## PHARMACON-PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN BUAH CABAI RAWIT MELALUI PENGUJIAN DPPH
Irma Antasionasti 1* , Surya Sumantri Abdullah 1 , Jainer Pasca Siampa 1 , dan Imam Jayanto 1
1 Program Studi Farmasi, Universitas Sam Ratulangi, Manado, Sulawesi Utara, Indonesia, 95115
*Email: irmaantasionasti07@gmail.com

## ABSTRACT
Red chili (Capsicum frutescens L.) is a spice that has an important role as a raw material for food, industry, and medicine. Therefore, the exploration of red chili as a natural antioxidant is highly needed. The study aims to investigate the antioxidant activity of red chili from Kawangkoan, Tomohon, and Remboken using DPPH radical assay. Red chili was extracted using maceration technique by ethanol 70% as a solvent and tested for antioxidant activity using spectrophotometer UV-Vis at 517 nm. The antioxidant activity of red chili extract from Kawangkoan, Tomohon, and Remboken were 80,215 ± 2,486; 100,1 ± 0,140; and 97,136 ± 0,026 µg/mL, respectively. Based on statistical test, there are significant differences between the three samples of red chili (P>0,05), namely  red  chili  extract  from  Kawangkoan  is  different  with  red  chili  extract  from Tomohon  and Remboken,  whereas  not  significant  differences  between  red  chili  extract  from  Tomohon  and  Remboken (P>0,05). However, the antioxidant activity from three samples have strong antioxidant activity (IC 50 50-100 µg/mL), so that it have potential to be a antioxidant in the food and pharmaceutical industries.
.
Keywords : Red Chili, Antioxidant, dpph

## ABSTRAK
Cabai  rawit  ( Capsicum  frutescens L.)  merupakan  salah  satu  rempah  yang  sangat  penting  untuk  makanan, industry,  dan  obat.  Oleh  karena  itu,  eksplorasi  cabai  rawit  sebagai  antioksidan  alami  sangat  dibutuhkan. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan cabai rawit merah dari daerah Kawangkoan, Tomohon,  dan  Remboken  menggunakan  pengujian  DPPH.  Cabai  rawit  diekstraksi  menggunakan  teknik maserasi menggunakan etanol 70% sebagai pelarut dan pengujian antioksidan menggunakan spektrofotometer UV-Vis  pada  Panjang  gelombang  517  nm.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  cabai  rawit  dari  Kawangkoan, Tomohon,  dan  Remboken  secara  berturut-turut  adalah  80,215  ±  2,486;  100,1  ±  0,140;  and  97,136  ±  0,026 µg/mL. Berdasarkan analisis data statistic, terdapat perbedaan bermakna dari ketiga sampel ekstrak cabai rawit (P>0,05), yaitu ekstrak cabai rawit dari Kawangkoan berbeda dengan ekstrak cabai rawit dari Tomohon dan Remboken  (P>0,05).  Namun,  aktivitas  antioksidan  dari  ketiga  sampel  masih  dalamkategori  aktivitas antioksidan kuat (IC 50 50-100 µg/mL), sehingga ektrak cabai rawit memili potensi sebagai antioksidan pada makanan dan industry farmasi.
Kata kunci : Cabai rawit, antioksidan, dpph

