## PEMETAAN  KARAKTERISTIK  KIMIA  BIJI  KOPI  ARABIKA  GAYO  DAN ROBUSTA  GAYO

## [Mapping the Chemical Characteristics of Gayo Arabica and Robusta Grean Coffee Beans]

## Maya Saputri, Hanifah Nuryani Lioe*, dan C. Hanny Wijaya
Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Diterima 10 Juli 2019 / Disetujui 18 Mei 2020

## ABSTRACT
The distinctive aroma and taste of roasted coffee can b e due to varietal differences in green coffee b eans.  The purpose of this research  was to map the chemical characteristics of  green coffee b eans of Gayo  arab ica  and  Gayo  rob usta  using principal component analysis  (PCA) approach. Other analyses include pH using pH meter, total fats b y Soxhlet method, total ash b y gravimetric method, total protein b y Kjeldahl method, total carb ohydrates b y difference , total solub le solids (TSS) b y refractometer, organic acids composition b y HPLC-UV/Vis, and total amino acids composition b y UHPLC-PDAD. Six green coffee b ean  samples  of  Gayo  arab ica  and  Gayo  rob usta  from  different  locations  in  Gayo,  Aceh,  as  well  as samples of arab ica and rob usta coffee b eans each from plantation in West Java, Central Java and East Java (as comparators) were used in this study. The results showed the chemical characteristics of Gayo arab ica and Gayo rob usta could b e mapped b y PCA b ased on the concentrations of fats, organic acids and carb ohydrates. The organic acid composition of Gayo arab ica was associated with malic acid, succinic acid  and  citric  acid,  while  Gayo  rob usta  to  acetic acid. The organic acids as well as TSS of  the coffee b eans could map Gayo arab ica separately from  Java arab ica. Gayo arab ica had higher organic acids, whereas  Java  arab ica  had  higher TSS. Gayo rob usta were characterized b y higher fats, ash and total amino acids, b ut lower TSS than Java rob usta. This study suggested the distinct characteristics of Gayo coffee b eans to their corresponding coffee b eans from Java.
Keywords: amino acid composition, chemical characteristic, green coffee b eans, organic acid compo- sition, principal component analysis

## ABSTRAK
1
Perbedaan varietas dapat menyebabkan aroma dan rasa khas kopi hasil penyangraian berbeda . Tujuan  dari penelitian ini adalah untuk memetakan karakteristik kimia biji kopi hijau  arabika gayo dan robusta gayo dengan pendekatan principal component analysis (PCA). Analisis pH dengan pH meter, total lemak dengan metode Soxhlet, total abu dengan metod e gravimetri, total protein dengan metode Kjeldahl, total karbohidrat b y difference , total padatan terlarut (TPT) dengan refraktometer, kompos isi asam organik dengan  HPLC-UV/Vis,  dan  komposisi  total asam amino oleh UHPLC -PDAD dari kedua jenis biji kopi dilakukan. Enam sampel biji kopi hijau arabika gayo dan robusta gayo dari berbagai lokasi di Gayo, Aceh, serta sampel biji kopi arabika dan robusta masing-masing dari perkebunan di Jawa Barat, Jawa Tengah dan Jawa Timur (sebagai pembanding) digunakan dalam pe nelitian ini. Hasil penelitian menunjukkan karakteristik kimia arabika gayo dan robusta gayo dapat dipetakan dengan PCA berdasarkan konsentrasi lemak, asam organik dan karbohidrat. Komposisi asam organik dari arabika gayo dihubungkan dengan asam malat, asam suksinat dan asam sitrat, sementara robusta gayo dengan asam asetat. Asam organik serta TPT biji kopi dapat memetakan arabika gayo terpisah dari arabika jawa. Arabika gayo memiliki asam organik yang lebih tinggi, sedangkan arabika jawa memiliki TPT yang lebih tinggi. Robusta gayo ditandai dengan kadar lemak, kadar abu dan asam amino total yang lebih tinggi, tetapi TPT lebih rendah daripada robusta jawa. Studi ini menunjukkan karakteristik biji kopi hijau baik arabika maupun robusta dari Gayo berbeda dengan karakteristik biji kopi hijau sejenis  dari Jawa.
Kata kunci: biji kopi, karakteristik kimia, komposisi asam amino, komposisi asam organik, principal com- ponent analysis
*Penulis Korespondensi: E-mail: hanifahlioe@apps.ipb.ac.id

## PENDAHULUAN
Biji  kopi  dihasilkan  dari  tanaman  kopi  yang umumnya  dipakai  sebagai minuman  yang  memiliki aroma  dan  rasa  yang  khas  setelah  disangrai.  Kon- sumsi  kopi  di  dunia  meningkat  setiap  tahunnya.  Hal ini  dapat  dilihat  pada  tahun  2012,  yaitu  konsumsi mencapai  8,5  juta  ton  (ICO,  2014)  dan  terus  me- ningkat  hingga  tahun  2019  yaitu  sebanyak  10  juta ton (USDA,  2019).
Genus Coffea  arabica dan Coffea  robusta yang biasa  dikenal  dengan  kopi  arabika  dan  kopi  robusta banyak  dibudidaya  di  Indonesia.  Spesies  arabika mendominasi  dataran  tinggi  dengan  ketinggian  600- 1800  meter  dpl,  sedangkan  spesies  kopi  robusta tumbuh  di  daerah  yang  kurang  dari  1000  meter  dpl. (Frega et  al., 2015).  Kopi  arabika  dan  robusta  juga mengalami  waktu  pemanenan  dan  proses  pengolah- an  pasca  panen  yang  berbeda  (Velasques et  al., 2019).  Proses  pengolahan  pasca  panen  yang  di- maksud,  yaitu  proses  kering  dan  proses  basah  (Lee et  al .,  2015)  yang  juga  umum  ditemukan  pada  biji kopi  dalam  perdagangan  internasional.  Perbedaan tersebut  mengakibatkan  perbedaan  karakteristik  ki- mia  biji  kopi.  Komposisi  kimia  yang  berbeda membe- rikan  citarasa  kopi  sangrai  (untuk  kopi  siap  konsum- si) yang berbeda.
