@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
INDUKSI EKSPLAN EMBRIO Intsia bijuga SECARA IN VITRO DENGAN MENGGUNAKAN HORMON KINETIN, GA3 DAN IBA

## (Explants Embryo Induction of Intsia bijuga by In Vitro Using Kinetin, GA3 and IBA Hormones)
Andreas Sinuhaji 1 , Julius D. Nugroho 1  dan Nunang L. May 1
Jurusan Kehutanan, Fakultas Kehutanan Universitas Papua Manokwari, Papua Barat, 98314. Tlp/Fax: +62986211065.
 Penulis Korespondensi: Email: jd_nugroho2004@yahoo.com Diterima: 12 Mar 2017 | Disetujui: 18 Apr 2017

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat  kesesuaian  kombinasi  konsentrasi  beberapa  zat pengatur  tumbuh  terhadap  pertumbuhan  embrio Intsia  bijuga melalui  media  tumbuh. Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  eksperimen  dengan  perhitungan statistik deskriptif melalui ulangan perlakuan sampel. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat variasi waktu dari respon kultur embrio Intsia bijuga terhadap media tumbuhnya. Tingkat  persentasi  hidup  eksplan  dengan  perlakuan  MS  0  dan  MS  +  Kinetin  2  ppm memiliki  persentasi  hidup  eksplan  100%.  Namun  kontaminasi  juga  terlihat  banyak  pada perlakuan media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm dan media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2ppm  +  IBA  1  ppm.  Adanya  kombinasi  hormon kinetin  dan  GA3  akan  mendorong pertumbuhan tunas.
Kata Kunci: Embrio, Intsia bijuga , hormon pertumbuhan, media tumbuh, perlakuan.

## Abstract
The  objective  of  this  study  was  to  reveal  the  appropriate  combination  of  consentrtion treatment  from  several  growing  hormones  towards  the  embryo  growth  of  Intsia  bijuga through growth medias. Method applied in the study was experiment by way of descriptive statistical calculation through repetition of the tested samples. The result pointed out that there  were  variations  in  responding  time  of  the  embryo  among  growth  medias.  Life presentation  rate  of  the  explants  from  MS  0  and  MS  +  Kinetin  2  ppm  treatment  had  a optimal life presentation of 100%. However, contaminations have been found a lot in the treatment  of  MS  +  Kinetin  4  ppm  +  GA 3 2  ppm  and  media  MS  +  Kinetin  4  ppm  +  GA 3 2ppm  +  IBA  1  ppm.  The  combination  of  kinetin  and  GA3  will  accelerate  the  growth  of sprout.
Keywords: Embryo, Intsia bijuga, growing hormone, growth media, treatment.

## PENDAHULUAN
Dewasa  ini,  beberapa  tanaman kehutanan  telah  dieksploitasi  sehingga ketersediaan  tanaman  tersebut  di  alam semakin  menurun,  bahkan  terancam
punah.  Salah  satu  tanaman  yang  menjadi perhatian  saat  ini  adalah  merbau  ( Intsia spp)  yang  populasinya  semakin  terbatas di  alam  karena  adanya  eksploitasi  dan sulitnya  perbanyakan  generatif  secara alami di alam. Jenis ini memiliki  banyak
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
kegunaan  yaitu  sebagai  bahan  bangunan, lantai,  alat  –  alat  rumah  tangga,  tiang listrik,  jembatan  dan  lain-lain.  Melihat banyaknya  manfaat  dan  kegunaan  yang diberikan  tanaman  merbau  dan  semakin kompleksnya  kebutuhan  manusia  bukan tidak  mungkin  untuk  tahun  –  tahun  ke depan  permintaan  akan  kayu  merbau semakin  meningkat  juga  (Sukendro 2010).
