## POTENSI ANTIPLATELET CAMPURAN EKSTRAK BINAHONG, JAHE DAN KUNYIT PADA MENCIT PUTIH JANTAN
Submitted : 15 Oktober 2021
Edited : 6 Desember 2021 Accepted : 13 Desember 2021
Lusi Indriani* 1 , Moerfiah 2 , Oktaviana Zunnita 1 , Faisal Pradana 1
1 Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan
2 Prodi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan *Email : lusi.apoteker@gmail.com
*Telepon : 081519301396

## ABSTRACT
Antiplatelets  can  inhibit  platelets  aggregation  and  have  been  used  in  prevention  and treatment the trombotic desease. Binahong leaves, ginger dan turmeric have antiplatelets activity. The mixture of these plants are expected to increase the antiplatelets potency. This study aimed to determine the optimum dose of ethanol extracts of binahong leaves, ginger dan turmeric as antiplatelets agent. The antiplatelets testing were carried out by in vivo method using parameter of bleeding and coagulation time. The testing solutions were administered orally once a day for 8  days.  There  were  7  treatment  groups  consist  of  positive  control  (Acetosal  0.29mg/20gBW), negative control (CMC-Na 0.5%), binahong 10mg/20gBW, mixture 1 of binahong:ginger:turmeric  (5:0.5:1mg/20gBW),  mixture  2  (10:0.5:1mg/20gBW),  mixture  3 (5:1:1mg/20gBW), and mixture 4 (5:0.5:2mg/20gBW). The bleeding and coagulation time were determined at 0, 3rd, 6th and 9th day. The bleeding time was determined by injuring mice tail, the blood that comes out were absorbed with absorption paper. From the first bleeding time until stopped was calculated as bleeding time. The coagulation time was determined by observing the formation of fibrin thread in the broken capillary pipe. The blood from the end tail were absorbed with capillary pipe, and then was broken every 15 seconds. The antiplatelets activity in mice with bleeding time parameter showed that mixture 3 was more effective at 3rd day with an increased of 16.60%, than the positive control group (3.92%). The coagulation time parameter showed that the binahong group was more effective at 9th day with an increased of 203.55%, than the positive control group (89.71%). The mixture of binahong, ginger, and turmeric were the most effective in increasing bleeding time, whereas binahong was the most effective in increasing coagulation time.
Keywords : Binahong ginger turmeric, Antiplatelets, Bleeding Time

## PENDAHULUAN
Platelet  merupakan  sel  darah  yang berperan  pada  proses  hemostasis.  Platelet beragregasi  membentuk  sumbat  hemostasis ketika  terjadi  luka  pada  pembuluh  darah. Sumbat  hemostasis  dapat  berupa  bekuan darah  yang  terbentuk  dari  agregat-agregat platelet (thrombus).  Dalam  keadaan normal, pembentukan  trombus  digunakan  untuk
mencegah perdarahan, namun pada pembentukan  trombus  patologis,  trombus akan tetap terbentuk meskipun tidak ada luka pada pembuluh darah. Karena adanya proses ketidaknormalan dari trombus sehingga dapat menyebabkan  penyakit  kelainan  vaskuler seperti  infark  miokard, stroke ,  dan  penyakit peripheral  vaskuler (1) .  Penyakit  kelainan vaskuler dapat dihambat dengan terapi obat-
obatan  antitrombosis,  seperti  antiplatelet. Anti  platelet  berperan  dalam  menghambat agregasi  platelet  dan  digunakan  dalam pencegahan  maupun  pengobatan  penyakit thrombosis (2) . Asetosal dosis rendah merupakan salah satu golongan anti inflamasi non steroid yang bisa digunakan sebagai obat antiplatelet.  Asetosal  sebagai  antiplatelet mampu menghambat pembentukan
tromboxan  A2  melalui  penghambatan siklooksigenase secara irreversible (3) . Binahong,  jahe,  dan  k unyit  adalah tanaman obat yang  secara  terpisah  atau digabung sudah digunakan masyarakat secara empiris untuk mencegah maupun mengobati penyakit. Ekstrak  daun  bihanong  yang mengandung
flavonoid kaempferol
mempunyai  aktivitas  hipolipidemia  dan antioksidan pada tikus putih mulai dosis 500 mg/kgBB (4) .  Ekstrak  rimpang  jahe  yang mengandung  gingerol  pada  dosis  50 mg/kgBB mempunyai aktivitas antiplatelet (5) . Pada  penelitian  Sukandar,  ekstrak  rimpang kunyit yang  mengandung  kurkuminoid pada dosis  100  mg/kgBB  mempunyai  aktivitas antiplatelet (6) .
