## SINTESIS DAN UJI TOKSISITAS SENYAWA ANALOG KURKUMIN
3,5-BIS(( E )-METOKSI BENZILIDEN)-1-(FENILSULFONIL)-PIPERIDIN-4-ON
E. N. Rahmawati 1 , H. Y. Teruna 2 , dan A. Zhamri 2
1 Mahasiswa Program Pascasarjana Kimia
2 Bidang Kimia Organik Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Kampus Binawidya, Pekanbaru, 28293, Indonesia
Email: eninur.rahmawati@gmail.com

## Abstract
A  study  has  been  conducted  to  synthesize  analog  of  curcumin  with  base  catalyzed condensation of 4-piperidone hydrochloride with substituted benzaldehyde under reflux led the formation  of  mono-carbonyl  curcumin.  The  synthesized  curcumin  were  further  reacted  with benzosulphonyl  chloride  by  nucleophilic  substitution  of  –NH  group  to  afford  3,5-bis((E)-2- metoksi  benziliden)-1-(fenilsulfonil)piperidin-4-on (EN-BS) compounds with excellent yield, 94%. Structure of the synthesized compounds were confirmed by UV, IR, MS and NMR spectra analysis. All the synthesized compounds were screened for their toxicity activity using BSLT method. The result showed that compounds are toxic whereas the LC 50 is below 200 ppm.
Key word: Curcumin, synthesize curcumin, Brine Shrimp Lethality (BSLT)

## PENDAHULUAN
Kurkumin  merupakan  senyawa fenolik yang terdapat dalam rimpang kunyit ( Curcuma  longa  L .)  dengan  aktivitas biologi  sebagai  antioksidan,  antiinflamasi, kemopreventif  dan  kemoterapi.  Kurkumin juga memiliki aktivitas sebagai antikanker, antimutagenik,  antikoagulan,  antifertilitas, antidiabetes, antibakteri, antijamur, antiprotozoa,  antivirus,  dan  antifibrosis (Chattopadhyay et  al., 2004).  Di  India,
Cina,  dan  negara-negara  Asia  Tenggara seperti  Indonesia,  zat  warna  kuning  dari kurkuma  dimanfaatkan  sebagai  bahan tambahan makanan, bumbu, maupun obat- obatan, yang tidak bersifat toksik. Kurkumin ditemukan pada berbagai genus Curcuma  dan  merupakan  pigmen  kuning pada tanaman Curcuma  longa L . Di alam, kurkumin  selalu  terdapat  bersama-sama dengan dua senyawa turunan lainnya yaitu demetoksi kurkumin dan bis-
demetoksi kurkumin, yang dikenal dengan nama kurkuminoid (Badreldin et al ., 2006). Modifikasi senyawa kurkumin pada cincin aromatis dapat menghasilkan senyawa  analog  kurkumin  yang  memiliki aktivitas biologis yang lebih baik dibandingkan  senyawa  kurkumin.  Sintesis kurkumin  dapat  dilakukan  dengan  reaksi kondensasi  aldol.  Sintesis  dapat  dilakukan dalam  suasana  asam  (Selvakumar.  B  dan Venkataraman.  R,  2002)  maupun  dalam suasana basa.
Kurkumin  hasil  sintesis  dapat dikelompokkan  menjadi  dua  kelompok utama  yaitu  derivat  kurkumin  dan  analog kurkumin. Derivat kurkumin dibatasi pada senyawa  yang  masih  mempertahankan bentuk  dasar  senyawa  kurkumin  (-C=C- CO-CH 2 -CO-C=C-).  Derivatisasi  terhadap senyawa kurkumin adalah dengan asetilasi, alkilasi,  glikosilasi,  aminoasilasi.  Analog kurkumin merupakan senyawa yang relatif
berbeda  dengan  bentuk  dasar  kurkumin. Analog  kurkumin  dapat  diperoleh  dari penyederhanaan gugus beta diketo menjadi gugus  monoketo  dan  variasi  pada  enon ataupun  ena  pada  C7  linker.  Analog kurkumin  telah  banyak  disintesis  dengan tujuan  untuk  meningkatkan  stabilitas, meningkatkan  potensi  dan  selektivitas aktivitas  biologisnya,  (Da’i,  2010).
Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh (Eryanti et  al. ,  2011  )  menghasilkan senyawa  analog  kurkumin  yaitu  (2 E, 5 E )- 2,5-dibenziliden-siklopentanon,  (2 E, 5 E )- 2,5-bis-(4-hidroksi-benzeliden)- siklopentanon    yang  bersifat  toksik  dan (2 E, 5 E )-2,5-bis-(4-dimetil-amin- benziliden)-siklopentanon  yang  bersifat sebagai antioksidan.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  pada penelitian  ini  telah  dilakukan  sintesis senyawa  analog  kurkumin  3,5-bis(( E )- metoksibenziliden)-1-(fenilsulfonil) piperidin-4-on menggunakan metode refluks.  Senyawa  hasil  sintesis  ini  akan diuji  aktivitas  biologisnya  melalui  uji toksisitas  menggunakan  metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  adalah oven microwave (Samsung  ME109F), ultrasonik  (Ney ® ),  satu  set  alat  destilasi, neraca  analitik,  pompa  vakum,  corong Buchner , chamber KLT,  alat  penentu  titik leleh Fisher John (SMP 11-Stuart ® ), pipet mikro,  lampu  UV  (Camag ® 254  dan  366 nm), spektrofotometer UV-Visible (Genesys 10S UV-VIS v4.002
2L9N175013), HPLC (UFLC Prominance-
Shimadzu  LC  Solution,  detektor  UV  SPD 20AD),  spektrofotometer  FTIR  (FTIR Shimadzu,  IR  Prestige-21),  spektrometer massa  (Water  LCT  premier  XE  mode positif),  spektrometer  NMR  (Agilent  500 MHz  dengan  sistem  konsol  DD2),  serta alat-alat  gelas  yang  umum  digunakan  di Laboratorium  Kimia  FMIPA.  Bahan  – bahan yang digunakan adalah 2- metoksibenzaldehid  (Sigma-Aldrich),  3- metoksibenzaldehid (Merck), 4-
metoksibenzaldehid  (Merck),  4-piperidon (Sigma-Aldrich),  etanol  absolut  (Merck), kalium hidroksida (KOH), indikator universal,  pelat  KLT  GF 254 (Merck), metanol, n -heksana,  etilasetat  dan  aqua DM.

## Prosedur Penelitian
Sintesis  senyawa  analog  kurkumin  3,5- bis(( E )-metoksi  benziliden)piperidin-4- on (EN)
Campuran  senyawa  4-piperidon (5,0  mmol)  dan  metoksibenzaldehid  (10,0 mmol) dilarutkan dalam pelarut etanol 20,0 mL, kemudian ditambahkan tetes demi tetes KOH (10%, 10,0 mL).  Campuran tersebut di  refluks  pada  suhu  80 o C  dan  reaksi dikontrol  tiap  30  menit  dengan  KLT. Setelah reaksi selesai, campuran dinetralkan dengan HCl 10%, lalu didiamkan  pada  lemari  pendingin  selama 24  jam.  Padatan  yang  diperoleh  disaring menggunakan  corong  Buchner  dan  dicuci dengan n -heksan dan aqua DM. Kemurnian senyawa  hasil  sintesis,  dianalisis  dengan KLT. Padatan yang tidak murni direkristalisasi dengan metanol.
Sintesis  senyawa  analog  kurkumin  3,5- bis(( E )-metoksi
benziliden)-1- (fenilsulfonil)piperidin-4-on (EN-BS)
Senyawa  kurkumin  (1,0  mmol), cesium  karbonat  (1,5  mmol)  dilarutkan dalam  asetonitril  20,0  mL.  Benzosulfonil klorida (1,0 mmol) ditambahkan tetes demi
tetes kedalam campuran, kemudian campuran  tersebut  di  refluks  pada  suhu 80 o C selama 12 jam. Reaksi dikontrol tiap
2  jam  dengan  kromatografi  lapis  tipis.
