## Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Kulit Batang Awar-awar dengan Metode BSLT
Annisa Yunia Rachmatika, Suwendar *
Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung, Indonesia

## A R T I C L E   I N F O
Article history : Received  : 11/11/2023 Revised : 22/12/2023 Published  : 24//12/2023
Creative Commons Attribution- NonCommercial-ShareAlike 4.0
International License.
Volume : 3
No. : 2
Halaman  : 103-108 Terbitan  : Desember 2023

## A B S T R A K
Tumbuhan Awar-awar (Ficus septica Burm. F.) pada umumnya tumbuh di dataran rendah hingga pegunungan. Tumbuhan ini biasanya digunakan untuk mengatasi penyakit kulit, radang usus buntu, bisul, mengatasi gigitan ular berbisa dan sesak nafas. Penelitian ini dilakukan bertujuan untuk mengetahui kandungan golongan senyawa metabolit sekunder, menetapkan aktivitas sitotoksik dari kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.)., dan mengetahui nilai Lethal Concentration (LC50) dari ekstrak etanol kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.). Uji sitotoksik dilakukan menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) terhadap larva udang Artemia franciscana Kellogg. Parameter yang diamati yaitu kematian larva udang. Berdasarkan metode uji tersebut, ditetapkan nilai LC50 yang dihitung dari persamaan regresi linier menggunakan analisis probit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kulit batang awar-awar terdeteksi adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, dan triterpenoid/steroid, serta ekstrak etanol kulit batang awar-awar memiliki aktivitas sitotoksik dengan nilai LC50 sebesar 33,93 ppm.
Kata Kunci: Awar-awar (Ficus septica Burm. F.), Kulit Batang Awar-awar, Uji Sitotoksik

## A B S T R A C T
The awar-awar plant (Ficus septica Burm. F.) generally grows in the lowlands to the mountains. This plant is usually used to treat skin diseases, appendicitis, boils, poisonous snake bites and shortness of breath. This research was carried out with the aim of determining the content of secondary metabolite compounds, the cytotoxic activity of awar-awar (Ficus septica Burm. F.) stem bark, and the Lethal Concentration (LC50) value of the ethanol extract of awar- awar (Ficus septica Burm. F.) stem bark. The cytotoxic test was carried out using the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) method on Artemia franciscana Kellogg shrimp larvae. The parameter observed was the death of shrimp larvae. Based on this test method, the LC50 value was determined by calculating the linear regression equation using Probit analysis. The results of the research showed that in the bark of awar-awar stems, the presence of alkaloids, flavonoids, tannins, and triterpenoids/steroids was detected, and the ethanol extract of awar-awar stem bark had cytotoxic activity with an LC50 value of 33,93 ppm.
Keywords :  Awar-awar  (Ficus  septica  Burm.  F.),  Awar-awar  Stem  Bark, Cytotoxic Test

## A. Pendahuluan
Kanker sebagai salah satu penyakit penyebab utama kematian di dunia dengan mortalitas dan insidensi yang tinggi, sehingga kesehatan masyarakat dan masalah ekonomi menjadi hal penting dalam pencegahan penyakit kanker yang  efektif.  Metode  pengobatan  kanker  yang  paling  umum  digunakan  adalah  radioterapi,  imunoterapi,  dan kemoterapi  [1].  Namun,  pengobatan  tersebut  juga  mempengaruhi  sel  normal  yang  berdampak  buruk  seperti  pada kemoterapi yang memiliki efek samping berupa mual, muntah, dan alopesia [2].
Penggunaan bahan alam sebagai obat herbal dalam menangani masalah kesehatan telah banyak dimanfaatkan dan dipercaya akan khasiatnya. Menurut WHO, faktor yang mempengaruhi meningkatnya pemanfaatan bahan alam sebagai obat herbal adalah adanya harapan hidup, kemudahan dalam mengakses informasi mengenai obat herbal, serta adanya efek samping dari penggunaan obat modern seperti obat kanker. Hal ini mendorong WHO untuk menyarankan penggunaan obat herbal dalam pemeliharaan kesehatan, pencegahan, dan pengobatan, serta adanya dukungan dari WHO dalam peningkatan keamanan dan khasiat dari obat herbal [3]. Oleh karena itu, dalam penelitian ini dilakukan skrining awal dalam rangka mencari kandidat obat tradisional sebagai penunjang penyakit kanker.
