Efek Histopatologis Insektisida λ-Cyhalothrin terhadap Insang, Hati, dan Usus Halus Ikan Nila ( Oreochromis niloticus L., 1758)
Siwi Dwi Rahayu 1 , Zeyna Listy Zulfatin 1 , dan Ardaning Nuriliani 2
1 Alumnus Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada
2 Laboratorium Struktur Perkembangan Hewan, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada, Jl. Teknika Selatan, Sekip Utara, Yogyakarta 55281 * Email: shiwie_bubleblue@yahoo.co.id , d_ningciit@yahoo.com
Diterima April 2012 disetujui untuk diterbitkan Mei 2013

## Abstract
λ-cyhalothrin  is  phyrethroid  insecticide  that  can  pollute  the  waters  environment  and  cause sublethal  as  well  as  lethal  effects  to  non-target  organisms  such  as  tilapia.  This  research  were aimed to study the LC 50 96 h  value and  histopathological effects of λ-cyhalothrin on the gills, liver, and small intestine of tilapia. In t his research fish were divided into control group and the treatment groups  of λ-cyhalothrin at  the  concentration  of  3,  6,  9,  and  12  µg/L.  The  treatment  used  a  static system  for  96  hours.  The  LC 50 96  h  value  was  analyzed  by  linear  regression.  Histopathological effects  on  the  organs  were  analyzed  using  descriptive  comparative.  Histological  preparation  was done  by  the  paraffin  method,  fixed  in  Bouin  solution,  and  stained  with  Hematoxylin-Eosin.  The results  showed  that  LC 50 -96  h  values  of  λ-cyhalothrin  on  tilapia  was  6.519  µg/L.  Gills  damages were  in  the  form  of  hyperplasia,  necrosis,  edema,  secondary  lamella  fusion,  removal  of  lamella epithelial  cells,  and  primary  lamella  dilatation.  Liver  damages  include  hemorrhage,  intravascular hemolysis on blood vessels, piknosis,  and leukocytes infiltration. The intestine damages were fatty degeneration,  edema,  leukocyte  infiltration,  hemorhage,  cloudy  swelling,  vacuolisation,  necrosis, and  arthropy. The gills, liver,  and small  intestine damages  of tilapia range from slight to severe. It could be concluded that λ-cyhalothrin caused histopathological effects on the gills, liver, and small intestine of tilapia.
Keywords: λ-cyhalothrin, Tilapia ( Oreochromis niloticus ), gills, liver, small intestine

## Abstrak
λ-cyhalothrin merupakan insektisida phyrethroid yang dapat mencemari lingkungan perairan dan  mengakibatkan  efek  sublethal  maupun  lethal  pada  organisme  non  target  seperti  ikan  nila. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  LC 50 96  jam  dan  efek  histopatologis λ-cyhalothrin terhadap  insang,  hati,  dan  usus  halus  ikan  nila.  Pada  penelitian  ini  ikan  nila  dibagi  ke  dalam kelompok kontrol dan perlakuan dengan konsentrasi λ-cyhalothrin 3, 6, 9, dan 12 µg/L.  Perlakuan menggunakan sistem statik selama 96 jam. Nilai LC 50 96 jam danalisis menggunakan regresi linier. Efek  histopatologis  organ  dianalisis  secara  deskriptif  komparatif.  Sediaan  histologis  organ  dibuat dengan  metode  parafin,  fiksatif    larutan  Bouin,  dan  pewarnaan  Hematoksilin-Eosin.  Berdasarkan hasil  penelitian  LC 50 96  jam λ-cyhalothrin terhadap  ikan  nila  sebesar  6,519  µg/L.  Kerusakan struktur  histologis  pada  insang  berupa  hiperplasia,  nekrosis,  edema,  fusi  lamela  sekunder, pengangkatan  sel  epitel  lamela,  serta  dilatasi  lamela  primer.  Kerusakan  pada  hati  meliputi hemoragi,  intravaskular  hemolisis,  piknosis,  dan  infiltrasi  leukosit.  Kerusakan  pada  usus  meliputi degenerasi  lemak,  edema,  infiltrasi  leukosit,  hemoragi,  bengkak  keruh,  vakuolisasi,  nekrosis,  dan atropi vili.  Tingkat kerusakan  insang,  hati,  dan  usus  ikan  nila  mulai dari ringan  hingga berat. Oleh karena  itu,  dapat  disimpulkan  bahwa λ-cyhalothrin menyebabkan  efek  histopatologis  terhadap insang, hati, dan usus halus ikan nila.
