## Analisis Kadar Hidrokuinon Pada Krim Pemutih Yang Beredar Online Dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis (Klt) Dan Spektrofotometri UV- Vis

## Analysis of Hyrdroquinone Levels in Online Bleaching Cream Using Thin Layer Chromatography (TLC) and UV-Vis Spectrophotometry
Novelita Anggi Charismawati*, Susanti Erikania, Novi Ayuwardani Program Studi S1 Farmasi, STIKes Bhakti Husada Mulia, Madiun *E-mail: novelitaanggi02@gmail.com
DOI : https://doi.org/10.26874/jkk.v4i2.79
Received : 25 Aug 2021, Revised : 30 Nov 2021, Accepted : 30 Nov 2021, O nline : 30 Nov 2021

## Abstrak
Kosmetika adalah sediaan yang digunakan pada permukaan luar tubuh dengan maksud untuk mengubah penampilan,  mewangikan,  membersihkan,  atau  memelihara  tubuh  pada  kondisi  baik.  Saat  ini masyarakat sangat tertarik menggunakan kosmetik krim pemutih wajah yang dijual secara online dan sering ditemukan kandungan dalam krim pemutih adalah Hidrokuinon. Penggunaan hidrokuinon dalam krim  pemutih  telah  dibatasi  karena  efek  samping  yang  merugikan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  kadar  hidrokuinon  pada  krim  pemutih  yang  beredar  secara online .  Metode  yang digunakan adalah analisis kualitatif pada 3 sampel krim pemutih yang diduga mengandung hidrokuinon. Hasil positif uji kualitatif dilanjutkan dengan analisis menggunakan KLT (Kromatografi Lapis Tipis) dengan  fase  gerak  metanol:kloroform  (50:50)  dan n -heksana:aseton  (3:2),  serta  analisis Spektrofotometri UV-Vis. Hasil dari penelitian ini adalah pengujian KLT pada sampel didapatkan nilai Rf masing-masing 0,8 dan 0,4. Penetapan panjang gelombang maksimal pada 294 nm diperoleh hasil kadar rata-rata kandungan hidrokuinon dari sampel 1 sebesar 2,020µg/mL, sampel kedua sebesar 16,244 µg/mL, sedangkan pada sampel ketiga sebesar 9,387µg/mL Kesimpulan kadar hidrokuinon yang ada di dalam masing-masing sampel krim adalah 2,020 µg/mL, 16,244µg/mL, 9,387µg/mL dimana kadar ini tidak sesuai dengan peraturan BPOM RI tahun 2008.
Kata Kunci: hidrokuinon, krim pemutih, kromatografi lapis tipis, spektrofotometri UV-Vis.

## Abstract
Cosmetics are preparations that are applied to the external surface of the body for the purpose of  cleaning,  perfuming,  changing  the  appearance  or  keeping  the  body  in  good  condition. Currently, people are very interested in using facial whitening cream cosmetics that are sold online  and  often  found  the  content  in  whitening  creams  is  Hydroquinone.  The  use  of hydroquinone in whitening creams has been limited due to adverse side effects. This study aims to  determine  the  levels  of  hydroquinone  in  whitening  creams  circulating  online.The  method used was qualitative analysis on 3 samples of whitening cream which were suspected to contain hydroquinone, the positive results of the qualitative test were followed by analysis using Thin Layer Chromatography (TLC) with methanol:chloroform (50:50) and n-Hexane:acetone (3:2) as mobile phase, and UV-Vis spectrophotometric analysis. The results of this study are TLC testing  on  samples  obtained  Rf  values  of  0.8  and  0.4,  respectively.  Determination  of  the maximum  wavelength  at  294nm  resulted  in  the  average  level  of  hydroquinone  content  from sample  1  of  2,020µg/ml,  the  second  sample  of  16,244µg/ml,  while  in  the  third  sample  of
9,387µg/ml. In conclusion, the levels of hydroquinone in each cream sample were 2,020µg/ml, 16,244µg/ml, 9,387µg/ml where these levels were not in accordance with the 2008 BPOM RI regulations.
Keywords:  hydroquinone,  whitening  cream,  thin  layer  chromatography,  UV-Vis spectrophotometry.

