## Qualitative Phytochemical Analysis of Gracilaria verrucosa from North Sulawesi Waters
(Analisis Fitokimia kuatitatif Gracilaria verrucosa Dari Perairan Sulawesi Utara)
Ekklesia Luringunusa 1 , Grace sanger 2 *, Deiske A. Sumilat 2 , Roike I. Montolalu 2 , Lena J. Damongilala 2 , dan Verly Dotulong 2
1 Program Studi Ilmu Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado 95115 Sulawesi Utara, Indonesia
2 Staf Pengajar Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi Jl. Kampus Unsrat Bahu, Manado 95115 Sulawesi Utara, Indonesia
*Corresponding author: sanger.grace@unsrat.ac.id
Manuscript received: 7 July 2023. Revision accepted: 29 July 2023.

## Abstract
The research aims to determine the phytochemical content such as phenolics, flavonoids, tannins, saponins, alkaloids, steroids, and triterpenoids found in the seaweed G. verrucosa. Seaweed G. verrucosa taken from the waters of North Sulawesi, Nain Village, North Minahasa, was extracted by maceration for 24 hours at room temperature, repeated 3 times using 96% ethanol solvent. The  analysis  in  this  study  consisted  of  seven  test  parameters  such  as  phenolic  compounds, flavonoids,  tannins,  saponins,  steroids,  triterpenoids,  and  alkaloids.  The  results  of the  analysis showed  that  the  secondary  metabolites  of G.  verrucosa contained  phytochemical  compounds such  as  phenols,  flavonoids,  tannins,  saponins,  steroids,  and  alkaloids,  and  no  triterpenoid compounds were found. It was concluded that G. verrucosa which grows in the waters of North Sulawesi,  Nain  Village,  can  function  as  functional  food,  and  medicine  because  it  has  natural bioactive compounds.

## Keywords: Phytochemical content, Gracilaria verrucosa, secondary metabolites

## Abstrak
Penelitian  bertujuan  mengetahui  kandungan  fitokimia  seperti  fenol,  flavanoid,  tanin,  saponin, alkaloid,  steroid,  dan  triterpenoid  yang  terdapat  pada  rumput  laut G.  verrucosa .    Senyawa metabolit  sekunder  yang  umum  terdapat  pada  tanaman  adalah  senyawa  terpenoid,  alkaloid, fenolik, streroid, saponin, tannin. Rumput laut G. verrucosa yang di ambil dari perairan Sulawesi Utara Desa Nain Minahasa Utara di ekstraksi dengan cara maserasi selama 24 jam pada suhu ruang di ulangi sebanyak 3 kali menggunakan pelarut etanol 96 %. Analisis pada penelitian ini terdiri dari tujuh parameter pengujian seperti senyawa fenol, flavonoid, tanin, saponin, steroid, triterpenoid dan alkaloid. Hasil analisis menunjukan bahwa kandungan metabolit sekunder dari G.  verrucosa mengandung  senyawa  fitokimia  seperti  fenol,  flavonoid,  tanin,  saponin,  steroid, alkaloid  dan  tidak  ditemukan  adanya  senyawa  triterpenoid.  Hal  ini  disimpulkan  bahwa G. verrucosa yang tumbuh di perairan Sulawesi utara Desa Nain dapat berfungsi sebagai pangan fungsional, obat-obatan karena memiliki senyawa bioaktif alami.
Kata kunci : Kandungan fitokimia, Gracilaria verrucosa, metabolit sekunder

