Efek Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Edamame ( Glycine Max (L) Merril) terhadap Bakteri E. Coli
The Antibacterial Effect of Ethanol Edamame Seeds (Glycine Max (L) Merril) Extract to E.coli Bacteria
Diayu Putri Akhita 1 , Edy Junaidi 2 , Septa Surya Wahyudi 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Farmakologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jalan Kalimantan No.37, Jember, Indonesia 68121 e-mail korespondensi: akhitadiayu@gmail.com

## Abstrak
Penyakit infeksi dapat terjadi pada seluruh bagian tubuh. Salah satu penyebab infeksi pada manusia adalah bakteri Escherichia coli. Escherichia coli adalah bakteri berbentuk batang, merupakan bakteri gram negatif, bersifat aerob fakultatif  dan  diklasifikasikan  anggota  keluarga  dari Enterobacteriaceae dari  kelas Gammaproteobacteria. Seiring perkembangan  zaman,  bakteri E.coli mengalami  resistensi  terhadap  beberapa  antibiotic,  sehingga  dibutuhkan alternatif  baru.  Terdapat  zat  antibakteri  golongan  isoflavon  yang  terkandung  dalam  edamame.  Genistein merupakan isoflavon utama pada kedelai edamame yang memiliki efek anti inflamasi, antibakteri, dan antioksidan. Tujuan  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui  apakah  ada  efek  antibakteri  dari  ekstrak  etanol  biji  edamame terhadap bakteri E.coli. Penelitian yang dilakukan adalah penelitian true experimental design secara in vitro dengan rancangan post  test  only  control  group  design. Hasil  rata-rata  diameter  zona  hambat  dianalisis  menggunakan metode Kruskal-Wallis dan didapatkan p=0,001 yang artinya terdapat perbedaan yang signifikan pada minimal dua kelompok.  Setelah  itu  dilakukan  uji post  hoc  Mann  Whitney dan  didapatkan  perbedaan  yang  bermakna  pada kelompok  kontrol  positif  dan  negatif  terhadap  semua  kelompok  namun  tidak  ada  perbedaan  pada  kelompok perlakuan, baik kelompok K1, K2 dan K3 terhadap semua kelompok.
Kata kunci : Edamame, Antibakteri, E.coli

## Abstract
Infectious diseases can occur in all parts of the body. One of the causes of infection in humans is Escherichia coli bacteria.  Escherichia  coli  is  a  rod-shaped  bacteria,  a  gram-negative  bacteria,  facultative  aerobics,  and  classified family member of Enterobacteriaceae from  the Gammaproteobacteria class. Along the times, E.coli bacteria have resistant to some antibiotics. So we need a new alternative. There is an antibacterial substance in the isoflavone group  contained  in  edamame.  Genistein  is  the  main  isoflavone  in  edamame  that  have  anti-inflammation, antibacterial, and antioxidant effects. The purpose of this study was to determine is there any antibacterial effects in ethanol edamame seeds extract to E.coli bacteria. This study used true experimental research design in vitro with a post-test only control group design. The average diameter results of the inhibition zone were analyzed using the Kruskal-Wallis method and obtained p = 0.001, which means there are significant differences in at least two groups. After that, the Mann Whitney post hoc test was conducted and a significant difference was found in the positive and negative control groups for all groups, but there was no difference in the treatment group, both groups K1, K2, and K3 for all groups.
Keywords : Edamame, Antibacterial, E.coli

## Pendahuluan
Penyakit infeksi masih merupakan masalah kesehatan  dunia,  baik  di  negara  maju  maupun berkembang,  salah  satunya  Indonesia  (Sari  dan  Erly 2015).  Penyakit  infeksi  dapat  terjadi  pada  seluruh bagian  tubuh,  seperti  saluran  pernafasan,  saluran cerna  serta  saluran  kemih.  Berdasarkan  hasil  Riset Kesehatan  Dasar  (2013)  diare  memiliki  insiden  dan prevalensi  pada  semua  umur  di  Indonesia  sebesar 3,5  %  dan  7,0  %,  sedangkan  menurut  Musdalipah (2018)  angka  kejadian  infeksi  saluran  kemih  di Indonesia  yaitu  sekitar  39%-60%.  Salah  satu penyebab  infeksi  pada  manusia  adalah  bakteri Escherichia coli .
