BERKALA SAINSTEK 2023 11(2): 106-113 doi: 10.19184/bst.v11i2.38015 https://jurnal.unej.ac.id/index.php/BST/article/view/38015

## RESEARCH   ARTICLE
Anti-Termite Activities of The Bioactive Compounds of Gaharu Culture ( Aetoxylon sympetalum ) From Maceration Results Using Acetone Solvent
(Aktivitas Antirayap Senyawa Bioaktif Gubal Gaharu Buaya ( Aetoxylon Sympetalum ) dari Hasil Maserasi Menggunakan Pelarut Aseton)
Risa Yuniar 1 , Afghani Jayuska 2* , Andi Hairil Alimuddin 1 , Muhamad Agus Wibowo 2 , Puji Ardiningsih 3 1 Laboratorium Kimia Organik, Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia
2 Laboratorium Kimia Minyak Atsiri, Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia
3 Laboratorium Biokimia, Jurusan Kimiaa, FMIPA, Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia

## ABSTRACT
Agarwood is a plant known for its aromatic resin, which is one of the most widely distributed species in Indonesia. This research was carried out in several stages, namely maceration, partitioning, Thin Layer Chromatography (TLC), and termites activity. The test was carried out for 3 days with variations in the concentration of 0% (negative control), 0.1%, 0.2%. 0.3%, 0.4%, 0.5% (w/v), and 0.25% fipronil reagent as positive controls. The crude extract yield of sapwood gaharu aloe acetone obtained was 23,4321% and the partition result of 233,789 grams of crude extract of acetone consisted of n-hexane fraction with a yield of 3.812%, chloroform fraction  of  42.205%,  and  acetone  fraction  of  43.621%.  The  results  of  the  phytochemical  test  showed  that  aloe  vera  sapwood contained alkaloid compounds, flavonoids, steroids, terpenoids, phenolics and saponins. GC-MS analysis of the n-hexane fraction showed the number of peaks as many as 55 peaks which may contain 55 compounds in the fraction. The compound with the highest % area was 4-Chloro-6-methoxy-2-methyl quinoline-8-amine (10.33%) followed by stigmasterol compound (5.94%). The results of the termite activity test showed that the most active fraction as an anti-termite was acetone fraction (LC 50 0.082%) followed by chloroform fraction (LC 50 0.134%), crude extract (LC 50 0.144%) and n-hexane fraction (LC 50 0.176%).
Gaharu merupakan tanaman yang dikenal dengan resin aromatiknya yang merupakan salah satu spesies yang banyak tersebar di Indonesia. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui adanya aktivitas gubal gaharu buaya sebagai antirayap. Penelitian ini dilakukan dengan beberapa tahapan yaitu maserasi, partisi, Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan uji aktivitas antirayap. Uji dilakukan selama 3 hari dengan variasi konsentrasi 0% (kontrol negatif), 0,1%, 0,2%. 0,3%, 0,4%, 0,5% (b/v) dan reagen fipronil 0,25% sebagai kontrol positif. Rendemen ekstrak kasar aseton gubal gaharu buaya yang diperoleh yaitu sebesar 23,432% dan hasil partisi dari 233,789 gram ekstrak kasar aseton terdiri dari fraksi n-heksana dengan rendemen 3,812%, fraksi kloroform sebesar 42,205% dan fraksi aseton sebesar 43,621%.. Hasil uji fitokimia yaitu gubal gaharu buaya mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, steroid, terpenoid, fenolik dan saponin. Analisis GC-MS fraksi n-heksana menunjukkan jumlah peak sebanyak 55 peak yang berarti terdapat 55 senyawa pada fraksi  tersebut.  Senyawa  dengan  %  area  terbanyak  yaitu  4-kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin-8-amina  (10,33%)  kemudian  diikuti dengan senyawa stigmasterol (5,94%). Hasil penelitian uji aktivitas antirayap menunjukkan bahwa fraksi yang paling aktif sebagai antirayap yaitu fraksi aseton (LC 50 0,082%) kemudian diikuti dengan fraksi kloroform (LC 50 0,134%), ekstrak kasar (LC 50 0,144%) dan fraksi n-heksana (LC 50 0,176%).
Keywords: Agarwood, Acetone fraction, Termite.