## PENDAHULUAN
Perairan Laut memiliki banyak keunggulan  yang  terbukti  telah  ditemukan senyawa  bioatif  alami  dari  biota  laut  dan makro  alga.  Hal  ini  diperkuat  menurut Sumilat et al., (2018) senyawa bioaktif yang disentesis  oleh  biota  laut  ascidin  yang  di ambil dari perairan Sulawesi Utara terdapat senyawa  metabolik  sekunder  alami  dan
memiliki  aktivitas  farmakologi  untuk  di isolasi  dan  dimanfaatkan  dalam  bidang farmasi. Selain pada biota laut makro alga juga  terbuti  memiliki  senyawa  bioaktif seperti kandungan senyawa fenol berperan penting  sebagai  penyumbang  aktivitas antioksidan, antimutagenik, antitumor, dan antikanker  dari  rumput  laut  (Sanger et  al.,
2019).
Rumput  laut  merupakan  salah  satu spesies  yang  dapat  hidup  di  air  laut, tumbuhan  tingkat  rendah,  tidak  memiliki struktur  tulang  yang  berbeda  seperti  akar, batang,  dan  daun.  Rumput  laut  atau  alga juga  dikenal  sebagai  sebagai seaweed merupakan  bagian  terbesar  dari  rumput laut yang tergolong dalam divisi Thallophyta .  Sektor  ini  memiliki  empat kategori  yang  diketahui Thallophyta yaitu Chlorophyceae (alga hijau) Phaeophyceae
(alga coklat), Rhodophytaceae (alga merah).  Ganggang  hijau  banyak  tumbuh subur  di  air  tawar,  sedangkan  ganggang merah dan coklat ditemukan hanya sebagai habitat laut (Ghufran, 2010).
Ganggang  merah  dibudiyakan  di Indonesia adalah Gracilaria sp. Ganggang ini  tumbuh  cukup  baik  di  daerah  dengan suplai  nutrisi  yang  cukup  serta  memiliki distribusi yang sangat baik di daerah yang tenang dan kawasan lindung. Tipe ini dapat menyebar  hingga  5  km  pada  titik penyebaran awal. Jumlahnya kini dilaporkan  sekitar  150  spesies  yang menyebar  dari  perairan  subtropis  yang dingin  hingga  perairan  tropis  (Kasim, 2016).
Morfologi G.  verrucosa termasuk salah  jenis  rumput  laut  yang  mempunyai batang semu sehingga dikolongkan sebagai Thallophyta . Tanaman ini memiliki struktur  tubuh  yang  mirip  walaupun sebenarnya  berbedah,  disebut  sebagai tallus.  Thalus ini  tersusun  dari  jaringan yang  sangat  kuat  berwarna  kuning-hijau atau kuning-coklat, berbentuk silindris, licin, percabangan  thallus  selang-seling  tidak teratur,  memusat  pada  bagian  pangkal, cabangnya  berbentuk  lateral  memanjang seperti  rambut,  ukuran  panjang  sekitar  25 cm  dan  thallus  0,5 –  1,5  mm  (Nugroho  & Kusnendar,  2015) . Taksonomi  klasifikasi dari  rumput  laut Gracilaria  verrucosa (Gambar 1) dapat di klasifikasikan. Menurut (Anggadiredja, 2011) sebagai berikut:
Divisio : Rhodophytae Class : Rhodhophyceae Ordo : Gracilariaales Family : Gracilariceae Genus : Gracilaria Spesies : G.verrucosa
Gambar 1. Gracilaria verrucosa
Senyawa  fitokimia  adalah  jenis  zat kimia  atau  nutrient  yang  di  turunkan  dari sumber tumbuhan. Pada dasarnya tanaman  memiliki  dua  jenis  senyawa metabolit,  yaitu  metabolit  primer  dan metabolit sekunder (Nofiani, 2008).
Sebagian  besar  karbon,  nitrogen,  dan energi digunakan untuk menyusun molekul-molekul utama (karbohidrat,
lemak,  protein,  dan  asam  nukleat)  yang disebut  metabolit  primer.  Sebagian  kecil karbon, nitrogen, dan energi juga digunakan  untuk  mensintesis  molekul organik  yang  tidak  memiliki  peran  secara langsung dalam pertumbuhan dan perkembangan, dinamakan metabolit sekunder  yang  dapat  di  gunakan  sebagai lead  compounds dalam  penemuan  obat- obat baru (Croteau et al., 2015). Senyawa metabolit  sekunder  yang  umum  terdapat pada  tanaman  adalah  senyawa  terpenoid, alkaloid, fenolik,streroid,saponin,tannin (Gutzeit & Ludwig-Müller, 2014). Metabolit sekunder  dapat  di  manfaatkan  dalam bidang  farmakologi  diantaranya  sebagai antibiotic,  antioksida,  antikanker,  inhibitor enzim,  pigmen,  promotor  pertumbuhan hewan dan tumbuhan (Ergina et al., 2014). Ekstrak  alga  laut  juga  telah  di  buat tablet  pengganti  garam  untuk  hipertensi dan  obat  rematik  dan  alga  laut  dapat bermanfaat sebagai antioksidan (Sanger et al. ,  2013),  anti-bakteri  (Dotulong et  al. , 2016),  antiperadangan,  antidiabetes,  anti kanker  dan  lain-lain.  Pigmen  rumput  laut selain  berfungsi  sebagai  pewarna,  juga mempunyai banyak manfaat bagi kesehatan,  Jenis-jenis  fotosintetik  pigmen rumput  laut  terdiri  dari  klorofil  (a,  b,  c), karotenoid  (karoten  dan  xantofil)  dan
fikobilin  (fikoeritrin  dan  fikosianin)  (Sanger et al. , 2017).
Rumput laut G. verrucosa mempunyai kandungan  cukup  lengkap.  Secara  kimia rumput laut terdiri dari air (27,8%), protein (5,4%)  protein  berperan  penting  sebagai pembentuk  sel, karbohidrat  (33,3%),  pada alga  merah  Karbohidrat  mengandung polisakarida  memiliki  peran  sebagai  serat yang baik bagi pencernaan manusia, lemak (8,6%)  asam  lemak  memiliki  fungsi  bagi tubuh  manusia  yang  dapat  berperan sebagai  antioksidan,  serat  (3%)  sangat rendah  karena  di  pengaruhi  oleh  proses fotosistensis  akibat  dari  pertumbuhan  dan musim  yang  di  sebabkan  oleh  perubahan lingkungan mempengaruhi fotosintesis dan penyerap nutrient dan abu (22,25%) Kadar abu rumput laut cukup tinggi karena rumput laut  mengandung  mineral-mineral  baik. Komposisi kimia tersebut tergantung pada jenis  habitat  dan  musim  (Rukmi et  al., 2012).
Ekstrak etanol rumput laut umumnya terdiri  dari  senyawa  polifenol  sekitar  20- 30%,  sedangkan  ekstrak  air  rumput  laut memiliki jumlah polifenol yang sangat kecil dan > 90% polisakarida. Gracilaria spesies mengandung phycocolloids, sumber utama agar α-(1,4)-3,6-  anhydro-L-galaktosa  dan β-(1,3)-D-galaktosa  dengan  esterifikasi  di dinding sel. Oleh karena itu mereka adalah zat  penting  untuk  keperluan  bioteknologi (Oh et al. , 2016).
Hasil penelitian (Sanger et al ., 2018) juga  membuktikan  rumput  laut  merah  dan ekstraknya  mengandung  banyak  senyawa kimia  protektif  yang  berfungsi  sebagai antioksidan,  di  antaranya  senyawa  fenol, dietary  fiber,  polyunsaturated  fatty  acids (PUFA)  dan  fotosintetik  pigmen.  Rumput laut  merah  dari  perairan  Sulawesi  Utara yang  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi  dengan  pelarut  aseton  dan etanol.  Kadar  total  fenol  tertinggi  terdapat pada ekstrak aseton G. salicornia sebesar (72,224±6,01 µg GAE (galic acid equivalent)/g.  Hal  ini  disimpulkan  bahwa rumput  laut  merah G.  Salicornia dapat berfungsi  sebagai  pangan  fungsional sumber bahan alami.
Indonesia termasuk
Perairan Sulawesi  Utara,  Desa  Nain  sejauh  ini
memiliki  sejumlah  besar  spesies  rumput laut akan tetapi belum ada penelitian untuk mengatahui kandungan metabolit sekunder G.  verrucosa. Tujuan  dari  Penelitian  ini untuk  mengetahui  kandungan  fitokimia seperti  fenol,  flavanoid,  tanin,  saponin, alkaloid  dan  steroid,  triterpenoid  yang terdapat pada rumput laut G. verrucosa

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  telah  lakukan  di Laboratorium  Pengendalian  Mutu  Hasil Perikanan  dan  Penanganan  Pengolahan Hasil Perikanan dan Laboratorium Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan  Alam  Unsrat,  Universitas Sam  Ratulangi  Manado  selama  3  bulan yaitu  bulan  Desember  sampai  dengan Maret 2023.

