ANALISIS KADAR PROTEIN, ASAM AMINO, DAN DAYA TERIMA PEMBERIAN MAKANAN TAMBAHAN (PMT) PEMULIHAN BERBASIS LABU KUNING ( CUCURBITA MOSCHATA )

## UNTUK BATITA GIZI KURANG
Fiona Christina Widya, Gemala Anjani * , Ahmad Syauqy
Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
* Penulis Penanggungjawab. E-mail: gemaanjani@gmail.com

## ABSTRACT
Background: Malnourished toddlers are at higher risk of morbidity and mortality. Supplementary food (PMT-P) made of nutrient-rich ingredients such as pumpkin (Cucurbita moschata) may become a beneficial dietary alternative. The aims of the study is to compare protein, amino acid content, and acceptability of PMT-P pumpkin-based formulations. Methods: Three pumpkin-based formulations—20% pumpkin seeds (A1); 25% pumpkin seeds (A2); 30% pumpkin seeds (A3)—were analyzed in a completely randomized experiment with three replications, with the exception of amino acid content analysis in which was done  with one replication. Protein content was determined using Kjeldahl while amino acid content used High-Performance Liquid Chromatography (HPLC). Twenty-five panelists assessed each formulation with  a  five-scale  hedonic  test.  Statistical  analysis  was  completed  with  One-way  ANOVA  for  protein  composition  and Kruskal-Wallis  test  for  sensory  evaluation  data;  all  on  α  =  5%  significance  level.  Amino  acid  content  is  analyzed descriptively.
Result :  Protein  content  (%  w/w)  was  significantly  different  among  three  formulations  (p  =  0.000)  with  A3  being  the highest  (13,87±0.30),  followed  by  A2  (11.70±0.19)  and  A1  (9.63±0.23).  The  formulation  with  the  highest  amino  acid content (% w/w) is shown in A3 (10,00), followed by A2 (8.65) and A1 (7.39). The best overall acceptability (in terms of appearance, color, and aroma) was found in formulation A1 (p = 0.007; 0.000; and 0.028).
Conclusion: Pumpkin-based PMT-P with 30% pumpkin seeds has the highest protein and amino acid content, whereas PMT-P with 20% pumpkin seed has the best overall acceptability. The recommended formulation according to this study is A1.
Keywords: protein; amino acid; pumpkin seeds; supplementary food; toddler; malnutrition

## ABSTRAK
Latar Belakang: Batita dengan status gizi kurang memiliki risiko morbiditas dan mortalitas yang lebih tinggi. Pemberian Makanan  Tambahan  (PMT)  Pemulihan  yang  terbuat  dengan  bahan-bahan  bernilai  gizi  tinggi  seperti  labu  kuning (Cucurbita  moschata)  dapat  menjadi  alternatif  makanan  yang  baik.  Tujuan  penelitian  adalah  untuk  menganalisis perbedaan  kandungan  protein,  asam  amino,  dan  daya  terima  dari  PMT-P  berbasis  labu  kuning  dengan  tiga  macam formulasi.
Metode: Tiga macam formulasi—20% biji labu (A1); 25% biji labu (A2); 30% biji labu (A3) —diuji dalam eksperimen rancangan  acak  lengkap  dengan  tiga  ulangan,  kecuali  untuk  uji  kandungan  asam  amino  yang  hanya  dilakukan  satu pengulangan.  Kandungan  protein  diuji  dengan  metode  Kjeldahl,  di  mana  kandungan  asam  amino  dianalisis  dengan metode HPLC. Uji organoleptik dilakukan dengan uji hedonik berskala 5 pada 25 orang panelis. Perbedaan kandungan protein diuji dengan One Way ANOVA dan daya terima dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis pada α = 5%. Sedangkan kandungan asam amino dianalisis secara deskriptif.
Hasil: Kadar  protein  (%  w/w)  menunjukkan  perbedaan  signifikan  antarformulasi  (p  =  0,000),  dengan  kandungan tertinggi pada formulasi A3 (13,87±0,30), diikuti dengan A2 (11,70±0,19) and A1 (9,63±0,23). Formulasi dengan kadar asam amino (% w/w) tertinggi secara keseluruhan adalah pada formulasi A3 (10,00), diikuti dengan A2 (8,65) dan A1 (7,39). Tingkat kesukaan tertinggi dari segi penampilan, warna, dan aroma ditemukan pada formulasi A1 (p = 0,007; 0,000; and 0,028).
Simpulan: Formulasi PMT-P berbasis labu kuning dengan 30% biji labu kuning memiliki kandungan protein dan asam amino  tertinggi,  sedangkan  PMT-P  dengan  20%  biji  labu kuning  memiliki  tingkat  kesukaan  paling  tinggi.  Formulasi yang direkomendasikan untuk digunakan adalah formulasi A1.
Keywords: protein; asam amino; biji labu kuning; PMT; batita; gizi kurang

## PENDAHULUAN
Salah  satu  permasalahan  gizi  yang  tengah dihadapi oleh Indonesia adalah gizi kurang pada anak bawah  lima  tahun  (balita) 1 .  Hingga  tahun  2018,
tercatat  balita  di  Indonesia  dengan  berat  badan  di bawah  normal  yang  mengalami  gizi  buruk  sebesar 3,9%  sedangkan  anak  balita  dengan  gizi  kurang mencapai angka 13,8% 2 . Sedangkan di Jawa Tengah,
Submitted : 25 Agustus 2019 Accepted : 21 Oktober 2019 Volume 8, Nomor 4, Tahun 2019, Halaman 207-218 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/

## J OURNAL OF N UTRITION C OLLEGE
tercatat  terdapat  982  kasus  balita  gizi  buruk  pada tahun  2016  di  mana  di  antaranya  masih  berusia  di bawah tiga tahun 3 . Anak dengan gizi buruk maupun gizi kurang  memiliki risiko yang lebih tinggi dalam peningkatan  frekuensi  mengalami  penyakit  infeksi, seperti diare dan pneumonia, gangguan pertumbuhan dan  perkembangan,  serta  berisiko  mengalami peningkatan  keparahan  dalam  morbiditas  dan mortalitas  jangka  pendek  maupun  jangka  panjang ketika  terinfeksi  oleh  penyakit  yang  dalam  jangka panjang mampu menghambat produktivitas ekonomi suatu  negara 4,5 .  Salah  satu  penyebab  paling  utama terjadinya  gizi  kurang  pada  anak  batita  adalah ketidakcukupan  asupan  makanan  bergizi  baik kuantitas  maupun  kualitasnya.  Protein  merupakan salah  satu  zat  gizi  makro  yang  dibutuhkan  dalam pertumbuhan dan perkembangan anak yang optimal 6 . Namun  menurut  studi  melaporkan  bahwa  sebagian batita  dengan  gizi  kurang  masih  belum  mengasup protein  dalam  jumlah  yang  cukup 7–9 .  Sedangkan beberapa  studi  menyatakan  bahwa  asupan  protein yang  telah  direkomendasikan  bagi  anak  yang  sehat dapat  membantu  penyembuhan  batita  dengan  gizi kurang, namun protein dalam jumlah yang lebih besar dibutuhkan dalam proses akselerasi tumbuh kembang 10 .
Kualitas  protein  dari  suatu  makanan  dapat dinilai dari daya cerna protein (bioavailabilitas) dan keberagaman  perbandingan  kandungan  asam  amino yang  dimiliki  makanan  tersebut 11 .  Asam  amino merupakan  bagian  dari  protein  yang  masing-masing memiliki peran dan fungsi spesifik bagi pertumbuhan, perkembangan,  dan  fungsi  imun  batita.  Studi-studi yang  dilaksanakan  di  Peru  menunjukan  adanya kenaikan  berat  badan  pada  anak  setelah  diberikan tepung gandum yang telah difortifikasi dengan asam amino lisin 10 . Penelitian di Jepang melaporkan bahwa suplementasi  lisin,  triptofan,  asam  amino  rantai cabang, metionin, dan fenilalanin memiliki hubungan signifikan  dengan  panjang  badan  tikus  yang mengalami malnutrisi 12 .
Salah satu upaya untuk mengatasi permasalahan  gizi  kurang  pada  anak  batita  adalah dengan  Pemberian  Makanan  Tambahan  (PMT) Pemulihan 13 .  Salah  satu  strategi  pemerintah  untuk menangani  problematika  gizi  kurang  pada  batita adalah  menyediakan  PMT-P  berbentuk  biskuit pabrikan  kemasan 14 .  Namun  terkadang  terdapat beberapa kendala yang dapat menghambat keberhasilan  manajemen  gizi  kurang,  antara  lain adalah  tidak  semua  anak  batita  gizi  kurang  mampu mendapatkan  biskuit  tersebut  karena  adanya keterbatasan  paket  makanan  yang  ada,  anggota keluarga  yang  ikut  memakan  jatah  biskuit  PMT-P untuk  batita  gizi  kurang,  serta  kelalaian  petugas dalam memberikan informasi terkait cara
mengonsumsi atau mengolah PMT-P menjadi bentuk makanan  selain  biskuit  untuk  mencegah  anak  batita menjadi  bosan 15 .  Oleh  karena  itu, dibutuhkan  solusi alternatif  lainnya  untuk  membantu  menuntaskan permasalahan gizi kurang pada batita.
