Efektiﬁ tas  Rebusan  Daun  Babadotan  Dan  Kombinasinya  dengan Pregabalin Sebagai Anti Nyeri Neuropatik Serta Uji Toksisitas Akutnya
(The Eﬀ ectiveness Of Babadotan  Leaves Aqueous  Exctract And  Its Combination With Pregabalin As Anti Neuropathic-Pain
And Acute Toxicity Testing)

## YEDY PURWANDI SUKMAWAN*, HENDY SUHENDY, MARITSA NURFATWA
Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bakti Tunas Husada, Tasikmalaya, Jawa Barat, Indonesia.
Diterima 21 Januari 2021, Disetujui 19 September 2021
Vol. 19, No. 2 JURNAL ILMU KEFARMASIAN  INDONESIA, Oktober 2021,  hlm. 184-188 ISSN 1693-1831, E-ISSN 2614-6495
Abstract: Neuropathic pain is a condition that is diﬃ cult to treated and impaired quality of life. The objective of the study was to determine the anti-neuropathic pain eﬀ ectivity of Ageratum conyzoides aqueous extract and the acute toxicity study. We had 7 groups (normal, negative, pregabalin, ageratum. conyzoides-I (AC-I) 50mg/kg BW, A. conyzoides-II (AC-II) 100mg/kg BW, combination of pregabalin and AC-II),  combination  of AC-II and  naloxone).  Each  group  contain  5  animals  (mice). All  groups was  induced  with  pyridoxine  400  mg/kg  BW  i.p  for  14  days  to  cause  neuropathy  and  followed  by hyperalgesia, allodynia, and wire-hang test. In the acute toxicity study, we had 1 group and contain 5 animals (rats).  The results of the hyperalgesia and allodynia study showed the eﬀ ect of AC-II was better than AC-I. The combination of pregabalin and AC-II was better than AC-II as monotherapy (p<0.05). However, AC II activity was abolished when combined with naloxone. In wire hang test demonstrated no diﬀ erence between falling score (p: 0.053) and reaching score (0.903), that showed AC-II wasn’t impaired the motoric system. No death or toxicity symptoms were observed for 14 days in the acute toxicity study. A. conyzoides aqueous extract is potential for anti-neuropathic pain..
Keywords : Ageratum conyzoides, feces, water extract, anti-neuropathic pain.
Abstrak: Nyeri neuropatik merupakan kondisi yang sulit untuk ditangani dan mengakibatkan penurunan kualitas hidup. Penelitian bertujuan untuk mengetahui efek rebusan daun Ageratum conyzoides L (AC) sebagai anti-nyeri neuropatik disertai proﬁ l keamanannya. Hewan percobaan (mencit) dikelompokkan menjadi tujuh kelompok dengan masing-masing terdiri dari 5 hewan. Pada semua kelompok diberikan induksi piridoksin (400 mg/Kb BB) selama 14 hari kecuali kelompok normal, yang diikuti pemberian sediaan sesuai dengan kelompoknya serta dilanjutkan dengan pengujian thermal allodynia , hiperlagesia , dan wire  hang .  Pengujian  toksisitas  akut  menggunakan  tikus  dengan  menggunakan  dosis  2000  mg/ kg BB. Hasil thermal allodynia dan hiperalgesia menunjukkan AC-II memberikan efek peningkatan threshold pain lebih baik dibandingkan AC-I. Pada kombinasi AC-II dan pregabalin memberikan efek paling  baik  dibandingkan  dengan  kelompok  lainnya dan menunjukkan efek sinergistik. Akan tetapi, efek AC-II mengalami penurunan (reversal) bila dikombinasikan dengan naloxone , hal ini menunjukkan adanya keterlibatan pada reseptor opioid (µ, κ and σ). Pengujian wire hang menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan dalam falling score (p;0.053) dan reaching score (p: 0.903), hal ini menunjukkan bahwa AC-II tidak mengakibatkan gangguan terhadap fungsi motorik. Pada pengujian toksisitas akut, tidak ditemukan gejala toksisitas ataupun kematian terhadap hewan percobaan. Berdasarkan hal tersebut maka dapat disimpulkan bahwa rebusan daun babadotan berpotensi sebagai anti-nyeri neuropatik.
