## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang  memiliki  lahan  luas dengan  kondisi  alam  yang  mendukung  bagi  pertanian dan  perkebunan,  serta  dianugerahi  keanekaragaman flora  yang  sebagian  besar  dapat  dijadikan  sebagai tanaman  obat  (Fajar et  al .,  2018;  Malik et  al .,  2013).
Teh  ( Camellia  sinensis (L.) Kuntze)  merupakan  jenis tanaman  berkhasiat  yang  paling  banyak  dibudidayakan dengan baik di Indonesia (Fajar et al. , 2018; Widyasanti et  al., 2016) . Teh  banyak  diminati  dan  hampir  setiap hari dikonsumsi masyarakat sebagai minuman penyegar maupun  minuman  kesehatan,  karena  efek  relaksasi yang  ditimbulkan  serta  dipercaya  memiliki  segudang

## TELAAH METODE PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA DAUN TEH HIJAU ( Camellia sinensis (L.) Kuntze)
Study Of Antioxidan Activity Testing Methods Of Green Tea (Camellia sinensis (L.) Kuntze )
Risma Aryanti 1*
Farid Perdana 2 Raden Aldizal Mahendra Rizkio S. 3
*1 Prodi Farmasi, FMIPA, Universitas Garut, Jawa Barat, Indonesia
2 Prodi Farmasi, FMIPA, Universitas Garut, Jawa Barat, Indonesia
3 Prodi Farmasi, FMIPA, Universitas Garut, Jawa Barat, Indonesia
*email: rismaaryanti11@gmail.com

## Abstrak
Teh  hijau (Camellia  sinensis (L.) Kuntze ) merupakan  minuman  herbal  yang  banyak diminati karena memiliki banyak manfaat salah satunya sebagai antioksidan. Senyawa katekin  dari  golongan  flavonoid  (polifenol)  dalam  teh  hijau  diketahui  bertanggung jawab  dalam  menentukan  sifat  antioksidan  pada  teh.  Telah  banyak  penelitian  yang dilakukan untuk mengukur aktivitas antioksidan pada teh hijau, sehingga diperlukan perbandingan  metode  pengujian  aktivitas  antioksidan  untuk  mengetahui  metode mana  yang  paling  baik  berdasarkan  perbedaan  mekanisme  aksinya.  Metode pengujian aktivitas antioksidan yang digunakan diantaranya yaitu DPPH (1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl) ,  ABTS,  FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power) ,  CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity) , dan ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) . Hasil menunjukkan  bahwa  aktivitas  antioksidan  dalam  teh  hijau  paling  tinggi  didapatkan dengan  menggunakan  metode  ABTS  yang  dinyatakan  dalam Trolox  Equivalent yaitu sebesar 3210 µmol TE/g dengan total fenol sebesar 240,73 mg GAE/g.
Kata Kunci:
Teh hijau Metode pengujian aktivitas antioksidan DPPH
ABTS
FRAP
CUPRAC
ORAC
Keywords :
Green tea Antioxidant activity testing methods
DPPH ABTS
FRAP
CUPRAC ORAC

## Abstract
Green  tea (Camellia  sinensis (L.) Kuntze ) is  a  very  popular  herbal  drink  that because  has  many  benefits,  which  one  as  an  antioxidant.  Catechin  from  the flavonoid class (polyphenols) in green tea is known as responsible for determining the  antioxidant  properties  of  tea.  There  were  many  research  that  measures antioxidant activity in green tea, so its have to compare the antioxidant activity testing method to see which one the method is better based on their mechanism in  action.  The  antioxidant  activity  testing  methods  were  used  is  DPPH  (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl),  ABTS,  FRAP  (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power), CUPRAC  (Cupric  Reducing  Antioxidant  Capacity),  and  ORAC  (Oxygen  Radical Absorbance Capacity). The results showed that the highest antioxidant activity in green  tea  was  obtained  using  the  ABTS  method  that  expressed  in  Trolox Equivalent, which is equal to 3210 µmol TE / g with a total phenol of 240.73 mg GAE / g.
©  year  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.  This  is  Open  Access  article  under  the  CC-BY-SA  License  (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.vxix.xxx .
manfaat  bagi  kesehatan  tubuh  diantaranya  sebagai antikanker,  antioksidan,  antijamur,  antibakteri,  dan mencegah  penuaan  (Falah,  2016;  Malik et  al. ,  2013;
Natalia et al ., 2018) .
Teh  dibagi  menjadi  beberapa  jenis  berdasarkan  cara pembuatannya,  diantaranya  yakni  teh  hijau  (tanpa fermentasi),  teh  oolong  (semi-fermentasi),  dan  teh hitam (fermentasi total) (Nibir et al., 2017) . Daun teh mengandung  lebih  dari  700  senyawa  kimia,  salah satunya  yaitu  katekin  yang  merupakan  senyawa flavonoid  golongan  polifenol  dan  merupakan  senyawa utama dalam teh yang bertanggung jawab terhadap sifat antioksidan teh (Falah, 2016; Purwanti, 2019; Susilo et al., 2012) . Antioksidan  merupakan  zat  yang  dapat menangkal  dan  menghambat  pembentukkan  radikal bebas  yang  berbahaya  bagi  tubuh  (Purwanti,  2019; Widyasanti et al ., 2016) .
