ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Aminah Asngad, Ervian Jan Marudin , Devi Setyaning Cahyo. (2020). Kualitas  Bioplastik dari Umbi Singkong Karet dengan Penambahan kombinasi Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol dan Kitosan. Journal Bioeksperimen. Vol. 6 (1) Pp. 36-44. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v6i1.2795

## KUALITAS  BIOPLASTIK DARI UMBI SINGKONG KARET DENGAN PENAMBAHAN KOMBINASI PLASTICIZER GLISEROL DENGAN SORBITOL DAN KITOSAN
Aminah Asngad*, Ervian Jan Marudin , Devi Setyaning Cahyo Pendidikan Biologi FKIP Universitas Muhammadiyah Surakarta *Email: aa125@ums.ac.id Paper submit : 17 Agustus 2019, Paper publish : Maret 2020
Abstract - High plastic demand has the potential to cause problems because plastic is a synthetic polymer made from petroleum that is difficult to decipher. Therefore, saving the current development of biodegradable plastics that can be decomposed by microorganisms naturally. Cassava rubber tubers are rarely used because they contain HCN toxin but have a carbohydrate content of 98.4674%, so it has the potential as a bio-plastic material. The purpose of this study was to determine the Bioplastic Quality of Cassava Rubber with the addition of a combination of Plasticizer Glycerol with Sorbitol and Chitosan. The study was conducted in the lab. Biology FKIP UMS, research methods used are experimental research methods. The study design used was completely randomized design with 2 treatment factors, namely: treatment factor 1 volume of glycerol (G), G 1 = 3ml; G 2 = 5ml; G 3 = 7ml. Treatment factors are 2 types of Plasticizer (P), P1 = Sorbitol and; P2 = Chitosan. The analysis used is descriptive qualitative used to test tensile resistance, elongation at break. Based on the results of the study showed the strongest spacer resistance, G1P1 which is 17.20N / mm², and the highest breaking length, G3P1 which is 24.00%. with sorbitol and chitosan.
Keywords: tensile resistance, elongation at break, rubber cassava tubers, sorbitol and chitosan

## Pendahuluan
Plastik merupakan produk polimerisasi sintetik atau semi-sintetik sebagai kemasan yang banyak digunakan dalam kehidupan manusia. Hal tersebut dikarenakan mempunyai keunggulan antara lain ringan, kuat, transparan, dan harga yang terjangkau oleh semua kalangan masyarakat . Di Indonesia Kebutuhan plastik terus meningkat setiap tahunya perkapita mencapai 17 kg per tahun dengan pertumbuhan konsumsi mencapai 6-7 persen pertahun ( Supriadi, 2016). Kebutuhan plastik yang tinggi berpotensi menimbulkan masalah yang serius karenaplastik yang beredar di pasaran saat ini merupakan polimer sintetik yang terbuat dari minyak bumi yang sulit untuk terurai di alam. Akibatnya semakin banyak yang menggunakan plastik, akan semakin meningkat pula pencemaran lingkungan seperti penurunan kualitas air dan
tanah menjadi tidak subur. Selain itu plastik mempunyai kelemahan yang berbahaya bagi kesehatan manusia, diantaranya adalah migrasi residu monomer vinil klorida sebagai unit penyusun polivinil klorida (PVC) yang bersifat karsinogenik (Siswono, 2008).
Salah satu cara untuk mengurangi limbah plastik dengan cara mendaur ulang plastik tersebut. Plastik daur ulang juga menimbulkan isu kesehatan yang dapat membahayakan terkait tingkat keamanan dan kesehatan bagi pemakainya (Sanjaya,2011), sehingga perlu adanya pengembangan dari plastik yang bersifat ramah lingkungan ( biodegradable ). Untuk menyelamatkan lingkungan dari bahaya plastik, saat ini telah dikembangkan plastik biodegradable , yakni plastik ini dapat diuraikan kembali mikroorganisme secara alami menjadi senyawa yang ramah lingkungan.
Pada umumnya plastik konvensional berbahan dasar petroleum, gas alam, atau
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
batu bara. Sementara bio plastik terbuat dari material yang dapat diperbaharui, yaitu dari senyawa-senyawa yang terdapat dalam tanaman serta beberapa material plastik atau polimer lain yang terdapat di sel tumbuhan dan hewan. Jenis bio plastik antara lain poly hidroksi alkanoat (PHA) dan poli-asam amino yang berasal dari sel bakteri, polylaktida (PLA) yang merupakan modifikasi asam laktat hasil perubahan zat tepung kentang atau jagung oleh mikroorganisme, dan poliaspartat sintesis yang dapat terdegradasi.