Menurut  Jazilah,  ekstrak  etanol  daun binahong lebih toksik dibanding ekstrak etil asetat  dan  ekstrak  n-heksan (7) . Penggunaan jahe  dan  kunyit  dalam  campuran  ditujukan untuk  memperkuat  fungsi  campuran  yang dibuat.  Gabungan  dari  ketiga  tanaman  ini diharapkan  dapat  meningkatkan  potensinya sebagai  antiplatelet.  Pengujian  antiplatelet dilakukan  secara in  vivo ,  menggunakan parameter  waktu  perdarahan  dan  waktu koagulasi (8) . Penelitian ini bertujuan menentukan dosis optimal campuran ekstrak etanol  daun  binahong,  jahe,  dan  kunyit sebagai antiplatelet.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain ayakan Mesh  30 , grinder ,  botol  kaca  gelap,  jarum suntik,  spuit  oral,  neraca  analitik  (Ohaus ® ),
Oven, Tanur (Vulcan A-55 ® ), Vaccum rotary evaporator , stopwatch ,  kertas  saring, lancet steril, penanda hewan coba, sonde lambung, lumpang,  alu,  cawan  porcelain,  krus porcelain, dan alat-alat gelas. Alat lain yang digunakan selama penelitian adalah kandang tikus berupa kandang plastik dengan penutup kawat berukuran (30x20x12) cm 2 yang dialasi dengan sekam.
Bahan  yang  digunakan  antara  lain mencit jantan galur Mus musculus (28 ekor) dengan BB±30g dari peternakan, pakan tikus, daun binahong (BALITRO Bogor), rimpang jahe  dan  kunyit  (pasar  Bogor).  Pereaksi Bouchardat, Dragendorff , Mayer , HCl pekat, HCl  2  N,  serbuk  Mg,  gelatin,  FeCl3, kloroform,  asam  asetat  anhidrat,  H2SO4 pekat, akuades, etanol 70%, etanol 96%, Na- CMC, dan Asetosal (Trombo aspilet ® )

## Pembuatan Simplisia
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Juli hingga  Desember  2020  di  Laboratorium
Penelitian IRATCO (Indonesia Rat Company) Dramaga Bogor. Daun binahong, rimpang jahe emprit, dan kunyit dibersihkan, dicuci,  ditiriskan,  dirajang  (kecuali  daun binahong), kemudian
dikeringkan menggunakan  oven  suhu  50-55℃  selama  3 hari. Kemudian disortasi kering, dihaluskan, diayak,  dan  disimpan  dalam  wadah  tertutup rapat  dengan  penambahan  silica  gel  untuk mengontrol kelembaban.

## Pembuatan Ekstrak
Daun  binahong  diekstraksi  dengan pelarut etanol 70%, sedangkan rimpang jahe dan kunyit diekstraksi dengan pelarut etanol 96%.  Ketiga  tanaman  tersebut  diekstraksi secara maserasi dengan perbandingan bahan dan  pelarut  1:10  yang  dilakukan  selama  3 hari. Kemudian pelarutnya diuapkan menggunakan vaccum  rotavapor hingga diperoleh  ekstrak  kental.  Selanjutnya dilakukan pengujian kadar air dan kadar abu ekstrak (9) .

## Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  aktif  yang terdapat  pada  ekstrak  daun  binahong, rimpang  jahe,  dan  kunyit  secara  kualitatif. Pengujian  fitokimia  meliputi  pengujian alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, triterpen dan steroid (10) .

