## ISOLASI DAN  SELEKSI BAKTERI FILOSFER PEMICU TUMBUH
DARI  DAUN  PADI (ORYZA  SATIVA L.)  VARIETAS IR-64

## Isolation and Selection o/Growth Promoting Phyllosphere Bacteria/rom
Lea/o/ Rice (Oryza sativa L.) Cultivar IR·64
D.A.  Santosa1,2*,  N.  Handayanf3, dan A.  Iswandil
IStaf Pengajar Jurusan Tanah,  Fakultas Pertanian, lnstitut Pertanian Bogar, Jl.  Meranti,  Kampus IPB  Darmaga,  Bogar  16680 2Pusat Penelitian Lingkungan Hidup (PPLH),  Institut Pertanian Bogar 3Alumni Fakultas Pertanian,  Institut Pertanian Bogar

## ABSTRACT
Phylosphere bacteria are bacteria live on the leave surface.  Phylosphere bacteria have been reported to  improve the growth of several plants such as rice.  However,  in  Indonesia,  the study concerning phylosphere bacteria is very rare.
The  aims  of this  study were  to  isolate and select phylosphere bacteria which are able to stimulate the growth of rice cultivar IR-64.  Phylosphere bacteria were  isolated from  leaves of rice cultivar lR-64 grown at Ciherang (Sindangbarang)  and at Pasirkuda (Ciomas)  Bogor at the age of two, four and eight weeks after planting.  The  media used to isolate the phylosphere bacteria was Agar Ashbey.
The  surface of rice seeds was sterilized and then inoculated by deeping the rice seeds into bacterial suspention with a cell density  of 1 x 10 6 cells mr'.  Leave  inoculation was done  by deeping leaves  of three weeks old rice seedling into bacterial suspension with a cell density of 1 x 10 6 cells mr'.
Parameters measured were plant height,  upper part biomas and root biomas.  Phyllosphere bacteria were identified based on Bergey's Manual of Determinative Bacteriology.
Nineteen isolates ofphyllosphere bacteria were isolatedfrom rice leaves,  nine isolates were from Pasirkuda (Ciomas) and ten  isolates  were from  Ciherang  (Sindangbarang);  eleven  isolates  were from  rice phyllosphere  and eight  isolates  were from  endophyllosphere.  Based on the age of the rice,  two  isolates were from  two  weeks old rice,  nine  isolates were from four weeks old rice and eight isolates were from eight weeks old rice.
Phyllosphere  bacteria  significantly  increased the  plant  height,  upper parts  biomass  as  well  as  root  biomass.  Six isolates were able to  improve the growth of rice seedling IR-64 were Aureobacterium seperdae (two  isolates),  Arthrobacterium globiformis (one  isolate) and Microbacterium lacticum (three  isolates).
Key  words:  endophyllosphere,  phyllosphere bacteria,  rice cultivar IR-64

## PENDAHULUAN
Mikrob  filosfer  hidup  pada daun  tanaman.  Mikrob  ini berasal  dari  tanah,  air,  udara,  tanaman  lain,  atau  dibawa oleh  binatang  khususnya  insekta  (Phyllosphere,  2000). Bakteri  filosfer  ditemukan  pada  stomata,  di  sepanjang tulang  daun  dan  dinding  sel  epidermis  (Beattie  dan Lindow,  1999). Bakteri  ini hidup  pada  daun  karena adanya  senyawa  organik  seperti  fruktosa,  sukrosa,  asam organik,  asam  amino,  dan  vitamin  yang  dijadikan  sebagai sumber  karbon,  energi  dan  senyawa  pemicu  tumbuh. Bakteri  filosfer  dikelompokkan  sebagai  bakteri  endofit, epifit  (atau  filosfer),  dan  fitopatogen  (Azevado et  al., 2000).  Mikrob  endofit adalah  mikrob yang berkoloni  pada jaringan  tanaman  sehat  (Bills,  1996),  terutama  hidup  pada jaringan vaskular tanaman  (Klopper et al.,  1999).  Menurut Leveau  (200 I),  filosfer  adalah  habitat  alami  bagi  mikrob epifit sehingga mikrobnya disebut mikrob filosfer.
• Alamat korespondensi: dsantosa@indo.net.id
Warner  (1992)  melaporkan  bahwa  spesies bakteri yang paling  sering  dijumpai pada  filosfer  adalah Pseudomonas, Xanthomonas, Flavobacterium, Archromobacterium, Bacillus, Mycobacterium,
Beijerinckia,  dan  Azotobacter. Berbagai  spesies  bakteri filosfer  ini  menghasilkan hormon yang dapat memperbaiki pertumbuhan tanaman. Hormon  yang  dihasilkan  oleh tanaman berinteraksi dengan hormon  (IAA)  yang dihasilkan  oleh  bakteri  filosfer.  Bakteri  tumbuh  dengan baik,  sedangkan  IAA yang dihasilkan bakteri  memperbaiki pertumbuhan tanaman.
