Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5 Nomor 3, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i3.15292
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan dan Etanol Kombinasi Buas-Buas dan Secang Terhadap Pertumbuhan Propionibacterium acnes
Isnindar 1* , Inka Riesty Wulandari 2 , Sri Luliana 3
1,2,3 Jurusan Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura, Jl. Prof. Dr. H. Nawawi, Bansir Laut, Kec. Pontianak Tenggara, Kota Pontianak, Kalimantan Barat
* Penulis Korespondensi. Email: isnindar@yahoo.com

## ABSTRAK
Jerawat adalah penyakit kulit atau peradangan yang dapat terjadi karena sumbatan di pori- pori  kulit  dengan  tanda  bintik-bintik  diarea  wajah.  Penyebab  yang  dapat  menimbulkan jerawat salah satunya yaitu bakteri Propionibacterium acnes yang merupakan bakteri yang ada pada  jerawat.  Pengobatan  jerawat  dapat  dilakukan  dengan  penggunaan  antibiotik,  namun memiliki  efek  samping  yang  menyebabkan  iritasi.  Pemanfaatan  tumbuhan  dapat meminimalisir terjadinya iritasi. Daun Buas-buas ( Premna serratifolia Linn.) dan Kayu secang ( Caesalpinia  sappan Linn.)  dimanfaatkan  masyarakat  sebagai  obat  dan  juga  berkhasiat antibakteri. Penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan dan ekstrak etanol  kombinasi  daun  Buas-buas  dan  Kayu  secang  terhadap  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acnes . Ekstrak n-heksan dan etanol diperoleh dengan menggunakan metode maserasi bertingkat. Selanjutnya kedua ekstrak diuji antibakteri dengan menggunakan metode difusi cakram. Ekstrak n-Heksan (Buas-buas : Secang) pada perbandingan 2:1 (150 ppm dan 300 ppm) zona bening yang terbentuk 1,0 mm; 1,5 mm. Pengujian Ekstrak Etanol (Buas-buas : Secang) tidak memberikan zona bening yang terbentuk. Ekstrak n-Heksan dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan kategori lemah, sedangkan ekstrak etanol tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes.
Kata Kunci: Premna serratifolia Linn; Caesalpinia sappan Linn; Acne vulgaris ; Propionibacterium acnes ; Ekstrak
Diterima: 12-07-2023 Disetujui: 26-11-2023 Online: 01-12-2023

## ABSTRACT
Acne is a skin disease or inflammation that can occur due to blockages in the skin pores with signs of spots on the face area. One of the causes that can be acne is Propionibacterium acnes which is a bacteria that comes from acne. Acne treatment can be solved with the use of antibiotics, but they have side effects such as irritation. The utilization of plants can minimize irritation. The leaves of Buas-buas (Premna serratifolia Linn.) and secang wood (Caesalpinia sappan Linn.) are used by people as medicine and also have antibacterial efficacy. The research for determining the antibacterial activity of n-Hexane extract and  Ethanol  extract  of  the  combination  Buas-buas  leaves  and  secang  wood  against  the  growth  of Propionibacterium  acnes  bacteria.  n-Hexane  and  Ethanol  extract  were  obtained  using  a  multiple maceration method and antibacterial activity using a disc diffusion method. The results of the research of n-hexane extract (Buas-buas : Secang) at a ratio of 2: 1 (150 ppm and 300 ppm) of inhibition zones that  formed  were  1.0  mm;  1,5  mm.  Ethanol  extract  (Buas-buas  :  Secang)  did  not  give  the  formed inhibition zone. n-Hexane extract can inhibit the growth of the Propionibacterium acnes bacteria with a

