## Pengaruh Pemberian Brusein A dari Biji Buah Makasar (Brucea javanica
L. Merr) terhadap Kematian Larva Culex quinquefasciatus Say
Destyana Ayu Wulandari * , Retno Hestiningsih ** , Lintang Dian Saraswati ** , Sri Rahayu ***
* Alumni Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Diponegoro, ** Bagian Epidemiologi dan Penyakit Tropik, Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Diponegoro. *** Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan, Universitas Bhakti Kencana

## ABSTRACT
Background: This study aims to determine the effect of brusein A from Macassar fruit seeds (Brucea javanica (L) Merr ) on the death of larvae Cx. quinquefasciatus Say. Methods: This  research  was  an  explanatory  research  using  experimental  method  with  post test  only  control  group  design.  The  sample  was  larvae Cx.  quinquefaciatus  Say. The distribution  of  the  sample  treatment  and  control  groups  was  done  randomly.  Data  analysis using Probit to determine the value of LC50, LC90, LT50, LT90. Further tests use ANOVA if the data are normally distributed and homogeneous, but if the data is not normally distributed or not homogeneous using Kruskal wallis.
Result: The results showed that the highest percentage of Culex quinquefasciatus Say larvae mortality after administration of various concentrations of brusein A compared with temefos was at a concentration of 27 ppm, which was 55.29 percent. The higher the concentration, the higher the percentage of Culex quinquefasciatus Say deaths. The highest percentage of deaths after  administration  of  various  brusein  A  concentrations  takes  24  hours,  namely  91.13 percent.  The  longer  time  used,  the  higher  the  percentage  of Culex  quinquefasciatus  Say deaths . LC50 was 18.833 ppm. LC90 was 68,852 ppm. The LT50 value was 437,639 minutes or 7 hours 18 minutes. The LT90 value was 1103.403 minutes or 18 hours 23 minutes. There was  a  difference  in  the  average  number  of  deaths  in  the  brusein  A  concentration  group (p=0.000).
Conclusion: There  was  a  difference  in  the  average  number  of  deaths  of Culex quinquefasciatus  Say larvae  in  the  time  group  (p=0.000).  So,  there  is  the  influence  of  the administration  of  brusein  A  isolated  from  Makasar  fruit  seeds (Brucea  javanica (L)  Merr ) against the death of larvae Cx. quinquefasciatus Say.
Keywords: brusein A; Brucea javanica (L) Merr; death of larvae Cx. quinquefasciatus Say.

