DISTRIBUSI PENYAKIT Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV) PADA UDANG VANNAMEI ( Litopenaeus vannamei ) DI PANTAI UTARA JAWA TIMUR
DISTRIBUTION OF Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV) IN WHITE SHRIMP VANNAMEI ( Litopenaeus vannamei )  IN NORTH COAST, EAST JAVA
Andre Rekasana, Laksmi Sulmartiwi dan Soedarno
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
White shrimp vannamei (Litopenaeus vannamei) is the main commodities among shrimp farmers because  it  has  a  rapid  growth,  can  be  cultivated  with  high  density  and  world  market  demand  is  large enough  .Since  being  introduced  in  Indonesia,  vannamei  shrimp  has  spread  to  the  north  of  East  Java pesisisr like Probolinggo, Pasuruan, Lamongan and Tuban. Shrimp growth factors are must be faced on vannamei  shrimp  culture,  including  the  problems  of  disease.  One  type  of  virus  disease  is  an  Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV). IMNV has affecting to the 70% of shrimp mortality (Tang et al., 2008). This study aims to determine the distribution of IMNV on white shrimp vannamei from the northern coast of East Java. This research uses descriptive method by taking samples from five different location which 75 samples totaly. In this research also take the water  quality parameter  including pH, DO, salinity and temperature. Whole  of  the  samples  performed  the  PCR  test  to  determine  how  many  samples  which  is indicating of IMNV.
Based on measurements of water quality at five different locations, the plots I, II and III obtained the  temperature  range  between  29.3-30.2  °C,  salinity  90-30  ppt,  pH  7.5-7.9,  and  DO 3.8-5.7 ppm. Temperature,  pH  and  DO  parameters  show  normally  on  white  shrimp  vannamei,  while  salinity shows  different  valve  from  normal  conditions. Abnormallity  happened  in  Situbondo  with  the  salinity betwen 32-33 ppt and Pasuruan betwen 9-10 ppt.
Results  showed  that  the  number  of  the  lowest  infection  is  Lamongan  (53%)  following Probolinggo (60%), Tuban (67%), Pasuruan (73%) and the highest is from Situbondo (100%)
Keywords : Litopenaeus vannamei , Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV), water quality
Pendahuluan Udang vannamei ( Litopenaeus vannamei )  merupakan  komoditas  baru  dengan kualitas ekspor yang sangat menjanjikan. Udang vannamei memiliki keunggulan yaitu pertumbuhan  yang  cepat,  dapat  dibudidayakan dengan  kepadatan  tinggi  mencapai  92-100 ekor/m 2 (Ruswahono,  2011).  Udang  vannamei memiliki ketahanan tubuh yang kuat, diantaranya adalah rentang salinitas yang sangat luas yaitu antara 15-30 ppt, sehingga masyarakat  di  daerah  pesisir  tertarik  untuk membudidayakan udang vannamei.
Setelah 2 tahun diintroduksi di Indonesia,  udang  vannamei  telah  menyebar hingga  ke  pesisisr  utara  Jawa  Timur  seperti Probolinggo,  Pasuruan,  Lamongan  dan  Tuban dengan  kondisi  lingkungan  yang  sesuai  dengan pertumbuhan  udang  vannamei.  Menurut  Dirjen Perikanan  dan  Kelautan  (2010)  dewasa  ini produksi  udang  di  Indonesia  terkendala  oleh timbulnya wabah penyakit yang datang dari luar Indonesia  bersamaan  dengan  udang  atau  ikan
lain  yang  diimpor,  salah  satunya  adalah Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV). IMNV  pertama  kali  ditemukan  di Brazil pada tahun 2002  dalam kolam budidaya Litopenaeus vannamei (Tang et  al .,  2005). Penyakit  yang  ditandai  dengan  nekrosis  otot rangka,  saluran  pencernaan  dan  ekor  ini  dapat menyebabkan kematian massal hampir 70% dari total  udang  yang  ditebar  selama  satu  siklus (Tang et  al. ,  2008).  Gejala  klinis  penyakit  ini pada  awalnya  adalah  perubahan  warna  putih pada  otot  rangka  dan  berubah  menjadi  warna merah pada pangkal ekor atau ruas terakhir dari abdomen  udang  vannamei  (Dirjen  Perikanan dan  Kelautan,  2010).  Udang  vannamei  akan mati secara bertahap di dasar tambak dan dapat menyebar luas jika tidak ada pemantauan secara dini (Prajitno, 2008).