Bio plastik berbahan dasar tepung dapat didegradasi bakteri Pseudomona s dan Bacillus memutus rantai polimer menjadi monomer- monomernya. Senyawa-senyawa hasil degradasi polimer selain menghasilkan karbon dioksida dan air, juga menghasilkan senyawa organik lain yaitu asam organik dan aldehid yang tidak berbahaya bagi lingkungan.Plastik yang biodegradable bila terbakar tidak menghasilkan senyawa kimia berbahaya, melainkan kualitas tanah akan meningkat, karena hasil penguraian mikroorganisme meningkatkan unsur hara dalam tanah. Hasil degradasi plastik ini juga dapat digunakan sebagai makanan hewan ternak atau sebagai pupuk kompos.
Bahan dasar bioplastik berasal dari selulosa, kolagen, kasein, kitin, kitosan, protein atau tepung yang terkandung dalam tumbuhan. Hal ini tentu bisa menjadi sebuah potensi yang besar di Indonesia, karena terdapat berbagai tanaman penghasil tepung seperti singkong, beras, kentang, dan tanaman lainnya. Apalagi harga umbi-umbian di Indonesia relatif rendah. Dengan memanfaatkan sebagai bahan plastik yang biodegradable, akan memberi nilai tambah ekonomi yang tinggi, sehingga penelitian lebih lanjut sangat diperlukan. Penggunaan plastik yang biodegredable di Indonesia masih jarang,padahal jelas sekali, bahwa potensi bahan baku pembuatan bioplastik sangat besar di Indonesia. Tampaknya perlu dukungan dari semua pihak terutama pemerintah selaku regulator, industri kimia dan proses, serta kesadaran dari seluruh masyarakat.
Pembuatan bio plastik dengan bahan dari pati menggunakan prinsip gelatinisasi. Pati yang
telah diolah menghasilkan kandungan air dan meninggalkan lapisan film yang bersifat kaku dan stabil. Film adalah lembaran tipis yang fleksibel dan tidak mengandung bahan metalik dengan ketebalan 0,01 inci sampai 250 mikron (Pudjiastuti W, 2012). Plastik yang biodegradable dapat hancur dalam waktu yang relatif singkat dibandingkan plastik dari polimersintetis. Bio plastik memanfaatkan limbah-limbah organik yang mengandung banyak pati didalamnya misalnya umbi-umbian. Jenis umbi-umbian di Indonesia banyak sekali, diantaranya umbi gembili, jewawut, kimpul, tales dan singkong. Umbi singkongkaret merupakan salah satu jenis singkong yang jarang dimanfaatkan karena didalamnya mengandung racuns ianida atau HCN. Namun kandungan pati  pada singkong karet tinggi, berdasarkan hasil analisis Laboratorium Ilmu Makanan Ternak FP Undip, (2013) singkong karet yang memiliki kadar karbohidrat 98,4674%, sehingga berpotensi sebagai bahan bio plastik . Disamping  hal ntersebut tanaman singkong karet dapat menghasilkan ubi yang beratnya mencapai empat kali lipat ubi biasa sehingga sebagai bahan baku hasil pembuatan bioplastik sangat layak dari segi ketersediaannya.
Menurut penelitian Huda dan Firdaus(2007), Pembuatan bioplastik dari komposit pati ubi jalar dan singkong mampu menghasilkan formasi yang cukup baik yaitu memiliki ketahanan panas maksimum film bioplastik yakni 100ºC. Sedangkan hasil penelitian Susilawati dkk (2011) menggunakan 4 g pati ubi kayu yang sebelum nya telah dikeringkan pada oven bersuhu 60 0 C dengan tekanan1atmselama 24 jam serta penambahan gliserol dan asam akrilat dalam hasil uji biodegradasi didapatkan prosentase kehilangan berat optimum sebesar 59,26% dalam tanah kompos selama 60 hari.
Kelenturan plastik biodegradable masih perlu dikembangkan, karena masih memiliki kekurangan sehingga dibutuhkan zat additive (bahan tambahan) untuk memperbaikinya. Bahan tambahan yang diperlukan untuk menambah kelenturan seperti plasticizer gliserol, kitosan dansorbitol. Sebabgliserol, kitosan dan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
sorbitol dapat meningkatkan elastisitas pada suatu materi (Darnidkk,2009).
