Abstract : One of medicinal plant empirically used for traditional is buni leaves (Antidesma bunius L. Spreng) This  plant  is  potential  to  be  developed  as  medicine  for  anti-inflammatory.  A  research  on  anti-inflammatory activity  test  of  ethanol  extract  buni  leaves  (Antidesma  bunius  L.  Spreng)  to  mice  with  Rat  hind  paw  edema method.    The  purpose  of  study was  to  investigate the  anti-inflammatory activity  of the  ethanol extract  buni leaves  (Antidesma bunius  L. Spreng) to mice induced with carrageen. The research has done by giving orally suspension of ethanol extract buni leaves (Antidesma bunius L. Spreng) in the dose 5 mg/kg BB, 50 mg/kg BB, and  500  mg/kg  BB,  Sodium  CMC  1%  w/v  as  control  negatove  and  Sodium  Diclofenac  as  control  positive. Measurements were made every hour for six hours used plethysmometer. The result after statistically analyzed using Complete Randomized Design showed that dose of 5 mg/kg BB, 50 mg/kg BB and 500 mg/kg BB have anti-  inflammatory  activity.  The  result  of  Duncan’s  Real  Distance  Different  test  (BNJD)  dose  50  mg/kg  BB showed that anti-inflammatory activity did not significantly different with Sodium Diclofenac ((α = 0,05).
Keywords :  Buni leaves extract (Antidesma bunius L. Spreng); Anti- inflammatory; carrageen; Sodium diclofenac
Abstrak  : Salah  satu  tanaman  obat  yang  digunakan  secara  empiris  untuk  pengobatan  secara  tradisional untuk  beberapa  macam  penyakit  adalah  daun  buni  ( Antidesma  bunius L.  Spreng).  Tanaman  ini  memiliki potensi  untuk  dikembangkan  menjadi  obat  antiinflamasi.  Telah  dilakukan  penelitian  tentang  uji  aktivitas antiinflamasi ekstrak etanol daun buni ( Antidesma bunius L.  Spreng)  terhadap tikus putih dengan  metode pembentukan  edema  buatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  meneliti  aktivitas  antiinflmasi  ekstrak  etanol daun  buni  ( Antidesma  bunius L.  Spreng)  terhadap  tikus  ( Rattus  noervegicus) yang  diinduksi  karagenan. Penelitian  dilakukan  dengan  pemberian  secara  peroral  ekstrak  daun  buni  ( Antidesma  bunius L.  Spreng) dalam dosis 5 mg/kg BB. 50 mg/kg BB, dan 500 mg/kg BB, Natrium CMC 1% sebagai kontrol negatif dan Natrium  Diklofenak  sebagai  kontrol  positif.  Pengukuran  edema  kaki  dilakukan  tiap  1  jam  selama  5  jam menggunakan  alat  plethysmometer.  Hasil  penelitian  setelah  dianalisis  dengan  metode  RAL  (  Rancangan Acak Lengkap) menunjukkan bahwa ekstrak dosis 5 mg/kg BB, 50 mg/kg BB, da 500 mg/kg BB memiliki aktivitas  antiinflamasi.  Hasil  uji  lanjutan  (BNJD)  Beda  Nyata  Jarak  Duncan  menunjukkan  ekstrak  dengan dosis  50  mg/kg  BB  menunjukkan  aktivitas  antiinflamasi  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan  pembanding Natrium diklofenak (α = 0,05).
Kata Kunci : Antidesma bunius L. Spreng ; Antiinflamasi; Karagenan; Natrium diklofenak
UJI AKTIVITAS ANTI INFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN BUNI ( Antidesma bunius L. Spreng) TERHADAP TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus
1|Mukhriani,  2| Nurshalati Tahar, 3| Muhammad Rusdi, 4|Khaerani, 5| Mutia Fitri Almaidah Email Korespondensi : mukhriani.tetty@uin-alauddin.ac.id Jurusan Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Alauddin Makassar