Di  Indonesia  IMNV  diketahui  sudah menyerang  udang  putih  yang  dibudidayakan  di tambak  di  kecamatan  Kapongan  kabupaten Situbondo  dengan  tingkat  prevalensi  pada sekitar  bulan  mei  tahun  2006  sebesar  11,11%
(Nuraini,  2007),  meskipun  pada  saat  dilakukan survey  di  Kabupaten  Situbondo  terdeteksi adanya  IMNV  dengan  prevalensi  sebesar  100 %.  Hal  tersebut  tidak  menutup  kemungkinan bahwa  di  daerah  lain  saat  ini  sudah  terdeteksi IMNV.  Hasil  survey  dan  analisa  sampel  udang putih  di  Laboratorium  Kesehatan  Ikan  dan Lingkungan  Balai  Budidaya  Ikan  Payau (BBAP)  Situbondo  dari  tahun  2006  sampai pertengahan  tahun  2007  menunjukkan  bahwa IMNV  sudah  menyebar  di  daerah  pertambakan Kabupaten  Probolinggo,  Banyuwangi  dan Kalimantan  Selatan  (Nuraini,  2008).  Budidaya udang vannamei di Indonesia makin berkembang, sehingga perlu dilakukan penelitian  tentang  distribusi  IMNV  pada  udang vannamei di pantai utara Jawa Timur.
Metodologi Tempat dan Waktu Pelaksanaan Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Basah  Unit  Pelayanan  Teknis Pengembangan  Budidaya  Air  Payau  (UPT
PBAP) Bangil, Jawa Timur bulan Maret hingga Mei 2011.
Materi Penelitian Bahan  yang  digunakan  adalah  udang vannamei  yang  berasal  dari  tambak  tradisional dan  intensif  yang  diduga  terkena  wabah  IMNV di  Lamongan,  Tuban,  Pasuruan,  Probolinggo dan  Situbondo  Jawa  Timur.  Bahan  untuk  uji PCR  antara  lain  RNA extraction  solution , alkohol  absolut,  chloroform,  isopropanol,  RT- PCR PreMix (buffer, dNTPs, primer IMNV).
Peralatan yang  digunakan  adalah sterofoam, freezer ,  plastik  klip, gel  ice ,  sarung tangan.  Peralatan  yang  digunakan  untuk  uji PCR  adalah  sentrifuge,  gunting,  mikro  pipet, tabung  ependorf,  vortex  dan  kit  IQ  2000. Peralatan  pengukur  kualitas  air  berupa  pH  pen/ refraktometer, DO meter dan termometer.
Rancangan Penelitian Data  hasil  penelitian  disajikan  secara
deskriptif yaitu penyajian data dengan memaparkan  data  dalam  bentuk  penjelasan, angka  dan  gambar  yang  dideskriptifkan  dan juga  dapat  secara  grafis  yaitu  dalam  bentuk ataupun  grafik  guna  mendapatkan  gambaran tentang  data–data  penelitian  sehingga  lebih mudah  di  baca  dan  di  pahami  (Dergibson  dan Sugiarto, 2002).
Prosedur Penelitian a. Pengambilan Sampel
Sampel  didapat  dari  tambak  udang yang  diduga  terkena  wabah  IMNV  di  daerah Lamongan,  Tuban,  Pasuruan,  Probolinggo  dan Situbondo lalu dilakukan sampling secara acak.
