## ANALISIS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN PACAR KUKU
(Lawsonia inermis L ) TERHADAP PERTUMBUHAN

## Salmonella sp
Andi Fatmawati 1) , Waode  Rustiah 1) , Syaiful S. 1)
1) Prodi DIII Teknologi Laboratorium Medis Politeknik Kesehatan Muhmmadiyah Makassar Alamat Korespondensi: fatmawati.moe@gmail.com

## Abstrak
Daun  pacar  kuku  (Lawsonia  inermis  L)  merupakan  salah  satu  tanaman  Indonesia  yang sering digunakan masyarakat untuk pengobatan radang, luka bakar, dan penyakit kulit. Tanaman ini    memiliki  aktivitas  antibakteri  karena  mengandung  flavonoid,  tanin,  alkaloid,  dan  quinon. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  kemampuan  antibakteri  ekstrak  daun  pacar  kuku terhadap pertumbuhan Salmonella sp. Uji antibakteri ekstrak daun pacar kuku dilakukan dengan menggunakan    5  konsentrasi  yaitu  15%,  25%,  50%,  75%,  100%  pada  media  agar  yang mengandung  kultur  bakteri  Salmonella  sp.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun pacar  kuku  pada  konsentrasi  100%,  75%,  dan  50%  memiliki  kemampuan  antibakteri  terhadap pertumbuhan  Salmonella  sp,  hal  ini  ditunjukkan  dengan  adanya  zona  bening  yang  terbentuk. Sedangkan  pada  konsentrasi  25%  dan  15%  tidak  ditemukan  kemampuan  antibakteri  terhadap pertumbuhan Salmonella sp.
Kata kunci : Ekstrak daun pacar kuku, Antibakteri, Pertumbuhan Salmonella sp

## PENDAHULUAN
Obat-obatan tradisional yang berasal  dari  tanaman  sudah  digunakan oleh  penduduk  dibelahan  dunia  sebagai obat  alternatif  untuk  penyakit-penyakit tertentu.  Salah  satu  tanaman  yang memiliki khasiat untuk digunakan sebagai obat  tradisonal  adalah  daun  pacar  kuku. Pacar kuku ( Lawsonia inermis )
merupakan  jenis  tanaman  yang  termasuk dalam  famili  Lytraceae  berupa  tanaman perdu bercabang banyak atau pohon kecil bertinggi 1-4 meter (Cahyani et al., 2001).
Tanaman daun pacar kuku merupakan  salah  satu  jenis  daun  yang terdapat  di  Indonesia  dan dikenal sebagai daun inai yang digunakan untuk menyembuhkan radang ruas jari
(paniritium)  dan  luka  pada  kulit.  Selain itu  pada  bagian  bunga,  biji,  kulit,  batang dan  akar  berpotensi  menyembuhkan  sakit kepala,  arthritis,  diare,  dan  demam  . Ekstrak daun pacar kuku mempunyai sifar bakterisid  dan  fungisid.  Daun  pacar  kuku (Lawsonia  inermis  Linn)  mengandung tanin yang dapat  mencegah lapisan. Kulit yang  terluka  dari  serangan  bakteri  yang akan membentuk jaringan baru pada kulit
yang  terluka.  Ekstrak  daun  pacar  kuku juga  bersifat  ekstringet  yang  dapat mengecilkan  luka  pada  kulit.  Skrining fitokimia yang dilakukan terhadap ekstrak daun  pacar  kuku  mengandung  senyawa glikosida,  fitosterol,  tanin,  flavonoid,  dan kukumin (Rahmania, 2015). Selain digunakan  sebagai  pewarna  alami,  secara farmakologi  daun  pacar  kuku  digunakan untuk pengobatan hiperglikemik , memiliki  aktivitas  antimikroba  ,  efek penyembuhan  luka  ,  sitoksik,  antioksidan dan  antivirus  (Caudhary,  et  al.,2010). Secara tradisional bagian daun, bunga dan biji berkhasiat secara antipiretik, penyembuhan  luka  bakar,  sembelit,  obat diare, dan disentri (Ditjen POM, 2000). Salah satu bakteri yang menyebabkan penyakit adalah infeksi dan kontaminasi yang disebabkan oleh Salmonella  sp.  dan ditemukan  hampir diseluruh  belahan  dunia.  Infeksi  bakteri ini  pada  hewan  atau  manusia  dapat mengakibatkan  penyakit  yang  disebut salmonellosis (Jawetz,2018,).
Berdasarkan  kajian  diatas  maka peneliti merasa penting untuk menganalisis kemampuan antibakteri
ekstrak  daun  pacar  kuku  terhadap pertumbuhan Salmonella  sp. Prinsip metode  yang  digunakan  adalah  dengan menarik  senyawa  kimia  aktif  yang terdapat  pada  simplisia  daun  pacar  kuku dengan  menggunakan  metode  maserasi kemudian  ekstrak  yang  dihasilkan  akan diuji  kemampuan antibakterinya terhadap pertumbuhan Salmonella  sp. Selanjutnya akan dianalisis lebih mendalam.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen laboratorik dengan menyeleksi  daun  pacar  kuku  yang dikoleksi  dari  daerah  Sinjai,  selanjutkan akan  diekstrak  menggunakan  metode maserasi    dan  dilanjutkan  dengan  uji antibakteri.
Sampel penelitian ini adalah
ekstrak daun pacar kuku dengan konsentrasi  15%,  25%,  50%,  75%,  dan 100% dan bakteri Salmonella sp. Pembuatan  medium  MHA  (Muller Hinton Agar)
Ditimbang  sebanyak  3,42  gram serbuk  MHA  dan  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer lalu dilarutkan dengan aquades    hingga  volume  100  ml  , dilakukan  pemanasan  hingga  semua bahan  larut,  lalu  disterilkan  dalam autoklaf suhu 121º selama 15 menit. Pembuatan larutan Mc Farland 0,5%
Larutan  baku  Mc  Farland  terdiri atas  2  komponen,  yaitu  Bacl 2 1%  dan H 2 SO 4 1%.  Larutan  Bacl 2 1%  sebanyak 0,5  ml  dicampur  dengan  larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95  ml  dalam  labu  takar hingga  homogen.  Suspensi  ini  digunakan sebagai  larutan  standar  pembanding kekeruhan  suspensi  jamur  uji  (Widiyanti dan Amran, 2018).

