STUDI PENDAHULUAN FERMENTASI DEDAK DAN ONGGOK DENGAN MENGGUNAKAN KAPANG Rhizopus orizae UNTUK BUDIDAYA CACING SUTERA (Tubifex sp.)
Mega Trishuta Pathiassana 1) , Aulia Tri Matasari 2) , Catur Sriherwanto 3)
1, 2) Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Teknologi Sumbawa
3) Balai Bioteknologi, Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi Email: mega.trishuta@uts.ac.id

## Abstrak
Penelitian  ini  merupakan  studi  pendahuluan  fermentasi  dedak  dan  onggok  yang  menggunakan kapang Rhizopus orizae sebagai media budidaya cacing sutera (Tubifex sp.). Cacing sutera sangatlah penting dalam budidaya perikanan sebagai pakan alami yang biasanya sangat disukai oleh larva dan benih ikan.  Ada 3 jenis air yang digunakan sebagai habitat cacing sutera ini, yaitu air hitam , air hijau , dan air bersih . Metode yang digunakan adalah perhitungan cawan petri dengan pengenceran secara berseri dan metode cawan sebar yang dilakukan dengan 3 perlakuan dan 3 kali pengenceran tanpa ada pengulangan. Perhitungan ini dilakukan agar dapat mengetahui jumlah koloni Rhizopus oryzae yang terdapat pada inokulum dedak dan onggok yang telah dibuat untuk dijadikan pakan fermentasi untuk cacing sutera (Tubifex sp.). Kata kunci: cacing sutera, Rhizopus orizae, Tubifex sp., fermentasi

## Abstract
This research is preliminary study about fermentation of bran and tapioca pulp applied Rhizopus orizae  mold  as  cultivation  media  of  silk  worms  (Tubifex  sp.).  Silk  worms  is  very  important  in aquaculture as natural feed is usually preferred by larvae and fish seeds. There were 3 kinds of water used as habitat of the silk worm, such as black water, green water, and clean water. The method applied is total plate count with serial dilution and spread plate method in 3 treatments and 3 times of dilution without repetition. The calculation to understand the amount of Rhizopus orizae’s colony in bran and tapioca pulp’s inoculum had been made being fermentation feeds for silk worms (Tubifex sp.).
Keywords: silk worms, Rhizopus orizae, Tubifex sp., fermentation

## PENDAHULUAN
Cacing sutera ( Tubifex sp.) merupakan pakan  alami  yang  kebutuhannya  sangat penting dalam budidaya perikanan, terutama  pada  pemeliharaan  larva  dan benih. Cacing ini lebih mudah dicerna dan mengandung  nutrisi  berupa  kadar  air 11,21%; protein kasar 64,47%; lemak kasar 17,63%;  abu  7,84%;  dan  bahan  ekstrak tanpa nitrogen (BETN) 10,06% (Wijayanti, 2010). Habitatnya berada di dasar perairan tawar yang jernih, belumpur, dan mengandung  bahan  organik,  serta  mencari makan dengan cara membenamkan kepalanya  masuk  ke  dalam  lumpur  untuk mendapatkan  bahan  organik  yang  telah terurai dan mengendap.
Cacing  sutera  tergolong  ke  dalam Ologochaeta  yang  telah  menjadi  incaran
untuk  dibudidayakan  karena  memiliki kemampuan  untuk  hidup  pada  densitas yang  tinggi  dan  kesanggunpan  bertahan pada lingkungan dengan kelarutan oksigen yang  sangat  rendah.  Biota  ini  juga menunjang  pertumbuhan,  memperpanjang masa reproduksi, dan menstimulasi pemijahan  ikan  (Oz,  dkk.,  2015).  Warna tubuhnya dominan kemerah-merahan dengan  ukuran  yang  sangat  ramping  dan halus,  serta  panjang  1-2  cm.  Cacing  ini sangat  senang  hidup  berkelompok  atau bergerombol, karena masing-masing individu  berkumpul  menjadi  koloni  yang sangat sulit diurai dan saling berkaitan satu sama lainnya.
