UJI POTENSI ANTIFUNGI PERASAN DAUN SELEDRI ( Apium graveolens L) TERHADAP Aspergilllus terreus SECARA IN VITRO
ANTIFUNGAL POTENTIAL TEST OF CELERY LEAVES JUICE ( Apium graveolens L ) AGAINST Aspergilllus terreus BY IN VITRO

## Illa Rohdiana Hermawati, Sudarno dan Didik Handijatno
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Aspergillus terreus is a fungal that is able to produce several mycotoxins such as patulin, sitrinin and aflatoxin and contained in processed mackerel mixed with fresh steamed way. The impact of the use of chemicals to control fungal attack A. terreus showed a negative effect.
This  study  aims  to  determine  the  potential  and  the  minimum  concentration  of  the  juice  of  the leaves  of  celery  ( Apium  graveolens L)  as  antifungal  against  the  growth  of A.  terreus in  vitro.  The experiment was conducted at the Laboratory of the Faculty of Fisheries and Marine Airlangga University in  July  2013.  The  method  was  used  in  this  research  that  using  paper  disc  diffusion  method.  Treatment outcome data were analyzed using descriptive statistics.
Test  potential  antifungal  celery  juice  in  inhibiting  the  growth  of  fungus A.  terreus obtained negative be results. The concentrations of juices were given as a treatment of 10 % to 100 % are not able to inhibit the growth of A. terreus shown  with no inhibition zone formation in all treatments except the concentration of 10 % formalin as a control (+).
Keywords : Celery Leaves, Aspergillus terreus , Diffusion Sensitivity Test
Pendahuluan Menurut  Handajani  dan  Purwoko (2008), A . terreus merupakan  jamur  yang mampu  memproduksi  beberapa  mikotoksin yaitu patulin,  sitrinin  dan  aflatoksin.  Aflatoksin B1  adalah  jenis  mikotoksin  yang  diproduksi oleh A. terreus (Amadi and Adeniyi, 2009). Data  hasil  sampel  yang  diteliti  oleh Supraptini  dkk.  (1998/1999)  menunjukkan bahwa A. terreus terdapat  dalam  olahan  ikan kembung  yang  diolah  dengan  cara  dikukus segar. Aspergillus terreus di  negara  seperti Pakistan  dan  India  telah  mampu  menginfeksi ikan dan telur dengan cara salah satunya melalui kontaminasi  pakan  (Shrivastava,  1996;  Iqbal and Mumtaz, 2013).
Pengobatan  penyakit  jamur  pada  ikan menggunakan  bahan  kimia  menimbulkan  efek negatif  yaitu resistensi  mikroorganisme, bahaya yang ditimbulkan terhadap lingkungan sekitarnya, ikan yang bersangkutan dan manusia yang mengonsumsinya (Sugianti, 2005). Akibat yang  ditimbulkannya  menunjukkan  dampak yang  negatif,  maka  diperlukan  bahan  kimia alami  berupa  tanaman  yang  mengandung antifungi  alami.  Salah  satu  tanaman  yang mengandung  antifungi  alami  adalah  tanaman seledri ( Apium graveolens L) yang mengandung minyak  atsiri  (limonene),  flavonoid  (apigenin,
isoquercetrin), saponin, kumarin dan sedanolide (Santoso dkk, 2011).
Sukandar  dkk  (2006)  menyatakan bahwa  ekstrak  etanol  herba  seledri  dan  daun urang aring menunjukkan aktivitas penghambatan terhadap pertumbuhan Pityrosporum  ovale dan  ekstrak  seledri  pada konsentrasi 50% efektif menghambat
pertumbuhan Malassezia sp . yang sama dengan efektifitas  ketokonazol  2%  (Nitihapsari,  2010). Shad et  al .  (2011)  menyatakan  potensi antijamur  dari  seledri  telah  ditentukan  terhadap Trichphyton longifuss, Candida albicans, Aspergillus flavus, Microsporum canis, Fusarium solani dan Candida glabrata .