Gliserol merupakan plasticizer yang banyak digunakan dalam pembuatan bioplastik. Menurut hasil penelitian Saputra dkk., (2015), pengujian kuat tarik tertinggi dengan perlakuan variasi gliserol dimiliki oleh plastik dengan perbandingan 90% pati suweg dan 10% gliserol sebesar 5,43 Mpa. Pengujian elongasi tertinggi dengan perlakuan variasi gliserol dimiliki plastik dengan komposisi 80% pati ubi suweg dan 20% gliserol sebesar 46%.Sedangkan menurut hasil penelitian Radhiyatullah dkk., (2015) bahwa Penggunaan gliserol yang terlalu banyak akan menurunkan nilai kuat tarik, sedangkan nilai perpanjangan putus (elongasi) akan semakin bertambah.
Sorbitol merupakan bahan additive berfungsi sebagai plasticizer yang ramah lingkungan, banyak terdapat dialam, dan bersifat non-toksik serta dapat menghambat penguapan air pada produk. Menurut hasil penelitian Danny (2012) bahwa biofilm yang baik dapat dibuat dari pati kulit singkong dengan penambahan sorbitol sebagai plasticizer yang  menghasilkan bioplastik dengan kuat  tarik tertinggi, yaitu 49 Mpa dari formulasi 2 mL sorbitol. Sedangkan Menurut penelitan Sanjaya dkk (2011) hasil yang tertinggi diperoleh gliserol pada konsentrasi 3mL dengan nilai modul us young 494925,675 (psi), elongation 1,27%dan tensile strength 6269,059 (psi). Kitosan merupakan bahan yang ramah lingkungan, dan berfungsi menambah sifat mekanik bioplastik serta ketahanan terhadap air semakin baik. Kitosan mudah terdegradasi, mudah digabungkan dengan material lainnya, dan bersifat antimikrobakterial (Dutta, 2009). Berdasarkan hasil penelitian Coniwanti dkk (2014), Penambahan konsentrasi kitosan yang semakin tinggi akan meningkatkan nilai kuat tarik bioplastik, sedangkan nilai elongasi semakin menurun.  Pemberian kitosan yang semakin banyak akan memperlambat kerusakan bioplastik (Hartatik dkk., 2014).
Berdasarkan latar belakang di atas maka yang menjadi permasalahan dalam penelitian iniadalahBagaimana kualitas bioplastik dari umbi
singkong karet dengan penambahan kombinasi plasticizer gliserol dengan sorbitol dan kitosan. Adapun tujuan yang akan dicapai pada penelitian ini adalah untuk mengetahui kualitas bioplastik dari umbi singkong karet dengan penambahan kombinasi plasticizer gliserol dengan sorbitol dan kitosan

## Metode Penelitian
Tempat Penelitian di Laboratorium Biokimia-Prodi. Pend.  Biologi UMS, dan Laboratorium Uji dan Kalibrasi Balai Besar Karet, Kulit, dan Plastik Yogyakarta Waktu dilaksanakan pada Bulan Maret-Desember 2018. Alat spektrofotometer IR Shimazu, alat uji kuat tarik perpanjangan putus adalah Universal Testing Machine dengan metode uji SNI dan bahan tepung umbi singkong karet, kitosan dari laboratorium analisa CV. Chem-Mix Pratama, sorbitol dan gliserol. Metode penelitian yang digunakan adalah metode penelitian eksperimental. Rancangan lingkungan yang digunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan pola faktorial dan dua ulangan. Penelitian digunakan 2 faktor, yaitu: Faktor perlakuan 1 volume gliserol (G) G 1 =3 ml G 2 = 5 ml G 3 =7 ml
Faktor  perlakuan 2 jenis bahan Plasticizer (P), P 1 = Sorbitol P 2 = Kitosan. Adapun Prosedur Penelitian meliputi: a). Tahap persiapan, b). Tahap pelaksanaan pembuatan Plastik biodegredebel, c). Tahap pengujian uji ketahanan tarik, uji perpanjangan putus dengan menggunakan alat Universal Testing Machine dan  uji biodegradabelitas dengan mengeringkan plastik dalam desikator kemudian mengubur sampel dalam tanah selama ± 2 minggu.
