## PENGARUH PENAMBAHAN JERUK NIPIS SEBAGAI ACIDIFIER PADA PAKAN STEP DOWN TERHADAP KONDISI USUS HALUS AYAM PEDAGING
(The Effect of Inclusion of Lime as Acidifier in Step-Down Feeding System on Intestinal Condition of Broiler Chickens)

## Jamilah, N. Suthama, L. D. Mahfudz
Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro Jl. Drh Soejono Kusumowardojo, Tembalang, Semarang e-mail : jamilahdoma@yahoo.com

## ABSTRACT
The aim of the research was to improve the condition of the broilers’ intestine raised with single step down feeding system and the dietary inclusion of lime as acidifier. The research was conducted according to completely randomized design with 8 treatments and 4 replications (each experimental unit consisted of 8 broilers). Treatments were P0 (normal diet), P1 (single  step down diet), P2 (single step down diet + citric acid 0.8%), P3 (single  step down diet + lime acid 0.4 % (6.9 ml /100g feed)), P4 (single  step down diet + lime  acid 0.8% (13.8 ml /100g feed)) and P5 (single  step down diet + lime acid 1.2% ( 20.7 ml /100g feed)). Weight and length of the villus of all part of the small intestine were not affected by the addition of lime, but villus height of the duodenum was significantly affected by the inclusion of lime in the diet. Single step down feeding system and dietary inclusion of lime could improve duodenal villus characteristic of broiler chickens.
Key words : Broiler, Single step-down, Acidifier, Villus, Small intestine

## ABSTRAK
Penelitian  bertujuan  memperbaiki  kondisi  saluran  pencernaan  broiler  yang  dipelihara  pada sistem single  step  down dan  diberi  jeruk  nipis  sebagai acidifier dalam  pakan.  Penelitian  disusun berdasarkan Rancangan Acak Lengkap dengan 8 perlakuan dan 4 ulangan (masing-masing terdiri atas 8 ekor ayam). Perlakuan yang diterapkan antara lain: P 0 (pakan kontrol (tanpa step down )) , P 1 (pakan step dow ), P 2 (pakan step down + asam sitrat 0,8 %), P 3 (pakan step down + asam jeruk nipis  0,4 % (6,9 ml /100g pakan)) P 4 , (pakan step down + asam jeruk nipis  0,8 % (13,8 ml /100g pakan))dan P 5 (pakan step down + asam jeruk nipis  1,2 % (20,7 ml /100g pakan)). Bobot dan panjang tiap bagian usus halus tidak dipengaruhi oleh penambahan jeruk nipis, namun tinggi villi duodenum nyata dipengaruhi oleh pemberian jeruk nipis. Sistem pemberian pakan single step down dan penambahan jeruk nipis dalam pakan dapat memperbaiki kondisi vili duodenum ayam pedaging.
Kata kunci : Ayam pedaging, Single step down , Acidifier, Villi, Usus halus.

## PENDAHULUAN
Ayam  pedaging  secara  genetik  dirancang untuk  bertumbuh  dengan  cepat,  namun untuk  mendukung  pertumbuhan  yang  cepat diperlukan  nutrisi  yang  berimbang  terutama kebutuhan  protein  yang  cukup  tinggi.  Protein sangat  mempengaruhi  tingginya  harga  pakan, dengan  penerapan  pakan  sistem single  step down yaitu  penurunan  protein  pakan  pada fase  pertumbuhan  (fase  starter),  diharapkan dapat mengefisienkan harga pakan. Penurunan protein  pakan  pada  umur  pemeliharaan  yang lebih  cepat  atau  penggunaan  protein  yang
tidak  sesuai  rekomendasi  dapat  menyebabkan pencapaian  berat  badan  akhir  yang  lebih rendah  (Houshmand et  al .,  2012)  oleh  karena itu,  penurunan  kadar  protein  pakan  harus diimbangi dengan penyerapan yang maksimal agar tidak mengganggu pertumbuhan. Penambahan  asam  organik  pada  air  mi- num  atau  pakan  ayam  pedaging  ( acidifier ) terbukti  mampu  meningkatkan  penyerapan dengan meningkatkan fungsi dari enzim pencer- naan yang berpengaruh terhadap peningkatan pencernaan  dan  penyerapan  terutama  serat dan protein (Atapattu and Nelligaswatta, 2005; Abdel-Fattah et al., 2008). Pemberian asam sitrat
Jamilah, dkk.
sebagai acidifier mampu  meningkatkan  bobot relatif usus halus (Abdel-Fattah et al. , 2008) dan tinggi  villi  usus  halus  (Deghani  dan  Jahanian, 2012), yang mengindikasikan adanya peningka- tan penyerapan nutrisi.
