Identifikasi Kandungan Rhodamin B, Methanyl Yellow dan Escherichia coli pada Manisan Mangga Basah di Daerah Cirebon
Identification of Rhodamine B, Methanyl Yellow and Escherichia coli in Wet Mango in Cirebon Area
Sarah Shafira 1 , Rosy Hutami 1a , M. Fakih Kurniawan 1
1Jurusan  Teknologi  Pangan  dan  Gizi,  Fakultas  Teknik  dan  Ilmu  Pangan Halal, Universitas Djuanda Bogor, Jl. Tol Ciawi No.1, Kotak Pos 35 Ciawi, Bogor 16720
a Korespondensi : Rosy Hutami, E-mail: rosy.hutami@unida.ac.id
Diterima: 30 – 12 – 2021, Disetujui: 28 – 04 - 2022

## ABSTRACT
Wet mango is one of the popular products in Cirebon area. This study aims to determine the food safety of wet mango sold in the Cirebon area. The qualitative test for rhodamine B and methanyl yellow used a test kit, while the quantitative test for Escherichia coli used the most probable number (MPN). The research sample was taken using a purposive sampling method, totaling 10 samples of wet mangoes from  7  different  locations  in  the  Cirebon  area.  The  data  obtained  based  on  the  identification  of rhodamine B and methanyl yellow will be analyzed qualitatively descriptively, while the results of the identification of Escherichia coli will be analyzed quantitatively. The result was that all samples did not contain rhodamine B and methanyl yellow, but 90% of the samples contained Escherichia coli which exceeded  the  maximum  limit  set  by  SNI  7338:2009.  In  this  study,  almost  all  samples contained Escherichia coli which exceeded the maximum limit.
Keywords: Escherichia coli , methanyl yellow, rhodamin B, wet mango

## ABSTRAK
Manisan mangga merupakan salah satu produk olahan khas daerah yang terkenal di daerah Cirebon. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keamanan pangan manisan mangga basah yang dijual di daerah Cirebon. Uji kualitatif rhodamin B dan methanyl yellow menggunakan test kit , sedangkan uji kuantitatif Escherichia  coli menggunakan most  probable  number (MPN).  Sampel  penelitian  diambil dengan menggunakan metode purposive sampling yang berjumlah 10 sampel manisan mangga basah yang berasal dari 7 lokasi yang berbeda di daerah Cirebon. Data yang didapatkan berdasarkan hasil identifikasi rhodamin B dan methanyl yellow dianalisis secara kualitatif deskriptif, sedangkan hasil identifikasi  kandungan Escherichia  coli dianalisis  secara  kuantitatif.  Hasilnya  seluruh  sampel  tidak mengandung rhodamin B dan methanyl yellow, tetapi sebanyak 90% sampel mengandung Escherichia coli yang melebihi batas maksimal yang ditetapkan oleh SNI 7338:2009. Pada penelitian ini, hampir seluruh sampel mengandung Escherichia coli yang melebihi batas maksimum.
Kata kunci: Escherichia coli , manisan mangga basah, methanyl yellow, rhodamin B
Shafira, S., Hutami, R., & Kurniawan, M. F. (2022). Identifikasi kandungan rhodamin b, methanyl yellow dan Escherichia coli pada manisan mangga basah di daerah Cirebon. Jurnal Agroindustri Halal, 8(1), 01 - 12.

## PENDAHULUAN
Menurut Gultom dan Lies (2018), manisan mangga merupakan salah satu produk olahan khas  daerah  yang  terkenal  di  daerah  Cirebon.  Manisan  mangga  basah  masih  sedikit  yang memiliki  izin  edar,  apalagi  produknya  dijual  di  pinggir  jalan,  sehingga  berdampak  pada keamanan pangan yang masih dipertanyakan keamanannya. Keamanan pangan merupakan persyaratan  mutlak,  yaitu  pangan  yang  dikonsumsi  masyarakat  harus  aman,  dalam  arti terbebas  dari  cemaran  kimia,  mikrobiologi  dan  fisik.  Rhodamin  B  dan  methanyl  yellow merupakan bahan tambahan pangan yang dilarang penggunaannya dalam pangan (Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia,  2012;  Badan  Pengawasan  Obat  dan  Makanan,  2019),  akan tetapi  belum  adanya  laporan  terkait  adanya  kasus  penemuan  manisan  mangga  yang mengandung pewarna rhodamin B dan methanyl yellow di daerah Cirebon mencakup wilayah Kota dan Kabupaten Cirebon.
