## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KULIT JERUK JESIGO  (Citrus nobilis
Lour) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli DAN Listeria monocytogenes
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF THE EXTRACT OF JESIGO ORANGE (Citrus nobilis Lour) PEEL AGAINST Escherichia coli AND Listeria monocytogenes BACTERIA
Heppy Setya Prima* 1 , Fatridha Yansen 2
1 Prodi Teknologi Laboratorium Medis Stikes Syedza Saintika, Padang, Sumatera Barat , 25132
2 Prodi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Unisbar, Lubuk Alung, Sumatera Barat , 25581
*e-mail korespondensi: Heppysetya94@gmail.com

## Abstrak
Listeria  monocytogenes dan Escherichia    coli adalah  bakteri  penyebab  berbagai  infeksi  pada manusia. Kulit jeruk JESIGO  ( Citrus nobilis Lour ) mengandung  senyawa kimia berupa flavonoid, alkaloid,  saponin  dan  tanin yang  berfungsi  sebagai  antibakteri. Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui    aktivitas  ekstrak  kulit  jeruk  JESIGO    ( Citrus  nobilis  Lour )  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan Listeria  monocytogenes. Penelitian  ini  merupakan eksperimental  laboratorium    dengan  metode    difusi    agar  untuk  mengetahui  daya  hambat  terhadap bakteri Escherichia  coli dan Listeria  monocytogenes melalui  pembentukan  zona  inhibisi.  Sampel yang    digunakan  adalah  bakteri Escherichia  coli dan Listeria  monocytogenes .  Beberapa  variasi konsentrasi  ekstrak  kulit  jeruk  JESIGO;  5%,  15%,  25%,    45%,  digunakan  dalam  penelitian  ini. Amoxicilin    dan  DMSO  digunakan  sebagai  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.  Berdasarkan  hasil penelitian,    konsentrasi  ekstrak  kulit  jeruk  JESIGO  konsentrasi  45%  menunjukkan  daya  hambat terbaik  terhadap E.  coli O157  dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  15,76  mm  (kuat).  Diameter zona  hambat  terbesar  terhadap  bakteri Listeria  monocytogenes diperoleh  dari  ekstrak  kulit  jeruk JESIGO  dengan  kosentrasi  45%  yaitu  19,98  mm  (kuat).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  kulit  jeruk  JESIGO    ( Citrus  nobilis  Lour )    memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia coli dan Listeria monocytogenes dalam kategori kuat.
Kata kunci: Zona inhibisi, Infeksi bakteri, Flavonoid, Simplisia kering, Gunuang omeh

## Abstract
Escherichia  coli and Listeria  monocytogenes are  bacteria  that  can  cause  various  infections  in humans. The orange peel  of JESIGO ( Citrus nobilis Lour) contains beneficial  chemical  substances such  as  tannins,  alkaloids,  saponins,  and  flavonoids  that  have  antimicrobial  properties.  This  study aims to determine JESIGO ( Citrus nobilis Lour ) orange peel extract activity to inhibit the growth of Escherichia  coli and Listeria  monocytogenes bacteria.  This  research  is  an  experimental  laboratory research using agar diffusion method. Several concentrations of JESIGO orange peel extract used in this  study  were  20%,  40%,  60%,  80%,  100%.  Amoxicillin    and  DMSO  were  used  as  the  positive control  and  the  negative  control,  respectively.  According  to  the  study's  findings,  JESIGO  orange peel extract at a concentration of 45% produced an inhibition zone diameter of 15.76 mm (strong), which was the optimal concentration for preventing the growth of harmful bacteria like E. coli O157. The concentration of 45% the JESIGO orange peel extract generated the diameter of inhibition zone, 19.98  mm,  against Listeria  monocytogenes bacteria  and  it  was  considered  as  strong  inhibition activity.  The  results  depicted  that  the  extract  of  JESIGO  ( Citrus  nobilis  Lour )  orange  peel  had antibacterial activity against Escherichia coli and Listeria monocytogenes in the strong category.
Keywords: Inhibition zone, bacterial infection, Flavonoid, dried simplicia, Gunuang omeh

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya akan  tanaman  obat  dan  sudah  dikembangkan
menjadi  obat  tradisional  yang  digunakan  untuk pengobatan  berbagai  macam  penyakit  terutama penyakit  yang  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri.
Umumnya  penyakit  yang  ditimbulkan  oleh infeksi  bakteri  lazimnya  bisa  diobati  dengan menggunakan  antibiotik.  Namun  penggunaan antibiotik  dalam  waktu  yang  sangat  lama  bisa mengakibatkan resistensi bakteri terhadap antibiotic tersebut. Penggunaan antibiotik sebagai  obat  dapat  menimbulkan  berbagai macam  efek  samping  yang  tidak  dinginkan seperti  terjadinya perubahan biologis, alergi dan toksi (Widyaningrum et al., 2011). Maka dari itu efek  samping  dari  penggunaan  obat  antibakteri dapat  dikurangi  dengan  mengkonsumsi  obat tradisional    yang  diperoleh  dari  bahan  alam (Prima  dan  Rusfidra,  2021).  Itulah  sebabnya baru-baru  ini  lahir  obat  tradisional  sebagai alternatif pengganti antibiotik dalam pengobatan penyakit, terutama penyakit menular.