Tanaman  tersebut  memiliki  potensi untuk menghambat pertumbuhan jamur sehingga  perlu  dilakukan  percobaan  uji  potensi perasan  daun  seledri  sebagai  bahan  pengobatan alternatif untuk mengatasi infeksi yang disebabkan oleh jamur A. terreus . Berdasarkan  latar  belakang  maka didapatkan  beberapa  masalah  yang  perlu dilakukan  penelitian  yaitu  :  apakah  perasan daun  seledri  ( Apium  graveolens L ) dapat menghambat  pertumbuhan  jamur A.  terreus secara in vitro dan berapa konsentrasi minimum dari perasan daun seledri ( Apium graveolens L)
yang  dapat  menghambat  pertumbuhan A. terreus secara in vitro.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui potensi perasan daun seledri ( Apium graveolens L) sebagai  antifungi  terhadap pertumbuhan  jamur A.  terreus secara in  vitro dan  untuk  mengetahui  konsentrasi  minimum dari perasan daun seledri ( Apium graveolens L) yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  jamur A. terreus secara in vitro .
Manfaat  yang  dapat  diperoleh  dari penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan informasi  ilmiah  kepada  masyarakat  bahwa serangan  jamur A.  terreus dapat  ditangani dengan  pemberian  perasan  daun  seledri  dan dapat  digunakan  sebagai  dasar  pengembangan penelitian selanjutnya dan dapat berguna dalam mendukung perkembangan perikanan.

## Materi dan Metode
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan Universitas Airlangga Surabaya pada bulan Juli 2013. Peralatan  yang  dibutuhkan  dalam penelitian ini yaitu kertas
cakram, haemocytometer ,  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi,  cawan  Petri,  kaca spreader ,  pembakar bunsen,  ose,  mikroskop, object  glass , cover glass , blender , kertas saring, kain kasa, autoklaf, pipet  ukur,  pipet  tetes,  spatula,  Erlenmeyer, gelas ukur dan timbangan digital.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  alkohol,  NaCl  0,85  % steril,  formalin  10  %,  akuades  steril,  daun seledri ( A. graveolens L), kultur murni jamur A. terreus ,  media Sabouraud Detroxe Agar (SDA) dan antibiotik. Persiapan  Media Saboroud  Dextrose  Agar (SDA) dan Sterilisasi Alat Bahan-bahan  yang  digunakan  untuk membuat media SDA steril adalah serbuk SDA, akuades  dan  antibiotik.  Media  SDA  ini  dibuat dengan  cara  menimbang  bahan  (serbuk  SDA) dengan  perhitungan  65  gram/L  kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu Erlenmeyer  dan ditambahkan  akuades  (Hakim,  2009).  Bahan- bahan  tersebut  diaduk  perlahan  dengan  cara menggoyangkan  labu  Erlenmeyer  agar  dapat tercampur  rata  dan  homogen.  Ujung  labu  yang berisi  larutan  homogen  ditutupi  dengan  kapas kemudian  dibungkus  dengan  kertas  aluminium. Sterilisasi  dilakukan  dengan  menggunakan autoklaf  pada  suhu  121  ˚C  tekanan  15  Psi  atau 1,02  atm  selama  15  menit.  Bahan  dikeluarkan dari autoklaf dan ditambah antibiotik ( chloramphenicol ).  Hal  ini  dimaksudkan  untuk meminimalisasi dan menghindari adanya
kontaminasi  bakteri.  Bahan    SDA  yang  dalam keadaan  cair  dimasukkan  sebanyak  20  ml  pada setiap  cawan  Petri.  Media  SDA  kemudian didinginkan, didiamkan selama 24 jam dan siap digunakan (Sugiawan, 2006). Pembuatan Perasan Daun Seledri Menurut Hasbi (2012), pembuatan perasan  daun  seledri  dilakukan  dengan  cara memilih  daun  seledri  yang  segar  dengan  berat 100  gram  lalu  dicuci  bersih.  Daun  tersebut dihaluskan  menggunakan juicer kemudian disaring  dengan  kain  kasa  steril.  Air  perasan yang  dihasilkan  kemudian  diencerkan  sesuai dengan konsentrasi :
1) Konsentrasi 100% yaitu 5 ml bahan.
