UJI TOKSISITAS AKUT (LETHAL DOSE 50 )
EKSTRAK ETANOL DAUN GEDI MERAH (Abelmoschus manihot L.) TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR (Rattus norvegicus L.)

## Fadhila Assagaf, Adeanne Wullur, Adithya Yudistira
Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This  study  aimed  to  determine  the  acute  toxicity  Lethal  Dose 50 of  red  aibika  (Abelmoschus Manihot L.) leaves extract against white males rats (Rattus norvegicus L.) wistar strain. The method used was controlled group post-test only design. Subject were white male white rats with  a  total  of  20  and  divided  into  5  groups:  namely  group  1  as  a  positive  control,  group  2 was treated 40% red aibeka leaf extract, g, group 3 was treated 60% red aibeka leaf extract, , group 4 was treated 80% red aibeka leaf extract, and , group 5 was treated 100% red aibeka leaf extract,. Data was recorded when there was a death in rats after a given treatment. LD 50 calculation  formula  according  to  Thomson  and  Weil  Method  to  calculate  the  LD 50 value  of red aibeka leaf extract. The results showed that mortality in the entire group 4 and 5 of tested animal  occurred  after  treatment  with  LD 50 values  of  6,25  g/KgBB.  It  can  be  concluded  that the  leaf  extracts  of  red  aibika  slightly  toxic  to  the  male  white  rat  wistar  strain.
Keywords: Abelmoschus Manihot L., Red aibika, Acute Toxicity Test, Lethal Dose 50 (LD 50 ).

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui toksisitas akut (Lethal Dose 50 ) ekstrak Daun Gedi  Merah  (Abelmoschus  manihot  L.)  Terhadap  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  (Rattus norvegicus L.).  Metode yang digunakan yaitu dengan post test only controlled group design. Subjek penelitian berupa tikus putih jantan berjumlah 20 ekor yang dibagi dalam 5 kelompok yaitu  kelompok  1  sebagai  kontrol  positif,  kelompok  2  diberi  perlakuan  ekstrak  daun  gedi merah  40%,  kelompok  3  diberi  perlakuan  ekstrak  daun  gedi  merah  60%,  kelompok  4  beri perlakuan ekstrak daun gedi merah 80% dan kelompok 5 diberi perlakuan ekstrak daun gedi merah  100%.  Data  diperoleh  jika  terjadi  kematian  pada  tikus  setelah  diberi  perlakuan.  Data diolah  menggunakan  rumus  perhitungan  LD 50 menurut  cara  Thomson  and  Weil  untuk menghitung  nilai  LD 50 ekstrak  daun  gedi  merah.  Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya kematian  yang  terjadi  pada  seluruh  hewan  uji  kelompok  4  dan  5  setelah  perlakuan  dengan nilai  LD 50 sebesar  6,25  g/KgBB.  Kesimpulannya  ekstrak  daun  gedi  merah  sebagai  zat  yang sedikit toksik terhadap tikus putih jantan galur wistar.
Kata Kunci : Abelmoschus manihot L., Daun Gedi Merah, Uji Toksisitas Akut, LD 50 .

