## PEMANFAATAN POOL SERUM SEBAGAI BAHAN KONTROL KETELITIAN PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH

## Muhammad Muslim, Yayuk Kustiningsih, Endah Yanuarti
Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Banjarmasin Jl Mistar Cokrokusumo 4a Banjarbaru e-mail : muslim@gmail.com
Abstract :  Efforts  to  efficiency  in  the  implementation  of  the  medical  laboratory's  internal  quality control is done with the use of control serum pool. Pool control serum is a material made from leftover  serum of  patients  who  generally  discarded because  it  is not  used anymore  ..  The  pur- pose of the study to determine the accuracy of the quality of the pool serum as compared with the control materials for the plant control serum glucose in improving internal quality control. Type analytic  survey  research  with  comparative  approach.  Analysis  of  data  using  the  value  of  CV (coefficient of variation) and the Wilcoxon test. The results showed a decrease in serum pool of blood glucose levels after 30 days of storage by 4.7%. Based on a statistical test  serum taken with the pool serum obtained significance value of 0.000 where this value is less than the value of α = 0.05, which means that there is a difference between serum taken with the pool serum. In the control serum before and after storage decreased blood glucose levels of 4.5% and is based on statistical test obtained significance value of 0.073 where the value is more than the value of α = 0.05, so there is no difference between the control serum before and after storage. Based on the calculation, the value of CV (coefficient of variation) of 5.4% serum pool and a CV (coefficient of variation) control serum by 11.6%. Accuracy pool serum and serum control exceeds the limits CV (coefficient of variation) a maximum of 5%. It is suggested further research on how long endur- ance pool serum as a control.
Keywords : Pool serum, accuracy, control serum, blood glucose
Abstrak :  Upaya  untuk  efisiensi  dalam  pelaksanaan  kendali  mutu  internal  laboratorium  medik dilakukan  dengan  menggunakan  bahan  kontrol pool serum.  Pool  serum  merupakan  bahan control yang dibuat dari sisa serum pasien yang umumnya dibuang karena tidak digunakan lagi.. Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  kualitas  ketelitian pool serum  sebagai  bahan  kontrol dibandingkan  dengan  serum  control  pabrik  untuk  pemeriksaan  glukosa  dalam  meningkatkan kendali  mutu  internal.  Jenis  penelitian  survei  analitik  dengan  pendekatan comparative .  Analisa data  menggunakan  nilai    CV  (koefisien  variasi)  &  uji  Wilcoxon.  Hasil  penelitian  menunjukkan adanya penurunan kadar glukosa darah pool serum setelah penyimpanan 30 hari sebesar 4,7%. Berdasarkan  uji  statistik  pada  serum  yang  diambil  dengan pool serum  didapatkan  nilai signifikansi sebesar 0,000 dimana nilai ini kurang dari nilai α = 0,05, yang berarti ada perbedaan antara  serum  yang  diambil  dengan pool serum.  Pada  serum  kontrol  sebelum  dan  setelah penyimpanan terjadi penurunan kadar glukosa darah sebesar 4,5% dan berdasarkan uji statistik didapatkan nilai signifikansi sebesar 0,073 dimana nilai ini lebih dari nilai α = 0,05, sehingga tidak ada  perbedaan  antara  serum  kontrol  sebelum  dan  setelah  penyimpanan.  Berdasarkan perhitungan didapatkan nilai CV (koefisien variasi) pool serum sebesar 5,4% dan CV (koefisien variasi) serum kontrol sebesar 11,6%. Ketelitian pool serum dan serum kontrol melebihi batas CV (koefisien variasi) maksimum yaitu 5%. Disarankan penelitian lebih lanjut mengenai berapa lama ketahanan pool serum sebagai bahan kontrol.