## PENDAHULUAN
Banyak jenis tanaman yang dapat tumbuh di Indonesia yang sebagian besar dapat digunakan sebagai sumber bahan obat alam dan telah banyak digunakan oleh masyarakat secara turun temurun untuk keperluan pengobatan guna mengatasi masalah kesehatan. Obat tradisional tersebut  perlu  diteliti  dan  dikembangkan sehingga  dapat  bermanfaat  secara  optimal  untuk peningkatan kesehatan masyarakat. Telah banyak dilakukan penelitian untuk pengembangan dalam  bidang  kesehatan  terkhusus  untuk  berbagai  macam  penyakit  dan  infeksi mikroorganisme  dari  berbagai  macam  tanaman,  salah  satunya  adalah  tanaman  dari  genus Antidesma yaitu Tanaman Buni ( Antidesma bunius ) (Ida & Rizki. 2017).
Buni  ( Antidesma  bunius )  adalah  tanaman  yang  biasa  digunakan  sebagai  tanaman  peneduh, mempunyai  tekstur  dedaunan  yang  sangat  rindang,  dan  buahnya  biasa  digunakan  sebagai campuran makanan.
Inflamasi atau disebut juga peradangan merupakan kejadian yang umum dan sering dialami oleh  setiap  individu.  Inflamasi  merupakan  salah  satu  respon  normal  tubuh  yang  dapat disebabkan  oleh  cedera,  trauma  fisik,  zat  kimia  yang  merusak,  atau  zat-zat  mikrobiologi ( Mycek , dkk. 2009). Inflamasi yang terjadi dapat bersifat akut ataupun kronis. Inflamasi akut terjadi dalam waktu singkat yang ditujukan  untuk menghilangkan agen penyebab inflamasi dan  membatasi  jumlah  jaringan  yang  rusak.  Sedangkan  inflamasi  kronik  berlangsung  lama
dan  dapat  merupakan  perkembangan  dari  inflamasi  akut  (Kumar  et  al.,  2009).  Untuk mengatasi  inflamasi  dapat  dilakukan  dengan  pemberian  obat-obat  sintesis  Antiinflamasi yang  pada  umumnya  mempunyai  sejumlah  efek  samping  yang  berkaitan  dengan penggunaannya  dan  terutama  terjadi  pada  lambung,  usus,  dan  ginjal.  Adanya  berbagai macam efek samping yang dapat ditimbulkan oleh obat- obat sintesis mendorong masyarakat untuk  mencari  alternatif  pengobatan  menggunakan  bahan  alam  yang  memiliki  banyak keuntungan  diantaranya  lebih  murah,  mudah  diperoleh  dan  memiliki  efek  samping  yang relatif lebih rendah.
Mekanisme  flavonoid  dapat  melalui  beberapa  jalur  yaitu  dengan  menghambat siklooksigenase atau lipooksigenase, menghambat akumulasi leukosit di daerah yang cedera, penghambatan  degradasi  neutrofil  dan  penghambatan  pelepasan  histamin  sehingga  dapat menjadi  antiinflamasi  (Nijveltd  dkk.,  2014).  Sementara  itu,  saponin  juga  menunjukkan aktivitas  antiinflamasi.  Penelitian  menunjukkan  kandungan  senyawa  daun  buni  antara  lain saponin,  flavonoid,  tanin  dan  alkaloid  yang  beberapa  diantaranya  merupakan  metabolit sekunder  yang  berpotensi  sebagai  anti  inflamasi  (Inrawati  &  Rizki.  2017).  Hal  inilah  yang kemudian  melatarbelakangi  dilakukannya  penelitian  anti  inflamasi  pada  daun  buni ( Antidesma bunius L. Spreng ) terhadap tikus putih ( Rattus norvegicus ).

