Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.10, No.1, Mei 2021, pp. 44 - 48 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338 – 5634 (Print)

## Antibacterial Activity Test Of Leaves Bidara ( Ziziphus Mauritiana Lam)
Ethanolic Extracts Against Staphylococcus Aureus
Uji Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bidara ( Ziziphus Mauritiana Lam) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus
Dini Mardhiyani 1, Moni Afriani 2
Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan, Universitas Abdurrab 1,2 Email dini.mardhiyani@univrab.ac.id

## Abstract
Infection is the most common ilnness in public. One of the triggers of infection is bacteria.  Bidara  leaf  (Ziziphus  mauritiana  L)  is  a  plant  that  has  antibacterial compounds  is  phenolics,  saponins  and  triterpenoids/steroids.  The  study  aims  to test  antibacterial  potency  Staphylococcus.  a ntibacterial  activity  testing  was carried  out  using paper  disc  difussion  methode,  the  etanol  extract  show antibacterial activity against Staphylococcus Aureus which is characterized by the presence  of  clear  zone  on  the  media. The  results  of ethanol  extract  of  bidara leaves with  concentrations  of  30%,  50%  and  70%  against  Staphylococcus aureus bacteria, the average diameter of inhibitory zones respectively were 8,39 mm, 10,64 mm and 12 mm with the positive control diameter of inhibition zone was 23,46 mm, the  negative control diameter of inhibition zone was 0 mm.
Keywords: Bidara leaf; antibacterial; Staphylococcus aureus

## Abstrak
Infeksi merupakan salah penyakit yang paling banyak terjadi dimasyarakat. Salah satu pencetus infeksi adalah bakteri. Daun bidara ( Ziziphus mauritiana L)  merupakan  tanaman  yang  memiliki  senyawa  antibakteri  diantaranya fenolik,  saponin  dan  triterpenoid/steroid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menguji  potensi  antibakteri Staphylococcus  aureus .  Sampel  ekstrak  daun bidara  diekstraksi  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  70  %  dengan metode maserasi. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi cakram  kertas.  Ekstrak  etanol  daun  bidara  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap Staphylococcus aureus yang  ditandai  dengan  adanya  zona  bening pada  media.  Hasil  yang  diperoleh  bahwa  ekstrak  etanol  daun  bidara konsentrasi  30%,  50%  dan  70%  terhadap Staphylococcus aureus memiliki rerata diameter zona hambat berturut-turut yaitu 8,39 mm, 10,64 mm dan 12 mm dengan kontrol positif diameter zona hambat 23,46 mm, kontrol negatif diameter  zona  hambat  0  mm.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini,  ekstrak  etanol daun  bidara  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  dengan  daya hambat kuat pada konsentrasi 50% dan 70% . Kata Kunci Daun bidara; antibakteri; Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  saat  ini  sudah  sangat dibutuhkan oleh masyarakat diera kemajuan
ilmu  pengetahuan  dan  teknologi  modern. Namun  belum  banyaknya  informasi  dan pengetahuan  masyarakat  mengenai  jenis

## Article Info

## Article history
Received date: 2021-07-03 Revised date: 2021-07-22 Accepted date: 2021-07-30
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.10, No.1, Mei 2021, pp. 44 - 48 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338 – 5634 (Print)
