Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra
# Korespondensi:  Program  Studi  Akuakultur  Fakultas Perikanan,Universitas  Dharmawangsa.  Jl.  Kol.  Yos  Sudarso No.224,  Glugur  Kota,  Kec.  Medan  Bar.,  Kota  Medan,  Sumatera Utara  20115,  Indonesia Tel.  +  62  61  6613783 E-mail:  esyafitri@dharmawangsa.ac.id
KANDUNGAN  FITOKIMIA  DAN  UJI  AKTIVITAS  ANTIBAKTERIA  EKSTRAK  DAUN MANGROVE (Sonneratia alba) SECARA INVITRO TERHADAP Aeromonas hydrophila
Emmy Syafitri *)# ,  Dwi Tika  Afriani *) , Budiman  Siregar *) ,  dan Yuda  Gustiawan **)
*) Program Studi Akuakultur Fakultas Perikanan,Universitas Dharmawangsa Jl. Kol. Yos Sudarso No.224, Glugur Kota, Kec. Medan Bar., Kota Medan, Sumatera Utara 20115
**) Teknisi Laboratorium Perikanan Universitas Dharmawangsa
(Naskah diterima: 24 Maret 2020; Revisi final: 4 Desember 2020; Disetujui publikasi: 4 Desember 2020)

## ABSTRAK
Pengendalian  penyakit  infeksi  Aeromonas  hydrophila  pada  ikan  budidaya  air  tawar  belum  sepenuhnya tertangani  dengan  baik.  Upaya  alternatif  untuk  mencegah  penyakit  infeksi A.  hydrophila,  maka  dicoba menggunakan bahan alami berupa daun Sonneratia alba yang merupakan tumbuhan mangrove. Tumbuhan tersebut disinyalir mampu mengendalikan keberlangsungan hidup mikroba patogen dari kelompok gram negatif maupun gram positif. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui komponen aktif dan menguji daya hambat daun S. alba terhadap pertumbuhan A. hydrophila. Penapisan senyawa kimia diuji dengan metode kualitatif dan uji antibakteri ditentukan dengan metode difusi cakram. Hasil analisa penapisan fitokimia kualitatif menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun S. alba mengandung tanin, steroid, alkaloid, flavonoid, dan  saponin.  Aktivitas  antibakteri  dilakukan  terhadap  diameter  zona bening  yang  terbentuk  di  sekitar paper disk. Penelitian ini menghasilkan bahwa ekstrak daun S. alba memiliki potensi dalam mengendalikan pertumbuhan  A.  hydrophila  dengan  zona  bening  terbesar  yaitu  15,67  mm  pada  perlakuan  dosis 10.000  mg/L.
KATA KUNCI: fitokimia;  antibakteri;  daun  Sonneratia  alba;  Aeromonas  hydrophila
ABSTRACT: Phytochemical  content  screening  and  antibacterial  activity  test  of  mangrove  leaf  extract (Sonneratia alba) by in vitro against Aeromonas hydrophila. By: Emmy Syafitri, Dwi Tika Afriani, Budiman Siregar, and Yuda Gustiawan
Aeromonas hydrophila infections in freshwater aquaculture have not been fully controlled. Several  prevention alternatives are available and could be used to control A. hydrophila infection, one of which is using the natural ingredients in the leaves of Sonneratia alba, a tropical mangrove plant. The chemical compounds in the plant’s leaves were suspected to be capable of inhibiting the growth of pathogenic bacteria both gram negative and gram positive. The purpose of this study was to determine these chemcial compounds and test their inhibitory capabilities on the growth of A. hydrophila. Screening of chemical compounds was done using qualitative methods, and bacterial inhibitory test was determined by the disk diffusion method. Results of the qualitative phytochemical screening showed that ethanol extract of S. alba leaves contained tannins, steroids, alkaloids, flavonoids, and saponins. Antibacterial activity was carried out by measuring the inhibition zone diameter. The results showed that S. alba leaf extract had the potential to inhibit the growth of A. hydrophila where the largest inhibitory zone was 15.67 mm at a concentration of 10,000 mg/L
KEYWORDS: phytochemicals; antibacterial; Sonneratia alba leaves; Aeromonas hydrophila

## PENDAHULUAN
Penyakit Motile Aeromonas Septicaemia (MAS) adalah penyakit yang menyerang semua jenis ikan air tawar yang disebabkan bakteri Aeromonas hydrophila. Pada kondisi  lingkungan  tidak  memadai,  bakteri  bisa mengakibatkan taraf kematian yang tinggi (80-100%) pada waktu yang singkat (1-2 minggu) (Christy et al., 2019).  Dinas  Peternakan  dan  Perikanan  Daerah Banyumas  melaporkan  setidaknya  terdapat  sekitar 82.000  ekor  gurami  dan  33  ekor  lele  dumbo  yang terinfeksi A. hydrophyla dari tahun 2003 hingga 2005 (Kusdarwati, 2019).