## Pengolahan sampel uji
Daun  pacar  kuku  yang  sudah diambil,  disortasi  basah  lalu  dicuci dengan menggunakan air mengalir kemudian  dikeringkan  dengan  diangin- anginkan tanpa terkena matahari langsung sampai  kering  lalu  disortasi  kering. Selanjutnya
dihaluskan kemudian dimasukkan  kedalam  wadah  dan  ditutup
dengan baik.
Ekstraksi  bahan  uji  menggunakan metode meserasi
Disiapkan  bejana  meserasi  lalu  di cuci  sampai  bersih,  dikeringkan  dan dibilas  dengan  etanol.  Bahan  uji  daun pacar kuku yang telah dihaluskan ditimbang  sebanyak  800  gram  dan dimasukkan  ke  dalam  bejana  meserasi kemudian  ditambahkan  pelarut  etanol 96%  sampai  bahan  uji  tertutupi  oleh pelarut.  Bejana  meserasi  ditutup  dengan rapat  dan  disimpan  di  tempat  yang  tidak terkena  matahari  langsung  selama  5  hari, setiap  1  ×24  jam  bahan  uji  diaduk. Setelah  5  hari  bahan  uji  disaring  dengan menggunakan  kain  kasa  ke  dalam  tempat penampungan.  Ampasnya  dimasukkan kembali  ke  dalam  bejana      maserasi .Ekstrak  yang  diperoleh  dikumpulkan dalam  wadah,  lalu  filtrat  dan  endapan dipisahkan.  Filtrat  diambil  dan  diuapkan hingga kental dengan alat rotary evaporator.

## Pembuatan suspensi bakteri
Diambil  seujung  mata  ose  biakan bakteri  dengan  menggunakan  ose  steril, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  NaCL 0,9%  steril,dihomogenkan,  setelah  itu dibuat  kekeruhan  dimana  kekeruhannya setara dengan Mc Farland.

## Pembuatan konsentrasi sampel
Untuk  kosentrasi  15%  diambil  15 ml  ekstrak  daun  pacar  kuku  ke  dalam Erlenmeyer, kemudian diencerkan dengan aquadest hingga 100 ml. Untuk
konsentrasi  25%,  50%,  75%,  dan  100% masing-masing  diambil  ekstrak  daun pacar  kuku  ke  dalam  Erlenmeyer  sesuai dengan  konsentrasi  yang  akan  dibuat kemudian  dicukupkan  hingga  100  ml. Setelah semua konsentrasi dibuat, masukkan  paper  disk  blank  ke  dalam masing-masing  sampel  yang  telah  dibuat lalu direndam selama 1 jam.

