## PENGARUH PENGGUNAAN KOMBUCHA TERHADAP KANDUNGAN PROTEIN KASAR
DAN SERAT KASAR PADA FERMENTASI ECENG GONDOK ( Eichornia crassipes )
THE EFFECT OF USING KOMBUCHA ON CRUDE PROTEIN AND CRUDE FIBER CONTENTS IN  WATER HYACINTH ( Eichornia crassipes ) FERMENTATION
Agustono 1 ,  Salim Hidayat 1 , dan Widya Paramita L 2
1 Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451
2 Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5993016

## Abstract
Water  hyacinth  ( Eichornia  crassipes )  is  a  one  of  the  feed  materials  from  the  green  plants  a potential. Howefer, the water hyacinth are low of protein and high fiber contents. Therefore, there should be efforts intentionally done to increase the leaf protein. One the ways to raise water hyacinth nutrient is performing biologically fermentation by using microbes. The Kombucha organism is a symbiotic colony of  yeast’s  and  bacteria  that  composed  by  strong  membrane  that  covers  gelatinous  mass.  Kombucha microorganism is living together with permeate the tea drink. The objective of this research is to know the effect  of    Kombucha  to  increased  crude  protein  and  decreased  crude  fiber  contents  in  water  hyacinth fermentation.  The  advantage  of  the  research  is  to  provide  information  regarding  a  Kombucha  dosage which is required to enhance crude protein and reduce crude fiber content on water hyacinth fermentation. The research used water hyacinth as substrate and Kombucha as fermentor. Kombucha dosaged used here were  P0  (0%),  P1  (7,5%),  P2  (15%)  and  P3  (22,5%).  The  fermentation  took  place  7  days  and  then proceeded  with  proximate  analysis.  Variables  observed  consisted  of  crude  protein  and  crude  fiber contents  after  being  fermented  using  Kombucha.  The  result  showed  that  Kombucha  that  was  used  for fermenting water hyacinth, could  increase the crude protein content  from 13,3040 % (P0) to 15,9972% (P3) and not significantly reduce the crude fiber. The Kombucha dosage at 7,5% (P1) was most effective for fermenting the water hyacinth.
Keywords : water hyacinth, crude protein, crude fiber, Kombucha, Eichornia crassipes

## Pendahuluan
Perkembangan  usaha  budidaya  ikan semakin  hari  semakin  meningkat,  hal  ini semakin  disadari  betapa  penting  peranan  pakan dalam  menunjang  kegiatan  pembudidayaan ikan. Fungsi pakan yang utama bagi ikan adalah sebagai  sumber  energi  yang  berperan  dalam menunjang  pertumbuhan,  beraktivitas  dan bereproduksi,  oleh  karena  itu  pakan  yang diberikan  harus  memenuhi kebutuhan  bagi  ikan seperti protein, lemak dan karbohidrat (Mudjiman,  2004),  selain  itu  pakan  juga  harus mengandung vitamin, mineral, serat dan juga air (Anggorodi,  1994).  Pemanfaatan  eceng  gondok ( Eichornia crassipes) sebagai bahan pakan pada ikan memang baru dan belum banyak digunakan karena  bahan  ini  memiliki  serat  kasar  yang tinggi.  Eceng  gondok  selama  ini  masih dianggap  oleh  sebagian  orang  sebagai  limbah dan  sering  mengotori  aliran  sungai,  sehingga untuk meningkatkan pemanfaatan eceng gondok dapat  dilakukan  proses  fermentasi  secara biologis.
