## ANALISIS FISIOLOGI STEK PUCUK DALAM PERBANYAKAN Eucalyptus pellita F. Muell TANPA MENGGUNAKAN HORMON
Physiological Analysis of Eucalyptus pellita F. Muell Shoot Cuttings in Propagation Without the Application of Hormones
Muhammad Miftah Fadhlurrahman 1 , Sri Wilarso Budi 2* , dan Arum Sekar Wulandari 2
(Diterima 6 Maret 2024 /Disetujui 28 Maret 2024)

## ABSTRACT
The  plant  species  commonly  used  in  Industrial  Plantation  Forests  as  raw  material  for  pulp  and  paper  is Eucalyptus pellita. One of the quality seeds of E. pellita is produced from superior clones by vegetative propagation, namely shoot cuttings. There are research results that show the propagation of certain clones has the highest Survival Rate  when  treated  without  using  additional  hormones.  Therefore,  it  is  necessary  to  conduct  research  on  the propagation of E. pellita seed cuttings without using hormones. The results of the physiological analysis of E. pellita shoot cuttings showed that each parameter observed, namely IAA hormone content, C-organic, and N value, showed non-linear results with shoot age treatment. The results of measuring shoot length, number of nodes, and distance between nodes showed linear values with shoot age treatment. The results of observations of total Survival Rate, total roots and shoots showed that the 18 day shoot age treatment had the lowest value compared to other treatments. At the age of 2 weeks, it showed that the 21 day shoot age treatment had the fastest root growth ability compared to other treatments. Based on the results of height and diameter measurements at 12 weeks, it shows that 21 day old shoots have the best growth and Survival Rate so that they can be used as a basis for determining the age of shoots in the production of clone 148 seedlings on an operational scale.
Keywords: E. pellita, physiological, propagation, hormone

## ABSTRAK
Jenis  tanaman  yang  umum  digunakan  di  Hutan  Tanaman  Industri  (HTI)  sebagai  bahan  baku pulp dan  kertas adalah Eucalyptus pellita . Bibit berkualitas E. pellita salah satunya diproduksi dari klon unggul dengan perbanyakan secara  vegetatif,  yakni  stek  pucuk.  Terdapat  hasil  penelitian  yang  menunjukkan  bahwa  perbanyakan  klon  tertentu memiliki nilai keberhasilan hidup tertinggi dengan perlakuan tanpa menggunakan hormon tambahan. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian perbanyakan bibit stek E. pellita tanpa menggunakan hormon. Hasil analisa fisiologi stek pucuk E. pellita menunjukkan setiap parameter yang diamati yakni kandungan hormon IAA, nilai C-organik, dan nilai N yang diamati menunjukkan hasil yang tidak linear dengan perlakuan umur tunas. Hasil pengukuran panjang tunas, jumlah node , dan jarak antar node menunjukkan nilai yang linear dengan perlakuan umur tunas. Hasil pengamatan total  hidup  ( Survival  Rate ),  total  berakar  dan  bertunas  menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  18  hari  memiliki  nilai terendah  dibandingkan  perlakuan  lain.  Pada  umur  2  MST  menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  21  hari  memiliki kemampuan pertumbuhan akar paling cepat dibandingkan perlakuan lain. Berdasarkan hasil pengukuran tinggi dan diameter umur 12 MST menunjukkan perlakuan tunas umur 21 hari memiliki pertumbuhan dan Survival Rate terbaik sehingga dapat menjadi dasar penentuan umur tunas dalam produksi bibit klon 148 skala operasional.
Kata kunci: E. pellita , fisiologi, perbanyakan, hormon
1 Mahasiswa Program Studi Silvikultur Tropika Departemen Silvikultur Fakultas Kehutanan dan Lingkungan IPB University Jl. Ulin Kampus IPB, Dramaga, Bogor Jawa Barat, Indonesia 16680
2 Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan dan Lingkungan, IPB University Jl. Ulin Kampus IPB, Dramaga, Bogor Jawa Barat, Indonesia 16680 *  Penulis korespondensi: e-mail: swilarso@apps.ipb.ac.id