Pengambilan sampel disesuaikan dengan jumlah yang  ada  yaitu  minimal  5-10  ekor  apabila kondisi lapangan tidak memungkinkan (Supriadi, 2004 dalam BKI, 2009). Sampel pada penelitian  ini  adalah  sebanyak  75  ekor  udang vannamei  berumur  45  hari  dengan  berat  rata- rata  7-8  gram,  panjang  8-10  cm.  Pengambilan sampel  pada  tiap  daerah  dilakukan  dengan memilih  3  petakan  tambak  yang  diduga terinfeksi  IMNV,  kemudian  diambil  masing- masing  5  ekor pada tiap petakan tambak  secara acak.
b. Pemeriksaan dengan PCR
Udang  sampel  yang  dibawa  dalam keadaan hidup atau hampir mati dan secepatnya dilakukan pemeriksaan virus maupun
pengambilan  organ  yang  di  duga  ada  penyakit.
Untuk  memastikan  adanya  infeksi  IMNV  pada udang  vannamei  maka  langkah  awal  dilakukan skrining dengan teknik PCR. Skrining  dilakukan  dengan  metode Polymerase Chain Reaction (PCR) menggunakan  alat  kit  IQ  2000  dan  primer khusus IMNV. PCR merupakan teknik amplifikasi DNA/RNA tertentu secara
sistematis  yang  dilakukan  secara in  vitro.
Metode  ini  telah  diterapkan  secara  luas  baik pada  crustacea  maupun  pada  ikan,  karena tingkat akurasinya  yang cukup tinggi dan cepat (Murdjani et al ., 2003).
c. Pengukuran Kualitas Air
Pengukuran  kualitas  air  pada  kultur S. platensis dilakukan  setiap  hari.  Parameter kualitas  air  yang  diamati  meliputi    suhu,  pH, DO dan salinitas air.

## Analisis Data
Data  hasil  penelitian  disajikan  dalam bentuk  tabel  dan  gambar  serta  dianalisis  secara deskriptif yang bertujuan
untuk mendeskripsikan  gejala  yang  ada  berdasarkan data  yang  diambil  melalui  pengamatan  atau observasi (Sulipan, 2003).

## Hasil dan Pembahasan
Udang  yang  terinfeksi  dari  5  lokasi  di  pantai utara  Jawa  Timur  (Situbondo,  Probolinggo, Pasuruan,  Lamongan  dan  Tuban)  dideteksi dengan  menggunakan  uji polymerase  chain reaction (PCR).  Pada  tiap-tiap  lokasi  tersebut dilakukan  pengambilan  sampel  sebanyak  15 ekor  dengan  jumlah  total  sampel  dari  5  lokasi sebanyak 75 ekor dan diketahui bahwa rata-rata udang  yang  diperiksa  positif  IMNV  seperti terlihat  pada  tabel  1,  sedangkan  grafik persentase jumlah udang terinfeksi dapat dilihat pada gambar 1.
Hasil PCR menunjukkan bahwa daerah Lamongan  dari  sampel  yang  diambil  sebanyak 15 ekor yang diperiksa, 8 ekor terinfeksi IMNV. Pada  daerah  Probolinggo  jumlah  udang  yang terinfeksi  sebanyak  9  ekor,  Tuban  10  ekor, Pasuruan 11 ekor dan Situbondo dengan jumlah udang terinfeksi paling banyak adalah sebanyak 15 ekor. Grafik persentase jumlah udang vannamei  yang terinfeksi IMNV terlihat  bahwa persentase  sampel  yang  diperiksa  di  daerah Lamongan  sebesar  53%,  Probolinggo  60%, Tuban  67%,  Pasuruan  73%  dan  Situbondo 100%.  Daerah  dengan  jumlah  udang  terinfeksi terendah  terdapat  pada  daerah  Lamongan, sedangkan  daerah  dengan  jumlah  udang terinfeksi  tertinggi  terdapat  pada  daerah Situbondo.