Berdasarkan  bahan  kering  dari  eceng gondok  ( E.  crassipes) memiliki  nilai  nutrisi sebagai  berikut,  kandungan  protein  kasar  9,8  – 12,0  %,  abu  11,9  –  23,9  %,  lemak  kasar  1,1  – 3,3 %, serat kasar 16,8 – 24,6 % (Astuti, 2008). Kandungan  protein  yang  ada  masih  cukup memadai untuk digunakan sebagai bahan pakan alternatif.  Eceng  gondok  memiliki  serat  kasar yang tinggi. Eceng gondok sebagai bahan pakan alternatif  sangat  mudah  untuk  didapatkan karena  bahan  ini  tersedia  banyak  di  alam  dan masih belum termanfaatkan dengan baik. Bahan ini  termasuk  bahan  pakan  yang  murah.  Salah satu  upaya  untuk  meningkatkan  kandungan nutrisi  dari  eceng  gondok  adalah  dengan melakukan  fermentasi  secara  biologis  dengan menggunakan  mikroba  proteolitik  dan  mikroba selulolitik. Mikroba proteolitik dapat
menghasilkan  enzim  protease  yang  mampu mengubah protein menjadi asam amino (Anggorodi,  1994),  sedangkan  enzim  selulase dapat  mendegradasi  selulosa  menjadi  senyawa oligosakarida,  disakarida,  dan  monosakarida
yang bersifat larut, sehingga dapat dimanfaatkan sebagai  sumber  karbon  oleh  koloni  mikroba untuk berkembang biak sehingga dapat meningkatkan  kandungan  protein  yang  berasal dari koloni mikroba (Mc Donald et al ., 1994). Kombucha merupakan simbiosis antara koloni  ragi,  jamur,  dan  bakteri  yang  tersusun dari  membran  keras  yang  tersusun  dari  masa gelatin  (Murray,  2002).  Sel  dari  Kombucha adalah  eukariotik  (Thomson,  2002).  Organisme
Kombucha tersebut hidup
dengan memfermentasikan  minuman  teh.  Kombucha juga  mengandung  berbagai  enzim  selulase  dan protease yang dapat memecah molekul makanan menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana.  Eceng gondok  memiliki  nutrisi  yang  cukup  untuk digunakan  sebagai  bahan  pakan  pada  ikan. Kandungan  karbohidrat  yang  ada  dalam  eceng gondok  cukup  tinggi  dan  dapat  digunakan sebagai  sumber  energi  bagi  ikan.  Kandungan beta-karoten  dan  karotenoid  yang  ada  dalam eceng gondok juga masih tinggi yang juga dapat dimanfaatkan oleh ikan. Hasil analisis menunjukkan  eceng  gondok  memiliki  nilai nutrisi  yang  cukup  untuk  digunakan  sebagai bahan pakan dan dalam keadaan segar memiliki kandungan  nutrisi  yang  lebih  tinggi  (Astuti, 2008).

## Metodologi
Penelitian  ini    dilaksanakan  pada  pada bulan  februari  2010  di  Laboratorium  Makanan
Ternak    Departemen  Peternakan  Fakultas
Kedokteran Hewan, UniversitasAirlangga. Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi  :  pisau,  kantong,  plastik  ukuran  3  kg, ember  plastik,  baki,  timbangan,  spuit,  sarung tangan,  gelas  ukur,  alat  untuk  analisis  protein kasar  yang  terdiri  dari  :  labu Kjeldhal 100cc, pemanas  labu Kjeldhal, spatula,  timbangan elektrik  Sartorius,  gelas  ukur,  labu  ukur  250cc, labu  destilasi  500cc,  pendingin Lienbeigh ,  pipa bengkok,  sumbat  karet,  pembakar  bunsen  dan kawat  kasa  dan  alat  untuk  analisis  serat  kasar terdiri  dari  :  erlenmeyer  300cc,    erlenmeyer penghisap,  corong  Buchner,  spatula,  cawan porselen,  gelas  ukur,  timbangan  analitik,  oven, pemanas air dan kompresor.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  eceng  gondok,  tetes  dan  kombucha. Bahan  kimia  untuk  analisis  protein  kasar  yang terdiri  dari  :  Tablet Kjeldhal ,  H 2 SO 4, pekat, NaOH  40  %,  Asam  Borat,  indikator Metil-Red, Brom  Cresol  Green, H 2 SO 4 0,01  N  dan aquadest. Bahan kimia untuk analisis serat kasar terdiri dari : H 2 SO 4 0,3 N, NaOH 1,5 N, HCl 0,3 N, Aceton dan H 2 O panas.