## METODOLOGI PENELITIAN
Pembuatan ekstrak etanol Daun buni ( Antidesma bunius L. Spreng)
Sebanyak  500  g  simplisia  Daun  buni  ( Antidesma  bunius L.  Spreng)  dimasukkan  kedalam wadah, dimaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 3000 ml selama 2 x 24 jam disimpan pada  tempat  yang  terlindung  dari  cahaya  selanjutnya  disaring  dan  dipisahkan  ampas  dan filtrat.  Perlakuan ini  dilakukan  sebanyak  3  kali.  Filtrat  yang  diperoleh  disatukan,  kemudian dipekatkan dengan  rotary  evaporator  lalu  diuapkan  hingga  diperoleh  ekstrak  kental  etanol kemudian dibebas etanolkan ekstrak  sebelum dilakukan pengujian.

## Pembuatan suspensi karagenan 1%
Supsensi karagenan 1% dibuat dengan melarutkan 1 mg karagenan dalam NaCl 0,9% sampai 100  ml.  Pembuatan  larutan  kolodial  NaCMC  Larutan  kolodial  NaCMC  1%  dibuat  dengan menimbang 1 g serbuk NaCMC, ditambahkan aquadest hingga 100 ml sambil digerus hingga membentuk mucilago.

## Pembuatan suspensi tablet Natrium Diklofenak
Diambil  20  tablet  natrium  dikofenak,  digerus  lalu  ditimbang  40,977  mg,  disuspensikan dengan NaCMC 1 % lalu dicukupkan volumenya hingga 100 ml.

## Pembuatan suspensi ekstrak daun buni
Untuk  dosis  5  mg/kg  BB,  50  mg/kg BB, dan 500 mg/kg BB masing-masing ditimbang 5 mg, 50  mg,  dan  500  mg  ekstrak  lalu  disuspensikan  dengan  Na.CMC  1%  dan  dicukupkan volumenya hingga 25 ml dalam labu tentukur.

## Uji Identifikasi Golongan
Analisis Alkaloid

## Uji pereksi mayer
Disiapkan ekstrak daun buni yang dilarutkan dalam pelarutnya dan diambil beberapa tetes kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi. Pada sampel tersebut  ditambahkan pereaksi mayer. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya endapan putih atau kuning.

## Uji pereaksi wagner
Disiapkan ekstrak daun buni yang dilarutkan dalam pelarutnya dan diambil beberapa tetes kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi. Pada sampel tersebut ditambahkan pereaksi wagner. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya endapan cokelat.

## Uji pereaksi dragendorff
Disiapkan ekstrak daun buni  yang dilarutkan dalam pelarutnya dan diambil beberapa tetes kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi. Pada sampel tersebut ditambahkan pereaksi dragendorff. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya endapan jingga atau cokelat.

## Analisis Tanin
Disiapkan ekstrak daun buni 1 ml. Ditambahkan beberapa tetes larutan besi (III) Klorida 1%. Perubahan  yang  terjadi  diamati,  terbentuknya  warna  biru  tua  atau  hitam  kehijauan menunjukkan adanya  senyawa tanin.

## Analisis Flavonoid
Ekstrak  daun  buni  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi.  Ditambahkan  pada  sampel  berupa serbuk Magnesium 2 N sebanyak 2 mg dan diberikan 3 tetes HCl pekat. Sampel dikocok dan diamati perubahan yang terjadi, terbentuknya warna merah, jingga atau kuning pada larutan menunjukkan adanya flavonoid.

## Analisis Saponin
Disiapkan  ekstrak  daun  buni  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi.  Air  panas  ditambahkan pada sampel. Perubahan yang terjadi terhadap terbentuknya busa diamati, reaksi positif jika busa stabil selama 30 menit dan tidak hilang pada penambahan 1 tetes HCl 2 N.

