Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 585 – 590

## Pertumbuhan In Vitro Tiga Varietas Krisan Pada Variasi Media Murashige & Skoog (Ms)

## In vitro Growth of Three Chrysanthemum Varieties on Murashige & Skoog (Ms) Media Variations
Tamariska Julita Kaurow (1)(*) , Jeany Mandang (2) , Rinny Mamarimbing (2)
1) Mahasiswa Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado 2) Dosen Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
*Penulis untuk korespondensi: ikamarinka673@gmail.com
Naskah diterima melalui e-mail jurnal ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id
: Selasa, 06 Desember 2022
Disetujui diterbitkan : Sabtu, 28 Januari 2023

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  growth  of  three  Chrysanthemum  varieties  on  complete  MS  media,  50% MS  and  50%  MS  which  were  given  coconut  water  through  In  vitro  culture.  This  research  was  conducted  from March to May 2022 at the Tissue Culture Laboratory, Faculty of Agriculture, Sam Ratulangi University, Manado. This study used a factorial design in a completely randomized design (CRD) with 2 treatment factors, namely media and varieties consisting of 9 treatments and 4 replications so that a total of 36 bottles, namely MS 100%, MS ½ (MS 50%), MS ½ AK (MS 50% + coconut water 200 ml/l). The variables observed were: plant height, number of leaves, fresh weight, and number of roots. The results of the study showed that the average growth of the 3 Chrysanthemum varieties was better on ½ MS and ½ MS media supplemented with coconut water. The best wet weight on ½ MS+AK media corresponds to the highest number of roots in the same treatment.
Keywords : growth; chrysanthemum; coconut water; murashige and skoog

