## Pendahuluan
Leukosit merupakan salah satu sel yang memiliki  peranan  utama  terhadap  sistem pertahanan  tubuh  atau  sistem  imun  (1). Dalam pemeriksaan laboratorium, pemeriksaan  jumlah  leukosit  merupakan pemeriksaan  rutin  untuk  menilai  kondisi sistem imun dan kadar inflamasi dalam tubuh. Peningkatan jumlah leukosit biasa dihubungkan dengan adanya infeksi, inflamasi,  dan  nekrosis  jaringan.  (2).  Rata- rata jumlah leukosit manusia dalam keadaan normal adalah 3.200-10.000 sel/mm3 (3).
Dokter  seringkali  merekomendasikan pemeriksaan  hematologi  sebagai  penunjang untuk menegakkan diagnosis suatu penyakit (4).  Pemeriksaan darah lengkap yang umum dilakukan  di  Indonesia  adalah  pemeriksaan hematologi rutin dengan hitung jenis leukosit dan  LED  (1).    Terdapat  dua  jenis
pemeriksaan  untuk  menghitung  sel  darah salah  satunya  leukosit  yaitu  menggunakan cara manual dengan kamar hitung serta cara automatic menggunakan alat (4).
Saat  ini,  banyak  laboratorium  yang menggunakan  alat  penghitung automatic , walaupun  demikian  pemeriksaan  metode manual  serta  pemeriksaan  visual  tetap  bisa diandalkan  terutama bagi  laboratorium  klinik sederhana  maupun  klinik  Puskesmas  di daerah terpencil.
Pemeriksaan  secara  manual  dilakukan dengan mengencerkan darah menggunakan reagen Turk dan selanjutnya diamati dibawah mikroskop.  Reagen  Turk  memiliki  komposisi asam  asetat  glasial,  gentian  violet,  dan aquadest.  Reagen  tersebut  berperan  untuk melisiskan  sel  selain  leukosit  dan  mewarnai sel yang tidak dilisiskan (5)
Perbedaan Hasil Hitung Jumlah Leukosit dengan Modifikasi Air Perasan Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia Swingle) dan Asam Cuka sebagai Pengganti Komposisi Larutan Turk
Differences in Leukocyte Count Result with Modified Lime Juice (Citrus aurantifolia Swingle) and Vinegar as a Substitute for Composition of Turk Solution
Yuliana Salman 1 , Novita Nadia 1 , Rabiatul Wahidah 2
1 Politeknik Unggulan Kalimantan Jl. Pangeran Hidayatullah RT. 14 Komplek Upik Futsal Benua Anyar Banjarmasin
2 Puskesmas Cempaka Jl. Cempaka Besar No.1, Kertak Baru Ilir, Banjarmasin
* Korespondensi: salmanyuliana86@gmail.com

## Abstract
Examination  of  the  leukocyte  count  is  a  routine  examination  to  assess  the  condition  of  the immune system and inflammation levels in the body. There are two types of examinations to count blood cells, one of which is leukocytes, using manual and automatic methods. Manual examination  was  carried  out  by  thinning  the  blood  using  Turk's  reagent.  Under  certain conditions, Turk reagents are often not available. This study aimed to determine the number of leukocytes with modified lime juice (Citrus aurantifolia Swingle) and vinegar as an alternative to the composition of the Turk solution. This experimental study used a completely randomized design (CRD) consisting of three treatments and five replications. The samples in this study were 5 samples of venous blood from patients in the level three Dr. R. Soeharsono Hospital in Banjarmasin. This study used a simple random sampling. The treatment used in this study was to  use  Turk  rule,  lemon  juice  (Citrus  aurantifolia  Swingle)  with  a  concentration  of  2%,  and vinegar  with  a  concentration  of  5%.  The  results  of  this  study  showed  that  there  was  no difference  in  the  value  of  the  leukocyte  count  between  the  Turk  solution  (control)  and  the modified  treatment  of  2%  lime  juice  and  5%  vinegar.  Based  on  these  results,  it  can  be concluded that 2% lime juice and 5% vinegar can be used as an alternative to Turk's solution .