2) Konsentrasi  90%  yaitu  4,5  ml  bahan ditambah  dengan  0,5  ml  NaCl  0,85% steril.
3) Konsentrasi  80%  yaitu  4  ml  bahan ditambah dengan 1 ml NaCl 0,85% steril.
4) Konsentrasi  70%  yaitu  3,5  ml  bahan ditambah  dengan  1,5  ml  NaCl  0,85% steril.
5) Konsentrasi  60%  yaitu  3  ml  bahan ditambah dengan 2 ml NaCl 0,85% steril.
6) Konsentrasi  50%  yaitu  2,5  ml  bahan ditambah  dengan  2,5  ml  NaCl  0,85% steril.
7) Konsentrasi  40%  yaitu  2  ml  bahan ditambah dengan 3 ml NaCl 0,85% steril.
8) Konsentrasi  30%  yaitu  1,5  ml  bahan ditambah  dengan  3,5  ml  NaCl  0,85% steril.
9) Konsentrasi  20%  yaitu  1  ml  bahan ditambah dengan 4 ml NaCl 0,85% steril.
10) Konsentrasi  10%  yaitu  0,5  ml  bahan ditambah  dengan  4,5  ml  NaCl  0,85% steril.
Kultur dan Identifikasi A. terreus Biakan  murni A.  terreus didapatkan dari  Jurusan  Biologi  Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Airlangga.  Jamur A. terreus diinokulasikan  secara  zig-zag  dengan menggunakan  Ose  steril  secara  aseptis  pada media  SDA  dan  diinkubasikan  dan  pada  suhu 30  ˚C  selama  5  hari  (Sumanti,  2003). Inokulan yang akan digunakan pada penelitian, sebelumnya  dilakukan  identifikasi  dengan melihat karakteristik morfologi dengan menggunakan  mikroskop.  Menurut  Deak et  al .
(2009),  karakteristik A.  terreus memiliki aksesoris  konidia  ( aleuroconidia )  yang  tumbuh tunggal dari hifa dengan perbesaran 100x. Uji Potensi Antijamur Pengujian potensi antijamur ini dilakukan  menggunakan  metode  difusi  agar. Pengujian dilakukan dengan meremajakan isolat jamur  dari  agar  miring  ke  media  padat  pada
cawan  petri.  Menurut  Alves et  al. (2013), suspensi  jamur  dibuat  dengan  cara  melarutkan jamur ke dalam akuades sampai pada konsentrasi  2  x  10 4 spora/ml  yang  dihitung dengan menggunakan haemocytometer . Sebanyak  1  ml  jamur  dari  suspensi yang  telah  ditentukan  kepadatannya  diambil dengan  mikropipet  lalu  diletakkan  di  tengah media dan diratakan dengan menggunakan kaca speader agar tersebar merata di atas permukaan media (Hakim, 2009). Kertas cakram yang akan digunakan  direndam  selama  ±  10  menit  dalam larutan  bahan  antijamur  berupa  perasan  daun seledri  dengan  konsentrasi  10%,  20%,  30%, 40%,  50%,  60%,  70%,  80%,  90%  dan  100%. Media  kontrol  (-)  berupa  NaCl  0,85%  steril sedangkan  kontrol  (+)  menurut  Shathele  and Fadlelmula (2010) ditambahkan larutan formalin  10%.  Kertas  cakram  yang  telah mengandung  perasan  diangin-anginkan  sampai tidak  ada  larutan  yang  menetes  kemudian diletakkan  dengan  jarak  minimal  dari  tepi cawan  adalah  20-25  mm  di  atas  permukaan media  (Hakim,  2009).  Inkubasi  dilakukan  pada suhu  25  ˚C  selama  48  jam.    Kertas  cakram tersebut  akan  berdifusi  ke  dalam  media  uji  dan menghasilkan  zona  bening  di  sekitarnya (Sarjono  dan  Mulyani,  2007).  Besarnya  zona bening  yang  dihasilkan  sebanding  dengan potensi antijamur yang dihasilkan oleh zat aktif yang  terdapat  dalam  bahan  dan  diukur menggunakan penggaris.
