UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI EKSTRAK RIMPANG KENCUR ( Kaempferia galanga L.) TERHADAP Saprolegnia sp. SECARA IN VITRO
ANTIFUNGAL ACTIVITY TEST of Kaempferia galanga L. EXTRACT TO Saprolegnia sp . by IN VITRO

## Rahayu Kusdarwati, Ayu Ratnaningtyas dan Dewa Ketut Meles
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Saprolegnia sp.  is a  fungus that causes the Saprolegniasis  disease can  infection eggs  and  fresh water fish. Treatment Saprolegniasis done using chemical drugs, however the use of drugs is bad for the environment and  biota.  The purpose of the research  was to determined the antifungal activity  include a minimum  inhibitory  concentration  (MIC)  and  minimum  fungicidal  concentration  (MFC)  from Kaempferia  galanga L.  to Saprolegnia sp.  by in  vitro. This  research  used  9  different  concentrations  of Kaempferia  galanga L extract  were 50%, 12.5%,  6.25%, 3.12%, 1.56%,  0.78%, 0,  39%, 0.2%,  positive control  used  H 2 O 2 3%  and  negative  control  used  DMSO  10%.  The  results  showed  that  the  extract  of Kaempferia  galanga  L had  an  antifungal  activity  were  inhibits  and  kill  with  minimum  inhibitory concentration (MIC) was 0.39% equivalen with 3,9 mg/ml and minimu fungicidal concentration (MBC) was 1.56% equivalen with 15,6 mg/ml. The existence of antifungal activity against Saprolegnia sp. by in vitro caused by some active compounds from the extracts of the Kaempferia galanga L. are polyphenolic compounds, flavonoin, saponins and essential oils.
Keywords : Antifungal Activity, Kaempferia galanga L Extract, Saprolegnia sp.

## Pendahuluan
Perkembangan  budidaya  ikan  masih terkendala  oleh  penyakit  ikan  yang  menjadi pembatas  keberhasilan  budidaya.  Secara  umum penyakit  ikan  dapat  dikelompokkan  menjadi dua  yaitu  penyakit  infeksius  dan  non  infeksius. Penyakit  infeksius  merupakan  penyakit  yang disebabkan  oleh  parasit,  jamur,  bakteri  dan virus.  Penyakit  non-infeksius  disebabkan  oleh lingkungan,  makanan  dan  genetis.  Salah  satu penyakit yang berbahaya bagi kegiatan budidaya  salah  satunya  adalah  saprolegniasis yang disebabkan oleh Saprolegnia sp . (Subandi, 2010).  Jamur  ini  banyak  menginfeksi  telur  dan ikan  air  tawar  yang  dapat  mengakibatkan kematian  massal  pada  ikan  budidaya  (Akbar, 2008).
Penyebaran  spora  jamur  dapat  melalui ikan  liar,  telur,  suplai  air  dan  peralatan.  Faktor yang  menyebabkan  ikan  terinfeksi Saprolegnia sp.  adalah  kondisi  lingkungan  yang  buruk, kepadatan  penebaran  ikan,  malnutrisi  dan  luka karena  infeksi  bakteri  ataupun  parasit  (Osman et.,al , 2008).
Pemakaian bahan kimia seperti malachite green, formalin, NaCl, asetic acid dan hydrogen peroxide (Mayer, 2005) sebagai upaya penanggulangan saprolegnia sp. dapat berdampak  negatif  bagi  ikan  dan  lingkungan
karena mempunyai aktivitas  karsinogenik pada manusia  dan  ikan  (Osman et.,al ,  2008).  Maka diperlukan  cara  yang  aman  untuk  pencegahan dan  pengobatan  jamur saprolegnia sp.  yaitu dengan pemanfaatan tanaman obat.