Cara  pembuatan  fermentor  Kombucha,  air direbus  sampai  mendidih  kemudian  setelah mendidih  diukur  sebanyak  500  ml,  kemudian dimasukkan  teh  celup  sebanyak  2  cup  untuk mendapatkan  larutan  teh,  setelah  itu  baru dimasukkan  gula  pasir  sebanyak  100  gram untuk  mendapatkan  larutan  teh  manis.  Teh manis  yang  telah  jadi  dibiarkan  sampai  dingin sebelum memasukkan starter Kombucha. Starter jamur  Kombucha  sebanyak  50  gram  dipotong- potong kecil-kecil kemudian dimasukkan dalam larutan  teh  manis  yang  telah  dingin  dan ditambahkan  larutan  Kombucha  yang telah  jadi dimasukkan  dalam  larutan  teh  manis  sebanyak 50  ml.  Larutan  teh  manis  dan  Kombucha kemudian diaduk sampai rata sebelum difermentasi  dalam  kondisi  anaerob.  Larutan Kombucha  tersebut  kemudian  dimasukkan dalam  botol  kaca  masing-masing  sebanyak  200 ml,  kemudian  difermentsi  selama  2  minggu. Larutan  yang  telah  difermentasi  selama  2 minggu  akan  bersifat  asam  dan  siap  digunakan sebagai  fermentor  untuk  memfermentasi  eceng gondok.    Eceng  gondok  yang  sudah  diambil, diangin-anginkan  kemudian  dipotong-potong dan  dibagi  secara  acak  menjadi  20  unit percobaan,  masing-masing  sampel  seberat  50 gram, agar setelah sampel dikeringkan beratnya masih  mencukupi  untuk  dilakukan  analisis proksimat.  Tiap  unit  percobaan  dicampur  tetes dan  kombucha  sesuai  dengan  dosis  yang  telah ditetapkan,  kemudian  dilakukan  fermentasi bahan  selama  7  hari  dalam  keadaan  anaerob (Chusniati dkk, 2005).
Perlakuan  pada  penelitian  ini  adalah sebagai berikut :
P 0 :   Eceng gondok + tetes 2 % + kombucha 0 %.
P 1 :   Eceng gondok + tetes 2 % + kombucha
7,5 %.
P 2 :   Eceng gondok +  tetes 2 % +
kombucha 15 %.
P 3 :   Eceng gondok +  tetes 2 % +
kombucha 22,5 %.
Parameter  uji  utama  dari  penelitian  ini adalah kandungan protein kasar dan serat kasar dari  eceng  gondok  yang  difermentasi  dengan Kombucha  selama  7  hari.  Parameter  ini digunakan untuk mengetahui pengaruh Kombucha  terhadap  kandungan  protein  kasar dan  serat  kasar  dari  eceng  gondok.  Hasil penelitian akan dianalisis dengan  menggunakan statistic Analisis  Varian (Anava),  dilanjutkan dengan  Uji  Jarak  Berganda  Duncan  dengan derajat  kepercayaan  95  %  untuk  menentukan perlakuan mana yang berbeda dengan perlakuan lain (Kusriningrum, 1989).