tumbuhan  apa  saja  yang  dapat  digunakan sebagai ramuan obat-obatan traditional [1]. Hal  tersebut  menjadi  penyebab  beberapa tahun  terakhir  terjadi  peningkatan  minat peneliti dalam melakukan penelitian mengenai penggunaan bahan alam sebagai senyawa  biologis  alam  dalam  pembuatan obat untuk meningkatkan informasi mengenai penggunaaan bahan alam sebagai obat [2]. Penyakit  infeksi  merupakan  salah  satu penyakit yang banyak terjadi dimasyarakat [3],  sehingga  perlu  dilakukan  penelitian mengenai  solusi  untuk  mengatasi  penyakit tersebut. Sebagai contoh bakteri Staphylococcus    aureus merupakan  flora normal  pada  kulit  manusia,  tetapi  pada kondisi yang memungkinkan dapat menginfeksi  kulit  manusia  juga  dapat menginfeksi  luka,  lalu  masuk  ke  peredaran darah  menyebar  ke  organ  lain  dan menyebabkan  pneumonia,  infeksi  pada katup  jantung  yang  memicu  gagal  jantung, radang tulang, bahkan dapat menyebabkan shok yang dapat menimbulkan kematian [4]. Adanya akibat yang ditimbulkan dari infeksi bakteri  tersebut  maka  perlunya  penelitian tanaman obat yang dapat memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  tersebut. Tanaman  bidara  merupakan  tanaman  yang memiliki banyak manfaat karena kandungan fenolat  dan  flavonoid  diantaranya  memiliki manfaat  sebagai  antioksidan,  antiinflamasi, antimikroba, antifungi dan mencegah timbulnya  tumor.  Ekstrak  etanol  dari  daun bidara  mempunyai  aktivitas  antimikroba terhadap Staphylococcus  aureus ,  diikuti Escheria  coli ,  dan  terakhir Staphylococcus pyogenes [5].  Berdasarkan  hal  tersebut maka  penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat ekstrak  etanol  daun  bidara  yang  diperoleh dan dibudidayakan di  daerah Riau apakah memiliki
potensi terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
METODE
Penelitian ini merupakan penelitian kuantitatif  untuk  menentukan  daya  hambat ekstrak  etanol  70%  daun  bidara  terhadap bakteri Staphylococus aureus dengan konsentrasi 30%, 50% dan 70%
menggunakan metode difusi cakram.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  beakerglass  (Iwaki), gunting,  timbangan  analitik,  kaca  arloji, autoklaf  (Memmert),  pipet  tetes,  batang pengaduk,  kawat  ose,  cawan  petridish (Iwaki),  erlenmeyer  (Iwaki),  gelas  ukur (Iwaki), inkubator  (Memmert), lampu bunsen, kaki  tiga  penyangga,  asbes,  labu  ukur (Iwaki),  oven  (Memmert),  rotary  evaporator (Labo RE-52CS), jangka sorong (Kenmaster), pinset,  pipet  volume  (Iwaki),  gelas  ukur (Iwaki),  pipet  mikro,  tabung  reaksi  (Iwaki), rak tabung reaksi, spatel.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  daun  bidara,  akuades,  NaCl fisiologis  steril,  spiritus,  etanol  70%,  cakram kosong,  cakram  antibiotik  kloramfenikol, strain Staphylococus  Aureus, media  MHA ( Mueller Hinton Agar ), kapas steril.

## Prosedur Kerja Pembuatan Simplisia
Sampel  daun  Bidara  yang  diperoleh  dari dari  pekanbaru,  Riau  dilakukan  sortasi basah yaitu pembersihan dari kotoran yang menempel  pada  daun  yang  diambil misalnya  tanah,  kerikil  atau  pengotor lainnya,  kemudian  dibersihkan  atau  dicuci kemudian  dikering  anginkan  pada  suhu kamar,  lalu  dilakukan  sortasi  kering  yakni memisahkan  kotoran,  bahan  organik  asing, dan  sebagian  simplisia  yang  rusak  akibat proses sebelumnya kemudian dipotong kecil, diblender hingga halus.
Pembuatan ekstrak etanol daun bidara 900  gram  serbuk  Bidara  dimaserasi menggunakan etanol 70% selama tiga hari.
