UJI TOKSISITAS SUB AKUT INFUS DAUN JARAK PAGAR ( Jatropha curcas Linn.) TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGI HATI MENCIT
Surya Amal
Fakultas Farmasi Universitas Buana Perjuangan Karawang email : surya.amal@ubpkarawang.ac.id

## Abstrak
Penggunaan  daun  jarak  pagar,  khususnya  sebagai  obat  antihipertensi,  masih  perlu  didukung  data toksisitas  untuk  menjamin  keamanan  pemanfaatannya.  Telah  dilakukan  penelitian  pengaruh  infus daun jarak pagar ( Jatropha curcas Linn.) terhadap gambaran histologi hati mencit ( Mus musculus ) yang diamati secara mikroskopik.  Penelitian ini menggunakan 60  ekor mencit jantan yang  dibagi dalam tiga kelompok konsentrasi : kelompok I, 5 % b/v; kelompok II, 10 % b/v; kelompok III, 20 %  b/v  ditambah  satu  kelompok  kontrol.  Kelompok  I,  II  dan  III  serta  kelompok  kontrol  masing- masing  dibagi  atas  tiga  subkelompok  berdasarkan  lama  pemberian  (15  hari,  30  hari,  45  hari). Masing-masing  subkelompok  terdiri  dari  5  ekor  mencit.  Hasil  pemeriksaan  mikroskopik menunjukkan bahwa  pemberian  infus  daun jarak  pagar  5  % b/v,  10  %  b/v dan  20  %  b/v  peroral sekali sehari  dengan  dosis  1  ml/30  gram  berat  badan  memengaruhi  struktur  jaringan  hati  mencit. Pemberian infus daun jarak pagar 5 % b/v selama 15 hari menunjukkan struktur jaringan hati mencit yang masih dalam batas-batas normal. Kerusakan struktur jaringan hati mencit mulai terlihat setelah pemberian  infus  daun  jarak  pagar  5  %  b/v  selama  30  hari  dan  45  hari  yang  meningkat  dengan semakin besarnya  konsentrasi dan  lamanya masa  pemberian.    Perhitungan secara  statistik  dengan menggunakan  desain  blok  lengkap  acak  menunjukkan  bahwa  parameter  susunan  radier  sel, sinusoid, membran sel, sitoplasma sel dan inti sel jaringan hati mencit mengalami kerusakan akibat pemberian infus daun jarak pagar 5 % b/v, 10 % b/v dan 20 % b/v dengan efek yang sangat berbeda nyata.
Kata kunci : jarak pagar, histologi hati, infus

## Abstract
The use of Jatropha leaves, especially as an antihypertensive drug, still needs to be supported by toxicity  data  to  ensure  the  safety  of  its  use.  Research  on  the  effect  of  jatropha  (Jatropha  curcas Linn.) Infusion on mice (Mus musculus) histology was observed microscopically. This study used 60 male  mice  divided  into  three  concentration  groups:  group  I, 5%  w  /  v;  group  II, 10% w  /  v; group III, 20% w / v plus one control group. Groups I, II and III and the control group each divided into  three  subgroups  based  on  the  length  of  administration  (15  days,  30  days,  45  days).  Each subgroup consists of 5 mice. Microscopic  examination results  showed that the administration of Jatropha leaf infusion of 5% w / v, 10% w / v and 20% w / v orally once a day at a dose of 1 ml / 30  grams  of  body  weight  affected  the  structure  of  the  liver  tissue  of  mice.  The administration of Jatropha leaf infusion of 5% w / v for 15 days showed that the structure of the liver tissue of mice was still within normal limits. Damage to the structure of the liver tissue of mice began to be seen after administration of Jatropha leaf infusion of 5% w / v for 30 days and 45 days which increased with  increasing  concentration  and  length  of  administration.  Statistical  calculations  using  a randomized  complete  block  design  showed  that  the  parameters  of  the  cell  radier,  sinusoid,  cell
membrane, cell cytoplasm and liver cell nuclei of the mice suffered damage due to jatropha leaf infusion of 5% w / v, 10% w / v and 20 % b / v with a very different effect.
Keywords: jatropha, liver histology, infusion

