J. Kartika Kimia , November 2020, 3, (2), 53-59 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Aktivitas Antibakteri Ektsrak Mikroalga Navicula salinicola terhadap Bakteri Propionibacteriom acnes dan Staphylococcus epidermidis

## Antibacterial Activity of Marine Microalgae Navicula salinicola Extract Against Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermidis
Dewi Kurnia*, Fitri Bella Mustika Sari, Wempi Budiana Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Bhakti Kencana *E-mail : dewi.kurnia@bku.ac.id
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v3i2.65
Received : 6 Nov 2020, Revised : 29 Nov 2020, Accepted : 29 Nov 2020, O nline : 30 Nov 2020

## Abstrak
Navicula  salinicola merupakan  salah  satu  jenis  mikroalga  laut  yang  termasuk  dalam  kelas Bacillariophyceae (diatom). Mikroalga ini bersifat bentik dan memiliki warna agak kecoklatan. Pada penelitian ini dilakukan uji aktivitas antibakteri dari mikroalga Naviculla salinicolla yang diekstraksi menggunakan  beberapa  pelarut  organik.  Adanya  aktivitas  antibakteri  dilihat  melalui  nilai  KHM  dan KBM  dari  masing-masing  ekstrak  serta  mengidentifikasi  golongan  senyawa  aktif  yang  terkandung dalam ekstrak tersebut. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi bertingkat menggunakan pelarut n-heksana,  kloroform,  dan  etanol.  Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis menggunakan  metode  mikrodilusi  dengan klindamisin  sebagai  standar  pembanding.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  kloroform  memiliki aktivitas  antibakteri  dengan  nilai  KHM  1.024  µg/mL  dan  nilai  KBM  >16.384  µg/ml.  Pemantauan ekstrak  kloroform  menunjukkan  adanya  senyawa  alkaloid,  fenol,  flavonoid,  steroid  dan  terpenoid. Hasil  pengujian  bioautografi  terhadap  ekstrak  kloroform Navicula  salinicola menunjukan  bahwa golongan senyawa fenol dan flavonoid memberikan aktivitas antibakteri.
Kata  kunci: aktivitas antibakteri,  Naviculla  salinicola,  Propionibacterium  acnes , Staphylococcus epidermidis

## Abstract
Navicula  salinicola  is  a  type  of  marine  microalgae  that  is  included  in  the  class  Bacillariophyceae (diatoms).  These  microalgae  are  benthic  and  have  a  slightly  brownish  color.  In  this  study,  the antibacterial activity test of the Naviculla salinicolla microalgae was extracted using several organic solvents.  The  presence  of  antibacterial  activity  was  seen  through  the  MIC  and  MBC  values  of  each extract and identified the active compound groups contained in the extract. Extraction was carried out by  graded  maceration  method  using  n-hexane,  chloroform,  and  ethanol  as  solvents.  Antibacterial activity test was carried out against Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermidis using the  microdilution  method with clindamycin  as  the standard  for  comparison.  The  results  showed that the  chloroform  extract  had  antibacterial  activity  with  a  MIC  value  of  1.024  µg  /  mL  and  a  MBC value>  16.384  µg  /  ml.  Monitoring  of  chloroform  extract  with  TLC  method  showed  the  presence  of alkaloids,  phenols,  flavonoids,  steroids  and  terpenoids.  The  results  of  bioautographic  testing  on  the chloroform  extract  of  Navicula  salinicola  showed  that  the  phenol  and  flavonoid  compounds  gave antibacterial activity
Keywords:  antibacterial  activity,  Naviculla  salinicola,  Propionibacterium  acnes , Staphylococcus epidermidis
1 Pendahuluan
Jerawat  adalah  penyakit  kulit  kronis  yang umum  melibatkan  penyumbatan  dan  atau peradangan  unit polisebacea (folikel  rambut  dan kelenjar sebasea) yang ditandai dengan munculnya  komedo,  papula,  pustul,  dan  nodul. Jerawat terjadi pada kulit yang banyak mengandung  kelenjar  sebasea  seperti  wajah, punggung,  bahu  dan  dada  [1].  Salah  satu penyebab terjadinya jerawat yaitu adanya infeksi bakteri Propionibacterium acnes atau Staphylococcus  epidermidis. Banyak  cara  yang dilakukan  untuk  menghilangkan  jerawat  mulai dari penggunaan obat-obat anti jerawat, perawatan  ke  klinik  kecantikan  hingga  cara tradisional  untuk  menghilangkan  masalah  akibat jerawat.  Penggunaan antibiotik dalam mengobati jerawat  pada  jangka  panjang  selain  dapat menimbulkan  resistensi  mikroba  juga  dapat menimbulkan kerusakan organ dan imunohipersensitivitas  [2].  Oleh  karena  itu  perlu dilakukan penelitian untuk memperoleh alternatif pengobatan  jerawat  menggunakan  bahan  atau senyawa yang lebih aman dan tidak menimbulkan resistensi.
