## PENINGKATAN KONSENTRASI KARBONDIOKSIDA DAN SUHU TERHADAP PERTUMBUHAN DAN HISTOPATOLOGI MAKROALGA TROPIK Halimeda sp
INCREASING CARBON DIOXIDE CONCENTRATION AND TEMPERATURE ON GROWTH AND HISTOPATHOLOGY OF TROPIC MACROALGAE Halimeda sp
Sahabuddin 1* , Jamaluddin Jompa 2 , dan Nita Rukminasari 2
1 Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Payau, Maros
2 Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan Universitas Hasanuddin, Makassar *E-mail: s.abud_din@yahoo.co.id

## ABSTRACT
The  increasing  CO 2 concentration  and  temperature  affected  growth,  chlorophyll  content,  calcium content,  and  histological  tissue  of  tropical  macroalgae  Halimeda sp .  The  study  was  conducted  to examine  the  interaction  effect  of  the  increased  CO 2 concentration  and  temperature  on  growth, chlorophyll-a content, calcium content, and histological tissue of tropical macroalgae Halimeda sp in a laboratory. Research was set with a completely randomized factorial design at 3 levels of factors (A) the  CO 2 concentration:  385  ppm  (ambient),  750  ppm  (medium),  1000  ppm  (high),  and  3  levels  of factor (B) the temperature: 30 o C, 32 o C, 34 o C. Microcolony of macroalgae Halimeda sp were selected and  obtained  from  the  Lae-lae  island  then  growing  in  the  aquarium  30  x  30  x  45  cm 3 .  Biological parameters  observed  were  growth  rate  (total,  specific  and  relative),  chlorophyll-a  content,  calcium content,  and  histopathology  tissue.  The  results  showed  that  the  increased  of  CO 2 concentration  and temperature  negatively  affected  on  the  growth  of  Halimeda  sp,  reduced  of  the  growth  rate,  the chlorophyll-a  content,  calcium  content  and    damaged    to  histopatology tissue  of  the  Halimeda sp at trophical macroalgae.
Keywords : CO 2 concentration, temperature, growth response, histopathology, Halimeda sp

## ABSTRAK
Peningkatan  konsentrasi  karbondioksida  dan  suhu  mempengaruhi  pertumbuhan,  kandungan  klorofil, kandungan  kalsium  dan  jaringan  histopatologi  makroalga Halimeda sp.  Penelitian  dilakukan  untuk menguji  efek  interaksi  peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  terhadap  pertumbuhan,  kandungan klorofil-a,  kandungan  kalsium  serta  jaringan  histopatologi Halimeda sp  pada  uji  laboratorium. Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap pola faktorial, terdapat 3 taraf perlakuan dari faktor (A)  konsentrasi  CO 2 yakni  :  385  ppm  (ambien),  750  ppm  (sedang),  1000  ppm  (tinggi),  dan  3  taraf perlakuan dari faktor (B) suhu yakni : 30 o C, 32 o C, 34 o C. Makroalga Halimed a sp diperoleh dari pulau Lae-lae kemudian diuji dalam akuarium 30 x 30 x 45 cm 3 . Parameter biologi yang diamati yakni : laju pertumbuhan  (total,  spesifik  dan  relatif),  kandungan  klorofil-a,  kandungan  kalsium,  serta  jaringan histopatologi.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu berpengaruh  negatif  terhadap  pertumbuhan Halimeda sp,  menurunkan  kandungan  klorofil-a  dan kandungan kalsium, serta merusak jaringan histopatologi makroalga tersebut.
Kata kunci : konsentrasi CO 2 , suhu, respon pertumbuhan, histopatologi, Halimeda sp

## I. PENDAHULUAN
Peningkatan  aktivitas  antropogenik berupa penggunaan bahan bakar fosil ( BBF ), produksi  semen,  serta  pembakaran  biomas dan  alih  fungsi  lahan  yang  semakin  intensif
setelah  memasuki  era  industrialisasi,  sehing- ga menyebabkan tingginya konsentrasi karbondioksida  di  atmosfir  (IPPC,  2007). Karbon  di  atmosfer  diperkirakan  sekitar 4,1±0,1x10 15 gC/tahun (Gattuso et  al., 1998; Houghton et al., 2001).
Peningkatan  laju  tekanan  parsial  kar- bondioksida  0,4%  per  tahun,  menyebabkan karbondioksida  di  atmosfer  meningkat  dari 280  ppm  (pra-industri)  menjadi  385  ppm pada  kondisi  ambien  (Pajusalu et  al .,  2013). Pada akhir abad ke-21 diperkirakan mencapai nilai 900 ppm (Houghton et al., 2001; Royal Society,  2005).  Konsentrasi  karbondioksida tinggi di atmosfir diprediksi menurunkan pH laut sekitar 0,4 unit hingga tahun 2100 (Orr et al. ,  2005)  sehingga  menyebabkan  terjadinya pengasaman  laut ocean  acidification (Koch et  al. ,  2013;  Pajusalu et  al. ,  2013).  Hal  ini memiliki  konsekuensi  negatif  terhadap  eko- sistem  dan  menyebabkan  gangguan  jaringan pada  makroalga  dan  kerangka  kapur  pada organisme calcifying (Gattuso et  al. ,  1998; Pajusalu et al. , 2013).
Pengasaman laut umumnya menurun- kan  tingkat  kalsifikasi  pada coccolithophor (Riebesell et al. , 2000; Zondervan et al. , 20- 02; Delille et al. , 2005; Beaufort et al ., 2011) dan  makroalga  berkapur  lainnya  (Gao  dan Zheng,  2010;  Sinutok et  al .,  2011)  dengan respon yang berbeda-beda pada setiap spesies pada  kondisi  lingkungan  yang  berbeda  pula (Langer et  al .,  2006,  2009;  Iglesias- Rodriguez et  al., 2008;  Doney et  al., 2009; Shi et al. , 2009). Efek dari tingginya CO 2 dan suhu  pada  fotosintesis  dan  kalsifikasi  dari jenis makroalga pembentuk kapur karang ( H. macroloba dan H.  cylindracea )  telah  diseli- diki dengan mikrosensor O 2 dan klorofil flu- orometri  melalui  kombinasi  CO 2 (400  dan 1.200 ppm) pada perlakuan suhu ambien dan prediksi  suhu  pada  tahun  2100  (28°C  dan 32°C).  Pengapuran  pada  spesies  ini  erat  kai- tannya  dengan  fotosintesis,  sehingga  penu- runan efisiensi fotosintesis menyebabkan pe- nurunan  kalsifikasi,  pH  tampaknya  menjadi faktor  utama  yang  mempengaruhi  spesies Halimeda sp , stres panas juga memiliki dam- pak pada efisiensi pada  fotosistem dan foto- kimia (Sinutok e t al., 2011). Kalsifikasi  alga pada gilirannya  dipengaruhi oleh dampak ra- diasi ultraviolet matahari (280-400 nm) pada fotofisiologi  makroalga  (Gao et  al. ,  2009; Gao dan Zheng, 2010; Guan dan Gao, 2010).
Peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan suhu  sebagai  unsur  utama  perubahan  iklim sangat  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan dan  produktifitas  makroalga Halimeda sp. Kondisi  ini  menggambarkan  makroalga tropik Halimeda sp mengalami ancaman pro- duktifitas  dengan  semakin  intensifnya  ke- giatan  industrialisasi,  sekaligus  menjadi  an- caman  bagi  lingkungan  ekosistem  di  per- airan  tropik,  sedangkan Halimeda sp  terma- suk  kelompok  alga  berkapur  yang  meman- faatkan  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  untuk membentuk  kerangka  tubuhnya,  serta  dapat menghasilkan  kristal  kalsit    untuk  pemben- tukan kerangka kapur, produksi sedimen bagi komunitas  lainnya  seperti  pembentukan  ke- rangka  kapur  pada  koloni  karang  (Adey, 1998;  Nelson,  2009). Hal  ini ditegaskan Do- ney et al . (2012) bahwa organisme laut diha- dapkan  dengan  stres  gabungan  antara  me- ningkatnya  suhu  laut  dan  pengasaman  laut. Olehnya  itu  pengujian  terhadap  makroalga jenis Halimeda sp  terhadap  efek  peningkat- an  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  seyogyanya sangat  berguna  bagi  pengembangan  penge- lolaan  komunitas  ekosistem  bagi  keberlan- jutan sumberdaya laut.
Peningkatan  konsentrasi  karbondiok- sida  dan  suhu  mempengaruhi  pertumbuhan, kandungan klorofil-a dan kandungan kalsium serta jaringan histopatologi makroalga tropik Halimeda sp.  Hasil  penelitian  tentang  efek peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  pada makroalga  tropik  belum  banyak  didokumen- tasikan,  baik  penelitian  laboratorium  mau- pun  penelitian  skala  lapangan,  maka  dilaku- kan  penelitian  tentang  efek  peningkatan konsentrasi  CO 2 dan  suhu  terhadap  pertum- buhan,  kandungan  klorofil-a  dan  kandungan kalsium  serta  jaringan  histopatologi  makro- alga Halimeda sp pada kondisi daerah tropik.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan selama 6 minggu di  laboratorium  Biologi  dan  Plankton  Balai Penelitian  dan  Pengembangan  Budidaya  Air
Payau,  Maros.  Mikrokoloni Halimeda sp diseleksi  dan  dikoleksi  di  sekitar  perairan pulau  Lae-Lae  Kota  Makassar  pada  salinitas 29  ppt  dan  suhu  30 o C,  sehingga  diperoleh mikrokoloni  dengan  performansi  yang  baik dari  warna  dan  morfologinya,  selanjutnya disterilkan  kemudian  diaklimatisasi  selama 24  jam  pada  akuarium  yang  telah  disiapkan di laboratorium pada suhu ruangan.

## 2.2. Bahan dan Data
Mikrokoloni  makroalga Halimeda sp hasil seleksi dari alam  ditimbang dan diukur berat  dan  panjang  awalnya,  kemudian  dima- sukkan ke dalam wadah penelitian yang telah dipersiapkan  terlebih  dahulu  berupa  akua- rium  berukuran  30  cm  x  30  cm  x  45  cm, didesain dengan rancangan acak lengkap pola faktorial.  Terdapat  2  faktor  perlakuan masing-masing  3  level  yakni:  konsentrasi CO 2 (385  ppm;  750  ppm;  1000  ppm ekuivalen  dengan  pH  8,12;  7,99;  dan  7,72- 7,78). Konsentrasi 385 ppm CO 2 adalah kon- sentrasi CO 2 sekarang (Pajusalu et al. , 2013) ekuivalen  dengan  pH  alami  yakni  pH  8,12 (ambien),  kemudian  konsentrasi  750  ppm CO 2 adalah  konsentrasi  prediksi  tahun  2050 (ekuivalen  dengan  pH  7,99)  dan  konsentrasi 1.000 ppm  CO 2 adalah konsentrasi  CO 2 pre- diksi  tahun  2100  (akhir  abad  21)  diprediksi pH  laut  sekitar  7,72-7,87  karena  konsentrasi CO 2 tinggi  di  atmosfir  akan  menurunkan pH laut  sekitar  0,4  unit  hingga  tahun  2100 (IPPC,  2007;  Orr et  al. ,  2005;  Meehl et  al ., 2007;  Fernandes et  al .,  2015).  Faktor  suhu juga  mengikuti  tren  peningkatan  konsentrasi CO 2 yakni;  30 o C  suhu  permukaan  laut  kon- disi  sekarang;  yang  kemudian  dinaikkan menjadi 32°C dan  34°C (+2 dan +4) masing- masing  3  ulangan,  sehingga  terdapat  27  unit percobaan.
Mikrokoloni  makroalga  ditumbuhkan dalam  media  kultur  setelah  media  tersebut diinjeksi  CO 2 mix  0.075%  balance  N 2 mix yang  ekuivalen  dengan  750  ppmv  CO 2 ske- nario tahun 2050 dan 0.1% CO 2 , balance N2 mix yang ekuivalen dengan 1000 ppmv CO 2 , skenario  tahun  2100  (Caldeira  &  Wickett
2005;  Feely et  al ,  2010).  Gas  CO 2 mix  ter- sebut  dialirkan  dari  tabung  melalui  penga- turan  regulator  merk  Harris  sesuai  konsen- trasi uji yang telah ditentukan.
Untuk  mempertahankan  kondisi  CO 2 , maka  di  equivalenkan  menggunakan  larutan asam  basa:  HCl  dan  NaOH  (Riebesel et  al ., 2010).  Untuk  mempertahankan  suhu  media, maka  aquarium  dihubungkan  dengan  pema- nas air “ heater” yang telah diatur sesuai kon- disi suhu uji; 30 o C, 32 o C, dan 34 o C. Kondisi pH  dan  suhu  selalu  dikontrol  setiap  hari menggunakan  pH  meter  dan  termometer. Pengukuran  pertambahan  panjang  dan  berat makroalga  di  ukur  setiap  pekan  selama  6 minggu penelitian di laboratorium.

## 2.3. Analisis Data
Peubah  biologi  yang  diamati  yakni  : pertumbuhan  (total,  harian  dan  relatif), kandungan  klorofil-a,  kandungan  kalsium (Ca),  dan  jaringan  histopatologi.  Pertum- buhan  dihitung  dari  pertambahan  panjang dan  berat  biomassa  makroalga  dari  hasil sampling  setiap  pekan.Kandungan  klorofil-a dianalisis  melalui  ekstraksi  1  gram  sampel dalam  80%  pelarut  aseton.  Ekstrak  yang dihasilkan  diukur  menggunakan  spektro- fotometer sinar tampak, pada panjang gelom- bang 663 nm, dengan ketebalan tabung sel 1 cm (APHA, 2005). Kandungan kalsium (Ca) diukur  dengan  metode  titrasi  (Sudarmaji, 2010).  Analisis  histopatologi  menggunakan mikroskop Olympus bX 51 dan kamera dp 21 dengan  skala  100  mikron  (1  mikron=pem- besaran 200 kali mikroskop). Parameter kua- litas  air  diamati  setiap  melakukan  sampling pertumbuhan  makroalga,  yakni:  salinitas, suhu,  pH,  alkalinitas  (APHA,  2005).  Data diolah  dengan  software  SPSS  20,  untuk mengetahui ragam  tiap perlakuan maka dila- kukan  analisa  varian  (anova),  kalau  terjadi signifikansi  antar  perlakuan  dilakukan  uji lanjut  post-hoc  (Steel  and  Torrie,  1991), hasilnya    ditampilkan  dalam  bentuk    grafik dan  histogram.
