Respon Imun Spesifik Larva Ikan Mas ( Cyprinus carpio ) melalui Imunitas Maternal yang Diberi Vaksin Inaktif Whole Cell Aeromonas salmonicida
Specific Immune response Larva Goldfish (Cyprinus carpio) Maternal Immunity through The Whole of Cell Vaccine given Aeromonas salmonicida

## Syohibahttul Islamiyah BAHAR, Esti HARPEN, Eko EFFENDI
Jurusan Perikanan dan Kelautan Fakultas Pertanian Universitas Lampung Jl. Sumantri Brojonegoro No. 1 Bandar Lampung 35145 E-mail: syohibaht@gmail.com
Abstract. Aeromonas  salmonicida are  specific  bacteria  that  can  cause  infections  and  death  to  the cultivation of carp (Cyprinus carpio ) during larval stage. Death in carp can be prevented by a vaccine, but the vaccine can only be given on the seed over the age of 3 weeks. Maternal vaccination needs to be  done  to  improve  the  immune  system  of  the larvae  by  means  of  inactivated whole cell  vaccine A. salmonicida on  broodstock  ready  to  spawn.  Aims  to  determine  the  effectiveness  of  vaccines  on breeders carp to the parent antibody titer test and larvae, as well Survival Rate (SR) and the Relative Percent Survival (RPS) larvae. This research was conducted with a completely randomized design, 4 treatments A (control); B (0.3 ml/kg); C (0.4 ml/kg); D (0.5 ml/kg) and 3 repetitions. The results show that  the  antibody  titer  of  0.3  ml  dose  capable  of  providing  agglutination  reaction  to  pitting  7th  (64x dilution) in broodstock, and vaccine doses 0,4 ml on broodstock able to give agglutination reaction to the larvae until all 6 wells (32x dilution). A dose of 0.4 ml/kg resulted the highest SR and RPS with 96.11%  and  81.25%  respectively.  Clinical  symptoms  of  redness  in  control  larvae  was  spread throughout the body whereas on the vaccine treatment was only in certain body parts.
Keywords: A. salmonicida , vaccines, maternal immunity, larva, specific immune respon
Abstrak. Aeromonas  salmonicida merupakan  bakteri  spesifik  yang  dapat  menyebabkan  penyakit infeksi  dan  kematian  pada budidaya ikan  mas (Cyprinus  carpio )  saat  stadia larva.  Pencegahan  dapat dilakukan  dengan  pemberian  vaksin,  namun  pemberian  vaksin  hanya  dapat  diberikan  pada  benih berumur  lebih  dari  3  minggu.  Vaksinasi  indukan  perlu  dilakukan  untuk  meningkatkan  sistem  imun larva  dengan  cara  pemberian  vaksin  inaktif whole  cell  A.  salmonicida pada  indukan  yang  siap memijah. Tujuan dari pemberian vaksin yaitu untuk mengetahui efektivitas pemberian vaksin terhadap uji titer antibodi induk dan larva, serta Survival Rate (SR) dan Relative Percent Survival (RPS) larva. Penelitian ini dilakukan dengan Rancangan Acak Lengkap, 4 perlakuan A (kontrol); B (0,3 ml/kg); C (0,4 ml/kg); D (0,5 ml/kg) dan 3 kali ulangan. Hasil uji titer antibodi menunjukan bahwa dosis 0,3 ml mampu  memberikan  reaksi  aglutinasi  hingga  sumuran  ke-7  (pengenceran  64x)  pada  indukan,  dan dosis vaksin 0,4 ml pada indukan mampu memberikan reaksi aglutinasi pada larva hingga sumuran ke- 6 (pengenceran 32x). SR larva pada perlakuan tanpa vaksinasi jauh lebih rendah dari pada perlakuan dengan  vaksinasi.  Dosis  0,4  ml/kg  menghasilkan  SR  dan  RPS  tertinggi  yaitu  96,11%  dan  81,25%. Gejala kemerahan pada larva kontrol terlihat menyebar diseluruh tubuh sedangkan pada larva dengan perlakuan vaksin hanya dibagian tubuh tertentu.
