UJI SENSITIFITAS SARI BUAH PARE ( Momordica charantia L ) PADA BAKTERI Edwardsiella tarda DENGAN METODE DIFUSI KERTAS CAKRAM SECARA IN VITRO
SENSITIVITY TEST OF FRUIT BITTER MELON JUICE ( Momordica charantia L) ON BACTERIA Edwardsiella tarda WITH PAPER DISC DIFFUSION METHOD IN VITRO
Sudarno, Selvi Lely Rosanti  dan Sri Subekti
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
One of the problems encountered in fish farming is the disease attack. The attack of disease that was caused by bacteria is a problem that often occur in aquaculture. Traditional medicine is more readily accepted  by  communities  because  is  cheap  and  easily  available,  have  been  quite  familiar  with  the community.  There  were  various  kind  of  traditional  medicine  and  has  been  widely  studied  chemically content and usefulness. Therefore there were still many plants unknown levels of toxicity, therefore need further study.
Bacteria E.  tarda spread  in  some  countries  such  as  Europe,  Japan,  Taiwan,  Thailand,  United States, Singapore, and Malaysia. While in Indonesia E. tarda were found in Java, Sumatra, and Borneo. The  aim  of  the  research  is  to  know the  capabilities  of  the  inhibition  zone  of  fruit  bitter  melon power against the bacteria E. tarda in vitro and knowing whether fruit bitter melon effective in inhibiting the growth of the bacteria E. tarda with gold standard comparator antibiotics Tetracycline. The research was conducted on February 2011 in Bacteriology and Microbiology,  laboratory in Fish  Quarantine  Juanda  Sidoarjo  district  of  East  Java.  The  method  used  in  this  research  is  descriptive method  that  was  done  in  vitro  by  using  sensitivity  test  of  diffusion  method  with  the  determination  of inhibition zone by comparing with antibiotic inhibition zones.
The  results  showed  that  bitter  melon  juice  has  a  bacterial  growth  inhibition  against E . tarda , although when was compared with gold standard antibiotic tetracycline shared considered less sensitive. Observations  showed  clear  zone  of  bitter  melon  fruit  juice  shared  with  a  diameter  of  13.3mm,  was compared with standard antibiotic tetracycline can inhibit with a minimum diameter of 15mm. Sensitivity test  of  bitter  melon  fruit  juice  will  be  classified  as  not  susceptible  to  the  bacteria  therefore  is  able  to inhibit E. tarda..
Keywords : Edwardsiella tarda , Momordica charantia L.,  Antibiotic Tetracycline

