Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Kulit Nanas ( Ananas comosus (L) Merr).

## Sri Febriani Hatam, Edi Suryanto, Jemmy Abidjulu
Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
The objectives of this research were to determine antioxidant n activity from pineapple peal extract.  Pineapple  peel  extracted  by  maceration,  soxhlet  and  reflux  using  ethanol  80%  as  a solvent.  Phenolics  and  flavonoids  content  of  Crude  extract  were  analyzed.Evaluation  of antioxidant  activity  using  DPPH  free  radicals  method,  The  results  shows  that  maceration, soxhlet and reflux extract possess phenolics content 16,53; 28,78; 16,02  g/mL respectively, and  flavonoid total content 3,514; 5,115; 4,414  g/mL respectively. Maceration extract with concentration  3000  g/mL  possess  low  free  radical  scavenging  activity,  and  soxhlet  extract possess  the  highest.Inhibition  concentration  50%  (IC 50 )  of  soxhlet  extract  were  602,56 g/mL,  it’s  indicate  that  soxhlet  extract  possess  high  scavenging  of  50%  free  radicals.  This result shows that pineapple peel extract possess phytochemical phenolics and flavonoids that potential to be antioxidant and as active compound of sun screen.
Keywords: antioxidant, pineapple peel extract.

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan aktivitas antioksidan dari ekstrak kulit nanas. Kulit  nanas  diekstrak  dengan  metode  maserasi,  soxhlet  dan  refluks  dengan  pelarut  etanol 80%.  Setelah  itu,  ekstrak  dianalisis  kandungan  fenolik  dan  flavonoid.  Pengujian  aktivitas antioksidan menggunakan radikal bebas DPPH. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kulit nanas dengan metode maserasi, soxhlet, dan refluks mengandung total fenolik berturut- turut  16,53;  28,78;  16,02 g/mL,  total  flavonoid  berturut-turut  adalah  3,514;  5,115;  4,414 g/mL.  Metode  maserasi  dengan  konsentrasi  3000  g/mL  memiliki  aktivitas  penangkal radikal  bebas  yang  terendah  dan  metode  soxhlet  memiliki  aktivitas  penangkal  radikal  bebas tertinggi. Nilai  IC50 dari metode  ekstraksi soxhlet menunjukkan konsentrasi sebesar 602,56 g/mL, hal ini mengindikasikan bahwa metode ekstraksi soxhlet memiliki kemampuan yang paling tinggi sebagai penangkal radikal bebas sebesar 50%.
Kata kunci: antioksidan, ekstrak kulit nanas.

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Indonesia  adalah  negara  yang beriklim  tropis  karena  terletak  di  daerah khatulistiwa dengan paparan sinar matahari sepanjang musim. Sinar matahari yang sampai di permukaan bumi dibedakan  menjadi  sinar  ultraviolet  A panjang gelombang
320-400
nm, ultraviolet  B  panjang  gelombang  290-320 nm  dan  ultraviolet  C  panjang  gelombang 200-290  nm,  ketiga  jenis  sinar  ultraviolet tersebut memiliki efek terhadap kulit.
Nanas  merupakan  salah  satu  jenis buah  yang  diminati  oleh  masyarakat,  baik lokal  maupun  dunia.  Nanas  memiliki bagian-bagian  yang  bersifat  buangan antara  lain  adalah  kulit  yang  memiliki tekstur  yang  tidak  rata  dan  berduri  kecil pada  permukaan  luarnya.  Kulit  nanas hanya dibuang begitu saja sebagai limbah, padahal  kulit  nanas  mengandung  vitamin C, karotenoid dan flavonoid (Erukainure et al.,  2010).  Sejumlah  derivat  tanaman mengandung  fitokimia  fenolik  seperti asam  fenolik,  flavonoid,  tanin,  lignin  dan non fenolik seperti karotenoid dan vitamin C  yang  memiliki  kemampuan  sebagai antioksidan  dan  antikarsinogenik  (Shahidi dan  Naczk,  1995).  Selain  itu,  senyawa fenolik  terbukti  mampu  menurunkan resiko  kanker,  penyakit  jantung  koroner, strok, arterosklerosis, inflamasi yang dapat dihubungi  dengan  stres  oksidatif  (Surh, 2003).  Sejalan  dengan  itu,  Black  (1990) menyatakan  bahwa  antioksidan  memiliki potensi  sebagai  fotoprotektor.  Cahaya  UV dapat  memacu  pembentukan  sejumlah senyawa  reaktif  atau  radikal  bebas  pada kulit sehingga senyawa dengan kemampuan antioksidan dapat mengurangi efek yang merugikan dari radikal bebas.
Penelitian ini mengkaji penggunaan tiga metode ekstraksi
(maserasi,  soxhlet  dan  refluks)  untuk mengekstrak kulit nanas
serta mengeksplorasi kandungan fitokimia terutama  komponen  fenolik  dan  pengujian aktivitas  antioksidan  ekstrak  fenolik  dari kulit nanas.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan pada bulan Oktober 2012 di  Laboratorium Advance,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan metode eksperimen laboratorium  dengan  rancangan  penelitian yaitu sampel dari kulit nanas disiapkan dan diekstraksi  dengan  metode  maserasi, soxhlet  dan  refluks  menggunakan  pelarut etanol 80%, kemudian ditentukan
kandungan  total  fenolik  dan  flavonoid terkondensasi,. Selanjutnya ditentukan juga aktivitas antioksidan.

