Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)

## Anti-Inflammatory Effects of Kersen Leaf ( Muntingia Calabura L.) Ethanol Extract on Wistar Male White Rats
Efek Antiinflamasi Ektrak Etanol Daun Kersen ( Muntingia Calabura L.) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar
Rahimatul Uthia *1 , Ira Oktaviani Rz 2 , Fathul Jannah 3 , Helmi Arifin 4 , Hengk Afdhal 5 1 Program Studi D III Kebidanan Poltekkes Kemenkes Riau, Pekanbaru, Indonesia 2,3 Program Studi DIII Keperawatan, Poltekkes Kemenkes Riau, Pekanbaru, Indonesia
4 Fakultas Farmasi, Universitas Andalas, Padang, Indonesia 5 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM), Padang, Indonesia Email: rahimatul1089@gmail.com

## Abstract
Research on the effect of ethanol extract on Muntingia calabura L. leaf in the white male rat has been done. The extract was administrated orally in doses of 100, 200, and 400 mg/kg BW and the negative control group used sodium carboxy methyl cellulose 1%. As positive control group used acetosal 500 mg/kg BW. The  inflamation  induced  by  Karagen  (1%)  injected  into  the  sole  of  rats. Inflamation  volume  measured  with  plestimometer  after,  14  and  21  days  of administration.  The  result  showed  that  the  Kersen  leaf  (Muntingia  calabura  L.) extract in doses of 100, 200, and 400 mg/kg BW can decrease the inflamatiomn volume equal to acetosal 500 mg/kg BW after 21 days . Keywords: ethanol extract Muntingia calabuara L.; antiinflamation; Kersen leaf

## Abstrak
Penelitian tentang pengaruh ekstrak etanol daun kersen (Muntingia calabura L.) pada tikus putih jantan. Ekstrak diberikan secara oral dengan dosis 100, 200 dan 400 mg/kg BB dan kelompok kontrol negatif menggunakan natrium karboksi  metil  selulosa  1%.  Sebagai  kelompok  kontrol  positif  digunakan asetosal 500 mg/kg BB. Peradangan disebabkan oleh Karagen (1%) yang disuntikkan  pada  telapak  kaki  tikus.  Volume  inflamasi  diukur  dengan plestimometer  setelah  pemberian  7,14  dan  21  hari.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.) dengan dosis 100,  200  dan  400  mg/kg  BB  dapat  menurunkan  volume  inflamasi  sebesar asetosal 500 mg/kg BB setelah 21 hari. Kata Kunci:
Ekstrak etanol Muntingia calabuara L; antuunflamasi; daun kersen

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara tropis yang  terkenal  dengan  keanekaragaman tanamannya  yang  dapat  digunakan  sebagai obat. Bagian tanaman yang dapat digunakan sebagai  obat  berupa  daun,  batang,  buah, bunga  dan  akar.  Salah  satu  tanaman  yang dapat digunakan sebagai obat adalah kersen ( Muntingia calabura L.). Daun kersen
mengandung  senyawa  flavonoid.  Flavonoid yang  merupakan  seyawa  obat  yang  dapat digunakan  sebagai  antioksidan,  antibakteri, dan  inflamasi.  Penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  kersen  merupakan  seyawa flavonoid  berupa  auron,  flavonol,  dan  flavon [1].
Hasil penelitian yang telah dilakukan oleh para peneliti dapat dilihat adanya pengaruh ekstrak

## Article Info
Article history Received date: 2022-06-07 Revised date: 2022-12-07 Accepted date: 2022-12-12
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
daun kersen terhadap aktivitas antioksidan dan antiinflamasi. Ekstrak daun kersen menunjukkan aktivitas antioksidan dan aktivitas antihiperglikemik secara in-vivo [2].