## PENDAHULUAN
Pertumbuhan Hutan Tanaman Industri (HTI) sebagai bahan baku pulp dan kertas di Indonesia sejak tahun 1990 terus  meningkat  (Badan  Pusat  Statistik  2021).  Secara umum  jenis-jenis  yang  dikembangkan  diantaranya adalah Acacia mangium dan Eucalyptus pellita . Pada saat ini jenis A. mangium mulai ditinggalkan karena adanya serangan  hama  dan  penyakit  (Hardiyanto et  al. 2024). Bibit berkualitas baik diharapkan menghasilkan tegakan dengan produktivitas tinggi dan tahan terhadap serangan hama  serta  penyakit.  Upaya  tersebut  salah  satunya diwujudkan  dengan  memproduksi  bibit E.  pellita dari klon unggul dengan perbanyakan secara vegetatif, yakni stek  pucuk.  Klon  unggul  dalam  produktivitas  dan ketahanan  terhadap  hama  penyakit  serta  keseragaman yang  tinggi  akan  menghasilkan  tegakan  dengan produktivitas yang optimal. Perbanyakan stek pucuk juga sangat  mudah  dilakukan,  tidak  memerlukan  tingkat keahlian yang tinggi (Sulichantini 2016).
Terdapat  dua  kategori  bahan  stek  pucuk  untuk perbanyakan E. pellita yakni: stek pucuk makro ( macro- cutting ) dan stek pucuk mini ( mini-cutting ). Perbedaannya adalah stek makro tidak mempertahankan keberadaan tunas apikal sedangkan stek mini mempertahankan  keberadaan  tunas  apikal.  Hal  tersebut menjadikan  bahan  stek  pucuk  makro  berukuran  lebih kecil dari pada bahan stek pucuk mini. Perbanyakan salah satu  klon  unggul  di  PT.  Musi  Hutan  Persada  (MHP) yakni  klon  148 diperbanyak menggunakan metode stek pucuk mini.
Perbanyakan  stek  pucuk  umumnya  menggunakan hormon untuk memicu pertumbuhan akar. Jenis hormon yang  umum  digunakan  adalah  hormon  auksin.  Dalam penelitian Fogaça and Fett-Neto AG (2005) menyebutkan  hormon  auksin  dapat  memiliki  peran sentral  dalam  menentukan  kapasitas rooting dengan mempengaruhi kemampuan berakar ( rooting abilty ) dari bahan  stek  yang  mana  hal  tersebut  sangat  berperan penting dalam keberhasilan perbanyakan secara vegetatif (stek). Hormon auksin jenis IAA ( Indole Acetic Acid ) dan IBA  ( Indole  Butryric  Acid )  merupakan  hormon  yang umum  digunakan  dalam  perbanyakan  bibit  stek E. pellita .  Brondani et  al. (2012)  menyebutkan  IBA  dapat menyebabkan perubahan metabolisme enzim, karbohidrat,  RNA,  DNA,  dan  protein  yang  dapat memengaruhi  (berupa  mendorong  atau  menghambat) regenerasi  akar  adventif  selama  proses  diferensiasi  sel akar berlangsung.
Namun,  terdapat  beberapa  hal  yang  perlu diperhatikan dalam penggunaan hormon untuk perbanyakan bibit stek E. pellita yaitu dibutuhkan biaya dalam penyediaan hormon, alokasi waktu tambahan dan keterampilan  bagi  pekerja.  Selain  itu,  hasil  penelitian Sarpong et  al. (2021)  menunjukkan  terdapat  beberapa klon  yang  memiliki  nilai  keberhasilan  hidup  ( Survival Rate )  tertinggi  dengan  perlakuan  tanpa  menggunakan hormon IBA. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian pada  stek E.  pellita yang  banyak  digunakan  oleh perusahaan HTI.
Penelitian  mengenai  analisis  fisiologis  pada  bahan stek  pucuk  mini  yang  digunakan  untuk  perbanyakan tanpa menggunakan hormon diperlukan untuk
mengetahui  kondisi  fisiologis  seperti  apa  yang  dapat mendukung  pembentukan  akar  dan  pertumbuhan  bibit stek  pucuk  mini  tanpa  menggunakan  hormon. Pengetahuan  kondisi  fisiologis  tersebut  juga  dapat menjadi  dasar  dalam  pengembangan  perbanyakan  bibit dengan  metode  stek  pucuk  mini E.  pellita .  Kondisi fisiologis  yang  dimaksud  adalah  konsentrasi  auksin endogen  dan  C  (Carbon)  /  N  (Nitrogen)  rasio  yang terdapat  pada  bahan  stek  yang  digunakan.  Siregar  dan Djam’an (2017) menyebutkan bahan stek yang memiliki kadar  C  rendah  dan  N  yang  tinggi  dapat  menyebabkan bahan  stek  mudah  menjadi  busuk.  Oleh  karena  itu, penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  konsentrasi hormon endogen IAA pada stek pucuk yang digunakan untuk  perbanyakan  tanpa  menggunakan  hormon  serta menganalisis  umur  tunas  yang  memiliki  kondisi fisiologis dan pertumbuhan yang optimum.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  selama  3  bulan.  Persiapan bahan  stek  hingga  penanaman  dilakukan  di  Nurseri Divisi Research  and  Development (RnD)  PT.  Musi Hutan  Persada  sedangkan  analisis  konsentrasi  hormon IAA  dan  rasio  C/N  dilakukan  di  Pusat  Penelitian Bioteknologi dan Bioindustri Indonesia (PPBBI), Bogor.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain gunting stek, HPLC ( High Performance Liquid Chromatography ), alat tulis, papan  jalan,  penggaris,  jangka  sorong,  kantung  plastik, label, laptop dengan aplikasi Microsoft Word, Microsoft Excel, SAS 9.0, dan peralatan pendukung dokumentasi. Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain bahan stek tanaman Eucalyptus pellita , cocopeat , pupuk osmokot, dan pupuk TSP granular.

## Prosedur Penelitian
Tahapan kegiatan yang dilakukan pada penelitian ini meliputi pembuatan rancangan percobaan, persiapan dan pemanenan  bahan  stek,  penanaman  bahan  stek, pengamatan,  pengukuran  dan  analisis  data.  Tata pelaksanaan dari prosedur penelitian ini sebagai berikut:

## Rancangan Percobaan
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 1 faktor yakni umur bahan stek. Umur bahan stek terbagi menjadi lima yakni umur 30 hari, 27 hari, 24 hari, 21 hari dan 18 hari. Setiap perlakuan memiliki ulangan sebanyak 5 kali  dan setiap ulangan terdiri dari 96 bahan stek (1 tray ukuran 96) sehingga total terdapat 2400 bahan stek (480 bahan stek  setiap  perlakuan)  untuk  ditanam.  Selain  itu, dipersiapkan  juga  bahan  stek  seberat  100  gram  pada setiap  perlakuan  untuk  analisis  fisiologis  berupa kandungan hormon IAA dan C/N rasio.
Persiapan dan Pemanenan Bahan Stek Persiapan bahan stek dilakukan dengan memproduksi  /  mengambil  bahan  stek  dari stool  plant (induk  bahan  stek)  yang  berada  di  kebun  pangkas. Ukuran bahan stek yang dipanen adalah sesuai perlakuan yakni  stek  umur  18-30  hari  sejak stool  plant tersebut dilakukan pemangkasan/ topping . Pemanenan bahan stek dilakukan  secara  bersamaan  pada  variabel  umur  bahan stek 30 hari sehingga proses topping dilakukan pada hari yang  berbeda.  Setiap  bahan  stek  dilakukan  pengukuran panjang  dan  jarak  antar  ruas.  Bahan  stek  yang  akan dianalisis  disimpan  ke  dalam ice  box dan  di  kirim  ke Pusat Penelitian Bioteknologi dan Bioindustri Indonesia di Bogor.

