## PERUBAHAN TEKANAN MEDIA PEMELIHARAAN LARVA KERANG MUTIARA
( Pinctada maxima ) TERHADAP DAYA REAKSI ENZIM PROTEASE DALAM MEMACU PERTUMBUHAN DAN SINTASAN
PRESSURE CHANGES IN MEDIA MAINTENANCE OF SHELL PEARL (Pinctada maxima) LARVAE ON PROTEASE ENZYME ACTIVITY ENHANCING GROWTH AND SURVIVAL
M.S. Hamzah
UPT. Loka Pengembangan Bio Industri Laut Mataram, Puslit. Oseanografi LIPI Email : mats.cancuhou@yahoo.co.id

## ABSTRACT
The growth of pearl shell oyster is influenced by nacre  availability  consisting of calcium  carbonate. Nacre  is  identified  as  a  protein  metabolism  product  in  pearl  oyster.  The  aim  of  this  study  was  to evaluate  the  effects  of  media  level  pressure  in  larva  rearing  tank  on  protease  enzyme  activity  to promote  growth  performance  and  survival  rate  of  Pinctada  maxima  larvae.  The  research  was conducted from March 6 th to May 7 th 2015 in laboratorium of Mataram Marine Bio Industry Technical Implementation  Unit,  LIPI.  “Chi-Square”  test  showed  that  survival  rate  of  larvae  at  Umbo-veliger stage (planktonic) was significantly affected by water level pressure within 99% with ratio 1.00:1.61. In  contrast,  treatment  with  no  water  level  pressure  also  significantly  influenced  the  survival  rate  of larvae in spat stage within 99% confidence with ratio of 1.00:1.93. The highest average survival rate of larvae in umbo-veliger and spat stages were 13.10% and 2.60%, respectively. The effect of protease enzyme  activity  on  calcium  carbonate  production  to  produce  oyster  shell  are  also  discussed  in  this paper.
Keywords :  water level pressure, protease enzyme activity, survival rate, growth, larvae, P. maxima

## ABSTRAK
Pertumbuhan cangkang moluska termasuk kerang mutiara dipengaruhi oleh ketersediaan cairan nacre yang mengandung kalsium karbonat (CaCO 3 ) berupa lendir hasil metabolisme enzim dalam mencerna protein.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  melihat  perubahan  tekanan  media  pemeliharaan  larva  terhadap aktivtas  enzim  protease  dan  pengaruhnya  terhadap  pertumbuhan  dan  sintasan.  Penelitian  dilakukan pada tgl. 6 Maret–7 Mei 2015 di laboratorium UPT. Loka Pengembangan Bio Industri Laut. Sintasan larva pada fase Umbo-veliger (bersifat planktonik) dipengaruhi secara nyata oleh perubahan tekanan media  pemeliharaan  pada  tingkat  kepercayaan  99%  dengan  perbandingan  1,00:1,61.  Sementara  uji “Chi-Square”    larva  pada  fase  spat  (menempel)  tercatat  media  pemeliharaan  tanpa  gerakan  pola pasang-surut  memberikan  pengaruh  sangat  nyata  (99%)  dengan  perbandingan  1,00:1,93.  Persentasi sintasan rerata  tertinggi dari fase Umbo-veliger sebesar 13,10%  dan fase spat sebesar  2,60% tercatat pada  media  tanpa  perubahan  tekanan.  Daya  reaksi  enzim  protease  kaitannya  dengan  produksi kandungan  kadar  kalsium  karbonat  sebagai  bahan  mineralisasi  pembentukan  cangkang  kerang  turut dibahas dalam makalah ini.
Kata kunci :  perubahan tekanan media air, daya reaksi enzim protease, sintasan,   pertumbuhan,  larva kerang mutiara, P. maxima .

## I. PENDAHULUAN
Teknologi  budidaya  kerang  mutiara semakin  berkembang  dan  didukung  oleh  ha- sil  riset  dari  beberapa  negara  yang  beriklim
tropis  maupun  subtropis  yang  dimuat  dalam berbagai  penerbitan  jurnal  internasonal.  Pe- nerbitan yang telah dilakukan dijadikan seba- gai  pendekatan  referensi  dan  acuan  dalam peningkatan  kualitas  hasil  pemijahan  hingga
pembesaran  di  laut.  Pertumbuhan  cangkang kerang dan pembentukan butiran adalah hasil biomineralisasi dari lapisan cairan nacre yang mengandung  kalsium  karbonat  (CaCO 3 ) (Naganuma et al. , 2014; Caiping et al. , 2005; Hamester et  al. ,  2012).  Dikemukakan  pula bahwa  persentasi  kandungan  kalsium  karbo- nat  dalam  cangkang  kerang  sebesar  95%  se- mentara sisanya adalah kandungan bahan or- ganik yang lain (Hamester et al. , 2012; Feng et al. , 2009)
Proses  pembentukan  cangkang  larva kerang mutiara  sangat  ditentukan oleh keter- sedian  kalsium  karbonat  yang  diproduksi oleh  enzim  dalam  mencerna  protein.  Seba- gaimana  dikemukakan  oleh  Naganuma et  al. (2014) bahwa kegagalan pembentukan  cang- kang kerang mabe ( Pteria penguin ) pada fase D-veliger sangat  ditentukan  oleh  ketersedian komponen  protein  yang  digunakan  untuk proses  metabolisme  enzim  dalam  pemben- tukan  cairan  nacre  yang  menghasilkan  ele- men  kristal  kalsium  karbonat  (CaCO 3 ).  Ke- kurangan  cairan  nacre  dapat  memperlambat pertumbuhan  cangkang  (Zaremba et  al. , 1996;  Weiner  &  Addadi,  1997;  Fritz  & Morse,  1998) dalam Blank et  al. (2003). Cangkang  moluska  dan  butiran  mutiara  di- bentuk  oleh  mineral  yang  tersusun  dari kandungan kristal kalsium karbonat (CaCO 3 ) dan  polymer  organik  (Caiping et  al. ,  2005). Demikian juga penjelasan Feng et al . (2009) bahwa  ketersedian  kandungan  protein  dalam daging  sangat  mempengaruhi  endapan  kal- sium  karbonat  (CaCO 3 )  dalam  membentuk pertumbuhan cangkang melalui cairan nacre.
