Aktivitas Ekstrak Daun Salam ( Syzygium Polyanthum ) sebagai Antirheumatoid  Artritis  pada  Tikus  yang  Diinduksi  Complete  Freund’s Adjuvants (CFA)
( Antirheumatoid  Arthritis  Activity  of  Salam  (Syzygium  polyanthum)  Leaf  Extract  to  Mice Induced by Complete Freund’s Adjuvants (CFA) )
Sitti Amirah 1* , Aulia Wati 1 , Bayu Putra 1 , Fitri A. Walani 1
1 Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia, Makassar, Indonesia . E-mail: sitti.amirah@umi.ac.id
Article Info:
Received: 2 Desember 2019
in revised form: 21 Januari 2020 Accepted: 20 Februari 2020
Available Online: 02 Maret 2020

## ABSTRACT
Rheumatoid  arthritis  is  a  chronic  autoimmune  disease,  which  is characterized  by  inflammation  and  degradation  of  the  joints  and  cartilages. Rheumatoid  therapy  is  currently  using  immunosuppressant  drugs, nonsteroidal  anti-inflammatory  drugs  and  corticosteroids . Treatment  of chronic  rheumatoid  can  trigger  side  effects . Syzygium  polyanthum leaves contain alkaloid compounds, flavonoids, saponins, tannins and essential oils consist  of  citral  and  eugenol  which  are  thought  to  be  potential  as antirheumatoid . This  study  aims  to  determine  the  effect  antirheumatoid arthritis and effective dose of ethanol extracts of Syzygium polyanthum leaf . This  study  used  15  male  rats . Treatment  started  by  measuring  foot  volume using a pletismometer and then inducting CFA intraplantary as much as 0,1 mL  on  day  1  and  left  until  day  16 th . On  the  day  17 th a  foot  volume  and arthritis index was measured and then treated until the day 30 th . The animals were divided into 5 groups: negative control (Na. CMC 1%), positive control (methylprednisolone  dose  1.646  mg  /  kg  BW),  ethanol  extractof Syzygium polyanthum leaf at a dose of 75 mg / kg, 150 mg / kg and 300 mg / kg. On the day 31 st , foot volume and arthritis index measurements were taken again. The results showed a decrease in foot volume and arthritis index after given of  the  extract.  Foot  volume  difference  data  were  analyzed  using  the  One Way Anova test followed by the Post Hoc LSD test. The difference between the  arthritis  index  data  was  analyzed  using  Kruskal-Wallis  followed  by  the Mann-Whitney  test.  Statistical  results  show  that  positive  control  has  the same effect as extract (P> 0.05). Based on the results of statistical analysis of  inflammation  of  the  foot  volume  and  the  arthritis  index  shows  that  the ethanol  extract  of Syzygium  polyanthum leaf  had  an  effect  as  an antirheumatoid arthritis.
Keywords : Arthritis rheumatoid Complete Freund’s Adjuvant Syzygium polyanthum leaf
Corresponding Author: Sitti Amirah Program Studi Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia
Makassar 90231 Indonesia email: sitti.amirah@umi.ac.id
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Amirah,  S.,  Wati,  A.,  Putra,  B.,  Walani,  F.  A.  (2020).  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Salam  ( Syzygium  Polyanthum )  Sebagai Antirheumatoid  Artritis  Pada  Tikus  yang  Diinduksi Complete  Freund’s  Adjuvants (CFA). Jurnal  Farmasi  Galenika :Galenika Journal of Pharmacy (e-Journal), 6 (1), 77-83. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.14581
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6 (1): 77 – 83 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.14581

