Perbedaan metode pembuatan VCO antibakteria terhadap sifat Fisikokimia, dan uji organoleptik, Antibakteri VCO terhadap Bakteri

## Staphylococcus Aureus
Octo Zulkarnain 1* , Suci Ferdiana 2
1,2 Prodi S1 Ilmu Keperawatan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Surabaya, Indonesia * octo.zulkarnain@stikessurabaya.ac.id

## ABSTRACT
Wounds have slowed healing due to the formation of biofilms, which are the surface formation of bacterial cells that are covered by the polymeric substance. Staphylococcus au- reus is a gram-positive bacteria that play a role in producing multilayer in biofilms and is very easy to resistant to antibiotics. VCO has the ability as an anti-bacterial content based on lauric acid and kaprat acid. This study used experimental Quasy with a mixed Methode method.  VCO is made with 3 methods, fishing, heating and mixing on physicochemical test. Physicochemical test results show, the highest water content is found in the VCO heating, the same three-type weight, the highest peroxide number is in the VCO mixing and the highest free fatty acids on the VCO fishing. The results of antibacterial test with Kirby-Baur method There is no barrier zone from the 3 types of VCO. VCO used as a topical is VCO fishing.
The results of a test analysis of the results of observations in patients as much as 15 people for 9 days in 3 treatments with chronic wounds obtained p < 0.05 (0.000) which means during the treatment that the wound condition is better.
Keyword : Organoleptic, Staphylococcus aureus, Physicochemical, VCO

## PENDAHULUAN
Jenis  bakteri  yang  berevolusi menjadi  MRSA  adalah Staphylococcus Aureus .  Bakteri  ini  banyak  ditemukan  di lingkungan  sekitar  kita  dan  banyak berperan  dalam  kejadian  infeksi  salah satunya  infeksi  terhadap  pada  luka  kronis yang  mengakibatkan  munculnya biofilm .
Staphylococcus  aureus adalah  merupakan bakteri gram positif yang banyak menyebabkan  infeksi  kulit,  dan  mukosa pada  manusia. Staphylococcus  aureus diperkirakan  15%  dari  populasi  orang
dewasa  terpapar  terus  menerus,  hampir 80% kolonisasi bakteri tersebut di dapatkan pada  tenaga  kesehatan  (Tracey  A.2017). Salah  satu  penyebab  luka  sulit  untuk sembuh  adalah  terbentuknya biofilm . Biofilm merupakan  bentukan  permukaan sel bakteri yang dilingkupi oleh ekstarselluler  polymeric  substance (EPS)
(Homenta  H.  2016).  Salah  satu  bakteri yang  berperan  dalam  proses  terbentuknya biofilm adalah staphylococcus  aureus . Bakteri  ini  berperan  dalam  menghasilkan multilayer dalam biofilm dan sangat mudah resisten  terhadap  antibiotic  (Archer,  N.K.
et.al.2011).  Pengobatan  terhadap  infeksi banyak  mengandalkan  antibiotik  sebagai solusinya.  Penggunaan  antibiotik  yang irrasional dapat memicu terjadinya resistensi  terhadap  antibiotik  itu  sendiri. Selain  itu  dampak  antibiotik  berdampak buruk  untuk  perkembangan  flora  normal usus  dan  pembentukan  vitamin  B  dan  K (Anna,L.K.  2009).  Karena  banyaknya permasalah  akibat  dampak  penggunaan antibiotik  inilah  peneliti  berkeinginan mengembangkan fitofarmaka dengan menggunakan  buah  kelapa  sebagai  bahan utamanya.  Buah  kelapa  akan  diubah menjadi VCO (Virgin Coconut Oil) dengan 3  cara  yaitu  pemanasan,  mixing  dan pancingan.  Hasil  VCO  dijadikan  bahan topikal atau salep luka kronis dan melihat efek penggunaan VCO terhadap penyembuhan  Luka.  Kemampuan  VCO sebagai anti bakteri didasarkan kandungan asam  laurat dan asam  kaprat (6  –  7  %).