Dalam penelitian ini, analisis yang digunakan adalah deskriptif kualitatif yang digunakan untuk melakukan uji ketahanan tarik dan perpanjangan putus
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)

## Hasil Penelitian
Kualitas  Bioplastik dari Umbi Singkong Karet dengan Penambahan  kombinasi  Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol dan kitosan diperoleh data hasil uji ketahanan tarik dan perpanjangan putus. Adapun pengujian kekuatan tarik dan perpanjangan putus tersebut dilakukan di Laboratorium Uji dan Kalibrasi Balai Besar Karet, Kulit, dan Plastik Yogyakarta dengan menggunakan alat Universal Testing Machine. Hasil uji kekuatan tarik dan perpanjangan putus (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil Rata-rata Kekuatan Tarik dan Perpanjangan Putus pada Bioplastik dari Umbi Singkong Karet dengan Penambahan kombinasi Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol dan kitosan Perlakuan Kekuatan Tarik ((N/mm²)) Perpanjangan Putus (%) G 1 P 1
17.20* 20,42 G 2 P 1 12.74 22,33 G 3 P 1 6.63 24.00 #
G 1 P 2 4.75 16,21 ##
G 2 P 2 3.67 19,32 G 3 P 2 2.82** 20.67 Keterangan: * : Kekuatan tarik yang paling kuat ** : Kekuatan tarik paling lemah # : Perpanjangan putus paling kuat
# # : Perpanjangan putus paling lemah
Berdasarkan hasil penelitian pada tabel.1 diperoleh data bahwa rata-ratakekuatan tarik yang paling kuat adalah pada perlakuan G 1 P 1 yaitu pada konsentrasi Tepung ubi kayu karet dengan gliserol 3 ml dan tambahan bahan Plasticizer sorbitol dengan nilai 17,20N/mm², sedangkan perlakuan G 2 P 3 yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 7 ml dan tambahan bahan Plasticizer kitosan memiliki rata-rata kekuatan tarik yang paling lemah yaitu 2,82N/mm².
Berdasarkan hasil penelitian pada tabel 1 diperoleh data bahwa rata-rata perpanjangan putus paling tinggi adalah pada perlakuan G 3 P 1 yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 7 ml dan tambahan bahan Plasticizer
sorbitol dengan nilai 24,00%. Sedangkan perlakuan G 1 P 2 , yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 3 ml dan tambahan bahan Plasticizer kitosan memiliki perpanjangan putus paling rendah yaitu 16,21%.

## PEMBAHASAN
1.  Uji Kekuatan Tarik.
Hasil uji Kualitas  Bioplastik dari Umbi Singkong Karet dengan Penambahan kombinasi Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol dan kitosan diperoleh data hasil uji ketahanan tarik.
Gambar 1. Uji Kekuatan Tarik plastik
Rata-rata kekuatan tarik yang paling kuat adalah pada perlakuan G 1 P 1 (Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 3 ml dan tambahan bahan Plasticizer sorbitol) dengan nilai 17,20 N/mm², sedangkan perlakuan G 2 P 3 ( Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 7 ml dan tambahan bahan Plasticizer kitosan) memiliki rata-rata kekuatan tarik yang paling lemah yaitu 2,82N/mm². Salah satu faktor yang mempengaruhi meningkatnya nilai kekuatan tarik adalah konsentrasi gliserol yang digunakan dalam pembuatan bioplastik. Menurut hasil penelitian Asngad A dkk (2018) bahwa Ada perbedaan ketahanan tarik dan perpanjangan putus plastik biodegradabel dari kulit kacang dengan bonggol pisang dan biji nangka dengan penambahan gliserol.
Pengurangan atau penggunaan konsentrasi gliserol yang semakin sedikit akan menyebabkan nilai kekuatan tarik menjadi tinggi. Gliserol akan menurunkan tegangan antar molekul yang menyusun matrik pada bioplastik sehingga menyebabkan bioplastik semakin lemah. Hal tersebut sesuai dengan hasil penelitian Radhiyatullah dkk., (2015), bahwa kekuatan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut.
Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
tarik mengalami penurunan seiring penggunaan gliserol yang terlalu banyak akan menurunkan nilai kuat tarik, sedangkan nilai perpanjangan putus (elongasi) akan semakin bertambah. Kenaikan penambahan konsentrasi gliserol juga menyebabkan nilai kuat tarik semakin berkurang seiring dengan berkurangnya interaksi inter molekul. Interaksi berkurang karena adanya gliserol yang menyisip dan menghilangkan ikatan hidrogen diantara polisakarida. Meningkatnya jumlah gliserol yang digunakan menghasilkan mobilitas yanglebih besar terhadap makro molekul patis ehingga kuat tarik bioplastik menurun.