Analisis Data
Data  hasil  penelitian  berupa  diameter zona hambat pertumbuhan jamur A.terreus oleh antifungi perasan daun seledri ( A. graveolens L) dan  formalin.  Diameter  zona  hambat  adalah diameter  daerah  yang  tidak  ditumbuhi  oleh
jamur disekitar kertas cakram dikurangi dengan diameter kertas cakram (Sunarmi, 2010).
Data tersebut disajikan secara deskriptif  yang  merupakan  bagian  dari  statitik yang  mempelajari  alat,  teknik,  atau  prosedur yang digunakan untuk menganalisis data dengan cara  menggambarkan  atau  mendeskripsikan kumpulan  data  atau  hasil  pengamatan.  Statistik deskriptif  juga  dapat  dilakukan  untuk  mencari kuatnya  hubungan  antar  variabel  dengan membuat  perbandingan  dari  rata-rata  data sampel atau populasi (Sugiyono, 2006).

## Hasil dan Pembahasan
Proses  identifikasi  dilakukan  untuk memastikan  kebenaran  terhadap  isolat  jamur yang  didapatkan  dari  Jurusan  Biologi  Fakultas Sains  dan  Teknologi  Universitas  Airlangga bahwa  jamur  tersebut  adalah A.  terreus .  Ilyas (2007)  menyatakan  bahwa  identifikasi  dapat dilakukan  dengan  melihat  secara  mikroskopis dan makroskopis.
Identifikasi  jamur  secara  mikroskopis dapat  dilakukan  dengan  cara  melihat  morfologi yang dimiliki A. terreus yaitu hifa berseptat dan hialin,  kepala  konidia  yang  biseriat  dan kolumnar, konidiofor yang berdinding halus dan hialin serta  konidia  yang  kecil, bulat, dan  halus juga  terdapat aleuroconidia yang  tumbuh  dari hifa.  Karakterisitik  tersebut  sesuai  dengan  yang dinyatakan oleh Padmavathi et. al (2012). Secara  makroskopis, A.  terreus dapat dilihat  dengan  karakteristik  koloni  berwarna putih pada hari kedua kemudian menjadi cokelat pada  hari  keenam  dan  terlihat  bersepta.  Hal  ini sesuai  dengan  pernyataan  Sumanti  dkk.  (2003) bahwa  di  permukaan  agar  spora A.  terreus berukuran  kecil,  ringan,  berwarna  cokelat  krem
Gambar 1.   (a) koloni A. terreus secara makroskopis (b) A. terreus secara mikroskopis 1) aluroconidia 2) hifa 3) konidia Sumber : Dokumen Pribadi (2013)
dan  koloninya  terlihat  kompak.  Pengamatan secara  mikroskopis  dan  makroskopis  dapat dilihat pada Gambar 1.
Pengamatan  hasil  uji  potensi  perasan daun  seledri  terhadap  pertumbuhan A.  terreus dilakukan  dengan  melihat  terjadinya  zona hambat yang terjadi akibat mekanisme antifungi dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur.  Hasil yang didapatkan pada penelitian ini menunjukkan  hasil  yang  negatif  karena  tidak terjadi  zona  hambat  pada  konsentrasi  yang diberikan.
Perasan  seledri  yang  dihasilkan  baik dengan kain kasa maupun kertas saring hasilnya belum  mampu  menghambat  pertumbuhan A. terreus .  Hal  itu  ditunjukkan  dengan  tidak terbentuknya  zona  hambat  pada  konsentrasi 10%,  20%,  30%,  40%,  50%,  60%,  70%,  80%, 90%  maupun  100%  yang  bententangan  dengan kontrol  (+)  berupa  larutan  formalin  10%  yang mampu menghambat A. terreus sebesar 5,3 cm.
