## Degradasi Bahan Kering dan Produksi Asam Lemak Terbang In Vitro pada Kulit Buah Kakao Terfermentasi
Nelson 1
1 Fakultas Peternakan Universitas Jambi, Jambi

## Intisari
Penelitian bertujuan untuk menyelidiki degradasi bahan kering dan produksi asam lemak terbang dari  kulit  buah  kakao  yang  difermentasi  dengan kapang  Phanerochaete  chrysosporium. Percobaan  dirancang  dengan  pola  Faktorial  pada  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  3 perlakuan penambahan mineral dan 4 perlakuan lama penyimpanan. Peubah yang diamati adalah degradasi  bahan  kering,  produksi  asam  lemak  terbang  dan  konsentrasi  amonia.  Hasil  penelitian menunjukkan penambahan mineral tidak mempengaruhi degradasi bahan kering, produksi asam lemak  ternbang  dan  konsentrasi  amonia.  Lama  fermentasi  mempengaruhi  produksi  asam  lemak terbang dengan produksi tertinggi pada lama fermentasi 10 hari. Penambahan mineral  pada kulit buah  kakao  difermentasi  dengan  kapang  P.  chrysosoporium  menunjukkan  hasil  yang  belum optimal terhadap degradasi bahan kering, produksi VFA dan konsentrasi amonia.
Kata kunci: bahan kering, asam lemak terbang, kulit buah kakao, fermentasi

## Abstract
The research was conducted to investigate dry matter degradation and VFA production of fermented cocoa pods by Phanerochaete chrysosporium. The experiment method Completely Randomized Block Design with two factors: three treatment mineral supplementation and four treatment storage length. The result showed that  mineral  administration  had  no  effect  to  dry  matter  degradation,  VFA  production,    ammonia concentration.  Fermentation  length  affected  volatile  fatty  acids  with  the  highest  production  at  day  10. Mineral  supplementation  to  fermented  cacao  pods  had  no  optimal  yield  on  dry  matter  degradation,  VFA production, and ammonia production.
Kata kunci : dry matter, VFA, cacao pods, fermentation

## Pendahuluan
Subsektor  peternakan  merupakan sumber utama penyediaan protein hewani. Kemampuan subsektor ini dalam penyediaan protein hewani sangat dipengaruhi oleh manajemen pemeliharaan antara lain penyediaan dan pengelolaan  pakan.  Pakan  mempunyai peran  penting  dalam  pertumbuhan,
produksi dan reproduksi  ternak. Dewasa ini,  penyediaan  pakan  telah  bergeser kepada upaya eksplorasi dan pemanfaatan bahan pakan nonkonvensional  dengan  nilai  kompetisi yang  masih  rendah.    Salah  satu  bahan nonkonvensional  potensial  yang  dapat dijadikan  sebagai  bahan  pakan  ternak adalah kulit buah kakao.
Kulit buah kakao merupakan limbah  panen  hasil  perkebunan  anaman kakao.  Jumlah  kulit  buah  kakao  yang dihasilkan dalam produksi kakao sebesar 75,67%  dari  buah  utuh  (Darwis  dkk. 1988). Produksi kulit  buah  kakao mengalami  peningkatan  seiring  dengan peningkatan produktivitas dan luas areal tanam  kakao.  Pemanfaatan  kulit  buah kakao  sebagai  pakan  ternak  akan memberikan  2  dampak  utama  yaitu peningkatan  ketersediaan  bahan  pakan dan mengurangi pencemaran lingkungan akibat  pembuangan  kulit  buah  kakao yang kurang baik. Penggunan kulit buah kakao  sebagai  mulsa  yang  disebarkan disekeliling tanaman dapat menjaditempat tumbuh cendawan
Phytopthora  palmivora. Cendawan  ini dapat menjadi hama dan penyakit busuk buah,  hawar  daun  dan  kangker  batang tanaman kakao sehingga
dapat menurunkan  produksi  tanaman  tersebut (Tequaia dkk. 2004).
Potensi  kulit  buah  kakao  sebagai pakan  ternak  harus  dilihat  dari  3  aspek yaitu  aspek  kuantitas,  kualitas  dan kontinuitas. Produksi yang berkesinambungandapat menjamin ketersediaan  bahan  sepanjang  tahun.
Kendala  utama  pemanfaatan  kulit  buah kakao  sebagai  pakan  ternak  adalah kandungan  lignin  yang  cukup  tinggi berkisar  yang  berkisar  antara  27,95% (Amiroenas  1990)    sampai  38,78% (Laconi1998)  sehingga  sulit  dicerna  oleh ternak.  Peningkatan  nilai  manfaat  kulit buah  kakao  dapat  dilakukan  dengan perlakuan  secara  biologis  yaitu  dengan memutuskan  atau  mengurangi  keeratan ikatan  antara  selulosa,  hemiselulosa dengan  lignin  dengan  menggunakan kapang Phanerochaete chrysosporium.
Kapang P. chrysosporium merupakan kapang  pendegradasi  lignin  dari  kelas Basidiomycetes. Pertumbuhan  kapang  ini dipengaruhi  oleh  ketersediaan  mineral dalam  substrat,  untuk  itu  diperlukan mineral sesuai dengan kebutuhan kapang yaitu  kalsium  (Ca)  dan  mangan  (Mn).
Penelitian Wuyep dkk. (2003) menyatakan  bahwa  ion  Mn  dan  ion  Ca dapat memacu pertumbuhan dan perpanjangan  miselia.  Hasil  penelitian pendahuluan menunjukkan kapang mencapai  pertumbuhan  maksimal  pada perlakuan penambahan Ca1190 ppm dan Mn100  ppm.  Diharapkan  pertumbuhan maksimal  menghasilkan  enzim  lebih banyak  sehingga  degradasi  lebih  cepat dan  optimal.  Oleh  karena  itu  telah dilakukan penelitian dengan
menggunakan  kapang  P.  chrysosporium dengan  perlakuan  penambahan  mineral serta lama waktu fermentasi.

