## POTENSI ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK KULIT BATANG
Bauhinia semibifida Roxb
Haiyul Fadhli * , Ainun Nurain Nurdin, Melzi Octaviani Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFAR) Riau
*Email: haiyulfadhli@stifar-riau.ac.id
Artikel diterima: 10 Desember 2018; Disetujui: 20 Maret 2019

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  kulit batang  pohon  kupu-kupu  ( Bauhinia  semibifida Roxb)  dengan  metode  DPPH. Pengujian  aktivitas  antioksidan  menggunakan  ekstrak n -heksana,  etil  asetat  dan metanol  dari  kulit  batang pohon  kupu-kupu  dan  sebagai  kontrol  pembanding digunakan  Vitamin  C.  Pengujian  berdasarkan  absorban  DPPH  terhadap  ekstrak pada  panjang  gelombang  517  nm  menggunakan microplate  reader. Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak n -heksana  kulit  batang pohon  kupu-kupu memiliki  nilai  IC 50 137  µg/mL  dengan  nilai  AAI  <0,5  dan  dikategorikan  lemah, nilai IC 50 ekstrak etil asetat 30,15 µg/mL dengan nilai AAI 1,32 dan dikategorikan kuat dan ekstrak metanol memiliki nilai IC 50 sebesar 16 µg/mL dengan nilai AAI sebesar  2,5  yang  dikategorikan  sangat  kuat.  Hal  itu  menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol  kulit  batang pohon  kupu-kupu  ( Bauhinia  semibifida Roxb)  mempunyai aktivitas  sebagai  antioksidan  yang  sangat  kuat  dibandingkan  dengan  ekstrak lainnya.
Kata Kunci: AAI, antioksidan, Bauhinia semibifida Roxb, IC 50

## ABSTRACT
Has done research about the trials of antioxidant activity the extract of bark of  butterfly  trees  (Bauhinia  semibifida Roxb)  with  the  DPPH  method.  Testing  of antioxidant  activity  using  n-hexane,  ethyl  acetate  and  methanol  extract  from  the bark of the butterfly tree and Vitamin C was used as a control. Testing based on absorbance  value  of  extract  against  DPPH  at  a  wavelength  of  517  nm  using  a microplate reader.  The results showed that the IC 50 value of  n-hexane extract of butterfly bark was 137 µg/mL with an AAI value of 0.5 and categorized as weak, the IC 50 value of ethyl acetate extract was 30.15 µg/mL with an AAI value of 1.32 and categorized as strong, and IC 50 value of the methanol extract was 16 µg/mL with a an AAI value of 2.5 and categorized very strong. It shows that the methanol extract of bark of butterfly tree have a very strong antioxidant activity compared with other extracts.
Keywords: AAI, antioxidants, Bauhinia semibifida Roxb, IC 50

## PENDAHULUAN
Bauhinia merupakan genus dari famili  Leguminosae  yang  terdiri  dari 300  spesies  dapat  tumbuh  di  daerah tropis  dan  subtropis,  walaupun  di Indonesia  hanya  terdapat  10  spesies (Heyne,  1987).  Berdasarkan  data  uji fitokimia, tumbuhan Bauhinia menghasilkan senyawa metabolit sekunder  golongan  fenolik,  flavonoid dan  stilbenoid.  Senyawa  flavonoid dan stilbenoid dilaporkan mempunyai aktivitas antikanker, antimalaria,
antidiabetes, antimikroba,
antiinflamasi, dan antioksidan
(Boonphong  et  al.,  2007;  Yadava  &
Tripathi, 2000). Berdasarkan
penelitian  Tanjung  and  Tjahjandarie (2014)  terdapat  dua  jenis  flavonoid yang  berhasil  diisolasi  dari  kulit batang Bauhinia semibifida yaitu  6C-
7O-dimethylaromadendrin dan phlorizin. Penelitian
lainnya menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol akar  tumbuhan Bauhinia  semibifida memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat tinggi  dengan  IC 50 sebesar  6,6247 µg/mL (Fitmawati et al., 2017).
