UJI TOKSISITAS AKUT DAN TERTUNDA FRAKSI BUTANOL DAUN AKAR KAIK-KAIK (Uncaria cordata (Lour) Merr.) PADA MENCIT PUTIH (Mus musculus L.)
Meiriza Djohari 1* , Tania Tiara Efendi 1 , Noveri Rahmawati 2 , Husnawati 1 , Fina Aryani 1
1 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau; Jl. Bangau Sakti no 90, Simpang Baru, Tampan. Pekanbaru
2 Universitas Muhammadyah, Pekanbaru
*Email: meirizadj@gmail.com
Artikel diterima: 24 Januari 2022; Disetujui: 9 Maret 2022 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v7i1.874

## ABSTRAK
Uncaria  cordata  merupakan  tumbuhan  yang  digunakan  untuk  mengobati diabetes dan bersifat antioksidan. Telah dilakukan penelitian tentang Uji Toksisitas Akut  dan  Tertunda  Fraksi  Butanol  Daun  Tumbuhan  Akar  Kaik-Kaik  ( Uncaria cordata (Lour) Merr.) pada Mencit Putih ( Mus musculus L.) Jantan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek toksisitas akut fraksi butanol daun tumbuhan akar kaik-kaik  melalui  penentuan  nilai  LD 50 .  Pengamatan  yang  dilakukan  pada pengujian  ini  yaitu  jumlah  hewan  yang  mati,  gejala  toksik,  dan  pengamatan terhadap organ hewan uji. Pengamatan dilakukan selama 24 jam untuk penentuan nilai LD 50 hingga 14 hari setelah pemberian sediaan uji. Pada pengamatan gejala toksik tidak terjadi adanya tremor, kejang, salivasi, diare, letargi, lemah, tidur, dan koma pada setiap hewan percobaan. Pada parameter berat relatif organ yang terdiri dari jantung, hati dan ginjal tidak ditemukan adanya efek dari fraksi tersebut, dan tidak  adanya  perubahan  jika  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol.  Hasil penelitian  menunjukkan  nilai  LD 50 >5000  mg/kgBB  yang  dikategorikan  relatif tidak membahayakan dan berpotensi sebagai obat herbal terstandar..
Kata  kunci: Fraksi  butanol,  Daun  Tumbuhan  Akar  Kaik-kaik,  Nilai  LD 50 ,
Toksisitas Akut

## ABSTRACT
Uncaria cordata is a plant that is used to treat diabetes and has antioxidant properties. Research has been carried out on Acute and Delayed Toxicity Tests of Butanol  Fraction  of  Leaves  of  Kaik-Kaik  Root  Plant  (Uncaria  cordata  (Lour) Merr.)  on  Male  White  Mice  (Mus  musculus  L.  This  study  aims  to  determine  the effect  of  acute  toxicity  of  the  butanol  fraction  of  the  leaves  of  kaik-kaik  root  by determining the LD 50 value. Observations made in this test were the number of dead animals,  toxic  symptoms,  and  observations  of  the  organs  of  the  test  animals. Observations were made for 24 hours to determine the LD 50 value to 14 days after administration of the test preparation. In the observation of toxic symptoms, there were  no  tremors,  seizures,  salivation,  diarrhea,  lethargy,  weakness,  sleep,  and
coma  in  each  experimental  animal.  In  the  relative  weight  parameters  of  organs consisting of the heart, liver and kidneys, there was no effect of this fraction, and there was no change when compared to the control group. The results showed LD 50 values  >  5000  mg/kgBB  are  considered  relatively  harmless  and  potentially  as standardized herbal medicine.
Keywords: Butanol Fraction, Leaves of Kaik-kaik Root, LD 50 value, Acute Toxicity

## PENDAHULUAN
Indonesia adalah negara
kepulauan  yang  memiliki  luas  sekiar
1,3% dari luas bumi, namun memiliki
tingkat  keberagaman  kehidupan  yang sangat  tinggi  termasuk  flora  dan faunanya. Indonesia merupakan urutan negara terbesar ketujuh dengan jumlah  spesies  mencapai  20.000 spesies dan 40% merupakan tumbuhan endemik  Indonesia  (Kusmana,et  al, 2015).