PMT Pemulihan dapat pula diolah menggunakan  bahan-bahan  lokal  sesuai  dengan kondisi  setempat  daerah  batita  gizi  kurang  dengan kandungan  energi,  protein,  dan  zat  gizi  mikro  yang tinggi  dan  ditujukan  sebagai  makanan  tambahan untuk  membantu  memenuhi  kebutuhan  gizi  batita, bukan  merupakan  alternatif  pengganti  makanan utama.  Penerapan  PMT  Pemulihan  yang  telah dimodifikasi  dalam  berbagai  bentuk  seperti  bubur yang berbahan dasar bermacam-macam bahan seperti ikan,  kacang  hijau,  dan  kuning  telur  telah  terbukti efektif  dalam  memberikan  pengaruh  terhadap perubahan  status  gizi  anak  balita  gizi  kurang 16,17 . Pemerintah  menyarankan  kegiatan  program  PMT Pemulihan  dilakukan  setiap  hari  selama  90  hari selama  berturut-turut  dan  pemasakan  makanan tambahan dilakukan setiap hari apabila memungkinkan, sehingga pengolahan PMT Pemulihan  sebaiknya  mudah,  sederhana,  dan  tidak memerlukan  cara  memasak  yang  rumit.  Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  telah  menyediakan syarat mutu kandungan PMT Pemulihan, di antaranya adalah  suatu  produk  PMT  Pemulihan  setidaknya harus mengandung 400 kalori, 8-12 gram protein, dan 10-18  gram  lemak  di  dalam  setiap  100  gram produknya 18 .
Berbagai  penelitian  telah  melaporkan  bahwa biji-bijian  merupakan  makanan  padat  zat  gizi  yang juga termasuk sebagai sumber protein yang baik dan memiliki keuntungan kesehatan lainnya 19,20 . Sebagai contoh,  biji  labu  kuning  mengandung  jumlah  kalori yang  cukup  besar  yaitu  sebesar  1866  kalori  dalam setiap  100  gram 21 ,  dibandingkan  dengan  jenis  biji- bijian  tumbuhan  yang  buahnya  umum  dikonsumsi oleh  rakyat  Indonesia  lainnya  seperti  biji  nangka (382,79  ±  1,20  kalori/  100  g) 22 dan  biji  jambu  (182 kalori/100  g) 23 .  Selain  itu,  biji  labu  kuning mengandung  jumlah  protein  dalam  jumlah  yang cukup besar, yaitu sebesar 14,05 ± 1,3 s.d. 37,4±0,2 gram  dalam  setiap  100  gram 24,25 ,  dibandingkan dengan  jenis  biji-bijian  lainnya  seperti  biji  nangka (13,50 ±  0,06   s.d.  16,01±0,11  g/100  g) 22,26 dan biji jambu (7,6 ± 0,02 s.d. 11,19 ± 0,28 g/100 g) 23,27 . Buah labu  kuning  sendiri  mengandung  vitamin  A  dalam jumlah  yang  tinggi,  yakni  sebesar  426  miligram dalam  setiap  100  gram  buah  labu  kuning 28 .  Pada tahun 2014, Indonesia mampu menghasilkan 523.063 ton labu kuning, sehingga dapat diperkirakan biji labu kuning  yang  terdapat  dalam  buah  juga  diproduksi dalam  jumlah  yang  besar 29 .  Formulasi  dan pengolahan buah dan biji labu kuning secara tepat dan
optimal dapat menghasilkan produk PMT Pemulihan dengan nilai protein yang tinggi serta memiliki rasa dan tekstur yang diminati oleh batita. Namun hingga sekarang, penggunaan biji labu kuning sebagai bahan makanan  belum  maksimal.  Oleh  karena  itu, pemanfaatan buah dan biji labu kuning sebagai bahan makanan tinggi zat gizi untuk PMT Pemulihan dapat dikembangkan untuk membantu meningkatkan status gizi batita gizi kurang.
Produk  PMT  Pemulihan  dibuat  dalam  bentuk menyerupai  bubur  yang  memiliki  tekstur  lumat  dan rasa manis alami dapat dimodifikasi kembali menjadi makanan lain seperti es krim, pudding, atau isian roti melalui  proses  pengolahan  tambahan  lainnya sehingga  anak  tidak  mudah  bosan.  Berdasarkan uraian  tersebut,  penelitian  ini  dilakukan  untuk menganalisis  perbedaan  protein,  asam  amino,  dan daya  terima  PMT-P  berbasis  labu  kuning  dari  tiga macam  formulasi:  20%  biji  labu  kuning,  25%  biji labu kuning, dan 30% biji labu kuning.

## METODE
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  dalam  bidang food  production yang menggunakan desain rancangan acak lengkap dengan tiga variasi komposisi biji labu kuning, yaitu A1 (20% biji labu kuning), A2 (25% biji labu kuning), dan A3 (30%  biji  labu  kuning).  Biji  labu  kuning  yang digunakan  berasal  dari  Kecamatan  Sawangan, Kabupaten Magelang. Formulasi dibuat berdasarkan resep PMT peneliti yang persentase zat gizinya telah disesuaikan  dengan  standar  komposisi  gizi  PMT-P oleh Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia dan dianalisis dengan software Nutrisurvey for  Windows 2007.  Biji  labu  kuning  setelah  dicuci bersih  diberi  perlakuan  perendaman  selama  12  jam (berat  biji  :  volume  air  =  1  :  4),  kemudian  dicuci dengan  air  mengalir  dan  dihaluskan  serta  diolah bersama buah labu kuning (25–35%), santan (28,4%), gula merah (10%), tepung beras (5,3%), dan minyak kelapa  sawit  (1,3%)  secara  pengukusan  selama  25 menit.  Pengulangan  dilakukan  sebanyak  tiga  kali. Selanjutnya,  produk  PMT-P  berbasis  labu  kuning yang matang disimpan di plastik kedap udara hingga waktu pengujian.
Tabel 1. Formulasi PMT-P Berbasis Labu Kuning
No Komposisi A1 A2 A3 1 Gula merah 10% 10% 10% 2 Santan 28,4% 28,4% 28,4% 3 Isian biji labu 20% 25% 30% 4 Daging labu kuning 35% 30% 25% 5 Tepung beras 5,3% 5,3% 5,3% 6 Minyak kelapa sawit 1,3% 1,3% 1,3% Total 100% 100% 100%
Variabel  yang  diteliti  terdiri  dari  kandungan protein,  asam  amino,  dan  tingkat  kesukaan  panelis. Kadar  protein  diuji  dengan  metode  Kjeldahl, sedangkan  kadar  asam  amino  diuji  menggunakan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Kedua  uji  kandungan  dilaksanakan  pada  bulan  Juli 2018  di  Laboratorium  Terpadu  Institusi  Pertanian Bogor.  Tingkat  kesukaan  panelis  diuji  melalui  uji hedonik berskala 5 (“1 = sangat tidak suka” hingga “5 = sangat suka”) yang dilakukan pada 28 orang panelis pada bulan Mei 2019 di Laboratorium Teknik Pangan Gedung  Gizi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro.  Syarat  panelis  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah dalam keadaan sehat, bebas dari penyakit  THT  dan influenza ,  tidak  buta  warna  atau mengalami  gangguan  mata,  serta  mengalami gangguan psikologis, tidak alergi terhadap biji-bijian, tidak  melakukan  uji  satu  jam  setelah  mengonsumsi makanan,  serta  konsisten  dalam  pengambilan keputusan. Uji hedonik mencakup penilaian terhadap lima aspek yaitu penampilan, warna, aroma, rasa, dan tekstur.  Pendapat  panelis  terhadap  PMT-P  berbasis labu  kuning  juga  diminta  dengan  mengisi  kolom komentar dalam setiap lembar uji organoleptik.
Hasil pengukuran kandungan protein, kandungan  asam  amino,  dan  tingkat  kesukaan termasuk data numerik sehingga data akan disajikan dalam  bentuk  rerata  dengan  standar  deviasi.  Data kandungan protein dan asam amino termasuk dalam data berskala rasio, sedangkan data tingkat kesukaan panelis  termasuk  dalam  data  berskala  interval.  Data kandungan  protein  dan  tingkat  kesukaan  akan  diuji normalitasnya  dengan  uji Shaphiro-Wilk .  Analisis kandungan  protein  diuji  dengan  uji  parametrik one way analysis of variance (ANOVA) yang dilanjutkan dengan  uji Tukey ,  sedangkan  analisis  tingkat kesukaan  panelis  diuji  dengan  uji Kruskal-Wallis yang  dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney untuk mengetahui  perbedaan  yang  bermakna.  Analisis kandungan asam amino akan diolah secara deskriptif. Seluruh  data  diolah  pada  derajat  kepercayaan  95% dengan α = 0,05.
Tabel 2. Perbedaan Kandungan Protein pada Tiga Macam Formulasi PMT-P Berbasis Labu Kuning
Jenis Formulasi* Rerata  Kandungan  Protein (% w/w) A1 9,63±0,23 a A2 11,70±0,19 b A3 13,87±0,30 c p = 0,000
*Formulasi  A1:  20%  biji  labu  kuning;  Formulasi  A2:  25%  biji  labu kuning; Formulasi A3: 30% biji labu kuning.; **Uji One Way ANOVA. Angka  yang  diikuti  huruf superscript yang  berbeda  (a,  b,  c)  pada parameter menunjukkan adanya beda nyata dengan uji Tukey .

