## B A A R
Bulletin of Applied Animal Research
https://www.ejournal.unper.ac.id/index.php/BAAR 2(1):33-37, Februari 2020 pISSN 2714-5395   eISSN 2684-8007
Kandungan Neutral Detergent Fibre (NDF), Acid Detergent Fibre (ADF), Hemiselulosa, Lignin dan Selulosa Onggok yang Difermentasi  Trichoderma reesei dengan Suplementasi N, S, P.
Pramisti Wildany Putri, Surahmanto dan Joelal Achmadi Faculty of Animal and Agricultural Sciences, Diponegoro University Tembalang Campus, Semarang 50275 Central Java – Indonesia a E-mail: pramistiwildany@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan Neutral Detergeni Fibre (NDF), Acid Detergent Fibre  (ADF),  hemiselulosa,  selulosa  dan  lignin  onggok  yang  difermentasi  Trichoderma  ressei  dengan suplementasi N, S, P. Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap terdiri dari 4 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan terdiri dari T0 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 0 day incubation), T1 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 2 days incubation), T2 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 4 days incubation), T3 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 6 days incubation). Data yang diperoleh kemudian dianalisis menggunakan analisis of variance (ANOVA),  apabila  terdapat  pernedaan  nyata  maka  dilanjutkan  menggunakan  uji  Duncan.  Parameter  yang diamati yaitu kandungan NDF, ADF, hemiselulosa, selulosa dan lignin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fermentasi  onggok  menggunakan  Trichoderma  reesei  dengan  suplementasi  N,  S,  P  berpengaruh  nyata terhadap kandungan NDF, selulosa dan lignin (P<0,05) namun tidak berpengaruh terhadap kandungan ADF dan hemiselulosa (P>0,05).
Kata Kunci : NDF, ADF, Hemiselulosa, Selulosa.

## ABSTRACT
This research was aimed to determine Neutral Detergeni Fibre (NDF), Acid Detergent Fibre (ADF), hemicellulose,  lignin  and  cellulose  contents  of  onggok  fermented  by  Trichoderma  reesei  with  N,  S,  P supplementation.  The  experimental  design  was  a  completely  randomized  design  with  4  treatments  and  5 replications. The treatments were T0 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 0 day incubation), T1 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 2 days incubation), T2 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 4 days incubation), T3 (onggok + NSP + T. reesei 1,5% 6 days incubation). Data were analyzed by using analysis of variance, when there was difference  among  the  treatment  it  was  continued  with  Duncan.  The  observed  variable  are  NDF,  ADF, hemicellulose, lignin and cellulolse contents. The result of the research concluded that the contents of NDF, lignin  and  cellulose  significantly  different  (P<0,05)  but  the  contents  of  ADF  and  hemicellulose  are  not (P>0,05).
Keywords : NDF, ADF, Hemicellulose, Cellulose.

## PENDAHULUAN
Pakan  merupakan  salah  satu  faktor  penentu dalam  keberhasilan  usaha  peternakan  disamping bibit,  kesehatan  dan  manajemen  pemeliharaan. Dalam  industri  peternakan  pakan  memiliki  biaya produksi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan komponen  lainnya.  Upaya  yang  dapat  dilakukan untuk mengurangi tingginya biaya pakan yaitu
dengan  melakukan  pemanfaatan  hasil  samping pertanian  atau  perkebunan  sebagai  bahan  pakan alternatif.  Hasil  samping  industri  pertanian  atau perkebunan  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai bahan pakan alternatif salah satunya onggok.
Onggok  merupakan  hasil  samping  dari pengolahan  argoindustri  tepung  tapioka  yang masih mengandung karbohidrat dan protein (Ari et al., 2014). Onggok mengandung serat kasar yang di dalamnya  terdapat  selulosa,  hemiselulosa  dan
lignin  yang  merupakan  bagian  terbesar  dari komponen  polisakarida  non  pati.  Pemanfaatan onggok  sebagai  pakan  ternak  masih  memiliki beberapa  kendala  yaitu  rendahnya  kandungan protein  dan  tingginya  serat  kasar.  Kandungan nutrien dalam onggok kering diantaranya kadar air 16,55%,  protein  2,88%,  lemak  1,09%,  abu 6,16%, serat kasar 34,58% dan pati 38% (Wijayanti et  al.,  2012).  Penerapan  teknologi  fermentasi onggok  sebagai  pakan  ternak  diharapkan  dapat meningkatkan kandungan protein dan menurunkan kandungan  serat.  Fermentasi  dilakukan  dengan memanfaatkan  mikroba  berupa  Trichoderma reesei.
