## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara kaya akan beraneka ragam tumbuhan  dengan  negara  beriklim  tropis  yang  dapat tumbuh  dengan  mudah.  Keanekaragaman  hayati diantaranya  merupakan  tanaman  obat  yang  memiliki khasiat  pengobatan  dalam  menangani  masalah kesehatan.  Tanaman  yang  berkhasiat  pengobatan  dari pengetahuan pengalaman dan keterampilan secara turun temurun  yang  diwariskan  dari  leluhur  keturunan  dari generasi ke generas selanjutnya (Miftahul Jannah, et al. 2021). Obat tradisional merupakan dari ramuan bahan
yang berasal dari bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral  dan  sediaan  sarian  (galenik)  yang  dilakukan secara  turun  temurun  yang  telah  digunakan  untuk pengobatan  menangani  masalah  kesehatan  yang diterapkan  berlaku  di  masyarakat.  Penggunaan  obat tradisional  khususnya  dari  tumbuh-tumbuhan  sudah cukup  meluas  digunakan  dalam  kalangan  masyarakat menangani masalah kesehatan.
Terpenoid  merupakan  salah  satu  senyawa  metabolit sekunder  atau  disebut  juga  senyawa  kimia  aktif  yang memberikan efek fisiologis dan efek farmakologis. Pada

## Research Article: Isolasi dan Identifikasi Senyawa Terpenoid

## Research Article: Isolation and Identification of Terpenoid Compounds
Vriezka Mierza 1*
Antolin S 2
Audi Ichsani 3
Nurma Dwi 4
Sridevi A 5
Syfa Dwi 6
Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Singaperbangsa Karawang, Jawa Barat, Indonesia
*email: vriezka.mierza@fikes.unsika.ac.id

## Abstrak
Terpenoid  merupakan  suatu  golongan  hidrokarbon  yang  banyak  diproduksi oleh tumbuhan dan terutama terkandung pada getah dan vakuola selnya. Pada tumbuhan,  senyawa-senyawa  golongan  terpena  dan modifikasinya,  terpenoid, merupakan metabolit sekunder. Terpenoid menyusun banyak minyak atsiri yang di produksi oleh tumbuhan. Kandungan minyak atsiri memengaruhi penggunaan produk rempah-rempah, baik sebagai bumbu, sebagai wewangian, serta sebagai bahan  pengobatan,  kesehatan,  dll.  Uji  terpenoid-steroid  dilakukan  dengan dengan  menggunakan  pereaksi  lieberman-buchard  menghasilkan  positif terhadap terpenoid untuk semua fraksi. Hasil yang didapatkan untuk fraksi n- heksan dan fraksi etil asetat pada penambahan lieberman-buchard menghasilkan positif  terhadap  terpenoid  yang  ditandai  dengan  terbentuknya  warna  merah keunguan  pada  fraksi.  Tujuan  dari  Research  artikel  ini  dapat  memberikan informasi untuk mengetahui metode apa saja yang digunakan pada isolasi dalam identifikasi senyawa terpenoid dan mengetahui jenis senyawa terpenoid yang di dapat dari hasil jurnal peneletian sebelumnya.
Kata Kunci: Terpenoid
Tumbuhan
Senyawa Keywords : Terpenoids Plant Compound