Dikutip  dari  literatur  ilmiah  preparat  yang berasal  dari  kersen  memiliki  banyak  aktifitas farmakologi  seperti  antiseptik,  antipiretik  dan antibakteri.  Daun  juga  dilaporkan  memiliki khasiat sebagai adstringent, diuretik, tonik dan juga  digunakan  untuk  bisul,  kesembuhan  luka serta  bantuan  pencernaan  [3].  Inflamasi merupakan mekanisme pertahanan tubuh yang disebabkan adanya respon jaringan terhadap rangsangan yang merusak, baik yang bersifat lokal  maupun  yang  masuk  ke  dalam  tubuh. Rangsangan  dapat  berupa  rangsangan  fisika (seperti kerusakan jaringan akibat radiasi dan panas),  kimia  dan  biologi  (seperti  infeksi bakteri) [4].

## METODE
Prosedur Penelitian:
1. Persiapan sampel 2. Organoleptik Spesifik Ekstrak Pemeriksaan organoleptic ekstrak dilakukan  dengan  penggunaan  panca indera  untuk  mendeskripsikan  bentuk, warna, bau dan rasa ekstrak [5].
3. Karakterisasi Non-spesifik Ekstrak
- Susut Pengeringan
Sebanyak 1 g ekstrak ditimbang seksama dan  dimasukkan  ke  dalam  botol  timbang yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu  105ºC  selama  30  menit  dan  telah ditara. Goyangkan botol hingga terbentuk lapisan  setebal  ±  5  mm-10  mm,  lalu masukkan  ke  dalam  ruang  pengering dalam  keadaan  tutup  krus  terbuka  pada suhu 105º C hingga bobot tetap [5].
- Kadar Abu
2  g  ekstrak  yang  telah  ditimbang dimasukkan  ke  dalam  krus  silikat  yang telah  dipijarkan  dan  ditara,  kemudian diratakan.  Ekstrak  dipijarkan  di  dalam tanur  pada  temperatur  800ºC  hingga arang abis, kemudian didinginkan (5 menit
di  udara,  kemudian  10  menit  di    dalam desikator)  dan  ditimbang.  Ulangi  proses tersebut hingga bobot tetap [5]. 4. Uji Kandungan Fitokimia Daun Kersen Sampel daun kersen diekstraksi menggunakan pelarut etanol dan ditotolkan  pada  plat  kromatografi  lapis tipis.  Plat  kemudian  dielusi  menggunakan fase  gerak  n-hexan.  Pola  kromatogram dianalisis  untuk  melihat  kandungan fitokimianya.  Kandungan  flavonoid  total ekstrak  kemudian  dihitung  menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan pembanding kuersetin [6]. 5. Penyiapan Hewan Uji Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  tikus  putih  jantan berumur  2-3  bulan  dengan  berat  antara 200-250  g  [7].  Sebelum  digunakan sebagai  hewan  uji,  tikus  diaklimatisasi dalam  ruangan  penelitian  lebih  kurang satu minggu [8].
6. Pembuatan Suspensi Karagen 1%
Karagen ditimbang sebanyak 100 mg lalu tambahkan larutan NaCl fisiologis 5 ml dan diaduk  homogeny.  Kemudian  masukkan kedalam  gelas  ukur  10  ml,  kemudian cukupkan  sampai  10  ml  dengan  larutan NaCl  fisiologis,  lalu  inkubasi  pada  suhu 37˚C selama 24 jam [9].