Permintaan pakan alami cacing sutera semakin  meningkat  pesat  menyebabkan harga cacing sutera semakin mahal. Hal ini
tentunya  dapat  menjadi  prospek  di  masa depan.  Kebutuhan  cacing  sutera  sebagai salah  satu  pakan  alami  untuk  budidaya perikanan  dari  waktu  ke  waktu  terus memperlihatkan peningkatan. Kenaikan itu bisa  terjadi,  karena  cacing  sutera  menjadi salah satu pakan alami yang digunakan para pembudidaya di seluruh Indonesia
(Wahyuningsih. 2001). Tubifex sp. saat ini belum  banyak  dibudidayakan,  sehingga bergantung  pada  hasil  tangkapan  dari perairan  umum.  Sedangkan,  keberadaan Tubifex  sp.  dialam  tidak  menentu,  karena dipengaruhi oleh faktor musim dan keadaan lingkungan (Muria, 2011).
Selama  ini  budidaya  cacing  sutera hanya  dilakukan  dengan  cara  membuat media tempat hidupnya dari limbah organik kotoran  burung  puyuh  yang  dikombinasi- kan dengan kotoran ayam dan menggunakan  tiga  pakan  tambahan,  yaitu ampas  tahu,  tepung  limbah  udang,  dan dedak menggunakan efektif mikro-
organisme-4 ( EM-4) . Efektif mikro- organisme-4  ( EM-4) merupakan  hasil fermentasi  dari  bahan-bahan  organik  yang berwarna cokelat kekuning-kuningan berwujud  cair  dan  beraroma  manis  asam (segar)  yang  di  dalamnya  terkandung campuran  dari  beberapa  mikroorganisme hidup yang bermanfaat dan menguntungkan (Wididana, 1994).

## METODE DAN PELAKSANAAN Alat dan Bahan
Alat yang
digunakan dalam
penelitian  ini,  yaitu  erlenmayer,  cawan
petri,  tabung,  rak  tabung, alumunium  foil, sill, parafilm, pipet, pipet tip, autoclap, dan batang  L,  baki  (nampan),  sendok,  baskom kecil, timbangan, timbangan analitik, gelas ukur, wadah, plastik, binder clip , saringan, dan oven.
Sedangkan,  bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah Rhizopus oryzae ,  air,  media  agar,  aquades,  dedak, onggok, black  water,  green  water, dan  air bersih.

## Cara Kerja Pembuatan Inokulum
1. Skala Cawan Petri
Dedak  ditimbang  sebanyak  75g  dan onggok sebanyak 40g, dicampurkan dengan kapang sebanyak 2% (0,8g) hingga merata. Kemudian,  ditambahkan  air  pada  dedak sebanyak 60ml dan onggok sebanyak 30ml, lalu  diaduk  hingga  tercampur rata.  Setelah semua bahan telah tercampur rata, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  cawan petri  masing-masing  dibagi  3  buah  cawan petri.  Setelah  itu,  dimasukkan  ke  dalam inkubator  untuk  diinkubasi  dengan  suhu 31°C selama 48 jam.
Setelah 48 jam, inokulum dikeluarkan dari cawan petri dan diletakkan pada  nampan.  Kemudian,  dikeringkan  di dalam  oven  dengan  suhu  40°C  selama  24 jam  untuk  dikeringkan.  Inokulum  yang sudah kering kemudian dihaluskan menggunakan  blender  dan  dimasukkan dalam plastik.
Gambar 1. Produksi Inokulum Skala Cawan Petri
2. Skala Baki (Nampan)
Onggok  ditimbang  sebanyak  200g, kemudian  dicampurkan  dengan  kapang sebanyak  2%  (4g)  hingga  merata.  Lalu, ditambahkan  air  sebanyak  400ml  dan
diaduk hingga tercampur rata. Semua bahan yang  telah  dicampur  rata  dimasukkan  ke dalam baki (nampan) dan ditutup menggunakan  plastik,  serta  di  setiap  sudut dijepit  dengan  menggunakan binder  clip .
Setelah itu, dimasukkan ke dalam inkubator untuk diinkubasi pada suhu 31°C selama 48 jam. Setelah 48 jam, inokulum dikeluarkan dan dibuka plastiknya. Kemudian,  dimasukkan  ke  dalam  oven dengan  suhu  40°C  selama  24  jam  untuk dikeringkan.  Inokulum  yang  sudah  kering dihaluskan  menggunakan  blender  dan dimasukkan dalam plastik.
