DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600

## JBIO: JURNAL BIOSAINS (The Journal of Biosciences)
http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
ISOLASI DAN KARAKTERISASI BAKTERI RESISTEN TIMBAL

## DARI SEDIMEN LAUT TERDAMPAK PENAMBANGAN TIMAH INKONVENSIONAL DI PANTAI SAMPUR, BANGKA TENGAH
Ina Miranti 1 , Rahmad Lingga 1* , Very Andre Fabiani 2
Program Studi Biologi, Universitas Bangka Belitung, Balun ijuk, Merawang, Bangka, Kep. Bangka Belitung,
33172 1) ; Program Studi Kimia, Universitas Bangka Belitung, Balun ijuk, Merawang, Bangka, Kep. Bangka Belitung, 33172 2) email korespondensi: linkgarahmad@gmail.com
Diterima:  April 2021; Direvisi: Juni 2021; Disetujui: Agustus 2021

## ABSTRAK
Penambangan  timah  di  Laut  dapat  menyebabkan  terjadinya  pencemaran  logam  berat,  salah satunya logam Timbal (Pb). Pencemaran Timbal dapat menyebabkan kerusakan lingkungan dan bersifat toksik bagi makhluk hidup. Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk mengurangi pencemaran Timbal adalah  dengan  teknik  bioremediasi.  Bakteri  resisten  diketahui  berpotensi  sebagai  agen  bioremediasi. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kadar  Timbal  di  perairan  Pantai  Sampur  dan  mendapatkan bakteri yang memiliki resistensi terhadap logam berat Timbal. Metode penelitian yang dilakukan adalah purposive sampling untuk mengambil sampel air dan sedimen. Hasil uji SSA menunjukkan bahwa kadar Pb pada air laut lebih tinggi dibandingkan pada sedimen. pH air laut yang normal menyebabkan kelarutan senyawa  Pb  dalam  air  menjadi  stabil.  Kadar  Pb  dalam  air  laut  sudah  melewati  baku  mutu  sehingga berpotensi menyebabkan toksisitas bagi biota perairan. Kadar Pb pada sedimen paling tinggi berada di lokasi yang dekat dengan aktivitas penambangan timah. Hasil isolasi menunjukkan bahwa jumlah bakteri berkisar 11,10 5 – 34,10 5 CFU/g. Semakin tinggi kadar Pb pada sedimen maka jumlah bakteri akan semakin rendah. Terdapat 7 isolat yang resisten Pb 100 ppm dan diduga merupakan bakteri dari genus Alcaligens, Meniscus, Neisseria, Erythrobacter, dan Alteromonas .
Kata  Kunci  : Bakteri  resisten  Timbal,  Bioremediasi,  Pantai  Sampur,  Penambangan  timah,  Pencemaran Timbal.

## ISOLATION AND CHARACTERISATION OF Pb RESISTANT BACTERIA FROM MARINE SEDIMENT AFFECTED BY INCONVENTIONAL TIN MINING AT SAMPUR BEACH, BANGKA TENGAH DISTRICT

