## PERBANDINGAN HASIL PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH PADA SERUM YANG DISENTRIFUGASI DENGAN SERUM TANPA SENTRIFUGASI MENGGUNAKAN METODE GOD-PAP
Rahmawati 1) , Effendy Rasiyanto 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar Alamat korenspondensi: rahmawatiamma60@gmail.com

## Abstrak
Glukosa merupakan monosakarida terpenting bagi tubuh manusia yang berfungsi sebagai energi utama. Konsentrasi gula darah, atau tingkat glukosa serum,  diatur dengan ketat di dalam tubuh.  Glukosa  yang  dialirkan  melalui  darah  adalah  sumber  utama  energi  untuk  sel-sel  tubuh. Umumnya tingkat gula darah bertahan pada batas-batas yang sempit sepanjang hari: 4-8 mmol/l (70-150 mg/dl). Metode yang digunakan dalam pemeriksaan glukosa darah biasanya menggunakan serum sebagai spesimen. Serum yang digunakan dalam pemeriksaan glukosa darah terdiri dari dua jenis,  yaitu  serum  tanpa  sentifugasi  dan  serum  dengan  sentrifugasi.  Pada  pemeriksaan  glukosa darah,  serum  harus  segera  dipisahkan  dari  sel  darah  dan  segera  diperiksa  agar  tidak  terjadi metabolisme  yang  menyebabkan  penurunan  kadar  glukosa  darah.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui perbandingan  hasil  pemeriksaan  glukosa  darah  pada  serum  yang disentrifugasi  dan serum  tanpa  sentrifugasi  menggunakan  metode  GOD-PAP  (Glucose  Oxsidase  –  Peroxidase Aminoantypirin)  di  Laboratorium  Patotologi  Klinik  Akademi  Analis  Kesehatan  Muhammadiyah Makassar.  Jenis  penelitian  ini  adalah  bersifat  eksperimen  laboratorium,  dengan  jumlah  sampel sebanyak 20  menggunakan teknik accidental sampling. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada hasil pemeriksaan glukosa darah dengan serum tanpa sentrifugasi didapatkan hasil lebih rendah daripada pemeriksaan glukosa darah dengan serum yang disentrifugasi. Pada serum sentrifugasi didapatkan nilai tertinggi 113 mg/dl dan nilai terendah adalah 71.0 mg/dl, sedangkan pada serum tanpa  sentrifugasi  didapatkan  nilai  tertinggi  103  mg/dl  dan  nilai  terendah  adalah  58.6  mg/dl . Analisis statustuk dengan uji T independent menunjukkan bahwa t- hitung (3.559) > t-tabel (2.024) dan  nilai  p  =  0,001<  0,05 yang  berarti  bahwa  Ha  diterima  dan  Ho  ditolak  dimana  terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  hasil  pemeriksaan  glukosa  darah  menggunakan  serum  yang disentrifugasi dan serum tanpa sentrifugasi.
Kata  kunci:  Glukosa  Darah,  Serum  yang  Disentrifugasi  dan  Serum  Tanpa  Sentrifugasi,  Metode GOD-PAP

## PENDAHULUAN
Gula  darah  adalah  istilah  yang mengacu  pada  tingkat  glukosa  di  dalam darah.  Gukosa  terbentuk  dari  karbohidrat dalam  makan  dan  disimpan  sebagai glikogen dihati dan di otot rangka. Insulin dan  glukagon  adalah  dua  hormon  yang berasal dari pankreas, dapat memengaruhi kadar  glukosa  darah.  Insulin  diperlukan untuk permeabilitas membran sel terhadap glukosa dan untuk transportasi glukosa ke dalam  sel.  Tanpa  insulin,  glukosa  tidak dapat memasuki sel. Glukagon menstimulasi  glikogenolisis  (pengubahan glikogen  cadangan  menjadi  glukosa) dalam hati (Joyce, 2007). Penurunan kadar gula darah ( hipoglikemia )  terjadi  akibat  asupan
makanan  yang  tidak    edukat  atau  darah terlalu  banyak  mengandung  insulin.  Jika terjadi  peningkatan  kadar  gula  darah (hiperglikemia),  berarti  insulin  yang beredar  tidak  mencukupi,  kondisi  ini disebut  sebagai  diabetes  melitus.  Untuk mengetahui berapa kadar gula darah dalam tubuh maka dilakukan pemeriksaan pengukuran glukosa darah.