## 1.  Pendahuluan
Tanaman  yang  memiliki  khasiat  sebagai  obat-obatan  banyak  dimanfaatkan, seperti penyakit pada kulit (komedo, pustul, nodul dan papula). Penyakit kulit yang banyak dijumpai pada umumnya yaitu Jerawat (acne vulgaris) [1]. Jerawat dapat terjadi karena sumbatan di  pori-pori kulit dengan tanda bitnik-bintik di area wajah. Komedo dapat  terbentuk  karena  adanya  sumbatan  saluran  pilosebasea  sehingga  sebum  tidak bisa keluar dari saluran dan menyebabkan bengkak. Komedo merupakan cikal bakal timbulnya  jerawat[2].  Bakteri  penyebab  jerawat  yaitu Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis.
Bakteri  P.  acnes  adalah  bakteri  gram  positif  yang  bekerja  pada  cikal  bakal pembentukan jerawat. P. acnes mengeluarkan enzim hidrolitik yaitu enzim yang dapat menyebabkan  kerusakan  folikel  polisebasea  dan  menghasilkan  lipase,  protease, lesitinase,  hyaluronidase, dan neurimidase yang mana enzim-enzim ini bertindak pada proses peradangan[2]. Pengobatan jerawat yang disebabkan bakteri dapat dilakukan di klinik  ataupun  dilakukan  dengan  cara  swamedikasi.  Salah  satu  tumbuhan  yang berperan sebagai antibakteri yaitu Buas-buas ( Premna serratifolia Linn.) dan Kayu Secang ( Caesalpinia sappan Linn.) Buas-buas ( Premna serratifolia Linn.) umumnya digunakan masyarakat melayu sebagai  sayuran  atau  lalapan.  Kandungan  senyawa  pada  Buas-buas  yang  berperan sebagai antibakteri yaitu flavonoid dan fenolik[3][4]. Kayu secang ( Caesalpinia sappan L.) dimanfaatkan kayunya dalam pengobatan tradisional dan banyak digunakan sebagai minuman  herbal.  Senyawa  flavonoid,  fenolik  dan  terpenoid  dapat  berperan  untuk menghambat pertumbuhan dan metabolisme sel mikroba[5]. Penelitian yang dilakukan Restuati (2016) menggunakan daun Buas-buas terhadap bakteri B.cereus menghasilkan zona  bening  sebesar  12,5  mm.  Prabawa  (2019)  juga  meneliti  aktivitas  ekstrak  kayu secang  terhadap  bakteri P.acnes yang  menghasilkan  zona  bening  sebesar  12,2  mm. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri kombinasi daun Buas- buas  dan  Kayu  secang  terhadap  pertumbuhan  bakteri P.acnes dengan  menggunakan ekstrak n-heksan dan ekstrak etanol. Parameter yang dilihat yaitu diameter zona bening yang  terbentuk  disekeliling  cakram.  Penelitian  ini  merupakan  keterbaruan  dalam pemanfaatan daun Buas-buas sebagai antibakteri terhadap P.acnes .

## 2.  Metode Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  alat-alat  gelas  ( Pyrex  Iwaki ® ), autoklaf ( Daihan WACS-1045 ® ), ayakan no. mesh 40, blender simplisia, buchner ( Iwaki ® ), inkubator  ( Memmert ® E24899),  kawat  ose,  Laminar  Air  Flow  ( APS-LAF-V-010 ® ), mikropipet 100µl - 1000µl ( DRAWELL ® ), mikroskop ( POVIC ® ), oven ( Memmert ® UP400), penangas  air,  penggaris,  pinset,  pisau,  Rotary  evaporator  (Buchi®),  sendok  penyu, sendok stainless, swab alkohol, timbangan analitik ( Ohaous ® PA 2012). Bahan-bahan yang digunakan adalah daun Buas-buas ( Premna serratifolia Linn.)
weak  category,  while  the  ethanol  extract  cannot  inhibit  the  growth  of  the  Propionibacterium  acnes bacteria.
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Premna serratifolia Linn; Caesalpinia sappan Linn; Acne vulgaris; Propionibacterium acnes; Extract
Received: 2023-07-12 Accepted: 2023-11-26 Online: 2023-12-01
dan  Kayu  secang  ( Caesalpinia  sappan Linn.),  bakteri Propionibacterium  acnes ,  media Mueller Hinton Agar (MHA), media Blood Agar Plate (BAP), pelarut n-Heksan Merck ( EMSURE ® ),  etanol  96%,  BaCl2  1%,  H2SO4,  NaCl,  FeCl3,  CHCl3,  aluminium  foil, Ciprofloxacin 5µg/disc, DMSO, kertas cakram.
Prosedur Kerja Preparasi Sampel
Sampel  yang  digunakan  yaitu  Buas-buas  ( Premna  serratifolia Linn.)  dan  Kayu secang ( Caesalpinia sappan Linn.). Bagian yang digunakan yaitu daun dan kayu. Sampel diambil  di  Limbung,  Kubu  Raya,  Kalimantan  Barat  dan  Pontianak.  Sampel dikumpulkan, dibersihkan dengan menggunakan air bersih yang mengalir. Selanjutnya daun dilakukan perajangan dan pengeringan dengan oven pada suhu 40 O C, kemudian diserbukkan menggunakan blender dan disimpan dalam wadah.

