## Arwana Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan
Profil hematologi calon induk bawal bintang ( Trachinotus blochii ) dengan induksi hormonal dan fitobiotik melalui pakan [Hematological profile of silver pompano ( Trachinotus blochii ) broodstock with hormonal induction and phytobiotic supplementation in feed]
Azizah 1 ,  Munti  Sarida 1,2* ,  Yudha  Trinoegraha  Adiputra 1,2 ,  Gregorius  Nugroho Susanto 1,3 , Agus Setyawan 1,2
1 Program Studi Magister Manajemen Wilayah Pesisir dan Laut, Pascasarjana, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro No 1, Kota Bandar Lampung, Lampung, Indonesia
2 Jurusan Perikanan dan Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro No 1, Kota Bandar Lampung, Lampung, Indonesia
3 Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro No 1, Kota Bandar Lampung, Lampung, Indonesia
ABSTRACT ú Hematological  profiles  are  useful  in  providing  information  regarding  the  fish's  response  to  stress, contaminants, and physiological conditions, particularly in silver pompano. The use of immune stimulant drugs, both hormonal and herbal, is known to enhance the immune system in fish. This study aims to evaluate the hematological profile  of  potential  broodstock  silver  pompano  through  hormonal  and  phyto-biotic  induction  via  feed.  The  study employed a completely randomized design (CRD) conducted in two research experiments. The first experiment involved hormonal induction using estradiol-17 β on female potential broodstock silver pompano, consisting of three treatments: E1 (0 mg/kg), E2 (20 mg/kg), and E3 (60 mg/kg). The second experiment involved phyto-biotic induction using Tribulus terrestris extract (ETT) and gonadotropin hormone, consisting of five treatments: T1: ETT 0 mg/kg feed, T2: ETT 50 mg/kg feed, T3: ETT 250 mg/kg feed, T4: ETT 50 mg/kg feed + gonadotropin 1000 IU/kg body weight, and T5: ETT 250 mg/kg feed + gonadotropin 500 IU/kg body weight. Each experiment was replicated eight times per treatment. Hormonal induction using estradiol-17 β through feed at a dosage of 20 mg/kg resulted in the highest total leukocyte count in female potential broodstock silver pompano. Additionally, the administration of phyto-biotics with Tribulus terrestris extract through feed was found to increase the total erythrocyte count and hematocrit level in male potential broodstock silver pompano, with the optimal dosage being 250 mg/kg feed.
Key words ú Silver pompano, estradiol-17 β , phytobiotic, hematology, Tribulus terrestris
ABSTRAK ú Profil hematologi berguna dalam memberikan informasi terkait reaksi ikan terhadap stres, kontaminan, dan keadaan fisiologis, khususnya pada bawal bintang. Penggunaan obat perangsang kekebalan tubuh baik secara hormonal maupun herbal diketahui dapat meningkatkan sistem kekebalan tubuh pada ikan. Penelitian ini bertujuan untuk  mengevaluasi  profil  hematologi  calon  induk  bawal  bintang  dengan  induksi  hormonal  dan  fitobiotik  melalui pakan. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) yang dilakukan dalam dua percobaan penelitian. Penelitian pertama: induksi hormonal dengan estradiol-17 β pada calon induk bawal bintang betina yang terdiri dari tiga perlakuan: E1 (0 mg/kg), E2 (20 mg/kg), dan E3 (60 mg/kg). Percobaan kedua: induksi fitobiotik ekstrak Tribulus terrestris  (ETT) dan hormon gonadotropin yang terdiri dari lima perlakuan: T1: ETT 0 mg/kg pakan, T2: ETT 50 mg/kg pakan, T3: ETT 250 mg/kg pakan, T4: ETT 50 mg/kg pakan+gonadotropin 1000 IU/kg tubuh, dan T5: ETT 250 mg/kg pakan+gonadotropin 500 IU/kg tubuh; masing-masing percobaan mengggunakan ulangan individu sebanyak delapan ekor/perlakuan. Induksi hormonal dengan estradiol-17 β melalui pakan dengan dosis 20 mg/kg pakan menghasilkan total  leukosit  tertinggi  pada  calon  induk  bawal  bawal  betina.  Serta,  pemberian  fitobiotik  dengan  ekstrak Tribulus terretris melalui pakan dapat meningkatkan total eritrosit dan kadar hematokrit calon induk bawal bintang jantan dengan dosis terbaik yaitu 250 mg/kg pakan.
Kata kunci ú Bawal bintang, estradiol-17 β , fitobiotik, hematologi, Tribulus terrestris
Received ú 10 Maret 2024, Accepted ú 16 April 2024, Published ú 7 Mei 2024. *Koresponden ú Munti Sarida, Jurusan Perikanan dan Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro No 1, Kota Bandar Lampung, Lampung, Indonesia. Email: munti.sarida@fp.unila.ac.id Kutipan ú Azizah, A.,  Sarida,  M., Adiputra, Y.T.,  Susanto,  G.N.,  Setyawan, A.  (2024).  Profil  hematologi  calon  induk bawal bintang ( Trachinotus blochii) dengan induksi hormonal dan fitobiotik melalui pakan. Arwana: Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan, 6(1), 75-82.
p-ISSN (Media Cetak) ú 2657-0254 e-ISSN (Media Online) ú 2797-3530
© 2024 Oleh authors. Arwana: Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan . Artikel ini bersifat open access yang  didistribusikan  di  bawah  syarat  dan  ketentuan Creative  Commons  Attribution-ShareAlike  4.0  International License .
