Pemanfaatan Isi Rumen Sapi yang Difermentasikan dengan Bakteri Bacillus pumilus terhadap Kandungan Klorofil pada Kultur Dunaliella salina
Use of Content Cow Rumen Fermented With Bacillus pumilus Bacterial Chlorophyll Content On The Culture Dunaliella salina
Endang Dewi Masithah, Nur Choiriyah dan Prayogo
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031 - 5911451

## Abstract
Dunaliella salina is one type of natural food that can be used in an attempt pembeniha rumen contents of cows is one of the waste obtained from the abattoir which is rich in nutrients. Synthesis of chlorophyll a and b require N and P. The purpose of this study was to determine the effect and the best dose utilization of rumen contents of cows and Bacillus pumilus in the culture of Dunaliella salina in chlorophyll content. The research design used was Completely Randomized  Design  (CRD)  followed  by  Duncan  multiple  range  test.  Treatment  research  Dunaliella  salina  was cultured in 500 mL glass bottle with 5 treatments and 4 replications. Culture medium used was sea water that has salinity 30 ppt as much as 0.5 liters of rumen fluid is added 0.5 ml of solution that has been fermented with Bacillus pumilus in accordance with the treatment dose. The results showed that the use of fermenter bacteria Bacillus pumilus in cow rumen contents effect on chlorophyll content and dose fermenter rumen bacterium Bacillus pumilus in cattle that  give  the  best  chlorophyll  content  in  Dunaliella  salina  culture  fermentation  is  the  dose i n t r e a t m e n t C ( 7 . 5 % d o s e f e r m e n t a t i o n ) r e a c h e d 0 . 7 1 5 6 5 3 2 11 a ì m o l c h l / c e l l o n t h e f i r s t d a y.
Keywords : Dunaliella salina , cow rumen, Bacillus pumilus , chlorophyll
z z z z

## Latar Belakang
Dunaliella  salina merupakan  salah  satu jenis  Chlorophyceae  yang  sering  disebut  flagellata hijau  bersel  satu  ( green  unicellulair  flagellate )  yang mempunyai  klorofil  a  dan  b,  selain  itu  juga  sebagai pakan  alami  pada  pembenihan  ikan.  Manfaat  dari
Dunaliella  salina antara  lain  adalah  sebagai  pakan alami  dan  sebagi  zat  antioksidan  bagi  manusia. Lobban and Harrison (1994) dalam Kim et al. (2007) menyatakan  bahwa  sintesis  klorofil a dan b memerlukan N. Selain N dan P, pembentukan klorofil
a juga  dipengaruhi  oleh  Magnesium  (Mg).  Mg merupakan  unsur  yang  membentuk  struktur  klorofil dan  berperan  dalam  penangkapan  cahaya  dalam proses  fotosintesis  (Lawlor,  1993).  Harrison and
Berges  (2005)  menyatakan  bahwa  salah  satu  cara untuk  meningkatkan  pertumbuhan  fitoplankton adalah  mengontrol  kandungan  nutrien  baik  makro maupun mikro pada lingkungan budidaya.
Isi  rumen  sapi  adalah  salah  satu  limbah yang  diperoleh  dari  rumah  potong  hewan  yang  kaya akan nutrisi. Limbah ini sebenarnya sangat potensial bila  dimanfaatkan  sebagai  pupuk  karena  isi  rumen memiliki nutrisi tinggi.
Bakteri Bacillus pumilus merupakan bakteri selulolitik  yang  memiliki  kemampuan  mendegadrasi serat  kasar  menjadi  glukosa  dan  asam  laktat (Gunawan  dan  Sundari,  2003).  Guna  meningkatkan kualitas  isi  rumen  sapi  maka  dilakukan  proses fermentasi  menggunakan  bakteri Bacillus  pumilus.
dalam  penelitian  ini  dilakukan  studi  sejauh  mana kesuburan D.  salina berdasarkan  kandungan klorofilnya  dengan  menggunakan  pupuk  isi  rumen sapi  yang  difermentasi  dengan  bakteri Bacillus pumilus dengan dosis berbeda.

## Tujuan
Untuk  mengetahui  apakah  penggunaan bakteri Bacillus  pumilus pada  rumen  sapi  dapat meningkatkan  kandungan  klorofil  pada  kultur Dunaliella salina .