## Tahapan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  beberapa tahap yang meliputi :
a. Persiapan sampel
b. Ekstraksi sampel
c. Penentuan kandungan
1) Kandungan total fenolik
2) Kandungan total flavonoid
d. Penentuan aktifitas antioksidan 1) Penentuan  penangkal  radikal bebas DPPH
2) Penentuan  antioksidan  dengan metode  spektrofotometer  UV- Vis.

## Alat dan Bahan Penelitian

## Alat
Alat yang digunakan yaitu alat-alat gelas  pyrex,  botol  kaca  transparan, mikropipet, blender, spatula, vortex, saringan,
rotari
evaporator,
Spektrofotometer  Milton  Roy,  timbangan analitik.

## Bahan
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  kulit  nanas  (Ananas comosus (L) Merr) berasal dari Kabupaten Bolaang  Mongondow  dengan    jenis  nanas yaitu  Queen  (daun  pendek  berduri  tajam,
buah  lonjong  mirip  kerucut).  Bahan  kimia yang  digunakan  adalah  etanol  80%, vanilin,  asam  klorida  pekat  (HCl),  larutan natrium  karbonat  2%,  reagen  Folin- Ciocalteu  50%,  1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) 93 µ M, alumunium klorida 2%.

## Prosedur Kerja Persiapan Sampel
Buah  nanas  di  cuci  kemudian dikupas kulitnya, di potong-potong menjadi  lebih  kecil,  lalu  dihaluskan dengan cara diblender.

## Ekstraksi
Ekstraksi kulit nanas menggunakan pelarut  etanol  80%.  Ekstraksi  dilakukan dengan cara maserasi, soxhlet, dan refluks. Sebanyak  50  g  kulit  nanas  dimasukkan  ke dalam  gelas  Erlenmeyer  lalu  ditambahkan pelarut  150  mL  hingga  sampel  terendam semuanya. Masing-masing ekstraksi dilakukan selama 2 jam kemudian disaring.
Filtrat diuapkan untuk menghilangkan  pelarutnya  menggunakan rotari evaporator sehingga diperoleh ekstrak kulit nanas.

## Penentuan Kandungan Fitokimia Penentuan Kandungan Total Fenolik
Kandungan  total  fenolik  ekstrak kulit  nanas  (Ananas  comosus  (L)  Merr) ditentukan  menggunakan  metode  Folin Ciocalteu  (Conde  dkk.  1997).  Sebanyak 0,1  mL  larutan  ekstrak  dimasukkan  dalam tabung  reaksi,  lalu  ditambahkan  0,1  mL reagen  Folin  Ciocalteu  50%.  Campuran tersebut  divortex,  lalu  ditambahkan  2  mL larutan  natrium  karbonat  2%.  Selanjutnya campuran  diinkubasi  dalam  ruang  gelap selama  30  menit.  Absorbansinya  dibaca pada    750  nm  dengan  spektrofotometer. Kandungan  total  fenol  dinyatakan  sebagai mg ekivalen asam galat/g ekstrak.

## Penentuan Kandungan Total Flavonoid
Penentuan kandungan total flavonoid  menggunakan  metode  Meda dkk.  (2005).  Sebanyak  2  mL  larutan ekstrak ditambah dengan 2 mL alumunium
klorida  2%  yang  telah  dilarutkan  dalam etanol,  kemudian  divorteks  dan  dibaca absorbansi  pada    415  nm.  Kandungan total flavonoid dinyatakan sebagai ekivalen kuersetin dalam mg/kg ekstrak.
Penentuan Aktivitas Antioksidan Penentuan  Penangkal  Radikal  Bebas
DPPH
Penentuan aktivitas penangkal radikal  bebas  DPPH  menurut  Burda  dan Olezek  (2001).  Sebanyak  0,1  mL  masing- masing  ekstrak  ditambahkan  dengan  1,5
mL larutan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil
(DPPH)  93 µ M  dalam  etanol  dan divortekx  selama  2  menit.  Berubahnya warna  larutan  dari  kuning  ke  biru menunjukkan  efisiensi  penangkal  radikal bebas.  Selanjutnya  pada  5  menit  terakhir menjelang  30  menit  inkubasi,  absorbansi diukur pada 517 nm dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Aktifitas penangkapan radikal bebas dihitung  sebagai  persentase  berkurangnya warna DPPH dengan menggunakan persamaan :
Absorbansi sampel Aktifitas penangkal radikal bebas (%) = 1 -
x100%
Absorbansi kontrol

