## ANALISIS KEMAMPUAN DARI EKSTRAK ETANOL RUMPUT LAUT
Ulva  lactuca SEBAGAI  ANTIBAKTERI Vibrio sp.    DAN  KAJIAN FITOKIMIANYA
ABILITY  ANALYSIS  OF  Ulva  lactuca  SEAWEED  ETHANOL  EXTRACT  AS  AN ANTIBACTERIAL OF Vibrio sp. AND PHYTOCHEMICAL STUDIES
Jacomina  Metungun 1 ,  Mariana  Yerminal  Beruatjaan 1 ,  Hendro  Hitijahubessy* 2 , Endang Tamher 2
1 Program Studi Teknologi Budidaya Perikanan, Politeknik Perikanan Negeri Tual , Tual - Indonesia 2 Program Studi Bioteknologi Perikanan, Politeknik Perikanan Negeri Tual , Tual - Indonesia * Corresponding Author e-mail : hendro@polikant.ac.id
Abstract
Key words :
Seaweed; Ulva lactuca; Vibrio;
Phytochemical
An analysis of the antibacterial ability of Vibrio sp. has been carried out from the ethanol extract of Ulva lactuca  seaweed and  its phytochemical  study. Analysis  of the antibacterial ability of  Vibrio sp.  using the  disk diffusion  method was the main thing carried out in this research, then the extract yield was calculated from the maceration process of Ulva lactuca seaweed,  as  well  as  phytochemical  analysis  to  support  the  antibacterial  ability  of  Ulva lactuca seaweed against the bacteria Vibrio sp. The results of the extraction of Ulva lactuca seaweed  with  ethanol  solvent  obtained  a  yield  of  3.67%.  The  results  showed  a  moderate antibacterial activity of Vibrio sp. from Ulva lactuca seaweed extract at a concentration of 100%  was  17.3  mm.  Weak  antibacterial  activity  was  at  a  concentration  of  75%  of  12.525 mm and extracts below a concentration of 75% did not have inhibitory power against Vibrio sp  bacteria.  Phytochemical  studies  of  Ulva  lactuca  seaweed  found  secondary  metabolite compounds  in  the  form  of  alkaloids,  flavonoids,  steroids,  tannins  and  saponins.  Based  on the  results  of  this  research,  it  is  hoped  that  the  antibacterial  ability  of  Vibrio  sp.  can  be further investigated from ethanol extract of Ulva lactuca seaweed in vivo.

## Article History:
Recieved: 14 Oktober 2023 Revised: 26 November 2023 Accepted: 01 Desember 2023 © 2023 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Pattimura
Copyright © 2023 Biofaal Journal Homepage: https://ojs3.unpatti.ac.id/index.php/biofaal/index E-mail: biofaaljournal@gmail.com
This  article  is  an  open  access  article  distributed a  Creative  Commons  Attribution-NonCommercial-ShareAlike  4.0 International License
How to cite:
Metungun J,  Beruatjaan MY,  Hitijahubessy  H, and Tamher E. 2023. Glutamine protects mitochondrial structure  and  function in oxygen toxicity  Ability  Analysis  of Ulva  lactuca Seaweed  Ethanol Extract as  an Antibacterial of Vibrio sp.  and  Phytochemical  Studies.  Biofaal Journal. 4(2): 100-107.

## BIOFAAL Journal Desember 2023   Volume 4 Nomor 2   Halaman 100-107
E-ISSN: 2723-4959
https://doi.org/10.30598/biofaal.v4i2pp100-107

