Accredited by Ministry of Research, Technology
DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v21i2. 35625 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019               Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis

## Aktivitas Antihipertensi Ekstrak dan Fraksi-Fraksi Daun Avokad
(Persea americana Mill) pada Tikus Jantan dengan Parameter Sistolik dan Diastolik
Novi Elisa 1) , Aloysius Barry Anggoro 1) , Erwin Indriyanti 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Yayasan Pharmasi Semarang novieliza737@gmail.com

## ABSTRAK
Penyakit kardiovaskuler yang terjadi di Indonesia berawal dari penyakit menular kemudian beralih menjadi  tidak  menular,  salah  satunya  hipertensi.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mengetahui skrining fitokimia dan hasil uji KLT ekstrak dan fraksi-farksi daun avokad pada tikus jantan yang dibuat model hipertensi dengan induksi NaCl dan prednison.   Pengujian ini dilakukan selama 28 hari  menggunakan  alat  Blood  Presure  Analizer  Tail  Caff  dengan  kelompok  perlakuan  kontrol normal,  positif,  negatif,  ekstrak  dosis  75mg/kgbb,  150mg/kgbb,  250mg/kgbb  dan  fraksi  air,  etil asetat,  n-heksana  masing-masing  kelompok  berisi  5  ekor  tikus.  Pengukuran  tekanan  darah dilakukan  pada  T0  (belum  diberi  perlakuan),  T1,  T2,  T3  (induksi  NaCl  dan  Prednison),  T4 (diberikan  dosis  ekstrak  dan  dosis  fraksi).  Hasil  uji  skrinning  fitokimia  positif  flavonoid  dan  uji KLT dimana nilai Rf yang dihasilkan setelah percobaan KLT dengan metode penyinaran UV 254, ekstrak daun alpukat dengan menggunakan baku kuersetin yang dihasilkan Rf 0,75, fraksi air 0,82, n-heksana  0,93,  etil  asetat  0,82  dari  hasil  tersebut  dapat  dibuktikan  terjadi  penurunan  aktivitas tekanan  darah.  Hasil  persentasi  penurunan  ekstrak  dan  fraksi-fraksi  daun  alpukat  menunjukkan dosis efektif ekstrak 250mg/kgbb yaitu 5,87/10,96% sig > 0,05 berbeda makna dengan kelompok negatif dan fraksi etil asetat 5.71/14.53%. sig > 0,05 berbeda makna dengan kelompok negatif.
Kata kunci: Antihipertensi; daun avokad; diastolik; sistolik; tikus
Anti-Hypertension Activity of Avocado ( Persea americana Mill) Leaves Extracts and Fractions in Male Rats with Systolic and Diastolic Parameters

## ABSTRACT
One of cardiovascular diseases that occur in Indonesia that start from infectious diseases and then turn into non-infectious diseases is hypertension. This study aimed to determine the phytochemical screening  and  TLC  test  results  of  avocado  leaves  extract  and  fractions  in  hypertension-modeled male  rats  through  induction  of  NaCl  and  prednisone.  This  test  was  done  in  28  days  used  Blood Pressure Analyzer Tail Caff with normal, positive, negative control treatment groups, extract doses of  75mg/kgbb,  150mg/kgbb,  250mg/kgbb  and  water,  ethyl  acetate,  n-hexane  fractions  for  each group. Each group contains 5 rats. Blood pressure measurement was done at T0 (untreated), T1, T2, T3 (induction of NaCl and Prednisone), T4 (given extract dose and fraction dose). The results of phytochemical  screening  test  were  positive  for  flavonoids  and  the  TLC  test,  where  the  Rf  value produced for avocado leaves extract after TLC test with UV 254 irradiation method, using quercetin standard produced was 0.75, water fraction was 0.82, n-hexane was 0.93, ethyl acetate was 0.82. These  results  then  proved  with  decrease  in  blood  pressure  activity.  The  results  of  decreases  in percentage  of  avocado  leaves  extract  and  fractions  showed  that  the  effective  dose  of  extract 250mg/kgBW was 5.87/10,96% sig > 0.05, which was significantly different from negative group and ethyl acetate fraction was 5.71/14.53%. sig > 0.05 significantly different with negative group.
Keywords: Antihypertensive; avocado leaves; diastolic; rat; systolic
(Article History: Received 19-08-2021; Accepted 01-10-2021; Published 07-10-2021)

