## PENDAHULUAN
Data WHO (2017) menyatakan bahwa terdapat sekitar 1,7  milyar  kasus  diare  pada  balita  menyebabkan kematian  sebanyak  525.000  bila  setiap  tahunnya. Menurut  Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia tahun  2016,  menunjukkan  bahwa  prevalensi  angka
kematian  yang  disebabkan  oleh  diare  sebesar  3,04% (Kemenkes, 2016).
Penyakit diare didefinisikan sebagai suatu penyakit yang ditandai dengan perubahan bentuk dan konsistensi tinja yang  lembek  sampai  mencair  dan  bertambahnya frekuensi buang air besar yang lebih dari biasanya yaitu
Aktivitas Antibakteri Infusa Daun Sungkai ( Peronema canesces Jack) Terhadap Bakteri Escherichia coli
Antibacterial Activity of Sungkai Leaf Infusion (Peronema canescens Jack) Against Escherichia coli Bacteria
Siti Aisyiyah 1*
Putri Vidiasari D 1
Noval 1
Rohama 1
Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Kesehatan, Universitas Sari Mulia, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia
*email:
sitiaisyiyah833@gmail.com

## Abstrak
Diare merupakan masalah kesehatan masyarakat dengan prevalensi yang tinggi. Diare disebabkan  oleh Escherichia  coli. Penemuan  obat  alternatif  antibakteri  untuk  diare salah  satunya  dengan  terapi  non  farmakologi  yaitu  infusa  daun  sungkai  ( Peronema canescens Jack)  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui aktivitas infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) terhadap bakteri Escherichia coli. Jenis penelitian yang digunakan adalah True Experimental dengan desain penelitian Posttest-only  Control  Group. Skrinning  aktivitas  antibakteri  infusa  daun sungkai  ( Peronema  canescens Jack)  terhadap  bakteri Escherichia  coli menggunakan metode difusi sumuran dan metode dilusi kemudian dianalisis menggunakan Kruskal- Wallis Test dan Mann Whitney Test. Hasil Infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dengan diameter zona hambat 14,46 mm dan nilai KHM pada konsentrasi 75%. Hasil analisis statistic menunjukkan terdapat  perbedaan  bermakna  dengan p  value 0,003 pada  Kruskal-Wallis  Test  dan pada Mann Whitney Test menunjukkan p value 0,025. Infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) tidak memiliki kemampuan daya bunuh terhadap Escherichia coli. Dapat disimpulkan bahwa Infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli dengan  nilai  Konsentrasi  Hambat Minimum sebesar 75%.

## Kata Kunci:
Antibakteri
Peronema canescens Jack Konsentrasi Hambat Minimum Konsentrasi Bunuh Minimum Escherichia coli.
Keywords : Antibacterial
Peronema canescens Jack Minimum inhibitory concentration Minimum kill concentration
Escherichia coli.

## Abstract
Diarrhea  is  a  public  health  problem  with  a  high  prevalence.  Diarrhea  is  caused  by Escherichia coli. One of the discoveries of alternative antibacterial drugs for diarrhea is non- pharmacological  therapy,  namely  infusion  of  sungkai  leaves  (Peronema  canescens  Jack) which has antibacterial activity. This study aims to determine the activity of sungkai leaf infusion (Peronema canescens Jack) against Escherichia coli bacteria. The type of research used is True Experimental with a Posttest-only Control Group research design. Screening of the  antibacterial  activity  of  sungkai  leaf  infusion  (Peronema  canescens  Jack)  against Escherichia  coli  bacteria  using  the  well  diffusion  method  and  dilution  method  was  then analyzed  using  the  Kruskal-Wallis  Test  and  Mann  Whitney  Test.  Results  Sungkai  leaf infusion (Peronema canescens Jack) has antibacterial activity against Escherichia coli with an inhibition zone diameter of 14.46 mm and an MIC value at a concentration of 75%.
The results of statistical analysis show that there is a significant difference with a p value of 0.003 in the Kruskal-Wallis Test and the Mann Whitney Test shows a p value of 0.025.
Sungkai leaf infusion (Peronema canescens Jack) does not have the ability to kill Escherichia coli.  It  can  be  concluded  that  sungkai  leaf  infusion  (Peronema  canescens  Jack)  has antibacterial  activity  against  Escherichia  coli  bacteria  with  a  Minimum  Inhibitory Concentration value of 75%.
© 2024 The Authors. Published by Institute for Research and Community Services Universitas Muhammadiyah Palangkaraya. This  is  Open  Access  article  under  the  CC-BY-SA  License  (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/).  DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.v10i2.7728
3 kali atau lebih dalam sehari (Saputri & Astuti, 2019). Diare  diakibatkan  oleh  bakteri Escherichia  coli.  E.  coli adalah  bakteri  batang  dan  bakteri  gram  negatif  yang habitat alaminya berada di dalam saluran cerna manusia dan juga hewan (Brooks et al. , 2013; Zhou et al. , 2018).
Salah  satu  alterantif  penyembuhan  diare  yaitu menggunakan  tanaman  herbal,  salah  satunya  tanaman daun  sungkai  ( Peronema  canescens Jack).  Sungkai dimanfaatkan masyarakat sebagai obat luka, obat diare, obat  luka  dalam,  obat  sakit  gigi/obat  kumur,  disentri, serta  penurunan  demam  dengan  cara  mengambil  air hasil rebusan kulit batang maupun daun sungkai (Pradito et al ., 2022). Salah satu senyawa antibakteri yang mampu menghambat  aktivitas  dan  pertumbuhan  bakteri terdapat pada tumbuhan daun sungkai yang didalamnya memiliki  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  fenolik,  saponin, steroid, terpenoid, dan tanin.  (Ardica, 2022).
Dari paparan di atas, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian  uji  aktivitas  antibakteri  infusa  daun  sungkai ( Peronema  canescens Jack)  terhadap  bakteri Escherichia coli.

