Jurnal Pharmascience, Vol. 9, No. 2, Oktober 2022, hal: 280-286 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Uji Preklinik: Aktivitas Penyembuhan Luka Bakar Ekstrak Air Daun Singkong (Manihot esculenta)
Havizur Rahman*, Raudhatul Jannah, Elisma , Fathnur Sani
Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Jambi, Jambi, Indonesia
Email: havizurrahman27@unja.ac.id

## ABSTRAK
Daun singkong (Manihot esculenta) merupakan tanaman yang sering digunakan masyarakat untuk mengobati luka bakar, luka bernanah, atau luka baru. Daun singkong mengandung  metabolit  sekunder  yang  beraktivitas  sebagai  antiinflamasi,  antioksidan dan  antibakteri.  Kuersetin  merupakan  salah  satu  senyawa  golongan  flavonoid  yang banyak  terkandung  pada  daun  singkong  yang  memiliki  kemampuan  menghambat radikal  bebas.  Antioksidan  dari  senyawa  kuersetin  mampu  memicu  kolagen  dan peningkatan vaskular endothelia growth factor (VEGF), sebagai parameter kesembuhan luka bakar. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas penyembuhan luka  bakar  dari  ekstrak  daun  singkong.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental menggunakan metode rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri dari 5 kelompok perlakuan: kontrol positif (Bioplacenton ® ), kontrol negatif (vaselin flavum), dan  ekstrak  air  daun  singkong  dengan  konsentrasi  2,5%,  5%  serta  7,5%.  Hasil pengukuran  diameter  kesembuhan  luka  bakar  menunjukkan  adanya  aktivitas penyembuhan  luka  dengan  perbedaan  yang  nyata  (p  <  0,05)  pada  tiap  perlakuan terhadap kontrol negatif. Konsentrasi terbaik terdapat pada konsentrasi 7,5% dengan presentase  kesembuhan  82,18%  dan  diikuti  dengan  konsentrasi  5%  serta  2,5%. Berdasarkan  hal  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  singkong  telah menunjukan aktivitas penyembuhan luka bakar pada konsentrasi terendah yaitu 2,5%.
Kata Kunci: Ekstrak Air, Daun Singkong, AUC, Penyembuhan Luka Bakar

## ABSTRACT
Cassava leaf (Manihot esculenta) is a plant that is often used by the community to treat  burns,  festering  wounds  or  new  wounds.  Cassava  leaves  contain  compounds  of alkaloids,  flavonoids,  tannins,  phenolics  and  saponins  which  act  as  anti-inflammatory, antioxidant and antibacterial. Quercetin is one of the flavonoid groups contained in cassava leaves which has the ability to inhibit free radicals. Antioxidants from quercetin compounds are  able  to  trigger  collagen  and  increase  vascularity  endothelia  growth  factor  as  a  burn
wound  healing  parameter.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  burn  healing activity  of  cassava  leaf  extract.  This  study  was  an  experimental  study  using  a  completely randomized  design  (CRD)  method  consisting  of  5  treatment  groups:  positive  control (Bioplacenton), negative control (vaseline flavum) and water extract of cassava leaves with a concentration of 2.5%, 5%, 7.5 %. Based on the results of measuring the diameter of the burn wound healing  showed a significant difference in each treatment given to the negative control, which indicated the presence of wound healing activity in each treatment. The best concentration is 7.5% with a cure percentage of 82.18%. Followed by a concentration of 5% and 2.5%. It can be concluded that cassava leaf extract has shown burn healing activity at the lowest concentration of 2.5%.
Keywords: Cassava Leaf, Area Under Curve, Wound Healing