## Abstract
Terpenoids  are  a  group  of  hydrocarbons  that  are  produced  in  large  quantities  by plants  and  are  mainly  contained  in  the  sap  and  cell  vacuoles.  In  plants,  terpene compounds  and  their  modifications,  terpenoids,  are  secondary  metabolites. Terpenoids make up many of the essential oils produced by plants. The content of essential oils influences the use of spice products, both as seasonings, as fragrances, as well as ingredients for medicine, health, etc. The terpenoid-steroid test was carried out using the Lieberman-Buchard reagent which yielded positive results for terpenoids for all fractions. The results obtained for the n-hexane and ethyl acetate fractions on the addition of lieberman-buchard yielded positive results for steroids as indicated by the formation of a green color in the fractions. The purpose of this research article is to provide information to find out what methods are used in isolation in identifying terpenoid compounds and knowing the types of terpenoid compounds obtained from the results of previous research journals.
©  2023  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.  This  is  Open  Access  article  under  the  CC-BY-SA  License  (http://creativecommons.org/licenses/by- sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.v9i2.5681
tumbuhan  berkhasiat  pengobatan  salah  satunya mengandung terpenoid, komponen dari terpenoid yaitu dari  minyak  atsiri,  resin  dan  aktivitas  biologi  sebagai antibakteri,  penghambat  sel  kanker,  inhibisi  terhadap sintesis  kolesterol,  antiinflamasi,  gangguan  menstruasi, patukan ular, gangguan kulit, kerusakan hati dan malaria (Roumondang, 2013).
Senyawa  golongan  terpenoid  merupakan  komponen dari ekstrak kayu dan dari ekstrak yang diperoleh dari pelarut non polar, sebagai zat pengatur tumbuh dan anti rayap. Terpenoid komponen penyusun nya yaitu minyak atsiri  mempengaruhi  penggunaan  produk  rempah- rempah  sebagai  bumbu  masak,  wewangian,  ritual upacara  dan  sebagai  pengobatan  kesehatan.    Senyawa golongan  ini  diambil  dari  nama-nama  umum  minyak atsiri yang mengandungnya.
Suatu  simplisia  yang  memenuhi  persyaratan  mutu setelah  melakukan  uji  susut  pengeringan,  kadar  abu total,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  kadar  sari  larut  air, kadar  sari  larut  etanol  dan  kandungan  kimia  yang terdapat  di  simplisia  yaitu  minyak  atsiri  dan  kadar kurkuminoid (Nina Salamah, dkk. 2013).
Identifikasi  senyawa-senyawa  yang  terdapat  dalam simplisia  dilakukan  dengan  isolasi  untuk  mendapatkan isolat-isolat suatu senyawa.
Dari  identifikasi  isolat-isolat  suatu  senyawa  untuk mengetahui  terkandung  jenis  senyawa  terpenoid. Tujuan  dari  Research  artikel  ini  dapat  memberikan informasi  untuk  mengetahui  metode  apa  saja  yang digunakan  pada  isolasi  dalam  identifikasi  senyawa terpenoid dan mengetahui jenis senyawa terpenoid yang di dapat dari hasil jurnal peneletian sebelumnya.