## PENDAHULUAN
Gaharu merupakan tanaman yang dikenal dengan resin aromatiknya yang merupakan salah satu spesies
yang banyak tersebar di Indonesia. Jenis gaharu yang ditemukan di  Kalimantan salah satunya yaitu gaharu buaya  ( Aetoxylon s ympetalum ).  Gaharu  buaya (A. sympetalum )  adalah  salah  satu  jenis  tanaman
*) Corresponding author: Afghani Jayuska E-mail: afghani.jayuska@fmipa.untan.ac.id

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
penghasil  gaharu  dengan  kandungan  senyawa metabolit sekunder yang meliputi alkaloid, flavonoid, steroid, terpenoid dan fenolik [1]. Ekstrak kayu gaharu buaya telah diduga memiliki aktivitas antirayap seperti penelitian yang telah dilakukan Meidianto, et al . [1] Serangan  rayap  pada  bangunan  atau  gedung semakin  meningkat.  Serangan  rayap  menyebabkan kerugian  yang  besar.  Serangan  rayap  menyebabkan kerusakan  bangunan  yang  komponen  bangunan  dan perabot rumah yang terbuat dari kayu, bangunan kayu yang langsung berhubungan dengan tanah, tumpukan kayu  maupun  komponen  yang  didalamnya mengandung selulosa [2].
Anti rayap diperlukan untuk mengurangi kerusakan bangunan  dan  mengurangi  kerugian  akibat  serangan dari rayap. Terdapat aktivitas anti rayap pada senyawa metabolit  sekunder  pada  ekstrak  kayu  gaharu  buaya yaitu  memiliki  kandungan  golongan  steroid  yang berpengaruh  terhadap  bioaktivitas  rayap  [1],  [3]. Aktivitas  anti  rayap  ditunjukkan  oleh  senyawa  dari golongan steroid yaitu β-Sitosterol [4].
Penelitian yang telah dilakukan oleh Meidianto, et al [1]  menyatakan  bahwa  fraksi  metanol  ekstrak  kayu gaharu buaya memiliki aktivitas anti rayap yang lebih besar dari ekstrak metanol, fraksi n-heksan dan fraksi kloroform.  Sementara  itu,  fraksi  aseton,  fraksi  n- heksana, fraksi kloroforom dan ekstrak gubal gaharu buaya  belum  diketahui  memiliki  aktivitas  antirayap. Oleh  karena  itu,  perlu  adanya  penelitian  lebih  lanjut untuk  mengetahui  adanya  aktivitas  antirayap  pada gubal gaharu buaya.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu autoklaf, botol semprot, botol vial, bulb, cawan petri, chamber,  corong  kaca,  corong  pisah,  desikator,  hot plate,  kain  hitam,  neraca analitik,  oven,  pinset,  pipet mikro,  vacuum  rotary  evaporator,  seperangkat  alat ekstraksi, seperangkat alat uji GC-MS dan seperangkat alat uji antirayap.
Adapun bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu  akuades,  aseton,  besi  (III)  klorida  (FeCl 3 )  2%, insektisida  bermerek  Regent  yang  mengandung fipronil, kapas, kertas Whattman No.3, kloroform, n- heksana,  pasir  steril,  pereaksi  Dragendroff,  pereaksi Liebermann Burchard, pereaksi Serium Sulfat, plaster paris,  plastik  wrapping,  plat  KLT,  rayap  tanah  kasta
pekerja  dan  kasta  prajurit  serta  serbuk  gubal  gaharu buaya.
Ekstraksi dan Partisi Ekstraksi  pada  penelitian  ini  dilakukan  dengan metode  maserasi  yaitu  1  kg  serbuk  gubal  gaharu direndam dengan aseton selama 4 × 24 jam dengan suhu ruang (28±2°C) kemudian maserat disaring dan filtrat yang diperoleh dipekatkan. Setelah itu sebanyak 234,3  gram  ekstrak  kasar  aseton  dilakukan  partisi bertingkat  dengan  pelarut  n-heksan  dan  kloroform sehingga diperoleh fraksi n-heksana, fraksi kloroform dan  fraksi  aseton.  Selanjutnya  fraksi  yang  diperoleh dipekatkan  kembali  dengan  menggunakan  rotary evaporator.