## Pembuatan Ekstrak
Simplisia di maserasi  bertingkat dengan  menggunakan  pelarut  non-polar  dan polar.  Maserasi  dilakukan  menggunakan  pelarut  n-Heksan  terlebih  dahulu  pada masing-masing  simplisia  buas-buas  dan  kayu  secang  selama  3x24  jam  dengan pergantian pelarut dan dilakukan pengadukan sesekali setiap 1x24 jam. Maserat yang diperoleh selanjutnya disaring menggunakan Buchner vacum sehingga diperoleh filtrat yang jernih untuk selanjutnya dipekatkan menggunakan rotary evaporator. Setelah itu dilakukan maserasi kembali menggunakan pelarut etanol 96% dengan perlakuan yang sama. Ekstrak yang dihasilkan dihitung %rendemen, berikut  persamaan perhitungan %rendemen :
(Berat ekstrak yang didapat)/(Berat simplisia) x 100% …………......... [1]

## Skrining Fitokimia
Flavonoid
Ekstrak dilarutkan dalam etanol 70%, kemudian tambahkan serbuk Mg dan 1 tetes HCl pekat. Senyawa flavonoid memberikan warna oranye, merah dan biru[5].

## Alkaloid
Ekstrak dilarutkan dalam H 2 SO 4 , kemudian diambil 1 mL dan ditaruh pada tiga tabung reaksi yaitu reagen Mayer, Dragendorff dan Wagner. Hasil positif menunjukkan adanya  endapan  putih  pada  Mayer,  endapan  coklat  oranye  atau  jingga  pada Dragendorff, dan endapan coklat pada Wagner[5].

## Terpenoid
Ekstrak dilarutkan dalam CHCl 3 , kemudian ditambahkan dengan beberapa tetes H2SO4. Hasil positif menunjukkan adanya warna cokelat kemerahan yang terbentuk[5].

## Tanin
Ekstrak dilarutkan dalam aquadest, kemudian disaring. Filtrat diambil beberapa mL  dan  diteteskan  dengan  FeCl 3 1%.  Terbentuknya  endapan  biru  atau  hitam menunjukkan adanya tannin[5].

## Saponin
Ekstrak dilarutkan dalam 10 mL aquadest atau air suling didalam tabung reaksi. Campuran kemudian dikocok kuat selama beberapa menit hingga terbentuk buih atau busa. Hasil positif adanya saponin ditandai apabila buih atau busa ketika didiamkan
selama beberapa menit tidak hilang[5].

## Fenolik
Ekstrak  dilarutkan  dalam  aquadest,  kemudian  diambil  1-2  tetes  larutan  dan ditambahkan FeCl 3 , membentuk warna hijau dan hitam biru[5].

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat non gelas dan media MHA disterilkan di dalam autoklaf ±15 menit di suhu 120 O C.  Alat  gelas  dan  kertas  cakram  disterilisasikan  menggunakan  oven  pada  suhu 160 O C ±120 menit. Kawat ose disterilkan di api Bunsen hingga kawat berwarna merah.

## Peremajaan Bakteri
Bakteri Propionibacterium  acnes diremajakan  menggunakan  media  Blood  Agar Plate (BAP), diinkubasi 2 hari pada suhu 37 O C.

## Pembuatan Media MHA
Pembuatan dilakukan dengan cara 38 gram serbuk MHA dilarutkan dalam 1L aquadest pada Erlenmeyer dan diaduk hingga larut sambil dilakukan pemanasan diatas hotplate agar larutan homogen. Larutan kemudian disterilkan dalam autoklaf di suhu 121 O C selama 20 menit. Media MHA yang sudah steril di masukkan ke cawan petri dan didiamkan hingga memadat.