Pada penelitian ini ekstrak kulit batang  pohon  kupu-kupu  ( Bauhinia semibifida Roxb) didapat  dengan
metode  maserasi  bertingkat.  Cara  ini diharapkan  menghasilkan  rendemen yang  lebih  banyak  karena  tidak memerlukan peralatan khusus, pengerjaan  yang  sederhana,  dan ekstrak yang didapatkan berbeda sifat kepolarannya  dengan  pelarut  yang digunakan.  Ekstrak n -heksana,  etil asetat dan metanol  yang didapat  diuji aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH menggunakan instrumen microplate  reader (Epoch),  karena sensitifitasnya  cukup  tinggi,  waktu yang  diperlukan  dalam  pengujian lebih  cepat,  dapat  mendeteksi  banyak sampel secara bersamaan, dan jumlah (volume)  sampel  yang  digunakan lebih  sedikit.  Vitamin  C  digunakan sebagai antioksidan pembanding (Ham & Maham, 2016).

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  adalah simplisia  kulit  batang  pohon  kupu- kupu, n- heksana,  etil  asetat,  metanol, etanol  70%,  kloroform,  amoniak 0,05N,  asam  sulfat,  pereaksi  Mayer, asam klorida p, pereaksi ferri klorida, asam asetat anhidrat, aquadest, DPPH, vitamin C.
Alat  yaitu  tabung  reaksi,  pipet tetes,  rak  tabung,  plat  tetes,  botol gelap, rotary  evaporator ,  timbangan analitik,  vial,  alat-alat  gelas,  batang pengaduk, spatel, kertas saring, corong, desikator, pipet micro (Dragon  Med), microplate  reader
(Epoch ® ).
Pengambilan dan Persiapan
Sampel
Kulit  batang  pohon  kupu-kupu ( Bauhinia semibifida Roxb) diperoleh dari KHDTK  Bukit Suligi  Kabupaten Rokan Hulu, yang diambil dari batang yang  tidak  terlalu  tua  dan  berwarna coklat.  Kulit  batang  dibersihkan  dan dikeringkan, kemudian dirajang.

## Ekstraksi Kulit Batang
Sampel  2  kg  yang  telah  halus diproses  secara  maserasi  bertingkat dengan  dimasukan  ke  dalam  botol gelap,  direndam  dengan n- heksana selama  3-4  hari  dengan  3  kali pengulangan, lalu ampasnya dimaserasi  kembali  dengan  etil  asetat selama  3-4  hari  dengan  3  kali pengulangan  sambil  sesekali  dikocok lalu  ampasnya  dimaserasi  kembali dengan  metanol  selama  3-4  hari dengan  3  kali  pengulangan.  Proses berlangsung  terlindung  dari  sinar
matahari  langsung.  Lalu  dilakukan penyaringan  sehingga  menghasilkan maserat  yang  dipekatkan  dengan didapatkan evaporator sehingga menghasilkan ekstrak kental n- heksana, etil asetat dan metanol Skrining Fitokimia Pemeriksaan Alkaloid
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak ditambahkan 2 mL kloroform, 10 mL amonia, dan 10 tetes H 2 SO 4 . Campuran  dikocok  dan  dibiarkan hingga membentuk 2 lapisan. Sebanyak  2,5  mL  lapisan  H 2 SO 4 dipindahkan dan diuji dengan pereaksi  Meyer.  Adanya  alkaloid ditunjukkan jika ada endapan putih. Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak ditambahkan 5 mL etanol, dipanaskan selama 5 menit, ditambahkan 10 tetes HCl  pekat,  dan  0,2  gram  serbuk  Mg. Adanya  flavonoid  ditunjukkan  oleh timbulnya warna merah coklat.
Pemeriksaan Fenolik
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak ditambahkan 5 mL, dipanaskan selama  5  menit,  dan  ditambahkan  10 tetes FeCl 3 . Adanya fenolik ditunjukkan  oleh  timbulnya  warna ungu sampai biru kehitaman.

## Pemeriksaan Saponin
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak ditambahkan 10 mL akuades, dikocok kuat  selama  1  menit,  didiamkan    dan diamati buih atau busa yang terbentuk. Keberadaan saponin dalam sampel  ditandai  dengan  terbentuknya buih yang stabil.
Pemeriksaan Steroid dan Terpenoid Sebanyak  0,5  gram  ekstrak dilarutkan dengan kloroform, ditambahkan  0,5  mL  asam  asetat anhidrat, dan 2 mL asam sulfat pekat. Adanya  terpenoid  ditandai  dengan terbentuknya  larutan  berwarna  jingga hingga  merah  tua.  Sedangkan  steroid ditandai  dengan  terbentuknya  larutan berwarna hijau hingga biru.