Kata Kunci: Pool serum, ketelitian, serum kontrol, glukosa darah

## Medical Laboratory Technology Journal
Available online at : http://ejurnal-analiskesehatan.web.id

## PENDAHULUAN
Pelayanan  Laboratorium  Kesehatan merupakan bagian yang tidak terpisahkan dari pelayanan kesehatan kepada masyarakat. La- boratorium  kesehatan  sebagai  unit  pelayanan penunjang  medis,  diharapkan  dapat  memberi- kan  informasi  yang  teliti  dan  akurat  tentang aspek  laboratoris  terhadap  spesimen  atau sampel yang pengujiannya dilakukan di labora- torium.  Masyarakat  menghendaki  mutu  hasil pengujian laboratorium terus ditingkatkan seir- ing  dengan  kemajuan  ilmu  pengetahuan  dan teknologi  serta  perkembangan  penyakit.  Ahli teknologi  laboratorium  kesehatan  yang  terdiri dari para analis kesehatan dan praktisi labora- torium lainnya harus senantiasa mengembang- kan diri dalam menjawab kebutuhan masyara- kat  akan  adanya  jaminan  mutu  terhadap  hasil pengujian laboratorium dan tuntunan diberikan pelayanan yang prima (RI, 2007).
Mutu  pelayanan  di  laboratorium  ber- kaitan  dengan  data  hasil  uji  analisa  laborato- rium.  Mutu  pelayanan  didasari  penilaian  hasil pelayanan  laboratorium  secara  keseluruhan, dan salah satu titik penting terletak pada mutu pemeriksaan  atau  parameter  yang  diperiksa. Laboratorium dikatakan bermutu tinggi apabila data  hasil  uji  laboratorium  tersebut  dapat  me- muaskan  pelanggan  dengan  memperhatikan aspek-aspek  teknis  seperti  ketelitian ( precision )  dan  ketepatan  ( accuracy )  yang tinggi  dapat  dicapai  dan  data  tersebut  harus tercatat  dengan  baik  sehingga  dapat  diper- tahankan secara ilmiah.
Laboratorium  Kimia  Klinik  perlu  mela- kukan  kendali  mutu  yang dipengaruhi  dianta- ranya  oleh  penilaian  terhadap  ketelitian  dan ketepatan.  Pengukuran  tersebut  digunakan dengan bahan kontrol. Bahan kontrol yang ser- ing  digunakan  di  laboratorium  Kimia  Klinik sekarang adalah serum kontrol komersial. Ber- dasarkan  buku  pedoman Good  Laboratory Practice tahun  2008  selain  bahan  kontrol  ko- mersial  ada  juga  bahan  kontrol  yang  dibuat sendiri, salah satunya pool serum. Di laborato- rium-laboratorium  sekarang  serum  kontrol yang  digunakan  adalah  serum  kontrol  komer- sial, serum kontrol ini diambil dari hewan yang mungkin  tidak  sama  dengan  serum  manusia. Sedangkan pool serum  dilihat  dari  segi efisiensi pool serum  tidak  memerlukan  biaya
untuk  membuatnya.  Selain  itu  untuk  meman- faatkan  sampel  yang  digunakan  dalam  pe- meriksaan Kimia Klinik biasanya hanya sedikit sehingga sisa sampel yang tidak terpakai akan dibuang.
Berdasarkan hasil penelitian Dwicahyo Adi Nugroho (2011), pool serum yang diguna- kan  sebagai  bahan  kontrol  pada  pemeriksaan asam urat di laboratorium klinik memiliki kuali- tas yang baik.  Oleh karena itu, penulis tertarik untuk  meneliti  tentang  kualitas pool serum, apakah pool serum  memiliki  ketelitian  yang sama  dengan  serum  kontrol  komersial.  Untuk mengetahui  ketepatan,  bahan  kontrol  harus memiliki  nilai  rujukan  ( actual  value ),  sehingga yang  akan  dilihat  dari  penelitian  ini  hanya ketelitian.
Pemeriksaan  glukosa  menggunakan pool serum  sebagai  bahan  kontrol  Penting dilakukan  karena  parameter  pemeriksaan glukosa  darah  merupakan  salah  satu pemeriksaan  yang  cukup  banyak  diminta  oleh dokter  ataupun  pasien secara  pribadi. Penelitian  ini  bertujuan    untuk  mengetahui ketelitian pool serum (serum gabungan) seba- gai bahan kontrol pemeriksaan glukosa.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini menggunakan jenis peneli- tian  survei  analitik  dengan  metode  studi  per- bandingan  ( comparative  study )  yaitu,  peneli- tian  yang  mencoba  menggali  bagaimana  dan mengapa fenomena kesehatan itu terjadi den- gan cara membandingkan persamaan dan per- bedaan  sebagai fenomena untuk  mencari fak- tor-faktor  apa  atau  situasi  bagaimana  yang menyebabkan  timbulnya  suatu  peristiwa  ter- tentu (Notoadmodjo,2012).