Pengendalian penyakit pada ikan budidaya belum bisa  diatasi  dengan  baik  hingga  waktu  sekarang. Berbagai macam usaha telah dilakukan untuk menekan tingkat kematian ikan. Upaya pemberantasan penyakit dengan menggunakan bahan kimia dan antibiotik yang selama  ini  dilakukan belum  memperoleh  hasil  yang memadai dan tidak dianjurkan, tidak ramah lingkungan dan membahayakan kesehatan manusia. Oleh karena itu,  perlu  dicoba  untuk  mencegah  infeksi  penyakit pada ikan dengan memberikan bahan alami tertentu, sehingga  dengan  kondisi  lingkungan  yang  kurang mendukung  seperti  adanya  patogen,  ikan  masih mampu  bertahan  hidup.  Menurut  Boopathy  & Kathiresan  (2011), tumbuhan  yang  berasal dari  laut merupakan sumber farmasetikal yang menarik untuk dijadikan  sebagai  sumber  bahan  obat,  yang  tidak dijumpai pada tumbuhan teresterial.
Penelitian  tumbuhan  mangrove  dan  asosiasinya sebagai zat antibakteri dalam mencegah penyakit yang menyerang usaha perikanan mulai dilakukan meskipun masih terbatas pada skala laboratorium (Putri et al., 2016; Mastuti et al., 2018; Mulyani et al., 2013; Syafitri et al., 2017). Penelitian terdahulu menemukan bahwa daun S. alba memiliki bahan  antibakteri yang  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  pathogen  baik gram negatif maupun gram positif dengan daya hambat tertinggi dibandingkan jenis mangrove lainnya (Saad et al., 2012). Selain sebagai antibakteri, tanaman man- grove  juga  berperan  sebagai  bahan  imunostimulan pada ikan (Pandey & Sharma, 2012).
Namun penelitian terhadap daun mangrove (S. alba) dalam  menghambat  laju  pertumbuhan  bakteri  A. hydrophila  belum  pernah  dilakukan.  Saptiani  et  al. (2013) menjelaskan kandungan senyawa antibakteri lebih banyak terdapat pada bagian daunnya akibat dari proses fotosintesis. Berdasarkan penjelasan di atas, perlu  dilakukan  suatu  kajian  farmakologi  terhadap tumbuhan  mangrove  khususnya  daun  S.  alba  yang meliputi  pengujian  aktivitas  antibakteri  terhadap pertumbuhan  bakteri  A.  hydrophila  secara  in  vitro.
Hasil penelitian diharapkan menjadi langkah awal dalam upaya pencegahan penyakit MAS pada ikan budidaya. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui golongan kimia dan menguji kemampuan hambatan daun S. alba terhadap pertumbuhan A. hydrophila.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan bulan Agustus sampai Desember  2019.  Proses  preparasi  dan  ekstraksi sampel  serta  uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  di Laboratorium Perikanan Universitas Dharmawangsa, Medan.  Uji  fitokimia  dilakukan  di  Laboratorium Fitokimia Universitas Tjut Nyak Dhien, Medan.

## Pengambilan  dan  Pengeringan  Daun Mangrove
Daun mangrove S. alba dikoleksi dari wilayah hutan mangrove  Sicanang  Kecamatan  Medan  Belawan, Sumatera Utara. Pengambilan sampel daun dilakukan untuk  daun  tua  saja.  Daun  dikumpulkan  dan dimasukkan ke  dalam kantung  plastik serta  dibawa menuju laboratorium preparasi lebih lanjut. Daun S. alba selanjutnya  dicuci,  ditiriskan,  dipotong-potong kecil, dan dilakukan pengeringan dengan menggunakan oven pada suhu 45 o C selama ± 8 jam.
Daun  S.  alba  yang  sudah  kering,  selanjutnya dihaluskan menggunakan blender dan disaring hingga mencapai ukuran sekitar 1 mm dan disebut simplisia. Simplisia daun mangrove ini disimpan dalam kantong plastik klip untuk proses uji lebih lanjut.