## PENDAHULUAN
Meluasnya  penyakit  kardiovaskuler yang  terjadi  di  Indonesia  berawal  dari penyakit menular yang semula menjadi dasar pertama  kemudian  beralih  menjadi  tidak
menular  (Kemenkes  RI,  2014).  Penyakit kardiovaskuler salah satunya adalah hipertensi.  Penyakit  hipertensi  dibedakan menjadi dua jenis yaitu hipertensi primer dan sekunder (Mancia et al ., 2013).
Faktor-farktor  yang  berperan  pada penyakit  kardiovaskuler  hipertensi  yang mengarah  berdasarkan  epidemiologi  adalah stroke,  gagal  jantung,  infark  miokard,  atrial fibrilasi,  diseksi  aorta,  dan  penyakit  arteri perifer  berkaitan  secara  langsung  dengan derajat  peningkatan  tekanan  darah  hipertensi ringan 140/90 mmHg (Mancia et al ., 2013). World  Health  Organization  (WHO) , 2012 menjelaskan hipertensi dapat ningkatkan kematian  hamper  9,4  juta  yang  disebabkan bertambahnya  penyakit  kardiovaskuler  tiap tahun ke tahun adanya hal tersebut dapat pula meningkatkan resiko kematian jantung coroner  12%,  stroke  24%,  WHO  telah menyebut  negara  ekonomi  berkembang  yang mengalami  penyakit  hipertensi,  negara  maju 35%. Asia Tenggara 36% orang dewasa yang mengalami hipertensi dan telah meninggal 1,5 juta disetiap tahunnya (DINKES Sulut, 2016).
Pengguanakan  obat  sintetik  untuk penyakit hipertensi seperti captopril memiliki mekanisme  kerja  menghambat  Angiotensin Converting Enzym (ACE), mekanisme  ACEI dengan  menghambat  angiotensin  I  menjadi angiotensin  II  dimana  sifat  kerja  dari angiotensin  II  sebagai  vasokonstriktor  dan berpotensi  juga  dalam  merangsang  sekresi aldosterone  dimana  ACEI  akan  memblok degradasi  bradikinin  dan  merangsang  sintesa zat-zat  vasodilatasi,  prostaglandin  E2  dan prostasiklin (DEPKES, 2006).
Terjadi  peningkatan  bradikinin  akan meningkatkan  efek  penurunan  tekanan  darah oleh ACEI yang bertanggung jawab juga pada efek samping batuk kering secara efektif akan mencegah  dan  meregresi  hipertrofi  vertikel kiri  dengan  megurangi  rangsangan  langsung oleh  angiotensin  II  pada  sel  miokardial (DEPKES, 2006).
Adapun solusi pada pengobatan hipertensi  selain  dari  pengguanaan  obat sintetik masyarakat umum telah membudidayakan pengobatan tradisional berdasarkan  ramuan  nenek  moyang  pada jaman
dahulu dengan
pengobatan menggunakan  tanaman-tanaman  yang  ada  di masyarakat  pada  umumnya  (Mardiyaningsih & Ismiyati, 2014).
Potensi  daun  avokad  cukup  banyak dikenal pada masyarakat luas sebagai tanaman buah, perasa dan obar-obatan herba. Penggunaan  daun  avokad  sudah  banyak dilakukan  masyarakat  sejak  zaman  dulu, penggunaan  daun  avobat  sebagai  bahan  obat
alternatif  pengganti  obat  hipertensi  yang relatif mahal dan penggunaan harus di lakukan seumur  hidup  oleh  penderita  hipertensi (Setyawan, 2018).
Salah satu tanaman yang memiliki efek dalam menurunkan tekanan darah adalah daun avokad ( Persea americana Mill) berdasarkan pengobatan  tradisional,  sebanyak  rebusan tujuh lember daun. Tetapi pada jaman dahulu belum  pernah  dilakukan  lebih  lanjut  tentang senyawa  kimia  yang  berperan  sebagai pengobatan.Sehingga  dunia  modern  meneliti lebih  lanjut  senyawa-senyawa  yang  berperan dalam  pengobatan  hipertensi  yaitu  flavonoid, saponin  dan  tanin  (Mardiyaningsih  & Ismiyati, 2014).
Menurut  penelitian  Bernes  Griner McFann  dan  Nahin  tahun  2002  di  Amerika, menyatakan  ada  beberapa  faktor  yang mendorong masyarakat memilih
Complementary  and  Alternative  Medicine (CAM) masyarakat meyakini apabila kombinasi  pengobatan  medis  konvensional akan  lebih  membantu  dalam  penyembuhan (54,9%)  adanya  ketertarikan  ingin  mencoba, (50,1%)  karena  provisional  pengobatan konvensional  menyarankan  untuk  mencoba (26%) DAN (13%) pengguna yang mengakatan  obat  medis  konvensional  mahal (Barnes et al ., 2008).
Penelitian  ini  memiliki  tujuan  untuk mengetahui  skrining  fitokimia  dan  hasil  uji KLT  ekstrak  dan  fraksi-farksi  daun  avokad pada tikus jantan yang dibuat model hipertensi dengan induksi NaCl dan prednison.
Pengujian  ini  dilakukan  selama  28  hari menggunakan  alat  MrBP  Analizer  Tail  Caff dengan  kelompok  perlakuan  kontrol  normal, positif,  negatif,  ekstrak  dosis  75mg/kgbb, 150mg/kgbb,  250mg/kgbb  dan  fraksi  air,  etil asetat,  n-heksana  masing-masing  kelompok berisi 5 ekor tikus.

## METODE PENELITIAN
Penelitian
eksperimental yang dilaksanakan  pada  bulan  Maret  2021  sampai Agustus 2021 yang dilakukan di Laboratorium Sekolah  Tinggi  Ilmu  Farmasi  Yayasan Pharmasi  Semarang  dan  Patologi  Anatomi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
Penelitian ini sudah mendapat persetujuan  etik  dengn  nomor  263/AHW- SW/KEPK/STIFAR/EC/V/2021(Mardiya- ningsih & Ismiyati, 2014).

## Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan  di Laboratorium Biologi Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu  Farmasi  Yayasan  Pharmasi  Semarang. Dengan  menggunakan  tanaman  daun  avokad meliputi (daun, akar, batang, biji).
Hasil  determinasi  menyatakan  spesies tumbuhan merupakan tanaman Persea americana Mill  yang  merujuk  pada  sitasi (Soemarie et al ., 2016).

## Alat
Ekstrak  dan  fraksi  yaitu  kain  flannel, kertas  saring  whatman ,  bejana  bewarna gelap,  neraca  elektrik,  beaker  glass,  oven, blender, ayakan dan vakum, batang pengaduk, Rotary  Evaporator, alat  untuk  perlakuan hewan uji adalah timbagan analitik, alat untuk mengukur  tekanan  darah  alat  @Instrumen MrBp analyzer tail cuff . Alat untuk penetapan susut pengeringan moisture balance, lempeng KLT.
Bahan
Daun  avokad,  etanol  96%,  n-heksana, etil asetat, air, kontrol negatif yang digunakan adalah CMC, kontrol positif Captopril 25mg, pakan tukus BR1, bahan penginduksi Nacl dan Presnison. Klorofom, Metanol.

## Hewan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  hewan  uji tikus (Galur wistar) total hewan uji sebanyak 45 ekor, hewan uji dikelompokkan menjadi 9 dengan  jumlah  masing-masing  kelompok sebanyak 5 hewan uji.