Escherichia  coli adalah  bakteri  berbentuk  batang, merupakan  bakteri  gram  negatif,  bersifat  aerob fakultatif  dan  diklasifikasikan  anggota  keluarga  dari Enterobacteriaceae dari kelas Gammaproteobacteria .  Bakteri  ini  tumbuh  sebagai flora  normal  di  usus  manusia  dan  mempunyai banyak  peran  penting.  Namun  bakteri  ini  dapat menjadi  patogen  bila  jumlah  di  saluran  pencernaan meningkat atau berada di luar usus (Noviana, 2004).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Seta  e t  al .,  (2015) menyimpulkan  bahwa  hampir  semua  bakteri Escherichia  coli yang  ditemukan  pada  penelitian tersebut peka terhadap fosfomisin (92,4%), imipenem  (85,7%)  dan  amikasin  (82,2%).  Namun sebagian  besar  bakteri  telah  resisten  terhadap kotrimoksazol  (83,1%),  seftriakson  (58,8%)  dan gentamisin  (58%).  Penelitian  lainnya  yang  dilakukan oleh Renaldo dan Saputra (2015) juga menyimpulkan bahwa  antibiotik  dengan  kepekaan  terhadap E.coli paling  rendah  antara  lain  adalah  Ampisilin- sulbaktam, seftriakson, sefotaksim dan kotrimoksazol,  siprofloksasin  dan  levofloksasin dengan  kepekaan  kurang  dari  30%  sehingga diperlukannya alternatif antibakteri baru.
Edamame  merupakan  jenis  kedelai  yang  dipanen saat  polongnya    masih  muda  dan  berwarna  hijau, tepat sebelum kedelai matang dan kering, yaitu saat stadia R6 (pengisian biji 80 –  90% pengisian) (Asadi, 2009).  Kedelai  edamame  merupakan  produk unggulan  Jember  karena  mempunyai  berbagai keunggulan,  yaitu  produktivitas  tinggi,  kandungan gizi yang lebih, kecepatan waktu panen, pasar ekspor edamame masih luas dan yang terakhir adalah harga edamame  yang  cukup  tinggi  di  pasar  ekspor (Firmansyah dan Dhuha, 2014). Edamame mengandung  40%  protein,  33%  karbohidrat,  20% lemak  (tanpa  kolesterol),  dan  6%  serat.  Selain
kandungan gizi tersebut, edamame juga mengandung  kalsium,  zat  besi,  kalium,  asam askorbat,  dan  vitamin  E.  Menurut  Preedy  (2013), isoflavon  yang  terkandung  dalam  edamame diantaranya  genistein,  daidzein,  dan  glisitein. Genistein  yang  merupakan  salah  satu  isoflavon utama  pada  kedelai  edamame  memiliki  efek antibakteri,  antioksidan  dan  antiinflamasi  (Yang et al ., 2004). Kandungan isoflavon pada edamame rata- rata  sebesar  92,81  µg/g  dan  genistein  rata-rata sebesar  19,79  µ  g/g  (Mebrahtu et  al .,  2004). Genistein,  yang  merupakan  isoflavon  kedelai radioprotektif dan inhibitor protein kinase, menghambat  dari  invasi  bakteri  patogen  seperti Staphylococcus  aureus pada  sel  epitel  mamalia (Hong et  al .,  2006).  Genistein  adalah  penghambat topoisomerase  DNA  (McCabe  dan  Orrenius,  1993) yang berpartisipasi dalam berbagai aspek metabolisme DNA, dan banyak inhibitor topoisomerase  bakteri  bertindak  sebagai  agen antibakteri (Dong et al ., 2000). Mekanisme genistein yang  menghambat E.coli diduga  melalui  cara menginhibisi  aktivitas  enzim  topoisemerase  IV  dari bakteri E.coli .  Sehingga  DNA  baru  dan  lama  dari bakteri E.coli tetap  terhubung  dan  akhirnya  tidak terjadi  replikasi  karena  DNA  tersebut  tidak  terurai (Hong et  al. ,  2004).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  efek  anti  bakteri  ekstrak  etanol  biji edamame  ( Glycine  max (L)  Merrill)    terhadap pertumbuhan bakteri E. coli .