Menurut  Rendon et  al. (2014)  kopi  arabika  me- miliki flavor dan  rasa  yang  lebih  disukai  oleh  para konsumen  dibandingkan  kopi  robusta.  Tingginya kualitas  citarasa  kopi  arabika  menyebabkan  nilai komersial  kopi  tersebut  juga  tinggi,  hal  ini  memung- kinkan  terjadinya  pencampuran  antara  kopi  arabika dan  robusta  (Giraudo et  al., 2019)  dalam  perda- gangan.  Pencampuran  dapat  terjadi  baik  pada  biji kopi  (sebelum  disangrai)  maupun  kopi  yang  telah disangrai.  Selain  itu,  menurut  penelitian  Teuber (2010),  daerah  asal  kopi  merupakan  penentu  pen- ting  harga  kopi  di  pasar.  Hal  ini  memungkinkan  kopi jenis  tertentu  tetapi  dari  daerah  berbeda  (berbeda varietas)  dicampur.  Perbedaan  varietas  biji  kopi  tel- ah  dikenali  dari  komposisi  kimia,  terutama komposisi fraksi  berberat  molekul  besar  (protein  teranalisis pada  280  nm)  maupun  komponen  volatilnya  (Smrke et  al., 2015)  yang  didukung  dengan  uji  statistik multivariate  analysis menggunakan principal  compo- nent analysis (PCA).  Uji  statistik  dengan multivariate analysis juga  berhasil  membedakan  kopi  berbeda varietas  dari  berbagai  daerah,  hanya  dari  karakteris- tik komposisi mineral  biji kopi (Habte et al., 2016).
Biji  kopi  arabika  ditandai  dengan  ukuran  yang lebih  besar,  berbentuk  oval  dan  warna  hijau  pucat sedangkan  biji  kopi  robusta  ditandai  dengan  ukuran yang  lebih  kecil,  cenderung  bulat  dan  warnanya yang  kecokelatan  (Ghosh  dan  Venkatachalapathy , 2014).  Pencampuran  biji  kopi  dapat  dikenali  dengan mengetahui  karakteristik  kimia  maisng-masing  biji kopi  seperti  komposisi  asam  amino  (Dong et  al.,
2017),  komposisi  asam  organik  (Borem et  al., 2016; Casas et  al., 2017)  dan  kandungan  kafein  (Dong et al., 2017).  Karakteristik  kimia  biji  kopi  dari  Gayo, baik  arabika  maupun  robusta  yang  produknya  dike- tahui  memiliki  preferensi  konsumen  yang  relatif tinggi  di  Indonesia,  belum  diungkap  dengan  baik. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  mengetahui  karak- teristik  kimia  biji  kopi  hijau  yang  berasal  dari  Gayo, baik  arabika  gayo  maupun  robusta  gayo,  serta  me- metakannya  dan  membandingkannya  dengan  karak- teristik  biji  kopi  sejenis  dari  Jawa.  Uji  statistik  de- ngan  PCA  digunakan  untuk tujuan  pemetaan  ini.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  biji  kopi  arabika  gayo  ( Coffea arabica L.) dan  robusta  gayo  ( Coffea robusta L . ) yang  diperoleh dari  petani  kopi  di  tiga  lokasi  berbeda  di  dataran tinggi  Gayo,  yaitu:  untuk  kopi  arabika  gayo diperoleh dari  (1)  Kecamatan  Kabayakan,  (2)  Kecamatan Jaluk  dan  (3)  Kecamatan  Bintang,  selanjutnya  dise- but  sampel  AG  1,  AG  2  dan  AG  3, sedangkan untuk biji  kopi  robusta  gayo  diperoleh  dari  (1)  Kecamatan Lut  Tawar,  (2)  Kecamatan  Ketol  dan  (3)  Kecamatan Blang  Mancung,  Provinsi  Aceh,  selanjutnya  disebut sampel  RG  1,  RG  2  dan  RG  3.  Biji  kopi  arabika  dan robusta  pembanding  diperoleh  dari  petani  kopi  di berbagai  provinsi  di  Pulau  Jawa:  (1)  Jawa  Timur,  (2) Jawa  Barat  dan  (3)  Jawa  Tengah,  selanjutnya masing-masing  disebut  sampel  AJ  1,  AJ  2  dan  AJ  3 untuk  arabika  jawa,  sedangkan  sampel  robusta  jawa diberi  kode  RJ  1,  RJ  2  dan  RJ  3.  Pengambilan  sam- pel  dilakukan  dua  ulangan  (duplikat).  Dalam  peneli- tian  ini,  diketahui  dari  petani  kopi  bahwa  biji  kopi arabika  baik  dari  Gayo  maupun  dari  Jawa  semua- nya  diproses  dengan  cara  basah,  sedangkan  biji kopi  robusta  baik  dari  Gayo  maupun  dari  Jawa  di- proses  dengan  cara  kering.

## Persiapan sampel
Sampel  biji  kopi  yang  berwarna  hijau  dan  ke- ring  dari  petani  kopi  direduksi  ukurannya  sebelum dianalisis  dengan  cara  digiling  menggunakan  peng- gilingan  tradisional  buatan  lokal  yang  digerakkan dengan  listrik  ( Grinding  machine ,  CV.  Agromesin, Indonesia)  dengan  kapasitas  250  g  biji  kopi  dan selanjutnya  hasil  gilingan  berupa  bubuk  diseragam- kan  ukurannya  menggunakan  saringan  ukuran  40 mesh.  Hal  ini  dilakukan  agar  memudahkan  homo- genisasi  sampel,  sehingga  memberikan  hasil  anali- sis  yang  lebih  baik.  Sampel  dikemas  dalam  kantong plastik  berbahan  polietilen  berlapis  dua  dan  disim- pan  pada  suhu refrigerator (4-10°C)  hingga  dilaku- kan  analisis.  Cara  persiapan  sampel  ini  mengikuti persiapan  sampel  pada  penelitian  biji  kopi  arabika
dan  robusta  yang  dilakukan  oleh  Dias  dan  Benassi (2015).

## Karakterisasi  kimia biji kopi
Setiap  sampel  biji  kopi  dari  persiapan  sampel di atas  dianalisis  proksimat,  pH,  total  padatan  terlarut (TPT),  komposisi  asam  organik  dan  komposisi  asam amino.  Prosedur  analisis  dijelaskan  di  bawah  ini. Analisis  proksimat  dilakukan  mengikuti  metode AOAC  (2012).  Analisis  terdiri  dari  analisis  kadar  air dengan  cara  gravimetrik  menggunakan  oven  biasa pada  suhu  105°C,  analisis  kadar  abu  dengan  cara gravimetrik  menggunakan  tanur  pada  suhu  550°C, analisis  kadar  lemak  dengan  cara  gravimetrik  meng- gunakan  alat  ekstraksi  Soxhlet  dan  oven  biasa  pada suhu  105°C,  analisis  kadar  protein  dengan  cara  titri- metrik  menggunakan  alat  destruksi  dan  destilasi Kjeldahl,  dan  analisis  kadar  karbohidrat  diakukan dengan  cara by  difference .  Analisis  dilakukan  duplo. Pengukuran  pH  dilakukan  menggunakan  pH  meter (Eutech  Instrument,  Singapore)  dengan  cara  seba- gai  berikut.  Sampel  biji  kopi  sebanyak  1,0  g  yang sudah  dihaluskan,  ditambahkan  100  mL  akuades dan  dihomogenkan  selama  10  menit.  pH  meter  di- kalibrasi  menggunakan  bufer  standar  pH  4  dan  7 (Merck,  Jerman).  Selanjutnya  pH  sampel  diukur duplo.