## 1 Pendahuluan
Kosmetika  adalah  bahan  yang  digunakan pada bagian luar tubuh manusia seperti epidermis, rambut,  kuku,  bibir,  gigi  dan  membran  mukosa mulut  terutama  untuk  mengubah  penampilan, membersihkan,  mewangikan,  atau  memelihara tubuh pada kondisi baik [1]. Baik wanita maupun pria  membutuhkan  kosmetik  atau  sebagai konsumen  kosmetik.  Industri  kosmetik  saat  ini memproduksi  banyak  jenis  produk  kosmetik untuk dikonsumsi oleh semua kalangan [2].
Banyaknya pengguna kosmetik menyebabkan  cepatnya  perkembangan  tren kosmetik. Salah satu tren kosmetik saat ini yaitu kosmetik krim pemutih yang dapat dengan mudah didapatkan  secara online .  Harga  krim  pemutih wajah  yang  relatif  murah  dan  hasilnya  cepat menjadi alasan utama tingginya minat masyarakat. Krim adalah sediaan yang mengandung satu atau lebih  bahan  dasar  yang  sesuai  dan  berbentuk setengah  padat.    Bahan  kosmetika  adalah  bahan atau campurannya yang berasal dari alam maupun sintetik  yang  merupakan  komponen  kosmetika seperti  bahan  bahan  tabir  surya,  pewarna,  dan bahan pengawet [1].
Salah  satu  bahan  pencerah  yang  sering digunakan  pada  krim  adalah  hidrokuinon. Mekanisme kerja hidrokuinon dalam mengurangi jumlah  melanin  secara  langsung  dengan  cara menghambat  aktivitas  enzim  tirosinase  dalam melanosit. Peraturan yang membatasi penggunaan hidrokuinon  dalam  kosmetik  telah  dikeluarkan oleh  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan (BPOM) RI sejak tahun 2008 [3].
Desiderio et al pada tahun 2000 melaporkan penetapan  kadar  hidrokuinon  dengan  beberapa metode, yaitu titrasi redoks, spektrofotometri UV- Vis,  kolometri,  Miselar  Elektro  Kromatografi, Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan
Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi.  Metode kromatografi  lapis  tipis  merupakan  suatu  teknik pemisahan  secara  fisika  dengan  menggunakan prinsip  distribusi  suatu  zat  dalam  dua  fase  yaitu fase  diam  dan  fase  gerak.  Pemisahan  ini  terjadi karena  adanya  perbedaan  migrasi  dari  masing- masing  komponen.  Penggunaan  metode  KLT yang semakin meluas mengingat KLT merupakan
cara  pemisahan  yang  baik,  khususnya  untuk analisis  kualitatif.  Metode  spektrofotometri  UV- Vis  merupakan  metode  untuk  menetapkan kuantitas zat yang sangat kecil namun sederhana serta hasil yang didapat pun cukup akurat [4].
Penelitian terkait analisis kandungan hidrokuinon  pada  krim  wajah  telah  banyak dilaporkan.  Irnawati  et  al  [5]  yang  mengambil sampel  dari  beberapa  salon  kecantikan  yang terletak di kecamatan Kendari Barat, menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis.  Selain itu, penelitian analisis hidrokuinon pada beberapa sediaan krim malam dengan spektrofotometri UV- Vis oleh Rahma et al [6] didapatkan hasil dua dari lima  sampel  mengandung  hidrokuinon  melebihi batas  aman  yang  diperbolehkan  BPOM  RI  [7] yaitu  pada  sampel  1  dan  2  dengan  kadar  2,16% dan 2,22%.
Pada artikel ini dibahas kandungan hidrokuinon  dalam  sediaan  krim  pemutih  yang beredar secara online . Tahap awal yang dilakukan yaitu  analisis  kualitatif  sediaan  dengan  KLT. Kemudian dilanjutkan dengan  analisis kuantitatif menggunakan  instrumen  Spektrofotometri  UV- Vis.

## 2 Metode Penelitian

## 2.1 Bahan
Etanol  70%  (p.a),  hidrokuinon  (p.a),  reagen Benedict (p.a), reagen FeCl 3 1% (p.a), kloroform (p.a), metanol (p.a), NaOH, aquadest, dan sampel krim pemutih online .

## 2.2 Penyiapan dan pengambilan sampel
Dalam Penelitian disiapkan 3 sampel 1, 2, 3 yang  diambil  dari  klinik  kecantikan online yang tidak memiliki ijin Produksi oleh BPOM.

