Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## DETEKSI Escherichia coli PATOGEN PADA PANGAN MENGGUNAKAN METODE KONVENSIONAL DAN METODE MULTIPLEX PCR
Evy Ratnasari Ekawati 1) , Siti Nur Husnul Y. 2) , Fakhmi Rooslan Hamidi 2)
1),2) Dosen Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo
3) Balai Besar POM di Surabaya
evysains@dosen.umaha.ac.id

## ABSTRACT
Foodstuffs  are  a  source  of  nutrition  for  humans  and  as  well  as  a  source  of  food  for microorganisms. Microbes can contaminate food through water, dust, air, soil, processing tools (during production or preparation processes, as well as secretions from human and animal guts). Food can be toxic because it has been contaminated by pathogenic bacteria which can then grow and multiply during storage, so the bacteria are able to produce toxins that are harmful to humans. The aimed of this study was to detect the presence of Escherichia coli pathogen in food. This type of research is experimental laboratory using conventional method and multiplex PCR method. 8 positive  samples of Escherichia coli ATCC 25922 by conventional method, consisting of 5 samples of tofu; 2 samples of ice syrup and 1  sample  iced  tea.  All  positive  samples  in  EMB  agar  continued Escherichia  coli pathogen  detection using PCR multiplex method. From the PCR multiplex test, no samples were detected Escherichia coli pathogen
Keywords: Escherichia coli, foodstuffs, conventional method, multiplex PCR method

## PENDAHULUAN
Pangan adalah segala sesuatu yang berasal dari  sumber  hayatu  dan  air,  baik  yang  diolah maupun  tidak  diolah,  yang  diperuntukkan sebagai makanan atau minuman bagi konsumsi manusia  termasuk  bahan  tambahan  pangan, bahan  baku  pangan  dan  bahan  lain  yang digunakan dalam proses penyiapan, pengolahan dan  atau  pembuatan  makanan  atau  minuman. Definisi  pangan  yang  memiliki  cakupan  luas, maka  upaya  untuk  mencegah  pangan  dari kemungkinan  tercemar,  baik  dari  cemaran biologis,  kimia  dan  benda  lain  yang  dapat mengganggu,  merugikan  dan  membahayakan kesehatan manusia merupakan suatu keharusan (UU RI No. 7, 1996; BPOM, 2008).
Bahan  makanan  merupakan  sumber  gizi bagi  manusia  dan  sekaligus  sebagai  sumber makanan  bagi  mikroorganisme.  Pertumbuhan mikroorganisme  dalam  bahan  pangan  dapat
menyebabkan  perubahan  yang  menguntngkan, seperti  perbaikan  bahan  pangan  secara  gizi, daya  cerna  amaupun  daya  simpannya.  Tetapi pertumbuhan  mikroorganisme  dalam  bahan pangan  juga  dapat  mengakibatkan  perubahan fisik atau kimia yang tidak diinginkan, sehingga bahan  pangan  tersebut  menjadi  tidak  layak untuk  dikonsumsi.  Hal  tersebut  terjadi  pada prmbusukan bahan pangan (Siagian, 2002).
Mikroba dapat mencemari pangan melalui air,  debu,  udara,  tanah,  alat-alat  pengolah (selama  proses  produksi  atau  penyiapan)  juga sekresi dari usus manusia dan hewan. Penyakit akibat pangan ( food borne disease ) yang terjadi segera setelah mengkonsumsi pangan, umumnya  disebut  dengan  keracunan.  Pangan dapat beracun karena telah terkontaminasi oleh bakteri pathogen yang kemudian dapat tumbuh dan  berkembang  biak  selama  penyimpanan, sehingga bakteri tersebut mampu memproduksi
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
toksin  yang  berbahaya  bagi  manusia.  Bakteri yang  terkait  dengan  keracunan  makanan diantaranya adalah
Escherichia coli enteropatogenik , Salmonella, Shigella, Campylobacter, Listeria monocytogenes,
Yersinia enterocolityca, Staphylococcus aureus,  Clostridium  perfringens,  Clostridium botulinum,  Bacillus  cereus,  Vibrio  cholera, Vibrio  parahaemolyticus dan Enterobacter sakazaki (ISO, 2006; BPOM, 2008).