Keywords: Turk’s solution, Lime Juice, Vinegar, Leukocyte Count
Ketersediaan reagen Turk untuk pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit  secara manual  yang  biasa  dilakukan  oleh  klinik sederhana  atau  klinik  Puskesmas  terpencil seringkali tidak tersedia.  Hal itu dapat terjadi karena  kehabisan  larutan  Turk  akibat pemeriksaan yang terlalu banyak atau masa pakai  yang  sudah  kadaluarsa  dan  jarak antara laboratorium dengan penyedia reagen cukup  jauh.    Salah  satu  upaya  untuk mengantisipasi  kondisi  tersebut,  maka  perlu dikaji  lebih  lanjut  bahan  alternatif    sebagai pengganti larutan Turk.
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh  Rimal  (6)  bahwa  hitung  jumlah  leukosit menggunakan  larutan  pengencer  modifikasi satu  (larutan  asam  asetat  glasial  2%  tanpa menggunakan zat pewarna di  dalam  larutan pengencer)  tidak  berbeda  secara  signifikan dengan  larutan  standar  Turk  (larutan  asam asetat glasial 2% ditambah pewarna gentian violet 1%), Larutan pengencer modifikasi dua (larutan  asam  asetat  glasial  2%  ditambah pewarna  fuchsin  1  %)  tidak  berbeda  secara signifikan dengan standar Turk (larutan asam asetat glasial 2% ditambah pewarna gentian violet 1%).
Pengukuran yang dilakukan oleh  Cindy (7),  membuktikan bahwa kadar  asam asetat dalam  cuka  makan  25%  sebesar  5,266%. Cuka  makan  sering  digunakan  masyarakat sebagai  bahan  penambah  rasa  asam  pada makanan,  bahan  ini  mudah  didapat  dan harganya  relatif  murah,  dimana  cuka  dalam berbagai jenis makanan umumnya terdiri dari larutan 3-6% asam cuka dalam air.
Selain  asam  cuka,  jeruk  Nipis  ( C. aurantifolia  S.) memiliki  kandungan  asam sitrat  dengan  pH  2,0  (8).    Asam  sitrat  pada jeruk  nipis  mempunyai  sifat  yang  mirip dengan  asam  asetat  yaitu  sifat  keasaman sebagai  asam  lemah  dan  pH  serta  mampu melisiskan eritrosit,  maka peneliti  berasumsi jeruk  nipis  mampu  menggantikan  peranan asam asetat pada larutan Turk (1).
Mengacu pada penelitian yang dilakukan  oleh  Hurrohmah  (9)  bahwa modifikasi  air  perasan  jeruk  nipis  ( C. aurantifolia  S. )  dapat  digunakan  sebagai alternatif  pengganti  komposisi  larutan  Turk dalam  pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit paling  efektif  dengan  konsentrasi  2%. Berdasarkan  hal  tersebut  di  atas,  maka peneliti tertarik untuk mengetahui perbedaan hitung jumlah leukosit antara larutan Turk dan
larutan modifikasi asam cuka dan air perasan jeruk  nipis  guna  dijadikan  bahan  alternatif pengganti  larutan  Turk  pada  pemeriksaan hitung jumlah leukosit secara manual.

## Metode Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian  Eksperimental  dengan  rancangan acak  lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  3 perlakuan dan 5 kali ulangan.  Sampel dalam penelitian ini adalah 5 sampel darah vena dari pasien  di  RS.  Tk.  III  Dr.  R.Soeharsono, Banjarmasin.  Teknik  pengambilan  sampel secara simple random sampling . Perlakuan yang digunakan pada penelitian ini yaitu menggunakan 1). Laturan Turk,  2).  Air  perasan  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia Swingle ) konsentrasi 2% dan  3). Asam  cuka  konsentrasi  5%,  yang  masing- masing diaplikasikan kepada 5 sampel darah vena.