Salah  satu  tumbuhan  yang sering  digunakan  dalam  pengobatan adalah tumbuhan  dari  genus  Uncaria. Beberapa  genus  Uncaria  yang  paling banyak  digunakan  adalah  Uncaria tamentosa,  Uncaria  rhynchophylla, Uncaria  collophy  hirsuta,  Uncaria gambir,  Uncaria  longifolia,  Uncaria acida, dan Uncaria callophylla. Genus Uncaria tersebar luas di daerah tropis, termasuk  Asia  Selatan,  Afrika,  dan Amerika  Selatan,  dan  sebagian  besar tanaman  dari  genus  Uncaria  telah digunakan  sebagai  sumber  penting
produk  obat  herbal.  Spesies  lain  dari genus  Uncaria  yang  belum  banyak dieksplorasi  adalah  Uncaria  cordata (Lour) Merr (Achmad,et al, 2012).
Meskipun obat tradisional sudah dimanfaatkan sejak lama namun tidak sepenuhnya aman, karena obat tradisional  merupakan  senyawa  asing bagi tubuh, sehingga sangatlah penting mengetahui potensi ketoksikannya.  Efek  toksik  pada makhluk  hidup  dapat  terlihat  dan dapat  juga  tidak  bila  dosis  yang diserap  relatif  kecil  kerusakannya dapat terbatas  pada  sel  saja  (Eriadi,et al, 2016).
Toksisitas  dapat  menyebabkan kerusakan beberapa organ tubuh, salah satunya  adalah  hati.  Kerusakan  hati karena obat dan zat kimia dapat terjadi akibat hilangnya kemampuan regenerasi sel hati, sehingga hati akan mengalami kerusakan permanen yang dapat  menimbulkan  kematian.  Uji toksisitas  diperlukan  untuk  menilai keamanan  suatu  obat,  maupun  bahan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
yang dipakai sebagai suplemen ataupun  makanan.  Hal  ini  juga  untuk melindungi masyarakat dari efek  yang mungkin  merugikan  dikarenakan  hati berperan sentral dalam proses memetabolisme  semua  obat  dan bahan-bahan asing yang masuk tubuh (Priyanto, 2010). Dalam   hakekatnya maksud      obat      tradisional  tersebut ditelitikembangkan adalah untuk dimanfaatkan    sebagai  obat  untuk manusia, karenanya uji toksisitas  obat tradisional perlu dilakukan untuk menilai  keamanan  obat  tradisional yang di uji (Depkes RI, 2000).
Uji  toksisitas  akut  adalah  salah satu uji praklinik yang penting. Uji ini dirancang  untuk  menentukan  efek toksik  suatu  senyawa  yang  akan terjadi  dalam  waktu  yang  singkat setelah pemajanan atau pemberiannya dalam takaran tertentu. Data kuantitatif  yang  diperoleh  dari  uji toksisitas akut ini adalah LD 50 ( Lethal Dose  50). Berdasar  atas  data  LD 50 , suatu  senyawa  dapat  digolongkan sebagai  bahan  yang  sangat  toksik ( extremely  toxic )  hingga  bahan  yang tidak  toksik  ( practically  nontoxic).
Data kualitatif yang diperoleh meliputi penampakan  klinis,  morfologis,  dan
mekanisme  efek  toksik  (Khan,  et.al, 2008).