## A. PENDAHULUAN
Vibriosis adalah  salah  satu  penyakit  utama  yang  menyerang  ikan  dan  organisme akuatik  lainnya  yang  menyebabkan  kematian  dan  kerugian besar  dalam  industri  akuakultur. Spesies-spesies  Vibrio  penyebab  vibriosis  pada  organisme  laut  adalah V.  parahaemolyticus , V. alginolyticus , V. harveyi , dan V. vulnificus . Infeksi Vibrio ini dapat menyebabkan kematian yang  tinggi  dan  menghambat  pertumbuhan  organisme  yang  dibudidayakan  (Forouhar  et  al., 2019). Vibrio termasuk  dalam  famili Vibrionaceae ,  merupakan  bakteri  gram  negatif  yang banyak  tersebar  di  lingkungan  muara,  laut  dan  pesisir  karena  bersifat  halofilik  (Ranjani  & Hemalatha,  2022).  Untuk  mengatasi vibriosis ,  industri  akuakultur  memilih  memberi  makan ikan  yang  terinfeksi  dengan  makanan  obat  antibiotik  (Elabd  et  al.,  2022).  Karena meningkatnya  pemberian  antibiotik  sintesis,  maka  munculah  resistensi  antibiotik  (Jenish  et al.,  2022).  Oleh  karena  itu,  semakin  dibutuhkan  agen  terapeutik  baru  untuk  mengobati penyakit  tersebut  tanpa  menimbulkan  dampak  berbahaya  bagi  ikan  dan  lingkungan sekitarnya. Pengobatan yang berasal dari tumbuhan merupakan alat terbaik dalam mengobati berbagai penyakit  tanpa  menimbulkan  efek  samping  yang  merugikan,  dan juga  hemat biaya (Ranjani & Hemalatha, 2022).
Penelitian  Liswandari  et  al.,  (2018)  menyebutkan  bahwa  salah  satu  bahan  alam  laut yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus adalah  rumput  laut Ulva  lactuca .    Zona  hambat  ekstrak  etanol  rumput  laut Ulva lactuca terhadap E.  coli sebesar  8,47  mm  dengan  zona  hambat  terhadap S.  aureus sebesar 8,90  mm.  Kemudian  dari  hasil  penelitian  Azizah  (2021)  lebih  mempertegas  bahwa  rumput laut Ulva lactuca dalam ekstrak etanol dapat berfungsi sebagai antibakteri untuk memhambat bakteri Staphylococcus aureus dengan variasi konsentrasi esktrak sebesar 0,2 % dan dengan zona  hambat  sebesar  9,87  mm.  Analisis  kandungan  metabolit  sekunder  dalam  uji  fitokimia mengindikasikan Ulva  lactuca mengandung  flavonoid,  triterpen,  steroid,  saponin  dan  tanin. Hasil  penelitian  Tran  et  al  (2018)  ditemukan  daya  hambat  bakteri  dari  ekstrak  air Ulva recticulata terhadap bakteri E. coli, P. aeruginosa dan E. Cloace .
Berdarasakan  uraian  kemampuan  ekstrak  etanol  rumput  laut Ulva  lactuca terhadap bakteri lainnnya, maka ada potensi ekstrak etanol rumput laut Ulva lactuca untuk dilakukan penelitian  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Vibrio sp.  Selain  itu,  hal  ini  sangat berhubungan  dengan  berkembanganya  budidaya  ikan  dan  rumput  laut  di  Maluku  Tenggara, dengan  demikian  memungkinkan  adanya  inovasi  dalam  pengobatan  ikan  dan  rumput  laut yang  terserang  bakteri Vibrio sp.  Inovasi  ini  didukung  dengan  meneliti  kemampuan  anti bakteri dari bahan alami seperti rumput laut Ulva lactuca terhadap bakteri Vibrio sp.

## B. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Juli  sampai  September  2023  di  Laboratoium  Hama dan Penyakit Ikan Politeknik Perikanan Negeri Tual.

## Alat dan Bahan

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  tugas  akhir  teknik  isolasi  bakteri.  Alat  yang digunakan dalam penelitian ini adalah pembakar spirtus, incubator air concept, incubator bio concept , autoclave , hot  plate ,  neraca, gloves  sterill ,  oven,  evaporator,  saringan  40  mesh, cawan petridish , erlenmeyer, tabung reaksi, spatula, gelas ukur, labu ukur, gelas kimia, pipet tetes, pinset, sarbet, Bunsen , Neraca analitik, colloni counter , blender , mortar dan alu.