Peranan  Trichoderma  reesei  dalam  proses fermentasi  yaitu  mendegradasi  selulosa  dan  pati menjadi  protein  dengan  menghasilkan  enzim selulolitik  (Fransistika  et  al.,  2012).  Selain menghasilkan  enzim  selulolitik  kapang  dari golongan  Trichoderma  mampu  menghasilkan enzim xyloglukagonik yaitu enzim yang berfungsi untuk  mempermudah  enzim  selulolitik  dalam mendegradasi  selulosa  dan  pati  (Gunam,  2011). Penambahan  suplementasi  yang  diperlukan  untuk pertumbuhan  kapang  saat  proses  fermentasi  yaitu urea  [CO(NH2)2]  sebagai  sumber  N,  amonium sulfat [(NH4)2SO4] sebagai sumber S dan sodium bifosfat cair [NaH2PO4 + 12H2O] sebagai sumber P. Penambahan suplementasi pada proses fermentasi  yaitu  sebagai  sumber  nutrien  dan metabolisme bagi Trichoderma reesei agar tumbuh secara optimal. Sumber N yang berasal dari protein dimanfaatkan oleh kapang untuk pertumbuhan dan metabolisme. Hal ini dikarenakan kapang merupakan organisme hemoorgantrotof dan memperleh  nutrisinya  secara  absorbsi  dengan bantuan  enzim  ekstraseluler  yang  terdiri  dari pretoelitik, amilolitik, lipotok dan selulolitik untuk memecah  biomolekul  kompleks  berupa  protein, karbohidrat  dan  lemak  menjadi  monomernya. Monomer  protein,  karbohidrat  dan  lemak  yang terbentuk  kemudian  akan  diasimilasi  menjadi sumber  karbon  dan  energi  untuk  selanjutnya dimanfaatkan  untuk  proses  pertumbuhan  dan metabolisme kapang.
Penelitian tentang pemanfaatan mikroorganisme  berupa  kapang  dalam  proses fermentasi  pakan  telah  banyak  dilakukan  dan menunjukkan  adanya  pengaruh  positif  terhadap peningkatan kandungan nutrien. Hal ini dikarenakan  adanya  peningkatan  aktivitas  enzim selulolitik yang dihasilkan oleh Trichoderma reesei dalam  mendegradasi  selulosa  dan  pati  (Safaria  et al., 2013).

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  bulan  September  2018- Januari 2019 dan terbagi dalam 4  tahap yaitu tahap persiapan, tahap pelaksanaan, pengambilan data dan analisis  laboratorium.  Penelitian  dilaksanakan  di Laboratorium  Ilmu  Nutrisi  dan  Pakan  Fakultas Peternakan  dan  Pertanian  Universitas  Diponegoro, Semarang.  Materi  yang  digunakan  yaitu  onggok kering sebanyak 3,750 kg, akuabides, Trichoderma reesei, urea [CO(NH2)2], amonium sulfat [(NH4)2SO4],  sodium  bifosfat  cair  [NaH2PO4  + 12H2O],  aluminium  foil  dan  pH  stick.  Peralatan yang  digunakan  meliputi  fermentor  untuk  tempat fermentasi  onggok,  plastik  cor  dan  lakban  untuk membungkus  fermentor,  kapas  dan  kawat  jaring untuk  lubang  fermentor,  kabel  NYA    untuk  rak tabung fermentor dan lampu bohlam untuk pemanas dalam fermentor, nampan untuk meletakkan onggok di dalam fermentor, kompor dan teko untuk sumber pemanas saat proses penguapan serta autoklaf untuk sterilisasi  onggok.  Bahan  yang  digunakan  dalam analisis  laboratorium  yaitu  larutan  ADF,  larutan NDF,  natrium  sulfit  [Na2SO3],  aseton,    akuades, dan H2SO4 pekat. Peralatan yang  digunakan  yaitu timbangan  analitik  kapasitas  300  gram  dengan ketelitian  0,0001  gram,  oven  listrik,  tanur  listrik, kompor listrik, pompa vakum, kertas minyak, gelas beker, crusible dan eksikator.