## ABSTRACT
Offshore tin mining can causes heavy metal contamination, one of which is lead (Pb) metal. Lead pollution can causes environmental damage and  toxic  to living organisms. One of the methods to reduce lead  pollution  was  by  bioremediation  techniques.  Resistant  bacteria  were  potential  to  be  used  as bioremediation agent. This research aimed to determine the lead level in Sampur coastal waters and to obtain bacteria that have resistance to lead (Pb). The research method was purposive sampling to take a sample of water and sediment. The AAS test results indicated that the Pb level in seawater is higher than sediment. A normal sea water pH can caused the Pb solubility in the water to be stable. The Pb level in seawater was passed the established quality standards, so that potentially cause toxicity for the aquatic biota. The highest Pb levels in sediment was found in vicinity of tin mining activities area. The isolation results showed that the number of bacteria ranged from 11,10 5 – 34,10 5 CFU/g. The higher Pb levels in sediment causing the number of bacteria will be lower. There were 7 isolates that resistant of Pb 100 ppm and constitute bacteria from the genus Alcaligens, Meniscus, Neisseria, Erythrobacter, and Alteromonas .
Keywords: Bioremediation, Lead pollution, Lead resistant bacteria, Sampur Beach, Tin mining
Pendahuluan Indonesia  merupakan  negara  produsen timah  terbesar  kedua  di  dunia  setelah  Republik Rakyat Tiongkok (Salim & Munadi, 2016). Daerah penghasil  timah  utama  di  Indonesia  adalah Kepulauan  Bangka  Belitung  (Sukarman  &  Gani, 2017).  Penambangan  timah  di  Bangka  Belitung pada  awalnya  dilakukan  di  wilayah  darat, kemudian mulai masuk ke wilayah laut sejak tahun 1952 (Sujitno, 2015).
Pantai Sampur di Kabupaten Bangka Tengah merupakan salah satu kawasan pesisir yang banyak ditemui aktivitas penambangan timah inkonvensional di laut (TI Apung) dan diduga telah mengalami  pencemaran.  Perairan  yang  keruh, berwarna  coklat,  dan  adanya  sedimentasi merupakan gejala umum pencemaran perairan laut (Santosa,  2013).  Penambangan  timah  di  laut dilakukan dengan proses pengerukan menggunakan kapal keruk. Material kerukan akan mengendap  dan  menutupi  dasar  perairan  yang disebut sedimen kerukan. Sedimen kerukan dapat mengandung  polutan  berupa  material  organik, pestisida,  minyak,  bahan  kimia  berbahaya,  dan logam berat.
Timbal  (Pb)  merupakan  salah  satu  logam berat  yang  terkandung  di  dalam  limbah penambangan timah dan dapat terakumulasi di air, sedimen, dan biota laut dalam jangka waktu yang lama (Christita et al ., 2018; Komalasari et al ., 2019). Timbal  termasuk  polutan  di  laut  yang  sangat berbahaya, tidak hanya bagi biota perairan, tetapi akan berdampak bagi manusia yang mengkonsumsi  biota  perairan  tersebut  (Rompas, 2010).
Salah  satu  upaya  yang  dapat  dilakukan untuk  mengurangi  pencemaran  Timbal  adalah dengan  metode  bioremediasi.  Bioremediasi merupakan  proses  yang  dapat  menurunkan konsentrasi  zat  pencemar  di  lingkungan  dengan bantuan  makhluk  hidup.  Makhluk  hidup  yang digunakan  harus  mampu  hidup  di  lingkungan tercemar,  seperti  bakteri  resisten  yang  diketahui memiliki kemampuan untuk mengembangkan daya tahan  terhadap  ion  logam  berat  yang  toksik (Inggraini, 2014).
Sampai  saat  ini,  aktivitas  penambangan timah  di  laut  masih  berlangsung,  termasuk aktivitas  tambang  inkonvensional  yang  dalam operasinya  jauh  dari  praktek  penambangan  yang aman  dan  memperhatikan  aspek  lingkungan.  Jika
hal  ini  terus  berlangsung,  maka  dikhawatirkan dapat memberikan efek negatif bagi keberlangsungan  ekosistem  laut  beserta  biota  di dalamnya.  Oleh  karena  itu,  maka  pentingnya dilakukan  penelitian  ini  menjadi  semakin  tinggi. Beberapa  penelitian  sejenis  telah  dilakukan sebelumnya  (Lingga  &  Afriyansyah,  2020),  akan tetapi belum menyentuh aspek komunitas mikrob dan resistensinya terhadap logam timbal (Pb).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar  Pb  di  perairan  Pantai  Sampur  dan mendapatkan  isolat  bakteri  yang  resisten  Pb. Isolasi bakteri yang memiliki kemampuan resisten Pb diharapkan bermanfaat sebagai informasi awal untuk  mengembangkan  upaya  bioremediasi  laut atau bioremediasi lahan bekas tambang timah yang tercemar logam berat Timbal (Pb).

## Bahan dan Metode

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dari  bulan November 2019 – April 2020. Pengambilan sampel dilakukan  pada  bulan  Januari  di  Pantai  Sampur Desa  Kebintik,  Kecamatan  Pangkalan  Baru, Kabupaten  Bangka  Tengah,  Provinsi  Kepulauan Bangka  Belitung.  Isolasi,  karakterisasi,  dan  uji resistensi  bakteri  dilakukan  di  Laboratorium Pengujian  dan  Penerapan  Mutu  Hasil  Perikanan (LPPMHP) Prov. Kepulauan Bangka Belitung dan di Laboratorium  Mikrobiologi  Universitas  Bangka Belitung.  Sementara  itu,  uji  kadar  Pb  di  sedimen dan  air  laut  dilakukan  di  Baristand  Industri Palembang.
Penentuan titik dalam pengambilan sampel dilakukan  secara purposive  sampling dengan mempertimbangkan  keberadaan  TI  apung.  TI apung  merupakan  aktivitas  penambangan  yang biasa dilakukan oleh masyarakat secara tradisional dengan  menggunakan  kapal  ponton  kayu  dan dilengkapi dengan alat hisap sederhana. Terdapat 3 titik  dalam  pengambilan  sampel,  yaitu  di  bagian tepi pantai (titik 1 atau P1), titik 2 atau P2 dan titik yang terletak di dekat penambangan timah (titik 3 atau  P3).  Aktivitas  TI  umumnya  dilakukan  pada jarak  yang  bervariasi.  Di  lokasi  penelitian  ini, aktivitas  TI  apung  dilakukan  pada  jarak  sampai beberapa ratus meter dari tepi pantai.s Setiap titik terdiri  atas  3  ulangan  pengambilan  sampel.  Peta lokasi penelitian ditampilkan pada Gambar 1.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600
Gambar 1. Peta lokasi penelitian dan titik-titik pengambilan sampel
Alat dan Bahan Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah Sediment  core ,  spektrofotometer  serapan atom  (SSA),  autoklaf, laminar  air  flow ,  mikroskop cahaya  binokuler, colony  counter dan  jangka sorong.  Bahan  yang  digunakan  adalah  sampel sedimen  dan  air  laut  dari  Pantai  Sampur,  media Zobell  2216  E,  Pb  nitrat  (Pb(NO 3 ) 2 ),  HNO 3 Pekat, akuades, alkohol 70%, dan NaCl fisiologis.