Kata kunci: A. salmonicida , vaksin, imunitas maternal, larva, respon imun spesifik

## PENDAHULUAN
Penyakit  bakterial  yang  disebabkan  oleh A. salmonicida masih  menjadi  masalah  bagi pembudidaya  ikan  mas  ( C.  carpio ).  Penyakit ini  dapat  menular  bahkan  menyebabkan kematian  pada  ikan  budidaya,  terutama golongan  cyprinid  (Irianto  2005);  (Austin et al .,  2007).  Tatang  (2014)  menyatakan  bahwa, organ-organ  yang  berperan  dalam  sistem pembentukan  antibodi  pada  umur  lebih  dari tiga  minggu  masih  belum  sempurna,  sehingga patogen dengan mudah menginfeksi benih ikan mas.  Penggunaan  obat-obatan  saat  ini  sebagai metode  pengobatan  juga  sudah  tidak  dianjur- kan  karena  dapat  menyebabkan  dampak negatif  seperti  timbulnya  resistensi  pada  bak- teri, adanya residu dalam tubuh ikan, pencema- ran  lingkungan,  bahkan  dapat  menyebabkan penolakan  ekspor  oleh  negara  lain.  Salah  satu upaya  pencegahan  yang  dapat  dilakukan  yaitu dengan  pemberian  vaksin  (vaksinasi)  (Astuti, 2015).
Aplikasi  pemberian  vaksin  inaktif whole  cell A.  salmonicida pada  indukan  ikan  mas  yang sudah  matang  gonad  pada  tahap  oosit  primer dilakukan  dalam  penelitian  ini  sebagai  bentuk pencegahan  awal  agar  larva  memiliki  kekeba- lan spesifik bawaan dari induk yang divaksina- si.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  (Davis, et al .,  2007;  Mor  &  Avtalion,  1990).    Respon imun  spesifik  dapat  dilihat  pada  uji  titer antibodi induk maupun larva. Apabila terdapat reaksi  antara  antigen A.  salmonicida dan antibodi  (reaksi  aglutinasi)  pada  uji  titer  anti- bodi  induk  maka  dapat  dipastikan  larva  yang dihasilkan  juga  memiliki  imunitas  spesifik sama  dengan  induknya.  Respon  lainnya  dapat diamati  dari  tingkat  kelangsungan  hidup  dan tingkat  kelangsungan  hidup  relatif.  Reaksi hasil  uji  dapat  dilihat  setelah  uji  tantang  larva dengan  bakteri A.  salmonicida .  Gudkovs (1988)  menjelaskan  bahwa,  tingkat  kelangsu- ngan  hidup  (SR)  rata-rata  ikan  yang  baik berkisar 73,50-86,60 %. Sedangkan untuk RPS yaitu > 60%.
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  mengetahui efektivitas pemberian vaksin inaktif Whole cell A.  salmonicida pada  indukan  ikan  mas (C. carpio ),  terhadap  uji  Titer  antibodi  induk  dan larva,  serta  mengetahui    efektivitas  pemberian vaksin tersebut terhadap uji tantang larva.

## BAHAN DAN METODE
Isolat  bakteri A.  salmonicida didapatkan  dari Stasiun Karantina Ikan Pengendalian Mutu dan Keamanan  Hasil  Perikanan  Kelas  I  Lampung. Untuk  indukan  ikan  mas  ( C.  carpio ),  didapat- kan  dari  Balai  Benih  Ikan  Sentra  (BBIS) Purbolinggo  Lampung  Timur.  Penelitian  dila- kukan  dengan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  yang  terdiri  dari  4  perlakuan  dengan  3 kali  ulangan  yaitu  Perlakuan  A:  induk  tanpa vaksinasi  (kontrol),  Perlakuan  B:  vaksinasi induk  dengan  dosis  0,3 ml/kg,  perlakuan  C: vaksinasi  induk  dengan  dosis  0,4 ml/kg, perlakuan D: vaksinasi induk dengan dosis 0,5 ml/kg.
