## ESCHERICHIA COLI RESISTEN ANTIBIOTIK ASAL AIR KERAN DI KAMPUS ISTN
Fathin Hamida 1 , Lisana Sidqi Aliya 2 , Vilya Syafriana 3 dan Della Pratiwi 4
1,2,3,4 Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut Sains dan Teknologi Nasional, Jl. Moch. Kahfi 2 Bhumi Srengseng Sawah, Jagakarsa, Jakarta
Selatan.
Email: 1 fathinfarmasi@istn.ac.id, 2 lisana.aliya@istn.ac.id,
3 v.syafriana@istn.ac.id, 4 dellaaapratiwi@gmail.com

## ABSTRAK
Resistensi  antibiotik  menjadi  masalah  global  yang  menyebar luas  di  dunia.  Lingkungan  merupakan  jalur  transmisi  dan menyebabkan  resistensi  antibiotik.  Hal  itu  dapat  disebabkan oleh  buruknya  infrastruktur  limbah  air  dan  kontaminasi  fekal. Kontaminasi  air  berpengaruh  buruk  bagi  kesehatan  manusia. Kampus  ISTN  memiliki  pipa  saluran  air  keran  yang  jarak berdekatan dengan pipa septic tank, jarak antara pipa air keran dengan  pipa septic  tank berkisar  ≤  11  meter.  Kontaminasi  air
oleh Escherichia  coli menjadi  factor  penurunan  kualitas  air. Penelitian  ini  bertujuan  mengisolasi E.  coli dari pipa  air  keran kampus ISTN dan mendeteksi resistensinya terhadap antibiotik.
Empat  isolate E.  coli telah  diisolasi  menggunakan  media
Lactose Broth dan Chromogenic Coliform Agar . Empat isolat E. coli telah diidentifikasi secara biokimiawi. Empat isolate E. coli diuji  sensitivitasnya  terhadap  antibiotik  amoksisilin,  tetrasiklin, kloramfenikol,  dan  siprofloksasin  menggunakan  metode  difusi cakram.  Sensitivitas  antibiotik  diinterpresikan  berdasarkan standar  CLSI  ( Clinical  and  Laboratory  Standard  Institute ). Hasil  menunjukkan  bahwa  isolat  1A,  2A,  3A,  dan  4A  resisten terhadap amoksisilin, dan isolat 1A bersifat intermediat.
Kata kunci : Escherichia coli , air, resistensi, antibiotic, difusi cakram

## ABSTRACT
Antibiotic  resistance  has  become  a  global  issue  in  wide  world. Environment  is  transmission  track  and  caused  antibiotic resistance.  It  was  caused by  poor  wastewater infrastructure and fecal contamination. Water contamination is a poor influence on human  health.  ISTN  (National  Science  and  Technology Institute) campus have landwater pipes that were closed to septic tank  pipes,  the  distance  between  water  pipes  and  septic  tank
pipes were ≤ 11 meters. These raises concerns to water quality. Water contaminated by Escherichia coli will become one factor of  water  low  quality.  This  research  was  aimed  to  isolation Escherichia coli from landwater of  ISTN campus and detecting their  antibiotic  resistance.  Four  samples  were  collected  from four locations in the ISTN campus environment, it was 1A, 2A, 3A,  and  4A.  Four Escherichia  coli isolates  were  isolated  from the  ISTN campus landwater.  Isolation was using  Lactose Broth and  Chromogenic  Coliform  Agar  media.  Four Escherichia  coli isolates  were  identified  by  biochemichal  assay.  Four Escherichia  coli isolates  were  treated  by  Amoxycilin, Tetracyclin,  Chloramphenicol,  and  Ciprofloxacin  antibiotic  use disc  diffusion  method.  Antibiotic  sensitivity  was  interpreted  by the CLSI 2012 standard. The result showed that 2A, 3A, and 4A isolates  were  resistant  to  Amoxycilin,  and  1A  isolates  were intermediate to Amoxycilin.
Keywords : Escherichia  coli ,  water,  resistance,  antibiotic,  disc diffusion.