## Pengambilan Sampel
Sampel air laut diambil menggunakan botol sampel  pada  bagian  permukaan  perairan. Sementara itu, sampel sedimen diambil pada saat kondisi  air  laut  paling  surut  menggunakan Sediment  core pada  kedalaman  keruk  ±10  cm. Sampel air dan sedimen selanjutnya dimasukkan ke dalam  kotak  pendingin  sebelum  dibawa  ke laboratorium  agar  tidak  terjadi  perubahan  secara biologis  dan  kimiawi.  Sifat  fisik  kimia  perairan seperti  suhu,  pH,  oksigen  terlarut  (DO),  salinitas, dan  kekeruhan  diukur  pada  saat  pengambilan sampel.

## Pengukuran Kadar Timbal
Sampel  air  dan  sedimen  untuk  uji  kadar logam timbal di preparasi dengan proses destruksi basah  menggunakan  asam  nitrat  pekat  (HNO 3 ). Sampel  yang  telah  di  preparasi  kemudian  diukur
menggunakan  Spektrofotometer  Serapan  Atom (SSA).

## Isolasi Bakteri Sedimen
Sampel sedimen untuk isolasi bakteri dibuat pengenceran bertingkat hingga 10 -5 menggunakan NaCl  fisiologis.  Hasil  pengenceran  10 -2 s.d  10 -5 sebanyak  100  µL  diinokulasikan  ke  dalam  media Zobell 2216 E dengan metode sebar dan diinkubasi pada  suhu  37 o C  selama  24-48  jam.  Jumlah  koloni bakteri dihitung menggunakan colony counter dan isolat  dengan  karakteristik  koloni  berbeda  akan dimurnikan dengan metode gores.

## Uji Resistensi Logam Pb
Isolat yang  sudah  murni,  diinokulasikan  ke dalam cawan petri yang berisi media Zobell 2216 E sampai  merata.  Selanjutnya paper  disk diletakkan pada  media  dan  ditetesi  dengan  larutan  logam berat Pb nitrat konsenrasi 10, 20, 40, 80, dan 100 ppm  sebanyak  20  µl  dengan  menggunakan  pipet mikro.  Media  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu 37 o C selama 24 jam, dan zona hambat yang muncul disekitar paper  disk diukur  menggunakan  jangka sorong.  Apabila  ukuran  zona  hambat  yang terbentuk  kurang  dari  1  mm  maka  tergolong bakteri yang resisten.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600
Identifikasi Bakteri Resisten Pb Identifikasi isolat dilakukan secara   manual menggunakan  buku Bergey’s Manual Determinative Bacteriology 9th Edition . Karakteristik yang diamati meliputi  karakter  makroskopis  (bentuk,  ukuran, tepi,  permukaan,  dan  warna  koloni  bakteri), mikroskopis  (bentuk  sel  bakteri  dan  pewarnaan gram),  dan  fisiologis  (uji  sitrat,  indol,  MRVP, katalase, dan uji TSIA).

## Analisis dan Interpretasi Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara deskriptif  dan  disajikan  dalam  bentuk  tabel  atau gambar.  Data  perbandingan  kepadatan  bakteri antar  ulangan  pada  setiap  titik  dianalisis menggunakan uji Kruskal Wallis. Uji ini digunakan untuk  mengetahui  apakah  jumlah  bakteri  pada setiap ulangan berbeda nyata atau tidak. Selain itu, dilakukan Analisis Korelasi menggunakan SPSS 20
untuk melihat korelasi atau hubungan antara dua variabel.  Jika  nilai  koefisien  korelasi  positif  maka hubungan  kedua  variable  searah,  sebaliknya  jika koefisien  korelasi  negatif  maka  hubungan  kedua variable mempunyai hubungan terbalik.