## Bahan Dan Alat Penelitian
Bahan  kimia  yang  di  gunakan  untuk analisa fitokimia yaitu (Ferri Klorida (FeCl3 1  %),  Asam  Sulfat  (H ₂ SO ₄ ),  Mangnesium (Mg), Asam Klorida (HCl), kloroform, asam asetat anhidrat dan peraksi meyer, reagen folin  ciocalteau  7,5%,  Natrium  karbonat (Na ₂ CO ₃ ),  etanol  96%,  nantrium  asetat (C ₂ H ₃ NaO ₂ ), aluminium klorida (Alcl ₃ ), folin denis,  asam  asetat  25%,  asam  sulfat (H ₂ SO ₄ )  25%,  kertas  lebel,  kertas  saring whatman  No  1,  air  suling,  air  panas, aluminium  foil,  kertas  lebel,  kertas  saring, tissue.
Alat penelitian yang di gunakan untuk analisa  fitokimia  yaitu Rotary  Vakuum Evaporator (Shimatzu, England), ), spektrofotometer  UV-VIS  (AMV  11)  , timbangan  analitik,  erlenmeyer,  corong (Buchner  Funnel),  tabung  reaksi,  rak tabung  reaksi,  mikro  pipet  adjustable  0,5- 10 ml, vortex, hot plate, gelas piala 50 ml, gelas  ukur  kaca  1000  ml  (Pyrex),  cawan petri,  batang  pengaduk  kaca,  lemari  es, dan  oven,  blender,  botol  sampel  20  ml, toples, dan keranjang.

## Tahap Penelitian
Rumput  Laut  merah G.  verrucosa segar di ambil dari perairan Sulawesi Utara Desa  Nain  Kabupaten  Minahasa  Utara, kemudian  di  cuci  bersih  dengan  air
mengalir  untuk  mengeluarkan  kotoran ephypita dan kerang-kerangan yang menempel  di  rumput  laut,  setelah  sudah bersih ditiriskan lalu di timbang, selanjutnya dikeringkan  menggunakan  oven  50  °C selama  2  minggu,  sampel  yang  sudah kering  digilingi  menggunakan  blender sampai menjadi bubuk, kemudian disimpan dalam  suhu  ruang.  Setelah  itu  ekstraksi sampel  di  lakukan  dengan  cara  maserasi menggunakan pelarut etanol 96%, kemudian di maserasi selama 24 jam pada suhu  ruang yang di ulangi sebanyak 3 kali,
sampel ditampung dan di saring menggunakan  kertas  saring  Whatman No.1, ekstrak kental etanol yang di peroleh kemudian  di  evaporasi  menggunakan vaccum  rotary vaporator dengan  suhu  40 °C, Ekstrak dari sampel yang di peroleh di simpan  pada  suhu  dingin.  Pengujian  di lakukan  terdiri  dari:  kandungan  fitokimia secara kualitatif yang terdiri dari flavonoid, saponin,  alkaloid,  steroid  dan  triterpenoid. Tahap  penelitian  dapat  lihat  pada  gambar 2.

## Gambar 2. Diagram Alir Penelitian

## Metode Analisis

## Analisis Senyawa Alkaloid
Penentuan  kadar  alkaloid  mengikuti metode (Herborne, 1973). Sebanyak 0,5 g sampel ditambakan dengan beberapa tetes ammonium  dan  dilarutkan  dalam  5  ml CHCL ₃ kemudian disaring. Filtrat kemudian ditambakan  2-5  tetes  H ₂ SO ₄ dan  dikocok sampai  terbentuk  2  lapisan.  Kemudian diobsevasi  perubahan  warna  yang  cepat atau  spontan  yang  terjadi  menandakan kehadiran  alkaloid.  Penggunaan reagen Dragendroff menghasilkan  warna  ungu, Reagens  Wagner menghasilkan  warna coklat  dan Reagen  Meyer menghasilkan warna putih krem impulsive.

## Analisis Senyawa Tanin
Penentuan kadar tanin menggunakan metode (Mehdinezhad et al. , 2016).
Secara ringkas: 1 gr sampel didihkan selama  5  menit  didalam  water  bath menggunakan  20  ml  aquades,  kemudian disaring. Filtrat yang sudah dingin
sebanyak  1  ml  dilarutkan  kedalam  5  ml aquades  dan  ditambahkan  2-3  tetes  10% firric chloride, kemudian diamati perubahan warna  yang  terjadi.  Pembentukan  warna hitam  atau  hijau  kecoklatan  yang  cepat atau tiba-tiba menunjukan kehadiran tanin.

## Analisis Senyawa Saponin
Penentuan
kadar saponin menggunakan  metode  (Danapalan  & Thangaraju, 2013)
Secara  ringkas:  100  mg  sampel didihkan  dengan  1  ml  aquades  dan disaring.  Setelah  itu  ditambahkan  0,5  ml aquades  kedalam  filtrat  dan  dikocok dengan kuat selama 5 menit. Terbentuknya busa  yang  kontinyu  menandakan  adanya saponin.

## Analisis Senyawa Flavanoid
Penetapan kadar flavonoid
menggunakan metode (Mehdinezhad et al., 2016).
Dengan  sedikit  modifikasi.  Secara ringkas  sebagai  berikut:  1  g  sampel
didihkan dengan 10 ml aquades, kemudian di tambakan 5-10 tetes HCL dan potongan kecil magnesium kemudian didihkan selama  beberapa  menit.  Pembentukan warna  coklat  kemerahan  menandakan kehadiran flavonoid.

## Analisis Senyawa Steroid/Triterpenoid
Penentuan
kadar uji steroid/triterpenoid  ekstrak  rumput  laut menggunakan metode (Mehdinezhad et al., 2016).  Sebagai  berikut:  1  g  sampel dimasukkan dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan  5  ml  etanol  50%,  kemudian dipanaskan selama 3 menit didalam water bath  kemudian  didinginkan  dalam  suhu ruang kemudian disaring. Filtrat dikeringkan  didalam  cawan  evaporator kemudian  dilarutan  dalam  1  ml  etil  eter, setelah  itu  dikocok  selama  5  menit. Kemudian  fraksi  etil  eter  didekantasi (pemisahan) dan dikeluarkan. Sesudah itu ditambakan  10  ml  kloroform  lalu  di  aduk selama 5 menit. Setelah itu tambahkan 0,5 mg  anhydrous  sodium  sulfat,  dikocok perlahan  kemudian  disaring.  Setelah  itu filtrat dimasukkan dalam tabung reaksi dan selanjutnya diuji menggunakan a.  Reaksi
Liebermann-
Burchard’s Rection: filtrat acetic anhydride ditambahkan
ditambahkan Liebermann- Burchard’s reaction engan volume  yang  sama  kemudian  dikocok dengan  perlahan-lahan,  setelah  itu ditambahkan  1  ml  asam  sulfat  murni pada sisi luar tabung rekasi. Pembentukan  cicin  merah  kecoklatan pada  daerah  contak  dan  warna  hijau kekuningan pada lapisan asetat menunjukkan adanya kehadiran sterol/triterpenoid.
b. Salwoski  test. 2-3  tetes  asam  sulfat murni ditambahkan pada lapisan bawah  dari  acetic  anhidrride  akan membentuk cicin warna coklat kemerarahan menunjukkan keberadaan steroid.
Analisis Senyawa Fenol Uji fenol ektrak rumput laut menggunakan  metode  (Harborne,  1973). Prosedurnya sebagai  berikut:  1  ml  larutan FeCl ₃ (Besi (III) klorida) 1% dalam air atau
etanol  ditambahkan  5  ml  larutan  ekstrak, kemudian  dikocok.  Terbentuknya  warna hijau,  merah,  ungu,  biru,  atau  hitam  yang kuat mengunjukkan adanya fenol.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Parameter pengujian dalam penelitian ini adalah menganalisa fitokimia ekstrak  rumput  laut Gracilaria  verrucosa yang dilakukan antara lain adalah identifikasi alkaloid,
tanin, steroid/triterpenoid  dan  fenol.  Skrining fitokimia kualitatif rumput laut G. verrucosa menggunakan  pereaksi  pereaksi  kimia, diuraikan sebagai berikut:

