## Peningkatan Kadar
8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) Urine pada Pasien Dermatitis Atopik Anak
( Increasing of Urinary 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) Levels in

## Children with Atopic Dermatitis )

## Shakti Indraprasta, Iskandar Zulkarnain, Evy Ervianti
Departemen/Staf Medik Fungsional Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga/Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Soetomo Surabaya

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Dermatitis  atopik  (DA)  merupakan  penyakit  inflamasi  kronis  kulit  yang  terjadi  pada  individu  dengan diatesis  alergi. Reactive  oxygen  species (ROS)  dianggap  terlibat  dalam  patogenesis  inflamasi  alergi. 8- Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG)  merupakan  suatu  penanda  kerusakan  basa  DNA  oksidatif.  Penelitian  terdahulu  tentang kadar 8-OHdG urine pada DA anak menunjukkan hasil yang bervariasi. Tujuan : Mengevaluasi kadar 8-OHdG urine pasien DA  anak  di  Unit  Rawat  Jalan  RSUD  Dr.  Soetomo  Surabaya. Metode: Penelitian  deskriptif  observasional  potong  lintang, pasien DA pada anak-anak  yang  memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi selama periode waktu  3 bulan (Maret hingga Juni 2016).  Dilakukan  pengambilan  sampel  urine  dan  diperiksa  8-OHdG. Hasil: Rerata  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA  anak sebesar 17,236 ± 13,596 ng/mL. Rerata 8-OHdG urine pada pasien DA anak dengan derajat keparahan ringan, sedang, dan berat masing-masing yaitu 7,892 ± 5,596 ng/mL, 16,006 ± 13,662 ng/mL, dan 27,321 ± 12,668 ng/mL. Simpulan : Terdapat kecenderungan peningkatan kadar 8-OHdG urine sesuai dengan peningkatan derajat keparahan DA anak yang kemungkinan dapat disebabkan oleh peran stres oksidatif pada patogenesis DA. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui peran antioksidan pada DA dan hubungan antara derajat keparahan DA dengan kadar 8-OHdG urine.
Kata kunci : dermatitis atopik, 8-OHdG urine, stres oksidatif.

## ABSTRACT
Background: Atopic dermatitis (AD) is a chronic inflammation of the skin occurring in individuals with allergic diathesis. Reactive  oxygen  species  (ROS)  is  assumed  to  be  involved  in  the  pathogenesis  of  allergic  inflammation.  8- Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) is a marker of oxidative DNA base damage. Previous research showed a various result in  urinary  8-OHdG  levels  of  AD  in  children. Purpose: To  evaluate  urinary  8-OHdG  level  of  children  with  AD  in Dermatology and Venereology Outpatient Clinic at Dr. Soetomo general hospital Surabaya. Methods: This is a descriptive observational cross sectional research in children with AD at Dermatology and Venereology Outpatient Clinic Dr. Soetomo hospital who qualified inclusion and exclusion criteria in three months period (March to June 2016). Urine sampling for 8- OhdG examination were underwent from all subjets. Results: Mean urinary 8-OHdG level of children with AD was 17.236 ± 13.596 ng/mL. Mean urinary 8-OHdG level of AD in children with mild, moderate, and severe based on grade of severity were  7.892  ±  5.596  ng/mL,  16.006  ±  13.662  ng/mL,  and  27.321  ±  12.668  ng/mL  respectively. Conclusion: There  is  a tendency of increased levels of urinary 8-OHdG in accordance with increasing grade of severity in children with AD which possibly  caused  by  the  role  of  oxidative  stress  in  the  pathogenesis  of  AD.  Further  research  is  needed  to  reveal  the  role  of antioxidant in AD and the connection between the severity of AD and urinary 8-OHdG levels.
Key words : atopic dermatitis, urinary 8-OHdG, oxidative stress.
Alamat  korespondensi:  Shakti  Indraprasta,  Departemen/Staf  Medik  Fungsional  Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin,  Fakultas Kedokteran  Universitas  Airlangga,  Rumah  Sakit  Umum  Daerah  Dr.  Soetomo,  Jl.  Mayjen  Prof  Dr.  Moestopo  No.  6-8 Surabaya 60131, Indonesia. Telepon: +62315501609, Indonesia, e-mail: shakti.indraprasta@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Dermatitis  Atopik  (DA)  merupakan  penyakit eksaserbasi  berulang,  terutama  ditandai  dengan keradangan  kulit  dan  gatal,  yang  sebagian  besar didapatkan  pada  pasien  dengan  diatesis  atopik. Diatesis  atopik  yaitu  riwayat  pribadi  atau  keluarga
dengan  asma  bronkial,  rinitis  alergi,  konjungtivitis, dan/atau  dermatitis  atopik  dan/atau  predisposisi terhadap  produksi  antibodi  imunoglobulin  E  (IgE) yang  berlebihan.  Lesi  eksematosa  yang  muncul  saat masa  bayi  atau  masa  kanak-kanak  dapat  bertahan tanpa sembuh total atau berulang kali kambuh bahkan
pada  saat  dewasa. 1 Prevalensi  DA  bervariasi  antara negara dan terus meningkat di seluruh dunia terutama terjadi  pada  negara-negara  industri.  Prevalensi  DA diperkirakan  sekitar  15-30%  pada  anak-anak  dan  2- 10%  pada  dewasa. 2 Prevalensi  DA  di  Divisi Dermatologi Anak Unit Rawat Jalan (URJ) Kesehatan Kulit  dan  Kelamin  RSUD  Dr.  Soetomo  Surabaya, selama  kurun  waktu 3 tahun  yaitu sejak 2010 hingga 2012 tercatat sebesar 12,16%. 3
Etiopatogenesis  DA  belum  diketahui  secara pasti, namun secara umum dipengaruhi oleh interaksi kompleks  gangguan  fungsi  sawar  kulit,  kelainan sistem imun, genetik, dan faktor-faktor lain termasuk keadaan  lingkungan,  diet,  infeksi,  dan  stres.  Pasien DA  yang  memiliki  gangguan  fungsi  sawar  kulit  dan sistem  imunitas,  memiliki  kecenderungan  terjadi kolonisasi  dan  infeksi  mikroorganisme  terutama Staphylococcus aureus yaitu sekitar 90%. Patogen ini berpotensi  memperberat  atau  memberikan  kontribusi pada inflamasi yang persisten pada kulit pasien DA. 4