Pengujian  aktivitas  antioksidan  diperlukan  untuk mengetahui  aktivitas  antioksidan  dalam  suatu  sampel. Berbagai  metode  pengujian  aktivitas  antioksidan  dapat menentukan  karakteristik  dari  antioksidan  pada sampel, sehingga dapat diketahui mekanisme kerja dari setiap  antioksidan  (Maryam et  al., 2016).  Pengujian aktivitas  antioksidan  non-enzimatik  seperti  polifenol dapat  dilakukan  berdasarkan  perbedaan  meknisme aksinya, diantaranya yaitu reaksi reduksi dengan radikal bebas  atau  dengan  pengkhelatan  ion  radikal  bebas melalui reaksi pembentukan kompleks (Rachman et al., 2017).  Metode  pengujian  yang  biasanya  paling  sering digunakan  yaitu  DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) , FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power) ,  ORAC (Oxygen  Radical  Absorbance  Capacity) , Total  Phenolics Content ,  ABTS (2,2 ′ -azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6- sulphonic  acid) ,  CUPRAC (Cupric  Reducing  Antioxidant Capacity) ,  TRAP (Total  Radical  Trapping  Antioxidant
Parameter) ,  TEAC (Trolox  Equivalent  Antioxidant Capacity) dan  lain  sebagainya  (Sardarodiyan et  al., 2016) .
Atas  dasar  perbedaan  cara  kerja  metode  pengujian tersebut,  maka  tujuan  dari  review  artikel  ini  yaitu untuk  mengetahui  metode  pengujian  aktivitas antioksidan  yang  paling  baik  pada  daun  teh  hijau ( Camellia  sinensis (L.) Kuntze)  dengan  hasil  yang dinyatakan dalam Trolox Equivalent dan total fenol.

## METODELOGI
Penulisan  review  artikel  ini  dilakukan  dengan menggunakan  metode  studi  pustaka  dimana  kriteria inklusi  jurnal  yang  digunakan  yaitu  jurnal  nasional  dan internasional yang terbit secara online serta  berkaitan dengan  teh  hijau,  aktivitasnya  sebagai  antioksidan,  dan khususnya  berbagai  metode  pengujian  aktivitas antioksidan.  Jurnal/pustaka  diakses  melalui  mesin pencarian/ google  search seperti google  scholarship, elsevier,  asian  journal  of  pacific dan  lain  sebagainya. Kriteria eksklusi jurnal yaitu jurnal yang dipilih minimal terbitan 10 tahun terakhir.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Teh (Camellia sinensis (L.) Kuntze ) merupakan tanaman yang  banyak  diminati  dan  menjadi  konsumsi  minuman kedua  setelah  air  putih  oleh  hampir  seluruh  kalangan masyarakat  karena  dianggap  memiliki  banyak  khasiat dan  potensi  yang  baik  bagi  kesehatan  tubuh  salah satunya  yaitu  sebagai  antioksidan,    khasiat  tersebut berasal  dari  kandungan  senyawa  yang  terdapat didalamnya  (Fajar et  al .,  2018;  Juniaty,  2013;  Sukina et al., 2013) . Kandungan  terbesar  dalam  teh  hijau  yaitu senyawa  flavonoid  yang  merupakan  golongan  senyawa polifenol  (Mukty et  al. ,  2018) . Polifenol  diketahui
memiliki  kemampuan  penangkapan  radikal  bebas  100 kali lebih baik dibandingkan vitamin C dan 25 kali lebih baik dibandingkan vitamin E (Shabri et al., 2016; Sukina et al., 2013) . Senyawa polifenol (flavonoid) paling utama yang  terkandung  didalam  teh  hijau  yaitu  senyawa katekin  (sekitar  90%  dari  total  polifenol)  dimana senyawa  EGCG  ( Epigallocatechin  gallate )  merupakan senyawa  yang  paling  berperan  aktif  dalam  katekin diantara senyawa lainnya (Amalia et al., 2016; Lee et al., 2014;  Mukty et  al .,  2018) . Senyawa  katekin  ini bertanggung  jawab  terhadap  sifat  teh  hijau  sebagai antioksidan untuk melindungi tubuh dari radikal bebas (Falah, 2016; Peel, 2020) .
Pada teh hijau kandungan senyawa katekin lebih tinggi dari pada teh yang lain, karena teh hijau tidak melalui proses  fermentasi  (oksidasi  enzimatis)  yang  dapat menurunkan  atau  bahkan  merusak  senyawa  katekin didalam teh (Fajar et al ., 2018) . Proses pembuatan teh hijau setelah pemetikan yaitu dengan cara pengasapan, sehingga  kandungan  nutrisi  dan  senyawa  antioksidan dalam teh hijau tidak rusak (Rahmanisa et al. , 2016) .
Kandungan  polifenol  (flavonoid)  dalam  teh  hijau diketahui  berpengaruh  terhadap  senyawa  antioksidan dan  aktivitas  antioksidan  dalam  teh  (Nishant et  al. , 2012).  Hubungan  antara  aktivitas  antioksidan  dengan kandungan  polifenol  didalam  teh  hijau  berbanding lurus,  dimana  semakin  banyak  kandungan  polifenol (flavonoid)  dalam  teh  maka  semakin  tinggi  aktivitas antioksidannya  (Fajar et  al .,  2018) . Antioksidan  adalah senyawa  pendonor  elektron  yang  dapat  memutus reaksi  oksidasi,  sehingga  tubuh  dapat  terlindungi  dari bahaya  radikal  bebas  penyebab  terbentuknya  stres oksidatif  yang  dapat  memicu  beberapa  penyakit degeneratif  seperti  aterosklerosis,  stroke,  bahkan kanker (Natalia et al ., 2018) .