Untuk  mengetahui  berapa  dosis  fermentor bakteri Bacillus  pumilus pada  rumen  sapi  yang memberikan  kandungan  klorofil Dunaliella  salina tertinggi.

## Materi dan Metode Penelitian
Waktu dan Tempat
Kegiatan  penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  September  –  Oktober  2010  di  Laboratorium Perikanan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Unair. Materi Penelitian
Materi  penelitian  yang  akan  digunakan terdiri  atas  bahan  dan  alat  penelitian.  Bahan penelitian  yang  digunakan  adalah  adalah  D unaliella salina dari  BBAP  Situbondo,  rumen  yang  didapat dari RPH Pegirian, Bacillus pumilus isolat dari Lamit (Unair,  2009 ). Pupuk  komersial  Walne,  air  laut  dan air  tawar,  aquadest,  Chlorine  dan  Na  Thiosulfat, amonium  sulfat,  aceton  90%,  MgCO ,  media  untuk 3
peremajaan Bacillus pumilus (g/L): Pepton 5,0; Yeast Ekstrak1,0; K2HPO4 1,0; MgSO4 7H2 O 0,2; media yang  diperkaya  xilan  10,0%  (w/v);  0,5  mL spelt xylan 1%  (w/v),  tetes  tebu,  alkohol.  Peralatan  yang digunakan  dalam  penelitian  adalah  spektrofometer, toples  kaca,  aerator,  selang  aerator,  gabus,  plastik, gelas ukur, pipet tetes, mikroskop, Sedgewich Rafter (50  mm  x  20  mm  x  0.1  mm), Handtally  Counter , autoclave ,  Refraktometer,  pH  universal,  pipet volume,  galon,  amonia  test,  kapas,  corong  air, sentrifuge,  elenmeyer,  timbangan,  termometer,  pH universal, lampu TL, kasa, aluminium foil dan kertas saring.

## Metode Penelitian
Rancangan  penelitian  yang  digunakan dalam  penelitian  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL),  penelitian  terdiri  dari  Perlakuan  A  (dosis 12.5%),  B  (dosis  10  %),  C  (dosis  7,5  %),  kontrol  1 (tanpa  fermentasi)  dan  kontrol  2  (pupuk  walne). Setiap perlakuan mendapat ulangan sebanyak 4 kali.

## Prosedur Kerja
Sterilisasi
Sterilisasi  alat  dan  air  laut  dimaksudkan u n t u k   m e n g h i n d a r i   a d a n y a   k o n t a m i n a s i mikroorganisme lain. Peralatan yang akan digunakan dicuci  sampai  bersih  kemudian  dibilas  dengan  air tawar. Peralatan yang sudah bersih direndam dengan larutan  klorin  150  mg/L  selama  24  jam.  Setelah  itu, peralatan  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari. Peralatan  yang  akan  digunakan  untuk  kultur disterilkan  dengan  menggunakan autoclave dengan suhu  121°C  selama  15  menit.  Sterilisasi  dengan autoclave dilakukan  untuk  peralatan  yang  terbuat dari kaca tahan panas.
Air  laut  sebagai  media  kultur  juga disterilkan  dengan  larutan  klorin.  Air  laut  disaring dengan kapas yang diletakkan dalam corong air, lalu disterilkan dengan klorin 60 mg/L selama 24 jam. Na Thiosulfat  20  mg/L  diberikan  untuk  menghilangkan sisa-sisa  bau  klorin.  Air  laut  yang  telah  steril disimpan  dalam  wadah  yang  tidak  tembus  cahaya dan tertutup. Hal ini dimaksudkan agar tidak tumbuh lumut atau mikroorganisme lain (Ekawati, 2005).
Persiapan Rumen
Rumen  yang  digunakan  untuk  penelitian diperoleh  dari  limbah  Rumah  Potong  Hewan, Pegirian,  Surabaya.  Rumen  yang  akan  digunakan dikeringkan  dengan  terik  sinar  matahari  sampai kering  kemudian  dihaluskan.  Kandungan  N  dan  P
pada  rumen  sapi  yang  belum  difermentasi kemudian dianalisis.