## PENDAHULUAN
Salah satu tumbuhan yang telah digunakan masyarakat Indonesia sebagai obat tradisional adalah tumbuhan jarak pagar ( Jatropha curcas Linn.). Tumbuhan ini berupa perdu  yang agak besar, bercabang tidak teratur, berasal dari Amerika, ditanam dan tumbuh liar dimana- mana di daerah tropis. Tumbuhan ini banyak digunakan sebagai obat cacing, radang anak telinga,  gusi  berdarah,  eksema,  encok,  obat  gosok,  rematik,  borok.  antimikroba, antioksidan, antikanker, dan antiinflamasi (Baroroh, H.N dan Eka Prasasti Nur Rachmani, E.P.N. 2013).
Pada  penelitian  sebelumnnya  Tedjakusuma,  P.I.  (1982)  melaporkan  bahwa  penggunaan infus daun jarak pagar ( Jatropha curcas Linn.) memberikan efek antihipertensi pada hewan percobaan anjing dengan konsentrasi 10 % b/v, 20 % b/v, dan terutama pada konsentrasi 30 % b/v. Pada penelitian yang lain, Haryono, K dan Soegiarso, N.C (1985) melaporkan efek hipotensif infus daun jarak pagar ( Jatropha curcas Linn.) terhadap tikus putih jantan strain Wistar pada konsentrasi  2,5 % b/v,  5 % b/v,  10 % b/v,  20 % b/v dan 40 % b/v (Haryono, K. dan Soegiarso, N.C. (1985).
Tujuan pengobatan hipertensi adalah untuk mencegah terjadinya morbiditas dan mortalitas akibat  tekanan  darah  tinggi.  Ini  berarti  bahwa  tekanan  darah  harus  diturunkan  dan dipertahankan pada keadaan normal. Bila tidak, mungkin akan mengganggu fungsi organ atau  menimbulkan  gejala-gejala  yang  tidak  dapat  ditolerir.  Disamping  itu  penggunaan antihipertensi  pada  umumnya  dalam  waktu  yang  lama,  sehingga  perlu  diteliti  toksisitas subakut  pada  hewan  percobaan.  Salah  satu  uji  tokisitas  subakut  adalah  pemeriksaan terhadap jaringan hati.
Penelitian ini dilakukan pada hewan percobaan mencit ( Mus musculus ) jantan  yang diberi infus  daun  jarak    pagar  dengan  konsentrasi  5  %  b/v,  10  %  b/v  dan  20  %  b/v,  beserta kelompok kontrol dengan pemberian peroral selama 15 hari, 30 hari dan 45 hari. Apakah
pemberian  infus  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  cusrcas Linn.)  berpotensi  menyebabkan kerusakan jaringan hati mencit ?
Hipotesis  dari  penelitian  ini  ialah  adanya  pengaruh  pemberian  infus  daun  jarak  pagar terhadap  kerusakan  struktur  jaringan  hati  mencit  yang  dilakukan  dengan  pemeriksaan secara mikroskopik.
Penelitian ini dimaksudkan untuk mengetahui pengaruh pemberian infus daun jarak pagar terhadap  gambaran  histologi  hati  mencit  dengan  tujuan  untuk  memperoleh  data  ilmiah mengenai toksisitas sub akut infus daun jarak pagar.

## METODE PENELITIAN
Daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas Linn.)  dikumpulkan  dengan  memetik  daun  tua  yang masih  hijau.    Daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas Linn.)  yang  telah  dikumpulkan, dibersihkan  dengan  cara  dicuci  dengan  air,  kemudian  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan  di  tempat  yang  terlindung  dari  cahaya  matahari  langsung.  Setelah  kering dijadikan serbuk sesuai ayakan 4/18. Selanjutnya dibuat infus dengan konsentrasi 5 % b/v, 10 % b/v, dan 20 % b/v.
Hewan  coba  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  mencit  ( Mus  musculus )  jantan dewasa  umur  tiga  sampai  lima  bulan  yang  telah  dipelihara  dan  diamati  kesehatannya selama dua minggu. Kemudian dipilh yang sehat dan mempunyai berat badan 20-30 gram sebanyak 60 ekor. Mencit dibagi menjadi tiga kelompok perlakuan untuk masing-masing konsentrasi    infus  daun  jarak  pagar.    Masing-masing  kelompok  perlakuan  dan  kontrol dibagi menjadi tiga subkelompok berdasarkan lamanya pemberian (15 hari, 30 hari dan 45 hari). Tiap-tiap subkelompok terdiri dari 5 ekor mencit.

## Pembuatan Preparat Mikroskopik
Mencit  dikorbankan  dengan  cara  dislokasi  leher,  dibedah,  diambil  organ  hatinya,  dan dipotong-potong sebesar 5x5x5 mm.  Pembuatan preparat mikroskopik dilakukan dengan metode parafin.