## PENDAHULUAN
Escherichia  coli adalah  bakteri batang Gram negatif, fakultatif anaerob, dan merupakan anggota
Enterobacteriaceae (Brooks dkk , 2007).
E.  coli merupakan  mikroflora  normal pada  usus,  namun  dapat  menjadi patogen  pada  kondisi  tertentu. E.  coli
sebagai bakteri patogen sering ditemukan  sebagai  bakteri  penyebab infeksi  saluran  kemih  (Kumala  dkk, 2009;  Prabowo  dan  Habib,  2012), infeksi  saluran  pencernaan  (Sujaya dkk,  2010;  Robins-Browne  dkk , 2004; Schuetz,  2019),  dan  terlibat  dalam infeksi luka pasca operasi (Alharbi dkk, 2018).
E. coli digunakan sebagai indikator  kualitas  air. E.  coli secara normal  hanya  ditemukan  di  saluran pencernaan  manusia  atau  hewan,  atau bahan yang telah terkontaminasi dengan  tinja  manusia  atau  hewan. Berdasarkan hasil penelitian di Instalasi Rawat  Khusus  RSUP  Dr.  Wahidin
Sudirohisodo Makassar ditemukan beberapa bakteri pada air salah satunya adalah bakteri Escherichia  coli sebesar 20%  (Taslim  dan  Maskoen,  2016). Sebesar  80% Escherichia  coli resisten terhadap  amoksisilin  dan  20%  resisten terhadap  kloramfenikol  berasal  dari  air sungai. Sebesar 66,7% Escherichia coli resisten terhadap amoksisilin dan 6.7% resisten terhadap kloramfenikol dari air rumah  tangga  (Sasongko,  2014).  Air yang  tercemar E.  coli dianggap berbahaya  bagi  penggunaan  domestik (Sumampouw  dan  Risjani,  2014).  Air yang  berkualitas  baik  adalah  air  yang memenuhi  baku  mutu  air  minum sebagaimana  ditetapkan  oleh  Peraturan
Menteri Kesehatan RI No 492/MENKES/PER/IV/2010. Pipa  saluran  air  keran  yang berada  di  lingkungan  Kampus  ISTN memiliki  jarak  kurang  dari  15  meter dengan  jarak septic  tank ,  sehingga dikhawatirkan  air  yang  digunakan untuk  memenuhi  kebutuhan  harian menjadi  tercemar  oleh  bakteri E.  coli .
Sumber  air  ini  salah  satunya  sering digunakan  untuk  memenuhi  kebutuhan kantin  dan  akifitas  di  masjid  Kampus
ISTN  yang  biasa  digunakan  untuk berwudhu. Berdasarkan Peraturan Menteri  PUPR  No.  20/PRT/M/2016 tentang sistem penyelenggaran pada air jarak  sumur  harus  >  15  meter  dari sumber  pencemaran  seperti  kakus, empang, lubang galian sampah, lubang galian  kotor  dan  lain-lain,  serta  letak sumur  harus  lebih  tinggi  dari  sumber pengotoran untuk menghindari kontaminasi air. Penelitian ini bertujuan  mengisolasi  bakteri E.  coli dari air keran Kampus ISTN Jagakarsa, serta  menguji  sensitivitasnya  terhadap antibiotik amoksisilin, tetrasiklin, kloramfenikol, dan siprofloksasin.

## METODE PENELITIAN
Penentuan Lokasi Pengambilan Sampel Air Empat sampel air keran diperoleh  dari  empat  titik  lokasi berbeda  yang  berada  di  Kampus  ISTN Jagakarsa, Jakarta Selatan. Pengambilan sampel ditentukan berdasarkan  jarak  pipa  air  dengan saluran pembuangan tinja (septic tank).
Empat titik lokasi pengambilan sampel sebagai berikut :
1. Sampel 1A : Sumber air yang  diambil  dari  kantin  di
Kampus  ISTN  Jagakarsa  (Dekat pos satpam).