## ABSTRAK
Rheumatoid  artritis  merupakan  penyakit  autoimun  yang  bersifat  kronis,  yang  ditandai  dengan  inflamasi  dan degradasi  pada  sendi  serta  kartilago.  Terapi  rheumatoid  saat  ini  menggunakan  obat-obat  imunosupresan, antiinflamasi  nonsteroid  dan  kortikosteroid.  Pengobatan  rheumatoid  yang  bersifat  kronik  dapat  memicu munculnya  berbagai  efek  samping  yang  tidak  dikehendaki.  Daun  salam  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid, saponin, tanin serta minyak atsiri yang terdiri dari sitral dan eugenol yang di duga berpotensi sebagai antirheumatoid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan  efek  dan  dosis  efektif  ekstrak  etanol  daun  salam sebagai  antirheumatoid  artritis.  Penelitian  ini  menggunakan  15  ekor  tikus  jantan.  Perlakuan  dimulai  dengan mengukur volume kaki menggunakan pletismometer kemudia menginduksi hewan uji dengan CFA 0,1 ml secara intraplantar pada hari ke-1 dan dibiarkan sampai hari ke-16.  Pada hari ke 17 dilakukan pengukuran volume kaki dan indeks artritis kemudian diberikan perlakuan sampai hari ke-30. Hewan uji dibagi dalam 5 kelompok yaitu kontrol  negatif  (Na.  CMC  1%),  kontrol  positif  (metilprednisolon  dosis  1,646  mg/kg  BB),  ekstrak  etanol  daun salam  dengan  dosis  75  mg/KgBB,  150  mg/KgBB  dan  300  mg/KgBB.  Pada  hari  ke-31  kembali  dilakukan pengukuran volume kaki dan indeks artritis. Hasil penelitian menunjukkan adanya penurunan volume kaki dan indeks artritis setelah pemberian ekstrak. Data selisih volume kaki dianalisis menggunakan uji One Way Anova yang  dilanjutkan  dengan  Post  Hoc  uji  LSD.  Selanjutnya,  data  selisih  indeks  arthritis  dianalisis  dengan menggunakan Kruskal-Wallis yang    dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney .  Hasil  statistik  menunjukkan  bahwa kontrol positif memiliki efek yang sama dengan ekstrak (P>0,05). Berdasarkan hasil analisa statistik volume kaki radang dan indeks artitis menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun salam memiliki efek sebagai antirheumatoid artritis.
Kata kunci: Rheumatoid artritis , Complete Freund’s Adjuvant , daun salam, Syzygium polyanthum