## Persiapan Bacillus pumilus
Isolat  Bacillus  pumilus  yang  digunakan adalah isolat yang diisolasi oleh Lamit (Unair, 2009) dari  Rumen  sapi.  Adapun  persiapan  untuk  isolat Bacillus  pumilus yaitu  dengan  menyediakan  media cair  untuk  menghasilkan  xilanase.  Komposisi  untuk membuat media cair yang diperkaya xilan (g/L) yaitu :  Xilan  10,01%  (w/v);  Pepton  5,0; Yeast  Ekstrak1,0; K HPO 1,0;  MgSO 7H O  0,2.  Sebelum  digunakan
2 4 4 2
untuk  fermentasi,  dianalisis  TPC  untuk  mengetahui kepadatan bakteri (metode Mc farlan).
Fermentasi Rumen Dengan Bacillus pumilus
Rumen  sapi  yang  telah  kering  dan  sudah d i t i m b a n g   s e b a n y a k   5   g r a m   d i f e r m e n t a s i menggunakan  isolat Bacillus  pumilus. Sebagai aktivator  adalah  tetes.  Proses  ini  diawali  dengan mencampur  4  %  tetes,  1,5  mL  air,  5  gram  isi  rumen sapi dan isolat Bacillus pumilus dengan dosis sesuai perlakuan, kemudian diaduk secara merata.  Sesudah itu  dimasukkan  dalam  plastik  hitam  dan  diinkubasi
o selama  5,7,  dan  9  hari  dengan  suhu  27  –  32 C.
Setelah  mencapai  jangka  waktu  fermentasi  yang ditentukan,  rumen  yang  telah  difermentasi dikeringkan dan siap digunakan.
Persiapan  Pembuatan  Stok  Rumen  Terfermentasi

## Bacillus pumilus
Rumen  yang  sudah  kering  dan  telah difermentasi  dengan  isolat Bacillus  pumilus ditimbang  sebanyak  5000  mg,  kemudian  rumen tersebut  dilarutkan  dalam  500  mL  aquadest. Konsentrasi  larutan  rumen  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  10  ppm  dengan  volume penggunaan  1mL/L.  Kemudian  larutan  rumen dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  sambil  disaring dengan kertas saring.  Erlenmeyer yang berisi rumen ditutup  dengan  gause  (kapas  yang  dibalut  dengan kasa)  dan  dibalut  dengan  aluminium  foil  lalu disterilkan  menggunakan  autoclave.  Pembuatan cairan  rumen  terfermentasi  isolat Bacillus  pumilus untuk kultur Dunaliella salina menggunakan rumus :
Keterangan:
Q = berat bahan yang dilarutkan (mg, gram) V = volume pelarut/ aquadest (ml, L)

## Pemanfaatan Isi Rumen ......
98 K P V Q × = (Satyantini dan  Masithah, 2008)
P = volume penggunaan dalam media kultur (ml/L) K = konsentrasi pupuk yang diketahui (ppm, mg/L)
Media Kultur dan Lingkungan Dunaliella salina
Media  kultur  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah  air  yang  mempunyai  salinitas  30 ppt sebanyak 0.5 liter yang dimasukkan dalam toples kaca.  Selanjutnya ditambahkan 0,5 ml larutan rumen yang  telah  difermentasi  dengan Bacillus  pumilus sesuai  dengan  dosis  perlakuan.  Kemudian  media kultur  diletakkan  di  rak  kultur  lalu  diberi  aerasi  dan siap  dimasukkan  bibit Dunaliella  salina dengan kepadatan yang diinginkan.
Lingkungan  kultur    dapat  mempengaruhi pertumbuhan Dunaliella  salina ,  oleh  karena  itu lingkungan  dikondisikan  sama  untuk  setiap perlakuan.  Lingkungan  kultur Dunaliella  salina o
dalam penelitian ini adalah suhu 25 – 30 C, salinitas 30 - 32 ppt, intensitas cahaya 1300 – 2300 lux, pH 7 –  9  dan  photoperiod  18  jam  dalam  keadaan  terang dan 6 jam dalam keadaan gelap (Yurong, 2005).  Rak kultur ditutup dengan plastik hitam, agar suhu ruang stabil,  untuk  menghindari  kontaminan,  dan  untuk mengatur fotoperiod.