Data  BPOM  berdasarkan  laporan  balai besar/balai  POM  mengenai  frekuensi  kejadian luar  biasa  (KLB)  keracunan  pangan  pada  25 propinsi,  melaporkan  frekuensi  kejadian  luar biasa  (KLB)  keracunan  pangan  pada  3  kota diantaranya kota Semarang terdapat 14 kejadian (10,94%),  Makassar dengan  14  kejadian
(10,94%)  dan  Lampung  dengan  12  kejadian
(9,38%).  Berdasarkan  tempat  atau  lokasi kejadian  KLB  keracunan  pangan  pada  19 tempat, Sekolah Dasar (SD) menempati urutan kedua  tempat  KLB  dengan  angka  kejadian  24 kejadian  (18,75%)  setelah  tempat  atau  lokasi rumah  tangga  dengan  59  kejadian  (46,09%), disusul pada urutan ketiga, yaitu tempat terbuka dengan 8 kejadian (6,25%) (BPOM, 2011).
Bahaya  mikroba  pada  pangan  perlu mendapat  perhatian,  karena  jenis  bahaya  ini sering menjadi agen penyebab kasus keracunan pangan. Escherichia  coli merupakan  bakteri pathogen yang sering menyebabkan keracunan pangan  dan  juga  menjadi  salah  satu  mikroba inidikator sanitasi. Keberadaan Escherichia coli pada pangan dapat menunjukkan bahwa prakten sanitasi lingkungan yang buruk (Wijaya, 2009).
Escherichia  coli umumnya  berhabitat  pada saluran  pencernaan  manusia  dan  hewan (Tannock,  1995;  Sorum  and  Sunde,  2001; Biswas, 2010), dapat dengan mudah disebarluaskan  di  luar  habitat  asalnya  melaui perantara air dan pangan (Perreten, 2005). Pada kondisi  tertentu, Escherichia  coli dapat menyebabkan  infeksi,  terutama  pada  pasien dengan  gangguan  sistem  imun  atau  pada kondisi  dimana barrier pada  gastrointestinal terganggu,  bahkan Escherichia  coli non
pathogen sekalipun dapat menyebabkan infeksi (Huang et al., 2006).
Sekitar  98%  mikroba  yang  terdapat  pada pangan  merupakan  mikroba  non  pathogen (Kumar  et  al.,  2002).  Sehingga  perlu dikembangkan tes diagnostik yang sesuai untuk mendeteksi Escherichia coli pathogen. Metode konvensional untuk mendeteksi bakteri pathogen  pada  pangan  adalah  dengan  teknik kultur  (Djoepri,  2006;  Biswas  et  al.,  2010). Karakterisasi fenotip dan genotip membutuhkan waktu 3-4 hari untuk memastikan hasilnya. Deteksi dengan imunologi  dan  biokimia  memakan  waktu, membutuhkan kultur murni dan kurang sensitif terhadap  metode  molekuler.Metode  berbasis DNA  dapat  digunakan  dengan  menggunakan kultur  bakteri  campuran.  Variasi  polimorfisme DNA  diantara  berbagai  spesies  bakteri  dapat dieksploitasi  untuk  mengidentifikasi  pathogen pada pangan (Biswas et al., 2010).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  peneliti melakukan  kajian  adanya Escherichia  coli pathogen  dalam  berbagai  jenis  sampel  pangan yang  dikumpulkan  dari  pasar  tradisional,  ritel modern dan penjual di sekitar sekolah dasar.

## METODOLOGI PENELITIAN
Jenis  penelitian  ini  adalah  eksperimental laboratorium.  Pengambilan  sampel  dilakukan sesuai  dengan  protokol  sampling  yang  telah disusun,  yaitu  pengambilan  sampel  rutin  dan pengambilan  sampel  khusus  untuk  kajian  ini. Ruang  lingkup  protokol  ini  adalah  persiapan pengambilan  dan  penanganan  sampel  yang diambil  untuk  dianalisis  mikrobiologi  terkait keberadaan Escherechia coli pathogen. Sampel yang dianalisis merupakan sampel pangan yang berasal dari beberapa sub katergori pangan.

## Waktu dan Tempat Penelitian
Pengambilan sampel dilakukan pada bulan Juni – Agustus 2016 di 22 lokasi, yaitu 6 pasar tradisional, 4 ritel modern, dan 12 SD/MI yang tersebar  di  Kota  Surabaya,  Provinsi  Jawa Timur.  Lokasi  sampling  merupakan  lokasi
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
pengambilan sampel rutin yang dilakukan oleh Balai Besar POM di Surabaya dan untuk SD/MI yang  menjadi  lokasi  sampling  PJAS  adalah sekolah  dengan  temuan Escherichia  coli pada PJAS dalam sampling tahun-tahun sebelumnya. sedangkan  deteksi  keberadaan  dan  jenis Escherichia  coli pathogen  dilakukan  bulan Juni-Oktober 2016.

