DOI 10.33323/indigenous.v3i2.114 Volume 3(2) 2020 (76-82)

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI  EKSTRAK KASAR KULIT BATANG MANGROVE
Avicennia marina TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli
( ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF BARK RUDE EXTRACT Avicennia marina AGAINST THE GROWTH OF BACTERIA Escherichia coli )
Marta Ina Kii 1 , Andriani Rafael 1 , Sonya T. M. Nge 1
1 Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Kristen Artha Wacana Kupang
Email: martainakii95@gmail.com

## ABSTRAK
Tumbuhan  mangrove  merupakan  salah  satu  ekosistem  pantai  yang  mendominasi  wilayah pantai  suatu  daerah  dan  berpotensi  untuk  dikembangkan  dalam  penanggulangan  berbagai  penyakit baik  infeksi  pada  ikan  budidaya  maupun  sebagai  medi  pengobatan  alami  bagi  manusia,  karena senyawa  metaboit  sekunder  yang  terkandung  didalamnya  mampu  berkhasiat  sebagai  antibakteri. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui pengaruh ekstrak kasar kulit batang mangrove A. marina terhadap pertumbuhan bakteri E. coli dan konsentrasi optimum dari estrak kasar kulit batang mangrove A. marina dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli. Metode yang digunakan dalam penelitian ini metode eksperimen laboratorium dengan 4 perlakuan  yaitu konsentrasi 55 mg/mL, 60 mg/mL, 65 mg/mL, 70 mg/mL dan 1 kontrol tanpa pemberian ekstrak dengan 3 kali ulangan. Hasil pengamatan diameter  zona  hambat  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  analisis  variansi  (ANOVA)  satu  jalur dengan  signifikansi  5%.  Analisis  statistik  dilakukan  menggunakan  program  SPSS  versi  16.0.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kasar kulit batang mangrove A. marina berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri E. coli. Hal ini dapat dilihat dar konsentrasi yang digunakan mulai dari 55 mg/mL, 60 mg/mL, 65 mg/mL, 70 mg/mL memiliki rata-rata zona hambat yang berkisar antara 26 mm, 27.33 mm, 27.66 mm dan 28.66 mm. Dengan demikian semakin tinggi konsentrasi ekstrak yang digunakan, maka semakin besar daya hambat yang terbentuk.
Kata Kunci : Avicennia marina, Escherichia coli, Antibakteri

## ABSTRACT
Mangrove plant is one of the coastal ecosystems that dominates the coastal area and has the potential to be developed in the prevention of various diseases both infections in aquaculture and as a natural treatment  medium  for  humans,  because  the  secondary  metabolite  compound  contained  can  be efficacious  as  an  anti-bacterial.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  A.  marina mangrove  bark  extract  against  the  growth  of  E.  coli  and  the  optimum  concentration  of  A.  marina mangrove bark extract in inhibiting the growth of E. coli bacteria. The method used in this study is a laboratory experimental method with 4 treatments namely a concentration of 55 mg/mL, 60 mg/mL, 65 mg/mL, 70 mg/mL and 1 control without administration of extract with 3 replications. Observation result of inhibition zone diameters   were statistically analyzed using a one-way analysis was performed using the SPSS program version 16.0. the results showed that the rough extract of A. marina mangrove bark affected the growth of E. coli bacteria. This can be seen from the concentrations used starting from 55 mg/mL,  60  mg/mL,  65  mg/mL  and  70  mg/mL  having  average  inhibition  zones  ranging  from  26  mm, 27.33  mm,  27.66  mm  and  28.66  mm.  thus  the  higher  the  concentration  of  the  extract  used,  the greatervthe inhibition formed.
Keywords : Avicennia marina, Escherichia coli, Antibacterial