Peningkatan penggunaan senyawa bioaktif hasil biodiversitas tumbuhan di Indonesia  memberikan  peluang  lebih  besar untuk  menghasilkan  senyawa  antibakteri  alami sebagai  pilihan  alternatif  akibat  semakin meningkatnya resistensi bakteri terhadap antibotik.  Penggunaan  obat  tradisonal    sudah diwariskan  secara  turun  temurun  sehingga penggunaan  obat  tradisonal    sebagai  metode alternatif  pengobatan  dapat  dijadikan  sebagai parameter dalam pengembangan obat. Penelitian    tentang  tanaman  obat  dengan aktivitas  antibakteri  telah  banyak  diteliti  agar dapar menurunkan efek samping  dari pemakain bahan  kimia  pada  produk  perkebunan  dan peternakan.  Tumbuhan  obat  tersebut  antara  lain kunyit,  kunyit  putih,  temulawak,  jeruk,  dan bunga (Prima, 2023).
Diare  yang  tergolong  infeksi  saluran cerna  merupakan  penyakit  utama  di  dunia, terutama  di  negara  berkembang  dalam  bidang kesehatan. Infeksi gastrointestinal yang disebabkan  oleh mikroorganisme  patogen, termasuk E.  coli.  E.  coli adalah  salah  satu bakteri  umum  yang  terdapat  di  usus  besar  dan memeiliki  peran  yang  besar  terhadap  infeksi saluran  cerna  manusia  (Sumampouw,  2018). Penyakit  menular  yang  timbulkan    oleh  bakteri Listeria  monocytogenes adalah Listeriosis .  Di Indonesia kasus penyakit Listeriosis ini umumnya  terjadi  pada  bayi,  anak-anak  dan usia lanjut (Andriani et al. , 2016).
Escherichia    coli adalah    bakteri penyebab    infeksi    saluran    pencernaan. Escherichia  coli dapat  menyebabkan  berbagai infeksi pada  manusia. Sebagian besar waktu hal ini  disebabkan  oleh  penyebaran  dari  flora  usus ketika  pasien  memiliki  beberapa  kekurangan
atau masalah lain. Namun, strain E. coli tertentu juga  dapat  menyebabkan  diare.  Dalam  semua kasus  ini,  infeksi  mengikuti  penyebaran  feses- oral  langsung  atau  tidak  langsung  dari  manusia lain  atau  dari  hewan. Escherichia  coli yang dapat mengakibatkan  infeksi saluran kemih juga dapat  menyebabkan  meningitis  pada  bayi prematur  dan  balita  (Arivo  dan  Dwiningtyas, 2017).  Strain Escherichia  coli enteropatogenik umumnya menyebabkan diare akut pada anak di bawah  usia  2  tahun  dan  juga  menyebabkan infeksi  paru-paru  dan  saluran  kemih.  Diare adalah penyakit infeksi saluran cerna, khususnya infeksi  saluran  cerna  yang  disebabkan  oleh bakteri Escherichia  coli (Yashir  and  Apriani, 2019).
Cara pengendalian infeksi yang disebabkan  oleh  bakteri Listeria  monocytogenes adalah  dengan  antibiotik.  Antibiotik  adalah senyawa kimia yang dihasilkan oleh mikroorganisme,  terutama  jamur,  atau  produk sintetik yang dapat menghambat atau membunuh  pertumbuhan  bakteri  dan  organisme lain  (Prima  dan  Rusfidra,  2021).  Tetapi pemakaian  antibiotik  yang  berlebihan  dapat mengakbiatkan bakteri kebal terhadap antibiotik sehingga  menyebabkan  berkurangnya    manfaat antibiotik.  Bakteri  yang  resistan  terhadap  obat, khususnya  bakteri  yang  resisten  terhadap  obat merupakan  masalah  yang  sulit  diatasi  dalam proses  pengobatan  bagi  pasien.  Masalah  ini muncul  akibat  penggunaan  antibiotik  dengan dosis,  jenis,  dan  durasi  yang  salah  sehingga membuat  bakteri  kebal  terhadap  antibiotik. Salah  satu  upaya  pengendalian  infeksi Listeria monocytogenes adalah penggunaan bahan herbal.
Menurut  Dinas  Pertanian  Tanaman Pangan  Kabupaten  Lima  Puluh  Kota  (2012), Kabupaten  Lima  Puluh  Kota  adalah  sentra pengembangan  komoditi    jeruk    di    Sumatera Barat.    Kecamatan    Gunung    Omeh    adalah salah    satu  Kecamatan  yang  ada  di  Kabupaten Lima  Puluh  Kota  yang  sangat  dikenal  dengan tanaman  jeruknya.  memiliki  rasa  manis  dan buah yang relatif besar, Bagian buah jeruk yang paling  sedikit  digunakan  adalah  kulit  jeruknya. Kulit jeruk memiliki potensi pertumbuhan dalam industri  makanan  dan  hewan.  Kulit  jeruk sebelumnya  dikenal  sebagai  buah  yang  kaya akan  vitamin  C  dan  bermanfaat  bagi  kesehatan (Yashir  dan  Apriani,  2019).  Kulit  jeruk  manis mengandung  vitamin  C,  senyawa  fenolik, flavonoid,  glikosida  flavon  dan  saponin  serta Sisa  kulit  jeruk  mengandung  136mg  vitamin  C,
18 | Jurnal Zarah , Vol. 12 No. 1 (2024)
sangat  berbeda  dengan  buahnya  yang  hanya mengandung 71  mg vitamin C dan dapat diolah menjadi  produk  yang  berharga  untuk  keperluan Kesehatan  (Kurniawan et al., 2017).