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  analisis  proksimat  kandungan protein  kasar  eceng  gondok  dapat  dilihat  pada lampiran  1.  Rata-rata  kandungan  protein  kasar eceng  gondok  yang  telah  difermentasi  dengan menggunakan  Kombucha  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1.  Rata-rata  kandungan  protein  kasar eceng  gondok  setelah  difermentasi (berdasarkan bahan kering bebas air) Dosis Perlakuan % Kandungan Protein % Rata-rata ± SD Transformasi (√) Rata-rata ± SD P0 (0%) 13,3040 ± 1,42 b 3,6531 ± 0,20 P1 (7,5%) 14,9626 ± 1,06 ab 3,8657 ± 0,14 P2 (15%) 14,7882 ± 0,59 ab 3,8448 ± 0,08 P3 (22,5%) 15,9977 ± 0,99 a 3,9984 ± 0,13
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik dengan  mengunakan  Analisis  Varian  (Anava) dapat  diketahui  bahwa  dosis  Kombucha  pada fermentasi  eceng  gondok  berpengaruh  nyata terhadap kandungan protein kasar eceng gondok (p>0,05).  Berdasarkan  hasil  uji  Duncan  dapat diketahui  bahwa  kandungan  protein  kasar tertinggi adalah P3 (22,5%)  yang berbeda nyata dengan  P0  (0%)  tetapi  tidak  berbeda  nyata dengan P1 (7,5%) dan P2 (15%).
Rata-rata  kandungan  protein  kasar eceng  gondok  yang  difermentasi  dengan menggunakan  kombucha  (P1,  P2  dan  P3) mengalami  peningkatan  bila  dibandingkan dengan  eceng  gondok  yang  difermentasi  tanpa menggunakan  Kombucha  (P0).  Kandungan protein kasar meningkat dari P0, P2, P1 dan P3 kandungan  protein  kasar  tersebut  secara berturut-turut  adalah    13,3040  %,  14,9626%, 14,7882%,  15,9977%.  Rata-rata  peningkatan kandungan  protein  kasar  ini  dapat  dilihat  pada gambar 5.
Gambar 5.   Grafik  kandungan  protein  kasar eceng gondok
Hasil  analisis  proksimat  kandungan  serat  kasar eceng  gondok  dapat  dilihat  pada  lampiran  1. Rata-rata  kandungan  serat  kasar  eceng  gondok yang  telah  difermentasi  dengan  menggunakan Kombucha dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Rata-rata kandungan  serat kasar eceng gondok setelah difermentasi (berdasarkan berat kering bebas air) Dosis Perlakuan % Kandungan Serat Kasar % Rata-rata ± SD Transformasi (√) Rata-rata ± SD P0 (0%) 29,2772 ± 2,96 5,4038 ± 0,28 P1 (7,5%) 26,9179 ± 3,03 5,1798 ±0,30 P2 (15%) 26,7380 ± 2, 27 5,1663 ± 0,23 P3 (22,5%) 26,2367 ± 2,06 5,1182 ± 0,28 Berdasarkan  analisis  statistik  dengan menggunakan  Analisis  Varian  (Anava)  dapat diketahui bahwa dosis Kombucha pada fermentasi  eceng  gondok  tidak  berpengaruh nyata  terhadap  penurunan  kandungan  serat kasar eceng gondok (p<0,05).
Grafik  rata-rata  kandungan  serat  kasar  tersebut dapat dilihat pada gambar 6.