## Indigenous Biologi

## PENDAHULUAN
Tumbuhan mangrove merupakan salah satu ekosistem pantai yang mendominasi wilayah pantai  suatu  daerah.  Mangrove  merupakan  tumbuhan  tropis  yang  berpotensi  untuk dikembangkan dalam penanggulangan penyakit infeksi pada ikan budidaya, karena senyawa bioaktif yang dikandungnya belum banyak digunakan sebagai orientasi ekonomi. Upaya untuk mendapatkan  senyawa  bioaktif  dari  sumber  daya  laut  terus  digalakkan,  seperti  pencarian senyawa  bioaktif  antibakterial  pada  spons  laut  (Linington  dkk.,  2002)  dari  siput  bakau (Allimuddin  dan  Rante,  2006)  telah  dilakukan,  namun  potensi  senyawa  pada  tumbuhan mangrove  sebagai  kandidat  fitofarmaka  budidaya  perairan  yang  memiliki  potensi farmakologisebagai antimikrobia belum banyak dikaji.
Indonesia  merupakan  negara  dengan  tumbuhan  mangrove  terbanyak  didunia,  baik  segi kuantitas  area  (±  42.550  km²)  maupun  jumlah  spesies  (±  202  spesies)  (Spalding,  2001). Meskipun  belum  mewakili  keragaman  jenis    mangrove  secara  keseluruhan,  NTT  memiliki potensi  mangrove  dengan  keragaman  jenis  yang  cukup  tinggi  yang  dianalisis  dari  9  lokasi yang  mewakili  pulau-pulau  besar  di  NTT  yaitu  Flores,  Sumba,  Timor  dan  Alor  terdapat sebanyak  45  jenis  dan  22  famili  mangrove  (Hidayatullah,  2017).Selain  itu,  mangrove  juga merupakan  tumbuhan  khas  yang  terdapat  pada  muara  sungai  dan  pesisir  pantai  yang dipengaruhi oleh pasang surut air laut. Sebagian besar dari tumbuhan mangrove bermanfaat sebagai  bahan  obat  (Purnobasuki,  2004).  Ekstrak  dan  bahan  mentah  dari  tumbuhan mangrove inilah yang telah digunakan oleh masyarakat pesisir untuk keperluan pengobatan alamiah.  Senyawa aktif yang terdapat dalam tumbuhan mangrove seperti alkaloid, saponin, tannin,  flavonoid  dan    triterpenoid  dapat  dimanfaatkan  dalam  bidang  farmakologi  (Wibowo dkk.,  2009).  Senyawa  tersebut  dapat  digunakan  sebagai  racun  ikan  maupun  antimikrobial (Kordi, 2012).
Tumbuhan A.  marina merupakan  salah  satu  spesies  dari  mangrove  yang  memiliki  ciri khas yakni batang pohon besar dan tinggi, dominan serta hidup di muara sungai dan dekat dengan pemukiman penduduk. Tumbuhan mangrove memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder  yang  berbeda-beda  (Renaldi  dkk.,  2018),  misalnya A.  marina memiliki  senyawa metabolit  sekunder  seperti  fenol,  flavonoid  dan  tannin  yang  diekstraksi  dari  kulit  batang (Rafael dan Calumpong, 2018). Hasil penelitian serupa yang dilakukan oleh Darminto dkk., (2009) dan Handayani (2012) menunjukkan bahwa kulit batang Avicennia spp . mengandung senyawa metabolit sekunder berupa  alkaloid, terpenoid, flavonoid dan steroid.