Pengukuran  total  padatan  terlarut  (TPT)  dilaku- kan  dengan  refraktometer  Abbe  (Atago,  Japan). Sampel  biji  kopi  yang  telah  dihaluskan  sebanyak  1,0 g  ditambah  5  mL  akuades  dan  dibaca  kadar  padatan terlarutnya  pada  skala  °Brix.  Pengukuran  dilakukan duplo.
Analisis  komposisi  asam  organik  dilakukan mengikuti  prosedur  Borem et  al .  (2016).  Sebanyak 1,0  g  sampel  biji  kopi  yang  telah  dihaluskan  di- ekstraksi  menggunakan  50  mL  air  deionisasi  pada suhu  70°C  selama  30  menit.  Selanjutnya  ekstrak  di- tepatkan  volumenya  menggunakan  labu  ukur  100 mL  dengan  penambahan  fase  gerak  HPLC  yaitu  4 mM  asam  sulfat  (Merck,  Jerman)  dalam  akuabides lalu  disaring.  Kemudian  3  mL  ekstrak  disaring  SPE silika  60  sekitar  1  g  (Merck,  Jerman).  Penentuan kuantitatif  asam  organik  (asam  oksalat, asam asetat, asam  malat,  asam  sitrat,  asam  suksinat  dan  asam format  (Bio-Rad,  Amerika  Serikat)  dilakukan  meng- gunakan  HPLC-UV/VIS  (MWD) Agilent 1200 series (Agilent  Technologies,  USA)  dengan  kondisi  sebagai berikut:  kolom:  Aminex  HPX-87H  300×7,8  mm,  Bio- Rad;  fase  gerak:  4  mM  asam  sulfat  dalam  akuabi- des;  waktu  elusi:  20  menit;  laju  alir:  0,6  mL/menit; suhu  kolom:  suhu  ruang;  volume  sampel :  20  μL; detektor: Multiwavelength  detector (MWD);  deteksi: UV  pada  215  nm.  Kuantifikasi  dilakukan  dengan  per- bandingan  luas  area peak sampel  dengan peak yang  berkaitan  dari  standar.  Larutan  standar  yang terdiri  dari  campuran  asam  oksalat  72,02  µg/mL, asam  sitrat  768,50  µg/mL,  asam  malat  1072,70
µg/mL,  asam  suksinat  2361,80  µg/mL,  asam  format 920,50  µg/mL,  dan  asam  asetat  2402,00  µg/mL  di- injeksi  ke  HPLC  pada  kondisi  yang  sama  secara terpisah.
Analisis  komposisi  asam  amino  dilakukan  de- ngan  hidrolisis  0,1  g  sampel  biji  kopi  yang  telah  di- haluskan  menggunakan  5  mL  HCl  6N  selama  22 jam  pada  suhu  110°C.  Hasilnya  ditepatkan  dengan labu  ukur  50  mL  memakai  akuades.  Hidrolisat  di- saring  menggunakan  membran  PVDF  0, 45  μm (Milipore,  Amerika  Serikat).  Filtrat  yang  dihasilkan dipipet  sebanyak  500  μL  dan  ditambah  larutan stan- dar  internal alpha  amino  butyric  acid (AABA)  seba- nyak  40 dan  460  μL akuades. Campuran larutan ter- sebut  dipipet kembali sebanyak 10 μL dan kemudian ditambah  70  μL  AccQ-Fluor  borat  dan  20  μL  AccQ Tag  Fluor  reagen  sebagai  pengekstrak.  Larutan diinkubasi  selama  10  menit  pada  suhu  55°C  dan siap  untuk  dianalisis.  Metode  ini  mengikuti  prosedur dari  Waters  Corporation  (2012).  Penentuan  kuantita- tif  asam  amino  dilakukan  menggunakan  UPLC- PDAD  (Waters  Corporation,  USA)  dengan  kondisi sebagai  berikut:  Kolom:  AccQ-Tag  Ultra  C18  (2,1 ×100  mm);  temperatur:  49°C;  fase  gerak:  sistem komposisi  gradien  yang  terdiri  dari  fase  gerak  A: Eluent  AccQ-Taq  Ultra  from  water  (part  no. 186003838),  fase  gerak  B:  10%  fase  gerak  D,  fase gerak  C:  air  Milli-Q,  fase  gerak  D:  Eluent AccQ-Taq Ultra  from  Waters  (part  no.  186003839);  Laju  alir: 0,7  mL  per  menit;  Detektor: photo  diode  array (PDA),  deteksi  pada  panjang  gelombang  UV  260 nm; v olume  injeksi: 10 μL.

## Analisis  statistik
Data  dianalisis  menggunakan one  way  analysis of  varians (ANOVA).  Jika  terdapat  perbedaan  nyata yang  signifikan  maka  diuji  lebih  lanjut  menggunakan uji  Duncan  (DMRT)  pada P <0,05,  menggunakan SPSS  20.0.  Pemetaan  data  hasil  analisis  dilakukan dengan  analisis  multivariat principal component ana- lysis  (PCA)  menggunakan XLSTAT versi  2016.02. 28451  (Addinsoft,  Amerika)  berdasarkan  karakteris- tik kimia biji kopi yang dianalisis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakteristik  kimia biji kopi arabika gayo
Biji  kopi  arabika  yang  berasal  dari  berbagai  lo- kasi  di  daerah  Gayo,  yaitu  AG  1,  AG 2 dan AG 3, di- hasilkan  melalui  proses  basah  yaitu  melibatkan  pro- ses  fermentasi  yang  dilakukan  oleh  para  petani.  Ber- dasarkan  hasil  analisis  biji  kopi  arabika  gayo  (Tabel 1),  nilai  pH  yang  diperoleh  bervariasi  antara  5,2 hingga  5,8,  sedangkan  pH  sampel  biji  kopi  arabika jawa  berkisar  antara  4,9  hingga  5,3,  dengan  demi- kian  pH  sampel  biji  kopi  arabika  gayo  relatif  lebih tinggi  daripada  arabika  jawa.
