## UJI EFEK ANALGETIK ANTIPIRETIK EKSTRAK ETANOL ALFALFA
( Medicago sativa ) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
AA. Hesti Wulan S., Uning Rininingsih EM., dan Ika Puspitaningrum

## STIFAR “Yayasan Pharmasi” Semarang
e-mail: ika2vita@gmail.com

## ABSTRACT
Analgesic is a group of drugs to relieve pain without erasing consciousness and antipyretic is  a  compound  that  can  reduce  fever.  This  study  aims  to  verify  the  effects  of  analgesic  and antipyretic  and  determine  the  effective  dose  of  alfalfa  ethanol  extract  ( Medicago  sativa )  as  an analgesic-antipyretic.  Twenty-five  male  Wistar  rats  were  divided  into  five  groups.  Group  I (negative  control),  rats  were  treated  with  CMC-Na  0.5%.  Group  II  (positive  control),  rats  were treated  with  paracetamol  50  mg/kg  BW.  Rats  in  group  III,  IV,  and  V  were  treated  with  a suspension of the alfalfa ethanol extract (50; 100 and 200) mg/kg BW. Pain stimuli conducted by dipping a rat's tail into 40 °C hot water for 10 seconds. Response time to a painful stimulus were measured before and 30 minutes after treatment. Fever in rats induced with 0.2 mL DPT vaccine intramuscularly.  Rectal  temperature  was  measured  before  treatment  (initial  temperature),  60 minutes  after  the  vaccine,  and  30  minutes  after  treatment.  Data  response  time  to  the  stimulus  of pain and rectal temperature were statistically Analyzed with a one-way ANOVA and Scheffe test at  95%  confidence  level.  The  results  showed  that  the  alfalfa  ethanol  extract  can  improve  the response time to pain stimulation and decrease the rectal temperature of fever-induced rats with a DPT vaccine. The effective dose of alfalfa ethanol extract as an analgesic-antipyretic is 200 mg/kg BW.
Key words: Alfalfa ethanol extract, analgesics, antipyretics

## PENDAHULUAN
Nyeri  dan  demam  banyak  dialami  oleh  semua  orang dari segala  usia  dan  disebabkan  oleh banyak hal. Nyeri menurut Merskey (1986) adalah pengalaman sensorik dan emosional yang tidak menyenangkan  yang  berkaitan  dengan  jaringan  rusak  atau  jaringan  yang  cenderung  rusak.  Nyeri merupakan  suatu  perasaan  subjektif  pribadi  dengan  ambang  toleransi  nyeri  yang  berbeda-beda bagi setiap orang (Widiastuti, 2009).
Secara  patofisiologis,  demam  adalah  peningkatan thermoregulatory  set  point dari  pusat hipotalamus yang diperantarai oleh interleukin 1 (IL-1). Secara klinis, demam adalah peningkatan suhu  tubuh  1 o C  atau  lebih  besar  diatas  nilai  rerata  suhu  normal.    Sebagai  respons  terhadap perubahan set  point ini,  terjadi  proses  aktif  untuk  mencapai set  point yang  baru.  Hal  ini  dicapai secara fisiologis dengan meminimalkan pelepasan panas dan memproduksi panas (El-Radhi dkk., 2009; Fisher dan Boyce 2005).
Senyawa yang berkhasiat sebagai analgetik-antipiretik diperlukan untuk mengatasi masalah nyeri  dan  demam.  Analgetik  adalah  senyawa  yang  dapat  mengurangi  atau  menghilangkan  rasa nyeri  tanpa  menghilangkan  kesadaran.  Sementara  itu,  antipiretik  adalah  senyawa  yang  dapat menurunkan  demam  (suhu  tubuh  tinggi)  (Tjay  dan  Rahardja,  2008).  Selain  obat  sintesis,  bahan alam  seperti  obat  tradisional  juga  dapat  digunakan  sebagai  analgetik-antipiretik.  Salah  satu tanaman yang dipercaya dapat digunakan sebagai obat adalah Alfalfa ( Medicago sativa ). Alfalfa  merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  polong-polongan  dengan  habitat  asli  daerah subtropis  yang  dahulu  sering  digunakan  sebagai  tanaman  hias  dan  pakan  ternak.  Akan  tetapi, seiring dengan perkembangan zaman, pemanfaatan Alfalfa mulai diekspansi ke arah medis untuk kepentingan  manusia.  Daun  alfalfa  diyakini  berkhasiat  untuk  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit  seperti  arterosklerosis,  kolesterol  tinggi,  sakit  jantung,  kanker  paru-paru,  kanker  usus,
kanker prostat, diabetes, asam urat, reumatik, osteoporosis, gangguan pencernaan, penyakit ginjal, gangguan rambut kulit dan kuku, eksim, anemia, menstruasi tidak normal, keracunan, migrain dan lain-lain (Rahmayanti dan Sitanggang, 2006).
Penelitian  terakhir  membuktikan  bahwa  fraksi  etil  asetat  ekstrak  alfalfa  dapat  berefek antiinflamasi. Hal ini diduga disebabkan oleh kandungan flavonoid, saponin dan steroid (Kusmita, dkk.  2014).  Flavonoid  selain  berefek  antiinflamasi,  juga  diduga  dapat  berefek  sebagai  analgetik (Hossinzadeh,  dkk.,  2002)  dan  antipiretik.  Flavonoid  dan  alkaloid  diduga  dapat  menghambat sintesis  prostaglandin  E-2  (suatu  mediator  demam  perifer)  melalui  penghambatan  sintesa prostaglandin,  lebih  tepatnya  endoperoksida  (Ramaswamy,  dkk.  1985).  Penelitian  mengenai  uji analgetik antipiretik Alfalfa belum pernah dilakukan. Oleh sebab itu, penelitian diperlukan untuk melihat ada tidaknya efek analgetik antipiretik Alfalfa beserta dosis efektifnya.

