## UJI STABILITAS FISIK DAN DAYA ANTIBAKTERI SUSPENSI ERITROMISIN DENGAN SUSPENDING AGENT PULVIS GUMMI ARABICI

## PHYSICAL STABILITY AND ANTIBACTERICAL ACTIVITY OF ERYTHROMYCIN SUSPENSION USING PULVIS GUMMI ARABICI AS A SUSPENDING AGENT
Ika Ristia Rahman, Ika Trisharyanti Dian Kusumowati * , Peni Indrayudha, Anita Sukmawati Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta kyandika@yahoo.com

## ABSTRAK
Eritromisin  adalah  salah  satu  antibiotik  golongan  makrolida  yang  tidak  larut  dalam  air, sehingga  dibuat  dalam  sediaan  suspensi.  Untuk  membuat  suspensi  stabil  dalam  penyimpanan salah  satu  caranya  adalah  dengan  meningkatkan  viskositas  suspensi  yaitu  dengan  penambahan suspending  agent  salah  satunya  adalah  PGA  (Pulvis  Gummi  Arabici).    Tujuan  dari  penelitian  ini adalah  untuk  mengevaluasi  stabilitas  fisik  (volume  sedimentasi,  mudah  tidaknya  dituang,  ukuran partikel,  viskositas,  dan  redispersibilitas)  dan  daya  anti  bakteri  suspensi  eritromisin  dengan  PGA sebagai suspending agent. Suspensi dibuat 3 formula dengan perbedaan konsentrasi suspending agent  (PGA).  Formula  I  dengan  konsentrasi  PGA  5%,  formula  II  konsentrasi  PGA  7,5%  dan formula III dengan konsentrasi PGA 10%. Uji stabilitas fisik dan daya antibakteri dianalisis dengan diuji  distribusi  normalnya  dengan  uji  Kolmogorov-Smirnov  yang  dilanjutkan  dengan  uji  anava  dua jalan dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan t-test. Hasil uji stabilitas fisik suspensi eritromisin,  formula  yang  paling  baik  adalah  formula  1  dengan  konsentrasi  PGA  5%  karena memiliki  ukuran  partikel  yang  kecil  dan  konstan  selama  penyimpanan,  volume  sedimentasi  yang terbentuk  lambat,  memberikan  waktu  tuang  dan  waktu  suspensi  untuk  terdispersi  kembali,  cepat. Suspensi  eritromisin  konsentrasi  5%;  7,5%  dan  10%  memberikan  hasil  daya  hambat  yang  sama terhadap  Staphylococcus  aureus.  Suspensi  eritromisin  konsentrasi  7,5%  memberikan  diameter hambat yang konstan selama penyimpanan.
Kata kunci: suspensi, Eritromisin, Pulvis Gummi Arabici, Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Erythromycin  is  one  of  antibiotic  macrolide  group  not  soluble  in  water.  It  is  made  in preparation  of  suspension.  To  stabilize  suspension,  increasing  viscosity  suspension  with suspending  agent  is  necessary.  The  aim  is  to  evaluate  physical  stability  (sedimentation  volume, easy to pour,  particle size, viscosity, and redispersibility) and antibacterial activity of erythromycin suspension  with  PGA  as  suspending  agent.  The  suspension  is  made  3  formulas  with  difference concentration.  Formula  I  with  5%  PGA  concentration,  formula  II  7,5%  PGA  concentration  and formula III with 10% PGA concentration. Physical stability test and antibacterial activity is analyzed with normal distribution tested with Kolmogorov-Smirnov test and continue with anova two test with confident  interval  95%,  then  continued  wit    t-test.The  conclusion  of  the  physical  stability  test  of Erythromycin suspension, formula 1 with 5% PGA is the best formulation, it had  little  particle size and  constant  as  long  as  storage,  sedimentation  volume  slow  created,  giving  pour  time  and suspension  time  to  repeat  dispersion.  Suspension  of  erythromycin  with  concentration  5%;  7,5% and  10%  have  same  size  inhibition  zone  against  Staphylococcus  aureus.  Suspension  of erythromycin with concentration 7,5% provides  constant inhibition zone during storage.
