## Cendekia Journal of Pharmacy
STIKES Cendekia Utama Kudus

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
MENGKUDU ( Morinda citrifolia L . ) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Staphylococcus epidermidis DAN Propionibacterium acnes
Lilis Sugiarti 1* , Jihaan Maila Shofa 2 1*,2 Program Studi S-1 Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Cendekia Utama Kudus Jl. Lingkar Raya Kudus – Pati KM 5 Jepang Mejobo Kudus 59381 Email: lilis_suwarno@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Jerawat  atau acne  vulgaris merupakan  penyakit  kulit  yang  sering  timbul  serta  dapat mengganggu para  remaja.  Pengobatan  jerawat  yang  umumnya  digunakan  yaitu  antibiotik seperti ampicillin, klindamisin dan lain-lain. Oleh karena itu, diperlukan alternatif lain sebagai pengobatan jerawat  dengan memanfaatkan bahan  alam yaitu tanaman mengkudu ( Morinda citrifolia L.). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dan Konsentrasi Hambat  Minimal  (KHM)  ekstrak  etanol  daun  parijoto  terhadap  bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionobacterium acnes serta  untuk  mengetahui  adanya  korelasi  antara aktivitas antibakteri dan konsentrasi ekstrak etanol. Metode yang dilakukan yaitu pengolahan sampel sampai diperoleh serbuk dan diekstraksi menggunakan metode maserasi serta diujikan pada  bakteri  dengan  metode  difusi  cakram.  Hasil  yang  didapatkan  di  analisis  dengan menggunakan  uji One  Way Anova,  korelasi  dan  regresi  linear, sedangkan  perbedaan  daya hambat antara dua bakteri menggunakan uji Independent Samples T- Test . Hasil uji One Way Anova menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan nilai signifikasi < 0,05. Uji korelasi menunjukkan hubungan yang sangat kuat dengan nilai Asymp Sig (2-tailed) < 0,05 dengan pengaruh  konsentrasi  ekstrak  terhadap  diameter  zona  hambat Staphylococcus  epidermidis sebesar  93,33%  dan  sebesar  98,19%  pada Propionibacterium  acnes. Konsentrasi  ekstrak etanol daun mengkudu lebih efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis daripada Propionibacterium  acnes .  Ekstrak  Etanol  Daun  Mengkudu memiliki potensi  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Propionibacterium  acnes .  Ekstrak  etanol  lebih  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis daripada Propionibacterium acnes .
Kata  Kunci : Morinda  citrifolia L,  Ekstrak  Etanol  daun  mengkudu,  KHM, Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes

## ABSTRACT
Acne is a skin disease that often arises and can interfere with adolescents. Acne treatments that are commonly used are antibiotics such as ampicillin, clindamycin and others. Therefore, another alternative is needed as a treatment for acne by utilizing natural ingredients namely noni plants (Morinda citrifolia L.). The objective of this research is to know the antibacterial activity and Minimal Barrier Concentration (MBC) of mengkudu leaf ethanol extract against
P-ISSN 2559 – 2163           E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 5, No. 2, November 2021 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id
Staphylococcus epidermidis  and  Propionobacterium  acnes  bacteria  and  to  know  the correlation between antibacterial activity and concentration extract ethanol. The method that is done is processing the sample until obtained powder and extracted using maseration method and tested on bacteria with disk diffusion method. The results obtained were analyzed using the One Way Anova test, correlation and linear regression, while the differences in inhibition between  the  two  bacteria using the Independent Samples T-Test. One Way Anova test results showed a significant difference with a significance value <0.05. Correlation test showed a very strong  relationship  with  the  Asymp  Sig  (2-tailed)  value  <0.05  with  the  effect  of  extract concentration on the diameter of the Staphylococcus epidermidis inhibition zone of 93.33% and 98.19% in Propionibacterium acnes. The concentration of ethanol extract of noni leaves is  more  effective  in  inhibiting  the  growth  of  Staphylococcus  epidermidis  than Propionibacterium  acnes.  Ethanol  Extract  of  Noni  Leaf  has  potential  as  an  antibacterial against Staphylococcus epidermidis and Propionibacterium acnes bacteria. Ethanol extract is more effective in inhibiting the growth of Staphylococcus epidermidis than Propionibacterium acnes.