Peta hasil olahan Greenpeace menunjukkan  bahwa  dari  seluruh  luas hutan  yang  saat  ini  menjadi  tempat pertahanan  terakhir  populasi  merbau  di Pulau  Papua  83%  sudah  dialokasikan untuk  pembalakan  komersial,  sehingga tinggal  17%  habitat  merbau  yang  masih tumbuh  asli  dan  belum  dirusak  atau  di tebang.  Sukendro  (2010)  memperkirakan bahwa populasi merbau di Indonesia akan punah dalam waktu 35 tahun mendatang, bahkan bisa lebih cepat.
Permudaan  alam  merbau  jarang terdapat karena benih yang jatuh ke tanah sukar  berkecambah  kecuali  jika  jatuh  di atas  tanah  yang  baik  dan  mendapat cahaya penuh. Untuk pertumbuhan semai yang optimal di butuhkan cahaya dengan intensitas  tinggi  dan  hal  ini  akan  lebih cepat dibandingan di bawah tajuk tertutup (Sahupala  2005).  Berdasarkan  kondisi diatas  upaya  terkait  perbanyakan  merbau dengan  tekhnik  non  konvensional  sangat diperlukan.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui  konsentrasi  kombinasi  zat pengatur  tumbuh  GA 3 ,  Kinetin  dan  IBA untuk  pertumbuhan  embrio Intsia  bijuga dengan menggunakan media media MS (8) (Murashige dan Skoog) dengan menggunakan  tehnik  kultur  secara in vitro. Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah sebagai  referensi  bagi  peneliti  dan pembaca  tentang  kombinasi  zat  pengatur
tumbuh  untuk  perbanyakan  tanaman merbau  dengan  menggunakan  eksplan embrio.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Silvikultur, Fakultas Kehutanan  Univeritas  Papua,  selama  3 bulan.  Bahan  utama  yang  digunakan antara  lain  embrio Intsia  bijuga, larutan stock  media  MS  (Murashige  &  skoog), zat  pengatur  tumbuh  kinetin,  indole butyric acid (IBA) dan Giberelin (GA 3 ).

## Metodologi
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  metode  eksperimen dengan menggunakan perhitungan statistik  deskriptif.  Penelitian  ini  terdiri dari  5  perlakuan  dan  7  ulangan  sehingga didapat  35  satuan  percobaan.  Perlakuan dari penelitaian ini adalah sebagai berikut :
A : Media MS 0 (Kontrol) B : Media MS + Kinetin 2 ppm C : Media MS + Kinetin 2 ppm + GA 3 2 ppm D : Media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm E : Media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm.
Data  yang  diperoleh  akan  dianalisis dengan  menggunakan  perhitungan  rerata dari setiap perlakuan

## Pelaksanaan Penelitian
1. Sterilisasi Alat dan Bahan Alat  dan  bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini harus dalam keadaan steril. Sterilisasi  bahan  menggunakan  autoklaf dengan tekanan berkisar antara 15- 20 psi. Cara  sterilisasi  dengan  autoklaf  yaitu dengan mengisi air pada autoklaf sampai pada  batas  yang  telah  ditetapkan,  lalu
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
masukkan  botol  kultur  yang  berisi  ke dalam  autoklaf.  Tutup  autoklaf  dengan rapat,  lalu  dipanaskan  setelah  tekanan pada  autoklaf  mencapai  15-20  psi,  maka sterilisasi dilakukan selama 20 menit.
Pada  sterilisasi  alat  yang  digunakan adalah  oven  yang  bersuhu  60 0 C.  Alatalat yang  disterilkan  yaitu  pingset,  gunting, pisau,  gelas  elemeyer,  botol  kultur,  gelas piala, gelas ukur, cawan petri, pipet tetes, kertas saring. Semua peralatan disterilkan dahulu sebelum digunakan dan pensterilan  melalui  oven  dilakukan semalam  atau  dengan  waktu  yang  lebih lama  untuk  memperoleh  hasil  sterilisasi yang lebih baik.