Kata kunci: λ-cyhalothrin , ikan nila ( Oreochromis niloticus ), insang, hati, usus halus

## Pendahuluan
Insektisida  golongan phyrethroid merupakan  salah  satu  pembasmi  hama serangga  pada  lahan  pertanian  yang banyak digunakan di
negara berkembang  termasuk  Indonesia. λ-
cyhalothrin merupakan  salah  satu  jenis insektisida phyrethroid sintetik  yang dapat  mengakibatkan  gangguan  sistem saraf,  paralisis,  dan  kematian  pada serangga (Anonim, 2001). Namun
penggunaan
insektisida dapat menyebabkan  pencemaran  lingkungan seperti  lingkungan  perairan. Hal tersebut dapat  mengakibatkan  efek  sublethal maupun  lethal  pada  organisme  non target. Dalam jumlah berlebih, λ- cyhalothrin dapat  bersifat  racun  bagi organisme  perairan  (Velmurugan et  al ., 2007)  sehingga  dikhawatirkan  akan berpengaruh  buruk  terhadap  organisme lain  yang  mengkonsumsi  organisme perairan tersebut melalui proses bioakumulasi.  Menurut  Mason  (2002), bahan toksik di perairan dapat menyebabkan gangguan fisiologis
organisme  air  yang  diikuti  dengan kerusakan anatomis dan histologis.
Beberapa penelitian terhadap pengaruh
insektisida golongan phyrethroid telah dilakukan . Deltamethrin dapat  menyebabkan  kerusakan  pada insang  ikan  air  tawar Aphanus  dispar berupa  hipertropi  dan  hiperplasia  sel klorida,  vakuolisasi,  pengangkatan  epitel lamela, fusi lamela sekunder, deskuamasi,  dilatasi  ruang  interselular (Al-Ghanbousi et  al. ,  2012) dan  pada insang Gambusia affinis berupa pendarahan,  poliferasi,  hiperplasia,  atau hipertrofi pada sel epitel, serta hiperemia (Cengiz  &  Unlu,  2002).  Insektisida  ini juga menyebabkan pembengkakan, perubahan warna, pendarahan,
hipertropi,  dan nekrosis  pada  hati Gambusia  affinis .  Selain  itu  juga  terjadi
perubahan  pada  struktur  histopatologis usus  seperti  infiltrasi leukosit  dan eosinofil,  serta  nekrosis  pada  jaringan (Cengiz  &  Unlu,  2002).  Kumar et  al . (2007)  melaporkan  bahwa  paparan  λ- cyhalothrin dapat menyebabkan kerusakan  mukosa  usus,  hipertrofi,  dan nekrosis pada usus ikan air tawar.
Analisis  histopatologis  pada  ikan dapat  digunakan  sebagai  biomarker untuk  memonitor  lingkungan  perairan melalui  pengamatan  terhadap  kondisi kesehatan  ikan.  Pengamatan  tersebut dapat  dilakukan  terhadap  organ-organ yang berfungsi penting dalam metabolisme  sehingga  dapat  digunakan sebagai diagnosis awal terjadinya gangguan kesehatan pada ikan (Camargo &  Martinez, 2007). Salah satu jenis  ikan  air  tawar  yang  peka  terhadap pencemaran  perairan  adalah  ikan  nila ( Oreochromis niloticus L., 1758).
Kurangnya  penelitian  mengenai efek  insektisida  terhadap  hewan  non target  di  lingkungan  perairan  khususnya λ-cyhalothrin di  Indonesia  mendorong dilakukannya penelitian ini. Tujuan penelitian ini yaitu mempelajari nilai LC 50 -
96  jam  dan  efek  histopatologis  insang, hati,  dan  usus  ikan  nila  akibat λ- cyhalothrin. Penelitian  ini  diharapkan dapat memberikan gambaran efek penggunaan insektisida agar masyarakat lebih bijaksana dalam menggunakannya.

## Materi dan Metode

## Bahan dan alat
Bahan  yang  digunakan:  ikan  nila ( Oreochromis niloticus
L., 1758) (panjang  7-9  cm,  berat  badan  4-10  g) diperoleh  dari  Unit  Pelaksana  Teknis Daerah Balai Benih Ikan, Dinas Pertanian dan Ketahanan Pangan, Klaten,  Jawa  Tengah, λ-cyhalothrin ,  air ledeng,  dan  pakan  ikan  berupa  pelet. Bahan  pembuatan  preparat  histologis: alkohol  30%  s.d.  absolut,  larutan  Bouin, akuades,  toluol,  xilol,  parafin,  eosin  Y, Erlich  Hematoxylin ,  entelan, Meyer’s albumin, kaca benda, dan  kaca penutup. Bahan  untuk  pengukuran  kualitas  air: MnSO 4 ,  KOH  KI,  H 2 SO 4 ,  Na 2 S 2 O 3, indikator pp, NaOH, dan amilum.
Alat yang digunakan yaitu akuarium, aerator, termometer, pH meter, timbangan semi analitik, penggaris,  pipet  tetes,  mikro  pipet  1000 µL, rotary  microtome ,  pisau microtome , oven, holder ,  skalpel, hotplate ,  kuas, mikroskop cahaya, dan kamera digital.