2. Sampel 2A : Sumber air yang  diambil  dari  kantin  di Kampus ISTN Jagakarsa (Belakang Auditorium). 3. Sampel 3A : Sumber air yang  diambil  dari  tempat  wudhu laki  -  laki  Masjid  Bilal  ISTN Jagakarsa. 4. Sampel 4A : Sumber air yang  diambil  dari  tempat  wudhu perempuan  Masjid  Bilal  ISTN Jagakarsa.
Sampel  air  diambil  langsung dari  keran  air  dan  dimasukkan  ke dalam  botol  kaca  steril,  pengambilan sampel  air  dilakukan  sebanyak  5  kali pengulangan  dari  setiap  titik  lokasi, kemudian  air  yang  ditempatkan  pada botol kaca ditutup rapat.
Isolasi Escherichia coli
Sebanyak  1  mL  sampel  air diinokulasi  ke  dalam  5  mL  media  LB ( Lactose  Broth )  kemudian  diinkubasi selama  24  jam  pada  suhu  37 0 C.  Hasil positif  pertumbuhan E.  coli dan koliform  ditandai  dengan  tampak gelembung  gas  yang  terperangkap  di dalam tabung durham. Isolasi dilanjutkan  dengan  inokulasi  sampel LB positif ke media CCA ( Chromocult Coliform  Agar (CCA)  dengan  cara gores  kuadran  lalu  diinkubasi  selama 24  jam  pada  suhu  37 0 C.  Hasil  positif pertumbuhan E.  coli pada  media  CCA ditandai dengan koloni tunggal tumbuh berwarna  biru  violet.  Koloni  tumbuh berwarna  biru  violet  diambil  sebanyak 1  ose  kemudian  ditanam  pada  media agar  miring Nutrient  Agar (NA),  lalu diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24 jam,  dan  disimpan  dalam  lemari  es sebagai kultur stok.
Identifikasi Escherichia coli Identifikasi  E.  coli  dilakukan pada  setiap  isolat  hasil  isolasi  asal  air keran.
Identifikasi mikroskopik dilakukan dengan pewarnaan Gram dan identifikasi aktifitas biokimiawi. Identifikasi aktifitas biokimiawi
meliputi:  uji  katalase,  uji  produksi Indol,  uji  pemanfaatan  sitrat,  dan  uji fermentasi karbohidrat.
Uji  Sensitivitas Escherichia  coli terhadap  Antibiotik  dengan  Metode Difusi Cakram Uji sensitivitas antibiotik dilakukan  menggunakan  metode  difusi cakram.  Sebanyak  0.1  mL  suspensi isolat  bakteri E.  coli berumur  24  jam (kerapatan sel 10 6 CFU/mL) diinokulasi  ke  media Mueller  Hinton Agar (MHA)  dan  disebar  dengan batang sebar. Kemudian cakram antibiotik  diletakkan  diatas  permukaan media  MHA  lalu  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C  selama  24  jam.  Diameter  zona hambat  yang  terbentuk  disekililing cakram  diukur  dengan  jangka  sorong. Uji  sensitivitas  dilakukan  3  kali ulangan  masing  –  masing  ulangan dibuat triplo. Rata – rata diameter zona hambat  diinterpretasikan  berdasarkan interpretasi sensitivitas antibiotic Clinical  Laboratory  Standard  Institute (CLSI, 2012)
Analisis Data
Data  isolasi,  identifikasi,  dan sensitivitas  antibiotik  diolah  secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi Escherichia coli
Tabel  1  menunjukkan  bahwa pada  media  LB  diperoleh  hasil  positif koliform.  Hal  ini  ditandai  dengan terbentuknya  gelembung  gas  yang terperangkap  pada  tabung  durham setelah  inkubasi  24  jam  pada  suhu 37°C.  Media  LB  mengandung  pepton, beef  extract, dan  laktosa.  Pepton  dan beef  extract menyediakan nutrient essential untuk  metabolisme  bakteri, sedangkan  laktosa  dapat  dimanfaatkan oleh  bakteri  koliform  sebagai  sumber karbohidrat. (Kusuma dkk, 2015).