## Senyawa Alkaloid
Hasil  uji  senyawa  alkaloid  dapat  di lihat pada gambar 3.
Gambar 4. Hasil Uji Alkaloid 3.
Masing-masing tabung tersebut ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi Mayer, Wagner Dan Dragendorff. Sehingga terbentuk  endapan  tersebut  menunjukan adanya  alkaloid,  dengan  pereaksi  Mayer memberikan endapan warna putih, dengan pereaksi  Wagner  memberikan  endapan berwarna  coklat  dan  pereaksi  Dragendorff memberikan  endapatn  berwarna  merah (Sangi et al., 2008).
Akaloid merupakan
metabolit sekunder pada umumnya senyawa alkaloid berasal dari tumbuhan, terutama tumbuhan berbunga, di mana lebih dari 20% spesies angiosperma  (tumbuhan  berbunga)  yang mengandung  alkaloid.  Alkaloid  berfungsi sebagai  obat,  menetralisir  zat  racun, detoksifikasi  hasil  metabolisme,  pengatur pertumbuhan dan penyedia unsur nitrogen yang diperlukan tumbuhan, anti diare, anti diabetes,  antimikroba  dan  antimalaria (Ningrum et al ., 2016). Senyawa golongan alkaloid  diklasifikasikan  menurut  jenis cincin heterosiklik nitrogen yang
merupakan  bagian  dari  molekul.  Menurut klasifikasi tersebut, maka alkaloid piperidin, alkaloid isoquinoline, alkaloid indol, alkaloid piridin dan alkaloid tropan. Struktur alkaloid dapat  di  lihat  pada  gambar  4  sebagai berikut:
Gambar 4. Alkoloid (Endarini, 2016)
Senyawa  metabolit  sekunder G. verrucosa ini  mempunyai  fungsi  biologis tertentu pada tumbuhan. Menurut Ningrum et  al., (2016),  Alkaloid  berfungsi  sebagai obat,  menetralisir  zat  racun,  detoksifikasi hasil  metabolisme,  pengatur  pertumbuhan dan penyedia unsur nitrogen yang diperlukan tumbuhan, antidiare, antidiabetes, antimikroba dan antimalaria.

## Senyawa Tanin
Pengujian  senyawa  tanin  dari  hasil penelitian  menggunakan  sampel  rumput laut G. verrucosa menunjukan hasil positif karena terjadi sedikit perubahan pembentukan  warna  hitam  atau  hijau kecoklatan  yang  cepat  atau  tiba-tiba menunjukan  kehadiran  tanin  pada  saat penam penambahan
FeCl ₃
1% (Mehdinezhad et  al. ,  2016).  Hasil  uji senyawa tanin dapat di lihat pada gambar 5.

## Gambar 5. Hasil Uji Tanin
Tanin adalah senyawa organik sangat kompleks, dengan berat molekul lebih dari 400, terdiri dari senyawa fenolik yang sulit dipisahkan dan dikristalkan, protein diendapkan  dari  larutan.  Tanin  ini  juga merupakan  senyawa  polifenol  yang  kaya akan manfaat sektor kesehatan seperti anti
diare, anti bakteri, dan antioksidan (Desmiaty et  al. ,  2008).  Tanin  dibagi menjadi  dua  kategori:  Tanin  mudah terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin terhidrolosis  adalah  polimer  ester  asam galat  dan  ellagic  molekul  gula,  dan  tanin. Tanin terkondensasi adalah polimer flavonoid  dengan  ikatan  karbon-karbon dengan cathecin dan gallocathecin (Patra & Saxena, 2010). Struktur tanin dapat dilihat pada gambar 6.

## Gambar 6. Tanin (Patra & Saxena, 2010)
Tanin  memiliki  nilai  obat  yang  cukup tinggi dalam industri obat dan farmasi yang memiliki  peran  penting  sebagai  antivirus, antikanker  dan  juga  telah  di  laporkan bahwa tanin mampu menghambat replikasi HIV  secara  selektif  (Eluvakkal et  al. , 2010).Tanin didefinisikan sebagai polifenol tanaman  alami  dan  tersebar  luas  diantara tanaman darat dan laut. Banyak obat telah mengandung tanin digunakan dalam pengobatan  luka  bakar  karena  bergerak dalam mengendapkan protein dari jaringan yang  terpapar  untuk  membentuk  lapisan pelindung.  Tanin  telah  ditemukan memiliki antivirus, antibakteri, efek anti-parasit, anti- inflamasi, dan antioksidan, sebagai contoh dari  rumput  laut  dalam  hasil  penelitian mengkonfirmasi  kehadiran  tanin  juga terdapat  dari  ektrak  air  dari  alga  coklat
Sargassum polychystum, Padina gymnospora dan Sargassum duplika
(Ndhlala et al. , 2007).

## Senyawa Saponin
Pengujian
senyawa saponin dilakukan  dengan  memanaskan  sampel yang  di  tambakan  air  panas  hingga mendidih  selama  2-3  menit,  setelah didinginkan  sampel  di  kocok  kuat  kuat dengan  terbentuknya  busa  kemudian ditambakan HCL 2M. Hasil yang di peroleh menunjukan  adanya  busa  menandakan positif  adanya  senyawa  saponin.  Hasil  uji
senyawa  saponin  dapat  di  lihat  pada gambar 7.
Gambar 7. Hasil Uji Saponin
Saponin
merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak ditemukan pada  tanaman  dibagian  kulit,  daun,  biji, akar,  dan  buah  yang  berfungsi  sebagai sistem pertahanan dan bertanggung jawab dalam  berbagai  bidang  seperti  makanan maupun obat-obatan sampo, industi kosmetik,  pertanian.  Senyawa  dalam saponin  diaplikasikan  dalam  dunia  obat- obatan diketahui memiliki aktifitas sebagai obat anti bakteri, anti tumor, dan antikanker (Bintoro et  al., 2017).  Struktur  saponin dapat dilihat pada gambar 8.