Reactive  Oxygen  Species (ROS)  yang  terbentuk secara  terus  menerus  dalam  sel  organisme  aerobik merupakan  bagian  dari  proses  fisiologis,  metabolik, dan  reaksi  biokimia  lainnya.  ROS  endogen  dan radikal  oksigen  bebas  memiliki  fungsi  fisiologis penting  yaitu  berperan  pada  pelepasan  sinyal  sel  dan homeostasis, tetapi karena sifatnya yang reaktif dapat menyebabkan  kerusakan  oksidatif  membran  sel lemak,  protein,  dan Deoxyribonucleic  Acid (DNA). Faktor eksogen seperti radiasi  Ultraviolet (UV), asap rokok,  asbes,  dan  zat  karsinogenik  juga  dapat menghasilkan ROS dalam berbagai macam kondisi. 5 DA  merupakan  inflamasi  kronis  kulit  yang terjadi  pada  individu  dengan  diatesis  alergi.  ROS dianggap  terlibat  dalam  patogenesis  inflamasi  alergi. Peningkatan  generasi  ROS  kemungkinan  dapat menjadi  salah  satu  faktor  yang  berkontribusi  pada kerusakan  jaringan  pada  DA  jangka  panjang. 6 Produk-produk rusak yang dihasilkan akibat kerusakan  DNA,  dieliminasi  oleh  enzim repair dan terdeteksi  sebagai  derivat  nukleosida.  Kadar  produk- produk  ini  tergantung  pada  keseimbangan  kerusakan dan  perbaikan  ( repair ),  sehingga  kadar  ini  dapat digunakan  sebagai  jumlah  relatif  kerusakan  DNA keseluruhan  oleh  ion  OH - .  Suatu  penanda  kerusakan basa DNA oksidatif adalah 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG),  yang  terjadi  ketika  OH - mengoksidasi deoxyguanosine .  Jumlah  produk  yang  diekskresikan melalui urine ini mencerminkan besarnya kerusakan. 7
8-OHdG telah dievaluasi penggunaannya sebagai penanda kerusakan oksidatif pada DA. Urine dianggap  sebagai  bahan  biologis  yang  ideal  untuk melihat  stres  oksidatif  karena  dapat  dilakukan  secara
noninvasif. Stres oksidatif merupakan salah satu jalur inflamasi  pada  DA  dan  dapat  menyebabkan kerusakan  DNA.  8-OHdG  pada  urine  merupakan salah satu hasil reaksi kerusakan dan perbaikan DNA yang  dieliminasi  oleh  enzim repair yang  disebabkan oleh stres oksidatif. 8-OHdG merupakan produk yang relatif  berlimpah  dan  mudah  terdeteksi  sebagai  hasil kerusakan  DNA  oksidatif  dan  dengan  demikian dianggap  sebagai  penanda  yang  berguna  dan  relevan untuk stres oksidatif. 8
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Tsuboi  dan kawan-kawan  di  Jepang  menunjukkan  peningkatan kadar  8-OHdG  urine  yang  diambil  setiap  hari  dan didapatkan  korelasi  antara  indeks Scoring  of  Atopic Dermatitis (SCORAD)  pada  pasien  DA 6 , namun penelitian  oleh  Nakai  dan  kawan-kawan  diketahui bahwa  kadar  8-OHdG  urine  pada  pengambilan  satu sampel  tidak  meningkat  dan  tidak  berhubungan dengan skor Eczema Area and Severity Index (EASI) pada  pasien  DA. 8 Penelitian  Tsukahara  dan  kawan- kawan  menyimpulkan  kadar  urine  8-OHdG  lebih tinggi secara signifikan pada pasien DA dibandingkan pada  kontrol  orang  sehat. 9 Penelitian  Tsuboi  dan kawan-kawan  diketahui  bahwa  kadar  8-OHdG  urine menunjukkan korelasi kuat dengan kadar IgE sebagai penanda derajat keparahan DA, sehingga pengukuran 8-OHdG urine, sebuah metode yang noninvasif, dapat menjadi  teknik  yang  nyaman  dilakukan  dalam mengevaluasi  derajat  keparahan  DA. 6 Kesimpulan dari  penelitian-penelitian  tersebut  secara  keseluruhan dapat  menjadi  dasar  hipotesis  yang  diajukan  pada peran  kunci  stres  oksidatif  pada  DA. Hasil  penelitian tersebut tidak membahas etiologi DA pada anak-anak, namun  mendukung  hipotesis  bahwa  gangguan homeostasis radikal oksigen/nitrogen dan peningkatan stres  oksidatif  berhubungan  dengan  patofisiologi  DA masa kanak-kanak. Hasil penelitian-penelitian tersebut  juga  menunjukkan  bahwa  penggunaan  agen antioksidan  dapat  menjadi  suatu  strategi  yang berpotensi bermanfaat untuk pengobatan DA. 10
Penelitian  mengenai  8-OHdG  urine  pada  DA anak  sudah  beberapa  kali  dilakukan  di  Jepang  dan belum  banyak  dilakukan  di  negara  lain,  sehingga penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengukur  kadar  8- OHdG  urine  pada  berbagai  derajat  keparahan  DA anak pada populasi  yang banyak  terpapar  oleh faktor ROS eksogen di Surabaya,  mengetahui perbandingan gambaran  hasil  penelitian  yang  serupa  dengan penelitian  sebelumnya  di  negara-negara  lain,  dapat mengetahui  peran  stres  oksidatif  dalam  patogenesis DA,  serta  mempertimbangkan  pemberian  terapi antioksidan pada DA.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  deskriptif observasional  dengan  rancangan  penelitian  potong lintang  yang  bertujuan  untuk  mengevaluasi  kadar  8- OHdG urine pada pasien DA anak. Sampel penelitian berupa  urine pasien DA anak  yang datang berobat di URJ  Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin  RSUD  Dr. Soetomo Surabaya yang memenuhi kriteria penerimaan  sampel  selama  periode  3  bulan  (Maret hingga Juni 2016). Kriteria penerimaan sampel adalah semua  pasien  DA  anak  berusia  1  bulan  hingga  14 tahun yang memenuhi kriteria diagnosis DA menurut Hanifin  dan  Rajka,  bersedia  ikut  penelitian,  dan menandatangani informed consent. Kriteria penolakan sampel  meliputi pasien  yang  mengonsumsi suplemen antioksidan  atau  obat  antiinflamasi  sistemik  dalam  2 minggu terakhir atau sesuai dengan  waktu paruh  tiap obat,  pasien  dengan  kelainan  sistemik  (keganasan, diabetes  melitus,  gangguan  hepar,  gangguan  ginjal, gangguan jantung), dan pasien dengan gizi buruk atau gizi  kurang  berdasarkan  kurva  pertumbuhan World Health  Organization (WHO)  dan growth  charts dari Centers for Disease Control and Prevention (CDC).