## 2.3 Analisis Kualitatif
Metode Reaksi Warna
Tabel  1. Analisis  Kualitatif  dengan  Pereaksi Warna Sampel Pereaksi + Hidrokuinon Krim pemutih online FeCl 3 Endapan kuning Reagent Benedict Endapan Merah

## Kromatografi Lapis Tipis
Ditimbang  secara  seksama  100  mg  bahan baku pembanding hidrokuinon murni dan 2 gram sampel A, B, C. Masukkan ke dalam beaker glass 25 mL. Tambahkan 15 mL etanol p.a, Campuran tersebut dihomogenkan di atas penangas air suhu 60°C selama 10 menit. Masukkan dalam penangas es sampai terpisah lemak dan lilin dengan fase cair lalu saring, Hasil saringan dapat digunakan untuk analisis KLT. Siapkan plat KLT berukuran 1x10 cm  diaktifkan  dengan  cara  dipanaskan.  Sampel ditotolkan  pada  plat  KLT  dengan  menggunakan pipa kapiler pada jarak 1,5 cm dari bagian bawah plat.
Biarkan  beberapa  saat  hingga  mengering. Plat  KLT  yang  telah  mengandung  cuplikan dimasukkan  ke  dalam chamber yang  terlebih dahulu  telah  dijenuhkan  dengan  fase  gerak  I kloroform:metanol (50:50) yaitu 10 mL kloroform dan  10  mL  metanol,  fase  gerak  II n-Heksana - aseton  (3:2)  yaitu  12  mL n- heksana  dan  8  mL aseton.  Dibiarkan  hingga  lempeng  terelusi sempurna,  plat  KLT  diangkat  dan  dikeringkan. Noda  hasil  pemisahan  diamati  di  bawah  cahaya lampu UV254 nm kemudian dihitung nilai Rf.
Nilai Rf = jarak tempuh komponen jarak tempuh eluen

## 2.4 Analisis kuantitatif dengan Metode Spetrofotometri UV-Vis

## Pembuatan larutan baku hidrokuinon 50 ppm
Ditimbang hidrokuinon murni sebanyak 5 mg dan  dilarutkan  dengan  etanol  p.a  dalam  gelas kimia.  Kemudian  pindahkan  ke  dalam  labu  ukur 100 mL lalu tambahkan etanol pa sampai volume tepat 100 mL, Larutan dikocok sampai homogen. Sehingga  didapatkan  konsentrasi  baku  induk hidrokuinon 50 ppm dalam etanol PA [8].

## Penentuan  panjang  gelombang  Maksimum hidrokuinon
Larutan  baku  hidrokuinon  konsentrasi  50 ppm diambil sebanyak 2,8 mL tambahkan sampai dengan  10  mL  di  dalam  labu  ukur.  Larutan dikocok hingga tercampur sempurna. Selanjutnya dibaca  absorbansi  larutan  tersebut  pada  panjang
gelombang  200-400  nm  sehingga  diperoleh panjang gelombang maksimum [8].

## Pembuatan kurva baku hidrokuinon
Diambil  larutan  baku  hidrokuinon  dengan konsentrasi  6,  8,  10,  12,  dan  14  ppm.  Pada konsentrasi  6  ppm,  diambil  larutan  baku  1,2  ml ditambahkan  dengan  etanol  hingga  batas  10  ml, untuk  konsentrasi  8  ppm  diambil  larutan  baku sebanyak  1,6  ml  lalu  ditambahkan  etanol  hingga batas  10  ml,  untuk  konsentrasi  10  ppm  diambil larutan baku sebanyak 1 ml ditambahkan dengan etanol  hingga  batas  5  ml,  untuk  konsentrasi  12 ppm  diambil  larutan  baku  sebanyak  1,2  ml ditambahkan dengan etanol hingga batas 5 ml dan untuk  konsentrasi  14  ppm  diambil  larutan  baku sebanyak 1,4 ml ditambahkan etanol hingga batas 5 ml. Masing-masing larutan dibaca absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum untuk mendapatkan kurva baku hidrokuinon.

## Penetapan kadar hidrokuinon dalam sampel
Ditimbang  500  mg  sampel  krim  A,  B,  C, kemudian  dilarutkan  dalam  5  mL  etanol  PA, Saring dengan kertas saring ke dalam labu ukur 10 mL,  dan  ditambahkan  etanol  PA  sampai  tanda batas. Larutan tersebut di pipet sebanyak 1 mL dan dimasukkan dalam labu ukur 10 mL, ditambahkan dengan  etanol  PA  sampai  tanda  batas.  Baca absorbansinya  menggunakan  spektrofotometri UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimum. Masing-masing  pengukuran  sampel  direplikasi dua kali.