## METODE PENELITIAN

## Bahan Penelitian
Bahan utama adalah herba alfalfa ( Medicago sativa ) tropis yang diperoleh dari perkebunan Selopass Boyolali. Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Wistar. Bahan-bahan lain yang digunakan dalam penelitian ini adalah pelarut etanol 96%, ammonia, AlCl 3 , anisaldehid, asam sulfat, butanol, asam asetat, kloroform, metanol, parasetamol, vaksin DPT. tikus

## Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender, seperangkat alat gelas, waterbath, batang pengaduk, kertas saring, cawan poselin, rotary evaporator, pipa kapiler, lempeng silika Gel GF  254,  chamber,  papan  penyemprot,  lampu  UV,  botol  semprot,  timbangan  hewan  uji,  spuit injeksi, sonde tikus dan thermometer.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Alfalfa
Sampel  herba  alfalfa  ditimbang  dan  dilakukan  sortasi  basah.  Herba  alfalfa  yang  telah disortasi,  dicuci  bersih  dan  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari  dengan  ditutup  akin  hitam  agar tidak terkena langsung sinar matahari. Setelah kering, simplisia disortasi kering dengan ditimbang kembali.  Simplisia  dibuat  dalam  bentuk  serbuk  dan  diayak  dengan  ayakan  no.30/40.  Simplisia yang digunakan adalah simplisia yang lolos pada ayakan no.30 dan tidak lolos pada ayakan no.40. serbuk simplisia selanjutnya diekstraksi dengan metode maserasi.
Sebanyak 200 g serbuk herba alfalfa direndam dengan pelarut etanol 96% selama 5 hari dan diaduk  dengan  bantuan  shaker  rotator  selama  dua  jam,  kemudian  didiamkan  selama  24  jam. Dilakukan  penyaringan  setelah  dienapkan  selama  24 jam sehingga terpisah  antara filtrat  (ekstrak etanol)  dengan  residu.  Residu  yang  didapat  ditambah  lagi  dengan  500  mL  etanol  96%  dan dilakukan  proses  yang  sama  selama  lima  hari.  Semua  filtrat  dicampur  dan  dipekatkan  dengan rotary evaporator .