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pertumbuhan tiga varietas Krisan pada media MS lengkap, MS 50% dan MS 50% yang diberi air kelapa lewat kultur in vitro . Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei sampai dengan Juli 2022 di Laboratorium Kultur Jaringan Fakultas Pertanian Universitas Sam Ratulangi Manado. Penelitian ini  menggunakan  rancangan  Faktorial  dalam  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  2  faktor  perlakuan  yaitu media  dan  varietas  yang  terdiri  dari  9  perlakuan  dan  4  ulangan  sehingga  seluruhnya  berjumlah  36  botol  yaitu MS100%,  MS  ½  (MS  50  %),  MS  ½  AK  (MS  50%  +  Air  kelapa  200  ml/l).  Variabel  yang  diamati  ialah  tinggi tanaman, jumlah daun, berat basah, dan jumlah akar. Hasil penelitian menunjukkan bahwa rata-rata pertumbuhan 3 varietas Krisan lebih bagus pada media ½ MS dan ½ MS yang diberi air kelapa. Berat basah terbaik pada media ½ MS+AK sesuai dengan jumlah akar yang tertinggi pada perlakuan yang sama.
Kata kunci : pertumbuhan; krisan; air kelapa; murashige and skoog
Pertumbuhan In Vitro Tiga Varietas Krisan………………………..…....…....(Tamariska Kaurow, Jeany Mandang, Rinny Mamarimbing)
PENDAHULUAN Latar Belakang Tanaman Krisan ( Chrysanthemum morifolium. Ramat ) adalah salah satu jenis bunga potong  yang  banyak  diusahakan  oleh  para  petani bunga.  Permintaan  bunga  Krisan  pada  saat  ini berada  di  urutan  teratas  dibandingkan  dengan jenis  bunga  potong  lainnya  dikarenakan  bentuk dan  warna  dari  bunga  ini  sangatlah  menarik  dan beranekaragam,  itulah  sebabnya  tanaman  hias  ini sangat diminati oleh banyak konsumen.
Data  BPS  tahun  2020  di  Indonesia permintaan  Krisan  dari  tahun  ke  tahun  semakin meningkat.  Produksi  bunga  potong  Krisan  pada tahun  2010  sebanyak  185.232.970,00  potong  dan meningkat pada tahun 2020 menjadi 383.466.100,00  potong.  Oleh  karena  itu,  Krisan mempunyai prospek yang baik untuk dibudidayakan. Pada umumnya petani
bunga memperbanyak  bunga  dengan  cara  konvensional yaitu  dengan  cara  diperbanyak  menggunakan  biji atau  stek,  dengan  menggunakan  kedua  cara tersebut  tentunya  memerlukan  waktu  yang  relatif lama.  Perbanyakan  secara  modern  dilakukan dengan  cara  kultur  jaringan  untuk  menghasilkan kebutuhan  penyediaan  bibit  dalam  jumlah  yang besar, dan serentak selain itu dengan menggunakan metode ini juga dapat mempertahankan sifat  induk yang unggul (Rahardja, 2003).
Faktor-faktor  penentu  keberhasilan  kultur jaringan  tanaman  diantaranya  yaitu  genotipe (varietas) dan media yang akan digunakan. Media Murashige  and  Skoog (MS)  dicirikan  dengan kandungan  garam-garam  anorganik  yang  tinggi. Media  MS  merupakan  media  yang  sangat  luas pemakaiannya  2  karena  mengandung  unsur  hara makro  dan  mikro  yang  lengkap  sehingga  dapat digunakan  untuk  berbagai  spesies  tanaman (Mardin,  2002).  Media  MS  sering  digunakan karena cukup memenuhi unsur hara makro, mikro dan vitamin untuk pertumbuhan tanaman (Marlina, 2004). Namun salah satu masalah dalam menggunakan  media  MS  yaitu  biayanya  yang relatif mahal ±Rp20.000/liter.
Itulah  sebabnya  penambahan  air  kelapa kedalam media kultur diharapkan dapat menggantikan sebagian media MS sehingga biaya untuk perbanyakan tanaman secara kultur jaringan
akan  lebih  ekonomis.  Kandungan  unsur-unsur hara  dalam  air  kelapa  dapat  meningkatkan kandungan  hara  dalam  media  untuk  mendukung pertumbuhan eksplan. Wetherell (1982), menyatakan bahwa untuk tujuan tertentu komposisi media dapat dimodifikasi.
Air  kelapa  merupakan  senyawa  organik yang mengandung 1,3 diphenilurea, zeatin, zeatin gluoksida, zeatin ribosida, kadar K dan Cl tinggi, sukrosa,  fruktosa,  glukosa,  protein,  karbohidrat, mineral, vitamin, sedikit lemak, Ca dan P (Yunita, 2011).  Penggunaan  air  kelapa  dalam  kultur jaringan  sudah  terbukti  untuk  meningkatkan pertumbuhan tanaman. Menurut Mandang (1993), bahwa  komponen  penyusun  air  kelapa  hampir sama  dengan  komponen  media  MS.  Oleh  sebab itu  air  kelapa  dapat  mendorong  pertumbuhan tanaman.  Berdasarkan  uraian  tersebut,  maka dilakukan  percobaan  mengenai  pertumbuhan in vitro tiga varietas krisan pada variasi media MS.

## Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui  pertumbuhan  tiga  varietas  Krisan pada  media  MS  lengkap,  MS  50%  dan  MS  50% yang diberi air kelapa.

## Manfaat penelitian
Manfaat  penelitian  ini  diharapkan  dapat menambah pengetahuan dalam kultur pertumbuhan In  vitro tiga  varietas  krisan  pada variasi  media  MS  dan  dapat  membantu  pelaku kultur jaringan dalam menghemat biaya.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Mei sampai dengan Juli 2022, di Laboratorium Kultur Jaringan Bioteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian yakni botol  kultur,  gelas  ukur,  pipet  tetes,  spatula, cawan  petri,  gelas  kimia,  Erlenmeyer,  timbangan analitik, pH meter, hot plate and stirrer, autoclave, laminar  air  flow,  pinset,  scalpel,  mata  pisau, lampu  Bunsen,  batang  pengaduk,  panci,  kompor dan rak kultur.
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 585 – 590
Bahan  yang  digunakan  yaitu  tanaman Krisan  varietas  Suryandari,  Jayanti  dan  Ririh selanjutnya  yang  digunakan  ialah  Media  MS (Murashige  &  Skoog),  Air  kelapa,  Agar-agar, Gula,  NaOH,  Alkohol  70%,  Alkohol  95%, Spritus,  Tissue,  Karet  gelang,  Aluminium foil/Plastik, aquades.