Setelah  reaksi  selesai,  campuran  diuapkan dengan rotary  evaporator .  Padatan  yang diperoleh  diekstrak  menggunakan  pelarut air:etil  asetat.  Senyawa  yang  diperoleh dicuci  dengan n -heksan  dan  aqua  DM. Kemurnian senyawa hasil sintesis, dianalisis  dengan  KLT,  HPLC  dan penentuan  titik  leleh.  Padatan  yang  tidak murni direkristalisasi dengan metanol.

## Identifikasi struktur senyawa
Senyawa  analog  kurkumin  murni yang  diperoleh  diidentifikasi  strukturnya melalui  analisis  spektroskopi  UV,  FTIR, NMR  dan  HRMS.  Analisis  UV  dan  FTIR dilakukan  di  Jurusan  Kimia  FMIPA  UR, sedangkan  analisis  HRMS  di  Universitas Padjajaran dan analisis NMR dilakukan di Institut Teknologi Bandung.

## Uji toksisitas dengan metode BSLT
Masing-masing  sebanyak  5,0  mg senyawa kurkumin dilarutkan dengan 5 mL metanol  sehingga  menghasilkan  larutan induk 1.000 µg/mL. Kemudian dari larutan induk  dibuat  konsentrasi  yang  berbeda melalui  pengenceran  bertingkat  yaitu 100,0,  10,0,  1,0  dan 0,1 µg/mL. Larutan sampel  dipipet  ke  dalam  masing-masing
vial sebanyak 0,5 mL, lalu pelarut diuapkan hingga  kering.  Sampel  uji  dilarutkan kembali dengan 50,0 µL DMSO, kemudian ditambahkan 2,0 mL air laut. Sebanyak 10 ekor larva udang A . salina dimasukkan ke tiap-tiap vial dan ditambahkan lagi dengan air laut sampai batas kalibrasi 5,0 mL. Vial lain  yang  terkalibrasi  juga  disiapkan sebagai  kontrol.  Vial  tersebut  berisi  50,0 µL  DMSO  tanpa  senyawa  uji  dan diperlakukan  sama  seperti  vial  dengan senyawa  uji.  Selanjutnya  vial  uji  dan kontrol  dibiarkan  selama  24  jam.  Jumlah larva  udang A . salina yang  mati  dihitung dan  dicatat.  Tingkat  toksisitas  diukur dengan melihat persentase larva yang mati.
Pengujian  dilakukan  sebanyak  tiga  kali pengulangan dengan perlakuan sama untuk masing-masing  konsentrasi.  Data  yang diperoleh dianalisis untuk menentukan nilai LC 50 dengan  metode  kurva  menggunakan tabel analisis probit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil sintesis senyawa analog kurkumin 3,5-bis(( E )-2-
metoksibenziliden)piperidin-4-on (EN)
Senyawa  murni  yang  diperoleh berupa padatan kuning dengan massa 1,174 g dan rendemen yang diperoleh sebesar 70 %, Titik leleh senyawa yang diperoleh 182- 184 o C

## Gambar 1. Struktur EN
Senyawa  analog  kurkumin  3,5- bis(( E )-2-metoksibenziliden)piperidin-4- on  diperoleh  dari  hasil  reaksi  antara metoksibenzaldehid  dengan  4-piperidon
melalui  reaksi  kondensasi  aldol  atau  yang dikenal  sebagai  reaksi Claisen-Schmidt . Reaksi  ini  lebih  umum  dikenal  untuk sintesis  senyawa  kalkon.  Pada  dasarnya,
N H O EtOH, KOH O O N H O O O H +
perbedaan  sintesis  senyawa  kalkon  dan kurkumin  adalah  rasio  senyawa  keton  dan aldehid  yang  direaksikan  yaitu  rasio  1:1 untuk  sintesis  senyawa  kalkon  dan  1:2 untuk  sintesis  senyawa  kurkumin.  Selain itu,  pada  sintesis  senyawa  kurkumin, senyawa  keton  harus  memiliki  dua hidrogen  α  yang  simetris  sebagai  situs reaksi.