Kondisi usus halus seperti tinggi villi pada usus halus menggambarkan area untuk penye– rapan nutrisi yang lebih luas (Awad et al ., 2009). Peningkatan tinggi vili dan lebar vili diasosiasi- kan dengan lebih luasnya permukaan vili untuk penyerapan nutrisi masuk kedalam aliran darah (Miles et al. , 2006). Awad et al . (2008) lebih rinci menyatakan  bahwa  peningkatan  tinggi  villi pada usus halus ayam pedaging berkaitan erat dengan  peningkatan  fungsi  pencernaan  dan fungsi  penyerapan  karena  meluasnya  area  ab- sorpsi  serta  merupakan  suatu  ekspresi  lancar- nya sistem transportasi nutrisi ke seluruh tubuh yang menguntungkan inang.
Jeruk  nipis  sabagai  sumber  asam  sitrat alami  dapat  digunakan  sebagai acidifier pada pakan ayam pedaging. Belum terdapat laporan mengenai  penggunaan  jeruk  nipis  sebagai sumber asam sitrat untuk memperbaiki kondisi saluran  pencernaan  ayam  pedaging  terutama pada sistem pemberian pakan single step down . Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui pengaruh  pemberian  pakan  sistem single  step down dan penambahan jeruk nipis pada pakan terhadap kondisi saluran pencernaan terutama usus halus ayam pedaging.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  ini menggunakan  ayam pedaging sebanyak  192  ekor  broiler  umur  1 minggu  (jantan  dan  betina),  yang  dipelihara hingga umur 6 minggu. Pemeliharaan dilakukan menggunakan kandang panggung yang disekat 24 petak, dan disusun secara acak berdasarkan rancangan acak lengkap dengan 6 perlakuan dan 4 ulangan sehingga terdapat 24 unit percobaan, tiap  unit  terdiri  dari  8  ekor  ayam.  Perlakuan yang diterapkan sebagai berikut:
P 0 : Pakan kontrol (tanpa step down ) P 1 : Pakan step down P 2 : Pakan step down + asam sitrat 0,8 % P 3 : Pakan step down + asam jeruk nipis 0,4% (6,9 ml /100g pakan) P 4 : Pakan step down + asam jeruk nipis 0,8% (13,8 ml /100g pakan) P 5 : Pakan step down + asam jeruk nipis 1,2% (20,7 ml /100g pakan)
Pakan  disusun  dengan  menggunakan jagung,  bekatul,  minyak  nabati,  tepung  ikan, bungkil  kedelai,  bungkil  kelapa,  CaCO 3 , tepung  kerang,  vitamin,  mineral,  lysine,  dan methionine. Komposisi pakan yang digunakan selama  penelitian  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Pada  perlakuan  kontrol,  ayam  diberi  pakan starter umur  1  sampai  3  minggu,  selanjutnya diberi  pakan finisher sampai  umur  6  minggu. Pada perlakuan pakan step down, pakan dengan komposisi  yang  sama  dengan  pakan finisher , mulai  diberikan  pada  saat  ayam  berumur  1 minggu sampai akhir periode penelitian (umur 6 minggu). Pakan dan air minum diberikan ad libitum. Acidifier yang  diberikan  berupa  asam sitrat  komersial  dan  sumber  alami  yaitu  jeruk nipis  yang  dicampur  dengan  1/2  bagian  dari total  pakan  yang  diberikan  pada  pagi  hari dan  sebagian  lagi  pada  sore  hari.  Pada  akhir penelitian,  satu  ekor  ayam  dipilih  secara  acak dari  tiap  unit  percobaan  untuk  dilakukan pemeriksaan kondisi usus halus.
