## UJI TOKSISITAS DAN IDENTIFIKASI SENYAWA EKSTRAK ALGA MERAH
( Eucheuma cottonii ) TERHADAP LARVA UDANG Artemia salina LEACH
Noer Mardlatillah Sharo, Rachmawati Ningsih, A. Nasichuddin, Ahmad Hanapi
Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi UIN Maulana Malik Ibrahim Malang Corresponding author : l4l4_scorpio@yahoo.com

## ABSTRACT
Eucheuma  cottonii is  a  multicellular  algae  (multicellular)  that  have  bioactive  compounds  used  in medicine, such as anticancer. The purpose of this research is to know the level of toxicity of the crude extract of ethanol and n-hexane red algae ( Eucheuma cottonii ) against larvae of shrimp A. salina Leach and to know the active compounds contained in crude extracts of ethanol and n-hexane red algae ( Eucheuma cottonii ).
This research was conducted with the maceration extraction continuing by test toxicity against the shrimp larvae  of A.  salina Leach  (BSLT).  The  result  of  the  toxicity  test  then  proceeds  with  the  test  reagents  and phytochemicals  with  thin  layer  chromatography  for  positive  test  of  compound  phytochemicals.  Thin-layer chromatography using eluen n-hexane: ethyl acetate (7: 3) to ethanol extract and n-hexane: ethyl acetate (17: 3) for n-hexane extract. Data on toxicity of A. salina Leach analyzed by probit analysis to find out the value of LC 50 on each extract.
The results of this research indicate that each of the rough red algae extract ( Eucheuma cottonii ) by using a solvent of ethanol and n-hexane  have toxicity  values (LC 50 ) of shrimp larvae of A. salina Leach consecutive 58,0128  ppm  and  61,7571  ppm.  Active  compounds  content  of  Phytochemical  test  results  i.e.  triterpenoid (ethanol  extract)  and  steroids  (n-hexsane  extract).  The  TLC  triterpenoid  obtained  7  stains,  and  the  results obtained steroids 8 TLC stains.
Keywords : red algae ( Eucheuma cottonii ), toxicity test, Artemiasalina Leach, phytochemicals test, a thin Layer Chromatography (TLC).

## ABSTRAK
Eucheuma  cottonii merupakan  alga  multiseluler  (bersel  banyak)  yang  memiliki  senyawa  bioaktif  yang digunakandalamduniapengobatan,  misalnyasebagaiantikanker.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui tingkat toksisitas ekstrak kasar etanol dan n -heksana alga merah ( Eucheuma cottonii ) terhadap larva udang A.  salina  Leach dan  untuk  mengetahui  golongan  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak  kasar etanol dan n -heksana alga merah ( Eucheuma cottonii ).
Penelitian ini dilakukan dengan ekstraksi maserasi dilanjutkan dengan uji toksisitas terhadap larva udang A.salinaLeach  (BSLT).  Hasil  dari  uji  toksisitas  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  fitokimia  dengan  reagen  dan kromatografi  lapis  tipis  untuk  senyawa  yang  positif  dari  uji  fitokimia.  Kromatografi  lapis  tipis  menggunakan eluen n -heksana:etil  asetat  (7:3)  untuk  ekstrak  etanol  dan n -heksana:etil  asetat  (17:3)  untuk  ekstrak n -heksana. Data toksisitasA.salinaLeach dianalisis dengan analisis probit untuk mengetahui nilai LC50 pada masing-masing ekstrak.
Hasil  dari  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  masing-masing  ekstrak  kasar  alga  merah  ( Eucheuma cottonii )  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  dan n -heksana  memiliki  nilai  toksisitas  (LC 50 )  terhadap  larva udang A.  salina Leach  berturut-turut  yaitu  58,0128  ppm  dan  61,7571  ppm.  Kandungan  senyawa  aktif  hasil  uji fitokimia yaitu triterpenoid (ekstrak etanol) dan steroid (ekstrak n -heksana). Hasil KLT triterpenoid diperoleh 7 noda, dan hasil KLT steroid diperoleh 8 noda.
Kata Kunci : Alga merah ( Eucheuma cottonii ), uji toksisitas, Artemia salina Leach , uji fitokimia, Kromatografi Lapis Tipis (KLT).

