## ABSTRAK
Hati merupakan salah satu organ vital manusia yang memiliki peranan penting dalam tubuh namun juga rentan terhadap agen-agen yang dapat merusak jaringan hati atau disebut juga sebagai hepatotoksin. Alkohol yang dikonsumsi akan dinetralkan dihati, yang menyebabkan perlemakan serta sikrosis pada jaringan hati melalui beberapa mekanisme seperti melalui induksi enzim dan radikal bebas sehingga muncul stress oksidatif yang ditandai dengan meningkatnya lipid peroksidase dan menurunnya kadar glutation hati. Daun kenikir (Cosmos caudatus K) mengandung senyawa yang memiliki daya antioksidan cukup tinggi dengan IC50 sebesar 70 mg/L. Daun kenikir (Cosmos caudatus K) merupakan salah satu tanaman yang memiliki efek hepatoprotektor. Penelitian dilakukan dengan menginduksi alkohol sebagai agen hepatotoksik. Penelitian bertujuan untuk mengetahui aktivitas hepatoprotekstor dan antioksidan fraksi  etil  daun  kenikir  (Cosmos  caudatus  K)  pada  tikus  jantan  galur  wistar  yang  diinduksi  alkohol. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu dengan melakukan uji praklinis dengan menginduksi alkohol  pada  tikus  jantan.  Penelitian  ini  menggunakan  30  tikus  jantan,  umur  2-3  bulan  yang  dibagi secara acak menjadi enam kelompok. Kelompok I sebagai kontrol normal diberi aquadest, kelompok II sebagai kontrol negatif diberi CMC Na 1%, kelompok III sebagai kontrol positif diberi kurkumin 100 mg/ KgBB, kelompok IV sampai VI diberi fraksi etyl asetat daun kenikir berturut-turut sebanyak 281,25mg/ kgBB,  562,5mg/kgBB,  dan  1.125mg/kgBB.  Fraksi  etil  asetat  daun  kenikir  terbukti  memiliki  aktivitas hepatoprotektor, mampu menghambat kenaikan kadar SGPT, SGOT, LPO dan mampu menaikkan kadar GSH tikus putih galur wistar yang diinduksi alkohol.
Kata kunci : kenikir, Cosmos caudatus K., alkohol, antioksidan, hepatoprotektor

## ABSTRACT
The liver is one of the vital human organs which have an important role in the body but also susceptible to agents that can damage the liver tissue or also called as hepatotoxins . Alcohol consumed will be neutralized hearts , that cause fatty liver and sikrosis on the network through several mechanisms such as  through  the  induction  of  enzymes  and  free  radicals  that  appear  oxidative  stress  characterized  by increased lipid peroxidation and decreased levels of liver glutathione . Research shows leaves marigolds (  Cosmos  caudatus  K  )  contains  compounds  that  have  antioxidant  power  is  high  enough  to  IC50  of 70 mg / L . Leaves of marigolds ( Cosmos caudatus K ) is a plant that has a hepatoprotective effect .  Research  carried  out  by  inducing  alcohol  as  hepatotoxic  agent  .  This  study  aims  to  determine  the fraction of the antioxidant activity and ethyl hepatoprotekstor leaves marigolds ( Cosmos caudatus K ) in male rats wistar strain induced by alcohol .The method used in this research is to conduct preclinical testing with alcohol induced in male rats . This study used 30 male rats , aged 2-3 months who were randomly divided into six groups. I as normal control group were given distilled water , group II as a

## UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR DAN ANTIOKSIDAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN
KENIKIR ( Cosmos caudatus K) PADA TIKUS JANTAN

## GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI ALKOHOL
Ifanerose Melinda Nofanni 1) , Dwi Ruqoyah 2)
1, 2 Akademi Farmasi Nasional Surakarta ifanerosemn@gmail..com ; ruqoyah22@gmail.com
negative control were given CMC Na 1 % , group III as positive controls were given 100 mg of curcumin / KgBW , Group IV to VI given etyl acetate fraction consecutive marigolds leaves much 281,25mg / kg , 562,5mg / kg and 1.125mg / kg . 0,05 ) . Hepatoprotective activity was analyzed by measuring oxidative parameters Glutathione ( GSH ) and lipid peroxidation ( LPO ) in-vivo Ethyl acetate fraction leaves marigolds shown to have hepatoprotective activity , capable of inhibiting the increase in the levels of ALT , AST , LPO and GSH levels were able to raise the Wistar rat strain induced by alcohol
Keywords : marigolds , Cosmos caudatus K. , alcohol , antioxidant, hepatoprotective

## VHQ\DZD ÀDYRQRLG \DQJ EHUSHUDQ VHEDJDL
antioksidan.  Uji  aktivitas  antioksidan  dengan metode penangkapan radikal DPPH ( 2,2-difenil- 1-pikrilhidrazil )  menunjukkan  ekstrak  etanol PHPLOLNL ,&  ȝJP/ 1XUKDHQL 2012) dan fraksi etil asetat memiliki IC50 14,229

## ȝJP/.XUQLDVLK
Berdasarkan  penggunaan  empiris  dan penelitian  yang  telah  dilakukan,  mendorong peneliti  untuk  melakukan  penelitian  dengan tujuan  mengetahui  apakah  fraksi  etil  asetat daun  kenikir  memiliki  efek  hepatoprotektor dan  antioksidan  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar  yang  diinduksi  alkohol  dan  mengetahui dosis  optimal  fraksi  etil  asetat  daun  kenikir ( Cosmos  caudatus K.)  dalam  memberikan  efek hepatoprotektor dan antioksidan.

## 2.   METODE PENELITIAN

## Alat dan bahan
Daun  kenikir,  alkohol  70%,  aquades,  n-heksan, etil asetat, Na CMC, kurkumin, rotary evaporator, waterbath  corong  pisah,  Spektrofotometri  Uv Vis,  lempeng  selulosa,  standar  quercetin,  Tris, SDS,  TBA,  TCA,  asam  asetat,  Reagen  SGPT dialys kecil, Reagen SGOT dialys kecil,

## Cara Kerja
a.  Preparasi Sampel
Pembuatan  fraksi  etil  asetat  daun  kenikir dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 2  kg  simplisia  kering  dihaluskan.  Serbuk kering  yang  diperoleh  diayak  dengan mess  60.  Hasil  ayakan  di  ekstraksi  dengan menggunakan  metode  maserasi  dengan etanol 70% (15L) dalam bejana tertutup dan dibiarkan  selama  5  hari  dengan  dilakukan pengadukan  sesekali.  Setelah  5  hari  isi bejana  disaring  kemudian ¿OWUDW diuapkan

## 1.  PENDAHULUAN
Penyalahgunaan  alkohol  sebagai  minuman saat  ini  sangat  meningkat  di  masyarakat. Penggunaan alkohol terutama secara kronis dapat menimbulkan  kerusakan  jaringan  hati  melalui beberapa  mekanisme  seperti  melalui  induksi enzim  dan  radikal  bebas.  Reaksi  antara  etanol dengan  H 2 O 2 dan  radikal  reaktif  spesies  yang lain akan menghasilkan radikal hidroksietil yang merupakan  oksidan  kuat.  Radikal  hidroksietil tersebut  dapat  mengoksidasi  lipid  dan  rotein sel  hepar  sehingga  terjadi  kerusakan  jaringan hepar  (Chamultirat et  al., 1998).  Hati  adalah organ  yang  menjadi  target  utama  dampak toksisitas  etanol,  telah  dibuktikan  melalui penelitian,  pengonsumsian  etanol  yang  kronis dapat  meningkatkan  kadar  peroxidation  lipid dan  penurunan  antioksidan  seperti glutathione (GSH) (Diaz et al., 2002) dan penggunaan etanol yang berlebih memiliki sifat radikal bebas yang dapat  meningkatkan  kadar  SGPT  dan  SGOT (Bakry  F,  2007). Metabolisme  alkohol  melalui usus akan meningkatkan permebilitas usus yang efeknya  dapat  menyebabkan  endotoksemia (Bakry,  2007). Akibat  terjadinya  endotoksemia akan  mengaktivasi  sel  Kuppfer  yang  akan mengaktifkan nuclear  factor (TNFalfa)  yang EHUSHUDQ WHUKDGDS QHNURVLV GDQ LQÀDPDVL SDGD hepar (Bakry, 2007).
Penelitian  Novianto  dan  Hartono  (2013), fraksi etil asetat daun kenikir pada dosis 1125 mg/ kg BB terbukti secara optimal memiliki aktivitas sebagai hepatoprotektor yang ditunjukan dengan kemampuan  untuk  menurunkan  kadar  SGPT dan SGOT, selain itu kenikir dapat menurunkan kadar  peroxidation  lipid  dan  meningkatkan kadar  catalase  pada  tikus  yang  diinduksi paracetamol.  Abas et  al., (2003)  menyatakan bahwa  dalam  ekstrak  metanol  kenikir  terdapat