Keywords: Morinda  citrifolia  L,  Morinda  citrifolia  L  leaf’s  ethanol  extract,  Minimum Inhibitory Concentration,  Staphylococcus  epidermidis  and  Propionibacterium acnes

## LATAR BELAKANG
Jerawat atau acne vulgaris merupakan penyakit kulit yang sering timbul serta dapat  mengganggu  para  remaja  (Murtiningsih  dkk.,  2014).  Di  Indonesia  penderita acne  vulgaris pada tahun 2006, 2007 dan tahun 2009 secara berturut-turut mencapai porsentase sebanyak 60%, 80% dan 90%. Pada perempuan antara usia 14 hingga 17 tahun, sedangkan pada laki-laki antara usia 16 hingga 19 tahun merupakan insidensi tertinggi, tetapi pada usia 30 hingga 40 tahun dapat timbul acne vulgaris bahkan pada usia lanjut dapat menetap (Lema dkk., 2019).
Penyebab jerawat yaitu akibat terjadinya hiperproliferasi epidermis folikular seperti sumbatan folikel, produksi sebum berlebihan, inflamasi dan aktivitas bakteri. Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis merupakan  bakteri  yang dapat memicu  tumbuhnya  jerawat  (Wahdaningsih  dkk.,  2014).  Beberapa  agen antimikroba  yang  aktivitasnya  dapat  melawan Staphylococcus  epidermidis dan Propionibacterium  acnes diantaranya  yaitu  ampicillin,  clindamycin,  erythromycin, tetracycline,  doxycycline, nadifloxacin,  ofloxacin,  minocycline,  cephalexin,  dan gentamycin (Streets, 2001). Penggunaan obat-obatan kimia jika diberikan secara terus menerus akan berdampak seperti terjadinya resistensi bakteri.
Indonesia  merupakan mega  center di  dunia  sehingga  terkenal  dengan keragaman hayati tanaman obat tradisional. Sebanyak 30.000 spesies tumbuhan yang hidup  di kepulauan  Indonesia,  serta  diketahui  sekurang-kurangnya  9.600  spesies tumbuhan  berkhasiat  sebagai  obat  dan  kurang  lebih  300  spesies  telah  digunakan sebagai bahan obat tradisional oleh industri obat tradisional (Depkes RI, 2007).
Metabolit sekunder (bahan organik sekunder) merupakan hasil akhir dari suatu metabolisme yang dapat dihasilkan dari suatu makhluk hidup. Bahan organik sekunder ini  juga  dapat  berperan  pada  proses  fisiologi.  Salah  satu  tanaman  yang  dapat menghasilkan senyawa metabolit sekunder yaitu daun mengkudu ( Morinda citrifolia L.) dimana senyawa yang terkandung yaitu saponin, flavonoid, polifenol, tannin dan triterpen (Afiff & Amilah, 2017). Senyawa flavonoid pada daun mengkudu mempunyai aktivitas antibakteri yaitu dengan cara mengganggu fungsi dinding sel sehingga terjadi lisis pada sel bakteri. Senyawa tanin mampu mengkerutkan dinding sel atau membran sel  sehingga mengganggu permeabilitas sel bakteri, dan saponin dapat menyebabkan lisis pada dinding sel mikroba (Afni et al ., 2015).

## METODE PENELITIAN Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimen dengan model penelitian yang  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas ekstrak  etanol  daun  mengkudu  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes serta mengetahui  jumlah  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  dan  konsentrasi  hambat optimum.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  Rancangan  Acak Lengkap (RAL).
Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  timbangan  analitik  (Pioneer dan Great Scale ), blender, waterbath , peralatan gelas, autoklaf, inkubator (Yenaco), oven ( One Med ), mikropipet, dan tip, pinset, mikroskop, batang pengaduk, jarum ose, cawan petri, pembakar bunsen, tabung reaksi, rak tabung reaksi, alat vortex ( Thermo Scientific ), jangka  sorong, hotplate  magnetic  stirer (WINA Instrument  Type :  208), Laminar Air Flow , kertas Whatman No. 01, kain flanel, botol berwarna gelap, ayakan
mesh 40, batang drigalsky , moisture balance, rotary evaporator (RE 100-Pro). Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun mengkudu ( Morinda citrifolia L.) yang diperoleh dari desa Karangrowo Krajan Undaan kabupaten Kudus, etanol  70%,  pelarut  DMSO  ( Dimethyl  Sulfoxide )  4%,  kapsul Clindamycin 150  mg, akuades  steril,  kultur  bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC  3163 dan Propionibacterium acnes ATCC 2714 , Nutrient broth (Merck), media Nutrient Agar , Magnesium, HCI pekat, FeCI 3 1%, CH 3 COOH, H 2 SO 4 pekat.

## Ekstraksi Daun Mengkudu
Serbuk kering daun mengkudu dimaserasi dengan pelarut etanol 70% selama 1x24 jam (sebanyak 3 kali) sambil sesekali diaduk. Maserat yang didapatkan disaring dengan kain flanel dan ditampung pada erlenmeyer. Ampasnya dilakukan remaserasi sampai  diperoleh  hasil  maserat  sebanyak  3  kali.  Kemudian  semua  maserat dikumpulkan dan dipekatkan sampai diperoleh ekstrak pekat.
Uji Bebas Etanol Ekstrak Daun Mengkudu
Esterifikasi alkohol dilakukan dengan cara ekstrak daun mengkudu 0,1 gram ditambahkan dengan 5 tetes asam asetat (CH 3 COOH) dan 2 tetes asam sulfat pekat (H 2 SO 4 )  yang  kemudian  dipanaskan.  Ekstrak  yang  sudah  bebas  dari  pelarut  etanol 70% ditunjukkan dengan tidak terbentuknya bau ester yang khas dari alkohol pada uji esterifikasi
Skrinning Fitokimia
1. Identifikasi  flavonoid:  Ekstrak  pekat  daun  mengkudu  sebanyak  0,5  gram dilarutkan dengan etanol dan ditambahkan 0,1 gram Mg  dan 5 tetes HCl pekat. Bila terbentuk warna jingga, maka positif mengandung flavonoid.
2. Identifikasi  tanin:  Ekstrak  pekat  sebanyak  0,5  gram  dilarutkan  dengan  10  mL akuades, selanjutnya  disaring  dan  filtrat  ditetesi  dengan  3  tetes  FeCl 3 1%.  Jika terbentuk warna hijau kehitaman, maka positif mengandung tanin.
3. Identifikasi  saponin:  Ekstrak  pekat  0,5  gram  direaksikan  dengan  pembentukan busa,  yaitu  dengan  melarutkan  ekstrak  pekat  dengan  akuades  panas  kemudian dikocok  dan ditambahkan  dengan  HCl.  Terbentuknya  busa  yang  stabil  artinya menunjukkan positif
mengandung saponin

## Pembuatan Konsentrasi Ekstrak
Pembuatan larutan induk (konsentrasi 100 mg/mL) yaitu dengan menimbang 400 mg ekstrak etanol daun mengkudu dilarutkan dengan 4 mL DMSO. Konsentrasi 50 mg/mL dibuat dengan mengambil sebanyak 2 mL dari larutan induk (konsentrasi 100 mg/mL) dan ditambahkan dengan 2 mL DMSO, dilakukan pengenceran bertingkat yang sama sampai pada konsentrasi 6,25 mg/mL. Pembuatan konsentrasi 75 mg/mL dilakukan dengan menimbang 150 mg ekstrak etanol dimasukkan dalam tabung reaksi lain dilarutkan dengan 2 mL DMSO, selanjutnya divortex selama 60 detik.

## Menyiapkan Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Kontrol  positif  menggunakan clindamycin 2  μg  yang  dilarutkan  dalam  1  mL aquades  steril,  sebagai  kontrol  negatif  menggunakan  DMSO  ( Dimethyl  Sulfoxide ), aquades steril dan media Nutrien Agar.