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  adalah  negara  kepulauan terbesar  di  dunia.  Perairan  laut  yang  luas membentang,  menghubungkan  pulau-pulau tersebut.  Panjang  pantai  81.000  Km
atau14%  garis  pantai  seluruh  dunia,  di mana  2/3  wilayah  Indonesia  berupa perairan laut.Salah satu sumber daya hayati yang  cukup  potensial  dari  perairan  laut Indonesia  adalah  rumput  laut  dengan
berbagai  macam  jenisnya.  Penyebaran rumput  laut  terdapat  hampir  di  seluruh perairan  Indonesia.  Budidaya  rumput  laut telah  dilaksanakan,  antara  lain  di  Pulau Lombok,  Nusa  Tenggara  Barat  (NTB)  dan di  Pulau-pulau  Jawa  dan  Madura.  Rumput laut  merupakan  bagian  dari  tanaman perairan,  yang  termasuk  pada  kelas  makro alga (Costa, 2003).
Alga adalah biota laut yang umumnya  tumbuh  melekat  pada  substrat tertentu.  Alga  merah  merupakan  kelompok alga  yang  jenis-jenisnya  memiliki  berbagai bentuk  dan  variasi  warna.  Alga  merah Eucheumacottoni i ini banyak dibudidayakan  oleh  masyarakat  Indonesia. Salah  satud  aerah  yang  membudidayakan Eucheuma  cottonii adalah  di  Pantai Jumiang.  Pantai  ini  terletak  di  Dusun Jumiang, Desa Tanjung, Kecamatan
Pademawu, Kabupaten Pamekasan. Alga di pantai  ini  hanya  dibudidayakan  oleh masyarakat  sekitar,  tetapi  hampir  seluruh hasil produksinya yang jumlahnya mencapai  puluhan  ton  pertahun  di  ekspor dan  sebagian  besar  dijadikan  bahan makanan  (Nurhayati  dkk,  2006).  Penelitian ini  adalah  untuk  mencari  manfaat  lain  dari makro  alga Eucheuma  cottonii terutama  di bidang pengobatan sebagai senyawa antimikroba, antikanker dan pestisida.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  tingkat  toksisitas  ekstrak kasar  etanol  dan n -heksana  alga  merah ( Eucheuma  cottonii )  terhadap  larva  udang A.  salina  Leach dan  untuk  mengetahui golongan  senyawa  aktif  yang  terkandung dalam ekstrak kasar etanol  dan n -heksana alga merah ( Eucheuma cottonii ).

## II. METODE PENELITIAN ALAT DAN BAHAN
Alat  yang  digunakanadalah  pisau,
neraca analitik, cawan penguap, oven,desikator kaca vakum,nampan, blender,  spatula,  erlenmeyer  500  mL, aluminium foil, kertassaring, rotary evaporator ,  botolvial,  kaca  arloji,  aerator, labuukur  10  mL,  pipet  ukurmikro,  pipet tetes, sonikasi ,  gelaskimia,tabungreaksi,
raktabungreaksi, plat silika GF 254 , gelaskimia  50  mL,  bejanapengembang, pipakapilerdanlampu UV.
Bahan yang digunakan adalah Eucheuma  cottonii ,  telur  larva  udang Artemiasalina Leach,  larutan  ragi  roti,  dan air laut.
Sedangkan bahan kimia yang digunakan  adalah  etanol  96  %, n -heksana, DMSO,  asam  klorida  2  %,  metanol  50  %, kloroform,  asam  asetat,  asam  sulfat  pekat, logam Mg, asam klorida pekat, reagenDragendorf,  reagenMayer,  metanol, amoniak pekat, butanol, etil asetat, aquades, sikloheksana  dan  pereaksi  Liebermann- Burchard.