Penelitian ini  bertujuan untuk mengisolasi, menyeleksi dan  mengidentifikasi bakteri  filosfer  yang  mampu meningkatkan pertumbuhan benih padi  IR-64.

## BAHAN DAN METODE
Sumber  bakteri  filosfer  adalah  daun  padi  varietas  IR- 64  yang  berumur  2  minggu  setelah  tanam  (MST),  4  MST dan  8  MST  dari  daerah  Pasirkuda-Ciomas  (C)  dan
Santosa, D.  A.,  N.  Handayani,  dan A.  Iswandi.  2003.  Isolasi dan  seleksi bakteri filosfer pemicu  tumbuh dari daun padi. J. Tanah Lingk.,5(1):7-12.
Ciherang-Sindangbarang  (S),  Bogor.  Benih  padi  yang digunakan sebagai tanaman  uji  adalah  padi  varietas IR-64.
Daun  padi  dipotong  sepanjang  satu  sentimenter, permukaan  daun  disterilisasi  dengan  alkohol  70% selama tiga  menit  untuk  mendapatkan  bakteri  endofilosfer  dan tanpa  sterilisasi  permukaan  untuk  bakteri  filosfer.  Daun digerus  dan  diberi  aquades,  lalu di-vorteks  sehingga didapatkan  suspensi.  Sebanyak  100 III suspensi  bakteri disebar  pada  medium  Agar  Ashbey  (Atlas,  1997)  dengan komposisi  (g 1'1):  (agar  Bacto  15;  manito I IS; CaCh.2H20 0.2;  K 2 HP0 4 0.2; MgS0 4 .7H 2 0 0.2; Mo03  (10%
solution)  0.1;  FeCI 3 (10%  solution)  0.05  dan diinkubasi selama  5-7  hari  pada  temperatur  30'  C. Koloni  yang terpisah  dan berbeda  dimurnikan pada  medium  Agar Ashbey.
Suspensi  bakteri  filosfer  dibuat  dengan  memasukkan satu  lup  koloni  dari  medium  Agar  Ashbey  ke  dalam  10  ml media  Ashbey  cair  dan  dilakukan  pengenceran  sampai diperoleh  populasi  bakteri  filosfer sekitar  10 6 sel  ml'l.
Inokulasi  benih  dilakukan  dengan  mensterilisasi permukaan  benih  padi  dengan  menggunakan  H 2 0 2• dan dibilas  dengan  akuades  steril. Benih  padi  tersebut kemudian  direndam  di  dalam  suspensi  bakteri  filosfer  (10 6 sel  ml'l),  lalu  disemai  pad a  botol  kaca  yang  beralaskan kasa  dengan  media  tan am  Jhonson  cair  (Jhonson et  al., 1957).  Komposisi  dari  media Jhonson  ada!ah  dalam  g 1'1: (CaHP0 4 I; K 2 HP0 4 0.2;  MgS0 4 .7H 2 0  0.2;  NaCI  0.2; FeCI3 0.1;  serta  unsur  mikro  (0.5%  B;  0.05%  Mn; 0.005% Zn; 0.005%  Mo; 0.002% Cu)  1 ml  rl.  Botol  kaca ditutup  plastik. Pengukuran  tinggi  tanaman  dilakukan setiap  minggu,  dimulai  pada  minggu  kedua  sampai minggu kelima.
Inokulasi  bakteri  mosfer  pada  daun  padi  dilakukan dengan  mencelupkan  daun  padi  umur  3  MST  pada suspensi  bakteri  filosfer  sebanyak  50  ml (± 10 6 sel  ml'l), lalu  ditanam  pada  bak  penanaman  ukuran  20  cm x 40  cm dengan  tinggi  5  cm,  dengan  menggunakan  media  pasir dengan  larutan  hara Hoagland  (Hoagland  dan  Arnon, 1950).  Komposisi  larutan  Hoagland  (g  rl  atau  ml  rl) adalah:  (Ca(N03h  10;  KN03  10;  MgS04  4;  KH 2 P04  2; FeCh  2.  Hara  mikro  lain  yang  diberikan  adalah  H3B03, MnCI 2 .411 2 0, ZnCl b CuCl l ·21I l 0, Na l Mo0 4 .211 2 0 sebanyak  2  mL.  Pengukuran  tinggi  tanaman  dilakukan pada  4  MST  dan  5  MST  sedangkan  pada  minggu  kelima dilakukan  pengukuran bobot  basah  dan  bobot  kering bagian  atas  tanaman  dan  akar.  Identifikasi  bakteri  filosfer didasarkan  pada  ciri-ciri  morfologi,  ciri  koloni  dan  hasil pengujian  fisiologis  dengan  berpedoman  pada  Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (Holt et al.,  1994).