Uji Antibakteri
Uji antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode spread plate dan harus dilakukan didekat Bunsen di dalam Laminar Air Flow (LAF). cawan petri yang sudah berisi  media  NA  padat  ditambahkan  100  l  suspensi  bakteri  setelah  itu  diratakan dengan menggunakan spatula drigalsky dan ditunggu sampai bakteri terserap semua di
dalam media. Kertas cakram (kertas Whatman No. 01) dengan diameter 6 mm masing- masing perlakuan ditetesi dengan 200  L baik dengan ekstrak sampel, kontrol negatif maupun kontrol positif. Setelah itu, kertas cakram diletakkan di atas permukaan media NA dan di inkubasi pada suhu 37  C selama 18 jam. Uji ini dilakukan sebanyak 5 kali pengulangan. Kemudian,  diamati  ada  atau  tidaknya  zona  bening  disekitar  kertas cakram dan diukur diameter dengan jangka sorong. Adanya daerah bening disekeliling kertas cakram menunjukkan adanya aktivitas antibakteri.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dari  diameter  zona  hambat  selanjutnya  diolah menggunakan analisis One Way ANOVA. Selain itu juga data dianalisis menggunakan program Korelasi Pearson dan dilanjutkan dengan analisis regresi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Determinasi
Determinasi dari suatu tanaman bertujuan untuk mengetahui dan memastikan kebenaran dan jenis dari tanaman yang digunakan. Tujuan dari determinasi tanaman mengkudu  yaitu  untuk  mencocokan  ciri-ciri  morfologi  yang  ada  pada  tanaman mengkudu.  Hasil  determinasi  tanaman  pada  penelitian  ini  membuktikan  bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini yaitu Morinda citrifolia L dengan nama Indonesia Mengkudu.

## Pembuatan Simplisia Daun Mengkudu
Bagian  tanaman  yang  digunakan  sebagai  sampel  penelitian  ini  yaitu  daun mengkudu dengan kriteria yaitu berwarna hijau tua, segar dan tidak terserang hama yang diperoleh di Desa Karangrowo Krajan, Kecamatan Undaan, Kabupaten  Kudus. Daun mengkudu di sortasi basah dan dilakukan pencucian dengan air mengalir untuk memisahkan dari kotoran dan benda asing, selanjutnya diiris tipis menggunakan pisau yang tajam dengan tujuan untuk mempercepat proses pengeringan pada oven di suhu 40 ºC.
Daun mengkudu yang telah kering kemudian dihaluskan dengan menggunakan blender  simplisia  dan  diayak  menggunakan  ayakan  40  mesh.  Simplisia  dihaluskan dengan blender yang bertujuan untuk memperkecil ukuran sehingga memperbesar luas permukaan  kontak  antara  daun  mengkudu  dengan  cairan  penyari  (Rahayu,  2013). Hasil pembuatan simplisia daun mengkudu dapat dilihat pada tabel 1.

## Tabel 1 Hasil Pembuatan Simplisia Daun Mengkudu
Berat Daun Segar Berat Simplisia Kering Berat Serbuk Simplisia Susut Pengeringan Kadar Air Warna Daun Segar Warna Simplisa 3500,00 Gram 510,00 gram 491,34 gram 85,42% 7,30% Hijau Tua  Coklat Muda Pudar
Pengukuran kadar air menggunakan Moisture balance , dimana pengukuran ini bertujuan untuk mengetahui persentase air yang masih terkandung dalam serbuk daun mengkudu.  Kadar  air  serbuk  simplisia  daun  mengkudu  pada  penelitian  ini  adalah 7,30%, kadar air ini memenuhi persyaratan mutu obat tradisional yaitu syarat kadar air kurang dari 10% (BPOM, 2014).

## Pembuatan Ekstrak Daun Mengkudu
Ekstraksi  daun  mengkudu  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut etanol 70% sebanyak 1000 mL pada 200 gram serbuk daun mengkudu (5:1).
Tabel 2 Hasil Maserasi Daun Mengkudu Serbuk Simplisia Ekstrak Etanol Rendemen Organoleptis 200,00 gram 35,00 gram 17,50% Ekstrak kental berwarna hijau tua  kehitaman,  lengket,  dan berbau khas.