## Hasil  dan Pembahasan Sifat Fisik Kimia Perairan
Perairan Pantai Sampur secara fisik  terlihat berwarna    coklat    keruh  dengan  dasar  perairan yang  tertutup  oleh  lumpur.  Perubahan  warna  air dan  sedimentasi  di  Pantai  Sampur  diduga  terjadi akibat  adanya  aktivitas  penambangan  timah  di lokasi tersebut. Tingginya lumpur dari limbah hasil penambangan  dapat  menghambat  lalu  lintas nelayan saat ingin menangkap ikan  (Dede, 2020). Sedimentasi  juga  dapat  menyebabkan  kerusakan dan  kemusnahan  biota  laut  terutama  untuk komunitas bentik (Santosa, 2013).
Tabel 1. Data Pengukuran Sifat Fisik Kimia Perairan No.  Parameter Baku Mutu* Lokasi Titik 1 Titik 2 Titik 3 1. Suhu air ( o C) 28-32 27 26 27 2. Suhu sedimen ( o C) - 25 25,5 25,5 3. pH 7-8,5 7,74 7,78 7,77 4. Salinitas (‰) 33-34 35 37 36 5. Kekeruhan (NTU) <5 339 553 132 6. DO (mg/L) >5 0,16 0,17 0,17
*Baku mutu menurut Keputusan Menteri Lingkungan Hidup No.51 Tahun 2004 tentang Baku mutu air laut untuk biota laut.
Suhu air laut Pantai Sampur pada semua titik sedikit  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  baku mutu  (Tabel  1).  Hal  ini  diduga  dipengaruhi  oleh kondisi  cuaca  saat  pengambilan  sampel  yang mendung  dan  berawan.  Menurut  Hamuna et  al . (2018)  penutupan  awan  dapat  mempengaruhi suhu  pada  badan  air.  pH  perairan  Pantai  Sampur pada semua titik masih sesuai dengan baku mutu (Tabel  1).  Perairan  Pantai  Sampur  memiliki  pH normal  yang  berada  di  kisaran  7-8  (Prianto  & Husnah,  2009).  Salinitas  perairan  pantai  sampur memiliki  nilai  yang  sedikit  lebih  tinggi dibandingkan baku mutu. Namun jika dibandingkan  dengan  pernyataan  Effendi  (2003) bahwa  nilai  salinitas  normal  pada  perairan  laut adalah  30- 40  ‰,  maka  nilai  salinitas  Pantai Sampur masih dikatakan normal.
Data  hasil  pengukuran  DO  (oksigen terlarut)  dan  kekeruhan  perairan  tidak  sesuai dengan baku mutu (Tabel 1). Menurut Mentari et al . (2017)  limbah  hasil  penambangan  timah mengandung  lumpur  dan  senyawa  organik  yang dapat meningkatkan kekeruhan perairan. Kekeruhan  air  dapat  mempengaruhi  kadar  DO, dimana pada saat kekeruhan suatu perairan tinggi
maka  nilai  DO  akan  semakin  rendah.  Menurut Hamuna et al . (2018), DO dibutuhkan oleh semua jasad  hidup  untuk  proses  pernafasan  dan metabolisme. Kadar DO yang terlalu rendah dapat mengakibatkan  ikan  dan  organisme  air  lainnya mengalami  kematian,  sehingga  dapat  mengurangi hasil  tangkapan  ikan  oleh  nelayan  (Sugianti  & Astuti, 2018).

## Kadar Pb pada air dan sedimen
Kandungan Pb di sedimen laut lebih rendah dibandingkan  dengan  kandungan  Pb  di  air  laut (Tabel 2). Hal ini diduga disebabkan karena logam berat  Pb  lebih  banyak  yang  terlarut  di  dalam  air. Kelarutan  senyawa  Pb  dalam  air  sangat dipengaruhi oleh pH perairan, dimana pH perairan Pantai  Sampur  berada  pada  kisaran  pH  normal yaitu 7-8 (Tabel 1). Kelarutan Pb cenderung lebih stabil  pada  badan  perairan  yang  mempunyai  pH mendekati normal. Kenaikan  pH dapat mengubah kestabilan logam berat dari bentuk karbonat (CO 32- )  menjadi  hidroksida  (OH - ),  yang  kemudian membentuk ikatan dengan partikel pada badan air sehingga  akan  mengendap  dalam  bentuk  lumpur (Usman et al ., 2013).
Tabel 2. Data Hasil Pengukuran kadar Timbal (Pb) dalam Air dan Sedimen
Lokasi Kadar Timbal (ppm) Baku Mutu* (ppm) Air Sedimen Air Sedimen Titik 1 0,2476 0,0121 0,008 30,2 Titik 2 0,1546 0,0741 Titik 3 0,2104 0,1546 Rata-rata 0,2042 0,0803
*Baku mutu air  menurut KMNLH No.51 Tahun 2004 Baku mutu sedimen menurut (CCME) Canadian Council of Ministers for the Environment
Kadar  Pb  di  air  laut  Pantai  Sampur  pada semua  titik  sudah  melewati  baku  mutu  yang ditetapkan  (Tabel  2).  Hal  ini  diduga  dipengaruhi karena adanya aktivitas penambangan timah yang masih aktif beroperasi di lokasi tersebut. Penelitian Prianto  &  Husnah  (2009)  menunjukkan  bahwa limbah cair hasil penambangan timah mengandung Pb  hingga  konsentrasi  0,095  ppm.  Penelitian Komalasari (2019) juga menunjukkan bahwa kadar Pb  pada  perairan  yang  dekat  dengan  aktivitas penambangan  timah  tradisional  sudah  melewati baku  mutu  (0,1042-0,1748  ppm).  Hasil  analisis Korelasi  Pearson  menunjukkan  bahwa  tidak  ada korelasi/pengaruh antara jarak (lokasi penambangan  timah)  terhadap  kadar  logam  Pb dalam air laut Pantai Sampur (Sig. 0,740). Amin et al. (2011)  menyatakan  bahwa  kandungan  logam berat pada sampel air dapat berubah-ubah  dalam waktu  yang  relatif  singkat  disebabkan  oleh mobilitas air yang tinggi dan pengaruh pertukaran air di perairan. Kadar Pb yang tinggi dalam perairan dapat  menyebabkan  toksisitas  terhadap  biota perairan.  Penelitian  Triadayani et  al .  (2010) menunjukkan bahwa paparan Pb konsentrasi 0,15 ppm dapat menyebabkan kerusakan pada sel hati ikan.
Kadar  Pb  pada  sedimen  jauh  lebih  rendah dibandingkan  baku  mutu  yang  ditetapkan  (Tabel 2). Hal ini menunjukkan bahwa keberadaan logam Pb  di  sedimen  Pantai  Sampur  masih  berada  pada kisaran  normal.  Hasil  analisis  Korelasi  Pearson menunjukkan  bahwa  semakin  jauh  jarak  (lokasi penambangan  timah)  maka  semakin  rendah kandungan  logam  Pb  dalam  sedimen  Pantai Sampur  (koefisien  korelasi  -0,997).  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  terdahulu  yang  menunjukkan bahwa  pola  sebaran  Pb  dalam  sedimen  diketahui bersifat  lokal,  sehingga  stasiun  yang  paling  dekat dengan  sumber  pencemar  memiliki  kandungan logam  berat  paling  tinggi  (Susantoro  &  Andayani, 2019; Usman et al ., 2013). Hasil penelitian (Nguyen &  Volkova,  2018)  menunjukkan  bahwa  distribusi Pb di perairan dan sedimen dapat menyebar hingga jarak  40  km  dari  titik  awal  pencemaran  dan semakin  jauh  jarak  maka  konsentrasi  Pb  dalam sedimen akan semakin rendah.