## Jurnal KesMaDaSka - Juli 2016
di atas rotary evaporator hingga didapatkan ekstrak dengan bobot konstan.
Pembuatan  fraksi  etil  asetat  kenikir  yaitu dengan  ekstrak  kental  etanol  disuspensikan dalam  aquades  panas  sebanyak  30  ml,  ke- mudian difraksinasi sebanyak 2 kali dengan heksan (@15 ml), kemudian didapatkan dua fase yaitu fase air dan fase heksan. Fase air hasil  proses  fraksinasi  selanjutnya  difraksi- nasi dengan menggunakan pelarut etil asetat sebanyak  2  kali  (@15  ml)  dan  didapatkan dua  fase,  yaitu  fase  air  dan  fase  etil  asetat, selanjutnya fase etil asetat dipekatkan.
b.  Reaksi Pendahuluan Reaksi  pendahuluan  dilakukan  untuk  me-

## QJHWDKXL DSDNDK DGD VHQ\DZD ÀDYRQRLG
dalam  fraksi  sebelum  dilakukan  uji  KLT. Reaksi  pendahuluan  yang  dilakukan  yaitu

## VKLQRGDWHVWUHDNVLXQWXNÀDYRQRLGGHQJDQ
Mg + HCl, FeCl 3 GDQ1D2++DVLOXMLÀD - vonoid  dari  fraksi  yang  diperoleh  menun- jukkan  bahwa  fraksi  mengandung  senyawa ÀDYRQRLGGHQJDQLQGLNDVLSHUXEDKDQZDUQD VHWHODK SHQDPEDKDQ SHUHDNVL ,GHQWL¿NDVL
KLT dilakukan untuk mengetahui golongan VHQ\DZD ÀDYRQRLG \DQJ WHUNDQGXQJ GDODP IUDNVL .URPDWRJUD¿ ODSLV WLSLV GLODNXNDQ dengan  menotolkan  sampel  menggunakan mikro  pipet  pada  fase  diam  lempeng  KLT silica  gel  dengan  eluen  pengembang  fase atas  n-butanol:  asam  asetat:  air  (4:1:5). Pengembangan dilakukan dalam bejana jen- uh uap eluen dan tertutup rapat agar proses elusi  dapat  terjadi  dengan  cepat  dan  untuk menghindari penguapan pelarut.
c.  Uji Efek Hepatoprotektor Sebanyak  30  ekor  tikus  dibagi  secara  acak menjadi  6  kelompok.  Kelompok  I  sebagai kontrol  normal  diberi  aquadest,  kelompok II  sebagai  kontrol  negatif  diberi  alkohol 30%  1.5ml  dengan  dosis  pemberian  2  kali sehari, kelompok III sebagai kontrol positif diberi kurkumin 100 mg/Kg BB, kelompok IV  sampai  VI  diberi  fraksi  etil  asetat  daun kenikir  berturut-turut  sebanyak  281,25mg/ kgBB,  562,5mg/kgBB,  dan  1125mg/kgBB. Semua kelompok hewan uji diinduksi alkohol 30%  (1.5ml)  scara  per  oral  2  kali  sehari
selama  15  hari,  kecuali  kelompok  normal yang  tanpa  diinduksi  alkohol.  Pemberiaan sediaan uji dilakukan selama 15 hari dengan dosis  1  kali  sehari.  Pada  hari  ke-15,  semua kelompok  hewan  uji  diambil  sampel  darah untuk analisa parameter biokimia, kemudian dilanjut  dengan  pengambilan  sampel  liver untuk analisa antioksidan dan histopatologi.
d.  Uji Parameter Biokimia