## Standar Kekeruhan McFarland
Standar kekeruhan yang digunakan yaitu standar 0,5 ekivalen dengan suspensi sel  bakteri  sebanyakk  10  (CFU)/mL.  Larutan  terdiri  dari  BaCl 2 1%  dan  H 2 SO 4 1% sebanyak  9,95  mL.  Larutan  di  homogenkan  dan  digunakan  sebagai  pembanding kekeruhan dengan suspensi bakteri.

## Pembuatan Suspensi Bakteri P.acnes
Biakan  bakteri P.acnes disuspensi  ke  tabung  reaksi  yang  mengandung  10  mL NaCl  0,9%.  Biakan  yang  sudah  disuspensikan  kemudian  divortex  sesuai  standar McFarland.

## Larutan Uji dan Uji Kontrol
Kontrol positif yaitu Ciprofloxacin 5µg/disc. Kontrol negatif yaitu DMSO 10%. Ekstrak n-Heksan dan ekstrak etanol kombinasi buas-buas dan kayu secang (1:1, 1:2 dan 2:1) dengan variasi konsentrasi sebagai berikut :
Tabel 1. Konsentrasi Sampel Uji Ekstrak n-Heksan (Buas-buas : Secang) 1:1 1:2 2:1 100 ppm 100 ppm 100 ppm 150 ppm 150 ppm 150 ppm 300 ppm 300 ppm 300 ppm Ekstrak Etanol  (Buas-buas : Secang) 1:1 1:2 2:1 1500 ppm 1500 ppm 1500 ppm 2000 ppm 2000 ppm 2000 ppm 2500 ppm 2500 ppm 2500 ppm

## Uji Aktivitas Antibakteri Difusi Cakram
Media MHA yang sudah dibuat dan dilakukan sterilisasi dituang dalam cawan petri hingga memadat, lalu ditambahkan biakan bakteri yang sudah dibuat suspensi, kemudian  digoreskan  diatas  permukaan  media  dengan  menggunakan  cotton  swab steril. Setelah itu diletakkan kertas cakram kosong yang sudah direndam dengan variasi konsentrasi dari ekstrak n-Heksan dan ekstrak etanol kombinasi daun buas-buas dan kayu secang diatas media yang telah ditanami bakteri. Kertas cakram juga direndam dalam pelarut DMSO yang sebagai kontrol negatif serta Ciprofloxacin 5µg/disc sebagai kontrol positif. Lalu kertas cakram tersebut diletakkan diatas media yang telah ditanami bakteri.