## PENDAHULUAN
Rheumatoid arthritis adalah suatu penyakit yang  ditandai dengan inflamasi kronik dan menyebabkan degenerasi  jaringan  ikat.  Inflamasi  terjadi  secara  terus-menerus  terutama  pada  organ  sinovium  dan menyebar  ke  struktur  sendi  disekitarnya  seperti  tulang  rawan,  kapsul  fibrosa  sendi,  legamen  dan tendon.  Inflamasi  ditandai  dengan  penimbunan  sel  darah  putih,  pengaktifan  komplemen,  fagositosis ekstensif  dan  pembentukan  jaringan  granular.  Pada  inflamasi  kronis,  membrane  sinovial  mengalami hipertrofi  dan  menebal  sehingga  menyembat  aliran  darah  dan  lebih  lanjut  menstimulasi  nekrosis  sel dan  respons inflamasi  yang  disebut  panus.  Panus  menyebar  ke  seluruh  sendi  sehingga  menyebabkan inflamasi  dan  pembentukan  jaringan  parut  lebih  lanjut.  Proses  ini  secara  lambat  merusak  tulang  dan menimbulkan nyeri hebat serta deformitas (Corwin & Elizabeth, 2009).
Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar  2013,  menunjukkan  prevalensi  penyakit  sendi  berdasarkan  gejala  atau diagnosis  tenaga  kesehatan  sebesar  24,7%.  Prevalensi  penyakit  sendi  ini  meningkat  dengan  semakin bertambahnya usia yaitu usia 25-34 tahun sebesar 16,1%, 35-44 tahun sebesar 26,9%, dan 45-54 tahun sebesar 37,25%. Perempuan memiliki resiko lebih besar dari pada laki-laki (Riskesdas, 2013).
Terapi  yang  sering  digunakan  untuk  rheumatoid arthritis adalah  obat  golongan  DMARD  ( disease modifying anti rheumatic drugs ) seperti metotreksat, leflunomida, dan sulfasalazin. Obat golongan ini bersifat  antiradang  yang  kuat.  Senyawa-senyawa  ini  sering  dikombinasikan  dengan  obat  golongan antiinflamasi  nonsteroid  maupun  golongan  kortikosteroid  untuk  memperkuat  efeknya,  namun  efek samping  yang  ditimbulkan  dari  penggunaan  obat-obat  tersebut  cukup  berbahaya,  yaitu  dapat menyebabkan pendarahan pada gastrointestinal, mual, dispepsia, gangguan fungsi ginjal (Dipiro et al , 2009).  Hal  inilah  yang  mendorong  peneliti  untuk  melakukan  pencarian  kandidat  obat  antireumatoid dari  bahan  alam  dengan  efek  samping  yang  relatif  lebih  kecil.  Salah  satu  tanaman  yang  banyak digunakan  sebagai  obat  tradisional  adalah  daun  salam.  Daun  salam  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin  serta  minyak  atsiri  yang  terdiri  dari  sitral  dan  eugenol.  Beberapa  senyawa kimia yang terdapat pada daun salam diduga memiliki potensi sebagai antireumatoid (Widyaningrum, 2011).
Jenis  flavonoid  yang  diketahui  berperan  dalam  aktivitas  antiinflamasi,  senyawa  ini  memiliki mekanisme  antiinflamasi  dengan  menghambat  enzim  siklooksigenase  sehingga  tidak  membentuk mediator  inflamasi  (Sativa et  al., 2014).  Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa  daun  salam memiliki  efek  sebagai  antiinflamasi,  dimana  dosis  125mg/kgBB  memiliki  efek  penurunan  volume edema  kaki  tikus  yang  paling  optimal  (Khatimah,  2015).  Hal  inilah  yang  mendorong  peneliti  untuk melakukan penelitian lebih lanjut terkait potensi efek antireumatoid dari daun salam.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini  yaitu labu ukur (pyrex), kanula tikus, spoit (Disposable syringe ), plestimometer (Panlab), timbangan analitik (Ohaus), timbangan hewan (Ohaus), seperangkat alat maserasi, dan seperangkat alat rotavapor (IKA). Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu Complete Freund’s Adjuvant , aquades, ekstrak daun salam ( Syzygium polyanthum (Weight) Walph.), etanol 70%, Na-CMC 1% b/v, Metilprednisolon.

## Metode

## Pengambilan dan Pengolahan Sampel
Daun  salam  ( Syzygium  polyanthum (Weight)  Walph.)  diambil  di  Kota  Makassar.  Daun  salam  yang telah diambil kemudian dicuci menggunakan air yang mengalir dan dikeringkan tanpa sinar matahari. Setelah itu dipotong-potong kecil lalu diserbukkan.
Pembuatan Ekstrak Daun salam ( Syzygium polyanthum (Weight) Walph.)
Serbuk  simplisia  daun  salam  ditimbang  sebanyak  500  gram,  dimasukkan  dalam  bejana  maserasi (toples), kemudian ditambahkan etanol 70% sampai serbuk simplisia seluruhnya terendam. Dibiarkan selama  1×24  jam,  sambil  sekali-kali  diaduk  selama  6  jam,  dan  dibiarkan  selama  18  jam  pada  suhu kamar dan terlindung dari sinar matahari langsung. Setelah itu dilakukan penyaringan dan dilakukan remaserasi  sebanyak  2  kali.  Filtrat  yang  diperoleh  ditampung  kemudian  diuapkan  dengan menggunakan rotavapor sehingga diperoleh ekstrak kental dari daun salam (Depkes RI, 2010).

## Penyiapan Hewan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  15  ekor  hewan  coba  yang  diperoleh  dari  peternakan  hewan  Surabaya. Hewan coba terlebih dahulu diadaptasikan selama ±7 hari didalam kadang Laboratorium Farmakologi Fakultas  Farmasi  Universitas  Muslim.  Hewan  coba  yang  sehat  dan  memenuhi  syarat  berat  badan selanjutnya akan digunakan dalam penelitian.