## PHARMACON-PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## Pendahuluan
Cabai  merupakan  salah  satu  komoditas buah-buahan yang penting di Indonesia karena banyak  digunakan  sebagai  pewarna  dan penyedap  rasa  agen  dalam  banyak  makanan Indonesia.  Ada  dua  jenis  cabai  dan  dijual  di setiap  pasar  tradisional  atau  modern  di Indonesia  yaitu Capsicum  annum L.  dan C. frustescens L.  C.  annum  memiliki  banyak varietas seperti Cabai merah besar (C. annum L.  var  abbreviata),  cabai  merah  keriting  (C. annum  L  var  longum  Sendt)  dan  paprika  (C. annum  L.  var  grossum)  adalah  yang  paling terkenal [Zhigila et al ., 2014 dan Octaviani et al .,  2014].  Cabai  dikenal  karena  karakteristik aroma dan rasa pedasnya yang membuat cabai banyak  digunakan  di  banyak  kuliner  dunia [Naccarato et al ., 2016].
Cabai  kaya  akan  karbohidrat,  protein, lemak, vitamin (vitamin A, vitamin B, vitamin C,  dan  vitamin  E),  flavonoid,  capsaicin, mineral, air, dan serat. Cabai juga mengandung senyawa  antioksidan  antara  lain  vitamin  K, fitosterol, beta karoten dan beta cryptoxanchin (Anggraeni  dan  Fadlil,  2013).  Kandungan vitamin  C  pada  buah  cabai  rawit  merupakan suatu  antioksidan  enzimatis  yang  bekerja dengan cara pembersih senyawa radikal bebas baru  (Firdaus et  al .,  2013).  Radikal  bebas merupakan  molekul  atau  senyawa  dapat berdiri  sendiri  mengandung  satu  atau  lebih elektron  tidak  berpasangan  (Reni,  2018). Dampak dari reaktivitas senyawa radikal bebas dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  struktur sel  yang  mengganggu  fisiologi  sel,  bahkan akhirnya  seluruh  sel  menjadi  rusak  sehingga terjadi inflamasi, proses penuaan, menurunnya kekebalan, kanker dan atherosclerosis ( Reni, 2018).
Salah satu metode yang dapat digunakan untuk  mengukur  aktivitas  antioksidan  adalah metode
DPPH ( 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl). Uji  DPPH  didasarkan  pada reduksi warna ungu larutan DPPH (Floegel et al .,  2011),  dimana  terjad  reaksi  transfer atom hidrogen  antara  antioksidan  dan  radikal peroksil  (Wootton-Beard et  al .,  2011). Elektron  yang  tidak  berpasangan  dalam radikal  bebas  DPPH  memberikan  absorpsi
yang  kuat  pada  panjang  gelombang  517  nm dan berwarna ungu. Warna akan berubah dari ungu  menjadi  kuning  sebagai  absorptifitas molar  dari  radikal  DPPH  pada  panjang gelombang  517  nm  menurun  dari  9660 menjadi 1640 ketika elektron tidak berpasangan dari radikal bebas DPPH menjadi berpasangan dengan hidrogen dari antioksidan penangkap  radikal  bebas  menjadi  bentuk DPPH-H tereduksi. Dekolorisasi yang dihasilkan  merupakan  stoikiometri  dengan jumlah  elektron  yang  ditangkap  (Prakash, 2011). Menurut  penelitian  Nascimento  et  al., (2013),  ekstrak  etanol  buah  cabai  rawit memiliki  aktivitas  antioksidan  ketika  diuji menggunakan  metode  DPPH  dengan  nilai IC50 sebesar 302,3±3,97 µg/mL. Oleh karena itu, berdasarkan uraian diatas, perlu dilakukan pengujian  aktivitas  antioksidan  buah  cabai rawit dari beberapa daerah di Sulawesi Utara

## Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain : neraca analitik  dengan  kepekaan  0,1  mg  (Mettler Toledo), spektrofotometer UV-VIS (UV 1800- Shimadzu),  dan  alat-alat  gelas  (Pyrex)  yang lazim  digunakan  di  Laboratorium  Kimia Analisis.
Bahan yang digunakan antara lain : buah cabai  yang  berasal  dari  Kawangkoan,
Tomohon,dan  Remboken,  Provinsi  Sulawesi Utara,
Indonesia,
2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH) (Sigma-Aldrich),
ethanol p.a. (Merck), aquadest (Bratachem). Metode
1. Preparasi Sampel
Buah cabai dicuci bersih, dipotong kecil- kecil  dan  dikeringkan.  Simplisia  yang  telah kering  dihaluskan  dan  dilakukan  pengayakan dengan ukuran 90 mesh.
2. Ekstraksi Sampel
Serbuk  sampel  ditimbang  sebanyak  1  g dan  ditambahkan  dengan  10  mL  etanol  70% dan diekstraksi selama 30 menit menggunakan ultrasonikator  dengan  frekuensi  42  kHz  pada suhu ruang. Ekstrak disaring dalam botol yang bersih kemudian ditutup rapat.
3. Uji Aktivitas Antioksidan DPPH