Kencur ( Kaempferia galanga L)
merupakan  salah  satu  tanaman  obat  yang bernilai ekonomis cukup tinggi sehingga banyak dibudidayakan.  Sebagai  tanaman  obat,  kencur mempunyai banyak manfaat terutama rimpangnya.  (Agoes,  2010).  Rimpang  kencur digunakan  sebagai  obat  infeksi  bakteri,  obat batuk,  ekspektoran,  masuk  angin  dan  sakit perut.  Minyak  atsiri  didalam  rimpang  kencur mengandung  etil  p-metoksi  sinamat  (EPMS) yang  banyak  dimanfaatkan  sebagai  obat  asma dan  anti  jamur  (Rostiana  dkk,  2005)  selain  itu senyawa  fenol,  saponin  dan  flavonoid  yang terdapat  dalam  rimpang  kencur  juga  memiliki daya anti jamur (Gandahusada.,dkk. 2002).
Berdasarkan  penelitian  Gholib  (2009) tentang kandungan rimpang kencur sebagai anti jamur,  maka  dilakukan  uji  aktivitas  antifungi ekstrak  rimpang  kencur.  Penelitian  ini  diawali dengan  ekstraksi  serbuk  rimpang  kencur  yang kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  aktivitas antifungi  dengan  menggunakan  metode  dilusi untuk  mengetahui  aktivitas  antifungi  ekstrak rimpang kencur terhadap Saprolegnia sp.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuktikan aktivitas antifungi ekstrak
rimpang kencur terhadap jamur Saprolegnia sp. secara in  vitro ?  Mengetahui  Konsentrasi Hambat  Minimum  (KHM)    ekstrak  rimpang kencur  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan Saprolegnia sp.  secara in  vitro ?  Untuk mengetahui  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM) dari ekstrak rimpang kencur yang dapat membunuh Saprolegnia sp. secara in vitro ? Diharapkan  hasil  penelitian  ini  dapat memberikan  informasi  tentang  penggunaan rimpang  kencur  sebagai  salah  satu  alternatif pengobatan  penyakit  fungal,  khususnya  yang disebabkan  oleh Saprolegnia sp.  sehingga menjadi  salah  satu  upaya  pengembangan  dan pelestarian obat tradisional.

## Metodologi
Tempat dan Waktu Penelitian  akan  dilaksanakan  pada bulan November - Desember 2012 di Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Perikanan dan  Kelautan  Universitas  Airlangga  Surabaya.
Pembuatan ekstrak rimpang kencur dilaksanakan  di  Unit  Layanan  Pengujian Fakultas Farmasi Universitas Airlangga Surabaya. Metode Penelitian Rancangan Percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental untuk mengetahui aktivitas ektrak rimpang  kencur  sebagai  antifungi  terhadap Saprolegnia sp.  dengan  membandingkan  antara perlakuan dan kontrol. Perlakuan yang diberikan  yaitu  konsentrasi  ekstrak  rimpang kencur  sebesar  50%,  25%,  12,5%,  6,25%, 3,12%,  1,56%,  0,78%,  0,39%,  0,20,  kontrol positif  dan  kontrol  negatif  yang  dilakukan dalam tiga kali ulangan. Kontrol positif berisi 2 ml  H 2 O 2 3%  dan  2  ml  suspensi  jamur.  Kontrol negatif  berisi  2  ml  DMSO  10%  dan  2  ml suspensi jamur. Menurut Reapina (2007) Tujuan menggunakan  kontrol  negatif  adalah  untuk melihat  pengaruh  DMSO  terhadap  aktivitas antimikroba  ekstrak.  Kontrol  positif  digunakan sebagai pembanding terhadap aktivitas antimikroba ekstrak, karena antibiotik merupakan  senyawa  antimikroba  yang  telah dibuat secara terstandar.
Prosedur Kerja
A. Persiapan Alat dan Media SDA Persiapan alat dimulai dengan sterilisasi alat - alat yang akan digunakan untuk penelitian.  Sterilisasi  media  dengan  autoclave menggunakan suhu 121 o C pada tekanan uap 1,5 atm selama 15 menit (Setiyani, 2010).
B.  Pembuatan  Serbuk  dan  Ekstraksi  Rimpang Kencur
Rimpang kencur  yang digunakan  yaitu rimpang  kencur  yang  berdaun  besar.  Rimpang kencur  dicuci  dengan  air  mengalir,  dipotong tipis  -  tipis  kemudian  dikeringkan  dalam  suhu kamar  dan  dihaluskan  hingga  menjadi  serbuk kencur.  Serbuk  kencur  sebanyak  500  gram dimaserasi  dengan  menggunakan  etanol  96  % selama 3 x 24 jam dalam suhu kamar.