Gambar 2. Produksi Inokulum Skala Nampan (Baki)
Membuat Tempat Hidup Cacing Sutera Wadah  plastik  yang  berukuran 30x20x10cm diisi dengan 3 jenis air, yaitu air  hitam (black  water), air  hijau (green water), dan air bersih (clean water) masing- masing 1,5L kemudian nyalakan aerator.

## Gambar 3. Tempat Hidup Cacing Sutera
Pemberian  Pakan  untuk  Cacing  Sutera (Tubifex sp.)
Pemberian pakan cacing sutera, yaitu dengan  cara  timbang  pakan  yang  akan diberikan  (pakan  yang  diberikan  cacing sutera  inokulum  yang  dibuat  dengan  skala petri),  kemudian  masukkan  cacing  sutera dan  letakkan  di  salah  satu  pojok  wadah. Campur  pakan  yang  sudah  ditimbang dengan  sedikit  air  supaya  bisa  tenggelam, kemudian  letakkan  di  salah  satu  pojok wadah  yang  berhadapan  dengan  cacing sutra.  Amati  durasi/waktu  cacing  sutera menghampiri  pakan  dan  perilaku  cacing sutera terhadap pakan fermentasi tersebut.
Lihat  pengaruh  pakan  fermentasi tersebut terhadap cacing sutra dengan cara menimbang  cacing  sutera  dalam  beberapa hari  yang  sudah  diberi  pakan  fermentasi tersebut.  Bandingkan  dengan  berat  awal cacing  sutera  sebelum  diberi  pakan fermentasi. Setelah satu minggu, air tempat hidup  cacing  sutera  diganti  dengan  cara membuang  air  yang  ada  di    dalam  wadah sebanyak  500ml  dan  diganti  dengan  air bersih sebanyak 500ml supaya tetap terlihat jernih  dan  cacing  sutra  mudah terlihat  dan diamati.
Gambar 4. Memberi Pakan Cacing Sutera (Tubifex sp.)
Hitung Cawan Petri ( Tota Plate Count ) Langkah-langkah dalam menghitung cawan petri ialah pertama- tama  dilakukan  pengenceran  dengan menyiapkan 6 buah cawan petri, 8 buah tabung  reaksi  beserta  tutupnya,  dan  2 tutup tabung (tanpa tabungnya). Kemudian,  8  buah  tabung  reaksi  diisi dengan  aquades  masing-masing  9ml lalu  ditutup.  Siapkan  cawan  petri, tabung  yang  sudah  diisi  aquades  dan pipet  tip  yang  akan  digunakan, selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam autoklaf  untuk  disterilisasi.  Lalu, masukan  ke  dalam  oven.  Timbang inokulum dedak dan onggok sebanyak 1gr.  Kemudian  dimasukkan  ke  dalam tutup  tabung  secara  terpisah,  masing- masing  ditutup  dengan  menggunakan parafilm.  Setelah  itu,  timbang  sampai sebanyak  2,25gr  dan  dimasukkan  ke dalam  erlenmayer,  serta  tambahkan aquades sebanyak 150ml. Lalu, diaduk menggunakan  alat  pengaduk  hingga merata.
Pengenceran  sampel  dengan konsenrasi  ¹),  diambil  1gr  sampel  dan dicampurkan  ke  dalam  tabung  yang telah  diisi  dengan  aquades,  kemudian diportex. Ambil 1ml sampel menggunakan  pipet  dari  tabung  a¹), dimasukkan  ke  dalam  tabung  b²),  dan diencerkan  pula  dengan  aquades  9ml, dan diportex.  Ambil   1ml   dari tabung b²)    dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung c³).  Selanjutnya,  diencerkan  dengan 9ml aquades kemudian diportex. Ambil 1ml  dari  tabung  c²)  dimasukkan  ke dalam tabung d 4 ), kemudian diencerkan dengan  9ml  aquades  dan  diportex. Sampel pada tabung b, c, dan d dipipet ke  dalam  cawan  petri  yang  sudah terdapat  25ml  nutrien  agar  menjadi sebanyak 0,1ml. Lalu, diratakan menggunakan  batang L  Rod .  Apabila sudah rata, ditutup rapat dan simpan di dalam inkubator lalu diletakkan secara terbalik supaya uap air selalu di bawah dan tidak terjadi kontaminasi.