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. Hasil
3.1.1. Performa Halimeda sp Performa  makroalga Halimeda sp yang dikoleksi  dari alam dan  performa mak- roalga  setelah  diinjeksi  dengan  konsentrasi 385  ppm,  750  ppm  dan  1.000  ppm  CO 2 tertera pada Gambar 1.  Secara anatomi tidak terjadi  perbedaan  warna  dan  bentuk  yang sangat  mencolok  antara  makroalga  yang tumbuh  pada  media  injeksi  CO 2 dan  non injeksi  CO 2 .  Makroalga  hijau  berkapur memiliki  proses  pengapuran  yang  unik.  Ge- nus Halimeda tempat terlarutnya kristal pada permukaan inter selular ruang antara struktur khusus  yang  disebut  utricles.  Ruang  utricles dipisahkan  dari  air  laut  eksternal,  karena  itu makroalga  ini  memiliki  pengendalian  hayati lingkungan  internal    melalui  proses  fotosin- tesis  dan  pernapasan  (Borowitzka  and  Lar- kum  1977,  Lee  and  Carpenter  2001).  Mak- roalga Halimeda spp.  juga  menunjukkan berbagai macam morfologi, lebar dan jumlah lapisan  utricle  dalam  thallus  yang  mem- pengaruhi pengapuran, dan karena itu spesies seperti H.  macroloba dan H.  incrassata , dengan  2  sampai  4  lapisan  utricles  yang  re- latif  tebal  mungkin  kurang  sensitif  terhadap pCO2  daripada H.  minima ,  yang  memiliki  1 atau  2  lapisan  tipis  utricles  (Verbruggen et al ., 2004; Dijoux et al ., 2012).

## 3.1.2. Pertumbuhan Total, Harian, dan Relatif
Pertumbuhan  total,  harian,  dan  relatif Halimeda sp  pada  peningkatan  konsentrasi
CO 2 (385, 750, 1.000 ppm)  dan suhu (30, 32, dan  34°C)  terlihat  pada  Gambar  2.  Hasil pengujian  pada  injeksi  konsentrasi  CO 2 terhadap  pertumbuhan  total  makroalga Hali- meda sp  didapatkan  tertinggi  pada  konsen- trasi 385 ppm CO 2 ; yakni 3,75±0,25 gr pada suhu 30°C, selanjutnya pertumbuhan totalnya menurun  pada  injeksi  750  ppm  CO 2 ;  yakni 2,75±0,24  gr  pada  suhu  34°C  dan  terendah pada  konsentrasi  1000  ppm  CO 2 pada  suhu 34°C;  yakni  1,45±0,15  gr.    Hasil  analisis keragaman  (anova)  didapatkan  bahwa  CO 2 dan suhu serta efek interaksinya berpengaruh nyata  (P<0,05)  terhadap  pertumbuhan  total Halimeda sp.  Terjadi  tren  penurunan  per- tumbuhan  total  seiring  peningkatan  konsen- trasi  CO 2 dan  suhu,  hal  ini  menunjukkan bahwa  makroalga Halimeda sp  masih  me- mungkinkan  melakukan  aklimasi  pada  kon- disi  konsentrasi  CO 2 dan  kondisi  suhu  seka- rang karena masih mampu melakukan proses metabolisme  secara  normal,  sedangkan  pada kondisi  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  ke  depan sudah  sulit  melakukan  adaptasi,  kondisi  ter- sebut  sesuai  dengan  hasil  kajian  Vogel et  al (2015)  bahwa Halimeda spp  masih  dapat melakukan aklimasi dan kalsifikasi pada kon- disi konsentrasi CO 2 sekarang, namun sangat pesimis  pada  konsentrasi  CO 2 proyeksi  ke depan.
Laju  pertumbuhan  harian Halimeda sp  tertinggi  pada  konsentrasi  385  ppm  CO 2 yakni  0,045  cm  pada  suhu  30°C,  kemudian turun pada suhu 32°C dan 34°C  yakni  0,029 cm  dan  0,027  cm.  Pada peningkatan  CO 2 ke level 750 ppm pertumbuhan hariannya  yakni 0,035 cm pada suhu 30°C dan turun menjadi A B                             C D
Gambar 1. Performa Halimeda sp : A) Alami ; B) injeksi CO 2 385 ppm; C) injeksi CO 2 750 ppm, dan D) injeksi CO 2 1000 ppm.
Gambar 2. Rataan±SE (A) pertumbuhan total, (B) pertumbuhan harian, dan (C) pertumbuhan relatif  makroalga Halimeda sp pada peningkatan konsentrasi CO 2 dan suhu selama penelitian. Standar error dihitung dari ulangan sampel.
A B C
0,025  cm  dan  0,2  cm  pada  suhu  32°C  dan 34°C.  Pertumbuhan  relatif  tertinggi  pada konsentrasi  385  ppm  CO 2 yakni;  0,83  cm pada suhu 30°C,  turun menjadi 0,79 cm dan 0,70  cm  pada  suhu  32°C  dan  34°C.  Pada konsentrasi  750  ppm  CO 2 pertumbuhan relatifnya semakin turun yakni 0,45 cm, 0,44 cm, dan 0,354 cm  masing-masing pada suhu 30°C,  32°C,  34°C,  begitu  pula  pada  konsen- trasi 1.000 ppm CO 2 pertumbuhan relatifnya menjadi  0,32  cm,  0,29  cm  dan  0,254  cm masing-masing  pada  suhu  30 o C,  32°C  dan 34°C.  Pertumbuhan  relatif  semakin  menurun seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu.  Hasil  analisis  keragaman  (anova) didapatkan  bahwa  efek  interaksi  CO 2 dan suhu  berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap pertumbuhan  total,  pertumbuhan  harian,  dan pertumbuhan relatif makroalga Halimeda sp. Laju  pertumbuhan  total,  harian,  dan  relatif menurun  dengan  semakin  meningkatnya konsentrasi  CO 2 dan  suhu.  Peningkatan konsentrasi  CO 2 yang  menurunkan  pH permukaan  air  laut  menyebabkan  terjadinya perubahan kimia karbonat air laut, maka akan dapat  berpengaruh  terhadap  proses  biologi dan fisika dari organisme laut yang berkapur maupun  tidak  berkapur  (Fernandez et  al ., 2015)  yang  pada  akhirnya  mempengaruhi proses  metabolisme  pada  organisme  laut termasuk makroalga tersebut sehingga proses pertumbuhannya melambat.