## Kromatografi Lapis Tipis
Proses  KLT  dimulai  dengan  larutan  yang  telah diekstrak  ditotol  pada  plat-plat  KLT  dengan menggunakan fasa diam silika gel dan fasa gerak yang sesuai. Setelah itu bercak hasil elusi disemprot dengan menggunakan pereaksi Dragendorff untuk mengidentifikasi  senyawa  alkaloid,  pereaksi  serium sulfat untuk senyawa flavonoid, pereaksi
LiebermannBurchard  untuk  senyawa  terpenoid  dan steroid serta pereaksi FeCl 3 2% untuk senyawa fenolik. Pada senyawa saponin dilakukan uji dengan cara fraksi yang diperoleh dilarutkan dengan 10 mL akuades dan dikocok.

## Uji Aktivitas Antirayap
Metode  yang  dilakukan  pada  uji  bioaktivitas antirayap  ekstrak  kayu  gaharu  yaitu  dengan  umpan paksa  ( forced  feeding  test ).  Rayap  dikumpulkan  dengan cara  mengumpulkan  kayu-kayu  yang  diserang  oleh rayap.  Rayap  tersebut  dipelihara  dan  dilakukan  uji pendahuluan dengan kertas umpan tanpa ekstrak dan pelarut  dalam  wadah  plastik  tertutup  kain  hitam selama 3 hari. Bentuk dari gelas uji yaitu silinder yang terbuat dari plastik yang memiliki ukuran diameter atas 7,5 cm, diameter bawah 5,5 dan tinggi 10,5 cm. Plaster paris berpori  terletak di bagian bawah gelas uji yang terdapat 10 gram pasir steril yang telah ditambahkan akuades 1 mL agar memberikan kelembaban dan kain strimin yang berdiameter 4,5 cm dan ditutup dengan kain hitam.
Kertas  umpan  yang  digunakan  yaitu  kertas Whattman  No.3  yang  bentuknya  lingkaran berdiameter 3 cm. Setelah itu kertas tersebut direndam dalam larutan ekstrak dengan variasi konsentrasi 0% sebagai  kontrol  negatif;  0,1%;  0,2%;  0,3%;  0,4;  dan

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
0,5%  (b/v)  dan  reagen  fipronil  dengan  konsentrasi 0,25%  sebagai  kontrol  positif.  Kertas  umpan  yang telah dilakukan perendaman dikeringkan didalam oven dengan suhu 60°C selama 12 jam kemudian disimpan dalam  desikator  selama  1  hari  agar  pelarutnya menguap  kemudian  kertas  tersebut  ditimbang  agar berat awal diketahui.
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  kertas  umpan diletakkan di atas kain strimin kemudian dimasukkan ke  dalam  gelas  uji  yang  terdapat  rayap  didalamnya. Gelas  uji  masing-masing  berisi  27  ekor  rayap  kasta pekerja  dan  3  ekor  rayap  kasta  prajurit.  Setelah  itu masing-masing gelas uji ditutup dengan kain hitam dan diletakkan dalam wadah yang diberi kapas basah pada bagian  bawahnya  kemudian  disimpan  selama  3  hari dalam ruangan gelap. Setiap hari rayap yang mati akan dihitung. Setelah 3 hari, kertas umpan yang diberikan pada rayap dikeringkan dalam oven dengan suhu 60°C selama  12  jam  kemudian  disimpan  dalam  desikator selama  24  jam.  Setelah  itu  kertas  tersebut  ditimbang agar  berat  akhir  diketahui.  Pengujian  tersebut dilakukan secara triplo. Masing-masing kertas umpan selanjutnya dihitung kehilangan beratnya dan dihitung tingkat kematian rayap.
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  kertas  umpan diletakkan di atas kain strimin kemudian dimasukkan ke  dalam  gelas  uji  yang  terdapat  rayap  didalamnya. Gelas  uji  masing-masing  berisi  27  ekor  rayap  kasta pekerja  dan  3  ekor  rayap  kasta  prajurit.  Setelah  itu masing-masing gelas uji ditutup dengan kain hitam dan diletakkan dalam wadah yang diberi kapas basah pada bagian  bawahnya  kemudian  disimpan  selama  3  hari dalam ruangan gelap. Setiap hari rayap yang mati akan dihitung. Setelah 3 hari, kertas umpan yang diberikan pada rayap dikeringkan dalam oven dengan suhu 60°C selama  12  jam  kemudian  disimpan  dalam  desikator selama  24  jam.  Setelah  itu  kertas  tersebut  ditimbang agar  berat  akhir  diketahui.  Pengujian  tersebut dilakukan  secara  triplo.  Masingmasing  kertas  umpan selanjutnya dihitung kehilangan beratnya dan dihitung tingkat kematian rayap.

