, Apr. 2016, doi: 10.3390/ijms17040569.
[9] Q.-W. Zhang, L.-G. Lin, and W.-C. Ye, “Techniques for extraction and isolation of natural products: a compre-
hensive review,” Chin Med , vol. 13, no. 1, p. 20, Dec. 2018, doi: 10.1186/s13020-018-0177-x.
[10] N. Yuniarti, R. Nur Maulawati, and S. Pramono, “Effect Of Water Soluble Fraction Of Cotton Banana (Musa Paradisiaca L.) Ethanolic Extract On The Blood Glu- cose Levels In Vivo And Active Compounds Identifica- tion Pengaruh Pemberian Fraksi Larut Air Ekstrak Eta- nolik Pisang Kapas (Musa Paradisiaca L.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Secara In Vivo Dan Pelacakan Senyawa Aktifnya,” Traditional Medicine Journal , vol. 19, no. 2, p. 2014, 2014.
[11] Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Materia Medika Indonesia , 4th ed. Jakarta: Departemen Kese- hatan Republik Indonesia, 1995.
[12] [12]  Harborne, Motode Fitokimia , 2nd ed. Bandung: Penerbit ITB, 1987.
[13] [13]  N. Jiménez-Moreno, F. Volpe, J. A. Moler, I. Es- parza, and C. Ancín-Azpilicueta, “Impact of Extraction Conditions on the Phenolic Composition and Antioxi- dant Capacity of Grape Stem Extracts,” Antioxidants , vol. 8, no. 12, p. 597, Nov. 2019, doi:
10.3390/antiox8120597.
[14] S. Henkel, M. C. Misuraca, P. Troselj, J. Davidson, and C. A. Hunter, “Polarisation effects on the solvation properties of alcohols,” Chem Sci , vol. 9, no. 1, pp. 88– 99, 2018, doi: 10.1039/C7SC04890D.
[15] [15]  P. Subra-Paternault, M. del P. Garcia-Mendoza, R. Savoire, and C. Harscoat-Schiavo, “Impact of Hy- dro-Alcoholic Solvents on the Oil and Phenolics Ex- traction from Walnut (Juglans regia L.) Press-Cake and the Self-Emulsification of Extracts,” Foods , vol. 11, no. 2, p. 186, Jan. 2022, doi: 10.3390/foods11020186.
[16] E. S. Prasedya et al. , “Effect of particle size on phyto- chemical composition and antioxidant properties of Sargassum cristaefolium ethanol extract,” Sci Rep , vol. 11, no. 1, p. 17876, Sep. 2021, doi: 10.1038/s41598- 021-95769-y.
[17] A. Abubakar and M. Haque, “Preparation of medicinal plants: Basic extraction and fractionation procedures for experimental purposes,” J Pharm Bioallied Sci , vol. 12, no. 1, p. 1, 2020, doi: 10.4103/jpbs.JPBS_175_19.
[18] M. Alemany, “Estrogens and the regulation of glucose metabolism,” World J Diabetes , vol. 12, no. 10, pp. 1622–1654, Oct. 2021, doi: 10.4239/wjd.v12.i10.1622.
[19] F. Ghaemmaleki, P. Mohammadi, M. Baeeri, M. Na- vaei-Nigjeh, M. Abdollahi, and S. Mostafalou, “Estro- gens counteract tributyltin-induced toxicity in the rat is- lets of Langerhans,” Heliyon , vol. 6, no. 3, p. e03562, Mar. 2020, doi: 10.1016/j.heliyon.2020.e03562.
[20] L. A. D. Queiroz et al. , “Endangered Lymphocytes: The Effects of Alloxan and Streptozotocin on Immune Cells in Type 1 Induced Diabetes,” Mediators Inflamm , vol. 2021, pp. 1–15, Oct. 2021, doi: 10.1155/2021/9940009.
[21] O. M. Ighodaro, A. M. Adeosun, and O. A. Akinloye, “Alloxan-induced diabetes, a common model for eva- luating the glycemic-control potential of therapeutic compounds and plants extracts in experimental stu-
dies,” Medicina (B Aires) , vol. 53, no. 6, pp. 365–374, 2017, doi: 10.1016/j.medici.2018.02.001.
[22] M. Sinnott et al. , “Fasting Plasma Glucose as Initial Screening for Diabetes and Prediabetes in Irish Adults: The Diabetes Mellitus and Vascular Health Initiative (DMVhi),” PLoS One , vol. 10, no. 4, p. e0122704, Apr. 2015, doi: 10.1371/journal.pone.0122704.
[23] A. Mostafavinia, A. Amini, S. K. Ghorishi, R. Pouriran, and M. Bayat, “The effects of dosage and the routes of administrations of streptozotocin and alloxan on induc- tion rate of type1 diabetes mellitus and mortality rate in rats,” Lab Anim Res , vol. 32, no. 3, p. 160, 2016, doi: 10.5625/lar.2016.32.3.160.
[24] S. S. Rahman, N. Yasmin, A. T. M. Mizanur Rahman, A. zaman, M. H. Rahman, and S. M. Abdur Rouf, “Evaluation and Optimization of Effective-dose of Al- loxan for Inducing Type-2 Diabetes Mellitus in Long Evans Rat,” Indian Journal of Pharmaceutical Education and Research , vol. 51, no. 4s, pp. s661–s666, Dec. 2017, doi: 10.5530/ijper.51.4s.96.