Menurut  Hezmela  (2006)  maserasi merupakan cara ekstraksi yang paling sederhana karena  bahan  yang  akan  diekstrak  cukup dilarutkan  di  dalam  pelarut.  Selain  itu  pelarut yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  etanol 96%.  Hal  ini  karena  etanol  dapat  mengekstrak seluruh  bahan  aktif  yang  terkandung  dalam lengkuas, terutama yang memiliki sifat antijamur.  Larutan  yang  didapat  kemudian disaring  menggunakan  kertas  saring  lalu diuapkan menggunakan Rotary vacum evaporator . C. Pembuatan Pelarut Ekstrak Rimpang Kencur
Ekstrak  rimpang  kencur  diencerkan dengan  pelarut dimethylsulfoxide (DMSO). Pelarut DMSO yang digunakan yaitu kosentrasi 10%,  untuk  membuat  larutan  tersebut  maka diperlukan  10  ml  DMSO  100  %  ditambahkan 90 ml aquades (Assidqi, 2012) D. Kultur Saprolegnia sp. Saprolegnia sp.  yang  didapatkan  dari stok  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Sains  dan  Teknologi  Universitas  Airlangga diperbanyak  dengan  mengkultur  jamur  pada media  SDA.  Proses  diawali  dengan  cara menginokulasikan  jamur  pada  salah  satu  media SDA  yang  sudah  dibuat  dengan  menggunakan ose steril secara aseptis, kemudian menginkubasi  media  yang  telah  diinokulasi tersebut  dan  membiarkan  beberapa  hari  sampai tampak koloni jamur. (Akbar, 2008).
Setelah  itu  dilakukan  kultur  pada media  air  untuk  memudahkan  pengamatan. Dimulai  dengan  memotong  bagian  tepi  agar yang terdapat koloni  jamur kira  - kira 0,5  - 1,0 cm menggunakan  pisau  bedah  yang  telah dibakar lalu memindahkan potongan agar ke air steril  dalam  cawan  petri  dan  inkubasi  selama beberapa  hari  pada  suhu  25 o C  (Yuasa  dkk, 2003). E. Identifikasi Jamur Jamur Saprolegnia sp . yang  sudah dimurnikan diidentifikasi berdasarkan karakteristik morfologi organ reproduksi aseksual  yang  diamati  pada  kultur  dengan  air. Identifikasi dilakukan secara  makroskopis  yaitu dengan  pengamatan  bentuk  dan  warna  koloni sedangkan  pengamatan  secara  mikroskopos
meliputi  bentuk  hifa,  bentuk  spora  dan  letak spora dengan menggunakan mikroskop inverted.  Sporangia Saprolegnia sp.  lebih  lebar dan pendek. Zoospora dilepaskan dari sporangium  matang  dan  berenang.  (Yuasa,
2003). F.  Pembuatan Suspensi Jamur
Isolat  jamur  murni Saprolegnia sp. yang telah dikultur pada  media air dipindahkan dalam  tabung  untuk  mendapatkan  suspense jamur    maka  dilakukan  perhitungan  spora menggunakan haemocytometer. Kepadatan spora  minimal  yang  akan  digunakan  kira  -  kira 10 5 sel/ml  (Yuasa,  2003).  Tahapannya  yaitu mengambil  sedikit  suspense Saprolegnia sp. dengan  pipet  tetes  dan  teteskan  sebanyak    satu tetes di tepi gelas penutup, membiarkan  selama satu  sampai  dua  menit  agar  sel  yang  ada  di dalam
bilik stabil. Menempatkan
haemocytometer  pada  meja  mikroskop  dan menghitung  jumlah  spora  yang  ada  dengan perhitungan  sebagai  berikut  (Svobodova  et al.,1991 dalam Kamaludin, 2011) : Σ Saprolegnia sp. =
rataan Σ sel terhitung x 1         x pengencer Volume kotak besar
Pelaksanaan Penelitian Uji  aktivitas  antifungi  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  metode  dilusi. Parameter  potensi  aktivitas  antifungi  adalah harga  Kadar  Hambat  Minimum  (KHM)  dan Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  (Ramadanti, 2008).
