Pengamatan Kromosom Ikan Bilih ( Mystacoleucus padangensis BLKR., Cyprinidae) dari Danau Singkarak Sumatera Barat
Chromosomes Investigation of Bilih Fish ( Mystacoleucus padangensis BLKR., Cyprinidae) from Singkarak Lake West Sumatera
Dewi I. ROESMA 1 ), Syaifullah 1 ) & Melyawati 1 )
1 ) Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Andalas, Kampus Limau Manis, Padang (25163), email: dewi_roesma@yahoo.com
ABSTRACT. The research on chromosomes of Bilih Fish ( Mystacoleucus padangensis Blkr., Cyprinidae) from Singkarak Lake in West Sumatera amis to investigate  the number of the fish’s chromosomes. The research  was  done  by  using  descriptive  method  through  making  preparation  of  chromosomes  with squashing method. The result shows that the number of chromosomes of M. padangensis is 2 n = 50.
Keywords:  chromosome, bilih fish, Mystacoleucus padangensis Blkr.
ABSTRAK. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  jumlah  kromosom  Ikan  Bilih  ( Mystacoleucus padangensis Blkr.,  Cyprinidae)  yang  hidup  di  Danau  Singkarak  Sumatera  Barat.    Penelitian  dilakukan dengan  metoda  deskriptif  melalui  pembuatan  preparat  kromosom  menggunakan  metoda squash .  Hasil penelitian menunjukkan bahwa jumlah kromosom M. padangensis adalah 2 n = 50.
Kata kunci : kromosom, ikan bilih, Mystacoleucus padangensis Blkr

## PENDAHULUAN
Telah  disetujui  oleh  para    ahli  biologi  evolusi  bahwa dalam  banyak  kasus,  kromosom  sangat  berperan dalam  spesiasi  dari  organisme  yang  bereproduksi secara  seksual. Perubahan  pada  level  kromosom telah mendorong terjadinya isolasi reproduksi. Secara  umum, jumlah  kromosom  pada  suatu  spesies adalah  konstan  dan  dapat  ditemukan  variasi  antara spesies satu dengan spesies lainnya. Menurut Adrian dkk. (1965),  kromosom  pada  saat  tertentu  dapat mengalami  perubahan  misalnya  terjadi  mutasi  yang menyebabkan aberasi (perubahan  jumlah  atau struktur  kromosom).  Perubahan  jumlah  kromosom dapat  berupa euploidi ataupun aneuploidi .   Namun demikian,  jumlah  dan  morfologi  kromosom  menurut Burn  (1976)  umumnya  konstan  untuk  setiap  spesies. Moyle  and  Cech  (2000)  menyatakan  bahwa  jumlah dan  morfologi  kromosom  dalam  satu  spesies merupakan  karakteristik  yang  konstan  dan  dapat digunakan untuk menentukan hubungan perkerabatan spesies.
Kromosom  dapat  diamati  pada  sel  jaringan yang kecepatan  pembelahan  selnya  tinggi,  seperti  pada ginjal,  embrio  dan  insang  pada  ikan.  Ukuran kromosom dapat sama atau berbeda, ada yang relatif besar  dan  dapat  diukur  dan  ada  yang  relatif  kecil. Menurut  Black dan  Pickering  (1998),  spesies  ikan pada umumnya memiliki ukuran kromosom yang kecil, sehingga sulit mengamati morfologinya.
M.  padangensis sebagai  salah  satu  anggota  famili Cyprinidae ditemukan dan dideskripsikan pertama kali oleh  Bleeker  pada  tahun  1852. M.  padangensis merupakan  ikan  bertulang  sejati  yang  termasuk kedalam  subkelas teleostei . Ikan  ini  memiliki  ciri kepala  simetris,  bentuk  badan  tidak  seperti  ular  dan memiliki  sisik.  Pada  kedua  rusuk  terdapat  gurat  sisi ( linea  lateralis )  yang  membentang  di  atas  sirip  dada. Sirip  punggung  terdiri  dari  jari-jari  lemah  dan  jari-jari keras.  Sirip  perut  jauh  ke  belakang  di  muka  sirip dubur  dan  terdapat  satu  jari-jari  keras  pada  sirip punggung  (Jafnir  dkk., 1989).  Ikan  ini    merupakan ikan  air  tawar  endemik  danau  Singkarak  Sumatera Barat (Kottelat dkk., 1993; Dirjen Perikanan Tangkap, 2005).  Penelitian  mengenai  ikan  ini  telah  banyak
dilakukan,  misalnya  mengenai  taksonomi,  reproduksi dan  pembudidayaannya  (Syandri,  1996).  Akan  tetapi, belum  diketahui  berapa  jumlah  kromosomnya.  Untuk itu  dilakukan  penelitian  mengenai  jumlah  kromosom M. padangensis . Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan  informasi  genetik M.  padangensis dan dapat dijadikan sebagai dasar penelitian lanjutan.