Dilakukan  anamnesis  dan  pemeriksaan  fisik pada  tiap  pasien  DA  anak,  jika  pasien  memenuhi kriteria penerimaan sampel, maka dilakukan informed consent dan diambil sampel urine. Sampel yang telah diambil  diserahkan  ke  laboratorium  Rumah  Sakit Khusus  Infeksi  (RSKI)  Universitas  Airlangga Surabaya  untuk  dilakukan  pemeriksaan  kadar  8- OHdG  urine.  Hasil  pemeriksaan  kadar  8-OHdG dicatat  pada  lembar  pengumpul  data  kemudian dilakukan pengolahan data.

## HASIL
Jumlah  keseluruhan  subjek  pasien  DA  yaitu anak  laki-laki  14  orang  (46,7%)  dan  perempuan sebanyak 16 orang (53,3%). Subjek penelitian berusia antara  1,5  bulan  sampai  13  tahun,  dengan  rerata  usia 4,48  tahun.  Pasien  dikelompokkan  berdasarkan kategori  usia  menurut  CDC.  Kelompok  usia  infantil 0-  2  tahun  sebanyak  14  orang  (46,7%)  dan kelompok  usia  anak  >2-14  tahun  sebanyak  16  orang (53,3%). Derajat keparahan DA ditentukan menggunakan  indeks  SCORAD  dan  dikelompokkan menjadi  3  kategori  yaitu  ringan  (<25),  sedang  (25- 50),  dan  berat  (>50).  Nilai  SCORAD  subjek
penelitian  terendah  adalah  10,9  dan  tertinggi  adalah 70,8  dengan  rerata  40,32.  Berdasarkan  derajat keparahan  didapatkan  kelompok  derajat  keparahan ringan  sebanyak  8  orang  (26,7%),  derajat  keparahan sedang  sebanyak  13  orang  (43,3%),  dan  derajat keparahan berat sebanyak 9 orang (30,0%). Distribusi subjek penelitian berdasarkan jenis kelamin, kelompok usia, dan derajat keparahan DA berdasarkan indeks SCORAD ditampilkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Distribusi jenis kelamin, kelompok usia, dan derajat keparahan dermatitis atopik berdasarkan  indeks  SCORAD  pada  pasien dermatitis  atopik  di  Divisi  Dermatologi Anak Unit Rawat Jalan Kesehatan Kulit dan
Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya Variabel Jumlah Persentase (%) Jenis kelamin Laki-laki 14 46,7 Perempuan 16 53,3 Kelompok usia (tahun) Infantil (0-  2) 14 46,7 Anak (>2-14) 16 53,3 Derajat keparahan Ringan 8 26,7 Sedang 13 43,3 Berat 9 30,0 Jumlah 30 100 Keterangan:  SCORAD  = Scoring  of  Atopic Dermatitis
Kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA  dengan menggunakan  metode  pemeriksaan Human 8-OHdG
Enzyme-linked
Immunosorbent Assay /ELISA ( Elabscience  Biotechnology )  berkisar  antara  1,952 ng/mL  sampai  44,609  ng/mL,  dengan  rerata  sebesar 17,236 ng/mL. Kadar 8-OHdG urine pada pasien DA ditampilkan  pada  Tabel  2.  Rerata  kadar  8-OHdG urine  pada  pasien  DA  laki-laki  adalah  17,859  ± 15,936 ng/mL dan pada pasien DA perempuan adalah 16,929  ±  11,688  ng/mL.  Kadar  8-OHdG  urine berdasarkan jenis kelamin pada pasien DA ditampilkan pada Tabel 3.