Tabel  1.  Hasil  inokulasi  sampel  air pada  Media LB  dari  sampel  air  keran setelah  inkubasi  24  jam  pada  suhu 37°C. Sampel Hasil 1A (+) Koliform 2A (+) Koliform 3A (+) Koliform 4A (+) Koliform Kontrol positif (+) Koliform Keterangan: 1A: Kantin Kampus (Dekat pos satpam) 2A: Kantin Kampus (Belakang Auditorium) 3A: Tempat  wudhu Masjid  Bilal  (Laki  – laki) 4A: Tempat wudhu Masjid Bilal (Perempuan) Isolasi dilanjutkan dengan purifikasi koloni tunggal diduga E. coli pada  media  CCA.  Media  CCA  adalah media  selektif  diferensial  yang  dapat mendeteksi pertumbuhan bakteri koliform dan E. coli . Media CCA ( Chromocult Coliform  Agar )  merupakan  media diferensial  untuk  membedakan  bakteri E.  coli dengan  bakteri  koliform lainnya.  Prinsipnya  yaitu  berdasarkan kemampuan bakteri menghasilkan enzim  ß-D- galactosidase dan  enzim  ß- D- glucuronidase . Media CCA mengandung  dua  substrat  kromogenik yaitu Salmon-GAL (6-chloro-3- indoxyl-beta-D-galactopyranoside)  dan X - beta-D-Glucuronide (5-Bromo-4- chloro-3-indoxyl-β-Dglucuronic  acid, cyclohexylammonium salt
monohydrate). Media CCA merupakan media  selektif  yang  digunakan  untuk mendeteksi  bakteri  koliform  dan E. coli .  Media  ini  mengandung  ekstrak ragi,  sodium  piruvat,  sodium  klorida, sodium  dihidrogen  fosfat,  sorbitol,
tergitol,  dan  substrat  kromogenik (Salmon-GAL  dan  X-Glucuronidae). Tergitol  berfungsi  untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri  Gram  positif  dan beberapa  Gram  negatif  tetapi  tidak mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri koliform. Ekstrak ragi, sodium piruvat, disodium  hidrogen  fosfat,  sodium
dihidrogen fosfat dan sorbitol berfungsi mempercepat  pertumbuhan  koliform (Byamukama  dkk,  2000;  Lange  dkk.,
2013). Hasil isolasi E. coli pada media cawan  CCA  menunjukkan  terdapat E. coli pada  sampel  air  yang  ditandai dengan  pertumbuhan  koloni  berwarna biru violet (Gambar 1). Sampel 1A Sampel 2A Sampel 3A Sampel 4A Kontrol positif Gambar 1. Hasil isolasi dan purifikasi E. coli pada media CCA Media CCA ( Chromocult Coliform  Agar )  merupakan  media diferensial  untuk  membedakan  bakteri
E.  coli dengan  bakteri  koliform lainnya.  Prinsipnya  yaitu  berdasarkan kemampuan bakteri menghasilkan
enzim  ß-D- galactosidase dan  enzim  ß-
D- glucuronidase . Media CCA mengandung  dua  substrat  kromogenik yaitu Salmon-GAL (6-chloro-3- indoxyl-beta-D-galactopyranoside)  dan X - beta-D-Glucuronide (5-Bromo-4- chloro-3-indoxyl-β-Dglucuronic  acid, cyclohexylammonium salt monohydrate). Media CCA merupakan media  selektif  yang  digunakan  untuk mendeteksi  bakteri  koliform  dan E. coli .  Media  ini  mengandung  ekstrak ragi,  sodium  piruvat,  sodium  klorida, sodium  dihidrogen  fosfat,  sorbitol, tergitol,  dan  substrat  kromogenik (Salmon-GAL  dan  X-Glucuronidae). Tergitol  berfungsi  untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri  Gram  positif  dan beberapa  Gram  negatif  tetapi  tidak
mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri koliform. Ekstrak ragi, sodium piruvat, disodium  hidrogen  fosfat,  sodium dihidrogen fosfat dan sorbitol berfungsi mempercepat  pertumbuhan  koliform (Byamukama  dkk,  2000;  Lange  dkk., 2013).