Ekstrak etanol daun mengkudu mempunyai warna hijau tua kehitaman, lengket dan berbau khas. Rendemen yang diperoleh sebesar 17,50%. Penapisan fitokimia yang dilakukan  untuk  mengetahui  adanya  metabolit  sekunder  dengan  metode  kualitatif didapatkan hasil bahwa ekstrak etanol daun mengkudu mengandung flavonoid, tanin dan saponin.

## Uji Bebas Etanol Ekstrak Daun Mengkudu
Ekstrak  kental  daun  mengkudu  dilakukan  uji  bebas  alkohol  yang  bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak daun mengkudu tersebut benar-benar sudah bebas alkohol 70% yaitu dengan cara esterifikasi.
Tabel 3 Hasil Uji Bebas Alkohol Ekstrak Etanol Daun Mengkudu
Prosedur Hasil Ekstrak  Etanol   Daun   Mengkudu   0,1   gram   + CH3COOH 5 tetes + H2SO4  pekat 2 tetes kemudian dipanaskan Tidak terbentuk bau ester yang khas dari etanol
Hasil uji bebas etanol pada tabel 2 menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun mengkudu tersebut sudah bebas dari pelarutnya yaitu etanol 70% yang ditunjukkan dengan tidak adanya bau ester yang khas dari etanol.

## Skrinning Fitokimia secara Kualitatif
Skrining  fitokimia  dilakukan  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan metabolit sekunder dalam daun mengkudu yang meliputi flavonoid, tanin dan saponin. Hasil skrinning fitokimia ekstrak kental daun mengkudu dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4 Hasil Skrinning Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Mengkudu
Metabolit Sekunder Uji Kualitatif Hasil Flavonoid Terbentuk Warna Jingga + Tanin Terbentuk Warna Hijau Kehitaman + Saponin Terbentuk Busa Stabil + Keterangan: positif mengandung senyawa tersebut (+)
Potensi Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mengkudu Ekstrak etanol daun mengkudu yang memiliki kandungan flavonoid, tanin dan saponin di uji aktivitas antibakterinya pada bakteri Staphylococcus epidermidis dan
Propionibacterium  acnes dengan  menggunakan  metode  difusi  cakram.  Hasil  nilai absorbansi  pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis setelah  diukur  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  yaitu  sebesar  0,085  dan  pada  bakteri Propionibacterium acnes sebesar 0,090. Hasil pengukuran diameter zona hambat bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium  acnes pada  berbagai  konsentrasi  ekstrak  etanol daun mengkudu dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5   Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Mengkudu terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes Perlakuan Rata-rata diameter zona hambat (dalam mm) Staphylococcus epidermidis Propionibacterium acnes A1 0 0 A2 1,9 ± 0,7 a 0,8 ± 0,6 a A3 3,8 ± 0,7 b 2,5 ± 0,5 b A4 5,3 ± 0,8 c 4,7 ± 0,8 c A5 6,4 ± 0,6 c 6,0 ±0,8 d A6 8,6 ± 1,2 d 8,1 ± 0,9 e C (+) 12,1 ± 0,8 e 11,4 ± 0,4 f C (-)1 - - C (-)2 - - Keterangan: A1 : Konsentrasi 6,25 mg/mL A2 : Konsentrasi 12,5 mg/mL A3 : Konsentrasi 25 mg/mL A4 : Konsentrasi 50 mg/mL A5 : Konsentrasi 75 mg/mL A6 : Konsentrasi 100 mg/mL C (+) : Kontrol Positif (Klindamisin 2 µg/mL)
C (-)1  : Kontrol Negatif (DMSO) C (-)2  : Kontrol Negatif (Aquadest Steril)
Angka  yang diikuti  dengan huruf  yang sama  menunjukkan diameter  zona hambat yang tidak berbeda signifikan (sig > 0,05).