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.10, No.1, Mei 2021, pp. 44 - 48 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338 – 5634 (Print)
Selanjutnya dilakukan penyaringan sehingga residu  yang  dihasilkan  kemudian  dimaserasi kembali  dengan  penambahan  etanol  baru selama  3  hari  dan  dilakukan  penyaringan kembali.  Semua  filtrat  yang  dihasilkan disatukan  menjadi  satu  dalam  satu  wadah sebagai  filtrat  ekstrak  Etanol.  Kemudian filtrat  tersebut  dipekatkan  dengan  vacum rotary  evaporator hingga  didapatkan ekstrak kental kemudian ditimbang [6]. Pembuatan Larutan Uji Konsentrasi 70% 7  Gram  ekstrak  etanol  daun  bidara ditimbang  kemudian  dimasukkan  ke  dalam labu  ukur  Steril  10  mL  dan  ditambahkan DMSO sampai tanda batas.
Pembuatan Larutan Uji Konsentrasi 50% 7,14  ml  ekstrak  etanol  daun  Bidara konsentrasi  70% dimasukkan  ke dalam  labu ukur  10  mL  Steril  dan  ditambahkan  DMSO sampai tanda batas.
Pembuatan Larutan Uji Konsentrasi 30% 6  ml  ekstrak  daun  Bidara  50%  dimasukkan ke  dalam  labu  ukur  10  mL  Steril,  lalu ditambahkan DMSO sampai tanda batas. Pembuatan  Media Mueller  Hinton  Agar (MHA)
3,8  gram  media  MHA  dimasukkan  kedalam labu  takar  250  ml,  kemudian  ditambahkan aquades  100  ml.  Selanjutnya  media  MHA diaduk  dan  dipanaskan  menggunakan  hot plate.  Selanjutnya  media  MHA  di  autoclave selama  15  menit  dengan  suhu  121 ℃ untuk mensterilkan  media.  Setelah  steril  media MHA  di  tambahkan  darah  sebnayak  5  ml Kemudian  media  dituang  kedalam  cawan petri steril sebanyak 10 ml [7].
Pembuatan Larutan Standart Mc.Farland BaCl2  1%  sebanyak  0,5  ml  dan  larutan H2SO4  1%  sebanyak  9,5  ml  dimasukan  ke dalam  tabung  reaksi  tutup  ulir  dan  di homogenkan  sampai  tercampur  sempurna [8].
Pembuatan Suspensi Staphylococus aureus Diambil 1  ose  bakteri Staphylococcus  aureus dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  yang
berisi  10  ml  larutan  NaCl  fisiologi  0,9%, kemudian dikocok sampai homogen, kemudian  disamakan  dengan  standar  Mc Farland [9].

## Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun Bidara
Kapas lidi steril dicelupkan kedalam tabung reaksi  yang  telah    berisi  suspensi  uji,  lalu peras  kapas  lidi  dari dinding  tabung reaksi sambil  diputar.  Setelah  itu  suspensi  uji dioleskan  pada  permukaan  media  secara zig  zag  sampai  semua  media  teroleskan secara  merata.  Kemudian  kertas  cakram kosong  diletakkan  di  tengah  permukaan media  sambal  menggunakan  pinset  dan ditetesi dengan larutan DMSO
menggunakan  pipet  mikro  yang  digunakan sebagai  kontrol negatif (-). Lalu kertas disk Kloramfenikol  diambil  dan  diletakkan  pada permukaan  media  yang  digunakan  sebgai kontrol positif (+). Selanjutnya kertas cakram kosong  diletakkan  pada  permukaan  media dan  ditetesi  dengan  larutan  uji  konsentrasi 30%,  50%,  dan  70%  menggunakan  pipet mikro.  Pengulangan  dilakukan  sebanyak  3 kali.  Selanjutnya  cawan  diinkubasi  dalam inkubator  secara  terbalik  selama  24  jam pada suhu 37 o C. Zona hambat pertumbuhan bakteri  dari  masing-masing  cakram  diukur sebagai data hasil penelitian.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini akan  disajikan  dalam  bentuk  tabulasi  dan dijelaskan secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian yang dilakukan dengan menggunakan simplisia daun bidara ( Ziziphus  mauritiana Lam)  sebanyak  900  g yang  dimaserasi  dengan  4,5  liter  etanol 70%  sehingga  diperoleh  ekstrak  etanol kental sebanyak 190,63 gram.