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 Asam
Oksalat Asam Sitrat Asam Malat Asam Suksinat Asam Format Asam Asetat
K o n s e n tr a s i (% b k) Jenis  Asam Organik A AG 1 AG 2 AG 3 AJ 1 AJ 2 AJ 3 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 Asam
Oksalat Asam Sitrat Asam Malat Asam Suksinat Asam Format Asam Asetat
K o n s e n tr a s i (% b k) Jenis  Asam Organik B RG 1 RG 2 RG 3 RJ 1 RJ 2 RJ 3
Tabel  1. Komposisi kimia biji kopi arabika  dan  robusta  dari  Gayo dan  Jawa
Komposisi Konsentrasi * Arabika Gayo Arabika Jawa Robusta Gayo Robusta Jawa Kadar air (% bk) 116,44±20,58 106,91±8,07 107,79±5,55 104,39±0,53 Kadar abu (% bk) 4,67±0,97 4,27±0,68 4,97±0,19 4,77±0,64 Kadar protein (% bk) 14,90±1,49 14,75±0,70 16,13±0,67 16,52±0,96 Kadar lemak (% bk) 13,91±2,81 14,75±1,08 13,15±3,54 10,67±0,52 Kadar karbohidrat (% bk) 66,50±0,45 66,54±0,24 65,74±2,68 68,04±1,58 pH 5,66±0,39 5,10±0,17 4,89±0,44 5,71±0,61 TPT (% bk) 12,74±3,99 14,83±1,85 14,09±3,35 17,90±1,97 Asam amino total (% bk) 13,09±1,96 10,61±0,74 14,28±3,23 12,00±1,77 Asam organik total (% bk) 2,03±1,50 1,52±0,84 3,50±0,66 2,22±1,31
Keterangan: *% bk adalah persentase g/100 g berdasarkan basis kering.  Nilai tidak berbeda nyata diantara sampel arabika dan robusta ( P >0,05). TPT adalah total padatan terlarut (refraktometer Abbe)
Menurut  literatur,  pH  biji  kopi  arabika  berkisar antara  5,30  hingga  6,07  (Abubakar et  al., 2011;  Lee et  al., 2017),  dengan  demikian  biji  kopi  arabika  gayo masuk  dalam  rentang  ini.  Fermentasi  biji  kopi  yang terjadi  pada  proses  basah  dapat  menyebabkan  pe- ningkatan  kadar  asam  laktat  pada  biji  kopi  arabika, sehingga  dapat  menurunkan  pH  dan  meningkatkan keasaman  biji  kopi (Afriliana et  al., 2018).  Asam laktat  diproduksi  selama  fermentasi  biji  kopi  karena aktivitas  mikroba.  Asam  laktat  tidak dianalisis karena keterbatasan  senyawa  standar  yang  tersedia  tetapi jenis  asam  organik  lain  dapat  dianalisis  (Gambar  1), yaitu  asam  asetat,  asam  sitrat,  asam  malat  dan asam  suksinat,  yang  dominan  ditemukan  pada  biji kopi arabika  gayo, serta biji kopi  robusta  gayo.
Nilai  TPT  sampel  biji  kopi  arabika  gayo,  berki- sar  9,39-17,16%  bk,  relatif  lebih  kecil  dibandingkan nilai  TPT  biji  kopi  arabika  jawa  yang  berkisar  13,37- 16,91%  bk  (Tabel  1).  Padatan  terlarut  diantaranya berupa  asam  organik,  asam  amino  dan  karbohidrat sederhana  dapat  berkontribusi  terhadap  citarasa dan  pembentukan  aroma  kopi  yang  telah  disangrai (Borem et  al., 2016).  Proses  fermentasi  yang  dite- rapkan  pada  biji  kopi  arabika  gayo  kemungkinan berbeda  dari  proses  pengolahan  biji  kopi  arabika jawa,  sehingga  memberikan  nilai  TPT  yang  berva- riasi.
Pada  penelitian  ini,  kisaran  total  asam  organik sampel  biji  kopi  arabika  gayo  adalah  0,68-3,65%  bk. Total  asam  organik  biji  kopi  arabika  jawa  relatif  lebih rendah  akan  tetapi  berada  dalam  kisaran  total  asam organik  biji  kopi  tersebut  yaitu  0,82-2,45%  (bk) (Gambar  1).  Proses  fermentasi  dalam  pengolahan biji  kopi  cara  basah  memengaruhi  kadar  asam  orga- nik  biji  kopi.  Beberapa  asam  organik  yang  relatif tinggi  konsentrasinya  dalam  biji  kopi  arabika  adalah asam  sitrat,  asam  malat  dan  asam  asetat  (Gambar 1).  Asam  organik  merupakan  senyawa  penting  da- lam  pembentukan  rasa  dan  aroma  kopi  setelah  di- sangrai,  sehingga  kadar  asam  organik  yang  lebih tinggi  memungkinkan  biji  kopi  arabika  gayo  memiliki citarasa  yang  lebih  baik  dibandingkan  arabika  jawa ( Diviš et al., 2019).
Gambar  1.   Komposisi  asam  organik  (g/100  g  biji kopi  basis  kering)  pada:  (A)  biji  kopi arabika  (asal  dari  Gayo  AG  dan  Jawa AJ)  dan  (B)  biji  kopi  robusta  (asal  Gayo
RG  dan  Jawa  RJ)
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 His Ser Arg Gli
Asp Glu Thr Ala Pro Lis Tyr Val Ile Leu Phe
K o n s e n tra s i (% b k) Jenis Asam Amino B RG 1 RG 2 RG 3 RJ 1 RJ 2 RJ 3 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 His Ser Arg Gli Asp Glu Thr Ala Pro Lis Tyr Val Ile Leu Phe K o n s e n tra s i (% b k) Jenis Asam Amino A AG 1 AG 2 AG 3
AJ 1 AJ 2 AJ 3
Biji  kopi  mengandung  protein  yang  lebih  tinggi dibandingkan  kopi  yang  telah  disangrai,  ini  diung- kapkan  Dong et  al. (2015)  berdasarkan  hasil  analisis total  asam  amino.  Sebagian  asam  amino  bereaksi membentuk  komponen  aroma  dan  warna  kopi sangrai.  Dengan  demikian  asam  amino  yang  terkan- dung  dalam  biji  kopi  menentukan  karakteristik  kopi hasil  sangrai.  Asam  amino  total  dalam  sampel  biji kopi  arabika  gayo  berkisar  pada  11,04-14,95%  (bk) lebih  tinggi  ( P <0,05)  daripada  asam  amino  total dalam  sampel  biji  kopi  arabika  jawa,  pada  kisaran 9,81-11,27%  (bk)  (Gambar  2A).  Proses  fermentasi yang  diterapkan  dapat  mengakibatkan  konsentrasi asam  amino  dari  biji  kopi  arabika  bervariasi  (Lee et al., 2017),  sebagaimana  yang  ditemukan  pada  sam-
pel  biji  kopi  arabika  gayo  AG  1, AG 2 dan AG 3 yang berasal  dari  tiga  petani  di  lokasi  berbeda  yang  ke- mungkinan  menerapkan  proses  pengolahan  basah yang  berbeda.  Berdasarkan  hasil  analisis  pada Gambar  2A,  profil  komposisi  asam  amino  biji  kopi arabika  relatif  mirip  dengan  profil  komposisi  asam amino  biji  kopi  robusta.  Meskipun  demikian  kadar asam  amino  pada  biji  kopi  robusta  lebih  tinggi  dari- pada  biji  kopi  arabika  (Tabel  1  dan  Gambar  2A). Komposisi  asam  amino  pada  biji  kopi  arabika  yang berbeda  khususnya  kadar  lisin,  valin,  isoleusin,  feni- lalanin,  arginin,  glisin  dan  prolin.  Perbedaan  kadar asam  amino  ini  memungkinkan  terjadinya  perbeda- an  citarasa  biji  kopi  apabila  telah  disangrai  (Wong et al., 2008).