## Kepadatan Populasi Bakteri
Hasil uji Kruskal Wallis menunjukkan bahwa data antar ulangan pada setiap titik tidak berbeda nyata  (Sig.  >  0,05).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa bakteri  tersebar  homogen  pada  setiap  ulangan pengambilan  sampel.  Perhitungan  jumlah  bakteri (Tabel 3) menunjukkan  bahwa kepadatan  bakteri tertinggi  ada  pada  titik  1,  yaitu  titik  yang  paling dekat  dengan  tepi  pantai.  Kepadatan  bakteri tertinggi ke-dua ada pada titik 2 dan yang terendah ada  pada  titik  3.  Hal  ini  diduga  dipengaruhi  oleh kandungan  Pb  pada  sedimen.  Hal  ini  didukung dengan  hasil  uji  Korelasi  Pearson  yang menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  kandungan logam  Pb  dalam  sedimen  Pantai  Sampur  maka jumlah  bakteri  akan  semakin  rendah  (koefisien korelasi -0.772).
Timbal  merupakan  salah  satu  logam  berat yang bersifat toksik bagi makhluk hidup. Pb dapat merusak struktur protein dan asam nukleat, serta menghambat  kerja  enzim,  proses  transkripsi  dan fosforilasi oksidatif  (Fashola et al ., 2016). Hal inilah yang  menyebabkan  sedimen  dengan  konsentrasi Pb  lebih  tinggi  (titik  3)  memiliki  jumlah  bakteri lebih  sedikit.  Semakin  besar  konsentrasi  suatu logam maka semakin banyak juga kerusakan yang ditimbulkan dalam sel bakteri.
Selain  itu,  faktor  abiotik  seperti  suhu,  pH, kadar oksigen terlarut, dan salinitas (Tabel 1) juga dapat  mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri.  Suhu sedimen berada pada kisaran 25 o C dan masih dapat mendukung  pertumbuhan  bakteri  terutama kelompok mesofilik (Lisdayanti, 2013). Sementara itu,  pH  perairan  Pantai  Sampur  termasuk  normal (kisaran  7-8)  dan  masih  dapat  mendukung pertumbuhan  bakteri  air  yang  umunya  hidup optimum  pada  pH  6-8  (Mudatsir,  2007).  Nilai  DO perairan  Pantai  Sampur  diketahui  sangat  rendah yaitu 0,1 ppm (Tabel 2). Menurut Mudatsir (2007), jika  kadar  DO  air  mendekati  nol,  maka mikroorganisme yang berperan dalam perombakan  adalah  mikroorganisme  anaerobik. Sementara  itu,  salinitas  perairan  berkisar  35-  37 ‰  dan  masih  dapat  mendukung  pertumbuhan bakteri  laut  yang  umumnya  halofilik  (Lisdayanti, 2013).
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600
Tabel 3. Data Jumlah Bakteri Hasil Isolasi
Lokasi Ulangan Jumlah Bakteri (CFU/mg) Rata-rata Jumlah Bakteri (CFU/mg) Titik 1 1 2,3.10 6 ± 0,7* 3.10 6 ± 0,8* 2
3,9.10
6 ± 0,7* 3 2,9.10
6 ± 0,3* Titik 2 1 3,8.10 6 ± 0,2* 2,6.10 6 ± 1,0* 2
2,3.10
6 ± 0,5* 3 1,8.10
6 ± 0,2* Titik 3 1 1,2.10 6 ± 0.7* 1,1.10 6 ± 0,1* 2
1,0.10
6 ± 0.1*
3 1,2.10 6 ± 0.1*
Keterangan : *Standar Deviasi