## PENDAHULUAN
Tanaman genus
Abelmoschus hanya  dapat  ditemui  di  daerah  beriklim tropika,  terutama  di  Afrika  dan  Asia.    Di Manado,  masyarakat  mengenal  2  macam tanaman  gedi  yaitu  gedi  hijau  dan  gedi merah. Tanaman Gedi Hijau (Abelmoschus esculentus  L.  Medik)  secara  tradisional, telah  lama  dikenal  sebagai  tanaman sayuran yang biasanya dikonsumsi dengan campuran  dalam  makanan  khas  Kota Manado yang biasa disebut Bubur Manado (Tinutuan). Sedangkan  untuk  tanaman gedi  merah ( Abelmoschus  manihot    L.
Medik)  secara  tradisional  masyarakat memanfaatkannya  sebagai  obat  tradisional yang  dapat  menyembuhkan  beberapa penyakit (Mamahit, et al., 2010).
Beberapa  pengalaman  secara  empiris menyatakan  bahwa  tanaman  gedi  merah dapat  dijadikan  sebagai  obat  diare,  obat usus  buntu    dan  berkhasiat  untuk mempercepat  proses  melahirkan.  Daun gedi  merah  yang    direbus  tanpa  garam, digunakan  untuk  mengobati  beberapa penyakit,  antara  lain  untuk  sakit  ginjal, maag,  dan  kolesterol  tinggi.    Di  Papua, daunnya  banyak  dimanfaatkan  sebagai obat  tradisional  usai  persalinan  bagi  ibu hamil, daunnya dipercaya mampu meningkatkan produksi ASI bagi ibu yang sedang menyusui (Plantamor, 2006). Untuk  keamanan  pemanfaatan  gedi merah jika digunakan sebagai pengobatan, diperlukan  uji  toksisitas.  Uji  toksisitas dibedakan  menjadi  uji  toksisitas  akut, subkronik,  dan  kronik.  Uji  toksisitas  akut dirancang  untuk menentukkan Lethal dose atau  disingkat  LD 50 suatu  zat.    LD 50 didefinisikan  sebagai  dosis  tunggal  suatu zat  yang secara statistik diperkirakan  akan membunuh 50% hewan percobaan (Harmita, 2006)
Penelitian ini dibatasi pada pengamatan  toksisitas  akut  (lethal  dose 50 ) kelompok  kontrol  negatif,  dan  kelompok perlakuan  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar  (Rattus  norvegicus  L.).  Tujuan penelitian  ini  untuk  mengetahui  toksisitas akut  (Lethal  Dose 50 )  ekstrak  Daun  Gedi Merah (Abelmoschus manihot L.)
Terhadap Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus L.)

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  telah  dilakukan  pada bulan  september  2012  sampai  dengan januari 2013 di Laboratorium Farmakologi,  Program  Studi  Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan  Alam  (MIPA),  Universitas Sam  Ratulangi  Manado.  Penelitian  ini bersifat eksperimen laboratorium.
Subjek  berupa  tikus  putih  jantan galur  wistar  (Rattus  norvegicus  L.) berjumlah 20 ekor.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini:  kandang,  sarung  tangan, tempat air minum dan makan hewan, alat- alat  gelas  (Pyrex),  vacum  evaporator, waterbath,  magnetic  stirrer,  jarum  suntik berujung  Nasogastric  tube  (NGT)  no.5, disposible syringe 5 ml.
Bahan-bahan yang digunakan dalam  penelitian  ini:  daun  gedi  merah (Abelmoschus  manihot  L.),  etanol  70  %, aquades, kertas saring.

## Pembagian Kelompok Hewan Uji
Hewan uji dibagi dalam 5 kelompok.  Sebelum  diberi  perlakuan, semua  tikus  dipuasakan  selama  12  jam (minum  tetap  diberikan).  Semua  tikus yang  telah  dipuasakan  ditimbang  berat badannya.  Selanjutnya,  semua  tikus  diberi
sediaan per oral, untuk kelompok 1 kontrol negatif  (K1)  hanya  diberi  aquades,  untuk kelompok  2  (K2)  diberi  ekstrak  daun  gedi merah  40%,  kelompok  3  (K3)  diberi ekstrak daun gedi merah 60%, kelompok 4 (K4) diberi ekstrak daun gedi merah 80%, dan  kelompok  5  (K5)  diberi  ekstrak  daun gedi  merah  100%,  kemudian  diamati aktivitas,  tingkah  laku  dan  berat  badan tikus pada hari ke 3-14 setelah perlakuan.

## Pengambilan Sampel Daun Gedi Merah
Daun  gedi  merah  segar  3000  g dikeringkan dalam oven dengan suhu 40 0 C sampai  menjadi  simplisia  dan  diperoleh berat kering 304 g.