## Parameter Pengamatan
Perhitungan  parameter  pengamatan  pada  rayap dapat dilakukan dengan rumus sebagai berikut [5]:
a. Mortalitas (tingkat kematian rayap) Pengamatan  kematian  rayap  dilakukan  setiap  hari sekali. Rumus dari mortalitas adalah sebagai berikut.
Mortalitas(%) = 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑖𝑛𝑑𝑖𝑣𝑖𝑑𝑢 𝑟𝑎𝑦𝑎𝑝 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑚𝑎𝑡𝑖 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑖𝑛𝑑𝑖𝑣𝑖𝑑𝑢 𝑟𝑎𝑦𝑎𝑝 𝑚𝑢𝑙𝑎−𝑚𝑢𝑙𝑎 × 100%...................(1)
b. Pengurangan berat kertas umpan Rumus  dari  pengurangan  berat  kertas  ump  an adalah sebagai berikut.
Pengurangan berat (%) = 𝑊0 – 𝑊1
𝑊0 × 100%.............................(2)
Keterangan :
W0 : massa kertas uji sebelum pengumpanan (g) W1 : massa kertas uji setelah pengumpanan (g)
Analisis Data Data yang diperoleh dari persentase mortalitas dan pengurangan  berat  kemudian  diuji  dengan  Analisis Varians  (ANOVA)  dengan  taraf   kepercayaan  95%. Jika  mendapatkan  hasil  yang  berbeda,  maka dilanjutkan  dengan  uji  Least  Significance  Difference (LSD) (Meidianto, et al , 2019). Nilai dugaan kematian dalam  50%  dilakukan  dengan  menghitung  nilai  LC 50 dalam waktu 3 hari.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Maserasi dan Partisi Ekstraksi  gubal  gaharu  buaya  menggunakan metode  maserasi  dengan  pelarut  aseton.  Hasil maserasi dan partisi dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1.  Hasil  Maserasi  dan  Partisi  Gubal  Gaharu
Buaya Nama Ekstrak Massa Ekstrak(g) Rendemen(%) Ekstrak kasar 234,321 23,432 a Fraksi n-heksana 8,532 3,812 b Fraksi kloroform 94,452 42,205 b Fraksi aseton 97,619 43,621 b
a: rendemen ekstrak terhadap 1000 gram gubal gaharu buaya
b:  rendemen  fraksi  terhadap  233,789  gram  ekstrak aseton yang dipartisi
Analisis Fitokimia dengan Reagen Semprot pada KLT
Hasil  analisis  fitokimia  dengan  reagen  semprot dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Analisis Fitokimia
Uji Ekstrak Fraksi n-heksana  Kloroform  Aseton Alkaloid + + + - Flavonoid + + + + Steroid + + + + Terpenoid + + + + Fenolik + - + + Saponin + + + -

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
Identifikasi senyawa alkaloid dengan menggunakan reagen Dragendorff yang ditandai dengan terbentuknya  noda  berwarna  jingga  [1].  Perubahan warna  noda  pada  plat  KLT  menggunakan  reagen Dragendorff  disebabkan karena nitrogen pada sampel yang mengandung alkaloid membentuk ikatan kovalen koordinasi  dengan  ion  logam  K + dari  kalium tetraidobismutat yang kemudian membentuk kompleks kalium alkaloid [6].
Analisis  senyawa  flavonoid  menggunakan  reagen Serium Sulfat yang ditandai dengan terbentuknya noda berwarna jingga hingga coklat (Meidianto, et al , 2019). Noda berwarna merah jingga hingga coklat terbentuk karena terjadi reaksi redoks karena senyawa flavonoid teroksidasi  dari  gugus  karboksilat  menjadi  keton, kemudian serium (IV) sulfat (Ce(SO 4 ) 2 ) tereduksi yang semula  Ce 4+ menjadi  Ce 3+ sehingga  menimbulkan warna jingga-coklat [7].
Uji  steroid  dan  terpenoid  menggunakan  reagen Liebermann-Burchard.  Sampel  dikatakan  positif mengandung  steroid  ditandai  dengan  terbentuknya noda  berwarna  hijau  dan  terpenoid  berwarna  jingga [1].  Terbentuknya  noda  tersebut  disebabkan  oleh adanya  kemampuan  senyawa  steroid  dan  terpenoid membentuk  warna  oleh  H 2 SO 4 dalam  pelarut  asam asetat  anhidrid.  Perbedaan  warna  yang  terbentuk
antara  steroid  dan  terpenoid  disebabkan  adanya perbedaan gugus pada atom C-4 [8].