Selain gliserol jenis bahan Plasticizer yang digunakan akan mempengaruhi kekuatan tarik juga. Bahan Plasticizer sorbitol lebih baik dari pada bahan Plasticizer kitosan. Hal tersebut dikarenakan sorbitol berfungsi mengurangi ikatan hidrogen internal sehingga akan meningkatkan jarak inter molekul. Menurut hasil penelitian Mchugh dan Krochta (1994) bahwa poliol seperti sorbitol dan gliserol  adalah plasticizer yang berfungsi mengurangi ikatan hidrogen internal sehingga akan meningkatkan jarak inter molekul.
Penggunaan sorbitol sebagai plasticizer diketahui lebih efektif,sehingga dihasilkan film dengan permeabilitas oksigen yang lebih rendah bila dibandingkan dengan menggunakan kitosan. Hal tersebut sesuai dengan hasil penelitian Purwanti (2010), bahwa penambahan plasticizer menyebabkan nilai kuat tarik plastik kitosan menurun dari 3,94 MPa menjadi 0,2 MPa dan nilai persen elongasi plastik kitosan mengalami peningkatan dari 1,5% menjadi 16,6%.
Kekuatantarik pada bioplastik yang rendah diduga disebabkan juga karena  ukuran partikel pati dari umbi singkong karet dan kecepatan dari cara pengadukan. Ukuran partikel pati dari umbi singkong karetyang semakin besar, maka bahan sulit tercampur karena penyebaran butirannya tidak merata. Penyebaran yang kurang merata ini dikarenakan kecilnya luas
permukaan butiran pati dari umbi singkong karet, sehingga pada saat proses gelatinisasi pati dari umbi singkong karet tersebut tidak mengalami pembengkakan secara maksimal. Hal inilah yang  menyebabkan bahan menjadi elastis, sehingga menurunkan ketahanan tarik. Hal tersebut sesuai dengan penelitian  Sinaga, (2014), bahwa Semakin besar ukuran partikel pati, maka bahan sulit tercampur karena butirannya tidak menyebar secara merata. Penyebaran yang tidak merata ini disebabkan oleh kecilnya luas permukaan butiran pati,s ehingga saat proses gelatinisasi pati tersebut tidak mengalami pembengkakan secara maksimal. Hal demikian menyebabkan bahan menjadi elastis, sehingga menurunkan ketahanan tarik bahan tersebut.
Dalam penggunaan pati dari umbi singkong karet menambah padatan dalam bioplastik yang menyebabkan bioplastik menjadi kuat tetapi kurang elastis sehingga kekuatan tarik akan menurun. Menurut penelitian Radhiyatullah, dkk. (2015), kekuatan tarik maksimum pada film plastik terjadi pada saat berat pati 10 gram dan volume gliserol 0 ml yaitu 9,397 Mpa. Hal ini dapat diketahui bahwa konsentrasi berat pati dan gliserol yang sedikit akan menghasilkan nilai kuat tarik yang semakin tinggi. Nilai kuat tarik tertinggi bioplastik dari singkong karet dengan penambahan kombinasi Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol sebesar 17200 kN/mm 2 . Menurut Wafiroh, dkk (2010) bahwa parameter plastik komersial memiliki kuat tarik sebesar 0,3266kN/mm 2 (32,66Mpa). Sehingga pada penelitian bioplastik dari pati singkong  karet  dengan penambahan gliserol dan sorbitol memiliki kuat tarik yang baik.