Cekaman  kondisi  lingkungan  seperti suhu, salinitas dan perubahan tekanan pasang surut  turut  mempengaruhi  kehidupan  biota moluska  yang  hidup  pada  daerah  intertidal. Sebagaimana  dikemukakan  Islami  (2012) bahwa  faktor-faktor  yang mempengaruhi ke- hidupan  moluska  di  laut  pada  daerah  inter- tidal  adalah  selain  faktor  fisik  termasuk  pas- ang  surut  juga  faktor  kimia.  Lebih  lanjut dijelaskan  bahwa  pola  agregasi,  pergerakan, pertumbuhan,  ukuran  tumbuh  dan  ritme  bio- logis dari moluska turut dipengaruhi oleh pa-
sang  surut  dimana  terjadi  fluktuasi  harian pada naik turunnya permukaan air. Cekaman kehidupan  moluska  pada  daerah  intertidal yang  diakibatkan  oleh  perubahan  tekanan lingkungan  secara  fisik  maupun  kimia  turut memicu  reaksi  metabolisme  enzim  dalam daging  moluska.  Sebagaimana  dikemukakan oleh  Wong  &  Cheung  (2001) dalam Islami (2012)  bahwa  aktivitas  makan  kerang Perna viridis meningkat  seiring  dengan  bertam- bahnya  bahan  organik  dan  turut  dipengaruhi oleh  gerakan  pasang  surut,  penyerapan  ma- kanan tertinggi terjadi pada periode surut dan terendah  pada  periode  pasang.  Lebih  lanjut dijelaskan  bahwa  kaitan  dengan  proses  pen- cernaan  menunjukan  aktivitas  enzim ᾳ - amilase  meningkat  pada  saat  periode  pasang purnama,  sementara  aktivitas  celullase  tidak memperlihatkan  perbedaan  nyata  terkait dengan  gerakan  pasang  surut.  Zeng et  al. (2009) mengemukakan bahwa kadar aktivitas enzim  dalam  daging  kerang  mutiara  ( Pin- ctada martensii ) setelah  dihidrolisasi  dengan perlakuan suhu yang bebeda ternyata menga- lami  reaksi.  Respon  reaksi  tinggi  yang  ter- masuk dalam komponen enzim protease ada- lah antara lain enzim alcalase  yaitu 4,84±0,9 mL -1 pada  kondisi  suhu  50ᴼC  dengan  kadar pH  8,0  dan  disusul  reaksi  enzim  pancreatin yaitu  4,79±0,89  µmol/ml/  menit  pada  suhu 37ᴼC dengan kadar pH 8,0.
Pengamatan yang terfokus pada peru- bahan  tekanan  lingkungan  secara  fisik dengan  pola  gerakan  pasang  dan  surut  teru- tama  bagi  kehidupan  kerang  mutiara  pada fase larva hingga menempel pada kolektor di laboratorium  masih  sangat  jarang  dilakukan. Perubahan tekanan media pemeliharaan larva dapat  berpengaruh  terhadap  reaksi  enzim protease  dalam  memacu  pertumbuhan  cang- kang.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menga- mati reaksi enzim protease yang memproduk- si  cairan  nacre  sebagai  bahan  organik  dalam pembentukan  elemen-elemen  kristal  yang mengandung  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  un- tuk  pertumbuhan  cangkang  kerang.  Luaran hasil penelitian ini dapat dijadikan tambahan referensi  dan  acuan  dalam  mendesain
pengembangan  penelitian  lebih  lanjut,  teru- tama  pasca  pemeliharaan  larva  kerang  mu- tiara  hingga  menempel  pada  kolektor  di laboratorium.

## II. METODA PENELITIAN
2.1. Pemijahan Induk Kerang Mutiara ( P. maxima )
Larva  kerang  mutiara  ( P.  maxima ) fase D-veliger (bersifat planktonik) diperoleh dari  hasil  pemijahan  “PT.  Autore  Pearl  Cul- ture”(Gambar1) yang berlokasi di Teluk Nare dan berjarak kurang dari 1 km dari laborato- rium  UPT. Loka Pengembangan Bio Industri Laut  Mataram.  Induk  kerang  mutiara  yang dipijahkan berasal dari induk F1 sebanyak 40 ekor yang sudah matang gonad terdiri dari 21 jenis  jantan  dan  19  ekor  jenis  betina  dengan ukuran  lebar  cangkang  berturut-turut  antara 12,0-14,7cm dengan bobot tubuh antara 550- 730gr dan antara 12,6-14,6 cm dengan bobot tubuh antara 550-660gr. Namun dalam waktu proses  rangsangan  pemijahan  dengan  meng- gunakan  kejutan  suhu  ternyata  yang  respon memijah  hanya  19  ekor  yang  terdiri  dari  8 ekor jenis jantan dan 11 ekor betina. Jumlah telur  yang  dibuahi  sebanyak  kurang  lebih 77,46  juta.  Telur-telur  yang  dibuahi  ditam- pung dalam bak fibre kapasitas muat 5 ton air sebanyak  5  buah  bak  dengan  padat  tebar kurang  lebih  15.000.000/bak.  Proses  pemeli- haraan selama 24 jam dalam bak-bak tersebut tidak diberi  pakan,  kecuali sedikit  suplai  ok- sigen  terlarut  hingga  mencapai  fase D- veliger .  Selanjutnya  dilakukan  penyaringan larva  dengan  menggunakan  saringan  net plankton  (screen  net)  dengan  ukuran  mata cukup  besar  yaitu  75µm,  63  µm  dan  57µm yang  disusul  berdasarkan  ukuran  mata  besar lapisan  bagian  atas  dan  terkecil  lapisan paling bawah. Tujuan menggunakan saringan ukuran ini  adalah untuk mendapatkan kuali- tas  larva  dengan  indikator  berukuran  besar, sehingga  diharapkan  sintasan  dan  pertum- buhan yang lebih menguntungkan dibanding- kan dengan ukuran larva  yang kecil. Sampel larva setelah mencapai  fase D-veliger .  Larva
fase D-veliger diangkut  menggunakan  galon air  kapasitas  20  liter  berjumlah  kurang  lebih 1,5  juta  larva  dan  selanjutnya  dilakukan pengamatan  di  laboratorium  UPT.  Loka Pengembangan Bio Industri Laut Mataram.
Gambar 1. Morfologi larva fase D-veliger setelah 24 jam pemeliharaan di bak penampungan.

## 2.2. Pemeliharaan Larva pada Bak Uji
Bak  uji  menggunakan  aquarium  kaca dengan  luas  26cm  x  52cm  dan  tinggi  51  cm dengan kapasitas muat ± 68 liter berjumlah 8 buah  dan  ditebar  larva  fase  D-veliger  se- banyak  20.000  larva/bak  dengan  volume areal  renang  tiap  larva  3,4  ml.  Sedangkan bagi  perusahaan  skala  industri  padat  tebar larva  fase D-veliger sebanyak  10.000.000 larva dalam 5 ton  air dengan  rincian volume ranang tiap larva 2 ml (hasil wawancara tek- nisi  Lab.  PT.  Autore  Pearl  Culture).  Bak aquarium  tersebut  dibagi  menjadi  2  bagian yaitu 4 buah dijadikan sebagai ulangan perla- kuan  uji  perubahan  tekanan  pola  gerakan pasang  surut  dan  sisanya  (4  buah)  sebagai pembanding tanpa perubahan tekanan (media diam). Bak uji diletakan di atas meja dengan tinggi  40  cm  dan  saling  berhadapan  serta diatur secara acak (Gambar 2). Aquarium uji yang  diberi  perlakuan  perubahan  tekanan dipasang selang aerasi diameter 4,8 mm ma- suk  melalui  pipa  paralon  0,5  inch  dan  pada ujung  pipa  dipasang  net  planktor  ukuran mata 25 µm, sehingga pada saat air  mengalir ke wadah plastik kapasitas 20 liter larva tidak
Gambar  2.    Aquarium  yang  digunakan  untuk  pengamatan  perubahan    tekanan  pola  gerakan pasang (A) dan penyedotan air pola gerakan surut (B).