## JEKK

## Jurnal Epidemiologi Kesehatan Komunitas 5 (2), 2020, 113-118

## Pendahuluan
Nyamuk merupakan
serangga penggangu yang dapat menularkan berbagai macam penyakit berbahaya. Nyamuk termasuk  dalam  filum Anthropoda ,  ordo Diptera ,  famili Culicidae ,  dengan  tiga  sub famili yaitu Toxorhynchitinae (Toxorhynchites) ,  Culicinae (Aedes,  Culex, Mansonia,  Armigeres) dan Anophelinae (Anopheles) . 1 Culex sp merupakan salah satu nyamuk  yang  banyak  terdapat  di  sekitar kita.  Nyamuk  ini  menimbulkan  masalah kesehatan di berbagai negara beriklim tropis seperti  Indonesia. Culex sp  merupakan vektor  dari  beberapa  penyakit  serius  yang dapat  menyerang  manusia  seperti West  Nile Virus , filariasis, Japanese Encefalitis , dan St Louis  Encefalitis . 3 Nyamuk  rumah  atau Culex  quinquefasciatus merupakan  vektor filariasis  atau  kaki  gajah 4 dan Japanese Encefalitis (JE). 5 Japanese  Encefalitis (JE) adalah  penyakit  radang  otak  disebabkan oleh  virus Japanese  Encefalitis termasuk Family  Flavivirus dan  merupakan  masalah kesehatan  masyarakat  di  Asia  termasuk  di Indonesia.  Jumlah  kasus  JE  di  Indonesia tahun  2016  yang  dilaporkan  sebanyak  326 kasus.  Kasus  terbanyak  dilaporkan  terdapat di  Provinsi  Bali  dengan  jumlah  kasus  226 (69,3%).
Sementara  itu  filariasis  di  Indonesia sampai  saat  ini  dilaporkan  terdapat  lebih dari  14.932  penderita  kasus  kronis  yang tersebar  di  418  kabupaten/kota  di  34 propinsi 6 .  Penyakit  filariasis  disebabkan oleh  tiga  spesies  cacing  filaria  yaitu Wucheria  bancrofti,  Brugia  malayi dan Brugia timori . Semua spesies ini terdapat di Indonesia,  namun  lebih  dari  70%  kasus filariasis di  Indonesia  disebabkan  oleh Brugia  malayi . 7 Saat  ini telah diketahui  ada 23  spesies  nyamuk  dari  genus Anopheles , Culex , Mansonia , dan Armigeres yang dapat berperan  sebagai  vektor  filariasis.,  tetapi vektor utamanya adalah Culex quinquefasciatus  Say . 8 Cara  pengendalian vektor  dengan  memanfaatkan  tanaman sebagai  biopestisida  merupakan  salah  satu alternatif pengendalian yang ramah
lingkungan,  mudah  diaplikasikan  dan  tidak berbahaya  bagi  musuh  alami  dan  serangga menguntungkan lainnya. Selain itu, insektisida  dari  tanaman  lebih  selektif  dan aman  karena  mudah  terdegradasi  di  alam sehingga  tidak  meninggalkan  residu. 9 Buah Makasar (Brucea  javanica  L.  Merr) telah lama  dikenal  sebagai  tanaman  obat.  Bijinya telah  digunakan  sebagai  anti  malaria  dalam pengobatan  tradisional  Cina. 10 Tanaman buah  makasar  ( B.  javanica  L.  Merr) diketahui  kaya  akan  senyawa  kuasinoid 11 seperti  bruseantin,  brusatol  dan  brusein. Sejauh  ini  diketahui  72  senyawa  yang  telah diidentifikasi  dari  tanaman  ini,  termasuk diantaranya 52 kuasinoid, sembilan triterpenoid,  lima  glikosida  pregnan, dan satu monoterpenoid. 11 Brusein A, merupakan  kuasinoid  yang    berasal  dari buah B.  javanica (L)  Merr . 12 Brusein  A ([15]-3  Metil-2-butanoil-bruseolid)  dengan rumus molekul C 26 H 34 O 11 dan massa 522,54 g/mol berupa serbuk berasa pahit. Brusein A memiliki aktivitas biologis yang sangat luas seperti antibabesial, antitrypanosomal, antimalarial,  dan  sitotoksisitas  terhadap  sel line  kanker. 13 Hasil  pemeriksaan  histologi menunjukkan  adanya  nekrosis  difus  pada epitel  gastrointestinal  larva Ae.  aegypti . 14 Informasi-informasi  tersebut  membuktikan bahwa  brusein  A  dari  biji  Buah  Makasar berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai larvasida  dan  insektisida  alami  untuk digunakan  dalam  pengendalian  vektor penyakit.  Oleh  karena  itu  peneliti  tertarik untuk meneliti lebih lanjut apakah brusein A juga dapat membunuh larva Cx. quenquefasciatus Say .