Kata kunci: Ageratum conyzoides , rebusan, anti-nyeri neuropatik .
185  SUKMAWAN ET AL.

## Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia
METODE.  Penyediaan  Hewan  Uji .  Seluruh prosedural  dalam  penelitian  ini  telah  dilakukan penelaahan dan disetujui oleh Komisi Etik Penelitian Universitas  Padjadjaran  dengan  nomor  no.  938/ UN6.KEP/EC/2019.  Hewan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  mencit  putih  jantan  galur swiss  webster  dengan  berat  20-25  g.  Hewan  uji diaklimatisasi terlebih dahulu selama 5 hari. Hewan ditempatkan pada kondisi standar dengan temperatur 25 0 C, kelembaban 50-70% dan siklus 12 jam gelap/ 12 jam terang. Hewan diberikan makanan standar dan minuman ad libitum.
Penyediaan  Tanaman. Daun  Babadotan  ( A. conyzoides L)  didapatkan  dari  daerah  Singaparna, Kabupaten Tasikmalaya. Tanaman diindentiﬁ kasi di Herbarium Sekolah Ilmu Teknologi Hayati, Institut Teknologi  Bandung,  Jawa  Barat,  Indonesia.  Daun yang  diperoleh  dicuci  menggunakan  air  mengalir, dikeringkan  dan  diserbukkan.  Serbuk  daun  ini merupakan bahan uji untuk pengujian aktivitas anti- nyeri neuropatik.
Pengujian  Skrining  Fitokimia. Pengujian skrining ﬁ tokimia meliputi ﬂ avonoid, kuinon, tanin, saponin, alkaloid, monoterpen-seskuiterpen.
Pembuatan Rebusan Daun Babadotan. Rebus daun  babadotan  yang  telah  diserbukkan  dalam  air mendidih  selama  15  menit.  Rebusan  ini  digunakan sebagai bahan uji.
Pengelompokkan  Hewan  Uji. Hewan dikelompokkan  menjadi  tujuh  kelompok  masing- masing  5  hewan.  Kelompok  tersebut  terdiri  dari kelompok  normal,  kelompok  negatif  (piridoksin secara intraperitoneal (i.p)  dosis  400  mg/Kg  BB selama  14  hari  sehari  dua  kali),  kelompok  positif (piridoksin secara i.p dosis 400 mg/Kg BB selama 14 hari sehari dua kali, kemudian diberikan pregabalin dosis  0.195  mg/20  g  BB  mencit),  kelompok  I (piridoksin secara i.p dosis 400 mg/Kg BB selama 14 hari sehari dua kali, kemudian diberikan infusa daun AC 0,2 mL dengan dosis 50 mg/Kg BB), kelompok II (piridoksin secara i.p dosis 400 mg/Kg BB selama 14 hari sehari dua kali, kemudian diberikan infusa daun AC 0,2 mL dengan dosis 100 mg/Kg BB). Kelompok III (piridoksin secara i.p dosis 400 mg/Kg BB selama 14 hari sehari dua kali, kemudian diberikan kombinasi infusa daun AC0,2 mL dengan dosis 100 mg/Kg BB dan  pregabalin  dosis  0,195  mg/20  g  BB  mencit), Kelompok IV (piridoksin secara i.p dosis 400 mg/Kg BB selama 14 hari sehari dua kali, kemudian diberikan naloxone  (4mg/kg  BB  sc)  dan  15  menit  kemudian diberikan infusa daun AC dengan aktivitas terbaik.
Pengujian Thermal  hyperalgesia. Hewan percobaan  ditempatkan  pada hot  plate dengan temperatur terjaga pada 50±1 0 C. Pengujian dilakukan

## PENDAHULUAN
NYERI  neuropatik  dihasilkan  akibat  adanya disfungsi  atau  kerusakan  pada  syaraf (1-3) .  Penderita nyeri neuropatik mengalami penurunan kualitas hidup. Para  penderita  menjelaskan  hambatan  yang  terjadi akibat  nyeri  yang  dideritanya  seperti  kemampuan bekerja, kemampuan mobilitas, serta dampak sosial. Selain  itu,  terdapat  beban  biaya  yang  besar  pada penderita  nyeri  baik  biaya  langsung  ataupun  tidak langsung (4-5) .