Bobot  relatif  dan  panjang  usus  (cm) diamati  setelah  usus  halus  dibersihkan  dan masing-masing  bagian  usus  halus  dipisahkan. Duodenum  merupakan  bagian  usus  yang berbentuk huruf U, jejunum merupakan bagian tengah  usus  halus  yang  dimulai  dari  bagian akhir duodenum sampai ke Meckel’s diverticulum , dan Ileum merupakan bagian akhir usus halus yang dimulai dari Meckel’s diverticulum sampai dengan  awal  percabangan caecum (Incharoen et  al .,  2010;  Incharoen,  2013).  Penimbangan dilakukan  setelah  bagian  digesta  dikeluarkan, dan  dituliskan  sebagai  bentuk  bobot  relatif terhadap bobot hidup.
Sampel  usus  dari  tiap  bagian  usus (duodenum,  jejenum  dan  ileum)  dipisahkan dan direndam dalam buffer netral formalin (BNF) 10%  untuk  selanjutnya  dilakukan  pengukuran tinggi villi dan perubahan histopatologi melalui prosedur pewarnaan hematoksilin eosin (HE) dan menggunakan  video-mikrometer  (Incharoen et al .,  2010;  Incharoen,  2013).  Perhitungan  tinggi per  villi  dihitung  menggunakan  mikroskop dengan  perbesaran  objektif  4  kali  dan  video- mikrometer  pada  lapang  pandang  dari  setiap preparat  histopatologi  dan  setiap  lapang pandang dihitung 3 villi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Bobot relatif, panjang usus dan tinggi villi usus  dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  Pemberian acidifier tidak  memberikan  pengaruh  nyata
pada  bobot  relatif  dan  panjang  usus  halus ayam  pedaging,  baik  secara  keseluruhan maupun bagian-bagian usus. Hasil yang sama juga ditunjukkan oleh Houshmand et al. (2012) yang  memberikan  asam  organik,  prebiotik, dan probiotik pada ayam pedaging yang diberi pakan dengan level protein rendah dan tinggi. Berbeda halnya dengan Abdel-Fattah et al. (2008) yang melaporkan bahwa pemberian acidifier baik berupa asam laktat maupun asam sitrat mampu meningkatkan  bobot  relatif  dan  panjang  usus halus pada ayam pedaging.
Bobot  usus  halus  broiler  pada  pada pemberian acidifier menunjukkan  hasil  yang normal, tidak berada dibawah standar. Menurut Incharoen et al . (2010) bobot relatif usus (g/100g bobot  badan)  yaitu  duodenum  0,31,  jejenum 0,52,  dan  ileum  0,42.  Kandungan  nutrisi  pada penelitian ini meskipun berbeda terutama pada perlakuan step  down ,  dengan  adanya  unsur acidifier dapat  meningkatkan  penggunaan nutrien  terutama  protein  untuk  pertumbuhan organ  pencernaan  sehingga  menghasilkan
bobot usus yang sama. Bobot usus yang normal menunjukkan  kondisi  broiler  yang  digunakan sehat.  Bobot  usus  halus  menunjukkan  adanya respon positif broiler yang diberi acidifier karena nilainya tidak berbeda dengan kontrol artinya, asam  sitrat  tidak  mengganggu  perkembangan usus halus broiler. Disisi lain pengaruh positif juga  terlihat  dengan  tidak  adanya  pengaruh penurunan protein pakan.