2. Pembuatan Media Media yang digunakan pada
penelitian  ini  adalah  media  dasar Murashige  &  Skoog  (MS)  dengan perlakuan  MS  0  (kontrol),  Media  MS  + Kinetin  2  ppm,  Media  MS  +  Kinetin  2 ppm + GA 3 2 ppm, Media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm, Media MS + Kinetin 4 ppm  +  GA 3 2  ppm  +  IBA  1  ppm  dan dibuat masing - masing sebanyak 500 ml. Tahapan pembuatan media untuk 500 ml yaitu  masukan  aquades  ke  dalam  gelas piala  sebanyak  200  ml  lalu,  masukan larutan stok A 10 ml, Stok B, 10 ml, stok C 5 ml, Stok D 5 ml, Stok E 2,5 ml, stok
F  2,5  ml,  larutan  vitamin  0,5  ppm,  gula 15  gram lalu di  aduk  dengan menggunakan  magnetik  stirer  sampai larut.  Tambahkan  zat  pengatur  tumbuh pada  masing  –  masing  media  tanam dengan konsentrasi yang telah ditetapkan. Tahap  selanjutnya  yaitu  pengukuran  pH larutan  dengan  menggunakan  kertas lakmus  dan  pH  yang  diinginkan  yaitu berkisar  antara  5,5-5,8.  Jika  pH  kurang dari 5,5 maka bisa ditambahkan beberapa tetes  NaOH  untuk  menaikkan  tingkatan kebasaan  namun,  jika  pH  lebih  dari  5,8
maka  kita  bisa  menambahkan  beberapa tetes  HCl  untuk  menurunkan  tingkat keasaman  larutan.  Tambahkan  agar  agar murni  sebanyak  7,5  g  kedalam  larutan media  tanam  lalu  tambahkan  aquades sampai  garis  500  ml.  Panaskan  larutan hingga  mendidih  sambil  diaduk  dengan mengunakan  magnetik  stirer  yang  juga bisa  juga  digunakan  untuk  pemanasan. Setelah  mendidih  larutan  dituang  pada masing-masing  botol  kultur  steril  masing –  masing  sebanyak  kurang  lebih  20  ml. Lalu  botol  ditutup  dengan  menggunakan plastik transparan dan diikat dengan karet serta  dililit  dengan  plastik  seal  agar penutupan botol lebih tertutup rapat. Lalu media disterilkan menggunakan autoklaf.
3. Sterilisasi Eksplan Biji Intsia bijuga dicuci bersih dengan air  untuk  menghilangkan  kotoran  yang melekat  setelah  bersih  biji  di  kocok dengan  krolox  100%  selama  20  menit. Kulit biji dilukai lalu direndam dengan air panas dengan suhu 70 0 – 80 0 hingga kulit merbau  yang  keras  menjadi  lebih  lunak. Biji  kocok  kembali  dengan  krolox  30% selama  10  menit  lalu  bilas  dengan  air steril.  Biji  yang  sudah  steril  di  belah dengan  pisau  steril  guna  menggambil embrio  yang  terdapat  pada  biji.  Embrio yang  sudah  diperoleh  kemudian  dikocok dengan betadin lalu tiriskan dengan kertas saring steril.
4.   Penanaman Eksplan Eksplan  yang  telah  steril  diambil dengan  pingset  lalu  ditanam  pada  media tanam  yang  telah  disediakan.  Buka  tutup plastik  botol  lalu  panaskan  lubang  botol agar  tidak  ada  kontaminasi  oleh  bakteri maupun  fungi,  pingset  yang  digunakan terlebih  dahulu  dicelupkan  pada  alkohol lalu  ujung  pingset  dipanasi  oleh  api bunsen  agar  pingset  lebih  steril.  Setelah eksplan  ditanam  pada  media  lalu  botol
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
kembali ditutup dengan palstik dan diikat dengan  karet  serta dililit  kembali  dengan plastik  warp.  Setelah  proses  selesai dilakukan pada laminar air flow lalu botol kultur  ditaru  pada  rak  kultur  di  ruangan kultur.