Pembuatan Larutan DPPH
DPPH sebanyak 5 mg dilarutkan  dalam  50  mL  metano, dikocok  hingga  homogen,  disimpan di  dalam  botol  gelap  sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 100 µg/mL, yang
kemudian  diencerkan  menjadi  40 µg/mL.
Pembuatan Konsentrasi Sampel Uji
Sebanyak 10 mg ekstrak ditambahkan  metanol  sampai  10  mL sehingga  didapatkan  larutan  induk
1000  µg/mL.  Pengujian  dilakukan dengan  6  seri  konsentrasi  1000;  500; 250;  125;  62,5;  31,25  µg/mL,  namun jika  tidak  ditemukan  nilai  IC 50 maka dilanjutkan  pada  konsentrasi  250; 125;  62,5;  31,25;  15,6;  7,8  µg/mL, dan jika masih belum ditemukan nilai IC 50 akan dilanjutkan kembali dengan konsentrasi 50; 25; 12,5; 6,25; 3,125;
1,56 µg/mL. Asam askorbat ditimbang  5  mg  dilarutkan  dalam  50 mL  metanol  sehingga  didapatkan konsentrasi  100  µg/mL,  Pengujian dilakukan  6  seri  konsentrasi  100 µg/mL;  50  µg/mL;  25  µg/mL;  12,5 µg/mL;  6,25  µg/mL;  dan  3,125 µg/mL dalam larutan metanol. Masing-masing  dilakukan  3  kali pengulangan. Pelaksanaan Uji Aktivitas Antioksidan Uji aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH (1,1- diphenyl-2- picrylhydrazyl) dengan alat
microplate  reader ( 96  well  plate ) yang diukur pada panjang gelombang 517 nm (Fadhli et  al.,  2018).  Larutan uji dari kulit batang pohon kupu-kupu dengan  konsentrasi  1000  µg/mL, dipipet  masing-masing  100  µl  lalu
dimasukkan  kedalam  sumur  baris  A pada plate .  Sumur  baris  B  sampai dengan sumur baris F ditambahkan 50 µl  metanol.  Sumur  baris  A  dipipet sebanyak  50  µl  dimasukkan  kedalam sumur  baris  B,  kemudian  baris  B dipipet kembali ke baris C, dilakukan berulang  sampai  sumur  baris  F dipipet  50  µl  kemudian  dibuang.
Pengenceran  ini  dilakukan  untuk membuat  larutan  dengan  konsentrasi sumur  baris  A  (1000  µg/mL),  sumur B (500 µg/mL), sumur C (250µg/mL),  sumur  D  (125  µg/mL), sumur  E  (62,5  µg/mL),  dan  sumur  F (31,25 µg/mL. Larutan DPPH dengan konsentrasi 40 µg/mL dipipet sebanyak  80  µl  dan  dimasukkan sumur baris A sampai sumur baris G. Sumur  baris  G  tidak  diisi  hanya  diisi dengan  50  µl  metanol  dan  80  µl larutan  DPPH  konsentrasi  40  µg/mL, sementara  sumur  baris  H  hanya  diisi dengan  metanol  sebagai  blanko. Perlakuan  yang  sama  untuk  larutan uji  asam  askorbat  pada  konsentrasi 100; 50; 25; 12,5; 6,25; 3,125 µg/mL. Selanjutnya  diinkubasi  selama  30 menit dan ditutup agar reaksi
sempurna kemudian diukur absorbansinya
pada panjang
gelombang 517 nm dengan microplate reader .

## Analisa Data
Hasil  penelitian  diolah  dan disajikan  dalam  bentuk  grafik  dan tabel. Uji aktivitas antioksidan dengan  menghitung  nilai  IC 50 dan AAI (Aktivitas Antioksidan Indeks).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Penyiapan Sampel
Sampel  yang  telah  didapat disortasi  basah,  dicuci,  dikeringkan pada  suhu  ruangan,  dirajang,  dan disortasi kering. Sortasi basah dilakukan  untuk  memisahkan  sampel dengan pengotor seperti tanah, lumut, dan benalu. Sampel dikeringkan pada suhu  ruangan  untuk  menjaga  agar dapat  digunakan  dalam  jangka  waktu yang  relatif  lama  dengan  mengurangi kandungan airnya sehingga menghentikan  reaksi  enzimatik  yang memungkinkan  terjadinya  penguraian senyawa aktif sampel (Hanani, 2015).