## BAHAN DAN CARA KERJA
Penelitian  ini    dilaksanakan  di  lapangan  dan  di Laboratorium  Genetika  /  Sitologi  Jurusan  Biologi FMIPA  Unand,  Padang.    Pengoleksian  sampel dilakukan  pada  beberapa  lokasi  di  dalam Danau Singkarak,  Sumatera  Barat  yaitu  di  Sumani  (Kec.X Koto  Singkarak, Kabupaten  Solok),  Paninggahan (Kec.  Junjung  Sirih, Kabupaten  Solok),  Sumpur  dan Batu  Taba  (Kec.  Batipuh  Selatan,  Kabupaten Tanah Datar). Penelitian ini  menggunakan metode deskriptif.
M.  padangensis dikoleksi  dari  Danau  Singkarak dengan  jumlah  sampel  sebanyak  lima  ekor  untuk masing-masing  lokasi.  Ikan  ditangkap  dan  dibawa  ke laboratorium  dalam  keadaan  hidup  untuk  selanjutnya dilakukan pembuatan preparat kromosomnya. Preparat  kromosom  dibuat  dengan  metode  squash yang  mengacu  kepada  Gul  dkk. (2004)  dengan modifikasi. Ikan dalam keadaan hidup  ditimbang lalu disuntik  dengan  larutan  kolkisin  0,25  %  (0,01ml/g berat  tubuh)  secara intra  abdominal kemudian dipelihara  di  dalam  akuarium  yang  beraerasi  baik selama  4  jam.  Kemudian,  ujung  filamen  insang diambil  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  kecil  yang berisi  aquadest  selama  40  menit.  Jaringan  insang tersebut  dipindahkan ke  dalam  larutan  fiksatif  Carnoy yang  terdiri  dari  metanol  dan  asam  asetat  glasial dengan  perbandingan 3:1 selama  30  menit.  Larutan fiksatif  diganti  dengan  larutan  fiksatif  yang  baru  dan dingin,  kemudian  disimpan  dalam  lemari  es  pada suhu  0-4 o C.  Pada  saat  akan  digunakan,  larutan fiksatif tersebut diganti kembali dengan larutan fiksatif yang  baru  selama  10  menit.  Selanjutnya,  filamen insang  dicacah  dengan  jarum,  kemudian  jaringan diambil    dengan  menggunakan  pipet,  lalu  diteteskan ke kaca objek. Jaringan diwarnai dengan aseto-orsein selama 5 menit, dan ditutup dengan kaca penutup lalu ditekan.  Sampel  ikan  yang  telah  diambil  jaringan insangnya  diberi  label  untuk  kemudian  disimpan dalam larutan formalin 40%.
Pengamatan  kromosom  dilakukan  dengan  mikroskop cahaya  terhadap  kelompok  kromosom  yang  tersebar baik.  Kelompok  yang  tersebar  dengan  baik  difoto dengan kamera digital merk Kodak C613. Pemotretan dilakukan pada perbesaran 10 x 100. Jumlah preparat
yang  diamati  adalah  lima  preparat  metafase  per lokasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari  penelitian  mengenai  studi  kromosom M. padangensis pada  empat  lokasi  di Danau  Singkarak, Sumatera  Barat  yaitu  Sumani,  Paninggahan,  Sumpur dan  Batu  Taba,  didapatkan  jumlah  kromosom M. padangensis adalah  2 n =  50  dari  20  sel  metafase yang  diamati  (Gambar  1). Berdasarkan  beberapa laporan penelitian, diketahui bahwa jumlah kromosom dari  genus  Mystacoleucus  adalah  2 n =  50,  misalnya M.  marginatus (Ryoichi  and  Wichian,  1991)  dan M. argenteus (Donsakul  dkk., 2000)  yang  berasal  dari Thailand, memiliki jumlah kromosom 2 n = 50.
Gambar 1. Kromosom metafase M. padangensis
Pada  umumnya  ikan-ikan  dari  famili  Cyprinidae memiliki  jumlah  kromosom    2 n =  50  (Bukhsh,  1982). Laporan  Veranita  (1999)  menunjukkan  bahwa  empat spesies  ikan  air  tawar  yaitu Rasbora  lateristiata , Puntius  tetrazona,  P.  binotatus, dan P.  javanicus, mempunyai jumlah kromosom yang masing- masingnya 2n  =  50 .  Berdasarkan  Penelitian Boron
(2001) diperoleh jumlah kromosom Phoxinus phoxinus dan Eupallasella  perenurus, yang  masing- masingnya  adalah 2n  =  50 . Hasil  observasi  Gul dkk. (2004)  terhadap  jumlah  kromosom Alburnus  heckeli yang  terdapat  di Danau  Hazer  Turki  menunjukan jumlah  kromosomnya  2 n =  50.  Esmaeili  and  Piravar (2006)  meneliti  kromosom  ikan  Persian  Chub ( Petroleuciscus  persidis )  yang  berasal  dari  Iran bagian  Selatan  dan  didapatkan  jumlah  kromosom yang juga 2n = 50 .