Hasil  pengukuran  kualitas  air  di  5 lokasi  pengambilan  sampel  dilakukan  secara acak.  Dari  tiap  lokasi  diambil  sampel  sebanyak 3 petak tambak yang berdasar pada
pengambilan sampel udang. Pengukuran kualitas  air  masing-masing  3  petak  pada  tiap lokasi  yaitu  pH,  suhu,  oksigen  terlarut ( Dissolved  Oxygen )  dan  salinitas.  pH  dari  tiap lokasi berkisar antara 7-8, pH terendah terdapat pada  daerah  Lamongan  yaitu  di  petak  2  dan  3 dengan  nilai  pH  7,5,  sedangkan  tertinggi  pada daerah Situbondo pada petak 3 dengan nilai pH 7,9.  Suhu  selama  penelitian  berkisar  antara 29,3-30,2°C,  suhu  terendah  terdapat  pada daerah  Tuban  yaitu  pada  petak  1  dan  tertinggi pada  daerah  Lamongan  pada  petak  1  dan  3. Pengukuran  DO  berkisar  3,8-5,7  ppm  dengan DO  terendah  sebesar  3,8  di  daerah  Situbondo terdapat pada petak 3 dan tertinggi pada daerah Pasuruan  pada  petak  1,sedangkan  salinitas berkisar  antara  9-33  ppt  dengan  salinitas terendah pada daerah Pasuruan yaitu pada petak 2 dan 3 sebesar 9 ppt dan tertinggi pada daerah Tuban  dan  Situbondo  yaitu  sebesar  33  ppt. Kisaran kualitas air dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 1. Jumlah Udang Vannamei Yang Terinfeksi dari Beberapa Lokasi
Lokasi Positif IMNV Negatif IMNV Jumlah Persentase (%) (ekor) (ekor) (ekor) (+) (-) Tuban 10 5 15 67 33 Lamongan 8 7 15 53 47 Pasuruan 11 4 15 73 27 Probolinggo 9 6 15 60 40 Situbondo 15 - 15 100 -
Gambar 1. Grafik persentase udang vannamei yang terinfeksi IMNV
Udang  yang  terserang  IMNV  mengalami gangguan pada sistem motorik dan nafsu makan berkurang,  hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan Lightner (2003) dan Nuraini et al . (2007)  yaitu tanda klinis udang yang terserang IMNV adalah 2  ruas  belakang  abdomen  serta  pangkal  ekor berwarna putih sampai
kemerahan.
Karakteristik  serangan  IMNV  secara  patologi ditandai  dengan  adanya  nekrosis  yang  tampak secara  kasat  mata  berwarna  putih  pada  daging udang  vannamei  dan  berlanjut  ke  warna  merah pada  bagian  ekor  kipas  dan  2  ruas  abdomen terakhir.
Pada  penelitian  ini,  untuk  mendeteksi IMNV, digunakan metode PCR. PCR ( Polymerase Chain Reaction ) adalah  satu
teknik  biokimia  dan  biologi  molekuler  untuk memperbanyak DNA secara eksponensial menggunakan enzim replikasi  tanpa organisme. PCR  adalah  metode in  vitro pada  sintesis  asam nukleat  dimana  segmen  DNA  tertentu  dapat diperbanyak (Saiki, 1990). Berdasarkan hasil uji PCR terhadap udang vannamei di daerah Tuban,
Lamongan, Pasuruan, Probolinggo dan Situbondo  diperoleh  hasil  positif  terinfeksi
IMNV.