Keyword: suspension, Erythromycin, Pulvis Gummi Arabici, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Suspensi  banyak  digunakan  karena mudah  penggunaannya  terhadap  anak-  anak, bayi, dan juga untuk orang dewasa  yang sukar menelan  tablet  atau  kapsul.  Suspensi  juga dapat diberi zat tambahan untuk menutupi rasa tidak  enak  dari  zat  aktifnya.  Umumnya  bentuk cair  lebih  disukai  daripada  bentuk  tablet  atau
kapsul karena mudah ditelan dan mudah diatur penyesuaian  dosisnya  untuk  anak  (Ansel, 1989). Suatu suspensi dari mulai diolah sampai menjadi  produk  yang  pada  akhirnya  sampai  ke pasien  membutuhkan  waktu  yang  cukup  lama. Oleh  karena  itu,  sediaan  tersebut  harus  tetap stabil, baik dalam penyimpanan maupun dalam penggunaan.  Hal  ini  dimaksudkan  agar  obat
dalam bentuk, bau, dan rasanya dapat diterima pasien  dalam  keadaan  yang  baik.  Faktor  yang mempengaruhi    stabilitas  fisik  suspensi  adalah volume  sedimentasi,  sifat  alir,  dan  ukuran partikel (Ansel, 1989).
Pembuatan sediaan farmasi dalam bentuk  suspensi  mempunyai  beberapa  alasan diantaranya  karena  obat  tersebut  tidak  larut dalam  air.  Eritromisin  merupakan  antimikroba yang  dihasilkan  oleh Streptomyces  eryterus yang  sangat  sukar  larut  dalam  air . Eritromisin bersifat bakteriostatik dan bakterisid, tergantung  dari  jenis  kuman  dan  kadar eritromisin.  Aktif  terhadap  kuman  gram  positif cocci,  gram  negatif  cocci,dan  beberapa  gram negatif  basili.  Eritromisin  dapat  diindikasikan untuk  infeksi  kulit  dan  jaringan  lunak  yang disebabkan oleh Staphylococcus aureus, infeksi  saluran  pernapasan  pada  anak,  batuk rejan,  sinusitis  yang  disebabkan Streptococcus pyogenes,
Haemofilus
influenzae,
Streptococcus pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae. Radang  panggul  akut  yang disebabkan  oleh Neisseria  gonorrhoeae pada penderita  yang  alergi  terhadap  penisilin. Pencegahan  terhadap endocarditis  bacterial pada  penderita  yang  alergi  terhadap  penisilin dengan  riwayat  demam  rematik  dan  kelainan jantung  bawaan.  Eritromisin  aktif  terhadap kuman anaerob dalam usus sehingga bersama neomisin  digunakan  untuk  profilaksis  bedah usus.  Penyakit  Legionnaires,  karier Bordetella pertussis pada  nasofaring.  Eritromisin  biasa digunakan untuk infeksi Mycoplasma pneumoniae ,  penyakit  Legionnaire,  infeksi klamidia, difteri, pertusis, infeksi Streptococcus , Staphylococcus ,  infeksi Camylobacter ,  tetanus, syphilis , gonore (Purwanto, 2002). Sediaan dari eritromisin  berupa delayed-release  capsules, delayed-release tablets dan ophtalamic ointment (Gerald, 2005). Penggunaan suspending  agent dalam suspensi adalah untuk meningkatkan viskositas suspensi  sehingga  suspensi  menjadi  lebih stabil. Salah satu contoh dari suspending agent adalah  PGA  ( Pulvis  Gummi  Arabici ) . PGA  atau gom  arab, Gom  akasia,  gummi  acaciae adalah eksudat gom kering yang diperoleh dari batang dan  dahan Acacia  senegal  wllid dan  beberapa spesies  Acacia  lain.  Pemerian  hampir  tidak berbau dan rasa tawar seperti lendir. Kelarutannya mudah larut  dalam air  yang akan menghasilkan  larutan  yang  kental  dan  tembus cahaya.  PGA  praktis  tidak  larut  dalam  etanol 95% P (Anonim, 1979). PGA mempunyai fungsi sebagai stabilizing  agent,  suspending  agent, emulsifying  agent,  viscosity-increasing  agent (Rowe  dan  Sheskey,  2000).  Tujuan  penelitian ini  dilakukan untuk mengevaluasi stabilitas fisik
dan  daya  antibakteri  suspensi  eritromisin dengan PGA sebagai suspending agent .