Berdasarkan hal tersebut, peneliti  tertarik  untuk  melakukan  uji toksisitas akut dari fraksi butanol daun tumbuhan akar kaik-kaik yang diukur dengan  penentuan  LD 50 dari  fraksi butanol daun tumbuhan akar kaik-kaik (Uncaria cordata (Lour) Merr.) terhadap mencit putih (Mus musculus L.) jantan.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah alat suntik (sonde oral), gelas beker (Iwaki®), gelas ukur (Iwaki®),  kaca  arloji  (Pyrex®), kandang  mencit,  lumpang  (Rofa), stamfer  (Rofa),  pipet  tetes  (Pudak), spatula,  vial,  meja  pengamatan, stopwatch,  gunting  (Yinglian),  pinset (Alfamed),  dan  timbangan  hewan (Kitchen  scale),  fraksi  butanol  daun tumbuhan  akar  kaik-kaik  ( Uncaria cordata (Lour)  Merr.),  aquadest, NaCMC  1%,  mencit  putih  jantan, makanan  mencit  (pakan  standar No.552  (Vital)),  etanol,  n-heksan, butanol, etil asesat.

## Penyiapan Hewan Percobaan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Hewan uji yang digunakan yaitu mencit  putih  jantan  dengan  berat badan  20-30  gram  dan  berumur  6-8 minggu.
Hewan percobaan dikelompokkan  menjadi  4  kelompok yang masing-masing kelompok terdiri dari  5  ekor  mencit.  Satu  kelompok dijadikan  sebagai  kontrol  dan  tiga kelompok  lainnya  dijadikan  sebagai perlakuan.  Mencit  yang  digunakan adalah  mencit  yang  sehat  dan  tidak menunjukkan  perubahan  berat  badan yang  berarti  serta  secara  visual menunjukkan  perilaku  yang  normal.
Sebelum perlakuan, mencit diaklimatisasi  selama  satu  minggu disertai pemberian makan dan minum yang cukup (Irwandi et al., 2018).

## Penentuan Dosis
Untuk  menentukan  jarak  antar dosis, digunakan faktor kenaikan dosis dari Malone (Thompson, 1985) : F = n-1√ DB : DK      Dn = DK . F n-1 Keterangan :
F = faktor kelipatan dosis N = jumlah tingkatan dosis yang diinginkan DB = dosis terbesar DK = dosis terkecil Dn = dosis yang akan diberikan

## Penyiapan Sediaan Uji
1. Pembuatan Suspensi NaCMC 1%
Serbuk NaCMC 1% sebanyak 100
mg  dikembangkan  di  dalam lumpang  yang  sudah  berisi  air panas  sebanyak  20  kalinya. Kemudian digerus sampai homogen, lalu ditambahkan aquadest sampai volume 10 mL.
2. Penyiapan Sediaan Uji
Fraksi  butanol  daun  tumbuhan akar  kaik-kaik  (Uncaria  cordata (lour)  Merr.)  ditimbang  dengan berat  masing-masing  untuk  dosis 200  mg/kgBB,  1000  mg/kgBB, dan  5000  mg/kgBB  yang  dibuat dalam volume sediaan uji masing- masing sebanyak 2 mL, Kemudian fraksi tersebut
disuspensikan  dengan  NaCMC 1%.  Volume  sediaan  uji  yang diberikan  secara  peroral  adalah sebanyak  1%  dari  berat  badan hewan uji.
Penentuan Nilai LD 50
Nilai  LD 50 ditentukan  dengan menghitung  jumlah  kematian  hewan selama 24 jam akibat pemberian zat uji pada  tingkat  dosis.  LD 50 dinyatakan sebagai  dosis  yang  menunjukkan kematian  hewan  sebanyak  50%  dari jumlah  hewan  percobaan  selama  24 jam setelah penyuntikan.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Evaluasi  Efek  Toksisitas  Tertunda

## Selama 14 Hari
Pada  mencit  yang  masih  hidup setelah 24 jam sampai dengan 14 hari setelah  perlakuan,  diamati  gejala terlihat pada hewan uji seperti tremor, kejang,  saliva,  diare,  letargi,  lemah, tidur,  dan  koma.  Selain  itu  diamati juga berat badan, konsumsi makanan, berat feses, volume air minum, volume urin, dan berat relatif organ
(Departemen  Kesehatan  Republik
Indonesia, 2014).