Hasil  pengamatan  dari  ke  lima  lokasi
(Tuban,  Lamongan,  Pasuruan,  Probolinggo  dan Situbondo),  menunjukkan  bahwa  jumlah  udang yang  terinfeksi  terendah  terdapat  pada  daerah Lamongan  sebesar  53%  dan  tertinggi  pada daerah Situbondo sebesar 100%, kedua perbedaan  tersebut  disebabkan  karena  adanya perbedaan  kualitas  air  pemeliharaan  udang vannamei.  Dari  parameter  kualitas  air  yang diamati, perbedaan salinitas pada daerah Tuban, Pasuruan,  dan  Situbondo  tidak  sesuai  dengan salinitas  budidaya  udang  vannamei,  sedangkan pada  daerah  Lamongan  dan  Probolinggo  sudah sesuai  dengan  salinitas  optimal  untuk  budidaya udang  vannamei.  Host  (udang  vannamei)  akan mampu  tumbuh  dengan  baik  apabila  dipelihara
pada  media  dengan  temperatur  26-30°C, oksigen  terlarut  diatas  3  mg/L,  pH  7,5-8,5  dan salinitas 15-30 ppt (Haliman dan Dian, 2006).
Boyd  (1982)  menjelaskan  bahwa  efek dari  kualitas  air  yang  kurang  baik  akan  lebih besar  pengaruhnya  untuk  udang  vannamei disaat  sedang  mengalami  proses  ganti  kulit ( moulting ).  Kisaran  toleransi  yang  optimal untuk  pemeliharaan  udang  vannamei  sebagai media  pemeliharaan  adalah  media  bersalinitas 15-30 ppt, hal ini dikarenakan apabila dipelihara pada salinitas yang lebih rendah dari 15 ppt dari kadar  garam  dari  sel  tubuh  udang,  air  dari lingkungan  akan  masuk  ke  dalam  sel  tubuh udang  melalui  membran  semipermeabel  sel maka kadar garam dalam  sel tubuh udang akan menurun,  sehingga  organ  osmoregulator  akan mengeluarkan  air  dari  sel  tubuh  udang, sedangkan  pada  salinitas  yang  lebih  tinggi  dari 30 ppt kadar garam dari dalam sel tubuh udang akan  keluar  dan  air  yang  berada  di  lingkungan akan  masuk  ke  dalam  sel  tubuh  udang (Widigdo, 2011).
Perbedaan salinitas berpengaruh
terhadap  infeksi  IMNV  pada  udang  vannamei (Poulos et.al ., 2006). Tekanan pada  lingkungan dapat  mempengaruhi  mutasi  dari  IMNV,  setiap tekanan lingkungan pada host akan berpengaruh terhadap  genotip  sel  secara  spesifik,  faktor lingkungan  tersebut  meliputi  kualitas  air  yang langsung  berhubungan  dengan  host  (Semancik and Duran,  1999 dalam Andalusia,  2011). IMNV  bereplikasi  di  dalam  sitoplasma  sel  otot udang. Udang yang terinfeksi IMNV mengalami respon  inflamasi  sebagai  respon  imun  yang terjadi pada jaringan terinfeksi, ditandai dengan berkembangnya  lesi  pada  inflamasi  jaringan yang di duga sebagai indikasi terjadinya aktivasi respon imunnonspesifik yang disebabkan ds RNA (Robalino et.al., 2004 ).