## Metode Pengambilan Sampel
Penelitian ini dilaksanakan dengan menggunakan rancangan Faktorial dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 2 faktor perlakuan yaitu media dan varietas:
1. Faktor I: Media MS 100: Media Murashige And Skoog MS1/2: Media Murashige And Skoog 50% 13 MS 1/2AK: Media Murashige And Skoog 50% + Air kelapa 20%
2. Faktor II: Varietas Krisan S: Varietas. Suryandari
J: Varietas. Jayanti
R: Varietas. Ririh
3. Jadi kombinasi perlakuan:
a. MS 100% Suryandari: Media yang digunakan ialah MS jadi 100%
b. MS1 /2: Media MS 50% (Var. Suryandari)
c. MS1  /2AK:  Media  MS  50%  +  Air  kelapa 20% (Var. Suryandari)
d. MS  100%  Jayanti:  Media  yang  digunakan ialah MS jadi 100%
e. MS1 /2: Media MS 50% (Var. Jayanti)
f. MS1  /2AK:  Media  MS  50%  +  Air  kelapa 20% (Var. Jayanti)
g. MS  100%  Ririh:  Media  yang  digunakan ialah MS jadi 100%
h. MS1 /2: Media MS 50% (Var. Ririh)
i. MS1  /2AK:  Media  MS  50%  +  Air  kelapa 20% (Var. Ririh)
Dengan jumlah ulangan disetiap perlakuan ada 4 jadi jumlah unit percobaan yaitu 36 unit botol.