## Pembuatan Ekstrak Daun Gedi Merah
Pembuatan  ekstrak  daun  gedi merah dilakukan dengan metode maserasi, yaitu  daun  gedi  merah  yang  telah  halus, ditimbang  sebanyak  300  g  lalu  diekstraksi dengan menggunakan 2250 ml etanol 70% dengan  cara  maserasi  selama  5  jam menggunakan  magnetic  stirer.  Ekstrak kemudian  disaring  dengan  menggunakan kertas saring (filtrat 1).  Selanjutnya filtrat, diuapkan  dengan  vacum  evaporator  pada suhu  70 0 C  sampai  volumenya  menjadi  ¼ dari  volume  awal,  dan  dilanjutkan  dengan pengeringan  di  oven  pada  suhu  40 0 C sampai menjadi ekstrak kental. Di dapatkan ekstrak kental sebanyak 51 g.
Pembuatan  dan  pemberian  larutan  uji ekstrak daun gedi merah  40%.
Ekstrak  daun  gedi  merah  40% dibuat  dengan  cara  menimbang  sejumlah 7,2  g  ekstrak  kental  daun  gedi  merah kemudian ditambahkan 10,8 ml aquades.
Ekstrak  daun  gedi  merah  40% diberikan  secara  oral  pada  tikus  wistar. Ekstrak  hanya  diberikan  sekali  dengan
volume maksimum larutan untuk tikus 200 g masing-masing 5 ml.

## Pembuatan  dan  pemberian  larutan  uji ekstrak daun gedi merah 60%.
Ekstrak  daun  gedi  merah  60% dibuat  dengan  cara  menimbang  sejumlah 10,8  g  ekstrak  kental  daun  gedi  merah kemudian ditambahkan 7,2 ml aquades. Ekstrak  daun  gedi  merah  60%  diberikan secara  oral  pada  tikus  wistar.  Ekstrak hanya  diberikan  sekali  dengan  volume maksimum  larutan  untuk  tikus  200  g masing-masing 5 ml
Pembuatan  dan  pemberian  larutan  uji ekstrak daun gedi merah 80%.
Ekstrak  daun  gedi  merah  80% dibuat  dengan  cara  menimbang  sejumlah 13,6  g  ekstrak  kental  daun  gedi  merah kemudian ditambahkan 3,4 ml aquades. Ekstrak  daun  gedi  merah  80%  diberikan secara  oral  pada  tikus  wistar.  Ekstrak hanya  diberikan  sekali  dengan  volume maksimum  larutan  untuk  tikus  200  g masing-masing 5 ml

## Pembuatan  dan  pemberian  larutan  uji ekstrak daun gedi merah 100%.
Ekstrak  daun  gedi  merah  100% dibuat  dengan  cara  menimbang  sejumlah 16 g ekstrak kental daun gedi merah.
Ekstrak  daun  gedi  merah  100%  diberikan secara  oral  pada  tikus  wistar.  Ekstrak hanya  diberikan  sekali  dengan  volume maksimum  larutan  untuk  tikus  200  g masing-masing 5 ml

## Analisis Data
Data  yang diperoleh diolah dengan menggunakan  rumus  perhitungan  LD 50 menurut cara Thomson and weil.