Gambar 5. Teknik Serial Delution
Perhitungan cawan petri ( total plate count )  dengan  pengenceran  secara  berseri ( serial  dilution )  dengan  metode  sebar ( spread  plate )  ini  dilakukan  dengan  3 perlakuan dan 3 kali pengenceran tanpa ada pengulangan.  Perhitungan  ini  dilakukan agar  dapat  mengetahui  jumlah  koloni Rhizopus  oryzae yang  terdapat  pada inokulum  dedak  dan  onggok  yang  telah
dibuat  untuk  dijadikan  pakan  fermentasi untuk cacing sutera (Tubifex sp.).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan Cacing Sutra (Tubifex sp,)
Hasil pengamatan cacing sutera sebagaimana yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Cacing Sutera
Hari Ke- Posisi Cacing Warna Air Pakan Hari ke-0 Cacing berpindah dari pojok menghampiri aerator secara bergerombolan dan saling mengikat. Kekuningan tetapi jernih. Masih utuh dan belum menyebar. Hari ke-3 Cacing mulai menyebar mencari pakan. Terlihat ada beberapa kelompok cacing dan terlihat ada pakan di setiap kelompok. Kekuningan tetapi jernih. Sudah dihampiri (walaupun ada beberapa). Hari ke-4 Cacing tidak meninggalkan pakan, terlihat ada beberapa kelompok cacing yang terlihat sedang menggerombol  di pakan. Kekuningan tetapi cukup jernih dan berkurang. Dihampiri oleh cacing dan menetap di tempat pakan. Hari ke-5 Cacing berada di atas pakan. Kekuningan cukup jernih dan berkurang. Terlihat sangat berkurang dan terdapat cekungan. Hari ke-6 Cacing sutra meninggalkan pakan menghampiri aerator (menyebar). Kekuningan jenih, karena air diganti. Pakan masih belum menyebar tetapi terlihat berkurang. Hari ke-7 Cacing terlihat berpisah dan terdapat beberapa kelompok dan menyebar. Kekuningan jernih. Pakan  terlihat  menyebar dan  setiap  tempat  pakan terlihat dihampiri oleh koloni  cacing. Hari ke-10 Cacing membentuk beberapa kelompok dan ada pula yang menyebar. Kekuningan cukup jernih dan berkurang. Setiap permukaan pakan terdapat cacing sutra baik yang berkoloni maupun yang menyebar individu. Hari ke-11 Cacing membentuk beberapa koloni. Kekuningan cukup jernih dan berkurang. Setiap permukaan pakan di tempati oleh koloni cacing sutra.
Hari ke-12 Cacing terdapat beberapa koloni. Kekuningan cukup jernih dan berkurang. Setiap permukaan pakan terdapat koloni cacing. Hari ke-13 Terdapat lebih banyak dari hari sebelumnya. Kekuningan keruh dan berkurang. Gumpalan pakan habis dimakan cacing. Hari ke-14 Cacing dipisahkan dengan kotoran- kotoran sisa pakan karena cacing akan ditimbang. Keruh. Gumpalan terlihat habis. Perhitungan pengaruh pakan fermentasi  terhadap  pertumbuhan  cacing sutera: Pengaruh pakan = Berat akhir – Berat awal = T1 – T0 = 3,43g – 5g = -1,57g Tabel 1 menguraikan hasil
pengamatan cacing sutera selama 2 minggu. Cacing  sutera  yang  diberi  pakan  fermentasi dengan  menggunakan  kapang Rhizopus orizae bertujuan untuk mengetahui pengaruh pakan fermentasi terhadap pertumbuhan dan perkembangan  cacing  sutera  tersebut.  Dari hasil  pengamatan  selama  2  minggu,  cacing sutera  terlihat  dapat  menyesuaikan  diri dengan lingkungan, baik air, pakan, ataupun tempat  hidupnya,  seperti  percobaan  yang dilakukan  ini.  Setiap  hari  pengamatan, mereka terlihat terpisah-pisah yang biasanya hidup secara bergerombolan, saling mengikat tidak  mau  berpisah,  dan  sulit  dipisahkan. Namun  pada  percobaan  ini,  cacing  sutera dapat  memisahkan  diri  dan  menyebar membuat beberapa koloni dari satu koloni ke setiap  permukaan  yang  terdapat  pakan  yang tadinya jauh dari posisi mereka.
