p-ISSN : 2442-6032 e-ISSN :  2598-9979
DOI : 10.35311/jmpi.v9i2.414
Standarisasi  Ekstrak  Rimpang  Wundu  Watu  ( Alpinia  monopleura )  dan Aktivitasnya sebagai Antiinflamasi Secara In Vitro
Musdalipah * ,  Agung  Wibawa  Mahatva  Yodha,  Muh.  Azdar  Setiawan,  Selfyana  Austin  Tee, Reymon, Randa Wulaisfan, Muh. Arnas, Lisa Wulansari Siregar, Eny Nurhikma, Yulianti Fauziah Politeknik Bina Husada Kendari

## ABSTRAK
Tanaman Alpinia, khususnya Alpinia monopleura , merupakan tanaman endemik yang dapat ditemukan dengan mudah di Sulawesi Tenggara, sebarannya luas dan melimpah. Tanaman ini merupakan tanaman endemik dan dikenal dengan nama wundu watu.  Secara empiris, rimpang  wundu  watu  digunakan  untuk  mengurangi  pegal-pegal  dan  sebagai  bumbu masakan. Studi pendahuluan pada minyak atsiri daun dan buah wundu watu menunjukkan sifat antibakteri, antioksidan dan antiinflamasi. Komposisi dan studi farmakologi tanaman ini  belum  diketahui  sepenuhnya.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan  standarisasi  untuk menjamin  mutu  dan  keamanan  esktrak  dan  khasiatnya  sebagai  antiinflamasi.  Tujuan penelitian  ialah  melakukan  standarisasi  ekstrak  wundu  watu  ( Alpinia  monopleura )  dengan parameter spesifik dan non spesifik sesuai persyaratan Farmakope Indonesia serta aktivitas antiinflamasinya  terhadap  penghambatan  denaturasi  protein.  Jenis  penelitian  ialah eksperimen.  Rimpang  wundu  watu  di  ekstraksi  dengan  pelarut  metanol  menggunakan metode  maserasi.  Hasil  penelitian  menunjukkan  standarisasi  dengan  parameter  spesifik diperoleh yaitu berbentuk ekstrak kental, berwarna coklat, dan berbau khas, senyawa larut air yaitu 6,7%, senyawa larut metanol yaitu 10,35%. Kandungan metabolit sekunder positif mengandung senyawa alkaloid, flavanoid, saponin, tanin dan steroid. Pada parameter non spesifik diperoleh susut pengeringan 68,30%, kadar air 23%, kadar abu  total 11,94%, kadar abu tidak larut asam 0,327% dan cemaran logam Pb 0,00076 mg/L, logam Cd 0,00052 mg/L, dan logam Hg 0,00062 mg/L. Ekstrak etanol rimpang Alpinia menopleura memiliki aktivitas antiinflamasi dengan nilai IC 50 sebesar 8.47 mg/L dan natrium diklofenak (kontrol) dengan nilai  IC 50 sebesar  8,46  mg/L.  Berdasarkan  data  tersebut  dapat  disimpulkan  standarisasi ekstrak rimpang wundu watu secara spesifik dan non spesifik memenuhi persyaratan sesuai Farmakope Herbal Indonesia serta memiliki khasiat sebagai antiinflamasi.
Kata  Kunci: Parameter  Spesifik,  Parameter  Non  Spesifik,  Denaturasi  Protein, Standarisasi, Zingiberaceae

## ABSTRACT
Alpinia plants, especially Alpinia monopleura , are endemic plants that can be found easily in Southeast Sulawesi, with a wide and abundant distribution. This plant is an endemic plant and is known as wundu watu. Empirically, the rhizome of wundu watu is used to reduce aches and pains and as a cooking  spice. Preliminary studies  on the essential oil of wundu watu leaves and fruits showed antibacterial, antioxidant and anti-inflammatory properties. The  composition  and  pharmacological  studies  of  this  plant  are  not  yet  fully  known. Therefore, standardization is necessary to ensure the quality and safety of the extract and its efficacy as an anti-inflammatory. The purpose of the study was to standardize the extract of wundu watu ( Alpinia monopleura ) with specific and non-specific parameters according to the requirements  of  the  Indonesian  Pharmacopoeia  and  its  anti-inflammatory  activity  against protein denaturation inhibition. The type of research is experimental. Wundu watu rhizome was  extracted  with  methanol  solvent  using  maceration  method.  The  results  showed standardization with specific parameters obtained, namely in the form of thick extract, brown in  color,  and  distinctive  odor,  water  soluble  compounds  are  6.7%,  methanol  soluble compounds are 10.35%. The content of secondary metabolites positively contains alkaloid, flavanoid, saponin, tannin  and  steroid  compounds.  In  non-specific  parameters,  the  drying shrinkage is 68.30%, moisture content is 23%, total ash content is 11.94%, acid insoluble ash content is 0.327% and Pb metal contamination is 0.00076 mg/L, Cd metal is 0.00052 mg/L, and Hg  metal  is  0.00062  mg/L.  ethanol  extract  of Alpinia  menopleura rhizome  has  anti- inflammatory activity with an IC 50 of 8. 47 mg/L and diclofenac sodium (control) with an IC 50 of 8.46 mg/L. based on these data it can be concluded that the standardization of wundu watu rhizome  extract  specifically  and  non-specifically  meets  the  requirements  according  to  the Indonesian pharmacopoeia and has anti-inflammatory properties.
Keywords: Specific  Parameters,  Non-Specific  Parameters,  Protein  Denaturation, Standardization, Zingiberaceae
Sitasi: Musdalipah, Yodha, A. W. M., Setiawan, A., Tee, A. A., Reymon, Wulaisfan, R., Arnas, M., Siregar, L. W., Nurhikma, E., & Fauziah, Y. (2023). Standarisasi Ekstrak Rimpang Wundu Watu ( Alpinia monopleura ) dan Aktivitasnya sebagai Antiinflamasi Secara In Vitro. Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 9(2), 501-513. https://doi.org/10.35311/jmpi. v9i2.414
Submitted: 20 Oktober 2023 Accepted: 29 September 2023 Published: 27 Desember 2023
*Penulis Korespondensi: Musdalipah Email:
musdalipahapt@gmail.com
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License