Pada produk manisan buah sering ditambahkan cabai merah sebagai bahan baku bumbu manisan buah, penggunaan cabai merah sendiri ada yang berasal dari cabai merah segar dan cabai  merah  yang  telah  diolah  menjadi  cabai  giling  atau  cabai  bubuk  (Afifah,  2021). Berdasarkan hasil penelitian Ripaldy et al. (2017), didapatkan sampel cabai merah giling yang memiliki kandungan rhodamin B sebanyak 3 sampel (4,68%) yang dijual di pasar Sambilegi dan  pasar  Sleman  dari  delapan  pasar  tradisional  yang  menjual  cabai  merah  giling  di Kabupaten Sleman, Daerah Istimewa Yogyakarta.
Pewarna sintetik methanyl yellow banyak digunakan untuk beberapa produk makanan, salah satunya adalah manisan mangga. Methanyl yellow merupakan salah satu pewarna yang telah dilarang digunakan dalam pangan. Hasil pengawasan yang dilakukan oleh Pemerintah Kota  Palembang  bersama  Balai  Besar  Pengawasan  Obat  dan  Makanan  Palembang,  yang dilakukan di salah satu pusat retail di Kota Palembang menemukan manisan mangga pedas mengandung zat kimia berbahaya yaitu pewarna tekstil berupa methanyl yellow (Inge, 2021).
Beberapa penelitian mengenai kandungan cemaran Escherichia coli pada produk pangan diantaranya dilakukan oleh Rahmani & Handayani (2016), yang mengidentifikasi kontaminasi bakteri Escherichia  coli pada  makanan  dan  minuman  pada  penjual  jajanan  di  lingkungan pendidikan  Muhammadiyah  Limau,  Jakarta  Selatan.  Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan oleh Napitupulu et al. (2019), dari  30 sampel jajanan manisan, terdapat 2 (dua) sampel adanya bakteri Escherichia coli pada jajanan manisan asam potong di jajanan manisan pedagang A, dan manisan kolang-kaling pedagang B yang dijual di Pasar Ramai Kota Medan. Mengingat pentingnya keamanan pangan yang dikonsumsi oleh tiap orang, maka perlu untuk dilakukan uji terhadap kandungan zat-zat pewarna berbahaya dan bakteri yang terkandung dalam suatu produk makanan. Oleh karena itu pada penelitian ini dilakukan analisis rhodamin B, methanyl yellow dan Escherichia coli pada manisan mangga basah di daerah Cirebon, untuk dapat mengetahui keamanan dari produk tersebut.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah manisan mangga basah yang dibeli dari beberapa  pedagang  manisan  mangga  yang  dijual  di  tempat  padat  mobilitas/transportasi umum,  berdekatan  dengan  pasar  tradisional,  maupun  di  tempat  yang  merupakan  pusat perbelanjaan  oleh-oleh  yang  berada  di  daerah  Cirebon  mencakup  wilayah  Kabupaten  dan Kota  Cirebon,  pewarna  rhodamin  B,  pewarna methanyl  yellow,  pewarna  pangan berwarna merah  cabai  dan  kuning  muda  merek  Koepoe-koepoe,  pewarna  tekstil  berwarna  merah lombok  1  dan  kuning  podang  5  merek  Padi  Gunting,  air,  gula  pasir,  cabai  merah,  garam, Aquadest, Buffered Destiled Water (BDW), Lactose Broth (LB), dan Brilliant Green Lactose Bile Broth (BGLB).
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah tabung reaksi  (150 x 15 mm), beaker glass 100 mL, spatula, sendok,  blender chopper , timbangan, erlenmeyer 500 mL, inkubator, pipet ukur 1 mL, Ose, tabung durham (75 x 10 mm), test kit rhodamin B merek Labtest dari Labtest, Jakarta-Indonesia dan test kit methanyl yellow merek Labtest dari Labtest, Jakarta- Indonesia.

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Cirebon  pada  tanggal  07  September-02  Oktober  2021. Analisis  penelitian  ini  dilakukan  di  kediaman  peneliti  di  Desa  Wanasaba  Kidul,  Kecamatan Talun, Kabupaten Cirebon dengan menerapkan Good Laboratory Practicing dan Laboratorium Kesehatan Daerah Kabupaten Cirebon.

## Metode Penelitian
Metode  penelitian  mencakup  penentuan  metode  sampling,  validasi  kit,  pengambilan sampel,  pengujian  sampel  untuk  mengetahui  kandungan  rhodamin  B  dan  methanyl  yellow secara  kualitatif,  pengujian  sampel  untuk  mengetahui  kandungan Escherichia  coli secara kuantitatif dan pengambilan kesimpulan. Diagram alir penelitian dapat dilihat pada Gambar 1.