Aktivitas  antioksidan  dalam  tumbuhan  seperti  dalam teh  hijau  dapat  diuji  dengan  menggunakan  beberapa metode pengujian, dalam praktiknya pengujian aktivitas antioksidan  dikelaskan  berdasarkan  mekanisme kerjanya  (reaksi  kimianya)  yaitu  berbasis  transfer elektron (Elektron Transfer Based) dan berbasis transfer atom hidrogen (Hidrogen Atom Transfer Based) (Gupta, 2015;  Xiao et  al., 2020).  Metode  berbasis  HAT mengukur aktivitas antioksidan dalam menjebak radikal bebas dengan donasi atom hidrogen, diantaranya yaitu ORAC,  TRAP, β - Caroten bleaching  assay dan  lain sebagainya  (Gupta,  2015;  Pisoschi et  al., 2016) .
Sedangkan metode berbasis ET mengukur kemampuan reduktif  antioksidan  terhadap  radikal  bebas  dengan mengandalkan  transfer  elektron,  yang  termasuk metode  ini  diantaranya  FRAP,  CUPRAC,  FIC,  DMPD dan  sebagainya  (Gupta,  2015;  Pisoschi et  al .,  2016) .
Adapun  DPPH,  dan  ABTS  merupakan  metode  yang dianggap  menggunakan  kedua  basis  (HAT  atau  ET) (Pisoschi et al ., 2016).
1. Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode DPPH ( 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl)
Prinsip  kerja  dari  metode  DPPH  yaitu  reaksi oksidasi-reduksi (Purwanti, 2019). DPPH merupakan  suatu  radikal  bebas  sintetik  yang dapat  larut  dalam  senyawa  polar  seperti  etanol dan  metanol  (Malik et  al .,  2013;  Susilo et  al.,
2012). DPPH akan bereaksi dengan dua cara yaitu mekanisme  donor  atom  hidrogen  dan  donor elektron, dimana DPPH yang bersifat radikal akan mengambil  atom  hidrogen  dari  senyawa antioksidan untuk mendapatkan pasangan elektron  (Apak et  al .,  2013;  Malik et  al .,  2013) .
Adanya  aktivitas  antioksidan  pada  teh  hijau ditandai  dengan  berubahnya  warna  ungu  larutan

## DPPH menjadi warna kuning akibat tereduksinya
DPPH oleh senyawa antioksidan sehingga menjadi DPPH-H  (Falah,  2016;  Malik et  al .,  2013;
Molyneux, 2004). Perubahan warna ini berhubungan  dengan  jumlah  elektron  yang diterima  DPPH  dan  menentukan  seberapa  kuat aktivitas antioksidan pada teh hijau ketika  diukur intensitasnya dengan menggunakan
spektrofotometer  pada  panjang  gelombang  517 nm  (Falah,  2016;  Malik et  al .,  2013;  Purwanti,
2019; Widyasanti et al., 2016) .
DPPH  merupakan  metode  pengujian  antioksidan yang paling mudah, cepat, murah, dapat digunakan di laboratorium sederhana dan sensitif digunakan untuk menentukan aktivitas antioksidan (Purwanti,  2019) . Namun  metode  ini  sangat mudah  terpengaruh  oleh  berbagai  faktor,  selain itu  pelarut  DPPH  juga  harus  selalu  dibuat  baru (Ácsová et al., 2020) . Senyawa polifenol dalam teh hijau  memiliki  gugus  hidroksil  yang  atom hidrogennya akan diberikan kepada radikal bebas DPPH,  sehingga  DPPH  yang  bersifat  reaktif karena memiliki elektron yang tidak  berpasangan akan  menjadi  stabil.  Semakin  tinggi  kandungan polifenol  pada  teh  hijau  maka  semakin  banyak elektron  yang  disumbangkan  kepada  radikal bebas,  dan  semakin  tinggi  pula  aktivitas antioksidannya  (Falah,  2016;  Widyasanti et  al. , 2016).
Pada penelitian yang dilakukan oleh Aristizabal et al .,  (2015)  dengan  mengunakan  metode  DPPH pada 4 brand teh hijau yaitu Lipton, Oriental, Hindu, dan  Jaibel dengan  Trolox  sebagai  standar,
diperoleh  aktivitas  antioksidan  tertinggi  pada merk Oriental yaitu  sebesar  1138,45  µmol  TE/g
sampel  dengan  kadar  fenol  total  sebesar  127,74 mg GAE/g. Sedangkan aktivitas antioksidan paling rendah ditemukan pada merk Jaibel yaitu sebesar 93,76  µmol  TE/g  sampel  dengan  total  fenol sebesar  748,09  mg  GAE/g.  Hasil  tersebut menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  antara aktivitas  antioksidan  merk  teh  hijau Oriental dan Jaibel ,  hal  itu  dimungkinkan  karena  faktor perbedaan ukuran partikel teh yang mempengaruhi  hasil  ekstraksi,  selain  itu  juga pengaruh  perbedaan  proses  manufakturing  yang digunakan  oleh  masing-masing  industri  pembuat teh (Aristizabal et al., 2015) .
2. Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode ABTS (2,2’-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ABTS merupakan metode pengujian aktivitas/aktivitas antioksidan dengan menggunakan senyawa 2,2’-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) sebagai
penghasil  radikal  bebas  (Oliveira et  al. ,  2014).
