Volume 4, Nomor 1, Juni 2021 e-ISSN : 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v4i1.2239

## KANDUNGAN LOGAM BERAT DAN VITAMIN E PADA TESTIS TIKUS WISTAR SETELAH DIPAPARKAN AIR LINDI
Elisa Nurma Riana 1 , Ayda T. Yusuf 2
Institut Teknologi Sumatera 1
Institut Teknologi Bandung 2
elisa.riana@bi.itera.ac.id 1

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan logam berat dan konsentrasi Vitamin  E  testis  tikus  Wistar  jantan  yang  dipaparkan  air  lindi  TPAs  Sarimukti. Desain penelitian yang digunakan adalah rancangan acak kelompok. Tikus dibagi menjadi  empat  perlakuan  yaitu:  aquabidestilata,  air  lindi  63%,  CdCl 2 ,  H 2 O 2. Pemberian  zat  uji  dilakukan  secara  intraperitoneal  selama  14  hari.  Konsentrasi logam  berat  diukur  menggunakan  metode Atomic  Absorption  Spectrometry (AAS),  sedangkan  konsentrasi  Vitamin  E  diukur  dengan  menggunakan  HPLC. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  logam  berat  Zn  jaringan  testis yang  dipaparkan  air  lindi  63%  adalah  sebesar  0,6  ppm,  aquabidestilata  0,5  ppm, sedangkan  enam  logam  yang  lain  konsentrasinya  0  ppm.  Hasil  pengukuran Vitamin  E  pada  perlakuan  air  lindi  63%  sangat  rendah  yaitu  1,06  ppm  jika dibandingkan  dengan  perlakuan  aquabidestilata  7,92  ppm,  CdCl 2 dan  H 2 O 2 masing-masing  sebesar  0,53  ppm  dan  0,85  ppm.  Simpulan,  air  lindi  TPA Sarimukti  dapat  menyebabkan  peningkatan  ROS  yang  diindikasikan  dengan biomarker  penurunan  konsentrasi  Vitamin  E  pada  testis,  sehingga  menyebabkan kerusakan testis.
Kata Kunci : Air lindi, Logam berat, Testis Tikus Wistar, Vitamin E

## ABSTRACT
This study aims to determine the heavy metal content and vitamin E concentration of  male  Wistar  rat  testes  exposed  to  Sarimukti  landfill  leachate.  The  research design  used  was  a  randomized  block  design.  Rats  were  divided  into  four treatments,  namely:  aquabidestylates,  63%  leachate,  CdCl2,  H2O2.  The  test substance  was  administered  intraperitoneally  for  14  days.  Heavy  metal concentrations  were  measured  using  the  Atomic  Absorption  Spectrometry  (AAS) method, while Vitamin E concentrations were measured using HPLC. The results showed  that  the  concentration  of  heavy  metal  Zn  in  testicular  tissue  exposed  to 63%  leachate  was  0.6  ppm,  aquabidestylates  was  0.5  ppm,  while  the  other  six metals had a concentration of 0 ppm. The measurement results of Vitamin E in the 63%  leachate  treatment  were  meager,  namely,  1.06  ppm  when  compared  to  the aquabidestyl  treatment  of  7.92  ppm,  CdCl2  and  H2O2  were  0.53  ppm  and  0.85 ppm,  respectively.  In  conclusion,  Sarimukti  landfill  leachate  can  cause  an increase  in  ROS,  which  is  indicated  by  a  biomarker  of  decreased  Vitamin  E concentration in the testes, causing testicular damage.
Keywords : Leachate, Heavy Metals, Wistar Rat Testicles, Vitamin E