.Tahap  persiapan  dimulai  dengan  menyiapkan onggok  sebanyak  3,750  kg  kemudian  dikeringkan selama  2  hari  di  bawah  sinar  matahari.  Analisis kandungan  nutrien  onggok  meliputi  analisis  bahan kering, protein kasar, sulfur dan fosfat. Pembuatan fermentor  menggunakan  bilah  bambu  dan  ditutup rapat  dengan  plastik  cor,  kemudian  dilakukan sterilisasi  menggunakan  metode  penguapan  air panas  hingga  mencapai  kelembaban  90%.  Tahap perhitungan starter Trichoderma dan sumber N, S, P yang akan ditambahkan ke dalam substrat.
Tahap pelaksanaan yaitu perlakuan berupa inkubasi yang  berlangsung  selama  6  hari.  Setelah  proses inkubasi,  sampel  ditimbang  untuk  dianalisis  di laboratorium.  Tahap  pengambilan  data  dilakukan sesuai  waktu  perlakuan  yaitu  hari  ke-0,  ke-2,  ke-4 dan ke-6. Tahap analisis laboratorium berlangsung  selama  6  minggu  dan  dilaksanakan  di Laboratorium  Ilmu  Nutrisi  dan  Pakan,  Fakultas Peternakan  dan  Pertanian  Universitas  Diponegoro, Semarang.  Analisis  yang  dilakukan  meliputi analisis  kandungan  bahan  kering  menggunakan metode Proksimat, analisis kandungan NDF, ADF, hemiselulosa,  lignin  dan  selulosa  menggunakan metode Van Soest.
Penelitian  menggunakan  metode  Rancangan  Acak Lengkap  terdiri  dari  4  perlakuan  dan  5  ulangan. Adapun taraf perlakuan tersebut adalah
T0 : Onggok, T. reesei + N, S, P Inkubasi 0 hari T1 :  Onggok,  T.  reesei  +  N,  S,  P Inkubasi 2 hari T2 :  Onggok,  T.  reesei  +  N,  S,  P Inkubasi 4 hari T3 :  Onggok,  T.  reesei  +  N,  S,  P Inkubasi 5 hari Hasil  penelitian  berupa  nilai  tengah  diuji menggunakan  analisis  ANOVA,  apabila  hasil
menunjukkan  pengaruh  nyata  (P<0,05)  maka dilanjutkan  menggunakan  Uji  Duncan  pada    taraf 5% (Steel dan Torrie, 1995).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Parameter  yang  diuji  dalam  penelitian  ini meliputi kandungan Neutral Detergent Fibre (NDF), Acid  Detergent  Fibre  (ADF),  hemiselulosa,  lignin dan selulosa disajikan pada Tabel :
Tabel 1. Data kandungan fraksi serat onggok fermentasi. Parameter (%) T0 T1 T2 T3 NDF 33,6772 b 35,1952 a 33,8219 b 30,6375 c ADF 29,9630 32,3406 31,2936 29,0455 Hemiselulosa 3,7141 2,8546 2,5282 1,5921 Selulosa 25,1296 ab 28,0037 a 26,4655 ab 23,4493 b Lignin 4,8405 b 4,3677 b 4,8099 b 5,5594 a
Superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).

## Neutral Detergent Fibre (NDF)
Berdasarkan hasil analisis ragam fermentasi onggok  menggunakan  Trichoderma  reesei  dengan suplementasi  N,  S,  P  pada  waktu  inkubasi  yang berbeda yang terdapat pada Tabel 1.  menunjukkan adanya  pengaruh  nyata  terhadap  kandungan  NDF (P<0,05). Hal ini disebabkan karena selama proses inkubasi  Trichoderma  reesei  menghasilkan  enzim selulase  yang  mendegradasi  selulosa  dan  lignin yang merupakan bagian dari NDF.