Tabel  2. Kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  dermatitis  atopik  di  Divisi  Dermatologi  Anak  Unit  Rawat  Jalan Kesehatan Kulit dan Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya
N Minimum (ng/mL) Maksimum (ng/mL) Mean ± SD (ng/mL) Kadar 8-OHdG Urine 30 1,952 44,609 17,236 ± 13,596
Keterangan: 8-OHdG= 8-Hydroxydeoxyguanosine ; SD=Standar Deviasi
Tabel 3. Kadar 8-OHdG  urine berdasarkan jenis  kelamin pada pasien dermatitis atopik  di Divisi Dermatologi Anak Unit Rawat Jalan Kesehatan Kulit dan Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya
Jenis kelamin n Minimum (ng/mL) Maksimum (ng/mL) Mean ± SD (ng/mL) Laki-laki 14 1,952 44,609 17,859 ± 15,936 Perempuan 16 3,627 38,613 16,929 ± 11,688 Jumlah 30 Keterangan: 8-OHdG=8- Hydroxydeoxyguanosine ; SD=Standar Deviasi
Rerata  kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA kelompok  usia  0-  2  tahun  adalah  17,587  ±  14,712 ng/mL dan kelompok usia > 2-14 tahun adalah 16,930 ±  13,022  ng/mL.  Kadar  8-OHdG  urine  berdasarkan usia  pada  pasien  DA  ditampilkan  pada  Tabel  4. Rerata  kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA  dengan
derajat keparahan ringan adalah 7,892 ± 5,396 ng/mL, derajat  keparahan  sedang  adalah  16,006  ±  13,662 ng/mL,  dan  derajat  keparahan  berat  adalah  27,321  ± 12,668  ng/mL.  Distribusi  rerata  dan  standar  deviasi kadar  8-OHdG  urine  berdasarkan  derajat  keparahan DA ditampilkan pada Tabel 5.
Tabel 4. Kadar 8-OHdG urine berdasarkan usia pada pasien dermatitis atopik di Divisi Dermatologi Anak Unit Rawat Jalan Kesehatan Kulit dan Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya
Kelompok usia N Minimum (ng/mL) Maksimum (ng/mL) Mean ± SD (ng/mL) 0-  2 tahun 14 1,961 44,609 17,587 ± 14,712 > 2-14 tahun 16 1,952 38,613 16,930 ± 13,022 Jumlah 30
Keterangan: 8-OHdG=8- Hydroxydeoxyguanosine ; SD=Standar Deviasi
Tabel  5. Distribusi  rerata  kadar  8-OHdG  urine  berdasarkan  derajat  keparahan  dermatitis  atopik  pada  pasien dermatitis atopik anak di Divisi Dermatologi Anak Unit Rawat Jalan  Kesehatan Kulit dan Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya
Keterangan: 8-OHdG=8- Hydroxydeoxyguanosine ; SD=Standar Deviasi

## PEMBAHASAN
Jumlah  pasien  DA anak  dengan  jenis  kelamin perempuan  lebih  banyak  daripada  laki-laki,  yaitu  16 orang  perempuan  (53,3%)  dan  14  orang  laki-laki (46,7%) (Tabel  1). Perbandingan  jenis  kelamin
perempuan  dan  laki-laki  pada  penelitian  ini  adalah 1,143:1. Terdapat  perbedaan  yang  bervariasi  dalam hal  prevalensi  pada  tiap  negara.    Hasil  penelitian  ini serupa  dengan  beberapa  penelitian  lain,  didapatkan bahwa DA lebih sering pada perempuan Derajat keparahan Kadar 8-OHdG Urine (ng/mL) Minimum Maksimum Mean ± SD Ringan 1,952 17,517 7,892 ± 5,396 Sedang 1,961 44,609 16,006 ± 13,662 Berat 5,241 38,613 27,321 ± 12,668
dibandingkan  laki-laki,  dengan  perbandingan  hingga 2,6  kali  lebih  sering  pada  perempuan. 11,12 Beberapa penelitian  lain  didapatkan  hasil  yang  berlawanan. 13 Penelitian  oleh  Shi  dan  kawan-kawan  yang  meneliti gambaran  klinis  pada  1008  pasien  DA  di  Cina,  juga didapatkan pasien DA laki-laki lebih banyak daripada perempuan  dengan  perbandingan  1,63:1. 14 Sebuah penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Civelek  dan kawan-kawan tidak menemukan hubungan antara DA dengan jenis kelamin. 15
DA  merupakan  penyakit  eksaserbasi  berulang, terutama ditandai dengan  keradangan  kulit dan  gatal, yang  sebagian  besar  ditunjukkan  oleh  pasien  dengan diatesis  atopik.  Lesi  eksematosa  yang  muncul  saat masa  bayi  atau  masa  kanak-kanak  dapat  bertahan tanpa sembuh total atau berulang kali kambuh bahkan pada saat dewasa. 1 Lebih dari 10% DA dapat bertahan sampai  remaja  atau  dewasa.  Prevalensi  DA diperkirakan  sekitar  15-30%  pada  anak-anak  dan  2- 10%  pada  dewasa. 2 Kriteria  anak  pada  penelitian  ini menggunakan  batasan  usia  bayi  1  bulan  sampai remaja muda (14 tahun) sesuai dengan penggolongan usia  dari  CDC.  Gejala  klinis  DA  dibagi  menjadi  3 kelompok  usia  yaitu  bayi  (kurang  dari  2  tahun),  usia sekolah  (2-12  tahun),  dan  remaja/dewasa  (lebih  dari 13  tahun).  