Journal of Parasite Science                                                                                         Vol.3  No.1  Maret 2019 eISSN : 2656-5331 , pISSN : 2599-0993
The Anthelmintics Activity of Ethanol Extract of African Leaf ( Vernonia amygdalina ) on Mortality of Fasciola gigantica in Vitro
Aktivitas Anthelmintika Ekstrak Etanol Daun Afrika ( Vernonia amygdalina ) terhadap Mortalitas Fasciola gigantica Secara in Vitro
1) Dhio Asmaydo, 2) Iwan Sahrial Hamid, 3) Kusnoto, 2) Muhammad Sukmanadi, 3) Endang Suprihati
1) Student, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga
2) Department of Basic Veterinary Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga
3) Department of Veterinary Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga.
Received : 20-02-2019 , Accepted : 10-03-2019 , Published : 19-03-2019

## Abstract
The  Aims  of  this  study  is  to  know  the  anthelmintics  activity  of  ethanol  extract  of african leaf ( Vernonia amygdalina ) on mortality of Fasciola gigantica in Vitro. Method that used in the research was a completely randomized design. There were five treatments and each treatment was done in four replications. This research used ten Fasciola gigantica in each  treatment  for  all  replications.  The  observation  and  recording  of  dead Fasciola gigantica was done at 2, 4, 6, 8, and 10 hours. Fasciola gigantica were declared dead if there was no movement when disturbed by anatomy tweezers and when dipped in slightly warm water (50 0 C). The obtained  data was analyzed using ANOVA  and  continued with  Duncan Multiple Range Test. The result of this research show that ethanol of extract of African Leaf ( Vernonia amygdalina ) has activity anthelmintic on mortality of Fasciola gigantica in Vitro. Ethanol extract african leaf ( Vernonia amygdalina ) with concentration of 1.4% is the optimal concentration of anthelmintics. This higher the concentration of the extract, the higher the property of anthelmintics.
Keywords: Vernonia amygdalina, anthelmintic, Fasciola gigantica

## Pendahuluan
Perendaman Fasciola gigantica mengguna- kan  ekstrak  etanol  daun  Afrika  ( Vernonia amygdalina ) belum banyak diteliti. Parasit yang digunakan dalam penelitian ini adalah Fasciola gigantica.  Parasit  ini  merupakan  subjek  yang merugikan  pada  stadium  dewasa  sehingga peneliti  ingin  mengetahui  apakah  terdapat aktivitas  anthelmintika  ekstrak  etanol  daun Afrika  ( Vernonia  amygdalina )  terhadap  morta- litas Fasciola gigantica secara in Vitro .
Endoparasit  fasciolosis  cukup  menimbul- kan  masalah  dalam  bidang  peternakan  yang disebabkan  oleh  cacing  hati  ini,  hewan  ternak yang dapat terinfeksi oleh cacing hati ini antara lain sapi, kerbau, kambing dan domba. Kerugi- an  ekonomi  akibat  fasciolosis  di  Indonesia akibat pembua-ngan organ hati sapi yang terin- feksi Fasciola  gigantica mencapai  28,28  miliar rupiah (Budiono, dkk 2018).
Secara umum patogenesis dan gejala klinis fasciolosis  tergantung  dari  jumlah  dan  tahap perkembangan  cacing  di  hepar  serta  tingkat kerusakan  pada  organ  hepar.  Kejadian  infeksi
dimulai  dari  masuknya  metaserkaria  ke  dalam tubuh  inang  definitif  melalui  makanan  atau minuman  yang  terkontaminasi,  kemudian metaserkaria  masuk  ke  dalam  usus  terus menembus  mukosa  usus  dan  masuk  ke  rongga abdomen dan bermigrasi menuju hepar. Akibat yang  ditimbulkan  oleh  cacing  dewasa  ini  yaitu rusaknya jaringan organ hepar, rusaknya paren- kim  hati  hingga  mengakibatkan  perdarahan, dan  rusaknya  epitel  saluran  empedu  sehingga terbentuknya cirrhosis hepatitis.