## Bahan
Adapun bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  sampel rumput  laut Ulva lactuca dari  pantai  Desa  Fair  Kota  Tual,  sampel  air  laut  dari  pantai    Desa  Watdek  Kota Langgur  Kabupaten  Maluku  Tenggara,  media  agar Thiosulfate  citrate  bile  salts  sucrose (TCBS),  akuades,  etanol, cotton  swab  sterill ,  kertas  cakram  antibiotik  tetrasiklin,  kertas cakram kosong, kertas lakmus merah dan biru.

## Prosedur Penelitian
Penentuan rendemen ekstrak
Penentuan  rendemen  ekstrak  meliputi  preparasi  sampel  rumput  laut Ulva  lactuca dengan  cara  bersihkan  air  mengalir,  digunting  halus,  lalu  dikeringkan  pada  suhu  ruang. Proses selanjutnya yakni sampel sebanyak dimaserasi salama 5 hari dengan pelarut etanol dan dievaporasi  sampai  mendapatkan  ekstrak  dalam  bentuk  pasta,  kemudian  ditimbang  hasil ekstrak.

## Uji aktivitas antibakteri metode difusi cakram
Uji  aktivitas  antibakteri  meliputi  proses  sterilisasi  alat-alat  gelas  dengan  metode sterilisasi  kering  dengan  oven  dengan  suhu  170 o C  selama  2  jam.  Kemudian  dilakukan preparasi  air  laut  dengan  cara  mengambil  air  laut  dengan  botol  yang  sudah  steril.  Tahap berkutnya  adalah  ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca diencerkan  bertingkat  dari  kosentarsi 100%  sampai  konsentrasi  3,125%,  serta  disiapkan  juga  kertas  cakran  antibiotic  tetrasiklin sebagai  kontrol  postif.  Proses  selanjutnya  dibuat  media  TCBS  agar  dengan  cara  melarutkan 8,808  gram  media  TCBS  dalam  100  ml  akuades.  Media  dipanaskan  sampai  mendidih berbusa, didinginkan dan dituang perlahan dalam petri dish .  Selanjutnya dinyalakan Bunsen untuk proses isolasi bakteri dari air laut. Air laut dioret pada media TCBS agar menggunakan cotton  swab  sterill dengan  metode  streak  plate,  sambil  merendam  kertas  cakram  kosong dalam  masing-masing  konsentrasi  ekstrak  dan  akuades  sebagai  kontrol  negatif.  Perendaman kertas  cakram  dilakukan  selama  10  menit,  kemudian  diambil  kertas  cakram  dengan  pinset dan ditempelkan ditaruh dengan lembut pada permukaan media TCBS agar yang sudah dioret air laut. Cawan petri ditutup dan dibalik permukaannya, kemudian diinkubasi selama 24 jam dalam  incubator  pada  suhu  35 o C.  Pengamatan  zona  bening  akan  dilakukan  setelah  24  jam proses inkubasi.

## Analisis fitokimia
Menurut  Sangi  et  al  (2019),  analisis  fitokimia  dilakukan  dengan  menganalisis metabolit  sekunder  alkaloid  dengan  menggunakan  reagen  mayer,  wagner  dan  dragendorf.
Selain  itu,  dilakukan  juga  analisis  metabolit  sekunder  untuk  golongan  flavonoid,  triterpen, steroid, saponin dan tanin.

## Analisis Data

## Penentuan Rendemen Ekstrak
Menurut  Sudarmadji  &  Suhardi  (1997),  rendemen  esktrak  rumput  laut Ulva  lactuca dapat dihitung dengan rumus di bawah ini:
Rendemen ekstrak Berat ekstrak kental Berat bubuk sampel x100%
Pengukuran zona hambat (David & Stout, 1971)
Gambar 1. Area perhitungan zona bening
Zona hambat DV DC DH DC 2 " 100%
Keterangan : DV : Diameter vertical
DH : Diameter horizontal
DC : Diameter Kertas cakram

