## AKTIVITAS ANTIDIABETES FRAKSI n-HEKSAN EKSTRAK ETANOL
DAUN LENGLENGAN ( Leucas lavandulifolia JE. Smith) PADA TIKUS NEONATAL STZ-INDUCED TYPE-2 DIABETES MELLITUS
Yance Anas 1* , Risha Fillah Fithria 1 , Maulita Cut Nuria 2 , Yunita Midkha 1 , Agung Endro Nugroho 3 , Puji Astuti 4
1 Bagian Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
2 Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
3 Bagian Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
4 Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
* E-mail : yance.apt@gmail.com

## ABSTRAK
Dalam  penelitian  ini,  kami  melakukan  fraksinasi  ekstrak  etanol  daun  lenglengan  dengan pelarut n-heksan untuk menyederhanakan kandungan zat aktif yang terkandung di dalamnya dan  mengevaluasi  efek  antidiabetesnya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  efek antidiabetes  fraksi  n-heksan  ekstrak  etanol  daun  lenglengan  (FHDL)  pada  tikus  neonatal STZ-induced type-2 diabetes mellitus.
STZ  90  μg/KgBB  diberikan  secara  i.p  pada  35  ekor  anak  tikus  galur  Wistar  umur  2  hari. Pada  usia  3  bulan,  dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa  pre-prandial  dan  post-prandial. Sebanyak  25  ekor  tikus  neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus  dikelompokkan  ke dalam lima kelompok perlakuan, terdiri dari kelompok kontrol diabetes (CMC-Na 0,5%; 25 mL/KgBB),  kelompok  glibenklamid  5  mg/KgBB  dan  tiga  kelompok  FHDL  (62,5;  125  and 250)  mg/KgBB.  Sediaan  uji  diberikan  selama  28  hari.  Kadar  glukosa  darah  pre-prandial dan post-prandial diukur pada hari ke-0, 7, 14 dan 28. FHDL  secara  signifikan  berhasil  menurunkan  kadar  glukosa  darah  pre-prandial  dan post- prandial  tikus  neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus  (p<0,05).  Perlakuan  FHDL 62,5  mg/KgBB  selama  28  hari  memiliki  efek  antidiabetes  yang  tinggi,  yaitu  mampu menurunkan kadar glukosa darah pre-prandial tikus sebesar 45,99%. Perlakuan FHDL 250 mg/KgBB  juga  signifikan  menurunkan  kadar  glukosa  darah  post-prandial  tikus  (p<0,05) dengan efek antidiabetes  pada hari ke-7, 14 dan 28 berturut-turut adalah sebesar 19,28%; 22,68% dan 24,92%.
Kata Kunci: Daun Lenglengan, Efek Antidiabetes, Fraksi n-Heksan,  Neonatal STZ-induced type-2 diabetes mellitus

## 1. PENDAHULUAN
Sel  β-pankreas  memainkan  peranan  penting  dalam  pengaturan  kadar  insulin  dan glukosa  darah  dalam  tubuh  manusia.  Destruksi  sel  β-pankreas  akibat  proses  autoimmun dalam tubuh merupakan penyebab utama Diabetes Mellitus (DM) tipe-1. Penderita DM tipe- 1 mengalami kekurangan insulin secara absolut akibat sedikitnya sel β–pankreas yang masih berfungsi dalam mensekresikan insulin.  Akibatnya,  pasien membutuhkan terapi insulin dari luar untuk mengendalikan kadar gluksa darah. Selain karena resistensi insulin  pada jaringan otot  dan  adiposa,  DM  tipe-2  juga  berhubungan  dengan  defisiensi  sekresi  insulin  dari  sel  β- pankreas.  Defisiensi  insulin  ini  akan  mengakibatkan  peningkatan  glikogenolisis  dari  hepar dan  penurunan  absorpsi  glukosa  ke  dalam  jaringan  otot  (Greenspan  dan  Strewler,  1997; Triplitt, et.al ., 2005; Sumrall dan Bouldin, 2009). Lenglengan  ( Leucas  lavandulaefolia JE.  Smith)  adalah  salah  satu  tumbuhan  liar yang potensial untuk dikembangkan dalam terapi DM. Tumbuhan ini telah digunakan secara
empiris  oleh  masyarakat  Indonesia  dan  India  untuk  mengobati  penyakit  DM.  Di  Indonesia, harba  lenglengan  banyak  tersebar  di  daerah  Jawa,  Ternate  dan  Tidore  (Backer  dan  Brink, 1963).