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Kulit Nanas
Tabel 1. Rendemen hasil ekstrak kering kulit nanas.
Metode ekstraksi Rendemen (%) Warna Maserasi (EM) Soxhlet (ES) Refluks (ER) 1,23 3,29 3,20 Cokelat Cokelat Cokelat
Dari  hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  rendemen  dari  metode  ES  lebih tinggi,  ini  disebabkan  bahwa  dengan perlakuan  panas  dapat  meningkatkan kemampuan  pelarut  untuk  mengekstraksi senyawa-senyawa  yang  tidak  larut  di
dalam  kondisi  suhu  kamar,  sehingga memberikan peningkatan rendemen.

## Penentuan  Kandungan  Total  Fenolik Dan Flavonoid
Gambar 1. Grafik kandungan total Fenolik ekstrak Kulit Nanas.
Gambar  2.  Grafik kandungan  total Flavonoid ekstrak Kulit Nanas.
Berdasarkan  Gambar  1,  dapat diketahui  bahwa  ekstrak  kulit  nanas dengan  metode  ES  memiliki  kandungan total fenolik yang paling tinggi yaitu 28,78 g/mL,  diikuti  dengan  EM  yaitu  16,53 g/mL, sedangkan ER
memiliki kandungan  total  fenolik  yang  paling rendah  yaitu  16,02 g/mL.  Kandungan total  flavonoid  yang  tertinggi  yaitu  ES 5,11 g/mL,  diikuti  dengan  ER  4,41 g/mL,  dan  yang  terendah  adalah  ekstrak dengan metode EM yaitu 3,51  g/mL.
Hasil  ini  mengindikasikan  bahwa senyawa fenolik dan flavonoid dalam kulit nenas  dapat  terekstraksi  dengan  perlakuan panas.  Menurut  Jeong  et  al  (2004),
perlakuan  panas  dapat  membebaskan  dan mengaktifkan  berat  molekul  rendah  dari sub  unit  molekul  polimer  yang  berberat molekul  tinggi  sehingga  efektif  untuk meningkatkan  kandungan  fenolik  dalam tanaman.

## Aktivitas Penangkal Radikal Bebas (%)
Gambar  3.  Grafik  Aktivitas  penangkal  radikal bebas DPPH dari ekstrak kulit nanas
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh pada  Gambar  1,  maka  dapat  diketahui bahwa ekstrak dengan metode ES memiliki  kemampuan  penangkal  radikal bebas  yang  paling  tinggi  yaitu  91,3%  Ini berarti  adanya  pengaruh  perlakuan  panas dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan (Jeong et al, 2004).
Tabel 2. Persamaan regresi dan nilai IC 50 dari ekstrak kulit nanas
Sampel Persamaan R 2 IC 50 Konsentrasi ( g/mL) EM y = 57,09x - 128,0 R² = 0,902 3,18 1513,56 ES y = 52,39x - 95,52 R² = 0,915 2,78 602,56 ER y = 60,56x - 128,5 R² = 0,977 2,95 891,25
Untuk  nilai  IC 50 ,  semakin  kecil nilainya  maka  semakin  rendah  pula konsentrasi  yang  dibutuhkan  dari  ekstrak kulit nanas sebagai penagkal radikal bebas. Berdasarkan  tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa ekstrak  kulit  nanas  dengan  metode  ES memiliki  nilai  IC 50 terendah  yaitu  2,78 sehingga  pada  konsentrasi  602,56  g/mL sudah  dapat  menangkal  radikal  bebas
16.53 28.78 16.02 0 10 20 30 40 EM ES ER K a n d u n g a n T o ta l F en o li k Konsentrasi (1000 µ g/mL) A 3.51 5.11 4.41 0 2 4 6 EM ES ER K a n d u n g a n T o ta l F la v o n o id Konsentrasi (1000 µg/mL) B 63.8 91.3 81.2 0 20 40 60 80 100 EM ES ER A k ti v it a s P en a n g k a l R a d ik a l B eb a s Konsentrasi  (3000 µ g/mL)
sebanyak 50%. Selanjutnya diikuti dengan ER  yang  memiliki  IC 50 2,95  sehingga dibutuhkan konsentrasi 891,25  g/mL dan EM  memiliki  nilai  IC 50 3,18  sehingga dibutuhkan  konsentrasi  1513,56 g/mL. Dengan  kata  lain  metode  ES  lebih berpotensi  sebagai  penangkal  radikal bebas dibandingkan dengan metode ekstraksi refluks dan maserasi.

