Aenah,  N.,  Fauziah,  Cindhy  M,  N.,  Hermin  Marlian,  Irene  Virda  Sakina,  Nurlaela,  Siti  Farikha (2022) Perbandingan Metode Analisis Α-Mangostin Dalam Plasma Darah Manusia Secara In Vitro, Syntax Idea, 4(3), https://doi.org/ 10.36418/syntax-idea.v4i3.1828
E-ISSN: 2684-883X
Published by:
Ridwan Institute
Syntax Idea: p–ISSN: 2684-6853 e-ISSN: 2684-883X Vol.4, No.3, Maret 2022

## PERBANDINGAN  METODE  ANALISIS  Α-MANGOSTIN  DALAM  PLASMA DARAH MANUSIA SECARA IN VITRO
Nur  Aenah,  Anisa  Fauziah,  Cindhy  Maulida  N,  Hermin  Marlian, Irene  Virda Sakina, Nurlaela, Siti Farikha
Universitas Singaperbangsa Karawang Jawa Barat, Indonesia Email: Nuraenah2000@gmail.com, anisaafziah@gmail.com, cindhymaulida05@gmail.com, herminmarlian@gmail.com, irenevirda.simdig18@gmail.com, nurlaelanurlaela2002@gmail.com, sitiffarikha@gmail.com

## Abstrak
α-Mangostin  merupakan  senyawa  yang  memiliki  fungsi  sebagai  antibakteri, antijamur,  antitumor,  antiinflamasi,  dan  antioksidan.  Validasi  metode  analisis  α- Mangostin  dalam  review  artikel  ini  menggunakan  dua  metode  yaitu spektrofotometri  ultraviolet  dan  KLT-densitometri.  Dengan  tujuan  yaitu  untuk memvalidasi metode analisis yang paling sesuai pada penetapan kadar α-mangostin dalam  plasma  darah  manusia  secara  In  vitro.  Pada  metode  spektrofotometri ultraviolet  protein  dilakukan  pengendapan  dengan  metanol  agar  obat  yang  terikat dengan protein dapat terbebaskan. Sedangkan pada KLT-Densitometri, silica gel 60 F254 sebagai fase diam dan kloroform:etil asetat (9:1) sebagai fase gerak dilakukan proses  pemisahan  yang  selanjutnya  akan  dilakukan  proses  scanner  dengan menggunakan  densitometri.  Dari  kedua metode tersebut,  metode  yang  paling  baik untuk  analisis  a-manhostin  ini  adalah  metode  KLT-Densitometri  karena  memiliki nilai  akurasi  dsn  linearitas  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  metode spektrofotometri ultraviolet
Kata  Kunci: α-mangostin;  spektrofotometri  ultraviolet;  KLT-densitometri;  validasi analisis; In vitro

## Abstract
α  -Mangostin  is  a  compound  that  has  antibacterial,  antifungal,  antitumor,  anti- inflammatory, and antioxidant functions. The validation of the -Mangostin analysis method  in  this  review  article  uses  two  methods,  namely  ultraviolet spectrophotometry  and  TLC-densitometry.  With  the  aim  of  validating  the  most suitable analytical method for in vitro determination of -mangostin levels in human blood plasma. In the ultraviolet spectrophotometric method of protein precipitation is  carried  out  with  methanol  so  that  the  drug  bound  to  the  protein  can  be  freed. Meanwhile,  in  TLC-Densitometry,  silica  gel  60  F254  as  the  stationary  phase  and chloroform:ethyl  acetate  (9:1)  as  the  mobile  phase,  the  separation  process  is carried out which will then be carried out by a scanner process using densitometry. Of  the  two  methods,  the  best  method  for  the  analysis  of  a-mangostin  is  the  TLC-
Densitometry method because it has a higher accuracy and linearity value than the ultraviolet spectrophotometric method.
Keywords:  mangostin;  ultraviolet  spectrophotometry;  TLC-densitometry;  analytical validation; In vitro