Penyebaran  IMNV  pada  tiap  daerah dimungkinkan  terjadi  secara  vertikal  maupun
Tabel 2. Kisaran kualitas air tambak dari 5 lokasi
Lokasi Kualitas Air pH Suhu (˚C) DO (ppm) Salinitas (ppt) Tuban 7.8 29.3 - 29.5 5.0 - 5.1 33 Lamongan 7.5 -7.8 29.9 - 30.2 5.2 - 5.6 21 – 23 Pasuruan 7.7 - 7.8 29.4 - 29.6 4.7 - 5.7 9 – 10 Probolinggo 7.7 - 7.8 29.5 5.0 - 5.4 20 – 21 Situbondo 7.7 - 7.9 29.5 - 29.6 3.8 - 5.4 32 – 33
horisontal.  Benur  yang  digunakan  oleh  petani- petani  di  daerah  tersebut  terinfeksi  dari induknya,  karena  tidak  adanya  sertifikat kesehatan  yang  menjamin  benur  tersebut  SPF ( Spesific Pathogen Free ). Benur yang tidak SPF dihasilkan  dari  indukan  yang  sudah  terinfeksi IMNV  dan  berada  pada  lingkungan  yang mempunyai biosecurity dengan  tingkatan  lebih rendah. Benur terserang IMNV karena kontaminasi  perairan  tambak  tanpa treatment dan  sterilisasi  terlebih  dahulu,  sehingga  air  laut yang  mungkin  terkontaminasi  virus  dapat menginfeksi  benur  di  perairan  tersebut.  Fegan and Clifford (2001) menyatakan bahwa penyebaran  penyakit  di  lokasi  tambak  dapat terjadi  dengan  beberapa  cara  antara  lain  karena udang  yang  karier,  bangkai  udang  yang  mati, kontak dengan objek yang sudah terkontaminasi,  sumber  air  maupun  udara  yang terkontaminasi.    Sistem  budidaya  pembawa patogen  meliputi  inang  yang  terinfeksi  (benih, induk, inang vektor dan inang perantara),  karier inang  biologis  (burung,  anjing,  serangga  dan manusia)  serta  perantara  lainnya  (air,  mobil, sepatu, ember, jaring).

## Kesimpulan
Distribusi Infectious  Myo  Necrosis Virus (IMNV)  di  Pantai  Utara  Jawa  Timur meliputi  daerah  Tuban,  Lamongan,  Pasuruan, Probolinggo  dan  Situbondo.  Jumlah  udang vannamei  terinfeksi  terendah  terdapat  pada daerah  Lamongan  dengan  persentase  sebesar 53%, sedangkan pada daerah Probolinggo 60%, Tuban  67%,  Pasuruan  73%  dan  tertinggi terdapat pada daerah Situbondo dengan persentase 100%.
Beberapa  saran  untuk  pencegahan  distribusi Infectious  Myo  Necrosis  Virus  (IMNV)  di Pantai  Utara  Jawa  Timur  antara  lain  selalu melakukan  kontrol  kualitas  air  yang  optimum untuk pertumbuhan udang vannamei, penerapan biosecurity  antar  tambak,  pengawasan  kualitas induk  dan benih  udang vannamei dan monitoring penyakit antara pemerintah,
produsen  dan  konsumen  agar  mendapatkan informasi  tentang  penyebaran  penyakit  IMNV terbaru.

## Daftar Pustaka
Andalusia,  R.  2011.  Analisis  Antigenitas
Berdasarkan Susunan Nukleotida, Asam  Amino  dan  Peptida  Pada Infectious Myo Necrosis Virus (IMNV) Yang Menyerang Udang Putih ( L.vannamei ).  Disertasi  Program  Studi
S-2  Kedokteran.  Fakultas  Kedokteran Umum. Universitas Airlangga. 70 hal.
Balai  Karantina  Ikan  Kelas  II.  2009.  Laporan Pemantauan  Hama  Dan  Penyakit  Ikan Karantina.  Tanjung  Emas.  Semarang. 84 hal.
Boyd, CE. 1982. Water Quality Manajement for ponds Fish Culture. Elsevier Scientific Publishing Company, Amsterdam the Netherland. p 7-12.
Dergibson,  S.  dan  Sugiarto.  2002.  Metode Statistika  Untuk  Bisnis  dan  Ekonomi. Gramedia  Pustaka  Utama.  Jakarta.  hal 4-6.