ABTS  adalah  substrat  dari  enzim  peroksidase yang  dapat  teroksidasi  oleh  peroksida  (H 2 O 2 ) menjadi  kation  radikal  (Windiawati et  al., 2015). Reagen  ABTS  memiliki  ciri  kimia  yang  stabil, dapat larut dalam air ataupun lemak (Windiawati et  al., 2015).  Prinsip  metode  ini  yaitu  melihat kemampuan senyawa antioksidan dalam menstabilkan radikal bebas dengan mendonorkan proton kepada radikal bebas yang ditandai dengan pemudaran  warna  dari  warna  biru  kehijauan menjadi  tidak  berwarna  seiring  tereduksinya kation  radikal  ABTS  (Shalaby et  al., 2014; Sukweenadhi et  al .,  2020).  Dalam  pengujian aktivitas  antioksidan  dengan  metode  ABTS  ini
diperlukan reaksi oksidasi senyawa ABTS terlebih dahulu  oleh  kalium  persulfat  (K 2 S 2 O 8 )  untuk membentuk  kation  radikal  ABTS  (ABTS •+ )  yang selanjutnya direaksikan dengan senyawa antioksidan  (Oliveira et  al., 2014;  Shalaby et  al.,
2014).  Penghilangan  warna  serapan  dapat  diukur dengan  menggunakan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  734  nm  (Sukweenadhi et  al.,
2020 ) .
Metode  ini  baik  digunakan  untuk  sistem  yang berbasis air maupun organik, dengan waktu reaksi yang  dibutuhkan  lebih  cepat,  sederhana,  serta dapat bekerja pada rentang pH yang luas (Apak et al .,  2013;  Susilo et  al. ,  2012) . Namun  metode ABTS  ini  sangat  sensitif  terhadap  cahaya,  pada saat  pembentukan  radikal  ABTS •+ memerlukan waktu  inkubasi  12-16  jam  dalam  kondisi  gelap ( Maryam et al ., 2016).
Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Veljković et  al .  (2013)  dengan  menggunakan  metode pengujian  ABTS  pada  beberapa  jenis  teh  dan Trolox  sebagai  pembanding  diperoleh  hasil pengukuran  aktivitas  antioksidan  pada  teh  hijau sebesar  3210  µmol  TE/g  dengan  hasil  total  fenol sebesar  240,73  mg  GAE/g.  Hasil  tersebut menunjukkan  teh  hijau  memiliki  kandungan  fenol total  paling  tinggi  diantara  jenis  teh  yang  lainnya, namun untuk hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode ABTS ini tidak menunjukkan hasil yang paling baik diantara teh lainnya bahkan hasil pengujian  menunjukkan  nilai  yang  sama  dengan hasil pengujian teh hitam (Veljković et al ., 2013) .
3.   Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode  FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant
Power)
Prinsip  penetapan  aktivitas  antioksidan  dengan metode  pengujian  FRAP  yaitu  kemampuan antioksidan dalam mereduksi kompleks ferri (Fe 3+ ) dari ferri-tripyridyl-triazine (TPTZ) menjadi kompleks ferro (Fe 2+ )  yang  ditandai  dengan perubahan  warna  menjadi  biru  dan  dapat  diukur pada  panjang  gelombang  593  nm  (Dontha,  2016; Jayanthi et  al. ,  2011;  Pires et  al .,  2017; Sukweenadhi et  al .,  2020).  Reagen  FRAP  tidak berwarna  terdiri  dari  campuran  TPTZ, FeCl 3 .6H 2 O, dan dapar asetat (Sukweenadhi et al ., 2020) . Penambahan FeCl 3 .6H 2 O diperlukan untuk membentuk  senyawa  kompleks  Fe 3+ ,  dan penambahan  dapar  asetat  karena  reaksi  biasanya terjadi pada pH asam yaitu 3,6 (Choirunnisa et al.,
2016).  Metode  FRAP  menggunakan  senyawa antioksidan  sebagai  agen  pereduksi  (reduktan) dalam reaksi reduksi-oksidasi  (Choirunnisa et al. , 2016).  Mekanisme  kerja  metode  FRAP  yaitu dengan  cara  menginaktivasi  radikal  bebas  dengan transfer elektron (Jayanthi et al., 2011).
FRAP  merupakan  metode  pengujian  yang sederhana,  cepat,  serta  tanpa  memerlukan  alat khusus  dalam  pengukurannya  (Jayanthi et  al. , 2011;  Sukweenadhi et  al. ,  2020).  Namun kelemahan metode uji FRAP yaitu reagen bersifat kurang  stabil  sehingga  harus  dibuat  baru  dan harus  segera  digunakan,  selain  itu  metode  FRAP tidak  spesifik  dimana  senyawa  lain  yang  tidak memiliki  kandungan  antioksidan  namun  memiliki potensial  reduksi  rendah  dari  Fe 3+ /Fe 2+ dapat terdeteksi  oleh  metode  ini  (Choirunnisa et  al .,
2016;  Jayanthi et  al .,  2011;  Sukweenadhi et  al .,
2020).
Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Lee et al .