Tabel 1.  Hasil  pengamatan  pembentukan  zona hambat  perasan  daun  seledri  terhadap
A. terreus Konsentrasi (%) Diameter zona hambat (cm) 10 0,0 20 0,0 30 0,0 40 0,0 50 0,0 60 0,0 70 0,0 80 0,0 90 0,0 100 0,0 K (-) 0,0 K (+) 4,7
Zat  antifungi  merupakan  bahan  yang dapat  membasmi  jamur  pada  umumnya  (Brock and  Madigan  (1991) dalam Budiarti  (2007)). Zat  antifungi  yang  memiliki  kemampuan menghambat  pertumbuhan  jamur  dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain : konsentrasi zat antijamur,  jenis,  jumlah,  umur,  dan  keadaan jamur, suhu, waktu kontak, sifat-sifat kimia dan fisik  media pertumbuhan, seperti pH, kadar air, nutrisi,  serta  jumlah  komponen  didalamnya (Fardiaz (1985) dalam Budiarti (2007)). Penggunaan daun seledri pada penelitian  ini  dikarenakan  bahwa  seledri merupakan salah satu tumbuhan obat yang telah menjadi  produk  fitofarmaka,  yaitu  obat  bahan
alam yang telah memenuhi kriteria aman sesuai dengan  persyaratan  yang  ditetapkan.  Khasiat dari tumbuhan ini telah dibuktikan secara klinis dan  bahan  baku  yang  digunakan  dalam  produk jadinya  telah  melalui  proses  standardisasi (BPOM, 2008).
Uji  potensi  antifungi  perasan  daun seledri  dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur A.  terreus diperoleh  hasil  negatif.  Larutan konsentrasi  perasan  yang  diberikan  sebagai perlakuan tidak
mampu menghambat
pertumbuhan A.  terreus yang  ditunjukkan dengan  tidak  terbentuknya  zona  hambat  pada seluruh  konsentrasi  perlakuan  kecuali  pada kontrol (+).
Hasil  negatif  terhadap  uji  potensi antifungi terjadi karena dimungkinkan kandungan  senyawa  antifungi  pada  perasan daun  seledri  tidak  banyak  atau  bahkan  tidak dapat  tersari  dalam  larutan  tersebut,  sedangkan penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Chee  and Lee (2009) menunjukkan 1% minyak atsiri dari seledri dan 1 ml/100 ml uap volatile pada ruang udara sangat mampu menghambat pertumbuhan Malassezia furfur . Santoso dkk (2011) menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  seledri memiliki kadar bunuh minimum pada konsentrasi  27%  terhadap  pertumbuhan  koloni Candida albicans dan juga penelitian yang telah dilakukan oleh Nitihapsari (2010) menunjukkan bahwa  efektifitas  ekstrak  seledri (Apium graveolens) 50%  sama  dengan  efektifitas ketokonazol 2% secara invitro dalam menghambat pertumbuhan Malassezia sp. Antifungi menurut Santoso dkk (2011) yang  terkandung  didalam  ekstrak  etanol  seledri adalah  minyak  atsiri  (limonene),  flavonoid (apigenin,  isoquercetrin),  saponin,  kumarin  dan sedanolide.  Kandungan  senyawa  kumarin  pada seledri  berupa  furanokumarin  yang  terdiri  dari psoralens  (psoralen,  bergapten,  xanthotoxin) dan marmesin (Afek et al ., 1995).