## METODOLOGI
Bahan : Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah eritromisin etilsuksinat (pa, Etercon),  PGA  (pa,  Brataco),  asam  sitrat  (pa, Merck),  Na  benzoat  (pa,  Merck),  NaOH  (pa, Merck), media agar Mueller Hinton (pa, Merck), BHI  (pa,  Oxoid), Staphylococcus  aureus ( Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi UMS). Alat  : Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah stopwatch ,  alat  penggojog,  mikroskop (Olympus),  viskotester  (Rion  Viskotester  VT- 04),  alat-alat  gelas, autoclave (ALL  American), mikropipet (Socorex), neraca analitik (Precissa), inkubator (Memmert), oven (Maxim).

## Jalannya Penelitian Pembuatan suspensi
Tabel 1- Formula suspensi untuk uji stabilitas fisik Komposisi Formula suspensi (gram) I II III Eritromisin 2,5 2,5 2,5 PGA 5 7,5 10 Asam sitrat 1 1 1 Sodium Benzoat 0,1 0,1 0,1 Natrium hidroksida 1,4 1,4 1,4 Sirup simplek 13 13 13 Aqua ad (ml) 100 100 100
Keterangan: Perbedaan  formula  I,  II,  III,  terletak  pada jumlah  PGA,  formula  I  5%,  Formula  II  7,5%,  formula  III 10%
Suspensi eritromisin dibuat dengan bahan-bahan  pada  Tabel  1.  PGA  dilarutkan dengan  air  sebanyak  7  kalinya  kemudian eritromisin  dilarutkan  dengan  asam  sitrat. Larutan  PGA  dicampurkan  sedikit  demi  sedikit ke  dalam  larutan  eritromisin.  Sodium  benzoat yang  telah  dilarutkan  dengan  air  ditambahkan pada  campuran  PGA  dan  eritromisin.  Sirup simplek  dan  natrium  hidroksida  yang  telah dilarutkan  dengan  air  dicampurkan  pada campuran PGA dan eritromisin. Diaduk sampai homogen,  suspensi  ditempatkan  dalam  tabung berskala yang kemudian dilakukan pengamatan selama  2  bulan,  pengamatannya  mencakup volume sedimentasi, viskositas, mudah tidaknya dituang, redispersibilitas, ukuran partikel, dan daya  antibakteri.

## Evaluasi sediaan suspensi Volume sedimentasi
Suspensi disimpan dalam tabung berskala.  Volume  sedimentasi  diamati  dari  hari pertama  sampai  hari  ketujuh,  kemudian  tiap minggu  selama  2  bulan.  Suspensi  diukur  tinggi sedimentasi akhir (Hu) dan tinggi suspensi awal (Ho). Volume sedimentasi merupakan perbandingan  antara  tinggi  sedimentasi  akhir dan tinggi suspensi awal.

## Mudah tidaknya dituang
Suspensi  dituang  dari  botol  dengan kemiringan  kurang  lebih  45 0 ,  waktu  yang diperlukan  untuk  mencapai  volume  tertentu dicatat.