## SGPT
Sampel  yang  digunakan  adalah  serum, yang  selanjutnya  ditambahkan  dengan  dua komponen reagen kit SGPT yang selanjutnya diukur  pada  panjang  gelombang  3400  nm, dengan prosedur campurkan sampel dengan BUF, kemudian inkubasi selama 5 menit pada suhu  kamar  (25 q C)  kemudian  campurkan dengan SUB, lalu baca absorbansi setelah 1 menit.

## SGOT
Sampel digunakan adalah serum, Yang selan- jutnya  ditambahkan  dengan  dua  komponen reagen  kit  SGOT  yang  selanjutnya  diukur pada  panjang  gelombang  340  nm,  dengan prosedur  campurkan  sampel  dengan  BUF, kemudian  inkubasi  selama  5  menit  pada suhu  kamar  (25 q C)  kemudian  campurkan dengan SUB, lalu baca absorbansi 1 menit.
e.  Analisa Parameter Antioksidan Untuk  analisis  aktivitas  antioksidan  digu- nakan organ liver. Organ liver dicuci dengan ice cold saline. Organ liver selanjutnya dik- eringkan  dan  ditimbang,  sebesar  10%  dari jaringan  ini  selanjutnya  dihomogenkan  dan dilakukan  preparasi  dengan  larutan  0,  15 M Tris HCl (pH 7,4). Liver yang telah dho- mogenkan ini digunakan untuk analisis lipid peroxidation  (LPO).  Bagian  lain  liver  yang telah  dihomogenkan  dan  dilakukan  pen- gendapan  protein  dengan  TCA  digunakan untuk glutathione
Pengukuran Kadar Glutathion (GSH)
Pengukuran  kadar  GSH  dalam  sampel  me- ngacu  pada  metode  yang  dikembangkan oleh Ellman et al, (1984). Untuk mengukur jumlah glutathione (GSH) jaringan liver di- homogenkan dalam 0,1 M phosphate buffer
(pH 7,4). Campuran yang telah dihomogen- kan  ini  selanjutnya  ditambahkan  dengan TCA 10 % sentrifugal 3000 rpm selama 10 menit.  Ambil  500 P l  supernatant  dan  dit- ambahkan dengan 2 ml Disodium hydrogen phospat 1,3 M terakhir tambahkan sejumlah 200 P l  reagen  Ellman’s  ( 5,  5’-dithiobis-2- nitrobenzoic acid) (0,4 mg/ml dalam sodium citrate 1 %). Larutan selanjutnya diukur pada 412  nm  yang  dibandingkan  dengan  blanko (Bose et al., 2007).
Pengukuran  Kadar Lipid  Peroksidase (LPO)
Analisis kadar LPO berdasarkan metode yang dikembangkan oleh Ohkawa et al.(1979). Ja- ringan liver dihomogenkan dalam 0,1 M buf- fer (pH 7,4). Kadar lipid peroksidase dalam campuran ini ditentukan berdasarkan jumlah terbentuknya  malondialdehyde  (MDA).  Se- jumlah  0,2  ml  liver  yang  telah  dihomogen- kan ditambah dengan 0,2 ml Sodium Dodec- yl Sulfate (SDS) 8,1 %, 1,5 ml asam asetat 20
%,  dan  1,5  ml TBA  8  %.  Campuran  dibuat sejumlah 4 ml dengan menambahkan aqua- dest, dan dihangatkan pada suhu 95 q C sela- ma 60 menit. Setelah diinkubasi, selanjutnya diamkan dalam suhu kamar. Dengan volume yang  sama  tambahkan  TCA  10%  selanjut- nya dilakukan sentrifugasi selama 10 menit pada  3000  rpm.  Lapisan  atas  yang  terben- tuk selanjutnya diambil dan diukur nilai OD pada  panjang  gelombang  532  nm  terhadap blanko yang tidak diberikan sampel. Jumlah lipid  peroksidase (LPO)  dinyatakan  dengan sejumlah  mol thiobarbituric  acid  reactive substanc e  (TBARS)/mg  49  protein  dengan