Penggunaan bahan alam merupakan alternatif  dari  pengobatan  antibakteri.  Potensi yang  dapat  dikembangkan  yakni  berasal  dari tanaman bahari yaitu mikroalga. Jika dibandingkan tanaman lainnya, mikroalga mempunyai  keunggulan  yaitu  memiliki  waktu hidup singkat dan tidak membutuhkan lahan yang besar untuk kultivasinya. Dalam produk makanan, kosmetik, kosmeseutikal, nutriseutikal, dan  industri  biomedisin,  mikroalga  digunakan sebagai  sumber  senyawa  bioaktifnya.  Adapun beberapa senyawa yang efektif sebagai antiparasit,  antivirus  dan  antibakteri  seperti peptida,  asam  lemak,  gliserol,  pigmen,  karoten, sterol,  vitamin  dan  metabolit  yang  aktif  secara biologis [3–5].
Navicula  salinicola merupakan  salah  satu jenis  mikroalga  laut  yang  termasuk  dalam  kelas Bacillariophyceae (diatom).  Diatom  banyak dimanfaatkan  dalam  bioteknologi  dengan  tujuan utamanya  pada  produksi  biodiesel  karena memiliki  kadar  lemak  yang  tinggi  [6].  Lemak yang  terkandung  dalam Navicula  salinicola meliputi  asam  lemak  jenuh  dan  tidak  jenuh. Asam  lemak  jenuh  yang  teridentifikasi  yaitu asam  miristat,  asam  pentadekanoat,  asam palmitat  dan  asam  stearat  [7].  Asam  lemak  tak jenuh teridentifikasi sebagai omega-3 [8] omega- 7 dan asam eikosapentanoat (EPA) [7].
Beberapa  penelitian  menyatakan  bahwa polisakarida  mikroalga  memiliki  potensi  besar sebagai  antivirus,  antibakteri,  dan  senyawa antioksidan, serta penggunaan lainnya. Diketahui pula  bahwa Navicula  directa memiliki  aktivitas sebagai  antivirus  yang  mengandung  polisakarida dengan  aktivitas  antivirus  terhadap  HSV-1  dan HSV-2  dan  virus  influenza  [9]. Navicula  f. delicatula memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus,  Micrococus  luteus dan Pseudomonas  aeruginosa [10].  Berdasarkan paparan  diatas,  maka  pada  penelitian  dilakukan uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  n-heksana, kloroform,  dan  etanol Navicula  salinicola terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis.
2 Metode Penelitian/ Method

## 2.1 Alat
Peralatan  gelas  yang  digunakan  meliputi gelas  kimia,  Erlenmeyer,  gelas  ukur,  corong gelas,  tabung  reaksi,  batang  pengaduk,  pipet tetes, botol gelap, botol kaca berkapasitas 1 liter, pipa  L,  serta  cawan  petri.  Peralatan  non  gelas meliputi  lampu  neon,  aerator,  selang  plastik, sumbat  karet,  batang  statip,  bunsen,  tip  mikro, korek api, batang L, kuvet dispossible . Instrumen yang  digunakan  antara  lain Sentrifuge Beckman, autoklaf,  Neraca  Analitik Mettler  Toledo , mikroskop,  timer,  Spektrofotometer  UV-Vis, Freeze  Dryer ,  Alat  Sonikasi  Elmasonic  40  H, haemocytometer  ( Improved  Neurbaeur ),  pipet mikro  ( Eppendorf )  ukuran  10–100  μL  dan  100– 1000 μL, vortex, plat silika 60G F 254 , lampu UV 254  dan  366  nm, microplate ,  dan  inkubator anaerob,  membran  filter  bakteri  berukuran  0,2 μm,  kawat ose,  aluminium  foil,  penjepit  tabung, kertas saring, botol vial, pinset dan tabung falcon.