## Gambar 8. Saponin (Sutardi, 2016)
Menurut  Danapalan  &  Thangaraju, (2013)  Saponin  memiliki  kapasitas  dari tanaman alami yang tersebar luas diantara tanaman  darat  dan  laut.  Selain  pada spesies ganggang coklat Padina boergesenni ,  saponin  juga  hadir  pada ganggang  merah G.  verrucosa yang sekarang ini menjadi sorotan untuk produk alami adalah aktivitas antiflamasi,
antimikroba berperan
sebagai penghambatan  membran  sel  dan  dinding sel.

## Senyawa Flavanoid
Hasil  uji  flavonoid  dinyatakan  positif, setelah ekstrak ditambakan HCl pekat dan
bubug Mg sehingga potongan pita magnesium  menghasilkan  warna  coklat kemerahan selama 3 menit  (Mehdinezhad et  al. ,  2016).  Hasil  uji  senyawa  Flavanoid dapat di lihat pada gambar 9.

## Gambar 9. Hasil Uji Flavanoid
Flavonoid  ditemukan  dalam  tumbuh- tumbuhan  dialam  antara  lain  quecetin, myricetin, luteolin dan flavanones. Senyawa ini ditemukan bervariasi berdasarkan tanaman seperti buah- buahan,  sayuran,  biji-bijian,  dan  rempah- rempah  dan  senyawa  fenol  yang  terbesar yang merupakan zat warna merah, biru dan ungu  dan  sebagian  zat  warna  kuning (Arukwe,  Amadi,  Duru,  Agomuo,  et  al., 2012).  Flavanoid  khususnya  isoflavonon, memiliki kemampuan lebih tinggi melawan bakteri  gram  positif  dibandingkan  bakteri gram negatife. Isoflavonon memiliki aktivitas melawan jamur pathogen (Rachel &  Thangaraju,  2015).Flanoid,  isoflavone, flavon, antosionin, kumarin, lihnan, katekin, dan  isokatekin  terbukti  memiliki  aktivitas anti  tumor  dan  antiosidan  (Boopathy  & Kathiresan,  2010).  Komposisi  flavonoid pada  champia  parvula,  masing-masing adalah 24,30±0,11, 10,17±01, 55,33±0,14, 22,50±0,11  dan  10,43±0,00  mg  g-g-1 (Boopathy  &  Kathiresan,  2010).  Golongan flavonoid utama ditunjukkan pada Gambar 10.
Flavanoid  juga  merupakan  agen antimikroba  penting  yang  ditemukan  di tumbuhan darat. Pada tumbuhan flavonoid berfungsi  sebagai  metabolik  sekunder memiliki  aktivitas  antialergi,  antiflamasi, antikanker,  dan  antibiotik  (Arsianti et  al.,
2020).  Falvonoid  merupakan  golongan bahan  alami  dengan  struktur  penyusun utama fenolik. Flavonoid merupakan
senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam tumbuh-tumbuhan, senyawa ini juga ditemukan didalam buah-buahan, sayuran, biji-bijian,  kulit,kayu,  akar,  batang  dan bunga.  Komponen  tersebut  memiliki  efek yang menguntungkan di bidang kesehatan ,  dan  sangat  diperlukan  dalam  berbagai aplikasi  nutraceutical,  farmasi,  obat  dan kosmetik. Pada tumbuhan flavonoid berfungsi sebagai
antioksidan, antimikroba,  fotoresepotor,  penarik  visual,
makanan, untuk penyerap dan filter cahaya (Fitri & Putra, 2021).
Flavonoid  ditemukan  dalam  tumbuh- tumbuhan  dialam  adalah  senyawa  fenol yang  terbesar  yang  merupakan  zat  warna merah,  biru  dan  ungu  dan  sebagian  zat warna  kuning  (Arukwe,  2012).  Flavonoid merupakan  turunan  fenol  yang  memilki struktur  dasar  fenilbenzopiron  (tokoferl), dicirikan  oleh  15  karbon  (C6-C3-C6)  yang terdiri  dari  satu  cincin  teroksigenasi  dan dua cincin aromatis.
Flavon Flavanol           Flavanoid Gambar 10.  Golongan Flavanoid (Redha, 2010)

## Senyawa Steroid/Triterpenoid
Hasil  uji  sampel  steroid  dinyatakan positif mengandung  senyawa steroid ditunjukkan  dengan  terjadinya  warna kecoklatan  setelah  ditambakan  larutan anhidrida  asetat  dan  asam  sulfat  pekat menghasilkan  cincin  kecoklatan  pada perbatasan pelarut. sedangkan
Triterpenoid bersifat negative karena tidak
adanya  perubahan  warna.  Menurut  Sangi et al., (2008) bahwa uji ini di dasarkan pada kemampuan senyawa triterpenoid membentuk warna oleh H ₂ SO ₄ pekat pada pelarut  asetat  glasial  yang  membentuk warna jingga.Hasil uji senyawa steroid/triterpenoid  dapat  di  lihat  pada gambar 11. Uji Steroid                 Uji Triterpenoid Gambar 11. hasil uji steroid dan triterpenoid
Steroid. adalah sumber dari tumbuhan  yang  di  akui  sebagai  pertama dengan memilki keunggulan sebagai antimikroba,  antiparasit,  insektisida  dan kardiotonik.  Steroid  juga  memiliki  tujuan penting  dalam  diet,  obat  herbal  dan kosmetik  (Domettila et  al. ,  2013).Steroid
adalah  terpenoid  lipid  4  cincin  merupakan nama populernya karbon menyatu menjadi basa.  Senyawanya  memilki  beragam struktur. Penambahan gugus kimia teroksidasi ke cincin mengubah penampilannya.  Efek  ini  disebabkan  oleh
oksidasi  cincin  karbon  itu  sendiri  (Samejo et al., 2013).
Steroid  merupakan  senyawa  yang struktue  kimianya  mengandung  cincin  atai lingkar  siklopentana  perhidrofenantrena merupakan kombinasi antara lingkar siklopentena
dan lingkar lingkar perhidrofenantrena  (fenantrena  jenuh). Struktur kimia steroid memiliki empat buah lingkar.  Ke  empat  lingkar  diberi  petunjuk dengan huruf besar A, B, C, dan D. Atom- atom  karbon  dalam  struktur  kimia  steroid diberi  nomor  yang  dimulai  dari  lingkar  A menuju  ke  lingkar  D.  Beberapa  steroid mengandung  satu,  dua,  atau  tiga  ikatan rangkap  dua  dan  banyak  di  antaranya mempunyai satu atau lebih gugus hidroksil. Cincin  atau  lingkar  pada  sebagian  besar steroid  bukanlah  lingkar  aromatik.  Steroid mempunyai substituen pada atom C 10 dan atom  C  13  (Samejo et  al., 2013).  Struktur senyawa  steroi  dapat  dilihat  pada  gambar 12.
Gambar 12. Steroid (Samejo et al., 2013)
Sterol  juga  di  kenal  sebagai  alkohol steroid  adalah  kelas  bahan  kimia  yang berperan  penting  dalam  tubuh.  Sterol manusia  dikenal  dengan  kolestrol  yang berfungsi sebagai vitamin yang larut dalam lemak (Martin-Creuzburg & Merkel, 2016). Sterol dalam  alga laut merupakan sumber utama  dari  banyaknya  jenis  sterol  yang ditemukan di lingkungan laut (Mouritsen et al. ,  2017).  Selain  sterol  pada  alga, ditemukan  bahwa  Senyawa  alga  laut mengandung  fraksi  steroid.  Hasil  uji fitokimia  khususnya  pada Ulvan  lactuca , menyatakan bahwa hasilnya positif mengandung  steroid.  Selain  pada  alga merah  dan  steroid  juga  menunjukan keberadaannya  pada  alga  hijau.  Hasil positif  pada  steroid  yang  menyatakan bahwa steroid mengandung senyawa alami
yang  di  produksi  oleh  tubuh  (Jati et  al., 2019).