Gambar  2.   Komposisi  asam  amino  (g/100  g  biji  kopi  basis  kering)  pada:  (A)  biji  kopi  arabika  (AG  dan  AJ) dan  (B) biji kopi  robusta  (RG  dan  RJ)  dari  Gayo  dan  Jawa
AG 1 AG 2 AG 3 RG 1 RG 2 RG 3 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 F 2 (2 3 ,7 1 % ) F1 (44,39 %) A Kadar Protein Kadar Lemak Kadar Karbohidrat Kadar Abu TPT Total Asam Amino Total Asam Organik -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 F 2 (2 3 ,7 1 % ) F1 (44,39 %) B

## Karakteristik  kimia biji kopi robusta gayo
Tabel  1  menunjukkan  karakteristik  kimia  biji  ko- pi  robusta.  Hasil  analisis  pH  menunjukkan  pH  sam- pel  biji  kopi  robusta  gayo  berkisar  4,60-5,40,  lebih kecil  daripada  pH  sampel  biji  kopi  robusta  jawa  yang berkisar  5,01-6,12.  Hasil  analisis  total  padatan  terla- rut  (TPT)  menunjukkan  bahwa  nilai  TPT  sampel  biji kopi  robusta  gayo  yang  berkisar  10,56-17,23%  (bk) lebih  kecil  dibandingkan  nilai  TPT  sampel  biji  kopi robusta  jawa  yang  berkisar  16,31-20,10%  (bk) (Gambar  2).  Rendahnya  nilai  TPT  dapat  berpenga- ruh  terhadap  citarasa  biji  kopi  tersebut  (Finotello et al., 2017),  semakin  rendah  nilai  TPT  tetapi  total asam  organik  semakin  tinggi  seperti  pada  biji  kopi robusta  gayo  maka  akan  meningkatkan  keasaman biji kopi.
Berdasarkan  analisis  komposisi  asam  organik, sampel  biji  kopi  robusta  gayo  dan  robusta  jawa  ke- duanya  juga  didominasi  oleh  asam  asetat,  asam sitrat  dan  asam  malat.  Total  asam  organik  sampel biji  kopi  robusta  gayo,  yaitu  2,74-3,96%  (bk),  relatif lebih  tinggi  ( P <0,05)  dibandingkan  sampel  biji  kopi robusta  jawa,  yaitu  0,72-3,14%  (bk)  (Gambar  3). Tingginya  konsentrasi  asam  asetat,  asam  sitrat  dan asam  malat  akan  menyebabkan  tingginya  tingkat  ke- asaman  pada  biji  kopi  tersebut,  akan  tetapi  konsen- trasi  asam  asetat  yang  tinggi  juga  akan  menghasil- kan rasa  yang  tidak disukai (Lee et al., 2017).
Hasil  analisis  komposisi  asam  amino  menunjuk- kan  total  asam  amino  sampel  biji  kopi  robusta  gayo yang  berkisar  11,09-17,54%  (bk),  lebih  tinggi  daripa- da  total  asam  amino  sampel  biji  kopi  robusta  jawa yang  berkisar  10,19-13,72%  (bk)  (Gambar  2B).  Kon- sentrasi  total  asam  amino  yang  lebih  tinggi  ini  dapat memengaruhi  kualitas  citarasa  biji  kopi  robusta  gayo setelah  disangrai.
Secara  umum,  karakteristik  kimia  biji  kopi arabi- ka  berbeda  dari  biji  kopi  robusta  baik  yang  diperoleh dari  tiga  lokasi  berbeda  di  daerah  Gayo  maupun  dari tiga  provinsi  di  Pulau  Jawa  ( P <0,05)  (Tabel  1).  Hal ini  dapat  dipengaruhi  oleh  proses  pengolahan  biji kopi  yang  berbeda,  dimana  biji  kopi  arabika  diproses dengan  pengolahan  basah,  sedangkan  kopi  robusta dengan  pengolahan  kering  sebagaimana  diinforma- sikan  dalam  bagian  Bahan  dan  Metode.  Hal  ini  se- suai  dengan  penelitian  sebelumnya  yang  menggu- nakan  sampel  biji  kopi  dari  Brasil,  India  dan  Korea (Bicho et  al., 2013;  Lee et  al., 2017),  bahwa  pH  biji kopi  arabika  dan  robusta  berbeda.  Biji  kopi  arabika memiliki  nilai  pH  yang  lebih  rendah,  yaitu  pH biji kopi arabika  berkisar  4,60-5,60,  sedangkan  pH  biji  kopi robusta  berkisar  5,30-6,10.
Hal  yang  berbeda  dari  literatur  tersebut,  terlihat pada  penelitian  ini,  sampel  biji  kopi  arabika  gayo memiliki  rata-rata  nilai  pH  (5,66)  sedikit  lebih  tinggi dibandingkan  sampel  biji  kopi  robusta  gayo  (4,89). Hal  ini  ditandai  dengan  kadar  asam  organik  yang lebih  tinggi  pada  biji  kopi  robusta  (Gambar  1).  De-
ngan  demikian,  sampel  biji  kopi  robusta  gayo  memi- liki  pH  yang  sangat  berbeda  dari  biji  kopi  sejenis dari Jawa  maupun  dari  negara  lain.  Meskipun  demikian, penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Borem et  al. (2016)  mengonfirmasi  bahwa  asam  organik  pada  biji kopi  robusta  lebih  tinggi  dibandingkan  biji  kopi arabika.