## Materi dan Metode
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  kulit  buah  coklat yang  berasal  dari  Paal  Merah  Jambi  dan kapang
Phanerochaete chrysosporium Burdsaal  IFO  31249  yang  diperoleh  dari pusat  penelitian  Kimia-LIPI  kawasan PUSPIPTEK  Serpong,  cairan  rumen berasal dari sapi berfistula, mineral CaCl 2 dan MnSO 4 .
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  botol  selai  200  ml, sendok  teh,  autoclave,inkubator,  kain kasa, erlemeyer, aquashaker, tabung fermentor,  sentrifuge,  kertas  saring, termos  air,  waterbath,  thermometer,  oven, cawan conway dan alat untuk
pengukuran produksi VFA.

## Proses Fermentasi Kulit Buah Kakao
Kulit buah kakao digunakan dipotong-potong terlebih dahulu
kemudian  dikeringkan  dibawah  sinar matahari kemudian dimasukkan kedalam oven  60 0 C.  Setelah  kering  digiling  halus menggunakan  hummer  mill  dengan ukuran 2 mm.
Teknik  fermentasi  yang  dilakukan menurut cara Kerem dkk.
(1992).Sebanyak  120g  kulit  buah  kakao yang  telah  digiling  halus  ditambah  air sehingga  mencapai  kadar  air  65%  dan ditambahkan  mineral  MnSO 4 (100  ppm) dan  CaCl 2 (1190  ppm)sesuai  dengan perlakuan  yang  digunakan.    pH    diatur hingga  4.5  kemudian  masukkan  dalam botol selai 200 ml dan diautoclave. Substrat diinokulasi dengan inokulum P.
chrysosporium yang telah dipersiapkan dan inkubasi  dilakukan  pada  suhu  39 0 C. Penentuan  waktu  fermentasi  dilakukan setiap 0,5,10 dan 15 hari.Setelah
fermentasi selesai biomasa yang
diperoleh  dikeringkan  dan  disiapkan untuk  uji  in  vitro  dan  kandungan  zat makanan.

## Metode In Vitro
Pengukuran  In  Vitro  dilakukan menurut  Tilley  dan  Tery  (1963)  dengan modifikasi Haris (1977). Tahapan fermentasi  dilakukan  hanya  sampai proses  pencernaan  secara  fermentatif. Satu  gram  sampel  di  masukkan  kedalam tabung  fermentor  yang berukuran 50  ml.
Lalu ditambahkan 12 ml larutan penyangga Mc.Dougall yang sebelumnya sudah diturunkan pH nya sekitar 6.8 dan 6  ml  cairan  rumen  lalu  dimasukkan kedalam  tabung  fermentor  kemudian ditutup  dengan  karet.  Kondisi  anaerob dibuat dengan jalan mengalirkan gas CO 2 dilakukan  inkubasi  selama  48  jam  pada suhu  39 0 C  dalam  inkubator.  Proses fermentasi  dihentikan  dengan  jalan menambahkan  0.2 ml HgCl 2 jenuh untuk membunuh mikroba.