## Metode
Jenis  penelitian  yang  dilakukan  adalah  penelitian true experimental design . Penelitian ini menggunakan  rancangan post  test  only  control group design yaitu dalam penelitian ini terdapat lima kelompok  yang  dipilih  secara  random.  Salah  satu kelompok  diberi  perlakuan  yaitu  dengan  pemberian ekstrak etanol biji edamame yang disebut kelompok eksperimen  dan  kelompok  lainnya  tidak  diberi perlakuan  disebut  kelompok  kontrol  (Purwanto  dan Sulistyastuti,  2011).  Dalam  penelitian  ini  dilakukan tahap  pengujian  sumuran  untuk  menentukan diameter zona hambat.
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah koloni  bakteri E.  coli dari  stok  kultur  milik  Fakultas Kedokteran  Universitas  Jember  yang  disesuaikan dengan standar 0,5 Mc Farland (10 8 CFU/ml). Jumlah sampel  dari  25 total  sample  size ,  dibagi  dalam  5 kelompok  menghasilkan    jumlah  elemen  sampel sebanyak  5  buah.  Penelitian  ini  menggunakan
sampel  koloni  bakteri E.coli yang  terdapat  pada Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas Jember.
Ekstrak  etanol  edamame  yang  dipakai  terbuat  dari edamame yang diambil dari PT. Mitra Tani Dua Tujuh Jember. Setelah dicuci bersih dan  diangin-anginkan hingga  kadar  air  berkurang.  Edamame  dihaluskan menggunakan  blender  hingga  menjadi  serbuk  dan diekstraksi  dengan  pelarut  etanol  96%  dengan metode remaserasi selama 3 hari, kemudian disaring menggunakan  kertas  saring  untuk  mendapatkan filtrat.  Filtrat  yang  terkumpul  kemudian  diuapkan pada rotary  evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak etanol  biji  edamame.  Lalu  ekstrak  etanol  dilarutkan dengan  pelarut  DMSO  10%  sesuai  konsentrasi  yang digunakan  pada  kelompok  perlakuan.  Untuk konsentrasi ekstrak etanol biji edamame 400 mg/ml didapatkan dengan cara melarutkan 800 mg ekstrak etanol biji edamame dengan pelarut 2 ml DMSO 10% kemudian dihomogenkan selama 60 detik kemudian dilakukan  pengenceran  bertingkat  dengan  kelipatan setengahnya hingga 100 mg/ml.
Penelitian  ini  menggunakan  cara  sumuran  dalam melakukan uji kepekaan bakteri. Suspensi bakteri E. coli 10 8 CFU/ml  diratakan  pada  MHA,  kemudian dibuat  sumuran  dengan  tabung  logam  pencetak sumuran.  Pada  kelompok  K+,  diberikan  obat kotrimoksazol  dosis  25µg,  pada  kelompok  K- diberikan  larutan  DMSO  10%,  dan  pada  kelompook perlakuan  K1,  K2,  K3  diberikan  ekstrak  etanol  biji edamame  diteteskan  ke  dalam  sumuran  dengan konsentrasi 100 mg/ml, 200 mg/ml, dan 400 mg/ml. Selanjutnya  diletakkan  pada anaerobic  jar lalu diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam. Kemudian mengukur  zona  hambat  di  sekitar  sumuran  dengan menggunakan jangka sorong (Brooks et al ., 2007).
Setelah  dilakukan  penelitian,  data  diambil  dan dikumpulkan. Lalu data tersebut dianalisis menggunakan  perangkat  lunak  pengolah  data dengan  uji  komparatif Kruskal-Wallis karena  data tidak terdistribusi normal (Dahlan, 2015). Interpretasi hasilnya dianggap bermakna jika p value <  0,05.  Analisis  dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc Multiple Comparison metode Mann-Whitney untuk melihat kelompok mana yang berpengaruh.

## Hasil
Pada Gambar 1 dapat dilihat hasil dari zona hambat yang dibentuk oleh kelompok perlakuan K1, K2, dan
K3.  Hasil  ini  didapatkan  setelah  inkubasi  bakteri selama 24 jam pada suhu 37 o .
Gambar 1. Hasil zona hambat kelompok perlakuan
Dari  hasil  ini  didapatkan  data  dari  pengukuran menggunakan  jangka  sorong  sebagai  berikut  (Tabel 1).