## 3.1.3. Kandungan Klorofil-a
Kandungan  klorofil-a  tertinggi  pada konsentrasi  385  ppm  CO2,  yakni  21,18 mg.m -3 pada  suhu  30°C,  kandungan  klo- rofilnya  turun  pada  suhu  32°C  dan  34°C menjadi  20,26  mg.m -3 dan  19,11  mg.m -3 . Pada  konsentrasi  750  ppm  CO 2 kandungan klorofilnya  makin  turun,yakni:14,28  mg.m -3 pada suhu 30°C bahkan menjadi 12,31 mg.m - 3 dan 10,42 mg.m -3 pada suhu 32 dan 34°C. Kandungan  klorofil-anya  semakin  rendah pada konsentrasi 1.000 ppm CO 2 yakni: 8,21 mg.m -3 pada  suhu  30°C  dan  terendah  pada suhu  34°C  yakni:  6,09  mg.m -3 (Gambar  3). Hasil analisis keragaman (anova) didapatkan
bahwa  efek  interaksi  CO 2 dan  suhu berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap  menu- runnya  kandungan  klorofil-a Halimeda sp. Hal  tersebut  terjadi  karena  pada  konsentrasi 385  ppm  CO 2 makroalga  masih  dapat melakukan  proses  fisiologi  dengan  baik karena  kebutuhan  akan  kalsium  karbonat masih  normal,  ketika  terjadi  kenaikan konsentrasi  CO 2 maka  terjadi  disolusi karbonat  yang  berpengaruh  terhadap  lapisan utricle  dalam  thallus  sehingga  mengganggu proses  fotosintesa  dan  respirasi  apalagi dengan  terjadinya  peningkatan  suhu  maka kebutuhan  komponen  dan  proses  metabolik semakin  bertambah  sehingga  kemampuan kloroplas dalam dinding sel semakin menurun  pula  (Dijoux et  al., 2012).  Hasil penelitian  Khairy et  al .  (2014)  juga  terjadi pada  fitoplankton Chaetoceros  gracilis mengalami  kerusakan  kloroplas,  disintegrasi membran  tilakoid,  dan  terjadinya  sel  lyses ketika  terjadi  peningkatan  konsentrasi  CO 2 550-1.050 ppm.

## 3.1.4. Kandungan Kalsium (Ca)
Kandungan  kalsium  tertinggi  pada konsentrasi  385  ppm  CO 2, yakni  23,26% pada  suhu  30°C,  kemudian  kandungannya menurun  dengan  meningkatnya  CO 2 yakni 20,24%  pada  konsentrasi  750  ppm  CO 2 dan paling  rendah  pada  konsentrasi  1.000  ppm CO 2 yakni 17,19%  pada suhu 34°C (Gambar 4). Hasil analisis keragaman (anova) didapat- kan  bahwa  efek  interaksi  peningkatan  kon- sentrasi  CO 2 dan  suhu  berpengaruh  nyata (P<0,05)  terhadap  kandungan  kalsium  mak- roalga Halimeda sp.  Terjadi  penurunan  kan- dungan  kalsium  seiring  dengan  mening- katnya konsentrasi CO 2 dan suhu. Hasil kaji- an  berupa  ekspose  konsentrasi  CO 2 tinggi terhadap beberapa jenis makroalga  yakni: H. tuna,  H.  macroloba,  H.  opuntia,  dan  H. minima ditemukan  kerangka  mineralnya berupa  kristal  aragonit  semakin  menurun (Robbin et al , 2009; Ries et al , 2009; Sinutok et al. , 2011; Comeau et al ., 2013).
Gambar  3.  Rataan±SE  kandungan  klorofil  (mg.m -3 ) Halimeda sp  pada  peningkatan konsentrasi CO 2 dan suhu. Standar error dihitung dari ulangan sampel.
Gambar  4.  Rataan±SE  kandungan  klorofil  (mg.m -3 ) Halimeda sp  pada  peningkatan konsentrasi CO 2 dan suhu. Standar error dihitung dari ulangan sampel.
3.1.5. Jaringan Histopatologi
Pada  konsentrasi  385  ppm  CO 2 tidak terjadi  perubahan  pada  bag  cortex  zone begitu  pula  pada  bagian  medulla  zone,  kon- disi makroalga tersebut  masih  normal.    Pada konsentrasi  750  ppm  CO 2 terdapat  sedikit sporangial  cell  nekrotik,  thallus  cell  necrotic pada  bag  makroalga  dari  up  cell  dan  lower cell  yang mengindikasikan mulai  mengalami kerusakan. Pada konsentrasi 1.000 ppm CO 2 , ditemukan  banyak  sporangial  cell  necrotic (scn),  begitu  juga  thallus  cell  necrotic  (tcn) pada  bag  makroalga  dari  up  cell  (uc)  dan lower  cell  (lc)  yang  menunjukkan  terjadinya kerusakan (Gambar 5). Terjadinya kerusakan kerangka  sel  karena  meningkatnya  konsen- trasi  CO 2 yang  mengakibatkan  disolusi  Ca- CO 3 .  Hal  yang  sama  ditemukan  pada  jenis yang  lain  yakni: Lithophyllum  incrustan, Lithotamnium  corallioides,  dan  Lithotham- nion glassiale ketika diekspose pada konsen-
trasi  CO 2 melebihi  600  ppm,  maka  ditemu- kan  terjadi  pemutihan,  dinding  selnya  me- nipis, pertumbuhannya menurun, dan kerang- ka  mineralnya  berupa  kalsit  menurun  bah- kan  mengalami  kerusakan  (Noisette et  al ., 2013 dan Ragazzola et al ., 2012).

## 3.2. Pembahasan
Pada penelitian ini pertumbuhan total, pertumbuhan harian, dan pertumbuhan relatif Halimeda sp  tertinggi  pada  perlakuan  kon- sentrasi  385  ppm  CO 2 pada  suhu  30 o C  (lihat Gambar  2) , selanjutnya  menurun  dengan meningkatnya konsentrasi CO 2 dan suhu, hal ini  terjadi  karena  proses  peningkatan konsentrasi CO 2 yang mengakibatkan penurunan pH mengganggu proses metabolisme pada makroalga tersebut karena terjadinya  ketidakseimbangan  asam  basa dalam  struktur  sel.  Beberapa  penelitian sebelumnya yang memperlihatkan efek nega-
Gambar  5.  Histopatologi Halimeda sp:    A)  Normal,  tidak  ada  perubahan  bag  cortex    zone (bcz) dan bagian medulla zone (mz) normal;  B)  Ada sporangia cell necrotik (scn) juga thallus cell necrotik (tcn) mulai rusak : C) Banyak sporangia cell necrotik (scn) begitu juga thallus cell necrotik (tcn) pada bagian alga dari up cell (uc)  dan lower cell (lc) kerusakan sedang.
tif  dari acidification seperti  pada  species makroalga  (Israel et  al. ,  1999;  Israel  and Hophy,  2002;  Connel  and  Russell,  2010; Porzio et al. , 2010). Pertumbuhan makroalga menurun  oleh  peningkatan  level  CO 2 (Palacios  and  Zimmerman,  2007;  Hall- Spencer et  al .,  2008;  Eklof et  al .,  2012). Hasil analisis statitistik menunjukkan adanya pengaruh  perlakuan  dan  interaksinya  terha- dap  pertumbuhan  makroalga Halimeda sp (P<0,05).  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu menyebabkan  menurunnya  partumbuhan, kandungan  klorofil-a,  kandungan  kalsium dan  menyebabkan  malformasi  pada  jaringan histopatologi makroalga tersebut.
Pada beberapa penelitian sebelumnya tentang  kajian  efek  peningkatan  CO 2 terha- dap  makroalga  genus  Halimeda  ditemukan tanggapan  yang  beragam  (Hofmann  and Bischof,  2014;  Edmunds et  al .,  2013).  Na- mun,  secara  umum  ukuran  kristal  aragonit dalam  kerangka  menurun,  sedangkan  kepa- datan kristal meningkat pada pH lebih rendah dari 7,7 (Robbins et  al . 2009, Sinutok et  al ., 2011). Terdapat hasil kajian pada H. opuntia memperlihatkan  bahwa menurunnya  trans- port  elektron  dan  disolusi  pada  946  ppm
CO 2 ,  tapi    Hofmann et  al .  (2014)  menemu- kan  tidak  ada  efek  dari  peningkatan  CO 2 pada  transport  elektron  atau  laju  kalsifikasi pada H. opuntia yang diekspos sampai 1700 ppm CO 2 . Kandungan klorofil-a makroalga Halimeda sp  menurun dengan meningkatnya kon-sentrasi  karbondioksida  dan  suhu  (lihat Gambar  3),  hal  ini  menunjukkan  bahwa kemampuan  makroalga  tersebut  melakukan fotosintesa  dan  metabolisme  terpengaruh dengan  terjadinya  pengasaman  laut.  Sejalan dengan  hasil  penelitian  Porzio et  al. (2013) bahwa tidak hanya makroalga berkapur yang terganggu  dengan  terjadinya  pengasaman laut  namun  sekumpulan  komunitas  akan berubah  dengan  terjadinya  pengasaman  laut, hal  ini  mungkin  karena  kapasitas  reproduksi alga  (Porzio et  al., 2011)  atau  kemampuan fotosintesisnya (Porzio et  al., 2010)  tergang- gu  dengan  menurunnya  derajat    keasaman laut.  Selanjutnya  penjelasan  Barry  (2011) bahwa  konsekuensi  dari  tingginya  konsen- trasi CO 2 adalah menurunnya aktifitas enzim, terjadi  inefisiensi  fungsi  seluler  (seperti sintesa  protein),  terjadi  depresi  metabolik, bahkan pada organisme fitoplankton berpengaruh  terhadap  produksi  pigmen  sel
dan produktifitasnya. Selanjutnya hasil pene- litian Khairy et  al. (2014) bahwa kandungan total  protein,  karbohidrat  dan  lipid  pada fitoplankton Chaetoceros  gracilis menurun pada  konsentrasi  550-1.050  ppm  CO 2 . Sejalan  dengan  penemuan  Porzio et  al. (2013)  bahwa  ganggang  laut  menunjukkan respon  yang  berbeda  terhadap  pengasaman laut,  yang  mana  pada  penurunan  pH  tidak selalu  mendukung  organisme  fotosintetik laut.
Kandungan kalsium berhubungan erat dengan  proses  kalsifikasi  yang  membentuk kerangka kapur dari makroalga, pada peneli- tian ini terjadi penurunan kandungan kalsium (Ca)  dengan  meningkatnya  konsentrasi  CO 2 dan suhu. Pada beberapa penelitian sebelum- nya terjadi penurunan kandungan kristal ara- gonit  pada Padina  sp di  perairan  Papua Nugini  ketika  terkspose  konsentrasi  CO 2 tinggi (1.000 ppm) dengan pH 7,78 (Johnsen et  al .,  2012),  begitu  pula  pada  jenis  mak- roalga Porolithon  onkodes ketika  terekspos konsentrasi  CO 2 tinggi  (600  ppm;  pH  7,86) maka kristal aragonitnya turun 35% (Johnsen et  al .,  2014).  Hal  ini  berhubungan  dengan peningkatan  konsentrasi  CO 2 yang  menye- babkan  terjadinya  peleburan  kalsium  kar- bonat (CaCO 3 ) yang merupakan bahan utama pembentukan  kerangka  mineral  tersebut. Sebuah  hasil  metaanalisis  dimana  tersedia seluruh  data  eksperimen,  menunjukkan  bah- wa  kalsifikasi  adalah  proses  yang  paling sering  diobservasi  dengan  konsentrasi  CO 2 dengan  prediksi  masa  depan  (Kroeker et  al ., 2010).  Pengapuran  sangat  rentan  dengan terjadinya  pengasaman  laut  (Royal  Society, 2005;  Kleypas et  al. ,  2006).  Perubahan kalsifikasi  berpengaruh  bukan  hanya  pada individu  organisme  seperti  kerang  dan  tiram (Gazeau et  al. ,  2007;  Miller et  al. ,  2009), makroalga  berkapur  (Martin  dan  Gattuso, 2009),  bahkan  ekosistem  juga  bergantung pada kalsifikasi seperti terumbu karang tropis (Kleypas et  al. ,  2006;  Silverman et  al ., 2007), dan karang air dingin (Guinotte et al. , 2006; Turley et al ., 2007; Maier et al. , 2009) serta berpengaruh pada plankton mikroskopis
berkapur e.g. coccolithophor (Riebesell et al. , 2000),  foraminifera  (Bijma et  al. ,  2002;  de Moel et al. , 2009), dan pteropods (Comeau et al ., 2010).
Hasil  analisis  histopatologi  menun- jukkan terjadinya kerusakan pada struktur sel makroalga  ketika  diinjeksi  750  ppm  dan 1.000 ppm CO 2 terutama pada suhu 32°C dan 34°C  (Gambar  4),  hal  ini  terjadi  karena berhubungan  dengan  konsentrasi  ion  karbo- nat  yang  semakin  menurun  seiring  dengan meningkatnya  konsentrasi  CO 2, sesuai  hasil penelitian  Kuffner et al. (2007), bahwa  ting- kat  kalsifikasi  dan  tingkat  rekruitmen  menu- run  pada  keadaan  saturasi  rendah  karbonat (CO 3 2- ) saat terjadi peningkatan CO 2 . Bahkan terjadi  kerusakan  kerangka  sel  makroalga Halimeda sp  dengan  menigkatnya  konsen- trasi  CO 2 dan  suhu,  hal  ini  terjadi  karena peningkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  me- nyebabkan  perubahan  kesetimbangan  asam basa  yang  berpengaruh  terhadap  kejenuhan CaCO 3 .  Barry et  al .  (2002)  menjelaskan bahwa  peningkatan  konsentrasi  CO 2 dapat meningkatkan  peleburan  kalsium  karbonat (CaCO 3 ) . Kondisi tersebut berpengaruh nega- tif serta mengakibatkan terjadinya kerusakan jaringan  sel Halimeda sp,  sebagaimana  Sei- bel et  al. (2001)  menjelaskan  bahwa  asam- basa  yang  tidak  seimbang  dapat  memicu rusaknya  komponen  eksoskeleton  (seperti cangkang calcareas ),  penimbunan  hasil metabolisme,  aktivitas  menurun,  lemah  aki- bat  gangguan  proses  transport  oksigen,  dan jika berlangsung terus menerus akan menye- babkan kematian.
Hasil  kajian  Sinutok et  al. (2012) yang  mengggabungkan  peningkatan  paparan suhu dan CO 2 terhadap spesies Halimeda sp . Terjadi  penurunan  kalsifikasi,  fotosintesis dan  perubahan  dalam  lingkungan  mikro  di sekitar  segmen  alga  dan  terjadi  penurunan kinerja  fisiologis,  terjadi  penurunan  50-70% dalam efisiensi fotokimia, penurunan 70-80% dalam produksi O 2 dan pengurangan tiga kali lipat dalam tingkat kalsifikasi pada peningkatan  CO 2 dan  perlakuan  suhu  yang tinggi. Terdapat pula efek tidak langsung dari
kenaikan  suhu  atau  CO 2 pada  herbivora  laut yang mungkin timbul jika stres ini mengubah komposisi  alga  atau  jaringan  rumput  laut sebagai  makanan  sehingga  merubah  kualitas komposisi  makanannya.  Suhu  merupakan faktor  penentu  penting  serapan  hara  pada produsen  utama  di  laut  (Raven  dan  Geider, 1988)  dan  dapat  mengubah  kandungan  nit- rogen pada jaringan alga.