## Resistensi Bakteri Terhadap Pb
Resistensi logam berat merupakan kemampuan mikro-organisme untuk mengembangkan  daya  tahan  terhadap  ion  logam berat  yang  toksik. Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  dari  13  isolat  yang  diuji,  terdapat  7  isolat yang  resisten  terhadap  Timbal  pada  konsentrasi 100 ppm, yaitu isolat I2, I3, I7, I9, I10, I12, dan I13. Penelitian  sebelumnya  oleh  Lingga  &  Afriyansyah (2020) telah berhasil mendapatkan 3 isolat bakteri potensial dari lokasi yang sama yaitu isolat B6, B8, dan A10 yang resisten terhadap logam berat Cu 100 ppm.
Mekanisme  resistensi  bakteri  terhadap logam  berat  secara  umum  terbagi  menjadi mekanisme ekstraseluler dan intraseluler. Mekanisme ekstraseluler berperan dalam mencegah  masuknya  logam  berat  ke  dalam  sel bakteri,  yaitu  dengan  menghasilkan  polimer ekstaseluler  dan  menggunakan  dinding  sel  untuk mengikat  ion  logam  di  luar  sel.  Sementara  itu, mekanisme intraseluler berperan dalam mencegah ion  logam  mengganggu  metabolisme  sel  bakteri, yaitu  dengan  menghasilkan  enzim  fosfatase  dan Methallothienins (MTs)  yang  dapat  mengikat  ion logam di dalam sel (Rohmah, 2017).
Tabel 4. Resistensi bakteri sedimen terhadap berbagai konsentrasi logam Pb Nama Isolat Hasil Uji Resistensi 10 ppm 20 ppm 40 ppm 80 ppm 100 ppm I 2 + + + + + I 3 + + + + + I 7 + + + + + I 9 + + + + + I 10 + + + + + I 12 + + + + + I 13 + + + + + I 1 + + + - - I 4 + + + - - I 6 + + - - - I 8 + + - - - I 5 - - - - - I 11 - - - - - Keterangan : (+) resisten, (-) tidak resisten
Identifikasi Bakteri Berdasarkan  hasil  identifikasi  terhadap tujuh  isolat  bakteri  yang  resisten  Pb  100  ppm
diperoleh  5  genus  bakteri  yaitu Alcaligenes,
Meniscus,
Neisseria, Erythrobacter , dan Alteromonas .
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600
Tabel 5. Hasil Identifikasi Isolat Bakteri Sedimen
Karakteristik Isolat I 2 I 3 I 7 I 9 I10 I 12 I 13 Makroskopis -Warna Krem Putih Kuning Putih Putih Oranye Putih -Bentuk Bulat Bulat Bulat Bulat Tidak beraturan Bulat Tidak beraturan -Elevasi Cembung  Cembung  Cembung Timbul Datar Timbul Datar -Margin Tidak beraturan Licin Licin Licin Tidak beraturan Licin Berombak Mikroskopis -Bentuk sel Batang Batang Bulat Batang Bulat Batang Batang -Gram Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Fisiologis -Simon Sitrat - - - - - - + -Indol - - - - - - - -Motil + - + - - + + -H 2 S - - - - - - - -MR - - - - - - - -VP - - - - - - - -Katalase + - + - - + - Fermentasi -Glukosa + + + + + + + -Laktosa + + + + + + - -Sukrosa + + + + + + - Genus Alcali- Genes Menis- Cus Alcali- Genes Menis- cus Neis- Seria Erythro- bacter Altero- Monas
Keterangan :  (-) = hasil uji negatif,  (+) = hasil uji positif
Isolat I 3 dan I 9 memiliki karakteristik yang mirip dengan genus Meniscus, yaitu bakteri garam negatif,  berbentuk  batang,  tidak  motil,  fermentasi karbohidrat  menghasilkan  asam  dan  tidak menghasilkan gas, serta menunjukkan katalase dan oksidase  negatif  ( Be rgey’s  Manual  Determinative Bacteriology  9th  Edition ).  Bakteri  ini  memiliki koloni  berwarna  putih  tulang  berbentuk  bulat, margin  smoth,  dan  elevasi  convex,  serta menunjukkan hasil negatif terhadap uji indol, H 2 S, reduksi nitrat, dan urease.
Isolat I10 memiliki karakteristik yang mirip dengan genus Neisseria, yaitu bakteri gram negatif berbentuk  kokus  kecuali N.elongata berebentuk basil,  bersifat  tidak  motil,  katalase  positif  atau negatif,  serta  fermentasi  karbohidrat  dapat  atau tidak  dapat  menghasilkan  asam  (TSIA  +/-) ( Bergey’s  Manual  Determinative  Bacteriology  9th Edition ). Isolat  I  12  memiliki  karakteristik  mirip dengan genus Erythrobacter, yaitu bakteri dengan koloni  berwarna  oranye  karena  adanya  pigmen Carotenoid  dan  termasuk  bakteri  gram  negatif berbentuk  basil,  bersifat  motil,  katalase  positif, serta  MR  dan  VP  negatif  ( Bergey’s  Manual Determinative Bacteriology 9th Edition ). Jung et al . (2012) melaporkan bahwa Erytrobacter memproduksi  asam  dari  fermentasi  karbohidrat
(TSIA  positif),  H 2 S  negatif,  uji  sitrat  negatif  dan memproduksi pigmen Carotenoid.
Isolat I13 memiliki karakteristik yang mirip dengan  genus Alteromonas, yaitu  bakteri  gram negatif berbentuk basil, bersifat motil dan biasanya ditemukan  pada  laut  terbuka.  Bakteri  ini membutuhkan bahan dasar berupa air laut  untuk dapat  tumbuh  ( Bergey’s  Manual  Determinative Bacteriology 9th Edition ). Bakteri ini menunjukkan hasil negatif pada uji katalase dan oksidase, dapat memfermentasi  glukosa  namun  tidak  untuk sukrosa  dan  laktosa,  serta  menunjukkan  hasil negatif pada uji MR, Indol, dan sitrat (Sardiani et al ., 2015).

