## DOI: 10.30644/rik.v8i2.267
Uji efek tonikum ekstrak daun sawo manila (Manilkara zapota) pada mencit putih jantan (Mus musculus) dengan metode ketahanan renang
Fathnur Sani K 1* , Yuliawati 1 , Herlina 2 , Reza Yolandini 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Jambi, Jambi, Indonesia, 36122
2 Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu *Email Korespondensi: fathnursanik@unja.ac.id
Accepted: 05 Oktober 2019; revision: 03 Januari 2020; published: 30 Juni 2020

## Abstrak
Latar  Belakang: Penggunaan obat penambah stamina tubuh sangat dibutuhkan dalam kegiatan sehari- hari,  pola  aktifitas  kerja  masyarakat  yang  semakin  meningkat  membutuhkan  tenaga  yang  lebih  banyak sehingga  untuk  memenuhi  kebutuhan  tersebut  diperlukan  suplemen  penambah  stamina.  Sawo  Manila merupakan  salah  satu  tanaman  yang  dapat  digunakan  oleh  masyarakat  sebagai  penambah  stamina. Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui efek tonikum dari ekstrak daun sawo manila ( Manilkara zapota L.) terhadap hewan uji mencit putih jantan ( Mus musculus ). Metode: Metode  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  metode  uji  renang.  Dimana  dosis perlakuannya  adalah  kontrol  positif  (Kafein  0,52mg/20gram  BB),  control  negative  (Na  CMC),  Dosis  I (6mg/20gramBB), Dosis II (12 mg/20 gram BB), dan Dosis III (18mg/20gram BB). Hasil: Berdasarkan  hasil  Anova  satu  arah  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  bermakna  pada  tiap kelompok (p<0,05). Dimana berdasarkan uji lanjutan Duncan menunjukkan dosis terbaik adalah dosis III (18mg/20gram BB) dengan waktu lelah 81,8 detik. Kemudian diikuti dosis II (12mg/20 gram BB) dengan waktu lelahnya 53 detik dan dosis I (6mg/20gram BB) dengan waktu lelahnya 37,4 detik.
Kesimpulan: Ektrak daun sawo memiliki efek tonikum , dengan dosis terbaik adalah 18 mg/20gram BB
Kata Kunci : mencit, renang, sawo manila, tonikum

## Abstract
Backgroud: The use of stamina enhancing drugs is needed in daily activities, the pattern of community work  activities  that  are  increasingly  in  need  of  more  energy  so  that  in  fulfilling  it  is  necessary  to  have supplement  supplements.  Sawo  Manila  is  one  of  the  plants  that  is  often  used  by  the  community  as  a stamina  enhancer.  This  test  aims  to  determine  the  effect  of  tonic  from  the  extract  of  Manila  leaves (Manilkara zapota L.).
Method:  The  method  used  in  this  study  is  the  swimming  test  method.  Where  the  treatment  dosage  is positive  control  (0.52  mg  /  20gram  BW  caffeine),  negative  control (Na  CMC),  Dosage  I  (6  mg  /  20gram BW), Dose II (12 mg / 20 gram BW), and Dose III (18 mg / 20gram BW).
Result:  Based  on  the  1-way  Anova  results,  there  was  a  significant  difference  in  each  group  (p  <0.05). Where  based  on  Duncan's  follow-up  tests  showed  the  best  dose  is  dose  III  (18mg  /  20gramBB).  Then followed by dose II (12mg / 20 gram BW) and dose I (6mg / 20gram BW).
Conclusion: Extract Manila leaves has a a tonic effect, where based on Duncan's follow-up tests showed the best dose is dose III (18mg / 20gram BW)
Keyword: mice, sawo manila, swimming, tonikum
Uji efek tonikum ekstrak daun sawo manila ( Manilkara zapota ) pada  mencit  putih  jantan (Mus  musculus) dengan  metode ketahanan renang