## HASIL Perbedaan Kandungan Protein pada Tiga Macam Formulasi PMT-P  Berbasis Labu Kuning
Pengujian  pada  kandungan  protein  dari masing-masing formulasi PMT-P mendapatkan hasil seperti yang tertera pada Tabel 2.
Perbedaan  Kandungan  Asam  Amino  pada  Tiga Macam Formulasi PMT-P  Berbasis Labu Kuning
Pengujian pada kandungan asam amino dari masing-masing formulasi PMT-P mendapatkan hasil seperti yang tertera pada Tabel 3.
Tabel 3. Perbedaan Kandungan Asam Amino pada Tiga Formulasi PMT-P Berbasis Labu Kuning Jenis asam amino Kandungan asam amino pada formulasi A1* (% w/w) Kandungan asam amino pada formulasi A2* (% w/w) Kandungan asam amino pada formulasi A3* (% w/w) Asam aspartat 0,72 0,82 0,97 Treonin 0,24 0,28 0,32 Serin 0,39 0,46 0,54 Glutamat 1,63 1,92 2,33 Glisin 0,41 0,48 0,57 Alanin 0,35 0,42 0,48 Valin 0,49 0,57 0,59 Metionin 0,22 0,26 0,26 Ileusin 0,33 0,36 0,41 Leusin 0,58 0,67 0,79 Tirosin 0,18 0,21 0,25 Fenilalanin 0,38 0,46 0,53 Histidin 0,32 0,39 0,37 Lisin 0,18 0,24 0,25 Arginin 0,98 1,11 1,33 Total asam amino 7,39 8,65 10,00
*Formulasi A1: 20% biji labu kuning; Formulasi A2: 25% biji labu kuning; Formulasi A3: 30% biji labu kuning.
Tabel 4. Karakteristik Subjek Penelitian Karakteristik n % Jenis Kelamin Laki-laki 1 4,0 Perempuan 24 96,0 Nafsu Makan Kurang sekali 1 4,0 Kurang 0 0,0 Cukup 1 4,0 Baik 17 68,0 Sangat baik 6 24,0
Perbedaan  Tingkat  Kesukaan  Panelis  Terhadap Tiga  Macam  Formulasi  PMT-P  Berbasis  Labu Kuning
Tabel  4  menampilkan  karakteristik  panelis uji organoleptik. Total subjek awal adalah sebesar 28 orang,  tetapi  terdapat  3  orang  (10,7%)  yang  tidak mengisi  data  lembar  kuisioner  uji  organoleptik dengan lengkap, sehingga tidak diikutsertakan dalam analisis. Panelis akhir terdiri atas 25 orang, yaitu dua puluh  empat  wanita  dan  satu  pria.  Rata-rata  usia subjek  adalah  21,08  tahun,  dengan  rentang  umur antara 21 s.d. 22 tahun.
Tabel 5. Perbedaan Tingkat Kesukaan Panelis pada Tiga Macam Formulasi PMT-P Berbasis Labu Kuning
Jenis Formulasi* Penampilan Warna Aroma Rasa Tekstur Rerata Ket Rerata Ket Rerata Ket Rerata Ket Rerata Ket A1 3,72± 1,14 a Suka 3,96± 0,98 a Suka 3,84± 1,14 a Suka 3,64± 1,08 Suka 3,64± 1,15 Suka A2 3,08± 1,15 a,b Netral 3,00± 0,87 b Netral 3,32± 1,14 b Netral 3,80± 1,04 Suka 3,32± 0,99 Netral A3 2,68± 1,07 b Netral 2,64± 0,95 b, c Netral 3,16± 0,80 b, c Netral 3,28± 1,21 Netral 3,20± 1,04 Netral p = 0,007 p = 0,000 p = 0,028 p = 0,287 p = 0,265 *Formulasi A1: 20% biji labu kuning; Formulasi A2: 25% biji labu kuning; Formulasi A3: 30% biji labu kuning.; **Uji Kruskal-Wallis . Angka yang diikuti huruf superscript yang berbeda (a, b, c) pada parameter menunjukkan adanya beda nyata dengan uji Mann-Whitney .
Analisis statistik menunjukkan adanya perbedaan  yang  signifikan  pada  tingkat  kesukaan antar formulasi produk PMT-P berbasis labu kuning dalam  aspek  penampilan  ( p =  0,007),  warna  ( p = 0,000),  dan  aroma  ( p =  0,028).  Meskipun  rata-rata panelis  menyatakan  netral  pada  seluruh  aspek
formulasi A2, namun formulasi ini merupakan jenis formulasi  yang  paling  disukai  di  aspek  rasa  (68%). Rincian  hasil  uji  tingkat  kesukaan  PMT-P  berbasis labu kuning dapat dilihat di Tabel 5.
Selain memberikan penilaian sesuai skala yang ada, panelis juga diminta untuk menuliskan pendapat
mereka  terhadap  masing-masing  produk  dalam kelima aspek yang dinilai. Formulasi A1 digambarkan  memiliki  penampilan  yang  cukup menarik  dan  terlihat  cocok  untuk  dijadikan  PMT-P untuk  balita  karena  terlihat  lembek;  sedangkan formulasi  A2  dinilai  agak  kurang  menarik  karena tidak terlihat lembek dan formulasi A3 dianggap tidak menarik karena tampak memiliki tekstur paling keras dan padat.
Formulasi  A1  digambarkan  memiliki  warna kekuningan  yang  paling  cerah  dan  menarik; sedangkan  formulasi  A2  dinilai  agak  cerah  dan menarik dan formulasi A3 dianggap kurang menarik karena warnanya yang pucat.
Aroma  produk  A1  paling  disukai  sebagian besar  panelis  dan  dinilai  memiliki  wangi  labu  yang creamy , kuat, sedap, dan sedikit menyengat, berbeda dengan  formulasi  A2  yang  digambarkan  memiliki aroma labu dan biji labu yang seimbang, namun tidak seharum  produk  A1.  Formulasi  A3  digambarkan tidak  memiliki  aroma  labu  yang  sekuat  produk  A1 dan cenderung memiliki wangi biji labu.
Pendapat  mengenai  rasa  dari  masing-masing produk  PMT-P  berbasis  labu  kuning  cukup bervariasi.  Namun  rasa  formulasi  A1  digambarkan memiliki  cita  rasa  paling  manis  dengan  rasa  labu kuning  yang  paling  kuat;  sedangkan  formulasi  A2 dinilai memiliki rasa yang cukup manis dengan rasa labu kuning yang tidak terlalu kuat dan formulasi A3 memiliki rasa paling tidak manis dengan rasa biji labu yang  paling  kuat  di  antara  yang  lainnya.  Selain  itu, beberapa  panelis  menyatakan  bahwa  produk-produk PMT-P  berbasis  labu  kuning  memiliki  cita  rasa  di akhir ( aftertaste ) pahit yang samar.
Dari  segi  tekstur,  panelis  menggambarkan formulasi  A1  memiliki  tekstur  paling  halus,  lembek dan  mudah  untuk  dilumat  dan  ditelan,  sedangkan formulasi A2 memiliki tekstur yang lebih padat, kasar dan  lebih  membutuhkan  usaha  untuk  dilumat dibandingkan  dengan  produk  A1.  Panelis  menilai formulasi A3 memiliki tekstur yang paling padat dan kasar.

## PEMBAHASAN
Perbedaan Kandungan Protein dan Asam Amino pada  Tiga  Macam  Formulasi  PMT-P  Berbasis Labu Kuning
Pembuatan PMT-P berbahan dasar labu kuning melibatkan  beberapa  proses  mengolahan  yang membuat  dampak  pada  kandungan  gizinya,  yaitu protein dan asam amino. Proses perendaman selama setidaknya dua jam dapat meningkatkan bioavailabilitas protein dan asam amino yang terdapat pada  berbagai  jenis  biji-bijian  dan  kacang- kacangan 30–34 .  Hal  ini  dapat  terjadi  karena  adanya penurunan kandungan zat asam fitat dalam biji labu
kuning  setelah  perendaman,  di  mana  asam  fitat mampu membentuk ikatan kompleks dengan protein dan  menurunkan  aktivitas  enzimatik,  solubilitas protein, dan daya cerna proteolitik 35 . Meskipun tidak dapat mengurangi jumlah asam fitat yang terkandung dalam biji labu seluruhnya, proses perendaman dapat mengaktifkan  enzim  fitase  endogen  yang  akan menghidrolisa  asam  fitat  dalam  biji  menjadi  bentuk yang  lebih  sederhana,  sehingga  protein  yang sebelumnya  terikat  pada  asam  fitat  tersebut  dapat terlepas dan terserap dalam pencernaan manusia 31,36,37 .
Selain  perendaman,  PMT-P  berbasis  labu kuning  juga  menerima  perlakuan  lainnya,  yaitu pemanasan  melalui  proses  pengukusan.  Meskipun penelitian  menyatakan  bahwa  proses  pemanasan dapat mengurangi kandungan protein dalam biji labu akibat  denaturasi  protein,  namun  bioavailabilitas protein dalam biji labu akan meningkat karena adanya proses  pemanasan  yang  mampu  menyederhanakan rantai protein menjadi asam amino serta mengurangi jumlah  asam  fitat 38,39,40 .  Metode  pengukusan  dipilih karena  dipercaya  merupakan  metode  pemasakan paling baik dalam mempertahankan kualitas zat gizi dalam  makanan  dibandingkan  dengan  metode lainnya 41,42 .