Metode pembuatan vaksin inaktif whole cell A. salmonicida mengacu  pada  Setyawan  dkk., (2012) menggunakan isolat murni A. salmonicida yang  diinaktif  dengan  formalin 1,5  %.  Bakteri  yang  inaktif    selanjutnya  diuji Viabilitas untuk mengetahui kelayakan vaksin, dengan  mengkultur  kembali  bakteri  inaktif pada  media  TSA.  Vaksin  dikatakan  layak ditandai  dengan  tidak  adanya  bakteri  yang tumbuh  saat  dikultur  pada  media  TSA. Pemberian vaksin dilakukan pada induk betina ikan  mas (C.  carpio) dengan  cara,  induk dianestesi  menggunakan  minyak  cengkeh  (0,3 ml/L)  sebelum  vaksin  diberikan.  Indukan divaksinasi dengan cara disuntik dibagian Intra muscullar (IM) (Anderson, 1974), menggunakan  vaksin  inaktif whole  cell  A. salmonicida dengan  kepadatan  10 7 CFU/ml (Setyawan  dkk.,  2012).  Pemberian  vaksin sebanyak 2 kali dengan, pemberian vaksin ke-2 sebagai booster (Tatang, 2014).
Uji  titer  antibodi  yang  dilakukan  pada penelitian ini yaitu, uji pada Induk yang divak- sin, dan Larva yang ditetaskan dari induk yang divaksinasi.  Metode  uji  titer  antibodi  induk mengikuti  metode  uji  (Setyawan  dkk.,  2012). Sedangkan  untuk  metode  uji  titer  antibodi larva  mengacu  pada  Nur  dkk.,  (2004);  Nur, dkk.,  (2006);  Hadie  dkk.,    (2010).  Parameter uji  titer  antibodi,  dilihat  berdasarkan  ada tidaknya  reaksi  Aglutinasi,  yang  ditandai dengan  menyebarnya  titik  didasar  sumuran, diberi keterangan (+), sedangkan apabila tidak ada  aglutinasi  ditandai  dengan  berpusatnya titik  didasar  sumuran,  diberi  keterangan  (-) (Hadie dkk., 2010).
Larva  diuji  tantang  pada  umur  5  hari  pasca penetasan  dan  13  hari  pasca  penetasan.  Uji tantang  dilakukan  dengan  menantang  larva dengan  bakteri  aktif A.  salmonicida pada kepadatan  bakteri  10 7 cfu/ml.  Metode  yang digunakan yaitu perendaman selama 30 menit, dan diamati selama 7 hari, respon yang diberi- kan  pasca  uji  tantang.  Parameter  uji  tantang, dilihat berdasarkan tingkat kelangsungan hidup (SR)  dan  tingkat  kelangsungan  hidup  (RPS). Dihitung menggunakan rumus:
a. SR = Nt No × 100% .............(1)
Nt  =  Jumlah  ikan  yang  hidup  pada  awal pengujian.
N 0 =   Jumlah  ikan  yang  hidup  pada  akhir pengujian.
b. RPS = 1 𝑀𝑣
𝑀𝑐
× 100% .....(2)
Mv = Moralitas larva perlakuan (%) Mc = Mortalitas larva tanpa perlakuan (%)
Hasil yang baik menunjukan jika, nilai tingkat kelangsungan  hidup  (SR)  ikan  rata-rata  yang berkisar  73,50  -  86,60  %  (Gudkovs,  1988), sedangkan untuk RPS > 60% (Nur dkk., 2004). Data  hasil  uji  titer  antibodi  dan  uji  tantang, dianalisis  secara  statistik.  Analisis  data  untuk uji  titer  antibodi  menggunakan  uji  t.  Data  SR dan  RPS  dianalisis  menggunakan  ANOVA dengan  tingkat  kepercayaan  95%.  Transfortasi data menggunakan Arsin, pengujian normalitas data  menggunakan  Lilifore,  dan  Homogenitas menggunakan  Bartlet,  untuk  uji  lanjut  meng- gunakan Beda Nyata Terkecil (Nazir, 2005).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Vaksin dan Pemberian Vaksin
Vaksin Whole  cell  A.  salmonicida yang  di- inaktivasi dengan menggunakan formalin 1,5% dianggap  aman  untuk  digunakan  karena  dari hasil  uji  viabilitas  menunjukan  bahwa  tidak ada  pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida pada media kultur TSA dalam waktu kultur 22 jam, dengan  ini  bakteri  sudah  siap  digunakan sebagai  vaksin.  Bakteri  aktif A.  salmonicida akan  tumbuh  optimal  pada  media  kultur  TSA dalam waktu 18 - 24 jam, koloni yang tumbuh memiliki  ciri  berwarna  putih,  berbentuk  bulat, dan  permukaan  cembung  (Buller,  2004).  Vak- sin  yang  telah  siap  selanjutnya  diaplikasikan pada ikan uji yaitu indukan ikan mas.