Pemberian air  jeruk  nipis  sebagai acidifier berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap usus halus, khususnya  tinggi  vili  duodenum.  Pemberian asam sitrat sintetis maupun alami (P2,P3,P4,dan P5)  memiliki  tinggi  vili  duodenum  nyata lebih  ting gi  (P<0,05) dibanding  dengan  pakan kontrol  (P0)  namun  tidak  berbeda  dengan pakan step down tanpa acidifier (P1). Penurunan kadar  protein  pakan  (P0  vs  P1)  juga  tidak menunjukkan adanya perbedaan pada kondisi usus.    Perbedaan  tinggi  vili  menunjukkan bahwa asam sitrat dapat memberikan kontribusi terhadap perkembangan dan pertumbuhan usus halus  yang  terjadi  pada  perlakuan.  Tinggi  vili
Tabel 1. Komposisi pakan  (%) yang digunakan selama penelitian
Bahan Baku Pakan Pakan Perlakuan Starter Finisher (step down) Jagung 50,00 53,00 Dedak 6,00 10,00 Minyak Nabati 4,00 2,00 Tepung Ikan 6,00 6,00 Bungkil Kedelai 25,00 20,00 Bungkil Kelapa 8,00 8,00 CaCO3 0,3,00 0,30 Tepung Kulit Kerang 0,20 0,20 Premix 0,20 0,20 Methionine 0,30 0,30 TOTAL 100,00 100,00 Kandungan Nutrisi Energi Metabolisme (kkal/kg) 2988,20 2870,50 Protein Kasar 21,18 19,72 Serat Kasar 4,48 4,72 Lemak Kasar 7,64 6,23 Lysine 1,35 1,25 Methionine 0,70 0,68 Ca 0,77 0,76 P 0,39 0,38 *Bahan pakan dianalisis di Laboratorium ilmu makanan ternak Fakultas Peternakan Universitas Diponegoro
bagian  jejenum  dan  ileum  tidak  menunjukkan adanya perbedaan akibat pengaruh perlakuan. Hasil  penelitian  Houshmand, et  al (2012) menunjukkan hasil yang sama yaitu pemberian asam  organik  hanya  berpengaruh  pada  tinggi villi  duodenum  sementara  bagian  lain  tidak dipengaruhi .  Duodenum  merupakan  bagian usus  halus  dengan  pH  asam  antara  4  sampai 5,  dengan  penambahan  asam  organik  dapat menjaga  agar  pH  tetap  dalam  kondisi  normal meskipun  suhu  lingkungan  kandang  tinggi sehingga  vili  usus berkembang  dengan  baik. Berbeda halnya dengan bagian jejenum (pH 5-6) dan ileum (pH 6-7) pada dasarnya merupakan bagian  usus  yang  secara  alami  memiliki  pH netral, sehingga walaupun diberi penambahan asam  sitrat  tidak  mempengaruhi  perubahan pH  yang  pada  akhirnya  berdampak  pada pertumbuhan villi.
Perlakuan  dengan  penggunaan  asam sitrat menunjukkan tinggi villi usus halus yang lebih baik daripada kontrol hal ini disebabkan asam  sitrat  mampu  menciptakan  kondisi yang  ideal  untuk  perkembangan  bakteri  yang menguntungkan bagi saluran pencernaan, dan mampu menekan pertumbuhan bakteri patogen . Kondisi ini berimbas pada perbaikan kekebalan mukosa  ( gut-associated  lymphoid  tissue /GALT) . Koloni  bakteri  patogen  yang  menurun  sangat mempengaruhi tinggi vili usus halus, demikian juga sebaliknya, jika bakteri patogen meningkat maka  akan  menghambat  pertumbuhan    tinggi villi usus halus. Menurut Paul et al . (2007) faktor
seperti  bakteri  patogen,  dan  stress  memiliki efek negatif terhadap mikroflora usus ataupun epitel usus, yang mengakibatkan permeabilitas sel sebagai ketahanan tubuh alami mengalami perubahan  sehingga  memudahkan  senyawa berbahaya  dan  bakteri  patogen  menembus sel  usus  halus,  yang  akan  mengganggu metabolisme,  pencernaan  dan  penyerapan nutrien.  Kondisi  tersebut  dapat  menyebabkan peradangan  kronis  pada  mukosa  usus,  yang akhirnya menyebabkan tinggi vili, pencernaan dan penyerapan terganggu . Perlakuan  dengan  pakan  kontrol  tanpa acidifier menunjukkan  tinggi  vili  usus  halus terendah.  Kondisi  lingkungan  pada  saat penelitian yang kurang mendukung karena suhu tinggi  (menyebabkan  ternak  mengalami  stres panas, sehingga berdampak pada terhambatnya perkembangan  saluran  pencernaan  secara khusus.  Perkembangan  vili  pada  P0  juga berhubungan  dengan  perkembangan  bakteri patogen, kolonisasi bakteri patogen cenderung lebih  tinggi.  Beberapa  peneliti  melaporkan bahwa  terganggunya  pertumbuhan  vili  pada usus ayam yang mengalami terpaan suhu panas terkait  dengan  perkembangan  mikroba  dalam saluran  usus  (Lan et  al .,  2004  dan  Sandikci et al .,2004).