Bakteri merupakan mikroba prokariotik yang uniseluler dan berkembangbiak dengan cara aseksual dengan pembelahan sel. Hidup secara bebas  dan parasit sebagai pathogen pada manusia  dan  hewan  (Alimuddin,  2005).  Berdasarkan  pewarnaan  gramnya,  bakteri  dapat dibedakan menjadi dua bagian yaitu bakteri gram positif dan bakteri gram negatif.Bakteri gram positif merupakan bakteri yang memiliki dinding sel yang lebih sederhana dan mengandung banyak  peptidoglikan.  Misalnya Microccus,  Staphylococcus,  Leoconoctoc,  Pedioccus dan Aerococcu s.  Bakteri  Gram  negatif  merupakan  bakteri  yang  memiliki  dinding  sel  lebih kompleks dan peptidoglikan yang lebih sedikit. Misalnya Escherichia,Citrobacter,Salmonella, Enterobacter, Vibrio, Aeromonas, Photobacterium, Chro mabacterium, Flavobacterium. Bakteri yang umum dan sering dijumpai menginfeksi manusia diantaranya yaitu Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Beberapa peneliti seperti James dkk . (2002) dan Pelczar dan Chan (1986) menyatakan bahwa S. aureus merupakan bakteri kokus Gram positif dan patogen utama bagi manusia, mulai dari keracunan makanan maupun  infeksi kulit ringan sampai infeksi berat. Bakteri E. coli umumnya  merupakan  flora  normal  saluran  pencernaan  manusia  dan  hewan  termasuk dalam kelompok fakultatif Gram negatif yang dapat menyebabkan diare pada bayi dan orang dewasa,  infeksi  saluran  kemih  (Harti,  2015).  Umumnya  jika  terinfeksi  bakteri  orang menggunakan obat-obat kimia atau antibiotik. Upaya pencarian obat yang berasal dari alam untuk  mengurangi  tingkat  konsumsi  obat  kimia  semakin  gencar  dilakukan,  karena penggunaan obat kimia yang berlebihan dapat menimbulkan resistensi bakteri terhadap obat maupun antibiotik dan dapat menimbulkan tumbuhnya bakteri lain yang lebih tahan terhadap obat-obatan atau disebut juga ‘super bug’ (James dkk., 2002).
Penelitian yang dilakukan oleh Bandaranayake (1998) pada mangrove jenis Rhizopora apiculata menunjukkan  bahwa  senyawa  metabolit  sekunder  dapat  berfungsi  untuk menyembuhkan  penyakit  beri-beri ,  haematoma (kulit  dan  batang), hepatitis (kulit,  batang, daun, bunga dan akar) dan borok (kulit dan batang). Ekstrak dari beberapa jenis tumbuhan mangrove seperti Rhizopora stylosa, Sonneratia griffithi, Aegiceras floridum dan Excoecaria agallocha memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan S. aureus. Selain itu akar R. apiculata berpotensi  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli dan S.  aureus (Usman , 2017). Hasil  penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Renaldi  dkk.,  2018  menunjukkan  bahwa  ekstrak batang, daun dan akar mangrove A. marina efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri E.  coli serta  penelitian  serupa  yang  dilakukan  oleh  Sabiladiyni  dkk.,  (2016)  menunjukkan bahwa ekstrak daun A. marina efektif menghambat pertunbuhan bakteri Vibrio harveyi dan Vibrio parahaemolytics.
Desa  Huilelot  merupakan  desa  yang  terletak  di  Kecamatan  Semau  Utara,  Kabupaten Kupang, Provinsi Nusa Tenggara Timur. Desa ini merupakan salah satu desa yang memiliki beberapa jenis mangrove seperti Avicennia alba, Avicennia marina, Rhizophora mucronata, Rhizophora stylosa, Sonneratia alba dan Bruguiera cylindrica, tetapi penelitian yang berkaitan dengan uji aktivitas antibakteri pada jenis-jenis mangrove ini belum pernah dilakukan. Tujuan dilakukan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  kasar  kulit  batang mangrove Avicennia marina (Forks.) Vierh terhadap pertumbuhan bakteri Eschrichia coli.