## PROSEDUR PENELITIAN Preparasi Sampel
Alga  merah Eucheuma  cottonii segar dicuci, dilakukan proses pengeringan dengan  cara  penjemuran.  Setelah  kering alga merah dihaluskan dengan cara digiling, kemudian diayak dengan ayakan 60 mesh.

## Analisis Kadar Air
Sebanyak 5 gram serbuk sampel pada cawan konstan dipanaskan dalam oven pada suhu  100-105 0 C  sekitar  15  menit.  Cawan disimpan  dalam  desikator  sekitar  10  menit selanjutnya ditimbang.
Dilakukan pengulangan  sampai  di  peroleh  berat konstan. Rumus kadar air:
% Kadar air : 𝑏−𝑐 𝑏−𝑎 x 100 %

## Ekstraksi Maserasi
Alga merah ditimbang sebanyak 60 g dan diekstraksi secara maserasi menggunakan  300  mL  pelarut  etanol kemudian dilakukan
pengocokan menggunakan shakker selama  3  jam, disaring dengan corong Buchner. Perlakuan yang  sama  dilakukan  dengan  mengunakan pelarut n -heksana.  Masing-masing  filtrat dipekatkan dengan rotary evaporator .
Ket: a = beratkonstancawankosong
b  =  beratcawan  +  sampel  sebelum dikerigkan
c  =  berat  konstan  cawan  +  sampel setelah dikeringkan

## Penetasan Telur
Sebanyak250 mL air laut dimasukkan dalam botol penetasan, dimasukkan 2,5 mg telur A.  salina Leach.  Selanjutnya  diaerasi dan  telur  akan  menetas  dalam  waktu  ±  48 jam  dan  siap  digunakan  sebagai  target  uji toksisitas.

## Uji Toksisitas
Perlakuanujitoksisitasdilakukanseban yak  3  kali  ulangan  pada  masing-masing ekstrak  sampel.    Botol  disiapkan  untuk pengujian, masing-masing ekstrak membutuhkan 5  botol dan  1 botol sebagai kontrol.    Ekstrak  kental  etanol  dan n - heksana ditimbang masing-masing sebanyak  100  mg  dan  dilarutkan  dalam masing-masing  pelarutnya  hingga  volume 10 mL untuk membuat larutan stok  10.000 ppm.   Dari  larutan stok tersebut kemudian dipipet masing-masing  sebanyak 25 μL, 50 μL, 100 μL, 150 μLdan  200 μL, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan pelarutnya diuapkan. Selanjutnya dimasukkan  100  μL  dimetil  sulfoksida, setetes  larutan  ragi  roti,  2  mL  air  laut, kemudian diaduk sampai ekstrak dapat larut dalam  air  laut.  Dimasukkan  10  ekor  larva udang Artemia salina Leach dan ditambahkan  air  laut  sampai  volumenya menjadi  10  mL,  sehingga  konsentrasinya masing-masing larutan menjadi 25, 50, 100, 150  dan  200  ppm.  Kemudian  larutan dipindahkan kedalam botol vial.
Kontrol digunakan sebagai pembanding  yang  dibuat  dengan  cara  yang sama  kecuali  penambahan  ekstrak,  yaitu dimasukkan  100  μL  dimetil  sulfoksida, setetes  larutan  ragi  roti,  2  mL  air  laut, kemudian  dikocok  sampai  ekstrak  dapat larut dalam air laut. Kemudian dimasukkan 10  ekor  larva  udang Artemia  salina Leach dan ditambahkan air laut sampai volumenya menjadi  10    mL.  Pengamatan  dilakukan setelah  24  jam  terhadap  kematian  larva udang. (Rita dkk, 2008).