Penebaran bibit Dunaliella salina Dunaliella  salina yang  digunakan  untuk penelitian  diperoleh  dari  Balai  Besar  Budidaya  Air Payau Situbondo dan Jepara. Bibit Dunaliella salina murni  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  botol  sesuai dengan  kepadatan  sebesar  500.000  sel/ml. Penghitungan  jumlah  bibit Dunaliella  salina yang diperlukan  untuk  kultur,  dapat  menggunakan  rumus sebagai berikut:
Keterangan: V1 = Volume bibit untuk penebaran awal (ml) N1 = Kepadatan bibit/ stock Dunaliella salina
(unit/ ml)
V2 = Volume media kultur yang dikehendaki (L) N2 = Kepadatan bibit Dunaliella salina yang dikehendaki (unit/ ml)
Penghitungan Klorofil Pengukuran  kandungan  klorofil D.  salina dilakukan  menggunakan  spektrofotometer  dengan metode  modifikasi  dari  Lobban et  al .,  1988.  Sampel diambil  sebanyak  80  ml,  selanjutnya  dihitung kepadatan  sel  per  ml D.  salina. Sampel  dibagi menjadi  8  bagian  (kode  A-H),  masing-masing
sebanyak  10  ml  dan  dimasukkan  ke  dalam  cuvet sentrifuge.  Sampel  disentrifuge  dengan  kecepatan 5000 rpm selama 5 menit.
S e t e l a h   p r o s e s   s e n t r i f u g e   s e l e s a i , supernatan  dibuang  hingga  tersisa  pelletnya.  Sampel A  ditambah  MgCO   dan  1  ml  acetone  90%  untuk 3 proses  ekstraksi.  Sample  dihomogenkan  secara manual  selama  kurang  lebih  10-15  menit.  Sample kode  A  (1  tabung)  merupakan  blanko.  Sedangkan pellet  dari  sample  kode    B-H  (7  tabung),  dijadikan satu  dalam  satu  kuvet,  selanjutnya  ditambahkan MgCO   dan  1  ml  acetone  90%.  Sample  tersebut 3 merupakan  sample  kandungan  klorofil  yang  akan dihitung pada spektrofotometer.
Sebelum  digunakan,  spektrofotometer dikaliberasi  terlebih  dahulu,  sesuai  dengan  panjang gelombang  yang  akan  digunakan  yaitu A   dan A .
664 647
Selanjutnya  blanko  dan  sample  diukur  serapan cahayanya  pada  spektrofotometer.  Selanjutnya kandungan  klorofil  dihitung  menggunakan  rumus berikut :
1. Kandungan  klorofil-a  dan  klorofil-b  (larutan aceton 90%) :
a) Klorofil-a = 11,93 A  – 1,93 A 664 647 b) Klorofil-b = 20,63 – 5,50 A647 A664 -1 2. Jumlah untuk µg chl cell  dari fitoplankton :
(Berat molekul : chl-a 894, chl-b 908)
Parameter Pengamatan Parameter Utama
Parameter  utama  dalam  penelitian  ini adalah jumlah klorofil dalam kultur Dunaliella salina yang  telah  dikultur  dengan  pupuk  fermentasi  rumen sapi  dengan  isolat  bakteri Bacillus  pumilus ..
Perhitungan  kandungan  klorofil Dunaliella  salina dilakukan  pada  hari  pertama,  ketiga  dan  kelima. Perhitungan  kandungan  klorofil  dihitung  dengan menggunakan Spekttofotometer .

## Parameter Pendukung
Parameter  pendukung  dalam  penelitian adalah  kepadatan  populasi Dunaliella  salina, suhu, pH,  salinitas.  Perhitungan  terhadap  suhu,  pH, salinitas dilakukan setiap hari. Parameter pendukung digunakan  untuk  melengkapi  data  dari  parameter utama.