## Uji Potensi Antiplatelet
Hewan uji yang akan digunakan adalah mencit  jantan  galur  DDY  (Deutchland Denken  Yonken)  usia  2-3  bulan  dan  sehat dengan  berat  rata-rata  25-35  g  sebanyak  28 ekor.  Mencit  dipelihara  dalam  kandang plastik,  lalu  diaklimatisasi  selama  kurang lebih 1 minggu, kemudian ditimbang kembali untuk pengelompokan. Aklimatisasi bertujuan untuk membiasakan tikus terhadap lingkungan  yang  baru  dan  kandang  selama perlakuan.  Pengelompokan  hewan  coba dilakukan secara acak dengan jumlah 4 ekor per  kelompok,  dibuat  menjadi  7  kelompok perlakuan, seperti yang tertera pada Tabel 1.
Tabel 1. Kelompok Perlakuan Antiplatelet
Kelompok Perlakuan Kontrol Positif Asetosal dosis 0,29 mg/20 gBB Kontrol Negatif Na-CMC 0,5 % Binahong Ekstrak  binahong  (10  mg/20 gBB) Kombinasi 1 Ekstrak binahong-jahe-kunyit (5:0,5:1 mg/20 gBB) Kombinasi 2 Ekstrak binahong-jahe-kunyit (10:0,5:1 mg/20 gBB) Kombinasi 3 Ekstrak binahong-jahe-kunyit (5:1:1 mg/20 gBB) Kombinasi 4 Ekstrak binahong-jahe-kunyit (5:0,5:2 mg/20 gBB)
Bahan  uji  diberikan  secara  oral  sehari sekali  selama  8  hari.  Penentuan  waktu perdarahan  dilakukan  pada  mencit  kelompok uji  pada  hari  ke-0,  3,  6,  dan  9  dengan  cara melukai  ekor  mencit  yang  terlebih  dahulu
dibersihkan  dengan  etanol.  Ekor  dilukai dengan menggunakan lancet steril pada jarak 2 cm dari pangkal ekor dengan kedalaman tidak lebih  dari  2  mm.  Darah  yang  keluar  diserap pada  kertas  saring  dengan  interval  tertentu. Waktu  mulainya  keluar  darah  sampai  tidak terdeteksi  lagi  pada  kertas  saring  digunakan sebagai  waktu  perdarahan (11) .  Berdasarkan hasil  penentuan  waktu  perdarahan  dapat ditentukan  persentase  peningkatan  waktu perdarahan,  kemudian  dianalisis  secara statistik  dengan  menggunakan  software Statistical  Product  and  Service  Solution (SPSS).  Metode  yang  dipakai  adalah  Anova Satu  Arah  dengan  taraf  kepercayaan  95%. Hasil uji One Way Anova dilanjutkan dengan uji  statistik  lanjutan  yaitu  LSD  ( Least Significantly  Difference ).  Pengukuran  waktu koagulasi  dilakukan  dengan  cara  mengamati pembentukan benang fibrin pada bagian pipa kapiler yang dipatahkan, darah dari ujung ekor diserap  dengan  pipa  kapiler  lalu  dipatahkan setiap  interval  waktu  15  detik.  Waktu koagulasi adalah waktu yang diperlukan untuk terbentuknya benang fibrin tersebut.

## Kode Etik Hewan Coba
Rancangan penelitian ini telah mendapatkan  persetujuan  dan  diterima  oleh Komite  Etik  Penelitian  dengan  nomor  Surat Keputusan  Komite  Etik  Penggunaan  Hewan Percobaan  FMIPA  Universitas  Pakuan  No. 121/KEPHP-UNPAK/09-2020  pada  tanggal 18 September 2020.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Karakteristik Sampel Penelitian
Hasil  perhitungan  rendemen  serbuk simplisia  daun  binahong  didapatkan  sebesar 14%, jahe sebesar 16,46% dan kunyit sebesar 12,75%. Hasil perhitungan rendemen ekstrak kental daun binahong sebesar 17,67%, hasil ini sesuai dengan persyaratan yaitu tidak kurang dari 11,9%. Rendemen ekstrak jahe diperoleh sebesar  17,7%,  yaitu  sesuai  dengan persyaratan tidak kurang dari 5,9%. Rendemen
ekstrak  kunyit  diperoleh  sebesar  18,4%,  ini juga  sesuai  dengan  persyaratan  yaitu  tidak kurang dari 11,7% (12) .