## Uji Fitokimia dengan Reagen
Uji Alkaloid Ekstrakalga merah ( Eucheuma
Cottonii) dimasukkan  dalam  tabung  reaksi,
ditambah  0,5  mL  HCl  2  %  dan  larutan dibagi  dalam  dua  tabung.  Tabung  I ditambahkan  2-3  tetes  reagen  Dragendorff, tabung  II  ditambahkan  2-3  tetes  reagen Mayer.  Jika  tabung  I  terbentuk  endapan jingga  dan  pada  tabung  II  terbentuk endapan  kekuning-kuningan    menunjukkan adanya alkaloid.

## Uji Flavonoid
Ekstrak
algamerah( Eucheuma cottonii) dimasukkan  dalam  tabung  reaksi kemudian  dilarutkan  dalam  1–2  mL metanol  panas  50  %.  Setelah  itu  ditambah logam Mg dan 4–5 tetes HCl pekat. Larutan berwarna merah atau jingga yang terbentuk menunjukkan adanya flavonoid.

## Uji Triterpenoiddan Steroid
Ekstrak alga merah ( Eucheuma Cottonii) dimasukkan  dalam  tabung  reaksi, dilarutkan  dalam  0,5  mL  kloroformlalu ditambah  dengan  0,5  mL  asam  asetat anhidrat. Campuran ini selanjutnya ditambah  dengan  1–2  mL  asam  sulfatpekat melalui  dinding  tabung  tersebut.  Jika  hasil yang  diperoleh  berupa  cincin  kecoklatan atau  violet  pada  perbatasan  dua  pelarut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan  jika  terbentuk  warna  hijau kebiruan menunjukkan adanya steroid.

## PemisahanSenyawaAktif
Ekstrakpelarut yang positif uji fitokimia  dipisahkan  golongan  senyawanya menggunakan KLT Silika GF 254 .

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dibuat  dalam bentuk tabel dan grafik, kemudian dideskripsikan  hasilnya.  Tingkat  toksisitas larva udang A. salina Leach dapat diketahui dengan  melakukan  uji  LC50  menggunakan analisis  probit  pada  program  MINITAB  16 dengan tingkat kepercayaan 95 %.
Identifikasi golongan senyawa dilakukan  dengan  uji  fitokimia.  Data  dari pemisahan dianalisis secara deskriptif  yaitu dengan memperhatikan pola pemisahan dan kenampakan  noda  pada  kromatogram,  dari berbagai eluen yang digunakan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Preparasi Sampel Sampel basah yang diperoleh dikeringkan dengan cara penjemuran selama  7  hari.  Pengeringan  dimaksudkan untuk mengurangi jumlah air yang terkandung pada alga, menghentikan reaksi enzimatis, dan mencegah tumbuhnya jamur sehingga  dapat  disimpan  lebih  lama  dan tidak  mudah  rusak  sehingga  komposisi kimianya  tidak  mengalami  perubahan (Baraja, 2008). Sampel alga kering
berwarna coklat kehitaman.
Sampel  kering  dihaluskan  dengan cara  penggilingan  karena  alga  kering memiliki  tekstur  yang  keras.  Setelah digiling  sampel  diayak,  hal  ini  dilakukan bertujuan  agar  luas  permukaan  semakin besar sehingga interaksi zat cairan ekstraksi semakin besar. Serbuk dengan penghalusan yang tinggi kemungkinan sel-sel yang rusak juga semakin besar,
sehingga mempermudah  pengambilan  senyawa  aktif dari  alga  merah  oleh  bahan  pelarut (Octavia,  2009).  Serbuk  alga  merah  yang telah dihaluskan berwarna coklat.