7. Pengujian efek antiinflamasi [9]
Efek antiinflamasi ditentukan dari  edema pada tiga kelompok tikus yaitu kelompok kontrol  negatif  (NaCMC),  kontrol  positif (asetosal),  dan  kelompok  uji  yang diberikan  suspensi  ekstrak  daun  kersen ( Muntingia  calabura ,  L.)  dosis  100,  200, dan  400  mg/kgBB  secara  oral  dengan volume  0,5%  berat  badan.  Perlakuan pada  masing-masing  kelompok  kontrol negatif,  kontrol  positif,  dan  kelompok  uji diberikan  selama  21  hari.  Perubahan volume edema yang terbentuk diukur dan dicatat pada hari ke 7, 14, dan 21. Pada hari-hari pengamatan, kaki tikus diinduksi dengan  suspensi  karagen  1%  sebanyak
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
Rahimatul Uthia and rahimatul1089@gmail.com
0,2ml/200gBB. Tepat pada lateral maleus kaki  belakang  masing-masing  tikus  diberi tanda menggunakan spidol sebagai batas pencelupan kaki tikus ke dalam air raksa. Catat tinggi kenaikan air raksa pada pipa kapiler  sebelum  (sebagai  volume  awal) dan 1, 2, 3, dan 4 jam setelah pemberian suspensi  karagen  1%.  Persen  radang masing-masing  kelompok  dan  persentasi hambatan  radang  rata-rata  untuk  setiap dosis zat uji dihitung dengan rumus sebagai berikut:
a. %radang = ! !" $% ! % 𝑥 100%
Keterangan: X t = volume edema pada waktu t X o =  volume  edeme  sebelum  di  beri perlakuan.
b. %hambatan radang = "#$ " 𝑥 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini didapatkan ekstrak etanol kental daun kersen ( Muntingia calabura L.) yang berwarna  coklat  kehitaman,  berbau  khas aromatik,  dan  berasa  pahit  (Tabel  1). Rendemen ekstrak etanol daun kersen adalah 12,65%  (Tabel  2),  dengan  nilai  susut pengeringan  dan  kadar  abu  total  ekstrak masing-masing  sebesar  17,4139  %  dan  4,62 %.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Secara Organoleptik
Ekstrak Etanol Daun Kersen No. Pemeriksaan Pengamatan 1. Warna Coklat kehitaman 2. Rasa Pahit 3. Bau Khas aromatik 4. Bentuk Kental Tabel 2. Penentuan Rendemen Ekstrak Etanol Daun Kersen ( Muntingia calabuara L.) Parameter Nilai Berat sampel segar 2,500 kg
Berat simplisia 950 g Berat ekstrak kental 120,2184 g Rendemen 12,6545 %
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metoda  maserasi, hal  ini  dilakukan  karena  metode  ini  lebih sederhana, tidak memerlukan peralatan khusus dan  tidak  memerlukan  pemanasan  sehingga dapat  mengatasi  kemungkinan  adanya senyawa  yang  terurai  atau  menguap  akibat pemanasan.  Maserasi  dilakukan  dengan merendam simplisia daun kersen dalam pelarut etanol  70%  selama  3–5  hari.  Selama  proses perendaman,  simplisia  daun  kersen  sesekali diaduk  untuk  mempercepat  penetrasi  pelarut kedalam  simplisia  daun  kersen  sehingga komponen-komponen  kimia  didalamnya  akan terlarut.  Proses  maserasi  dilakukan  ditempat yang  terlindung  dari  cahaya  dengan  tujuan untuk  menghindari  kemungkinan  terjadinya degradasi  struktur  zat  aktif  terutama  untuk golongan  senyawa  non  polar  dan  kurang stabilnya terhadap cahaya.
Hasil  maserasi  diuapkan  dengan  destilasi vakum  yang  kerjanya  dapat  mengurangi tekanan  udara  pada  permukaan  sehingga akan  menurunkan  tekanan  uap  pelarut  yang selanjutnya akan menurunkan titik didih. Hal ini dapat  mengurangi  kemungkinan  terjadinya penguraian zat aktif pada ekstrak etanol daun kersen  yang  tidak  tahan  dengan  suhu pemanasan  yang  tinggi.  Pelarut  yang  masih tersisa diuapkan lagi dengan rotary evaporator sampai didapatkan ekstrak kental.
