## Skrining Fitokimia, Uji Toksisitas dan Uji Peredaman Radikal DPPH Ekstrak Daun Gelinggang ( Cassia alata L.)

## [Phytochemical Screening, Toxicity Test and DPPH Radical Scavenging Test of
Cassia alata L. ( Gelinggang ) Leaves Extract]
Izkia Mawaddah 1 , Erwin 1 *, Chairul Saleh 1
1 Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Jl. Barong Tongkok Kampus Gunung Kelua UNMUL Samarida Kalimantan Timur, 75123
* ) Coresponding author: winulica@yahoo.co.id
ABSTRACT. Cassia  alata L.  ( Gelinggang )  one  of  the  plants  known  as  medicinal  plants,  especially  for  the treatment of skin diseases. The purpose of this study was to determine the type of secondary metabolites using phytochemical  tests,  toxicity  with  the  BSLT  method  and  antioxidant  properties  against  DPPH  radicals  from  the extract  of  the Gelinggang leaves.  The  results  of  the  study  showed  extracts  of Gelinggang leaves  containing alkaloids, triterpenoids, steroids, and quinones. Based on the results of toxicity and antioxidant tests showed that Gelinggang leaves extract was very toxic to Artemia salina shrimp and it was a strong antioxidant against DPPH radicals with LC 50 and IC 50 were 28.84 ppm and 73.57 ppm, respectively.
Keywords: Gelinggang, Cassia alata L. , toxicity, antioxidants, DPPH
ABSTRAK. Cassia alata L. (Gelinggang) merupakan salah satu tumbuhan yang dikenal sebagai tumbuhan yang berkhasisat obat terutama untuk mengobati penyakit gatal-gatal. Tujuan penelitian ini adalah untuk  mengetahui kandungan  metabolit  skunder  dengan  menggunakan  uji  fitokimia,  toksisitas  dengan  metode  BSLT  dan  sifat antioksidan  terhadap  radikal DPPH  dari ekstrak  kasar  daun  Gelinggang.  Hasil  penelitian  menunjukkan    ekstrak daun  gelinggang  mengandung  alkaloid,  triterpenoid,  steroid,  dan  kuinon.    Berdasarkan  hasil  uji  toksisitas  dan antioksidan menunjukkan bahwa ekstrak kasar daun gelinggang sangat toksit terhadap udang Artemia salina dan bersifat  antioksidan kuat  terhadap  radikal  DPPH  dengan  LC 50 dan  IC 50 secara  berturut-turut  adalah  28,84  ppm dan 73,57 ppm.
Kata kunci : Gelinggang, Cassia alata L. , toksisitas, antioksidan, DPPH
Riwayat artikel: Diterima 30 Maret 2020, Disetujui 12 April 2020 Cara sitasi: Mawaddah, I., Erwin., Saleh, C. (2020). Skrining Fitokimia, Uji Toksisitas dan Uji Peredaman Radikal DPPH Ekstrak Daun Gelinggang ( Cassia alata L). KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 6(1): 61-66. DOI: https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i1.15045

## LATAR BELAKANG
Sebagai  negara  yang  tergolong  salah satu negara mega diversiti, Indonesia menyimpan  banyak  tumbuh-tumbuhan  tropis yang berkhasiat obat dan telah lama
digunakan oleh masyarakat dalam pengobatan tradisional. Cassia  alata atau  dikenal  dengan nama  Ketepeng  Cina  tersebar  secara  merata di  hutan-hutan  tropis  Indonesia.  Di  beberapa daerah  tumbuhan  ini  mempunyai  nama  lokal
seperti Gelinggang oleh  suku  Banjar  di
Kalimantan Selatan dan Gulingkang oleh suku bugis di daerah Sulawesi Selatan.
Daun Cassia  alata dapat  mengobati
Tinea pedis,  merupakan  salah  satu  penyakit dermatofita yang menyerang pada bagian kaki terutama  pada  bagian  sela  jari  dan  telapak kaki yang disebabkan oleh jamur Trichophyton rubrum (Anwar, 2015).
Disamping itu,
beberapa hasil penelitian menunjukkan ekstrak daun C. alata dapat berfungsi sebagai anti  jamur  seperti  terhadap  jamur M.  furfur
(Triana et  al .,  2016), Microsporum  cani s  (Fajri et  al. ,  2018), Trichophyton sp    (Edo,  2017).
Dalam penelitian ini dilakukan skrining fitokimia,  toksisitas  dan  antioksidan  terhadap ekstrak kasar daun gelinggang.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan yang
digunakan
dalam penenelitian  ini  adalah  metanol,  DPPH,  telur udang Artemia  salina ,  air  laut,  akuades,  dan larutan  DMSO.  Adapun  alat  yang  digunakan meliputi gelas ukur, gelas kimia, rotaevaporator, batang pengaduk, alat maserasi, mikropipet, mikroplat, wadah penumbuhan larva udang. Untuk uji antioksidan pengukuran absorbansi digunakan instrument UV-Vis Variant Cary 100/300.