Penelitian  yang  dilakukan  adalah  meli- hat  bagaimana  ketelitian pool serum  dengan cara  membandingkan pool serum  dengan  se- rum  kontrol  komersial  pada  pemeriksaan  glu- kosa.
Objek  penelitian  ini  adalah  kumpulan serum  pemeriksaan  glukosa  dari  pasien  yang kadar  glukosanya  normal  di  Laboratorium Klinik  Analis  Kesehatan  Poltekkes  Kemenkes Banjarmasin  dan  serum  kontrol  HumaTrol  N. Variable dari penelitian ini adalah ketelitian dari pool serum.
Pembuatan  serum  kontrol.  Serum kontrol  dalam  bentuk  serbuk  diolah  menjadi cair.  Serum  kontrol  yang  telah  diolah  dibagi menjadi  lima  mikrotube  dengan  volume  yang sama.  Setiap  mikrotube  diberi  label  sesuai dengan  hari  yang  akan  digunakan.  Disimpan semua  serum  kontrol  tersebut  dalam freezer. Pengukuran  glukosa  metode  GOD-PAP. Disiapkan  3  buah  tabung  reaksi  dan  diberi label Blanko, Standar, dan Sampel. Dipipet ke dalam tabung Blanko 1000 ul reagen glukosa. Dipipet  ke  dalam  tabung  Standar  1000  ul reagen  glukosa  dan  10  ul  larutan  standar glukosa. Dipipet kedalam tabung Sampel 1000 ul  reagen  glukosa  dan  10  ul  sampel  serum. Dicampur,  kemudian  diinkubasi  10  menit dalam suhu kamar. Dibaca hasil pada panjang gelombang  505  nm  dengan  fotometer. Dilakukan  pemeriksaan  glukosa  dengan sampel  5  serum  pasien  dan  5  serum  kontrol per hari. Pemeriksaan diatas diulang selama 5 hari  berturut-turut  dengan  5  sampel  berbeda setiap  harinya.  Dicatat  setiap  nilai  yang diperoleh.  Setelah  diperoleh  semua  hasil pemeriksaan,  dihitung  nilai  rata-rata  (mean), standar deviasi (SD), koefisien variasi (CV).
Pembuatan pool serum.  Dikumpulkan serum-serum  yang  kadar  glukosanya  normal, tidak  hemolisis,  tidak  ikterik  dan  tidak  lipemik dalam  botol  serum  kemudian  dimasukkan  ke dalam freezer .  Ditambahkan  sisa-sisa  serum pemeriksaan  glukosa  setiap  hari  tanpa menyebabkan  serum  gabungan  yang  telah ada  dalam  botol  serum  mencair  kembali. Serum  yang  sudah  terkumpul  dalam  botol serum  dikeluarkan  dari freezer ,  lalu  dibiarkan mencair  pada  suhu  kamar.  Dengan menggunakan  batang  pengaduk  serum kumpulan diaduk hingga homogen. Campuran serum  tersebut  lalu  disentrifuge  untuk memisahkan  bagian  yang  tidak  homogen. Semua  supernatan  dicampur  menjadi  satu dalam  sebuah  wadah  penampung  dan  diaduk dengan  hati-hati.  Campuran  ini  disebut pool serum.  Dimasukkan pool serum  ke  dalam  30 mikrotube. Disimpan serum-serum tersebut ke dalam freezer selama  30  hari . Setelah penyimpanan pool serum  dilakukan  persiapan pool serum  dengan  cara,  dikeluarkan  5 mikrotube  yang  berisi pool serum  dari freezer
yang telah disimpan selama 30 hari kemudian dibiarkan mencair pada suhu kamar. Dilakukan persiapan  serum  kontrol  dengan  cara dikeluarkan  1  mikrotube  yang  sesuai  dengan label pada wadah dan dibiarkan mencair pada suhu  kamar.  Dilakukan  pengukuran  glukosa pada pool serum  dan  serum  kontrol.  Diulangi langkah  diatas  selama  5  hari  berturut-turut. Dicatat  semua  data  yang  didapat.  Setelah diperoleh  semua  hasil  pemeriksaan,  dihitung nilai  rata-rata  (mean),  standar  deviasi  (SD), koefisien variasi (CV).