## 2.  Uji Perpanjangan Putus
Hasil uji Kualitas  Bioplastik dari Umbi Singkong Karet dengan Penambahan kombinasi Plasticizer Gliserol dengan Sorbitol dan kitosan diperoleh data hasil uji perpanjangan putus, dapat pula disajikan pada diagram 4.1 berikut.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Gambar 2. Uji Perpanjangan Putus plastik
Rata-rata perpanjangan putus paling tinggi  adalah pada perlakuan G 3 P 1 yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 7 ml dan tambahan bahan Plasticizer sorbitol dengan nilai 24,00N/mm². Sedangkan perlakuan G 1 P 2 , yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 3 ml dan tambahan bahan Plasticizer kitosan memiliki perpanjangan putus paling rendah yaitu 16,21 N/mm². Bila dilihat d ari diagram 4.2 tersebut, faktor yang mempengaruhi nilai perpanjangan putusya itu besarnya  volume gliserol dan penambahan  jenis Plasticizer. Penambahan gliserol yang semakin besar volumenya maka akan menyebabkan perpanjangan putus cenderung  akan meningkat atau lebih kuat. Hal tersebut dikarenakan gliserol berfungsi sebagai pemberi sifat elastisitas pada film plastik sehingga semakin banyak gliserol yang ditambahkan maka akan meningkatkan nilai elongasi pada plastik. Dengan penambahan volume gliserol yang banyak maka akan meningkatkan mobilitas molekuler rantai polimer yang ditunjukan dengans emakin elastis bioplastik sehingga perpanjangan putus cenderung akan meningkat. Hal tersebut sesuai dengan hasil penelitian Selpiana, dkk., (2015) bahwa penggunaan gliserol yang terlalu tinggi jumlahnya akan menaikkan persentase elongasi, tetapi memberi efek negatif terhadap plastik yang dihasilkan yaitu plastik akan mudah sobek karena sifat elastis dari plastik terlalu besar.
Selain gliserol jenis bahan Plasticizer yang digunakan akan mempengaruhi perpanjangan putus juga. Bahan Plasticizer sorbitol lebih baik dari pada bahan Plasticizer kitosan. Hal tersebut dikarenakan sorbitol merupakan plasticizer yang cukup baik untuk mengurangi ikatan hidrogen internal sehingga akanmeningkatkan
jarak intermolekul. Matriks dalam bioplastik menjadi kurang padatdan memungkinkan terjadinya pergerakan rantai polimer ketika film diberi tekanan. Menurut hasil penelitian Dyah(2013), bahwa penambahan plasticizer mampu mengurangi kerapuhan (meningkatkan nilai kuat tarik) dan meningkatkan elastisitas filmkarenaikatan hidrogen antara molekul polimer yang berdekatan sehingga kekuatan tarik menarik inter molekul rantai polimer menjadi bertambah.
Perubahan yang terjadi pada struktur mikro pati ini mendorong masuknya sorbotol kedalam matrik spati. Sorbitol yang sudah masuk kedalam molekul pati selanjutnya menurunkan interaksi antar molekul  pati  (kohesi)  dengan membentuk ikatan  hidrogen antara gugus hidroksil dalam molekul pati dengan molekul sorbitol. Dengan demikian akan menyebabkan peningkatan  fleksibilitas biodegradable film dan meningkatkan nilaipersen pemanjangan (Laohakunjit dan Noomhorm, 2004). Selain itu, sorbitol merupakan senyawa yang bersifat hidrofilik sehingga dapat melunakkan bahan dan mengakibatkan peningkatan persen perpanjangan.
Pada umumnya adanya penambahan plasticizer dalam jumlah lebih besar akan menghasilkan nilai persen pemanjangan suatu film semakin lebih besar ( Widya ningsih, dkk. 2012).Sedangkan rendahnya perpanjangan putus film bioplastik pada perlakuan G 1 P 2 disebabkan jenis plasticizer y ang diguankan berupa kitosan dan jumlah volume gliserol yang sedikit. Hal tersebut sesuai dengan hasil penelitian Purwanti (2010), bahwa penambahan plasticizer menyebabkan nilai kuat tarik plastik kitosan menurun dari 3,94 MPa menjadi 0,2 MPa dan nilai persen elongasi plastik kitosan mengalami peningkatan dari 1,5 % menjadi 16,6 %. Adapun faktor lain yang juga mempengaruhi rendahnya perpanjangan putus pada film bioplastik adalah dalam pengadukan campuran yang kurang homogen mengakibatkan menurunnya perpanjangan putus film bioplastik. Hal tersebut dikarenakan apabila pencampuran larutan kurang sempurna
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut.
Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
maka pati singkong karet akan mengendap yang menyebabkan terjadi penurunan ikatan hidrogen pada   film plastik. Dengan adanya peningkatan fleksibilitas pada film bioplastik maka akan berpengaruh pada kecilnya nilai perpanjangan putus padafilm bioplastik. Sifat mekanik yang memenuhi golongan Moderate Properties untuk nilai perpanjangan putus yaitu 10-20% (Ani, 2010). Dalam penelitian bioplastik dari pati singkong karet dengan penambahan kombinasi plasticizer gliserol dengan sorbitol dan kitosan memiliki nilai perpanjangan putus berkisar antara 16,21%- 24%, sehingga bioplastik dari pati singkong karet telah memenuhi golongan tersebut.