Uji fenolik menggunakan reagen FeCl 3 2% ditandai dengan  terbentuk  noda  berwarna  biru  tua  dan  hijau kehitaman  [1].  Terbentuknya  noda  tersebut disebabkan karena FeCl 3 bereaksi dengan gugus -OH aromatis [8].
Uji  selanjutnya  yaitu  uji  saponin  yang  dilakukan pada setiap fraksi dan ekstrak yang dilarutkan dengan air  kemudian  dikocok.  Hasil  uji  saponin  dikatakan positif   apabila  terbentuk  busa  yang  bertahan  lama setelah pengocokan.
Analisis GC-MS Hasil  analisis  GC-MS  dilakukan  pada  fraksi nheksana gubal gaharu buaya. Terdapat 55 peak pada kromatogram yang berarti bahwa terdapat 55 senyawa pada  fraksi  tersebut.  Senyawa  utama yang  dihasilkan dapat dilihat pada Tabel 3.
Senyawa utama pada fraksi n-heksana gubal gaharu buaya yang dihasilkan dari hasil GC-MS yaitu senyawa 4-Kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin-8-amina  (16,02%) yang  merupakan  senyawa  golongan  alkaloid. Berdasarkan spektrum massa yang ditunjukkan pada Gambar  1,  dapat  dibuat  kemungkinan  pola fragmentasi yang dapat dilihat pada Gambar 2.
Tabel 3. Senyawa utama fraksi n-heksana gubal gaharu buaya No Waktu Retensi Senyawa Rumus Molekul Area (%) 1. 52.449 4-Kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin- 8-amina C 11 H 11 ClN 2 O 16,02 2. 54.893 Stigmasterol C 29 H 48 O 5,94 3. 34.795 n-asam heksadekanoat C 16 H 32 O 3,2 4. 38.057 6-asam oktadekanoat C 18 H 34 O 2 2,99
Gambar 1. Spektrum massa fraksi n-heksana

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
Gambar 2. Pola fragmentasi senyawa 4-Kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin-8-amina Spektrum  massa  dengan  waktu  retensi  52.449 menit diprediksi merupakan senyawa alkaloid dengan rumus  molekul  C 11 H 11 ClN 2 O  dengan  indeks kemiripan 86%. Spektra yang dihasilkan dari fraksi n- heksana  gubal  gaharu  buaya  dapat  dibandingkan dengan spektra standar library NIST14.L.
Pola fragmentasi 4-Kloro-6-metoksi-2- metilkuinolin-8-amina  pada  Gambar  2  dapat  dilihat bahwa  spektrum  massa  dari  sampel  memberikan puncak ion molekul 222 m/z yang merupakan berat molekul  dari  4-Kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin-8- amina (C 11 H 11 ClN 2 O). Pelepasan -CH 3 menghasilkan fragmentasi ion 207 m/z yang merupakan ion molekul dari  [C 10 H 8 ClN 2 O] + .  Pelepasan  -CO  menghasilkan fragmentasi ion 179 m/z yang merupakan ion molekul dari  [C 9 H 8 ClN 2 ] + .  Pelepasan  -C 2 H 2 menghasilkan fragmentasi ion 153 m/z yang merupakan ion molekul dari  [C 7 H 6 ClN 2 ] + .  Pelepasan  -HCN  menghasilkan
fragmentasi ion 126 m/z yang merupakan ion molekul dari  [C 6 H 5 ClN] + .  Pelepasan  -C 2 Cl  menghasilkan fragmentasi ion 67 m/z yang merupakan ion molekul dari [C 4 H 5 N] + .
Aktivitas  Antirayap  Gubal  Gaharu  Buaya (Aetoxylon sympetalum)
Aktivitas  antirayap  pada  ekstrak  dan  fraksi  dapat dilihat dengan melihat penurunan berat kertas umpan yaitu dengan menghitung persentase penurunan berat kertas  umpan  setelah  diuji  selama  3  hari.  Persentase penurunan berat kertas dapat dilihat pada Gambar 3.
Berdasarkan  grafik  pada  Gambar  3  secara  umum dapat  dilihat  bahwa  seiring  dengan  penambahan konsentrasi, rayap akan menolak untuk makan. Rayap yang mati juga menyebabkan penurunan berat kertas semakin kecil [1].