Pada pengujian kandungan metabolit sekunder tiga larutan sampel, didapatkan bahwa larutan A  memiliki  dua  bercak  noda  dengan  nilai  Rf bercak 1 = 0,74 dan bercak 2 = 0,34 dimana, kemungkinan larutan ini mengandung kuersetin yang  memberikan nilai R f = 0,8. Selanjutnya, dari  larutan  B  diperoleh    enam  bercak  noda dengan  nilai  Rf  masing-masing  adalah  0,9; 0,79;  0,66;  0,51;  0,40;  dan  0,66  dimana, kemungkinan  larutan  ini  mengandung  katekin
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
yang  memiliki  nilai  Rf  0,66.  Diperoleh diperoleh  dua  bercak  noda  dengan  nilai  R f masing-masing  yaitu  0,90  dan  0,46  yang kemungkinan  mengandung  kuersetin  yang memberikan  nilai  Rf  0,94  pada  proses  elusi yang sama. Kandungan flavonoid total ekstrak adalah  0,7815%  yang  dihitung  sebagai kuersetin.  Ekstrak  daun  kersen  mengandung flavonoid,  dimana  manfaat  flavonoid  antara lain  adalah  untuk  melindungi  struktur  sel, memiliki  hubungan  sinergis  dengan  vitamin  C (meningkatkan efektivitas vitamin C),
antiinflamasi,  mencegah  keropos  tulang,  dan sebagai antibiotik.
Untuk  menentukan  efek  antiinflamasi  sampel digunakan  tikus  putih  jantan  dengan  berat antara 200 - 300 g dan berumur 2 - 3 bulan sebanyak  25  ekor.  Selama  satu  minggu sebelum digunakan hewan diadaptasi dengan lingkungan laboratorium (aklimatisasi). Selama pemeliharaan  tersebut  hewan  diberi  makan dan  minum  yang  cukup.  Tujuan  aklimatisasi untuk  menyesuaikan  terhadap  lingkungannya dan  menghindari  stres  pada  saat  perlakuan. Hewan yang memenuhi syarat untuk digunakan adalah  hewan  yang  dinyatakan  sehat,  yaitu hewan yang selama pengamatan tidak terjadi perubahan  berat  badan  lebih  dari  10%  dan secara  visual  tidak  menunjukan  gejala  sakit. Sebelum pengujian tikus dipuasakan selama 12 jam, minum tetap diberikan.
Gambar 1. Efek Daun Kersen Terhadap Persen Radang Pada Tikus Putih Jantan.
Gambar 2. Efek Daun Kersen Terhadap Persen Hambatan Radang Pada Tikus Putih Jantan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  pada  kelompok ekstrak  daun  kersen  mengandung  berbagai macam senyawa kimia, diantaranya flavonoid manfaat  flavonoid  antara  lain  adalah  untuk melindungi  struktur  sel,  memiliki  hubungan sinergis  dengan  vitamin  C  (meningkatkan efektivitas vitamin C), antiinflamasi, mencegah keropos tulang, dan sebagai antibiotik. Berdasarkan  hasil  penelitian,  pada  kelompok kontrol  (-)  pada  jam  1  terjadi  proses  radang dan selanjutnya berkurang sedikit demi sedikit rata-rata  persentase  radang  jam  ke  2,  ke  3 dan  4.  Baik  pada  hari  ke  7,  14  maupun  21 Kelompok  kontrol  (-)  punya  nilai  rata-rata persentase  radang  tertinggi  dibandingkan dengan  kontrol  positif  (asetasol),  kelompok ekstrak 100 mg/kg BB dan kelompok ekstrak 200  mg/kg  BB  serta  lebih  tinggi  persentase radangnya  dibanding  kelompok  ekstrak  400 mg/kg BB pada pengamatan hari ke 7, 14 dan 21.  Pada  kelompok  kontrol  negative  tidak mengalami perbaikan inflamasi.