## Penanaman Bahan Stek
Penanaman  bahan  stek  dilakukan  dengan  media cocopeat yang  dipadatkan  serta  ditambahkan  pupuk osmokot sebanyak 5 kg/m3 dan TSP granular sebanyak 3 kg/m3. Bahan stek yang telah ditanam diletakan di dalam misting house selama 4 pekan, shading area 2 pekan, dan open area 6 pekan atau hingga bibit berumur 12 pekan. Penyiraman di misting house dilakukan secara otomatis setiap  lima  menit  sekali  dengan  durasi  setiap  kali penyiraman adalah 15 detik dimulai pukul 07.00 hingga 18.00.  Penyiraman  di shading  area dan open  area dilakukan  pada  pagi,  siang,  dan  sore  hari  dengan  lama penyiraman  disesuaikan  dengan  kondisi  cuaca  di  hari penyiraman.

## Parameter yang Diamati
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah jarak antar ruas ( node ) pada bahan stek tunas yang digunakan, kemampuan tumbuh stek yakni kemampuan stek berakar dan bertunas, jumlah stek bertunas dan berakar ( rooting succes ) serta tinggi dan diameter bibit stek pada umur 6 minggu  hingga  12  minggu  setelah  tanam  (MST). Dilakukan  juga  analisis  kondisi  fisiologis  berupa konsentrasi  hormon  IAA  dan  rasio  C/N  berdasarkan umur  bahan  stek.  Selain  itu,  dilakukan  pengamatan lingkungan  berupa  suhu  dan  kelembapan  selama  di misting house .

## Pengamatan stek mulai berakar (Rooting Rate)
Pengamatan stek mulai berakar dimulai dua minggu setelah  penanaman  dan  seterusnya  selang  dua  minggu sampai stek berumur 1 bulan.

## Pengukuran Persentase Bertunas
Persentase bertunas diperoleh dengan membanding- kan jumlah bahan stek yang bertunas dengan bahan stek
yang  tidak  bertunas.  Data  ini  diukur  pada  4  minggu setelah bahan stek ditanam.
Pengukuran Persentase Hidup (Survival Rate)
Persentase hidup  atau Survival  Rate diperoleh dengan  membandingkan  jumlah  bahan  stek  yang  hidup degan  jumlah  bahan  stek  yang  mati.  Data  ini  mulai diambil pada 2 minggu setelah bahan stek ditanam.

## Pengukuran Tinggi dan Diameter
Pengukuran  tinggi  bibit  dan  diameter  bibit  mulai dilakukan pada saat 6 minggu setelah bahan stek ditanam hingga  berumur  12  minggu.  Pengukuran  tinggi  dimulai dari  pangkal  batang  hingga  ke  bagian  tunas  bibit sedangkan  diameter  bibit  diukur  pada  ketinggian  1  cm dari media tanam.

## Analisis  Konsentrasi  Hormon  IAA  dan  C/N  Rasio Bahan Stek
Analisis konsentrasi hormon IAA menggunakan alat High  Performance  Liquid  Chromatography  (HPLC). Prosedur  pengujian  mengikuti  metode  Lacobellis et  al . (1998) yakni Eluen yang digunakan dibuat dari campuran metanol dan air ( waters ) dengan perbandingan 60 : 40 v/v kemudian  disaring  dengan  membran  selulosa  asetat dengan porositas 0,2 μm. Sebanyak 0,0025 g IAA standar dilarutkan dalam 20 ml  metanol  glacial dan diencerkan secara  bertahap  dengan  metanol  glacial  dengan perbandingan  1  :  1.  Sampel,  eluen  dan  IAA  standar disonikasi selama 15 menit. Kemudian eluen di- running dalam  kolom  HPLC  shimpak  CLC–ODS  C–18  dengan diameter  0,6  mm  dan  ditunggu  selama  10  menit. Sebanyak 10 μl IAA standar dengan berbagai konsentrasi disuntikan ke dalam kolom HPLC. Setelah itu, sebanyak 10 μl  sampel  pada berbagai  pengenceran disuntikan ke dalam kolom HPLC. Kondisi pengukuran dilakukan pada suhu kolom 400C, kecepatan alir 1 ml/menit dan panjang gelombang  280  nm.  Hasil  yang  positif  ditunjukkan dengan waktu  retensi kromatogram  sampel  relatif sama dengan  waktu  retensi  kromatogram  IAA  standar. Konsentrasi  fitohormon  IAA  yang  dihasilkan  dapat dihitung  dengan  menggunakan  variabel  area  IAA standar, area sampel dan faktor pengencerannya. Analisis C  (karbohidrat)  menggunakan  metode  Titrimetri  dan Kjeldahl untuk N (nitrogen).

## Pengolahan dan Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  diuji  secara  statistik menggunakan  ANOVA.  Data  diolah  menggunakan software statistik SAS 9.0 dan Microsoft Excel.
Tabel 1 Hasil analisa parameter fisiologi (hormon IAA, C-Organik, dan N)
No. Umur Tunas Parameter IAA (mg/kg) C-Organik (%) N (%) C/N 1 30 25.51 51.68 2.36 21.9 2 27 36.55 45.3 1.83 24.75 3 24 26.68 44.23 1.47 30.09 4 21 33.65 45.65 2.23 20.47 5 18 34.82 50.53 2.26 22.36 Metode HPLC Spektro Kjeldahl Perhitungan

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil analisis fisiologi umur bahan stek mini E. pellita
Berdasarkan  Tabel  1,  setiap  parameter  analisa fisiologi  menunjukkan  hasil  yang  tidak  linear  dengan perlakuan  umur  tunas.  Semakin  bertambahnya  umur tunas  tidak  menunjukkan  semakin  bertambahnya kandungan  /  nilai  parameter  yang  diamati.  Begitu  pun sebaliknya,  semakin  berkurang  umur  tunas  tidak menunjukkan semakin berkurangnya kandungan hormon IAA, nilai C-organik, dan nilai N yang diamati. Namun, terdapat hubungan yang linear antara nilai C-organik dan nilai  N.  Semakin  besar  nilai  C-Organik  semakin  besar pula  nilai  N.  Berdasarkan  nilai  C-organik  dan  N  mulai dari yang terbesar hingga yang terkecil adalah perlakuan umur tunas 30 hari, 18 hari, 21 hari, 27 hari, dan 24 hari. Nilai  C-organik  yang  dibagi  dengan  nilai  N  sehingga diperoleh  nilai  rasio  C/N  menunjukkan  nilai  terbesar dimiliki oleh perlakuan 24 hari dan nilai terkecil dimiliki oleh perlakuan 21 hari atau secara berurutan adalah umur 24 hari, 27 hari , 18 hari, 30 hari, dan 21 hari. Selain itu, berdasarkan Tabel 1 terdapat informasi bahwa perlakuan umur  tunas  21  hari  memiliki  kandungan  hormon  IAA, nilai  C-organik,  dan  N  yang  konsisten  yakni  selalu berada di urutan ketiga baik dari urutan terbesar maupun urutan terkecil atau berada di tengah-tengah.