ikut  tersedot.  Pipa  paralon  dan  selang  aerasi sama  panjang  dan  di  masukan  kedalam  bak uji  hingga  kedalaman  20cm  dari  permukaan, sebanding dengan air yang tersedot sebanyak 20 liter. Perubahan tekanan air dialirkan me- lalui  selang  yang  dilengkapi  dengan  keran aerasi sebagai pengatur debit air, maka posisi wada  penampung  air  lebih  rendah  dari  bak uji  dan  sebaliknya  pengembalian  pengisian air semula, maka wada diletakan lebih tinggi dari  bak  uji.  Perhitungan  periode  waktu penyedotan  air  keluar  dan  masuk  melalui selang aerasi dalam bak uji digunakan waktu daftar  pasang  surut. Contoh waktu  periode surut atau pasang dalam daftar  pasut  tercatat 3,3  jam,  maka  perhitungan  penyedotan  air bak  uji  adalah  sebagai  berikut:  sampel  air 100  mL  tersedot  dengan  waktu  1  menit, maka  dalam  jumlah  20  liter  waktu  dibu- tuhkan adalah 20 liter (20.000 mL)/100 mL = 200 menit/60 menit = 3,3 jam.
Alat  pengukur  tekanan  air  media  pe- meliharaan larva beberapa kedalaman  meng- gunakan  kamera  digital  merek: Nikon  Cool- pix  aw120  underwater dan  hasilnya  terlihat pada  Tabel  1.  Pengamatan  perubahan  tekan- an  air  dalam    bak  uji  sebagai  batas  penye- dotan media dilakukan pada kedalaman 20cm dengan  nilai  tekanan  air  sebesar  1,033  bar. Rentang waktu penyedotan air melalui selang aerasi  diukur  disesuaikan  dengan  lamanya
waktu  periode  pasang  dan  surut  dengan mengunakan  daftar  pasang  surut  dan  stop sementara  pada  saat  pergantian  air  50%/2 hari dan 100%/4 hari  (Gambar 3). Bersama- an dengan pergantian air total (100  %) pada media  bak  uji  tiap  4  hari,  maka  dilakukan pengukuran  kualitas  air  antara  lain  suhu, salinitas  dan  derajat  keasaman  (pH)  dengan menggunakan  alat  termometer  batang,  ref- raktometer dan pH meter HANNA H191 24N. Pemberian pakan campuran diberikan 2 kali sehari  yaitu pagi dan sore hari dengan jenis Pavlova  luteri , Chaetoceros spp.  dan Isochrysis  galbana. Penebaran  kolektor  da- lam bak uji dengan ukuran luas 20cm x 30cm dilakukan  setelah  larva  mencapai  fase eye spot kurang  lebih  75%  sebanyak  3  lembar/ bak uji. Pengamatan ini dilakukan hingga lar- va semua menempel pada kolektor dan selan- jutnya  dibesarkan  hingga  pada  hari  ke  60  di dalam bak uji. Hasil pembesaran benih  dise- leksi  ukuran  besar  sebanyak  48  ekor  dengan rincian  6  ekor  tiap  bak  uji  untuk  kebutuhan analisa  enzim  dan  kandungan  kadar  kalsium karbonat cangkang diukur menggunakan alat kalipper digital dan timbangan digital merek BSA323S-CW,d =1mg.
Indikator  penentuan  ukuran  pertum- buhan  dan  sintasan  larva  terutama  pada  fase Umbo-veliger dan Pedi-veliger yang  masih bersifat  planktonik  diketahui  dari  saringan ukuran  mata  net  plankton  (screen  net)  yaitu
A B
Tabel 1. Hasil pengukuran  rerata tekanan air dalam bak uji dengan  menggunakan  kamera digital  merek : Nikon Coolpix aw120 underwater.
Kedalaman media uji Suhu (°C) hPa (Alat ukur) Konversi tekanan Pascal cmHg mmHg Bar atm Udara 27,7   1.011 101.100   75,8312378   758,3124  1,011   1,03093 Permukaan   27,6   1.014 101.400   76,0562564   760,5626  1,014   1,03399 10 cm 27,6   1.022 102.200   76,6563057   766,5631   1,022   1,04215 20 cm 27,5   1.033 103.300   77,4813736   774,8137   1,033   1,05337 30 cm 27,5   1.043 104.300   78,2314353   782,3144   1,043   1,06356 40 cm 27,3   1.055 105.500   79,1315093   791,3151   1,055   1,07580
Keterangan.:  Panah warna putih = periode waktu pasang  & panah warna biru = periode waktu surut (Balai Penelitian dan Observasi Laut-KKP, Sembrana-Bali, 2015).
Gambar 3.  Prediksi pasang surut Lombok Utara tgl. 27/3-26/4 -2015.
180  µm,  100  µm  dan    60  µm.  Jumlah  larva yang  tertahan  pada  masing-masing  ukuran mata saringan dipisahkan dan selanjutnya di- hitung  menggunakan  mikroskop  dengan pembesaran 100x.
Selanjutnya  alat  “ Sedgewik  Rafter ” dipasang  di  bawah  lensa  okuler  mokroskop untuk  menghitung  sampel  larva  dan  diulang 3  kali,  sehingga  jumlah  larva  pada  masing- masing  ukuran  saringan  dapat  diketahui. Sementara  larva  fase  juvenil  (menempel) pada  kolektor  dan  dinding  bak  uji  dihitung secara  visual  menggunakan  kaca  pembesar dan  alat  hitung  (hand  counter).  Perkem- bangan  fase  larva  dan  juvenil  (menempel) serta dibesarkan hingga  mencapai  fase  anak- an terlihat pada  Tabel 2.
2.3. Daya Reaksi Enzim Protease dan
Kandungan Kalsium Karbonat (CaCO 3 ) Analisa  daya  reaksi  enzim  protease dan  kandungan  kalsium  karbonat  anakan kerang  mutiara  ( P.  maxima )  dilakukan  di Lab.  Kimia,  Univ.  Brawijaya  sebanyak  48 ekor  dengan  rincian  24  ekor  untuk  media perubahan  tekanan  dan  24  ekor  untuk  per- lakuan  netral  (media  diam).  Daging  kerang untuk analisa reaksi enzim protease tiap  per- lakuan  diulang  4 kali dan  tiap  unit ulangan sebanyak  6  ekor.  Hal yang  sama  dilakukan analisa  kandungan  kadar  kalsium  karbonat (CaCO 3 )  dengan  menggunakan metoda AAS dengan tujuan untuk  mengetahui  daya  reaksi enzim  protease hubungannya  dengan  per- tumbuhan cangkang.
Tabel 2. Hasil pengamatan perkembangan larva kerang mutiara hingga menjadi spat (benih) pada hari ke 60 di laboratorium. Klasifikasi penentuan fase mengikuti prosedur Haws and Ellis (2000).