Hal  ini  disebabkan  karena  rendahnya pengetahuan  masyrakat  akan  khasiat  dan kandungan  senyawa  kimia  yang  terdapat  pada kulit  jeruk  jesigo  sehingga  mengakibatkan  kulit buah jeruk jesigo menjadi sampah yang terbuang sia-sia  yang  merusak  lingkungan  dan  menjadi limbah yang tidak diolah dengan baik (Meliyana    2022).  Sementara    (Ifmalinda et  al ., 2018)  menjelaskan  bahwa  bagian  jeruk  jesigo, meliputi daun, kulit dan buah, berkhasiat sebagai antibakteri  karena  mengandung  senyawa  aktif berupa flavonoid.
Penelitian  oleh  (Ropiqa  et  al.,  2023) membuktikan bahwa ekstrak kulit jeruk Pontianak ( Citrus nobilis Lour. var. microcarpa ) mampu menghasilkan diameter zona  hambat  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aerues pada  kategori  kuat dan Staphylococcus mutans pada  kategori sedang. Aktivitas antibakteri ini dipengaruhi oleh  senyawa  kimia  yang  terkandung  pada tanaman,  dan  kandungan  ini  dipengaruhi oleh  berbagai  faktor  meliputi  kondisi lingkungan  berupa  iklim  dan  tempat tumbuh, faktor genetik, perlakuan saat masa tumbuh  dan  kondisi  saat  panen.  Sehingga penggunaan  ekstrak  sampel  dari  lokasi berbeda  berkemungkinan  memberikan  hasil yang  berbeda.    Penelitian  ini  menggunakan ekstrak  kulit  jeruk  JESIGO  asal  Kecamatan Gunung  Omeh  yang  merupakan  jeruk unggulan Sumatera Barat, kemudian dilakukan  uji  daya  hambat  bakteri  terhadap bakteri E.coli dan monocytogenes .

## METODE PENELITIAN
1. Pengambilan Sampel
Jeruk  JESIGO  diperoleh  dari  Kecamatan Gunung  Omeh  Kabupaten  50  Kota,  Sumatera Barat.
Gambar 1 : Peta lokasi pengambilan sampel jeruk JESIGO
Sampel  isolat    bakteri E.  coli dan Listeria monocytogenes pada penelitian ini diisolasi  dari koleksi    laboratorium  mikrobiologi    STIKes Syedza  Saintika  dan  laboratorium  Fitokimia Unisbar,  serta    kulit  jeruk  JESIGO  ( Citrus nobilis Lour ) yang di dapatkan dari Kecamatan Gunung  Omeh  yang  selanjutnya  dilakukan ekstraksi dan pembuatan simplisia di Laboratorium Mikrobiologi Stikes Syedza Saintika.
2. Pembuatan Simplisia
Kulit  jeruk  JESIGO  ( Citrus  nobilis  Lour) yang  sudah  di  dapatkan  selanjutnya  dilakukan sortasi  basah  dengan  cara  kulit  jeruk  Jesigo  di cuci  bersih  dengan  menngunakan  air  yang mengalir,  untuk  menghilangkan  kotoran  yang menempel,  selanjutnya    ditiriskan,  setelah  itu dilakukan  pemotongan  dengan  ukuran  kecil- kecil. Selanjunya dilakukan pengeringan dengan oven  pada  suhu  50-80 o C  selama  4-7  hari.  Daun yang    telah    kering    dihaluskan    dengan menggunakan  glider  dan  disimpan  pada  wadah yang kering. (Arfania, 2017)
3. Ekstraksi  Kulit  Jeruk  JESIGO  ( Citrus nobilis Lour )
Proses  ekstraksi  kulit  buah  jeruk  JESIGO ( Citrus  nobilis  Lour  ) menggunakan  metode maserasi.  Serbuk  simplisia  kering  kulit  jeruk Jesigo  diambil  dan  dilakukan  penimbangan sebanyak  800gr.  Selanjuntnya  dicuci  dengan  air mengalir,  lalu  dipotong  tipis-tipis  memakai pisau  dan  dikeringkan.  Setelah  kering,  timbang irisan  kulit  jeruk  Jesigo  dan  dihaluskan  dengan memakai  blender  sampai  berbentuk  bubuk. Ambil  sampel  simplisia  sebanyak  60  gr  lalu direndam  dengan  250  ml  pelarut  C 4 H 8 O 2 . Setelah itu, hasil rendaman disaring dan dituang ke  labu  erlenmeyer.  Ekstrak  kental  diperoleh menggunakan  menggunakan  evaporator  rotasi. (Putra et al. , 2018)
4. Skrining Fitokimia a. Identifikasi Flavonoid Kandungan  flavonoid  total  diperkirakan menggunakan  metode  yang  dijelaskan oleh  Ebrahimzadeh  et  al,.  Ekstrak  (0,5
mL 1 mg/mL) dicampur dengan 1,5 mL metanol.  Ke  dalam  campuran  ini, ditambahkan  0,1  mL  aluminium  klorida
10%,  diikuti  dengan  0,1  mL  kalium asetat  1  M  dan  2,8  mL  air  suling. Campuran  diinkubasi  pada  suhu  kamar selama 30 menit. Jika  larutan  terbentuk warna    kuning    jingga  sampai  merah, maka  positif  mengandung  flavonoid (Base, 2018)