Tabel 1 Hasil Pengukuran Zona  Hambat pada Media MHA dalam Satuan milimeter
Tabel  1  menunjukkan  rerata  zona  hambat  terbesar pada  kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan kotrimoksazol  25  µg,  sebesar  17,820  mm  ±  0,68, sedangkan  rerata  zona  hambat  terkecil  yang didapatkan pada penelitian ini sebesar 0,0 mm pada kontrol  negatif.  Kelompok  perlakuan  didapatkan adanya  zona  hambat  pada  media  MHA  yang  tidak terlalu  besar.  Uji  normalitas  dan  homogenitas dilakukan  untuk  mengetahui  perbedaan  zona hambat    pada  tiap  perlakuan.  Uji  normalitas  yang digunakan  yaitu  dengan  metode Shapiro-Wilk p  > 0,05.  Hasil  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa distribusi  data  kelima  kelompok  perlakuan  adalah normal.  Hasil  uji  homogenitas  pada  penelitian  ini yakni  p=0,001.  Nilai  uji  homogenitas  dikatakan memiliki  data  dengan  varian  sama  apabila  memiliki nilai  (p  >  0,05)  sehingga  dari  data  tersebut menunjukkan varians data adalah tidak sama.
Data  penelitian  ini  memiliki  distribusi  normal  dan variansi  tidak  homogen  sehingga  dianalisis  dengan
Kelompok Perlakuan
Rata-rata zona hambat (mm ± SD) K(+) K(-) K1 K2 K3 17,820 ± 0,68 0,0 ± 0,0 0,260 ± 0,89 0,300 ± 0,707 0,360± 0,114
menggunakan  metode Kruskal  Wallis .  Hasil  uji Kruskal Wallis pada  penelitian ini adalah p=0,001 (p <  0,05)  yang  artinya  terdapat  perbedaan  yang signifikan pada minimal dua kelompok.
Hasil  analisis Kruskal  Wallis dilanjutkan  dengan analisis menggunakan post hoc Mann-Whitney untuk mengetahui  adanya  perbedaan  secara  signifikan antar  kelompok.  Hasil  Uji Kruskal  Wallis yang dilanjutkan  dengan post  hoc Mann-Whitney dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Hasil  analisis  zona  hambat  dengan  uji Mann- Whitney
Berdasarkan data hasil uji Mann-Whitney , kelompok kontrol  negatif  (K(-))  dan  kelompok  kontrol  positif (K(+))  memiliki  perbedaan  yang  bermakna  dengan semua  kelompok  perlakuan,  dengan  nilai  p  <  0,05. Kelompok  perlakuan yang tidak memiliki  perbedaan ada  di  kelompok  perlakuan  1  dengan  2,  kelompok perlakuan  1  dengan  3,  dan  kelompok  perlakuan  2 dengan  3  dengan  nilai  p=0,371,  p=0,154,  dan p=0,324.

## Pembahasan
Pada penelitian ini, didapatkan zona hambat sebesar ≤  5mm  pada  semua  kelompok  perlakuan  yaitu ekstrak etanol biji edamame dengan konsentrasi 100 mg/ml, 200 mg/ml, dan 400 mg/ml. Sedangkan pada kelompok  positif  yaitu  dengan  pemberian  antibiotik kotrimoksazol  didapatkan  adanya  zona  hambat sebesar 17,820 mm. Menurut penilaian zona hambat menurut  Susanto,  Sudrajat,  dan  Ruga  (2012), diameter zona hambat ≤ 5 mm dikategorikan lemah; zona  hambat  6-10  mm  dikategorikan  sedang;  zona hambat 11-20 mm dikategorikan kuat, zona hambat ≥ 21 mm dikategorikan sangat kuat.
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini didapatkan  dari  kultur E.  coli yang  dimiliki Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas  Jember  namun  tidak  diketahui  strain E.
coli yang  dipakai.  Pada  penelitian  yang  dilakukan Chalestori (2017) dan Sharma (2011) tidak dijelaskan strain E.  coli apa  yang  dipakai.  Metode  yang  dipilih adalah  metode  sumuran,  sedangkan  yang  dilakukan oleh  Chalestori  (2017)  dan  Prestiandari  (2018) merupakan  metode  disk  difusi.  Menurut  penelitian yang dilakukan Haryati et al. (2017) metode sumuran dinilai  lebih  menghasilkan  efek  zona  hambat  yang lebih besar. Selain itu metode sumuran lebih mudah dalam  mengukur  luas  zona  hambat  yang  terbentuk karena  aktivitas  isolat  tidak  hanya  berada  di  atas permukaan agar tetapi juga sampai ke bagian bawah agar.  Metode  sumuran  juga  dikatakan  lebih  cocok untuk  mengukur  kadar  antibakteri  ekstrak  tanaman karena  konsentrasi  yang  digunakan  dapat  langsung terserap dalam media.