## METODOLOGI
Penelitian ini merupakan studi literatur yang diperoleh dari artikel-artikel ilmiah yang ditelusuri melalui Google Scholar,  PubMed,  dan  Research  Gate  dengan menggunakan  kata  kunci  Terpenoid,  Isolasi,  dan Identifikasi.  Kriteria  artikel  yang  digunakan  telah diterbitkan  10  tahun,  yaitu  2012-2022,  judul  dan  isi jurnal sesuai dengan tujuan penelitian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Hasil Sitasi Jurnal
Sitasi Jurnal Sampel Metode Keterangan (Dwisari  et  al., 2016) Ekstrak  metanol akar  pohon  kayu buta-buta 1. Maserasi 2. Fraksinasi 3. Kromatografi Vakum Cair 4. Kromatografi Kolom Gravitasi 5. Kromatografi Lapis Tipis 6. Spektrofotometer FT-IR Hasil  akhir  yang  didapat  pada  jurnal  ini yaitu,  senyawa  murni  memperlihatkan adanya  gugus  fungsi  -OH,  C-H  alifatik, C=O, C-O, dan C=C. (Furi  et  al., 2015) Ekstrak etil asetat kulit batang meranti kunyit 1. Maserasi 2. Kromatografi Cair Vakum 3. Kromatografi Kolom 4. Kromatografi Lapis Tipis 5. spektrofotometer UV-VIS 6. Spektrofotometer FT-IR
Senyawa  murni  dalam  jurnal  ini menunjukan gugus, C=O,C-O, C-H, dan
C-  H  Alifatis.  hal  ini  dapat  dikatakan senyawa  murni  tersebut  tergolong terpenoid dengan substituen keton.
(Astuti  et  al., 2017) Ekstrak n-heksana Daun Kelopak Tambahan Tumbuhan Permot 1. Maserasi 2. Fraksinasi
3. Kromatografi Vakum Cair 4. Kromatografi Lapis Tipis 5. Spektroskopi UV-Vis, IR, 1H- NMR dan 13C-NMR Hasil  yang  didapat  dalam  jurnal,  Isolat murni  pada  sampel  daun  kelopak tambahan ( Passiflora foetida L . )
merupakan golongan senyawa terpenoid pentasiklik  dimana  dalam  stukturnya terdapat ikatan rangkap terkonjugasi dan gugus karbonil ester. (Rutdianti et al., 2017) Isolat  Etil  Asetat Daun Ekaliptus 1. Maserasi 2. Fraksinasi 3. Kromatografi Lapis Tipis 4. Kromatografi kolom 5. Spektrofotometri UV/Vis 6. Kromatografi Gas- Spektrometri  massa  (KG- SM) Isolat  murni  etil  asetat  menunjukan turunan  senyawa  terpenoid  yaitu senyawa 6, 10, 14-trimetil. 2- pentadekanon. (Sumarni  et  al., 2020) Ekstrak etanol pada sabut kelapa muda 1. Ekstraksi 2. Fraksinasi 3. Kromatografi Vakum Cair 4. Kromatografi Kolom Gravitasi 5. Spektrofotometri FT-IR Isolat menunjukkan serapan gugus -OH, CO-  alkohol,  alkana  CH  alifatik,  C=C, dan  C=O  keton.  isolat  tersebut  adalah senyawa terpenoid. (Fauzia  et  al., 2021) Fraksi Heksana Dari Umbi Rumput Teki 1. Maserasi 2. Kromatografi  vakum  cair Kromatografi Lapis Tipis 3. Spektrofotometer UV-Vis, Infra Red, dan GCMS Hasil yang didapat pada jurnal terdapat 3 senyawa terpenoid dengan jenis
seskuiterpen. senyawa tersebut diantaranya α -cyperon  (C15H22O),
Caryophyllen oxide (C15H24O), dan β - selinene (C15H24). (Sathishkumar & Anandakumar, 2021) Ekstrak  methanol Akasia caesia (L.) 1. Kromatografi kolom 2. Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT) 3. Spektroskopi Resonansi Magnetik  Nuklir  Proton  (1H NMR). 4. Analisis GC-MS 5. LC-MS  (Kromatografi  Cair  - Spektrometri massa)
Berdasarkan  data  spektral  massa Akasia caesia (L.) memberikan senyawa  dengan rumus  molekul  C18H38  sebagai  N- oktadekana  (diterpen)  dengan  berat molekul  254  dan  C20H42  sebagai  N  - eikosan  (  isomer  struktural  rantai  lurus dari hidrokarbon alifatik jenuh)  dengan berat molekul 282.
Terpenoid adalah kelas metabolit sekunder yang terdiri dari unit isoprena yang mempunyai 5 karbon (-C5) yang disintesis dari asetat melalui jalur mevalonat. (Hartati et al.,  2016).  Terpenoid  dapat  terekstrak  dengan  pelarut non-polar atau polar. Dalam bentuk glikosida, senyawa terpenoid dapat tertarik dengan pelarut semi polar atau polar  (Wulansari  et  al.,  2020).  Dalam  isolasi  dan identifikasi  senyawa  terpenoid  dilakukan  dengan beberapa  metode  diantaranya  ekstraksi,  kromatografi cair  vakum,  kromatografi  kolom,  Kromatografi  Lapis Tipis, Spektrofotometri UV-Vis, Spektrofotometri FT- IR,  Spektroskopi  Resonansi  Magnetik  Nuklir  Proton (1H  NMR),  Kromatografi  Cair  -  Spektrometri  massa (GC-MS), dan Kromatografi Cair - Spektrometri massa (LC-MS ).

## Ekstraksi
Berdasarkan  tinjauan  literatur  metode  ekstraksi  yang paling  banyak  digunakan  untuk  mendapatkan  ekstrak dari senyawa terpenoid yaitu maserasi. Menurut (Furi et al., 2015) dilakukan ekstraksi dengan metode maserasi yaitu karena maserasi memberikan ekstraksi yang cukup baik, selain itu bertujuan untuk menghindari terjadinya dekomposisi  zat  aktif  akibat  pemanasan.  Sebagaimana dari peneliti oleh (Astuti et al., 2017) dan (Fauzia et al., 2021)  pada  proses  ekstraksi  menggunakan  metode maserasi dengan pelarut yang digunakan yaitu N-Heksan dimana  pelarut  ini  merupakan  senyawa  nonpolar. Sedangkan pada peneliti oleh (Rutdianti et al., 2017) dan (Sumarni  et  al.,  2020)  proses  ektraksi  menggunakan maserasi  tetapi  untuk  pelarut  yang  digunakan  yaitu pelarut semi polar diantaranya etil asetat dan etanol.