Dahulu  kala  pengukuran  glukosa darah  dilakukan  terhadap  darah,  tetapi sekarang  sebagian  besar  laboratorium melakukan  pengukuran  kadar  glukosa dalam  serum.  Hal  ini  disebabkan  karena eritrosit  memiliki  kadar  protein  (yaitu hemoglobin ) yang lebih tinggi Serum atau plasma harus segera dipisahkan dari sel-sel darah  sebab  sel  darah  walaupun  telah
berada diluar tubuh tetap terjadi metabolisme  glukosa.  Pada  lekositosis dapat  menurunkan  kadar  glukosa,  pada suhu  kamar.  Sedangkan  pada  suhu  18°C kadar  glukosa  darah  akan  tetap  stabil sampai 24 jam, kecuali jika terkontaminasi dengan bakteri.
Serum    diperoleh  dengan  cara membiarkan darah membeku dan selanjutnya mengambil cairan yang
terdapat  di  luar  bekuan  darah.  Bekuan darah terdiri dari sel-sel darah dan benang- benang  fibrin.  Serum  masih  mengandung faktor-faktor  pembekuan  darah    dalam jumlah  sedikit  karena  faktor  pembekuan telah  terpakai  untuk  membentuk  bekuan darah (Herawati, 2009).
Untuk  menghasilkan  serum  dapat dilakukan  dengan  dua  cara  yang  pertama yaitu  dengan  cara  mendiamkan  darah beberapa  menit  hingga  membeku  lalu disentrifugasi  selama  15  menit  dengan kecepatan  3000  rotasi  permenit.  Cara kedua  yaitu  dengan  mendiamkan  darah hingga  membeku  selama  1-2  jam  pada suhu  ruangan  hingga  terjadi  pemisahan secara  spontan  antara  serum  dan  sel-sel darah (Sadikin, 2001).
Berdasarkan  uraian  diatas,  maka peneliti  melakukan  penelitian  dengan tujuan  untuk  mengetahui  perbandingan hasil  pemeriksaan  glukosa  pada  serum yang  disentrifuge  dengan  serum  tanpa sentrifuge  menggunakan  metode  GOD- PAP.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam
penelitian  ini  adalah  Spektrofotometer, Spoit, kapas alcohol 70%, Mikropipet 10µl dan  1000µl,  Centrifuge,  Tabung  reaksi, Rak  tabung,  Alat  Penunjuk  Waktu (Stopwatch), Tourniquet, Tips kuning dan tips  biru.  Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini  adalah:  Serum  dan    Reagen glukosa.
Prosedur Kerja Persiapan sampel
Darah  diambil  dari  vena  dengan menggunakan  spoit  sebanyak  3  cc.  Lalu darah dimasukkan kedalam 2 tabung yang bersih  dan  kering  tanpa  antikoagulan masing-masing  1,5  cc.  Kemudian  darah pada  tabung  pertama  dibiarkan  membeku selama  kurang  lebih  1-2  jam  pada  suhu ruangan  hingga  terbentuk  serum.  Darah pada  tabung  kedua  dibiarkan  membeku selama beberapa menit kemudian disentrifugasi  dengan  kecepatan  3000 rotasi  permenit  selama  15  menit  untuk memperoleh serum. Serum yang dihasilkan segera dipisahkan dari bekuannya. Cara Kerja Menyiapkan alat yang telah
dikalibrasi  sebelumnya  dan  bahan  yang akan  digunakan.  Lalu  menyiapkan  tiga buah  tabung  reaksi  yang  bersih  dan  steril masing-masing diberi label blanko, standar dan  sampel.  Lalu  memipet  sampel  serum sebanyak  10  µl  dimasukan  pada  tabung sampel  dan  standar  glukosa  pada  tabung standar sebanyak 10 µl. Dengan menggunakan  mikropipet,  ketiga  tabung (blanko  standar,  sampel)  diisi  dengan reagen  glukosa  sebanyak  1000  µl. Kemudian  di  campur  dan  dihomogenkan tiap-tiap  tabung,  diinkubasi  selama  10 menit pada suhu ruangan. Kemudian kadar glukosa dibaca pada alat Spektrofotometer. Nilai Normal: 75 – 115 mg/dl Rumus perhitungan Kadar  glukosa  : Abs Sampel Abs Standar x konsentrasi standar

## Analisis Data
Pengolahan  data  dengan  analisa kuantitatif berdasarkan hasil experimental, kemudian hasil penelitian di sajikan dalam bentuk  dua  tabel  yang  berbeda  pada masing-masing dua perlakuan yang berbeda  dan  dianalisis  secara  deskriptif, hasil  yang  diperoleh  pada  perbandingan dua  perlakuan  yang  berbeda  pada  sampel serum yang  disentrifuge dan serum tanpa sentrifuge.