Senyawa  EN yang  disintesis, merupakan  senyawa  kurkumin  yang  telah disintesis oleh Eryanti (2014). Sehubungan dengan  hal  tersebut,  dilakukan  modifikasi metode sintesis agar memperoleh rendemen yang  lebih  tinggi.  Sebelumnya  Eryanti (2014),  telah  mensintesis  senyawa  target EN dengan rendemen 67,1% menggunakan katalis asam dan metode iradiasi gelombang  mikro.  Pada  penelitian  ini,
senyawa EN disintesis
dengan
menggunakan  katalis  basa  KOH  dan metode refluk yang masing-masing diperoleh  dengan  rendemen  70%.  Hasil tersebut  menunjukkan  penggunaan  katalis basa  KOH  dan  metode  refluk  lebih  baik dalam  sintesis  kurkumin.  Senyawa  EN telah  disintesis,  diidentifikasi  dengan  uji KLT  dan  pengukuran  titik  leleh.  Uji  KLT dan  pengukuran  titik  leleh  dilakukan dengan  membandingkan  senyawa  EN dengan  senyawa  kurkumin  yang  telah disintesis  oleh  Eryanti  (2014)  sebagai standar.  Pengukuran  titik  leleh  juga menunjukkan  range  yang  sama  dengan kurkumin Eryanti (2014), yaitu 182-184 o C
Sintesis  senyawa  analog  kurkumin  3,5- bis(( E )-metoksi benziliden)-1- (fenilsulfonil) piperidin-4-on (EN-BS)
Senyawa  analog  kurkumin  3,5- bis(( E )-metoksi benziliden)-1- (fenilsulfonil)  piperidin-4-on  merupakan hasil  reaksi  lanjutan  dari  kurkumin  EN, dalam  hal  ini,  kurkumin  yang  telah
disintesis direaksikan dengan benzosulfonil klorida melalui reaksi subtitusi pada gugus –NH  yang  dibantu  oleh  katalis  Cs 2 CO 3 untuk  menghasilkan  senyawa  analog kurkumin. Reaksi ini dikatalis oleh Cs 2 CO 3 bersifat  sebagai  basa  yang  akan  mengikat atom  H  pada  gugus  –NH  kurkumin sehingga  membentuk  ion  N - yang  bersifat nukleofilik.  Kemudian,  ion  N - akan menyerang  atom  S  pada  benzosulfonil klorida  yang  bersifat  elektrofil  akibat adanya gaya tarik dari atom-atom elektronegatif  seperti  O  dan  Cl,  sehingga terbentuk  senyawa  analog  kurkumin. Mekanisme  reaksi  pembentukan  senyawa analog kurkumin EN-BS dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Mekanisme reaksi senyawa analog kurkumin EN-BS
Produk  hasil  sintesis  dipisahkan dari  pelarutnya  menggunakan rotary evaporator .  Kemudian  padatan  yang diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  corong pisah dan diekstraksi menggunakan system palarut  yang  tidak  saling  bercampur  yaitu air  :  etilasetat.  Dalam  hal  ini,  senyawa kurkumin  akan  larut  dalam  pelarut etilasetat, sedangkan katalis Cs 2 CO 3 berlebih  akan  larut  dalam  air,  sehingga produk kurkumin dapat dipisahkan dengan mengambil lapisan etil asetat. Selanjutnya, lapisan  etil  asetat  tersebut  dicuci  dengan NaHCO 3 untuk  mengikat  H 2 CO 3 yang terbentuk  sebagai  produk  samping  hasil reaksi. Endapan diperoleh dengan
memekatkan
lapisan etilasetat menggunakan rotary evaporator, sehingga diperoleh senyawa EN-BS dengan rendemen  yang  sangat  memuaskan  yaitu 91%.