Meskipun jumlah  kromosom  dasar  Cyprinidae  pada umumnya 2 n = 50, Bukhsh (1982) menyatakan bahwa pada  beberapa  kasus,  ditemukan  adanya tetraploid ataupun poliploid sehingga jumlah kromosom Cyprinidae  ada  yang  100  dan  150. Sebagai  contoh

## 2µm
adalah  seperti  yang  dilaporkan  oleh  Bukhsh  (1980; 1982),  bahwa jumlah  kromosom Tor  putitora yang terdapat  di  India  dan  dua  spesies  Tor  ( Tor  khudree and Tor  tor )  yang  terdapat  di  aliran  sungai  Himalaya adalah  100.  Tsigenopoulos  dkk. (2002)  melaporkan bahwa pada spesies-spesies dari Genus Barbus yang terdapat  di  Afrika  Selatan  ditemukan  adanya beberapa  kelompok  spesies,  yaitu  spesies  yang mempunyai  jumlah  kromosom  diploid  (2 n =  50) diantaranya B.  anoplus,  B.  trimaculatus, dan B. macrops . Spesies yang mempunyai jumlah kromosom tetraploid  (4 n =  100)  diantaranya B.  andrewi,  B. trevelyani,  B.  bocagei. Sedangkan spesies  yang mempunyai  jumlah  kromosom  hexaploid  (6 n =  150) contohnya  spesies B.  marequensis,  B.  poliylepis,  B. capensis .  Berdasarkan  jumlah  kromosom  dasar  yang umum  dimiliki  Cyprinidae  dan  jumlah  kromosom poliploid  yang  juga  ditemukan  pada  spesies-spesies dalam  famili  Cyprinidae,  dapat  disimpulkan  bahwa pada M. padangensis tidak  terdapat  kromosom poliploid.
Perbedaan morfologi pada  kromosom dengan jumlah yang  sama  (baik pada  level  intraspesies  maupun - inter  spesies)  umumnya  dapat diamati dari  aspek yang  lebih  spesifik  yaitu  kariotip.  Analisa  kariotip  ini menurut  White (1978) dapat dilakukan pada tingkatan-tingkatan  spesifisitas  yang  berbeda  seperti analisa kariotip alfa, beta, gamma, delta, epsilon, dan kariotip zeta.
Sebagai  informasi  awal,  hasil  penelitian  ini  dapat memberikan  data  yang  berguna  terutama  sebagai dasar  untuk  menduga  adanya  tingkatan  evolusi spesies  dalam  satu  genus  berdasarkan  sedikit  atau banyaknya jumlah kromosom. Denton (1973) menyatakan bahwa adanya kecenderungan hubungan  jumlah  kromosom  terhadap  tingkatan evolusi  spesies.  Spesies  yang  lebih  primitif  lebih banyak  jumlah  kromosomnya  dibandingkan  dengan spesies  yang  lebih  maju. Hal  ini  terjadi  karena kromosom  spesies  yang  lebih  primitif  sebagian  besar terdiri dari acrosentrik , sedangkan kromosom spesies yang lebih maju sebagian besar terdiri dari kromosom metasentrik . Berdasarkan  pernyataan  Denton  (1973) tersebut, maka perlu dipertimbangkan untuk melakukan  penelitian  mengenai  jumlah  kromosom pada spesies lainnya dalam genus Mystacoleucus .
Hasil  penelitian  ini  juga  membuka  peluang  bagi kajian-kajian  spesifik  lainnya  seperti  analisa  kariotip, pemetaan    repetitif  DNA  dengan  teknik  FISH (Fluorecent In Situ Hiybridization)  dan berbagai kajian lainnya  yang  berhubungan.  Keakuratan  analisa  dari masing-masing  kajian  tersebut  berpeluang  besar untuk mendeteksi perbedaan-perbedaan yang mungkin  ada,  baik  antar  populasi  pada  spesies  yang sama  dengan  jumlah  kromosom  yang  sama  maupun antar spesies yang berbeda dengan jumlah
kromosom  yang  sama.  Sebagai  contoh  adalah  hasil penelitian  Rosi  and  Gornung  (2005)  pada  spesies Coregonus  lavaretus dari  beberapa  populasi  yang berbeda  di  Italia  yang  memberikan  kariotip  yang sama.  Setelah  dilakukan  analisa  repetitif  DNA ternyata terdapat perbedaan posisi repetitif DNA pada kromosom spesies yang sama.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  mengenai  jumlah kromosom  dari  spesies M.  padangensis dari  Danau Singkarak  Sumatera  Barat  yang  telah  dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa jumlah kromosomnya adalah 2n = 50.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari  penelitian  yang dibiayai  oleh  Proyek  TPSDP  Universitas  Andalas Tahun  2006. Penulis  menyampaikan  terima  kasih kepada pihak Managemen Proyek TPSDP Universitas Andalas dan Ketua Jurusan Biologi FMIPA Universitas  Andalas  atas  semua fasilitas  yang  telah diberikan untuk membantu pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adrian, M. S., Owen, R. D.,  and Edgar, R.S. 1965. General Genetics Second edition . Erusia Publishing House. New Delhi.