## Pendahuluan
Pada  masa  sekarang,  kebutuhan  akan  obat  baru  terus  meningkat  baik  secara kualitatif  maupun  kuantitatif.  Penggunaan  obat  tradisional  oleh  masyarakat  Indonesia sudah  dikenal  sebelum  adanya  obat  sintetis.  Obat  tradisional  yang  digunakan  oleh masyarakat  Indonesia  berasal  dari  alam,  sehingga  obat  tradisional  dapat  digunakan sebagai  alternative  dalam  memenuhi  kebutuhan  obat  baru.  Pencarian  obat  baru  dapat dimulai  dari  isolasi  dan  identifikasi  senyawa  utama  yang  ada  pada  bahan  alam.  Salah satu  senyawa  yang  diketahui  mempunyai  khasiat  yaitu  α-mangostin.  α-mangostin merupakan  salah  satu  senyawa  turunan  xanton  yang  terdapat  pada  kulit  buah  manggis (Yunitasari, 2011).
Besarnya  efek  farmakologi  yang  diberikan  oleh  suatu  obat  seringkali  dikaitkan dengan konsentrasi obat bebas yang berikatan  dengan reseptor yang sebagian besarnya terdapat  dalam  sel-sel  jaringan.  Oleh  karena  sel-sel  jaringan  diperfusi  oleh  plasma, maka  pemeriksaan  kadar  obat  dalam  sampel  plasma  merupakan  metode  yang  tepat untuk  pemantauan  dan  pengoptimalan  manfaat  terapi  obat (Gaudiano,  Bonabeau,  & Shargel, 2005).
Pada  obat  yang  memiliki  ikatan  dengan  protein  plasma  lebih  dari  70%  dapat berpengaruh terhadap efek terapeutik  dari  obat  tersebut.  Oleh  karena itu,  obat tersebut harus dibebaskan terlebih dahulu. Salah satu cara untuk membebaskan obat yang terikat dengan  protein  plasma  adalah  dengan  teknik  pengendapan  protein.  Teknik  ini  dipilih karena prosedurnya yang sederhana, sensitive dan meminimalisir kehilangan obat.
Dalam  review  ini  terdapat  dua  metode  yang  digunakan  untuk  menganalisis  α- mangostin  dalam  sampel  plasma  manusia.  Tujuan  dari  review  artikel  ini  adalah  untuk membandingkan metode mana yang lebih sesuai untuk menganalisis α-mangostin dalam sampel plasma darah manusia secara in vitro.