## PENUTUP

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, dapat  diambil  kesimpulan  bahwa,  kulit nanas  yang  diekstraksi  dengan  metode soxhlet  memiliki  kandungan  total  fenolik dan  flavonoid  paling  tinggi  selanjutnya diikuti  oleh  metode  refluks  dan  maserasi merupakan  yang  paling  rendah.  Dari  data aktivitas penangkal radikal bebas menunjukkan  bahwa  ekstrak  kulit  nanas dengan metode soxhlet memiliki kemampuan  sebagai  penangkal  radikal bebas yang paling tinggi.

## Saran
Sebaiknya  dilakukan  penelitian lebih lanjut untuk mengaplikasikan ekstrak kulit  nanas  ke  dalam  formulasi  sediaan tabir surya.

## DAFTAR PUSTAKA
Black,  H.S.,  1990,  Antioxidant  and
Carotenoid as Potensial Photoprotectants  dalam  Nicholas, J.L  dan  Nadim,  A  S.  (eds.,) Sunscreens Development and
Regulatory  Aspects.  Marcel  Dekker
Inc., New York.
Bonina,  F.,  M.  Lanza,  P.  Lucia,  T. Claudio,  T.  Antonio,  F.  Domenico,
Castelli dan A. Saija. 2005. Flavonoid  as  Potensial  Protective Agents Againts Photo-oxidative Skin Damage.  Int.  J.  of  Pharm.  146:  87- 94.
Burda, S. dan W. Olezek. 2001. Antioxidant and Antiradical
Activities  of  Flavonoids.  J.  Agric.
Food Chem. 49 : 2774-2779.
Conde,  E.E.,  M.C.  Cadahia,  G.  Vallejo,
B.F.D.  Simon  dan  J.R.G.  Adrados. 1997. Low Molecular Weight
Polyphenol  in  Cork  of  Querceus Suber.  J.  Agric.  Food  Chem.  45: 2695-2700.
Erukairune,  O.L.,  J.A.  Ajiboye,  R.O.
Adejobi, O.Y. Okafor, S.O.
Adenekan. 2011. Protective effect of pineapple  (ananas  comosus)  peel extract on alcohol- induced oxidative stress in brain tissues of male albino rats.  Asian  Pac.  J.  Trop.  Disease.  5- 9.
Jeong,  S.M.,  Kim,  S.Y.,  Kim,  D.R.,  Jo, S.C.,  Nam,  D.U.,  Lee,  S.C.  2004. Effect  of  Heat  Treatment  on  the Antioxidant  Activity  of  Extracts from  Citrus  Peels.  J.  Agric.  Food Chem. 52 : 3389-3393.
Kawira,  J.A.  2005.  Penetapan  Sun Protection  Factor.  Laboratorium Farmasi Universitas Indonesia. Depok Jakarta.
Meda,  A.,  C.E.  Lamien,  M.  Romito,  J. Milliogo  dan  O.G  Nacoulina.  2005. Determination of the Total Phenolic, Flavonoid,  and  Proline  Content  in Burkina  Fasan  Money,  as  well  as their  Radical  Scavenging  Activity. Food Chemistry. 91 : 571-577.
Sahidi,  F.  dan  M.  Naczk.  1995.  Food Phenolics.  Tecnomicpub.  Co.  Inc.
Lancester-Basel. Surh, Y-J., (2003) Cancer Chemopreventive with Diertary phytochemicals. Nat. Rev. Cancer. 3: 768-780.
Wasitaadmatdja,  S.  M.  1997.  Penuntun Ilmu Kosmetik Medik. UI : Jakarta.
Filename: 2 Directory: G:\jurnal pharmacon\pharmacon ed.3\terbit Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title:
Subject:
Author:
Acer Keywords: Comments: Creation Date: 1/17/2013 10:14:00 PM Change Number: 27 Last Saved On: 1/31/2013 12:14:00 PM Last Saved By: User Total Editing Time: 89 Minutes Last Printed On: 1/31/2013 12:16:00 PM As of Last Complete Printing Number of Pages:  5 Number of Words:  1,956 (approx.) Number of Characters:
11,152 (approx.)