(2014)  menggunakan  metode  FRAP  pada  empat bagian daun teh hijau sesuai waktu pemetikannya dan  Trolox  sebagai  pembanding,  diperoleh  hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  paling  tinggi  pada bagian  daun  ke  empat/daun  paling  tua  ( Daejak) yang  dipetik  pada  akhir  bulan  Mei  yaitu  sebesar 1697,81µmol  TE/g.  Hasil  pengujian  aktivitas antioksidan  paling  rendah  diperoleh  pada  bagian daun  pertama (Woojeon) yang  dipetik  pada  akhir bulan  April  yaitu  sebesar  1555,06  µmol  TE/g. Dari  hasil  penelitian  tersebut  diketahui  bahwa bagian  daun/umur  daun  serta  periode  waktu pemetikan  teh  berpengaruh  terhadap  aktivitas antioksidan (Lee et al ., 2014) .
4. Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity) Prinsip  metode  CUPRAC yaitu  berdasarkan
reaksi reduksi-oksidasi sederhana antara
antioksidan  dengan  radikal  bebas,  yang  dapat diukur  melalui  reduksi  ion cupric (Cu 2+ )  menjadi cuprous (Cu + )  dengan  cara  donor  elektron  oleh antioksidan  (Dontha,  2016) . Metode  ini menggunakan  pereaksi  Cu(II)-neokuproin  (Cu 2+ -
(Nc) 2 ) sebagai oksidator/agen pengkhelat (Gülçin,
2012;  Maryam et  al .,  2016).  Adanya  aktivitas antioksidan  secara  kualitatif  ditandai  dengan terjadinya  perubahan  warna  kuning  kecoklatan (Maryam et  al .,  2016).  Hasil  reaksi  reduksi  ion Cu 2+ dapat  diukur  pada  panjang  gelombang  450 nm (Maryam et al ., 2016) .
Kelebihan  dari  metode  CUPRAC  yaitu  pereaksi CUPRAC  cukup  selektif  karena  memiliki  nilai potensial  reduksi  yang  rendah,  cepat,  pereaksi
lebih stabil, bisa didapat dari pereaksi lain (DPPH, ABTS),  dapat  digunakan  untuk  antioksidan  yang bersifat hidrofilik atau lipofilik dalam pH fisiologis, selain  itu  metode  ini  mudah,  sederhana, terpercaya, dengan sedikit biaya yang dibutuhkan, dan dapat digunakan di laboratorium konvensional dengan standar alat yang sederhana (Choirunnisa et al., 2016; Maryam et al ., 2016).
Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Pekal et al .  (2012)  dengan  menggunakan  metode CUPRAC  dan  trolox  sebagai  pembanding  pada tiga jenis teh (teh hitam, teh hijau, dan teh buah) menunjukkan  bahwa  infusa  teh  hijau  memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dari ketiga jenis teh  tersebut  dengan  hasil  tertinggi  nilai  teh  hijau yang  diperoleh  yaitu  sebesar  2710  µmol  TE/g dengan  nilai  total  fenol  sebesar  513,4  mg  GAE/g (Pekal et al., 2012) .
5. Pengujian  Aktvitas  Antioksidan  dengan Metode ORAC ( Oxygen Radical Absorbance

## Capacity)
Prinsip  dasar  metode  ORAC  ini  yaitu  mengukur kemampuan  antioksidan  dengan  cara  donor hidrogen  dalam  meredam  radikal  peroksil  yang dilihat berdasarkan penurunan intensitas molekul fluoresen  selama  waktu  reaksi  (Aristizabal et  a l.,
2015;  Gülçin,  2012) . Mekanisme  kerja  metode pengujian  ini  yaitu  menggunakan  inisiator  bis azida/AAPH (2,2’-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride) sebagai  pembentuk  radikal peroksil  lewat  oksidasi,  yang  akan  bereaksi dengan molekul fluoresen seperti fluorescein atau β -pikoeritrin dan menyebabkan hilangnya kemampuan  berfluorosensi  sebagai  interpretasi dari kemampuan peredaman senyawa antioksidan
terhadap  radikal  bebas  (Gülçin,  2012) . Intensitas fluoresen  akan  menurun  seiring  berlangsungnya degenerasi oksidatif sebagai indikator dekomposisi fluoresen yang akan direkam selama setengah  jam  setelah  penambahan  AAPH,  dan dapat  diukur  pada  panjang  gelombang  520  nm pada  saat  emisi  dan  480  nm  pada  saat  eksitasi (Gülçin,  2012).  Senyawa  antioksidan  dalam  teh hijau  dalam  hal  ini  berperan  melindungi  molekul fluorosen  dari  degenerasi  oksidatif,  semakin sedikit  senyawa  antioksidan  yang  berpartisipasi maka  semakin  tinggi  dekomposisi  fluorosen  dan semakin  tinggi  pula  kehilangan  sinyal  fluorosensi (Ácsová et al ., 2020; Gülçin, 2012) .
Kelebihan  metode  ini  yaitu  cepat,  rendah  biaya, dapat  digunakan  untuk  antioksidan  yang  bersifat hidrofilik  maupun  hidrofobik  serta  signifikan
secara  fisiologis  (Aristizabal et  al .,  2015;  Gülçin, 2012;) . Kekurangan  metode  ini  sulit  dalam praktiknya,  sensitif  terhadap  suhu  rendah  yang dapat  menurunkan  reproduktifitas  pengujian (Ácsová et al ., 2020; Gülçin, 2012) .