## Hasil pengukuran parameter panjang tunas, jumlah
node, dan jarak antar node
Hasil  pengukuran  panjang  tunas,  jumlah node ,  dan jarak  antar node pada  Tabel  2  menunjukkan  nilai  yang linear dengan perlakuan umur tunas. Semakin besar atau tua  umur  tunas  maka  parameter  yang  diamati  yakni panjang  tunas,  jumlah node ,  dan  jarak  antar node akan semakin  besar.  Sebaliknya  semakin  kecil  atau  muda umur tunas, panjang tunas, jumlah node , dan jarak antar node akan  semakin  kecil.  Hal  ini  sejalan  dengan pertumbuhan  pada  tunas  tanaman,  semakin  tua  tunas, pertumbuhan  tunas  akan  semakin  besar.  Metode  mini
cutting yang  mempertahankan  keberadaan  tunas  apikal menjadikan  jumlah node dan  jarak  antar node menjadi penting.  Kuppusamy et al. (2019) menyebutkan jumlah node dan  jarak  antar node menjadi  hal  yang  perlu diperhatikan agar dapat menjaga keseragaman tunas saat dipanen dan ditanam. Selain mempertimbangkan ukuran tunas,  tingkat  juvenilitas  tunas  juga  perlu  diperhatikan, Bonga dan Durzan (2012) menyebutkan kondisi tanaman yang  juvenil  dapat  mendukung  kemampuan  berakar materi stek.

## Hasil  pengamatan  parameter  total  hidup,  total berakar, dan total bertunas
Berdasarkan  Tabel  3,  nilai  total  berakar  terendah dimiliki  oleh  perlakuan  umur  tunas  18  hari  baik  pada umur 2 MST dan 4 MST yakni 3.3% dan 20%. Nilai total berakar  tertinggi  pada  umur  2  MST  dimiliki  oleh perlakuan  umur  tunas  21  hari  yakni  18.1%  sedangkan perlakuan umur tunas 30, 27, dan 24 hari masing-masing adalah  12.1%,  13.5%,  dan  14.8%.Pada  umur  4  MST, nilai total berakar tertinggi dimiliki oleh perlakuan umur tunas  27  hari  yakni  55.83%  sedangkan  perlakuan  umur tunas  30,  24,  dan  21  hari  masing-masing  adalah  45%, 49.6%, dan 46.9%. Nilai total bertunas pada umur 4 MT menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  18  hari  masih memiliki  nilai  terendah  yakni  70.2%  sedangkan  nilai total  bertunas  tertinggi  dimiliki  oleh  perlakuan  umur tunas  27  hari  yakni  94.4%  namun  demikian  nilai  total
Tabel 2 Hasil pengamatan panjang tunas, jumlah node, dan jarak antar node
Perlakuan Umur Tunas Rerata Panjang Tunas (cm) Jumlah Node Jarak antar Node (cm) 30 10.9 a 3.4 a 3.8 a 27 8.2 b 3.1 b 3.1 b 24 7.7 c 2.9 c 2.9 b 21 6.6 d 2.8 cd 2.7 c 18 5.3 e 2.7 d 2.0 d
Angka yang diikuti oleh huruf yang sama dalam 1 perlakuan menunjukkan pengaruh yang tidak berbeda nyata berdasarkan uji Duncan taraf 5%.