## Pengamatan Preparat Mikroskopik dan Pengumpulan Hasil
Preparat yang telah selesai dibuat, dilakukan pengamatan dengan mikroskop Nikon PFX, kemudian dibuat foto dengan pembesaran 100 X dan 200 X. Hasil foto dikumpulkan.

## PEMBAHASAN
Pemberian  infus  daun  jarak  pagar  dengan  konsentrasi    5  %  b/v  selama  15  hari memperlihatkn gambaran histologi hati mencit yang masih dalam batas normal, terutama pada susunan radier selnya dan batas vena sentralisnya. Pada pemberian selama 30 hari dan 45 hari kerusakan jaringan hati mulai terlihat berupa tanda-tanda stase aliran darah pada hati.
Gambar 1: Foto mikroskopik jaringan hati mencit kelompok perlakuan 30 hari (Keterangan dari kiri ke kanan : kontrol, konsentrasi 5 % b/v, konsentrasi 10 % b/v, dan konsentrasi 20 % b/v)
Gambar 2: Foto mikroskopik jaringan hati mencit kelompok perlakuan 45 hari (Keterangan dari kiri ke kanan : kontrol, konsentrasi 5 % b/v, konsentrasi 10 % b/v, dan konsentrasi 20 % b/v
Pengamatan  mikroskopik  terhadap  beberapa  paremeter  histologi  jaringan  hati  mencit setelah  pemberian infus  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas Linn.)  untuk  masing-masing konsentrasi 5 % b/v, 10 % b/v dan 20 % b/v dapat dilihat pada tabel 1, 2 dan 3 berikut :
Tebel 1.  Hasil Pengamatan Mikroskopik Jaringan Hati Mencit Setelah Pemberian Infus Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas Linn.) 5 % b/v
No. Parameter Histologi Hati Kontrol Dosis Sehari Selama 15 hari 30 Hari 45 Hari 1. Susunan Radier Sel Teratur Teratur Teratur Teratur 2. Sinusoid Normal Sedikit melebar Melebar Melebar 3. Vena Sentralis Jelas Jelas Terdapat butir darah merah Banyak butir darah merah 4. Membran Sel Jelas Jelas Jelas Beberapa tak jelas 5. Sitoplasma Homogen  Homogen  Beberapa tidak homogen Tidak homogen 6. Inti sel Jelas Jelas Jelas Jelas
Pemberian  infus  daun  jarak  pagar  dengan  konsentrasi  10  %  b/v  selama  15  hari  mulai memengaruhi gambaran histologi hati mencit. Pada pemberian selama 30 hari dan 45 hari memperlihatkan tingkat kerusakan struktur jaringan sel yang lebih besar, ditandai dengan banyaknya butir darah merah pada vena sentralisnya.
Tabel 2. Hasil Pengamatan Mikroskopik Jaringan Hati Mencit Setelah Pemberian Infus Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas Linn.) 10 % b/v.
No. Parameter Histologi Hati Kontrol Dosis Sehari Selama 15 hari 30 Hari 45 Hari 1. Susunan Radier Sel Teratur Tidak teratur Sangat tidak teratur Kacau 2. Sinusoid Normal Melebar Melebar Sangat melebar 3. Vena Sentralis Jelas Jelas Terdapat butir darah merah Banyak butir darah merah
4. Membran Sel Jelas Tidak Jelas Tidak jelas Tidak jelas 5. Sitoplasma Homogen  Tidak homogen Ada vakuola Banyak vakuola 6. Inti sel Jelas Menghilang  Menghilang  Menghilang
Pemberian  infus  daun  jarak  pagar  dengan  konsentrasi  20  %  b/v  selama  15  hari menyebabkan kerusakan struktur jaringan sel hati mencit. Kerusakan sangat tinggi terlihat pada pemberian selama 30 hari dan 45 hari, dimana hampir semua parameter histologik yang teramati terjadi kerusakan.
Tabel 3. Hasil Pengamatan Mikroskopik Jaringan Hati Mencit Setelah Pemberian Infus Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas Linn.) 20 % b/v.
No.  Parameter Histologi Hati Kontrol Dosis Sehari Selama 15 hari 30 Hari 45 Hari 1. Susunan Radier Sel Teratur Kacau Kacau Kacau 2. Sinusoid Normal Melebar Sangat melebar Sangat melebar 3. Vena Sentralis Jelas Terdapat butir darah merah Banyak butir darah merah Banyak butir darah merah 4. Membran Sel Jelas Beberapa tidak jelas Tidak jelas Tidak jelas 5. Sitoplasma  Homogen  Tidak homogen Banyak vakuola Banyak vakuola 6. Inti sel Jelas Menghilang  Menghilang  Menghilang
Berdasarkan  pengamatan  pada  beberapa  parameter  histologi  hati  mancit  di  atas menunjukkan makin besar konsentrasi yang digunakan, serta makin lama waktu pemberian menyebabkan kerusakan struktur jaringan hati mencit yang lebih besar.
Tabel 4. Skor Penilaian Beberapa Parameter Histologi Hati Mencit Setelah Perlakuan Dibandingkan Dengan Kontrol.
No . Parameter Histologi Hati Mencit Kon -trol KONSENTRASI INFUS DAUN JARAK PAGAR 5 % b/v 10 % b/v 20 % b/v 15 hari 30 hari 45 hari 15 hari 30 hari 45 hari 15 hari 30 hari 45 hari 1. Susunan Radier Sel 1 1 1 2 2 3 4 4 5 6 2. Sinusoid 1 2 3 4 3 4 5 4 5 6
3 Vena Sentralis 1 1 2 3 1 2 4 3 4 5 4. Membran sel 1 1 1 2 2 3 4 3 4 6 5. Sitoplasma 1 1 2 3 2 3 4 2 5 5 6. Inti Sel 1 1 1 1 2 3 4 3 4 5
Keterangan : Makin tinggi nilai skor, kerusakan makin besar
Perhitungan secara statistik dengan menggunakan desain blok lengkap acak menunjukkan bahwa  parameter  susunan  radier  sel,  sinusoid,  membran  sel,  sitoplasma  sel  dan  inti  sel jaringan hati mencit mengalami kerusakan akibat pemberian infus daun jarak pagar 5 % b/v, 10 % b/v dan 20 % b/v dengan efek yang sangat berbeda nyata.

