Jurnal Pharmascience, Vol. 07, No.02, Oktober 2020, hal: 27-35 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Artikel Penelitian
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Muntingia calabura dengan Variasi Laju Pengadukan menggunakan Macerator-Magnetic Stirrer (M-MS)
Muhammad Zaini 1 *, Hajrah Hidriya 2 , Japeri Japeri 3
1 Program Studi D-III Farmasi, Politeknik Unggulan Kalimantan, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia
2 Program Studi D-III Analis Kesehatan, Politeknik Unggulan Kalimantan, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia
3 Program Studi D-III Teknik Elektromedik, Politeknik Unggulan Kalimantan, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia *Email: zaini@polanka.ac.id

## ABSTRAK
Maserasi  merupakan  salah  satu  metode  ekstraksi  yang  digunakan  untuk menarik  kandungan  kimia  dari  bahan  alam. Macerator  Magnetic  Stirrer (M-MS) merupakan  alat  yang  dikembangkan  untuk  memaksimalkan  proses  maserasi  melalui pengadukan secara berkesinambungan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efektivitas penggunaan M-MS dalam proses ekstraksi senyawa bahan alam. Parameter yang  digunakan  yaitu  persentase  zat  terekstraksi  (%  rendemen)  dan  aktivitas antioksidan  (IC 50 )  ekstrak  etanol Muntingia  calabura (EEMC)  menggunakan  metode DPPH  ( 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazil ).  Pengujian  dilakukan  terhadap  simplisia  daun Muntingia  calabura yang  dimaserasi  selama  24  jam  menggunakan  etanol  95%  dengan maserator  konvensional,  M-MS  dengan  laju  pengadukan  200  rpm  dan  300  rpm. Pengadukan  dengan  maserator  konvensional  dilakukan  sebanyak  3  kali  setiap  8  jam, sedangkan dengan M-MS dilakukan secara kontinyu selama 24 jam. Nilai % rendemen EEMC  dari  maserator  konevnsional,  M-MS  200  rpm  dan  300  rpm  secara  berturut- turut  adalah  7,6  %,  8,4  %  dan  10,2  %.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  menghasilkan nilai  IC 50 EEMC  dengan  maserator  konvensional  sebesar  18,19  ppm,  M-MS  200  rpm adalah  14,35  ppm  dan  300  rpm  adalah  7,85  ppm.  Nilai  IC 50 untuk  masing-masing  uji menunjukan  <  50  ppm  yang  termasuk  dalam  kategori  sangat  kuat.  Ekstraksi  EEMC paling efektif adalah menggunakan M-MS dengan laju pengadukan 300 rpm.
Kata Kunci: maserasi, M-MS, EEMC, antioksidan

## ABSTRACT
The  maceration  is  one of  the  extraction methods  used  to  extract  chemical  content from  natural  compounds.  Macerator  Magnetic  Stirrer  (M-MS)  is  a  tool  developed  to maximize  the  maceration  process  through  continuous  stirring.  The  purpose  of  this  study was  to  determine  the  effectiveness  of  using  M-MS  in  the  process  of  extracting  natural compounds. The parameters used were the percentage of extracted substance (% yield) and antioxidant  activity  (IC 50 )  of  ethanol  extract  of  Muntingia  calabura  (EEMC)  using  the DPPH method (2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazil). Tests were carried out  on the simplicia  of Muntingia calabura leaves which were macerated for 24 hours using 95% ethanol with a conventional macerator, M-MS with a stirring rate of 200 rpm and 300 rpm. Stirring with a conventional macerator was carried out 3 times every 8 hours, while with M-MS it was done continuously for 24 hours. EEMC yield value respectively of conventional macerator, M-MS  at  200  rpm  and  300  rpm  showed  7.6  %,  8.4%  and  10.2  %.  The  results  of  the antioxidant activity test resulted in the IC 50 EEMC value with a conventional macerator is 18.19 ppm, M-MS 200 rpm is 14.35 ppm and 300 rpm is 7.85 ppm. The IC50 value for each test  shows  <50  ppm  which  is  included  in  the  very  strong  category.  The  most  effective EEMC extraction is using M-MS with a stirring rate of 300 rpm.