Minyak  atsiri  merupakan  senyawa organik  yang  bersifat  mudah  menguap  dan berasal  dari  tumbuhan  (Istianto,  2009).  Salah satu  minyak  atsiri  dari  seledri  berupa  limonene yang  termasuk  kedalam  golongan  terpen  yang umumnya tidak mudah larut dalam air (Castillo et al ., 2012) dan mudah larut dalam etanol yang diduga  dapat  menyebabkan  perubahan  pada integritas  membran  sel  dan  mempengaruhi aktivitas metabolik sel sehingga lama-kelamaan jamur  tidak  dapat  bertahan  hidup  dan  mati (Cusnie  and  Andrew  (2005) dalam Santoso (2011)).  Larutan  perasan  pada  perlakuan  ini dimungkinkan  tidak  mengandung  minyak  atsiri yang  diduga  menganggu  kerja  senyawa  aktif
yang  lain  dalam  menghambat  pertumbuhan jamur.
Menurut  Santoso  dkk  (2011)  tidak diketahui  pula  apakah  bahan  aktif  tersebut bekerja  sendiri-sendiri  ataupun  bersama-sama sehingga  senyawa  aktif  lain  yang  terdapat  atau sedikit  tersari  saat  proses  perasan  seperti flavonoid  (apigenin,  isoquercetrin),  saponin, dan  sedanolide  diduga  tidak  dapat  bekerja dengan  baik  karena  kehilangan  beberapa senyawa aktif (minyak atsiri dan kumarin) yang membantu penghambatan pertumbuhan jamur.
Tumbuhnya  koloni jamur pada kontrol
(-)  berupa  larutan  NaCl  0,85%  menunjukkan bahwa  larutan  tersebut  tidak  mempengaruhi pertumbuhan  jamur.  Hal  ini  terjadi  karena menurut  Yogatama  (2006)  penggunaan  larutan NaCl  0,85%    ini  bertujuan  untuk  menghindari lisis sel.
Formalin  digunakan  sebagai  larutan kontrol (+)  yang bertujuan sebagai pembanding pengukuran  zona  hambat  yang  terbentuk. Formalin dipilih karena menurut Hastuti (2010) bahwa  formalin  adalah  senyawa  antimikroba serbaguna  yang  dapat  salah  satunya  dapat membunuh jamur.

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian ini diperoleh  kesimpulan  sebagai  berikut:  Larutan dari perasan daun seledri ( Apium graveolens L) tidak  memiliki  potensi  antifungi  terhadap pertumbuhan Apergillus terreus dan konsentrasi 10%  sampai  100%  dari  perasan  daun  seledri tidak mampu menghambat pertumbuhan Apergillus  terreus sedangkan  formalin  10% sebagai kontrol (+) mampu menghambat dengan zona hambat sebesar 4,7 cm.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan, penulis menyarankan untuk dilakukan  penelitian  terhadap  penghambatan Apergillus terreus menggunakan metode lainnya  atau  tanaman  obat  yang  lainnya  yang memiliki  sifat  antifungi  lebih  tinggi  daripada seledri.

## Daftar Pustaka
Afek,  U.,  N.  Aharoni,  and  S.  Carmeli.  1995. The  Involvement  of  Marmesin  in Celery Resistance to Pathogens During Storage  and  the  Effect  of  Temperature on  Its  Concentration.  Phytopathology,
85: 1033-1036. Alves, J. L., J. H. C. Woudenberg, L. L. Duarte, P. W. Crous, and R. W. Barreto. 2013. Reappraisal of The Genus Alternariaster ( Dothideomycetes ).  The Netherlands. Persoonia 31 : 77–85.
Amadi,  J.  E.  and  Adeniyi,  D.  O.  2009. Mycotoxin Production By Fungi
Isolated  From  Stored  Grains.  African
Journal of Biotechnology, 8 (7): 1219 –
1221.
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan.  2008. Seledri (Apium  graveolens  L.) Sebagai Bahan  Obat  Alam.  Naturakos  BPOM,
III (7): 8-10.
Budiarti,  R.  2007.  Pemanfaatan  Lengkuas Merah  ( Alpinia  purpurata  K.  Schum ) sebagia Bahan Antijamur dalam
Sampo.  Skripsi.  Fakultas  Teknologi Pertanian.  Institut  Pertanian  Bogor. Jawa Barat. 114 hal.