Pemberian  VCO  topikal  0,4  cc  /  hari mampu membunuh bakteri sehingga dapat mengurangi  jumlah  bakteri  pada  luka secara  bermakna(8).  Karena  ketertarikan tersebut  peneliti  menyusun  proposal penelitian dan mengajukannya dalam skim Penelitian  Dosen  Pemula  (PDP)  dari Kemeterian  RISTEK  DIKTI  tahun  usulan 2018 untuk pendanaan tahun 2019-2019. METODE PENELITIAN
Dalam penelitian peneliti menggunakan bahan kelapa sebagai bahan utama dalam membuat VCO. Kelapa yang digunakan  adalah  kelapa  bali  dengan karakteristik  daging  kelapa  tebal  dan menghasilkan banyak santan.  Tiga metode yang  diterapkan  dalam  membuat  VCO. VCO pertama adalah dengan metode pan- cingan, kedua adalah dengan metode pema- nasan dan yang ketiga dengan metode mix- ing.  Ketiga  metode  tersebut  murni  hanya menggunakan bahan VCO tanpa campuran bahan lainnya. Ketiga hasil VCO kemudian dilakukan uji fisikokimia untuk melihat un- sur  kandungan  kadar  air,  berat  jenis, bilangan  peroksida  dan  kandungan  asam lemak bebas. Pengujian selanjutnya adalah metode  untuk  melihat  perbedaan  warna, rasa  dan  endapan  pada  ketiga  jenis  VCO dengan  organoleptic  dengan  panelis  yang tak terlatih. Selanjutnya adalah uji anti bak- teria dengan metode Kirby-baur disk diffu- sion. Langkah selanjutnya adalah melakukan  intervensi  pada  luka  kronis pada pasien dengan DM.
Jenis penelitian ini adalah eksperimental  dengan  metode mixing method. Metode  yang  menggambungkan antara  data  kuantitatif  dengan  kulitatif (Foodrisc Reource center. 2016).   Data uji fisikokimia akan dijabarkan dalam bentuk kuantitatif (berupa angka), data
organoleptic dibahas dalam bentuk
kuantitatif,  hasil  uji  hambat  dijabarkan dalam  bentuk  kualitatif  dan  uji  pengaruh topical  terhadap  luka  kronis  dijabarkan dalam bentuk kuantitatif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  fisikokimia  pada  VCO dengan  metode  pembuatan  yang  berbeda adalah sebagai berikut :
Tabel 1. Hasil uji fisikokimia VCO dengan tiga metode pembuatan yang berbeda.
Pancing Pemanasan Mixing Kadar Air 0.5% Kadar Air 1.4% Kadar Air 0.94% Berat Jenis 0.92 Berat jenis 0.9218 Berat jenis 0.9215 Bilangan peroksida  0.41 mgrek O 2 /Kg
Bilangan peroksida  0.19 mgrek O 2 /Kg Bilangan peroksida 1.01  mgrek O 2 /Kg Asam lemak
bebas 2.4%
Asam lemak bebas 2.26% Asam  lemak bebas 2.36%
Dari penjabaran tabel 1 diatas dapat dijelaskan  bahwa  kandungan  kadar  air tertinggi  dimiliki  oleh  VCO  dari  hasil pemenasan  1.4  %  untuk  berat  jenisnya ketiganya  tidak  menunjukkan  perbedaan yang  signifikan,  namun  yang  tertinggi adalah VCO pemanasan. Bilangan peroksida  tertinggi  VCO  hasil  mixing. Kandungan asam lemak tertinggi ada pada VCO hasil pancingan.
Hasil uji organoleptic yang bertujuan untuk melihat perbedaan warna,
aroma , rasa dan endapan didapatkan hasil sebagai berikut.
Perbedaan  warna  yang  signifikan antara  tiga  sampel  A  VCO  pancingan sampel  VCO  pemanasan  sampel    VCO mixing  (p=0.000  <  α  =  0,05).  Perbedaan aroma yang signifikan antara ketiga sampel (p=0.000 < α = 0,05). Perbedaan rasa yang signifikan antara 3 sampel (p=0.000 < α = 0,05). Endapan tidak menunjukkan perbedaan  antara  3  sampel  dengan  hasil (p=0.90 > α = 0,05).
Uji  zona  hambat  pertumbuhan staphylococcus aureus dengan menggunakan  metode Kirby-baur  disk diffusion .  Sebuah  metode  yang  sering digunakan  untuk  menguji  untuk  menguji daya  hambat  sebuah  antibiotic  terhadap bakteri pathogent tertentu 17 .  Sampel terdiri atas 5 sampel, satu sampel control positif, 1  sampel  control  negative  dan  3  sampel untuk  jenis  VCO  dengan  metode  yang berbeda. Jenis bakteri yang digunakan pada uji ini adalah staphylococcus aureus Hasil yang  di  dapakan  dari  hasil  uji  Kirby-baur disk diffusion control positif menunjukkan memilki  zona  hambat,  control  negative tidak terjadi zona hambat dan ketiga jenis varian  VCO  menunjukkan  hasil  0  (nol) yang artinya tidak memilki zona hambat. Tabel  2.  Hasil  uji  zona  hambat  terhadap bakteri staphylococcus aureus .