## PHARMACON-PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Aktivitas  antioksidan  radikal  DPPH dilakukan berdasarkan Kikuzaki et al ., (2002) dengan modifikasi. Pada pengujian ini diambil 4 mL dari masing-masing larutan sampel (80, 160, 240, 320, 400 µg/mL) dan ditambahkan 1 mL DPPH 0,4 mM. Campuran divortex selama 1 menit dan didiamkan selama 15 menit pada suhu 25 o C di ruang gelap. Absorbansi masing- masing larutan diukur menggunakan spektrofotometer  pada  Panjang  gelombang maksimum  517  nm  menggunakan  etanol sebagai blanko. Aktivitas antioksidan dihitung sebagai  nilai  IC 50 .  Nilai  IC 50 diperoleh  dari persamaan  regresi  linier  hasil  ploting  persen inhibisi dengan konsentrasi (µg/mL). Persamaan berikut menghitung persen inhibisi:
% Inhibisi =

## Hasil dan Pembahasan
Sejumlah besar bukti telah menunjukkan peran kunci untuk radikal bebas dalam proses penuaan  dan  penyakit  degeneratif  seperti kanker, penyakit kardiovaskular, katarak, dan sistem  kekebalan  tubuh  serta  disfungsi  otak (Park et  al .,  2017).  Salah  satu  buah  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  yaitu  buah cabai.  Ekstrak  buah  cabai  rawit  memiliki aktivitas  antioksidan  sebesar  505,67  ±  0,56 µmol  Fe 2+ /g  ekstrak  pada  konsentrasi  100 µg/ml.  Aktivitas  antioksidan  yang  diberikan cukup besar jika dibandingkan dengan vitamin C  sebagai  control  positif  yaitu  726,33  ±  3,37 µmol  Fe 2+ /g  vitamin  C  pada  konsentrasi  100 µg/ml (Fridiana et al ., 2019).
Selain  menggunakan  metode  FRAP, Angelista  (2017)  dan  Rinanda  (2019)  telah melakukan  pengujian  aktivitas  antioksidan buah  cabai  menggunakan  metode  DPPH. Indicator  uji  aktivitas  antioksidan  DPPH adalah nilai IC 50 yang merupakan konsentrasi substrat  yang  dapat  menyebabkan  hilangnya aktivitas  DPPH  sebesar  50%.  Hilangnya aktivitas  DPPH  sebesar  50%  ditandai  dengan adanya  perubahan  warna  larutan  dari  ungu menjadi  kuning  pucat  ketika  direaksikan dengan larutan yang mampu medonorkan atom hidrogen. Hasil penentuan aktivitas
antioksidan  ekstrak  cabai  rawit  uji  DPPH disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  cabai
rawit Sampel DPPH (IC 50 -µg/mL ± SD) Ekstrak Cabai Rawit Kawangkoan 80,215 ± 2,486 Ekstrak Cabai Rawit Tomohon 100,1 ± 0,140 Ekstrak Cabai Rawit Remboken 97,136 ± 0,026
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  ekstrak cabai  rawit  Kawangkoan  dan  Remboken memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kuat dibandingkan  dengan  ekstrak  cabai  rawit Tomohon  (IC 50 berada  pada  rentang  100-150 µg/mL yang mengindikasikan bahwa aktivitas antioksidan yang diberikan sedang) (Ervina et al .,  2016).  Walaupun  memiliki  aktivitas antioksidan yang sedang berdasarkan pengujian DPPH, ekstrak cabai rawit Tomohon memiliki aktivitas yang lebih besar dibandingkan  dengan  fraksi-toluen  etil  asetat ekstrak etanol buah cabai rawit (IC 50 347,998 ±  19,359)  yang  dilaporkan  oleh  Angelista (2017). Hal  yang  sama juga ditunjukkan oleh penelitian  Mulia et  al .(2016),  cabe  jawa  dari daerah Karangasem dan Pamekasan memiliki aktivitas  antioksidan  tergolong  lemah  dengan nilai IC 50 masing-masing sebesar 285.61 ppm dan 288.037 ppm.
Aktivitas  antioksidan erat  hubungannya dengan  kandungan  metabolit  sekunder  yang berfungsi  sebagai  antioksidan.  Senyawa bioaktif  yang  ada  pada  cabai  seperti  fenol, flavonoid  dan  capsaicinoid  menurut  Chen et al .  (2012)  memiliki  korelasi  yang  positif terhadap  aktivitas  antioksidan.  Sebagaimana yang dilaporkan oleh Mulia et al .(2016) bahwa kadar total senyawa fenolik yang berasal dari Karangasem lebih tinggi dibandingkan dengan yang  berasal  dari  Pamekasan.  Hal  ini berkorelasi positif dengan aktivitas antioksidan  yang  diberikan,  yang  mana  cabe jawa  dari  Karangasem  dengan  kandungan fenolik  lebih  besar  memiliki  nilai  IC 50 lebih rendah  dibandingkan  dengan  cabe  jawa  dari