## Proses Pengeringan
Daun  alpukat  diambil  dari  Kecamatan Pringsurat, Kabupaten Tawangmangu, Semarang  Jawa  Tengah,  setelah  itu  disortasi, dicuci  dengan  air  mengalir  hingga  bersih kemudian ditimbang.
Selanjutnya  daun  avokad  yang  telah ditimbang dipotong menjadi dua bagian hal ini berfungsi agar mudah proses pengeringannya kemudian siapkan tempat pengering atau oven dengan  suhu  40◦C  diamkan  sampai  daun benar-benar  mengering  dan  siap  untuk dihaluskan yang berfungsi agar mempermudah  proses  penggilingan  atau penyerbukan daun avokad (Elisa et al ., 2020).

## Persiapan Simplisia
Setelah daun avokad mengering dilanjutkan  dengan  proses  penyerbukan simplisia  kering  daun  avokad,  dengan  cara
dihaluskan  dengan  alat  penggiling  atau penghalus simplisia.
Simplisia  halus  kemudian  diayak dengan  ayakan  nomor  40  dan  nomor  30, Diambil  serbuk  simplisia  yang  lolos  ayakan nomor  30  dan  tidak  lolos  ayakan  nomor  40 kemudian  disimpan  dalam  wadah  tertutup, kering, tidak lembab (Elisa et al ., 2020).

## Pembuatan Ekstrak Etanol
Serbuk  simplisia  daun  avokad  yang sudah halus selanjutnya ditimbang menggunakan  alat  neraca  kasar  yakni sebanyak 558,4 g yang telah didapat dari hasil proses penyerbukan dan penyaringan.
Proses  ekstraksi  menggunakan  pelarut etanol  96%  yakni  dengan  perbandingan  1:10 (serbuk 558,4g : etanol 96%) maserasi selama 3x24  jam  dengan  sesekali  pengadukan  jika sudah selesai maka dilanjut dengan penyaringan.
Maserat  diambil  menggunakan  kertas saring  whatman.  Maserat  ditampung  dan ampas  dipisahkan,  setelah  didapat  hasil hitunglah rendemennya  (Purwidyaningrum et al. ,  2017a).  Proses  tersebut  dilakukan  di Laboratorium  Kimia  Sekolah  Tinggi  Ilmu Farmasi Yayasan Pharmasi Semarang.

## Pembuatan Fraksi Air, Etil Asetat, n-Heksana
Fraksinasi  dengan  metode  ekstraksi cair-cair,  Ekstrak  etanol  daun  avokad sebanyak 100 gram dimasukkan dalam beaker glass tambahkan etanol sampai tercempur.
Masukkan  pelarut  air  dan  n-heksana dengan  perbandingan  (1:1)  kedalam  corong pisah, tambahkan dengan ekstrak etanol daun avokat  yang  sudah  tercampur  kemudian  di kocok selama 1 menit dan didiamkan selama 10  menit.  Fraksi  air  berada  dibagian  bawah diambil kemudian pekatkan dengan menggunakan waterbath pada suhu 40oC dan fraksi  n-heksana  dibagian  atas  dan  pekatkan menggunakan  rotary  evaporator  pada  suhu 60oC  proses  ini  dilakukan  sebanyak  3  kali (Purwidyaningrum et al ., 2017b).
Sebanyak100 gram ekstrak dimasukkan kedalam  beaker  glass  dan  tambahkan  etanol hingga  tercampur,  masukkan  pelarut  air  dan etil asetat dengan perbandingan (1:1) kedalam corong  pisah  ditambahkan  dengan  ekstrak etanol  daun  alpukat  yang  sudah  tercampur kemudian  dikocok  selama  1  menit  dan diamkan  selama  10  menit.  Fraksi  air  yang berada  di  bagian  bawah  diambil  selanjutnya
pekatkan menggunakan waterbath suhu 40oC dan  fraksi  etil  asetat  berada  di  bagian  atas diambil  dan  dipekatkan  menggunakan  rotary evaporator  pada  suhu  60oC  proses  ini dilakukan sebanyak 3 kali (Purwidyaningrum et al., 2017a). Fraksi n-heksana, etil asetat dan air  masing-masing  di  tempatkan  di  wadah terpisah dan diberi label nama masing-masing fraksi.

## Penetapan Susut Pengeringan
Sebanyak  1  gram  ekstrak  etanol  daun avokad  diletakan  pada  lempeng  alumunium foil  kemudian  letakan  pada  alat  Moisture Analyzer  selanjutnya  panaskan  pada  suhu 105̊C  selama  15  menit,  dilakukan  3x percobaan  dihitung  nilai  rata-ratanya.  Susut pengeringan  dapat  memenuhi  syarat  apabila <10 (Salamah & Widyasari, 2015) .