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh Aristizabal et  al .  (2014)  dengan  menggunakan metode ORAC pada empat jenis brand teh hijau yaitu Origin,  Lipton,  Hindu,  dan  Jaibel didapatkan hasil pengukuran aktivitas antioksidan paling tinggi pada brand teh Origin sebesar 1588,05 µmol TE/g dan total fenol sebesar 127,74 mg GAE/g dengan hasil pengukuran brand teh Jaibel diketahui paling rendah yaitu sebesar 740,83 µmol TE/g dan hasil fenol total sebesar 93,76 mg GAE/g (Aristizabal et al ., 2015).
Tabel 1. Perbandingan hasil pengujian antioksidan dengan metode DPPH, ABTS, FRAP, CUPRAC, dan ORAC
Metode Hasil pengujian Kelebihan Kekurangan Sumber Total fenol (mg GAE/g) Aktivitas antioksidan (µmol TE/g) DPPH 127,74 1138,45 Pengukuran sensitif, radikal bisa direaksikan langsung dengan antioksidan. Hanya untuk senyawa polar, reagen harus selalu dibuat baru. Aristizabal et al . (2015) ABTS 240,73 3210 Bisa digunakan untuk senyawa hidrofilik/ lipofilik, bekerja pada rentang pH luas. Perlu dilakukan reaksi oksidasi dahulu, waktu reaksi/inkubasi pembentukan radikal lama. Veljković et al . (2013) FRAP - 1697,81 Sederhana, waktu yang diperlukan cepat Reaksi tidak spesifik, bekerja pada pH asam. Lee et al . (2014) CUPRAC 513,4 2710 Pereaksi CUPRAC selektif, lebih stabil, dan bisa didapat dari pereaksi lain, bisa digunakan untuk senyawa hidrofilik/lipofilik, bekerja pada pH fisiologis. - Pekal et al . (2012) ORAC 127,74 1588,05 Bisa digunakan untuk senyawa hidrofilik/lipofilik, signifikan secara fisiologis. Praktiknya sulit, sensitif terhadap penurunan suhu Aristizabal et al . (2014) Dari  Tabel  I.  menunjukkan  bahwa  metode pengujian  aktivitas  antioksidan  yang  paling  baik tanpa memperhatikan faktor yang mempengaruhi
pengujian, ditunjukkan oleh metode ABTS dengan hasil  yang  diperoleh  sebesar  3210  µmol  TE/g dengan total fenol sebesar 240,73 mg GAE/g.
Secara  keseluruhan  dari  hasil  pengujian  aktivitas antioksidan,  diketahui  bahwa  teh  hijau  memiliki
kandungan  senyawa  antioksidan  dan  aktivitas antioksidan  yang  tinggi,  baik  berdasarkan  cara donor hidrogen (HAT base) ataupun berdasarkan cara transfer elektron (ET base) .

## KESIMPULAN
Teh  hijau  ( Camellia  sinensis (L.)  Kuntze)  memiliki kandungan  katekin  (polifenol)  sangat  tinggi  yaitu mencapai  90%  dari  seluruh  total  polifenolnya  dan diketahui  bertanggung  jawab  dalam  sifat  teh  sebagai antioksidan.  Untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan dalam  teh  hijau  digunakan  beberapa  metode pengujian/pengukuran berdasarkan mekanisme kerjanya (berbasis transfer hidrogen/transfer elektron) diantaranya  yaitu  metode  DPPH,  ABTS,  FRAP, CUPRAC,  dan  ORAC.  Hasil  pengujian  aktivitas antioksidan  pada  teh  hijau  paling  tinggi  diperoleh dengan  menggunakan  metode  ABTS  yaitu  sebesar 3210 µmol TE/g dengan total fenol sebesar 240,73 mg GAE/g tanpa memperhatikan faktor yang mempengaruhinya.  Penelitian  lebih  lanjut  dengan variasi  metode  lebih  banyak  disarankan  untuk mendapatkan hasil yang lebih spesifik dan jelas.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Reviewer  mengucapkan  terima  kasih  kepada  semua pihak yang membantu dan mendukung terselesaikannya review jurnal ini.

## REFERENSI
1. Fajar, R. I., Wrasiati, L. P., & Suhendra, L. (2018). Kandungan  Senyawa  Flavonoid  Dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Teh  Hijau  Pada  Perlakuan Suhu Awal Dan Lama Penyeduhan. Jurnal Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri , 6 (3), 196.
https://doi.org/10.24843/jrma.2018.v06.i03.p02
2. Malik, A., Ahmad, A. R., & Najib, A. (2013). Daun Teh  Hijau  Dan  Jati  Belanda. Jurnal  Fitofarmaka Indonesia , 4 (2), 238–240.
3. Widyasanti  A.,  Rohdiana  D.,  E.  N.  (2016).
AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  EKSTRAK  TEH  PUTIH (Camellia  sinensis)  DENGAN  METODE  DPPH  (2,2 Difenil -1- Pikrilhidrazil) . 1 (1), 1–9.
4. Falah, S. (2016).

## KETINGGIAN TEMPAT
ANTIOXIDANT  ACTIVITIES  OF  GMB  7  VARIETY  OF TEA  AT  DIFFERENT  ALTITUDE  Balai  Penelitian Tanaman Industri dan  Penyegar Jalan Raya Pakuwon
Km  2  Parungkuda  ,  Sukabumi  43357  Indonesia Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  ,
Departemen . 3 , 53–60.
5. Natalia, F., Widyantika, D., Pengajar, S., Teknologi, J.,  Pertanian,  H.,  Semarang,  U.,  …  Semarang,  U. (2018). METODE  PENYEDUHAN  DAN  AKTIVITAS ANTIOKSIDATIF MINUMAN TEH ( Camellia sinensis Linn .) . 7 , 241–249.