Bakteri koliform anggota Enterobacteriaceae ( Citrobacter , Enterobacter ,  dan Klebsiella )  mampu menghasilkan  enzim  β- galactosidase yang  dapat  mendegradasi  substrat Salmon-GAL menjadi senyawa kromogenik  sehingga  koloni  yang tumbuh  pada  media  CCA  berwarna merah salmon. Genus Shigella ,
Salmonella, dan Yersinia tidak dapat menghasilkan  enzim  β- galactosidase namun dapat menghasilkan enzim β-D- glucuronidase menjadi senyawa kromogenik  sehingga  koloni  yang tumbuh  pada  media  CCA  berwarna biru muda hingga toska. E. coli mampu menghasilkan  enzim  β- galactosidase dan  β-D- glucuronidase ,  enzim  β-
galactosidase mendegradasi  Salmon- GAL dan β-D- glucuronidase mendegradasi  substrat  X-glucuronida menghasilkan produk senyawa kromogenik  sehingga  koloni  yang tumbuh  pada  media  CCA  berwarna biru  tua.  Bakteri  Gram  negatif  lainnya non  koliform  tidak  memiliki  β- galactosidase dan  β-D- glucuronidase sehingga  koloni  yang  tumbuh  pada media  CCA  tidak  berwarna  ( colorless ) karena tidak dapat mendegradasi Salmon-GAL menjadi senyawa koromogenik dan X-glucuronida menjadi X dan Glucuronida (Rice dkk, 1990;  Tryland  dan  Fiksdal,  1998). Warna  koloni  disebabkan  oleh  reaksi enzimatis  yang  mengubah  substrat kromogenik  menjadi  produk  senyawa berwarna. Warna yang terbentuk merupakan hasil reaksi  enzimatik  yang spesifik  untuk  masing  –  masing  genus (Turner dkk., 2000; Finney dkk, 2003).
Identifikasi Mikroskopik dengan
Pewarnaan Gram Berdasarkan  hasil  identifikasi mikroskopik  diperoleh  bahwa  empat isolat  berbentuk  basil  pendek  dan  tipe reaksi  gram  adalah  Gram  negatif.
Reaksi  Gram  dibedakan  berdasarkan komponen penyusun dinding sel bakteri.  Bakteri  Gram  negatif  adalah kelompok bakteri yang memiliki dinding sel tersusun oleh 10% peptidoglikan,  membran  luar,  dan periplasma.  Empat isolat asal  air keran memiliki  sifat  aktifitas  biokimiawi yang    menunjukkan E.  coli yaitu katalase  positif,  indol  positif,  sitrat negatif,  fermentasi  karbohidrat  positif, motil, dan negatif H 2 S (Tabel 2). Katalase  positif  menunjukkan bahwa E.  coli mampu  menghasilkan enzim  hidrogen  peroksidase  selama pertumbuhannya. Indol positif menunjukkan  bahwa E.  coli mampu menghasilkan enzim triptofanase untuk mendegradasi  triptofan  menjadi  indol. Sitrat  negatif  menunjukkan  bahwa E. coli tidak  mampu  memanfaatkan  sitrat sebagai  satu  –  satunya  sumber  karbon karena tidak dapat menghasilkan enzim sitrat permease . E.  coli mampu memfermentasi  tiga  jenis  gula  pada media  TSIA  ( Triple  Sugar  Iron  Agar ), dan  tidak  dapat  memanfaatkan  sulfida sehingga  tidak  menghasilkan  H 2 S (Jorgensen dkk, 2015).