5.  Pengamatan dan Evaluasi Pengamatan  kultur  jaringan  ini dilakukan  setiap  hari  untuk  melihat perkembangan  dari  eksplan  yang  telah ditanam.  Dari  pengamatan  akan  tahu berapa banyak ekspaln yang berkecambah dengan  baik  dan  berkecambah  pada minggu  keberapa  maupun  eksplan  yang terkena kontaminasi.
Variabel Pengamatan:
a. Persen Hidup Eksplan adalah eksplan yang  tumbuh  (%)  =  ∑  eksplan  yang tumbuh/∑  semua  eksplan  yang dikulturkan x 100.
b. Persen  eksplan  terkontaminasi  adalah eksplan  terkontaminasi  (%)  =  ∑ eksplan terkontaminasi/∑ semua eksplan yang dikulturkan x 100. c. Persen  Browing  adalah  eksplan Browing (%) = ∑ eksplan browing/∑ semua  eksplan  yang  dikulturkan  x 100.
d. Persen eksplan berakar adalah eksplan berakar  (%)  =  ∑  eksplan  berakar/∑ semua  eksplan  yang  dikulturkan  x 100.
e. Persen  eksplan  bertunas  adalah eksplan  bertunas  (%)  =  ∑  eksplan bertunas/∑  semua  eksplan  yang dikulturkan x 100.
f. Persen  eksplan  memanjang  adalah eksplan  memanjang  (%)  =  ∑  eksplan memanjang/∑  semua  eksplan  yang dikulturkan x 100.
g. Waktu terbentuknya tunas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Tahapan  pertumbuhan  dari  embrio Intsia  bijuga yaitu  pemanjangan  embrio, perkecambahan,  pembentukan  akar  dan pembentukan  tunas.  Hasil  pengamatan tertera pada Tabel 1. Tabel  1.  Respon  kultur  embrio Intsia  bijuga yang  dikulturkan  pada  media  MS  terhadap kombinasi zat pengatur tumbuh. Perlakuan EH (%) EK (%) EB (%) EM (%) EA (%) ET (%) Waktu terbentuknya tunas MS 0 100 0 14 100 71 43 Minggu ke 5 MS + Kin 2 ppm 100 0 85 71 14 0 - MS + Kin 2 ppm + GA 3 2 ppm 86 14 28 71 14 14 Minggu ke 3 MS + Kin 4 ppm + GA 3 2 ppm 72 28 28 57 0 28 Minggu ke 3 MS + Kin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm 72 28 28 71 0 43 Minggu ke 3
Keterangan : EH = Eksplan Hidup, EK = Eksplan Kontaminasi, EB = Eksplan Browing, EM = Eksplan Memanjang, EA = Eksplan Berakar, ET = Eksplan Bertunas.
1.   Persen Hidup Eksplan Pada perlakuan MS 0 memiliki persen hidup 100%, media MS + Kinetin 2 ppm
memiliki  persen  hidup  100%,  media  MS +  Kinetin  2  ppm  +  GA 3 2  ppm  memiliki persen hidup 86%, media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm memiliki persen hidup
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
72% dan pada media MS + Kinetin 4 ppm +  GA 3 2ppm  +  IBA  1  ppm  memiliki persen hidup 72%.
2.   Persen Eksplan Terkontaminasi Beberapa eksplan tidak dapat bertahan hidup dikarenakan tekontaminasi oleh jamur maupun bakteri. Dalam  penelitian  ini,  kontaminasi  tidak hanya  terjadi  pada  eksplan  melainkan kontaminasi  juga  terjadi  pada  media. Media  yang  telah  terkontaminasi  akan
menghambat pertumbuhan embrio hingga embrio mati (Gambar 1). Pada media MS 0  dan  media  MS  +  Kinetin  2  ppm memiliki  persen  kontaminasi  0%,  media MS  +  Kinetin  2  ppm  +  GA 3 2  ppm memiliki persen kontaminasi 14%, media MS  +  Kinetin  4  ppm  +  GA 3 2  ppm  dan pada media  MS  +  Kinetin  4  ppm  +  GA 3 2ppm  +  IBA  1  ppm  memiliki  persen kontaminasi 28%.