## Partisi dan Fraksinasi
Pada  Proses  Fraksinasi  ini  dilakukan  untuk  pemisahan senyawa  dari  suatu  ekstrak  dengan  berbagai  pelarut dengan  tingkat  kepolaran  yang  berbeda,  baik  itu  semi polar,  polar  dan  pelarut  non  polar.  pada  prinsipnya pelarut  non  polar  seperti  pelarut  n-heksan  akan menarik senyawa-senyawa bersifat non polar (sopomo et al., 2021). Fraksinasi menurut (sopomo et al., 2021) dibedakan  dalam  beberapa  cara  metodenya,  seperti
fraksinasi cair-cair dilakukannya menggunakan alat labu pemisah  yang  berisikan  2  pelarut  tidak  tercampur dengan  tingkat  kepolaran  berbeda.  Metode  fraksinasi lain yaitu menggunakan kolom kromatografi, metode ini menggunakan  sebuah  alat  berupa  kolom  seperti kromatografi vakum cair, kromatografi gas dan lainnya. Berdasarkan peneliti yang dilakukan oleh (Dwisari et al., 2016) dan (Sumarni et al., 2020) Sampel yang diekstraksi kemudian  secara  bertahap  dipartisi  dengan  pelarut  n- heksana dan etil asetat.

## Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Pada umumnya teknik kromatografi  adalah  suatu metode untuk dilakukannya pemisahan senyawa dengan menggunakan  fase  diam  dan  fase  gerak.  Berdasarkan tinjauan  literatur  beberapa  peneliti  KLT  digunakan berbagai  macam  fungsinya  sesuai  kebutuhan. Berdasarkan peneliti oleh (Dwisari et al., 2016) metode KLT digunakan untuk menentukan eluen atau fase gerak memberikan  pola  pemisahannya  yang  paling  baik. Dimana silika gel G60 F254 sebagai fase diam dan fase gerak yaitu n-heksana: etil asetat, etil asetat : metanol dengan  nilai  perbandingan  yang  berbeda  dan  juga menggunakan pelarut etil asetat 100%; metanol 100%. Eluen  hasil  KLT  ini  kemudian  akan  dilanjutkan  pada Kromatigrafi cair vakum (KCV).
Selain  itu  KLT  juga  dapat  digunakan  sebagai  skrining fitokimia  untuk  mengetahui  senyawa  terpenoid  pada sampel yang telah diekstrak, sebagaima yang dilakukan oleh peneliti (Dwisari et al., 2016) melakukan skrining fitokimia  senyawa  terpenoid  menggunakan  pereaksi semprot yaitu Lieberman-buchard. Plat KLT dipanaskan hasil positif menunjukan warna merah keunguan, hal ini dikarenakan adanya reaksi reduksi oleh kedua senyawa yaitu  asam  sulfat  dalam  asam  asetat  (Sumarni  et  al., 2020).  Perbedaan  warna  yang  dihasilkan  terpenoid disebabkan oleh perbedaan gugus atom karbon 4 (C-4) (Kumari et al., 2017). Sedangkan dalam penelitian oleh (Sathishkumar  &  Anandakumar,  2021)  melakukan skrining senyawa ternoid menggunakan reagen vanillin- asam  fosfat  dan  plat  KLT  dipanaskan  selama  5  menit.
Hasil  positif  terpenoid  menunjukan  bercak  berwarna biru.
Tak  hanya  itu  pada  proses  pemurnian  KLT  juga digunakan  untuk  melihat  pola  pemisahan  yang mempunyai kemiripan pada fraksi-fraksi sehingga fraksi dapat digabungkan. Seperti yang dilakukan oleh peneliti (Sumarni  et  al.,  2020)  mendapatkan  18  fraksi  lalu dilakukan  pemantauan  dengan  KLT,  setelah  diketahui pola  pemisahan  yang  sama  18  digabungkan  sehingga dapat  dibagi  menjadi  2  fraksi.  Hal  ini  serupa  dengan penelitian oleh (Astuti et al., 2017) dan (Dwisari et al., 2016) Fraksi-fraksi hasil pemisahan dimonitoring dengan KLT  lalu  digabungkan  yang  terdapat  kemiripan  pola pemisahan sehingga diperoleh beberapa fraksi gabungan. Untuk menggabungkan fraksi-fraksi dilihat pada nilai Rf ( rate of flow ) sama dan spot noda menunjukan satu noda yang sama. Kemudian dimurnikan dengan rekristalisasi berulang-ulang  dengan  pelarut  yang  sesuai  sampai mendapatkan isolat murni (Fauzia et al., 2021).