## 1. Aklimatisasi
Ikan diaklimatisasi dalam  akuarium berukuran  1x0,5x0,5  m³  di  Lab.  Struktur Perkembangan  Hewan,  Fakultas  Biologi UGM selama 10 hari. Kondisi lingkungan ekternal  telah  disesuaikan.  Air  diberi aerasi  dan  diganti  setiap  3  hari  sekali. Ikan  diberi  pakan  pelet  sekali  sehari  ( ad libitum ).  Dua  hari  sebelum  pengujian, ikan dipuasakan.

## 2.  Perlakuan  λ-cyhalothrin  dan  Uji  LC 50

## 96 jam
Konsentrasi λ-cyhalothrin yang digunakan  dalam  penelitian  ini  mengacu pada  hasil  uji  pendahuluan  (data  tidak ditampilkan)  sehingga  diperoleh  variasi konsentrasi  3,  6,  9,  dan  12  µg/L  serta kelompok  kontrol.  Akuarium  berukuran 25x25x25  cm³  berjumlah  15  buah  (untuk 5  kelompok  perlakuan,  masing-masing dengan 3 kali ulangan) diisi air 10 L untuk setiap akuarium. Setiap akuarium diisi 10 ekor  ikan  nila.  Ikan  didedah  selama  96 jam  dengan metode static (Benli &  Ozkul (2010).  Kematian  ikan  dicatat  setiap  24 jam.  Efek  sublethal  pada  ikan  berupa gerakan  renang  dan  irama  pernapasan diamati.  Selama  96  jam  pengujian, dilakukan pengukuran  kualitas  air berupa temperatur,  pH,  DO,  dan  CO 2 bebas setiap 24 jam. DO dan CO 2 bebas diukur dengan  metode  micro-winkler.  Hasil pengukuran  suhu  udara  selama  96  jam yaitu  27  ±  1 o C.  Sedangkan  hasil pengukuran suhu air yaitu 24,3-27,75 o C. Nilai  pH  air  5,67-7,5.  Kadar  DO  pada  0- 48  jam  3,29-7,9  ppm,  pada  72  jam  1,6-8 ppm,  dan  pada  96  jam  2,87-7,4  ppm. Kadar  CO 2 bebas  15,7-38  ppm.  Menurut Manson  (2002)  kondisi  perairan  yang baik  memiliki  suhu  air  25-27 o C  (dengan kisaran < 5 o C). pH 6-7,5 atau 5-9. Kadar DO  4  (atau  setidaknya  ≥  3)  -  8  ppm. Kadar  CO 2 bebas  3-15  ppm  atau  <  500 ppm.

## 3. Pembuatan Preparat Histologis
Ikan  yang  hidup  pada  96  jam perlakuan,  diambil  5  ekor  secara  acak dari 3 ulangan setiap konsentrasi kecuali kelompok  konsentrasi  9  dan  12  g/L jumlah  ikan  yang  hidup  tinggal  3  ekor. Ikan ditimbang dan dibedah. Insang, hati, dan  usus  halus  diambil  dan  ditimbang (panjang usus diukur). Sediaan histologis dibuat  dengan    metode  parafin,  difiksasi dengan larutan Bouin, dipotong setebal 6 µm, dan diwarnai dengan Erlich Hematoksilin-Eosin . Tingkat  kerusakan dianalisis  dengan  menggunakan  skoring yaitu:  -  :  tidak  ada  kerusakan;  +  : kerusakan  ringan (<  25%);  ++ :
kerusakan sedang (25 - 50%); dan +++ : kerusakan berat (> 50%).

## 4. Analisis Data
Struktur histologis kelompok kontrol  dengan  perlakuan  dianalisis secara  deskriptif  komparatif.  Nilai  LC 50 - 96  jam  dianalisis  menggunakan  regresi linier.
Data sekunder berupa pengamatan  efek  sublethal  gerakan renang dan irama pernafasan dibandingkan  antara  kelompok  kontrol dengan  perlakuan.  Rasio  berat  organ dianalisis  dengan ANAVA satu  jalan dan diuji  beda  nyata  menggunakan  DMRT memakai SPSS  Statistics versi  17.0. Rasio  berat  organ  ditentukan  dengan menggunakan  perhitungan:  rasio  berat organ  =  (berat  organ/berat  badan)  x 100%.

## Hasil dan Pembahasan

## 1. Nilai LC 50 96 jam
Berdasarkan  hasil  penelitian  LC 50 - 96  jam λ-cyhalothrin terhadap  ikan  nila dalam  penelitian  ini  sebesar  6,519  µg/L. Hasil  ini  lebih  tinggi  dari  LC 50 -96  jam λ- cyhalothrin pada Clarias  batrachus yaitu 5  µg/L  (Kumar et  al .,  2009)  dan Danio rerio yaitu  0,053  µg/L  (Ahmad et  al ., 2011).  Namun  lebih  rendah  daripada LC 50 -96  jam λ-cyhalothrin terhadap
Chana punctatus yaitu 7,29  µg/L (Kumar et  al .,  2007).  Hal  tersebut  terjadi kemungkinan karena pengaruh lingkungan,  sensitivitas,  ukuran  tubuh dari  setiap  spesies  yang  digunakan, serta  perbedaan  system  perlakuan  yang digunakan (Ahmad et al ., 2011; Kumar et al . 2007, 2009).