## Pengelompokkan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  tikus  jantan  galur  Wistar  usia  2-3  bulan  dengan  berat badan 180 - 200 g. Sebanyak 25 ekor tikus dipuasakan selama 18 jam dengan tetap diberikan air minum. Selanjutnya tikus dibagi secara acak ke dalam lima kelompok perlakuan (masing-masing lima  ekor  tikus).  Tikus  kelompok  I  (kontrol  negatif)  diberi  perlakuan  suspensi  CMC  Na  0,5% secara oral. Tikus kelompok II (kontrol positif) diberi suspensi parasetamol 50 mg/kg BB  secara oral. Tikus Kelompok III, IV dan V berturut-turut diberikan perlakuan ekstrak etanol alfalfa  (50, 100 dan 200) mg/kg BB.

## Uji Efek Analgetik Ekstrak Etanol Alfalfa
Sebelum  perlakuan  sediaan  uji,  ekor  tiap-tiap  tikus  dicelupkan  dalam  penangas  air  suhu 40°C, dan selanjutnya dicatat waktu yang diperlukan tikus untuk menjentikkan ekornya keluar dari penangas air. Tiap rangkaian pengamatan dilakukan tiga kali, dalam selang waktu dua menit. Data respon waktu terhadap stimulus nyeri dari dua pengamatan terakhir dicatat dan dirata-rata sebagai respon normal tikus terhadap stimulus nyeri.
Sediaan  uji  diberikan  pada  masing-masing  tikus  sesuai  kelompok  perlakuan  secara  oral. Pengamatan  data  respon  waktu  terhadap  rangsang  nyeri  dilakukan  kembali  pada  menit  ke-10 setelah pemberian sediaan uji. Jika tikus tidak menjentikan ekornya keluar air panas (suhu 40 °C) dalam waktu 10 detik, maka dapat dianggap bahwa tikus tidak menyadari stimulus nyeri tersebut. Respon waktu terhadap stimulus nyeri dilakukan kembali pada menit ke-20, 30, 60 dan 90 setelah pemberian sediaan uji.

## Uji Efek Antipiretik Ekstrak Etanol Alfalfa
Suhu  rektal  normal  dari  masing-masing  tikus  dicatat  sebelum  pemberian  sediaan  uji. Masing-masing  tikus  pada  tiap  kelompok  perlakuan  diinjeksi  dengan  0,2  mL  vaksin  DPT  secara intramuskular.  Suhu  rektal  tiap  tikus  dicatat  kembali  tiap  selang  setengah  jam.  Sediaan  uji diberikan  pada  masing-masing  tikus  pada  saat  tercapai  puncak  demam  (empat  jam  setelah pemberian vaksin DPT). Suhu rektal tikus dicatat kembali pada menit ke-20,40, 60, 90, 120,150, dan 180 setelah pemberian sediaan uji.

## Analisa Data
Data yang diperoleh dalam penelitian ini berupa respon waktu terhadap stimulus nyeri dan suhu rektal.  Data dianalisis dengan menggunakan ANAVA satu arah yang dilanjutkan dengan uji Shefee pada taraf kepercayaan 95%. Data dianalisis dengan menggunakan Software SPSS release 16.