Analisis Data
Data  penelitian  dianalisis  secara  statistik dengan  menggunakan  ANAVA.  Bila  terdapat
1 2 2 1 N V N V × =
(Ekawati, 2005)
perbedaan  dapat  dilakukan  uji  lanjutan.  Untuk mengetahui  signifikasi  pengaruh  perlakuan  satu dengan  perlakuan  yang  lain  dapat  dilakukan  uji lanjutan  yaitu  dengan  Uji  Jarak  Berganda  Duncan ( Duncan's  Multiple  Range  Test )  (Kusriningrum, 2008).

## Hasil dan Pembahasan
Hasil Penelitian Data  kandungan  klorofil  dan  hasil  analisis varian  (ANAVA)  yang  ditunjukkan  pada  tabel  1
menunjukan  bahwa  masing-masing  perlakuan memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata  (p<0,05) terhadap kandungan klorofil Dunaliella salina .

## Kualitas Air
Parameter  kualitas  air  yang  diukur  selama
o penelitian  adalah  suhu  ( C),  pH  dan  salinitas.  Hasil pengukuran  suhu  selama  penelitian  pada  setiap
o perlakuan dan ulangan yaitu berkisar antara 26-28  C. pH  berkisar  antara  7-8.  Salinitas  pada  setiap perlakuan berkisar sampai 45‰.
Tabel 1. Hasil uji jarak berganda Duncan terhadap jumlah klorofil a Dunaliella salina Perlakuan Jumlah klorofil a rata-rata akhir penelitian ( ìg/ml ) Jumlah klorofil a rata-rata akhir (Transformasi  Y)
Kontrol 1 (tanpa fermentasi)
Kontrol 2 (walne) Perlakuan A (dosis 12,5%) Perlakuan B (dosis 10%) Perlakuan C (dosis 7,5%) c 0,0072 a 0,0125 b
0,0090 b 0,0097 a 0,0122 c 0,71215354 a 0,715910532 b 0,713429377 b
0,713907734 a 0,715653211
Tabel 2. Hasil uji jarak berganda Duncan terhadap jumlah klorofil b Dunaliella salina Perlakuan Jumlah klorofil b rata-rata akhir penelitian ( ìg/ml ) Jumlah klorofil b rata-rata akhir (Transformasi  Y) Kontrol 1 (tanpa fermentasi) Kontrol 2 (walne) Perlakuan A (dosis 12,5%) Perlakuan B (dosis 10%) Perlakuan C (dosis 7,5%) b 0,0103 a 0,0178 ab
0,0117 a
0,0179 a 0,0184 c 0,71215354 a 0,715910532 b 0,713429377 b 0,713907734 a 0,715653211
Kandungan Nutrisi Rumen Sapi Hasil  uji  laboratorium  kadar  nitrogen  dan phosphor  sebelum  fermentasi  adalah  1,5413  dan 1,22.  Kadar  unsur  nitrogen  rumen  sapi  setelah fermentasi  menggunakan  bakteri Bacillus  pumilus terjadi  peningkatan    menjadi    1,5415  %  sedangkan kadar unsur phosphor mengalami penurunan menjadi 0,345 %.
Hasil  perhitungan  Anava  pada  penelitian pemberian  pupuk  fermentasi  isi  rumen  sapi  dengan Bacillus  pumilus berpengaruh  nyata  (p<0,05) terhadap  jumlah  klorofil a dan b D.salina .  Hasil menunjukkan bahwa pupuk fermentasi isi rumen sapi dengan Bacillus  pumilus yang  dapat  memberikan jumlah  klorofil a dan b  D.salina terbaik  adalah perlakuan  C  (dosis  7,5%)  yang  tidak  berbeda  nyata (p>0,05)  dengan  kontrol  2  (pupuk  walne),  dan perlakuan  A  (dosis  12,5%)  tidak  berbeda  nyata (p>0,05)    dengan  perlakuan  B  (dosis  10%).  Hasil terendah pada perlakuan kontrol 1 (tanpa fermentasi).
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian pupuk  fermentasi  isi  rumen  sapi  dengan Bacillus pumilus memberikan  pengaruh  yang  berbeda terhadap  jumlah  klorofil a dan b  D.salina antara perlakuan.  Diduga  bahwa  adanya  perbedaan  antara perlakuan  yang  menggunakan  pupuk  fermentasi dengan yang tanpa fermentasi karena pada perlakuan tanpa  fermentasi,  penambahan  unsur  hara  tersedia bagi  plankton,  tidak  sebanyak  pada  perlakuan  yang menggunakan fermentasi.