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan di laboratorium Biologi, Universitas Kristen Artha Wacana (UKAW) Kupang yang berlangsung pada bulan September-Oktober 2019.

## Alat Dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  terdiri  dari  parang , plastik, Autoclave , Oven , timbangan analitik, lesung dan alu, beaker glass (250 mL), kertas saring (Whatman Nomor 42), rotary evaporator , erlenmeyer (500 mL), aluminium foil, hotplate, tabung dan rak tabung  reaksi,  kapas  steril,  vortex,  jarum  ose,  Bunsen,  jarum  ose,  batang  L,  pipet  tetes, pinset,  Inkubator,  penggaris,  alat  tulis,  kamera  digital.  Bahan-bahan    yang  digunakan diantaranya  sampel  kulit  batang  tumbuhan A.  marina yang  diambil  dari  Desa  Huilelot, Kecamatan  Semau,  Kabupaten  Kupang.  Media  NA,  bakteri E.  coli yang  diambil  dari laboratorium Biologi UKAW, pelarut metanol, aquades dan alkohol.

## Prosedur Penelitian
Penanganan Sampel Kulit  batang  mangrove A.  marina dicuci  dengan  air  bersih  lalu  dipotong-potong  dan dikeringanginkan selama 2 minggu, lalu sampel dihaluskan dengan cara dipotong-potong dan ditumbuk kemudian disaring sampai mendapatkan serbuk. Sampel yang telah halus disimpan pada suhu ruangan untuk tindakan selanjutnya (Renaldi dkk., 2015).

## Sterilisasi Alat
Sterilisasi  alat  dilakukan  sebelum  peralatan  digunakan  yaitu  dengan  cara membungkus  peralatan  (cawan  petri)  tersebut  menggunakan  kertas,  kemudian dimasukkan ke dalam oven pada suhu 121ºC selama 15 menit. Sedangkan alat yang tidak tahan panas disterilisasi menggunakan zat kimia berupa alkohol 70%.

## Maserasi dan Ekstraksi
Sebanyak 50 gram sampel kulit batang tumbuhanmangrove A. marina yang telah halus diekstraksi dengan pelarut methanol (b/v; 1/4) dan difiltrasi. Residu yang diperoleh kemudian  diekstraksi  kembali  dengan  pelarut  yang  sama  sampai  semua  senyawa terangkat. Kemudian sampel disaring menggunakan kertas saring  (Whatman Nomor 42) dan  diuapkan menggunakan Rotary Evaporator sehingga diperoleh ekstrak pekat. Ekstrak kasar  yang diperoleh disimpan dalam botol sampel untuk dilakukan uji lanjut (Britton dkk., 1995).
Pembuatan Medium Agar (NA)

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 3(2) 2020
Pembuatan media dilakukan dengan cara menyiapkan erlenmeyer dan melarutkan 6 gr media NA kedalam  300 mL aquades, tutup menggunakan alumunium  foil lalu media dipanaskan  menggunakan hot  plate  with  magnetic  stirer sampai  homogen.  Untuk pembuatan agar miring masukkan NA kedalam 5 tabung reaksi dengan takaran masing- masing  sebanyak  5  mL  kemudian  ditutup  dengan  kapas.  Setelah  disterilisasi  tabung segera dimiringkan pada rak tabung sampai dingin. Untuk pembuatan medium NA setelah dilakukan  sterilisasi,  media  agar  dalam  erlenmeyer  kemudian  secara  aseptik  dituang kedalam cawan petri dengan masing-masing cawan petri 15 ml dan diamkan pada suhu ruang (Yunus dkk., 2018).