## Analisis Kadar Air
Analisis  kadar  air  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  air  yang  terdapat dalam sampel. Prinsipnya adalah penentuan kadar air dengan proses penguapan air yang terdapat  pada  sampel  menggunakan  oven dengan  suhu  100−105 ο C  hingga  diperoleh berat  konstan.  Hasil  analisis  kadar  air  pada alga  merah  ( Eucheuma  cottonii )  kering adalah 6,399%.
Hasil  pengukuran  kadar  air  ini menunjukkan bahwa sampel yang dianalisis mempunyai  kadar  air  cukup  baik  untuk dilakukan  proses  ekstraksi  karena  semakin rendah  kadar  air  suatu  sampel  maka semakin  mudah  pelarut  untuk  mengekstrak
komponen  senyawa  aktif.  Sulistijowati (2001)  menyatakan  bahwa  kadar  air maksimum  yang  disyaratkan  agar  proses ekstraksi dapat berjalan lancar yaitu sebesar 11 %.

## EkstraksiMaserasi
Maserasi dilakukan dengan
menimbang  serbuk  sampel  sebanyak  60  g kemudian direndam dalam pelarutnya  yaitu etanol  96  %  dan n -heksana.  Pemilihan pelarut didasarkan pada tingkat kepolarannya.  Senyawa  yang  bersifat  polar hanya  dapat  larut  dalam  pelarut  polar  dan semipolar,  dan  sebaliknya,  senyawa  yang bersifat  nonpolar  hanya  dapat  larut  dalam pelarut  nonpolar  dan  semi  polar  yang dikenal  dengan  hukum “likedissolvelike” (Khopkar, 1990) .
Hasil  proses  ekstraksi  dapat  dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Hasil Proses maserasi
Pelarut Warna filtrat Warnaeks trakpekat Rend emen (%) (b/b) Etanol Hijau Coklat 1,13 n - heksana Kuning Hijau kecoklatan 0,78

## Uji Toksisitas
Larutan  uji  di  ambil  dari  larutan  stok 10.000  ppm  yaitu  dengan  mengambil  25 µL,  50  µL,  100  µL,  150  µL  dan  200  µL masing-masing  ekstrak  kedalam  labu  ukur 10  mL.  Selanjutnya  pelarut  masing-masing ekstrak  diuapkan  sampai  kering  dalam lemari  asam  agar  kematian  larva  tidak dipengaruhi oleh pelarutnya. Setelah pelarutnya  menguap,  ditambahkan  dengan 100  µL  surfaktan  dan  2  mL  air  laut, kemudian  dilarutkan  sampai  ekstrak  larut sempurna dengan bantuan sonikasi, surfaktan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah DMSO (dimetil-sulfoksida).
Meyer  (1982)  dalam  Farihah  (2008) melaporkan bahwa suatu ekstrak menunjukkan  aktivitas  ketoksikan  dalam BSLT  jika  ekstrak  dapat  menyebabkan kematian  50%  hewan  uji  pada  konsentrasi
kurang  dari  1000  ppm.  Pernyataan  diatas menunjukkan  kedua  ekstrak  alga  merah ( Eucheuma cottonii ) bersifat toksik terhadap Artemiasalina karena  memiliki nilai  LC 50 <  1000  ppm.  Berdasarkan analisis  probit  kedua  ekstrak,  yaitu  ekstrak etanol dan n -heksana masing-masing diperoleh  nilai  LC 50 yaitu  58,0128    ppm dan  61,7571  ppm.  Kandungan  senyawa yang  berpotensi  dalam  kedua  ekstrak tanaman  ini  dapat  diketahui  berdasarkan hasil uji fitokimia.