## I. PENDAHULUAN
Luka  bakar  merupakan  kondisi serius  yang  membutuhkan  penanganan yang  cepat.  Data  WHO  menunjukkan sekitar  265.000  kasus  luka  bakar  terjadi setiap  tahunnya.  Di  Indonesia  luka  bakar menduduki  peringkat  ke-6  sebagai  cedera yang  tidak  sengaja  yang  sering  terjadi dengan prevalensi 1,3% (Riskesdas, 2018). Sekitar  96%  kasus  luka  bakar  di  seluruh dunia lebih sering terjadi pada masyarakat dengan  penghasilan  menengah  hingga rendah akibat insiden kebakaran.
Iklim tropis di Indonesia menyebabkan  tanaman  singkong  mudah tumbuh. Daun singkong yang lebih terkenal digunakan sebagai sayuran, ternyata sering digunakan  masyarakat  secara  tradisional sebagai  pengobatan  pertama  pada  kondisi luka  dan  luka  bakar.  Selain  digunakan sebagai  obat  luka  bakar,  daun  singkong juga  sering  digunakan  sebagai  obat rematik,  demam,  sakit  kepala,  diare, cacingan,  dan  peningkat  nafsu  makan
(Hasim, et  al .,  2016).  Diperkirakan kandungan  komponen  kimia  aktif  yang terkandung  pada  daun  singkong  yang berpotensi sebagai obat. Beberapa penelitian  telah  melaporkan  kandungan senyawa  tunggal pada daun  singkong, diantaranya  alkaloid,  flavonoid,  tannin, fenolik, dan saponin (Faezah, et al ., 2013).
Zat  aktif  yang  paling  popular  pada daun  singkong  salah  satunya  adalah kuersetin.  Kuersetin  merupakan  zat  aktif golongan flavonoid yang diketahui memiliki  aktivitas  menghambat  radikal bebas.  Aktivitas  antioksidan  yang  tinggi (Yuslinda et al. , 2012) pada kuersetin dapat memicu produksi kolagen dan peningkatan vascular endothelial growth factor ( VEGF) yang  merupakan  endogen  terpenting  pada penyembuhan  luka  bakar.  Selain  itu, kuersetin
beraktivitas
sebagai antiinflamasi dengan menghambat siklooksigenase dan lipoksigenase (Maladiyah et  al. ,  2011  dan  Anggraini, et al ., 2017). Infeksi dan inflamasi merupakan
beberapa resiko yang mungkin terjadi pada konsisi  luka  bakar  (Setiawati  A. et  al.,
2016;  Riansyah  Y ,  et  al .,  2015).  Dengan demikian  aktivitas  anti  infalmasi  dan antibakteri  dari  daun  singkong  tentunya akan  mempercepat  penyembuhan  luka bakar.
Penelitian yang
dilakukan
Anggraini et  al. (2017)  menggunakan pelarut  yang  berbeda  menunjukan  bahwa ekstrak daun singkong ( Manihot esculenta ) memiliki efektivitas dalam mengobati luka bakar.  Peningkatan  kadar  ekstrak  daun singkong menunjukan perbaikan penyembuhan  luka  bakar  yaitu  dengan meningkatnya  konsentrasi  maka  proses penyembuhan  luka  bakar  semakin  cepat. Penggunaan  pelarut  air  digunakan  pada penelitian ini disebabkan air sebagai media yang  digunakan  di  masyarakat  dalam menarik senyawa aktif pada daun singkong dalam pengobatan luka bakar.

## II. METODE

## A. Determinasi Tanaman
Sampel  daun  singkong  telah  di determinasi  di  Herbarium  Universitas Andalas,  yang  menunjukkan  merupakan tanaman Manihot esculenta Crantz.

## B. Preparasi Ekstrak
Daun  singkong dibilas  dengan  air hingga  bersih,  lalu  dilakukan  perajangan untuk  memperbesar  luas  permukaan,
dikering anginkan, sehingga diperoleh daun kering  dan  dihancurkan  dengan  tangan. Selanjutnya disaring menggunakan saringan mesh 40. Daun kering dimaserasi menggunakan  akuades  dan  diaduk,  lalu didiamkan, disaring, dan kemudian filtrat di freeze drying .

## C. Desain Penelitian
Protokol  penelitian  yang  dilakukan telah  memperoleh  persetujuan  dari  Tim Komisi Etik Penelitian Fakultas Kedokteran  Universitas  Andalas  dengan No.  543/UN.16.2/KEP-FK/2022.  Hewan uji  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan ( Rattus norvegicus ) dengan umur 2- 3  bulan  dan  berat  badan  150-250  gram. Sebelum perlakuan, tikus dilakukan aklimatisasi. Hewan percobaan ditempatkan pada kandang yang bersih dan dalam ruangan  dengan  ventilasi  yang baik dengan  kondisi  optimal  (suhu:  23  ±  1 ∘ C; pencahayaan:  12  jam  cahaya  alami  dan gelap 12 jam; kelembaban: 45–50%).

