UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL GAMBIR ( Uncaria gambir Roxb . )

## TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA BAKAR PADA KULIT PUNGGUNG
MENCIT PUTIH JANTAN ( Mus musculus )
Submitted : 19 Nov 2015
Edited : 15 Des 2015
Accepted : 21 Des 2015
Fitri Handayani, Eka Siswanto, Lintang Ayu Trisna Pangesti
Akademi Farmasi Samarinda Email : sausanrukan@yahoo.co.id

## ABSTRACT
Gambir (Uncaria gambir Roxb.) contains flavonoids, tannins, saponins and alkaloids that can help in the healing process of burns on the back skin of mice. Gambir has been used for the treatment because it has the effect of antimicrobial and anti-inflammatory. Gambir is used by the people as a traditional medicine to treat burns.This research is experimental research. The object studied is the potential of gambir extract on healing burns of mice back skin. The number of mice used are 15 which divided into 5 groups: the positive control group (branded ointment), negative control group (vaseline flavum), group of gambir ethanol extract and vaseline flavum concentration of 25%, 35%, and 45%. Each group consisted of 3 mice.Backs of the mice induced  using  a  heated  solder  which  tip  contained  stainlees  plate  measuring  1x1  cm  and  placed  for  2 seconds  on  the  back  skin  of  mice.  The  percentage  of  burns  healing  is  obtained  by  calculating  the  surface area of the wound. The data were analyzed using ANOVA analysis followed by LSD test. The results showed that  ethanol  extract  of  gambir  concentration  of  25%  with  the  healing  burns  percentage  of  (72.00%),  the concentration of 35% (85.00%), and the concentration of 45%  (88.67%) have  activity on healing burns of back skin of mice. The results of data analysis using ANOVA showed that the data has significant differences with a significance value <0.05 is 0.000. LSD test results stated that each treatment group have significant differences  with  a  significance  value  <0.05.  It  can  be  seen  that  with  increasing  dose  will  be  followed  by duration of burns healing.
Keywords : ethanol extract of gambir, burns, wound surface area

## PENDAHULUAN
Kulit  adalah  organ  tubuh  yang  terletak paling  luar  dan  membatasinya  dari  lingkungan hidup  manusia.  Kulit  merupakan  organ  yang esensial  dan  vital  serta  merupakan  cermin kesehatan  dan  kehidupan.  Kulit  juga  sangat kompleks,  elastis  dan  peka.  Masalah  pada  kulit yang  sering  dijumpai  adalah  luka.  Luka  ada beberapa jenis, salah satunya adalah luka bakar (1) .
Luka bakar adalah kerusakan atau kehilangan  jaringan  yang  disebabkan  kontak dengan  sumber  panas  seperti  api,  air  panas,  bahan kimia,  listrik  dan  radiasi (2) .  Luka  bakar  jika  tidak ditangani sesegera mungkin, maka akan menyebabkan  berbagai  komplikasi  seperti  infeksi, perdarahan,  ketidakseimbangan  elektrolit,  sampai syok.
Salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan masyarakat  sebagai  obat  tradisional  adalah tumbuhan  gambir  (Uncaria  gambir  Roxb.)  yang termasuk  famili  Rubiaceae.  Tumbuhan  digunakan masyarakat  untuk  mengobati  berbagai  penyakit seperti  luka  terbakar,  luka,  sariawan,  radang  gusi (getahnya),  radang  tenggorokan,  diare,  disentri, batuk,  haid  banyak,  demam  kuning,  dan  suara parau (3) . Dilaporkan adanya penelitian aktifitas gambir  sebagai  analgetik  dan  antiinflamasi (4) , antimikroba (5) ,  antioksidan (6) dan  antinematoda (7) . Penelitian  tentang  toksisitasnya  terhadap  ginjal, hati  dan  jantung  telah  dilakukan  oleh  Armenia  et al., 2005 (8) , sedangkan penelitian tentang teratogenitasnya  secara  in–ovo  telah  dilakukan oleh Almahdy et al., 2004 (9) .