b. Identifikasi Alkaloid Pengujian dilakukan dengan mengambil  2  ml  sampel  ekstrak  kulit jeruk JESIGO ( Citrus nobilis Lour ) ke dalam tabung reaksi. Setelah itu ekstrak ditambah dengan 5 tetes reagen Dragendroff.  Apabila  larutan  terbentuk endapan jingga maka positif mengandung  alkaloid  (Suryanita et  al. ,
2019)
c. Uji Tanin
Kandungan tanin total ditentukan dengan metode modifikasi putra (2018). Ke  dalam  0,1  mL  ekstrak  sampel  1 mg/mL  ditambahkan  0,5  mL  reagen Folin-Denis diikuti dengan 1 mL larutan Na2CO3  (0,5%  W/V)  dan  akuades hingga  5  mL.  Jika  larutan  terbentuk warna  coklat  kehijauan  atau  biru kehitaman  maka  positif  mengandung tanin. (Parama et al., 2019)
d. Uji Saponin Ditambahkan sepuluh mililiter air suling
panas  untuk  masing-masing  sampel, ekstrak etanol dilarutkan dalam
penangas  air  sebelum  dikocok  dengan kuat.    Jika  buih  tidak  terbentuk,  itu negatif;  tetapi  jika  tetap  berbuih  setelah didiamkan  selama  sepuluh  menit  dan ditambahkan  HCl  2  N,  buih  itu  tidak hilang  dan  mengandung  saponin.(Saleh et al. , 2017)
5. Skrining  Bakteri  Asam  Laktat  (BAL) Potensial Antimikroba (Prima et al., 2022)
Ekstrak    yang  digunakan  untuk  uji aktivitas  antibakteri  pada  konsentrasi  5%,  15%, 25%;  35%  dan  45%.  Dua  bakteri  uji, Listeria monocytogenes dan Escherichia coli O157, diuji untuk  resistensi  antimikroba  bakteri  melalui metode difusi sumur agar.  Untuk meningkatkan resistensi  antimikroba,  kultur  Bakteri  Asam Laktat  (BAL)  1  mm  disentrifus  selama  5  menit dengan  kecepatan  10.000  rpm  dan  suhu  27 o C. Dalam  20  mililiter  media  Mueller  Hinton  Agar (MHA) ditambahkan 0,2% bakteri uji yang telah diremajakan,  dan  agar  dibiarkan  mengeras dalam cawat petri. Setelah itu, lubang dibuat
pada  media  MHA  dengan  diameter  ±  6,5 mm.    Selanjutnya,  sebagai  kontrol  positif, antibiotik  berupa  amoksilin  ditambahkan  untuk membandingkan  zona  hambat  yang  terbentuk pada  bakteri  uji  patogen.  Antibiotik  diberikan pada  kertas  disk  yang  sudah  mengandung antibiotik untuk menguji resistensi dan sensitifitas bakteri uji patogen dengan menggunakan kontrol positif antibiotik. Kemudian ditambahkan 50 μl supernatan bakteri dan diinkubasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Ekstraksi  Kulit  Jeruk  JESIGO  (  Citrus nobilis Lour )
Ekstraksi yang dilakukan yaitu ekstraksi dingin  dengan  cara  maserasi,  metode  ini merupakan  metode  yang  mudah,  murah  dan efektif  untuk  menghindari  kerusakan  zat  aktif yang  termolabil.  Hasil  ekstrak  kulit  jeruk JESIGO ( Citrus nobilis Lour ) jeruk  berwarna kuning  kehijauan  dan  tidak  berbau  etanol  dapat dilihat pada Tabel 1 dan gambar 2.
Bobot Kulit Bobot Serbuk Bobot Ekstrak Kadar Air Rendemen 2 kg 800 gr 90 gr 10 % 30 %

## Gambar 2. Ekstrak Kulit Jeruk Jesigo JESIGO ( Citrus nobilis Lour )
Berdasarkan tabel 1 dan gambar 1 dapat dilihat  bahwa  hasil  ektrak  kulit  jeruk  Jesigo didapat  hasil  bobot  kulit  jeruk  Jesigo  sebesar  2 kg  ,  bobot  serbuk  sebesar  800  gr  dan  bobot ektrak  sebesar  90  gr    dengan  rendemen  sebesar 30  %.    Rendemen    dihitung    terhadap    berat bubuk  kulit  jeruk  kering  dengan  kadar  air  10 %  b/b. Hal  tersebut  sesuai  dengan pernyataan (Suryanita et  al. ,  2019)    bahwa  Metode ekstraksi  dengan  maserasi  merupakan  metode yang  mudah  dilakukan  dan  menghasilkan rendemen yang relatif tinggi .
20 | Jurnal Zarah , Vol. 12 No. 1 (2024)
2. Skrining Fitokimia
Hasil  skrining  fitokimia  dari  simplisia daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  dapat  dilihat pada tabel 2 berikut:
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  di  lihat  bahwa  hasil identifikasi    kandungan    kimia    ekstrak  Kulit Jeruk JESIGO ( Citrus nobilis Lour) menunjukan    adanya    kandungan  metabolit sekunder    Flavonoid,    Alkaloid,  Tanin,    dan Saponin    yang    merupakan  senyawa  yang memiliki sifat antibakteri.