## Uji Titer Antibodi
Reaksi  uji  titer  antibodi  ditandai  dengan adanya  reaksi  aglutinasi  antara  serum  antibodi terhadap antigen yang dilihat dari titik menye- bar  disekitar  dasar  sumuran  (+),  sedangkan apabila tidak terjadi aglutinasi ditandai dengan berpusatnya  satu  titik  ditengah-tengah  dasar sumuran  (-).  Kondisi  awal  uji  titer  antibodi induk  sebelum  vaksinasi  tidak  ditemukan reaksi  aglutinasi,  hal  ini  karena  sebelumnya indukan  belum  terinfeksi  antigen  yang  sama ( A.  salmonicida ),  Nur  (2006)  menyatakan bahwa  secara  alami  ikan  yang  telah  terinfeksi akan  menunjukan  reaksi  aglutinasi  saat dilakukan pengujian titer antibodi.
Tabel 1. Reaksi uji titer antibodi pada induk dan larva
Ikan uji Perlakuan (ml) Sumuran/ Pengenceran 1/1 2/2 ¾ 4/8 5/16 6/32 7/64 Indukan Sebelum vaksinasi 0 - - - - - - - 0,3 - - - - - - - 0,4 - - - - - - - 0,5 - - - - - - - Indukan Setelah Vaksinasi 0 - - - - - - - 0,3 + + + + + + + 0,4 + + + + + + - 0,5 - - - - - - - Larva dari indukan yang divaksinasi 0 - - - - - - - 0,3 + + + + - - - 0,4 + + + + + + - 0,5 - - - - - - -
Keterangan  :  (+)  ada reaksi aglutinasi (pembentukan antibodi (-)  tidak ada reaksi aglutinasi (tidak terbentuk antibodi)
Tabel 1 menunjukan bahwa Induksi kekebalan pada  induk  ikan  mas  terhadap  titer  antibodi memberikan  perbedaan  yang  signifikan  antara perlakuan  vaksin  (0,3  dan  0,4  ml)    terhadap kontrol  (tanpa  perlakuan)  ditandai  dengan adanya  reaksi  aglutinasi  pada  perlakuan  terse- but  saat  uji  titer  antibodi.  Sedangkan  untuk pemberian  dosis  vaksin  0,5ml  tidak  berbeda terhadap  kontrol  dengan  tidak  munculnya reaksi aglutinasi pada saat uji titer antibodi.
Kondisi  ikan  uji  yang  akan  divaksinasi sebaiknya belum terpapar bakteri spesifik yang digunakan  sebagai  vaksin,  dalam  keadaan sehat, dan minimal berumur > 3 minggu pasca menetas. Tatang (2014); Astuti (2015), menya- takan  bahwa  pemberian  vaksin  diberikan  pada ikan  yang  status  kondisinya  dalam  keadaan optimal ( > 3 minggu pasca menetas) dan tidak memiliki riwayat penyakit akibat patogen yang akan  digunakan  sebagai  vaksin.  Reaksi  agluti- nasi  hingga  sumuran  ke-7  (pengenceran  64x) termasuk  dalam  katergori  respon  positif  yang relatif  tinggi,  sedangkan  reaksi  aglutinasi  di bawah sumuran ke-6 (pengenceran 32x) reaksi titer antibodi relatif rendah (Hadie dkk., 2010). Terlihat  bahwa  pemberian vaksin  0,3  ml  lebih tinggi  hasil  uji  titer  antibodinya  dibandingkan 0,4 ml dan 0,5 ml. Hal ini karena dosis vaksin yang  diberikan  dapat  mengubah  imunogenesi- tas  dan  ada  dosis  vaksin  tertentu  dari  suatu antigen  yang  dapat  menimbulkan  respon antibodi maksimal, selain itu peningkatan dosis vaksin tidak selalu sebanding dengan kenaikan titer antibodi (Olga dkk., 2007).