Kandungan  utama  gambir  adalah  katekin
(51%), zat penyamak (20-25%), asam catechutannat,  quersetin,  catechu  merah,  gambir fluoresein,  abu,  asam  lemak,  lilin,  alkaloid,  dan tanin.  Kandungan  kimia  gambir  yang  paling banyak  dimanfaatkan  adalah  katekin  dan  tanin (10) . Kandungan  kimia  gambir  yang  terbesar  adalah katekin merupakan bagian dari golongan flavonoid,  flavonoid  berfungsi  sebagai  antibakteri dengan  cara  membentuk  senyawa  kompleks terhadap  protein  ekstraseluler  yang  menganggu integritas membran sel bakteri (11) . Kandungan tanin dalam gambir bekerja baik sebagai antibakteri dan antifungi. Tanin dapat digunakan sebagai adstringen  yang  menyebabkan  penciutan  pori-pori kulit, memperkeras kulit, menghentikan pendarahan  yang  ringan,  antiseptik  dan  obat  luka bakar (12) .  Alkaloid  memiliki  kemampuan  sebagai antibakteri. Mekanisme yang diduga adalah dengan cara menganggu komponen penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri,  sehingga  lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh  dan menyebabkan  kematian  sel  tersebut.  Berdasarkan hal  tersebut,  maka  peneliti  melakukan  pengujian aktivitas  dari  ektrak  etanol  gambir  ( Uncaria gambir Roxb.)  untuk  mempercepat  penyembuhan luka  bakar  pada  kulit  punggung  mencit  putih jantan  yang  diinduksi  dengan  solder  yang dipanaskan  dengan  ujung  yang  terdapat  lempeng stainless berukuran 1x1 cm.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah : Gambir, etanol 95% dan vaselin flavum.

## Metode
1. Konsentrasi Ekstrak Etanol Gambir Konsentrasi  yang  digunakan  ada  3  peringkat konsentrasi, di mana konsentrasi ekstrak etanol gambir  yang  digunakan  adalah  konsentrasi (25%), (35% ), dan (45% ).
2. Penyiapan Hewan Uji Mencit  putih  yang  akan  digunakan  pada pengujian  terlebih  dahulu  disiapkan  dan dikondisikan  selama  1 minggu  dengan dilakukan  penimbangan  berat  badan  mencit sekali setiap hari sebelum pengujian.
Penyiapan hewan uji ini dilakukan agar hewan uji  dapat  beradaptasi  dengan  lingkungan  baru,
mengontrol  kesehatan  dan  menyeragamkan makanannya.
3. Pembuatan Salep Ekstrak Gambir Vaselin  flavum  diaduk  sebagian  dengan ekstrak  etanol  gambir,  kemudian  ditambahkan sisa  vaselin  flavum  diaduk  lagi  sampai semuanya tercampur atau homogen, disesuaikan dengan masing-masing konsentrasi.
4. Pembuatan Luka Bakar Solder  panas  dimodifikasi  dengan  lempeng stainless yang berukuran 1x1 cm. Rambut pada daerah  punggung  mencit  dicukur,  kemudian ditempel  solder  panas  ke  punggung  mencit selama  2  detik,  sampai  bagian  dermis  beserta jaringan  yang  terikat  dibawahnya,  sehingga terjadi  pelepuhan  dan  kulit  terkelupas  pada bagian tertentu.
5. Proses  pengobatan  luka  bakar  pada  punggung mencit
a. Disiapkan  5  kelompok  hewan  uji  yang terdiri  dari  3  mencit  tiap  kelompok  : kelompok  I  pemberian  kontrol  positif (salep  bermerek),  kelompok  II  pemberian kontrol negatif (vaselin flavum), kelompok III  pemberian  ekstrak  etanol  gambir konsentrasi  25%  dan  vaselin  flavum, kelompok  IV  pemberian  ekstrak  etanol gambir  konsentrasi  35%  dan  vaselin flavum,  kelompok  V  pemberian  ekstrak etanol gambir konsentrasi 45% dan vaselin flavum.
b. Disiapkan sediaan uji yaitu salep bermerek,  vaselin  flavum,  dan  ekstrak etanol gambir.
c. Pengujian penyembuhan luka dengan :
1) Dioleskan salep bermerek pada kelompok pertama terhadap luka bakar pada kulit punggung mencit.