Gambar  6.  Grafik  kandungan  serat  kasar  eceng gondok
Salah  satu  upaya  untuk  meningkatkan kandungan  nutrisi  dari  eceng  gondok  adalah dengan  melakukan  fermentasi  secara  biologis dengan  menggunakan  mikroba  proteolitik  dan mikroba  selulotik.  Mikroba  proteolitik  dapat menghasilkan  enzim  protease  yang  mampu mengubah protein menjadi asam amino (Anggorodi,  1994),  sedangkan  enzim  selulase dapat  mendegradasi  selulosa  menjadi  senyawa oligosakarida,  disakarida,  dan  monosakarida yang bersifat larut, sehingga dapat dimanfaatkan sebagai  sumber  karbon  oleh  koloni  mikroba untuk berkembang biak sehingga dapat
P r o
t Q e i n
Perlakuan
S e r
a t k a s a r Perlakuan 12 12.5 13 13.5 14 14.5 15 P0 P1 P2 P3 24 25 26 27 28 29 30 P0 P1 P2 P3 P 0 P 1 P 2
meningkatkan  kandungan  protein  yang  berasal dari koloni mikroba (Mc Donald et al ., 1994). Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat dilihat  bahwa  terjadi  peningkatan  kandungan protein  kasar  eceng  gondok  yang  difermentasi dengan  menggunakan  Kombucha  dari    13,3040 %  (P0)  menjadi  15,9977%  (P3)  (Tabel  1). Perlakuan  yang  menunjukkan  hasil  terbaik dengan  kandungan  protein  kasar  tertinggi adalah  pada  P3  (15,9977%)  hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Hoffman  (2000)  yang menyatakan  bahwa  terjadi  peningkatan  protein yang  disebabkan  oleh  adanya  enzim  dalam Kombucha  yang  dapat  memecah  molekul  gula menjadi  komponen  sederhana  yang  dapat dimanfatkan  untuk  perkembangbiakan  serta pertumbuhan  dari  koloni  mikroba  yang  ada dalam Kombucha.
Peningkatan  protein  kasar  dari  eceng gondok  yang  difermentasi  dengan  Kombucha menunjukkan  bahwa  di  dalam  Kombucha terdapat mikroba proteolitik. Salah satu mikroba proteolitik  yang  terdapat  dalam  Kombucha adalah Lactobacillus
sp. Mikroba ini
menghasilkan  enzim  protease  yang  akan merombak protein menjadi polipeptida, selanjutnya menjadi peptida sederhana, kemudian  peptide  tersebut  akan  dirombak menjadi  asam-asam  amino  (Anggorodi,  1994). Asam-asam amino inilah yang akan dimanfaatkan oleh mikroba untuk memperbanyak diri. Peningkatan  jumlah koloni mikroba  selama  proses  fermentasi  secara  tidak langsung dapat meningkatkan kandungan protein  kasar  karena  mikroba  merupakan sumber protein sel tunggal (Wuryantoro, 2000)
Pada  proses  fermentasi  dibutuhkan karbon  dan  nitrogen  untuk  perkembangan  sel- sel  mikroba  (Rachman,  1989).  Penambahan tetes tebu pada proses fermentasi eceng gondok dapat menyediakan sumber energi bagi mikroba untuk  bekerja  pada  pakan  yang  banyak mengandung serat kasar seperti selulosa dan  hemiselulosa.  De  jong et  al .,  (1991)  yang dikutip  Indrawan  (2005)  menyatakan  bahwa tingginya  kadar  karbohidrat  (73,1%)  dan mineral  (11,7%)  pada  tetes  tebu  (molasses) mampu  menstimulir  pertumbuhan  mikroba sehingga  kandungan  protein  kasar  meningkat. Perkembangan  dari  mikroba  tergantung  dari karbon  yang  tersedia,  dengan  meningkatnya jumlah mikroba tersebut maka terjadi kompetisi diantara  mikroba  untuk  mendapatkan  karbon, sehingga  ketersediaan  karbon  menjadi  faktor pembatas  perkembangbiakan  mikroba  (Rifqiah, 2005).
Rendahnya  kandungan  protein  kasar pada  P0  disebabkan  karena  tidak  ditambahnya
Kombucha selama proses fermentasi. Sementara pada  P1,  P2  dan  P3  diberi  penambahan Kombucha  sehingga  protein  kasar  yang  ada dalam  eceng  gondok  yang  telah  difermentasi meningkat. Dwidjoseputro (1994) menyebutkan bahwa  selain  membutuhkan  waktu  agar  dapat tumbuh  dan  berkembang,    mikroba  juga membutuhkan nutrisi untuk melakukan aktivitasnya.