Penggunaan  anthelmintika  adalah  efektif untuk pengobatan fasciolosis, namun obat yang beredar  adalah  obat  sintetik  yang  mempunyai berbagai masalah karena anthelmintika tersebut  memiliki  toksisitas,  apabila  produk yang  berasal  dari  ternak  ini  dikonsumsi  oleh manusia  dapat  menimbulkan  ancaman  serius bagi  kesehatan  manusia  (Adate  dkk.,  2012). Penelitian  saat  ini  banyak  yang  memanfaatkan tanaman  obat  herbal,  yang  memiliki  tujuan untuk  menguji  efek  dalam  mencegah  dan mengatasi  penyakit  infeksi  yang  disebabkan oleh cacing. Daun Afrika ( Vernonia
amygdalina )  merupakan  salah  satu  tanaman yang  bermanfaat  sebagai  tanaman  obat. Vernonia  amygdalina adalah  tumbuhan  semak yang  berasal  dari  benua  Afrika  dan  bagian  lain dari  Afrika,  seperti  Nigeria,  Kamerun,  dan Zimbabwe dan negara beriklim tropis lainnya.
Senyawa  yang  berperan  sebagai  aktivitas anthelmintika adalah saponin, tannin, dan flav- onoid. Menurut Munthe (2011), saponin bekerja dengan cara menghambat kerja enzim kolines- terase.  Enzim  ini  berperan  menjaga  agar  otot, kelenjar, dan syaraf dalam tubuh dapat bekerja teratur apabila enzim kolinesterase tidak dapat melaksanakan tugasnya dalam tubuh maka otot cacing  akan  berkontrasi  terus-menerus  tanpa dapat  dikendalikan.  Hal  ini  menyebabkan penumpukan  asetilkolin  sehingga  otot  cacing mengalami  hiperkontraksi  dan  menyebabkan kematian pada cacing (Kuntari, 2008). Senyawa tannin  menpunyai  daya  anthelmintika  dengan cara  menganggu  pembentukan  energi  dengan menghambat  fosforilasi  oksidatif  (Salhan  dkk., 2011).  Senyawa  flavonoid  mempunyai  daya  an- thelmintika  dengan  cara  menganggu  impuls saraf dan keseimbangan cacing sehingga meng- alami  paralisa  dan  akhirnya  mati  (Fitriana, 2008).

## Materi dan Metode Penelitian
Tahap  Pembuatan  Ekstrak  Daun  Afrika ( Vernonia amygdalina ) Pembuatan ekstrak daun Afrika ( Vernonia amygdalina )  dilakukan  di  Fakultas  Kedokteran Hewan,  Universitas  Airlangga.  Metode  yang  di gunakan adalah teknik ekstrak maserasi dengan menggunakan  pelarut  etanol  teknis  96%  se- hingga  akan  didapat  ekstrak  dalam  bentuk padat yang dapat ditimbang.
Pembuatan ekstrak daun Afrika dilakukan di Laboratorium Farmakologi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga. Daun Afrika sebanyak 5000 gr dicuci bersih, dipotong kemudian dikeringkan dengan cara  diangin-anginkan  terlindung  dari  sinar matahari  langsung.  Setelah  kering  daun dihaluskan  kemudian  diayak  hingga  diperoleh bentukan  simplisia  halus.  Serbuk  daun  Afrika dimaserasi  dengan  cara  ditambahkan  pelarut etanol  96%  dan  didiamkan  selama  24  jam setelah  itu  disaring.  Residu  dimaserasi  ulang sebanyak  tiga  kali.  Filtrat  yang  terkumpul kemudian  diuapkan  menggunakan  rotavapor dengan water bath bersuhu 50ºC, kecepatan 70 rpm,  dan  tekanan  0,7  bar  sehingga  diperoleh ekstrak kental daun afrika yang siap digunakan. Ekstrak  yang  dihasilkan  disimpan  pada  suhu
4ºC  hingga  digunakan  (Bachaya  dkk.,  2009; Mahardika dkk., 2017; Qurrota, 2016).

## Tahap Perlakuan
Penelitian  ini  menggunakan  5  perlakuan dengan masing - masing 4 ulangan yaitu P0, P1, P2,  P3  dan  P4.  P0  adalah  kelompok  kendali negatif,  cacing  direndam  dengan  laruta  NaCl fisiologis,  P1  adalah  kelompok  kendali  positif, cacing direndam dengan larutan Nitroxynil 2%, P2  adalah  kelompok  perlakuan  cacing  yang direndam  dengan  ekstrak  etanol  daun  Afrika konsentrasi  0,35%,  P3  adalah  kelompok perlakuan  cacing  yang  direndam  dengan ekstrak etanol daun Afrika konsentrasi 0,7%, P4 adalah  kelompok  perlakuan  perlakuan  cacing yang  direndam  dengan  ekstrak  etanol  daun Afrika konsentrasi 1,4%.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  perhitung- an  berupa  jumlah  kematian Fasciola  gigantica kemudian  dianalisis  menggunakan  ANOVA dan  untuk  membandingkan  efektifitas  antar perlakuan  dilakukan  Uji  Jarak  Berganda Duncan  menggunakan  bantuan Statistical Product and Service Solution .

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dalam  lima  perlakuan  perendaman  dengan empat  kali  pengulangan  yaitu  perendaman dalam larutan NaCl fisiologis (P0), perendaman dalam  larutan  nitroxynil  2%  (P1),  Perendaman dalam  ekstrak  etanol  daun  Afrika  0,35%  (P2), 0,7%  (P3),  1,4%  (P4),  didapatkan  hasil kumulatif  kematian  cacing  tertinggi  pada konsentrasi  1,4%  (P4).  Mekanisme  kerja nitroxynil yaitu menghambat fosforilasi oksidatif  pada  mitokondria  cacing,  pada keadaan  tersebut  dapat  menganggu  produksi ATP  yang  merupakan  sumber  energi  cacing, apabila  kekurangan  energi  maka  cacing  akan mati  (Rahman  dkk.,  2017).  Untuk  menentukan kriteria  keadaan  cacing  yang  mati  atau  masih hidup  setelah  diinkubasi  dengan  cara  diusik dengan  menggunakan  batang  pengaduk  kaca. Apabila  cacing  diam,  segera  ambil  dengan menggunakan  pinset  anatomis  dan  masukkan bagian ekor cacing ke dalam air hangat bersuhu 50ºC.  Cacing  yang  bergerak  menandakan bahwa  cacing  mengalami  paralisis,  sedangkan cacing  yang  diam  menunjukkan  bahwal  telah mengalami  kematian  (Ali  dkk.,  2012).  Cacing yang  mengalami  paralisa  dikembalikan  ke dalam  cawan  perlakuan  hingga  cacing  meng-
Journal of Parasite Science                                                                                         Vol.3  No.1  Maret 2019 eISSN : 2656-5331 , pISSN : 2599-0993
alami  kematian.  Berdasarkan  hasil  penelitian tersebut  didapatkan  persentase  kematian Fasciola  gigantica pada  semua  per  lakuan dalam waktu pengamatan 2, 4, 6, 8, dan 10 jam setelah  perlakuan  adalah  seperti  yang  tertera pada Gambar 1.
Gambar  1. Mortalitas Fasciola  gigantica tiap perlakuan
Dari  Gambar  1  menunjukkan  bahwa kematian Fasciola  gigantica pada  perlakuan perendaman dengan ekstrak etanol daun Afrika konsentrasi  1,4%  memiliki  kemampuan  lebih cepat  dari  ekstrak  etanol  daun  afrika  pada konsentrasi  0,35,  0,7%  dan  NaCl  fisiologis, namun  belum  dapat  menyamai  efikasi  dari nitroxynil  2%.  Pada  konsentrasi  1,4%  ini didapatkan kematian paling tinggi.