Vaksinasi  dengan  pemberian  dosis  0,5  ml belum  mampu  memunculkan  antibodi,  karena dosis  yang  terlalu  tinggi  akan  menghambat respon  imun  spesifik  yang  diharapkan. Pasaribu  dkk.,  (1990)  menyatakan,  jika  dosis dan  konsentrasi  vaksin  yang  diberikan  mele- bihi  batas  kemampuan  tubuh  ikan,  maka vaksin akan bersifat immunosupresif (menekan munculnya  respon  imun).  Dosis  vaksin  yang cukup  besar  belum  tentu  dapat  memberikan kekebalan  yang  tinggi  dalam  tubuh  ikan  (Nur, 2006).  Selain  itu  juga  tidak  munculnya  reaksi dapat  disebabkan  karena  limfosit  tidak  dapat mengenal antigen yang merangsang terbentuk- nya antibodi (Fujaya, 1999). Masih terdeteksi- nya  antibodi  pada  larva  membuktikan  adanya transfer  antibodi  dari  induk  ke  larva  yang diduga  terbawa  oleh  telur  setelah  perlakuan
vaksinasi (Tang & Affandi, 2000). Keberadaan antibodi  di  dalam  telur  diperjelas  dengan terdapatnya  keberadaan  antibodi  yang  ikut dalam  aliran  darah  yang  terbawa  ke  hati (tempat  terbentuknya Vitellogenin )  kemudian terbawa  oleh  aliran  darah  ke  dalam  oosit primer,  selanjut  oosit  primer  berkembang sampai  terbentuk  embrio  dan  ditetaskan.  Ku- ning  telur  merupakan  sumber  makanan  utama benih  pada  awal  pertumbuhannya,  hal  ini menyebabkan  keberadaan  antibodi  dalam cairan tubuh larva saat uji titer antibodi (Davis et al ., 2007). Transfer imun dari induk ke larva telah  dibuktikan  dalam  telur  dan  embrio  dari beberapa spesies ikan air tawar (Bly & Morris, 1986) seperti, ikan nila ( Oreochromis niliticus )
(Nur  dkk.,  2004;  Nur,  2006)  dan  ikan  patin ( Pangesius pangesius ) (Hadie dkk., 2010).
Hasil tabel 1 setelah dianalisis uji t menunjuk- kan  tidak  ada pengaruh  yang  signifikan  antara pemberian  dosis  vaksin  0,3  ml  dan  0,4  ml, sehingga  dapat  diasumsikan  bahwa  pemberian dosis  vaksin  yang  tepat  untuk  indukan  ikan mas  dapat  diberikan  pada  kisaran  dosis  0,3  – 0,4  ml.  Dilihat  dari  penelitian  sebelumnya menyatakan  bahwa  pemberian  0,4  ml/ekor indukan  sudah  memberikan  respon  titer  anti- bodi  yang  cukup  baik  (Nur  dkk.,  2004;  Hadie dkk., 2010).

## Uji Tantang
Nilai  tingkat  kelangsungan  hidup  (SR)  larva dari  induk  yang  divaksinasi  lebih  tinggi dibanding kontrol dengan nilai peluang (0,02 < 0,05)  atau  sama  dengan  20%  dari  seluruh perlakuan yang  mempengaruhi tingkat kelang- sungan  hidup  larva  pasca  uji  tantang  yang merujuk  pada  perbedaan  sangat  nyata  antara perlakuan  terhadap  kontrol  untuk  uji  tantang pada  hari  ke-5.  Sedangkan  pada  uji  tantang hari  ke  13  tidak  berbeda  nyata,  namun  jika dilihat berdasarkan rataan presentasenya menunjukan  bahwa  vaksinasi  pada  indukan mampu  melindungi  larva  dari  paparan  bakteri A.  salmonicida (Mor  &  Avtalion,  1990).  Nilai rerata tingkat kelangsungan hidup relatif (RPS) tertinggi terdapat pada larva dari indukan yang divaksinasi  dengan  dosis  0,4  ml,  berdasarkan hasil  analisis  sidik  ragam  menunjukan  bahwa nilai  RPS  antar  perlakuan  yang  divaksinasi tidak berbeda nyata.