## Prosedur kerja
1. Persiapan Sampel Penelitian
Eksplan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  eksplan  Krisan  ( Chrysanthemum morifolium,  Ram .)  yang  diambil  dari  stek  yang diperoleh  dari  laboratorium Show  window Tomohon.  Eksplan  yang  digunakan  untuk perlakuan  adalah  eksplan  stek  berbuku  dua  yang memiliki jumlah 2 daun.
2. Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  kultur jaringan,  seperti  cawan  petri,  gagang  scalpel, pinset,  atau  gunting,  botol  kultur  kosong,  botol berisi  akuades,  botol  berisi  kapas,  atau  lipatan kertas  tisu  kering,  sebelum  digunakan  harus disterilkan terlebih dahulu. Sterilisasi alat maupun bahan  untuk  penanaman  ini  umumnya  dilakukan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121 ℃ dan tekanan  1.2  kg/cm  selama  20-30  menit.  Autoklaf diatur  untuk  suhu  dan  tekanan  tersebut  sebelum waktu  sterilisasi  dimulai.  Sebelum  disterilkan dengan  autoklaf  semua  alat  dibungkus  dulu dengan  aluminium  foil  atau  kertas.  Botol-botol kosong,  botol  berisi  akuades,  kapas,  dan  kertas tissue  harus  ditutup  dengan  plastic  diikat  karet atau aluminium foil sebelum disterilkan.
3. Pembuatan  Media  MS  ( Murashige  and
Skoog) Tabel 1. Komposisi pembuatan media MS Perlakuan MS (g)/L AK (%) Gula (g) Agar (g) MS ½ 2,22 g 0 30 g 8 g MS100% 4,44 g 0 30 g 8 g MS1/2+AK 2,22 g 20% 30 g 8 g
Pembuatan media MS:
a. Timbang MS jadi 4,44 (g), gula 30 (g), agar 8 (g), setelah itu masukan kedalam gelas ukur.
b. Tambahkan  Aquades  300 ml,  gula,  dan  media MS  jadi  kedalam  gelas  ukur,  kemudian gunakan hot  plate  &  magnetic  stirrer untuk melarutkan semua bahan.
c. Mengukur  pH  hingga  mencapai  5,8,  jika  pH rendah  dan  belum  mencapai  pH  optimal tambahkan  NaoH  dan jika pH  kelebihan  ingin menurunkan pH tambahkan larutan HCL.
d. Setelah  semua  bahan  terlarut  tambahkan aquades hingga genap 1000 ml.
e. Tambahkan  agar  8  (g),  lalu  masak  sambil diaduk sampai mendidih.
f. Tuangkan  ke  botol  kultur  sebanyak  25 ml/botol.
g. Botol  ditutup  dengan  plastik  dan  diikat menggunakan karet.
h. Media  dimasukan  ke  autoklaf  dan  disterilkan selama  20  menit  dengan  suhu  121 ͦ  C  dan tekanan 17,5 psi.
i. Media  yang  telah  disteril  disimpan  pada  rak kultur selama 1 minggu.
4. Penanaman Eksplan Penanaman  eksplan  dilakukan  di  LAFC
( Laminar Air Flow Cabinet ) harus dalam keadaan
Pertumbuhan In Vitro Tiga Varietas Krisan………………………..…....…....(Tamariska Kaurow, Jeany Mandang, Rinny Mamarimbing)
steril,  LAFC  disterilisasi  dengan  sinar  UV. Eksplan  dalam  keadaan  steril  dipindahkan  dalam LAFC.  Setelah  itu  eksplan  ditanam  dalam  botol dengan volume media 25 ml, botol kultur ditutup dengan  plastik  yang  diikat  dengan  karet.  Setelah itu botol eksplan diinkubasi di dalam ruangan. 5. Pemeliharaan Kultur
Eksplan  yang  telah  ditanam  di  dalam  botol kultur  yang  telah  diberikan  label  kemudian diletakkan  pada  rak  kultur.  Botol-botol  yang berisi  eksplan  disusun  dengan  rapi  sehingga memudahkan dalam pengamatan. Untuk
mengurangi tingkat kontaminasi, dilakukan penyemprotan  disekitar  botol  kultur  dengan menggunakan  alkohol  70%  hingga  eksplan tumbuh,  setelah  eksplan  tumbuh  penyemprotan alkohol 70% hanya dilakukan seminggu 3 kali.

## Variabel Pengamatan
1. Tinggi  tanaman  (cm)  dengan  pengukuran  dari pangkal  batang  sampai  ujung  daun  terpanjang dengan  menggunakan  penggaris,  diukur  di pengamatan akhir.
2. Jumlah daun dapat diketahui dengan menghitung  semua  daun  yang  muncul  pada tanaman 17.
3. Berat  basah  tanaman  (g)  dapat  diketahui dengan cara menimbang pada akhir penelitian.
4. Jumlah  akar  menghitung  jumlah  akar  dari tanaman diakhir pengamatan.
Analisis Data Data
semua variabel dianalisis menggunakan  analisis  sidik  ragam  (ANOVA: Analysis  of  variance )  dan  jika  terdapat  pengaruh perlakuan dilanjutkan dengan uji lanjut beda nyata terkecil (BNT) dengan nilai 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Tinggi Tanaman
Tabel  2.  Rerata  Tinggi  Tanaman  Krisan  umur  12  Minggu Setelah Tanam (MST) Varietas Tinggi Tanaman (cm) Rata- rata Media MS ½ MS ½ MS AK Suryandari 8,17 12 12 10,72 b Jayanti 7,75 9 7,83 8,19 a Ririh 6,73 7,75 7,42 7,3 b Rata-rata 7,55 a 9,58 b 9,08 b
BNT 5% = 1,33 Keterangan: Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Sesuai  hasil  uji  BNT  taraf  5%  Tabel  2 menunjukkan  bahwa  pemberian  ½  MS  dan penambahan  air  kelapa  memiliki  tinggi  yang nyata  terhadap  tinggi  planlet  pada  12  minggu setelah tanam. Dibanding pada media MS lengkap rataan tertinggi terdapat pada varietas Suryandari, yaitu  dengan  rata-rata  10,72  (cm)  nyata  lebih tinggi  dari  varietas  Jayanti  dan  Ririh.  Komposisi media  yang  paling  baik  untuk  tinggi  tanaman ialah  ½  MS yaitu  dengan rata-rata  9,58  (cm)  dan ½  MS  dengan  penambahan  air  kelapa  20%  yaitu dengan rata-rata 9,08 (cm).

