Cibinong. Indonesia. Speight, M.R., Hunter, M.D., dan Watt, A.D. Plona,  M.B.  2002.  Butterfly  Monitoring 1999. Ecology of insects: concepts and Report. Cuyahoga Valley National applications.  London:  Blackwell
Park:http://www.nps.gov/cuva/mana
Science.
gement/rm/02butterflies.htm. Tsukada, E., Nishiyama, Y. 1981. Butterflies
Rizal,  S.  2007.  Populasi  Kupu-kupu  di
of the South East Asian Island, Part II
Kawasan  Cagar  Alam  Rimbo  Panti
Pieridae-Danaidae.  Palapa  Co.  Ltd.
dan  Kawasan  Wisata    Lubuk
Minatok-Tokyo.
Minturun Sumatera. Mandiri, Volume
Tsukada, E., Nishiyama, Y. 1982. Butterflies 9, No. 3. Hal. 177-184.
of the South East Asian Island, Part I
Schulze,C.H. 2000. Effects of antrhopogenic
Papilionidae. Palapa Co. Ltd. Minatok-
disturbance  on  the  diversity  of
Tokyo.
herbivores-an analysis of moth spesies
Tsukada, E., Nishiyama, Y. 1982. Butterflies assemblages  along  habitat  gradients
of the South East Asian Island, Part III in  East  Malaysia  (in  German).  Ph.D.
Satyridae-Lybytheidae.  Palapa  Co.
Thesis,  University  of  Bayreuth,
Ltd. Minatok-Tokyo.
Germany.
Tsukada, E., Nishiyama, Y. 1985. Butterflies
Schulze, C.H., Fiedler K. 2003. Vertical and
of the South East Asian Island, Part IV temporal diversity of species-rich moth
Nympalidae  (I).  Palapa  Co.  Ltd.
taxon  in  Borneo.  In:  Basset  Y.  et  al.
Minatok-Tokyo.
(eds)  Arthropods  of  tropical  forest:
Tsukada, E., Nishiyama, Y. 1991. Butterflies
Spatio-temporal  dynamics  and
of the South East Asian Island, Part V resource use in the canopy. Cambridge
Nympalidae  (II).  Palapa  Co.  Ltd.
University Press, Cambridge, UK.
Minatok-Tokyo.
Shahabuddin, Schulze, C.H., Tscharnke, T.
2005.  Changes  of  dung  beetle communities from rainforests towards sgroforestry  systems  an  annual cultures  in  Sulawesi  (Indonesia). Biodiversity and Conservation 14. 863-
877.

## 92

## Seleksi Isolat Bakteri Pelarut Fosfat (BPF) untuk Mengembangkan Inokulum
Efektif 1) 2) 2) 2) Tamad , Bostang Radjagukguk , Eko Hanudin , dan Jaka Widada 1) PS Agroteknologi, Faperta, UNSOED, Purwokerto/S3 Ilmu Tanah Program Pasca Sarjana, Faperta, UGM, Yogyakarta
2) Dosen Program Pasca Sarjana, Faperta, UGM, Yogyakarta Email:

## Diterima Desember 2010 disetujui untuk diterbitkan Mei 2011

## Abstract
The phosphate solubilizing bacteria (PSB) can release insoluble phosphate in soil by anorganik-P dissolution, organic-P mineralization, and blocking of soil adsorption site.  The selection of effective PSB, therefore,    is  urgently  required  to  study  the  effectiveness  of  PSB.    The  research  was  arranged  to determine: 1) P-solubi-lization or P-mineralization, 2)   physiology, and 3) PSB inoculant improvement. The research was arranged in complete random design, with PSB isolate as treatment.   The variables were: soluble-P, mineralize-P, adsorption-P, pH, PSB population, phosphatase and phythase activity. The result  showed  that  PSB  isolate  1  = Pseudomonas  trivialis ,  5  = Pseudomonas  putida ,  and  9  = Pseudomonas fluorescens , were the best in P solubilization or P mineralization.  Solubilization efficiency of isolate were 1 = 291%, 5 = 280%, and 9 = 347%.  Five days incubation (the end of log phase or early of stationary phase) was the best time to culture harvest for PSB inoculant formulate.  Within twelve months age of culture, population stability of PSB inoculant decreased between 81 and 88%,  and P solubilizing stability PSB inoculant decrease between 65 and 81%. Decreasing of P solubility to P source types of PSB inoculant was AlP > FeP > PR > CaP.
Key words: PSB,  inoculant, organic acid, phosphatase, phytase

## Abstrak
Bakteri  pelarut  fosfat  (BPF)  mampu  melepaskan  fosfat  yang  tidak  larut  dalam  tanah  melalui pelarutan P-anorganik, pemineralan P-organik, dan pemblokan loka jerapan.     Oleh karena itu, seleksi isolat  BPF  efektif  merupakan  langkah  awal  penting  untuk  mengembangkan  inokulum  pelarut  fosfat. Suatu  penelitian  disusun  untuk  menentukan:  1)  pelarutan  atau  pemineralan  P,  2)  fisiologi,  dan  3) pengembangan inokulum BPF.   Ketiga penelitian disusun dalam rancangan acak lengkap, isolat BPF sebagai perlakuan.   Variabel pengamatan meliputi P-larut, P-termineral, P-terjerap, pH, populasi BPF, dan aktivitas fosfatase dan fitase. Hasil penelitian menunjukan bahwa   BPF isolat 1 = Pseudomonas trivialis , 5 = Pseudomonas putida , dan 9 = Pseudomonas fluorescens , ketiganya gram negatif, terbaik melarutkan atau memineralkan P. Efisiensi pelarutan P isolat 1 = 291%, isolat 5 = 280%, dan isolat 9 = 347%. Hari ke-5 inkubasi (akhir fase log atau awal fase stationer) merupakan waktu terbaik pemanenan kultur BPF untuk dijadikan inokulum.  Setelah dua belas bulan, stabilitas populasi inokulum BPF menurun antara  81  dan    88%,    dan  stabilitas  pelarutan  menurun  antara  65  dan  81  %.  Penurunan  daya  larut terhadap sumber P inokulum BPF adalah AlP > FeP > BF > CaP.
Kata kunci: BPF, inokulum, asam organik, fosfatase, fitase

## tamad_1965@yahoo.com
Fosfor dalam tanah dapat ditingkatkan
Pendahuluan
kelarutannya  dengan  rekayasa  biotis
K e t e r s e d i a a n   P   d a l a m   t a n a h
menggunakan  BPF  (Miyasaka  dan  Habte,
d i t e n t u k a n   o l e h   k e l a r u t a n   P  y a n g
2001).   Hediyati (1993) melaporkan bahwa
dipengaruhi  oleh  jenis  sumber  P  dan
10-50  %  mikrobia  tanah  dapat  melarutkan
keberadaan agen penjerap P (anorganik dan
fosfat.  Mikrobia  tanah  yang  memiliki
organik)  dalam  tanah.    Cahyono  (2002)
kemampuan    melarutkan  fosfat  dari  genus
melaporkan  bahwa  besarnya  P  terjerap
bakteri adalah   Pseudomonas, Bacillus dan
(occluded) di dalam tanah akibat pemberian
Escherichia (Subba Rao, 1982; Ruijter et al ., pupuk  P  sintetis  yang  belum  dimanfaatkan
1999; Subba Rao, 1999).
oleh tanaman pada tanah sawah  mencapai
BPF  dapat  meningkatkan  keter-
50 % dari dosis pemberian pupuk P. Dari total
sediaan  P  melalui:  1)  peng-asaman  (sitrat,
P tanah, 1-5 % yang tersedia untuk tanaman
malat,  oksalat/yaitu  asam-asam  organik
(Arcand dan Schneider, 2006)
dengan  bobot  molekul  rendah),  2)  kelasi ketersediaan P dalam tanah. oleh anion asam organik yang mengandung grup hidkroksil dan karboksil terhadap kation

## Materi dan metode
Al, Fe dan Ca, 3) reaksi pertukaran ligan oleh
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium
anion  organik  terhadap  fosfat  pada  Al,  Fe
Tanah  dan  Laboratorium  Riset  Universitas dan  Ca,  sehingga  fosfat  bebas,  4)
J e n d e r a l   S o e d i r m a n ,   P u r w o k e r t o . pemineralan  enzimatis  P  organik  dan  5)
Penelitian  dilakukan  mulai  Januari  2010 mengisi  loka  jerapan  koloid  oleh  asam
sampai April 2011. organik (Arcand dan Schneider, 2006). A. Uji pelarutan/pemineralan P oleh BPF Lal  (2002)  menyatakan  bahwa,  BPF Satu mL sepuluh isolat BPF populasi 8
menghasilkan  asam  organik  meliputi:
10   Unit  Pembentuk  Koloni  (UPK)/mL monokarboksilat (asam asetat dan format),
diinokulasikan  dalam  100  mL  pikovskaya hidroksi  monokarboksilat  (asam  laktat,
padat dan cair dengan sumber P Ca (PO )
3 4 2
glukonat  dan  glikolat),  dikarboksilat  (asam
atau AlPO  atau FePO  atau BF atau pNPP 4 4
oksalat dan suksinat), hidroksi dikarboksilat
(para-nitrophenyl  phosphate)  atau  Na-fitat (asam  malat  dan  maleat)  dan  hidroksi
diinkubasikan seminggu (1 MI).  Pelarutan P trikarboksilat (asam sitrat).     Asam organik
pada  Pikovskaya  (Oxoid)  padat  dicirikan yang  mempunyai  kemampuan  kuat  dalam
adanya zona pelarutan P (zona jernih).   P- melarutkan  fosfat  adalah  asam  sitrat,
terlarut  pada  Pikovskaya  cair  ditentukan kemudian diikuti oleh asam malonat, tartrat,
dengan  pewarnaan  Amonium  Vanado asetat,  malat  dan  suksinat  (Subba  Rao,
M o l i b d a t   ( N V M )   d a n   p e m b a c a a n 1999; Solano et al ., 2008). spektofotometer  (UV-VIS  UVmin-1240
Violante et  al .,  (2002)  menya-takan
Shimadzu)  pada  panjang  gelombang  420 bahwa,  ligan  organik  membentuk  komplek
nm  (BPT,  2005).  Variabel  yang  diamati organo  mineral  dengan Al-OH  atau  Fe-OH
adalah:    P-terlarut,  indeks  pelarutan  (IP  = yang  mengendap.    Ligan  organik  (sitrat,
ØH/ØK), efisiensi zona larut (EZL = (H-K)/K),
malat,  oksalat  dan  fumarat)  berkom-petisi efisiensi pelarutan  P (EPP = (P-P )/P ),  pH, k k kuat  dengan  fosfat  untuk  menduduki  loka
dan populasi BPF.
jerapan  membentuk  ikatan  komplek  inner- sphere.      Selain  itu,  ligan  organik  juga mampu  mengkelat  (Al,  Fe,  Ca)  agen
B. Uji fisiologi BPF
pengikat  fosfat  (Fankem et  al .,  2006).