## Uji Antibakteri
Setelah mendapat biakan murni bakteri E. coli, ambil bakteri tersebut dari agar miring dan  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  yang  berisikan  aquadest  dengan  menggunakan jarum  ose  untuk  dilakukan  pengenceran  yaitu  dengan  cara    ambil  1  mL  kultur  dan ditambahkan kedalam 9 mL aquades dan dilakukan pengenceran 10 -1 kemudian divortex. Hasil  pengenceran  10 -1 dipindahkan  1  mL  ke  tabung  10 -2 dan  di  vortex,  kemudian dipindahkan ke tabung 10 -3 dan selanjutnya dipindahkan ke tabung 10 -4. Setelah divortex hasil pengenceran10 -4 dipindahkan ke cawan petri (agar plate) menggunakan mikropipet dengan metode spread plate .
Kemudian encerkan  ekstrak kasar kulit batang A. marina sesuai dengan konsentrasi yang telah ditentukan yaitu 55 mg/mL, 60 mg/mL, 65 mg/mL dan 70 mg/mL.  Kemudian direndam kertas cakram (6 mm) selama 15 menit. Selanjutnya, meletakkan kertas cakram tersebut dengan mengunakan pinset diatas inokulum bakteri dalam cawan petri. Setelah itu diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam. Selanjutnya pengukuran zona hambat yang terbentuk digunakan penggaris dengan cara membalik cawan petri. Aktivitas antibakteri dinyatakan positif apabila terbentuk zona hambat berupa zona bening disekeliling kertas cakram  (Liwang  dkk.,  2013).  Data  hasil  pengamatan  dianalisis  secara  statistik menggunakan analisis variansi ANOVA satu jalur  dengan taraf signifikansi 5%. Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan program SPSS versi 16.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak kasar kulit batang mangrove jenis A. marina terhadap pertumbuhan  bakteri E.  coli menggunakan  variasi  konsentrasi  55  mg/mL,  60  mg/mL,  65 mg/mL,  70  mg/mL  dan  kontrol  sebagai  pembanding.  Cawan  petri  yang  telah  diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C kemudian dilihat zona hambat yang terbentuk. Zona hambat yang terbentuk dalam penelitian ini dapat dilihat pada gambar 1 .
(a) (b)                    (c)
(d) (e)
Gambar  1.  Diameter  Zona  Bening  Pada  Setiap  Konsentrasi;  a)  Kontrol  0  mg/mL,  b) Konsentrasi  (55  mg/mL),  c)  Konsentrasi  (60  mg/mL),d)  Konsentrasi  (65  mg/mL),  e) Konsentrasi (70 mg/mL)