Tabel 1. Variasi perlakuan Perlakuan  Volume air (ml) Volume Gentian violet (ml) Volume bahan (ml) Larutan Turk 100 100 2 Air perasan jeruk nipis 2% 100 100 2 Asam cuka 5% 100 100 5
Data  hasil  penelitian  disajikan  dalam bentuk deskriptif dan dianalisis menggunakan uji statistik one way anova untuk mengetahui perbedaan antar perlakuan (10).

## Hasil
Hasil  perhitungan  yang  didapatkan dengan  menggunakan  larutan  Turk  sebagai kontrol, perasan air jeruk nipis dan asam cuka dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 2. Rata-rata Hasill Hitung Jumlah Leukosit
Perlakuan Rata-rata jumlah leukosit (Sel/mm 3 ) Kategori Larutan Turk (Standar) 7.820 Normal Air Jeruk Nipis 2% 7.660 Normal Asam Cuka 5% 7.540 Normal Sig.Homogenitas: 0.200 Sig.Anova: 0.932
Berdasarkan  Tabel  2,  terlihat  bahwa larutan  modifikasi  air  perasan  jeruk  nipis dengan konsentrasi 2% dan larutan modifikasi asam cuka dengan konsentrasi 5% memiliki  hasil  hitung  jumlah  leukosit  yang mendekati  hasil  dari  jumlah  leukosit  pada larutan  Turk  (kontrol)  dan  tidak  berbeda dalam  menentukan  kategori  jumlah  leukosit. Pada uji statistik menggunakan analisis One Way  Anova didapatkan  nilai  p=0,932 (p > 0,05),  artinya  tidak  terdapat  perbedaan nilai hitung jumlah leukosit dengan perlakuan modifikasi  larutan  Turk,  sehingga  dapat digunakan  sebagai  pengganti  komposisi larutan Turk.

## Pembahasan
Leukosit merupakan salah satu komponen darah yang memiliki peran dalam tubuh yaitu berguna untuk pertahanan tubuh ketika  ada  benda  asing  berbahaya.  yang masuk  dalam  tubuh  manusia  (11).  Leukosit dapat mengalami peningkatan dan penurunan  sesuai  dengan  keadaan  yang dialami  dalam  darah  manusia.  Apabila leukosit  mengalami  peningkatan  disebut leukositosis, dan sebaliknya apabila mengalami  penurunan  disebut  leukopenia (12).  Pemeriksaan jumlah leukosit seringkali direkomendasikan sebagai penunjang dalam penegakkan diagnosis.
Pemeriks aan  jumlah  leukosit  dapat  dilakukan  secara automatic  maupun  manual.    Perhitungan jumlah  leukosit  secara  manual  memerlukan reagen  berupa  Larutan  Turk.    Larutan  turk standar adalah campuran asam asetat glasial 2%  dan  gentian  violet  1%.  Asam  asetat glasial  akan  melisiskan  sel  selain  leukosit sedangkan  gentian  violet  merupakan  zat warna bersifat basa yang akan mewarnai inti dan  granula  leukosit  yang  bersifat  asam, dimana pewarna tersebut tidak berpengaruh pada jumlah leukosit (13).
Berdasarkan  hasil  penelitian  terlihat bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang signifikan  nilai  hitung  jumlah  leukosit  antar perlakuan.  Hal tersebut menunjukkan bahwa modifikasi  larutan  Turk  dengan  air  perasan jeruk  nipis  2%  dan  asam  cuka  5%  dapat digunakan  sebagai  alternatif  pengganti larutan Turk.
Theml  2004  dalam  Mujiburizal  (14), mengatakan  bahwa  air  perasan  jeruk  nipis merupakan  asam  lemah  dengan  sifat
keasaman  rendah  yaitu  2,0  berupa  asam sitrat  merupakan  asam  organik  larut  dalam air. leukosit bersifat stabil dalam larutan asam hingga  kadar  3%,  maka  dari  itu  pemberian asam  dalam  larutan  pengencer  memiliki peranan  penting  dalam  pemeriksaan  hitung jumlah leukosit.