## Ekstraksi  Etanol  dan  Pengkisatan
Ekstraksi  maserasi  menggunakan  pelarut  yang bersifat polaryaituetanol 96%. Sebanyak 50 g simplisia dilarutkan dalam 250 mL pelarut etanol (perbandingan antara daun dan pelarut adalah 1:5), lalu dimaserasi selama tiga hari dan setiap hari dilakukan penyaringan, jika  rendaman  sudah  nampak  jernih  maka  proses maserasi  dihentikan.  Hal  ini  dimaksudkan  untuk memaksimalkan  proses  ekstraksi  senyawa  kimia tanaman oleh  etanol (Saptiani et  al., 2018).  Ekstrak etanol yang dihasilkan disaring dengan menggunakan kertas saring whatman dan dikisatkan dengan vacum rotary  evaporator  pada  suhu  40 o C.  Ekstrak  yang diperoleh kemudian ditimbang beratnya.

## Pengujian  Kualitatif  Komponen  Aktif  Ekstrak Daun  Mangrove
Skrining fitokimia adalah tahap pendahuluan dalam menyampaikan gambaran perihal golongan senyawa kimia  yang  terkandung  dalam  tanaman  secara kualitatif. Tahap ini dilakukan uji kandungan senyawa bioaktif pada daun S. alba melalui uji fitokimia yang
dirujuk  dan  dimodifikasi  berdasarkan  (Harborne, 1987). Uji ini terdiri atas uji alkaloid, uji steroid, uji flavonoid, uji saponin, dan uji tanin.
Alkaloid; Pada uji alkaloid digunakan 0,05 g hasil ekstraksi  (pasta)  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  lalu  ditambahkan  H 2 SO 4 ,  dikocok  hingga tercampur  sempurna.  Selanjutnya  disaring  kertas saring  whatman  dan  ditambahkan  pereaksi  Meyer, hingga  terlihat  endapan  putih,  kemudian  dengan menambahkan  pereaksi  Dragendorff  akan  terlihat endapan jingga. Hal ini dapat dikatakan bahwa sampel ekstrak bersifat positif mengandung alkaloid
Flavonoid; Sebanyak 0,05 g sampel hasil ekstraksi (pasta) ditambahkan senyawa Mg 0,05 mg dan 0,2 mL amil alkohol serta 4 mL alkohol. Hasil menunjukkan positif apabila larutan berturut-turut berwarna merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol.
Saponin; Uji saponin dapat terbentuk dengan uji busa dalam air panas pada 0,05 g sampelhasilekstraksi(pasta) dalam tabung reaksi dan dikocok.  Setelah  melalui  pengocokan,  tabung didiamkan  selama  30  menit  dan  selanjutnya ditambahkan 1 tetes larutan HCl 2 N. Hasil positif uji saponin ditunjukkan dengan adanya busa yang stabil.
Tanin; Uji adanya kandungan tannin dalam ekstrak daun  mangrove  diawali  dengan  menyeduh  0,05  g sampel hasil ekstraksi dengan air yang telah dimasak selama  tiga  menit.  Sampel  kemudian  disaring  dan ditetesi dengan 1% FeCl 3 . Hasil uji positif jika larutan bewarna biru tua atau hijau kehitaman.
Steroid/Triterpenoid;  Deteksi  adanya  steroid/ti- ter  penoid  dilakukan  dengan  menambahkan  0,05  g sampel hasil ekstraksi dengan kloroform dan ditetesi anhidrida asam asetat sebanyak lima tetes. Selanjutnya dengan  menambahkan  tiga  tetes  larutan  H 2 SO 4 98% larutan akan berwarna merah. Hasil test steroid positif bila apabila terbentuk perubahan warna menjadi biru, sedangkan hasil test triterpenoid positif bila terbentuk perubahan  warna  menjadi  merah  kecoklatan  pada lapisan permukaan larutan.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Bakteri  patogen  yang  digunakan  adalah A.  hydrophila  diperoleh  di  Ina  CC  Biologi  LIPI. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi agar (Kirby-Bauer) dengan bantuan kertas cakram. Bakteri yang telah diinkubasi 24 jam dengan suhu 30 o C pada media TSB diencerkan menjadi 10 5 CFU/mL dan diinokulasi ke dalam media TSA sebanyak100  L. Ada tiga konsentrasi yang dicobakan adalah: A) 100 mg/L, B) 1.000 mg/L, C) 10.000 mg/L, dan D) Kontrol negatif (larutanPBS)  dan  masing-masing  perlakuan  diulang
sebanyak tiga kali. Perlakuan diberikan dengan cara meneteskan 10  L larutan ekstrak pada kertas cakram berdiameter 6 mm, selanjutnya diletakkan dan ditata dalam petri untuk diinkubasi  selama satu hari pada suhu 30 o C, diameter daerah bening yang terbentuk di sekeliling  paper  disk  diukur.