Sortasi  kering  dilakukan  untuk memisahkan  benda-benda  asing  yang tidak  dibutuhkan  dalam  pengujian. Sampel kering yang didapat sebanyak 4,1  kg.  Sampel  dihaluskan  untuk mempermudah proses penetrasi
pelarut ke dalam sel dan mengoptimalkan  proses  penarikan senyawa-senyawa yang terkandung di dalam sampel dengan cara memperluas  permukaan  sampel  pada saat ekstraksi (Harborne, 1987).

## Ekstraksi
Untuk  mendapatkan  ekstrak dilakukan  penyarian  menggunakan
metode maserasi bertingkat
menggunakan  pelarut n- heksana,  etil asetat,  dan  metanol.  Proses  awal penyarian  dengan  cara  perendaman menggunakan  pelarut  n-heksana  lalu pelarut  etil  asetat dan terakhir pelarut metanol dengan 3 kali pengulangan.
Ekstrak  cair  dipekatkan  untuk memisahkan  pelarut  yang  terdapat dalam  ekstrak  sehingga  diperoleh ekstrak kental. Proses ini
menggunakan  alat rotary  evaporator pada  suhu  50ºC  untuk  menjaga senyawa  yang  tidak  tahan  panas (Anonim,  1986).  Hasil  ekstrak  n- heksana  1,234  g  (0,0617%),  ekstrak etil  asetat  10,051  g  (0,50%),  ekstrak metanol 114,778 g (5,738%). Uji Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa fitokimia metabolit sekunder
ekstrak  kental  kulit  batang pohon kupu-kupu ( Bauhinia semibifida
Roxb) secara kualitatif. Hasil pengujian  dari  skrining  fitokimia sampel segar dan ekstrak kulit batang pohon  kupu-kupu  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Uji  Aktivitas  Antioksidan  Dengan

## Metode DPPH
Pengukuran aktivitas antioksidan  dilakukan  pada  panjang gelombang 517
nm karena penangkapan  radikal  DPPH  diikuti oleh penurunan serapan pada panjang gelombang  515–517  nm.  Penurunan serapan  elektron  nitrogen  ganjil dalam
DPPH ( 1,1-difenil-2- pikrilhidrazil ) digunakan sebagai substrat untuk mempelajari mekanisme penangkapan radikal. Parameter  analisa  data  uji  aktivitas antioksidan  dengan  metode  DPPH adalah dengan inhibition concentration (IC 50 ), yaitu konsentrasi yang dapat meredam 50% aktivitas  DPPH  (Molyneux,  2004). Activity  Antioxidant  Index (AAI) merupakan  salah  satu  metode  untuk menstandarisasi hasil pengujian antioksidan berdasarkan metode
DPPH.
Tabel 1. Hasil Uji Skrining Fitokimia Sampel Segar dan Ekstrak.
Kandungan Kimia Hasil Pengamatan Ekstrak  n-Heksana Ekstrak Etil asetat Ekstrak Metanol Alkaloid (-) (+) (+) Flavonoid (-) (+) (+) Fenolik (-) (+) (+) Saponin (-) (+) (+) Steroid (-) (-) (-) Terpenoid (+) (+) (-)
Pelarut  yang  digunakan  adalah metanol  karena  DPPH  stabil  dalam metanol  dan  dapat  menarik  senyawa yang  beraktivitas  sebagai  antioksidan (Marxen et  al .,  2007).  Adanya
aktivitas antioksidan sampel mengakibatkan perubahan warna larutan  DPPH  yang  semula  berwarna violet  pekat  menjadi  kuning  pucat. Perubahan warna terjadi karena DPPH  mengalami  reduksi  sehingga menyebabkan elektron menjadi berpasangan. Perubahan
ini
memberikan  perubahan  absorbansi pada  panjang  gelombang  maksimum DPPH  sehingga  diketahui  adanya aktivitas  peredaman  radikal  bebas
yang  dinyatakan  dengan  nilai  IC 50 (Inhibitory Concentration). Molyneux (2004)  menyatakan  bahwa  suatu  zat mempunyai sifat antioksidan bila nilai IC 50 kurang  dari  200  µg/mL.  Bila nilai  IC 50 yang  diperoleh  berkisar antara  200-1000  µg/mL,  maka  zat tersebut  kurang  aktif  namun  masih berpotensi  sebagai  zat  antioksidan. (Wang, 2001).
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan pada  ekstrak n- heksana  dengan  nilai IC 50 137  µg/mL  dengan  kategori sedang  menunjukkan  bahwa  pada konsentrasi 137 µg/mL ekstrak mampu meredam radikal bebas sebanyak 50%.