Gambar 1. Grafik rataan kelangsungan hidup larva pasca uji tantang hari ke 5 dan hari ke 13
Keterangan  :  “sunperskrip  huruf  yang  berbeda  pada  warna  kolom  grafik  yang  sama  menunjukan perbedaan yang sangat nyata p (0,02 < 0,05)”
“Perlakuan (A) kontrol/tanpa vaksin; (B) pemberian vaksinasi induk 0,3ml/ekor; (C) pemberian vaksinasi induk 0,4 ml/ekor; (D) pemberian vaksinasi induk 0,5 ml/ekor”
Gambar 2. Grafik rataan kelangsungan hidup relatif larva pasca uji tantang harike 5 dan hari ke 13
Keterangan  :    “Perlakuan (A)  kontrol/tanpa  vaksin ; (B)  pemberian  vaksinasi induk  0,3ml/ekor;  (C) pemberian vaksinasi induk 0,4ml/ekor; (D) pemberian vaksinasi induk 0,5ml/ekor”
73,77 ± 14,18 91,26 ± 3,13 92,29 ± 3,53 91,58±2,96
79,26±12,01
90,11±9,68 96,11±1,50 93,01±5,76 0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 120,00 Ra ta -ra ta t ing k a t k ela ng sun g a n hid up la rv a (%) A                               B                           C                       D Tingkat Kelangsungan Hidup larva (%) Kelangsungan Hidup (%) Hari ke 5 Kelangsungan
Hidup (%) Hari ke 13
66,68 ±11,92 70,58±13,48 67,89 ±11,28 53,30±46,70 81,25 ±7,21 66,27 ±27,76 0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 120,00 B Ra ta -ra ta t ing k a t k ela ng sun g a n hid up re la tif ( %) B                                         C                                 D TINGKAT KELANGSUNGAN HIDUP RELATIF LARVA (%) Tingkat kelangsungan hidup relatif (%)
hari ke 5
Tingkat Kelangsungan Hidup Relatif (%) hari ke 13 a b b b Perlakuan
Nilai SR dan RPS menunjukan bahwa antibodi cukup  berperan  pada  pertahanan  larva  dalam melawan  serangan  bakteri  uji  tantang.  Perbe- daan  yang  sangat  nyata  antara  perlakuan terhadap  kontrol  pada  uji  tantang  hari  ke-5 disebabkan  karena  pada  awal  pasca  penetasan larva  masih  rentan  terhadap  paparan  sehingga larva kontrol yang tidak memiliki sistem imun bawaan dari induknya lebih banyak mengalami kematian  dibanding  perlakuan,  sedangkan antar  perlakuan  tidak  terjadi  perbedaan  nyata yang  signifikan.  Jika  dilihat  dari  pengamatan pasca  uji  tantang,  larva  kontrol  dan  larva dengan  pemberian  dosis  vaksin  induk  0,5  ml lebih  cepat  menunjukan  gejala  klinis  berupa kemerahan pada perut dan sirip ekor pada hari ke-3,  kemerahan  yang  menyebar  keseluruh tubuh,  dan  sudah  mulai  terjadi  kematian. Sedangkan pada perlakuan 0,3 dan 0,4 ml luka umumnya  terjadi  tidak  menyebar  hanya  di bagian  tubuh  tertentu  (lokalisasi).  Ghenghesh et  al., (2008)  menyatakan  bahwa  infeksi A. salmonicida akan  mulai  muncul  gejala  klinis hingga  kematian  berawal  dari  hari  ke-3  pasca menginfeksi  inang.  Hal  ini  membuktikan bahwa  vaksinasi  induk  memberikan  tingkat perlindungan  yang  bervariasi  pada  larva  (Nur, 2006). Hal tersebut tidak ada kaitannya dengan kualitas  air,  karena  saat  pengukuran  kualitas air  menunjukan  hasil  yang  cukup  baik  untuk kelangsungan hidup larva dengan kisaran suhu (27  -  28 o C),  pH  (7,0  -  7,2)  dan  DO  (3,79  - 5,56  ppm),  sudah  sesuai  dengan  baku  mutu pada  pengukuran,  suhu,  pH,  dan  DO  untuk pemeliharaan  larva  ikan  mas  (Suseno,  1996; Afriyanto  dan  Liviawaty,  1992;  Cholik,  1986; Cahyono,  2000).  Secara  keseluruhan  nilai kisaran  kualitas  air  masih  mendukung  untuk kehidupan  larva  ikan  mas,  selain  itu  kualitas air yang baik tidak mendukung untuk kontami- nasi  bakteri A.  salmonicida atau  bakteri  pato- gen  yang  ada  di  wadah  pemeliharaan  larva. Buller  (2004)  menyatakan  bahwa  bakteri patogen akan tumbuh optimal pada suhu 22 o C dengan  keadaan  perairan  cenderung  asam  (pH >  5,5) (Ghenghesh,  2008) dan  bakteri tersebut hanya dapat menginfeksi dalam keadaan kepa- datan  bakteri  minimal  10 6 CFU/ml  diperairan untuk  memunculkan  luka  (Setyawan  dkk., 2012).  Dengan  demikian  kualitas  air  tidak menjadi  faktor  yang  mempengaruhi  kelangsu- ngan  hidup  larva,  serta  tidak  meningkatkan kinerja bakteri  patogen  di kolom  air,  sehingga ikan  yang  mati  dapat  dipastikan  diakibatkan oleh paparan bakteri pada uji tantang.