Pada  penelitian  [4],  diketahui  bahwa  ekstrak  etanol  daun  awar-awar  memiliki  efek  toksik  terhadap  larva Artemia salina Leach dengan nilai LC50 sebesar 39,710 ppm. Dalam penelitian ini digunakan bagian tanaman yang berbeda yaitu kulit batang  awar-awar. Berdasarkan riwayat empiris di masyarakat, bahwa kulit batang  awar-awar digunakan dan dipercaya dapat mencegah penyebaran kanker [5]. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai aktivitas kulit batang awar-awar yang diduga memiliki kandungan senyawa kimia yang sama dengan bagian daun untuk mengamati efek sitotoksik pada kulit batang awar-awar dengan metode Brine Shrimp Lethality Test  (BSLT)  menggunakan  pelarut  ekstraksi  etanol  96%,  karena  etanol  memiliki  sifat  universal  sehingga  dapat menarik senyawa non polar, semipolar, dan polar [6].
Berdasarkan  uraian  latar  belakang  diatas,  diperoleh  perumusan  masalah  dalam  penelitian  ini  yaitu  apa  saja kandungan golongan senyawa metabolit sekunder pada kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.), apakah kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.) memiliki aktivitas sitotoksik dan berapa nilai LC50 ekstrak etanol kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan golongan senyawa metabolit sekunder dengan uji skrining fitokimia, menetapkan aktivitas sitotoksik pada kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.) dan mengetahui nilai LC50 ekstrak etanol kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.).

## B. Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  eksperimental  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Farmasi  Universitas  Islam Bandung  untuk  mengevaluasi  aktivitas  sitotoksik  dari  kulit  batang  awar-awar  (Ficus  septica  Burm.  F.). Tahapan  penelitian  diawali  dengan  pengumpulan  bahan,  determinasi  tumbuhan,  dan  preparasi  sampel. Preparasi  sampel  yang  dilakukan  meliputi  sortasi  basah,  pencucian,  perajangan,  pengeringan,  dan penyerbukkan. Simplisia dan ekstrak dilakukan uji skrining fitokimia untuk mengetahui kandungan golongan senyawa  metabolit  sekunder,  kemudian  simplisia  dilakukan  ekstraksi  dengan  cara  maserasi  menggunakan pelarut etanol 96% dan ekstrak dipekatkan dengan cara evaporasi [7]. Hasil ekstraksi dibagi menjadi beberapa kelompok yaitu 6 kelompok uji dan 1 kelompok kontrol dengan masing-masing konsentrasi sebesar 200 ppm, 100 ppm, 50 ppm, 25 ppm, 12,5 ppm, 6,25 ppm, dan kontrol tanpa pemberian ekstrak uji [4].
Aktivitas sitotoksik diamati secara in vitro menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) terhadap larva udang Artemia franciscana Kellogg, berdasarkan metode uji tersebut ditetapkan nilai LC50 dari bahan  uji  terhadap  larva  udang  Artemia.  Parameter  yang  diamati  adalah  kematian  larva  udang.  Parameter tersebut digunakan untuk menetapkan nilai LC50. Nilai LC50 diperoleh dari persamaan regresi linier antara log konsentrasi sebagai sumbu x dan mortalitas probit sebagai sumbu y. Nilai LC50 merupakan konsentrasi yang  menyebabkan  kematian  larva  sebanyak  50%  dari  total  larva  udang  yang  diamati.  Analisis  data  hasil penelitian menggunakan analisis probit dengan persamaan regresi linier untuk menetapkan nilai LC50.

