e-ISSN Number 2655 2967

## Journal of Chemical Process Engineering
Volume 5 Nomor 1 (2020) SINTA Accreditation Number28/E/KPT/2019 Published by Corresponding Author Department of Chemical Engineering Dwiardiana@staff.uns.ac.id Faculty of Industrial Technology Universitas Muslim Indonesia, Makassar Address Jalan Urip Sumohardjo km. 05 (Kampus 2 UMI) Journal History Makassar- Sulawesi Selatan Paper received : 28 Januari 2020
Received in revised : 10 Februari 2020 Accepted: 10 Mei 2020

## Pengaruh Variasi dan Komposisi Pelarut terhadap Pengambilan Asam Lemak Omega dari Minyak Biji Anggur dengan Kompleksasi Urea
(The Effect of Solvent Variation and Composition for Concentrating Omega Fatty Acids from Grape Seed Oil by Urea Complexation)

## Dwi Ardiana Setyawardhani, Dinda Sekar Laras, Kurnia Jayanti Prasetya
Program Studi Sarjana Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Sebelas Maret Jl. Ir. Sutami No. 36A, Surakarta
Kata  Kunci: Asam lemak omega, kompleksasi urea, minyak biji anggur Key Words : Omega fatty acids, urea complexation, grapeseed oil

## Inti Sari
Asam lemak omega berperan penting dalam perkembangan  otak dan sistem syaraf bagi anak-anak  dan  pencegahan  penyakit  degeneratif  bagi  orang  dewasa.  Kompleksasi  urea merupakan metode yang dinilai paling efektif dan efisien untuk memperoleh konsentrat asam  lemak  omega.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  pengaruh  variasi  dan komposisi pelarut terhadap peningkatan kadar asam lemak omega pada konsentrat asam lemak minyak biji anggur dengan metode kompleksasi urea. Penelitian ini mempelajari 3 variasi pelarut yaitu metanol, etanol dan air serta campurannya dalam komposisi 0-100% w/w.  Kompleksasi urea  memiliki beberapa tahapan  yaitu (1) hidrolisis  minyak  menjadi asam lemak bebas, (2) kristalisasi/kompleksasi urea, (3) pemungutan asam lemak omega dan (4) analisa. Proses diawali  dengan saponifikasi dan pemurnian asam lemak  minyak biji anggur, kemudian ditambahkan urea dan pelarut dengan variasi dan komposisi yang berbeda untuk mendapatkan senyawa kompleks urea. Analisa gas kromatografi dilakukan untuk mengetahui komposisi asam lemak pada fasa kristal ( urea complexd fraction /UCF) maupun konsentrat ( non-urea complexed fraction /NUCF). Hasil penelitian menunjukkan bahwa  asam  lemak  jenuh  yang  terjerap  dalam  senyawa  kompleks  urea  dengan  pelarut etanol mencapai nilai yang maksimal, sehingga yang tertinggal dalam konsentrat menjadi minimal.  Etanol  merupakan  pelarut  yang  terbaik  untuk  kompleksasi  urea  dibandingkan metanol  dan  air.  Kadar  asam  lemak  omega  dalam  konsentrat  dapat  dikonsentrasikan hingga 90,334%.

## Abstract
Omega  fatty  acids  play  an  important  role  for  development  of  the  brain  and  nervous system  for  babies  and  infants.  They  also  prevent  degeneratif  diseases  for  adults.  The purposes of this research were  to study the effect of solvents and their compositions on
increasing omega fatty acids concentrates of grapeseed oil by urea complexation. This method is considered as the most effective and efficient way. The solvents which were studied in this research were methanol, ethanol, water and their mixtures (0-100% w/w). Urea complexation conducted in several steps : (1) grapesed oil hydrolysis into free fatty acids,  (2)  crystallization,  (3)  splitting  the  unsaturated  fatty  acids,  and  (4)  analysis. Grapeseed oil was saponified into fatty acids mixtures and then be refined. Fatty acids mixtures  were  added  with  urea  and  solvents  in  different  compositions  to  obtain  urea complex  compounds.  Gas  chromatography  was  used  to  determine  the  composition  of fatty acids in each phase (urea complexed fraction-UCF as solid phase and non-urea complexed fraction-NUCF as liquid phase).  The less saturated fatty acids remaining in the sample, the more effective the solvent will be. The results showed that saturated fatty acids  which  formed  complexes  with  urea  using  ethanol  reached  maximum  values. Ethanol was the best solvent for urea complexation, with 90.334% PUFA in the NUCF.