No Gambar Fase Keterangan 1 Embriogenesis (Plantonik) D-Veliger Cangkang larva berbentuk D , garis ensel (hinge) telah  tampak. Umur : 2hari (24 jam) 2 Umbo-veliger Dua sisi cangkang telah terbentuk setelah adanya tonjolan pada bagian dorsal. Umur : 14hari 3 Eye – spot Bintik hitam kecil pada dua  sisi cang- kang mulai tampak setelah berumur 16- 17 hari. Bintik hitam ini menggambarkan larva mulai menempel dan kolektor sege- ra ditebarkan dalam bak pemeliharaan Umur antara : 16-17 hari 4 Pedi-veliger (Umbo akhir) Kaki bysus mulai tampak dan menonjol pada bagian dorsal yang digunakan untuk menempel pada substrat/kolektor. Umur : 20 hari 5 Metamorfisis (Bentik) Plantigrade Larva masuk dalam fase transisi akhir plantonik. Cangkang telah sempurna lengkap dengan anterior, posterior dan bysus serta mulai proses menempel pada kolektor. Umur 22 hari 6 Spot (juvenil) Larva berkembang dan tumbuh menjadi fase juvenil (spot) dalam keaadan menempel pada substrat/kolektor Umur antara : 35-40 hari 7 Spat Bentuk morfologi terutama cangkang telah sempuna menyerupai bentuk anakan kerang mutiara Umur : 60 hari
Prosedur  kerja  untuk  uji  daya  reaksi enzim  protease  berdasarkan  metode  yang dikembangkan  oleh  Simonian  (2002) dalam Amalia  (2011)  adalah  sebagai  berikut:  Sam- pel 1 mL ekstrak kasar enzim dimasukan da- lam  tabung  reaksi  dan  ditambahkan  2,5  mL larutan  kasein  1%  dalam  buffer  fospat  pada pH 6,5. Selanjutnya diinkubasi  dalam water- bath  pada  suhu  37°C  selama  10  menit  dan ditambahkan  2,5  mL  larutan  TCA  5%,  didi- amkan  selama  30  menit  pada  suhu  kamar. Kemudian  disentrifugasi  pada  kecepatan 3000 rpm selama 5 menit dan diambil filtrat- nya.  Diukur  absorbansinya  dengan  meng- gunakan spektrofotometer  UV-Vis pada  pan- jang  gelombang  (λ)  275,2  nm,  untuk  blanko digunakan  larutan  enzim  dengan  perlakuan yang  sama,  tetapi  penambahan  TCA  dilaku- kan  sebelum  penambahan  substrat.  Daya  re- aksi  enzim  protease  dihitung  melalui  kadar tirosin  yaitu pengkonversian nilai  absorbansi protease  pada  standar  tirosin  dengan  meng- gunakan persamaan  regresi kurva baku Tiro- sin  menurut  rumus  yang  dikembangkan  oleh Simonian (2002) dalam Amalia (2011) yaitu:
Y = 0,007x……………………………….(1) dimana: Y=absorbansi, x=kosentrasi.
Sementara  penentuan  aktivitas  enzim protease  dinyatakan  dalam  satuan  unit. Dimana  1  unit  adalah  jumlah  µmol  tirosin yang  terbentuk  pada  setiap  1  mL  enzim/ menit.  Penentuan  aktivitas  enzim  protease mengikuti persamaan sebagai berikut:
[Tirosin]         V AE = x BM Tirosin    pq dimana: AE=aktivitas enzim (unit), V= volume sampel tiap tabung (1 mL) BM=berat molekul Tirosin (1 mL) (181 µg/µmol),  q=waktu reaksi (1 mL) (10 menit), p=volume ekstrak kasar protease (1 mL).
Data  sintasan  anakan  kerang  mutiara pada fase Umbo-veliger yang bersifat plank- tonik dan  fase juvenil (menempel)  dianalisa
dengan menggunakan uji “ Chi Square ” (Gaspersz, 1989).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Kandungan Kalsium Karbonat
Hasil  kandungan  kadar  kalsium  kar- bonat (CaCO 3 ) cangkang kerang mutiara tiap unit ulangan perlakuan dan kadar tirosin dihi- tung  melalui  konversi  nilai  absorbansi  pro- tease  pada  persamaan  regresi  kurva  standar Tirosin  (Y  =  0,007x)  (  Tabel  3).  Tabel  ter- sebut  terlihat  bahwa  kandungan  kadar  kal- sium  karbonat  (CaCO 3 )  cangkang  kerang mutiara  cenderung  lebih  tinggi  tercatat  pada perlakuan  media  yang  digerakan  mengikuti pola  pasang  dan  surut  yaitu  nilai  rerata sebesar  94,873±0,04  %  dengan  daya  reaksi enzim  protease  rerata  sebesar  0,0518  Unit. Sementara  benih  kerang  mutiara  yang  dipe- lihara  pada  perlakuan  media  yang  netral (diam)  diperoleh  kadar  kandungan  kalsium karbonat  sedikit  lebih  rendah  yaitu  nilai rerata  sebesar    94,302±  0,04  %  dengan  daya reaksi  enzim  protease  rerata  sebesar  0,0485 Unit.

## 3.2. Sintasan dan  Pertumbuhan Fase
Umbo-veliger & Pedi-veliger
Hasil  pengamatan  sintasan  pada  fase Umbo-veliger dan Pedi-veliger berdasarkan perlakuan  perubahan  pola  gerakan  pasut  (air naik  dan  turun)  dan  netral  (media  diam) terlihat  pada  Gambar  4.  Gambar  ini  terlihat bahwa sintasan pada kedua fase ternyata cen- derung  lebih  menguntungkan  tercatat  pada perlakuan  pola  gerakan  pasang  dan  surut (perubahan  tekanan)  dibandingkan  terhadap perlakuan  netral  (media  diam).  Keadaan  ini secara  imperisasi  terlihat  pada  uji  “ Chi- Square ”  terutama  sintasan  larva  pada  fase Umbo-veliger . Hasilnya memperlihatkan bahwa  persentasi  sintasan  larva  fase Umbo- veliger yang dipelihara pada perlakuan media pemeliharaan  yang  berbeda  memberikan pengaruh  sangat  nyata  pada  tingkat  keya- kinan  99%  dengan  perbandingan  1,00:1,61. Keberhasilan   larva   yang   dipelihara  pada
Tabel  3.  Hasil  kadar  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  cangkang  kerang  dan  daya  reaksi  enzim protease  hubungannya dengan sintasan dan pertumbuhan cangkang.
Ulangan  Perlakuan  Absorbansi Konsentrasi Tirosin µg/ml Daya Reaksi Enzim Protease Kadar Kalsium Karbonat Cangkang (CaCO 3 )  (%) µmol/mL .menit -10 µmol/mL .menit -1 1 PS1 0,666 95,143 0,525 0,0525 94,86±0,03 2 PS2 0,633 90,429 0,499 0,0499 94,70±0,05 3 PS3 0,656 93,714 0,518 0,0518 95,06±0,04 4 PS4 0,671 95,857 0,529 0,0529 94,87±0,04 Rerata 0,656 93,668 0,518 0,0518 94,873±0,04 1 N1 0,611 87,286 0,481 0,0481 94,38±0,02 2 N2 0,609 86,88 0,482 0,0482 94,00±0,05 3 N3 0,613 87,571 0,484 0,0484 94,45±0,05 4 N4 0,624 89,143 0,493 0,0493 94,30±0,04 Rerata 0,614 87,72 0,485 0,0485 94,302±0,04
Keterangan : PS= Perlakuan pola gerakan air turun (surut) dan naik (pasang) media pemeliharaan larva mengikuti waktu  daftar pasut pada periode waktu penelitian yang sama.  N = Media uji  netral  (media  diam).  PS  dan  N  adalah  perlakuan  yang  diuji  dan  masing-masing perlakuan diulang 4 kali (sebagai ulangan perlakuan).