Analisa Data
Untuk  mendapatkan  nilai  LD 50 data yang diperoleh diolah
menggunakan  Metoda  perhitungan yang  ada  pada  Farmakope  Indonesia. Rumus  perhitungan  LD 50 adalah (Departemen Kesehatan RI, 1995) : m = a – b (∑pi – 0,5) Keterangan : m = log LD 50 a  =  log  dosis  terkecil  yang  masih menyebabkan jumlah kematian 100% b = beda log dosis yang berurutan pi  =  jumlah  hewan  yang  mati menerima  dosis  i  dibagi  dengan jumlah hewan seluruhnya yang menerima dosis i.
Untuk parameter perubahan berat badan, konsumsi makanan, berat feses, volume air minum, volume urin, berat  relatif  organ  (hati,  ginjal,  dan
jantung)  disajikan  dalam  bentuk deskripsi dari hasil pengamatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Toksisitas Akut
Tabel 1 . Jumlah kematian K Perlakuan N Mati I Kontrol 5 0 II 200 mg/kgBB 5 0 III 1000 mg/kgBB 5 0 IV 5000 mg/kgBB 5 0 Keterangan : K = Kelompok
N = Jumlah hewan uji
Berdasarkan  penelitian  hasil  uji toksisitas  akut terhadap  fraksi  butanol daun  tumbuhan  akar  kaik-  kaik ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.)  tidak ditemukan  kematian  pada  hewan percobaan,  baik  pada  dosis  200 mg/kgBB,  1000  mg/kgBB,  dan  5000 mg/kgBB, sehingga nilai LD 50 >5000 mg/kgBB yang dikategorikan sebagai zat  yang  relatif  tidak  membahayakan dan  berpotensi  dijadikan  obat  herbal terstandar.
Dalam pemilihan hewan percobaan  dipilih  mencit putih  jantan yang  dinilai  sehat  dan  berumur  6-8 minggu, dengan  berat  badan  20-30 gram. Pemilihan jenis kelamin jantan pada  hewan  uji  karena  mencit  jantan tidak  mengalami  masa  kehamilan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
seperti  halnya  pada  mencit  betina sehingga hormon-hormon pada mencit  jantan  tetap  stabil  dan  tidak mempengaruhi  obat  yang  diujikan sehingga  efek  yang  diinginkan  bisa tercapai  secara  maksimal.  Sebelum perlakuan, hewan yang dipilih diaklimatisasi  terlebih  dahulu  selama 7 hari (Irwandi, et al. , 2018).
Dosis  yang  digunakan  pada  uji toksisitas akut ini yaitu variasi 3 dosis yang  berbeda.  Berdasarkan  rumus Malone,  faktor  kelipatan  dosis  yang diperoleh  adalah  5, sehingga  variasi dosis  yang  digunakan  adalah  200 mg/kgBB,  1000  mg/kgBB,  dan  5000 mg/kgBB  dan  satu kelompok  kontrol
yang digunakan sebagai perbandingan.  Uji  toksisitas  akut dimulai dengan  melakukan uji pendahuluan.  Tujuan  dari  uji  ini adalah mencari dosis awal yang sesuai untuk uji utama. Dosis terkecil adalah dosis yang memiliki efek farmakologi dan  tidak  menimbulkan  kematian pada  hewan  uji  sedangkan  dosis terbesar merupakan dosis yang menimbulkan  kematian  100%  pada hewan  uji  (Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, 2014).
Pengamatan  dilakukan  dengan
melihat  jumlah  kematian  hewan percobaan  selama  24  jam,  dimana waktu  dihitung  setelah  dilakukannya pemberian sediaan uji terhadap hewan percobaan.  Dari  hasil  uji  toksisitas akut, setelah diberi perlakuan dengan dosis 200 mg/kgBB, 1000 mg/kgBB, dan  5000  mg/kgBB  tidak  ditemukan adanya kematian pada hewan percobaan selama 24 jam
pengamatan.  Sehingga  fraksi  butanol daun tumbuhan akar kaik-kaik memiliki nilai LD 50. >5000 mg/kgBB. Hal  ini  berarti  fraksi  butanol  daun tumbuhan  akar  kaik-kaik  ( Uncaria
cordata (Lour) Merr.) dapat dikategorikan sebagai zat yang relatif tidak membahayakan  dan  berpotensi dijadikan  obat  herbal  terstandar (Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, 2018).