## PENDAHULUAN
Minyak  nabati  merupakan  komoditas  pertanian  yang digunakan untuk industri oleochemical. Di Indonesia, minyak  nabati  utamanya  digunakan  untuk  keperluan pangan.  Minyak  nabati  memiliki  kandungan  berupa asam-asam lemak yang terdiri atas 3 golongan, yaitu: 1)  asam  lemak  jenuh  ( Saturated  Fatty  Acid -SFA) semisal asam palmitat atau stearat; 2) asam lemak tak jenuh tunggal ( Mono Unsaturated Fatty Acid -MUFA) semisal asam oleat, dan 3) asam lemak tak jenuh ganda ( Poly  Unsaturated  Fatty  Acid -PUFA),  semisal  asam linoleat dan linolenat [1]. Asam lemak dapat diperoleh dari  minyak  nabati  melalui  reaksi  hidrolisis  yang merupakan reaksi kesetimbangan. Untuk memperoleh produk asam lemak yang lebih besar, dapat dilakukan penggeseran  reaksi  hidrolisis  dengan  menambahkan jumlah  air  secara  berlebih  atau  memisahkan  produk gliserol.
Asam lemak omega merupakan jenis asam lemak tak  jenuh,  baik  tak  jenuh  ganda (Poly  Unsaturated Fatty Acid -PUFA) maupun tunggal ( Mono
Unsaturated  Fatty  Acid -MUFA).  PUFA  terbagi  atas asam lemak omega-3 (Linoleic Acid (LA), AlphaLinolenic Acid (ALA), Eicosa Pentaenoic Acid (EPA)  dan  Docosa  Hexaenoic  Acid  (DHA))  serta omega-6  (Gamma-Linolenic  Acid-GLA),  sedangkan MUFA terdiri atas asam lemak omega-9 (asam oleat) [1].  Fungsi  dan  kegunaan  PUFA  dan  MUFA  sangat berbeda, sehingga PUFA dan MUFA harus dipisahkan satu  sama  lain  untuk  dimanfaatkan  secara  optimal. PUFA memiliki peranan penting terhadap pencegahan penyakit  kardiovaskular,  peningkatan  kemampuan belajar, dan peningkatan sistem imun tubuh [2]. PUFA bersifat  essensial  dan  harus  dikonsumsi  lewat makanan,  sedangkan  MUFA  bersifat  non-essensial dan dihasilkan dari dalam tubuh.
PUFA  dapat  dipisahkan  dari  minyak  nabati dengan metode   fraksinasi kompleksasi urea, kromatografi,  destilasi,  kristalisasi  pada  suhu  rendah, dan  ekstraksi  fluida  superkritik.  Beberapa  metode seperti  kromatografi,  destilasi,  enzimatik,  kristalisasi pada  suhu  rendah  memiliki  kekurangan  yaitu  lebih lambat,  kurang  efisien,  mahal,  dan  sulit  digunakan untuk skala yang besar [3]. Penelitian ini memisahkan PUFA dengan cara fraksinasi kompleksasi urea. Cara ini dipilih karena dapat meningkatkan kandungan asam lemak tak jenuh ganda tanpa mengalami degradasi dan kondisi  operasinya  relatif  moderat.  Kondisi  operasi pemisahan PUFA melalui fraksinasi kompleksasi urea tergolong  mudah  dicapai  karena  membutuhkan peralatan  yang sederhana dan dilakukan pada kisaran suhu  yang  tidak  terlalu  tinggi  [4].  Proses  fraksinasi kompleksasi  urea  dapat  menggunakan  variasi  pelarut organik  seperti  metanol,  etanol,  dan  aquadest  karena murah, tidak bersifat toksik, dan dapat di-r ecovery [5]. Dengan beberapa kelebihan tersebut, maka metode ini dinilai lebih efektif dari segi biaya dan ramah terhadap lingkungan.