## Teknik Analisa Data
Analisis data kualitatif hidrokuinon dilakukan  dengan  metode  Kromatografi  Lapis Tipis  dengan  melihat  nilai  Rf.  Analisis  data kuantitatif hidrokuinon dilakukan dengan metode Spektrofotometri  UV-Vis  dengan  membaca  nilai absorbansi  untuk  mengetahui  kadar  hidrokuinon pada 3 krim pemutih online yang digunakan.

## 3 Hasil dan Pembahasan
Krim  adalah  bentuk  sediaan  setengah  padat berupa  emulsi  yang  mengandung  satu  atau  lebih bahan  obat  yang  terlarut  atau  terdispersi  dalam bahan dasar yang sesuai dan mengandung air tidak kurang dari 60%. Krim ada 2 tipe, yaitu krim tipe minyak  dalam  air  (M/A)  dan  tipe  air  dalam minyak  (A/M),  di  mana  krim  yang  dapat  dicuci dengan  air  (M/A)  ditujukan  untuk  penggunaan kosmetik dan estetika, selain itu juga krim dapat
digunakan  untuk  pemberian  obat  melalui  vagina [9].
Sediaan  krim  harus  memenuhi  persyaratan mutu  secara  fisik  maupun  kimia  sebelum diproduksi. persyaratan mutu tersebut meliputi Uji organoleptis,  pengukuran  pH,  homogenitas,  uji daya sebar, dan pengukuran viskositas. Setelah itu dilakukan  pengujian  kimia  dengan  melihat  nilai hidrokuinon  dengan  metode  Spektrofotometri UV-Vis [10].
Uji  organoleptis  adalah  uji  yang  didasarkan pada  proses  penginderaan  bagian  organ  tubuh. Dari uji organoleptis didapatkan hasil pada sampel 1  berwarna  putih  berbau  harum  dan  bertekstur lengket,  pada  sampel  2  berwarna  kuning  berbau harum dan bertekstur lebih lengket , dan sampel 3 berwarna  kuning  berbau  harum  dan  bertekstur lembut  lengket.  Bervariasinya  warna  krim  yang diperoleh  secara online dikarenakan  adanya penambahan  zat  pewarna  yang  dapat  menarik konsumen  akan  warnanya.  Sedangkan  aroma menyengat  produk  krim  juga  merupakan  salah satu  ciri-ciri  bahwa  krim  mengandung  bahan berbahaya  karena  untuk  menutupi  bau  lain  dari bahan  berbahaya  yang  ditambahkan  ke  dalam krim [11].
Komponen  krim  pada  umumnya  terdiri  dari beberapa  senyawa  seperti  pengemulsi  untuk meningkatkan konsistensi sediaan krim, humektan dan emolien , pengawet antimikroba, pembentukan emulsi, emulsifying  agent berwarna  putih. Sehingga  secara  umum tidak  terdapat  komponen yang  memberikan  aroma  menyengat  pada  krim [10].
Tabel 2. Hasil Pengujian Organoleptis Sampel Krim Warna Aroma Tekstur 1 Putih Harum Lengket 2 Kuning cerah Harum Lebih lengket 3 Kuning Harum Lengket
Hasil ini sejalan dengan penelitian Sumarini [12]  melakukan  penelitian  analisis  merkuri  dan hidrokuinon  pada  krim  pemutih  yang  beredar  di Jayapura dengan hasil penelitian pada sampel rata- rata berwarna kuning, berbau harum dan memiliki tekstur lembut lengket.
Aroma menyengat pada krim adalah parfum minyak  atsiri  yang  ditambahkan  bertujuan  agar dapat  menutupi  aroma  bahan  berbahaya  seperti aroma  logam.  Hasil  tekstur  yang  di  dapatkan menurut  Mohamad  tahun  2014  krim  yang bertekstur lengket merupakan ciri-ciri bahwa krim
mengandung  bahan  berbahaya.  Lengketnya  krim dikarenakan logam memiliki daya ikat yang kuat sehingga mampu mengikat ion logam yang ada di sekitarnya [11].
Hidrokuinon  termasuk  golongan  senyawa fenol  yang  bersifat  larut  dalam  air.  Hidrokuinon banyak digunakan pada produk kosmetik, karena sifatnya  sebagai  antioksidan,  berperan  dalam proses  penghambatan  melanogenesis  sehingga mengurangi  warna  gelap  pada  kulit.  Namun demikian,  tetap  tidak  bisa  merubah  kosmetik berbahaya  menjadi  layak  digunakan  dengan pengaruh  positifnya  tersebut.  Mekanisme  kerja hidrokuinon  dengan  cara    menghambat  aktivitas enzim tirosinase dalam melanosit dan mengurangi jumlah melanin secara langsung.