## Kromatografi kolom
Kromatografi mencakup berbagai tahapam berdasarkan perbedaan  distribusi  komponen  penyusun  sampel antara  dua  fase.  Dua  fase  tersebut  yaitu  fasa  diam sebagai adsorben yang mana fasanya hanya tinggal pada system dan fasa gerak yaitu memperkolasi melalui celah fasa  diam.  Gerakan  fase  ini  menyebabkan  perbedaan migrasi  dari  komponen  sampel,  menyebabkan  fraksi membentuk  beberapa  lapisan  zona  berwarna  yang dinamakan  dengan  kromatogram.    (Maslebu  et  al., 2012). Seperti peneliti yang dilakukan oleh (Sumarni et al., 2020) Kromatografi Kolom Gravitasi (KKG) dengan fase  gerak  yaitu  etil  asetat:  n-heksana  sebagai  mobile fase  dan  fase  diam  yaitu  silika  gel.  Peneliti  lain  oleh (Rutdianti  et  al.,  2017)  dan  (Sathishkumar  & Anandakumar,  2021)  yang  juga  menggunakan  metode kromatografi kolom.

## Kromatografi Cair Vakum (KCV)
Kromatografi  Cair  Vakum  merupakan  suatu  metode pemisahan yang memodifikasi dari kromatografi kolom gravitasi dengan menambahkan vakum (penarik udara)
pada  bagian  bawah  kolom.  KCV  ini  digunakan  untuk fraksinasi  dan  dapat  juga  memurnikan  fraksi  dengan menggunakan fase diam dan fase gerak. Cara kerja dari KCV yaitu sampel dilarutkan dengan pelarut yang sesuai lalu  ditambahkan  langsung  pada  bagian  atas  kolom kemudian  dihisap  perlahan-lahan  ke  dalam  wadah dengan  memvakumnya  (Fauzia  et  al.,  2021). Berdasarkan  penelitian  oleh  (Fauzia  et  al.,  2021)  pada metode KCV, silika gel 60 F–254 digunakan sebagai fase diam dan perbandingan pelarut Heksan: Kloroform:Metanol  (6:3:1)  sebagai  fase  gerak. Kemudian  fraksi-fraksi  diperoleh  dimasukkan  dalam botol vial. Seperti pada peneliti oleh (Astuti et al., 2017) dan (Sumarni et al., 2020) melakukan Fraksinasi dengan metode KCV.

## Spektrofotometri UV-Vis
Spektroskopi merupakan sebuah alat yang mempelajari antara  interaksi  cahaya  dengan  atom  dan  molekul. Ketika  suatu  senyawa  (sampel)  terkena  cahaya,  maka struktur  elektronik  dari  molekul  zat  akan mempengaruhi  penyerapan  cahaya  oleh  molekul  di daerah  spektrum  ultraviolet  (UV)  dan  cahaya  tampak (Visible) (Maslebu et al., 2012). Spektrofotometri UV- VIS  merupakan  salah  satu  metode  instrumentasi  yang paling  banyak  digunakan  untuk  mendeteksi  senyawa berdasarkan  serapan  foton  dalam  analisis  kimia.  Agar sampel  dapat  menyerap  foton  pada  daerah  UV-VIS, biasanya  sampel  perlu  diolah  atau  diderivatisasi. Misalnya,  menambahkan  reagen  dalam  pembentukan garam kompleks (Irawan, 2019). Pada sinar UV memiliki panjang  gelombang  foton  berkisar  200-400  nm sementara  sinar  tampak  (visible)  memiliki  panjang gelombang foton berkisar 400-750 nm (Gandjar et al., 2019).
Berdasarkan  peneliti  oleh  (Fauzia  et  al.,  2021)  hasil spektrum  UV-VIS  dari  sampel  ekstrak  heksan meberikan serapan cahaya pada panjang gelombang 201 nm  disebabkan  karena  transisi  π → π*  dari  gugus kromofor  C=C  dan  lalu  pada  panjang  gelombang  306 nm  dikarenakan  adanya  transisi  n → π*  dari  gugus
kromofor C=O. Penelitian lain oleh (Astuti et al., 2017) Spektra  UV  isolat  B1  dalam  pelarut  heksana menunjukkan  isolat  tersebut  memiliki  serapan  pada panjang  gelombang  maksimum  232  nm  karena  adanya transisi  π → π*  yang  disebabkan  oleh  ikatan  rangkap terkonjugasi (-C=C-C=C-).