## METODOLOGI

## Alat dan Bahan
Alat  yang  diperlukan  pada  penelitian  ini  yaitu  panci infusa,  incubator,  Bio  Safety  Cabinet  (BSC),  magnetic stirrer,  batang  pengaduk,  sarung  tangan,  masker, spatula, korek api, tisu, mikro pipet, cawan petri, tabung reaksi (Pyrex), gelas ukur (Pyrex),beaker glass (Pyrex) oven,  timbangan  analitik  (AciS  AD-600i),  sendok tanduk, gelas ukur, autoklaf (GEA YX-280D), jarum ose, lampu spritus, spuit, batang pengaduk, batang L, batang T,  inkubator,  corong,  gunting,  kain  flanel,  corong, alummunium  foil,  blender,  ayakan,  pipet  tetes, erlenmayer, lemari pendingin, , jangka sorong.
Bahan yang diperlukan pada penelitian ini Daun sungkai, kertas saring, media Mueller hinton agar (MHA), media Nutrient Broth (NB), media Tryptone Soya Agar (TSA),
larutan standar Mc Farland I  (3x10 8 CFU/ml),  aquades steril, DMSO, bakteri Escherichia coli , klindamisin sebagai kontrol positif, akuades steril sebagai kontrol negatif.

## Metode Pelaksanaan

## Infudasi
Pada  penelitian  ini  digunakan  infusa  daun  sungkai ( Peronema  canescens Jack)  diinfudasi  menggunakan metode infusa dengan suhu 90°C.
Pembuatan  Infusa  Daun  Sungkai  ( Peronema canescens Jack)
Pembuatan  simplisian  daun  sungkai:  simplisia  daun sungkai yang dikumpulkan dibersihkan menggunakan air yang  mengalir,  lalu  dipisahkan  bagian  yang  tidak diperlukan, kemudian ditiriskan setelah itu dikeringkan dibawah sinar matahari.
Pembuatan sediaan infusa daun sungkai: simplisian daun sungkai  ditimbang  sebanyak  300.  Dimasukkan  dalam panci  infusa  kemudian  ditambahkan  dengan  aquadest steril  sebanyak  300  ml.  Campuran  simplisia  dan aquadest dipnaskan selama 15 menit yang mulai dihitung saat suhu sudah mencapai 90°C sambil sesekali diaduk. Kemudian  hasil  infudasi  di  saring  menggunakan  kain flanel  saat  masih  dalam  keadaan  panas  dari  proses  ini didapatkan hasil infusa daun sungkai konsentrasi 100% kemudian diencerkan menjadi empat konsentrasi (10%, 30%, 50%, dan 75%).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Persiapan bakteri Escherichia coli : Peremajaan dilakukan dengan  mengambil  1  koloni  bakteri  menggunakan  ose steril.  Lalu  bakteri Escherichia  coli disuspensikan  dalam media NB kemudian diinkubasi pada suhu 37 ℃ selama 24  jam.  Pada  media  nutrient  broth  (NB)  yang  sudah diinkubasi  selama  24  jam  diencerkan  dengan menggunakan  NaCl  0,9%.  Kekeruhannya  disamakan dengan Mc Farland 0,5.
Pengujian  aktivitas  antibakteri  infusa  daun  sungkai: pengujian kali ini menggunakan metode difusi sumuran.