Untuk  menentukan  adanya  perbedaan data sebelum pengolahan pool serum dengan data pool serum  yang  telah  disimpan  selama 30  hari.  Pada  penelitian  ini  menggunakan  uji statistik  Paired-Samples  T  Test,  tetapi  data yang  diperoleh  tidak  berdistribusi  normal  se- hingga  menggunakan  uji  non-parametrik Two Related  Samples  Test menggunakan  uji  Wil- coxon.
Uji ini digunakan untuk mengetahui per- bedaan antara dua variabel yang berpasangan atau berhubungan. Uji ini untuk mengukur data berskala  ordinal  dan  tidak  mensyaratkan  data berdistribusi  normal  (Priyatno,  2009).  Analisa ini  dilakukan  dengan  menggunakan software SPSS Statistics 17.0 .
Menentukan ketelitian dengan CV sebagai pa- rameter yang dihitung dengan formula :
Keterangan: CV = koefisien variasi (%) SD = simpangan baku ẋ = nilai rata-rata
Ketelitian  dinyatakan  baik  jika  <5%  atau  nilai CV tidak melebihi batas maksimum.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar Glukosa Darah Pool Serum. Penelitian  ini  menggunakan pool serum sebagai bahan uji, dimana kriteria serum yang digunakan  adalah  nilai  glukosa  darah  normal, jernih  dan  tidak  lipemik  yang  dihomogenkan kemudian  dipisah  kedalam  mikrotube, disimpan  selama  30  hari  dalam freezer ,  lalu diperiksa.
Grafik 1. Hasil pemeriksaan kadar glukosa darah serum yang diambil & yang sudah dijadikan pool serum
Pada  gambar  di  atas  merupakan  hasil pemeriksaan kadar glukosa serum yang diam- bil dan serum yang telah dijadikan pool serum serta  disimpan  selama  30  hari,  dimana  pada pemeriksaan serum yang diambil dan pool se- rum  dilakukan  masing-masing  25  pemerik- saan.  Pemeriksaan  gula  darah  pada  serum yang  diambil  lebih  tinggi  daripada pool serum terlihat pada jumlah kadar glukosa pada serum yang  diambil  sebesar  2090  dan  jumlah  kadar glukosa pada pool serum sebesar 1992.
Berdasarkan  hasil  uji descriptive statistics antara  kadar  glukosa  serum  yang diambil  (sebelum  penyimpanan)  dan  kadar glukosa pool serum  (setelah  penyimpanan), yaitu  kelompok  kadar  glukosa  serum  yang diambil  dengan  rata-rata  83,60  dan  standar
deviasi  (SD)  5,951.  Kelompok  kadar  glukosa pool serum  dengan  rata-rata  79,68  dan standar  deviasi  4,279.  Data-data  tersebut digunakan  untuk  menentukan  nilai  ketelitian. Dilihat  pada  gambar  diatas  kadar  glukosa darah  pada pool serum  terjadi  penurunan sebesar  4,7%  dari  kadar  glukosa  darah semula.
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  dengan menggunakan  α  =  0,05  pada  uji  Wilcoxon didapat  nilai  Asymp.  Sig.  0,000    berarti  <  α 0,05,  sehingga  dari  hasil  pengujian  dengan statistik  didapatkan  ada  perbedaan  antara serum  sebelum  penyimpanan  dengan pool serum (serum setelah penyimpanan).
Kadar Glukosa Darah Serum Kontrol Sebelum dan Setelah Penyimpanan.
Grafik 2. Hasil pemeriksaan glukosa darah serum kontrol sebelum & setelah penyimpanan
Gambar  diatas  adalah  hasil  pemerik- saan glukosa darah serum kontrol yang dilaku- kan  bersamaan  dengan  pemeriksaan  bahan uji.  Pada  hasil  di  atas  diperoleh  50  data,  25 data  kadar  glukosa  serum  kontrol  sebelum penyimpanan  dan  25  data  kadar  glukosa  se- rum kontrol setelah penyimpanan.