## Uji Fitokimia dengan Reagen
Uji  fitokimia  dilakukan  terhadap golongan  senyawa  alkaloid,  flavonoid  dan triterpenoid/steroid.  Kedua  ekstrak  etanol dan n -heksana  memiliki  sifat  toksik sehingga  pengujian  fitokimia  dilakukan terhadap kedua esktrak ini
Tabel 2. Hasil pengamatan uji fitokimia Golongan senyawa Ekstrak etanol Ekstrak n - heksana Alkaloid, meliputi  - Reagen Dragendroff  - Reagen Meyer - - - - Flavonoid - - Steroid - + Triterpenoid + -
Keterangan:
tanda+  :  terkandung  senyawa/terbentuk warna
tanda  -  :  tidak  terkandung  senyawa/tidak terbentuk warna Hasil identifikasi senyawa aktif berdasarkan  uji  fitokimia  pada  masing- masing ekstrak ditunjukkan adanya golongan senyawa triterpenoid pada ekstrak etanol dan steroid pada ekstrak n -heksana.
Ekstrak
etanol E. cottonii menunjukkan  adanya  senyawa  triterpenoid karena  terbentuk  cincin  coklat  setelah ditetesi  asam  sulfat  pekat  melalui  dinding tabung reaksi (Robinson, 1995). Senyawaan triterpenoid  yang  memiliki  gugus  –OH menyebabkan sifatnya menjadi polar, sehingga  dapat  terekstrak  dalam  pelarut
etanol (polar). Harborne (1987)
menyebutkan  bahwa  senyawa  triterpenoid dapat  diekstraksi  menggunakan  metanol panas.  Metanol  bersifat  polar  memiliki konstanta  dielektrikum  33,6,  sedangkan etanol  juga  bersifat  polar  dengan  konstanta dielektrikum  24,3  (Sudarmadjidkk,  2003). Berdasarkan  pendekatan  tingkat  kepolaran kedua  pelarut  ini  maka  triterpenoid  dapat terlarut  dalam  pelarut  etanol.  Anhidrida asetat  akan  bereaksi  dengan  atom  O  pada gugus  –OH  yang  ada  pada  senyawa triterpenoid. Reaksi yang terjadi merupakan reaksi  esterifikasi,  dimana  senyawa  ester dan  asam  karboksilat  dibentuk  oleh senyawa  triterpenoid  dengan  anhidrida asetat.
Steroid  merupakan  golongan  lipid yang  diturunkan  dari  senyawa  jenuh  yang dinamakan  siklopentanoperhidrofenantrena, yang  memiliki  inti  dengan  3  cincin sikloheksana terpadu dan 1 cincin siklopentana  yang  tergabung  pada  ujung cincin  sikloheksana  tersebut.  Beberapa turunan  steroid  yang  penting  ialah  steroid alkohol  atau  sterol.  Steroid  lain  antara  lain asam-asam empedu, hormon seks (androgen  dan  estrogen)  dan  hormon kortikosteroid  (Poedjiadi,  1994).  Senyawa steroid  terdapat  dalam  setiap  makhluk hidup.  Steroid  yang  ditemukan  dalam jaringan tumbuhan disebut fitosterol, sedangkan  yang  ditemukan  dalam  jaringan hewan disebut kolesterol. Beberapa senyawa  ini  jika  terdapat  dalam  tumbuhan akan  dapat  berperan  menjadi  pelindung. Senyawa  ini  tidak  hanya  bekerja  menolak beberapa  serangga  tetapi  juga  menarik beberapa serangga lain (Robinson, 1995).

## Uji Fitokimia dengan KLT Triterpenoid
Hasil identifikasi dengan KLT golongan  senyawa  triterpenoid dalam ekstrak  etanol  dengan  eluen n -heksana:etil asetat  (7:3)  dengan  pereaksi  penyemprot reagenLiebermann-Burchard.
(a) (b)             (c) (d) Gambar 1. Hasil KLT senyawa triterpenoid pada  ekstrak  etanol;  (a)  hasil pengamatan  di  bawah  sinar  UV pada  λ  366  nm  sebelum
disemprot reagenLieberman- Burchard;  (b)  ilustrasi  gambar  a; (c)  hasil  pengamatan  di  bawah sinar  UV  pada  λ  366  nm  setelah disemprot reagenLieberman- Burchard; (d) ilustrasi gambar c. Tabel  3.  Hasil  KLT  senyawa  triterpenoid pada ekstrak etanol No Rf tiap noda Warna  noda  di  bawah  sinar UV pada λ 366 nm Sebelum disemprot reagen Liebermann- Burchard Setelah disemprot reagen Liebermann- Burchard 1 0,33 Merah Merah keunguan 2 0,36 Merah Merah keunguan 3 0,39 Merah Merah keunguan 4 0,48 Ungu Ungu tua 5 0,56 Ungu Ungu tua 6 0,65 - Ungu muda 7 0,74 - Ungu muda
Golongan  senyawa  triterpenoid  hasil KLT  setelah  disemprot  dengan  reagen Lieberman-Burchard  ditunjukkan  dengan terbentuknya  bercak  noda  berwarna  merah ungu (violet) (Listiani dkk., 2005), ungu tua (Bawa,  2009),  merah  keunguan  dan kecoklatan (Halimah, 2010).