## D. Induksi Luka Bakar
Tikus  dianastesi  terlebih  dahulu menggunakan eter dengan cara memasukkan  tikus  kedalam  wadah  dan sedikit ditutup. Bulu-bulu tikus pada bagian punggun dicukur, kemudian dibilas dengan alkohol  70%,  didiamkan  selama  24  jam. Luka  bakar  terbentuk  dari  koin  yang dipanaskan pada api biru bunsen selama 3
menit  lalu  ditempelkan  pada  punggung tikus selama 5 detik (Mappa et al ., 2013).
Luka  bakar  yang  terbentuk  setelah ditempelkan koin adalah luka bakar derajat dua  yang  ditandai  dengan  kulit  memerah, melepuh,  dan  menimbulkan  gelembung- gelembung yang berisi air.

## E. Prosedur Perlakuan dan Pengukuran Luka Bakar
Rancangan penelitian berupa rancangan  acak  lengkap , 5  kelompok perlakuan dengan 5 ekor tikus untuk setiap kelompoknya.
Kelompok  kontrol  positif  diolesi dengan sediaan uji menggunakan Bioplacenton ® ,  kontrol  negatif  hanya diberi vaselin flavum, serta untuk perlakuan  P1,  P2,  dan  P3  masing- masingnya diolesi dengan ekstrak air daun singkong  dengan  konsentrasi  2,5%,  5%, 7,5%    dengan  ditambahkan  vaseline flavum.
Setiap kelompok perlakuan diberikan  sediaan  uji  selama  21  hari  dan dilakukan  pengamatan  setiap  harinya. pengukuran  luas  permukaan  luka  bakar dilakukan  dengan  menggunakan  jangka sorong.