## Ukuran partikel
Ukuran partikel ditentukan secara mikroskopis dengan cara, skala okuler dikalibrasi dengan cara mikrometer ditempatkan  di  bawah  mikroskop.  Setelah  itu garis  awal  skala  okuler  dihimpitkan  dengan garis  awal  objektif  dan  ditentukan  harga  skala okuler; suspensi yang partikelnya akan dianalisis  diletakkan  di  atas  obyek glass ,  lalu dilakukan grouping ,  yaitu  ditentukan  ukuran partikel  yang  terkecil  dan  terbesar  untuk sediaan  dengan  membagi  jarak  ukur  menjadi
beberapa  bagian;  diukur  kurang  lebih  100 partikel  dan  digolongkan  ke  dalam  grup  yang telah ditentukan.

## Viskositas
Caranya  suspensi  yang  telah  dingin dimasukan dalam wadah, kemudian viskosimeter  dicelupkan  di  wadah  tersebut. Tunggu  hingga  jarum  berhenti  bergerak,  catat angka  yang  tertera.  Penetapan  dilakukan  tiap minggu selama dua bulan.

## Redispersibilitas
Suspensi  yang  telah  disimpan  dalam tabung  berskala  dengan  volume  yang  sama digojok dengan kecepataan tertentu menggunakan  alat  penggojok.  Waktu  yang diperlukan untuk terdispersi kembali dicatat.

## Uji antibakteri
Tabel 2- Formula suspensi untuk uji daya antibakteri
Komposisi Formula suspensi (gram) Formula kontrol negatif(gram) Kontrol positif (gram) I II III
I II III Eritromisin 2,5 2,5 2,5 - - - 2,5 PGA 5 7,5 10 5 7,5 10 - Asam sitrat 1 1 1 1 1 1 - Sodium benzoat 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 - Natrium hidroksida 1,4 1,4 1,4 1,4 1,4 1,4 - Sirup .simplek 13 13 13 13 13 13 - Aquadest ad (ml) 100 100 100 100 100 100 100

## Pewarnaan Gram
Spesimen  dioleskan  ke  permukaan  kaca objek mikroskop. Kaca objek dilewatkan di atas api bunsen 3-4 kali untuk mematikan mikroorganisme. Kaca objek ditutup dengan zat warna ungu (metil atau kristal violet) selama 15 detik, cairan yang berlebihan dibuang. Kemudian dialiri dengan iodium Gram selama 1 menit,  dan  keringkan.  Setelah  kering  dialiri  lagi dengan  aseton  selama  2-5  detik,  cuci  dengan air  atau  etanol  untuk  membilas  semua  zat warna  yang  tidak  diserap  oleh  bakteri.  Bakteri diberi counterstain (pewarna tandingan) dengan menuangkan  zat  warna  merah  (karbol  fuksin) ke  kaca  selama  20  detik,  lalu  keringkan  dan diamati.  Bakteri  Gram  positif  memberikan warna ungu dan untuk Gram negatif memberikan  warna  merah  muda  karena  tidak menyerap zat warna ungu dan menyerap warna tandingan.
Uji antibakteri Staphylococcus aureus secara in vitro Koloni Staphylococcus  aureus diambil dari  biakan  murni  sebanyak  1  ose  kemudian disuspensikan  ke  dalam  media  BHI  cair  dan diinkubasi  pada  temperatur  37 C  selama  24 jam.  Biakan  tersebut diambil  200  μL  dan dimasukkan  ke  dalam  media  BHI  DS.  Biakan diinkubasi  selama  3-5  jam.  Setelah  itu,  biakan
tersebut  diencerkan  dengan  akuades  steril untuk disamakan kekeruhannya dengan standar  Mc.  Farland  (10 8 CFU/mL).  Suspensi bakteri yang telah distandarkan tersebut diambil 50  μL  bakteri  dan  dicampur  dalam  5 ml media BHI DS sehingga kekeruhannya 10 6 CFU/mL. Biakan bakteri dalam BHI DS diambil 100 μL menggunakan mikropipet, kemudian dituang di atas permukaan media MH. Suspensi bakteri diratakan  menggunakan spreader  glass .  Pada agar tersebut dibuat sumuran dengan diameter 7 mm untuk masing-masing perlakuan. Suspensi  eritromisin  dimasukkan  ke  dalam sumuran  sebanyak  100µl  untuk  tiap  formula. Inkubasi  dilakukan  suhu  37 0 C  selama  24  jam. Diameter zona hambatan yang terbentuk diukur menggunakan penggaris.