Hasil  analisis  kandungan  protein  antar formulasi  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan ( p = 0,000), dengan formulasi A3 dengan kandungan  30%  biji  labu  kuning  sebagai  resep dengan kadar protein tertinggi (13,87±0,30 g/100 g) dan  formulasi  A1  dengan  kandungan  20%  biji  labu kuning sebagai resep dengan kadar protein terendah (9,63±0,23 g/100 g). Hal ini sejalan dengan berbagai penelitian  yang  menunjukkan  bahwa  adanya kandungan protein yang cukup tinggi dalam biji labu kuning, sehingga penambahan biji labu kuning dalam formulasi  dapat  meningkatkan  kandungan  protein total 21,24,43,44 .  Selain  biji  labu  kuning,  santan  juga merupakan  penyumbang  kandungan  protein  yang cukup  besar  dalam  produk  PMT-P  berbasis  labu kuning,  yaitu  sebesar  2,31  s.d.  3,69  g/100  g 45,46 . Berdasarkan  syarat  PMT-P  yang  ditetapkan  oleh Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, formulasi  A1  dan  A2  telah  memenuhi  syarat kandungan  protein,  yakni  sebesar  8-12  gram  dalam tiap  100  gram  produk.  Sebaliknya,  kadar  protein formulasi A3 sedikit lebih tinggi dari standar protein untuk  PMT-P  yang  telah  ditetapkan,  namun  hal  ini tidak perlu untuk diangkat menjadi suatu permasalahan  karena  saat  batita  gizi  kurang membutuhkan  asupan  protein  yang  tinggi  sebesar hingga  2,72  g/kg  untuk  melakukan  proses  tumbuh kejar 47 .  Ketika  dibandingkan  dengan  PMT-P modifikasi  lainnya,  PMT-P  berbasis  labu  kuning memiliki  nilai  protein  yang  lebih  besar  (9,63±0,23
g/100  g  s.d.  13,87±0,30  g/100  g)  dibandingkan dengan  roti  manis  yang  diolah  dengan  tepung spirulina  (9,13±0,22  s.d.  12,90±0,28  g/100  g) 48 , namun  lebih  kecil  dibandingkan  dengan  biskuit dengan substitusi tepung daging ikan lele dumbo dan tepung ubi jalar kuning yang berbasis bahan makanan hewani (17,99±0,39 s.d. 19,81±1,10 g/100 g) 49 .
Formulasi A3 ditemukan sebagai resep dengan kadar asam amino total tertinggi (10,00 g/100 g) dan formulasi A1 sebagai resep dengan kadar asam amino total  terendah  (7,39  g/100  g).  Asam  amino  esensial yang  terdapat  dalam  produk  PMT-P  berbasis  labu kuning  adalah  histidin,  treonin,  tirosin,  metionin, valin, fenilalanin, ileusin, leusin, dan lisin. Sedangkan asam  amino  non-esensial  yang  terkandung  dalam produk  ini  adalah  asam  aspartat,  glutamat,  serin, glisin,  arginin,  dan  alanin.  Asam  amino  esensial tertinggi  pada  produk  PMT-P  berbasis  labu  kuning dalam ketiga variasi adalah leusin yaitu sebesar 0,58 s.d. 0,79 g/100 g, sedangkan untuk asam amino non- esensial adalah glutamat yang mencapai 1,63 s.d. 2,33 g/100 g. Asam amino pembatas pada produk PMT-P berbasis labu kuning adalah lisin yang berkisar antara 0,18 s.d. 0,25 g/100 g dan tirosin yang berkisar antara 0,18  s.d.  0,25  g/100  g.  Biji  labu  kuning  ( Cucurbita moschata )  segar  mengandung  berbagai  jenis  asam amino, antara lain adalah: alanin (7,43 ± 1,01 mg/kg), arginin (7,03 ± 0,56 mg/kg), asam aspartat (15,31 ± 1,00  mg/kg),  glutamat  (42,94  ±  3,06  mg/kg),  glisin (12,97 ± 1,63 mg/kg), histidin (11,74 ± 0,89 mg/kg),
isoleusin  (8,50  ±  1,10  mg/kg),  leusin  (16,51  ±  1,75 mg/kg), lisin (7,05 ± 0,59 mg/kg),  metionin (4,86 ± 0,37 mg/kg), fenilalanin (10,99 ± 0,91 mg/kg), prolin (12,98  ±  0,76  mg/kg),  serin  (9,58  ±  0,64  mg/kg), treonin  (4,68  ±  0,46  mg/kg),  tirosin  (4,74  ±  0,10 mg/kg), dan valin (10,79 ± 0,80 mg/kg) 44 . Meskipun Kementerian Kesehatan Indonesia belum menetapkan  standar  kandungan  asam  amino  dalam PMT-P, organisasi kesehatan WHO/FAO/UNU telah menyediakan  kebutuhan  asam  amino  berdasarkan usia yang dirangkum dalam Tabel 6.
Perbandingan kadar jenis asam amino dengan nilai  kebutuhan  asam  amino  oleh  WHO/FAO/UNU dirangkum dalam Tabel 7.
Tabel 6. Kebutuhan Asam Amino Anak Menurut WHO/FAO/UNU 50 Asam Amino Usia 0,5 tahun (mg/kg/hari) Usia 1-2 tahun (mg/kg/hari) Histidin 22 15 Isoleusin 36 27 Leusin 73 54 Lisin 63 44 Asam amino sulfur 31 22 Asam amino aromatik 59 40 Treonin 35 24 Triptofan 9,5 6 Valin 48 36
Tabel 7. Pemenuhan Kebutuhan Asam Amino Antar Formulasi untuk Batita Normal Jenis Asam Amino Kebutuhan Asam Amino (mg/kg/hari) Pemenuhan Formulasi A1 (%) Pemenuhan Formulasi A2 (%) Pemenuhan Formulasi A3 (%) Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Histidin 173,8 163,5 184,1 195,7 224,4 238,5 212,9 226,3 Isoleusin 284,4 294,2 116,0 112,2 126,6 122,4 144,2 139,4 Leusin 576,7 588,6 100,5 98,5 134,6 113,8 137,0 134,2 Lisin 497,7 479,6 36,2 37,5 48,2 50,0 50,2 52,1 Treonin 276,5 261,6 86,8 91,7 97,6 107,0 115,7 122,3 Valin 379,2 392,4 129,2 124,9 150,3 145,3 156,0 150,4
*Dengan asumsi bahwa rata-rata berat badan anak usia 6 bulan laki-laki sebesar 7,9 kilogram berdasarkan persentil SD-0 pada skor-Z berat badan untuk umur dari WHO ; *Dengan asumsi bahwa rata-rata berat badan anak usia 18 bulan laki-laki sebesar 10,9 kilogram berdasarkan persentil SD-0 pada skor-Z berat badan untuk umur dari WHO
Tabel 8. Pemenuhan Kebutuhan Asam Amino Antar Formulasi untuk Batita Gizi Kurang
Jenis Asam Amino Kebutuhan Asam Amino (mg/kg/hari) Pemenuhan Formulasi A1 (%) Pemenuhan Formulasi A2 (%) Pemenuhan Formulasi A3 (%) Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Usia 0,5 tahun* Usia 1-2 tahun** Histidin 140,8 132,0 227,3 242,4 277,0 295,5 262,8 280,3 Isoleusin 230,4 237,6 143,2 138,9 156,3 151,5 178,0 172,6 Leusin 467,2 475,2 124,1 122,1 143,3 141,0 169,1 166,2 Lisin 403,2 387,2 44,6 46,5 59,5 62,0 62,0 64,6 Treonin 224,0 211,2 107,1 113,6 125,0 132,6 142,9 151,5 Valin 307,2 316,8 159,5 154,7 185,5 179,9 192,1 186,2
*Dengan asumsi bahwa rata-rata berat badan anak usia 6 bulan laki-laki sebesar 6,4 kilogram berdasarkan persentil SD-2 pada skor-Z berat badan untuk umur dari WHO ; *Dengan asumsi bahwa rata-rata berat badan anak usia 18 bulan laki-laki sebesar 8,8 kilogram berdasarkan persentil SD-2 pada skor- Z berat badan untuk umur dari WHO
Selain kuantitas, kualitas dari protein juga akan mempengaruhi nilai gizi dari suatu makanan 51 . Sejak tahun  1989,  para  ahli  FAO/WHO  memberikan rekomendasi untuk menggunakan Protein
Digestibility Corrected
Amino Acid Score (PDCAAS) untuk mengevaluasi kualitas protein pada manusia,  di  mana  metode  ini  dilakukan  dengan menghitung  nilai  asam  amino  pembatas  yang dikalikan  dengan  daya  cerna  protein  untuk memprediksi  utilisasi  asupan  protein 50 .  Namun metode  PDCAAS  dinilai  memiliki  keterbatasan karena  nilai  yang  ditemukan  dihitung  menggunakan daya  cerna  total  protein  dan  menggunakan  asumsi bahwa semua asam amino memiliki daya cerna yang sama seperti protein 52 . Padahal bioavailabilitas asam amino  ditentukan  secara  paling  akurat  pada  ujung
usus halus (ileum), karena asam amino diserap hanya di  dalam  usus  halus  dan  fermentasi hindgut dapat mempengaruhi  ekskresi  fekal  asam  amino.  Oleh karena  itu,  suatu  metode  baru  yang  dinamakan Digestible Indispensable Amino Acid Score (DIAAS) diajukan  oleh  ahli  FAO  untuk  menggantikan PDCAAS  untuk  menutup  kekurangan  dari  metode sebelumnya. Untuk menghitung nilai kualitas protein dengan  metode  DIAAS,  maka  dapat  menggunakan rumus berikut.