Keterangan: Score plot (A) dan loading plot (B)
Gambar  3.   karakteristik  kimia  biji  kopi  arabika  gayo (AG)  dan  robusta  gayo  (RG)
Hasil  analisis  TPT  sampel  biji  kopi  menunjuk - kan  bahwa  nilai  TPT  sampel  biji  kopi  robusta  lebih tinggi  dibandingkan  nilai  TPT  sampel  biji  kopi  arabi- ka  yang  berasal  dari  daerah  yang  sama.  Hal  ini  se- jalan  dengan  kadar  asam  organik  dan  asam  amino biji  kopi  arabika  yang  lebih  rendah  daripada  biji  kopi
RG 1 RG 2 RG 3 AG 1 AG 2 AG 3 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 -4,0 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 F 2 (3 2 ,5 5 % ) F1 (46,25 %) A Asam Oksalat Asam Sitrat Asam Malat Asam Suksinat Asam Format Asam Asetat -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 F 2 (3 2 ,5 5 % ) F1 (46,25 %) B
robusta  (Gambar  1  dan  2).  Selain  itu,  proses  fer- mentasi  yang  diterapkan  pada  biji  kopi  arabika  (pro- ses  basah)  memengaruhi  kadar  gula  biji  kopi  arabi- ka,  sehingga  TPT  sampel  biji  kopi  arabika  lebih  ren- dah  (Finotello et al., 2017).
Hasil  yang  sama  dengan  TPT,  terdapat  pada hasil  analisis  asam  amino  biji  kopi  arabika  dan robusta  (Gambar  2),  biji  kopi  robusta  yang  menga- lami  proses  pengolahan  kering  memungkinkan  me- miliki  konsentrasi  asam  amino  yang  lebih  tinggi  di- bandingkan  biji  kopi  arabika  yang  mengalami  proses pengolahan  basah  ( P >0,05).  Fakta  ini  juga  terdapat pada  hasil  penelitian  lain  (Borem et  al., 2016  dan Rodrigues et al., 2007).
Pemetaan  karakteristik  kimia  biji  kopi  arabika gayo dan robusta  gayo
Pemetaan  karakteristik  kimia  biji  kopi  arabika gayo  dan  robusta  gayo,  arabika  gayo  dan  arabika jawa,  serta  robusta  gayo  dan  robusta  jawa,  diperli- hatkan  pada  Gambar  3-6.  Hasil  analisis  PCA  yang dilakukan  ditampilkan  dalam  bentuk score  plot dan loading  plot . Score  plot PCA  digunakan  untuk  meli- hat  pemisahan  sampel  biji  kopi,  sedangkan loading plot PCA  digunakan  untuk  melihat  penyebaran  ka- rakteristik  kimia  yang  menentukan  pemisahan  sam- pel  tersebut  (Giraudo et  al., 2019;  Monakhova et  al., 2015).
Hasil  analisis  PCA  biji  kopi  arabika  gayo  dan robusta  gayo  ditunjukkan  pada  Gambar  3,  pemisah- an  sampel  dapat  digambarkan  oleh  68,11%  kera- gaman  data.  Gambar  3A  menunjukkan  sampel  biji kopi  arabika  gayo  (AG  2  dan  AG  3)  dapat  dipisah- kan  dari  biji  kopi  robusta  gayo  (RG  2  dan  RG  3), meskipun  hanya  dua  dari  tiga  sampel  yang  dapat  di- petakan.  Pemisahan  sampel  ini  ditentukan  oleh  ka- rakteristik  kadar  lemak,  total  asam  organik  dan  ka- dar  karbohidrat.  Pemetaan  lebih  lanjut  komposisi asam  organik  pada  Gambar  4  menunjukkan  bahwa asam  organik  biji  kopi  arabika  gayo  berhubungan dengan  asam  malat,  asam  suksinat  dan  asam  sitrat, sedangkan  sampel  biji  kopi  robusta  gayo  berhu- bungan  dengan  asam  asetat.
Hasil  pemetaan  PCA  (Gambar  3)  terlihat  bahwa karakteristik  biji  kopi  robusta  gayo  berhubungan  de- ngan  kadar  abu,  kadar  karbohidrat  dan  kadar  pro- tein,  sedangkan  biji  kopi  arabika  gayo  berhubungan dengan  kadar  lemak  dan  total  asam  organik.  Tinggi- nya  kadar  lemak  biji  kopi  arabika  gayo  dapat  dipe- ngaruhi  oleh  ketinggian  tempat  budidaya  biji  kopi arabika  gayo,  yaitu  sekitar  1000-1400  m  di  atas  per- mukaan  laut  (Wahyuni et  al., 2013)  lebih  tinggi  di- bandingkan  tempat  budidaya  biji  kopi  robusta  gayo. Semakin  tinggi  letaknya  dari  permukaan  laut  maka sintesis  lemak  semakin  intensif  (Towaha et  al., 2015).  Dalam  penelitian  ini,  karakteristik  kimia  biji kopi  arabika  gayo  dan  robusta  gayo  dapat  dipisah- kan.  Hal  yang  sama  untuk  biji  kopi  arabika  dan  ro-
busta  lain,  telah  dibuktikan  dalam  beberapa  pene- litian (Babova et al., 2017; Ciaramelli et al., 2019).
Keterangan: Score plot (A) dan loading plot (B)
Gambar  4.   komposisi  asam  organik  biji  kopi  arabika gayo  (AG) dan  robusta  gayo (RG)
Pemetaan  karakteristik  sampel  biji  kopi  arabika gayo  dan  arabika  jawa  menggambarkan  77,09%  va- riasi  data  (Gambar  5).  Sebagian  besar  sampel  biji kopi  arabika  gayo  dan  arabika  jawa  terlihat  jelas dipisahkan  oleh  komponen  utama  F2.  Karakteristik biji  kopi  arabika  gayo  (AG  2  dan  AG  3)  berhubungan dengan  total  asam  amino  dan  total  asam  organik, sedangkan  karakteristik  biji  kopi  arabika  jawa  (AJ  2 dan  AJ  3)  berhubungan  dengan  nilai  TPT.  Hal  ini mengungkapkan  bahwa  sampel  biji  kopi  arabika gayo  dapat  dibedakan  dengan  sampel  biji  kopi  ara- bika  jawa  berdasarkan  karakteristik  total  asam  ami-
AG 1 AG 2 AG 3 AJ 1 AJ 2  AJ 3 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 -4,0 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 F 2 ( 2 1 ,2 3 % ) F1 (55,85 %) A Kadar Protein Kadar Lemak Kadar Karbohidrat Kadar Abu TPT Total Asam Amino Total Asam Organik -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 F 2 (2 1 ,2 3 % ) F1 (55,85 %) B RG 1 RG 2 RG 3 RJ 1 RJ 2 RJ 3 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 -4,0 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 F 2 (3 4 ,0 2 % ) F1 (42,06 %) A Kadar Protein Kadar Lemak Kadar Karbohidrat Kadar Abu TPT Total Asam Amino Total Asam Organik -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 -1,0 -0,8 -0,5 -0,3 0,0 0,3 0,5 0,8 1,0 F 2 ( 3 4 ,0 2 % ) F1 (42,06 %) B
no,  total  asam  organik  dan  TPT.  Tingginya  total asam  amino  dan  asam  organik  yang  menjadi  karak- teristik  biji  kopi  arabika  gayo  dibandingkan  arabika jawa  menyebabkan  kopi  ini  memiliki  potensi  kualitas rasa  kopi  sangrai  yang  lebih  baik.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  penelitian  sebelumnya  oleh Diviš et  al . (2019).