Faktor  abiotik  sangat  berpengaruh terhadap  jenis  makroalga  berkapur  dan  aso- siasi  komunitasnya  terhadap  lingkungan masa  depannya,  menjadi  perhatian  besar dalam  dekade  terakhir  (Sinutok et  al., 2011; Martin et  al .,  2013;  Olabarria et  al .,  2013; Reyes-Nivia et  al .,  2014).  Sinutok et  al . (2011) menemukan bahwa peningkatan suhu berimplikasi negatif  terhadap Halimeda spp. Olabarria et  al .  (2013)  melaporkan  bahwa kombinasi  peningkatan  CO 2 dan  suhu  secara drastis  menurunkan  produktivitas  makroalga berkapur dan tidak berkapur yang tumbuh di daerah  batu  karang.  Martin et  al. (2013) menemukan  bahwa  kalsifikasi  pada Litho- phyllum  cabiochae terstimulasi  dengan  me- ningkatnya suhu pada kondisi CO 2 sekarang, tapi  kombinasi  suhu  dan  CO 2 berdampak negatif terhadap laju kalsifikasi.

## IV. KESIMPULAN
Peningkatan  konsentrasi  karbondiok- sida  dan  suhu  berpengaruh  negatif  terhadap pertumbuhan  total,  harian,  dan  relatif,  mak- roalga  berkapur Halimeda sp.  Laju  pertum- buhan tertinggi  terstimulasi  pada  konsentrasi CO 2 dan  suhu  kondisi  ambien,  namun  efek kombinasi  meningkatnya  konsentrasi  CO 2 dan suhu pada kondisi ke depan menghambat produktifitas  makroalga  tersebut.  Jaringan histopatologi  makroalga  tropik Halimeda sp mengalami  malformasi,  kandungan  klorofil dan  kalsium  menurun  pada  kombinasi  peni- ngkatan  konsentrasi  CO 2 dan  suhu  pada kondisi  ke  depan,  sehingga  produktivitas makroalga  tersebut  tidak  maksimal  pada kondisi tersebut.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada teknisi laboratorium Biologi Plankton dan  Kualitas  Air  pada  Balai  Penelitian  dan Pengembangan  Budidaya  Air  Payau  Maros, yang  telah  membantu  menganalisa  sampel, drh.Yuni  yang  telah  membantu  menganalisa jaringan  histopatologi,  teknisi  pada  Jurusan Produksi  Ternak  Fakultas  Peternakan  Uni- versitas  Hasanuddin  yang  telah  membantu menganalisa  kadar  kalsiumnya.  Penelitian berlangsung  atas  dukungan  dana  penelitian kolaborasi  antara  Essex  University  United Kingdom dengan Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan  Universitas  Hasanuddin,  Makas- sar.

## DAFTAR PUSTAKA
Adey,  W.H.  1998.  Coral  reefs:  algal structured  and  mediated  ecosystems in shallow, turbulent, alkaline waters. J. Phycol ,. 34:393-406.
American  Public  Health  Association  (AP- HA).  2005.  Standard  methods  for  the examination of water and wastewater. APHA  AWWA  (American  Water Work  Organization)  and  WPCF (Water Pollution Control Federation). 21 th edition, Washington D.C.1368p.
Barry,  J.,  B.A.  Seibel,  J.  Drazen,  M.  Tam- burri,  C.  Lovera,  and  P.  Brewer. 2002.  Field  experiments  on  direct ocean CO 2 sequestration: the response of  deep-sea  faunal  assemblages  to CO 2 injection  at  3200  m  off  Central California. Eos  Trans.  AGU 83,
OS51F-02.
Barry,  J.P.,  S.  Widdicombe,  and  J.M.  Hall- Spencer.  2011.  Effects  of  ocean  aci- dification  on  marine  biodiversity  and ecosystem  function. In: Gattuso  J.P. and L. Hansson ( eds. ). Ocean acidifi- cation.  Oxford  University  Press. Oxford. 192-209pp.
Beaufort,  L.,  I.  Probert,  T.  de  Garidel- Thoron,  E.M.  Bendif,  D.  Ruiz-Pino,
N.  Metzl,  C.  Goyet,  N.  Buchet,  P.  Coupel, and  M.  Grelaud.  2011.  Sensitivity  of coccolithophores  to  carbonate  che- mistry and ocean acidification.
Nature ,  476:80-83.
Bijma, J., B. Honisch, and R.E. Zeebe. 2002. The  impact  of  the  ocean  carbonate chemistry  on  living  foraminiferal shell weight: comment on “carbonate ion  concentration  in  glacial-age  deep waters of the caribbean sea” by W. S. Broecker  and  E.  Clark. Geochemical, Geophysic, Geosystem , 3:1064-1264.
Borowitzka,  M.A.  and  A.W.D.  Larkum.
1977.  Calcification  in  the  green  alga Hali-meda .  I.  An  ultrastructure  study of  thallus  development. J  Phycol ., 13:6-16
Caldeira, K. and  W.E. Wickett. 2005. Ocean model predictions of chemistry changes  from  carbon  dioxide  emis- sions to the atmosphere and ocean. J. Geophys. Res. Oceans, 110:C09S4 Comeau,  S.,  R.  Jeffree,  J.  Teyssie,  and  J. Gattuso.  2010.  Responses  of  the arctic  pteropod Limacina  helicina to projected  future  environmental  con- ditions. PLoS One , 5 (6):11362. Connell,  S.D.  and  B.D.  Russell.  2010.  The direct  effects  of  increasing  CO 2 and temperature  on  non-calcifying  orga- nisms:  increasing  the  potential  for phase  shifts  in  kelp  forests. Proc.  R. Soc. B. , 277(1686):1409–1415.
Delille,  B.,  J.  Harlay,    I.  Zondervan,  S. Jacquet,  L.  Chou,  R.  Wollast,  G.J. Richard, R.G.J.  Bellerby, M. Franki- gnoulle,  and  A.V.  Borges.  2005. Response  of  primary  production  and calcification  to  changes  of  pCO 2 during  experimental  blooms  of  the coccolithophorid Emiliania  huxleyi . Global  Biogeochemical  Cycles, 19: GB2023.
de Moel, H., G. M. Ganssen, F.J.C.  Peeters,
S.J.A.  Jung,  D.  Kroon,  G.J.A.  Brum- mer,  and  R.E.  Zeebe.2009.  Planktic foraminiferal  shell  thinning  in  the
Arabian  sea  due  to  anthropogenic ocean  acidification. Biogeo-sciences , 6(9):1917-1925.
Dijoux,  L.,  H.  Verbruggen,  L.  Mattio,  N. Duong, and  C.  Payri. 2012.  Diversity of Halimeda (Bryopsidales,  Chloro- phyta) in New Caledonia: a combined morphological and molecular study. J Phycol., 48:1465-1481.
Doney, S.C., V.J. Fabry, R.A. Feely, and J.A. Kleypas.  2009.  Ocean  acidification: the other CO 2 problem. Annual  Rev. Marine  Science, 1:169-192.