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Tanah, Jurusan  Tanah,  Fakultas  Pertanian,  IPB  dan  Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi Lingkungan, Pusat Penelitian  Lingkungan  Hidup (PPLH),  IPB.
Percobaan  dirancang  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL).  Perlakuan  terdiri  dari  19  bakteri  filosfer murni,  satu  campuran  dan  satu  kontrol  (tanpa  bakteri filosfer).  Setiap  perlakuan  mempunyai  tiga  ulangan.  Data dlanalisis  menurut  uji  F  dan  bila  perlakuan  berbeda  nyata digunakan  uji  lanjut Duncan's  Multiple  Range  Test (DMRT).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Bakteri  filosfer  padi  yang  berhasil  diisolasi  dari berbagai  sumber  disajikan  pada  Tabel  I.  Sembilan  isolat dapat  diisolasi  dari  padi  yang  ditanam  di  Pasir  Kuda- Ciomas (C)  dan  10  isolat  dari  Ciherang-Sindangbarang (S). Bakteri  filosfer  tersebut  berada  pada  filosfer  (11 isolat = CA  dan  SA) dan  endofilosfer (  8  isolat = CD  dan SB).  Berdasarkan  umur  tanaman  padi,  balderi  filosfer tersebut  juga  dapat  diisolasi  dari  ketiga  kelompok  umur contoh  yaitu  dua  isolat  dari  daun  padi  berumur  2 MST (X), sembi Ian  isolat berasal dari daun padi berumur 4 MST (Y),  dan  delapan  isolat  berasal  dari  daun  padi  berumur  8 MST  (Z).  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  bakteri  filosfer dapat diisolasi  dari  daun  padi yang ditanam di tempat yang berbeda. dari  daerah filosfer  maupun  endofilosfer dan dari tanaman  yang  memiliki  umur  berbeda. Hal  ini menunjukkan  bahwa,  bakteri  filosfer ini dapat ditemukan.
Berbagai  macam  respon benih  padi  terhadap inokulasi  bakteri  filosfer  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Kelompok pertama adalah kelompok balderi filosfer yang cepat  menunjukkan  pengaruh  terhadap  peningkatan  tinggi benih  padi  dan  pengaruh  tersebut  secara  konstan  terjadi sampai  minggu  ke  lima. Ada  sepuluh  bakteri  filosfer'  (> 50%)  bakteri  filosfer  yang diinokulasikan pada benih padi yang  mampu  meningkatkan tinggi  benih padi IR-64  secara nyata. Bakteri  filosfer  yang  paling  besar  kemampuan untuk  meningkatkan  tinggi  benih  padi  IR-64  adalah  isolat SBY8.  Isolat  SBY8  memiliki  kemampuan  terbaik  dalam meningkatkan tinggi benih IR-64 sampai 41.6% dibandingkan kontrol.  Kelompok kedua adalah  kelompok yang  terdiri  dari  tiga  isolat  bakteri  filosfer yang tidak menunjukkan  pengaruh yang konsisten.  Kelo.pok kdiga adalah  kelompok  yang  terdiri  dari  empat  isolat  balderi filosfer yang meningkatkan tinggi benih, namun peningkatan  ini  baru  terjadi  pada minggu  keempat  bahkan pada  minggu  kelima  setelah  inokulasi.  Contohnya adalah bakteri  filosfer  CAZ4,  SAY3  dan  SBZIO. Kelo_pok keempat  adalah  kelompok  yang  terdiri  dari  dua  isolat bakteri filosfer yang sarna sekali tidak meningkatkan tinggi benih  padi  IR-64  dibandingkan  dengan  kontrol.  Dua  isolat baktcri filosler yaitu CAX I  dan SAX I.
Pada perlakuan dengan campuran bakteri menunjukkan bahwa sekalipun inokulasi clapat meningkatkan  tinggi  tanaman  padi,  namun  peningkatan tinggi  benih  padi  tersebut tidak  melebihi pengaruh  bakteri filosfer  tunggal.  Ini  berarti  bahwa  campuran  isolat  bakteri tidak  dapat  bersinergi  dalam  meningkatkan pertumbuhan benih  padi  IR-64.  Hasil  yang juga sangat menarik  adalah bahwa tidak ada  isolat  bakteri  filosfer  yang diisolasi yang berpengaruh  negatifterhadap pertumbuhan  benih padi  IR- 64.