## PENDAHULUAN
Air  lindi  TPAs  Sarimukti  terbukti  dapat  menyebabkan  kerusakan  testis, abnormalitas morfologi spermatozoa dan kerusakan DNA sperma tikus. Penyebab abnormalitas  tersebut  adalah  komponen  yang  ada  di  dalam  air  lindi.  Salah  satu senyawa  yang  dapat  menyebabkan  gangguan  reproduksi  yang  ada  di  air  lindi adalah logam berat (Yakubu & Omar, 2020). Logam berat dapat merusak struktur testis, gangguan hormonal dan gangguan spermatogenesis sehingga menghasilkan spermatozoa  abnormal  (He  et  al.,  2020).  Logam  berat  dapat  terakumulasi  pada jaringan  maupun  organ  yang  memiliki  aktivitas  tinggi,  kebutuhan  oksigen  yang tinggi  dan  juga  nutrisi  yang  tinggi  (Nesta  et  al.,  2016).  Testis  merupakan  organ yang  diduga  menjadi  tempat  akumulasi  logam  berat  karena  pada  testis  terjadi aktivitas yang tinggi, yaitu spermatogenesis.
Konsentrasi  logam  berat  yang  tinggi  menyebabkan  peningkatan  ROS sehingga  terjadi  gangguan  aktivitas  enzim,  peroksida  lipid,  bereaksi  dengan protein ataupun DNA (Fu & Xi, 2019). Hal tersebut menyebabkan stres oksidatif yang  menghasilkan  kerusakan  seluler  maupun  jaringan  pada  organ  dan  beberapa penyakit  kronis  (Marreiro  et  al.,  2017).  Penelitian  yang  sudah  dilakukan menunjukkan bahwa air lindi TPAs Sarimukti mengandung beberapa logam berat antara  lain  As,  Zn,  Pb,  Cu,  Cd,  Fe  dan  Ag.  Logam  berat  tersebut  diduga meningkat  pada  testis,  sehingga  menyebabkan  abnormalitas  organ  reproduksi jantan melalui peningkatan ROS pada testis.
Oksidan  dan  antioksidan  di  dalam  tubuh  harus  seimbang.  Salah  satu antioksidan  non  enzimatik  yang  berperan  menghambat  efek  dari  ROS  adalah Vitamin  E  (Anbarkeh  et  al.,  2019).  Vitamin  E  sebagai  scavenger  ROS  banyak ditemukan pada jaringan yang banyak mengandung lemak dan pada membran sel (Fang,  2021).  Hal  tersebut  dikarenakan  Vitamin  E  merupakan  antioksidan  yang berfungsi  menangkap  radikal  peroksil  dan  dan  menghambat  peroksidasi  lipid (Mumtaz et al., 2020).
Salah  satu  organ  yang  banyak  mengandung  lemak  adalah  testis.  Hal  ini dikarenakan  struktur  membran  plasma  sperma  dalam  testis  yang  mengandung lemak  tak  jenuh  ganda  yang  mengandung  ikatan  rangkap  yang  rentan  terhadap serangan  radikal bebas  peroksidasi  lipid  (Gandhi  et  al.,  2017). Peningkatan ROS dapat menyebabkan ketidakseimbangan antara oksidan dan antioksidan, sehingga level  Vitamin  E  pada  testis  berubah.  Perubahan  level  Vitamin  E  yang  menurun pada testis mengindikasikan terjadinya stres oksidatif akibat peningkatan ROS. Berdasarkan  uraian  sebelumnya,  maka  penelitian  ini  dirancang  untuk mengetahui  kandungan  logam  berat  pada  testis  tikus  Wistar  jantan  yang dipaparkan  air  lindi  TPAs  Sarimukti,  serta  mengetahui  konsentrasi  Vitamin  E testis  tikus  Wistar  yang  dipaparkan  terhadap  air  lindi  TPAs  Sarimukti. Diharapkan,  dengan  ditemukannya  salah  satu  mekanisme  peningkatan  logam berat dan penurunan konsentrasi Vitamin E testis akan memberikan pengetahuan baru mengenai cara pencegahan dampak paparan air lindi terhadap kesehatan.

## METODE PENELITIAN Sampling Air Lindi
Air lindi yang digunakan dalam penelitian ini didapat dari TPAs Sarimukti, Desa  Cipatat,  Kabupaten  Bandung  barat.  TPAs  Sarimukti  terletak  pada  LS 6 o 48’03’’  BT  107 o 20’55’’  dengan  luas  area  1000  m  x  459  m.  TPAs  Sarimukti berlokasi 45 km sebelah barat kota Bandung dan terletak pada ketinggian 834 m dpl.  Pengambilan  air  lindi  dilakukan  pada  kolam  utama  lindi  yang  merupakan kolam  tampungan  lindi  yang  secara  langsung  terhubung  dengan  tumpukan sampah  TPAs  sarimukti.  Air  lindi  hasil  pencuplikan  dibawa  ke  laboratorium Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, ITB dan disimpan pada suhu 4 o C.
Gambar 1. Lokasi Pengambilan Air Lindi

## Pemeliharaan Hewan Uji
Penelitan ini menggunakan hewan uji tikus jantan galur Wistar yang didapat dari  PT.  Biofarma.  Tikus  diaklimatisasi,  dipelihara  dan  dikembangbiakkan  di rumah  hewan  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi  Hayati,  Institut  Teknologi  Bandung. Tikus  Jantan  dewasa  umur  10  minggu  dipisahkan  dan  siap  untuk  dijadikan sebagai hewan uji. Tikus jantan ditimbang, tikus dengan berat badan kurang lebih 250  gram  yang  digunakan  sebagai  hewan  uji.  Perlakuan  hewan  uji  dilakukan dengan  memberikan  zat  uji  secara  intraperitoneal  (IP).  Hewan  uji  yang  sudah selesai diberi perlakuan kemudian dibunuh dengan menggunakan CO 2 .