Tabel 2. Hasil Identifikasi Aktifitas Biokimiawi Isolat E.coli asal air keran Kode Isolat E. coli K I M Su Si C 1A + + + - - + 2A + + + - - + 3A + + + - - + 4A + + + - - + Kontrol positif + + + - - +
Keterangan: K: uji katalase dengan pereaksi H 2 O 2 I: uji produksi indol menggunakan media SIM ( Sulfide Indole Motility ) M: uji motilitas menggunakan media SIM Su: uji produksi H 2 S menggunakan media SIM Si: uji pemanfaatan sitrat menggunakan media Simmon’s Citrate Agar
C: uji fermentasi karbohidrat menggunakan media TSIA ( Triple Sugar Iron Agar )

## Uji Sensitivitas Antibiotik
Tabel 3. Rata – Rata Diameter Zona Hambat dengan Metode Difusi Cakram
Kode Isolat E. coli AML (25 µg) TE (30 µg) C (5 µg) CIP (5 µg) 1A 15,75 (I) 19,7 (S) 23,12 (S) 23,38 (S) 2A 12,45 (R) 18,55 (S) 23,8 (S) 28,52 (S) 3A 10,98 (R) 18,53 (S) 22,22 (S) 23,56 (S) 4A 11,34 (R) 17,05 (S) 23,56 (S) 26,37 (S)
Keterangan  :  AML  =  Amoksisilin  (S:  ≥17  mm,  I:  15-16mm,  R:  ≤14mm)  ;  TE  = Tetrasiklin (S: ≥15 mm, I: 12-14mm, R: ≤11mm) ; C = Kloramfenikol (S: ≥18 mm, I: 13- 17mm,  R:  ≤12mm)  ;  CIP  =  Siprofloksasin  (S:  ≥21  mm,  I:  16-20mm,  R:  ≤15mm). ( Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2012)).
Tabel  3  menunjukkan  bahwa seluruh  isolat E.  coli asal  air  keran dapat  dihambat  oleh  antibiotik  uji dengan  respon  berbeda.  Seluruh  isolat E.  coli menunjukkan  sensitif  terhadap tetrasiklin, kloramfenikol, dan siprofloksasin.  Isolat E.  coli 1A ditemukan  bersifat  intermediet,  artinya isolat  tersebut  memiliki  sensitivitas yang lebih rendah terhadap amoksisilin.  Isolat E.  coli 2A,  3A,  dan
4A ditemukan bersifat resisten terhadap amoksisilin, artinya ketiga isolat tersebut  tidak  lagi  sensitif  terhadap amoksisilin  (CLSI,  2012).  Amoksisilin merupakan  antibiotik  yang  umum diresepkan  oleh  dokter  pada  pasien penderita  infeksi  saluran  pencernaan dan  infeksi  saluran  kemih  (Kumala dkk,  2009).  Berdasarkan  hasil  uji sensitivitas  ditemukan  bahwa  sebagian besar  isolat  telah  resisten  terhadap amoksisilin, hal ini diduga  akibat jarak sumber  air  dengan septic  tank yang berdekatan  beresiko  mencemari  air bersih . Sampel  1A  jarak  antara  sumur dengan septic  tank 11  meter,  Sampel 2A  jarak  antara  sumur  dengan septic
tank 8,9 meter, Sampel 3A jarak antara sumur  dengan septic  tank 9,65  meter,
Sampel  4A  jarak  antara  sumur  dengan septic  tank 5,6  meter.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  jarak  antara sumur  dengan septic  tank kurang  dari
15  meter  dapat  mempengaruhi  kualitas air  (Awuy  dkk,  2018).  Semakin  dekat jarak  sumber  pencemar (septic  tank) dengan  sumur maka  semakin  tinggi populasi E. coli (Sapulete, 2010) . Jarak sumber air dengan septic tank mempengaruhi populasi mikroorganisme  pada  hasil  Angka Lempeng  Total  (Awuy  dkk , 2018). Belakangan ini E. coli resisten antibiotik  terutama  resisten  terhadap amoksisilin  sering  ditemukan  sebagai bakteri pencemar air (Sasongko, 2014).
Cemaran ini di duga akibat kontaminasi  air  dengan  urin  atau  tinja yang  telah  terkontaminasi  dengan E. coli yang  telah  resisten  terhadap antibiotik.    Air  yang  berkualitas  baik adalah  air  yang  memenuhi  baku  mutu air  minum  yang  ditetapkan  oleh Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  No 492/MENKES/PER/IV/2010,  meliputi persyaratan  fisika,  kimia  dan    biologi, air tersebut harus bebas dari mikroorganisme  patogen  dan  bahan kimia  berbahaya  (Wulandari  dkk, 2014).