Castillo,  F.,  D.  Hernandez,  G.  Gallegos,  R. guez  and  C.  N.  Aguilar  (2012). Antifungal  Properties  of  Bioactive Compounds  from  Plants,  Fungicides for  Plant  and  Animal  Diseases,  Dr. Dharumadurai  Dhanasekaran  (Ed.). InTech: 81-108.
Chee,  H.  Y.  and  M.  H.  Lee.  2009. In  vitro Activity of Celery Essential Oil against Malassezia furfur . Korea. Mycobiology, 37(1) : 67-68. Deak, E., S. D. Wilson, E. White, J. H. Carr dan A.  Balajee.  2009. Aspergillus  terreus Accessory  Conidia  Are  Unique  in Surface Architecture, Cell Wall Compotision and Germination Kinetics.  Albert  Einstein  College  of Medicine,  United  States  of  America.
PLoS ONE, 4(10): e7673.
Hakim,  A.  R.  2009.  Uji  Potensi  Antifungi Ekstrak  Etanol  Rimpang  Kecombrang ( Nicolaia  speciosa Horan)  terhadap
Trichophyton mentagrophytes dan Trichophyton rubrum . Skripsi. Fakultas
Kedokteran
Dan Ilmu Kesehatan Program  Studi  Farmasi  Universitas
Islam  Negeri  Syarif  Hidayatullah. Jakarta. Hal 18. Handajani,  N.  S.  dan  T.  Purwoko.  2008. Aktivitas  Ekstrak  Rimpang  Lengkuas (Alpinia galanga) terhadap Pertumbuhan  Jamur Aspergillus spp . Penghasil  Aflatoksin  dan  Fusarium moniliforme. Biodeversitas, 9 (3): 161- 164.
Hasbi,  S.  2012.  Uji  Sensitivitas  Perasan  Daun Alpokat  ( Persea  mericana  miller ) terhadap Pseudomonas sp.  Metode In Vitro .  Karya  Tulis  Ilmiah.  Akademis Analis Kesehatan. Banda Aceh. 61 hal. Hastuti,  S.  2010.  Analisis  Kualitatif  dan Kuantitatif  Formaldehid  pada  Ikan
Asin di Madura. Bangkalan. AGROINTEK, 4 (2) : 132-137 Ilyas,  M.  2007.  Isolasi  dan  Identifikasi Mikoflora Kapang pada Sampel Serasah  Daun  Tumbuhan  di  Kawasan Gunung Lawu, Surakarta, Jawa Tengah. Biodiversitas, 8 (2): 105-110
Iqbal,  Z  and  R.  Mumtaz.  2013.  Some  Fungal Pathogens  Of  An  Ornamental  Fish, Black  Moor  ( Carrasius  auratus L). European Journal of Veterinary Medicine, 2 (1): 1-10.
Istianto,  M.  2009.  Pemanfaatan  Minyak  Atsiri,
Alternatif Teknologi Pengendalian Organisme Pengganggu Tanaman Buah yang Ramah Lingkungan. Balai
Penelitian  Tanaman  Buah  Tropika.
Solok. Sumatera Barat. 5 hal.
Nitihapsari,  G.  Y.  2010.  Efektifitas  Ekstrak
Seledri (Apium graveolens) 50% Dibandingkan Ketokonazol 2% terhadap  Pertumbuhan Malassezia sp. pada  Ketombe.  Artikel  Karya  Tulis Ilmiah.  Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro. Semarang. 14 hal.
Padmavathi,  T.,  N.  Vaswati  and  P.  Agarwal.
2012.  Optimization  of  The  Medium
For  The  Production  of  Cellulases  By Aspergillus terreus and Mucor plumbeus .  India.  European  Journal  of Experimental  Biology,  2  (4):  1161- 1170.
Santoso,  S.,  Soemardini  dan  P.  A.  Nugroho.