Research Article doi: 10.51179/jipsbp.v6i1.2521
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82

## PENDAHULUAN
Akuakultur  global  saat  ini  merupakan  salah  satu sektor  produksi  pangan  dengan  pertumbuhan tercepat,  menyumbang  50%  dari  total  pasokan pangan (FAO, 2018; Okocha et al., 2018; Ibrahim et al.,  2020) .  Wabah  penyakit  menimbulkan  ancaman yang signifikan terhadap masa depan dan perluasan industri  akuakultur.  Akibatnya,  pengembangan strategi pencegahan penyakit menjadi penting diteliti untuk pengendalian wabah penyakit pada akuakultur.  Saat  ini  banyak  penelitian  untuk mengidentifikasi senyawa yang mampu memodulasi sistem  kekebalan  ikan,  yang  bertujuan  untuk meningkatkan pengelolaan kesehatan. Baru-baru ini, kehadiran berbagai macam zat, baik alami maupun antropogenik dalam media perairan telah membangkitkan minat untuk menentukan pengaruhnya  pada  berbagai  aspek  biologi  ikan, termasuk hematologi.
Profil  hematologi  merupakan  alat  yang  berguna untuk  menentukan  posisi  kesejahteraan  berbagai organisme akuatik, baik ikan budidaya maupun ikan liar (Sidiq & Ahmed, 2020; Jan & Ahmed, 2021; Jan et  al.,  2021) .  Indeks  hematologi  memberikan informasi  berharga  untuk  mempelajari  reaksi  ikan terhadap  stres,  kontaminan,  hipoksia,  nutrisi,  dan habitat, serta ekologi dan keadaan fisiologis (Ahmed &  Sheikh,  2020;  Ahmed et  al.,  2019;  Fazio,  2019, Suljevic  &  Mitrasinovic-Brulic,  2020) .  Beberapa faktor  dapat  mempengaruhi  nilai  dari  profil hematologi pada ikan, diantaranya yaitu umur, pola makan, jenis kelamin, spesies dan strain ikan, siklus kematangan seksual, kepadatan penebaran dan cara pemberian  pakan,  variasi  musim,  fotoperiode, keadaan  nutrisi,  lokasi  geografis,  penyakit,  variasi fisika-kimia, suhu dan salinitas, kondisi pengambilan sampel,  jenis  anestesi  dan  teknik  laboratorium, penanganan dan pengangkutan, pengumpulan darah, penanganan,  waktu  penyimpanan  sampel  darah, antikoagulan yang digunakan (Cieplinski et al., 2019; Ahmed et al., 2020; Jan et al., 2021) .
Stimulasi  hormonal  pada  kekebalan  tubuh  dan hematologi  pada  ikan  biasanya  menggunakan  dua jenis agen imunodulator: sintesis dan herbal (Saha et al.,  2024) .  Penggunaan  obat  perangsang  kekebalan tubuh baik secara hormonal maupun herbal di sektor akuakultur  telah  menyebar  ke  seluruh  dunia, khususnya  untuk  meningkatkan  sistem  kekebalan tubuh  dan  meningkatkan  toleransi  ikan  terhadap berbagai  penyakit  menular.  Banyak  penelitian
menunjukkan  bahwa  stimulan  kekebalan  dengan hormonal  maupun  fitobiotik  dapat  meningkatkan mekanisme  perlindungan  kekebalan  spesifik  dan non-spesifik serta mengurangi kerugian ikan akibat berbagai patogen (Fawole et al., 2024) .
Steroid merupakan metabolit sekunder yang berasal dari  tumbuhan  yang  dapat  digunakan  sebagai komponen  aditif  alami  dalam  pakan  atau  fitobiotik (Kuralkar  &  Kuralkar,  2021) .  Steroid  mengatur beberapa  proses  biologis,  termasuk  perkembangan embrio,  diferensiasi  jenis  kelamin,  reproduksi, metabolisme,  serta  respons  imun  dan  stres  pada vertebrata (Tokarz et  al.,  2015;  Rajakumat  & Senthilkumaran, 2020) . Mengenai respon imun, telah diketahui  selama  bertahun-tahun  bahwa  steroid bekerja  pada  semua  jenis  sel  imun  melalui mekanisme  yang  bergantung  pada  reseptor  steroid (Chaves-Pozo et  al.,  2018) .  Estrogen  dan  androogen termasuk dalam golongan steroid yang terlibat dalam regulasi  oogenesis,  perkembangan  testis  dan beberapa  aspek  reproduksi  lainnya.  Pada  ikan, informasi ini lebih terbatas walaupun telah diketahui selama  bertahun-tahun  bahwa  estrogen  dan androgen  mengatur  sistem  kekebalan  ikan (Wojnarowski et  al.,  2022;  Maciuszek  et  al.,  2020; Rahdari et  al.,  2020; Ż arski et  al.,  2020) .  Di  antara stimulus hormonal yang digunakan dalam budidaya perikanan,  herbal  cukup  menjanjikan  karena kecenderungannya  untuk  meningkatkan  kinerja pertumbuhan, kekebalan ikan, dan sifat antimikrobanya,  karena  merupakan  alternatif  yang baik terhadap pengobatan kimia dan antibiotik yang dapat  mengurangi  kerentanan  terhadap  penyakit. Keunggulan dari penggunaan tanaman obat (herbal) yaitu ramah lingkungan, hemat biaya, memiliki efek samping  minimal,  dan  mendapat  perhatian  dalam pencegahan dan pengobatan penyakit ikan (Elumalai et al., 2020) .
Salah satu bahan fitobiotik yang dapat diekstrak dari tumbuhan  yaitu Tribulus  terrestris (Gultepe et  al., 2014) . Tribulus terrestris memiliki kandungan bahan aktif,  seperti  steroid  saponin,  tanin,  flavonoid,  dan alkaloid yang dapat digunakan sebagai imunostimulan  alami ( Ș tef ă nescu et  al.,  2020) . Berdasarkan penelitian yang dilakukan pada ekstrak Tribulus terrestris (Yilmaz et al., 2014) pada ikan nila ( Oreochromis  mossambicus)  yang  diinfeksi  bakteri Streptococcus iniae melalui metode pemberian pakan dengan dosis 200; 400; 600; 800 mg/kg diperoleh hasil sintasan  tertinggi  pada  dosis  400  mg/kg,  yaitu sebesar  7,22%  per  hari. Hassona et  al.  (2020) ,
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82
menyatakan  bahwa  ekstrak T.  terrestris  pada parameter  hematologic  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  signifikan  (P<0,5)  di  antara kelompok  eksperimen,  yaitu  hemoglobin,  sel  darah merah, ukuran rata-rata sel darah merah (MCV) dan total  sel  darah  putih  dengan  dosis  ekstrak T. terrestris yang paling berpengaruh yaitu 750 mg/kg pakan.