## PHARMACON-PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Pamekasan. Nascimento et al . (2014) menambahkan bahwa capsaicin yang terkandung dalam buah cabai selain memberikan rasa pedas juga memiliki aktivitas antioksidan.  Senyawa  fenolik  dan  capsaisin bersifat sebagai antioksdian karena kemampuannya mendonorkan atom hidrogen, menangkap radikal bebas dan sebagai pengikat logam. Aktivitas antioksidan sangat ditentukan oleh  reaktivitasnya  sebagai  agen  pendonor hidrogen.
Selanjutnya,  untuk  membandingkan aktivitas  yang  diberikan  oleh  ekstrak  cabai rawit  dari  Kawangkoan,  Tomohon,  dan Remboken,  dilakukan  analisis  statistic.  Hasil analisis  diawali  dengan  uji  Kolmogorov Smirnov,  hasil  menunjukkan  bahwa  data aktivitas  antioksidan  ekstrak  cabai  rawit terdistribusi  normal  dengan  nilai  asiymp.Sig (2-tailed)  sebesar  1,000  >  0,05.  Dengan demikian, asumsi atau persyaratan normalitas dalam model regresi sudah terpenuhi. Setelah itu,  dilakukan  pengujian  Levene  untuk mengetahui homogenitas varian dan diperoleh nilai  sig.  0,007  <  0,05.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  aktivitas  antioksidan  setiap  ekstrak tidak  homogen.  Walaupun  tidak  homogen, namun data aktivitas antioksidan ekstrak cabai rawit  terdistibusi  normal.  Oleh  karena  itu, dilakukan pengujian parametrik menggunakan post  hoc  test.  Berdasarkan  uji  parametrik tersebut,  terdapat  perbedaan  bermakna  antara ekstrak  cabai  rawit  Tomohon  dan  Remboken (P>0,05)

## Kesimpulan
Aktivitas antioksidan ekstrak cabai rawit dari  Kawangkoan,  Tomohon,  dan  Remboken secara  berturut-turut  adalah  80,215  ±  2,486; 100,1 ± 0,140; and 97,136 ± 0,026 µg/mL yang mana  terdapat  perbedaan  bermakna  pada aktivitas  antioksidan  ekstrak  cabai  rawit Tomohon dan ekstrak cabai rawit Remboken. n