Kandungan  asam  lemah  yang  dimiliki asam sitrat dapat meilisiskan eritrosit karena eritrosit  tidak  tahan  terhadap  asam  dan memiliki sifat hanya zat yang dibutuhkan saja yang  bisa  diserap  oleh  sel,  serta  memiliki batasan fisiologis terhadap tekanan dari luar, yang apabila berlebih maka dapat menyebabkan sel tersebut mengalami kerapuhan atau fragilitas. Oleh karena itu, air perasan jeruk nipis
(C. aurantifolia S.) cukup mampu menggantikan  peranan  asam  asetat  yang terkandung  dalam  komposisi  larutan  Turk memiliki  pH 2,4.  Pemeriksaan hitung  jumlah leukosit dengan menggunakan modifikasi air perasan jeruk nipis (C. aurantifolia S.) dengan konsentrasi 2% memiliki kualitas yang sama dengan  larutan  Turk  standar,  karena  inti leukosit  dapat  terlihat  jelas  dan  jernih  pada konsentrasi tersebut.
Penelitian ini sejalan dengan penelitian Subaiyah,dkk  (1)  yang  menyatakan  bahwa dengan menggunakan modifikasi air perasan jeruk  nipis  sebagai  pengganti  komposisi larutan  Turk  untuk  hitung  jumlah  leukosit. Berdasarkan  penelitian  tersebut  diperoleh jumlah leukosit yang berbeda dengan kontrol namun  interprestasi  hasil  dengan  modifikasi air perasan jeruk nipis ini masih menunjukkan kesamaan dengan larutan Turk (kontrol) yaitu sesuai dengan nilai rujukan.
Selain  air  perasan  jeruk  nipis,  asam cuka  (cuka  makan)  5%  juga dapat  dijadikan alternatif  pengganti  larutan  Turk.    Cuka makan  yang  biasa  dipakai  untuk  aroma makanan  mengandung  4-18%  asam  asetat glasial.  Asam asetat glasial akan melisiskan sel  selain  leukosit  Pemberian  asam  asetat glasial  dan  gentian  violet  tersebut  akan menghasilkan  reaksi  absorbsi  oleh  sel sehingga terlihat jelas pada saat perhitungan (13).
Hal  tersebut  juga  sejalan  dengan penelitian Mujiburizal (14), yang menyatakan bahwa  larutan  pengencer  asam  cuka  5% (asam  asetat)  yang  biasa  dipakai  untuk aroma  makanan  dapat  melisiskan  darah selain sel leukosit dan dapat terbaca di bawah
mikroskop 40x dengan kelemahan tidak ada zat pewarnanya.
Beberapa  hal  yang  perlu  diperhatikan dalam  pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit baik  tahap  pra  analitik,  analitik,  dan  post analitik,  agar  pemeriksaan  yang  dilakukan merupakan  hasil  yang  teliti  dan  dapat dipertanggung  jawabkan.  Kesalahan  yang mungkin  terjadi  dalam  pemeriksaan  yaitu pada  tahap  pra  analitik  seperti  pembuatan reagen,  pipet  sampel  dan  tahap  analitik seperti  perhitungan  leukosit  menggunakan kamar  hitung  improved  neubauer  yang sangat  sulit  dalam  membedakan  kotoran dengan  sel  darah  pada  saat  menghitung menggunakan mikroskop.
Faktor lain yaitu sampel yang diperiksa menggunakan  modifikasi  air  perasan  jeruk nipis  ( C.  aurantifolia  S .)  terlihat  agak  keruh ketika  diperiksa  pada  mikroskop  namun  sel masih  terlihat  jelas  hanya  saja  tidak  sejelas kontrol  karena  pengaruh  dari  air  perasan jeruk  nipis  yang  mengandung  bahan-bahan senyawa  lain  selain  asam  sitrat  dan  tidak dilakukan ekstraksi spesifik terhadap senyawa yang dibutuhkan.