Senyawa EN-BS diidentifikasi strukturnya
menggunakan analisis spektroskopi  UV,  FTIR, 1 H-NMR, 13 C- NMR dan HRMS. Spektrum UV senyawa EN-BS menunjukkan serapan pada panjang gelombang   206 nm dan 365 nm. Serapan pada panjang gelombang 206 nm menunjukkan adanya transisi  electron dari orbital π→π*  cincin  benzosulfonil, sedangkan serapan pada panjang gelombang  353  nm  menunjukkan  adanya transisi  electron  dari  orbital  π→π*  sistem sinamoil. Serapan sistem sinamoil terdapat pada  panjang  gelombang  lebih  besar dikarenakan  panjangnya  system  konjugasi system sinamoil mengakibatkan terjadinya splitting orbital  π,  sehingga  energi  yang dibutuhkan  untuk  mengeksitasi  electron  π lebih kecil.
Spektrum  FTIR  senyawa  EN-BS menunjukkan serapan pada bilangan gelombang (cm -1 ) 3024, 2969, 1675, 1608, 1351  dan  1251.  Serapan  pada  bilangan gelombang 3024 cm -1 menunjukkan vibrasi ikatan  C-H  aromatik  dari  cincin  fenil, sedangkan serapan pada bilangan gelombang 2969 cm -1 menunjukkan adanya vibrasi  dari  ikatan  C-H  alifatik  dari  gugus metoksi  serta  cincin  piperidon.  Selain  itu, adanya  serapan  pada  bilangan  gelombang 1675  dan  1608  cm -1 yang  masing-masing menunjukkan vibrasi ikatan C=O dan C=C alkena  mengindikasikan  adanya  gugus enon dari senyawa kurkumin. Serapan pada bilangan gelombang 1351 cm -1 menunjukkan  adanya  vibrasi  ikatan  S=O, sedangkan pada bilangan gelombang 1251 cm -1 menunjukkan adanya vibrasi ikatan C- O  dari  gugus  metoksi.  Pembentukan
senyawa  kurkumin  hybrid  dapat  terlihat jelas  pada  perbandingan  spektrum  FTIR senyawa  EN  dengan  senyawa  EN-BS, dimana  serapan  pada  bilangan  gelombang 3246 cm -1 yang menunjukkan vibrasi ikatan N-H,  sudah  tidak  tampak  pada  spectrum FTIR EN-BS yang mengkonfimasi pembentukan senyawa analog kurkumin.
Senyawa target merupakan molekul yang  memiliki  struktur  yang  simetris, sehingga  ada  beberapa  proton  dan  karbon yang  memiliki  lingkungan  yang  sama  dan muncul  pada  pergeseran  kimia  yang  sama pula.  Pada  spektrum 1 H-NMR,  terdapat puncak-puncak  dengan  orientasi  dan integrasi  yang  mengindikasikan  senyawa EN-BS  sesuai  dengan  molekul  target. Spektrum 1 H-NMR EN-BS terbagi atas dua daerah  yaitu downfield dan upfield .  Pada daerah downfield terdapat  puncak  dari proton-proton  yang  lebih shielding ,  yaitu pada  pergerasan  δ  3,89  terdapat  puncak dengan orientasi singlet yang menunjukkan proton  pada  gugus  –OCH 3 .  Kemudian, pada  δ  4,49  juga  terdapat  puncak berorientasi singlet yang  menunjukkan proton H2 dan H4. Sedangkan pada daerah upfield terdapat  puncak  dari  proton  yang deshielding yaitu proton-proton dari cincin aromatic  dan  proton  H β .  Proton  H4' membentuk puncak triplet pada pergeseran δ 7,08 karena proton H4' memiliki kopling
ortho terhadap proton H3' dan H5' ( J H4'-H3' = J H4'-H5' = 7,5 Hz). Proton H3' membentuk puncak doublet pada  pergeseran  δ  7,16 karena  proton  H3'  memiliki  kopling ortho terhadap  proton  H4'  ( J H3'-H4' =  8,5  Hz). Proton  H6'  membentuk  puncak doublet pada  pergeseran  δ  7,24  karena  proton  H6' memiliki kopling ortho terhadap proton H5'
( J H6'-H5' =  7,7  Hz).  Proton-proton  aromatic lainnya ditemukan sebagai puncak multiplet pada  pergeseran  δ  7,55  –  7,44. Sama  halnya  dengan  puncak  proton  H β
yang  tidak  tampak  secara  jelas,  karena muncul  sebagai  puncak multiplet pada pergeseran δ 7,73 – 7,66 akibat overlapping dengan puncak dari proton H4'' dari cincin fenilsulfonil. Interpretasi data spectrum 1 H- NMR dapat dilihat pada Tabel 1.