## F. Analisis Data
Data dianalisis menggunakan software  SPSS  21 dengan  uji One  Way Anova (p < 0,05) dan dilanjutkan dengan uji
Post-Hoc untuk  mengetahui  perbedaan secara signifikan antar kelompok perlakuan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel daun singkong yang didapatkan  kemudian  di  determinasi  di Herbarium  Universitas  Andalas,  hasil determinasi menunjukkan tanaman ( Manihot  esculenta Crantz).  Pada  proses freeze  drying  diperoleh  rendemen  ekstrak sebesar  4,93%.  Proses  freeze  drying  yang bertujuan mempertahankan kestabilan dalam jangka waktu  panjang dari  zat  aktif yang  terkandung  dalam  daun  singkong (Habibi et al ., 2019).
Pengujian aktivitas ekstrak air daun singkong  terhadap  penyembuhan  luka bakar bertujuan untuk mengetahui aktivitas dan efek ekstrak air daun singkong terhadap penurunan  diameter  luka  bakar.  Beberapa fase dalam proses penyembuhan luka bakar yaitu fase haemostasis, fase inflamasi, fase prolierasi, dan fase maturase (Balqis et al ., 2014).  Pengamatan  selama  21  hari dilakukan  bertujuan  untuk  mengamati penyembuhan  luka  sampai  dengan  fase proliferasi  berakhir.  Dimana  pada  fase  ini berlangsung dari hari ke- 5 hingga hari ke- 20. Tujuan fase proliferasi ini adalah untuk membentuk keseimbangan antara pembentukan jaringan parut dan regenerasi jaringan  (Landen et  al .,  2016).  Data  hasil rata-rata  pengukuran  diameter  luka  bakar
ditunjukkan  dalam  bentuk  data  deskriptif pada Tabel I.
Tabel I. Hasil pengukuran diameter luka bakar
Kelompok Perlakuan AUC ± SEM Persentase Kesembuhan (%) K- 40,932 e ± 0,056 72,46 % P1 38,947 d ± 0,092 78,37 % P2 38,341 c ± 0,104 82,24 % P3 37,460 b ± 0,086 82,18 % K+ 37,007 a ± 0,118 82,42 %
Superscript dengan huruf kecil yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan nyata (p<0,05) K- : Vaselin flavum, K+ : Bioplacenton, P1 : 2,5%, P2 : 5%, P3 : 7,5%
Berdasarkan  hasil  analisa  statistik dengan  analisis  variansi one  wav  anova menunjukkan  bahwa  perlakuan  pemberian ekstrak  air  daun  singkong  memiliki perbedaan  yang  nyata  (p  <  0,05)  terhadap rata-rata  pengukuran  diameter  luka  bakar. Konsentrasi  terbaik  pada  penelitian  ini adalah  kelompok  perlakuan  tiga  dengan konsentrasi  ekstrak  7,5%.  Berdasarkan  uji post-hoc dengan nilai diameter  37,460 cm dan  hasil  persentase  kesembuhan  luka
82,18%.  Jika  dilihat  berdasarkan  hasil  uji menunjukkan bahwa perlakuan tiga memiliki aktivitas sebagai obat luka bakar. Konsentrasi yang memberikan efek selanjutnya  yaitu  pemberian  konsentrasi ekstrak  5%  dengan  nilai  diameter  38,341 cm  dan  persentase  kesembuhan  sebesar 82,24%,  diikuti  konsentrasi  ekstrak  2,5% dengan  nilai  diameter  38,947  cm  dan persentase  kesembuhan  sebesar  78,37% (Gambar 1).
Gambar 1. Persentase efektifitas kesembuhan luka bakar
67.50% 90.00% K- P1 P2 P3 K+ P er sent a se k esem buha n
% Penyembuhan Luka Bakar
Berdasarkan  analisis  menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak air  daun  singkong  yang  diberikan  maka semakin memperkecil diameter luka bakar dan  semakin  baik  persentase  kesembuhan yang diberikan.  Kandungan senyawa yang terdapat  pada  daun  singkong  yang  dapat membantu  dalam  proses  penyembuhan luka  yaitu  terdiri  dari  alkaloid,  flavonoid, tannin, fenolik, dan saponin (Hasim et al .,
2016).
Senyawa flavonoid bekerja sebagai antiinflamasi dengan menghambat permeabilitas  kapiler  dan  menghambat metabolisme asam arakidonat dan menghambat sekresi enzim lisosom sebagai mediator
inflamasi yang
dapat
menghambat proliferasi dari proses peradanganan. Flavonoid berfungsi sebagai antikosidan yang bekerja dengan menginhibisi proses lipid peroksidasi yaitu meningkatkan  serabut  kolagen,  mencegah kerusakan sel (Alrawaiq & Azman, 2014). Mekanisme flavonoid sebagai antiinflamasi dapat melalui beberapa cara seperti dengan penghambatan aktivitas enzim siklooksigenase (COX) dan
lipooksigenase,  penghambatan  akumulasi leukosit, penghambatan degranulasi neutrofil,  atau  penghambatan  pelepasan histamin  (Nijveltd et  al .,  2001).  Saponin akan  menstimulasi  pembentukan  kolagen yang  berperan  meningkatkan  epitalisasi jaringan, sehingga dapat menutup
permukaan  luka.  Senyawa  tanin  berfungsi sebagai  astringensia.  Mekanisme  kerja tanin  sebagai  astringensia  yaitu  dengan mengecilkan pori-pori kulit dan menghentikan  eksudat  serta  pendarahan, senyawa  tanin  juga  berfungsi  untuk meningkatkan jumlah pembentukan pembuluh  darah  kapiler  dan  sel  fibroblast (Sukmawati et al ., 2021).

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan,  pemberian  ekstrak  air  daun singkong  ( Manihot  esculenta )  pada  dosis terendah  2,5  %,  menunjukkan    adanya aktivitas dalam penyembuhan luka bakar.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Universitas Jambi  yang  telah  memberikan  pendanaan penelitian tahun 2021 dengan sumber dana fakultas,  skim  penelitian  dasar  unggulan prodi.