Rerata  usia  subjek  penelitian  ini  adalah 4,48  tahun.  Berdasarkan  kelompok  usia  didapatkan kelompok  usia  yang  terbanyak  terdapat  pada kelompok  usia  sekolah  (>2-14  tahun)  sebanyak  16 orang  (53,3%), sedangkan  kelompok    bayi  atau infantil (  2 tahun) sebanyak 14 orang (46,7%) (Tabel 1).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Yu  dan  kawan- kawan  di  Korea  menunjukkan  bahwa  prevalensi  DA yang  tertinggi  berdasarkan  usia  adalah  26,5%  pada kelompok  usia  12-23  bulan  dan  semakin  berkurang pada  usia  yang  lebih  tua  (7,6%  pada  usia  6  tahun, 3,4%  pada  usia  12  tahun  dan  2,4%  pada  usia  18 tahun). 13 DA  didapatkan  terutama  selama  masa  bayi dan  dilaporkan  bahwa  45%  pasien  DA  memulai gejala  pertama  pada  6  bulan  pertama  setelah kelahiran,  60%  selama  usia  tahun  pertama,  dan  85% sebelum  usia  5  tahun,  serta  hanya  60%  yang mengalami  remisi  pada  masa  dewasa.  Hal  itu menunjukkan  sifat  kronis  DA.  Insidensi  dan prevalensi  DA  menurun  seiring  bertambahnya  usia pasien. 16,17 Penelitian yang dilakukan oleh Weber dan Haidinger  menyatakan  bahwa  faktor  pencetus  yang berperan dalam timbulnya DA pada anak usia sekolah adalah  faktor  lingkungan  dan  stres  terutama  pada pelajar  atau  mahasiswa  saat  menghadapi  ujian. 11
Penelitian  oleh  Sybilski  dan  kawan-kawan  di Polandia  menyatakan  bahwa  pasien  DA  yang  tinggal di  perkotaan  dan  mempunyai  pendidikan  serta  status
ekonomi yang lebih tinggi juga merupakan salah satu faktor pencetus terjadinya DA. 18
Derajat  keparahan  DA  pada  penelitian  ini ditentukan  menggunakan  indeks  SCORAD  yang terdiri  dari  luas  lesi,  intensitas  lesi,  dan  keluhan pasien.  Nilai  SCORAD  subjek  penelitian  terendah adalah  10,9  dan  tertinggi  adalah  70,8  dengan  rerata 40,32.  Derajat  keparahan  DA  terbanyak  adalah derajat  keparahan  sedang  yaitu  sebanyak 13  orang (43,3%), sedangkan derajat keparahan berat sebanyak 9  orang  (30,0%),  dan  derajat  keparahan  ringan sebanyak 8 orang (26,7%), dapat dilihat pada Tabel 1. Hasil pada penelitian ini sama dengan hasil penelitian sebelumnya  oleh  Nnoruka  dan  kawan-kawan  di Nigeria  yang  menyatakan  bahwa  pasien  DA terbanyak  berada  pada  derajat  keparahan  sedang sebesar  44,9%,  sedangkan  derajat  keparahan  berat 32,0%,  dan  derajat  keparahan  ringan  23,1%. 19 Hasil penelitian Han dan kawan-kawan pada tahun 2015 di Korea, didapatkan proporsi terbesar adalah pasien DA dengan  derajat  keparahan  sedang  (50%),  sedangkan derajat keparahan berat 48,6% , dan derajat keparahan ringan  1,4%. 20 Penelitian  ini  dilakukan  di  RSUD  Dr. Soetomo yang merupakan rumah sakit rujukan tipe A, sehingga  pasien  yang  datang  cenderung  merupakan pasien  yang  berada  dalam  kondisi  derajat  keparahan sedang  hingga  berat  yang  membutuhkan  penanganan spesialistik.
Pengukuran  8-OHdG  dianggap  sebagai  cara terbaik  untuk  melihat  tingkat  kerusakan  oksidatif DNA  melalui  urine  karena  telah  dikembangkan berbagai  metode  pengukuran  senyawa  ini.  Sampel urine  yang  dikumpulkan  kemudian  disimpan  tanpa bahan  tambahan  pada  suhu  -20 0 C  sampai  dilakukan analisis . Setelah dilakukan pencairan dan sentrifugasi, kemudian  supernatan  diukur.  Konsentrasi  8-OHdG ditentukan dengan menggunakan ELISA kit kompetitif  dengan  menggunakan  kit  yang  tersedia secara  komersial.  Penelitian  ini  menggunakan  alat Elabscience ® 8-OHdG Elabscience  Biotechnology Co.,  Ltd, Wuhan,  Cina  untuk  mengukur  kadar  8- OHdG  urine  pasien  DA. Kit Elabscience ® 8-OHdG merupakan  ELISA  kompetitif  untuk  pengukuran kuantitatif  8-OHdG  dalam  jaringan,  serum,  plasma, dan  urine,  yang  merupakan  hasil  kerusakan  oksidatif DNA.  Batas  minimum  kadar  yang  dapat  dideteksi adalah  0,94  ng/mL. Belum  ada  literatur  yang menyebutkan nilai cut off untuk kadar 8-OHdG dalam urine. Alat  ini  harus  disimpan  dalam  suhu  4 ° C, kondisi  gelap,  dan  dapat  digunakan  sebelum  tanggal kadaluwarsa  bila  disimpan  dengan  benar.  Seluruh prosedur  pengukuran  8-OHdG  urine  telah  dilakukan sesuai dengan protokol yang tertera.