[25] A. N. Lucchesi, L. L. Cassettari, and C. T. Spadella, “Alloxan-Induced Diabetes Causes Morphological and Ultrastructural Changes in Rat Liver that Resemble the Natural History of Chronic Fatty Liver Disease in Hu- mans,” J Diabetes Res , vol. 2015, pp. 1–11, 2015, doi: 10.1155/2015/494578.
[26] P. Rorsman and F. M. Ashcroft, “Pancreatic β -Cell Elec- trical Activity and Insulin Secretion: Of Mice and Men,” Physiol Rev , vol. 98, no. 1, pp. 117–214, Jan. 2018, doi: 10.1152/physrev.00008.2017.
[27] W. Lv, X. Wang, Q. Xu, and W. Lu, “Mechanisms and Characteristics of Sulfonylureas and Glinides,” Curr Top Med Chem , vol. 20, no. 1, pp. 37–56, Jan. 2020, doi: 10.2174/1568026620666191224141617.
[28] [28]  H. E. Lebovitz, “Thiazolidinediones: the Forgot- ten Diabetes Medications,” Curr Diab Rep , vol. 19, no. 12, p. 151, Dec. 2019, doi: 10.1007/s11892-019-1270-y.
[29] M. Altay, “Acarbose is again on the stage,” World J Diabetes , vol. 13, no. 1, pp. 1–4, Jan. 2022, doi: 10.4239/wjd.v13.i1.1.
[30] B. Gallwitz, “Clinical Use of DPP-4 Inhibitors,” Front Endocrinol (Lausanne) , vol. 10, Jun. 2019, doi: 10.3389/fendo.2019.00389.
[31] D. S. Hsia, O. Grove, and W. T. Cefalu, “An update on sodium-glucose co-transporter-2 inhibitors for the treatment of diabetes mellitus,” Current Opinion in En- docrinology & Diabetes and Obesity , p. 1, Nov. 2016, doi: 10.1097/MED.0000000000000311.
[32] G. Rena, D. G. Hardie, and E. R. Pearson, “The me- chanisms of action of metformin,” Diabetologia , vol. 60, no. 9, pp. 1577–1585, Sep. 2017, doi: 10.1007/s00125- 017-4342-z.
[33] M. Jadna Silva Frederico et al. , “Mechanism of Action of Novel Glibenclamide Derivatives on Potassium and Calcium Channels for Insulin Secretion,” Curr Drug Targets , vol. 18, no. 6, pp. 641–650, Mar. 2017, doi:
10.2174/1389450117666160615084752.
[34] AL-Ishaq, Abotaleb, Kubatka, Kajo, and Büsselberg, “Flavonoids and Their Anti-Diabetic Effects: Cellular Mechanisms and Effects to Improve Blood Sugar Le- vels,” Biomolecules , vol. 9, no. 9, p. 430, Sep. 2019, doi: 10.3390/biom9090430.
[35] P. Haddad and H. Eid, “The Antidiabetic Potential of Quercetin: Underlying Mechanisms,” Curr Med Chem , vol. 24, no. 4, pp. 355–364, Mar. 2017, doi: 10.2174/0929867323666160909153707.
[36] AL-Ishaq, Abotaleb, Kubatka, Kajo, and Büsselberg, “Flavonoids and Their Anti-Diabetic Effects: Cellular Mechanisms and Effects to Improve Blood Sugar Le- vels,” Biomolecules , vol. 9, no. 9, p. 430, Sep. 2019, doi: 10.3390/biom9090430.
[37] A. Ghorbani, “Mechanisms of antidiabetic effects of flavonoid rutin,” Biomedicine & Pharmacotherapy , vol. 96, pp. 305–312, Dec. 2017, doi:
10.1016/j.biopha.2017.10.001.
[38] Y. O. Agrawal et al. , “Hesperidin Produces Cardiopro- tective Activity via PPAR- γ Pathway in Ischemic Heart Disease Model in Diabetic Rats,” PLoS One , vol. 9, no. 11, p. e111212, Nov. 2014, doi: 10.1371/journal.pone.0111212.
[39] A. K. Singh et al. , “Isolated mangiferin and naringenin exert antidiabetic effect via PPAR γ /GLUT4 dual ago- nistic action with strong metabolic regulation,” Chem Biol Interact , vol. 280, pp. 33–44, Jan. 2018, doi: 10.1016/j.cbi.2017.12.007.
[40] Z. Yang, W. Huang, J. Zhang, M. Xie, and X. Wang, “Baicalein improves glucose metabolism in insulin re- sistant HepG2 cells,” Eur J Pharmacol , vol. 854, pp. 187–193, Jul. 2019, doi: 10.1016/j.ejphar.2019.04.005.
[41] M. Ajebli and M. Eddouks, “The Promising Role of Plant Tannins as Bioactive Antidiabetic Agents,” Curr Med Chem , vol. 26, no. 25, pp. 4852–4884, Oct. 2019, doi: 10.2174/0929867325666180605124256.
[42] G. Oboh, O. B. Ogunsuyi, D. O. Adegbola, A. O. Ade- miluyi, and F. L. Oladun, “Influence of gallic and tan- nic acid on therapeutic properties of acarbose in vitro and in vivo in Drosophila melanogaster,” Biomed J , vol. 42, no. 5, pp. 317–327, Oct. 2019, doi: 10.1016/j.bj.2019.01.005.
[43] Y. Gu, X. Yang, C. Shang, T. T. P. Thao, and T. Koya- ma, “Inhibitory properties of saponin from Eleocharis dulcis peel against α -glucosidase,” RSC Adv , vol. 11, no. 25, pp. 15400–15409, 2021, doi: 10.1039/D1RA02198B.____________________________