## 1. Uji Aktivitas fosfatase dan fitase BPF
Peningkatan P tersedia juga akibat adanya
Ke dalam kultur BPF umur seminggu
fosfatase  dan  fitase  yang  diproduksi  oleh
d i t a m b a h k a n   p N P P   a t a u   N a - f i t a t
BPF (Achal et al ., 2007).
(C6H18P6O24.12Na.xH2O) sebanyak  5,0  g Berdasarkan uji in vitro 10 isolat BPF
dan 2 g CaCl2   per liter media pH 7,0 (Burns,
Ajibarang  mempunyai  kegiatan  fosfatase
1978;  Anas,  1989;  Milko et  al .,  2008).
20-30  mg  fosfat/mL/jam  dan  menghasilkan
Setelah  diinkubasikan  selama  1  jam  pada
sitrat,  malonat,  tartrat,  asetat  dan  malat
suhu  ruang,  kultur  dibaca  dengan mampu melarutkan P BF 10-20 mg P/L, dan
spektrofotometer  (UV-VIS  UVmin-1240
Ca-P  sebesar  150-235  mg  P/L  selama
Shimadzu)  pada  panjang  gelombang  413
empat  hari    (Tamad et  al .,  2007).    BPF
nm,  dengan  pewarnaan  NVM  (BPT,  2005).
mening-katkan serapan P dan hasil kedelai
A k t i v i t a s   B P F   d i h e n t i k a n   d e n g a n
pada  Ultisol    Tangeran  Banyumas  50  %
penambahan  2  tetes  kloroform.    Aktivitas
(Tamad  dan  Maryanto,  2010).    Demikian
fosfatase  atau  fitase  dinyatakan  dalam  mg
juga, inokulasi BPF pada Vertisol Jatibarang
fosfat/L/jam  (Ullah  dan  Gibson,  1987;
Brebes mening-katkan serapan P dan bobot
Ponmurugan dan Gopi, 2006).
umbi  bawang  merah    10  %  (Tamad  dan
2. Uji pelekatan dan adhesi BPF
Mearita, 2005).
Biji jagung direndam dalam etanol 70
BPF  potensial  untuk  dijadikan
%  (v/v)  selama  15  menit,  kemudian  dibilas
inokulum.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk
dengan etanol 20 % (v/v) dan aquades steril
mendapatkan  isolat  BPF  efektif  yang  akan
dua  kali.    Biji  jagung  dihidrasi  dengan dikembangkan  menjadi  inokulum  pelarut
direndam  dalam  aquades  steril  selama  16 fosfat.   Manfaat penelitian ini ialah sebagai
jam.  Sebobot 20 g biji jagung steril terhidrasi
pedoman  pengembangan  BPF  dan
dimasukan  ke  dalam  tabung  steril  50  ml,
i n o k u l u m n y a   u n t u k   m e n i n g k a t k a n
bagian  bawah  tabung  ditutup.    Kemudian,
94
ditambahkan  20  ml  kultur  BPF  umur  satu pembawa cair BPF adalah 20 % (v) molase minggu  dan    diinkubasikan  selama  1  jam.
dan  5  g/L  ekstrak  kedelai.    Sedangkan, Populasi  BPF  pada  kultur  penampungan media pembawa padat BPF ialah campuran dari  tabung  ditentukan  melalui  hubungan
(100  mesh)  steril    20  %  abu  sekam,  20  % antara  OD  (600  nm)  dan  UPK/mL.    Nilai
dedak  padi,  20  %  onggok  tapioka,  3,0  %
pelekatan merupakan persentase BPF yang
asam asetat, 2,0 % CuSO . 5H O, 5 % zeolit,
4 2 melekat pada biji terhadap kontrol (Urgel et dan 30 % H O (Tamad dan Maryanto, 2010). 2 al. , 2000). Setelah  dua  belas  bulan  penyimpanan, Satu  biji  jagung  terhidrasi  dan  steril inokulum BPF ditentukan stabilitas populasi
setelah diinkubasi selama 1 jam pada suhu
dan  stabilitas  kemampuan  melarutkan    P ruang  pada  kultur  BPF  umur  satu  minggu,
(Ca-P, Al-P, Fe-P, dan BF).
selanjutnya  dikultur  untuk  menentukan
Analisis data populasi  BPF  yang  menempel  pada  biji Data  percobaan  dianalisis  ragam
jagung tersebut. BPF yang melekat pada biji
( ANOVA ).    Hasil  analisis  ragam  yang jagung adalah adhesi kualitatif (Urgel et al. , berbeda  nyata,  dan  sangat  beda  nyata
2000).    Selanjutnya  biji  jagung  tersebut
dilanjutkan    uji  tengah  ( ANOM ) Duncans
dibilas dengan aquades steril, dikultur untuk
Multiple  Range  Test ( DMRT) pada  taraf
menentukan  BPF  (adhesi  kuantitatif).  Nilai
kepercayaan  95%  ( á =  5%).  Keterkaitan adhesi  merupakan  persentase  BPF  yang
antar  variabel  diuji  dengan  korelasi  dan tumbuh  dari  biji  jagung  antara  uji  adhesi
regresi (Gomez dan Gomez, 1984). kuantitatif  dengan      kualitatif  (Urgel et  al. , 2000). Hasil dan pembahasan 3. Penentuan kurva tumbuh BPF BPF  koleksi  Laboratorium  Tanah, Satu  mL  isolat  BPF  terdeterminasi
Fakultas  Pertanian,  UNSOED,  Purwokerto diinokulasikan pada 100 ml Pikovskaya cair,
mampu  tumbuh  pada  Pikovskaya  dengan selanjutnya  diinkubasikan  selama  sepuluh
sumber  P  berbeda  (Gambar  1).      Adanya
hari  dengan  penggojogan  100  rpm  pada
zona  jernih  sekitar  koloni  BPF  pada suhu  ruang.    Tiap  24  jam  diambil  1  ml
Pikovskaya  sebagai  indikator  kegiatan cuplikan  untuk  ditentukan  populasinya
pelarutan fosfat (Subba Rao, 1982; Booker, dengan metode SPC ( standard plate count ). et  al., 2004).    BPF  mampu  melarutkan  P,
Data populasi BPF tiap 24 jam penga-matan
karena  menurut  Victoria et  al. (2009)
dan waktu pengamatan (tiap 24 jam) dibuat
menghasilkan:  1)  asam  organik  (sitrat, + kurva (Pepper dan Gerba, 2004). malat, oksalat, glukonat, dan  asetat), ion H - C. Pengembangan inokulum BPF dan  HCO ,  dan  2)  polisakarida.  Fenotif 3 Isolat BPF tunggal dan konsorsium (3 +
pelarut  mineral  fosfat  (Mps )  gen gabY
8
isolat)  dengan  populasi  (10   UPK/mL)
menghasilkan  glukonat,  2-ketoglukonat diinokulasikan  sebanyak  10  mL/L  atau  kg
dan/atau  2,5-diketoglukonat  yang  mampu pada  media  pembawa  cair  dan  padat  dan
melarutkan  mineral  fosfat  (Khan et  al.,
diinkubasikan  selama  satu  bulan.  Media 1995).
Gambar 1.   Koloni, zona pelarutan P oleh BPF pada Pikovskya satu minggu inkubasi (1 MI) dengan sumber P berbeda
Figure 1. Colony, solubilizing zone of P by PSB in Pikovskya a week incubation (1 MI) with different P sources
Tamad dkk., Seleksi Isolat Bakteri Pelarut (BPF) :  93-101
dengan  bobot  molekul  rendah),  2)  kelasi ketersediaan P dalam tanah.
oleh anion asam organik yang mengandung grup hidkroksil dan karboksil terhadap kation