𝐷𝐼𝐴𝐴𝑆 (%) = 100 × 𝐴𝑠𝑎𝑚 𝐴𝑚𝑖𝑛𝑜 𝑃𝑒𝑚𝑏𝑎𝑡𝑎𝑠 (𝑚𝑔 𝑔 ⁄ 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛) 𝑅𝑒𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑠𝑖 𝐴𝑠𝑎𝑚 𝐴𝑚𝑖𝑛𝑜 (𝑚𝑔 𝑔 ⁄ 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛)
Dengan rumus tersebut, maka dapat diperoleh hasil nilai kualitas protein sebagai berikut:

## Tabel 9. Nilai Kualitas Protein Berdasarkan Formulasi DIAAS
Jenis Asam Amino Pembatas Nilai Referensi Asam Amino (mg/g protein) Nilai Kualitas Protein Formulasi A1 (%) Nilai Kualitas Protein Formulasi A2 (%) Nilai Kualitas Protein Formulasi A3 (%) Lisin 57,0 32,8 36,0 31,6
Menurut  ahli  FAO,  kualitas  protein  dianggap baik  apabila  nilainya  berkisar  antara  75,0  –  99,9% dan dianggap sangat baik apabila nilainya mencapai 100%  atau  lebih 50 .  Merujuk  pada  hasil  perhitungan menggunakan  rumus  DIAAS,  seluruh  formulasi belum  dapat  dinyatakan  memiliki  kualitas  protein yang  baik.  Hal  ini  dapat  dikarenakan  oleh  jalur biosintesis asam amino tanaman dalam memproduksi jenis asam amino tertentu dan keberadaan faktor anti- gizi yang terdapat dalam bahan makanan yang berasal dari  tumbuhan  seperti  inhibitor  tripsin,  tanin,  dan asam  fitat  yang  mampu  menghambat  penyerapan protein  dan  asam  amino  serta  mempengaruhi  daya cerna  secara  negatif 53–55 .  Penentuan  nilai  kualitas protein menggunakan tirosin tidak digunakan karena tidak memiliki nilai referensi asam amino individual, melainkan  tergabung  dalam  grup  asam  amino aromatik  lainnya  bersama  triptofan  dan  fenilalanin, sehingga dapat menimbulkan bias 50 .
Pada  dasarnya,  protein  merupakan  senyawa kompleks  organik  yang  disusun  oleh  asam  amino yang  saling  terhubung  melalui  ikatan  peptida, sulfhidril,  hidrogen,  serta  gaya  van  der  Waals 56 . Meskipun asam amino adalah zat penyusun protein, hasil  analisis  total  protein  dan  asam  amino menunjukkan  angka  yang  berbeda.  Hal  ini  dapat dikarenakan oleh hakekat makanan yang merupakan materi  heterogenik,  perbedaaan  metode  ekstraksi protein  dari  makanan,  serta  perbedaan  metode pengujian  protein  yang  digunakan,  di  mana  analisis total  protein  pada  penelitian  kali  ini  menggunakan metode Kjeldahl sedangkan untuk  menentukan total
asam  amino  dalam  PMT-P  berbasis  labu  kuning menggunakan  metode High-Performance  Liquid Chromatography (HPLC).  Pengujian  protein  dapat dilakukan  dengan  dua  macam  metode,  yakni  secara langsung  maupun  tidak  langsung.  Analisis  protein secara  langsung  adalah  perhitungan  kandungan protein  yang  didasarkan  pada  analisis  residu  asam amino,  sedangkan  analisis  protein  secara  tidak langsung  dilakukan  dengan  menentukan  kandungan nitrogen  atau  reaksi  kimia  dengan  kelompok fungsional  asam  amino  lainnya  di  dalam  protein sebelum dikonversikan menjadi nilai protein dengan faktor angka tertentu 57,58 . Pada  metode Kjeldahl ,  sampel  dicampurkan dengan  asam  kuat  seperti  asam  sulfat  sehingga nitrogen  dapat  terlepas  dan  menjadi  amonium sulfat. 59 Amonia  yang  terbentuk  akan  didistilasi menjadi  solusi  asam  borat  dalam  kondisi  alkali,  di mana  anion  borat  yang  terbentuk  dititrasi  dengan asam hidroklorat standar dan dapat digunakan untuk menghitung  jumlah  nitrogen  dalam  sampel  yang mampu  menggambarkan  jumlah  protein.  Karena metode Kjeldahl menganggap  bahwa  seluruh nitrogen yang terbentuk dari sampel bersumber dari protein, maka hal ini dapat menyebabkan kekeliruan perhitungan,  karena  nitrogen  yang  berasal  dari senyawa  yang  mengandung  nitrogen,  seperti  asam nukleat, klorofil, dan alkaloid; zat aditif non-protein, dan  kontaminan,  seperti  melamin,  juga  turut dikalkulasi  sebagai  protein 58,59 .  Selain  itu,  ahli-ahli berpendapat bahwa sebagian besar protein mengandung 16% nitrogen, sehingga faktor konversi
yang umumnya digunakan adalah 6,25. Validitas dan akurasi  dari  penggunaan  faktor  konversi  6,25  juga telah  memicu  kontroversi  karena  faktor  konversi satu-satunya tersebut dapat menyebabkan kekeliruan yang  disebabkan  oleh  asumsi  yang  mengeneralisir kandungan  nitrogen  tetap  dalam  total  protein. 60 Beberapa  studi  juga  telah  melaporkan  adanya overestimasi  jumlah  protein  yang  diakibatkan  oleh penggunaan faktor konversi 6,25 57,61–63 .
HPLC merupakan bentuk metode kromatografi yang  banyak  digunakan  pada  analisis  kimia  untuk memurnikan,  mengidentifikasi,  menganalisis,  dan menghitung senyawa-senyawa pada sampel 64 . Prosedur dasar yang dilakukan dalam metode HPLC adalah dengan mengalirkan fase bergerak cair ( liquid mobile  phase )  yang  mengandung  sampel  pada tekanan  tinggi  yang  didorong  oleh  pompa  melalui kolom  yang  berisi  matriks  yang  sesuai.  Pemisahan akan  dicapai  melalui  interaksi  diferensiasi  oleh molekul  dengan  matriks  kolom,  sehingga  sampel akan terpisah ketika harus memasuki kolom tersebut. Struktur  kolom  menyediakan  kemungkinan  untuk menggunakan  tekanan  tinggi  untuk  mendorong  fase bergerak  untuk  mengalir  lebih  cepat  dan  akhirnya proses  separasi  dapat  dilakukan  dalam  waktu  yang cepat.  Sinyal  dari  molekul  yang  telah  terpisah  akan dideteksi  oleh  detektor  yang  sesuai  dan  data  akan dianalisis  dalam  sistem  komputer.  Pada  metode  ini, protein  diuraikan  menjadi  asam  amino  konstituen melalui hidrolisis ikatan peptida, di mana total protein akan  ditentukan  dengan  menjumlahkan  residu  asam amino  yang  dianalisis  secara  kromatografis  setelah dikurangi  dengan  massa  molekular  dari  H 2 O 58 . Namun, proses hidrolisa yang melibatkan penggunaan  asam  kuat  dan  pemanasan  tidak  hanya memecahkan  ikatan  peptida  saja,  namun  juga mengurangi  atau  bahkan  menghancurkan  beberapa kandungan asam amino, sehingga kandungan protein yang  dianalisis  bisa  jadi  lebih  kecil  dari  jumlah sebenarnya.