Beberapa  penelitian  terdahulu  melaporkan  bahwa  berbagai  ekstrak  dari  herba lenglengan  memiliki  aktivitas  hipoglikemik  yang  cukup  potent  pada  tikus  (Saha, et.al ., 1997 c ;  Bhoja,  2009;  Chandrashekar  dan  Prasanna,  2010;  Makhija, et.al .,  2011)  sehingga dapat dikembangkan lebih lanjut untuk menemukan  senyawa antidiabetes baru.  Kandungan senyawa  aktif  yang  telah  berhasil  diidentifikasi  dari  berbagai  ekstrak  herba  lenglengan diantaranya  adalah  aecetin,  chryosoeriol,  limfoside,  linifoliol,  chryosoeriol-6’-(OAc)-4’-β- glukosida,  lupeol  dan  tarakseron  (Makhija, et.al .,  2011).  Walaupun  demikian,  peneliti terdahulu  belum  dapat  memastikan  kandungan  senyawa  aktif  yang  bertanggung  jawab terhadap  efek  antidiabetes  herba  lenglengan.  Sebagai  uji  pendahuluan,  kami  melakukan fraksinasi  ekstrak  etanol  daun  lenglengan  dengan  berbagai  pelarut  untuk  menyederhanakan kandungan  zat  aktif.  Pelarut  organik  yang  digunakan  adalah  n-heksan,  kloroform,  dan  etil- asetat. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi efek antidiabetes fraksi n-heksan ekstrak etanol  daun  lenglengan  (FHDL)  pada  tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus . Parameter yang diukur adalah kadar glukosa pre-prandial dan post-prandial .

## 2. METODOLOGI

## 2.a. Bahan Penelitian
Stretozotocin dibeli dari Sigma Chemical Co. (St.Louis, MO, USA).  Cairan penyari yang  digunakan  untuk  ekstraksi  dan  fraksinasi  daun  lenglengan  adalah  etanol  70%  dan  n- heksan kualitas teknis diperoleh dari PT. Bratachem Tbk. Bahan lain yang digunakan dalam uji  aktivitas  antidiabetes  adalah  CMC-Na  ( pharmaceutical  grade dibeli  dari PT.  Bratacho Chemika,  Tbk.)  dan  glibenklamid  ( pharmaceutical  grade diperoleh dari  PT.  Phapros  Tbk. Semarang). 2. b. Alat Penelitian Oven  (Mamert), moisture  balance (Oppus),  ayakan  ukuran  40  Mesh,  blender, Seperangkat alat gelas,  corong pisah, rotary  evaporator (Heidolph), kertas  saring Whatman no.1,  timbangan  hewan  (Acyss),  spuit  injeksi  dan  jarum  per  oral,  alat  pengukur  kadar glukosa darah dan strip One-Touch Ultra ® (Adva Med). 2.c. Jalannya Penelitian
2.c.1. Pembuatan Fraksi n-Heksan Ekstrak Etanol Daun Lenglengan
Herba  lenglengan  dipanen  pada  bulan  April  tahun  2013  dari  daerah  Kecamatan Pathuk,  Gunung  Kidul  D.I.  Yogyakarta.  Daun  lenglengan  dikeringkan  dalam  oven  dengan pengaturan  suhu  <  55  °C  hingga  didapatkan  simplisia  kering  daun  lenglengan.  Setelah kering,  semua  daun  lenglengan  diserbuk  dengan  menggunakan  blender  dan  diayak  dengan ayakan  ukuran  40  Mesh.  Ekstrak  etanol  daun  lenglengan  dibuat  dengan  cara  meserasi menggunakan    etanol  70  %.  Ekstrak  dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator dengan pengaturan  suhu  50 -  60 0 C.  Fraksinasi  ekstrak  etanol  daun  lenglengan  dilakukan  dengan metode  partisi  cair-cair  menggunakan  pelarut  n-heksan.  Sisa  pelarut  n-heksan  diuapkan dengan rotary evaporator hingga didapatkan fraksi n-heksan daun lenglengan (FHDL).