Peraturan  yang  membatasi  penggunaan hidrokuinon  dalam  kosmetik  telah  dikeluarkan oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan RI sejak tahun 2008, yaitu Peraturan kepala Badan POM RI nomor  HK  00.05.42.1018  Tentang  Bahan Kosmetik, dan melalui surat edaran Kepala Badan POM  RI  pada  September  2008  semua  kosmetik yang  tidak  memenuhi  ketentuan  ditarik  dari peredaran  dan  dimusnahkan.  Dalam  peraturan tersebut  disebutkan  bahwa  hidrokuinon  sebagai bahan  kosmetik  hanya  boleh  digunakan  untuk bahan  pengoksidasi  warna  pada  pewarna  rambut dengan ketentuan kadar maksimum sebesar 0,3% dan untuk kuku artifisial dengan kadar maksimum sebesar 0,02% setelah pencampuran hanya boleh digunakan oleh tenaga profesional [13].
Tabel 3. Hasil Analisis Kualitatif dengan Pereaksi Warna Sampel Pereaksi Hasil 1 FeCl 3 1% Endapan kuning 2 Endapan kuning 3 Endapan kuning 1 Reagen Benedict Endapan coklat 2 Endapan merah 3 Endapan merah
Hasil  identifikasi  kualitatif  dengan  pereaksi warna  FeCl  1%  dan  reagen  Benedict  diperoleh adanya endapan warna kuning, sedangkan dengan penambahan  reagen  Benedict  terbentuk  endapan coklat.  Hal  ini  karena  hidrokuinon  membentuk senyawa  kompleks  dengan  FeCl  1%.  Senyawa kompleks  terbentuk  karena  unsur  O  pada hidrokuinon berikatan dengan FeCl 3 1% membentuk  reaksi  yang  menghasilkan  warna kuning hingga hijau dalam kondisi asam [14].
Uji  kualitatif  dengan  metode  Kromatografi Lapis  Tipis  untuk  mengetahui  apakah  senyawa
yang diidentifikasi pada krim memiliki kesamaan dengan senyawa hidrokuinon dengan melihat nilai Rf  yang  diperoleh.  Jika  nilai  yang  Rf  yang diperoleh antara sampel dan baku yang digunakan sama,  dapat  dikatakan  bahwa  sampel  dapat dikatakan mengandung hidrokuinon [15].
Pada  penelitian  ini  KLT  dilakukan  dengan menggunakan  2  fase  gerak  yang  pertama  yaitu metanol  :  kloroform    (50:50)  dan  fase  gerak  II heksana : aseton (3:2). Hasil uji analisis kualitatif didapatkan hasil yaitu untuk fase gerak I metanol
:  kloroform    (50:50)  nilai  Rf  yang  didapatkan untuk  baku  hidrokuinon  0,87  ,  untuk  sampel pertama nilai Rf yang diperoleh adalah 0,73 untuk nilai Rf sampel kedua adalah 0,85 dan untuk nilai Rf sampel ketiga adalah 0,85. Adi Yugatama pada tahun 2017 melaporkan bahwa nilai Rf dikatakan positif  apabila  nilai  Rf  sama  atau  mendekati dengan  selisih  ≤  0,2.  Hasil  ini  sejalan  dengan penelitian yang dilakukan oleh Rahma pada tahun 2020 dengan nilai Rf yang didapatkan untuk baku dan sampel yang digunakan adalah 0,8.
Tabel 4. Hasil Analisis KLT Fase Gerak I
Metanol : Kloroform (1:1) N o Sampel Nilai Rf Rata- rata Rf Ket 1 2 3 1 Baku Hidrokuinon 0,86 0,88 0,86 0,87 + 2 Sampel 1 0,78 0,70 0,70 0,73 + 3 Sampel 2 0,86 0,82 0,84 0,85 + 4 Sampel 3 0,84 0,84 0,84 0,85 +
Tabel 5. Hasil Analisis KLT Fase Gerak II
Heksana : Aseton (3:2) N o Sampel Nilai Rf Rata- rata Rf Ket 1 2 3 1 Baku Hidrokuinon 0,40 0,40 0,38 0,39 + 2 Sampel 1 0,20 0,24 0,24 0,22 + 3 Sampel 2 0,40 0,40 0,36 0,38 + 4 Sampel 3 0,40 0,38 0,3 8 0,38 +
Hasil  uji  analisis  kualitatif  dengan  KLT dengan  fase  gerak  II  heksana  :  aseton  (3:2) didapatkan hasil untuk baku hidrokuinon nilai Rf yang diperoleh adalah 0,39, untuk sampel pertama nilai Rf yang didapatkan yaitu 0,22, untuk nilai Rf yang kedua yang didapatkan yaitu 0,38 dan untuk nilai  Rf  yang  ketiga  didapatkan  hasil  0,38.  Hasil ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Katya  tahun  2014  dengan  hasil  nilai  rf  yang didapat yaitu 0,33.
Nilai  Rf  yang  didapatkan  dari  kedua  fase gerak yang digunakan sesuai dengan teori dimana
kemampuan  elusi  fase  gerak  harus  diatur sedemikian  rupa  sehingga  harga  nilai  Rf  antara 0,2-0,8 untuk mengoptimalkan pemisahan. Perbedaan  hasil  antara  fase  gerak  I  dan  II diperkirakan karena polaritas yang mempengaruhi fase  gerak.  senyawa-senyawa  terpisah  akibat polaritas  analit  terhadap  kedua  fase  tergantung kedekatan polaritas analit terhadap fase diam dan fase gerak. Analit akan cenderung larut dalam fase dengan polaritas sama [16].
Tabel 6. Nilai Rf dari Fase Gerak I dan Fase Gerak II