Data-data ditampilkan dalam bentuk tabel  dari  total  jumlah  kemudian    diolah secara  statistik  menggunakan  uji  statistik parametrik ( t-test ) untuk melihat adanya perbedaan dengan kriteria penerimaan dan penolakan (Riwidikdo, 2010). HASIL DAN PEMBAHASAN Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan terhadap perbandingan pemeriksaan  glukosa  darah  pada  serum yang  disentrifugasi  dengan  serum  tanpa sentrifugasi  menggunakan  metode  GOD-
PAP, diperoleh hasil sebagai berikut:
Tabel  1.  Hasil  Pemeriksaan  Glukosa  Darah  Pada  Serum  Yang  Disentrifugasi  Dan Serum Tanpa Sentrifugasi Metode GOD-PAP
Pada  tabel  1  diperoleh  hasil  bahwa Jumlah  kadar  glukosa  dari  pemeriksaan glukosa  darah  sewaktu  menggunakan metode  GOD-PAP  pada  serum  yang disentrifugasi  menunjukkan  jumlah  nilai berkisar antara 113 - 71 mg/dl, sedangkan pada serum tanpa sentrifugasi
menunjukkan jumlah nilai berkisar antara 103 – 62,5 mg/dl. Berdasarkan hasil penelitian tersebut
dilanjutkan dengan statistik menggunakan SPSS  22.0  dan  diperoleh  data  sebagai berikut: Kode Sampel Hasil Pemeriksaan Glukosa Darah (mg/dl) Serum yang disentrifugasi Serum tanpa sentrifugasi A 93.7 68.2 B 78.1 58.6 C 76.8 66.3 D 83.4 72.3 E 84.0 71.7 F 100 85.6 G 77.3 62.5 H 106 103 I 71.0 68.2 J 84.6 74.5 K 94.9 70.6 L 88.4 76.4 M 91.2 69.8 N 92.9 77.6 O 81.4 69.6 P 113 100 Q 98.8 90.9 R 110 98 S 86.5 70.6 T 92.4 80.7
Tabel 2.Analisis Statistik Terhadap Perbandingan Hasil Pemeriksaan Glukosa Darah Menggunakan Serum Yang  Disentrifugasi Dan Serum Tanpa Sentrifugasi Metode GOD-PAP Pemeriksaan Glukosa darah N Mean SD t-hitung t-tabel Serum sentrifugasi 20 90.22 11.34 3.559 2.024 Serum tanpa sentrifugasi 20 76.75 12.54
Tabel 3. Hasil Independent Samples Test terhadap Pemeriksaan Glukosa Darah Menggunakan Serum Yang Disentrifugasi Dan Serum Tanpa Sentrifugasi Metode GOD-PAP
Levene's Test
for Equality of
Variances t-test for Equality of Means F Sig. t df Sig. (2- tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Kadar Glukosa Darah Equal variances assumed .125 .725 3.559 38 .001 13.46500 3.78359 5.80551  21.12449 Equal variances not assumed 3.559  37.630 .001 13.46500 3.78359 5.80304  21.12696
Pada  tabel  2  dari  hasil  analisa  uji  t menunjukkan  bahwa  t-  hitung  (3.559)  > dari t- tabel (2.024) dan tabel 3 diperoleh hasil nilai p = 0,001< 0,05 yang berarti Ha diterima  dan  Ho  ditolak  berarti  terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  hasil pemeriksaan glukosa darah menggunakan serum yang disentrifugasi dan serum tanpa sentrifugasi metode GOD-PAP.
Gula  darah  adalah  bahan  bakar tubuh yang dibutuhkan untuk  kerja otak , sistem saraf, dan jaringan tubuh yang lain. Gula  darah  yang  terdapat  dalam  tubuh dihasilkan
oleh makanan yang mengandung  karbohidrat,  protein,  dan lemak. Gukosa terbentuk dari karbohidrat dalam  makan  dan  disimpan  sebagai glikogen dihati dan diotot rangka.  Insulin dan  glukagon  adalah  dua  hormon  yang
berasal dari pankreas, dapat mempengaruhi kadar glukosa darah. Penurunan  kadar  glukosa  darah
(hipoglikemia)  terjadi  akibat  asupan makan  yang  tidak  adekuat  atau  darah terlalu  banyak mengandung  insulin.
Peningkatan kadar glukosa darah (hiperglikemia)  terjadi  jika  insulin  yang beredar tidak  mencukupi  atau tidak  dapat berfungsi dengan baik, keadaan ini disebut dengan diabetes melitus . Hasil pemeriksaan glukosa darah dapat
dipengaruhi oleh faktor instrument, metode, reagen, dan sumber daya manusia (SDM).  Nilai  normal  pada  pemeriksaan glukosa  metode  GOD  PAP  mencapai  70- 115 mg/dl.