## Skrining Fitokimia
Uji  pendahuluan  ekstrak  dan  fraksi-fraksi daun avokad yang dilakukan meliputi:
1.  Alkaloid
Uji  alkaloid  yang  dilakukan  pertama timbang  sebanyak  1  gram  ekstrak  kental  dan fraksi-fraksi daun alpukat, sebanyak 1 ml HCl 2  N  dan  9  ml  aquadest,  dipanaskan  di  atas penangas  air  selama  2  menit  setelah  itu dinginkan dan saring, diambil filtrat beberapa tetes  masukan  ke  dalam  3  tabung  reaksi, ditambahkan  2  tetes  pereaksi  mayer  dan terbentuk endapan putih/kuning, tambahkan 2 tetes  pereaksi  bouchardat  sehingga  terbentuk endapan  coklat  sampai  hitam,  tambahkan  2 tetes  pereaksi  dragendrof  sehingga  terbentuk endapan  jingga  sampai  merah  coklat,  Bila sedikitnya  2  dari  3  pereaksi  menghasilkan endapan yang sama maka positif mengandung alkaloid (Sentat & Permatasari, 2017). 2.  Flavonoid
Uji  flavonoid  yang  dilakukan  timbang sebanyak  1  gram  ekstrak  kental  dan  fraksi- fraksi  daun  alpukat,  kemudian  masukkan  ke dalam  tabung  reaksi,  tambahkan  2  tetes  HCl pekat,  serbuk  Mg,  dan  2  tetes  amil  alcohol, sehingga menghasilkan warna kuning, jingga, atau  merah  pada  lapisan  amil  alkohol memberikan indikasi adanya flavonoid (Sentat & Permatasari, 2017).
3.  Uji Saponin
Uji  saponin  yang  pertama  timbang sebanyak  1  gram  ekstrak  kental  dan  fraksi- fraksi  daun  alpukat,  kemudian  masukkan  ke dalam  tabung  reaksi,  selanjutnya  tambahkan air  panas  secukupnya,  kemudian  dikocok
selama 15 menit dan tambahkan 2 tetes HCl 2 N,  Bila  terbentuk  buih  permanen  selama kurang  lebih  10  menit  maka  memberikan indikasi adanya saponin (Sentat & Permatasari, 2017).
4.  Tanin Uji  Tanin  timbang  sebanyak  1  gram ekstrak kental dan fraksi-fraksi daun alpukat, kemudian tambah 10 ml air suling selanjutnya saring,  Filtrat  diencerkan  dengan  air  suling sampai  tidak  berwarna,  kemudian  diambil  2 mL  filtrat  dan  ditambahkan  1  sampai  2  tetes pereaksi FeCl3, bila terbentuk warna biru tua atau  hijau  kehitaman  memberikan  indikasi adanya tanin (Sentat & Permatasari, 2017).
5.  Uji Steroid dan Triterpenoid
Uji  steroid  dan  triterpenoid  yang dilakukan  timbang  sebanyak  1  gram  ekstrak kental  dan  fraksi-fraksi  daun  alpukat, tambahkan  pelarutnya  kemudian  diuapkan menggunakan cawan porselin. residu dilarutkan  dengan  0,5  mL  kloroform, kemudian  ditambahkan  0,5  mL  asam  asetat anhidrat,  tambahkan  Asam  sulfat  pekat sebanyak  2  mL  melalui  dinding  tabung, Terbentuk  cincin  kecoklatan  atau  violet  pada perbatasan  larutan  menunjukkan  adanya triterpenoid,  sedangkan  bila  muncul  cincin biru  kehijauan  menunjukkan  adanya  steroid (Manoranjan et al ., 2018).

## Uji KLT Ekstrak dan Fraksi-fraksi Ekstrak Daun Avokat
Pembuatan  fase  gerak  kloroform  : metanol  (1:9)  dan  penjenuhan,  larutan  baku kuersetin  dan  ekstrak  kental  daun  avokat ditotolkan pada lempeng KLT kemudian spot dibawah  lampu  UV  254  nm,  Lempeng  KLT dielusi  hingga  batas  elusi,  hasil  spot  diamati yang  terpisah  dengan  sinar  tampak,  UV254, dan diberi penampak bercak uap moniak 25%.

## Fraksi Air
Pembuatan  fase  gerak  kloroform  :  metanol (1:10)  dan  penjenuhan,  baku  kuersetin  dan sampel fraksi air daun avokat ditotolkan pada lempeng  KLT,  Dilihat  spot  dibawah  lampu UV  254  nm,  Lempeng  KLT  dielusi  hingga batas elusi, Diamati spot yang terpisah dengan sinar  tampak,  UV254,  dan  diberi  penampak bercak uap moniak 25%.

## Fraksi n-heksana dan etil asetat
Pembuatan  fase  gerak  kloroform  :  metanol (4:6)  dan  penjenuhan,  kemudian  baku kuersetin  dan  etil  asetat  dan  n-heksan  daun
avokat ditotolkan pada lempeng KLT, dilihat pada bagian spot dibawah lampu UV 254 nm, lempeng  KLT  dielusi  hingga  batas  elusi  dan amati spot yang terpisah dengan sinar tampak, UV254,  dan  diberi  penampak  bercak  uap moniak 25%.
Pembuatan  stok  prednisone  1,5mg/kgbb tikus
Dihitung  dosis  tikus  terbesar  dan konsentrasi  larutan  stok  kemudian  timbang beberapa  tablet  prednison  dihitung  reratanya ad halus, hitung serbuk yang akan digunakan, kemudian  ditimbang  dan  hitunglah  larutan stok  sebenarnya,  kembangkan  CMC  0,5%, disuspensikan prednison ke dalamnya. Masukan  labu  takar,  tambahkan  aquadest hingga tanda batas hingga homogen.
Pembuatan Larutan Suspensi NaCl 2%
Dihitung  NaCl  yang  dibutuhkan kemudian timbang, selanjutnya larutkan NaCl dalam  aquadest,  Dimasukan  labu  takar, tambahkan  aquadest  hingga  tanda  batas  dan homogenkan .
Uji Antihipertensi
Penelitian aktivitas antihipertensi menggunakan  45  ekor  tikus  dan  hewan  uji dibagi menjadi 9 kelompok, dimana kelompok 1  (Kontrol  Normal),  kelompok  II  (Captopril 25mg),  kelompok  III  (Na  CMC  0.5%), kelompok  IV  (E.  75mg),  kelompok  V  (E. 150mg), kelompok VI (E. 250mg), kelompok VII (FA), kelompok VIII (FEA), kelompok IX (FH).
Pengujian pertama yaitu kelompok 1-6 dahulu  kemudian  diukur  tekanan  darah dengan  menggunakan  alat  MrBP Blood Pressure  Analizer  Tail  Caff pada  hari  ke-0
(T0)  sebelum  perlakuan.  Pada  T0  diberikan standart pakan BR1 dan diberi minum, Hari ke 1-7  (T1)  diberikan  prednisone  dan  NaCl sebagai  induksi  kemudian  hari  ke-7  diukur tekanan darahnya, kemudian pada hari ke 8-14 (T2)  diberikan  prednisone  dan  NaCl  sebagai induksi  kemudian  hari  ke-14  diukur  tekanan darahnya  dan  pada  hari  ke  15-21  (T3) diberikan  prednisone  dan  NaCl  sebagai induksi  kemudian  hari  ke-21  diukur  tekanan darahnya.  Hari  ke  22-28  (T4)  diberikan captopril  25  mg  dan  dosis  ekstrak  75mg, 150mg,  250mg/KgBB  hari  ke-28  diukur tekanan  darahnya,  selanjutnya  dosis  ekstrak terbaik  dilanjutkan  ke  dosis  fraksi  air,  etil asetat, n-heksana dengan perlakuan yang sama (Purwidyaningrum et al ., 2017a).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  pendahuluan  determinasi tanaman  menyatakan  spesies  tumbuhan merupakan  tanaman  Persea  Americana  Mill (Soemarie et  al .,  2016). Pengujian  dilakukan di  Laboratorium  Stifar  Yayasan  Farmasi Semarang.