Data yang dikumpulkan dalam penelitian berupa data rendeman berat ekstrak, data zona daya hambat (zona  bening),  dan  golongan  fitokimia  ekstrakdaun S.  alba.  Data  disajikan  dalam  bentuk  tabulasi  dan deskriptif.

## HASIL DAN BAHASAN

## Rendeman  Ekstrak  Daun  S.  alba
Penarikan  atau  pemisahan  komponen  senyawa kimia  suatu  simplisia  yang  menggunakan  pelarut khusus adalah proses ekstraksi. Bagian tumbuhan yang akan diekstrak menggunakan larutan etanol adalah daun mangrove S. alba. Berat daun S. alba segar ditimbang sebanyak 300 g dan setelah melalui proses pengeringan oven  selama  8  jam diperoleh  berat  kering  sebanyak 100 g. Terlihat bahwa sampel daun mangrove memiliki persentase  kisaran berat  sebanyak  33,3%  dari  berat sampel segar sebelum proses pengeringan. Pengecilan ukuran  sampel  daun  sebelum  proses  ekstraksi bertujuan untuk memudahkan kontak dengan pelarut sehingga diharapkan senyawa kimia aktif akan semakin banyak yang dapat terekstrak (Putri et al., 2016).
Hasil  ekstraksi  maserasi  statis  dari  50  g  serbuk daun S. alba dalam 250 mL pelarut etanol menghasilkan 7,13 g ekstrak kasar berupa pasta yang berwarna coklat kehitaman  dengan  nilai  rendeman  ekstrak  sebesar 14,26%  lebih  tinggi  bila  dibandingkan  penelitian sebelumnya (Putri et al., 2016) dengan nilai rendeman ekstrak  methanol  daun  S.  alba  sebesar  7,9%. Rendeman  yang  diperoleh  dari  tiap  jenis  bagian mangrove dan tiap bagian yang dimaserasi bervariasi pada habitat dan lokasi yang berbeda. Perbedaan ini dikarenakan pola adaptasi fisiologi mangrove terhadap lingkungannya (Prihanto et al., 2012).
Besarnya  nilai  rendeman  ekstrak  etanol  juga disebabkan oleh sifat polar dari etanol sehingga dapat menarik hamper semua senyawa organik yang ada pada simplisia. Selain itu tingginya potensi ikatan hidrogen yang terbentuk pada pelarut etanol, menyebabkan zat bioaktif  yang  terkandung  dalam  daun  S.  alba  lebih mudah larut di dalamnya, sehingga lebih banyak zat bioaktif yang diperoleh dari proses ekstraksi tersebut.

## Komponen  Aktif  Ekstrak Etanol  Daun S.  alba
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung dalam  tiap  ekstrak  daun  mangrove  S.  alba  dapat
dianalisa  dengan  uji  fitokimia  dengan  mengamati perubahan warna setelah diberi larutan uji. Metabolit sekunder  ini  merupakan  senyawa  aktif  yang  dapat memberikan kesehatan pada tubuh manusia (Boopathy & Kathiresan, 2011). Pengujian fitokimia menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  S.  Alba  mengandung senyawa golongan  alkaloid, saponin,  tanin, steroid, dan flavonoid (Tabel 1). Hal yang sama dilaporkan Syafitri et  al.  (2017)  bahwa  ekstrak  metanol  daun  S.  alba positif  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  steroid, saponin, dan tanin. Kandungan ekstrak etanol daun S.  alba  memiliki  senyawa  bioaktif  sifat  sebagai antibakteri (Bayu, 2009).
Tanin  sebagai  salah  satu  golongan  kimia  yang memiliki  sifat  sebagai  antibakteri  akan  berinteraksi dengan  membran  sel, penghancuran  atau  inaktivasi fungsi  dari  substansi  genetik  dan  inaktivasi  enzim (Saad  et  al.,  2012).  Prosedur  kerja  flavonoid  dalam menganggu pertumbuhan bakteri adalah menggunakan cara  inaktivasi  protein  (enzim)  di  membran  sel sehingga menyebabkan struktur protein menjadi rusak yg akan menghilangkan makromolekul serta ion yang ada pada sel, sehingga sel bakteri menjadi kehilangan bentuk  dan  terjadi  lisis  serta  bahkan  kematian (Prajitno, 2007). Senyawa saponin dalam melakukan proses  penghambatan  adalah  membentuk  senyawa kompleks  dengan  membran  sel  melalui  ikatan hidrogen yang berakibat hancurnya sifat permeabilitas dinding  sel  dan  akhirnya  dapat  mengakibatkan kematian sel (Harborne, 1987).