Pengujian rhodamin B dan methanyl yellow Kit tervalidasi Ya Tidak Kit tidak dapat digunakan Kit dapat digunakan Penetapan area sampling Pengambilan sampel Pengujian Escherichia coli dan perbanding
kan dengan SNI 7388:2009
Penentuan jenis sampling Validasi Kit Pengambilan Kesimpulan Mencari alternatif kit lain
Penelusuran pedagang manisan mangga basah di Kabupaten dan Kota Cirebon Penentuan area sampling
Penetapan area sampling
Validasi Kit

## Validasi Kit
Untuk mengetahui validitas reagen test kit yang digunakan dalam penelitian ini, maka dilakukannya validasi kit untuk mengetahui apakah test kit yang digunakan, dapat digunakan sesuai  dengan  klaim  yang  berguna  untuk  menguji  spesifik  bahan  pewarna  yang  dilarang berupa  rhodamin  B  dan  methanyl  yellow.  Validasi  kit  ini  dilakukan  dengan  menggunakan kontrol positif dan kontrol negatif rhodamin B dan methanyl yellow.
a) Validasi kit rhodamin B:
• Kontrol positif: manisan mangga basah yang dibuat sendiri dengan pewarna rhodamin B.
• Kontrol negatif: manisan mangga basah yang dibuat sendiri tanpa pewarna.
• Kontrol  dengan  pewarna  tekstil:  manisan  mangga  basah  yang  dibuat  sendiri  dengan pewarna tekstil merah Lombok 1 merek Padi Gunting.
• Kontrol dengan pewarna pangan: manisan mangga basah yang dibuat sendiri dengan pewarna pangan merah cabai merek Koepoe-koepoe.
b) Validasi kit methanyl yellow:
• Kontrol positif: manisan mangga basah yang dibuat sendiri dengan pewarna methanyl yelloiw.
• Kontrol negatif: manisan mangga basah yang dibuat sendiri tanpa pewarna.
• Kontrol  dengan  pewarna  tekstil:  manisan  mangga  basah  yang  dibuat  sendiri  dengan pewarna tekstil kuning podang 5 merek Padi Gunting.
• Kontrol dengan pewarna pangan: manisan Mangga basah yang dibuat sendiri dengan pewarna pangan kuning muda merek Koepoe-koepoe.

## Teknik Pengambilan Sampel
Teknik pengambilan sampel yang digunakan adalah purposive sampling , yaitu metode sampling dengan  pengambilan  sampel  secara  sengaja  sesuai  dengan  persyaratan  yang diperlukan (Fachrul, 2007), dan metode purposive sampling merupakan teknik pengambilan sampel dengan menentukan kriteria-kriteria tertentu (Sugiyono, 2008). Metode sampling ini dipilih karena tidak diketahui jumlah populasi penjual manisan mangga di wilayah Cirebon dan  penjualan  manisan  mangga  tidak  tersebar  secara  merata  di  seluruh  lokasi  di Kota/Kabupaten  Cirebon.  Penjualan  mangga  hanya  di  lokasi  tertentu  yang  biasanya  padat akan transportasi umum, berdekatan dengan pasar tradisional, merupakan sentra produsen buah mangga dan bertempat di pusat perbelanjaan oleh-oleh khas  Cirebon yang berada di Kota/Kabupaten Cirebon.
Tabel 1. Daftar lokasi dan jumlah pedagang manisan manga No. Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah Pedagang 1. Terminal Harjamukti 3 2. Lampu Merah Palimanan 1 3. Pinggir Jalan Ki Ageng Tapa 1 4. Pinggir Jalan Pahlawan 1 5. Pinggir Jalan Lemah Wungkuk 2 6. Pinggir Jalan Jagasatru 1 7. Pinggir Jalan Kutagara 1 Total 10
Kriteria yang digunakan dalam pengambilan dan banyaknya sampel manisan mangga pada  penelitian  ini  didapatkan  berdasarkan  data  hasil  survey  pencarian  titik  tempat ditemukan adanya pedagang manisan mangga pinggir jalan di daerah Cirebon. Total sampel manisan mangga yang digunakan pada penelitian ini, diambil dari 10 pedagang yang berbeda
yang  terdapat  di  area  Kota/Kabupaten  Cirebon.  Unit  percobaan  yang  digunakan  pada pengujian methanyl yellow dan rhodamin B adalah 3 ulangan dari setiap pedagang dan unit percobaan pada pengujian Escherichia coli adalah 1 ulangan percobaan dari setiap pedagang.

## Analisis Sampel
1. Deteksi rhodamin B dengan test kit Diagram alir deteksi rhodamin B dengan test kit dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Deteksi rhodamine B dengan test kit (Labtest dengan Modifikasi, 2021)
2. Deteksi methanyl yellow dengan test kit Diagram alir deteksi methanyl yellow dengan test kit dapat dilihat pada Gambar 3.