Pada lempeng agar dimasukkan 20 μ L suspensi bakteri dan  disebar, menggunakan batang L. Kemudian dibuat suatu lubang yang kemudian dimasukkan dengan masing- masing konsentrasi infusa daun sungkai yang digunakan. Kemudian  dilakukan  pengamatan  dengan  melihat  ada atau  tidaknya  zona  hambatan  disekitar  atau  disekitar lubang  (Ariani et  al. ,  2018).  Selanjutnya  pengujian aktivitas  antibakteri  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM)  dan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM). Pengujian  KHM  dilakukan  dengan  memasukkan  infusa daun  sungkai  sesuai  dengan  konsentrasi  yang  telah ditetapkan yaitu 10%, 30%, 50%, 75% dan 100% kedalam tabung  reaksi  yang  sudah  disterilkan,  kemudian  setiap tabung ditambahkan dengan suspensi bakteri yang telah disesuaikan dengan standar Mc. Farland 0,5. Selanjutnya diinkubasi  selama  18-24  jam  pada  suhu  37 ℃ .  Diamati kekeruhannya dan dibandingkan dengan kontrol positif yaitu  Antibiotik  klindamsin  dan  kontrol  negatif Aquadest.  KHM  merupakan  konsentrasi  yang  paling rendah yang akan menunjukan tidak adanya kekeruhan pada tabung uji (Noval et al ., 2019).
Pengujian yang dilakukan pada penentuan KBM, diambil 20 μ L dari masing masing tabung perlakuan KHM dan dituangkan  pada  media  padat  kemudian  disebar menggunakan  teknik  spread  memakai  batang  L, Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37ºC  selama  24  jam dengan 3 kali replikasi. Amati ada tidaknya pertumbuhan koloni  bakteri  pada  dengan  menghitung  jumlah  koloni bakteri  menggunakan  colony  counter.  KBM  adalah konsentrasi  paling  rendah  yang  tidak  menunjukkan adanya  pertumbuhan  koloni  bakteri  pada  media  padat (Mahdiyah et al. , 2020).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel  I. Hasil Penelitian Skrinning Aktivitas Antibakteri Infusa Daun Sungkai ( Peronema canescens Jack)
Terhadap Bakteri Escherichia coli. No Perlakuan Zona Hambat (mm) Rata- rata Gambar 1 Infusa  daun sungkai ( Peronema canescen Jack) 15, 38 15,03 12,97 14,46 2 Kontrol positif (Klindamisin ) 21, 36 13,23 11,90 15,49 3 Kontrol negatif (Aquadest) 0 0
Berdasarkan data hasil dari tabel 1 penelitian uji skrining aktivitas  antibakteri  infusa  daun  sungkai  ( Peronema canescens Jack)  terhadap  bakteri Escherichia  coli dapat diketahui  bahwa  infusa  daun  sungkai  ( Peronema canescens Jack)  mempunyai  daya  antibakteri  yang ditandai  dengan  adanya zona bening hambat di sekitar lubang  sumuran.  Pada  hasil  infusa  daun  sungkai ( Peronema  canescens Jack)  didapatkan  hasil  rata-rata zona  bening  yaitu  sebesar  14,46  mm.  pada  kontrol positif yaitu klindamisin diperoleh zona bening sebesar 15,49  mm,  sedangkan  pada  kelompok  negatif  yaitu aquadest tidak didapatkannya zona bening.