## Hasil uji skrinning fitokimia
Uji  skrinning  fitokimia  adalah  untuk mengetahui senyawa-senyawa metabolit sekunder  yang  ada  di  dalam  kandungan ekstrak  dan  fraksi  tersebut.  Dari  hasil pengujian  diketahui  alkaloid,  flavonoid, tannin, saponin, steroid dan triterpenoid yang dapat  dilihat  pada  Tabel  1  (Sentat  & Permatasari, 2017).
Tabel 1. Hasil Skrinning Fitokimia Ekstrak dan Fraksi-Fraksi
Senyawa kimia Hasil Eks- trak Fraksi Air Fraksi n-Hkn Fraksi EA Alkaloid Mayer Dragendroff Bouchardat + + + + + + - - - - - - Flavonoid + + + + Tannin + - + - Saponin + + + + Steroid dan triterpenoid + + + +
(+) Positif Menunjukkan hasil positif (-) Negatif menunjukkan hasil negatif
Uji  KLT  (Kromatografi  Lapis  Tipis) pada  ekstrak  dan  fraksi-fraksi  daun  alpukat pada Gambar 1 yang menunjukkan perbedaan nilai Rf antara masing-masing sempel.
Tabel 2 . Hasil Uji KLT Ekstrak dan Fraksi-

## Fraksi dengan standar kuersetin
Sampel Nilai Rf Kuersetin Ekstrak Fraksi Air Fraksi n-Heksan Fraksi Etil Asetat 0.75 0.82 0.93 0.81
Tahap pengujian dengan menggunakan spektrofotometer  visibel  yang  berfungsi menentukan waktu oprasional OP ( Operating time )  pada  saat  pengukuran  penyerap  sinar dalam  keadaan  stabil  dengan  membuktikan aktivitas  hipertensi  bereaksi  secara  optimal antara  senyawa  dan  standar  baku  kuersetin diberi penampak  bercak  uap moniak  25% (Anggorowati et al ., 2016).
Gambar 1. Hasil KLT pada UV254 Keterangan:
A Ekstrak B Fraksi Air
C Fraksi n-Heksana, Etil Asetat
Tabel 2 menunjukkan bahwa kandungan aktivitas antihipertensi dari ekstrak daun  alpukat  tidak  jauh  antara  sampel  uji, dimana  hal  ini  dapat  dibuktikan  dengan  nilai Rf  yang  dihasilkan  setelah  percobaan  KTL dengan  penyinaran  UV  254,  ekstrak  daun alpukat  dengan  menggunakan  baku  kuersetin
yang  dihasilkan  Rf  0,75,  fraksi  air  0,82,  n- heksana  0,93,  etil  asetat  0,82  dari  hasil tersebut  dapat  dibuktikan  bahwa  penurunan aktivitas  antihipertensi  tidak  terlalu  jauh antara  kelompok  uji.  Berdasarkan  penelitian sebelumnya  pada  uji  antioksidan  dengan menggunakan  baku  kuersetin  sama  halnya tidak  terlalu  jauh  dalam  memberikan  efek antara  kelompok  uji  (Anggorowati et  al .,
2016). Tabel 3 . Susut Pengeringan No Penimba- ngan (g) Susut penge- ringan (%) 1 2 3 1,0 1,0 1,0 7,73 8,89 8,96 Rata-rata 8,53±0,69
Tabel  3  menunjukkan  susut  pengeri- ngan dari ekstrak daun avokad yang dilakukan sebanyak  3  kali  perakuan  dengan  pemanasan suhu  105◦C  selama  15  menit  diperoleh  rata- rata  8,53%  dengan  nilai  SD  0,69,  hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  avokad terdapat air dan zat-zat volatile 8,53% dengan kandungan kelembaban sebagai syarat kurang dari 10% (Indriyanti et al ., 2017).
Tabel 4. Tekanan darah ekstrak sistolik
Kelompok AUC TD Sistolik (mmHg.Hari) Total AUC Persentase Penurunan T0-T1                T1-T2             T2-T3             T3-T4 Normal Positif Negatif E 75mg/kgbb E 150mg/kgbb E 250 mg/kgbb 749±34ab 883±31a 949±17c 816±216c 917±23c 909±36ac 758±20ab 1023±9a 1060±7c 1030±36c 1032±23c 1017±25ac 759±37ab 1044±18a 1060±23c 1080±25c 1086±11c 1029±21ac 794±53ab 951±12a 1057±14c 1068±17c 1037±43c 928±30ac 3060±108 3901±22 4125±29 3994±164 4072±39 3883±11 - 5,45±27,23 - 3,18±3,72 1,29±1,03 5,87±0,63
Keterangan: abc = Hasil total AUC perbedaan makna penurunan tekanan darah
a. Berbeda makna terhadap kelompok negatif < 0,05
b. Berbeda makna terhadap kelompok terapi < 0,05
c. Berbeda makna terhadap kelompok normal < 0,05