## KESIMPULAN
Seluruh  sampel  air  di  Kampus ISTN Jagakarsa, Jakarta Selatan tercemar  bakteri Escherichia  coli .
Isolat Escherichia coli dari  sampel  air
2A,  3A,  dan  4A  resisten  terhadap antibiotik amoksisilin.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  diberikan pada KEMENRISTEKDIKTI atas bantuan  dana  hibah  penelitian  PDP (Penelitian Dosen Pemula) tahun 2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Alharbi,  N.S,  Khaled,  J.M.,  Kadaikunnan,  S.,  Alobaidi,  A.S.,  Sharafaddin,  A.H., Alyahya,  S.A.,  Almanaa,  T.N.,  Alsughayier,  M.A.,  Shehu,  M.R.  (2018). Prevalence  of Escherichia  coli strains  resistance  to  antibiotics  in  wound infections  and  raw  milk. Saudi  Journal  of  Biological  Sciences . https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2018.11.016 . Awuy,  S.C,  Sumampouw,  O.J.,  Boky,  B.  (2018).  Kandungan Escherichia  coli pada  air  sumur  gali  dengan  septic  tank  di  kelurahan  Rap-Rap  kabupaten Minahasa Utara tahun 2018. Jurnal Kesmas . 7(4): 1-6. Brooks,  G.F.,  Carroll,  K.C.,  Butel,  J.S.,  Morse,  S.A.  (2007). Jawetz,  Melnick,  & Adelberg’s:  Medical  Microbiology. 24 th Ed.  McGraw-Hill  Medical.  New York.
Byamukama,  D.,  Kansiime,  F.,  March,  R.L.,  Farnleitner,  A.H.  (2000). Determination  of  Escherichia  coli  contamination  with  Chromocult Coliform  Agar  showed  a  high  level  of  discrimination  efficiency  for differening  fecal  pollution  levels  in  tropical  waters  of  Kampala,  Uganda. Appl. Environ. Microbiol . 66: 864-868.
Clinical  dan  Laboratory  Standards  Institute.  (2012).  Performance  Standards  for Antimicrobial  Susceptibility  Testing  :  Twenty-Second  Informational Supplement. M100-S22. 32(3).
Finney, M., Smullen, J., Foster, H.A, Brokx, S., Storey, D.M. (2003). Evaluation of  chromocult  coliform  agar  for  the  detection  and  enumeration  of Enterobacteriaceae from faecal samples from healthy subjects. Journal of Microbiological Methods.
54: 353– 358. doi:10.1016/S0167- 7012(03)00068-X.
Jorgensen,  J.H.,  Pfaller,  M.A.,  Carroll,  K.C.,  Funke,  G.,  Landry,  M.  L.,  Richter, S.S.,  Warnock,  D.W.  (2015). Manual  of  Clinical  Microbiology ,  11 th Edition . ASM Press. Washington DC.
Kumala,  S.,  Raisa,  N.,  Rahayu,  L.,  Kiranasar,  A.  (2009).  Uji  kepekaan  bakteri yang  diisolasi  dari  urin  penderita  infeksi  saluran  kemih  (Isk)  terhadap beberapa  antibiotika  pada  periode  Maret–Juni  2008. Majalah  Ilmu Kefarmasian . VI( 2): 45 – 55.
Kumala,  S.,  Raisa,  N.,  Rahayu,  L.,  Kiranasari,  A.  (2009).  Uji  kepekaan  bakteri yang  diisolasi  dari  urin  penderita  infeksi  saluran  kemih  (isk)  terhadap beberapa  antibiotika  pada  periode  Maret  –  Juni  2008. Majalah  Ilmu Kefarmasian . VI(2): 45 – 55.
Kusuma, E.A., Rasyid, R., Endrinaldi. (2015). Identifikasi bakteri Coliform pada air kobokan di rumah makan kelurahan Andalas kecamatan Padang Timur. Jurnal Kesehatan Andalas . 4(3): 845.