Hasil  dari  ekstrak  etanol  daun  bidara ( Ziziphus  mauritiana Lam)  yang  dibentuk dalam berbagai konsentrasi, baik
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.10, No.1, Mei 2021, pp. 44 - 48 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338 – 5634 (Print)
konsentrasi  30%,  50%  dan  70%,  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus yang ditumbuhkan pada media MHA mampu membentuk  diameter  zona  hambat  dalam pertumbuhan bakteri tersebut. Hal ini dapat terlihat  dari  hasil  yang  tercantum  pada tabel 1 dibawah ini.
Tabel 1. Hasil pengukuran Diameter Zona hambat yang terbentuk pada media MHA
Pengukuran  hasil  penelitian  uji  aktiivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  bidara ( Ziziphus mauritiana Lam) terhadap Staphylococcus  aureus dengan  konsentrasi 30%,  50%,  dan  70%  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dapat  dilihat  dari zona  bening  yang  berada  disekitar  kertas disk.  Terbentuknya  zona  hambat  terjadi karena  kemampuan  ekstrak  etanol  daun bidara untuk menghambat bakteri Staphylococcus aureus [10].
Rata-rata zona hambat yang terbentuk oleh ekstrak  daun  bidara  pada  konsentrasi  30% adalah  8,39  mm,  50%  adalah  10,64  mm, dan 70% adalah 12,00 mm. Hasil rata-rata diameter zona hambat pembanding kloramfenikol  (kontrol  positif)  yaitu  sebesar 23,46 mm. Hasil pengukuran  diameter  zona hambat  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  bidara  ( Ziziphus  mauritiana Lam) memiliki  daya  hambat  kuat  terhadap Staphylococcus  aureus. Penentuan  kriteria  ini berdasarkan  kategori  menurut  Susanto et  al [11]  yaitu  kategori  lemah  memiliki diameter ≤ 5 mm, kategori sedang memiliki diameter
zona  hambat  sekitar  antara  6-10  mm,  dan diameter  zona  hambat  yang  kuat  sekitar antara  11-20  mm.  Tumbuhan  daun  bidara secara  keseluruhan  mengandung  beberapa golongan  senyawa  seperti  terpenoid, flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tanin,  kionon dan steroid [12].
Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri diprediksi melalui penghambatan sintesis dinding sel yang akan menyebabkan lisis  pada  sel  sehingga  sel  akan  mati  [13]. Flavonoid diketahui memiliki sifat antibakteri dimana mekanisme kerjanya adalah membentuk  senyawa  kompleks  dengan protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga dapat  merusak  membran  sel  bakteri  dan diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler [14]. Berdasarkan hasil
penelitian  ini,  bahwa  semakin  besar konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  bidara ( Ziziphus  mauritiana lam),  semakin  besar zona hambat yang terbentuk.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa: 1.  Ekstrak  etanol  daun  bidara  ( Ziziphus mauritiana lam) dapat menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus pada konsentrasi 30%, 50% dan 70%. 2.  Aktivitas  antibakteri  Ekstrak  etanol  daun bidara  ( Ziziphus  mauritiana lam)  terhadap Staphylococcus  aureus memberikan  zona hambat  tertinggi  pada  konsentrasi  70% dengan diameter zona hambat 12,25 mm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima    kasih   ucapakan kepada   Rektor Universitas Abdurrab, Kepala LPPM Universitas Abdurrab, Koordinator
laboratorium,        analis        laboratorium serta  semua  pihak    yang    membantu    dan terlibat dalam penelitian ini.