Direktorat  Jendral  Perikanan  dan  Kelautan. 2010.  http://www.perikanan-budidaya. dkp.go.id  .  di  akses  tanggal  12/  08/
2010. 5 hal. Direktorat  Jendral  Perikanan  dan  Kelautan. 2010. Buku Saku Pengendalian Penyakit Ikan. Direktur Kesehatan Ikan dan Lingkungan. Jakarta. 127 Hal. Fegan,  D.  F.  and  Clifford,  H.  C.  2001.  Health Management  For  Viral  Disease  in
Shrimp  Farms.  Procedding  of  The Special Session On Sustainable Shrimp
Farming.  World  Aquacultue Society. p 168-198
Haliman,  R.  W.  dan  Dian  A.  S.  2006.  Udang vannamei.  Penebar  Swadaya.  Jakarta. 48 hal.
Murdjani,  M.  Nuraini,  Y.L.  dan  Triastutik,  G. 2003.  Hama  Penyakit  Ikan  dan  Udang Pada  Usaha  Pembenihan.  Departemen
Kelautan  dan  Perikanan.  Direktorat Jendral  Perikanan  Budidaya.  Balai Budidaya Air Payau Situbondo. Situbonda. 13 hal. Nuraini,  Y.L.  2007.  Virus  Myo  ;  Situbondo Diserang Brazil. www.trubus- online.co.id. Malang. Di Akses Tanggal  10/  03/    2009.5  hal._______. 2008. Prevalensi dan Perubahan
Histopatologik Infectious  Myonecrosis (IMN) Pada Udang Putih ( Litopenaeus vannamei )  Di  Jawa  Timur.  Program Pasca  Sarjana.  Fakultas  Kedokteran
Hewan.  Universitas  Gajah  Mada.
Yogyakarta. 66 hal.
Poulos, B.T., K. F. J. Tang, C. R. Pantoja, J. R. Bonami, D. V. Lighner. 2006. Purification  and  Characterization  of Infectious Myonecrosis Virus of Penaeid  Shrimp. Journal  of  General Virologi . 87: 987-996.
Prajitno, A. 2008. Penyakit Ikan-Udang : Virus.
UM  Press.  Malang.  106  Hal.  2008. respository.ipb.ac.id
Robalino,  J.   Browdy,  C. L.   Prior, S.   Metz,
A.    Parnell,  P.    Gross,  P.    Warr,    G.
2004.  Introduction    of    antiviral immunity   by   double-stranded   RNA in   a   marine invertebrata. J Virol 78: 10442-10448. Ruswahono,  A.  2011.  Pengelolaan  Media Budidaya  Dalam  Upaya  Pencegahan Penyakit  Pada  Pembesaran  Udang
Vannamei ( L.vannamei ) Teknologi Intensif Di PT. Segara Indah
Kecamatan  Besuki.  Tulungagung  Jawa Timur.  www.apsidoarjo.bpsdmkp.kkp. go.id.  Tanggal  akses  24  September 2011. Saiki,  R.  1990.    In  PCR  Protocols.  Academic Press. London. PP. 3-12. Sulipan.  2003.  Penelitian  Deskriptif  Analisis. www.ktiguru.org.  tanggal  akses  20 April 2011. Tang,  F.J.,  Kathy,  C.R.  Fantoja,  B.T.  Poulos, R.M.  Redman and D.V.  Lightner.
2005. In Situ
Hybridization Demonstrates  That L.  vannamei , L. styloristris and P.  monodon Are Susceptible  To  Experimental  Infection With  Infectious  Myonecrosis  Virus (IMNV).  Department  of  Veterinary Science  and  Microbiology  University of Arizona. Arizona. 5 hal. Tang,  F.J.,  W.  F.  Ochoa,  R.S.  Sinkovtsa,  B.  T. Poulos, S. A. Gabrialc, D. V. Lightner, T. S. Bakera and M. L. Niberte. 2008. Infectious  Myonecrosis  Virus  Has  A Totivirus-Like,  120-Subunit  Capsid, But With Fiber Complexes at The