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang memiliki  wilayah  hutan  tropika  dengan keanekaragaman hayati tertinggi didunia lebih dari  20.000  tumbuhan  obat  tumbuh  dan berkembang  dengan  baik 1 .  Penggunaan  obat penambah stamina tubuh sangat dibutuhkan dalam kegiatan sehari-hari, pola aktifitas kerja masyarakat yang selalu meningkat memerlukan  tenaga  yang  lebih  banyak sehingga dalam mengcukupinya perlu adanya suplemen  penambah  energi.  Oleh  karena  itu, kebutuhan  akan  suplemen  penambah  energy sangat  penting  demi  mendapatkan  kondisi fisik  yang  baik  dalam  waktu  sesingkat mungkin  agar  dapat  menjalankan  kegiatan sehari-hari dengan stamina yang lebih baik 2, 3 . Tanaman  sawo  Manila (M.  zapota L) adalah  anggota Sapotaceae yang  banyak dibudidayakan pada pekarangan rumah. Daun tanaman ini banyak dimanfaatkan masyarakat salah  satunya  sebagai  penambah  stamina. Daun  sawo  manila  mengandung  banyak antioksidan seperti Vitamin (A,C,E,K), karotenoid,  falvonon,  antosianin,  flavonoid, katekin,  polifenol,  saponin,  tannin,  enzim  dan mineral 4 . Kandungan saponin,tanin dan flavonoid membuat daun sawo manila berkhasiat sebagai obat. Khususnya Flavonoid  berguna  untuk  memperbaiki  dan merevitalisasi  pembuluh  darah  dan  sel-sel yang  rusak  dalam  tubuh,  melalui peningkatan daya tahan tubuh pasien 5 .
Berdasarkan permasalahan diatas maka perlu  dilakukan  penelitian  tentang  Uji  Efek Tonikum  Ekstrak  Daun  Sawo  Manila  ( M. zapota L)  Asal  Bengkulu  Terhadap  Mencit Putih  Jantan  ( Mus  musculus )  menggunakan metode Ketahanan Renang. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek tonikum dari ekstrak daun sawo.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat  yang  digunakan  yaitu  botol  gelap, rotary evaporator ,  kertas  saring,  corong,  gelas  ukur 100  ml,  labu  ukur  10  ml,  beker  glass  500  ml,
Erlenmeyer ,  spuit  peroral,  timbangan  analitik, stopwatch , beaker glass 1000 ml.

## Bahan
Bahan yang digunakan yaitu daun sawo ( M. zapota L.), hewan percobaan mencit putih jantan galur Swiss webster berumur 2-3 bulan dan  sehat  sebanyak  25  ekor,  aquadest, Na.CMC, pelarut etanol 70 %, dan kafein.

## Pengolahan Sampel
Sampel  daun  sawo  manila  ( M.  zapota L.) yang telah dikumpulkan dicuci dengan air. Kemudian  daun  yang  telah  di  cuci  di  rajang lalu  diangin-  angina  sampai  kering  selama kurang  lebih  7  hari,  setelah  kering  sampel  di blender.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun  Sawo Manila Menggunakan Metode Maserasi
Serbuk daun yang sudah kering sebanyak  500  gram  dimasukan  kedalam botol  gelap,  lalu  tambahkan  etanol  70% sebanyak  3  liter.  Disimpan pada  tempat yang tidak  terkena  sinar  matahari  langsung  dan dibiarkan  selama  1  minggu  sambil  dikocok. Setelah  satu  minggu,  lalu  disaring  dengan kertas  saring,  ekstrak  etanol  daun  sawo manila  yang  didapat  kemudian  dikentalkan dengan rotary  evaporator hingga  diperoleh ekstrak kental lalu ditimbang.

## Hewan Percobaan
Hewan  percobaan  yang  digunakan adalah  mencit  putih  jantan  berbadan  sehat dengan  berat  20-30  gram.  Diadaptasikan pada  lingkungan  sekitar  selama  satu  minggu. Sebelum  mendapatkan  perlakuan  hewan percobaan dipuasakan terlebih dahulu selama 8  jam.  Hewan  percobaan  yang  digunakan pada  masing-masing  perlakuan  sebanyak  5 ekor mencit.