## PENDAHULUAN
Penggunaan  empiris  tanaman  obat selama  ratusan  tahun  menunjukkan  bahwa Indonesia  mempunyai  peluang  yang  sangat besar  untuk  mendukung  pengembangan pengobatan  tradisional  (Juwita  et  al.,  2018). Zingiberaceae  sebagai  famili  terbesar  dari kingdom  tumbuhan  terbagi  menjadi  empat subfamili  yaitu  Hedychieae,  Zingibereae, Alpineae,  dan  Globbeae  dimana  genus Etlingera  termasuk  dalam  suku  Alpineae. Genus  ini  tersebar  dari  Himalaya  dan  Cina barat  daya  melalui  Burma,  Thailand, Malaysia, dan Indonesia hingga New Guinea dan Queensland Utara (Mahdavi et al., 2017).
Fitokimia  dari  tanaman  obat  diyakini bermanfaat  bagi  kesehatan  manusia  dan membantu  mencegah  berbagai  penyakit seperti  penyakit  menular,  antiinflamasi, kanker,  diabetes  dan  hipertensi.  Sejumlah metabolit sekunder yang berasal dari tanaman obat  merupakan  sumber  utama  pengobatan sintetik  tradisional  dan  modern.  Menurut Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), diperkirakan sekitar 80% populasi di negara- negara  berkembang  sangat  bergantung  pada obat  herbal  untuk  layanan  kesehatan (Jamshidi-Kia et al., 2018).
Alpinia  memiliki  kurang  lebih  250 spesies  yang  tersebar  di  daerah  tropis  dan subtropis  dan  merupakan  genus  dengan spesies terbesar dari Zingiberaceae (Zhang et al.,  2016).  Genus  Alpinia  terutama  dikenal sebagai  tanaman  dan  herba  etnomedis  di banyak  negara  seperti  Indonesia,  India, Vietnam, Cina, dan Jepang (Van et al., 2021). Beberapa  studi  farmakologi  Alpinia  telah dilaporkan  memiliki  berbagai  bioaktivitas seperti  aktivitas  antikanker  (Ibrahim,  2022; Lintao & Medina, 2021) aktivitas antioksidan, aktivitas  antimikroba  (Cruz  et  al.,  2020; Ferdous  et  al.,  2018),  aktivitas  anti  inflamasi (Yu  et  al.,  2020),  dan  aktivitas  analgesik (Ahmed & Kumar, 2022).
Tanaman  Alpinia,  khususnya Alpinia monopleura ,  dapat  ditemukan  dengan  mudah di  Sulawesi  Tenggara  dan  dikenal  dengan wundu watu (Yodha et al., 2023). Tanaman ini merupakan  tanaman  endemik  Alpinia  di
Sulawesi,  sebarannya  luas  dan  melimpah serta  banyak  dimanfaatkan  di  Masyarakat (Rugayah  et  al.,  2019).  Secara  empiris, masyarakat  Konawe  Selatan  memanfaatkan rimpang  wundu  watu  untuk  mengurangi pegal-pegal  pada  tubuh  dan  sebagai  bumbu masakan.  Selain  itu,  buahnya  dimakan sebagai  cemilan  untuk  menghangatkan badan.  Penelitian  sebelumnya  menyebutkan bahwa  kandungan  metabolit  sekunder  pada tanaman wundu watu ialah alkaloid, saponin, flavonoid  dan  steroid  (Yodha  et  al.,  2023). Fenolik  dan  flavonoid  memiliki  aktivitas biologis  yang  penting  seperti  antitumor, antiinflamasi, dan aktivitas antioksidan  yang bermanfaat bagi kesehatan manusia (Praptiwi et  al.,  2021).  Untuk  membuktikan  khasiat inflamasi  suatu  tanaman,  maka  diperlukan pengujian  farmakologi  baik  secara  in  vivo maupun in vitro.
Pengujian antiinflamasi rimpang
wundu watu menggunakan metode penghambatan  denaturasi  protein  dengan Bovine  Serum  Albumin (BSA).  Denaturasi protein  pada  jaringan  adalah  salah  satu penyebab  penyakit  inflamasi  dan  artritis. Produksi  dari  antigen-auto  pada  penyakit artritis  dapat  mengakibatkan  denaturasi protein  secara  in  vivo.  Oleh  karena  itu, dibutuhkan  suatu  agen  tertentu  yang  dapat mencegah  denaturasi  protein  yang  akan bermanfaat pada pengembangan obat antiinflamasi.
Komposisi  dan  studi  farmakologi tanaman  ini  belum  diketahui  sepenuhnya. Oleh  karena  itu,  tentunya  menjadi  suatu  hal yang  menarik  untuk  dikaji  dan  dieksplorasi sebagai  salah  satu  upaya  pengembangan bahan obat alternatif, khususnya pengembangan antiinflamasi. Studi
pendahuluan  pada  kandungan  minyak  atsiri daun  dan  buah  wundu  watu  ( Alpinia monopleura )  adalah  α-caryophyllene,  β- pinene,  limonene,  α-pinene,  β-caryophyllene dan caryophyllene oksida. Minyak atsiri daun dan buah menunjukkan sifat antibakteri yang sangat baik dengan kekuatan MIC 31,3 μg/mL terhadap Staphylococcus  aureus ATCC  25023 dan Escherichia  coli ATCC  35218.  Efek
antioksidan tertinggi juga ditunjukkan dengan  menghambat  radikal  ABTS  dan DPPH,  dengan  IC 50 kekuatan  minyak  atsiri yang  diperoleh  dari  daun  masing-masing sebesar  15,60  dan  19,42  μg/mL,  sedangkan dari  buahnya  diperoleh  10,44  dan  11,93 μg/mL (Yodha et al., 2023).
Pengobatan  herbal  dari  berbagai tanaman  memiliki  peran  penting  dalam bidang kesehatan dan dapat menjadi produk andalan  Indonesia.  Olehnya  itu,  diperlukan upaya penetapan standar mutu dan keamanan ekstrak tanaman obat.
Standardisasi  bahan  obat  alam  (SBOA)  atau standardisasi obat herbal merupakan rangkaian  proses  berbagai  metode  analisis kimiawi  berdasarkan  data  farmakologis, analisis  fisik  dan  mikrobiologi  berdasarkan kriteria umum keamanan (toksikologi) terhadap suatu ekstrak alam (tumbuhan obat) (Burhan et al., 2016).
Standarisasi merupakan tahapan penting  dalam  melakukan  penelitian  dan pengembangan obat bahan alam di Indonesia untuk  menjamin  mutu  dan  keamanan  dari sediaan  obat.  Standarisasi  ekstrak  secara kualitatif  meliputi  parameter  non  spesifk (susut  pengeringan,  kadar  abu,  kadar  abu tidak  larut  asam  dan  kadar  air),  dan parameter  spesifk  ekstrak  (organoleptis  dan metabolit sekunder) (Samodra, 2019).
Standardisasi
tanaman mensyaratkan
pengukuran obat dan bahan aktif yang harus dicantumkan pada label produk (Nafiu et al., 2017). Untuk mendukung khasiat penggunaan  tanaman  wundu  watu  sebagai bahan  baku  obat,  maka  perlu  dilakukan pengawasan  standar  kualitas  ekstrak  wundu watu.
Pada penelitian ini, digunakan ekstrak rimpang  wundu  watu  untuk  di  standarisasi berdasarkan  parameter  spesifik  dan  non spesifik sesuai dengan persyaratan parameter umum standar ekstrak Indonesia (Depkes RI, 2000)  dan  Farmakope  Herbal  Indonesia (Kementerian  Kesehatan  RI,  2017)  serta pengujian aktivitas inflamasi melalui penghambatan  denaturasi  protein  secara  in Vitro.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian yaitu  batang  pengaduk,  blender,  bejana maserasi,  cawan  krus,  cawan  petri,  corong, desikator,  gelas  kimia  50  ml  dan  100  ml (pyrex),  gelas  ukur  5  ml  (pyrex), hot  plate, kertas  saring,  labu  ukur  50  ml  (pyrex),  oven, pipet  tetes,  piknometer,  penjepit,  rak  tabung reaksi, rotary evaporator ,  sendok  tanduk, spatula,  tabung  reaksi,  timbangan  analitik, spektrofotometri UV Visible,
spektrofotometer serapan atom, waterbath.
Bahan Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  yaitu  aluminium  foil,  asam formiat, aquadest, asam asetat glacial, bismut submitrat,  Bovine  Serum  Albumin  (BSA), ekstrak  metanol  rimpang Alpinia  monopleura , FeCL 3 ,  H 2 SO 4 ,  HCl,  Kloroform,  n-butanol, NaCl,  NaCl  10%,  natrium  diklofenak  50  g (Novell),  serbuk  Mg,  NaOH  10%,  HgCl 2 ,  KI, Iodium, toluene.
Pembuatan ekstrak metanol rimpang