## Tabel 3 Hasil pengamatan berakar dan bertunas umur 2-4 MST
No. Perlakuan Umur Tunas Total Berakar (%) Total Bertunas (%) Umur (MST) Umur  (MST) 2 4 4 1 30 12.1 45 90.2 2 27 13.5 55.8 94.4 3 24 14.8 49.6 90.6 4 21 18.1 46.9 91.3 5 18 3.3 20 70.2
Gambar 1  Pengukuran panjang tunas, jumlah node , dan jarak antar node
bertunas  yang  dimiliki  tidak  berbeda  signifikan  dengan perlakuan umur tunas 30, 24, dan 21 hari yakni 90.2%, 90.6%, dan 91.3%.
Hasil  pengamatan  total  berakar  dan  bertunas menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  18  hari  memiliki nilai  terendah  dibandingkan  perlakuan  lain  baik  pada umur  2  MST  maupun  4  MST.  Pada  umur  2  MST menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  21  hari  memiliki kemampuan pertumbuhan akar paling cepat dibandingkan perlakuan lain. Namun pada umur 4 MST menunjukkan  total  berakar  terbanyak  dimiliki  oleh perlakuan umur tunas 27 hari, hal ini sejalan dengan nilai total  bertunas  terbesar  pada  umur  4  MST  juga  dimiliki oleh  perlakuan  umur  tunas  27  hari.  Pertumbuhan  akar yang  baik  akan  mendukung  pertumbuhan  tunas  yang baik,  hal  ini  sejalan  dengan  Nakhooda  dan  Jain  (2016) yang menyebutkan bahwa kemampuan stek membentuk akar menentukan hidup dan matinya tanaman. Selain itu, hasil  pengamatan  perlakuan  umur  tunas  18  hari  juga menunjukkan  nilai  total  berakar  yang  rendah  diiringi dengan  nilai  total  bertunas  yang  rendah,  begitu  pun sebaliknya yakni  nilai total  berakar yang tinggi  diiringi dengan nilai total bertunas yang tinggi.
Hasil  pengukuran  parameter  tinggi  dan  diameter umur 6-12 MST
Berdasarkan  Tabel  4  hasil  pengukuran  tinggi  dan diameter,  pada  umur  6  minggu  setelah  tanam  (MST) menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  30  dan  24  hari memiliki  pertumbuhan  tinggi  terbaik  yakni  13.8  cm dengan nilai total hidup  (SR) sebesar 93.8% sedangkan pertumbuhan  diameter  terbaik  dimiliki  oleh  perlakuan tunas umur 30 hari yakni 1.2 mm dengan nilai SR sebesar 93.8%. Pertumbuhan tinggi dan diameter terendah umur
6 MST dimiliki oleh perlakuan umur tunas 18 hari yakni 8.9  cm  dan  0.9  mm  dengan  nilai  SR  sebesar  68.8%. Perlakuan lain yakni umur tunas 27 dan 21 hari pada 6 MST memiliki tinggi 13.4 cm, 13.7 cm dan diameter 1- 1.1 mm serta nilai SR sebesar 93.8%, 98.1%, dan 98.1%.
Pada pengukuran umur 8 MST, tinggi dan diameter terbaik serta terendah dimiliki oleh perlakuan umur tunas 30 hari dan umur tunas 18 hari yakni tinggi 19.2 cm dan 13.7 cm serta diameter 1.4 mm dan 1.1 mm juga nilai SR sebesar  90.6%  dan  66.9%.  Perlakuan  lain  yakni  umur tunas  27,  24,  dan  21  hari  pada  8  MST  masing-masing memiliki tinggi 18 cm, 18.2 cm, dan 18.3 cm, diameter sebesar  1.2-1.3  mm,  dan  nilai  SR  sebesar  95%,  92.5%, dan 95%. Pada pengukuran umur 10 MST, tinggi terbaik serta terendah masih dimiliki oleh perlakuan umur tunas 30  hari  dan  18  hari  yakni  tinggi  20.9  cm  dan  15.3  cm dengan  nilai  SR  sebesar  90%  dan  59.4%  sedangkan diameter  terbaik  serta  terendah  dimiliki  oleh  perlakuan umur tunas 21 hari dan 18 hari yakni 1.8 mm dan 1.6 mm. Perlakuan lain yakni umur tunas 27, 24, dan 21 hari pada 10  MST  masing-masing  memiliki  tinggi  20.2  cm,  20.4 cm, dan 20.1 cm dengan nilai SR sebesar 94.4%, 92.5%, dan 95% sedangkan diameter perlakuan tunas umur 30, 27, dan 24 hari masing-masing sebesar 1.6 mm, 1.6 mm, dan 1.7 mm.
Pada  umur  12  MST,  tinggi  terbaik  masih  dimiliki oleh perlakuan umur tunas 30 hari yakni 25.8 cm dengan nilai  SR  sebesar  90%  sedangkan  diameter  terbaik dimiliki oleh perlakuan umur tunas 21 hari yakni 2.3 mm. Pertumbuhan  tinggi  dan  diameter  terendah  masih dimiliki oleh perlakuan umur tunas 18 hari yakni tinggi 19.7  cm  dan  diameter  2  mm  dengan  nilai  SR  sebesar 59.4%.  Tinggi  perlakuan  umur  tunas  lain  yakni  27,  24, dan 21 hari adalah sebesar 24.7 cm, 24.8 cm dan 25 cm
Gambar 2  Pengamatan persen bertunas (A) dan berakar (B) serta pertumbuhan akar dari setiap  perlakuan stek umur 18, 21, 24, 27, dan 30 hari (kiri-kanan)
Tabel 4 Hasil Pengukuran tinggi (Tg), diameter (Dia), dan total hidup (SR) umur 6-12 MST
No. Perlakuan Umur (MST) 6 8 10 12 Tg (cm) Dia (cm) SR (%) Tg (cm) Dia (cm) SR (%) Tg (cm) Dia (cm) SR (%) Tg (cm) Dia (cm) SR (%) 1 30 13.8 a 1.2 a 93.8 a 19.2 a 1.4 a 90.6 a 20.9 a 1.6 b 90.0 a 25.8 a 2.0 b 90.0 a 2 27 13.4 a 1.1 b 98.1 a 18.0 b 1.3 b 95.0 a 20.2 a 1.6 b 94.4 a 24.7 a 2.1 b 94.4 a 3 24 13.8 a 1.0 c 93.8 a 18.2 ab 1.2 c 92.5 a 20.4 a 1.7 b 92.5 a 24.8 a 2.1 b 92.5 a 4 21 13.7 a 1.1 cb 98.1 a 18.3 ab 1.3 b 95.0 a 20.1 a 1.8 a 95.0 a 25.0 a 2.3 a 95.0 a 5 18 8.9 b 0.9 d 68.8 b 13.7 ac 1.1 c 66.9 b 15.3 b 1.6 b 59.4 b 19.7 b 2.0 b 59.4 b Angka yang diikuti oleh huruf yang sama dalam 1 perlakuan menunjukkan pengaruh yang tidak berbeda nyata  berdasarkan uji Duncan taraf 5%.
serta diameter sebesar 2 mm, 2.1 mm dan 2.1 mm dengan nilai SR sebesar 94.4%, 92.5%, dan 95%.
Hasil pengukuran tinggi dan diameter umur 6 MST hingga 12 MST menunjukkan perlakuan umur tunas 18 hari  memiliki  pertumbuhan  paling  rendah  baik  pada parameter tinggi maupun diameter. Pertumbuhan terbaik pada  parameter  tinggi  umur  6  hingga  12  MST  dimiliki oleh  perlakuan  umur  tunas  30  hari.  Pada  parameter diameter  umur  6-8  MST,  pertumbuhan  terbaik  dimiliki oleh  perlakuan  umur  tunas  30  hari.  Pertumbuhan diameter  pada  umur  10  MST  menunjukkan  perbedaan yang  tidak  signifikan,  sedangkan  pada  umur  12  MST pertumbuhan  diameter  terbaik  dimiliki  oleh  perlakuan umur tunas 21 hari.
Pertumbuhan terendah pada perlakuan umur tunas 18 hari dapat disebabkan ukuran tunas yang masih kecil, ukuran  tunas  yang  masih  kecil  menunjukkan  jumlah cadangan  makanan  yang  sedikit.  Cadangan  makanan menjadi  salah  satu  faktor  yang  dapat  mempengaruhi keberhasilan tanaman stek (Hartman 1997). Sebagaimana  data  pada  tabel  pengukuran  tunas, perlakuan  umur  tunas  18  hari  memiliki  panjang  tunas rata-rata  paling  kecil  yakni  5.3  cm  serta  jumlah node paling  sedikit  yakni  rata-rata  2.7  .  Berbeda  dengan perlakuan  umur  tunas  30,  27,  24  dan  21  hari  yang memiliki  rata-rata  panjang  tunas  serta  jumlah node masing-masing 10.9 cm, 8.2 cm, 7.7 cm, dan 6.6 cm serta 3.4,  3.1,  2.9,  dan  2.8 node .  Hal  ini  ditunjukkan  pada persen  berakar  umur  2  dan  4  minggu,  perlakuan  tunas umur 18 hari memiliki kemampuan berakar yang paling rendah  dibandingkan  perlakuan  lainnya.  Hal  tersebut juga menjadikan perlakuan umur tunas 18 hari memiliki nilai SR paling rendah serta nilai SR yang terus menerus turun  mulai  dari  2  MST  hingga  12  MST.  Kemampuan stek menumbuhkan akar menentukan hidup dan matinya tanaman stek (Nakhooda dan Jain 2016).
Pada  parameter  pertumbuhan  tinggi,  mulai  dari umur  6  MST  hingga  12  MST  menunjukkan  perbedaan yang  tidak  terlalu  signifikan  atau  berbeda  nyata. Perbedaan nyata yang terjadi disebabkan perlakuan umur tunas  18  hari  memiliki  pertumbuhan  tinggi  yang  lebih rendah  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya. Berdasarkan hal  tersebut,  perlakuan tunas umur  21, 24, 27 dan 30 hari memiliki pertumbuhan tinggi yang baik. Jika  dibandingkan  dengan  pertumbuhan  diameter, pertumbuhan  tinggi  dari  waktu  ke  waktu  menunjukkan pertambahan  ukuran  yang  nyata,  hal  ini  sejalan  dengan Wilson  (2000)  yang  menyebutkan  pertumbuhan  semai akan  lebih  terlihat  pada  pertumbuhan  meningginya,  hal ini  ditandai  dengan  aktifnya  pertumbuhan  jaringan-