## Steroid
Hasil identifikasi dengan KLT golongan senyawa steroid dalam ekstrak n - heksana  dengan  eluen n -heksana:etil  asetat (17:3)  yang  disemprot  dengan  pereaksi Lieberman-Burchardmenunjukkan terbentuknya 8 noda yang terpisah di bawah sinar UV pada panjang gelombang 366 nm. Hasil  KLT  dari  pemisahan  steroid  ekstrak kloroform  ini  dapat  ditunjukkan  pada Gambar 2 dan Tabel 4.
(a) (b)            (c)                 (d)
Gambar 2. Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak n -heksana;  (a)  hasil pengamatan  di  bawah  sinar  UV pada  λ  366  nm  sebelum disemprot reagenLieberman- Burchard;  (b)  ilustrasi  gambar  a; (c)  hasil  pengamatan  di  bawah sinar  UV  pada  λ  366  nm  setelah disemprot reagenLieberman- Burchard; (d) ilustrasi gambar c. Tabel  4.4  Hasil  KLT  senyawa  steroid  pada ekstrak n -heksana
No Rf tiap noda Warna  noda  di  bawah  sinar UV pada λ 366 nm Sebelum disemprot reagen Liebermann- Burchard Setelah disemprot reagen Liebermann- Burchard 1 0,02 Oranye Hijau 2 0,08 Oranye Oranye 3 0,13 Merah muda Merah muda 4 0,17 Merah muda Merah muda 5 0,22 Merah Merah 6 0,23 Merah Merah 7 0,31 Ungu Ungu 8 0.36 Biru Biru kehijauan
8 7 6 5 4 3 2 1 8 7 6 5 4 3 2 1 5 4 3 2 1 3 5 4 2 1 6 7
Golongan  senyawa  steroid  hasil  KLT setelah disemprot dengan reagenLieberman-Burchard
ditunjukkan dengan terbentuknya bercak noda berwarna hijau  (Handayani,  2008),  hijau  terang sampai  hijau  kecoklatan  (Halimah,  2010), biru  (Kristanti,  2008).  Dari  tabel  diatas diketahui bahwa ada dua bercak yang dapat diasumsikan sebagai senyawa steroid.

## IV. KESIMPULAN
1. Masing-masingekstrak alga merah
( Eucheuma  cottonii )  memiliki  tingkat toksisitas  yang  cukup  tinggi  terhadap larva  udang Artemia  salina Leach, ditunjukkan  dengan  nilai  LC 50 <  1000 ppm.  Ekstrak  etanol  dengan  nilai  LC 50 sebesar 58,0128 ppm dan 61,7571 ppm untuk ekstrak n -heksana.
2. Kandungan  golongan  senyawa  aktif yang  terkandung  dalam  ekstrak  alga merah (E.  cottonii) yaitu  golongan senyawa  triterpenoid  dalam  ekstrak etanol  dan  steroid  dalam  ekstrak n - heksana.