Kandungan  NDF  cenderung  menurun selama  inkubasi,  meskipun  pada  perlakuan  T1 mengalami  peningkatan  jika  dibandingkan  dengan T0.  Terjadinya  peningkatan  kandungan  NDF  pada perlakuan  T1  disebabkan  karena  pada  awal fermentasi,  kapang  aktif  menggunakan  nutrien dalam substrat untuk pertumbuhan. Karena struktur tubuh  kapang  terdiri  dari  dinding  sel,  maka  terjadi penambahan  serat  pada  onggok  oleh  dinding  sel kapang  (Djaya  et  al.,  2016).  Faktor  lain  yang menyebabkan tingginya kandungan NDF pada awal fermentasi yaitu Trichoderma reesei terlebih dahulu mencerna  amilum  sebelum  mendegradasi  selulosa. Degradasi  NDF  oleh  Trichoderma  reesei  semakin tinggi  diperoleh  pada  perlakuan  T3.  Penurunan kandungan NDF selama proses inkubasi disebabkan oleh  adanya  aktivitas  kapang  dalam  mencerna komponen  dinding  sel.  Sesuai  dengan  pendapat Crampton  dan  Haris  (1969)  bahwa  menurunnya kandungan  NDF  bahan  pakan  yang  memperoleh perlakuan fermentasi dikarenakan adanya
penurunan komponen dinding sel yaitu hemiselulosa yang mudah dicerna oleh mikroba.

## Acid Detergent Fibre (ADF)
Hasil  analisis  ragam  fermentasi  onggok menggunakan Trichoderma reesei dengan suplementasi  N,  S,  P  pada  waktu  inkubasi  yang berbeda yang tertera pada Tabel 1. tidak signifikan. Hal  ini  disebabkan  oleh  aktivitas  kapang  selama proses  inkubasi  cenderung  mencerna  fraksi  yang lebih mudah larut seperti amilum dan hemiselulosa sebelum  mendegradasi  selulosa.  Sesuai  dengan pendapat  Sukarti  et  al.,  (2012)  yang  menyatakan bahwa  saat  awal  proses  fermentasi  Trichoderma reesei  lebih  dahulu  memanfaatkan  fraksi  mudah larut untuk memenuhi  kebutuhan hidup pokok dan pertumbuhan,  sehingga  pada  awal  fermentasi kandungan  di  dalam  onggok  seperti  lignin  dan selulosa yang bersifat sukar larut belum terdegradasi oleh enzim selulase.
Penurunan kandungan ADF selama fermentasi  yang  terjadi  pada  perlakuan  T3 disebabkan karena adanya perombakan dinding sel menjadi  komponen  yang  lebih  sederhana  menjadi glukosa dan larutnya sebagian dari dinding sel dan hemiselulosa dalam larutan deterjen asam pada saat proses  pemanasan,  sehingga  terjadi  peningkatan porsi  ADS  (Acid  Detergent  Solution)  dan  diikuti penurunan porsi ADF. Faktor lain yang mempengaruhi penurunan kandungan ADF onggok yaitu  terjadinya  pemutusan  ikatan  lignoselulosa yang  tersusun  dari  komponen  hemiselulosa,  lignin
dan selulosa oleh mikroba. Sesuai dengan pendapat Setiawan  et al., (2014) penurunan kandungan ADF bahan  pakan  setelah  diberi  perlakuan  fermentasi dengan  mikroba  terjadi  karena  adanya  pemutusan ikatan lignoselulosa yang komponennya terdiri dari lignin,  selulosa  dan  hemiselulosa  akibat  aktivitas mikroba  yang  terus  berkembang  selama  proses fermentasi.

## Hemiselulosa
Hasil  analisis  ragam  fermentasi  onggok menggunakan Trichoderma reesei dengan suplementasi  N,  S,  P  pada  waktu  inkubasi  yang berbeda  yang  terdapat  pada  Tabel  1.  tidak menunjukkan  adanya  pengaruh  nyata  terhadap kandungan hemiselulosa (P>0,05).
Kandungan  hemiselulosa  onggok  yang difermentasi  cenderung  mengalami  penurunan seiring  lamanya  inkubasi.  Penurunan  kandungan hemiselulosa  terjadi  karena  hemiselulosa  memiliki sifat  lebih  mudah  larut  jika  dibandingkan  dengan selulosa.  Menurut  Van  Soest  (1982)  komponen serat  kasar  berupa  hemiselulosa  memiliki  sifat mudah  dicerna  oleh  mikroba  jika  dibandingkan dengan selulosa. Penurunan kandungan hemiselulosa selama inkubasi menunjukkan adanya proses hidrolisis hemiselulosa menjadi manosa dan glukosa  yang  bersifat  mudah  larut  sehinga  dapat digunakan  oleh  kapang  sebagai  sumber  nutrien untuk  pertumbuhan.  Jaelani  et  al.,  (2008) menyatakan  bahwa  selama  berlangsungnya  proses fermentasi,  akan  terjadi  peristiwa  degradasi komponen polisakarida mannan menjadi oligosakarida  ditandai  dengan  adanya  penurunan kandungan hemiselulosa.