## Analisis kimia
Pengukuran  BK  menurut  AOAC
(1998),  pengukuran  VFA  menggunakan destilasi uap sedangkan NH 3 menggunakan teknik
mikrodifusi
Conway yang telah di modifikasi Sutardi (1981).
Peubah yang Diamati Peubah yang diamati dalam penelitian ini adalah :
1. Degradasi bahan kering (DBK)
2. Produksi VFA
3. Konsentrasi amonia

## Rancangan Percobaan
Rancangan percobaan yang digunakan  adalah  Rancangan  Acak
Lengkap  (RAL)  pola  Faktorial  3  x  4 dengan 3 kali ulangan.
Faktor 1 adalah penambahan mineral (A) yaitu:
A1 =  Phanerochaete chrysosporium tanpa penambahan mineral
A2 =  Phanerochaete chrysosporium + Mineral Calsium 1190 ppm
A3 =  Phanerochaete chrysosporium + Mineral
Mangan 100 ppm
Faktor II adalah lama fermentasi (B) yaitu :
B1  = Waktu fermentasi 0 hari B2  = Waktu fermentasi 5 hari B3  = Waktu fermentasi 10 hari B4  = Waktu fermentasi 15 hari

## Analisis Data
Untuk mengetahui pengaruh perlakuan  terhadap  parameter  yang diamati  dilakukan  uji  statistik  dengan menggunakan sidik ragam sesuai dengan rancangan  yang  digunakan  dan  apabila terdapat  pengaruh  yang  nyata  maka dilanjutkan  dengan  uji    Polynomial Orthogonal (Steel dan Torrie, 1993).

## Hasil dan Pembahasan

## Degradasi Bahan Kering
Rataan  degradasi  bahan  kering antara    perlakuan  penambahan  mineral dengan  lama  waktu  fermentasi  dapat dilihat  pada  Tabel  1.Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  rataan  degradasi bahan kering lebih besar pada perlakuan tanpa penambahan mineral (A1) dibandingkan perlakuan penambahan Ca dan perlakuan penambahan Mn.
Tabel  1.  Rataan  degradasi  bahan  kering  pada  kulit  buah  kakao  antara perlakuan    penambahan  mineral  dengan  lama  waktu  fermentasi (%). Lama Fermentasi Penambahan Mineral Rataan 0 Ca Mn 0 5 10 15 25,78 23,18 21,75 23,46 19,51 21,26 23,70 24,08 20,01 21,58 21,48 23,16 21,76 22,01 22,31 23,56 Rataan 23,54 22,14 21,56 Hasil analisis ragam menunjukkan  bahwa  penambahan mineral,  lama  waktu  fermentasi  dan interaksi antara kedua perlakuan tidak berpengaruh  nyata  (P>0,05)terhadap degradasi bahan kering.Hal ini diduga bahwa kapang P. chrysosporium cenderung  menggunakan  karbohidrat sebagai  sumber  energi  untuk  hidup setelah terlebih dahulu dipecah menjadi glukosa selama proses fermentasi  menyebabkan  terjadinya penurunan  degradasi  bahan  kering. Fardiaz  (1989)  menyatakan  bahwa mikroorganisme  akan  menggunakan karbohidrat  sebagai  sumber  energi setelah  terlebih  dahulu  dirombak menjadi glukosa melalui jalur glikolisis  sampai  akhirnya  dihasilkan
energi,  CO 2 dan  H 2 O.    Air  yang dihasilkan tersebut akan meningkatkan kadar air produk sehingga mengakibatkan bahan kering produk menurun.