Keywords: maceration, M-MS, EEMC, antioxidant

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu negara  dengan  kekayaan  hayati  terbesar termasuk  obat-obatan  dan  bahan  jamu. Setidaknya terdapat 30.000 jenis tumbuhan obat ada di Indonesia. Terdapat 7.500 jenis tumbuhan  obat  yang  telah  diketahui khasiatnya  dan  dari  jumlah  tersebut  1.200 jenis  tanaman  obat  telah  dimanfaatkan sebagai  bahan  baku  obat  herbal  dan  jamu (PT.  Sidomuncul,  2015).  Pengembangan obat  tradisional  menjadi  isu  strategis nasional  untuk  memaksimalkan  potensi dari bahan alam Indonesia yang berilmpah. Pengembangan  obat  tradisional  melalui saintifikasi berdasarkan bukti ilmiah sehingga dapat digunakan dalam pelayanan  kesehatan  formal  dan  modern (Mukhriani, 2014).
Salah  satu  metode  yang  digunakan untuk  penemuan  obat  tradisional  yaitu dengan  teknik  ekstraksi.  Metode  ekstraksi adalah langkah awal investigasi kandungan  senyawa  bahan  alam  melalui proses perendaman dengan pelarut tertentu. Ekstraksi  yang  paling  sederhana  yaitu dengan  cara  maserasi  (Azwanida,  2015). Penggunaan alat maserasi secara konvensional  dengan  bejana  kaca  dan pengadukan  secara  manual  memiliki beberapa  kelemahan.  Kelemahan  yang sering  ditemui  yaitu  terjadi  kebocoran bejana akibat tekanan kuat pada pelarut di dalam bejana. Selain itu maserasi memerlukan  banyak  pelarut  untuk  proses ekstraksi  dan  pengadukan  yang  tidak konstan  mengakibatkan  pelarut  menjadi
jenuh  dalam  menarik  senyawa  kimia  dari tumbuhan.
Berdasarkan  hal  tersebut,  maka perlu dibuat alat maserasi dengan kombinasi  pengaduk  berkesinambungan untuk  meningkatkan  penarikan  zat  aktif dari tumbuhan. Hasil penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa peningkatan kecepatan pengadukan meningkatkan hasil persentase tannin pada proses ekstraksi  (Mardina et  al .,2011)  dan flavonoid  total  (Gustia et  al .,2017).
Rancangan  alat  merasi  skala  laboratorium dengan  pengadukan  magnetik  otomatis yang  diberi  nama Macerator-Magnetic Stirrer (M-MS)  diprediksi  dapat  menjadi solusi terhadap kejenuhan proses ekstraksi secara maserasi sekaligus dapat mengoptimalkan proses ekstraksi.
Alat  M-MS  (No.  Hak  Cipta  : 000193896)  telah  dinyatakan  laik  melalui uji  fungsi  secara  mekanik  dan  elektronik. Optimasi  alat  M-MS  diperlukan  untuk mengetahui  laju  pengadukan  optimum dalam  menarik  kandungan  berkhasiat ekstrak  hasil  maserasi  dengan  M-MS.  Uji dilakukan terhadap EEMC dengan parameter  %  rendemen  dan  aktivitas Antioksidan  mengunakan  metode  DPPH
( 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazil ). Sehingga,
diharapkan  hasil  aktivitas  antioksidan  dari EEMC dapat menjadi gambaran efektivitas rancangan M-MS khususnya dalam meningkatkan mutu ekstrak hasil maserasi.

## II. METODE

## A. Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  DPPH,  etanol 95%, methanol PA, aquadest dan simplisia daun  kersen.  Alat-alat  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  alat  M-MS, alat-alat gelas laboratorium, kuvet, spektrofotometer  UV-Vis, vacum  rotary evaporator , waterbath , blender , ayakan no.