## Pendahuluan
Salah  satu  kendala yang  sering dihadapi  dalam  budidaya  ikan  adalah  serangan penyakit.  Serangan  penyakit  yang  disebabkan oleh  bakteri  merupakan  suatu  kendala  yang sering  terjadi  dalam  budidaya  perikanan. Masyarakat  Indonesia  telah  lama  mengenal serta menggunakan obat-obatan alami atau yang dikenal dengan obat tradisional. Obat tradisional lebih  mudah  diterima  oleh  masyarakat  karena selain  murah  dan  mudah  didapat,telah  cukup akrab  dengan  masyarakat.  Terdapat  berbagai macam  obat  tradisional  yang  berasal  dari tanaman  dan  telah  banyak  diteliti  kandungan kimia  dan  khasiat  yang  berada  di  dalamnya. Namun  masih  banyak  tanaman  yang  belum diketahui  kadar  toksisitasnya,  sehingga  perlu diteliti lebih lanjut (Hyeronimus, 2006).
Buah  Pare  mudah  sekali  didapatkan hampir  di  seluruh  Indonesia.  Masyarakat
Indonesia  telah  sejak  lama  menggunakan  buah pare sebagai hidangan sehari-hari dan juga telah lama  dipercaya  dan  dipergunakan  sebagai  obat tradisional  untuk  mengobati  berbagai  macam penyakit.  Hal  inilah  yang  mengundang  banyak penelitian  mengenai  buah  pare  mulai  dari kandungan  kimia  yang  ada  didalamnya  sampai manfaat  atau  khasiat  yang  dapat  diperoleh  dari buah pare itu sendiri (Subahar, 2004).
Senyawa  yang  terdapat  dalam  buah pare  ( M.  charantia L.)  meliputi  :  alkaloid, flavonoid,  polifenol,  steroid/triterpenoid  (Chan, et al. , 1984; Rivera, 1941). Mekanisme aktivitas biologis  oleh  senyawa  flavonoid  pada  pare berbeda  dengan  yang  dilakukan  oleh  senyawa alkaloid,  dimana  senyawa  flavonoid  dalam merusak  sel  bakteri  memanfaatkan  perbedaan kepolaran  antara  lipid  penyusun  sel  bakteri dengan  gugus  alkohol  pada  senyawa  flavonoid.
Sedangkan pada senyawa alkaloid
memanfaatkan  sifat  reaktif  gugus  basa  pada senyawa  alkaloid  untuk  bereaksi  dengan  gugus asam  amino  pada  sel  bakteri E.  tarda (Robinson, 1995).
E. tarda merupakan penyebab penyakit bakteri  yang  paling  serius  pada  budidaya  ikan sidat  di  Taiwan  dan  Jepang,  sedangkan E. ictaluri pada  akhir  tahun  1980  dilaporkan  telah menyebabkan  kernatian  masal  (lebih  dari  50%) anak  ikan  dan  induk  ikan  lele  Amerika  di  AS. Kerugian  yang  ditimbulkan  mencapai  puluhan juta dolar atau puluhan milyar rupiah. Beberapa sampel  yang  ditemukan  pada  saat  dilakukan pemantauan  HPIK  menunjukkan  haemorrhage pada  beberapa  bagian  permukaan  tubuh  dan sirip  dari  sampel-sampel  yang  sakit.  Dari  hasil pemeriksaan sampel pemantauan HPIK diketahui  bahwa  sampel  terserang  bakteri E.
tarda (Karantina Ikan, 2007).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui kemampuan zona hambat daya Sari Buah  Pare  terhadap  bakteri E.  tarda secara in vitro dan  mengetahui  apakah  Sari  Buah  Pare efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri E.  tarda dengan  standar  pembanding  antibiotik Tetracycline.
Penelitian  ini  diharapkan  dapat memberikan informasi tentang kemampuan Sari Buah  Pare  dalam  menghambat  bakteri E.  tarda secara in vitro.

## Metodologi
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Bakteriologi  Balai  Karantina  Ikan    Juanda kecamatan  Semambung  kabupaten  Sidoarjo Jawa  Timur  pada  bulan  Februari  2011.  Bahan yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  buah pare  gajih  yang  diperoleh  dari  pasar-pasar
Tradisional atau Swalayan, bakteri Edwardsiella  tarda yang  diperoleh  dari  Balai Karantina Ikan Juanda, aquades steril, Trypticase  Soya  Agar (TSA), kertas  saring, kertas  cakram,  Antibiotik Tetracycline 30µm, bahan untuk uji biokimia (TSIA, urea, simmons citrate agar, O/F, MR/VP, gula-gula, LIA). Alat yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah tabung  erlenmeyer,  petri  dish,  tabung  reaksi, cawan  petri,  rak,  mikropipet,  paper  disk,  jarum ose, Spatel bengkok,  inkubator, autoclave , pembakar  bunsen,  kapas,  dan blender ,  corong dan vortex, mikroskop, object glass , penggaris . Prosedur  kerja  dari  penelitian  ini  yaitu melakukan  persiapan  alat  dan  bahan  untuk kemudian di sterilisasi,
kemudian mempersiapkan larutan sari buah pare
( Momordica  charantia L.)  dengan  berbagai konsentrasi dan tiap-tiap konsentrasi
dimasukkan  paper  disk  untuk  direndam  sampai
jenuh.  Setelah  itu  mempersiapkan  suspensi bakteri E.  tarda yang  telah  disetarakan  dengan kepadatan bakteri 10 8 CFU/ml dan ditanam pada media  TSA  ( Tryptone  Soy  Agar )  sebanyak  0,2 ml.  Kemudian  paper  disk  ditempelkan  pada media  dan  sebagai  kontrol  pada  media ditempelkan antibiotika disk Tetracycline 30 µg. Setelah itu diinkubasi dan diukur diameter zona hambat yang  terbentuk  untuk  kemudian dibandingkan  dengan  standar  umum  antibiotika Tetracycline 30 µg.