## Simpulan
Nilai terbaik kekuatan tarik bioplastik dari pati singkong karet dengan penambahan kombinasi plasticizer gliserol dengan sorbitol dan kitosan pada perlakuan  G 1 P 1 yaitu pada tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 3 ml dan tambahan bahan Plasticizer sorbitol dengan nilai 17,20N/mm². Nilai terbaik perpanjangan putus bioplastik dari pati singkong karet dengan penambahan kombinasi plasticizer gliserol dengan sorbitol dan kitosan pada perlakuan G 3 P 1 yaitu pada Tepung ubi kayu karet  dengan gliserol 7 ml dan tambahan bahan Plasticizer sorbitoldengan nilai 24,00%.

## Daftar Pustaka
Agoes, A. (2010). Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Salemba Medika.
Arin Widya, A. (2010). Pembuatan Edible Film Dari Semirefine Carrageenan (Kajian Konsentrasi Tepung Src Dan Sorbitol). Tesis. Jawa Timur: UPN.
Asngad, A., Amelia, R., & Aeni, N. (2018). Pemanfaatan Kombinasi Kulit Kacang Dengan Bonggol Pisang Dan Biji Nangka Untuk Pembuatan Plastik Biodegradable Dengan Penambahan Gliserol. Bioeksperimen: Jurnal Penelitian Biologi , 4(1), 11. https://doi.org/10.23917/ bioeksperimen.v4i1.5924.
Coniwanti, P., Laila, L., & Alfira, R. (2014). Pembuatan Film Plastik Biodegredabel Dari Pati Jagung Dengan Penambahan Kitosan Dan Pemplastis Gliserol. Jurnal Teknik Kimia (Vol. 20). Retrieved from http://jtk.unsri.ac.id/index.php/jtk/article/view/188.
Darni, Y., & Utami, H. (2010). Studi Pembuatan Dan Karakteristik Sifat Mekanik Dan Hidrofobisitas Bioplastik Dari Pati Sorgum. Jurnal Rekayasa Kimia & Lingkungan , 7(4), 88– 93. Retrieved from http://jurnal.unsyiah.ac.id/RKL/article/view/79.
Dwi Hartatik, Y., & Nuriyah, L. (2014). Pengaruh Komposisi Kitosan terhadap Sifat Mekanik dan Biodegradable Bioplastik. Jurnal Ilmiah .Jurusan Fisika FMIPA, Universitas Brawijaya. Retrieved from https://www.neliti.com/publications/159022/pengaruh-komposisi-kitosan- terhadap-sifat-mekanik-dan-biodegradable-bioplastik.
Fairus, S., & dkk. (2010). Pengaruh Konsentrasi HCl dan Waktu Hidrolisis Terhadap Perolehan Glukosa yang Dihasilkan dari Pati Biji Nangka. Yogyakarta: Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia“Kejuangan.” .
Gontard, N., Guilbert, S., & CUQ, J. ‐L. (1993). Water and Glycerol as Plasticizers Affect Mechanical and Water Vapor Barrier Properties of an Edible Wheat Gluten Film. Journal of Food Science , 58(1), 206–211. https://doi.org/10.1111/j.1365-2621.1993.tb03246.x. Huda, T. (2007). Karakteristik Fisikokimiawi Film Plastik Biodegradable dari Komposit Pati Singkong-Ubi Jalar. JurnalPenelitian dan Sains “Logika” , 4(1), 3-10.
Laboratorium Makanan dan Ternak FP Universitas Diponegoro . (2013).
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Laohakunjit, N., & Noomhorm, A. (2004). Effect Of Plasticizers On Mechanical And Barrier Properties Of Rice Starch Film. Starch/Staerke , 56(8), 348–356. https://doi.org/10.1002/ star.200300249.
Lehninger, A. L. (1982). Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: Warta Medika.
Mali, S., Grossmann, M. V. E., García, M. A., Martino, M. N., & Zaritzky, N. E. (2005). Mechanical And Thermal Properties Of Yam Starch Films. Food Hydrocolloids , 19(1), 157–164. https:// doi.org/10.1016/j.foodhyd.2004.05.002.