## Selulosa
Berdasarkan hasil analisis ragam fermentasi onggok  menggunakan  Trichoderma  reesei  dengan suplementasi  N,  S,  P  pada  waktu  inkubasi  yang berbeda yang terdapat pada Tabel 1.  menunjukkan adanya  perbedaan  nyata  pada  tiap  perlakuan  dan berpengaruh terhadap kandungan selulosa.
Produksi  enzim  selulase  merupakan  tahap dihasilkannya enzim dari proses fermentasi onggok akibat  dari  metabolisme  Trichoderma  reesei. Perolehan  kandungan  selulosa  yang  rendah  pada perlakuan  T3,  sesuai  dengan  peranan  Trichoderma reesei  dalam  proses  fermentasi  yaitu  dapat memecah  selulosa  menjadi  komponen  yang  lebih sederhana  berupa  glukosa  dengan  memanfaatkan enzim  selulase  yang  dihasilkan.  Menurut  Hatta  et al.,  (2014)  keberadaan  enzim  selulase  yang dihasilkan  oleh  mikroorganisme  selulolitik  pada proses  fermentasi  akan  mempermudah  proses pemecahan  selulosa  menjadi  komponen  glukosa. Faktor lain yang menyebabkan rendahnya kandungan  selulosa  pada  perlakuan  T3  yaitu kandungan  ADF  onggok  hasil  fermentasi  yang
cenderung  menurun  selama  inkubasi.  Semakin rendah kandungan  ADF dalam suatu bahan pakan, maka  akan  menyebabkan  semakin  rendah  pula kandungan selulosa dikarenakan selulosa merupakan bagian dari ADF. Kenaikan kandungan selulosa pada perlakuan T1 dan T2 disebabkan oleh kemungkinan  adanya  kandungan  pati  yang  tidak terlarut  saat  proses  pemanasan  sehingga  terukur menjadi  selulosa.  Sesuai  dengan  pendapat  Naufala dan Pandebesie (2015) yang menyatakan bahwa pati yang  tidak  ikut  terlarut  dalam  proses  pemanasan akan terhitung sebagai selulosa.

## Lignin
Berdasarkan hasil analisis ragam fermentasi onggok  menggunakan  Trichoderma  reesei  dengan suplementasi  N,  S,  P  pada  waktu  inkubasi  yang berbeda yang terdapat pada Tabel 1.  menunjukkan adanya  pengaruh  nyata  terhadap  kandungan  lignin (P<0,05). Hal ini ditandai dengan adanya penurunan kandungan lignin pada awal masa inkubasi.
Penurunan  kandungan  lignin  pada  awal masa  inkubasi  disebabkan  karena  onggok  pada perlakuan  T1  telah  mengalami  proses  fermentasi sejak awal inkubasi, sehingga terjadi perenggangan ikatan  lignohemiselulosa  dan  lignoselulosa  oleh enzim selulase yang dihasilkan kapang Trichoderma  reesei.  Sesuai  dengan  pendapat Naufala  dan  Pandebesie  (2015)  fermentasi  bahan pakan  bertujuan  untuk  memecah  ikatan  kompleks lignoselulosa  menjadi  selulosa  dan  selanjutnya dipecah  kembali  menjadi  glukosa  oleh  enzim selulase.  Berbeda  dengan  tujuan  fermentasi  untuk menurunkan  kandungan  lignin  onggok  agar diperoleh kecernaan yang tinggi, pada penelitian ini kandungan  lignin  onggok  fermentasi  justru mengalami  kenaikan  yaitu  pada  perlakuan  T2  dan T3. Faktor yang mempengaruhi kenaikan kandungan  lignin  yaitu  Menurut  Pielhop  et  al. (2015)  penyebab  kenaikan  kadar  lignin  yaitu terbentuknya  lignin  semu  yang  terukur  menjadi lignin  yang  disebabkan  karena  terjadinya  ikatan silang antara polisakarida dengan ester.

## KESIMPULAN
Fermentasi  onggok  menggunakan  starter berupa Trichoderma reesei dengan suplementasi N, S,  P  memberikan  pengaruh  yang  nyata  terhadap kandungan  NDF,  lignin  dan  selulosa  namun  tidak memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  kandungan ADF dan hemiselulosa.