## Metode Analisis
Data hasil evaluasi stabilitas fisik suspensi  eritromisin  (volume  sedimentasi, mudah  tidaknya  dituang,  ukuran  partikel, viskositas, dan redispersibilitas) dan pengukuran diameter zona hambat pada media agar  diuji  distribusi  normalnya  dengan  uji Kolmogorov-Smirnov. Data kemudian dilakukan uji  anava  dua  jalan  dengan  taraf  kepercayaan 95%. Analisis dilanjutkan dengan t independent - test.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  volume  sedimentasi dari  suspensi  eritromisin  dapat  dilihat  dari Gambar  1  bahwa  formula  III  memiliki  volume sedimentasi yang lebih besar dari formula I dan formula  II  dan  semakin  lama  penyimpanan, volume sedimentasi semakin kecil. Pengendapan  partikel  dipengaruhi  oleh  ukuran partikel,  semakin  besar  ukuran  partikel  maka semakin  cepat  pengendapan  terjadi  yang  juga berkaitan  dengan  kemampuan  mendispersi kembali  karena  sedimen  yang  terbentuk  akan menjadi cake yang keras yang sukar terdispersi kembali.  Ini  menyebabkan  suspensi  sukar terdispersi kembali.
Gambar 1- Grafik volume sedimentasi suspensi eritromisin dengan suspending  agent PGA  selama  penyimpanan  2 bulan,  suspensi  eritromisin  formula  III  memiliki  volume sedimentasi  paling  besar  dibandingkan  dengan  formula  I dan formula II
Hasil  uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov menunjukkan data volume sedimentasi terdistribusi  normal,  sehingga  dilanjutkan  uji statistik anava 2 jalan.  Dari uji anava dua jalan dari hasil uji untuk faktor formula mempunyai p- value =  0,000<0,05  maka  ketiga  formula memberikan volume sedimentasi yang berbeda.  Faktor  hari  nilai p-value =  0,000<0,05 yang  berarti  lamanya  penyimpanan  juga memberikan volume sedimentasi yang berbeda.  Pada  faktor  interaksi  antara  formula dengan  hari  didapat  nilai p-value =  0,000<0,05 yang berarti adanya interaksi antara perbedaan formula  dengan  lamanya  penyimpanan  dalam mempengaruhi  volume  sedimentasi  suspensi eritromisin.  Analisis  dilanjutkan  dengan  t- test independent , t- test dilakukan untuk mengetahui perbedaan  volume  sedimentasi  tiap  formula. Dari  analisis  dapat  disimpulkan  bahwa  pada tiap formula terdapat perbedaan yang signifikan (bermakna)  yaitu  antara  formula  I  dengan formula  II  dengan p-value =  0,000,    formula    I dan  formula  III  dengan p-value  = 0,009, sementara  pada  pengujian  formula  II  dengan formula  III  tidak  berbeda  bermakna  dengan p- value = 0,084.
Hasil  uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov menunjukkan  data  mudah  tidaknya  dituang
terdistribusi  normal,  sehingga  dilanjutkan  uji statistik anava 2 jalan.  Dari uji anava dua jalan dari  hasil  uji  untuk  faktor  formula  mempunyai nilai p-value =  0,000<0,05  maka  ketiga  formula memberikan  waktu  yang  berbeda.  Faktor  hari nilai p-value =  0,000<0,05  yang berarti  lamanya penyimpanan  juga  memberikan  waktu  yang berbeda.  Faktor  interaksi  antara  formula dengan  hari  didapat  nilai p-value =  1,000>0,05 yang  berarti  adanya  interaksi  antara  formula dengan lamanya penyimpanan tidak mempengaruhi  waktu  penuangan.  Analisis dilanjutkan t- test independent , dengan pengujian  tiap  formula.  Dari  uji t  test independent diperoleh    hasil  formula  I  dengan formula  II  tidak  signifikan  (berbeda  tidak bermakna) dengan nilai p-value =0,117. Kemudian  formula  II  dan  formula  III  tidak signifikan  (berbeda  tidak  bermakna)  dengan nilai p-value =0,633, sementara pengujian formula I dengan formula III signifikan (berbeda bermakna) dengan nilai p-value = 0,016.