Pengaruh  inokulasi  19  bakteri  filosfer  pada daun padi terhadap  tinggi  benih  padi  IR-64  disajikan  pada  Tabel  3. Empat belas  bakteri  filosfer dari  19  isolat  yang diuji  atau sekitar  74%  isolat,  tidak  mampu  meningkatkan  tinggi benih  padi. Dengan  demikian  hanya  lima  isolat  (26%) dari  bakteri  filosfer  yang  diuji,  mampu  meningkatkan tinggi  benih padi  pada minggu  keempat.
Tabell.  Bakteri  Filosfer  yang  Diisolasi  dari  Daun  Padi  IR-64  yang  Berumur  Dua,  Empat  dan Delapan  Minggu Setelah Tanam
No. NO.lsolat Umur(MST) Jenis Bakteri Lokasi CAXI 2 MST Filosfer Pasirkuda-Ciomas 2 CAl2 8 MST Filosfer Pasirkuda-Ciomas 3 CAl3 8 MST Filosfer Pasirkuda-Ciomas 4 CAZ4 8MST Filosfer Pasirkuda-Ciomas 5 CAl5 8 MST Filosfer Pasirkuda-Ciomas 6 CBY6 4MST EndotiIosfer Pasirkuda-Ciomas 7 CBl7 8MST Endotilosfer Pasirkuda-Ciomas 8 CBl8 8MST Endofilosfer Pasirkuda-Ciomas 9 CBl9 8 MST EndotiIosfer Pasirkuda-Ciomas 10 SAXI 2MST Filosfer Ciherang-Sindangbarang II SAY2 4MST Filosfer Ciherang-Sindangbarang 12 SAY3 4 MST Filosfer Ciherang-Sindangbarang 13 SAY4 4 MST Filosfer Ciherang-Sindangbarang 14 SAY5 4MST Filosfer C iherang-Sindangbarang 15 SAY6 4MST Filosfer Ciherang-Sindangbarang 16 SBY7 4 MST Endofilosfer Ciherang-Sindangbarang 17 SBY8 4MST EndotiIosfer Ciherang-Sindangbarang 18 SBY9 4MST EndotiIosfer Ciherang-Sindangbarang 19 SBllO 8MST Endofilosfer Ciherang-Sindangbarang
Persentase  peningkatan  tinggi  benih  padi  akibat inokulasi  bakteri  filosfer  pada  daun  padi  juga  tidak setinggi  peningkatan  pad a  inokulasi  benih  padi  (Tabel  2). Pada  minggu  kelima,  enam  bakteri  filosfer  (32%)  masih tidak  mampu  meningkatkan  tinggi  benih  padi  IR-64. Bakteri  filosfer  yang  paling  besar  kemampuannya  dalam meningkatkan  tinggi  benih  padi  IR-64  adalah  isolat  CBZ9. Bakteri  filosfer  ini  mampu  meningkatkan tinggi  benih  padi sebesar  24%  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kontrol. Alasan  yang  mungkin  terjadi  adalah: (I) bakteri  filosfer kurang/tidak  mampu  menghasilkan  senyawa  yang  dapat merangsang  pertumbuhan  tanaman  padi,  baik  itu  berupa senyawa  nitrogen  hasil  penambatan  N2  atau  hormon tumbuh  tanaman,  dan  (2)  pertumbuhan  bakteri  tidak  lagi aktif  setelah  diinokulasikan  ke  daun.  Pada  pengujian inokulasi  daun  ini,  bakteri  filosfer  yang  mempunyai pengaruh  yang  paling  tinggi  pada  inokulasi  benih  (SBYS) tidak  menunjukkan  kemampuannya  dalam  meningkatkan tinggi  benih  padi  IR-64  bila  bakteri  filosfer  ini diinokulasikan melalui daun.
Dari  hasil  penelitian  tersebut  tampak  dengan  jelas bahwa  tan am an  padi  memperlihatkan  respon  berbeda  bila bakteri  diinokulasikan  langsung  pada  benih  atau  pada daun.  Respon  benih  padi  yang  positif  ini  kemungkinan disebabkan  oleh  adanya  hormon  tumbuh,  peningkatan ketersediaan  nitrogen,  atau  kemungkinan  adanya  senyawa menguntungkan  lainnya  yang  disekresikan  oleh  bakteri filosfer (Azevado et al., 2000).