Tidak terbentuknya zona hambat pada media bakteri E.  coli dijelaskan  melalui  dua  mekanisme;  pertama, diduga  genistein  bekerja  dengan  cara  menginhibisi aktivitas  enzim  Topoisomerase  IV  daripada  enzim DNA Gyrase yang  lebih  dipakai  oleh  bakteri E.  coli; kedua,  pada E.coli target  utama  dari  obat  yang menargetkan  topo-II  adalah  DNA gyrase sedangkan genistein  lebih  mentarget  Topoisomerase  IV (Verdrengh, 2004).
Genistein  dan  antibiotik  sintetik  dari  golongan kuinolon  mempunyai  persamaan  dalam  cara kerjanya,  yaitu  menghambat  pertumbuhan  bakteri melalui penstabilan reaksi intermediat topoisomerase II dan DNA, sehingga tidak terbentuk kompleks pembelahan DNA yang baru dan akhirnya terjadi  lisis  pada  bakteri  (Verdrengh et  al. ,  2004). Enzim  topoisomerase  II  yang  terdapat  pada  bakteri antara lain Topoisomerase IV dan DNA gyrase.
Hal  ini  juga  berkaitan  dengan  penelitian  yang dilakukan oleh Drlica et al . (1971), yang menjelaskan mekanisme resistensi yaitu pada bakteri gram positif yang mengalami perubahan adalah enzim topoisomerase  IV  sedangkan  pada  bakteri  gram negatif  yang  mengalami  perubahan  adalah  enzim DNA gyrase sehinga  membuat  bakteri  menjadi resisten. Selain itu bakteri gram negatif lebih resistan terhadap  komponen  antibiotik  diakibatkan  oleh struktur  membran  luar  polisakaridanya  yang  lebih hidrofilik,  sehingga  menyebabkan  makro  molekul dan  hidrofobik  molekul  yang  terkandung  pada komponen antimikrobial lebih susah untuk menembus  dinding  selnya  (Chalestori et  al. ,  2017). Penelitian  yang  dilakukan  Adamus-Bialek  (2013) menyatakan  bahwa  terdapat  strain  bakteri E.  coli yang  resisten  terhadap  beberapa  kelompok
Kelompok Perlakuan K (+) K (-) K1 K2 K3 K (+) - 0.005 0.008 0.008 0.009 K (-) 0.005 - 0.005 0.005 0.005 K1 0.008 0.005 - 0.371 0.154 K2 0.008 0.005 0.371 - 0.324 K3 0.009 0.005 0.154 0.324 -
antibiotik.  Jika  sebuah  strain  bakteri  resisten terhadap  salah  satu  antibiotik  dalam  kelompok, maka strain tersebut biasanya juga resisten terhadap sebagian  besar  antibiotik  dalam  kelompok  yang sama.
Selain  itu  menurut  Dhayakaran¸ et  al. (2015) menyatakan  bahwa  ekstrak  kasar  ( crude  extract ) mengandung  bentuk  isoflavon  terkonjugasi  atau glikosidik  selain  bentuk  bebas  atau  aglikon. Keberadaan  gula  dapat  mengurangi  aktivitas isoflavon  melawan  bakteri  karena  gula  merupakan sumber makanan bakteri (Kapoor et al , 2007). Dalam penelitian  ini  digunakan  ekstrak  kasar  isoflavon secara  keseluruhan  (termasuk  bentuk  terkonjugasi) yang  dapat  mengurangi  aktivitasnya  terhadap spesies bakteri.
Perbedaan  hasil  terhadap  penelitian  sebelumnya dapat  dijelaskan  karena  perbedaan  varietas  yang digunakan  pada  penelitian,  yaitu  varietas  SPM-1 (Balitkabi, 2019), sedangkan penelitian Chalestori et al .,  (2017)  menggunakan  varietas  M7  dan  M9  yang mengandung  lebih  banyak  saponin,  sehingga menimbulkan zona hambat pada media bakteri.