## Bahan Uji
Bahan  uji  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  terdiri  dari  air  lindi, aquabidestilata, CdCl 2 dan H 2 O 2 . Konsentrasi  air lindi  yang digunakan pada saat pendedahan  adalah  63%.  CdCl 2 dan  H 2 O 2 didapatkan  dari  gudang  bahan  kimia SITH  ITB.  Aquabidestilata  didapat  dari  PT.  Sakura,  Indonesia.  Penentuan  dosis CdCl 2 berdasarkan literatur dan penelitian sebelumnya yaitu 1 mg/kg berat badan tikus. Dosis H 2 O 2 yang diberikan adalah 1 Mm.

## Desain Penelitian
Rancangan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  rancangan  acak kelompok (RAK). Hewan uji dibagi menjadi empat kelompok perlakuan yaitu: air lindi  63%,  akuabides  sebagai  kontrol  pelarut,  CdCl 2 sebagai  kontrol  positif  air lindi dan H 2 O 2 sebagai kontrol positif peningkatan logam berat. Setiap kelompok memerlukan  pengulangan  sebanyak  enam  kali,  sehingga  didapatkan  jumlah  total
hewan  uji  yang  diperlukan  adalah  24  ekor.  Hewan  uji  diberikan  pendedahan dengan  zat  uji  selama  14  hari.  Pada  hari  ke-15,  hewan  uji  dibunuh  untuk dilakukan pembedahan dan isolasi jaringan testis. Komponen  logam berat diukur menggunakan  metode Atomic  Absorption  Spectroscopy (AAS),  konsentrasi Vitamin  E  testis  tikus  dengan menggunanakan  Hight  Performance  Liquid Chromatography ( HPLC).
Isolasi dan Cryopreservation Testis Tikus
Tikus dieuthanasia pada hari ke-15, dibedah pada bagian abdominal, bagian skrotum dibuka, testis diisolasi dan dipindahkan ke dalam cawan petri yang berisi PBS  pH  7,8  steril  yang  bersuhu  4 o C.  Isolasi  testis  dilakukan  dengan  cara  testis kanan  dan  kiri  diisolasi  secara  terpisah  dan  dibersihkan  dari  jaringan-jaringan lemak  maupun  jaringan  ikat.  Testis  dimasukkan  ke  dalam  cryotube  yang berukuran  1,8  mL,  ditimbang  sehingga  diketahui  berat  masing-masing  testis. Cryotube yang berisi testis tersebut kemudian dimasukkan ke dalam nitrogen cair dengan suhu -196 o C dan disimpan pada suhu -20 o C.

## Pengukuran Konsentrasi Logam Berat pada Testis
Sampel  testis  yang  diuji  adalah  testis  sebelah  kiri.  Sampel  dikeringkan dengan cara dioven pada suhu 70-80oC selama 24 jam. Sampel tersebut ditimbang dan digerus. Sampel yang sudah halus dimasukkan ke dalam erlenmeyer 100 mL. Sampel kemudian ditambahkan HNO 3 sebanyak 10 mL dan HCl 1 mL, kemudian dipanaskan  dengan  menggunakan  hot  plate  dengan  suhu  80 o C  selama  2  jam, didiamkan  selama  10  menit,  disaring  menggunakan  kertas  saring.  Homogenat ditambah  aquabidestilata  sampai  volume  mencapai  50  mL.  Sampel  diuji  dengan menggunakan Atomic  Absorption  Spectroscopy (AAS)  di  Laboratorium  Pusat Sumber Daya Mineral, Batubara dan Panas Bumi, Bandung, Jawa Barat.