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa tidak  terdapat  perbedaan  jumlah  leukosit dengan  modifikasi  air  perasan  peruk  nipis ( Citrus aurantifolia Swingle ) dan asam cuka.

## Daftar Pustaka
1.  Subaiyah,  Santosa,  B.,  Ariyadi,  T.
Perbandingan  Larutan  Turk  dengan Modifikasi  Larutan  Turk  Perasan  Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia Swingle) terhadap Jumlah Leukosit . Skripsi. Semarang:  Universitas  Muhammadiyah Semarang; 2018. Available from: http://repository.unimus.ac.id/3302/.
2.  Canzoneri, B.J., Lewis, D.F., Groome, L., Wang, Y. Increased Neutrophil Numbers Account for Leukocytosis in Women  with Preeclampsia.
American Journal Perinatology . 26(10): 729-732; 2009. 3.  Khasanah, M.N., Harjoko, A., Candradewi, I. Klasifikasi Sel Darah Putih Berdasarkan  Ciri  Warna  dan  Bentuk dengan  Metode  K-Nearest  Neighbor  (K- NN). Indones J Electron Instrumentations Syst. 6  (2):  151 –162;  2016.  Available from:
https://jurnal.ugm.ac.id/ijeis/article/view/1 5254.
4.  Sacher,  R.  A. Tinjauan  Klinis  Hasil Pemeriksaan Laboratorium . Jakarta: EGC; 2012.
5.  Nugraha,  G. Panduan  Pemeriksaan Laboratorium  Hematologi  Dasar .  2 nd ed. Jakarta: CV. Trans Info Media; 2017.
6.  Rimal,  F. Perbandingan  Hasil  Hitung Jumlah  Leukosit  Menggunakan  Larutan Turk dengan Asam Cuka yang Diadisi Zat Warna  di  Puskesmas  Lepo-Lepo  Kota Kendari .  Karya  Tulis  Ilmiah.  Kendari:
Poltekkes  Kemenkes  Kendari;  2019. Available from:
http://repository.poltekkes-
kdi.ac.id/1092/.
7.  Lanovia,  C. Penentuan  Asam  Asetat dalam  Cuka  Makan.  Modul  Laporan Praktikum  Lab.  Teknik  Lingkungan . Tangerang: Surya University; 2015.
8.  Sarwono,  B. Khasiat  dan  Manfaat  Jeruk Nipis . Jakarta: Agromedia Pustaka; 2001. 9.  Hurrohmah, R.I. Gambaran Modifikasi Air Perasan  Jeruk  Nipis  (Citrus  aurantifolia swingle)  sebagai  Pengganti  Komposisi Larutan  Turk  untuk  Hitung  Jumlah
Leukosit .  Karya  Tulis  Ilmiah.  Jombang: STIKes Insan Cendekia Medika
Jombang; 2020.
10. Sugiyono. Statistika  untuk  Penelitian . Bandung: Alfabeta; 2017.
11. Handayani,  W.,  Haribowo,  A. Asuhan Keperawatan pada Klien dengan
Gangguan  Sistem  Hematologi .  Jakarta: Salemba Medika; 2008.
12. Sofro,  A.  S.  M. Darah .  Yogyakarta:  PT. Rineka Cipta; 2012.
13. Rahmadhanty,  N.  A.,  Purnama,  T., Nursidah. Efektifitas Ekstrak Buah Asam Jawa  ( Tamarindus  Indica L.)  terhadap Hitung Jumlah Leukosit Metode
Langsung. Jurnal  MediLab  Mandala Waluya Kendari . 3(2): 155-160; 2019.
14. Mujiburizal,  M.  N.  F. Identifikasi  Hitung
Jumlah Leukosit Metode Manual
Menggunakan  Tabung  dengan  Larutan Turk  dan  Asam  Cuka .  Skripsi.  Malang: Stikes Maharani Malang; 2018.