A. Penentuan Kadar Hambat Minimum (KHM)
Pelaksanaan  uji  KHM  mengacu  dari penelitian  Ogbulie et  al., (2007)  adalah menyiapkan  tabung  reaksi  yang  telah  berisi ekstrak  rimpang  kencur  dengan  konsentrasi sesuai  perlakuan.  Kontrol  positif  menggunakan H 2 O 2 3% sedangkan kontrol negatif menggunakan  DMSO  10  %  dengan  ulangan sebanyak tiga kali. Pengenceran pertama dilakukan
dengan  mengambil  2  gram  dari  larutan  stok hasil  ekstraksi  lalu  ditambah  2  ml  DMSO  10% sehingga  didapatkan  konsentrasi  50%  (tabung 1).  Selanjutnya,  diambil  2  ml  dari  tabung  1
(konsentrasi  50%),  dimasukkan  ke  dalam tabung  2  dan  ditambah  2  ml  DMSO  10% sehingga diperoleh konsentrasi 25%. Cara  yang sama dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi 12,5%,  6,25%,  3,125%,  dan  1,56%,  0,78%, 0,39%,  0,2  %.  Pada  konsentrasi  0,2  %  larutan diambil  2 ml lalu  dibuang. Kemudian memasukkan  2  ml  suspensi  jamur  ke  dalam tabung 1  sampai tabung  11. Tabung  10  sebagai kontrol  positif  berisi  2  ml  H 2 O 2 3%  dan  2  ml suspensi  jamur.  Tabung  11  sebagai  kontrol negatif  berisi  2  ml  DMSO  10%  dan  2  ml suspensi  jamur.    Seluruh  tabung  dilakukan pengamatan  dengan  spektrofotometer  sebelum masa  inkubasi  sebagai  nilai  OD  sebelum perlakuan  kemudian  tabung  diinkubasi  pada suhu  25°  C  selama  48  jam  sebagai  nilai  OD setelah  perlakuan.  Jika  selisih  nilai  OD  antara konsentrasi  ekstrak  yang  belum  diinokulasi jamur  dengan  yang  telah  diinokulasi  jamur mendekati  kontrol  positif  maka,  konsentrasi ekstrak  rimpang  kencur  dianggap  mampu menghambat pertumbuhan Saprolegnia sp .
B.  Penentuan  Kosentrasi  Bunuh  Minimum (KBM) Uji KBM dilakukan setelah
pelaksanaan  uji  KHM  yaitu  dengan  mengambil jamur  menggunakan ose dari tabung reaksi satu sampai 11 kemudian diinokulasikan pada media SDA  dalam  cawan  petri.  Media  SDA  yang digunakan  yaitu  dua  buah  untuk  satu  kali ulangan, dimana  media pertama dibagi  menjadi lima  bagian  dan  media  kedua  dibagi  menjadi enam  bagian.  Kemudian  diinkubasi  selama  48 jam  pada  suhu  25°  C.  Selanjutnya  dilakukan pengamatan  pertumbuhan  koloni  jamur  pada media SDA.
Parameter Penelitian
a. Parameter Utama
Parameter  yang  diamati  dalam  penelitian  ini adalah  adanya aktivitas ekstrak rimpang kencur terhadap Saprolegnia sp.  pada  media  kultur. Hasil  KHM  (konsentrasi  pengenceran  terendah yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  jamur) berupa nilai optical  density (OD)  dari spektrofotometer,  dan  hasil  KBM  (konsentrasi pengenceran  terendah  yang  dapat  membunuh jamur)  dilihat  dari  pertumbuhan  koloni  jamur pada media SDA (Tabel 1).
Variabel Penelitian Variabel  Tergantung  yaitu  pertumbuhan  jamur pada  media  cair  dan  pada  media  SDA  (koloni jamur).  Variabel  Tidak  Tergantung  yaitu konsentrasi  ekstrak  rimpang  kencur.  Variabel Kendali  meliputi  suhu  inkubasi,  lama  inkubasi, dan kondisi aseptik.