Penimbangan sebanyak 25 gr
Penghalusan dengan menggunakan blender
Pemindahan sampel ke dalam beaker glass 100 mL Pengambilan sampel ke dalam tabung reaksi sebanyak 3 mL Manisan mangga basah 50 mL aquadest Pengadukan hingga homogen 1 tetes reagen rhodamin-1 Pengadukan hingga homogen
3 tetes reagen rhodamin-2
Perubahan warna menjadi warna ungu, maka sampel positif mengandung rhodamin B Tidak terjadi perubahan warna menjadi warna ungu, maka sampel negatif mengandung rhodamin B Pengambilan kesimpulan
Gambar 3 Deteksi deteksi methanyl yellow dengan test kit (Labtest dengan Modifikasi, 2021) 3. Deteksi kandungan bakteri Escheria coli
Gambar 4. Diagram alir persiapan sampel uji E. coli (Badan Standarisasi Nasional, 1992)
Penimbangan sebanyak 25 gr Penghalusan dengan menggunakan blender Manisan mangga basah 50 mL aquadest Pengadukan hingga homogen 3 tetes reagen methanyl yellow-1
Perubahan warna menjadi warna merah seulas sampai merah tua atau merah keunguan, maka sampel positif mengandung methanyl yellow Tidak terjadi perubahan warna menjadi warna merah seulas sampai merah tua atau merah keunguan, maka sampel negatif mengandung methanyl yellow
Pengambilan kesimpulan Pemindahan sampel ke dalam beaker glass 100 mL
Pengambilan sampel ke dalam tabung reaksi sebanyak 3 mL
Manisan mangga basah Penimbangan sebanyak 25 gr Pemindahan sampel ke dalam erlenmeyer 225 mL buffered
destiled water (BDW)
Pengocokkan hingga diperoleh suspensi dengan
pengenceran 10 -1
Gambar 5. Diagram alir uji praduga E. coli (BSN, 1992)
Gambar 6. Diagram alir uji penegasan E. coli (BSN, 1992)
Hasil positif ditandai dengan terbentuknya gas, yang dapat dilihat dengan melayangnya tabung durham, yang selanjutnya dapat dilanjutkan dengan tes penegasan Hasil negatif ditandai dengan tidak terbentuknya gas pada tabung durham, maka tidak perlu dilakukan tes penegasan
Penginokulasian masing-masing sampel dan LB ke dalam 9 tabung LB
Penginkubasian pada suhu 37 o C selama 24-48 jam
1 mL sampel manisan mangga 10 -1 (3); 10 -2
(3); 10 -3 (3) dan 10 mL
Lactose Broth (LB) (9)
Penyiapan 9 tabung tes praduga yang di dalamnya sudah terisi dengan tabung durham dalam posisi terbalik Pencatatan jumlah tabung BGLB yang positif, ditandai dengan terbentuknya gas
Perbandingkan hasil jumlah  tabung BGLB yang positif dengan tabel Angka Paling Mungkin (APM) Escherichia coli
Pengambilan kesimpulan Pengambilan 1-2 ose ke dalam tabung Penginokulasian 5 mL brilliant green
lactose bile broth
(BGLB)
Penginkubasian tabung BGLB pada suhu 37 o C selama 24-48 jam
Pengamatan terbentuknya gas pada tabung durham
Pengocokkan setiap tabung yang menunjukkan gas positif pada uji praduga

## Analisis Data
Data yang didapatkan berdasarkan hasil identifikasi rhodamin B dan methanyl yellow pada manisan mangga basah dianalisis secara kualitatif deskriptif, dimana data akan diolah secara  komputerisasi,  disusun  dan  disajikan  dalam  tabel  disertai  dengan  penjelasan- penjelasannya  (Syarfaini  &  Rusmin,  2014).  Sedangkan  hasil  kandungan  bakteri Escherichia coli dianalisis secara kuantitatif dilakukan perhitungan jumlah tabung yang positif pada tes penegasan untuk mengetahui kandungannya dan dibandingkan dengan SNI batas maksimum cemaran mikroba dalam pangan, pada kategori pangan manisan buah basah yaitu < 3 APM/g (BSN, 2009).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Validasi Kit Rhodamin B dan Methanyl Yellow
Berdasarkan hasil validasi kit rhodamin B dan methanyl  yellow yang telah dilakukan, didapatkan  bahwa test  kit rhodamin  B  dan  methanyl  yellow  merek  Labtest  dari  Labtest, Jakarta-Indonesia  dinyatakan  valid,  sehingga  dapat  digunakan  sebagai  pereaksi  untuk dilakukan analisis sampel manisan mangga basah berupa rhodamin B dan methanyl yellow.
Pada kit merek Labtest diketahui bahwa kemampuan kit dalam mendeteksi kandungan rhodamin B dan methanyl yellow yaitu minimal 2 ppm atau setara dengan 2 mg/L atau setara dengan 2 mg/Kg, yaitu dapat mendeteksi hingga 2 mg kandungan rhodamin B atau methanyl yellow dalam 1 L atau 1 Kg dalam suatu zat atau sampel. Limit deteksi adalah konsentrasi zat terendah dari zat yang masih dapat ditentukan. Semakin kecil nilai limit deteksi suatu sensor kimia, maka akan semakin baik karakteristik sensor tersebut (Prabowo, 2012).

