## KEBERADAAN DAN KARAKTERISTIK MIKORIZA RHIZOCTONIA SP. BINUKLEAT PADA SPESIES
ANGGREK PENAWAR RACUN ( Plocoglottis lowii Rchb.f.)

## DARI ETNIS MELAYU SANGGAU KALIMANTAN BARAT
The existence and characterization of Mycorrhiza Rhizoctonia sp. Binucleate in traditional medicinal orchid ( Plocoglottis lowii Rchb.f.) from Sanggau Malay Ethnic West Kalimantan
Sigit Normagiat 1) , Rista Delyani 1)* , Rita Kurnia Apindiati 2)
1) Program Studi Agroteknologi Universitas Nahdlatul Ulama Kalimantan Barat
2) Program Studi Agroteknologi Universitas Tanjungpura Pontianak
DOI: http://dx.doi.org/ 10.21111/agrotech.v5i1.3608 Terima1 2 November  2019                 Revisi 6  Desember  2019                        Terbit 9 Januari 2020
Abstrak :  Alih  fungsi  lahan  hutan  menjadi  areal  penggunaan  lain  membuat populasi  dan  keanekaragaman    tumbuhan  obat  di  alam  semakin  terancam. Urgensi  pelestarian  ex-situ  dengan  cara  budidaya  harus  menyediakan lingkungan  yang  cocok  agar  tumbuhan  obat  dapat  tumbuh  dengan  optimal  dan terjaga  khasiatnya.    Diantara  tumbuhan  obat  tradisional  etnis  Melayu  Sanggau Kalimantan  Barat  adalah  Anggrek  Penawar  Racun  ( Plocoglottis  lowii Rcbb.f.) yang  diyakini  oleh  masyarakat  setempat  dapat  menetralkan  racun  di  dalam tubuh.Penelitian  ini  penting  dilaksanakan  mengingat  belum  adanya  data  dan informasi jenis  mikoriza  yang berasosiasipada perakaran pada jenis anggrek P. lowii Rchb.f.di  habitat  asalnya.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  menyediakan data dan informasi  mengenai  keberadaan jenis, karakteristik,  presentase infeksi fungi mikoriza di dalam jaringan akar untuk keperluan konservasi dan budidaya. Penelitian  akan  dilaksanakan  menggunakan  metode  pemanasan  KOH  10%  dan metode freehand  section, pewarnaan  menggunakan Trypan  Blue,  Acid  Fushin dan Safranin-O yang  dilakukan  pada  penampang  akar.  Hasil  isolasi  pada perakaran P.  lowii Rchb.f  hanya  menemukan  satu  jenis  fungi  dan  didentifikasi

## * Korespondensi email: ristadelyani@gmail.com
Alamat : Program Studi Agroteknologi Universitas Nahdlatul Ulama Kalimantan Barat Jl. K.H. Ahmad Dahlan, No. 72 Pontianak, Kalimantan Barat 786116
sebagai  jenis Rhizoctonia sp. binukleat.  Persentase  infeksi  mikoriza    pada  akar tertinggi terjadi pada bagian ujung akar  yaitu sebesar 90 persen. Lokasi infeksi mikoriza  di  jaringan  akar  diketahui  ada  di  daerah  antara  epidermis  dan  kortex. Diharapkan  isolat  mikoriza Rhizoctonia sp.yang  sudah  diperolah  dapat  diteliti efektifitasnya pada pertumbuhan P. lowii Rchb.f dilahan budidaya.
Kata kunci : Anggrek obat, Etnis Melayu, Kalimantan Barat, Mikoriza, Rhizoctonia sp. Binukleat.
Abstract: The conversion of forest for another purpose has made the population and diversity of medicinal plants increasingly threatened. The ex situ conversion by cultivation is needed to provide the suitable environment to ensure the plants grow in their natural habitat and maintain their properties. One of the traditional medicinal plants in Sanggau Malay which has been believed to neutralize toxin is  “anggrek  penawar  racun”( Plocoglottis  lowii Rcbb.f.).  This  research  was important to be done since there was no data and information about mychorrizal type  associated  with  root  of  orchid P.  lowii Rchb.f.  in  its  natural  habitat.  The aim of this research was to find out the data and information about the types, the characteristics, and the percentage of mycchorizal fungal infection in root tissue for conservation and cultivation purpose. The research used 10% KOH heating method  and  freehand  section  coloring  using Trypan  Blue,  Acid  Fushin dan Safranin-O conducted in cross section of the roots. The results showed that there was only one species of fungi and it was identified as Rhizoctonia sp. Binucleate type.  The  highest  percentage  of  mycchorizal  infection  occurred  at  the  tip  of roots  (90%).  It  has  been  found  that  the  location  of  mychorrizal  infection  has occurred  between  epidermis  and  cortex.  It  is  needed  to  do  further  study  about mychorrizal  isolate Rhizoctonia sp . effectiveness  in  the  growth  of P.  lowii Rchb.f in the cultivated land.
Keywords: Malay ethnic, Medicinal orchids, Mycorrhiza, West Kalimantan, Rhizoctonia sp. Binucleat,

## 1. Pendahuluan
Hutan di Kalimantan Barat
menyimpan potensi keanekaragaman  tumbuhan  obat  yang  besar.  Menurut  data Kementerian  Kesehatan  Riset  Tumbuhan  Obat  dan  Jamu  Tahun 2017, tercatat  lebih dari  143 spesies  tumbuhan obat  khusus  untuk Kabupaten  Sanggau  Kalimantan  Barat  dari  etnis  Melayu.