Tabel 2 : hasil skrining fitokimia ekstrak kulit jeruk JESIGO
Dengan adanya perubahan warna kuning,  uji  flavonoid  menunjukkan  hasil  yang baik.  Flavonoid  adalah  kelompok  fenol  yang memiliki  perbedaan  keelektronegatifan  yang tinggi  dan  banyak  gugus  –OH.  Karena  adanya gugus hidroksil, flavonoid mudah terekstrak dari pelarut  etanol  yang  memiliki sifat  polar, sehingga  dapat  terbentuk  ikatan  hidrogen (Amiliah  et  al.,  2021)  Flavonoid  adalah senyawa yang ditemukan pada buah-buahan, sayur-sayuran, dan beberapa  minuman  yang memiliki banyak manfaat biokimia dan efek antioksidan.  Flavonoid  ditemukan  di  kulit buah  jeruk  karena  aromanya  (Prima  and Yansen, 2023) dan metode ekstraksi sampel juga  memengaruhi  kandungan  flavonoid,
teknik  blending  menghasilkan  konsentrasi flavonoid yang lebih tinggi daripada metode juicing  dan  hand  squeezing  (Prima  dan Yansen, 2023).
Dengan  menambah  Mg  dan  HCl  pekat pada  sampel  ekstrak  etanol  kulit  batang  kelor, flavonoid diuji  menggunakan pereaksi wilstater. Untuk menghidrolisis flavonoid menjadi aglikonnya, yaitu O-glikosil, HCl pekat ditambahkan.    Karena  sifat  elektrofilik  asam, glikosil  akan  digantikan  oleh  H+.   Dalam  kasus flavonol,  flavanonol,  flavanonol,  dan  xanton, reduksi  dengan  Mg  dan  HCl  pekat  dapat menghasilkan  senyawa  kompleks  berwarna merah atau jingga (Devy et al., 2010)
Uji Wagner dan Mayer mengidentifikasi alkaloid  pada  ekstrak  etanol  kulit  batang  kelor. Reaksi  yang  dihasilkan  oleh  uji  Wagner menyebabkan  pembentukan  senyawa  kompleks yang mengendap.  Terbentuknya endapan coklat muda hingga kuning pada uji Wagner menunjukkan  hasil  alkaloid  positif.    Seseorang memperkirakan  bahwa  endapan  tersebut  adalah kalium-alkaloid.    Uji  alkaloid  dengan  pereaksi Mayer  memperkirakan  bahwa  nitrogen  pada alkaloid  akan  bereaksi  dengan  ion  logam  K+ dari  kalium  tetraiodomerkurat(II),  membentuk kompleks  kalium-alkaloid  yang  mengendap. Dalam  uji  Wagner,  ion  logam  K+  akan membentuk  ikatan  kovalen  koordinat  dengan nitrogen  pada  alkaloid,  membentuk  kompleks kalium-alkaloid  yang  mengendap  (Ikalinus  et al., 2015). Alkaloid berfungsi sebagai analgesik, mengubah fungsi jantung, memengaruhi peredaran  darah  dan  pernafasan,  antimalaria, stimulan  uterus,  dan  anestetik  lokal  dalam bidang kesehatan (Marsodinata, 2022)
Dengan  menambahkan  ekstrak  etanol kulit  Jeruk  Jesigo  ke  larutan  FeCl3  dan  kedua menggunakan  gelatin,  uji  fitokimia  senyawa tanin  menunjukkan  hasil  positif.  jika  terdapat gugus  fenol,  maka  tanin  juga  mungkin  ada, karena tanin adalah senyawa polifenol. Pembentukan senyawa komplek antara tanin dan FeCl3  menyebabkan  warna  menjadi  hijau kehitaman.    Pengujian  menggunakan  gelatin memperkuat hipotesis tentang adanya tanin. Jika ditambahkan dengan gelatin, tanin akan menghasilkan endapan yang sedikit atau banyak (Meliyana and Ridwanto, 2022)
Pada    tumbuhan,    tanin  melindungi tumbuhan dari bakteri, jamur, virus, insekta, dan vertebrata  herbivora.    Tanin  juga  berperan penting dalam mencegah degradasi nutrien yang
No Hasil Pemeriks aan Pereaksi Hasil  Keterangan 1 Flavonoi d Mg+  HCl Pekat + Terbentuk warna merah 2 Alkaloid Mayer + Terbentuk endapan Putih Wanger + Terbentuk endapan Coklat Dragendor ff + Terbentuk endapan Jingga 3 Tanin FeCl3+ Gelatin + Terbentik warna  biru kehitaman dan endapan 4 Saponin Aquades  + HCl + Terbentuk busa Stabil
berlebihan di dalam tanah. Akibatnya, simpanan nutrien  di  dalam  tanah  dapat  dipertahankan untuk  tumbuhan  selama  periode  vegetasi berikutnya  (Ajeng  dan  Asngad,  2016).  Tanin juga  berfungsi  sebagai  antibiotik  dalam  bidang kesehatan,  Tanin  berfungsi  sebagai  antibiotik dengan  membentuk  kompleks  dengan  enzim ekstraseluler  patogen  atau  menghentikan  proses metabolisme  patogen.    Ellagitanin  memiliki kemampuan  untuk  mencegah  virus  HIV  masuk ke  dalam  sel  dan  menghentikan  aktivitas transkriptase kebalikan virus.