Analisis Data
Data  hasil  pengujian  dianalisis  secara statistik.  Hasil  penelitian  uji  KHM  secara kuantitatif  yaitu  nilai  OD dari  spektrofotometer diuji  dengan  analisis  varian  (ANAVA)  dan dilanjutkan dengan uji Jarak Berganda Duncan(Kusriningrum, 2008) dengan
menggunakan  SPSS  versi  15.0 for  Windows . Sedangkan  hasil  pengujian  KBM  dianalisis secara  deskriptif  dengan  menampilkan  gambar ada  atau  tidaknya  pertumbuhan  jamur  pada kosentrasi tertentu.

## Hasil dan Pembahasan
Identifikasi  jamur  dilakukan  untuk memastikan kebenaran identitas Saprolegnia sp. yang diperoleh dari Laboratorium  Mikrobiologi Fakultas  Sains  dan  Teknologi  Universitas Airlangga.  Metode  yang  digunakan  untuk identifikasi  jamur  yaitu  melalui  pengamatan makroskopis  meliputi  bentuk  dan  warna  koloni jamur  dan  pengamatan  secara  mikroskopik meliputi  bentuk  hifa,  bentuk  spora  dan  letak spora dengan menggunakan mikroskop inverted (Yuasa, 2003).
Pengamatan  makroskopis  menunjuk- kan  bahwa  koloni  jamur  berwarna  putih  dan bentuknya seperti kapas tebal. Sedangkan secara mikroskopis  bentuk  sporangia  melebar  dan pendek  serta  pada  bagian  ujung  sporangia terlihat  agak  gelap.  Berdasarkan  pengamatan secara  makroskopis  dan  dibandingkan  dengan Stoskopf (1993) yang menyatakan bahwa genus Saprolegnia memiliki ciri yaitu, terdapat koloni yang  menyerupai  kapas,  berwarna  putih  dan menurut Yuasa (2003) secara mikroskopis yang menyatakan  bahwa  sporangia Saprolegnia sp. lebih  lebar  dan  pendek.  Sedangkan  bentuk  hifa
memanjang  seperti  helaian  benang  halus  dan tidak bersepta. Bentuk spora kecil, agak lonjong dan  berflagel,  maka  jamur  ini  diidentifikasikan sebagai jamur Saprolegnia sp. dan benar bahwa isolat  jamur  yang  di  dapat  dari  Laboratorium Mikrobiologi  Fakultas  Sains  dan  Teknologi Universitas Airlangga merupakan jamur Saprolegnia sp.
Rimpang  kencur  ( Kaempferia  galanga L.) yang digunakan untuk penelitian sejumlah 3 Kg  dan  didapatkan  berat  sejumlah  500  gram. Setelah  diekstraksi  didapatkan  ekstrak  yang berwarna cokelat tua sejumlah 17,03
gram.Kultur  dilakukan  selama  dua  hari  pada media  air  steril  dan  diamati  dengan  mikroskop setelah  terlihat  spora,  maka  diambil  sedikit sampel untuk dihitung kepadatan spora menggunakan haemocytometer.
Jumlah spora yang digunakan untuk uji aktivitas  antifungi  terhadap Saprolegnia sp. sudah  cukup untuk menginfeksi  ikan  yaitu 1,17 x 10 5 . Hal ini sesuai dengan Yuasa (2003) yang menyatakan  bahwa  jumlah  zoospore  yang digunakan  untuk  infeksi  buatan  kira  -  kira  10 5 sel/ml.
Tabel 2. Hasil Uji Kosentrasi Hambat Minimum
(KHM) Konsentrasi Ekstrak Rimpang Kencur Selisih Rata - rata + SD nilai OD 50% 25% 12,5% 6,25% 3,12% 1,56% 0,78% 0,39% Kontrol + 0,2% Kontrol - 0,393 ± 0,007 a 0,345 ±0,037 b 0,306 ±0,030 c 0,275 ±0,029 cd 0,255 ±0,021 de 0,236 ±0,007 e 0,178 ±0,026 f 0,168 ±0,023 f 0,150 ±0,014 f 0,086 ±0,007 g
0,083 ±0,002 g
 Notasi  yang  berbeda  pada  kolom  yang sama artinya terdapat perbedaan nyata (p < 0,05).