## Hasil Identifikasi Rhodamin B dengan Test Kit
Hasil identifikasi rhodamin B pada sampel manisan mangga basah dengan menggunakan test kit merek Labtest, dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil identifikasi kandungan rhodamin B dengan test kit No. Sampel Pengamatan Hasil a b c 1. KTG1 Oranye Oranye Oranye - 2. LW1 Kuning Kuning Kuning - 3. LW2 Kuning Kuning Kuning - 4. JGS1 Kuning pucat Kuning pucat Kuning pucat - 5. PH1 Kuning pucat Oranye Kuning pucat - 6. KAT1 Oranye Kuning Kuning - 7. TH1 Oranye pucat Putih keruh Putih agak Oranye pucat - 8. TH2 Oranye Oranye Oranye - 9. TH3 Kuning pucat dan keruh Kuning pucat dan keruh Kuning pucat dan keruh - 10. LMP1 Oranye pucat Oranye Pucat Oranye Pucat -
Keterangan: KTG : Jl. Kutagara; LW : Jl.  Lemahwungkuk; JGS: Jl. Jagasatru; PH : Jl. Pahlawan; KAT : Jl. Ki Ageng Tapa; TH : Terminal Harjamukti; LMP : Lampu Merah Palimanan; 1,2,3 : jumlah pedagang dalam satu lokasi; a,b,c : ulangan ke-1,2,3; - : negatif.
Berdasarkan  hasil  identifikasi  kandungan  rhodamin  B  didapatkan  bahwa  seluruh sampel manisan mangga basah tidak mengandung pewarna sintetik rhodamin B. Hal serupa juga didapatkan pada penelitian Masthura (2019), yaitu dari lima sampel manisan buah yang diuji, empat diantaranya tidak terdeteksi mengandung pewarna sintetik rhodamin B, karena tidak  adanya  reaksi  antara  reagen  rhodamin  B  dengan  sampel.  Analisis  terhadap  adanya rhodamin B akan positif dideteksi apabila warna cairan uji berubah menjadi warna ungu, dan
berdasarkan  3  sampel  yang  diuji  semuanya  tidak  mengandung  rhodamin  B  (Subhan et  al., 2019).
Hal  tersebut  dikarenakan  cabai  yang  digunakan  dalam  manisan  mangga  basah  tidak mengandung rhodamin B. Hal serupa juga ditemukan pada penelitian Rachmatiah & Larasati (2009), didapatkan sampel cabai merah giling yang tidak teridentifikasi kandungan rhodamin B sebanyak 6 sampel yang dijual di Pasar Minggu, Pasar Kebayoran Lama, Pasar Majestik dan Pasar Mampang.
Berdasarkan hasil pengamatan pada 10 sampel manisan mangga basah, sampel KTG1 dan  KAT  1  menggunakan  cabai  merah  segar,  sampel  LW1,  LW2,  JGS1  dan  TH1  tidak menggunakan cabai, sampel PH1 menggunakan cabai merah dan cabai rawit segar dan pada sampel TH2, TH3 dan LMP1 menggunakan cabai merah bubuk/giling, sehingga cabai merah bubuk/giling yang digunakan pada sampel TH2, TH3 dan LMP1 dinyatakan aman dan tidak mengandung pewarna sintetik rhodamin B.

## Hasil Identifikasi Methanyl Yellow dengan Test kit
Hasil  identifikasi  methanyl  yellow  pada  sampel  manisan  mangga  basah  dengan menggunakan test kit merek Labtest, dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil identifikasi methanyl yellow dengan test kit No. Sampel Pengamatan Hasil a b c 1. KTG1 Oranye Oranye Oranye - 2. LW1 Kuning Kuning Kuning - 3. LW2 Kuning Kuning Kuning - 4. JGS1 Kuning pucat Kuning Kuning pucat - 5. PH1 Kuning pucat Oranye Kuning pucat - 6. KAT1 Oranye Kuning Kuning - 7. TH1 Oranye pucat Putih keruh Putih agak Oranye pucat - 8. TH2 Oranye Oranye Oranye - 9. TH3 Oranye Oranye Oranye - 10. LMP1 Oranye Oranye Oranye -
Keterangan: KTG : Jl. Kutagara; LW : Jl. Lemahwungkuk; JGS : Jl. Jagasatru; PH : Jl. Pahlawan; KAT : Jl. Ki Ageng Tapa; TH : Terminal Harjamukti; LMP : Lampu Merah Palimanan; 1,2,3 : banyaknya pedagang dalam satu lokasi; a,b,c : ulangan ke-1,2,3; - : negatif.