## Pemilihan dan penyiapan Hewan uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  sebanyak  18  ekor. Merupakan  tikus  dewasa  dan  sehat  dengan  berat  badan  rata-rata  150-250  g  yang  dibagi menjadi 5 kelompok dan tiap kelompok terdiri atas 3 ekor. Dosis untuk senyawa uji ekstrak etanol  daun  Buni  terhadap  tikus  putih  ditetapkan  secara  kelipatan  yaitu  5;  50  dan  500 mg/kgBB secara oral.

## Perlakuan terhadap hewan uji
Hewan  percobaan  dipuasakan  dahulu  selama  8-12  jam.  Hewan  dikelompokkan  menjadi  5 kelompok, tiap kelompok terdiri dari 3 ekor tikus putih dengan berat badan 150-250 gram. Timbang  masing-masing  hewan,  catat  berat  badannya  dan  ukur  volume  kaki  tikus  dengan alat pletismometer sebagai volume awal (Vo). Setelah itu, hewan diinduksi dengan karagenan 1%  secara  sub-plantar.  Setelah  60  menit  masing-  masing  diukur  volume  edema  kaki menggunakan  alat  pletismometer,  kemudian  diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  daun  buni, Na.CMC  dan  suspensi  obat  diberikan  secara  peroral  pada  tikus  sesuai  dengan  kelompok perlakuannya, yaitu sebagai berikut:
Kelompok I beri Na CMC 1% dan diberikan sebanyak 1% dari berat badan secara oral sebagai kontrol negatif.
Kelompok II diberi natrium diklofenak 1% secara oral sebagai kontrol positif. Kelompok III diberi ekstrak etanol daun Buni dengan dosis 5 mg/kgBB secara oral. Kelompok IV diberi ekstrak etanol daun Buni dengan dosis 50 mg/kgBB secara oral. Kelompok IV diberi ekstrak etanol daun Buni dengan dosis 500 mg/kgBB secara oral. Volume  udem  diukur  pada  jam  ke-1,  2,  3,  4,  dan  5  dengan  menggunakan  alat plethysmometer/ pletismometer.

## Pengujian efek antiinflamasi
Metode  pengujian  efek  antiinflamasi  suatu  bahan  obat  dilakukan  berdasarkan  kepada kemampuan  obat  uji  mengurangi  atau  menekan  derajat  udem  pada  hewan  percobaan.
Induksi udema dilakukan pada kaki hewan percobaan dalam hal ini tikus putih, dengan cara menyuntikkan karagenan secara intraplantar. Kemudian obat diberikan secara oral. Ukuran udem  kaki  tikus  diukur  dengan  alat  (Plethysmometer).  Efek  anti  inflamasi  obat  uji ditunjukksan dengan kemampuannya mengurangi udema yang diinduksi pada kaki hewan uji (Alfi Inayati, 2010).

## Analisis Hasil
Hasil pengujian efek antiinflamasi dibandingkan dengan kontrol negatif dan kontrol positif. Efek  antiinflamasi  sampel  dihitung  dengan  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL) kemudian diuji lanjutan menggunakan Uji Beda Nyata Jarak Duncan (BNJD).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Ekstraksi Daun Buni
Daun buni yang telah ditimbang sebanyak 500 g, yang selanjutnya akan diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan larutan penyari etanol 96%. Diperoleh hasil ekstrak kental, dapat dilihat pada (tabel. 1).
Tabel 1. Hasil Ekstraksi Daun buni ( Antidesma bunius L. Spreng)
No. Sampel Berat sampel Berat ekstrak % rendamen 1. Daun Buni 500 gram 57,8 gram 11.56 %