Pada  spectrum 13 C-NMR  senyawa EN-BS menunjukkan puncak atom karbon dengan  pergeseran  kimia  yang  sesuai dengan  senyawa  target.  Pada  pergeseran kimia  δ  184,6  ditemukan  puncak  dari karbon  karbonil  (C=O).  Selain  itu  puncak dari  karbon  C2'  yang  berikatan  dengan gugus  –OCH 3 serta  puncak  dari  karbon  - OCH 3 masing-masing  ditemukan  pada pergeseran kimia δ 158,4 dan δ 56,1. Pada
pergeseran  kimia  δ  127,7  ditemukan puncak  dari  karbon  yang  mengikat  H β . Sedangkan  karbon  C1''  yang  berikatan dengan  gugus  sulfonil  ditemukan  pada  δ 137,6. Interpretasi data spektrum 13 C-NMR dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Interpretasi data spektroskopi
NMR senyawa EN-BS Posisi δ C (ppm) δ H (ppm) (Multiplisitas, J) -OCH 3 56,1 3,89 (s) 2 47,4 4,49 (s) 3 133,9 - 4 184,6 - 5 133,9 - 6 47,4 4,49 (s) C β 127,7 7,73 – 7,66 (m) 1' 133,6 - 2' 158,4 - 3' 112,0 7,16 (d, J = 8,5 Hz) 4' 130,6 7,08 (t, J = 7,5 Hz) 5' 120,9 7,55 – 7,44 (m) 6' 129,8 7,24 (d, J = 7,7 Hz) 1'' 137,6 - 2'' 130,8 7,55 – 7,44 (m) 3'' 123,0 7,55 – 7,44 (m) 4'' 132,1 7,73 – 7,66 (m) 5'' 123,0 7,55 – 7,44 (m) 6'' 130,8 7,55 – 7,44 (m) *Spektrum 1 H-NMR (500 MHz) dan 13 C-NMR (125 MHz) dalam pelarut DMSO- d 6
Spektrum HRMS dari senyawa EN- BS  yang  telah  disintesis  menunjukkan puncak ion molekul  yang teramati sebagai [M+H] + dengan m/z 476,1558  dengan kelimpahan  100%.  Massa  terhitung  dari senyawa  target  dengan  rumus  molekul C 27 H 26 NO 5 S  menunjukkan  [M+H] + =
476,1532.  Berdasarkan Journal  of  the American Chemical Society (JACS) spectrum MS diharuskan memiliki standar deviasi  ˂  3  mDA.  Perbandingan  massa puncak  ion  molekul  terhadap  massa molekul terhitung menunjukkan selisih 2,6 mDA  (˂  3  mDA),  maka  spectrum  HRMS
senyawa  EN-BS  telah  sesuai  dengan molekul target.