6. Nibir,  Y.  M.,  Sumit,  A.  F.,  Akhand,  A.  A.,  Ahsan, N.,  &  Hossain,  M.  S.  (2017).  Comparative assessment  of  total  polyphenols,  antioxidant  and antimicrobial  activity  of  different  tea  varieties  of Bangladesh. Asian  Pacific  Journal  of  Tropical
Biomedicine , 7 (4), 352–357. https://doi.org/10.1016/j.apjtb.2017.01.005 7. Purwanti, L. (2019).
PERBANDINGAN AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  DARI  SEDUHAN  3 MERK  TEH  HITAM  (Camellia  sinensis  (L.) Kuntze) DENGAN METODE SEDUHAN BERDASARKAN  SNI  01-1902-1995. Jurnal  Ilmiah Farmasi Farmasyifa , 2 (1), 19–25.
https://doi.org/10.29313/jiff.v2i1.4207
8. Maryam,  S.,  Pratama,  R.,  Effendi,  N.,  &  Naid,  T. (2016).  DENGAN  METODE  CUPRIC  ION
REDUCING ANTIOXIDANT CAPACITY
Fakultas  Farmasi  Universitas  Muslim  Indonesia  , Makassar. Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 2 (1), 90–93.
9. Rachman, S. D., Mukhtari, Z., & Soedjanaatmadja, R. U. M. . (2017). Chimica et Natura Acta. Chimica et Natura Acta , 5 (3), 124–131. https://doi.org/10.24198/cna.v6.n1.14791
10. Sardarodiyan,  M.,  &  Mohamadi  Sani,  A.  (2016). Natural  antioxidants:  sources,  extraction  and application  in  food  systems. Nutrition  and  Food
Science , 46 (3), 363–373. https://doi.org/10.1108/NFS-01-2016-0005
11. Juniaty  Towaha,  B.  (2013). KANDUNGAN
SENYAWA  KIMIA  PADA  DAUN  TEH  (Camellia sinensis) . 19 , 12–16.
12. Sukina  B,  Gwenny  I.P,  Suhartati,  H.  N.  (2013). KATEKIN  DAUN  TEH  HIJAU  (Camelia  sinensis) TERHADAP  MALONDIALDEHYDE  DAN  SUPER OXIDE DISMUTASE . 19 , 65–139.
13. Mukty,  I.,  Wirjatmadi,  B.,  &  Purwanto,  B.  (2018). Pengaruh  Pemberian  Seduhan  Teh  Hijau  (  Camellia Sinensis ) Terhadap Aktivitas Superoksida Dismutase ( SOD  )  Effect  Of  Green  Tea  (  Camellia  Sinensis  ) Against  Supeoxyde  Dismutase  (  SOD  )  Activity .
2071 (September), 158–164.
14. Shabri,  &  Rohdiana,  D.  (2016).  Optimasi  dan Karakterisasi  Ekstrak  Polifenol  Teh  Hijau  dari Berbagai  Pelarut. Jurnal  Penelitian  Teh  Dan  Kina ,
19 (1), 57–66.
15. Lee,  L.  S.,  Kim,  S.  H.,  Kim,  Y.  B.,  &  Kim,  Y.  C. (2014). Quantitative analysis of major constituents in  green  tea  with  different  plucking  periods  and their  antioxidant  activity. Molecules , 19 (7),  9173–
9186. https://doi.org/10.3390/molecules19079173
16. Peel,  O.  (2020). Uji  Aktivitas  Antioksidan  Kombinasi Ekstrak  Etanol  Daun  Teh  dan  Kulit  Jeruk  Mandarin .
8 (1), 1–7. https://doi.org/10.5281/zenodo.3881551
17. Rahmanisa,  S.,  &  Wulandari,  R.  (2016).  Pengaruh Ekstrak  Teh  Hijau  terhadap  Penurunan  Berat Badan  pada  Remaja  The  Effect  of  Green  Tea Extract  in  Decreasing  Weight  in  Adolescent. Majority , 5 (2), 109.
18. Gupta,  D.  (2015).  Methods  for  determination  of antioxidant capacity: A review. International Journal of  Pharmaceutical  Sciences  and  Research , 6 (2),546–
566. https://doi.org/10.13040/IJPSR.09758232.6(2).546-
66
19. Xiao, F., Xu, T., Lu, B., & Liu, R. (2020). Guidelines for antioxidant assays for food components. Food
Frontiers , 1 (1), 60–69. https://doi.org/10.1002/fft2.10
20. Pisoschi, A. M., Pop, A., Cimpeanu,  C., & Predoi, G.  (2016).  Antioxidant  capacity  determination  in plants  and  plant-derived  products:  A  review. Oxidative  Medicine  and  Cellular  Longevity , 2016 .
https://doi.org/10.1155/2016/9130976
21. Apak, R., Gorinstein, S., Böhm, V., Schaich, K. M., Özyürek,  M.,  &  Güçlü,  K.  (2013).  Methods  of measurement and evaluation of natural antioxidant  capacity/activity  (IUPAC  technical report). Pure  and  Applied  Chemistry , 85 (5),  957–
998. https://doi.org/10.1351/PAC-REP-12-07-15
22. Molyneux,  P.  (2004). The  use  of  the  stable  free radical  diphenylpicryl-  hydrazyl  (  DPPH  )  for estimating antioxidant  activity . 50 (December 2003), 211–219
23. Ácsová, A., Martiniaková, S., & Hojerová, J. (2020). Selectedin vitro methods to determine antioxidant  activity  of  hydrophilic/lipophilic substances. Acta  Chimica  Slovaca , 12 (2),  200–211. https://doi.org/10.2478/acs-2019-0028
24. Oliveira,  S ;  Souza,  G.A;  Eckert,  C.R;  Silva,  T.A; Edmar  Silva  Sobra,  E.S;  Fávero,  O.P;  Ferreira, M.J.P;  Romoff,  P;  Baader,  W.  .  (2014). EVALUATION  OF  ANTIRADICAL  ASSAYS USED  IN  DETERMINING  THE  ANTIOXIDANT CAPACITY  OF  PURE  Artigo. Quim.  Nova , 37 (3),
497–503.