## PHQJJXQDNDQ NRH¿VLHQ HNVWLQJVL  [
10 -5 M-1cm-1(Bose et al., 2007).
f. Histopatologi Sebanyak  24  tikus  wistar  digunakan  se- bagai  sampel.  Sebelum  penelitian,  tikus wistar  dibagi  menjadi  4  kelompok  dengan masing-masing  6  ekor  tikus  wistar.  Kelom- pok  pertama  adalah  kelompok  kontrol,  ke- lompok  kedua,  ketiga,  dan  keempat  adalah kelompok  perlakuan  dengan  dosis  masing- masing  281,25  mg/Kg  BB,  562,5  mg/Kg BB,  dan  1125  mg/Kg  BB,  kemudian  tikus
diadaptasi  selama  1  minggu.  Tikus  wistar diinduksi alkohol secara oral dengan meng- gunakan sonde, 4 hari setelah perlakuan ke- mudian  dilakukan  terminasi.  Pembedahan dilakukan  segera  setelah  terminasi  untuk mengambil hepar, lalu dibuat preparat yang diproses sesuai dengan metode baku histol- ogy (Aleksunes MA, 2014). Masing-masing hati dikumpulkan untuk volume, massa, dan penelitian  histopatologi.  Tingkat  kerusakan hati ditentukan dengan menggunakan Manja Roenigk  Score.  Perbedaan  penampilan  his- topatologi  antara  kelompok  penelitian  diuji dengan  analisis  statistik One-Way  ANOVA dan Post  Hoc  Mann-Whitney $GD VLJQL¿ - cant perbedaan massa hati, volume, dan nilai Manja  Roenigk  antara  kelompok  (p-value =  0,000;  0,001,  0,000; D <  0,05).  (Sutrisna, 2013).
Cara preparat Histologi : Hewan uji coba (ti-

## NXVGLDPELOEDJLDQKDWL'LODQMXWNDQ¿NVDVL
ditujukan  untuk  menghentikan  proses  enzi- matik  sel  tubuh  secepatnya  untuk  mence-

## JDK DXWROLVLV GDQ PHOLQGXQJL EHQWXN ¿VLN
Selanjutnya  Embedding  tujuannya  untuk memperkeras  jaringan  sehingga  bias  di  po- tong tipis, prodesur : 1. Dehidrasi (mengelu- arkan air jaringan dengan alcohol bertingkat 70%-100%).  2.  Penjernihan  menggunakan pelarut lemak seperti benzen, xilen). 3. Pem-

## EXDWDQEORNSDUDI¿QPHPDVXNNDQMDULQJDQ NHGDODPSDUDI¿QFDLUGLLQFXEDWRU±ƕ
C).  Selanjutnya  Pemotongan  dengan  mi- krotom, jaringan diiris setebal 3 – 8 mikron. Selanjutnya  Pewarnaan  antara  lain  dengan zat warna Hematoksilin Eosin (HE).  Selan- jutnya  Mounting  dengan  perekat  misalnya kanada balsam, penutup (deck glass) dilarut- kan pada irisan jaringan yang telah diwarnai pada object glass. Selanjutnya di Mikroskop dengan  Perberan  tertentu  dimulai  dari  per- besaran terkecil hingga pengamatan dengan perbesran 1000x.