Pengaruh  inokulasi  benih  padi  dengan  bakteri  filosfer terhadap  bobot bagian  atas dan  bobot akar benih  padi  umur lima  minggu  disajikan  pada  Tabel  4. Dari  19  isolat bakteri  filosfer  yang  diuji  sebagai  inokulan  benih  padi, 17  isolat  (89%)  mampu  meningkatkan  bobot  basah  bagian atas  benih  padi  sedangkan  dua  isolat  yaitu  CAX I  dan SBY7 tidak  mampu  meningkatkan  bobot  basah  bag ian  atas benih  padi.  Peningkatan  bobot  basah  bag ian  atas  benih padi  tidak  selalu  sejalan  dengan  peningkatan  bobot  kering bagian  atas  tanaman.  Isolat  CAZ2  dan  SAX)  misalnya, sekalipun  isolat  ini  mampu  meningkatkan  bobot  basah bagian  atas  benih  padi  namun  isolat  ini  tidak  mampu meningkatkan  bobot  kering  benih  padi. Hal  ini menunjukkan  bahwa  kadar  air  dalam  benih  padi sedemikian  tingginya,  sehingga  bobot  keringnya  tidak berbeda dengan  kontrol.  Hal  yang sebaliknya terjadi  pada inokulasi  dengan  bakteri  filosfer  SBY7  dimana  isolat  ini tidak  mampu  meningkatkan  bobot  basah  bagian  atas benih padi,  namun  bobot  keringnya  adalah  yang  tertinggi diantara isolat yang diuji.  Ini  berarti  bahwa  bakteri filosfer SBY7 membuat penyerapan  hara tinggi namun  penyerapan air  kurang  sehingga  kadar  air  tanamannya  rendah. Peningkatan  bobot  kering  bagian  atas  benih  padi  yang nyata  berkisar  dari  17%  sampai 47%. Isolat  CAX I merupakan  isolat  yang  seClara  konsisten  tidak  berpengaruh terhadap  tinggi  benih  (Tabel  2)  maupun  terhadap  bobot bag ian  atas  dan  bobot  akar  benih  padi  (Tabel  4).  Dari semua  bakteri  filosfer  yang  diuji,  tidak  satupun  yang
lsolasi dan  seleksi bakteri filosfer pemicu  tumbuh  (D.  A.  Santosa)
menimbulkan  efek negatif terhadap pertumbuhan tanaman. Penggunaan  bakteri  campuran tidak lebih  baik dari  bakteri tilosfer  tunggaJ. Peningkatan  bobot  akar  tertinggi dihasilkan  pada  inokulasi  dengan bakteri  CBZ8  yang mampu meningkatkan  bobot kering akar sebesar  35%.
Tabel  2.  Pengaruh  Inokulasi  Benih  dengan  Bakteri  Filosfer
terhadap Tinggi  Benih Padi  IR-64 Tinggi  benih  padi  minggu  ke- Isolat 2 3 4 5 (em) CAXI 4.43 hi 5.43f.1 6.27hi 7.4i CAZ2 5.30c.f 6.07"'f 6.53 8· i 8.93e.h CAZ3 5.47"" 6.231>-0 7.13<-h 9.23<-g CAZ4 4.93e.h 5.23,·1 6.508·i 8.57'h CAZ5 5.00d. g 6.20"'· 7.17d., 9.13d.g CBY6 5.27c.f 6.40 b •• 6.83f.i 8.60,h CBZ7 4.87f.h 6.27"'· 7.30d.f 9.17d. g CBZ8 5.83 ab 6.47"'d 8.43 ab 9.97ab CBZ9 5.50"'d 6.50bc 7.20d. g 9.90bc SAXI 4.17i 5.40,·1 6.07i 7.40i SAY2 4.73 hi 5.93"'f 7.37c.e . 9.40i SAY3 4.90f.h 5.S7cg 6.20hi 8.73 f.h SAY4 5.50"'d 6.60b 7.40t-e 9.70"'d SAY5 5.67bc 6.53 bc 7.S0"'d 9.60"'· SAY6 6.17' 7.27" 8.77" 10.60" SBY7 5.33c.f 6.57 b 7.90bc 9.73"'d SBYS 5.l3 d. g 6.17"'f 7.97bc 1O.IO"b SBY9 5.17d.f 5.60··h 6.20hi 8.37h SBZIO 4.47 hi 5.80d. g 6.508·i 8.33 h Campuran 5.33 c• f 6.23"'e 7.47t-e 9.67"'d Kontrol 4.43 hi 5.20h.1 6.IOi 7.13 i Keterangan: Angka  pada setiap kolom yang diikuti oleh hurufyang berbeda, menunjukkan perbedaan yang nyata pada taraf
DMRT5%
Hasif  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  bakteri filosfer  yang  diinokulasikan  pada  benih padi mampu meningkatkan tinggi, bobot  bag ian  atas  dan  bobot  akar benih  padi.  Dengan  demikian,  peningkatan  pertumbuhan tidak saja pada bagian atas tetapi juga pada akar.