2. Efek Insektisida λ-cyhalothrin terhadap Stuktur Histologis Insang, Hati, dan Usus Halus  Ikan  Nila  (Oreochromis  niloticus, 1758)
Berdasarkan hasil penelitian tampak  bahwa  pemberian λ-cyhalothrin selama 96  jam  menyebabkan  kerusakan struktur  histologis  insang,  hati,  dan  usus halus (Tabel 1. dan 2.). Jenis  kerusakan yang terjadi  pada insang meliputi hiperplasia, nekrosis, edema, fusi  lamela sekunder, pengangkatan sel epitel
lamela,  dan  dilatasi  lamela  primer (Gambar 1.). Pada hati meliputi hemoragi,  intravaskular  hemolisis  pada pembuluh  darah,  piknosis  dan  infiltrasi leukosit  (Gambar  2.).  Pada  usus  halus meliputi degenerasi lemak, edema,
bengkak  keruh,  vakuolisasi,  infiltrasi leukosit,  hemoragi,  nekrosis,  dan  artropi (Gambar  3.).  Tingkat  kerusakan  yang terjadi  bervariasi  mulai  dari  ringan  (+) sampai kerusakan berat (+++).
Tabel  1.  Jenis  kerusakan  struktur  histologis  insang  dan  hati  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus L,1758) setelah perlakuan insektisida λ-cyhalothrin selama 96 jam.
Table  1.  Damage  type  of  structural  histology  of  gill  and  liver  of Oreochromis niloticus L,1758 after insecticide treatment of λ-cyhalothrin for 96 hours Organ Jenis Kerusakan Konsentrasi (µg/L) 0 3 6 9 12 Insang ∑ ikan yang dibedah (ekor) 5 5 5 3 3 Hiperplasia - - + ++ +++ Nekrosis - + ++ +++ +++ Edema - + ++ +++ ++ Fusi lamela sekunder - - + + +++ Dilatasi lamela primer - - + ++ + Pengangkatan sel epitel lamela - - + ++ ++ Hati Hemoragi - - + + +++ Intravaskular hemolisis pada pembuluh darah - + ++ ++ +++ Piknosis - + + ++ ++ Infiltrasi leukosit - - + + +
Keterangan: - (tidak terjadi kerusakan), + (kerusakan ringan), ++ (kerusakan sedang), +++ (kerusakan berat)
Tabel  2.  Jenis-jenis  kerusakan  yang  terjadi  pada  usus  ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ) akibat paparan λ- cyhalothrin selama 96 jam
Table  2.  Kinds  of  damages  in  intestine  of  tilapia  ( Oreochromis  niloticus )  due  to  λ- cyhalothrin exposure for 96 hours
Kons
en trasi (  g/L) Bagian Kerusakan Degener asi Lemak Edem a Infiltrasi leukosit Hemora gi Bengkak keruh Vakuolis asi Nekros is Artro pi 0 Anterio r - - - - - - - - Tenga h + + - - - - - - Posteri or - - - - - - - - 3 Anterio r ++ + + + + + - - Tenga h ++ + + - + + - - Posteri or ++ + + + + + + + 6 Anterio r + + ++ - ++ ++ + - Tenga + + ++ ++ ++ ++ + -
Kons
en trasi (  g/L) Bagian Kerusakan Degener asi Lemak Edem a Infiltrasi leukosit Hemora gi Bengkak keruh Vakuolis asi Nekros is Artro pi h Posteri or + + ++ ++ ++ ++ + + 9 Anterio r + + +++ +++ + ++ ++ - Tenga h + + +++ +++ + ++ ++ + Posteri or + + +++ +++ + ++ +++ ++ 12 Anterio r + + +++ +++ + ++ +++ +++ Tenga h + + +++ +++ + ++ +++ +++ Posteri or + + +++ +++
+
++ +++ +++
Keterangan: - (tidak terjadi kerusakan), + (kerusakan ringan), ++ (kerusakan sedang), +++ (kerusakan berat)
Gambar 1. Struktur histologis insang ikan nila ( Oreochromis niloticus ). Kontrol A): 1). lamela primer; 2). lamela sekunder; 3). lakuna; 4). sel epitel lamela primer; 5). sel epitel lamela sekunder;  6). sel pillar
Figure  1.  Histological  structure  of  tilapia  ( Oreochromis  niloticus )  gills.  Control  A):  1) primary  lamella,  2)  secundary  lamella,  3)  lacuna,  4)  primary  lamella  epitelial cells, 5) secundary lamella epitelial cells, 6) pillar cells 50
A 2 1 3 4 5 6
Gamber 2. Perlakuan 3 µg/L. (B)
Figure 2. Treatment of 3 µg/L (B)
Gamber 3. Perlakuan 6 µg/L. (C)
Figure 3. Treatment of 6 µg/L (C)
50 1 2 B
50 C 3 4
Gambar 4.  Perlakuan 9 µg/L. (D)
Figure 4. Treatment of 9 µg/L. (D)
Gambar 5.  Perlakuan 12 µg/L (E): 1). nekrosis; 2). edema; 3).  fusi lamela sekunder; 4). hiperplasia; 5). pengangkatan sel epitel lamela; 6). dilatasi lamela primer epitel lamela. Pewarnaan HE.