2011. Efektifitas Ekstrak Etanol Seledri ( Apium graveolens ) Sebagai Antifungal terhadap Candida  albicans Secara  In Vitro.  Jurnal  Penelitian.  Malang.  12 hal.
Sarjono,  P.  R.  dan  N.  S.  Mulyani.  2007.
Aktivitas  Antibakteri  Rimpang  Temu Putih  ( Curcuma  mangga Vall).  Jurnal Sains dan Matematika, 15 (2): 89-93.
Shad,  A.  A.,  H.  U.  Shah,  J.  Bakht,  M.  I.
Choudhary and J. Ullah. 2011. Nutraceutical potential and bioassay of
Apium  graveolens L.  grown  in  Khyber Pakhtunkhwa-Pakistan. Pakistan.
Journal  of  Medicinal  Plants  Research,
5 (20): 5160-5166.
Shathele,  M.  S.  and  A.  Fadlelmula.  2010. In vitro Effectiveness of Some Antifungal Drugs  in  Treatment  of Trichophyton verrucosum ; Dermatophytic Fungi. Saudi Arabia. Asian Journal of Animal and  Veterinary  Advances,  5  (3):  180- 192.
Shrivastava,  A.  K.  1996.  Record  of Aspergillus terreus (Thorn.)  (Fungi)  as  Fish
Pathogen. Indian Jurnal Fish, 43 : 203-
204. Sugianti, B. 2005. Pemanfaatan Tumbuhan Obat Tradisional dalam Pengendalian Penyakit Ikan. Makalah Pribadi Falsafah  Sains.  Sekolah  Pasca  Sarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor. 37 hal. Sugiawan,  W.  2006.  Peningkatan  Efektivitas Media  Isolasi  Khamir  Contoh  Kecap dengan  Penambahan  Kecap.  Bogor. Temu Teknis Nasional Tenaga Fungsional Pertanian: 76-80. Sugiyono.  2006.  Metode  Penelitian  Pendidikan (Pendekatan  Kuantitatif,  Kualitatif  dan R&D).  Cetakan  Kedua.  ALFABETA. Bandung. Hal 207-209.
Sukandar,  E.  Y.,  Suwendar  dan  E.  Ekawati. 2006.  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Herba Seledri (Apium  graveolens) dan  Daun Urang  Aring (Eclipta  prostata  (L.)L.) terhadap Pityrosporum  ovale. Majalah Farmasi Indonesia, 17 (1): 7-12.
Sumanti,  D.  M.,  C.  Tjahjadi,  M.  Herudiyanto dan  T.  Sukarti.  2003.  Mempelajari Mekanisme  Produksi  Minyak  Sel Tunggal  dengan  Sistem  Fermentasi Padat  pada  Media  Onggok-Ampas Tahu  dengan  Menggunakan  Kapang Aspergillus terreus . Laporan Penelitian Dasar.  Fakultas  Pertanian  Universitas Padjadjaran. Bandung, Jawa Barat. 116 hal.
Sunarmi, N. 2010. Isolasi dan Identifikasi Jamur Endofitdari  Akar  Tanaman  Kentang Sebagai  Anti  Jamur  ( Fusarium Sp, Phytoptora infestans ) dan  Anti Bakteri ( Ralstonia solanacaerum ). Skripsi. Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana  Malik  Ibrahim.  Malang.  Hal 47. Supraptini,  N.  S.  Aminah,  E.  W.  Lestari,  R. Nainggolan, Djarismawati dan Sugiharti. 1998/1999. Penelitian tentang  Cara  Pengolahan  Ikan  Laut (Tongkol  dan  Kembung)  yang  Aman untuk  Kesehatan.  Pusat  Penelitian Ekologi  Kesehatan,  Badan  Litbangkes, Depkes RI. Buletin Penelitian Kesehatan, 26 (2-3). 10 hal. Yogatama,  K.  2006.  Pengaruh  Penambahan Natrium Selenit Terhadap Kadar
Selenium  dalam  Khamir  Terseleksi dari  Tanah  Vulkanis.  Skripsi.  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hal 11.