2.c.2.  Pembuatan  dan  Pemeliharaan  Tikus Neonatal  STZ-Induced  Type-2  Diabetes Mellitus
Hewan  uji  dipelihara  sesuai  dengan  protokol  pemeliharaan  dan  penanganan  hewan uji  Bagian  Farmakologi  dan  Farmasi  Klinik  Fakultas  Farmasi,  Universitas  Gadjah  Mada, Yogyakarta.  Tikus  galur  Wistar  yang  sedang  hamil  ditempatkan  secara  individual  dalam kandang  pemeliharaan  dengan  pengaturan  suhu  (22±2°C),  kelembaban  udara  ruangan (55±10%),  dan  pengaturan  cahaya  secara  otomatis  dengan  siklus  terang-gelap  (12:12  jam). Hewan uji diberi akses makanan dan minuman secara bebas.
Streptozotosin  (STZ)  dilarutkan  dalam  NaCl  0,9% dan  dibuat  baru  ( fresh ).  STZ  90 μg/KgBB diberikan  secara i.p pada 35 ekor anak tikus galur Wistar umur 2 hari (Dzeufiet, et.al ., 2007). Sebagai kontrol digunakan NaCl 0,9% 1,25 mL/KgBB.  Anak tikus yang telah diinduksi  dengan  STZ  tersebut  dibiarkan  tetap  menyusui  sampai  pada  usia  30  hari,  dan selanjutnya  dipisahkan  dari  induknya.    Pada  usia  3  bulan,  dilakukan  pengukuran  kadar glukosa darah puasa ( pre-prandial ) dan kadar glukosa 90 menit setelah pembebanan glukosa 5 g/KgBB ( post-prandial ).
2.c.3. Uji  Aktivitas  Antidiabetes  FHDL  pada  Tikus Neonatal  STZ-Induced  Type-2 Diabetes Mellitus
Desain  percobaan  yang  digunakan  adalah randomized  matched  pre-test  post-test control group design . Sebanyak 25 ekor tikus neonatal STZ-induced type-2 diabetes mellitus dikelompokkan ke dalam lima kelompok perlakuan (masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor), yaitu :
a. CMC-Na12,5: Kelompok kontrol diabetes (CMC-Na 0,5% 12,5 mL/KgBB/hari)
b. Glib. :  kelompok kontrol positif (glibenklamid 5 mg/KgBB /hari)
c. FHDL 62,5 :  kelompok FHDL 62,5 mg/KgBB/hari d. FHDL 125  :  kelompok FHDL 125,0 mg/KgBB/hari
e. FHDL 250  :  kelompok FHDL 250,0 mg/KgBB/hari Sebelum pemberiaan FHDL dan glibenklamid, setiap tikus diukur kadar glukosa darah pre-prandial (kadar  glukosa  darah  puasa)  dan post-prandial (90  menit  setelah  pembebanan gluksoa  5  g/KgBB).  Sediaan  uji  diberikan  setiap  hari  sebanyak  satu  kali  sehari  selama  4 minggu  (28  hari).    Selama  pengujian,  tikus  diberikan  pakan  standar  dan  air  minum ad.libitum .    Pada  hari  ke-30,  kadar  glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial kembali diukur untuk mengevaluasi efek antidiabetes FHDL dan glibenklamid uji pada hari ke-7, 14, 21  dan  28.      Data  kadar  kadar  glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial sebelum  dan setelah perlakuan FHDL dan glibenklamid dibandingkan secara statistik.