Gambar 1. Kontaminasi yang terjadi pada eksplan dan media pada minggu ke dua. (A) MS + kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm , (B) MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm.
3.   Persen Browning Persen browning menunjukkan bahwa perlakuan dengan media MS 0 menghasilkan  persen  eksplan browning 14%, media MS + Kinetin 2 ppm  persen eksplan browning 85%,  media  MS  + Kinetin  2  ppm  +  GA 3 2  ppm  persen browning 28%,  media  MS  +  Kinetin  4 ppm  +  GA 3 2  ppm  persen browning 28 dan  pada  media  MS  +  Kinetin  4  ppm  + GA 3 2  ppm  +  IBA  1  ppm  persen browning 28%.
4.   Persentasi Eksplan Memanjang Sebelum terbentuknya akar dan tunas, embrio  terlebih  dahulu  mengalami elongasi. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa  persentasi  memanjangnya  eksplan
pada  media  MS  0  sebesar  100%,  media MS + Kinetin 2 ppm sebesar 71%, media MS  +  Kinetin  2  ppm  +  GA 3 2  ppm sebesar 71%, media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm sebesar 57% dan media MS +  Kinetin  4  ppm  +  GA 3 2  ppm  +  IBA  1 ppm  memiliki  persen  eksplan  sebesar 71%.
5.   Persentasi Eksplan Berakar Dari hasil pengamatan pada penelitian ini  terlihat  bahwa  tidak  semua  eksplan menghasilkan  akar.  Beberapa  eksplan hanya  mengeluarkan  satu  akar  dan beberapa  lainya  memiliki  cabang  – cabang  akar.  Pada  perlakuan  MS  0 persentasi  eksplan  berakar  71%  ,  pada perlakuan  media  MS  +  Kinetin  2  ppm
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
memiliki  persen  eksplan  berakar  14%  , pada media MS + Kinetin 2 ppm + GA 3 2
ppm  memiliki  persen  eksplan  berakar 14%, pada media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2  ppm  memiliki  persen  eksplan berakar  0  %  ,  dan  pada  media  MS  + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm memiliki  persen  eksplan  berakar  0  %.
Gambar 2. Pertumbuhan akar pada ekspkan embrio Intsia bijuga pada umur 9 minggu (A) Media MS 0, (B) Media MS + Kinetin 2 ppm, (C) MS + Kinetin 2 ppm + GA 3 2 ppm).
6.   Persentasi Eksplan Bertunas Dari  hasil  pengamatan  munculnya tunas  pada  tiap  perlakuan  relative beragam. Pada perlakuan MS 0 persentasi eksplan  bertunas  43%,  pada  perlakuan media  MS  +  Kinetin  2  ppm  memiliki persentasi  eksplan  bertunas  0  %  ,  pada media MS + Kinetin 2 ppm + GA 3 2 ppm
memiliki  persentasi  eksplan  bertunas 14%, pada media MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2  ppm  memiliki  persentasi  eksplan bertunas  28%  ,  dan  pada  media  MS  + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm memiliki  persentasi  eksplan  bertunas 43%.
Gambar 3. Petumbuhan tunas eksplan embrio pada umur 9 minggu dalam kultur (A) Media MS 0, (B) MS + Kinetin 2ppm + GA 3 2ppm, (C) MS + Kinetin 4ppm + GA 3 2ppm, D. MS + Kinetin 4ppm + GA 3 2ppm + IBA 1ppm.