Tabel 2. Data Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak n- heksana Kulit Batang Bauhinia semibifida Roxb Konsentrasi (µg/mL)  Ln Konsentrasi  Absorbansi Sampel  % Inhibisi  IC 50 (μg/mL)  AAI 1000 6,908 0,003 98,36 137 <0,5 500 6,215 0,025 87,83 250 5,521 0,052 74,18 125 4,828 0,112 44,57 62,5 4,135 0,154 23,85 31,25 3,442 0,178 12,17
Gambar 1. Kurva Kalibrasi Ekstrak n-heksana
Pada hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etil asetat didapatkan  IC 50 sebesar  30,15  µg/mL dengan kategori sangat kuat.
Tabel 3. Data Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak etil asetat Kulit Batang Bauhinia semibifida Roxb
Konsentrasi (µg/mL)  Ln Konsentrasi  Absorbansi Sampel  % Inhibisi  IC 50 (μg/mL)  AAI 250 5,521 0,011 95,78 30,15 1,32 125 4,828 0,039 85,17 62,5 4,135 0,079 69,57 31,25 3,442 0,132 49,23 15,6 2,749 0,178 31,59 7,812 2,056 0,205 21,23
Gambar 2. Kurva Kalibrasi Ekstrak Etil Asetat
Pada pengujian antioksidan ekstrak  metanol  didapatkan  IC 50 16 µg/mL,  konsentrasi  hambatan  efektif 50%  dari  metanol  paling  kecil dibanding  ekstrak  lainnya,  artinya dengan  konsentrasi  tersebut  ekstrak sudah  dapat  menurunkan  konsentrasi radikal  bebas  (DPPH)  hingga  tinggal 50%.  Hal  tersebut  dapat  dilihat berdasarkan persamaan regresi
dengan  perbandingan  ln  konsentrasi dan % inhibisi yang dapat dilihat pada Tabel 4 dan Gambar 3 .
Efektivitas  ini  kemungkinan terjadi karena polifenol terlarut dalam metanol  mempunyai  struktur  dengan gugus  hidroksil  yang  banyak  dan paling  efektif  untuk  memindahkan atom  hidrogennya  ke  radikal  bebas. Prior et al. (2005) menjelaskan bahwa
metanol  adalah  senyawa  polar  yang mudah  memposisikan  atom  hidrogen dari  suatu  senyawa  atau  gugus hidroksil  untuk  membentuk  ikatan
hidrogen  karena  adanya  ikatan  ini akan memudahkan perpindahan
proton  (atom  hidrogen  antioksidan) ke radikal bebas.
Tabel 4. Data Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metonal Kulit Batang Bauhinia semibifida Roxb
Konsentrasi (µg/mL)  Ln Konsentrasi  Absorbansi Sampel  % Inhibisi  IC 50 (μg/mL)  AAI 50 3,912 0,052 79,97 16 2,5 25 3,219 0,090 65,12 12,5 2,526 0,143 44,70 6,25 1,833 0,202 21,71 3,125 1,139 0,257 0,39 1,563 0,446 0,311 -20,54
Gambar 3. Kurva Kalibrasi Ekstrak Metanol
Dalam  penelitian  ini  vitamin  C digunakan sebagai pembanding
karena  memiliki  gugus  pendonor
elektron  pada  atom  C2  dan  C3  yang memungkinkan  untuk  menangkap radikal.
Pengujian aktivitas antiokisdan  vitamin  C  dibuat  dengan konsentrasi  yang  berbeda  karena vitamin  C  sudah  terbukti  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  tinggi. Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  pada vitamin  C  adalah  4  µg/mL  dengan kategori  sangat  kuat.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol
memilki  aktivitas  antioksidan  yang hampir  sebanding  dengan  vitamin  C berdasarkan persamaan regresi vitamin C pada Gambar 4.
Penentuan index aktivitas antioksidan AAI ( Antioxidant Activity Index) diperoleh  dari  perbandingan antara  konsentrasi  larutan  DPPH dengan  IC 50 ekstrak.  Nilai  AAI digunakan untuk mengetahui
kapasitas atau kemampuan
antioksidan  ekstrak  terhadap  DPPH (Vasić et  al .,  2012).  Aktivitas antioksidan  berdasarkan  nilai  AAI,
dikatakan lemah jika nilai AAI < 0,5, sedang  0,5  -1,0,  kuat  1,0–2,0,  dan sangat  kuat  >  2,0  (Scherer  dan Godoy.,  2009).  Nilai  AAI  pada
ekstrak kulit batang pohon kupu-kupu ( Bauhinia  semibifida Roxb)  dapat dilihat pada Tabel 5.