Hasil  penetapan  kadar  air  pada  serbuk simplisia binahong, jahe, dan kunyit berturut- turut  adalah  3,93%,  5,67%,  dan  5,74%. Sedangkan kadar air ekstrak etanol binahong, jahe, dan kunyit berturut-turut sebesar 4,92%, 7,60%,  dan  8,41%.  Hasil  yang  didapat memenuhi  persyaratan  bahwa  kadar  air ekstrak  binahong  tidak  melebihi  8,9%  dan kadar  air  jahe  dan  kunyit  tidak  melebihi 10% (12) .
Hasil  penetapan  kadar  abu  serbuk simplisia  daun  binahong,  jahe,  dan  kunyit didapatkan  rata-rata  sebesar  7,42%,  6,56%, dan  6,18%.  Sedangkan  penetapan  kadar  abu ekstrak etanol daun binahong, jahe, dan kunyit didapatkan  berturut-turut  sebesar  8,05%, 7,60%,  8,64%.  Hasil  ini  memenuhi persyaratan karena tidak melebihi 10% (13) . Hasil  pengujian  fitokimia  simplisia  dan ekstrak  daun  binahong,  jahe,  dan  kunyit ditunjukkan pada Tabel 2. Dimana hasil yang didapatkan sesuai dengan penelitian Paskartini (14) dan Agustina (15) .

## Pengujian Antiplatelet
Hewan  coba  yang  digunakan  yaitu  28 ekor  mencit  putih  jantan (Mus  musculus) dengan  rata-rata  berat  badan  31,6±3,60  g. Mencit dikelompokkan ke dalam 7 kelompok perlakuan.  Pengujian  potensi  antiplatelet menggunakan  parameter  waktu  perdarahan dan  waktu  koagulasi.  Waktu  perdarahan diamati  untuk  melihat  pengaruh  bahan  uji terhadap proses pembentukan sumbat hemostatik sementara, yaitu proses hemostatik fase platelet. Adanya efek antiagregasi platelet ditunjukkan  oleh  waktu  perdarahan  yang semakin  panjang  setelah  pemberian  bahan uji (16) .

## Waktu perdarahan
Penentuan waktu perdarahan merupakan pengujian  untuk  mengetahui  sejauh  mana interaksi  antara  platelet  dengan  dinding pembuluh  darah  dalam  membentuk  bekuan darah. Pemanjangan waktu pembekuan darah menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas agregasi  platelet  yang  disebabkan  karena penghambatan enzim siklooksigenase, sehingga  sintesis  tromboksan  A2  menurun.
Persentase  kenaikan  atau  penurunan  waktu perdarahan pada hari ke-0 dan 3 dapat dilihat pada Tabel 3. Persentase peningkatan
waktu perdarahan tertinggi pada hari 0-3 ditunjukkan oleh  kelompok  dosis  campuran  3  (16,6%). Kelompok ini terdiri dari kandungan jahe yang lebih besar dibanding kelompok lainnya yaitu 1 mg/20 gBB. Waktu perdarahan normal pada manusia  adalah  1-3  menit,  sedangkan  waktu perdarahan  normal  untuk  mencit  adalah  ±  1 menit (17) . Waktu perdarahan yang memanjang setelah  pemberian  ekstrak  uji  diduga  karena terjadi  penghambatan  pembentukan  sumbat hemostatis. Penghambatan sumbat hemostatis terjadi  ketika  ada  penumpukan  platelet  di jaringan  ikat  pada  daerah  luka  yang membentuk  agregat.  Dengan  dihambatnya penumpukan  platelet  tersebut,  maka  waktu pendarahan  semakin  meningkat.  Efek  ini diduga  disebabkan  oleh  adanya  senyawa flavonoid  pada  ketiga  tanaman.  Menurut Middleton et  al . (18) ,  flavonoid  merupakan salah  satu  jenis  antioksidan  yang  dapat menghambat pelekatan, agregasi, dan sekresi platelet. Mekanisme kerja flavonoid menghambat  metabolisme  asam  arakidonat yang  menyebabkan  sintesis  tromboksan  A2 terhambat sehingga agregasi platelet menjadi terhambat.  Alkaloid  dapat  menghambat sintesis  kolagen  dan  ADP  yang  dapat menginduksi terjadinya agregasi platelet (16) .