## 2.2 Bahan
Mikroalga  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah isolat kultur murni Navicula salinicola yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Biokimia, Program  Studi  Kimia,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Institut  Teknologi Bandung.  Bahan-bahan  lain  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  antara  lain  garam  tidak beriodium, Aqua  Pro  Injection ,  NaCl,  alkohol 70%, n-heksana, kloroform, etanol, kapas lemak, kasa  steril,  kertas  saring,  alumunium  foil, medium  Walne,  DMSO,  AlCl 3 ,  FeCl 3, sitroborat, H 2 SO 4, klindamisin,  bakteri Propionibacterium acnes , bakteri Staphylococcus epidermidis , MHB
( Muller  Hinton  Broth ),  MHA  ( Muller  Hinton Agar ).

## 2.3 Prosedur Penelitian

## Persiapan sampel
Penelitian  ini  dilakukan  dalam  beberapa tahapan  penelitian  meliputi  persiapan  bahan, penetapan kurva pertumbuhan, kultivasi, pemanenan, ekstraksi, pengujian aktivitas antibakteri,  dan  identifikasi  golongan  senyawa aktif. Proses kultivasi dilakukan di laboratorium Penelitian  Fakultas  Farmasi  Universitas  Bhakti Kencana  untuk  mengumpulkan  biomassa  basah dari  mikroalga Naviculla  salinicola. Kerapatan inokulum  sel Navicula  salinicola awal  yang digunakan  sebanyak  150.000  sel/mL.  Inokulum ini ditambahkan ke dalam 810 mL air laut steril dan diperkaya dengan medium Walne sebanyak 900  μL.  Selama  kultivasi,  diberi  aerasi  selama 24 jam dan foto periode 12:12 jam (gelap:terang)  dengan  intensitas  cahaya  5000- 7000  lux.  Proses  kultivasi  dilakukan  selama  7 hari kemudian dipanen menggunakan sentrifuga untuk memperoleh biomassa basah. Selanjutnya biomassa  dikeringkan  dengan  metode  beku kering untuk mendapatkan biomassa kering.
Ekstraksi  dilakukan  menggunakan biomassa kering  dengan  metode  maserasi  bertingkat dengan  pelarut  n-heksana,  kloroform,  dan  etanol selama 3x24 jam. Ekstrak yang didapat kemudian dipekatkan untuk digunakan pada uji selanjutnya. Ekstrak  yang  diperoleh  dikarakterisasi  dengan metode kromatografi lapis tipis dengan plat silika gel  60  F 254 sebagai  fasa  diam  dan  beberapa campuran  pelarut  organik  sebagai  fasa  gerak. Hasil pemisahan dilakukan identifikasi menggunakan  berbagai  penampak  bercak  yaitu H 2 SO 4 , AlCl 3 , FeCl 3 , pereaksi sitroborat, Liebermann Burchard, dan Dragendorf [11].

## Uji Akvitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan metode  mikrodilusi  dan disc  diffusion dari ekstrak  pelarut  n-heksana,  kloroform,  dan  etanol Navicula salinicola terhadap bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis dengan  menentukan  nilai  KHM (konsentrasi  hambat  minimum)  dan  KBM (konsentrasi  bunuh  minimum).  Pada  identifikasi golongan senyawa aktif ekstrak dilakukan dengan metode bioautografi kontak.
Suspensi  bakteri  uji  dibuat  dengan  cara meremajakan  bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis ke dalam tabung
reaksi  yang  berisi  agar  miring Muchler  Hilton Agar (MHA)  sebanyak  1  ose.  Selanjutnya dilakukan  inkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 37°C  [12].  Sebanyak  2  ose  bakteri  uji  hasil peremajaan,  disuspensikan  dalam  2  mL  NaCl fisiologis/NaCl  0,9%  dalam  tabung  reaksi  steril dan  dihomogenkan  dengan  vortex  selama  15 detik,  kemudian  kekeruhannya  dilihat  dengan membandingkan  kekeruhan  standar  0,5  Mc Farland  (setara  dengan  3x10 8 CFU/mL)  [13]. Larutan uji ekstrak mikroalga Navicula salinicola disiapkan  dengan  cara  melarutkan  sejumlah ekstrak ke dalam larutan DMSO ( dimethylsulfoxide ).  Konsentrasi  larutan  induk ekstrak  yang  digunakan  sebesar  32,768  µg/mL. Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  larutan klindamisin  dengan  konsentrasi  induk  1.024 µl/mL.