Menurut  Dewi  (2015),  penelitian  yang  dilakukannya mendapatkan  hasil  kandungan  genistein  ekstrak etanol  edamame  yang  ada  di  Jember  menggunakan metode  sonikasi  yaitu  0,0252  ±  2,066  %  b/b, maserasi  kinetik  0,0167  ±  1,931  %  b/b,  dan soxhletasi  0,0436  ±  1,012  %  b/b.  Perbedaan kandungan  pada  beberapa  metode  tersebut  dapat dijelaskan  karena  hal  ini  diduga  bahwa  proses pemanasan  mampu  merubah  bentuk  isoflavon glukosida,  isoflavon  asetil  glukosida  dan  isoflavon malonil  glukosida  menjadi  bentuk  aglikon  dan senyawa  turunannya.    Sedangkan  penelitian  yang dilakukan oleh Fukutake (1996) kandungan genistein pada  kedelai  yang  ada  di  Jepang  sekitar    pada  4,6 µg/g  makanan.  Penelitian  ini  juga  menyatakan semakin  kedelai  difermentasi  maka  kandungan genisteinnya akan semakin tinggi.

## Kesimpulan
Kesimpulan  dari  hasil  penelitian  ini  adalah  terdapat efek  antibakteri  yang  sangat  lemah  dari  ekstrak etanol  biji  edamame Glycinne  max  L. (Merril) terhadap  pertumbuhan  bakteri Eschericieae coli secara in  vitro .  Saran  yang  dapat  diberikan  oleh peneliti dari penelitian ini adalah perlu dilakukannya tinjauan  ulang  tentang  kandungan  zat  aktif  dari varian edamame yang ada di Jember.

## Daftar Pustaka
Adamus-Bialek  W et  al .  2013. Comparison  of antibiotic resistance patterns in  collections of Escherichia  coli  and  Proteus  mirabilis uropathogenic  strains. Mol  Biol  Rep  (2013) 40:3429–3435
Asadi.  2009. Karakteristik  plasma  nutfah  untuk perbaikan  varietas  kedelai  sayur  (edamame ). Buletin Plasma Nutfah 15 (2): 59-69.
Balai  Penelitian  Tanaman  Aneka  Kacang  dan  Umbi.
Kedelai Sayur Edamame. http://balitkabi.litbang.pertanian.go.id/berita /kedelai-sayur-edamame/ [Diakses pada tanggal 23 Maret 2019]
Brooks  GF.  2000. Mikrobiologi  kedokteran Ed.1. Jakarta: Salemba Medika.
Dahlan  MS.  2013. Statistik  untuk  Kedokteran  dan
Kesehatan: Deskriptif, Bivariat,dan Multivariat,  Dilengkapi  Aplikasi  dengan Menggunakan SPSS . Edisi 5. Jakarta: Salemba Medika.
Dewi,  E.N.A.  2015. Pengaruh  Perbedaan  Metode Ekstraksi  Terhadap  Kadar  Genistein  Dan Aktivitas  Hambatan  Tirosinase  Edamame (Glycine Max) In Vitro.
Dhayakaran RPA et al., 2015. Characterization of antimicrobial efficacy of soy isoflavones against pathogenic biofilms. LWT - Food Science and Technology 63 (2015) 859e865
Chaleshtori  HSA,  Ataie  Kachoie  M  dan  Hashemi  Jazi SM.  (2017). Antibacterial  effects  of  the methanolic  extract  of  Glycine  Max  (Soybean) . Microbiology Research, 8(2). doi:10.4081/mr.2017.7319
Drlica  K,  Zhao  X.  1997 .  DNA  gyrase,  topoisomerase IV,  and  the  4-quinolones. Microbiol  Mol  Biol Rev. 61(3):377-92.
Fukutake  M,  Takahashi  M,  Ishida  K,  Kawamura  H,
Sugimura T, dan Wakabayashi K.
1996. Quantification  of  genistein  and  genistin in  soybeans  and  soybean  products.  Food  and Chemical Toxicology, 34(5), 457–461 .