## PENUTUP
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
1. Pemberian  infus  daun  jarak  pagar  dengan  konsentrasi    5  %  b/v  selama  15  hari memperlihatkan gambaran histologi hati mencit yang masih dalam batas normal, dan kerusakan jaringan hati mulai terlihat pada pemberian selama 30 hari dan 45 hari.
2. Pemberian  infus  daun  jarak  pagar  dengan  konsentrasi  10  %  b/v    dan  20  %  b/v memperlihatkan  tingkat  kerusakan  struktur  jaringan  sel  yang  teramati  makin  besar dengan peningkatan konsentrasi dan lama pemberian.
3. Parameter susunan radier sel, sinusoid, membran sel, sitoplasma sel dan inti sel jaringan hati mencit mengalami kerusakan akibat pemberian infus daun jarak pagar 5 % b/v, 10
% b/v dan 20 % b/v dengan efek yang sangat berbeda nyata.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Gerber,  Michael,  A.  Thung.  Swan,  N.  (1987). Histology  of  The  Liver .  American Journal of Surgical Pathology. 11(9):709-710
2. Baroroh,  H.N dan Eka Prasasti Nur Rachmani, E.P.N. 2013 . Ketoksikan  Akut  dari Ekstrak Etanolik Daun Jarak Pagar ( Jatropa curcas ) pada Mencit Jantan Galur Balb/C . Jurnal Natur Indonesia 15(1), Februari 2013: 52–56
3. Haryono,  K.  dan  Soegiarso,  N.C.  (1985). Uji  Efek  Hipotensi  Daun  Jarak  Pagar ( Jatropha curcas Linn., Euphorbiaceae) pada Tikus Jantan. Tesis. Sekolah Tinggi Farmasi ITB. Bandung.
4. Tedjakusuma,  P.I.  (1982 ).  Pengaruh  Infus  Daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas , Linn.) Terhadap Tekanan Darah Anjing. Skripsi Sarjana. Jurusan Farmasi F.MIPA Universitas Hasanuddin, Makassar.
5. Casarett, L.J. and Doull, J. (1986). Toxicology The Basic Science of Poisons . Third edition. Macmillan Publishing. Company. New York. 286-305
6. Jacobsen,  N.E.  Beck,SD.  Jacobson,L.E.  Bihrle,R.  Einhorn,L.H.  Foster,R.S.(2010) Is retroperitoneal  histology  predictive  of  liver  histology  at  concurrent  post- chemotherapy  retroperitoneal  lymph  node  dissection  and  hepatic  resection? J Urol.;184(3):Indiana-USA.949-53.
7. Suntoro,S. Handari. (1983). Metode Pewarnaan (Histologi dan Histokimia). Bagian Anatomi  dan  Mikroteknik  Hewan.  Fakultas  Biologi  UGM.  Penerbit  Bharata  Karya Aksara. Jakarta. 22-37.