2) Dioleskan vaselin flavum pada kelompok  kedua  terhadap  luka  bakar pada kulit punggung mencit.
3) Dioleskan  ekstrak  etanol  gambir  dan vaselin  flavum  pada  kelompok  ketiga dengan  konsentrasi  (25%),  keempat dengan konsentrasi (35%), dan kelima dengan  konsentrasi  (45%)  terhadap luka  bakar  pada  kulit  punggung mencit.
d. Perawatan Luka Bakar
Mencit  yang  telah  dilukai  pada  bagian kulit  punggungnya  masing-masing  diberi perawatan berdasarkan kelompoknya. Perawatan  dilakukan  mulai  hari  ke-1 sampai  hari  ke-14  sebanyak  1  kali  sehari. Luka  bakar  dirawat  secara  terbuka  hingga sembuh yang ditandai dengan merapat dan tertutupnya luka.
e. Diamati perubahan pada luka bakar selama 14 hari secara makroskopik perkembangan penyembuhan  luka  pada  kulit  punggung mencit  dan  pengukuran  luas  permukaan luka dengan menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Gambir Terhadap Penyembuhan Luka Bakar Pada Kulit

## Punggung Mencit
Pengujian  dilakukan  secara  bersamaan antara kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif,  dan  kelompok  ekstrak  etanol  gambir dengan  3  variasi  konsentrasi.  Pada  penelitian  ini digunakan  3  konsentrasi  berbeda,  yang  bertujuan untuk  mengetahui  konsentrasi  maksimal  dari ekstrak  etanol  gambir  dalam  penyembuhan  luka bakar  pada  kulit  punggung  mencit.  Konsentrasi ekstrak etanol gambir terdiri dari konsentrasi 25%, 35%,  dan  45%  kemudian  semua  kosentrasi  dibuat dalam  1  g  stok  salep  untuk  persediaan  2  hari masing-masing hewan uji diberikan dosis sebanyak 0,1  g  untuk  sekali  oles.  Sebelum  melakukan pengujian terlebih dahulu diadaptasikan masingmasing hewan uji selama 1 minggu, hal ini dimaksudkan  agar  keadaan  mencit  kembali  stabil, mengontrol kesehatannya dan dapat menyesuaikan diri terhadap lingkungan baru.
Adaptasi  dilakukan  dengan  cara  memberi makananan dan menimbang berat badan hewan uji selama  1  minggu  menggunakan  timbangan  digital hal  ini  bertujuan  untuk  mengontrol  kesehatan hewan  uji.  Grafik  penimbangan  rata-rata  berat badan mencit dapat dilihat pada gambar 1.
Berdasarkan  gambar  1  grafik  penimbangan rata-rata  berat  badan  mencit  selama  1  minggu grafik  mengalami  kenaikan  setiap  harinya,  hal  ini dikarenakan  mencit  diberi  makanan  dan  minuman setiap  harinya  tepat  waktu.  Kenaikan  berat  badan mencit  sangat  dipengaruhi  oleh  nutrisi  yang  ada dalam makanan, apabila seekor hewan kekurangan
nutrisi  atau  mengalami  defisiensi  suatu  zat makanan  maka  laju  pertumbuhan  hewan  tersebut akan  terhambat (13) .  Pertumbuhan  berat  badan hewan akan berjalan normal apabila makanan yang diberikan  mengandung  nutrisi  dalam  kualitas  dan kuantitas  yang  baik (14) .  Mencit  yang  diadaptasi selama  1  minggu  dianggap  sehat  dan  dapat digunakan  sebagai  hewan  uji  karena  mengalami kenaikan berat badan setiap harinya .
Mencit  dibagi  menjadi  5  kelompok  yang masing-masing  kelompok  terdiri  dari  3  mencit kelompok pertama yaitu kontrol positif yang diberi salep  bermerek,  kelompok  kedua  yaitu  kontrol negatif  yang  diberi  vaselin  flavum,  kelompok ketiga  yaitu  ekstrak  etanol  gambir  konsentrasi 25%,  kelompok  keempat  yaitu  ekstrak  etanol gambir  konsentrasi  35%,  dan  kelompok  kelima yaitu  ekstrak  etanol  gambir  konsentrasi  45%. Setelah  dilakukan  pengelompokkan,  selanjutnya dilakukan  pencukuran  bulu  mencit  menggunakan alat  pencukur  bulu  dibagian  sekitar  punggung mencit  hal  ini  bertujuan  agar  memudahkan  pada saat  pembuatan  luka  bakar  pada  kulit  punggung mencit.