## Waktu Koagulasi
Parameter  kedua  yang  diamati  adalah waktu koagulasi. Pengamatan waktu koagulasi bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  bahan  uji terhadap proses pembentukan sumbat hemostatik sekunder,  yaitu proses hemostatis fase koagulasi. Tahapan dalam fase koagulasi menyebabkan  perubahan  fibrinogen  yang bersirkulasi menjadi fibrin yang tidak larut dan fibrin menutup permukaan sumbatan platelet. Platelet diperangkap dalam suatu struktur yang sangat  berserabut,  membentuk  suatu  bekuan darah yang menutup secara efektif bagian yang terluka dari pembuluh darah (19) .
Pengujian  waktu  koagulasi  dilakukan pada mencit kelompok uji pada hari ke-0, 3, 6, dan  9  dengan  memotong  ujung  ekor  1-2  cm dari pangkal ekor, darah yang  keluar diserap dengan  pipa  kapiler  selama  30  detik.  Pipa kapiler  dipatahkan  setiap  interval  waktu  15 detik  hingga  teramati  pembentukan  benang fibrin pada bagian yang di patahkan. Adanya efek  ditunjukkan  oleh  waktu  koagulasi  yang semakin panjang setelah pemberian bahan uji. Kesulitan  pada  pengujian  waktu  koagulasi adalah pada saat pematahan pipa kapiler, pipa kapiler  sulit  dipatahkan  untuk  menentukan ukuran  patahan  pipa  kapiler  yang  sama  dan konstan.
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  pada  hari ke-9  kelompok  kontrol  positif  memberikan peningkatan waktu koagulasi sebesar 89,71%. Kelompok  binahong  dan  kombinasi  1
menunjukkan  peningkatan  waktu  koagulasi yang melebihi kelompok kontrol positif yaitu sebesar  203,55%  dan  138,60%.  Sedangkan pada  kontrol  negatif  terus  mengalami penurunan. Kelompok binahong tunggal pada dosis 10 mg/20 gBB memiliki waktu koagulasi paling tinggi, hal ini diduga karena kandungan flavonoid  yang  lebih  besar  pada  daun binahong.  Flavonoid  dapat  menghambat interleukin-1  yang  menginduksi  faktor jaringan  yang  merupakan  faktor  ekstrinsik dalam mekanisme pembekuan darah. Penghambatan  terhadap  faktor  jaringan menyebabkan proses koagulasi akan terhambat (20) .
Waktu  koagulasi  cenderung  lebih meningkat  dibandingkan  waktu  perdarahan. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kemungkinan ekstrak uji lebih mempengaruhi proses-proses yang  terjadi  pada  hemostatis  sekunder daripada  hemostatis  primer.  Hemostasis sekunder  terdiri  dari  faktor  pembekuan  dan anti pembekuan, dimana akhir dari mekanisme hemostasis  sekunder  adalah  terbentuknya benang fibrin. Jika terjadi luka yang besar pada pembuluh darah atau jaringan lain,
vasokonstriksi  dan  sumbat  trombosit  belum cukup untuk mengkompensasi luka ini. Maka, terjadilah hemostasis sekunder yang
melibatkan  trombosit  dan  faktor  koagulasi.