## Jumlah Daun
Tabel 3. Rerata Jumlah Daun Tanaman Krisan umur 12 Minggu
Setelah Tanam (MST) Varietas Tinggi Tanaman (cm) Rata- rata Media MS ½ MS ½ MS AK Suryandari 14,5 17,5 14,66 15,55 a Jayanti 26,25 27,25 35,66 29,72 b Ririh 14,5 15,25 24,25 18,00 a Rata-rata 18,41 a 20,00 a 24,85 b
BNT 5% = 3,63
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Sesuai hasil uji BNT taraf 5% pada Tabel 3 menunjukkan  pembentukan  daun  paling  banyak diperoleh  pada  Krisan  varietas  Jayanti,  yaitu dengan rata-rata  29,72  helai  daun  per  planlet  dan media yang paling baik untuk pembentukan daun pada  varietas  ialah  ½  MS  yang  ditambahkan  air kelapa 20% sehingga dapat 20 disimpulkan bahwa penambahan  air  kelapa  pada  media  ½  MS  sangat berpengaruh nyata terhadap pembentukan daun.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan selama  12 minggu setelah tanam  penambahan air kelapa  20%  pada  media  MS,  mengakibatkan pertumbuhan jumlah daun yang signifikan, hal ini disebabkan  penambahan  air  kelapa  berperan penting dalam proses pembentukkan dan pertumbuhan  daun  karena  di  dalam  air  kelapa terdapat hormon sitokinin yang mampu merangsang  pembentukkan  daun  dengan  baik (Nana dan Salamah, 2014).

## Jumlah Akar
Tabel 4. Rerata Jumlah Akar Tanaman Krisan umur 12 Minggu Setelah Tanam (MST)
Varietas
Jumlah akar/Planet
Rata- rata Media MS ½ MS ½ MS AK Suryandari 5,75 5,75 13 8,16 a Jayanti 14 14 17,66 15,22 b
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 585 – 590
Ririh 4,75 6,75 9,75 7,08 a Rata-rata 8,16 a 8,83 a 13,47 b
BNT 5% = 3,03 Keterangan:  Angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Sesuai hasil uji BNT 5% rerata jumlah akar yang  paling  berpengaruh  nyata  pada  Tabel  3 terdapat  pada  varietas  Jayanti  yaitu  dengan  rata- rata  15,25.  Dari  Tabel  3  pada  Perlakuan  ½  MS dan  penambahan  air  kelapa  200  ml/l  di  ketiga varietas menunjukkan jumlah akar terbanyak.