## Inkubasi Bakteri
Bakteri dengan media MHA di cawan petri dimasukkan dalam inkubator suhu 37oC  dan  diinkubasi  selama  1x24  jam.  Aktivitas  antibakteri  diamati  dengan  melihat zona bening yang terbentuk.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan  metode  maserasi  bertingkat,  yaitu menggunakan  pelarut  non-polar  dan  polar.  Ekstraksi  maserasi  bertingkat  memiliki tingkat  pemurnian  ekstrak  yang  lebih  baik  menggunakan  2  pelarut  dengan  tingkat kepolaran yang berbeda, yaitu dari nonpolar ke polar[6]. Pelarut n-Heksan digunakan untuk menarik senyawa nonpolar pada tumbuhan, sedangkan etanol 96% digunakan untuk  menarik  senyawa  yang  polar  pada  tumbuhan.  Proses  maserasi  menggunakan pelarut  n-Heksan  terlebih  dahulu  (3x24  jam  tiap  1x24  jam  diganti  pelarut  serta pengadukan sesekali yang bertujuan untuk menjamin serbuk telah berkontak dengan cairan penyari).
Tabel 2. Hasil %rendemen ekstrak Ekstrak Berat Simplisia (g) Berat Ekstrak (g) %Rendemen NHBB 1.133 13,6 1,20 NHKS 3500 4,5 0,12 EBB 1.133 46,5 4,10 EKS 3.500 81,3 2,32 Keterangan : NHBB : n-Heksan Buas-buas
NHKS : n-Heksan Kayu Secang EBB    : Etanol Buas-buas EKS    : Etanol Kayu secang
Residu kemudian dimaserasi kembali menggunakan pelarut etanol 96% dengan perlakuan  yang  sama.  Maserat  yang  diperoleh  selanjutnya  disaring  menggunakan buchner  vacum  yang  bertujuan  untuk  memisahkan  pengotor  yang  tidak  diinginkan, mempercepat proses penyaringan dan filtrat yang dihasilkan lebih jernih[7]. Hasil filtrat di Rotary evaporator untuk memperoleh ekstrak yang pekat[7]. Nilai rendemen dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 3. Skrining Fitokimia Senyawa NHBB NHKS EBB EKS Flavonoid - - + + Fenol - - + + Tanin - - - - Alkaloid - - - - Saponin - - + + Terpenoid + + - + Keterangan : (-) tidak terdeteksi, (+) terdeteksi
NHBB : n-Heksan Buas-buas NHKS : n-Heksan Kayu Secang EBB    : Etanol Buas-buas EKS    : Etanol Kayu secang
Hasil  skrining  fitokimia  pada  ekstrak  n-Heksan  Buas-buas  dan  kayu  secang menunjukkan  hasil  positif  adanya  senyawa  terpenoid.  Ekstrak  etanol  buas-buas terdeteksi adanya senyawa flavonoid, fenol dan saponin, sedangkan ekstrak etanol kayu secang menunjukkan adanya senyawa flavonoid, fenol dan terpenoid. Hasil Skrining fitokimia dapat dilihat pada Tabel 3.
Hasil  penelitian  antibakteri  pada  ekstrak  n-heksan  kombinasi  buas-buas  dan kayu secang (1:1 dan 1:2) tidak menunjukkan adanya zona bening. Akan tetapi, pada perbandingan 2:1 menunjukkan adanya zona bening yang terbentuk di konsentrasi 150 ppm dan 300 ppm berturut-turut yaitu 1,0 dan 1,5 mm yang termasuk kategori lemah menurut  David  dan  Stoute  karena  ≤  5  mm.  Adapun  ukuran  kertas  cakram  yang digunakan yaitu 6 mm, sehingga jika dibandingkan dengan hasil pengujian nilai zona bening yang terbentuk disekitar cakram yaitu tergolong kecil atau semu. Pengujian ini menunjukkan  semakin  besar  konsentrasi  yang  digunakan  semakin  meningkat  zona bening yang terbentuk dan adanya perbedaan kecepatan ekstrak berdifusi ke medium agar [8]. Hasil penelitian antibakteri dapat dilihat pada Tabel 4
Tabel 4. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan Kombinasi Daun Buas-buas dan Kayu secang terhadap P.acnes Sampel uji Konsen- trasi Diameter zona bening (mm) Rata - rata Ket. Pengulangan ke- I II III 1 : 1 100 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 150 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 300 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 1 : 2 100 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 150 ppm 2,5 0 0 0,83 Tidak ada zona bening 300 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2 : 1 100 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 150 ppm 0 0 3,0 1,0 Lemah 300 ppm 4,5 0 0 1,5 Lemah Kontrol (+) Ciprofloxacin 5µg/disc 24,5  25,0  25,5 25,5 Sensitif Kontrol (-) DMSO 10% 0 0 0 0 Tidak ada zona bening
Zona  bening  yang  terbentuk  pada  esktrak  n-heksan  diduga  karena  adanya senyawa  terpenoid  yang  terkandung,  hal  ini  sesuai  dengan  hasil  pengujian  skrining fitokimia  yang  dilakukan  pada  ekstrak  n-heksan  buas-buas  dan  secang  [9].  Senyawa terpenoid  yang  diduga  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada  daun  buas-buas  yaitu neophytadiene [10].  Hal  ini  juga  didukung  oleh  penelitian  Ngazizah  (2016)  bahwa neophytadiene  memiliki  aktivitas  sebagai  antimikroba  dengan  mengganggu  proses terbentuknya membran atau dinding sel [9].