## Materi dan metode
Al, Fe dan Ca, 3) reaksi pertukaran ligan oleh
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium anion  organik  terhadap  fosfat  pada  Al,  Fe
Tanah  dan  Laboratorium  Riset  Universitas dan  Ca,  sehingga  fosfat  bebas,  4)
J e n d e r a l   S o e d i r m a n ,   P u r w o k e r t o . pemineralan  enzimatis  P  organik  dan  5)
Penelitian  dilakukan  mulai  Januari  2010 mengisi  loka  jerapan  koloid  oleh  asam sampai April 2011. organik (Arcand dan Schneider, 2006).
A. Uji pelarutan/pemineralan P oleh BPF Lal  (2002)  menyatakan  bahwa,  BPF Satu mL sepuluh isolat BPF populasi
8
menghasilkan  asam  organik  meliputi:
10   Unit  Pembentuk  Koloni  (UPK)/mL monokarboksilat (asam asetat dan format),
diinokulasikan  dalam  100  mL  pikovskaya hidroksi  monokarboksilat  (asam  laktat, padat dan cair dengan sumber P Ca (PO ) 3 4 2
glukonat  dan  glikolat),  dikarboksilat  (asam atau AlPO  atau FePO  atau BF atau pNPP
4
4 oksalat dan suksinat), hidroksi dikarboksilat
(para-nitrophenyl  phosphate)  atau  Na-fitat
(asam  malat  dan  maleat)  dan  hidroksi
diinkubasikan seminggu (1 MI).  Pelarutan P trikarboksilat (asam sitrat).     Asam organik
pada  Pikovskaya  (Oxoid)  padat  dicirikan yang  mempunyai  kemampuan  kuat  dalam
adanya zona pelarutan P (zona jernih).   P- melarutkan  fosfat  adalah  asam  sitrat,
terlarut  pada  Pikovskaya  cair  ditentukan kemudian diikuti oleh asam malonat, tartrat,
dengan  pewarnaan  Amonium  Vanado asetat,  malat  dan  suksinat  (Subba  Rao,
M o l i b d a t   ( N V M )   d a n   p e m b a c a a n 1999; Solano et al ., 2008).
spektofotometer  (UV-VIS  UVmin-1240 Violante et  al .,  (2002)  menya-takan
Shimadzu)  pada  panjang  gelombang  420 bahwa,  ligan  organik  membentuk  komplek
nm  (BPT,  2005).  Variabel  yang  diamati organo  mineral  dengan Al-OH  atau  Fe-OH
adalah:    P-terlarut,  indeks  pelarutan  (IP  = yang  mengendap.    Ligan  organik  (sitrat,
ØH/ØK), efisiensi zona larut (EZL = (H-K)/K),
malat,  oksalat  dan  fumarat)  berkom-petisi efisiensi pelarutan  P (EPP = (P-P )/P ),  pH, k k kuat  dengan  fosfat  untuk  menduduki  loka
dan populasi BPF.
jerapan  membentuk  ikatan  komplek  inner- sphere.      Selain  itu,  ligan  organik  juga mampu  mengkelat  (Al,  Fe,  Ca)  agen
B. Uji fisiologi BPF pengikat  fosfat  (Fankem et  al .,  2006).

## 1. Uji Aktivitas fosfatase dan fitase BPF
Peningkatan P tersedia juga akibat adanya
Ke dalam kultur BPF umur seminggu
fosfatase  dan  fitase  yang  diproduksi  oleh
d i t a m b a h k a n   p N P P   a t a u   N a - f i t a t
BPF (Achal et al ., 2007).
(C6H18P6O24.12Na.xH2O) sebanyak  5,0  g Berdasarkan uji in vitro 10 isolat BPF
dan 2 g CaCl2   per liter media pH 7,0 (Burns,
Ajibarang  mempunyai  kegiatan  fosfatase
1978;  Anas,  1989;  Milko et  al .,  2008).
20-30  mg  fosfat/mL/jam  dan  menghasilkan
Setelah  diinkubasikan  selama  1  jam  pada sitrat,  malonat,  tartrat,  asetat  dan  malat
suhu  ruang,  kultur  dibaca  dengan mampu melarutkan P BF 10-20 mg P/L, dan
spektrofotometer  (UV-VIS  UVmin-1240 Ca-P  sebesar  150-235  mg  P/L  selama
Shimadzu)  pada  panjang  gelombang  413 empat  hari    (Tamad et  al .,  2007).    BPF nm,  dengan  pewarnaan  NVM  (BPT,  2005). mening-katkan serapan P dan hasil kedelai
A k t i v i t a s   B P F   d i h e n t i k a n   d e n g a n pada  Ultisol    Tangeran  Banyumas  50  %
penambahan  2  tetes  kloroform.    Aktivitas (Tamad  dan  Maryanto,  2010).    Demikian
fosfatase  atau  fitase  dinyatakan  dalam  mg
juga, inokulasi BPF pada Vertisol Jatibarang
fosfat/L/jam  (Ullah  dan  Gibson,  1987;
Brebes mening-katkan serapan P dan bobot
Ponmurugan dan Gopi, 2006).
umbi  bawang  merah    10  %  (Tamad  dan