## Klasifikasi zona hambat
Hasil  kajian  aktivitas  antibakteri  dengan  metode disc  diffusion berupa  zona  bening, selanjutnya dilakukan analisis data yang didasarkan pada  analisa diameter zona hambat dan daya hambat bakteri oleh Greenwood et al., (1995) pada tabel 1.
Tabel 1. Diameter zona dan daya hambat
Diameter zona hambat Daya hambat bakteri D >20 Golongan Kuat 15 < D < 20 Golongan Sedang 10 < D <15 Golongan Lemah D <10 Tidak ada daya hambat
Keterangan: D = diameter

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen ekstrak
Ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca dibuat  dengan  metode  maserasi  yaitu  pemeraman pada suhu ruang. Proses ini dilakukan selama 5 hari dan hasil yang diperoleh akan diuapkan. Residu yang tertinggal dari hasil evaporasi dinamakan ekstrak. Hasil eksetrak dalam benmtuk
pasta  kemudian  dihitung  rendemen.  Rendemen  ekstrak  dalam  penelitian  ini  didapatkan  dari hasil  bagi  massa  hasil  ekstrak  daun  sukun  dengan  massa  serbuk  daun  sukun  yang  akan digunakan untuk ekstraksi dikalikan 100%. Rendemen ekstrak yang diperoleh adalah sebesar 3,67  %.  Dimana  massa  pasta  ekstrak  daun  sukun  sebesar  22  gram  dan  massa  serbuk  daun sukun untuk ekstraksi sebanyak 600 gram.
Tujuan  rendemen  ekstrak  dihitung  adalah  untuk  medukung  hasil  penelitian  uji aktivitas  antibakteri  dengan  menggunakan  ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca .  Selain  itu, tujuan selanjutnya adalah menganalisa potensi total massa ekstrak yang akan ikut larut dalam pelarut etanol 70%. Menurut Verdiana et al (2018), etanol 70% adalah pelarut polar sehingga mampu  mengekstrak  metabolit  sekunder  dengan  sangat  baik  terutama  flavonoid.  Menurut Safitri  &  Fatmawati  (2021),  aktivitas  antibakteri  ditimbulkan  dari  interaksi  metabolit sekunder  dan  pelarut.  Pelarut  yang  dapat  mengekstrak  dengan  baik  metabolit  tersebut merupakan turunan alkohol yaitu etanol. Pelarut ini dapat membantu aktivitas senyawa aktif atau  metabolit  sekunder  seperti  merusak  struktur  bakteri,  menghambat  sintesis  bakteri,  dan menghambat proses metabolisme sel pada bakteri.

## Uji aktivitas antibakteri metode difusi cakram
Sampel  air  laut  yang  digunakan  dalam  isolasi  bakteri  diambil  di  pesisir  pantai Watdek.  Data  zona  hambat  berupa  data  rata-rata  pengukuran  zona  hambat  berdasarkan konsentrasi  ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca dalam  konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25%, 12,5%,  6,25%  dan  3,125%  dengan  perlakuan  sebanyak  dua  kali  (duplo),  kontrol  positif (tetrasiklin) dan kontrol negatif (aquades) dapat dilihat pada gambar 2.