Tumbuhan  obat  tersebut  dikumpulkan  dari  hutan  kemudian  dan diramu  oleh  penyehat  tradisional  (hatra)  sesuai  dengan  jenis penyakit yang akan diobati. Tumbuhan obat yang selalu digunakan dalam campuran setiap ramuan yang dibuat oleh hatra adalah daun anggrek  penawar  racun  yang  teridentifikasi  sebagai  spesies Plocoglottis lowii Rchb.f.. Daun tumbuhan ini diyakini masyarakat lokal  dapat  membersihkan  racun  yang  berada  di  dalam  tubuh penderita  penyakit  infeksi  maupun  dan  juga  dapat  menetralkan kadar  nikotin  dalam  darah.  Bagi  orang  yang  meminum  ramuan daun  anggrek  ini  akan  merasakan  tubuhnya  lebih  segar  dan menghilangkan rasa lelah pada otot setelah beraktifitas.
Keberadaan P.  lowii Rchb.f.  obat  di  hutan  alam  pada  saat  ini terancam  oleh  deforestasi  dan  alih  fungsi  lahan.  Maraknya pembukaan  perkebunan  sawit  disekitar  habitat  menjadi  ancaman utama  kelestarian  tumbuhan  obat  tersebut.  Pendataan  tumbuhan obat sudah sering dilakukan namun upaya tindak lanjut konservasi dan  budidaya  belum  maksimal.  Teknologi  budidaya  perlu memperhatikan  kebutuhan  fisiologis  tumbuhan  obat  sebagaimana yang  didapat  dari  kondisi  tempat  tumbuhnya  di  alam.  Kegiatan budidaya  yang  mengabaikan  faktor  kebutuhan  lingkungan  dapat menyebabkan  menurunnya  kadar  kualitas  kandungan  fitokimia bermanfaat  yang terdapat pada tumbuhan obat. Hal tersebut dapat dilihat dari perubahan karakter agronomi P. lowii Rchb.f. pada saat tumbuh di hutan alam memiliki warna daun yang khas yaitu hijau
keunguan.  Namun  ketika dipindahkan dan ditanam  di  pekarangan rumah  warna  daun  berubah  menjadi  dominan  berwarna  hijau  dan khasiatnya menjadi menurun.
Anggrek  diketahui  memiliki  hubungan  dengan  fungi  yang berperan  sebagai  mikoriza.  Penelitian  terhadap  genus  anggrek Pterostylis yang berasal dari Australia ternyata ditemukan 72 jenis fungi yang berasosiasi di perakaran dan 20 diantaranya merupakan jenis Rhizoctonia sp.  dengan Anostomosis Group  (AG)  yang berbeda.  Selain Rhizoctonia sp.  spesies  utama  yang  menjadi mikoriza  pada  anggrek  adalah Tulasnellasp .(Reiter,  Lawrie,  &
Linde, 2018).
Asosiasi  mikoriza  pada  tumbuhan  anggrek  menarik  untuk diteliti  karena  dapat  memberikan  pengaruh  positif  pada penyerapan  nutrisi  dan  pertumbuhan  inangnya.  Isolat  mikoriza yang  diambil  dari  perakaran P.  lowii Rchb.f.  yang  tumbuh  di habitat aslinya diduga memiliki keunggulan berupa kompatibilitas yang  lebih  baik  dibanding  menggunakan  jenis  mikoriza  dari  jenis tumbuhan  lainnya  (Bonnardeaux  et  al.,  2007).  Selain  itu keberadaan  mikoriza  dapat  mempengaruhi  kualitas  senyawa  obat yang  yang  terkandung  di  dalam  anggrek  (Zeng  et  al.,  2013). Anggrek  penawar  racun  merupakan  tumbuhan  obat  yang  belum lama  dikenal  kalangan  masyarakat  di  Kalimantan  Barat  sehingga belum  diketahui karakteristik biologisnya.  Penelitian  ini memfokuskan  pada  masalah  keberadaan  dan  karakteristik  jenis
mikoriza yang berasosiasi di perakaran pada jenis anggrek P. lowii
Rchb.f.  sehingga  informasi  yang  diperoleh  merupakan  masukan yang  penting  dalam  upaya  budidya  sekaligus  konservasi  eksitu jenis tumbuhan ini.

## 2. Bahan dan Metode
Sebanyak  30  individu P.lowii Rchb.f.  didapatkan  dari  habitat hutan alam di  kabupaten Sanggau,  Kalimantan  Barat  (Gambar 1). Dari  sampel  tersebut  diambil  sejumlah  100  akar  secara  random untuk  dilihat  persentase  infeksi  mikoriza  yang  terjadi.  Sampel akardianalisis di Laboratorium Penyakit Tanaman dan Laboratorium  Silvikultur  Universitas  Tanjungpura.  Penelitian dilaksanakan  pada  bulan  Mei  –  Sepetember  2019.Bagan  alur penelitian terdapat pada Gambar 2.