20, neraca analitik, tachometer, dan bejana maserasi.
B. Pembuatan Simplisia
Muntingia calabura dibuat simplisia  melalui  berbagai  tahapan  yaitu pengumpulan  daun  yang  diambil  di wilayah  Banjarbaru,  Kalimantan  Selatan, kemudian sortasi  basah  dan dicuci  dengan air mengalir. Setelah itu daun dirajang dan dikeringkan  dengan  dikering  anginkan atau  terhindar  dari  cahaya  matahari langsung.  Kemudian  dilakukan  sortasi kering  untuk  menghilangkan  pengotor. Simplisia  kering  dibuat  serbuk  kasar menggunakan blender dan  diayak  dengan ayakan  No.20,  kemudian  disimpan  di wadah tertutup baik.
C. Pembuatan Ekstrak
Ekstrak etanol Muntingia  calabura (EEMC)  dibuat  menggunakan  alat  M-MS dan Maserator konvensional sebagai pembanding.  Simplisia  daun Muntingia
calabura sebanyak  100  gram  diekstraksi dengan pelarut etanol 95% sebanyak 1000 mL menggunakan M-MS dengan 2 variasi laju  pengadukan  yaitu  200  rpm  dan  300 rpm. Pengadukan dilakukan secara berkesinambungan  selama  24  jam.  Laju ekstraksi  tersebut  ditetapkan  berdasarkan hasil  orientasi  yang  telah  dilakukan sebelumnya.  Ekstaksi  dengan  maserator konvensional  menggunakan  100  gram daun Muntingia  calabura dengan  pelarut etanol  95%  sebanyak  1000  mL  dengan pengadukan    sebanyak  3  kali  setiap  8 jam selama 24 jam. Ekstrak cair yang diperoleh dikentalkan dengan vacuum rotary evaporator dan waterbath hingga  bobot tetap.

## D. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak
EEMC  dibuat  dengan  melarutkan ekstrak  kental  kedalam  metanol  PA  dan dibuat  konsentrasi  5,10,15,  dan  20  ppm berdasarkan  larutan  induk  100  ppm. Larutan  stock  DPPH  dibuat  dengan melarutkan  4  mg  padatan  DPPH  kedalam 25  ml  metanol  PA  pada  labu  25  mL sehingga  diperolah  larutan  DPPH  4  µM. Kemudian disiapkan larutan perbandingan, yaitu  larutan  kontrol  yang  berisi  2  ml metanol  PA  dan  2  ml  larutan  DPPH.
Untuk  sampel  uji,  disiapkan  masing- masing  2  ml  larutan  sampel  dan  2  ml larutan  DPPH.  Kemudian,  di  inkubasi selama  30  menit  pada  suhu  27℃  hingga
terjadi  perubahan  warna  dari  aktivitas DPPH (Tristantini et al., 2016).

## E. Penetuan Nilai IC
50
Analisis pengujian antioksidan metode  DPPH  dilakukan  dengan  melihat perubahan  warna  masing-masing  sampel setelah  di  inkubasi  bersama  DPPH. Sampel diukur absorbanisnya menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Nilai absorbansi DPPH antara 515-520 nm (Marxen et  al .,  2007)  Parameter  yang biasa digunakan untuk menetapkan aktivitas  antioksidan  adalah  menggunakan IC 50 yaitu  merupakan  konsentrasi  yang menyebabkan  hilangnya  50%  aktivitas DPPH (Molyneux, 2004).
Perhitungan konsentrasi IC 50 menggunakan rumus sebagai berikut :
Kemudian  dibuat  dalam  kurva  regresi linier untuk mendapatkan nilai IC 50 .