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA

## PEMBAHASAN
Tingkat persentasi hidup eksplan pada penelitian  ini  terlihat  bahwa  pada perlakuan MS 0 dan MS + Kinetin 2 ppm memiliki persentasi hidup eksplan 100%. Hal  ini  terjadi  karena  tingkat  kebersihan eksplan  maupun  media  dan  lingkungan sekitar  sangatlah  baik.  Namun,  hal tersebut tidak terjadi pada perlakuan yang lainya.  Kesterilan  pada  kegiatan  kultur jaringan  haruslah  diutamakan,  karena tingginya  tingkat  keberhasilan  salah satunya  dikarenaan  minimnya  tingkat kontaminasi  baik  pada  eksplan  maupun pada  media  tanam.  Pada  penelitian  ini tingkat  kontaminasi  yang  tinggi  di sebabkan  oleh  bakteri.  Kurangnya kebersihan,  dapat  menyebabkan  media tanam yang telah disiapkan terkontaminasi  oleh  bakteri.  Terlihat bahwa kontaminasi banyak terdapat pada perlakuan  media  MS  +  Kinetin  4  ppm  + GA 3 2  ppm  dan  media  MS  +  Kinetin  4 ppm  +  GA 3 2ppm  +  IBA  1  ppm  yaitu masing  –  masing  28%  atau  dari  7 ualangan terdapat 2 ulangan terkontaminasi, dan perlakuan media MS
0  dan  media  MS  +  Kinetin  2  ppm memiliki persen kontaminasi 0%.
Yuliarti  (2010)  melaporkan  bahwa kontaminasi adalah gangguan yang sangat umum  terjadi  dalam  kegiatan  kultur jaringan.  Munculnya  gangguan  ini  bisa dipahami  sebagai  konsekuensi  yang sangat wajar atas penggunaan media yang diperkaya.  Fenomena  kontaminasi  ini sangat  beragam,  dapat  dilihat  dari  jenis kontaminasinya (bakteri, jamur, virus). Dari  hasil  pengamatan  eksplan  embrio yang  ditanam  pada  awalnya  akan memanjang  terlebih  dahulu  dan  setelah itu akan memunculkan akar dan bertunas, namun  hal  ini  tidak  terjadi  pada  setiap perlakuan.  Pada perlakuan  MS  +  Kinetin
4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm setelah embrio memanjang tunas akan muncul di minggu  ke  tiga  walaupun  akar  dari eksplan  belum  keluar.  Pada  perlakuan kontrol  yaitu  MS  0  proses  pertumbuhan embrio  dimulai  dengan  pemanjangan embrio,  diikuti  pertumbuhan  akar  pada minggu  kedua  dan  tunas  pada  minggu kelima.
Browning (pencoklatan)  adalah  suatu keadaan dimana munculnya warna coklat atau  hitam  pada  eksplan  atau  media tanam  karena  adanya  produksi  senyawa phenol. Senyawa tersebut dapat menghambat pertumbuhan dan perkembangan eksplan. Pencoklatan umumnya  merupakan  tanda  adanya kemunduran  fisiologi  eksplan.  Tidak jarang  kondisi  ini  diakhiri  dengan kematian  eksplan  (Yuliarti  2010).  Pada penelitian  ini  persen  browning  yang paling  tinggi  terdapat  pada  perlakuan media MS + Kinetin 2 ppm yaitu sebesar 85%, sedangkan pada perlakuan  lain rata –  rata  persen  browning  di  bawah  30  %. Dari  hasil  ini  jelas  terlihat  bahwa  pada perlakuan  MS  +  Kinetin  2  ppm,  eksplan atau  media  tanam  banyak  memproduksi senyawa phenol. Penggunaan kinetin saja akan  mendorong  peningkatan  produksi senyawa phenol.