## 2. Uji pelekatan dan adhesi BPF
Mearita, 2005).
Biji jagung direndam dalam etanol 70
BPF  potensial  untuk  dijadikan
%  (v/v)  selama  15  menit,  kemudian  dibilas
inokulum.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk
dengan etanol 20 % (v/v) dan aquades steril mendapatkan  isolat  BPF  efektif  yang  akan
dua  kali.    Biji  jagung  dihidrasi  dengan dikembangkan  menjadi  inokulum  pelarut
direndam  dalam  aquades  steril  selama  16 fosfat.   Manfaat penelitian ini ialah sebagai
jam.  Sebobot 20 g biji jagung steril terhidrasi pedoman  pengembangan  BPF  dan
dimasukan  ke  dalam  tabung  steril  50  ml,
i n o k u l u m n y a   u n t u k   m e n i n g k a t k a n
bagian  bawah  tabung  ditutup.    Kemudian,
94
ditambahkan  20  ml  kultur  BPF  umur  satu
pembawa cair BPF adalah 20 % (v) molase minggu  dan    diinkubasikan  selama  1  jam.
dan  5  g/L  ekstrak  kedelai.    Sedangkan, Populasi  BPF  pada  kultur  penampungan
media pembawa padat BPF ialah campuran dari  tabung  ditentukan  melalui  hubungan
(100  mesh)  steril    20  %  abu  sekam,  20  %
antara  OD  (600  nm)  dan  UPK/mL.    Nilai
dedak  padi,  20  %  onggok  tapioka,  3,0  % pelekatan merupakan persentase BPF yang
asam asetat, 2,0 % CuSO . 5H O, 5 % zeolit,
4 2
melekat pada biji terhadap kontrol (Urgel et dan 30 % H O (Tamad dan Maryanto, 2010). 2
al. , 2000).
Setelah  dua  belas  bulan  penyimpanan,
Satu  biji  jagung  terhidrasi  dan  steril
inokulum BPF ditentukan stabilitas populasi setelah diinkubasi selama 1 jam pada suhu
dan  stabilitas  kemampuan  melarutkan    P ruang  pada  kultur  BPF  umur  satu  minggu,
(Ca-P, Al-P, Fe-P, dan BF).
selanjutnya  dikultur  untuk  menentukan
Analisis data populasi  BPF  yang  menempel  pada  biji
Data  percobaan  dianalisis  ragam
jagung tersebut. BPF yang melekat pada biji ( ANOVA ).    Hasil  analisis  ragam  yang jagung adalah adhesi kualitatif (Urgel et al. , berbeda  nyata,  dan  sangat  beda  nyata
2000).    Selanjutnya  biji  jagung  tersebut
dilanjutkan    uji  tengah  ( ANOM ) Duncans dibilas dengan aquades steril, dikultur untuk
Multiple  Range  Test ( DMRT) pada  taraf menentukan  BPF  (adhesi  kuantitatif).  Nilai
kepercayaan  95%  ( á =  5%).  Keterkaitan adhesi  merupakan  persentase  BPF  yang
antar  variabel  diuji  dengan  korelasi  dan tumbuh  dari  biji  jagung  antara  uji  adhesi
regresi (Gomez dan Gomez, 1984).
kuantitatif  dengan      kualitatif  (Urgel et  al. ,
2000).
Hasil dan pembahasan
3. Penentuan kurva tumbuh BPF
BPF  koleksi  Laboratorium  Tanah,
Satu  mL  isolat  BPF  terdeterminasi
Fakultas  Pertanian,  UNSOED,  Purwokerto
diinokulasikan pada 100 ml Pikovskaya cair,
mampu  tumbuh  pada  Pikovskaya  dengan
selanjutnya  diinkubasikan  selama  sepuluh
sumber  P  berbeda  (Gambar  1).      Adanya
hari  dengan  penggojogan  100  rpm  pada
zona  jernih  sekitar  koloni  BPF  pada
suhu  ruang.    Tiap  24  jam  diambil  1  ml
Pikovskaya  sebagai  indikator  kegiatan
cuplikan  untuk  ditentukan  populasinya
pelarutan fosfat (Subba Rao, 1982; Booker,
dengan metode SPC ( standard plate count ). et  al., 2004).    BPF  mampu  melarutkan  P, Data populasi BPF tiap 24 jam penga-matan
karena  menurut  Victoria et  al. (2009) dan waktu pengamatan (tiap 24 jam) dibuat
menghasilkan:  1)  asam  organik  (sitrat, +
kurva (Pepper dan Gerba, 2004). malat, oksalat, glukonat, dan  asetat), ion H - C. Pengembangan inokulum BPF dan  HCO ,  dan  2)  polisakarida.  Fenotif 3
Isolat BPF tunggal dan konsorsium (3
+
pelarut  mineral  fosfat  (Mps )  gen gabY 8 isolat)  dengan  populasi  (10   UPK/mL)
menghasilkan  glukonat,  2-ketoglukonat diinokulasikan  sebanyak  10  mL/L  atau  kg
dan/atau  2,5-diketoglukonat  yang  mampu
pada  media  pembawa  cair  dan  padat  dan
melarutkan  mineral  fosfat  (Khan et  al., diinkubasikan  selama  satu  bulan.  Media
1995).
Gambar 1.   Koloni, zona pelarutan P oleh BPF pada Pikovskya satu minggu inkubasi (1 MI) dengan sumber P berbeda
Figure 1. Colony, solubilizing zone of P by PSB in Pikovskya a week incubation (1 MI) with different P sources
Pelarutan P oleh BPF isolat 1, 5 dan 9 Populasi;  (R   =  0,335).  Lal  (2002) relatif  lebih  tinggi  dibanding  isolat  lainnya
menyatakan  bahwa,  BPF  banyak  yang (Tabel  1),  sejalan  dengan  penurunan  pH, mampu melarutkan Ca-P, tetapi sedikit yang populasi  BPF,  indeks  pelarutan,  efisiensi
mampu  melarutkan  BF,    Fe-P  dan  Al-P. zona  larut,  efisiensi  pelarutan  P  (Tabel  2), Bolan et  al .  (1997)  dan  Subba  Rao  (1999) d a n   p e n g k o l o n i a n   B P F   ( Ta b e l   3 ) . melaporkan  bahwa  asam  malat,  tartarat, Pelarutan P oleh BPF CaP > BF > FeP > AlP.
oksalat, dan sitrat mampu melarutkan P dari P larut  berkorelasi positif dengan IP (0,834),
P  trikalsium  fosfat  yang  tidak  larut  seperti
EP (0,708), populasi BPF (0,578), pelekatan
batuan fosfat. Asam malat, tartrat, malonat, (0,492),  adhesi  (0,527)  dan  berkorelasi
oksalat,  dan  sitrat  mampu  membebaskan negatif dengan pH (-0,428). P-larut = 36,12 + ikatan  AlP  (Johnson  dan  Loeppert,  2006;
34,31  IP  +  0,37  EZL    –  4,63  pH  +  6,50
Fankem et al ., 2008).
Tabel 1. Pelarutan P oleh BPF dalam Pikovskaya pada jenis sumber P (1 MI) Table 1. Solubilizing of P by PSB in Pikovskaya in source of P (1 MI)
Perlakuan BF Ca-P Al-P Fe-P Rataan .............................................. ppm P ................................................ Kontrol 34,92 e 46,28 f 37,20 e 35,27 g 38,42 e 1 (Ja.b2) 151,94 cd 197,36 e 94,62 d 156,88 b 150,20 c 2 (Jt. b2) 129,28 d 240,68 d 111,95 c 74,20 e 139,03 d 3 (Uja. b1) 198,17 b 238,61 d 101,63 d 127,20 c 166,40 b 4 (Ktt. b2) 234,47 a 292,66 a 105,76 d 69,96 f 175,71 a 5 (Bt. b2) 156,09 cd 290,18 a 84,97 d 75,61 e 151,71 c 6 (Bt. b5) 165,17 c 264,39 b 125,56 ab 74,20 e 157,33 bc 7 (Pt. b2) 173,42 c 220,18 d 130,51 a 84,80 d 152,23 c 8 (Pa.b1) 170,53 c 225,62 d 122,26 b 77,03 e 148,86 cd 9 (Uka.b2) 170,12 c 204,70 de 112,36 c 195,04 a 170,56 a 10 (Uka.b1) 221,27 a 236,55 c 120,20 b 69,25 f 161,81 b
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95 % (á = 5%).
Tabel 2. pH medium, populasi BPF, indeks pelarutan (IP), efisiensi zona larut (EZL), efisiensi pelarutan  P (EPP),  aktivitas fosfatase (Afo) dan fitase (Afi) BPF
Table 2. Medium pH, PSB population, solubilizing index (IP), solubilizing zone efficiency (SZE), P solubilizing efficiency (PSE), activity of phosphatase (PA) and Phytase (PhyA) of PSB
Perlakuan pH log UPK /mL IP EZL (%) EPP (%) Afo (mg Fosfat/ L/jam) Afi (mg Fosfat/ L/jam) 1 (Ja.b2) 3,73 b 14,12 a 1,53 c 52,32 e 290,69 c 33,9 b 45,9 a 2 (Jt. b2) 3,88 b 13,90 a 1,51 c 50,94 e 250,87 d 39,7 b 12,7 c 3 (Uja. b1) 3,96 b 12,98 b 1,42 c 41,95 f 328,49 b 18,8 d 15,2 c 4 (Ktt. b2) 3,71 b 13,04 b 1,50 c 50,41 e 347,20 a 39,2 b 46,2 a 5 (Bt. b2) 3,90 b 13,87 a 1,49 c 79,33 d 279,62 cd 47,7 a 46,7 a 6 (Bt. b5) 4,05 a 13,49 ab 1,86 b 86,33 c 298,59 c 25,9 c 18,9 c 7 (Pt. b2) 3,81 b 12,95 b 1,91 b 91,31 c 291,49 c 25,3 c 12,4 c 8 (Pa.b1) 3,88 b 13,02 b 3,16 a 215,35 a 281,26 c 44,5 ab 28,3 b 9 (Uka.b2) 3,55 b 14,21 a 2,83 a 126,91 b 346,60 a 47,7 a 44,7 a 10 (Uka.b1) 3,62 b 13,54 ab 1,88 b 88,12 c 317,05 b 21,5 d 25,6 b
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%). (kontrol: pH = 6,00 c, aktivitas fosfatase = 0,2 a, aktivitas fitase = 0,2
a) Tabel 3. Pengkolonian BPF Table 3. PSB colonization Perlakuan Pelekatan Adhesi Nilai (%) Relatif (%) Nilai (%) Relatif (%) 1 (Ja.b2) 7,55 a 90,96 a 6,64 a 96,09 a 3 (Uja. b1) 4,54 c 54,70 c 6,35 b 91,90 b 5 (Bt. b2) 5,84 b 70,36 b 6,35 b 91,90 b 7 (Pt. b2) 3,92 c 47,23 c 6,35 b 91,90 b 9 (Uka. b2) 8,30 a 100,00 a 6,91 a 100,00 a
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Aktivitas fosfatase dan fitase sebagai
fosfatase 2) fitase, dan 3) fosfonatase dan C- indikator pemineralan P oleh BPF isolat 1, 5 P  liase.  Fosfatase  adalah  enzim  hidrolisis dan  9  relatif  lebih  tinggi  dibanding  isolat
f o s f o r   o r g a n i k   m e n j a d i   f o s f a t lainnya  (Tabel  2).  Hal  tersebut  sejalan anorganik/asam-asam orto fosfat (Eichler et dengan  populasi  BPF,  dan    pengkolonian al., 2004;  Ponmurugan  dan  Gopi,  2006; (Tabel 3). P pemineralan berkorelasi positif
Guicharnaud et  al. (2010).  Fitase  adalah dengan populasi (0,579), pelekatan (0,492),
katalis hidrolisis asam fitat, glukosa 6-fosfat adhesi (0,527), fosfatase (0,594) dan fitase
dan  gliserol  1-fosfat  menjadi  inositol  dan
(0,642).    P  pemineralan    =  44,86  +  1,08
asam  orto  fosfat.    Fosfatase  atau  fitase
2 termasuk  gen  APases.    Kegiatan  APases populasi + 0,66 fosfatase  + 0,71 fitase; (R  =
melalui  hidrolisis  pNPP    atau  Na-phytate 0,392).        BPF  mampu  memineralkan  P,
(Colpaert et al., 1997; Aseri et al ., 2009). karena menurut Muleta (2007) dan Victoria et  al. (2009)    menghasilkan  enzim:  1)