Perlakuan   Rata-rata  penghambatan  bakteri staphylococcus aureus
Diameter zona hambat (mm) Pengahambatan rat-rata (%) P (-) 0.00 0 P(+) 24,5±61 37,5 P0 0.00 0 P1 0.00 0 P2 0.00 0
P(-)  =  Aquades  steril,  P(+)  antibiotic klorampenikol, P0 = VCO pancingan, P1= VCO pemanasan, P2= VCO mixing.
Hasil  uji  antibakteria  dengan melihat  zona  hambat  bakteri  menujukkan bahwa  dari  lima  sampel  yang  digunakan hanya  sampel  kontrol  possitif  yang menunjukkan adanya zona hambat pada uji tersebut.
Hasil  uji  topical  VCO  pancingan terhadap luka kronis adalah sebagai berikut :  hasil  analisis  data  menggunakan  uji ANOVA  yang  dilakukan  selama  3  kali dalam  waktu  9  hari  didapatkan  hasil  nilai signifikansi  0.000,  yang  artinya  selama perawatan  yang  dilakukan  kondisi  luka semakin  lebih  baik.    Rincian  hasil penghitungan anilisis menggunakan anova juga  diadapatkan  data  bahwa  perawatan hari  ke-3  menunjukkan  hasil  paling signifikan  menunjukkan  p<0.05  (0.001) yang  artinya  hasil  pada  perawatan  ke-3 yang  terbaik  dibandingkan  hari  ke-2  dan ke-3.
Berdasarkan  hasil  uji  fisikokimia yang  telah  dilakukan  peneliti  kadar  air tertinggi  dimiliki  oleh  VCO  pemanasan sebesar  1,4%.  Campuran  air  yang  tinggi
dimungkinkan  akibat  dari  bercampurnya air  pada  saat  pembuatan  dan  tidak  bisa dipisahkan dengan metode biasa. Kadar air yang  tinggi  dapat  memicu  reaksi  kimia seperti  rekasi  redoks  dan  enzimatik sehingga  dalam  waktu  yang  cepat  VCO akan berbau tengik (3).
Kadar berat jenis berdasarkan hasil uji  fisikokimia  menujukkan  tidak  ada perbedaan  yang  berarti  dari  ketiganya. Kandungan  peroksida  tertinggi  terdapat pada VCO mixing dengan kandungan 1.01 mgrek  O 2 /kg.  kandungan  peroksida  yang tinggi akibat reaksi oksidasi yang mengakibatkan  munculnya  radikal  bebas. Proses pengadukan yang dilakukan menggunakan  alat  mixer  memungkinkan terjadi  reaksi  oksidasi  (Asy’ari  M.  dan Cahyo  B.  2006).  Kandungan  asam  lemak bebas dari hasil uji fisikokimia menunjukkan asam lemak tertinggi terjadi pada  VCO  pancingan  meskipun  tidak terlalu spesifik perbedaan ketiganya.  VCO pancing  mengikuti  kandungan  VCO  yang digunakan sebagai bahan pancingan. Hasil VCO pancingan akan identik dengan bahan yang digunakan untuk Pancingan.
Hasil uji organoleptic menunjukkan ada  perbedaan  yang  siginifkan  antara, warna, aroma , rasa. Sedangkan endapannya  tidak  menujukkan  perbedaan yang  signifikan.  Karena  melalui  metode yang  berbeda  maka  hasil  VCO  dari ketiganya akan menggambarkan perbedaan
antara  warna,  aroma  dan  rasa.  Sedangkan endapan  tidak  menunjukkan  perbedaan yang spesifik karena proses penyaringannya  dilakukan  dengan  Teknik dan jumlah penyaringan yang sama.
Hasil  uji  zona  hambat  bakteri
Staphylococcus  Aureus menujukkan
gambaran  dari  ketiga  sampel  VCO  yang diujikan secara invitro zona hambat 0 (nol) sedangkan  uji  zona  hambat  pada  kontrol positif menujukkan gambaran zona hambat,  dan  kontrol  negative  juga  tidak menunjukkan zona hambat. Sifat antibakteria dalam VCO berasal monogliserida dan asam lemak bebas yang keduanya berasal dari senyawa trigliserida. Trigliserida  dapat  aktif  dan  berubah menjadi  monogliserida  dan  asam  lemak bebas  jika  berada  dalam  tubuh  manusia. Penggunaan topikal VCO dapat mengaktifkan    trigliserida  yang  dimiliki VCO untuk menjadi anti bakteria (Widiyanti R,A. 2015 ) .
Hasil pengujian luka dengan menggunakan topical VCO pancing ternyata memberikan dampak yang signifikan  terhadap  proses  penyembuhan luka.  Gambaran  luka  di  awal  pertemuan tanpa terlihat jelas biofilm sehingga proses penyembuhannya terhambat. Kondisi yang lembab  pada  permukaan  luka  dapat meningkatkan proses perkembangan perbaikan luka, mencegah dehidrasi jaringan dan kematian sel (Ismail D.D.S.L,
et.al 2009). Hasil pengujian secara invitro VCO  yang  dihasilkan  tidak  memberikan daya  hambat  pada  bakteri staphylococcus aureus namun  VCO  merupakan  bahan minyak yang dapat mendukung kelembapan luka.