## 3.   HASIL DAN PEMBAHASAN
Reaksi  pendahuluan  yang  dilakukan  yaitu VKLQRGDWHVWUHDNVLXQWXNÀDYRQRLGGHQJDQ0J +&O )H&O GDQ 1D2+ +DVLO XML ÀDYRQRLG

## Jurnal KesMaDaSka - Juli 2016
dari  fraksi  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa

## IUDNVL PHQJDQGXQJ VHQ\DZD ÀDYRQRLG GHQJDQ
indikasi  perubahan  warna  setelah  penambahan

## SHUHDNVL 6DODK VDWX UHDNVL VSHVL¿N XQWXN SHQJXMLDQDGDQ\DÀDYRQRLGDGDODKUHDNVLZDUQD
menggunakan serbuk Mg dengan asam kuat (HCl P). Magnesium mudah larut dalam suasana asam dan  menghasilkan  kation  bivalen  Mg 2+ serta gas  hidrogen.  Dibuktikan  ketika  penambahan HCl  P  ke  dalam  sampel  dengan  pelarut  air  dan serbuk magnesium, muncul busa atau gelembung udara  pada  campuran.  Hal  ini  dapat  dilihat  dari persamaan reaksi berikut:
Mg + 2H ĺ Mg 2+ + H 2 (Vogel, 1985).
Ion magnesium ini berikatan pada senyawa

## ÀDYRQRLGSDGDVDPSHOVHKLQJJDPXQFXOODUXWDQ
berwarna  merah.  Warna  yang  dihasilkan  adalah warna merah tua maka senyawa tersebut termasuk

## JRORQJDQVHQ\DZDÀDYRQRODWDXÀDYRQRQ
Dari  uji  pendahuluan  dapat  disimpulkan bahwa  pada  fraksi  etil  asetat  daun  kenikir ( Cosmos  caudatus K.)  positif  mengandung VHQ\DZDÀDYRQRLG ,GHQWL¿NDVL./7GLODNXNDQXQWXNPHQJHWDKXL JRORQJDQ VHQ\DZD ÀDYRQRLG \DQJ WHUNDQGXQJ GDODPIUDNVL.URPDWRJUD¿ODSLVWLSLVGLODNXNDQ
dengan menotolkan sampel menggunakan mikro pipet  pada  fase  diam  lempeng  KLT  silica  gel dengan  eluen  pengembang  fase  atas  n-butanol: asam asetat: air (4:1:5). Pengembangan dilakukan dalam bejana jenuh uap eluen dan tertutup rapat agar proses elusi dapat terjadi dengan cepat dan untuk menghindari penguapan pelarut. Dari hasil yang  diperoleh  pada  uji  KLT,  nilai  hRf  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  identik  dengan  standar quersetin  sehingga  pada  analisis  KLT  ini,  daun kersen mengandung quersetin.
Untuk  melihat  mekanisme  hepatoprotektif fraksi etil asetat daun kenikir ( Cosmos caudatus K.)  dilakukan  analisis  terhadap  parameter  bio- kimia  yang  dilihat  dari  dua  aspek  yaitu  SGPT ( Serum  Glutamic  Pyruvic  Transaminase )  dan SGOT  ( Serum  Glutamic  Oxaloacetic  Transami- nase ) serta analisis terhadap parameter stress ok- sidatif yang dilihat dari dua aspek yaitu glutathi- one (GSH), dan lipid peroksidase (LPO).

## a.  Analisa Kadar SGPT
Apabila  kadar  SGPT  di  dalam  darah meningkat  akibat  pemberian  alkohol,  maka menunjukkan  adanya  kerusakan  pada  hati  yang ditunjukkan pada tabel berikut:

## Hasil pengukuran SGPT
Dari  perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus K.) didapatkan  kadar  SGPT  terendah  pada  dosis  III 1.125 mg/kgBB, kemudian meningkat pada dosis II  562,5  mg/kgBB,  dan  kadar  tertinggi  terdapat pada kelompok perlakuan pada dosis I 281,25 mg/ kgBB. Berturut-turut kadar SGPT pada kelompok perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  adalah  96,5  UI/L pada dosis I, 76,5 UI/L pada dosis II, dan 65,25 UI/L pada dosis III. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian  dosis  fraksi  etil  asetat  daun  kenikir ( Cosmos caudtas K.) berbanding terbalik dengan kadar  SGPT  dalam  darah.  Apabila  pemberian fraksi etil asetat daun kenikir ( Cosmos caudatus K.) dinaikkan dosisnya maka kadar SGPT dalam darah  akan  turun.  Dari  hasil  pengukuran  SGPT pada tabel 3 dan histogram terlihat bahwa kadar SGPT  pada  dosis  III  lebih  rendah  dibandingkan
dengan  dosis  I  dan  dosis  II.  Dengan  demikian dosis III lebih efektif sebagai hepatoprotektor.