## Hasil Pengujian Anti inflamasi
Pada  pengujian  aktivitas  antinlamasi,  tikus  setiap  kelompok  dipuasakan  selama  8  jam  dan ditimbang berat badannya, untuk mengetahui volume pemberian obat yang sesuai. Dilakukan pengukuran  volume  awal  (normal)  pada  kaki  kiri  tikus  untuk  mengetahui  volume  kaki sebelum  pengukuran  lebih  lanjut  dengan menggunakan  alat  ukur Pletismomet er Panlab  LE 7500 .  Setelah  itu  masing-masing  kelompok  dinduksi  dengan  karagenan,  dengan  cara disuntikkan secara intraplantar pada bagian kaki tikus. Setelah diinduksi dengan karagenan, ditunggu  selama  1  jam,  hal  ini  disebabkan  karena  selama  waktu  1  jam  setelah  pemberian karagenan  terjadi  pelepasan  mediator-mediator  inflamasi.  Lalu  dilakukan  pengukuran volume  kaki  kiri  tikus  setelah  induksi  dengan  alat  ukur Pletismometer  Panlab  LE  7500 , kemudian  diberikan  ekstrak  dengan  dosis  5  mg/kg  BB,  50  mg/kg  BB  dan  500  mg/kg  BB serta  kontrol  positif,  dan  kontrol  negatif  sesuai  kelompok  perlakuannya.  Diukur  volume penurunan edema setiap 1 jam selama 5 jam dengan menggunakan alat Pletismometer Panlab LE  7500 .  Pada  jam-jam  pertama  akan  timbul  mediator-mediator  inflamasi  seperti  histamin dan serotonin berlangsung selama 90 menit, ini merupakan fase pertama dari pembentukan edema. Fase kedua yaitu pelepasan bradikinin selama 1,5-2,5 jam setelah induksi. Pada fase ketiga  adalah  terjadi   pelepasan   prostaglandin  pada  3 jam  setelah.  Edema  yang  dihasilkan berkembang cepat dan maksimal sekitar 5 jam setelah induksi. Bertahan selama 6  jam  dan berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam.
Dari  pengujian  diatas  diperoleh  data  volume  penurunan  edema  kaki  tikus  Dari  data  yang diperoleh kemudian dihitung penurunannya dengan cara menghitung selisih antara volume setelah  induksi  dengan  karagenan  dengan  rata-rata volume  terapi.  Hasil  penelitian terlihat bahwa semua kelompok perlakuan mengalami penurunan  edema kecuali kelompok kontrol negatif. Pada kelompok kontrol negatif yang diberi Na.CMC pada data hasil penelitian terjadi peningkatan  edema  hal  ini  disebabkan  pada  kelompok  kontrol  negatif  yang  di  induksi karagenan tidak diberi perlakuan apapun sehingga tidak ada rangsangan berupa obat untuk mengurangi edema, sehingga penurunan edemanya 0.
Tabel  2.  Hasil  pengukuran  rata-rata  penurunan  volume  edema  telapak  kaki  tikus  awal, setelah induksi, terapi, dan volume penurunannya.
Dari  data  hasil  pengukuran  volume  edema  kaki  tikus  selama  5  jam,  menunjukkan  adanya aktivitas  antinflamasi  yang  dihasilkan,  hal  ini  disebabkan  karena  kemungkinan  adanya penghambatan  enzim  siklooksogenase  yang  disebabkan  oleh  flavonoid  yang  tersari  dalam ekstrak,  flavonoid  mempunyai  kemampuan  dalam  menghambat  enzim  lipooksigenase dansiklooksigenase.  Flavanoid  terutama  bekerja  pada  endotelium  mikrovaskular  untuk mengurangi  terjadinya  hiperpermeabilitas  dari  edema.  Flavonoid  memiliki  kemampuan memblok  siklooksigenase  dan  lipooksigenase  asam  arakidonat  sehingga  sintesis  PEG2, leukotrien,  histamin,  bradikinin dan tromboksan  terhambat.  