Bawal bintang Trachinotus blochii merupakan salah satu  jenis  ikan  air  laut  yang  potensial  untuk dibudidayakan  karena  mempunyai  pertumbuhan yang  cepat  dan  mudah  dalam  pemeliharaannya (Prabu et  al., 2021; Weirich et  al, 2021) .  Mengingat kandungan gizi yang tinggi dan rasanya yang enak, ikan  ini  sangat  diminati  baik  pasar  lokal  maupun internasional seperti di Singapura, Taiwan, Cina dan Hongkong (Ebeneezar et  al.,  2020) .  Seperti  pada spesies  budidaya  lainnya,  praktik  budidaya  intensif pada  ikan  bawal  bintang  telah  mengakibatkan meningkatnya wabah penyakit yang disebabkan oleh patogen berbahaya. Wabah penyakit yang disebabkan oleh patogen berbahaya merupakan tantangan besar dan  luas  terhadap  budidaya  air  laut  dalam  skala global. Oleh karena itu, pengelolaan status fisiologis induk  ikan  menjadi  sangat  penting.  Pengecekan profil  hematologi  adalah  pendekatan  paling sederhana  dan  komprehensif  untuk  mengetahui status kesehatan ikan. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi  profil  hematologi  calon  induk  bawal bintang  ( Trachinotus  blochii)  dengan  induksi hormonal dan fitobiotik melalui pakan.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilaksanakan pada Juli-Agustus 2023, bertempat di Balai Besar Perikanan Budidaya Laut Lampung, Jl. Yos Sudarso, Hanura, Kecamatan Teluk Pandan, Kabupaten Pesawaran.

## Ikan Uji
Ikan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah calon  induk  bawal  bintang  betina  dengan  panjang rata-rata 51,96 ±1,96 cm dan bobot rata-rata 2408,71 ± 213,38 g, sedangkan jantan memiliki panjang rata- rata  46,53  ±  2,40  cm  dan  bobot  rata-rata  1792,88  ± 286,73  g.  Ikan  yang  digunakan  sebanyak  44  ekor calon induk bawal bintang jantan dan 28 ekor bawal bintang betina. Ikan diperoleh dari stok Balai Besar Perikanan  Budidaya  Laut  (BBPBL)  Lampung. Sebelum  diberikan  perlakuan,  ikan  terlebih  dahulu
diadaptasikan dengan kondisi lingkungan yang baru selama 7 hari.

## Rancangan Percobaan
Selama pemeliharaan wadah yang digunakan berupa keramba  jaring  apung  berukuran  3  x  3  x  3  m 3 sebanyak  8  unit.  Penelitian  ini  menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) yang dilakukan dalam dua percobaan penelitian secara terpisah. Penelitian pertama  menggunakan  induksi  hormonal  dengan hormon estradiol-17 β pada calon induk bawal bintang betina. yang terdiri dari 3 perlakuan dengan ulangan individu sebanyak 8 ekor per perlakuan: E1 (0 mg/kg), E2 (20 mg/kg), dan E3 (60 mg/kg).
Percobaan  kedua  menggunakan  induksi  fitobiotik ekstrak Tribulus  terrestris  (ETT)  dan  hormon gonadotropin  pada  induk  jantan  yang  terdiri  dari  5 perlakuan dengan ulangan individu sebanyak 8 ekor per  perlakuan:    Berikut  ini  adalah  perlakuan  yang digunakan dalam penelitian: T1: ETT 0 mg/kg pakan, T2: ETT 50 mg/kg pakan, T3: ETT 250 mg/kg pakan, T4: ETT 50 mg/kg pakan + gonadotropin 1000 IU/kg tubuh, dan T5: ETT 250 mg/kg pakan + gonadotropin 500  IU/kg  tubuh.  Pemeliharaan  calon  induk  bawal bintang yang diberi pakan hormon dilakukan selama 30 hari. Frekuensi pemberian pakan dua kali sehari pada  pagi  (08.00  WIB),  dan  siang  (14.00  WIB). Pemberian  pakan  sebanyak  2%  dari  total  bobot biomassa ikan.

## Prosedur Pelaksanaan Pakan Uji
Pakan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah pakan pakan pelet komersil ‘Megami GR-10’ dengan protein 50%. Cara penambahan hormon estradiol-17 β dalam  pakan  yaitu  bubuk  estradiol-17 β komersil dengan  merk  dagang  ‘Argent’  ditimbangan  sesuai dengan  perlakuan.  Kemudian,  dilarutkan  dalam ethanol 96% (Vidal-López et al., 2019). Setiap 100 ml larutan  estradiol  disemprotkan  pada  1  kg  pakan secara merata, lalu pakan dibiarkan kering udara.
Pencampuran  ekstrak Tribulus  terrestris  dilakukan sesuai dosis 50 dan 250 mg/kg dengan etanol 90% dan kemudian dicampurkan gliserin sebanyak 0,50 g/100 ml  etanol  agar  pakan  tidak  mudah  larut  dalam  air (El-Greisy et al., 2012). Setiap 100 ml larutan ekstrak Tribulus  terrestris  disemprotkan  pada  1  kg  pakan secara  merata,  lalu  pakan  dibiarkan  kering  udara. Pakan  disimpan  dalam  suhu  -20 ℃ dan  dipisahkan wadah antar perlakuan, kemudian diberi label.