## Perlakuan Hewan Percobaan
Adapun kelompok perlakuan pada penelitian ini adalah:
Uji  Efek  Tonikum  Ekstrak  Daun  Sawo  Manila  ( Manilkara zapota )  pada  Mencit  Putih  Jantan (Mus  musculus) dengan Metode Ketahanan Renang
1.  Kelompok  I  sebagai  kontrol  negatif  diberi perlakuan Na-CMC 1 %
2.  Kelompok  II  sebagai  kontrol  positif  diberi perlakuan  secara  peroral  kafein  0,52mg/ 20gram  BB  yang  telah  disuspensikan dalam Na-CMC 1%
3.  Kelompok  III  sebagai  Dosis  I  diberikan ekstrak  daun  sawo  manila  6mg/  20gram BB  yang  telah  disuspensikan  dalam  Na- CMC 1%
4.  Kelompok  IV  sebagai  Dosis  II  12mg/ 20gram  BB  yang  telah  disuspensikan dalam Na-CMC 1%
5.  Kelompok  V  sebagai  Dosis  III  18mg/ 20gram  BB  yang  telah  disuspensikan dalam Na-CMC 1 %.

## Uji Renang
Hewan direnangkan dalam wadah berisi air  hingga  timbul  kelelahan.  Tanda  kelelahan dilihat  dari  hewan  percobaan  menundukkan kepala  dibawah  permukaan  air  selama  4-5 detik. Waktu timbul kelelahan dicatat, kemudian  diistirahatnya  30  menit.  Setelah  itu diberikan  perlakuan  secara  peroral,  30  menit setelah  mendapatkan  perlakukan  hewan  uji direnangkan  kembali  dan  catat  waktunya. Data  yang  diambil  adalah  selisih  waktu
munculnya rasa lelah pada hewan percobaan. Selisih waktu adalah selisih setelah pemberian perlakuan dengan sebelum pemberian perlakuan

## Analisis Data
Hasil ekstrak daun sawo dan uji fitokimia di  tampilkan  secara  deskriptif.  Sedangkan untuk  data  hasil  uji  daya  tahan  renang dianalisa dengan menggunakan SPSS metode  Anova  Satu  Arah  dengan  nilai signifikansi 0,05. Kemudian dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil ekstraksi daun sawo manila
Hasil  ekstraksi  daun  sawo  manila dengan  menggunakan  simplisia  kering  daun sawo  manila  yang  digunakan  sebanyak  500 gram  didapatkan  21,78  gram  ekstrak  kental, sehingga didapat rendemen sebesar 4,35%.

## Hasil Uji Fitokimia
Uji fitokimia meliputi uji alkaloid, triterpenoid,  flavonoid,  saponin,  steroid,  dan tannin.  Hasil  pengujian  fitokimia  dapat  dilihat pada tabel 1.

## Table 1. Hasil Pengujian Fitokimia
Pengujian Cara Kerja Hasil Pengujian Keterangan Flavonoid Ektrak + Serbuk Mg + HCl Pekat Terbentuk Warna Merah + Tannin Ekstrak + FeCl 3 Terbentuk Warna Biru + Saponin Ekstrak di kocok kuat Terbentuk busa permanen (15 menit) + Steroid Ekstrak  +  norit  +  H 2 SO 4 pekat  + asam asetat Terbentuk warna biru ungu + Alkaloid Ekstrak  +  kloroform  +  H 2 SO 4 2N  + mayer Terbentuk gumpalan putih +

## Daya Tahan Renang
Hasil analisis uji efek tonikum uji renang dengan  menggunakan  SPSS  metode  Anova Satu Arah didapatkan hasil adanya perbedaan yang signifikan pada setiap kelompok perlakuan  (p<0,05).  Setelah  dilakukan  uji
Duncan  didapatkan  dosis  III  (81,8±22,23) adalah dosis terbaik sebagai tonikum. Dimana didapatkan  hasil  memiliki  efek  yang  sama dengan  kontrol  positif  (86±13,62),  kemudian diikuti  oleh  dosis  II  (53  ±  8,51)  dan  dosis  I (37,4±24,05).
Uji efek tonikum ekstrak daun sawo manila ( Manilkara zapota ) pada  mencit  putih  jantan (Mus  musculus) dengan  metode ketahanan renang
Tabel 2. Rata-rata ±SD Selisih Waktu Lelah Setiap Kelompok Perlakuan Kelompok Perlakuan Rata-Rata (Detik) ± SD Kontrol Positif (Kafein 0,52mg/20gram BB) 86±13,62 Kontrol Negatif 8±5,83 Dosis I (6 mg/20 gramBB) 37,4± 24,05 Dosis II (12 mg/20 gramBB) 53±8,51 Dosis III (18 mg/20 gramBB) 81,8±22,33
Gambar 1. Grafik rata-rata selisih waktu lelah setiap kelompok

## PEMBAHASAN Ekstraksi Daun Sawo Manila
Pada  penelitian  ini  metode  ekstraksi yang  digunakan  adalah  metode  maserasi. Pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol  70%. Berdasarakn  penelitian  yang  dilakukan  oleh Indraswari  (2008)  menyatakan  bahwa  etanol 70% merupakan pelarut yang mampu menarik zat  aktif  secara  optimal  dengan  sedikit  zat pengganggu  dibandingkan  dengan  pelarut lain 6 . Dimana pada penelitian ini menggunakan  simplisia  kering  daun  sawo manila  yang  digunakan  sebanyak  500  gram didapatkan  21,78  gram  ekstrak  kental, sehingga didapat rendemen sebesar 4,35%.

## Uji Fitokimia
Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  daun  sawo manila  yang  didapat  adalah  flavonoid,  tannin, saponin, steroid, dan alkaloid. Hasil ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Osman &  Abdul  (2011),  sedangkan  menurut  Kenerja
(2009)  ekstrak  daun  sawo  juga  memiliki kandungan terpenoid dan glikosida 7, 8 .

## Uji Daya Tahan Renang
Pengujian  efek  tonikum  ekstrak  daun sawo manila dilakukan dengan menggunakan metode  ketahanan  renang.  Pada  metode ketahanan  renang,  hewan  uji  dimasukan kedalam  wadah  berisi  air  hingga  timbul kelelahan.  Waktu  timbul  kelelahan  sebelum dan sesudah perlakuan dicatat, untuk mengetahui  perpanjangan  waktu  lelah  pada hewan percobaan 9 .
Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  mencit  putih  jantan galur Swiss  webster .  Hewan  dibagi  menjadi  5 kelompok  perlakuan  dimana  masing-masing kelompok  perlakuan  terdapat  5  hewan  uji. Kelompok  I  kontrol  positif  diberi  kafein  200 mg/Kg BB, kontrol negatif diberi Na-CMC dan variasi  dosis  ekstrak  daun  sawo  manila  yaitu dosis  I  6  mg/  20gram  BB,  dosis  II  12  mg/ 20gram BB, dosis III 18 mg/ 20gram BB.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis II Dosis III R ata -r ata sel isi h waktu l el ah (D eti k) Dosis perlakuan
Uji  Efek  Tonikum  Ekstrak  Daun  Sawo  Manila  ( Manilkara zapota )  pada  Mencit  Putih  Jantan (Mus  musculus) dengan Metode Ketahanan Renang
Penggunaan  kafein  sebagai  kontrol positif  karena  kafein  merupakan  xantin  yang paling  kuat,  menghasilkan  stimulasi  korteks dan  medula,  bahkan  stimulasi  spiral  pada dosis yang besar. Kafein juga memperpanjang waktu kemampuan seseorang untuk melakukan pekerjaan yang melelahkan tubuh. Kafein  terutama  bekerja  pada  bagian  otak terluar.  Kafein  merupakan  obat  pilihan  untuk memperoleh efek stimulan pada sistem syaraf pusat 10
Hasil  uji  renang  secara  statistik  Anova Satu  Arah  menunjukkan  adanya  perbedaan yang signifikan untuk tiap kelompok perlakuan (p<0,05).  Kemudian  dilanjut  dengan  uji Duncan  yang  menunjukkan    dosis  III  adalah dosis terbaik kemudian diikuti dengan dosis II dan  dosis  I.  Hal  ini  menunjukan  adanya  efek tonikum dari ekstrak etanol daun sawo manila dibandingkan dengan kontrol negatif.
Ekstrak  daun  sawo  manila  memberikan efek  tonikum  karena  adanya  kandungan flavonoid.  Adapun  mekanisme  kerja  dari senyawa  flavonoid  adalah  dengan  cara mengantagonis  reseptor  adenosine  A 1 ,  yang mekanismenya sama dengan kafein, adenosine  itu  sendiri  adalah  salah  satu  sel otak yang berperan dalam proses pengaturan tidur  seseorang.  Reseptor  senyawa  flavonoid tidak  memperlambat  gerak  sel  tubuh  yang berefek  pada  tidak  bekerjanya  lagi  tubuh terhadap perintah adenosin. Flavonoid bekerja membalikkan  seluruh  kerja  dari  adenosin sehingga  rasa  kantuk  menjadi  hilang  dan muncul  perasan  segar,  bersemangat,  dan mata  terbuka  lebar 11,12 .  Reseptor  flavonoid sama  dengan  reseptor  kafein.  Selain  itu adanya  flavonoid  dapat  berperan  sebagai antioksidan.Dimana antioksidan adalah senyawa  yang  memiliki  kemampuan  dalam menangkal  dampak  negatif  dari  oksidan dalam  tubuh.  Keseimbangan  oksidan  dan antioksidan  menjadi  sangat  penting  karena berkaitan  dengan  fungsi  sistem  imunitas tubuh 13,14 .
Penelitian  pendukung  adanya  aktifitas tonikum  dari  senyawa  flavonoid  pada  ekstrak
tanaman  adalah  penelitian  Mafitri,  dkk.  dan Setyawati,  dkk.  Hasil  penelitian  tersebut menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  daun pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) dan  Rimpang  Temu  Kunci  ( Boesenbergia pandurata (Roxb) Schlecht) yang