## Indigenous Biologi
Pengamatan terhadap pertumbuhan bakteri  dilakukan setelah diinkubasi selama 24 jam dan dilakukan pengukuran. Hasil pengukuran diameter zona hambat bakteri E . coli dengan variasi konsentrasi ekstrak kasar kulit batang mangrove A. marina dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1 Diameter zona hambat setiap perlakuan
Keterangan : A0: Perlakuan ke-1, A1: Perlakuan Ke-2, A2: Perlakuan Ke-2, A3: Perlakuan Ke- 3, A4: Perlakuan Ke-4, U1: Ulangan Ke-1, U2: Ulangan Ke-2, U3: Ulangan Ke-3
Tabel 1 menunjukkan hasil pengukuran diameter zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri E. coli . Zona hambat yang terbentuk dengan pemberian konsentrasi ekstrak kasar kulit batang A. marina yang berbeda-beda. Penambahan ekstrak pada semua variasi konsentrasi memiliki pengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli dan dikategorikan sebagai daya hambat sangat kuat.
Pemberian  ekstrak  kasar  kulit  batang A.  marina memiliki  pengaruh  terhadap pertumbuhan bakteri E. coli. Hal ini dapat dilihat dari konsentrasi yang digunakan mulai dari 55 mg/mL, 60 mg/mL, 65 mg/mL dan 70 mg/mL memiliki rata-rata zona hambat yang berkisar antara  26  mm  sampai  dengan  28.66  mm.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ernawati  dan Hasmila (2014) yang menggunakan ekstrak daun R. mucronata memperlihatkan daya hambat sebesar  13,42  mm  dengan  kategori  kuat  pada  konsentrasi  tertinggi  60%.  Semakin  tinggi konsentrasi yang digunakan maka semakin besar diameter zona hambat yang terbentuk.
Hasil  penelitian  ini  didukung  oleh  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Paputungan  dkk., (2017)  yang  menemukan  bahwa  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak buah S. alba seperti tannin berfungsi sebagai antibakteri dan antioksidan sedangkan fenol dan flavonoid  berfungsi  sebagai  antioksidan.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Muda  (2019) menggunakan  ekstrak  kulit  batang A.  marina menunjukkan  hasil  positif  adanya  senyawa metabolit  sekunder  seperti  fenol,  flavonoid  dan  tanninmerupakan  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi luasarea daya hambat bakteri yang terbentuk.Penelitian yang dilakukan oleh Ernawati  dan  Hasmila  (2014)  menunjukkan  bahwa  pada  konsentrasi  40%  ekstrak  daun mangrove R.  mucronata sudah  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli dengan kategori  sedang.  Dengan  demikian  penggunaan  konsentrasi  yang  semakin  tinggi  dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
Penelitian serupa yang dilakukan oleh Renaldi dkk.(2018) dengan menggunakan kulit batang, daun dan akar dari A. marina berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri E. coli. Hal ini diduga karena ekstrak batang mangrove A. marina memiliki senyawa antimikroba seperti steroid  dan  triterpenoid.  Selain  itu  senyawa  streroid  dan  triterpenoid  juga  ditemukan  pada bunga dan buah A.marina (Zhu dkk., 2009; Ravikumar dkk., 2010; Yusuf., 2010; Kiplimo dkk., 2011; Doughari 2012).
Konsentrasi ekstrak kulit batang A. marina yang digunakan menyebabkan dinding sel bakteri menjadi rusak sehingga pertumbuhan bakteri menjadi terhambat. Pada penelitian ini bakteri yang digunakan merupakan bakteri yang termasuk dalam bakteri gram negatif yang mengandung banyak lipid, sedikit peptidoglikan, membranuar berupa bilayer yang berfungsi sebagai pertahanan selektif senyawa-senyawa yang keluar atau masuk sel dan menyebabkan efek toksik (Pradana  dkk., 2014).
Perlakuan Konsentrasi Ekstrak Kulit Batang A. marina (mg/mL) Diameter  Zona Hambat  (mm) Rata- rata (mm) Kategori zona hambat (mm) U1 U2 U3 A0 0 0 0 0 0 Lemah A1 55 24 25 29 26 Sangat kuat A2 60 29 24 29 27.33 Sangat kuat A3 65 29 25 29 27.66 Sangat kuat A4 70 30 27 29 28.66 Sangat kuat

## Indigenous Biologi
Menurut Jawetz dkk. (2001) pertumbuhan bakteri yang terhambat atau kematian bakteri akibat suatu zat antibakteri dapat disebabkan oleh penghambatan terhadap fungsi membran sel,  penghambatan  terhadap  sintesis  protein  atau  penghambatan  terhadap  sintesis  asam nukleat.  Mekanisme  penghambatan  yang  mungkin  terjadi  pada  bakteri E.  coli adalah penghambatan sintesis dinding sel yang didasarkan pada adanya kandungan flavonoid yang merupakan senyawa fenol (Harbone, 1987).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian  dapat disimpulkan bahwa ekstrak kasar kulit batang A. marina berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri E. coli. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak yang digunakan, maka semakin besar daya hambat bakteri yang terbentuk.
SARAN
1.  Perlu dilakukan penelitian lanjutan mengenai uji aktivitas antibakteri dari ekstrak kasar kulit batang A. marina terhadap bakteri lain maupun jamur dengan konsentrasi dan metode yang berbeda.
2.  Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  mengenai    manfaat  lain  dari  kulit  batang  mangrove A. marina selain sebagai antibakteri misalnya sebagai pewarna alami kain.