Penilaian  yang  digunakan  untuk menentukan  antioksidan  sangat  kuat  jika nilai  IC 50 kurang  dari  50,  kuat  (50-100), sedang  (100-150),  dan  lemah  (151-200). Jika nilai IC 50 semakin kecil maka ktivitas antioksidan  semakin  tinggi  (Badarinath et al ., 2010).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Optimasi  laju  pengadukan  secara mekanik  telah  dilakukan  uji  sebelumnya
menggunakan  parameter  laju  motor  DC yang digunakan sebagai penggerak magnet batang  pada  alat  M-MS.  Standarisasi  alat pengukuran menggunakan tachometer . Uji dilakukan pada laju 100, 200 dan 300 rpm. Laju  pengadukan  berpengaruh  terhadap kemampuan  M-MS  dalam  menggerakan simplisia dalam bejana maserasi.
Berdasarkan  hasil  pengukuran,  laju  200 rpm  dan  300  rpm  yang  dipilih  dalam penelitian  karena  menunjukan  hasil  laju pengadukan  paling  laik  dan  stabil  untuk alat M-MS. Pengukuran efektivitas ekstrak hasil esktraksi M-MS pada laju pengadukan  200  dan  300  rpm  dilakukan dengan  mengamati  hasil  %  rendemen  dan aktivitas  antioksidan  dari  EEMC  yang dibandingkan dengan maserator konvensional.
Ekstraksi  maserasi  simplisia  daun Muntingia  calabura menggunakan  M-MS dengan pengadukan otomatis dan maserator konvensional dengan pengadukan  manual.  Kondisi  ekstraksi maserasi  yang  diujikan  adalah  sama  yaitu menggunakan  simplisia  daun Muntingia calabura 100  gram,  etanol  95%  sebanyak 1000  mL  dan  perlakuan  selama  24  jam. Perbedaan  perlakuan  terletak  pada  laju pengadukan  yaitu  M-MS  dengan  200  dan 300  rpm  dan  maserator  konvensional menggunakan  3  kali  pengadukan  tiap  8 jam. Maserator konvensional dalam penelitian ini digunakan sebagai
pembanding.  Sehingga  akan  diperoleh informasi  efektivitas  penggunaan  alat  M- MS  dibandingkan  secara  konvensional. Proses  maserasi  dengan  M-MS ditunjukan pada Gambar 1.
Hasil rendemen EEMC
menggunakan M-MS dan maserator konvensional ditampilkan pada Tabel I.
(a)                           (b)
Gambar  1 .  Alat  M-MS  (a),  proses maserasi dengan M-MS (b)
Tabel I. Hasil rendemen EEMC
Berdasarkan  hasil  pada  Tabel  I menunjukan  perbedaan  laju  pengadukan berpengaruh  pada  %  rendemen  dari ekstrak  yang  dihasilkan  pada  proses maserasi. M-MS 300 rpm menghasilkan % rendemen ekstrak paling besar yang diikuti oleh  M-MS  200  rpm  dan  maserator konvensional. Semakin tinggi laju pengadukan  semakin  besar  %  rendemen dari  ekstrak.  Hasil  ini  sesuai  dengan
No Uji Bobot simplisia (gr) Bobot Ekstrak kental (gr) Rende men (%) 1 Maserator konvensional 100 7,6 7,6 2 M-MS 200 rpm 100 8,4 8,4 3 M-MS 300 rpm 100 10,2 10,2
penelitian  yang  dilakukan  oleh  Setyowati et.al (2014) yang menyatakan semakin laju pengadukan  makan  semakin  besar  sudut kontak  antara  sampel  dan  pelarut  dengan adanya pengadukan yang kontinyu.
Metode  yang  digunakan  dalam  uji antioksidan  dalam  penelitian  ini  adalah metode  serapan  radikal  bebas  DPPH. Metode DPPH digunakan karena merupakan metode yang sederhana, mudah dan  menggunakan  sampel  yang  relatif sedikit  (Hanani et  al .,  2005).  Aktivitas antioksidan  dari  sampel  mengakibatkan perubahan  warna  pada  larutan  DPPH  dari violet pekat menjadi kuning pucat (Permana et  al .,  2003).  Perubahan  warna tersebut terjadi seiring dengan penambahan antioksidan yaitu saat elektron  tunggal  pada  DPPH  berpasangan dengan hydrogen dan antioksidan.