Penetapan  nilai  KHM  dilakukan  dengan metode  mikrodilusi  cair  dengan  menggunakan microplate yang terdiri dari 8 baris dan 12 kolom sehingga terdapat 96 sumur microplate . Sebanyak  100  µL  MHB  dimasukan  pada  kolom pertama sebagai kontrol negatif media. Kemudian ditambahkan 5 µL suspensi bakteri uji ke dalam 10 ml MHB, diaduk menggunakan alat vortex. Setelah itu, dimasukkan media yang telah dicampur  dengan  suspensi  bakteri  sebanyak  100 µL pada kolom yang kosong (kolom ke-2 hingga 12),  dan  ditambahkan  larutan  ekstrak Navicula salinicola yang telah diencerkan pada kolom ke- 12,  serta  dihomogenkan.  Kemudian  diambil sebanyak 100 µL  dan dipindahkan  ke  kolom  ke- 11.  Pengenceran  terus  dilakukan  sampai  pada kolom ke-3 yang merupakan konsentrasi terkecil. Kolom  ke-3  akan  memiliki  konsentrasi  ekstrak yang  terendah.  Setelah  itu  diinkubasi microplate pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Kemudian diamati  adanya  bagian  yang  jernih  (tidak  ada pertumbuhan bakteri) tersebut dinyatakan sebagai KHM. Pengujian ini dilakukan secara triplo [14].
Penetapan  nilai  KBM  dilakukan  dengan metode disc  diffusion .  Nilai  KBM  ditentukan dengan  melakukan  penggoresan  dari  hasil  dilusi yang  menunjukkan  KHM  dan  pada  konsentrasi diatas KHM atau tidak menunjukkan pertumbuhan  (bagian  yang  jernih),  diambil masing-masing 5 µL lalu ditanamkan pada media MHA  padat.  Cawan  petri  diinkubasi  pada  suhu 37°C selama 18-24 jam. KBM ditentukan apabila tidak  ada  pertumbuhan  pada  permukaan  media [15].
Pengujian  bioautografi  dilakukan  dengan menggunakan metode bioautografi kontak. lempeng  kromatogram  hasil  elusi  senyawa  yang akan  diuji  dari  ekstrak  mikroalga  laut Navicula salinicola diletakan  di  atas  media  padat  yang sudah  diinokulasi  dengan  mikroba  uji  selama  30 menit. Selanjutnya  dilakukan inkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam tanpa lempeng KLT, adanya dugaan  senyawa  antimikroba  ditandai  dengan adanya  daerah  jernih  yang  tidak  ditumbuhi mikroba.

## 3 Hasil dan Diskusi
Mikroalga Navicula salinicola yang digunakan  pada  pelitian  ini  diperoleh  dari Laboratorim Penelitian Biokimia Institut Teknologi  Bandung.  Kultur  diperoleh  dalam keadaan  aksenik,  yaitu  hanya  terdiri  dari  satu jenis mikroalga saja dalam stok medium cair dan tidak terdapat mikroalga lain maupun kontaminan lainnya. Sel Navicula salinicola memiliki bentuk lonjong  dan  berwarna  coklat  keemasan  (Gambar 1).