.
Perlakuan Netral (media diam
Perlakuan Pola Gerakan Pasut
Keterangan:  Larva fase Umbo-veliger = larva bersifat planktonik yaitu berenang-renang memutar sesuai arah jarum jam memenuhi kolom air mencari makanan.
Gambar 4.  Persentasi sintasan rerata larva kerang mutiara fase Umbo-veliger (hari ke-14) dan Umbo-akhir (hari ke-21) berdasarkan ukuran pertumbuhan pada perlakuan media pemeliharaan yang berbeda.
media  perlakuan  mengikuti  pola  gerakan pasang  dan  surut  diduga  sebagai  akibat pengadukan massa air, sehingga memungkin- kan  pakan  yang  diberikan  menyebar  merata dan  mudah  dimangsa  oleh  larva  kerang mutiara  yang  masih  bersifat  planktonik. Dugaan  ini  diperkuat  oleh  hasil  penelitian Wong & Cheung (2001) dalam Islami (2012) bahwa    aktivitas  makan    kerang Perna viridis meningkat  seiring    dengan    bertam- bahnya bahan  organik dan turut dipengaruhi oleh  gerakan  pasang  surut,  penyerapan makanan  tertinggi terjadi  pada  periode  surut dan  terendah  pada  periode  pasang.  Kaitan dengan  proses  pencernaan  memperlihatkan aktivitas  enzim ᾳ -amilase  meningkat  pada saat  periode  pasang  purnama,  sementara  ak- tivitas  celullase  tidak  memperlihatkan  per- bedaan  nyata  terkait  dengan  gerakan  pasang surut. Lebih lanjut dijelaskan pula faktor fisik antara  lain  dorongan  air  pasang  dan  surut diketahui  berpengaruh  terhadap  penyebaran, perkembangan,  ritme  biologis,  fisiologis  dan aspek x lainnya pada moluska.
Pertumbuhan larva berdasarkan ukur- an mata screen net (180 µm,100 µm dan  60 µm)  ternyata  cenderung  lebih  cepat  tumbuh tercatat  pada  perlakuan  mengikuti  pola gerakan pasut seperti terlihat pada Gambar 4. Gambar  ini  terlihat  bahwa  larva  fase Umbo- veliger maupun  fase Pedi  veliger yang dipelihara  pada  media  yang  diberi  perlakuan yang berbeda, ternyata media yang digerakan mengikuti  pola  pasang  dan  surut  mendomi- nasi  ukuran  pertumbuhan  besar  baik  pada umur  14  hari  maupun  21  hari  dibandingkan dengan media netral (diam). Perlakuan media yang  digerakan  mengikuti  pola  pasang  dan surut tercatat larva pada umur 14 hari dengan ukuran mata screen net 180 µm, 100 µm dan 60  µm  diperoleh  jumlah  sintasan  larva berturut-turut  sebesar  31,31%;  45,83%  dan 60,9%  dan  pada  umur  21  hari  sebesar  33, 29%;  12,49%  dan  6,64%.  Sementara  per- lakuan media diam sintasan larva pada umur 14  hari  tercatat  sedikit  menurun  yaitu 18,09%; 44,2% dan 33,77 %, dan pada umur 21 hari diperoleh 15,9%; 10,06% dan 6,64%.
Kecepatan  tumbuh  larva  yang  di- pelihara pada media mengikuti pola gerakkan pasang  dan  surut  adalah  dimungkinkan adanya reaksi enzim dalam tubuh larva  yang memicu pertumbuhan yaitu salah satu dianta- ranya  adalah  reaksi  enzim  protease  seperti terlihat  pada  Tabel  2  di  atas.  Pada  tabel  ini terlihat  bahwa  daya  reaksi  enzim  protease rerata  benih  kerang  mutiara  dipelihara  pada media  yang  diberi  perlakuan  mengikuti gerakan  pasang  dan  surut  cenderung  lebih tinggi  yaitu  0,0518  µmol/mL.menit-1  (Unit) dengan  kandungan  kadar  kalsium  karbonat (CaCO3)  rerata  sebesar  94,873±0,04%.  Se- mentara  daya  reaksi  enzim  protease  rerata yang  tercatat  pada  perlakuan  media  diam adalah sedikit rendah yaitu 0,0485 µmol/mL. menit-1 (Unit) dengan kadar kandungan kal- sium  karbonat  (CaCO3)  rerata  sebesar  94, 302±0,04 %.
Kadar  kalsium  karbonat  (CaCO3) yang  terkandung  dalam  cangkang  kerang mutiara merupakan hasil produksi dari meta- bolisme  reaksi  enzim  dalam  mencerna  pro- tein  yang  hasilnya  sebagian  dalam  bentuk cairan  nacre.  Hal  ini  dapat  diduga  bahwa semakin  tinggi  kadar  kalsium  karbonat  yang terkandung  dalam  cangkang  adalah  berban- ding  lurus  dengan  tingginya  daya  metabo- lisme  reaksi  enzim  dalam  mencerna  protein untuk  pertumbuhan.  Dugaan  ini  diperkuat oleh  beberapa  hasil  riset  seperti  yang  telah dijelaskan  terdahulu  antara  lain  yaitu  Naga- numa et al . (2014) bahwa kegagalan pemben- tukan  cangkang  kerang  mabe  ( Pteria penguin )  pada  fase D-veliger sangat  ditentu- kan oleh ketersedian komponen protein yang digunakan  untuk  proses  metabolisme  enzim dalam pembentukan cairan nacre yang meng- hasilkan  elemen  kristal  kalsium  karbonat (CaCO3).  Kekurangan  cairan  nacre  dapat memperlambat  pertumbuhan  cangkang  (Za- remba et al ., 1996; Weiner & Addadi, 1997; Fritz  &  Morse,  1998)  dalam  Blank et  al. (2003).  Cangkang  moluska  dan  butiran  mu- tiara  dibentuk  oleh  mineral  yang  tersusun dari  kandungan  kristal  kalsium  karbonat  (Ca CO3)  dan  polymer  organik  (Caiping et  al .,
2005).  Demikian  juga  penjelasan  Feng et  al. (2009) bahwa ketersedian kandungan protein dalam daging sangat mempengaruhi endapan kalsium  karbonat  (CaCO3)  dalam  memben tuk  pertumbuhan  cangkang  melalui  cairan nacre. Dijelaskan terdahulu bahwa persentasi kandungan  kalsium  karbonat  dalam  cang- kang kerang sebesar 95%, sementara sisanya adalah  kandungan  bahan  organik  yang  lain (Hamester et al ., 2012; Feng et al ., 2009)

## 3.3. Sintasan dan Pertumbuhan Fase Juvenil
Sintasan  pada  fase  juvenil  kerang mutiara  berdasarkan  perlakuan  media  diam dan berubahan  tekanan  mengikuti  pola pasut terlihat  pada  Gambar  5.  Gambar  ini  terlihat bahwa  sintasan  tertinggi  pada  fase  juvenil (menempel)  tercatat  pada  perlakuan  media netral  yaitu sebesar 19,95%  yang terdiri dari menempel  pada  kolektor  15,7%  dan  dinding
4,25%. Sementara media yang diberi tekanan mengukuti  pola  gerakan  pasang  dan  surut cenderung lebih menurun yaitu hanya sebesar 9,78%  terdiri  dari  menempel  dikolektor 7,57%  dan  didinding  bak  uji  2,21%.  Nilai diterminasi (R2= 0,883) menggambar bahwa pemeliharaan larva dalam bak uji yang diberi perlakuan  mengikuti  gerakan  pasut  dan  me- dia diam berpengaruh nyata terhadap sintasan sebesar  88,3%,  sementara  sisanya  sebesar 11,7% adalah pengaruh faktor luar yang tidak dapat dijelaskan dalam model.