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
Gambar 3. Grafik persentase penurunan berat kertas uji

## Tabel 4. Mortalitas rayap selama 3 hari
Mortalitas (%) Jenis Ekstrak Konsentrasi (%) 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 Ekstrak 0 27,78 60 100 100 100 n- heksana 0 27,78 46,67 74,44 90 95,56 Kloroform 0 44,44 48,89 90 93,33 93,33 aseton 0 64,44 83,33 96,6 100 100
Fipronil
100 (0,25%)
Gambar 4. Diagram LC 50-3hari Tabel 5. Rentang mortalitas rayap [15] Klasifikasi Persentase (%) Lemah 0-33 Sedang 34-66 Kuat 67-99 Sangat Kuat 100
Selain  itu,  pengamatan  aktivitas  antirayap  dapat dilihat  dari  mortalitas  rayap  yang  dihitung  selama  3 hari. Data mortalitas rayap selama 3 hari dapat dilihat pada Tabel 4.
Kontrol negatif  0% menggunakan pelarut aseton, n-heksana dan kloroform tidak menunjukkan adanya
mortalitas  rayap.  Hal  tersebut  berarti  bahwa  pelarut telah  menguap  dengan  sempurna  dan  tidak mempengaruhi  mortalitas  rayap.  Kontrol  negatif digunakan  untuk  mengetahui  pengaruh  pelarut terhadap  mortalitas  rayap  [3].  Klasifikasi  rentang mortalitas rayap dapat dilihat pada Tabel 5.
0,144 0,176 0,134 0,082 0 0,05 0,1 0,15 0,2 Ekstrak Fraksi n- heksana Fraksi kloroform Fraksi aseton Nilai L C 50 (%)

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
Ekstrak  kasar  aseton  dan  fraksi  aseton  dapat mencapai mortalitas 100% dalam kurun waktu 3 hari pengujian. Hal tersebut menunjukkan bahwa ekstrak gubal  gaharu  buaya  memiliki  bioaktivitas  sebagai antirayap yang sangat kuat. Kontrol positif  digunakan sebagai pembanding apakah zat uji memiliki efek yang sama terhadap fipronil [9].
Mortalitas  rayap  yang  memperoleh  nilai  100% ditunjukkan  pada  ekstrak  aseton  dengan  konsentrasi 0,3%;  0,4;  dan  0,5%  dan  pada  fraksi  aseton  dengan konsentrasi  4%  dan  5%  Hasil  mortalitas  rayap  juga dapat dilihat pada perhitungan LC 50 pada Gambar 4. Berdasarkan diagram pada Gambar 4 dapat dilihat bahwa  fraksi  aseton  memiliki  nilai  LC 50 yang  paling rendah  kemudian  diikuti  dengan  fraksi  kloroform, ekstrak  aseton  dan  fraksi  n-heksana.  Nilai  LC 50 menunjukkan  tingkat  konsentrasi  yang  dapat membuat rayap mati 50% dari jumlah total rayap yang diuji.  Semakin  rendah  nilai  LC 50 yang  dimiliki  oleh suatu sampel, maka semakin tinggi sifat toksisitas pada sampel tersebut [3]. Hasil tersebut masih jauh dengan nilai LC 50 dari reagen fipronil yaitu sebesar 0,00243% [10]. Kematian  rayap  disebabkan  karena  adanya pengaruh senyawa bioaktif  pada ekstrak gubal gaharu buaya.  Ekstrak  gubal  gaharu  buaya  mengandung senyawa metabolit sekunder yang meliputi flavonoid, steroid,  terpenoid,  dan  fenolik.  Hal  tersebut dibuktikan  dengan  beberapa  penelitian  yang  telah dilakukan oleh Puteri, et al , [3] dan Meidianto, et al , [1] yang  menyatakan  bahwa  senyawa  yang  memberikan pengaruh bioaktivitas sebagai antirayap yaitu senyawa golongan steroid.
Steroid  berperan  sebagai  bahan  aktif   pengendali hama  karena  memiliki  aktivitas  biologi  yang  khas seperti  toksik,  menghambat  makan,  antiparasit  dan pestisida  [11].  Senyawa  dari  golongan  steroid  yang berperan sebagai aktivitas antirayap salah satunya yaitu β -sitosterol  [4].  Pada  penelitian  ini,  kematian  rayap kemungkinan  disebabkan  karena  adanya  senyawa golongan  alkaloid  yaitu  4-Kloro-6-metoksi-2- metilkuinolin-8-amina dan senyawa golonngan steroid yaitu stigmasterol yang merupakan senyawa dominan pada  gubal  gaharu  buaya  (Aetoxylon  sympetalum) berdasarkan analisis GC-MS.