## 2.d. Penentapan Kadar Glukosa Darah
Penetapan  kadar  glukosa  darah  dilakukan  dengan  secara  enzimatik  dengan  metode GOD-PAP,  menggunakan  alat  pengukur  kadar  glukosa  darah  ( One  Touch  Ultra ® ). Pembuluh darah vena pada ekor dilukai dengan scalpel dan darah dibiarkan mengalir keluar sebanyak  3  tetes.  Tetesan  darah  keempat  diletakkan  di  atas  strip One  Touch  Ultra ® dan selanjutnya  dimasukkan  pada  alat  pengukur  kadar  glukosa  darah.  Kadar  gula  darah  akan terbaca pada layar dengan satuan mg/dL.
2.e. Analisa data
FHDL  dan  glibenklamid  dinyatakan  memiliki  efek  antidiabetes  apabila  kadar glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes mellitus setelah  mendapatkan  perlakuan  dengan  FHDL  dan  glibenklamid  ada  hari  ke  7,  14 dan 28 hari lebih rendah dari pada sebelum perlakuan (p<0,05). Uji statistik yang digunakan adalah uji t berpasangan dengan menggunakan taraf kepercayaan 95 %. Nilai signifikansi < 0,05 menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.a. Ekstraksi dan Fraksinasi Daun Lenglengan
Simplisia  kering  daun  lenglengan  yang  digunakan  dalam  pembuatan  ekstrak  etanol daun  lenglengan  adalah  sebanyak  1.850  g  dengan  kadar  air  sebesar  4,4%.  Ekstrak  etanol daun  lenglengan  yang  dihasilkan  dalam  penelitian  ini  adalah  sebanyak  461,56  gram (rendemen  24,94%).  Secara  makroskopik,  ekstrak  etanol  daun  lenglengan  berwarna  coklat, berbau  khas  lenglengan.  Ekstrak  etanol  daun  lenglengan  difraksinasi  dengan  pelarut  n- heksan  dan  sisa  pelarut  dihilangkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu  40  °C.  Fraksi  n- heksan yang diperoleh adalah 47,53 g (rendemen sebesar 2,56 %).

## 3.b. Pembuatan Tikus Neonatal STZ-Induced Type-2 Diabetes Mellitus
Pada usia  tiga bulan, anak tikus baru lahir usia 2 hari  yang mendapatkan perlakuan dengan  STZ  90  μg/KgBB  mengalami  peningkatan  kadar  glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial yang  signifikan  dibandingkan  dengan  tikus  kelompok  kontrol  (Gambar  1). Kadar  glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial tikus neonatal  STZ-induced  type-2 diabetes  mellitus adalah  (165,56  ±  12,25  dan  215,27  ±  17,55)  mg/dL,  sedangkan  kadar glukosa  darah pre-prandial dan post-prandial tikus  normal  (kontrol)  berturut-turut  adalah (81,35  ±  4,37  dan  121,76  ±  13,35)  mg/dL.  Hasil  penelitan  ini  menyimpulkan  bahwa  tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus telah  mengalami  DM  tipe-2  pada  usia  tiga bulan, dimana kadar glukosa darah tikus diabetes hampir satu setengah kali lipat lebih tinggi bila dibandingkan dengan tikus normal (p<0,05).
Perlakuan  STZ  pada  tikus  neonatal  baru  lahir  usia  dua  hari  juga  berpengaruh  pada penurunan berat badan  tikus jika dibandingkan dengan tikus  normal . Rata-rata berat badan tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes usia  tiga  bulan  adalah  (192,55±4,22)  g, sedangkan rata-rata berat badan tikus normal adalah (214,17±3,35) g.
Gambar 1.   Kadar glukosa darah pre-prandial (mg/dL) dan post-prandial (mg/dL) tikus normal (kontrol) dan tikus neonatal STZ-induced type-2 diabetes mellitus pada usia 3 bulan. Data disajikan dalam bentuk rata-rata SEM dari 5 – 10 percobaan independent. * Hasil Uji  T  independen  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  bermakna  dengan  tikus kelompok normal (p<0,05).