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82

## Pengambilan Sampel Darah
Pengambilan  darah  ikan  uji  pada  awal  penelitian menggunakan 4 ekor ikan dari stok, sedangkan pada akhir  penelitian  menggunakan  2  ekor  ikan  uji  per perlakuan.  Ikan  yang  diambil  sampel  darahnya, terlebih  dahulu  dibius  dengan  menggunakan anastesi. Ikan yang pingsan, darahnya diambil pada bagian  pangkal  ekor  sebanyak  1  ml  dengan menggunakan syringe  kapasitas  1  ml  yang  telah dibilas dengan anti koagulan EDTA 10%, kemudian darah dimasukkan ke dalam microtube volume 1,5 ml dan disimpan dalam cool box.

## Parameter Penelitian Total Eritrosit
Penghitungan  dilakukan  dengan  mengencerkan darah  dengan  larutan  Hayem  di  dalam  pipet pencampur berskala maksimum 101. Dalam pipet ini terdapat  bulir  berwarna  merah  yang  berfungsi sebagai  pengaduk.  Darah  dihisap  dengan  pipet pencampur hingga skala 0,5 lalu dengan pipet yang sama dihisap larutan Hayem hingga skala 101. Pipet kemudian  digoyang  membentuk  angka  delapan selama  10-15  menit  agar  darah  tercampur  secara merata.  Sebelum  dilakukan  penghitungan,  larutan pada bagian ujung pipet yang tidak teraduk dibuang, selanjutnya  diteteskan  ke  dalam  haemositometer yang  telah  dilengkapi  dengan  kaca  penutup  dan diamati  di  bawah  mikroskop.  Penghitungan dilakukan  pada  5  kotak  kecil  haemositometer, perhitungan rumus ditentukan dengan perhitungan (Parida et al., 2012) adalah sebagai berikut:
! eritrosit = ! sel eritrosit terhitung  × faktor pengencer  × 10 ! sel/mm ³

## Total Leukosit
Penghitungan  dilakukan  dengan  mengencerkan darah  dengan  larutan  Turks  di  dalam  pipet pencampur berskala maksimum 11. Darah dicampur dengan pipet pencampur hingga skala 0,5 kemudian pipet yang sama dihisap larutan Turks hingga skala 11.  Pipet  kemudian  digoyang  membentuk  angka delapan  selama  10-15  menit  agar  darah  tercampur secara  merata.  Sebelum  dilakukan  penghitungan, larutan pada bagian ujung pipet yang tidak teraduk dibuang,  tetesan  berikutnya  dimasukkan  ke  dalam haemositometer  yang  telah  dilengkapi  dengan  kaca penutup  kemudian  diamati  di  bawah  mikroskop. Penghitungan  dilakukan  pada  4  kotak  besar haemositometer,  perhitungan  rumus  ditentukan dengan  perhitungan (Parida et  al.,  2012) adalah sebagai berikut:
! leukosit = ! sel leukosit terhitung  × 50 (faktor pengencer) sel/mm ³
Hematokrit
Pengukuran hematokrit dilakukan dengan memasukkan  sampel  darah  dalam  tabung  mikro hematokrit  sampai  kira-kira  3/4  bagian  tabung. Kemudian,  pada  bagian  ujung  tabung  disumbat dengan cristoseal lalu disentrifugasi selama 15 menit dengan  kecepatan  3.500  rpm.  Setelah  itu  diukur persentase dari nilai hematokrit. Perhitungan rumus ditentukan dengan perhitungan (Witeska et al., 2022) adalah sebagai berikut:
Hematokrit = Panjang volume sel darah merah yang mengendap Panjang total volume darah dalam tabung × 100%

## Analisis Data
Data parameter yang diperoleh disajikan dalam rata- rata±standard  error,  ditabulasi  menggunakan Microsoft  Excel  2016  dan  dianalisis  secara  statistik dengan analisis sidik ragam (anova). Apabila berbeda nyata  akan  diuji  lanjut  menggunakan  uji  Duncan dengan tingkat kepercayaan 90%.

## HASIL
Profil  hematologi  calon  induk  bawal  bintang  betina yang diberi perlakuan hormon estradiol-17 β disajikan pada Tabel 1. Profil hematologi yang diamati adalah profil hematologi dari calon induk bawal bintang pada awal  dan  akhir  penelitian.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan bahwa pemberian perlakuan memberikan  pengaruh  yang  signifikan  (p<0,10) terhadap total leukosit, sedangkan total eritrosit dan kadar hematokrit tidak memberikan pengaruh yang signifikan  (p>0,010).  Total  eritrosit  pada  penelitian ini berkisar 0,48-0,71 x10 6 sel/mm 3 . Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  total  leukosit  yang  dihasilkan meningkat  pada  akhir  penelitian.  Pemberian perlakuan  hromon  estradiol-17 β pada  calon  induk bawal  bintang  betina  memberikan  pengaruh terhadap  total  leukosit  pada  akhir  penelitian (p<0,10).  Rata-rata  total  leukosit  dari  perlakuan estradiol-17 β dengan  dosis  20  mg/kg  pakan memberikan  hasil  yang  lebih  tinggi  dibandingkan perlakuan  lainnya  sebesar  65.15±7.25  x10 3 sel/mm 3 . Kadar hematokrit calon induk bawal bintang betina yang diberi perlakuan hormon estradiol-17 β memiliki kisaran 37,55-41,53%.
Profil  hematologi  calon  induk  bawal  bintang  jantan yang diberi perlakuan ekstrak Tribulus terrestris dan hormon  gonadotropin  disajikan  pada  Tabel  2.  Profil
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82
hematologi  yang  diamati  adalah  profil  hematologi dari calon induk bawal bintang pada awal dan akhir penelitian.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa
total eritrosit yang dihasilkan meningkat pada akhir penelitian.
Tabel 1 . Rata-rata (±SE) total eritrosit, leukosit, dan hematokrit calon induk bawal bintang ( Trachinotus blochii ) betina dengan pemberian dosis estradiol-17 β yang berbeda melalui pakan.