Uji “Chi-Square” terhadap  sintasan juvenil  yang  diberi  perlakuan  media  diam dan pola gerakan pasut memperlihatkan hasil sangat  berpengaruh  nyata  dengan  tingkat keyakinan  99%  dengan    perbandingan  1,00: 1,93.  Rendahnya  nilai  sintasan  yang  tercatat pada  perlakuan  pola  gerakan  pasut  adalah diduga  lebih  diakibatkan  oleh  faktor  fisik yaitu  pengeringan  dinding  bak  uji  selama
Perlakuan netral (media diam)          Perlakuan pola gerakan pasut Keterangan : Larva fase spat = larva bersifat bentik yaitu larva dalam keadaan menempel pada substrat/kolektor,  sehingga  makanan  (phytoplankton)  yang  diperoleh  sangat tergantung  dari  gerakan  massa  air  (arus).  Perlakuan  pola  gerakan  pasut,  larva yang  menempel  dekat  lapisan  permukaan  bak  uji  akan  mengalami  kekeringan pada  waktu  periose  surut.  Sementara  perlakuan  netral  (diam)  larva  yang menempel pada dinding bak uji tidak mengalami kekeringan.
Gambar 5.    Persentasi sintasan rerata larva kerang mutiara fase spat (hari ke-40) berdasarkan daya  penempelan  pada  kolektor  (K1-K3)  dan  dinding  bak  aquarium  (D)    pada perlakuan media pemeliharaan yang berbeda.
periode  waktu  penyedotan  media,  sehingga juvenil  yang  menempel  pada  dinding  bak kedalaman 20 cm dari permukaan mengalami kekeringan,  akhirnya  stres  dan  mati.  Hasil riset  di  laboratorium  memperlihatkan  bahwa tingkah  laku  larva  kerang  mutiara  ( P.  maxi- ma )  lebih  senang  menempel  pada  kolektor warna  hitam  yang  cenderung  berada  pada lapisan  dekat  permukaan  (Hamzah,  2013). Demikian  juga  halnya  dengan  sifat  sebaran larva  kerang  mabe  ( Pteria  penguin )  (Ham- zah,  2007).  Dari  kedua  hasil  riset  ini  diduga bahwa  rendahnya  nilai  persentasi  sintasan yang  tercatat  pada  perlakuan  pola  gerakan pasang  dan  surut  terutama  fase juvenil (me- nempel)  adalah  lebih  cenderung  diakibatkan karena  mengalami  kekeringan  selama  pe- riode surut (penyedotan media).
Nilai  selisih  determinasi  sebesar 11,7%  yang  tidak  dapat  dijelaskan  dalam model  adalah  diduga  merupakan  faktor  fisik luar  yaitu  kekeringan  yang  turut  mempenga- ruhi  kehidupan juvenil yang  menempel  pada dinding  bak  uji.  Sebagaimana  dikemukakan oleh  Islami  (2012)  bahwa  masalah  utama bagi  organisme  yang  hidup  di  daerah  inter- tidal  adalah  kekeringan  pada  waktu  periode surut  yakni  minimnya  air,  bahkan  terjadi pengeringan  total  pada  intertidal  bagian  atas pada  saat  pasang  purnama.  Sifat  organisme untuk  mempertahankan  hidupnya  pada  kon- disi  demikian  adalah  menghindar,  bersem- bunyi dan mencari tempat yang basah. Demi- kian  juga  penjelasan  Hamzah  (2015)  bahwa salah satu sifat hidup moluska contoh, Turbo chrysostomus yang  sering naik  kepermukaan wadah  hingga  mengering  merupakan  pe- micu  faktor  kematian,  bila  tidak  segera  di- selamatkan.
Pertumbuhan  cangkang  kerang  muti- ara  yang  dipelihara  pada  media  mengikuti pola  gerakan  pasut  dan  media  diam  terlihat pada Tabel 4. Tabel ini memperlihatkan bah- wa  pertumbuhan  rerata  lebar,  tinggi  dan  bo- bot  tubuh  cangkang  cenderung  lebih  tinggi dipelihara  pada  perlakuan  media  mengikuti pola gerakan pasut  yaitu berturut-turut 5,855 mm;  1,0225  mm  dan  0,008  gr,  sementara
untuk media  diam tercatat 5,489 mm; 0,999 mm dengan bobot tubuh 0,007gr.  Tingginya nilai  pertumbuhan  yang  tercatat  pada  per- lakuan  mengikuti  pola  gerakan  pasut  adalah diduga  berkaitan  dengan  daya  metabolisme reaksi  enzim  protease  dalam  mencerna  pro- tein.  Hal  ini  diindikasikan  dari  kandungan kadar kalsium karbonat (CaCO 3 ) rerata sebe- sar 94,873±0,04% dengan daya reaksi enzim protease  0,0518  µmol/mL.menit -1 (Unit)  ter- catat  pada  perlakuan  pola  gerakan  pasut, sementara  perlakuan  media  diam  kandungan kadar  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  sedikit rendah  yaitu  94,302±0,04%  dengan  daya reaksi  enzim  protease  sebesar  0,0485  µmol/ mL.menit -1 (Unit).  Mouries et  al. (2002) mengemukakan  bahwa  hasil  analisa  karakte- risasi protein melalui kandungan cairan nacre kerang  mutiara  ( P.  maxima )  dengan  meng- gunakan metoda SDS-PAGE ditemukan bend marker lebih kontras pada kisaran  antara 14- 96 kDa.  Cangkang moluska dan butiran mu- tiara  dibentuk  oleh  mineral  yang  tersusun dari  kandungan  kristal  kalsium  karbonat (CaCO 3 )  dan  polymer  organik  (Caiping et al. , 2005). Demikian juga penjelasan Feng et al .  (2009)  bahwa  ketersedian  kandungan protein  dalam  daging  sangat  mem  pengaruhi endapan  kalsium  karbonat  (Ca  CO 3 )  dalam membentuk  pertumbuhan  cangkang  melalui cairan nacre.