## REFERENSI
Ari, I. N., S. Tantalo dan Liman. 2014. Survei sifat fisik  dan  kandungan  nutrien  onggok  terhadap metode  pengeringan  yang  berbeda  di  dua
Kabupaten  Provinsi  Lampung.  J.  Ilmiah Peternakan Terpadu. 2(2) : 58-62.
Crampton,  E.  W.  Dan  L.  E.  Haris.  1969.  Applied Animal  Nutrition  1st  Ed.  The  Engsminger Publishing Company. California, USA.
Djaya, M. S., S. Dharmawati dan A. Nursalam. 2016.
Tingkat  penggunaan  Trichoderma  sp  dalam fermentasi  pelepah  sawit  terhadap  kandungan lignin,  adf  dan  ndf  pada  lama  penyimpanan yang berbeda. J. Budidaya Tanaman
Perkebunan Politeknik Hasnur. 2(2) : 67-72.
Fransistika,  R.,  N.  Idiawati  dan  L.  Destiarti.  2012.
Pengaruh waktu fermentasi campuran Trichoderma  neesei  dan  Aspergillus  Niger terhadap  kandungan  protein  dan  serat  kasar ampas  sagu.  J.  Kajian  Komunikasi.  1(1)  :  35- 39.
Hatta, U., O. Sjofjan dan B. Sundu. 2014. Pengaruh fermentasi kombinasi jamur Plourotus ostreatus dengan Trichoderma viridae terhadap kandungan nutrien dan aktivitas enzim selulase bungkil kopra. J. Ilmu-Ilmu Peternakan 24(2) : 20-30.
Jaelani, A. W. G. P., Suharyadi dan I. Rahayu. 2008.
Hidrolisis bungkil  inti  sawit  (Elaeis  guneensis Jacq) oleh kapang Trichoderma reesei sebagai pendegradasi  polisakarida  mannan.  Animal Production. 10(1) : 42-49.
Naufala,  W.  A.,  dan  Pandebesie,  E.  S.  2015.
Hidrolisis eceng gondok dan sekam padi untuk menghasilkan gula reduksi sebagai tahap awal produksi  bioetanol. J. Teknik  ITS. 4(2)  :  109- 113.
Pielhop,  T.,  G.  O.  Larrazabar,  M.  H.  Studer,  S. Brethauer,  C.  M.  Seidal  dan  P.  R.  Von  Rohr.
2015.  Lignin  repolymerisation  in  spruce autohydrolysis  pretreatment  increase  cellulase deactivation.  Green  Chemistry  Article  Online Journal.
Safaria,  S.,  N.  Idiawati  dan  T.  A.  Zaharah.  2013. Efektivitas  campuran  enzim  selulase  dari Aspergillus  niger  dan  Trichoderma  reesei dalam  menghidrolisis substrat sabut  kelapa. J. Kimia Khatulistiwa. 2(1) : 46-51.
Setiawan,  G.,  T.  Dhalika  dan  Mansyur.  2016. pengaruh  penambahan  mikroba  lokal  (MOL) terhadap kadar neutral detergent fiber dan acid detergent  fiber  pada  ransum  terfermentasi.  J. Unpad. 3(2) : 1-11.
Steel, R. G. D. dan Torrie, J. H. 1995. Prinsip  dan
Prosedur Statistika Suatu Pendekatan Biometrik.  Catatan  Ke-4.  PT.  Gramedia Pustaka  Utama,  Jakarta  (Diterjemahkan  Oleh B. Sumantri).
Sukarti,  E.,  B.  Sulistiyanto  dan  S.  Mukodiningsih. 2012. Kualitas serat limbah pertanian dan hasil samping  pertanian  yang  difermentasi  dengan Aspergilus  niger  pada  aras  dan  lama pemeraman yang berbeda. J. Animal Agriculture. 1(2) : 77-85.
Van  Soest  P.  J.  1982.  Nutritional  Ecology  of  the Ruminant : Ruminant Metabolism, Nutritional Strategies the Cellulolytic Fermentation and the Chemistry of Foragesand Plant Fibers. Cornell University O & B Books Inc. USA.
Wijayanti,  D.  K.,  C.  Lestari  dan  M.  T.  Mulyanto. 2012.  Pengaruh  overliming  pada  pembuatan etanol  dari  limbah  pabrik  tepung  tapioka (onggok) dengan hidrolisis asam dan enzim. J. Teknik POMITS. 1(1) : 1-3.