SIMPULAN DAN

## SARAN
Simpulan
VCO memberikan pengaruh terhadap proses penyembuhan luka pada 15 pasien dengan luka kronis, meskipun pada gambaran  analisis  uji  hambat  yang dilakukan secara invitro tidak menujukkan reaksi hambatan terhadap bakteri staphylococcus aureus . Hasil uji fisikokimia  juga  menggambarkan  bahwa VCO  denga  pancingan,  pemanasan,  dan mixing  tidak  memenuhi  standart  VCO yang  berkualitas.  Hasil  VCO  dengan metode  yang  berbeda  tidak  memberikan karakter  hasil  warna,  aroma,  endapan  dan rasa yang berbeda.

## Saran
VCO  dapat  membantu  dalam proses  penyembuhan  karena  sifatnya berupa  minyak  sehingga  dapat  membuat luka  menjadi  moist/  lembab.  Dan  VCO yang  dihasilkan  tidak  memenuhi  standar untuk  dikonsumsi  namun  telah  terbukti memberikan  dampak  terhadap  proses penyembuhan luka.

## DAFTAR PUSTAKA
Anna,L.K.  2009.  Dampak  Penggunaan
Antibiotik yang Irasional,
lifestyle.kompas. cited at 1 november 2019.
https://lifestyle.kompas.com/read/2
009/09/17/11223219/dampak.peng gunaan.antibiotik.yang.irasional?p
age=all/
Archer,
N.K.&
Mazaitis,M.J.,Shirtliff,M.E.  2011.
staphylococcus aureus
biofilmvrulence.2(5):445-459.
Asy’ari  M.  dan  Cahyo  B.  2006.  Pra- standarisasi: Produksi dan Analysis Minyak Virgin Coconut Oil (VCO). Researchgate,  9(3).  cited  at  1 november
2019. https://www.researchgate.net/publi cation/273755055_Pra Standarisasi_Produksi_dan_Analis is_Minyak_Virgin_Coconut_Oil_ VCO.
Foodrisc  Reource  center.  2016.  Mixed Methods  Research.  Cited  at  18
oktober 2019. http://resourcecentre.foodrisc.org/ mixed-methods-research_185.html
Homenta  H.  2016.  Infeksi  Biofilm Bacterial. Jurnal e-Biomedik (eBm), 4(1),1-5.reteive from https://ejournal.unsrat.ac.id/index.p hp/ebiomedik/article/view/11736/1
1329.
Hudzicki  Jan.  2009.  Kirby-Bauer  Disk Diffusion Susceptibility Test Protocol.  American  Society  For Microbiology.
https://www.google.com/url?sa=t& source=web&rct=j&url=https://w ww.asm.org/getattachment/2594ce 26-bd44-47f6-8287- 0657aa9185ad/Kirby-Bauer-Disk- Diffusion-Susceptibility-Test- Protocol- pdf.pdf&ved=2ahUKEwjfiPXO19 DlAhU5yosBHVRrBNoQFjAheg QIBRAB&usg=AOvVaw30HVIHI oxXNMitPAj5oyxm.
Ismail  D.D.S.L,  Irawati  Dewi  &  Haryati T.S. 2009. Modern dressing improve  the  healing  process  in diabetic wound penggunaan balutan modern memperbaiki proses penyembuhan luka diabetic. Jurnal Kedokteran Brawijaya,
15(1), halaman, 32-35.
Susanto,  Sujatno  &  yuwono.  Efek Antibakteri  Virgin  Coconut  Oil Terhadap Methicillin  Resistant
Staphylococcus Aureus. Medicinus Vol. 4  No. 8. Februari 2015 – Mei 2015.
Tracey  A.  Taylor1;  Chandrashekhar  G.
Unakal. 2017. Staphylococcus Aureus  StatPearls Publishing LLC. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/boo ks/NBK441868/.29/9/2018.
Widiyanti R,A. 2015. Pemanfaatan kelapa menjadi VCO (Virgin Coconut Oil) sebagai antibiotik kesehatan dalam upaya  mendukung  visi  indonesia sehat  2015.  Prosiding  Seminar Nasional Pendidikan Biologi 2015, yang  diselenggarakan  oleh  Prodi
Pendidikan Biologi FKIP Universitas Muhammadiyah Malang. reteive from
http://biology.umm.ac.id/files/file/
577- 584%20Rahma%20Ayu%20Widiy
anti.pdf