Kandungan  klorofil D.salina terendah terjadi  pada  perlakuan  kontrol  1  (tanpa  fermentasi oleh  bakteri).  Hal  ini  diduga  disebabkan  nutrien tersedia yang digunakan untuk pembentukan klorofil lebih  sedikit  dibanding  perlakuan  dengan  bakteri fermentasi.  Bakteri  fermentasi  membantu  proses degradasi  bahan  organik  (rumen  sapi)  menjadi nutrien  tersedia,  sehingga  pertumbuhan  dan  klorofil D.salina meningkat.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Aslan  (1998)  bahwa  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi pertumbuhan D.salina adalah nutrien
Pemanfaatan Isi Rumen ......
yang  dapat  diperoleh  dari  pupuk.  Denault et  al.,
(2000)  juga  menyatakan  bahwa  jumlah  klorofil a menurun  seiring  dengan  menurunnya  hara  pada media  pemeliharaan.  Kurangnya  unsur  hara  dapat menyebabkan  proses  fotosintesis  terhambat  dan berpengaruh terhadap jumlah klorofil (Latif, 2008).
Faktor  utama  yang  dibutuhkan  untuk pembentukan  klorofil a dan b adalah  nutrien  dan c a h a y a .   A s l a n   ( 1 9 9 8 )   m e n y a t a k a n   b a h w a pertumbuhan  dan  perkembangan  mikroalga membutuhkan  kualitas  cahaya  serta  nutrien  yang cukup  seperti  nitrat  dan  fosfat Nitrat  dan  fosfat diperlukan sebagai bahan dasar penyusun protein dan pembentukan  klorofil  dalam  proses  fotosintesis. Klorofil  adalah  zat  pembawa  warna  hijau  pada tumbuhan  (Carter,  1996).  Komponen  utama penyusun  klorofil  adalah  N  dan  Mg  (Lawlor,  1993). N  diperlukan  sebagai  bahan  dasar  penyusun  protein dan  pembentukan  klorofil  dalam  fotosintesis. Semakin  banyak  pembentukan  klorofil  maka  proses fotosintesis semakin optimal (Jadid, 2008).
Analisis  kandungan  nitrogen  (N)  dan fosfor  (P)  menunjukan  bahwa  terjadi  peningkatan rasio  N:P  setelah  fermentasi  dari  1,26  :  1  menjadi
4,47:1.  Peningkatan  rasio  N:P  ini  menyebabkan kandungan  nutrisi  rumen  setelah  fermentasi  menjadi lebih  sesuai  bagi  pertumbuhan D.  salina walaupun belum  ideal.  Menurut  Shoni  (2006)  rasio  N:P  ideal untuk  pertumbuhan  Chlorophyceae  adalah  10-20:1. Unsur  N  merupakan  komponen  penting  bagi pertumbuhan plankton (Anggadireja dkk., 2006). Hal ini  disebabkan  N  merupakan  faktor  pembatas  bagi pertumbuhan  mikrolaga  (Hanisak,  1983).  Novizan (2000) dalam Latif (2008)  menyatakan bahwa  unsur
N  di  dalam  perairan  menyebabkan  tanaman  tumbuh subur, sehingga produksinya meningkat.
Selain  unsur  N, Dunaliella  salina juga m e m b u t u h k a n   u n s u r   f o s f o r   ( P )   d a l a m pertumbuhannya.  Khul  (1974) dalam Susanto  dkk.
(2001) menyatakan bahwa penambahan P diperlukan untuk  pembentukan  ATP  dan  berperan  dalam penyerapan ion oleh mikroalga.
Faktor  cahaya,  diduga  tidak  menjadi faktor  yang  menyebabkan  perbedaan  hasil  pada penelitian ini. Hal ini disebabkan, pencahayaan telah diatur merata dan sesuai dengan kebutuhan D. salina , seperti  pendapat  Isnansetyo  dan  Kurniastuty  (1995) bahwa D.  salina optimum  pada  pencahayaan  1300-
2300 lux.