## FMEase
P-nitrofenilfosfat/fenilfosfat + H O    P-nitrofenol/fenol (ROH) + H PO 2 3 4 fitase Mioinositolheksakisfosfat/fitat + H O    Mioinositolheksakis + H PO 2 3 4 0 5 10 15 20 0 2 4 6
8 10 12 14 16 18 Hari Inkubasi BPF (log UPK/mL) Islt-1 Islt-5 Islt-9
Gambar 2. Kurva tumbuh BPF  isolat 1, 5 dan 9 selama 18 hari inkubasi Figure 2. Growth curve of PSB isolate 1, 5 and 9 during 18 day incubation
Tamad dkk., Seleksi Isolat Bakteri Pelarut (BPF) :  93-101
2 Pelarutan P oleh BPF isolat 1, 5 dan 9 Populasi;  (R   =  0,335).  Lal  (2002) relatif  lebih  tinggi  dibanding  isolat  lainnya menyatakan  bahwa,  BPF  banyak  yang (Tabel  1),  sejalan  dengan  penurunan  pH,
mampu melarutkan Ca-P, tetapi sedikit yang populasi  BPF,  indeks  pelarutan,  efisiensi mampu  melarutkan  BF,    Fe-P  dan  Al-P. zona  larut,  efisiensi  pelarutan  P  (Tabel  2), Bolan et  al .  (1997)  dan  Subba  Rao  (1999) d a n   p e n g k o l o n i a n   B P F   ( Ta b e l   3 ) . melaporkan  bahwa  asam  malat,  tartarat, Pelarutan P oleh BPF CaP > BF > FeP > AlP. oksalat, dan sitrat mampu melarutkan P dari P larut  berkorelasi positif dengan IP (0,834),
P  trikalsium  fosfat  yang  tidak  larut  seperti EP (0,708), populasi BPF (0,578), pelekatan batuan fosfat. Asam malat, tartrat, malonat,
(0,492),  adhesi  (0,527)  dan  berkorelasi oksalat,  dan  sitrat  mampu  membebaskan negatif dengan pH (-0,428). P-larut = 36,12 + ikatan  AlP  (Johnson  dan  Loeppert,  2006;
34,31  IP  +  0,37  EZL    –  4,63  pH  +  6,50
Fankem et al ., 2008). Tabel 1. Pelarutan P oleh BPF dalam Pikovskaya pada jenis sumber P (1 MI)
Table 1. Solubilizing of P by PSB in Pikovskaya in source of P (1 MI)
Perlakuan BF Ca-P Al-P Fe-P Rataan .............................................. ppm P ................................................ Kontrol 34,92 e 46,28 f 37,20 e 35,27 g 38,42 e 1 (Ja.b2) 151,94 cd 197,36 e 94,62 d 156,88 b 150,20 c 2 (Jt. b2) 129,28 d 240,68 d 111,95 c 74,20 e 139,03 d 3 (Uja. b1) 198,17 b 238,61 d 101,63 d 127,20 c 166,40 b 4 (Ktt. b2) 234,47 a 292,66 a 105,76 d 69,96 f 175,71 a 5 (Bt. b2) 156,09 cd 290,18 a 84,97 d 75,61 e 151,71 c 6 (Bt. b5) 165,17 c 264,39 b 125,56 ab 74,20 e 157,33 bc 7 (Pt. b2) 173,42 c 220,18 d 130,51 a 84,80 d 152,23 c 8 (Pa.b1) 170,53 c 225,62 d 122,26 b 77,03 e 148,86 cd 9 (Uka.b2) 170,12 c 204,70 de 112,36 c 195,04 a 170,56 a 10 (Uka.b1) 221,27 a 236,55 c 120,20 b 69,25 f 161,81 b
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95 % (á = 5%).
Tabel 2. pH medium, populasi BPF, indeks pelarutan (IP), efisiensi zona larut (EZL), efisiensi pelarutan  P (EPP),  aktivitas fosfatase (Afo) dan fitase (Afi) BPF
Table 2. Medium pH, PSB population, solubilizing index (IP), solubilizing zone efficiency (SZE),
P solubilizing efficiency (PSE), activity of phosphatase (PA) and Phytase (PhyA) of PSB
Perlakuan pH log UPK /mL IP EZL (%) EPP (%) Afo (mg Fosfat/ L/jam) Afi (mg Fosfat/ L/jam) 1 (Ja.b2) 3,73 b 14,12 a 1,53 c 52,32 e 290,69 c 33,9 b 45,9 a 2 (Jt. b2) 3,88 b 13,90 a 1,51 c 50,94 e 250,87 d 39,7 b 12,7 c 3 (Uja. b1) 3,96 b 12,98 b 1,42 c 41,95 f 328,49 b 18,8 d 15,2 c 4 (Ktt. b2) 3,71 b 13,04 b 1,50 c 50,41 e 347,20 a 39,2 b 46,2 a 5 (Bt. b2) 3,90 b 13,87 a 1,49 c 79,33 d 279,62 cd 47,7 a 46,7 a 6 (Bt. b5) 4,05 a 13,49 ab 1,86 b 86,33 c 298,59 c 25,9 c 18,9 c 7 (Pt. b2) 3,81 b 12,95 b 1,91 b 91,31 c 291,49 c 25,3 c 12,4 c 8 (Pa.b1) 3,88 b 13,02 b 3,16 a 215,35 a 281,26 c 44,5 ab 28,3 b 9 (Uka.b2) 3,55 b 14,21 a 2,83 a 126,91 b 346,60 a 47,7 a 44,7 a 10 (Uka.b1) 3,62 b 13,54 ab 1,88 b 88,12 c 317,05 b 21,5 d 25,6 b
96
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%). (kontrol: pH = 6,00 c, aktivitas fosfatase = 0,2 a, aktivitas fitase = 0,2 a)
Tabel 3. Pengkolonian BPF Table 3. PSB colonization
Perlakuan Pelekatan Adhesi Nilai (%) Relatif (%) Nilai (%) Relatif (%) 1 (Ja.b2) 7,55 a 90,96 a 6,64 a 96,09 a 3 (Uja. b1) 4,54 c 54,70 c 6,35 b 91,90 b 5 (Bt. b2) 5,84 b 70,36 b 6,35 b 91,90 b 7 (Pt. b2) 3,92 c 47,23 c 6,35 b 91,90 b 9 (Uka. b2) 8,30 a 100,00 a 6,91 a 100,00 a
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Aktivitas fosfatase dan fitase sebagai
fosfatase 2) fitase, dan 3) fosfonatase dan C- indikator pemineralan P oleh BPF isolat 1, 5
P  liase.  Fosfatase  adalah  enzim  hidrolisis dan  9  relatif  lebih  tinggi  dibanding  isolat
f o s f o r   o r g a n i k   m e n j a d i   f o s f a t lainnya  (Tabel  2).  Hal  tersebut  sejalan
anorganik/asam-asam orto fosfat (Eichler et dengan  populasi  BPF,  dan    pengkolonian al., 2004;  Ponmurugan  dan  Gopi,  2006;
(Tabel 3). P pemineralan berkorelasi positif
Guicharnaud et  al. (2010).  Fitase  adalah dengan populasi (0,579), pelekatan (0,492),
katalis hidrolisis asam fitat, glukosa 6-fosfat adhesi (0,527), fosfatase (0,594) dan fitase
dan  gliserol  1-fosfat  menjadi  inositol  dan (0,642).    P  pemineralan    =  44,86  +  1,08
asam  orto  fosfat.    Fosfatase  atau  fitase 2 termasuk  gen  APases.    Kegiatan  APases populasi + 0,66 fosfatase  + 0,71 fitase; (R  =
melalui  hidrolisis  pNPP    atau  Na-phytate 0,392).        BPF  mampu  memineralkan  P,
(Colpaert et al., 1997; Aseri et al ., 2009). karena menurut Muleta (2007) dan Victoria et  al. (2009)    menghasilkan  enzim:  1)

## FMEase
P-nitrofenilfosfat/fenilfosfat + H O    P-nitrofenol/fenol (ROH) + H PO
2 3 4
fitase Mioinositolheksakisfosfat/fitat + H O    Mioinositolheksakis + H PO
2 3 4 0 5 10 15 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Hari Inkubasi BPF (log UPK/mL) Islt-1 Islt-5
Islt-9
Gambar 2. Kurva tumbuh BPF  isolat 1, 5 dan 9 selama 18 hari inkubasi Figure 2. Growth curve of PSB isolate 1, 5 and 9 during 18 day incubation
Pola pertumbuhan BPF isolat 1, 5 dan Pseudomonas  fluorescens ),  ketiganya 9  hampir  mirip  walaupun  dengan  jumlah bakteri gram negatif, terbaik melarut-kan P populasi yang berbeda (Gambar 2), yaitu: 1)
dirakit menjadi inokulum cair dan padat. Hari fase lag/adaptasi sampai hari   ke-2, 2) fase
ke-5 (akhir fase log atau awal fase stationer) log/eksponensial pada hari ke-2 sampai 5, 3)
merupakan waktu terbaik untuk pemanenan fase stationer pada hari    ke-5 sampai 8 dan
kultur  BPF  untuk  dijadikan  inokulum 4)  fase  decline/  kematian  mulai  hari  ke-8
(Gambar  3)  (Thiel,  1999).    Berdasarkan
sampai 18 (akhir pengamatan).   Tiga isolat
kurva tumbuh pada hari ke-5 populasi BPF 10 14 BPF  (1  = Pseudomonas  trivialis ,  5  =
isolat  1  10 UPK/mL,  isolat  5  10 UPK/mL
17 P s e u d o m o n a s   p u t i d a ,   d a n   9   =
dan isolat 9 10  UPK/mL.