Tabel 5. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kombinasi Daun Buas-buas dan
Kayu secang terhadap P.acnes Sampel uji Konsen- trasi Diameter zona bening (mm) Rata - rata Ket. Pengulangan ke- I II III 1 : 1 1500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2000 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 1 : 2 1500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2000 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2 : 1 1500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2000 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening 2500 ppm 0 0 0 0 Tidak ada zona bening Kontrol (+) Ciprofloxacin 5µg/disc 24,5 25,0 25,5 25,5 Sensitif Kontrol (-) DMSO 10% 0 0 0 0 Tidak ada zona bening
Hasil penelitian antibakteri pada ekstrak etanol kombinasi buas-buas dan kayu secang seperti pada Tabel 5. tidak menunjukkan adanya zona bening. Faktor-faktor yang diduga  dapat  mempengaruhi  tidak  terbentuknya  zona  bening  yaitu  kurangnya konsentrasi  ekstrak  dan  kandungan  metabolit  sekunder[11][12].  Konsentrasi  sampel pada penelitian ini tergolong kecil sehingga tidak efektif untuk membentuk zona bening dan menghambat bakteri P.acnes . Hal ini juga didukung oleh Hardiningtyas dkk (2010) bahwa potensi bioaktivitas ekstrak bisa saja sulit berdifusi yang menyebabkan diameter menjadi lebih kecil bahkan tidak terbentuk [13].
Menurut  Madigan  (2000)  menyatakan  bahwa  terbentuknya  zona  bening tergantung dari konsentrasi antibakteri yang digunakan, kelarutan antibakteri tersebut ke  media,  koefisien  difusi  dan  aktivitas  antibakteri.  Semakin  besar  konsentrasi maka daya hambat akan besar. Konsentrasi ekstrak yang besar dapat mempengaruhi aktivitas bakteri yang di uji[14]. Akan tetapi pada penelitian ini penggunaan konsentrasi cukup kecil, sehingga konsentrasi sampel tidak bekerja dengan baik terhadap media uji dimana dapat mempengaruhi ada tidaknya zona bening. Pada penelitian sampel tumbuhan lain yang menggunakan konsentrasi dengan satuan persen pun tidak menunjukkan aktivitas antibakteri  terhadap P.acnes .  Riferty  (2018)  menggunakan  ekstrak  etanol  biji  pare terhadap P.acnes tidak memberikan zona bening pada konsentrasi 20 dan 25% (b/v)[15]. Penelitian lain juga dilakukan Retnaningsih (2019) menggunakan ekstrak etanol daun ungu terhadap bakteri P.acnes tidak menunjukkan zona bening di konsentrasi 100, 80, 60, 40 dan 20% [16].
Pengujian  skrining  fitokimia  menunjukkan  adanya  kandungan  metabolit sekunder pada tumbuhan buas-buas dan secang (Tabel 3.) yang dapat berperan sebagai antibakteri  yaitu  fenol.  Adapun  pengaruh  fenol  terhadap  pertumbuhan  antibakteri P.acnes yaitu  mendenaturasi  protein  dan  menyebabkan  sel  menjadi  lisis[5].  Hal  ini diduga karena rendahnya kandungan total fenol pada buas-buas dan secang, sehingga tidak menunjukkan adanya aktivitas antibakteri terhadap P.acnes . Adapun pernyataan tersebut didukung oleh Isnindar dan Luliana (2020) bahwa kandungan total fenol yang dimiliki  buas-buas  dan  secang  sangat  kecil  yaitu  9,82  dan  11,10%  jika  dibandingkan dengan tumbuhan meniran dan bunga rosella yaitu 30,60 dan 26,15% [17].
Menurut Mulyani (2017) tidak terdapatnya zona bening antibakteri dikarenakan bakteri  memiliki  sifat  dan  ketahanan  yang  berbeda  terhadap  suatu  antibakteri, walaupun bakteri tersebut termasuk dalam satu golongan yang sama yaitu golongan bakteri gram positif [18]. Bakteri P.acnes merupakan bakteri Gram positif dengan lapisan peptidoglikan yang tebal [19][20].
Kontrol  positif  yang  digunakan  yaitu  antibiotik  Ciprofloxacin  5µg/disc,  yaitu antibiotik berspektrum luas terhadap bakteri gram positif dan negatif yang merupakan golongan fluoroquinolin[21]. Hasil zona bening pada Ciprofloxacin yang didapat yaitu 25,0 mm yang termasuk kategori sensitif menurut CLSI 2012 ( The Clinical and Laboratory Standards Institute ) yaitu ≥ 21 mm. Kontrol negatif yang digunakan yaitu DMSO 10%. DMSO  dipilih  karena  dapat  melarutkan  hampir  semua  senyawa  polar  maupun nonpolar. Berdasarkan hasil uji peneliti menunjukkan tidak terdapat zona bening pada pelarut DMSO 10%.