Gambar  2- Grafik  waktu  penuangan  suspensi  Eritromisin dengan  perbedaan  konsentrasi suspending  agent yang berbeda  selama  penyimpanan  2  bulan,  suspensi  dengan formula  III  memerlukan  waktu  tuang  yang  lebih  lama  dari formula I dan II
Hasil  pengujian  ukuran  partikel  dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3- Grafik  ukuran  partikel  suspensi  eritromisin dengan  perbedaan  konsentrasi suspending  agent yang berbeda  selama  penyimpanan  2  bulan,  suspensi  dengan formula  I  dan  II  menunjukan  semakin  lama  penyimpanan ukuran  partikel  semakin  kecil  sedangkan  pada  formula  III semakin lama penyimpanan ukuran partikel semakin besar
0.000 0.050 0.100 0.150 0.200 0.250 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lama penyimpanan (hari) V ol um e s e di m e nt a s i FI FII FIII 14 21 21 35 42 49 56 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 3,50 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lama penyimpanan (hari) M u d a h t id a k n y a d it u a n g ( d e t ik ) FI FII FIII 14 21 28 35 42 49 56 0,000 0,050 0,100 0,150 0,200 0,250 0,300 0,350 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lama penyimpanan (hari) U k ura n pa r t i k e l ( m m ) FI FII FIII 14 21 28 35 42 49 56
Data  uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov menunjukkan  data  ukuran  partikel  terdistribusi normal,  sehingga  dilanjutkan  uji  statistik  anava 2  jalan.    Dari  uji  anava  dua  jalan  dari  hasil  uji untuk faktor formula mempunyai  nilai p-value = 0,000<0,05  maka  ketiga  formula  memberikan ukuran  partikel  yang  berbeda.  Faktor  hari  nilai p-value =  0,040<0,05  yang  berarti  lamanya penyimpanan  juga  memberikan  ukuran  partikel yang  berbeda.  Faktor  interaksi  antara  formula dengan  hari  didapat  nilai p-value =  0,007<0,05 yang  berarti  adanya  interaksi  antara  formula dengan  lamanya  penyimpanan,  mempengaruhi ukuran  partikel  suspensi.  Analisis  dilanjutkan  t- test  independent ,  dengan  pengujian  tiap formula.  Dari  uji t  test independent diperoleh hasil    formula  I  dengan  formula  II  tidak signifikan  (berbeda  tidak  bermakna)  dengan nilai p-value =0,586.  Kemudian  formula  II dengan  formula  III  tidak  signifikan  (berbeda tidak  bermakna)  dengan  nilai p-value =0,064, sementara  pengujian  formula  I  dengan  formula III  signifikan  (berbeda  bermakna)  dengan  nilai p-value =0,038.
Hasil  uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov menunjukkan data viskositas terdistribusi normal,  sehingga  dilanjutkan  uji  statistik  anava 2  jalan.  Dari  uji  anava  dua  jalan  dari  hasil  uji faktor  formula  mempunyai  nilai p-value = 0,000<0,05  maka  ketiga  formula  memberikan viskositas  yang  berbeda.  Faktor  hari  nilai p- value =  0,000<0,05  yang  berarti  lamanya penyimpanan juga memberikan viskositas yang berbeda.  Faktor  interaksi  antara  formula dengan  hari  didapat  nilai p-value =  0,999>0,05 yang  berarti  adanya  interaksi  antara  formula dengan lamanya penyimpanan tidak mempengaruhi  viskositas  suspensi.  Dari  uji t test independent diperoleh  hasil  formula  I dengan formula II signifikan (berbeda bermakna) dengan nilai p-value =0,002. Kemudian  formula  II  dan  formula  III  signifikan (berbeda bermakna) dengan nilai p- value =0,000,  pengujian  formula  I  dengan formula  III  signifikan  (berbeda  bermakna) dengan nilai p-value = 0,001.