## Pengujian Mikrobiologi
1) Metode Konvensional
Pengujian  mikrobiologi  dilakukan  untuk deteksi keberadaan Escherichia coli pathogen pada sampel pangan yang diambil. Parameter  analisis  yang  digunakan  yaitu : Escherichia  coli secara  kuantitatif  dengan metode  APM Escherichia  coli .  Standar cemaran mikrobiologi Escherichia coli pada pangan  yang  digunakan  sebagai  acuan adalah  peraturan  Kepala  Badan  Pengawas Obat dan Makanan No. HK.00.06.1.52.4011
Tahun  2009  Tentang  Batas  Maksimum Cemaran  Mikroba  dalam  Makanan  dan Minuman.

## 2) Metode Multiplex PCR
Identifikasi Escherichia  coli pathogen (ETEC,  EPEC,  EHEC)  dilakukan  dengan metode Multiplex PCR.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dimasukkan ke dalam formulir  entri  data  menggunakan  Microsoft Excel.
Bagan Pengujian Deteksi Escherichia coli Patogen
Sampel 25 g + PDF 225 mL
9 tabung MCB
(10 -1 , 10 -2 , 10 -3 )
9 tabung ECB
(10 -1 , 10 -2 , 10 -3 ) EMB IMViC TABEL APM/MPN Positif Positif Positif Positif Isolat 1 (2-5 koloni EMBA
Pengenceran terendah) Isolat 2 (2-5 koloni EMBA Pengenceran terendah) Isolat 3 (2-5 koloni EMBA Pengenceran terendah) Isolat 4 (2-5 koloni EMBA
Pengenceran terendah)
Isolat 5 (2-5 koloni EMBA Pengenceran terendah) P C R
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Identifikasi  Escherichia  coli  pada  Sampel Pangan
Dari  seluruh  pengambilan  sampel  telah dilakukan  uji  Deteksi Escherichia  coli dengan menggunakan metode konvensional dan metode multiplex PCR untuk deteksi Escherichia  coli patogen.  Sesuai  dengan protokol  uji  yang  tersedia.  Uji  Deteksi Escherichia  coli pathogen  dilakukan  apabila terdapat koloni tipikal pada media EMB Agar, dilakukan uji parallel terhadap sampel tersebut baik secara konvensional maupun PCR.
Setelah  dilakukan  pengujian  sampel  dari bulan  Juni-Oktober  2016,  didapatkan  hasil bahwa 8 sampel positif Escherichia coli ATCC
25922 secara metode konvensional, yang terdiri dari  5  sampel  tahu;  2  sampel  es  sirup  dan  1 sampel  es  teh.  Seluruh  sampel  yang  positif  di EMB Agar dilanjutkan deteksi Escherichia coli pathogen dengan menggunakan metode multiplex  PCR.  Dari  uji  multiplex  PCR,  tidak ada satu sampel pun yang terdeteksi Escherichia coli pathogen. Data hasil pengujian disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1 Hasil Pengujian Escherichia coli Patogen pada Pangan
No Jenis Sampel N Standar Nilai APM Rata-rata (APM/g) Persentase Temuan Escherichia coli Patogen (%) Metode Konvensional Metode Multiplex PCR ETEC  EPEC  EHEC 1 Tepung terigu 8 <3 APM/g 0 0 0 0 0 2 Mi basah mentah 8 <3 APM/g 0 0 0 0 0 3 Tahu 8 <3 APM/g >1100 62,5 0 0 0 4 Biskuit 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 5 Keik 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 6 Sosis ayam 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 7 Sosis sapi 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 8 Dendeng daging 8 <3 APM/g 0 0 0 0 0 9 Bakso daging 8 <3 APM/g 0 0 0 0 0 10 Bakso ikan 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 11 Otak-otak ikan 4 <3 APM/g 0 0 0 0 0 12 Agar-agar 9 <3 APM/g 0 0 0 0 0 13 Es The 9 <3 APM/g 21 11,11 0 0 0 14 Es Sirup 9 <3 APM/g 131 22,22 0 0 0 15 Bakso pentol 9 <3 APM/g 0 0 0 0 0
Hasil  Pengujian  Escherichia  coli  Patogen pada Pangan Berdasarkan Jenis Registrasi
Dari  8  sampel  yang  positif Escherechia  coli ATCC  25922,  berdasarkan  jenis  registrasinya paling  banyak  adalah  untuk  5  sampel  tahu dengan registrasi PIRT, 2 sampel es sirup dan 1 sampel  es  teh  yang  memang  tanpa  registrasi.