Penggunaan obat-obatan anti neuropatik seperti pregabalin terbukti efektif serta dapat meningkatkan kualitas hidup pasien. Terdapat beberapa kekurangan seperti efek samping sedasi, hipotensi ortostatik, resiko terjatuh, dan hipersensitiﬁ tas yang dapat mengancam jiwa (5-9) . Berdasarkan hal ini, maka pencarian obat baru dengan efek samping yang lebih ringan untuk keadaan nyeri neuropatik perlu dilakukan.
Ageratum  conyzoides atau  yang  sering  dikenal di  Indonesia  sebagai  babandotan  atau  bandotan secara  empiris  telah  digunakan  sebagai  obat  untuk penahan rasa sakit dan obat (10,11) . Data etnofarmakologi babadotan  menunjukkan  telah  digunakan  untuk berbagai  macam  pengobatan  seperti  pencahar, optalmik, anti-piretik, kolik, penyembuhan luka, sakit kepala, sesak, infeksi, diare, reumatik, analgesik dan anti-inﬂ amasi, pelindung kardiovaskular, anti alergi, insomnia, digunakan pada penderita HIV, hemostatik, dan  hemostatik  yang  diinduksi  kombinasi  asetosal, clopidogrel dan enoxaparin (12-14) .
Meskipun  sudah  terdapat  penelitian  mengenai efek  analgesik  dan  antiinflamasinya,  akan  tetapi efek  anti-nyeri  neuropatik  rebusan  daun  babadotan serta kombinasinya dengan pregabalin masih belum diketahui. Bila pada hasil penelitian daun babadotan ini  memiliki  aktifitas  anti-nyeri  neuropatik  dan terdapat efek sinergis dalam kombinasinya, maka kita dapat  menurunkan  dosis  pregabalin  yang  akhirnya dapat  menurunkan  efek  samping  yang  terjadi. Berdasarkan  hal  tersebut  maka  pengujian  aktiﬁ tas anti-nyeri neuropatik daun babadotan perlu dilakukan pengujian  sebagai  novel  pengobatan  neuropatik disertai pengujian keamanannya.

## BAHAN DAN METODE
BAHAN. P yridoxine   (Brataco),  naloxone (Fahrenheit),  Daun  kering  babandotan,  aqua  pro injection (Ikapharmindo), pregabalin (Pﬁ zer).
Alat. Alat  yang  digunakan  yaitu:  Eddy’s hot plate , syringe 1 mL dan 3 mL, panci Infus, wire hang (panjang 55 cm, jarak atas-bawah 35 cm), sode oral, stopwatch , gelas ukur 10, 25, 50 dan 100 mL.
Vol 19, 2021
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia  186
dalam 15 detik. Respon yang dilihat adalah terjadinya lompatan atau menjilati telapak kakinya,  kemudian dicatat waktu reaksinya menggunakan stopwatch .
Pengujian Thermal Allodynia . Hewan percobaan ditempatkan pada hot plate dengan temperatur terjaga pada 40±1 0 C. Pengujian dilakukan dalam 60 detik. Respon yang dilihat adalah terjadinya lompatan atau menjilati  telapak  kakinya,  kemudian  dicatat  waktu reaksinya menggunakan stopwatch . Pengujian Wire  Hang .  Hewan  percobaan dibiarkan  menggelantung  pada  alat  uji  yang  telah disediakan (panjang kabel 55 cm, jarak atas-bawah 35 cm). Pengujian dilakukan dalam waktu 180 detik. Respon yang dilihat meliputi 3 parameter yaitu falling score dan reaching  score .  Pengujian  ini  dilakukan untuk mengetahui fungsi motorik.