Pengujian  aktivitas  ekstrak  etanol  gambir terhadap  luka  bakar  pada  kulit  punggung  mencit dilakukan  dengan  cara  mencampurkan  ekstrak kental  gambir  dengan  basis  salep  vaselin  flavum dengan konsentrasi yang telah ditentukan. Pemilihan vaselin kuning sebagai basis dikarenakan  banyak  digunakan  dalam  penggunaan basis  salep  pada  umumnya yang  bersifat hidrokarbon  sehingga  tidak  mudah  hilang  jika terkena air  sehingga  dapat memperpanjang  kontak antara bahan obat dan kulit.
Pembuatan luka bakar dengan cara menempelkan  solder  panas  diatas  punggung mencit  dengan  lempeng stainlees berukuran  1x1 cm  selama  2  detik,  kemudian  salep  dioleskan  ke hewan uji dan dioleskan sehari 1 kali.

## Hasil Persentase Penyembuhan Luka Bakar
Hasil  penelitian  mengenai  aktivitas  ekstrak etanol  gambir  dan  vaselin  flavum  terhadap penyembuhan  luka  bakar  pada  kulit  punggung mencit dapat dilihat pada gambar 2.
Hasil persentase penyembuhakan luka bakar berdasarkan  grafik  menunjukkan  bahwa  kontrol positif  yang  dioleskan  salep  bermerek  lebih  cepat menutup  luka  dengan  persentase  kesembuhan
sebesar  100%  pada  hari  ke-11  hal  ini  dapat dikarenakan  salep  bermerek  yang  digunakan sebagai  kontrol  positif  merupakan  salep  yang dipasarkan  sebagai  salep  luka  bakar  yang  sudah terkenal  dan  telah  mengalami  beberapa  proses pengujian baik uji praklinik maupun uji klinik dan pada salep bermerek yang  digunakan memiliki zat aktif lebih dari satu sehingga proses penyembuhan luka  bakar  terjadi  dengan  cepat.  Fungsi  kontrol positif  adalah  sebagai  pembanding  apakah  zat  uji bisa  berefek  sama  dengan  obat  luka  bakar  yang
digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Salep  bermerek yang  digunakan  mengandung  bahan  aktif, Radix scutellarie yang memiliki khasiat untuk mengatasi peradangan, demam, kejang-kejang dan meningkatkan daya tahan tubuh; Cortex phellodendri yang  berkhasiat  untuk  membunuh kuman, bakteri, jamur, dan dapat mengurangi kulit merah  dan  peradangan; Rhizoma  coptidis yang berkhasiat  sebagai  antibakteri,  anti  peradangan, antioksidan, dan megeluarkan panas tubuh.
Gambar 1. Grafik Penimbangan Rata-Rata Berat Badan Mencit
Gambar 2. Grafik Persentase Penyembuhan Luka Bakar
Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah vaselin  flavum,  kontrol  negatif  berfungsi  untuk mengetahui apakah basis yang digunakan mempunyai  efek  terhadap  hewan  uji.  Kontrol negatif mulai terlihat perubahan lukanya pada hari ke-5 hasil persentase penyembuhan yang dihasilkan kontrol negatif sebesar 32,67%. Kontrol negatif  memiliki  persentase  penyembuhan  yang tidak  terlalu  besar  tetapi  menunjukkan  adanya proses  penyembuhan.  Hal  ini  dikarenakan  vaselin flavum  dapat  menghambat  hilangnya  kandungan air  dari  sel-sel  kulit  dengan  membentuk  lapisan film yang waterproff . Vaselin flavum juga mampu meningkatkan  hidrasi  pada  kulit.  Sifat-sifat tersebut  sangat  menguntungkan  karena  mampu mempertahankan kelembaban kulit sehingga vaselin  flavum  disebut  juga  memiliki  sifat moisturizer dan emollient .  Ekstrak  etanol  gambir konsentrasi 25% mulai terlihat proses penyembuhan  luka  pada  hari  ke-4  dan  memiliki persentase  penyembuhan  sebesar  72,00%,  ekstrak etanol  gambir  konsentrasi 35%  dan  45%  memiliki persentase  penyembuhan  sebesar  85,00%  dan 88,67%  karena  didalam  ekstrak  etanol  gambir terkandung  senyawa  kimia  yang  dapat  membantu proses penyembuhan luka bakar.