Gambar 4. Kurva Kalibrasi Vitamin C
Tabel 5 . Nilai AAI pada ekstrak kulit batang Bauhinia semibifida Roxb Ekstrak IC 50 AAI Kekuatan Antioksidan n- Heksana 137 µg/mL < 0,5 Lemah Etil Asetat 30,15 µg/mL 1,32 Kuat Metanol 16 µg/mL 2,5 Sangat kuat Vitamin C 4 µg/mL 10 Sangat kuat

## KESIMPULAN
Uji aktivitas antioksidan terhadap  ekstrak  kulit  batang pohon kupu-kupu ( Bauhinia semibifida
Roxb)  menunjukkan  ekstrak  metanol memiliki  aktivitas  antioksidan  yang sangat  kuat  hampir  sama  dengan kontrol positif (Vitamin C).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  STIFAR Riau  yang  telah  memberikan  dana Penelitian Dosen Pemula 2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  1986. Sediaan  Galenik . Jakarta:  Departemen  Kesehatan RI.
Boonphong,  S.,  Puangsombat,  P.,
Baramee,  A.,  Mahidol,  C.,
Ruchirawat, S., & Kittakoop, P.
(2007).  Bioactive  Compounds from Bauhinia purpurea Possessing Antimalarial, Antimycobacterial,  Antifungal, Anti-inflammatory, and Cytotoxic Activities. Journal of Natural  Products , 70 (5),  795– 801.
Fadhli,  H.,  Soeharto,  A.  B.  R.,  &
Windarti, T. (2018). Uji
Aktivitas Antioksidan Kulit Buah Pulasan (Nephelium mutabile  Blume)  dan  Bunga Turi Putih (Sesbania
grandiflora)  dengan  Metoda DPPH. Jurnal Katalisator , 3 (2), 114–124.
Fitmawati, F., Sofiyanti, N., Roza, R. M.,  Isnaini,  I.,  Irawan,  Y.  R., Winata, D. R., & Dewi, A. P. K. (2017).  Antioxidant  Activity  of
Dominant  Plants  Species  in Obat  Pahit  from  Lingga  Malay Ethnic  in  Riau  Archipelago. Biosaintifika: Journal of Biology  &  Biology  Education ,
9 (2),
325–331.
https://doi.org/10.15294/biosain tifika.v9i2.9808 Ham,  B.  M.,  &  Maham,  A.  (2016). Analytical Chemistry : A Chemist And Laboratory Technician’s  Toolkit .  Canada: John Wiley.
Heyne, K. (1987). Tumbuhan
Berguna Indonesia . (Badan Penelitian  dan  Pengembangan Kehutanan, Ed.) (3 ed.). Jakarta:  Departemen  Kesehatan RI. Molyneux,  P.  (2004).  The  Use  of  the Stable Free Radical Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal of Science  and  Technology , 26 (2), 211–219.
https://doi.org/10.1287/isre.6.2. 144 Prior,  R.,  Wu,  X.,  &  Kschaich,  K. (2005).  Standardized  Methods for the Determination of Antioxidant Capacity and Phenolics  in  Foods  and  Dietary Supplements. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 53 (10),  4290–4302.
https://doi.org/10.1021/jf05026 98
Scherer,  R.,  &  Godoy,  H.  T.  (2009). Antioxidant Activity Index (AAI)  by  the  2  ,2-Diphenyl-1-
Picrylhydrazyl  Method. food chemistry , 112 (3),  654–658. https://doi.org/10.1016/j.foodch em.2008.06.026
Tanjung,  M.,  &  Tjahjandarie,  T.  S.
(2014).  Flavonoids  from  the Stem Bark of Bauhinia semibifida  L. Der  Pharmacia Lettre , 6 (6), 434–438.
Vasić,  S.  M.,  Stefanović,  O.  D., Ličina,  B.  Z.,  Radojević,  I.  D.,
&  Čomić,  L.  R.  (2012). Biological Activities of Extracts from Cultivated Granadilla
Passiflora alata. EXCLI Journal , 11 , 208–218.
Yadava, R. N., & Tripathi, P. (2000).
A  Novel  Flavone  Glycoside from  the  Stem  of  Bauhinia purpurea. Fitoterapia , 71 (1), 88–90.
https://doi.org/10.1016/S0367-
326X(99)00114-8