jaringan  meristematik  dari  sel-sel  kuncup  terminal dikarenakan adanya dominasi apikal yang dikontrol oleh aktivitas  hormon  auksin  pada  bagian  kuncup  terminal. Dengan  demikian  umumnya  akan  terjadi  pertumbuhan tinggi yang lebih cepat dibandingkan dengan pertumbuhan diameternya.
Pada  parameter  pertumbuhan  diameter,  perbedaan yang  cukup  nyata  terjadi  pada  umur  6  dan  8  MST sedangkan  umur  10  dan  12  MST  memiliki  perbedaan yang  tidak  terlalu  nyata.  Pada  umur  6  dan  8  MST menunjukkan  pertumbuhan  diameter  terbesar  dimiliki oleh  perlakuan  tunas  umur  30  hari,  hal  tersebut  dapat disebabkan  umur  tunas  yang  memang  sudah  berukuran besar dari awalnya, sedangkan pada umur 10 dan 12 MST menunjukkan  pertumbuhan  diameter  terbesar  dimiliki oleh  perlakuan  umur  21  hari.  Pertumbuhan  diameter terbaik  umur  10  dan  12  MST  yang  dimiliki  oleh perlakuan  umur  tunas  21  hari  dapat  disebabkan pertumbuhan  akar  yang  optimal  sehingga  dapat mendukung  pertumbuhan  yang  lebih  baik  (Kuppusamy et  al. 2019),  hal  ini  dibuktikan  dengan  perlakuan  umur tunas 21 hari yang memiliki nilai  total  berakar  terbesar pada  umur  2  MST  (Tabel  3)  sehingga  menunjukkan pertumbuhan  akar  tercepat  dibandingkan  perlakuan lainnya.  Hasil  penelitian  Lodama et  al. (2016) menunjukkan  diperlukan  perlakuan  terkait  waktu  yang tepat agar dapat memberikan kondisi fisiologis tanaman yang optimal dalam mendukung kemampuan materi stek berakar sehingga memiliki pertumbuhan yang baik. Jika dibandingkan dengan perlakuan umur tunas 24, 27, dan 30 hari, maka perlakuan umur tunas 21 hari merupakan umur termuda sehingga memberikan kondisi materi stek yang  lebih  juvenil.  Bonga  dan  Durzan  (2012) menyebutkan  kondisi  tanaman  yang  juvenil  dapat mendukung kemampuan berakar materi stek. Kemampuan  berakar  terbaik  materi  stek  didukung  oleh tingkat juvenilitas materi stek (De Assis et al. 2004).
Gambar 3  Pengukuran  tinggi,  diameter,  dan  total hidup (SR) umur 6-12 MST
Tabel 4 Nilai koefisien korelasi antara kondisi fisiologi dengan karakteristik tunas dan pertumbuhan tanaman
Karakter Morfologi Kondisi Fisiologi Umur Tunas IAA C-Organik (C) Nitrogen (N) C/N Panjang tunas -0.64tn 0.25tn 0.06tn 0.05tn 0.97** Jumlah node -0.51tn 0.33tn 0.14tn -0.05tn 0.97** Jarak antar node -0.60tn 0.11tn 0.01tn 0.05tn 0.97** Total berakar (4 MST) -0.17tn -0.64tn -0.49tn 0.34tn 0.67tn Total bertunas (4 MST) -0.23tn -0.56tn -0.38tn 0.23tn 0.70tn Tinggi bibit (12 MST) -0.47tn -0.35tn -0.21tn 0.14tn 0.77tn Diameter bibit (12 MST) 0.28tn -0.66tn -0.09tn -0.18tn -0.26tn Total hidup (12 MST) -0.27tn -0.58tn -0.37tn 0.22tn 0.63tn Umur tunas -0.50tn 0.09tn -0.09tn 0.14tn
Berdasarkan hal tersebut dapat disimpulkan bahwa perbanyakan stek clone 148 tanpa menggunakan hormon dengan  perlakuan  tunas  umur  21  hari  memiliki pertumbuhan  dan Survival  Rate terbaik  sehingga  dapat menjadi  dasar  penentuan  umur  tunas  dalam  produksi bibit klon 148 skala besar atau skala operasional. Sejalan dengan hasil penelitian Venkataramanan et al. (2015) dan Sarpong et al. (2021) yang menunjukkan bahwa terdapat beberapa  klon  yang  memiliki  nilai  keberhasilan  hidup ( Survival  Rate )  tertinggi  dengan  perlakuan  tanpa menggunakan  hormon  tambahan.  Selain  memiliki  nilai Survival Rate dan pertumbuhan terbaik, perlakuan umur tunas 21 hari juga dapat mempercepat siklus panen jika dibandingkan dengan perlakuan umur tunas lain (24, 27, dan 31 hari) sehingga potensi tunas yang dihasilkan dari kebun pangkas lebih optimal.
Hasil  analisis  korelasi  karakteristik  tunas  (panjang, jumlah  node,  dan  jarak  antar  node)  dengan pertumbuhan tanaman
Berdasarkan  Tabel  5  nilai  koefisien korelasi antara kondisi  fisiologis  dengan  karakteristik  tunas  dan pertumbuhan  tanaman  menunjukkan  tidak  adanya  nilai korelasi  yang  nyata.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil penelitian  Putri  dan  Danu  (2014)  yang  menyebutkan kondisi  fisiologi  bahan  stek  yakni  hormon  endogen auksin,  karbohidrat,  dan  nitrogen  mempengaruhi keberhasilan  stek  tetapi  tidak  dapat  diperkirakan  secara pasti  nilai  terbaik  untuk  pertumbuhan  stek  suatu  jenis tanaman.  Geiss et  al .  (2009)  juga  menyatakan pertumbuhan akar pada tanaman stek merupakan proses yang  kompleks  yang  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor seperti  latar  belakang  genetik  fisiologi,  pohon  induk, serta  hormon  dan  kemampuan  metabolisme  tanaman. Setiap  faktor  tersebut  penting  diperhatikan  untuk mempermudah  perbanyakan  klon  unggul  dengan  setiap karakteristiknya  masing-masing.  Dalam  penelitian  ini, klon 148 memiliki pertumbuhan terbaik pada perbanyakan  menggunakan  tunas  umur  21  dengan kondisi  hormon  endogen  IAA  sebesar  33.65  mg/kg dengan rasa kandungan C/N sebesar 20.47.
Berdasarkan  tabel  nilai  koefisien  korelasi  antar karakteristik tunas dan pertumbuhan tanaman, menunjukkan  parameter  karakteristik  tunas  memiliki nilai  korelasi  positif  dan  nyata  terhadap  pertumbuhan tinggi tanaman namun tidak nyata terhadap pertumbuhan diameter  dan  pertumbuhan  tunas  di  awal  (berakar  dan bertunas).  Namun,  terdapat  nilai  korelasi  positif  dan nyata antara total berakar (0.67) dan total bertunas (0.73) dengan pertumbuhan tinggi tanaman pada umur 12 MST. Selain  karena  karakteristik  tunas,  hal  ini  menunjukkan
pertumbuhan akar di awal memiliki peran yang penting terhadap  pertumbuhan  tinggi  tanaman.  Selain  itu,  nilai koefisien korelasi pada tabel 5 menunjukkan umur tunas memiliki  nilai  korelasi  yang  positif  dan  nyata  terhadap seluruh parameter yang diamati kecuali pada pertumbuhan  diameter  tanaman.  Hal  ini  sejalan  dengan data pertumbuhan diameter yang menunjukkan perlakuan umur 21 hari memiliki pertumbuhan terbaik.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Hasil analisa fisiologi menunjukkan setiap parameter yang diamati yakni kandungan hormon IAA, nilai  C-organik,  dan  nilai  N  yang  diamati  memiliki hubungan  yang  tidak  linear  dengan  perlakuan  umur tunas.  Semakin  bertambahnya  umur  tunas  tidak menunjukkan  semakin  bertambahnya  kandungan  /  nilai parameter  yang  diamati,  begitu  pun  sebaliknya.  Hasil analisa  fisiologi  menunjukkan  bahwa  perlakuan  umur tunas 21 hari memiliki kandungan hormon IAA, nilai C- organik,  dan  N  yang  konsisten  yakni  selalu  berada  di urutan  ketiga  baik  dari  urutan  terbesar  maupun  urutan terkecil atau berada di tengah-tengah. Hasil pengamatan total  hidup  ( Survival  Rate ),  total  berakar  dan  bertunas menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  18  hari  memiliki nilai terendah dibandingkan perlakuan lain. Pada umur 2 MST  menunjukkan  perlakuan  umur  tunas  21  hari memiliki  kemampuan  pertumbuhan  akar  paling  cepat dibandingkan perlakuan lain. Berdasarkan hasil pengukuran  tinggi  dan  diameter  umur  12  MST menunjukkan  perlakuan  tunas  umur  21  hari  memiliki pertumbuhan  dan Survival  Rate terbaik  sehingga  dapat menjadi  dasar  penentuan  umur  tunas  dalam  produksi bibit klon 148 skala besar atau skala operasional.