Pertumbuhan  plankton  juga  dipengaruhi faktor  eksternal  (Kamlasi,  2006).  Suhu  merupakan salah  satu  faktor  yang  penting  bagi  pertumbuhan
.
rumput laut (Raikar et al. , 2001). Hal ini disebabkan suhu  mempengaruhi  aktivitas  metabolisme  dan perkembangan  suatu  organisme  (Sahabuddin  dan Tangko,  2008).  Hasil  pengukuran  suhu  selama
o penelitian  berkisar  antara  26-28 C.  Aslan  (1998) menyatakan  bahwa  suhu  yang  baik  untuk
o pertumbuhan mikroalga berkisar antara 26-33 C.
Salinitas  yang  terukur  selama  penelitian berkisar  antara  34  -  45‰.  Chen  (1994)  menyatakan bahwa salinitas optimal bagi pertumbuhan Dunaliella adalah 20-35‰. Penurunan dan peningkatan salinitas di atas batas optimum tidak menyebabkan kematian, tetapi  mengakibatkan  pertumbuhan  akan  terhambat (Syafruddin, 1993 dalam Latif, 2008)
Power  of  Hydrogen (pH)  adalah  suatu  ukuran  dari konsentrasi  ion  hidrogen  dan  menunjukkan  sifat asam  atau  basa  suatu  perairan  (Summerfelt,  1997). Power  of  Hydrogen (pH)  air  selama  penelitian berkisar antara 7-8. Aslan (1998) menyatakan bahwa pH  optimum  bagi  mikroalga  berkisar  antara  6,8-8,2. Kualitas air pemeliharaan D.salina selama penelitian dapat    disimpulkan    masih  layak  dan  sesuai kebutuhan hidup D.salina .

## Kesimpulan
Penggunaan  fermentor  bakteri Bacillus pumilus pada rumen sapi berpengaruh nyata terhadap kandungan  klorofil  pada  kultur Dunaliella salina Dosis fermentor bakteri Bacillus pumilus pada rumen sapi  yang  memberikan  kandungan  klorofil    terbaik pada kultur Dunaliella salina adalah dosis fermentasi pada  perlakuan  C  (dosis  fermentasi  7,5%)  mencapai
a 0,715653211 µ mol chl/sel.
Isi  rumen  sapi  yang  di  fermentasi  dengan Bacillus  pumilus (5  g  rumen  sapi,  tetes  4%  dan  1,5 mL  air)  sebagai  pupuk  dalam  kultur Dunaliella salina memiliki  nilai  N  yang  cukup  tinggi  dan mampu menyediakan unsur hara, namun nilai P yang
rendah.  Nilai  P  yang  rendah  tersebut  dapat ditingkatkan  dengan  penambahan  dari  sumber nutrient  lainnya.  Namun  masih  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  penambahan phosphor  dari  nutrient  yang  berbeda  yang  bisa meningkatkan  kandungan  klorofil Dunaliella  salina yang  lebih  baik  lagi.  Sterilisasi  alat  dan  lingkungan kultur  meliputi  suhu,  pH  dan  salinitas  sebaiknya dalam kondisi terkontrol.

## Daftar Pustaka
Beker.  E.  W.  1994.  Microalgae  Biotechnology  and Microbiology. Cambrige University Press
Ben-Amotz, A.  1993.  Production  of â -  carotene  and Vitamins  by  The  Halotolerant  Alga Dunaliella . Marine  Biotechnology Vol  1. Pharmaceutical  and  Bioactive  Natural Products.  Ed.  Attaway,  D.H.  &  Zaborsky, O.R. Enum. 411- 416p Borowitzka,  M.  A.  1990.  The  Mass  Culture  of
Dunaliella  salina .  http://www.fao.org. 09/08/2009. 16 hal.
Edhy,.  W.  A.,  J.  Pribadi  dan  Kurniawan.  2003. Plankton.  PT.  Central  Pertiwi  Bahari. Kalimantan Barat. Hal. 1 – 29.
Ekawati, A. W. 2005. Diktat Kuliah Budidaya Pakan Alami.  Fakultas  Perikanan  Universitas
Brawijaya. Malang. Hal. 3 – 48.