## Tabel 5. Tekanan darah ekstrak diastolik
Kelompok Total TD Diastolik (mmHg.Hari) Total AUC Persentase Penurunan T0-T1        T1-T2        T2-T3       T3-T4 Normal Positif Negatif E 75mg/kgbb E 150mg/kgbb E 250mg/kgbb 665±23ab 679±32a 38±56c 773±51c 777±55c 777±55ac 718±44ab 784±47a 916±46c 920±24c 859±52c 849±30ac 703±55ab 870±41a 879±51c 903±15c 946±44c 697±315ac 610±107ab 759±35a 828±25c 840±07c 878±16c 714±66ac 2696±107 3091±81 3407±142 3435±58 3503±112 3037±289 - 9.16±3.44 - -0.92±3.03 -3.05±6.93 10.96±6.62
Keterangan: abc = Hasil total AUC perbedaan makna penurunan tekanan darah
a. Berbeda makna terhadap kelompok negatif < 0,05
b. Berbeda makna terhadap kelompok terapi < 0,05
c. Berbeda makna terhadap kelompok normal < 0,05
A B C
Tabel 6. Tekanan darah fraksi sistolik Kelompok Total TD Sistolik (mmHg.Hari) Total AUC Persentase Penurunan T0-T1 T1-T2 T2-T3 T3-T4 Fraksi Air 25mg/ml Fraksi EA 25mg/ml Fraksi n-Hkn 25mg/ml 896±22c 871±26ac 894±21c 1009±22c 979±16ac 1027±15c 1086±23c 1065±18ac 1087±16c 1060±22c 975±20ac 1071±25c 4050±66 3890±43 4078±55 1.82±1.27 5.71±0.63 1.14±0.99 Keterangan: abc = Hasil total AUC perbedaan makna penurunan tekanan darah
a. Berbeda makna terhadap kelompok negatif < 0,05
b. Berbeda makna terhadap kelompok terapi < 0,05
c. Berbeda makna terhadap kelompok normal < 0,05
Tabel 7. Tekanan darah fraksi diastolik
Kelompok Total TD Diastolik (mmHg.Hari) Total AUC Persentase penurunan T0-T1 T1-T2 T2-T3 T3-T4 Fraksi Air 25mg/ml Fraksi EA 25mg/ml Fraksi n-Hkn 25mg/ml 703±49c 666±41ac 693±61c 829±51c 709±18ac 843±37c 877±44c 778±12ac 878±31c 832±49c 753±09ac 814±12c 3241±176 2907±73 3227±78 4.83±4.95 14.53±4.88 5.23±1.90 Keterangan: abc = Hasil total AUC perbedaan makna penurunan tekanan darah
a. Berbeda makna terhadap kelompok negatif < 0,05
b. Berbeda makna terhadap kelompok terapi < 0,05
c. Berbeda makna terhadap kelompok normal < 0,05
Hipertensi  terjadi  dikarenakan  kondisi arterosklerosis  pada  arteri  terutama  yang mengalir  pada  aorta  jantung.  Bagian  arteri terjadi  pengerasan  dan  kekakuan  sehingga aorta  dan  arteri  kehilangan  kekuatan  dalam pergerakan.  Dinding  arteri  yang  sekarang tidak  elastis  tidak  dapat  lagi  mengeluarkan darah  dari  jantung  ke  dalam  aliran  darah. Peningkatan tekanan darah yang terjadi dapat menimbulkan  beberapa  gejala  pada  organ target  yang  terlibat  seperti  stroke,  otak, penyakit  jantung  koroner  untuk  pembuluh darah  jantung  dan  otot  jantung  (Isnaini  & Fulanah, 2019). Peran dari parameter sistolik adalah  keadaan  jantung  mengalami  fase kontraksi  dan  diastolik  adalah  keadaan jantung  mengalami  relaksasi  (Elisa et  al ., 2020).
NaCl dan prednisone digunakan sebagai  penginduksi  dalam  penelitian  ini. Dimana  NaCl  dan  prednisone  memiliki mekanisme kerja dalam meningkatkan tekanan darah dan ada beberapa faktor antara lain  adanya  peningkatan  asupan  garam  di dalam  tubuh  tinggi  sehingga  volume  cairan ekstrasel terjadi peningkatan hal tersebut yang dapat  menyebabkan  terjadinya  penyakit hipertensi (Rauf et al ., 2018).