Berbagai  sumber  minyak  mulai  banyak dieksplorasi,  untuk  menyesuaikan  kebutuhan  asam lemak tertentu yang ingin diperoleh. Minyak tersebut seringkali  merupakan  minyak  dari  hewan  dan tumbuhan  khas  dari  suatu  daerah,  seperti  minyak telur Rana [6], ikan lele Asia [7], hati ikan Raya [8], [9]  bahkan  minyak  biji  Echium  yang  khusus menghasilkan  asam  stearidonat  yang  bermanfaat untuk diet [10]. Penelitian ini memanfaatkan minyak biji  anggur  ( Grape  Seed  Oil )  sebagai  salah  satu minyak yang berpotensi menghasilkan PUFA karena kandungan  asam  lemak  tak  jenuhnya  tinggi,  serta berasal dari bahan yang kurang dimanfaatkan. Secara umum  biji  anggur  memiliki  kandungan  10  -  20%
minyak yang kaya akan asam lemak tak jenuh seperti asam  oleat  dan  asam  linoleat.  Minyak  biji  anggur mengandung  10-14,4%  asam  palmitat  dan  asam stearat  yang  merupakan  asam  lemak  jenuh,  dan sisanya  yang  merupakan  kandungan  terbesar  adalah asam-asam  lemak  tak  jenuh  seperti  asam  oleat, linoleat,  EPA  dan  DHA  [11].  Senyawa-senyawa antioksidan  yang  terkandung  dalam  minyak  biji anggur menyebabkan minyak biji anggur lebih tahan lama  dan  tidak  mudah  teroksidasi  sehingga  sering dimanfaatkan  dalam  industri  kosmetik,  kuliner, farmasetika dan tujuan kesehatan lainnya. Selain itu, minyak biji anggur apabila dikomersialisasikan tidak akan  bersaing  dengan  minyak  pangan  ( edible  oil ) seperti  minyak  sawit  karena  minyak  biji  anggur termasuk dalam non-edible oil.
Minyak  biji  anggur  diperoleh  dengan  cara mengekstrak  biji  anggur  menggunakan  metode cold
pressed .  Metode  ini  dinilai  sederhana  karena  tidak melibatkan  pemanasan  ataupun  zat  kimia,  tetapi menggunakan alat pengepres dengan cara memasukkan biji ke alat tersebut, kemudian ditekan sampai menghasilkan minyak dan ampas yang sudah terpisah.
Pada produksi konsentrat asam lemak tak jenuh dengan  metode  fraksinasi  kompleksasi  urea,  pelarut yang  dapat  digunakan  di  antaranya  adalah  air  atau alkohol rantai pendek seperti etanol dan  metanol [5], [12].  Penelitian  ini  bertujuan  mempelajari  pengaruh variasi  dan  komposisi  pelarut  terhadap  kadar  asam lemak tak jenuh pada konsentrat asam lemak minyak biji anggur.

## METODE PENELITIAN
Bahan  utama  pada  penelitian  ini  adalah minyak  biji  anggur  merk Borges .  Bahan  pendukung yang  dipakai  adalah  etanol food  grade berkadar 96,0%,  etanol  absolut  dari  Merck  berkadar  99,9%, metanol absolut dari Merck berkadar 99,8%, KOH pro analyze  grade dari  Merck  berkadar  85,0%,  urea pro analyze grade dari Merck berkadar > 99,5%, aquadest, nhexana  teknis,  HCl  kadar  37,8%,  dan  Na 2 SO 4 pro analyze grade dari Merck berkadar 99,0%. Alat yang digunakan  dalam  proses  pengambilan  FFA  maupun kompleksasi  urea  meliputi  alat-alat  gelas  (labu  leher tiga  dengan  rangkaian  pendingin),  alat  pemanas  dan pengaduk (tersaji pada Gambar 1), rotary evaporator , serta lemari pendingin untuk kristalisasi.