Pada evaluasi toksisitas tertunda,  dapat  dilihat  efek  dari masing-masing sediaan uji kelompok kontrol  dan  tiga  variasi  dosis terhadap  parameter  perubahan  berat badan,  konsumsi  makanan,  berat feses,  konsumsi  air  minum,  volume urin, dan berat relatif organ (jantung, ginjal, dan hati). Selain itu, pengamatan  juga  dilakukan  pada
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
gejala-gejala yang muncul selama 14 hari, diperoleh hasil tidak ditemukan gejala-gejala  seperti  tremor,  kejang, salivasi,  diare,  letargi,  lemah,  tidur, dan  koma.  Hal  ini  menyimpulkan bahwa fraksi butanol daun tumbuhan akar  kaik-kaik  ( Uncaria  cordata (Lour) Merr.) tidak memberikan efek samping  seperti  tremor,  kejang, salivasi,  diare,  letargi,  lemah,  tidur, dan koma.
Pengamatan  pada  parameter berupa  persentase  perubahan  berat badan, konsumsi makanan, dan berat feses pada kelompok hewan uji dosis 200  mg/kgBB,  1000  mg/kgBB,  dan 5000 mg/kgBB tidak terjadi perubahan  terhadap  parameter  yang diamati  jika  dibandingkan  dengan kelompok kontrol.
Pengamatan  pada  parameter berupa  konsumsi  air  minum  dan volume  urin  didapatkan  hasil  bahwa pada  kelompok  hewan  uji  dosis  200 mg/kgBB,  1000  mg/kgBB,  dan  5000 mg/kgBB  adanya  perubahan terhadap parameter yang diamati jika dibandingkan dengan kelompok kontrol.  Peningkatan  volume  urin berhubungan  dengan  peningkatan konsumsi  air  minum, dimana  hal  ini
disebabkan kerena terjadinya peningkatan osmolaritas cairan ekstraseluler yang menyebabkan dehidrasi  sehingga  hewan  percobaan akan  minum  lebih  banyak  lagi. Adanya perubahan volume air minum pada  hewan  uji  dipengaruhi  oleh pemberian fraksi butanol daun tumbuhan  akar  kaik-  kaik.  Hal  ini dikarenakan  fraksi  butanol  daun tumbuhan akar kaik-kaik mengandung senyawa  metabolit  sekunder  berupa saponin.  Menurut  Suparjo  (2014), senyawa  saponin  memiliki  rasa  yang cenderung  pahit,  sehingga  dengan mengkonsumsi sediaan yang mengandung senyawa metabolit sekunder berupa saponin maka hewan uji tersebut akan cenderung mengkonsumsi air yang relatif banyak untuk mengurangi rasa pahitnya.
Parameter  yang  diamati  pada evaluasi uji toksisitas  tertunda selanjutnya  yaitu  berat  relatif  organ meliputi jantung, hati, dan ginjal pada hewan  percobaan.  Penentuan  berat relatif  organ  perlu  dilakukan  karena merupakan  gambaran  awal  untuk melihat  adanya  efek  toksik  dari substansi  yang  digunakan  terhadap organ  tubuh.  Jantung  adalah  organ
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
vital  dalam  tubuh  yang  berperan dalam  sirkulasi  sistemik,  sehingga jantung  juga  bisa  dirusak  oleh berbagai  senyawa  kimia  walaupun bukan merupakan organ sasaran. Hati merupakan kelenjar yang bertanggung jawab  terhadap  metabolisme  zat,  dan juga  berperan  detoksifikasi  sisa metabolisme  zat  makanan,  obat,  dan racun  yang  masuk  ke  dalam  tubuh. Ginjal  merupakan  organ  lain  yang menjadi  sasaran  efek  toksik  senyawa kimia.  Urin  sebagai  jalur  eksresi utama,  memiliki  peran  yang  vital dalam  proses  filtrasi,  reabsorpsi,  dan augmentasi urin (Corwin, 2009).