Figure 5. Treatment of 12 µg/L (E): 1). Necrosis, 2) edema, 3) secundary lamella fusion, 4)  hyperplasia,  5)  lamella  epitellial  cell  elevation,  6)  upper  part  of  primary lamella of epitellial lamella.  HE Staining.
50 D 1 2 5
50 E 1 2 4 5
Gambar 6. Struktur  histologis  hati ikan  nila ( Oreochromis niloticus ). Perlakuan 3 µg/L (B)
1). vena sentralis; 2). Sinusoid.
Figure  6.  Histoloigical structure  of liver of tilapia  ( Oreochromis niloticus ) Treatment of 3 µg/L (B): 1) central vein, 2) sinusoid
Gambar 7. Perlakuan 6 µg/L (C)
Figure 7.  Treatment of 6 µg/L (C)
50 2 1 B
50 C 1 2
Gambar 8. Perlakuan 9 µg/L (D)
Figure 8. Tretament of 9 µg/L (D)
Gambar 9. Perlakuan 12 µg/L (F): 1). piknosis; 2). hemolisis intravaskular pada pembuluh darah; 3). hemoragi. Pewarnaan HE.
Figure  9.  Treatment  of  12  µg/L  (F):  1).  picnosis;  2).  hemolisis  intravaskular  in  vein;  3). hemoragi. HE staining.
50 1 D
50 E 2 3
Gambar  10. Struktur  histologis  usus  ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ).  Kontrol bagian  anterior  (A):  1).  epitel kolumnar selapis,  2).  lamina  propria,  3). lumen.
Fuigure 10.  Histoloigical structure of intestine of tilapia ( Oreochromis niloticus ).
Control anterior part (A), 1) a layer of epitelial columnar, 2) propria lamina, 3) lumen
Gambar 11. Perlakuan 3  g/L bagian tengah (B)
Figure 11. Treatment of 3  g/L middle part (B)
Gambar 12. Perlakuan 6  g/L bagian tengah (C)
Figure 12.  Treatment of 6  g/L middle part (C)
1
2 3 50  m A 1 2 3 4 50  m B 2 5 3 6 1 50  m C
Gambar  13.  Perlakuan  9  g/L  bagian  tengah  (D),  dan  12  g/L  bagian  tengah  (E).  1). edema; 2). infiltrasi leukosit; 3). vakuolisasi; 4). bengkak keruh; 5). hemoragi; 6). nekrosis; 7). degenerasi lemak; 8). atropi vili.  Pewarnaan HE.
Figure 13.  Treatment of 9  g/L middle part (D) and 12  g/L middle part (E).  1) edema, 2) leucocyte  infiltration,  3)  vacuolisation,  4)  blur  swollen,  5)  hemorraghie,  6) necrosis, 7) fat degeneration, 8) atriphi villi. HE staning
λ- cyhalothrin dapat masuk ke dalam  tubuh  ikan  melalui  kulit,  sistem respirasi, dan sistem pencernaan. Senyawa  ini  memiliki  koefisien  daya pisah dengan air (K ow ) yang cukup tinggi, sehingga cenderung lebih mudah berikatan  dengan  lipid  (Kumar et  al ., 2010)  dan  mudah  melewati  membran biologis  serta  masuk  ke  dalam  sel.  λ- cyhalothrin tidak  mudah  mengalami metabolisme  dalam  tubuh  organisme sehingga dapat terakumulasi dan menyebabkan kerusakan sel serta jaringan. Leahey  &  Parker  (1985) menunjukkan bahwa dalam waktu paparan  28  hari  pada  ikan  gurame,  50- 65%  λ- cyhalothrin masih  dalam  bentuk utuh sedangkan 10-19% berubah menjadi senyawa a. Insang  merupakan  organ  yang berhubungan
langsung
dengan lingkungan  luar sehingga mudah terkena pengaruh  polutan.  Kerusakan  insang menyebabkan  terganggunya  mekanisme pernafasan karena adanya penghambatan  pengangkutan  elektron dan fosforilasi oksidatif (Connell &  Miller, 1995).  Kerusakan  insang  akibat  λ- cyhalothrin meliputi  edema,  hiperplasia, fusi lamela, pengangkatan sel epitel, dan nekrosis  epitel.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian  Vermurugen et  al .  (2007) terhadap Cirrhinus  mrigala . Edema