Adanya  kemampuan flavonoid dalam menghambat sintesis mediator inilah yang berperan dalam mengurangi edema. Selain menghambat  metabolisme  asam  arakidonat,  flavonoid  juga  menghambat  sekresi  enzim lisosom  yang  merupakan  mediator  inflamasi.  Penghambatan  mediator  inflamasi  ini  dapat menghambat poliferase dari proses radang. Pada penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak dengan  dosis  50  mg/kg  BB  memiliki  aktivitas  yang  baik,  hal  ini  mungkin  disebabkan  oleh semakin  tinggi  konsentrasi  zat  aktif  yang  terkandung  di  dalamnya  semakin  banyak  yang memberikan  aktivitas  antinflamasi,  yang  artinya  zat  aktif  pada  konsentrasi  tersebut  sudah mempunyai  kemampuan  yang  cukup  baik  untuk  menurunkan  volume  edema  yang  hampir sama  dengan  suspensi  natrium  diklofenak.  Untuk  dosis  5  mg/kg  BB  juga  memiliki kemampuan  menurunkan  edema  tetapi  belum  maksimal  dan  lebih  rendah  kemampuannya dibanding kontrol  positif, sedangkan dosis 500 mg/kg BB juga terbukti dapat menurunkan edema  akan  tetapi  berpengaruh  lebih  rendah  dibanding    dosis  50  mg/kg  BB  dapat dikarenakan  konsentrasi  zat  terlalu  besar  sehingga  kemungkinan  dapat  terjadi  overdosis atau  toksik.  Dengan  demikian,  ekstrak  dosis  50  mg/kg  BB  dapat  digunakan  sebagai  dosis awal dalam pengobatan radang (inflamasi).
Hasil  analisis  data  secara  statistik  dengan  menggunakan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) pada taraf kepercayaan 0,05% F-hitung lebih besar dan F-tabel, F-hitung sebesar 19.1 > F-tabel sebesar 2.919 yang menunjukkan perbedaan signifikan artinya ada perbedaan efek antara  perlakuan,  sehingga  dikatakan  bahwa  ada  pengaruh  yang signifikan dari pemberian ekstrak  daun  buni  terhadap  aktivitas  antiinflamasi.  Uji  BJND  (Beda  Jarak  Nyata  Duncan) menunjukkan bahwa kelompok perlakuan dengan dosis 50 dan 500 mg/kg BB menunjukkan
efek  antiinflamasi  dengan  yang  berpengaruh  nyata  pada  dosis  50  mg/kg  BB  dan  berbeda pengaruhnya secara nyata antar perlakuan dengan pembanding Natrium diklofenak.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  96%  daun  buni  ( Antidesma bunius L. Spreng)  memiliki  aktivitas  antiinflmasi terhadap tikus jantan ( Rattus norvegicus) yang diinduksi karagenan. Efek antiinflamasi yang paling  besar  dari  ekstrak  etanol  96%  daun  buni  ( Antidesma  bunius L. Spreng)  ditunjukkan pada dosis 50 mg/kg BB.

## DAFTAR PUSTAKA
Inayati, Alfi. Uji Efek Analgetik dan Antiinflamasi Ekstrak Etanol 70% Daun Sirih (Piper betle Linn)  Secara In vivo. Skripsi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu  Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. 2010.
Inrawati,  I.  &  Rizki,  A.  F.  M. Potensi  Ekstrak  Buni  (Antidesma  bunius L) sebagai  Antibakteri dengan Bakteri Uji Salmonella thypimurium dan Bacillus cereus. Jurnal Biodjati, 2 (2). 2017. Kumar V., Cotran R. S., Robbins S. L. Buku Saku Dasar Patologi Penyakit. Cetakan I. Jakarta: EGC. 2009. Mycek, J.Mary., Harvey. Farmakologi Ulasan Bergambar . Widya Medika: Jakarta . 2009. Mycek, J.Mary., Harvey. Farmakologi Ulasan Bergambar . Widya Medika: Jakarta . 2009. Nijveldt.  R,  J.,  dkk. Flavonoids;  a  Review  of  Probable  Mechanisms  of  Action  and  Potential Applications. American Journal of Clinical and Nutrition Vol 74. America. 2001.