Gambar 1. Sel Navicula salinicola di bawah pengamatan mikroskop dengan perbesaran 40× ( Sumber : Koleksi pribadi)
Biomassa  mikroalga Navicula  salinicola diperoleh dengan cara kultivasi dalam botol-botol kaca  dengan  kapasitas  1  L  (fotobioreaktor sederhana)  dengan  teknik batch .  Teknik batch merupakan  cara  menginokulasi  sel  tunggal  dan mengkultivasinya  dalam  kolam  atau  reaktor dengan  periode  pertumbuhan  tertentu  dan dipanen  ketika  kepadatan  mikroalga  mencapai maksimum. Parameter pertumbuhan yang digunakan  antara  lain  fotoperiode  12:12  (gelap  : terang)  menggunakan  lampu  neon  dengan intensitas ±5000-7000 lux; suhu ruangan berkisar ±  24-25  °C;  serta  aerasi  sebagai  sumber  CO 2 selama  24  jam.  Air  laut  yang  digunakan  sebagai media  pertumbuhan  ditambahkan  nutrisi  makro dan  mikro  dengan  medium  Walne.  Penggunaan lampu  ini sebagai pengganti  sinar matahari yang merupakan  menjadi  sumber  foton  pada  proses fotosintesis  sel  mikroalga.  Aerasi  digunakan sebagai  sumber  CO 2 bagi  mikroalga  untuk
melakukan fotosintesis, menghomogenkan nutrisi yang  telah  diberikan  dan  cahaya  yang  berada  di dalam fotobioreaktor.
Kultivasi mikroalga dilakukan dengan menggunakan medium Walne Pemanenan dilakukan  dengan  metode  sentrifugasi  dengan kecepatan 5.000 rpm selama 20 menit pada suhu 4  °C.  Teknik  sentrifugasi  merupakan  teknik pemanenan  yang dinilai lebih efektif dan efisien untuk  dilakukan  pada  pemanenan  sel  yang berukuran  kecil.  Selain  itu  sel  yang  diperoleh merupakan  sel  yang  utuh,  belum  terjadi perubahan  komposisi  sel  bila  dibandingkan dengan  pemanenan  cara  koagulasi  dengan penambahan  senyawa  koagulan.  Selanjutnya sampel mikroalga dilakukan pengeringan dengan cara freeze dry, untuk menghilangkan kandungan air dalam mikroalga sehingga diperoleh biomassa kering.  Penghilangan  kandungan  air  dilakukan agar air tidak mengganggu proses ekstraksi serta sampel  biomassa  mikroalga  bertahan  lama  dan tidak ditumbuhi oleh jamur.
Sebanyak 20 gram biomasa kering mikroalga Navicula salinicola diekstraksi dengan menggunakan metode maserasi bertingkat menggunakan  pelarut n -heksana,  kloroform  dan etanol  96%.  Metode  maserasi  dipilih  karena metode ini cukup sederhana dan untuk menghindari  kemungkinan  terjadinya  penguraian zat  aktif  yang  terkandung  dalam  sampel  oleh pengaruh  suhu,  karena  pada  metode  ini  tidak memerlukan  pemanasan.  Sebelum  dilakukan maserasi,  terlebih  dahulu  dilakukan  pemecahan sel  dengan  cara  fisika  yaitu  dengan  gelombang ultrasonik menggunakan alat sonikator. Gelombang suara yang dihasilkan dapat menyebabkan terjadinya kavitasi yaitu terbentuknya  gelembung-gelembung  gas  yang bergerak pada kecepatan tinggi sehingga terbentuk  energi  mekanik.  Efek  kavitasi  banyak digunakan  untuk mengganggu  sel mikroalga  dan energi  mekanik  tersebut  yang  menyebabkan pecahnya  dinding  sel  [16,17].  Hasil  ekstraksi dalam  berupa  bobot  ekstrak  dan  rendemen diperlihatkan pada Tabel 1.