## Tabel II. Hasil  Penelitian  Konsentrasi  Hambat
Minimum  (KHM)  Infusa  Daun  Sungkai
( Peronema  canescens Jack)  terhadap
bakteri Escherichia coli. N o Variasi konsent rasi Replikasi P value Gambar I II III 1 100% - - - a 0,003 b 1,000
2 75% - - - a 0,003 b 1,000 3 50% + + + a 0,003 b 0,025 4 30% + + + a 0,003 b 0,025 5 10% + + + a 0,003 b 0,025
6 Kontrol Positif - - - a 0,003
7 Kontrol Negatif + + + a 0,003 b 0,025
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  dapat  dilihat  dari tabel  2  diatas  pada  setiap  tabung  dapat  dilihat  bahwa infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) memiliki daya  hambat  atau  nilai  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) terhadap bakteri Escherichia coli ditandai dengan beningnya  larutan  yang  terdapat  pada  tabung  reaksi yaitu  konsentrasi  75%  diketahui  bahwa  terdapat perbedaan  pengaruh  pemberian  infusa  daun  sungkai ( Peronema  canescens Jack)  terhadap  bakteri Escherichia coli menggunakan  Kruskal-Wallis  Test  didapatkan  nilai signifikansi  0,003  (p  >  0,05).  Berdasarkan  pengujian Mann  Whitney  Test  diperoleh  hasil  bahwa  tidak terdapat perbedaan bermakna antar variasi konsentrasi yang  dibandingkan  dengan  kontrol  positif  dengan  nilai signifikansi yaitu 1,00 (p> 0,05).
Ketentuan  pengambilan  keputusan  hipotesis  diterima atau ditolak didasarkan pada besarnya nilai signifikansi, jika  signifikansi  lebih  kecil  atau  sama  dengan  0,05  (≤ 0,05)  maka  hipotesis  diterima  dan  apabila  nilai signifikansi lebih besar atau sama dengan 0,05 (≥ 0.05) maka  hipotesis  ditolak.  Hasil  pengujian  hipotesis  pada Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  menunjukkan nilai  signifikansi  1,00  >  0,05  maka  disimpulkan  bahwa hipotesis  (Ha)  yang  berbunyi  “adanya  aktivitas antibakteri  infusa  daun  sungkai  pada  Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)” yang artinya Ha diterima dan H0 ditolak.
Tabel  III. Hasil  Penelitian  Konsentrasi  Bunuh Minimum  (KBM)  Infusa  Daun  Sungkai ( Peronema  canescens
Jack)  terhadap Bakteri Escherichia coli No Variasi Konsentrasi Replikasi Gambar I II III 1 100% +  + + 2 75% +  + +
3 Kontrol Positif - - - 4 Kontrol Negatif  +  + +
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  dapat  dilihat  dari tabel  3  diatas  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  ditandai dengan adanya koloni bakteri yang tumbuh pada semua variasi  konsentrasi.  Berdasarkan  hasil  pengamatan menggunakan colony  counter bias  dilihat  bahwa  infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) tidak memiliki daya  bunuh  atau  nilai  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM) terhadap bakteri Escherichia coli.

## Pembahasan
Hasil yang didapatkan dari penelitian infusa daun sungkai ( Peronema  canescens Jack)  terhadap  bakteri Escherichia coli yang ditunjukkan pada tabel 1 , yaitu didapatkan rata- rata  diameter  zona  hambat  yang  diperoleh  dari pengujian infusa daun sungkai ( Peronema canescens Jack) adalah  14,46  mm,  menurut  paduan  (CLSI,  2021)  zona hambat  dari  infusa  daun  sungkai  termasuk  dalam
kategori  Intermediate.  mekanisme  kerja  sebagai antibakteri diduga dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu sendiri,  akibat  terganggunya  permeabilitas,  sel  tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya  terhambat  atau  bahkan  mati.    Hasil pengamatan  skrinning  bakteri  obat  clindamycin terhadap  bakteri Escherichia  coli didapatkan  hasil  zona hambat  sebesar  15.49  mm  yang  termasuk    ke  dalam kategori  zona  hambat  kuat.  Klindamisin  memiliki  daya hambat kuat untuk menghambat bakteri Escherichia coli. Mekanisme  kerja  klindamisin  adalah  menghambat sintesa  protein  bakteri  dengan  mnegikat  subunit ribosom  50S  yang  menghambat  terbentuknya  ikatan peptide (Novaryatiin, 2016). Hasil pengamatan skrining antibakteri  menggunakan  aquadest  terhadap  bakteri Escherichia  coli didapatkan  zona  hambat  0  mm  yang termasuk  dalam  zona  hambat  lemah.  Dimana  kontrol negatif  (aquades)  yang  digunakan  mempunyai  tujuan untuk  memastikan  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan  oleh  infusa  bukan  pengaruh  dari  pelarut, melainkan  murni  dari  senyawa  aktif  yang  terkandung didalam infusa yang digunakan (Noval et al., 2019).
Hasil yang didapatkan pada pengujian ini dapat dilihat di tabel 2. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa tabung yang  berisi  infusa  daun  sungkai  ( Peronema  canescens Jack)  pada  konsentrasi  75%  dan  100%  menunjukkan bahwa  tabung  tidak  ada  pertumbuhan  bakteri,  hal  ini diperkuat dengan larutan tersebut jernih. Tabung yang berisi kontrol positif (Clindamycin) tidak menunjukkan adanya  pertumbuhan  bakteri,  hal  ini  dapat  diartikan bahwa  obat  klindamisin  memiliki  aktivitas  antibakteri, sedangkan tabung yang berisi kontrol negatif (aquadest) menunjukkan  adanya  pertumbuhan  ditandai  dengan adanya kekeruhan pada larutan tersebut.
Berdasarkan tabel 3 dapat diketahui bahwa infusa daun sungkai  ( Peronema  canescens Jack)  tidak  memiliki  nilai KBM  terhadap Escherichia  coli pada  seluruh  variasi konsentrasi.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  ditemukannya
pertumbuhan bakteri pada media padat dengan ekstrak berbagai konsentrasi.  Hal ini  disebabkan karena infusa daun  sungkai  termasuk  golongan  bakteriostatik  yaitu hanya mampu menghambat bakteri. Menurut penelitian (Pradito  dkk.,  2022)  hal  ini  juga  disebabkan  oleh beberapa faktor lingkungan pertumbuhan yaitu kondisi dan jenis tanah, serta suhu dan kadar CO2.