## Spektrofotometri FT-IR
Spektroskopi  inframerah  transformasi  Fourier  (FTIR) spektroskopi  bergantung  pada  konsep  interferensi radiasi  antara  dua  berkas  untuk  membentuk interferogram. Sinyal akhir yang dihasilkan adalah fungsi mengubah panjang jalur antara dua balok. Dua jarak dan frekuensi  diubah  menggunakan  metode  matematika transformasi  Fourier  (Stuart  2005).  Komponen  dasar spektrometer  FTIR  ditunjukkan  sesuai  dengan  skema. Radiasi  yang  dipancarkan  dari  sumber  melewati interferometer  ke  sampel  sebelum  mencapai  sensor. Setelah  amplifikasi,  sinyal  dengan  kontribusi  frekuensi tinggi  yang  diekstraksi  oleh  filter  data  diubah  menjadi format  digital  oleh  konverter  analog-ke-digital  dan ditransfer ke komputer untuk konversi Fourier (Stuart 2005).
Dalam  identifikasi  terpenoid,  FT-IR  digunakan  untuk karakterisasi  isolat.  Pada  penelitian  (Sumarni  et  al. 2020), senyawa yang diperoleh dianalisis dengan FT-IR untuk mengetahui gugus fungsi yang terkandung dalam senyawa  tersebut.  Berdasarkan  spektrum  terlihat adanya  serapan  ikatan  rangkap  C=C  pada  bilangan gelombang  1635,64  cm-1.  Spektrum  IR  juga menunjukkan adanya vibrasi gugus hidroksi (OH) pada bilangan gelombang 3448,72 cm-1 dan vibrasi karbonil. Adanya karbonil ester pada isolat A1.1 juga diperkuat dengan munculnya vibrasi C-O pada bilangan gelombang 1101,35 cm-1. Vibrasi C-H sp3 pada bilangan gelombang 2991,59 cm-1 menunjukkan adanya vibrasi ulur gugus C- H  alifatik  yang  mengindikasikan  adanya  gugus  metil  (- CH3) dan metilen (-CH2). Didukung dengan penelitian (Dwisari  et  al.  2016),  spektrum  FT-IR  isolat  F2.1 menunjukkan  adanya  pita  pada  daerah  serapan  pada
bilangan  gelombang  3456,44  cm-1  yang  menunjukkan adanya gugus hidroksil -OH. Pita serapan pada bilangan gelombang 2924,09 cm-1 menunjukkan keberadaan ini. Batang  C-H  dari  CH3,  2862,36  cm  -1  diasumsikan sebagai  batang  C-H.  Adanya  fungsi  karbonil  (C=O) ditunjukkan  dengan  munculnya  serapan  pada  daerah bilangan gelombang 1712,79 cm-1. Serapan yang lemah pada  bilangan  gelombang  1643,35  dan  1512,19  cm  -1 menunjukkan  adanya  gugus  C=C  aromatik.  Bilangan gelombang  1273,02  dan  1226,73  cm-1  menunjukkan adanya serapan C-O.