## Daftar Pustaka
Angelista,  R.  H.  E.  2016.  Penetapan  Kadar Kapsaisin dan Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi  Toluen-Etil  Asetat  Buah  Cabai
Rawit (Capsicum frustescens L.) dengan Metode 2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil
(DPPH). [Skripsi] .  Fakultas  Farmasi Universitas Sanata Dharma. Yogyakarta. Angraeni,  N.T  &  Fadlil,  A.  (2013).  Sistem identifikasi  citra  jenis  cabai  (Capsicum annum L.) Menggunakan Metode Klasifikasi  City  Block  Distance.  Jurnal
Sarjana Teknik Informatika, 1, (2), 409- 410.
Chen,  L,  Hwang,  J,  E,  Gu,  K,  M,  Kim,  J,  H, Choi, B, Song, K, S, Park Y, Kang, Y, H. 2012. Comparative study of antioxidant effects  of  five  Korean  varieties  red pepper  (Capsicum  annuum  L)  extracts from  various  parts  including  placenta, stalk,  and  pericarp.  Food  Science  and Biotechnology. 21(3):715-721
Ervina, M., Nawu, Y. E., & Esar, S. Y. (2016).
Comparison  of  in  vitro  antioxidant activity of infusion, extract and fractions of  Indonesian  Cinnamon  (Cinnamomum burmannii)  bark. International  Food Research Journal , 23 (3), 1346–1350.
Firdaus, Muhammad., Prihatno, Asep Awaludin.,  &  Nurdiani,Rahmi.  (2013). Tanaman Bakau Biologi dan Bioaktivitas Malang: Universitas Brawijaya Press. Floegel,  A.,  Kim,  D.-O.,  Chung,  S.-J.,  Koo, S.I., dan Chun, O.K., 2011. Comparison of  ABTS/DPPH  assays  to  measure antioxidant capacity in popular antioxidant-rich  US  foods. Journal  of Food  Composition  and  Analysis , 24 : 1043–1048.
Fridiana, Slamet, Arifiyanto, D., dan  Wirasti.
2019. UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PARTISI n-HEKSAN, METANOL DAN
EKSTRAK  BUAH  CABAI  RAWIT (Capsicum  frutescens  L.)  DENGAN METODE  FRAP  (Ferric  Reducing Antioxidant Power). Universitas Muhamadiyah  Pekajangan  Pekalongan. 1-9. Istininrum,  Reni  Banowati.”Analysis  Total Antioxidant  Capacity  on.  Ingredients  of Lotek Menu by Ferric Reducing Antioxidant  Power  Assay”  Eksaktaa  13
(2013): 40-48.
Kikuzaki,  Hiroe;Hisamoto,  Masahi;  Hirose,
Kanae;  Akiyama,  Kayo;  Taniguchi,  H.
(2002).  Antioxidant  properties  of  ferulic acid  and  its  related  compounds. Journal of  Agricultural  and  Food  Chemistry ,
50 (7), 2161–2168.
Mulia, K.,  Hasan,  A. E. Z., dan Suryani. otal Fenolik, Aktivitas Antikanker dan
Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Cabe  Jawa (Piper retrofractum Vahl) dari Pamekasan dan Karang Asem. Current Biochemistry. 3(2): 80-90. Naccarato,  A.,  Furia,  E.,  Sindona,  G.,  and Tagarelli,  A.,  2016,  Multivariate  class modeling
techniques applied to multielement
analysis
for
the verification of the geographical origin of chili pepper, Food Chem., 206, 217–222. Nascimento,  P.L.A.,  Nascimento,  T.C.E.S., Ramos,  N.S.M.,  Silva,  G.R.,  Camara, C.A.,  Silva,  T.M.,  2013.  Antimicrobial and  antioxidant  activities  of  Pimenta malagueta ( Capsicum frustescens ).
Academic Journal . 7(27), 3526-3533. Octaviani,  T.,  Guntarti,  A.,  and  Susanti,  H., 2014,  Penetapan  kadar  β-karoten  pada beberapa  jenis  cabe  (Genus  Capsicum)
dengan
metode spektrofotometri tampak, Pharmaciana, 4 (2), 101–109. Park, S. J., Kim, M. O., Kim, J. H., Jeong, S., Kim, M. H., Yang, S. J., Lee, J., & Lee, H.  J.  (2017).  Antioxidant  activities  of functional beverage
concentrates containing  herbal  medicine  extracts.
Preventive  Nutrition  and  Food  Science ,
22 (1),
16–20. https://doi.org/10.3746/pnf.2017.22.1.16
Prakash,  A.,  2011.  Antioxidant  activity.
Medallion Laboratories Analytical
Progress  Summer  2011  Takes  You  into the Heart of a Giant  Resource , 19 : 1–4. Wootton-Beard,  P.C.,  Moran,  A.,  dan  Ryan, L., 2011. Stability of the total antioxidant capacity and total polyphenol content of 23  commercially  available  vegetable juices before and after in vitro digestion measured  by  FRAP,  DPPH,  ABTS  and
Folin–Ciocalteu methods. Food Research International , 44 : 217–224.
Zhigila,  D.A.,  Rahaman,  A.A.A.,  Kolawole, O.S.,  and  Oladele,  F.A.,  2014,  Fruit morphology  as  taxonomic  features  in five  varieties  of  Capsicum  annuum  L. Solanaceae, J Bot., 2014, 540868.