## Pengukuran Konsentrasi Vitamin E pada Testis
Preparasi  sampel  untuk  pengujian  Vitamin  E  dengan  cara  sampel  yang diawetkan  dengan  metode cryopreservation .  Ekstraksi  Jaringan  dilakukan kemudian  dilakukan  saponifikasi.  Saponifikasi  dilakukan  dengan  cara  1,5  mL homogenat  jaringan  atau  suspensi  dari  fraksi  subseluler  (supernatan)  ditambah dengan  1  mL  etanol  absolut  dan  0,5  mL  asam  askorbik  25  mL.  Homogenat tersebut  kemudian  dipreinkubasi  pada  suhu  70 o C  selama  5  menit  dalam  tabung kaca.  KOH  ditambahkan  pada  campuran  tersebut  dan  inkubasi  dilanjutkan  pada suhu 70 o C dan dilakukan selama 30 menit.
Setelah inkubasi  dengan  suhu tinggi,  tabung kemudian didinginkan  dengan menempatkan  pada  tempat  berisi  es  dan  ditambahkan  4  mL  heksana  murni. Heksana murni ini ditambahkan untuk mengekstrak sampel yang menempel pada dasar  labu.  Setelah  itu  tabung  divortex  selama  minimal  1  menit  dan  kemudian disentrifugasi.  Kemudian  dilakukan  pemurnian  heksana  dan  sampel  siap dilakukan pengujian HPLC.

## HASIL PENELITIAN
Kandungan  Logam  Berat  Testis  Tikus  yang  Dipaparkan  Air  Lindi  TPAs Sarimukti
Hasil penelitian konsentrasi logam berat jaringan testis tikus yang diinduksi air lindi TPAs Sarimukti dapat dilihat pada tabel 1. Hasil penelitian menunjukkan bahwa  perlakuan  air  lindi  TPAs  Sarimukti  63%  menyebabkan  perubahan konsentrasi  logam  berat  Zinc  (Zn)  meskipun  peningkatannya  tidak  jauh  dari kontrol perlakuan. Pada perlakuan air lindi TPAs Sarimukti, konsentrasi Zn pada jaringan testis adalah 0,6 ppm. Hal tersebut menunjukkan konsentrasi  yang lebih tinggi  dibandingkan  kontrol  perlakuan  (aquabidestilata)  yaitu  0,5  ppm  dan  lebih rendah  dari  kontrol  positif  H 2 O 2 dan  CdCl 2 yaitu  4,6  ppm  dan  6,7  ppm. Sedangkan  untuk  keenam  logam  yang  lain  yaitu:  Cu,  Pb,  Ag,  As,  Cd  dan  Fe konsentrasinya 0 ppm.
Tabel 1. Konsentrasi Logam Berat pada Testis Tikus Wistar
Perlakuan Konsentrasi Logam Berat (ppm) Cu Pb Zn Ag As Cd Fe Aquabides 0 0 0,5 0 0 0 0 Air lindi 63% 0 0 0,6 0 0 0 0 H 2 O 2 0 0 4,6
0 0 0,1 0 CdCl 2 0 0 6,7 0 0 0 0

## Kandungan  Vitamin  E  Testis  Tikus  yang  Dipaparkan  Air  Lindi  TPAs Sarimukti
Hasil penelitian mengenai kandungan vitamin E testis tikus dipaparkan pada Gambar  IV.3.  Konsentrasi  vitamin  E  testis  pada  kelompok  yang  dipaparkan  air lindi  TPAs  Sarimukti  63%  lebih  rendah  dibanding  kelompok  perlakuan aquabidestilata.  Konsentrasi  Vitamin  E  testis  tikus  yang  didedahkan  dengan  air lindi  yaitu  1,06  ppm,  sedangkan  kelompok  kontrol  pelarut  yang  didedahkan aquabidestilata  yaitu  7,92  ppm.  Konsentrasi  tersebut  masih  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  positif  yaitu  CdCl 2 dan  H 2 O 2 yang konsentrasi masing-masing adalah 0,53 ppm dan 0,85 ppm.
Gambar 2. Konsentrasi Vitamin E pada Testis Tikus Wistar
0 2 4 6 8 10 Aquabides Air Lindi 63% CdCl2 H2O2 K o ns ent ra si ( m g /L ) Perlakuan
Penurunan  konsentrasi  vitamin  E  pada  testis  tikus  Wistar  yang  dipaparkan air  lindi  TPAs  Sarimukti  63%  sebesar  86,6  %  dibandingkan  dengan  perlakuan akuabidestilata.  Persentase  penurunan  vitamin  E  pada  perlakuan  tersebut  tidak jauh  berbeda  dengan  kontrol  positif  perlakuan  dengan  CdCl 2 dan  H 2 O 2 yaitu 93,3% dan 89,5% (gambar 3).
Gambar 3. Persentase Penurunan Konsentrasi Vitamin E pada Testis Tikus