25. Windiawati,  Bina  Lohita  Sari,    dan  S.  W.  (2015). AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  EKSTRAK  ETANOL  TEH PUTIH  (Camellia  sinensis  L.)  DAN  BENALU  TEH (Scurulla atropurpurea BL.Dans). 1–8.
26. Shalaby1,  E.  A.,  &  *  and  Sanaa  M.  M.  Shanab. (2014). African  Journal  of  Pharmacy  and Pharmacology Surfactants solubility, concentration and the other formulations effects on the drug release rate from  a  controlled-release  matrix . 8 (13),  364–371. https://doi.org/10.5897/AJPP2013
27. Sukweenadhi,  J.,  Yunita,  O.,  Setiawan,  F.,  Siagian,
M.  T.,  Danduru,  A.  P.,  &  Avanti,  C.  (2020). Antioxidant  activity  screening  of  seven  Indonesian herbal extract . 21 (5), 2062–2067. https://doi.org/10.13057/biodiv/d210532
28. Veljković, J. N., Pavlović, A. N., Mitić, S. S., Tošić, S.  B.,  Stojanović,  G.  S.,  Kaličanin,  B.  M.,  … Brcanović,  J.  M.  (2013).  Evaluation  of  individual phenolic  compounds  and  antioxidant  properties of  black,  green,  herbal  and  fruit  tea  infusions consumed  in  Serbia:  Spectrophotometrical  and
electrochemical  approaches. Journal  of  Food  and Nutrition Research , 52 (1), 12–24.
29. Dontha,  S.  (2016).  A  review  on  antioxidant methods. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical
Research , 9 (2),14–32.
https://doi.org/10.22159/ajpcr.2016.v9s2.13092
30. Pires, M. A., Munekata,  P. E. S., Villanueva, N. D. M.,  Tonin,  F.  G.,  Baldin,  J.  C.,  Rocha,  Y.  J.  P.,  … Trindade, M. A. (2017). The Antioxidant Capacity of
Rosemary  and  Green  Tea  Extracts  to  Replace  the Carcinogenic Antioxidant ( BHA ) in Chicken Burgers . 2017 .
31. Choirunnisa,  A.  R.,  Fidrianny,  I.,  &  Ruslan,  K. (2016).  Comparison  of  Five  Antioxidant  Assays for  Estimating  Antioxidant  Capacity  from  Three Solanum  SP.  Extracts. Asian  Journal  of
Pharmaceutical  and  Clinical  Research , 9 ,  123–128. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2016.v9s2.13155
32. Jayanthi,  P.,  &  Lalitha,  P.  (2011).  Reducing  power of  the  solvent  extracts  of  Eichhornia  crassipes (Mart.) Solms. International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences , 3 (SUPPL. 3), 126–128.
33. Pekal,  A.,  Drozdz,  P.,  &  Pyrzynska,  K.  (2012). Comparison  of  the  antioxidant  properties  of commonly
consumed
commercial teas.
International Journal of Food Properties , 15 (5), 1101– 1109.
https://doi.org/10.1080/10942912.2010.514642
34. Gülçin,  I.  (2012).  Antioxidant  activity  of  food constituents:  An  overview. Archives  of  Toxicology ,
86 (3),  345–391.  https://doi.org/10.1007/s00204- 011-0774-2
35. Anand  Jigisha,  Rai  Nishant*,  K.  N.  and  G.  P. (2012). Green  tea :  A  magical  herb  with  miraculous outcomes  Review  Article  GREEN  TEA :  A  MAGICAL
HERB  WITH  MIRACULOUS  OUTCOMES  Anand Jigisha  ,  Rai  Nishant  *,  Kumar  Navin  and  Gautam Pankaj . 3 (May), 139–148.
36. Fryda  Amalia,  Nana  Sutisna  Achyadi,  A.  D.  S. (2016). PENGARUH  GRADE  TEH  HIJAU  DAN
KONSENTRASI  GULA  STEVIA  (Stevia  rebaudiana bertoni M.) TERHADAP KARAKTERISTIK SIRUP TEH
HIJAU (GREEN TEA) . 1–12.
37. Haryato Susilo1, Dwi Indriati2, A. R. (2012). 1 , 2 , 3 1 . 2 (2), 126–136.
38. Ramiréz-Aristizabal,  L.  S.,  Ortiz,  A.,  &  Ospina- Ocampo,  L.  F.  (2015).  Evaluation  of  the antioxidant  capacity  and  characterization  of phenolic compounds obtained from tea (Camellia sinensis)  for  products  of  different  brands  sold  in
Colombia. Pharmacologyonline , 3 (2015- DECEMBER), 149–159.