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

## Efek Analgetik Ekstrak Etanol Alfalfa
Metode  uji  analgetik  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  jentik  ekor. Induksi  untuk  menimbulkan  rasa  nyeri  yaitu  rangsangan  fisis  berupa  panas  yang  berasal  dari  air dalam  penangas  air  yang  sudah  diatur  suhunya,  yaitu  sebesar  40 o C.  Langkah  awal  dilakukan orientasi terlebih dahulu untuk melihat respon hewan uji terhadap rangsangan nyeri, yaitu dengan cara mencelupkan ekor hewan uji ke dalam penangas air, dan dicatat waktu yang diperlukan tikus untuk menjentikkan ekornya keluar dari penangas air yang selanjutnya disebut sebagai data respon waktu terhadap stimulus nyeri. Hasil rata-rata orientasi data respon waktu terhadap stimulus nyeri sebagai respon normal tikus terhadap stimulus nyeri sebesar 2-4 detik. Data respon waktu terhadap stimulus nyeri setelah perlakukan sediaan uji hasil uji efek analgetik dapat dilihat pada tabel I.
Tabel I. Data  Respon  Waktu  terhadap  Stimulus  Nyeri  Sebelum  dan  Setelah  Perlakuan CMC-Na 0,5%, Parasetamol dan Ekstrak Etanol Alfalfa
Kelompok Respon Waktu terhadap Stimulus Nyeri (detik) Sebelum Perlakuan Setelah Perlakuan (Menit ke-) Jentik Normal  SD 10 20 30 60 90 120 150 Rata-
rata  SD CMC-Na 0,5% 2,45  0,42 2,80 2,94 2,63 3,29 3,49 3,10 2,61 2,98  0,08 b Parasetamol 50 mg/KgBB 3,82  0,28 4,13 4,70 5,49 9,60 7,09 6,76 6,51 6,32  0,17 a Ekstrak etanol 50 mg/kgBB 3,38  0,28 3,49 4,53 4,17 5,42 4,95 3,64 3,42 4,23  0,10 ab Ekstrak etanol 100 mg/KgBB 3,67  0,25 3,68 3,76 4,01 8,35 6,51 4,62 3,83 4,96  0,15 ab Ekstrak etanol 200 mg/KgBB 2,94  0,42 4,51 4,70 4,70 9,23 7,01 4,05 3,96 5,45  0,13 ab
Keterangan: a: berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok negatif dengan uji Mann-Whitney b: berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok positif dengan uji Mann-Whitney
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  data  respon  waktu  normal  tikus  terhadap  stimulus nyeri  adalah  berkisar  antara  2,45-3,82  detik.  Perlakuan  CMC-Na  0,5%    pada  tikus  tidak  mampu meningkatkan  respon  waktu  terhadap  stimulus nyeri  yang signifikan  (p>0,05).  Pada  menit  ke-60 dan 90, tikus kelompok kontrol negatif sedikit mengalami peningkatan respon waktu rangsangan

## AA. Hesti Wulan S
stimulus  nyeri.  Hal  ini  bukan  berarti  CMC-Na  0,5  %  dapat  meningkatkan  ambang  nyeri,  namun mungkin disebabkan adanya respon alami tubuh saat mengalami nyeri. Tubuh lama kelamaan akan beradaptasi  dengan  adanya  stimulus  nyeri,  karena  sesungguhnya  tubuh  mempunyai  analgetik alami yaitu senyawa endorphin. Hal ini yang menyebabkan tubuh akan meningkatkan kekuatannya dalam menahan rasa nyeri (Goodman dan Gilman, 2006).
Perlakuan  parasetamol  50  mg/Kg  BB  dan  ekstrak  etanol  alfalfa  (50, 100  dan  200)  mg/Kg BB  mampu  meningkatkan  secara  signifikan  respon  waktu  terhadap  stimulus  nyeri  (p<0,05).  Hal ini sudah mulai terlihat pada menit ke-10 setelah perlakuan sediaan uji. Puncak meningkatnya nilai ambang terhadap nyeri pada tikus yang mendapatkan perlakuan parasetamol 50 mg/KgBB terlihat pada menit ke-60 setelah perlakuan, dengan rata-rata respon waktu terhadap stimulus nyeri paling lama, yaitu sebesar 9,60 detik (gambar 1).
Parasetamol  telah  terbukti  mempunyai  kerja  analgetik  dan  antipiretik,  tetapi  tidak mempunyai  aktivitas  anti-inflamasi.  Parasetamol  atau  asetaminofen  menghambat  sintesis prostaglandin  secara  lemah  dan  tidak  mempunyai  efek  pada  agregasi  platelet  (Stringer,  2009). Parasetamol merupakan salah satu contoh analgetik perifer yang bekerja dengan cara menghambat penerusan  mediator  nyeri  berikatan  dengan  reseptor  yang  ada  di  ujung-ujung  syaraf  perifer (nociceptor) (Tjay dan Rahardja, 2008).
Selanjutnya,  kelompok  perlakuan  yang  memberikan  waktu  rangsangan  stimulus  nyeri terlama  adalah  pemberian  ekstrak  Alfalfa  mulai  dosis  200  mg/kg  BB,  100  mg/kgBB  dan  50 mg/kgBB.  Berdasarkan  hal ini,  ekstrak  etanol alfalfa  terbukti mempunyai efek analgetik,  dengan dosis  efektif  sebesar  200  mg/kgBB.  Berdasarkan  metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini, ekstrak  etanol  alfalfa  200  mg/kgBB  memiliki  efek  analgetik  yang  hampir  sama  dengan parasetamol 50 mg/Kg BB. Diagram perubahan respon waktu terhadap stimulus nyeri sebelum dan sesudah perlakuan dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 1.  Grafik  rata-rata  respon  waktu  terhadap  stimulus  nyeri  tikus  yang  mendapat perlakuan CMC-Na, parasetamol dan ekstrak etanol alfalfa