Pengujian Toksisitas Akut. Uji Toksisitas  ini berdasarkan  peraturan  KBPOM  No.  7  tahun  2014 tentang  pedoman  uji  toksistas  non-klinik  secara in vivo dan  menurut  OECD  No.  425.  Uji  toksisitas ini  menggunakan  5  hewan  percobaan  tikus  betina galur  wistar  dan  diberikan  pemerian  rebusan  daun babadotan  dengan  dosis  2000  mg/Kg.  Bila  hewan percobaan mati, maka pengujian dilakukan pada satu hewan  lainnya,  bila  hewan  tersebut  kembali  mati maka pengujian dihentikan. Akan tetapi, bila hewan hidup  maka  pengujian  dilakukan  secara  berurutan pada  3  hewan  uji  lainnya.  Pengamatan  dilakukan pada 4 jam pertama pada hari kesatu dan dilanjutkan sehari sekali setiap harinya sampai hari ke 14. Hasil pengamatan  yang  diamati  adalah  jumlah  kematian hewan percobaan serta waktu terjadinya. Selain itu, paramater toksisitas lain  seperti warna kulit, mata, salivasi, respirasi, urinasi (warna), gatal dan kejang atau tremor juga dilakukan pengamatan.
Analisa  Statistika. Seluruh  data  disajikan dalam  bentuk  rataan  ±SD.  Data  dilakukan  analisa statistika  menggunakan One  way ANOVA  apabila data  normal  dan  homogen,  akan  tetapi  bila  tidak normal dan homogen maka menggunakan pengujian non parametrik. Data ANOVA dilanjutkan dengan uji post-hoc Tukey .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Skrining Fitokimia. Hasil skrining ﬁ tokimia menunjukkan  bahwa  simplisia  dan  rebusan  daun babadotan ( A. conyzoides ) memberikan hasil positif terhadap  metabolit  sekunder  ﬂ avonoid,  tanin  dan monoterpen-seskuiterpen. Babadotan sangat kaya akan tannin, ﬂ avonoid dan monoterpen-seskuiterpen (15,18) .
Hasil skrining ﬁ tokimia diperlihatkan pada Tabel 1.
Terdapat  dua  puluh  satu  ﬂ avonoid  yang  telah dilaporkan terkandung dalam seluruh bagian tanaman termasuk 119 polymethoxylated ﬂ avones, scutellarein- 5,6,7,1-tetrahydroxyﬂ avone,  quercetin,  quercetin-3- rhamnopiranoside,  kaempferol,  14  polymethoxy ﬂ avones, Eupalestin, quercetin-3- rhamnopiranoside and  kaempferol  3,7-  diglucopiranoside,  isoﬂ avone glycoside,  5,7,2,19-tetrahydroxy-6,3-di-(3,3- dimethylallyl)- isoﬂ avone 5-O-α–L-rhamnopyranosyl– (1→19)–α-L-rhamnopyranoside (16,17) .  Selain kandungan ﬂ avonoid, telah dilaporkan pula mengenai kandungan  60  senyawa  dalam  minyak  atsiri A. conyzoides dengan kandungan senyawa tertinggi yaitu precocene II (18) . Allodynia. Berdasarkan hasil pengujian thermal allodynia (40 0 C)  pada  kelompok  negatif    pada Gambar 1, menunjukkan penurunan waktu threshold pain dibandingkan  kelompok  normal.  Hal  ini menunjukkan kerusakan pada syaraf yang diakibatkan induksi  piridoksin  ( positive  neuropathy/gain  of functions ). Sebaliknya, pada kelompok lainnya yaitu kelompok normal, pregabalin, AC-I, AC-II, AC-II plus pregabalin terjadi peningkatan persentase threshold pain sebesar 190%, 160%, 193%, 225% dan 400% dibandingkan kelompok negatif.
No Metabolit Sekunder Simplisia Rebusan 1 Flavonoid + + 2 Kuinon - - 3 Tanin + + 4 Saponin - - 5 6 Alkaloid Monoterpen- Seskuiterpen - + - + Tabel 1. Hasil skrining ﬁ tokimia.
Keterangan: positif (+); negatif (-)
Gambar 1. Hasil pengujian thermal Allodynia .
Keterangan:
*Menunjukkan terdapat perbedaan bermakna dibandingkan kelompok negatif.
Keterangan kiri ke kanan : kelompok normal, negatif, prega- balin, AC-I, AC-II, AC-II + pregabalin, AC + naloxone.