## Alpinia monopleura
Tanaman  telah  dideterminasi  oleh Pusat  Penelitian  Biologi  BRIN  dengan No.1535/IPH.1.01/If.07/VIII/2019. Sebanyak 500  gr  serbuk  rimpang Alpinia  monopleura dilarutkan dengan metanol sebanyak 3.750 L (1:7.5)  dalam  wadah  kaca  selama  3x24  jam. Proses maserasi dilakukan selama 3 hari dan dilakukan  penyaringan  dan  penggantian pelarut. Setelah itu, ekstrak disaring menggunakan  kertas  saring,  kemudian dikumpulkan filtratnya lalu diuapkan menggunakan rotary  evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental.
Standarisasi ekstrak Berdasarkan Parameter spesifik
1. Identitas dan Organoleptik
Identitas  terkait  tata  nama  ekstrak, sedangkan  organoleptik  didasarkan  pada bau, rasa, bentuk dan warna ekstrak (Burhan et al., 2016)
2. Kadar senyawa larut air
Sebanyak 5 g ekstrak (W1) dimaserasi selama  24  jam  dengan  100  mL  kloroform-air
menggunakan labu bersumbat sambil dikocok  selama  6  jam  pertama,  kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Lapisan kloroform  dan  air  dipisahkan.  20  mL  filtrat lapisan  air  diuapkan  hingga  kering  dalam cawan  porselen  yang  telah  dikalibrasi  (W0). Residu  dipanaskan  pada  suhu  105ºC  hingga bobot  konstan  (W2).  Di  hitung  konsentrasi dalam  persen  senyawa  yang  larut  dalam  air terhadap berat ekstrak awal. Ulangi pengujian sebanyak  3  kali  (Depkes  RI,  2000;  Nur  et  al., 2023).
% kadar senyawa larut air = (𝑊2−𝑊0) 𝑊1 X 100%
3. Kadar senyawa larut etanol
Sebanyak 5 g ekstrak (W1) dimaserasi selama  24  jam  dengan  100  mL  etanol  (96%) menggunakan labu bersumbat sambil dikocok berulang-ulang selama 6 jam pertama dan dibiarkan selama 18 jam. Disaring dan 20 mL  filtrat  diuapkan  hingga  kering  dalam cawan  yang  telah  dikalibrasi  (W0).  Residu dipanaskan  pada  suhu  105°C  hingga  berat konstan (W2). Diualangi pengujian sebanyak 3 kali (Depkes RI, 2000).
% kadar senyawa larut etanol = (𝑊2−𝑊0)
𝑊1 x 100%
4. Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia pada ekstrak etanol rimpang  wundu  watu  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  alkaloid, flavonoid,  steroid,  saponin  dan  tanin mengikuti  prosedur  yang  telah  ditetapkan sebelumnya  (Sarker  et  al.,  2006).  Deteksi dilakukan  berdasarkan  pengamatan  visual terhadap perubahan warna atau terbentuknya endapan setelah penambahan pereaksi tertentu (Ferdous et al., 2018).
Standarisasi ekstrak Berdasarkan Parameter non spesifik
1. Susut Pengeringan
Sebanyak 1 gram ekstrak dimasukkan ke  dalam  wadah  porselen  tertutup  yang sebelumnya  telah  dipanaskan  pada  suhu 105°C  selama  30  menit  dan  telah  dikalibrasi. Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan dalam cawan porselen dengan cara menggoyangkan cawan  hingga  membentuk  lapisan  setebal  5 mm-10 mm. kemudian dimasukkan ke dalam oven,  buka  tutupnya,  dan  keringkan  pada
suhu 105°C sampai beratnya tetap. Dinginkan dalam  desikator.  Ulangi  pengujian  sebanyak tiga kali dan kn hitung persentasenya (Depkes RI, 2000) .
% susut pengeringan = 𝑊1 (𝑊2−𝑊0) 𝑊1 x 100%
2. Penentuan kadar air
Sebanyak  2  gram  esktrak  ditimbang (W1), dimasukkan ke dalam cawan porselen, dan  ditimbang  dalam  keadaan  kosong  (W0). Kemudian  dikeringkan  dalam  oven  pada suhu  105 o C  selama  5  jam  dan  ditimbang kemudian lanjutkan pengeringan dan timbang dengan interval 1 jam hingga selisih antara  penimbangan  berturut-turut  tidak lebih dari 0,25% (W2) (Depkes RI, 2000).
% kadar air = 𝑊1−𝑊0 𝑊1−𝑊2 x 100%
3. Penentuan kadar abu total
Sebanyak  2  gram  ekstrak  ditimbang (W1) ke dalam wadah yang telah dialasi dan ditimbang  (W0).  Setelah  itu,  ekstrak  dibakar dengan  menggunakan  tanur,  perlahan-lahan suhu  dinaikkan  hingga  600  ±  25°C  sampai arang  hilang.  Setelah  itu  didinginkan  dalam desikator, dan ditimbang berat abunya (W2). Kemudian  dihitung  persen  kadar  abu  total. Pengujian  dilakukan  sebanyak  tiga  kali ulangan (Depkes RI, 2000; Nur et al., 2023).
% kadar abu total = (𝑊2−𝑊0) 𝑊1 𝑥 100%
4. Penentuan kadar abu tidak larut asam
Abu  yang  diperoleh  dari  hasil penetapan  kadar  abu  dididihkan  dengan  25 mL  HCl  encer  selama  5  menit.  Bagian  yang tidak  larut  dalam  asam  dikumpulkan  dan disaring melalui kertas saring bebas abu, dan wadah  dibilas  dengan  air  panas.  Abu  dan kertas saring yang telah disaring dimasukkan kembali  ke  dalam  wadah  yang  sama  dan dipijarkan  di  dalam  tanur  secara  perlahan- lahan  pada  suhu  600  ±  25°C  hingga  arang hilang. Kemudian ditimbang hingga diperoleh berat yang tersisa (W3). Ditentukan kadar abu tidak larut asam dalam persen dari berat  sampel  awal.  Pengujian  dilakukan sebanyak tiga kali ulangan (Depkes RI, 2000; Nur et al., 2023).
% kadar abu tidak larut asam = (𝑊3−𝑊0) 𝑊1 𝑥 100%
5. Penentuan cemaran logam berat 10  g  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam wadah, dan dipijarkan dengan hati-hati pada suhu  rendah  sampai  menjadi  arang.  Selama pemijaran,  wadah  tidak  boleh  ditutup  rapat. Pada bagian yang telah menyatu ditambahkan  2  ml  asam  nitrat  pekat, dipanaskan  dengan  hati-hati  sampai  tidak terbentuk asap putih lagi. Dibakar pada suhu 500 o C  sampai  600 o C  sampai  arang  habis terbakar.  Didinginkan  dan  dilarutkan  dalam pelarut  HNO3  1%  untuk  sampel  yang digunakan  untuk  analisis  Pb  dan  Cd sedangkan  untuk  analisis  Hg  menggunakan pelarut  aquadest  dalam  labu  ukur  25  ml. Setiap sampel kemudian disaring menggunakan kertas saring bebas abu. Larutan  standar  Pb,  Cd,  dan  Hg  dibuat masing-masing  dengan  kadar:  0,05;  0,1;  0,25; 0,5; 1 ppm dalam pelarut HNO3 1% untuk Pb dan  Cd,  sedangkan untuk  Hg  menggunakan pelarut aquades. Sampel dianalisa menggunakan  AAS,  kemudian  dihitung kadar  logam  beratnya  terhadap  sampel awal (Ma’arif et al., 2020).
6. Pengujian antiiflamasi secara In Vitro
Larutan BSA (0,2%, b/v) dibuat dalam Tris Buffered Saline (Sebanyak 1, 21 gram basa Tris dan 8,7 gram NaCl kemudian dilarutkan dengan  akuades  hingga  900  mL.  Sesuaikan pH dengan asam asetat glasial hingga pH 6,2- 6,5  (pH  patologis)  kemudian  tambahkan  air suling hingga 1000 mL. Setiap ekstrak dibuat dalam konsentrasi 50 µg/mL atau 0,005%, b/v dalam pelarut metanol (larutan stok). Alikuot 5,0  µL,  10  µL  dan  20  µL  yang  mewakili konsentrasi 0,25 µg / mL, 0,50 µg / mL dan 1,00 µg  /  mL  larutan  stok,  masing-masing, ditambahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang berisi 1 mL 0,2%, b / v larutan penyangga BSA. Kontrol negatif (metanol) dan positif (natrium diklofenak)  diuji  dengan  cara  yang  sama. Larutan kemudian dipanaskan dalam penangas air pada suhu 72°C selama 10 menit, dan didinginkan selama 20 menit  pada suhu ruang. Kekeruhan larutan (tingkat pengendapan  protein)  diukur  pada  660  nm menggunakan  spektrofotometer.  Percobaan diulangi  dua  kali  dan  nilai  rata-rata
absorbansi dicatat. Persentase penghambatan pengendapan (denaturasi protein) ditentukan berdasarkan  persentase,  relatif  terhadap kontrol negatif dengan menggunakan persamaan berikut (Ngoua-Meye-Misso et al., 2018):
Aktivitas Anti-Denaturasi (%) =
Absorbansi Kontrol−Absorbansi sampel
Absorbansi Kontrol 𝑥 100