Hasil  pengujian Escheriachia  coli pathogen berdasarkan  jenis  registrasi  disajikan  pada Tabel 2.

## Hasil  Pengujian  Escherichia  coli  Pada Pangan Berdasarkan Lokasi
Pengambilan sampel pada kajian ini dilakukan pada  bulan  Juni-September  2016  di  22  lokasi, yaitu 6 pasar tradisional, 4 ritel modern dan di 12  SD/MI.  Sampel  positif Escherichia  coli diperoleh  dari  2  ritel  modern  dan  2  SD.  Hasil pengujian Escherichia coli pathogen berdasarkan lokasi di sajikan pada Tabel 3.
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Tabel 2 Hasil Pengujian Escherechia coli Patogen Berdasarkan Jenis Registrasi No Jenis Sampel Jenis Registrasi N Standar (APM/g) Nilai APM Rata- rata Temuan Escherichia coli Metode Konvensional Temuan Escherichia coli Metode Multiplex PCR ETEC EPEC EHEC Jumlah  Persentase (%) Jumlah  Persentase (%) Jumlah  Persentase (%) Jumlah  Persentase (%) 1 Tepung Terigu MD 8 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 Mi basah mentah P-IRT 7 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Curah 1 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 Tahu P-IRT 8 <3 >1100 5 62,5 0 0 0 0 0 0 4 Biskuit MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 Keik P-IRT 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 Sosis ayam MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 Sosis sapi MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 Dendeng daging P-IRT 8 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 Bakso daging MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 P-IRT/SP 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 Bakso ikan MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 11  Otak-otak ikan MD 4 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12  Agar-agar PSS 9 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 13  Es teh PSS 9 <3 21 1 11,11 0 0 0 0 0 0 14  Es sirup PSS 9 <3 131 2 22,22 0 0 0 0 0 0 15  Bakso pentol PSS 9 <3 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Tabel 3  Hasil Pengujian Escherechia coli Patogen Berdasarkan Lokasi No Jenis Sampel Lokasi Sampling N Standar (APM/g) Nilai APM Rata- rata Temuan Escherichia coli Metode Konvensional Temuan Escherichia coli Metode Multiplex PCR ETEC EPEC EHEC Jumlah Persentase (%) Jumlah Persentase (%) Jumlah Persentase (%) Jumlah Persentase (%) 1 Tepung Terigu Ritel modern 8 <3 0 0 0 0 0 0 2 Mi basah mentah Ritel modern 7 <3 0 0 0 0 0 0 Pasar tradisional 1 <3 0 0 0 0 0 0 3 Tahu Ritel modern 8 <3 >1100 5 62,5 0 0 0 4 Biskuit Titel modern 4 <3 0 0 0 0 0 0 5 Keik Ritel modern 1 <3 0 0 0 0 0 0 Pasar Tradisional 3 <3 0 0 0 0 0 0 6 Sosis ayam Pasar tradisional 4 <3 0 0 0 0 0 0 7 Sosis sapi Ritel modern 4 <3 0 0 0 0 0 0 8 Dendeng daging Ritel modern 1 <3 0 0 0 0 0 0 Pasar tradisional 7 <3 0 0 0 0 0 0 9 Bakso daging Ritel modern 2 <3 0 0 0 0 0 0 Pasar tradisional 6 <3 0 0 0 0 0 0 10 Bakso ikan Pasar tradisional 4 <3 0 0 0 0 0 0 11 Otak-otak ikan Pasar tradisional 4 <3 0 0 0 0 0 0 12 Agar-agar SD/MI 9 <3 0 0 0 0 0 0 13 Es teh SD/MI 9 <3 21 1 11,11 0 0 0 14 Es sirup SD/MI 9 <3 131 2 22,22 0 0 0 15 Bakso pentol SD/MI 9 <3 0 0 0 0 0 0
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Dari  hasil  penelitian  ini  didapatkan  hasil bahwa  sebanyak  62,5  %  sampel  tahu,  22,22% sampel  es  sirup  dan  11,11%  sampel  es  teh positif  ditemukan  adanya Escherichia  coli , tetapi Escherichia  coli yang  ditemukan  pada sampel  tersebut  tidak  pathogen  setelah  diuji menggunakan multiplex PCR.