## Produksi  VFA (Volatile Fatty Acid)
Rataan  produksi  VFA    antara perlakuan penambahan mineral dengan  lama  waktu  fermentasi  dapat dilihat  pada  Tabel  2.Hasil  analisis ragam  menunjukkan  bahwa  lama waktu  fermentasi  berpengaruh  sangat nyata (P<0,01) sedangkan penambahan  mineral  dan  interaksi antara  penambahan  mineral  dengan lama waktu fermentasi tidak berpengaruh  nyata  (P>0,05)  terhadap produksi  VFA  pada  kulit  buah kakao.
Tabel 2.  Rataan  produksi  VFA  pada  kulit  buah  kakao  antara  penambahan mineral dengan lama waktu fermentasi (mM). Lama Fermentasi Penambahan Mineral Rataan A1 A2 A3 B1 B2 B3 B4 48,48 31,22 88,46 63,59 22,13 30,49 91,95 66,75 34,43 29,27 79,77 60,61 35,01 a 30,32 a 86,73 b 63,65 c Rataan 57,93 52,83 51,02
Keterangan : Supercript yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P<0,05).
Uji polinomial orthogonal menunjukkan hubungan kubik antara lama  fermentasi  terhadap  produksi VFA  dengan  persamaan  y  =  27,98  – 5,60x  +  0.18x 2 dan  koefisien  korelasi R 2 =  0,526  (Gambar  1).  Dimana  y
adalah  produksi  VFA  dan  x  lama fermentasi.
Produksi  VFA    pada  lama fermentasi  10  hari  (B3)  mengalami kenaikan sedangkan  pada lama fermentasi 0 hari (B1), 5 hari (B2) dan 15  hari  (B4)  mengalami  penurunan. Hal  ini  diduga  bahwa  fermentasi  10 hari (B3) merupakan fase pertumbuhan  stasioner  kapang  yang meningkat dan enzim yang dihasilkan lebih  banyak  sehingga  kapang  lebih mampu  menguraikan  lignin  dalam substrat  sehingga  dapat  menembus selulosa dan  hemiselulosa yang melekat  pada  matrik  lignin.  Hal  ini sesuai  dengan  pendapat  Hammel
(1997)  menyatakan  bahwa  kapang  P. chrysosporium dapat menguraikan lignin  dalam  substrat  sehingga  dapat menembus  selulosa  dan  hemiselulosa yang melekat pada matrik lignin.
Kisaran  produksi  VFA  pada penelitian  ini  adalah  22,13  sampai 91,95mM.  Sutardi  (1981)  menyatakan
bahwa  kadar  VFA  yang  optimum dalam  rumen  adalah  80  sampai  160 mM.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pada  penelitian  kulit  buah  kakao  ini berada  dibawah  kisaran  normal, sehingga secara umum pakan tersebut tidak  dapat  memenuhi  kebutuhan VFA  untuk  sintesis  mikroba  pada rumen. Hal ini kemungkinan disebabkan  karena  produksi  VFA pada  penelitian  ini  diukur  setelah inkubasi  selama  48  jam  pada  proses pencernaan secara fermentatif dengan teknik in vitro. Ulya (2007)
menyatakan  bahwa  semakin  lama waktu  inkubasi  maka  akan  terjadi penurunan populasi bakteri amililotik akibat fase pertumbuhan bakteri yang lebih  cepat  dan  adanya  persaingan dengan  protozoa  dalam  mencerna pati.  Penurunan  populasi  bakteri amilolitik ini juga dapat
mempengaruhi  produksi  VFA  yang dihasilkan  pada  waktu  inkubasi  48 jam.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 5 10 15 20 Po du ks i V FA Lama fermentasi
Gambar 1.  Hubungan Antara Lama Fermentasi Kapang Phanerochaete chrysosporium Terhadap Produksi VFA.
Konsentrasi  Amonia (NH 3 ) Rataan konsentrasi amonia antara perlakuan penambahan mineral dengan lama waktu fermentasi  dapat  dilihat  pada  Tabel 3.Hasil penelitian menunjukkan bahwa  rataan  konsentrasi  amonia meningkat pada perlakuan penambahan  Mn  tetapi  menurun pada  perlakuan  tanpa  penambahan mineral dan penambahan Ca. Sementara
konsentrasi amonia meningkat  pada  perlakuan  lama fermentasi 5 hari, kemudian menurun
y = 27.98-5.60x+0.18x 2
R 2 = 0.526
pada  lama    10  hari  (B3)  dan  15  hari
(B4).
Tabel 3.  Rataan  konsentrasi  amonia  pada  kulit  buah  kakao  antara penambahan mineral dengan lama waktu fermentasi (mM). Lama Fermentasi Penambahan  Mineral Rataan A1 A2 A3 B1 B2 B3 B4 1,12 1,62 1,41 1,25 1 1,20 1,41 1 1,25 2,54 1,41 1,12 1,12 1,79 1,41 1,12 Rataan 1,35 1,15 1,58 Hasil analisis ragam menunjukkan  bahwa  penambahan mineral dengan lama waktu fermentasi  dan  interaksi  antara  kedua perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata (P>0,05) terhadap konsentrasi amonia.Hal  inididuga  bahwa  pada proses fermentasi tidak adanya keseimbangan  energi  dan  kandungan nitrogen  untuk  mensintesis  protein mikroba  sehingga  dapat  menghambat pertumbuhan dan perkembangan mikroba rumen. Hal ini sesuai dengan pendapatKaunang  (2005)  menyatakan bahwa  untuk  mensintesis  protein mikroba  yang  optimal  diperlukan keseimbangan  energi  (VFA) dan nitrogen dalam bentuk N-NH 3 kekurangan salah satu unsur ini dapat menghambat pertumbuhan
dan perkembangan mikroba rumen.
Konsentrasi amonia penelitian ini sebesar 1-2,5416 mM lebih rendah dari kebutuhan  konsentrasi  amonia  untuk mendukung  pertumbuhan  mikroba yaitu  sebesar  5  –  17,65  mM  (Sutardi, 1981).Hal ini menyebabkan ketersediaan nutrisi yang belum mencukupi untuk menunjang kehidupan  dan  aktifitas  mikroba mengakibatkan  proses  perkembangan mikroba tersebut terhenti atau menurun akibatnya hasil kerja mikroba selama inkubasi belum dapat dihasilkan sebagaimana yang
diharapkan.    Dwidjo  Saputro  (1994) menyatakan  bahwa  dalam  waktu  20 jam mikroba dapat mengalami kematian  dikarenakan  zat  makanan (energi) yang dibutuhkan  untuk beraktivitas  menjadi  berkurang  atau habis.