## Spektroskopi Resonansi Magnetik Nuklir Proton (1H-NMR)
Spektrometri resonansi magnetik nuklir (NMR) adalah alat yang sangat penting untuk mendapatkan informasi tentang  senyawa  kimia.  Deskripsi  hasil  spektroskopi NMR  sangat  penting  untuk  mengamati  baik  senyawa kimia,  struktur  senyawa  dari  bahan  alam  yang  tidak diketahui,  pembentukan  ikatan  peptida  dan  dinamika internal polimer. NMR juga dapat memecahkan masalah atau  informasi  yang  sebelumnya  sulit  diperoleh  dan dipecahkan (Jenie et al. 2014).
Pada  penelitian  (Sathishkumar  et  al.  2021),  1H-NMR (CDCl3, 300.1318534 MHz) spektra fraksi murni kolom II  menunjukkan  sinyal  pada δ H=  0,8  -1,8  ppm ditampilkan  untuk  daerah  alifatik.  Sedangkan  pada penelitian (Astuti et al. 2017) spektra 1H-NMR isolat B1 menunjukkan  pergeseran  kimia  8H(ppm)  sebesar  0,7- 5,5.  Pergeseran  data  menunjukkan  bahwa  senyawa tersebut memiliki proton (H) pada karbon alifatik atau siklik.  Berdasarkan  spektra  1H-NMR,  terdapat pergeseran kimia δ H(ppm) khas proton olefin (proton yang terikat C=C), yaitu pergeseran kimia 5,369 (1H, d, J= 5,5 Hz) dan 5,347 (1H, d , J = 5,5 Hz).
Kromatografi  Gas  -  Spektrometri  massa  (GC- MS)
GC-MS  (Gas  Chromatography-Mass  Spectrometry) merupakan  instrumen  gabungan  dari  alat  GC  dan  MS. Hal  ini  berarti  sampel  yang  hendak  diperiksa diidentifikasi  dahulu dengan alat  GC (Gas
Chromatography),  kemudian  dildentifikasi  dengan  alat MS (Mass Spectrometry). GC dan MS digunakan untuk memisahkan  dan  mengidentifikasi  semua  komponen campuran yang mudah menguap (LPPT UGM 2017). Berdasarkan penelitian (Sathishkumar et al. 2021), data yang  diperoleh  melalui  GC-MS  senyawa  tersebut memberikan  rumus  molekul  C18H38  dengan  berat molekul  254  dan  C20H42  dengan  berat  molekul  282. Mereka  menunjukkan  bahwa  senyawa  tersebut  untuk sementara diidentifikasi sebagai N-oktadekana (diterpen) dan N-eikosan masing-masing.
Kromatografi  Cair  -  Spektrometri  massa  (LC-
MS)
LC-MS merupakan gabungan teknik analisis kromatografi  cair  dengan  kemampuan  analisis  deteksi spektrometri  massa.  Prinsip  kerja  LC-MS/MS  adalah pemisahan  komponen  sampel  berdasarkan  tingkat kepolaran  yang  selanjutnya  ion  bermuatan  akan dideteksi  oleh  detektor  spektrometer  massa  (LPPT UGM  2017).  Spektra  massa  LC-MS  pada  penelitian (Sathishkumar  2021),  mendukung  data  GC  dengan memiliki  kemiripan  berat  molekul  yang  kuat.  Hasil penelitian  menunjukkan  terbentuknya  puncak  yang dominan untuk senyawa terpenoid padam/z255 dan 282 yang  menegaskan  berat  molekul  senyawa  I  dan  II berturut- turut adalah 254 dan 282.

## KESIMPULAN
Proses  isolasi  senyawa  terpenoid  melalui  beberapa tahap  yaitu  ekstraksi  sebagian  besar  peneliti menggunakan metose maserasi. Pemisahannya dilakukan dengan menggunakan kromatografi.
Diantaranya  yaitu  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT), dimana  KLT  ini  dapat  digunakan  untuk  pemilihan  fase gerak yang menunjukan pola pemisahannya paling baik, selain  itu  KLT  juga  dapat  digunakan  sebagai  skrining fitokimia  seperti  pada  senyawa  terpenoid  yang menggunakan  penampak  bercak    Lieberman-buchard atau dapat dengan reagen vanillin-asam fosfat. kemudian keguanaan KLT terutama yaitu sebagai pemisahan pola
pada plat KLT dilakukan hingga terdapat noda tunggal, hal itu dapat dikatakan bahwa senyawa terpenoid relatif murni  dan  dapat  dilanjutkan  pada  metode  yang menentukan  gugus  fungsi  senyawa.  Metode  lain  dari pemisahan  senyawa  yaitu  Kromatografi  Cair  Vakum (KCV)  dan  Kromatografi  Kolom  Gravitasi  (KKG). Untuk  fase  gerak  yang  digunakan  pada  kromatografi yaitu  menggunakan  beberapa  pelarut  dengan  tingkat kepolaran yang berbeda baik itu pelarut non polar-semi polar-polar.  Senyawa  hasil  isolasi  selanjutnya diidentifikasi dapat digunakan metode spektroskopi UV- Vis, FTIR, (1H-NMR), GC-MS, dan LC-MS. Pada proses ini dilakukan untuk mengtahui jenis senyawa terpenoid yang  ada  isolat  murni.  dengan  melihat  struktur  kimia atau rumus molekulnya, dengan itu senyawa terpenoid dapat  terdeteksi.  seperti  pada  spektroskopi  UV-Vis, yang  mendeteksi  senyawa  berdasarkan  serapan  foton dengan  rentang  antara  200-750  nm.  Pada  metode spektroskopi FTIR bergantung pada konsep interferensi radiasi  antara  dua  berkas  untuk  membentuk interferogram.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih  kepada  dosen  pengampu,  serta  seluruh pihak yang terlibat.