Gambar 1.Marka merah menunjukkan titik pengambilan sampel
Penelitian  diawali  dengan  pengamatan  terhadap  karakteristik morfologi  perakaran  yang  dimiliki  oleh P.  lowii Rchb.f.  Hal  ini menjadi  penting  karena  belum  ada  studi  yang  mengenai  botani spesies  ini.  Parameter  yang  diamati  berupa  morfologi  perakaran. Sampel  diukur  jumlah  dan  panjangnya  kemudian  dilakukan pengamatan  rambut  akar.  Kegiatan  selanjutnya  merupakan karakteristik  infeksi  fungi  mikoriza  pada  perakaran P.  Lowii
Rchb.f.  Metode  mengacu  pada  (Fajriyah,  2011) dengan  prosedur sebagai berikut:
Metode Pemanasan Akar dengan KOH 10%
Sampel akar cuci bersih + KOH 10%  dioven 60 -70 0 C ± 5 jam  sampel didinginkan  dibilas dengan  aquades  sampel akar + Methylene  blue 1-2  hari  sampel  dibilas  aquades  sampel yang  pewarnaan  berlebih  direndam  gliserol  50%  bagian  ujung tengah  dan  pangkal  akar  masing-masing  dipotong  1  cm  sebanyak 10  potongan  pengamatan  dibawah  mikroskop  dan  dihitung persentase potongan akar yang terinfeksi.

## Metode Freehand sections
Perendaman  sampel  akar  dalam  larutan  fiksatif  (FAA)  selama  24 jam  +  sampel  dicuci  alkohol  70%  +  larutan  pewarna acid fuchsin 0.01% diteteskan pada slides  sampel akar disayat secara longitudinal  dengan  silet  sayatan  ditempatkan  pada  slides kemudian  ditutup  kaca  preparat  kutek  bening  di  sisi  kaca preparat  agar  tidak  bergeser  hasil  sayatan  diamati  dengan mikroskop terhadap keberadaan dan bentuk hifa mikoriza di dalam akar
Akar  disayat  melintang  ketebalan  60  mikrometer  menggunakan mikrotome  hasil  potongan  melintangsegera  diberi  pewarnaan safranin  0.01%  selama  1  menit  jaringan  akar  diamati menggunakan mikroskop pembesaran 10 kali  untuk melihat posisi infeksi di jaringan akar.
Kegiatan  isolasi,  identifikasi  dan  pemurnian  fungi  mikoriza dilakukan  pada  bagian  akar  yang  terindikasi  adanya  hifa  maupun peloton  untuk  selanjutnya  dikulturkan  dalam  media Potato Dextrose  Agar (PDA)  yang  ditempatkan  di  dalam  cawan  petri .
Setelah  2-3  hari  diinkubasi,  hifa  yang  tumbuh  dilihat  perbedaan karakter  fisiknya.  Setiap  hifa  yang  menunjukkan  perbedaan karakteristik  di  pindahkan  ke  cawan  petri  yang  lain  untuk pemurnian. Kultur murni fungi hasil isolasi yang digunakan untuk identifikasi  terlebih  dahulu  diamati  berdasarkan  ciri  makroskopik koloni yaitu pola pertumbuhan, warna, dan kecepatan pertumbuhan.Sedangkan  pengamatan  mikroskopis  dilakukan dengan menggunakan mikroskop  dan dilihat bentuk  dari hifa, sel, dan  adanya  spora.Penentuan  jenis  fungi  menggunakan  kunci determinasi fungi.
Data  morfologi  perakaran  yang  dijelaskan  secara  deskriptif kemudian  di  analisis  kemungkinan  adanya  korelasi  antara pertumbuhan akar dengan daun. Begitu juga karakteristik mikoriza baik  di  dalam  jaringan  maupun  di  media  kultur  dijelaskan  secara deskriptif  disertai  dengan  foto  dan  ilustrasi  gambar.  Sedangkan
data  kuantitatif  yang  dihasilkan  berupa  persentase  keberadaan fungi  mikoriza  di  jaringan  akar  dihitung  dengan  menggunakan rumus :
% kepadatan peloton = 𝛴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙  𝑎𝑘𝑎𝑟  𝑡𝑒𝑟𝑖𝑛𝑓𝑒𝑘𝑠𝑖 𝛴 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙  𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙  𝑎𝑘𝑎𝑟 𝑥 100%
Gambar 2.Bagan alur penelitian
3. Hasil dan Pembahasan
Karakteristik individu dan perakaran P. lowii Rchb.f
Karakterisasi  morfologi P.  lowii Rchb.f.  meliputi  bentuk daun,  bentuk  dan  dimensi  perakaran,  bentuk  dan  dimensi  daun, pseudobulb .  Hasil  pengukuran  yang  diperoleh  bahwa  jenis  ini
Sampel P. lowii Rchb.f Morfologi akar Pengamatan karakteristik  mikoriza Pengamatan  mikoriza  dari  dalam jaringan akar Pengamatan dari luar jaringan akar Metode  Pemanasan  akar dengan KOH 10% Metode
Freehand sections
Pemurnian biakan
mikoriza
 Persentase kolonisasi mikoriza pada akar
 Karakteristik infeksi mikoriza dalam jaringan  Jenis dan karakteristik mikoriza Informasi keberadaan dan jenis mikoriza yang berkontribusi dalam usaha budidaya dan konservasi P. lowii Rchb.f.
memiliki  panjang  maksimal  daun  40  cm  dengan  rata-rata  36.2 cm, lebar daun maksimal 10 cm dengan rata-rata 9.8 cm.  Jumlah akar pada individu P. lowii Rchb.f  tercatat antara 16-31, panjang akar maksimal 46 cm dengan rata-rata 34.7 cm. hasil pengukuran pseudobulb diperoleh diameter maksimal 11.57 mm dengan rata- rata  10.5  mm.    Ilustrasi  mengenai  karakteristik P.  lowii Rchb.f dapat dilihat secara jelas pada Gambar 3.