Antibodi  8-OHdG  (anti-8-OHdG)  ditambahkan ke  sumur  pada  alat  ini  bersama  dengan  sampel  atau standar.  8-OHdG sampel  atau  standar  yang  tidak berikatan,  berkompetisi  dengan  8-OHdG  yang terdapat dalam dinding sumur untuk berikatan dengan antibodi  8-OHdG,  sehingga  konsentrasi  tinggi  8- OHdG  pada  sampel  menyebabkan  berkurangnya ikatan antibodi terhadap 8-OHdG di lempeng. Setelah kompleks  anti-8-OHdG/8-OHdG  bebas  dibuang  dari sumur,  kompleks  anti-8-OHdG/8-OHdG  di  lempeng ditambahkan  antibodi  sekunder  berlabel  enzim. Penambahan substrat kromogen selanjutnya memungkinkan  penghitungan  kuantitatif  anti-8- OHdG  yang  terdapat  di  sumur.  Warna  yang dihasilkan  berbanding  terbalik  dengan  sampel  8- OHdG.  Kit Elabscience ® 8-OHdG  spesifik  untuk  8- OHdG,  tidak  terdapat cross-reactivity dengan  analog 8-OHdG.  Hasil  penelitian  ini  didapatkan  kadar minimum  dan  maksimum  8-OHdG  urine  masing- masing  adalah  1,952  ng/mL  dan  44,609  ng/mL dengan  rerata  17,236  ±  13,596  ng/mL  (Tabel  2). Tidak ada hasil kadar 8-OHdG yang berada di bawah batas deteksi minimal kit Elabscience ® 8-OHdG. Banyak  faktor  yang  dapat  memengaruhi  8- OHdG,  yaitu  diantaranya  jenis  kelamin,  usia,  latihan fisik, alkohol, rokok,  berat badan, dan  nutrisi.  Rerata kadar  8-OHdG  urine  pasien  DA  laki-laki  sebesar 17,859  ±  15,936  ng/mL,  sedangkan  pada  perempuan didapatkan  rerata  16,929  ±  11,688  ng/mL  (Tabel  3). Didapatkan kadar 8-OHdG urine laki-laki lebih tinggi dibandingkan  pada  perempuan.  Hasil  tersebut  sama dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Loft  dan kawan-kawan  yang  menyatakan  bahwa  ekskresi  8- OHdG laki-laki lebih banyak dibandingkan perempuan. 21 Hal itu diduga berkaitan dengan tingkat metabolik  basal,  pada  kondisi  tersebut  tubuh menghasilkan  radikal  bebas  sehingga  menciptakan keadaan  stres  oksidatif  yang  dapat  merusak biokomponen  tubuh  pada  proses  metabolisme. Tingkat  metabolik  basal  laki-laki  lebih  tinggi daripada  perempuan,  sehingga  menghasilkan  radikal bebas yang lebih banyak dan menimbulkan kerusakan DNA yang lebih besar, oleh karena itu kadar 8-OHdG urine yang dihasilkan juga lebih tinggi. 21
Rerata  kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA kelompok  usia  0-  2  tahun  adalah  17,587  ±  14,712 ng/mL dan kelompok usia > 2-14 tahun adalah 16,930 ±  13,022  ng/mL  (Tabel  4).  Faktor  eksogen  seperti radiasi  UV,  asap  rokok,  asbes,  dan  zat  karsinogenik dapat  menghasilkan  ROS  dalam  berbagai  macam kondisi. 5 Saat  terjadi  ketidakseimbangan  antara oksidan endogen dan berbagai pertahanan antioksidan enzimatik  dan  nonenzimatik,  oksidan  menghasilkan
kerusakan  oksidatif  yang  luas  pada  DNA.  8-OHdG akan  keluar  dari  sel  dan  diekskresikan  dalam  urine ketika kerusakan oksidatif DNA diperbaiki. 22
Berdasarkan  teori  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa seiring berjalannya waktu dan semakin meningkatnya usia,  manusia akan  makin sering terpapar oleh faktor eksogen seperti radiasi UV, asap rokok, asbes, dan zat karsinogenik,  maka  nilai  8-OHdG  urine  pun kemungkinan  akan  semakin  tinggi.  Hasil  penelitian ini didapatkan nilai 8-OHdG urine yang serupa antara kelompok usia 0-  2 tahun dan kelompok usia > 2-14 tahun.  Hal  itu  dapat  disebabkan  oleh  jumlah  sampel yang  kurang  cukup  pada  penelitian  ini  sehingga mempengaruhi distribusi usia dan nilai 8-OHdG juga dipengaruhi  oleh  faktor-faktor  lain  seperti  jenis kelamin,  latihan  fisik,  alkohol,  rokok,  berat  badan, serta nutrisi.
Hasil beberapa penelitian sebelumnya menunjukkan  bahwa  kadar  8-OHdG  urine  berkaitan dengan derajat keparahan penyakit DA dengan  kadar yang  cenderung  mengalami  peningkatan  seiring dengan  meningkatnya  derajat  keparahan  DA. 6 Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pasien DA dengan derajat  keparahan  berat  cenderung  memiliki  kadar  8- OHdG  urine  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  pasien DA dengan derajat keparahan sedang maupun ringan, dan  pasien  DA  dengan  derajat  keparahan  sedang cenderung  memiliki  kadar  8-OHdG  urine  yang  lebih tinggi  dibandingkan  pasien  DA  dengan  derajat keparahan ringan, walaupun terdapat beberapa outlier dan overlap seperti pada Tabel 5.
Telah  didapatkan  beberapa  laporan  mengenai kadar  8-OHdG  urine  pada  pasien  DA  dari  penelitan- penelitian  sebelumnya  di  berbagai  negara.  Secara teoritis  semakin  berat  derajat  keparahan  DA,  maka kadar  8-OHdG  dalam  urine  akan  semakin  tinggi, tetapi  dari  penelitian-penelitian  yang  telah  dilakukan mengenai  hubungan  antara  kadar  8-OHdG  urine  dan derajat  keparahan  DA  didapatkan  hasil  yang bervariasi.  Hasil  8-OHdG  urine  pada  penelitian  ini mendukung  hasil  penelitian  yang  didapatkan  oleh Tsuboi dan kawan-kawan di Jepang yang menunjukkan peningkatan  kadar 8-OHdG urine  yang diambil  setiap  hari  dibandingkan  dengan  kontrol  dan menemukan  korelasi  kuat  yang  bermakna  secara statistik  dengan  indeks  SCORAD  pada  pasien  DA. Kadar 8-OHdG urine pada penelitian ini menunjukkan korelasi kuat dengan kadar IgE sebagai penanda derajat keparahan DA. 6 Penelitian oleh Nakai dan  kawan-kawan  didapatkan  hasil  yang  berbeda, kadar  8-OHdG  urine  pada  pengambilan  satu  sampel tidak terdapat peningkatan secara bermakna dan tidak berhubungan  dengan  skor  EASI  pada  pasien  DA. 8
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Omata  dan  kawan- kawan  didapatkan  bahwa  ekskresi  8-OHdG  urine lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kontrol,  namun tidak  berkorelasi  dengan  derajat  keparahan  DA  yang dinilai  dengan  menggunakan  sistem  penilaian  yang digunakan di Jepang. 10 Terdapat beberapa faktor yang dapat  menjadi  penyebab  hasil  yang  bervariasi  antara korelasi  8-OHdG  dengan  DA,  yaitu  jumlah  sampel penelitian  yang  tidak  terlalu  besar,  usia  pasien, sampel  yang  diperiksa  termasuk  kriteria  inklusi  dan eksklusi,  jenis  urine  yang  diperiksa,  dan  jenis  kit  8- OHdG yang digunakan.