## Metode Penelitian
Pada  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Rasyid  et  al  pada  tahun  2015  telah melakukan validasi metode analisis α-mangostin dalam plasma darah manusia secara in vitro  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri  ultraviolet  (UV).  Pada  penelitian ini dilakukan terlebih dahulu pemeriksaan kemurnian dari sampel dengan menggunakan plat KLT, lalu dilakukan pembuatan larutan induk α-mangostin dengan konsentrasi 100 ppm  dengan  menggunakan  pelarut  metanol,  selanjutnya  dilakukan  penentuan  panjang gelombang  maksimum  α-mangostin  dengan  menggunakan  spektrofotometri  UV  pada panjang  gelombang  200-400  nm,  setelah  diketahui  panjang  gelombang  maksimum, kemudian dilakukan pembuatan kurva kalibrasi dengan rentang konsentrasi sejumlah 2; 4;  6; 8; dan 10 μg/mL serta ditentukan persamaan regresinya. Setelah diperoleh kurva
kalibrasi,  konsentrasi  terkecil  yang  masih  dapat  dideteksi  (BD)  dan  terdeteksi  secara kuantitasi  (BK)  dihitung  secara  statistik  melalui  garis  linier  dari  kurva  standar. Selanjutnya  dilakukan  uji  akurasi  dengan  menetapan  %  perolehan  kembali  dengan menggunakan  persamaan  regresi  linear  dari  kurva  kalibrasi,  serta  uji  presisi  dengan menetapkan  Relatif  Standar  Deviasi  (RSD)  atau  Koefisien  Variasi  (KV)  dari perhitungan  konsentrasi  dari  larutan  pembanding  α-mangostin  dengan  menggunakan persamaan  regresi  linear  dari  kurva  kalibrasi.  Setelah  dilakukan  validasi  metode analisis,  kemudian  dilakukan  penetapan  kadar  α-mangostin  dalam  plasma  in  vitro dengan menggunakan metode spektrofotometri UV yang telah divalidasi.
Sedangkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Fauziah  et  al  pada  tahun  2017 telah  melakukan  validasi  metode  analisis  α-mangostin  dalam  plasma  darah  manusia secara  in  vitro  dengan  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  densitometri.  Pada penelitian  ini  dilakukan  dahulu  pembuatan  larutan  induk  α-mangostin  dengan konsentrasi  1000  ppm  dengan  menggunakan  pelarut  metanol,  selanjutnya  dilakukan analisis  kualitatif  pada  larutan  campuran  pembanding  α-mangostin  1000  ppm  dan larutan sampel α-mangostin 120 ppm (1:1), larutan pembanding α-mangostin 1000 ppm, larutan  sampel  α-mangostin  120  ppm  dengan  menggunakan  plat  KLT  dengan  volume penotolan 2 μL dengan jarak penotolan masing-masing 1 cm serta fase gerak (kloroform -  etil  asetat  (9:1)).  Setelah  dilakukan  analisis  kualitatif  dilakukan  validasi  metode analisis  yang  terdiri  dari  pembuatan  Kurva  Kalibrasi  α  mangostin  dengan  seri konsentrasi  sejumlah  50;  100;  150  ppm;  200;  dan  250  ppm,  data  dari  kurva  kalibrasi tersebut akan digunakan untuk penetapan liniearitas yang ditentukan dengan mengolah data  konsentrasi  seri  kadar  (x)  dan  luas  area  (y)  dari  kurva  kalibrasi  yang  diperoleh menggunakan  persamaan  regresi  linear  sehingga  diperoleh  nilai  koefisien  korelasi  (r). Persamaan  regresi  ini  dapat  digunakan  jika  koefisien  korelasinya  0,99  ≤  r  ≤  1. Selanjutnya  dilakukan  uji  akurasi  dengan  menetapan  %  perolehan  kembali  dengan menggunakan  persamaan  regresi  linear  dari  kurva  kalibrasi,  serta  uji  presisi  dengan menetapkan  Relatif  Standar  Deviasi  (RSD)  atau  Koefisien  Variasi  (KV)  dari perhitungan  konsentrasi  dari  larutan  pembanding  α-mangostin  dengan  menggunakan persamaan  regresi  linear  dari  kurva  kalibrasi.  Setelah  itu,  dilakukan  penetapan  batas deteksi  (BD)  dan  batas  kuantitasi  (BK)  yang  dihitung  berdasarkan  persamaan  regresi linear. Setelah dilakukan validasi metode analisis, kemudian dilakukan penetapan kadar α-mangostin  dalam  plasma  in  vitro  dengan  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis densitometri

## Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Roslinda,  dkk  menunjukkan hasil uji kualitatif terhadap kemurnian α-mangostin dengan metode KLT menggunakan fase diam plat silika gel 60 F254 dan fase gerak kloroform: metanol (9:1) pada larutan pembanding, sampel, dan campuran pembanding dengan sampel diperoleh nilai Rf yang sama pada ketiga totolan tersebut yaitu 0,533. Penelitian yang dilakukan oleh Fitra, dkk
juga  menunjukkan  nilai  Rf  yang  sama  dengan  metode  KLT  menggunakan  fase  diam yang sama dan fase gerak yang berbeda, yaitu kloroform: etil asetat (9:1).
Penelitian Roslinda, dkk dilanjutkan dengan penetapan kadar panjang gelombang maksimum  α-mangostin  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometer  ultraviolet pada panjang gelombang 200-400nm terhadap larutan α-mangostin dengan konsentrasi 10  µg/mL  yang  dibuat  dari  larutan  induk  α-mangostin  100  µg/mL  dengan  pelarut metanol  menunjukkan  panjang  gelombang  maksimum  yang  diperoleh  yaitu  316,2nm. Sedangkan  pada  penelitian  Fitra,  dkk  melakukan  penetapan  kadar  menggunakan  TLC scanner dan memperoleh panjang gelombang maksimum 317 nm dan didapat data luas area dari senyawa α-mangostin.
Selanjutnya dilakukan penghitungan konsentrasi senyawa α-mangostin dan persen perolehan kembali dengan menggunakan persamaan regresi linear dari kurva kalibrasi. Pembuatan  kurva  kalibrasi  α-mangostin  pada  penelitian  Roslinda,  dkk  dibuat  dengan beberapa  konsentrasi  yaitu  2,  4,  6,  8  dan  10  µg/mL  yang  kemudian  masing-masing konsentrasi  diukur  serapannya  pada  panjang  gelombang  316,2  nm.  Sedangkan  pada penelitian Fitria, dkk pembuatan kurva kalibrasi α-mangostin dibuat dengan konsentrasi 50,  100,  150,  200,  dan  250  ppm  yang  kemudian  dilakukan  scanning  dengan menggunakan TLC scanner pada panjang gelombang maksimum α-mangostin yaitu 317 nm sehingga didapatkan luas area dari masing-masing konsentrasi.
Hasil  pengukuran  kurva  kalibrasi  pada  penelitian  Roslinda,  dkk  menunjukkan persamaan  regresi  linear  y  =  0,1584  +  0,0586x  dengan  nilai  koefisien  korelasi  (r)  = 0,9947.  Sedangkan  pada  penelitian  Fitria,  dkk  menunjukkan  hasil  persamaan  regresi linear  y  =  594,781  +  20,82242x  dan  koefisien  korelasi  (r)  =  0,992206.  Nilai  koefisien korelasi  dari  dua  penelitian  tersebut menunjukkan  hasil  yang  linear,  karena  memenuhi kriteria penerimaan yaitu 0,99 ≤ r < 1.
Dari hasil pengujian yang dilakukan Roslinda, dkk diperoleh standar deviasi dari kurva kalibrasi tersebut yaitu 0,02203 µg/mL, batas deteksi α-mangostin 0,00312 µg/ml dan batas kuantitasinya 0,01058 µg/ml. Sedangkan pada penelitian Fitria, dkk diperoleh standar  deviasi  3,7990  ppm,  batas  deteksi  α-mangostin  37,8323  ppm  dan  batas kuantitasinya 110,8014 ppm.

## Kesimpulan
Didapatkan  hasil  bahwa  penetapan  kadar  α-mangostin  menggunakan  metode spektrofotometer ultraviolet yang telah ditambahkan ke dalam plasma manusia secara in vitro  telah  memenuhi  persyaratan  akurasi,  linieritas  dan  presisi.  Dalam  plasma  darah manusia di dapatkan hasil kadar α-mangostin secara in vitro ialah 3,747 % ± 93,9799%.
Metode yang valid untuk menganalisis α-mangostin dalam plasma darah manusia secara  in  vitro  ialah  metode  KLT-densitometri  yang  dapat  digunakan  sebagai  metode yang  valid.  Dilihat  dari  terpenuhinya  parameter  dengan  nilai  linearitas  0,9922  akurasi 96,0591%,  presisi  intraday  dimulai  dari  konsentrasi  50  ppm,  100  ppm,  dan  150  ppm. Diperoleh rata  – rata % RSD sekitar 1,6440%, 2,1993% dan 1,6389%, presisi interday yaitu  2,8533%,  1,4208%,  3,0985%,  batas  deteksi  37,832332  ppm  dan  batas  kuantitasi
110,8014ppm.  Di  dapatkan  Kadar  α-mangostin  dalam  plasma  darah  manusia  yang sebelumnya di tambahkan larutan αmangostin secara in vitro yaitu sebesar 115,2709 ± 3,7990 ppm dari kadar sampel 120 ppm.
Dari  kesimpulan  di  atas  makan  di  dapatkan  hasil  bahwa  penetapan  kadar  a- mangostin  menggunakan  metode  spektro  uv  dan  densitometri  sudah  memenuhi persyaratan  akurasi,  linearitas  dan  presisi.  Namun,  metode  yang  lebih  bagus  untuk analisis a-mangostin ini adalah metode densitometri. Karena nilai akurasi dan linearitas pada metode klt densitometri lebih tinggi dibandingkan dengan metode spektro uv. Nilai akurasi pada metode densitometri yaitu 96,0591% sedangkan nilai akurasi pada metode klt 95,221%.