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia
187  SUKMAWAN ET AL.
Quercetin  diketahui  terkandung  didalam  daun babadotan (16,17) .  Pada  penelitian  yang  dilakukan Anjaneyulu dan  Chopra  (2003) menyatakan  bahwa quercetin memberikan efek anti-neuropatik terhadap mencit diabetes melalui modulasi terhadap reseptor opioid (21) . Akan tetapi Gim et al (2015) menyatakan
Kelompok AC-II memberikan efek paling kuat dalam  penggunaannya  sebagai  monoterapi. Akan tetapi  aktifitas  anti-neuropatik  kelompok AC-II mengalami  penurunan  aktiﬁ tas  dari  225%  menjadi 129% (penurunan sebesar 96%) setelah penambahan naloxone .
Kombinasi  antara  AC-II  dan  pregabalin menunjukkan aktiﬁ tas paling kuat secara signiﬁ kan (p<0.05) dibanding dengan kelompok normal, negatif, pregabalin dan AC-I. Akan tetapi, bila dibandingkan kelompok  AC-II  tidak  memberikan  perbedaan signiﬁ kan (p: 0.069) meskipun kelompok kombinasi AC-II  dan  pregabalin  memberikan  peningkatan threshold  pain  lebih  besar  dibandingkan  kelompok AC-II sebagai monoterapinya. Hal ini menunjukkan bahwa  kombinasi  antara AC-II  dan  pregabalin memberikan efek sinergistik.
Hyperalgesia. Berdasarkan  hasil  penelitian yang  telah  dilakukan  pada  pengujian threshold pain hyperalgesia yang diperlihatkan pada Gambar 2 , terdapat  peningkatan  persentase threshold  pain pada  kelompok  normal,  pregabalin, AC-I, AC-II, AC-II  plus  pregabalin  bila  dibandingkan  dengan kelompok negatif sebesar 146%, 194%, 157%, 228% dan  278%.  Sedangkan kelompok AC-II mengalami penurunan aktiﬁ tas dari 228% (AC-II alone) menjadi 176% (penurunan sebesar 96%) setelah penambahan naloxone .  Hal  ini  mengindikasikan  aktivitas  anti- nyeri neuropatik AC melalui sistem syaraf pusat yaitu pada opioid reseptor. Telah diketahui bahwa naloxone memiliki aﬃ nitas yang tinggi (200 kali lipat) sehingga memberikan efek kompetitif pada reseptor µ, κ and σ di sistem syaraf pusat yang mengakibatkan reversal terhadap efek opioid (19,20) .
Gambar 1. Hasil pengujian termal Hiperalgesia.
bahwa  quercetin  tidak  terlibat  dalam  modulasi kanal  kalsium (22) .  Selain  quercetin,  dalam  daun babadotan  juga  diketahui mengandung  kaempferol. Kaempferol  diketahui  memiliki  efek  analgesik  dan anti-inﬂ amasi (23) . Akan tetapi, Sukmawan et al (2021) menunjukkan bahwa komponen minyak atsiri yang terkandung dalam A. conyzoides yang berperan dalam aktivitas  anti-nyeri  neuropatik,  dengan  precocene II  merupakan  kandungan  yang  paling  besar  dalam minyak atsiri (18) .
Wire  Hang. Kelompok AC-II  dilanjutkan untuk pengujian wire hang dikarenakan memberikan hasil  paling  baik  dibanding  kelompok AC-I  pada pengujian Allodynia dan Hyperalgesia . Berdasarkan hasil  penelitian  yang  dilakukan  dalam  pengujian wire  hang    menunjukkan  bahwa  kelompok AC-II dosis  100  mg/kg  BB  tidak  memberikan  pengaruh signifikan  terhadap  fungsi  motorik  dibandingkan kelompok negatif  dengan nilai p falling score yaitu 0.053  dan  nilai  p reaching  score yaitu  0.903.    Hal ini  berbeda  dengan pregabalin sebagai ﬁ rst  line  of choice  for  neuropathic  pain yang  memiliki  efek samping  kehilangan  keseimbangan  dan  masalah terhadap memori atau konsentrasi (24) . Efek samping yang  kehilangan  keseimbangan  ini  mengakibatkan penurunan kualitas hidup dan kehilangan waktu kerja serta  dapat  meningkatkan  resiko  peningkatan  jatuh ( falls ) yang pada akhirnya akan meningkatkan resiko morbiditas dan mortalitas (25) .