ROS  memiliki  potensi  berbahaya  walaupun penting  pada  proses  biologi  normal.  Terdapat keseimbangan  antara  pembentukan  radikal  bebas, ROS,  dan mekanisme pertahanan  antioksidan endogen,  tetapi  jika  keseimbangan  ini  terganggu, dapat  menghasilkan  stres  oksidatif.  Keseimbangan antara produksi dan eliminasi ROS dikendalikan oleh antioksidan  enzimatik  dan  nonenzimatik.  Stres oksidatif disebabkan oleh ketidakseimbangan oksidan dan antioksidan, serta mampu menimbulkan kerusakan  pada  membran  lipid,  protein,  dan  asam nukleat,  yang  dapat  menyebabkan  kematian  sel  dan akhirnya  berkontribusi  terhadap  penuaan,  keganasan, dan  penyakit  degeneratif  lainnya.  Besar  kerusakan oksidatif in  vivo bisa  dievaluasi  dengan  mengukur penanda spesifik untuk stres oksidatif. 10
Senyawa  DNA  yang  mengandung  guanin  (G) disebut deoxyguanosine (dG),  akan  berubah  menjadi 8-OHdG  ketika  karbon-8  teroksidasi  oleh  radikal bebas  akibat  stres  oksidatif,  kerusakan  DNA  terjadi secara  terus-menerus  dan  diubah  secara  oksidatif. Stres  oksidatif  menyerang  basa  guanin  pada  DNA dengan  mudah  dan  membentuk  8-OHdG.  Saat kerusakan  oksidatif  DNA  diperbaiki,  8-OHdG  akan keluar  dari  sel  dan  diekskresikan  dalam  urine.  8- OHdG  larut  dalam  air  dan  diekskresikan  ke  dalam urine  tanpa  dimetabolisme  lebih  lanjut,  akan  tetap stabil  sampai  dilepaskan  dalam  urine.  8-OHdG merupakan  salah  satu  bentuk  dominan  dari  lesi radikal bebas yang diinduksi DNA, sehingga 8-OHdG merupakan  penanda  yang  sangat  baik  untuk menentukan  tingkat  kerusakan  oksidatif.  8-OHdG tidak  menunjukkan  bagian  mana  dari  tubuh  yang rusak  oleh  aktivitas  radikal  bebas  tetapi  dapat mengevaluasi  status  kesehatan  manusia  secara keseluruhan dalam kaitannya dengan stres oksidatif. 5 Hasil  penelitian  ini  mendukung  teori  bahwa ROS  yang  berlebihan  yang  dihasilkan  pada  lokasi inflamasi  alergi  mempercepat  kerusakan  oksidatif DNA  dan  makromolekul  lain  pada  kulit,  dan kerusakan  produk-produk  tersebut  seperti  8-OHdG diekskresikan kedalam urine. Hasil penelitian ini juga
mendukung  hipotesis  bahwa  gangguan  homeostasis radikal  oksigen/nitrogen  dan  peningkatan  stres oksidatif berhubungan dengan patofisiologi DA masa kanak-kanak,  sehingga  penggunaan  agen  antioksidan dapat  menjadi  suatu  strategi  yang  berpotensi bermanfaat  untuk  pengobatan  DA. 10 Terdapat peningkatan  derajat  keparahan  DA  yang  mungkin berhubungan dengan konsentrasi 8-OHdG urine yang tinggi,  sehingga  mendukung  adanya  peran  stres oksidatif  pada  patogenesis  DA,  walaupun  terdapat beberapa  kelemahan  antara  lain  desain  penelitian yang  bersifat  deskriptif  dan  tidak  dilakukan pengukuran  kadar  8-OHdG  urine  pada  kontrol  sehat, sehingga tidak dapat diketahui apakah kadar 8-OHdG urine  pada  pasien  DA  di  penelitian  ini  lebih  tinggi dibandingkan  kadar  pada  orang  normal.  Kelemahan lain  pada  penelitian  mengenai  8-OHdG  urine  adalah pemeriksaan  ini  tidak  spesifik  untuk  DA,  karena  8- OHdG tidak hanya merupakan penanda stres oksidatif tetapi  juga  sebagai  penanda  faktor  risiko  pada keganasan,  penyakit  jantung  koroner,  diabetes,  dan aterosklerosis,  dan  juga  nilainya  meningkat  pada malnutrisi, diabetes melitus dan hipertensi. Keterkaitan  nilai  8-OHdG  urine  dengan  pemberian suplemen  antioksidan  juga  masih  harus  dilakukan dengan  penelitian  lebih  lanjut. Penelitian  ini  adalah penelitian  deskriptif  observasional  potong  lintang ( cross sectional ), oleh karena itu sebaiknya dilakukan penelitian lanjutan dengan desain yang lebih baik dan juga  perlu  dilakukan  penelitian  mengenai  kadar  8- OHdG  urine  pada  pasien  DA  anak  dikaitkan  dengan aspek pemberian suplemen antioksidan.