Gambar 3. Morfologi spesies P. lowii Rchb.f., A). daun berbentuk lanceolate , permukaan daun sebelah atas dominan berwarna hijau dan permukaan bawah daun berwarna ungu kehijauan, di setiap pangkal daun terdapat pseudobulb B) agregat  perakaran  serabut  pada P.  lowii Rchb.f.,  C).  akar P.  lowii Rchb.f. dipenuhi oleh rambut akar yang padat.
Spesies P.  lowii Rchb.f.  merupakan  jenis  anggrek  terestrial yang  tumbuh  pada  serasah  dan  tidak  bersinggungan  langsung dengan  tanah.  Hasil  analisa  hubungan  antara  panjang  akar  dan panjang  daun  menggunakan  korelasi  Pearson  diperoleh  nilai 0.647. Hal tersebut berarti bahwa kemungkinan terjadi hubungan
Melayu Sanggau Kalimantan Barat
yang kuat antara perpanjangan akar dengan dengan pertumbuhan daun pada P. lowii Rchb.f.
Karakteristik infeksi fungsi mikoriza pada perakaran P.Lowii

## Rchb.f
Indikasi  terjadinya  infeksi  mikoriza  pada  perakaran  dapat dilihat  berdasarkan  adanya  hifa  dan  gulungan  hifa  ( pelotons )
yang terdapat di dalam jaringan akar.
(Gambar 4. A). Pengamatan terhadap potongan akar bagian ujung, tengah dan pangkal  untuk  mengetahui  persentase  infeksi.  B).  pelotons  yang  mengalami lisis di dalam jaringan akar P. lowii Rchb.f
Berdasarkan  perhitungan  persentase  infeksi  menggunakan metode  perendaman  KOH  10%  dan  pewarnaan Trypan  Blue diketahui  bahwa  indikasi  infeksi  mikoriza  terjadi  di  semua sampel  akar  yang  diamati,  namun,  untuk  persentase  lokasi ditemukannya infeksi  tersebut  yang tertinggi  terjadi  pada  bagian ujung  akar  adalah  90  persen,  dikuti  oleh  bagian  tengah  akar
A B
sebesar  70  persen  sedangkan  dibagian  pangkal  akar  hanya  50 persen.
Gambar 5.A) Pewarnaan Acid Fuhsin .Sayatan membujur akar P. lowii Rchb.f. tanda panah merah menunjukkan hifa yang mikoriza yang searah dengan perpanjangan akar.  B). Pewarnaan Safranin pada sayatan melintang akar P. lowii Rchb.f. tampak infeksi mikoriza terjadi di antara jaringan epidermis (Ep) dan kortex (Kr).
Gambar  6.  Identifikasi  terhadap  mikoriza  di  perakaran P.  lowii Rchb.f. diperoleh  satu  spesies Rhizoctonia sp.  A)  Karakteristik  hifa Rhizoctonia  sp . tampak  membentuk  sudut  percabangan  90 0 ,  hialin,  bersekat  namun  tidak memiliki  spora,  memiliki  dua  inti  (binukleat)  di  dalam  satu  sel mengindikasikan  jenis  ini  memiliki  virulensi  yang  rendah  ( hypovirulen ).  B).
Ciri  lain  bagian  hifa Rhizoctonia sp.  ada  pertumbuhan  sel  yang  berbentuk moniloid.
A B
Melayu Sanggau Kalimantan Barat
Gambar 7. Karateristik koloni Rhizoctonia sp. yang dikulturkan di media PDA
A)  Stock  koloni Rhizoctonia sp.   yang disimpan dengan  metode agar  miring, koloni  dewasa  memilikikecenderungan    warna  abu  -  abu  hingga  hitam  B) Koloni yang sedang tumbuh pada cawan petri, koloni mulai muncul pada hari ketiga  setelah  tanam,  awal  petumbuhan  mula-mula  berwarna  putih  kemudian krem  dan  menjadi  abu-abu  kehitaman.  Luas  pertumbuhan  menutup  cawan petri pada hari ke 7.
Fungi  yang  berhasil  diisolasi  dari  perakaran P.  lowii Rchb.f. pada  penelitian  ini  hanya  terdiri  dari  satu  spesies  yaitu Rhizoctonia sp..Hal  ini sama dengan spesies  anggrek Pterostylis acuminata yang  diketahui  hanya  berasosiasi  dengan  fungi Rhizoctonia  solani AG6  (Dixon, Brundrett, & Sivasithamparam, 2004).  Keberadaan  mikoriza Rhizoctonia sp.  sebagai  mikoriza utama di perakaran anggrek (Caldwell, Martyn M, Sandra Dı´az, Gerhard HeldmaierRobert B. Jackson, Otto L. Lange & Schulze, 2017).  Penelitian  lain  menunjukkan  bahwa  hasil  isolasi  fungi
A B
pada  perakaran  anggrek Plocoglottis sp.  yang  berasal  dari pegunungan  Cycloops  di Papua mendapatkan hanya satu  hingga tiga spesies fungi yang berasosiasi pada perakarannya. Penelitian tersebut  juga  mencatat  bahwa  jenis  fungi  dari Plocoglottis sp. juga  terdapat  pada  jenis  anggrek Phaius sp.  yang  berarti  bahwa asosiasi  fungi  yang  berada  pada  perakaran Plocoglottis sp. bukanlah  spesies  yang  spesifik  (Agustini,  2009).    Diduga  masih terdapat fungi jenis lainnya yang bersifat endofit pada perakaran P.  lowii Rchb.f,  namun  memerlukan  media  yang  lebih  spesifik.