## Senyawa Fenol
Hasil uji senyawa fenol dapat di lihat pada gambar 13.

## Gambar 13 Hasil Uji Fenol
Hasil  pengujian  fenol  dinyatakan positif  setelah  ditambakan  FeCl ₃ .  Adanya perubahan  warna  hijau  kekuningan  yang menunjukan adanya senyawa fenol. Fenol kata lain disebut asam karbolat merupakan zat  kristal  tidak  berwarna  dengan  warna merah muda cerah memiliki bau yang khas. Senyawa fenol adalah bagian dari golongan metabolit sekunder pada
tumbuhan  yang  termasuk  dalam  alcohol aromatic karena gugus hidroksilnya terikat pada  cincin  benzene.  Senyawa  fenolik alami biasanya ada dalam bentuk polifenol, membentuk  eter.  Ester  atau  antara  lain flavonoidlignin,  tanin,  tokofenol,  kumarin, turunan  asam,  asam  organic  sinamat  dan multifungsi  (Dhurhania  &  Novianto,  2018). Senyawa  fenolik  merupakan  salah  satu senyawa metabolik sekunder yang memiliki struktur  senyawa  cincin  aromatik  dengan adanya  salah  satu  gugus  hidroksil  (OH) yang terikat. Selain itu senyawa fenolik juga dikelompokan  berdasarkan  jumlah  cincin aromatik  dan  jumlah  atom  yang  terikat pada  rantai  sampingnya  yaitu  fenolik dengan  satu  cincin  aromatik,  fenolik dengan  dua  cincin  aromatik,  quinon  serta polimer.  Selain  itu  pengelompokan  yang lebih  kompleks  yaitu  bedasrakan  ikatnnya dengan gula atau beberapa asam organik. Senyawa  fenol  banyak  terdapat  pada rumput  laut  seperti:  pholorotanin.  Contoh senyawa
pholrotanin seperti
Tetraphlorethol  dapat  dilihat  pada  gambar 14.
Gambar 14. Tetraphlorethol (Samejo et al., 2013) Alga mengandung senyawa polifenolik  seperti  phrotannin  senyawa yang  bereaksi  sebagai  penangkapan elektron  dan  bertanggung  jawab  penting sebagai sifat antioksidan multifungsi seperti penangkapan  radikal  hidroksil,  radikal peroksil atau radikal superoksida (Chakraborty et  al. ,  2013).  Data  analisa kandungan  fitokimia  dapat  dilihat  pada (tabel 1).
Tabel 1. Analisis fitokimia kualitatif Gracilaria verrucosa
G.  verrucosa mengandung  senyawa Alkaloid,  tanin, saponin, flavonoid,  steroid, fenol akan tetapi tidak menunjukan adanya senyawa  triterpenoid.  Hasil  penelitian fitokimia  kualititatif  yang  di  peroleh  dari penelitian  ini  lebih  banyak  dibandingkan metabolit  bioaktif  yang  dihasilkan  menurut Febrianto et  al., (2019),  pada  rumput  laut G.  verrucosa yang  di  ekstraksi  metanol hanya  mengandung  alkaloid,  saponin, flavanoid dan fenolik, triterpenoid.
Beberapa  jenis  alga  merupakan sumber  potensial  bagi  pangan  fungsional yang dapat dimanfaatkan untuk kesehatan karena  mengandung  senyawa  kimia  yang mempunyai  aktivitas  biologis  atau  zat bioaktif (Lantah et al., 2017).
Alga  juga  diketahui  sebagai  sumber pangan fungsional karena memiliki kandungan antioksidan yang sangat dibutuhkan  tubuh  (Sanger  et  al.  2019) karena  dapat  menghambat  tumbuhnya radikal  bebas  yang  menjadi  sumber penyakit. Penelitian yang dilakukan sanger et al. 2019 dari salah satu jenis rumput laut merah G.  Salicornia,  Halymenia  durvilae dan…… tronoi di  perairan  Sulawesi  Utara mengandung senyawa bioaktif yang mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang
mampu  menghambat  radikal  bebas  dan terbukti  juga  dapat  menghambat  diabetes dan kanker  (Sanger et al. , 2022;  Sanger et al. , 2023).