Mekanisme  penyembuhan  luka  dengan ekstrak  etanol  gambir  dapat  terjadi  dikarenakan pada ekstrak etanol gambir terdapat senyawa kimia yang  berfungsi  mempercepat  penyembuhan  luka yaitu  senyawa  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai antibakteri  dengan  cara  membentuk  senyawa kompleks  terhadap  protein  extraseluler  yang menganggu integritas membran sel
bakteri (11) .Flavonoid juga memiliki efek antiinflamasi dimana berfungsi sebagai anti radang dan  mampu  mencegah  kekakuan,  nyeri  dan berfungsi  sebagai  antioksidan  sehingga  mampu menghambat zat yang bersifat racun (15) .
Adapun  mekanisme  kerja  dari  flavonoid yaitu  melancarkan  peredaran  darah  ke  seluruh tubuh dan mencegah terjadinya penyumbatan pada pembuluh  darah,  mengandung  antiinflamasi,  juga berfungsi  sebagai  antioksidan,  dan  membantu mengurangi rasa sakit jika terjadi  pendarahan atau pembengkakan (16) . Selain flavonoid yang  memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri  adalah  alkaloid, alkaloid  juga  memiliki  kemampuan  sebagai antibakteri. Mekanisme yang diduga adalah dengan cara mengganggu komponen penyusun
peptidoglikan  pada  sel  bakteri,  sehingga  lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh  dan menyebabkan  kematian  sel  tersebut (17) .  Tanin dalam  gambir  berfungsi  sebagai  antibakteri  dan antifungi serta sebagai adstringen yang menyebabkan penciutan pori-pori kulit, memperkeras  kulit,  dan  menghentikan  pendarahan yang ringan (10) .
Tanin  juga  mempunyai  daya  antibakteri dengan cara mempresipitasi protein, karena diduga tanin mempunyai efek yang sama dengan senyawa fenolik (18) .  Efek  antibakteri  tanin  antara  lain melalui  reaksi  dengan  membran  sel,  inaktivasi enzim,  dan  destruksi  atau  inaktivasi  fungsi  materi genetik.  Saponin  memiliki  kemampuan  sebagai pembersih dan antiseptik yang berfungsi membunuh  kuman  atau  mencegah  pertumbuhan mikroorganisme  yang  biasa  timbul  pada  luka sehingga  luka  tidak  mengalami  infeksi  yang berat (19) . Kemampuan gambir untuk menyembuhkan  luka  bakar  disebabkan  adanya  zat antibakteri,  dimana  zat  tersebut  berperan  sebagai anti  mikroba  dan  anti  jamur,  dengan  adanya  zat tersebut  sebagai  antibakteri  dapat  menekan pertumbuhan  bakteri  patogen  dan  mencegah terjadinya  infeksi  pada luka  sehingga  kesembuhan luka  dapat  dipercepat.  Secara  alami  tubuh mempunyai  kemampuan  untuk  melindungi  dan memulihkan  dirinya.  Peningkatan  aliran  darah  ke daerah  yang  rusak,  membersihkan  sel  dan  benda asing  dan  perkembangan  awal  dari  proses penyembuhan  secara  normal  tanpa  bantuan. Mekanisme  penyembuhan  luka  secara  alami  akan mengalami  tiga  fase  yaitu:  fase  inflamasi,  fase proliferasi,  dan  fase  maturasi.  Perawatan  dapat membantu  untuk  mempercepat  dalam  proses penyembuhan luka diantaranya perawatan terhadap kandang  mencit  yang  setiap  harinya  selalu dibersihkan,  memberi  makan  dan  minum  mencit agar mencit tidak sakit.