## Kesimpulan dan Saran

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa penambahan  mineral  pada  kulit  buah kakao  difermentasi  dengan  kapang  P. chrysosoporium menunjukkan hasil yang belum optimal terhadap degradasi bahan kering, produksi VFA dan konsentrasi amonia
Saran Disarankan perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan meningkatkan nilai nutrisi buah kakao agar diperoleh hasil yang optimal

## Daftar Pustaka
Amirroenas  DE.  1990.  Mutu  Ransum Berbentuk  Pellet  dengan  Bahan Serat  Biomassa  Pod Coklat (Theobroma cacao L.) Untuk Pertumbuhan  Sapi  Perah  Jantan [tesis]. Bogor Fakultas Pascasarjana.Institut Pertanian Bogor.
Darwis  AA.  Sakura  E.  Tun  Tedja.
Purnawati  R.  1988.  Biokonversi LimbahLignoselulosa olehTrichoderma viride dan Aspergillus niger . Bogor : laboratorium  Bio-Industri,  PAU Bioteknologi IPB. Fardiaz,  S.  1992.  Mikrobiologi  Pangan 1. Gramedia. Jakarta. Kaunang.  2005.  Kajian  suplementasi probiotik  bermineral  terhadap produksi VFA, NH 3 dan kecernaan  zat  makanan  pada domba. Skripsi. Fakultas Peternakan.  Institut  Pertanian Bogor, Bogor. Kerem  Z,  Friesem  D,  Hadar  Y.  1992. Lignocellulose degradation during  solidstate  fermentation  : Pleurotus ostreatus versus Phanerocheate chrysosporium. ApplEnviron  Microbiol 58:1121- 1127. Laconi, E.B, 1998. Peningkatan Kualitas Kakao Melalui Amoniasi  Dengan  Urea  Dan Biofermentasi Dengan Phanerochaete  chrysosporium serta Penjabaranya  Dalam  Formulasi Ransum  Ruminansia  [disertai]. Bogor  :  Program  Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. 117 hlm. Sutardi  T.  1981.  Pemanfaatan  Limbah Perkebunan Sebagai Pakan
Ternak  Ruminansia.  Makalah Seminar  Fakultas  Peternakan. Institut Pertanian Bogo. Bogor.
Steel,  R.  G.  D  dan  J.  H.  Torrie.  1993. Prinsip  dan  Prosedur  Statistika Suatu  Pendekatan Biometrik. Terjemahan:  M.  Syah.  Gramedia Pustaka Umum. Jakarta. Tequia  A.  Endeley  HNL.  and  Beynen AC.  2004.  Broiler  performance upun  dietary  substitution  of cocoa  husks  for  maize.  Int  J  Poul Sci 3 (12) : 799-782.
Tilley,  J.M.  and  R.A.  Terry.  1963.  A. Two  Stage  Tecnique  for  the  In vitro  Digestion  of  Forage  Crop. Journal  of  British  Grassland
Socienty, 18:104-111. Ulya, A. 2007. Kajian  In Vitro Mikroba Rumen Berbagai Ternak Ruminansia  dalam  Fermentasi Biji Jarak Pagar (Jatropha cucas L). Skripsi.  Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. WuyepPA,  Khan  AU,  Nok  AJ.  2003.
Production  and  regulation  of lignin  degrading  enzymes  from
Lentinus squarrosulus (Mont) singer and Psathyrellaatroumbonata Pegler. African J Biotechnol . 2(11):444-447.