## Uji Antibakteri
Diambil  suspensi  bakteri  dengan menggunakan  swab  steril  lalu  diusapkan merata  pada  seluruh  permukaan  media MHA.  Kemudian  ditempelkan  masing-
masing  paper  disk  yang  sudah  direndam pada  masing-masing  bahan  uji  ekstrak daun  pacar  kuku  sesuai  konsentrasi  dan control  positif  (Cefadroxil)  serta  control negative  (aquades)  diletakkan  secara aseptis  dengan  menggunakan  pinset  steril di  atas  permukaan  media  MHA  dengan jarak  tertentu dan diinkubasi  selama  24  – 48 jam pada suhu 30ºC.
Analisis  uji  dikategorikan  positif  apabila uji  hasil  laboratorium  pada  ekstrak  dan pacar  kuku  (Lawsonia  inermis  L)  dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella  sp yang  ditandai  dengan terbentuknya zona bening di sekitar kertas cakram. Lalu diameter zona bening diukur dengan menggunakan jangka sorong.
Penilaian  diameter  zona  hambat  dengan antibiotic Cefadroxil: Sensitif : ≥ 18 mm; Intermediet : 15-17 mm; Resisten : ≤ 14 mm HASIL PENELITIAN
Tabel  1. Hasil  Uji  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Pacar  Kuku  ( Lawsonia  Inermis  L ) Terhadap Pertumbuhan Salmonella sp
Keterangan: Diameter Paper Disk : 6 mm Sensitif : ≥ 18 mm Intermediet : 15-17 mm Resisten : ≤ 14 mm PEMBAHASAN Penelitian tentang analisis antibakteri  ekstrak  daun  pacar  kuku ( Lawsonia inermis L ) terhadap pertumbuhan  Salmonella  sp  dilakukan  di
Laboratorium  Mikrobiologi  Politeknik Kesehatan  Muhammadiyah  Makassar. Pengamatan  hasil  uji  antibakteri  ekstrak daun  pacar  kuku  terhadap  pertumbuhan Salmonella  sp    dilakukan  dengan  melihat adanya  zona  bening  yang  terjadi  akibat mekanisme antibakteri dalam menghambat pertumbuhan Salmonella sp.
Hasil yang didapatkan pada penelitian ini adalah  menunjukkan  adanya  kemampuan antibakteri yang ditunjukkan pada konsentrasi  100%,  75%,  dan  50  %, masing –masing dengan diameter hambatan sebesar 16,1 mm; 15,2 mm; dan 14,4 mm. Sedangkan pada ekstrak dengan konsentrasi  25%  dan  15  %  tidak menunjukkan  terbentuknya  zona  bening. Ekstrak  daun  pacar  kuku  yang  digunakan pada  konsentasi  25%  dan  15%  belum mampu menghambat pertumbuhan Salmonella sp, hal  ini  disebabkan  karena Perlakuan Zona Hambat (mm) Keterangan Replikasi I Replikasi II Replikasi III Rata-rata Kontrol positif (Cefadroxil) 40,3 30 32 34,1 Sensitif Konsentrasi100% 14,8 16 17,6 16,1 Intermediet Konsentrasi 75% 16 14,8 14,8 15,2 Resisten Konsentrasi 50% 15,6 15,2 12,4 14,4 Resisten Konsentrasi 25% 0 0 0 0 Tidak menghambat Konsentrasi 15% 0 0 0 0 Tidak menghambat
kurangnya senyawa aktif yang terkandung pada  konsentrasi  yang  rendah  sehingga tidak memiliki kemampuan untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Zona hambat  juga    terbentuk  pada  kontrol positif  yang  menggunakan  antibiotic
Cefadroxil sebesar 34,1 mm.
Pembuatan  ekstrak  daun  pacar kuku  dilakukan  dengan  metode  maserasi. Ekstraksi  merupakan  proses  penarikan senyawa  metabolit  sekunder  dengan bantuan pelarut yaitu etanol 70%. Ekstrak daun pacar kuku dibuat dalam konsentrasi tertentu  dengan  menggunakan  DMSO. DMSO  ( Dimethyl  sulfoxide) merupakan salah  satu  pelarut  yang  dapat  melarutkan hampir  semua  senyawa  baik  polar maupun non polar, karena tidak memberikan pengaruh terhadap pertumbuhan biakan bakteri. Hasil  uji  penelitian  ini  ,  juga bersesuaian dengan penelititan yang telah dilakukan    Silva  dan  Devi  (2017)  bahwa ekstrak daun pacar kuku dapat menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas auriginosa dengan konsentrasi  15%,  25%,  50%,  75%  dan
100%  menghambat  sangat  kuat  dengan zona  hambat  sebesar  21,6  mm.  Ekstrak daun  pacar  kuku  dapat  bereaksi  terhadap bakteri,    hal  ini  dapat  disebabkan  karena struktur  dari  dinding  sel  bakteri  yang dapat  dirusak  oleh  senyawa  aktif  dari ekstrak daun pacar kuku.
Kandungan  yang  terdapat  pada daun  pacar  kuku  diantaranya  flavonoid, alkaloid,  quinon,  kumarin,  triterpenoid, fenol, tanin, yang memiliki peran tersendiri  dalam  mengatasi  pertumbuhan bakteri (Pratiwi, 2014). Flavonoid memiliki mekanisme membentuk komplek  dengan  protein  ekstraseluler sehingga  akan  merusak  membrane  sel bakteri.  Selain  flavonoid,  terdapat  juga alkaloid  yang  memiliki  senyawa  yang dapat  menganggu  komponen  penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri  sehingga lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh  yang  menyebabkan  kematian  sel bakteri  tersebut  .  Terdapat  pula  senyawa
tanin  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri dengan  cara  menggandakan  kompleks hidrofobik dengan protein, menginaktivasi  adhesion,  enzim  dan protein  transpordinding  sel  sehingga menganggu pertumbuhan
mikroorganisme.  Quinon  memiliki  efek sebagai antibakteri karena quinon mampu menghasilkan  radikal  bebas  yang  stabil dan  membentuk  kompleks  irreversible dengan  asam  amino  nukleofilik  pada protein  sehingga  protein    kehilangan fungsi (Muslim, 2014).
Mekanisme  kerja  obat  antibakteri, yaitu  inhibis  sintetis  dinding  sel,  inhibisi fungsi  membrane  sel,  inhibisi  sintetis protein, dan inhibisi sintetis asam nukleat (Jawetz et  al ,  2008).  Pada  penelitian  ini digunakan  Cefadroxil  sebagai  kontrol positif. Mekanisme kerjanya adalah menghambat  sintetis  dinding  sel  bakteri. Kontrol  positif  ini  bertujuan  untuk melihat gambaran terbunuhnya bakteri uji yang  dilihat  dari  zona  hambat.  Hasil aktivitas  antibakteri  Cefadroxil  sebagai kontrol positif dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  hasil  rata- rata 34,1 mm dengan kategori yang sangat kuat  (sensitif),  sehingga  dapat  dikatakan bahwa  dengan  kontrol  positif  antibiotic (Cefadroxil) dapat menghambat pertumbuhan Salmonella  sp .  Kontrol negatif  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  aquadest.  Kontrol  negatif bertujuan  untuk  membuktikan  bahwa aquadest yang digunakan untuk melarutkan ekstrak daun pacar kuku tidak memiliki  aktivitas  terhadap  bakteri  uji yang digunakan. Beradasarkan hasil  yang didapatkan  pada  penelitian  ini,  kontrol negative tidak menghasilkan zona hambat terhadap  bakteri Salmonella  sp sehingga tidak  ada  pengaruh  antara  pelarut  dengan bakteri uji yang digunakan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan analisis penelitian yang  telah dilakukan,  disimpulkan  bahwa ekstrak  daun  pacar  kuku (Lawsonia inermis L) memiliki kemampuan antibakteri terhadap pertumbuhan
Salmonella sp pada konsentrasi
100%,75%,  dan  50%  dengan  besaran zona  hambat  masing-masing  16,1  mm;
15,2 mm; dan 14,4.