Enam  bakteri  filosfer  yang secara keseluruhan  mampu meningkatkan tinggi,  bobot tanaman  bagian atas dan bobot akar  benih  padi  diidentifikasi  lebih  lanjut  dengan berpedoman  pada  Bergey's  Manual  of  Determinative Bacteriology (Holt et al., 1994).  Keenam  bakteri  tersebut adalah  isolat  CBZ8,  CBZ9,  SA Y3,  SA Y5,  SBY8  dan SBZIO.  Keenam isolat tersebut  adalah  Gram  positif dan motif,  katalase  (+), nitrat (+) dan  lysine  (+)  dan  warn a koloni  kuning  pada  media  agar  nutrien  (NA).  Hasil identifikasi disajikan pada Tabel 5.
Tabel3.  Pengaruh  Inokulasi  Daun  Padi  dengan  Bakteri  Filosfer terhadap Tinggi  Padi  IR-64
Minggu ke- Isolat 4 5 (em) CAXI 10.501-t 14.83<-8 CAl2 IO.OObc 16.00"" CAl3 10.00bc 16.50"" CAl4 10.50°'c 14-'7' CAl5 10.00bc 15.6r CBY6 10.67 ab 16.33 be CBl7 1O.331-t 15.33b-f CBl8 11.17" 16.6f CBZ9 11.00ab 18.00' SAXI 10. I 7 8 • C 14.50 fs SAY2 10.33"c 16.17 be SAY3 10.5abc 16.50"" SAY4 1O.331-t 15.33"'f SAY5 1O.67ob 16.001>-0 SAY6 11.67ob 16.6r SBY7 10.33°'c 16.50 be SBY8 10.50"'c 15.50"'f SBY9 1O.00bc 16.50bc SBZIO 10.50 H 15.00d-8 Campuran 11.17" 16.50 be Kontrol 9.50c 14.50f,
Keterangan:  Angka  pada  setiap  kolom  yang  diikuti  oleh  huruf  yang berbeda,  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  pada  taraf DMRT5%
Setengah  (50%)  dari  jumlah  bakteri  tilosfer  yang mampu  memperbaiki  pertumbuhan  benih  padi  adalah Microbacterium  lacticum yang  berasal  dari padi  yang ditanam  di  dua daerah  yang  berbeda.  Bakteri  tilosfer yang lain  adalah Aureobacterium  seperdae (dua  isolat)  dan Arthrobacterium globi/ormis (satu  isolat).  Semua  bakteri tilosfer  tersebut  sudah  pernah  dilaporkan  oleh  Thompson et af. (1993).
Menurut  hasiJ  penelitian  Thompson et  al. (l993), bakteri  Gram  positif yang diisolasi dari  tiga  jenis  daun adalah Arthrobacter  oxydans,  Micrococcus  roseus. Microbacterium  lacticum,  Bacillus  sp.,  Arthrobaclerium globi/ormis,  A.  mysorens,  A.  viscosus,  Aurobaclerium saperdae,  Curlobacterium flaccumfaciens,  Kurthia  zopfi, dan Micrococcus krislinae.