Pada kelompok kontrol (+), dosis ekstrak 100 mg/kg BB, dosis 200 mg/kg BB, 400 mg//kg BB pada hari ke 7, 14 dan 21 pengamatan jam ke  1,  2,  3  dan  4  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  (-),  terjadi  penurunan persentase  radang  pada  setiap  waktu pengamatan,  mampu  menurunkan  volume udema  dan  pada  persen  hambatan  radang terjadi kenaikan pada setiap waktu pengamatan  sehingga  mampu  juga  untuk menurunkan  volume  edema  pada  tikus  putih jantan.  Secara  keseluruhan  kelompok  ekstrak
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
Rahimatul Uthia and rahimatul1089@gmail.com
400  mg/kg  BB  dan  kelompok  kontrol  positif memiliki  nilai  rata-rata  persentase  radang lebih  rendah  dari  pada  kelompok  kontrol  (-),
ekstrak 100mg/kgBB,
dan ekstrak
200mg/kgBB pada setiap waktu pengamatan.
Hal  ini  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak 400mg/kgBB memiliki efek antiinflamasi. Pada kelompok  ekstrak  400mg/kgBB  memiliki duration  of  action yang  berbeda  dengan kelompok  ekstrak  100mg/kgBB  maupun  200 mg/kgBB.
Adanya  kemampuan  menurunkan  persentase edema  diduga  terjadi  karena  aktifitas senyawa  aktif  yang  terdapat  dalam    daun kersen.  Flavanoid  terutama  bekerja  pada endotelium  mikrovaskular  untuk  mengurangi terjadinya  hiperpermeabilitas  dan  udema. Flavonoid  memiliki  kemampuan  memblok siklooksigenase  dan  lipooksigenase  asam arakidonat  sehingga  sintesis  PGE2,  leukotrien, histamin, bradikinin dan tromboksan terhambat [10].
Adanya kemampuan flavonoid dalam menghambat  sintesis  mediator  inilah  yang berperan  dalam  mengurangi  edema.  Selain menghambat  metabolisme  asam  arakidonat, flavonoid  juga  menghambat  sekresi  enzim lisosom  yang  merupakan  mediator  inflamasi. Penghambatan  mediatorinflamasi  ini  dapat menghambat  proliferasi  dari  proses  radang. Antioksidan  berperan  sebagai  antiinflamasi dengan  cara  menangkap  radikal  bebas. Radikal bebas dapat menyebabkan kerusakan membran selsehingga akan membentuk proses peradangan [11].
Ekstrak dosis 400 mg/kg BB menunjukkan efek yang  paling  baik  dalam  menghambat pembentukan edema mendekati kontrol positif daripada,  ekstrak  100mg/kgBB  dan  ekstrak 200mg/kgBB. Hal ini terlihat dari konsistennya kelompok  ekstrak  400  mg/kg  BB  dalam menurunkan  edema.  Pada  konsentrasi  400 mg/kg  BB  terkandung  lebih  banyak  ekstrak daun  kersen  sehingga  zat  aktif  yang terkandung  didalamnya  juga  lebih  banyak. Semakin  banyak  zat  aktif  yang  terkandung
didalamnya  diduga  menyebabkan  semakin baik efek antiinflamasi yang ditimbulkan oleh daun kersen.
Untuk memperoleh respon farmakologi tertentu dari suatu obat, kadar efektif minimal didalam darah/plasma  harus  tercapai.  Pada  ekstrak daun  kersen  dosis  400  mg/kg  BB  yang  lebih kental daripada ekstrak 200 mg/kg BB terjadi absorpsi  yang  lebih  lambat  sehingga dibutuhkan waktu yang lebih lama dari pada ekstrak 400 mg/kg BB untuk memberikan efek yang diharapkan.