Penelitian  Ohmura, et  al ,  [12]  menyatakan  bahwa senyawa  golongan  flavonoid  menunjukkan  aktivitas antifeedant  atau  daya  hambat  makan  pada  rayap. Senyawa  flavonoid  dapat  menembus  peptidoglikan
pada  sel  bakteri  di  dalam  perut  rayap  sehingga menyebabkan kerusakan sel.
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada gubal gaharu buaya menyebabkan sistem syaraf  pada rayap  rusak  sehingga  tidak  berfungsi  dan  rayap bergerak dengan tidak terkendali sehingga menyebabkan  rayap  mati  [13].  Mekanisme  kematian rayap  juga  disebabkan  karena  senyawa  bioaktif   yang bersifat  toksik  sehingga  menyebabkan  protozoa simbion  pada  rayap  menjadi  mati  melalui  gangguan terhadap  aktivitas  enzim.  Rayap  yang  tidak  memiliki protozoa  di  dalam  ususnya  tidak  dapat  mencerna makanan sehingga rayap akan mati [14].
Kematian rayap dapat diidentifikasi secara spesifik dengan uji ANOVA untuk melihat adanya pengaruh mortalitas  rayap  terhadap  konsentrasi  sampel  uji dengan  menganalisis  pengurangan  berat  kertas terhadap kematian rayap. Hasil analisis dengan SPSS One-Way ANOVA menunjukkan hasil signifikan 0,00 dimana hasil tersebut lebih kecil dari 0,05 sehingga H 0 ditolak  dan  H 1 diterima.  Hal  tersebut  berarti  bahwa pengurangan  berat  kertas  dengan  variasi  konsentrasi 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4% dan 0,5% berbeda nyata.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa Ekstraksi maserasi dari 1000 gram  gubal  gaharu  buaya  ( Aetoxylon  sympetalum ) dengan  pelarut  aseton  menghasilkan  rendemen sebesar  23,432%.  Hasil  uji  fitokimia  menggunakan reagen semprot pada Kromatografi Lapis Tipis (KLT) yaitu  gubal  gaharu  buaya  ( Aetoxylon  sympetalum ) mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  steroid, terpenoid, fenolik dan saponin. Hasil analisis GC-MS fraksi  n-heksana  diperoleh  senyawa  utama  yaitu  4- Kloro-6-metoksi-2-metilkuinolin-8-amina  (10,33%), kemudian  diikuti  dengan  stigmasterol  (5,94%),  n- Asam Heksadekanoat (3,2%) dan 6-Asam Oktadekanoat  (2,99%).  Aktivitas  fraksi  aseton terhadap  uji  antirayap  lebih  aktif   (LC 50 0,082%) daripada fraksi kloroform (LC 50 0,134%), ekstrak kasar (LC 50 0,144%) dan fraksi n-heksana (LC 50 0,176%).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tanjungpura  yang  telah  memfasilitasi  penelitian  ini

## Yuniara, Anti-Termite Activities of The Bioactive …
melalui  Dana  DIPA  PNBP  Universitas  Tanjungpura Tahun  Anggaran  2022  Nomor  SP  DIPA- 023.17.2.677517/2022  tanggal  17  November  2021. Penulis  juga  mengucapkan  terimakasih  kepada COMDEV dan Outreaching Universitas Tanjungpura yang juga telah memberikan dukungan finansial untuk keperluan proses penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  A.  Meidianto,  A.  Jayuska,  and  M.  A.  Wibowo, “Bioaktivitas Antirayap Ekstrak Kayu Gaharu Buaya ( Aetoxylon  sympetalum )  terhadap  Rayap  Tanah ( Coptotermes sp),” J. Kim. Khatulistiwa , vol. 8, no. 1, pp. 11-16, 2019.
[2]  A. Savitri, Martini, and S. Yuliawati, “Keanekaragaman Jenis  Rayap  Tanah  dan  Dampak  Serangan  Pada Bangunan Rumah di Perumahan Kawasan Mijen Kota Semarang,” J.  Kesehat.  Masy. ,  vol.  4,  pp.  2013-2015, 2016.