## Efek Antipiretik Ekstrak Etanol Alfalfa
Efek antipiretik ekstrak etanol alfalfa diuji pada tikus demam yang diinduksi secara kimia dengan 0,2 mL vaksin Difteri Pertusis Tetanus (DPT) secara intramuskular. Data penelitian berupa suhu rektal normal sebelum perlakuan sediaan uji, sehu rektal 60 menit setelah pemberian vaksin DPT  dan  30  menit  setelah  pemberian  sediaan  uji.  Suhu  rektal  diukur  dengan  cara  memasukkan thermometer  digital  ke  dalam  rektal.  Hasil  penelitian  (tabel  II)  menunjukkan  bahwa  suhu  rektal awal  tikus  rata-rata  berkisar  antara  36,04-36,56 o C.  Waktu  puncak  terjadinya  demam  yang disebabkan oleh vaksin DPT yang dihasilkan adalah 60 menit pemberian vaksin DPT. Suhu rektal tikus  setelah  pemberian  vaksin  DPT  dengan  rata-rata  suhu  berkisar  antara  (37,54-38,04) o C. Kenaikan suhu rektal sebesar 1 o C sudah menunjukkan adanya demam pada tikus. Seluruh hewan uji pada masing-masing kelompok perlakuan yang telah mengalami demam, diberi perlakuan CMC-Na 0,5% (kontrol negatif), parasetamol 50 mg/Kg BB (kontrol positif), dan
Uji Efek Analgetik Antipiretik Ekstrak Etanol Alfalfa
ekstrak  etanol  alfalfa  (50,  100  dan  200)  mg/kg  BB  tikus  secara  oral.  Hasil  uji  antipiretik  semua kelompok perlakuan dapat dilihat pada tabel II .
Keterangan: KN : CMC-Na 0,5 % KP : Parasetamol 50 mg/Kg BB EEA 1  : Ekstrak etanol alfalfa 50 mg/Kg BB EEA 2  : Ekstrak etanol alfalfa 100 mg/Kg BB EEA 3  : Ekstrak etanol alfalfa 200 mg/Kg BB
Gambar 2.  Diagram  Perubahan  Respon  Waktu  terhadap  Stimulus  Nyeri    Sebelum  dan Sesudah Perlakuan CMC-Na 0,5%, parasetamol dan ekstrak etanol alfalfa
Tabel II.   Rata-rata  Suhu  Rektal  ( o C)  Tikus  Sebelum  Perlakuan,  Saat  Demam  dan  Setelah Perlakuan CMC-Na0,5%, Parasetamol dan Ekstrak Etanol Alfalfa
Kelompok Suhu Rektal ( °C) Sebelum Perlakuan Setelah Perlakuan Suhu awal  SD Suhu demam (60’ setelah DPT)  SD
T30 T60 T90 T120 T150 T180
Rata-rata setelah perlakuan  SD CMC-Na 0,5% 36,22  0,30 37,78  0,24 37,88 37,96 38,08 38,24 38,32 38,32 38,13 ± 0,15 b Parasetamol 50 mg/Kg BB 36,26  0,39 38,04  0,40 37,88 37,78 37,42 37,08 36,82 36,64 37,27 ± 0,21 a Ekstrak etanol alfalfa 50 mg/Kg BB 36,04  0,19 37,54  0,28 37,4 37,2 36,78 36,56 36,38 36,28 36,77 ± 0,16 ab Ekstrak etanol alfalfa 100mg/Kg BB 36,56  0,24 37,9  0,16 37,66 37,38 36,8 36,48 36,2 35,92 36,74 ± 0,15 ab Ekstrak etanol alfalfa 200mg/Kg BB 36,2  0,21 37,84  0,10 37,6 37,28 36,66 36,22 35,88 35,66 36,55 ± 0,10 ab
Keterangan: a: berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok kontrol negatif dengan uji Schefee b: berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok kontrol positif dengan uji Schefee