Pada penelitian ini dilakukan pemeriksaan glukosa darah menggunakan metode  glukosa  oksidase  peroksidase
(GOD  PAP).  Metode  GOD  PAP  adalah metode  yang  sangat  spesifik  untuk pengukuran  glukosa  didalam  serum  atau plasma  melalui  reaksi  dengan  glukosa oksidase,  asam  glukonat  serta  dibentuk hydrogen peroksida. Pemeriksaan glukosa darah  metode  GOD  PAP  menggunakan sampel  serum.  Cara  pemisahan  serum terdapat  dua  cara  yaitu;  pertama  dengan mendiamkan  darah  ±5  menit  sampai membeku,  kemudian  di  sentrifugasi selama  15  menit  dengan  kecepatan  3000 rpm.  Cara  kedua  dengan  mendiamkan darah  1-2  jam  hingga  membentuk  serum sendiri. Kemudian disiapkan tabung untuk larutan  standar  20µL.  Lalu  masing  – masing serum dipipet 20µL lalu ditambahkan  dengan  reagent  glukosa
1000µL.  Dan  hasil  kadar  glukosa  darah dibaca pada alat spektrofotometer.
Penelitian  ini  dilakukan  secara eksperimen  laboratorium,  yaitu  untuk membandingkan  ada  tidaknya  pebedaan pemisahan  serum tanpa sentrifugasi dengan serum yang disentrifugasi terhadap hasil  pemeriksaan  glukosa  darah  metode GOD-PAP. Tabel  1  menunjukkan  bahwa  hasil pada  hasil  pemeriksaan  glukosa  darah dengan serum tanpa sentrifugasi didapatkan  hasil  lebih  rendah  daripada pemeriksaan glukosa darah dengan serum yang disentrifugasi. Pada serum sentrifugasi didapatkan nilai tertinggi 113 mg/dl  dan  nilai  terendah  adalah  71.0
mg/dl,  sedangkan  pada  serum  tanpa sentrifugasi didapatkan nilai tertinggi 103 mg/dl  dan  nilai  terendah  adalah  58.6 mg/dl.
Hal ini disebabkan karena terjadinya metabolisme  glukosa  didalam  darah.
Serum atau plasma harus segera dipisahkan  dari  sel-sel  darah  sebab  sel darah walaupun telah berada diluar tubuh tetap  terjadi  metabolisme  glukosa,  yang dapat menurunkan kadar glukosa, sehingga  hasil  yang  didapatkan  tidak akurat dan dapat mengakibatkan kesalahan diagnosa serta
kesalahan pada pengobatannya.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  maka  dapat  disimpulkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna antara  hasil  pemeriksaan  glukosa  darah menggunakan  serum  yang  disentrifugasi dan  sepprum  tanpa  sentrifugasi,  dimana nilai t-hitung 3.559 > t tabel 2.024 dan nilai p = 0,001< 0,05 artinya hipotesa alternatif (Ha) diterima dan hipotesa (Ho) ditolak.

## DAFTAR PUSTAKA
Andryani,  Metty.  2004.  http://www. academia. edu/ 6718562/ Evaporation_of_multicomponent_d rop_arrays. Bakta,  I.  M.  2006. Hematologi  Klinik Ringkas. Jakarta: EGC.
Human. 2012. Glucose Liquicolor : KIT. Jeni, Maryanti. 2013. http://jennypedamakalahsentrifuge. blogspot.com Kee,  Joyce  Lefever.  2007. Pedoman Pemeriksaan  Laboratorium  Dan Diagnostik. Jakarta: EGC. Murray,  Robert  K.  dkk.  2009. Biokimia Harper. Jakarta: EGC Notoatmodjo, soekidjo. 2010. Metodologi Penelitian Kesehatan . Jakarta: Rineka cipta. Poedjiadi,  Anna.  1994. Dasar-  Dasar Biokimia. Jakarta: Universitas Indonesia.
Riwidikdo.  H.  2010. Statistik  Kesehatan . Yogyakarta: Mitra Cendekia press. Sadikin, Mohamad. 2001. Biokimia Darah . Jakarta: Widya Medika. Soewato, Hafiz. Sadikin, Mohamad. 2001. Biokimia Eksperiman Laboratorium . Jakarta: Widya Medika. Toho,  Abdul  hamid  A.  2005. Biokimia Metabolisme Biomolekul . Bandung: ALFABETA. Wirahadikusumah, Mohamad. 1985. Biokimia Metabolisme Energi, Karbohidrat,  dan  Lipid. Bandung: ITB.
Yazid,  Eztien,  dan  lisda  nursanti.  2006.
Penuntun Praktikum Biokimia .
Yogyakarta: ANDI.