Gambar 1
Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Mengkudu terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis Gambar 2 Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Mengkudu terhadap Bakteri Propionibacterium acnes
Ekstrak etanol daun mengkudu memiliki efek antibakteri karena mengandung senyawa polifenol seperti flavonoid,  tanin dan saponin.  Flavonoid  yang terkandung dalam ekstrak  etanol  daun  mengkudu  dapat  menghambat  sintesis  asam  nukleat, penghambatan  fungsi  membran  serta  menghambat  metabolisme  energi  bakteri (Ernawati & Sari, 2015). Senyawa tanin dapat mengkerutkan dinding sel atau membran
sel  sehingga  mengganggu permeabilitas  sel  tersebut,  protein  yang  terikat pada  tanin dapat mengganggu  pertumbuhan sintesis  protein dari bakteri (Afni, Said, & Yuliet, 2015).  Saponin  akan  menurunkan  tegangan  permukaan  dinding  sel  bakteri  dan merusak permeabilitas membran, saponin berdifusi melalui membran luar dan dinding sel yang rentan kemudian mengikat  membran sitoplasma sehingga  mengganggu  dan mengurangi kestabilan membran sel (Ernawati & Sari, 2015).
Menurut Davis dan Stout (1971), aktivitas antibakteri dengan daerah hambatan ≥ 20 mm dikategorikan sangat kuat, daerah hambatan 10–20 mm kuat, daerah hambatan 5– 10 mm sedang, dan daerah hambatan ≤5 mm lemah. Diameter zona hambat ekstrak etanol daun  mengkudu  dengan  konsentrasi  100;  75;  50;  25;  12,5  mg/mL  pada Staphylococcus epidermidis berturut-turut yaitu 8,6; 6,4; 5,3; 3,8; 1,9 mm. Konsentrasi 100;  75;  50  mg/mL  pada Staphylococcus  epidermidis menunjukkan  diameter  zona hambat yang termasuk dalam kategori penghambatan sedang, pada konsentrasi 25 dan 12,5 mg/mL termasuk dalam kategori lemah, sedangkan pada konsentrasi 6,25 mg/mL tidak menunjukkan adanya diameter zona hambat terhadap bakteri tersebut.
Pengujian  aktivitas  bakteri Propionibacterium  acnes dengan  diameter  zona hambat pada konsentrasi 100; 75; 50; 25; 12,5 mg/mL berturut-turut  yaitu 8,1; 6,0; 4,7; 2,5; 0,8. Konsentrasi 100 dan 75 mg/mL pada Propionibacterium acnes tergolong kategori sedang, sedangkan pada konsentrasi 50;25;12,5 mg/mL dikategorikan lemah. Konsentrasi 6,25 mg/mL tidak menunjukkan adanya diameter zona hambat terhadap bakteri  tersebut.  semakin  kecil  konsentrasi  ekstrak  daun  mengkudu  maka  tidak menunjukkan  diameter  zona hambat  hal  ini  dapat  disebabkan  karena  senyawa aktif yang terkandung dalam  ekstrak  daun mengkudu  tidak  mampu memberikan  aktivitas antibakteri secara lebih optimal.
Hasil  penelitian  Herawati  dan  Amelia  (2018)  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol daun mengkudu dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 50%, 75% dan 100% dengan diameter zona hambat berturut-turut yaitu 3,8;  5,5;  11,5  mm.  Menurut  hasil  penelitian  Sugiarti  dan  Fitrianingsih  (2018) menunjukkan  bahwa penelitian yang dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun parijoto dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes pada konsentrasi 6,25; 12,5; 25; 50 dan 100 mg/mL dengan diameter zona hambat bakteri berturut-turut  1,6;  2,72; 3,06; 4,94 dan 6,85 mm.
Kontrol negatif yang dilakukan pada penelitian ini yaitu akuadest steril yang digunakan untuk melarutkan  klindamisin dan DMSO sebgai pelarut ekstrak. Kedua kontrol negatif ini tidak menunjukkan adanya diameter zona hambat yang berarti tidak memiliki sifat antibakteri, sedangkan kontrol positif yang digunakan yaitu klindamisin yang sering digunakan sebagai obat jerawat (Streets, 2001).