Antibakteri  dari  golongan  steroid/triterpenoid akan bereaksi dengan porin (protein trans membran) di membran luar dinding sel bakteri, membentuk ikan polimer yang kuat yang akan mengakibatkan rusaknya porin. Rusaknya porin akan mengurangi permeabilitas dinding  sel  bakteri  sehingga  menganggu  proses
perpindahan senyawa nutrisi dari luar masuk ke dalam sel,  sebagai  akibatnya  proses  pertumbuhan  bakteri akan terganggu atau mati (Cowan, 1999).
Mekanisme  penghambatan  golongan  alkaloid adalah  dengan  merusak  komponen  penyusun peptidoglikan yang ada di sel bakteri, sebagai akibatnya lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh sehingga  menyebabkan  kematian  sel,  selain  itu terdapatnya gugus basa yang mengandung nitrogen akan bereaksi dengan asam amino yang menysusun dinding  sel  bakteri  dan  DNA  bakteri,  reaksi  ini menyebabkan  terjadinya  perubahan  struktur  dan susunan  asam  amino,  yang  akan  mengakibatkan perubahan keseimbangan genetik di rantai DNA, sel akan  lisis  dan  akhirnya  bakteri  akan  mati  (Cowan, 1999).

## Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun S. alba
Ekstrak  kasar  daun  S.  alba  selanjutnya  diuji aktivitasnya  terhadap  bakteri  A.  hydrophila  dengan menggunakan  perbandingan  konsentrasi  dari  yang terendah  hingga  terbesar.  Aktivitas  antibakteri  dari ekstrak isolate potensial terhadap bakteri uji disajikan pada Tabel 2, sedangkan gambar aktivitas antibakteri dari ekstrak daun S. alba disajikan pada Gambar 1.
Zona bening yang terbentuk merupakan hasil dari aktivitas  senyawa  antibakteri  ekstrak  daun  S.  alba dalam  menganggu  pertumbuhan  bakteri  patogen (Gambar 1). Kontrol negatif memperlihatkan adanya zona bening sebesar ± 0,3 mm dengan diameter blank paper  disc  adalah  6  mm.  Kontrol  negatif  yang digunakan adalah pelarut PBS, namun pada penelitian ini  ditemukan  adanya  zona  bening  yang mengindikasikan  adanya  penghambatan  pada pertumbuhan  bakteri  A.  hydrophila.  Hal  ini
Tabel 1. Hasil uji fitokimia ekstrak daun S. alba Table  1. Result  of  phytochemical  test  for    extract  leaf  of  S.  Alba
Pengujian (Test ) Ekstrak etanol (Ethanol extract ) Indikasi (Indicator ) Alkaloid 1. Dragendorff + Terbentuk endapan kuning kecoklatan Brownish yellow sediment formed 2. Meyer + Terbentuk endapan putih White sediment formed Tanin + Warna hijau kehitaman (Blac kish green color ) Saponin + Busa stabil (Stabil foam ) Steroid + Larutan berubah menjadi biru kehijauan The solution turned greenish blue Flavonoid + Terbentuk warna kuning kejinggaan Yellow orange c olor was formed
Keterangan  (Remark): (-) = Tidak teridentifikasi (Not  identified) (+) =  Teridentifikasi  (Identified)
menimbulkan  dugaan  bahwa  pelarut  PBS  yang digunakan telah terkontaminasi dengan ekstrak kasar daun S. alba.
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  S.  alba menunjukkan hubungan linier terhadap besaran zona bening, yaitu semakin tinggi dosis maka zona bening yang  terbentuk  akan  semakin  besar  pula.  Hal  ini dipertegas  Kapitan  et  al.  (2017)  bahwa  secara kuantitatif  luasnya  diameter  zona  bening  yang terbentuk mengindikasikan adanya proses difusi dari senyawa antibakteri yang ada dalam sampel ke seluruh medium.  Dalam  hal  ini  semakin  besar  dosis  maka senyawa antibakteri yang terkandung di dalamnya akan semakin  tinggi  pula,  sehingga  dengan  semakin tingginya  senyawa  kimia  yang  berdifusi  akan menyebabkan kerusakan yang parah terhadap struktur dinding sel bakteri yaitu semakin besarnya luasan zona bening yang terbentuk. (Gambar 1).