Karena saponin memiliki gugus hidrofilik  dan  hidrofob,  saat  digojok,  saponin membentuk buih karena gugus hidrofil berikatan dengan air dan gugus hidrofob berikatan dengan udara.    Gugus  polar  menghadap  ke  luar, sedangkan  gugus  non-polar  menghadap  ke dalam  pada  struktur  misel.  Keadaan  ini  dapat membentuk  busa,  tetapi  karena  tidak  dapat membentuk busa, sampel tidak memiliki saponin dalam  analisis  ini.      Rasa  pahit  buah  jeruk, terutama di kulit, menunjukkan adanya senyawa saponin  (Andasari  et  al.,  2020)Saponin  banyak ditemukan  pada  tanaman.  Manfaatnya  adalah sebagai imunostimulan, hipokolesterolemik, dan antikarsinogenik.  Selain  itu,  saponin  banyak digunakan  dalam  industri  makanan,  pertanian, dan kosmetik (Barliyani, 2014).
3. Daya  Hambat  Ekstrak  Kulit  Jeruk JESIGO  ( Citrus  nobilis  Lour  )  Terhadap

## Bakteri Patogen
Ekstrak  Kulit  Jeruk  JESIGO  ( Citrus nobilis Lour ) memiliki kemampuan menghambat  pertumbuhan  dan  perkembangan bakteri  patogen Escheriachia  coli O157  dan Listeria monocytogenes dapat dilihat pada Tabel 3 dibawah ini.
Tabel 3. Diamater Zona Bening Uji Aktivitas Antimikroba (mm)
Gambar 2. Diameter Zona Hambat ekstrak kulit jeruk Jesigo terhadap bakteri patogen
Hasil  yang  didapat  dari  penelitian  dapat dilihat  pada  Tabel  3  menunjukkan    luas  zona bening/luas zona hambat masing-masing kosentrasi sangat bervariasi. Menurut Vesterlund et al. (2004) luasan zona bening yang terbentuk  disekitar  sumur    agar  yang  telah diinkubasi  selama  24  jam  dengan  suhu  37 0 C dapat dikatakan dengan hasil positif. Terbentuknya  zona  bening  dikarenakan  hasil metabolisme  dari  ekstrak  kulit  jeruk  Jesigo memproduksi flavonoid, tinin, hydrogen peroksida dan bakteriosin yang mempunyai sifat sebagai  antimikroba.  ekstrak  kulit  jeruk  Jesigo yang memiliki zona hambat terbesar pada E. coli O157 dimiliki  oleh  Kosentrasi  45  %  dengan diameter  15,76  mm,  sedangkan  terendah  adalah kosentrasi  5%  yaitu  12,09  mm.  Diameter  zona hambat  terbesar  terhadap  bakteri Listeria monocytogenes pada  Kosentrasi  45  %  yaitu 19,98 mm, sedangkan terendah adalah kosentrasi 5% yaitu 13,43 mm.
Pengaruh  konsentrasi  yang  berbeda terhadap  area  hambatan  yang  dibuat  berbeda. Daya antimikroba ekstrak Hylocareus costarisensis  meningkat  seiring  dengan  luas zona  hambatan  yang  terbentuk  di  sekitar  kertas disk.    Ini  sejalan  dengan  apa  yang  dikatakan Prima  et  al.,  (2022)  yang  menyatakan  bahwa wilayah  jernih  di  sekitar  zat  antimikroba berfungsi sebagai penghalang untuk menghentikan  perkembangan  mikroorganisme. Ini  dapat  dilihat  dengan  terbentuk  nya  zona hambat dimana pertumbuhan E. coli dan Listeria monocytogenes terjadi.
Hasil penelitian pada tabel menunjukkan bahwa,  berdasarkan  luasan  zona  bening  yang dihasilkan oleh setiap kosentrasi, masing-masing kosentrasi  memiliki  kemampuan  penghambatan bakteri patogen yang berbeda. Menurut Kusbiantoro,  (2018)Uji  kepekaan  terhadap antibiotik  dimaksudkan  untuk  mengidentifikasi bakteri  penyebab  penyakit  yang  mungkin menunjukkan resistensi terhadap suatu antimikroba untuk menghentikan perkembangan bakteri secara invitro.
Ketika  flavonoid  membentuk  kompleks dengan protein ekstraseluler dan terlarut, mereka dapat  merusak  membran  sel  bakteri  dan kemudian  mengeluarkan  senyawa  intraseluler. Sebagai  antibakteri,  flavonoid  menghentikan pertumbuhan  bakteri  dengan  menghentikan  dua fase  inflamasi:  pelepasan  asam  arakidonat  dan sekresi  enzim  lisosom  dari  sel  neutrofil  dan  sel
Kosentarasi (%) Diameter zona bening (mm) Escherichia coli O157 Listeria monocytogenes 5 12,09 13,43 15 14,84 15,84 25 15,57 18,73 45 15,76 19,98
22 | Jurnal Zarah , Vol. 12 No. 1 (2024)
endothelial, dan penghentian fase proliferasi dan eksudasi proses inflamasi (Base, 2018). Penelitian    lain    menyatakan    mekanisme flavonoid    menghambat    fungsi    membran    sel dengan    cara    mengganggu  permebealitas membran  sel  dan  menghambat  ikatan  enzim seperti ATPase dan phospholipase.
Mekanisme  kerja  Alkaloid  berfungsi sebagai  antibakteri  dengan  mengganggu  bagian penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, menyebabkan lapisan dinding sel tidak terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel (Kristiandi,  2020)  Mekanisme  antibakteri  lain alkaloid  adalah  dengan  menghentikan  enzim topoisomerase sel bakteri.