## PEMBAHASAN
Konsentrasi Zn di testis yang lebih tinggi diduga akibat dari konsentrasi Zn yang tinggi pada air lindi TPAs Sarimukti. Sedangkan konsentrasi keenam logam yang  tidak  terdeteksi  pada  testis  diduga  disebabkan  oleh  kandungan  keenam logam  tersebut  di  air  lindi  yang  rendah  (mendekati  0)  sehingga  tidak  terjadi akumulasi  di  testis  karena  pada  proses  biotransformasi  di  hati,  keenam  logam tersebut dapat diekskresikan keluar tubuh.
Hasil  penelitian  ini  berbeda  dengan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh peneliti  lain.  Beberapa  penelitian  menjelaskan  bahwa  paparan  zat  dari  tempat pembuangan sampah menyebabkan akumulasi logam berat Hg, Fe, Zn, Ni, Cd, As pada testis (Oyelowo et al., 2020). Logam berat dapat memberikan efek gangguan reproduksi  pada  tikus  jantan  dengan  mengganggu  hormonal  hipotalamus- hipofisis-testis  (Adedara  et  al.,  2019). Paparan  air  lindi  menyebabkan  penurunan hormon reproduksi seperti FSH, LH dan testosteron (Wasiu & Abdulfatai, 2019). Efek toksik logam berat yang terlihat antara lain kelainan morfologi spermatozoa dan  penyempitan  lumen  tubulus  seminiferus  akibat  penebalan  epitel  tubulus seminiferus (Ademola et al., 2020).
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  berbeda  dengan  penelitian  lain  disebabkan oleh  beberapa  faktor.  Faktor  tersebut  antara  lain:  kondisi  iklim,  cuaca, pengelolaan sampah tiap individu,  jumlah dan jenis sampah  yang dibuang, umur TPA,  kondisi  geologi  (Seibert  et  al.,  2019;  Vaccari  et  al.,  2019),  teknologi pengolahan  limbah  (Luo  et  al.,  2019)  dan  waktu  pengambilan  sampel (berdasarkan  musim)  (Xaypanya  et  al.,  2018).  Konsentrasi  logam  berat  TPAs Sarimukti  yang  rendah  sehingga  tidak  terakumulasi  pada  testis  disebabkan  oleh beberapa faktor antara lain jenis sampah yang ada di TPAs Sarimukti merupakan sampah  rumah  tangga  (bukan  sampah  industri).  Selain  itu  pengambilan  sampel ketika  musim  kemarau  juga  menjadi  faktor  penting  karena  pada  penelitian  lain menjelaskan  pada  saat  musim  kemarau  kandungan  logam  berat  air  lindi  rendah
0 20 40 60 80 100 P ro sent a se P enurun a n Vita m in E ( %) Perlakuan
disebabkan  oleh  tidak  adanya  pergerakan  molekul-molekul  di  dalam  air (Xaypanya et al., 2018).
Penurunan  konsentrasi  vitamin  E  testis  Tikus  Wistar  yang  dipaparkan  air lindi  menunjukkan  bahwa  air  lindi  TPAs  Sarimukti  dapat  menyebabkan ketidakseimbangan  antioksidan  non  enzimatik  di  dalam  tubuh.  Meskipun Penurunan konsentrasi vitamin E merupakan salah satu marka stres oksidatif yang mengindikasikan  adanya  peningkatan  level  ROS  pada  tingkat  sel,  jaringan, maupun  organ.  Berdasarkan  kedua  data  tersebut  dapat  diketahui  bahwa  air  lindi dapat menyebabkan penurunan vitamin E pada testis tikus Wistar akibat senyawa- senyawa  yang  bersifat  toksik  yang  terkandung  di  dalam  air  lindi.  