Toksisitas Akut. Hasil dari pengujian toksisitas akut pada dosis 2000 mg/kgBB rebusan daun babadotan ( Ageratum conyzoides ) tidak mengakibatkan kematian pada  satupun  hewan  percobaan  yang  dilakukan pemantauan selama 14 hari. Akan tetapi pada awal 30 menit awal seluruh hewan percobaan menunjukkan perilaku seperti menjilat kaki, mengusap mulut, telinga dan  kepalanya  oleh  kaki  depan  dan  belakangnya. Tingkah laku tersebut bukan merupakan tanda-tanda toksisitas,  melainkan  keadaan  normal  yang  disebut dengan self  grooming untuk  membersihkan  dirinya sendiri setelah diberikan sediaan melalui oral (26) .

## SIMPULAN
Rebusan  daun  babadotan  kelompok  AC-II menunjukkan  efek  anti-nyeri  neuropatik  paling baik  melalui  mekanisme  kerja  yang  melibatkan reseptor  opioid.  Rebusan  ini  juga  memberikan efek  sinergistik  bila  dikombinasikan  dengan pregabali n  dan  ti dak  membe rikan  geja l a toksik  atau  gangguan  terhadap  fungsi  motorik.
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia  188
Vol 19, 2021

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami mengucapkan terimakasih kepada kementerian riset,  teknologi  dan  pendidikan  tinggi  yang  telah mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  International Association  for  the  Study  of  Pain. Classiﬁ cation of chronic pain: descriptions of chronic pain  syndromes  and deﬁ nitions of pain terms. Pain. 1986. (suppl 3): S1–S225.
2.  Brennan F, Carr DB, Cousins M. Pain management: a fundamental human right. Anesth Analg. 2007. 105: 205-21.
3.  Sweetman SC. Martindale the complete drugs reference “thirty sixth edition”. London: Pharmaceutical Press. 2009. p. 2
4.  O’Connor AB.  Neuropathic  pain:  quality-of-life impact,  costs  and  cost  effectiveness  of  therapy. PharmacoEconomics. 2009. 27(2): 95–112.
5.  Cruccu G and Truini A. A review of neuropathic pain: from guidelines to clinical practice. Pain Ther. 2017. 6(Suppl 1): 35-42.
6.  Taylor  CP, Angelotti  T,  Fauman  E.  Pharmacology and mechanism of action of pregabalin: the calcium channel alpha2-delta (alpha2-delta) subunit as a target for  antiepileptic  drug  discovery.  Epilepsy  research. 2007. 73(2): 137–50.
7.  Bamanikar A,  Dhobale  S,  Lokwani  S.  Pregabalin hypersensitivity  in a  patient  treated for  postherpetic neuralgia. Indian J Pharmacol. 2013. 45(5):522-3.
8.  Mehta M, Shah J, Khakhkhar T, Shah R, Hemavathi KG.  Anticonvulsant  hypersensitivity  syndrome associated with carbamazepine administration: Case series. J Pharmacol Pharmacother. 2014. 5(1): 59-62.
9.  Ono  Y,  Shimo  T,  Shirafuji  Y,  Hamada  T,  Masui M,  Obata  K,  et  al.  Drug-induced  hypersensitivity syndrome  caused  by  carbamazepine  used  for  the treatment  of  trigeminal  neuralgia.  Case  Rep  Dent. 2016. 2016: 4605231.