Tabel  4.  Pengaruh  Inokulasi  Bakteri  Filosfer  terhadap  Bobot  Tanaman  Bagian  Atas  dan  Akar Benih Padi IR-64 Umur 5 MST
NO.lsolat Bobot basah Bobot kering Bobot basah Bobot kering bagian atas bagian atas akar akar (g) CAXI 0.680r 0.222ij 1.049 m 0.31si CAZ2 0.755" 0.22Sh-j 1.279kl 0.34 I rgh CAZ3 0.976"b 0.263b-r I.S48f"g 0.396b CAZ4 0.979"b 0.243r-h 1.217kl 0.3S3"r CAZS 0.917 be 0.266b-" 1.697d 0.349"rg CBY6 0.76Sd 0.273b-d 1.542or 0.331 ghi CBZ7 0.878ed 0.267b-" 1.571" 0.393 b CBZ8 1.0021 0.273b-d 1.749 c 0.424" CBZ9 0.870ed 0.254 c - g 1.301 k 0.347rgh SAXI 0.872ed 0.218 j 1.240 1 0.327hij SAY2 0.760" 0.2831b 1.421ij 0.337 rgh SAY3 0.9 13 be 0.248"-g 1.310 k 0.360 d " SAY4 1.000" 0.252<1-g 1.543"r 0.341 rgh SAYS 0.9651b 0.244r-h 1.850b 0.374ed SAY6 0.947"b 0.240g- 1 1.473gh 0.345"-h SBY7 0.738"r. 0.300" 1.40oi 0.355"r SBY8 0.917lb 0.261b-g 1.452hi 0.399b SBY9 0.937"- c 0.240g- 1 1.487sh 0.350"r SBZIO 0.980"b 0.275 be I. 930' 0.385 be Campuran 0.826d 0.249"-8 1.3 14k 0.344 e - h Kontrol 0.679r 0.206i 1.040 m 0.315ij
Keterangan:  Angka  pada  setiap  kolom  yang  diikuti  oleh  huruf yang  berbeda,  menunjukkan  perbedaan  yang nyata pada  tarafDMRT 5% Tabel5.  Identifikasi  Bakteri Filosfer yang Meningkatkan Pertumbuhan  Bagian Atas dan Akar Benih IR-64 No. No.  isolat Hasil identifikasi I. CBZ8 Microbacterium lacticum 2. CBZ9 Arthrobacterium globiformis 3. SAY3 A ureobacterium seperdae 4. SAY5 A ureobacterium seperdae 5. SBY8 Microbacterium lacticum 6. SBZIO Microbacterium lacticum

## KESIMPULAN
Bakteri  filosfer  dapat  diisolasi  dari  endofilosfer maupun  dari  filosfer  daun  padi  IR-64  dari  berbagai  umur. Inokulasi  daun  benih  padi  IR-64  dengan  bakteri  filosfer
meningkatkan  tinggi,  bobot  bagian  atas  dan  bobot  akar benih padi.
Bakteri  filosfer  dari  daun  padi  bersifat Gram positif, moti!,  katalase  (+),  nitrat  (+)  dan  lysine  (+) dan warna koloni  kuning  pada  media  agar  nutrien  (NA).  Bakteri filosfer tersebut adalah Microbacterium lacticum, Arthrobacterium globiformis dan
Aureobacterium seperdae

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  dapat  terlaksana  atas  bantuan  dana penelitian  dari  Indonesian  Center  for  Biodiversity  and Biotechnology  (lCBB), Bogor. Untuk itu penulis mengucapkan  terimakasih.  Penulis  juga  mengucapkan terimakasih  kepada  Kepala  Pusat  Penelitian  Lingkungan Hidup  (PPLH)  IPB  dan  Kepala  Laboratorium  Biologi Tanah, Jurusan Tanah, Fakultas Pertanian IPB.

## DAFTAR PUS TAKA
Azevado  J.L.,  W.  Maccheroni  Jr.,  and  1.0.  Pereira.  2000. Endophitic  microorganisms:  a  review  on  insect  control  and recent  advances  on  tropical  plants.  Biotech,  3  (I): http://www.ejb.orglcontentlvoI3/issue/fuIl/4  (diakses  pada 22  November 2003).
Atlas,  R.M.  1997. Handbook of Microbiological Media. 2nd  ed.
Beattie,  G.A.  and  S.  Lindow.  1999.  Bacterial  colonization  of leaves: A spectrum of strategies.  Phytopathol., 89: 353- 359.
Bills.  G.F.  1996.  Isolation  and  analysis  of endophytic  fungal communities  from  woody  plants.  In  S.  Redlin  and  L.M. Carries  (eds.):  Systematics,  Ecology  and  Evolution  of Endophytic Fungi in  Grasses and  Woody  Plants. APS  Press, St.  Paul,  M.N.
Hoagland.  D.R.  and  0.1.  Amon.  1950.  The  water-culture  method for  growing  plants  without  soil.  The  Colleque  of Agriculture,  University  of  California,  Berkeley.  Circular 347.
Holt,  J.G.,  R.K.  Noel,  P.H.A.  Sneath, T.S. James  and  T.W. Stanley. 1994. Bergey's Manual of  Determinative Bacteriology.  9 th ed.  The  Williams  and  Wilkins  Co. Baltimore.
Jhonson.  e.M.R.,  P.R.  Stout,  T.e.  Broyer  and  A.B.  Carlton.
1957.  Comparative  chlorine  requirement  of different  plant species. 1. Plant and Soil,  8:337-353.
Kloepper,  J.W.,  R.  Rodriquez-Ubana,  G.W.  Zehnder,  J.F. Murphy,  E.  Sikora  and  C.  Fernandez.  1999.  Plant  root bacterial  interactions  in  biological  control  of  soilborne disease  and  potential  extension  to  sistemic  and. foliar disease. Aust.  Plant Pathol., 28:21-26.