## Metode
Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Parasitologi
Fakultas
Kesehatan  Masyarakat  dan  Keperawatan (FK-KMK)  UGM.  Jenis  penelitian  ini menggunakan  explanatory  research  dengan metode penelitian dengan rancangan penelitian  menggunakan  post  test  only control  group  design.  Subyek  yang  dibagi dalam  dua  kelompok  secara  random.
Perlakuan  diberikan  pada  satu  kelompok (kelompok  perlakuan)  sedangkan  kelompok lain  tidak  diberi  perlakuan  (kelompok control).  Setelah  waktu  yang  ditentukan, variabel  tercoba  pada  kedua  kelompok tersebut  diukur.  Populasi  dan  penelitian  ini adalah Culex quinquefasciatus Say instar III sampai  awal  instar  IV.  Oleh  karena  itu apabila terjadi kematian pada saat perlakuan bukan  dikarenakan  pengaruh  organ  yang belum terbentuk sempurna melainkan pengaruh senyawa uji. Larva yang digunakan tiap unit perlakuan 25 ekor larva dengan  7  konsentrasi  (0.1ppm,  0.3ppm, 0.6ppm,  1ppm,  3ppm,  9  ppm,  27ppm), control  negative  (akuades),  dan  control positif  (temefos  1%).  Menurut  acuan WHO 15 besar  sampel  dalam  penelitian larvasida  adalah  20-30  ekor  larva  Culex quinquefasciatus  Say  instar  III  sampai  awal instar  IV.  Penelitian  ini  besar  sampel  25 ekor  larva  Culex  quinquefasciatus  Say dimasukan  kedalam  36  cup  plastik.  Jumlah seluruh sampel yang dibutuhkan adalah 900
ekor larva. Setelah itu dilakukan pengamatan  selama  10  menit,  30  menit,  60 menit,  3jam,  jam,  6jam,  12jam,  24jam. perhitungan  jumlah  larca  mati  pada  setiap konsentrasi dianalisis probit untuk menentukan nilai LC 50 LC 90 LT 50 LT 90. Data yang  dikumpulkan  dalam  penelitian  ini adalah  data  primer  yang  didapatkan  dari jumlah  larva  yang  mati  pada  24  jam  pada setiap  konsentrasi  larvasida  brusein  A  dari Brucea javanica L. Merr.

## Hasil Penelitian
Hasil pengamatan 24 jam menunjukkan bahwa  kelompok  control  tidak  terjadi kematian  larva Culex  quinquefasciatus  Say pada  konsentrasi  brusein  A  yang  terendah yaitu 0,1 ppm  tidak terdapat  kematian larva Culex  quinquefasciatus  Say sebesar  86%, sedangkan kematian larva Culex quinquefasciatus Say mencapai 100%
dijumoai  pada  konsentrasi  3ppm  dan 27ppm. Dapat dilihat pada Tabel 1.
Table 1.  Persentase  Kematian  Larva Culex  quinquefasciatus  Say Pada  Berbagai  Waktu
Pengamatan Konsentrasi brusein A (ppm) Jumlah larva setiap pengujian Jumlah kematian larva Cx. quenquefascitus S. tiap ulangan Rerata kematian Persentase kematian (%) ± SE
I
II III IV
0,1 25
16 17 15 18 17,80 66  ± 0,39 0,3 25 24 21 17 16 19,50 78  ± 0,11 0,6 25 23 20 15 22 20,00 80  ± 1,07 1 25 24 24 21 23 23,00 92  ± 0,43 3 25 25 25 25 25 25,00 100  ± 0,00 9 25 24 25 25 24 24,50 98  ± 0,17 27 25 25 25 25 25 25,00 100  ± 0,00 Temephos 25 25 25 25 25 25,00 100  ± 0,00 Kontrol 25 0 0 0 0 0,00 0  ± 0,00
ppm: part per million ; SE:Standar Error
Kemudian  penelitian  diuji  menggunakan analisis  Probit  dengan  tingkat  kepercayaan 95%  untuk  mendapatkan  nilai  LC 50 LC 90 LT 50 LT 90. Hasil  analisis  probit  menunjukan bahwa kematian larva
Culex
quinquefasciatus  Say sebanyak  50%  (LC) adalah  0,010ppm  dan  90%  (LC)  adalah 0,697ppm.  Hasil  analisis  probit  secara lengkap disajikan dalam Tabel 2.
Tabel  2.    Nilai Letal  Concentration 50  dan  90    (LC 50 ,  LC 90 )  Brusein  A  Pada  Larva Culex quinquefasciatus Say
Kematian larva pada LC (%) Konsentrasi brusein A (ppm) Tingkat kepercayaan (%) Range (%) 50 0,010 95 0,000 < LC <  0,085 90 0,697 95 0,086  < LC< 96,006
Hasil  analisis  terhadap  waktu  pengamatan 10  menit,  30menit,  60menit,  3jam,  6jam, 12jam, 24jam menunjukkan bahwa lamanya waktu  yang  dapat  menyebabkan  kematian larva  nyamuk Culex  quinquefasciatus  Say sebanyak 50%  (LT 50 ) adalah 437,639 menit atau    7  jam  18  menit  dan  kematian  larva
nyamuk Culex quinquefasciatus Say sebanyak  90%  (LT 90 )  adalah  1103,403 menit atau 18 jam 23 menit. Lethal Time 50 dan 90 (LT 50 dan LT 90 ) larva nyamuk Culex quinquefasciatus  Say setelah  pemberian berbagai  konsentrasi  brusein  A  disajikan pada Tabel 3.
Tabel  3.  Nilai Letal  Time 50  dan  90    (LT 50 ,  LT 90 )  Brusein  A  Pada  Larva Culex quinquefasciatus Say
Nilai Letal Time (LT) Waktu kematian (menit) Tingkat kepercayaan (%) Range (%) 50 437,639 95 357,126< LT<531,424 90 1103,403 95 943,223<LT<1342,845