Keberhasilan dalam mengisolasi fungi endofit diantaranya adalah dengan  cara  memvariasikan  jenis  media  kultur  (Zheng et  al .,
2016), dimana hal tesebut tidak dilakukan pada penelitian ini.
Rhizoctonia sp. memiliki ciri umum berupa percabangan yang membentuk  sudut  90°,  tidak  berspora,  memiliki  sel  berbentuk moniloid  pada  bagian  tertentu,  pada  saat  dorman  dapat membentuk sklerotia (gumpalan hifa) dan hifa udara, ciri spesifik berupa  hubungan anostomosis  group (AG)  dan  jumlah  inti  sel yang  bisa  menjadi  petunjuk  virulensi  dari  jenis Rhizoctonia sp., yang  biasanya  bekaitan  dengan  kemampuan  mikoriza  tersebut dalam  menimbulkan  penyakit  pada  tanaman  (Sneh,  Jabaji-Hare, Neate,  &  Dijst,  1996).  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa Rhizoctonia sp.  yang  berhasil  diisolasi  memiliki  dua  inti  sel (binukleat).  Namun,  belum  sampai  ketahap  karakteritisasi  tipe AG. Jenis Rhizoctonia sp. binukleat juga sebelumnya ditemukan
pada  perakaran  vanili  (Haryuni,  2013).  Saat  ini  cara  identifikasi Rhizoctonia  sudah  mengikuti.  perkembangan  teknologi  yaitu dengan  analisis  DNA.  Syaratnya  ekstraksi  DNA  fungi  harus dilakukan  pada  hasil  kultur  dan  bukan  langsung  dari  akar.  Hal tersebut  dimaksudkan  agar  DNA  yang  akan  diidentifikasi  tidak bercampur  dengan  DNA  fungi  jenis  lain  yang  juga  berasosiasi dalam perakaran (Kareem, 2018).
Ada  dikenal  istilah Rhizoctonia-like pada  terminologi mikoriza anggrek, hal ini ternyata untuk menunjukkan bahwa ada beberapa  spesies  mikoriza  anggrek  yang  sangat  mirip  dengan Rhizoctonia sp.,  contohnya  adalah Tulasnella sp.  karakteristik mikroskopis  hifanya  mirip  dengan Rhizoctonia sp.,  akan  tetapi bila  dilihat  secara  makroskopis  warna  koloninya  berbeda. Rhizoctonia sp.  memiliki  warna  koloni  yang  abu-abu  kehitaman sedangkan Tulasnella sp.  berwarna  putih  cenderung  krem (Frericks,  2014).  Hasil  pengamatan  terhadap  laju  pertumbuhan koloni  di  media Potato  Dextrose  Agar (PDA)  mikoriza Rhizoctonia sp.  mengalami  pertumbuhan  maksimal  pada petridish  pada  hari  ke-12  setelah  tanam.  Hal  tersebut  berbeda dengan Tulasnella sp.  yang tumbuh maksimal pada kisaran 20  – 40 hari setelah tanam (Beltrán-Nambo et al ., 2018).
Konservasi dan budidaya anggrek alam tidak dapat dipisahkan dari  peran  keberadaan  mikoriza  anggrek  ( Orchid  Mycorrhizal Fungi /OMF)  anggrek.  Keberadaan  mikoriza  pada  perakaran
anggrek  dapat  memberikan  pengaruh  positif  pada  pertumbuhan dan  penyebaran  anggrek  (McCormick,  Whigham,  &  Canchani- Viruet,  2018).  Spesies  anggrek  baik  anggrek  tanah  dan  epifit sebagian besar berasosiasi dengan mikoriza Rhizoctonia sp. Bukti keberadaan mikoriza Rhizoctonia pada anggrek epifit  ditemukan pada  jenis  anggrek Appendiculata sp., Calanthe  vestita, dan Bulbophyllum  beccarii di  wilayah  hutan  gunung  Pasi  dan Gunung  Ambawang  Kalimantan  Barat  (Suryantini et  al. ,  2015).
Selama  ini  penelitian  yang  khusus  pada  keberadaan  mikoriza Rhizoctonia sp.  pada  anggrek  tanah  berkhasiat  obat  dilakukan pada anggrek Anoectochilus formosanus , dan inokulasi mikoriza Rhizoctonia sp.  pada  anggrek  jenis  ini  terbukti  memberikan tingkat  perkecambahan  benih  44  –  91%  lebih  baik  dibanding tanpa inokulasi  mikoriza Rhizoctonia sp.  (Jiang,  Lee, Cubeta,  &
Chen, 2015).
Anggrek  yang  hidup  di  habitat  yang  spesifik  ternyata  dapat berasosiasi  dengan mikoriza  yang penyebarannya luas  (Oktalira, Whitehead, & Linde, 2019). Hal ini berarti bahwa Rhizoctonia sp. yang  umum  ditemukan  sebagai  mikoriza  suatu  jenis  anggrek tanah  kemungkinan  besar  juga  dapat  ditemukan  pada  jenis anggrek  tanah  lainya,  sehingga  implikasinya  dalam  budidaya anggrek Plocoglottis  lowii Rchb.f  bisa  saja  menggunakan mikoriza Rhizoctonia sp.dari  jenis  anggrek  lain,  begitu  juga sebaliknya.