## DAFTAR PUSTAKA
Alimuddin, A. 2005. Mikrobiologi Dasar Jilid 1. Cetakan 1; Makassar; UNM Press. Alimuddin, A.,& Rante H. 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Daging Siput Bakau Terhadap Artemia salina Leach. Jurnal Farmasi dan Farmakologi. Vol. 10 No 1. Bandaranayake, W. M. 1998. Traditional and medical uses of mangroves. Mangroves and Salt Marshes 2:133-148 Britton, G., S. L. Jansen, and H. Pfander. 1995. Carotenoids Volume 1A: Isolationand Analysis . Birkhauser Verlag. Basel Boston Berlin. pp: 81-107 Darminto, A. Ali, I. Dini. 2009. Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Potensial Menghamba t  Pertumbuhan  Bakteri Aeromonas  hydrophila  dariKulit  Batang  Tumbuhan  Avicennia  sp . Chemical. 10 (2): 92-99. Doughari,  J. H. 2012. Fitokimia- Perspektif Global Tentang Peran Mereka Dalam Nutrisi dan Kesehatan. Fitokimia: Metode Ekstraksi Struktur Dasar dan Cara Tindakan Sebagai Agen Kemoterapi Potensia l. 1-32 Ernawati dan Hasmila I. 2014. Uji Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri  Senyawa Metabolit S ekunder
Ekstrak
Methanol Daun Mangrove (Rhizopora mucronata). FMIPA. Universitas Negeri Makassar Harbone, J. B. 1987."Metode fitokimia, Terjemahan K." Padmawinata dan I. Soediso, Penerbit ITB, Bandung Harti, A. S. 2015. Mikrobiologi Kesehatan. Hidayatullah  M.2017. Mangroves  Nusa  Tenggara  Timur  :  Kaya  Ragam  Jenis  Tetapi  Miskin Pemanfaatannya. Peneliti  Balai  Penelitian  Dan  Pengembangan  Teknologi  Hasil  Hutan. Lombok barat- NTB
James  J,    Baker  C,  Swain  H.  2002. Prinsip-prinsip  Sains  untuk  Keperawatan . Diterjemahkan Oleh Indah RetnoWardhani. Jakarta:Penerbit Erlangga. Jawetz. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba Medika. Jakarta
Kiplimo J J ; Koorbanally N A; Chenia H. 2011. Triterpenoids from vernoia  auriculifera Hiern exhibit antimicrobial activity. African journal Of Pharmacy and Pharmacology 5 (8): 1150- 1156 Kordi GH.
Ekosistem
mangrove: Potensi, Fungsi dan Pengelolaan. Jakarta:     Penerbit Rineka Cipta.
Linington, R.G., Roberstson, M. G., Gauthier, A., Finlay, B. B., Soest, R., Anderson , R.J. 2002. Caminoside, An  Antimicrobial  Glicolipid  Isolated  From  The  Marine  Sponges Caminus spaeroconia. 14 Nov:     4 (23). 4089-4092.
Liwang F; Bara R; Awaloei; Wuisan J. 2013. U ji Aktivitas Antibakteri JamurEndofit Akar Bakau Avicennia marina terhadap bakteri S. aureus dan E. coli. Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi Manado Muda,  E.Y.  2019. Screening  Senyawa  Metabolit  Sekunder  Pada  Kulit    Batang  Tumbuhan Avicenni a marina (Forks.) Vierh dan Sonneratia alba J. Smith di desa Huilelot, Kecamatan Semau, Kabupaten Kupang . Universitas Kristen Artha Wacana. Kupang-NTT Paputungan, Zulkifli; Wonggo, Djuhria; Kaseger, Bertie Elias. 2017. Uji Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan  Buah  Mangrove  Sonneratia  Alba  Di  Desa  Nunuk  Kecamatan  Pinolosian Kabupaten  Bolaang  Mongondow  Selatan  Sulawesi  Utara.Media  Teknologi  Hasil Perikanan . 