Cacing sutera yang biasanya
dibudidaya  dengan  media  ampas  tahu, kotoran  ayam,  kotoran  puyuh,  dan  kotoran-
kotoran  lainnya,  karena  diketahui  bahwa cacing  sutera  itu  hidupnya  di  tempat-tempat yang  kotor,  seperti  di  got  dan  tempat  kotor lainnya.  Akan  tetapi,  pada  percobaan  ini hanya menggunakan pakan fermentasi dengan  menggunakan  kapang Rhizopus orizae untuk menambah nutrisi cacing sutera untuk benih-benih ikan dengan mengombinasikan  3  jenis  air  saja,  yaitu  air hitam (black water), air hijau (green water), dan  air  bersih (clean  water) yang  dapat dikatakan  sangat  cocok  untuk  budidaya cacing sutera, di mana diketahui pH air yang cocok  untuk  hidup  cacing  sutera  ialah  6-8. Sedangkan,  pH  kombinasi  dari  3  jenis  air yang digunakan pada percobaan ini ialah 7,9.
Kemudian, pengaruh pakan fermentasi  terhadap  cacing  sutera  yang  di mana  berat  awal  5g  dan  berat  akhir  3,43g. Pada percobaan ini, berat cacing sutera terjadi kekurangan  1,57g  dari  berat  cacing  sutera sebelum diberi  pakan fermentasi. Terjadinya pengurangan berat terhadap cacing sutera ini belum diketahui penyebabnya.

## Pengamatan Sampel Onggok
Data hasil pengamatan sampel onggok sebagaimana yang disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Data Pengamatan Sampel Onggok Pengenceran Perlakuan Hasil 2 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9ml, kemudian disebar ke media agar.
3 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9ml, kemudian disebar ke media agar. 4 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9ml, kemudian disebar ke media agar. Pengamatan Sampel Dedak Data hasil pengamatan sampel dedak sebagaimana yang disajikan pada Tabel 3. Tabel 3. Data Pengamatan Sampel Dedak Pengenceran Perlakuan Hasil 2 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9ml, kemudian disebar ke media agar. 3 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9ml, kemudian disebar ke media agar. 4 Setiap 1ml sampel yang sudah diencerkan dengan aquades 9mLl, kemudian disebar ke media agar.

## Koloni Sampel Onggok
Kisaran  yang  paling  tepat  dalam menghitung koloni pada cawan adalah 30- 300  koloni  per  cawan.  Jika  koloni  <  30, maka tidak dimasukkan ke dalam perhitungan. Dalam penelitian ini dilakukakan 3 kali pengenceran yang mana hasilnya, sebagai berikut: Data  hasil  pengamatan  koloni sampel onggok sebagaimana yang disajikan
pada Tabel 4.
Tabel 4 Perhitungan Koloni Sampel Onggok Pengenceran Jumlah Koloni (Jam) 24 48 72 144 2 0 ∞ ∞ ∞ 3 2 13 101 198 4 0 17 31 46
Rumus:  N = V x n x 1/f
Pengenceran³  (72  jam  jumlah  koloni, 101ml) = 10. 100 koloni/ml
Pengenceran³  (144  jam  jumlah koloni, 198ml) = 19.800 koloni/ml Pengenceran 4 (72  jam  jumlah  koloni, 31ml) = 31.000 koloni/ml Pengenceran 4 (144  jam  jumlah  koloni,
46ml) = 46.000 koloni/ml
Jadi,  rata-rata  koloni Rhizopus pada  cawan petri  dengan  sampel  onggok  adalah  jumlah rata-rata = 10.100 + 19.800 + 31.000 + 46.000 / 4 = 26,725 koloni/ml.

## Koloni Sampel Dedak
Data  hasil  pengamatan  koloni  sampel dedak  sebagaimana  yang  disajikan  pada Tabel 5.
Tabel 5. Perhitungan Koloni Sampel Dedak
Pengenceran Jumlah Koloni (Jam) 24 48 72 144 2 2 13 40 54 3 0 1 1 2 4 0 0 0 0
Rumus:  N = V x n x 1/f Pengenceran² (72 jam
jumlha koloni, 40 ml) = 400 koloni/ml
Pengenceran² (144 jam  jumlah koloni, 54 ml) = 540 koloni/ml Jadi, rata-rata koloni Rhizopus pada cawan petri dengan sampel onggok adalah jumlah rata-rata = 400 + 540 / 2 = 470 koloni/ml.