Perubaan  warna  akibat  antioksidan  setara dengan  jumlah  elektron  yang  ditangkap (Dehpour et al .,2009). Mekanisme aktivitas  antioksidan  terhadap  DPPH ditampilkan pada Gambar 2.
Gambar  2 .  Mekanisme aktivitas antioksidan terhadap DPPH (Arce-Amezquita et al ., 2019)
Hasil  uji  kuantitatif  kandungan antioksidan  (%  inhibisi)  dari  EEMC menggunakan maserator konvensional dan M-MS ditunjukan pada Tabel II.
Tabel II. Hasil aktivitas antioksidan

## EEMC
N o Uji C (ppm) A Kontrol A Samp el % Inhibisi (%) 1 Masera tor konven sional 5 0,782 0,653 16,50 10 0,782 0,557 28,77 15 0,782 0,406 48,08 20 0,782 0,384 50,90 2 M-MS 200 rpm 5 0,782 0,674 13,81 10 0,782 0.496 36,57 15 0,782 0,404 48,34 20 0,782 0,210 73,15 3 M-MS 300 rpm 5 0,782 0,510 34,78 10 0,782 0,270 65,47 15 0,782 0,188 5,96 20 0,782 0,036 95,40
Berdasarkan  hasil  pada  Tabel  II diketahui bahwa uji maserator konvensional,  M-MS  200  rpm  dan  M-MS 300  rpm  menunjukan  kenailakan  % inhibisi setiap kenaikan konsentrasi sampel.  Nilai  %  inhibisi  menggambarkan aktivitas  antioksidan  dari  EEMC.  M-MS dengan  pengadukan  kontinyu  300  rpm menunjukan  %  inhibisi  terbesar  dengan daya antioksidan 95,40 % pada konsentrasi 20  ppm.  M-MS  dengan  pengadukan  200 rpm  menunjukan  %  inhibisi  terbesar  yaitu 73,15  %  pada  konsentrasi  20  ppm  dan maserator  konvensional  dengan  daya antioksidan  50,90  %  pada  konsentrasi  20 ppm.  Urutan  daya  antioksidan  tertinggi hingga terendah yaitu M-MS 300 rpm, M- MS  200  rpm  dan  maserator  konvensional.
Hasil  ini  menunjukan  bahwa  semakin cepat  pengadukan  berpengaruh  terhadap kemampuan penyarian ekstrak yang berhubungan erat dengan aktivitas antioksidan dari EEMC.
Gambar  3. Kurva  hubungan  konsentrasi dan  %  inhibisi  EEMC  (a) maserator konvensional (b) M- MS  200  rpm  (c)  M-MS  300 rpm
Data % inhibisi yang telah diperoleh  digunakan  untuk  menghitung nilai  IC 50 dari  masing-masing  sampel  uji dengan  plot  konsentasi  sebagai  sumbu  x dan % inhibisi sebagai sumbu y. Hasil plot kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi EEMC ditampilkan pada Gambar 3.
Nilai  IC 50 berdasarkan perhitungan untuk maserator konvensional, M-MS 200 rpm  dan  300  rpm  secara  berturut-turut adalah  18,19  ppm,  14,35  ppm  dan  7,85 ppm.  Daya  antioksidan    dari  EEMC termasuk dalam kategori sangat kuat. Nilai IC 50 yang  diperoleh  dari  ekstrak  EEMC pada  penelitian  lainnya  menunjukkan aktivitas  terhadap  radikal  DPPH  adalah 6.8249 ppm (Sami et al ., 2017).  Nilai IC 50 terbesar  adalah  pada  ekstrak  hasil  dari  M- MS 300 rpm yaitu sebesar 7,85 ppm. Hasil ini  memberikan  informasi  bahwa  M-MS efektif  digunakan  sebagai  alat  untuk ekstraksi yang memberikan hasil parameter  antioksidan  ekstrak  lebih  besar dibandingkan dengan maserator konvensional.