Pada uji tantang hari ke -13 tidak terdapat per- bedaan  yang  nyata  baik  SR  maupun  RPS,  hal ini  karena  pada  fase  larva  sudah  mulai berkembang  menjadi  fase  benih  dan  organ  - organ  yang  membantu  terbentuknya  antibodi sudah  mulai  berkembang,  sehingga  pada perlakuan  kontrol  (tanpa  vaksinasi)  sudah dapat  mengurangi  kematian  akibat  paparan bakteri A. salmonicida (Tatang, 2014).

## KESIMPULAN
Kesimpulan  dari  hasil  penelitian  ini  adalah, pemberian  vaksin  inaktif A.  salmonicida pada indukan  dengan  dosis  yang  berbeda,  menun- jukkan  adanya  respon  imun  spesifik,  pada  uji titer antibodi  dengan  pemberian  vaksin  0,3  ml dan 0,4 ml. Sedangkan untuk pemberian vaksin 0,5  ml  tidak  berpengaruh  terhadap  uji  titer antibodi induk maupun larva.
Pemberian  vaksin  berpengaruh  terhadap  SR dan  RPS  larva  yang  ditetaskan.  SR  pada  uji tantang  hari  ke-5  menunjukan  hasil  berbeda nyata antar perlakuan terhadap kontrol, dengan kontrol  lebih  rendah  Srnya  dibanding  dengan perlakuan  lainya.  Hasil  tetinggi  diperoleh  dari larva  hasil  induk  yang  divaksinasi  dengan dosis  0,4  ml  dengan  SR  96,11%  dan  RPS 81,25%. Pemberian dosis vaksinasi induk yang sesuai untuk ikan mas, berkisar 0,3 - 0,4 ml.

## DAFTAR PUSTAKA
Afriyanto,  E.,  &  Liviawaty,  E.  1992. Pengendalian  Hama  dan  penyakit. Kanisius. Yogyakarta.
Anderson,  D.  P.  1974. Immunology  of  Fish Disease:  Disease  of  Fish.  Sniesko  JF, Axelrod  HR  (eds)  Book  4. TFH  publ. Neptune. New York.
Astuti, S. P.2015. Aplikasi Vaksin. Laboratorium Kesehatan Ikan dan Lingkungan. Balai Pengembangan Teknologi Perikanan dan Kelautan
Austin,  A.,  &  D,  A.  A.  2007. Bacterial  Fish pathogen,  Disease  of  Farm  and  Wild Fish  Fourt  Edition. Spinger-Praxis Publising. UK.
Bly, J. E., Grimm, A. S., & Morris, I. G. 1986. Transfer  of  Passive  Immunity  from Mother  to  Young  in  A  Teleost  Fish:
Haemagglutinating Activity in the
Serum and Eggs of Plaice, Pleuronectes platessa  L . Comparative  Biochemistry and Physiology Part A , 84: 309-313.
Buller,  N.  B.  2004. Bacteria  from  Fish  and Other  Aquatic  Animals:  A  paractical Identification Manual. CABI Publishing. Western Australia
Cahyono,  B.  2000. Budidaya  Air  Tawar. Kanisius. Yogyakarta.