## C. Hasil dan Pembahasan Penyiapan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu kulit batang awar-awar ( Ficus septica Burm. F.) yang diperoleh dari Kota Subang, Provinsi Jawa Barat. Bahan yang diperoleh sebanyak 5 kg dalam kondisi segar. Hasil  determinasi  tumbuhan  menyatakan  bahwa  tumbuhan  yang  digunakan  merupakan  jenis Ficus  septica Burm. F. dengan nama Famili Moraceae. Sedangkan hasil determinasi hewan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu Artemia franciscana Kellogg [1].
Kulit batang awar-awar diolah menjadi simplisia dengan melewati tahapan pengolahan pascapanen yang meliputi  sortasi  basah,  pencucian,  perajangan,  pengeringan,  dan  penyerbukkan.  Sortasi  basah  dilakukan
dengan  cara  memisahkan  bagian  tumbuhan  yang  akan  diolah  menjadi  simplisia  dengan  bagian  lain  pada tumbuhan, termasuk benda asing seperti tanah, kerikil, dan rumput [2]. Sortasi basah bertujuan untuk menjaga kemurnian  bahan  dari  pencemar  dan  memperoleh  simplisia  dengan  jenis  yang  sama  [2].  Setelah  itu,  bahan yang diperoleh kemudian dicuci menggunakan air bersih mengalir, sehingga penempelan kembali pengotor pada bahan dapat dihindari. Proses pencucian bertujuan untuk menghilangkan pengotor yang masih menempel pada bahan, seperti tanah ataupun pencemar lainnya. Selanjutnya, bahan ditiriskan dan dilakukan perajangan. Proses perajangan dilakukan untuk memperoleh simplisia dengan ukuran yang lebih kecil. Ukuran simplisia yang kecil dapat mempermudah proses pengeringan simplisia, karena air lebih cepat menguap sehingga proses pengeringan menjadi lebih singkat [2].
Bahan  simplisia  yang  telah  dirajang kemudian dilakukan  pengeringan.  Proses  pengeringan  dilakukan untuk  menurunkan  kadar  air  di  dalam  bahan,  sehingga  dapat  mencegah  terjadinya  pertumbuhan mikroorganisme dan reaksi enzimatis yang dapat menurunkan kandungan senyawa kimia di dalam bahan [2]. Selanjutnya,  bahan  simplisia  dilakukan  proses  penyerbukkan,  hal  ini  dilakukan  untuk  memperoleh  ukuran simplisia yang lebih kecil. Ukuran simplisia yang kecil dapat mempermudah proses pengeluaran senyawa yang terkandung di dalam simplisia pada tahap ekstraksi. Hal ini disebabkan karena semakin kecil ukuran simplisia, maka  luas  permukaan  kontak  antara  simplisia  dengan pelarut  akan  semakin  besar,  sehingga  senyawa  dapat mudah keluar saat proses ekstraksi [2].

## Proses Ekstraksi
Simplisia  kulit  batang  awar-awar  dilakukan  proses  ekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut etanol 96%. Metode maserasi dilakukan dengan merendam simplisia di dalam pelarut menggunakan wadah  tertutup  [2].  Simplisia  direndam  di  dalam  pelarut  selama  24  jam,  kemudian  dilakukan  remaserasi dengan  pelarut  etanol  96%  yang  baru  [3].  Proses  ini  dilakukan  pada  suhu  ruang  selama  3  hari  dengan pengadukan secara berkala [2]. Remaserasi dilakukan untuk mencegah pelarut mengalami kejenuhan, sehingga senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  di  dalam  bahan  dapat  terekstraksi  dengan  optimal  [2].  Proses perendaman bahan yang dilakukan saat maserasi menimbulkan perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar sel  pada  bahan,  sehingga  dinding  dan membran  sel  pada  bahan  mengalami  pemecahan,  akibatnya  senyawa yang  terkandung  di dalam  bahan  dapat  terlarut  dalam  pelarut  pengekstraksi.  Pelarut  etanol  96% digunakan karena pelarut tersebut bersifat universal yang dapat menarik senyawa dengan sifat kepolaran yang berbeda yaitu senyawa polar, senyawa semi polar, dan senyawa non polar [2].