McHugh, T. H., & Krochta, J. M. (1994). Sorbitol-vs Glycerol-Plasticized Whey Protein Edible Films: Integrated Oxygen Permeability and Tensile Property Evaluation. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 42(4), 841–845. https://doi.org/10.1021/jf00040a001.
Pudjiastuti, W., & dkk. (2010). Polimer Nano Komposit sebagai Master Batch Polimer Biodegradable untuk Kemasan Makanan. Jurnal  Riset Industri , 6(1), 51–60. Retrieved from http://ejournal. kemenperin.go.id/jri/article/view/3294.
Purwanti, A. (2010). Analisis Kuat Tarik Dan Elongasi Plastik Kitosan Terplastisasi Sorbitol. Jurnal Teknologi . Yogyakarta, 3(2), 99–106.. https://doi.org/https://ejournal.akprind.ac.id/index. php/jurtek/article/view/853.
Radhiyatullah, A., Indriani, N., Hendra, M., & Ginting, S. (2015). Pengaruh Berat Pati Dan Volume Plasticizer Gliserol Terhadap Karakteristik Film Bioplastik Pati Kentang. Jurnal Teknik Kimia USU , 4(3), 35–39. Retrieved from http://repository.usu.ac.id/handle/123456789/70016#. Rasyidi Fachry, A., Sartika, A., Raya Palembang Prabumulih Km, J., & Ogan Ilir, I. (2012). Pemanfaatan Limbah Kulit Udang Dan Limbah Kulit Ari Singkong Sebagai Bahan Baku Pembuatan Plastik Biodegradable. Jurnal Teknik Kimia ,18(3), 1–9.
Sanjaya, I. G., & Puspita, T. (2011). Pengaruh Penambahan Khitosan Danplasticizer Gliserol Pada Karakteristikplastik Biodegradable Dari Pati Limbahkulit Singkong. Undergraduete Theses,Chemical Engineering ,RSK 664.419 2 IGe p,2011. Retrieved from http://digilib.its. ac.id/ITS-Undergraduate-3100011044493/17047#.
Saputra, A., & dkk. (2015). Studi Pembuatan dan Karakteristik Sifat Mekanik Plastik Biodegradable Berbahan Dasar Ubi Suweg (Amorphophallus campanulatus). Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis Dan Biosistem , 3(1), 1–6. Retrieved from https://jkptb.ub.ac.id/index.php/jkptb/article/ view/240.
Selpiana dkk. (2015). Pembuatan Plastik Biodegrdable Dari Tepung Nasi Aking. Inderalaya: Teknik Kimia Fakultas Teknik Universitas Sriwijaya. Retrieved from http://eprints.unsri.ac.id/6042/#.
Sinaga, R. F., Ginting, G. M., Ginting, M. H. S., & Hasibuan, R. (2014). Pengaruh Penambahan Gliserol Terhadap Sifat Kekuatan Tarik dan Pemanjangan Saat Putus Bioplastik dari Pati Umbi Talas. Jurnal Teknik Kimia USU , 3(2). Retrieved from http://repository.usu.ac.id/ handle/123456789/70014.
Siswono. (2008). Jaringan Informasi Pangan dan Gizi, Volume XIV. Jakarta: Ditjen Bina Gizi Masyarakat.
Supriadi, A. (2016). Inaplas Soroti Manajemen Sampah dan Pengelolaan Dana Plastik. Retrieved from https://www.cnnindonesia.com/ekonomi/20160222123332-92-112525/inaplas-soroti- manajemen-sampah-dan-pengelolaan-dana-plastik.
Susilawati, & dkk. (2011). Biodegradable Plastics from a Mixture of Low Density Polyethylene (LDPE) and Cassava Starch with the Addition of Acrylic Acid. Jurnal Natural (Vol. 11). Retrieved from http://www.jurnal.unsyiah.ac.id/natural/article/view/578#.
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Tripathi, S., Mehrotra, G. K., & Dutta, P. K. (2009). Physicochemical and bioactivity of cross- linked chitosan-PVA film for food packaging applications. International Journal of Biological Macromolecules , 45(4), 372–376. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2009.07.006.
Winarno, F. (2002). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT. Gramedia Utama. Zhong, Q. P., & Xia, W. S. (2008). Physicochemical Properties of Edible and Preservative Films from Chitosan/Cassava Starch/Gelatin Blend Plasticized with Glycerol. Food Technology and Biotechnology , 46(3), 262–269. Retrieved from https://hrcak.srce.hr/26375.