## DAMPAK  VOLUME DARAH DALAM TABUNG K
2 EDTA DENGAN HASIL JUMLAH LEUKOSIT
Oleh Victoria Ire Tominik,M.Kes Dosen Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Katolik Musi Charitas Palembang
Email : tominikvictoriaire@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan: Salah  satu  aspek  pre  analitik  yang  dapat  mempengaruhi  hasil pemeriksaan  yaitu  perbandingan  antara  volume  darah  dengan  antikoagulan. Volume  darah  kurang  dari  jumlah  antikoagulan  akan  menyebabkan  Leukosit mengkerut dan volume darah berlebih dapat menyebabkan darah membeku . Metode: Penelitian  ini  bersifat  pre  eksperimen  dengan static  group  comparison design menggunakan teknik total sampling . Subjek penelitian berjumlah 34 orang warga  RT  57  RW  13  Kelurahan  Kebun  Bunga  Kecamatan  Sukarami  Palembang yang berumur 40-50 tahun. Setiap subjek penelitian dilakukan pengambilan darah sebanyak  3  mL,  kemudian  darah  tersebut  dibagi  menjadi  2  kelompok  yaitu kelompok 1 (0,5 mL darah dalam tabung K 2 EDTA 2 mL) dan kelompok 2 (2 mL darah  dalam  tabung  K 2 EDTA  2  mL).  Sampel  darah  kemudian  diperiksa menggunakan alat Sysmex XS-800i.
Hasil: Hasil rerata pemeriksaan jumlah  leukosit antara volume darah 0,5 mL dan 2 mL dengan K 2 EDTA mempunyai perbedaan sebanyak 2%. Kesimpulan: berdasarkan  hasil  pengujian  statistik  uji Wilcoxon  Sign  Rank diperoleh  p=0,01<0,05  menunjukkan  adanya  perbedaan  jumlah  leukosit  antara volume darah 0,5 mL dan 2 mL dalam tabung K 2 EDTA.
Kata kunci : pre analitik, volume darah, K 2 EDTA.

## PENDAHULUAN
Menurut PerMenKes No 411/Menkes/Per/III/2010, hasil pemeriksaan laboratorium harus akurat,  tepat  dan  dapat  dipercaya. Salah  satu  pemeriksaan  darah  yang sering dilakukan adalah pemeriksaan jumlah leukosit. Pemeriksaan leukosit dilakukan untuk mengetahui kelainan  sel  darah  putih  yang bertanggung jawab terhadap imunitas tubuh,  evaluasi  infeksi  bakteri  dan virus,  proses  metabolik  toksik  dan
diagnosis  keadaan  Leukimia.    Nilai Normal : 4,80-10,8 (103/µl). Ada  beberapa  jenis  EDTA namun jenis EDTA yang direkomendasikan oleh World Health Organization (WHO) ,  International
Council for Standardization in
Hematology (ICSH) dan Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) untuk pemeriksaan hematologi adalah tabung vacutainer adalah K 2 EDTA (WHO, 2002; Patel, 2009).  Konsentrasi  K 2 EDTA  yang
direkomendasi  oleh  BD vacuitaner company yaitu  1,8  mg/mL  (Becton Dickinson, 2014). Dalam proses melakukan penampungan  darah  maka  volume darah  yang  dimasukkan  ke  dalam tabung  harus  sesuai  dengan  volume yang  tertera  pada  tabung vacutainer tersebut.  Apabila  volume  darah kurang  atau  berlebih  dari  volume yang  ditunjukkan  pada  batas  tabung vacutainer maka hal tersebut berpotensi mempengaruhi keakuratan hasil  pemeriksaan  namun  kenyataan di  lapangan  karena kondisi  – kondisi tertentu  darah  yang  didapat  kadang tidak  mencukupi  sehingga  volume darah  tersebut  tidak  sesuai  dengan yang seharusnya.
Efek  yang  akan  terjadi  bila volume  darah  yang  dimasukkan  ke dalam tabung vacutainer kurang dari jumlah  antikoagulan  yang  terdapat didalam  tabung vacutainer tersebut hal  ini  akan  mengakibatkan  terjadi hipertonisitas terhadap darah. Hipertonisitas  yang  tinggi    akan menyebabkan  cairan  yang  terdapat dalam sel akan keluar untuk mempertahankan  tekanan  osmotik. Akibat cairan yang keluar menyebabkan  sel  darah  mengalami pengerutan  (krenasi)  dan  terjadi hemodilusi yang mengakibatkan konsentrasi  cairan  plasma  lebih tinggi  dibandingkan  konsentrasi  sel darah sehingga kadar leukosit mengalami  penurunan  (Novel et  al , 2012). Apabila  volume  darah  berlebih dibandingkan dengan jumlah antikoagulan  dalam  tabung  dapat menyebabkan darah mengalami
koagulasi (membeku)  karena  darah
tidak seluruhnya dihambat dari faktor
pembekuan  (Patel,  2009;  Becton Dickinson, 2011; Riswanto, 2013).
Menurut penelitian yang dilakukan  oleh  Dian  Fitriani  (2013) di  Semarang  tentang  Perbedaan variasi  volume  darah  dalam  tabung vacutainer K 3 EDTA terhadap jumlah trtrombosit. Hasil penelitian memberikan kesimpulan bahwa tidak terdapat  perbedaan  variasi  volume darah pada tabung vacutainer K 3 EDTA terhadap jumlah trombosit. Berdasarkan  latar  belakang  tersebut, penulis tertarik melakukan penelitian mengenai  hubungan  volume  darah dalam  tabung  K 2 EDTA  dengan jumlah  leukosit  dalam  darah  dengan pada warga RT 57 RW 13 Kelurahan Kebun  Bunga  Kecamatan  Sukarami
Palembang.  Tujuan  Penelitian  ini adalah mengetahui hubungan volume darah dalam tabung
K 2 EDTA  dengan  jumlah  leukosit pada warga RT 57 RW 13 Kelurahan Kebun  Bunga  Kecamatan  Sukarami Palembang.