Parameter Pengamatan Estradiol (mg/kg pakan) 0 20 60 Total eritrosit (x10 6 sel/mm 3 ) Awal 0.48±0.15 a 0.48±0.15 a 0.48±0.15 a Akhir 0.54±0.09 0.71±0.16 a 0.61±0.19 a Total leukosit (x10 3 sel/mm 3 ) Awal 12.81±2.89 a 12.81±2.89 a 12.81±2.89 a Akhir 42.90±2.85 b 65.15±7.25 a 46.83±2.53 b Hematokrit (%) Awal 37.55±6.25 a 37.55±6.25 a 37.55±6.25 a Akhir 37.58±3.10 a 41.53±7.63 a 38.52±2.16 a Keterangan: Rata-rata dengan huruf superskrip berbeda menunjukkan adanya perbedaan nyata yang signifikan (p < 0.10).
Pemberian perlakuan ekstrak Tribulus terrestris dan hormon gonadotropin pada calon induk bawal bintang memberikan pengaruh terhadap total eritrosit pada akhir  penelitian  (p<0,10).  Rata-rata  total  eritrosit tertinggi calon induk bawal bintang jantan yaitu pada perlakuan  T3  sebesar  0,88  x10 6 sel/mm 3 ,  disusul perlakuan T5 (0,76 x10 6 sel/mm 3 ), perlakuan T4 (0,75
x10 6 sel/mm 3 ), perlakuan T1 (0,54 x10 6 sel/mm 3 ), dan perlakuan T2 (0,44 x10 6 sel/mm 3 ). Total leukosit pada tiap  perlakuan  menunjukkan  hasil  berkisar  159,16- 219,60 x10 3 sel/mm 3 . Perlakuan yang diberikan pada calon  induk  bawal  jantan  memberikan  pengaruh yang  sama  terhadap  total  leukosit  pada  awal  dan akhir pemeliharaan (p>0,10).
Tabel 2. Rata-rata (±SE) total eritrosit, leukosit, dan hematokrit calon induk bawal bintang ( Trachinotus blochii ) jantan dengan pemberian ekstrak Tribulus terrestris (ETT) dan hormon gonadotropin.
Pengamatan data Perlakuan Total  eritrosit  (x10 6 sel/mm 3 ) Total  leukosit  (x10 3 sel/mm 3 ) Hematokrit (%) Awal (H0) T1 0,36±0.10 a 159,16±5,14 a 36,35±13,89 a T2 0,36±0.10 a 159,16±5,14 a 36,35±13,89 a T3 0,36±0.10 a 159,16±5,14 a 36,35±13,89 a T4 0,36±0.10 a 159,16±5,14 a 36,35±13,89 a T5 0,36±0.10 a 159,16±5,14 a 36,35±13,89 a Akhir (H31) T1 0,54±0,05 bc 164,80±67,20 a 84,52±1,19 ab T2 0,44±0,14 c 160,85±46,15 a 80,41±2,64 b T3 0,88±0,06 a 219,60±68,40 a 89,01±1,32 a T4 0,75±0.19 ab 171,73±3,94 a 87,76±2,26 a T5 0,76±0,07 ab 134,40±2,85 a 88,70±2,43 a
Keterangan: T1: ETT 0 mg/kg pakan; T2: ETT 50 mg/pakan; T3: ETT 250 mg/kg pakan; T4: ETT 50 mg/kg pakan + gonadotropin 1000 IU/kg bobot tubuh; T5: ETT 250 mg/kg pakan + gonadotropin 500 IU/kg bobot tubuh. Rata-rata dengan huruf superskrip berbeda menunjukkan adanya perbedaan nyata yang signifikan (p < 0.10).
Kadar hematokrit calon induk bawal bintang jantan yang diberi perlakuan ekstrak Tribulus terrestris dan hormon  gonadotropin  selama  penelitian  mengalami peningkatan  pada  akhir  penelitian  selama  masa pemeliharaan  30  hari.  Kadar  hematokrit  pada  tiap perlakuan menunjukkan hasil berkisar 36,35-89,01%, dengan  kadar  hematokrit  tertinggi  pada  perlakuan T3 sebesar 89,01±1,32%. Berdasarkan hasil analisis sidik  ragam  diketahui  bahwa  pemberian  ekstrak Tribulus  terrestris  dan  hormon  gonadotropin memberikan  pengaruh  nyata  (p<0,10)  terhadap kadar hematokrit calon induk bawal bintang jantan.

## PEMBAHASAN
Karakteristik  hematologi  darah  ikan  digunakan untuk  mengevaluasi  status  kesehatan  ikan  secara keseluruhan, baik gejala kronis, gangguan metabolisme,  dan  defisiensi.  sebelum  mereka terwujud  di  lingkungan  (Sheikh  &  Ahmed.  2019). Beberapa peneliti menemukan bahwa ikan memiliki kadar yang lebih besar untuk penanda hematologisnya (Ahmed et al., 2020) . Selain aktivitas ikan,  diketahui  bahwa  jenis  kelamin  mempunyai pengaruh  yang  signifikan  terhadap  nilai  parameter hematologi  ikan (Gabriel et  al., 2004; Ahmed  et  al., 2019;  Jan  &  Ahmed,  2021;  Jan et  al.,  2021) .  Pada penelitian ini semua indeks hematologi utama seperti
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82
total  eritrosit,  total  leukosit,  dan  kadar  hematokrit lebih  besar  pada  calon  induk  bawal  bintang  jantan yang  diberi  fitobiotik  ekstrak Tribulus  terrestris dibandingkan calon induk bawal bintang betina yang diinduksi secara hormonal dengan hormon estradiol- 17 β .