## 3.4. Kualitas Air
Pengamatan kualitas air selama peri- ode  pengamatan  terutama  pada  larva  yang masih bersifat planktonik ( Umbo-veliger dan Pedi-veliger )  dan  fase  juvenil  (menempel) ditunjukan pada  Gambar 6. Pada gambar ter- sebut  terlihat  bahwa  fluktuasi  suhu  bak  uji selama periode pengamatan pada fase plank- tonik maupun bentik tidak jauh berbeda yaitu bervariasi antara 27-29°C dengan nilai rerata harian  28,0°C.  Variasi  kadar  salinitas  harian antara 32,5-34,5 ppt dengan nilai rerata hari- an  33,43  ppt,  sementara  nilai  derajat  keasa- man  harian  bervariasi  antara  7,5-7,8.  Variasi kondisi  suhu  hasil  riset  dari  penelitian  ini tidak  jauh  berbeda  dengan  hasil  penelitian
Tabel 4.  Pertumbuhan kerang mutiara fase juvenil berdasarkan metoda media  pemeliharaan yang berbeda.
Perubahan Tekanan Netral (Media diam) Perlakuan Ul LC TC BT Perlakuan  Ul LC TC BT (mm) (mm) (gr) (mm) (mm) (gr) PS.1 1 6,93 1,12  0,012  N.1 1 5,32 1,11  0,011 2 6,76 1,12  0,012 2 5,17 1,11  0,011 3 7,15 1,16  0,013 3 5,99 1,01  0,006 4 6,24 1,12  0,012 4 4,45 1,01  0,002 5 5,65 1,11  0,011 5 4,85 0,55  0,003 6 6,73 1,13  0,011 6 5,8 1,12  0,012 PS.2 1 5,45 1,11  0,004  N.2 1 5,73 1,12  0,011 2 5,56 1,05  0,005 2 5,76 1,11  0,011 3 4,62 1,04  0,002 3 4,76 0,56  0,004 4 5,78 1,12  0,002 4 4,43 0,76  0,003 5 5,91 1,12  0,003 5 5,18 1,11  0,005 6 4,12 0,69  0,002 6 5,65 1,12  0,005 PS.3 1 7,92 1,13  0,013  N.3 1 5,99 1,13  0,004 2 4,14 0,7  0,003 2 5,76 1,11  0,004 3 4,11 0,71  0,002 3 4,87 0,71  0,002 4 4,83 0,87  0,003 4 5,8 1,11  0,004 5 4,92 0,54  0,002 5 4,72 0,73  0,002 6 5,75 1,13  0,011 6 4,71 0,82  0,002 PS.4 1 6,78 1,11  0,012  N.4 1 5,12 1,1  0,005 2 6,75 1,11  0,013 2 6,78 1,12  0,013 3 5,89 1,12  0,013 3 6,81 1,12  0,014 4 6,98 1,14  0,014 4 5,79 1,11  0,012 5 6,56 1,13  0,013 5 5,76 1,11  0,011 6 4,98 0,96  0,004 6 6,53 1,12  0,012 Jumlah : 24 140,51 24,54  0,192 Jumlah :  24  131,73 23,98  0,169 Rerata : 6 5,855  1,0225  0,008 Rerata : 6 5,489 0,999  0,007
Keterangan LC = Lebar cangkang (mm), TC = Tinggi cangkang (mm) & BT= Bobot   tubuh (gr)  PS  =  Perlakuan  perubahan  tekanan  mengikuti  pola  gerakan  pasut,  Ul= Ulangan  N  = Perlakuan media netral (media diam)
kerang  mutiara  yang  diperoleh  oleh  Susilo- wati  dan  Sumantadinata  (2011)  yaitu  antara 26-29°C.  Selanjutnya    dikemukakan    bahwa kisaran    kondisi    suhu  tersebut    bagi    biota yang masuk dalam filum moluska, lebih aktif melakukan  proses  metabolisme  dan  tumbuh dengan  baik.  Kisaran  nilai  salinitas  yang tercatat  selama  periode  pengamatan  masih
berada dalam kondisi batas ambang toleransi kehidupan kerang mutiara. Hal ini didu kung oleh  hasil  riset  Effendi  (2003) dalam Litaay (2011)  yang  mengemukakan  bahwa  kisaran parameter  kualitas  air  sebagai  pendukung kehidupan  kekerangan  yaitu  suhu  antara  20- 30ᴼC  dan  salinitas  antara  30-40  mg/L,  pH antara 7-8 dan oksigen terlarut antara 7,5-7,8
Gambar 6.  Kualitas air pemeliharaan larva kerang mutiara  yang bersifat planktonik dan bentik pada bak uji.
mg/L.  Hamzah  (2013)  mengemukakan  bah- wa  kisaran  kualitas  air  masih  layak  untuk pemeliharaan  larva  kerang  mutiara  di  labo- ratorium  yaitu  pH  antara  7,3-7,8.  Suhu    an- tara    26,5-28,0°C,  salinitas  antara  32-33  ppt dan  oksigen  terlarut  antara  4,7-5,5  ppm. Demikian  juga  pemeliharaan  anakan  kerang mutiara  ditemukan  kisaran  kualitas  air  yaitu suhu  antara  27-28ºC  dengan  pH  antara  7,6- 8,3  tercatat  hasil  kelangsungan  hidup  ter- tinggi  sebesar  83,33%  dibandingkan  dengan perlakuan  suhu  yang  lainnya  (Hamzah  dan Setiyono, 2009).

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN
Sintasan  larva  kerang  mutiara  pada fase Umbo-veliger (planktonik)  yang  dipeli- hara  dalam  bak  yang  diberi  perlakuan  pola gerakan  pasut  adalah  memberi  pengaruh sangat  nyata  dibandingkan  terhadap  pemeli- haraan  media  diam  (netral)  pada  tingkat keyakinan  99%  dengan  perbandingan  1,00: 1,61.  Namun  sebaliknya  pada  fase  juvenil (bentik)  pemeliharaan  dengan  media  diam memberi  pengaruh  sangat  nyata  terhadap pemeliharaan dengan pola gerakan pasut pada tingkat keyakinan 99% dengan  perban- dingan  1,00:1,93.  Selisih  nilai  diterminasi
sebesar  11,7%  diduga  kuat  menurununya persentasi  sintasan  benih  fase  juvenil  adalah dipicu  oleh  kekeringan  dinding  bak  uji  se- bagai  tempat  penempelan  benih  pada  saat penyedotan air mengikuti pola gerakan surut.
Kecepatan  tumbuh  larva  pada  fase Umbo-veliger,  Pedi-veliger dan  juvenil  yang dipelihara pada media mengikuti pola gerak- an pasut cenderung lebih besar dibandingkan dengan pemeliharaan pada media diam. Kea- daan ini diduga kuat sebagai akibat dari daya metabolisme  reaksi  enzim  protease  yang dipelihara pada media  mengikuti pola gerak- an pasut  cenderung lebih tinggi  yaitu 0,0518 Unit  dengan  kandungan  kadar  kalsium  karb- onat  sebesar  94,873±0,04  %  dibandingkan dengan  media  diam  0,0485  Unit  dengan  ka- dar  kalsium  karbonat  sebesar  94,302  ±0,04 %. Nilai kualitas air (suhu, salinitas dan pH) dalam  bak  uji  selama  periode  pengamatan masih  berada  dalam  kisaran  ambang  batas untuk kehidupan kerang mutiara.