Sampel Fase Gerak UV 254 nm Nilai Rf Ket Baku Metanol  :  kloroform (50:50) 0,87 + 1 0,73 + 2 0,85 + 3 0,85 + Baku Heksana : aseton (3:2) 0,39 + 1 0,22 + 2 0,38 + 3 0,38 +
Panjang gelombang serapan maksimum dari hidrokuinon  yang  diencerkan  dengan  metanol hingga  konsentrasi  14  ppm  diukur  pada  panjang gelombang 200-400 nm. Tujuan pengukuran dari
panjang  gelombang  maksimum  adalah  untuk mengetahui serapan maksimum dari hidrokuinon,
selanjutnya digunakan
untuk mengukur absorbansi sampel [14].
Hasil penetapan panjang gelombang maksimal  (λ)  pada  hidrokuinon  adalah  294  nm dengan  nilai  absorbansi  0,527.  Hasil  ini  sejalan dengan  penelitian  Prabawati  [17]  yaitu  panjang gelombang  maksimum  hidrokuinon  adalah    290 nm dengan nilai absorbansi 0,222.
Hasil penentuan kurva baku yaitu persamaan regresi linier. Berdasarkan penentuan kurva baku standar hasil pengukuran larutan standar hidrokuinon tersebut dapat dilihat bahwa semakin besar  konsentrasi  maka  larutan  standar  akan memiliki  nilai  absorbansi  yang  semakin  besar. Hasil  ini  sinergis  dengan  penelitian  yang dilakukan Azmalina tahun 2018 dimana semakin besar konsentrasi yang dibuat semakin besar pula nilai absorbansi yang didapatkan dengan konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm dan 10 ppm  dengan  nilai  absorbansi  secara  urut  yang didapat  yaitu,  0,102,  0,272,  0,322,  0,483  dan 0,587. Berdasarkan penentuan kurva baku Standar hasil  pengukuran  larutan  standar  hidrokuinon diatas  dapat  dilihat  bahwa  semakin  besar konsentrasi  maka  larutan  standar  akan  memiliki nilai absorbansi yang semakin besar, hal ini telah sesuai dengan teori.
Berdasarkan  kurva  baku  yang  didapat  garis lurus  (linier)  merupakan  kemampuan  metode analisis yang memberikan respon secara langsung, sehingga didapatkan persamaan regresi dari kurva standar yaitu y= 0,0804x + 0,2652 dengan nilai r yaitu  0,9982.  Dimana  0,0804  adalah  nilai  slope, dan  0,02652  adalah  nilai  intersep  dengan  nilai korelasi  0,9982.  Harga  koefisien  korelasi  yang mendekati  1  menyatakan  hubungan  yang  linear antara konsentrasi dengan serapan yang dihasilkan, yang berarti peningkatan nilai serapan analit  berbanding  lurus  dengan  peningkatan konsentrasinya  sesuai  kriteria  koefisien  korelasi (r) yang baik 0,989 [18].
Gambar  1 .  Kurva  standar  absorbansi  terhadap konsetrasi
Hasil  penetapan  kadar  yang  didapat  dalam penelitian yaitu untuk sampel  pertama didapatkan rata-rata  kadar  hidrokuinon  2,020  µg/ml,  untuk sampel  kedua  didapatkan  hasil  rata-rata  kadar hidrokuinon  16,244  µg/mL  dan  untuk  sampel ketiga  didapatkan  hasil  rata-rata  hidrokuinon sebanyak  9,387  µg/mL.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  masih  terdapat  hidrokuinon  pada  sampel yang digunakan  dalam  penelitian.  Hasil  ini tidak sesuai  dengan  peraturan  yang  membatasi penggunaan  hidrokuinon  dalam  kosmetik  yang telah dikeluarkan Kepala Badan POM RI Nomor : HK 00.05.42.1018 Tentang Bahan Kosmetik, dan melalui surat edaran Kepala Badan POM RI pada September  2008  semua  kosmetik  yang  tidak memenuhi  ketentuan  ditarik  dari  peredaran  dan dimusnahkan. Dalam peraturan tersebut disebutkan  bahwa  hidrokuinon  sebagai  bahan kosmetik  hanya  boleh  digunakan  untuk  bahan pengoksidasi warna pada pewarna rambut dengan ketentuan  kadar  maksimum  sebesar  0,3  %  dan untuk  kuku  artifisial  dengan  kadar  maksimum sebesar  0,02%  setelah  pencampuran  sebelum digunakan dan hanya boleh digunakan oleh tenaga profesional [3].
Tabel 7. Penetapan Kadar Hidrokuinon
No Sampel Absorbansi Rata-rata Absorbansi Kadar Hidrokuinon (µg/ml) 1 2 3 1 Blangko 0 0 0 0 0 2 1 0,428 0,430 0,425 0,427 2,014 3 2 1,568 1,570 1,575 1,571 16,243 4 3 1,024 1,016 1,020 1,020 9,388
0.342 0.425 0.513 0.591 0.661 y = 0,0804x + 0,2652 R² = 0,9982 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 2 3 4 5 Ab so rb an si
Konsentrasi Hidrokuinon (ppm)
Gambar 2. Kadar Hidrokuinon pada Sampel