Mekanisme    kerja    antibakteri    tanin mempunyai    daya    antibakteri    dengan  cara memprepitasi    protein.    Efek    antibakteri    tanin melalui  reaksi  dengan membran  sel,  inaktivasi enzim    dan    inaktivasi    fungsi    materi    genetic (Amiliah  et  al.,2021)  Mekanisme    kerja    tanin sebagai  antibakteri  adalah  menghambat  enzim reverse    transkriptase  dan  DNA  topoisomerase sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat    terbentuk. Tanin    juga    mempunyai    target    pada polipeptida  dinding  sel sehingga  pembentukan dinding    sel    menjadi    kurang    sempurna.    Hal ini  menyebabkan    sel    bakteri    menjadi    lisis karena    tekanan    osmotik    maupun  fisik sehingga    sel    bakteri    akan    mati  (Andasari  et al.,  2020).  Tanin  memiliki  sifat  antibakteri dengan  memprepitasi  protein,  Tanin  memiliki efek antibakteri melalui reaksi dengan membran sel,  penghentian  enzim,  dan  penghentian  fungsi materi genetik. Tanin berfungsi sebagai antibakteri  dengan  menghentikan  enzim  reverse transkriptase  dan  DNA  topoisomerase  (Putra et al. ,  2018).  Hal  ini  mencegah  pembentukan  sel bakteri.  Tanin  juga  merusak  pembentukan dinding  sel  dengan  menargetkan  polipeptida dinding  sel.    Hal  ini  menyebabkan  sel  bakteri lisis  karena  tekanan  osmotik  dan  fisik,  dan akhirnya mati (Barliyani, 2014).
Mekansime kerja Saponin dapat melepaskan  protein  dan  enzim  dari  sel  melalui fungsinya  sebagai  antibakteri.  Karena  zat  aktif permukaannya  yang  mirip  dengan  detergen, saponin  dapat  berfungsi  sebagai  anti  bakteri karena menurunkan tegangan permukaan dinding  sel  bakteri  dan  merusak  permebialitas membrane (Marsodinata, 2022). Saponin berdifusi  melalui  membran  luar  dan  dinding  sel yang  rentan,  kemudian  mengikat  membran sitoplasma, mengganggu dan mengurangi kestabilan  membran,  menyebabkan  sitoplasma
bocor keluar dari sel, menyebabkan kematian sel (Dumanauw et al., 2019).

## KESIMPULAN
Konsentrasi  ekstrak  kulit  JESIGO  45% mampu    menghambat  pertumbuhan  bakteri E. coli O157  dan Listeria  monocytogenes paling optimal  ditandai  dengan  diameter  zona  hambat masing-masing  sebesar  15,76  mm  dan  19,98 mm.  Pengujian  terhadap    bakteri E.  coli O157 dan Listeria  monocytogenes menghasilkan kategori antibakteri kuat.

## SARAN
Diperlukan    penelitian    lebih    lanjut mengenai    pentingnya    isolasi    senyawa antibakteri  pada  Kulit  Jeruk  JESIGO  ( Citrus nobilis Lour) yang dihasilkan, untuk mengetahui senyawa efektif.

## DAFTAR RUJUKAN
Ajeng, R. G. and Asngad, A. (2016) ‘Uji Organoleptik dan antioksidan teh daun kelor dan kulitjeruk purut dengan variasi suhu pengeringan’. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Amiliah, A., Nurhamidah, N. and Handayani, D. (2021) ‘Aktivitas Antibakteri Kulit Buah Jeruk Kalamansi (Citrofortunella Microcarpa) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli’, Alotrop , 5(1), pp. 92–105.
Andasari, S. D., Indriyastuti, I. and Arrosyid, M. (2020) ‘Standarisasi Ekstrak Etil Asetat Daun Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia S)’, in Prosiding University Research Colloquium , pp. 257–262. Andriani, M. D. et al. (2016) ‘Identifikasi Listeria monocytogenes pada Susu Kambing di Kabupaten Purworejo Jawa Tengah’, Indonesian Journal of Veterinary Science , 34(1),  pp. 16– 23.
Arfania, M. (2017) ‘Telaah Fitokimia
Ekstrak Etanol Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix DC) di Kabupaten
Karawang’, Pharma Xplore: Jurnal Sains dan Ilmu Farmasi , 2(2). Arivo, D. and Dwiningtyas, A. W. (2017) ‘Uji Sensitivitas antibiotik Terhadap Escherichia coli Penyebab Infeksi Saluran Kemih’, Jurnal Ilmu Kedokteran Dan Kesehatan , 4(4). Barliyani, R. D. (2014) ‘PENGARUH EKSTRAK ETANOLIK DAUN JERUK NIPIS (Citrus maurantifolia (Cristm.) Swingle) TERHADAP MORTALITAS LARVA Aedes aegypti L.(DIPTERA: CULICIDAE)’. Universitas Gadjah Mada.
Base, N. H. (2018) ‘Identifikasi kandungan senyawa flavonoid ekstrak kulit buah jeruk bali (Citrus maxima Merr.) secara kromatografi lapis tipis’, Jurnal Kesehatan Yamasi Makassar , 2(1).
Devy, N. F., Yulianti, Y. and Andrini, A. (2010) ‘Kandungan Flavonoid dan Limonoid pada Berbagai Fase Pertumbuhan Tanaman Jeruk Kalamondin (Citrus mitis Blanco) dan  Purut (Citrus hystrix Dc.)’.
Dumanauw, F. C., Rampe, H. L. and Baideng, E. L. (2019) ‘Intensitas serangan akibat hama pemakan daun setelah aplikasi ekstrak daun jeruk nipis (Citrus aurantifolia (cristm.) Swingle) pada tanaman sawi (Brassica juncea L.)’, Jurnal Ilmiah Sains , pp. 86–92.