Langkah kerja pada penelitian ini meliputi tiga tahap  [13],  yaitu:  1)  tahap  penyiapan  asam  lemak bebas  dari  minyak  nabati,  2)  tahap  kristalisasi (fraksinasi  kompleksasi  urea),  3)  tahap  pemungutan asam  lemak  tak  jenuh,  dan  4)  tahap  analisa.  Tahap penyiapan asam lemak bebas dari minyak biji anggur, meliputi hidrolisis minyak biji anggur dengan katalis KOH  hingga diperoleh campuran asam  lemak  jenuh dan  tak  jenuh.  Tahap  fraksinasi  kompleksasi  urea ditunjukkan  pada  Gambar  2.  Tahap  ini  diawali dengan  proses  kristalisasi  dengan  variabel  yang tertera  pada  Tabel  1.  Campuran  tersebut  diaduk hingga  terbentuk  campuran  homogen.  Proses kristalisasi dilakukan pada suhu 15°C dengan waktu kristalisasi  yang  sama  (24  jam).  Tahap  pemungutan asam  lemak  omega,  pemisahan  dan  pemurnian  dari asam lemak jenuh ditunjukkan pada Gambar 3.
Gambar 1. Skema rangkaian alat kompleksasi urea
Tabel 1. Variabel Tetap dan Variabel Bebas dalam Proses Kristalisasi
No Variabel tetap Variabel bebas 1 Rasio  kristalisasi  :  10 gram asam lemak bebas  dan  30  gram urea Jenis dan komposisi  pelarut Metanol 0%, 50%, 100% (w/w) 2 3 Suhu kristalisasi : 15 o C Waktu pengadukan : 2 jam Etanol 0% (w/w), 95% (w/w), 100% (w/w) 4 Kecepatan pengadukan : 300 rpm
Gambar 2. Diagram Alir Tahap Kristalisasi
Asam Lemak Jenuh Asam Lemak Omega
Gambar 3. Diagram Alir Tahap Pemungutan Asam Lemak
Omega
Tahap analisis sampel asam lemak di kedua fraksi dilakukan
dengan
rangkaian alat Gas Chromatography .  Komposisi  asam  lemak  dihitung berdasarkan  luas  area  puncak  dari  masing-masing asam  lemak  pada  kromatogram,  relatif  terhadap  total asam lemak.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Minyak biji anggur mempunyai presentase relatif  asam  lemak  sebagaimana  tertera pada  Tabel  2  [11].  Minyak  biji  anggur  selain mengandung asam  lemak omega (MUFA dan PUFA) yang  banyak,  juga  mengandung  asam  lemak  jenuh
(SFA) sebesar hampir 10% yang sebaiknya dipisahkan apabila akan dibuat konsentrat asam lemak omega.
Tabel 2. Komposisi Asam Lemak dalam Minyak Biji
Anggur [11] Asam lemak Jenis asam lemak Presentase relatif (%) Asam palmitat SFA 6,5 – 9,0 Asam stearat SFA 3,5 – 5,4 Asam oleat MUFA 17,8 – 25,5 Asam linoleat PUFA 60,1 – 68,8 ALA & EPA PUFA Sisanya
Pada  dasarnya  urea  memiliki  struktur  kristal berbentuk  tetragonal  sekitar  8,2  Å,  namun  struktur tersebut  akan  berubah  menjadi  heksagonal  dengan diameter  tertentu  (±  5,5  Å)  apabila  dicampurkan dengan  asam  lemak  maupun  senyawa  hidrokarbon rantai panjang [5]. PUFA dan MUFA memiliki rantai melekuk  dikarenakan  adanya  percabangan  pada ikatan  rangkapnya  sehingga  memiliki  ukuran  yang lebih besar dari SFA. SFA akan lebih mudah terjerap ke dalam rongga kristal urea karena ukurannya yang lebih kecil, sedangkan MUFA dan PUFA cenderung tertinggal dalam cairan karena ukurannya yang lebih besar.
SFA  yang  berupa  asam  palmitat  dan  asam stearat pada minyak biji anggur dapat dipisahkan dari asam lemak omega lainnya. Asam palmitat dan asam stearat  sebanyak  mungkin  perlu  dipisahkan  dari campuran asam lemak untuk memperoleh konsentrat asam  lemak  omega.  Konsentrat  asam  lemak  omega (PUFA)  terdapat  pada  fraksi  cairan  ( Non-Urea Complexed  Fraction -NUCF),  sedangkan  campuran asam  lemak  jenuh  terikat  pada  kristal  urea  dan terdapat  pada  fraksi  padatan  ( Urea  Complexed Fraction -UCF) [8].