Tabel 1. Parameter pengamatan uji KBM Konsentrasi (%) 50 25 12,5 6,25 3,12 1,56 0,78 0,39 0,2 K+ K- Pengamatan +/− +/− +/− +/− +/− +/− +/− +/− +/− − +
Keterangan:   + = terdapat koloni jamur − = tidak terdapat koloni jamur
Aktivitas menghambat yang ditunjukkan  oleh  ekstrak  rimpang  kencur terhadap Saprolegnia sp. dapat dilihat dari rata - rata    nilai  OD  sebelum  masa  inkubasi  dan setelah  masa  inkubas.  Berdasarkan  analisis varian  (ANAVA)  dengan  tingkat  kepercayaan 95%  terlihat  bahwa  F  hitung  sebesar  64.432 sedangkan  sig.  sebesar  0.00  artinya  F.hitung  > F.  tabel  0,05  artinya  konsentrasi  ekstrak rimpang  kencur  berpengaruh  nyata  (p  <  0,05) terhadap Saprolegnia sp. Setelah itu dilanjutkan dengan  uji  duncan  dimana  dari  nilai  rata  -  rata OD  dan  simpangan  baku  yang  ada  didapatkan notasi  pada  setiap  konsentrasi  ekstrak  rimpang kencur  yang  menunjukkan  bahwa  konsentrasi hambat  minimum  (KHM)  yaitu  0,39%  atau sebanding  dengan  3,9  mg/ml.  Konsentrasi 0,39%  merupakan  konsentrasi  minimal  yang tidak berbeda nyata dengan kontrol positif.
Dari  hasil  pengamatan  KBM  pada media  SDA  ekstrak  rimpang  kencur  pada konsentrasi  50%  sampai  1,56%  tidak  terdapat pertumbuhan Saprolegnia sp.  sedangkan  pada konsentrasi  0,78%  sampai  0,2%  terdapat pertumbuhan Saprolegnia sp. Jadi  ekstrak  yang mempunyai  daya  bunuh  minimum  yaitu  pada konsentrasi 1,56 % atau sebanding dengan 15,6 mg/ml.
Senyawa aktif yang dapat menghambat dan membunuh Saprolegnia sp. didapatkan dari hasil  ekstraksi  dengan  menggunakan  etanol berupa  flavonoid,  saponin,  senyawa  polifenol dan  minyak  atsiri  (Gholib,  2009).  Flavonoid bekerja  dengan  menghambat  pembelahan  atau proliferasi  sel  jamur.  Senyawa  ini  mengikat protein  pada  mikrotubulus  dalam  sel  dan mengganggu fungsi mitosis sehingga menimbulkan penghambatan pertumbuhan jamur. Senyawa fenol sebagai antifungal adalah dengan  mendenaturasi  ikatan  protein  pada
membran  sel  sehingga  membran  sel  lisis  dan memungkinkan  fenol  menembus  ke  dalam  inti sel  yang  menyebabkan  jamur  tidak  bekembang (Sulistyawati dan Mulyati, 2009).
Wulandari  (2012)  menyatakan  bahwa  saponin bersifat  antifungi  dengan  mekanisme  kerja dapat membentuk kompleks dengan sterol yaitu menurunkan  tegangan  permukaan  membrane sterol  sehingga  permeabilitas  membrane  sel kapang  dan  khamir  meningkat.Sedangakan Berbagai macam komponen minyak atsiri dapat mengganggu  kerja  enzim-enzim  yang  terikat pada  membran  sel,  sehingga  mengganggu aktivitas  kerja  pada  membran  sel  jamur. (Ridawati dkk ., 2011).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pengolahan  data  dapat  disimpulkan  sebagai berikut  :  Ekstrak  rimpang  kencur  ( Kaempferia galangal L.)  memiliki  aktivitas  antifungi terhadap Saprolegnia sp . secara in  vitro yaitu aktivitas menghambat pertumbuhan dan membunuh.  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM)  ekstrak  rimpang  kencur  ( Kaempferia galangal L.) yang dapat menghambat
Saprolegnia sp . yaitu  0,39%  setara  dengan  3,9 mg/ml.  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM) ekstrak  rimpang  kencur  ( Kaempferia  galangal L.) yang dapat membunuh Saprolegnia sp . yaitu 1,56% setara dengan 15,6 mg/ml.