Hasil analisis statistika pengamatan pada 2 jam dapat diketahui denga ekstrak etanol daun Afrika  belum  menunjukkan  aktivitas  anthel- mintika  karena  belum  didapat  kematian  dari berbagai  konsentrasi  ekstrak  yang  dilakukan. Menurut  Shargel  &  Yu  (1988),  obat  memerlu- kan waktu untuk mencapai sasaran organ yang dituju dan untuk melewati membran sel cacing, selain  itu  faktor  yang  mempengaruhi  lama reaksi  obat  atau  zat  aktif  adalah  kemampuan- nya  melewati  membran  sel  cacing.  Obat  atau zat kimia yang larut dalam lemak lebih mudah melewati  membran  sel  daripada  obat  atau  zat kimia yang larut dalam air. Saponin dan tannin merupakan  senyawa  metabolit  sekunder  yang dapat  larut  dalam  air  maupun  etanol  (Henry, 1949),  sehingga  memerlukan  waktu  yang  lebih lama  untuk  dapat  melewati  membran  sel  dan membawa  pengaruh  terhadap  sel  dan  organ sasaran.
Hasil analisis statistika pengamatan pada 4 jam  diketahui  sudah  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  daun  Afrika  memiliki  aktivitas anthelmintika  karena  pada  perlakuan  yang
diberikan  pada  konsentrasi  1,4%  menunjukkan adanya  kematian  yang  berarti onset  of  action mulai bekerja pada 4 jam dibandingkan dengan kelompok perlakuan EDA lainnya.
Hasil  analisis  statistika  pengamatan  pada
6  jam  diketahui  sudah  menunjukkan  pening- katan  aktivitas  anthelmintika  pada  semua kelompok  perlakuan  dengan  menunjukkan hasil  kematian  yang  berbeda-beda.  Kemam- puan    ekstrak  etanol  daun  Afrika  untuk  mem- bunuh Fasciola  gigantica karena  adanya  bahan aktif yang terkandung di dalamnya. Bahan aktif tersebut  yaitu  saponin,  tannin,  dan  flavonoid. Menurut  Munthe  (2011),  saponin  bekerja dengan cara menghambat kerja enzim kolines- terase.  Enzim  ini  berperan  menjaga  agar  otot, kelenjar, dan syaraf dalam tubuh dapat bekerja teratur apabila enzim kolinesterase tidak dapat melaksanakan tugasnya dalam tubuh maka otot cacing  akan  berkontrasi  terus-menerus  tanpa dapat  dikendalikan.  Hal  ini  menyebabkan penumpukan  asetilkolin  sehingga  otot  cacing mengalami  hiperkontraksi  dan  menyebabkan kematian pada cacing (Kuntari, 2008). Senyawa tannin  menpunyai  daya  anthelmintika  dengan cara  menganggu  pembentukan  energi  dengan menghambat  fosforilasi  oksidatif  (Salhan  dkk., 2011).  Senyawa  flavonoid  mempunyai  daya anthelmintika  dengan  cara  menganggu  impuls saraf dan keseimbangan cacing sehingga meng- alami  paralisa  dan  akhirnya  mati  (Fitriana, 2008).
Hasil analisis statistika pengamatan pada 8 jam  diketahui  menunjukkan  kematian  yang merata  antar  kelompok  perlakuan  ekstrak. Mortalitas  Fasciola  gigantica  dari  kelompok perlakuan  menunjukkan  berbeda  nyata  pada jam ke delapan. Setiap perlakuan menunjukkan jumlah kematian diatas kendali negatif.
Hasil  analisis  statistika  pengamatan  pada 10 jam diketahui pada konsentrasi 1,4% menun- jukkan  angka  kematian  tertinggi  dibandingkan kelompok  perlakuan  EDA  lainnya.  Hasil tersebut  sesuai  dengan  yang  dinyatakan  oleh Berijaya  &  Tetriana  (1999)  bahwa  semakin tinggi  konsen-trasi  yang  digunakan  maka semakin  cepat  dan  efektif  dalam  membunuh Fasciola  gigantica .  Hal  ini  dikarenakan  cacing akan  menyerap  lebih  banyak  saponin  dan tannin  yang  dapat  menjadi  racun  pada  tubuh cacing  hingga  dapat  menye-babkan  kematian pada Fasciola gigantica .