## Aktivitas Antihipertensi
Obat golongan kortikosteroid meningkatkan retensi natrium dan air melalui organ ginjal. Pada kasus peningkatan tekanan darah  sebagai  efek  terapi  obat  dengan  dosis tinggi  antara  lain  20%,  obat  kortikosteroid
akan memberikan efek meningkatkan tekanan darah  tergantung  lamanya  waktu  pemberiaan atau penggunakan obat tersebut, hal ini terjadi pada pasien jika menerima obat kortikosteroid dengan dosis ekuivalen > 20mg/hari  (Rauf et al ., 2018).
Hasil penelitian pada Tabel 4 dan Tabel 5  dengan  parameter  sistolik  dan  diastolik menjelaskan kelompok kontrol normal berbeda  makna  dengan  kelompok  terapi  dan kelompok  negatif  dengan  nilai  sig  <0.05. Sedangkan  kelompok  terapi  kontrol  positif (captopril)  persentasi  penurunan  sistolik (5,45±27,23),  diastolik  (9,16±3,44)  berbeda makna  dengan  kelompok  kontrol  negatif dengan  nilai  sig  <0.05.  kelompok  ekstrak dosis  75mg/kgbb persentase  penurunan sistolik  (3,18±3,72),  diastolik  (-0.92±3,03) dan 150mg/kgbb persentase penurunan sistolik  (1,29±1,0),  diastolik  (-3,05±6,93) berbeda  makna  dengan  kelompok  kontrol normal  dengan  nilai  sig  <0.05.  Kelompok ekstrak  dosis  250  mg/kgbb  persentase penurunan  sistolik  (5,87±0,63),  diastolik (10,96±6,62) berbeda makna dengan kelompok kontrol normal dan negatif dengan nilai sig <0.05.
Hasil penelitian uji fraksi air, etil asetat, n-heksana  pada  Tabel  6  dan  Tabel  7  dengan parameter sistolik dan diastolik menunjukkan fraksi  air  persentase  penurunan  sistolik (1,82±1,27),  diastolik  (4,83±4,95)  kemudian pada  fraksi  n-heksana  persentase  penurunan sistolik  (1,14±0.99),  diastolik  (5,23±1,90)
berbeda  makna  dengan  kelompok  kontrol normal  dengan  nilai  sig  <0.05,  sedangakan pada  fraksi  etil  asetat  persentase  penurunan sistolik  (5,71±0,63),  diastolik  (14,53±4,88) berbeda makna dengan kelompok normal dan negatif dengan nilai sig <0,05. Sehingga hasil penelitian  penelitian  sesuai  dengan  literature sebelumnya.  Nilai  normal  tenakan  darah hewan uji tikus  adalah 180/145 mmHg dapat dilihat pada tabel Laurence et al. (1964), pada manusia nilai normal tekanan darah berdasarkan JNC VIII 120/80 mmHg (Wells et al ., 2009).
Penelitian  model  hipertensi  dengan pemberian  induksi  NaCl    memberikan  hasil perbedaan  makna  dimana  dapat  disesuaikan dengan  literatur  yang  sebelumnya  bahwa NaCl  di  dalam  tubuh  jika  dalam  kondisi berlebih  maka  dapat  menyebabkan  asupan garam di dalam tubuh tinggi sehingga volume cairan ekstrasel terjadi peningkatan sedangakan  obat-obat  golongan  kortikostroid seperti  prednisone  jika  di  gunakan  dalam waktu  yang  lama  akan  meningkatkan  retensi natrium dan  air melalui organ ginjal  (Rauf et al. , 2018).
Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan penelitian (Setyawan, 2018) yang menyatakan bahwa daun avokad memiliki aktivitas sebagai hipertensi  diuretik,  ekstrak  daun  avokad diketahui  dapat  menurunkan  tekanan  darah pada  penderita  hipertensi  secara  signifikan, menurunkan  kadar  glukosa  darah  serta  dapat menurunkan  kadar  ureum  dan  kreatinin  pada ginjal  (Triani et  al .,  2016).    Penelitian  oleh Ojewole menyatakan daun avokad berkontribusi  terhadap  penurunan  tekanan darah  melalui  efek  vasorelaksan,  kandungan daun  avokad  memiliki  kandungan  kalium yang  tinggi,  kadar  kalium  diperlukan  untuk keseimbangan  elektrolit,  mengontrol  tekanan darah,  sehingga  hal  ini  dapat  menjadi  dasar dalam menurunkan tekanan darah (Setyawan, 2018).
Menurut penelitian senyawa kimia yang terlibat  yaitu  flavonoid.  Peran  dari  flavonoid memiliki  mekanisme  menurunkan  tekanan darah  dengan  cara  melancarkan  peredaran darah dan mencegah terjadinya penyumbatan pada  pembuluh  darah  sehingga  darah  dapat mengalir dengan normal. Flavonoid termasuk dalam  golongan  fenol  yang  telah  beredar bebas di alam (Nur et al ., 2019).
Flavonoid  memiliki  fungsi  dalam memperbaiki  endotel,  kemudian  lavonoid
akan  mempengaruhi  kerja  dari  Angiotensin Converting  Enzym  (ACE)  yang  dapat perberan dalam vasodilatasi sehingga tahanan resistensi perifer menurun dan dapat menurunkan tekanan darah (Nur et al ., 2019) Pada  literature  sebelumnya  menjelaskan ekstrak  dari  daun  avokad  dapat  menurunkan tekanan darah dengan dosis 100mg/kgbb dan senyawa  yang  berperan  berdasarkan  hasil  uji skrining fitokimia adalah flavonoid (Anggorowati et al ., 2016).