## Gambar 3. Inokulum BPF Figure 3. Inoculum of PSB
Setelah  disimpan  selama  dua  belas diduga  karena  kepadatan  sel  yang  tinggi bulan,  stabilitas  populasi  inokulum  BPF menyebabkan  kekurangan  nutrisi  dan menurun menjadi antara 81 dan 88% (Tabel penumpukan hasil limbah, dan pertumbuhan 4),  stabilitas  pelarutan  inokulum  BPF
abnormal  sehingga  jumlah  sel  mati  >  sel menurun menjadi antara 65 dan  81 % (Tabel hidup  (Roman et  al., 2007).  Tingkah  laku 5).  Daya  melarutkan  P  inokulum  BPF mikrobia  yang  tergantung  populasi  dikenal pengaruh  sumber  P  menurun  menjadi dengan  quorum  sensing  (QS).  Pada antara 55 dan 97%, dimana penurunan AlP >
populasi yang tinggi, bakteri mengekspresi- FeP  >  BF  >  CaP  (Tabel  5).    Penurunan
kan  kemampuannya,  termasuk  melarutkan populasi  dan  kemampuan  inokulum  BPF P (Ward et al ., 2001; DeAngelis, 2006).
Tabel 4.  Stabilitas populasi inokulum BPF 12 bulan Table 4. Population stability of PSB inoculum for 12 months
Pembawa Populasi BPF (log UPK/mL) (%) Jumlah Isolat Populasi BPF (log UPK/mL) (%) Cair 7,68 a (87,55) a 0 (kontrol) 0,00 b Padat 7,53 a (83,67) a 1 Isolat 7,32 a (81,33) a 2 Isolat 7,53 a (83,56) a 3 Isolat 7,30 a (81,11) a
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Tabel 5.  Stabilitas pelarutan P inokulum BPF 12 bulan Table 5. Stability of solubilizing P inoculum of PSB for 12 months
Sumber P P larut (ppm P) (%) Pem-bawa P larut (ppm P) (%) Jumlah Isolat P larut (ppm P) (%) BF 114,06 b (69,53) b Cair 123,22 a (81,01)a 0 (kontrol) 30,37 b CaP 123,04 a (55,09) c Padat 100,18 b (65,06) b  1 Isolat 109,62 a (72,07) a AlP 101,72 c (97,54) a 2 Isolat 114,00 a (74,95) a FeP 106,36 c (91,13) a 3 Isolat 111,46 a (73,28) a
Keterangan: Angka dalam kolom yang diikuti huruf sama tidak berbeda pada DMRT taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Phosphate Rocks in the Rhizosphere. Kesimpulan Biol. Fertil. Soils 24: 169-174. BPF isolat 1 = Pseudomonas trivialis , 5 Booker, B.M., L. Stahl, and P.F. Smith. 2004. In = Pseudomonas  putida ,  dan  9  = Pseu- Vitro Antagonism with the Combination domonas  fluorescens ,  ketiganya  gram
of  Vancomycin  and  Clindamycin
negatif,  terbaik  melarutkan  P,  dan  memi- Against Staphylococcus  aureus . The neralkan P. Efisiensi pelarutan P BPF isolat 1 Journal of Applied Research 4(3): 385- = 291%, 5 = 280%, dan 9 = 347%. Aktivitas 390. fosfatase BPF (mg fosfat/L/jam) isolat 1 = 34, BPT (Balai Penelitian Tanah). 2005. Petunjuk 5  dan  9  =  48,  dan    aktivitas  fitase  (mg Teknis: Analisis  Kimia  Tanah, fosfat/L/jam) isolat 1 = 46, 5 = 47, dan 9 = 45. Tanaman,  Air  dan  Pupuk .    Edisi Hari ke-5 (akhir fase log/ awal fase stationer) Pertama.  BPT,  Balitbangtan  Deptan, merupakan waktu terbaik pemanenan kultur Bogor. BPF untuk dijadikan inokulum.  Setelah dua Burns, R.G..  1978. Soil Enzymes .  Academic belas  bulan,  stabilitas  populasi  inokulum Press.  New York. 380p. BPF menurun menjadi 81-88% dan stabilitas Cahyono,  O..  2002.    Pembebasan  Fosfor
pelarutan  P  menurun    menjadi  65-81%.
Terperangkap  ( occluded-P )  pada Penurunan  daya  larut    terhadap  sumber  P Tanah Alfisol  dengan  Metode  Biologi, inokulum BPF adalah AlP > FeP > BF > CaP. Pengaruhnya pada Pertumbuhan dan Hasil Jagung ( Zea mays L.). Disertasi Program  Ilmu  Pertanian  Kekhususan
Daftar Pustaka
Ilmu Tanah .   Program Pasca Sarjana Achal, V., V.V., Savant,  and M.S. Reddy. 2007.
Universitas Brawijaya, Malang.
Phosphate  solubilization  by  a  wild
Colpaert,  J.V.,  Laere,  A.V.,  Tichelen,  K.K.V., strain  and  UV-induced  mutants  of
and J.A.V. Assche.  1997.  The Use of
Aspergillus  tubingensis . Soil  Biology
I n o s i t o l   H e x a p h o s p h a t e   a s   a
and Biochemistry 39: 695-699.
Phospharus  Source  by  Mychorryzal
Anas, I..  1989. Biologi Tanah Dalam Praktek.
and  Non-mychorrizal  Scots  Pine
P e t u n j u k   L a b o r a t o r i u m .     PA U
( Pinus sylvestris ). Functional Ecology
Bioteknologi IPB.  Bogor.
11: 407-415.
Arcand,  M.M.,  and  K.D.  Schneider.    2006.
DeAngelis, K.M.. 2006.   Microbial Community Plant and Microbial Based to Improve
Ecology  and  Bacterial  Quorum
the  Agronomic  Effectiveness  of
Sensing  as  Control  Points  in
Phosphate Rock: A Review. An Acad. Rhizosphere Nitrogen Cycling. Ph.D. Bras. Cienc. 78(4): 791-807. Dissertation ,  University  of  California,
Aseri, G.K., Jain, N., and J.C. Tarafdar.   2009.
Berkeley.
Hydrolysis  of  Phosphate  Forms  by
Eichler,  B.,  Caus,  M.,  Schnug,  E.,  and  D.

## Phosphatases and Phytase Producing
Koppen.    2004.    Soil  Acid  and
Fungi  of  Arid  and  Semi  Arid  Soils  of India. American-Eurasian J. Agric. & Alkaline  Phosphatase  Activities  in Environ. Sci. 5(4): 546-570. Regulation  to  Crop  Species  and Bolan,  N.S.,  J.  Elliot,  P.E.H.  Gregg,  and  S. F u n g i   t r e a t m e n t . L a n d b a t Well.   1997.   Enhanced Dissolution of Forschung Volkenrode 1(54): 01-05.
Tamad dkk., Seleksi Isolat Bakteri Pelarut (BPF) :  93-101
Pola pertumbuhan BPF isolat 1, 5 dan Pseudomonas  fluorescens ),  ketiganya 9  hampir  mirip  walaupun  dengan  jumlah bakteri gram negatif, terbaik melarut-kan P populasi yang berbeda (Gambar 2), yaitu: 1) dirakit menjadi inokulum cair dan padat. Hari fase lag/adaptasi sampai hari   ke-2, 2) fase
ke-5 (akhir fase log atau awal fase stationer) log/eksponensial pada hari ke-2 sampai 5, 3) merupakan waktu terbaik untuk pemanenan fase stationer pada hari    ke-5 sampai 8 dan kultur  BPF  untuk  dijadikan  inokulum 4)  fase  decline/  kematian  mulai  hari  ke-8 (Gambar  3)  (Thiel,  1999).    Berdasarkan sampai 18 (akhir pengamatan).   Tiga isolat kurva tumbuh pada hari ke-5 populasi BPF
10
14
BPF  (1  = Pseudomonas  trivialis ,  5  = isolat  1  10 UPK/mL,  isolat  5  10 UPK/mL
17
P s e u d o m o n a s   p u t i d a ,   d a n   9   =
dan isolat 9 10  UPK/mL.

## Gambar 3. Inokulum BPF Figure 3. Inoculum of PSB
Setelah  disimpan  selama  dua  belas diduga  karena  kepadatan  sel  yang  tinggi bulan,  stabilitas  populasi  inokulum  BPF menyebabkan  kekurangan  nutrisi  dan menurun menjadi antara 81 dan 88% (Tabel penumpukan hasil limbah, dan pertumbuhan
4),  stabilitas  pelarutan  inokulum  BPF abnormal  sehingga  jumlah  sel  mati  >  sel menurun menjadi antara 65 dan  81 % (Tabel hidup  (Roman et  al., 2007).  Tingkah  laku 5).  Daya  melarutkan  P  inokulum  BPF mikrobia  yang  tergantung  populasi  dikenal pengaruh  sumber  P  menurun  menjadi dengan  quorum  sensing  (QS).  Pada antara 55 dan 97%, dimana penurunan AlP > populasi yang tinggi, bakteri mengekspresi- FeP  >  BF  >  CaP  (Tabel  5).    Penurunan kan  kemampuannya,  termasuk  melarutkan populasi  dan  kemampuan  inokulum  BPF P (Ward et al ., 2001; DeAngelis, 2006).
Tabel 4.  Stabilitas populasi inokulum BPF 12 bulan
Table 4. Population stability of PSB inoculum for 12 months
Pembawa Populasi BPF (log UPK/mL) (%) Jumlah Isolat Populasi BPF (log UPK/mL) (%) Cair 7,68 a (87,55) a 0 (kontrol) 0,00 b Padat 7,53 a (83,67) a 1 Isolat 7,32 a (81,33) a 2 Isolat 7,53 a (83,56) a 3 Isolat 7,30 a (81,11) a
Keterangan:  Angka  dalam  kolom  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  pada  DMRT  taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Tabel 5.  Stabilitas pelarutan P inokulum BPF 12 bulan Table 5. Stability of solubilizing P inoculum of PSB for 12 months
Sumber P P larut (ppm P) (%) Pem-bawa P larut (ppm P) (%) Jumlah Isolat P larut (ppm P) (%) BF 114,06 b (69,53) b Cair 123,22 a (81,01)a 0 (kontrol) 30,37 b CaP 123,04 a (55,09) c Padat 100,18 b (65,06) b  1 Isolat 109,62 a (72,07) a AlP 101,72 c (97,54) a 2 Isolat 114,00 a (74,95) a FeP 106,36 c (91,13) a 3 Isolat 111,46 a (73,28) a
Keterangan: Angka dalam kolom yang diikuti huruf sama tidak berbeda pada DMRT taraf kepercayaan 95% ( á = 5%).
Phosphate Rocks in the Rhizosphere.
Kesimpulan
Biol. Fertil. Soils 24: 169-174.
BPF isolat 1 = Pseudomonas trivialis , 5
Booker, B.M., L. Stahl, and P.F. Smith. 2004. In = Pseudomonas  putida ,  dan  9  = Pseu-
Vitro Antagonism with the Combination domonas  fluorescens ,  ketiganya  gram
of  Vancomycin  and  Clindamycin
negatif,  terbaik  melarutkan  P,  dan  memi-
Against Staphylococcus  aureus . The neralkan P. Efisiensi pelarutan P BPF isolat 1
Journal of Applied Research 4(3): 385- = 291%, 5 = 280%, dan 9 = 347%. Aktivitas 390.
fosfatase BPF (mg fosfat/L/jam) isolat 1 = 34,
BPT (Balai Penelitian Tanah). 2005. Petunjuk
5  dan  9  =  48,  dan    aktivitas  fitase  (mg
Teknis: Analisis  Kimia  Tanah, fosfat/L/jam) isolat 1 = 46, 5 = 47, dan 9 = 45. Tanaman,  Air  dan  Pupuk .    Edisi Hari ke-5 (akhir fase log/ awal fase stationer) Pertama.  BPT,  Balitbangtan  Deptan, merupakan waktu terbaik pemanenan kultur Bogor. BPF untuk dijadikan inokulum.  Setelah dua Burns, R.G..  1978. Soil Enzymes .  Academic
belas  bulan,  stabilitas  populasi  inokulum
Press.  New York. 380p.
BPF menurun menjadi 81-88% dan stabilitas
Cahyono,  O..  2002.    Pembebasan  Fosfor pelarutan  P  menurun    menjadi  65-81%.
Terperangkap  ( occluded-P )  pada Penurunan  daya  larut    terhadap  sumber  P
Tanah Alfisol  dengan  Metode  Biologi, inokulum BPF adalah AlP > FeP > BF > CaP.
Pengaruhnya pada Pertumbuhan dan Hasil Jagung ( Zea mays L.). Disertasi Program  Ilmu  Pertanian  Kekhususan
Daftar Pustaka
Ilmu Tanah .   Program Pasca Sarjana Achal, V., V.V., Savant,  and M.S. Reddy. 2007.
Universitas Brawijaya, Malang.
Phosphate  solubilization  by  a  wild
Colpaert,  J.V.,  Laere,  A.V.,  Tichelen,  K.K.V.,
strain  and  UV-induced  mutants  of
and J.A.V. Assche.  1997.  The Use of
Aspergillus  tubingensis . Soil  Biology
I n o s i t o l   H e x a p h o s p h a t e   a s   a
and Biochemistry 39: 695-699.
Phospharus  Source  by  Mychorryzal
Anas, I..  1989. Biologi Tanah Dalam Praktek.
and  Non-mychorrizal  Scots  Pine
P e t u n j u k   L a b o r a t o r i u m .     PA U
( Pinus sylvestris ). Functional Ecology Bioteknologi IPB.  Bogor.
11: 407-415.
Arcand,  M.M.,  and  K.D.  Schneider.    2006.
DeAngelis, K.M.. 2006.   Microbial Community Plant and Microbial Based to Improve
Ecology  and  Bacterial  Quorum
the  Agronomic  Effectiveness  of
Sensing  as  Control  Points  in
Phosphate Rock: A Review. An Acad.
Rhizosphere Nitrogen Cycling. Ph.D.
Bras. Cienc. 78(4): 791-807.
Dissertation ,  University  of  California, Aseri, G.K., Jain, N., and J.C. Tarafdar.   2009.
Berkeley.
Hydrolysis  of  Phosphate  Forms  by
Eichler,  B.,  Caus,  M.,  Schnug,  E.,  and  D.