Perbedaan  Tingkat  Kesukaan  Panelis  Terhadap Tiga  Macam  Formulasi  PMT-P  Berbasis  Labu Kuning
Demi  mencapai keberhasilan perbaikan status gizi,  maka  diharapkan  para  batita  untuk  bersedia mengonsumsi  PMT-P  berbasis  labu  kuning  dengan jumlah  porsi  yang  direkomendasikan.  Oleh  karena itu,  tingkat  penerimaan  terhadap  produk  PMT-P berbasis labu kuning perlu diketahui terlebih dahulu kepada  panelis  agak  terlatih.  Meskipun  perilaku makan  batita  umumnya  dipengaruhi  oleh  kebiasaan makan  keluarga  dan  pola  asuh  orang  tua,  penelitian mengusulkan bahwa balita dapat memiliki preferensi mengenai  rasa  sejak  bayi  melalui  pengenalan  rasa dari  cairan  amnion  yang  mengalami  dampak  dari pilihan  makanan  ibunya 65 .  Sejak  lahir,  bayi
cenderung  lebih  menyukai  makanan  yang  manis karena  mengingatkankan  mereka  terhadap  ASI  dan bahkan  mampu  memberikan  efek  analgesik  yang menenangkan  pada  anak 66 .  Oleh  karena  itu,  dapat diasumsikan  bahwa  makanan  tambahan  yang memiliki cita rasa manis dapat diterima dengan lebih mudah  oleh  batita.  Pemilihan  tekstur  juga  menjadi poin  penting  yang  perlu  diperhatikan  demi meningkatkan  daya  penerimaan  batita  karena  sejak anak berusia 4-6 bulan, batita mampu untuk menolak dan  meludahkan  makanan  mereka,  sehingga  tekstur yang lembek dan tidak membutuhkan banyak usaha untuk  dikunyah  dapat  memudahkan  batita  untuk mengonsumsi  makanan  tersebut 67 .  Bentuk  makanan lokal  yang  dipilih  untuk  menjadi  PMT-P  dalam penelitian  ini  adalah  menyerupai  bubur  yang berwarna kuning dan kecoklatan serta sedikit warna hijau,  bergantung  pada  persentase  biji  labu  kuning dalam  resep  yang  digunakan,  dan  memiliki  tekstur lembek. Bentuk menyerupai bubur ini dipilih karena pemilihan  metode  pengolahan  pengukusan  yang mudah  diterapkan  dan  dapat  mempertahankan kualitas zat gizi yang terkandung, serta menyesuaikan dengan bentuk makanan yang familiar bagi batita 68 . Hasil  pengujian  PMT-P  berbasis  labu  kuning menggambarkan  bahwa  rata-rata  panelis  kurang menyukai  penampilan  formulasi  A3  dibandingkan dengan  A1  dan  A2  ( p =  0,007).  Keluhan  terbanyak terkait  penampilan  formulasi  A3  adalah  bentuknya yang  terlihat  keras  dan  kasar.  Hal  ini  dikarenakan adanya  perbedaan  persentase  penggunaan  daging labu dan biji labu kuning dalam resep.  Daging labu mengandung kadar air yang lebih tinggi dibandingkan dengan biji labu kuning, yang berkisar antara 88,21 g/100 g s.d. 91,60 g/100 g dibandingkan dengan  biji  labu  kuning  yang  hanya  mengandung 4,50 g/100 g s.d. 10,59 g/100 g 21,24,28,69 . Oleh karena itu,  formulasi  A1  dan  A2  yang  mengandung  lebih banyak daging labu dibandingkan dengan produk A3 memiliki  penampilan  yang  lebih  lembek  dan  tidak keras.
Penilaian  dari  aspek  warna  menunjukkan adanya  perbedaan  yang  signifikan  antar  variasi formulasi  produk.  Formulasi  A3  merupakan  jenis formulasi yang paling tidak disukai karena warnanya yang tampak lebih pucat dibandingkan dengan kedua produk  lainnya  yang  memiliki  warna  kuning  dan oranye cerah. Hal ini dapat terjadi karena produk A1 dan  A2  mengandung  persentase  daging  labu  lebih besar  daripada  formulasi  A3  yang  memiliki kandungan  biji  labu  paling  banyak,  di  mana  daging labu  memiliki  warna  kuning-oranye  keemasan  yang diperoleh dari pigmen karotenoid seperti beta karoten yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  100%  pro- vitamin  A  dan  banyak  terkandung  di  daging  labu kuning 70,71 .  Daging  labu  mengandung  lebih  banyak
beta  karoten,  yaitu  berkisar  antara  29,27  ±  6,44 mg/100 g s.d. 154,76 ± 2,75 mg/100 g dibandingkan dengan biji labu yang mengandung 7,15 ± 1,50 mg/kg beta  karoten 44,72 .  Meskipun  proses  pemanasan  dapat menguraikan maktriks makanan dan merenggangkan serat pengikat karoten yang menyebabkan hilangnya zat  gizi,  namun  bioavailabilitas  karotenoid  dalam makanan dapat bertambah 71 .
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik,  tingkat kesukaan  pada  PMT-P  berbasis  labu  kuning  dalam aspek aroma menunjukan adanya perbedaan bermakna antar formulasi. Subjek menyatakan bahwa produk A3 merupakan formulasi dengan aroma yang paling tidak disukai karena tidak memiliki wangi khas labu  seperti  variasi  lainnya  dan  sebaliknya  berbau khas  biji  labu.  Berdasarkan  studi  yang  dilakukan  di Cina, daging labu kuning teridentifikasi mengandung empat  puluh  senyawa  volatil  yang  memberikan aroma khas pada labu kuning, seperti alkohol, ester, dan  alkena 73 .  Menurut  penelitian  tersebut,  daging labu  kuning  mengandung  eukaliptol,  etanol,  2- heptanol,  etil  asetat,  etil  eter,  dan  1R-alfa-pinene dengan  kadar  yang  cukup  tinggi.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Potocnik  dan  Kosir  melaporkan bahwa  sampel  minyak  biji  labu  yang  belum dipanggang  mengandung  senyawa  volatil  berupa aldehid dan alkohol 74 . Ketika dipanaskan, studi turut menyatakan  bahwa  senyawa  aldehid,  heksanal  dan pentanal,  terbentuk  dari  hasil  oksidasi  linoleate  dan asam  linolenat.  2-butenal,  3-metilbutanal,  2- metilbutanal,  dan  benzaldehid  yang  membentuk aroma nutty atau menyerupai kacang juga dilaporkan terjadi  akibat  adanya  proses  degradasi  Strecker,  di mana  asam  amino  berubah  menjadi  senyawa aldehid 74,75 .
Hasil  uji  statistik  menunjukan  tidak  adanya perbedaan  antar  formulasi  PMT-P  berbasis  labu kuning.  Hal  ini  dapat  dikarenakan  oleh  terlalu kecilnya jarak perbedaan persentase penggunaan biji labu kuning dalam tiap formulasi, yaitu 5%. Namun di  antara  ketiga  variasi  formulasi,  produk  A2  yang mengandung  25%  biji  labu  kuning  dinyatakan sebagai  resep  dengan  rasa  yang  paling  disukai. Penelitian  melaporkan  bahwa  senyawa  etil  eter  dan etanol  yang  terkandung  dalam  daging  labu  kuning menghasilkan rasa mirip nanas serta rasa yang murni dan  segar. 73 Studi  lainnya  juga  menyatakan  bahwa proses  pemasakan  labu  kuning  dengan  metode pengukusan  memiliki  rasa  yang  tidak  jauh  berbeda dengan  rasa  aslinya  karena  dapat  mempertahankan senyawa-senyawa volatil, sedangkan senyawa volatil yang  dikandung  oleh  biji  labu  memberikan  rasa kacang yang lezat 76,77 . Terdapat beberapa bahan lain yang  memberikan  pengaruh  rasa  terhadap  produk PMT-P berbasis labu kuning, seperti gula merah dan santan.  Selain  memberikan  rasa  manis,  gula  merah
atau yang biasa dikenal dengan nama gula aren atau gula jawa juga memiliki kandungan berbagai zat gizi yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  gula  pasir, seperti  kalsium,  fosfor,  dan  zat  besi 78 .  Santan memberikan  rasa  gurih  dan creamy pada  produk karena adanya kandungan lemak yang tinggi 79 . Meskipun tidak ditemukan adanya perbedaan tingkat  kesukaan  pada  aspek  tekstur  menurut  uji statistik antar formulasi PMT-P berbasis labu kuning, sebanyak 56% responden menyatakan rasa suka pada formulasi A1; sedangkan hanya 48% responden yang menyukai tekstur produk A2 dan 32% pada formulasi A3.  Para  responden  mengaku  bahwa  formula  A1 memiliki tekstur yang lebih lembut dan mudah untuk dilumat  dibandingkan  dengan  kedua  formulasi lainnya.  Tekstur  yang  terbentuk  demikian  dapat diakibatkan oleh semakin tingginya penggunaan biji labu  dalam  formulasi  A2  dan  A3.  Biji  labu mengandung  lebih  banyak  serat  kasar  ( crude  fiber ) yang  berkisar  antara  4,2±0,1  g/100  g  s.d.  12,6±0,1 g/100  g,  dibandingkan  daging  labu  yang  hanya mengandung  serat  sebesar  0,5  g/100  g  s.d. 9,4±0,1 25,28 .  Semakin  tinggi  kadar  serat  kasar  yang ada  di  suatu  makanan,  maka  semakin  kasar  pula tekstur makanan tersebut 80 .
Merujuk pada hasil uji protein, asam amino, dan tingkat kesukaan, ditemukan bahwa nilai protein dan  asam  amino  tidak  selalu  selaras  dengan  nilai tingkat  kesukaan  antar  variasi.  Sebagai  contoh, formulasi A1 memiiki nilai protein dan asam amino paling rendah di antara kedua variasi lainnya, namun formulasi ini memiliki tingkat penerimaan tertinggi di segi  penampilan,  warna,  aroma,  dan  tekstur. Meskipun formulasi A2 memiliki tingkat penerimaan di  segi  rasa  tertinggi,  namun  uji  statistik  tidak menemukan  adanya  perbedaan  bermakna  di  antara dua formulasi lainnya. Setelah dilakukan perbandingan,  formulasi  A1  ditetapkan  sebagai formulasi yang dapat direkomendasikan berdasarkan nilai protein, asam amino, dan tingkat penerimaannya.

## SIMPULAN
Formulasi  A3  merupakan  formulasi  PMT-P berbasis labu kuning yang memiliki kandungan 30% biji labu dan ditemukan memiliki kandungan protein dan  asam  amino  paling  tinggi,  di  mana  kandungan proteinnya  berbeda  secara  signifikan  dibandingkan dengan  kedua  formulasi  lainnya.  Formulasi  A1 dengan  kandungan  20%  biji  labu  memiliki  tingkat penerimaan  tertinggi  secara  signifikan  di  segi penampilan,  warna,  dan  aroma.  Formulasi  yang direkomendasikan untuk digunakan adalah formulasi A1.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Atmarita. Nutrition Problems in Indonesia. Penelit Gizi dan Makanan. 2005;28(2):35–46.