## Prosedur Kerja

## Ekstraksi daun Gelinggang
Sampel  berupa  daun  gelinggang  terlebih dahulu  dikeringan  di  udara  terbuka,  setelah kering daun tersebut dihaluskan. Sampel yang sudah  dihaluskan  (500  gram)  kemudian dimaserasi  ke  dalam  metanol  selama  tiga  kali dua  puluh  empat  jam.  Filtrat  yang  diperoleh dari  hasil  penyaringan  selanjutnya  dipisahkan
dengan pelarutnya pada suhu rendah menggunakan rotary evaporator.

## Uji fitokimia
Uji  fitokimia  yang  dilakukan  meliputi  uji alkaloid, triterpenoid, steroid, fenolik, flavonoid, kuinon,  dan  saponin  yang  mengacu  pada prosedur  penelitian  sebelumnya  (Erwin et  al. , 2015; Harborne, 1987).

## Uji bioassay
Uji toksisitas terhadap ekstrak kasar yang dilakukan  dengan    metode  brine  shrimp letalithy  test  mengunggunakan  larva  udang Artemia  salina .  Adapun  prosedur  uji  BSLT dilakukan  sesuai  dengan  prosedur  penelitian sebelumnya (Erwin et al ., 2019; Karolina et al .,
2018;  Meyer et  al. ,  1982).      Untuk  uji antioksidan dilakukan dengan metode peredanaman  radikal  DPPH  sesuai    adapun prosedur  pengujian  juga  dilakukan  sesuai dalam  literatur  (Bohari et  al. ,  2019;  Erwin,
2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  dengan  cara  maserasi terhadap  daun  gelinggang  diperoleh  ekstrak kasar  kental  berwarna  coklat  tua  sebanyak  9 gram.

## Hasil Uji Fitokimia
Hasil  uji  fitokimia  menunjukkan  bahwa ekstrak  kasar  daun  gelinggang  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  dari  golongan alkaloid,  triterpenoid,  steroid,  dan  saponin (Tabel 1).

## Hasil Uji Toksisitas
Hasil  uji  toksisitas  dengan  metode Brine Shrimp  Lethality  Test (BSLT)  terhadap  larva udang Artemia  salina dapat  dilihat  dalam
Tabel 2 dan Gambar 1.
Tabel 1 . Kandungan metabolit sekunder ekstrak daun Cassia alata L.
No Metabolit Sekunder Gambar Hasil 1. Alkaloid (+) 2. Triterpenoid (+) 3. Steroid (+) 4. Fenolik (-) 5. Flavonoid (-) 6. Kuinon (+) 7. Saponin (-)
Keterangan: (+)mengandung metabolit sekunder
(-) tidak mengandung metabolit sekunder
Tabel 2. Hubungan antara konsentrasi dan nilai probit ekstrak daun Cassia alata L.
Konsentrasi (ppm) Log 10 Konsentrasi Total Larva Jumlah Larva Mati % Mortalitas Nilai Probit 1000 3 10 9,3 93 6,48 500 2,6989 10 7,6 76 5,71 250 2,3979 10 6,3 63 5,33 125 2,0969 10 3 30 4,48 62,5 1,7959 10 5 50 5,00 31,25 1,4948 10 5,3 53 5,08 15,625 1,1938 10 4 40 4,75 7,8125 0,8928 10 6 60 5,25
Grafik hubungan antara nilai probit versus log  konsentrasi  menghasilkan  persamaan regresi  linear,  yaitu  y  =  0,5394x  +  4,2101.
Persamaan  regresi  linier  tersebut  digunakan untuk  menghitung  nilai  LC 50 ,  dengan  rincian sebagi berikut:
y = ax + b
5 = 0,5394x + 4,2101
x = 1,46 10 (1,46) = 28,84,
maka  nilai LC 50 adalah 28,84 ppm
Gambar 1. Grafik  regresi  linier  antara  log konsentrasi  dengan  nilai  probit ekstrak kasar daun Gelinggang
Menurut  Meyer et  al. (1982)  nilai  LC 50 di bawah  31  ppm  bersifat  sangat  toksik, sehingga  ekstrak  kasar  Ketepeng  Cina  yang memiliki  LC 50 28,84  termasuk  katagori  sangat toksit.  Ada  korelasi  positif  antara  sifat  toksit terhadap  larva  udang A.  salina dengan  sifat sitotiksit. Sehingga sifat toksisitas eksrak kasar daun  ketepeng  ini  dapat  mengindikasikan
adanya  potensi  sifat  sitotoksit  terhadap  sel kanker.