Tabel  6  Hasil  Analisis  Korelasi  antara  Konsentrasi  Ekstrak  Etanol  Daun Mengkudu  dengan  Diameter  Zona  Hambat  Bakteri Staphylococcus epidermidis menggunakan Pearson Correlation Kelompok Staphylococcus epidermidis Daya Hambat Bakteri Kelompok S epidermidis Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N 1 25 0.943 ** 0.000 25
Hasil  uji  korelasi  pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis yang  telah dilakukan diperoleh nilai pearson correlation dari hasil uji yaitu 0,943 dan nilai Asymp Sig (2- tailed) 0,000 < 0,05 artinya menunjukkan adanya hubungan yang sangat kuat antara  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  mengkudu  dengan  diameter  zona  hambat bakteri Staphylococcus  epidermidis .  Berdasarkan  hasil  uji  regresi  linear  didapatkan nilai Y= 0,0802x + 0,7266 yang berarti setiap kenaikan konsentrasi sebesar 1 mg/mL mampu menaikkan diameter daya hambat sebesar 0,0802 mm dengan diameter awal yaitu 0,7266 mm. diameter zona hambat bakteri dipengaruhi oleh konsentrasi ekstrak sebesar  93,33% (R 2 =  0,9333),  sisanya  sebesar  6,67%  dipengaruhi  oleh  faktor  lain seperti suhu, radiasi cahaya, udara, kelembapan, pH dan lain-lain.
Tabel  7  Hasil  Analisis  Korelasi  antara  Konsentrasi  Ekstrak  Etanol  Daun Mengkudu dengan Diameter Zona Hambat Bakteri Propionibacterium acnes menggunakan Pearson Correlation Kelompok Propionibacterium acnes Daya Hambat Bakteri Kelompok P Acnes Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N 1 25 0.965 ** 0.000 25
Hasil  uji  korelasi  pada  bakteri Propionibacterium  acnes diperoleh  nilai pearson correlation sebesar 0,965 dan nilai Asymp Sig (2- tailed) 0,000 < 0,05 yang menunjukkan bahwa ada hubungan antara konsentrasi ekstrak etanol daun mengkudu dengan  diameter  zona  hambat  bakteri Propionibacterium  acnes .  Hal  tersebut menunjukkan bahwa terdapat hubungan  yang  sangat  kuat  antara  konsentrasi  dengan diameter  zona  hambat  bakteri.
Berdasarkan hasil uji regresi linear didapatkan nilai Y= 0,0836x – 0,0621 yang berarti setiap kenaikan konsentrasi sebesar 1 mg/mL mampu menaikkan diameter daya hambat sebesar 0,0836 mm dengan diameter awal yaitu – 0,0621 mm. diameter zona hambat bakteri dipengaruhi oleh konsentrasi ekstrak sebesar 98,19% (R 2 = 0,9819), sedangkan sisanya sebesar 1,81% dipengaruhi oleh faktor lain.
Angka yang diikuti dengan huruf yang sama menunjukkan diameter zona hambat    yang tidak berbeda signifikan (sig > 0,05)
Gambar  3  Diagram  Batang  Diameter  Zona  Hambat Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes

## Diameter Zona Hambat
Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes 10 8.5 g 8.1 g 3.8 c 5.3 e 4.7 e 6.4 f 6.0 f
1.9 a 2.5 d 0.8 b 12.5 mg/mL 25 mg/mL 50 mg/mL 75 mg/mL 100 mg/mL Staphylococcus epidermidis Propionibacterium acnes
Ekstrak  etanol  daun  mengkudu  memiliki  aktivitas  daya  hambat  terhadap Staphylococcus  epidermidis dan Propionibacterium  acnes. Hasil  analisa  data  zona hambat ekstrak etanol daun mengkudu pada konsentrasi 12,5 mg/mL dan konsentrasi 25 mg/mL  pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis menunjukkan  perbedaan  yang signifikan dengan bakteri Propionibacterium acnes . Namun analisa data hasil uji pada konsentrasi  50;75  dan  100  mg/mL  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan antara bakteri Staphylococcus epidermidis dengan Propionibacterium acnes , artinya semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  mengkudu  maka  menunjukkan semakin tidak ada  perbedaan  yang signifikan,  serta  dapat  memberikan  respon  yang sama.  Diantara  kedua  bakteri  yang  digunakan,  bakteri Staphylococcus  epidermidis lebih  sensitif  bila  dibandingakan  dengan Propionibacterium  acnes, ini  dilihat  dari besarnya zona hambat yang dihasilkan.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
1. Ekstrak  etanol  daun  mengkudu  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes .
2. Konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  etanol  daun  mengkudu  terhadap  bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes yaitu pada konsentrasi 12,5  mg/mL,  dan  konsentrasi  hambat  optimum  terdapat  pada  konsentrasi  100 mg/mL.