Suhu
lingkungan panas memicu peningkatan  hormon  glukokortikoid  yang berhubungan  dengan  sekresi  senyawa  mucin pada  mukosa  permukaan  usus.  Peningkatan kadar  hormon  glukokortikoid  cenderung
Tabel 2 . Rataan bobot usus, panjang usus,  dan tinggi villi usus halus
Parameter P0 P1 P2 P3 P4 P5 Bobot usus (g/100g bobot badan ) Duodenum 0,78 0,77 0,67 0,83 0,78 0,66 Jejenum 1,33 1,23 1,22 1,32 1,41 1,32 Ileum 1,09 1,02 0,98 0,97 1,04 1,06 Usus halus 3,19 3,02 2,86 3,12 3,23 3,04 Panjang usus (cm) Duodenum 26,25 27,25 27,75 29,25 28,00 28,25 Jejenum 67,00 67,75 66,25 64,75 69 76,00 Ileum 63,00 66,00 65,50 61,75 65,75 76,75 Usus halus 156,25 161,00 159,50 155,75 162,75 181,00 Tinggi Villi (µm) Duodenum 93,79 b 138,32 ab 143,49 a 147,67 a 152,55 a 172,90 a Jejenum 130,23 103,74 119,37 87,44 100,60 105,91 Ileum 66,40 75,65 71,09 87,30 75,50 89,25
ab Superskrip  pada baris yang sama menunjukkan perbedaan nyata P<0,05.
menurunkan goblet  cell (Sandikci et  al ., 2004)  sehingga  produksi    senyawa  mucin berkurang.  Pertumbuhan  bakteri  nonpatogen erat    hubungannya  berkurangannya  sekresi senyawa mucin yang berperan sebagai sumber nutrien.  Apabila  terjadi  penurunan  senyawa mucin dapat mempengaruhi laju pertumbuhan bakteri nonpatogen, sehingga menguntungkan bagi  pertumbuhan  bakteri  patogen  misalnya jenis coliform . Populasi  bakteri  patogen  seperti coliform yang tinggi menjadi penyebab adanya deplesi  perkembangan  saluran  pencernaan sehingga  menyebakan  berkurangnya  laju pertumbuhan tinggi villi usus. Menurut Uni et al . (2003) tekanan bakteri patogen pada saluran pencernaan  dapat  mengubah  morfologi  usus seperti terhambatnya pertumbuhan tinggi villi dan kedalaman kripta.
Apabila dibandingkan secara umum antara duodenum,  jejenum  maupun  ileum  dapat diketahui  bahwa  tinggi  villi  pada  duodenum cenderung lebih tinggi dari pada  bagian lainnya , kecuali  pada  perlakuan  pakan  kontrol  (P0) tinggi villi pada duodenum lebih rendah, dari pada bagian lainnya, kemungkinan mengalami infeksi pada bagian duodenum yang diperjelas oleh gambar histopatologi (Gambar 1) . Keadaan kemungkinan  terjadi  infeksi  didukung  oleh kondisi  bakteri  patogen  yang  tinggi,  karena
gambar  pada  Gambar  1  menunjukkan  adanya erosi. Menurut Garthner dan Hiat (1997) villi usus adalah bagian permanen dengan bentuk seperti jari  kelingking  yang  menyerupai  projections dimana  bagian  tertinggi  adalah  duodenum kemudian jejenum dan terakhir ileum.