Black, K.D. and Pickering, A.D. . 1998. Biology of Farmed Fish . Sheffield Academis Press. England.
Bukhsh, K. 1980. A high Number of Chromosomes in The Hillstream Cyprinid, Tor putitora (Pisces). Journal Cellular and Molecular life Sciences (CMLS). 36 : 173-174.
. 1982 . Karyomorphology of Two Spesies of Tor  (Pisces;  Cyprinidae)  with  A  High  Number of Chromosomes. Journal Cellular and Molecular life Sciences (CMLS) 38 : 82-83.
Burns, G. W. 1976. The Science of Genetics. An Introduction to Heredity, Third Edition . Macmillan Publishing Co. Inc. New York.
Boron, A. 2001. Comparative Chromosomal Studies On Two Minnow Fish, Phoxinus phoxinus (Linnaeus, 1758) and Eupallasella perenurus (Pallas, 1914); An Associated Cytogenetic- Taxonomic Considerations. Genetica . 111:
387-395.
Denton, T. E . 1973. Fish Chromosome Methodology. Charles C Thomas Publisher. Springfield. USA.
Dirjen Perikanan Tangkap . 2005. Upaya Pelestarian Ikan Bilih di Danau Singkarak. http://www.dkp.go.id/content.php?c=1787. 1 November 2006.
Donsakul, T., Magtoon, W., and Rangsiruji, A. 2000. Karyological studies of four cyprinid Fhises : Barbichthys nitidus, Mystacoleucus argenteus, Cyclocheilichthys lagleri and
Systomus sp. 1 from Thailand. Procceding of 44 th Kasetsart 30 : 469-476 .
Esmaeili, H.R and Piravar, Z. 2006 . Karyotyp of Persian Chub, Petroleuciscus persidis (Coad,1981) (Actinopterygii: Cyprinidae) from Southern Iran . Turk J Zool. 30 : 137-139
Gul, S., Sezgin, I., and Koluglu, B. 2004. Karyotipe Analysis in Alburnus heckeli (Battalgil, 1943) from Lake Hazer. Turk J Vet. Anim Sci . 28 :
309-314.
Jafnir, Harun, J., Marusin, N., Hamru dan Salsabila, A . 1989. Biologi Ikan Bilih Danau Singkarak. Laporan Penelitian. Departemen Pendidikan dan Budaya. FIPIA Universitas Andalas
Kottelat, M., Kartikasari, S.N., Whitten, A.J.,  and Wirjoatmadja, S . 1993. Freshwater Fishes of Western Indonesia and Sulawesi, Periplus Edition Liumited . Jakarta.
Moyle, P.B. and Cech, J.J. 2000. Fishes An Introduction to Ichthyology, Fourth Edition . Prentice-Hall,Inc.
Rossi, R.A. and Gornung, E. 2005. Cytogenetic Analysis of Three Italian  Populations Of Coregonus lavaretus (Pisces, Salmoniformes) With Chromosomal Localization Of Major and Minor Ribosomal Genes, And Telomeric Repeats.. Hereditas. 142 :15-21
Ryoichi, A., and Wichian, W . 1991. Karyotypes Of Four Cyprinid Fishes From Thailand. Bulletin of the National science Museum. Series A, Zoology 17 (4): 183-188.
Syandri, H. 1996. Aspek Reproduksi Ikan Bilih (Mystacoleucus padangensis Blkr.) dan Kemungkinan pembenihannya di Danau Singkarak. Disertasi Program Pasca Sarjana. IPB Bogor.
Tsigenopoulos, C.S., Rab, P., Naran, D. and Berrebi, P. 2002. Multiple Origin of Poliploidy in The Phylogeny of Southern African Barbs (Cyprinidae) as Inferred from mtDNA markers.
Heredity 88 : 466-473.
Veranita, D. 1999. Kariotipe empat spesies ikan famili Cyprinidae (Puntius tetrazona, P. binotatus, P. javanicus dan Rasbora lateristiata ). Laporan Penelitian. Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati (SITH) – ITB.
White, M.J.D. 1978. Mode of Speciation . W.H. Freeman and Company. San Fransisco.