## 4.  Kesimpulan
Skrining fitokimia dilaporkan pada buas-buas dan kayu secang yaitu Flavonoid, fenol, terpenoid dan saponin. Ekstrak n-Heksan kombinasi buas-buas dan kayu secang memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  pertumbuhan Propionibacterium  acnes pada perbandingan 2:1 (150 ppm dan 300 ppm). Sedangkan pada ekstrak etanol kombinasi buas-buas  dan  kayu  secang  tidak  adanya  zona  bening  yang  terbentuk  pada pertumbuhan Propionibacterium acnes.

## Referensi
[1] I. Indarto, W. Narulita, B. S. Anggoro, dan A. Novitasari, “Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong Terhadap Propionibacterium Acnes,” Biosfer: Jurnal Tadris Biologi , vol. 10, no. 1, hlm. 67 – 78, 2019, doi: 10.24042/biosfer.v10i1.4102.
[2] Anggita.  Rahmi.  Hafsari,  C.  Tri,  S.  Toni,  dan  Indri.  L.  Rahayu,  “Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Beluntas (Pluchea indica L.) terhadap Propionibacterium acnes Penyebab Jerawat,” Jurnal Istek , vol. 9, no. 1, hlm. 141 – 161, 2015.
[3] A. M. Mona dan M. Restuati, “Pengaruh Ektrak Etanol Daun Buas -Buas (Premna pubescens  Blume)  Sebagai  Antiinflamasi  Pada  Edema  Kaki  Tikus  Putih  (Rattus novergicus),” Jurnal  Biosains ,  vol.  1,  no.  3,  hlm.  1230 – 2443,  2016,  doi: 10.24114/jbio.v1i3.2930.
[4]  M.  Restuati,  U.  Hidayat,  A.  S.  S.  Pulungan,  N.  Pratiwi,  dan  D.  S.  Diningrat, “Antibacterial activity of buasbuas (Premna pubescens Blume) leaf extracts against Bacillus cereus and Escherichia coli,” Journal of Plant Sciences , vol. 11, no. 4, hlm. 81 – 85, 2016, doi: 10.3923/jps.2016.81.85.
[5] I. D. G. P. Prabawa, N. Khairiah, dan H. Ihsan, “Kajian Bioaktivitas dan Metabolit Sekunder dari Ekstrak Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.) Untuk Sediaan Bahan
Aktif,” Prosiding Seminar Nasional Balai Riset dan Standardisasi Industri Samarinda , hlm. 1 – 12, 2019.
[6] S.  H.  Putri,  I.  Ardiansah,  dan  Hanidah,  “Antioksidan  pada  Produk  Tahu  Hasil Koagulasi Menggunakan Biji Kelor (Moringa oleifera L.),” Jurnal Teknotan , vol. 12, no. 1, hlm. 73 – 78, 2018.
[7] Prastyo  dan  A.  S.  Rahayoe,  “Penyaringan  Metode  Buchner  Sebagai  Alternatif Pengganti  Penyaringan  Sederhana  Pada  Percobaan  Adsorpsi  Dalam  Pratikum Kimia Fisika,” Indonesian Journal of Laboratory , vol. 1, no. 1, hlm. 23 – 27, 2018, doi:
10.22146/ijl.v1i1.40966.
[8] M.  Handayani,  O.  Lambui,  dan  I.  Suwastika,  “Potensi  Tumbuhan  Melastoma malabathricum  L.  Sebagai  Bahan  Antibakteri  Salmonellosis  Ethanol  Extracts  of Melastoma  malabathricum  L.  Leaves  Potential  as  anti-bacterial  agent  on Salmonella,” Natural Science: Journal of Science and Technology , vol. 6, no. 2, hlm. 165 – 174, 2017.
[9] F.  N.  Ngazizah,  N.  Ekowati,  dan  A.  T.  Septiana,  “Potensi  Daun  Trembilungan (Begonia hirtella Link) sebagai Antibakteri dan Antifungi,” Jurnal Biosfera , vol. 33, no. 3, hlm. 126, 2017.
[10] D.  Hadiarti,  “Identification  of  n -hexane  Extract  Constituents  From  Premna Serratifolia Linn using GC- MS,” Majaah Ilmiah Al Ribaath , vol. 12, no. 1, hlm. 22 – 28,