Vaksin  DPT  mengandung  bakteri Clostridium  tetani , Corynebacterium  dipteriae dan Bordetella  pertusis yang  telah  diinaktifkan  sehingga  mekanisme  kerjanya  merangsang  tubuh membentuk antibody terhadap penyakit dipteri, tetanus dan pertusis. Menurut Tjay dan Rahardja (2002), perlakuan 0,5 mL DPT pada tikus dan marmot dapat meningkatkan suhu tubuh sampai  38 o C setelah tiga jam penyuntikan. Pada penelitian ini, suhu setelah penyuntikan vaksin DPT tidak sampai mencapai 38 o C. Hal ini mungkin disebabkan karena dosis yang digunakan hanya 0,2 mL. Namun  hewan  uji  dalam  penelitian  ini  sudah  dapat  dikatakan  demam,  karena  menurut  pendapat John et al dalam Sulasmirah (2012) mengatakan bahwa suhu normal tubuh tikus yaitu 37,4 o C. Berdasarkan  tabel  II,  tikus  pada  kelompok  kontrol  negatif  terlihat  terus  mengalami peningkatan  suhu  rektal  seiring  dengan  berjalannya  waktu  pengamatan.  Hal  ini  menunjukkan
2.54 3.82 3.38 3.67 2.94 2.98 6.32 4.23 4.96 5.45 0 1 2 3 4 5 6 7 KN KP EEA 1 EEA 2 EEA 3 R e sp on waktu th d . Stimu lu s n ye ri (d tk) Kelompok Perlakuan Sebelum Perlakuan Setelah Perlakuan AA. Hesti Wulan S
bahwa  hewan  uji  yang  diberi  CMC-Na  0,5%  tetap  dalam  keadaan  demam.  CMC-Na  bukan merupakan obat  antipiretik, namun berguna sebagai suspending agent yaitu  suatu  zat yang dapat mendispersikan ekstrak etanol alfalfa dalam air karena ekstrak etanol alfalfa tidak larut dalam air.
Kelompok  kontrol  positif  menunjukkan  adanya  penurunan  suhu  rektal  setelah  mengalami demam.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  parasetamol  50  mg/Kg  BB  memang  telah  terbukti  secara klinis  sebagai  antipiretik.  Parasetamol  telah  terbukti  mempunyai  kerja  analgetik  dan  antipiretik, tetapi  tidak  mempunyai  aktivitas  anti-inflamasi.  Parasetamol  atau  asetaminofen  menghambat sintesis  prostaglandin  secara  lemah  dan  tidak  mempunyai  efek  pada  agregasi  platelet  (Stringer, 2009).  Parasetamol  merupakan  salah  satu  contoh  analgetik  perifer  yang  bekerja  dengan  cara menghambat penerusan mediator nyeri berikatan dengan reseptor yang ada di ujung-ujung syaraf perifer (nociceptor) (Tjay dan Rahardja, 2008).
Hasil penelitian menunjukkan suhu rektal tikus yang mendapatkan perlakuan ekstrak etanol alfalfa  (50,  100  dan  200)  mg/Kg  BB  lebih  rendah  dari  pada  tikus  kelompok  kontrol  negatif (p<0,05).  Hal  ini  membuktikan  bahwa  ekstrak  etanol  alfalfa  terbukti  memiliki  efek  antipiretik. Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa dosis ekstrak etanol alfalfa 50 mg/Kg BB sudah efektif menurunkan suhu rektal tikus demam yang diinduksi vaksin DPT. Diagram perubahan suhu rektal awal, demam dan sesudah perlakuan sediaan uji dapat dilihat pada gambar 3.
Keterangan: KN : CMC-Na 0,5 % KP : Parasetamol 50 mg/Kg BB EEA 1  : Ekstrak etanol alfalfa 50 mg/Kg BB EEA 2  : Ekstrak etanol alfalfa 100 mg/Kg BB EEA 3  : Ekstrak etanol alfalfa 200 mg/Kg BB
Gambar 3.   Diagram  perubahan  suhu  rektal  tikus  awal  (sebelum  perlakuan),  demam  dan sesudah perlakuan CMC-Na 0,5%, parasetamol dan ekstrak etanol alfalfa