## DAFTAR PUSTAKA
Chaudhary,  G.,  Goyal,  S.  &  Poonia,  P.
2010. Lawsonia  inermis  Linnaeus: A  Phyopharmacological  Review, International Jurnal of Pharmaceutical Sciences and Drug Research , 2, hlm.91-98. Ditjen  POM.  (2000). Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Cetakan Pertama . Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Jawetz,  Z.E,  Melnick,  J.L,  and  Adelberg, E.A, 2008. Mikrobiologi Kedokteran,  23  th,  Editor  R.N. Elferia, EGC, Jakarta Muslim,  I.  2014.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Daun Pacar Kuku (Lawsonia  inermis  L)  Terhadap Pertumbuhan Enterococcus faecalis.  Skripsi,  Universitas  Syiah Kuala, Banda Aceh. Pratiwi, D.A.N., 2014. Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Pacar  Kuku  (Lawsonia  inermis  L) dan Bioautigrafi Terhadap Baccilus  subtillis  dan  Shigella sonnei. Skripsi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Rahmina,  P.  2015.  Pengaruh  Ekstrak Daun  Pacar  Kuku  7,5  Terhadap
Penyembuhan  Ulkus  Traumatik Pada  Mukosa  Oral  .  Skripsi,
Universitas  Syiah  Kuala,  Banda
Aceh.
Widiyanti,  T.  dan  Amran  P.  2018. Penuntun  Praktikum  Bakteriologi III  .Akademi  Analis  Kesehatan Muhammadiyah. Makassar.