## Pelakuan Hewan coba
Hewan  coba  yang  memenuhi  persyaratan  selanjutnya  diukur  volume  kaki  menggunakan plestismometer.  Pada  hari  ke-1,  hewan  uji  diinduksi  dengan  CFA  0,1  mL  secara  intraplantar  dan dibiarkan sampai hari ke-16. Pada hari ke-17 dilakukan pengukuran volume kaki kemudian hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok sebagai berikut:
a. Kelompok 1 diberikan Na.CMC sebagai kontrol negatif.
b. Kelompok 2 diberikan suspensi metilprednisolon 0,267 mg/KgBB sebagai kontrol positif.
c. Kelompok 3 diberikan ekstrak etanol daun salam dengan dosis ekstrak 75 mg/KgBB.
d. Kelompok 4 diberikan ekstrak etanol daun salam dengan dosis ekstrak 150 mg/KgBB.
e. Kelompok 4 diberikan ekstrak etanol daun salam dengan dosis ekstrak 300 mg/KgBB.
Pemberian  ekstrak  dilakukan  sampai  hari  ke-30  secara  oral.  Dilakukan  kembali  pengukuran  volume kaki pada hari ke-31 (Mulyaningsih & Darmawan, 2006; Asad et al , 2007).

## Pengukuran Indeks Arthritis
Pengukuran  indeks  arthritis  dilakukan  pada  hari  ke-17  dan  ke-31  berdasarkan  pada  tabel  1 (Mulyaningsih & Darmawan, 2006).
Tabel 1. Parameter pengamatan indeks arthritis (smith, 2000).
No Gejala Artritis yang Nampak pada tikus Skor 1 Bengkak dan merah pada 1 jari kaki 0,25 2 Bengkak dan merah sedikitnya 2 jari kaki 0,50 3 Bengkak pada telapak kaki 0,75 4 Bengkak  dan  merah  pada  jari  kaki  dan  perubahan  bentuk pada telapak kaki 1,00 5 Bengkak dan merah pada jari kaki dan telapak kaki 1,25 6 Bengkak  dan  merah  pada  jari  kaki  dan  sedikit  bengkak pada sebagian telapak dan pergelangan kaki. 1,50 7 Bengkak  dan  merah  pada  jari  dan  telapak  kaki  serta bengkak pada seluruh telapak dan pergelangan tangan 1,75 8 Bengkak dan merah pada jari kaki, telapak dan pergelangan kaki 2,00
Setiap  tikus  pada  masing-masing  kelompok  diamati  indeks  artritisnya  dimana  tikus  dinyatakan rematoid artritis  jika memiliki indeks arthritis > 1.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengukuran indeks arthritis
Hasil pengukuran volume kaki awal, induksi dan terapi dapat dilihat pada tabel 2 dibawah ini:
Tabel 2. Rata-Rata Volume Kaki Awal, Induksi Dan Terapi
Kelompok Perlakuan Rata-rata volume kaki (mL) Awal ± SD Induksi ± SD Terapi  ± SD Kelompok I kontrol negatif (Na.CMC 1%) 0,27 ± 0,01 0,85 ± 0,13 0,82 ± 0,58 Kelompok II Kontrol positif (Metilprednisolon) 0,33 ± 0,04 0,78 ± 0,06 0,37 ± 0,05 Kelompok III EEDS 75 mg/KgBB 0,30 ±0,01 0,79 ± 0,02 0,37 ± 0,03 Kelompok IV EEDS 150 mg/KgBB 0,30 ± 0,03 0,81 ± 0,01 0,40 ± 0,05 Kelompok V EEDS 300 mg/KgBB 0,32 ± 0,02 0,78 ± 0,07 0,38 ± 0,03
Keterangan:
EEDS
: Ekstrak Etanol Daun Salam
Dari  tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  terjadi  peningkatan  volume  kaki  pada  semua  kelompok  setelah diinduksi  CFA.  Peningkatan  volume  kaki  menunjukkan  kemampuan  CFA  untuk  menginduksi inflamasi.  Pemberian  CFA  akan  menstimulasi  fagositosis,  sekresi  sitokin  oleh  fagositosis mononuklear,    sehingga  berbagai  jenis  sitokin  proinflamasi  seperti  TNF-α,  IL-1,  IL-6,  IL-8,  PGE-2, NO,  MMP  dan  mediator  lainnya  akan  dilepaskan  (Fajrin,  Khatib  &  Susilo,  2013).  TNF-α    bekerja sinergis  dengan Receptor  Activator  Of  Nuclear  Factor  –kβ  Ligant (RANKL)  dan  menyebabkan
osteoklastogenesis  melalui  precursor  osteoklas. Receptor  Activator  Of  Nuclear  Factor–kβ  ( RANK) akan  memicu  diferensiasi  sel  menjadi  osteoklas.  TNF-α  juga  dapat  mengembangkan arthritis inflamasi  kronis,  dengan  hiperplasia  sinovium,  infiltrat  inflamasi  di  bagian  sendi,  pembentukkan pannus dan  kartilago  serta  destruksi  tulang.  Selain itu juga  terdapat  IL-1  dan  IL-6  yang  ikut  terlibat dalam patofisiologi rheumatoid artritis (Plenge et al., 2007).
Dari  tabel  2  juga  terlihat  adanya  penurunan  volume  kaki  pada  semua  kelompok  perlakukan  kecuali kontrol  negatif.  Besarnya  rata-rata  penurunan  volume  kaki  dapat  dilihat  pada  tabel  3.  Penurunan terbesar  terlihat  pada  kelompok  EEDS  75  mg/KgBB  dan  metilprednisolon.  Hal  ini  menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun salam memiliki efek sebagai antiinflamasi.
Tabel 3. Persen rata-rata penurunan volume kaki setelah terapi
Kelompok perlakuan % Penurunan Kelompok I kontrol negatif (Na. CMC 1%) 4,71 Kelompok II kontrol positif (Metilprednisolon) 52,09 Kelompok III EEDS 75 mg/KgBB 52,93 Kelompok IV EEDS 150 mg/KgBB 50,84 Kelompok V EEDS 300 mg/KgBB 51,18
Selanjutnya, hasil analisis statistik One-Way Anova data persen penurunan volume kaki menunjukkan adanya  perbedaan  antara  tiap  kelompok  perlakuan  (p<0,05).  Tidak  ada  perbedaan  antara  kelompok kontrol  positif  (Metilprednisolon)  dengan  kelompok  ekstrak.  Hal  ini  berarti  kelompok  ekstrak  uji dengan kelompok kontrol positif memiliki efek yang sama dalam menurunkan volume kaki tikus.