Hemostasis sekunder ini mencakup pembentukan jaring-jaring fibrin (21) .
Tabel 2 . Hasil Uji Fitokimia
Bahan Hasil Uji Alkaloid Flavonoid Saponin Tanin Tritepenoid Steroid Simplisia Binahong + + + - + Jahe + + + - + Kunyit + + + + + Ekstrak Binahong + + + - + Jahe + + + - + Kunyit + + + + +
Ket: (+) = terdapat/ mengandung (-) = tidak terdapat/ tidak mengandung
Tabel 3 . Peningkatan Waktu Perdarahan No. Kelompok Rata-rata Waktu Perdarahan (detik) Peningkatan Waktu Perdarahan (%) Hari ke-0 Hari ke-3 1 Kontrol Positif 63,75 ± 11,79 64 ± 19,34 0,39 2 Kontrol Negatif 74 ± 24,26 60,75 ± 18,08 -17,9 3 Binahong 66,25 ± 27,54 71,5 ± 8,18 7,92 4 Kombinasi 1 63 ± 20,35 62,5 ±15,19 -0,79 5 Kombinasi 2 80 ± 23,80 64,25 ± 22,97 -19,68 6 Kombinasi 3 63,25 ± 21,31 73,75 ± 7,27 16,6 7 Kombinasi 4 67,25 ± 25,90 72,75 ± 13,35 8,18 Tabel 4. Peningkatan Waktu Koagulasi No. Kelompok Perlakuan Peningkatan Waktu Koagulasi (%) Hari 0-3 Hari 0-6 Hari 0-9 1 Kontrol Positif 21,28 62,96 89,71 2 Kontrol Negatif 0 -10,41 -8,09 3 Binahong 54,96 203,13 203,55 4 Kombinasi 1 22,64 79,12 138,60 5 Kombinasi 2 65,47 69,83 7,87 6 Kombinasi 3 36,31 83,79 5,57 7 Kombinasi 4 35,33 158,16 31,70

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa aktivitas antiplatelet pada mencit ditunjukkan  melalui  parameter  waktu perdarahan dan waktu koagulasi. Kelompok kombinasi  3  lebih  efektif  meningkatkan waktu perdarahan, dan kelompok binahong lebih efektif meningkatkan waktu koagulasi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis menyampaikan ucapan terima kasih  kepada  Lembaga  Penelitian  dan Pengabdian  pada  Masyarakat  (LPPM) Universitas  Pakuan  yang  telah  mendanai penelitian  ini  melalui  hibah  internal  tahun 2020 pada skim Penelitian Dosen Pemula.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Saraf,  F.,  Benzalha,  I.,  Gorog,  D.A. 2009.  Antiplatelet  Resistence-Does  It Exist and How to Measure it. Clinical Medicine Cardiology . 2009; 3: 77-91. 2. Gross  PL,  Weitz  JL.  2009.  New Antithrombotic Drugs. Clinical Pharmacology  &  Therapeutics. 2009;
86 (2): 139-146.
3. Ebadi,  M.  2008. Desk  Reference  Of
Clinical  Pharmacology. New  York: CRC Press.
4. Aprilia,  C.A.,  dan  Dewiastuti,  M. 2017.  Efektivitas  Hipolipidemia  dan Antioksidan  Ekstrak  Daun  Binahong pada Tikus Putih yang Diinduksi Pakan Hiperkolesterol. Jurnal  Kedokteran Yarsi 25 (3) : 150-162 .
5. Fitriyani, N., & Sigit, J. I. (2008). Efek antiagegasi platelet ekstrak etanol buah mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.), rimpang jahe merah (Zingiber officinale  var.  Sunti  Val.)  dan kombinasinya pada mencit jantan galur swiss  webster. Maranatha  Journal  of
Medicine and Health, 7(2), 149447.