10.  Dharma AP. Indonesian Medicinal Plants [Tumbuhan Obat Indonesia]. Jakarta: Balai Pustaka; 1987.
11.  BPOM RI. Ageratum conyzoides L. Direktorat obat asli Indonesia. 2008.
12.  Singh SB, Devi WR, Marina A, Devi WI, Swapana N,    Singh  CB.  Ethnobotany,  phytochemistry  and pharmacology  of  Ageratum  conyzoides  Linn (Asteraceae). J.Med. Plant. Res. 2013. 7(8): 371-85. 13.  Sukmawan, YP and Suhendy H. Hemostatic eﬀ ect of ethanolic extract of Ageratum conyzoides l to strain of mice male swiss webster induced with combination of aspirin, clopidogrel and enoxaparin. Asian J Pharm Clin Res. 2017. 10(7): 276-9.
14.  Suhendy  H  and  Sukmawan  YP.    Aktivitas immunomodulator  ekstrak  etanol  daun  babadotan
[ Ageratum conyzoides (L.)]  Terhadap mencit jantan galur swiss webster. Journal of Pharmacopolium. 2019. 2(1): 9-14.
15.  Amadi  BA,  Duru  MKC, Agomuo  EN.  Chemical proﬁ lesof  leaf,  stem,  root  and  ﬂ ower  of Ageratum conyzoides . Asian J. Plant Sci. Res. 2012. 2(4): 428-32. 16.  Hasan MMd, Shahid-Ud-Daula AFM, Jahan IA, Nimmi I, Adnan T, Al-Mansur A,  et  al. Anti-inﬂ ammatory activity, total ﬂ avonoids and tannin content from the ethanolic extract of Ageratum conyzoides linn. Leaf. Int.J.Pharm.Phytopharmacol.Res. 2012. 1(5): 234-41.
17.  Chauhan A and Rijhwani S. A Comprehensive review on phytochemistry of Ageratum conyzoides linn. (Goat weed). Ijetmas. 2015. 3: 348-58.
18.  Sukmawan, YP, Anggadiredja, K, Adnyana, IK. Anti- neuropathic  pain  activity  of Ageratum  conyzoides L  due  to  the  essential  oil  components.  CNS  & neurological disorders drug targets. 2021. 20(2), 181–9.
19.  Wang  HY,  Frankfurt  M,  Burns  LH.  High-affinity naloxone  binding  to  ﬁ lamin  a  prevents  mu  opioid receptor-Gs coupling underlying opioid tolerance and dependence. PLoS One. 2008. 3(2): e1554.
20.  Jordan MR, Morrisonponce D. Naloxone. In: StatPearls [serial online]. 2019 Jan. Diambil dari URL: https:// www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK441910/.  diakses 31 Mei, 2019.
21.  Anjaneyulu M, Chopra K. Quercetin, a bioﬂ avonoid, attenuates thermal hyperalgesia in a mouse model of diabetic neuropathic pain. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 2003. 27(6): 1001-5.
22.  Gim H. Nam JH. Lee S. Shim JH. Kim HJ. Ha KT, et al. Quercetin inhibits pacemaker potentials via nitric oxide/cGMP-dependent  activation  and  trpm7/ano1 channels  in  cultured  interstitial  cells  of  cajal  from mouse small intestine. Cell Physiol Biochem. 2015. 35: 2422-43.
23.  Parveen Z, Deng Y,  Saeed MK, Dai R, Ahamad W, Yu  YH. Antiinﬂ ammatory  and  analgesic  activities of  Thesium  chinense  Turcz  extracts  and  its  major ﬂ avonoids, kaempferol and kaempferol-3-O-glucoside. Yakugaku Zasshi. 2007. 127(8):1275-9.
24.  Ogbru  O.  Lyrica  Side  Eﬀ ects  [serial  online].  2019 April.  diambil  dari  URL:  https://www.rxlist.com/ lyrica-side-eﬀ ects-drug-center.htm.  diakses  31  Mei, 2019.
25.  Çağlar  Okur  S, Vural  M,  Pekin  Doğan Y,  Mert  M, Sayıner Çağlar N. The eﬀ ect of pregabalin treatment on balance and gait in patients with chronic low back pain:  a  retrospective  observational  study.  J  Drug Assess. 2019. 8(1): 32-5.
26.  Kalueff AV,  Stewart AM,  Song  C,  Berridge  KC, Graybiel AM, Fentress JC. Neurobiology of rodent self- grooming and its value for translational neuroscience. Nat Rev Neurosci. 2016. 17(1): 45-59.