## Analisis data
Hasil  yang  diperoleh  berupa  data  kualitatif dan  kuantitatif.  Data  kualitatif  merupakan hasil dari identitas ekstrak, organoleptik, dan fitokimia. Sedangkan data kuantitatif merupakan hasil pengujian susut pengeringan, kadar air, kadar abu total, kadar abu  tidak  larut  asam,  kadar  sari  larut  air, kadar  sari  larut  etanol,  dan  kadar  cemaran logam  berat  serta  pengujian  antiinflamasi. Data tersebut dibuat dalam bentuk tabel dan dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengembangan obat tradisional diusahakan  sejalan  dengan  perkembangan pengobatan modern. Berbagai penelitian dan pengembangan yang memanfaatkan kemajuan teknologi juga dilaksanakan sebagai  langkah  peningkatan  kualitas  dan keamanan  produk,  dengan  harapan  dapat meningkatkan kepercayaan terhadap manfaat obat  tradisional.  Pendekatan  pengembangan obat  tradisional  juga  mendapat  dukungan dari  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik Indonesia mengenai fitofarmaka, yang menunjukkan kebutuhan untuk
mengendalikan mutu simplisia yang digunakan  sebagai  bahan  baku  dalam pembuatan  obat  atau  sediaan  galenik (Handayani  et  al.,  2019;  Najib  et  al.,  2017). Salah  satu  langkah  yang  ditempuh  untuk menjamin  mutu  dan  keamanan  dari  suatu tanaman ialah standarisasi ekstrak/simplisia.
Alpinia merupakan  genus  dari  famili Zingiberaceae yang  memiliki  keragaman taksonomi  yang  kompleks,  salah  satu diantaranya adalah Alpinia monopleura . Simplisia  rimpang Alpinia  monopleura di ekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan dengan pelarut metanol. Filtrat yang  diperoleh  dipekatkan  hingga  diperoleh
ekstrak kental dan diperoleh rendemen yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil rendemen ekstrak rimpang Alpinia monopleura Bobot Simplisia (g) Bobot Ekstrak (g) Rendemen (%) 500 27,8 5,56 Tabel 1 menunjukkan simplisia rimpang alpinia  monopleura sebanyak  500  g yang  dimaserasi  dengan  3.750  L  metanol sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  sebanyak 27,8  g,  dengan  persentasi  rendemen  5,56%. Ekstrak  yang  diperoleh  akan  digunakan untuk pengujian standarisasi ekstrak dengan parameter  spesifik  dan  non  spesifik  serta pengujian antiinflamasi secara in Vitro.

## Standarisasi Ekstrak Berdasarkan Parameter
Spesifik
Standardisasi merupakan suatu proses penentuan  untuk  menjamin  mutu  dan keamanan suatu ekstrak/simplisia
berdasarkan  parameter  spesifik  dan  non spesifik.
Penentuan parameter spesifik meliputi identitas  ekstrak,  organoleptik,  penentuan senyawa  kimia  yang  larut  dalam  air  dan etanol,  dan  identifikasi  kandungan  kimia. Hasil  pengujian  parameter  spesifik  ekstrak rimpang  wundu  watu  ( Alpinia  monopleura ) disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil standarisasi ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) dengan parameter spesifik No. Parameter Hasil Standar FHI 1 Identitas ekstrak Nama latin: Alpinia monopleura K.Schum; Bagian tanaman: rimpang Nama lokal: wundu watu - 2 Organoleptik Kental, warna coklat, bau khas ekstrak, rasa sepat dan pahit - 3 Ekstrak larut air 6,7 % < 17% 4 Ekstrak larut metanol  10,35% < 11,4% 5 Kandungan metabolit sekunder Alkaloid, saponin, tanin, flavonoid, steroid -

## Identitas ekstrak dan organoleptik
Identitas  ekstrak  dilakukan  secara visual  atau  melihat  secara  langsung  bagian ekstrak  tanaman  yang  digunakan.  Identitas ekstrak  merupakan  salah  satu  pengujian pendahuluan suatu tanaman sebagai pengenalan  awal  bagian  tanaman  yang digunakan (Fatimawali et al., 2020). Pengamatan  organoleptis  dilakukan  dengan melihat  bentuk,  warna,  rasa  dan  bau  pada rimpang wundu watu. Pada uji organoleptik ekstrak  rimpang  wundu  watu  diperoleh ekstrak kental, bewarna coklat, bau khas, serta rasa pahit dikarenakan tanaman ini kaya akan senyawa tanin yang memberikan rasa sepat.

## Kadar sari larut air dan metanol
Penetapan  kadar  sari  larut  air  dan metanol digunakan untuk mengetahui
persentase  senyawa  metabolit  yang  dapat tersari  dalam  pelarut  air  maupun  metanol (Mangalu  et  al.,  2022),  selain  itu  dapat memberikan  gambaran  jumlah  kandungan senyawa yang dapat di ekstraksi oleh pelarut tertentu (Depkes RI, 2000). Tabel 2
menunjukkan  kadar  senyawa  yang  terlarut dalam  air  sebesar  6,7%  dan  larut  metanol sebesar 10,35%. Berdasarkan standar Farmakope Herbal Indonesia, ekstrak rimpang wundu watu memenuhi persyaratan mutu  karena  memenuhi range sesuai  dengan yang  ditetapkan.  Tingginya  nilai  kadar senyawa  yang  larut  methanol  menunjukan bahwa  senyawa  yang  ada  pada  rimpang wundu  watu  lebih  larut  dalam  pelarut metanol.