Replikasi  Kontrol negatif (mm) Kontrol Positif (mm) Diameter Zona Hambat tiap Konsentrasi Ekstrak (mm) 30 % 50% 70% I 0 22,91 7,6 10,71  11,61 II 0 24,21 9,28  10,28  12,41 III 0 23,26 8,31  10,93  12 Rata- Rata 0 23,46 8,39  10,64  12,00
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.10, No.1, Mei 2021, pp. 44 - 48 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338 – 5634 (Print)

## DAFTAR PUSTAKA
[1] A.N.S., Thomas, Tanaman Obat Tradisional 1, Yogyakarta: Kanisius,
2012
[2] Dewo, Mas. Gendola: Obat Dewa Penakluk Aneka Penyakit . Jakarta: FMedia, 2013
[3] M. Radji, Mikrobiologi. Buku Kedokteran Jakarta: EGC, 2011
[4] H. Wasito, E.S., Priani, Y Lukmayani, Uji Aktivitas Antibakteri Madu Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. FMIPA Universitas Islam Bandung. Bandung, 2008
[5] M.E. Abalaka, S.Y. Daniyan & A. Mann, Evaluation of the antimicrobial activities of two Ziziphus species (Ziziphus mauritiana L. and Ziziphus spinachristi L.) on some microbial pathogens. African Journal of Pharmacy and Pharmacology , 4 (4), 135-139, April 2010
[6] W. Ningsih, D. Nofiandi, C.Deviarny, DR Roselin. Formulasi dan Efek Antibakteri Masker Peel Off Ekstrak Daun Dewa
(Gynura pseudochina (Lour.) DC.)Terhadap Staphylococcus epidermidis. Scientia , 7(1), 61–66,
Februari 2017
[7] S. Sarwendah, Y. Yusliana, H.C.G. Laia. Uji Daya Hambat Antibakteri Air Perasan Daging Buah Nanas (Ananas comosus (L) Merr Var. Queen) Terhadap Bakteri propionibacterium acnes. Jurnal Biologi Tropis, 20 ( 1 ) , 87-93 , Maret 2020
[8] R. Rosmania & F. Yanti, Perhitungan jumlah bakteri di Laboratorium Mikrobiologi menggunakan pengembangan metode
Spektrofotometri. Jurnal Penelitian
Sains , 22 (2), 76-86, Mei 2020
[9] M. Misna & K. Diana 2016. Aktivitas antibakteri ekstrak kulit bawang merah (Allium cepa l.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy)(e-Journal) , 2 (2), 138-144, Oktober 2016
[10] H. Haeria, N. Dhuha & R. Habra, Aktivitas Antibakteri Fraksi-Fraksi Daun Bidara (Ziziphus mauritiana). ad- Dawaa'Journal of Pharmaceutical Sciences, 1 (2), 94-102, Desember 2018 [11] D.S. Susanto & R. Ruga. Studi Kandungan Bahan Aktif Tumbuhan Meranti Merah (Shorea leprosula Miq) Sebagai Sumber Senyawa Antibakteri. Mulawarmnan Scientifie . 11 (2): 181- 190, 2012
[12] R.H. Kusriani &E. Machter. Penetapan kadar senyawa fenolat total dan aktivitas antioksidan ekstrak daun, buah dan biji bidara (ziziphus spina-christi l.). Prosiding SNaPP: Kesehatan (Kedokteran, Kebidanan, Keperawatan, Farmasi, Psikologi) , 1 (1), 311-318, 2015
[13] B.T. Nikham, Uji Bahan Baku Antibakteri dari  Buah  Mahkota  Dewa  (Phaleria Macrocarpa  (Scheff)  Boerl.)  Hasil Iradiasi Gamma dan Antibiotik terhadap  Bakteri  Patogen. Serpong: Prosiding Pertemuan Ilmiah Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Bahan , 2012 [14] A. Darmawati, I. Bawa, I.W. Suirta , Isolasi dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid pada Daun Nangka (Artocarpus heterophyllus Lmk) dan Aktivitas Antibakteri terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Jurnal Kimia , 9 (2), 203-210. Juli 2015