Keterangan: Score plot (A) dan loading plot (B)
Gambar  5.   Karakteristik  kimia  biji  kopi  arabika  gayo (AG)  dan  arabika  Jawa  (AJ)
Hasil  pemetaan  PCA  sampel  biji  kopi  robusta gayo  dan  robusta  jawa  menggambarkan  76,08% variasi  data  (Gambar  6).  Pemetaan  sampel  biji  kopi ini  juga  terutama  dipisahkan  oleh  komponen  utama F2.  Hasil score  plot dan loading  plot PCA  menun- jukkan  bahwa  sampel  biji  kopi  robusta  gayo  (RG  1
dan  RG  3)  berhubungan  dengan  kadar  lemak,  kadar abu  dan  total  asam  amino,  sedangkan  karakteristik sampel  biji  kopi  robusta  jawa  (RJ  2  dan  RJ  3)  ber- hubungan  dengan  nilai  TPT.  Sampel  biji  kopi  robus- ta  gayo  memiliki  kadar  lemak,  kadar  abu  dan  total asam  amino  yang  lebih  tinggi,  serta  nilai  TPT  lebih rendah  dibandingkan  sampel  biji kopi robusta  jawa.
Keterangan: Score plot (A) dan loading plot (B)
Gambar  6.   Karakteristik  kimia  kopi  robusta  gayo (RG)  dan  robusta  jawa  (RJ)
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  karak- teristik  kimia  biji  kopi  arabika  dan  robusta  dari  Gayo dapat  dipetakan  sebagai  biji  kopi  yang  berbeda  spe- siesnya.  Demikian  pula  bila  biji  kopi  arabika  atau robusta  gayo  dibandingkan  dengan  biji  kopi  arabika atau  robusta  jawa,  dalam  pemetaan  PCA,  biji  kopi
berbeda  varietas  ini  dapat  dipisahkan  berdasarkan karakteristik  kimianya.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil yang  dilaporkan  oleh  Smrke et  al. (2015)  meskipun menggunakan  karakteristik  kimia  (komponen  volatil dan  profil  berberat  molekul  besar  atau  protein  pada 280  nm)  yang berbeda  dari  penelitian  ini.

## KESIMPULAN
Pemetaan  karakteristik  kimia  biji  kopi  arabika maupun  robusta  dari  daerah  Gayo  dapat  dilakukan melalui principal  component  analysis (PCA).  Pemi- sahan  sampel  berdasarkan  karakteristik  kimianya semakin  jelas  terlihat  apabila  karakteristik  biji  kopi arabika  gayo  dipetakan  terhadap  biji  kopi  arabika jawa,  demikian  pula  karakteristik  biji  kopi  robusta gayo  dengan  biji kopi robusta  jawa,

## UCAPAN  TERIMA KASIH
Penulis  berterima  kasih  kepada  Lembaga  Pe- ngelola  Dana  Penelitian  (LPDP)  Republik  Indonesia atas  dukungan  dana  selama  penelitian  dengan kontrak no  20150611033274  Tahun  2015.

## DAFTAR PUSTAKA
Abubakar  Y,  Karim  A,  Fahlufi  F.  2011.  Flavor  of arabica  coffee  grown  in  gayo  plateau  as  affec- ted  by  varieties  and  processing  techniques . Proceedings  of  the  Annual  International  Confe- rence  Syiah  Kuala  University,  Banda  Aceh.  1: 70-75.
Afriliana  A,  Harada  H,  Khotijah  PQ,  Giyarto,  Jayus. 2018.  Fermented  technology  of  robusta  coffee beans  ( Canephora  coffee )  with  kefir  milk  to  pro- duce  specialty  coffee.  Adv  Eng  Res  172:  302- 309.  DOI:  10.2991/fanres-18.2018. 61.
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemist. 2012.  AOAC  Official  Method  of  Analysis.  19 th ed. AOAC  International  Press, Mayland  (USA).
Babova  O,  Occhipinti  A,  Maffei  ME.  2016.  Chemical partitioning  and  antioxidant  capacity  of  green coffee  ( Coffee  arabica and Coffee  canephora ) of  different  geographical  origin.  Phytochem 123:  33-39.  DOI:  10.1016/j.phytochem.2016.01. 016.
Bicho  NC,  Leitao  AE,  Ramalho  JC,  Alvarenga  NB, Lidon  FC.  2013.  Identification  of  chemical  clus - ters  discriminators  of  arabica  and  robusta green  coffee.  Int  J  Food  Prop  16:  985-904. DOI:  10.1080/10942912. 2011.573114.
Borem  FM,  Figueiredo  LP,  Ribeiro  FC,  Taveira  JHS, Giomo  GS,  Salva  TJG.  2016.  The  relationship between  organic  acid,  sucrose  and  the  quality of  specialty  coffees.  Afr  J  Agric  Res  11:  709- 717.  DOI:  10.5897/AJAR2015.10569.
Casas  MI,  Vaughan  MJ,  Bonello  P,  Gardener  BS, Grotewold  E,  Alonso  AP.  2017.  Identification  of biochemical  features  of  defective Coffea  arabi- ca L.  beans.  Food  Res  Int  95:  59-67.  DOI: 10.1016/j.foodres.2017. 02.015.
Ciaramelli  C,  Palmioli  A,  Airoldi  C.  2019.  Coffee variety,  origin  and  extraction  procedure:  Impli- cations  for  coffee  beneficial  effects  on  human health.  Food  Chem  278:  47-55.  DOI:  10.1016/j. foodchem.2018.11.063.
Dias  RCE,  Benassi  MT.  2015.  Discrimination  bet- ween  arabica  and  robusta  coffees  using  hydro- soluble  compounds;  Is  the  efficiency  of  the parameters  dependent  on  the  roast  degree?. Beverages  1:  127-139.  DOI:  10.3390/bevera ges1030127.