## Hasil dan Pembahasan
Perhitungan jumlah tikus yang mati dilihat setelah  pemberian  ekstrak  dan  diamati aktivitas  dan  tingkah  laku  tikus  selama  14
hari. Hasil penelitian toksisitas akut berupa gejala keracunan yang terjadi dan perhitungan  nilai  LD 50 dapat  dilihat  pada tabel 1 dan 2.
Tabel. 1. Gejala keracunan yang teramati pada hewan uji.
Pengamatan Gejala yang teramati aktivitas Aktivitas menurun Gastrointestinal Mencret gastrourinari Buang air kecil tidak terkontrol Saraf otot Gemetar
Berdasarkan  tabel  diatas,  dapat dilihat  bahwa  aktivitas  dari  tikus  menurun setelah  perlakuan,      yang  ditunjukkan dengan  tingkah  laku  yang  tidak  banyak bergerak,  paling  banyak  diam.    Gejala kercunan juga terjadi pada sistem  otot dan gastrointestinal dari tikus, dimana keseluruhan dari tikus yang diberi perlakuan,  yaitu  menjadi  gemetar  dan
mencret.    Sistem  gastrourinari  tikus  juga terganggu  yaitu  buang  air  kecil  tidak terkontrol  pada  kelompok  3  sampai kelompok  5.    Namun  keseluruhan  gejala tersebut  hanya  terjadi  selama  1  hari.  Hari kedua  setelah  pemberian  ekstrak,  tikus kelompok 2 dan kelompok 3 menunjukkan aktivitas normal.
Tabel.2 Data hasil perhitungan LD 50
Kelompok Dosis Jumlah hewan tiap kelompok Hewan yang mati Hewan yang hidup K1 (kontrol) 0 4 0 4 K2 0,4 4 0 4 K3 0,6 4 0 4 K4 0,8 4 4 0 K5 1 4 4 0 Rumus  : Log LD 50 = Log D + d (f + 1) D  = dosis terkecil yang diberikan d  = Logaritma kelipatan dosis f = Faktor (tabel weil)
log LD 50 = log 0,8 + log 1,35 ( 0,50000 + 1)
=  -0,096 + 0,130 (1,50000)
=  -0,096 + 0,195 =  0,099
LD 50 =  1,25 g /200 gBB =  6,25 g/KgBB
Berdasarkan  tabel  2,  pada  kelompok  1,2 dan  3  tidak  ditemukan  kematian    tikus. Sedangkan  pada  kelompok  4  dan  5 terdapat  kematian  semua  tikus  dari  dua kelompok  tersebut,  yang  terjadi  setelah  8 jam  pemberian  ekstrak  daun  gedi  merah dosis  tunggal.    Nilai  LD 50 ekstrak  daun gedi merah didapatkan dengan
menggunakan  rumus  perhitungan  LD 50 menurut cara Thomson and weil yang  nilai kisaran  LD 50 ekstrak  daun  gedi  merah diperoleh  sebesar  6,25  g/KgBB  dan  dapat dikategorikan  sebagai  zat  yang  sedikit toksik  karena  berada  pada  kisaran  nilai 0,5-5 g/Kg

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan diatas  dapat  disimpulkan  bahwa,  nilai kisaran  LD 50 ekstrak  daun  gedi  merah sebesar 6,25 g/KgBB dan dapat dikategorikan  sebagai  zat  yang  sedikit toksik terhadap tikus jantan galur wistar.

## Saran
Sebaiknya  dilakukan  penelitian lanjut  untuk  meneliti  gejala  toksik, toksisitas subkronis dan kronis dari ekstrak daun  gedi  merah  dengan  jumlah  hewan coba  yang  lebih  banyak  dan  rentang  dosis yang lebih bervariasi

## DAFTAR PUSTAKA
Donatus,  I.A.  2001.  Toksikologi  Dasar.
Laboratorium  Farmakologi  dan Toksikologi Fakultas Farmasi, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta
Harmita  dan  M.  Radji.  2008.  Buku  Ajar Analisis  Hayati  Edisi  3.  Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta
Mamahit,  L,  dan  N.Sukanto.  2010.  Satu Senyawa Asam Organik dari Daun Gedi  (Abelmoschus  manihot  L)
Asal  Sulawesi  Utara.  Jurusan Teknologi Pertanian, Fakultas Pertanian UNSRAT : Manado Plantamor, 2010. Informasi Spesies Abelmoschus (Abelmoschus manihot L.) http://www.plantamor.com/index .php?plant=2 .  (diakses  pada  10
september 2012)
Syarif,  A.,dkk.  2007.  Farmakologi  dan
Terapi. Edisi 5. Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia, Jakarta.
Filename: 5 Directory: G:\jurnal pharmacon\pharmacon ed.3\terbit Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title: Subject:
Author:
adiculun91 Keywords: Comments: Creation Date: 9/9/2012 4:30:00 AM Change Number: 27 Last Saved On: 2/5/2013 1:16:00 PM Last Saved By: User Total Editing Time:  297 Minutes Last Printed On: 2/5/2013 1:17:00 PM As of Last Complete Printing Number of Pages: 5 Number of Words: 1,747 (approx.) Number of Characters: 9,961 (approx.)