2.   Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Hasil Utama Riskesdas 2018. Jakarta; 2018.
3.   Dinas  Kesehatan  Provinsi  Jawa  Tengah.  Profil Kesehatan  Provinsi  Jawa  Tengah  Tahun  2016. Semarang; 2017.
4.   Walson JL, Berkley JA. The impact of malnutrition on  childhood  infections.  Curr  Opin  Infect  Dis. 2018;31(3):231–6.
5.   Victora CG, Adair L, Fall C, Hallal PC, Martorell R,  Richter  L,  et  al.  Maternal  and  child undernutrition:  consequences for  adult  health  and human capital. Lancet. 2008;371(9609):340–57.
6.   Martins  VJB,  Florê  TMMT,  Santos  CDL,  Vieira MDFA,  Sawaya  AL.  Long-Lasting  Effects  of Undernutrition.  Int  J  Environ  Res  Public  Health. 2011;8(6):1817–46.
7.   Ernawai  F,  Prihatini  M,  Yuriestia  A.  Gambaran Konsumsi Protein Nabati dan Hewani pada Anak Balita  Stunting  dan  Gizi  Kurang  di  Indonesia. Penelit Gizi dan Makanan. 2016;39(2):95–102.
8.   Diniyyah SR, Nindya TS. Asupan Energi , Protein dan  Lemak  dengan  Kejadian  Gizi  Kurang  pada Balita  Usia  24-59  Bulan  di  Desa  Suci,  Gresik. Amerta Nutr. 2017;341–50.
9.   Ibrahim  IA,  Nurdiyanah,  Supriadi.  Gambaran Asupan  Energi  Protein  dan  Konsumsi  Ikan  Anak Balita  (24-59  Bulan)  Gizi  Kurang  di  Puskesmas Dahlia  Kecamatan  Mariso  Kota  Makassar  Tahun 2015. Media Gizi Pangan. 2016;12(1):107–16. 10.   Arsenault  JE,  Brown  KH.  Effects  of  protein  or amino-acid  supplementation  on  the  physical growth of young children in low-income countries. 2017;75(9):699–717.
11.   Tome  D,  Jahoor  F,  Kurpad  A,  Micaelsen  KF, Pencharz  P,  Slater  C,  et  al.  Current  issues  in determining dietary protein quality and metabolic utilization. Eur J Clin Nutr. 2014;68:537–8.
12.   Furuta  C,  Murakami  H.  A  Novel  Concept  of Amino  Acid  Supplementation  to  Improve  the Growth  of  Young  Malnourished  Male  Rats.  Ann Nutr Metab. 2018;72(3):231–40.
13.   Ditjen  Bina  Gizi  dan  Kesehatan  Ibu  dan  Anak. Panduan  Penyelenggaraan  Pemberian  Makanan Tambahan  Pemulihan  Bagi  Balita  Gizi  Kurang (Bantuan Operasional Kesehatan). Jakarta: Kementerian Kesehatan RI; 2011.
14.   Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia. Perbaikan  Gizi  untuk  Generasi  Agar  Mampu Menangkan Persaingan. Jakarta; 2016.
15.   Indriati  R,  Nugraheni  SA,  Kartini  A.  Evaluasi
Program Pemberian Makanan Tambahan Pemulihan pada Balita Kurang Gizi di Kabupaten Wonogiri  Ditinjau  dari  Aspek  Input  dan  Proses.
Manaj Kesehat Indones. 2015;3(1):18–26. 16.   Iskandar. Pengaruh Pemberian Makanan Tambahan Modifikasi Terhadap Status Gizi Balita
(Effect of supplementary feeding modification on nutritional  status  of  toddler  ).  Aceh  Nutr  J. 2017;2(2):120–5.
17.   Fitriyanti  F,  Mulyati  T.  Pengaruh  Pemberian
Makanan Tambahan Pemulihan (PMT-P)
Terhadap  Status  Gizi  Buruk  di  Dinas  Kesehatan Kota  Semarang  Tahun  2012.  J  Nutr  Coll. 2014;1(1):373–81.
18.   Menteri Kesehatan Republik Indonesia. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 51 Tahun 2016 tentang Standar Produk Suplementasi Gizi. Jakarta; 2016.
19.   Drewnowski A, Dwyer J, King JC, Weaver CM. A proposed nutrient density score that includes food groups  and  nutrients  to  better  align  with  dietary guidance. Nutr Rev. 2019;77(6):404–16.
20.   Drewnowski  A,  Fulgoni  VL.  Nutrient  density: principles  and  evaluation  tools.  Am  J  Clin  Nutr. 2014;99(5):1223S–1228S.
21.   United  States  Department  of  Agriculture.  Full Report (All Nutrients) 12163, Seeds, pumpkin and squash seeds, whole, roasted, without salt. 2017.
22.   Ocloo  FCK,  Bansa  D,  Boatin  R,  Adom  T, Agbemavor  WS,  Lg  POB.  Physico-chemical  , functional  and  pasting  characteristics  of  flour produced from Jackfruits ( Artocarpus heterophyllus  )  seeds.  Agric  Biol  J  North  Am. 2010;1(5):903–8.
23.   Uchôa-thomaz  AMA,  Sousa  EC,  Osvaldo  J, Carioca  B,  Morais  SM  De,  Lima  A  De,  et  al. Chemical  composition,  fatty  acid  profile  and bioactive  compounds  of  guava  seeds  (Psidium guajava  L.).  Food  Sci  Technol.  2014;34(3):485– 92.
24.   Karanja  JK,  Mugendi  BJ,  Khamis  FM,  Muchugi AN.  Nutritional  Composition  of  the  Pumpkin (Cucurbita  spp.)  Seed  Cultivated  from  Selected Regions in Kenya. J Hortic Lett. 2013;3(1):17–22.
25.   Fedha MS. Physicochemical Characterization and Food Application Potential of Pumpkin (Cucurbita Sp.) Fruit and Seed Kernel Flours. Jomo Kenyatta University of Agriculture and Technology; 2008.
26.   Miah MY, Bhattacharjee S, Sultana A, Bhowmik S,  Kumar  A.  Evaluation  of  amino  acid  profile  of jackfruit  (Artocarpus  heterophyllus)  seed  and  its utilization  for  development  of  protein  enriched supplementary food. J Noakhali Sci Technol Univ. 2017;1(1):77–84.
27.   Nicanor AB, Moreno AO, Ayala ALM, Ortiz GD. Guava  Seed  Protein  Isolate:  Functional  and Nutritional  Characterization.  J  Food  Biochem. 2000;91(5):77–90.
28.   United  States  Department  of  Agriculture.  Basic Report 11422, Pumpkin, raw. 2017.
29.   Dinas  Pertanian  Kabupaten  Blora.  Tingkat Produksi Labu Kuning di Indonesia. Blora; 2014.
30.   Dipnaik  K,  Bathere  D.  Effect  of  soaking  and sprouting  on  protein  content  and  transaminase activity  in  pulses.  Int  J  Res  Med  Sci.
2017;5(10):4271–6.
31.   Gupta RK, Gangoliya SS. Reduction of phytic acid and enhancement of bioavailable micronutrients in food grains. J Food Sci Technol.
2015;52(February):676–84.
32.   Widjajaseputra  AI,  Widyastuti  TEW,  Trisnawati CY. Potency of mung bean with different soaking times as protein source for breastfeeding women in Indonesia. Food Res. 2019;3(5):501–5.
33.   Holli  EEB,  Nour  AAM,  Ahmed  AI.  Effect  of Soaking  on  the  Nutritional  Values  of  Kordala (Maerua  Pseudopetalosa)  Seeds  Grown  in Kordofan  Region,  Sudan.  J  Food  Technol  Res. 2017;4(2):40–5.
34.   D’Souza  MR.  Effect  of  Traditional  processing Methods on Nutritional Quality of Field Bean. Adv Biores. 2013;4(3):29–33.
35.   Nissar  J,  Ahad  T,  Naik  H,  Hussain  S.  A  review phytic  acid:  As  antinutrient  or  nutraceutical.  J Pharmacogn Phytochem. 2017;6(6):1554–60.
36.   Khattab  RY,  Arntfield  SD,  Nyachoti  CM. Nutritional quality of legume seeds as affected by some  physical  treatments,  Part  1:  Protein  quality evaluation. LWT - Food Sci Technol.
2009;42(6):1107–12.
37.   Mahesh  S,  Pavithra  G,  Parvathi  M,  Reddy  R, Shankar  A.  Effect  of  processing  on  phytic  acid content and nutrient availability in food grains. Int J Agric Sci. 2015;5(5):770–7.
38.   Hamed SY, El Hassan NM, Babiker HA, Eltayeb MM.  Nutritional  Evaluation  and  Physiochemical Properties  of  Processed  Pumpkin  (Telfairia occidentalis  Hook)  Seed  Flour.  Pakistan  J  Nutr. 2008;7(2):330–4.
39.   Abusham RAA.  Nutritional evaluation of processed pigeon pea and roasted pumpkin seeds. 2007.
40.   Joye  I.  Protein  Digestibility  of  Cereal  Products. Foods. 2019;8(6):199.
41.   Preti R, Rapa M, Vinci G. Effect of Steaming and Boiling on the Antioxidant Properties and Biogenic Amines  Content  in  Green  Bean  (Phaseolus vulgaris)  Varieties  of  Different  Colours.  J  Food Qual. 2017;1–8.