terjadi  karena  akumulasi  cairan  di  luar sel  melebihi  normal  (Grasso,  2002). Hiperplasia lamela terjadi akibat peningkatan  jumlah  sel  lamela  insang. Banyaknya sel yang mengalami kerusakan atau kematian mengakibatkan terjadinya proliferasi untuk menggantikan sel yang rusak. Proliferasi ini menyebabkan  bersatunya  dua  lamela yang  berdekatan  (Robbins et  al .,  2007). Fusi  lamela  merupakan  hasil  akhir  dari hiperplasia lamela secara besar-besaran yang  mengakibatkan  berkurangnya  luas permukaan  insang.  Fusi  lamela  dan hiperplasia  lamela  sekunder  merupakan reaksi  akut  akibat  iritasi  oleh  bahan- bahan  kimia  salah  satunya λ-cyhalothrin (Camargo & Martinez, 2007). λ- cyhalothrin pada  konsentrasi  3  dan  6 µg/L  menyebabkan  kerusakan  ringan hingga sedang pada insang kemungkinan  karena  jumlah  toksikan masih  sedikit  sehingga  sel  masih  dapat melakukan  adaptasi  selular  sehingga kerusakan yang terjadi bersifat reversible.  Sedangkan  pada  konsentrasi 9  dan  12  µg/L  mulai  terjadi  kerusakan berat.  Hal  ini  terjadi  karena  ikan  sudah tidak  mampu mentoleransi efek merusak dari insektisida tersebut.
Hati merupakan
tempat detoksifikasi racun. λ-cyhalothrin menyebabkan penurunan aktivitas enzim
2 5 6 7 50  m D 8 6 2 E
untuk  detoksifikasi  racun. Hal  tersebut mengakibatkan hepatosit mengalami gangguan fungsi dan perubahan struktur (Rocha & Rogerio, 1999). Kerusakan hati akibat λ-cyhalothrin yang teramati berupa piknosis. hal ini sesuai dengan penelitian Kumar et  al. (2010)  tentang  penaksiran toksikologi  pestisida phyrethroid yaitu cypermethrin dan λ-cyhalothrin pada ikan air  tawar.  Vermurugen et  al .  (2007) melaporkan bahwa
λ-cyhalothrin
mengakibatkan kariolisis, karioreksis, bengkak keruh, kongesti, hipertrofi hepatosit,  dilatasi  sinusoid,  dan  nekrosis fokal pada hati Cirrhinus mrigala .
Hemoragi terjadi akibat pecahnya pembuluh darah. Hal ini memicu terjadinya infiltrasi leukosit (Takashima & Hibiya,  1995).  Pada  hati λ-cyhalothrin mulai  menyebabkan  kerusakan  berat pada  konsentrasi  9  dan  12  µg/L.  Hal  ini terjadi  kemungkinan  karena  adanya penurunan aktivitas enzim yang berperan  dalam  detoksifikasi  sehingga sel  dan  jaringan  di  hati  yang  mengalami kerusakan tidak dapat segera dipulihkan.
Masuknya senyawa asing ke dalam tubuh ikan juga dapat menyebabkan  perubahan  pada  usus. Menurut Khillare et al . (1988), kerusakan pada saluran pencernaan akan mempengaruhi  aktivitas dan fungsi enzim  pencernaan  yang  mengakibatkan gangguan proses pencernaan dan penyerapan  makanan.  Pada  usus, λ- cyhalothrin konsentrasi  3  dan  6  g/L menyebabkan  terjadinya  vakuolisasi  di bagian epitel, sedangkan pada konsentrasi 9 dan 12  g/L selain tampak di bagian  epitel, vakuolisasi  juga tampak di  bagian  tunika  serosa  dengan  jumlah yang  cukup  banyak.  Edema  dijumpai merata  pada  semua  konsentrasi.  Pada
keadaan  normal,  cairan  ekstraselular berfungsi  untuk  membawa  nutrien  dan mengangkut  keluar  senyawa-senyawa xenobiotic. Namun dalam keadaan patologis,  akan  terbentuk  lebih  banyak cairan  ekstraselular  dibanding  pada keadaan  normal.  sehingga  volumenya bertambah  dan  menyebabkan  terjadinya pembengkakan  jaringan  atau  organ (Grasso,  2002).  Kerusakan  yang  lebih parah  pada  usus  yaitu  nekrosis.  λ- cyhalothrin dapat menyebabkan gangguan  pada  proses  penyerapan oksigen oleh insang sehingga berdampak  pada  gangguan  distribusi oksigen  dalam  tubuh.  Keadaan  inilah yang  menyebabkan  gangguan  oksidasi dalam tubuh ikan (Kozubek et al ., 1992). Nekrosis mulai tampak pada  konsentrasi 3  g/L di bagian posterior dengan jumlah yang  masih  sangat  sedikit.  Sedangkan pada  konsetrasi  9  dan  12  g/L  sudah sangat banyak dijumpai nekrosis. Nekrosis  merupakan  pertanda  bahwa telah  terjadi  kerusakan  kronis  yang bersifat  ireversibel.  Pada  penelitian  ini tampak bahwa semakin tinggi konsentrasi  λ- cyhalothrin maka  jenis kerusakan  akan  semakin  beragam  dan tingkat kerusakan akan semakin berat.