Pada  perlakuan  MS  0  persentasi pertumbuhan  akar  sangatlah  tinggi  yaitu 71%, namun setelah penambahan hormon kinetin  dengan  konsentrasi  2  ppm persentasi  pertumbuhan  akar  menjadi menurun  seperti  pada  perlakuan  MS  + Kinetin 2 ppm yaitu 14%. Pada perlakuan berikutnya  konsentrasi  kinetin  di  naikan menjadi 4 ppm yaitu MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm dan MS + Kinetin 4 ppm + GA 3 2 ppm + IBA 1 ppm, dari perlakuan ini  pertumbuhan  akar  menjadi  0  %.  dari hasil  yang  diperoleh  terlihat  bahwa
@ Asosiasi Peneliti Biodiversitas Papuasia - Fakultas Kehutanan UNIPA
dengan  penambahan  dan  peningkatan konsentrasi hormon kinetin dapat menghambat pertumbuhan akar. Hormon kinetin menghambat pertumbuhan  akar,  namun  sebaliknya hormon  kinetin  dengan  dikombinasikan dengan  hormom  GA 3 dan  IBA  terlihat mendorong  dalam  pembentukan  tunas. Pada  perlakuan  MS  0  persentasi pertumbuhan  tunas  43%.  Hal  ini  juga terjadi  pada  perlakuan  MS  +  Kinetin  4 ppm  +  GA 3 2  ppm  +  IBA  1  ppm  yaitu sebesar 43%. Namun,  yang membedakan pada  2  perlakuan  ini  adalah  waktu terbentuknya tunas. Pada perlakuan MS 0 tunas muncul pada minggu kelima namun pada  perlakuan  MS  +  Kinetin  4  ppm  + GA 3 2  ppm  +  IBA  1  ppm  tunas  muncul pada  minggu  ketiga.  Pada  perlakuan  MS 0  +  Kinetin  2  ppm  tidak  menghasilkan tunas.
Persentasi  eksplan  bertunas  pada perlakuan MS + Kinetin 2 ppm yaitu 0%,
namun pada perlakuan berikutnya ditambahkan hormon GA 3 dengan konsentrasi  2  ppm,  persentasi  esksplan yang  bertunas  meningkat  menjadi  14%. Peran  GA3  pada  perkecambahan  yaitu mempercepat  perkecambahan  biji  dan kuncup  tunas,  pemajangan  batang  dan kuncup  daun  dan  diferensiasi  akar (Campbell  et  al.  2003).  Selaian  elongasi batang,  giberelin  mengendalikan  dari berbagai macam aspek dari perkecambahan, termasuk menghilangkan dormansi  dan  mobilisasi  endosperm cadangan (Lincoln and Eduardo 2002).
Dari  hasil  penelitian,  terlihat  jika  pada perlakuan hanya terdapat hormone kinetin maka  pertumbuhan  tunas  akan  sangat sulit. Oleh karena itu harus dikombinasikan  dengan  hormon  GA3 untuk  mendorong  pertumbuhan  tunas.
Dengan  penambahan  konsentrasi  kinetin dari  2  ppm  hingga  4  ppm  akan  menekan pemunculan akar, walaupun
dikombinasian  dengan  GA3  2  ppm  dan IBA  1  ppm  belum  dapat  menghasilkan akar.  Hal  ini  bisa  diakibatkan  karena tingginya  konsentrasi  hormon  kinetin pada tiap-tiap perlakuan.

## DAFTAR PUSTAKA
Campbell  NA,  Reece  JB  and  Mitchell LG.  2003.  Biologi.  Alih  bahasa:  L. Rahayu,  EIM  Adil,  Anita  N,  Andri, WF  Wibowo,  W  Manalu.  Penerbit Erlangga. Jakarta.
Lincoln  and  Eduardo.  2002.  Plant physiology.  Sinauer  Associate,  Inc, Publishers. Sunderland.
Sahapula  2005.  Karakteristik  dari  pohon merbau ( Intsia bijuga O.K) http://www.irwantoshut.net/intsia_bij uga_merbau.html .  16  April  2013 22:33:17. Sukendro. 2010. Studi pembiakan vegetatif Intsia  bijuga (Colebr.)  O.K. melalui  grafting.  Jurnal  Silvikultur Tropika. IPB. Bogor.
Yuliarti N. 2010. Kultur jaringan tanaman Skala  rumah  tangga.  Lyli  Publisher. Yogyakarta.