Ifmalinda, I., Fahmy, K. and Fitria, E.
(2018) ‘Prediksi Tingkat Kematangan Buah Jeruk Siam Gunung Omeh (Citrus Nobilis Var. Microcarpa) dengan Pengolahan Citra’, Jurnal Keteknikan Pertanian , 6(3), pp. 335–342.
Ikalinus, R., Widyastuti, S. K. and Setiasih, N. L. E. (2015) ‘Skrining fitokimia ekstrak etanol kulit batang kelor (Moringa oleifera)’, Indonesia Medicus Veterinus , 4(1), pp. 71–79. Kristiandi, K. and Febrina, A. (2020) ‘Pemanfaatan kulit jeruk siam sebagai pestisida alami  utilization
of siam orange skin as a natural pesticide’, Jurnal Agrotek Lestari , 6(2), pp. 46–52. Kurniawan, A., Kurniawan, C. and Indraswati, N. (2017) ‘Ekstraksi minyak kulit jeruk dengan metode distilasi, pengepresan dan leaching’,
Widya Teknik , 7(1), pp. 15–24. Kusbiantoro, D. (2018) ‘Pemanfaatan kandungan metabolit sekunder pada tanaman kunyit dalam mendukung peningkatan pendapatan masyarakat’, Kultivasi , 17(1), pp. 544–549.
Marsodinata, L. (2022) ‘Skrining Fitokimia pada Ecoenzyme dari Bahan Organik Kulit Jeruk.’  Universitas Negeri Padang.
Meliyana, M. and Ridwanto, R. (2022) ‘Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jeruk  Kasturi (Citrus microcarpa Bunge) Di Daerah Labuhanbatu, Sumatera Utara Dengan  Metode DPPH (1, 1Diphenyl-2-Picrylhydrazil)’, Journal of Health and Medical Science , pp. 100–109. Parama, P. W., Sukrama, I. D. M. and Handoko, S. A. (2019) ‘Uji efektifitas antibakteri ekstrak buah jeruk nipis (Citrus aurantifolia) terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans in  vitro’, Bali dental journal , 3(1), pp. 45–52. Prima, H. S. (2023) ‘Karakterisasi dan Identifikasi Molekuler Bakteri Asam Laktat Diisolasi dari Ikan Bilih (Mystacoleucus padangensis) Danau Singkarak Berpotensi Sebagai  Probiotik’, Majalah Kedokteran Andalas , 46(4), pp. 535–547.
Prima, H. S. and Rusfidra, E. P. (2021)
‘Isolation, Characterization and Identification of  Molecular Lactic Acid is Isolated from Bilih Fish (Mystacoleucuspadangensis) Lake Singkarak Potential as a Probiotic’, Annals of the Romanian Society for Cell Biology ,  pp. 8581–8596.
24 | Jurnal Zarah , Vol. 12 No. 1 (2024)
Prima, H. S., Satrianto, A. and Amar, S.

## (2022) ‘Antimicrobial Potential of
Limosilactobacillus Fermentum Isolated from Bilih Fish (Mystacoleucus padangensis) of Singkarak Lake, West Sumatera, Indonesia’, Applied Food Biotechnology , 9(4), pp. 297–309.
Prima, H. S. and Yansen, F. (2023), Potensi BAL probiotik dari ikan bilih
( mystacoleucus padangensis ) danau singkarak dalam aplikasi pembuatan sabun padat  ekstrak lidah buaya ( Aloe vera ), Jurnal Kesehatan Medika Saintika , 14(1), pp. 254–265. Putra, G. M. D. et al. (2018) ‘Standarisasi dan skrining fitokimia ekstrak etanol 70% daun jeruk limau (Citrus amblycarpa (Hassk.) Osche)’,
Jurnal Kimia , 12(2), pp. 187–194. Ropiqa, M, Rahman, I. R., & Kurniawan, H. (2023). Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Jeruk Pontianak (Citrus nobilis Lour. var. microcarpa) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus mutans. Journal Syifa Sciences and Clinical Research , 5 (1). Saleh, M. et al. (2017) ‘Uji efektivitas ekstrak kulit buah jeruk nipis (Citrus  aurantifolia) sebagai insektisida hayati terhadap nyamuk Aedes aegypti’, HIGIENE: Jurnal Kesehatan Lingkungan , 3(1), pp. 30–36. Sumampouw, O. J. (2018) ‘Uji sensitivitas antibiotik terhadap bakteri escherichia coli penyebab diare balita di kota manado’, Journal of Current  Pharmaceutical Sciences , 2(1), pp. 104–110. Suryanita, S. et al. (2019) ‘Identifikasi senyawa kimia dan uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit jeruk bali (Citrus maxima Merr.)’,
Majalah Farmasi dan Farmakologi , 23(1), pp. 16–20. Vesterlund, S. et al. (2004) ‘Rapid screening
method for the detection of antimicrobial substances’, Journal of microbiological methods , 57(1), pp. 23–31. Widyaningrum, H. and Alternatif, T. S.
(2011)
Kitab tanaman obat Nusantara . MediaPressindo. Yashir, M. and Apriani, A. (2019) ‘Variasi Bakteri Pada Penderita Infeksi Saluran Kemih  (Isk)’, Jurnal Media Kesehatan , 12(2), pp. 102–109.