Zona bening yang terbentuk merupakan hasil dari aktivitas  senyawa  antibakteri  ekstrak  daun  S.  alba dalam  menganggu  pertumbuhan  bakteri  patogen (Gambar 1). Kontrol negatif memperlihatkan adanya
zona bening sebesar ± 0,3 mm dengan diameter blank paper  disc  adalah  6  mm.  Kontrol  negatif  yang digunakan adalah pelarut PBS,namun pada penelitian ini  ditemukan  adanya  zona  bening  yang mengindikasikan  adanya  penghambatan  pada pertumbuhan  bakteri  A.  hydrophila.  Hal  ini menimbulkan  dugaan  bahwa  pelarut  PBS  yang digunakan telah terkontaminasi dengan ekstrak kasar daun S. alba.
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  S.  alba menunjukkan hubungan linier terhadap besaran zona bening, yaitu semakin tinggi dosis maka zona bening yang  terbentuk  akan  semakin  besar  pula.  Hal  ini dipertegas  Kapitan  et  al.  (2017)  bahwa  secara kuantitatif  luasnya  diameter  zona  bening  yang terbentuk mengindikasikan adanya proses difusi dari senyawa antibakteri yang ada dalam sampel ke seluruh medium.  Dalam  hal  ini  semakin  besar  dosis  maka senyawa antibakteri yang terkandung di dalamnya akan semakin  tinggi  pula,  sehingga  dengan  semakin tingginya  senyawa  kimia  yang  berdifusi  akan menyebabkan kerusakan yang parah terhadap struktur
D A B C
Tabel 2. Aktivitas antibakteri ekstrak daun S. alba terhadap bakteri A. hydrophila
Table  2. Antibacterial  activity  of  S.  alba  leaf  extract  against  A.  hydrophila  bacteria
Sampel Sample Konsentrasi Concentration Diameter zona bening (Diameter of c lean zone )  (mm) Rata-rata Average  (mm) I II III Ekstrak daun S. Alba Leaf extrac t of  S. alba PBS Kontrol negatif Negative c ontrol 0 1 0 0,3 100 10 12 10 10,67 1,000 14 14 14 14 10,000 16 15 16 15,67
Gambar 1. Zona bening dari aktivitas antibakteri ekstrak daun S. alba (A= kontrol negatif; A= konsentrasi 100 mg/L; B=  konsentrasi 1000 mg/L; C= konsentrasi 10.000 mg/L). Figure  1. Clear  zone  of  antibacterial  activity  of  S.  alba  leaf  extract (D=negative control; A=concentration 100 mg/L;
B=concentration  1000  mg/L;  C=concentration  10.000  mg/L).
dinding sel bakteri yaitu semakin besarnya luasan zona bening yang terbentuk. (Gambar 1).
Pada  Tabel  2 menunjukkan  bahwa  diosis  10.000 mg/L ekstrak daun S. alba memberikan batas daerah hambat paling efektif dibandingkan konsentrasi lainnya yaitu 15,67 mm.  Hal yang sama dilaporkan Syafitri et al.  (2017)  dengan  konsentrasi  10.000  mg/L  ekstrak methanol  daun  S.  alba  memberikan  aktivitas antibakteri  tertinggi  dalam  menghambat  bakteri Alteromonas macleodii (bakteri  patogen gram  negatif yang  menyebabkan  penyakit  ice-ice  pada  budidaya rumput  laut  Echeuma  cottonii).    Kekuatan  daya hambat  dari  ekstrak  daun  S.  alba  termasuk  dalam kategori  sedang  (intermediate)  (Clinical  and  Labora- tory  Standards  Institute,  2012)  yang  artinya  jika konsentrasi  ekstrak  ditingkatkan  ada  kemungkinan kekuatan daya hambat ekstrak daun S. alba akan masuk dalam  kategori  kuat  (rentan).  Pendugaan  hal  ini disebabkan  semakin  tinggi  dosis  perlakuan  yang diberikan maka jumlah senyawa kimia yang terkandung di dalamnya akan semakin bertambah sehingga dari perbedaan konsentrasi ini akan menyebabkan proses difusi  semakin  intens  terhadap  dinding  sel  bakteri. Suciati  et  al.  (2012)  menegaskan  tinggi  rendahnya bahan antibakteri yang ada pada ekstrak daun man- grove akan berbanding lurus dengan nilai dosis yang telah ditentukan.