Menurut Zu  &  Su  (2022) ,  eritrosit  merupakan  sel darah  yang  paling  melimpah  pada  ikan.  Total eritrosit  merupakan  parameter  diagnostik  penting, bergantung  pada  berbagai  faktor  lingkungan, misalnya  lingkungan.  suhu  air (Paul et  al.,  2019) . Pada  peneltian  ini  total  eritrosit  calon  induk  bawal bintang jantan yang diberi fitobiotik ekstrak Tribulus terrestris lebih tingi dibandingkan calon induk bawal bintang  betina  yang  diinduksi  secara  hormonal dengan  estradiol-17 β .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa stimulan fitobiotik ekstrak Tribulus terrestris dapat meningkatkan  mekanisme  perlindungan  kekebalan non-spesifik  serta  meningkatkan  kekebalan  tubuh akibat  berbagai  patogen.  Diketahui  bahwa Tribulus terrestris  sangat  kaya  akan  zat  dengan  aktivitas biologis potensial seperti steroid glikosida (saponin), protodioscin, glikosida, alkaloid dan flavonoid (Saiyed et  al.,  2016;  Shahid  et  al.,  2016;  Zu  et  al.,  2017) . Banyak juga faktor biologis yang dapat mempengaruhi,  seperti  aktivitas  ikan,  umur,  jenis kelamin,  status  nutrisi,  dan  status  reproduksi,  dan dapat  berbeda  di  antara  berbagai  populasi  spesies yang  sama.  Total  eritrosit  biasanya  berkisar  antara 0,5-1,5 × 10 6 / µ L  pada  spesies  yang  kurang  aktif hingga 3,0-4,2 x 10 6 / µ L pada spesies yang lebih aktif (Witeska,  2013) .  Menurut Fazio et  al.  (2019) ,  total eritrosit  yang  ditentukan  secara  otomatis  pada spesies ikan berbeda berkisar antara 0,81 hingga 3,73 × 10 6 / µ L.  Total  eritrosit  juga  dapat  menunjukkan variabilitas  musiman,  bahkan  jika  ikan  dipelihara dalam kondisi laboratorium (Kondera et al., 2019) .
Calon  induk  bawal  bintang  jantan  yang  diberi fitobiotik  ekstrak Tribulus  terrestris  memiliki  total leukosit  lebih  besar  sehingga  kemampuan  untuk bereaksi dengan cepat terhadap berbagai perubahan yang  terjadi  dalam  medium  sebagai  akibat  dari transformasi  xenobiotik,  yang  berarti  bahwa  ikan jantan  memiliki  toleransi  yang  lebih  tinggi  untuk menghadapi stres racun yang berbahaya dibandingkan  dengan  ikan  betina (Nkpolu- Oroworkwo et  al,  2017) .  Total  leukosit  pada  ikan menunjukkan  rentang  yang  luas  dan  sangat bervariasi bahkan dalam spesies yang sama. Fazio et al. (2019) melaporkan bahwa total leukosit yang pada spesies  ikan  yang  berbeda  berkisar  antara  9,41
hingga  829,33 × 10 3 /µL.  Selain  itu,  banyak  faktor intrinsik dan lingkungan yang dapat mempengaruhi jumlah  leukosit  pada  ikan  seperti  jenis  kelamin, musim, kebiasaan makan, stres, polusi perairan, dan penyakit (Ahmed et al., 2020) .
Pengukuran  kadar  hematokrit  dijadikan  sebagai salah  satu  parameter  untuk  me-ngetahui  tingkat kesehatan pada ikan. Berdasarkan hasil pengamatan diketahui bahwa nilai kadar hematokrit calon induk bawal  bintangjantan  yang  diberi  fitobiotik  ekstrak Tribulus terrestris lebih tinggi dibandingkan dengan calon  induk  bawal  bintang  betina  yang  diinduksi secara  hormonal  dengan  hormon  estradiol-17 β . Menurut Fajriani et  al.  (2017) menyatakan  bahwa kandungan  antioksidan  pada  ekstrak Tribulus terrestris yang diberikan berperan dalam menetralisir radikal bebas dan berperan memperbaiki  struktur  sel  darah.  Menurut Grant (2015) ,  nilai  hematokrit  untuk  spesies  ikan  yang berbeda (termasuk berbagai teleost dan elasmobranch)  berkisar  antara  9,4  hingga  33,53%. Menurut Fazio et al. (2019) , kadar hematokrit yang diukur  secara  otomatis  pada  spesies  ikan  yang berbeda  adalah  antara  17,80  hingga  53,33%.  Nilai hematokrit  bergantung  pada  jumlah  dan  ukuran eritrosit dan dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor, seperti kualitas air, obat-obatan dan beberapa infeksi penyakit.

## KESIMPULAN
Induksi  hormonal  dengan  estradiol-17 β melalui pakan  dengan  dosis  20  mg/kg  pakan  menghasilkan total leukosit tertinggi pada calon induk bawal bawal betina.  Serta,  pemberian  fitobiotik  dengan  ekstrak Tribulus  terretris  yang  diberikan  melalui  pakan dapat  meningkatkan  total  eritrosit  dan  kadar hematokrit calon induk bawal bintang jantan dengan dosis terbaik yaitu 250 mg/kg pakan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Proyek  ini  didanai  oleh  Direktorat  Riset,  Teknologi, dan  Pengabdian  Masyarakat  –  Kementerian Pendidikan,  Kebudayaan,  Riset  dan  Teknologi  no: 0557/E5.5/AL.04/2023. Penulis mengucapkan terima kasih  kepada  Yuwana  Puja,  S.Pi.,  M.Ling.  dan Supriya,  A.Pi.,  M.Si.,  serta  staf  Balai  Perikanan Budidaya  Laut  Lampung  yang  telah  mendukung kegiatan penelitian ini.
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82

## DAFTAR PUSTAKA
Akmal, Y., Humairani, R., & Zulfahmi, I. (2020). Penerapan Teknologi Closed system Pada Pembudidaya Udang Vaname  (Litopenaeus  vannamei)  Kelompok  “Laut Mina Budidaya” Bireuen, Aceh. Jurnal Solma, 9(2), 249-260.