Ekstrak rimpang kencur dapat digunakan untuk menghambat  pertumbuhan  dan  membunuh jamur Saprolegnia sp.  secara in  vitro . Diperlukan penelitian lebih lanjut secara in vitro terhadap  telur  maupun  ikan  agar  dapat digunakan sebagai pengobatan terhadap Saprolegnia sp.  Diperlukan  penelitian  tentang mekanisme  zat  aktif  pada  rimpang  kencur ( Kaempferia galanga L.) yang dapat
Tabel 3. Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) Konsentrasi Ekstrak Rimpang Kencur Ulangan (%) mg/ml I II III 50 % 500 _ _ _ 25 % 250 _ _ _ 12,5 % 125 _ _ _ 6,25 % 62,5 _ _ _ 3,12 % 31,3 _ _ _ 1,56 % 15,6 _ _ _ 0,78 % 7,81 + + + 0,39 % 3,9 + + + 0,2 % 2 + + + Kontrol + 500 _ _ _ Kontrol - 500 + + +
Keterangan :   (+) = Ada pertumbuhan jamur (-) = Tidak ada pertumbuhan jamur
berpengaruh terhadap pertumbuhan Saprolegnia sp.

## Daftar Pustaka
Agoes,  A.  2010.  Tanaman  Obat  Indonesia.
Salemba Medika. Jakarta. Hal. 57-58 Akbar,  J.  2008.  Pemanfaatan  Ekstrak  Bunga Kecombrang ( Nicolaia speciosa Horan ) Terhadap Penyembuhan Infeksi Jamur Saprolegnia  sp .  Pada  Ikan  Nila Merah.  Fakultas  Perikanan  Universitas Lambung Mangkurat. 26 : 71. Assidqi, K. 2012. Potensi Ekstrak Daun Patikan
Kebo ( Euphorbia hirta ) Sebagai Antibakteri Terhadap Aeromonas hydrophila Secara In  Vitro. Skripsi.
Universitas  Airlangga.  Surabaya.  Hal. 12 Barus, R. 2009. Amidasi Etil P-Metoksisinamat yang diisolasi Dari Kencur ( Kaempferia  galangal  Linn ).  Tesis.
Universitas  Sumatera  Utara.  Medan. Hal. 23 Bruno  D.  W  and  Woo,  P.  T.  K..  1999.  Fish Disease  and  Disorders  vol.  3  (Viral, Bacterial  and  Fungal  Infection).  CAB International  Publishing.  Wallingford, UK. p : 23-36, 366-432.
Gandahusada S., D.H. Llahude dan  W. Pribadi. 2002.  Parasitologi  Kedokteran  Edisi
III.  Fakultas  Kedokteran  Universitas
Indonesia. Hal. 10 - 12 Gholib  D,  2009.  Daya  Hambat  Ekstrak  Kencur ( Kaempferia  Galanga L.)  Terhadap Trichophyton Mentagrophytes Dan Cryptococcus Neoformans Jamur Penyebab  Penyakit  Kurap  Pada  Kulit Dan  Penyakit  Paru.  Balai  Besar
Penelitian  Veteriner.  Buletin  Littro.
Vol. 20 No. 1 :  59 - 67
Hezmela,  R.  2006.  Daya  Antijamur  Ekstrak Lengkuas Merah ( Alpinia purpurata K. Schum )  Dalam  Sediaan  Salep . Skripsi . Fakultas  Teknologi  Pertanian  Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hal. 40-41 Kamaludin,  I.  2011.  Efektivitas  Ekstrak  Lidah Buaya Aloe  Vera Untuk  Pengobatan Infeksi Aeromonas  Hydrophila Pada Ikan  Lele  Dumbo Clarias sp.  melalui
Pakan.    Fakultas  Perikanan  Dan  Ilmu Kelautan  Institut  Pertanian  Bogor.