Hasil  kajian  ini  disarankan  aplikasi penggunaan  perlakuan  pola  gerakan  pasut hanya  dilakukan  pada  saat  larva  masih  ber- sifat  planktonik,  dan  sebaliknya  ketika  larva mulai  proses  menempel  (fase  bentik),  maka media pemeliharaan larva didiamkan netral.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  ditujukan  kepa- da  Direktur  Perusahan  PT.  Autore  Pearl Culture  (Jens  Knauer,  PhD)  dan  teknisi laboratoriumnya  yang  telah  memberikan  lar- va karang mutiara pada fase D-veliger untuk kebutuhan  riset.  Ucapan  yang  senada  disam- paikan  kepada  Ramli  Marsuki,  S.Pi  dan Balkam  F.  Badi  sebagai  teknisi  budidaya  di UPT. Loka Pengembangan Bio Industri Laut, Puslit.  Oseanografi–LIPI  yang  banyak  mem- bantu  pelaksanaan  penelitan  ini.  Terima kasih  juga  kami  ucapkan  kepada  para  mitra bebestari  yang  telah  banyak  memberikan saran dan masukan untuk memperbaiki mutu paper ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Amalia,  R.  2011.  Pengaruh  jenis  pengem- bang  pada  kultur Streptococcus  ther- mophilus terhadap  aktivitas  enzim protease. Skripsi .  Jurusan  Kimia  Fak. Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Univ.  Brawijaya.  Malang. 65hlm.
Blank,  S.,  M.  Arnoldi,  S.  Khoshnavaz,  L. Treccani,  M.  Kuntz,  K.Mann,  G. Grathwohl,  and  M.  Fritz.  2003.  The nacre  protein  perlucin  nucleates growth  calcium  carbonate  crystals. J. of Microscopy , 212:280-291. Caiping,  M.,  Z.  Cen,  N.  Yancheng,  X. Liping,  and  Z.  Rongqing.  2005.  Ex- traction  and  purification  of  matrix protein from the nacre of pearl oyster Pinctada  fucata . Tsinghua  Science Technology , 10(4):499-503.
Feng,  Q.,  Zi  Fang,  Z.  Yan,  R.  Xing,  L.  Xie, and  R.  Zhang.  2009.  The  structure- fungsional  relationship  of  MS17,  a matrix protein from pearl oyster Pinc- tada  fucata.  Acta  Biochim.  Biophys. Sin ., 11:955-962.
Gaspersz,  V.  1989.  Metode  perancangan percobaan  untuk  ilmu  pertanian,
ilmu-ilmu  teknik  dan  biologi.  CV. Armico. Bandung. 472hlm.
Hamzah,  M.S.  2007.  Pengaruh  level  keda- laman terhadap daya tempel larva ke- rang  mabe  ( Pteria  penguin )  dengan jaring  sebagai  kolektor  spat  di  Teluk Kapontori, Pulau Buton-Sulawesi Tenggara. Dalam :  Prosiding  Seminar Nasional  Muluska  dalam  penelitian, konservasi dan ekonomi. BRKP DKP RI bekerja sama dengan Jurusan Ilmu Kelautan,  FPIK  Undip,  Semarang. Hlm.:134-141.
Hamzah,  M.S.  dan  D.E.D.  Setyono.  2009 . Studi pertumbuhan dan  kelangsungan hidup  anakan  kerang  mutiara  ( Pinc- tada maxima ) pada kondisi suhu yang berbeda. Dalam :  Prosiding  Pertemu- an Ilmiah Tahunan ISOI 2008 di Ban- dung.  Ikatan  Sarjana  Oseanologi  In- donesia (ISOI). Hlm.:240-246.
Hamzah, M.S. 2013. Daya penempelan larva kerang  mutiara  ( Pinctada  maxima ) pada kolektor dengan posisi tebar dan kedalaman  berbeda. J.  Ilmu  dan  Tek- nologi Kelautan Tropis , 5(1):60-68.
Hamzah,  M.S.  2015.  Sintasan  dan  pertum- buhan  anakan  siput  mata  bulan  ( Tur- bo  chrysostomus L.)  pada  kondisi suhu  yang  berbeda. J.  Ilmu  dan  Tek- nologi  Kelautan  Tropis, 7(1):299- 308.
Hamester,  M.R.R.,  P.S.  Balze,  and  D. Becker.  2012.  Characterization  of calcium carbonate obtained from oys- ter  and  mussel  shells  and  incorpora- tion  in  Polypropylene. Materials  Re- search, 15(2):204-208.
Haws,  M.  and  S.  Ellis.  2000.  Aquafarmer information  sheet:  colectiong  black- lipped  pearl  oyster  spat.  Resources Center  Univ.  Of  Hawaii  at  Hilo,  HI 96720  USA.  Center  for  Tropical  and Subtropical  Aquaculture  CTSA  Pub- lication No. 144. 8p.
Islami,  M.M.  2012.  Beberapa  aspek  bio- ekologi  moluska  terkait  kondisi  pa-
sang  surut. Fauna  Indonesia ,  11(1):
37-43.
Litaay,  M.  2011.  Budidaya  lola Trochus nilotiucus L.  refleksi  pengembangan budidaya Indonesia. Dalam :  Refleksi pengembangan  budidaya  kekerangan di  Indonesia.  Sugadi,  M.F.,  I.N.A. Giri, and D. Pringgenies ( eds .). Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Kelau- tan  dan  Perikanan.  Pusat  Penelitian dan  Pengembangan  Perikanan  Budi- daya Jakarta. Hlm.:149-163. Mouries,  L.P.,  M.J.  Almeida,  C.  Ribeiro,  J. Peduzzi,  M.  Barthelemy,  C.  Milet, and  E.  Lopez.  2002.  Soluble  silklike organic  matrix  in  the  nacreous  layer the bivalve Pinctada  maxima. Eur.  J. Biochim . 269:4994-5003
Naganuma,  T.,  W.  Hoshino,  Y.  Shikanai,  R. Sato,  K.  Liu,  K.  Muramoto,    M. Osada, K. Yoshimi, T. Ogawa, and S. Sato.  2014.  Novel  matrix  proteins  of Pteria  penguin Pearl  Oyster  shell nacre  homologous  to  the  jacalin- related  ß-prism  prism  fold  lectin. PLoS  One ,  9(11):e112326.  doi:10.
1371/journal.
Susilowati,  R.,  K.  Sumantadinata.  2011.  Ke- ragaman  genetik  tiram  mutiara  seba- gai  informasi  dasar  untuk  pemuliaan tiram mutiara. Dalam : Refleksi pengembangan  budidaya  kekerangan di  Indonesia.  Sugadi,  M.F.,  I.N.A. Giri, and D. Pringgenies ( eds .). Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Kelau- tan  dan  Perikanan,  Pusat  Penelitian dan  Pengembangan  Perikanan  Budi- daya Jakarta. Hlm.:53-67.
Zeng,  H.,  C.  Zhang,  W.  Cao,  S.  Liu,  and  H. Ji.  2009.  Preparation  and  chracteri- sation  of  the  pearl  oyater  ( Pinctada martensii )  maet  protein  hydrolysates with  a  high  Fischer  ratio. Internati- onal  J.  of  Food  Science  and  Techno- logy , 44:1183-1191.
Diterima : 17 November 2015 Direview : 30 November 2015 Disetujui : 29 Desember 2015