Pemantauan KLT dilakukan pada ekstrak n -heksana  dan  ekstrak  kloroform. Pemantauan ekstrak dilakukan dengan tujuan untuk  mengetahui  golongan  senyawa  aktif yang  terkandung  pada  ekstrak  tersebut. Analisis dengan menggunakan KLT merupakan  pemisahan  komponen  kimia berdasarkan prinsip adsorpsi dan partisi yang
ditentukan  oleh  fase  diam  (adsorben)  dan fase  gerak  (eluen).  Dari  berbagai  kombinasi fase gerak yang diujikan, diketahui kombinasi  fase  gerak  antara  pelarut n - heksana : etil asetat dengan perbandingan 7:3 (v/v)  yang  menghasilkan  noda  pemisahan ekstrak n -heksana  terbaik  pada  plat  KLT silika  gel  F 254 .  Pada  ekstrak  kloroform  fase gerak  yang  menghasilkan  noda  pemisahan terbaik adalah kombinasi pelarut n -heksana : etil  asetat  :  kloroform  dengan  perbandingan 5:4:1  (v/v).  Hasil  identifikasi  golongan senyawa  pada  ekstrak n -heksana  dan kloroform dengan berbagai penampak bercak dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 1. Hasil Rendemen Ekstrak
Tabel 2. Uji Fitokimia
Pengujian  aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak n -heksana,  kloroform,  dan  etanol  mikroalga  laut Navicula  salinicola dilakukan  menggunakan metode mikrodilusi terhadap bakteri P.acnes dan S.epidermidis .  Kedua  jenis  bakteri  tersebut dipilih  dalam  uji  aktivitas  antibakteris  dengan pertimbangan  sebagai  perwakilan  Gram  positif yang  merupakan  jenis  bakteri  penyebab  infeksi paling banyak serta adanya masalah peningkatan resistensi  terhadap  berbagai  jenis  antibiotik ( Multi  Drug  Resistance ).  Konsentrasi  larutan induk  ekstrak  yang  digunakan  sebesar  32.768 µg/mL.  Antibiotik  yang  digunakan  sebagai pembanding adalah klindamisin yang merupakan
suatu antibiotik yang bekerja sebagai bakteriostatik  dan  bakterisidal,  tergantung  pada konsentrasi  obat,  tempat  infeksi  dan  organisme penyebab  infeksi  [18].  Klindamisin  digunakan untuk  mengobati  infeksi  serius  akibat  bakteri anaerob  atau  bakteri  aerob  gram  positif  [19]. Konsentrasi  untuk  semua  sampel  uji  adalah  32; 64;  128;  256;  512;  1.024;  2.048;  4.096;  8.192; dan 16.384 µg/mL. Konsentrasi standar klindamisin  yang  digunakan  yaitu  1;  2;  4;  8; 16; 32;  64;  128;  256  dan  512  µg/mL.  Berdasarkan pengujian  yang  telah  dilakukan,  ekstrak  terbaik yang memberikan aktivitas antibakteri yaitu pada ekstrak  kloroform  dengan  nilai  KHM  1.024 µg/mL  yang  menunjukkan  kejernihan  pada  saat pengujian  mikrodilusi  dan  nilai  KBM    >16.384 µg/mL  yang  menunjukkan  masih  terdapatnya koloni  bakteri  pada  media  agar  MHA.  Hasil pengujian aktivitas  antibakteri  dapat  dilihat  pada tabel 3.
Tabel 3. Aktivitas antibakteri ekstrak Navicula salinicola
Jenis ekstrak P.acnes (µg/ml) S.epider midis (µg/ml) n-heksana KHM - - KBM - - Kloroform KHM 1.024 1.024 KBM >16.384  >16.384 Etanol KHM - - KBM - - Standar (Klindamisin) KHM 16 16 KBM 512 512
Dalam  pengujian  aktivitas  ekstrak,  jika ekstrak  menghasilkan  KHM  kurang  dari  100 µg/mL, maka aktivitas antibakteri dikatakan kuat, jika  diperoleh  KHM  dalam  rentang  100-500 µg/mL maka aktivitas antibakteri dianggap cukup kuat,  jika  diperoleh  KHM  dalam  rentang  500- 1000  µg/mL  maka aktivitas  antibakteri  dianggap lemah  dan  jika  KHM  yang  diperoleh  lebih  dari 1000 µg/mL sediaan uji dianggap tidak memiliki aktivitas antibakteri [20]. Berdasarkan pernyataan tersebut, ekstrak kloroform N. salinicola memang memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  termasuk dalam  kategori  lemah.  Sehingga  ekstrak  tersebut tidak  berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai obat  antibakteri  baru  terhadap  bakteri P.acnes dan S.epidermidis dan  antibiotik  pembanding yakni  klindamisin  memiliki  aktivitas  antibakteri yang tergolong kuat pada kedua bakteri uji.