## KESIMPULAN
Ekstrak  dan  fraksi-fraksi  daun  avokad (Persea americana Mill) memiliki efek dalam menurunkan tekanan darah pada dosis ekstrak yang terbaik adalah 250mg/kgbb dengan hasil presentasi  penurunan  sistolik  5,87±0,63. Diastolik  10.96±6.62  sedangakan  pada  fraksi terbaik  adalah  etil  asetat  dengan  presentai penurunan  sistolik  5.71±0.63  dan  diastolik 14.53±4.88.  Senyawa  yang  berperan  dalam penurunkan  tekanan  darah  adalah  flavonoid berdasarkan  uji  skrining  fitokimia  dan  uji KLT.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan Terima kasih kepada Direktorat Riset dan Pengabdian Masyarakat. Direktorat Jenderal Penguatan Riset dan Pengembangan Kemenristekdikti  yang  telah  memberikan fasilitas  pendanaan  Hibah  Penelitian  Dosen Pemula  (PDP)  dengan  perjanjian  kontrak Nomor: 067/E4.1/AK.04.PT/2021. Selanjutnya  terima  kasih  pada  LPPM  Stifar Yayasan  Pharmasi  Semarang  yang  telah membantu dalam melancarkan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggorowati,  D.,  Priandini,  G.  &  Thufail. 2016.  Potensi  daun  alpukat  (persea americana miller) sebagai minuman teh herbal  yang  kaya  antioksidan. Industri Inovatif , 6(1): 1–7.
Barnes, P.M., Bloom, B., & Nahin, R.L. 2008.
Complementary and alternative medicine  use  among  adults  and children: United States, 2007. National Health Statistics Reports , 12 . DEPKES. 2006. Untuk Penyakit Hipertensi. Buku , BUKU , 1–37.
DINKES Sulut. 2016. Renstra dinas kesehatan prov sulut 2016-2021. 1-125.
Elisa,  N.,  Xaverius,  F.  &  Wibowo,  S.    2020.
Hypertension  Profile  of  Angiotensin
Receptor  Blocker  From  Matoa  Leaves Extract ( Pometia Pinnata J.R. Foster & G . Foster ) In Angiotensin II Induced- Male  Rat. STRADA  Jurnal  Ilmiah Kesehatan , 9(2) :1830–1836. https://doi. org/10.30994/sjik.v9i2.595.
Indriyanti, E., Purwaningsih, Y.  & Wigati, D.
2017. Skrining Fitokimia dan
Standarisasi  ekstrak  kulit  buah  labu kuning  ( Cucurbita  moschata ) .  Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta, 3(2): 20–25.
Isnaini,  N.  &  Fulanah,  U.  2019.  Penurunan tekanan  darah  dengan  simplisia  daun alpokat Decreasing blood pressure with avoid  simplicia  leaves. Journal  of Health Studies , 3(1): 44–52. https://doi.org/10.31101/jhes.839.
Kemenkes  RI.    2014.  Situasi  kesehatan jantung.  Pusat  Data  Dan  Informasi Kementerian Kesehatan RI, 3 . https://doi.org/10.1017/CBO97811074
15324.004.
Mancia,  G.,  Fagard,  R.,  Narkiewicz,  K., Redon,  J.,  Zanchetti,  A.,  Böhm,  M., Christiaens, T., Cifkova, R., De Backer, G.,  Dominiczak,  A.,  Galderisi,  M., Grobbee,  D.E.,  Jaarsma,  T.,  Kirchhof, P., Kjeldsen, S.E., Laurent, S., Manolis, A.J.,  Nilsson,  P.M.,  Ruilope,  L.M.  & Wood,  D.A.  2013.  2013  ESH/ESC guidelines  for  the  management  of arterial  hypertension:  The  Task  Force for the management of arterial hypertension of the European Society of Hypertension  (ESH)  and  of  the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal , 34(28) : 2159–
2219. https://doi.org/10.1093/eurheartj/ eht151. Manoranjan, T., Thangarajah, R. & Thavaranjit,  A.C.  2018.  Antifungal Activity and Qualitative Phytochemical Analysis  of  Some  Medicinal  Plants  in Jaffna (Sri Lanka). International Journal  of  Organic  Chemistry , 8(4): 335–340.  https://doi.org/10.4236/ijoc. 2018.84025.
Mardiyaningsih,  A.  &  Ismiyati,  N.  (2014).
Cytotoxic Activity Of Ethanolic Extract Of Persea Americana Mill . Leaves On Hela Cervical Cancer Cell. Traditional Medicine Journal , 19(1) : 24–28.
Nur,  F.,  Sami,  F.J.,  Awaluddin,  A.  &  Afsari, M.I.A.  2019.    Korelasi  antara  kadar total flavonoid dan fenolik dari ekstrak dan  fraksi  daun  jati  putih  ( Gmelina arborea Roxb.)  terhadap  aktivitas antioksidan. Jurnal Farmasi Galenika , 5(1) :33-42.    Https://doi.org/10.22487/
j24428744.2019.v5i1.12034.
Purwidyaningrum,  I.,  Sukandar,  E.Y.  &
Fidrianny,  I.    2017a.  Antihypertensive activity  of  extract  and  fractions  of matoa (Pometia Pinnata J. R & G forts) leaves.
Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research ,
10(3) :323–328.  ttps://doi.org/10.22159 /ajpcr.2017.v10i3.16221.
Purwidyaningrum,  I.,  Sukandar,  E.Y.  & Fidrianny, I.  2017b. Diuretic activity of matoa  leaves  extracts  and  fractions ( Pometia  pinnata J.R.  Forster  &  J.G Forster) and its influence on potassium and  sodium  levels. Asian  Journal  of Pharmaceutical and Clinical Research ,
10 :31–34. https://doi.org/10.22159
/ajpcr.2017.v10s2.19481.
Rauf, A., Ningsi, S. & Suhaidarwati, F.  2018. Uji Efek Ekstrak Etanol Bawang Dayak (Eleutherine Americana Merr.) Sebagai Antihipertensi  Pada  Tikus  Jantan (Rattus  norvegicus). Jurnal  Farmasi FakultasKedokteran Dan Ilmu Kesehatan, 6(1) :55–65.
Salamah, N. & Widyasari, E. 2015. Aktivitas antioksidan  ekstrak  metanol  daun kelengkeng  ( Euphoria  longan (L) Steud.)  dengan  metode  penangkapan radikal 2,2’-Difenil-1-Pikrilhidrazil. Pharmaciana , 5(1) :25–34.
Sentat,  T.  &  Permatasari,  R.  2017.  Uji aktivitas  ekstrak  etanol  daun  alpukat ( Persea  americana Mill.)  terhadap penyembuhan luka bakar pada punggung  mencit  putih  jantan  ( Mus musculus ). Jurnal  Ilmiah  Manuntung , 1(2 ):100-106.  https://doi.org/10.51352 /jim.v1i2.20.
Setyawan,  A.B.    2018.  Pengaruh  Rebusan Daun  Alpukat  Terhadap  Penurunan
Tekanan Darah Pada Penderita Hipertensi. Jurnal  Ilmu  Kesehatan , 6(1) :1–9. Soemarie,  Y.B.,  Astuti,  T.  &  Rochmah,  V. 2016.  Formulasi  sediaan  salep  ekstrak daun alpukat ( Persea americana Mill.) sebagai antiacne. Jurnal Ilmiah Manuntung , 2(2) :224-232.
Wells,  B.G.,  Dipiro,  J.T.,  Dipiro,  C.V.  &
Schwinghammer, T.L. 2009. Pharmacotherapy Handbook 7 th Edition. McGraw Hill, New York.