## SUBJEK DAN METODE
Penelitian  ini  telah  dilakukan
di Balai Besar Laboratorium Kesehatan Palembang. Subjek penelitian  warga  RT  57  RW  13
Kelurahan  Kebun  Bunga  Kecamatan Sukarami  Palembang.  Subjek  dipilih berdasarkan  kriteria  inklusi  dengan teknik  pengambilan  sampel  yaitu total sampling . Dari 35 orang jumlah populasi  yang  yang  terpilih,  terpilih 34  orang  yang  memenuhi  kriteria inklusi  dan  ada  1  orang  yang  tidak terpilih  dikarenakan  sedang  sakit. Berdasarkan  jenis  kelamin  terdiri dari  15  orang  laki-laki  dan  19  orang perempuan. Pada penelitian ini, antikoagulan  yang  digunakan  adalah
tabung vacutainer K 2 EDTA  volume 2  mL.  Metode  pemeriksaan  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah metode automatic menggunakan  alat Sysmex  XS-800i.  Metode automatic sering  digunakan  karena  lebih  cepat dan  mudah  dibandingkan  dengan metode  manual  menggunakan  bilik hitung  improved  neubauer  yang membutuhkan waktu yang lebih lama dalam memeriksa sampel.
Metode  penelitian  ini  bersifat pre  eksperimen  dengan static  group comparison  design menggunakan teknik  pengambilan  sampel  yaitu teknik total  sampling. Penelitian  ini dilakukan untuk mengetahui hubungan  volume darah 0,5 mL dan 0,2  mL  dalam  tabung  K 2 EDTA dengan jumlah leukosit.
Data  disajikan  dalam  bentuk tabel  dan  histogram.  Data  dianalisis dengan  komputer  dengan  program statistic for  windows versi 16.0  yang selanjutnya  dilakukan  uji  normalitas
Uji normalitas yang dilakukan adalah Kolmogorov – smirnov dan diperoleh hasil  data  berdistribusi  tidak  normal. Selanjutnya  dilakukan  uji  korelasi menggunakan  uji Wilcoxon  Sign Rank .    Hasil  uji  statistis  diperoleh  l nilai  probabilitas  (sig)  hitung  0,01  < dari  0,05  yang  artinya  bahwa  ada perbedaan  antara  volume  darah dengan jumlah leukosit.

## HASIL PENELITIAN
Hasil pemeriksaan jumlah leukosit  didapatkan  darah  K 2 EDTA
0,5  mL  mempunyai  rerata  sebesar
4,87 x 10 6 /µL dengan standar deviasi yaitu 0,70. Jumlah Leukosit didapatkan  dalam  darah  K 2 EDTA  2 mL mempunyai rerata sebesar 4,89 x 10 6 /µL dengan  standar deviasi  yaitu 0,68.  Hasil  pemeriksaan  Leukosit disajikan  pada  tabel  2  dan  gambar  1 sebagai berikut :