Dari  parameter  berat  relatif organ yang telah diamati, hasil yang didapat pada hewan uji dengan   dosis 200  mg/kgBB,  1000  mg/kgBB,  dan
5000 mg/kgBB tidak terlihat perbedaan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol. Hasil pengamatan yang  diperoleh  dapat  disimpulkan bahwa  pemberian  sediaan  uji  fraksi butanol  daun  tumbuhan  akar  kaik- kaik ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.)
pada  3  variasi  dosis  yang  berbeda tidak  mempengaruhi  berat  relatif organ  serta  gejala  dari  efek  toksik selama 14 hari, sesuai panduan Balai
POM  terkait  pengujian  toksisitas akut.  Data  hasil  pengamatan  yang diperoleh terhadap berat relatif organ pada  hewan  uji  disajikan  dalam Gambar 1.
Gambar 1 . Data Berat Relatif Organ

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang didapat  disimpulkan  bahwa  fraksi butanol daun tumbuhan akar kaik-kaik ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.) memiliki nilai LD 50
>5000  mg/kgBB  yang  dikategorikan sebagai zat yang relatif tidak membahayakan dan tidak memberikan efek toksik pada tubuh, sehingga dapat berpotensi  dijadikan  obat  herbal terstandar.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  A.,  Kassim,  J.,  Suan,  K,T., Amat,  R,C.,  Seey,  T.L.  2012. Equilibrium,
Kinetic and Thermodynamic Studies On The
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 203-211 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Adsorption Of Direct Dye Onto A  Novel  Green  Adsorbent Developed From Uncaria Gambir  Extract.  Journal  of Physical Science, hal. 1–13 Corwin, J. Elizabeth. 2009. Buku Saku Patofisiologi (Handbook of
Pathophysiology). Edisi 3.
Jakarta: EGC. BPOM. 2014. Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik  Secara  In  Vivo. Jakarta  :  Bada  Pengawas  Obat dan Makanan Republik Indonesia Depkes, RI, 1995, Farmakope Indonesia IV, Jakarta, Departemen Kesehatan RI Depkes,  RI.  2000.  Materia  Medika Indonesia,  Edisi  5,  120-123. Jakarta : Departemen Kesehatan Indonesia Depkes, RI Indonesia. 2018. Toksikologi  Klinik.  Jakarta  : Departemen Kesehatan Republik Indonesia Eriadi, A., Arifin,H., Nirwanto. 2016. Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak Etanol Daun Kirinyu (Chromolaenodorata (L) R.M.King  &  H.  Rob)  Pada Mencit  Putih  Jantan.  Jurnal
Farmasi  Higea,Vol.  8,  No.  2. Fakultas  Farmasi  Universitas Andalas Padang.
Irwandi, Tobat, S.R. & Sari, P.P. 2018. Uji  Efek  Analgetik  Ekstrak Etanol  Meniran  (Phyllanthus niruri  L.)  Pada  Mencit  Putih Jantan. Jurnal Akademi Farmasi Prayoga, 3(1): 12–20.
Khan A, Rahman M, Islam MS. 2008.
Antibacterial,  Antifungal  And Cytotoxic Activities Of
Amblyone Isolated From Amorphophallus Campanulatus. Indian  Journal  of  Pharmacol. 40(1):41–4. Kusmana,  C.,  Hikmat,  A.  2015. Keanekaragaman  Hayati  Flora Di Indonesia. Jurnal Pengelolaan  Sumberdaya  Alam Dan  Lingkungan.  Vol  5  (2).  pp
187-198.
Marjoni, R. 2016. Dasar-dasar Fitokimia. Jakarta: TIM.
Suparjo.  2014.  Saponin  :  Peran  dan Pengaruhnya  bagi  Ternak  dan Manusia.  Artikel.  Laboratorium Makanan Ternak. Fakultas Peternakan.  Universitas  Jambi. Jambi