Berdasarkan uraian di atas, dapat disimpulkan bahwa  ekstrak  daun  kersen  100  mg/kg  BB, 200  mg/kg  BB  dan  400  mg/kg  BB  memiliki kemampuan  menurunkan  volume  edema. Ekstrak  dosis  400  mg/kg  BB  memiliki kemampuan  menurunkan  volume  edema  lebih baik  dibanding  ekstrak  dosis  100  mg/kg  BB dan ekstrak dosis 200 mg/kg BB . Sama  halnya  dengan  ekstrak  daun  sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.) juga memiliki  efek  antiinflamasi  seperti  yang diberikan oleh ekstrak daun kersen [12].

## SIMPULAN
Pemberian  ekstrak  daun  etanol  kersen ( Muntingia  calabura L.)  dapat  menghambat radang  pada  tikus  putih  jantan. Pemberian dosis  yang  berbeda  memberikan  efek  yang berbeda  juga,  dosis  400mg/kgBB  memiliki kemanpuan  menurunkan  volume  udema  lebih baik dibanding ekstrak dosis 100mg/kgBB dan ekstrak dosis 200 mg/kg BB.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Arum, Y. P., Supartono, Sudarmin (2012). Isolasi dan Uji Daya Antimikroba Ekstrak daun  Kersen  ( Muntingia  calabura  L),
Jurnal MIPA ,35 (2), 165-174
[2] Yadav,  D.,  Shinde  Aruna,  M.,  dan Chandrashekar,  A.  (2013). Antioxidant and in vivo Anti- hyperglycemic activity of Muntingia  calabura  laves  extracts. Research Library , 5 (3), 427-435
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.1, Mei 2023, pp. 1-6 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
[3] Suresh,  K.  (2012).  Pharmacognostic evaluation in vitro anti oxidant and in vivo antiinflammatory  studies  of Muntingia calabura Linn.Journal of Global Trands in Pharmaceutical Sciences, (3),2230-7346
[4] Robbins,  S.  L.,  &  Kumar,  V.  (1995). Buku ajarpatolagi  I (Edisi  4).  Diterjemahkan
oleh Staf Pengajar Laboratorium patolagi  Anatomik  Falkultas  Kedokteran Airlangga,  Surabaya.  Jakarta:  Penerbit Buku Kedokteran EGC.
[5] Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.  (2000). Parameter  standar umun  ekstrak  tumbuhan obat  (Edisi  I). Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan  Obat  dan  Makanan, Direktorat Pengawasan ObatTradisional [6] Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  (2008). Farmakope  Herbal Indonesia (Edisi  I),  Jakarta:  Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
[7] Wientarsih, I., Madyastuti, R., Prasetyo, B. F.,  &  Firnanda,  D.  (2012).  Gambaran serum  ureum  &  kreatin  pada  tikus  putih yang  diberi  fraksi  etil  asetat  daun alpukat. Journal Vateriner, 13, (1), 57-62.
[8] Vogel,  H.G.  (2002). Drug  Discovery  and evalution pharmacological assay . Springer Verleg. Berlind. Haidenlherg. p764-765.
[9] Yadav, A. S., Kumar, S., Yadav, P. (2012). Antiinflamatory  activity  off  root,  leaves and  stem  of  Dipteracanthus  patulus (Janq.) Ness (Acanthaceae). Asian Dacific Juornal  of  Tropical  Biomedicune ,  (3), S187-S191
[10] Sabir,  A.  (2007). Inflammatory  Response on Rat’s Dental Pulp Following Application of Propolis-  Derived  Flavonoids  Extract . Dentika Dental Journal, 12, (1),2007.
[11] Mutsclher,  Ernst.  (1991). Dinamika Obat Farmakologi dan Toksikologi . Edisi kelima. Bandung. institut Teknologi Bandung.
[12] Uthia,  R.,  Kardela,  W.,  Transida,  K.B. 2018.  Uji  Efek  Antiinflamasi  Ekstrak Etanol  Daun  Sambung  Nyawa  ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.) terhadap Kaki
Tikus Putih Jantan. Jurnal Farmasi Higea,
10(1), 25-32