Nilai glukosa serum kontrol disesuaikan dengan  nilai  target  yang  tertera  pada  kit  yaitu 110 mg/dl dan nilai range -nya 92,6 – 128 mg/ dl.  Jumlah  kadar  glukosa  serum  kontrol  sebe- lum penyimpanan adalah 2697 dan jumlah ka- dar  glukosa  serum  kontrol  setelah  penyim- panan adalah 2576.
Berdasarkan  hasil  uji descriptive statistics antara  kelompok  serum  kontrol sebelum  penyimpanan  dan  serum  kontrol setelah  penyimpanan,  rata-rata  kadar  glukosa serum  kontrol  sebelum  penyimpanan  sebesar 107,88  dan  standar  deviasi  sebesar  6,133,
sedangkan  rata-rata  kadar  glukosa  serum kontrol  setelah  penyimpanan  sebesar  103,04 dan  standar  deviasi  sebesar  11,911.  Dilihat dari  gambar  diatas  diperoleh  32%  hasil  yang mengalami kenaikan kadar glukosa darah dan 68%  mengalami  penurunan  glukosa  darah pada  serum  kontrol.  Berdasarkan  rata-rata serum  kontrol  mengalami  penurunan  kadar glukosa  darah  sebesar  4,5%  dari  kadar glukosa darah semula.
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  dengan menggunakan  α  =  0,05  pada  uji  Wilcoxon didapat nilai Asymp.  Sig.  0,073 yang berarti > α  0,05,  sehingga  dari  hasil  pengujian  statistik tidak  ada  perbedaan  antara  serum  kontrol sebelum  penyimpanan  dan  serum  kontrol setelah penyimpanan.
Ketelitian Pool Serum  dan  Serum  Kontrol Terhadap Kadar Glukosa Darah.
Gambar 1. Hasil Perhitungan CV Pool Serum & Serum Kontrol
Berdasarkan  hasil  perhitungan  CV (koefisien  variasi)  yang  didapat  dari  pem- bagian SD terhadap nilai rata-rata dan dihitung dalam  persen didapatkan  nilai  CV pool serum 5,4%  dan  CV  serum  kontrol  11,5%.  Nilai  CV kedua  kontrol  tersebut  melebihi  nilai  CV  mak- simum yaitu sebesar 5% (DepKes RI,2008).
Pada  grafik  1.  merupakan  hasil  dari pemeriksaan kadar glukosa darah serum yang diambil  dan pool serum  yang  telah  disimpan selama  30  hari.  Berdasarkan  hasil  tersebut dapat  dilihat  dari  rata-rata  kelompok  serum yang  diambil  lebih  tinggi  daripada  rata-rata pool serum  yaitu  83,60  dan  79,68.  Hal  ini berarti  kadar  glukosa  darah  dalam  serum mengalami  penurunan  dari  kadar  semula. Dilihat  dari  hasil  bahwa  semua  data pool serum  mengalami  penurunan  kadar  glukosa darah dengan persentase penurunan rata-rata sebesar  4,7%  dari  kadar  semula.  Hal  ini
dibuktikan  dari  hasil  uji  statistik  menggunakan uji  Wilcoxon  didapatkan  adanya  perbedaan antara serum yang diambil dengan pool serum yang telah disimpan selama 30 hari.
Berdasarkan  grafik  2.  terlihat  terjadinya penurunan rata-rata kadar glukosa darah pada serum  kontrol  sebelum  penyimpanan  dan setelah  penyimpanan  selama  30  hari,  yaitu 107,88  dan  103,04  dengan  persentase sebesar 4,5%. Hasil uji statistik menggunakan uji  Wilcoxon  tidak  ada  perbedaan  antara serum  kontrol  sebelum  dan  setelah penyimpanan, meskipun dari data hasil terlihat berbeda.
Persentase  penurunan  kadar  glukosa darah  pada pool serum  adalah  4,7%  dan serum  kontrol  4,5%.  Hal  ini  menunjukkan ketahanan pool serum  selama  30  hari  baik karena  tidak  terjadi  perbedaan  yang  jauh dengan serum kontrol hanya selisih 0,2%.