## BIBLIOGRAFI
Agustina,  R.(2014). Analisis  α-Mangostin  dari  Ekstrak  Kulit  Buah  Muda,  Kulit  Buah Matang  dan  Kulit  Batang  Manggis  (Garcinia  mangostana,  L)  dengan  TLC Scannner . Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Padang Google Scholar
Chaverri,  J.  P.,  Rodriguez,  N.  C.,  Ibarra,  M.  O.,  &  Rojas,  J.  M.  P.  (2008).  Medicinal properties of mangosteen ( Garcinia mangostana) . Food and Chemical Toxicology, 46, 3227-3239. Google Scholar
Chaverri J. P., Reyes-Fermin L. M., Nolasco A. E. G., Orozco I. M., & Medina-Campos O. N. (2009), ROS scavenging capacity and neuroprotective Effect of α-mangostin against 3-nitropropionic acid in cerebellar granula neurons. Exp Toxicol Pathol , 61: 491-501. Google Scholar
Chaverri,  J.  P.,  Rodriguez,  N.  C.,  Ibarra,  M.  O.,  &  Rojas,  J.  M.  P.  (2008).  Medicinal properties of mangosteen ( Garcinia mangostana) . Food and Chemical Toxicology, 46, 3227-3239. Google Scholar
Etatutwuni.  (2013). Analisis  α-Mangostin  dari  Ekstrak  Kulit  Buah  dan  Kulit  Batang Garcinia  mangostana,  L  dengan  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi .Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Padang. Google Scholar
Food  and  Drug  Administration.  (2001). Guidance  for  Industry  :Bioanalytical  Method Validation . USA : Food and Drug. Google Scholar
Gaudiano,  Paolo,  Bonabeau,  Eric,  &  Shargel,  Ben.  (2005).  Evolving  behaviors  for  a swarm  of  unmanned  air  vehicles. Proceedings  2005  IEEE  Swarm  Intelligence Symposium, 2005. SIS 2005. , 317–324. IEEE. Google Scholar
Ghazali, S.A.I.S.M., Lian, G.E.C., & Ghani, K.D.A. (2010). Chemical Constituent from Roots of Garcinia mangostana Linn. J. Chemistry , 2, 134-142. Google Scholar
Harahap,  Y.  2010.  Sample  Preparation, Bioavailbility  and  Bioequivalency. Jakarta  :
Departement Farmasi UI. Google Scholar
Harahap, Y., Mansur, U., & Estherina, C. (2008). Validasi Metode Analisis Cilostazol dalam  Plasma  In  Vitro  secara  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi. Majalah  Ilmu Kefarmasian, 5 , (1), 9-20. Google Scholar
Iswari, K.,& Sudaryono, T. (2007). 4 Jenis Olahan Manggis, Si Ratu Buah Dunia dari Sumbar . BPPT-Sumbar. Sumbar Barat. Google Scholar
Yunitasari,  L.  (2011). Gempur  41  Penyakit  Dengan  Buah  Manggis  Khasiat  dan  Cara Pengolahan Untuk Kesehatan . Yogyakarta: Pustaka baru press. Google Scholar
Copyright holder:
Nur Aenah, Anisa Fauziah, Cindhy Maulida N, Hermin Marlian, Irene Virda Sakina, Nurlaela, Siti Farikha (2022)
First publication right:

## Syntax Idea
This article is licensed under: