Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
The Effect of Combination of Golden Berry Leaf ( Physalis angulate L .) and Bay Leaf ( Syzygium polyanthum ) on LDL Levels in White
Rats ( Rattus norvegicus )
Alinnisa 1* , Saryono 2 , Hernayanti 3
1 Student of Nursing Department, Faculty of Health Science, Jenderal Soedirman University 2,3 Lecturer of Nursing Department, Faculty of Health Science, Jenderal Soedirman University Purwokerto, Indonesia Jl. Dr. Soeparno, Karangwangkal, Purwokerto Utara 53123 Tel (0281) 642838 * Corresponding author: alinnisa27600@gmail.com

## Abstract
Elevated levels of Low-Density Lipoprotein (LDL) cholesterol can cause plaque on artery walls and be a contributing factor to myocardial infarction. The purpose of this study was  to  find  out  the  effect  of  giving  water  decoction  combination  of  golden  berry  leaves (Physalis angulate L.) and bay leaves (Syzygium polyanthum) against LDL levels of white rats (Rattus  norvegicus) that  have  induced High-Fat  Diet (HFD)  and  propylthiouracil (PTU). This experimental research study used the pretest-posttest method with a control group design. Use a simple random sampling method with 30 rats. Rats were divided into six treatment groups. Group A was the normal control group, group B was the negative control group, group C combination was 1:1, group D combination was 1:2, group E was 2:1, and group F was the positive control group, treated with simvastatin. LDL cholesterol levels were measured using a spectrophotometer at λ 546 nm. The data will be processed using the One-way ANOVA test followed by Duncan's Post hoc test. There is a significant difference between groups B, C, D, E, and F given HFD and PTU to normal group A. There was a significant reduction in LDL levels in groups C, D, E, and F. The optimal dose of a combination of golden berry leaves and bay leaves that can be given is by a ratio of 1:1 (160mg/200gBB:  720mg/200gBB).  The  group  was  given  boiled  water  a  combination  of golden  berry  leaves  and  bay  leaves  had  the  effect  of  lowering  LDL  levels  better  than simvastatin. The provision of boiled water a combination of golden berry leaves and bay leaves can lower the LDL levels of male white rats given HFD and PTU.
Keywords: Golden Berry Leaf (Physalis angulate L.) , Bay Leaf (Syzygium polyanthum ), LDL Level, White Rats.

## PENDAHULUAN
Kadar kolesterol yang tinggi dalam tubuh ditandai dengan peningkatan kadar low- Density Lipoprotein (LDL) dan trigliserida serta penurunan kadar High-Density Lipoprotein (HDL). Kadar LDL yang tinggi menyebabkan deposisi lipid pada dinding arteri sehingga membentuk plak dan penyakit kardiovaskular aterosklerotik (ASCVD) 1 . Tingginya kadar kolesterol menjadi salah satu faktor risiko terjadinya infark miokard atau serangan jantung.
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
Serangan jantung adalah kondisi berkurangnya suplai oksigen secara signifikan karena adanya pengendapan dan pembentukan plak aterosklerosis pada aliran darah jantung. Kejadian  ini  menyebabkan  jantung  mengalami  kerusakan  sel  secara irreversible dan nekrosis otot. Bagian jantung yang mengalami nekrosis akan berhenti berkontraksi secara permanen dan memerlukan penanganan iskemia yang tepat dan segera. Menurut World Health Organization (WHO) tahun 2016 serangan jantung dan strok bertanggung jawab atas 85% dari 17,9 juta kematian akibat kardiovaskular dan menjadikan penyakit jantung sebagai  penyebab  utama  kematian  di  seluruh  dunia 2 .  Berdasarkan  penjelasan  di  atas, diperlukan penatalaksanaan untuk menurunkan kadar LDL agar dapat mengurangi angka kematian akibat infark miokard.
Saat ini diketahui mengonsumsi obat sintetis konvensional seringkali memiliki efek samping berbahaya yang tidak diinginkan 3 . Dalam upaya untuk menghindari efek samping tersebut,  maka  diperlukan  pengobatan  dengan  bahan  herbal  yang  relatif  aman  dan mudah dicerna oleh tubuh manusia 4 . Selain itu, penggunaan obat herbal sebagai ramuan untuk  mengatasi  berbagai  penyakit  juga  telah  diterima  secara  luas  hampir  di  seluruh dunia.  Secara  empiris  ramuan  tradisional  mampu  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit, namun efektivitas dan kemampuannya belum banyak dibuktikan secara klinis 5 .
Adapun  tanaman  herbal  yang  dikenal  masyarakat  memiliki  banyak  manfaat  yaitu  daun ciplukan dan daun salam.
Bagian  tanaman  ciplukan  dan  daun  salam  telah  diteliti  dalam  bentuk  sediaan tunggal dapat menurunkan kadar LDL. Baik dari bagian tanaman ciplukan dan daun salam mengandung senyawa kimia yang bekerja untuk menurunkan kadar LDL, salah satunya flavonoid.  Senyawa  flavonoid  yang  tinggi  dibutuhkan  dalam  menyumbangkan  atom hidrogen untuk menurunkan oksidasi LDL 6 . Hasil penelitian didapatkan bahwa kandungan
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
senyawa flavonoid paling tinggi ialah pada bagian daun 7 . Dengan menggabungkan daun ciplukan dan daun salam diharapkan penurunan kadar LDL akan lebih efektif dibanding dengan  bentuk  sediaan  tunggal.  Maka  dari  itu,  peneliti  tertarik  mengkaji  pengaruh pemberian kombinasi air rebusan daun ciplukan ( Physalis angulata. L ) dan daun salam ( Syzygium  polyanthum )  terhadap  penurunan  kadar LDL  serum darah  tikus  putih  jantan ( Rattus norvegicus ) yang diberi diet tinggi lemak dan profiltiourasil (PTU).

## METODE

## Alat dan Bahan
Alat  yang digunakan terbagi menjadi 3  yaitu, alat untuk pemeliharaan tikus, alat pemeriksaan kadar kolesterol darah tikus, dan alat pembuatan kombinasi rebusan daun ciplukan dan daun salam. Dalam pemeliharaan tikus alat yang digunakan berupa kandang tikus, tempat/wadah minum, dan sonde. Alat yang digunakan dalam pemeriksaan kadar kolesterol  LDL  tikus  yaitu  Reagen  LDL  kolesterol,  buku  panduan  pemeriksaan  LDL cholesterol,  micropipet  1000uL  dan  10-100uL,  tip  biru,  tip  kuning,  tabung  eppendorf, tabung  EDTA,  spektrofotometer UV-VIS.  Pada pembuatan  kombinasi  air  rebusan  daun ciplukan dan daun salam alat yang dibutuhkan antara lain panci, kombor gas, penyaring, dan gelas ukur.  Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain plasma tikus putih jantan,  air  rebusan  kombinasi  daun  ciplukan  dan  daun  salam,  aquadest,  kuning  telur puyuh, minyak jelantah, lemak sapi, PTU, pakan BR II, dan simvastatin. Dosis Simvastatin umum diberikan adalah 10-40 mg/kgBB manusia. Jika diambil dosis minimalnya adalah 10  mg/kgBB  manusia.  Dikonversi  ke  dosis  tikus  menjadi:  10  mg  x  0.018  =  0.18 mg/200gramBB tikus 5 .
Rancangan Penelitian
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
Penelitian ini menggunakan metode true experimental pretest-posttest with control group  design .  Metode  ini  menerapkan  sistem  randomisasi  sederhana  pada pengelompokan hewan uji coba sejumlah 30 ekor tikus yang dibagi menjadi 6 kelompok. Selain  itu,  kelompok  kontrol  berupa  kontrol  positif  dan  negatif  dengan  perlakuan  dapat diberi dosis bertingkat atau kombinasi perlakuan.

## Analisis Data
Pengelolaan dan analisis data dilakukan dengan menggunakan program komputer yaitu SPSS. Uji normalitas data menggunakan uji Shapiro-wilk dengan hasil sebaran data normal atau p>0.05. Uji homogenitas dengan hasil p>0.05, maka data tersebut dianggap homogen  dan  dapat  mewakili  populasi.  Selanjutnya  dilakukan  uji  hipotesis  dengan menggunakan one-way ANOVA dengan nilai signifikansi p<0.05. Setelah itu, dilanjutkan dengan analisis Post-hoc Duncan . Sedangkan jika data tidak terdistribusi normal, maka data perlu ditransformasikan terlebih dahulu untuk kemudian diuji kembali menggunakan one-way  ANOVA dan post-hoc  Duncan .  Jika  setelah  ditransformasikan  datanya  tetap tidak  terdistribusi  normal  dan  homogen,  maka  dilakukan  uji  alternatif  menggunakan Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan Mann-Whitney .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL

## Rerata LDL Hewan Coba Sebelum Diberikan Intervensi
Tikus  telah  diaklimatisasi  7  hari  dengan  tujuan  menyeragamkan  cara  hidup  dan makanan  sebelum  digunakan  dalam  penelitian.  Pada  hari  ke-8  s.d  hari  ke-21,  tikus diinduksi  HFD  dan  PTU  menggunakan  sonde  lambung  dengan  tujuan  untuk meningkatkan  kadar  kolesterol  LDL.  Kelompok  B,  C,  D,  dan  E  diberikan  HFD  dengan komposisi  yaitu  lemak  sapi,  kuning  telur  puyuh  dan  minyak  jelantah.  Dosis  PTU  yang
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
diberikan yaitu 1ml pada setiap ekor. Pemberian HFD dan PTU dilakukan selama 14 hari pukul 09.00. Semua tikus dihari ke-15 dipuasakan 8 jam dengan hanya diberikan air untuk minum, kemudian dilakukan pengambilan darah untuk pemeriksaan LDL pretest. Kadar LDL pretest diperiksa untuk mengetahui profil lipid pada hewan coba sehingga intervensi dapat dilakukan.
Kadar  LDL  lebih  tinggi  pada  kelompok  perlakuan  dibanding  dengan  kelompok kontrol tanpa diinduksi HFD dan PTU. Hasil rerata pretest menunjukkan bahwa kelompok B,  C,  D,  E,  dan  F  memiliki  nilai  kadar  LDL  pretest  lebih  tinggi  dibanding  kelompok  A.
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  one-way  ANOVA  pada  tingkat  kepercayaan  95% menunjukkan terdapat perbedaan kadar LDL dengan signifikan p=0,000 (p< 0,05) pada minimal satu kelompok uji coba. Hasil yang diperoleh yaitu kadar LDL lebih tinggi pada tikus yang diinduksi HFD dan PTU dibandingkan dengan tikus yang hanya diberi pakan standar (Tabel 1).
Tabel 1 Rerata Kadar LDL Tikus Setelah Diinduksi HFD dan PTU
Kelompok Intervensi n Rerata ± S.D p A Kelompok kontrol normal 4 37,00 ± 3,266 0,000 B Kelompok kontrol negative 4 52,50 ± 3,559 C Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 1 4 63,00 ± 6,164 D Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 2 4 54,25 ± 4,031 E Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 2 : 1 4 57,50 ± 5,447 F Simvastatin 0,18mg/kgBB 4 63,00 ± 6,976
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
Induksi  HFD  dan  PTU  dianggap  berhasil  saat  kadar  LDL  darah  tikus  mencapai >50mg/dL. Dari tabel 4.1 didapatkan rerata kenaikan kadar kolesterol LDL >50mg/dL yang menandakan tikus B, C, D, E dan F terjadi peningkatan kadar LDL setelah diinduksi HFD dan PTU.

## Rerata LDL Hewan Coba Setelah Diberikan Intervensi
Hasil pemeriksaan kadar LDL setelah diberikan intervensi menunjukkan bahwa rata-rata kadar LDL terendah yaitu kelomopok A yaitu 37,50±5.323. Berdasarkan hasil uji  statistik One Way  ANOVA pada  tingkat  kepercayaan  95%  menunjukkan  adanya perbedaan kadar rerata LDL minimal pada satu kelompok uji dengan nilai signifikan p=0,009 (p<0,05) antar tiap kelompok intervensi (Tabel 2)
Tabel 2 Rerata Kadar LDL Setelah Diinduksi Air Kombinasi Daun Ciplukan dan Daun Salam, serta Simvastatin
Kelompok Intervensi n Rerata ± S.D P A Kelompok kontrol normal 4 37.50 ± 5.323 0,009 B Kelompok kontrol negative 4 50.00 ± 3.109 C Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 1 4 41.50 ± 8.544 D Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 2 4 41.00 ± 2.160 E Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 2 : 1 4 43.75 ± 3.500 F Simvastatin 0,18mg/kgBB 4 43.00 ± 4.690
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
Rerata  kadar  LDL  posttest  setelah  dilakukan  uji  lanjutan  post  hoc  Duncan menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signikan antara kelompok C, D, dan F terhadap kelompok A yang merupakan kelompok normal. Namun kelompok E dan F tidak berbeda nyata terhadap kelompok B. (Tabel 3).
Tabel 3 Hasil Analisis Duncan Kadar LDL Posttest
Subset for alpha = 0,05 Kelompok N 1 2 3 Duncan Kelompok A 4 37.50 Kelompok D 4 41.00 41.00 Kelompok C 4 41.50 41.50 Kelompok F 4 43.00 43.00 43.00 Kelompok E 4 46.25 46.25 Kelompok B 4 50.59 Sig .187 .207 .069

## Selisih Rerata Kadar LDL sebelum dan Setelah Diberikan Perlakuan.
Nilai  selisih  rerata  kadar  LDL  diperoleh  dari  hasil  rerata  kadar  LDL  pretest dikurangi  dengan  hasil  rerata  kadar  LDL  posttest.  Data  selisih  kadar  LDL  tiap kelompok  diuji  normalitas  dan  homogenitasnya.  Hasil  uji  one-way  ANOVA  dengan hasil  signifikansi  p=0,000  (p<0,05)  didapatkan  rerata  selisih  penurunan  kadar  LDL paling besar terdapat pada kelompok C (perlakuan kombinasi dengan perbandingan 1:1)  yaitu  sebesar  21,25  mg/dL  dibandingkan  dengan  kelompok  D  (Perlakuan kombinasi dengan perbandingan 1:2), kelompok E (kombinasi 2:1), dan kelompok F (simvastatin) (Tabel 4).
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY

## Tabel 4 Rerata Selisih Kadar LDL
Pretest dan Posttest Kelompok Intervensi n Rerata ± S.D P A Kelompok kontrol normal 4 -0.75 ± 2.500 0,000 B Kelompok kontrol negative 4 2.00 ± 0.000 C Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 1 4 21.25 ± 8.098 D Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 1 : 2 4 12.75 ± 3.594 E Kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam 2 : 1 4 14.50 ± 4.655 F Simvastatin 0,18mg/kgBB 4 13.25 ± 2.630
Rerata selisih kadar LDL Pretest dan posttest setelah dilakukan uji lanjutan post hoc  Duncan  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  nyata  penurunan  kadar LDL pada kelompok A dengan B. Tidak terdapat perbedaan nyata antar kelompok D, E, dan F. Sedangkan, kelompok C berbeda nyata dengan kelompok A, B, D, E, dan F (Tabel 5).
Table 5 Rerata Selisih Kadar LDL Pretest dan Posttest
Subset for alpha = 0,05 Kelompok N 1 2 3 Duncan Kelompok A 4 -0.75 Kelompok B 4 2.00 Kelompok D 4 12.75 Kelompok F 4 13.25 Kelompok E 4 14.50
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
Kelompok C 4 21.25 Sig .383 .597 1.000

## PEMBAHASAN

## Pengaruh pemberian Pakan Tinggi Lemak (High Fat Diet) dan PTU terhadap Kadar LDL

## Hewan Coba
Pemberian HFD dengan komposisi lemak sapi, kuning telur puyuh dan minyak jelantah.  Pakan  tinggi  lemak  yang  diberikan  pada  kelompok  perlakuan  dapat meningkatkan  kadar  lipid  hewan  coba.  Kandungan  Trigliserida  dan  kolesterol  yang berasal  dari  induksi  HFD  akan  diserap  oleh  usus  melalui  jalur  endogen.  Sebelum memasuki  sel  serap  usus  atau  enterosit,  trigliserida  akan  terpecah  menjadi  asam lemak  bebas  dan  monogliserida.  Sedangkan  kolesterol  diubah  menjadi  kolesterol ester.  Didalam  enterosit,  lipid  makanan  dimasukan  ke  dalam  partikel  lipoprotein spesifik yang disebut dengan kilomikron dan menuju ke aliran darah. Di dalam aliran darah  sebagian  kilomikron  trigliserida  dilepas  ke  jaringan  adiposa,  sedangkan kilomikron remnant yang memiliki sedikit kandungan trigliserida akan dibawa menuju hati 8 . Pada metabolisme lipid jalur eksogen kolesterol Very Low-Density Lipoprotein (VLDL) yang terbentuk di hepar memiliki fungsi mengangkut trigliserida dari intestinal menuju jaringan adiposa dan otot rangka. Sedangkan LDL terbentuk dari plasma IDL yang memiliki lebih banyak kolesterol ester dibandingkan dengan trigliserida 9 .
Propiltiourasil adalah obat anti-tiroid sebagai bahan tambahan induksi yang diberikan bersamaan  dengan  pemberian  HFD.  Salah  satu  fungsi  dari  hormone  tiroid  yang dihasilkan  tubuh  adalah  mengatur  metabolisme  lipid  secara  signifikan  dan menstimulasi  sintesis  kolesterol  hepatic  de  novo  dengan  menginduksi koenzim 3-
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
hydroxy-3-methylglutaryl  A (HMG-CoA) reductase dan  mengakatalase  HMG-CoA menjadi mevalonate sebagai bentuk awal dari biosintetis kolesterol. Sekresi kolesterol dan trigliserid oleh hati, masuk ke pembuluh darah dengan berikatan dengan fosfolipid dan apoB-100 membentuk kolesterol VLDL. Trigliserida dari VLDL akan terhidrolisis berulang  kali  oleh  enzim Lipoprotein  Lipase (LPL)  membentuk  LDL  dalam  tubuh.
Induksi PTU akan menyebabkan peningkatan biosintesis kolesterol yang berdampak pada banyaknya kadar koleseterol LDL yang terbentuk dalam darah 10 .
Pemberian  HFD  dan  PTU  menyebabkan  akumulasi  kadar  LDL dalam  darah. Kadar LDL tinggi pada sistem metabolik akan menyebabkan LDL teroksidasi (OxLDL). Proses  oksidasi  terjadi  apabila  kolesterol  LDL  ditangkap  oleh  resptor  scavenger-A (SR-A)  makrofag.  Oksidasi  LDL  dapat  memicu  terjadinya  aterosklerosis  dengan menginduksi  pembentukan  sel  busa  makrofag  yang  mengakumulasi  lipid  (yang dimodifikasi)  dan  menghasilkan  respons  inflamasi.  Akumulasi  sel  inflamasi  endotel akan  menebalkan  di  dinding  pembuluh  darah 11 .  Pemberian  HFD  dan  PTU  dapat meningkatkan kadar LDL tikus putih pada kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok normal (Tabel 4.1)
Pengaruh  Pemberian  Kombinasi  Daun  Ciplukan  dan  Daun  Salam,  serta

## Simvastatin terhadap Kadar LDL Hewan Coba
Pada  hasil  uji one-way  ANOVA rerata  selisih  kadar  LDL  didapatkan  bahwa kelompok  C  yang  diberikan  air  rebusan  kombinasi  daun  ciplukan  dan  daun  salam dengan dosis 1:1 mengalami penurunan kadar LDL yang lebih banyak dibandingkan dengan kelompok D dengan dosis 1:2 dan kelompok E dengan dosis 2:1. Kelompok C  yang  diberikan  kombinasi  air  rebusan  daun  ciplukan  dan  daun  salam  dapat
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
menurunkan  kadar  LDL  cukup  tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  F  yang  diberi perlakuan simvastatin. Hal ini dibuktikan melalui post hoc Duncan pada rerata selisih kadar LDL menunjukkan kelompok C berbeda nyata dengan kelompok D, E, dan F. Dari  data  tersebut,  didapatkan  bahwa  dosis  yang  diberikan  pada  kelompok  C merupakan dosis optimal sehingga sudah bisa memberikan efek farmakologis.
Daun  ciplukan  mengandung  flavonoid  sebanyak  6,83mg/g,  sedangkan  daun salam memiliki senyawa flavonoid quersetin sebanyak 15,66 QE/g. Dalam penelitian ini,  dosis  1:1  atau  160mg/200gBB:  720mg/200gBB  lebih  baik  dalam  menurunkan kadar  LDL.  Dosis  1:  2 atau  160mg/200gBB:  1.440mg/200gBB  kurang  efektif  dalam menurunkan  kadar  LDL  pada  tikus  dikarenkan  terlalu  banyak  daun  salam  yang digunakan  tidak  menghasilkan  kandungan  senyawa  yang  semakin  besar.  Pada penelitian  Yulinar  et  al.  (2020)  kandungan  senyawa  flavonoid  pada  pembuatan pudding daun salam dengan 3 ukuran yaitu 10g, 20g, dan 30g, didapatkan senyawa flavonoid  yang  terbanyak  ada  pada  20g  yaitu  12,9  mg  qe/g,  dibandingkan  dengan dosis 10g dengan kandungan flavonoid 6,5 mg qe/g dan dosis 30g sebanyak 5,10 mg qe/g. Sama halnya dengan dosis 2 :1 kurang maksimal dalam menurunkan kadar LDL dalam darah walaupun terdapat daun ciplukan yang lebih banyak. Menurut Brunton et al.  dalam 13 banyaknya  dosis  tidak  akan  menambah  efek  terapi  yaitu  dikarenakan terdapat kejenuhan respon terapi yang dapat berdampak pada penurunan efek terapi. Terjadinya kejenuhan ini disebabkan jika larutan memiliki zat terlarut dengan jumlah maksimum,  sehingga  terjadi  ketidakseimbangan  partikel  yang  tidak  terlarut.  Oleh karena  itu,  semakin  besar  konsentrasi  ekstrak  maka  koefisien  difusi  juga  semakin
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
besar, sehingga difusi obat semakin menurun. Dalam penelitian ini dosis penggunaan daun ciplukan dan daun salam yang disarankan yaitu dengan dosis 1:1.
Dosis  simvastatin  0,18mg/200gBB  yang  diberikan  pada  kelompok  F  memiliki efek penurunan kadar LDL yang kurang optimal dikarenakan pemberian simvastatin dilakukan pada pagi hari. Obat simvastatin memiliki waktu kerja hanya selama 2 jam, sehingga  pemberian  akan  lebih  efektif  diberikan  di  waktu  yang  bersamaan  dengan terjadinya  sintesis  kolesterol  yaitu  pada  malam  hari  sebelum  tidur.  Hal  ini  selaras dengan  penelitian  Asih  (2021)  yang  membandingkan  penggunaan  obat  statin  pada pagi  hari  dan  malam  hari  pada  18  pasien  di  RSUD  dr  Soekardjo  Tasikmlaya didapatkan hasil penggunaan obat golongan statin lebih baik digunakan pada malam hari.
Mekanisme  kerja  air  rebusan  daun  ciplukan  dan  daun  salam  dalam menurunkan kadar LDL yaitu melalui proses sintesis kolesterol. Kandungan senyawa yang  terdapat  pada  kedua  bahan  bekerja  dengan  meningkatkan  laju  ekskresi kolesterol. Air rebusan kombinasi daun ciplukan dan daun salam dapat menghambat kadar  LDL  hewan  coba  karena  daun  ciplukan  mengandung  senyawa  aktif  yaitu flavonoid, saponin, dan polifenol. Sedangkan pada daun salam terkandung senyawa aktif  berupa  flavonoid  (quercetin,  katekin  dan  rutin),  polifenol,  saponin,  tanin,  serta vitamin B3.
Mekanisme kerja senyawa flavonoid dalam daun ciplukan dan daun salam yaitu dengan  menekan  aktivitas  enzim  HMG-CoA reductase yang  terlibat  dalam  proses sintesis  kolesterol  plasma. Epigallocatechin-gallate atau  katekin  menghambat  kerja HMG-CoA reduktase in  vitro dalam  mengatasi  hiperkolesterolemia.  Senyawa
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
flavonoid dapat bekerja pada adiposit (mengurangi viabilitas dan proliferasi), menekan akumula si trigliserida, merangsang terjadinya lipolisi dan β-oksidasi asam lemak yang akan mengubah asam lemak menjadi Adenosine Triphospat (ATP), serta mengurangi terjadinya  inflamasi.  Senyawa  flavonoid  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan  cara menyumbangkan ion hidrogen yang akan menangkal dan menetralisir radikal bebas 9 .
Hal  tersebut  selaras  dengan  penelitian  Fatimah  et  al.  (2019)  yang  menyatakan kandungan flavonoid pada buah sirsak dapat menurunkan kadar kolesterol LDL pada tikus putih dengan dosis 0,25mg/gBB.
Kandungan senyawa flavonoid pada daun salam berjenis quercetin. Quercetin mampu  menonaktifkan Reactive  Oxygen  Species (ROS)  dengan  menetralkan oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL) dan melemahkan jalur pensinyalan Role of the  Toll-like  Receptor-4 (TLR4/NF- κB)  dalam  sel  endotel,  sehingga  mengurangi proses  inflamasi.  Pada  penelitian  Mbikay  et  al.  (2018)  yang  menyatakan  bahwa penggunaan  quercetin  pada  tikus  yang  diinduksi High  Colesterol  Diet (HCD)  dapat mengatur Proprotein  Convertase  Subtilisin/Kexin  Type  9 (PCSK9)  ekspresi  dan sekresi,  membalikkan  steatohepatitis,  hiperlipidemia,  dan  hyperinsulinemia  yang disebabkan oleh diet. Selain itu, quercetin dapat meningkatkan penyerapan kolesterol secara seluler melalui reseptor LDL di hati.
Senyawa  antioksidan  polifenol  dari  daun  ciplukan  dan  daun  salam  berperan penting  dalam  mengahambat  pembentukan  kolesterol  LDL.  Senyawa  ini  bekerja dengan  cara  menurunkan  aktivitas Microsomal  Transfer  Protein (MTP)  dan Acetyl- Coenzyme  A  acetyltransferase (ACAT)  yang  menyebabkan  terjadinya  penurunan penyerapan trigliserida dan kolesterol. Apoliprotein B-100 merupakan struktur protein
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
pembentuk  VLDL,  IDL,  dan  LDL.  Penurunan  jumlah  trigliserida dan  kolesterol akan menyebabkan penurunan jumlah Apo B-100 yang berpengaruh terhadap kadar LDL 16 .
Hal  ini  selaras  dengan  penelitian  Hidajat  et  al.  (2020)    yang  menyatakan  bahwa kandungan  polifenol  dalam  daun  jati  belanda  menurunkan  sekresi  lipoprotein  yang terdapat  di  hepar  dan  usus.  Selain  itu,  polifenol  juga  mengurangi  eskterifikasi kolesterol  sehingga  menurunkan  kadar  ester  kolesterol  (komponen  pembentuk VLDL),  serta  menghambat  sintesis Apo  B-48 dan Apo  B-100 yang  menurunkan pembentukan kilomikron, VLDL, IDL dan LDL.
Senyawa  Alkaloid  yang  terkandung  dalam  daun  ciplukan  bekerja  dengan penghambatan  enzim  lipase  pankreas  sehingga  sekresi  lemak  meningkat  melalui feses  yang  menurunkan  daya  serap  lemak  oleh  hati  sehingga  lemak  tidak  diubah menjadi  kolesterol.  Enzim  lipase  pankreas  yang  rendah  mengurangi  deposit trigliserida usus halus yang disebabkan enzim lipase pankreas memecah trigliserida menjadi  2-monogliserid  dan  2-asam  lemak  bebas  yang  dapat  masuk  melalui pembuluh darah 18 . Selain itu, senyawa saponin pada daun ciplukan bekerja dengan berikatan dengan garam empedu akibat adanya siklus enterohepatik sehingga garam empedu  tidak  diserap  dan  dikeluarkan  bersamaan  dengan  feses.  Saponin menghambat penyerapan lemak oleh usus dengan dihambatnya aktivitas enzim lipase pankreas  yang  bergantung  pada  ketersediaan  garam  empedu  untuk  mengubah trigliserida menjadi asam lemak dan gliserol yang terpisah. Hal ini, pengikatan garam empedu  oleh  saponin  akan  memengaruhi    jumlah  lipid  pengangkut  trigliserida  yaitu VLDL, IDL, dan LDL 19 . Hal ini selaras dengan penelitian Rahmawati (2020) kandungan alkaloid  pada Cordyline  fruticosa  L.A  Cheval ,  dapat  menurunkan  kadar  kolesterol
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
dengan menghambat penyerapan enzim lipase sehingga meningkatkan sekresi lemak melalui feses dan berakibat pada terhambatnya penyerapan lemak di hati.
Pada  daun  salam  terdapat  senyawa  tanin  yang  mengikat  protein  tubuh  dan melapisi  dinding  usus  sehingga  menghambat  lemak  untuk  diserap.  Tanin  bekerja dengan  melakukan  proses  pemadatan  lapisan  mukus  saluran  cerna  sehingga penyerapan  zat  makanan  termasuk  kolesterol  dihambat  oleh  saluran  pencernaan. Selain itu, tanin juga menstimulasi metabolisme glukosa dan lemak, sehingga dapat menghindari  pengendapan  glukosa  dan  lemak  dalam  darah.  Proses  ini  dapat menurunkan kolesterol dan glukosa dalam darah 21 . Pada penelitian Fatimah (2019), menyebutkan bahwa kandungan lain dalam buah sirsak yaitu tanin dapat menurunkan kadar LDL dengan cara bereaksi dengan mukosa protein.
Selain  itu,  daun  salam  memiliki  kandungan  vitamin  B3  ( niacin )  yang  bekerja untuk  menekan  perubahan  dan  menekan  pembuangan Apo-A1 selaku  prekusor pembentukan HDL. Apoliprotein-A1 merupakan senyawa yang ikut membentuk pre- beta HDL dan selanjutnya diubah menjadi alpha-HDL matur melalui proses esterifikasi kolesterol  bebas  menjadi  ester  kolesterol  dengan  bantuan  enzim  lesitin-kolesterol. asiltransferase.  Agar  kadar  HDL  selalu  lebih  besar  dari  LDL,  maka  vitamin  B3 mengurangi pembentukan VLDL yang disintesis di hati, yang dengan demikian akan mengurangi  kadar  LDL  dalam  darah 22 .  Hal ini  juga  didukung  oleh  penelitian  Fitriani (2021) yang menyatakan bahwa terkandung vitamin B3 pada daun salam yang dapat menurunkan produksi VLDL,IDL, dan LDL.

## KESIMPULAN
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
1.  Pemberian HFD dan PTU pada kelompok perlakuan dapat meningkatkan kadar LD kelompok B, C, D, E dan F.
2.  Pemberian air rebusan kombinasi daun ciplukan dan daun salam dengan dosis 1:1 terbukti dapat menurunkan kadar LDL sebesar 21.25±8.098mg/dL.
3.  Pemberian air rebusan kombinasi daun ciplukan dan daun salam dengan dosis 1:2 terbukti dapat menurunkan kadar LDL sebesar 12.75±3.594mg/dL.
4.  Pemberian air rebusan kombinasi daun ciplukan dan daun salam dengan 2:1 terbukti dapat menurunkan kadar LDL sebesar 14.50 ± 4.655mg/dL.
5.  Pemberian  simvastatin  dengan  dosis  0,18mg/200gBB  dapat  menurunkan kadar LDL sebesar 13.25 ± 2.630mg/dL
6.  Pemberian kombinasi air rebusan daun ciplukan dan daun salam dengan dosis 1:1 dapat menurunkan kadar LDL lebih baik dari pada kelompok yang diberikan simvastatin.
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY

## DAFTAR PUSTAKA
1. Jackson CL, Zordok M, Kullo IJ. American Journal of Preventive Cardiology Familial hypercholesterolemia in Southeast and East Asia. 2021;6(February).
2. He  L,  Chen  X.  Cardiomyocyte  Induction  and  Regeneration  for  Myocardial  Infarction Treatment:  Cell  Sources  and  Administration  Strategies.  Adv  Healthc  Mater. 2020;9(22):1 –24.
3. Yuwindry I. Pemberdayaan Masyarakat Peso (Pintar Efek Samping Obat) dalam Upaya Penerapan  Farmakovigilans  di  Masyarakat  dengan  Menggunakan  Media  Video Edukasi. J Pengabdi Farm Malahayati. 2018;3(2):23 –7.
4. Maqbool M, Dar M, Gani I, Mir S, Khan M. Herbal Medicines As an Alternative Source of Therapy: a Review. World J Pharm Pharm Sci. 2019;8(2):374 –80.
5. Afriyeni  H,  Surya  S.  Efektivitas  Antihiperkolesterolemia  Ekstrak  Etanol  Dari  Bagian Batang  Dan  Buah  Tumbuhan  Ciplukan  (  Physalis  Angulata  L  .)  pada  Tikus  Putih Hiperkolesterolemia. J Farm Higea. 2019;11(1).
6. Ganesan K, Xu B. Polyphenol-rich dry common beans (Phaseolus vulgaris L.) and their health benefits. Int J Mol Sci. 2017;18(11).
7. Ramadhan H, Rezky DP, Susiani EF. Penetapan Kandungan Total Fenolik-Flavonoid pada Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Kasturi (Mangifera casturi Kosterman). J Farm Dan Ilmu Kefarmasian Indones. 2021;8(1):58.
8. Hokkanen K, Tirronen A, Ylä-Herttuala S. Intestinal lymphatic vessels and their role in chylomicron absorption and lipid homeostasis. Curr Opin Lipidol. 2019;30(5):370 –6.
9. Sulistyowati E, Widyaningrum I, Sulistyowati E. Efek Antihiperlipidemia Alang-Alang ( Imperata cylindrica ) dan Senyawa Aktifnya :Review Sistematik. J Bio Komplementer Med. 2020;1 –5.
10. Prumnastianti  G,  Santoso  SD,  Santosa  RI.  Hubungan  Gangguan  Fungsi  Tiroid Terhadap Kadar LDL-Kolesterol. J SainHealth. 2021;5(2):6 –12.
11. Kumar  A,  Gupta  P,  Rana  M,  Chandra  T,  Dikshit  M,  Barthwal  MK.  Role  of  pyruvate kinase M2 in oxidized LDL-induced macrophage foam cell formation and inflammation.
J Lipid Res [Internet]. 2020;61(3):351 –64. Available from: http://dx.doi.org/10.1194/jlr.RA119000382
12. Yulinar AD, Sanubari TPE, Nugroho KPA. Kajian awal formulasi puding modifikasi daun salam untuk lansia berdasarkan kandungan flavonoid dan uji sensori (tekstur, warna, dan aroma). Ilmu Gizi Indones. 2020;3(2):163.
13. Sari W, Safitri F, Fithri A, Amirsyah M. Potensi Antidiabetik Ekstrak Etanol Kulit Buah Rambai ( Baccaurea motleyana Muell . Arg ) terhadap Kandungan Glikogen Hati Mencit Diabetik  Aloksan  The  Antidiabetic  Potency  From  Ethanol  Extract  of  Rambai  Peel  ( Baccaurea motleyana Muell . Arg ) Againts Mic. J bioleuser. 2018;2(3):78 –85.
Oceana Biomedicina Journal ocean-biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal
eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
RESEARCH STUDY
14. Asih RS, Alifiar I, Purwandy Y. Pengaruh Kronofarmakologi Terhadap Kadar Kolesterol Total  Dan  Trigliserida  Dalam  Darah  Pasien  Pengguna  Obat  Golongan  Statin  Dan Fibrat. JFL J Farm Lampung. 2021;9(2):78 –83.
15. Fatimah S, Arisandi D, Sismawati S. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Buah Sirsak (Annona muricata L.) Pada Kadar Kolesterol Low Density Lipoprotein (LDL) Tikus Putih (Rattus norvegicus) Hiperkolesterolemia. Biomedika. 2019;12(2):167 –74.
16. Lau  R,  Prabowo  S,  Riami.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Anggur  Laut  terhadap Penurunan Kadar Kolesterol LDL Rattus norvegicus Jantan yang Mendapat Diet Tinggi Lemak. Hang Tuah Med J. 2020;17(2):192.
17. Hidajat  M,  Aman  IGM,  Sukoco  H,  Siswanto  FM.  Ekstrak  Etanol  Daun  Jati  Belanda (Guazuma ulmifolia Lamk) Memperbaiki Profil Lipid Tikus (Rattus norvegicus) Wistar Jantan Dislipidemia. J Sains dan Teknol Peternak. 2020;1(1):25 –30.
18. Lestari RD, Lokapirnasari WP, Al Arif MA, Hidanah S, Soeharsono S, Lamid M. The Effect of Additional Feed Fermentation of Moringa Oleifera Leaves on The Cholesterol Level of Mojosari Laying Ducks. J Med Vet. 2021;4(2):221.
19. Navarro  Del  Hierro  J,  Casado-Hidalgo  G,  Reglero  G,  Martin  D.  The  hydrolysis  of saponin-rich  extracts  from  fenugreek  and  quinoa  improves  their  pancreatic  lipase inhibitory activity and hypocholesterolemic effect. Food Chem [Internet]. 2021;338(May 2020):128113. Available from: https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2020.128113
20. Rahmawati D. Hubungan Pemberian Ekstrak Cordyline fruticosa L.A Cheval Terhadap Penurunan Kolesterol Tikus Putih. J Farm Udayana. 2020;2030(Riskesdas 2018):152.
21. Sinaga  E,  Suprihatin,  Yenisbar,  Iswahyudi  M,  Setyowati  S,  Prasasty  VD.  Effect  of supplementation of Rhodomyrtus tomentosa fruit juice in preventing hypercholesterolemia  and  atherosclerosis  development  in  rats  fed  with  high  fat  high cholesterol  diet.  Biomed  Pharmacother  [Internet].  2021;142(July):111996.  Available from: https://doi.org/10.1016/j.biopha.2021.111996
22. Zhou  R,  Stouffer  GA,  Smith  SC.  Targeting  the  Cholesterol  Paradigm  in  the  Risk Reduction for Atherosclerotic Cardiovascular Disease: Does the Mechanism of Action of  Pharmacotherapy  Matter  for  Clinical  Outcomes?  J  Cardiovasc  Pharmacol  Ther. 2021;26(6):533 –49.
23. Fitriani  D.  Syzygium  Polyanthum  Extract  as  A  Therapy  for  Dyslipidemia  Satya Agusmansyah. Open Access Indones J Med Rev. 2021;1(5):49 –52.