## Skrining fitokimia
Skrining
fitokimia dilakukan menggunakan  metode  kolorimetri  untuk mengidentifikasi  metabolit  sekunder  ekstrak rimpang  wundu  watu  ( Alpinia  monopleura ). Skrining fitokimia bertujuan untuk mengetahui  adanya  golongan  senyawa metabolit  sekunder  yang  ada  dalam  ekstrak, serta  sebagai  gambaran  kandungan  ekstrak secara  kualitatif  (Utami  et  al.,  2020).  Hasil pengujian  skrining  fitokimia  disajikan  pada Tabel  2  menunjukkan  ekstrak  rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) mengandung  metabolit  sekunder  seperti saponin,  steroid,  alkaloid  dan  flavonoid.
Tanaman  mengandung  berbagai  senyawa kimia  seperti  alkaloid,  flavonoid,  steroid memiliki peranan penting pada sifat farmakologis (Musdalipah et al., 2021).
Standarisasi Ekstrak Berdasarkan Parameter non pesifik
Pengujian standarisasi dengan parameter  non  spesifik  meliputi  pengujian susut pengeringan, kadar air, kadar abu total, kadar  abu  tidak  larut  asam,  dan  cemaran logam.  Hasil  pengujian  parameter  non spesifik ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) disajikan pada Tabel 6.
Tabel 6. Hasil Pengujian parameter non spesifik ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) No. Parameter Hasil Standar FHI 1 Susut pengeringan 6,8 % < 10% 2 Kadar air 10,35 % < 17% 3 Kadar abu total 11,94% < 16 % 4 Kadar abu tidak larut asam 0,32% < 1,5% 5 Cemaran logam Pb (timbal) Cd (Cadmium) Hg (Merkuri) 0,00076 mg/L 0,00052 mg/L 0,00062 mg/L <10 mg/kg <0,3 mg/kg <0,5 mg/kg

## Susut pengeringan
Susut  pengeringan  dilakukan  untuk memberikan  batasan  maksimal  (rentang) sejumlah  senyawa  yang  hilang  pada  proses pengeringan  (Utami  et  al.,  2020).  Pada umumnya,  susut  kering  berkaitan  dengan kadar air yang terkandung dalam simplisia/ekstrak,  sehingga  semakin  kecil susut  pengeringan  maka  hasilnya  semakin baik  (Arnida  et  al.,  2021).  Parameter  susut pengeringan pada dasarnya adalah pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 105 o C sampai berat konstan. Tabel 6  menunjukkan  susut  pengeringan  sebesar 6,8%.  Berdasarkan  hasil  menggambarkan susut  pengeringan  ekstrak  rimpang  wundu watu ( Alpinia monopleura )  memenuhi  standar Farmakope Herbal yaitu < 10%.

## Kadar air
Kadar air merupakan parameter untuk menetapkan  residu  air  setelah  proses pengeringan.  Penetapan  kadar  air  dilakukan untuk  mengetahui  jumlah  kadar  air  yang
terdapat dalam ekstrak/simplisia (Nasri et al., 2023). Jumlah air yang terkandung mempengaruhi  kualitas  simplisia.  Semakin banyak  jumlah  air  yang  terkandung  maka semakin besar kemungkinan akan ditumbuhi jamur, karena kondisi lembab menjadi faktor pertumbuhan mikroorganisme. Hasil pengujian  kadar  air  ekstrak  rimpang  wundu watu ( Alpinia monopleura ) sebesar 10,35% dan telah memenuhi standar yang telah ditetapkan (<17%).

## Kadar abu total
Tujuan  pengujian  kadar  abu  ialah untuk  mengetahui  besarnya  kandungan mineral  internal  maupun  eksternal  yang berasal  dari  proses  pengambilan  sampel sampai terbentuknya ekstrak. Kadar abu total ekstrak  rimpang  wundu  watu  ( Alpinia monopleura )  sebesar  11,94%  (Tabel  6). Berdasarkan standar yang ditetapkan ekstrak rimpang  wundu  watu  memenuhi  kriteria yaitu  <  16%.  Semakin  tinggi  kadar  abu  total maka semakin tinggi pula kandungan mineral
yang  terdapat  pada  suatu  ekstrak/simplisia. Manusia  membutuhkan  mineral  seperti kalsium,  fosfor,  dan  magnesium  untuk pembentukan  tulang,  natrium,  dan  klorida untuk  cairan  tubuh,  serta  zat  besi  untuk membentuk hemoglobin dan sel darah merah (Sutomo  et  al.,  2019).  Mineral  juga  dapat berbahaya  jika  terakumulasi  dalam  tubuh manusia dalam jangka waktu yang lama, yang dapat  mengganggu  sistem  peredaran  darah, saraf,  dan  ginjal  seperti  merkuri,  timbal, tembaga, kadmium, dan strontium (Arnida et al., 2021).

## Kadar abu tidak larut asam
Kandungan  abu  yang  tidak  larut dalam  asam  memberikan  gambaran  tentang kontaminasi  mineral  atau  logam  yang  tidak larut  dalam  asam  dalam  suatu  ekstrak. Kandungan abu tidak larut asam yang tinggi pada  suatu  ekstrak  menunjukkan  adanya pengotor  seperti  tanah  atau  pasir,  unsur logam perak, timbal, dan merkuri. Nilai kadar abu tidak larut asam ekstrak rimpang wundu
watu  ( Alpinia  monopleura )  sebesar  0,32% (Tabel  6)  dan  memenuhi  standar  yang  telah ditetapkan yaitu < 6%.

## Cemaran logam
Pengukuran kandungan logam
memastikan bahwa sampel tidak mengandung  logam  berat  yang  dapat membahayakan  kesehatan  jika  melebihi persyaratan  yang  ditentukan  (Tabel  6). Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh,  kadar  Pb, Cd,  dan  Hg  memenuhi  persyaratan  yang ditentukan.

## Aktivitas antiinflamasi secara in Vitro
Uji  kuantitatif  aktivitas  antiinflamasi ekstrak  rimpang  wundu  watu  dilakukan dengan  cara  mengukur  nilai  aktivitas hambatan terhadap denaturasi protein menggunakan  metode  spektrofotometri  UV- Vis.  Pengukuran  aktivitas  antiinflamasi diawali dengan penetapan panjang gelombang  660  nm  dengan  konsentrasi  10 mg/L dan pelarut etanol 10 mL.
Tabel 7. Hasil uji aktivitas antiiflamasi ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) No. Sampel Konsentrasi (mg/L) Absorbansi % inhibisi U1 U2 U3 U1 U2 U3 Rata-rata 1 ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0,125 0.125 0,127 21,79 21,79 20,51 21,36 20 0,119 0,115 0,119 25,64 28,20 25,64 26,49 30 0,113 0,11 0,113 29,48 31,41 29,48 30,12 40 0,107 0,104 0,107 33,33 35,25 33,33 33,97 50 0,103 0.101 0,01 35,89 31,17 37,82 34,96 2 Natrium diklofenak 10 0.103 0.104 0.103 35.22 34.59 35.22 35.01 20 0.099 0.098 0.099 37.73 38.36 37.73 37.94 30 0.096 0.095 0.095 39.62 40.25 40.25 40.04 40 0.093 0.093 0.094 41.50 41.50 40.88 41.29 50 0.091 0.09 0.091 42.76 43.39 42.76 42.97 3 Kontrol negatif 0.159 0 0 0 0 0 0 0
Uji  aktivitas  antiinflamasi  melalui penghambatan  denaturasi  protein  dilakukan pada  ekstrak,  kontrol  negatif  dan  kontrol positif  (Tabel  7).  Pengujian  ini  dilakukan dengan tiga kali ulangan (U1, U2, U3). Metode yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah metode  penghambatan  denaturasi  protein Bovine  Serum  Albumin  (BSA)  yang  akan
mengalami  denaturasi  (perubahan  struktur primer  dan  sekunder)  ketika  dipanaskan. Albumin  yang  mengalami  kerusakan  saat diinduksi  panas  merupakan  penanda  oleh tubuh sehingga dianggap sebagai benda asing (antigen).  Olehnya  itu,  tubuh  melakukan perlawanan  melalui  mekanisme  inflamasi. Selanjutnya  larutan  diukur  serapannya  pada
λ 660 nm dan dihitung persentase inhibisinya. Larutan  memiliki  aktivitas  antiinflamasi  jika nilai inhibisinya lebih dari 20% (Farida et al., 2018).
Tabel 7 menunjukkan ekstrak rimpang wundu  watu  ( Alpinia  monopleura )  dapat menghambat denaturasi protein pada konsentrasi 10 mg/L. Semakin tinggi
konsentrasi  ekstrak  maka  nilai  inhibisi  juga semakin  besar  yang  artinya  kemampuan menghambat denaturasi protein juga semakin besar  (Gambar  1).  Untuk  mengetahui seberapa besar aktivitas antiinflamasi ekstrak etanol  rimpang  wundu  watu  ( Alpinia monopleura )  digunakan  parameter  nilai  IC 50 ( Inhibition Concentration 50% ).
Gambar 1. Aktivitas antiiflamasi ekstrak rimpang wundu watu ( Alpinia monopleura ) dan natrium diklofenak
IC 50 didefinisikan  sebagai  konsentrasi ekstrak  yang  menghasilkan  penangkapan 50% senyawa antiinflamasi.
Hasil
pengukuran  antiinflamasi  rimpang  wundu watu  ( Alpinia  monopleura )  dan  natrium diklofenak dapat dilihat pada Tabel 8.
Tabel 8. Nilai IC 50 ekstrak rimpang wundu watu Alpinia monopleura dan Natrium diklofenak
N o. Sampel Nilai IC 50 (mg/L) 1 Rimpang Alpinia monopleura 8.47 mg/L 2 Natrium diklofenak 8.46 mg/L Nilai  IC 50 menunjukkan  efektivitas ekstrak  dalam  menghambat  denaturasi protein.  Tabel  8  menunjukkan  ekstrak  etanol rimpang  wundu  watu Alpinia  monopleura memiliki  nilai  IC 50 sebesar  8,47  mg/L  dan kontrol  positif  sebesar  8.46  mg/L.  Secara spesifik  suatu  senyawa  dinyatakan  sebagai antiinflamasi sangat kuat jika IC 50 kurang dari 10 mg/L, kuat jika IC 50 10-30 mg/L, sedang jika IC 50 31-50  mg/L,  lemah  jika  IC 50 51-100  mg/L dan  tidak  aktif  jika  IC 50 lebih  dari  100  mg/L. Berdasarkan  nilai  IC 50 ekstrak  rimpang wundu  watu  ( Alpinia  monopleura )  memiliki aktivitas antiinflamasi dengan kategori sangat kuat (Farida et al., 2018).
Peradangan umumnya disebut sebagai respons biologis yang kompleks dari jaringan pembuluh darah terhadap rangsangan berbahaya. Selain itu, peradangan juga  dikaitkan  dengan  rasa  sakit,  dan melibatkan  peningkatan  denaturasi  protein, peningkatan  permeabilitas  pembuluh  darah, dan perubahan membran. Obat antiinflamasi nonsteroid  (NSAID)  umumnya  digunakan untuk  penanganan  kondisi  peradangan. Namun,  obat-obatan  ini  memiliki  beberapa efek  samping  yang  merugikan,  terutama iritasi  lambung,  yang  mengarah  pada pembentukan  tukak  lambung.  Oleh  karena itu,  pencarian  sumber  alami  dan  fitokimia
dengan aktivitas antiinflamasi telah meningkat  pesat  dalam  beberapa  tahun terakhir (Al-Khayri et al., 2022; Gunathilake et al., 2018).
Pengujian aktivitas antiinflamasi dievaluasi  menggunakan  empat  uji  berbasis in vitro: penghambatan hemolisis, penghambatan  proteinase,  penghambatan denaturasi  protein,  dan  penghambatan lipoksigenase  (Gunathilake  et  al.,  2018). Penghambatan denaturasi protein merupakan salah  satu  metode  yang  paling  banyak digunakan.  Denaturasi  protein  berhubungan dengan  protein  yang  kehilangan  struktur sekunder, tersier, dan struktur kuartener yang mengakibatkan  hilangnya  fungsi  biologis. Proses  ini  dapat  diinduksi  oleh  tekanan eksternal, seperti panas, atau dengan paparan bahan  kimia,  seperti  pelarut  organik  (Derbel et  al.,  2023).  Mekanisme  kerja  denaturasi protein yaitu menghambat pelepasan konstituen  lisosom  neutrofil  di  tempat peradangan.  Konstituen  lisosom  adalah enzim  bakterisida  dan  proteinase  setelah dilepaskan secara ekstraseluler menyebabkan peradangan  dan  kerusakan  jaringan  lebih lanjut (Gunathilake et al., 2018). Protein dalam tubuh  rentan  terhadap  denaturasi  yang disebabkan oleh pembentukan radikal bebas, menyebabkan  mekanisme  inflamasi  dengan merangsang  pelepasan  mediator  inflamasi (Rastogi et al., 2018).
Kandungan metabolit sekunder rimpang Alpinia  monopleura yang  diduga berkhasiat sebagai antiinflamasi ialah flavonoid  (Tabel  8).  Flavonoid  dikenal memiliki  sifat  dan  struktur  yang  berperan penting dalam aktivitas antiinflamasi.
Berbagai  penelitian  yang  telah  dilaporkan, senyawa  kimia  yang  terbukti  memiliki  efek antiinflamasi  adalah  flavonoid.  Flavonoid mampu menghambat aktivitas siklooksigenase  atau  lipooksigenase,  serta mengurangi  penumpukan  leukosit  di  area tertentu,  sehingga  berpotensi  sebagai  agen antiinflamasi  (Ramadhani  &  Sumiwi,  2016). Flavonoid memiliki sifat antiinflamasi melalui mekanisme  penghambatan  enzim  pengatur yang memiliki peran penting dalam
mengontrol  mediator  yang  terlibat  dalam peradangan.  Flavonoid  mengaktifkan  jalur antioksidan yang memberikan efek antiinflamasi  dengan  cara  menghambat sekresi enzim seperti lisozim, β- glukuronidase dan menghambat sekresi asam arakidonat yang mengurangi reaksi peradangan (Al-Khayri et al., 2022)