## 4 Kesimpulan
Analisis  kualitatif  hidrokuinon  metode pereaksi  warna  menggunakan  dan  Kromatografi Lapis  Tipis  di  mana  pada  uji  pereaksi menggunakan  pereaksi  FeCl 3 1%  dan  reagen Benedict diperoleh bahwa semua sampel mengandung hidrokuinon sedangkan pada uji klt menggunakan  fase  gerak    metanol  :  kloroform (50:50)  dan  fase  gerak  Heksana  :  aseton  (3:2) diperoleh hasil bahwa semua sampel mengandung hidrokuinon dengan nilai Rf yang didapat masing- masing 0,8 dan 0,4. Analisis kuantitatif senyawa hidrokuinon dapat dilakukan dengan spektrofotometri  UV-Vis  menggunakan  pelarut etanol p.a pada panjang gelombang maksimal 294 nm dari penelitian didapatkan hasil untuk sampel 1  dengan  kadar  rata-rata  2,020  µg/ml,  untuk sampel  kedua  didapatkan  hasil  rata-rata  kadar hidrokuinon  16,244  µg/ml  dan  untuk  sampel ketiga  didapatkan  hasil  rata-rata  hidrokuinon 9,387  µg/ml.  Kadar  hidrokuinon  yang  ada  di dalam  masing-masing  sampel  krim  adalah  2,020 µg/ml, 16,244  µg/ml,  9,387  µg/ml  dimana  kadar ini tidak sesuai dengan peraturan BPOM RI tahun 2008 [3] yaitu hidrokuinon hanya boleh digunakan untuk  bahan  pengoksidasi  warna  pada  pewarna rambut  dengan  ketentuan  kadar  maksimum sebesar  0,3%  dan  untuk  kuku  artifisial  dengan kadar maksimum sebesar 0,02% setelah pencampuran sebelum digunakan.

## Daftar Pustaka
[1]. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. Persyaratan  Teknis  Bahan  Kosmetik. Nomor  23  tahun  2019  Peraturan  Badan Pengawas Obat dan Makanan; 2019.
[2]. Draelos ZD. The cosmeceutical conundrum. J Cosmet Dermatol [Internet].
2005;4(3):149–50. Available from: http://dx.doi.org/10.1111/j.1473-
2165.2005.00301.x
[3]. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. Bahan  Berbahaya  Dalam  Kosmetik.  In: Kosmetik Pemutih (Whitening). Naturakos Vol III No 8. 2008;
[4]. Aryani. Pemeriksaan Hidrokuinon dengan Metode  Spektrofotometri  dalam  Sediaan Krim Pencerah Kulit N, DL, dan NNN. In: Seminar Teknik Kimia Soehadi Reksowardjo. Fakultas Farmasi Universitas Surabaya; 2010. p. 17.
[5]. Irnawati  MH,  Sahumena  WON.  Analisis Hidrokuinon  Pada  Krim  Pemutih  Wajah Dengan Metode Spektrofotometri Uv-Vis. Pharmacon. 2016;5(3).
[6]. Yulia  R.  Analisis  Hidrokuinon  pada Beberapa  Sediaan  Krim  Malam  dengan Spektrofotometri UV-Vis. Sci  J Farm dan Kesehat [Internet]. 2020;10(2):128. Available from: http://dx.doi.org/10.36434/scientia.v10i2.
242
[7]. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. Kosmetik  Mengandung  Bahan  Berbahaya dan  Zat  Warna  yang  Dilarang.  Indonesia: Keputusan  Kepala  Badan  Pengawas  Obat dan Makanan Republik Indonesia; 2007.
[8]. Katya  WS.  Analisis  Hidrokuion  Dalam Sediaan Krim Malam “CW1” Dan “CW2” dari  Klinik  Kecantikan  “N”  dan  “E”  di
Kabupaten Sidoarjo. Universitas Surabaya; 2014. [9]. Astuti TiAIY. Penetapan Kadar Hidrokuinon Dalam Sediaan Krim Malam Pemutih Di Klinik Kecantikan Purwokerto. 2011. [10].   Wulandari P. Uji stabilitas fisik dan kimia
sediaan  krim  ekstrak  etanol  tumbuhan paku. 2016.
[11].   Mohamad  AA.  Uji  Kandungan  Merkuri (Hg) pada Kosmetik Pemutih Wajah yang Dipasarkan  di  Media  Online.  Skripsi [Internet]. 2014;1(1):41–6. Available
from:
https://repository.ung.ac.id/skripsi/show/8
11410011/uji-kandungan-merkuri-hg- pada-kosmetik-pemutih-wajah-yang- dipasarkan-di-media-online.html
[12].   Chakti AS. Analisis Kuantitatif
Hidroquinon pada Produk Kosmetik Krim
Pemutih  yang  Beredar  di  Wilayah Surabaya  Pusat  dan  Surabaya  Utara dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis.
[13].   Tranggoono RI, Latifah F. Buku Pegangan Ilmu  Pengetahuan  Kosmetik.  Jakarta: Gramedia; 2013.
[14].   Sumarmini  A.  Analisis  Merkuri  dan Hidrokuinon  pada  krim  pemutih  yang
beredar di Jayapura. Universitas Cendrawasih; 2019.
[15].   Feladita N, Saputri  gusti ayu rai, Puspita L.  Identifikasi  dan  Penetapan  Kadar Hidrokuinon  dalam  Krim  Malam  pada Empat  Klinik  Kecantikan  di  Bandar
Lampung  Dengan  Menggunakan  Metode Kromatografi Lapis Tipis dan Spektrofotometri  UV-Vis.  J  Anal  Farm.
2016;1:135–43.
[16].   Wulandari  L.  Kromatografi  Lapis  Tipis. Jember:  PT.  Taman  Kampus  Presindo; 2011.
[17].   Prabawati  IDA,  Fatimawali  YA.  Analisis Zat  Hidroquinon  Pada  Krim  Pemutih Wajah  Yang  Beredar  Di  Kota  Manado. Pharmacon. 2012;1(1):41–6.
[18].   Miller  JN,  Miller  JC.  Statstic  and Chremometries  for  Analytical  Chemistry. Sixth. England: Pearson Education; 2010.