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  tersebut maka  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  ekstrak etanol daun Afrika ( Vernonia amygdalina ) pada konsentrasi  1,4%  memiliki  aktivitas  anthel- mintika  paling  cepat  terhadap  mortalitas Fasciola gigantica secara in Vitro .

## Daftar Pustaka
Adate,  P.S.,  S.  Parmesawaran  and  Y.  Chauhan. 2012. In Vitro Anthelmintic Activity of Stem Extracts  of Piper  betle Linn against Pheretima Posthuma . Pharmacognosy Journal , 4(29), 61-65.
Bachaya,  H.A.,  Z.  Iqbal,  M.N.  Khan,  and  A. Jabbar.  2009. Anthelmintic  activity  of Ziziphus  nummularia  (bark)  and  Acacia nilotica  (fruit)  against  Trichostrongylid nematodes  of  sheep . Journal  of  ethnophar- macology , 123 (2), 325-329.
Berijaya  dan  Tetriana.  1999.  Pengaruh  perasan dan  ekstrak  buah  mengkudu  ( Morinda citrifolia )  secara in-vitro .  Prosiding  I Seminar HasilHasil Penelitian Bidang Ilmu Hayat .PAU Ilmu Hayat IPB 16 September 1999.
Budiono,  N.G.,  F.  Satrija,  Y.  Ridwan,  dan  D. Nur.  2018.  Trematodosis  pada  Sapi  dan Kerbau  di  Wilayah  Endemik  Schistoso- miasis  di  Provinsi  Sulawesi  Tengah,
Indonesia. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia , 23 (2), 112-126.
Fitriana,  S.  2008.  Penapisan  Fitokimia  dan  Uji Aktivitas Anthelmintik Ekstrak Daun Jarak ( Jatropha  curcas  L. )  Terhadap  cacing Ascaridia  galli Secara in  Vitro [Skripsi]. Fakultas  Peternakan.  Institut  Pertanian Bogor.
Henry,  T.A.  1949. The  Plant  Alkaloids.  Fourth
Edition. Philadelphia: The Blakiston Company .
Kuntari,  T.  2008.  Daya  Antihelmintik  air rebusan  daun  ketepeng  ( Cassia  alata  L. ) terhadap  cacing  tambang  anjing in  Vitro . Jurnal Logika , 5(1).
Mahardika,  M.M.,  S.A.  Sudjarwo,  and  S. Koesdarto.  2017. Anthelmintic  Activity  of Ocimum  sanctum  Linn.  Leaves  Ethanol Extract  Against  Fasciola  gigantica  in Vitro . KnE Life Sciences , 3 (6), 266-277.
Munthe,  S.A.  2011.  Pengaruh  Binaan  LSM
Terhadap Perilaku dan Kadar Cholinesterase  Pada  Petani  Di  Kecamatan Kabanjahe  Tanah  Karo.  [Tesis].  Fakultas Kesehatan Masyarakat. Universitas Sumatera Utara. Qurrota,  A.  2016.  Uji  Efektifitas  Daya Anthelmintik Ekstrak Daun Kelor ( Moringa  oleifera )  Terhadap  Mortalitas Cacing Heterakis  gallinarum Secara In- Vitro (Doctoral Dissertation, UNIVERSITAS AIRLANGGA).
Salhan,  M.,  B.  Kumar,  P.  Tiwari,  P.  Sharma, H. Kaur,  and  M.  Gautam.  2011. Comparative Anthelmintic  Activity  of  Aqueous  and Ethanolic Leaf Extracts of Clitoria Ternatea . International  Journal  of  Drug Development and Research , 3(1), 68-69.
Shargel,  L.  dan  A.B.  Yu.  1988.  Biofarmasetika dan farmakokinetika terapan. Terjemahan) Dr. Fasich, Apt dan Dra. Siti Sjamsiah, Apt. Surabaya: Airlangga University Press , 175 .