## KEPUSTAKAAN
1. Katayama  I,  Kohno  Y,  Akiyama  K,  Aihara  M, Kondo N, Saeki H, et al. Japanese guideline for atopic  dermatitis  2014.  Allergol  Int  2014;  63: 377-98.
2. Bieber  T.  Atopic  dermatitis.  Ann  Dermatol 2010; 22(2): 125-37.
3. Thohiroh A, Zulkarnain I. Penelitian retrospektif:  pengobatan  oral  pada  pasien dermatitis  atopik  anak.  Berkala  Ilmu  Kesehatan Kulit dan Kelamin 2015; 27(3): 191-6.
4. Watson W, Kapur S.  Atopic  dermatitis.  Allergy Asthma Clin Immunol 2011; 7: 1-7.
5. Valavanidis  A,  Vlachogianni  T,  Fiotakis  C.  8- hydroxy-2-deoxyguanosine (8-OHdG): a critical biomarker of oxidative stress and carcinogenesis.  J  Environ  Sci  Health  2009;  27: 120-39.
6. Tsuboi  H,  Kouda  K,  Takeuchi  H,  Takigawa  M, Masamoto Y, Takeuchi M, et al. 8- hydroxydeoxyguanosine  in  urine  as  an  index  of
oxidative  damage  to  DNA  in  the  evaluation  of atopic  dermatitis.  Br  J  Dermatol  1998;  138: 1033-5.
7. Simic  MG.  Urinary  biomarkers  and  the  rate  of DNA damage in carcinogenesis and anticarcinogenesis.  Mutat  Res  1992;  267:  277- 90.
8. Nakai  K,  Yoneda  K,  Maeda  R,  Munehiro  A, Fujita  N,  Yokoi  I,  et  al.  Urinary  biomarker  of oxidative  stress  in  patients  with  psoriasis vulgaris  and  atopic  dermatitis.  J  Eur  Acad Dermatol Venereol 2009; 23: 1405-8.
9. Tsukahara  H,  Shibata  R,  Ohshima  Y,  Todoroki Y,  Sato  S,  Ohta  N,  et  al.  Oxidative  stress  and altered  antioxidant  defenses  in  children  with acute  exacerbation  of  atopic  dermatitis.  Life Sciences 2003; 72: 2509-16.
10. Omata  N,  Tsukahara  H,  Ito  S,  Ohshima  Y, Yasutomi  M,  Yamada  A,  et  al.  Increased oxidative  stress  in  childhood  atopic  dermatitis. Life Sciences 2001; 69: 223-8.
11. Weber  AS,  Haidinger  G.  The  Prevalence  of atopic  dermatitis  in  children  is  influenced  by their  parents  education:  results  of  two  cross- section  studies  conducted  in  upper  Austria. Pediatr Allergy Immunol 2010; 21:1028-35.
12. Odhiambo  JA,  Williams  HC,  Clayton  TO, Robertson  CF,  Asher  MI.  Global  variations  in prevalence  of  eczema  symptoms  in  children from  ISAAC  Phase  Three.  J  Allergy  Clin Immunol 2009; 124: 1251-8.
13. Yu JS, Lee CJ, Lee HS, Kim J, Han Y, Ahn K, et  al.  Prevalence  of  atopic  dermatitis  in  Korea: analysis  by  using  national  statistics.  J  Korean Med Sci 2012; 27:681-5.
14. Shi M,  Zhang H, Chen X, Guo Y, Tao J, Qi H, et  al.  Clinical  features  of  atopic  dermatitis  in  a hospital-based  setting  in  China.  J  Eur  Acad
Dermatol Venereol 2011; 25:1206-12.
15. Civelek  E,  Sahiner  UM,  Yuksel  H,  Boz  AB, Orhan F, Uner A, et al. Prevalence, burden, and risk  factors  of  atopic  eczema  in  school  children aged 10-11 years: a national multicenter study. J Investig  Allergol  Clin  Immunol  2011;  21(4): 270-7.
16. Zheng  T,  Yu  J,  Oh  MH,  Zhu  Z.  The  atopic march:  progression  from  atopic  dermatitis  to allergic  rhinitis  and  asthma.  Allergy  Asthma Immunol Res 2011; 3(2):67-73.
17. Lee  SI,  Kim  J,  Han  Y,  Ahn  K.  A  proposal: atopic dermatitis organizer (ADO) guideline  for children. Asia Pac Allergy 2011; 1: 53-63.
18. Sybilski AJ, Raciborski F, Lipiec A, Tomaszewska  A,  Lusawa  A,  Samel-Kowalik  P, et  al.  Epidemiology  of  atopic  dermatitis  in Poland according to the epidemiology of allergic disorders  in  Poland  (ECAP)  study.  J  Dermatol 2015; 42:140-7.
19. Nnoruka  EN.  Current  epidemiology  of  atopic dermatitis  in  south-eastern  Nigeria.  Int  J Dermatol 2004; 43:739-44.
20. Han  TY,  Kong  TS,  Kim  MH,  Chae  DA,  Lee JHK,  Son  SJ.  Vitamin  D  status  and  its association  with  the  SCORAD  score  and  serum LL-37  level  in  Korean  adults  and  children  with atopic dermatitis. Ann Dermatol 2015; 27:10-4.
21. Loft  S,  Fischer-Nielsen  A,  Jeding  IB,  Vistisen K, Poulsen HE. 8- Hydroxydeoxyguanosine as a urinary  biomarker  of  oxidative  DNA  damage.  J Toxicol Environ Health 1993; 40:391-404.
22. Subash  P,  Gurumurthy  P,  Sarasabharathi  A, Cherian  KM.  Urinary  8-OHdG:  a  marker  of oxidative  stress  to  DNA  and  total  antioxidant status  in  essential  hypertension  with  South Indian Population. Indian J  Clin Biochem 2010; 25(2): 127-32.