Ahmed, I., Reshi, Q. M., & Fazio, F. (2020). The influence of the  endogenous  and  exogenous  factors  on hematological parameters in different fish species: a review. Aquaculture international, 28, 869-899. doi: 10.1007/s10499-019-00501-3
Ahmed,  I.,  &  Sheikh,  Z.  A.  (2020).  Comparative  study  of hematological parameters of snow trout Schizopyge plagiostomus  and  Schizopyge  niger  inhabiting  two different habitats. The European Zoological Journal, 87(1), 12-19. doi: 10.1080/24750263.2019.1705647
Ahmed, I., Sheikh, Z. A., Wani, G. B., & Shah, B. A. (2019). Sex  variation  in  hematological  and  serum biochemical  parameters  of  cultured  Chinese  silver carp,  Hypophthalmichthys  molitrix. Comparative Clinical Pathology, 28, 1761-1767. doi: 10.1007/s00580-019-03017-7
Blaxhall,  P.  C.,  &  Daisley,  K.  W.  (1973).  Routine haematological  methods  for  use  with  fish blood. Journal of fish biology, 5(6), 771-781.
Cipolla-Neto, J., Amaral, F. G., Soares Jr, J. M., Gallo, C. C.,
Furtado, A., Cavaco, J. E., Gonçalves, I., Santos, C. R. A., & Quintela, T. (2022). The crosstalk between melatonin and sex steroid hormones. Neuroendocrinology, 112, 115-129. doi:
10.1159/000516148
Chokkalingam, P., Dhandapani, H., Sekar, K., Durairaj, P.,
&  Hari,  R.  (2020).  Enzymatic  and  nonenzymatic antioxidant  activity  of  the  saponin  rich  butanol extract  of  Tribulus  terrestris  fruits  against tetrachlorodibenzo-p-dioxin induced oxidative stress in  male  Wistar  rats. Biomedicine,  40,  281-285. doi: 10.51248/.v40i3.8
Ebeneezar, S., Vijayagopal, P., Srivastava, P. P., Gupta, S.,
Varghese,  T.,  Prabu,  D.  L.,  &  Wilson,  L.  (2020). Optimum  dietary  methionine  requirement  of  ju- venile  silver  pompano,  Trachinotus  blochii (Lacepede,  1801). Animal  Feed  Science  and Technology. 268, 114592. doi: 10.1016/j.anifeedsci.2020.114592
El-Greisy,  Z.  A.,  &  El-Gamal,  A.  E.  (2012).  Monosex production  of  tilapia,  Oreochromis  niloticus  using different  doses  of  17 α -methyltestosterone  with  res- pect  to  the  degree  of  sex  stability  after  one  year  of treatment. The  Egyptian  Journal  of  Aquatic
Research. 38(1), 59-66. doi: 10.1016/j.ejar.2012.08.005
Elumalai, P., Kurian, A., Lakshmi, S., Faggio, C., Esteban, M. A., & Ringø, E. (2020). Herbal immunomodulators in  aquaculture. Reviews  in  Fisheries  Science  & Aquaculture, 29(1), 33-57. doi: 10.1080/23308249.2020.1779651 FAO. (2018). The State of World Fisheries and Aquaculture 2018 - Meeting the Sustainable Development Goals. Rome. Licence: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.
Fawole, F. J., Nazeemashahul, S., Chanu, T. I., Sharma, A., Kazeem, G. O., Ferosekhan, S., & Kinnera, T. (2024). Application  of  Immunostimulants  for  Aquaculture Health  Management.  In Immunomodulators  in
Aquaculture  and  Fish  Health (pp.  103-115).  CRC Press.
Fazio, F. (2019). Fish hematology analysis as an important tool of aquaculture: a review. Aquaculture, 500, 237- 242. doi: 10.1016/j.aquaculture.2018.10.030 Hassona, N. N., Zayed, M. M., Eltras, W. F., & Mohamed, R. A.  (2020).  Dietary  supplementation  of  Tribulus terrestris extract improves growth and reproductive performances of the male Nile tilapia (Oreochromis niloticus), Aquaculture Research, 51 (10), 4245-4254. doi: 10.1111/are.14767
Ibrahim, M., Ahmad, F., Yaqub, B., Ramzan, A., Imran, A.,
Afzaal,  M.,  Mirza,  S.A.,  Mazhar,  I.,  Younus,  M., Akram,  Q.,  &  Ahmed,  S.  (2020).  Current  trends  of antimicrobials used in food animals and aquaculture. In Antibiotics and antimicrobial resistance genes in the  environment  (pp.  39-69). Elsevier. doi:
10.1016/B978-0-12-818882-8.00004-8
Jan, K., & Ahmed, I. (2021). The influence of sex and season on some hematological and biochemical parameters of  snow  trout  Schizothorax  labiatus  in  the  Indian Himalayan Region. Fisheries Science, 87, 39-54. doi: 10.1007/s12562-020-01469-3
Jan, K., Ahmed, I., & Dar, N. A. (2021). Haematological and serum  biochemical  reference  values  of  snow  trout, Schizothorax  labiatus  habiting  in  river  Sindh  of Indian Himalayan region. Journal  of  Fish
Biology, 98(5), 1289-1302. doi: 10.1111/jfb.14661 Kondera, E., Witeska, M., & Lugowska, K. (2019). Annual changes  in  hematological  parameters  of  common carp juveniles under laboratory conditions. Annals of Warsaw University of Life Sciences-SGGW. Animal Science, 58. doi: 10.22630/AAS.2019.58.2.15 Kuralkar,  P.,  &  Kuralkar,  S.  V.  (2021).  Role  of  herbal products  in  animal  production–An  updated  review. Journal  of  Ethnopharmacology,  278,  114246. doi: 10.1016/j.jep.2021.114246
Maciuszek,  M.,  Pijanowski,  L.,  Pekala-Safinska,  A., Kemenade, B. L. V. V., & Chadzinska, M. (2020). 17 β -
Estradiol  affects  the  innate  immune  response  in common carp. Fish physiology and biochemistry, 46,