Perubahan  dan  kerusakan  serta  inaktivasi  yang terjadi  di sel  bakteri merupakan  hasil interaksi  dari senyawa antibakteri yang berikatan dengan dinding sel bakteri. Pada dosis yang tidak bersifat bakterisida, bakteri akan mengalami perlukaan ringan, perubahan dan  struktur  sel  bakteri  serta  terganggunya  fungsi metabolisme, dan apabila terpapar dalam waktu yang lama sel bakteri akan rusak parah dan menyebabkan kematian.  Bentuk  dan  besarnya  perubahan  atau kerusakan struktur sel dipengaruhi oleh jenis senyawa antibakteri,  jenis  bakteri  dan  besarnya  konsentrasi yang digunakan (Kohanski et al., 2010).
Salah  satu  kriteria  pemilihan  bahan  alam  daun S. alba untuk mencegah serangan bakteri penyebab penyakit pada budidaya ikan adalah kandungan bahan kimia  yang  bersifat  antibakteri  yang  terkandung  di dalamnya yaitu alkaloid, saponin, tanin, steroid, dan flavonoid  dan  jika  diaplikasikan  tidak  akan menimbulkan efek mematikan pada ikan. Antibakteri yang  ideal  menunjukkan  toksisitas  selektif. Fitofarmaka  yang  digunakan  sebagai  fitomedis, mekanisme  kerjanya  cukup  komplek  dan  tidak sepenuhnya  dimengerti  namun,  proses  aktivitas  ini dapat  dikelompokkan  dalam  lima  kelompok  utama terhadap keberlangsungan hidup bakteri patogen (Bhat, Nagasampangi,  &  Meenakshi,  2009)  yaitu:  (1)
menganggu  proses  sintesis  dinding  sel;  (2) menganggu  proses  sintesis  asam  nukleat (metabolisme  DNA);  (3)  menganggu  proses  sintesis protein (penghambatan translasi dan transkripsi ma- terial genetik); (4) menganggu proses dan fungsi atau permeabilitas dinding sel; dan (5) menganggu proses metabolisme yang terjadi dalam sel.

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun mangrove  S. alba  dengan  berbagai konsentrasi  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  A.  hydrophila  secara  in  vitro.  Daya  hambat termasuk dalam kategori sedang (intermediate) pada konsentrasi 10.000 mg/L dengan diameter zona bening yang terbentuk yaitu 15,67 mm. Kandungan senyawa bioaktif  (metabolit  sekunder)  yang  terdapat  pada ekstrak etanol daun S. alba adalah alkaloid, tanin, sa- ponin, steroid, dan flavonoid.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih diucapkan kepada Lembaga Penelitian Universitas  Dharmawangsa,  Medan  yang  telah membiayai  kegiatan  ini  melalui  Skim  Penelitian  In- ternal Universitas Dharmawangsa, Medan tahun 2019.

## DAFTAR  ACUAN
Bayu, A. (2009). Hutan mangrove sebagai salah satu sumber  produk  alam  laut.  Oseana,  34(2),  15-23. Retrieved  from  http://oseanografi.lipi.go.id/ dokumen/os_xxxiv_2_2009-3.pdf.
Bhat, S.V, Nagasampangi, B.A., & Meenakshi, S. (2009). Natural  products:  Chemistry  and  applications. Narosa Publishing House.
Boopathy,  N.S.  &  Kathiresan,  K.  (2011).  Anticancer drugs from marine flora: An overview. Journal of Oncology, 2010, 1-18. https://doi.org/10.1155/2010/ 214186.
Christy, G., Kusdawarti, R., & Handijatno, D. (2019). Determination of the aerolysin gene in Aeromonas hydrophila  using  the  polymerase  chain  reaction (PCR)  technique.  IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental  Science,  236(1).  https://doi.org/ 10.1088/1755-1315/236/1/012097.
Clinical  and  Laboratory  Standards  Institute.  (2012). Performance standards for antimicrobial disk sus- ceptibility  tests:  Approved  standard  -  Eleventh edition (Vol. 32). https://doi.org/M02-A11.
Cowan, M.M. (1999). Plant products as antimicrobial agents.  Clinical  Microbiology  Reviews,  12(4),  564- 582.
Harborne,  J.B.  (1987).  Metode  fitokimia:  Penuntun cara  modern  menganalisis  tumbuhan.