## Phosphatases and Phytase Producing
Koppen.    2004.    Soil  Acid  and
Fungi  of  Arid  and  Semi  Arid  Soils  of India. American-Eurasian J. Agric. & Alkaline  Phosphatase  Activities  in Environ. Sci. 5(4): 546-570. Regulation  to  Crop  Species  and Bolan,  N.S.,  J.  Elliot,  P.E.H.  Gregg,  and  S. F u n g i   t r e a t m e n t . L a n d b a t Well.   1997.   Enhanced Dissolution of Forschung Volkenrode 1(54): 01-05.
Fankem, H., D. Nwaga, A. Deubel., L. Dieng,
Academis Press, New York. 226p.
W.  Merbach,  and  F.X.  Etoa.    2006. Ponmurugan, P., and C. Gopi.   2006. In vitro Occurrence  and  functioning  of production  of  growth  regulator  and p h o s p h a t e   s o l u b i l i z i n g phosphatase activity  by  phosphate microorganisms  from  oil  palm  tree
solubilizing  bacteria. African  Journal ( Elaeis  guennensis )  rhizosphere  in
of Biotechnology 5(4): 348-350. Cameroon. African  Journal  of Roman,  M.S.,  M.A.  Rivadeneyra,  C. Biotechnology 5(24): 2450-2460. Vasconcelos,  and  J.A.  McKenzie. Gomez,  K.A.,  and  A.A.  Gomez.  1984. 2007.   Biomineralization of carbonate Statistical Procedures For Agricultural and  phosphate  by  moderately nd halophilic  bacteria. FEMS  Microbiol. Research .    2   ed.    John  Wiley  and Ecol. 61: 273-284. Sons.  New York. 236p. Ruijter, G.J.G., P.J.I. van de Vondervoort, and
Guicharnaud, R., Arnalds, O., and G.I. Paton.
J.  Visser.    1999.    Oxalic  Acid
2010.    Short  Term  Changes  of
Production  by Aspergillus  niger :  an Microbial Processes in Icelandic Soils O x a l a t e - n o n - p r o d u c i n g   M u t a n t o   I n c r e a s i n g   Te m p e r a t u r e s . Produces Citric Acid at pH 5 and in the Biogeosciences 7: 671-682. P r e s e n c e   o f   M a n g a n e s e . Hediati,  T..  1993.  Memancing,  Isolasi  dan Microbiology 145: 2569-2576. Determinasi  Batuan  Fosfat  Alam Solano, B.R., J.B. Maicos, and F.J.G. Manero. sebagai  Faktor  Lingkungan  Biotis 2008.    Physiological  and  Molecular
Tanaman Asal Beberapa Jenis Tanah.
M e c h a n i s m s   o f   P l a n t   G r o w t h
Majalah  Ilmiah .  Universitas  Jenderal
Promoting Rhizobacteria (PGPR). Pp.
Soedirman. Purwokerto 1(19):33-40 41-54. In: Ahmad, I., J. Pichtel, and S. Johnson, S.E., and R.H. Loeppert.  2006.  Role
Hidayat  ( Eds. ). Plant  Bacteria of  Organic  Acids  in  Phosphate
I n t e r a c t i o n s :   S t r a t e g i e s   a n d
Mobilization from Iron Oxide. Soil Sci.
Techniques to Promote Plant Growth.
Soc. Am. J . 70: 222-234.
Wiley-VCH, Weinhelm. 310p.
Khan, S.R., T.C. Yeo, W.L. Martin, M.R. Duron,
Subba  Rao,  N.  S..  1982. Biofertilizers  in R.D.  Rogers,  and  A.H.  Goldstein.
Agriculture .  Oxford  &  IBH  Publising 1995.  Cloning of a Mineral Phosphate-
Co.,  New  Delhi,  Bombay,  Calcuta. Solubilizing Gene from Pseudomonas
189p. cepacia.   Applied  and  Environmental ----------------------.    1999. Soil  Microbiology Microbiology 61(3): 972-978.
(Fourth Edition of Soil Microorganisms
Lal,  L..  2002. Phosphatic  biofertilizer . and Plant Growth) .  Science Publisher, Agrotech. Publ. Acad. Udaipur. 224p.
Inc. New Hampshire. 248p.
Milko, A. J., Marcela, T.H., Zed, R., Petra, M.,
and M. dl. L. Mora.  2008.  Isolation of
Tamad,  dan  J.  Maryanto.  2010.    Pelarutan
Culturable Phosphobacteria with both Hayati Batuan Fosfat sebagai Pupuk P h y t a t e - M i n e r a l i z a t i o n   a n d Fosfor  pada  Budidaya  Kedelai  di Phosphate-Solubilization Activity from Ultisol. Agrin 14(1): 72-78. the Rhizosphere of Plants Grown in a
Tamad,  dan  J.  Maryanto.    2010.    Media Volcanic  Soil. Biol.  Fertil.  Soils 44:
P e m b a w a   A l t e r n a t i f   I n o k u l a n
1025-1034. Mikrobia  Pelarut  Fosfat  Berbasis Miyasaka, S.C., and M. Habte.   2001.   Plant Limbah Pertanian. Agrin 14(2): 167- M e c h a n i s m s   a n d   M y c o r r h i z a l 176. Symbioses  to  Increase  Phosphorus Tamad, J. Maryanto, dan Supartoto.   2007. Uptake Efficiency. Communications in Perakitan  Inokulan  Mikroba  Pelarut Soil Science and Plant Analysis 32 (7-
Fosfat  Berbasis  Sumberdaya  Lokal
8): 1101-1147. yang  Kompetitif  guna  Mendukung
Muleta,  D..    2007.    Microbial  Input  in  Coffee
Pertanian  Berkelanjutan. Laporan ( Coffea  arabica L.)  Production
Penelitian  Hibah  Bersaing  XV , Systems,  Soutwestern  Ethiopia:
Lemlit, Unsoed, Purwokerto.
I m p l i c a t i o n s   f o r   P r o m o t i o n   o f
Tamad,  dan  P.  Mearita.  2005.    Pengaruh
Biofertilizers  and  Biocontrol  Agents.
B P F   t e r h a d a p   S e r a p a n   P,
Doctoral Thesis , Swedish University of
P e r t u m b u h a n   d a n   H a s i l
Agricultural Sciences, Uppsala.
Bawang  Merah  yang  Ditanam  di
Pepper,  I.L.,  and  C.P.  Gerba.    2004.
Vertisol Jatibarang Brebes. Laporan Environmental  Microbiology.    A nd Penelitian ,    Kerjasama  IRF  Brebes
Laboratory  Manual ,  2   ed.    Elsevier
Violante, A., M. Pigna, M. Ricciardella, and L. dan Faperta Unsoed, Purwokerto.
Gianfreda.  2002.  Adsorption  of
Thiel,  T..    1999.  Science  in  the  Real  World:
phosphate on variabel charge minerals
Microbes  in  Action. Introduction  to
and  soils  as  affected  by  organic  nad
Bacteria . 1-8 p. Department of Biology, inorganic  ligands.    Pp.  279-295. In:
University of Missouri-St. Louis.
Violante, A., P.M. Huang, J.M. Bollag,
Ullah,  A.H.J.,  and  D.M.  Gibson.    1987.
and L. Gianfreda  ( Eds. ) Soil minerals- Extracellular  Phitase  (E.C.3.1.3.8)
organic  matter-microorganisms from Aspergillus  ficuum NRRL  3135: Interaction  and  Ecosystem  Health. Purification  and  Characterization. Volume  28A.  Dynamics,  Mobility,  and Prep. Biochem. 17: 63-91. Transformation  of  Pollutans  and
Urgel, M.E., A. Salido, and J.L. Ramos.  2000.
Nutrients.  Elsevier, Amsterdam.
Genetic Analysis of Functions Involved
Ward, J.P., J.R. King, A.J. Koerber, P. Williams, in Adhesion of Pseudomonas putida to J.M.  Croft,  and  R.E.  Sockett.    2001. Seeds. Journal  of  Bacteriology 182 Mathematical  modelling  of  quorum (9): 2363-2369. sensing  in  bacteria. IMA  Journal  of Victoria,  D.E.,  L.L.  Reyes,  and  A.D.L.C. Mathematics Applied in Medicine and