Bogor. Hal 25.
Kusriningrum. 2008. Dasar Perancangan Percobaan dan Rancangan Acak Lengkap. Fakultas  Kedokteran Hewan. Universitas  Airlangga.  Surabaya.  Hal 53-92. Markham  K.R.  1988.  Cara  Mengindentifikasi Flavonoid. Terjemahan Kosasih Padmawinata. ITB: Bandung Mayer, K. 2005. Saprolegnia : There’s a fungus among us. http://www.tnfish.org/disease/Saproleg nia.pdf. [ 3 September 2012 ] Ogbulie, J. N, C. C. Ogueke, I. C. Okoli and B. N Anyanwu. 2007. Antibacterial Activities  and  Toxicological  Potentials of Crude Ethanolic Extracts of
Euphorbia  hirta .  African  Journal  of Biotechnology.  Vol.  6  (13).  pp.  1544-
1548.
Osman,  H,M.,  W.E.  Solman,  A.E.  Noor  E.D., and Laila A. 2008. Mohamed. Induction of Saprolegniasis in Oreochromis  Niloticus with  Special
Reference  to  Its  Biology  Control. Hydrobiology  department,  National Research Center, Dokky, Gizza. Global
Veterenaria. Egypt.  2(1): 32-37.
Panda,  K.,  S.S.  Brahma  and  K.  Dutta, S.  2010. Selective  Antifungal  Action  of  Crude Extracts of Cassia fistula L.A Preltminary  Study  on  Candida  and Aspergillus spesies . Journal of Microbiology. Malaysia. 6(1):62- 68. Reapina M.E. 2007. Kajian Aktivitas Antimikroba Ekstrak Kulit Kayu Mesoyi ( Cryptocaria Massoia ) Terhadap Bakteri Patogen Dan Pembusuk  Pangan.  Skripsi.  Fakultas Teknologi  Pertanian  Institut  Pertanian Bogor. Bogor : 30 - 32
Ridawati, Betty S. L.,J., Ita D. dan Wellyzar S.
2011. Aktivitas  Antifungal  Minyak
Atsiri  Jinten  Putih  Terhadap Candida Parapsilosis SS25, C.  Orthopsilosis NN14, C.  Metapsilosis MP27,  Dan C. Etchellsii MP18.
Rostiana,  O.,  Rosita  SMD.,  Mono  R.  dan Taryono.  2005.  Budidaya  Tanaman Kencur.  Balai  Penelitian  Tanaman Obat dan Aromatika. Sirkuler: 11.
Setiyani,  A.  2010.    Uji  Aktivitas  Antijamur  Α- Mangostin  Hasil  Isolasi  Kulit  Buah Manggis  ( Garcinia  Mangostana L) Terhadap Malassezia Sp . Skripsi Fakultas Farmasi. Universitas Muhammadiyah  Surakarta.  Surakarta. Hal. 12 Sirikan,  P.  1981.  Parasites  Found  in  Some Indonesian  Foshes.  Thai  Fish  Gazette
34. Hal. 345 - 352
Stoskopf  M.K.  1993.  Fish  Medicine.  WB Saunders  Company.  Philadelphia.  Hal 8
Subandi.  2010. Mikrobiologi .  PT  Remaja Rosdakarya. Bandung. Hal 91. Sulistyawati,  D.  dan  Mulyati,  S.  2009.  Uji Aktivitas Antijamur Infusa Daun
Jambu  Mete ( Ana  ca  rdium  o ccidentale , L.)  terhadap Candida albicans . Biomedika. 2(1): 47-51. Yuasa  K.,  Novita  P.,Meliya  P.,  dan  Edy  B.K. 2003.  Teknik  Diagnosis  Penyakit  Ikan Budidaya  Air  Tawar  di  Indonesia.
Japan International Cooperation Agency dan Panduan Diagnosis Penyakit  Ikan.  Balai  Budidaya  Air Tawar Jambi. hal. 52-53.