Melayu Sanggau Kalimantan Barat
Keanekaragaman  mikoriza  pada  perakaran  anggrek  terbukti memberikan  pengaruh  positif  terhadap  pertumbuhan  anggrek. Contohnya  pada  keanekaragaman  jenis  fungi  pada  perakaran anggrek  jenis Dendrobium  exile yang  berhasil  diisolasi.  Ketika masing-masing fungi telah dikulturkan kemudian diujicobakan ke anggrek  inangnya,  perlakuan  dengan  menggunakan  kombinasi fungi  menimbulkan  respon  positif  pada  pertumbuhan protocrom dibanding dengan perlakuan yang menggunakan satu jenis fungi, hal  tersebut  menguatkan  dugaan  bahwa  masing-masing  fungi memiliki  peran  yang  berbeda  mendorong  pertumbuhan  anggrek tanah  (Meng,  Shao,  Liu,  &  Gao,  2019).  Keanekaragaman  fungi yang hadir di perakaran anggrek memberikan suplai nutrisi yang berbeda,  bahkan  mikoriza  anggrek  dapat  berinteraksi  dengan ekto-mikoriza  untuk  menyediakan  nutrisi  yang  berbeda  untuk mendukung pertumbuhan anggrek (Jacquemyn et al ., 2017).
Beberapa  penelitian  lain  menunjukkan  keanekaragaman simbion  fungi  yang  tinggi  khususnya  pada  perakaran  anggrek epifit  contohnya  pada  anggrek Epidendrum  marsupiale dan Cyrtochilum  pardinum yang  hidup  di  elevasi  tinggi  di  wilayah tropis  (Herrera et  al .,  2019).  Perbedaan  komunitas  fungi  yang terdapat  di  perakaran  anggrek  tidak  selalu  dipengaruhi  oleh musim.  Akan  tetapi  jika  ditanam  di  habitat  yang  berbeda menyebabkan  anggrek  dari  jenis  yang  sama  memungkinkan untuk  memiliki  komunitas  fungi  yang  berbeda  di  perakarannya,
penyebabnya  adalah  perbedaan  kondisi  nutrisi  dan  tingkat kelembapan tanah dimana anggrek tersebut tumbuh  (Han, Xiao,
& Gao, 2016). Contoh tersebut terjadi pada anggrek jenis Liparis japonica yang  hidup  ditempat  berbeda,  memiliki  asosiasi  fungi perakaran  yang  berbeda  pula  (Ding et  al .,  2014).  Namun  untuk jenis  anggrek  endemik  seperti  jenis Platanthera  praeclara yang hanya  hidup  di  habitat  spesifik  di  kawasan  padang  rumput  di Amerika  Utara,  fungi  mikoriza  yang  berasosiasi  juga  spesifik (Kaur, Andrews, & Sharma, 2019).
Keberadaan  mikoriza  anggrek  memiliki  peran  dalam mentransport  nitrogen  dari  koloid  tanah  ke  dalam  jaringan perakaran  anggrek  (Dearnaley  &  Cameron,  2017).  Hasil perhitungan terhadap presentase infeksi mikoriza pada perakaran P.  lowii Rchb.f.  bagian  yang  memiliki  persentase  infeksi Rhizoctonia sp. yang paling tinggi mikoriza berada di area ujung perakaran  yang  masih  muda.  Hal  tersebut  berhubungan  dengan efektifitas  mikoriza  dalam  mendukung  pertumbuhan  anggrek berada pada jaringan  yang masih  muda. Hasil penelitian tentang perbandingan  efektifitas  isolat  mikoriza  anggrek  antara  jaringan muda  dan  dewasa  menunjukkan  bahwa  mikoriza  yang  berada pada  jaringan  muda  perakaran  lebih  efektif  untuk  digunakan sebagai isolat (Meng, Zhang, Selosse, & Gao, 2019).
Kedepannya  mikoriza Rhizoctonia sp.  yang  diperoleh  dalam penelitian ini perlu diujikan pada budidaya P. lowii Rchb.f. untuk
Melayu Sanggau Kalimantan Barat
dilihat  pengaruh  terhadap  pertumbuhan  dan  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  yang  dihasilkan.  Beberapa  aplikasi  mikoriza Rhizoctonia sp.  telah  teruji  dapat  memberikan  pengaruh  positif pada tingkat  pertumbuhan di  lingkungan budidaya seperti dalam hal  tingkat  perkecambahan, ketahanan selama pertumbuhan, dan meningkatkan  reproduksi  tanaman  pada  genus  anggrek Anoectochilus  formosanus , Haemaria  discolor var. dawsoniana ,
Dendrobium,  Doritaenopsis,  Paphiopedilum dan Phalaenopsis (Chang,  2008).  Keberhasilan  budidaya  juga  memerlukan rekayasa  pada  tempat  tumbuh  agar  mendapatkan  kondisi  yang mirip dengan habitat di alam.  Penelitian terhadap habitat P. lowii
Rchb.f.  menujukkan  bahwa  anggrek  ini  tumbuh  baik  pada kondisi  tapak  dengan  tutupan  serasah  yang  tebal  (>12  cm)  dan lembab (Normagiat, Harfinda, & Sudirman, 2018).