## Tabel 1. Karakteristik Subjek Berdasarkan Jenis Kelamin
No.   Jenis Kelamin Jumlah Persentase 1 Laki-laki 15 44,1 % 2 Perempuan 19 55,9% Total 34 100%
-
Tabel 2. Hasil pemeriksaan Leukosit Hasil Pemeriksaan Sampel Volume Darah (mL) Mean SD p value 0,5 mL 2 mL 0,5 mL 2 mL 0,01 Leukosit (x 10 6 /µL darah) 4,87 4,89 0,70 0,68
Gambar 1. Hasil Pemeriksaan Leukosit antara volume darah 0,5 mL dan 2 mL terhadap K 2 EDTA.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  tabel  2.  Hasil
penelitian pemeriksaan leukosit didapatkan terjadi penurunan sebanyak  2%  antara  jumlah  leukosit dengan darah K 2 EDTA 0,5 mL dan 2 mL.
Menurut  Novel et  al (2012) dan  Wirawan  R  (2004),  terjadinya penuruanan jumlah leukosit disebabkan karena adanya hemodilusi yang terjadi akibat perpindahan  cairan  dari  dalam  sel keluar  dari  sel  tersebut  untuk mempertahankan  tekanan  osmotik sehingga  konsentrasi  cairan  plasma lebih tinggi dibandingkan konsentrasi sel (lebih encer). Dari hasil penelitian didapatkan adanya perbedaan jumlah leukosit antara darah yang sebanding
(2  mL)  dan  darah  yang  tidak sebanding (0,5 mL) dengan K 2 EDTA volume  2  mL  dimana p =  0,01  < 0,025.  Hasil  penelitian  ini  tidak sejalan dengan penelitian yang dilakukan  oleh  Fasakin  KA et  al
(2014)  di  Nigeria  dengan  jumlah sampel  15  orang  pasien  retroviral. Sampel  diperiksa  menggunakan  alat
Sysmex  KX-21N.  Hasil  penelitian menunjukkan tidak terdapat
perbedaan  jumlah  leukosit  pada
volume  1  mL  dan  4  mL  dalam tabung K 2 EDTA volume 4 mL.

## SIMPULAN
Berdasarkan penelitian ini
dapat  disimpulkan  bahwa  terdapat perbedaan  jumlah  leukosit  antara volume  darah  0,5  mL  dan  2  mL dalam  tabung  K 2 EDTA.  Volume darah yang tidak sebanding (0,5 mL) dengan K 2 EDTA dapat
menyebabkan hasil pemeriksaan leukosit tidak akurat.

## SARAN
Untuk  petugas  laboratorium, sebaiknya pada proses penampungan darah  dalam  tabung vacutainer K 2 EDTA, volume darah yang dimasukkan  ke  dalam  tabung  harus sesuai  dengan  volume  yang  tertera pada  tabung  vacutainer  K 2 EDTA sehingga  hasil  pemeriksaan  yang diperoleh  tepat,  akurat  dan  dapat dipercaya.

## DAFTAR PUSTAKA
Becton  Dickinson  (2011). What  is the  acceptable  minimum  draw volume for BD Vacutainer® Tubes ?.  TechTalk;  Vol.  10  No 2. Author: Lena Arzoumanian.
Becton Dickinson (2014). BD Vacutainer®  Plastic  K 2 EDTA Tubes.
http://www.krackeler.com/catal og/product/2752/BD- Vacutainer-Plastic-K2EDTA- Tubes.  Diakses  tanggal  26 November 2015.
Fitriani,  Dian  (2013).  Perbedaan variasi  volume  darah  dalam tabung  vacutainer  K 3 EDTA terhadap jumlah trombosit.
UNIMUS. Hoffbrand  AV,  Moss  PAH  (2013). Kapita Selekta Hematologi
Edisi 6. Jakarta: EGC.
KA Fasakin, CT Omisakin, AJ Esan, OD Ajayi (2014). Lower
Sample  Volumes  Collected Into  Spray  Dried  K 2 EDTA Vacuitaner Bottles Are Suitable For Automated Complete Blood Count Analysis  Including  Differential Leukocyte  Count.  Department of Hematology. Nigeria.
Novel  S,  Apriyani  R,  Setiadi  H, Safitri  R  (2012).  Biomedik. Jakarta:  Trans Info Media, pp  : 164-169.
Patel  N  (2009).  Why  is  EDTA  the anticoagulant  of  choice  for hematology  use?.  TechTalk;
Vol. 7 No 1. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia  Nomor 411/Menkes/Per/III/2010 tentang Laboratorium Klinik. Riswanto (2013). Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. WHO  (2002).  Use  of  anticoagulants in diagnostic laboratory investigations. WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2. Wians FH (2009). Clinical Laboratory Tests: Which, Why, and  What  Do  The  Results Mean?.  LabMedicine;Vol  40
No 2.
Wintrobe  MM  (2014).  Wintrobe’s clinical  hematology,  ed  13th.
Editor:  Richard  L  et  al. London-Philadelphia:  Lea  & Febiger. pp : 1-4; 83-121. Wirawan R (2004). Kualitas Pelayanan Laboratorium Patologi  Klinik  Dalam  Era Globalisasi. Dalam : Pemantapan Kualitas Hematologi  Sebagai  Model, Pidato Pada Upacara Pengukuhan Sebagai Guru Besar Tetap Dalam Ilmu Patologi  Klinik  Pada  Fakultas Kedokteran UI. Jakarta.