2015.
[11] S. G. Jenkins dan A. N. Schuetz, “Current concepts in laboratory testing to guide antimicrobial therapy,” Mayo Clinic Proceedings , vol. 87, no. 3, hlm. 290 – 308, 2012, doi: 10.1016/j.mayocp.2012.01.007.
[12]  A.  Altemimi,  N.  Lakhssassi,  A.  Baharlouei,  D.  G.  Watson,  dan  D.  A.  Lightfoot, “Phytochemicals: Extraction, isolation, and identification of bioactive compounds from  plant  extracts,” Plants ,  vol.  6,  no.  4,  hlm.  1 – 23,  2017,  doi: 10.3390/plants6040042.
[13]  M.  Kawaroe,  D.  Soedarma,  H.  Effendi,  T.  Nurhayati,  dan  D.  Hardiningtyas, “Aktivitas Antibakteri Ekstrak Karang Lunak Sarcophyton sp. yang Difragmentasi dan  Tidak  Difragmentasi  dari  Perairan  Pulau  Pramuka,  Kepulauan  Seribu, Jakarta,” Jurnal Biota , vol. 15, no. 3, hlm. 340 – 347, 2010.
[14]  M. Madigan, J. Martinko, dan J. Parker, Brock Biology of Microorganism . Pretince Hall Inc, 2000.
[15] F. Riferty, E. R. E. S. Sakti, dan U. A. Dasuki, “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Fraksi  Biji  Pare  (Momordica  charantia  L.)  Terhadap  Bakteri  Propionibacterium acnes,” Jurnal  Ilmiah  Farmasi  Farmasyifa ,  vol.  1,  no.  2,  hlm.  119 – 125,  2018,  doi: 10.29313/jiff.v1i2.3139.
[16] A. Retnaningsih, A. Primadiamanti, dan A. Febrianti, “Uji Daya Hambat Ekstrak Etanol Daun Ungu (Graptophyllum pictum (L.) GRIFF) Terhadap Staphylococcus epidermidis  dan  Bakteri  Propionibacterium  acnes  Penyebab  Jerawat  dengan Metode Cakram,” Jurnal Analisis Farmasi , vol. 4, no. 1, hlm. 1 – 9, 2019.
[17] Isnindar dan S. Luliana, “Synergism of Antioxidant Activity Combination of Buas - Buas  (Premnaserratifolia  Linn.),  Meniran  (Phyllanthusniruri  L.),  Secang (Caesalpiniasappan)  and  Roselle  (Hibiscus  sabdarifa)  Extracts,” Majalah  Obat Tradisional , vol. 25, no. 3, hlm. 138 – 143, 2020, doi: 10.22146/mot.51328.
[18] Y.  Mulyani,  D.  Hidayat,  Isbiantoro,  dan  Y.  Fatimah,  “Ekstrak  Daun  Katuk (Sauropus androgynus (L) Merr) sebagai Antibakteri terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis,” JFL : Jurnal Farmasi Lampung , vol. 6, no. 2, hlm. 46 – 55, 2017.
[19] I.  Fitri,  “Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  Herba  Meniran  (Phylanthus  niruri) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella sp. dan Propionibacterium acnes,” JST (Jurnal  Sains  dan  Teknologi) ,  vol.  6,  no.  2,  hlm.  300 – 310,  2017,  doi:
10.23887/jstundiksha.v6i2.11815.
[20] A.  B.  W.  Putra,  “Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kloroform  Kelopak  Rosella (Hibiscus  sabdariffa  Linn)  Terhadap  Propionibacterium  acnes,  Escherichia  colii dan  Staphylococcus  aureus  serta  Uji  Bioautografi,” Universitas  Muhammadiyah Surakarta , 2010.
[21] Fauzia, Wiryanto, dan S. Lubis, “Pemeriksaan Potensi Tablet Ciprofloxacin yang Beredar di Apotek Kota Medan dengan Metode Pengenceran,” Majalah Kedokteran Nusantara , vol. 38, no. 4, hlm. 302 – 304, 2005.