## KESIMPULAN
Penambahan  air  jeruk  nipis  dalam  pakan pada  sistem  pemberian  pakan single  step-down dapat meningkatkan tinggi villi duodenum dan mengindikasikan adanya manfaat penggunaan air  jeruk  nipis  pada  ayam  pedaging  yang diberikan  pakan  dengan  kadar  protein  lebih rendah pada fase pertumbuhan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Fattah. S. A., M. H. El-Sanhoury, N. M. El-Mednay and F. Abdel-Azeem. 2008. Thyroid activity, some blood constituents, organs morphology and performance of broiler chicks fed supplemental organic acids. Int. J. Poult. Sci. 7: 215-222.
Atapattu, N. S. B. M. and C. J. Nelligaswatta. 2005. Effect of  citric  acid  on  the  performance  and  utilization  of phosphorous  and  crude  protein  in  broiler  chickens fed rice by products based diets. Int. J. Poult. Sci., 4: 990-993.

## Gambar 1. Histopatologi usus ayam pedaging yang diberi air jeruk nipis dalam pakan step down

## Jamilah, dkk.
Awad,  W.  A.,  K.  Ghareeb,  S.  Nitch,  S.  Pasteiner,  S.  A.
Raheem, and J. Bohm. 2008. Efect of dietary inclusion of  probiotic,  prebiotic  and  symbiotic  on  intestinal glucose  absorbtion  of  broiler  chickens.  Int.  J.  Poult.
Sci., 7: 688-691.
Awad, W. A., K. Ghareeb, S. A. Raheem, and J. Bohm.. 2009. Effects of dietary inclusion of probiotic and synbiotic on growth performance, organ weights, and intestinal histomorphology of broiler chickens. Poult. Sci., 88: 49-55.
Dehghani,  N.  and  R.  Jahanian.  2012.  Interactive  impacts of dietary organic acids and Crude protein levels on performance  and  gut  Morphology  of  broiler  chick. Book  of  abstrak,  World´s  Poultry  Science  Journal. Brazil ( 5 - 9 August 2012).
Gartner,  L.  P.  and  J.  L.  Hiat.  1997.  Color  Textbook  of Histology.  W.  B.  Saunders  Company,  Philadelphia, Pennsylvania, USA.
Houshmand, M., K. Azhar, I. Zulkifli, M. H. Bejo and A.
Kamyab. 2012. Effects of non-antibiotic feed additives on performance, immunity and intestinal morphology of broilers fed different levels of protein. Afr. J. Anim. Sci., 42 (1) : 22- 32.
Incharoen, T., K. Yamauchi, T. Erikawa and H. Gotoh. 2010. Histology  of  intestinal  villi  and  epithelial  cells  in chickens fed low-crude protein or low-crude fat diets. Ital. J. Anim. Sci.,  9(e82): 429-434.
Incharoen,  T.  2013.  Histological  adaptations  of  the gastrointestinal tract of broilers fed diets containing insoluble fiber from rice hull meal. Am. J. Anim. Vet. Sci., 8(2): 79-88.
Lan,  P.  T.  G.,  M.  Sakamoto  and  Y.  Benno.  2004.  Effect  of two probiotic Lactobacillus strains on jejunal and fecal microbiota of broiler chicken under acute heat stress condition  as  revealed  by  molecular  analysis  of  16s rRNA genes. Microbiol. Immunol., 48: 917-929.
Miles, R. D., G. D. Butcher, P. R. Henry, and R. C. Littel. 2006. Effect of antibiotic growth promoters on broiler performance  intestinal  growth  parameters,  and quantitative morphology. Poult. Sci., 85: 476-485.
Paul, S. K., G. Halder, M. K. Mondal and G. Samanta. 2007. Effect of organic acid salt on the performance and gut health of broiler chicken. J. Poult. Sci., 44: 389-395.
Sandikci, M., U. Eren, A. G. Onol and  S. Kum. 2004. The effect  of  heat  stress  and  the  use  of Saccharomyces cerevisiae or (and) bacitracin zinc against heat stress on the intestinal mucosa in quails. Revue Méd.Vét.,155: 552-556.
Uni, Z., Y. Noy and D. Sklan. 1999. Posthatch development of small intestinal function in the poult. Int. J. Poult. Sci., 78: 215-222.