Firmansyah  dan  Dhuha.  2014.  Kedelai  Jember
Tembus Pasar Internasional Pusdatin Sekretariat  Kabinet  Republik  Indonesia.
http://setkab.go.id/kedelai-jember-tembus-
pasar-internasional/ . [Diakses pada 11
November 2018] Haryati  SD,  Darmawati  S,  Wilson  W.  2017. Perbandingan  Efek  Ekstrak  Buah  Alpukat (Persea Americana Mill) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas Aeruginosa    dengan  Metode  Disk  dan Sumuran. Implementasi Penelitian dan Pengabdian  Masyarakat  Untuk  Peningkatan Kekayaan  Intelektual.  30  September  2017.
Universitas Muhammadiyah Semarang
Hong H, Landauer MR, Foriska MA,  dan Ledney GD. 2006. Antibacterial  activity  of  the  soy isoflavone genistein . Journal of Basic Microbiology. 46(4), 329–335. doi:10.1002/jobm.200510073
Kemenkes  RI.  2013. Riset  Kesehatan  Dasar;
RISKESDAS . Jakarta: Balitbang Kemenkes RI
Mebrahtu  T,  Mohamed  A,  Wang  CY,  Andrehban  T.
2004. Analysis  of  isoflavones  contains  in vegetable  soybean .  Plant  Food  for  Human Nutrition. 59: 55-61.
Musdalipah. 2018. Identifikasi Drug Related Problem (Drp)    Pada  Pasien  Infeksi  Saluran  Kemih    Di Rumah  Sakit  Bhayangkara  Kendari .  Jurnal Kesehatan Vol 11 (1)
Noviana  H.  2004. Pola  kepekaan  antibiotika Escherichia  coli  yang  diisolasi  dari  berbagai spesimen  klinis. Jurnal  Kedokteran  Trisakti. 23(4)
Preedy VR. 2013. B Vitamins and Folate : Chemistry, Analysis,  Function  and  Effects .  Cambridge  : The Royal Society of Chemistry.
Prestiandari  E,  Hermawati  S,  Dewi  LR.  2018. Daya
Hambat  Ekstrak  Buah  Delima  Merah  (Punica granatum  Linn)  terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus  aureus  (The  Inhibition  of  Red Pomegranate  Fruit  Extract  (Punica  granatum Linn)  on  The  Growth  of  Staphylococcus
aureus ).  e-Jurnal  Pustaka  Kesehatan,  vol.  6 (no. 1)
Purwanto  EA  dan  Sulistyastuti  DR.  2011. Metode
Penelitian  Kuantitatif  untuk  Administrasi Publik dan Masalah-Masalah Sosial . Yogyakarta: Gava Media.
Ronaldo  J  dan  Seputra  KP.  2015. Pola  Bakteri  Dan Sensitivitas  Bakteri  Terhadap  Antibiotik. Guideline Penatalaksanaan Infeksi  Saluran
Kemih  dan  Genitalia Pria 2015
Sari  PS  dan  Erly  DA.  2015. Perbandingan  Efektivitas Daya  Hambat  Kotrimoksazol  Generik  dan Paten terhadap Pertumbuhan Bakteri
Escherichia  coli  sebagai  Penyebab  Infeksi Saluran  Kemih  secara  In  Vitro .  Jurnal Kesehatan Andalas. 3(1).
Seta  IS,  Indah  HL  dan  Rizka.  2015. Pola  Kepekaan Bakteri  Penyebab  Infeksi  Saluran  Kemih  pada Anak Terhadap Antimikroba. MKS, Th. 47, No. 2.
Sharma  A.  2011. Antibacterial  activity  of  ethanolic extracts of some arid zone plant . International Journal  of  PharmTech  Research.  Vol.  3,  No.1, pp 283-286,
Susanto  S  dan    Ruga  R.    (2012 ).    Studi    Kandungan Bahan    Aktif    Tumbuhan  Meranti  Merah (Shorea  leprosula  Miq)  sebagai  sumber senyawa  antibakteri .  Mulawarman  Scientifie, 11(12), 181–190.
Yang  Z,  Kulkarni  K,  Zhu  W,  Hu  M.  2012. Bioavailability  and  pharmakokinetics  of genistein:  mechanistic  studies  on  its  ADME . Anticancer  Agent  Med  chem.  12(10):  1264- 1280.
Verdrengh  M,  Collins  LV,  Bergin  P  dan  Tarkowski  A,
2004. Phytoestrogen  genistein  as  an  anti- staphylococcal agent . Microbes Infect., 6, 86– 92.