Pada  sampel  tahu,  es  sirup  dan  es  the  masing- masing    memiliki  nilai  indeks  rata-rata  APM sebesar>1100  APM/g,  131  APM/g  dan  21 APM/g,  dimana  angka  tersebut  berada  di  atas ambang  batas  maksimum  cemaran  mikroba yang  telah  ditetapkan  dalam  Peraturan  BPOM RI No. HK.00.06.1.52.4011 tentang penetapan batas  maksimum  cemaran  mikroba  dan  kimia dalam  makanan.  Sedangkan  pada  penelitian Pasalu et al (2013),  dari hasil uji Escherichia coli-coliform metode  APM  didapatkan  hasil pada  es  jeruk  dan  es  buah  secara  berurutan terdapat Escherichia  coli dengan  indeks  APM secara berurutan, yaitu 23 APM/100 ml dan 240 APM/100 mL .
Tahu  dengan  kandungan  protein  sekitar
8%  atau  lebih  dan  a w 0,89-0,99,  menyebabkan tahu  menjadi  media  yang  cocok  untuk pertumbuhan  mikroba.  Tigkat  populasi  bakteri yang tinggi akan menyebabkan perubahan mutu tahu,  karena  matabolit  yang  dihasilkan  selama pertumbuhan  bakteri.  Sumber  cemaran  bakteri pada  tahu  dapat  melalui  bahan  baku,  yaitu kedelai dan atau air, juga lingkungan produksi dan  pekerja.  Tanah  dan  air  merupakan  habitat bakteri, diantaranya Escherichia coli,
Staphylococcus  aureus,  Bacillus  cereus dan bakteri pembentuk spora (Rajkovic et al., 2013; Mailia et al., 2015).Es sirup dan es teh memiliki nilai  rata-rata  APM    yang  melebihi  ambang batas maksimum cemaran mikroba  karena pada kedua sampel menggunakan air yang mungkin tidak  dimasak,  es  batu  yang  ditambahkan  atau peralatan yang terkontaminasi oleh Escherichia coli serta  hygiene  penjual yang tidak baik.
Penelitian yang sama terhadap es teh yang pernah dilakukan oleh Ritonga et al.(2013), dari 10  sampel  es  teh  yang  diperiksa  ditemukan bakteri Escherichia  coli .  Dari  hasil  uji
laboratorium, adanya cemaran Escherichia coli pada sampel es sirup dan es teh dikarenakan air yang digunakan tidak sampai mendidih, karena bakteri Escherichia coli relative peka terhadap panas dan dapat dihilangkan dengan pendidihan hingga 100 0 C, terletak pada penyimpanan es teh yang  terlalu  lama  di  dispenser,  sirup  yang disimpan dalam wadah yang kurang bersih serta es batu yang digunakan mengandung Escherichia coli.
Penyakit  akibat  makanan  yang  terjadi segera setelah mengkonsumsi pangan, umumnya  disebut  sebagai  keracunan.  Pangan dapat menjadi beracun karena telah terkontaminasi  oleh  bakteri  pathogen  yang selanjutnya dapat tumbuh dan berkembang biak selama penyimpanan, sehingga bakateri pathogen tersebut mampu memproduksi toksin yang dapat membahayakan manusia.
Keracunan  pangan  oleh  bakteri  dapat  berupa intoksifikasi atau infeksi. Intoksifikasi disebabkan  oleh  adanya  toksin  bakteri  yang terbentuk di dalam  makanan pada saat bakteri bermultiplikasi,  sedangkan  keracunan  pangan berupa  infeksi  disebabkan  oleh  masuknya bakteri  kedalam  tubuh  melalui  makanan  yang terkontaminasi  dan  tubuh  memberikan  reaksi terhadap  bakteri  tersebut  (BPOM,  2008; Pasalu, 2013).
Hasil  pengujian  deteksi Escherichia  coli pda  sampel  tahu,  es  sirup  dan  es  teh  dengan menggunakan  media  EMBA  terdapat  mirkoba yang  tumbuh  dengan  ciri-ciri  spesifik  sebagai Escherichia  coli ,  namun  setelah  dilanjutkan dengan  uji  multiplex  PCR  dari  koloni  yang tumbuh  pada  EMBA  tersebut  tidak  ditemukan Escherichia coli pathogen.
Pada    penelitian  ini  terdapat  beberapa kelemahan,  diantaranya Escherichia  coli pada pangan  yang  diperoleh  dari  pasar  tradisional, ritel modern, dan SD/MI tidak dapat diketahui faktor  penyebab,  karena  tidak  dilakukan pengamatan  secara  prospektif  dan  terus menerus  serta    tidak  dilakukan  uji  multiplex PCR    untuk Escherichia  coli pathogen  jenis EIEC dan EAEC.