## b.  Analisa Kadar SGOT
Apabila  kadar  SGOT  di  dalam  darah meningkat  akibat  pemberian  alkohol,  maka menunjukkan  adanya  kerusakan  pada  hati  yang ditunjukkan pada tabel berikut:

## Hasil pengukuran SGOT
Dari  perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus K.) didapatkan kadar SGOT terendah pada dosis III 1.125 mg/kgBB, kemudian meningkat pada dosis II  562,5  mg/kgBB,  dan  kadar  tertinggi  terdapat pada kelompok perlakuan pada dosis I 281,25 mg/ kgBB. Berturut-turut kadar SGOT pada kelompok perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  adalah  115  UI/L pada dosis I, 112,5 UI/L pada dosis II, dan 102,5 UI/L pada dosis III. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian  dosis  fraksi  etil  asetat  daun  kenikir ( Cosmos caudtas K.) berbanding terbalik dengan kadar  SGOT  dalam  darah.  Apabila  pemberian fraksi etil asetat daun kenikir ( Cosmos caudatus
K.) dinaikkan dosisnya maka kadar SGOT dalam darah  akan  turun.  Dari  hasil  pengukuran  SGOT terlihat bahwa  kadar  SGOT pada  dosis  III  lebih rendah dibandingkan dengan dosis I dan dosis II. Dengan  demikian  dosis  III  lebih  efektif  sebagai hepatoprotektor.

## c.  Lipid Peroksidase (LPO)
Dari  perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus K.) didapatkan  kadar  LPO  terendah  pada  dosis  III 1.125 mg/kgBB, kemudian meningkat pada dosis II  562,5  mg/kgBB,  dan  kadar  tertinggi  terdapat pada kelompok perlakuan pada dosis I 281,25 mg/ kgBB. Berturut-turut kadar LPO pada kelompok perlakuan dosis I, II, dan III adalah 0.4230 mM/g tissue  pada  dosis  I,  0.4130  mM/g  tissue  pada dosis II, dan 0.4061 mM/g tissue pada dosis III. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian  dosis fraksi  etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos caudtas K.)  berbanding  terbalik  dengan  kadar  LPO dalam darah. Apabila pemberian fraksi etil asetat daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus K.)  dinaikkan dosisnya maka kadar LPO akan turun. Dari hasil pengukuran LPO terlihat bahwa kadar LPO pada dosis III lebih rendah dibandingkan dengan dosis

## Jurnal KesMaDaSka - Juli 2016
I  dan  dosis  II.  Dengan  demikian  dosis  III  lebih efektif sebagai hepatoprotektor.

## d.  GSH
d. GSH
Dari  perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus K.) didapatkan  kadar  GSH  terendah  pada  dosis  I 281,25  mg/kgBB,  kemudian  meningkat  pada dosis  II  562,5  mg/kgBB,  dan  kadar  tertinggi terdapat pada kelompok perlakuan pada dosis III 1.125 mg/kgBB. Berturut-turut kadar GSH pada kelompok  perlakuan  dosis  I,  II,  dan  III  adalah 29.310  mM/g  pada  dosis  I,  34.069  mM/g  pada dosis  II,  dan  71.54  mM/g  pada  dosis  III.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  pemberian  dosis  fraksi etil  asetat  daun  kenikir  ( Cosmos caudtas  K.) berbanding  lurus  dengan  kadar  GSH.  Apabila pemberian fraksi etil asetat daun kenikir ( Cosmos caudatus K.)  dinaikkan  dosisnya  maka  kadar GSH  akan  turun.  Dari  hasil  pengukuran  GSH pada tabel 4 dan histogram terlihat bahwa kadar GSH  pada  dosis  III  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  dosis  I  dan  dosis  II.  Dengan  demikian dosis III lebih efektif sebagai hepatoprotektor.