Dilihat  dari  hasil  penelitian  bahwa terjadi  penurunan  kadar  glukosa  setelah penyimpanan selama 30 hari pada pool serum maupun  serum  kontrol.  Kemungkinan  adanya k o n t a m i n a s i d a r i m i k r o o r g a n i s m e menyababkan  terjadinya  penurunan  kadar glukosa  darah.  Mikroorganisme  juga membutuhkan  sumber  energi  untuk metabolisme.  Menurut  Murray  (2003) penundaan preparasi sampel dan pemeriksaan  untuk  mengukur  kadar  glukosa darah  dapat  berdampak  pada  penurunan kadar  glukosa  darah  dalam  sampel  akibat mikroorganisme yang mungkin terdapat dalam sampel darah tersebut.
Hasil perhitungan CV (koefisien variasi) pool serum  sebesar  5,4%  dan  CV  serum kontrol  sebesar  11,6%.  Nilai  CV pool serum lebih mendekati nilai CV maksimum yaitu 5%, sehingga ketelitian pool serum sebagai kontrol pemeriksaan  glukosa  darah  lebih  mendekati CV  maksimum  dibandingkan  serum  kontrol. Tingginya  CV  serum  kontrol  tersebut  dapat disebabkan  karena  suhu  penyimpanan.  Suhu penyimpanan  menjadi  salah  satu  faktor penting  dalam  kestabilan  bahan  kontrol. Stabilitas  serum  kontrol  yang  disimpan  pada suhu  -20°C  relatif  lebih  baik  dibandingkan dengan  serum  kontrol  yang  disimpan  dalam lemari  pendingin  (Soehartini,  2005).  Selain  itu kulkas  tidak  boleh  mati  dalam  waktu  lama, sehingga  ketika  kulkas  mati  akan  membuat perubahan  suhu  kulkas  berubah  dan  bahan kontrol  akan  menjadi  tidak  stabil.  Hal-hal tersebut  yang  dapat  mempengaruhi  bahan kontrol memiliki ketelitian yang rendah.

## DAFTAR PUSTAKA
Irawan,  M.,  (2007). Glukosa  &  Metabolisme Energi . [Online] Available at: www.ppsplsb.com  [Accessed  19  Januari 2014]
Keputusan  Menteri  Kesehatan,  RI.  ,
(2007). Standar Profesi Ahli Teknologi La- boratorium  Kesehatan .  Jakarta:  KeMen- Kes RI
Marks,  D.B.,  Marks,  A.D.  &  Smith,  C.M.,
(2000). Biokimia  Kedokteran  Dasar .  Ja- karta: EGC Notoadmodjo, S. (2012). Metodologi Penelitian Kesehatan, Rineka  Cipta,  Jakarta  Nu- groho, D.A., 2011. Uji Presisi dan Akurasi Serum Gabungan Sebagai Bahan Kontrol Pada Parameter Asam Urat . KTI. Banjar- baru: Poltekkes Kemenkes Banjarmasin Pedoman  Praktik  Laboratorium  Kesehatan yang  Benar .  Jakarta:  Departemen  Kese- hatan RI,(2008)
Pertiwi, D., (2010). Pemantapan Mutu Labora- torium Bidang Kimia Klinik. Sultan Agung Vol XLVIII No 122 , Maret-Mei. pp.17-31 Priyatno,  D.,  (2009). 5 Jam Belajar Olah Data dengan SPSS17 . Yogyakarta: ANDI Pusdiknakes, (1989). Hematologi . Jakarta: De- partemen Kesehatan RI Sacher,  R.  &  McPhearson,  R.,  (2004). Tin- jauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laborato- rium . 11th ed. Jakarta: EGC. Soehartini,  (2005). Pembuatan  Serum  Kontrol Untuk Kimia Klinik dengan Menggunakan Etilen  Glikol .  Surabaya:  GDLHUB  Fakul- tas Kedokteran Universitas Airlangga Sukorini,  U.  &  Rizki,  M.,  (2010).  Dasar-Dasar Kontrol  Kualitas  Internal.  In  U.  Sukorini, D.K.  Nugroho,  M.  Rizki  &  B.  Hendiawan, eds. Pemantapan  Mutu  Internal Laboratorium  Klinik .  Yogyakarta:  Alfa Medika Yogyakarta. pp.13-23