Secara  umum  hasil  dari  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  penggunaan  Kombucha sebagai fermentor pada proses fermentasi eceng gondok terbukti dapat meningkatkan kandungan protein  kasar  eceng  gondok.  Peningkatan protein  kasar  berasal  dari  jumlah  koloni mikroba  yang  berkembang  yang  merupakan sumber  protein  sel  tunggal.  Pada  proses fermentasi mikroba proteolitik akan menghasilkan  enzim  protease  yang  mampu merombak molekul protein menjadi polipeptida, selanjutnya menjadi peptide sederhana, kemudian  peptide  tersebut  akan  dirombak menjadi  asam  amino  (Anggorodi,  1994).  Asam amino  ini  akan  dimanfaatkan  oleh  mikroba proteolitik maupun selulolitik untuk memperbanyak  diri.  Meningkatkan  jumlah koloni mikroba selama proses fermentasi secara tidak  langsung  dapat  meningkatkan  kandungan protein  kasar  karena  mikroba  merupakan sumber protein sel tunggal (Wuryantoro, 2000).
Peningkatan  kandungan  protein  kasar dapat  menyebabkan  kandungan  serat  kasar dalam pakan menurun. Kondisi ini menyebabkan aktifitas mikroba selulotik semakin  meningkat,  sehingga  proses  degradasi selulosa  oleh  enzim  selulase  yang  dihasilkan oleh mikroba selulotik semakin optimal
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat dilihat bahwa tidak terjadi penurunan kandungan  serat  kasar  eceng  gondok  yang difermentasi  dengan  menggunakan  Kombucha. Pada perlakuan ini tidak menunjukkan perbedaan yang nyata antara P0, P1, P2 dan P3 disebabkan  karena  kandungan  serat  kasar  yang ada  dalam  eceng  gondok  tinggi  sehingga mikroba  selulotik  yang  ada  dalam  Kombucha belum  mampu  mendegradasi  semua  serat  kasar yang  ada  dalam  eceng  gondok  secara  optimal. Hal  ini  juga  dapat  disebabkan  karena  mikroba yang  ada  dalam  bahan  belum  berkembang dengan baik, sehingga belum dapat mendegradasi  serat  kasar  yang  tinggi  yang  ada dalam  eceng  gondok.  Dwijoseputro  (1994) menyebutkan bahwa  selain membutuhkan waktu  agar  untuk  berkembang  biak  mikroba juga  memerlukan  nutrisi  untuk  melakukan aktivitasnya.
Secara  umum  hasil  dari  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  pengunaan  Kombucha sebagai  fermentor  untuk  dapat  menurunkan kandungan  serat  kasar  eceng  gondok  terbuki dapat  menurunkan  kandungan  serat  kasar  yang ada  dalam  eceng  gondok,  tetapi  dari  keempat perlakuan yang ada tidak menunjukkan perbedaan yang nyata terhadap penurunan kadar serat kasar eceng gondok.

## Kesimpulan
Penggunaan  Kombucha  pada  fermentasi  eceng gondok  dapat  meningkatkan  kandungan  protein kasar  dari  13,3040  %  (P0)  menjadi  15,9977% (P3).
Penggunaan  Kombucha  pada  fermentasi  eceng gondok  tidak  dapat  menurunkan  kandungan serat kasar pada fermentasi eceng gondok. Melakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan  lama waktu fermentasi yang berbeda untuk mengetahui  pengaruh  lama  fermentasi  terhadap peningkatan  kandungan  protein  kasar  dan penurunan  serat  kasar  pada  fermentasi  eceng gondok.
Melakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan menggunakan  mikroba  proteolitik  maupun selulolitik  yang  lain  pada  fermentasi  eceng gondok.
Melakukan  penelitian  dengan  menggunakan Kombucha dengan dosis yang lebih tinggi untuk mengetahui  pengaruhnya  terhadap  perubahan protein kasar dan serat kasar setelah
difermentasi. Melakukan pengujian pada
Kombucha mikroorganisme mana yang paling dominan.

## Daftar Pustaka
Anggorodi,  R.  1994.  Ilmu  Makanan  Ternak Dasar. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. Arora,  S.  P.  1989.  Pencernaan  Mikroba  pada Ruminansia.  Gadjah  Mada  University press. Yogyakarta.