## Hasil dan Pembahasan
Identifikasi  bakteri  dilakukan  untuk memastikan  suatu  kebenaran  bakteri E.  tarda yang  diperoleh  dari  Balai  Karantina  Ikan Juanda. Metode yang digunakan untuk identifikasi  bakteri  yaitu,  melalui  pengamatan morfologi koloni bakteri dan pengamatan secara mikroskopik  menggunakan  pewarnaan  gram serta  pengujian  sifat  biokimia  dari  bakteri E. tarda.
Pada  penelitian  ini  hasil  penentuan zona  hambat  yang  diperoleh  bahwa  sari  buah pare (Momordica  charantia L ) mempunyai aktivitas  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.
tarda dilakukan dengan cara mengukur besarnya  zona  terang  dengan  menggunakan penggaris. Menurut Wibowo (2002), pengukuran zona hambat dilakukan dengan cara mengukur  secara  garis  lurus  tengah  zona hambat  (diukur  dari  tepi  sampai  tepi  zona hambat yang terbentuk).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa sari  buah  pare  ( Momordica  charantia  L ) mempunyai  daya  hambat  terhadap  petumbuhan bakteri E. tarda tetapi jika dibandingkan dengan standar  antibiotika  tetracycline  30µm  masih dikategorikan  kurang  peka . Hasil  pengamatan zona  terang  menunjukan  sari  buah  pare  hanya mampu  menghambat  dengan  diameter    13,3 mm.  Hal  ini  disebabkan  sebagai  pembanding standar antibiotika tetracycline mampu menghambat  dengan  minimal  diameter  15mm. Uji  sensitifitas  sari  buah  pare  tergolong  tidak peka  akan  tetapi  mampu  menghambat  terhadap bakteri E.  tarda dikarenakan,  sari  buah  pare yang  terdapat  kandungan  antibakteri  itu  sendiri berbeda dengan ekstrak.
Uji sensitifitas sari buah pare tergolong tidak  peka  akan  tetapi  mampu  menghambat terhadap  bakteri E.  tarda hasil  pegamatan  zona terang  menunjukakn  sari  buah  pare  hanya mampu  menghambat dengan diameter 13,3mm, pembanding  antibiotik  Tetracycline  30µm mampu  menghambat  dengan  diameter  15mm. Sari  buah  pare  yang  terdapat  kandungan antibakteri  itu  sendiri  berbeda  dengan  ekstrak,
kemungkinan  pada  saat  di blender kandungan antibakteri  yang  terdapat  pada  pare  tidak  dapat larut  dalam  air  sehingga  zona  hambat  yang didapatkan tidak cukup maksimal.
Hasil pengamatan terdapat zona hambat pada pemberian sari buah pare terhadap E.  tarda tetapi  tidak  melebihi  zona  hambat antibiotika  Tetracycline  30µm.  Oleh  karena  itu dalam  upaya  menghambat  pertumbuhan  bakteri diperlukan  juga  dengan  ekstraksi  sehingga kandungan  antibakteri  dapat  diperoleh  secara maksimal (Volk and Wheeler, 1993).

## Kesimpulan
Sari  buah  pare  memiliki  zona  hambat terhadap  bakteri E.  tarda. Sari  buah  pare memiliki  zona  hambat  tertinggi  13,3mm  yang tidak   melebihi antibiotik tetracycline 15mm.
Perlu  dilakukannya  penelitian  lebih lanjut  dengan  cara  ekstraksi.  Sehingga  bisa didapatkan  hasil  yang  lebih  maksimal  dalam mendapatkan kandungan antibakteri yang diperoleh dari pare tersebut.

## Daftar Pustaka
Hyeronimus  SB,  2006.  Ragam  dan  Khasiat Tanaman  Obat.  1st  ed.  Jakarta:  Agro Media;. Karantina  ikan.  2007.  Laporan  Pemantauan HPI/HPIK  karantina  ikan  Batam  tahun 2007. http://114.31.243.67/upt/batam/ doc/pantau2007.pdf.  diakses  pada  tgl  2 maret 2011.
Rivera,  G.  1941.  Preminary  Chemical  and Pharmacological  Studies  on  “cunde amor” Momordica  charantia L.  (I)  Am.
J. Pharm. 113 (7) : 281-297
Robinson,  T.  1995.  Kandungan  tinggi  bahan organik  tinggi.  Bandung:  ITB.  Hal  71-
72.
Subahar  TS.  2004.  Khasiat  dan  Manfaat  Pare.
Penerbit Agromedia Pustaka, Jakarta.
Volk, W.A., M.F. Wheeler. 1993. Mikrobiologi
Dasar  edisi  kelima  Jilid  1  Terjemahan Markham. Erlangga. Jakarta.
Wibowo,  M.  S.  2002.  Penetapan  potensi antibiotic secara mikrobiologi. School of pharmacy. ITB. Bandung.