## V. DAFTAR PUSTAKA
Baraja,  M.  2008.  Uji  Toksisitas  Ekstrak Daun Ficuselastica Noisex  Blume terhadap Artemia  salina Leach  dan
Profil  Kromatografi  Lapis  Tipis. Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Bawa, IG. A. G., Putra, B. A. A., danLaila, I.  R.  2007.  Penentuan  pH  Optimum Isolasi  Karaginan  dari  Rumput  Laut Jenis Eucheuma cottonii . Jurnal Kimia 1 (1) : 15-20.
Costa,  M.  2003.  Potential  Hazard  of
Hexavalent Chromate in Our
Drinking  Water,  Toxicol.  Appl.
Pharmacol., 188 : 1-5.
Farihah. 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Daun Ficusbenjamina  L terhadap Artemia salina Leach dan Profil Kromatografi
Lapis  Tipis. Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halimah,  N.  2010. Uji  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Tanaman  Anting- Anting (Acalypha indica L. )Terhadap Larva Udang Artemia salina L. Tugas Akhir  Tidak  Diterbitkan.  Malang: UIN Maulana Malik Ibrahim Malang. Handayani  D.,  N.  SayutidanDachriyanus.
2008 . Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Anti bakteri Epidioksi Sterol dari Spon Laut Petrosianigrans , Asal Sumatera  Barat .  Prosiding  Seminar Nasional  Sains  dan  Teknologi-  II 2008 . Lampung: Universitas Lampung Harborne,  J.B.  1987. MetodeFitokimia . diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata  dan  Iwang  Sudiro, Terbitan  II,  5-9,  147-155.  Bandung: Institut Teknologi Bandung
Khopkar,  S.M.  1990. Konsep  Dasar  Kimia Analitik . Jakarta: Penerbit UI-Press. Kristanti,  A.V,  Aminah,  N.S,  Tanjung,  M.,
Kurniadi,  B.  2008. Buku  Ajar Fitokimia . Airlangga University Press. Surabaya Listiani, L., I. FidriannydanSukrasno. 2005. Telaah  Kandungan  Kimia  Daun Kucai ( Allium schoenoprasum L., Liliaceae).  Bandung: Jurnal  Sekolah Farmasi ITB . http://bahan- alam.fa.itb.ac.id. Diaksestanggal  25
Desember 2012.
Nurhayati,  A.  P.  D.,  Nurlita  A.,  dan Rachmat  F.  2006.  Uji  Toksisitas
Ekstrak Eucheuma alvarezii Terhadap Artemia salina Sebagai Studi Pendahuluan Potensi Antikanker. Jurnal Akta  Kimindo  Vol.  2  No.  1 Hal. 41-46 Octavia, D,R. 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal Ekstrak Petroleum Eter, Etil Asetat dan Etanol Daun  Binahong (Anredera  Corfolia
(Tenore)    Steen) dengan  metode
DPPH    (2,2-difenil-1-  pikrihidrasil.). Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhamadiyah Poedjiadi, A. 1994. Dasar-Dasar Biokimia.
Jakarta: UI Press
Rita,  W.  S.,  I.  W.  Suirtadan  A.  Sabirin.
2008. Isolasi dan Identifikasi Senyawa  yang  Berpotensi  Sebagai Antitumor  pada  Daging  Buah    Pare (Momordicacarantia L) . Bukit Jimbaran:  Jurusan  Kimia  FMIPA
Universitas  Udayana.  Jurnal  Kimia 2(1). ISSN 1907-9850: 1-6. Robinson,  T.  1995. Kandungan  Senyawa Organik Tumbuhan Tinggi . Diterjemahkan oleh  Prof.Dr.Kosasih Padmawinata, Bandung: ITB. Sudarmadji, S., B. HaryonodanSuhardi.2007. Prosedur Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Yogyakarta: Liberty. Sulistijowati, S dan D. Gunawan.2001. Efek Ekstrak Daun Kembang Bulan (Tithoniadifersifolia A. Gray) Terhadap Candicaalbicans Serta Profil Kromatografinya . Jakarta: Pusat  Penelitian  Dan  Pengembangan Kesehatan.