## Berat Basah
Tabel 5. Rerata Berat Basah Tanaman Krisan umur 12 Minggu
Setelah Tanam (MST) Varietas Berat basah tanaman (g)
Rata- rata Media MS ½ MS ½ MS AK Suryandari 1,15 1,49 1,70 1,44 Jayanti 1,28 1,31 1,84 1,47 Ririh 0,83 1,23 1,44 1,16 Rata-rata 1,08 a 1,34 ab 1,66 b BNT 5% = 0,33 Keterangan:  Angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Sesuai  hasil  uji  BNT  taraf  5%  analisis ragam  menunjukkan  bahwa  rata-rata  berat  basah tanaman  Krisan  varietas  Suryandari,  Jayanti  dan Ririh dengan modifikasi media MS, menunjukkan bahwa  rerata  berat  basah  yang  paling  tinggi terdapat pada perlakuan ½ MS dengan penambahan air kelapa 20%, hal ini sesuai dengan jumlah  akar  dan  jumlah  daun  yang  banyak  pada media MS ½ dengan penambahan air kelapa 20%. Hal  ini  juga  berhubungan  dengan  jumlah  akar karena  sesuai  dengan  data  yang  ada  bahwa semakin  banyak  jumlah  akar  yang  ada  maka begitupun  dengan  24  jumlah  daun  yang  ada.  Hal ini  dikarenakan  semakin  banyak  akar  yang  ada pada  tanaman  maka  semakin  besar  juga penyerapan nutrisi tanaman.
Hasil penelitian Mandang (1998), menemukan  bahwa  penambahan  air  kelapa  30% pada  kultur  pisang  nyata  meningkatkan  berat tunas.  Air  kelapa  mendorong  pertumbuhan tanaman pada kultur jaringan karena mengandung komponen  yang  sama  dengan  media  MS,  air kelapa  juga  mengandung  asam-asam  amino  dan asam asam organik.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Rata-rata  pertumbuhan  3  varietas  Krisan lebih  baik  pada  ½  MS  yang  diberi  air  kelapa. Berat  basah  terbaik  pada  media  ½  MS+AK  20% sesuai  dengan  jumlah  akar  yang  tertinggi  pada perlakuan yang sama.

## Saran
Peneliti  yang  akan  melakukan  penelitian berikutnya  agar  perlunya  untuk  mengetahui dalam  pemakaian  jenis  dan  konsentrasi  air kelapa  sehingga  sesuai  dengan  apa  yang  akan dicapai  dan  pembuatan  media  harus  dalam keadaan  yang  bersih  dan  aseptik,  agar  supaya terhindar dari kontaminasi jamur dan bakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Mandang,  J.P.  1993.  Peranan  Air  Kelapa  dalam
Kultur Jaringan Tanaman Krisan (Chrysanthemum morifolium Ramat).
Disertasi  Program  Pascasarjana .  Institut Pertanian Bogor. Bogor. 113 hlm.
____________.  1998.  Penggunaan  Air  Kelapa Dan  Bahan  Pengganti  Agar  Murni  Pada Kultur  Invitro  Anggrek  Dendrobium  Sp. Media  Publikasi  Ilmiah  Eugenia ,  Volume  4
Nomor 1. Tahun IV, Januari 1998. P. 6-12.
Mardin, S. 2002. Media Tumbuh Kultur Jaringan Tanaman.  Makalah  pada  Pelatihan  Kultur Jaringan  Tanaman  PS  Agronomi  Unsoed: Purwokerto.
Marlina,  N.  2004.  Teknik  modifikasi  media Murashige dan Skoog (MS) untuk konservasi In  vitro mawar  (Rossa  sp.).  Buletin  Teknik Pertanian. Vol: 9(1):4- 7.
Nana,  S.A.,  dan  Z.  Salamah.  2014.  Pertumbuhan Tanaman  Bawang  Merah  (Allium  cepa  L.) dengan  Penyiraman  Air  Kelapa  (Cocos nucifera  L.)  Sebagai  Sumber  Belajar  Biologi SMA Kelas XII. JUPEMASI-PBIO , 1(1): 82 – 86.
Pertumbuhan In Vitro Tiga Varietas Krisan………………………..…....…....(Tamariska Kaurow, Jeany Mandang, Rinny Mamarimbing)
Rahardja, P.C. 2003. Aneka Cara Memperbanyak Tanaman . Agromedia Pustaka. Jakarta.
Wetherell,  D.F.  1982.  Pengantar  Propagasi Tanaman  Secara In  vitro .  Semarang:  IKIP Semarang Press.
Yunita, R. 2011. Pengaruh Pemberian Urine Sapi, Air  Kelapa,  dan  Rootone-  F  Terhadap
Pertumbuhan Setek Tanaman Markisa
(Passiflora  edulis  var.  flavicarpa).  Fakultas Pertanian Universitas Andalas: Padang.