Berdasarkan  hasil  analisis  data spektroskopi  UV,  FTIR, 1 H-NMR, 13 C- NMR  dan  HRMS  menunjukkan    bahwa senyawa  EN-BS  yang  telah  disintesis  dari senyawa  kurkumin  EN  dan  benzosulfonil klorida  pada  penelitian  ini  sesuai  dengan senyawa  target  yang  diharapkan  yaitu senyawa  kurkumin  3,5-bis(( E )-2-metoksi benziliden)-1-(fenilsulfonil) piperidin-4- on.
Hasil  uji  toksisitas  senyawa  kurkumin EN-BS
Senyawa  kurkumin  EN-BS  yang telah  disintesis  diuji  toksisitasnya  guna untuk mengetahui sifat toksiknya. Berdasarkan perhitungan diketahui senyawa  kurkumin  EN-BS  dan  memiliki harga  LC 50 yaitu  0,85 µ g/mL.  Menurut
Anderson et  al. ,  (1991),  suatu  senyawa murni  dikatakan  memiliki  sifat  toksik  jika memiliki  harga  LC 50 ≤  200 µ g/mL. Berdasarkan hal tersebut, dapat disimpulkan bahwa senyawa kurkumin EN- BS merupakan senyawa yang toksik.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan, maka dapat disimpulkan, analog senyawa  kurkumin  yaitu  3,5-bis(( E )-2- metoksi benziliden)-1- (fenilsulfonil)piperidin-4-on  telah  berhasil disintesis dengan rendemen yang memuaskan yaitu 94%. Identifikasi struktur melalui  analisis  spektroskopi  UV,  FTIR, HRMS dan NMR mengkonfirmasi senyawa EN1-BS  sesuai  dengan  senyawa  target. Senyawa kurkumin EN1-BS bersifat toksik dengan harga LC 50 yaitu 0,85 µg/mL.

## DAFTAR RUJUKAN
Anderson,  J.E.,  Goetz,  C.M.  &  Laughlin, L.C.  1991.  A  blind  comparison  of simple  bench-top  bioassays  and human  tumour  cell  cytotoxicities  as antitumor  prescreens. Pytochemical Analisys , 2: 107-111.
Badreldin, H.A., Marrif, H., Salwa, A,N., dan Amel, O.B. 2006. Some Biological Properties Of Curcumin.
Natural Product Communication. 1
(6): 509-521
Chattopadhyay, I., Biswas, K.,
Bandyopadhyay,  U.,  Banerjee,  R.K. 2004. Turmeric and curcumin:
Biological  actions  and  medicinal applications. Current  Science ,  Vol
4:1
Da’i,  M.,  Fajria,  A  dan  Utami,  W.  2010.
Sintesis  Senyawa  Analog  Kurkumin 3,5-bis-(4-hidroksi-3-
metoksibenzilidin) Piperidin4-on
(Monohidrat  Hidroklorida)  dengan
Katalis  HCl.  P harmacon .  11(1):  33- 38.
Eryanti, Y., 2014. Sintesis Senyawa Analog
Kurkumin Serta Aktivitas Sitotoksiknya  Terhadap  Sel  Murin Leukemia P-388 dan Sel
promielositik  leukemia  Manusia  Hl- 60.  Disertasi.  Bandung:  Universitas Padjajaran
Da’i,  M.,  Fajria,  A  dan  Utami,  W.  2010. Sintesis  Senyawa  Analog  Kurkumin 3,5-bis-(4-hidroksi-3-
metoksibenzilidin) Piperidin4-on (Monohidrat  Hidroklorida)  dengan Katalis  HCl.  Pharmacon.  11(1):  33- 38.
Pandey,  A.,  Kumar,  R.  dan  Srivastava,  R. 2010.  Curcumin-the  yellow  magic. Internasional Journal Pharmacol , 4: 343-354
Selvakumar.  B  dan  Venkataraman.  R.
(2002).  Synthesis  and  Biological
Evaluation of Some Curcumin Analogs  and  Their  Derivatives. Journal Chemical. 3(2) :260-265