## KESIMPULAN
Standarisasi  ekstrak  rimpang  wundu watu  secara  spesifik  dan  non  spesifik memenuhi  persyaratan  sesuai  Farmakope Herbal  Indonesia  dan  parameter  standar umum ekstrak tumbuhan obat. Ekstrak etanol rimpang  wundu  watu  memiliki  aktivitas antiinflamasi  dengan  nilai  IC 50 sebesar  8.47 mg/L.  sehingga  dapat  disimpulkan  ekstrak rimpang  tanaman  wundu  watu  dapat digunakan  sebagai  bahan  baku  dalam pengembangan obat tradisional.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih pada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Kepada  Masyarakat,  Kepala  Laboratorium Farmakognosi,  dan  Laboratorium  Kimia Terpadu  Politeknik  Bina  Husada  Kendari yang telah memberikan izin penelitian hingga selesai.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmed,  S.  S.,  &  Kumar,  R.  M.  (2022).
Pharmacognostical  standardization  of Cassia  auriculata,  Centella  asiatica  and Zingiber  officinale. Journal  of  Medical Pharmaceutical  and  Allied  Sciences , 11 (5), 5227–5231.
https://doi.org/10.55522/jmpas.V11I5.40 60
Al-Khayri,  J.  M.,  Sahana,  G.  R.,  Nagella,  P.,
Joseph,  B.  V.,  Alessa,  F.  M.,  &  Al- Mssallem,  M.  Q.  (2022).  Flavonoids  as Potential Anti-Inflammatory Molecules: A Review. Molecules , 27 (9).
https://doi.org/10.3390/molecules270929 01
Arnida,  A.,  Maulidia,  M.,  Khairunnisa,  A., Sutomo,  S.,  &  Faisal,  F.  (2021).
Standardization of Simplicia and Ethanol  Extract  of  Purun  Danau (Lepironia  articulata  (Retz.)  Domin) Rhizome. Borneo  Journal  of  Pharmacy ,
4 (4),
273–282. https://doi.org/10.33084/bjop.v4i4.2794
Burhan,  A.,  Rahim,  A.,  &  Regina.  (2016). Standardisasi  parameter  spesifik  dan non  spesifik  ekstrak  etanol  daun kecombrang  (Etlingera  elatior  (Jack) RM. Smith). Journal of Pharmaceutical and Medicinal Sciences , 1 (2), 21–24.
Cruz, J. D. d., Mpalantinos, M. a., Ramos, A. D. S., Ferreira, J. L. P., de Oliveira, A. a., Júnior,  N.  L.  N.,  Silva,  J.  R.  D.  a.,  & Amaral,  A.  C.  F.  (2020).  Chemical standardization,  antioxidant  activity and  phenolic  contents  of  cultivated
Alpinia zerumbet preparations. Industrial Crops and Products , 151 (112495), 1–9. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2020.11 2495
Depkes  RI.  (2000). Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat (1st  ed.).
Direktorat  Jenderal  Pengawasan  Obat dan  Makanan,  Direktorat  Pengawasan Obat Tradisional.
Derbel,  H.,  Elleuch,  J.,  Mahfoudh,  W.,
Michaud,  P.,  Fendri,  I.,  &  Abdelkafi,  S.
(2023).  In  Vitro  Antioxidant  and  Anti- Inflammatory  Activities  of  Bioactive
Proteins and Peptides from Rhodomonas sp. Applied Sciences (Switzerland) , 13 (5), 1–15. https://doi.org/10.3390/app13053202
Farida, Y., Rahmat, D., & Widia Amanda, A.
(2018).  Uji  Aktivitas  Antiinflamasi Nanopartikel  Ekstrak  Etanol  Rimpang Temulawak  (Curcuma  xanthorrhiza Roxb.)  dengan  Metode  Penghambatan Denaturasi  Protein  (Anti-Inflammation Activity  Test  of  Nanoparticles  Ethanol
Extract of Temulawak Rhizome
(Curcuma  xanthorrhi. Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia , 16 (2), 225–230.
Fatimawali, F., Kepel, B. J., & Bodhi, W. (2020).
Standarisasi  Parameter  Spesifik  dan Non-Spesifik Ekstrak Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia Purpurata K. Schum) sebagai Obat Antibakteri. Jurnal E-Biomedik , 8 (1), 63–67. https://doi.org/10.35790/ebm.8.1.2020.28 131
Ferdous, M., Basher, M., Khan, I., F, A., MS, S., &  Daula,  A.  (2018).  Evaluation  of phytochemicals  ,  antioxidant  and antibacterial  potentials  of  Alpinia calcarata. Journal  of  Medicinal  Plants Studies , 6 (2), 152–158.
Gunathilake, K. D. P. P., Ranaweera, K. K. D. S.,  &  Rupasinghe,  H.  P.  V.  (2018).  In vitro  anti-inflammatory  properties  of selected green leafy vegetables.
Biomedicines , 6 (4), 1–10. https://doi.org/10.3390/biomedicines604 0107
Handayani,  V.,  Najib,  A.,  Syarif,  R.  A., Mahmud, A., Asha, N., & Ahmad, A. R. (2019).  Standardization  of  Purified Extract  Mahoni  Seed  and  Antioxidant Activity. International Journal of
PharmTech  Research , 12 (02),  96–102. https://doi.org/10.20902/ijptr.2019.12020 1
Ibrahim,  S.  (2022).  Alpinia  galanga  Extract
Inhibits MCF-7/HER2+ Cells by Inducing  Apoptosis. Journal  of  Science and  Technology  Research  for  Pharmacy , 1 (2),
31–36.
https://doi.org/10.15294/jstrp.v1i2.51512
Jamshidi-Kia,  F.,  Lorigooini,  Z.,  &  Amini- Khoei, H. (2018). Medicinal plants: Past history and future perspective. Journal of HerbMed Pharmacology , 7 (1), 1–7. https://doi.org/10.15171/jhp.2018.01
Juwita,  T.,  Puspitasari,  I.  M.,  &  Levita,  J. (2018). Torch Ginger ( Etlingera elatior ): A Review  on  its  Botanical  Aspects  , Phytoconstituents  and  Pharmacological Activities .
April .
https://doi.org/10.3923/pjbs.2018.151.16 5
Kementerian Kesehatan RI. (2017). Farmakope Herbal  Indonesia.  In Kemenkes  RI . https://doi.org/10.2307/jj.2430657.12
Lintao,  R.  C.  V.,  &  Medina,  P.  M.  B.  (2021). Screening  for  Anticancer  Activity  of Leaf Ethanolic Extract of Alpinia elegans (“tagbak”) on Human Cancer Cell Lines.
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention ,
22 (12), 3781–3787. https://doi.org/10.31557/APJCP.2021.22.
12.3781
Ma’arif,  B.,  Muti’ah,  R.,  Suryadinata,  A.,
Nashichuddin,  A.,  &  Karawid,  G.  E.