Doney,  S.C.,  M.  Ruckelshaus,    J.E.  Duffy, J.P.  Barry,  F.  Chan,  C.A.  English, H.M.  Galindo,  J.M.  Grebmeier,  A.B. Hollowed, N. Knowlton, J. Polovina., N.N.  Rabalais,  W.J.  Sydeman,  and L.D.  Talley.    2012.    Climate  change impacts on marine ecosystems. Annu- al Report Marine  Science , 4:11-37. Eklöf,  J.,  Alsterberg,  J.  Havenhand,  K. Sundbäck,  H.  Wood,  and  L.  Gam- feldt.  2012.  Experimental  climate change  weakens  the  insurance  effect of  biodiversity. Ecology    Letter,  15 : 864-872.
Feely,  R.A.,  S.R.  Alin,  J.  Newton,  C.L. Sabine,  M.  Warner,  A.  Devol,  C. Krembs,  and  C.  Maloy.  2010.    The combined  effects  of  ocean  acidify- cation, mixing, and respiration on pH and  carbonate  saturation  in  an urbanized estuary. Estuarine, Coastal and Shelf Science , 88(4):442-449.
Fernández,  P.A.,  M.Y.  Roleda,  and  C.L. Hurd.  2015.  Effects  of  ocean  acidi- fication  on  the  photosynthetic  perfor- mance,  carbonic  anhydrase  activity and  growth  of  the  giant  kelp  Mac- rocystis  pyrifera. Photosynthesis  Re- search , 124:293-304.
Gao  K.,  Z.  Ruan,  V.  E.  Villafañe,  J.  P. Gattuso,  and  E.  W.  Helbling.  2009. Ocean  acidification  exacerbates  the effect  of  uv  radiation  on  the  calci- fying  phytoplankter E.  huxleyi . Lim- nology Oceanography, 54:1855-1862
Gao,  K.  and  Y.  Zheng.  2010.  Combined effects  of  ocean  acidification  and solar  uv  radiation  on  photosynthesis, growth,  pigmentation  and  calcify- cation  of  the  coralline  alga  corallina sessilis (Rhodophyta). Global Change Biology, 16:2388-2398.
Gattuso, J.P., M. Frankignoulle, I. Bourge, S.
Romaine,  and  R.W.  Buddemeier. 1998.  Effect  of  calcium  carbonate saturation  of  seawater  on  coral  cal- cifycation. Global Planet Change , 18, 37-46.
Guan,  W.  and  K.  Gao.  2010.  Enhanced calcification  ameliorates  the  negative effects  of  uv  radiation  on  photo- synthesis  in  the  calcifying  phyto- plankter E.  huxleyi . China.  Science. Bulletin , 55:588-593
Guinotte,  J.  M.,  J.  Orr,  S.  Cairns,  A. Freiwald,  L.  Morgan,  and R.  George. 2006. Will human-induced changes in seawater  chemistry  alter  the  distribu- tion  of  deep-sea  scleractinian  corals. Ecology  Environmental, 4(3):141- 146.
Hall-Spencer,  J.,  R.  Rodolfo-Metalpa,  S. Martin,  E.  Ransome,  M.  Fine,  and  S. M.  Turner.  2008.  Volcanic  carbon dioxide vents show ecosystem effects of  ocean  acidification. Nature ,  454 (7200): 96-99.
Hofmann, L.C. and K. Bischof. 2014.  Ocean acidification  effects  on  calcifying macroalgae.  Aquat Biol, 22:261-279.
Houghton,  J.T.  2001.  Climate  change  2001: the  Scientific  Basis.  Cambridge  Uni- versity Press. Cambridge. 881p.
Iglesias-Rodriguez,  M.D.,  P.R.  Halloran,  R.- E.M. Rickaby, I.R. Hall, E. Colmenero-Hidalgo,  J.R.  Gittins,  D. R.H.  Green,  T.  Tyrrell,  S.  J.  Gibbs, and  P.  von  Dassow.  2008.  Phyto- plankton  calcification  in  a  high-CO 2 World. Science, 320:336-340.
(IPCC)  Intergovernmental  Panel  on  Climate Change.  2007.  Climate  change  2007: the  fourth  assessment  report  of  the
Cambridge  University  Press.  Cam- bridge. 344p.
Israel, A., S. Z. Katz, J. E. Dubinsky, Merrill, and  M.  Friedlander.  1999.  Photo- synthetic  inorganic  carbon  utilization and  growth  of Porphyra  linearis (Rhodophyta). J.  Appl.  Phycology. , 11:447-453.
Israel,  A.  and  M.  Hophy.  2002.  Growth, photosynthetic  properties  and  rubisco activities  and  amounts  of  marine macroalgae  grown  under  current  and elevated  seawater  CO 2 concentra- tions. Global Change Biology , 8:831- 840.
Khairy,    H.M.,    N.A.  Shaltout.,  M.F.  El- Naggar,  N.A.  El-Naggar.  2014.  Im- pact  of  elevated  CO 2 concentrations on  the  growth  and  ultrastructure  of non-calcifying  marine  diatom  ( Chae- toceros  gracilis F.Schu¨tt). Egyptian J.of Aquatic Research. http:// dx. doi. org/ 10 1016/j.ejar.2014.08.002
Kleypas,  J.A.,  R.A.  Feely,  V.J.  Fabry,  C. Langdon,  C.L.  Sabine,  L.L.  Robbins. 2006.  Impacts  of  ocean  acidification on  coral  reefs  and  other  marine calcifiers: a guide for future research, report  of  a  workshop  held  18–20 April  2005.  St  Petersburg,  FL, sponsored  by  NSF,  NOAA  and  the U. S.,Geological Survey , 88p.
Koch,  M.,    G.  Bowes,  C.  Ross,  and  X.
Zhang.  2013.    Climate  change  and ocean  acidification  effects  on  seag- rasses  and  marine  macroalgae. Global Change  Biology ,  19:103–132,  doi: 10.1111/j.1365-2486. 2012. 02791.x Kroeker,  K.J.,  R.L.  Kordas,  R.N.  Crim,  and G.G.  Singh.  2010.    Meta-analysis  re- veals  negative  yet  variable  effects  of ocean  acidification  on  marine  orga- nisms. Ecology  Letter. ,  13(11):1419- 1434.
Kuffner,  I.B.,  Andersson,  A.J,  Jokiel,  P.L.,
Rodgers, K.S., Mackenzie, F.T. 2007. Decreased  abundance  of  crustose coralline  algae  due  to  ocean  acidi-
fication. Nature  Geoscience, 1:114- 117.
Lee,  D.  and  S.J.  Carpenter.  2001.  Isotopic disequilibrium  in  marine  calcareous algae. Chemical  Geology ,  172:307- 332
Langer,  G.,  M.  Geisen,  K.H.  Baumann,  J. Klas,    U.  Riebesell,  S.  Thoms,  and J.R.  Young.  2006.  Species-specific responses  of  calcifying  algae  to changing  seawater  carbonate  chemis- try. Geochemic,    Geophysic,  Geosys- tem, 7:223-312.
Langer,  G.,  G.  Nehrke,  I.  L.  Z.  Probert,  and P.  Ziveri.  2009.  Strain-specific  res- ponses  of e.huxleyi to  changing  sea- water  carbonate  chemistry. Biogeo- sciences , 6:2637–2646
Maier,  C.,  J.  Hegeman,  M.  G.  Weinbauer, and  J. P.  Gattuso.  2009. Calcification of  the  cold-water  coral lophelia  per- tusa under  ambient  and  reduced  pH. Biogeosciences, 6:1671-1680.