## KESIMPULAN
Rumput  laut G.  verrucosa yang  di ambil dari perairan Sulawesi Utara mengandung  senyawa  bioaktif  seperti fenol, flavonoid, tanin, alkaloid, steroid dan saponin.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggadiredja, J. T. (2011). Laporan forum rumput laut. Pusat Riset Pengolahan Produk Dan Sosial Ekonomi Kelautan Dan Perikanan. Jakarta .
Arsianti,  A.,  Bahtiar,  A.,  Wangsaputra,  V. K.,  Azizah,  N.  N.,  Fachri,  W., Nadapdap,  L.  D.,  Fajrin,  A.  M., Tanimoto,  H.,  &  Kakiuchi,  K.  (2020). Phytochemical composition and evaluation of marine algal Sargassum polycystum for antioxidant activity and in  vitro  cytotoxicity  on  hela  cells. Pharmacognosy Journal , 12 (1).
Arukwe, U., Amadi, B. A., Duru, M. K. C., & Agomuo,  E.  N.  (2012).  Chemical Composition  of  Persea  Americana
No Golongan senyawa Reagen Hasil pengamatan 1 Alkaloid Dragendroft Wagner Meyer + + + 2 Tanin FeCl ₃ + 3 Saponin HCl + 4 Flavanoid Mg. HCl + 5 Steroid CH ₃ COOH, H ₂ SO ₄ + 6 Triterpenoid CH ₃ COOH, H ₂ SO ₄ - 7 Fenol FeCl ₃ +
leaf, fruit and seed. Ijrras , 11 (2), 346 – 349.
Arukwe,  U.,  Amadi,  B.  A.,  Duru,  M.  K.  C.,
Agomuo, E. N., Adindu, E. A., Odika,
P.  C.,  Lele,  K.  C.,  Egejuru,  L.,  & Anudike, J. (2012). Chemical composition  of  Persea  americana leaf, fruit and seed. Ijrras , 11 (2), 346 – 349.
Bintoro, A., Ibrahim, A. M., Situmeang, B., Kimia,  J.,  &  Cilegon,  B.  (2017). Analisis  dan  identifikasi  senyawa saponin  dari  daun  bidara  (Zhizipus mauritania  L.). Jurnal  Itekima , 2 (1),
84 –94.
Boopathy,  N.  S.,  &  Kathiresan,  K.  (2010).
Anticancer  drugs  from  marine  flora: an  overview. Journal  of  Oncology , 2010 , 1 –18.
Croteau R, Kutchan TM & Lewis NG. 2015.
Natural products (Secondary metabolites). In Biochemistry & Molecular  Biology  of  Plants,  B. Buchanan,  W.  Gruissem,  R.  Jones, Eds.  2nd  Ed.  London:  Wiley  & Blackwell.
Chakraborty,  N.,  Ghosh,  R.,  Ghosh,  S., Narula,  K.,  Tayal,  R.,  Datta,  A.,  & Chakraborty, S. (2013). Reduction of oxalate  levels  in  tomato  fruit  and consequent  metabolic  remodeling following  overexpression  of  a  fungal oxalate
decarboxylase.
Plant
Physiology , 162 (1), 364 –378.
Danapalan,  R.,  &  Thangaraju,  N.  (2013).
Phytochemical Screening And Comparative Analysis of AntimicrobialActivity Of Selected
Species  Of  Brown  Seaweeds  From Gulf  Of  Mannar,  Tamil  Nadu,  India. Journal Of Modern Biotechnology , 4 ,
1 –7.
Desmiaty,  Y.,  Ratih,  H.,  Dewi,  M.  A.,  &
Agustín, R. (2008). Penentuan jumlah tanin  total  pada  daun  jati  belanda (Guazuma  ulmifolia  Lamk)  dan  daun sambang  darah  (Excoecaria  bicolor Hassk.)  secara  kolorimetri  dengan pereaksi biru prusia. Ortocarpus , 8 (1),
106 –109.
Dhurhania, C. E., & Novianto, A. (2018). Uji kandungan fenolik total dan
pengaruhnya terhadap aktivitas antioksidan  dari  berbagai  bentuk sediaan  sarang  semut  (Myrmecodia pendens). Jurnal  Farmasi  Dan  Ilmu Kefarmasian Indonesia , 5 (2), 62 –68. Domettila,  C.,  Joselin,  J.,  &  Jeeva,  S. (2013).  Phytochemical  analysis  on some south Indian seaweeds. Journal of  Chemical  and  Pharmaceutical Research , 5 (4), 275 –278.
Dotulong, V., Montolalu, L., & Damongilala,
L.  J.  (2016).  Potensi  Anti  Bakteri Rumput  Laut  Merah  Laurencia  sp. Asal Perairan Sulawesi Utara. Jurnal, Bioteknologi Kelautan Dan Perikanan .
Eluvakkal,  T.,  Sivakumar,  S.  R.,  & Arunkumar,  K.  (2010).  Fucoidan  in some  Indian  brown  seaweeds  found along  the  coast  Gulf  of  Mannar. International  Journal  of Botany , 6 (2),
176 –181.
Endarini,  L.  H.  (2016).  Farmakologis  dan Fitokimia. Modul  Bahan  Ajar  Cetak. Pusdik  SDM  Kesehatan.  Kementrian Kesehatan Republik Indonesia . Ergina, E., Nuryanti, S., & Pursitasari, I. D. (2014). Uji kualitatif senyawa metabolit sekunder pada daun palado (Agave  angustifolia)  yang  diekstraksi dengan pelarut air dan etanol. Jurnal Akademika Kimia , 3 (3), 165 –172. Febrianto,  W.,  Djunaedi,  A.,  Suryono,  S.,
Santosa, G. W., & Sunaryo, S. (2019). Potensi  Antioksidan  Rumput  Laut Gracilaria  verrucosa  Dari  Pantai Gunung  Kidul,  Yogyakarta. Jurnal Kelautan Tropis , 22 (1), 81.
Fitri,  W.  E.,  &  Putra,  A.  (2021).  Peranan
Senyawa Flavonoid Dalam Meningkatkan  Sistem  Imun  Di  Masa Pandemi Covid-19. Prosiding Seminar  Nasional  Stikes  Syedza Saintika , 1 (1). Ghufran, M. (2010). Kiat Sukses Budidaya Rumput  Laut  di  Laut  dan  Tambak.
Yogyakarta . Lily Publisher.
Gutzeit, H. O., & Ludwig-Müller, J. (2014).
Plant  natural  products:  synthesis, biological  functions  and  practical applications . John Wiley & Sons.
Herborne,  J.  B.  (1973).  Phytochemical
methods. A Guide to Modern Techniques  of  Plant  Analysis , 2 ,  5 –
11.
Jati,  B.  N.,  Nuraeni,  C.,  Yunilawati,  R.,  &
Oktarina,  E.  (2019).  Phytochemical screening  and  total  lipid  content  of marine macroalgae from Binuangeun beach. Journal of Physics:
Conference Series , 1317 (1), 12103. Kasim,  M.  (2016).  Makro  alga. Penebar Swadaya. Jakarta , 116.