Laju pengadukan memberikan pengaruh  terhadap  perbedaan  aktivitas antioksidan EEMC dengan perlakuan yang sama.  Penelitian  sebelumnya  melakukan ekstraksi  dengan  maserasi,kulit  buah durian dengan variasi pengadukan sesekali dan  setiap  1  jam.  Hasil  yang  diperoleh yaitu rendemen dengan pengadukan setiap 1  jam  lebih  besar  daripada  dengan  variasi
(a)
(b)
(c)
pengadukan  sesekali.  Semakin  banyak pengadukan maka semakin banyak desakan antara pelarut dengan sel tumbuhan    sehingga  semakin  banyak senyawa  organik  yang  terlarut  dalam pelarut.  Selain  itu,  hasil  uji  antioksidan dengan  pengadukan  setiap  1  jam    (IC 50 = 94,125  ppm)  lebih  besar  dibandingkan dengan  pengadukan  sesekali  (IC 50 = 106,87  ppm)  (Setyowati et  al .,2014).
Kandungan  metabolit  sekunder  di  dalam EEMC juga memberikan kontribusi dalam aktivitas  antioksidan  dari  EEMC.  EEMC diketahui  memiliki  kandungan  fenolik, flavonoid dan saponin (Sami et al ., 2017).

## IV. KESIMPULAN
Simpulan dari penelitian ini adalah EEMC  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan nilai IC 50 menggunakan masertator konvensional,  M-MS  200  rpm  dan  M-MS 300 rpm secara berturut-turut adalah 18,19 ppm,  14,35  ppm  dan  7,85  ppm  dengan katergori  sangat  kuat.  Ekstraksi  EEMC paling efektif dengan aktivitas antioksidan tertinggi  adalah  menggunakan  M-MS dengan laju pengadukan 300 rpm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih  kepada  Direktorat  Riset dan  Pengabdian  Masyarakat  (DRPM) Kementerian Riset  dan  Teknologi  /  Badan Riset  dan  Inovasi  Nasional  melalui Lembaga  Layanan  Pendidikan  Tinggi
(LLDIKTI)  Wilayah  XI  Kalimantan  dan Unit  Penelitian  dan  Pengabdian  kepada Masyarakat  (UPPM)  Politeknik  Unggulan Kalimantan yang telah mendanai penelitian  berdasarkan  Surat  Keputusan Nomor  26/E1/KPT/2020  dan  Kontrak Nomor 087/SP2H/LT/DRPM/2020, (Adendum  Kontrak  Nomor  087/AMD/ SP2H/LT/DRPM/2020, 415/LL11/KM/
2020, 04/PUK.10/KP/III/2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Arce-Amezquita,  P.  M.,  Beltrán-Morales, F.  A.,  Manríquez-Rivera,  G.  A., Cota-Almanza, M. E., Quian-Torres, A.,  &  Peralta-Olachea,  R.  G.,  2019. Nutritional  Value  of  Conventional, Wild  and  Organically  Produced Fruits  and  Vegetables  Available  in Baja California Sur Markets. Revista Terra Latinoamericana , Vol.37, No.4 : 401-406.
Azwanida, N. N., 2015. A Review on The
Extraction Methods Use in Medicinal Plants, Principle, Strength and  Limitation. Med  Aromat  Plants , Vol. 4, No.196 : 412 - 2167.
Badarinath,  A.,  Rao,  K.,  Chetty,  C.  S.,
Ramkanth, S., Rajan, T,, &
Gnanaprakash,  K.  2010.  A  Review on  In-vitro  Antioxidant  Methods:
Comparisons, Correlations, and Considerations. International Journal  of  PharmTech  Research .