Bedasarkan  hasil  uji  statistik  rasio berat insang dan hati akibat perlakuan λ- cyhalothrin selama 96  jam tidak terdapat beda  nyata  antara  kelompok  kontrol dan perlakuan (Tabel 3.). Artinya, λ- cyhalothrin tidak mengakibatkan pembengkakan  atau  penyusutan  insang, hati,  dan  usus  halus  secara  nyata. Namun  pada  beberapa  konsentrasi tampak ada kecenderungan peningkatan berat  organ.  hal  tersebut  kemungkinan terjadi karena edema maupun
hiperplasia.
Tabel  3.  Rasio  berat  insang  dan  hati  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus L,  1758)  pada pengujian λ-cyhalothrin selama 96 jam.
Table  3.    Weight  ratio  of  gill  and  liver  of  tilapia  ( Oreochromis  niloticus )  on  the  test  of λ- cyhalothrin for  96 hours
Konsentrasi (µg/L) n Rasio berat organ (g/g BB) Rasio berat organ (g/cm/gBB) Insang Hati Usus 0 5 2,578 ± 0.714 a 1,306 ± 0,341 a 3,108  0,993 a
Konsentrasi (µg/L) n Rasio berat organ (g/g BB) Rasio berat organ (g/cm/gBB) Insang Hati Usus 3 5 3,278 ± 0,165 a 1,692 ± 1,170 a 3,838  0,60 a 6 5 3,776 ± 0,480 a 1,202 ± 0,178 a 3,500  0,816 a 9 3 2,963 ± 0,924 a 1,413 ± 0,232 a 3,590  0,700 a 12 3 3,203 ± 0,515 a 1,375 ± 0,092 a 4,660  1,588 a
Keterangan : Huruf yang sama dibelakang angka dalam satu kolom menunjukkan tidak ada perbedaan nyata (p>0,05)
Selama  uji  terjadi  perubahan  pada gerakan  ikan  dan  irama  pernapasan ikan.  Berdasarkan  penelitian  terlihat bahwa  pada  kondisi  normal  ikan  nila bergerak menyebar di permukaan dan di dasar  air,  tenang  dan  dapat  merespons gangguan dari luar dengan baik, keadaan  tersebut  dapat  dilihat  pada kontrol. Pada konsentrasi 3  g/L gerakan renang  normal,  ikan  menyebar  di  dasar dan  permukaan  air,  refleks  normal,  dan irama  pernafasan  ikan  normal.  Pada konsentrasi 6  g/L  gerakan  renang  lebih lambat, menyebar di dasar dan permukaan  air  namun  lebih  banyak  di permukaan, refleks ikan mulai berkurang,  dan  irama  pernafasan  mulai melambat.  Pada  konsentrasi  9  dan  12  g/L, saat setelah λ- cyhalothrin dimasukkan  ke  dalam  akuarium,  ikan langsung  bergerak  lebih  cepat  dan  tidak terkendali.  Namun  dalam  beberapa  jam, gerakan semakin melambat dan melemah,  ikan  cenderung  bergerak  di permukaan  air,  mulai  tidak  merespons gangguan dari luar, dan irama pernafasan lambat.
Pada  hari  ke-2  banyak  ikan  yang mati  pada  konsentrasi  tersebut.  Setelah 96  jam,  ikan  yang  masih  hidup  pada konsentrasi
9 dan 12  g/L pergerakannya sudah sangat lambat dan sudah  tidak  dapat  merespons  gangguan dari  luar.  Hal  tersebut  menunjukkan kemungkinan adanya pengaruh λ- cyhalothrin terhadap sistem saraf sehingga  refleks  dan  kesadaran  ikan juga  berkurang.  Hal  tersebut  sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Kozubek et  al .  (1992)  yang  mengatakan bahwa  pada  umumnya,  ikan  yang
terpapar  λ- cyhalothrin akan  mengalami gangguan pada sistem saraf, histopatologis pada organ, dan perubahan hormonal  serta  aktivitas enzimatik.  Connell  &  Miller  (1995) menyatakan bahwa λ-cyhalothrin merupakan jenis insektisida yang
menyerang  sistem  saraf.  Insektisida  ini bekerja dengan
menghambat asetilkolinesterase. Asetilkolinesterase mengendalikan  hidrolisis  asetilkolin yang merupakan  neurotransmiter.  Asetilkolin dihidrolisis oleh asetilkolinesterase menjadi kolin. Apabila tidak ada asetilkolinesterase, asetilkolin yang dihasilkan akan berakumulasi dan menyebabkan  gangguan  penyampaian impuls  yang  mengakibatkan  penurunan koordinasi otot, konvulsi, dan kematian.