Metode  penyebaran  ( spread  plate method ) dilakukan dengan cara menyebarkan sampel yang telah diencerkan
di atas permukaan agar dalam cawan petri. Digunakan  metode  penyebaran  ini,  karena lebih efektif dalam perhitungan cawan petri dan bakteri dapat tersebar merata ke seluruh cawan  dengan  minimnya  penumpukan, tetapi risiko terkena kontaminannya tinggi.
Pertama kali yang dilakukan adalah pengenceran  sampel  sebanyak  3  kali dengan  perbandingan  1:10.  Pengenceran dilakukan  dengan  memindahkan  sampel menggunakan  pipet  sebanyak  1  ml  ke dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  aquades
steril  9  ml.  Dilakukan  3  kali  pengenceran, yaitu 2, 3, dan 4.
Pada  saat  pemindahan  sampel, dilakukan  di  dekat  api  supaya  steril  dari kontaminasi.  Sterilisasi  adalah  proses mematikan semua mikroorganisme dengan pemanasan yang bertujuan untuk membebaskan  bahan  dari  semua  mikroba perusak.  Kemudian,  sampel  yang  sudah diencerkan  dimasukkan  ke  dalam  cawan petri  sesuai  dengan  pengencerannya,  yaitu 2, 3,  dan  4 sebanyak 0,1 ml. Setelah larutan sampel  sudah  berada  pada  cawan  petri, selanjutnya  homogenkan  supaya  bakteri tersebar secara merata.
Dari  hasil  inkubasi  diperoleh koloni Rhizopus  orizae pada  setiap  cawan petri  ada  sampel  onggok  pengenceran 2 dengan  waktu  inkubasi  selama  24  jam masih  belum  terlihat,  kemudian  inkubasi 48,  72,  dan  144  jam  jumlah  koloni  sudah tidak  bisa  untuk  di hitung  pengenceran³ dengan    waktu  inkubasi  selama  24  jam didapatkan  2  koloni,  inkubasi  48  jam didapatkan  sebanyak  13  koloni,  inkubasi selama 72 jam didapatkan koloni sebanyak 101  dan  inkubasi  selama  144  jam didapatkan  koloni  sebanyak  198  koloni. Pengenceran 4 dengan  waktu  inkubasi selama  24  jam  masih  belum  terlihat, inkubasi  selama  48  jam  didapatkan  koloni sebanyak  17,  inkubasi  selama  72  jam didapatkan  koloni  sebanyak  31,  dan inkubasi selama 144 jam didapatkan koloni sebanyak 46 koloni. Sehingga, perhitungan koloni  pada  cawan  petri  didapatkan  rata- rata koloni Rhizopus dengan sampel onggok adalah 26.725 koloni/ml.
Sedangkan,  pada  sampel  dedak pengenceran²  dengan  waktu  inkubasi selama 24 jam didapatkan koloni sebanyak 2 koloni, inkubasi selama 48 jam didapatkan koloni sebanyak 3, inkubasi selama 72 jam didapatkan koloni sebanyak 4, dan inkubasi selama 144 jam didapatkan koloni sebanyak 54 koloni. Pada pengenceran³ dengan waktu inkubasi  selama  24  jam koloni  belum  bisa dilihat, inkubasi selama 48 jam didapatkan koloni sebanyak 1, inkubasi selama 72 jam didapatkan koloni sebanyak 1, dan inkubasi selama 144 jam didapatkan koloni sebanyak 2  koloni.    Pengenceran 4 dengan    waktu inkubasi  selama  24,  48,  72,  dan  144  jam koloni Rhizopus tidak  terlihat.  Sehingga,
perhitungan  koloni  pada  cawan  petri didapatkan  rata-rata koloni Rhizopus dengan sampel dedak adalah 470 koloni/ml.
Dari  hasil  di  atas,  sesuai  dengan penelitian  yang  dikerjakan,  yaitu  semakin tinggi  pengenceran,  maka semakin  banyak koloni yang terdapat. Lalu, semakin rendah pengenceran,  maka  semakin  sedikit  koloni yang muncul.