## Kesimpulan
Kadar Timbal (Pb) dalam air laut lebih tinggi dibandingkan  sedimen  dan  sudah  melebihi  baku mutu.  Sementara  itu,  untuk  kadar  Pb  dalam sedimen  masih  berada  pada  kisaran  normal . Semakin jauh jarak dari lokasi penambangan maka kadar  Pb  sedimen  akan  semakin  rendah.  Jumlah bakteri  di  sedimen  perairan  Pantai  Sampur berkisar 1,1.10 6 – 3,4.10 6 CFU/g dan berbeda-beda pada setiap titik pengambilan sampel dipengaruhi oleh  kadar  Pb  dalam  sedimen,  dimana  semakin tinggi kadar Pb maka jumlah bakteri akan semakin rendah.  Ditemukan  7  isolat  bakteri  yang  resisten
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.24600
terhadap Pb pada konsentrasi 100 ppm dan diduga merupakan bakteri dari genus Alcaligens, Meniscus, Neisseria, Erythrobacter, dan Alteromonas .

## Daftar putaka
Amin,  B.,  Afriyani,  E.,  &  Saputra,  M.  A.  (2011). Distribusi  Spasial  Logam  Pb  dan  Cu  pada Sedimen dan Air Laut Permukaan di Perairan Tanjung Buton Kabupaten Siak Provinsi Riau. Jurnal Teknobiologi , 2 (1), 1 – 8.
Christita, M., Iwanuddin, Kafiar, Y., Supratman, T., & Mokodompit, H. S. (2018). Identifikasi Bakteri Pada Air Dari Lahan Bekas Tambang Nikel Di Halmahera Timur. Jurnal Wasian , 5 (1), 35 – 42. Dede, H. (2020). 30 Ponton TI Rajuk Kepung Areal Tangkap Nelayan Sampur . https://www.wowbabel.com
Effendi,  H.  (2003). Telaah  Kualitas  Air:  Bagi Pengelolaan  Sumber  Daya  Alam  dan Lingkungan Perairan . Kanisius.
Fashola, M., Ngole-jame, V., & Babalola, O. (2016).
Heavy  Metal  Pollution  from  Gold  Mines: Environmental Effect and Bacterial Strategies For  Resistance. Int.  J.  Environ.  Res.  Public Health , 13 (1), 1047 – 1067.
Hamuna, B., Tanjung, R. H. R., & Maury, H. K. (2018).
Kajian  Kualitas  Air  Laut  dan  Indeks Pencemaran  Berdasarkan  Parameter  Fisika- Kimia Di Perairan Distrik Depapre , Jayapura.
Jurnal  Ilmu  Lingkungan , 16 (1),  35 – 43. https://doi.org/10.14710/jil.16.135-43 Inggraini, M. (2014). Efektivitas Pengikatan Logam
Pb Oleh Bakteri Bacillus subtilis. Jurnal Sains Natural  Universitas  Nusa  Bangsa , 4 (2),  152 – 156. Jung,  Y.,  Park,  S.,  Oh,  T.,  &  Yoon,  J.  (2012).
Erythrobacter  marinus  sp  .  nov  .,  isolated from  seawater. International  Journal  of Systematic and Evolutionary Microbiology , 62 , 2050 – 2055. https://doi.org/10.1099/ijs.0.034702-0 Komalasari, A., Afriyansyah, B., & Ihsan, M. (2019). Bioakumulasi  Logam  Berat  Pb  dan  Cu terhadap  Penaeus  merguiensis  di  Perairan Teluk Kelabat Bagian Dalam. Jurnal Kelautan Tropis , 22 (1), 1 – 8.
Lingga,  R.,  &  Afriyansyah,  B.  (2020).  Identifikasi Bakteri  Resisten  Cu  dari  Sedimen  Laut Terdampak Aktivitas Tambang Timah. Jurnal Pendidikan Biologi Nukleus , 6 (2), 112 – 119. Lisdayanti,  E.  (2013). Potensi  Antibakteri  dari Bakteri Asosiasi Lamun (Seagrass) Dari Pulau