Lange,  B.,  Strathmann,  M.,  Oßmer,  R.  (2013).  Performance  validation  of chromogenic  coliform  agar  for  the  enumeration  of Escherichia  coli and coliform bacteria. Lett. Appl. Microbiol . 57: 547-553.
Prabowo,  F.I  dan  Habib,  I.  (2012).  Identifikasi  pola  kepekaan  dan  jenis  bakteri pada  pasien  infeksi  saluran  kemih  di  Rumah  Sakit  PKU  Muhammadiyah Yogyakarta. Mutiara Media Jurnal Kedoteran dan Kesehatan . 12 (2): 93 – 101.
Rice, E.W., Allen, M. J., Edberg, S.C. (1990). Efficacy of β- Glucuronidase assay for identification of Escherichia coli by the defined-substrate technology. Applied and Environmental Microbiology . 56(5): 1203-1205. Robins-Browne,  R.M.,  Bordun,  A.M.,  Tauschek,  M.,  Bennett-Wood,  V.R., Russell,  J.,  Oppedisano,  F.,  Lister,  N.A.,  Bettelheim,  K.A,  Fairley,  C.K, Sinclair,  M.I.,    Hellard,  M.E.  (2004). Escherichia  coli and  community acquired  gastroenteritis,  Melbourne,  Australia. Emerging  Infectious Diseases . 10(10): 1797 – 1805.
Sapulete. (2010). Hubungan antara jarak septic tank ke sumur Gali dan kandungan Escherichia coli dalam air sumur Gali di kelurahan Tuminting kecamatan Tuminting Kota Manado. Jurnal Biomedik . 2(3):179- 186.
Sasongko, H. (2014).  Uji resistensi bakteri Escherichia Coli dari sungai Boyong kabupaten  Sleman  terhadap  antibiotik  amoksisilin,  kloramfenikol, sulfametoxasol,  dan  streptomisin. Jurnal  Bioedukatika .  2(1):  25-29.  doi: 10.26555/bioedukatika.v2i1.4108.
Schuetz,  A.N.  (2019).  Emerging  agents  of  gastroenteritis:  Aeromonas, Plesiomonas,  and  the  diarrheagenic  pathotypes  of Escherichia  coli . Seminars in Diagnostic Pathology . 36(3): 187-192.
https://doi.org/10.1053/j.semdp.2019.04.012.
Sujaya,  I.N.,  Aryantini,  N.P.D.,  Nursini,  N.W.,  Purnama,  S.G.,  Dwipayanti, N.M.U, Artawan, I.G., Sutarga, I.M. (2010). Identifikasi penyebab diare di kabupaten  Karangasem,  Bali.  KESMAS, Jurnal  Kesehatan  Masyarakat Nasional . 4(4): 186-192.
Sumampouw, O.J., dan Risjani, Y. (2014). Bacteria as indicators of environmental pollution. International  Journal  of  Ecosystem .  4(6):  251-258.  doi  : 10.5923/j.ije.20140406.03.
Taslim,  E.,  dan  Maskoen,  T.T.  (2016).  Pola  kuman  terbanyak  sebagai  agen penyebab  infeksi  di  intensive  care  unit  pada  beberapa  rumh  sakit  di Indonesia. Anesthesia & Critical Care . 34 (1): 56-62.
Tryland,  I  dan  Fiksdal,  L.  (1998).  Enzyme  characteristics  of  β-D- Galactosidase - and  β-D- Glucuronidase -positive  bacteria  and  their  interference  in  rapid methods  for  detection  of  waterborne  Coliforms  and Escherichia  coli. Applied and Environmental Microbiology. 64(3): 1018–1023. Turner,  K.M.,  Restaino,  L.,  Frampton,  E.W.  (2000). Efficacy  of  chromocult coliform  agar  for  Coliform  and Escherichia  coli detection  in  foods. Journal of Food Protection . 63(4): 539–541.
Wulandari, C., Nasril, N., Anthoni, A. (2014). Kondisi bakteriologis air sumur di sekitar  tempat  pembuangan  akhir  air  dingin  kota  Padang. Jurnal  Biologi Universitas Andalas . 3(4): 289 – 295.