3. Pengaruh  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  mengkudu  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  epidermidis sebesar  98,33%  dan  sisanya  6,67% dipengaruhi  oleh  faktor  lain,  sedangkan  pada  bakteri Propionibacterium  acnes sebesar 98,19% dan sisanya sebanyak 1,81% dipengaruhi oleh faktor lain.
4. Terdapat  perbedaan yang signifikan daya hambat antara bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes pada konsentrasi 12,5 dan 25 mg/mL, sedangkan pada konsentrasi 50; 75 dan 100 mg/mL tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan.
Saran
1. Mengkaji  kembali  manfaat  dari  daun  mengkudu,  dengan  melakukan  penelitian tentang  manfaat  lain  dari  daun  mengkudu.  Misalnya  sebagai  antioksidan, antiseptik, antiinflamasi dan lain-lain.
2. Dilakukan  uji  SEM  ( Scanning  Electron  Microscopy )  untuk  mengetahui mekanisme penghambatan bakteri.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  kami  haturkan  kepada  program  studi  S-1  Farmasi STIKES  Cendekia Utama Kudus yang telah memfasilitasi penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Afiff,  F.  E.,  &  Amilah,  S.  (2017).  'Efektivitas  ekstrak  daun  mengkudu (Morinda citrifolia L.) dan daun sirih merah (Piper crocatum Ruiz & Pav ) terhadap zona hambat pertumbuhan Staphylococcus aureus '. 10 (April), 12–16. Afni, N., Said, N., & Yuliet. (2015). 'Uji aktivitas antibakteri pasta gigi ekstrak biji pinang ( Areca  catechu L.)  terhadap Streptococcus  mutans dan Staphylococcus aureus '. Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) , 1 (1), 48–58.
Davis, W.W., & Stout, T. R. (1971). 'Disc plate method of microbiological antibiotic assay'. American Society for Microbiology , 22(4) , 659–665. Depkes,  RI.  (2007). Kebijakan  obat  tradisional  nasional .  Departemen  Kesehatan press: Jakarta
Ernawati,  &  Sari,  K.  (2015).  'Kandungan  senyawa  kimia  dan  aktivitas  antibakteri ekstrak kulit  buah  alpukat  ( Persea  americana P.Mill)  terhadap  bakteri Vibrio alginolyticus '. Jurnal Kajian Veteriner , 3 (2), 203–211.
Herawati, E., & Amelia, T. R. N. (2018). 'Potensi bahan herbal ekstrak etanol daun mengkudu  asal  desa  wajak  lor,  tulungagung,  jawa  timur  terhadap  bakteri penyebab jerawat'. 2 (2), 173–178. Lema, E. R. M., Yusuf, A., & Wahyuni, S. D. (2019). 'Gambaran konsep diri remaja putri dengan acne vulgaris di fakultas keperawatan universitas airlangga surabaya'.
Jurnal Keperawatan Jiwa , 1 (1).
Murtiningsih, S., Nurbaeni, S.N., & Kusharyanti, I. (2014). 'Efektivitas gel antijerawat ekstrak  metanol  daun  pacar  air  ( Impatiens  balsamina L.)  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis secara  in  vitro'. Journal Of Tropical Pharmacy And Chemistry , 2 (4), 225–234. Rahayu,  P.  (2013).  'Pengaruh  suhu  dan  lama  ekstraksi  secara  pengukuran  terhadap rendemen dan kadar albumin ikan gabus (Opjiocephalus striatus) '. Jurnal Saintik Perikanan . Vol. 8. No. 2.
Streets,  S. (2001).  'Current  issues  in  antimicrobial  therapy for  the  treatment of acne'.
European Academy of Dermatology and Venereology , 15 , 51–55.
Wahdaningsih,  S.,  Untari,  E.  K.,  Fauziah,  Y.  (2014).  'Antibakteri  fraksi  n-Heksana kulit Hylocereus  polyrhizus terhadap Staphylococcus  epidermidis dan Propionibacterium acnes '. 1 , 180–193.