## Aktivitas Antioksidan
Hasil uji peredaman radikal DPPH ekstrak kasar  daun  gelinggang  diperoleh  aktivitas antioksidan  ekstrak  dan  vitamin  C  sebagai pembanding  (Tabel  2).  Persamaan  regresi linier  antara  konsentrasi  dan  %  aktivitas antioksidan  (%AA)  vitamin  C  adalah  y  =
8,0635x + 10,275, R² = 0,9965 (Gambar 2).
Nilai  IC 50 vitamin  C  diperoleh  dari persamaan linear dengan rincian perhitungan:
y = 8,0635x + 10,275
50 =  8,0635x + 10,275
x = -
x  =  4,92 ppm
Jadi  besarnya  nilai  IC 50 vitamin  C  adalah sebesar 4,92 ppm.
Tabel 2. Data absorbansi, %AA, IC 50 vitamin C dan ekstrak kasar daun Gelinggang
Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Aktivitas Antioksidan (%AA) IC 50 (ppm) Vit. C 2 0,123 26,74 4,92 4 0,093 42,91 6 0,072 56,88 8 0,042 75,84 Ekstrak kasar 20 0,133 19,95 73,57 40 0,104 37,32 60 0,079 52,69 80 0,057 65,46
Gambar 2. Grafik hubungan konsentrasi  dan
% AA vitamin C.
Perhitungan IC 50 ekstrak
daun
Gelinggang dilakukan berdasarkan persamaan regersi linier yang diperoleh antara konsentrasi dan  %AA  ekstrak  kasar  daun  gelinggang (Gambar  3),  yaitu  y  =  0,7595x  +  5,88  R²  = 0,9954,  dimana  y  =  persentase  aktivitas antioksidan  (%AA)  dan    x  =  konsentrasi ekstrak kasar daun gelinggang.
y = 0.5394x + 4.2101 R² = 0.4156 0 2 4 6 8 0 1 2 3 4 Nila i Probi t Log 10 Konsentrasi y = 8.0635x + 10.275 R² = 0.9965 0 20 40 60 80 0 2 4 6 8 10 % A kti vi tas
A n ti o ksi d an Konsentrasi (ppm)
y = 0,7595x + 5,88 50 = 0,7595x + 5,88
x  = x  =  73,57 ppm
Hasil perhitungan di atas menunjukan nilai IC 50 ekstrak  kasar daun Gelinggang adalah 73,57ppm.
Gambar 3. Hubungan  konsentrasi    ekstrak kasar  daun  Gelinggang  terhadap %AA
Menurut  Phongpaichit et  al. (2007)
pengujian  antioksidan  dengan  peredaman radikal  DPPH,  jika  nilai  IC 50 <  10  mg/mL sangat  aktif,  10-50  mg/mL  aktif,    50-100 mg/mL  moderat,  100-250  mg/mL  lemah,  dan >250  mg/mL  tidak  aktif.  Berdasarkan  hal tersebut  maka  ekstrak  kasar  daun  gelinggang termasuk  memiliki  sifat  antioksidan  yang moderat.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian tentang ekstrak kasar daun  gelinggang,  maka  dapat  disimpulkan bahwa ekstrak kasar daun gelinggang mengandung  senyawa  metabolit  sekunder antara  lain  adalah  alkaloid,  triterpenoid, steroid,  dan  kuinon.  Hasil  uji  toksisitas terhadap  larva  udang Artemia  salina termsuk katagori  sangat  toksit  sehingga  berpotensi juga  bersifat  sitotoksit  terhadap  sel  kanker. Hasil  uji  peredaman  radikal  bebas  DPPH,
ekstrak  ini  juga  bersifat  antioksidan  yang moderat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  menyampaikan  terima  kasih kepada  Kepala  Laboratorium  Anatomi  dan Sistematika Tumbuhan Jurusan Biologi FMIPA UNMUL atas bantuannya telah mengindentifikasi  tumbuhan  ini.  Dan  juga kepada  kepala  Laboratorium  Kimia  Organik Jurusan  Kimia  FMIPA  UNMUL  yang  telah menyediakan  fasilitas  laboratorium  sehingga penelitian  ini  dapat  diselesaikan  sesuai dengan waktu yang direncanakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  A.  N.  D.  (2015).  Manfaat  Daun Ketepeng  Cina  ( Cassia  alata L.)  sebagai Antifungi  pada  Tinea  Pedis. Jurnal Agromedicine , 2 (4): 385 –388.