42.   Fabbri AD., Crosby GA. A review of the impact of preparation and cooking on the nutritional quality of vegetables and legumes. Int J Gastron Food Sci. 2016;3:2–11.
43.   El-Adawy  TA,  Taha  KM.  Characteristics  and Composition  of  Watermelon,  Pumpkin,  and Paprika Seed Oils and Flours. J Agric Food Chem. 2001;49:1253–9.
44.   Kim  MY,  Kim  EJ,  Kim  Y,  Choi  C,  Lee  B.
Comparison  of  the  chemical  compositions  and nutritive values of various pumpkin ( Cucurbitaceae ) species and parts. Nutr Res Pract. 2012;6(1):21–7.
45.   Barasi  E,  Fatimah  F,  Mamuaja  C.  Karakterisasi Santan  di  Sulawesi  Utara  Sebagai  Bahan  Baku
Santan  Instan.  J  Ilmu  dan  Teknol  Pangan. 2014;2(2):20–7.
46.   Patil  U,  Benjakul  S,  Prodpran  T,  Senphan  T,
Cheetangdee  N.  A  Comparative  Study  of  the Physicochemical Properties and Emulsion Stability of Coconut Milk at Different Maturity Stages. Ital J Food Sci. 2017;29:145–57.
47.   Manary  M,  Callaghan  M.  Protein  Quality  and Growth in Malnourished Children. Food Nutr Bull. 2016;37(Supplement 1):29–36.
48.   Sugiharto E, Ayustaningwarno F.  Kandungan Zat Gizi dan Tingkat Kesukaan Roti Manis Substitusi Tepung  Spirulina  Sebagai  Alternatif  Makanan Tambahan  Anak  Gizi  Kurang.  J  Nutr  Coll. 2014;3(4):911–7.
49.   Imandira  PAN,  Ayustaningwarno  F.  Pengaruh Substitusi  Tepung  Daging  Ikan  Lele  Dumbo (Clarias gariepinus) dan Tepung Ubi Jalar Kuning (Ipomoea batatas l.) Terhadap Kandungan Zat Gizi dan Penerimaan Biskuit Balita Tinggi Protein dan B-Karoten. J Nutr Coll. 2013;2(1):89–97.
50.   Food  and  Agriculture  Organization  of  the  United Nations.  Dietary  protein  quality  evaluation  in human nutrition. Auckland, New Zealand; 2011.
51.   Hendriks  WH.  Nutritional  quality  of  proteins. Wageningen University & Research. Wageningen, Netherlands; 2019.
52.   Mathai JK, Liu Y, Stein HH. Values for digestible indispensable  amino  acid  scores  (  DIAAS  )  for some dairy and plant proteins may better describe protein  quality  than  values  calculated  using  the concept  for  protein  digestibility-corrected  amino acid scores ( PDCAAS ). Br J Nutr. 2017;117:490– 9.
53.   Gilani  GS,  Xiao  CW,  Cockell  KA.  Impact  of Antinutritional  Factors  in  Food  Proteins  on  the Digestibility  of  Protein  and the  Bioavailability  of Amino  Acids  and  on  Protein  Quality.  Br  J  Nutr. 2012;108:S315–32.
54.   Vliet  S  Van,  Burd  NA,  Loon  LJC  Van.  The Skeletal  Muscle  Anabolic  Response  to  Plant- versus  Animal-Based  Protein  Consumption.  J Nutr. 2015;145(9):1981–91.
55.   Le  DT,  Chu  HD,  Le  NQ.  Improving  Nutritional Quality  of  Plant  Proteins  Through  Genetic Engineering. Curr Genomics. 2016;17(3):220–9.
56.   Halver JE. Chapter 3. Proteins and Amino Acids. Seattle, Washington; 2019.
57.   Lourenço  SO,  Barbarino  E,  De-Paula  JC,  Pereira LODS,  Lanfer  Marquez  UM.  Amino  acid composition,  protein  content  and  calculation  of nitrogen-to-protein  conversion  factors  for  19 tropical  seaweeds.  Phycol  Res.  2002;50(3):233– 41.
58.   Mæhre  HK,  Dalheim  L,  Edvinsen  GK,  Elvevoll EO,  Jensen  IJ.  Protein  determination—Method matters. Foods. 2018;7(1):1–11.
59.   Jiang B, Tsao R, Li Y, Miao M. Food Safety: Food Analysis  Technologies/Techniques.  Encycl  Agric
Food Syst. 2014;3:273–88.
60.   Lynch  JM,  Barbano  DM.  Kjeldahl  nitrogen analysis  as  a  reference  method  for  protein determination  in  dairy  products.  J  AOAC  Int. 1999;82(6):1389–92.
61.   Hall NG, Schönfeldt HC. Total nitrogen vs. amino- acid profile as indicator of protein content of beef. Food  Chem  [Internet].  2013;140(3):608–12.
Available
from: http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2012.08.046 62.   Mariotti  F,  Tome  D,  Mirand  PP.  Converting
nitrogen  into  protein ㅡ Beyond  6.25  and  Jones’ factors. Crit Rev Food Sci Nutr. 2008;48:177–84.
63.   Jones  DB.  Factors  for  Converting  Percentages  of Nitrogen  in  Foods  and  Feeds  into  Percentages  of Protein. Washington, DC, USA; 1941.
64.   Pratap G, Jadaun S, Dixit S, Saklani V, Mendiratta S, Jain R, et al. HPLC for Peptides and Proteins : Principles,  Methods  and  Applications.  Pharm Methods. 2016;8(1):139–44.
65.   Bellisle  F.  Intense  Sweeteners,  Appetite  for  the Sweet  Taste,  and  Relationship  to  Weight Management. Curr Obes Rep. 2015;4(1):106–10.
66.   Mennella  JA.  The  sweetness  and  bitterness  of childhood:  Insights  from  basic  research  on  taste preferences. Physiol Behav. 2016;152:502–7.
67.   Boulanger  AM,  Vernet  M.  Introduction  of  new food  textures  during  complementary  feeding: Observations in France. Arch Pédiatrie. 2018;25(1):6–12.
68.   Van  der  Horst  K,  Deming  DM,  Lesniauskas  R, Carr  BT,  Reidy  KC.  Picky  eating:  Associations with  child  eating  characteristics  and  food  intake. Appetite. 2016;103:286–93.
69.   Suranto,  Tedianto,  Purwanto  E,  Setyono  P,
Mahadjoeno  E.  The  Relationship  Between Altitudes and the Contents of Protein, Carbohydrates,  Lipids  of  Pumpkin  (Cucurbita moschata). Agrivita. 2015;37(1):59–66.
70.   Usmiati  S,  Setyaningsih  D,  Purwani  EY,  S.  Y, Maria  OG.  Karakteristik  Serbuk  Labu  Kuning (Cucurbita  moschata).  J  Teknol  dan  Ind  Pangan. 2005;16(2):157–67.
71.   Carvalho LMJ de, Smirderle L de ASM, Carvalho JLV  de,  Cardoso  F  de  SN,  Koblitz  MGB. Assessment  of  carotenoids  in  pumpkins  after different  home  cooking  conditions.  Food  Sci Technol. 2014;34(2):365–70.
72.   Shahidan N, Othman R, Hashim YZH-Y, Othman R.  Carotenoid  content  in  different  locality  of pumpkin  (Cucurbita  moschata)  in  Malaysia.  Int  J Pharm Pharm Sci. 2014;6(Supplement 3):29–32.
73.   Li  CZ,  Hu  MX.  Evaluation  of  three  pumpkin species :  correlation  with  physicochemical  , antioxidant  properties  and  classification  using SPME-GC – MS and E-nose methods. J Food Sci Technol. 2017;54(10):3118–31.
74.   Potocnik  T,  Kosir  IJ.  Influence  of  roasting temperature of  pumpkin  seed  on PAH  and  aroma formation. Eur J Lipid Sci Technol. 2016;119(3):1–8.
75.   Rizzi  GP.  The  Strecker  Degradation  and  Its Contribution to Food Flavor. In: Teranishi R, Wick EL, Hornstein I, editors. Flavor Chemistry. Boston, MA: Springer; 1999. p. 335–43.
76.   Leffingwell  JC,  Alford  ED,  Leffingwell  D.
Identification of the Volatile Constituents of Raw Pumpkin  (Cucurbita  pepo  L.)  by  Dynamic Headspace Analyses. Leffingwell Reports. 2015;7(1):1–14.
77.   da Sila M de FG, de Sousa PHM, Figueiredo RW, Gouveia  ST,  Lima  JSS.  Cooking  effects  on bioactive compounds and sensory acceptability in pumpkin  (Cucurbita  moschata  cv.  Leite).  Rev Ciência Agronômica. 2019;50(3):394–401.
78.   Rahmah FA, Nurminabari IS, Gozali T. Pengaruh Penggunaan  Jenis  GUla  Merah  dan  Lama Fermentasi  Terhadap  Karakteristik  Water  Kefir. Jurnal Penelitian Tugas Akhir. Bandung; 2017.
79.   Marina  AM,  Azizah  SN.  Use  of  Coconut  Versus Dairy  Milk  Products  in  Malaysian  Dishes: Comparison  of  Nutritional  Composition  and Sensory Evaluation. J Food Nutr Res.
2014;2(4):204–8.
80.   Dhingra D, Michael M, Rajput H. Dietary fibre in foods: a review. J Food Sci Technol. 2012;49(June):255–66.