## Saran
Perbanyakan klon 148 skala besar atau operasional dapat  dilakukan  pada  umur  tunas  21  hari.  Selain memberikan pertubuhan terbaik, umur tunas 21 hari juga dapat mempersingkat waktu atau siklus panen dan dapat mengoptimalkan potensi tunas yang tersedia. Diperlukan perbandingan  perbanyakan  bibit  stek E.  pellita tanpa hormon  menggunakan  materi  klon  lain.  Perbandingan antar  klon  dapat  dilakukan  dengan  membandingkan morfologi  karakteristik  tunas  setiap  klon.  Hasil  yang diperoleh  dapat  disandingkan  dengan  analisa  fisiologi sehingga  memperkuat  informasi  teknik  perbanyakan bibit stek tanpa menggunakan hormon pada setiap klon.
Tabel 5  Nilai koefisien korelasi antara karakteristik tunas dengan pertumbuhan tanaman
Umur tunas Total Hidup (12 MST) Tinggi (Bibit 12 MST) Diameter Bibit (12 MST) Total berakar (4 MST) 0.56** 0.86** 0.67** 0.30tn Total bertunas (4 MST) 0.58** 0.96** 0.73** 0.35tn Panjang Tunas 0.75** 0.27tn 0.46* -0.17tn Jumlah Node 0.68** 0.17tn 0.42* -0.10tn Jarah Node 0.70** 0.40* 0.54** -0.04tn