Streptozotocin (STZ, 2-deoxy-2-(3-(methyl-3-nitrosoureido)-D-glucopyranose) adalah antibiotik yang dihasilkan oleh Streptomycetes achromogenes (Szkuldeski, 2001) dan telah  digunakan  secara  luas  dalam  berbagai  penelitian  untuk  menginduksi  terjadinya  DM tipe-1 dan tipe-2 pada tikus percobaan (Arulmozhi, et.al ., 2004). Senyawa ini secara selektif menghancurkan sel β-pankreas tikus (Bonner-Weir, et.al ., 1981). STZ masuk ke dalam sel β- pankreas  melalui  GLUT-2  dan  menginduksi  produksi  radikal  superoksida,  hidrogen peroksida,  dan  radikal  hidroksil  yang  pada  akhirnya  akan  mengakibatkan  kerusakan  yang sangat  cepat  dan  nekrosis.  Senyawa  ini  juga  akan  merangsang  pelepasan  nitrogen  oksida yang akan menghambat aktivitas enzim acitonase yang ikut berperan dalam proses kerusakan DNA sel β-pankreas (Szkuldeski, 2001; Arulmozhi, et.al ., 2004).
Dalam  penelitian  ini,  STZ  digunakan  untuk  menginduksi  terjadinya  nekrosis  pada sel  β–pankreas.  STZ  90  g/KgBB  diinjeksikan  secara  intra  peritoneal  (i.p)  pada  anak  tikus usia 2 hari (Dzeufiet, et.al ., 2007). Beberapa penelitian terdahulu menerangkan bahwa pada usia  4  hari,  massa  sel  β-pankreas  tikus  tinggal  sekitar  20-26,5%  dan  akan  mengakibatkan keadaan hiperglikemik yang sangat parah (Bonner-Weir, et.al ., 1981; Garofano, et.al ., 2000). Regenerasi sel β–pankreas akan mulai  terjadi pada usia 5-7 hari dan massa sel β–pankreas meningkat  menjadi  55%.  Regenerasi  sel  β-pankreas  umumnya  terjadi  melalui  proses
neogenesis  dan  peningkatan  proliferasi  massa  sel  (Garofano, et.al .,  2000).  Kadar  glukosa darah  tikus  kembali  normal  pada  usia  10  hari  yang  berhubungan  dengan  terjadinya regenerasi sel β–pankreas secara parsial. Akan tetapi, keadaan hiperglikemik kembali terlihat pada saat tikus berusia 6 minggu walaupun terjadi peningkatan jumlah sel β–pankreas hingga mencapai  72%.  Hiperglikemia  yang  terjadi  bertahan  sampai  tikus  berusia  13  minggu  (3 bulan). Keadaan ini menunjukkan bahwa  kemampuan regenerasi atau normalisasi fungsi sel β–pankreas  tidak  dapat  berjalan  dengan  sempurna  sehingga  mengakibatkan  keadaan hiperglikemik pada saat tikus berusia 3 bulan (Bonner-Weir, et.al ., 1981).
3.c.  Efek  Antidiabetes  FHDL  pada  Tikus Neonatal  Streptozotocin-Induced  Type-2 Diabetes Mellitus
Dalam  penelitian  ini,  FHDL  (62,5–250)  mg/KgBB  berhasil  menurunkan  kadar glukosa darah pre-prandial tikus neonatal STZ-induced type-2 diabetes mellitus p ada hari ke-7, 14 dan  28  (Gambar  2).  FHDL  62,5  mg/KgBB  memiliki  efek hipoglikemik  tertinggi  terhadap kadar glukosa  darah pre-prandial pada  hari  ke-28 ,  yaitu  mam p u  menurunkan  kadar  glukosa  tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus sebesar  45,99%. Perlakuan  FHDL  juga  dapat menurunkan secara signifikan kadar glukosa darah post-prandial tikus neonatal STZ-induced type-2  diabetes  mellitus .  FHDL  dosis  tinggi  (250  mg/KgBB)  mampu  menurunkan  kadar glukosa darah post-prandial pada hari ke-7 (19,28%), 14 (22,68%) dan 28 (24,92%).