## e.  Histopatologi
Dari  hasil  gambar  diatas  diketahu  bahwa kerusakan  terparah  adalah  control  negatif  dan kerusakan  paling  rendah  adalah  control  positif. Dari  ketiga  dosis  diketahui  dosis  paling  baik adalah dosis 3 dibanding dosis yang lainnya, dan dosis  3  mendekati  control  positif  maka  dosis  3 paling berpengaruh sebagai hepatoprotektor.

## 4.   KESIMPULAN
Pada  pemeriksaan  parameter  biokimia dan  stress  oksidatif,  fraksi  etil  asetat  daun
kenikir  berkhasiat  sebagai  hepatoprotektor  dan antioksidan yang ditandai dengan kemampuannya menurunkan  kadar  SGPT,  SGOT  dan  LPO,  dan mampu kenaikkan kadar GSH.

## 5.  REFERENSI
Abraham,  Charles  &  Eamon  Shanley.  2003. Alih bahasa Leony Sally M. Editor : Robert Prihajo  &  Yasmin  Asih. Psikologi  Sosial untuk Perawat . Jakarta : EGC
Abas,  2003,  Antioxidative  Radical  Scavenging Properties  of  the  Constituent  Isolated  from Cosmos  caudatus K., Natural  Product Science, 9(4), 245-248.
Agestiawaji, R., and Sugrani, A., 2009, Flavonoid (Quercetin) ,  Makalah,  FMIPA  Universitas Hasanudi, Makassar.
Bakry  F.  2007. Hepatitis  Alkohol  dalam  Buku Ajar  Ilmu  Penyakit  Hati  ed Ali  Sulaiman dkk.  Jakarta:  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC.
Blachier  M, et  al .  2013.  The  burden  of  liver disease in Europe: a review of teh available epidemiological data. Journal of Hepatology 58 : 593-608.
Bharat  Aggarwal,  Anushree  Kumar,  Manoj S.  Aggarwal,  and  Shishir  Shishodia. 2005. Curcumin  Derived  from  Turmeric (Curcuma  longa)  a  Spice  for  All  Seasons in  Phytochemicals  in  Cancer  Chemo prevention , CRC Press LLC.
Diaz, J.; Espana, M.; Soriano-Romero,; S.Marin;
N.Muriach.  2002. Oxidative  stress  in
the  rat  optic  nerve  induced  by  chronic administration  of  ethanol. Archievos  de la  Sociedadn  Espanola  de  Oftamologia .
77:263-268
Hadi,  Sujono,  2000, Hepatology ,  Bandung: Mandar Maju.
Haki Mohamdis, 2009. Efek Ekstrak Daun Talok (Muntingia Calabura L.) Terhadap Aktivitas Enzim  SGPT  Pada Mencit  yang  Diinduksi Karbon  Tetraklorid a.  Skripsi. Universitas Sebelas Maret Surakarta : Surakarta.
Kurniasih.  2008. Daya  Antioksidan  Fraksi  Etil Asetat Ekstrak Herba Daun Kenikir(Cosmos FDXGDWXV . GDQ 3UR¿O ./7 .  Jogjakarta: FMIPA UII Press.
Novianto, A. dan Hartono, 2013, Uji Antioksidan dan  Hepatoprotektor  Fraksi  Etil  Asetat Kenikir pada Tikus yang Diinduksi Paracetamol, Laporan  Penelitian, Akademi Farmasi Nasional, Surakarta.
Stein,  V.  2005. Flora .  Jakarta:  PT.  Pradya Paramhyta.
Sutrisno. 1987. Diktat Fisiologi Ternak . Fakultas Peternakan, UNSOED : Purwokerto.
Zakhari, Samir, 2006, Overview: How Is Alkohol Metabolized  By  The  Body?, National Institute On Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA)  5635.  Fisher  Lane  MSC  9304, Bethesda.
Zimmerman H.J, 1978, Hepatotoxicity , Appleton Century Croft, New York.