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada  para pembimbing, Prof. Dr. Ir. Sri Wilarso Budi R, MS. dan Dr.  Ir.  Arum  Sekar  Wulandari,  MS.  yang  telah membimbing dan banyak memberi saran. Ucapan terima kasih  juga  disampaikan  kepada  berbagai  pihak  di  PT Musi  Hutan  Persada  khususnya  Ir.  Bambang  Supriadi selaku Division  Head ,  Dr.  Ir.  Eko  Bhakti  Hardiyanto selaku advisor ,  dan  Bapak  Suja’i  serta  Bapak  Saiful Anwar  selaku  peneliti  perbanyakan  bibit  yang  telah bersedia memberikan masukan dan saran.

## DAFTAR PUSTAKA
Bonga JM, Durzan DJ. 2012. Cell and Tissue Culture in Forestry:  Volume  2  Specific  Principles  and Methods:  Growth  and  Developments .  Springer Science & Business Media.
De Assis TF, Fett-Neto AG, Alfenas AC. 2004. Current Techniques  and  Prospects  for  the  Clonal Propagation  of  Hardwoods  with  Emphasis  on Eucalyptus.  Plantation  Forest  Biotechnology  for the 21st Century. Research Signpost, Trivandrum, India : 303-333.
Brondani  GE,  Baccarin  FJB,  de  Wit  Ondas  HW,  Stape JL,  Gonçalves  AN,  De  Almeida  M.  2012.  Low temperature, IBA concentrations and optimal time for  adventitious  rooting  of  Eucalyptus  benthamii mini-cuttings. Journal  of  Forestry  Research 23, 583–592. https://doi.org/10.1007/s11676-012- 0298-5
Fogaça CM and Fett-Neto AG. 2005. Role of auxin and its  modulators  in  the  adventitious  rooting  of Eucalyptus  species  differing  in  recalcitrance. Plant  Growth  Regulation 45:  1–10. DOI: 10.1007/s10725-004-6547-7
Geiss G, Gutierrez L, C Bellini. 2009. Adventitious root formation  :  new  insight  and  perspectives.  Annu Plant Rev. 37 : 127-146.
Hardiyanto  EB,  Inail  MA,  Nambiar  S,  Mendham  DS. 2024. S ustaining plantation forest productivity in Sumatra  over  three  decades:  From  acacias  to eucalypts.  Forest  Ecology  Management 553 (2024) 121613 : 1-13.
Hartmann  HT,  Kester  DE,  Davies  RT.  1997. Plant propagation.  Principles  and  practices  (Sixth Edit) . Inc. Englewood : New Jersey Pentice Hall. Kuppusamy  S,  Ramanathan  S,  Sengodagounder  S, Senniappan C, Brindhadevi K, dan Kaliannan T. Minicutting  -  A  powerful  tool  for  the  clonal propagation  of  the  selected  species  of  the Eucalyptus hybrid clones based on their pulpwood studies.
Biocatalysis and Agricultural
Biotechnology 22 101357 : 1-5.
Lacobellis  NS,  A  Caponero,  A  Evidente.  1998.
Characterization  of Pseudomonas  syringae ssp.
Savastanoi  Strains  Isolated  from  Ash. Plant Pathology . 47 : 73-83.
Lodama KE, du Toit ES, Steyn JM, Araya HT, Prinsloo G,  du  Plooy  CP,  Robbertse  PJ.  2016. Improving rooting of Lobostemon fruticosus L. cuttings with delayed auxin treatment. South African Journal of Botany 105 : 111 - 115. Nakhooda  M,  Jain  SM.  2016. A  Review  of  Eucalyptus Propoagation  and  Conservation. Propagation  of Ornamental Plants 16 (4) : 101-119.
Putri KP, Danu. 2014. Pengaruh umur bahan stek dan zat pengatur  tumbuh  terhadap  keberhasilan  stek Kemenyan  ( Styraz  benzoin Dryand). Jurnal Penelitian Hutan Tanaman 11 (3) : 141-147. Sarpong NY, Agyemang FO, Siaw DEKA, Menason E.
2021.  Effect  of  different  levels  of  I.B.A concentration on clonal propagation of Eucalyptus species  in  Ghana  West  Africa. Tropical Agroecosystems (TAEC) 2(1): 26-29. https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-126050/v1 Sulichantini ED. 2016. Pertumbuhan tanaman Eucalyptus  pellita F.  Muell  di  lapangan  dengan menggunakan  bibit  hasil  perbanyakan  dengan metode  kultur  jaringan,  stek  pucuk,  dan  biji. Jurnal Ziraa’ah. 2(41) : 269-275.
Venkataramanan  KS,  Palanisamy  M,  Selvaraj  P,
Vellaichamy P, Senthamil SS, dan Divya G. 2015. Vegetative  propagation  of  Eucalyptus  Hybrids through  Water  Culture  Method.  International Research Journal of Biological Sciences 4(5) : 15- 18.
Wilson BF. 2000. Apical  control of branch growth  and angle  inwoody  plants. American  Journal  of Botany 87(5): 601-607.