## Hasil pengukuran indeks artritis
Hasil pengukuran indeks artritis setelah induksi dan terapi dapat dilihat pada tabel 5 dibawah ini:
Tabel 4. Rata-rata indeks artritis induksi dan terapi
Kelompok Perlakuan Rata-rata volume kaki (mL) Induksi ± SD Terapi ± SD Kelompok I  (Na.CMC 1%) 2,67 ± 0,58 2,67 ± 0,58 Kelompok II (Metilprednisolon) 2,00 ± 0,00 0,67 ± 0,00 Kelompok III (EEDS 75 mg/KgBB) 2,67 ± 0,58 0,67 ± 0,00 Kelompok IV (EEDS 150 mg/KgBB) 2,33 ± 0,58 0,67 ± 0,58 Kelompok V (EEDS 300 mg/KgBB) 2,33 ± 0,58 0,67 ± 0,58
Keterangan:
EEDS         :  Ekstrak Etanol Daun Salam
Tabel  4  menunjukkan  adanya  penurunan  indeks  artritis  pada  semua  kelompok  uji  kecuali  kelompok kontrol negatif. Kelompok EEDS 75 mg/KgBB menunjukkan penurunan indeks artritis terbesar. Hasil statistik selisih indeks artritis antara induski dan terapi menggunakan uji Kruskal-Wallis menunjukkan adanya  perbedaan  antara  kelompok  perlakuan  (p<0,05).  Hasil  uji Mann-Whitney menunjukkan  tidak ada perbedaan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok ekstrak uji. Hal ini berarti kelompok
kontrol  positif  (Metilprednisolon)  memiliki  efek  yang  sama  dengna  kelompok  kontrol  uji    dalam menurunkan indeks artritis pada hewan uji.
Kemampuan  daun  salam  sebagai  antirheumatoid  artritis  diduga  karena  adanya  kandungan  golongan senyawa  flavonoid  yang  diketahui  berperan  dalam  aktivitas  antiinflamasi,  senyawa  ini  memiliki mekanisme  antiinflamasi  dengan  menghambat  enzim  siklooksigenase  sehingga  menghambat pembentukan sitokin proinflamasi (Sativa, Sulastri & Yuliet, 2014). Selain itu flavonoid juga berperan dalam aktivasi sistem imun yang dapat berefek sebagai antirheumatoid arthritis (Scheet & Ian, 2011).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  salam Syzygium  polyanthum (Weight)  Walph.h.)  dengan  dosis  75  mg/KgBB efektif  sebagai  antirheumatoid  artritis  terhadap  tikus  jantan  yang  diinduksi Complete  Freund’s Adjuvant .