Astuti, R, D. 2008. Analisis  Kandungan Nutrisi pada  Eceng  Gondok.  Institute  Peratabian Bogor. Bogor.
Chusniati,  S.  P.  Kusriningrum,  Mustikoweni, dan  M.  Lamid.  2005.  Pengaruh  Lama Pemeraman Jerami Padi yang Difermentasi oleh  Isolat  Bakteri  Selulotik  Rumen
Terhadap  Kandungan  Protein  Kasar  dan Serat Ksar. Lembaga Penelitian. Universitas Airlangga. Surabaya. 33 halaman. Dwidjoseputro, D. 2003. Dasar-dasar Mikrobiologi. Penerbit Djambatan. Jakarta. Hariati,  A.  M.  1989.  Diktat  Mata  Kuliah Makanan Ikan. Malang.
Indrawan, D. 2005. Kandungan Serat Kasar dan Protein  Kasar  pada  Jerami  Padi  yang
Difermentasi  dengan  Probiotik  Alami  dan Tetes  Tebu.  Skripsi.  Fakultas  Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya. Kusriningrum. 1989. Dasar Perancangan Percobaan  dan  Rancangan  Acak  Lengkap. Universitas Airlangga. Surabaya. Luke,  K.  2005.  Kombucha  Mushroom  Tea.
http://www.,keth@awakening- Healing.com . 2p McDonald,  p.,  R.  A.  Edwards,  and  J.  F.  D.
Greenhalgh. 1994. Animal Nutrition.Fourh Edition. Longman Scientific and technical. London.
Moenandir.  1986.  Pemanfaatan  Eceng  Gondok
Sebagai  Biofilter  Perairan.  Gramedia.
Jakarta.
Mudjiman,  A.  2004.  Makanan  Ikan.  Penebar
Swadaya. Jakarta.
Murray,  M.  T.  2002.  Silymarin  Complex  for Liver Disorder. www.hon.ch/library/them/HepB/comp.html . 1p.
Naland, H. 2008. Kombucha Teh dengan Seribu Kasiat. Agromedia Pustaka. Jakarta.
Parakkasi,  A. 1995. ILmu Nutrisi dan Makanan Ternak  Ruminan.  UI-Perss.  Jakarta.  509 halaman.
Rachman,  A.  1989.  Pengantar  Teknologi Fermentasi. PAU-Pangan dan Gizi. Institute Pertanian Bogor. Bogor. Schlegel,  H.  G.  dan  K  Scuhmidt.  1994. Mikrobiologi Umum. Gadjah Mada University  Press.  Yogyakarta.    Halaman 468-505. Setyono,  H.,  Kusriningrum,  Mustikoweni,  T.
Nurhajati,  Agustono,  M.  Arief,  M.  Anam, M.  Lamid,  A.  Monica,  dan  W.  Paramita. 2004.  Pengolahan  Bahan  Pakan  Ternak. Laboratorium  Ilmui  Makanan  Ternak. Fakultas  Kedokteran  Hewan.  Universitas Airlangga.
Tillman,  A D., H. Hartadi, S. Reksohadiprodjo,
S.  Prawirokusumo,  dan  S.  Lebdosoekojo.
1989.  Ilmu  Makanan  Ternak  Dasar. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Tjitrosoepomo.  1994.  Klasifikasi  Tumbuhan. Penebar Swadaya. Jakarta.
Widayati,  E  dan  Y.  Widalestari.  1996.  Limbah untuk  pakan  ternak.  Trubus  Agrisarana. Jakarta.
Wuryantoro, S. 2000. Kandungan Protein Kasar dan  Serat  Kasar  Hay  Padi  Teramonisasi yang  Difermentasidengan  Cairan  Rumen.
Fakultas  Kedokteran  Hewan.  Universitas Airlangga. Surabaya.