Berdasarkan hasil identifikasi kandungan methanyl yellow dengan menggunakan test kit merek Labtest yang ditunjukkan pada Tabel 3, didapatkan bahwa seluruh sampel manisan mangga  basah  tidak  mengandung  pewarna  sintetik  methanyl  yellow  atau  negatif  pewarna methanyl yellow. Hasil serupa juga didapatkan pada penelitian Subhan et al., (2019), suatu bahan dapat dikatakan mengandung methanyl yellow apabila larutan sampel berubah warna menjadi berwarna merah atau merah muda, dimana dari 3 sampel makanan yang diuji berupa makaroni kering, selai roti dan air manisan jambu yang diuji seluruhnya menunjukkan hasil yang negatif terhadap pewarna sintetik methanyl yellow.
Hasil negatif methanyl yellow disebabkan karena, ketika sampel direaksikan dengan 3 tetes  reagen  methanyl  yellow-1  tidak  mengalami  perubahan  warna  menjadi  warna  merah seulas  sampai  merah  tua  atau  merah  keunguan,  namun  tetap  tidak  berubah  warna  atau memiliki warna yang sama dengan sampel yang dianalisis. Hal serupa juga didapatkan pada penelitian  Masthura  (2019),  dari  total  3  sampel  manisan  yang  diteliti  semuanya  tidak mengandung  pewarna sintetik  methanyl  yellow,  hal  tersebut dikarenakan  dalam uji  reaksi
0010 Shafira et al. Identifikasi kandungan rhodamin B, methanyl yellow
warna tidak adanya perubahan warna menjadi berwarna merah serta perubahan warna sama dengan sampel yang dianalisis.

## Hasil Identifikasi Escherichia coli
Hasil  identifkasi  kandungan Escherichia  coli pada  manisan  mangga  basah  dengan menggunakan metode APM, dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan Escherichia coli
Keterangan: KTG : Jl. Kutagara; LW : Jl. Lemahwungkuk; JGS : Jl. Jagasatru; PH : Jl. Pahlawan; KAT : Jl. Ki Ageng Tapa; TH : Terminal Harjamukti; LMP : Lampu Merah Palimanan; 1,2,3 : jumlah pedagang dalam satu lokasi; MS : memenuhi syarat; TMS : tidak memenuhi syarat.
Berdasarkan hasil indentikasi kandungan Escherichia coli pada sampel manisan mangga yang  ditunjukkan  pada  Tabel  4,  didapatkan  bahwa  sembilan  dari  sepuluh  sampel  (90%) teridentifikasi  mengandung  bakteri Escherichia  coli yang  tidak  memenuhi  syarat  atau melebihi  batas  maksimum Escherichia  coli pada  manisan  mangga  yaitu  <  3  APM/g  (BSN, 2009).  Sampel  manisan  mangga  TH1  negatif  mengandung  bakteri Escherichia  coli dan dinyatakan  aman  untuk  dikonsumsi  karena  memenuhi  syarat  dan  tidak  melebihi  batas maksimum.  Dari  30  sampel  jajanan  manisan,  terdapat  2  (dua)  sampel  adanya  bakteri Escherichia  coli yang  tidak  memenuhi  syarat  yaitu pada  jajanan  manisan  asam  potong  di jajanan  manisan  pedagang  A  dan  manisan  kolang-kaling  pedagang  B  yang  dijual  di  Pasar Ramai Kota Medan (Napitupulu et al. , 2019).
Faktor  yang  mempengaruhi  adanya  bakteri Escherichia  coli yaitu  kurangnya hygiene sanitasi  yang  dilakukan  oleh  pedagang  (Napitupulu et  al. ,  2019).  Pengaruh  keberadaan Escherichia coli disebabkan oleh kurangnya sanitasi pada praktik pengolahan makanan, alat, air dan tempat penjualan (Hakim, 2012).
Berdasarkan  hasil  obeservasi hygiene dan  sanitasi  pada  seluruh  pedagang  manisan mangga, hampir seluruh pedagang kurang memperhatikan hygene pada diri sendiri seperti tidak memakai masker, sarung tangan plastik dan celemek. Pada alat yang digunakan untuk berjualan, terdapat padagang yang menggunakan centong plastik untuk mengambil manisan mangganya  namun  disimpan  didalam  toples  manisan  mangganya  sehingga  mudah  terjadi kontaminasi  yang  berasal  dari  pedagangnya  dan  juga  terdapat  pedagang yang  menyimpan centong  plastik  yang  digunakan  di  mangkok  plastik  secara  terbuka  sehingga  mudah terkontaminasi  dari  debu  dan  polusi.  Hampir  seluruh  pedagang  juga  kurang  memfasilitasi sanitasi  pada  tempat  berjualan,  seperti  tidak  terdapat  tempat  pembuangan  sampah sementara, air bersih untuk cuci tangan dan lap/kain.