Gambar  4- Grafik  viskositas  suspensi  eritromisin  dengan perbedaan  konsentrasi suspending  agent yang  berbeda selama penyimpanan 2 bulan, semakin lama penyimpanan, viskositas ketiga formula semakin kecil.
Gambar  5- Grafik  waktu  terdispersi  kembali  suspensi eritromisin  dengan  perbedaan  konsentrasi suspending agent yang  berbeda  selama  penyimpanan  2  bulan, suspensi  dengan  formula III memberikan  waktu  terdispersi yang paling lama dari formula I dan II.
Hasil  uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov menunjukkan  data  waktu  untuk  terdispersi kembali terdistribusi normal, sehingga dilanjutkan  uji  statistik  anava  2  jalan.  Dari  uji anava  dua  jalan  dari  hasil  uji  untuk  faktor formula  mempunyai  nilai p-value =  0,000<0,05 maka  ketiga  formula  memberikan  waktu terdispersi  kembali  yang  berbeda.  Faktor  hari diperoleh nilai p-value = 0,000<0,05 yang berarti lamanya  penyimpanan  juga memberikan  waktu untuk terdispersi kembali yang berbeda.
Faktor  interaksi  antara  formula  dengan hari  didapat  nilai p-value =  0,00<  0,05  yang berarti  adanya  interaksi  antara  formula  dengan lamanya  penyimpanan  mempengaruhi  waktu suspensi  untuk  terdispersi  kembali.  Analisa dilanjutkan degan t- test independent . Hasil uji t test independent diperoleh    hasil    formula  I dengan formula II signifikan (berbeda bermakna)  dengan  nilai p-value =  0,049. Kemudian  formula  II  dan  formula  III  signifikan (berbeda  bermakna)  dengan  nilai p-value = 0,000,  pengujian  formula  I  dengan  formula  III signifikan  (berbeda  bermakna)  dengan  nilai p- value = 0,005.
Parameter  uji  mikrobiologi  suspensi eritromisin  terhadap Staphylococcus  aureus, dengan  PGA  sebagai suspending  agent dapat diketahui dari diameter hambatan yang dihasilkan.  Hasil  pengujian  reaksi  pewarnaan Gram memberikan warna ungu, yang menunjukkan bahwa bakteri merupakan bakteri Gram positif. Pada pengujian suspensi eritromisin  pada  hari  ke  1,  30  dan  60  masih memiliki  aktivitas  daya  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus yang ditunjukkan dengan  terbentuknya  diameter  zona  hambat radikal.  Diameter  zona  hambat  radikal  ditandai dengan tidak diketemukan adanya pertumbuhan  bakteri  di  sekitar  sumuran.  Data uji  statistik  Kolmogorov-Smirnov  menunjukkan data daya hambat suspensi terdistribusi normal, sehingga dilanjutkan uji statistik anava 2 jalan.