(2020).  Analisis  Kandungan  Logam Berat  Cd,  Hg,  dan  Pb  Daun  Semanggi (Marsilea crenata Presl.) di Desa Semen, Kecamatan  Pagu,  Kabupaten  Kediri. Journal  of  Islamic  Pharmacy , 5 (2),  53–56. https://doi.org/10.18860/jip.v5i2.9356
Mahdavi, B., Yaacob, W. a., & Din, L. B. (2017).
Chemical composition, antioxidant, and antibacterial  activity  of  essential  oils from Etlingera sayapensis A.D. Poulsen
&  Ibrahim. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Medicine , 10 (8), 819–826.
https://doi.org/10.1016/j.apjtm.2017.08.0
06
Mangalu,  M.  A.,  Herny,  E.  I.,  &  Suoth,  E.  J.
(2022).  Standarisasi  Parameter  Spesifik Ekstrak  Buah  Pinang  Yaki  (Areca vestiaria  ). Pharmacy  Medical  Journal ,
5 (1), 20–26.
Musdalipah,  M.,  Tee,  S.  A.,  Karmilah,  K., Sahidin, S., Fristiohady, A., & Yodha, A. W.  M.  (2021).  Total  Phenolic  and Flavonoid  Content,  Antioxidant,  and Toxicity  Test  with  BSLT  of  Meistera chinensis Fruit Fraction from Southeast Sulawesi. Borneo  Journal  of  Pharmacy , 4 (1),
6–15. https://doi.org/10.33084/bjop.v4i1.1686
Nafiu, M. O., Hamid, A. A., Muritala, H. F., & Adeyemi,  S.  B.  (2017).  Preparation, Standardization, and Quality Control of
Medicinal Plants in Africa. In Medicinal Spices  and  Vegetables  from  Africa: Therapeutic  Potential  Against  Metabolic,
Inflammatory,  Infectious  and  Systemic Diseases . Elsevier Inc. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-
809286-6.00007-8
Najib,  A.,  Malik,  A.,  Ahmad,  A.  R., Handayani, V., Syarif, R. A., & Waris, R. (2017).  Standarisasi  Ekstrak  Air  Daun Jati  Belanda  Dan  Teh  Hijau. Jurnal Fitofarmaka  Indonesia , 4 (2),  241–245. https://doi.org/10.33096/jffi.v4i2.268
Nasri,  N.,  Rumaseuw,  E.,  Kaban,  V.,  Yodha,
A., Lestari, Y., Asjur, A.,
Taufiqurrahman,  M.,  Hasan,  H.,  Putra, T., & Umarudin, U. (2023). Farmakognosi (N.  Sulung,  Ed.;  1st  ed.).  PT.  Global Eksekutif Teknologi.
Ngoua-Meye-Misso,  R.-L.,  Sima-Obiang,  C., Ndong,  J.  D.  L.  C.,  Ondo,  J.  P.,  Ovono Abessolo,  F.,  &  Obame-Engonga,  L.-C. (2018). Phytochemical screening, antioxidant, anti-inflammatory and antiangiogenic  activities  of  Lophira procera A. Chev. (Ochnaceae) medicinal plant  from  Gabon  . Egyptian  Journal  of Basic  and  Applied  Sciences , 5 (1),  80–86. https://doi.org/10.1016/j.ejbas.2017.11.00 3
Nur, S., Aisyah, a. N., Nursamsiar, Sami, F. J.,
Fadri,  a.,  Khairi,  N.,  &  Sapra,  a.  (2023). Standardization and Gc-Ms Analysis of Kersen  (Muntingia  Calabura  L.)  Fruit
Ethanol  Extract  As  an  Herbal  Raw Material. Bulletin  of  Pharmaceutical
Sciences. Assiut , 46 (1), 173–187. https://doi.org/10.21608/BFSA.2023.300
915
Praptiwi, P., Sulistiarini, D., Qodrie, E. N. P., &  Sahroni,  D.  (2021).  Antibacterial activity,  antioxidant  potential,  total phenolic  and  flavonoids  of  three  plant species  of  Rubiaceae  from  Banggai Island,  Indonesia. Biodiversitas , 22 (5), 2773–2778.
https://doi.org/10.13057/biodiv/d220540
Ramadhani, N., & Sumiwi, S. (2016). Aktivitas Antiinflamasi  Berbagai  Tanaman  di duga  Berasal  dari  Flavonoid. Farmaka ,
14 (2), 111–123.
Rastogi, S., Iqbal, M. S., & Ohri, D. (2018). In vitro  study  of  anti-inflammatory  and antioxidant  activity  of  some  medicinal plants and their interrelationship. Asian Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research , 11 (4), 195–202. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2018.v11i
4.23583
Rugayah, Rahayu, M., Mulyadi, & Rahajoe, J. (2019). Pulau  Wawonii :  Keanekaragaman Ekosistem, Flora, dan Fauna (2nd ed.). LIPI
Press.
Samodra,  G.  (2019).  Standarisasi  parameter spesifik dan non spesifik ekstrak etanol buah asam gelugur. Viva Medika , 11 (02),
50–63.
Sarker,  S.  D.,  Latif,  Z.,  &  Gray,  A.  I.  (2006).
Natural  Product  Isolation.  In Natural Product  Reports (Second  Edi,  Vol.  25, Issue 3). https://doi.org/10.1039/b700306b
Sutomo,  S.,  Lestari,  H.  D.,  Arnida,  A.,  & Sriyono,  A.  (2019).  Simplicia  and Extracts  Standardization  from  Jualing Leaves (Micromelum minutum Wight & Arn.)  from  South  Kalimantan. Borneo Journal  of  Pharmacy , 2 (2),  55–62. https://doi.org/10.33084/bjop.v2i2.898
Utami,  Y.  P.,  Sisang,  S.,  &  Burhan,  A.  (2020).
Pengukuran  Parameter  Simplisia  dan Ekstrak Etanol Daun Patikala (Etlingera elatior  (Jack)  R.M.Sm)  Asal  Kabupaten Enrekang  Sulawesi  Selatan. Majalah Farmasi  Dan  Farmakologi , 24 (1),  6–10. https://doi.org/10.20956/mff.v24i1.9831
Van, H. T., Thang, T. D., Luu, T. N., & Doan, V.  D.  (2021).  An  overview  of  the chemical  composition  and  biological activities  of  essential  oils  from:  Alpinia genus  (Zingiberaceae). RSC  Advances , 11 (60), 37767–37783.
https://doi.org/10.1039/d1ra07370b
Yodha,  A.  W.  M.,  Badia,  E.,  Musdalipah,  M.,
Setiawan,  M.  A.,  Daud,  N.  S.,  Fusvita, A., Fristiohady, A., & Sahidin, I. (2023). Essential  Oils  of  Alpinia  monopleura and Their Antibacterial and Antioxidant Activity. Molekul , 18 (1), 80–88.
Yu,  S.  H.,  Kim,  H.  J.,  Jeon,  S.  Y.,  Kim,  M.  R., Lee, B. S., Lee, J. J., Kim, D. S., & Lee, Y. C.  (2020).  Anti-inflammatory  and  anti- nociceptive activities of Alpinia
Oxyphylla  Miquel  extracts  in  animal models. Journal  of  Ethnopharmacology , 260 (December 2019), 112985. https://doi.org/10.1016/j.jep.2020.112985
Zhang, W. J., Luo, J. G., & Kong, L. Y. (2016).
The  genus  Alpinia:  A  review  of  its phytochemistry  and  pharmacology. World  Journal  of  Traditional  Chinese
Medicine , 2 (1), 26–41. https://doi.org/10.15806/j.issn.2311- 8571.2015.0026