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  analisis  dan  pembahasan  maka  dapat  ditarik kesimpulan  bahwa  terdapat  satu  jenis  mikoriza  pada  perakaran anggrek  pada  spesies P.  lowii Rchb.f.  yaitu  jenis Rhizoctonia sp. yang  memiliki  dua  inti  sel  (binukleat).  Spesies  mikoriza Rhizoctonia sp.  memiliki  karakteristik  morfologi  yang  mirip dengan  jenis  mikoriza  jenis Tulasnella sp.,  yang  juga  sering ditemukan  berasosiasi  dengan  perakaran  anggrek.  Kedua  spesies tersebut  dapat  dibedakan  berdasarkan  warna  dan  kecepatan
pertumbuhan  koloninya  .Persentase  infeksi  tertinggi  (90%)  yang dicirikan dengan keberadaan peloton terdapat pada jaringan muda di area ujung akar.Sedangkan pada irisan melintang akar diketahui posisi  hifa  berada  di  area  antara  jaringan  epidermis  dan  korteks akar.  Diperlukan  penelitian  lanjutan  terutama  penggunaan  media kultur  yanng  lebih  spesifik  untuk  mengetahui  keanekaragaman fungi yang ada di dalam perakaran P.lowii Rchb.f.sp.

## 5. Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kami  sampaikan  kepada  Kementrian Ristek  Dikti  yang  telah  mendanai  pelaksanaan  penelitian  ini, kepada  LPPM  Universitas  Nahdlatul  Ulama  Kalimantan  Barat yang  telah  memfasilitasi  administrasi  penelitian,  dan  kepada saudari  Utin  Delima  sebagai  penyehat  tradisional  dari  Kabupaten Sanggau  yang  telah  memberikan  anggrek  penawar  racun  untuk diteliti secara ilmiah.

## 6. Referensi
Agustini,  V.  (2009).  The  Association  of  Mycorrhizal  with Terrestrial  Orchid  Root  in  Mt.  Cycloops  Nature  Reserve, Jayapura. Biodiversitas,  Journal  of  Biological  Diversity ,
10 (4), 175–180. https://doi.org/10.13057/biodiv/d100403
Beltrán-Nambo,  M.  D.  los  Á.,  Montero-Castro,  J.  C.,  Martínez- Trujillo,  M.,  Salgado-Garciglia,  R.,  Otero-Ospina,  J.  T.,  & Carreón-Abud,  Y.  (2018).  Characterization  of  mycorrhizal
fungi of the genus Tulasnella (Tulasnellaceae,
Basidiomycota) in the genus of orchids Bletia from Barranca del  Cupatitzio  Natural  Reserve,  Mexico. Anales  Del  Jardín Botánico de Madrid , 75 (2), 075. https://doi.org/10.3989/ajbm.2491
Bonnardeaux, Y., Brundrett, M., Batty, A., Dixon, K., Koch, J., &
Sivasithamparam,  K.  (2007).  Diversity  of  mycorrhizal  fungi of  terrestrial  orchids:  compatibility  webs,  brief  encounters, lasting  relationships  and  alien  invasions. Mycological Research , 111 (1), 51–61. https://doi.org/10.1016/j.mycres.2006.11.006
Caldwell,  Martyn  M,  Sandra  Dı´az,  Gerhard  HeldmaierRobert  B.
Jackson, Otto L. Lange, D. F. L. H. A. M., & Schulze, E.-D.
(2017).  Population  ecology  in  ectomycorrhizal  fungi.  In Biogeography  of  Mycorrhizal  Symbiosis (Vol.  230,  pp.  160– 174). Paris: Springer International Publishing AG. https://doi.org/10.1007/978-3-319-56363-3
Chang,  D.  C.  N.  (2008).  Research  and  application  of  orchid mycorrhiza  in  Taiwan. Acta  Horticulturae , 766 ,  299–306. https://doi.org/10.17660/ActaHortic.2008.766.39
Dearnaley, J. D. W., & Cameron, D. D. (2017). Nitrogen transport in  the  orchid  mycorrhizal  symbiosis  –  further  evidence  for  a mutualistic  association. New  Phytologist , 213 (1),  10–12. https://doi.org/10.1111/nph.14357
Ding, R., Chen, X. H., Zhang, L. J., Yu, X. D., Qu, B., Duan, R., &  Xu,  Y.  F.  (2014).  Identity  and  specificity  of  Rhizoctonia- like  fungi  from  different  populations  of  Liparis  japonica (Orchidaceae)  in  northeast  China. PLoS  ONE , 9 (8). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0105573
Dixon,  K.,  Brundrett,  M.  C.,  &  Sivasithamparam,  K.  (2004).
Microorganisms  in  Plant  Conservation  and  Biodiversity . Microorganisms  in  Plant  Conservation  and  Biodiversity . https://doi.org/10.1007/0-306-48099-9
Fajriyah,  H.  N.  (2011). Keberadaan  Fungi  Mikoriza  pada
Dendrobium  crumenatum  Sw.,  Dendrobium  cucullatum  R. Br.,  DAN  Dendrobium  anosmum  Lindl. Universitas Indonesia. https://doi.org/Jakarta: Universitas Indonesia
Frericks, J. (2014). The effects of endophytic fungi of NZ terrestrial orchids:  developing  methods  for  conservation. Victoria University.
Han, J. Y., Xiao, H. F., & Gao, J. Y. (2016). Seasonal dynamics of mycorrhizal  fungi  in  Paphiopedilum  spicerianum  (Rchb.  f)
Pfitzer  -  A  critically  endangered  orchid  from  China. Global Ecology and Conservation , 6 , 327–338. https://doi.org/10.1016/j.gecco.2016.03.011
Haryuni.  (2013).  Identifikasi  Rhizoctonia  Mikoriza  Pada
Anggrekan  Dan  Kelompok  Anastomosisnya. Biosantifika ,
5 (1).