Diviš  P,  Pořízka  J,  Kříkala  J.  2019.  The  effect  of coffee  beans  roasting  on  its  chemical  compo- sition.  Slovak  J  Food  Sci  13:  344-350.  DOI: 10.5219/1062.
Dong  W,  Hu  R,  Chu  Z,  Zhao  J,  Tan  L.  2017.  Effect of  different  drying  techniques  on  bioactive  com- ponents,  fatty  acid  composition,  and  volatile profile  of  robusta  coffee  beans.  Food  Chem 234:  121-130.  DOI:  10.1016/j.foodchem.2017. 04.156.
Dong  W,  Tan  L,  Zhao  J,  Hu  R,  Lu  M.  2015.  Charac- terization  of  fatty  acid,  amino  acid  and  volatile compound  composition  and  bioactive  compo- nents  of  seven  coffee  ( Coffee  robusta) cultivar grown  in  Hainan  Province,  China.  Molecules 20:  16687-16708.  DOI:  10.3390/molecules2009 16687.
Finotello  C,  Forzato  C,  Gasparini  A,  Mammi  S,  Na- varini  L,  Schievano  E.  2017.  NMR  quantifica- tion  of  16-o-methylcafestol  and  kahweol  C offee canephora var.  robusta  beans  from  different geographical  origins.  Food  Control  75:  62-69. DOI:  10.1016/j.foodcont.2016.12.019.
Frega  NG,  Pacetti  D,  Mozzon  M,  Balzano  M.  2015. Chapter  12-Authentication  of  coffee  blends. Coffee  in  Health  and  Disease  Prevention.  107- 115.  Academic  Press.  DOI:  10.1016/B978-0- 12-409517-5.00012-7.
Giraudo  A,  Grassi  S,  Savorani  F,  Gavoci  G, Casiraghi  E,  Geobaldo  F.  2019.  Determination of  the  geographical  origin  of  green  coffee  beans using  NIR  spectroscopy  and  multivariate  data analysis.  Food  Control  99:  137-145.  DOI:  10.10 16/j.foodcont.2018.12.033.
Ghosh  P,  Venkatachalaphaty  N.  2014.  Processing and  drying  of  coffee  -a  review.  Int  J  Eng  Res Technol  3: 784-794.
Habte  G,  Hwang  IM,  Kim  JS,  Hong  JH,  Hong  YS, Choi  JY,  Nho  EY,  Jamila  N,  Khan  N,  Kim  KS. 2016.  Elemental  profiling  and  geographical  dif- ferentiation  of  Ethiopian  coffee  samples  through inductively  coupled  plasma-optical  emission spectroscopy  (ICP-OES),  ICP-mass  spectro- metry  (ICP-MS)  and  direct  mercury  analyzer (DMA).  Food  Chem  212:  512-520.  DOI:  10.10 16/j.foodchem.2016.05.178.
[ICO]  International  Coffee  Organization.  2014.  World Coffee  Trade  (1963-2013): A  Review  of  the Markets,  Challenges  and  Opportunities  Facing the Sector. London: International Coffee
Council .
Lee  LW,  Cheong  MW,  Curran  P,  Yu  B,  Liu  SQ. 2015.  Review-Coffee  fermentation  and  flavor- An  intricate  and  delicate  relationship.  Food Chem  185:  182-191.  DOI:  10.1016/j.foodchem. 2015.03.124.
Lee  SJ,  Kim  MK,  Lee  KG.  2017.  Effect  of  reversed coffee  grinding  and  roasting  process  on  physi- cochemical  properties  including  volatile  com- pound  profiles.  Innov  Food  Sci  Emerg  44:  97- 102.  DOI:  10.1016/j.ifset.2017.07.009.
Monakhova  YB,  Ruge  W,  Kuballa  T,  Ilse  M,  Winkel- mann  O,  Diehl  B,  Thomas  F,  Lachenmeier  DW. 2015.  Rapid  approach  to  identify  the  presence of  arabica  and  robusta  species  in  coffee  using 1 H  NMR  spectroscopy.  Food  Chem  182:  178- 184.  DOI:  10.1016/j.foodchem.2015.02.132.
Rendon  MY,  Salva  TJG,  Bragagnolo  N.  2014.  Im- pact  of  chemical  changes  on  the  sensory  cha- racteristics  of  coffee  beans  during  storage. Food  Chem 147:  279-286.  DOI:  10.1016/j.food chem.2013.09.123.
Rodrigues  CI,  Marta  L,  Maia  R,  Miranda  M,  Ribeirin- ho  M,  Maguas  C.  2007.  Application  of  solid- phase  extraction  to  brewed  coffee  caffeine  and organic  acid  determination  by  UV/HPLC.  J Food  Compos  Anal 20:  440-448.  DOI:  10.1016/ j/jfca.2006.08.005.
Smrke  S,  Kroslakova  I,  Gloess  AN,  Yeretzian  C. 2015.  Differentiation  of  degrees  of  ripeness  of Catuai and Tipica green  coffee  by  chromato- graphical  and  statistical  techniques.  Food Chem  174:  637-642.  DOI:  10.1016/j.foodchem. 2014.11.060.
Teuber  R.  2010.  Geographical  Indications  of  Origin as  a  Tool  of  Product  Differentiation:  The  Case of  Coffee.  J  Int  Food  Agribusiness  Marketing 22:  277-298.  DOI:  10.1080/089744310036416 12.
Towaha  J,  Purwanto  EH,  Supriadi  H.  2015.  Atribut kualitas  kopi  arabika  pada  tiga  ketinggian  tem- pat  di  kabupaten  Garut.  J  TIDP  2:  29-34.  DOI: 10.21082/jtidp.v2n1. 2015.p29-34.
[USDA]  United  States  Department  of  Agriculture. 2019.  Coffee:  World  Market  and  Trade.  USA: Foreign  Agricultural  Service.
Wahyuni  E,  Karim  A,  Anhar  A.  2013.  analisis  citar- asa  kopi  arabika  organik  pada  beberapa  ke- tinggian  tempat  dan  cara  pengolahannya  di  da- taran  tinggi  Gayo.  J  Manajemen  Sumberdaya Lahan  2: 261-269.
Waters  Corporation.  2012.  Amino  Acid  Analysis Application  Notebook.  https://www.waters.com/ webassets/cms/library/docs/720006130en.pdf. [19 Juni  2019].
Wong  KH,  Aziz  SA,  Mohamed  S.  2008.  Sensory aroma  from  Maillard  reaction  of  individual  and combinations  of  amino  acids  with  glucose  in acidic  conditions.  Int  J  Food  Sci  Technol  43: 1512-1519.  DOI:  10.1111/j.1365-2621.2006.01 445.x.