Kelarutan  suatu  zat  tergantung  pada  tingkat kepolaran  pelarut  dan  zat  terlarut.  Komponen  polar akan  larut  dalam  pelarut  polar  serta  sebaliknya, komponen  non  polar  akan  larut  dalam  pelarut  non polar. Urea dapat larut dalam alkohol dan air dengan komposisi tertentu, karena jumlah urea mempengaruhi suhu kelarutan. Semakin tinggi massa urea  dalam  pelarut  maka  semakin  tinggi  suhu  yang dibutuhkan untuk melarutkan urea tersebut [5].
Syarat pelarut   yang digunakan dalam fraksinasi  kompleksasi  urea  adalah  pelarut  tersebut tidak  dapat  membentuk  senyawa  kompleks  inklusi dengan  urea  atau  tidak  dapat  berperan  sebagai senyawa  tamu  ( guest  molecule ).  Proses  fraksinasi kompleksasi urea dapat menggunakan variasi pelarut organik  yang  tidak  bersifat  toksik  seperti  etanol, metanol,  dan  aquadest  [5].  Tujuan  penggunaan pelarut  organik  dalam  fraksinasi  adalah  untuk membantu pemisahan fraksi cair dan mengikat lebih banyak  komponen  terlarut  sehingga  dihasilkan produk konsentrat dengan konsentrasi yang tinggi.

## Pengaruh Jenis Pelarut
Penelitian ini  menggunakan 3 variasi pelarut, yakni  metanol,  aquadest,  dan  etanol.  Ketiga  pelarut ini merupakan wetting agent yang paling sesuai untuk kompleksasi urea [5], karena tidak dapat membentuk senyawa  kompleks  inklusi  dengan  urea  dan  tidak dapat  berperan  sebagai  senyawa  tamu  ( guest molecule ).  Pelarut  dapat  terpisahkan  dengan  baik dalam  proses  pemurnian  asam  lemak  dari  NUCF, sehingga konsentrat asam lemak (NUCF) telah bebas dari  pelarut  dan  relatif  aman.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa pelarut yang paling baik dalam memisahkan  asam  lemak  tak  jenuh  dan  asam  lemak jenuh yakni etanol absolut. Etanol merupakan pelarut yang  paling  baik  karena  etanol  memiliki  gugus metilen paling panjang. Dibandingkan dengan air dan metanol, etanol bersifat paling non polar. Asam lemak adalah  senyawa  non  polar  sehingga  mampu  terlarut paling baik dalam etanol. Kelarutan ini memudahkan SFA  untuk  terjerap  ke  dalam  kristal  urea  sehingga SFA  yang  tertinggal  di  dalam  fraksi  cairan  (NUCF) lebih sedikit dibanding pelarut lain (Tabel 3).

## T abel 3. Komposisi Asam Lemak pada NUCF dalam Berbagai Jenis Pelarut
Jenis pelarut % PUFA % SFA Etanol absolut 90,334 8,264 Aquadest 76,098 22,672 Metanol absolut 50,277 43,502

## Pengaruh Komposisi Pelarut
Pada  variasi  komposisi  pelarut,  dilakukan  uji terhadap  variasi  komposisi  metanol  dan  etanol. Pengambilan  asam  lemak  omega  dengan  pelarut
metanol  menunjukkan  hasil  bahwa  semakin  tinggi kadar metanol maka semakin tinggi pula kandungan asam  lemak  jenuh  yang  terdapat  pada  fraksi  padat ( Urea  Complexed  Fraction -UCF).  Metanol  absolut mampu memisahkan asam lemak jenuh lebih efektif dibandingkan  metanol dengan komposisi  yang  lebih rendah. SFA yang terjerap pada kristal urea di fraksi UCF (metanol komposisi 100%) mencapai 91,977%, sedangkan  kadar  MUFA  yang  tersisa  hanya  sebesar 5,856%. Hal ini disebabkan metanol lebih non polar dibandingkan  dengan  air  karrena  memiliki  gugus metilen, sedangkan air tidak.  Kelarutan asam  lemak pada  metanol  murni  paling  tinggi,  sehingga memudahkan SFA untuk terjerap dalam kristal urea membentuk  UCF.  Perbandingan  kadar  SFA  dan kadar MUFA pada UCF dapat dilihat dalam Tabel 4 dan Gambar 5 di bawah ini.