Hasil  uji  anava  dua  jalan  dari  hasil  uji untuk  faktor  formula  mempunyai  nilai p-value =
0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 7,00 8,00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lama penyimpanan (hari) V is k o s it a s ( d - p a ) FI FII FIII 14 21 28 35 42 49 56 0 5 10 15 20 25 30 35 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lam a penyim panan (hari) N il a i re d is p e rs ( d e ti k ) FI FII FIII 14 21 28 35 42 49 52
0,000<0,05  maka  ketiga  formula  memberikan daya hambat yang berbeda. Faktor hari nilai uji p-value =  0,242>0,05  yang  berarti  lamanya penyimpanan  tidak  berpengaruh  pada  daya hambat  suspensi.  Faktor  interaksi  antara formula  dengan  hari  didapat  nilai p-value = 0,033<  0,05  yang  berarti  adanya  interaksi antara  formula  dengan  lamanya  penyimpanan, namun secara keseluruhan tidak mempengaruhi daya hambat suspensi terhadap bakteri Staphylococcus  aureus .  Hal  ini  dapat dilihat  dari  hasil  penelitian  dimana  tidak berbeda  daya  hambatnya.  Analisa  dilanjutkan
dengan  t- test  independent .  Hasil  uji t  test independent diperoleh    hasil    formula  I  dengan formula  II  tidak  signifikan  (berbeda  tidak bermakna)  dalam  diameter  daya  hambat suspensi  dengan  nilai p-value =  0,109. Kemudian  formula  II  dengan  formula  III memberikan  diameter  daya  hambat  yang berbeda  bermakna  dengan  nilai p-value = 0,007,  pengujian  formula  I  dengan  formula  III tidak  memberikan  perbedaan  yang  bermakna pada  diameter  daya  hambat  suspensi  dengan nilai p-value =  0,359.  Sehingga  ketiga  formula mempunyai aktivitas yang sama.
Tabel 3. Hasil uji aktivitas antibakteri suspensi eritromisin
Hari Diameter Hambat (cm) F I F II F III K F I K F II K F III K P 1 3,08 3,18 3,05 0,00 0,00 0,00 2,88 30 2,78 3,10 2,80 0,00 0,00 0,00 3,10 60 3,13 3,05 2,78 0,00 0,00 0,00 3,08 Keterangan:
F1: suspensi eritromisin dengan konsentrasi PGA 5% F2: suspensi eritromisin dengan konsentrasi PGA 7,5% F3: suspensi eritromisin dengan konsentrasi PGA 10% KF I : kontrol formula I KF II: kontrol Formula II KF III: kontrol formula III
Dari  pengamatan  diameter  daya  hambat suspensi eritromisin menggunakan PGA sebagai suspending agent terhadap Staphylococcus  aureus formula  II  memberikan diameter  zona  hambat  yang  paling  besar  dan cenderung  konstan  selama  penyimpanan  2 bulan. Apabila dilihat dari hasil uji stabilitas fisik, maka  formula  I  yang  paling  baik  dibandingkan formula  II  dan  formula  III.  Suspensi  dengan konsentrasi  PGA  5%  memiliki  stabilitas  yang paling  baik,  karena  memiliki  ukuran  partikel yang  kecil  dan  konstan  selama  penyimpanan, volume  sedimentasi  yang  terbentuk  lambat, memberikan  waktu  tuang  dan  waktu  untuk suspensi terdispersi kembali cepat.

## KESIMPULAN
1.  Suspensi formula I yang mengandung PGA konsentrasi  5%  memiliki  stabilitas  yang paling baik, karena memiliki ukuran partikel yang kecil dan konstan selama penyimpanan,  volume  sedimentasi  yang terbentuk lambat, memberikan waktu tuang dan  waktu  untuk  suspensi  terdispersi kembali cepat.
2.  Suspensi  masih  memiliki  daya  antibakteri sampai penyimpanan hari ke-60. Formula II yang  mengandung  PGA  konsentrasi  7,5% mempunyai  diameter  yang  konstan  selama penyimpanan.

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel,  H.C.,  1989, Pengantar  Bentuk  Sediaan  Farmasi ,  354,  356-357  Edisi  IV,  Universitas Indonesia, Jakarta.
Departemen  Kesehatan  RI,  1979, Farmakope  Indonesia ,  Edisi  III,  hal  32,  247,  248,  279, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Gerald,  K.,  2005, AHFS  Drug  Information ,  2646,  2645,  American  Society  of  Health,  System Pharmacist, USA.
Purwanto, H., 2002, Daftar Obat Indonesia , Edisi 10, 358-359, Grafidian Medipress, Jakarta.
Rowe,  C.  R,  Sheskey,  J.  R.,  2000, Handbook  of  Pharmaceutical  Exipients, edisi  IV,  1,  American Society of Health, System Pharmacist , USA.