## Gambar 2. Zona hambat ekstrak Ulva lactuva
Aktivitas  antibakteri  ini  ditunjukan  dengan  adanya  zona  hambat  dengan  berbagai kemampuan menghambat sesuai dengan konsentrasi ekstrak rumput laut ulva.  Kontrol positif yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  tetrasiklin  30  mg  dan  kontrol  negatif  adalah aquades. Klasifikasi daya hambat dari masing-masing konsentrasi  ekstrak dan control dapat dilihat pada tabel 2 yang dibandingkan dengan nilai zona hambat pada gambar 2.
Data  hasil  penelitian  menunjukan  adanya  aktivitas  antibakteri  yang  sedang  dari ekstrak  rumput  laut  ulva  dalam  konsentrasi  100%,  dengan  zona  hambat  sebesar  17,3  mm. Aktifitas antibakteri yang lemah diperoleh dari konsentrasi 75% dengan zona hambat sebesar 12,525.  Konsentrasi  ekstrak  rumput  laut  ulva  dibawa  75%  tidak  ada  kemampuan
0 10 20 30 17,3 12,525 7,325 4,475 0 0 0 22,35 0 Rata-rata Zona hambat (mm)
menghambat bakteri.  Jika aktivitas antibakteri ekstrak rumput laut ulva dibandingkan dengan kontrol  positif  yang  merupakan  antibiotik  tetrasiklin  dalam  30  mg,  maka  hasil  antibiotik masih  tergolong  kuat  sebagai  antibakteri  dengan  zona  hambat  sebesar  22,35  mm  sedangkan ekstrak  rumput  laut  ulva  yang bersifat  lemah pada  konsentrasi  tertinggi  (100%).  Pengunaan tetrasiklin  sebagai  kontrol  positif  dalam  penelitian  ini  dimaksudkan  sebagai  pembanding antibiotik/antibakteri  yang  sudah  merupakan  senyawa  murni  yang  pasti  dapat  membentuk zona  hambat.  Sedangkan  aquades  digunakan  sebagai  kontrol  negatif  dimaksudkan  untuk menjadi  pembanding  yang  tidak  dapat  membentuk  zona  hambat  karena  hanya  bersifat sebagai pelarut ekstrak.
Tabel 2 Klasifikasi daya hambat
No Sampel Klasifikasi daya hambat 1 Ekstrak 100% Sedang 2 Ekstrak 75% Lemah 3 Ekstrak 50% Tidak ada 4 Ekstrak 25% Tidak ada 5 Ekstrak 12,5% Tidak ada 6 Ekstrak 6,25% Tidak ada 7 Ekstrak 3,125% Tidak ada 8 Kontrol positif (Tetrasiklin) Kuat 9 Kontrol Negatif (Aquades) Tidak ada
Adanya  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca menunjukan adanya  peran  metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  rumput  laut Ulva  lactuca . Hal  ini dapat  dijelaskan  dengan  melakukan  analisis  fitokimia  terhadap  rumput  laut Ulva  lactuca (Yulianti & Manguntungi, 2018). Hasil analisis fitokimia nantinya akan menghubungkan sifat antibakteri dari ekstrak rumput laut Ulva lactuca terhadap bakteri Vibrio sp.

## Analisis fitokimia
Analisis  fitokimia  pada  rumput  laut Ulva  lactuca dan  hasil  analisis  fitokimia  dalam penelitian ini dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil analisis fitokimia rumput laut Ulva lactuca No Uji fitokimia Hasil uji Hasil reaksi 1 Alkaloid: Wagner Mayer Dragendorff + + + terbentuk endapan coklat terbentuk endapan putih terbentuk endapan merah jingga 2 Terpenoid - Tidak terbentuk endapan warna merah jingga/ ungu 3 Steroid + terbentuk endapan warna biru. 4 Flavonoid + terbentuk endapan warna merah tua 5 6 Saponin Tanin + + terbentuk busa yang stabil. terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau.
Keterangan: (+): hasil uji menunjukan adanya metabolit (-): hasil uji tidak menunjukan adanya metabolit
Analisis  fitokimia  merupakan  analisis  kualitatif  yang  didasarkan  pada  warna  yang tebentuk  karena  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan.  Hasil  yang  diperoleh  adanya  senyawa alkaloid,  flavanoid,  triterpen,  tanin  dan  saponin.  Terbentuknya  Zona  Bening  menunjukan adanya aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol rumput laut Ulva lactuca . Aktivitas antibakteri ini daru rumput laut sangat berkaitan erat dengan metabolit sekunder yang terkandung dalam rumput  laut Ulva  lactuca .  Hasil  penelitian  menunjukan  adanya  alkaloid,  flavonoid,  steroid, tanin dan saponin dalam rumput laut Ulva lactuca .
Alkaloid  diduga  dapat  merusak  membran  sel  dan  protein  sel  bakteri  sehingga menyebabkan  bakteri  mati  (Brooks  et  al.,  2005).  Flavonoid  diduga  berfungsi  sebagai  agen antibakteri  dengan  membentuk  protein  ekstraseluler  dari  senyawa  kompleks  yang  larut, sehingga  dapat  merusak  membran  sel  bakteri  dan  selanjutnya  melepaskan  senyawa intraseluler.  Selait  itu,  flavonoid  juga  menghambat  sistem  energi  dan  pemulihan  bakteri, karena  bakteri  membutuhkan  energi  untuk  menyerap  berbagai  metabolit,  serta  untuk melakukan biosintesis senyawa makromolekul dalam sel (Ngozi et al., 2009). Tanin berfungsi untuk  inaktivasi  adhesi  dalam  sel  dan  enzim  pada  bakteri.  Tanin  juga  dapat  menggangu penyaluran  protein  pada  lapisan  dalam  sel.  Tanin  dapat  membuat  dinding  sel  bakteri  tidak dapat  terbentuk  dengan  sempurna,  karena  tanin  dapat  melisis  polipeptida  pada  dinding  sel bakteri  (Ngozi  et  al.,  2009).  Bontjura  et  al  (2015),  fungsi  steroid  sebagai  antibakteri  yang dapat merusak membran sel sehingga menjadi rapuh dan lisis. Rijayanti (2014), menyatakan bahwa  saponin  diduga  bisa  mendenaturasi  peptidoglikan  dinding  sel  bakteri  dan  DNA bakteri.