## Pembahasan
Hasil  pengamatan  selama  24  jam menunjukkan  bahwa  persentase  kematian larva Culex  quinquefasciatus  Say sebesar 100%  dicapai  pada  konsentrasi  brusein  A  3 ppm  dan  27  ppm,  sedangkan  persentase kematian  terendah  (66%)  dijumpai  pada konsentrasi    brusein  A  sebesar  0,1  ppm. Pada  konsentrasi  brusein  A  3  ppm  ternyata mampu membunuh larva sebesar 100%, hal ini  juga  ditemukan  pada  konsentrasi tertinggi  brusein  A  yaitu  27  ppm  dan konsentrasi  temephos  1  ppm.  Kemungkinan ini  bisa  terjadi  karena  adanya  perbedaan kepekaan  larva  uji  yang  digunakan  pada setiap media perlakuan, setiap larva memiliki  tingkat  kerentanan  yang  berbeda terhadap  senyawa  brusein  A.  Komisi Pestisida menyatakan bahwa suatu larvasida dikatakan efektif apabila jumlah kematian/sekarat dari larva mencapai paling sedikit  90%  dalam  waktu  24  jam. 69 Ini
berarti  bahwa  brusein  A  pada  berbagai konsentrasi terbukti efektif sebagai larvasida botani  pada  larva Culex  quinquefasciatus Say .  Berdasarkan  analisis  probit,  diketahui nilai  Lethal  Concentration  (LC)  &  Lethal Time  (LT)  brusein  A  terhadap  larva Culex quinquefasciatus Say masing-masing adalah LC 50 =  0,010  ppm,  LC 90 =  0,697,  LT 50 = 437,639  jam,  dan  LT 90 =  1103,403  jam. Nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa  brusein A dari Buah Makasar ( B. javanica L. Merr) efektif  sebagai  larvasida  terhadap  larva nyamuk Culex quinquefasciatus Say .
Sutiningsih et  al . 35 menyebutkan  bahwa brusein  A  yang  diisolasi  dari  biji  Buah Makasar  ( B.  javanica L.  Merr)  memiliki efek  larvasida  pada  larva Ae.  aegypti (L) dengan  nilai  LC 50 dan  LC 90 masing-masing adalah  0,408  ppm  dan  4,923ppm.  Apabila daya  bunuh  brusein  A  terhadap  larva Ae. aegypti (L) dibandingkan  dengan  larva Culex quinquefasciatus Say maka brusein A
lebih  efektif  sebagai  larvasida  pada  larva
Culex quinquefasciatus
Say, karena mempunyai  nilai  LC 50 lebih  kecil.  Semakin kecil  nilai Lethal  Concentration semakin toksik suatu senyawa. 17

## Kesimpulan
Berdasarkan
hasil penelitian,
disimpulkan  bahwa  Brusein  A  terbukti efektif membunuh larva Culex quinquefasciatus  Say dan  bermakna  secara statistic (p>005).