## REFERENSI
Astuti,  Maria  Dewi,  Tuti  Sriwinarti,  and  Kamilia Mustikasari. (2017). Isolasi Dan Identifikasi Senyawa  Terpenoid  Dari  Ekstrak  N- Heksana  Daun  Kelopak  Tambahan Tumbuhan  Permot  (Passiflora  Foetida  L). Jurnal Sains Dan Terapan Kimia 11(2):80.
Barokati  Azizah,  Nina  Salamah.  (2013).  Standarisasi Parameter Non Spesifik dan Perbandingan Kadar  Kurkumin  Ekstrak  Etanol  dan Ekstrak  Terpurifikasi  Rimpang  Kunyit. Jurnal  Ilmiah  Kefarmasian,  Vol.  3,  No.  1, 2013: 21-30.
Dwisari, Fath, Harlia, and Andi Hairil Alimuddin. (2016). “Isolasi  Dan  Karakterisasi  Senyawa Terpenoid  Ekstrak  Metanol  Akar  Pohon

## Kayu Buta-Buta (Excoecaria Agallocha L.).
Jurnal Kajian Komunikasi (JKK) 5(3):25–30.
Fauzia, Dini Nur, Mukasi W. Kurniawati, Arina I. Fuady, and Khairani S. Pratiwi. (2021). Isolasi Dan Identifikasi  Senyawa  Terpenoid  Fraksi Heksana Dari Umbi Rumput Teki (Cyperus Rotundus, L). Jurnal Sintesis 2(1):10–15.
Furi, Mustika, Enda Mora, and Zuhriyah. (2015). Isolasi Dan Karakteristik Terpenoid Dari Ekstrak Etil  Asetat  Kulit  Batang  Meranti  Kunyit (Shorea  Conica). Jurnal  Penelitian  Farmasi Indoneisa 3(2):38–42.
Gandjar, Ibnu Gholib, and Rohman, Abdul. (2019). Kimia farmasi analisis . Yogyakarta: Pustaka pelajar.
Jenie,  Umar  Anggara,  Leonardus  B.  S.  Kardono, Muhammad Hanafi, Rymond J. Rumampuk, and  Akhmad  Darmawan.  (2014).  Teknik Modern  Spektroskopi  NMR :  Teori  Dan Aplikasi  Dalam  Elusidasi  Struktur  Molekul Organik.
LPPT UGM. (2017). Kalibrasi – Laboratorium Penelitian Dan Pengujian Terpadu.
Masadi,  Yuniar  Indo,  Titik  Lestari,  and  Indri  Kusuma Dewi.  (2018).  Identifikasi  Kualitatif Senyawa  Terpenoid  Ekstrak  N-  Heksana Sediaan  Losion  Daun  Jeruk  Purut  (Citrus Hystrix  Dc). Jurnal  Kebidanan  Dan Kesehatan Tradisional 3(1):32–40.
Miftahul Jannah, Sumi Wijaya, Henry Kurnia Setiawan. (2021). Standarisasi Simplisia Daun Kenikir (Cosmos  caudatus  Kunth)  Dari  Tiga Daerah  Berbeda.  Journal  Of  Pharmacy Sciene and Practice, Vol 8 no 1, 2021.
Rutdianti,  Sayu,  Rudi  Kartika,  and  Partomun Simanjuntak. (2017). Isolasi Dan Identifikasi Senyawa  Kimia  Terpenoid  Dari  Isolat  Etil
Asetat Daun Ekaliptus (Eucalyptus Deglupta  Blume.). Prosiding  Seminar
Nasional Kimia 2017 148–52.
Rumondang,  M.,  D.  Kusrini,  dan  E.  Fachriyah.  (2013). Isolasi,  Identifikasi,  Dan  Uji  Antibakteri Senyawa  Triterpenoid  Dari  Ekstrak  n- Heksana  Daun  Tempuyung  (Sonchus arvensis L.). Chem Info. 1:156-164.
Supomo. (2021). Khasiat Tumbuhan Akar Kuning Berbasis Bukti . Ypgyakarta: Nas Media Pustaka.
Stuart,  Barbara  H.  (2005).  Infrared  Spectroscopy: Fundamentals and Applications.
Sumarni, Ni Ketut, Asriani Hasanuddi, Siti Nuryanti, and Gatot Siswo Hutumo. (2020). Isolation and Characterization of Terpenoid Compounds  Ethanol  Extract  on  Young Coconut  Coir  (Cocos  Nucifera  L).
International  Journal  of  Scientific  and Technology Research 9(2):5622–25.
Osward,  T.  T.,  (1995).  Tumbuhan  Obat,  Baratha, Jakarta.