## DAFTAR PUSTAKA
Alrawaiq,  N.  A.,  &  Azman,  A.  (2014).  A Review  of  Flavonoid  Quercetin : Metabolism, Bioactivity and Antioxidant  Properties.  International
Journal  of  Pharm  Tech  Research ,  6
(3), 933–941.
Anggraini,  D.,  Suhada,  A.,  &  Rahmawati, S. (2017). Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Singkong ( Manihot Esculenta ) Dalam  Mengobati  Luka  Bakar  Kulit Punggung Tikus ( Rattus Novergicus)
Jantan. Jurnal  Farmasetis, 6(2), 39– 46.
Balqis,  U.,  Rasmaidar,  &  Marwiyah.
(2014).  Gambaran  Histopatologis Penyembuhan Luka Bakar Menggunakan Daun Kedondong ( Spondias  dulcis F.)  dan  Minyak
Kelapa  Pada  Tikus  Putih  (Rattus norvegicus). Jurnal Medika Veterinaria, 8(1), 31–36. Faezah, O. N., Aishah, H. S., & Kalsom, Y. U.  (2013).  Comparative  Evaluation of  Organic  and  Inorganic  Fertilizers on  Total  Phenolic,  Total  Flavonoid, Antioxidant Activity and Cyanogenic
Glycosides  in  Cassava  ( Manihot esculenta ). African Journal of Biotechnology , 12(18), 2414–2421. Habibi,  N.  A.,  Fathia,  S.,  &  Utami,  C.  T. (2019) Perubahan Karakteristik Bahan  Pangan  pada  Keripik  Buah dengan  Metode  Freeze  Drying. Jurnal Sains Terapan, 5(2), 67–76. Hasim,  Falah,  S.,  &  Dewi,  L.  K.  (2016). Effect  of  Boiled  Cassava  Leaves ( Manihot esculenta Crantz) on Total Phenolic, Flavonoid and its
Antioxidant Activity. Current Biochemistry, 3(3) Landen, N.  X., Dongging, L., & Mona, S. (2016). Transition from inflammation to proliferation: a critical step during wound  healing. Cell  Mol  Life  Sci , 73(20), 3861–3885.
Maladiyah  I,  Dayi  F,  Desrini  S.  (2011). Analgesic  Activity  of  Ethanolic Extract of Manihot Esculenta Crantz Leaves  In  Mice. Universamedicina, 30 (1), 3-10
Mappa, T., Edy, J.H., Kojong, N.  (2013).
Formulasi Gel Ekstrak Daun Sasaladahan  ( Peperomia  pellucida (L.)  H.B.K)  dan  Uji  Efektifitasnya Terhadap  Luka  Bakar  pada  Kelinci ( Oryctolagus cuniculus ). Jurnal Ilmiah Farmasi, 2(2), 49-55 Nijveldt,  R,  J.,  Nood,  E,  V.,  Hoorn,  D, EC,V., Boelens, P,G., Norren, K,V., Leeuwen,  P,  AM,  V.  (2001). Flavonoids:  a  review  of  probable mechanisms  of  action  and  potential applications. American  Journal  of Clinical and Nutrition, 74.
Riansyah  Y,  Mulqie  L,  Choesrina  R.
(2015).  Uji  Aktivitas  Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Ubi Jalar Ungu ( Ipomoea Batatas (L.) Lamk)
terhadap Tikus Wistar Jantan.
Prosiding Penelitian SPeSIA Unisba Riskesdas, (2018). Laporan  nasional riskesdas  (Vol.  1).  Retrieved  from https://www.kemkes.go.id/article/vie w/19093000001/penyakit-jantung- penyebab-kematian-terbanyak-ke-2- di-indonesia.html
Setiawati A, Fitriani VY, Amir M. (2016).
Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Daun  Ubi  Jalar  ( Ipomoea  Batatas Poir.) Terhadap  Tikus Putih  (Rattus norvegicus). Jurnal  Sains  dan Kesehatan, 1(6)
Sukmawati,  S.  S.,  Siwi,  H.,  &  Sri,  R.
(2021). Activity Test of The Ethanol Extract  of  Cassava  Leaves  ( Manihot esculenta  Crantz )  Against  The Healing  of  Crosses  In  Rabbit.
Indonesian  Journal  On  Medical Science , 8(2), 160–165.
Yuslinda  E,  Mukhtar  H,  Khairunnisa.
(2012). Penentuan Aktivitas
Antioksidan  dari  Beberapa  Ekstrak Sayur-Sayuran  Segar  dan  Dikukus Dengan  Metode  DPPH. Scientia, 2(1), 1-5