## Ucapan Terimakasih
Terimakasih kepada Ibu Dwi
Sutiningsih yang telah berbaik hati memberikan arahan dalam penelitian.

## Daftar Pustakan
1. Harfriani H. 2012. Efektivitas Larvasida Ekastrak Daun Sirsak Dalam Membunuh Jnetik Nyamuk. Kemas. 7(2); 164-169.
2. Karmila M, Syahribulan, Wahid I. 2013. Keanekaragaman  Jenis  Nyamuk  Di
Sekitar  Kampus  Universitas  Hasanudin [skripsi]. Makassar: Universitas Hassanuddin Makassar.
3. Rinjani F, 2007. Ekstrak Serai, Pengusir
Nyamuk Alamiah (http://fattahrinjani.multiply.com/journal /item/17/Ekstrak_Serai_Pengusir_Nyam uk_Alamiah). Diunduh tanggal 20 Februari 2012.
4. Anonim,  2008. Culex  quinquefasciatis Say .  www.smsl.co.nz.  Diakses  pada tanggal 8 Desember 2016.
5. Hadi  UK,  Soviana  S.  Syafriati  T.  2011. Ragam  jenis  nyamuk  di sekitar kandang babi  dan  kaitannya  dalam  penyebaran Japanese encephalitis.
J.Vet .
Vol.12(4):326-334.
6. Departemen Kesehatan RI. 2006 . Filariasis .  Departemen  Kesehatan
Republik  Indonesia  Direktorat  Jendral PP&PL. Jakarta.
7. Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit  dan  Penyehatan  Lingkungan Kementrian Kesehatan Republik Indonesia,  2012. Peraturan  Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  : 374/Menkes/Per/Iii/2010 tentang
Pengendalian Vektor. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.
8. Depkes  RI,  2005.    Pelaksanaan  Kasus Klinis  Filariasis,  Ditjen  PP  &  PL, Jakarta.
9. Martinez-Torres  D,  Chevillon  C,  Brun- Barale  A,  Berge  JB,  Pasteur  N,  Pauron D. 2009. Voltage-dependent Na+ channels  in  pyrethroid-resistant Culex pipiens L. mosquitoes. Pest Sci. 55:1012–1020.
10. Annaria,  2010.  Identifikasi  Senyawa Organik bahan Alam pada Daun Melur.
11. NoorShahida  A,  Tin  WW,  Chee  YC. 2009. Hypoglycemic effect of quassinoids  from Brucea  javanica  (L)
Merr (Simaroubaceace) seeds. J Ethnopharmacol. 124:586-591. doi:10.1016/j.jep.2009.04.058.
12. Plantamor. 2012. Buah Makasar. [Internet].  [diunduh  2013  Mar  15]. Tersedia
pada: http://www.plantamor.com/index.php?pl ant=229.
13. Liu,  J.H.,  Qin,  J.J.,  Jin,  H.Z.,  Hu,  X.J., Chen,  M.,  Shen,  Y.H.,  Yan,  S.K.,  dan Zhang,  W.D.  2009.  A  new  triterpenoid from Brucea  javanica . Arch.  Pharm . Res., 32, 661-666.
14. Pan,  L.,  Chin,  Y.W  .,  Chai,  H.B.,  Ninh, T.N.,  Soejarto,  D.D.,  dan  Kinghorn, A.D. 2009. Bioactivity guieded isolation of  cytotoxic  constituents  of Brucea
javanica. Bioorg. Med. Chem ., 17, 2219-
2224.
15. Sutiningsih,  D.,  Mustofa.,  Satoto  TBT., Martono,  E. 2017.  Inhibitory  effect  of brucine  A  on  growth  &  development  of Aedes  aegypti  larvae,  J.  Entomol Vol.14(2):104-111.
16. Ruede,  L.M.,  Patel,  K.J.,  Axtell,  R.C., dan  Sinner,  R.R.  2004.  Temperature- dependent  development  and  survival rates  of Culex  quinquifasciatus  and Aedes  aegypti  (  Diptera;  Culicidae).  J. Med. Entomol. 51,156-160.
17. Komisi Pestisida. (1995). Metoda
Standar  Pengujian  Efikasi  Pestisida. Jakarta: Departemen Pertanian, 2.