Gambar 2.  Efek FHDL (62,5; 125 dan 250) mg/Kg BB dan glibenklamid 5 mg/KgBB terhadap (a)  kadar  glukosa  darah pre-prandial (mg/dL)  dan (b) post-prandial tikus neonatal STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus . Data  disajikan  dalam  nilai  rata-rata  ±SEM  (n=4- 5). *Hasil uji t berpasangan menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna dengan data hari ke-0 (p<0,05).
Keterangan
CMC-Na12,5  :  kelompok kontrol diabetes (CMC-Na 0,5%; 12,5 mL/KgBB). Glib. :  kelompok kontrol positif (metformin150 mg/KgBB).
FHDL 62,5 :  kelompok FHDL 62,5mg/KgBB. FHDL 125 :  kelompok FHDL 125 mg/KgBB.
FHDL 250 :  kelompok FHDL 250mg/KgBB.
Glibenklamid  5  mg/KgBB,  antidiabetes  oral  golongan  sulfonilurea  sangat  efektif menurunkan  kadar  gluksa  darah pre-prandial tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes mellitus selama 28 hari (p<0,05). Efek hipoglikemik glibenklamid 5 mg/KgBB pada hari ke- 7,  14  dan  28  berturut-turut  adalah  sebesar  31,01%;  37,78%  dan  48,70%.  Akan  tetapi, kemampuan  glibenklamid  5  mg/KgBB  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah post- prandial hanya  bertahan  selama  7  hari  (efek  hipoglikemik  sebesar  27,72%).  Kadar  glukosa darah post-prandial pada  hari  ke-14  dan  28  meningkat  secara  drastis,  yaitu  diatas  200 mg/dL.  Pola  yang  sama  juga  ditunjukkan  oleh  kadar  glukosa  darah post-prandial tikus kelompok kontrol diabetes  (CMC-Na 0,5%; 12,5 mL/KgBB). Keadaan ini menggambarkan
bahwa  tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus yang  tidak  mendapatkan pengobatan  dengan  antidiabetes  yang  efektif  akan  mengalami  keadaan  hiperglikemik  yang parah setelah menerima asupan glukosa yang tinggi.
Lenglengan merupakan tanaman liar yang dapat hidup sepanjang musim. Tumbuhan ini tidak banyak dikenal oleh masyarakat karena hanya tumbuh  pada tempat-tempat tertentu seperti  di  tanah  kering  sepanjang  tepi  jalan,  tanah  terlantar,  makam,  ladang-ladang  yang tandus  dan  tanah  berbatu.  Lenglengan  dikenal  masyarakat  dengan  berbagai  nama  seperti Paci-paci  (Sunda),  Lenglengan  (Jawa  Tengah),  dan  Serapnonor  (Madura)  (Depkes  RI., 2001),”Gumo dan Halkusha” (India) (Makhija, et.al ., 2011).
Selain  sebagai  herbal  dalam  pengobatan  diabetes,  masyarakat  menggunakan tanaman  ini  sebagai  obat  pendingin,  obat  sakit  kepala,  obat  kejang  pada  anak,  batuk  rejan, obat  cacing  atau  sebagai  tapal  pada  perut  dan  untuk  melunakkan  kapalan.  Berbagai penelitian  in  vivo  telah  membuktikan  bahwa  ekstrak  herba  lenglengan  memiliki  beberapa efek  farmakologi,  diantaranya  adalah  sebagai  hepatoprotektif  (Chandrashekar, et.al .,  2007), penyembuh  luka  (Saha, et.al .,  1997 a ),  antiinflamasi  (Chandrashekar  dan  Satyanadayana, 2013),  antipiretik,  antitusif  (Saha, et.al .,  1997 b ),  antidiare  serta  memiliki  efek psikofarmaklogis  sebagai  penenang  dan  relaksan  otot  (Makhija, et.al .,  2011),  antiulcer (Gupta, et.al ., 2010) serta anthelmintik (Gupta, et.al ., 2012). Hasil p enelitian  ini  melengka p i  berbagai  hasil p enelitian  terdahulu  tentang  aktivitas hi p oglikemik ekstrak herba lenglengan p ada model tikus diabetes mellitus. Dalam p enelitian ini,  FHDL  (62,5–250)  mg/KgBB  berhasil  menurunkan  kadar  glukosa  darah pre-prandial tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus p ada  hari  ke-7,  14  dan  28. Perlakuan  FHDL 250  mg/KgBB  juga  dapat  menurunkan  secara  signifikan  kadar  glukosa  darah post-prandial tikus neonatal  streptozotocin-induced  type-2 diabetes  mellitus .  