1775-1794. doi: 10.1007/s10695-020-00827-3 Malhotra, N., Ger, T. R., Uapipatanakul, B., Huang, J. C., Chen,  K.  H.  C.,  &  Hsiao,  C.  D.  (2020).  Review  of copper  and  copper  nanoparticle  toxicity  in  fish. Nanomaterials, 10, 1126. doi: 10.3390/nano10061126 Okocha, R. C., Olatoye, I. O., & Adedeji, O. B. (2018). Food safety  impacts  of  antimicrobial  use  and  their residues in aquaculture. Public health reviews, 39(1),
1-22. doi: 10.1186/s40985-018-0099-2
Parida, S. P., Dutta, S. K., & Pal, A. (2012). Hematological and  plasma  biochemistry  in  Psammophilus blanfordanus  (Sauria:  Agamidae).  Comparative Clinical Pathology, 21, 1387-1394. doi: 10.1007/s00580-011-1303-7
Paul, T., Shukla, S. P., Kumar, K., Poojary, N., & Kumar, S. (2019). Effect of temperature on triclosan toxicity in Pangasianodon  hypophthalmus  (Sauvage,  1878): Hematology, biochemistry and genotoxicity evaluation. Science  of  the  total  environment, 668, 104-114. doi: 10.1016/j.scitotenv.2019.02.443 Prabu, D. L., Ebeneezar, S., Chandrasekar, S., Kavitha, M., & Vijayagopal, P. (2021). Antioxidant defence system based  oxidative  stress  mitigation  through  dietary jamun tree leaf in experimentally infected snubnose pompano,  Trachinotus  blochii. Fish  Physiology  and
Azizah et al ., (2024)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 6(1), 75-82
Biochemistry.  47(2),  617-637. doi:  10.1007/s10695- 021-00935-8
Rahdari,  A.,  Khoshkholgh,  M.  R.,  Yarmohammadi,  M., Ortiz-Zarragoitia,  M.,  &  Falahatkar,  B.  (2020). Immune  responses  and  hematological  variables  of cultured great sturgeon (Huso huso) subjected to 11- ketotestosterone  implantation. Iranian  Journal  of Fisheries Sciences, 19(5), 2437-2453. doi: Rajakumar, A., & Senthilkumaran, B. (2020).
Steroidogenesis  and  its  regulation  in  teleost-a review. Fish Physiology and Biochemistry, 46, 803- 818. doi: 10.1007/s10695-019-00752-0
Saha, S., Chukwuka, A. V., Saha, N. C., Faggio, C., & Sabet,
H. M. (2024). Natural and Synthetic
Immunomodulators: Inferences for Stress Responses in  Aquaculture  Fish. Immunomodulators  in Aquaculture  and  Fish  Health,  18-28. doi: 10.1201/9781003361183-3
Sheikh, Z. A., & Ahmed, I. (2019). Impact of environmental changes on plasma biochemistry and hematological parameters of Himalayan snow trout, Schizothorax plagiostomus. Comparative  Clinical  Pathology, 28,
793-804. doi: 10.1007/s00580-019-02914-1
Sidiq,  M.,  &  Ahmed,  I.  (2020).  Comparative  study  of hematological  profile  of  three  forage  fish  species habiting  in  Dal  Lake  of  Kashmir  Himalaya, India. Comparative Clinical Pathology, 29, 913-920. doi: 10.1007/s00580-020-03143-7
Ș tef ă nescu, R., Tero-Vescan, A., Negroiu, A., Auric ă , E., & Vari,  C.  E.  (2020).  A  comprehensive  review  of  the phytochemical,  pharmacological,  and  toxicological properties of Tribulus terrestris L. Biomolecules, 10,
752. doi: 10.3390/biom10050752 Vidal-López, J. M., Contreras-Sánchez, W. M., Hernández-
Franyutti, A., Contreras-García, M. D. J., & Uribe- Aranzábal, M. D. C. (2019). Functional feminization of the Mexican snook (Centropomus poeyi) using 17 β - estradiol  in  the  diet. Latin  american  journal  of aquatic research, 47(2), 240-250. doi: 10.3856/vol47-

## issue2-fulltext-4
Weirich, C. R., Riley, K. L., Riche, M., Main, K. L., Wills, P. S.,  Illán,  G.,  &  Pfeiffer,  T.  J.  (2021).  The  status  of Florida  pompano,  Trachinotus  carolinus,  as  a commercially  ready  species  for  US  marine aquaculture. Journal  of  the  World  Aquaculture Society, 52(3), 731-763. doi: 10.1111/jwas.12809 Witeska,  M.  (2013).  Erythrocytes  in  teleost  fishes:  a review. Zoology  and  Ecology, 23(4),  275-281. doi: 10.1080/21658005.2013.846963 Witeska,  M.,  Kondera,  E., Ł ugowska,  K.,  &  Bojarski,  B.
(2022). Hematological methods in fish–Not only for beginners. Aquaculture, 547, 737498. doi: 10.1016/j.aquaculture.2021.737498
Wojnarowski, K., Cholewi ń ska, P., Pali ć , D., Bednarska, M., Jarosz,  M.,  &  Wi ś niewska,  I.  (2022).  Estrogen receptors mediated negative effects of estrogens and xenoestrogens  in  teleost  fishes.  International Journal  of  Molecular  Sciences,  23(5),  2605. doi: 10.3390/ijms23052605
Yilmaz, S., Ergun, S., Kaya, H., & Gurkan, M. 512 (2014). Influence  of  Tribulus  terrestris  extract  on  the survival  dan  histopathology  of  Oreochromis mossambicus  (Peters,  1852)  fry  before  and  after Streptococcus  iniae  infection. Journal  of  Applied Ichthyology, 30(5), 994-1000. doi: org/10.1111/jai.12458
Ż arski, D., Ammar, I. B., Bernáth, G., Baekelandt, S., Bokor, Z., Pali ń ska- Ż arska, K., Horváth, Á., Kestemont, P., &  Mandiki,  S.  N.  (2020).  Repeated  hormonal induction of spermiation affects the stress but not the immune response in pikeperch (Sander lucioperca). Fish  &  shellfish  immunology,  101,  143-151. doi: 10.1016/j.fsi.2020.03.057
Zhu, W., & Su, J. (2022). Immune functions of phagocytic blood cells in teleost. Reviews in Aquaculture, 14(2), 630-646. doi: 10.1111/raq.12616