Bonebatang Perairan Kota Makassar . Universitas Hasanudin. Mentari,  Umroh,  &  Kurniawan.  (2017).  Pengaruh Aktivitas  Penambangan  Timah  Terhadap Kualitas  Air  Di  Sungai  Baturusa  Kabupaten Bangka. Jurnal  Sumberdaya  Perairan , 11 (2), 23 – 30.
Mudatsir. (2007). Faktor-Faktor yang
Mempengaruhi  Kehidupan  Mikroba  Dalam Air. Jurnal Kedokteran Syiah Kuala , 7 (1), 23 – 29.
Nguyen,  N.,  &  Volkova,  I.  (2018).  Mathematical Modelling for Distribution of Heavy Metals in Estuary Area of Red River ( Vietnam ). Journal of Physiics , 1015 , 1 – 6.
Prianto, E., & Husnah. (2009). Penambangan timah Inkonvensiaonal:  Dampaknya  Terhadap Kerusakan  Biodiversitas  Perairan  Umum  di Pulau Bangka. Bawal , 2 (5), 193 – 198. Rohmah,  N.  S.  (2017). Isolasi  Dan  Identifikasi Bakteri  Yang  Berpotensi  Sebagai  Agen Bioremediasi  Timbal  (Pb)  Dari  Lumpur Lapindo .  Universitas  Negeri  Maulana  Malik Ibrahim. Rompas. (2010). Toksikologi Kelautan . Sekretariat Dewan Kelautan Indonesia.
Salim, Z., & Munadi, E. (2016). Info Komoditi Tanah . Badan  Pengkajian  dan  Pengembangan Perdagangan.
Santosa,  R.  W.  (2013).  Dampak  Pencemaran Lingkungan Laut Oleh Perusahaan Pertambangan Terhadap Nelayan Tradisional. Lex Administratum , 1 (2), 65 – 78. Sardiani, N., Litaay, M., Budji, R. G., Priosambodo, D., Syahribulan,  &  Dwyana,  Z.  (2015).  Potensi Tunikata  Rhopalaea  sp  Sebagai  Sumber Inokulum  Bakteri  Endosimbion  Penghasil Antibakteri. Jurnal  Alam  Dan  Lingkungan , 6 (11), 1 – 11.
Sugianti,  Y.,  &  Astuti,  L.  (2018).  Respon  Oksigen
Terlarut Terhadap Pencemaran dan Pengaruhnya  Terhadap  Keberadaan  Sumber Daya Ikan di Sungai Citarum. Jurnal Teknologi Lingkungan , 19 (2), 203 – 112. Sujitno,  S.  (2015). Timah  Indonesia  sepanjang Sejarah . PT.Timah (Persero) TBK. Sukarman,  &  Gani,  R.  A.  (2017).  Lahan  Bekas Tambang  Timah  di  Pulau  Bangka  dan Belitung  ,  Indonesia  dan  Kesesuaiannya untuk Komoditas Pertanian. Jurnal Tanah Dan Iklim , 41 (2), 101 – 112.
Susantoro,  M.  T.,  &  Andayani,  A.  (2019). Kontaminasi Logam Berat di Kawasan Pesisir Tanjung  Selor  Kalimantan  Utara. Oseanologi Dan  Limnologi  Di  Indonesia , 4 (1),  1 – 14. https://doi.org/10.14203/oldi.2019.v4i1.18 1
Thoyib,  H.,  Setyaningsih,  R.,  &  Suranto.  (2017). Seleksi  dan  Identifikasi  Bakteri  Alkalifilik Penghasil Xilanase dari Tanah Bukit Krakitan, Bayat,  Klaten. Bioteknologi , 4 (1),  6 – 12. https://doi.org/10.13057/biotek/c040102 Triadayani,  A.  E.,  Aryawati,  R.,  &  Diansyah,  G. (2010).  Pengaruh  logam  timbal  (  pb  ) terhadap  jaringan  hati  ikan  kerapu  bebek  ( Cromileptes  altivelis  ). Maspari  Journal , 01 ,
42 – 47. Usman,  S.,  Nafie,  N.  La,  &  Ramang,  M.  (2013). Distribusi Kuantitatif Logam Berat Pb dalam
Air  ,  Sedimen  dan  Ikan  Merah  (  Lutjanus erythropterus ) di Sekitar Perairan Pelabuhan Parepare. Marina Chimica Acta , 14 (2), 49 – 55.