Diterjemahkan  oleh  Kosasih  Padmawinata  dan Iwang Soediro. Penerbit ITB, Bandung. Bandung: ITB  Press.
Kapitan, O.B., Ambarsari, L., & Falah, S. (2017). In vitro antibakteri  ekstrak  etanol  puni  (Zingiber zerumbet) asal Pulau Timor. Savana Cendana, 2(02), 29-32. https://doi.org/10.32938/sc.v2i02.82.
Kohanski, M.A., Dwyer, D.J., & Collins, J.J. (2010). How antibiotics kill bacteria: from targets to networks. Nature  Reviews  Microbiology,  8(6),  423-435. https://doi.org/10.1038/nrmicro2333.
Kusdarwati,  R.  (2019).  Bakteri  virulensi  Aeromonas hydrophila sebabkan kematian ikan. Unair News.
Mastuti,  R.,  Syawal,  H.,  &  Lukistyowati,  I.  (2018). Pengobatan penyakit MAS (Motile Aeromonas Sep- ticaemia)  dengan  ekstrak  daun  mangrove (Rhizophora sp.) pada ikan jambal siam (Pangasius hypophthalmus).  Jomfaperika,  5(1),  1-12.
Mulyani,  Y.,  Bachtiar,  E.,  &  Agung,  M.U.K.  (2013).
Peranan senyawa metabolit sekunder tumbuhan mangrove  terhadap  infeksi  bakteri  Aeromonas hydrophila  pada  ikan  mas  (Cyprinus  carpio  L). Akuatika,  IV(1),  1-9.
Pandey,  G.  &  Sharma,  M.  (2012).  Immunostimulant effect  of  medicinal  plants  on  fish.  International Research  Journal  of  Pharmacy,  3(3),  112-114.
Prajitno, A. (2007). Uji sensitivitas flavonoid rumput laut  (Eucheuma  cottoni)  sebagai  bioaktif  alami terhadap  bakteri  Vibrio  harveyi.  Jurnal  Protein, 15(2), 66-71.
Prihanto, A.A., Firdaus, M., & Nurdiani, R. (2012). Anti- methicillin  resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA) of  methanol extract of  mangrove plants leaf:  Preliminary  report.  Drug  Invention  Today,
4(8), 439-440.
Putri, R.R., Hasanah, R., & Kusimaningrum, I. (2016).
Uji aktivitas antibakteri dan uji fitokimia ekstrak daun  mangrove  Sonneratia  alba.  Aquawarman Jurnal  Sains  dan  Teknologi  Akuakultur,  2(1), 43-50.
Saad, S., Taher, M., Susanti, D., Qaralleh, H., & Awang, A.F.I.B.  (2012).  In  vitro  antimicrobial  activity  of mangrove plant Sonneratia alba. Asian Pacific Jour- nal of Tropical Biomedicine, 2(6), 427–429. https:/ /doi.org/10.1016/S2221-1691(12)60069-0.
Saptiani,  G.,  Prayitno,  S.B.,  &  Anggoro,  S.  (2013). Potensi antibakteri ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius)  terhadap  Vibrio  harveyi  secara  in  vitro. Jurnal  Kedokteran  Hewan,  7(1),  17-20.  https:// doi.org/10.21157/j.ked.hewan.v7i1.558.
Saptiani,  G.,  Asikin,  A.N.,  Ardhani,  F.,  &  Hardi,  E.H. (2018). Tanaman bakau api-api putih (Avicenia ma- rina) berpotensi menghambat mikrob patogen dan melindungi  post  lar va  udang  windu.  Jurnal Veteriner,  19(1),  45.  https://doi.org/10.19087/ jveteriner.2018.19.1.45.
Suciati, A., Wardiyanto, & Sumino. (2012). Efektifitas ekstrak  daun  Rhizophora  mucronata  dalam menghambat pertumbuhan Aeromonas salmonicida  dan  Vibrio  harveyi.  Jurnal  Rekayasa dan  Teknologi  Budidaya  Perairan,  I(1),  1-8.
Syafitri,  E.,  Prayitno,  S.B.,  Radjasa,  O.K.,  &  Ma’ruf, W.F.  (2017).  The  performance  of  mangrove  leaf extract  (Sonneratia  alba)  in  combating  bacterial associated  with  ice–ice  disease  of  seaweed (Kappaphycus  alvarezii).  Advanced  Science  Letters, 23(7),  6413-6415.  https://doi.org/10.1166/ asl.2017.9639.