Cholik,  F.,  Artanty,  &  Arifudin.  1986. Pengelolahan  Kualitas  Air  Kolam. Direktorat Jendral Perikanan. Jakarta.
Davis,  K.  L.,  Hiramatsu,  N.,  Hiramatsu,  K., Reading, J. B., Matsubara, T., Hara, A., et  al.  2007.  Induction  of  Three Vitellogenins  by  17Beta-Estradiol  with Concurrent  Inhibition  of  the  Growth Hormone-Insulin-Like  Growth  Factor  1 Axis in a Euryhaline Teleost, the Tilapia ( Oroechomis  mossambicus ). Biology  of Reproduction , 77: 614-625.
Fujaya, Y. 1999. Bahan Pengajaran Fisiologis Ikan. Universitas  Hasanudin.  Ujung Pandang.
Ghenghesh, S. K., Ahmed, F., El- Khalek, A., Al  -  Gendy,  A.,  &  Klena,  J.  2008.
Aeromonas  -  Associated  Infections  in Developing Countries. J. Infect Developing Countries , 81-98.
Gudkovs,  N.  1988.  Fish  Immunology. Fish Disease Veterinarians , 531-544.
Hadie,  W.,  Angela,  M.  L.,  Sularto,  &  Evi,  T.
2010.  Imunitas  Maternal  Terhadap Aeromonas  hidrophila:  Pengaruhnya Terhadap  Fekunditas  dan  Daya  Tetas Ikan Patin Siam ( Pangasionodon hypothalamus ). Jurnal  Ris  Akuakultur ,
5 (2): 229-235.
Irianto,  A.  2005. Patologi  Ikan  Teleostei. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta.
Mor,  A.,  &  Avtalion,  R.  R.  1990.  Transfer  of Antibody  Activity  from  Immunized Mother  to  Embryo  in  Tilapias. Journal Fish Biology , 37: 249-255.
Nazir,  M.  2005. Metode  Penelitian. Ghalia indonesia. Jakarta.
Nur,  Sukenda,  &  Dana,  D.  2004.  Ketahanan Benih  Ikan  Nila  Gift  ( Oreochromis niloticus  Linn) dari  Hasil  Induk  yang Diberi  Vaksin  Terhadap  Infeksi  Buatan Streptococus  iniae. Jurnal  Akuakultur Indonesia , 3 (1): 37-43.
Nur,  I.  2006.  Respon  Humoral  Ikan  Nila ( Oreochromis  niloticus  Linne) yang Divakasinasi dengan Konsentrasi Bakterin  Aeromonas  hydrophila  yang Berbeda. WARTA-WIPTEK ,14 (2) : 60- 66.
Nur, I., Halipa, & Yusnaini. 2006. Peningkatan Imunitas  Benih  Ikan  Nila (Oreochromis niloticus )  Melalui  Vaksinasi  Induk. Warta-wiptek , 14 (2): 60-66.
Olga, Rini, R. K., Akbar, J., Isnansetyo, A., & Sembiring,  L.  2007.  Protein Aeromonas hydrophila Sebagai Vaksin untuk Pengendalian  MAS  (Motile  Aeromonas Septicemia) pada Jambal Siam
( Pangasius  hypophthalamus ). Jurnal Perikanan , 9 (1) :17-25.
Pasaribu,  F.  H.,  N,  D.,  &  M,  P.  1990.
Pengobatan  dan  Pencegahan  Penyakit Bercak Merah. Balai Penelitian Perikanan Air Tawar. Bogor. Setyawan, A., Hudaidah, S., Ranopati, Z. Z., & Sumino.  2012.  Imunogenesitas  Vaksin Inaktif Wholecell Aeromonas salmonicida pada  Ikan  Mas  ( Cyprinus carpio) . Aquasains , 1 : 17-21.
Suseno,  D.  1996. Pengelolahan  Usaha Pembenihan Ikan Mas. Penebar
Swadaya. Jakarta.
Tang,  U.  M.,  &  Affandi,  R.  2000. Biologi
Reproduksi Ikan. UNRI PRESS. Riau.
Tatang.  2014. Modul  Praktek  Vaksinasi  Pada Ikan. Loka  pemeriksaan  penyakit ikan dan lingkungan. Jakarta.