## D. KESIMPULAN
Kesimpulan dari penelitian ini adalah ekstraksi rumput laut Ulva lactuca dengan pelarut etanol  didapatkan  rendemen  sebesar  3,67%.  Aktifitas  antibakteri Vibrio sp.  dengan  daya hambat  sedang  dari  ekstrak  rumput  laut Ulva  lactuca pada  konsentrasi  100%  sebesar  17,3 mm.  Aktifitas  antibakteri  dengan  daya  hambat  lemah  berada  pada  konsentrasi  75%  sebesar 12,525  mm  dan  ekstrak  konsentrasi  50%  sampai  3,125%  tidak  memiliki  daya  hambat terhadap  bakteri Vibrio sp.  Kajian  fitokimia  dari  rumput  laut Ulva  lactuca ditemukan senyawa  aktif  yang  diduga  sebagai  antibakteri  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  steroid,  tanin  dan saponin.

## E. UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  kami  sampaikan  kepada  Direktorat  Akademi  Pendidikan  Vokasi yang  telah  memberikan  kami  kesempatan  untuk  dibiayai  penelitian  ini  sampai  tahap  akhir pada  tahun  2023.  Ucapan  terima  kasih  juga  diberikan  kepada  laboran  dalam  Laboratorium Hama dan Penyakit Ikan Polikant yang sudah membantu kami dalam penelitian ini.