Hasil p enelitian  sebelumnya menyim p ulkan bahwa ekstrak etanol daun lenglengan dosis 400 mg/KgBB secara signifikan menurunkan  kadar  glukosa darah sebesar 39,5% pada tikus diabetes yang diinduksi dengan streptozotosin  (Saha, et.al .,  1997 c ).  Dalam  penelitian  lainnya,  ekstrak  kloroform  bunga lenglengan  dosis  (150  –  250  mg/KgBB)  juga  dilaporkan  dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah  dan  HbA 1 C  tikus  diabetes  yang  diinduksi  aloksan  (Chandrashekar  dan  Prasanna, 2009). Selain itu, ekstrak etanol daun lenglengan dosis 252 mg/KgBB terbukti memiliki efek hipoglikemik sebesar 45,89% pada tikus jantan galur Wistar yang dibebani glukosa (Bhoja, 2009).

## 4. KESIMPULAN
FHDL secara signifikan berhasil menurunkan kadar glukosa darah pre-prandial dan post-prandial tikus neonatal  STZ-induced  type-2  diabetes  mellitus (p<0,05).  Perlakuan FHDL 62,5 mg/KgBB  selama 28 hari memiliki efek  antidiabetes  yang tinggi,  yaitu mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah pre-prandial tikus  sebesar  45,99%.  Perlakuan  FHDL  250 mg/KgBB  juga  signifikan  menurunkan  kadar  glukosa  darah post-prandial tikus  (p<0,05) dengan  efek  antidiabetes  pada  hari  ke-7,  14  dan  28  berturut-turut  adalah  sebesar  19,28%; 22,68% dan 24,92%.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kami sampaikan kepada DP2M Dikti Kementerian Pendidikan dan  Kebudayaan  Republik  Indonesia  melalui  Hibah  Penelitian  Desentralisasi Block  Grant Tahun 2013

## 6.  DAFTAR PUSTAKA
Arulmozhi,  D.K.,  Veeranjaneyulu,  A  and  Bodhankar,  S.L.,  2004,  Neonatal  Streptozotocin- Induced  Rat  Model  of  Type-2  Diabetes  Mellitus:  A  Glance, Indian  J.  Pharmacol. 36 (4), 217-221
Backer,  C.A  and  Brink,  R.B.C.V.D.,  1963, Flora  of  Java .  Volume  I  (III).  NV.  Noordhoff, Groningen, The Netherlands.
Bhoja,  Y.L.,  2009,  Efek  Hipoglikemik  Ekstrak  Etanolik  Daun  Lenglengan  ( Leucas lavandulaefolia JE. Smith) terhadap Tikus Jantan Galur Wistar yang diberi Glukosa Berlebih, Skripsi , Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim Semarang. Bonner-Weir, S., Trent, D.F., Honey, R.N. and Weir, G.C., 1981, Responses of Neonatal Rat Islets to Streptozotocin, Limited B-Cell Regeneration and Hyperglycemia, Diabetes , 30, 64-69
Chandrashekar, KS., Prasanna, KS., and Joshi, AB., 2007, Hepatoprotective  Activity of the Leucas  lavandulaefolia on  D(+)galactosamine-induced  Hepatic  Injury  in  Rats, Fitoterapia , 78 (6), 440-442
Chandrashekar,  K.S  and  Prasanna,  K.S.,  2009,  Hypoglycemic  Effect  of Leucas lavandulaefolia Willd  in  Alloxan-induced  Diabetic  Rats, J  Young  Pharmacists , 1, 326-9
Chandrashekar, K.S. and Satyanadayana D., 2013, Evaluation of Antiinflammatory Activity of  Petroleum  Ether  Extract  from Leucaslavandulaefolia Rees  in  Albino  Rats, AJCPT , 1 (7), 562-566
Garofano,  A,  Czernichow,  P.  And  Br´eant,  B.,  2000,  Impaired  B-cell  Regeneration  in Perinatally Malnourished Rats: a Study with STZ, FASEB J . 14, 2611–2617 Depkes  RI.,  2001, Inventaris  Tanaman  Obat  Indonesia  (I). Jilid  2,  Departemen  Kesehatan dan  Kesejahteraan  Sosial  RI,  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan, Jakarta, 201-202.