Gambar 4. Komposisi Asam Lemak pada NUCF dalam Berbagai Jenis Pelarut
Tabel 4. Komposisi Asam Lemak pada UCF dalam
Berbagai Kadar Metanol Kadar Metanol % SFA % MUFA 0 35,829 58,143 50 42,026 52,503 100 91,977 5,856
Gambar 5. Komposisi Asam Lemak pada UCF dalam Berbagai Kadar Metanol
Tabel  5  menunjukkan  pengaruh  komposisi etanol  terhadap  konsentrasi  asam  lemak  dalam konsentrat  (NUCF).  Data  etanol  murni  dan  0% diambil  dari  Tabel  3,  sementara  data  etanol  95% diambil  dari  penelitian  sebelumnya  [11].  Etanol absolut dapat menyerap asam lemak jenuh ke dalam senyawa kompleks urea secara efisien, terbukti SFA yang tersisa pada fraksi NUCF hanya sebesar 8,264% dan  kadar  PUFA  mencapai  90,334%.  Namun  hasil kompleksasi ini belum sebanyak yang diperoleh pada penelitian  sebelumnya  dengan  menggunakan  etanol teknis (95%).
Menurut  penelitian  sebelumnya  [5],  kelarutan masing-masing  komponen  SFA  dan  urea  dalam etanol  murni  dan  etanol  teknis  (95%)  memiliki karakter  yang  berbeda.  Kelarutan  SFA  lebih  tinggi dalam etanol  murni, sedangkan kelarutan urea  lebih tinggi  dalam  etanol  teknis.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kompleksasi  urea  merupakan  kondisi  yang dipengaruhi oleh berbagai faktor. Dalam hal ini yang berpengaruh tidak hanya kelarutan asam lemak dalam wetting  agent (air, metanol atau etanol) namun  juga kelarutan  kristal  ureanya.  Ini  dapat  dipahami mengingat bahwa UCF terbentuk dari urea dan asam lemak. Dengan menggunakan etanol sebagai pelarut, terlihat  bahwa  keberadaan  air  sebagai  impuritas justru  meningkatkan  efektifitas  kompleksasi  urea, meskipun dalam batas tertentu (95%-5% etanol-air). Ditinjau  dari  aspek  komersialisasi,  penggunaan etanol  teknis  lebih  menguntungkan  karena  biaya produksi  lebih  murah. Gambar  6  menunjukkan pengaruh kadar etanol terhadap komposisi NUCF.
Tabel 5. Komposisi Asam Lemak pada NUCF dalam
Pelarut Etanol
Kadar etanol % SFA % PUFA 0 22,672 76,098 95* 3,550 95,720 100 8,264 90,334 * [11]
Gambar 6. Komposisi Asam Lemak pada NUCF dalam Berbagai Kadar Etanol
Data  kelarutan  urea  dalam  larutan  etanol ditunjukkan  pada  Gambar  7.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa urea dengan pelarut etanol yang mempunyai  konsentrasi  lebih  tinggi  (64,88  %  w/w) membutuhkan  suhu  untuk  larut  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  etanol  yang  mempunyai konsentrasi  rendah  (55,8  %  w/w).  Dapat  dinyatakan bahwa  kelarutan  urea  meningkat  dengan  kenaikan suhu.
Gambar 7. Kelarutan Urea dalam Campuran Etanol – Air

## KESIMPULAN
Etanol  merupakan  pelarut  yang  terbaik  untuk kompleksasi  urea  dibandingkan  metanol  dan  air, hingga kadar tertentu (95%). Penggunaan etanol murni dapat meningkatkan kadar PUFA hingga 90,334%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Tim  Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada Kemeterian Riset, Teknologi dan Pendidikan Tinggi  yang  telah  mendanai  sebagian  penelitian  ini melalui  Hibah  Penelitian  Mandiri  Aktif  Universitas Sebelas Maret tahun anggaran 2018.
.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] D.  A.  Setyawardhani,  H.  Sulistyo,  W.  B.