Hal  tersebut mengindikasikan  bahwa  senyawa-senyawa  toksik  tersebut  menyebabkan penurunan  konsentrasi  vitamin  E  pada  testis  akibat  adanya  peningkatan pembentukan  ROS  sehingga  menyebabkan  stres  oksidatif  pada  testis.  Sperma sangat  rentan  terhadap  stres  oksidatif  akibat  kandungan  sitoplasma  yang  sedikit dan lipid yang tinggi (Asadi et al., 2017). Vitamin E merupakan antioksidan non enzimatik yang larut dalam lemak yang berperan dalam menghambat peroksidasi lipid sehingga menjaga stabilitas membran sel dan lipoprotein (Fang et al., 2021; Mumtaz et al., 2020). Apabila keseimbangan vitamin E terganggu maka membran sel akan mengalami kerusakan (Saito et al., 2020).
Persentase  penurunan  konsentrasi  vitamin  E  testis  tikus  yang  diinduksi  air lindi  TPAs  Sarimukti  63%  dibandingkan  dengan  perlakuan  kontrol  pelarut (aquabidestilata). Penurunan konsentrasi vitamin E testis pada perlakuan air lindi 63% sebesar 86,6 % jika dibandingkan dengan perlakuan  akuabides. Paparan  air lindi menyebabkan ketidakseimbangan pro-oksidan/antioksidan sehingga meningkatkan  radikal  pada  testis  (Yakubu  &  Omar,  2020).  Peningkatan  ROS seperti  lipid  peroksida  dan  gangguan  level  antioksidan  menyebabkan  penurunan kualitas  sperma  dan  disfungsi  tesis  (Asadi  et  al.,  2017).  Dalam  hal  ini, peningkatan  radikal  lipid  peroksil  menyebabkan  vitamin  E  (  -tokoferol)  dalam jumlah  yang  sedikit  tidak  mampu  untuk  menetralisir  radikal  bebas  sehingga menyebabkan kerusakan membran sel (Saito et al., 2020).
Air  lindi  sangat  berbahaya  terhadap  membran  sel  di  testis  jika  melebihi batas  normal.  Efek  biotoksin  dari  komponen  yang  ada  di  air  lindi  dapat memberikan  efek  secara  individual,  sinergis,  antagonis  atau  interferensi  kolektif pada  membran  sel  normal  testis  (Akintunde  et  al.,  2013).  Toksikan  tersebut melewati  sirkulasi  darah  sistemik  dan  berubah  menjadi  oksidan  (seperti  Pb2+, Cr3+,  Cu2+  dan  Fe3+).  Bentuk  teroksidasi  ini  bercampur  dan  berikatan  dengan biomolekul  di  testis,  seperti polyunsaturated  fatty  acids (PUFA),  protein  dan enzim.  Kerusakan  membran  sel  disebabkan  oleh  gangguan  enzim  ATPase. ATPase ini merupakan enzim yang berperan dalam transport ion yang berada pada membran  sel  dan  juga  berpengaruh  terhadap  level  senyawa  yang  mengandung gugus thiol (Azevedo et al., 2016).
Interaksi  antara  ROS  akibat  peningkatan  logam  berat  Zn  dengan  membran sel menyebabkan disfungsi dari ATPase. Apabila terjadi gangguan pada enzim ini maka dapat merusak aktivitas enzim dan juga dapat merusak asam amino atau pun protein  pada  bagian  hidrofobik  membran  sel  (Jomova  &  Valko,  2011).  Dampak selanjutnya  adalah  terjadi  kerusakan  pada  membran  sel  di  jaringan  testis, inaktifasi  reseptor  di  membran  sel,  inaktivasi  enzim  dan  peningkatan
permeabilitas  jaringan  sehingga  menyebabkan  gangguan  spermatogenesis (Adedara et al., 2015).