Hasil  maserasi  yang  diperoleh  selanjutnya  dilakukan  pemekatan  ekstrak  untuk  memperoleh  ekstrak kental menggunakan Rotary vacuum evaporator dengan suhu 40℃ dan diperoleh ekstrak pekat kulit batang awar-awar sebanyak 18,60 gram [4].

## Uji Skrining Fitokimia
Uji  skrining  fitokimia  dilakukan  terhadap  simplisia  dan  ekstrak  pekat  kulit  batang  awar-awar  ( Ficus septica Burm.  F.).  Skrining  fitokimia  merupakan  tahap  awal  yang  dapat  memberikan  gambaran  mengenai golongan senyawa yang terdapat di dalam tanaman, metode pengujiannya merupakan reaksi pengujian warna dengan  suatu  pereaksi  [5].  Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  keberadaan  senyawa  metabolit sekunder melalui perubahan warna atau adanya endapan yang terbentuk akibat reagen yang ditambahkan [6].
Tabel 1. Hasil Uji Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Etanol Kulit Batang Awar-awar
Keterangan:
Golongan Senyawa Identifikasi Simplisia Ekstrak Alkaloid + + Flavonoid + + Saponin - - Tanin + + Triterpenoid/Steroid + +
(+) = Terdeteksi
(-) = Tidak Terdeteksi

## Penyiapan Larva Artemia
Penetasan  telur  Artemia  dilakukan  menggunakan  air  laut berkadar  garam  sebanyak  1  liter.  kemudian diberi aerator didalamnya dan penerangan menggunakan lampu pijar 40 watt. Aerator berfungsi untuk menjaga kadar oksigen untuk keberlangsungan hidup Artemia. Jika kadar oksigen sangat rendah, maka telur Artemia akan sulit menetas. Sedangkan lampu pijar berfungsi untuk membuat kondisi air laut tetap hangat, sehingga proses penetasan telur dapat berlangsung dengan cepat  [7]. Larva Artemia yang digunakan dalam penelitian ini yaitu larva yang berusia 48 jam setelah menetas dan berwarna kemerah-merahan [6]., karena pada saat larva berusia 48 jam, larva memiliki tingkat kepekaan yang tinggi, hal ini terjadi karena sudah terbentuknya organ- organ  pada  larva.  Melalui  mulutnya,  larva  dapat  meminum  air  laut  yang  telah  ditambahkan  ekstrak  uji, sehingga kematian larva yang terjadi dapat dipastikan karena adanya penambahan ekstrak uji [8].

## Uji Sitotoksik dengan Metode BSLT
Metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT)  merupakan  uji  pendahuluan  terhadap  senyawa  untuk menentukan adanya aktivitas sitotoksik dari suatu senyawa atau ekstrak menggunakan hewan uji larva udang Artemia  salina  [6].  Parameter  yang  digunakan  pada  metode  ini  yaitu  jumlah  kematian  larva  udang  akibat adanya  pengaruh  penambahan  senyawa  atau  ekstrak  pada  larva  sesuai  dengan  dosis  yang  ditentukan  [6]. Metode BSLT digunakan karena pengujian yang dilakukan memerlukan waktu cukup singkat, mudah, tidak memerlukan  peralatan  khusus,  tanpa  teknik  aseptik,  terjangkau,  jumlah  organisme  yang  diperoleh  dalam jumlah banyak, sedikit sampel dapat memenuhi validasi statistik [6].
Pada pengujian sitotoksik, kelompok uji dibuat dengan konsentrasi 200 ppm, 100 ppm, 50 ppm, 25 ppm, 12,5  ppm,  dan  6,25  ppm  serta  kelompok  kontrol  tanpa  pemberian  ekstrak.  Kelompok  kontrol  digunakan sebagai pembanding untuk menghilangkan faktor lain selain  ekstrak uji yang dapat menyebabkan kematian larva [6].
Tabel 2 . Hasil Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Kulit Batang Awar-awar
Pengujian  sitotoksik  dilakukan  sebanyak  5  replikasi  dan  menunjukkan  bahwa  kematian  larva  mulai terjadi  pada konsentrasi  uji  terkecil  yaitu  6,25 ppm dengan  jumlah  kematian  larva  sebesar  10%,  sedangkan pada  konsentrasi  12,5  ppm  memiliki  jumlah  kematian  sebesar  12%,  dan  mengalami  peningkatan  jumlah kematian  larva  yang  cukup  jauh  pada  konsentrasi  25  ppm  yaitu  sebesar  56%,  hal  ini  menunjukkan  bahwa peningkatan  kematian  larva  dari  konsentrasi  12,5  ppm  ke  25  ppm  sebesar  44%.  Pada  konsentrasi  50  ppm, jumlah  kematian  larva  sebesar  72% dan  terus  mengalami  peningkatan  hingga  konsentrasi  uji  terbesar  yaitu 200  ppm  dengan  jumlah  kematian  larva  sebesar  90%,  sedangkan  pada  kelompok  kontrol  yang  tidak ditambahkan ekstrak uji atau larutan dengan konsentrasi sebesar 0 ppm, menunjukkan tidak adanya kematian larva, sehingga jumlah kematian sebesar 0%.
Berdasarkan data tersebut, dapat diketahui bahwa nilai konsentrasi akan berpengaruh terhadap jumlah kematian  larva,  hal  tersebut  ditunjukkan  adanya  perbandingan  lurus  antara  konsentrasi  dengan  jumlah kematian larva. Semakin besar konsentrasi uji, maka jumlah kematian larva akan semakin meningkat [7].
Konsentrasi
(ppm) Log
Konsentrasi
Rata-rata ± SD Jumlah Larva Mati pada Sampel Uji % Mortalitas Mortalitas Probit LC 50 (ppm) 0 0 0
0 0 33,93
6,25 0,80 1,00 ± 1,41 10 3,72 12,5 1,10 1,20 ± 1,30 12 3,82 25 1,40 5,60 ± 1,52 56 5,15 50 1,70 7,20 ± 2,59 72 5,58 100 2,00 7,40 ± 3,13 74 5,64 200 2,30 9,00 ± 1,41 90 6,28
Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit batang awar-awar memiliki aktivitas sitotoksik terhadap larva  Artemia.  Selanjutnya,  setelah  diketahui  nilai  jumlah  kematian  larva  dalam  satuan  persen  (%)  atau  % mortalitas, maka nilai % mortalitas tersebut dapat disesuaikan dengan nilai probit yang tercantum pada tabel nilai probit, sehingga dapat diperoleh nilai mortalitas probit. Setelah itu, nilai LC 50 dapat ditentukan melalui persamaan regresi linier antara log konsentrasi dengan mortalitas probit yang telah diperoleh, dimana nilai log konsentrasi sebagai sumbu x dan nilai mortalitas probit sebagai sumbu y, sehingga diperoleh persamaan regresi linier y = a + bx, dalam penelitian ini persamaan regresi linier yang diperoleh yaitu y = 1,7739x + 2,2848 dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik Regresi Linier Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Kulit Batang Awar-awar
Berdasarkan  Gambar  1.  regresi  linier  antara  log  konsentrasi  dan  mortalitas  probit  menghasilkan persamaan regresi linier y = 1,7739x + 2,2848 dengan koefisien korelasi (R) sebesar 0,9187, sehingga dapat diperoleh  nilai  LC 50 dengan  cara  mensubstitusi  nilai  5  sebagai  nilai  probit  dari  50%  ke dalam  y, kemudian diperoleh nilai x sebagai nilai konsentrasi log yaitu sebesar 1,5306. Selanjutnya nilai x tersebut di ubah menjadi bentuk antilog x (antilog 1,5306), sehingga diperoleh nilai 33,93. Nilai tersebut ditetapkan sebagai nilai LC 50 yaitu 33,93 ppm yang dapat dilihat pada Tabel 2.
Berdasarkan  nilai  LC 50 yang  diperoleh  sebesar  33,93  ppm  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  kulit batang awar-awar termasuk ke dalam rentang toksik, karena memiliki nilai kurang dari 1000 ppm [9]. Dalam penelitian  ini  diketahui  bahwa  kulit  batang  awar-awar  mengandung  golongan  senyawa  metabolit  sekunder yaitu  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  dan  triterpenoid.  Senyawa  tersebut  masuk  melalui  mulut  Artemia  salina, selanjutnya senyawa akan diabsorbsi melalui membran sel ke dalam saluran pencernaan, lalu senyawa toksik akan terdistribusi di dalam tubuh larva dan mempengaruhi metabolisme larva, sehingga terjadi kerusakan pada proses metabolismenya [6].
Senyawa golongan alkaloid yang terkandung dalam kulit batang awar-awar yaitu ficuseptine, tylophorin, tylocrebrine, dan isotylocrebrine [10]. Hasil isolasi diketahui bahwa senyawa tersebut juga terdapat di bagian batang  dan  daun  awar-awar  yang  menunjukkan  aktivitas  sitotoksik  yang  kuat  terhadap  sel  kanker  manusia yaitu NUGC ( gastric adenocarcinoma) and HONE-1 ( nasopharyngeal carcinoma ) [14], [15].
Senyawa yang bersifat toksik dapat menyebabkan kematian larva, senyawa tersebut berperan sebagai racun  perut  ( stomach  poisoning )  dan  dapat  mengganggu  alat  pencernaan  serta  dapat  menghambat  reseptor perasa pada daerah mulut larva, sehingga larva mengalami kehilangan stimulus rasa dan tidak dapat mengenali makanannya,  akibatnya  larva  mengalami  kematian.  Kematian  larva  diperkirakan  terjadi  karena  adanya mekanisme  dari  golongan  senyawa  alkaloid  dan  flavonoid  [8].  Mekanisme  sitotoksik  dari  alkaloid  yaitu bertindak  sebagai antifeedant atau  menghambat  daya  makan  larva.  Alkaloid  dalam  jumlah  sedikit  dapat membunuh  larva  secara  perlahan  melalui  penurunan  nafsu  makan  dan  akan  menyebabkan  kematian  dalam beberapa  waktu  karena  larva  mengalami  kelaparan.  Namun,  alkaloid  dalam  jumlah banyak  dapat  bertindak sebagai racun pencernaan yang dapat menyebabkan kematian larva secara cepat  [6]. Selain itu, pada proses siklus sel, alkaloid bertindak sebagai tubulin inhibitor, dimana alkaloid akan berikatan dengan protein yang membentuk  mikrotubulus,  protein  ini  disebut  tubulin.  Alkaloid  yang  berikatan  dengan  tubulin  akan menyebabkan terhambatnya pembentukan mikrotubulus, hal ini mengakibatkan terhambatnya pembentukan
spindle  mitotik,  sehingga  siklus  sel  tidak  dapat  berlanjut  pada  saat  metafase.  Akibatnya,  sel  tidak  dapat membelah yang selanjutnya akan mengalami apoptosis [8].
Senyawa flavonoid juga berperan dalam menghambat reseptor perasa pada mulut larva, sehingga larva tidak dapat mendapatkan stimulus rasa, akibatnya larva mati karena kelaparan [6]. Selain itu, flavonoid dapat menghambat  proliferasi  kanker  dengan  cara  menghambat  jalur  transduksi  sinyal  dari  membran  ke  sel  inti melalui  penghambatan  aktivitas  protein  kinase  [8].  Senyawa  ini  juga  dapat  mengurangi  resistensi  tumor terhadap agen kemoterapi [13].

## D. Kesimpulan
Berdasarkan  pembahasan  dalam  penelitian  ini,  hasil  uji  skrining  fitokimia  menunjukkan  bahwa  kulit batang awar-awar (Ficus septica Burm. F.) terdeteksi adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, dan triterpenoid/steroid.  Berdasarkan  uji  sitotoksik  dengan  metode  Brine  Shrimp  Lethality  Test  (BSLT) menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit batang awar-awar memiliki aktivitas sitotoksik terhadap larva udang Artemia franciscana Kellogg. dengan nilai LC50 sebesar 33,93 ppm. Nilai LC50 tersebut termasuk ke dalam kategori toksik karena memiliki nilai kurang dari 1000 ppm.

## Daftar Pustaka
[1] K. U. Prameswari, “Penelusuran Pustaka Tanaman yang Berpotensi Sebagai Antibakteri Untuk Penyakit Infeksi Saluran Kemih,” Jurnal Riset Farmasi , vol. Vol 3 no 1, 2023, doi: https://doi.org/10.29313/jrf.v3i1.2360.
[2] I. T. Maulana, Buku Ajar Teknologi & Pengembangan Bahan Alam . Bandung: CV Sadari, 2021.
[3] M. F. F. Zein, S. Hazar, and Suwendar, “Uji Sitotoksik Fraksi dan Ekstrak Batang Kayu Bajakah (Uncaria sp.) Menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT),” Bandung Conference Series: Pharmacy , vol. 2, no. 2, pp. 1–11, 2022, doi: 10.29313/bcsp.v2i2.ID.
[4] Shifa Fudjayanti and Farendina Suarantika, “Tinjauan Pustaka Metode Analisis Senyawa Hidrokuinon dalam Sediaan Krim,” Jurnal Riset Farmasi , pp. 139–144, 2022, doi: 10.29313/jrf.v2i2.1483.
[5] L. H. Endarini, Farmakognosi dan Fitokimia . Jakarta: Pusdik SDM Kesehatan, 2016.
[6] H. Kurniawan and M. Ropiqa, “Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Ekor Kucing (Acalypha hispida Burm.f.) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT),” Journal Syifa Sciences and Clinical Research , vol. 3, no. 2, 2021, [Online]. Available: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr,E-
[7] J. Aritan, J. Mongie, S. Untu, and D. Pareta, “Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Tagalolo Ficus septica Burm. F. Terhadap Larva Artemia salina Leach dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT),” Jurnal Biofarmasetikal Tropis , vol. 2, no. 1, pp. 85–90, 2019.
[8] Z. Rani et al. , “Cytotoxicity Test of Cocoa Leaf Ethanol Extract (Theobroma Cacao L.) With Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) Method,” Indonesian Journal of Chemical Science and Technology , vol. 05, no. 2, pp. 80–87, 2022.
[9] B. N. Meyer, N. A. Ferrigni, J. E. Putnam, L. B. Jacobsen, D. E. Nichols, and J. L. Mclaughlin, “Brine Shrimp: A Convenient General Bioassay For Active Plant Constituents,” vol. 45, pp. 31–34, 1982.
[10] W. A. Mustaqim, “Ficus septica Burm.f. Moraceae,” 2020, pp. 1–8. doi: 10.1007/978-3-030-14116-5_85-1.
[11] A. G. Damu et al. , “Phenanthroindolizidine Alkaloids From The Stems of Ficus septica,” J Nat Prod , vol. 68, no. 7, pp. 1071–1075, Jul. 2005, doi: 10.1021/np050095o.
[12] C. Y. Ragasa, M. Roxanne Macuha, M. M. De Los Reyes, E. H. Mandia, and I. A. Van Altena, “Chemical Constituents of Ficus septica Burm. F,” 2016. [Online]. Available: www.ijpcr.com
[13] S. Rahimah, F. Maryam BA, and B. A. Limbong, “The Toxicity Test of Ethanol Extract of Leaves Averrhoa bilimbi L. Using Brine Shrimp Lethality Test (BSLT),” Journal of Pharmaceutical and Medicinal Sciences , vol. 4, no. 1, pp. 10–14, 2019.