Hal serupa juga ditemukan pada penelitian Napitupulu et al., (2019), kurangnya hygiene dan sanitasi pada sarana produksi, tempat berjualan, hingga pada diri sendiri dapat menjadi peluang terjadinya kontaminasi Escherichia coli, seperti tidak mencuci tangan terlebih dahulu
No. Sampel Standar (APM/g) (BSN, 2009) Kandungan Escherichia coli (APM/g) Ket 1. KTG1 < 3 7 TMS 2. LW1 < 3 240 TMS 3. LW2 < 3 240 TMS 4. JGS1 < 3 12 TMS 5. PH1 < 3 10 TMS 6. KAT1 < 3 240 TMS 7. TH1 < 3 0 MS 8. TH2 < 3 240 TMS 9. TH3 < 3 240 TMS 10. LMP1 < 3 240 TMS
pada saat memproduksi makanan, tidak menggunakan air yang matang, tidak menggunakan sarung  tangan,  masker,  celemek,  dan  penutup  kepala  pada  saat  produksi  makanan,  tidak memperhatikan  kebersihan  lingkungan  tempat  berjualan,  menyimpan  produk  makanan terlalu  lama,  maupun  tidak  terdapat  lap,  air  bersih  untuk  mencuci,  toilet  dan  tempat pembuangan sampah sementara.
Pedagang  tidak  semua  membuat  produk  manisannya  sendiri,  berdasarkan  hasil wawancara yang didapatkan dari pedagang, pada pedagang 1 di Jalan Kutagara, pedagang 1 di  Jalan  Pahlawan,  pedagang  1  di  Jalan  Ki  Ageng  Tapa,  Pedagang  1,  2  dan  3  di  terminal Harjamukti dan pedagang 1 di Lampu Merah Palimanan memproduksi manisannya sendiri. Sedangkan  pada  pedagang  1  dan  2  di  Jalan  Pahlawan  dan  pedagang  1  di  Jalan  Jagasatru membeli  manisan  mangganya  dari  produsen  lain.  Untuk  produsen  dan  pembuatan  produk manisan mangga basah tidak diketahui karena pedagang langsung menjual dagangannya pada etalase atau secara keliling sehingga hygiene dan sanitasi pada proses pembuatan manisan mangga kurang diketahui hygiene dan sanitasinya secara pasti mulai dari alat dan bahan yang digunakan  hingga  produk  dijual,  sehingga  perlu  dilakukan  penelusuran  produsen  dan mengetahui pengolahan produk manisan mangga basah dan dapat memiliki data yang lebih akurat darimanakah  kontaminasi Escherichia coli berasal.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil identifikasi kandungan rhodamin B dan methanyl yellow pada manisan mangga basah yang dijual di Daerah Cirebon, dapat disimpulkan bahwa seluruh sampel manisan mangga  basah  tidak  mengandung  pewarna  sintetik  rhodamin  B  dan  methanyl  yellow,  tetapi sebanyak  90%  sampel  mengandung Escherichia  coli yang  melebihi  batas  maksimal  yang ditetapkan  oleh  SNI  7338:2009  tentang  cara  uji  cemaran  mikroba  dalam  pangan  kategori pangan manisan buah basah.

## Saran
Perlu  dilakukan  pencatatan  tabung  BGLB  yang  positif  pada  tes  penegasan  sehingga memiliki data yang lebih kuat dan perlu dilakukan identifikasi jenis Escherichia coli patogen (ETEC, EPEC, EHEC) yang berada pada sampel manisan mangga dengan menggunakan metode multiplex PCR. Pengujian serupa dapat dilakukan jenis pengujian mikroba yang lain sesuai dengan Peraturan BPOM Nomor 13 Tahun 2019 tentang Batas Maksimal Cemaran Mikroba Dalam Pangan Olahan. Perlu dilakukan penelusuran produsen manisan mangga basah agar lebih  mengetahui  darimanakah  kontaminasi Escherichia  coli berasal  dan  pada  observasi hygiene dan  sanitasi  diharapkan  dapat  diperkuat  lagi  sistem  dokumentasinya  agar  lebih terperinci dan akurat.
Diharapkan Dinas Ketahanan Pangan Kabupaten Cirebon dan Dinas Pangan, Pertanian, Kelautan  dan  Perikanan  Kota  Cirebon  untuk  mengadakan  pengawasan,  pembinaan, penyuluhan  dan  sosialisasi  kepada  pedagang  untuk  memberikan  pengetahuan  bagaimana cara mengolah produk manisan mangga dan memperhatikan tempat berjualan agar terjaga hygiene dan  sanitasinya.  Dan  diharapkan  kepada  pedagang  manisan  mangga  dapat  sadar, menjaga serta mempraktikkan hygiene dan sanitasi mulai dari personal , pengolahan makanan hingga menjual produknya dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan Pengawasan Obat dan Makanan. (2019). Peraturan Badan Pengawas Obat dan Makanan Nomor 11 Tahun 2019 tentang Bahan Tambahan Pangan. BPOM RI, Jakarta.