## SIMPULAN
Air lindi TPAs Sarimukti menyebabkan perubahan konsentrasi logam berat Zn  pada  testis  tikus  Wistar,  sedangkan  pada  keenam  logam  berat  yaitu:  As,  Cu, Cd,  Pb,  Fe  dan  Ag  konsentrasinya  0.  Hal  ini  disebabkan  oleh  beberapa  faktor yaitu  konsentrasi  logam  berat  di  air  lindi  yang  sangat  rendah  dan  juga  adanya biotransformasi  di  hati.  Air  lindi  TPA  Sarimukti  diduga  dapat  menyebabkan peningkatan  ROS  yang  diindikasikan  dengan  biomarker  penurunan  konsentrasi Vitamin  E  pada  testis  yang  menyebabkan  kerusakan  membran  sel  sehingga berlanjut dengan kerusakan sel dan jaringan testis.

## DAFTAR PUSTAKA
Adedara, I. A., Abiola, M. A., Adegbosin, A. N., Odunewu, A. A., & Farombi, E. O.  (2019).  Impact  of  Binary  Waterborne  Mixtures  of  Nickel  and  Zinc  on Hypothalamic-Pituitary-Testicular  Axis  in  Rats. Chemosphere , 237 ,  1-10. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2019.124501
Adedara, I. A., Awogbindin, I. O., Adesina, A. A., Oyebiyi, O. O., Lawal, T. A., &  Farombi,  E.  O.  (2015).  Municipal  Landfill  Leachate-Induced  Testicular Oxidative  Damage  is  Associated  with  Biometal  Accumulation  and Endocrine  Disruption  in  Rats. Archives  of  Environmental  Contamination and Toxicology , 68 (1), 74–82. https://doi.org/10.1007/s00244-014-0075-x Ademola,  O.  J.,  Alimba,  C.  G.,  &  Bakare,  A.  A.  (2020).  Reproductive  Toxicity Assessment  of  Olusosun  Municipal  Landfill  Leachate  in Mus  musculus using Abnormal Sperm Morphology and Dominant Lethal Mutation Assays. Environmental Health and Toxicology , 35 (2). 1-10 https://doi.org/10.5620/eaht.e2020010 Akintunde, J. K., Oboh, G., & Akindahunsi, A. A. (2013). Testicular Membrane Lipid  Damage  by  Complex  Mixture  of  Leachate  from  Municipal  Battery Recycling  Site  as  Indication  of  Idiopathic  Male  Infertility  in  Rat. Interdisciplinary  Toxicology , 6 (4),  192–197.  https://doi.org/10.2478/intox- 2013-0028
Anbarkeh,  F.  R.,  Nikravesh,  M.  R.,  Jalali,  M.,  Sadeghnia,  H.  R.,  &  Sargazi,  Z. (2019).  The  Effect  of  Diazinon  on  Cell  Proliferation  and  Apoptosis  in Testicular  Tissue  of  Rats  and  the  Protective  Effect  of  Vitamin  E. International  Journal  of  Fertility  and  Sterility , 13 (2),  154–160. https://doi.org/10.22074/ijfs.2019.5612
Asadi,  N.,  Bahmani,  M.,  Kheradmand,  A.,  &  Rafieian-Kopaei,  M.  (2017).  The Impact  of  Oxidative  Stress  on  Testicular  Function  and  the  Role  of Antioxidants in Improving It: A Review. Journal of Clinical and Diagnostic Research , 11 (5), 1–5. https://doi.org/10.7860/JCDR/2017/23927.9886
Azevedo, M. M., Guimarães-Soares, L., Pascoal, C., & Cássio, F. (2016). Copper and  Zinc  Affect  the  Activity  of  Plasma  Membrane  H+-Atpase  and  Thiol Content  in  Aquatic  Fungi. Microbiology  (United  Kingdom) , 162 (5),  740– 747. https://doi.org/10.1099/mic.0.000262
Fang,  J.,  Xie,  S.,  Chen,  Z.,  Wang,  F.,  Chen,  K.,  Zuo,  Z.,  Cui,  H.,  Guo,  H.,
Ouyang,  P.,  Chen,  Z.,  Huang,  C.,  Liu,  W.,  &  Geng,  Y.  (2021).  Protective
Effect  of  Vitamin  E  on  Cadmium-Induced  Renal  Oxidative  Damage  and Apoptosis in Rats. Biological Trace Element Research . https://doi.org/10.1007/s12011-021-02606-4 Fu,  Z.,  &  Xi,  S.  (2019).  The  Effects  of  Heavy  Metals  on  Human  Metabolism. Toxicology Mechanisms and Methods, 30 (3) 167–176. https://doi.org/10.1080/15376516.2019.1701594 Gandhi, J., Hernandez, R. J., Chen, A., Smith, N. L., Sheynkin, Y. R., Joshi, G., & Khan,  S.  A.  (2017).  Impaired  Hypothalamic-Pituitary-Testicular  Axis Activity, Spermatogenesis, and Sperm Function Promote Infertility in Males with Lead Poisoning. Zygote, 25 (2), 103-110. https://doi.org/10.1017/S0967199417000028 He, Y., Zou, L., Luo, W., Yi, Z., Yang, P., Yu, S., Liu, N., Ji, J., Guo, Y., Liu, P., He,  X.,  Lv,  Z.,  &  Huang,  S.  (2020).  Heavy  Metal  Exposure,  Oxidative Stress and Semen Quality: Exploring Associations and Mediation Effects in Reproductive-Aged Men. Chemosphere , 244 , 1-8. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2019.125498 Jomova,  K.,  &  Valko,  M.  (2011).  Advances  In  Metal-Induced  Oxidative  Stress and Human Disease. Toxicology , 283 (2–3), 65–87. https://doi.org/10.1016/j.tox.2011.03.001