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih penulis sampaikan kepada Universitas Muslim Indonesia atas dukungannya baik materil maupun nonmateril sehingga penelitian ini dapat terlaksana.

## DAFTAR PUSTAKA
Asad,  M.,  Prasad,  K.,  Thomas,  L.,  &  Kamath,  J.  V.  (2007).  Evaluation  of  Analgesics  and  Anti- Inflammatory  Activiyt  of  Sudard,  A  Poly-Herbal  Formulation ,  Iranian  Journal  of Pharmacology & Therapeutics,6 (1), 71-75.
Corwin., Elizabeth, J. (2009). Handbook of pathophysiology 3th edition. Lippincort Williams & Wilkins: Philadelphia.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2010). Farmakope  Herbal .  Jakarta:  Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Dipiro,  J.  T.,  Wells,  G.  B.,  Schwinghammer,  L.  T.,  dan  Dipiro,  V,  C  2009, Pharmacotherapy Handbook Seven Edition, The McGraw-Hill Companies: United States of America.
Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2013). Riset  Kesehatan  Dasar  2013 .  Jakarta:  Badan Penelitian dan Pengembangan.
Khatimah, K. (2015). Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Salam
( Syzygium polyanthum (wight) walp) Terhadap Tikus ( Rattus norvegicus ) Jantan  yang  Diinduksi Karagen. (Unpublished Undergraduate Thesis) . Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia. Indonesia.
Mulyaningsih,  S.,  &  Darmawan,  E.  (2006).  Efek  Anti  Artritis  Pisang  Ambon  (Musa  paradisiaca sapientum L) dan lidah buaya (Aloe Vera L) terhadapa Adjuvant-Induces Arthritic pada tikus. Biodiversitas, 7 (3), 273-277.
Plenge, R., Cotsapas, C., Davies, L., Price, A., Bakker, P., Maller, J., Pe’er, I., Burtt, N., Blumenstiel, B.,  DeFelice,  M.,  Parkin,  M.,  Barry,  R.,  Winslow,  W.,  Healy,  C.,  Graham,  R.,  Neale,  B., Izmailova,  E.,  Roubenoff,  R.,  Parker,  A.,  &  Altshuler,  D.  (2007).  Two  independent  alleles  at 6q23  associated  with  risk  of  rheumatoid  arthritis. Nature  Genetics ,  39,  1477–1482. https://doi.org/10.1038/ng.2007.27
Sativa, O., Sulstri, E., & Yuliet. (2014). Uji aktivitas antiinflamasi gel ekstrak buah kaktus ( Opuntia elatior Mill.) pada tikus ( Rattus norvegicus ) yang diinduksi  lamda  karagen.
Jurnal of Science and Technology, 3 (2), 79-94.
Smith,  F.  (2000). Picrorhiza  Scrophulariiflora  from  Traditional  Use  to  Immunomodulatory , (Dissertation). Rijksuniversiteit Utrech. Utrecht.
Widyaningrum. (2011). Kitab Tanaman Obat Nusantara . Yogyakarta: Penerbit   Medpress.