Jurnal SainHealth Vol. 1 No. 2 Edisi September 2017
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan pada  5  sampel  tahu,  2  sampel  es  sirup  dan  1 sampel es teh yang diuji menggunakan metode konvensionalditemukan
Escherichia coli
ATCC 25922dengan masing-masing nilai index rata-ratasecara berurutan sebesar >1100 APM/g, 131 APM/g dan 21 APM/g. Escherichia  coli yang  ditemukan  pada
sampel  tahu,  es  sirup  dan  es  teh  tidak  ada satupun yang pathogen setelah diuji menggunakan multiplex PCR.

## DAFTAR PUSTAKA
Biswas, S., M.A.K. Parves, M. Shafiquzzaman, S.  Nahar  and  M.N.  Rahman.  2010.
Isolation and Characterization of Escherichia  coli in  Ready-to-eats  Foods
Vended in Islamic University Kushtia. J .
Biol-Sci. 18 : 99-103.
BPOM. 2008. Pengujian Mikrobiologi Pangan.
InfoPOM. 9(2) : 1-9.
BPOM. 2015. Listeria monocytogenes Sebagai Agen  Penyebab  Keracunan  Pangan. InfoPOM. 16 (1) : 3-5.
Djoepri,  M.R.  2006.  Isolasi  dan  Identifikasi
Mikroba Escherichia coli pada Makanan Sosis dan Nuget. Temu Teknis Nasional Tenaga Fungsional Pertanian. 265-268.
Huang, D.B., Mohanty, Dupont, H.L., Okhuysen,  P.C.  and  Chiang  T.  2006.  A Review of An Emeging Enteric Pathogen
Enteroaggregative Escherichia  coli . J. Med-Microbiol. 55 : 1303-1311.
International  Standard  Organization.  2006. Milk  and  Milk  Product  :  Detection Enterobacter  sakazakii .  First  Esition.
22964. IDF/RM 210.
Kumar,  S.H.,  Iddya,  K.,  Karunasajar,  I.  2002.
Molecular.  Methods  for  Rapid  and
Specific  detection  of  Pathogens  in Seafood. Aquacult Asia 3. 34-37.
Mailia,  R.,  B.  Yudhistira,  Y.  Pranoto,  dan  S.
Rochdyanto.  2015.  Ketahanan  Panas Cemaran  Mikroba Escherichia  coli,
Staphylococcus  aureus,  Bacillus  cereus dan  Bakteri  Pembentuk  Spora  yang Diisolasi dari Proses Pembuatan Tahu di Sudagaran Yogyakarta. Agritech . 35 (3) :
300-308.
Peraturan  BPOM  Hk.00.061.1.52.4011.  2009. Penetapan  Batas  Maksimum  Cemaran Mikroba dan Kimia Dalam Makanan.
Perreten, V. 2005. Resistance in the Food Chain in Bacteria From Animals : Relevance to Human  Infections,  In  White  D.G., Aleksum  M.N.,  McDemont  PF  (eds). Frontiers  in  Antimicrobial  Resistance. ASM  Press.  Washington  DC.  446-464 pp.
Rajkovic,  A.,  Kljajic,  M.,  Smigic,  N.,
Devlieghere, F., and Uttendale, M. 2013. Toxin  Producing Bacillus  cereus Persist in  Ready-to-reheat  Spagheti  Bolognese Mainly in Vegetative State. International
Journal  of    Food  Microbiology .  167  :
236-243.
Ritonga,  R.,  I.  Marsaulina  dan  I.  Chahaya.
2013.  Analisis Escherichia  coli dan Higiene  Sanitasi  pada  Minuman  Es  Teh yang  Dijual  di  Pajak  Karona  Jamin Ginting, Kec. Medan Baru. FKM. USU.
Siagian,  A.  2002.  Mikroba  Patogen  pada Makanan  dan  Sumber  Pencemarannya. USU  Digital  Library.  FKM.  Univ. Sumatera  Utara.  Then  Human  Body. Chapman and Hall. London.
Sorum,  H.,  and  Sunde.  2001.  Resitance  to
Antibiotics  in  the  Normal  Flora  od
Animals. Vet Res. 32 : 227-241.
Tannock,  G.W.  1995.  Normal  Microflora  An Introduction to Microbes Inhabiting.