mengandung  senyawa  flavonoid  dan  mampu meningkatkan waktu bertahan berenang pada hewan percobaan. penelitian lain juga menyebutkan  bahwa  hewan  uji  yang  diberi ekstrak yang mengandung senyawa flavonoid memberikan  efek  tonikum  sehingga  dapat meningkatkan waktu bertahan berenang pada hewan uji 15,16 .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun sawo manila dapat  berfungsi  sebagai  tonikum.  Dimana berdasarkan hasil analisis data menggunakan anova  satu  arah  didapatkan  bahwa  dosis  III (18mg  /20gram  BB)  merupakan  dosis  terbaik dengan  rata-rata  waktu  lelah  81,8  detik. Kemudian diikuti dengan dosis II dan dosis I.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Hariana  A.  Manggis.  In: 262  Tumbuhan Obat Dan Khasiatnya . ; 2013.
2.   Hermayanti.  Uji  Efek  Tonikum  Ekstrak Daun  Ceguk  ( Quisqualis  indica L.)
Terhadap Hewan Uji Mencit (Mus musculus). J Bionature . 2013;14(171):95- 99.
3.   Sugiarto. Hubungan  Asupan  Energi, Protein  dan  Suplemen  dengan  Tingkat Kebugaran . Media  Ilmu  Keolahragaan Indonesia . 2012;2(2).
4.   Chanda  S  V,  Nagani  K  V.  Antioxidant Capacity  of  Manilkara  zapota  L  .  Leaves Extracts  Evaluated  by  Four  in  vitro Methods. J Biol Sci . 2010;8(10):260-266. 5.   Islam MR, Parvin MS, Banu MR, Jahan N,
Das  N,  Islam  ME.  Antibacterial  and phytochemical screening of ethanol extracts  of  Manilkara  zapota  leaves  and bark. Int J Pharma Sci . 2013.
6.   Indraswari A. Optimasi Pembuatan
Uji efek tonikum ekstrak daun sawo manila ( Manilkara zapota ) pada  mencit  putih  jantan (Mus  musculus) dengan  metode ketahanan renang
Ekstrak Daun Dewandaru ( Eugenia uniflora L.) Menggunakan Metode Maserasi  Dengan  Parameter  Kadar  Total Senyawa  Fenolik  Dan  Flavonoid. Fak Farm  Univ  Muhammadiyah  Surakarta Surakarta . 2008:5-8.
7.   Abu Osman M, Abdul Aziz M, Rowshanul Habib  M,  Rezaul  Karim  M.  Antimicrobial Investigation  on  Manilkara  zapota  (L.)  P. Royen. Int J Drug Dev Res .
2011;3(1):185-190.
8.   Kaneria  M,  Chanda  S.  Evaluation  of antioxidant and antimicrobial properties of Manilkara  zapota  L.  (chiku)  leaves  by sequential  soxhlet  extraction  method. Asian  Pac  J  Trop  Biomed .  2012. doi:10.1016/S2221-1691(12)60448-1
9.   Sumarny  R,  Rahayu  L,  Made  NI, Sandhiutami  D.  Efek  Stimulansia  Infus Lada  Hitam  ( Piperis  nigri  fructus )  Pada Mencit  (Stimulant  effect  of  infusion  of black  pepper  ( Piperis  nigri  fructus )  in mice). J  Ilmu  Kefarmasian  Indinesia . 2013;11(2):142-146. jifi.ffup.org/.
10.  Restiani  KD.  Uji  Efek  Sediaan  Serbuk Instan  Rimpang  Jahe  (Zingiber  officinale Roscoe)  Sebagai  Tonikum  Terhadap Mencit  Jantan  Galur  Swiss  Webster. Fak Farm  Univ  Muhammadiyah  Surakarta . 2009.
11.  Li  W,  Li  T,  Tang  K.  Flavonoids  from mulberry  leaves  by  microwave-assisted
extract  and  anti-fatigue  activity. African  J Agric Res . 2009;4(9):898-902.
12.  Barnes  J.  Principles  and  practice  of phytotherapy  modern  herbal  medicine. Complement
Ther Med . 2001. doi:10.1054/ctim.2001.0439 13.  Shirisha  K,  Mastan  M.  Andrographis Paniculata and Its Bioactive Phytochemical  Constituents  for  Oxidative Damage: a Systemic Review. Pharmacophore . 2013;4(6):212. http://www.pharmacophorejournal.com/. 14.  Oocyst  OF,  Tenella  E,  Yellita  Y,  et  al. Ekstrak Sambiloto Menurunkan Patogenesitas  Ookista .  2011;12(4):307-
318.
15.  Mafitri  HM,  Parmadi  A.  Uji  Efek  Tonikum Ekstrak  Etanol  Daun  Pandan  Wangi (Pandanus  amaryllifolius  Roxb.)  terhadap
Mencit dengan Metode Natatory Exhaustion. Indones J Med Sci . 2018;5(1):64-69.
16.  Setyawati ER, Endrawati S, Kesehatan P, Mulia B. Uji Efek Tonikum Ekstrak Etanol Rimpang  Temu  Kunci  (Boesenbergia pandurata  (Roxb)  Schlecht)  Terhadap Mencit  Jantan  Galur  Swiss  The  Tonict Effects  Test  Of  Ethanolic  Extract  Of Rimpang  Temu  Kunci  (Boesenbergia pandurata  (Roxb)  Schlecht)  To  Male Mice. 2019;6(2):52-56.