Martin,  S.,  S.  Cohu,  C.  Vignot,  G.  Zimmer- man,  and  J.P.  Gattuso.  2013.  One- year  experiment  on  the  physiological response of the Mediterranean crustose  coralline  alga, Lithophyllum cabiochae ,  to  elevated  pCO2  and temperature. Ecol Evol, 3:676-693 Meehl,  G.A.,  T.F.  Stocker,  W.D.  Collins,  P. Friedlingstein, A.T. Gaye, J.M. Gregory,  A.  Kitoh,  R.  Knutti,  J.M. Murphy, A. Noda, S.C.B. Raper, I.G. Watterson,  A.J.    Weaver,  and  Z.C.
Zhao.  2007.  Global  climate  projec- tions.  Climate  Change: the  physical science  basis.  Contribution  of  work- ing  group  I  to  the  fourth  assessment report  of  the  IPPC.  Cambridge University. Cambridge. 881p.
Nelson,  W.A.  2009.  Calcified  macroalgae critical  to  coastal  ecosystems  and vulnerable  to  change:  a  review. Mar Freshw Res, 60:787-801
Noisette,  F.,  H.  Egilsdottir,  D.  Davoult,  and
S.  Martin.  2013.  Physiological  res- ponses  of  three  temperate  coralline
algae  from  contrasting  habitats  to near-future ocean acidification. J. Exp Mar Biol Ecol , 448:179−187 Olabarria,  C.,  F.  Arenas,  R.M.  Viejo,  I. Gestoso.  2013.  Response  of  macro- algal  assemblages  from  rockpools  to climate  change:  effects  of  persistent increase  in  temperature  and  CO2. Oikos 122:1065-1079
Orr,  J.  C.  2005.  Anthropogenic  ocean  acidi- fication  over  the  twenty-first  century and  its  impact  on  calcifying  orga- nisms. Nature ,  437:681-686.
Pajusalu,  L.  2013.  Results  of  laboratory  and field  experiments  of  the  direct  effect of  increasing  CO 2 on  net  primary production  of  macroalgal  species  in brackish-  ecosystems. Proceedings  of the  Estonian  Academy  of  Sciences ,
62(2):148-154 doi: 10.3176.
Pajusalu,  L.,  G.  Martin,  A.  Pollumae,  K.
Torn,  and  T.  Paalme.  2015.  Direct effects  of  increased  CO 2 concentra- tions  in  seawater  on  the  net  primary production  of  charophytes  in  a  shal- low,  coastal,  brackish-water  eco- system. Boreal  Environment  Re- search, 20:413-422.
Palacios,  S.L.  and  R.C.  Zimmerman.  2007. Response  of  eelgrass Zostera  marina to  CO2  enrichment:  possible  impacts of  climate  change  and  potential  for remediation  of  coastal  habitats. Ma- rine Ecology Progress Series, 344:1-
13.
Porzio,  L.,  M.  Lorenti,C.  Arena,  M.C.  Buia.
2010. Risposta fotosintetica di alcune specie  acroalgali  in  ambiente  acidi- ficato.  In:  Bottarin  R,  Schirpke  U, Tappeiner U ( eds. ) L’uomo nell’ eco- sistema:  una  relazione  bilanciata? Eurac Book , 56:181–187.
Porzio,  L.,  M.C.  Buia,  and  J.M.  Hall- Spencer.  2011.  Effects  of  ocean acidification  on  macroalgal  commu- nities. J.  Experimental  Marine  Biolo- gy  Ecology , 400:278-287.
Porzio,  L.,  S.L.  Garrard,  and  M.C.  Buia. 2013.  The  effect  of  ocean  acidi- fication  on  early  algal  colonization stages  at  natural  CO 2 vents. Marine Biology , doi 10.1007/s27-013-2251-3.
Raven,  J.A.,  and  R.J.  Geider.  1988.  Tempe- rature  and  algal  growth. New  Phy- tology , 110:441-461.
Reyes-Nivia  C,  Diaz-Pulido  G,  Dove  S (2014)  Relative  roles  of  endolithic algae  and  carbonate  chemistry  varia- bility  in  the  skeletal  dissolution  of crustose  coralline  algae. Biogeosci Discuss .,11:2993-3021
Riebesell,  U.,  I.  Zondervan,  B.  Rost,  P.D. Tortell,  R.E.  Zeebe  and  F.M.M. Morel. 2000. Reduced calcification of marine  plankton  in  response  to  in- creased  atmospheric  CO 2 . Nature , 407 : 364-367.
Royal Society. 2005. Ocean acidification due to increasing atmospheric carbon dio- xide. London: The Royal Society. 223 pp.
Sabine,  C.L.,  R.A.  Feely,  N  Gruber,  R.M. Key,  K.  Lee,  J.L.  Bullister,  R. Wannin-khof,  C.S.  Wong,  D.W. Wallace,  and  B.  Tilbrook.  2004.  The oceanic  sink  for  anthropogenic  CO 2 . Science, 305:367-371.
Seibel, B. A. and P.J. Walsh. 2001. Potential impacts  of CO 2 injection on deep-sea biota. Science, 294:319-320. Shi,  D.,  Y.  Xu,  and  F.  M.  M.  Morel.  2009. Effects  of  the  pH/pCO 2 control  me- thod on medium chemistry and phyto- plankton  growth. Biogeosciences, 6: 1199-1207.
Silverman,  J.,  B.  Lazar,  and  J.  Erez.  2007. Effect  of  aragonite  saturation,  tempe- rature,  and  nutrients  on  the  com- munity calcification rate of coral reef.
J.Geo.Research ,112:1-14.
Sinutok,  S.,  R.  Hill.,  M.  A.  Doblin, R.Wuhrer,  and  P.  J.  Ralph.  2011. Warmer more acidic conditions cause decreased  productivity  and  calcifyca- tion in subtropical coral reef sediment welling  calcifiers. Limnology  Ocea- nography, 56:1200-1212.
Steel,  R.G.D.  and  Torrie.  1991.  Principles and  procedures  of  statistics.  Mc Graw-Hill  Book  Company.  London. 487p.
Sudarmadji,  S.,  B.  Haryono,  dan  Suhardi. 2010.  Prosedur  analisa  untuk  bahan makanan  dan  pertanian.  Liberty. Yogjakarta. 324hlm.
Turley,  C.M.,J.  M.  Roberts,  and  J.  M.
Guinotte.  2007.  Corals  in  deepwater: will  the  unseen  hand  of  ocean  acidi- fication  destroy  coldwater  ecosys- tems. Coral Reefs ,  26:445-448.
Verbruggen,  H.,  W.H.C.F.  Kooistra.  2004. Morphological  characterization  of line-ages  within  the  calcified  tropical seaweed  genus Halimeda (Bryo- psidales,  Chlorophyta). J.  Eur.  Phy- col, 39:213-228
Vogel,  N.,  K.E.  Fabricius,  J.  Strahl,  S.H.C.
Noonan,  C.  Wild,  and  S.  Uthicke. 2015.  Calcareous  green  alga Halime- da tolerates ocean acidification condi- tions at tropical carbon seeps. Limno- logy and Oceanography, 60:263-275. Zondervan,  I.,  B.  Rost,  U.  Riebesell.  2002.
Effect  of  CO 2 concentration  on  the PIC/POC ratio in the coccolithophore E.  huxleyi grown  under  light-limiting conditions  and  different  daylengths. J.  Experiment  Marine  Biology  Eco- logy, 272:55-70.
Diterima : 26 Oktober 2015 Direview : 6 Desember 2015 Disetujui : 28 Desember 2015