Benitez. 2009.  Use of 16S rRNA Gene
Biology. 18: 263-292.
for  Characterization  of  Phosphate Solubilizing  Bacteria  Associated  with Corn. Rev. Fitotec. Mex. 32(1): 31-37. 101
Tamad dkk., Seleksi Isolat Bakteri Pelarut (BPF) :  93-101
Fankem, H., D. Nwaga, A. Deubel., L. Dieng,
Academis Press, New York. 226p. W.  Merbach,  and  F.X.  Etoa.    2006. Ponmurugan, P., and C. Gopi.   2006. In vitro
Occurrence  and  functioning  of production  of  growth  regulator  and
p h o s p h a t e   s o l u b i l i z i n g
phosphatase activity  by  phosphate microorganisms  from  oil  palm  tree
solubilizing  bacteria. African  Journal ( Elaeis  guennensis )  rhizosphere  in of Biotechnology 5(4): 348-350. Cameroon. African  Journal  of Roman,  M.S.,  M.A.  Rivadeneyra,  C. Biotechnology 5(24): 2450-2460. Vasconcelos,  and  J.A.  McKenzie. Gomez,  K.A.,  and  A.A.  Gomez.  1984. 2007.   Biomineralization of carbonate Statistical Procedures For Agricultural
and  phosphate  by  moderately
nd halophilic  bacteria. FEMS  Microbiol. Research .    2   ed.    John  Wiley  and
Ecol. 61: 273-284.
Sons.  New York. 236p.
Ruijter, G.J.G., P.J.I. van de Vondervoort, and
Guicharnaud, R., Arnalds, O., and G.I. Paton.
J.  Visser.    1999.    Oxalic  Acid
2010.    Short  Term  Changes  of
Production  by Aspergillus  niger :  an Microbial Processes in Icelandic Soils
O x a l a t e - n o n - p r o d u c i n g   M u t a n
t o   I n c r e a s i n g   Te m p e r a t u r e s .
Produces Citric Acid at pH 5 and in the
Biogeosciences 7: 671-682.
P r e s e n c e   o f   M a n g a n e s e .
Hediati,  T..  1993.  Memancing,  Isolasi  dan
Microbiology 145: 2569-2576. Determinasi  Batuan  Fosfat  Alam
Solano, B.R., J.B. Maicos, and F.J.G. Manero.
sebagai  Faktor  Lingkungan  Biotis
2008.    Physiological  and  Molecular
Tanaman Asal Beberapa Jenis Tanah.
M e c h a n i s m s   o f   P l a n t   G r o w t h Majalah  Ilmiah .  Universitas  Jenderal
Promoting Rhizobacteria (PGPR). Pp. Soedirman. Purwokerto 1(19):33-40
41-54. In: Ahmad, I., J. Pichtel, and S. Johnson, S.E., and R.H. Loeppert.  2006.  Role
Hidayat  ( Eds. ). Plant  Bacteria of  Organic  Acids  in  Phosphate
I n t e r a c t i o n s :   S t r a t e g i e s   a n d Mobilization from Iron Oxide. Soil Sci.
Techniques to Promote Plant Growth. Soc. Am. J . 70: 222-234.
Wiley-VCH, Weinhelm. 310p.
Khan, S.R., T.C. Yeo, W.L. Martin, M.R. Duron,
Subba  Rao,  N.  S..  1982. Biofertilizers  in R.D.  Rogers,  and  A.H.  Goldstein.
Agriculture .  Oxford  &  IBH  Publising 1995.  Cloning of a Mineral Phosphate-
Co.,  New  Delhi,  Bombay,  Calcuta.
Solubilizing Gene from Pseudomonas
189p. cepacia.   Applied  and  Environmental
----------------------.    1999. Soil  Microbiology Microbiology 61(3): 972-978.
(Fourth Edition of Soil Microorganisms Lal,  L..  2002. Phosphatic  biofertilizer . and Plant Growth) .  Science Publisher, Agrotech. Publ. Acad. Udaipur. 224p.
Inc. New Hampshire. 248p.
Milko, A. J., Marcela, T.H., Zed, R., Petra, M., and M. dl. L. Mora.  2008.  Isolation of
Tamad,  dan  J.  Maryanto.  2010.    Pelarutan Culturable Phosphobacteria with both
Hayati Batuan Fosfat sebagai Pupuk
P h y t a t e - M i n e r a l i z a t i o n   a n d
Fosfor  pada  Budidaya  Kedelai  di Phosphate-Solubilization Activity from
Ultisol. Agrin 14(1): 72-78. the Rhizosphere of Plants Grown in a
Tamad,  dan  J.  Maryanto.    2010.    Media Volcanic  Soil. Biol.  Fertil.  Soils 44: P e m b a w a   A l t e r n a t i f   I n o k u l a n 1025-1034.
Mikrobia  Pelarut  Fosfat  Berbasis
Miyasaka, S.C., and M. Habte.   2001.   Plant
Limbah Pertanian. Agrin 14(2): 167- M e c h a n i s m s   a n d   M y c o r r h i z a l
176. Symbioses  to  Increase  Phosphorus
Tamad, J. Maryanto, dan Supartoto.   2007. Uptake Efficiency. Communications in
Perakitan  Inokulan  Mikroba  Pelarut Soil Science and Plant Analysis 32 (7- Fosfat  Berbasis  Sumberdaya  Lokal 8): 1101-1147.
yang  Kompetitif  guna  Mendukung
Muleta,  D..    2007.    Microbial  Input  in  Coffee
Pertanian  Berkelanjutan. Laporan ( Coffea  arabica L.)  Production
Penelitian  Hibah  Bersaing  XV , Systems,  Soutwestern  Ethiopia:
Lemlit, Unsoed, Purwokerto.
I m p l i c a t i o n s   f o r   P r o m o t i o n   o f
Tamad,  dan  P.  Mearita.  2005.    Pengaruh Biofertilizers  and  Biocontrol  Agents.
B P F   t e r h a d a p   S e r a p a n   P,
Doctoral Thesis , Swedish University of
P e r t u m b u h a n   d a n   H a s i l Agricultural Sciences, Uppsala.
Bawang  Merah  yang  Ditanam  di Pepper,  I.L.,  and  C.P.  Gerba.    2004.
Vertisol Jatibarang Brebes. Laporan Environmental  Microbiology.    A nd Penelitian ,    Kerjasama  IRF  Brebes Laboratory  Manual ,  2   ed.    Elsevier
100
Violante, A., M. Pigna, M. Ricciardella, and L. dan Faperta Unsoed, Purwokerto.
Gianfreda.  2002.  Adsorption  of
Thiel,  T..    1999.  Science  in  the  Real  World:
phosphate on variabel charge minerals
Microbes  in  Action. Introduction  to
and  soils  as  affected  by  organic  nad
Bacteria . 1-8 p. Department of Biology,
inorganic  ligands.    Pp.  279-295. In: University of Missouri-St. Louis.
Violante, A., P.M. Huang, J.M. Bollag,
Ullah,  A.H.J.,  and  D.M.  Gibson.    1987.
and L. Gianfreda  ( Eds. ) Soil minerals- Extracellular  Phitase  (E.C.3.1.3.8)
organic  matter-microorganisms from Aspergillus  ficuum NRRL  3135:
Interaction  and  Ecosystem  Health.
Purification  and  Characterization.
Volume  28A.  Dynamics,  Mobility,  and
Prep. Biochem. 17: 63-91.
Transformation  of  Pollutans  and
Urgel, M.E., A. Salido, and J.L. Ramos.  2000.
Nutrients.  Elsevier, Amsterdam.
Genetic Analysis of Functions Involved
Ward, J.P., J.R. King, A.J. Koerber, P. Williams,
in Adhesion of Pseudomonas putida to
J.M.  Croft,  and  R.E.  Sockett.    2001.
Seeds. Journal  of  Bacteriology 182
Mathematical  modelling  of  quorum (9): 2363-2369.
sensing  in  bacteria. IMA  Journal  of Victoria,  D.E.,  L.L.  Reyes,  and  A.D.L.C.
Mathematics Applied in Medicine and
Benitez. 2009.  Use of 16S rRNA Gene
Biology. 18: 263-292.
for  Characterization  of  Phosphate
Solubilizing  Bacteria  Associated  with Corn. Rev. Fitotec. Mex. 32(1): 31-37.