Pelarut Bobot ekstrak (gram) Rendemen (%) n -heksana 5,066 25,330 Kloroform 4,295 21,475 Etanol 3,282 16,410 Golongan senyawa Ekstrak n -heksana kloroform Alkaloid Flavonoid Fenol Steroid Terpenoid + + + + - + + + + +
Pengujian  bioautografi  ditujukan  untuk mengetahui golongan senyawa yang aktif sebagai antibakteri. Dengan dilakukannya metode bioautografi,  dapat  mengetahui  senyawa  yang dianggap efektif dalam menghambat pertumbuhan  bakteri,  dalam  hal  ini  adalah senyawa yang terkandung dalam ekstrak kloroform.  Berdasarkan  pengujian  tersebut, terdapat dua bercak zona bening pada media agar MHA. Hasil bioautografi dapat dilihat di Gambar 2.
(a) (b)
Gambar 2. Hasil Uji Bioautografi : (a) Terhadap Propionibacterium acnes; (b) Terhadap Staphylococcus epidermidis
(a) (b)
Gambar 3. Plat KLT pada uji bioautografi (a) setelah di semprot AlCl 3 ; (b) setelah disemprot FeCl 3
Hasil pengujian dari ekstrak kloroform yang memiliki  potensi  aktivitas  antibakteri  kemudian dikembangkan  dengan  eluen  n-heksana  :  etil asetat  :  kloroform  (5:4:1)  terbentuk  zona  bening seperti yang tertera pada Gambar 2 . Zona bening tersebut menandakan adanya aktivitas penghambatan  yang  dihasilkan  oleh  senyawa yang  teripsahkan  pada  plat  KLT.  Senyawa  yang diduga  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada mikroalga  laut Navicula  salinicola adalah golongan  fenol  yang  termasuk  dalam  golongan flavonoid  juga,  terdapat  dua  bercak  zona  bening yang  menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Ekstrak
kloroform ini menunjukkan positif senyawa fenol yang menandakan bercak berubah menjadi warna hijau  dan  hitam,  sedangkan  setelah  disemprot AlCl 3 pada  penetapan golongan senyawa flavonoid menunjukkan bercak warna kuning/jingga (Gambar 3).

## 4 Kesimpulan
Pemantauan ekstrak kloroform menunjukkan adanya  senyawa  alkaloid,  fenol,  flavonoid, steroid dan terpenoid. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak kloroform Navicula
salinicola memiliki  aktivitas  antibakteri  yang lemah dengan nilai KHM 1.024 µg/mL dan nilai KBM  >16.384  µg/ml.  Meskipun  demikian,  uji bioautografi terhadap ekstrak kloroform Navicula salinicola menunjukan adanya aktivitas antibakteri  yang  teridentifikasi  sebagai  aktivitas dari golongan senyawa fenol dan flavonoid.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  pada Masyarakat (LPPM) Universitas Bhakti Kencana atas  bantuan  dana  penelitian  melalui  program Hibah Riset Dasar tahun 2019.

## Daftar Pustaka
[1]   Dawson  AL,  Dellavalle  RP.  Acne  vulgaris. BMJ. 2013;346(may08 1):f2634–f2634. Tersedia pada: http://dx.doi.org/10.1136/bmj.f2634 [2]   Nugroho  R.  Terapi  Topikal  Clindamycin Dibandingkan  Dengan  Niacinamide  +  Zinc Pada Acne  vulgaris .  Vol.  2,  Jurnal Kedokteran Diponegoro. Universitas Dipenegoro; 2013.
[3]   Barsanti  L,  Gualtieri  P.  Algae:  Anatomy, Biochemistry,  and  Biotechnology.  Taylor and  Francis  Group.  Florida:  CRC  Press; 2006.
[4]   Setyaningsih  I,  Linawati  H,  Monintja  DR, Sondita  FA,  Bintang  M,  Lailati  N,  et  al. Ekstraksi  Senyawa  Antibakteri  Dari  Diatom Chaetoceros  gracilis dengan  Berbagai Metode. Bogor: IPB Press; 2017.
[5]   Kawaroe  M,  Prartono  T,  Sunuddin  A,  Sari DW,  Augustine  D.  Mikroalga:  Potensi  dan Pemanfaatan  untuk  Produksi  Bio  Bahan Bakar. Bogor: IPB Press; 2010.
[6]  Markou  G,  Angelidaki  I,  Georgakakis  D.