## F. DAFTAR PUSTAKA
Azizah,  F.  (2021). Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  alga  hijau  (Ulva  lactuca)  dengan  variasi  waktu sonikasi . Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Bontjura,  S.,  Waworuntu,  O.  A.,  &  Siagian,  K.  V.  (2015).  Uji  efek  antibakteri  ekstrak  daun  leilem (Clerodendrum minahassae l.) terhadap bakteri streptococcus mutans. Pharmacon , 4 (4).
https://doi.org/https://doi.org/10.35799/pha.4.2015.10198 Brooks, G. F., Butel, J. S., & Morse, S. A. (2005). Mikrobiologi kedokteran (Vol. 6). Salemba Medika. David,  W.  W.,  &  Stout,  T.  R.  (1971).  Disc  plate  method  of  microbiological  antibiotic  assay. Microbiology ,
22 (4), 659–665.
Elabd, H., Youssuf, H., Mahboub, H. H., Salem, S. M. R., Husseiny, W. A., Khalid, A., El-Desouky, H. S., & Faggio,  C.  (2022).  Growth,  hemato-biochemical,  immune-antioxidant  response,  and  gene  expression  in Nile  tilapia  (Oreochromis  niloticus)  received  nano  iron  oxide-incorporated  diets. Fish  &  Shellfish Immunology , 128 , 574–581.
Forouhar,  V.  M.,  Imanpoor,  M.  R.,  Shabani,  A.,  Hedayati,  A.,  &  Faggio,  C.  (2019).  Effect  of  long‐term exposure of silver nanoparticles on growth indices, hematological and biochemical parameters and gonad histology of male goldfish (Carassius auratus gibelio). Microscopy Research and Technique , 82 (7), 1224– 1230.
Greenwood,  D.,  Finch,  R.,  Davey,  P.,  &  Wilcox,  M.  (1995).  Antibiotics,  susceptibility  (Sensitivity)  test antimicrobial and chemoterapy. United State of America: Mc Graw Hill Company . Jenish, A., Ranjani, S., & Hemalatha, S. (2022). Moringa oleifera nanoparticles demonstrate antifungal activity against plant pathogenic fungi. Applied Biochemistry and Biotechnology , 194 (10), 4959–4970. Liswandari,  M.  S.,  Lantang,  D.,  &  Dirgantara,  S.  (2018).  Uji  aktivitas  antibakteri  alga  hijau  (Ulva  sp.)  dari pantai  Sorido  Biak  terhadap  bakteri  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus  aureus. Jurnal  Farmasi Medica/Pharmacy Medical Journal (PMJ) , 1 (1).
Ngozi,  I.  M.,  Jude,  I.  C.,  &  Catherine,  I.  C.  (2009).  Chemical  profile  of  Chromolaena  odorata  L.(King  and Robinson) leaves. Pakistan Journal of Nutrition , 8 (5), 521–524.
Ranjani,  S.,  &  Hemalatha,  S.  (2022).  Triphala  decorated  multipotent  green  nanoparticles  and  its  applications.
Materials Letters , 308 , 131184. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.matlet.2021.131184 Rijayanti,  R.  P.  (2014).  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  mangga  bacang  (Mangifera  Foetida  L.) terhadap  Staphylococcus  aureus  secara  in  vitro. Jurnal  Mahasiswa  PSPD  FK  Universitas  Tanjungpura , 1 (1).
Safitri,  E.  A.,  &  Fatmawati,  A.  (2021).  Inhibition  Activity  Of  Ethanolic  Extract  Of  Ulva  lactuca  Against Staphylococcus aureus. Pharmaceutical Journal of Indonesia , 7 (1), 43–48.
Sangi,  M., Runtuwene, M. R.  J.,  Simbala, H.  E.  I., & Makang, V.  M. A.  (2019). Analisis fitokimia tumbuhan obat di Kabupaten Minahasa Utara. Chemistry Progress , 1 (1), 47–53.
Sudarmadji, S., & Suhardi, B. H. (1997). Prosedur analisa untuk bahan makanan dan pertanian . Liberty. Tran,  T.  T.  Van, Truong, H. B., Tran, N. H. V.,  Quach,  T.  M. T., Nguyen, T.  N.,  Bui, M. L., Yuguchi, Y., & Thanh,  T.  T.  T.  (2018).  Structure,  conformation  in  aqueous  solution  and  antimicrobial  activity  of  ulvan extracted from green seaweed Ulva reticulata. Natural Product Research , 32 (19), 2291–2296. Verdiana,  M.,  Widarta,  I.  W.  R.,  &  Permana,  I.  (2018).  Pengaruh  jenis  pelarut  pada  ekstraksi  menggunakan gelombang ultrasonik terhadap aktivitas antioksidan ekstrak kulit buah lemon (Citrus limon (Linn.) Burm F.). Jurnal Ilmu Dan Teknologi Pangan , 7 (4), 213–222.
Yulianti,  Y.,  &  Manguntungi,  A.  Y.  B.  (2018).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Alga  Merah  dari  Pantai  Luk, Sumbawa terhadap Salmonella thypi dan Staphylococcus aureus. Biota: Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu Hayati , 1–11.