Badan  Standarisasi  Nasional.  (1992).  SNI  19-2897-92  tentang  Cara  Uji  Cemaran  Mikroba.  Badan Standarisasi Nasional, Jakarta.
Badan  Standarisasi  Nasional.  (2009).  SNI  7388:2009  tentang  Batas  Maksimum  Cemaran  Mikroba Dalam Pangan. Badan Standarisasi Nasional, Jakarta.
Menteri Kesehatan Republik Indonesia.  (2012). Peraturan Menteri Kesehatan No. 033 Tahun 2012 tentang Bahan Tambahan Pangan. Menteri Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Afifah,  R.  F.  (2021,  Juli  31).  Manis  dan  Segar!  Intip  4  Resep  Manisan  Mangga  Di  Sini. Orami . https://www.google.com/amp/s/www.orami.co.id/magazine/am/resep-manisan- mangga/?espv=1.
Fachrul, M. F. (2007). Metode Sampling Bioekologi . Bumi Aksara.
Gultom, J. Y. T., & Lies, S. (2018). Strategi Pengembangan Manisan Mangga (Studi Kasus Pada UMKM Satria  di  Kecamatan  Kedawung,  Kabupaten  Cirebon). Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa  Agrofindo  Galuh, 5(1), 961-972.
Hakim, A, R. (2012). Hubungan Kondisi Hygiene dan Sanitasi Dengan Keberadaan Escherichia Coli pada Nasi  Kucing  Yang  Dijual  Di  Wilayah  Tembalang  Semarang  Tahun  2012. Jurnal  Kesehatan Masyarakat, 1(2), 861-870.
Inge, N. (2021, Juli 31). BBPOM Palembang Uji Kualitas Ratusan Manisan yang Diduga Mengandung Formalin. Liputan  6. https://www.liputan6.com/regional/read/4549056/bbpom-palembang-uji- kualitas-ratusan-manisan-yang-diduga-mengandung-formalin.
Labtest. (2022, Februari 07). Rapid Test Kit Methanyl Yellow. Labtest . https://www.labtestkit.com/rapid-test-kit-methanyl-yellow.html?o=default.
Labtest. (2022, Februari 07). Rapid Test Kit Rhodamin B. Labtest . https://www.labtestkit.com/rapid- test-kit-rhodamin-b.html?o=default.
Masthura. (2019). Identifikasi Rhodamin B dan Methanyl Yellow Pada Manisan Buah Yang Beredar Di Kota Banda Aceh Secara Kualitatif. Amina, 1(1), 39-44.
Napitupulu,  L.  H.,  Eili,  L.,  &  Muhammad,  C.  (2019).  Analisis  Hygiene  Sanitasi  Tempat  Penjualan Makanan dan Bakteri Escherichia coli pada Jajanan Manisan di Pasar Ramai Kota Medan. Journal of Healthcare technology and Medicine, 5(1), 102-117.
Prabowo,  I.  E.  (2012). Sensor  Kimia  Bentuk  Stik  Menggunakan  Reagen  Zn(CNS) 2 Untuk  Mendeteksi Rhodamin B Dalam Sampel Makanan [Skripsi, Universitas Airlangga]. Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya.
Rachmatiah, T., & Larasati, R. (2009). Identifikasi Rhodamin B pada Cabai Giling, Cabai Merah Bubuk dan Bawang Merah Giling Secara Spot Test. Sainstec, 19(1), 1-5.
Rahmani,  S.,  &  Handayani,  S.  (2016).  Kontaminasi  Bakteri  Escherichia  Coli  Pada  Makanan  Dan Minuman  Penjual  Jajanan  Di  Lingkungan  Pendidikan  Muhammadiyah  Limau,  Jakarta  Selatan. Arkesmas, 1(1), 25-35.
Ripaldy, I., Wijanarka, A., & Putriningtyas, N. D. (2017). Analisis Kandungan rhodamin B pada Cabai Merah Giling di Pasar Tradisional di Kabupaten Sleman. Daerah Istimewa Yogyakarta. Jurnal Ilmu Gizi Indonesia, 1(1), 10-18.
Subhan, Arfi, F., & Ummah, A. (2019). Uji Kualitatif Zat Pewarna Sintesis pada Jajanan Makanan Daerah Ketapang Kota Banda Aceh. Amina, 1(2), 67-71.
Sugiyono. (2008). Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan R& D. Alfabeta.
Syarfaini., & Rusmin, M. (2014). Analisis Kandungan Formalin Pada Tahu di Pasar Tradisional Kota Makassar Tahun 2014. Al-Sihah: Public Health Science Journal, 6(2), 1-1.