Herrera,  P.,  Suárez,  J.  P.,  Sánchez-Rodríguez,  A.,  Molina,  M.  C.,
Prieto,  M.,  &  Méndez,  M.  (2019).  Many  broadly-shared mycobionts  characterize  mycorrhizal  interactions  of  two coexisting  epiphytic  orchids  in  a  high  elevation  tropical forest. Fungal Ecology , 39 , 26–36. https://doi.org/10.1016/j.funeco.2018.11.003
Jacquemyn, H., Waud, M., Brys, R., Lallemand, F., Courty, P. E.,
Robionek,  A.,  &  Selosse,  M.  A.  (2017).  Mycorrhizal associations  and  trophic  modes  in  coexisting  orchids:  An ecological continuum between auto-and mixotrophy.
Frontiers in Plant Science , 8 (August), 1–12. https://doi.org/10.3389/fpls.2017.01497
Jiang,  J.  H.,  Lee,  Y.  I.,  Cubeta,  M.  A.,  &  Chen,  L.  C.  (2015).
Characterization  and  colonization  of  endomycorrhizal Rhizoctonia  fungi  in  the  medicinal  herb  Anoectochilus formosanus  (Orchidaceae). Mycorrhiza , 25 (6),  431–445. https://doi.org/10.1007/s00572-014-0616-1
Kareem,  T.  (2018). Morphology  and  molecular  identification  of
Rhizoctonia solani . Germany: Lambert Academic Publishing.
Melayu Sanggau Kalimantan Barat
Kaur, J., Andrews, L., & Sharma, J. (2019). High Specificity Of A Rare  Terrestrial  Orchid  Toward  A  Rare  Fungus  Within  The North American Tallgrass Prairie. Fungal Biology . https://doi.org/10.1016/j.funbio.2019.09.010
McCormick,  M.  K.,  Whigham,  D.  F.,  &  Canchani-Viruet,  A. (2018).  Mycorrhizal  fungi  affect  orchid  distribution  and population  dynamics. New  Phytologist , 219 (4),  1207–1215. https://doi.org/10.1111/nph.15223
Meng, Y. Y., Shao, S. C., Liu, S. J., & Gao, J. Y. (2019). Do the fungi  associated  with  roots  of  adult  plants  support  seed germination? A case study on Dendrobium exile (Orchidaceae). Global  Ecology  and  Conservation , 17 ,
e00582. https://doi.org/10.1016/j.gecco.2019.e00582
Meng, Y. Y., Zhang, W. L., Selosse, M. A., & Gao, J. Y. (2019).
Are  fungi  from  adult  orchid  roots  the  best  symbionts  at germination? A case study.
Mycorrhiza , (i).
https://doi.org/10.1007/s00572-019-00907-0
Normagiat,  S.,  Harfinda,  E.  M.,  &  Sudirman.  (2018).  Sebaran
Spasial  dan  Karakteristik  Habitat  Anggrek  Tanah  ( Plocoglottis lowii Rchb . f .) Tumbuhan Obat Penawar Racun (Plocoglottis  lowii  Rchb  .  f  .)  Asal  Sanggau  Kalimantan Barat. Agriovet , 1 (1), 37–50.
Oktalira,  F.  T.,  Whitehead,  M.  R.,  &  Linde,  C.  C.  (2019). Mycorrhizal  specificity  in  widespread  and  narrow-range distributed  Caladenia  orchid  species. Fungal  Ecology , 42 ,
100869. https://doi.org/10.1016/j.funeco.2019.100869
Reiter,  N.,  Lawrie,  A.  C.,  &  Linde,  C.  C.  (2018).  Matching symbiotic  associations  of  an  endangered  orchid  to  habitat  to improve  conservation  outcomes. Annals  of  Botany , 122 (6),
947–959. https://doi.org/10.1093/aob/mcy094
Sneh,  B.,  Jabaji-Hare,  S.,  Neate,  S.,  &  Dijst,  G.  (1996). Rhizoctonia Species: Taxonomy, Molecular Biology, Ecology, Pathology  and  Disease  Control .  Netherlands:  Springer-
Science+Business Media, B.V.
Suryantini,  R.,  Suci  Wulandari,  R.,  &  Sri  Kasiamdari,  A.  (2015).
Orchid  Mycorrhizae  Fungi:  Identification  of  Rhizoctonia  in West  Kalimantan. Microbiology  Indonesia , 9 (4),  157–162. https://doi.org/10.5454/mi.9.4.3
Zeng,  Y.,  Guo,  L.-P.,  Chen,  B.-D.,  Hao,  Z.-P.,  Wang,  J.-Y., Huang,  L.-Q.,  …  Zhang,  Y.  (2013).  Arbuscular  mycorrhizal symbiosis and active ingredients  of medicinal  plants: current research status and prospectives. Mycorrhiza , 23 (4), 253–265. https://doi.org/10.1007/s00572-013-0484-0
Zheng, Y. K., Qiao, X. G., Miao, C. P., Liu, K., Chen, Y. W., Xu, L.  H.,  &  Zhao,  L.  X.  (2016).  Diversity,  distribution  and biotechnological  potential  of  endophytic  fungi. Annals  of
Microbiology , 66 (2), 529–542. https://doi.org/10.1007/s13213-015-1153-7
Melayu Sanggau Kalimantan Barat