## KESIMPULAN
Dapat  disimpulkan  bahwa  bahwa  infusa  daun  sungkai memiliki  aktivitas  antibakteri  ditandai  dengan  adanya zona hambat dengan nilai 14,46 mm yang termasuk zona hambat intermediate sesuai  hasil  skrining.  Pengujian KHM  dilakukan  dari  konsentrasi  terendah  yang  dapat menghambat  bakteri Escherichia  coli yaitu  konsentrasi 75%  dengan  nilai  signifikansi  pada Kruskal-Wallis  Test
0,003 dan nilai signifikansi pada Mann-Whitney Test 1,00.
Sedangkan  untuk  pengujian  daya  bunuh  (KBM)  infusa daun sungkai tidak memiliki nilai KBM karena pada saat dilakukan  penyebaran  pada  media  padat  masih  banyak ditumbuhi oleh bakteri.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Universitas Sari Mulia dan pihak-pihak yang turut-serta membantu mulai  dari  mempersiapkan,  melaksanakan,  dan menyelesaikan penelitian ini.

## REFERENSI
Ardica,  J.  2022.  Isolasi  Senyawa  Kimia  dari  Ekstrak Etanol  Daun  Sungkai  (Peronema  canescens. Jack) dan Uji Aktivitas Antibakteri Terhadap Staphylococcus  epidermidis  dan  Escherichia coli. Thesis .
Ibrahim, A., & Kuncoro, H. 2012. Identifikasi Metabolit Sekunder Dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun  Sungkai  (Peronema  Canescens  Jack.) Terhadap Beberapa Bakteri Patogen. Journal Of Tropical Pharmacy And Chemistry , 2 (1), 8–
18. https://doi.org/10.25026/jtpc.v2i1.43
Kemenkes.  2016. Profil  Data  Kesehatan  Indonesia . Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.
Mutammima,  N.  2017.  Uji  Aktivitas  Antijamur, Penentuan  Konsentrasi  Hambat  Minimu (Khm)  Dan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (Kbm)  Serta  KltBioautografi  Ekstrak  Etanol Daun  Plethekan  (Ruellia  Tuberosa  L.) Terhadap Candida Albicans.
Noval,  N.,  Yuwindry,  I.,  &  Syahrina,  D.  2019.
Phytochemical  Screening  and  Antimicrobial Activity  of  Bundung  Plants  Extract  by Dilution  Method. Jurnal  Surya  Medika (JSM) , 5 (1), 143-154.
Pradito,  S.  A.,  Muthmainah,  N.,  &  Biworo,  A.  2022. Perbandingan  Aktivitas  Antibakteri  Sediaan Ekstrak Daun Sungkai ( Peronema canescens Jack  )  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus. Homeostatis :  Jurnal  Mahasiswa Pendidikan Dokter , 5 (1),  13 5–144. https://ppjp.ulm.ac.id/journals/index.php/hms /article/view/5212/3568 WHO.  2017.  Diarrheal  Disease. World  Health
Organization .
Zhou,  P.,  Fan,  H.,  Lan,  T.,  Yang,  X.  Lou,  Shi,  W.  F., Zhang, W., Zhu, Y., Zhang, Y. W., Xie, Q. M., Mani, S., Zheng, X. S., Li, B., Li, J. M., Guo, H., Pei, G. Q., An, X. P., Chen, J. W., Zhou, L., Mai, K. J., … Ma, J. Y. 2018. Fatal swine acute diarrhoea  syndrome  caused  by  an  HKU2- related coronavirus of bat origin. Nature , 556
(7700),255–259. https://doi.org/10.1038/s41586- 018-0010-9