Lantah, P. L., Montolalu, L. A., & Reo, A. R. (2017).  Kandungan  Fitokimia  Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Rumput  Laut  Kappaphycus  alvarezii. Media  Teknologi  Hasil  Perikanan ,
5 (3), 73.
Martin-Creuzburg, D., & Merkel, P. (2016).
Sterols  of  freshwater  microalgae: potential implications for zooplankton nutrition. Journal of Plankton Research , 38 (4), 865 –877.
Mehdinezhad, N., Ghannadi, A., &
Yegdaneh,  A.  (2016).  Phytochemical and  biological  evaluation  of  some Sargassum  species  from  Persian Gulf. Research  in  Pharmaceutical Sciences , 11 (3), 243.
Mouritsen, O. G., Bagatolli, L. A., Duelund, L.,  Garvik,  O.,  Ipsen,  J.  H.,  & Simonsen,  A.  C.  (2017).  Effects  of seaweed sterols  fucosterol and desmosterol  on  lipid  membranes.
Chemistry and Physics of Lipids , 205 ,
1 –10.
Ndhlala,  A.  R.,  Kasiyamhuru,  A.,  Mupure,
C., Chitindingu, K., Benhura, M. A., & Muchuweti,  M.  (2007).  Phenolic composition  of  Flacourtia  indica,
Opuntia megacantha
and
Sclerocarya  birrea. Food  Chemistry , 103 (1), 82 –87.
Ningrum, R., Purwanti, E., & Sukarsono, S.
(2016). Alkaloid compound identification of Rhodomyrtus tomentosa stem as biology instructional  material  for  senior  high school X grade. JPBI (Jurnal Pendidikan  Biologi  Indonesia) , 2 (3),
231 –236.
Nofiani, R. (2008). Urgensi dan mekanisme biosintesis
metabolit sekunder
mikroba laut. Jurnal Natur Indonesia , 10 (2), 120 –125.
Nugroho,  E.,  &  Kusnendar,  E.  (2015). Agribisnis  rumput  laut .  Penebar Swadaya Grup.
Oh,  J.-H.,  Kim,  J.,  &  Lee,  Y.  (2016).  Anti- inflammatory and anti-diabetic effects of  brown  seaweeds  in  high-fat  diet- induced obese mice. Nutrition Research and Practice , 10 (1), 42 –48. Patra,  A.  K.,  &  Saxena,  J.  (2010).  A  new perspective  on  the  use  of  plant secondary  metabolites  to  inhibit methanogenesis in the rumen. Phytochemistry , 71 (11 –12),  1198–
1222.
Rachel,  D.,  &  Thangaraju,  N.  (2015). Phytochemical screening and comparative analysis of antimicrobial activity  of  selected  species  of  brown seaweeds from Gulf of Mannar, Tamil Nadu, India. J. Mod. Biotechnol , 5 , 1 – 7.
Redha, A. (2010). Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif  dan  Peranannya  Dalam Sistem  Biologis. Jurnal  Berlin , 9 (2),
196 –202.
Rukmi,  A.  S.,  Sunaryo,  &  Djunaedi,  A. (2012).  Sistem  budidaya  rumput  laut Gracilaria  verrucosa  di  pertambakan dengan perbedaan
waktu
perendaman  di  dalam  larutan  NPK.
Journal of Marine
Research , 141 (3569), 548 –549. Samejo, M. Q., Memon, S., Bhanger, M. I.,
&  Khan,  K.  M.  (2013).  Isolation  and characterization  of  steroids  from Calligonum  polygonoides. Journal  of Pharmacy Research , 6 (3), 346 –349. Sanger, G., Dotulong, V., & Damongilala, L. J.  (2022).  Isolasi  Asam  Lemak  dan Kadar  Pigmen  Rumput  Laut  Cokelat Sargassum crassifolium sebagai
Sumber  Antioksidan  Alami. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 25 (3).
Sanger, G., Kaseger, B. E., Rarung, L. K., &  Damongilala,  L.  (2018).  Potensi beberapa Jenis Rumput Laut sebagai Bahan  Pangan  Fungsional,  Sumber Pigmen dan Antioksidan Alami. Jurnal
Pengolahan Hasil Perikanan
Indonesia , 21 (2), 208.
Sanger, G., Rarung, L. K., Damongilala, L. J.,  Kaseger,  B.  E.,  &  Montolalu,  L. (2019).  Phytochemical  constituents and  antidiabetic  activity  of  edible marine  red  seaweed  (Halymenia durvilae). IOP  Conference  Series: Earth  and  Environmental  Science , 278 (1), 12069.
Sanger, G., Rarung, L. K., Kaseger, B. E., & Timbowo, S. (2017). Composition of Pigments  and  Antioxidant  Activity  in
Edible  Red  Seaweed  Halimenia durvilae Obtained from North
Sulawesi. International  Journal  of ChemTech  Research , 10 (15),  255 – 262.
Sanger, G., Widjanarko, S. B., Kusnadi, J.,
&  Berhimpon,  S.  (2013).  Antioxidant activity  of  methanol  extract  of seaweeds obtained from North Sulawesi. Food  Science  and  Quality Management , 19 (1), 63 –70. Sanger,  G.,  Wonggo,  D.,  Taher,  N., Dotulong,  V.,  Setiawan,  A.  A., Permatasari,  H.  K.,  Maulana,  S., Nurkolis,  F.,  Tsopmo,  A.,  &  Kim,  B.
(2023).  Green  seaweed  Caulerpa racemosa  -  Chemical  constituents,
cytotoxicity in breast cancer cells and molecular docking simulation. Journal of Agriculture and Food Research , 12 ,
100621.
Sangi, M. R., Shahmoradi, A., Zolgharnein,
J., Azimi, G. H., & Ghorbandoost, M. (2008).  Removal  and  recovery  of heavy  metals  from  aqueous  solution using Ulmus carpinifolia and Fraxinus excelsior  tree  leaves. Journal  of Hazardous  Materials , 155 (3),  513 – 522.
Sumilat, A., Wewengkang, D. S., Rotinsulu,
H., Oda, T., Ukai, K., Namikoshi, M.,
Perikanan, F., Universitas, K.,
Ratulangi,  S.,  Kampus-bahu,  J., Utara, S., Matematika, F., & Alam, P. (2018). Bioaktivitas  ekstrak  ascidia yang  dikoleksi  di  Sulawesi  Utara sebagai  bibit  obat  turunan  laut . 11 ,
516 –524.
Sutardi, S. (2016). Kandungan Bahan Aktif Tanaman  Pegagan  dan  Khasiatnya untuk  Meningkatkan  Sistem  Imun Tubuh. Jurnal Penelitian Dan Pengembangan  Pertanian , 35 (3), 121 –130.