'. Leaveau,  J.  200 I. Nutrient  ecology of bacterial  colonizers  of the phyllosphere. Univ. of  California, Berkeley. http:// www.cnr.berkeley.edU/icelab/oeople/johannew.html-33k (diakses pada 22  November 2003)
Phyllosphere.  2000. t h International  Symposium  on  the Microbiology  of Areal  Plant  Surfaces,  Berkeley,  CaJifornia, USA:  August  3-8,  2000.  http://www.cnr.berkeley.edu/ p2000/
Thompson,  J.P.,  M.1.  Bailey, 1.S. Fenlon,  T.  R.  Fermon,  A.K.
Lilley,  1.M.  Lynch,  P.l.  Mccormack,  M.P.  Mcquilken,  K.l. Purdy,  P.B.  Rainey and 1.M.  Whipps.  1993. Quantitative and qualitative  seasonal  changes  in  the  microbial  community from  the  phyllosphere  of sugar  beet  (Beta  vulgaris).  Plant and Soil, 150:177-191.
Werner,  D.  1992.  Symbiosis  of Plant  and  Microbes.  Chapman Hall, London.
Dierolf, T.S. and  R.S.  Yost.  2000.  Stover  and  potassium management  in  an  upland  rice-soybean  rotation  on  an Indonesian Ultisol. Agron. 1., 92: 106-114.
Fox,  R.L.  and E.1. Kamprath.  1970. Phosphate sorption isotherms for  evaluating the  phosphate  requirements of soils. Soil Sci. Soc.  Amer.  Proc., 34: 902-907.
Grimme,  H.  1985.  The  dynamics  of potassium  in  the  soil-plant system.  In  Potassium  in  the  Agricultural  System  of  the Humid  Tropics.  Proc.  of  the  19 th Colloquium  of  the International  Potash  Institute  held  in  Bangkok,  Thailand.  p. 127-154.
Lei,  Y.,  B.  Zhang,  M.  Zhang,  K.  Zhao,  W.  Qio,  and X. Wang. 2000.  Corn  response  to  potassium  in  Lioning  Province.
Beller Crops Inter., 14(1 ):6-9.
McLean,  E.O. 1977.  Contrasting  concepts  in  soil  test interpretation:  sufficiency  levels  of  available  nutrients versus  basic  cation  saturation  ratios.  In  Soil  Testing: Correlating  and  Interpreting  the  AnaJytical  Results.  ASA Special Publ. No.  29, Madison, Wisconsin. p.  39-54.
Nelson,  L.A.  and  R.L.  Anderson.  1977.  Partitioning  of soil  test- crop  renponse  probability.  In  Soil  Testing:  Correlating  and Interpreting  the  Anaytical  Results.  ASA  SpeciaJ  Pub.  No. 29, Madison, Wisconsin.  p.  19-38.
Ritchey,  K.D.  1979.  Potassium fertility  in Oxisols and  Ultisols of the  humid  tropics.  Cornell  InternationaJ Agriculture  Bulletin 37, Cornell  University, Ithaca, New York. 45  pp.
Prasetyo,  B.H.,  M.  Sukardi,  dan  H.  Subagjo.  19%.  Tanah-tanah intensifikasi  di  lawa:  susunan  mineral,  sifat-sifat  kimia,  dan klasifikasinya.  Pemb.  Penel.  Tanah  PupuJc,  14:12-24.
Prasetyo,  B.H.,  Sulaeman,  dan  N.  S.  Mulyani.  1997.  Red-yellow soils  from  Kotabumi,  Lampung:  Their  characteristics, classification,  and  utilization.  Indonesian 1. Crop  Sci.. 12 (1&2):37-45.
Prasetyo,  B.H.  dan  A.  Kasno.  2001.  Sifat  morfologi,  komposisi mineral  dan  fisika-kimia  tanah  sawah  irigasi  di  Propinsi Lampung.J.  Tanah  Trap.,  12:155-167.
Subagyo,  H.  1983.  Pedogenesis  dua  pedon  Grumusol  (Vertisol) dari  bahan  volkanik  gunung  Lawu dekat Ngawi  dan Karanganyar.  Pemb.  Penel.  Tanah  PupuIc,  2:8-18.
Syers, 1.K, M.G.  Browman, G.  W.  Smillie, and R.B.  Corey.  1973.
Phosphate  sorption  by  soils  evaluated  by  the  Langmuir adsorption equation. Soil Sci.  Soc.  Amer.  Proc., 37: 358-363.