Sediawan, and M. Fahrurrozi, “Peranan Waktu Pengadukan Terhadap Karakteristik Kompleksasi Urea sebagai Sarana Pemisahan Asam  Lemak  Omega  dari  Minyak  Nabati,” Reaktor , vol. 16, no. 2, pp. 81–86, 2016.
[2] R. A. A. Gazem and S. A. Chandrashekariah, “Omega Fatty Acids in Health and Disease : A Review,” J.  Pharm.  Res. ,  vol.  8,  no.  8,  pp.
1027–1044, 2014.
[3] J.  L.  Guil-Guerrero  and  E.-H.  Belarbi, “Purification  process  for  cod  liver  oil polyunsaturated fatty acids,” J. Am. Oil Chem.
Soc. , vol. 78, no. 5, pp. 477–484, 2001.
[4] D.  A.  Setyawardhani,  H.  Sulistyo,  W.  B.
Sediawan,  and  M.  Fahrurrozi,  “Separating poly-unsaturated fatty acids from vegetable oil
using  urea  complexation:  The  crystallisation temperature effects,” J. Eng. Sci. Technol. , vol.
10, pp. 41–49, 2015.
[5] D.  A.  Setyawardhani,  H.  Sulistyo,  W.  B. Sediawan, and M. Fahrurrozi, “Solid − Liquid
Equilibrium for Binary and Ternary Phases of Saturated Fatty Acid − Urea − Alcohol in Urea Complexation,” J. Chem. Eng. Data , vol. 64,
pp. 5066–5078, 2019.
[6] D.  Li et  al. ,  “Concentration  of  Omega-3
Polyunsaturated  Fatty  Acids  from  Rana  Egg Oil  by  Urea  Complexation  and  Response Surface Methodology,” Am. J. Food Technol. ,
vol. 11, no. 3, pp. 76–83, 2016.
[7] P.  Thammapat,  S.  Siriamornpun,  and  P.
Raviyan,  “Concentration  of  eicosapentaenoic acid ( EPA ) and docosahexaenoic acid ( DHA )  of  Asian  catfish  oil  by  urea  complexation : optimization of reaction conditions,”
Songklanakarin J.Sci.Technol. , vol. 38, no. 2,
pp. 163–170, 2016.
[8] D. Sathees, J. K. Vidanarachchi, and S. M. C. Himali, “Enrichment of Omega-3 Fatty Acids using Urea Complexation Method to Enhance the Nutritive Value of Stingray Fish ( Dasyatis Sephen F .) Liver Oil,” Int. J. Trend Sci. Res.
Dev. , vol. 3, no. 5, pp. 24–29, 2019.
[9] L. M. Magallanes, L. V Tarditto, N. R. Grosso, M.  C.  Pramparo,  and  M.  F.  Gayol,  “Highly concentrated omega-3 fatty acid ethyl esters by urea complexation and molecular distillation,”
J.Sci.Food Agric. , vol. 99, no. July, pp. 877–
884, 2019.
[10] L. Vázquez, E. Ortego, M. Corzo-martínez, G. Reglero, and C. F. Torres, “Stearidonic  Acid
Concentration  by  Urea  Complexation  from Echium Oil,” J.  Oleo  Sci. ,  vol.  67,  no.  9,  pp.
1091–1099, 2018.
[11] D. A. Setyawardhani, B. Kiswantono, and Y. P.  Cahyani,  “Pengambilan  Asam  Lemak
Omega  dari  Minyak  Biji  Anggur  dengan Metode  Kompleksasi  Urea,”  in Seminar Nasional  Teknik  Kimia  Unnes ,  2018,  no.  36,
pp. 46–52.
[12] A.  Idris,  S.  K.  Loh,  and  Y.  M.  Choo,  “Urea Fractionation  of  Used  Palm  Oil  Methyl
Esters,” J.  Oil  Palm  Res. ,  vol.  26,  no.  3,  pp.
226–231, 2014.
[13] U.  N.  Wanasundara  and  F.  Shahidi, “Concentration  of  omega  3-polyunsaturated
fatty  acids  of  seal  blubber  oil  by  urea
complexation :  optimization  of  reaction conditions,” Food Chem. , vol. 65, pp. 41–49,
1999.