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol Alfalfa ( Medicago sativa ) dapat berefek analgetik dan antipiretik pada tikus putih jantan galur Wistar. Dosis efektif ekstrak etanol alfalfa ( Medicago sativa ) sebagai analgetik- antipiretik sebesar 50 mg/kg BB.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  kami  sampaikan  pada  Kementerian  Pendidikan  dan  Kebudayaan Direktorat  Jenderal  Pendidikan  Tinggi  atas  dana  bantuan  penelitian  melalui  Hibah  Penelitian Dosen Pemula.
36.22 36.26 36.04 36.56 36.2 37.78 38.04 37.54 37.9 37.84 38.13 37.27 36.77 36.74 36.55 34.5 35 35.5 36 36.5 37 37.5 38 38.5 KN KP EEA 1 EEA 2 EEA 3 Su h u R e ktal Tikus ( °C) Kelompok Perlakuan Awal Demam Setelah Perlakuan Uji Efek Analgetik Antipiretik Ekstrak Etanol Alfalfa

## DAFTAR PUSTAKA
El-Radhi  A.S.,  Carroll  J.,  Klein  N.  and  Abbas  A.,  2009, Fever, dalam    El-Radhi  S.A.,  Carroll  J. and  Klein  N.  (Eds.), Clinical  Manual  of  Fever  in  Children ,  Edisi  ke-9,  1-24,  Springer- Verlag, Berlin
Fisher  R.G.  and  Boyce  T.G.,  2005,  Fever  and  Shock  Syndrome,  dalam  Fisher  R.G.  and  Boyce T.G. (Eds.), Moffet’s Pediatric Infectious Diseases: a Problem-Oriented Approach . Edisi ke-4, 318-373, Lippincott William & Wilkins, New York
Goodman  and  Gilman,  2006, The  Pharmacologic  Basis  of  Therapeutics, 11 th Ed ., McGraw-Hill Companies. Inc, New York
Hossinzadeh  H.,  Ramezani  M.,  Fedishei  M.  and  Mahmoudi  M.,  2002,  Antinociceptive,  Anti- Inflammatory and Acute Toxicity Effects of Zhumeria majdae Extracts In Mice and Rats, Phytomedicine, 2002( 9), 135
Kusmita  L.,  Puspitaningrum  I.  dan  Setyani  W.,  2014,  Uji  Efek  Antiinflamasi  Fraksi  Etil  Asetat Ekstrak  Alfalfa  ( Medicago  sativa )  pada  Tikus  Putih  Jantan  yang  Diinduksi  Karagenin, Proseding , Seminar Nasional “Perkembangan Terbaru Pemanfaatan Herbal sebagai Agen Kemopreventif pada Terapi Kanker ”, Universitas Wahid Hasyim, Semarang
Merskey  H.,  1986, Classification  of  Chronic  Pain  Descriptions  of  Chronic  Pain  Syndromes  and Definitions of Pain Terms , Second Edition, IASP Press, Seattle
Rahmayanti dan Sitanggang, 2006, Taklukkan Penyakit dengan Klorofil Alfalfa , PT.Agromedium Pustaka, Jakarta
Ramaswamy  S.,  Pillai  N.P.,  Gopalkrishnan  V.,  Parmar  N.S.  and  Ghosh  M.N.,  1985,  Analgesic Effect of O-(â-hydroxyethyl) Rutoside in Mice, Indian J. Exp. Biol ., 1985 (23), 219
Stringer J.L., 2009, Konsep Dasar Farmakologi , EGC, Jakarta
Sulasmirah,  2012,  Uji  Efek  Antipiretik  Ekstrak  Daun  Durian  ( Durio  zibethinus Murr.)  pada Mencit  ( Mus  musculus )  Swiss  Webster  Jantan, Skripsi ,  Jurusan  Biologi  FMIPA, Universitas Bengkulu.
Tjay  T.H.  dan  Rahardja  K.,  2008, Obat-Obat  Penting ,  Edisi  V,  PT  Elex    Media  Komputindo, Jakarta
Widiastuti, M. 2009. Farmakologi Keperawatan . Jakarta : LIPI
AA. Hesti Wulan S