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  nilai  LC50-96  jam  λ- cyhalothrin terhadap ikan nila ( Oreochromis niloticus L., 1758) sebesar 6,519  g/L.  λ- cyhalothrin menyebabkan efek histopatologis terhadap insang, hati, dan  usus  halus  ikan  nila  dengan  tingkat kerusakan ringan hingga berat.

## Daftar Pustaka
Ahmad,  M.K.,  Sharma,  D.K.,  Ansari,  S.,
and
Ansari, B.A., 2011.
Comparative  study  of  synthetic phyrethroid lambda-cyhalothrin and neem  based  pesticide  neemgold on  the  fingerlings  of  zebra  fish Danio rerio (Cyprinidae). Research Journal  of    Chemical  Sciences. 1(6): 91-94.
Al-Ghanbousi,  R.,  Ba-Omar,  T.,  and Victor, R., 2012. Effect of deltamethrin  on  the    gills  of Aphanius  dispar :  A  microscopic study. Tissue and Cell. 44: 7-14.
Anonim. 2001. National Pesticides Information Center. Lambda- Cyhalothrin  (General  Fact  Sheet). www.npic.orst.edu. Akses: 29
Januari 2012.
Benli, A.C.K. and Ozkul, A., 2010. Acute
toxicity and histopathological effects  of  sublethal  fenitrothion  on Nile  tilapia Oreochromis  niloticus. Pesticide Biochemistry and Physiology. 97:32-35
Camargo,  M.M.P.  and  C.B.R.  Martinez. 2007. Histopathology of gills, kidney,  and  liver  of  a  neotropical fish  caged  in  an  urban  stream.
Neotropical  Ichthyology.  5(3):  327- 336.
Cengiz,  E.  I.  and  Unlu,  I.,  2002. Histopathological  changes  in  the gills,  liver,  and  gut  of  mosquitofish ( Gambusia  affinis )  exposed  to endosulfan.  Bull.  Environ.  Contam. Toxicol., 68: 290-296
Connell,  D.W.  and  Miller,  G.J.,  1995.
Chemistry  and  ecotoxicology  of pollution,  A  Willey  Interscience Publ., New York.
Grasso, P. 2002. Essentials of pathology for  toxicologists,  Taylor  &  Francis Inc., New  York.
Khillare,  Y.K.  and  Wagh,  S.  B.,  1988. Acute  toxicity  of  pesticide  in  the freshwater  fish Barbus  stigma : histopatology  of  stomach.  Uttar Pradesh. J. Zoology., 8:176-179
Kozubek,    L.,    Lakota,    A.,    Polaczek- Adamowicz,    A.,  and  Reszka,    A., 1992.  Effect    of  deltamethrin  on carp fry. Part III. Effect of sublethal doses  of  deltamethrin  on  the activity  of  acid-  and  alkaline phosphatase  in  the  internal  organ of carp. Archiwum Ochrony Srodoiska. 2:83-90
Kumar,  A.,  Sharma,  B.,  and  Pandey, R.S.,  2007.  Preliminary  evaluation
of the acute toxicity of cypermethrin and λ-cyhalothrin to Canna punctatus .  Bull.  Environ.  Contam.
Toxicol., 79: 613-616.
Kumar,  A.,  Sharma,  B.,  and  Pandey, R.S.,  2009.  Assessment  of  acute toxicity  of  λ-cyhalothrin  to  a freshwater catfish, Clarias batrachus . Environ. Chem. Lett., 9: 43-46.
Kumar,  A.,  Sharma,  B.,  and  Pandey,
R.S., 2010. Toxicological assessment of pyrethroid
insecticides  with  spesial  reference to  cypermethrin  and  cyhalothrin  in freshwater fishes. Int. J. Biol. Med. Res., 1(4): 315-325.
Leahey,  J.P.  and  S.  Parker.  1985. λ- cyhalothrin: Characterisation of residus accumulated by carp continously  exposed  to  14  C- cyhalothrin .
(Unpublished proprietary  Report  No.  RJ0407B Submitted to WHO by ICI).
Mason, C.F.  2002.  Biological  of  fresh water pollution, London. New York
Rocha,  E.,  and  Rogerio,  A.F.M.,  1999.
Ichthyology: recent, research, advances .  Editor:    D.N.  Saksena, Science Pub. Inc., USA.
Takashima,  F.,  and  Hibiya,  T.,  1995. An atlas  of  fish  histology  normal  and pathological  features ,  2 nd Edition, Kodansha Ltd., Tokyo.
Vermurugen,  B.,  Selvanayagam,  M., Cengiz,  E.I.,  and  Unlu,  E.,  2007. Histopathology of lambda- cyhalothrin  on  tissue  (gill,  kidney, liver  and  intestine)  of Cirrhinus mrigala .  Environmental  Toxicology and Pharmacology. 24(3): 286-291.