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Berdasarkan penelitian dan pengamatan  yang  dilakukan,  dapat  ditarik kesimpulan bahwa kualitas pakan fermentasi  yang  dijadikan  pakan  untuk cacing sutera dipengaruhi oleh pengurangan  berat  yang  terjadi  belum diketahui penyebabnya. Namun, kombinasi air  yang  digunakan  pada  percobaan  ini sangat cocok untuk budidaya atau pertumbuhan cacing sutra. Hal ini dikarenakan  oleh  tempat  hidup  cacing sutera,  yaitu  pH  air  6-8.  Sedangkan,  pH kombinasi  air  yang  digunakan  pada percobaan ini adalah 7,9.
Dapat dilakukan pengenceran serial dengan  menggunakan  dua  sampel,  yaitu onggok dan dedak dengan pengenceran  2, 3,    4 ,  dan  ditambahkan  aquades  9  ml dengan  metode  hitungan  cawan  petri dengan  metode  sebar  yang  didapatkan perhitungan  koloni  pada  pengenceran³ sampel onggok dengan inkubasi selama 72 dan 144 jam, lalu pada pengenceran dengan inkubasi  selama  72  dan  144  jam. Didapatkan rata-rata koloni Rhizopus pada sampel  onggok  adalah  26.725  koloni/ml, sedangkan pada pengenceran sampel dedak koloni  terdapat  hanya  pada    pengenceran² dengan    lama   inkubasi  72    dan    144  jam. Rata-rata  koloni Rhizopus pada  sampel dedak adalah 470 koloni/ml.
Dari  penelitian  perhitungan  cawan petri ( total plate count) dengan konsentrasi Rhizopus masing-masing  sampel  yang digunakan  adalah  2%  dapat  dihitung  atau dilihat  tumbuhnya  koloni Rhizopus pada media agar adalah  pada inkubasi 3 hari ( 72 jam).

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  mengenai  pakan  fermentasi  untuk
dijadikan pakan untuk cacing sutera (Tubifex sp.) dengan mengoptimasikan komposisi dan nutrisi  bahan  yang  digunakan,  sehingga pakan  fermentasi  dapat  menyaingi  pakan biasa untuk budidaya cacing sutera. Kemudian,  tempat  percobaannya  lebih dikondisikan  supaya  tidak  terjadi  hal  yang tidak  diinginkan  pada  percobaan  ataupun pengamatan yang sedang dilakukan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amanta,  R.,  Usman,  Syammaun.,  Lubis,
M., Kurnia, R. 2015. Pengaruh Kombinasi  Pakan  Alami  dengan  Pakan
Buatan  Terhadap  Pertumbuhan  Benih Ikan Lele Dumbo ( Clarias Gariepinus ). Sumatera Utara. Amir, K., dan Khairuman. 2003. Membuat Pakan  Ikan  Konsumsi .  Agromedia pustaka.Tanggerang. 45 hal. Anggorodi, R. 1995. Nutrisi Aneka Ternak
Unggas. Cetakan kedua.Penerbit
PT.Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. Antika,  R.,  Hudaidah,  S.,  dan  Limin,  S. 2014  Penggunaan  Tepung  Onggok Singkong  yang  Difermentasi Rhizopus sp sebagai Bahan Baku Pakan Ikan Nila Merah ( Oreochronis Niloticus ).E-Jurnal Rekayasa  dan  Teknologi  Budidaya Perairan. Vol 2, No. 2, ISSN:2303-3600. Bidura,  I.G.N.G.  2007.Aplikasi  Produk
Bioteknologi Pakan ternak.Penerbit
Udayana University Press.Denpasar. Dani,  N.P,  Budiharja,  A.,  Listiawati,  S. 2005.  Kombinasi  Pakan  Buatan  Untuk Meningkatkan Pertumbuhan dan Kandungan Protein Ikan Tawes ( Puntius javanicus Blks).Biosmart.  ISSN:  1411- 32IX. Vol 7 No 2. Hal 83-90: Surakarta. Pengkajian Teknologi Pertanian Bengkulu. Darmawiyanti,  V.  2005.Formulasi  dan Proses Pembuatan Pakan Buatan.Bahan Presentasi Pada Pelatihan Teknis Teknologi  Produksi  Pakan  Alami  dan Buatan  Skala  Rumah  Tangga,  BBAP
Situbondo. Situbondo.
Dharmawan, B. (2010). Usaha Pembuatan Pakan  Ikan  Konsumsi .  Yogyakarta  : Pustaka Baru Press.