Proses penyembuhan luka bakar membutuhkan beberapa proses untuk menggantikan jaringan yang telah rusak, dalam hal ini  proses  epitelisasi  terjadi  setelah  pertumbuhan dari  jaringan  granulasi  yang  terlebih  dahulu diawali  dengan  proses  inflamasi  dimana  terjadi permeabilitas  membran  sel  sehingga  terjadi  rubor (kemerahan)  dan  juga  peradangan  dan  terkadang disertai  dengan  adanya  bula.  Proses  ini  bertujuan agar  sel  darah  putih  dan  trombosit  membatasi
kerusakan  yang  lebih  serius  juga  mempercepat penyembuhan.  Proses  ini  terjadi  pada  hari  ke-1 sampai  hari  ke-3,  sedangkan  proses  proliferasi ketika  luka  menjadi  meradang  berbentuk  benjolan halus  yang  disebut  granula  sehingga  epitel  pada tepi  luka  yang  terdiri  dari  sel  basal  terlepas  dan mengisi  permukaan  luka  dan  sel  akan  mengalami pembelahan secara mitosis hingga menjadi matang pada  perlakuan  ini  terjadi  pada  hari  ke-4  sampai hari  ke-21.  Adapun  proses  pematangan  ini  tiap luka  berbeda-beda  tergantung  pada  efek  sediaan yang  telah  diformulasi  dan  juga  keadaan  fisiologi hewan uji, proses pematangan ini dimulai pada hari ke-21.
Ekstrak  etanol  gambir  diuji  cobakan  pada punggung mencit yang telah dilukai dengan solder panas.  Menggunakan  mencit  sebagai  hewan  uji karena  perawatan  untuk  mencit  lebih  mudah dibandingkan  menggunakan  hewan  uji  yang  lain sehingga  memudahkan  dalam  pengamatan  dan pengukuran.  Ekstrak  etanol  dioleskan  pada  luka bakar  dengan  konsentrasi  25%,  35%  dan  45%. Pengamatan  dan  pengukuran  dilakukan  selama  14 hari,  dimana  setiap  hari  dilakukan  pengobatan sebanyak 1 kali sehari.
Data  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis dengan  program  SPSS,  terlebih  dahulu  data dianalisis  untuk  mengetahui  data  berdistribusi normal dengan menggunakan One-Sample Kolmogrov-Smirnov  Test setelah  data  dianalisis didapatkan  kesimpulan  bahwa  data  berdistribusi normal  karena  nilai p-value >  0,05  yaitu  0,553. Data kemudian dianalisis dengan menggunakan uji ANOVA  didapatkan  nilai p-value <  0,05  yaitu 0,000  yang  berarti  data  tersebut  memiliki perbedaan  bermakna.  Data  kemudian  dilanjutkan ke uji LSD untuk mengetahui perbedaan bermakna masing-masing  perlakuan,  sehingga  diperoleh kesimpulan  hasil  uji  LSD  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  gambir  konsentrasi  25%,  35%,  dan 45% memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol positif  dan  kontrol  negatif.  Ekstrak  etanol  gambir konsentrasi  25%,  35%,  dan  45%  masing-masing memiliki perbedaan bermakna yang signifikan.

## SIMPULAN
1. Ekstrak  etanol  gambir  konsentrasi  25%,  35%, dan 45% memiliki aktivitas terhadap
penyembuhan luka bakar pada kulit punggung mencit.
2. Konsentrasi  kelompok  ekstrak  etanol  gambir yang  paling  efektif  terhadap  penyembuhan luka bakar adalah konsentrasi 45%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Wasitaatmadja,  S.2002.  Ilmu  Penyakit  Kulit dan  Kelamin . Ed.  Adhi  Djuanda.  Edisi  ke- 3.Cetak ulang 2002 dengan perbaikan.FKUI.
2. Moenadjat,  Y.  2001.  Luka  Bakar  Dalam Penge-tahuan  Klinik  Praktis, ed.2,  Fakultas Kedokter-an Universitas Indonesia. Jakarta.
3. Hadad, EA., NR, Ahmadi., Herman., Supriadi., A., Hasibuan.,. 2007. Teknologi Budidaya dan Pengolahan Gambir. Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Aneka Tanaman Industri.