Bohari,  Karolina,  A.,  Pratiwi,  D.  R.,  Erwin,  & Rahmadi,  A.  (2019).  Toxicity  Test, Antioxidant  Activity  Test  and  GC-MS Profile of The Active Fraction of
Coptosapelta  tomentosa (Blume)  Root (Merung). Eurasian Journal of Biosciences , 13 (2): 2403 –2406.
Edo,  T.  (2017).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Etanol  Daun  Ketepeng  Cina  ( Cassia alata )  Terhadap  Pertumbuhan  Jamur Trichophyton sp. Secara In Vitro. JURNAL ILMIAH MAHASISWA VETERINER , 1 (1). https://doi.org/10.21157/jim vet..v1i1.2400
Erwin,  E.  (2015).  Phytocemical  Analysis  and Anti-Oxidant Activity of The  Wood
Ethanolic  Extracts  of  Sirih  Hutan  ( Pipe aduncum ). Jurnal  Akta  Kimia  Indonesia (Indonesia  Chimica  Acta) , 8 (2):  52 –59. https://doi.org/10.20956/ica.v8i2.2468
Erwin,  E.,  Pusparohmana,  W.  R.,  Sari,  I.  P.,
Hairani,  R.,  &  Usman,  U.  (2019).  GC-MS Profiling  and  DPPH  radical  Scavenging Activity of The Bark of Tampoi ( Baccaurea macrocarpa ).
y = 0.7595x + 5.88
R² = 0.9954 0 20 40 60 80 0 20 40 60 80 100 % A kti vi tas A n ti o ksi d an Konsentrasi (ppm)
F1000Research , 7 (1977): 1 –8.
https://doi.org/10.12688/f1000research.16 643.2
Erwin,  Sulistyaningsih,  S.,  &  Kusuma,  I. (2015).  Isolation  and  MS  Study  of Friedelinol  from  The  Leaves  of  Terap ( Artocarpus
odoratissimus
Blanco).
International  Journal  of  Pharma  and  Bio Sciences , 6 (1): 598 –604.
Fajri  M.  Marfu’ah  N.  & Artanti  L. O. (    ). Aktivitas  Antifungi  Daun  Ketepeng  Cina ( Cassia  alata L.)  Fraksi  Etanol,  N- Heksan,  Dan  Kloroform  Terhadap  Jamur Microsporium canis . Pharmaceutical Journal  of  Islamic  Pharmacy , 2 (1):  1 –8. https://doi.org/10.21111/pharmasipha.v2i 1.2134
Harborne, J. (1987). Metode Fitokimia.
Penerjemah:  Padmawinata  K,  Soediro I . ITB, Bandung.
Karolina, A., Pratiwi, D. R., & Akkas, E. (2018). Phytochemical  and  Toxicity  Test  of
Merung Extracts ( Coptosapelta tomentosa (Blume). JURNAL  ATOMIK ,
3 (2): 79 –82.
Meyer,  B.  N.,  Ferrigni,  N.  R.,  Putnam,  J.  E., Jacobsen,  L.  B.,  Nichols,  D.  E.,  & McLaughlin, J. L. (1982). Brine Shrimp: A Convenient  General  Bioassay  for  Active Plant  Constituents. Planta  Medica , 45 (5):
31 –34. https://doi.org/10.1055/s-2007- 971236
Phongpaichit, S., Nikom, J., Rungjindamai, N., Sakayaroj,  J.,  Hutadilok-Towatana,  N., Rukachaisirikul, V., & Kirtikara, K. (2007). Biological  Activities  of  Extracts  from Endophytic  Fungi  Isolated  from  Garcinia Plants. FEMS  Immunology  &  Medical Microbiology ,
51 (3):
517 –525.
https://doi.org/10.1111/j.1574-
695X.2007.00331.x
Triana,  O.,  Prasetya,  F.,  Kuncoro,  H.,  &  Rijai, L.  (2016).  Aktivitas  Antijamur  Ekstrak Daun  Ketepeng  Cina  ( Cassia  alata L.). Jurnal  Sains  dan  Kesehatan , 1 (6):  311 – 315. https://doi.org/10.25026/jsk.v1i6.67