Djarijah,  A.  S.  1995.  Pakan  Ikan  Alami. Kanisius.Yogyakarta.87 Hal. Eliyana,  P.  2011.  Pengaruh  Penambahan Ampas Kelapa Hasil Fermentasi
Aspergillus oryzae dalam Pakan Komersial  terhadap  Pertumbuhan  Ikan
Nila  ( Oreochronis  Niloticus Lim.). Skripsi. Universitas Sebelas Maret.
Fardiaz,  S.  1992.  Departemen  Pendidikan dan  Kebudayaan  Direktorat  Jendral Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Mikrobiologi Pangan. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Hadiroseyani, Y. 2003. Potensi Oligochaeta sebagai Inang antara Parasit Myxosporea  pada  Ikan  Mas  (Cyprinus carpio Linnaeus).Jurnal Akuakultur Indonesia  Institut  pertanian  Bogor. Bogor. 2 (1): 37-39. Hamdat, Hasniah, N. 2010. Pengaruh Lama Fermentasi  Menggunakan Rhizopus Oryzae Protein  Kasar  dan  Serat  Kasar Ampas  Sagu  ( Metroxilon  Rumphii ). Departemen Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan.Skripsi. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Lingga,  P.,  dan  Susanto,  H.(1989). Pakan Ikan .Jakarta : Penebar Swadaya.
Meilisza,  N.  2003.  Efisiensi  Pemberian Pakan pada benih Ikan Patin ( Pangasius pangasius )  dalam  Sistem  Keramba
Saluran  Cibalok,  Bogor.  [Skripsi].
Departemen Budidaya Perairan, Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Mujiman,  A.  1991. Makan  Ikan .  Penebar Swadaya : Jakarta.,
Muria, E. S., Masithah, E.D., dan Mubarak, S..  2011.  Pengaruh  Penggunaan  Media dengan  Rasio  C:N  yang  Berbeda terhadap  Pertumbuhan  Tubifex.  Jurnal Kelautan  dan  Perikanan  Universitas Airlangga. Universitas Airlangga. Semarang. Nugroho, Bangun, S. 2016. Kajian Limbah Padat  Pengolahan  Tepung  Tapioka (Onggok)  Sebagai  Bahan  Apung  Pada Komposisi Pakan Ikan Lele (Pelet).Agronomika.  ISSN:  1693-0142. Vol 11, No 01. Oz, M., Bahtiyar, M., Sahin, D., Karsli, Z.,
Oz,  U.  2015.  Using  White  Worm (Enchytraeus  spp.)  as  a  Life  Feed  in Aquarium  Fish  Culture.  Journal  of Academic Documents for Fisheries and Aquaculture, Vol. 1: 165-168.
Singh, R.K, Chavan, S.L., Sapkale, P.H. 2007. Heavy Metal Concentrations in Water,  Sediments  and  Body  Tissues of Red Worm ( Tubifex spp.)Collected from  Natural  Habitats  in  Mumbai, India.  Environ  Monit  Assess,  Vol. 129: 471– 481. Sumardjo,  D.  2009.  Pengantar  Kimia: Buku  Panduan  Kuliah  Mahasiswa
Kedokteran  dan  Program  Strata  I Fakultas Bioeksakta. Buku Kedokteran EGC. Jakarta. 641 hlm. Utami,  Y.  2011.  Pengaruh  Imbangan
Feed  Suplemen  terhadap  Kandungan Protein  Kasar,  Kalsium  dan  Fosfor Dedak  Padi  Yang  Difermentasi dengan Bacillusamyloliquefaciens .Skripsi.
Fakultas Peternakan
Universitas Andalas, Hal:32. Padang.
Wahyuningsih, T. 2001. Budidaya Pakan Alami  Untuk  Ikan.  PT  Penebar
Swadaya, Jakarta.
Wididan,  G.N.  1994.  Application  of Effective  Microorganism  (EM)  and Bokashi on Natural Farming. Bulletin Kyusei Nature farming 03 (2)  47-54. Wijayanti, K. 2010. Pengaruh Pemberian Pakan  Alamai  yang  Berbedaterhadap
Sintasan dan Pertumbuhan Benih Ikan Palmas (Polypterus senegalus senegalus Cuvier, 1829).Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam departemen Biologi Akuakultur. Universitas Indonesia. Depok.59 hlm.