Vol. 2, No.2 : 1276-1285.. Dehpour,  A.  A.,  Ebrahimzadeh,  M.  A.,
Fazel,  N.  S.,  &  Mohammad,  N.  S., 2009.  Antioxidant  activity  of  the methanol extract of Ferula assafoetida  and  its  essential  oil composition. Grasas  y  aceites , Vol.60, No.4 : 405-412.
Gustia,  S.J.,Septiawan.  I  and  Iriany.,2017.
Ekstraksi  Flavonoid  Dari  Bayam

## Merah (Alternanthera Amoena Voss).
Jurnal Integrasi Proses , Vol.6, No.4 :
162-167.
Hanani,  E,  A.  Mun’im,  R  and  Sekarini.,
2005. Identifikasi Senyawa Antioksidan Dalam Spons Callyspongia  SP  Dari  Kepulauan Seribu. Majalah  Ilmu  Kefarmasian , Vol.2, No.3 : 127-133.
Mardina, P., Astarina, E. N., and Aquarista, S.,  2011.  Pengaruh  Kecepatan  Putar Pengaduk  dan  Waktu  Operasi  pada Ekstraksi  Tannin  dari  Mahkota
Dewa. Jurnal  Kimia  (Journal  of Chemistry) , Vol. 5, No. 2 : 105 - 132. Marxen, K., Vanselow, K. H., Lippemeier, S.,  Hintze,  R.,  2007.  Determination of  DPPH  Radical  Oxidation  Caused by  Methanolic  Extracts  of  Some
Microalgal Species by Linear Regression Analysis of Spectrophotometric  Measurements.
Sensors. Vol.7 : 2080-2095.
Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  Stable Free  Diphenyl  Picrylhdrazil  (DPPH) for  Estimating  Antioxidant  Activity.
Songklanakarin
J. Seu Technol.26(2) : 211-219. Mukhriani.,  2014.  Ekstraksi,  Pemisahan
Senyawa,  dan  Identifikasi  Senyawa Aktif. Jurnal  Kesehatan ,  Vol.7, No.2 : 361-367
Permana, D.,N. Lajis., Faridah, A., Ghafar, O., Rohaya, A., Mariko, K., Hiromits,  T.,  Nario  Aimi,  Cl.,  2003.
Antioksidative Constituents Of
Hedotis Diffusa Wild. Natural Product Sciences , Vol.9, No.1 : 7-9. Pranowo,  D.,  Noor,  E.,  Haditjaroko,  L., and  Maddu,  A.,  2016.  Optimasi Ekstraksi  Flavonoid  Total  Daun Gedi (Abelmoschus manihot L.) dan Uji  Aktivitas  Antioksidan. Bul. Littro , Vol. 27, No.1 : 37-46. PT.  Sido  Muncul.,  2015, Delivering  The Vision  –  Laporan Tahunan PT. Sido Muncul  Tbk  Tahun  2015, PT.  Sido
Muncul, Jakarta.
Sami,  F.  J.,  &  Nur,  S.,2017.  Uji  Aktivitas
Antioksidan Daun Kersen (Muntingia  Calabura  L.)  Dengan Metode Dpph (1, 1-Difenil-2- Pikrilhidrazil)  Dan  Frap  (Ferric Reducing Antioxidan Power). Antiseptic , Vol.4, No.5. Setyowati, E., Agustina, W., and Damayanti,  D.  R.,  2014. Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Aktivitas Antioksidan  Kulit  Buah  Durian (Durio  zibethinus  Murr)  Varietas
Petruk . Seminar Nasional
Pendidikan  Sains  IV.  Sebelas  Maret
University. Tristantini,  D.,  Ismawati,  A.,  Pradana,  B.
T.,  &  Jonathan,  J.  G.  2016. Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan  metode  DPPH  pada daun  tanjung  (Mimusops  elengi  L) .
Seminar  Nasional  Teknik  Kimia Kejuangan. UPN Veteran Yogyakarta.