6. Sukandar,  E.Y.,  Sigit,  J.I.,  Fitriani, Nurul. 2008. Efek antiagregasi platelet ekstrak  air  bulbus  bawang  putih (Allium  sativum  L.),  ekstrak  etanol rimpang  kunyit  (Curcuma  domestica Val.)  dan  kombinasinya  pada  mencit jantan  galur  Swiss  Webster. Majalah Farmasi Indonesia. 2008.19(1):1–11.
7. Jazilah,  N.  2014.  Uji  Toksisitas
Ekstrak  Daun  Binahong  ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis  terhadap Larva  Udang Artemia  salina Leach dengan Metode Brine Shrimp Lethality
Test  (BSLT). Skripsi. Jurusan  Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas  Islam  Negeri  Maulana
Malik Ibrahim Malang.
8. Wei,  B.L.,  Weng,  J.R.,  Chiu,  P.H.,
Hung,  C.F.,  Wang,  J.P.,  Lin,  C.N. 2005.  Antiinflammatory  Effect  of Flavonoids from Artocarpus heterophyllus and Artocarpus communis.  J.  Agric.  Food.  Chem . 2005; 53 (10) 3867-3871. 9. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  2000. Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat . Kementrian Kesehatan Republik Indonesia: Jakarta.
10. Hanani,  E.  2015. Analisis  Fitokimia . Jakarta:  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC.
11. Putri,  R.R.R.F.,  Ulfa,  E.U.,  dan
Riyanti,  R.  2014.  Uji  Aktivitas Antiplatelet  Ekstrak  Etanol  Kubis Merah (Brassica oleracea var. capitata L.). e-Jurnal Pustaka
Kesehatan,  vol.  2  (no.  1),  Januari 2014. 12. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.  2017. Farmakope  Herbal Indonesia . Edisi II.  Jakarta  : Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. 13. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2013. Suplemen III Farmakope Herbal Indonesia , Edisi I. Jakarta.
14. Paskartini,  T.  G.,  2017.  Parameter Standarisai  Tanaman  Segar  Simplisia dan  Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong (Anredera cordifolia) Dari Tiga Daerah Berbeda. Skripsi. Universitas Khatolik Widya Mandala, Surabaya.
15. Agustina, S., Ruslan dan Wiraningtyas, A. 2016. Skrining Fitokimia Tanaman Obat Di Kabupaten Bima. Indonesia E- Journal of Applled Chemistry. Vol 4.
16. Jantan,  I.,  Raweh,  S.M.,  Sirat,  H.M.,
Jamil, S., Mohd Yasin, Y.H., Jalil, J., et  al.  2008.  Inhibitory  effect  of compounds from Zingiberaceae species on human platelet aggregation. Phytomedicine;15(4):306–9. 17. Hidayah,  L.  (2016).  Efektivitas Ekstrak Kulit Kayu Manis ( Cinnamomum  burmannii )  terhadap Perpanjangan  Waktu  Perdarahan  pada Mencit  Jantan  Galur  Swiss  Webster. Jurnal  Gizi  dan  Kesehatan.  Vol  8 No.17. Hal 97-102.
18. Middleton,  E.,  Kandaswami,  C.,  & Theoharides, T. C. (2000). The effects of  plant  flavonoids  on  mammalian cells:  implications  for  inflammation,
heart disease, and cancer. Pharmacological  reviews ,  52(4),  673-
751.
19. Fitriyani, N., & Sigit, J. I. (2008). Efek antiagegasi platelet ekstrak etanol buah mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.),
rimpang jahe merah (Zingiber
officinale  var.  Sunti  Val.)  dan kombinasinya pada mencit jantan galur swiss  webster. Maranatha  Journal  of
Medicine and Health, 7(2), 149447.
20. Guglielmone,  H.  A.,  Agnese,  A.  M., Montoya,  S.  C.  N.,  &  Cabrera,  J.  L. (2002). Anticoagulant effect and action mechanism  of  sulphated  flavonoids from  Flaveria  bidentis. Thrombosis Research , 105(2), 183-188.
21. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. (2018). Hemostasis. Bahan
Ajar  Teknologi  Laboratorium  Medik. Pusat  Pendidikan  Sumber  Daya Manusian Kesehatan.