El  Bas,  F.  K., Ahmed  M, Aboul  E,  Gamal  S.    2002. Accumulation  of  Antioxidant  Vitamins  in Dunaliella  salina .  www.sciencedirect.com. 10/08/2009. 4pp.
Gunawan  dan  Sundari.  2003.  Pengaruh  Penggunaan P r o b i o t i k   d a l a m   R a n s u m   t e r h a d a p P r o d u k t i v i t a s A y a m . http://peternakan.litbang.deptan.go.id/133- 2.pdf. 25/10/2009. 7 hal
Ivanova  ,  E.P,  Vysostskii,  Mv.<  sSvestashev,  V.I., Nedakashkovskaya,  O.I.  ;  Gorshkova, N.M.,  Mikhailov,  V.V;  N.;  Shigeri, yoshikawa,  S  (1999).  Characterisation  of Bacillus    strains  of  marine  origin.
Int.Microbiol 267-271
Gusrina.  2009.  Makalah  Budidaya  Pakan  Alami (Phytoplankton, Zooplankton dan Benthos). http://ardivedca.blogspot.com/makalah- budidaya-pakan-alami_08.html.  3/11/2009.
22 hal
H o s e i .   2 0 0 8 . D u n a l i e l l a   s a l i n a . http://protist.i.hosei.ac.jp/Dunaliella/salina_ 1.jpg. 10/11/2009.1 hal.
Isnansetyo, A. dan Kurniastuty. 1995. Ateknik Kultur Fitoplankton  dan  Zooplanton.  Penerbit Kanisius. Yogyakarta. hal. 46 – 85.
Jemiati.  2002.  Pengaruh  Perbedaan  Salinitas Terhadap  Pertumbuhan Chlorella  sp. pada Media  yang  Diperkaya  Dengan  Limbah Pabrik  Gula.  Skripsi.  Fakultas  Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. hal. 1 – 46.
Kusriani dan E. Yuli. 2005. Buku Ajar Planktonologi. Fakultas  Perikanan  Universitas  Brawijaya.
Malang. hal. 1 – 41.
Kusriningrum,  R.  S.  2008.  Perancangan  Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya. Hal. 165 – 173.
Lamid,  Mirni.,  Chuzaemi,  Siti.,    Puspaningsih,  Ni Nyoman  Tri.,  dan  Kusmartono.  2006. Inokulasi  Bakteri  Xilanolitik  Asal  Rumen sebagai  Upaya  Peningkatan  Nilai  Nutrisi Jerami  Padi.  Fakultas  Kedokteran  Hewan U n i v e r s i t a s   A i r l a n g g a .   S u r a b a y a . h t t p / / w w w. m i r n i l a m i d @ y a h o o . c o m . 11/03/2010. 7 hal.
Nurjariah.  2005.  Kelimpahan  Bakteri  dalam Budidaya  Cacing  Sutera Limnodrilus sp.
Yang  Dipupuk  Kotoran  Ayam  Hasil Fermentasi.  Skripsi.  Institut  Pertanian Bogor. Bogor. 34 hal.
Richmond,  A.  1988.  CRC  Handbook  of  Mikroalgal Mass  Culture.  CRC  Press  Ino.  Florida.  p. 156 – 190.
Satyantini,  W.  H.  dan  E.  D.  Masithah.  2008.  Diktat Penuntun  Praktikum  Budidaya  Pakan Alami.  Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan Universitas  Airlangga.  Surabaya.  hal.  28  – 49.
Sylvester,  B.  D.,  Nelvy  D  dan  Sudjiharno.  2002. Persyaratan  Budidaya  Fitoplankton. dalam Budidaya  Fitoplankton  dan  Zooplankton. 2002.  Balai  Budidaya  Laut,  Direktorat Jenderal  Perikanan  Budidaya  Departemen Kelautan  dan  Perikanan.  Bandar  Lampung.
Hal.24 – 36.
Tjahjo, W., L. Erawati dan Hanung, S. 2002. Biologi Fitoplankton. dalam Budidaya Fitoplankton dan  Zooplankton.  2002.  Balai  Budidaya Laut,  Direktorat  Jenderal  Perikanan Budidaya  Departemen  Kelautan  dan Perikanan. Bandar Lampung. Hal.3 – 23.