[3]  I.  T.  Puteri,  A.  Jayuska,  and  A.  H.  Alimuddin, “Aktivitas  Antirayap  Daun  Gaharu  (  Aquilaria malaccensis Lam .),” J. Kim. Khatulistiwa , vol. 5, no. 2, pp. 6-14, 2016.
[4]  M. Adfa, A. J. Kusnanda, W. D. Saputra, C. Banon, M. Efdi, and M. Koketsu, “Termiticidal activity of  Toona sinensis  wood  vinegar  against  Coptotermes curvignathus holmgren,” Rasayan J. Chem. , vol. 10, no.
4, pp. 1088-1093, 2017.
[5]  Wibaldus, A. Jayuska, and P. Ardiningsih, “Biokativitas Minyak  Atsiri  Kulit  Buah  Jeruk  Nipis  ( Citrus aurantifolia ) Terhadap Rayap Tanah ( Coptotermes sp.),” J. Kim. Khatulistiwa , vol. 5, no. 1, pp. 44-51, 2016.
[6]  S.  D.  Marliana,  V.  Suryanti,  and  Suyono,  “Skrining Fitokimia  dan  Analisis  Kromatografi  Lapis  Tipis Komponen  Kimia  Buah  Labu  Siam  (Sechium  edule Jacq.  Swartz.)  dalam  Ekstrak  Etanol  The phytochemical screenings and thin layer chromatography analysis of,” Biofarmasi , vol. 3, no. 1, pp. 26-31, 2005.
[7]  A.  Widiyantoro,  Harlia,  and  B.  Prasetysa,  “Senyawa Sitotoksik  dari  Fraksi  Diklorometana  Kulit  Terong Ungu  ( Solanum  melongena L.)  Terhadap  Sel  Kanker Payudara T47D,” Fitofarmaka  J. Ilm. Farm. , vol. 11, no.
2, 2021.
[8]  A. I. Habibi, R. A. Firmansyah, and S. M. Setyawati, “Skrining Fitokimia Ekstrak n-Heksan Korteks Batang Salam ( Syzygium polyanthum ),” Indones. J. Chem. Sci. , vol.
7, no. 1, pp. 1-4, 2018.
[9]  Emrizal,  A.  Fernando,  F.  Suryani,  F.  Ahmad,  H.  M. Sirat,  and  D. Dayar  Arbain,  “Isolasi senyawa  dan  uji aktivitas  anti-inflammasi  Isolasi  Senyawa  dan  Uji
Aktivitas  Anti-inflammasi  Ekstrak  Metanol  Daun Puwar  Kincung  ( Nicolaia  speciosa  Horan ),” J.  Penelit. Farm. Indones. , vol. 1, no. 1, pp. 1-5, 2012.
[10] F. Manzoor, A. H. Sayyed, T. Rafique, and S. A. Malik, “Toxicity  and  repellency  of   different  insecticides against heterotermes indicola (Isoptera:
Rhinotermitidae),” J. Anim. Plant Sci. , vol. 22, no. 1, pp. 65-71, 2012.
[11] J.  B.  Harbone,  Metode  Fitokimia :  Penuntun  Cara Modern  Menganalisis  Tumbuhan.  Bandung:  ITB, 1987.
[12] W.  Ohmura,  S.  Doi,  M.  Aoyama,  and  S.  Ohara, “Antifeedant  activity  of   flavonoids  and  related compounds  against  the  subterranean  termite Coptotermes formosanus Shiraki,” J. Wood Sci. , vol. 46, no. 2, pp. 149-153, 2000.
[13] Nabu,  F.  Diba,  and  M.  Dirhamsyah,  “Aktivitas  anti rayap  minyak  atsiri  dari  kulit  jeruk  citrus  nobilis var.microcarpa  terhadap  rayap  tanah  Coptotermes curvignathus  Holmgren  Anti-Termitic,” J.  Hutan Lestari , vol. 3, no. 1, pp. 133-141, 2015.
[14] D. Nandika, Y. Rismayadi, and F. Diba, Rayap : Biologi dan  Pengendaliannya.  Malang:  Muhammadiyah University Press, 2003.
[15] S. . Lee, P. . H’ng, T. . Peng, and W. . Lum, “Response of Captotermes curvignathus (Isoptera:
Rhinotermitidae)  to  Formaldehyde  Catcher-treated Particleboard,” Pakistan J. Biol. Sci. , vol. 16, no. 21, pp. 1415-1418, 2013.