5.3: 96-102. Pelczar M J, Chan ECS. 1986. Dasar-dasar mikrobiologi . Vol ke-1, 2. Hadioetomo RS, Imas T, Tjitrosomo  S,  Angka  Sl,  Penerjemah;  Jakarta  :  UI  Press.  Terjemahan  dari Elements  Of Mirobiology . Pradana, D., D. Suryanto, Y. Djayus. 2014. Uji Daya Hambat Ekstrak Kulit Batang Rhizopora mucronata  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Aeromonas  hydrophila,  Streptococcus agalactiae Dan Jamur Saprolegnia sp . Secara Invitro. Jurnal Aquacoastmarine. 2(1):78 Purnobasuki H. 2004. Potensi Mangrove Sebagai TanamanObat . Surabaya: UNAIR Rafael, A and Hilconida P. Calumpong. 2014. Comparison Of Litter Production Between Natural And  Reforested  Mangrove  Areas  In  Central  Philippines."Aquaculture,  Aquarium, Conservation and Legislation .
Ravikumar S; Gnanadesigan M; Suganti P; Ramalakshmi A. 2010. Antibacterial Potential Of Chosen  Mangrove  Plants  Againts  Isolated  Urinary  Tract  Infectious  Bacterial  Pathogens . International Journal Of Medicine And Medical Science2 (3): 94-99 Renaldi, Rozirwan Dan T Zia Ulqodry. 2018. Bioaktivitas senyawa bioaktif pada mangrove A. marina  dan  B.  Gymnorrhiza  sebagai  antibakteri  yang  diambil  dari  pulau  Payung  dan Tanjung api-api. Maspari Jurnal 10(1): 73-80. Program Studi Ilmu Kelautan. Indralaya Sabiladiyni, H A, Bahri M.S; Feska S ;dian R trianto A. 2016. Ekstrak Daun Mangrove (Avicennia marina)  Sebagai  Bahan  Antibakteri  Untuk  Penanggulangan  Bakteri  Pathogen  Pada Budidaya  Udang  Windu. Prossiding  Seminar  Nasional  Tahunan  Ke-,  Hasil  Penelitian Perikanan  Dan  Kelautan.  Program  Studi  Ilmu    Kelautan,  Fakultas  Perikanan  Dan  Ilmu Kelautan. Semarang Spalding, M. D., C. Ravilious and E.P. Green. 2001. World Atlas of Coral Reefs. University of California Press. Berkeley. USA. Usman. 2017. Uji Fitokimia Dan Uji Antibakteri Dari Akar R. Apiculata Terhadap Bakteri E. coli dan S. aureus. Jurnal kimia dan Pendidikan 2(3): 169-177. Program Studi Pendidikan Kimia Universitas Sebelas Maret. Samarinda Wibowo,  Cahyo.,  C.  Kusmana,  A.  Suryani,  Y.  Hartati  dan  P.  Oktadiyani.  2009.
Pemanfaatan Jenis Pohon Mangrove Api-Api (Avicennia
spp.) Sebagai Bahan Pangan dan Obat-obatan . Seminar Hasil Penelitian. Institut Pertanian Bogor: Bogor.
Yunus, M.F., Nge, S.T.,&  Sabuna, Ch.A. 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Del ima Merah (Punica Granatum L.) Terhadap Pertumbuha Vibrio Cholera. Indigenous Biologi : Jurnal Pendidikan dan Sains Biologi 1(3): 10-16. Yusuf  S. 2010. Isolasi dan Penentuan Struktur Molekul Senyawa Triterpenoid dari Kulit Batang Kayu api-api Betina (Avicennia marina Neesh). Jurnal Penelitian Sains 13 (2): 23-27 Zhu F; Chen X; Yuan Y; Huang M;Sun H; Xiang W. 2009. The chemical  investigation of the mangrove plant Avicennia marina and its endophytes. The Open Natural Product Journal 2:24-32