4. Sari,  G.P.  2010.  Uji  Efek  Analgetik  dan Antiinflamasi  Ekstrak  Kering  Air  Gambir Secara  In  Vivo.  Skripsi.  Jakarta  :  Universitas Islam Syarif Hidayatullah.
5. Chosdu,  R.,  Taty,  E.B.,  dan  Yessi,  W.  2005. Uji  Ekstrak  Daun  Gambir  ( Uncaria  Gambir (Hunter)  Roxb ),  Awet  Radiasi  Terhadap Kemampuannya Sebagai Anti Mikroba. Proseding  Seminar  Nasional  Tumbuhan  Obat Indonesia  XXVI.  Padang  :  Kelompok  Kerja Tumbuhan Obat Indonesia.
6. Chosdu, R., dan Sudrajat, A. 2005. Uji Radikal Bebas dengan Metoda ESR pada Daun Gambir ( Uncaria  gambir  (Hunter)  Roxb .)  Awet Radiasi. Proseding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia. Padang : Kelompok Kerja Tumbuhan Obat Indonesia.
7. Alen,  Y.,  Rahmayuni,  E.  dan  Bakhtiar,  A. 2005.  Isolasi  Senyawa  Bioaktif  Antinematoda Bursa  Pelenchus  Xylophilus  Dari  Ekstrak Gambir. Proseding Seminar Nasional Tumbuhan  Obat  Indonesia  XXVI.  Padang  : Kelompok Kerja Tumbuhan Indonesia.
8. Armenia,  A.,  Siregar,  dan  Arifin  H.  2005. Toksisitas  Ekstrak  Gambir  ( Uncaria  gambir Roxb .)  terhadap  Organ  Ginjal,  Hati  dan Jantung  Mencit.  Proseding  Seminar  Nasional Tumbuhan  Obat  Indonesia  XXVI.  Padang  : Kelompok Kerja Tumbuhan Obat Indonesia
9. Almahdy,  Samah,  A.  dan  Sari,  L.  2004.  Uji Teratogenitas  Gambir  Murni  Secara  In-  Ovo. Skripsi. Padang : Farmasi FMIPA UNAND.
10. Bakhtiar, A. 1991. Manfaat Tanaman Gambir,Makalah Penataran Petani dan Pedagang  Pengumpul  Gambir  di  Kecamatan Pangkalan  Kab.  50  Kota  2930 November
1991. Padang : FMIPA UNAND.
11. Dwidjoseputro,  A.  1994.  Pengantar  Fisiologi Tumbuhan . Jakarta  :  PT.  Gramedia  Pustaka Mulia.
12. Anief,  M.1997.  Formulasi  Obat  Topikal Dengan  Dasar  Penyakit  Kulit.  Yogyakarta  : Gajah Mada University Press.
13. Dawes, B. 1952. A Hundred Years of Biology. University of London Inc. London
14. Rasyaf.  1990.  Bahan  Makanan  Unggas  di Indonesia. Yogyakarta : Penerbit Kanisius.
15. Atmaja,  N.D.  2007.  Aktivitas  Antioksidan Fraksi  Eter  dan  Air  Ekstrak  Metanolik  Daun Jambu  Biji  (Psidium  guajava  Linn.)  terhadap Radikal  Bebas  1,1  -  difenil  2-pikrilhidrazil (DPPH). Skripsi .  Surakarta  :  Fakultas  Farmasi USB.
16. Wahyuningsih,  S.  Soemardji,  A.A.  dan Febiyanti,  D.  2006.  Efek  Gel  Lidah  Buaya (Aloe barbadensis Mill) Terhadap
Penyembuhan  Luka  Bakar  Eksperimen  Pada Tikus  Wistar  Betina. Prosiding  Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXIX.
17. Robinson,  T.  1991,  Kandungan  Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi. Bandung : ITB.
18. Masduki,  I.  1996.  Efek  Antibakteri  Ekstrak Biji  Pinang  (Areca  catechu)  terhadap  S.aureus dan E. coli. Cermin Dunia Kedokteran . 19. Robinson.  T.  1995.  Kandungan  Organik Tumbuhan  Tinggi.  Penerjemah:Padmawinata, K. Bandung : Penerbit ITB.