Luo,  H.,  Zeng,  Y.,  Cheng,  Y.,  He,  D.,  &  Pan,  X.  (2019).  Recent  Advances  in Municipal  Landfill  Leachate:  A  Review  Focusing  on  Its  Characteristics, Treatment,  and  Toxicity  Assessment. Science  of  the  Total  Environment, 1- 105. https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2019.135468
Marreiro,  D.,  Cruz,  K.,  Morais,  J.,  Beserra,  J.,  Severo,  J.,  &  de  Oliveira,  A. (2017). Zinc  and  Oxidative  Stress :  Current  Mechanisms , 6 (2).  1-9. https://doi.org/10.3390/antiox6020024
Mumtaz,  S.,  Ali,  S.,  Khan,  R.,  Shakir,  H.  A.,  &  Tahir,  H.  M.,  Mumtaz,  S., Andleeb,  S.  (2020). T herapeutic  Role  of  Garlic  and  Vitamins  C  and  E Against  Toxicity  Induced  by  Lead  on  Various  Organs. Environmental Science and Pollution Research. https://doi.org/10.1007/s11356-020-07654- 2
Nesta, B. S., Shouta, M. M. N., Yoshinori, I., Osei, A., Elvis, B., Hazuki, M., & Mayumi,  I.  (2016).  Heavy  Metals  and  Metalloid  Accumulation  in  Livers and  Kidneys  of  Wild  Rats  Around  Gold-Mining  Communities  in  Tarkwa, Ghana. Journal  of  Environmental  Chemistry  and  Ecotoxicology , 8 (7),  58– 68. https://doi.org/10.5897/jece2016.0374
Oyelowo,  O.  T.,  Omamogho,  O.  E.,  &  Ezenwajiaku,  I.  F.  (2020).  Heavy  Metals
Correlate  with  Cellular  Adenosine  Triphosphate  and  Fructose  Levels  in Municipal Dumpsite Exposure. Biokemistri , 32 (1), 1–10. http://ojs.klobexjournals.com/index.php/bkr/article/view/459 Saito,  H.,  Hara,  K.,  Kitajima,  S.,  &  Tanemura,  K.  (2020). Effect  of  Vitamin  E Deficiency  on  Spermatogenesis  in  Mice  and  Its  Similarity  to  Aging. Reproductive Toxicology , 1-36 .
https://doi.org/10.1016/j.reprotox.2020.10.003
Seibert,  D.,  Quesada,  H.,  Bergamasco,  R.,  Borba,  F.  H.,  &  Pellenz,  L.  (2019). Presence of Endocrine Disrupting Chemicals in Sanitary Landfill Leachate, Its  Treatment  and  Degradation  by  Fenton  Based  Processes:  A  review.
Process Safety and Environmental Protection , 131 , 255–267.
https://doi.org/10.1016/j.psep.2019.09.022 Vaccari,  M.,  Tudor,  T.,  &  Vinti,  G.  (2019).  Characteristics  of  Leachate  from
Landfills and Dumpsites in Asia, Africa and Latin America : An Overview. Waste Management , 95 , 416–431.
https://doi.org/10.1016/j.wasman.2019.06.032
Wasiu,  A.  O.,  &  Abdulfatai,  A.  (2019).  Toxic  Effects  of  Paraquat  Dichloride Leachate  on  Testes  and  Sperm  Parameters  of  Male  Wistar  Rats. International  Journal  of  Anatomy  and  Research , 7 (1.3),  6274–6279. https://doi.org/10.16965/ijar.2018.457
Xaypanya, P., Takemura, J., Chiemchaisri,  C., Seingheng, H., & Tanchuling, M. A.  N.  (2018). C haracterization  of  Landfill  Leachates  and  Sediments  in Major Cities of Indochina Peninsular Countries — Heavy Metal Partitioning in Municipal Solid Waste Leachate. Environments, 5 (6), 1-24. https://doi.org/10.3390/environments5060065
Yakubu,  M.  T.,  &  Omar,  S.  A.  (2020).  Impact  of  Groundwater  Samples  and Leachates  from  Gbagede  Dumpsite,  Amoyo,  Kwara  State,  Nigeria,  on Testes  and  Prostate  of  Male  Wistar  Rats:  A  Biochemical  And  Histological Study. Andrologia , 52 (11), 1–15. https://doi.org/10.1111/and.13801