Microalga carbohydrates: an overview of the factors influencing carbohydrates production,  and  of  main  bioconversion technologies for production of biofuels. Appl
Microbiol  Biotechnol .  2012;96(3):631–45. Tersedia pada: http://dx.doi.org/10.1007/s00253-012-4398-
0
[7]   Ramdanawati  L.  Analisis  Komposisi  Asam Lemak  Dari  Mikroalga  Laut Navicula salinicola . Al-Kimia .  2018;6(2).  Tersedia pada: http://dx.doi.org/10.24252/al- kimia.v6i2.6196
[8]   Etesami  E,  Saba  F,  Noroozi  M,  Amoozegar MA, Khaniki GB, Fazeli AS. Caspian Sea’s Navicula  salinicola  Hustedt  1939  and  effect of  the  prolonged  culture  on  its  fatty  acid profile. Int  J  Aquat  Biol .  2017;5(4):268–74.
Tersedia
pada: https://ij-
aquaticbiology.com/index.php/ijab/article/vi ew/271
[9]   Ahmadi  A,  Zorofchian  Moghadamtousi  S, Abubakar S, Zandi K. Antiviral Potential of Algae Polysaccharides Isolated from Marine Sources:  A  Review. Biomed  Res  Int .
2015/09/21.  2015;2015:825203.  Tersedia pada:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26484353
[10]  Elkomy  R,  Ibraheem  IBM,  Shreadah  M, Mohammed  R,  Ismael  A.  Antimicrobial activity  of  three  microalgae  isolated  from Mediterranean Sea coast, Egypt. J Pure Appl Microbiol . 29 November 2015;9:2751+.
[11]  Harbone JB. Metode
Fitokimia, Diterjemahkan  Oleh  Kosasih  Patmawinata dan Iwang Sudiro. Bandung: ITB; 1987.
[12]  Widyana  W,  Khotimah  S,  Lovadi  I. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Lumut
Octoblepharum  albidium  Hewd  Terhadap Pertumbuhan  Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. J Protobiont .
2014;3(2):166–70.
Tersedia pada: https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jprb/artic
le/view/5545/5709
[13]  Raihana N. Profil Kultur Dan Uji Sensitivitas  Bateri  Aerob  Dari  Infeksi  Luka Operasi Laparatomi di Bangsal Bedah RSUP
DR. M. Djamil Padang. Universitas Andalas; 2011.
[14]  Clinical  and  Laboratory  Standard  Institute. Performance  Standard  of  Antimicrobal Susceptibility  Testing  18th  ed.  Wayne; 2009.
[15]  National  Committee  for  Clinical  Laboratory
Standards. Methods For Dilution Antimicrobial Susceptibility Test For Bacteria  That  Grow  Aerobically.  Approved Standard-Eight Edition;
[16]  Chaplin M., Buckle C. Enzyme technology. , Cambridge,  New  York  u.a.  1990.  New York: Cambridge University Press; 1990.
[17]  Lee SJ, Yoon B-D, Oh H-M. Rapid Method for  the  Determination  of  Lipid  from  the Green Alga Botryococcus braunii. Biotechnol Tech . 1998;12(7):553–6. Tersedia pada: http://dx.doi.org/10.1023/a:1008811716448
[18]  Tri  Mulyani  YW,  Hidayat  D,  Isbiantoro  I, Fatimah  Y.  Ekstrak  Daun  Katuk  (Sauropus androgynus  (L)  Merr)  Sebagai  Antibakteri Terhadap Propionibacterium  acnes dan
Staphylococcus epidermidis . J Farm Lampung .  2017;6(2):46–54.  Tersedia  pada:
http://dx.doi.org/10.37090/jfl.v6i2.21
[19] BPOM RI. Klindamisin [Internet]. [dikutip 2
November 2020]. Tersedia pada:
http://pionas.pom.go.id/monografi/klindamis in
[20]  Holetz FB, Pessini GL, Sanches NR, Cortez DAG,  Nakamura  CV,  Dias  Filho  BP. Screening  of  some  plants  used  in  the Brazilian  folk medicine for  the  treatment  of infectious diseases. Mem Inst Oswaldo Cruz . 2002;97(7):1027–31. Tersedia pada: http://dx.doi.org/10.1590/s0074- 02762002000700017