Greenspan,  F.S  and  Strewler,  G.J.,  1997, Basic  and  Clinical  Endokriniology ,  5 th Edn,
Prentice-Hall, Sydney, 605-609
Dzeufiet,  P.D.D.,  Ohanja,  D.Y.,  Tedong,  L.,  Asongalem,  E.A.,  Dimo,  T.,  Sokeng,  S.D  and Kamtchouing.,  2007,  Antidiabetic  Effect  of  Ceiba  Petandra  Extract  on Streptozotocin  Induced  Non-insulin  Dependent  Diabetec  (NIDDM)  Rats., Afr.  J. Trad. CAM 4 (1), 47 – 54
Gupta,  J.K.,  Agrawal,  K.K.,  Verma,  A.  and  Singh,  K.,  2012,  Investigation  of  In-vitro Anthelmintic  Activity  of L.  lavandulifolia , L.  cephalotes and L.  aspera , J.  of Pharmacy Res. 5(1), 212
Gupta,  J.K.,  Upmanyu,  K.,  Patnaik  A.K.,  Papiya,  M.M.,  2010,  Evaluation  of  Antiulcer Activity  of Leucas  lavandulifolia on  Mucosal  Lesion  in  Rat. Asian  Journal  of Pharmaceutical and Clinical Research , 3 (2), 110-120. Makhija, L.K., Chandrashekar, K.S., Richard, L. and Jaykumar, G., 2011, Phitochemical and Pharmacological  Profile  of Leucas  lavandulaefolia :  a  Riview, Res.  J.  Med.  Plant . 5 (5), 500-507
Saha, K., Mukherjee, PK., Das, J. and Saha, BP., 1997 a , Wound Healing Activity of Leucas lavandulaefolia Rees. J. Ethnopharmacol . 56 (2). 139-144
Saha, K., Mukherjee, PK., Murugesan, T., Saha, BP. And Pal, M., 1997 b , Studies on In Vivo Antitussive  Activity  of Leucas  lavandulaefolia Using  a  Cough  Model  Induced  by Sulfur Dioxide Gas in Mice. J. Ethnopharmacol . 57 (2), 89-92
Saha,  K.,  Mukherjee,  P.K.,  Das,  J.,  Mandal,  S.C.,  Pal,  M.  and  Saha,  M.P.,  1997 c , Hipoglychemic  Activity of Leucas lavandulaefolia Ress. in Streptozotocin-induced Diabetic Rats, Phytother. Res. 11, 463-466
Sumrall,  C  and  Bouldin,  M.J.,  2009, Diabetes  Mellitus  Management ,  in  Linn,  W.D., Wofford, M.R., O’keefe, M.E. and Posey, LM., Pharmacotherapy  in Primary Care, The Mc-Graw Hill Companies, Inc. New York, 279-292 Szkuldeski,  2001,  The  Mechanism  of  Alloxan  and  Streptozotocin  Action  in  B  Cells  of  the Rat Pancreas, Physiol. Res. 50 , 536-546
Triplitt, C.L., Reasner, C.A and Isley W.L., 2005, Diabetes Mellitus , in Dipiro, J.T., Talbert, R.L.,  Yee,  G.C.,  Matzke  G.R.,  Wells,  B.G., Posey,  L.M.,  (Eds.),  Pharmacotherapy: A Pathophysiologic Approach, 6 th Edition, The McGraw-Hill Companies, Inc., New York,  1369-1378.